CZ294879B6

CZ294879B6 - Deriváty 11-acetyl-12,13-dioxabicyklo[8.2.1]tridekenonu, postup jejich výroby a léčiva, obsahující tyto sloučeniny

Info

Publication number: CZ294879B6
Application number: CZ1999458A
Authority: CZ
Inventors: Daniel Jasserand; Ulf Preuschoff; Christian Eeckhout
Original assignee: Solvay Pharmaceuticals Gmbh
Priority date: 1998-02-13
Filing date: 1999-02-10
Publication date: 2005-04-13
Also published as: ES2355187T3; HUP9900263A2; KR19990072345A; HU9900263D0; DE19805822A1; IL128238A; ZA99678B; AR014320A1; AU748670B2; AU1643899A; SK285313B6; PL331444A1; CA2260315C; TW579379B; HU222539B1; BR9900442A; NO310917B1; DZ2721A1; ATE486083T1; ID21968A

Abstract

Deriváty (2R,3S,4S,5R,6R,10R,11R)-2,4,6,8,10-pentamethyl-11-acetyl-12,13-dioxabicyklo[8.2.1]tridec-8-en-1-onu obecného vzorce I, kde R.sup.1.n. znamená vodík nebo methyl, R.sup.2.n. znamená vodík nebo C.sub.1-4 .n.alkylkarbonyl, a jejich stabilní a fyziologicky snášenlivé adiční soli kyselin, způsob jejich výroby spočívající v tom, že se ve sloučenině obecného vzorce II, kde R.sup.1.n. a R.sup.2.n. mají shora uvedený význam, převede postranní řětězec 2',3'-dihydroxypent-2'-yl v poloze 11 cyklického základního kruhu oxidačním glykolovým štěpením na acetylový postranní řětězec, a popřípadě se do získané sloučeniny obecného vzorce I, kde R.sup.1.n. znamená vodík, zavede methylový zbytek R.sup.1.n. nebo se ze získané sloučeniny vzoce I, kde R.sup.1.n. znamená methyl, methylový zbytek R.sup.1.n. odštěpí, a popřípadě se volné sloučeniny obecného vzorce I převedou na své adiční soli kyselin nebo se adiční soli kyselin převedou na volné sloučeniny obecného vzorce I, a léčivo obsahující tyto sloučeniny. Deriváty projevují fyziologické účinky mobilinu a hodí se k léčení poruch motility v gastrointestinálním traktu.ŕ

Description

Předložený vynález se týká nových sloučenin (27?,35,45,57?,67?,107?,117ř)-3-[(2,6-didesoxy-3C-methyl-3-<7-methyl-a-L-ribohexopyranozyl)-oxy]-5-[(3,4,6-tridesoxy-3-(ÝV-methyl-7Vizopropylamino)-P-D-xylohexopyranozyl)-oxy]-2,4,6,8,10-pentamethyl-11-acetyl-l 2,13-dioxabicyklo[8.2.1]-tridec-8-en-l-onu, substituovaných na atomu dusíku, s motilinoagonistickými vlastnostmi a jejich adičních solí kyselin, jakož i farmaceutických přípravků, obsahujících tyto sloučeniny. Sloučeniny podle vynálezu, představují cyklicky zmenšené A-desmethyl-Aizopropylové deriváty erytromycinu A s modifikovaným postranním řetězcem.

Dosavadní stav techniky

Antibiotikum erytromycin A má, jak známo, vedle svých antibiotických účinků, pro antibiotika také nežádoucí gastrointestinální vedlejší účinky, mimo jiné silný vzrůst kontrakční aktivity v oblasti trávicího ústrojí se žaludečními a střevními křečemi, nevolností, zvracením a průjmem.

Existovalo vícero pokusů, modifikovat erytromycin A tak, aby se získaly deriváty, u nichž se prakticky nevyskytuje žádný antibiotický účinek, avšak je zachován účinek, ovlivňující motilitu gastrointestinálního traktu. Z patentové přihlášky EP 0 550 895 jsou známy deriváty Ndesmethyl-A-izopropyl-erytromycinu A se zmenšenými kruhy, s gastrointestinálně účinnými agonistickými vlastnostmi motilinu.

Dále jsou známy z patentové přihlášky EP-A 382 472 podobné deriváty erytromycinu se zmenšenými kruhy, které ale vykazují antibiotické účinky.

Podstata vynálezu

Předložený vynález si klade za úlohu, vyvinout nové orálně účinné deriváty erytromycinu A se zmenšenými kruhy bez antibiotického účinku a vlastnostmi se zlepšeným účinným profilem, příznivě ovlivňujícími motilitu gastrointestinálního traktu.

Bylo vynalezeno, že nové 7V-desmethyl-A-izopropylové deriváty erytromycinu A se zmenšenými kruhy, jejichž postranní řetězec byl oxidací modifikován v poloze 11 cyklického základního kruhu, nejsou antibiotický účinné, ale mají selektivní agonistické vlastnosti motilinu a příznivým způsobem stimulují motilitu gastrointestinálního traktu a projevují zesilující účinky na tonus spodního jícnového svěrače a na tonus žaludku.

Na základě svého účinného profilu se hodí látky podle vynálezu k léčení poruch motility v gastrointestinálním traktu a vyznačují se přitom dobrou snášenlivostí a dobrou orální účinností.

Předložený vynález se proto týká nových sloučenin (27ř,35,45,57?,67?,107?,l 17?)-2,4,6,8,10pentamethyl-1 l-acetyl-12,13-dioxabicyklo[8.2.1]tridec-8-en-l-onu obecného vzorce I.

-1 CZ 294879 B6

kde

R¹ znamená vodík nebo methyl

R² znamená vodík nebo C]_4 alkylkarbonyl a jejich stabilních a fyziologicky snášenlivých adičních solí kyselin.

Pokud znamená či obsahuje ve sloučeninách obecného vzorce I substituent alkyl, může být tento rozvětven nebo nerozvětven.

Vhodnými se ukazují zejména sloučeniny obecného vzorce I, kde R¹ znamená methyl.

R² výhodně znamená vodík. Pokud R² znamená C| ₄ alkylkarbonyl, je upřednostňován acetyl.

Sloučeniny obecného vzorce I se získají tak, že se známým způsobem ve sloučenině obecného vzorce II

-2CZ 294879 B6 kde R¹ a R² mají v nároku 1 význam převede postranní řetězec 2',3'-dihydroxypent-2'-yl v poloze 11 cyklické základního kruhu oxidačním glykolovým štěpením na acetylový postranní řetězec, a popřípadě se do získané sloučeniny obecného vzorce I, kde R¹ znamená vodík, zavede methylový zbytek R¹ nebo se ze získané sloučeniny vzorce I, kde R¹ znamená methyl, methylový zbytek R¹ odštěpí, a popřípadě se volné sloučeniny obecného vzorce I převedou na své adiční soli kyselin nebo se adiční soli kyselin převedou na volné sloučeniny obecného vzorce I.

Oxidační glykolové štěpení 2',3'-dihydroxypent-2'-ylového postranního řetězce v poloze 11 cyklického základního kruhu sloučenin obecného vzorce II může být provedeno vhodnými oxidačními prostředky jako octanem olovičitým ve vhodných rozpouštědlech, kterými jsou příkladně nepolární Či slabě polární rozpouštědla jak benzen, toluen nebo xylen. Reakce může probíhat při teplotách mezi 0 °C a 40 °C, výhodně při teplotě místnosti.

Získané sloučeniny vzorce I, kde R¹ znamená vodík, mohou být v požadovaném případě dodatečně alkylovány známým způsobem na odpovídající sloučeniny sN-methylem. Alkylace může probíhat známým způsobem reakcí s methylhalogenidem nebo jako reduktivní alkylace reakcí s formaldehydem za redukčních podmínek a může být provedena, například v přítomnosti redukčního činidla, například komplexní borhydridové sloučeniny jako kyanoborohydridu sodného, triacetoxyborhydridu sodného nebo borhydridu sodného. V požadovaném případě může alkylace probíhat také reakcí s methylhalogenidem, zejména methyljodidem nebo esterem methylsulfonové kyseliny. Účelně se může alkylace provádět za reakčních podmínek v inertním rozpouštědle. Pro redukční alkylaci se hodí jako rozpouštědla cyklické étery jako tetrahydrofuran (=THF) nebo dioxan, aromatické uhlovodíky jako toluen či nižší alkoholy. Alkylace může probíhat při teplotách mezi teplotou místnosti a teplotou varu rozpouštědla. Při alkylaci s methylderivátem, příkladně methylhalogenidem jako methyljodidem, se pracuje účelně za přítomnosti zásady, jako například uhličitanem alkalického kovu nebo terciárním organickým aminem.

Ze sloučenin vzorce I, kde R¹ znamená methyl, může být v žádoucím případě dodatečně odštěpen methylový zbytek. Demethylace může probíhat známým způsobem působením halogenu, zejména jodu anebo bromu v inertním rozpouštědle za přítomnosti vhodné zásady.

Jako zásady se hodí například alkoholáty alkalických kovů, hydroxidy alkalických kovů a soli alkalických kovů slabých organických kyselin.

Sloučeniny vzorce I mohou být známým způsobem z reakční směsi izolovány a čištěny. Adiční soli kyselin mohou být převedeny známým způsobem na volné zásady a tyto se mohou v žádoucím případě převést známým způsobem na farmakologicky únosné adiční soli kyselin.

K zabránění hydrolyzačních reakcí je účelné, použít k tvorbě soli pouze ekvivalentní množství kyselin.

Jako farmakologicky přijatelné adiční soli kyselin sloučenin vzorce I se hodí například jejich soli anorganických kyselin, např. kyseliny uhličité, halogen vodíkových kyselin, zejména kyseliny chlorovodíkové nebo organických kyselin, například nižších alifatických mono- nebo dikarboxylových kyselin, jako kyselina maleinová, fumarová, mléčná, vinná nebo octová.

Výchozí sloučeniny vzorce II, kde R² znamená vodík, jsou známy z patentové přihlášky EP 0 550 895 a mohou být vyrobeny způsobem, který je v tomto spise popsán.

-3 CZ 294879 B6

Výchozí sloučeniny vzorce II, kde R² znamená nebo Ci_4 alkylkarbonyl, mohou být vyrobeny tak, že sloučeniny vzorce II, kde R² znamená vodík, reagují známým způsobem s karboxylovými kyselinami obecného vzorce III

R³---COOH (III), kde R³ znamená C_b4 alkyl, nebo s redukčními deriváty těchto kyselin.

Jako reakční deriváty kyselin vzorce III přicházejí v úvahu zejména eventuálně směsné anhydridy a halogenidy kyselin. Mohou být použity například chloridy či bromidy kyselin vzorce III nebo směsné estery kyselin vzorce III s organickými sulfonovými kyselinami, příkladně s eventuálně nižšími alkansulfonovými kyselinami, substituovanými halogenem, jako methansulfonová kyselina nebo trifluormethansulfonová kyselina nebo s benzensulfonovými kyselinami, substituovanými nižším alkylem nebo halogenem, příkladně toluensulfonovými nebo brombenzensulfonovými kyselinami.

Reakce může probíhat jako acylace za reakčních podmínek v inertním organickém rozpouštědle při teplotách mezi -20 °C a teplotou místnosti. Jako rozpouštědla se hodí nižší dialkylketony příkladně aceton, halogenované uhlovodíky jako dichlormethan nebo aromatické uhlovodíky jako benzen či toluen nebo cyklické étery jako THF nebo dioxan či směsi těchto rozpouštědel.

Acylace může být účelně použita zejména, použije-li se jako acylační činidlo anhydrid nebo směsný anhydrid kyselin obecného vzorce III se sulfonovou kyselinou za přítomnosti kyselinotvorných reagencí. Jako kyselinotvomá činidla se hodí například anorganické báze jako uhličitany alkalického kovu jako uhličitan draselný nebo organické báze, rozpustné v reakční směsi jako terciární dusíkové báze, příkladně terc.aminy s nižším alkylem, pyridiny jako triethylamin, tripropylamin, N-methylmorfolin, pyridin, 4-dimethylaminopyridin, 4-diethylaminopyridin nebo 4-pyrrolidinopyridin.

V žádaném případě může být do získané sloučeniny vzorce II, kde R¹ znamená vodík, zaveden methylový zbytek R¹ anebo ze získané sloučeniny vzorce II, kde R¹ znamená methyl, může být tento methylový zbytek odštěpen. Tyto methylace či demethylace mohou probíhat známým způsobem, za podmínek, popsaných například pro zavedení methylové skupiny do či její odštěpení ze sloučenin vzorce I.

Nové sloučeniny vzorce I a jejich stabilní a fyziologicky snášenlivé adiční soli kyselin mají zajímavé farmakologické vlastnosti, zejména agonistické vlastnosti motilinu, stimulující motilitu gastrointestinálního traktu. Přitom se vyznačují příznivým účinným profilem s dobrou orální účinností. Jsou zbaveny antibiotických účinků a mají vysokou selektivní afinitu kreceptorům motilinu, zatímco v agonisticky účinném dávkovém pásmu motilinu neprojevují prakticky žádnou relevantní afinitu k ostatním receptorům v gastrointestinálním traktu, jako receptorům adrenalinu, acetylcholinu, histaminu, dopaminu nebo serotoninu. Sloučeniny mají překvapivě dobrou snášenlivost pro játra a hodí se proto pro použití po delší časové období.

Aby se zabezpečilo regulované trávení přijaté potravy, působí ve zdravém stavu autonomní nervový systém a hormony gastrointestinálního traktu společně, aby se vytvořila kontrakční činnost gastrointestinálního traktu, nejen přímo po požití potravy, nýbrž také při prázdném gastrointestinálním traktu. Motilin je známý gastrointestinální peptidový hormon, který stimuluje motilitu gastrointestinálního traktu a indukuje koordinovanou motilitu v celém gastrointestinálním traktu v lačném stavu, jakož i požití potravy.

Sloučeniny vzorce I projevují fyziologické účinky motilinu tím, že se stávají účinnými, jako agonisté pro receptory motilinu. Sloučeniny vzorce I tak projevují vynikající stimulující účinky v trávicím ústrojí a na spodním jícnovém svěrači. Způsobují, především urychlení vyprázdnění žaludku, zvýšení žaludečného tonus a dlouhotrvající zvýšení klidu tonusu jícnového svěrače. Na

-4CZ 294879 B6 základě svého účinného profilu motilinu se hodí látky k léčení nemocných stavů, které jsou spojeny s poruchami motility v gastrointestinálním traktu anebo vracení kaše potravy ze žaludku do jícnu. Sloučeniny vzorce I se doporučují, například při gastroparitidě různého původu, poruchách tonusu žaludku, poruchách vyprazdňování žaludku a gastroezofagálního refluxu, dyspepsii a postoperačních poruchách motility.

Příklady provedení vynálezu

Gastrointestinálně účinné vlastnosti sloučenin vzorce I se dají prokázat farmakologickými zkušebními metodami ve zkumavce i v živém těle:

Popis testovacích metod.

1. Stanovení schopnosti zkušebních látek, vázat receptory motilinu.

Afinita sloučenin vzorce I k receptorům motilinu se zkouší ve zkumavce na frakci tkáňového homogenizátu z prepyrolitické části králičího žaludku. Stanovuje se vytlačení, radioaktivně jodem označeného motilinu, z vazby motilin-receptor, zkušebními látkami.

Studie vazby receptorů se provádějí podle modifikace metody Bormana a kol. (Regulátory peptidů 15 (1986), 143-153). K přípravě motilinu, označeného I¹²⁵, se motilin známým způsobem enzymaticky joduje, např. analogicky metodě, popsané Bloomem a kol. (Scand. J. Gastroenterol. 11 (1976) 47-52), za použití laktoperoxidázy.

K získání frakce tkáňového homogenizátu z prepyrolytické části králičího žaludku, použitého v testu, se prepyrolytická část žaludku, zbavená sliznice, rozdrtí a homogenizuje v 10ti násobném objemu chladného homogenizačního ústojného roztoku (50 mM pufru tris-HCl, 250 mM sacharózy, 25 mM KC1, 10 mM MgCb, pH 7,4) s přídavkem inhibitorů (1 mM jodacetamidu, 1 μΜ pepstatinu, 0,1 mM methylsulfonylfluoridu, 0,1 g/1 inhibitoru trypsinu, 0,25 g/1 bacitracinu), homogenizátorem, 15 sec. při 1500 otáčkách za minutu. Homogenizát se odstřeďuje po dobu 15 minut po 1000 g, získaný zbytek se čtyřikrát promývá homogenizačním ústojným roztokem a nakonec se resuspenduje v 0,9% roztoku chloridu sodného (v objemu, odpovídajícím pětinásobnému hmotnostnímu množství prepyrolytické části žaludku). Takto získaná tkáňová frakce, která se označuje jako „surový membránový přípravek“ se použije ke zkoušce.

K pokusu vazby se inkubuje 200 μΐ surové membránové frakce (0,5 - 1 mg proteinu) ve 400 μΐ ústojného roztoku A (50 mM pufru tris-HCl, 1,5% BSA, 10 mM MgCl₂, pH 8,0) se 100 μΐ jodovaného motilinu v ústojného roztoku B (10 mM pufru tris-HCl, 1% BSA, pH 8), zředěno na (konečnou koncentraci 50 pM), 60 min při 30 °C. Reakce se zastaví přídavkem 3,2 ml chladného ústojného roztoku B a vázaný i nevázaný motilin se od sebe oddělí odstředění (1000 g, 15 minut) a změří ve sčítači impulzů gama. Studie sliznice jsou prováděny přídavkem, zvyšujícího se množství látky, kterou je třeba změřit, do inkubačního média. Jako zkušební roztoky látek se použijí vodné roztoky, které se připraví vhodným zředěním 6x10 ⁴ molárních vodných kmenových roztoků. Zkušební látky, které jsou ve vodě těžko rozpustné, se rozpustí nejdříve v 60% ethanolu a tento roztok se zředí takovým množstvím vody, aby koncentrace ethanolu v roztoku, který je zapotřebí zkoušet, nepřesáhla 1,6 % obj. Ze získaných naměřených dat se určí jako IC50, koncentrace každé z měřených látek, která způsobí 50 % inhibice specifické vazby jodovaného motilinu na receptory motilinu. Z této se pak vypočte příslušná hodnota pIC₅o. Podle předcházející metody byly stanoveny pro látky z příkladů 1 a 2 hodnoty uvedené v tabulce 1. Uvedená čísla příkladů se vztahují na příklady, popsané v následujícím textu.

-5CZ 294879 B6

Tabulka 1

příklad č.	PIC₅₀
1	8,01
2	7,75

2. Stanovení vlivu látek na tonus žaludku v živém těle.

Tonus žaludku hraje důležitou roli při vyprazdňování žaludku. Zvýšený tonus žaludku přispívá k jeho urychlenému vyprazdňování.

Vliv látek na tonus žaludku se stanovuje na tonusu žaludku psí rasy Beagle pomocí barostatu, který je spojen s umělohmotným sáčkem v žaludku psa a umožňuje měření objemu a tlaku žaludku psa. Barostatem se stanoví objem žaludku při konstantním tlaku v žaludku nebo tlak žaludku při jeho konstantním objemu. Při zvýšení tonusu žaludku se stanoví za určitého tlaku snížený objem žaludku a zvýšený tlak při určitém objemu. V modelu, použitém ke zkoušení látek, způsobujících zvýšení tonusu žaludku, se změří při konstantním tlaku změna žaludku, způsobená látkami. Žaludek pokusného zvířete se relaxuje přijetím lipidů, tj. tonus žaludku klesne, čímž se příslušně zvětší objem žaludku. Jako míra pro zvyšující se působení látek na tonus žaludku se v % měří vznikající redukce objemu žaludku, zvětšeného přídavkem lipidu po přijetí látky, opětným nárůstem žaludečního tonusu.

Látka příkladu 1 ukázala v tomto zkušebním modelu v dobře snášenlivé dávce 2,15 μιηοΙ/kg, poskytnuté i.d., snížení objemu žaludku po přídavku lipidu o 59,5 %. Orální podávání předešle uvedené substance v téže dávce 2,15 pmol/kg způsobilo neobyčejně výrazné snížení objemu žaludku, přičemž bylo lipidem zcela zabráněno indukovaná relaxaci objemu žaludku. Tyto nálezy mohou být hodnoceny jako značné náznaky pro vysokou, zejména vysokou orální biologickou disponovatelnost substancí podle vynálezu.

3. Stanovení vlivu látek v živém těle na tonus spodního jícnového svěrače za klidu.

Toto stanovení se provádí na bdících psech rasy Beagle na lačno, jimž byly vloženy před začátkem pokusu fistule do jícnu a jemná trubička do dvanáctníku. Tlak spodního jícnového svěrače se měří pomocí perfundovaného systému katétru s bočním otvorem, který je spojen se snímačem tlaku a záznamovým zařízením. Katétr se vede přes fistuli jícnu do žaludku a pak se pomalu manuálně stahuje zpět (= tranzitní manometrie). Při tlačení části katétru s postranním otvorem přes vysokotlaké pásmo spodního jícnového svěrače se registruje vrchol. Z tohoto vrcholu se pak stanoví tlak v mm Hg.

Tímto způsobem se nejprve určí kontrolní hodnota výchozího tlaku jícnového svěrače. Následně se aplikuje zkušební substance a po 15 minutách se měří tlak na spodním jícnovém svěrači ve 2 minutových intervalech po dobu 60 minut. Zvýšení tlaku po dávce zkušební substance se vypočte v porovnání s výchozím tlakem.

V tomto testu se zvýšil výchozí tonus jícnového svěrače dávkou 2,15 μΜοΙ/kg substance příkladu 1 o 143 %. Tento účinek se udržel během celkové doby testu 60 minut.

Na základě svých účinků v gastrointestinálním traktu jsou sloučeniny vzorce I vhodné v gastroenterologii jako léčiva pro větší savce, zejména člověka, k profylaxi a léčení poruch motility gastrointestinálního traktu.

Dávky, které je zapotřebí použít, mohou být individuálně různé a mohou se přirozeně měnit podle druhu stavu, který je zapotřebí léčit a formy aplikace. Například parenterální formulace budou obsahovat všeobecně nižší množství účinné látky než orální preparáty. Všeobecně jsou

-6CZ 294879 B6 však pro aplikace u větších savců, zejména člověka, vhodné lékové formy, s obsahem účinné látky od 1 do 100 mg v jednotlivé dávce.

Jako léčivé látky mohou být sloučeniny vzorce I obsaženy s obvyklými farmaceutickými pomocnými látkami v galenických přípravcích, jako např. tabletách, kapslích, čípcích nebo roztocích. Tyto galenické přípravky mohou být vyrobeny podle známých metod, za použití obvyklých pevných nosičů, jako např. mléčného cukru, škrobu a talku nebo kapalných ředidel, jako např. vody, kapalných tuků nebo kapalných parafínů a s použitím farmaceuticky známých pomocných látek, například rozvolňovačů tablet, látek, zprostředkujících rozpouštění, nebo konzervačních prostředků.

Následující příklady mají vynález blíže objasnit, avšak jejich rozsah není žádným způsobem omezen.

Příklad 1 (2R,3S,4S,5R,6R, 10R, 11 7?)-3-[(2,6-didesoxy-3-C-methyl-3-0-methyl-a-L-ribohexopyranozyí)-oxy]-5-[(3,4,6-tridesoxy-3-(7V-methyl-7V-izopropylamino)-P-D-xylohexopyranozyl)-oxy]-2,4,6,8,10-pentamethyl-l 1-acetyl-l 2,13-dioxabicyklo[8.2.1 ]tridec-8-en-lonu (sloučenina vzorce I, R¹ = methyl, R² = vodík)

A) 100 g [2R(2'R,3'R), 3S,4S,5R,6R,10R,l 1R]-11-(2',3'-dihydroxypent-2'-y 1)-3-((2,6-didesoxy-3-C-methyl-3-(9-methyl-a-L-ribohexopyranozyl)-oxy]-5-[3,4,6-tridesoxy-3(A-methyl-A-izopropylamino)-p-D-xylohexopyranozyl)-oxy]-2,4,6,8,10-pentamethyl- l-acetyl-12,13-dioxabicyklo[8.2.1]tridec-8-en-l-onu (= sloučenina vzorce II, R¹ = methyl, R² = vodík) bylo pod dusíkovou atmosférou rozpuštěno ve 2500 ml toluenu. K této předloze bylo přidáno 100 g octanu olovičitého a vzniklá suspenze byla míchána po dobu 5 hodin při pokojové teplotě. Následně byla reakční směs v uvedeném sledu promyta nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a pak tak často promývána vodou až promývací voda reagovala neutrálně. Organická fáze byla sušena síranem sodným a za sníženého tlaku odpařena. Chromatografíe zbytku na silikagelu (eluent: methyl-/erc-butyléter = MTBE) poskytla 81,9 g titulní sloučeniny jako bílého prášku, teplota tání = 198 °C až 200 °C, optická otáčivost [a]D²⁰ = -24,6° (c = 1,0 v CH2C1₂).

B) 1,1 g shora získané sloučeniny bylo rozpuštěno v 1 ml acetonitrilu. Ktéto předloze bylo přidáno 0,17 g kyseliny malonové a zahříváno na 60 °C až 70 °C. Po rozpuštění pevných podílů bylo přidáno 10 ml MTBE a pod refluxem zahříváno 5 minut k varu. Následně bylo přidáno znovu 10 ml MTBE a směs byla ponechána za míchání k ochlazení na pokojovou teplotu. Vypadlé krystaly byly odfiltrovány, dvakrát promyty 10 ml MTBE a sušeny při 60 °C ve vakuu. Bylo získáno 1,2 g monomalonátu titulní sloučeniny, rozsah tání 115,6 až 174 °C (neostré).

Příklad 2 (2R,3S,4S,5R,6R, 10R, 117?)-3-[(2,6-didesoxy-3-C-methyl-3-O-methyl-a-L-ribohexopyranozyl)-oxy]-5-[3,4,6-tridesoxy-2-0-acetyl-3-(7V'-methyl-7V-izopropylamino)-3-D-xylohexopyranozyl)oxy]-2,4,6,8,10-pentamethyl-l 1-acetyl-l 2,13-dioxabicyklo[8.2.1 ]tridec-8-en1-onu (sloučenina vzorce I, R¹ = methyl, R² = acetyl)

A) 210 g výchozí sloučeniny z příkladu 1 (= sloučenina vzorce I, R¹ = methyl, R² = vodík) bylo rozpuštěno pod dusíkovou atmosférou ve 2,4 1 acetonu a založeno 85,8 g uhličitanu draselného. K této předloze bylo přidáno 63,4 g anhydridu kyseliny octové a získaná suspenze

-7 CZ 294879 B6 byla míchána po dobu 20 hodin při pokojové teplotě. Následně byla reakční směs zalita směsí z 2400 g ledu a 1000 ml vody a 30 minut míchána. Vodná fáze byla třikrát extrahována ethylesterem kyseliny octové, organická fáze zahuštěna a přebytečné rozpouštědlo bylo odpařeno ve vakuu. Překrystalováním získaného surového produktu znpentanu bylo získáno 200 g [2R(2'R,3'R),3S,4S,5R,6R,1QR,117?]-1 l-(2',3'-dihydroxypent2'-yl)-3-[(2,6-didesoxy-3-C-methyl-3-C>-methyl-a-L-ribohexopyranozyl)-oxy]-5[3,4,6-tridesoxy-3-C-methyl-3-0-methyl-a-L-ribohexopyranozyl)oxy]-5-[3,4,6-tridesoxy-2-O-acetyl-(TV-methyl-7V-izopropylamino)-3-D-xylohexopyranozyl)-oxy]2,4,6,8,10-pentamethyl-l l-acetyl-12,13-dioxabicyklo[8.2.1]tridec-8-en-l-onu (sloučenina vzorce II, R¹ = methyl, R² = acetyl), teplota tání 128 °C až 130 °C.

B) 10,1 g předešle získaného produktu bylo způsobem, popsaným v příklad 1, zreagováno s 9,lg octanu olovičitého. Bylo získáno 6,0 g titulní sloučeniny jako bílé pevné látky, teplota tání = 164 °C, optická otáčivost [a]_D ²⁰ = -23,2° (c = 1,0 v CH2CI2).

Příklad I

Kapsle obsahující (27?,35,45,57?,67?,107?,l1 /?)—3—[(2,6-didesoxy-3-C-methyl-3-0-methyl-aL-ribohexopyranozyl)-oxy]-5-[3,4,6-tridesoxy-3-(7V-methyl-V-izopropylamino)-P-D-xylohexopyranozyl)-oxy]-2,4,6,8,10-pentamethyl-l l-acetyl-12,13-dioxabicyklo[8.2. l]tridec-8en-l-onu:

Byly vyrobeny kapsle obsahující účinnou látku s použitím následujících pomocných a obsahovaných látek na 1 kapsli:

(2R, 35,45,57?, 67?, 107?, 117?)-3-[(2,6-didesoxy-3-C-methyl-3-C>-methyl-a-L-ribohexopyranozyl)-oxy]-5-[(3,4,6-tridesoxy-3-(7V-methyl-7V-izopropylamino)-p-D-xylohexopyranozyl)-oxy]-2,4,6,8,l 0-pentamethyl-l l-acetyl-12,13-dioxabicyklo[8.2.1]-tridec-8-en-lon 20mg kukuřičný škrob 60mg mléčný cukr 301mg ethylester kyseliny octové (=EE) q.s.

Účinná látka, kukuřičný škrob a mléčný cukr byly za pomoci EE zpracovány na homogenní pastovitou směs. Pasta byla rozetřena a vzniklý granulát byl umístěn na vhodný plech a za účelem odtažení rozpouštědla sušen při 45 °C. Suchý granulát byl vnesen do drtiče a v homogenizátoru smíchán s následujícími pomocnými látkami.

talek 5mg stearan hořečnatý 5mg kukuřičný škrob 9mg a poté byl plněn do kapslí o obsahu 400 mg (= velikost kapsle 0).

-8CZ 294879 B6

Claims

1. Deriváty (27?,35,45,57?,6Λ,107?,117?)-2,4,6,8,10-pentamethyl-l l-acetyl-12,13-dioxabicyklo[8.2.1]tridec-8-en-l-onu obecného vzorce I kde

R¹ znamená vodík nebo methyl

R² znamená vodík nebo C]_₄ alkylkarbonyl a jejich stabilní a fyziologicky snášenlivé adiční soli s kyselinami.

2. Deriváty podle nároku 1 obecného vzorce I, kde R¹ znamená methyl.

3. Deriváty podle kteréhokoliv z nároků 1 a 2 obecného vzorce I, kde R² znamená vodík.

4. Léčivo, vyznačující se tím, že obsahuje farmakologicky účinné množství derivátu podle nároku 1 a obvyklé farmaceutické pomocné a nosné látky.

5. Způsob výroby derivátů (27?,35,45,57?,67?,107?,117ř)-2,4,6,8,10-pentamethyl-ll-acefyl12,13-dioxabicyklo[8.2.1]tridec-8-en-l-onu obecného vzorce I podle nároku 1, a jejich stabilních a fyziologicky snášenlivých adiční solí s kyselinami, vyznačující se tím, že se ve sloučenině obecného vzorce II

-9CZ 294879 B6 kde R¹ a R² mají v nároku 1 uvedený význam, převede postranní řetězec 2',3'-dihydroxypent-2'yl v poloze 11 cyklického základního kruhu oxidačním glykolovým štěpením na acetylový postranní řetězec, a popřípadě se do získané sloučeniny obecného vzorce I, kde R¹ znamená vodík, zavede methylový zbytek nebo se ze získané sloučeniny vzorce I, kde R¹ znamená methyl, methylový zbytek odštěpí, ío a popřípadě se volné sloučeniny obecného vzorce I převedou na své adiční soli s kyselinou nebo se adiční soli kyseliny převedou na volné sloučeniny obecného vzorce I.