SK282186B6 - Použitie purifikovanej zlúčeniny na výrobu liečiva na inhibíciu aktivity steroidnej sulfatázy - Google Patents

Použitie purifikovanej zlúčeniny na výrobu liečiva na inhibíciu aktivity steroidnej sulfatázy Download PDF

Info

Publication number
SK282186B6
SK282186B6 SK246-94A SK24694A SK282186B6 SK 282186 B6 SK282186 B6 SK 282186B6 SK 24694 A SK24694 A SK 24694A SK 282186 B6 SK282186 B6 SK 282186B6
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
estrone
activity
compound
group
sulfamate
Prior art date
Application number
SK246-94A
Other languages
English (en)
Other versions
SK24694A3 (en
Inventor
Michael John Reed
Barry Victor Lloyd Potter
Original Assignee
Sterix Limited
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sterix Limited filed Critical Sterix Limited
Publication of SK24694A3 publication Critical patent/SK24694A3/sk
Publication of SK282186B6 publication Critical patent/SK282186B6/sk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/565—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
    • A61P5/30—Oestrogens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
    • A61P5/32—Antioestrogens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
    • A61P5/36—Antigestagens
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
    • C07J41/0033—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
    • C07J41/0033—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005
    • C07J41/0072—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005 the A ring of the steroid being aromatic

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Surgical Instruments (AREA)
  • Mechanical Treatment Of Semiconductor (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Abstract

Použitie purifikovanej zlúčeniny na výrobu liečiva na inhibíciu aktivity steroidnej sulfatázy, ktorá obsahuje kruhový systém obsahujúci kruh, ku ktorému je pripojená sulfamátová skupina vzorca (I), kde každý z R1 a R2 je nezávisle zvolený zo skupiny zahŕňajúcej atóm vodíka, alkyl, alkenyl, cykloalkyl a aryl alebo spoločne predstavujú alkylén obsahujúci buď jeden alebo viac heteroatómov, alebo skupín v alkylénovom reťazci a kde je zlúčenina inhibítorom enzýmu s aktivitou steroidnej sulfatázy (E.C.3.1.6.2) a kde, ak by bola sulfamátová skupina nahradená v zlúčenine sulfátovou skupinou na vytvorenie sulfátovej zlúčeniny a inkubovaná s enzýmom steroidnou sulfatázou (E.C.3.1.6.2) pri pH 7,4 a teplote 37 °C, získala by sa hodnota Km menšia ako 50 umol.ŕ

Description

Oblasť techniky
Vynález sa týka nových zlúčenín, ktoré môžu byť použité ako inhibitory steroidnej sulfatázy a farmaceutických prípravkov, ktoré ich obsahujú.
Doterajší stav techniky
Prekurzory steroidných hormónov, ktoré majú sulfátovú skupinu v pozícii 3 steroidného jadra, sú v ďalšom texte zjednodušene označované ako steroidné sulfáty. Tieto látky sú dôležitými medziproduktmi metabolizmu steroidov v ľudskom organizme. Estrón sulfát a dehydroepiandrosterón (DHA) sulfát sú známe ako dôležité medziprodukty tvorby telových estrogénov estrónu a estradiolu. Estrón sulfát je jedným z hlavných prekurzorov estrogénu v obehu zvlášť žien po menopauze a aktivita enzýmu estrónsulfatázy v tumoroch prsníkov je 100 až 1000-násobne vyššia než aktivita iných enzýmov, ktoré sa zúčastňujú tvorby estrogénu (James so spoluautormi, Steroids 50,269 - 279,1987).
Estrogény ako estrón a estradiol a najmä ich nadprodukcia sa značne uplatňujú za malígnych podmienok, napríklad pri rakovine prsníkov (pozri Breast Cancer, Treatment and Prognosis, R. A. Stoll, ed., str. 156 - 172, Blackwell Scientifíc Publications 1986). Kontrola produkcie estrogénov je preto špecifickým cieľom mnohých protirakovinových terapii, využívajúcich buď chemoterapeutiká alebo operatívne postupy, t. j. odstránenie vajíčkovodov alebo nadobličiek. Endokrinná terapia sa dosiaľ zameriavala na využitie látok, ktoré inhibujú aktivitu enzýmu aromatázy. Ako ukazuje obrázok č. 1, znázorňujúci metabolické premeny estrogénov, aktivita tohto enzýmu sa uplatňuje pri premene androgénov androstendiónu na estrón a testosterónu na estradiol.
Nedávno publikovaná medzinárodná patentová prihláška WO91/13083 sa zaoberá využitím odlišného miesta (či skôr dvoch miest) metabolickej dráhy estrogénu, t. j. premeny DHA sulfátu na DHA a estrón sulfátu na estrón za účasti enzýmu steroidnej sulfatázy. 3-Monoalkyltiofosfonáty esterov steroidov, presnejšie estrón-3-metyltiofosfonát, sú súčasne používané ako inhibítor steroidnej sulfatázy.
Tento vynález sa zaoberá novými zlúčeninami, ktoré sú schopné inhibovať aktivitu enzýmu steroidnej sulfatázy v podmienkach in vitro a in vivo.
Ďalším cieľom je stanovenie nových zlúčenín inhibujúcich steroidnú sulfatázu za podmienok tak in vitro, ako aj in vivo, so zvýšenou aktivitou.
Ďalej sa vynález zaoberá stanovením farmaceutických prostriedkov účinných pri liečbe od estrogénu závislých tumorov a pri liečbe rakoviny prsníka.
Podstata vynálezu
Vynález spočíva v objavení nových látok, ktoré prejavujú (v niektorých prípadoch extrémne silnú) inhibičnú aktivitu proti enzýmu steroidnej sulfatázy. Týmito látkami sú sulfamátové estery polycyklických alkoholov, ktoré majú povahu polycyklických alkoholov a ktorých sulfátová skupina slúži ako substrát na enzýmy s aktivitou steroidnej sulfatázy (EC 3.1.6.2). Ďalej sú to potom N-alkyl a N-aryl deriváty uvedených sufamátových esterov a ich farmaceutický využiteľné soli.
Podstatou vynálezu je purifikovaná zlúčenina obsahujúca kruhový systém a sulfamátovú skupinu vzorca o
kde každý z R1 a R2 je nezávisle zvolený zo skupiny zahŕňajúcej atóm vodíka, alkyl, alkenyl, cykloalkyl a aryl, kde najmenej jeden z R1 a R2 znamená atóm vodíka a kde kruhový systém obsahuje najmenej tri kruhy, z ktorých najmenej dva sú spojené, kde je zlúčenina inhibítorom enzýmu s aktivitou steroidnej sulfatázy (E.C.3.1.6.2), kde, ak by bola sulfamátovú skupina nahradená v zlúčenine sulfátovou skupinou na vytvorenie sulfátovej zlúčeniny a inkubovaná enzýmom steroidnou sulfatázou (E.C.3.1.6.2.) pri pH 7,4 a teplote 37 °C, získala by sa hodnota Km menšia ako 50 pmol.
Ďalej sa vynález týka purifikovanej zlúčeniny, kde zlúčeninou je zlúčenina vzorca (I)
O Rt || polycyklický systém — 5— 0^ (|) ,
R:^ || o
kde každý zo zvyškov R1 a R2 je zvolený zo skupiny zahŕňajúcej atóm vodíka, alkyl, cykloalkyl, alkenyl a aryl alebo spoločne predstavujú alkylén, obsahujúci buď jeden alebo viac heteroatómov či skupín v alkylénovom reťazci a skupina označená ako -O-polycyklický systém predstavuje zvyšok polycyklického alkoholu, ktorého sulfátová skupina je substrátom enzýmov s aktivitou steroidnej sulfatázy (EC 3.1.6.2).
V texte zmieňovanými polycyklickými alkoholmi, ktorých sulfátová skupina je substrátom enzýmov s aktivitou steroidnej sulfatázy, sú myslené polycyklické alkoholy so sulfátovou skupinou odvodenou od vzorca o
|| polycyklický systém , ho — s — o r
I!
o pre ktorú je hodnota Km získaná pri inkubácii týchto látok s enzýmom steroidnou sulfatázou (EC 3.1.6.2) pri pH 7,2 a teplote 37 °C menšia než 50 pmol.
Tento vynález predkladá ako nové látky sulfamátové estery polycyklických alkoholov, ktoré majú povahu polycyklických alkoholov a ktorých sulfátová skupina slúži ako substrát pre enzýmy s aktivitou steroidnej sulfatázy tak, ako bolo skôr definované a taktiež ich N-alkyl, N-cykloalkyl, N-alkenyl a N-aryl deriváty. Ich vzorec zodpovedá skôr uvedenému vzorcu (I).
Polycyklická časť zlúčeniny by mala obsahovať maximálne asi 40 uhlíkových atómov a to vrátane všetkých substituentov, najlepšie však do tridsiatich uhlíkových atómov. Prednosť je dávaná polycyklickým látkam obsahujúcim steroidný skelet cyklopentánfenantrénu. Je výhodné, pokiaľ je sulfamylová alebo substituovaná sulfamylová skupina na tento skelet viazaná v polohe 3, ako ukazuje vzorec (II).
o kde
R1 a R2 zodpovedajú definovaným skupinám a cyklický systém ABCĎ predstavuje substituované alebo nesubtituo2 (IV) vane, saturované alebo nesaturované steroidné jadro, najlepšie estrón alebo dehydroepiandrosterón.
Ďalšími vhodnými cyklikými steroidmi sú: substituované estróny:
2-OH-estrón, 2-metoxyestrón, 4-OH-estrón, 6a-OH-estrón, 7a-OH-estrón, 16a-OH-estrón a Ιόβ-ΟΗ-estrón;
estradioly a substituované estradioly: 2-OH-17p-estradiol, 2-mctoxy-17p-estradiol, 4-ΟΗ-17β-esradiol, 6a-OH-17P-estradiol, 7a-OH-17P-estradiol, 16a-OH-17a-estradiol, 16p-OH-17a-cstradiol, 16p-OH-17p-estradiol, 17a-estradiol, 17P-estradiol a 17a-etinyl-170-estradiol;
estradioly a substituované estrioly: estriol, 2-OH-estriol, 2-metoxyestriol, 4-OH-estriol, 6a-OH-estríol, 7a-OH-estriol;
substituované dehydroepiandrosteróny: 6a-OH-dehydroepiandrosterón, 7a-OH-dehydroepiandro steron, 16a-OH-dehydroepiandrosterón a 16p-OH-dchydroepiandrosterón.
Steroidný cyklický systém ABCD môže všeobecne obsahovať množstvo neinterferujúcich substituentov. Do úvahy prichádza jeden alebo viac hydroxylových zvyškov, z alkylových substituentov výhodne skupiny s 1 až 6 uhlíkovými atómami, t. j. metyl, etyl, n-propyl, izopropyl, n-butyl, sekundárny butyl, terciámy butyl, n-pentyl a ďalšie pentylové izoméry, n-hexyl a ďalšie hexylové izoméry, z alkoxylových substituentov výhodne skupiny obsahujúce 1 až 6 uhlíkových atómov, t. j. skupina metoxylovú, etoxylová, propoxylová atď., ďalej alkinyl (ako napríklad etínyl) alebo halogénový atóm, napríklad pri fluorovaných substituentoch.
Ako cyklický systém nesteroidnej povahy môže byť použitý dietylstilboestrol, stilboestrol alebo iný cyklický systém so sulfátovými skupinami, ktorého Km vzhľadom na steroidnú sulfatázu (EC 3.1.6.2) neprevyšuje 50 pmol.
V prípade N-substitúcie obsahujú látky, navrhované týmto vynálezom, jeden alebo dva N-alkylové, N-alkenylové, N-cykloalkylové alebo N-arylové substituenty. Tieto substituenty by mali obsahovať, či už každý z nich alebo sumárne, maximálne desať uhlíkových atómov. Pokiaľ je ako R1 alebo R2 naviazaná alkylová skupina, mali by R1 a R2 byť nezávisle zvolené z nižších alkylových skupín, metylovej, etylovej, propylovej atď., obsahujúcich najviac 5 uhlíkových atómov. Je výhodné, pokiaľ sú obidvoma substituentmi Ri a R2 metylová skupina. Pokiaľ je jedným zo substituentov aryl, ide prednostne o fenyl a tolyl (-PhCH3; orto, metá či para). Pokiaľ R1 a R2 predstavujú cykloalkylové skupiny, ide predovšetkým o cyklopropyl, cyklopentyl a podobne. K spojeniu R1 a R2 dochádza v prípade alkylénovej skupiny s reťazcom 4 až 6 uhlíkových atómov, ktorý môže obsahovať jeden alebo viac heteroatómov, prípadne skupín. Ide o morfolinové, pyrolidínové alebo piperidínové, to je päť, šesť alebo sedemčlenné heterocykly so skupinami -O- alebo -NH-.
Medzi alkylové, cykloalkylové, alkenylové a arylové skupiny sú zahrnuté aj skupiny, ktoré sú samé substituované takým zvyškom alebo zvyškami, ktoré neovplyvňujú inhibičnú alktivitu danej látky proti sulfatáze. Príkladom sú substituenty ako hydroxylovú, halogénová, alkoxylovú, alkylová, arylovú skupina alebo aminoskupina.
Výhodné sú zlúčeniny podľa vzorcov (III) a (IV):
kde
R1 a R2 predstavuje vodíkový atóm alebo alkyl CpCs, t. j. estrón-3-sulfamát a dehydroepiandrosterón-3-sulfamát a ich N-(CrC5) alkylové deriváty, najmä dimetylderiváty, kde R'=R2=CH3.
Uvádzané estery kyseliny sulfámovej sú pripravované reakciou polycyklického alkoholu, to je estrónu alebo dehydroepiandrosterónu, so sulfamoyl chloridom R'R^SOiCl podľa nasledujúcej schémy:
R'RsNSO,CI
----► / NaH
Reakcia prebieha za nasledujúcich podmienok: hydrid sodný a sulfamoyl chlorid sa za teploty O °C pridajú k stále miešanému roztoku estrónu v bezvodom dimetylformamide. Potom sa môže teplota zvýšiť na laboratórnu teplotu, zatiaľ čo miešanie pokračuje počas ďalších 24 hodín. Reakčná zmes sa potom pridá do studeného saturovaného roztoku hydrouhličitanu sodného a vzniknutá vodná fáza je extrahovaná dichlórmetánom. Spojené organické extrakty sa sušia pomocou bezvodého síranu horečnatého. Po prefíltrovani sa solvent vákuovo odparí a ďalším odparením za prítomnosti toluénu vzniká hrubý extrakt, ktorý sa ďalej chromatograficky čistí.
Pokiaľ je potrebné, funkčné skupiny polycyklického alkoholu (sterolu) môžu byť chránené známym spôsobom a ochranné skupiny (skupina) odstránené na konci reakcie.
Na farmaceutické podanie môžu byť inhibítory steroidnej sulfatázy podľa tohto vynálezu upravené ktorýmkoľvek vhodným spôsobom s použitím obvyklých farmaceutických metód úpravy a farmaceutických nosičov, pomocných látok, rozpúšťadiel a podobne, obvykle na parenterálne podanie. Približné hodnoty efektívnej dávky sa pohybujú v rozmedzí od 100 do 800 mg na deň v závislosti individuálnej účinnosti danej látky podanej pacientovi priemernej hmotnosti (70 kg). Obvyklejšie dávkovanie látok, ktorým je dávaná prednosť a sú účinnejšie, sa pohybuje v rozmedzí medzi 200 až 800 mg/deň, výhodnejšie medzi 200 až 500 mg/deň a najlepšie medzi 200 až 250 mg/deň. Látky môžu byť podávané buď raz denne alebo v dávke rozdelenej do niekoľkých intervalov počas
SK 282186 Β6 dňa alebo opakovane počas niekoľkých dní. Na perorálne podanie môžu byť upravené do formy tabliet, kapsúl, roztoku alebo suspenzie s obsahom 100 až 500 mg príslušnej zlúčeniny v jednej dávke. Tieto látky môžu byť prípadne výhodne upravené na perorálne podanie s využitím vhodného nosiča tak, aby ich jednorazová denná dávka bola v rozmedzí 200 až 800 mg, výhodnejšie 200 až 500 mg a najlepšie 200 až 250 mg. Je zrejmé, žc účinnosť dennej dávky závisí od vlastnej aktivity aktívnej zložky a od telesnej hmotnosti pacienta, čo posúdi podľa svojich znalostí ošetrujúci lekár.
V zvláštnych prípadoch je možné uvažovať o použití inhibítorov steroidnej sulfatázy v kombinovanej terapii buď spoločne s iným inhibítorom sulfatázy alebo v kombinácii s inhibitorom aromatázy, napríklad 4-hydroxyandrostenodiónom (4-OHA).
Prehľad obrázkov na výkresoch
Inhibičná aktivita uvádzaných látok proti steroidnej sulfatáze je znázornená na obrázkoch na priložených výkresoch:
Obrázok č. 1 ukazuje metabolické dráhy enzýmov a steroidných medziproduktov zúčastňujúcich sa na tvorbe estradiolu in vivo.
Obrázok č. 2 dokladá inhibičný účinok estrón-3-sul famátu (v závislosti od jeho dávky) na aktivitu steroidnej sulfatázy v ľudských bunkách MCF-7 in vitro. Na osi x sú vynesené použité moláme koncentrácie inhibítora, estrón3-sulfamátu. Na osi y je vynesená aktivita enzýmu steroidnej sulfatázy, vyjadrená množstvom vzniknutého produktu za čas inkubácie na 106 buniek.
Obrázok č. 3 dokladá inhibičný účinok estrón-3-Ν,Ν-dimetylsulfamátu (v závislosti od jeho dávky) na aktivitu steroidnej sulfatázy v ľudských bunkách MCF-7 in vitro. Na osi x sú vynesené použité moláme koncentrácie inhibítora. Na osi y je vynesená aktivita enzýmu steroidnej sulfatázy, vyjadrená množstvom vzniknutého produktu za čas inkubácie (20 hod.) na 106 buniek.
Obrázok č. 4 uvádza krivky závislosti aktivity steroidnej sulfatázy od logaritmu koncentrácie inhibítora, estrón3-sulfamátu a estrón-3-N,N-dimetylsulfamátu, v ľudských bunkách MCF-7 in vitro. Na osi x sú uvedené hodnoty záporného dekadického logaritmu koncentrácie inhibítora, na osi y je vynesené percento inhibície enzýmovej aktivity.
Obrázok č. 5 znázorňuje dávkovo závislý inhibičný účinok estrón-3-sulfamátu proti aktivite steroidnej sulfatázy v ľudských mikrozómoch placenty za podmienok in vitro a hodnotu IC5o pre vyššie uvedenú látku (t. j. koncentráciu, ktorá vyvolá 50 % inhibíciu reakcie). Na osi x sú vynesené mikromoláme koncentrácie inhibítora, estrón-3-sulfamátu, na osi y percento inhibície enzýmovej aktivity.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1
Príprava estrón-3-sulfamátu
Hydríd sodný (60 % disperzie, 2 diely) a sulfamoyl chlorid (2 diely) sa pri teplote 0 °C pridajú k stále miešanému roztoku estrónu (1 diel) v bezvodom dimetylformamide. Potom môže byť reakcia zohriata na laboratórnu teplotu, zatiaľ čo miešanie pokračuje počas ďalších 24 hodín.
Reakčná zmes sa potom pridá do studeného saturovaného roztoku hydrouhličitanu sodného a vzniknutá vodná fáza je extrahovaná dichlórmetánom. Spojené organické extrakty sú sušené pomocou bezvodého síranu horečnatého. Po prefiltrovaní sa solvent vákuovo odparí a ďalším odparením za prítomnosti toluénu vzniká extrakt, ktorý sa ďalej chromatograficky čistí.
Analýzou boli získané nasledujúce dáta:
δ'Η (270 MHz; CDjOD): 0,91 (s, 3H, Clg-Me), 1,40 až 2,55 (séria m, 13H), 2,90-2,92 (m, 2H) 7,04 (br d, 2H, J=10,44 Hz), 7,33 (br d, 1H, J=8,42 Hz).
δnC (67,8 MHz; CD3OD): 14,53 (q, Clg-Me), 22,80 (t), 27,24 (t), 27,73 (t), 30,68 (t), 33,05 (t), 37,01 (t), 39,76 (d), 45,73 (s, Clg), 51,86 (d), 120,76 (d), 123,54 (d), 127,89 (d), 139,83 (s), 150,27 (s), 223,87 (s, C=0).
m/z (%): 349 (9) (m+), 270 (100), 213 (26), 185 (43), 172 (31), 159 (21), 146 (36), 91 (33), 69 (37), 57 (73), 43 (56), 29 (24).
Mikroanalýza: C H N
predpoklad 61,87 % 6,63 % 4,01 %
zistené 61,90 % 6,58 % 3,95 %
Príklad 2
Príprava estrón-3-N-metylsulfamátu
Postup prípravy bol rovnaký ako v príklade 1, len s tým rozdielom, že namiesto sulfamoyl chloridu bolo použité rovnaké množstvo N-metylsulfamoyl chloridu.
Analýzou boli získané nasledujúce údaje: δ’Η (270 MHz; CDClj): 0,91 (s, 3H, C]g-Me), 1,281,68 (m, 611), 1,93-2,60 (séria m, 7H), 2,90-2,95 (m, 2H), 2,94 (d, 3H, J=5,13 Hz, MeN-), 4,684,71 (br m, obmeniteľný, 1H, -NH). 7,02-7,07 (m, 2H), 7,26-7,32 (m, 1H).
m/z(%): 364[M+Hf
Príklad 3
Príprava estrón-3-N,N-dimetylsulfamátu
Postup prípravy bol rovnaký ako v príklade 1, len s tým rozdielom, že sulfamoyl chlorid bol nahradený rovnakým množstvom Ν,Ν-dimetylsulfamoyl chloridu. Analýzou boli získané nasledujúce údaje: δ'Η (270 MHz; CDC13): 0,92 (s, 3H, Clg-Me), 1,39 až 1,75 (m, 5H), 1,95-2,60 (séria m, 6H), 2,82 (s, 3H MeN-), 2,96-3,0 (m, 4H), 2,98 (s, 3H, MeN-), 7,04 (br d, 2H, J=7,69 Hz), 7,29 (br d, J=7,88 Hz), m/z ( %): 377 [M]+
Mikroanalýza:
CHN
predpoklad 63,63 % 7,21 % 3,71 %
zistené 63,50 % 7,23 % 3,60 %
Príklad 4
Inhibícia aktivity enzýmu steroidnej sulfatázy v bunkách MCF-7 pomocou estrón-3-sulfamátu
Steroidná sulfatáza je definovaná ako sterylsulfatáza, EC 3.1.6.2.
Aktivita steroidnej sulfatázy sa meria v podmienkach in vitro v intaktných ľudských bunkách MCF-7 rakoviny prsníka. Táto línia buniek, závislých od prítomnosti hormónu, je široko používaná na štúdium kontroly bunkového rastu. Vykazuje taktiež signifikantnú aktivitu steroid nej sulfatázy (Maclndoem so spolupracovníkmi, Endocrinology 123, 1281 - 1287, 1988; Purohit a Reed, Iní. J. Cancer 50, 901 - 905, 1992) a jc k dispozícii vo verejnej zbierke bunkových kultúr v USA (Američan Type Culture Collection, ATCC), rovnako ako vo Veľkej Británii (The Imperiál Cancer Research Fund). Bunky sú udržované v minimálnom esenciálnom médiu (MEM, Flow Laboratories, Irvine, Scotland), obsahujúcom 20 mM HEPES, 5 % fetálne hovädzie sérum, 2 mM glutamínu, neesenciálne mastné kyseliny a 0,075 % hmotn. hydrouhličitanu sodného. Až do tridsiatej replikácie sú používané fľaštičky na tkanivové kultúry s veľkosťou 25 cm2, obsahujúce približne 1 x 105buniek/fľaštičku v uvedenom médiu. Bunky sú pestované do 80 % konfluencie s výmenou média každý tretí deň.
Intaktné monomolekuláme vrstvy buniek MCF-7 z troch zmienených kultivačných fľaštičiek sa premyjú Earlovým pufračným roztokom (EBSS, výrobok ICN Flow, High Wycombe, Veľká Británia). Potom sú spolu s 5 pmol (7 x 105 dpm) [6,7-3H]estrón-3-sulfátu so špecifickou aktivitou 60 Ci/mmol (New England Nuclear, Boston, Mass., USA) inkubované počas 3 až 4 hodín pri teplote 37 °C v 2,5 ml média MEM bez prídavku séra v prítomnosti estrón-3-sulfamátu v nasledujúcich koncentráciách: 0, 0,1 fM, 0,01 pM, 0,1 pM, 1 pM, 0,01 nM, 0,1 nM, 1 nM, 0,01 μΜ, 0,1 μΜ, 1 μΜ. Po skončení inkubácie je každá fľaštička ochladená a médium (1 ml) je napipetované do jednotlivých skúmaviek obsahujúcich [14C]estrón v množstve 7 x 103 dpm so špecifickou aktivitou 97 Ci/mmol (produkt Amersham Intemational Radiochemical Centre, Amersham, Veľká Británia). Táto reakčná zmes sa počas 30 sekúnd dôkladne pretrepe s 5 ml toluénu. Je preukázané, že týmto postupom je odstránené z vodnej fázy viac než 90 % [14C]estrónu a menej než 0,1 % [3H]estrón-3-sulfátu. 2 ml organickej fázy sú odobrané a odparené na stanovenie obsahu izotópov 3H a l4C v zvyšnej časti pomocou scintilačnej spektrometrie. Množstvo hydrolyzovaného estrón-3-sulfátu je zistené výpočtom na základe zmeranej rádioaktivity 3H (korigované vzhľadom na množstvo média, použitú organickú fázu a výťažku pridaného [l4C]estrónu) a špecifickej aktivity substrátu. Každá séria pokusov zahŕňa takisto inkubáciu mikrozómov pripravených z ľudskej placenty s pozitívnou aktivitou sulfatázy - pozitívna kontrola a inkubáciou kultivačných fľaštičiek neobsahujúcich bunky - na odhad neenzymatickej hydrolýzy substrátu. Počet bunkových jadier v jednej fľaštičke sa stanoví na prístroji Coulter Counter po interakcii mononukleámej vrstvy buniek so saponínom. Jedna fľaštička z každej série slúži na stanovenie stavu bunkovej membrány a životnosti buniek pomocou trypanovej modrej (H. J. Phillips, Tissue culture and Application, D. F. Kruse a M. K. Patterson, editori, str. 406 - 408, Academic Press, New York, 1973).
Údaje o účinku estrón-3-sulfamátu sú uvedené v tabuľke I a na obr. č. 2 a 4. Výsledky, týkajúce sa aktivity steroidnej sulfatázy, sú vyjadrené ako priemer ± 1 S. D. celkového produktu (t. j. estrón + estradiol), vzniknutého počas inkubácie (20 hodín) a vztiahnuté na 106 buniek a pri hodnotách štatisticky významných, stupňom inhibície, vzniknutej počas inkubácie bez prítomnosti estrón-3-sulfamátu. Štatistická významnosť výsledkov bola hodnotená nepárovým Študentovým t-testom.
Tabuľka I
Aktivita steroidnej sulfatázy v bunkách MCF-7 za prítomnosti estrón-3-sulfamátu
koncentrácia estrón-3sulfamátu aktivita steroid. sulfatázy π (ftnol/20h/l O6 buniek) % inhibície (% redukcie voči kontrole)
0 (kontrola) 319,7 ± 18,5
1,0 fM 353,3 ± 39,0
0,01 pM 362,3 ± 21,2
0,1 pM 330,7 ± 17,8
1,0 pM 321,8 ± 6,2
0,01 nM 265,1 ±11,0* 17,2
0,1 nM 124,8 ± 12,4 *** 60,9
1,0 nM 16,49 ± 4,7 ♦** 95,0
0,01 μΜ 3,92 ±0,4*** 98,8
0,1 μΜ 2,53 ±1,1 *** 99,2
1,0 μΜ 1,68 ±0,7*** 99,5
π je udané ± 1 S.D. n = 3 *p<0,05 ***p<0,001
Príklad 5
Inhibícia aktivity steroidnej sulfatázy v bunkách MCF-7 účinkom estrón-3-N,N-dimetylsulfamátu
Výsledky týkajúce sa estrón-N,N-dimetyl sulfamátu boli získané rovnakým postupom, aký bol opísaný v príklade 4. Len namiesto látky estrón-3-sulfemátu bol použitý estrón-3-Ν,Ν-dimetylsulfamát v koncentráciách 0,0,001 μΜ, 0,01 μΜ, 0,1 pMa 1 μΜ.
Údaje o účinku estrón-3-N,N-dimetylsulfamátu sú uvedené v tabuľke II na obr. č. 3 rovnakým spôsobom, akým bola spracovaná tabuľka I a obr. č. 2, Na obr. č. 4 sú navyše porovnané krivky logaritmickej dávkovej závislosti estrón3-sulfamátu a estrón-3-N,N-dimetylsulfamátu.
Tabuľka II
Aktivita steroidnej sulfatázy v bunkách MCF-7 za prítomnosti estrón-3-N,N-dimetylsulfamátu
koncentrácia estrón-3-Ν,Νdimetylsulfamátu aktivita steroid. sulfatázy π (fmol/20h/l 06 buniek) % inhibície (% redukcie voči kontrole)
0 (kontrola) 82,63 ± 3,6 -
0,001 μΜ 68,33 ±3,2** 17,3
0,01 μΜ 46,0 ± 4,9 *** 44,3
0,1 μΜ 17,43 ±4,3 ♦*♦ 78,9
1,0 μΜ 11,89 ±3,7*** 85,6
π je udané ±1 S.D.n = 3 **p<0,01 ***p<0,001
Príklad 6
Inhibícia aktivity steroidnej sulfatázy v bunkách MCF-7 po preinkubácii s estrón-3-sulfamátom alebo estrón-3-Ν,Ν-dimetylsulfamátom.
Obdobný postup ako v príklade 4 bol použitý pri preinkubácii buniek MCF-7 a estrón-sulfamátom a s estrón-3-N,N-dimetylsulfamátom.
Intaktné monomolekuláme vrstvy (buniek) boli najskôr inkubované počas 2 hodín pri 37 °C s 0,1 μΜ estrón-3-sulfamátom, estrón-3-N,N-dimetylsulfamátom alebo len s médiom (kontrola). Bunky potom boli z média odsaté a trikrát premyté 5 ml média. Potom boli resuspendované a inkubované 3 až 4 hodiny v médiu, ktoré obsahovalo 5 pmol (7 x 105 dpm) [6,7'3H]-estrón-3-sulfátu. Ďalší postup bol zhodný s postupom opísaným v príkladoch 3 a 4.
SK 282186 Β6
Údaje o účinkoch estrón-3-sulfamátu a estrón-3-Ν,Ν-dimetylsulfamátu sú uvedené v tabuľke III rovnakým spôsobom, akým bola spracovaná tabuľka I.
Tabuľka III
Aktivita steroidnej sulfatázy v bunkách MCF-7, preinkubovaných s estrón-3-sulfamátmi
Preinkubácia aktivita steroid. sulfatázy π (fmol/20h/106 buniek) % inhibície (% redukcie voči kontrole)
kontrola 65,4 ±6,4 -
estrón-3-sulfamát 1,7 ±0,2*** 97,4
estrón-3-N,N-dimetylsulfamát 53,1 ±3,4* 18,8
π je udané ± 1 S.D. n = 3 *p<0,05 ***p<0,001
Príklad 7
Inhibícia aktivity steroidnej sulfatázy v mikrozómoch placenty účinkom estrón-3-sulfamátu
Ľudské placenty z normálne donosených tehotenstiev (z pôrodného oddelenia St. Mary's Hospital, Londýn) boli dôkladne rozstrihané nožnicami, premyté studeným fosfátovým pufrom (pH 7,4, 50 mM) a potom resuspendované v studenom fosfátovom pufri v pomere 5 ml/g tkaniva. Homogenizácia na Ultra Turrax homogenizéri bola vykonaná trikrát počas 10 sekúnd oddelených dvojminútovým ochladením v ľade. Jadrá a bunkové trosky boli odstránené centrifugáciou pri 4 °C a 2000 g počas 30 minút; supematant rozdelený na 2 ml dávky bol potom uchovávaný pri -20 °C. Koncentrácia bielkovín v ňom bola stanovená metódou podľa Bradforda (Anál. Biochem. 72, 248 - 254,1976).
Pri inkubáciách (v objeme 1 ml) bola používaná koncentrácia bielkovín 100 pg/ml, ako substrát 20 pM [6,73H]estrón-3-sulfát so špecifickou aktivitou 60 Ci/mmol (z New England Nuclear, Boston, Mass., USA) a čas inkubácie 20 minút pri 37 °C. Estrón-3-sulfamát bol pridávaný v ôsmich koncentráciách: 0 (t. j. kontrola), 0,05 pM, 0,1 pM, 0,2 pM, 0,4 pM, 0,6 pM, 0,8 pM a 1,0 pM. Po skončení inkubácie bola každá vzorka ochladená a 1 ml média bol napipetovaný do jednotlivých skúmaviek, obsahujúcich [l4C]estrón (7 x 103 dpm) so špecifickou aktivitou 97 Ci/mmol (z Amersham Intemational Radiochemical Centre, Amersham, Veľká Británia). Reakčná zmes bola počas 30 sekúnd poriadne pretrepaná s 5 ml toluénu. Pokusy ukázali, že z vodnej fázy bolo týmto postupom odstránených 90 % [l4C]estrónu a < 0,1 % [3H]estrón-3-sulfátu. 2 ml organickej fázy boli odobrané a odparené na stanovenie obsahu 3H a 14C vo zvyšnej časti pomocou scintilačnej spektrometrie. Množstvo hydrolyzovaného estrón-3-sulfátu bolo zistené výpočtom na základe zmeranej rádioaktivity 3H (korigované vzhľadom na množstvo média, použitú organickú fázu a výťažok pridaného [14C]estrónu) a špecifickej aktivity substrátu.
Údaje o účinkoch estrón-3-sulfamátu sú uvedené v tabuľke IV a na obr. č. 5. Údaje o aktivite steroidnej sulfatázy sú v tabuľke IV vyjadrené množstvom celkového produktu (estrón a estradiol), vzniknutým počas inkubačného času a percentom inhibície voči kontrole, inkubovanej v neprítomnosti estrón-3-sulfamátu. Na obr. č. 5 je aktivita steroidnej sulfatázy vyjadrená percentom jej inhibície v závislosti od koncentrácie estrón-3-sulfamátu a ďalej je tu uvedená hodnota IC5o tejto látky, rovnajúca sa 0,07 pM (t. j. koncentrácia, ktorá vyvolá 50 % inhibíciu reakcie).
Tabuľka IV
Aktivita steroidnej sulfatázy v mikrozómoch placenty za prítomnosti estrón-3-sulfamátu
koncentrácia estrón-3sulfamátu aktivita steroid. sulfatázy π (pmol/hod/0,1 mg bielk.) % inhibície (% redukcie voči kontrole)
0 (kontrola) 768,6 -
0,05 μΜ 430,4 44,0
0,1 μΜ 305,9 60,2
0,2 μΜ 140,0 81,8
0,4 μΜ 83,3 89,2
0,6 μΜ 61,8 92,0
0,8 μΜ 49,2 93,6
1,0 μΜ 51,6 93,3
π je priemerom dvoch meraní
Príklad 8
Inhibícia aktivity steroidnej sulfatázy v jadrových mikrozómoch potkanov, ktorým bol podkožné podávaný estrón-3-sulfamát
Štyrom skupinám po troch samiciach potkanov kmeňa Wistar s hmotnosťou 80 až 110 g bolo počas siedmich dní raz denne podkožné podávaných 100 pl jednej z nasledujúcich látok (ako vehikulum bol použitý propylénglykol):
propylén glykol (kontrola vehikula), estrón-3-sulfamát 10 mg/kg/deň, estrón-3-sulfát (10 mg/kg/deň, substrátová kontrola), estrón-3-sulfát a estrón-3-sulfamát (á 10 mg/kg/deň).
Ôsmy deň boli všetky zvieratá zabité a bola im odobraná pečeň. Príprava pečeňových mikrozómov bola rovnaká ako postup opísaný v príklade č. 6 (okrem toho, že išlo o potkaniu pečeň), v duplicitnom stanovení aktivity steroidnej sulfatázy však bol použitý [6,7'3]estrón-3-sulfát a [7’3H]dehydroepiandrosteron-3-sulfát ako separačné substráty.
Údaje o aktivite steroidnej sulfatázy sú uvedené v tabuľke V a sú vyjadrené ako celkový produkt vzniknutý počas inkubačného času vo forme priemeru ± 1 S. D. Výsledky inkubácií v skupinách, ktorým bol podávaný estrón-3 sulfamát, sú vyjadrené tiež percentom inhibície aktivity steroidnej sulfatázy vzhľadom na príslušné kontroly.
Tabuľka V
Aktivita steroidnej sulfatázy v potkaních pečeňových mikrozómoch po subkutánnom podaní estrón-3-sulfamátu
skupina substrát aktivita steroid. sulfatázy π nmol/30 min/200 pg % inhibície voči kontrole
kontrola (vehi- ErS 20,95 ±0,2 -
kulum) ErSO3NH2 E,-S 0,34 ±0,1 *** 98,4
kontrola (E,-S) E,-S 20,6 ± 0,4 -
ErS+ErSOjNHz ErS 0,21 ± 0,03 *** 99,0
kontrola (vehi- DHA-S 1,73 ±0,4 -
kulum) ErSO3NH2 DHA-S 0,1 ±0,01 *** 94,2
kontrola (E,-S) DHA-S 1,71 ±0,1 -
EpS+Ej-SOjNHj DHA-S 0,09 ±0,01 *** 94,7
π je udané ± 1 S.D. n = 3 ***ρ<0,001π
ErS = estrón-3-sulfamát
DHA-S = dehydroepiandrosteron-3-sulfamát ErSO3NH2 = estrón-3-N,N-dimetylsulfamát

Claims (13)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Použitie zlúčeniny na výrobu liečiva na inhibíciu aktivity steroidnej sulfatázy, ktorá obsahuje kruhový systém obsahujúci kruh, ku ktorému jc pripojená sulfamátová skupina vzorca o
    kde každý z R* a R2 je nezávisle zvolený zo skupiny zahŕňajúcej atóm vodíka, alkyl, alkenyl, cykloalkyl a aryl alebo spoločne predstavujú alkylén, obsahujúci buď jeden alebo viac heteroatómov, alebo skupín v alkylénovom reťazci a kde, je zlúčenina inhibítorom enzýmu s aktivitou steroidnej sulfatázy (E.C.3.1.6.2) a kde ak by bola sulfamátová skupina nahradená v zlúčenine sulfátovou skupinou na vytvorenie sulfátovej zlúčeniny a inkubovaná s enzýmom steroidnou sulfatázou (E.C.3.1.6.2.) pri pH 7,4 a teplote 37 °C, získala by sa hodnota K„, menšia ako 50 gmol.
  2. 2. Použitie podľa nároku 1, kde zlúčeninou je zlúčenina vzorca o
    o polycyWický systém , kde R1 a R2 znamenajú substituenty definované v nároku 1.
  3. 3. Použitie podľa nároku 2, kde skupina označovaná ako polycyklický systém je zvyšok polycyklického alkoholu.
  4. 4. Použitie podľa nároku 2 alebo 3, kde skupina označovaná ako polycyklický systém znamená sterolový zvyšok.
  5. 5. Použitie podľa nároku 4, kde sterolom je 3-sterol.
  6. 6. Použitie podľa nároku 4 alebo 5, kde sterol je zvolený zo skupiny zahŕňajúcej estrón, dehydroepiandrosteróny, substituované estróny a substituované dehydroepiandrosteróny.
  7. 7. Použitie podľa ktoréhokoľvek nároku 1 až 6, kde R1 a R2 znamenajú nezávisle atóm vodíka alebo CrC10 alkyl.
  8. 8. Použitie podľa ktoréhokoľvek nároku 1 až 7, kde R1 až R2 znamenajú nezávisle atóm vodíka alebo CrC5 alkyl.
  9. 9. Použitie podľa ktoréhokoľvek nároku 1 až 8, kde R1 až R2 znamenajú nezávisle atóm vodíka alebo metyl.
  10. 10. Použitie podľa ktoréhokoľvek nároku 1 až 9, kde zlúčeninou je ktorákoľvek zlúčenina zo skupiny estrón-3-sulfamát, estrón-3-N,N-dimetylsulfamát, estrón-3-N-monometylsulfamát.
  11. 11. Použitie podľa ktoréhokoľvek nároku 1 až 10, kde najmenej jeden z R* a R2 je atóm vodíka.
  12. 12. Použitie podľa ktoréhokoľvek nároku 1 až 11, kde R1 je atóm vodíka a R2 je atóm vodíka.
  13. 13. Použitie zlúčeniny na výrobu liečiva na inhibíciu aktivity steroidnej sulfatázy, kde zlúčeninou je sulfamátový ester polycyklického alkoholu, alebo N-alkylový, N-alkenylový, N-cykloalkylový alebo N-arylový derivát tohto esteru, alebo farmaceutický prijateľná soľ ktoréhokoľvek takéhoto esteru alebo N-substituovaného esteru, pričom alkoholová súčasť esteru je zvyšok polycyklického alkoholu, ktorého sulfát je hydrolyzovateľný enzýmami s aktivitou steroidnej sulfatázy (E.C 3.1.6.2).
SK246-94A 1991-08-29 1992-08-28 Použitie purifikovanej zlúčeniny na výrobu liečiva na inhibíciu aktivity steroidnej sulfatázy SK282186B6 (sk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB919118478A GB9118478D0 (en) 1991-08-29 1991-08-29 Steroid sulphatase inhibitors
PCT/GB1992/001587 WO1993005064A1 (en) 1991-08-29 1992-08-28 Steroid sulphatase inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SK24694A3 SK24694A3 (en) 1994-11-09
SK282186B6 true SK282186B6 (sk) 2001-12-03

Family

ID=10700604

Family Applications (4)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK1254-2000A SK282189B6 (sk) 1991-08-29 1992-08-28 Farmaceutický prostriedok s obsahom purifikovanej zlúčeniny
SK1252-2000A SK282187B6 (sk) 1991-08-29 1992-08-28 Použitie zlúčeniny s cyklickým systémom
SK1253-2000A SK282188B6 (sk) 1991-08-29 1992-08-28 Purifikovaná zlúčenina
SK246-94A SK282186B6 (sk) 1991-08-29 1992-08-28 Použitie purifikovanej zlúčeniny na výrobu liečiva na inhibíciu aktivity steroidnej sulfatázy

Family Applications Before (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK1254-2000A SK282189B6 (sk) 1991-08-29 1992-08-28 Farmaceutický prostriedok s obsahom purifikovanej zlúčeniny
SK1252-2000A SK282187B6 (sk) 1991-08-29 1992-08-28 Použitie zlúčeniny s cyklickým systémom
SK1253-2000A SK282188B6 (sk) 1991-08-29 1992-08-28 Purifikovaná zlúčenina

Country Status (26)

Country Link
US (3) US5616574A (sk)
EP (6) EP1099706B1 (sk)
JP (6) JP3219408B2 (sk)
KR (4) KR100258396B1 (sk)
AT (5) ATE194843T1 (sk)
AU (2) AU689043B2 (sk)
BR (1) BR9206434A (sk)
CA (4) CA2305749A1 (sk)
CY (4) CY2253B1 (sk)
CZ (1) CZ295939B6 (sk)
DE (5) DE69233020T2 (sk)
DK (4) DK0921130T3 (sk)
ES (4) ES2193475T3 (sk)
FI (5) FI940903A (sk)
GB (1) GB9118478D0 (sk)
GE (6) GEP20022766B (sk)
GR (1) GR3034579T3 (sk)
HK (3) HK1020672A1 (sk)
HU (1) HUT66097A (sk)
LV (1) LV12618B (sk)
NO (6) NO307301B1 (sk)
RU (4) RU2001125673A (sk)
SG (7) SG88783A1 (sk)
SK (4) SK282189B6 (sk)
UA (4) UA41875C2 (sk)
WO (1) WO1993005064A1 (sk)

Families Citing this family (72)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9118478D0 (en) * 1991-08-29 1991-10-16 Imperial College Steroid sulphatase inhibitors
GB9604709D0 (en) * 1996-03-05 1996-05-01 Imperial College A compound
US6476011B1 (en) 1991-08-28 2002-11-05 Sterix Limited Methods for introducing an estrogenic compound
US6011024A (en) * 1991-08-28 2000-01-04 Imperial College Of Science Technology & Medicine Steroid sulphatase inhibitors
GB9625334D0 (en) * 1996-12-05 1997-01-22 Imperial College Compound
GB9603325D0 (en) * 1996-02-16 1996-04-17 Imperial College A compound
US6903084B2 (en) * 1991-08-29 2005-06-07 Sterix Limited Steroid sulphatase inhibitors
WO1995026717A1 (en) * 1994-04-05 1995-10-12 Celltech Therapeutics Limited Use of estrone derivatives as steroid sulphatase inhibitors
DE4447714C2 (de) * 1994-08-09 1998-02-05 Jenapharm Gmbh Verwendung von Estra-1,3,5(10)-trien-Derivaten zur Hormonsubstitutions-Therapie
DE4429397C2 (de) * 1994-08-09 2003-11-20 Jenapharm Gmbh Estra-1,3,5(10)-trien-Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende pharmazeutische Zusammensetzungen
GB9422777D0 (en) * 1994-11-11 1995-01-04 Imperial College Assay
US5571933A (en) * 1994-11-17 1996-11-05 Duquesne University Of The Holy Ghost Derivatives of estra 1,3,5(10)triene-17-one, 3-amino compounds and their use
US5705495A (en) * 1995-10-19 1998-01-06 Jenapharm Gmbh & Co. Kg. Sulfamate derivatives of 1,3,5(10)-estratriene derivatives, methods for their production and pharmaceuticals containing these compounds
US6921776B1 (en) 1996-02-16 2005-07-26 Sterix Limited Compound
US6506792B1 (en) 1997-03-04 2003-01-14 Sterix Limited Compounds that inhibit oestrone sulphatase and/or aromatase and methods for making and using
ATE286038T1 (de) * 1996-03-05 2005-01-15 Sterix Ltd Verbindungen mit sulfonsäure-amidgruppe
KR20000035979A (ko) * 1996-09-12 2000-06-26 야마구찌 다까시 3-치환-ｄ-호모-1,3,5(10)-에스트라트리엔 유도체
US6642220B1 (en) 1996-12-05 2003-11-04 Sterix Limited Compounds that inhibit oestrone sulphatase; compositions thereof; and methods employing the same
US20040127473A1 (en) * 1996-12-05 2004-07-01 Reed Michael John Compound
WO1999064013A1 (en) * 1998-06-10 1999-12-16 Sterix Limited Pharmaceutical composition with tumor necrosis factor a and 2-methoxyestrone-3-o-sulphamate for inhibition of estrone sulphatase
US5763432A (en) * 1997-01-29 1998-06-09 Sri International Steriod inhibitors of estrone sulfatase and associated pharmaceutical compositions and methods of use
DE19712488A1 (de) 1997-03-25 1998-10-01 Knoell Hans Forschung Ev Steroidsulfamate, Verfahren zu ihrer Herstellung und Anwendung derselben
GB9708716D0 (en) * 1997-04-29 1997-06-18 Imperial College Chronic heart failure
US6376687B1 (en) 1997-07-18 2002-04-23 Duquesne University Of The Holy Ghost Steroid sulfatase inhibitors and methods for making and using the same
US5880115A (en) * 1997-07-18 1999-03-09 Duquesne University Of The Holy Ghost Steroid sulfatase inhibitors and methods for making and using the same
US6288050B1 (en) 1997-07-18 2001-09-11 Duquesne University Of The Holy Ghost Steroid sulfatase inhibitors and methods for making and using the same
GB2331988B (en) 1997-12-04 2003-04-16 Imperial College Polycyclic sulphamate inhibitors or oestrone sulphatase
GB2331987B (en) * 1997-12-04 2002-11-27 Imperial College Polycyclic sulphamate inhibitors of oestrone sulphatase
US6046186A (en) * 1997-12-24 2000-04-04 Sri International Estrone sulfamate inhibitors of estrone sulfatase, and associated pharmaceutical compositions and methods of use
GB9807779D0 (en) 1998-04-09 1998-06-10 Ciba Geigy Ag Organic compounds
DE69942578D1 (de) 1998-05-22 2010-08-26 Univ R Bifunktionelle moleküle sowie darauf basierende therapien.
US6248780B1 (en) 1998-10-01 2001-06-19 Duquesne University Of The Holy Ghost Compounds for the treatment of estrogen-dependent illnesses and methods for making and using the same
US6667299B1 (en) 2000-03-16 2003-12-23 Hollis-Eden Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compositions and treatment methods
WO2000053620A1 (fr) * 1999-03-10 2000-09-14 Nippon Organon K. K. Nouveaux derives d'oestradiol
JP2000309599A (ja) 1999-04-13 2000-11-07 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd エストラ−１，３，５（１０），１６−テトラエン誘導体
US7078395B1 (en) 1999-06-16 2006-07-18 Sterix Limited Methods for treating or preventing cancer by preventing, inhibiting or arresting cell cycling
IL145995A0 (en) 1999-04-30 2002-07-25 Sterix Ltd Use
AU2005225148B2 (en) * 1999-04-30 2008-04-03 Sterix Limited Use
GB9913536D0 (en) * 1999-06-10 1999-08-11 Sterix Ltd Use
US6583130B1 (en) 1999-09-13 2003-06-24 Schering Ag C13-substituted estra-1,3,5,(10)-trien-3-yl sulfamates, methods of preparing same, and pharmaceutical compositions containing these compounds
DK1237902T3 (da) * 1999-12-13 2006-03-06 Sterix Ltd Halogenerede sulphamat-, fosfonat-, thiofosfonat-, sulfonat- og sulfonamidforbindelser som hæmmere af steroid sulfatase
US7335650B2 (en) 2000-01-14 2008-02-26 Sterix Limited Composition
EP1284272A4 (en) * 2000-04-24 2003-09-10 Kyowa Hakko Kogyo Kk Estra-1,3,5 (10) -triene
DE10027887A1 (de) * 2000-05-31 2001-12-13 Jenapharm Gmbh Verbindungen mit einer Sulfonamidgruppe und diese Verbindungen enthaltende pharmazeutische Zusammensetzungen
GB0020498D0 (en) * 2000-08-18 2000-10-11 Sterix Ltd Compound
EP1406634A1 (en) 2001-07-13 2004-04-14 Schering Aktiengesellschaft Combination of drospirenone and an estrogen sulphamate for hrt
EP1554572B1 (en) 2001-07-25 2009-10-14 Raptor Pharmaceutical Inc. Compositions and methods for modulating blood-brain barrier transport
US8026229B2 (en) 2001-08-13 2011-09-27 Sterix Limited Antitumor-active 2-alkoxyestradiol sulfamates
DE10139494A1 (de) * 2001-08-13 2003-03-06 Jenapharm Gmbh Antitumor wirksame 2-Alkoxyestradiolsulfamate
WO2003033518A1 (en) * 2001-10-18 2003-04-24 Sterix Limited Steroidal compounds for inhibiting steroid sulphatase
CA2463227C (en) 2001-10-18 2010-08-10 Sterix Limited Steroidal compounds for inhibiting steroid sulphotase
US20040254241A1 (en) * 2002-08-28 2004-12-16 Yoji Ino Aryl sulfamate derivatives
AU2003272964A1 (en) * 2002-10-09 2004-05-04 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Remedy for hormone-dependent cancer
DE10307104A1 (de) * 2003-02-19 2004-09-23 Schering Ag Antitumor wirksame 2-substituierte Estra-1,3,5(10)-trien-3-yl sulfamate
DE10307103A1 (de) * 2003-02-19 2004-09-09 Schering Ag Antitumor wirksame 2-substituierte D-Homostra-1,3,5(10)-trien-3-yl sulfamate
DE10307105A1 (de) * 2003-02-19 2004-09-09 Schering Ag Antitumor wirksame 2-substituierte 18a-Homoestra-1,3,5(10)-trien-3-yl sulfamate
DK1644350T3 (da) * 2003-05-16 2009-11-23 Theramex Sullfamatbenzothiophenderivater som steroidsulfataseinhibitorer
CA2526540C (en) 2003-05-21 2012-04-10 Aska Pharmaceutical Co., Ltd. Cyclicamino-phenyl sulfamate derivatives
US7534780B2 (en) 2004-05-21 2009-05-19 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Estradiol prodrugs
GB0412492D0 (en) 2004-06-04 2004-07-07 Sterix Ltd Compound
EP3827747A1 (en) 2005-04-28 2021-06-02 Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. Pharma-informatics system
US8030298B2 (en) 2005-05-26 2011-10-04 Abbott Products Gmbh 17β-HSD1 and STS inhibitors
GB0511190D0 (en) * 2005-06-01 2005-07-06 Sterix Ltd Use
US9062126B2 (en) 2005-09-16 2015-06-23 Raptor Pharmaceuticals Inc. Compositions comprising receptor-associated protein (RAP) variants specific for CR-containing proteins and uses thereof
GB0624105D0 (en) * 2006-12-01 2007-01-10 Sterix Ltd Use
GB0706072D0 (en) 2007-03-28 2007-05-09 Sterix Ltd Compound
JP5543920B2 (ja) 2007-09-17 2014-07-09 プレグレム エスアー 閉経前の女性におけるエストロゲン依存症状の治療
EP2149371A1 (en) * 2008-07-28 2010-02-03 PregLem S.A. Use of steroid sulfatase inhibitors for the treatment of preterm labor
NZ616673A (en) 2009-02-20 2014-08-29 To Bbb Holding B V Glutathione-based drug delivery system
ES2942923T3 (es) 2009-05-06 2023-06-07 Laboratory Skin Care Inc Composiciones de administración dérmica que comprenden complejos de agente activo-partículas de fosfato de calcio y métodos de uso de las mismas
GB0914767D0 (en) 2009-08-24 2009-09-30 Sterix Ltd Compound
CN110974840A (zh) * 2019-12-27 2020-04-10 天津市肿瘤医院 一种类固醇硫酸酯酶抑制剂及其药物用途

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE114806C (sk) *
DE1593846A1 (de) * 1967-01-28 1971-02-25 Hoechst Ag Verfahren zur Herstellung von Sulfamidsaeure-arylestern
US3647738A (en) * 1970-11-03 1972-03-07 Union Carbide Corp Alpha-olefin polymer compositions
GB1398026A (en) * 1972-11-10 1975-06-18 Jenapharm Veb Steroid esters
DE2418217A1 (de) * 1974-04-13 1975-11-06 Hoechst Ag Sulfamidsaeureester und verfahren zu ihrer herstellung
DD114806A1 (sk) * 1974-10-11 1975-08-20
US4937237A (en) * 1988-12-23 1990-06-26 Smithkline Beckman Corporation Phosphinic acid substituted aromatic steroids as inhibitors of steroid 5-60 -reductase
PT94305B (pt) * 1989-06-12 1997-02-28 Robins Co Inc A H Processo para a preparacao de compostos tendo um ou mais radicais aminossulfoniloxi uteis como produtos farmaceuticos
GB9003939D0 (en) * 1990-02-21 1990-04-18 Imperial College Sulphatase inhibitors
GB9118478D0 (en) * 1991-08-29 1991-10-16 Imperial College Steroid sulphatase inhibitors
GB9603325D0 (en) * 1996-02-16 1996-04-17 Imperial College A compound
GB9625334D0 (en) * 1996-12-05 1997-01-22 Imperial College Compound
GB9118465D0 (en) * 1991-08-29 1991-10-16 Imperial College Steroid sulphatase inhibitors
US5571933A (en) * 1994-11-17 1996-11-05 Duquesne University Of The Holy Ghost Derivatives of estra 1,3,5(10)triene-17-one, 3-amino compounds and their use
ATE286038T1 (de) * 1996-03-05 2005-01-15 Sterix Ltd Verbindungen mit sulfonsäure-amidgruppe
US5880115A (en) * 1997-07-18 1999-03-09 Duquesne University Of The Holy Ghost Steroid sulfatase inhibitors and methods for making and using the same

Also Published As

Publication number Publication date
NO995075L (no) 1994-04-29
GEP20022803B (en) 2002-09-25
DK0928609T3 (da) 2003-07-21
EP0982032A3 (en) 2002-03-20
DE69233020T2 (de) 2003-11-06
DE69231280T2 (de) 2000-11-30
GEP20022766B (en) 2002-08-26
NO940635L (sk) 1994-04-29
SG106116A1 (en) 2004-09-30
DE69233020D1 (de) 2003-05-22
UA41875C2 (uk) 2001-10-15
ATE194843T1 (de) 2000-08-15
ES2148178T3 (es) 2000-10-16
RU2001125673A (ru) 2003-06-27
AU1007799A (en) 1999-03-04
SK282188B6 (sk) 2001-12-03
ATE239753T1 (de) 2003-05-15
RU94019334A (ru) 1996-10-20
UA70958C2 (uk) 2004-11-15
RU2210574C2 (ru) 2003-08-20
ATE278704T1 (de) 2004-10-15
SK24694A3 (en) 1994-11-09
NO995076L (no) 1994-04-29
AU2490592A (en) 1993-04-05
CY2394B1 (en) 2004-09-10
JP3581802B2 (ja) 2004-10-27
UA70957C2 (uk) 2004-11-15
NO307301B1 (no) 2000-03-13
LV12618A (en) 2001-02-20
NO20025725L (no) 1994-04-29
EP1522543A1 (en) 2005-04-13
NO308774B1 (no) 2000-10-30
ATE237333T1 (de) 2003-05-15
NO995075D0 (no) 1999-10-18
US6159960A (en) 2000-12-12
FI940903A (fi) 1994-04-20
EP0928609A2 (en) 1999-07-14
DE69233149T2 (de) 2004-06-24
DK0982032T3 (da) 2003-11-03
SK282187B6 (sk) 2001-12-03
JP3581820B2 (ja) 2004-10-27
RU2182152C2 (ru) 2002-05-10
DE69233053T2 (de) 2003-11-20
CZ295939B6 (cs) 2005-12-14
FI20002261A (fi) 2000-10-13
JP3219408B2 (ja) 2001-10-15
NO20025725D0 (no) 2002-11-28
CA2305758A1 (en) 1993-03-18
RU2207134C2 (ru) 2003-06-27
ES2196483T3 (es) 2003-12-16
JPH07501515A (ja) 1995-02-16
GR3034579T3 (en) 2001-01-31
FI20002259A (fi) 2000-10-13
UA70956C2 (uk) 2004-11-15
SG88782A1 (en) 2002-05-21
SG103820A1 (en) 2004-05-26
NO940635D0 (no) 1994-02-24
GEP20033094B (en) 2003-10-27
CY2397B1 (en) 2004-09-10
EP0928609A3 (en) 2001-11-07
DE69233431T2 (de) 2006-02-23
NO2595A (no) 1994-04-29
NO20002595D0 (no) 2000-05-19
EP1099706A2 (en) 2001-05-16
HK1025051A1 (en) 2000-11-03
JP2000038341A (ja) 2000-02-08
AU668882B2 (en) 1996-05-23
NO308903B1 (no) 2000-11-13
ES2204059T3 (es) 2004-04-16
KR100321019B1 (ko) 2002-03-20
CY2253B1 (en) 2003-07-04
JP2000355542A (ja) 2000-12-26
EP0641355A1 (en) 1995-03-08
DE69233053D1 (de) 2003-06-12
HK1019753A1 (en) 2000-02-25
CA2305749A1 (en) 1993-03-18
EP1099706A3 (en) 2002-09-04
SG103374A1 (en) 2004-04-29
GEP20063773B (en) 2006-03-27
FI940903A0 (fi) 1994-02-25
NO20044458L (no) 1994-04-29
NO314287B1 (no) 2003-03-03
LV12618B (en) 2001-07-20
AU689043B2 (en) 1998-03-19
KR100322650B1 (ko) 2002-03-20
WO1993005064A1 (en) 1993-03-18
NO995076D0 (no) 1999-10-18
US5616574A (en) 1997-04-01
JP2000355598A (ja) 2000-12-26
BR9206434A (pt) 1994-09-27
HU9400583D0 (en) 1994-05-30
SK282189B6 (sk) 2001-12-03
AU717116B2 (en) 2000-03-16
CA2305767A1 (en) 1993-03-18
CA2114630C (en) 2003-09-30
NO318009B1 (no) 2005-01-17
EP1099706B1 (en) 2004-10-06
DK0921130T3 (da) 2003-07-21
GEP20022802B (en) 2002-09-25
FI20050991A (fi) 2005-10-03
JP3581821B2 (ja) 2004-10-27
JP2002255993A (ja) 2002-09-11
EP0982032B1 (en) 2003-08-06
SG115508A1 (en) 2005-10-28
ATE246706T1 (de) 2003-08-15
CY2398B1 (en) 2004-09-10
HK1020672A1 (en) 2000-05-19
CA2114630A1 (en) 1993-03-18
EP0641355B1 (en) 2000-07-19
DE69233431D1 (de) 2004-11-11
DK0641355T3 (da) 2000-10-09
EP0921130B1 (en) 2003-05-07
FI20002260A (fi) 2000-10-13
DE69231280D1 (de) 2000-08-24
SG73391A1 (en) 2006-08-30
JP2003176297A (ja) 2003-06-24
EP0921130A3 (en) 2001-09-05
SG88783A1 (en) 2002-05-21
GB9118478D0 (en) 1991-10-16
KR100258396B1 (ko) 2000-08-01
EP0982032A2 (en) 2000-03-01
HUT66097A (en) 1994-09-28
EP0921130A2 (en) 1999-06-09
ES2193475T3 (es) 2003-11-01
US5830886A (en) 1998-11-03
CZ44094A3 (en) 1995-01-18
GEP20022637B (en) 2002-02-25
DE69233149D1 (de) 2003-09-11
EP0928609B1 (en) 2003-04-16
KR100321018B1 (ko) 2002-03-20
AU5837396A (en) 1996-09-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SK282186B6 (sk) Použitie purifikovanej zlúčeniny na výrobu liečiva na inhibíciu aktivity steroidnej sulfatázy
US20020177619A1 (en) Steroid sulphatase inhibitors
US7968561B2 (en) Steroidal compounds as steroid sulphatase inhibitors
AU668882C (en) Steroid sulphatase inhibitors
AU726811B2 (en) Steroid sulphatase inhibitors
AU723707B2 (en) Steroid sulphatase inhibitors