SK279750B6 - Vysoko čistený, proti vírusu zabezpečený prípravok - Google Patents

Vysoko čistený, proti vírusu zabezpečený prípravok Download PDF

Info

Publication number
SK279750B6
SK279750B6 SK391-93A SK39193A SK279750B6 SK 279750 B6 SK279750 B6 SK 279750B6 SK 39193 A SK39193 A SK 39193A SK 279750 B6 SK279750 B6 SK 279750B6
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
factor viii
surfactant
chromatographic purification
treatment
preparation
Prior art date
Application number
SK391-93A
Other languages
English (en)
Other versions
SK39193A3 (en
Inventor
Johann Eibl
Friedrich Elsinger
Herbert Gritsch
Yendra Linnau
Otto Schwarz
Peter Turecek
G�Nther W�Ber
Original Assignee
Immuno Aktiengesellschaft
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=3501200&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=SK279750(B6) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Immuno Aktiengesellschaft filed Critical Immuno Aktiengesellschaft
Publication of SK39193A3 publication Critical patent/SK39193A3/sk
Publication of SK279750B6 publication Critical patent/SK279750B6/sk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
    • C07K14/755—Factors VIII, e.g. factor VIII C (AHF), factor VIII Ag (VWF)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
    • Y10S530/829—Blood
    • Y10S530/83—Plasma; serum
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
    • Y10S530/829—Blood
    • Y10S530/83—Plasma; serum
    • Y10S530/831—Cohn fractions

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Description

Oblasť techniky
Vynález sa týka vysoko čisteného proti vírusom zabezpečeného prípravku faktora VIII zrážania krvi a spôsobu jeho výroby.
Doterajší stav techniky
Zrážanie krvi prebieha celým radom po sebe idúcich reakcií rôznych proteínov, príp. enzýmov. Dôsledkom nedostatku faktorov zrážania krvi je nedostatočná tvorba fibrínu z fibrinogénu, a tým zabránenie zatvárania jaziev, následkom čoho sú krvácania Jedným takýmto prípadom je hemofília A. Táto je najrozšírenejšou krvnou chorobou a je vyvolaná nedostatkom faktora VIII. Faktor VIII sa vyskytuje v plazme spolu s von Willebrandovým faktorom (vWF) ako nekovalcntne viazaný komplex (FVIII/vWF). Proteíny FVIII a vWF, ako i komplex FVIII/vWF sa používajú na substitučné ošetrovanie hemofilikov. Na zodpovedajúce farmaceutické preparáty sú kladené vysoké požiadavky, pokiaľ ide o účinnosť a bezpečnosť.
Východiskovým materiálom výroby preparátov je väčšinou ľudská plazma, ktorá však obsahuje faktor VIII len v malých množstvách (asi 0,1 až 0,2 j'g/ml). Na získanie faktora VIII sa musí spracovať nielen veľké množstvo plazmy, ale musia sa tiež oddeliť rušivé sprievodné proteíny tak, ako je to len možné, pričom mnoho týchto proteinov má podobné fyzikálno-chemické vlastnosti.
Ďalší problém spočíva v tom, že preparát je nutné ešte inaktivovať vzhľadom na infekčné agensy, pretože východiskový materiál môže obsahovať napr. vírus žltačky. K tomu ešte pristupuje skutočnosť, že každý krok spôsobu a každá inaktivácia sa musí vykonávať tak, že biologická aktivita požadovaných faktorov zrážania zostane pokiaľ možno zachovaná
Pri klasických metódach výroby sa vykonávajú postupné zrážania (napr. kryozrážanie alebo koagulácia prídavkom síranu amónneho), ktorých účelom je odstránenie nečistôt, ako sú faktory protrombínového komplexu, fibrinogén a fibronektín. Čistota získaného koncentrátu faktora VIII leží približne pri 1 j/mg proteínu a obvykle nepresahuje hranice 10 - 20 j/mg proteínu.
Z EP - A - 0378208 je známy spôsob výroby faktora VIII, podľa ktorého sa roztok kryoprecipitátu spracuje s organickým rozpúšťadlom (tri(n-butyl)fosfót (TNBP)) za prítomnosti činidla, sprostredkujúceho rozpúšťanie - TweenR80 na inaktiváciu vírusu. Faktor VIII sa potom podrobí dvojstupňovému čisteniu vylučovaním, lyofilizuje a zahrieva v suchom stave.
Spracovanie biologických a farmaceutických produktov 0,25 až 10 % hmotn. nedenaturujúcich amfifilov (detergentov) je opísaný v EP - B - 0050061.
Spôsob spracovania proteínov organickými rozpúšťadlami, prípadne za prítomnosti detergentov, je známy z EP B - 0131740. Tuje ukázané, že spracovanie s detergentom samotným je vzhľadom na inaktiváciu vírusu relatívne neúčinné. Organické rozpúšťadlá pôsobia však len proti membránou obaleným vírusom. Existujú už zmienené infekcie žltačky, ktoré spätne vedú ku koncentrátu hepatídou A kontaminovaného faktora Vili, ktoré sa týmto spôsobom vírusovo inaktivujú. Vírus hepatídy A neobsahuje žiadnu membránu, obsahujúcu lipid, preto nie je takto inaktivovaný (Mannucci, P. M, a spol. (1992 The Lancet 339, 819 Outbreak of hepatitis A among Italian patients with haemophilia).
Spracovanie frakcií, obsahujúcich faktor VIII, organickými rozpúšťadlami sa väčšinou vykonáva tak, že sa toxicky pôsobiace rozpúšťadlo po vykonanom ošetrení musí nákladným spôsobom oddeliť. V EP - A - 0343275 je na tento účel navrhnutá extrakcia frakcií, obsahujúcich faktor VIII olejmi, ako je sójový olej alebo ricínový olej. Potom sa faktor VIII podrobí gélovej permeačnej chromatografii na iónovýmenných materiáloch.
Spôsobom podľa EP - B - 0094611 sa faktor na zníženie infekčnosti zahrieva v suchom stave.
Podľa EP - B - 0159311 sa zahrievajú krvné produkty v pevnom, vlhkom stave na inaktiváciu potenciálne prítomných vírusov. V takomto parou zahriatom koncentráte faktora VIII nie je známy žiadny prípad infekcie (Mannuci, P. M. (1992) Transfúsion 32, 134-138 Tow risk of viral infection after administration of vapor-heated factor VIII concentratcs).
Tepelné spracovanie vysoko čisteného koncentrátu faktora VIII platí ako kritické. K chromatograficky prečistenému faktoru VIII sa musí podľa EP - A - 0173242 napríklad pridávať zmes stabilizátorov (uhľohydrátov a aminokyselín), pred tým, než sa tento zahrieva v roztoku. Inak je bežné podrobiť frakcie, obsahujúce faktor VIII, ešte pred chromatografickým čistením inakti vácii vírusu.
Cieľom vynálezu je nájsť spôsob, podľa ktorého je možné vyrobiť prečistený faktor VIII, ktorý na základe účinného ošetrenia na inaktiváciu vírusu je proti vírusu zabezpečený.
Výhodne by špecifická aktivita vyrobeného preparátu mala byť najmenej 25 j/mg proteínu.
Podstata vynálezu
Vynález túto úlohu rieši v kombinácii nasledujúcich opatrení:
a) chromatografickým čistením frakcie, obsahujúcej faktor VIII,
b) spracovaním faktora VIII tenzidom vo vodnom roztoku pri pomere tenzid/protein od 1 : 1 do 1000 :1 a
c) tepelným spracovaním prípravku faktora VIII v pevnom stave.
Faktor VIII môže byť podľa vynálezu vyrobený ako komplex FVIII/vWF. Počas výrobného postupu sa môže vykonať približne jedno spracovanie na disociáciu komplexu FVIII/vWF, napr. chloridom vápenatým.
Zistilo sa, že spracovanie tenzidom podľa vynálezu prekvapivo môže viesť k úspešnej inaktivácii vírusu. Ako tenzidy môžu byť napríklad použité neiónové tenzidy ako TweenR80, TritonRX-100, TritonRX-114, dodecylmaltozid alebo oktylglukozid, tenzidy s obojakými iónmi ako dimetyloktylamín-N-oxid alebo N-dodecyl-N,N-dimetyl-3-amonio-l-propánsulfonát a iónové tenzidy, ako je desoxycholát sodný alebo cholát sodný. Spracovanie tenzidom sa vykonáva predovšetkým vo vodnom roztoku, ktorý je zbavený organických rozpúšťadiel. Ako vodný roztok sa ponúka roztok na kryozrážanie, ktorý sa prípadne ešte prečistí adsorpciou faktorov protrombínového komplexu. V takomto roztoku bude pomer tenzid/protein prednostne 1 : 1 až 10 : 1.
Spracovanie tenzidom sa výhodne vykonáva chromatografickým čistením, výhodne pri pomere tenzid/protein od 3,5 : 1 do 10 : 1, pričom sa tenzid môže počas chromatografie jednoduchým spôsobom oddeľovať.
V ďalšej forme vykonania je ale tiež možné spracovanie tenzidom počas chromatografie. Tento variant má tú výhodu, že faktor VIII sa bude tiež špecificky adsorbovať za prítomnosti proteinov, majúcich sklon k agregácii a tým k nežiaducej koadsorpcii.
Ak sa vychádza z východiskového materiálu, obsahujúceho faktor VIII s nízkym obsahom proteínu, je často namieste udržiavať vo vodnom roztoku určitú koncentráciu tenzidu. Pomer tenzid/proteín môže tak byť až 1000 : 1.
Bunkový supernatant, ktorý obsahuje faktor VIII, má napríklad obsah proteínu najmenej okolo 100 mg/l. Desaťpercentná koncentrácia tenzidu v tomto kultivačnom supernatante tak zodpovedá pomeru tenzid/proteín, ktorý nie je väčší než asi 1000 : 1.
Na zvýšenie zabezpečenia proti infekcii membránou neobalenými vírusmi je podľa vynálezu navrhnutá kombinácia tepelného spracovania faktora VIII v pevnom stave. Táto môže byť vykonaná na lyofllizovanom preparáte, pričom spracovanie teplom sa vykonáva vo vlhkom stave preparátu.
Výhodná forma vykonania vynálezu zahŕňa tepelné spracovanie horúcou parou, pričom je prípravok faktora VIII v pevnom stave nastavený na obsah vody, metanolu alebo etanolu vyšší než 0,05 (5 % hmotnosti) a menej než 0,70 (70 % hmotnosti), výhodne menej než 0,40 (40 % hmotnosti) a zahrieva sa v uzavretej nádobe, prípadne za prítomnosti interného ochranného plynu, na teplotu v rozsahu 50 až 121 °C.
V lyofilizáte faktora VIII môžu byť obsiahnuté ďalej albumín, prípadne soli ako citrát sodný, prípadne aminokyseliny.
Bolo s prekvapením zistené, že toto tepelné spracovanie nenesie so sebou žiadne podstatné straty aktivity, takže môže tiež byť takto spracovaný relatívne nestabilný, vysoko prečistený faktor VIII.
Počas chromatografického čistenia sa faktor VIII ďalej zbavuje sprievodných proteinov. Výhodná forma spôsobu výroby podľa vynálezu zahŕňa viacstupňové chromatografické čistenie, pričom sa v jednom stupni použije adsorpčný materiál pre faktor VIII a v ďalších stupňoch materiál na adsorpciu znečisťujúcich proteinov.
Môže sa tak použiť najprv aniónovýmenný materiál na adsorpciu faktora VIII, a potom materiál s vysokou afinitou k fibronektínu, ako želatína alebo heparín, imobilizovaný na nerozpustnom nosiči. Tiež tu môže byť výhodná chromatografia za prítomnosti tenzidov na minimalizáciu nešpecifickej adsorpcie faktora VIII na afinitnom nosiči.
Na výrobu albumínu zbaveného faktora VIII (prípravku) sa môže adsorpcia roztoku, obsahujúceho faktor VIII vykonávať na triazíngéli (CibacronR-Blue 3GA, imobilizovaný na nerozpustnom nosiči (fa Bio-Rad); Fractogéč- TSKAF-Blue (fa Merck), Blue-SepharoseR-CL6B (fa Pharmacia).
Tieto typy gélu viažu s vysokou selektivitou albumín, ktorý sa kvantitatívne neoddelí inými metódami od faktora VIII, pokiaľ nie je požadovaný obsah albumínu na stabilizáciu.
Výhodne sa používajú na chromatografické čistenie aniónomeniče, ako sú tie, ktoré sú na báze akiylátov, silikátov alebo uhľohydrátov, ako DEAE-SephadexR (fa Pharmacia), QAE-SepharoseR (fa Pharmacia), DEAE-Toyo-PearlR (fa Tosohaas), TMAE-FractogelR (fa Merck) a podobne.
Aniónomeniče na akrylátovej báze sú výhodne vytvorené ako tentakelmatrice (porov. Miiller W (1990) Journal of Chromatography 510, 133 - 140 New ion exchangers for the chromatography of biopolymers). V takejto matrici sa nachádzajú výmenné skupiny pozdĺž polymérne ho postranného reťazca, ktorý je spojený s povrchom matrice. Z toho vyplýva vysoká kapacita impregnácie a zlepšená selektivita.
Faktor VIII krvného zrážania, ktorý sa vyrobí spôsobom podľa vynálezu, je považovaný za zabezpečený proti vírusu a má výhodne vysokú špecifickú aktivitu najmenej 25 j/mg proteínu.
Vynález bude bližšie vysvetlený v nasledujúcich príkladoch, ktoré ho však nijako neobmedzujú.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1 kg kryozrazeniny, získanej zo 101 litrov plazmy sa rozpustí v 3,5 litroch pufra 1, NaCl - roztoku pufŕovanému tris-lyzínom (85 mmol/1).
Na predčistenie roztoku, obsahujúceho faktor VIII, sa primieša A1(OH)3, oddelí sa A1(OH)3, primieša sa BaSO4 a BaSO4 sa oddelí. Potom sa nastaví hodnota pH supernatantu na 6,5, teplota sa zníži na 4 °C a vzniknutá zrazenina sa oddelí odstredením a odloží.
Pridá sa 110 g TritonuRX-100 na liter supematantu (pomer tenzid/proteín 55 : 1) a 30 minút sa mieša pri 25 °C. Faktor VIII sa potom adsorbuje na 750 ml DEAE-ToyopearlR650 M fý Tosohaas, ekvilibrovaného pufrom 1, v kolóne s priemerom 9 cm.
Frakcia, obsahujúca faktor VIII, sa eluuje z gélu 2,25 litrami pufra 2 (citrátom pufŕovaný 500 mM NaCl - roztok).
Špecifická aktivita je 76 mj. faktora VIII na mg proteínu.
Po vymrazení ultrafiltrovanej frakcie, obsahujúcej faktor VIII, sa faktor VIII zahrieva so 7,5 % hmotn./hmotn. vody v uzatvorenej nádobe 10 hodín na 60 °C. Aktivita faktora VIII je 72 % nezahrievanej vzorky. Tepelné spracovanie za prítomnosti albumínu vedie k aktivite faktora VIII zodpovedajúcej 92 % nezahrievanej vzorky.
Príklad 2 kg kryozrazeniny sa spracuje rovnakým spôsobom ako v príklade 1 -1, j. získa a rozpustí.
Predčistenie sa vykoná A1(OH)3 a BaSO4. K supernatantu sa pridá 120 g Tweenu 80 na liter (pomer tenzid/proteín 4 : 1) a 45 minút sa mieša pri 25 °C. Po zriedení pufrom v pomere 1 : 3 sa roztok chromatograficky prečistí adsorpciou faktora VIII na 400 ml EMD-TM-AE-FractogéluR (fa Merck). Gél sa predtým ekvilibruje pufrom
1. Nenaviazané proteíny sa oddelia pufrom 1, potom sa eluuje frakcia, obsahujúca faktor VIII pufrom 2.
Špecifická aktivita je 45 mj faktora VIII na mg proteínu.
Eluát sa po ultrafiítrácii skoncentruje a suší vymrazením. V uzatvorenej nádobe sa zahrieva faktor VIII za prítomnosti 9,5 % hmotn./hmotn. vody 10 hodín na 60 °C.
Aktivita faktora VIII je 87 % vztiahnuté na nezahrievanú vzorku.
Celkový faktor redukcie vírusu podľa predpisu EC III/8115/89-EN Komisie európskeho spoločenstva sa stanoví na príklade H1V-1 a FSME-vírusu, pričom sa suspenzia vírusu pridáva viackrát počas tohto spôsobu. Celkový faktor redukcie vírusu je najmenej 12. To zodpovedá redukcii teoretického titra vírusu najmenej 1012 v celom spôsobe.
Príklad 3
Prípravok s 3000 mj. faktora VIII podľa príkladu 2 obsahuje 120 j fibronektínu (3960 pg).
Na odstránenie tejto nečistoty sa frakcia, obsahujúca faktor VIII, chromatograficky prečistí s 15 ml stĺpcom heparín-Sepharosy (1,6 cm priemer) s pufrom 260 mM NaCl.
Faktor VIII nie je naviazaný, fibronektín bol vo frakcii, obsahujúcej faktor VIII, nepreukázateľný. Špecifická aktivita bola 46 mj faktora VIII na mg proteínu. Fibronektín môže byť získaný elúciou 750 mM roztokom NaCl.
Príklad 4 kg kryozrazeniny sa získa a rozpustí rovnakým spôsobom ako v príklade 1.
Predčistenie sa vykoná A1(OH)3 a PEG 4000.
Pridá sa 0,15 % A1(OH)3 a 30 minút sa mieša pri teplote 25 °C. A1(OH)3 sa potom oddelí odstredením a odloží.
K supernatantu sa pridá 3,15 % PEG 4000, hodnota pH sa nastaví na 6,6 a teplota sa zníži na 9 °C. Mieša sa 30 minút a vzniknutá zrazenina sa oddelí odstredením a odloží.
K supernatantu sa pridá ďalších 100 g Tweenu 80 na liter (pomer tenzid/proteín 50 : 1) a dobre sa premieša. Po zriedení pufrom 1 v pomere 1 : 3 sa roztok chromatografuje na 1,75 litra Q-Sepharosy11 Fast Flow fy Pharmacia.
Faktor VIII sa adsorbuje a nenaviazané proteíny sa oddelia pomocou 7,9 litra pufra 1. Elúciou 5,25 litra citrátom sodným pufrovaného 500 mM NaCl-roztoku sa získa frakcia, obsahujúca faktor VIII.
Špecifická aktivita je 89 mj faktora VIII na mg proteínu.
Skoncentrovaný eluát sa lyofilizuje, a potom sa zahrieva za prítomnosti 8 % hmotn./hmotn. vody v uzatvorenej nádobe 10 hodín na 60 °C.

Claims (8)

1. Vysoko čistený, proti vírusu zabezpečený prípravok faktora VIII, zrážania krvi so špecifickou aktivitou najmenej 25 j/mg, vyrobiteľný kombináciou
a) chromatografického čistenia frakcie, obsahujúcej faktor VIII,
b) spracovania faktora VIII tenzidom vo vodnom roztoku pri pomere tenzid/proteín 1 ; 1 až 1000 ; 1 a
c) tepelného spracovania prípravku faktora VIII v pevnom stave.
2. Spôsob výroby vysoko čisteného, proti vírusu zabezpečeného prípravku faktora VIII zrážania krvi podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa kombináciu opatrení
a) chromatografického čistenia frakcie, obsahujúcej faktor VIII,
b) spracovania faktora VIII tenzidom vo vodnom roztoku pri pomere tenzid/proteín 1 : 1 až 1000 : 1 a
c) tepelného spracovania prípravku faktora VIII v pevnom stave.
3. Spôsob podľa nároku 2, vyznačujúci sa t ý m , že sa spracovanie tenzidom vykonáva pred chromatografickým čistením, pričom pomer tenzid/proteín je 3,5 : 1 až 10 : 1.
4. Spôsob podľa nároku 2, vyznačujúci sa t ý m , že sa spracovanie tenzidom vykonáva počas chromatografického čistenia.
5. Spôsob podľa jedného z nárokov 2 až 4, v y značujúci sa tým, že sa tepelné spracovanie vykonáva horúcou parou, pričom prípravok faktora
VIII v pevnom stave je upravený na obsah vody, metanolu alebo etanolu na viac ako 0,05 (5 % hmotn.) a menej než 0,70 (70 % hmotn.), výhodne menej než 0,40 (40 % hmotn,), a spracováva sa v uzatvorenej nádobe, prípadne za prítomnosti inertného ochranného plynu pri teplote v rozsahu od 50 do 121 °C.
6. Spôsob podľa jedného z nárokov 2 až 5, vyzná i u j ú c i sa tým, že chromatografické čistenie sa vykonáva vo viacerých stupňoch, pričom v jednom stupni sa použije materiál, ktorý adsorbuje faktor VIII a v jednom z ďalších stupňov materiál na adsorpciu proteínov, prítomných ako nečistoty.
7. Spôsob podľa niektorého z nárokov 2 až 6, v y značujúci sa tým, že sa na chromatografické čistenie použije aniónomenič na akrylátovej, silikátovej alebo uhľohydrátovej báze.
8. Spôsob podľa nároku 7, vyznačujúci sa t ý m , že sa použije aniónomenič, ktorý je tvorený matricou, na ktorú sú naviazané polyméme postranné reťazce, ktoré obsahujú aniónovýmenné skupiny.
SK391-93A 1992-04-24 1993-04-23 Vysoko čistený, proti vírusu zabezpečený prípravok SK279750B6 (sk)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
AT0084992A AT399818B (de) 1992-04-24 1992-04-24 Verfahren zur herstellung einer hochgereinigten virussicheren faktor viii-präparation

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SK39193A3 SK39193A3 (en) 1993-11-10
SK279750B6 true SK279750B6 (sk) 1999-03-12

Family

ID=3501200

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK391-93A SK279750B6 (sk) 1992-04-24 1993-04-23 Vysoko čistený, proti vírusu zabezpečený prípravok

Country Status (18)

Country Link
US (1) US5410022A (sk)
EP (1) EP0567448B2 (sk)
JP (1) JP2511631B2 (sk)
AT (2) AT399818B (sk)
AU (1) AU659301B2 (sk)
BR (1) BR9301641A (sk)
CA (1) CA2094347C (sk)
CZ (1) CZ279979B6 (sk)
DE (1) DE59308628D1 (sk)
DK (1) DK0567448T4 (sk)
ES (1) ES2117703T5 (sk)
FI (1) FI106468B (sk)
HU (1) HU210632B (sk)
MX (1) MX9302279A (sk)
NO (1) NO307465B1 (sk)
PL (1) PL172462B1 (sk)
SK (1) SK279750B6 (sk)
ZA (1) ZA932843B (sk)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0674531A1 (de) * 1992-12-16 1995-10-04 IMMUNO Aktiengesellschaft Verfahren zur herstellung eines virussicheren biologischen präparates
DE4320294A1 (de) * 1993-06-18 1994-12-22 Immuno Ag Verwendung von humanem Protein C zur Verhinderung und Behandlung von Thrombozytenablagerungen
DE4325872C1 (de) * 1993-08-02 1994-08-04 Immuno Ag Virusinaktivierte Faktor Xa-Präparation
AT402788B (de) * 1993-08-03 1997-08-25 Immuno Ag Virussichere blutgerinnungsfaktor xiii-präparation
DE4337573C1 (de) * 1993-11-04 1995-05-18 Octapharma Ag Verfahren zur Herstellung einer virusinaktivierten Faktor VIII enthaltenden Fraktion mittels chromatographischer Methoden
DE4407837C1 (de) * 1994-03-09 1995-08-17 Octapharma Ag Verfahren zur Gewinnung von hochreinem, virusinaktiviertem alpha¶1¶-Antitrypsin mittels Anionenaustauscher-Chromatographie
US5659017A (en) * 1995-11-07 1997-08-19 Alpha Therapeutic Corporation Anion exchange process for the purification of Factor VIII
AT403764B (de) 1996-03-15 1998-05-25 Immuno Ag Stabiler faktor viii/vwf-komplex
DE19623293C2 (de) * 1996-06-11 1998-10-22 Biotest Pharma Gmbh Nicht-immunogene Faktor VIII-enthaltende Zusammensetzung und ein Verfahren zu ihrer Herstellung
AT404358B (de) 1997-02-04 1998-11-25 Immuno Ag Verfahren zur chromatographischen reinigung bzw. fraktionierung von von willebrand-faktor aus einem vwf-hältigen ausgangsmaterial
JP5149470B2 (ja) 1999-02-22 2013-02-20 バクスター・インターナショナル・インコーポレイテッド 新規のアルブミンを含有していない第ｖｉｉｉ因子処方物
US20040117862A1 (en) * 2002-03-11 2004-06-17 Cooper Julian D. Production of high levels of transgenic factor VII with engineered stability and its therapeutic uses
US20060110788A1 (en) * 2004-10-01 2006-05-25 Invitrogen Corporation Feeding buffers, systems, and methods for in vitro synthesis of biomolecules
CA2742328C (en) 2008-11-07 2019-02-26 Baxter International Inc. Factor viii formulations
CN101967188B (zh) * 2010-11-08 2012-11-28 江西博雅生物制药股份有限公司 一种人凝血因子ⅷ的制备工艺
RU2712142C2 (ru) * 2014-11-05 2020-01-24 Эбботт Лабораторис Гмбх Способы получения композиций с улучшенным профилем безопасности, содержащих панкреатин, и композиции, пригодные для фармацевтического применения

Family Cites Families (49)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3920625A (en) * 1973-06-19 1975-11-18 Kabi Ab Isolation of coagulation factors from biological material using cross linked sulfated, sulfonated carbohydrates
AT350726B (de) * 1976-08-30 1979-06-11 Immuno Ag Verfahren zur herstellung einer blut- gerinnungsfoerdernden praeperation aus menschlichem blutplasma
FR2435832A1 (fr) * 1978-07-21 1980-04-04 Alsthom Cgee Dispositif de connexion electrique
US4250139A (en) * 1979-02-01 1981-02-10 Collagen Corporation Microwave sterilization of dry protein
DE2916711A1 (de) * 1979-04-25 1980-11-06 Behringwerke Ag Blutgerinnungsfaktoren und verfahren zu ihrer herstellung
DE3176491D1 (en) * 1980-03-05 1987-11-26 Miles Lab Pasteurized therapeutically active protein compositions
US4314997A (en) * 1980-10-06 1982-02-09 Edward Shanbrom Purification of plasma protein products
DE3173208D1 (en) * 1980-10-06 1986-01-23 Edward Shanbrom Method of reducing undesirable activities of biological and pharmaceutical products
DE3043857A1 (de) * 1980-11-21 1982-07-08 Behringwerke Ag, 3550 Marburg Verfahren zur herstellung von blutgerinnungsfaktoren und danach hergestellte praeparation der faktoren ii und vii
DE3045153A1 (de) * 1980-11-29 1982-07-08 Behringwerke Ag, 3550 Marburg Verfahren zur herstellung von blutgerinnungsfaktoren und danach hergestellte praeparation der faktoren ix und x
US4495278A (en) * 1981-04-27 1985-01-22 Baxter Travenol Laboratories, Inc. Process for making novel blood clotting enzyme compositions
US4456590B2 (en) * 1981-11-02 1989-05-30 Heat treatment of lyphilized blood clotting factor viii concentrate
US4481189A (en) * 1982-04-14 1984-11-06 New York Blood Center Inc. Process for preparing sterilized plasma and plasma derivatives
US4379085A (en) * 1982-05-14 1983-04-05 American National Red Cross Heat stabilization of plasma proteins
US4511556A (en) * 1982-06-10 1985-04-16 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Inactivation of a lipid virus
JPS59134730A (ja) * 1983-01-20 1984-08-02 Green Cross Corp:The 血液凝固第８因子の加熱処理法
CA1213827A (en) * 1983-04-29 1986-11-12 Ricardo H. Landaburu Process for pasteurizing fibronectin
ATE36457T1 (de) * 1983-05-02 1988-09-15 Immuno Ag Verfahren zur inaktivierung von vermehrungsfaehigen krankheitserregern.
US4540573A (en) * 1983-07-14 1985-09-10 New York Blood Center, Inc. Undenatured virus-free biologically active protein derivatives
JPS6054287B2 (ja) * 1983-10-19 1985-11-29 株式会社ミドリ十字 血漿蛋白の加熱処理方法
US4490361A (en) * 1983-12-02 1984-12-25 Alpha Therapeutic Corporation Virus inactivating heat treatment of plasma fractions
AT389815B (de) * 1984-03-09 1990-02-12 Immuno Ag Verfahren zur inaktivierung von vermehrungsfaehigen filtrierbaren krankheitserregern in blutprodukten
DE3432083A1 (de) * 1984-08-31 1986-03-06 Behringwerke Ag, 3550 Marburg Pasteurisierte, isoagglutininfreie faktor viii-praeparation und verfahren zu ihrer herstellung
US5043428A (en) * 1984-08-31 1991-08-27 Behringwerke Aktiengesellschaft Pasteurized, isoagglutinin-free factor VIII preparation and a process for its production
JPH0669961B2 (ja) * 1984-09-25 1994-09-07 株式会社ミドリ十字 免疫グロブリンの加熱処理方法
JPH0825902B2 (ja) * 1985-02-21 1996-03-13 株式会社ミドリ十字 γ−グロブリンの加熱処理方法
US4673733A (en) * 1985-04-11 1987-06-16 Sudhish Chandra Treatment of biological and pharmaceutical products adsorbed on a solid phase with virus and pyrogen inactivating agents
AT391808B (de) * 1986-11-03 1990-12-10 Immuno Ag Verfahren zur herstellung einer faktor viii (ahf)-haeltigen fraktion
AT388501B (de) * 1987-02-12 1989-07-25 Immuno Ag Verfahren zur herstellung von parenteral verabreichbaren blutprodukten
AU2251288A (en) * 1987-05-15 1988-12-06 Alan I. Rubinstein Sequential improved method for treatment of human blood- clotting factor products
IL86417A (en) * 1987-05-22 1992-09-06 Armour Pharma Process for the inactivation of pathogens in biological or pharmaceutical material by mixing with aqueous solution containing a sugar(alcohol)and neutral salts as stabilizers
AT391809B (de) * 1988-01-12 1990-12-10 Immuno Ag Verfahren zur inaktivierung von vermehrungsfaehigen filtrierbaren krankheitserregern in blutplasmaprodukten
FR2630115B1 (fr) * 1988-04-14 1994-10-28 Merieux Inst Procede de stabilisation des solutions d'albumine humaine et solution obtenue
ES2053619T3 (es) * 1988-05-27 1994-08-01 Centre Regional De Transfusion Procedimiento para la fabricacion de un factor antihemofilico de gran pureza y libre de virus mediante cromatografia.
AT397203B (de) * 1988-05-31 1994-02-25 Immuno Ag Gewebeklebstoff
FR2632309B1 (fr) * 1988-06-07 1990-08-24 Lille Transfusion Sanguine Procede de purification par voie chromatographique de proteines, notamment de facteur viii, et les produits obtenus
AT390801B (de) * 1988-07-28 1990-07-10 Immuno Ag Verfahren zur herstellung von lys-plasminogen
ATE85221T1 (de) * 1988-11-05 1993-02-15 Octapharma Ag Verfahren zur herstellung eines hochreinen, nicht infektioesen antihaemophiliefaktors mittels chromatographie.
US5156973A (en) * 1988-11-23 1992-10-20 Edward Shanbrom Antiviral blood sampling process and apparatus
DE3843126C3 (de) * 1988-12-22 1994-10-06 Octapharma Ag Verfahren zur Herstellung eines hochreinen Thrombinkonzentrates
CA2007545A1 (en) * 1989-01-13 1990-07-13 Yahiro Uemura Production method for protein-containing composition
EP0431129B1 (en) * 1989-06-15 1996-05-29 Rorer International (Overseas) Inc. Methods for the inactivation of viruses in viral-contaminated pharmaceutical compositions
IE73210B1 (en) * 1990-01-24 1997-05-07 Warner Lambert Co Process for the production of thrombin and high purity thrombin preparation thereby obtained
US5217737A (en) * 1991-05-20 1993-06-08 Abbott Laboratories Plastic containers capable of surviving sterilization
AT402891B (de) * 1991-06-20 1997-09-25 Immuno Ag Verfahren zur herstellung eines inaktivierten blutproduktes
FR2679251B1 (fr) * 1991-07-18 1993-11-12 Nord Assoc Essor Transfusion San Procede de preparation d'un concentre de thrombine humaine destine a un usage therapeutique.
FR2681867B1 (fr) * 1991-09-26 1993-12-31 Pasteur Merieux Serums Vaccins Procede de purification du facteur viii et preparations obtenues.
AT398079B (de) * 1991-11-04 1994-09-26 Immuno Ag Präparation mit thrombinaktivität sowie verfahren zu ihrer herstellung
FR2841484B1 (fr) * 2002-06-26 2004-09-10 Boucq De Beaudignies Ghisla Le Dispositif et procede de filtration de l'air et des gaz avec regeneration des particules captees

Also Published As

Publication number Publication date
HUT64777A (en) 1994-02-28
SK39193A3 (en) 1993-11-10
HU210632B (en) 1995-06-28
DE59308628D1 (de) 1998-07-09
AU659301B2 (en) 1995-05-11
JP2511631B2 (ja) 1996-07-03
CA2094347A1 (en) 1993-10-25
FI931826A (fi) 1993-10-25
JPH069694A (ja) 1994-01-18
DK0567448T3 (da) 1999-03-22
ES2117703T3 (es) 1998-08-16
CZ69293A3 (en) 1993-12-15
ES2117703T5 (es) 2005-07-16
EP0567448B1 (de) 1998-06-03
CA2094347C (en) 2002-06-25
US5410022A (en) 1995-04-25
EP0567448A1 (de) 1993-10-27
BR9301641A (pt) 1993-10-26
PL172462B1 (pl) 1997-09-30
FI931826A0 (fi) 1993-04-22
AT399818B (de) 1995-07-25
NO931476L (no) 1993-10-25
HU9301038D0 (en) 1993-06-28
MX9302279A (es) 1994-08-31
CZ279979B6 (cs) 1995-09-13
NO931476D0 (no) 1993-04-22
ZA932843B (en) 1993-11-23
FI106468B (fi) 2001-02-15
NO307465B1 (no) 2000-04-10
ATA84992A (de) 1994-12-15
PL298670A1 (en) 1994-04-05
EP0567448B2 (de) 2005-01-05
DK0567448T4 (da) 2005-05-02
ATE166881T1 (de) 1998-06-15
AU3687593A (en) 1993-10-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0315968B2 (en) Plasma and recombinant protein formulations in low ionic strength media
US5605884A (en) Factor VIII formulations in high ionic strength media
US4876241A (en) Stabilization of biological and pharmaceutical products during thermal inactivation of viral and bacterial contaminants
SK279750B6 (sk) Vysoko čistený, proti vírusu zabezpečený prípravok
FI104378B (fi) Menetelmä trombiinin valmistamiseksi
EP0314095B1 (en) Plasma and recombinant protein formulation in high ionic strength media
US5639730A (en) Method of producing a virus-safe biological preparation
JP3628703B2 (ja) 治療グレードトロンビン産物及び製品
US6358534B1 (en) Immunotolerant prothrombin complex preparation
JP4250771B2 (ja) カチオン交換クロマトグラフィーによる因子ＶＩＩＩ／ｖＷＦ複合体の精製方法
EP0117064A2 (en) Process for heat treatment of blood coagulation factor VIII
EP0292003B1 (en) Stabilzation of biological and pharmaceutical products during inactivation of viral and bacterial contaminants
WO1998030230A1 (fr) Compositions proteinees et procede de production
US20010019839A1 (en) Method for production of a C1 esterase inhibitor (C1-INH)-containing composition
AT405608B (de) Verfahren zur inaktivierung von pathogenen, insbesondere von viren, in einem biologischen material
HU211239A9 (hu) Eljárás nagy tisztaságú, vírusbiztos Vili faktor-készítmény előállítására