CZ279979B6 - Způsob výroby před virem zabezpečeného, vysocečištěného faktoru VIII - Google Patents
Způsob výroby před virem zabezpečeného, vysocečištěného faktoru VIII Download PDFInfo
- Publication number
- CZ279979B6 CZ279979B6 CZ93692A CZ69293A CZ279979B6 CZ 279979 B6 CZ279979 B6 CZ 279979B6 CZ 93692 A CZ93692 A CZ 93692A CZ 69293 A CZ69293 A CZ 69293A CZ 279979 B6 CZ279979 B6 CZ 279979B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- factor viii
- sodium
- surfactant
- polyoxyethylene
- chromatographic purification
- Prior art date
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 9
- 241000700605 Viruses Species 0.000 title description 17
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 claims abstract description 74
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 claims abstract description 74
- 229960000301 factor viii Drugs 0.000 claims abstract description 73
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 30
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 30
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims abstract description 26
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 claims abstract description 13
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 13
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims abstract description 6
- -1 dodecyl beta-alanine Chemical compound 0.000 claims description 21
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 20
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 12
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 10
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 10
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Chemical class 0.000 claims description 8
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 8
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 8
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 6
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 claims description 6
- SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N Dodecane Natural products CCCCCCCCCCCC SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 5
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 150000001252 acrylic acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 4
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 claims description 4
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 4
- 239000002563 ionic surfactant Substances 0.000 claims description 4
- 150000004760 silicates Chemical class 0.000 claims description 4
- 229940083542 sodium Drugs 0.000 claims description 4
- NRHMKIHPTBHXPF-TUJRSCDTSA-M sodium cholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 NRHMKIHPTBHXPF-TUJRSCDTSA-M 0.000 claims description 4
- CMCBDXRRFKYBDG-UHFFFAOYSA-N 1-dodecoxydodecane Chemical class CCCCCCCCCCCCOCCCCCCCCCCCC CMCBDXRRFKYBDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- SFCVVDTZXSZBHB-UHFFFAOYSA-M 1-dodecylpyrimidin-1-ium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCC[N+]1=CC=CN=C1 SFCVVDTZXSZBHB-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- DHNWFKDQGWAXQE-KTKRTIGZSA-N 2-[(z)-octadec-9-enoyl]oxyethanesulfonic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCCS(O)(=O)=O DHNWFKDQGWAXQE-KTKRTIGZSA-N 0.000 claims description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 3
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000003945 anionic surfactant Substances 0.000 claims description 3
- 229960003237 betaine Drugs 0.000 claims description 3
- 239000003093 cationic surfactant Substances 0.000 claims description 3
- GVGUFUZHNYFZLC-UHFFFAOYSA-N dodecyl benzenesulfonate;sodium Chemical compound [Na].CCCCCCCCCCCCOS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 GVGUFUZHNYFZLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 3
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 claims description 3
- 229940083575 sodium dodecyl sulfate Drugs 0.000 claims description 3
- 229940080264 sodium dodecylbenzenesulfonate Drugs 0.000 claims description 3
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 claims description 3
- CUXKZYSCZCNPNX-UHFFFAOYSA-N tetradecan-1-amine;hydrobromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCC[NH3+] CUXKZYSCZCNPNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M Acrylate Chemical compound [O-]C(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N Propylene oxide Chemical compound CC1CO1 GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 claims description 2
- JBIROUFYLSSYDX-UHFFFAOYSA-M benzododecinium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 JBIROUFYLSSYDX-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 229940000635 beta-alanine Drugs 0.000 claims description 2
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-aminopropionic acid Natural products NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 2
- WOWHHFRSBJGXCM-UHFFFAOYSA-M cetyltrimethylammonium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C WOWHHFRSBJGXCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 2
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 claims 2
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 claims 2
- HNJXPTMEWIVQQM-UHFFFAOYSA-M triethyl(hexadecyl)azanium;bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](CC)(CC)CC HNJXPTMEWIVQQM-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 2
- XBJWXHZULDTRGC-UHFFFAOYSA-N 1-(dodecylamino)ethanesulfonic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCNC(C)S(O)(=O)=O XBJWXHZULDTRGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- AEDQNOLIADXSBB-UHFFFAOYSA-N 3-(dodecylazaniumyl)propanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCNCCC(O)=O AEDQNOLIADXSBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- BPQQTUXANYXVAA-UHFFFAOYSA-N Orthosilicate Chemical compound [O-][Si]([O-])([O-])[O-] BPQQTUXANYXVAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 claims 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 108010047303 von Willebrand Factor Proteins 0.000 description 7
- 102100036537 von Willebrand factor Human genes 0.000 description 7
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 6
- 229960001134 von willebrand factor Drugs 0.000 description 6
- 102100026735 Coagulation factor VIII Human genes 0.000 description 5
- 102100037362 Fibronectin Human genes 0.000 description 5
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 5
- 101000911390 Homo sapiens Coagulation factor VIII Proteins 0.000 description 5
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 5
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 5
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 4
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 3
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- 201000003542 Factor VIII deficiency Diseases 0.000 description 2
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 2
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 2
- 208000009292 Hemophilia A Diseases 0.000 description 2
- 206010023126 Jaundice Diseases 0.000 description 2
- 229920001030 Polyethylene Glycol 4000 Polymers 0.000 description 2
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 2
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 description 2
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 2
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 2
- IDOQDZANRZQBTP-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(2,4,4-trimethylpentan-2-yl)phenoxy]ethanol Chemical compound CC(C)(C)CC(C)(C)C1=CC=CC=C1OCCO IDOQDZANRZQBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 description 1
- 208000019838 Blood disease Diseases 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 208000031220 Hemophilia Diseases 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 239000012614 Q-Sepharose Substances 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 241000710771 Tick-borne encephalitis virus Species 0.000 description 1
- 229920004929 Triton X-114 Polymers 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000010836 blood and blood product Substances 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 229940125691 blood product Drugs 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- NLEBIOOXCVAHBD-QKMCSOCLSA-N dodecyl beta-D-maltoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OCCCCCCCCCCCC)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 NLEBIOOXCVAHBD-QKMCSOCLSA-N 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 1
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000018706 hematopoietic system disease Diseases 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 208000005252 hepatitis A Diseases 0.000 description 1
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- IZWSFJTYBVKZNK-UHFFFAOYSA-N lauryl sulfobetaine Chemical compound CCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCS([O-])(=O)=O IZWSFJTYBVKZNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- RSVIRMFSJVHWJV-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethyloctan-1-amine oxide Chemical compound CCCCCCCC[N+](C)(C)[O-] RSVIRMFSJVHWJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HEGSGKPQLMEBJL-RKQHYHRCSA-N octyl beta-D-glucopyranoside Chemical compound CCCCCCCCO[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HEGSGKPQLMEBJL-RKQHYHRCSA-N 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000037390 scarring Effects 0.000 description 1
- FHHPUSMSKHSNKW-SMOYURAASA-M sodium deoxycholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 FHHPUSMSKHSNKW-SMOYURAASA-M 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- STCOOQWBFONSKY-UHFFFAOYSA-N tributyl phosphate Chemical compound CCCCOP(=O)(OCCCC)OCCCC STCOOQWBFONSKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WPPGURUIRLDHAB-UHFFFAOYSA-M triethyl(hexadecyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](CC)(CC)CC WPPGURUIRLDHAB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 239000002888 zwitterionic surfactant Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- C07K14/755—Factors VIII, e.g. factor VIII C (AHF), factor VIII Ag (VWF)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/829—Blood
- Y10S530/83—Plasma; serum
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/829—Blood
- Y10S530/83—Plasma; serum
- Y10S530/831—Cohn fractions
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Způsob výroby vysoce čistěného, před virem zabezpečeného přípravku faktoru VIII, vyznačující se kombinací opatření a) chromatografického čištění frakce, obsahující faktor VIII, b) tenzidového zpracování faktoru VIII ve vodném roztoku při poměru tenzid/ protein od 1:1 do 66:1 a , c) tepelného zpracování přípravku faktoru VIII v pevném stavu.ŕ
Description
Způsob výroby před virem zabezpečeného, vysocečištěného faktoru VIII a přípravek tohoto faktoru
Oblast techniky
Vynález se týká způsobu výroby před virem zabezpečeného, vysocečištěného faktoru VIII.
Dosavadní stav techniky
Srážení krve probíhá řadou po sobě jdoucích reakcí různých proteinů, popřípadě enzymů. Nedostatkem faktorů srážení krve je tvorba fibrinu z fibrinogenu, a tím zabránění zavírání jizev, následkem čehož jsou krvácení. Jedním takovým případem je hemofilie A. Tato je nejrozšířenější krevní chorobou a je vyvolána nedostatkem faktoru VIII. Faktor VIII se vyskytuje v plazmě spolu s s/vonWillebrandovým faktorem (vWF) jako nekovalentně vázaný komplex (FVIII/vWF). Proteiny FVIII a vWF, jakož i komplex FVIII/vWF se používají k substitučnímu ošetřování hemofiliků. Na odpovídající farmaceutické preparáty jsou kladeny vysoké požadavky pokud se týká účinnosti a bezpečnosti.
Výchozím materiálem pro výrobu preparátů je většinou lidská plazma, která však obsahuje faktor VIII jen v malých množstvích (asi 0,1 až 0,2 μg/ml). Pro získání faktoru VIII se musí zpracovat nejen velká množství plasmy, ale musí se také oddělit rušivé doprovodné proteiny tak, jak jen je to možné, přičemž mnoho těchto proteinů vykazuje podobné fyzikálně-chemické vlastnosti.
Další potíž spočívá v tom, že praparát je nutno ještě inaktivovat vzhledem k infekčním agens, protože výchozí materiál může obsahovat například virus žloutenky. K tomu ještě přistupuje skutečnost, ž každý krok způsobu a každá inaktivace se musí provádět tak, že biologická aktivita požadovaných faktorů srážení zůstane pokud možno zachována.
Při klasických metodách výroby se provádějí postupná srážení (například kryosrážení nebo koagulace přídavkem síranu amonného), jejichž účelem je odstranění nečistot, jako jsou faktory prothrombinového komplexu, fibrinogen a fibronektin. Čistota získaného koncentrátu faktoru VIII leží přibližné při 1 j/mg proteinu a obvykle nepřesahuje hranice 10-20 j/mg proteinu.
Z pat. spisu EP-A-0378208 je znám způsob výroby faktoru VIII, podle kterého se roztok kryoprecipitátu zpracuje s organickým rozpouštědlem (tri(n-butyl)fosfát (TNBP)) za přítomnosti činidla, zprostředkujícího rozpouštění - TweenR80 pro inaktivaci viru. Faktor VIII se potom podrobí dvojstupňovému čištění vylučováním, lyofilizuje a zahřívá v suchém stavu.
Zpracování biologických a farmaceutických produktů 0,25 až 10 % hmot, nedenaturujících amfifilů (detergentů) je popsán v pat. spisu EP-B-0050061.
Způsob zpracování proteinů organickými rozpouštědly, popřípadě za přítomnosti detergentů, je znám z pat. spisu EP-B-0131740.
-1CZ 279979 B6
Zde je ukázáno, že zpracování s detergentem samotným je vzhledem k inaktivaci viru relativně neúčinné. Organická rozpouštědla působí však jen proti membránou obaleným virům. Existují již zmíněné infekce žloutenky, které zpětně vedou ke koncentrátu hepatidou A kontaminovaného faktoru VIII, které se tímto způsobem virově inaktivují. Virus hepatidy A neobsahuje žádnou membránu, obsahující lipid, proto není takto inaktivován (Mannucci P M a spol. (1992 The Lancet 339, 819 Outbreak of hepatitis A among Italian patients with haemophilia).
Zpracování frakcí, obsahujících faktor VIII organickými rozpouštědly se většinou provádí tak, že se toxicky působící rozpouštědlo po provedeném ošetření musí nákladným způsobem oddělit. V pat. spisu EP-A-034275 je pro tento účel navržena extrakce frakcí, obsahujících faktor VIII oleji, jako je sojový olej nebo ricinový olej. Potom se faktor VIII podrobí gelové permeační chromatografii na iontovýměnných materiálech.
Způsobem podle pat. spisu EP-A-0094611 se faktor VIII pro snížení infekčnosti zahřívá v suchém stavu.
Podle pat. spisu EP-B-0159311 se zahřívají krevní produkty v pevném, vlhkém stavu pro inaktivaci potenciálně přítomných virů. V takovém parou zahřátém koncentrátu faktoru VIII není znám žádný případ infekce (Mannuci P M (1992) Transfusion 32, 134 až 138 Low risk of viral infection after administration of vapor-heated factor VIII concentrates).
Tepelné zpracování vysocečištěného koncentrátu faktoru VIII platí jako kritické. Ke chromatografíčky přečištěnému faktoru VIII musí být podle pat. spisu EP-A-0173242 například přidávána směs stabilizátorů (uhlohydrátů a aminokyselin), před tím, než se tento zahřívá v roztoku. Jinak je běžné podrobit frakce, obsahující faktor VIII ještě před chromatografickým čištěním inaktivaci viru.
Cílem vynálezu je nalézt způsob, podle kterého je možno vyrobit přečištěný faktor VIII, který na základě účinného ošetření pro inaktivaci viru je proti viru zabezpečen.
Výhodně by měla specifická aktivita vyrobeného preparátu činit nejméně 25 j/mg proteinu.
Podstata vynálezu
Vynález tuto úlohu řeší kombinací následujících opatření:
a) chromatografickým čištěním frakce, obsahující faktor VIII, za použití materiálů na bázi akrylátů, silikátů nebo uhlohydrátů
b) zpracováním faktoru VIII tenzidem, vybraným ze skupiny zahrnující z anionických tenzidů sulfatovaný oxyethylovaný alkylfenol, sulfatovaný lauryletheralkohol, dodecylbenzensulfonát sodný, 2-sulfoethyloleát sodný, N-methyl-N-oleylethanolsulfonát sodný, dodecylsulfát sodný, cholát sodný, deoxycholát sodný, dodecylsulfonát sodný a dodecyl-N-sarconisát sodný; z kationických tenzidů dodecyldimethylbenzylamoniumchlorid, oxyethylované aminy, cetyltriethylamoniumchlorid, tetradecylamoniumbromid, dodecylpyrimidiniumchlorid a hexadecyltrimethy-2- lamoniumchlorid; z amfolytických tenzidů dodecyl-p-alanin, kyselinu N-dodecylaminoethansulfonovou, palmitoyllysolecitin a dodecyl-N~betain a z neionických tenzidů kondenzáty ethylenoxidu a propylenoxidu, oxyethylovaný alkylfenol, parciální estery mastných kyselin C12_22 a hexitol anhydridů, polyoxyethylované deriváty parciálních esterů, získaných adicí polyoxyethylenových řetězců na neesterifikované hydroxyly, polyoxyethylenové parciální estery mastných kyselin a polyoxyethylenové ethery mastných alkoholů ve vodném roztoku při poměru tenzid/protein 1:1 až 1 000:1 a
c) tepelným zpracováním přípravku faktoru VIII v pevném stavu při teplotě v rozmezí 50 až 121 ’C.
Faktor VIII může být podle vynálezu vyroben jako komplex FVIII/vWF. Během výrobního postupu může být provedeno přibližně jedno zpracování pro disociaci komplexu FVIII/vWF, například chloridem vápenatým.
Bylo zjištěno, že zpracování tensidem podle vynálezu překvapivě může vést k úspěšné inaktivaci viru. Jako tensidy mohou být například použity neiontové tenzidy jako TweenR80, TritonRX-100, p
Triton X-114, dodecylmaltosid nebo oktylglukosid, tenzidy s obojetnými ionty jako dimethyloktylamin-N-oxid nebo N-dodecyl-N,N-dimethyl-3-amonio-l-propansulfonát a iontové tenzidy, jako je desoxycholát sodný nebo cholát sodný. Zpracování tenzidem se provádí především ve vodném roztoku, který je prostý organických rozpouštědel. Jako vodný roztok se nabízí roztok pro kryosrážení, který se popřípadě ještě přečistí adsorpcí faktorů prothrombinového komplexu. V takovém roztoku bude poměr tenzid/protein přednostně 1:1 až 10:1.
Zpracování tenzidem se výhodně provádí před chromatografickým čištěním, výhodně při poměru tenzid/protein od 3,5:1 do 10:1, přičemž se tenzid může během chromatografie jednoduchým způsobem oddělovat.
V další formě provedení je ale také možné zpracování tenzidem během chromatografie. Tato varianta má tu výhodu, že faktor VIII se bude také specificky adsorbovat za přítomnosti proteinů, majících sklon k agregaci, a tím k nežádoucí koadsorpci.
Jestliže se vychází z výchozího materiálu obsahujícího faktor VIII s nízkým obsahem proteinu, je často namístě udržovat ve vodném roztoku určitou koncentraci tenzidu. Poměr tenzid/protein může tak činit až 1 000:1.
Buněčný supernatant, který obsahuje faktor VIII, vykazuje například obsah proteinu nejméně kolem 100 mg/1. Desetiprocentní koncentrace tenzidu v tomto kultivačním supernatantu tak odpovídá poměru tenzid/protein, který není větší než asi 1 000:1.
Pro zvýšené zabezpečení vůči viry, je podle vynálezu navržena faktoru VIII v pevném stavu. Tato infekci membránou neobalenými kombinace tepelného zpracování může být provedena na lyofili-3CZ 279979 B6 zovaném preparátu, přičemž zpracování teplem se provádí výhodně ve vlhkém stavu preparátu.
Výhodná forma provedení vynálezu zahrnuje tepelné zpracování horkou parou, přičemž je přípravek faktoru VIII v pevném stavu nastaven na obsah vody, methanolu nebo ethanolu vyšší než 0,05 (5 % hmot.) a méně než 0,70 (70 % hmot.), výhodně méně než 0,40 (40 % hmot.) a zahřívá se v uzavřené nádobě, popřípadě za přítomnosti inertního ochranného plynu, na teplotu v rozsahu 50 až 121 ’C.
V lyofilizátu faktoru VIII mohou být obsaženy dále albumin, popřípadě soli jako citrát sodný, popřípadě aminokyseliny.
Bylo s překvapením zjištěno, že toto tepelné zpracování nenese s sebou žádné podstatné ztráty aktivity, takže může také být takto zpracován relativně nestabilní, vysoce přečištěný faktor VIII.
Během chromatografického čištění se faktor VIII dále zbavuje doprovodných proteinů. Výhodná forma způsobu výroby podle vynálezu zahrnuje vícestupňové chromatografické čištění, přičemž se v jednom stupni použije adsorpční materiál pro faktor VIII a v dalších stupních materiál pro adsorpci znečišťujících proteinů.
Může tak být použit nejprve aniontovýměnný materiál pro adsorpci faktoru VIII a potom materiál s vysokou afinitou k fibronektinu, jako želatina nebo heparin, imobilizovaný na nerozpustném nosiči. Tak zde může být výhodná chromtografie za přítomnosti tenzidů, pro minimalizaci nespecifické adsorpce faktoru VIII na afinitním nosiči.
Pro výrobu albuminuprostého faktoru VIII (přípravku) se může adsorpce roztoku obsahujícího faktor VIII provádět na triazingelu (CibacronR-Blue 3GA, imobilizovaný na nerozpustném nosiči (fa Bio-Rad); FractogelR TSK-AF-Blue (fa Měrek), Blue-SepharoseR-CL6B (fa Pharmacia).
Tyto typy gelu vážou s vysokou selektivitou albumin, který se kvantitativně neoddělí jinými metodami od faktoru VIII a je jako nečistota přítomen v přípravcích faktoru VIII, pokud není požadován obsah albuminu pro stabilizaci.
Výhodně se používají pro chromatografické čištění aniontoměniče jako jsou ty, které jsou na bázi akrylátů, silikátů nebo uhlohydrátů, jako DEAE-SephadexR (fa Pharmacia), QAE-SepharoseR (fa Pharmacia), DEAE-Toyo-PearlR (fa Tosohaas), TMAE-FractogelR (fa Měrek) a podobně.
Aniontoměniče na akrylátové bázi jsou výhodně vytvořeny jako tentakelmatrice (srov. Můller W (1990) Journal of Chromátography 510, 133 až 140 New ion exchangers for the chromatography of biopolymers). V takové matrici se nacházejí výměnné skupiny podél polymerního postranního řetězce, který je spojen s povrchem
-4CZ 279979 B6 matrice. Z toho vyplývá vysoká kapacita impregnace a zlepšená selektivita.
Faktor VIII krevního srážení, který se vyrobí způsobem podle vynálezu, je považován za zabezpečený proti viru a má výhodně vysokou specifickou aktivitu nejméně 25 j/mg proteinu.
Vynález bude blíže vysvětlen v následujících příkladech, které jej však nikterak neomezují.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1 kg kryosraženiny, získané ze 101 litrů plasmy se rozpustí ve 3,5 litrech pufru 1, NaCl-roztoku pufrovanému tris-lysinem (85 mmol/1).
Pro předčištění roztoku, obsahujícího faktor VIII, se přimíchá AI(OH)2, oddělí se A1(OH)3, přimíchá se BaSO4 a BaSO4 se oddělí. Potom se nastaví hodnota pH supernatantu na 6,5, teplota se sníží na 4 °C a vzniklá sraženina se oddělí odstředěním a odloží.
Přidá se 110 g TritonuRX-100 na litr supernatantu (poměr tenzid/protein 55:1) a 30 min se míchá při 25 °C. Faktor VIII se ϋ
potom adsorbuje na 750 ml DEAE-Toyopearl 650 M fy Tosohaas, ekvilibrováného pufrem 1, v koloně o průměru 9 cm.
Frakce, obsahující faktor VIII se eluuje z gelu 2,25 litry pufru 2 (citrátem pufrovaný 500 mM NaCl-roztok).
Specifická aktivita činí 76 mj. faktoru VIII na mg proteinu.
Po vymražení ultrafiltrované frakce, obsahující faktor VIII se faktor VIII zahřívá se 7,5 % hmot./hmot, vody v uzavřené nádobě 10 hodin na 60 °C. Aktivita faktoru VIII činí 72 % nezahřívaného vzorku. Tepelné zpracování za přítomnosti albuminu vede k aktivitě faktoru VIII odpovídající 92 % nezahřívaného vzorku.
Příklad 2 kg kryosraženiny se zpracuje stejným způsobem jako v příkladu 1 - tj. získá a rozpustí.
Předčištění se provede A1(OH)3 a BaSO4. K supernatantu se přidá 120 g Tweenu 80 na litr (poměr tenzid/protein 4:1) a 45 min se míchá při 25 ’C. Po zředění pufrem v poměru 1:3 se roztok chromatograficky přečistí adsorpci faktoru VIII na 400 ml EMD-TMAE-FractigeluR (fa Měrek). Gel se předtím ekvilibruje pufrem 1. Nenavázané proteiny se oddělí pufrem 1, potom se eluuje frakce, obsahující faktor VIII pufrem 2.
Specifická aktivita činí 45 mj faktoru VIII na mg proteinu.
-5CZ 279979 B6
Eluát se po ultrafiltraci zkoncentruje a suší vymražením. V uzavřené nádobě se zahřívá faktor VIII za přítomnosti 9,5 % hmot./hmot, vody 10 hodin na 60 °C.
Aktivita faktoru VIII činí 87 % vztaženo na nezahřívaný vzorek.
Celkový faktor redukce viru podle předpisu EC III/8115/89-EN Komise evropského společenství se stanoví na příkladu HIV-1 a FSME-viru, přičemž se suspenze viru přidává vícekrát během tohoto způsobu. Celkový faktor redukce viru činí nejméně 12. To odpovídá redukci teoretického titru viru nejméně 1012 v celém způsobu.
Příklad 3
Přípravek s 3 000 mj. faktoru VIII podle příkladu 2, obsahuje 120 j fibronektinu (3 960 μ9).
Pro odstranění této nečistoty se frakce, obsahující faktor VIII chromatografíčky přečistí s 15 ml sloupcem heparin-Sepharosy (1,6 cm průměr) s pufrem 260 mM NaCl.
Faktor VIII není navázán, fibronektin byl ve frakci, obsahující faktor VIII neprokazatelný. Specifická aktivita činila 46 mj faktoru VIII na mg proteinu. Fibronektin může být získán elucí 750 mM roztokem NaCl.
Příklad 4 kg kryosraženiny se získá a rozpustí stejným způsobem jako v příkladu 1.
Předčištění se provede A1(OH)3 a PEG 4 000.
Přidá se 0,15 % A1(OH)3 a 30 min se míchá při 25 °C. A1(OH)3 se potom oddělí odstředěním a odloží.
K supernatantu se přidá 3,15 % PEG 4 000, hodnota pH se nastaví na 6,6 a teplota se sníží na 9 °C. Míchá se 30 minut a vzniklá sraženina se oddělí odstředěním a odloží.
K supernatantu se přidá dalších 100 g Tweenu 80 na litr (poměr tenzid/protein 50:1) a dobře se promíchá. Po zředění pufrem 1 v poměru 1 ku 3 se roztok chromátografuje na 1,75 litru Q-SepharosyR Fast Flow fy Pharmacia.
Faktor VIII se adsorbuje a nenavázané proteiny se oddělí pomocí 7,9 litru pufru 1. Elucí 5,25 litru citrátem sodným pufrovaného 500 mM NaCl-roztoku se získá frakce, obsahující faktor VIII.
Specifická aktivita činí 89 mj. faktoru VIII na mg proteinu.
-6CZ 279979 B6
Zkoncentrovaný eluát se lyofilizuje a potom se zahřívá za přítomnosti 8 % hmot./hmot, vody v uzavřené nádobě 10 hodin na 60 ’C.
Aktivita .faktoru VIII činí 81 % nezahřívaného vzorku.
PATENTOVÉ NÁROKY
Claims (9)
1. Způsob výroby před virem zabezpečeného vysoce čištěného faktoru VIII, vyznačující se tím, že zahrnuje kombinaci opatření
a) chromatografického čištění frakce, obsahující faktor VIII, za použití materiálů na bázi akrylátů, silikátů nebo uhlohydrátů
b) zpracování faktoru VIII tenzidem, vybraným ze skupiny zahrnující z anionických tenzidů sulfatovaný oxyethylovaný alkylfenol, sulfatovaný lauryletheralkohol, dodecylbenzensulf onát sodný, 2-sulfoethyloleát sodný, N-methyl-N-oleylethanosulfonát sodný, dodecylsulfát sodný, cholát sodný, deoxycholát sodný, dodecylsulfonát sodný a dodecyl-N-sarconisát sodný; z kationických tenzidů dodecyldimethylbenzylamoniumchlorid, oxyethylované aminy, cetyltriethylamoniumbromid, tetradecylamoniumbromid, dodecylpyrimidiniumchlorid a hexadecyltrimethylamoniumchlorid; z amfolytických tenzidů dodecyl-p-alanin, kyselinu N-dodecylaminoethansulfonovou, palmitoyllysolecitin a dodecyl-N-betain a z neionických tenzidů kondenzáty ethylenoxidu a propylenoxidu, oxyethylovaný alkylfenol, parciální estery mastných kyselin C12_22 a hexitol anhydridů, polyoxyethylované deriváty parciálních esterů, získaných adicí polyoxyethylenových řetězců na neesterifikované hydroxyly, polyoxyethylenové parciální estery mastných kyselin a polyoxyethylenové ethery mastných alkoholů ve vodném roztoku při poměru tenzid/protein 1:1 až 1 000:1 a
c) tepelné zpracování přípravku faktoru VIII v pevném stavu při teplotě v rozmezí 50 až 121 °C.
2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že zahrnuje kombinaci opatření
a) chromatografického čištění frakce, obsahující faktor VIII, za použití materiálů na bázi akrylátů, silikátů nebo uhlohydrátů
b) zpracování faktoru VIII tenzidem, vybraným ze skupiny zahrnující z anionických tenzidů sulfatovaný oxyethylovaný alkylfenol, sulfatovaný lauryletheralkohol, dodecylbenzensulf onát sodný, 2-sulfoethyloleát sodný, N-methyl-N-oleylethanolsulfonát sodný, dodecylsulfát sodný, cholát sodný, deoxycholát sodný, dodecylsulfonát sodný a dodecyl-N-sarconisát sodný; z kationických tenzidů dodecyldimethylbenzyl-7-
I amoniumchlorid, oxyethylované aminy, cetyltriethylamoniumbromid, tetradecylamoniumbromid, dodecylpyrimidiniumchlorid a hexadecyltrimethylamoniumchlorid; z amfolytických tenzidů dodecyl-p-alanin, kyselinu N-dodecylaminoethansulfonovou, palmitoyllysolecitin a dodecyl-N-betain a z neionických tenzidů kondenzáty ethylenoxidu a propylenoxidu, oxyethylovaný alkylfenol, parciální estery mastných kyselin ^12-22 a hexitol anhydridů, polyoxyethylované deriváty parciálních esterů, získaných adicí polyoxyethylenových řetězců na neesterifikované hydroxyly, polyoxyethylenové parciální estery mastných kyselin a polyoxyethylenové ethery mastných alkoholů ve vodném roztoku při poměru tenzid/protein 1:1 až 66:1 a
c) tepelné zpracování přípravku faktoru VIII v pevném stavu při teplotě v rozmezí 50 až 121 C.
3. Způsob podle nároku 2, vyznačující se tím, že se zpracování tenzidem provádí před chromatografickým čištěním, přičemž poměr tenzid/protein činí 3,5:1 až 10:1.
4. Způsob podle nároku 2, vyznačující se tím, že se zpracování tenzidem provádí během chromatografického čištění.
5. Způsob podle jednoho z nároků 2 až 4, vyznačující se tím, že se tepelné zpracování provádí horkou parou, přičemž přípravek faktoru VIII v pevném stavu je upraven na obsah vody, methanolu nebo ethanolu na více než 5 % hmot, a méně než 70 % hmot., výhodně méně než 40 % hmot, a zpracovává se v uzavřené nádobě, popřípadě za přítomnosti inertního ochranného plynu při teplotě v rozsahu od 50 do 121 °C.
6. Způsob podle jednoho z nároků 2 až 5, vyznačující se tím, že chromatografické čištění se provádí ve více stupních, přičemž v jednom stupni se použije materiál, který adsorbuje faktor VIII a v jednom z dalších stupňů materiál pro adsorpci proteinů, přítomných jako nečistoty.
7. Způsob podle nároků 2 až 6, vyznačující se tím, že se pro chromatografické čištění použije aniontoměnič na akrylátové, silikátové nebo uhlohydrátové bázi.
8. Způsob podle nároku 7, vyznačující se tím, že se použije aniontoměnič, který je tvořen matricí, na kterou jsou navázány polymerní postranní řetězce, které obsahují aniontovýměnné skupiny.
9. Přípravek faktoru VIII srážení krve, vyrobený podle jednoho z nároků 2 až 8, se specifickou aktivitou nejméně 25 j/mg proteinu.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| AT0084992A AT399818B (de) | 1992-04-24 | 1992-04-24 | Verfahren zur herstellung einer hochgereinigten virussicheren faktor viii-präparation |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ69293A3 CZ69293A3 (en) | 1993-12-15 |
| CZ279979B6 true CZ279979B6 (cs) | 1995-09-13 |
Family
ID=3501200
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ93692A CZ279979B6 (cs) | 1992-04-24 | 1993-04-21 | Způsob výroby před virem zabezpečeného, vysocečištěného faktoru VIII |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5410022A (cs) |
| EP (1) | EP0567448B2 (cs) |
| JP (1) | JP2511631B2 (cs) |
| AT (2) | AT399818B (cs) |
| AU (1) | AU659301B2 (cs) |
| BR (1) | BR9301641A (cs) |
| CA (1) | CA2094347C (cs) |
| CZ (1) | CZ279979B6 (cs) |
| DE (1) | DE59308628D1 (cs) |
| DK (1) | DK0567448T4 (cs) |
| ES (1) | ES2117703T5 (cs) |
| FI (1) | FI106468B (cs) |
| HU (1) | HU210632B (cs) |
| MX (1) | MX9302279A (cs) |
| NO (1) | NO307465B1 (cs) |
| PL (1) | PL172462B1 (cs) |
| SK (1) | SK279750B6 (cs) |
| ZA (1) | ZA932843B (cs) |
Families Citing this family (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP3133338B2 (ja) * | 1992-12-16 | 2001-02-05 | イムノ・アクチエンゲゼルシャフト | ウイルス的に安全な生物学的組成物の調製方法 |
| DE4320294A1 (de) * | 1993-06-18 | 1994-12-22 | Immuno Ag | Verwendung von humanem Protein C zur Verhinderung und Behandlung von Thrombozytenablagerungen |
| DE4325872C1 (de) * | 1993-08-02 | 1994-08-04 | Immuno Ag | Virusinaktivierte Faktor Xa-Präparation |
| AT402788B (de) * | 1993-08-03 | 1997-08-25 | Immuno Ag | Virussichere blutgerinnungsfaktor xiii-präparation |
| DE4337573C1 (de) * | 1993-11-04 | 1995-05-18 | Octapharma Ag | Verfahren zur Herstellung einer virusinaktivierten Faktor VIII enthaltenden Fraktion mittels chromatographischer Methoden |
| DE4407837C1 (de) * | 1994-03-09 | 1995-08-17 | Octapharma Ag | Verfahren zur Gewinnung von hochreinem, virusinaktiviertem alpha¶1¶-Antitrypsin mittels Anionenaustauscher-Chromatographie |
| US5659017A (en) * | 1995-11-07 | 1997-08-19 | Alpha Therapeutic Corporation | Anion exchange process for the purification of Factor VIII |
| AT403764B (de) | 1996-03-15 | 1998-05-25 | Immuno Ag | Stabiler faktor viii/vwf-komplex |
| DE19623293C2 (de) * | 1996-06-11 | 1998-10-22 | Biotest Pharma Gmbh | Nicht-immunogene Faktor VIII-enthaltende Zusammensetzung und ein Verfahren zu ihrer Herstellung |
| AT404358B (de) | 1997-02-04 | 1998-11-25 | Immuno Ag | Verfahren zur chromatographischen reinigung bzw. fraktionierung von von willebrand-faktor aus einem vwf-hältigen ausgangsmaterial |
| PL203177B1 (pl) | 1999-02-22 | 2009-09-30 | Baxter Int | Sposób liofilizacji wodnego preparatu farmaceutycznego |
| US20040117862A1 (en) * | 2002-03-11 | 2004-06-17 | Cooper Julian D. | Production of high levels of transgenic factor VII with engineered stability and its therapeutic uses |
| US20060110788A1 (en) * | 2004-10-01 | 2006-05-25 | Invitrogen Corporation | Feeding buffers, systems, and methods for in vitro synthesis of biomolecules |
| JP5779780B2 (ja) | 2008-11-07 | 2015-09-16 | バクスター・インターナショナル・インコーポレイテッドＢａｘｔｅｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｃｏｒｐ０Ｒａｔｅｄ | 第ｖｉｉｉ因子製剤 |
| CN101967188B (zh) * | 2010-11-08 | 2012-11-28 | 江西博雅生物制药股份有限公司 | 一种人凝血因子ⅷ的制备工艺 |
| CN114917328B (zh) * | 2014-11-05 | 2025-06-20 | 雅培制药股份有限公司 | 用于生产具有改善的安全特性的具有脂肪酶活性的组合物和适用于药物用途的组合物的方法 |
Family Cites Families (50)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AT218391B (de) | 1959-01-26 | 1961-11-27 | Anton Daxboeck | Vorrichtung zur Sicherung einer Türschloßfalle, insbesondere für Kraftfahrzeuge |
| US3920625A (en) * | 1973-06-19 | 1975-11-18 | Kabi Ab | Isolation of coagulation factors from biological material using cross linked sulfated, sulfonated carbohydrates |
| AT350726B (de) * | 1976-08-30 | 1979-06-11 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung einer blut- gerinnungsfoerdernden praeperation aus menschlichem blutplasma |
| FR2435832A1 (fr) * | 1978-07-21 | 1980-04-04 | Alsthom Cgee | Dispositif de connexion electrique |
| US4250139A (en) * | 1979-02-01 | 1981-02-10 | Collagen Corporation | Microwave sterilization of dry protein |
| DE2916711A1 (de) * | 1979-04-25 | 1980-11-06 | Behringwerke Ag | Blutgerinnungsfaktoren und verfahren zu ihrer herstellung |
| EP0035204B2 (en) * | 1980-03-05 | 1991-05-22 | Miles Inc. | Pasteurized therapeutically active protein compositions |
| DE3173208D1 (en) * | 1980-10-06 | 1986-01-23 | Edward Shanbrom | Method of reducing undesirable activities of biological and pharmaceutical products |
| US4314997A (en) * | 1980-10-06 | 1982-02-09 | Edward Shanbrom | Purification of plasma protein products |
| DE3043857A1 (de) * | 1980-11-21 | 1982-07-08 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Verfahren zur herstellung von blutgerinnungsfaktoren und danach hergestellte praeparation der faktoren ii und vii |
| DE3045153A1 (de) * | 1980-11-29 | 1982-07-08 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Verfahren zur herstellung von blutgerinnungsfaktoren und danach hergestellte praeparation der faktoren ix und x |
| US4495278A (en) * | 1981-04-27 | 1985-01-22 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Process for making novel blood clotting enzyme compositions |
| US4456590B2 (en) * | 1981-11-02 | 1989-05-30 | Heat treatment of lyphilized blood clotting factor viii concentrate | |
| US4481189A (en) * | 1982-04-14 | 1984-11-06 | New York Blood Center Inc. | Process for preparing sterilized plasma and plasma derivatives |
| US4379085A (en) * | 1982-05-14 | 1983-04-05 | American National Red Cross | Heat stabilization of plasma proteins |
| US4511556A (en) * | 1982-06-10 | 1985-04-16 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Inactivation of a lipid virus |
| JPS59134730A (ja) * | 1983-01-20 | 1984-08-02 | Green Cross Corp:The | 血液凝固第８因子の加熱処理法 |
| CA1213827A (en) * | 1983-04-29 | 1986-11-12 | Ricardo H. Landaburu | Process for pasteurizing fibronectin |
| DE3473407D1 (en) * | 1983-05-02 | 1988-09-22 | Immuno Ag | Method of inactivating pathogens |
| US4540573A (en) * | 1983-07-14 | 1985-09-10 | New York Blood Center, Inc. | Undenatured virus-free biologically active protein derivatives |
| JPS6054287B2 (ja) * | 1983-10-19 | 1985-11-29 | 株式会社ミドリ十字 | 血漿蛋白の加熱処理方法 |
| US4490361A (en) * | 1983-12-02 | 1984-12-25 | Alpha Therapeutic Corporation | Virus inactivating heat treatment of plasma fractions |
| AT389815B (de) * | 1984-03-09 | 1990-02-12 | Immuno Ag | Verfahren zur inaktivierung von vermehrungsfaehigen filtrierbaren krankheitserregern in blutprodukten |
| US5043428A (en) * | 1984-08-31 | 1991-08-27 | Behringwerke Aktiengesellschaft | Pasteurized, isoagglutinin-free factor VIII preparation and a process for its production |
| DE3432083A1 (de) * | 1984-08-31 | 1986-03-06 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Pasteurisierte, isoagglutininfreie faktor viii-praeparation und verfahren zu ihrer herstellung |
| JPH0669961B2 (ja) * | 1984-09-25 | 1994-09-07 | 株式会社ミドリ十字 | 免疫グロブリンの加熱処理方法 |
| JPH0825902B2 (ja) * | 1985-02-21 | 1996-03-13 | 株式会社ミドリ十字 | γ−グロブリンの加熱処理方法 |
| US4673733A (en) * | 1985-04-11 | 1987-06-16 | Sudhish Chandra | Treatment of biological and pharmaceutical products adsorbed on a solid phase with virus and pyrogen inactivating agents |
| AT391808B (de) * | 1986-11-03 | 1990-12-10 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung einer faktor viii (ahf)-haeltigen fraktion |
| AT388501B (de) * | 1987-02-12 | 1989-07-25 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung von parenteral verabreichbaren blutprodukten |
| WO1988008710A1 (en) * | 1987-05-15 | 1988-11-17 | Rubinstein Alan I | Sequential improved method for treatment of human blood-clotting factor products |
| IL86417A (en) * | 1987-05-22 | 1992-09-06 | Armour Pharma | Process for the inactivation of pathogens in biological or pharmaceutical material by mixing with aqueous solution containing a sugar(alcohol)and neutral salts as stabilizers |
| AT391809B (de) * | 1988-01-12 | 1990-12-10 | Immuno Ag | Verfahren zur inaktivierung von vermehrungsfaehigen filtrierbaren krankheitserregern in blutplasmaprodukten |
| FR2630115B1 (fr) * | 1988-04-14 | 1994-10-28 | Merieux Inst | Procede de stabilisation des solutions d'albumine humaine et solution obtenue |
| ATE85220T1 (de) * | 1988-05-27 | 1993-02-15 | Centre Regional De Transfusion | Verfahren zur herstellung eines hochreinen, virusfreien antihaemophiliefaktors mittels chromatographie. |
| AT397203B (de) * | 1988-05-31 | 1994-02-25 | Immuno Ag | Gewebeklebstoff |
| FR2632309B1 (fr) * | 1988-06-07 | 1990-08-24 | Lille Transfusion Sanguine | Procede de purification par voie chromatographique de proteines, notamment de facteur viii, et les produits obtenus |
| AT390801B (de) * | 1988-07-28 | 1990-07-10 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung von lys-plasminogen |
| ES2053684T3 (es) * | 1988-11-05 | 1994-08-01 | Octapharma Ag | Procedimiento para preparar un factor antihemofilico, altamente puro, no infeccioso, mediante cromatografia. |
| US5156973A (en) * | 1988-11-23 | 1992-10-20 | Edward Shanbrom | Antiviral blood sampling process and apparatus |
| DE3843126C3 (de) * | 1988-12-22 | 1994-10-06 | Octapharma Ag | Verfahren zur Herstellung eines hochreinen Thrombinkonzentrates |
| DE69011136T3 (de) * | 1989-01-13 | 2003-10-23 | Mitsubishi Pharma Corp | Verfahren zur Herstellung einer Protein enthaltenden Zusammensetzung. |
| WO1990015613A1 (en) * | 1989-06-15 | 1990-12-27 | Rorer International (Overseas) Inc. | Methods for the inactivation of viruses in viral-contaminated pharmaceutical compositions |
| IE73210B1 (en) * | 1990-01-24 | 1997-05-07 | Warner Lambert Co | Process for the production of thrombin and high purity thrombin preparation thereby obtained |
| US5217737A (en) * | 1991-05-20 | 1993-06-08 | Abbott Laboratories | Plastic containers capable of surviving sterilization |
| AT402891B (de) * | 1991-06-20 | 1997-09-25 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung eines inaktivierten blutproduktes |
| FR2679251B1 (fr) * | 1991-07-18 | 1993-11-12 | Nord Assoc Essor Transfusion San | Procede de preparation d'un concentre de thrombine humaine destine a un usage therapeutique. |
| FR2681867B1 (fr) * | 1991-09-26 | 1993-12-31 | Pasteur Merieux Serums Vaccins | Procede de purification du facteur viii et preparations obtenues. |
| AT398079B (de) * | 1991-11-04 | 1994-09-26 | Immuno Ag | Präparation mit thrombinaktivität sowie verfahren zu ihrer herstellung |
| FR2841484B1 (fr) * | 2002-06-26 | 2004-09-10 | Boucq De Beaudignies Ghisla Le | Dispositif et procede de filtration de l'air et des gaz avec regeneration des particules captees |
-
1992
- 1992-04-24 AT AT0084992A patent/AT399818B/de not_active IP Right Cessation
-
1993
- 1993-04-07 AT AT93890076T patent/ATE166881T1/de not_active IP Right Cessation
- 1993-04-07 DK DK93890076T patent/DK0567448T4/da active
- 1993-04-07 ES ES93890076T patent/ES2117703T5/es not_active Expired - Lifetime
- 1993-04-07 DE DE59308628T patent/DE59308628D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-04-07 EP EP93890076A patent/EP0567448B2/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-04-09 HU HU9301038A patent/HU210632B/hu not_active IP Right Cessation
- 1993-04-14 AU AU36875/93A patent/AU659301B2/en not_active Ceased
- 1993-04-19 CA CA002094347A patent/CA2094347C/en not_active Expired - Fee Related
- 1993-04-20 US US08/049,585 patent/US5410022A/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-04-20 MX MX9302279A patent/MX9302279A/es not_active IP Right Cessation
- 1993-04-21 CZ CZ93692A patent/CZ279979B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1993-04-22 NO NO931476A patent/NO307465B1/no not_active IP Right Cessation
- 1993-04-22 PL PL93298670A patent/PL172462B1/pl unknown
- 1993-04-22 FI FI931826A patent/FI106468B/fi active
- 1993-04-22 ZA ZA932843A patent/ZA932843B/xx unknown
- 1993-04-23 SK SK391-93A patent/SK279750B6/sk unknown
- 1993-04-23 BR BR9301641A patent/BR9301641A/pt not_active Application Discontinuation
- 1993-04-23 JP JP5097532A patent/JP2511631B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0567448B2 (de) | 2005-01-05 |
| JPH069694A (ja) | 1994-01-18 |
| NO307465B1 (no) | 2000-04-10 |
| FI931826L (fi) | 1993-10-25 |
| DE59308628D1 (de) | 1998-07-09 |
| SK279750B6 (sk) | 1999-03-12 |
| HU9301038D0 (en) | 1993-06-28 |
| SK39193A3 (en) | 1993-11-10 |
| US5410022A (en) | 1995-04-25 |
| BR9301641A (pt) | 1993-10-26 |
| AU659301B2 (en) | 1995-05-11 |
| ATE166881T1 (de) | 1998-06-15 |
| FI931826A0 (fi) | 1993-04-22 |
| EP0567448A1 (de) | 1993-10-27 |
| PL298670A1 (en) | 1994-04-05 |
| ES2117703T5 (es) | 2005-07-16 |
| HU210632B (en) | 1995-06-28 |
| NO931476D0 (no) | 1993-04-22 |
| DK0567448T3 (da) | 1999-03-22 |
| HUT64777A (en) | 1994-02-28 |
| PL172462B1 (pl) | 1997-09-30 |
| NO931476L (no) | 1993-10-25 |
| DK0567448T4 (da) | 2005-05-02 |
| EP0567448B1 (de) | 1998-06-03 |
| AT399818B (de) | 1995-07-25 |
| CZ69293A3 (en) | 1993-12-15 |
| CA2094347C (en) | 2002-06-25 |
| ES2117703T3 (es) | 1998-08-16 |
| ATA84992A (de) | 1994-12-15 |
| AU3687593A (en) | 1993-10-28 |
| CA2094347A1 (en) | 1993-10-25 |
| JP2511631B2 (ja) | 1996-07-03 |
| ZA932843B (en) | 1993-11-23 |
| FI106468B (fi) | 2001-02-15 |
| MX9302279A (es) | 1994-08-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0315968B2 (en) | Plasma and recombinant protein formulations in low ionic strength media | |
| US5605884A (en) | Factor VIII formulations in high ionic strength media | |
| US4876241A (en) | Stabilization of biological and pharmaceutical products during thermal inactivation of viral and bacterial contaminants | |
| CZ279979B6 (cs) | Způsob výroby před virem zabezpečeného, vysocečištěného faktoru VIII | |
| EP0314095B1 (en) | Plasma and recombinant protein formulation in high ionic strength media | |
| JP3133338B2 (ja) | ウイルス的に安全な生物学的組成物の調製方法 | |
| JP3628703B2 (ja) | 治療グレードトロンビン産物及び製品 | |
| US6358534B1 (en) | Immunotolerant prothrombin complex preparation | |
| US4749783A (en) | Viral inactivation and purification of active proteins | |
| CA1337688C (en) | Stabilization of biological and pharmaceutical products during thermal inactivation of viral and bacterial contaminants | |
| AT405608B (de) | Verfahren zur inaktivierung von pathogenen, insbesondere von viren, in einem biologischen material | |
| HU211239A9 (hu) | Eljárás nagy tisztaságú, vírusbiztos Vili faktor-készítmény előállítására | |
| US6605222B1 (en) | Method for producing a factor VIII/von Willebrand factor complex |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20020421 |