SK283952B6 - Pyrido [2,3-D]pyrimidíny a farmaceutické kompozície na ich báze - Google Patents

Abstract

Pyrido [2,3-D]pyrimidíny vzorca (I),kde X je NH, N-acyl, O alebo S; R1 je NR3R4, SR3, OR3, SOR3 alebo SO2R3; každý z R2, R3 a R4 je nezávisle H, (CH2)nPh, kde Ph je prípadne substituovaný fenyl a n je 0, 1, 2 alebo 3; cykloalkyl s 3 až 6 C, alkanoyl s 1 až 6 C, alkyl s 1 až 6 C, alkenyl s 2 až 6 C alebo alkinyl s 2 až 6 C, pričom tieto alkyly, alkenyly a alkinyly sú prípadne substituované NR5R6, prípadne substituovaným fenylom, tioalkylom s 1 až 6 C, alkoxylom s 1 až 6 C, hydroxylom, karboxylom, halogénom alebo cykloalkylom s 3 až 6 C, kde R5 a R6 je každý nezávisle H, alkyl s 1 až 6 C, alkenyl s 2 až 6 C, alkinyl s 2 až 6 C, (CH2)nPh, kde Ph je prípadne substituovaný fenyl a n je 0, 1, 2 alebo 3 alebo cykloalkyl s 3 až 6 C alebo R5 a R6 brané dohromady s atómom dusíka, ku ktorému sú pripojené, môžu doplňovať kruh obsahujúci 3 až 7 atómov C a prípadne obsahujúci 1, 2 alebo 3 heteroatómy zvolené z N, O a S; pričom R4 môže tiež byť -C(=O)R3, -C(=O)R3, -SO2R3, -SO2NR5R6, -C(=O)NR5R6, -C(=S)NR5R6, -C(=NR)R3 alebo -C(=NH)NR5R6; a R3 a R4 brané dohromady s N, ku ktorému sú pripojené, môžu navyše doplňovať kruh obsahujúci 3 až 7 atómov C a prípadne obsahujúci 1, 2 alebo 3 heteroatómy zvolené z N, O a S; Ar predstavuje fenyl alebo substituovaný fenyl; a ich farmaceuticky vhodné soli. Tieto zlúčeniny sú vhodné na inhibíciu proteínkináz a sú tak účinné pri liečení bunkových proliferatívnych chorôb, aterosklerózy, restenózy, psoriázy a rakoviny. Farmaceutické kompozície na báze týchto zlúčenín.ŕ

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka určitých pyridof2,3-D]pyrimidínov a farmaceutických kompozícii na ich báze. Tieto zlúčeniny inhibujú proteínkinázu a sú teda vhodné predovšetkým na liečbu bunkových proliferativnych chorôb a všeobecne na inhibíciu enzymatickej aktivity proteínkinázy.

Doterajší stav techniky

Množstvo chorobných stavov je charakterizovaných nekontrolovanou proliferáciou a diferenciáciou buniek. Tieto stavy zahŕňajú rôzne bunkové typy a choroby ako jc rakovina, ateroskleróza a restenóza. Stimulácia rastového faktora, autofosforylácia a fosforylácia intracelulárnych proteínových substrátov sú dôležitými biologickými udalosťami v patomechanizme proliferativnych chorôb.

V normálnych bunkách má fosforylácia tyrozínových zvyškov kritickú funkciu v intracelulámom raste signálnej dráhy iniciovanej stimulovanými extracelulámymi receptormi. Napríklad spojenie rastových faktorov ako je od doštičiek odvodený rastový faktor (PDGF), fibroblastový rastový faktor (FGF) a epidermálny rastový faktor (EGF) s ich zodpovedajúcimi extracelulámymi receptormi aktivuje intracelulárna tyrozín kináza enzýmové domény týchto receptorov, čim katalyzujú fosforyláciu buď intracelulárnych substrátov, alebo receptorov samotných. Fosforylácia receptorov rastových faktorov v odpovedi k ligandovej väzbe je známa ako autofosforylácia.

Napríklad EGF receptor má ako svoje dva najdôležitejšie ligandy EGF a transformačný rastový faktor «, (Transformin Growth Factor α-TGFa). Receptory pravdepodobne majú len malé funkcie u normálnych dospelých ľudí, ale sú implikované v chorobných procesoch vo veľkej časti všetkých rakovín, najmä rakoviny čreva a prsníka. Blízke príbuzné Erb-2 a Erb-3 receptory majú rodinu Heregulins ako svoje hlavné ligandy a receptorová nadmerná expresia a mutácia bezpochyby demonštrované ako hlavný rizikový faktor v zlej prognóze rakoviny prsníka.

Proliferácia a riadená migrácia vaskulárnych hladkých svalových buniek (VSMC - vascular smooth muscle cells) sú dôležitými zložkami v takých procesoch ako je vaskulárna prestavba, restenóza a ateroskleróza. Od doštičiek odvodený rastový faktor bol identifikovaný ako jeden z najpotentnejších endogénnych VSMC mitogénov a chemoatraktantov. Zvýšená vaskuláma mRNA expresia PDGF-A a -B reťazcov a PDGF receptorov bola pozorovaná v balónikom poškodených krysích artériách carotis (J. Celí. Biol., III: 2149 - 2158 (1990)). V tomto modeli poškodenia infúzia PDGF tiež silne zvyšuje intimálne zhrubnutie a migráciu VSMC (J. Clin. Invest., 89: 507 - 511 (1992)). Ďalej PDGF-neutralizujúce protilátky výrazne redukujú intimálne zhrubnutie po balónikovom poškodení (Science, 253: 1129 až 1132 (1991)). Tyrfostín receptor tyrozín kináza inhibítorov, ktoré blokujú PDGF signálnu transdukčnú dráhu boli zistené ako majúce inhibíciu PDGF stimulovanej receptor tyrozín kináza fosforylácie in vivo v modeli poškodenia krysej manžety (Drug Develop. Res., 29; 158 - 166 (1993)).

Ako acidický fibroblastový rastový faktor (aFGF) a bázický fibroblastový rastový faktor (bFGF) majú mnoho biologických aktivít, zahrnujúcich schopnosť promotovať bunkovú proliferáciu a diferenciáciu. Priama evidencia podpory FGF zahrnutia do VSMC bola uvedená Lindnerom a Reidym (Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88: 3739 - 3743 (1991)), ktorí demonštrujú, že systémová injekcia neutralizujúcej protilátky proti bFGF pred balónikovou angiplas tiou krysích arteria carotis inhibuje poškodenie vyvolané mediálnou SMC proliferáciou z viac ako 80 % merané 2 dni po poškodení. Je pravdepodobné, že bFGF uvoľnený z poškodených buniek pôsobí parakrinálnym spôsobom na vyvolanie VSMC rastu. V poslednom čase Lindner a Reidy (Cir. Res., 73: 589 - 595 (1993)) demonštrovali zvýšenú expresiu tak mRNA pre bFGF ako aj FGFR-1 v replikácii VSMC a endotele v en face preparáciách balónikom poškodených krysích arteria carotis. Teda dáta poskytujú zistenie, že poškodené artérie ligand/receptor systému bFGF a FGFR-I môžu byť zahrnuté do kontinuálnej proliferatívnej odozvy VSMA vedúcej k formácii neointimy.

Buchdunger a spol., Proc. Natl. Acad. Sci ., Vol. 92, marec 1995, 2558 - 2562, uvádzajú inhibíciu PDGF signálnej transdukčnej dráhy ako in vitro tak in vivo PDGF receptor tyrozín proteín kinázovým inhibítorom. Zlúčenina má protinádorovú aktivitu v nádorových modeloch pri použití astrocytoma bunkových línií.

Tak EGF, PDGF, FGF a iné rastové faktory majú pivotálnu úlohu v patomechanizme bunkových proliferatívnych chorôb ako je rakovina, ateroskleróza a restenóza. Po spojení s ich zodpovedajúcimi receptormi stimulujú tieto rastové faktory aktivitu tyrozín kinázy ako jednej z počiatočných biochemických udalostí, ktoré vedú k DNA syntéze a bunkovému deleniu. Z toho vyplýva, že zlúčeniny, ktoré inhibujú proteín tyrozín kinázy spojené s transdukčnými dráhami intracelulárneho rastového faktora sú vhodnými činidlami na liečenie bunkových proliferativnych chorôb.

V súčasnosti bolo objavené, že určité pyrido[2,3-dj-pyrimidíny inhibujú proteín tyrozín kinázy a sú vhodné na liečenie a prevenciu aterosklerózy, restenózy a rakoviny.

Niektoré pyrido[2,3-d]pyrimidíny sú známe. Napríklad US patent 3534039 opisuje série 2,7-diamino-6-arylpyrido[2,3-d]-pyrimidinových zlúčenín ako diuretických činidiel; US patent 3639401 opisuje série 6-aryl-2,7-bis[(trialkylsilyl)amino]-pyrido[2,3-d]pyrimidínových zlúčenín ako diuretických činidiel; US patent 4271164 opisuje série 6-substituovaných-arylpyrido[2,3-d]pyrimidín-7-aminov a ich derivátov ako antihypertenzívnych činidiel; európska zverejnená prihláška 0537463 A2 opisuje série substituovaných-pyrido[2,3-d]pyrimidinov vhodných ako herbicídy. Podobné zlúčeniny sú tiež opísané v J. Med. Chem. 26 (1983), str. 403 až. 4Γ1 a v US-A-5 364 860 a US-A-5 409 930. Žiadny z predchádzajúcich odkazov neopisuje zlúčeniny podľa predloženého vynálezu alebo nenaznačuje, že také zlúčeniny sú vhodné na liečenie aterosklerózy, restenózy, psoriázy a rakoviny.

Podstata vynálezu

Predmetom vynálezu sú pyrido[2,3-D]pyrimidíny všeobecného vzorca (I)

X predstavuje skupinu vzorca NH, N-acyl, O alebo S, pričom acyl predstavuje alkanoylskupinu s I až 6 atómami uhlíka, ktorá je prípadne substituovaná skupinou NR5R6, kde R₅ a R_Ď majú ďalej uvedený význam, karboxvskupínou alebo heterocyklickou skupinou s 5 až 6 členmi, z ktorých 1 alebo 2 sú heteroatómy zvolené z dusíka, substituovaného dusíka, kyslíka alebo síry, pričom pod označením „substituovaný dusík“ sa rozumie dusík nesúci alkylskupinu s 1 až atómami uhlíka alebo skupinu (CH₂)_nPh, kde n a Ph majú ďalej uvedený význam, alebo acyl predstavuje fenylkarbonylskupinu alebo (substituovaný fenyljkarbonylskupinu, kde termín „substituovaný fenyl“ má ďalej uvedený význam;

R, predstavuje skupinu vzorca NR₃R₄, SR₃, OR₃, SOR₃ alebo SO₂R₃;

každý zo symbolov

R₂, Rj a R4 nezávisle predstavuje atóm vodíka, skupinu vzorca (CH₂)_nPh, kde Ph znamená fenylskupinu alebo substituovanú fenylskupinu a n je číslo 0, 1, 2 alebo 3; cykloalkyl skupinu s 3 až 6 atómami uhlíka, alkanoylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka alebo alkinylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, pričom tieto alkylskupiny, alkenylskupiny a alkinylskupiny sú prípadne substituované skupinou NR<R₆, fenylskupinou, substituovanou fcnylskupinou, tioalkylskupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, hydroxyskupinou, karboxyskupinou, halogénom alebo cykloalkylskupinou s 3 až 6 atómami uhlíka, kde R₅ a R_fl každý nezávisle predstavuje vodík, alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, alkinylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, skupinu (CH₂)_nPh, kde Ph predstavuje fenylskupinu alebo substituovanú fenylskupinu a n znamená číslo 0, 1, 2 alebo 3, alebo cykloalkylskupinu s 3 až 6 atómami uhlíka alebo R₅ a R₆ brané dohromady s atómom dusíka, ku ktorému sú pripojené, môžu doplňovať kruh obsahujúci 3 až 7 atómov uhlíka a prípadne obsahujúci 1,2 alebo 3 heteroatómy zvolené z dusíka, kyslíka a síry; pričom

R4 môže okrem toho predstavovať tiež skupinu vzorca -C(=O)R₃, -C(=O)OR₃, -SO₂R₃, -SO₂NR₅R_fl, -CÍOjNRjRé, -C^SjNRsR* -C(=NH)R₃ alebo -C(=NH)NR₅R₆; a

R₃ a R4 brané dohromady s atómom dusíka, ku ktorému sú pripojené, môžu navyše doplňovať kruh obsahujúci 3 až 7 atómov uhlíka a prípadne obsahujúci 1, 2 alebo 3 heteroatómy zvolené z dusíka, kyslíka a síry;

Ar predstavuje fenylskupinu alebo substituovanú fenylskupinu;

pričom pod pojmom „substituovaná fenylskupina“ sa rozumie fenylskupina substituovaná 1, 2 alebo 3 skupinami zvolenými zo súboru skladajúceho sa z halogénu, alkylskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, merkaptoskupiny, alkyltioskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, hydroxyskupiny, alkylkarbonylskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, kyanoskupiny, nitroskupiny, trifluórmetylskupiny, alkylkarbonyloxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, aminoskupiny, alkylaminoskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka a di-alkylaminoskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka v každej z alkylových častí;

a ich farmaceutický vhodné soli.

Tieto zlúčeniny sú vhodné na inhibíciu proteínkináz a sú tak účinné pri liečení bunkových proliferatívnych chorôb, aterosklerózy, restenózy, psoriázy a rakoviny.

Preferované zlúčeniny majú uvedený vzorec, kde Ar jc fenyl alebo fenyl substituovaný 1 alebo 2 skupinami vybranými z C_rC₆alkylu alebo halogénu, najmä halogénu ako je chlór alebo bróm.

Ďalšie preferované zlúčeniny sú tie, kde R₂ je C|-C₆ alkyl, C₂-C₆alkenyl, -(CH₂)_nPh, ako je fenyl a benzyl, alebo C₃-C₆cykloalkyl ako je cyklopropyl.

Osobitne preferovaná skupina zlúčenín má uvedený vzorec, kde X je O.

Iná preferovaná skupina zlúčenín sú tie, kde X je NH. Toto sú iminy a sú najmä vhodné ako medziprodukty, ktoré vedú k zlúčeninám, kde X je O.

Ďalšie preferované zlúčeniny majú uvedený vzorec, kde R] je NH₂ alebo NHR₃, kde R₃ je C|-C₆alkyl prípadne substituovaný NR₅R<;.

Osobitne preferovaná skupina zlúčenín podľa vynálezu má vzorec

kde Rj je NR3R4, OR₃ alebo SR₃, kde R₃ je vodík alebo C|-C₆alkyl a R₄ je vodík alebo C|-C₆alkanoyl; R₂ je C_rC₆alkyl a R₇ a R₈ nezávisle sú C_rC₆alkyl alebo halogén, najmä chlór, fluór alebo bróm. Preferované alkylové skupiny sú substituované NR₅R₆, kde R₅ a R„ sú vodík alebo alkyl, alebo spolu s dusíkom, ku ktorému sú pripojené, tvoria cyklický kruh, ktorý má 2 heteroatómy, napríklad

kde R₉ je vodík, Ci-C₆alkyl alebo (CH₂)_nPh.

Ďalšia preferovaná skupina zlúčenín má vzorec

kde Ri, R₂, R₇ a R₈ majú definovaný význam.

Ďalšia preferovaná skupina zlúčenín má vzorec

kde R], R₂, R₇ a R₈ majú definovaný význam.

Je potrebné vziať na vedomie, že ak R₂ je vodík, zlúčeniny môžu existovať v tautomémej forme, ako je uvedená ďalej

Najpreferovanejšie zlúčeniny podľa vynálezu majú vzorec

kde R_b R₂, R₇ a R₈ majú definovaný význam. Ideálne je R₂ alkyl ako je metyl alebo etyl a R₇ a R₈ je halogén ako je chlór alebo bróm. Najpreferovanejšia Ar skupina je fenyl, ideálne fenyl substituovaný jednou, dvoma alebo tromi skupinami vybratými z halogénu, C_rC₆alkylu, hydroxy, C_rC₆alkoxy, karboxy, C|-C₆alkoxykarbonylu a Q-C^lkylu substituovaného hydroxy, karboxy, alkoxykarbonylom, amino, C_rC₆alkylamino a di-Cj-C_flalkylamino, Obzvlášť preferovaná skupina takýchto zlúčenín má vzorec

kde Rio je fenyl, chlór, bróm, metyl, metoxy, hydroxy, hydroxymetyl, 2-dietylaminoetoxy, metoxykarbonylmetyl, karboxy, karboxymetyl, etoxykarbonyl, 2-karboxyetyl alebo 2-etoxykarbonyletyl.

Tento vynález tiež poskytuje farmaceutické formulácie, obsahujúce zlúčeninu všeobecného vzorca (I) spoločne s farmaceutický prijateľným nosičom, riedidlom alebo prísadou.

Zlúčeniny v rozsahu predloženého vynálezu majú špecifickú afinitu proti jednému alebo viacero substrátovým miestam tyrozin kináza domén EGF alebo inej EGF rodiny receptorov ako je erb B2, 3 a 4; FGF, PDGF, V-src a C-src.

Zlúčeniny v rozsahu predloženého vynálezu účinne inhibujú PDGF autofosforyiáciu receptora a inhibujú proliferáciu a migráciu vaskulámych hladkých svalových buniek.

Ako inhibitory proteín kináz, zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sú vhodné na kontrolu proliferativnych chorôb, zahrnujúcich leukémiu, rakovinu, psoriázu, proliferáciu vaskulámych hladkých svalov a postchirurgickú vaskulámu stenózu a restenózu u cicavcov.

Ďalším vyhotovením tohto vynálezu je spôsob liečenia subjektov, postihnutých chorobami vyvolanými proliferáciou vaskulámych hladkých svalov. Spôsob poskytuje inhibíciu proliferácie a/alebo migrácie vaskulámych hladkých svalov podaním účinného množstva zlúčeniny všeobecného vzorca (1) subjektu v prípade potreby takej liečby.

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu môžu existovať v nesolvátovanej forme ako aj v solvátovaných formách, zahrnujúcich hydratované formy. Všeobecne sú solvátované formy, zahrnujúce hydratované formy, ekvivalentné nesolvátovaným formám a sú zahrnuté do rozsahu predloženého vynálezu.

V zlúčeninách všeobecného vzorca (I) výraz „C,-C₆alkyl“ znamená priamy alebo rozvetvený uhľovodíkový radikál, ktorý má 1 až 6 atómov uhlíka a zahrnujúci, napríklad metyl, etyl, n-propyl, izopropyl, n-butyl, sek.butyl, izobutyl, terc.butyl, n-pentyl, n-hexyl a podobne.

„Halogén“ zahŕňa fluór, chlór, bróm a jód.

„C₂-C₆alkenyl“ predstavuje priame a rozvetvené uhľovodíkové radikály, ktoré majú od 2 do 6 atómov uhlíka a jednu dvojnú väzbu a zahrnujú etenyl, 3-buten-1 -yl, 2-etenylbutyl, 3-hexen-l-yl a podobne. Typicky C₂-C₆alkinylové skupiny zahrnujú propinyl, 2-butín-1 -yl, 3-pentín-l-yl a podobne.

„C₃-C₆cykloalkyl“ znamená cyklickú hydrokarbylovú skupinu ako jc cyklopropyl, cyklobutyl, cyklohexyl a cyklopentyl.

„C₁-C₆alkoxy“ znamená uvedené alkylové skupiny naviazané cez kyslík, ich príklady zahrnujú metoxy, etoxy, izopropoxy, terc.butoxy a podobne.

„C|-C₍alkanoyl“ skupiny sú alkyl pripojený cez karbonyl,

O

II napr. Ci-C₅alkyl C-. Takéto skupiny zahrňujú formyi, acetyl, propionyl, butyryl a izobutyryl.

„Acyl“ znamená alkyl alebo aryl (Ar) skupinu naviazanú

O

II cez karbonylovú skupinu (-C-). Napríklad acyl zahŕňa C|-C₆alkanoyl, zahrnujúci substituovaný alkanoyl, kde alkylová časť môže byť substituovaná NR₅R₆ alebo karbocyklickou, alebo heterocyklickou skupinou. Typické acylové skupiny zahrnujú acetyl, benzoyl a podobne.

Opísané alkylové, alkenylové, alkoxylové a alkinylové skupiny môžu byť substituované. Skupiny substituentov, ktoré môžu byť časťou alkylových, alkenylových, alkoxylových a alkynylových skupín sú NR₅R₆, fenyl, substituovaný fenyl, tioalkyl (Cj-C₆), C|-C₆alkoxy, hydroxy, karboxy, C_rC₆alkoxykarbonyl, halogén, cykloalkyl a 5- alebo 6členný karbocyklický kruh alebo heterocyklický kruh, majúci J alebo 2 heteroatómy vybraté z dusíka, substituovaného dusíka, kyslíka a síry, „Substituovaný dusík“ znamená dusík, ktorý nesie C|-C₆alkyl alebo (CH₂)_nPh.

Príklady substituovaných alkylových skupín tak zahrnujú

2- aminoetyl, 2-dietylaminoetyl, 2-dimetylaminopropyl, etoxykabonylmetyl, 3-fenylbutyl, metylsulfanylmetyl, metoxymetyl, 3-hydroxypentyl, 2-karboxybutyl, 4-chlórbutyl,

3- cyklopropylpropyl, 3-morfolinopropyl, piperazinylmetyl a 2-(4-metylpiperazinyl)etyl.

Príklady substituovaných alkenylových skupín tak zahrnujú 2-dietylaminoetenyl, 3-amino-2-butenyl, 3-(l-piperazinyl)-l-propenyl, 3-hydroxy-l-propenyl, 2-( 1-s-triazinyl)etenyl, 3-fenyl-3-pentenyl a podobne.

Príklady substituovaných alkinylskupín zahrnujú 2-metoxyetenyl, 2-etylsulfanyletinyl, 4-(l-piperazinyl)-3-(butinyl), 3-fenyl-5-hexinyl, 3-dietylamino-3-butinyl, 4-chlór-3-butmyl, 4-cyklobutyl-4-hexinyl a podobne.

Typické substituované alkoxyskupiny zahrnujú aminometoxy, trifluórmetoxy, 2-dietylaminoetoxy, 2-etoxykarbonyletoxy, 3-hydroxypropoxy, 6-karboxyhexyloxy a podobne.

Ďalej zahrnujú príklady substituovaných alkyl, alkenyl a alkinylskupín dimetylaminometyl, karboxymetyl, 4-dietyl-amino-3-butcn-l-yl, 5-etylmetylamino-3-pentín-l-yl, 4-morfolínobutyl, 4-tetrahydropyridinylbutyl-3-imidazolidín-1-ylpropyl, 4-tetrahydrotiazol-3-yl-butyl, fenylmetyl, 3-chlórfenylmetyl a podobne.

Výraz „Ar“ označuje nesubstituované a substituované aromatické a heteroaromatické skupiny. Heteroaromatické skupiny majú od 4 do 9 atómov v kruhu, z ktorých jeden až štyri sú vybraté z O, S a N. Preferované skupiny majú 1 alebo 2 heteroatómy v 5- alebo 6-člennom aromatickom kruhu. Mono a bicyklické kruhové systémy sem tiež spadajú. Typické Ar skupiny zahrnujú fenyl, 3-chlórfenyl, 2,6-dibrómfenyl, pyridyl, 3-metylpyridyl, benzotienyl, 2,4,6-tribrómfenyl, 4-etylbenzotienyl, furanyl, 3,4-dietylfuranyl, nafty], 4,7-dichlómaftyl a podobne.

Preferované Ar skupiny sú fenyl a fenyl substituovaný 1,2 alebo 3 skupinami nezávisle vybratými z halogénu, alkylu, alkoxylu, tio, tioalkylu, hydroxy, alkanoylu, -CN, -NO₂, -COOR_s, -CF₃, alkanoyloxy alebo amino vzorca -NR₅R₆. Alkyl a alkoxyskupiny môžu byť substituované ako je definované. Napríklad typické skupiny sú karboxyalkyl,t.j.

C_rC₆alkyl, alkoxykarbonylalkyl C_rC₆alkyl, hydroxyalkyl a

I

COOH COOalkyl hydroxyalkoxy, (O)₀ alebo i-C_rC_salkyl a alkoxyalkyl, t. j. C|-C_f)alkyl. Disubstituovaný fenyl je preferovaný a

O alkyl

2.6- disubstituovaný fenyl je predovšetkým preferovaný.

Typické Ar substituované fenyl skupiny, ktoré sú preferované, zahrnujú 2-aminofenyl, 3-chlór-4-metoxyfenyl,

2.6- dimetylfenyl, 2,6-dietylfenyl, 2-n-hexyl-3-fluórfenyl, 3-hydroxyfenyl, 4-hydroxymetylfenyl, 3,4-dimetoxyfenyl,

2.6- dichlórfenyl, 4-(3-aminopropoxy)fenyl-, 2,6-difluórfenyl, 2-chlór-6-metylfenyl, 2,4,6-trichlórfenyl, 2,6-dimetoxyfenyl, 4-(dietylaminoetoxy)fenyl, 2,6-dihydroxyfenyl,

2.6- dibrómfenyl, 2,6-dinitrofenyl, 2,6-di(trifluórmetyl)-fenyl, 3-(dimetylaminoetyl)fenyl, 2,6-dimetylfenyl, 2,3,6-trimetylfenyl, 2,6-dibróm-4-metylfenyl a podobne.

V preferovanom vyhotovení R] vo vzorci (I) je skupina NR3R4, kde R₃ a R₄ sú vodík, C,-C₆-alkyl, Ci-C_č-alkyl substituovaný skupinou NR₅R₆ a kde R₃ je vodík a R₄ je C,-C;-alkanoyl alebo alkanoyl substituovaný COOH.

Príklady takýchto NR₃R₄ skupín zahrnujú amino, metylamino, diizopropylamino, acetylamino, propionylamino, 3-ammopropylamino, 3-etylaminobutylamino, 3-di-n-propylamino-propylamino, 4-dietylaminobutylamino a 3-karboxypropionylamino. R> a R₄ môžu spolu s dusíkom, ku ktorému sú pripojené, tvoriť kruh, ktorý môže obsahovať 2 alebo viacero heteroatómov, výhodne dusík. Príklady takýchto cyklických NR₃R₄ skupín zahrnujú pyrrolidinyl, piperazinyl, 4-metyl-piperazinyl, 4-benzylpiperazinyl, pyridinyl, piperidinyl, pyrazinyl, morfolinyl a podobne. R₃ a R4 môže navyše tvoriť cyklický kruh, ktorý je substituovaný 1 alebo 2 oxoskupinami. Napríklad ak R₃ je vodík a R₄ je alkanovl

O

II (t. j. Cj-Cí-alkyl C), kde alkyl nesie substituent ako je karboxy alebo halogén, môžu byť takéto skupiny cyklizované pri vzniku cyklických ketónov. Typické skupiny zahrnujú 2-ketopyrrolidinyl a l-pyrrolidinyl-2,5-dión. Ako je uvedené, preferovanou skupinou zlúčenín sú tie, kde R₃ je vodík a R₄ je aryl, najmä fenyl a fenyl substituovaný skupinami ako je aminoalkyl a aminoalkoxy, napr. dimetylaminoetyl a dimetylaminoetoxy.

Zlúčeniny vzorca (I) sú schopné ďalej tvoriť tak farmaceutický prijateľné adičné soli s kyselinami a/alebo bázami. Všetky tieto formy sú v rozsahu predloženého vynálezu. Farmaceutický prijateľné adičné soli s kyselinami zlúčenín vzorca (I) zahrnujú soli odvodené od anorganických kyselín ako je kyselina chlorovodíková, dusičná, fosforitá, sírová, bromovodíková, jodovodíková, fosforečná a podobne, ako aj soli odvodené od organických kyselín, fenylsubstituovaných alkánových kyselín, hydroxyalkánových kyselín, alkándiových kyselín, aromatických kyselín, alifatických kyselín a aromatických sulfónových kyselín atď. Takéto soli zahrnujú sulfáty, pyrosulfáty, bisulfáty, sulfity, bisulfity, nitráty, fosfáty, monohydrogenfosfáty, dihydrogenfosfáty, metafosfáty, pyrofosfáty, chloridy, bromidy, jodidy, acetáty, propionáty, kapryláty, izobutyráty, oxaláty, malonáty, sukcináty, suberáty, sebakáty, fumaráty, maleáty, mandláty, benzoáty, chlórbenzoáty, metylbenzoáty, dinitrobenzoáty, ftaláty, benzénsulfonáty, toluénsulfonáty, fenylacetáty, citráty, laktáty, maleáty, tartaráty, metánsulfonáty a podobne. Zahrnuté sú tiež soli aminokyselín, ako sú argináty a podobne, a glukonáty, galaktouronáty, (pozri napr. Berge S. M. a spol., „Pharmaceutical Salts“, J. of Pharmaceutical Science, 66: 1 - 19 (1977)).

Adičné soli bázických zlúčenín s kyselinami sa pripravia kontaktom formy voľnej bázy s dostatočným množstvom požadovanej kyseliny pri vzniku soli bežným spôsobom. Forma voľnej bázy môže byť regenerovaná stykom soľnej formy s bázou a izoláciou voľnej bázy bežným spôsobom. Formy voľnej bázy sa čiastočne líšia od svojich zodpovedajúcich soľných foriem určitými fyzikálnymi vlastnosťami ako je rozpustnosť v polárnych rozpúšťadlách, ale inak sú soli ekvivalentné ich zodpovedajúcej voľnej báze na účely predloženého vynálezu.

Farmaceutický prijateľné adičné soli báz sa tvoria s kovmi alebo amínmi ako sú soli alkalických kovov a kovov alkalických zemín alebo organických amínov. Príklady kovov použitých ako katióny sú sodík, draslík, horčík, vápnik a podobne. Príklady vhodných amínov sú N,N'-dibenzyletyléndiamin, chlórprokaín, cholín, dietanolamín, etyléndiamín, N-metylglukamín a prokaín (pozri napr. Berge S. M. a spol., „Pharmaceutical Salts“, J. of Pharmaceutical Science, 66: i - 19 (1977)).

Adičné soli s bázami kyslých zlúčenín (napríklad keď R₃ je karboxy alkylskupina ako je karboxymetyl alebo 3-karboxybutyl) sa pripravia stykom formy voľnej kyseliny s dostačujúcim množstvom požadovanej bázy pri získaní soli bežným spôsobom. Forma voľnej kyseliny môže byť regenerovaná kontaktom soľnej formy s kyselinou a izoláciou voľnej kyseliny obvyklým spôsobom. Formy voľnej kyseliny sa líšia od svojich zodpovedajúcich solí čiastočne v určitých fyzikálnych vlastnostiach ako je rozpustnosť v polárnych rozpúšťadlách, ale inak sú soli ekvivalentné ich zodpovedajúcej voľnej kyseline na účely predloženého vynálezu.

Zatiaľ čo tu uvedené formy vynálezu tvoria preferované vyhotovenia, sú možne aj mnohé iné. Nie je možno tu uviesť všetky možné ekvivalentné formy alebo rozvetvenia vynálezu. Je treba chápať, že tu používané výrazy sú skôr opisné ako obmedzujúce a že je možno uskutočniť rôzne zmeny bez toho, aby bol narušený rozsah a myšlienka vynálezu.

Zlúčeniny vzorca (I) môžu byť pripravené podľa syntéz uvedených v schémach I až VII. Aj keď tieto schémy často uvádzajú presné štruktúry, sú metódy široko aplikovateľné na analogické zlúčeniny vzorca (I), pri pomoci vhodného chránenia alebo deprotekcie reaktívnych skupín metódami, ktoré sú v odbore organickej chémie štandardné. Napríklad hydroxyskupiny, na účely prevencie pred neočakávanými vedľajšími reakciami, všeobecne vyžadujú, aby boli prevedené na étery alebo estery počas chemických reakcií na iných miestach molekuly. Hydroxy- chrániaca skupina sa ľahko odstráni pri poskytnutí voľnej hydroxyskupiny. Aminoskupiny a karboxylové kyslé skupiny sú podobne derivatizované pre ich ochranu proti neočakávaným vedľajším reakciám. Typické chrániace skupiny a metódy na ich pripojenie a odštiepenie sú plne opísané v práci Greene a Wuts v Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, New York (2. vyd.; 1991) a McOmie, Protective Groups in Organic Chemistry, Plénum Press, New York, 1993.

Schéma I opisuje typickú metódu prípravy pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ónov 7-(8H)-imidov podľa vynálezu, zlúčenín vzorca (I), kde X je O alebo NH. Syntéza začína reakciou kyanoacetátu ako je etyletoxymetylénkyanoacetát s tiopseudomočovinou ako je 2-metyl-2-tiopseudomočovinasulfát pri získaní 5-kyano-4-hydroxy-2-(metylsulfanyl)pyrimidínu. Táto reakcia je podrobnejšie opísaná v Helv. Chim. Acta., 42: 763 - 772(1959). 4-Hydroxypyri midín v nasledujúcom stupni reaguje s halogenačným činidlom ako je fosforoxychlorid alebo tionylchlorid pri získaní 4-halogénpyrimidínu, napríklad 5-kyano-4-chlór-2-(metylsulfanyl)pyrimidínu. Halogénpyrimidín potom reaguje s amínom R₂NH₂ pri poskytnutí 5-kyano-4-substituovaného amino-2-(metylsulfanyl)pyrimidínu. Použitý amín môže mať R₂, ktorá je skupinou požadovanou v konečnom produkte vzorca (I), napríklad alkyl ako je metyl alebo R₂ môže byť skupina, ktorá sa neskôr odstráni, napríklad benzyl alebo podobne, pri vzniku zlúčeniny vzorca (I), kde R₂ je vodík. Zlúčeniny, kde R₂ je vodík môžu byť alkylované alebo acylované štandardnými metódami.

Reakcia medzi halogénpyrimidmom a amínom R₂NH₂ sa typicky uskutočňuje zmiešaním ekvimolámych množstiev halogénpyrimidínu a amínu v nereaktívnom organickom rozpúšťadle ako je toluén, xylén, metylénchlorid alebo podobne, pri teplote od asi 50 °C do asi 150 °C. Prebytok amínu je možno použiť, ak je to potrebné. 4-Aminopyrimidín, ktorý je získaný, potom reaguje s hydrazínom alebo substituovaným hydrazinom na nahradenie 2-metylsulfanylskupiny pri získaní 2-hydrazíno-4-substituovaného amino-5-kyano-pyrimidínu-. Hydrazínopyrimidín reaguje s dusitanom sodným vo vodnej anorganickej kyseline na uskutočnenie diazotácie hydrazínovej skupiny pri poskytnutí 2-azido-4-(substituovaný amino)-5-kyano-pyrimidínu. Reakcia tejto zlúčeniny s redukčným činidlom ako je Raney nikel prebieha hydrogenácia tak kyanoskupiny ako aj azidoskupiny pri získaní 2-amino-4-(substituovaný amino)-5-pyrimidinkarboxaldehydu.

4-(Substituovaný amino)-5-pyrimidínkarboxaldehydy môžu byť alternatívne pripravené tak, že sa vyjde z komerčne dostupného esteru 4-halogén-5-pyrimidínkarboxylovej kyseliny. Napríklad etylester kyseliny 2-metylsulfanyl-4-chlór-5-pyrimidínkarboxylovej (dostupný od Aldrich Co.) môže reagovať s amínom R₂NH₂ ako je metylamín, benzylamín alebo podobne, k nahradeniu 4-chlórskupiny a poskytnutia zodpovedajúceho etylesteru kyseliny 2-metylsulfanyl-4-(substituovaný amino)-5-pyrimidínkarboxylovej. Esterová skupina sa redukuje na alkohol, napríklad reakciou s litiumalumíniumhydridom v tetrahydrofuráne a alkoholová skupina sa potom oxiduje na aldehyd reakciou s oxidantom ako je dichromát sodný, oxid mangánatý alebo podobne pri získaní zodpovedajúceho 2-metylsulfanyl-4-(substituovaný amino)-5-pyrimidínkarboxaldehydu. 2-Metylsulfanylová skupina sa vytesní hydrazínom a hydrazínoskupina sa diazotizuje a následne redukuje ako je opísané pri poskytnutí požadovaného 2-amino-4-(substituovaný amino)-5-pyrimidínkarboxaldehydu.

Pyrimidínkarboxaldehyd potom reaguje s arylacetonitrilom v prítomnosti bázy a v rozpúšťadle ako je xylén 2-etoxyetanol, dioxán alebo podobne ako je uvedené v schéme I. Typické bázy, ktoré môžu byť použité, zahrnujú hydrid sodný, metoxid sodný, kovový sodík, uhličitan draselný a podobne. Pyrimidinkarboxaldehydy a arylacetonitrily sú typicky používané v približne ekvimolámych množstvách. Typické arylacetonitrily, ktoré môžu byť použité, zahrnujú fenylacetonitril, 2,6-dichlórfenylacetonitril, 2,6-dimetylfenylacetonitril, o-tolylacetonitril, pyridylacetonitril, furanylacetonitril, naftylacetonitril a podobne. Reakcie sa typicky uskutočňujú v nereaktívnom rozpúšťadle ako je metyl alebo etylcellosolve, diglym, dimetylformamid alebo podobne a pri zvýšenej teplote asi 50 °C až asi 200 °C a všeobecne je v podstate hotová počas asi 2 až asi 24 hodín. Produkt 6-aryl-7-imino-8-substituovaný-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]py-rimidín-2-ylamín vzorca (I), kde X je NH a R, je NR₃R₄, sa ľahko izoluje prídavkom vody k reakčnej zmesi, čo všeobecne spôsobí vyzrážanie produktu. Produkt imín môže byť ďalej čistený, ak je to potrebné, rekryštalizáciou z rozpúšťadiel ako je etylacetát, acetón, izopropanol a podobne, alebo chromatografiou cez pevné nosiče ako jc silikagél.

6-Aryl-7-imino-8-substituovaný-7,8-dihydro-pyrido-[2,3-d]-pyrimidín-2-ylamín takto pripravený má vzorec

		^Ar
i R3R4tr N	I
	1 R2

kde R₂, R₃, R₄ a Ar majú definovaný význam. Typické imíny takto získané zahrnujú nasledujúce:

r.	R.i	r4	Ar
CHj	H	CH,	fenyl
cyklopropyl	CH,	CH,	3-metoxyfenyl
3-butinyl	Et	acetyl	1 -naftyl
3-chlórfenyl	H	H	3-pyridyl
3-aminopropyl	H	2-furyl	2-tienyl
benzyl	-CH,·	-CH,-CH2-CH,	2,3,5-tribrom- fcnyl.HCI
Et	Et	Et	fenyl
Et	H	r~\	fenyl
		--__/N—cn3
Et	H	O	2-jódfenyl
Me	H	/^=\ —\\ /)--OCKjCHjN \k3	2,6-dibrómfenyl

6- Aryl-7-imino-8-substituovaný-7,8-dihydropyrido-[2,3-d]-pyrimidín-2-ylamíny sú vhodné ako terapeutické činidlá, rovnako ako medziprodukty, pretože sú ľahko konvertovateľné na zodpovedajúce 7-ketoderiváty jednoduchým zahriatím v anorganickej kyseline alebo podobne. Hydrolýzaje v podstate úplná po asi 5 až 24 hodinách, ak sa uskutočňuje pri asi 60 °C až asi 200 °C. Produkt, 2-amino-6-aryl-8-substituovaný-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-(8H)-ón sa ľahko izoluje odstránením reakčného rozpúšťadla, napríklad odparením pri zníženom tlaku a kryštalizáciou z bežných rozpúšťadiel ako je etylacetát, acetón, tetrahydrofurán a podobne.

7- Oxo-pyrido[2.3-d]pyrimidíny podľa vynálezu môžu byť pripravené jednoduchou hydrolýzou 7-amino-pyridopyrimidínov v anorganickej kyseline ako je ilustrované v schéme II. 7-Amino-pyridopyrimidíny sú ľahko dostupné metódami opísanými v US patente 3534039. 7-Aminopyridopyrimidínv sa jednoducho rozpustia v anorganickej kyseline ako jc koncentrovaná kyselina chlorovodíková, kyselina sírová, kyselina fosforečná alebo podobne. Hydrolyzačná reakcia je všeobecne úplná po asi 12 až asi 24 hodinách, ak sa uskutočňuje pri asi 80 °C až asi 200 °C. Produkt sa ľahko izoluje odstránením reakčného rozpúšťadla a kryštalizáciou z rozpúšťadla ako je dimetylsulfoxid, dimetylformamid, dioxán alebo podobne.

7-Oxo-pyrido[2,3-d]pyrimidíny môžu byť alternatívne pripravené reakciou 2,4-diamíno-5-pyrimidínokarboxaldehydov s arylacetoesterom ,tak ako je uvedené ďalej:

kde R₂, R3, R4 a Ar majú definovaný význam a alkyl je nižšia alkyl skupina ako je metyl, etyl, izobutyl a podobne. Reaktanty sú všeobecne zmiešané s nereaktívnym rozpúšťadlom ako je dimetylformamid, tetrahydrofúrán alebo etylcellosolve a arylacetoester je všeobecne používaný s prebytkom, napríklad v 0,5 až 1,0 molámom prebytku vzhľadom na pyrimidín. Reakcia sa uskutočňuje v prítomnosti bázy ako je metoxid sodný alebo hydrid sodný a všeobecne jc úplná počas asi 2 až 24 hodín, ak sa uskutočňuje pri zvýšenej teplote od asi 50 do asi 120 °C. Produkt 7-oxopyrido[2,3-d]pyrimidíny sa získajú odstránením rozpúšťadiel a kryštalizáciou produktu z organického rozpúšťadla ako je metanol, etylacetát alebo podobne. Proces môže byť uskutočnený s 2-oxy (R₍ = -OR₃) a 2-tio (R] = -SR₃) 4-amino-5-pyrimidínkarboxaldehydmi pri poskytnutí zodpovedajúcich 7-oxo-2-oxy- a 2-tio pyrido[2,3-d]pyrimidínov podľa vynálezu.

Zlúčeniny podľa vynálezu, kde R₂ vo vzorci (I) je iný ako vodík, sa pripraví ľahko použitím substituovaného amínu R₂NH₂ v opísanej reakcii, alebo alternatívne alkyláciou pyridopyrimidínov, kde R₂ je vodík, napríklad ako je ilustrované v schéme II. Reakcia je všeobecne uskutočňovaná zmiešaním pyridopyrimidínu s ekvimolámym množstvom alebo prebytkom alkylačného činidla, napríklad alkylhalogenidu ako je metyljodid, benzylbromid, 3-hexén-lyl-jodid alebo podobne vo vzájomnom rozpúšťadle ako je toluén, xylén, dimetylformamid alebo podobne. Báza ako je hydrid sodný môže byť pridaná na katalýzu reakcie a na pôsobenie ako lapač kyseliny. Produkt 8-substituovaný pyridopyrimidín sa ľahko izoluje odstránením reakčných rozpúšťadiel a ďalej sa čistí, ak je to žiaduce, chromatografiou alebo kryštalizáciou z toluénu, acetónu alebo podobne.

Schéma III ilustruje reakciu 2-aminopyridopyrimidínov s acylačnými činidlami a diacylačnými činidlami pri vzniku amidov a cyklických amino systémov. Napríklad 2-aminopyridopyrimidíny vzorca

kde R₂ je iný ako vodík, X je O alebo S a Ar má definovaný význam, môžu reagovať s ekvimolámym množstvom alebo slabým prebytkom halogenidu kyseliny alebo anhydridu kyseliny pri dosiahnutí acylácie 2-aminoskupiny. Typické halogenidy kyseliny zahrnujú acetylchlorid, benzoylbromid, propionyljodid a podobne. Bežne používané anhydridy zahrnujú acetanhydrid, propionylanhydrid a zmesové anhydridy ako anhydrid kyseliny octovej a maslovej. Acylačné činidlá ako je anhydrid kyseliny jantárovej a podobne, môžu byť použité pri vzniku cyklických imidov ako je opísané v schéme III.

Zlúčeniny podľa vynálezu, kde X je S, majú vzorec

kde R], R₂ a Ar majú definovaný význam. Tieto pyridopyrimidíntióny sa pripravujú reakciou zodpovedajúcich 7-o xozlúčenín (t. j. kde X = O) s ekvivalentným množstvom Lawessonovho činidla alebo sulfidu fosforečného v rozpúšťadle, výhodne pyridínu alebo toluénu, pri zvýšenej teplote asi 90 °C až asi 125 °C počas asi 1 až asi 24 hodín. Produkt sa ľahko izoluje jednoduchým odstránením všetkého reakčného rozpúšťadla a ďalej je možné uskutočniť, ak je to žiaduce, čistenie rutinnými metódami ako je kryštalizácia, chromatografia a podobne.

2-Oxy, 2-tio a 2-amino-pyridopyrimidíny podľa vynálezu, zlúčeniny vzorca

môžu alternatívne byť pripravené ako je opísané v schémach IV a V.

Schéma IV opisuje spôsob syntézy zlúčenín, ktoré majú bázický reťazec v 2-polohe pyrido[2,3-d]pyrimidínového kruhového systému, napríklad, kde R| je NR3R4 a R₃ je vodík alebo CľC^alkyl, substituovaný NR₅R_e a R4 je vodík. V prvom stupni kondenzuje aldehyd ako je 4-metylamino-2-metylsulfanyl-pyrimidín-5-karbaldehyd s arylacetonitrilovým derivátom ako je 2,6-dichlórfenylacetonitril, vo vzájomnom rozpúšťadle ako je Ν,Ν-dimetylformamid a v prítomnosti 1 až 5 molámeho prebytku bázy, výhodne práškovaného uhličitanu draselného alebo uhličitanu cézia, pri teplotách výhodne v rozmedzí 110 °C až 153 °C počas 0,5 až 25 hodín.

Výsledné 7-imino-2-metylsulfanylové deriváty sú použiteľné na prípravu rôznych 2-amino derivátov. Napríklad spracovaním so 100 až 500 percentným molámym prebytkom primárneho amínu ako je N,N-dietylaminopropylamín, pri teplote v rozmedzí 100 °C až 150 °C asi 1 až asi 24 hodín, sa získajú zodpovedajúce 2-substituované aminoderiváty. V prípade amínov, ktoré vrú pod menej ako asi 100 °C, napr. metylamínu, etylamínu, propylamínu a podobne, môže byť použitá vhodná tlaková bomba na dosiahnutie požadovaných reakčných teplôt. Výsledné 2-amino-7-iminoderiváty sú ľahko hydrolyzovateľné, ak je to žiaduce, na 2-amino-7-oxoderiváty reakciou so silnou anorganickou kyselinou, ako je koncentrovaná kyselina chlorovodíková alebo kyselina sírová, pri teplote refluxu pri predĺženom čase, v rozmedzí 6 hodín až 7 dní.

Alternatívne 7-immo-2-metylsulfanylderiváty môžu byť acylované reakciou s acylhalogenidom alebo acylanhydridom, napríklad acetylchloridom alebo anhydridom kyseliny propiónovej pri získaní zodpovedajúcich 7-acylimino-2-metylsulfanylpyridopyrimidínov. Tieto zlúčeniny môžu reagovať s amínom ako je opísané na uskutočnenie odstránenia 2-metylsulfanyl skupiny a poskytnutia 2-aminopyridopyrimidínov, majúcich acyliminoskupinu v polohe 7 (t. j. X = N acyl). 7-Acylimidoderiváty môžu reagovať so silnou kyselinou ako je opísané pri dosiahnutí hydrolýzy 7acylimíno skupiny na 7-oxoskupinu.

Sulfanylzlúčeniny vzorca (I), t. j., kde R| je SR₃, sa ľahko oxidujú na zodpovedajúce sulfoxidy a sulfóny reakciou s činidlami ako je kyselina m-chlórperbenzoová, peroxid vodíka, perboritan sodný, hydrogenpersíran draselný a podobne. Ako je uvedené, sulfanyl, sulfínyl a sulfonylderiváty vzorca (I) sú najmä vhodné na výrobu zodpovedajúcich aminoderivátov, pretože ľahko reagujú s amínmi (HNR3K1) po tom, ako boli podrobené nukleofilnému odstráneniu. Toto je zvlášť výhodná metóda na výrobu 2-arylamino- a 2-heteroarylaminozlúčenín podľa vynálezu (napr. kde R₃ je fenyl alebo pyridyl). Predchádzajúce oxi dačné a nukleofilné odstraňovacie reakcie sú ilustrované v schéme VI.

Oxidácia sulfanylzlúčeniny vzorca (I) sa uskutočni jej reakciou s ekvimolámym množstvom oxidantu, výhodne kyseliny m-chlórperbezoovej, pri získaní zodpovedajúceho sulfoxidu alebo s dvomi molárnymi ekvivalentmi pri získaní zodpovedajúceho sulfónu. Oxidácia sa typicky uskutočňuje v organickom rozpúšťadle ako je chloroform alebo dichlórmetán, a typicky je kompletná počas 1 až 24 hodín, ak sa uskutočňuje pri 25 °C až 45 °C. Vcľkc množstvá oxidantu a dlhšie reakčné časy zaisťujú úplnú tvorbu sulfónu. Zodpovedajúci sulfoxid alebo sulfón sa ľahko izoluje filtráciou alebo odstránením reakčného rozpúšťadla odparením pri zníženom tlaku.

Amíny ľahko nahradzujú sulfanyl, sulfinyl a sulfonylskupiny pri vzniku zlúčenín vzorca (I), kde R, je NR₃R₄. Toto je zvlášť preferovaná metóda na výrobu arylaminozlúčenín, t. j. fenylamino, substituovaných fenylamino, heteroarylamino (napr. pyridylamino, tienylamino) a substituovaných heteroarylamino (napr. etylpyridylamino). Vytesnenie sa uskutočňuje zmiešaním sulfanyl, sulfinyl alebo sulfonylzlúčeniny s amínom, výhodne primárnym alebo sekundárnym amínom. Amín sa všeobecne používa v prebytku, napríklad od asi 20 do 500 molámom prebytku vzhľadom na sulfanyl, sulfinyl alebo sulfonylzlúčeninu. Reaktanty sa všeobecne miešajú čisté alebo vo vzájomných organických rozpúšťadlách, napríklad ako je dimetylformamid, (etoxyetyl)éter, ľadová kyselina octová, dimetylsulfoxid a podobne. Reakcia je všeobecne kompletná po asi 5 minútach až asi 6 hodinách, ak sa uskutočňuje pri zvýšenej teplote asi 100 “C do asi 250 °C. Produkt, zlúčenina vzorca (I), kde R] je NR₃R₄, sa ľahko izoluje filtráciou alebo odstránením reakčného rozpúšťadla odparením. Produkt môže byť ďalej čistený, ak je to žiaduce, kryštalizáciou, chromatografiou alebo podobne.

2-Aminopyridopyrimidíny podľa vynálezu (vzorca (1), kde R[ je NR₃R₄) môžu byť alternatívne pripravené reakciou 2,4-diamino-5-pyrimidínkarboxaldehydu s arylacetonitrilom (ArCH₂CN). 2,4-Diamino-5-pyrimidínkarboxaldehydy môžu byť pripravené z ľahko dostupných 2-sulfanyl alebo sulfinylpyrimidínov nukleofilným vytesnením amínom ako je opísané. Napríklad 2-sulfanyl-4-substituovaný amino-5-alkoxykarbonylpyrimidín môže reagovať s oxidačným činidlom ako je oxaziridín pri získaní zodpovedajúceho sulfoxidu alebo sulfónu. Sulfoxidový alebo sulfonový substituent sa ľahko vytesni reakciou s amínom (HNR₃R₄), pri získaní zodpovedajúceho 2,4-diamino-5-alkoxykarbonyl pyrimidínu. Alkoxykarbonylová skupina môže byť prevedená na aldehydovú skupinu štandardnými metódami (t. j. redukciou na alkohol a oxidáciou alkoholu na aldehyd). 2,4-Diamino-5-pyrimidínkarboxaldehyd ľahko reaguje s arylacetonitrilom pri získaní 2-amino-6-aryl-pyridopyrimidínov podľa vynálezu. Predchádzajúce reakcie sú znázornené v schémach VII.

Ako je skôr uvedené, niektoré zo zlúčenín podľa vynálezu sú bázického charakteru, vďaka substituentovej skupine, ktorá je bázická, ako sú napríklad aminoskupiny. Zlúčeniny vzorca (I), kde R, je NR₃R₄, sú typicky bázické. Takéto bázické zlúčeniny ľahko tvoria farmaceutický prijateľné soli s akýmkoľvek množstvom anorganických a organických kyselín. Soli sú typicky kryštalické a sú tak dobre vhodné na orálne podávanie a podobne.

Schéma V opisuje syntézu 2-oxypyridopyrimidínov. 2-Metylsulfanylové medziprodukty, tak ako sú opísané, môžu reagovať s alkoholátmi ako je etoxyetanolová sodná soľ, ktorá sa všeobecne pripraví s ekvivalentným množstvom hydridu sodného a alkoholu. Ako reakčné rozpúšťadlo sa typicky používa etoxyetanol. Reakcia sa najlepšie uskutočňuje pri zvýšenej teplote asi 100 °C až asi 150 °C a normálne je kompletná za asi 15 minút až 6 hodín. Výsledný 2-(2-etoxy)-etoxyéter sa ľahko prevedie na 2-hydroxyzlúčeninu reakciou so silnou anorganickou kyselinou, výhodne 6N kyselinou chlorovodíkovou, po asi 5 minútach až asi 1 hodine. 2-Hydroxy-7-iminoderivát môže byť hydrolyzovaný na 7-oxo-zlúčeninu predĺženou reakciou so silnou anorganickou kyselinou, výhodne koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou, pri teplote refluxu počas 6 hodín až 7 dni. Alkylácia a aralkylácia 2-hydroxyderivátu (výhodne ak je R₂ iný ako vodík), môže byť uskutočnená ako je požadované reakciou s alkylačným činidlom ako je metyljodid, benzylbrormd, dietylaminoetylchlorid a podobne vo vzájomnom rozpúšťadle, výhodne dimetylformamide, typicky za prítomnosti bázy ako je práškovaný uhličitan draselný. Také reakcie sú normálne kompletné počas 2 hodín, ak sa uskutočňujú pri teplote asi 25 °C až 100 °C. Produkt sa ľahko izoluje odstránením reakčných rozpúšťadiel a ďalšie čistenie môže byť uskutočnené kryštalizáciou, chromatografiou alebo podobne.

Schéma I

BlOKe

MeOH

^r2

Schéma II

Schéma III

Schéma V

*2 acylačné činidlo” ^r3

C—

II

^s2

O

Schéma VI kde L je odštiepiteľná skupina ako je chlór alebo bróm a m je celé číslo 1, 2, 3 alebo 4.

Schéma IV

Schéma VII

Schéma VII (pokračovanie)

Nasledujúce podrobné príklady bližšie ilustrujú syntézu zlúčenín podľa vynálezu. Príklady sú len ilustratívne a nie sú mienené ako obmedzujúce vynález z akéhokoľvek hľadiska.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

5-Kyano-4-hydroxy-2-(metylsulfanyl)-pyrimidin

K roztoku čerstvo destilovaného etyletoxymetylénkyanoacetátu (118,99 g) v metanole (800 1) pri 5 °C sa pridá 2-metyl-2-tiopseudomočovina (107,69 g). K tejto zmesi sa pridá roztok metoxidu sodného v metanole pripravený rozpustením kovového sodíka (35,59 g) v metanole (800 ml). Reakčná zmes sa nechá zohriať na teplotu miestnosti a mieša sa 6 hodín. Po odstáti cez noc sa rozpúšťadlo odstráni pri zníženom tlaku, zvyšok sa rozpustí v 1500 ml vody pri 50 °C za miešania a roztok sa za horúca prefiltruje. Filtrát sa okyslí na pH 2 koncentrovanou HCI a ponechá odstáť cez noc pri izbovej teplote. Produkt sa zhromaždí filtráciou a sušením sa získa 48,33 g 5-kyano-4-hydroxy-2-mctylsulfanylpyrimidínu. Tento produkt sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho čistenia.

Príklad 2

4- Chlór-5-kyano-2-metylsulfanyl-pyrimidín

Zmes 5-kyano-4-hydroxy-2-metylsulfanyl-pyrimidínu (48,33 g) z príkladu 1 a fosforoxychloridu (150 ml) sa zahrieva pod refluxom 3 hodiny. Reakčná zmes sa nechá schladnúť na teplotu miestnosti, prefiltruje sa a filtrát sa zahustí do sucha vo vákuu. Zvyšok sa rozdelí medzi metylénchlorid a ľadovú vodu. Organická vrstva sa oddelí, premyje sa vodou, suší sa nad síranom horečnatým, filtruje a odparí pri zníženom tlaku. Zvyšok sa zahrieva pod refluxom v hexáne (750 ml) za miešania. Horúci hexánový roztok sa zleje z nerozpustného materiálu a ponechá schladnúť na teplotu miestnosti, získa sa 32 g titulnej zlúčeniny 4-chlór-5-kyano-2-metylsulfanyl-pyrimidínu.

Príklad 3

5- Kyano-4-metylamino-2-metylsulfanyl-pyrimidín

Studeným (5 °C) roztokom 4-chlór-5-kyano-2-metylsulfanylpyrimidínu z príkladu 2 v dietyléteri (700 ml) sa prebubláva plynný metylamín počas 20 minút. Reakčná zmes sa mieša 30 minút pri 5 °C, potom sa nechá ohriať na teplotu miestnosti a mieša sa cez noc. Chromatografia na tenkej vrstve ukazuje, že reakcia nie je úplná. Reakčná zmes sa znova ochladí na 5 °C a plynný metylamín sa prebubláva suspenziou pri miešaní ďalších 20 minút. Reakčná zmes sa mieša pri 25 °C 6 hodín, potom sa nechá stáť cez noc. Nerozpustný produkt sa oddelí a suspenduje sa vo vode pri miešaní. Suspenzia sa odfiltruje vo vákuu pri získaní 25,87 g titulnej zlúčeniny 5-kyano-4-metylamino-2-metylsulfanylpyrimidínu;

1.1. 185 až 187 °C

Elementárna analýza pre C₇H₈N₄S: vypočítané 46,65 % C, 4,47 % H, 31,09 % N, nájdené 46,62 % C, 4,61 % H, 31,43 % N.

Príklad 4

5- Kyano-2-hydrazino-4-metylamino-pyrimidín

Zmes 5-kyano-4-mety]amino-2-metylsuIfanyl-pyrimidínu (25,86 g) z príkladu 3 a hydrazínhydrátu (52 ml) v etanole (250 ml) sa zahrieva pod refluxom pri miešaní 3 hodiny. Reakčná zmes sa ochladí na teplotu miestnosti a nerozpustný produkt sa odstráni filtráciou, premyje studeným vodným etanolom (1 : 1) pri získaní 23 g titulnej zlúčeniny. Kryštalizáciou z etanolu sa získa analyticky čistá vzorka 5-kyano-2-hydrazino-4-metylamino-pyrimidínu, t. t. 247 až 249 °C.

Elementárna analýza pre C₆H₈N₆: vypočítané 43,90 % C, 4,91 % H, 51,21 % N, nájdené 44,05 % C, 4,92 % H, 51,39 % N.

Príklad 5 2-Azido-5-kyano-4-metylamino-pyrimidín

K studenému (5 °C) roztoku 5-kyano-2-hydrazino-4-metylaminopyrimidinu (21,7 g) z príkladu 4 v zmesi vody (260 ml) a koncentrovanej HCI (26,5 ml) sa po kvapkách pridá roztok NaNCl· (10,03 g) vo vode (25 ml) s horným mechanickým miešaním. Vytvorí sa biela zrazenina a po skončení pridávania sa reakčná zmes mieša ďalších 20 minút pri 5 °C. Nerozpustný produkt sa odfiltruje a premyje sa studenou vodou pri získaní 22,4 g titulnej zlúčeniny po sušení pri 23 °C za vysokého vákua cez noc. Kryštalizáciou z etanolu sa získa analyticky čistá vzorka 2-azido-5-kyano-4-mctylamino-pyrimidínu, 1.1. 225 až 230 °C.

Elementárna analýza pre C₆H₅N₇: vypočítané 41,14 % C, 2,88 % H, 55,99 % N, nájdené 40,88 % C, 2,81 % H, 55,82 % N.

Príklad 6 2-Amino-4-metylamino-5-pyrimidínkarboxaldehyd

K suspenzii 2-azido-5-kyano-4-metylamino-pyrimidínu (22,24 g) z príkladu 5 v 400 ml 50 % vodnej kyseliny mravčej sa pridá Raney-niklový katalyzátor (5 g). Reakčná zmes sa trepe pod atmosférou vodíka (40,1 psi) v Parrovej hydrogenačnej aparatúre. Pri trepaní zmesi pri teplote miestnosti došlo k intenzívnemu vývoju plynu. Po 30 minútach bolo zariadenie odvetrané, bol pridaný ďalší Raney-nikel (5 g), zariadenie znovu naplnené vodíkom a zmes trepaná cez noc. Katalyzátor bol odstránený filtráciou a filtrát bol odparený pri vysokom vákuu. Zvyšok bol suspendovaný vo vode a filtrovaný. Nerozpustný materiál bol oddelený a rozpustený v 450 ml vriacej vody. Vodný roztok bol prefíltrovaný a pH filtrátu bolo upravené na 7 IN hydroxidom sodným. Vyzrážaný produkt bol oddelený filtráciou a rekryštalizovanv z etanolu pri získaní 5,0 g 2-amino-4-metylamino-5-pyrimidínkarboxaldchydu.

Príklad 7

6- (2,6-Dimetylfenyl)-7-imino-8-metyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylamín

K 2-etoxyetanolu (7 ml) pri -10 °C sa pridá opatrne hydrid sodný (60 % suspendovaný v minerálnom oleji, 83 mg, 2,08 mmol) pri miešaní. Zmes sa nechá ohriať na teplotu miestnosti a pridá sa 2,6-dimetylfenylacetonitril (1,5 g, 10,33 mmol), a potom 2-amino-4-metylamino-5-pirimidínkarboxaldehyd (1,5 g, 9,86 mmol) z príkladu 6. Výsledná reakčná zmes sa zahrieva pod refluxom 2 hodiny, nechá sa ochladiť na teplotu miestnosti a naleje do vody. Nerozpustný surový produkt sa oddelí a suší na filtri. Pro dukt sa čistí rozpustením vo vriacom etylacetáte a pridaním horúceho hexánu tesne v momente pred vyzrážaním. Horúci roztok sa filtruje a po ochladení vyzrážaného produktu sa získa 1,22 g 6-(2,6-dimetylfenyl)-7-imino-8-metyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylammu; 1.1. 197 až 198 °C. Elementárna analýza pre C|₆H₁₇N₅.0,15H₂O vypočítané 68,14 % C, 6,18 % H, 24,83 % N nájdené 68,19 % C, 6,14 % H, 24,60 % N

Príklad 8

6-(2-Metylfenyl)-7-imino-8-metyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylamín

Titulná zlúčenina sa pripraví podobným spôsobom ako je opísaný v príklade 7, vychádza sa z 2-metylfenylacetonitrilu (0,72 g, 5,45 mmol) a 2-amino-4-metylamino-5-pyrimidínkarboxaldehydu (0,79 g, 5,19 mmol). Ako je opísané ako príslušná báza a rozpúšťadlo sa použijú hydrid sodný (60 % suspenzia v minerálnom oleji, 0,083 g, 2,08 mmol) a 2-etoxyetanol. Produkt sa čistí kryštalizáciou z etylacetátu-hexánu a získa sa 0,68 g 6-(2-metylfenyl)-7-imino-8-metyl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylamínu, 1.1. 189 až 190 °C.

Elementárna analýza pre C₁₅H₁₅N₅: vypočítané 67,91 % C, 5,70 % H, 26,40 % N, nájdené 67,52 % C, 5,71 % H, 26,33 % N.

Príklad 9 6-Fenyl-7-imino-8-metyl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylamín

Titulná zlúčenina sa pripraví podobným spôsobom ako je opísaný v príklade 7, vychádza sa z fenylacetonitrilu (6,5 ml) a 2-amino-4-metylamino-5-pyrimidínkarboxaldehydu (8,10 g). V tejto reakcii sa však použije metoxid sodný (0,5 g) miesto hydridu sodného. Produkt sa čistí rekryštalizáciou z izopropylalkoholu pri získaní 9,2 g 6-fenyl-7-imino-8-metyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylamínu, 1.1. 201 až 203 °C.

Elementárna analýza pre C|₄H|₃N₅: vypočítané 66,91 % C, 5,21 % H, 27,87 % N, nájdené 66,74 % C, 5,22 % H, 27,90 % N.

Príklad 10 2,7-Diamino-6-(2,6-dichlórfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidín (Príprava metódou podľa US patentu 3534039). K roztoku 2-etoxyetoxidu sodného pripraveného z 0,14 g sodíka a 60 ml 2-etoxyetanolu sa pridá 2,07 g 2,4-diamino-5-pyrimidínkarboxaldehydu a 2,79 g 2,6-dichlórfenylacetonitrilu. Zmes sa zahrieva na teplotu refluxu 4 hodiny, nechá ochladiť na teplotu miestnosti a vyzrážaný produkt sa odfiltruje a premyje dietyléterom pri získaní 2, 7-diamino-6-(2,6-dichlórfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidínu, 1.1.325 - 332 °C.

Príklad 11 2-Amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ol

Roztok 2,7-diamino-6-(2,6-dichlórfenyl)-pyrido[2,3-d]-pyrimidínu (30,6 g) z príkladu 10 v koncentrovanej HC1 (200 ml) sa zahrieva pod refluxom 24 hodín. Reakčná zmes sa nechá vychladnúť na teplotu miestnosti, prefiltruje sa, premyje sa vodou a sušením vo vákuu sa získa 16,5 g surového produktu. Filtrát sa refluxuje ďalších 24 hodín a po ochladení sa získa ďalších 8,8 g produktu. Tieto dva výťažky sa spoja, premyjú sa dvakrát dietyléterom a sušením vo vákuu sa získa 5,9 g 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-olu, 1.1, rozkl. 410 °C.

Elementárna analýza pre C₁₃H₈C1₂N₄O: vypočítané 50,84 % C, 2,62 % H, 18,24 % N, nájdené 50,45 % C, 2,87 % H, 18,09 % N.

Príklad 12 2-Ammo-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ón

K zmesi 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-pyrido[2,3-d]-pyrimidín-7-olu (3,7 g) z príkladu 11 v dimetylformamide sa pridá NaH (50 % suspenzia v minerálnom oleji, 0,64 g). Výsledná kaša sa zahrieva na 65 °C 0,5 hodiny do vytvorenia roztoku. Tento sa potom ochladí na 50 “C a k reakčnej zmesi sa po kvapkách pridá roztok metyljodidu (2,0 g) v dimetylformamide (10 ml). Reakčná zmes sa ohreje a udržuje medzi 60 °C až. 80 °C po 3 hodiny. Po ochladení na teplotu miestnosti sa reakčná zmes naleje do ľadovej vody. Nerozpustný biely produkt sa odfiltruje, premyje sa vodou a rekryštalizuje z etanolu pri použití aktívneho uhlia, získa sa 1,9 g 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metylpyrido [2,3-d] pyrimidín-7(8H)-ónu, 1.1. 235 až 237 °C. Elementárna analýza pre C₁₄H|₀Cl₂N₄O: vypočítané 52,36 % C, 3,14 % H, 17,44 % N, nájdené 52,03 % C, 3,24 % H, 17,46 % N.

Príklad 13 2-Amino-6-(2,6-dimetylfenyl)-8-metyl-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ón

Zmes 6-(2,6-dichlórfenyl)-7-imino-8-metyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylamínu (0,96 g) z príkladu 7 a vodná 6N HC1 (25 ml) sa zahrieva pod refluxom dva dni. Zmes sa nechá vychladnúť na teplotu miestnosti. Nerozpustná biela pevná látka sa oddelí filtráciou, premyje sa vodou a suší vzduchom. Surový produkt sa rozpusti v horúcom etanole pri pridaní horúceho etylacetátu tesne pred kryštalizáciou a horúci roztok sa prefiltruje. Po ochladení sa surový produkt kryštalizuje pri získaní 25 mg 2-amino-6-(2,6-dimetylfenyl)-8-metyl-pyrido[2,3 -d]pyrimidín-7(8H)-ónu, 1.1, postupne rozkl. nad 235 °C.

Elementárna analýza pre C₁₆H|₆N₄0,l HCl.0,15 H₂O: vypočítané 59,38 % C, 5,53 % H, 17,31 % N, nájdené 59,42 % C, 5,37 % H, 17,53 % N.

Príklad 14 2-Amino-6-(2,6-metylfenyl)-8-metyl-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ón

K zmesi 6-(2,6-dimetylfenyl)-7-imino-8-metyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylaminu (0,30 g) z príkladu 8 a koncentrovanej HC1 (0,6 ml) sa pridá voda (11 ml). Reakčná zmes sa refluxuje 20 hodín, potom sa nechá vychladnúť na teplotu miestnosti. Biela zrazenina z reakčnej zmesi sa odfiltruje a premyje vodou. Produkt sa suší vo vákuu a získa sa 0,21 g 2-amino-6-(2-metylfenyl)-8-metyl-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ónu, 1.1. 239 až 241 °C. Elementárna analýza pre C|₅H₁₄N₄O.1,46 HC1: vypočítané 56,45 % C, 4,88 % H, 17,55 % N, nájdené 56,47 % C, 4,68 % H, 17,59 % N.

Príklad 15 N-[6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl]acetamid

Zmes 64,2 mg (0,20 mmol) 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ónu (z príkladu 12) a 1 ml acetanhydridu sa zahrieva k refluxu. Výsledný roztok sa udržuje pod refluxom 20 minút a zahusti sa pri atmosférickom tlaku na objem asi 0,25 ml. Roztok sa ochladí na 25 °C a zriedi sa dietyléterom (1 ml). Oddelené kryštály sa odfiltrujú a premyjú sa dietyléterom (1 ml). Oddelené kryštály sa odfiltrujú a premyjú sa dietyléterom a získa sa N-[6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl]acetamid, hmotn. 44,0 mg,

1.1. 258 až 260 °C.

MS (Cl) 363 (M⁺+ I).

Elementárna analýza pre C₁₆H_I2C1₂N₄O₂: vypočítané 52,91 % C, 3,33 % H, 15,43 % N, nájdené 52,73 % C, 3,47 % H, 15,09 % N.

Príklad 16

Kyselina N-[6-(2,6-dichlórfenyl)-7-oxo-8-metyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl]-sukcinamínová

Zmes 0,40 g (1,25 mmol) 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ónu (z príkladu 12) a 2,00 g (10,0 mmol) anhydridu kyseliny jantárovej sa nechá reagovať pri 145 °C. Po 10 minútach sa homogénna tavenina ochladí a trituruje sa 25 ml vody. Zmes sa zahrieva na teplotu varu 5 minút pre hydrolýzu prebytku anhydridu. Zmes sa za horúca odfiltruje a koláč sa premyje 10 ml vriacej vody. Sušený koláč (hmotn. 0,50 g) sa trituruje s 8 ml metanolu : chloroformu (1 : 20). Nerozpustná pevná látka sa odfiltruje a premyje sa 1 ml rovnakého rozpúšťadla pri získaní 0,037 g čistej titulnej zlúčeniny, t. t. 214 až 218 °C.

Elementárna analýza pre Ci₈Hi₄CI₂N₄O₄.0,8 H₂O: vypočítané 49,62 % C, 3,61 % H, 12,86 % N, nájdené 49,26 % C, 3,16 % H, 12,83 % N.

Príklad 17 l-[6-(2,6-Dichlórfenyl)-7-oxo-8-metyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]-pyrrolidin-2,5-dión

Metanolchloroformový filtrát z príkladu 16 sa chromatografuje na silikagéli, eluuje 1 : 20 obj. (obj.) metanolom : : chloroformom pri získaní čistého kryštalického N-[6-(2,6-dichlórfenyl)-7-oxo-8-metyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl]-pyrrolidin-2,5-diónu, 1.1. 303 až 305 °C. Elementárna analýza pre C₁₈H_I2C12N₄O₃: vypočítané 53,62 % C, 3,00 % H, 13,89’% N, nájdené 53,75 % C, 2,90 % H, 13,79 % N.

Príklad 18 4-Metylamino-2-metylsulfanyl-pyrimidin-5-karboxaldehyd

Roztok 4,00 g (0,022 mol) 5-kyano-4-metylamino-2-metylsulfanylpyrimidinu (z príkladu 3) v 150 ml 50 % vodnej kyseliny mravčej sa nechá reagovať so 6,0 g vodou zvlhčeného Raney-niklu. Zmes sa mieša pri 25 °C 12 hodín. Pevné látky sa odfiltrujú a premyjú sa 40 ml 50 % vodnej kyseliny mravčej. Za chladenia ľadovým kúpeľom sa k zelenému filtrátu pridáva pomaly studený roztok uhličitanu draselného až sa dosiahne úplného vyzrážania pevných látok (pH je ešte kyslé; pH asi 5). Pevné látky sa extrahujú do 200 ml etylacetátu a roztok sa suší (uhličitan draselný), filtruje a zahustí; hmotn. 2,30 g (57 %): t. t. 98 až 100 °C: tlc (1 : 1 hexán : etylacetát) jedna škvrna Rf 0,5. Hmotové spektrum (Cl) 184 (M+l).

Elementárna analýza pre C₇H_QN₃OS: vypočítané 45,89 % C, 4,95 % H, 22,93 % N, nájdené 46,24 % C, 4,88 % H, 23,11 % N.

Príklad 18A

Alternatívna syntéza 4-metylamino-2-metylsulfanylpyrimidín-5-karboxaldehydu

K roztoku 4-chlór-2-metylsulfanyl-5-pyrímidínkarboxylát-etylesteru (18,66 g, 80,4 mmol) v 260 ml tetrahydrofuránu sa pridá trietylamín (34 ml, 244 mmol), nasledovaný 30 ml 40 % vodného roztoku metylamínu. Roztok sa mieša 30 minút pri 25 °C a potom sa zahustí vo vákuu a rozdelí sa medzi chloroform a nasýtený vodný hydrogenuhličitan sodný. Organická vrstva sa premyje soľankou, suší nad síranom horečnatým, filtruje a zahustením sa získa biela pevná látka. Pevná látka sa suspenduje v hexáne a filtráciou sa získa 14,70 g (81 %) 4-metylamino-2-metylsulfanyl-5-pyrimidínkarboxylátetylesteru; 1.1. 91 až 93 °C.

Elementárna analýza pre C₅H|₃N₃O₂S: vypočítané 47,56 % C, 5,76 % H, 18,49 % N, nájdené 47,93 % C, 5,67 % H, 18,58 % N.

Roztok 4-metylamino-2-metylsulfanyl-5-pyrimidínkarboxylátetylesteru (4,36 g, 19,3 mmol) v 60 ml tetrahydrofuráne sa pridá po kvapkách pri teplote miestnosti do suspenzie lítiumalumíniumhydridu (1,10 g, 29,0 mmol) v 40 ml tetrahydrofúráne. Po 10 minútach sa reakcia opatrne preruší 2 ml vody, 2 ml 15 % NaOH a ďalšími 7 ml vody. Zmes sa mieša 1 hodinu a vytvorená biela zrazenina sa odstráni filtráciou a premyje sa etylacetátom. Filtrát sa zahustí vo vákuu a pridá sa 3 : 1 hexán : etylacetát. Pevné látky sa oddelia a získa sa 2,99 g (84 %) 4-metylamino-2-metylsulfanyl-5-pyrimidin-metanolu; 1.1. 155 až 157 °C.

Elementárna analýza pre C7HHN3OS: vypočítané 45,39 % C, 5,99 % H, 22,68 % N, nájdené 45,42 % C, 5,93 % H, 22,42 % N.

4-Metylamino-2-metylsulfanyl-5-pyrimidín-metanol (2,40 g, 13,0 mmol) v 7 ml kyseliny octovej sa pridá k roztoku dihydrátu dvojchromanu sodného (1,30 g, 4,6 mmol) v 6 ml kyseliny octovej. Po 2 hodinách pri teplote miestnosti sa pridá ďalší dihydrát dvojchromanu sodného (0,3 g, 1,0 mmol) v 1 ml kyseliny octovej. Po 3,5 hodinách reakcie celkom sa filtráciou odstráni jasne zelená pevná látka. K filtrátu sa pridá voda (30 ml) nasledovaná vodným hydroxidom amónnym až do alkality (pH 9,0). Zmes sa chladí v chladničke počas 30 minút. Zrazenina sa oddelí a rozpustí v etylacetáte a roztok sa suší nad síranom horečnatým. Filtráciou a zahustením vo vákuu sa získa 0,72 g (30 %) 4-metylamino-2-metylsulfanyl-5-pyrimidínkarboxaldehydu;

1.1. 99 až 101 °C.

Elementárna analýza pre C₇H₉N₃OS: vypočítané 45,89 % C, 4,95 % H, 22,93 % N, nájdené 45,80 % C, 4,96 % H, 22,86 % N.

Príklad 19 6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ylidenamín

Práškovaný uhličitan draselný (0,8 g, 5,8 mmol) sa pridá k roztoku 0,220 g (1,2 mmol) aldehydu z príkladu 10 a 0,235 g (1,26 mmol) (asi 5 % prebytok) 2,6-dichlórfenylacetonitnlu v 2,0 ml dimetylformamide. Zmes sa zahrieva pri miešaní na 125 °C 6 hodín. K ochladenej zmesi sa pridá etylacetát (5 ml) a pevné látky sa odfiltrujú a premyjú sa etylacetátom. Filtrát sa zahusti pri zníženom tlaku. Zostatková guma sa trituruje s 10 ml vody a výsledná pevná látka sa odfiltruje, dobre sa premyje vodou a suší. Tento surový materiál sa chromatografuje nanesením chloroformového roztoku na silíkagélový stĺpec zvlhčený chloroformom. Stĺpec sa eluuje 1 : 1 (obj./obj.) hexánom : etylacetátom, oddelia sa frakcie, ktoré podľa tlc obsahujú škvrnu Rf 0,25 (1 : 1 hexán : etylacetát). Odparením rozpúšťadla sa získa pevná látka. Pevný produkt sa rozpustí v asi 0,5 ml metylénchloride. Vyvinú sa kryštály. Pridá sa petroléter (asi 2 ml) a kryštály sa odfiltrujú pri získaní 0,168 g (40 %) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ylidenaminu, 1.1. 198 až 200 °C. Hmotové spektrum (Cl) 351 (M+l).

Elementárna analýza pre C₁₅H_]2Cl2N₄S: vypočítané 51,29 % C, 3,44 % H, 15,95 % N, nájdené 51,31 % C, 3,41 % H, 15,73 % N.

Príklad 20 [6-(2,6-Dichlórfenyl)-7-imino-8-metyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl]-(3-dietylaminopropyl)-amín

Roztok 0,275 g (0,78 mmol) metylsulfanylového derivátu z príkladu 19 v 3 ml Ν,Ν-dietylaminopropylamínu sa zahrieva pri miešaní v olejovom kúpeli na 135 °C (t nádoby asi 125 °C) počas 16 hodín. Prebytok amínu sa odparí pri zníženom tlaku a zostatkový olej sa rozpustí v 10 ml dietyléteri. Kalný roztok sa vyčerí „celitom“, filtruje a zahustí sa. Zvyšok sa trituruje petroléterom a filtruje; hmotn. 0,288 g (85 % výťažok). Rekryštalizáciou z etylacetátu-petroléteru sa získa čistý produkt identifikovaný ako [6-(2,6-dichlórfenyl)-7-imino-8-metyl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl]-(3-dietylaminopropyl)-amín; 1.1. 154 až 156 °C. Hmotové spektrum (Cl) 433 (M*).

Elementárna analýza pre C₂₁H₂₆Cl₂N₆.0,25 H₂O: vypočítané 57,60 % C, 6,10 % H, 19,19 % N, nájdené 57,46 % C, 5,85 % H, 19,16 % N.

Príklad 21 [6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl]-(3-dietylaminopropyl)-amín

Roztok 0,111 g (0,25 mmol) iminoderivátu z príkladu 20 v 5 ml koncentrovanej kyseline chlorovodíkovej sa zahrieva pod refluxom 6 dní. Vodná kyselina sa odparí za zníženého tlaku a zvyšok sa rozpustí v 1,0 ml vody. Pre úplné vyzrážanie gumy sa pridá vodný 10 % roztok uhličitanu draselného. Rozpúšťadlo sa zleje, a guma sa rozpustí v 15 ml metylénchloridu. Roztok sa suší nad bezvodým uhličitanom draselným, filtruje a filtrát sa odparí. Zvyšná guma sa rozpustí v 0,5 ml dietyléteru. Kryštalický produkt, ktorý vznikol, sa odfiltruje a sušením sa získa [6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl]-(3-dietylaminopropyl)-amín. Hmotové spektrum (Cl) 434 (M⁺).

Príklad 22 6-(2,6-Dichlórfenyl)-2-(2-etoxy-etoxy)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ylidenamín

40,0 mg (1,0 mmol) 60 % hydridu sodného v minerálnom oleji sa pridá za miešania k 5,0 ml etoxyetanolu. Po ukončení uvoľňovania vodíka sa pridá 0,351 g (1,0 mmol) metylsulfanylového derivátu z príkladu 19. Roztok sa zahrieva na 135 °C 15 minút. Reakčná zmes sa ochladí. Pre vyzrážanie gumovitej pevnej látky sa pridá ľadová voda (50 ml). Tento materiál sa extrahuje do dietyléteru, roztok sa suší (uhličitan draselný) a zahustí sa na objem 15 ml. Oddelené kryštály sa odfiltrujú a premyjú sa dietyléterom pri získaní produktu identifikovaného ako 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-(2-etoxy-etoxy)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ylidenamínu; t. t. 133 až 135 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 393 (M+l). Elementárna analýza pre Ci₈H₁₈Cl₂N₄O₂: vypočítané 54,97 % C, 4,61 % H, 14,25 % N, nájdené 55,05 % C, 4,65 % H, 14,15 % N.

Príklad 23 6-(2,6-Dichlórfenyl)-2-hydroxy-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ylidenamín

Roztok 78,0 mg (0,20 mmol) etoxyetyléteru z príkladu 22 v 1,0 ml 6N kyseliny chlorovodíkovej sa zahrieva pod refluxom 5 minút. Rozpúšťadlo sa odstráni odparením za zníženého tlaku. Zvyšná pevná hydrochloridová soľ sa rekryštalizuje z etanolu-etylacetátu a získa sa kryštalický 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-hydroxy-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]-pyrimidín-7-ylidcnamín, hydrochlorid; t. t. 255 až 260 °C. Hmotové spektrum (Cl) 321 (M+l).

Elementárna analýza pre C₁₄H₁₀C1₂N₄O.HC1.0,3 C₂H₅OH: vypočítané 47,21 % C, 3,48 % H, 15,08 % N, nájdené 47,21 % C, 3,40 % H, 14,73 % N.

Príklad 24 6-(2,6-Dichlórfenyl)-2-hydroxy-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ón

Roztok 76,0 mg (0,19 mmol) iminoderivátu z príkladu 23 v 5,0 ml koncentrovanej kyseline chlorovodíkovej sa zahrieva pod refluxom 3 dni a rozpúšťadlo sa potom odparí. Zostatok sa trituruje s vodou, filtruje a suší. Získa sa 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-hydroxy-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]-pyrimidín-7-ón ako hydrát.

Hmotové spektrum (Cl) 322 (M⁺).

Elementárna analýza pre C₁₄H₉C1₂N₃O₂.1,25 H₂O: vypočítané 48,78 % C, 3,37 % H, 12,19 % N, nájdené 48,68 % C, 3,25 % H, 11,96 % N.

Príklad 25 6-(2,6-Dichlórfenyl)-2-[2-(dietylamino)etoxy]-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,173 g (0,5 mmol) 2-hydroxyderivátu z príkladu 24, 0,086 g (0,5 mmol) hydrochloridu 2-dietylaminoetylchloridu, 3 ml dimetylformamidu a 1,0 g práškovaného bezvodého uhličitanu draselného sa mieša pri teplote miestnosti 24 hodín. Pridá sa voda (25 ml) na vyzrážanie surového produktu. Čistenie sa uskutoční silikagélovou chromatografiou pri získaní požadovanej zlúčeniny identifikovanej ako 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-[2-(dietylamino)etoxy]-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón.

Príklad 26

2-Amino-6-fenyl-8-metyl-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ón

Táto zlúčenina sa pripraví zo 6-fenyl-7-imino-8-metyl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylamínu z príkladu 9 postupom kyslej hydrolýzy podobným postupom z príkladu 14; 1.1. 250 až 255 °C.

Príklad 27 2-Amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-tión

Zmes 0,321 g (1,0 mmol) 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ónu z príkladu 12 a 0,404 g (1,0 mmol) Lawessonovho činidla v 10 ml pyridínu sa zahrieva pod refluxom pri miešaní počas 24 hodín. Rozpúšťadlo sa odparí za zníženého tlaku a zostatok sa trituruje s 20 ml vody, filtruje a koláč sa dobre premyje vodou. Čistením chromatografiou na silikagéli sa získa požadovaná zlúčenina identifikovaná ako 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-tión.

Príklad 28

N-[6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-(8H)-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-yliden]-acetamid

Zmes 0,161 g (0,46 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidm-7-ylidenamínu z príkladu 19 a 1,0 ml acetanhydridu sa zahrieva do roztoku pri teplote varu. Po 2 minútach refluxu sa roztok zahustí na jednu polovicu objemu, pričom sa vytvoria kryštály. Zmes sa ochladí, pridajú sa 2 ml éteru a produkt sa odfiltruje a premyje sa éterom; 1.1. 229 až 231 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 393 (M⁺).

Elementárna analýza pre C|₇H|₄CI₂N₄OS.' vypočítané 51,92 % C, 3,59 % H, 14,25 % N, nájdené 52,12 % C, 3,62 % H, 14,20 % N.

Príklad 29

N-[6-(2,6-Dichlórfenyl)-2-(4-dietylaminobutylamino)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-yleden]-acetamid

Zmes 0,112 g (0,29 mmol) N-[6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-yliden]-acetamidu z príkladu 28 a 1,0 ml (veľký prebytok) 4-(dietylamino)butylaminu sa zahrieva v 135 °C olejovom kúpeli za miešania. Po 1 hodine sa roztok zahustí za zníženého tlaku a zostatok sa trituruje s 1 ml etylacetátu. Pridá sa petroléter (1 ml) a produkt sa filtruje. Hmotové spektrum (Cl) 489 (M⁺).

Príklad 30 2-Amino-6-(2,6-dich1órfenyl)-8-etyl-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ón

K suspenzii NaH (60 % v minerálnom oleji, 27 mg) v ml dimetylformamidu sa pridá 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ón (172 mg, 0,56 mmol) z príkladu 11. Zmes sa zahrieva na 50 °C 1 hodinu za vzniku číreho roztoku. Pridá sa etyljodid (60 μί, 0,75 mmol) a roztok sa mieša pri 50 “C 3,5 hodiny, ochladí sa na teplotu miestnosti a naleje do 30 ml ľadovej vody. Výsledná zrazenina sa odstráni filtráciou a rozdelí sa medzi etylacetát a vodu. Organická vrstva sa oddelí a suší sa nad síranom horečnatým, filtruje a zahustí sa vo vákuu. Rýchla chromatografia za elúcie etylacetátom poskytne 104 mg (55 %) 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-etyl-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8II)-ónu; 1.1. 207 až 209 °C.

Elementárna analýza pre C₁₅H_I2C1₂N₄O: vypočítané 53,75 % C, 3,61 % H, 16,71 % N, nájdené 53,84 % C, 3,67 % H, 16,57 % N.

Príklad 31 2-Amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-propyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimídín-7-ón

K suspenzii NaH (60 % v minerálnom oleji, 31 mg) v ml dimetylformamidu sa pridá 2-amino-6-(2,6-dichlór- fenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-ón z príkladu 11 (205 mg, 0,67 mmol). Zmes sa zahrieva na 50 °C 1 hodinu za získania číreho roztoku. Pridá sa 1-jódpropan (100 μΙ, 1,03 mmol) a roztok sa mieša pri 50 °C 10 minút, potom sa ochladí na teplotu miestnosti a naleje na 400 ml ľadovej vody. Výsledná zrazenina sa odstráni filtráciou a premyje sa vodou. Zostatok sa suší, čistí rýchlou chromatografiou za elúcie 1 : 1 hexánom : etylacetátom za získania 159 mg (68 %) 2-amino-(2,6-dichlórfenyl)-8-propyl-8H-pyrido-[2,3-d]pyrimidín-7-ónu; 1.1. 196 až 197 °C. Elementárna analýza pre C|₆H₁₄C1₂N₄O:

vypočítané 55,03 % C, 4,04 % H, 16,04 % N, nájdené 55,28 % C, 4,22 % H, 15,81 % N.

Príklad 32 2-Amino-8-butyl-6-(2,6-dichlórfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

K suspenzii NaH (60 % v minerálnom oleji, 34 mg) v 6 ml dimetylformamidu sa pridá 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ón (202 mg, 0,66 mmol). Zmes sa zahrieva na 50 °C, vznikne číry roztok. Pridá sa 1-jódbután (105 μί, 0,92 mmol) a roztok sa mieša pri 50 °C 30 minút, potom sa ochladí na teplotu miestnosti a naleje sa na 40 ml ľadovej vody. Výsledná zrazenina sa odstráni filtráciou a premyje sa vodou. Zostatok sa suší a čistí rýchlou chromatografiou, eluuje sa gradientom 1 : 1 hexán : etylacetát až iba etylacetát za získania 152 mg (64 %) 2-amino-8-butyl-6-(2,6-dichlórfenyl)-8H-pyrido-[2,3-d]pyrimidín-7-ónu; 1.1. 202 až 205 °C.

Elementárna analýza pre C₁₇H|₆CI₂N₄0.0,08 EtOAC: vypočítané 56,18 % C, 4,52 % H, 15,13 % N, nájdené 56,39 % C, 4,64 % H, 14,99 % N.

Príklad 33 2-Amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-izobutyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

K suspenzii NaH (60 % v minerálnom oleji, 36 mg) v 8 ml dimetylformamidu sa pridá 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrímidín-7(8H)-ón (205 mg, 0,67 mmol). Zmes sa zahrieva na 60 °C počas 20 minút za vzniku číreho roztoku. Pridá sa 1 -jód-2-metylpropán (110 μί, 0,94 mmol) a roztok sa mieša pri 50 °C 30 minút. Pridá sa ďalšie množstvo 1 -jód-2-metylpropánu (40 μί, 0,34 mmol) a roztok sa mieša pri 50 °C 40 minút, potom sa ochladí na teplotu miestnosti a naleje sa na 40 ml ľadovej vody. Vzniknutá zrazenina sa odfiltruje a premyje sa vodou. Gumovitý zostatok sa rozpustí v etylacetáte a premyje vodou. Organická vrstva sa suší nad síranom horečnatým, filtruje a zahustí sa vo vákuu. Výsledná pevná látka sa čistí rýchlou chromatografiou, elúcia 1 : 1 hexánom : etylacetátom poskytne 123 mg (51 %) 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-izobutyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu;t. t. 193 až 195 °C. Elementárna analýza pre C_I7H₁₆CI₂N₄O: vypočítané 56,21 % C, 4,44 % H, 15,42 % N, nájdené 56,60 % C, 4,59 % H, 15,11 % N.

Príklad 34 2-Amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-(3-dimetylaminopropyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

K suspenzii NaH (60 % v minerálnom oleji, 50 mg) v 8 ml dimetylformamide sa pridá 2-amino-6-(2,6-dichiórfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ón (319 mg, 1,04 mmol). Zmes sa zahrieva na 70 ^CC počas 1,5 hodiny za vzniku číreho roztoku. Do druhej banky, obsahujúcej NaH (60 % v minerálnom oleji, 68 mg) v 6 ml dimetylformamide sa pridá hydrochlorid 3-dimetylaminopropylchloridu (248 mg, 1,56 mmol). Táto suspenzia sa mieša pri teplote miestnosti 30 minút, potom sa zahrieva na 70 ^CC 10 minút a pridá sa k uvedenému roztoku sodnej soli 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ónu. Výsledná suspenzia sa zahrieva na 70 °C 3 hodiny, potom sa ochladí na teplotu miestnosti a filtruje sa premytím etylacetátom. Filtrát sa zahustí vo vákuu a pridá sa etylacetát a hexán. Výsledná pevná látka sa oddelí filtráciou a sušením vo vákuu sa získa 216 mg (53 %) 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-(3-dimetylaminopropyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu; 1.1. 136 až 141 °C.

Elementárna analýza pre C₁₈H₁₉C1₂N₅O: vypočítané 55,11 % C. 4,88 % H, 17,85 % N, nájdené 55,07 % C, 5,00 % H, 17,53 % N.

Príklad 35

Metylester kyseliny [2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-8-yl]-octovej

K suspenzii NaH (60 % v minerálnom oleji, 38 mg) v 6 ml dimetylformamidu sa pridá 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-pyrido [2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ón (203 mg, 0,66 mmol). Zmes sa zahrieva na 50 °C 40 minút za vzniku číreho roztoku. Pridá sa metylchlóracetát (90 μΐ, 1,03 mmol) a roztok sa zahrieva na 50 °C 20 minút, potom sa ochladí na teplotu miestnosti a naleje sa na 30 ml ľadovej vody. Výsledná zrazenina sa odstráni filtráciou a premyje sa vodou. Vodný filtrát sa extrahuje etylacetátom a organická vrstva sa súši nad síranom horečnatým, filtruje a zahustí. Pevné látky sa spoja a čistia rýchlou chromatografiou za elúcie gradientom 1 : 1 hexán : etylacetát, až iba etylacetát za získania 152 mg (61 %) metylesteru kyseliny [2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-8-yl]-octovej; t. t. 188 až 190 °C.

Elementárna analýza pre Ci₆H|₂C1₂N₄O₃: vypočítané 50,68 % C, 3,19 % H, 14,77 % N, nájdené 50,74 % C, 3,31 % H, 14,39 % N.

Príklad 36 terc.Butylester kyseliny [2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-8-yl]-octovej

K suspenzii NaH (60 % v minerálnom oleji, 7 mg) v 10 ml dimetylformamidu sa pridá 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ón (398 mg, 1,30 mmol). Zmes sa zahrieva na 45 °C až 55 °C 40 minút za vzniku číreho roztoku. Pridá sa terc.butylbrómacetát (250 μΐ, 1,69 mmol) a roztok sa mieša pri 50 °C niekoľko minút, potom sa ochladí na teplotu miestnosti a naleje sa na 60 ml ľadovej vody. Výsledná zrazenina sa odstráni filtráciou a premyje sa vodou. Pevná látka sa čistí rýchlou chromatografiou, elúcia gradientom 1 : 2 hexán : etylacetát, až iba etylacetát za získania 165 mg (30 %) terc.butylesteru kyseliny [2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-8-yl]-octovej; 1.1. 171 až 173 °C. Elementárna analýza pre C₁₉H_i8C1₂N₄O₃: vypočítané 54,17 % C, 4,31 % H, 13,30 % N, nájdené 54,17 % C, 4,34 % H, 13,08 % N.

Príklad 37 6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Roztok 0,20 g (0,51 mmol) N-[6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-yli-den]-acetamidu z príkladu 28 v 2,0 ml 6N kyseliny chlorovodíkovej sa zahrieva za miešania na teplotu varu. Ihneď sa vylučujú kryštály. Hustá zmes sa zahrieva ďalšie 2 minúty na teplotu varu, ochladí a filtruje. Koláč sa premyje dobre vodou a súši; hmotn. 0,175 g (92 %); 1.1. 249 až 251 °C. Hmotové spektrum (CI) 352 (M⁺).

Elementárna analýza pre C,₃H||C1-N₃OS. 1,4 H₂O: vypočítané 47,58 % C, 3,57 % H, 11,16 % N, nájdené 47,60 % C, 3,12 % H, 11,14 % N.

Príklad 38 6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-metyl-2-[3-(4-metylpiperazin-1 -yl)-propylamino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,152 g (0,43 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ónu z príkladu 37 a 1,0 g (6,40 mmol) l-(3-aminopropyl)-4-metylpiperazínu sa zahrieva za miešania v 170 °C teplom olejovom kúpeli (T nádoby = asi 160 °C) po 3 hodiny. Prebytok amínu sa odparí za zníženého tlaku. Pridá sa voda (5 ml) a oddelená guma sa extrahuje do 50 ml 10 % mety lénchloridu-éteru. Organická fáza sa premyje trikrát 10 ml vody, suší (uhličitan draselný), čistí aktívnym uhlím, filtruje a zahustí. Zvyšná guma sa rozpustí v 3 ml éteru. Kryštály, ktoré sa vytvoria, sa odfiltrujú a premyjú sa éterom; hmotn. 0,033 g; 1.1. 170 až 172 °C.

Hmotové spektrum (CI) 461 (M⁺). Elementárna analýza pre C₂₂H₂₆C1₂N₆O: vypočítané 57,27 % C, 5,68 % H, 18,21 % N, nájdené 57,39 % C, 5,70 % H, 18,10 % N.

Príklad 39 6-(2,6-Dichlórfenyl)-2-metánsulfonyl-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ón

0,346 g (1,00 mmol) 50 % až 60 % m-chlórbenzoovej kyseliny (celkom prítomné 50 % kyseliny) sa pridá pri 25 °C k miešanému roztoku 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]-pyrimidín-7-ónu z príkladu 37 v 15 ml chloroformu a roztok sa mieša cez noc. Na odstránenie akéhokoľvek prebytku kyseliny sa pridá 0,25 g (3,20 mmol) dimetylsulfoxidu. Po 15 minútach sa chloroformový roztok premyje 30 ml nasýteného hydrogenuhličitanu sodného a potom vodou. Oddelená organická vrstva sa suší nad síranom sodným, filtruje a zahustí na asi 5 ml objem. Oddelia sa kryštály. Pridá sa asi 5 ml petroléteru a filtruje; hmotn. 0,165 g (92 %); t. t. > 290 °C.

Hmotové spektrum (CI) 384 (M⁴). Elementárna analýza pre C|₅H_hC1₂N₃O₃S: vypočítané 46,89 % C, 2,89 % H, 10,94 % N, nájdené 47,14 % C, 2,96 % H, 10,87 % N.

Príklad 40 6-(2,6-Dichlórmetyl)-8-metyl-2-metylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 37 sa umiestni do tlakovej rúrky s magnetickou miešacou tyčinkou. Rúrka sa ochladí v kúpeli suchý ľad-acetón a v rúrke kondenzuje asi 3 ml monoetylamínu. Pridá sa dimetylformamid (1,0 ml) a rúrka sa uzavrie a ponechá ohriať na teplotu miestnosti. Pri miešaní sa reakčná zmes zahrieva za štítom v 110 °C teplom olejovom kúpeli. Po 10 minútach je všetka pevná látka v roztoku. Roztok sa zahrieva v olejovom kúpeli 20 hodín. Rúrka sa ochladí v kúpeli ľad-acetón, otvorí sa a ohreje sa na teplotu miestnosti na odvetranie prebytku amínu. Väčšina dimetylformamidu sa odparí pri zníženom tlaku a získajú sa kryštály. Pevná látka sa trituruje s 5 ml vody, filtruje, premyje sa vodou a suší; hmotn. 0,128 g. Čistenie sa uskutoční rekryštalizáciou z etylacetátu-petroléteru pri získaní 0,081 g čistého produktu; 1.1. 243 až 244 °C. Hmotové spektrum (Cl) 335 (M⁺).

Elementárna analýza pre C₁₅H₁₂C1₂N₄O: vypočítané 53,75 % C, 3,61 % H, 16,71 %N, nájdené 53,91 % C, 3,64 % H, 16,80 % N.

Príklad 41 6-(2,6-Dichlórfenyl)-2-dimetylamino-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Táto zlúčenina sa pripraví podobným postupom ako je opísaný v príklade 40, vychádza sa z 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 37 a dimetylamínového plynu; t. t. 256 až 258 °C. Hmotové spektrum (CI) 349 (M⁺).

Elementárna analýza pre Ci₆Hi₄Cl₂N₄O: vypočítané 55,03 % C, 4,04 % H, 16,06 % N, nájdené 55,13 % C, 4,06 % H, 16,03 % N.

Príklad 42

6-(2,6-Dichlórfenyl)-2-etylamino-8-mety]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Táto zlúčenina sa pripraví podobným postupom ako je opísaný v príklade 46, vychádza sa z 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-mctylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 37 a plynného etylamínu; t. t. 180 až 182 °C. Hmotové spektrum (Cl) 349 (M⁺).

Elementárna analýza pre C₁₆H|4CI₂N₄O: vypočítané 55,03 % C, 4,04 % H, 16,04 % N, nájdené 55,17 % C, 4,08 % H, 16,07 % N.

Príklad 43 6-(2,6-Dichlórfenyl)-2-(2-hydroxyetylamino)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 37, 1,0 g (16,4 mmol) etanolamínu a 0,5 ml dimetylformamidu sa zahrieva v 125 °C teplom olejovom kúpeli pri miešaní 1,5 hodiny. Výsledný roztok sa zahustí vo vákuu a zostatková guma sa trituruje s 5 ml vody. Lepivá pevná látka sa odfiltruje, dobre sa premyje vodou a rekryštalizuje z acetónu/petroléteru pri získaní 0,071 g čistého produktu; 1.1. 128 až 131 °C. Hmotové spektrum (Cl) 365 (M~).

Elementárna analýza pre C_lf,H|₄Cl₂N₄O₂.0,7 C₃H₆O: vypočítané 53,56 % C, 4,52 % H, 13,81 % N, nájdené 53,88 % C, 4,46 % H, 14,17 % N.

Príklad 44 6-(2,6-Dichlórfenyl)-2-izopropylamino-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Táto zlúčenina sa pripraví podobným postupom, ako je opísaný v príklade 40, vychádza sa z 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 37 a izopropylamínu; 1.1. 194 až 196 °C. Hmotové spektrum (Cl) 363 (M⁺).

Elementárna analýza pre C₁7H₁₆CI₂N₄O: vypočítané 56,21 % C, 4,44 % H, 15,42 % N, nájdené 56,17 % C, 4,48 % H, 15,43 % N.

Príklad 45 2-Butylamino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,177 g (0,50 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 37, 10 ml n-butylamínu a 1,0 ml dimetylformamidu sa zahrieva pri miešaní pod refluxom (110 °C olejový kúpeľ)· Po 1 hodine je roztok kompletný. Po 20 hodinách refluxu sa odparí prebytok amínu a dimetylformamidu, a zostatok sa trituruje s vodou, filtruje, premyje sa vodou a suší. Hmotn. 0,180 g. Rekryštalizáciou z etylacetátu/petroléteru sa získa čistý produkt; hmotn. 0,116 g; t. t. 184 až 186 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 377 (M⁺). Elementárna analýza pre C|_gH₁₈Cl₂N₄O: vypočítané 57,31 % C, 4,81 % H, 14,85 % N, nájdené 57,41 % C, 4,81 % H, 14,83 % N.

Príklad 46 2-Benzylamino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 37, 0,50 g (4,70 mmol) benzylamínu a 0,5 ml dimetylformamidu sa zahrieva pri miešaní v 120 °C teplom olejovom kúpeli. Po 5 minútach je roztok kompletný. Po 5 hodinách sa za zníženého tlaku odparí prebytok amínu a dimetylformamidu a zostatok sa trituruje s roztokom I ml acetónu a 2 ml petroléteru. Lepivá pevná látka sa filtruje a rekryštalizuje z etylacetátu/petroléteru pri získaní 0,092 g čistého produktu; 1.1. 217 až 219 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 411 (M⁺). Elementárna analýza pre C|₇H_I4CI₂N₄O₅: vypočítané 61,33 % C, 3,92 % H, 13,62 % N, nájdené 61,30 % C, 4,02 % H, 13,59 % N.

Príklad 47 6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-metyl-2-(3-morfolín-4-yl-propylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 37, 1,00 g (6,90 mmol) N-(3-aminopropyl)morfolínu a 0,5 ml dimetylformamidu sa zahrieva pri miešaní v 125 °C teplom olejovom kúpeli. Po 2 minútach je rozpustenie úplné. Po 1,5 hodine sa odparí prebytok amínu a dimetylformamidu za zníženého tlaku a zostatok sa trituruje s 5 I vody. Guma sa rozpustí v 25 ml etylacetátu a roztok sa premyje 2 x 5 ml vody, suší sa (uhličitan draselný) a zahustí. Po rozpustení v 5 ml éteru sa oddelia kryštály čistého produktu; hmotn. 0,101 g; 1.1. 140 až 142 °C. Hmotové spektrum (Cl) 448 (M⁺). Elementárna analýza pre C₂|H₂₃CI₂N₄O₂: vypočítané 56,26 % C, 5,17 % H, 15,62 % N, nájdené 56,48 % C, 5.24 % H, 15,53 % N.

Príklad 48 6-(2,6-Dichlórfenyl)-2-[2-(3,4-dimetoxyfenyl)-etylamino]-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 37, 0,80 g (4,40 mmol) 2-(3,4-dimetoxyfenyl) etylaminu a 0,5 ml dimetylformamidu sa zahrieva pri miešaní v olejovom kúpeli 125 ^CC. Po 2 minútach je rozpustenie úplné. Po 5 hodinách sa prebytok amínu a dimetylformamidu odparí pri zníženom tlaku a zostatok sa trituruje s 10 ml vody. Guma sa rozpusti v 75 ml éteru a roztok sa premyje 2 x 10 ml vody a suší sa (uhličitan draselný). Hydrochloridová soľ sa pripraví priechodom plynného chlorovodíka týmto éterovým roztokom za vyzrážania gumy. Éter sa zleje a guma sa rozpustí v 2,0 ml 2-propanolu. Vyvolá sa vyzrážanie kryštálov. Éter (10 ml) sa pridá a čisté kryštály sa odfiltrujú a premyjú sa éterom; hmotn. 0,034 g; t, t. 152 až 155 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 485 (M⁺).

Elementárna analýza pre C₂₄H₂₂CI₂N₄O₃.HCI.0,75 C₃H₈O: vypočítané 55,61 % C, 5,16 %*H, 9,88 % N, nájdené 55,32 % C, 5,28 % H, 9,50 % N.

Príklad 49 6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-metyl-2-[(pyridin-2-ylmetyl)-amino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 37, 1,08 g (10,0 mmol) 2-(aminoetyl)pyridínu a 0,5 ml dimetylformamidu sa zahrieva za miešania v 130 °C teplom olejovom kúpeli. Po 2 minútach je rozpustenie úplné. Po 2 hodinách sa prebytok amínu a dimetylformamidu odparí pri zníženom tlaku. K zvyšku sa pridá éter (5 ml). Okamžite sa vytvoria kryštály. Pridá sa voda (5 ml) a celá zmes sa odfiltruje. Koláč sa premyje 5 ml éteru, 5 ml vody a potom sa suší. Hmotn. 0,164 g. Rekryštalizáciou z etylacetátu sa získa 0,075 g čistého produktu; 1.1. 198 až 201 °C. Hmotové spektrum (Cl) 412 (M⁺).

Elementárna analýza pre C₂₀H₁₅Cl₂N₅O: vypočítané 58,27 % C, 3,67 % H, 16,99 % N, nájdené 58,36 % C, 3,82 % H, 16,82 % N.

Príklad 50 6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-metyl-2-[(pyridín-3-ylmetyl)-amino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Táto zlúčenina sa pripraví postupom podobným postupu opísanému v príklade 49, vychádza sa z 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 37 a 1,08 g (10,0 mmol)

3-(aminometyl)pyridínu pri získaní 0,053 g čistého produktu; 1.1. 224 až 226 °C.

Hmotové spektrum (CI) 412 (M⁺). Elementárna analýza pre C₂oH₁₅Cl₂N₅0: vypočítané 58,27 % C, 3,67 % H, 16,99 % N, nájdené 58,36 % C, 3,78 % H, 16,79 % N.

Príklad 51 6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-metyl-2-(pyridin-2-yl-etylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Táto zlúčenina sa pripraví postupom podobným postupu opísanému v príklade 49, vychádza sa z 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 37 a 1,00 g (8,20 mmol) 2-(2-aminometyl)pyridínu pri získaní 0,082 g čistého produktu; 1.1. 173 až 174 °C.

Hmotové spektrum (CI) 426 (M⁺). Elementárna analýza pre C₂₁H₁7C1₂N₅O: vypočítané 59,17 % C, 4,02 % H, 16,43 % N, nájdené 59,28 % C, 4,11 % H, 16,29 % N.

Príklad 52 6-(2,6-Dichlórfcnyl)-2-{3-[4-(2-metoxyfenyl)-piperazín-l-yl]-l-propylamino}-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Táto zlúčenina sa pripraví postupom podobným postupu opísanému v príklade 49, vychádza sa z 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 37 a 1,00 g (4,00 mmol) l-(3-aminopropyl)-4-(2-metoxyfenyl)piperazínu pri získaní 0,103 g čistého produktu; 1.1. 187 až 188 °C. Hmotové spektrum (CI) 553 (M⁺).

Elementárna analýza pre C₂8H₃₀Cl₂N₆O₂: vypočítané 60,76 % C, 5,46 % H, 15,18 % N, nájdené 61,04 % C, 5,41 % H, 15,20 % N.

Príklad 53 6-(2,6-Dichlórfenyl)-2-metánsulfinyl-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Táto zlúčenina sa izoluje ako vedľajší produkt pri oxidácii 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 37 kyselinou m-chlórperbenzoovou v jednom postupe, ktorý je podobný príkladu 39, ale kde reakčný čas je skrátený; 1.1. 244 až 247 °C. Hmotové spektrum (CI) 368 (M⁺).

Elementárna analýza pre CuH, ,C1₂N₂O₂S: vypočítané 48,93 % C, 3,01 % H, 11,41 % N, nájdené 48,42 % C, 3,20 % H, 11,05 % N.

Príklad 54 6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-metyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Roztok 0,113 g (0,29 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-metánsulfonyl-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 39 v 1,00 g (10,70 mmol) anilínu sa udržuje pod refluxom (184 °C) 3 minúty. Väčšina prebytku anilínu sa odstráni pri zníženom tlaku. Zvyšná guma sa rozpustí v 1 ,0 ml etylacetátu. Vyvinú sa kryštály; hmotn. 0,088 g. Ďalšie čistenie na odstránenie tmavej farby sa uskutoční silikagélovou chromatografiou, eluciou chloroformom a potom 50 % hexánom-etylacetátom pri získaní čistého kryštalického produktu; hmotn. 0,046 g; 1.1. 247 až 249 °C. Hmotové spektrum (CI) 397 (M⁺).

Elementárna analýza pre C₂oH₁₄Cl₂N₄0: vypočítané 60,47 % C, 3,55 % H, 14,10 % N, nájdené 60,25 % C, 3,64 % H, 14,00 % N.

Príklad 55 2-(3-Brómfenylamino)-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Roztok 0,155 g (0,40 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-metánsulfonyl-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidm-7-ónu z príkladu 39 v 0,50 g (2,90 mmol) 3-brómanilínu sa udržuje pod refluxom (251 °C) 5 minút. Väčšina prebytku 3-brómanilínu sa odparí pri zníženom tlaku. Ochladením vzniknutá guma sa trituruje s 1,0 ml éteru. Fialové kryštály, ktoré sa vyvinuli, sa odfiltrujú a premyjú 2 ml éteru; hmotn. 0,186 g. Ďalšie čistenie na odstránenie tmavej farby sa uskutoční silikagélovou chromatografiou, elúciou chloroformom a potom 50 % hexánom/etylacetátom pri získaní čistého kryštalického produktu; hmotn. 0,104 g;

1.1. 246 až 248 °C. Hmotové spektrum (Cl) 447 (M' ). Elementárna analýza pre C₂₀H|₃BrCl₂N₄O: vypočítané 50,45 % C, 2,75 % H, 11,77 % N, nájdené 50,53 % C, 2,76 % H, 11,52 % N.

Príklad 56 2-(4-Chlórfenylamino)-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,113 g (0,29 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-metánsulfonyl-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 39 v 0,50 g (3,90 mmol) 4-chlóranilínu sa zahrieva pri miešaní na teplotu varu (238 °C) 5 minút. K ochladenému tmavomodrému reakčnému roztoku sa pridá etylacetát (3 ml). Pridá sa petroléter (3 ml) na úplné vyzrážanie tmavej pevnej látky. Táto sa odfiltruje, premyje sa 50 % hexánom-etylacetátom; hmotn. 0,078 g. Surová pevná látka sa čistí na odstránenie tmavej farby silikagélovou chromatografiou, eluuje sa chloroformom a potom 50 % hexánometylacetátom pri získaní čistého kryštalického produktu; hmotn. 0,056 g; 1.1. 255 až 256 °C. Hmotové spektrum (CI) 431 (M⁺).

Elementárna analýza pre C₂₀H₁₃CI₃N₄O: vypočítané 55,64 % C, 3,04 % H, 12,98 % N, nájdené 55,75 % C, 3,04 % H, 12,97 % N.

Príklad 57

2-(Benzo[ 1,3]dioxo-5-ylamíno)-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ón

Zmes 0,113 g (0,29 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-metánsulfonyl-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 39 a 0,50 g (3,70 mmol) 3,4-metyléndioxyanilínu sa zahrieva pri miešaní na 200 °C v olejovom kúpeli. Výsledný roztok sa zahrieva 5 minút a ochladí sa na teplotu miestnosti. Pridá sa etylacetát (2 ml) a stopy pevnej látky sa odfiltrujú. Kryštály, ktoré sa pomaly vyvíjajú vo filtráte, sa odfiltrujú a premyjú s 2 ml etylacetátu; hmotn. 0,080 g. Pevná látka sa čistí na odstránenie tmavého zafarbenia silikagélovou chromatografiou, za elúcie chloroformom a potom 50 % hexánom/etylacetátom pri získaní čistého kryštalického produktu; hmotn. 0,054 g; 1.1. 240 až 241 °C. Hmotové spektrum (CI) 441 (M⁺).

Elementárna analýza pre C_2IH|₄C1₂N4O₃: vypočítané 57,16 % C, 3,20 % H, 12,70 % N, nájdené 56,95 % C, 3,11 % H, 12,47 % N.

Príklad 58 6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-metyl-2-(pyridín-4-ylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,550 g (1,25 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-metánsulfonyl-8-metyI-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ónu z príkladu 39 v 1,50 g (16,00 mmol) 4-aminopyridinu sa zahrieva pri miešaní na 150 °C v olejovom kúpeli. Výsledný roztok sa zahrieva 10 minút a ochladí sa na teplotu miestnosti. Stvrdnutá tavenina sa trituruje s 3 ml metanolu. Po 24 hodinách státia sa vyvinutá granuláma pevná látka odfiltruje a premyje sa 2 ml metanolu a 2 ml éteru; hmotn. 0,471 g.

Hydrochloridová soľ sa pripraví nasledovne: uvedená surová báza sa suspenduje v 5 ml metanolu. Pri miešaní sa pridá 1 ml 2N kyseliny chlorovodíkovej za získania kompletného roztoku. Ďalšia kyselina chlorovodíková sa pridáva až je roztok slabo zakalený. Kryštály sa potom vylúčia, odfiltrujú a premyjú 10 ml 10 % metanolu-éteru a potom éterom; hmotn. 0,485 g.

Rekryštalizáciou z metanolu/éteru sa získa čistý kryštalický produkt; hmotn. 0,405 g; 1.1. 338 až 340 °C. Hmotové spektrum (Cl) 398 (M⁺).

Elementárna analýza pre C, jHnCI₂\;O.HCLH_ľO: vypočítané 50,40 % C, 3,56 % H, 15,47 % N, nájdené 50,78 % C, 3,18 % H, 15,50 % N.

Príklad 59 6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-metyl-2[4-(4-metylpiperazin-1 -yl)-butylamino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,152 g (0,43 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 37 a 0,50 g (2,90 mmol) 1 -(4-aminobutyl)-4-metylpiperazínu sa zahrieva pri miešaní v 170 °C teplom olejovom kúpeli. Po 2 minútach je rozpustenie kompletné. Po 2 hodinách sa roztok ochladí na teplotu miestnosti a tmavá guma sa rozpusti v 25 ml éteru. Roztok sa premyje 4 x 5 ml vody. Väčšina zafarbenia prejde do vody na premývanie. Eterový roztok sa suší nad uhličitanom draselným, filtruje a zahusti sa na asi 2 ml objemu. Kryštály, ktoré sa vylúčia, sa odfiltrujú a premyjú sa éterom; hmotn. 0,063 g; 1.1. 130 až 132 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 475 (M ) Elementárna analýza pre Ci^mCEN^C): vypočítané 58,11 % C, 5,94 % H, 17,68 % N, nájdené 58,39 % C, 5,99 % H, 17,53 % N.

Príklad 60 2-Cyklohexylamino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ón

Zmes 0,100 g (0,26 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-metánsulfonyl-8-metyl-8H-pyrido(2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 39 a 0,300 g (3,00 mmol) cyklohexylamínu sa zahrieva na teplotu varu (134 °C). Výsledný roztok sa zahrieva pod refluxom 2 minúty. Väčšina prebytku amínu sa odparí pri zníženom tlaku. Zvyšná guma sa rozpustí v 2,0 ml etylacetátu za horúca. Pridá sa petroléter (2 ml) a kryštály, ktoré sa vylúčia z ochladeného roztoku sa odfiltrujú a premyjú sa vodou; hmotn. 0,090 g. Rekryštalizáciou z etylacetátu sa získa čistý kryštalický produkt; hmotn. 0,048 g;

1.1. 242 až 244 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 403 (M ) Elementárna analýza pre C20H20CI2N4O: vypočítané 59,56 % C, 5,00 % H, 13,89 % N, nájdené 59,92 % C, 5,03 % H, 13,86 % N.

Príklad 61 terc.Butylester kyseliny 6-(6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylamino]-hexánovej

Zmes 0,152 g (0,40 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-metánsulfonyl-8-metyl-8H-pyTÍdo[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 39 a 0,750 g (4,00 mmol) terc.butylesteru kyseliny

5- aminohexánovej sa zahrieva pri miešaní na 120 °C v 0lejovom kúpeli do úplného rozpustenia. Po 10 minútach sa roztok ochladí na teplotu miestnosti a pridá sa 20 ml 10 % hydrogensiričitanového roztoku s prítomnými ľadovými lupienkami. Oddelená guma sa extrahuje do 30 ml ctcru. Organická fáza sa premyje 3 x 5 ml vody, suší (síran horečnatý), filtruje a zahustí sa na objem 2 ml. Kryštály, ktoré sa vylúčia, sa odfiltrujú a premyjú sa 1 ml éteru: hmotn. 0,150 g; 1.1. 70 až 75 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 491 (M*).

Elementárna analýza pre C₂4H28C12N₄O₃.0,2 H₂O: vypočítané 58,22 % C. 5,78 %H, 11,32 % N, ’ nájdené 57,84 % C, 5,71 % H, 11,04 % N.

Príklad 62

6- (6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylamino]-hexánová kyselina

Roztok 0,095 g (0,19 mmol) terc.butylesteru kyseliny 6-(6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylamino]-hexánovej z príkladu 61 v 75 ml kyseliny trifluóroctovej pri 25 °C sa nechá stáť 1 hodinu. Väčšina kyseliny trifluóroctovej sa odparí. Zvyšná guma sa trituruje s 2 ml vody a zleje sa. Pre rozpustenie väčšiny gumy sa pridá metanol (1 ml), čím sa vyvinú dobre definované kryštály. Pridá sa voda (1 ml) a pevná látka sa filtruje a suší; hmotn. 0,100 g; t. t. 240 až 242 °C. Hmotové spektrum (Cl) 435 (M⁺).

Elementárna analýza pre C₂oH2oCI₂N₄0₃.CF₃C0₂H.O,75 CH₃OH:

vypočítané 47,65 % C, 4,22 % H, 9,77 % N, nájdené 47,38 % C. 4,28 % H, 9,72 % N.

Príklad 63 6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-metyl-2-p-tolylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,113 g (0,29 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-metánsulfonyl-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ónu z príkladu 39 a 1,50 g (4,70 mmol) 4-metylanilínu sa zahrieva za miešania v I 80 °C teplom olejovom kúpeli. Výsledný roztok sa zahrieva 10 minút. Väčšina prebytku 4-metylanilínu sa odparí pri zníženom tlaku. Zvyšok sa rozpusti v 1 ml etylacetátu. Kryštály, ktoré sa oddelia z tmavého roztoku sa filtrujú a premyjú 2 ml etylacetátu a potom éteru; hmotn. 0,111 g. Rekryštalizáciou z etylacetátu sa získa čistý produkt, hmotn. 0,050 g, t. t. 243 až 245 °C. Hmotové spektrum (Cl) 411 (M⁺).

Elementárna analýza pre C_2IH₁₆C1₂N₄O: vypočítané 61,33 % C, 3,92 % H, 13,62 % N, nájdené 61,1 I % C, 4,00 % H, 13,41 % N.

Príklad 64 6-(2,6-Dichlórfenyl)-2-(4-metoxyfenylamino)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,113 g (0,29 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-metánsulfonyl-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 39 a 0,50 g (4,10 mmol) 4-metoxyanilinu sa za miešania zahrieva v 180 °C teplom olejovom kúpeli. Výsledný roztok sa zahrieva 10 minút. Väčšina prebytku ani línu sa odparí za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozpustí v 2 ml etylacetátu. Kryštály, ktoré sa vylúčia z tmavého roztoku sa odfiltrujú a premyjú 2 ml etylacetátu; hmotn. 0,102 g. Rekryštalizáciou z etylacetátu sa získa čistý produkt; hmotn. 0,047 g; 1.1. 221 až 223 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 427 (M⁺). Elementárna analýza pre C₂₁H₁₆C1₂N₄O₂: vypočítané 59,03 % C, 3,77 % H, 13,11 % N, nájdené 59,19 % C, 3,84 % H, 13,07 % N.

Príklad 65 6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-etyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ylidénamin g práškovaného bezvodého uhličitanu draselného sa pridá k roztoku 4,95 g (0,025 mol) 4-etylamino-2-metylsulfanylpyrimidín-5-karbaldehydu a 5,25 g (0,028 mol) 2,6-dichlórfenylacetonitrilu v 50 ml dimetylformamidu. Zmes sa zahrieva za miešania v 130 °C teplom olejovom kúpeli (teplota nádoby = asi 120 °C) 16 hodín. Zmes sa ochladí a filtruje. Koláč sa premyje 30 ml dimetylformamidu. K fíltrátu sa pridá voda až do slabého zákalu. Kryštály, ktoré sa oddelia, sa odfiltrujú, premyjú sa 20 ml 50 % dímetylformamidu/vody a potom 20 ml vody a sušia sa; hmotn. 4,30 g, 11. 217 až 219 °C. Hmotové spektrum (Cl) 365 (M⁺).

Príklad 66 N-[6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-etyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ylidén]-acetamid

Zmes 2,70 g (7,40 mmol) 6-(2,6-dichlórfcnyl)-8-etyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ylidénamínu z príkladu 65 a 15 ml acetanhydridu sa zahrieva za miešania na teplotu varu. Výsledný roztok sa zahrieva pod refluxom 5 minút a zahustí sa za zníženého tlaku na objem asi 8 ml. Roztok sa ochladí a pridá sa éter (8 ml). Dobre definované kryštály, ktoré sa oddelia, sa odfiltrujú a premyjú sa 5 ml éteru a 10 ml petroléteru; hmotn. 2,68 g; 1.1. 175 až 177 °C. Hmotové spektrum (Cl) 407 (M⁺).

Príklad 67 6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-etyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ón

2,40 g (5,90 mmol) N-[6-(2,6-dichlórfenyl)-8-etyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ylidén]-acetamidu z príkladu 66 sa rozpustí v 35 ml 6N kyseliny chlorovodíkovej pri 25 °C. Roztok sa zahrieva za miešania na teplotu varu. Po 1 minúte sa oddelia kryštály produktu. Po ďalších 5 minútach pri teplote varu sa zmes ochladí, filtruje a koláč sa postupne premyje 5 ml 6N kyseliny chlorovodíkovej, 15 ml vody, 5 ml 2-propanolu a 5 ml éteru; hmotn. 2,11 g (98 %). Čistý produkt sa izoluje pri použití silikagélovej chromatografie s elúciou 50 % chloroformu/etylacetátu; 1.1. 233 až 236 °C.

Elementárna analýza pre Ci₆H₁₃C1₂N₃OS. 0,1 C₄H₈O₂.0,25 H₂O:

vypočítané 51,89 % C, 3,80 % H, 11,07 % N, nájdené 51,89 % C, 3,58 % H, 10,99 % N.

Príklad 68 6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-etyl-2-metánsulfonyl-8H-pyrido[2,3-d] pyrimidín-7-ón

Roztok 0,66 g (1,80 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-etyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 67 v 50 ml chloroformu sa spracuje za miešania s 1,50 g (4,32 mmol) 50 % až 60 % kyseliny m-chlórperbenzoovej (celkom 50 % perkyseliny prítomné). Roztok sa nechá stáť pri teplote miestnosti 16 hodín. Pre zníženie prebytku perkyseliny sa pridá 0,50 g (6,80 mmol) dimetylsulfoxidu. Po 15 minútach sa roztok premyje 2 x 30 ml nasýteného roztoku hydrogenuhličitanu a potom 30 ml vody.

Chloroformový roztok sa suší nad bezvodým síranom sodným, filtruje a zahustí na objem 10 ml. Pridáva sa petroléter až do slabého zákalu. Vylúčené kryštály sa odfiltrujú a premyjú sa éterom; hmotn. 0,401 g; t. t. 214 až 216 °C. Hmotové spektrum (Cl) 398 (M⁺).

Elementárna analýza pre C]6H_I3C1₂N₃O₃S . 0,25 H₂O: vypočítané 47,70 % C, 3,38 % H, 10,43 % N, nájdené 47,41 % C, 3,17 % H, 10,23 % N.

Príklad 69 6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-etyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,134 g (0,33 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-etyl-2-metánsulfonyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ónu z príkladu 68 a 0,500 g (5,40 mmol) anilínu sa zahrieva pri miešaní v 195 °C teplom olejovom kúpeli pod refluxom. Výsledný roztok sa udržuje pod refluxom 5 minút. Väčšina prebytku anilínu sa odparí za zníženého tlaku. Zvyšná guma sa rozpustí v 15 ml etylacetátu. Po odfiltrovaní relatívne malého množstva nerozpustného materiálu sa roztok filtruje cez vrstvu silikagélu na odstránenie fialovej farby.

Filtrát sa zahustí na objem 2 ml. Pridáva sa petroléter do slabého zákalu. Kryštály, ktoré sa oddelia, sa odfiltrujú a premyjú 50 % éterom/petroléterom; hmotn. 0,068 g; t. t. 223 až 225 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 411 (M⁺). Elementárna analýza pre C₂₁H_1SC1₂N₄O. 0, 25 C₄H_gO₂: vypočítané 60,98 % C, 4,19 % H, 12,93 % N, nájdené 61,19 % C, 4,29 % H, 12,57 % N.

Príklad 70 6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-ctyl-2-[3-(4-metyl-piperazín-1 -yl)-propylamino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,150 g (0,41 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-etyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 67 a 0,500 g (3,20 mmol) l-(3-aminopropyl)-4-metylpiperazínu sa zahrieva v 180 °C teplom olejovom kúpeli. Výsledný roztok sa zahrieva 0,5 hodiny. Väčšina prebytku amínu sa odparí za zníženého tlaku. Zvyšná guma sa trituruje s 2 ml vody a zleje. Guma sa rozpustí v 15 ml éteru. Roztok sa premyje 3 x 5 ml vody, suší (síran sodný), filtruje a zahusti na objem 2 ml. Pridáva sa petroléter do slabého zákalu. Vylúčené kryštály sa odfiltrujú a premyjú sa 2 ml 75 % éteru/petroléteru; hmotn. 0,90 g; t. t. 126 až 128 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 475 (M⁺). Elementárna analýza pre C₂₃H₂₈Cl₂N₆O.0,4 H₂O: vypočítané 57,24 % C, 6,01 % H, 17,42 % N, nájdené 57,33 % C, 6,04 % H, 17,07 % N.

Príklad 71 6-(2,6-Dichlórfenyl)-2-(2-metoxyfenylamino)-8-metyl-8H-pyrido [2,3 -d] pyrimidin-7-ón

Zmes 0,113 g (0,29 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-metánsulfonyl-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 39 a 0,50 g (4,10 mmol) 2-metoxyanilínu sa zahrieva, za miešania na 175 °C v olejovom kúpeli. Výsledný roztok sa 5 minút zahrieva a ochladí na teplotu miestnosti. Pridá sa éter 2 ml. Vylúčené kryštály sa odfiltrujú a premyjú sa 1 ml éteru; hmotn. 0,070 g. Pevná látka sa čistí pre odstránenie tmavej farby chromatografiou na silikagéli za elúcie chloroformom. Rekryštalizáciou z éteru sa získa čistý produkt; hmotn. 0,029 g; 1.1. 200 až 201 °C. Hmotové spektrum (Cl) 427 (M⁺).

Elementárna analýza pre C₂iH|₆CI₂N₄O₂: vypočítané 59,03 % C, 3,77 % H, 13,11 % N, nájdené 59,09 % C, 3,87 % H, 13,02 % N.

Príklad 72 6-(2,6-Dichlórfenyl)-2-(3-metoxyfenylamino)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,113 g (0,29 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-metánsulfonyI-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 39 a 0,50 g (4,10 mmol) 3-metoxyanilínu sa zahrieva, za miešania na 175 °C v olejovom kúpeli. Výsledný roztok sa 5 minút zahrieva a ochladí na teplotu miestnosti. Pridá sa éter (2 ml). Vylúčené kryštály sa odfiltrujú a premyjú sa 2 ml éteru; hmotn. 0,083 g. Pevná látka sa čistí pre odstránenie tmavej farby chromatografiou na silikagéli, elúcia chloroformom. Rekryštalizáciou z éteru sa získa čistý produkt; hmotn. 0,037 g; 1.1. 203 až 204 °C. Hmotové spektrum (Cl) 427 (M⁺).

Elementárna analýza pre C₂₁H₁₆C1₂N₄O₂. 0,5 H₂O: vypočítané 57,81 % C, 3,93 % H, 12,84 % N, nájdené 57,98 % C, 3,82 % H, 12,71 % N.

Príklad 73

6-(2,6-Dichlórfenyl)-2-(4-metoxy-3-metylfenylamino)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,113 g (0,29 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-metánsulfonyl-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 39 a 0,40 g (2,90 mmol) 3-metyl-4-metoxyanilínu sa zahrieva, za miešania na 165 °C v olejovom kúpeli. Výsledný roztok sa 5 minút zahrieva a ochladí sa na teplotu miestnosti. Pridá sa éter (1 ml). Vylúčené kryštály sa odfiltrujú a premyjú 2 ml éteru; hmotn. 0,109 g. Pevná látka sa čistí pre odstránenie tmavej farby chromatografiou na silikagéli, elúcia chloroformom potom etylacetátom. Etylacetátový eluent sa zahustí na objem 3 ml. Po ochladení sa oddelia čisté kryštály produktu; hmotn, 0,060 g; t. t. 218 až 220 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 441 (M ). Elementárna analýza pre C₂₂H₁₈C1₂N₄O₂: vypočítané 59,88 % C, 4,11 % H, 12,70 % N, nájdené 59,88 % C, 4,14 % H, 12,57 % N.

Príklad 74 6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-etyl-2-(4-metoxyfenylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Roztok 0,100 g (0,25 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-etyl-2-metánsulfonyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 68 a 0,061 g (0,50 mmol) 4-metoxyanilínu v 0,5 ml dimetylformamide sa zahrieva pod refluxom 10 minút. Pridajú sa tri kvapky vody. Vylúčia sa kryštály. Pre vyzrážanie ďalšej lepkavej pevnej látky sa pridajú ďalšie 3 kvapky vody. Po dekantácii sa pevná látka trituruje s 0,5 ml etylacetátu a 0,5 ml petroléteru. Pevné látky sa odfiltrujú a premyjú 50 % etylacetátom/petroléterom a sušia sa; hmotn. 0,080 g. Čistenie sa uskutočňuje filtráciou etylacetátového roztoku cez vrstvu silikagélu. Zahustením filtrátu na objem 1 ml sa získa čistý kryštalický produkt; hmotn. 0,033 g; t. t. 213 až215 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 441 (M⁺). Elementárna analýza pre C₂₂H|₈C1₂N₄O₂: vypočítané 59,88 % C, 4,11 % H, 12,70 % N, nájdené 59,52 % C, 4,17 % H, 12.56 % N.

Príklad 75 6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-etyl-2-(4-hydroxyfenylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,048 g (0,11 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-etyl-2-(4-metoxyfenylamíno)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 74 a 15 ml koncentrovanej (48 %) kyseliny brómvodíkovej sa zahrieva za miešania pod refluxom 3 hodiny. Výsledný roztok poskytne po ochladení kryštály; hmotn. 0,033 g; 1.1. 255 až 258 °C. Hmotové spektrum (Cl) 427 (M¹).

Elementárna analýza pre C₂₁Hi₆CI₂N₄O₂.HBr.H₂O: vypočítané 47,93 % C, 3,64 % H, 10,65 % N, nájdené 47,78 % C, 3,29 % H, 10,46 % N.

Príklad 76 6-(2,6-Dichlórfenyl)-2-(4-etoxyfenylamino)-8-etyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,150 g (0,38 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-etyl-2-metánsulfonyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 68 a 0,500 g (3,60 mmol) 4-etoxyanilínu sa kondenzuje na 160 °C v olejovom kúpeli 10 minút. Tmavo fialová tavenina sa ochladí a rozpustí v 1 ml teplej ľadovej kyseline octovej. Tento roztok sa zriedi na objem 10 ml vodou na vyzrážanie pevnej látky. Pevná látka sa odfiltruje, premyje sa dobre vodou a suší sa; hmotn. 0,140 g. Čistenie sa uskutočňuje filtráciou ctylacctátovcho roztoku cez vrstvu silikagélu a premytím silikagélu etylacetátom. Filtrát sa zahusti na objem 2 ml a pridajú sa 2 ml petroléteru. Kryštály, ktoré sa vylúčia, sa odfiltrujú a premyjú éterom; hmotn. 0,094 g; 1.1. 192 až 194 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 455 (M⁺). Elementárna analýza pre C₂jH₂₀Cl2N₄O₂: vypočítané 60,67 % C, 4,43 % H, 12,30 % N, nájdené 60,62 % C, 4,53 % H, 12,11 % N.

Príklad 77

6-(2,6-Dichlórfenyl )-2-(3,4-dimetoxyfenylamino)-8-etyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,150 g (0,38 mmol) 6-(2,6-dichlórfcnyl)-8-ctyl-2-metánsulfonyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 68 a 0,500 g (3,30 mmol) 3,4-dimetoxyanilínu sa zahrieva na 160 °C v olejovom kúpeli 5 minút. Tmavo modrý roztok sa ochladí a rozpustí v 2 ml teplej ľadovej kyseline octovej. Tento roztok sa zriedi na objem 10 ml vodou na vyzrážanie pevnej látky. Pevná látka sa odfiltruje, dobre sa premyje vodou a suší sa; hmotn. 0,200 g. Čistenie sa uskutoční filtráciou etylacetátového roztoku (25 ml) cez vrstvu silikagélu a premytím silikagélu etylacetátom. Filtrát sa zahustí na objem 3 ml. Kryštály sa vylúčia a odfiltrujú a premyjú sa I ml etylacetátu a potom l ml éteru; hmotn. 0,116 g;

1.1. 221 až 223 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 471 (M*). Elementárna analýza pre C_2íH2oCI₂N₄0₃: vypočítané 58,61 % C, 4,28 % H, 11,89 % N, nájdené 58,31 % C, 4,31 %H, 11,71 %N.

Príklad 78 6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-etyl-2-(3,4,5-trimetoxyfenylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,150 g (0,38 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-etyl-2-metánsulfonyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 68 a 0,500 g (2,70 mmol) 3,4,5-trimetoxyanilínu sa zahrieva na 160 °C v olejovom kúpeli 5 minút. Tmavý roztok sa ochladí a rozpustí sa v 2 ml teplej ľadovej kyseline octovej. Tento roztok sa zriedi na objem 15 ml vodou na vyzrážanie fialovej pevnej látky. Pevná látka sa odfiltruje, premyje sa dobre vodou a suší sa; hmotn. 0,140 g. Čistenie sa uskutoční filtráciou etylacetátového (30 ml) roztoku cez vrstvu silikagélu a premytím silikagélu etylacetátom. Filtrát sa zahustí na objem 3 ml. Kryštály, ktoré sa vylúčia, sa od filtrujú a premyjú 1 ml etylacetátu a 1 ml éteru; hmotn. 0,054 g; 1.1. 275 až 278 °C.

Hmotové spektrum (CI) 501 (M⁺). Elementárna analýza pre C₂₄H₂₂C1₂N₄O₄: vypočítané 57,50 % C, 4,42 % H, 11,17 % N, nájdené 57,41 % C, 4,51 % H, 10,98 % N.

Príklad 79 6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-metyl-2-(pyridín-3-ylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 37, 0,500 g (5,30 mmol) 3-aminopyridínovej bázy a 0,066 g (0,50 mmol) hydrochloridu 3-aminopyridínu sa zahrieva pri miešaní na 210 °C na olejovom kúpeli 1 hodinu. Pridá sa voda (5 ml) k ochladenej reakčnej zmesi na vyzrážanie pevnej látky. Pevná látka sa odfiltruje, premyje sa dobre vodou a suší sa; hmotn. 0,147 g. Čistenie sa uskutoční silikagélovou chromatografiou pri elúcii chloroformom a potom etylacetátom. Etylacetátový eluent, obsahujúci čistý produkt, sa zahustí na objem 2 ml. Kryštály, ktoré sa vylúčia, sa odfiltrujú a premyjú sa 0,5 ml etylacetátu a 1 ml éteru; hmotn. 0,810 g; 1.1. 247 až 248 °C. Hmotové spektrum (CI) 398 (M⁺).

Elementárna analýza pre C₁₉H₁₃C1₂N₅O: vypočítané 57,30 % C, 3,29 % H, 17,59 % N, nájdené 57,33 % C, 3,38 % H, 17,43 % N.

Príklad 80 6-(2,6-Dichlórfcnyl)-2-[4-(2-dietylaminoetoxy)-fenylamino]-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,155 g (0,40 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 37, 0,167 g (0,80 mmol) 4-(2-dietylaminoetoxy) anilínu a 1 ml (2-metoxyetyl)éteru (t. v. 162 °C) sa zahrieva pri miešaní na 150 °C na olejovom kúpeli. Postupne sa počas 10 minút rozpustí všetka pevná látka. Roztok sa zahrieva ďalších 10 minút a ochladí na 100 °C. Prikvapkáva sa voda do slabého zákalu. Oddelené kryštály sa odfdtrujú, premyjú sa 0,5 ml éteru a 2 ml vody a sušia sa; hmotn. 0,105 g. Čistenie sa uskutoční chromatografiou pri elúcii chloroformom, potom etylacetátom a nakoniec 10 % metanolom/chloroformom pri získaní frakcie s čistým produktom. Eluent sa odparí do sucha. Zvyšná amorfná pevná látka sa rozpustí v 1 ml teplého etylacetátu. Kryštály, ktoré sa vylúčia, sa odfiltrujú a opatrne premyjú etylacetátom a éterom; hmotn. 0,042 g; 1.1. 141 až 143 °C.

Hmotové spektrum (CI) 512 (M⁺). Elementárna analýza pre C₂₆H₂₇C1₂N₅O₂: vypočítané 60,94 % C, 5,31 % H, 13,67 % N, nájdené 60,96 % C, 5,36 % H, 13,52 % N.

Príklad 81 6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-metyl-2-[5-(4-metylpiperazín-1 -yl)-pentylamino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 37, 0,50 g (2,70 mmol) l-(5-aminopentyl)-4-metylpiperazínu sa zahrieva pri miešaní na 180 °C až 185 °C na olejovom kúpeli. Po 2 minútach je roztok úplný. Po 0,5 hodine sa roztok ochladí na teplotu miestnosti a pridá sa 5 ml vody na vyzrážanie gumy podobnej karamelu. Guma sa dekantuje a trituruje s 5 ml vody. Dekantuje sa a guma sa vyberie do 35 ml éteru. Eterový roztok sa premyje 2 x 50 ml vody, suší sa (uhličitan draselný) a zahustí na objem 5 ml. Do slabého zákalu sa pridáva petroléter. Vylúčené kryštály sa odfiltrujú a premyjú sa 80 % éterom/petroléterom; hmotn. 0,060 g; 1.1. 110 až 112 °C.

Hmotové spektrum (CI) 489 (M⁺). Elementárna analýza pre C₂₄H₃₀Cl₂N₆O: vypočítané 58,90 % C, 6,18 % H, 17,17 % N, nájdené 58,75 % C, 6,14 % H, 16,96 % N.

Príklad 82 6-(2,6-Dichlórfenyl)-2-(3-hydroxymetylfenylamino)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,155 g (0,40 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-metánsulfonyl-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 39 a 0,500 g (4,10 mmol) 3-(hydroxymetyljanilínu sa zahrieva v 180 °C teplom olejovom kúpeli 10 minút. Na asi 120 °C sa pridajú 2 ml ľadovej kyseliny octovej na rozpustenie gumy. Na vyzrážanie pevnej látky sa pridá voda (20 ml). Zmes sa odfiltruje. Koláč sa dobre premyje vodou a suší; hmotn. 0,130 g. Čistenie sa uskutoční silikagélovou chromatografiou pri elúcii chloroformom a potom etylacetátom pri získaní frakcie, obsahujúcej čistý produkt. Etylacetátový eluent sa zahustí na objem 1 ml. Kryštály, ktoré sa vylúčia, sa odfiltrujú a premyjú 0,5 ml etylacetátu a potom 1 ml éteru; hmotn. 0,059 g; 1.1. 215 až 217 °C.

Hmotové spektrum (CI) 427 (M⁺). Elementárna analýza pre C_2]H₁₆C1₂N₄O₂: vypočítané 59,03 % C, 3,77 % H, 13,11 % N, nájdené 59,14 % C, 3,91 % H, 12,78 % N.

Príklad 83 6-(2,6-Dichlórfenyl)-2-(3,5-dimetoxyfenylamino)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ón

Zmes 0,155 g (0,40 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-metánsulfonyl-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 39 a 0,400 g (2,60 mmol) 3,5-dimetoxyanilínu sa zahrieva v 160 °C teplom olejovom kúpeli 5 minút. Pri asi 100 °C sa pridá 1 ml ľadovej kyseliny octovej na rozpustenie taveniny. Na vyzrážanie gumy sa pridá voda (10 ml). Dekantuje sa a guma sa rozpusti v 35 ml mctylénchloridu. Roztok sa premyje 2 x 20 ml vody, suší sa nad síranom horečnatým, spracuje sa s aktívnym uhlím, filtruje a zahustí. Vzniknutá guma sa čistí silikagélovou chromatografiou pri elúcii chloroformom a potom 2 : 1 hexán : etylacetátom pri získaní frakcie, obsahujúcej čistý produkt. Eluent sa odparí takmer do sucha, kedy sa vylúčia kryštály. Kryštály sa odfiltrujú a premyjú 0,5 ml éteru; hmotn. 0,059 g; 1.1. 228 až 230 °C. Hmotové spektrum (CI) 457 (M⁺).

Elementárna analýza pre C₂₂H₁₈C1₂N₄O₃: vypočítané 57,78 % C, 3,97 % H, 12,25 % N, nájdené 57,93 % C, 4,07 % H, 12,16 % N.

Príklad 84

Metylester kyseliny {4-(6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylamino]fenyl} octovej

Zmes 0,226 g (0,58 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-metánsulfonyl-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 39 a 0,40 g (2,80 mmol) bázy metylesteru kyseliny

4-aminofenyloctovej sa zahrieva na 160 °C až 165 °C v olejovom kúpeli. Výsledný roztok sa 10 minút zahrieva a ochladí sa na teplotu miestnosti. Roztok sa spracuje s 1 ml ľadovej kyseliny octovej na rozpustenie. Na vyzrážanie gumy sa pridá voda (10 ml). Zmes sa dekantuje a zvyšná guma sa rozpustí v 20 ml chloroformu. Chloroformový roztok sa premyje 25 ml vody, suší sa (síran horečnatý), filtruje a zahustí. Čistenie sa vykonáva silikagélovou chro matografiou pri elúcii chloroformom a potom 50 % hexánom/etylacetátom pri získaní frakcie, obsahujúcej čistý produkt. Eluent sa zahustí do sucha, pri získaní pevnej látky; hmotn. 0,141 g. Rekryštalizáciou z etylacetátu sa získajú kryštály; hmotn. 0,054 g; t. t. 224 až 226 °C. Hmotovc spektrum (Cl) 469 (M⁺).

Elementárna analýza pre C₂₃H|₈C1₂N₄O₃: vypočítané 58,86 % C, 3,87 % H, i 1,94 % N, nájdené 59,10 % C, 3,94 % H, 11,85 % N.

Príklad 85 6-(2,6-Dichlórfenyl)-2-(6-metoxypyridín-3-ylamino)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,155 g (0,40 mmol) 6-(2,6-diehlórfenyl)-2-mctánsulfonyl-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ónu z príkladu 39 a 0,50 g (4,00 mmol) 5-amino-2-metoxypyridínu sa zahrieva za miešania na 160 °C v olejovom kúpeli. Výsledný roztok sa zahrieva 10 minút a ochladí sa na teplotu miestnosti. Po vyzrážaní gumy sa pridá voda (10 ml). Zmes sa dekantuje a zvyšná guma sa trituruje s 5 ml vody. Vzniknutá pevná hnedá látka sa odfiltruje, dobre sa premyje vodou a suší; hmotn. 0,135 g. Čistenie sa uskutočňuje silikagélovou chromatografiou za elúcie chloroformom a potom etylacetátom pri získaní frakcie, obsahujúcej čistý produkt. Eluent sa zahustí na objem 2 ml. Kryštály, ktoré sa vylúčia sa odfiltrujú a premyjú 0,2 ml etylacetátu a potom 0,5 ml éteru; hmotn. 0,045 g; t. t. 233 až 235 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 428 (M⁺). Elementárna analýza pre C₂oH_l5CI₂N₅02: vypočítané 56,09 % C. 3,53 % H, 16,35 % N, nájdené 56,07 % C, 3,53 % H, 16,06 % N.

Príklad 86

Kyselina {4-(6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylamino]fenyl}octová

0,065 g (0,14 mmol) metylesteru kyseliny {4-(6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]-pyrimidín-2-ylamino]fenyl}octovej z príkladu 84 sa rozpustí pri miešaní v 25 ml horúceho metanolu. Pri teplote varu sa pridá 1 ml 2N hydroxidu sodného. Po 1 hodine refluxu sa roztok zahustí na objem 5 ml (z roztoku sa odstráni pevná látka). Pridá sa voda (10 ml) na získanie kompletného roztoku. Na vyzrážanie voľnej kyseliny ako pevného produktu sa pridá ľadová kyselina octová (0,25 ml). Pevná látka sa odfiltruje, dobre sa premyje vodou a suší; hmotn. 0,060 g. Čistenie sa uskutočňuje rozpustením v 60 ml 50 % metanolu/'metylénchloridu. Stopy pevnej látky sa odfiltrujú a filtrát sa zahustí pri miešaní na objem 2 ml. Oddelené pevné látky sa odfiltrujú a premyjú vodou s 0,5 ml metanolu a éterom; hmotn. 0,050 g; 1.1. 286 až 290 °C. Hmotové spektrum (Cl) 455 (M⁺).

Elementárna analýza pre C₂₂H_I6CI₂N₄O₃: vypočítané 58,04 % C, 3,54 % H, 12,31 % N, nájdené 58,28 % C, 3,59 % H, 12,19 % N.

Príklad 87 6-(2,6-Dichlórfenyl)-2-(3-hydroxyfenylamino)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ún

Zmes 0,155 g (0,40 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-metánsulfonyl-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 39 a 0,50 g (4,60 mmol) 3-aminofenolu sa kondenzuje na 160 °C v olejovom kúpeli 10 minút. Tavenina sa ochladí na asi 100 °C a pridá sa 5 ml ľadovej kyseliny octovej na rozpustenie. Pridáva sa voda do dosiahnutia slabého zákalu. Vylúčené kryštály sa odfiltrujú, dobre sa premyjú vodou a sušia; hmotn. 0,104 g. Rekryštalizáciou z e tylacetátu/petroiéteru sa získa čistý kryštalický produkt; hmotn. 0,035 g; t. t. 290 až 292 °C.

H motové spektrum (Cl) 413 f M ).

Elementárna analýza pre C₂₀H₁₄CI₂N₄O₂.0,25 H₂O: vypočítané 57,50 % C, 3,50 % H, 13,41*% N, nájdené 57,68 % C, 3,50 % H, 13,36 % N.

Príklad 88

Kyselina 4-[6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pynmidín-2-ylamino]-benzoová

Zmes 0,226 g (0,58 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-metánsulfonyl-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ónu z príkladu 39 a 0,40 g (2,42 mmol) etylesteru kyseliny 4-aminobenzoovej sa kondenzuje na 170 °C v olejovom kúpeli pri získaní čírej taveniny. Po 15 minútach sa v horúcej tavenine začnú vylučovať kryštály. Reakčná zmes sa ochladí a trituruje sa 2 ml etylacetátu. Pridá sa petroléter (1 ml). Zmes sa odfiltruje a koláč sa premyje 2 ml éteru; hmotn. 0,200 g. Rekryštalizáciou z etylacetátu sa získa čistý produkt; hmotn. 0,078 g; 1.1. 278 až 280 °C. Hmotové spektrum (Cl) 469 (M⁺).

Elementárna analýza pre C₂₃H₁₈Cl₂N₄O₃.0,l H₂O: vypočítané 58,63 % C, 3,89 % H, ϊ 1,89 % N, * nájdené 58,43 % C, 4,01 % H, 11,61 % N.

Príklad 89

Etylester kyseliny 3-[6-(2,6-dichIórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylamino]benzoovej

Zmes 0,226 g (0,58 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-metánsulfonyi-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 39 a 0,40 g (2,42 mmol) etylesteru kyseliny 3-aminobenzoovej sa kondenzuje na 170 °C v olejovom kúpeli pri získaní čírej taveniny. Po 6 minútach sa tavenina ochladí na asi 100 °C. Na rozpustenie taveniny sa pridá ľadová kyselina octová (1 ml). Na vyzrážanie pevnej látky sa pridá voda (5 ml). Pevná látka sa odfiltruje, dobre sa premyje vodou a trituruje sa 2 ml metanolu. Zmes sa odfiltruje a koláč sa premyje I ml metanolu a potom éterom; hmotn. 0,194 g. Rekryštalizáciou z etylacetátu sa získa čistý produkt; hmotn. 0,075 g; 1.1. 238 až 240 °C. Hmotové spektrum (Cl) 469 (M⁺).

Elementárna analýza pre C₂₃H|₈CI₂N₄O₃: vypočítané 58,86 % C, 3,87 % H, 11,94 % N, nájdené 58,91 % C, 3,96 % H, 11,87 % N.

Príklad 90

Kyselina 3-(6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylamino]benzoová

0,065 g (0,139 mmol) etylesteru kyseliny 3-(6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]-pyrimidín-2-ylamino]benzoovej z príkladu 89 sa rozpustí v 75 ml vriaceho metanolu. Pridá sa hydroxid sodný 2N (2 ml) a číry roztok sa udržuje pod refluxom 2 hodiny. Roztok sa zahustí pri miešaní na objem asi 15 ml. Kalný roztok sa odfiltruje za horúca pre odstránenie stôp pevných látok. Filtrát sa zahustí na objem asi 4 ml. Pridá sa voda (5 ml) pri získaní kalnej zmesi. Na vyzrážanie vločkovitých pevných látok sa pridá ľadová kyselina octová (1 ml). Pevné látky sa odfiltrujú, dobre sa premyjú vodou a sušia; hmotn. 0,048 g. Čistenie sa uskutoční rozpustením v 4 ml teplého dimetylformamidu a prídavkom 20 ml éteru. Kryštály, ktoré sa pomaly vylúčia z číreho roztoku sa odfiltrujú a premyjú sa éterom a potom vodou (na odstránenie akýchkoľvek stôp octanu sodného); hmotn. 0,025 g; 1.1. > 300 °C. Hmotové spektrum (Cl) 441 (M⁺).

Elementárna analýza pre C₂₁H₁₄C1₂N₄O₃: vypočítané 57,16 % C. 3,20 % H, 12,70 % N, nájdené 56,88 % C, 3,42 % H, 12,52 % N.

Príklad 91

Etylester kyseliny 4-{4-[6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylamino]-fenyl} maslovej

Zmes 0,452 g (1,16 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-metánsulfonyl-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu z príkladu 39 a 1,00 g (4,83 mmol) etylesteru kyseliny 4-aminofenylmaslovej bázy sa zahrieva na 160 °C v olejovom kúpeli. Po 1 minúte je roztok kompletný. Po 10 minútach sa reakcia ochladí na asi 100 °C a pridajú sa 2 ml ľadovej kyseliny octovej na rozpustenie viskózneho materiálu. Na vyzrážanie gumy sa pridá voda (20 ml). Zmes sa zleje a zvyšková guma sa trituruje s 3 x 10 ml vody. Guma sa rozpustí v 25 ml metylénchloridu a roztok sa premyje 25 ml vody, súši (síran horečnatý), filtruje a odparí. Zvyškový materiál sa rozpustí v 2 ml horúceho etylacetátu. Vylúčené kryštály sa odfiltrujú a premyjú 2 ml éteru; hmotn. 0,358 g. Ďalšie čistenie silikagélovou chromatografiou bolo nevyhnutné na odstránenie stôp nečistôt. Chloroformový roztok zlúčeniny sa umiestni na kolónu a produkt sa eluuje 50 % hexánom/etylacetátom. Eluent sa zahustí a guma sa rozpustí v 5 ml teplého éteru. Po naočkovaní sa oddelia čisté kryštály; hmotn. 0,256 g; 1.1. 169 až 170 °C. Hmotové spektrum (Cl) 511 (M⁺).

Elementárna analýza pre C26H24CI2N4O3: vypočítané 61,06 % C, 4,73 % H, 10,96 % N, nájdené 61,19 % C, 4,76 % H, 10,86 % N.

Príklad 92

Kyselina 4- {4-[6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylamino]-fenyl} maslová ml 2N hydroxidu sodného sa pridá k horúcemu roztoku 0,170 g (0,33 mmol) etylesteru kyseliny 4-(4-[6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]-pyrimidín-2-ylamino]-fenyl}maslovej z príkladu 91. Roztok sa udržuje pod refluxom 1 hodinu. Pridá sa ľadová kyselina octová (1 ml) a reakčný roztok sa odparí na objem asi 25 ml. Na vyzrážanie pevnej látky sa pridá voda (50 ml). Zmes sa filtruje a koláč sa dobre premyje vodou a suší sa; hmotn. 0,130 g. Hydrolýza nie je za týchto podmienok úplná. Produkt sa čisti pre odstránenie východiskového esteru chromatografiou na silikagéli pri elúcii 1 : 20 metanolom : : chloroformom pri získaní 55 mg čistej kyseliny; t. t. 169 až 171 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 483 (M*). Elementárna analýza pre C₂4H₂oCl₂N40₃: vypočítané 59,64 % C, 4,17 % H, 11,59 % N, nájdené 59,77 % C, 4,24 % H, 11,44 % N.

Príklad 93 (2,6-Dichlórfenyl)-8-etyl-2-(pyrídín-4-ylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 0,126 g (0,31 mmol) 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-metánsulfonyl-8-etyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu, 0,25 mol hydrátu, z príkladu 68 a 0,300 g (3,20 mmol) 4-aminopyridínu sa zahrieva pri miešaní na 150 °C v olejovom kúpeli 10 minút. Po 3 minútach sa oddelia kryštály. Zmes sa ochladí a pridá sa 1 ml metanolu. Pevná látka sa odfiltruje, premyje sa 1 ml metanolu a potom éterom; hmotn. 0,100 g. Hydrochloridová soľ sa pripraví nasledovne: uvedená surová báza sa suspenduje v 2 ml metanolu. Pridá sa jeden ml 2N kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa ohreje do úplného rozpustenia. Pridajú sa ďalšie 2 ml 2N kyseliny chlorovodíkovej. Kryštály, ktoré sa vylúčia, sa odfiltrujú a premyjú postupne 1 ml 2N kyseliny chlorovodí kovej, 2 ml etylacetátu a potom éterom; hmotn. 0,110 g. Rekryštalizáciou z metanolu/éteru sa získa čistý kryštalický produkt; hmotn. 0,063 g; t. t. 325 až 330 °C. Hmotové spektrum (Cl) 412 (M*).

Elementárna analýza pre C20H15CI2N5O.HCI: vypočítané 53,53 % C, 3,59 % H, 15,61 % N, nájdené 53,48 % C, 3,74 % H, 15,38 % N.

Príklad 94 4-Etylamino-2-metyltio-5-pyrimidínkarboxylát etylester

K roztoku 4-chlór-2-metyltio-5-pyrimidínkarboxylátuetylesteru (10,00 g, 43,10 mmol) v 150 ml tetrahydrofuránu sa pri teplote miestnosti pridá trietylamín (18,5 1, 133 mmol) nasledovaný 9 ml 70 % vodného roztoku etylamínu. Roztok sa mieša 30 minút, potom sa zahustí vo vákuu a rozdelí sa medzi chloroform a nasýtený vodný hydrogenuhličitan. Organická vrstva sa súši nad síranom horečnatým, filtruje a zahustením sa získa 9,32 g (90 %) 4-etylamino-2-metyltio-5-pyrimidínkarboxylát-etylester ako olej. Elementárna analýza pre CioHi₅N₃0₂S: vypočítané 49,77 % C, 6,27 % H, 17,41 % N, nájdené 49,77 % C, 6,24 % H, 17,30 % N.

Príklad 96 4-Etylamino-2-metyltio-5-pyrimidínmetanol

Roztok 4-etylamino-2-mctyltio-5-pyrimidínkarboxylátetylesteru (8,93 g, 37,1 mmol) v 100 ml tetrahydrofuránu sa prikvapká pri teplote miestnosti k suspenzii lítiumaluminiumhydridu (2,30 g, 60,5 mmol) v 100 ml tetrahydrofuránu. Po 10 minútach sa reakcia opatrne preruší 4,5 ml vody, 4,5 ml 15 % NaOH a 16 ml vody a zmes sa 1,5 hodiny mieša. Biela zrazenina sa odstráni filtráciou pri premytí etylacetátom. Filtrát sa zahustí vo vákuu a pridá sa 1 : 1 hexán : : etylacetát. Pevné látky sa oddelia pri získaní 6,77 g (92 %) 4-etylamino-2-metyltio-5-pyrimidínmetanolu; t. t. 152 až 156 °C.

Elementárna analýza pre C₈H₁₃N₃OS: vypočítané 48,22 % C, 6,58 % H, 21,09 % N, nájdené 48,14 % C, 6,61 % H, 20,85 % N.

Príklad 96 4-Etylamino-2-metyltio-5-formylpyrimidm

K 4-etylamino-2-metyltio-5-pyrimidínmetanolu (6,44 g, 32,4 mmol) v 600 ml chloroformu sa pridá počas 3 minút oxid horečnatý (21,0 g, 241 mmol). Suspenzia sa mieša pri teplote miestnosti 2 hodiny a pridá sa ďalších 5,5 g oxidu horečnatého. V miešaní sa pokračuje 4,5 hodiny. Zmes sa potom odfiltruje cez celit pri premývaní chloroformom. Filtrát sa zahusti vo vákuu a získa sa 6,25 g (97 %) 4-etylamino-2-metyltio-5-formylpyrimidínu; 1.1. 58 až 61 °C. Elementárna analýza pre C₈H_1;N₃OS: vypočítané 48,71 % C, 5,62 % H, 21,30 % N, nájdené 48,62 % C, 5,60 % H, 21,28 % N.

Príklad 97

Etylester kyseliny 4-etylamino-2-metánsuífinyI-pyrimidín-5-karboxylovej

Pri teplote miestnosti sa k roztoku etylester-4-etylamino-2-metyltio-5-pyrimidínkarboxylátu (2,011 g, 8,34 mmol) v 70 ml chloroformu pridá (±)-trans-2-(fenylsulfonyl)-3-fcnyloxaziridín (2,70 g, 10,34 mmol). Roztok sa mieša pri teplote miestnosti 7 hodín, potom sa zahusti vo vákuu. Zvyšok sa čistí rýchlou chromatografiou pri elúcii gradientom etylacetát až 3 % metanolu v etylacetáte pri získaní 2,07 g (97 %) etylesteru kyseliny 4-etylamino-2-metánsulfinyl-pyrimidín-5-karboxylovej; t. t. 54 až 56 °C.

Elementárna analýza pre C₁₀H₁₅N₃O₃S: vypočítané 48,68 % C, 5,88 % H, 16,33 % N, nájdené 48,56 % C, 5,68 % H, 16,23 % N.

Príklad 98

Etylester kyseliny 4-etylamino-2-fenylamino-pyrimidín-5-karboxylovej

Roztok etylesteru kyseliny 4-etylamino-2-metánsulfinyl-pyrimidín-5-karboxylovej (166 mg, mmol) v 4 ml anilínu sa zahrieva na 110 “C 30 minút. Roztok sa ochladí na teplotu miestnosti a zahustí sa vo vákuu. Rýchla chromatografia pri elúcii 2 : 1 hexánom : etylacetátom poskytne 158 g (87 %) bielej pevnej látky, ktorá podľa NMR je prevažne požadovaný produkt.

Príklad 99 (4-Etylamino-2-fenylamino-pyrimidín-5-yl)metanol

Roztok etylesteru kyseliny 4-etylamino-2-fenylaminopyrimidín-5-karboxylovcj (109 mg, 0,38 mmol) v 6 ml tetrahydrofuránu sa pridá po kvapkách pri teplote miestnosti k suspenzii lítiumalumíniumhydridu (35 mg, 0,92 mmol) v 5 ml tetrahydrofuránu. Po 25 minútach sa pridá ďalší lítiumalumíniumhydrid a v miešaní sa pokračuje 30 minút. Reakcia sa opatrne preruší 120 μΐ vody, 200 μΙ 15 % NaOH a 300 μΙ vody. Po 1 hodine miešania sa biela zrazenina oddelí filtráciou pri premývaní etylacetátom. Filtrát sa zahustí vo vákuu a surový materiál sa čisti rýchlou chromatografiou pri elúcii etylacetátom pri získaní 36 mg (39 %) (4-etylamino-2-fenylamino-pyrimidín-5-yl)metanolu; 1.1. 174 až 176 °C.

Elementárna analýza pre C|₃H₁₆N₄O: vypočítané 63,92 % C, 6,60 % H, 22,93 % N, nájdené 63,97 % C, 6,58 % H, 22,79 % N.

Príklad 100 4-Etylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5-karbaldehyd

K roztoku (4-etylamino-2-fenylamino-pyrimidín-5-yl)metanolu (173 mg, 0,71 mmol) v 15 ml chloroformu sa pridá oxid horečnatý (600 mg, 6,89 mmol). Po miešaní cez noc pri teplote miestnosti sa zmes filtruje ccz stlpček Celitu, premyje sa chloroformom. Filtrát sa zahustí vo vákuu pri získaní 170 mg (99 %) 4-etylamíno-2-fenylaminopyrimidín-5-karbaldehydu; 1.1. 155 až 157 ^CC. Elementárna analýza pre C_]3H₁₄N₄O: vypočítané 64,45 % C, 5,82 % H, 23,12 % N, nájdené 64,31 % C, 6,01 % H, 22,98 % N.

Príklad 101 (8-Etyl-7-imino-6-tiofén-3-yl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl)-fenylamín

K suspenzii NaH (60 % v minerálnom oleji, 27 mg) v 5 ml 2-etoxyetanolu sa pridá 3-tiofénacetonitril (168 mg,

1,36 mmol). Po 5 minútach miešania pri teplote miestnosti sa pridá 4-etylamino-2-fenylamino-pyrimidín-5-karbaldehyd (300 mg, 1,24 mmol) a reakcia sa zahrieva na 120 °C 2 hodiny, vznikne tmavohnedý roztok. Po ochladení sa roztok naleje do vody, čo vyvolá vyzrážanie. Výsledná zrazenina sa odstráni filtráciou a premyje sa vodou. Surový produkt sa čistí rýchlou chromatografiou pri elúcii 5 % metanolom/metylénchloridom nasledovaným 10 % metanolom/metylénchloridom. Zahustením frakcii, obsahujúcich produkt sa získa 340 mg (78 %) (8-etyl-7-imino-6-tiofén-3-yl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]-pyrimidín-2-yl)-fenylamínu;

1.1. 220 až 222 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 348 (M⁺). Elementárna analýza pre C|₉H,₇N₅S: vypočítané 65,80 % C, 4,93 % H, 20,16 % N, nájdené 64,42 % C, 4,86 % H, 19,78 % N.

Príklad 102

8-Etyl-2-fenylamino-6-tiofén-3-yl-8H-pyrido[2,3-d]pyTÍmidin-7-ón

Zlúčenina sa pripraví z (8-etyl-7-imino-6-tiofén-3-yl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl)-fenylaminu podľa postupu z príkladu 116. Produkt sa čistí rýchlou chromatografiou pri elúcii 5 % metanolom/metylénchloridom, nasledovaným 10 % metanolom/metylénchloridom; t. t. 223 až 225 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 349 (M⁺). Elementárna analýza pre C_]9H₁₆N₄OS: vypočítané 65,49 % C, 4,63 % H, 16,08 % N, nájdené 65,33 % C, 4,49 % H, 15,73 % N.

Príklad 103 (8-Etyl-7-imino-6-tiofén-2-yl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl)-renylamín

K suspenzii NaH (60 % v minerálnom oleji, 27 mg) v 5 ml 2-etoxyetanolu sa pridá 2-tiofénacetonitril (168 mg,

1,36 mmol). Po 5 minútach miešania pri teplote miestnosti sa pridá 4-etylamino-2-fenylamino-pyrimidín-5-karbaldehyd (300 mg, 1,24 mmol) a reakcia sa zahrieva na 120 °C 2 hodiny, vznikne tmavohnedý roztok. Po ochladení sa roztok naleje do vody, čo vyvolá vyzrážanie. Výsledná zrazenina sa odstráni filtráciou a premyje sa vodou. Surový produkt sa čistí rýchlou chromatografiou pri elúcii 5 % metanolom/metylénchloridom, nasledovaným 10 % metanolom/metylénchloridom. Zahustením frakcií, obsahujúcich produkt, sa získa 370 mg (85 %) (8-etyl-7-imino-6-tiofén-2-yl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylamínu; 1.1. 204 až 205 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 348 (M“). Elementárna analýza pre C_I9H|₇N₅S: vypočítané 65,68 % C, 4,93 % H, 20,16 % N, nájdené 64,38 % C, 4.90 % H, 19,78 % N.

Príklad 104 8-Etyl-2-fenylamino-6-tiofén-2-yl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zlúčenina sa pripraví z (8-etyl-7-imino-6-tiofén-2-yl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl)-fenylamínu postupom podľa príkladu 116. Produkt sa čistí rýchlou chromatografiou pri elúcii 5 % metanolom/metylénchloridom, nasledovaným 10 % metanolom/metylénchloridom; t. t. 223 až 225 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 349 (M⁺). Elementárna analýza pre C₁₉H₁₆N₄OS: vypočítané 65,49 % C, 4,63 % H, 16,08 % N, nájdené 65,36 % C, 4,78 % H, 15,72 % N.

Príklad 105 (6-(2-Bróm-6-chlórfenyl)-8-etyl-7-imino-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl)-fenylamín

K suspenzii NaH (60 % v minerálnom oleji, 12 mg) v 5 ml 2-etoxyetanolu sa pridá 2-bróm-6-chlórfenylacetonitril (286 mg, 1,24 mmol). Po 5 minútach miešania pri teplote miestnosti sa pridá 4-etylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5-karbaldehyd (200 mg, 0,83 mmol) a reakcia sa zahrieva 3 hodiny na 130 °C, vznikne tmavohnedý roztok. Po ochladení sa vytvorená zrazenina trituruje s 20 1 vody. Zrazenina sa odfiltruje a premyje sa éterom pri získaní 178 mg (6-(2-bróm-6-chlórfenyl)-8-etyl-7-imino-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl)-fenylamínu.

Príklad 106 6-(2-Bróm-6-chlórfenyl)-8-etyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón (6-(2-Bróm-6-chlórfenyl)-8-etyl-7-imino-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl)-fenylamín (150 mg) sa pridá k 1 ml acetanhydridu a zahrieva sa pod refluxom 5 minút. Reakčná zmes sa ochladí a zahustí pri získaní oleja, ktorý sa zahrieva pod refluxom s 10 ml 6N HCI 10 minút. Reakcia sa ochladí a pridá sa 30 ml vody, čo vyvolá vyzrážanie. Zrazenina sa odstráni filtráciou a premyje sa vodou. Výsledná pevná látka sa suší pri získaní 130 mg 6-(2-bróm-6-chlórfenyl)-8-etyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]-pyrimidín-7-ónu; 1.1, mäkne pri 195 C a topí sa pri 210 až 214 °C. Hmotové spektrum (Cl) 457 (M⁺).

Elementárna analýza pre C₂iH₁₆N₄OBrCl. HCI: vypočítané 51,24 % C, 3,48 % H, 11,38 % N, nájdené 50,58 % C, 3,51 % H, 11,32 % N.

Príklad 107

Kyselina [2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-8-yl]-octová

K roztoku terc.butylesteru kyseliny [2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-8-yl]-octovej (157 mg, 0,37 mmol) z príkladu 36 v 4 ml metylénchloridu sa pridajú 2 1 kyseliny trifluóroctovej. Roztok sa mieša pri teplote miestnosti 5 hodín, potom sa zahustí vo vákuu. Výsledný olej sa rozdelí medzi metylénchlorid a soľanku. Vodná vrstva sa premyje etylacetátom a organické vrstvy sa spoja, sušia sa nad síranom horečnatým, filtrujú a zahustia vo vákuu pri získaní gumovitej pevnej látky. Pridá sa dietyléter a výsledná zrazenina sa oddelí. K filtrátu sa pridá hexán a vylúčená zrazenina sa oddelí. Pevné látky sa spoja a sušia vo vákuu pri 80 °C pri získaní 71 mg (52 %) kyseliny [2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-8-yl]-octovej, ktorá je podľa HPLC >97 % čistoty; 1.1. 297 až 300 °C rozkl.

Elementárna analýza pre C|5Hi₀Cl₂N₄O_3; vypočítané 49,34 % C, 2,76 % H, 15,34 % N, nájdené 46,01 % C, 2,77 % H, 13,28 % N.

Príklad 108 2-Amino-8-benzyl-6-(2,6-dichlórfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

K suspenzii NaH (60 % v minerálnom oleji, 34 mg) v 6 ml dimetylformamidu sa pridá 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ón (200 mg, 0,65 mmol). Zmes sa zahrieva na 50 °C pri vzniku číreho roztoku. Pridá sa benzylbromid (110 μΐ, 0,92 mmol) a roztok sa zahrieva na 50 °C 5 minút, mieša sa pri teplote miestnosti 2 hodiny, potom sa naleje do 40 ml ľadovej vody. Výsledná zrazenina sa oddelí filtráciou a premyje sa vodou. Pevná látka sa čistí rýchlou chromatografíou, eluuje etylacetátom pri získaní 181 mg produktu. Druhou chromatografíou pri elúcii etylacetátom nasledovanou sušením vo vákuu sa získa 110 mg (43 %) 2-amino-8-benzyl-6-(2,6-dichlórfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu; 1.1. 220 až 222 °C.

Elementárna analýza pre C₂₀H_I4Cl₂N₄O: vypočítané 60,47 % C, 3,55 % H, 14,10 % N, nájdené 60,55 % C, 3,69 % H, 13,93 % N.

Príklad 109 2-Amino-8-(3-brómbenzyl)-6-(2,6-dichlórfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

K suspenzii NaH (60 % v minerálnom oleji, 38 mg) v 8 ml dimetylformamidu sa pridá 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ón (200 mg, 0,65 mmol). Zmes sa zahrieva na 50 °C 20 minút pri vzniku číreho roz toku. Odstráni sa vyhrievací plášť a pridá sa 3-brómbenzylbromid (240 μ], 0,96 mmol). Po 10 minútach sa reakčná zmes naleje do 30 ml ľadovej vody. Výsledná zrazenina sa oddelí filtráciou a premyje sa vodou. Pevná látka sa čistí rýchlou chromatografíou, pri elúcii 1 : 1 hexánom : etylacetátom, potom sa suší vo vákuu a získa sa 178 mg (58 %) 2-amino-8-(3-brómbenzyl)-6-(2,6-dichlórfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu: t. t. mäkne pri 195 °C, topí sa pri 215 °C.

Elementárna analýza pre C₂₀H₁₃BrCl₂N₄O: vypočítané 50,45 % C, 2,75 % H, 11,77 % N, nájdené 50,82 % C, 2,91 % H, 11,63 % N.

Príklad 110

Metylester kyseliny 4-[2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-8-yl-metyl]ben7OOvej

K suspenzii NaH (60 % v minerálnom oleji, 36 mg) v ml dimetylformamidu sa pridá 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-ón (195 mg, 0,64 mmol). Zmes sa zahrieva na 40 °C až 50 °C 20 minút, vznikne číry roztok. Pridá sa metyl-4-(brómmetyl)benzoát (206 mg, 0,90 mmol) a reakčná zmes sa zahrieva na 40 °C až 50 °C 15 minút, potom sa naleje do 30 ml ľadovej vody. Výsledná zrazenina sa odstráni filtráciou a premyje sa vodou. Pevná látka sa čisti rýchlou chromatografíou, pri elúcii gradientom 1 : 1 hexán : etylacetát až 1 : 2 hexán : etylacetát, potom sa sušením vo vákuu získa 204 mg metylesteru kyseliny 4-[2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-8-yl-metyl]benzoovej, obsahujúceho 0,16 ekvivalentu etylacetátu; 1.1. 235 až 237 °C.

Elementárna analýza pre C₂₂H₁₆Cl₂N₄O₃.0,16 C₄H₈O₂: vypočítané 57,95 % C, 3,68 % H, 11,93 % N, nájdené 57,87 % C, 3,74 % H, 11,67 % N.

Príklad 111 2-Amino-8-(2,6-dichlórbenzyl)-6-(2,6-dichlórfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

K suspenzii NaH (60 % v minerálnom oleji, 36 mg) v ml dimetylformamidu sa pridá 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ón (208 mg, 0,68 mmol). Zmes sa zahrieva na 70 °C 10 minút a potom na 50 °C 30 minút, vznikne číry roztok. Pridá sa a-bróm-2,6-dichlórtoluén (215 mg, 0,90 mmol) a reakčná zmes sa zahrieva na 50 °C 25 minút, potom sa naleje do ľadovej vody. Výsledná zrazenina sa odstráni filtráciou a premyje sa vodou. Pevná látka sa čistí rýchlou chromatografíou, eluuje 1 : 1 hexánom : etylacetátom a potom suší vo vákuu pri získaní 112 mg (35 %) 2-amino-8-(2,6-dichlórbenzyl)-6-(2,6-dichlórfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu; t. t. 274 až 276 °C.

Elementárna analýza pre C₂₀H₁₂Cl₄N₄O: vypočítané 51,53 % C, 2,59 % H, 12,02 % N, nájdené 51,92 % C, 2,68 % H, 11,84 % N.

Príklad 112 2-Amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-(4-metoxybenzyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

K suspenzii NaH (60 % v minerálnom oleji, 38 mg) v 8 ml dimetylformamidu sa pridá 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-ón (208 mg, 0,68 mmol). Zmes sa zahrieva na 50 °C 1 hodinu, vznikne číry roztok. Pridá sa 4-metoxybenzylchlorid (130 μ], 0,95 mmol) a reakčná zmes sa zahrieva na 50 °C 30 minút, potom sa naleje do ľadovej vody. Výsledná zrazenina sa oddelí filtráciou a premyje sa vodou. Pevná látka sa čistí rýchlou chromatografíou, pri elúcii 1 : 1 hexánom : etylacetátom, potom sa suší vo vákuu pri získaní 208 mg (72 %) 2-amino-6-(2,6

-dichlórfenyl)-8-(4-metoxybenzyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu; t, t. 208 až 209 °C.

Elementárna analýza pre C2iH₁₆CI₂N₄O₂: vypočítané 59,03 % C, 3,77 % H, 13,11 % N, nájdené 59,39 % C, 3,92 % H, 12,88 % N.

Príklad 113 2-Amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-pyridín-4-ylmetyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

K suspenzii NaH (60 % v minerálnom oleji, 32 mg) v 6 ml dimetylformamidu sa pridá 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ón (200 mg, 0,65 mmol) a zmes sa zahrieva na 70 °C. Do druhej banky, obsahujúcej trietylamín (220 μΐ, 1,59 mmol) v 4 ml dimetylformamidu sa pridá hydrochlorid 4-pikolylchloridu (137 mg, 0,84 mmol). Táto tmavočervená zmes sa pridá k uvedenému roztoku sodnej soli 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ónu. Zmes sa zahrieva na 70 “C, potom ochladí na teplotu miestnosti. Zmes sa naleje do 20 ml ľadovej vody a výsledná zrazenina sa odstráni filtráciou a premyje sa vodou. Táto pevná látka sa premyje 10 % metanolom v etylacetáte za získania 96 mg surového produktu. Filtrát sa zahustí za získania ďalších 77 mg surového produktu. Analytická vzorka sa získa čistením rýchlou chromatografiou, elucia gradientom etylacetátu až 10 % metanolu v etylacetáte za získania 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-pyridín-4-ylmetyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ónu; 1.1. 268 až 270 °C (rozkl.).

Elementárna analýza pre C₁₉H|₃CI₂N₅O: vypočítané 57,30 % C, 3,29 % H, 17,59 % N, nájdené 57,62 % C, 3,57 % H, 17,31 % N.

Príklad 114 2-Amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-(3-fenylpropyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ón

K suspenzii NaH (60 % v minerálnom oleji, 58 mg) v 10 ml dimetylformamidu sa pridá 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ón (320 mg, 1,04 mmol). Zmes sa zahrieva na 60 °C za vzniku číreho roztoku. Pridá sa l-chlór-3-fenyIpropán (260 μΐ, 1,81 mmol) a reakčná zmes sa zahrieva na 60 °C 35 minút, potom sa naleje do ľadovej vody. Výsledná gumovitá pevná látka sa rozpusti v etylacetáte, premyje sa vodou a suší nad síranom horečnatým. Filtráciou nasledovanou zahustením vo vákuu sa získa olej, ktorý sa čistí rýchlou chromatografiou, elúcia 1 : 3 hexánom : etylacetátom za získania 345 mg surového produktu. Rekryštalizáciou z etylacetátu a hexánu s nasledujúcim sušením vo vákuu sa získa 253 mg (57 %) 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-(3-fenylpropyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu; 1.1. 161 až 163 °C.

Elementárna analýza pre C₂₂H_I8CI₂N₄O: vypočítané 62,13 % C, 4,27 % H, 13,17 % N, nájdené 62,08 % C, 4,37 % H, 13,15 % N.

Príklad 115 (8-Etyl-7-imino-6-fenyl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl)-2-fenylamín

K suspenzii NaH (60 % v minerálnom oleji, 8 mg) v 5 ml 2-etoxyetanolu sa pridá fenylacetonitril (100 μΙ, 0,87 mmol). Po 5 minútach miešania pri teplote miestnosti sa pridá 4-etylamino-2-fenylamino-pyrimidín-5-karbaldehyd (200 mg, 0,83 mmol) a reakcia sa zahrieva na 90 °C 24 hodín, vznikne tmavohnedý roztok. Tento sa ochladí na teplotu miestnosti a potom sa naleje do 20 ml vody. Výsledná zrazenina sa oddelí filtráciou a premyje sa vodou. Zvyšok sa suší a čistí rýchlou chromatografiou za elúcie 3 % metanolom/metylénchloridom. Získa sa 145 mg (51 %) (8-ctyl-7-imino-6-fenyl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl)-2-fenylamínu; 1.1. 196 až 197 °C.

Hmotové spektrum (CI) 342 (M⁺). Elementárna analýza pre C₂₁H₁₉N₅: vypočítané 73,88 % C, 5,61 % H, 20,51 % N, nájdené 73,22 % C, 5,59 % H, 20,29 % N.

Príklad 116

8-Etyl-6-fenyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón (8-Etyl-7-imino-6-fenyl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]-pyrimidín-2-yl)-2-fenylamín (150 mg) sa pridá k 2 ml acetanhydridu a zahrieva sa pod refluxom 2 minúty. Reakčná zmes sa ochladí a zahustí, vznikne olej, ktorý sa zahrieva pod refluxom s 10 ml 6N HCI počas 10 minút. Reakčná zmes sa ochladí a pridá sa 20 ml vody, čo vyvolá vyzrážanie. Zrazenina sa odstráni filtráciou a premyje sa vodou. Výsledná pevná látka sa suší vo vákuovej sušiarni pri 45 °C 2 hodiny za získania 122 mg (81 %) 8-etyl-6-fenyl-2-enylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu; t. t. 197 až 200 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 343 (M⁺). Elementárna analýza pre C_2lH₁₈N₄O.0,5 HCI: vypočítané 69,94 % C, 5,17 % H, 15,53 % N, 4,92 % Cl, nájdené 69,30 % C, 5,07 % H, 15,44 % N, 5,21 % Cl.

Príklad 117 (6-(3,5-Dimetyl fenyl )-8-etyl-7-imino-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl)-2-fenylamín

K suspenzii NaH (60 % v minerálnom oleji, 16 mg) v 5 ml 2-etoxyetanolu sa pridá 3,5-dimetylfenylacetonitril (126 mg, 0,87 mmol). Po 5 minútach miešania pri teplote miestnosti sa pridá 4-etylamino-2-fenylamino-pyrimidín-5-karboxaldehyd (200 mg, 0,83 mmol) a reakčná zmes sa zahrieva na 115 °C 2 hodiny za získania tmavohnedého roztoku. Po ochladení pevná látka stuhne a trituruje sa s 30 ml vody. Výsledná zrazenina sa odfiltruje a premyje sa dietyléterom. Zvyšok sa suší za získania sa 232 mg (76 %) (6-(3,5-dimetylfenyl)-8-etyl-7-imino-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl)-2-fenylamínu; 1.1. 243 až 244 °C. Elementárna analýza pre C₂₃H₂₃N₅: vypočítané 74,77 % C, 6,27 % H. 18,95 % N, nájdené 73,84 % C, 6,30 % H, 18,72 % N.

Príklad 118 6-(3,5-Dimetylfenyl)-8-etyl-2-fenylammo-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

6-(3,5-Dimetylfenyl)-8-etyl-7-imino-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl)-2-fcnylamín (150 mg) sa pridá k ml acetanhydridu a zahrieva sa pod refluxom 2 minúty. Reakčná zmes sa ochladí a zahustí za získania oleja, ktorý sa zahrieva pod refluxom s 10 ml 6N HCI počas 10 minút. Reakčná zmes sa ochladí a pridá sa 20 ml vody, čo vyvolá vyzrážanie. Zrazenina sa odfiltruje a premyje sa vodou. Výsledná pevná látka sa suší vo vákuovej sušiarni pri 45 °C hodiny za získania 140 mg (93 %) 6-(3,5-dimetylfenyl)-8-etyl-2-fenylamino-8H-pyrído[2,3-d]pyrimidín-7-ónu;

t. t. 220 až 223 °C.

Hmotové spektrum (CI) 371 (M⁺). Elementárna analýza pre C₂₃H₂₂N₄O.HCI: vypočítané 67,89 % C, 5,70 % H, 13,77 % N, nájdené 67,58 % C, 5,68 % H, 13,59 % N.

Príklad I19 (8-Etyl-7-imino-6-pyridín-4-yl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl)-2-fenylamm

Pripraví sa v 80 % výťažku z 4-pyridylacetonitrilu a 4-etylamino-2-fenylamino-pyrimidín-5-karbaldehydu postupom podľa príkladu 115.

Príklad 120 8-Etyl-2-fenylamino-6-pyridin-4-yl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Pripraví sa v 60 % výťažku z (8-etyl-7-imino-6-pyridín-4-yl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl)-2-fenylamínu postupom podľa príkladu 116; t. t. mäkne pri 230 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 344 (M⁺). Elementárna analýza pre Cy.HpNjO.HCl: vypočítané 63,24 % C, 4,78 % H, 18,44 % N, nájdené 63,92 % C, 4,70 % H, 18,66 % N.

Príklad 121 (8-Etyl-7-imino-6-naftalén-2-yl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl)-fenylamín

K suspenzii NaH (60 % v minerálnom oleji, 27 mg) v 5 ml 2-etoxyetanolu sa pridá 2-naftylacetonitril (227 mg,

1,36 mmol). Po 5 minútach miešania pri teplote miestnosti sa pridá 4-etylamino-2-fenylamino-pyrimidín-5-karbaldehyd (300 mg, 1,24 mmol) a reakčná zmes sa zahrieva na 110 °C 1 hodinu, získa sa tmavohnedý roztok. Po vychladnutí sa roztok naleje do 30 ml vody, čo vyvolá vyzrážanie. Výsledná zrazenina sa odstráni filtráciou a premyje sa vodou. Surový produkt sa čisti rýchlou chromatografiou pri elúcii 5 % metanolom/metylénchloridom nasledovaným 10 % metanolom/metylénchloridom. Zahustením frakcií, obsahujúcich produkt, sa získa 400 mg (82 %) žltej pevnej látky, (8-etyl-7-imino-6-naftalén-2-yl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidm-2-yl)-fenylamínu; 1.1. 236 až 242 °C. Hmotové spektrum (Cl) 392 (M⁺).

Elementárna analýza pre C25H21N5: vypočítané 76,70 % C, 5,41 % H, 17,89 % N, nájdené 75,58 % C, 5,49 % H, 17,58 % N.

Príklad 122 8-Etyl-6-naftalén-2-yl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón (8-Etyl-7-imino-6-naftalén-2-yl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidm-2-yl)-fenylamín (150 mg) sa pridá k 1 ml acetanhydridu a zahrieva sa pod refluxom 2 minúty. Reakcia sa ochladí a zahustí, získa sa olej, ktorý sa zahrieva pod refluxom s 10 ml 6N HC1 10 minút. Reakčná zmes sa ochladí a pridá sa 40 ml vody, čo vyvolá vyzrážanie. Zrazenina sa odstráni filtráciou a premyje sa vodou. Výsledná pevná látka sa suší vo vákuovej sušiarni pri získaní 8-etyl-6-naftalén-2-yl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu; 1.1. 254 až 256 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 393 (M⁺). Elementárna analýza pre C25H20N4O.HCI: vypočítané 70,00 % C, 4,94 % H, 13,06 % N, nájdené 68,61 % C, 4,97 % H, 12,83 % N.

Príklad 123 (6-Bifenyl-4-yl-8-etyl-7-imino-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrmidín-2-yl)-fenylamín

K suspenzii NaH (60 % v minerálnom oleji, 27 mg) v 5 ml 2-etoxyetanolu sa pridá 4-bifenylacetonitril (263 mg,

1,36 mmol). Po 5 minútach miešania pri teplote miestnosti sa pridá 4-etylamino-2-fenylamino-pyrimidín-5-karboxaldehyd (300 mg, 1,24 mmol) a reakčná zmes sa zahrieva na 110 °C 1 hodinu, získa sa tmavohnedý roztok. Po ochladení sa roztok naleje do vody, čo vyvolá vyzrážanie. Výsledná zrazenina sa odstráni filtráciou a premyje sa vodou. Surový produkt sa čistí rýchlou chromatografiou, eluuje sa 5 % metanolom/metylénchloridom, potom 10 % metanolom/metylénchloridom. Zahustením frakcií, obsahujúcich produkt, sa získa 427 mg (83 %) (6-bifenyl-4-yl-8-etyl-7-imino-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl)-fenylamínu; t. t. 245 až 249 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 418 (M⁺) Elementárna analýza pre C₂₇H23N₅: vypočítané 77,67 % C, 5,55 % H, 16,78 % N, nájdené 76,16 % C, 5,54 % H, 16,36 % N.

Príklad 124 6-Bifenyl-4-yl-8-etyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Pripraví sa zo (6-bifenyl-4-yl-8-etyl-7-imino-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yl)-fenylamínu postupom podľa príkladu 116; 1.1, mäkne pri 235 °C. Hmotové spektrum (Cl) 419 (M⁺).

Elementárna analýza pre C27H22N4O.HCI: vypočítané 71,28 % C, 5,10 % H, 12,32 % N, nájdené 69,22 % C, 5,10 % H, 11,85 % N.

Zlúčeniny vzorca (I) sú cennými inhibítormi proteín tyrozín kinázy a sú terapeuticky cenné ako bunkové antiproliferatívne činidlá na liečenie proliferativnych porúch. Tieto zlúčeniny sú potentnými inhibítormi proteín kináz, PDGF, FGF, EGF, virálny-src (V-src) a celulámy-src (C-src). Zlúčeniny podľa vynálezu sú tak vhodné na liečenie aterosklerózy, restenózy a rakoviny. Špecifické tumory na liečenie zlúčeninami zahrnujú malobunkový pľúcny karcinóm ako je opísaný v an. Rev. Respir. Dis, 142: 554 - 556 (1990); karcinóm ľudského prsníka tak ako je opísaný v Cancer Research, 52: 4773 - 4778 (1992); karcinómy ľudského mechúra typu opísaného v Cancer Research, 52: 1457 až 1462 (1992); ľudský kolorektálny karcinóm ako je diskutovaný v J. Clin. Invest., 91: 53 - 60 (1993) a v J. Surg. Res., 54: 293 -294(1993).

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu boli hodnotené v štandardných skúškach, ktoré sa používajú na stanovenie inhibície tyrozín kináz. Skúšky boli uskutočnené nasledovne:

Čistenie epidermálny rastový faktor receptor tyrozín kinázy

Ľudská EGF receptor tyrozín kynázy bola izolovaná z A431 epidermoidných karcinómových buniek nasledujúcimi metódami. Bunky rástli v otočných fľašiach v 50 % Dulbeccovom modifikovanom Eagle médiu a 50 % HAM F-12 živnom médiu (Gibco), obsahujúcom 10 % fetálneho teľacieho séra. Približne 10⁹ buniek bolo lyzovaných v dvoch objemoch pufra, obsahujúceho 20 mM 2-(4N-[2-hydroxymetyl]-piperazin-l-yl)etánsulfonovej kyseliny, pH 7,4, 5 mM etylénglykol-bis(2-aminoetyléter)-N,N,N',N-tetraoctovej kyseliny, 1 % Tritónu X-100, 10 % Glyccrolu, 0,1 mM ortovanadátu sodného, 5 mM fluoridu sodného, 4 mM pyrofosfátu, 4 mM benzamidu, 1 mM ditiotreitolu, 80 pg/ml aprotinínu, 40 pg/ml leupeptínu a 1 mM fenylmetylsulfonylfluoridu. Po odstreďovaní pri 25000 x g počas 10 minút bol supematant ekvilibrovaný 2 hodiny pri 4 °C s 10 ml aglitinín separózy pšeničných klíčkov, ktorá bola vopred ekvilibrovaná s 50 mM Hepes, 10 % glycerolu, 0,1 % Tritonu X-100 a 150 mM NaCl, pH 7,5 (ekvilibračný pufor). Kontaminujúce proteíny boli vymyté zo živice IM NaCl v ekvilibračnom pufri a enzým bol eluovaný 0,5M N-acetyl-l-D-glukozmainom v ekvilibračnom pufri.

Stanovenie IC₅o hodnôt

Enzýmové skúšky na stanovenie IC₅₀ boli uskutočnené v celkovom objeme 0,1 ml, obsahujúcom 25 mM Hepes, pH 7,4, 5 mM MgCl₂, 2 mM MnCl₂, 50 μΜ vanadátu sodného, 5-10 ng EGF receptor tyrozín kinázy, 200 μΜ substrátu peptidu (Ac-Lys-His-Lys-Lys-Leu-Ala-Glu-Gly-Ser-Ala-Tyr⁴⁷²-Glu-Glu-Val-NH₂), získaného z aminokyseliny (Tyr⁴⁷² bol zistený ako 1 zo 4 tyrozínov v PLC-g, ktoré sú fosforylované EGF receptor tyrozín kynázou (Wahl M. I., a spol., J. Biol. Chem., 265: 3944 - 3948 (1990)) a peptidmi získanými z enzýmovej sekvencie, obklopujúcej toto miesto, sú vynikajúce substráty pre enzým), 10 μΜ ATP, obsahujúci uCi [³²P]APT a inkubované 10 minút pri teplote miestnosti. Reakcia bola ukončená prídavkom 2 ml 75 mM kyseliny fosforečnej a potom prešla cez 2,5 cm fosfocelulózový filtračný disk na navázanie peptidu. Filter bol premytý 5 x 75 mM kyselinou fosforečnou a umiestnený do fľaštičky spolu s 5 ml scintilačnej kvapaliny (Ready gel Beckman).

PDGF a FGF receptor tyrozín kynázovej skúšky

Plná dĺžka cDNA pre myšie PDGF-β a ľudské FGF-I (flg) receptor tyrozín kynázy boli získané od J. Ecobeda a pripravené ako je opísané v J. Biol. Chem., 262: 1482 až 1487 (1991) a PCR pimery boli zostavené na amplifikáciu fragmentu DNA, ktorý kóduje intracelulámu tyrozín kynáza doménu. Fragment bol vnesený do bakulovírusového vektora, kotransfektovaný AcMNPV DNA a rekombinantný vírus bol izolovaný. SF9 hmyzie bunky boli infektované vírom na nadmernú expresiu proteínu a bunkové lyzáty boli použité na skúšku. Skúška bola uskutočnená v 96-jamkových plátoch (100 μΙ/inkubácia/jamka) a podmienky boli optimalizované na meranie inkorporácie ³²P z gama ³²P-ATP do glutamát-tyrozin kopolymérovcho substrátu. Stručne, do každej jamky bolo pridané 82,5 μΐ inkubačného pufra, obsahujúceho 25 mM Hepes (pH 7,0), 150 mM NaCl, 0,1 % Tritonu X-100, 0,2 mM PMSF, 0,2 mM Na₃VO₄, 10 mM MnCI₂ a 750 μ/ml Poly (4:1) glutamáztyrozinu a nasledovalo 2,5 μΙ inhibítoru a 5 μΙ enzýmového lyzátu (7,5 pg/μΙ FGF-TK alebo 6,0 grg/μΐ PDGF-TK) na iniciáciu reakcie. Po 10 minútach inkubácie pri 25 bolo do každej jamky pridané 10 μΐ gama³²P-ATP (0,4 uCi plus 50 μΜ ATP) a vzorky boli inkubované ďalších 10 minút pri 25 °C. Reakcia bola ukončená prídavkom 100 μΐ 30 % kyseliny trichlóroctovej (TCA), obsahujúcej 20 mM pyrofosforečnanu sodného a zrážaním materiálu na podložkách zo sklených vlákien (Wallac). Filtre boli premyté 3-krát 15 % TCA, obsahujúcou 100 mM pyrofosforečnanu sodného a rádioaktivita zachytená na filtroch bola spočítaná vo Wallac 1250 Betaplate čítačke. Nešpecifická aktivita bola definovaná ako rádioaktivita zachytená na filtroch po inkubácii vzoriek so samotným pufrom (bez enzýmu). Špecifická enzymatická aktivita bola definovaná ako celková aktivita, (enzým plus pufor) minus nešpecifická aktivita. Koncentrácia zlúčeniny, ktorá inhibuje špecifickú aktivitu z 50 % (IC50) bola stanovená na základe inhibičnej krivky.

V-src a C-src kinázové skúšky

V-src a C-src kináza sa čisti z bakulovirusom infikovaných hmyzích bunkových lyzátov pri použití antipeptidickej monoklonálnej protilátky riadenej proti N-terminálnym 2-17 aminokyselinám. Protilátka, kovalentne naviazaná k 0,65 pm veľkým latexovým guľôčkam, sa pridá k suspenzii hmyzieho bunkového lyzového pufra, obsahujúceho 150 mM NaCl, 50 mM Trís pH 7,5, 1 mM DDT, 1 % NP-40, 2 mM EGTA, I mM vanadátu sodného, 1 mM PMSF, pg/ml každého z leupeptínu, pepstatínu a aprotinínu. Hmyzí bunkový lyzát, obsahujúci buď C-src, alebo V-src proteín sa mkubuje s týmito guľôčkami 3 až 4 hodiny pri 4 °C pri otáčaní. Na konci inkubácie lyzátu sa guľôčky premyjú 3-krát v lyzovom pufri, resuspendujú sa v lyzovom pufri, obsahujúcom 10 % glycerolu a zmrazia sa. Tieto latexové guľôčky sa nechajú roztopiť, premyjú sa 3-krát v skúšobnom pufri, ktorý obsahuje 40 mM tris pH 7,5, 5 mM MgCl₂ a suspendujú v rovnakom pufri. Na Millipore 96-jamkovú platňu s 0,65 pm polyvinylidén membránovým dnom sa pridajú reakčné zložky: 1 O-μΙ V-src alebo C-src guľôčky, 10 μΐ 2,5 mg/ml poly GluTyr substrátu, 5 μΜ ATP, obsahujúceho 0,2 pCi označeného ³²P-ATP, 5 μΐ DMSO, obsahujúceho inhibítory alebo ako rozpúšťadlová kontrola a pufor na úpravu konečného objemu na 125 μΙ. Reakcia sa naštartuje pri teplote miestnosti prídavkom ATP a preruší sa o 10 minút neskôr prídavkom 125 μΙ 30 % TCA, 0,1 M pyrofosforečnanu sodného po 5 minút na ľade. Platňa sa potom filtruje a jamky sa premyjú dvomi 250 μΐ podielmi 15 % TCA, 0,1 M pyrofosforečnanom. Filtre sa vyklepnú, spočítajú v kvapalinovej scintilačnej čítačke a dáta sa hodnotia na inhibičnú aktivitu v porovnaní so známym inhibítorom ako je erbstatin. Metóda je podrobnejšie opísaná v J. Med. Chem., 37: 598 - 609 (1994).

Bunková kultúra

Bunky hladkých svalov krysej aorty (RASMC) boli izolované z torakálnej aorty krýs a spracované podľa metódy Rosse, J. Celí .Biol., 30: 172 - 186 (1971). Bunky rástli v Dulbeccovom modifikovanom Eaglovom médiu (DMEM, Gibco), obsahujúcom 10 % fetálneho teľacieho séra (FBS, Hyclone, Logan, Utah), 1 % glutamínu (Gibco) a 1 % penicilínu/streptomycínu (Gibco). Bunky boli identifikované ako bunky hladkých svalov podľa ich tvaru rastu „vrcholky a priehlbne“ a fluorescenčného vyfarbenia s monoklonálnou protilátkou špecifickou pre SMC oo-aktin (Sigma). RASMC boli použité medzi pasážami 5 a 20 pre všetky pokusy. Skúšané zlúčeniny boli pripravené v dimetylsulfoxide (DMSO) na účely dosiahnutia konzistencie vo vehikule a na zaistenie rozpustnosti zlúčeniny. Vhodné DMSO kontroly boli podobne hodnotené so skúšanými zlúčeninami.

Skúška inkorporácie [³H]-tymidinu

RASMC boli umiestnené na 24-jamkovú platňu (30000 buniek/jamka) v DMEM s 10 % FBS. Po 4 dňoch bunky dosiahli konfluencie a boli skľudnené inkubáciou v DMEM/F12 médiu (Gibco), obsahujúcom 0,2 % FBS po ďalšie 2 dni. DNA syntéza bola vyvolaná inkubáciou buniek počas 22 hodín s buď PDGF-BB, bFGF alebo FBS, plus testovaná zlúčenina v 0,5 ml/jamka sérum obsahujúceho média (DMEM/F12 + 1 % CPSR-2 od Sigma). Po 18 hodinách bolo pridané 0,25 pCi/jamku [³H]-tymidínu. O štyri hodiny neskôr bola inkubácia ukončená odstránením rádioaktívneho média, premytím buniek dvakrát 1 ml studeného fosfátom pufrovaného salinického roztoku a potom premytím 2-krát studenou 5 % kyselinou tnchlóroctovou. Kyslá nerozpustná frakcia bola lyzovaná v 0,75 ml 0,25N NaOH a rádioaktivita bola stanovená kvapalinovým scintilačným počtom. Graficky boli stanovené hodnoty IC₅₀.

PDGF receptor autofosforylácie

RASMC rástli do konfluencie v 100 mm miskách. Rastové médium bolo odstránené a nahradené séra prostým médiom a bunky boli inkubované pri 37 “C počas ďalších 24 hodín. Testované zlúčeniny boli potom pridané priamo do média a bunky inkubované počas ďalších 2 hodín. Po 2 hodinách bol pridávaný PDGF-BB v konečnej koncentrácii 30 pg/ml po 5 minút pri 37 °C na stimuláciu sutofosforylácie PGF receptora. Po spracovaní s rastovým faktorom bolo médium odstránené a bunky boli premyté studeným fosfátom pufrovaným salinickým roztokom a ihneď lyzované s 1 ml lyzového pufra (50 mM HEPES (pH 7,5), 150 mM NaCl, 10 % glycerolu, 1 % tritonu X-100, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, 50 mM NaF, 1 mM ortovanadátu sodného, 30 mM p-nitrofenylfosfátu, 10 mM pyrofosforečnanu sodného, 1 mM fenylmetylsulfonylfluoridu, 10 pg/ml aprotininu a 10 mg/ml leupeptínu). Lyzáty boli odstreďované pri 10000 x g po 10 minút. Supematanty boli inkubované s 10 μΐ králičej antihumánnej PDGF typ AB receptor protilátky (1 : 1000) po 2 hodiny. Po inkubácii boli pridané guľôčky proteín-A-separózy po 2 hodiny pri kontinuálnom miešaní a imúnne komplexy naviazane na guľôčky premyté štyrikrát s 1 ml lyzového premývacieho pufra. Imúnne komplexy boli solubilizované v 30 μΐ Laemml vzorkového pufra a elektroforézované v 4 - 20 % SDS polyakrylamidových géloch. Po elekroforéze boli oddelené proteíny prenesené na nitrocelulózu a imúnoblotované s antifosfotyrozínovým antisérom. Po inkubácii s [^,25]I-proteínom-A boli koncentrácie tyrozin fosforylovaných proteínov detegované fosfor zobrazujúcou analýzou a proteínové pásy kvantifikované denzitometricky. IC₅₀ hodnoty boli generované z denzitometrických údajov.

Skúška transplantovaného tumoru

Niektoré zo zlúčenín podľa vynálezu (napr. zlúčeniny z príkladov 54 a 80) zvyšovali čas prežitia pri zvieratách infikovaných transplantovanými tumormi. V skúške boli použité FI hybridné myši. Myš v deň 0 dostala ascitickú kvapalinu alebo riedenie tumorových zlomkov. Vzorka inokula sa inkubuje v tioglykolátovom médiu na overenie kontaminácie tumorovým materiálom. Po inokulácii všetkých testovaných zvierat tumormi sa tieto náhodne rozdelia pre test. Kontrolné zvieratá dostávajú vehikúlum, zatiaľ čo ošetrené zvieratá dostávajú zlúčeninu podľa vynálezu rozpustenú vo vehikule, všeobecne infúziou do chvostového upevnenia. Všetky zvieratá sa sledujú denne na akútnu toxicitu a iné klinické znaky. Prežitie sa kontroluje denne v kontrolnej aj ošetrenej skupine. Skúška sa všeobecne uskutočňuje počas 60 dní a potom sa prežívajúce zvieratá usmrtia.

Nasledujúce tabuľky I a II obsahujú biologické údaje reprezentatívnych zlúčenín podľa vynálezu po analýze predchádzajúcich skúšok.

Tabuľka I

Inhibícia proteín tyrozin kináz (IC₅₀ μΜ alebo % inhibície pri 50 μΜ)

Príklad	PDGFr-TK	FGFr-TK	C-src TK	EGF-FL
7	42%	28%
8	48,0	48,0
9	35%	34%
10	21,2	3,0	0,225
12	4,87	1,32	0,262	5,6
13	2,56	6,20	0,29	88%
14	1,41	7,65	3,92	65%
15	5,18	5,79	4,22
16	5,45	6,49	3,1
17	16,5	56,7
19	16%	20%
20	27%	21,9
21	8,85	1,97	0,963	93 %
22	13 %	17%
23	16%	34%

24	13 %	16%
26	11,3	19,8
28	0%	0%
29	32%	17,2
30	0,98	0,54	0,155	77%
31	1,2	0,46	100%	100%
32	0,875	0,737	33%	100%
33	1,84	0,426	0,89	95 %
34	2,73	1,2	0,037	2,9
35	3,57	1,91	0,34	1,2
36	7,53	1,45	0,56
37	33 %	29%	33%	42%
38	1,09	0,23	0,003	8,7
39	19%	5,5	26%	24%
40	3,22	1,45
41	16%	0%	12%	52%
42	4,49	0,8	0,588	82%
43	5,35	1,35	0,325	67%
44	2,09	0,88	1,57	64%
45	5,68	4,04	2,39	85%
46	17,6	18,1
47	5,98	1,26	36%	70%
48	17,9	19,6	2,54	64%
49	4,65	4,01	0,813	61 %
50	7,31	4,17	3,24	59%
51	7,16	8,03	1,57	55 %
52	5,36	3,61	1,05	46%
53	20%	45%	15 %	0,85
54	0,231	0,84	0,024	0,078
55	1,8	2,20	0,059	0,308
56	1,68	3,01	0,070
57	0,44	0,646	0,050	0,089
58	0,071	0,159	0,023	0,119
59	0,853	0,201	0,12	0,21
60	9,38	6,52	1,64
61	26,5	8,6	64%
62	0,736	0,453	0,365	1.0
63	1,01	1,05	0,033	0.14
64	0,546	0,403	0,020	0,065
67	31 %	27%
68	29%	12,5
69	0,593	0,214	0,079	0,12
70	0,475	0,109	0,070
71	1,14	3,46	6,0	0,54
72	0,259	0,365	0,052	0,033
73	1,3	0,45	0,037	0,16
74	0,76	0,277	0,079	0,13
75	0,353	0,141	0%	0,021
76	2,38	0,466	33 %	0,3
77	1,11	0,124	0,019	0,094
78	1,69	0,143	46%	0,097
79	0,102	0,172	0,044	0,11
80	0,105	0,045	0,006	0,035
81	0,743	0,279	94%	4,5
82	0,14	0,122	0,004
83	1,18	0,333	0,019	0,059
84	0,39	0,25	0,023	0,63
85	0,37	0,56	0,013	1,32
86	0,07	0,061	0,009	0,13
87	0,35	0,17	0,020	0,14
88	38,0	69,0	0,095
89	1,48	1,49	0,014
90	0,14	0,11	0,006	0,15
93	0,076	0,087	0,009	0,25
102	0,355	28%
103	0,15	1,06
104	0,373	58,0

106	1,23	0,415
107	43 %	9,24	52 %
108	5,05	1,19	0,158	87 %
109	9,29	3,37	0,240	0,062
110	25 %	20,3	17,19	64 %
111	3,15	1,5	0,041	1,4
112	11,2	9,1	1,16	19%
113	1,76	0,97	87%	6,7
114	5,17	3,31	1,09	3,2
115	0,17	0,097
116	0.152	1,96	1,38	0,18
117	38.0	0,8
118	12%	29%	0 %
120	1,83	2%	29%
121	44%	29,0
122	33,0	20,0
123	24%	26 %
124	38%	15 %	11 %

Tabuľka I

Bunkové skúšky (IC₅₀ = μΜ)

Príklad inhibície PDGF-stimulovanej receptor autofosforylácie v bunkách hladkých svalov krysej aorty

12	9,4
54	0,016
55	0,06
58	0,013
80	0,026

Zlúčeniny podľa vynálezu boli tiež hodnotené v skúškach, používajúcich bunky z rôznych adenokarcinómov ľudského kolónu. Tri také ľudské bunkové línie boli identifikované ako HCT-8, SW-620 a HT-29. V typickej skúške sú bunky suspendované v 0,3 % mäkkom agare, obsahujúcom zlúčeninu podľa vynálezu v rôznych koncentračných hladinách a sú umiestnené na platňu do šiestich jamkových platní, kde každá platňa obsahuje 1 % agarový čap. Bunkové platne sa inkubujú pri 37 °C vo zvlhčenom oxide uhličitom (5 %) v inkubátore všeobecne 2 týždne. Na konci inkubačnej periódy sú kolónie buniek detegované vyfarbením jamiek s 1 mg/ml p-jódnitrotetrazoliovej violety. Bunky sú spočítané na optickej čítačke kolónií. Koncentrácia testovanej zlúčeniny vyžadovaná na inhibíciu tvorby bunkových kolónii v koncentrácii 50 % vzhľadom na kontrolné platne, neobsahujúcim žiadnu testovanú zlúčeninu sa zaznamenáva ako IC₅₍₎. IC₅₀ pre niektoré zlúčeniny podľa vynálezu proti bunkám adenokarcinómu ľudského kolónu sú uvedené v tabuľke III.

Tabuľka III Inhibícia adenokarcinómu ľudského kolónu IC₅₀ (μΜ)

Zlúčenina z príkladu č. HCT-8 SW-620 HT-29

38	3,15
54	0,52	0,14	0,49
55	0,11	0,12	0,43
56		1,1
57	0,25	0,52	0,74
58	0,17	0,13	0,38
63	1,0
69		1,11
70		3,5

Ako je uvedené, sú zlúčeniny vzorca (I) vhodné na liečenie rakoviny a iných proliferatívnych chorôb ako je lupienka, restenóza a ateroskleróza.

Zlúčeniny podľa vynálezu sú zvlášť vhodné na liečenie restenózy po balónikovej angioplastii okludovaných artérií. Restenóza sa objavuje u asi 40 % jedincov, ktorí boli podrobení angioplastii kalcifikovaných artérií a je hlavným problémom spojeným s touto formou liečby pacientov postihnutých takým srdcovým stavom. Zlúčeniny podľa vynálezu demonštrujú dobrú aktivitu, keď sú hodnotené v štandardných testoch, ako sú opísané.

Balóniková angioplastia krysích artérií carotída

Samce krýs Sprague-Dawley (350 až 450 g) boli rozdelené na 2 ošetrované skupiny: 1 skupina krýs (n = 10) je ošetrená liečivom (100 mg/kg PO, BID) a druhá skupina dostala vehikulum (2 ml/kg PO, Bid (n=l0)). Všetky zvieratá boli vopred ošetrené 2 dni pred chirurgickým zákrokom a dostávali denne po zákroku liečivo až do usmrtenia.

Balónikové poškodenia v krysích arténách carotída boli uskutočnené podľa nasledujúceho protokolu. Krysy boli anestetizované Telazolom (0,1 ml 100 g IM) a artéria carotis odkrytá rezom na krku. Artéria carotis bola izolovaná bifurkáciou vnútorných a vonkajších artérií carotis. 2F embolektomický katéter bol vsunutý do vonkajšej artéria carotis a stláčal bežnú carotídu na hladinu aortického oblúka. Balónik sa napusti a katéter sa zasunie späť do bodu vstupu a potom vypustí. Tento postup sa dvakrát opakuje. Embolektomický katéter sa potom odstráni a vonkajšia artéria carotis sa liguje pri zachovaní nedotknutého toku vnútornej artéria carotis. Chirurgické rezy boli uzavreté a zviera bolo ponechané prebrať sa z anestézie pred tým, ako bolo navrátené do svojej klietky.

V rôznych časových bodoch po zákroku boli zvieratá usmrtené inhaláciou CO a artéria carotis bola perfúzne fixovaná a spracovaná na histologické hodnotenie. Morfologické stanovenie veľkostí lézii bolo uskutočnené meraním plochy artéria carotis intima vyjadrené ako pomer média pri jednotlivých zvieratách. Až 16 rezov bolo pripravených z každého zvieraťa na získanie jednotnej reprezentácie veľkostí lézii po dĺžke artéria carotis. Plochy prierezu krvných ciev boli kvantifikované pri použití programu zobrazovacej analýzy od Priceton Gamma Tech (Princeton, New Jersey).

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu môžu byť formulované a podávané v mnohých rôznych orálnych a parenterálnych dávkových formách, zahŕňajúcich transdermálne a rektálne podanie. Odborníkom v odbore bude zrejmé, že nasledujúce dávkové formy môžu obsahovať ako účinnú zložku buď zlúčeninu vzorca (I), alebo zodpovedajúcu farmaceutický prijateľnú soľ alebo solvát zlúčeniny vzorca (I).

Ďalším vyhotovením vynálezu je farmaceutická formulácia, obsahujúca zlúčeninu vzorca (I) spolu s jej farmaceutický prijateľným nosičom, riedidlom alebo prísadou. Na prípravu farmaceutických kompozícii so zlúčeninami podľa predloženého vynálezu môžu byť farmaceutický prijateľné nosiče buď pevné, alebo kvapalné. Pevná forma prípravkov zahŕňa prášky, tablety, pilulky, kapsuly, vrecká, čapíky a dispergovateľné granuly. Pevným nosičom môže byťjedna alebo viacej zložiek, ktoré môžu tiež pôsobiť ako riedidlá ochucovacie činidlá, spojivá, chrániace látky, tabletové dezintegračné činidlá alebo zapuzdrovací materiál.

V práškoch je nosič jemne rozdelená pevná látka ako mastenec alebo škrob, ktorá je v zmesi s jemne rozdelenou účinnou zložkou.

V tabletách je účinná zložka zmiešaná s nosičom, majúcim nevyhnutné väzbové vlastnosti vo vhodných pomeroch a zhutnená do požadovaného tvaru a veľkosti.

Formulácie podľa predloženého vynálezu výhodne obsahujú od asi 5 % do asi 70 % alebo viacej účinnej zlúčeniny. Vhodné nosiče zahrnujú uhličitan horečnatý, stearát horečnatý, mastenec, cukor, laktózu, pektín, dextrín, škrob, želatínu, tragant, metylcelulózu, sodnú karboxymetylcelulózu, nízko sa topiaci vosk, kakaové maslo a podobne. Preferovaná forma na orálne použitie sú kapsuly, ktoré obsahujú formuláciu účinnej zlúčeniny so zapuzdrovacím materiálom ako je nosič, poskytujúci kapsulu, v ktorej je účinná zložka s alebo bez iných nosičov, obklopená nosičom, ktorý je tak v spojení s ňou. Podobne sú tu zahrnuté vrecká a lozengy. Tablety, prášky, kapsuly, pilulky, vrecká a lozengy môžu byť použité ako pevné dávkové formy vhodné na orálne podanie.

Na prípravu čapíkov sa nízko sa topiaci vosk, ako je zmes glyceridov mastných kyselín alebo kakaového masla, najskôr roztaví a účinná zložka sa homogénne disperguje v tavenine za miešania. Roztavená homogénna zmes sa potom naleje do bežne tvarovaných foriem, ochladí sa a tým stuhne.

Kvapalné formy prípravkov zahrnujú roztoky, suspenzie a emulzie, napríklad vodné alebo vodné-propylénglykolové roztoky. Pre parenterálnu injekciu môžu byť kvapalné prípravky formulované do roztoku vo vodnom polyetylénglykolovom roztoku, izotonickom salinickom roztoku, 5 % vodnej glukóze a podobne.

Vodné roztoky vhodné na orálne podanie môžu byť pripravené rozpustením účinnej zložky vo vode a prídavkom vhodných farbív, príchutí, stabilizačných a zahusťovacích činidiel, ako je to žiaduce.

Vodné suspenzie vhodné na orálne použitie môžu byť vyrobené dispergovaním jemne rozdelenej účinnej zložky vo vode s viskóznym materiálom ako sú prírodné alebo syntetické gumy, živice, metylcelulóza, sodná karboxymetylcelulóza a iné dobre známe suspendačné činidlá.

Zahrnuté sú tu tiež pevné formy prípravkov, ktoré sú zamýšľané na premenu, krátko pred použitím, na kvapalné formy prípravkov na orálne podanie. Takéto kvapaliny zahrnujú roztoky, suspenzie a emulzie. Tieto prípravky môžu obsahovať, navyše k účinnej zložke, farbivá, príchuti, stabilizátory, pufry, umelé a prírodné sladidlá, disperganty, zahusťovadlá, solubilizačné činidlá a podobne. Vosky, polyméry, mikročastice a podobne môžu byť použité na prípravu dávkových foriem s udržovaným uvoľňovaním. Tiež môžu byť použité osmotické pumpy na doručovanie účinnej zlúčeniny jednotne po predĺžený čas.

Farmaceutické prípravky podľa vynálezu sú výhodne v jednotkovej dávkovej forme. V takejto forme je prípravok podrozdelený do jednotkových dávok, obsahujúcich vhodné množstvá účinnej zložky. Jednotková dávková forma môže byť balený prípravok, kde balenie obsahuje oddelené množstvá prípravku ako sú balené tablety, kapsuly a prášky vo fľaštičkách alebo v ampulkách. Tiež môžu byť jednotkovou dávkovou formou kapsula, tableta, vrecko alebo lozeng samotný, alebo ich môže byť zodpovedajúce množstvo v balenej forme.

Terapeuticky účinná dávka zlúčeniny vzorca (I) bude všeobecne od asi 1 mg do asi 100 mg/kg telesnej hmotnosti na deň. Typické dávky pre dospelých budú asi 50 až asi 800 mg na deň. Množstvo účinnej zložky v jednotkovom dávkovom prípravku sa môže meniť alebo byť upravené od asi 0,1 mg do asi 500 mg, výhodne asi 0,5 mg až asi 100 mg podľa konkrétneho použitia a potencie účinnej zložky. Kompozícia môže, ak je to žiaduce, tiež obsahovať iné kompatibilné terapeutické činidlá. Subjektu v prípade potreby ošetrenia zlúčeninou vzorca (I) bude podávaná dávka asi 1 až asi 500 mg na deň, buď ako jednotlivá, alebo násobná dávka počas 24 hodinovej periódy.

Príklad 125

Farmaceutická formulácia vo forme tvrdých želatínových kapsúl na orálne podávanie sa pripraví s použitím nasledujúcich zložiek:

_________________množstvo (mg/kapsula) účinná zlúčenina 250 škrobový prášok 200 stearát horečnatý_____________10___________ celkom 460 mg

Uvedené zložky sa zmiešajú a naplnia sa do tvrdých želatínových kapsúl v množstvách 460 mg. Typickou účinnou zložkou je 6-(2-metyl-l-naftyl)-7-imino-8-izopropyl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylamín.

Kompozícia sa podáva 2 až 4krát denne na liečenie postchirurgickej restenózy.

Príklad 126

Formulácia pre orálnu suspenziu

Zložka	množstvo
2-(cyklopropylamino)-6-(2-bróm-4-	500 mg
-metoxy-5-etyltiofenyl)-8-en-hexyl-
-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ón
roztok sorbitolu (70 % N. F.)	40 ml
benzoát sodný	150 mg
sacharín	10 mg
čerešňová príchuť	50 mg
destilovaná voda g. s. do	100 ml

Roztok sorbitolu a pridá k 40 ml destilovanej vody a v tomto sa suspenduje pyridopyrimidin. Pridá sa a rozpustí sacharín, benzoát sodný a príchuť. Objem sa upraví na 100 ml destilovanou vodou. Každý mililiter sirupu obsahuje 5 mg účinnej zložky.

Príklad 127

Tablety, obsahujúce každá 60 mg účinnej zložky.

účinná zložka	60 mg
škrob	45 mg
mikrokryštalická celulóza	35 mg
polyvinylpyrrolidón	4 mg
(ako 10 % roztok vo vode)
sodný karboxymetylškrob	4,5 mg
stearát horečnatý	0,5 mg
mastenec	1,0 mg
celkom	150 mg

Účinné zložky, škrob a celulóza sa pretlačia sitom č. 45 mesh U. S. a starostlivo sa premiesia. Roztok polyvinylpirrolidónu sa zmieša so vzniknutými práškami a potom sa pretlači sitom č. 14 mesh U. S. Granuly sa sušia pri 50 °C až 60 °C a pretlačia sa sitom č. 18 mesh U. S. Potom sa ku granuliam pridá sodný karboxymetylškrob, stearát horečnatý a mastenec, predtým pretlačené sitom č. 60 mesh U. S. Granuly sa po zmiešaní zlisujú na tabletovacom zariadení na tablety, každá s hmotnosťou 150 mg.

Typickou účinnou zložkou použitou v uvedenej príprave je zlúčenina z príkladu 12.

Príklad 128

Parenterálna kompozícia vhodná na injekčné podanie sa pripraví rozpustením 100 mg 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-7-tioxo-pyrido[2,3-d]pyrimidínu v 250 ml 0,9 % vodného roztoku chloridu sodného a úpravou pH roztoku na asi 7,0. Táto formulácia je vhodná na liečbu rakoviny prsníka.

Príklad 129

Príprava čapíkov

Zmes 500 mg 2-metylsulfanyl-6-(2,6-dichlórfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ónu a 1500 mg teobrómového oleja sa homogénne zmieša pri 60 °C. Zmes sa ochladí na 24 °C v zúžených formách. Každý čapik bude mať hmotnosť asi 2 g a môže byť podávaný I až 2-krát denne na liečbu bakteriálnych infekcii.

Príklad 130

Topický prípravok

Zložka	množstvo (mg)
2-acetamido-6-(2-naftyl)-8-etyl-	20
-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ón
propylénglykol	100
biela vazelína	500
cetearylalkohol	50
glycerylstearát	100
PEG 100 stearát	100
Ceteth-20	50
monobázický fosforečnan sodný	80
celkom	1000

Príklad 131

Prípravok s pomalým uvoľňovaním

Päťsto miligramov 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-[4-(2-dietyl-aminoetoxy)-fenylamino]-8-metoxy-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón-hydrochloridu sa umiestni do osmotickej tabletovej pumpy a podáva sa orálne na liečbu a prevenciu restenózy.

Claims (55)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Pyrido[2,3-D]pyrimidíny všeobecného vzorca (I) kde

   X predstavuje skupinu vzorca NH, N-acyl, O alebo S, pričom acyl predstavuje alkanoylskupinu s I až 6 atómami uhlíka, ktorá je pripadne substituovaná skupinou NR_SR,„ kde R₅ a R₆ majú ďalej uvedený význam, karboxyskupinou alebo heterocyklickou skupinou s 5 až 6 členmi, z ktorých 1 alebo 2 sú heteroatómy zvolené z dusíka, substituovaného dusíka, kyslíka alebo síry, pričom pod označením „substituovaný dusík“ sa rozumie dusík nesúci alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka alebo skupinu (CH₂)_nPh, kde n a Ph majú ďalej uvedený význam, alebo acyl predstavuje fenylkarbonylskupinu alebo (substituovaný fenyljkarbonylskupinu, kde termín „substituovaný fenyl“ má ďalej uvedený význam;

   Ri predstavuje skupinu vzorca NR₃R₄, SR₃, OR₃, SOR₃ alebo SO₂R₃;

   každý zo symbolov

   R₂, R₃ a R₄ nezávisle predstavuje atóm vodíka, skupinu vzorca (CH₂)_nPh, kde Ph znamená fenylskupinu alebo substituovanú fenylskupinu a n je číslo 0, I, 2 alebo 3; cykloalkylskupinu s 3 až 6 atómami uhlíka, alkanoylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkcnylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka alebo alkinylskupínu s 2 až 6 atómami uhlíka, pričom tieto alkylskupiny, alkenylskupiny a alkinylskupiny sú prípadne substituované skupinou NR₅R₆, fenylskupinou, substituovanou fenylskupinou, tioalkylskupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, hydroxyskupinou, karboxyskupinou, halogénom alebo cykloalkylskupinou s 3 až 6 atómami uhlíka, kde R₅ a R₆ každý nezávisle predstavuje vodík, alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, alkinylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, skupinu (CH₂)_nPh, kde Ph predstavuje fenylskupinu alebo substituovanú fenylskupinu a n znamená číslo 0, 1, 2 alebo 3, alebo cykloalkylskupinu s 3 až 6 atómami uhlíka alebo R₅ a R₆ brané dohromady s atómom dusíka, ku ktorému sú pripojené, môžu doplňovať kruh obsahujúci 3 až 7 atómov uhlíka a prípadne obsahujúci 1,2 alebo 3 heteroatómy zvolené z dusíka, kyslíka a síry; pričom

   R₄ môže okrem toho predstavovať tiež skupinu vzorca -C(-O)R₃, -C(-O)ORj, -SO₂R_3j -SO₂NR₅Rf„ -C(-OjNR_;R,„ -C(=S)NR₅R₆, -C(=NH)R₃ alebo -C(=NH)NR₅R₆; a

   R, a R₄ brané dohromady s atómom dusíka, ku ktorému sú pripojené, môžu navyše doplňovať kruh obsahujúci 3 až 7 atómov uhlíka a prípadne obsahujúci 1, 2 alebo 3 heteroatómy zvolené z dusíka, kyslíka a síry;

   Ar predstavuje fenylskupinu alebo substituovanú fenylskupinu;

   pričom pod pojmom „substituovaná fenylskupina“ sa rozumie fenylskupinu substituovaná 1, 2 alebo 3 skupinami zvolenými zo súboru skladajúceho sa z halogénu, alkylskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupiny s I až 6 atómami uhlíka, merkaptoskupiny, alkyltioskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, hydroxyskupiny, alkylkarbonylskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, kyanoskupiny, nitroskupiny, trifluórmetylskupiny, alkylkarbonyloxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, aminoskupiny, alkylaminoskupiny s I až 6 atómami uhlíka a dialkylaminoskupiny s I až 6 atómami uhlíka v každej z alkylových častí;

   a ich farmaceutický prijateľné soli.
2. 2. Pyrimidíny podľa nároku 1 všeobecného vzorca (1) kde R₇ a R₈ sú nezávislé C_rC₆ alkyl a halogén a R] R₂ a X majú definovaný význam.
3. 3. Pyrimidíny podľa nároku 2, kde R₂ je C_rC₆ alkyl alebo substituovaný C,-C₆ alkyl.
4. 4. Pyrimidíny podľa nároku 3, kde R|jeNR₃R₄.
5. 5. Pyrimidíny podľa nároku 4, kde R₃ je vodík.
6. 6. Pyrimidíny podľa nároku 5, kde R₄ je vodík.
7. 7. Pyrimidíny podľa nároku 6, kde X je NH.
8. 8. Pyrimidín podľa nároku 7, ktorým je 6-(2,6-dimetylfenyl)-7-imino-8-metyl-7,8-dihydropyrido2,3-d]pyrimídin-2-ylamín;

   6-(2-metylfenyl)-7-imino-8-metyl-7,8-dihydropyrido-[2,3]pyrimidin-2-ylamín a

   6-fenyl-7-imino-8-metyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]-pyrimidín-2-ylamín.
9. 9. Pyrimidíny podľa nároku 2, všeobecného vzorca kde R-2 je C_rC₆ alkyl, R₃ je vodík alebo C-C₆ alkyl, R₄, je C_rC₆ alkyl alebo substituovaný C_rC₆ alkyl a R₇ a R₈ sú Ci-C₆ alkyl alebo halogén.
10. 10. Pyrimidín podľa nároku 9, ktorým je 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-[3-(4-metylpiperazín-l-yl)-propylamino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ón; 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylamino-8H-pyrido-[2,3-d]pyrimidin-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-2-dimetylamino-8-metyl-8H-pyrido-[2,3-d]pyrimidin-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-2-etylamino-8-metyl-8H-pyrido-[2,3-d]pyrimidin-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-2-(2-hydroxyetylamino)-8-metyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-2-izopropylamino)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ón;

    2-butylamino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-8H-pyrido-[2,3-d]pyrimidin-7-ón;

    2-benzylamino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-8H-pyrido-[2,3-d]pyrimidin-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-(3-morfolin-4-yl-propylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-2-[2-(3,4-dimetoxyfenyl)-etylamino]-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-[(pyridín-2-ylmetyl)-amino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-[(pyridin-3-ylmetyl)-amino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-(2-pyridín-2-yl-etylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidm-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-2-{4-[4-(2-metoxyfenyl)-piperazín-l-yl]-propylamino}-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-[4-(4-metylpiperazín-1 -yl]-butylamino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    terc.butylester kyseliny 6-[6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]-hexánovej;

    6-[6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido [2,3-d]pyrimidín-2-ylamino]hexánová kyselina;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-8-etyl-2-[3-(4-metyl-piperazín-1 -yl)-propylamino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-[5-(4-metylpiperazín-l-yl)-pentylamino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    etylester kyseliny 4-{4-[6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]-fenyl)-maslovej a kyselina 4-{4-[6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylamino]-fenyl)-maslová.
11. 11. Pyrimidín podľa nároku 6, kde X je O.
12. 12. Pyrimidín podľa nároku 11, ktorým je 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ón;

    2-amino-6-fenyl-8-metyl-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ón; 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-etyl-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ón;

    2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-propyl-8H-pyrido[2,3-djpyrimidín-7-ón;

    2-amino-8-butyl-6-(2,6-dichlórfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-izobutyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-(3-dimetylaminopropyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    [2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-8-yl]-octová kyselina, metylester;

    [2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-8-yl]octová kyselina, terc.butylester;

    [2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-8-yl]-octová kyselina;

    2-amino-8-benzyl-6-(2,6-dichlórfenyl)-8H-pyrido[2,3-dJpyrimidín-7-ón;

    2-amino-8-(3-brómbenzyl)-6-(2,6-dichlórfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    4-[2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-dJpyrimidín-8-ylmetyl]-benzoová kyselina, metylester; 2-amino-8-(2,6-dichlórbenzyl)-6-(2,6-dichlórfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-(4-metoxybenzyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-pyridín-4-ylmetyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón a

    2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-(3-fenylpropyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón.
13. 13. Pyrimidín podľa nároku 11, ktorým je 2-amino-6-(2,6-metylfenyl)-8-metylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-ón.
14. 14. Pyrimidín podľa nároku 11, ktorým je 2-amino-6-(2-metylfenyl)-8-metyl-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7(8H)-ón.
15. 15. Pyrimidíny podľa nároku 5, kde R₄ je Ci-C₆ alkyl substituovaný NR₅R₆.
16. 16. Pyrimidíny podľa nároku 15, kde R₅ a R_g sú obidva C,-C₆ alkyl.
17. 17. Pyrimidíny podľa nároku 16, kde X je NH.
18. 18. Pyrimidín podľa nároku 17, ktorým je [6-(2,6-dichlórfenyl)-7-imino-8-metyl-7,8-dihydropyrido-[2,3-d]pyrimidin-2-yl]-(3-dietylaminopropyl)amín.
19. 19. Pyrimidíny podľa nároku 16, kde X je O.
20. 20. Pyrimidín podľa nároku 19, ktorým je [6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido-[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-(3-dietylaminopropyl)amín.
21. 21. Pyrimidín podľa nároku 19, ktorým je N-[6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido-[2,3-d]pyrimidin-2-yl]acetamid.
22. 22. Pyrimidíny podľa nároku 6, kde X je S.
23. 23. Pyrimidín podľa nároku 22, ktorým je 2-amino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-pyrido[2,3-d]-pyrimidin-7(8H)-tión.
24. 24. Pyrimidíny podľa nároku 24, kde X je O.
25. 25. Pyrimidín podľa nároku 24, ktorým je N-[6-(2,6-dichlórfenyl)-7-oxo-8-metyl-7,8-dihydropyrido-[2,3-d]pyrimidin-2-yl] sukcinámová kyselina.
26. 26. Pyrimidín podľa nároku 24, ktorým je l-[6-(2,6-dichlórfenyl)-7-oxo-8-metyl-7,8-dihydropyrido-[2,3-d]pyrimidin-2-yl]-pyrolidin-2,5-dión.
27. 27. Pyrimidíny podľa nároku 3, kde R, je OR₃.
28. 28. Pyrimidíny podľa nároku 27, kde X je NH.
29. 29. Pyrimidín podľa nároku 28, ktorým je 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-hydroxy-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]-pyrimidin-7-ylidénamín.
30. 30. Pyrimidín podľa nároku 28, ktorým je 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-(2-etoxy-etoxy)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ylidénamín.
31. 31. Pyrimidíny podľa nároku 27, kde X je O.
32. 32. Pyrimidín podľa nároku 31, ktorým je 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-hydroxy-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]-pyrimidin-7-ón.
33. 33. Pyrimidín podľa nároku 31, ktorým je 6-(2,6-dichlórfenyl)-2-[2-(dietylamino)etoxy]-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ón.
34. 34. Pyrimidíny podľa nároku 3, kde R₃ je S(O)₀1 alebo 2-R₃.
35. 35. Pyrimidíny podľa nároku 34, kde X je NH alebo O.
36. 36. Pyrimidín podľa nároku 35, ktorým je 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido-2,3-d]pyrimidín-7-ylídénamín;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-8-etyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido-2,3-d]pyrimidín-7-ylidénamín;

    6-(2,6-dichlórfenyI)-2-metánsulfinyl-8-mctyl-8H-pyrido-[2,3-d]pyrimidin-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido-[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-2-metánsulfonyl-8-metyl-8H-pyrido-[2,3-d]pyrimidin-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido-[2,3-d]pyrimidin-7-ón a

    6-(2,6-dichlórfenyl)-8-etyl-2-metánsulfonyl-8H-pyrido-[2,3-d]pyrimidin-7-ón.
37. 37. Pyrimidíny podľa nároku 34, kde X je N-acyl.
38. 38. Pyrimidín podľa nároku 37, ktorým je N-[6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido-[2,3-d]pyrimidin-7-ylidén]acctamid a N-[6-(2,6-dichlórfenyl)-8-etyl-2-metylsulfanyl-8H-pyrido-[2,3-d]pyrimidin-7-ylidén]acetamid.
39. 39. Pyrimidín podľa nároku 3, ktorým je N-[6-(2,6-dichlórfenyl)-2-(4-dietylaminobutylamino)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ylidén)acetamid.
40. 40. Pyrimidíny podľa nároku 1 všeobecného vzorca kde R, je C_rC₆ alkyl alebo substituovaný C_rC₆ alkyl, X je O alebo NH a Ar je fenyl, substituovaný fenyl, pyridyl alebo substituovaný pyridyl.
41. 41. Pyrimidín podľa nároku 40, ktorým je 6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    2-(3-brómfenylarnino)-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-8H-pyrido [2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    2-(4-chlórfenylammo)-6-(2,6-dichlórfcnyl)-8-mctyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    2-(benzo[ 1,3]dioxol-5-ylamino)-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-(pyridín-4-ylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimídín-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-2-p-tolylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-2-(4-metoxyfenylamino)-8-metyl-8H-pyrido(2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-8-etyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-2-(2-metoxyfenylamino)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-2-(3-metoxyfenylamino)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-2-(4-metoxy-3-metylfenylamino)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-8-etyl-2-(4-metoxyfenylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-8-etyl-2-(4-hydroxyfenylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-2-(4-etoxyfenylamino)-8-etyl-8H-pyrido [2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    6-(2,6-di chl órfenyl )-2-(3,4-dimetoxyfenylamino)-8-etyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-8-etyl-2-(3,4,5-trimetoxyfenylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    6-(2,Ď-dichlórfenyľ)-8-mctyl-2-(pyridín-3-ylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-2-[4-(2-dietylaminoetoxy)-fenylamino]-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)2-(3-hydroxymctylfcnylamino)-8-mctyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-2-(3,5-dimetoxyfenylammo)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    [4-[6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-yIamino]-fenyl( -octová kyselina, metylester;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-2-(6-metoxypyridín-3-ylamino)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    {4-(6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-Ylamino]-fenyl}-octová kyselina; 6-(2,6-dichlórfenyl)2-(3-hydroxyfenylamino)-8-metyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    4-(6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylamino]-benzoová kyselina, etylester; 3-[6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyi-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylamino]-benzoová kyselina, etylester;

    3-(6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-2-ylamino]-benzoová kyselina;

    6-(2,6-dichlórfenyl)-8-etyl-2-(pyrimidín-4-ylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    [6-(2-bróm-6-chlórfenyl)-8-etyl-7-imino-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidín-8-yl]-fenylamín;

    6-(2-bróm-6-chlórfenyl)-8-etyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    (8-etyl-7-imino-6-fcnyl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-2-feny lamín;

    8-etyI-6-fenyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón;

    (6-(3,5-dimetylfenyl)-8-etyl-7-imino-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-2-fenylamín a

    6-(3,5-dimetylfenyl)-8-etyl-2-fenylamino-81I-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón.
42. 42. Pyrimidíny podľa nároku 1 všeobecného vzorca kde R₂ je C_rC₆ alkyl alebo substituovaný C_rC₆ alkyl, X je NH alebo O a R₄ je fenyl alebo substituovaný fenyl.
43. 43. Pyrimidín podľa nároku 42, ktorým je 8-etyl-2-fenylamino-6-tiofen-3-yl-8H-pyrido[2,3-d]-pyrimidin-7-ón;

    (8-etyl-7-imíno-6-tiofen-2-yl-7,8-dihydropyrido-[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylamín;

    8-etyl-2-fenylamino-6-tiofen-2-yl-8H-pyrido[2,3-d]-pyrimidin-7-ón;

    (8-ctyl-7-imino-6-pyridin-4-yl-7,8-dihydropyrido-[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-2-fenylamín;

    8-etyl-2-fenylamino-6-pyridin-4-yl-8H-pyrido[2,3-d]-pyrimidin-7-ón;

    (8-etyl-7-imino-6-naftalen-2-yl-7,8-dihydropyrido-[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylamín;

    8-etyl-6-naftalen-2-yl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]-pyrimidin-7-ón;

    (6-bifenyl-4-yl-8-etyl-7-imino-7,8-dihydropyrido[2,3-d]-pyrimidin-2-yl)fenylamín a

    6-bifenyl-4-yl-8-etyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]-pyrimidm-7-όη.
44. 44. Pyrimidíny podľa nároku 1, kde R₃ je vodík a R4 je cykloalkyl.
45. 45. Pyrimidín podľa nároku 44, ktorým je 2-cyklohexylamino-6-(2,6-dichlórfenyl)-8-metyl-8H-pyrido-[2,3-d]pyrimidin-7-ón.
46. 46. Farmaceutická kompozícia, vyznačujúca sa tým, že obsahuje pyrimidín podľa nároku 1 spolu s jeho farmaceutický prijateľným nosičom.
47. 47. Kompozícia podľa nároku 46, vyznačujúca sa tým, že obsahuje pyrimidín podľa nároku 1 všeobecného vzorca (I), kde Ar je fenyl alebo substituovaný fenyl.
48. 48. Kompozícia podľa nároku 47, vyznačujúca sa tým, že obsahuje pyrimidín podľa nároku 1 všeobecného vzorca (I), kde X je NH alebo-N-acyl.
49. 49. Kompozícia podľa nároku 47, vyznačujúca sa tým, že obsahuje pyrimidín podľa nároku 1 všeobecného vzorca (I), kde X je O.
50. 50. Kompozícia podľa nároku 47, vyznačujúca sa tým, že obsahuje pyrimidín podľa nároku 1 všeobecného vzorca (I), kde X je S.
51. 51. Pyrimidíny všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1 na použitie ako liečivá na liečenie chorôb sprostredkovaných bunkovou proliferáciou.
52. 52. Pyrimidíny všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1 na použitie ako liečivá na liečenie rakoviny.
53. 53. Pyrimidíny všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1 na použitie ako liečivá na liečenie aterosklerózy.
54. 54. Pyrimidíny všeobecného vzorca (J) podľa nároku 1 na použitie ako liečivá na liečenie psoriázy.
55. 55. Pyrimidíny všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1 na použitie ako liečivá na liečenie restenózy.