SK16432001A3

SK16432001A3 - Indolové deriváty

Info

Publication number: SK16432001A3
Application number: SK1643-2001A
Authority: SK
Inventors: Nava Zisapel; Moshe Laudon
Original assignee: Neurim Pharmaceuticals (1991) Ltd.
Priority date: 1999-05-27
Filing date: 2000-05-24
Publication date: 2002-06-04
Also published as: DK1189583T3; MXPA01012041A; CN100425592C; SK285173B6; IL130169A; TWI285634B; EP1189583A4; NZ515867A; BR0012184A; CZ20014191A3; EA008907B1; PL351884A1; CZ300126B6; PT1189583E; ATE299876T1; NO20015737D0; IL130169A0; EE04675B1; JP2003517460A; JP3840378B2

Description

Oblasť techniky

Tento vynález sa týka nových zlúčenín, ktoré sú deriváty indolu, farmaceutických formulácií, ktoré ich obsahujú, a použitia zlúčenín na výrobu liékov na liečbu rôznych nemoci.

Doterajší stav techniky

Nové zlúčeniny tu opísané sú štruktúrne a funkčne odvodené od melatonínu, 3-(2-acetaminoetyl)-5-metoxyindolu, hormónu primárne produkovaného epifýzou. Melatonín je hlavným hormónom produkovaným epifýzou u všetkých stavovcov. U všetkých cicavcov doteraz študovaných, vrátane človeka, sa počas noci evidentne zvyšuje produkcia melatonínu epifýzou; telová produkcia melatonínu je svetlom intenzívne znížená. Melatonín je zapojený do koordinácie fyziologických procesov a procesov závislých na svetle. Schopnosť zvierat alebo ľudí odpovedať na melatonínový signál môže závisieť na melatonínových receptoroch. Melatonín pôsobí na CNS a ovplyvňuje nervové mechanizmy pomocou receptorov umiestnených v mozgu. Navyše mnoho štúdií indikuje existenciu priamych účinkov melatonínu v periférnych orgánoch cez periférne melatonínové receptory. Melatonínové receptory sú prítomné v srdci, pľúcach, prostate, pohlavných žľazách, bielych krvinkách, sietnici, hypofýze, štítnej žľaze, ľadvinách, črevách a v cievach. Retenčné obrázky rádioaktívneho melatonínu injektovaného do potkanov ukazujú akumuláciu melatonínu v mozgu, hypofýze, pľúcach, srdci, pohlavných žľazách a v príslušných pohlavných orgánoch (Withyachumnarnkul a kol., Life Sci, 12:175765,1986).

Syntéza a vylučovanie melatonínu vykazujú denný rytmus, ktorý sa mení s ročným obdobím a vekom, napr. s pubertou a vekom. Existuje mnoho dôkazov, že melatonín je dôležitý na reguláciu množstva nervových a endokrinných funkcií, najmä tých, ktoré vykazujú denný a ročný rytmus.

Melatonín spôsobuje ' mnoho ľudských porúch. Niektoré sa spájajú s chronobiologickými abnormalitami. Melatonín sa podáva na re-synchronizáciu denných rytmov, ktoré sa vyskytli mimo fázy lokálnych fotoperiodických cyklov.

Napríklad poruchy spánku/zobudenia spojené s rapídnou zmenou časových pásiem

-<2(desynchronizmus), alebo u pacientov so syndrómom oneskorenej fázy spánku (DSPS), zmeny pri pracovných smenách alebo poruchy slepých ľudí je možné liečiť melatonínom alebo melatonínovými analógmi (pozri USA Patenty č. 4 600 723 a

666 086 od Short a kol. a 5 242 941 od Lewy a kol.). Zdá sa však, že melatonín má tiež priame sedatívne/hypnotické účinky u normálnych ľudí (napr. Waldhauser a kol., Psychopharmacology, 100: 222-226, 1990; Vollrath a koľ, Bioscience, 29:327329, 1981; Dollins a koľ, Proc. Natl. Acad. Sci, 99:1824-1828, 1994; USA Patent č.

403 851 od D’Orlando a kol.). Doteraz sa identifikovali tri podtypy melatonínových receptorov mt-1, MT-2 a Me11c (Barrett a kol., Biol. Signals Recept., 1999, 8: 6-14). MT-2 sa nachádza hlavne v centrálnom nervovom systéme a mt-1 sa nachádza v CNS a tiež v periférnych orgánoch ako sú ľadviny a urogenitálny trakt (Dubocovich a kol., IUPHAR média, London, UK, 187-93, 1998). Doteraz známe podtypy nie sú dostatočné na vyhodnotenie veľkého množstva melatonínových účinkov a ďalšie podtypy receptorov čakajú na svoje odhalenie.

Melatonín bol demonštrovaný na mnohých experimentálnych príkladoch u hlodavcov, že má tak anxiolytickú (Golus a King, Pharmacol. Biochem. Behav., 41:405-408, 1992, Naranjo-Rodriguez a kol., Soc. Neurosci. Abst., 18:1167, 1992; Golombek a kol., Eur. J. Pharmacol, 237:231-236, 1993) a protizáchvatovú účinnosť (Brallowsky, Electroencephalo. Clin. Neurophysiol., 41:314-319, 1976; Farielio a kol., Neurology, 27:567-570, 1977; Rudeen a kol., Epilepsia, 21:149-154, 1980; Sugden, J. Pharmacol Exp. Ther., 227:587-591, 1983; Golombek a kol., Eur. J. Pharmacol, 210:253-258, 1992).

Melatonín je účinný pri liečbe bolestí hlavy a pri migrénach (Claustrat a kol., Headache, 29:241-4, 1989). Melatonín môže hrať úlohu pri iných psychiatrických stavoch, najmä u depresie, ale tiež u mánie a schizofrénie (pozri Dobocovich, “Antidepŕessant agents”; USA Patent č. 5 093 352; Miles a Philbrick, Biol. Psychiatry, 23:405-425, 1988; Sandyk a Kay, Schizophr. Bull., 16:653-662, 1990). V niektorých prípadoch môžu mať psychiatrické poruchy základ v chronobiologických etiológiach (napr. sezónna efektívna porucha) a určite sú kandidátmi na melatonínovú terapiu.

Melatonín je zapojený do regulácie denných a ročných zmien telesnej teploty.

Podávanie exogénneho melatonínu znižuje u ľudí ich vnútornú telesnú teplotu (Strassman a kol., J. Appl. Physiol, 71:2178-2182, 1991; Cagnacci a kol., J. Clin.

Endocrinol. Metab., 75:447-452, 1992). Melatonín môže tiež mať analgetické vlastnosti (Sugden, J. Pharmacol. Exp. Ther,, 227:587-591, 1983). Preto môžu byť

-J zlúčeniny podobné melatonínu užitočné ako alternatíva k nesteroidným protizápalovým, antipyretickým liekom, ako je aspirín, acetaminofén a ibuprofén.

Je známe, že hladiny melatonínu s postupujúcim vekom klesajú (Sack a kol.,

J. Pineal Res., 4:379-388, 1986; Waldhauser a kol., J. Clin. Endocrinol. Metab., 66:648-652, 1988; Van Coavorden a kol., Am. J. Physiol., 260:E651-661, 1991), čo môže prispieť k niektorým poruchám. Neurodegeneratívne choroby často spojené so starnutím, ako je Alzheimerova a Parkinsonova choroba, môžu sa liečiť melatonínergickými zlúčeninami (Maurizi, Med. Hypotheses, 31:233-242, 1990; Sandyk, Int. J. Neurosci., 50:37-53, 1990; Skene a kol., Brain Rev., 528:170-174, 1990).

Ukázalo sa, že poruchy spánku u starších ľudí reagujú na melatonínovú liečbu (Garfinkel a kol., Lancet, 346:541-543, 1995; USA Patent No. 5 498 423 od Zisapel). Objavujú sa uspávajúce účinky melatonínu (0,3-240 mg) u ľudí, ktorí sa podrobujú intravenóznemu, intran'azálnemu a orálnemu podávaniu. Okrem jeho uspávajúcich účinkov môže exogénny melatonín ovplyvňovať spánok jeho znovunastavovacím pôsobením na biologické hodiny. Podávanie melatonínu zlepšuje spánok u pacientov so syndrómom oneskorenej fázy spánku a synchronizuje spánok s denným-nočným cyklom u slepých subjektov. Účinnosť melatonínu (0,3-5 mg/ústne) na liečbu nespavosti sa ukázala na štúdiách uskutočnených najčastejšie na starších pacientoch, pacientoch liečených atenololom a pacientoch s chronickými problémami srdca, kde väčšina pacientov má nízky alebo deformovaný melatonínový rytmus. V niektorých týchto štúdiách sa použili formulácie, ktoré uvoľňujú melatonín cez noc, za účelom obísť rýchle odstránenie hormónu a napodobniť jeho endogénny profil (Nutrition, 1998, 14: 1-2; The Aging Malé, 1998, 1: 1-8). 3 mg melatonínu, ktoré sa podávali pacientom s poruchami spánku a demenciou počas 21 dní, výrazne zvýšili kvalitu spánku a znížili počet prebudení, pričom sa výrazne znížilo nekľudné chovanie v noci (sundowning) (Biol. Signals Recept., 1999, 8(1-2); 126-31).

Nedávno sa zistilo, že melatonínová liečba môže byť prospešná nie len na zlepšenie kvality spánku, ale môže tiež viesť k zlepšeniu celkového stavu diabetických pacientov, ako je vidieť z poklesu HbA1 c hladín po dlhodobej liečbe.

Denné prídavky melatonínu samčím Sprague-Dawleyovým potkanom od stredného veku (10 mesiacov) až do neskorého veku (22 mesiacov) v pitnej vode pri dávkovaní 4 gg/ml obnovili časom zvýšené hladiny relatívneho (% telesnej hmotnosti) retroperitoneálneho a epididymáíneho tuku, rovnako tak ako inzulín v plazme a hladiny leptínu na hladiny mladých jedincov (4 mesiace) (Rasmussen a koľ, Endocrinology, 1999, 140(2): 1009-12).

Dokonca i osteoporóza môže mať melatonínergickú zložku (Sandyk a kol., Int. J. Neurosci., 62:215-225, 1992). V skutočnosti je melatonín považovaný za hormón proti starnutiu a proti stresu (Armstrong a Redman, Med. Hypotheses, 34:300-309, 1991; Reiter, Bioassays, 14:169-175, 1992). Môže to byť spôsobené jeho účinkom ako zachytávač voľných radikálov (Pooggeler a kol., J. Pineal Res., 14:151-168, 1993) alebo jeho interakciou s imunitným systémom (Maestroni a Conti, J. Neuroimmun., 28:167-176, 1990; Fraschini a kol., Acta. Oncol., 29:775776, 1990; Guerrero a Reiter, Endocr. Res., 18:91-113, 1992). Melatonín môže chrániť pred ischemickou porážkou (Cho a kol., Brain Research, 755:335-338, 1997), môže znižovať úmrtnosť buniek u Alzheimerovej choroby (Pappola a kol., J. Neurosci, 17:1683-90, 1997) a môže znižovať nebezpečie AIDS u malých detí s nízkymi hladinami endogénneho melatonínu (izraelské patenty č. 115861/2 a USA Patent No. 5 500 225 od Laudon a kol.).

K skôr uvedenému sa tiež vzťahujú zistenia, že melatonín má onkostatické vlastnosti v odrodách rakovín, najviac sa študuje jeho vplyv na estrogénny receptor pozitívnych nádorov prsníka (Blasak a Hill, J. Neural. Transm. Suppl., 21:433^449, 1986; Gonžalez a kol., Melanoma. Res., 1:237-243, 1991; Lissoni a kol., Eur. J. Cancer, 29A: 185-189, 1993; Shellard a kol., Br. J. Cancer, 60:288-290, 1989; Philo a Berkowitz, J. Urol., 139:1099-1102, 1988; pozri USA Patenty č. 5 196 435 od Clemens a kol. a 5 272 141 od Fraschini a kol.). Tiež je možné, že melatonín má tiež účinky proti bujneniu na nerakovinové bunky a je ho možno použiť na liečbu benígnych nádorov a proliferatívnych chorôb ako je BPH (USA Patent č. 5 750 557 a európsky patent č. EP 0565296B od Zisapel) a lupienka.

Veľká časť výskumu melatonínu sa sústredila na účinky na reprodukciu, najmä u druhov, ktoré sa rozmnožujú sezónne (ako je škrečok a ovca), u ktorých sa vie, že melatonín reguluje fertilitu a pubertu, hibernáciu a farbu kožušiny. Tieto účinky majú zreteľný význam pre hospodárske využitie. Melatonín má u ľudí tiež reproduktívne endokrinné použitie: prostriedky na antikoncepciu a plodnosť, liečenie predčasnej puberty, liečenie premenštruačného syndrómu a hyperprolaktinémie (Pevre a kol., J. Clin. Endocrinol. Metab., 47:1383-1386, 1978; Pumy a koľ, Am. J. Psychiatry, 144:762-766, 1987; Waldhauser a kol., Clin. Endocrinol. Metab., 73:793.-5-79Q, 1991; Bispink a kol., Pineal Res., 8:97-106, 1990; Cagnacci a kol., J. Clin. Endocrinol. Metab., 73:210-220, 1991; Voordouw a kol., J. Clin. Endocrinol. Metab., 74:107-108, 1992; pozri USA patent č. 4 855 305 a 4 945 103 od Cohen a kol.; a 5 272 141 od Fraschini a kol.). Je pravdepodobné, že melatonínové zlúčeniny môžu tiež byť užitočné u iných endokrinných stavov, najmä u tých, kde je zapojený rastový hormón (Cramer a kol., Arzeneim-Forsch, 26:1076-1078, 1976; Wright a kol., Clin. Endocrinol., 24:375-382, 1986; Paccotti a kol., Chronobiologica, 15:279288, 1988; Vaicavi a kol., Clin. Endocrinol., 39:139-199, 1993). Melatonín môže slúžiť na redukciu zväčšovania prostaty (pozri vyše citované USA a EP patenty od Zisapel). Ústne podávaný melatonín mladým kastrovaným potkanom inhiboval androgénne závislý rast ventrálnej prostaty a semenných vačkov (Gilad a koľ, J. of Urol., 159:1069-73, 1998). Nedávno sa demonštrovala vysoká afinita melatonínových receptorov v ľudských benígnych výstelkových bunkách prostaty, ktoré môžu mať vplyv na rast a životaschopnosť buniek (Endocrinology, 137:141217, 1996).

Okrem epifýzy tiež oko syntetizuje melatonín. Nedávno sa zistilo, že melatonín je zapojený do kontroly intraokulámeho tlaku a môže byť užitočný pri zelenom zákale (Samples a kol., Curr. Eye Res., 7:649-653, 1988; Rhode a kol., Ophthalmic. Res., 25:10-15, 1993).

Ľadvina tiež vykazuje prítomnosť melatonínových receptorov a ukázalo sa, že melatonín ovplyvňuje antidiuretický hormón a vylučovanie močom (Song a kol., FASEB J. 11:93-100, 1997; Yasina kol., Brain Res. Bull; 39:1-5,1997).

Je zrejmé, že existuje široký rozsah terapeutických použití pre melatonín. Preto je tu neustály záujem o identifikáciu nových zlúčenín, ktoré interagujú s melatonínergickými systémami ako potenciálne terapeutické prostriedky. Tieto zlúčeniny môžu ponúknuť dlhšiu výdrž, selektívnu lokalizáciu a väčšiu účinnosť ako má melatonín.

Nové zlúčeniny odvodené od melatonínu, ale s iným farmakologickým alebo farmakokinetickým profilom než melatonín, sa zdajú byť novými dôležitými liečivami. Napríklad, pozri USA Patent č. 5 403 851, ktorý opisuje použitie substituovaných tryptamínov, fenylalkylamínov a odvodených zlúčenín za účelom liečby množstva farmaceutických indikácií včítane, porúch spánku, endokrinných indikácií, poruchy

-6zlúčeniny. Európska patentová prihláška č. 0330625A2 opisuje produkciu melatonínu a jeho analógov pre rôzne terapeutické účely včítane podávania melatonínu v kombinácii s azidotymidínom na liečbu AIDS. Melatonínové analógy založené na bioizosterických vlastnostiach naftalénového a indolového kruhu sú opísané v J. Med. Chem., 1992, 35:1484-1485; EP 662471 A2 950712 od Depreux a koľ; WO 9529173 A1 951102 od Ladlow a kol.; USA Patent č. 5 151 446 od Horn a kol.; 5 194 614 od Adrieux a kol. a 5 276 051 od Lesieur a kol.

Existujú dôkazy nasvedčujúce tomu, že by agonisti i antagonisti melatonínu mohli mať potencionálne terapeutické použitie pre rôzne choroby a stavy. Tento vynález sa zameriava na potrebu zlúčenín terapeuticky selektívnejších ako je melatonín.

Celé obsahy vyššie uvedených patentov, prihlášok vynálezov a článkov z literatúry sú považované, že sú tu odkazom zahrnuté.

Podstata vynálezu

V jednom aspekte tento vynález poskytuje zlúčeniny, ktoré majú všeobecné vzorce (I) a (II):

. a ich soli vzniknuté kyslou adíciou, kde zlúčeniny sú zásadité, kde:

každé R je nezávisle vybrané zo skupiny halogén, C^-alkyl, Ci-4-alkoxy,

NR’R, nitro, aryl, aryl-Ci-4-alkyl, alebo aryl-Ci-4-alkoxy, a každé z R’ a R” je nezávisle H alebo Ci-4-alkyl, alebo R’ = R” = CICH2CH2, alebo NR’R” tvorí nasýtený heterocyklický kruh obsahujúci 3-8 členov kruhu a m je 0-4;

R¹ je vybrané zo skupiny vodík, Ci_4-alkyl, Cw-alkanoyl, aryl-Ci-4-alkanoyl alebo aryl-Ci-4-alkyl; R² je vybrané zo skupiny vodík, halogén, C1 ^-alkyl, Ci.₄-alkoxy, aryl, aryl-C^-alkyl, aryl-Ci-4-alkoxy a NR’R” ako je definované vyššie;

A je Ci-4-alkylén;

-7X je >CH₂, >C=0 alebo >C=S;

V je 2-furyl, 2-dihydŕofuryl, 2-tetrahydrofuryl alebo (2-R°-COO-)fenyl, kde ktorýkoľvek z nich môže byť substituovaný 1-2 substituentami vybranými zo skupiny Ci_₄-alkyl, Cw-alkoxy, OH, NR’R” ako je definované vyššie alebo nitro, alebo Y je styryl, ktorý môže byť substituovaný na kruhu až dvoma substituentami nezávisle vybranými zo skupiny halogén, Ci-4-alkyl, Ci^-alkoxy, OH, NR’R” ako je definované vyššie, nitro, aryl, aryl-Cw-alkyl alebo aryl-Ci-4-alkoxy;

R° je C i-4-a Iky I alebo NR’R” ako je definované vyššie;

Z je vybrané zo skupiny 2-(e-(3,5-dioxoizoxazolidin-4-ylmetyl)fenoxy)etylamino, g-(3,5-dioxoizoxazolidin-4-ylmetyl)fenoxy, 2-(p-(2,4-dioxotiazolidin-5-ylmetyl)fenoxy)etylamino, p-(2,4-dioxotiazolidin-5-ylmetyl)fenoxy, 2-(p-(3,5-dioxoizoxazolidin-4-ylidenmetyl)fenoxy)etylamino, E-(3,5-dioxoizoxazolidin-4-ylidenmetyl)fenoxy, 2-(p-(2,4-dioxotiazolidin-5-ylidenmetyl)fenoxy)etylamino, p-(2,4-dioxotiazolidin-5-ylidenmetyl)fenoxy, 3,5-dÍoxoizoxazolidin-4-ylmetylamino, 2,4-dioxotiazolidin-5-ylmetylamino a cinnamoyloxy, ktoré sa môžu substituovať na kruhu až dvoma substituentami nezávisle vybranými zo skupiny halogén, Ci-4-alkyl, Ci_4-alkoxy, OH, NR’R” jak je definované vyše, nitro, aryl, aryl-Ci^-alkyl alebo arylCi-₄-alkoxy; a každý aryl je fenyl, ktorý je nesubstituovaný alebo je substituovaný 1-3 substituentami vybranými zo skupiny halogén, Ci-4-alkyl a CM-alkoxy.

V jednotlivých uskutočneniach vynálezu môže Y byť styryl, prípadne substituovaný na kruhu až dvoma substituentami nezávisle vybranými zo skupiny halogén, C1-4-alkyl, Ci-₄-alkoxy, OH, NR’R” ako je definované vyššie, nitro, aryl, aryl-Ci-4-alkyl alebo aryl-Ci-4-alkoxy; a/alebo Zmôže byť cinnamoyloxy, prípadne substituovaný na kruhu až dvoma substituentami nezávisle vybranými zo skupiny halogén, Ci^-alkyl, C1 ^-alkoxy, OH, NR’R” ako je definované vyššie, nitro, aryl, aryl-Ci-4-alkyl alebo aryl-Ci-4-alkoxy.

V inom ohľade vynález poskytuje farmaceutickú formuláciu, ktorá obsahuje aspoň jedno farmaceutický prijateľné rozpúšťadlo, ochrannú látku, solubilizátor, emulgátor, pomocnú látku, a/alebo nosič, a aspoň jeden člen skupiny skladá sa zo zlúčenín podľa tohoto vynálezu, ako je definované vyššie, a jeho farmaceutický prijateľných solí.

V ďalšom ohľade tento vynález poskytuje použitie aspoň jedného člena skupiny skladajúcej sa zo zlúčenín tohoto vynálezu, ako je definované predtým, a jeho

-8farmaceuticky prijateľných solí pri výrobe lieku na použitie pri chove zvierat alebo na prevenciu alebo liečbu stavov prostaty, impotencie, kardiovaskulárnych porúch, porúch centrálneho nervového systému a psychiatrických porúch, chronobiologicky odvodených porúch, endokrinných indikácií, neoplastických porúch, imunitného systému, stavov spojených so starnutím, očných nemocí, bolestí hlavy, migrény a dermatologických nemocí.

Bez zaujatia k všeobecnosti zlúčenín tohoto vynálezu, podskupina týchto výhodných zlúčenín je definovaná skutočnosťami, že vo vzorci (I) m je 1 a R je substituent na 5 polohe indolového kruhu. Ďalšia podskupina týchto zlúčenín je definovaná skutočnosťami, že vo vzorci (I) sa použije aspoň jedna z nasledujúcich podmienok, menovite: m je 1 a R je 5-metoxy; a/alebo A je CH2CH2, a v rámci tejto podskupiny sú ilustratívne uskutočnenia zlúčenín tohoto vynálezu, najmä kde R¹ = R² = H, nasledujúce:

X je -CO- a Y je 2-furyl; alebo X je -CO- a Y je 2-tetrahydrofuryl; alebo

X je -CH₂- a Y je 2-tetrahydrofuryl; alebo X je -CO- a Y je 2-acetoxyfenyl;

alebo

X je -CO- a Y je 3,4-dihydroxystyryl; alebo Z je 3,4-dihydroxycinnamoyloxy.

Farmaceutická formulácia podľa vynálezu sa s výhodou vyznačuje aspoň jedným z nasledujúcich znakov:

(i) je prispôsobená na orálne, rektálne, parenterálne, transbukálne, intrapulmonárne (napr. inhaláciou) alebo transdermálne podávanie;

(ii) je vo forme jednotlivých dávok, kde každá jednotlivá dávka obsahuje aspoň jeden skôr uvedený člen v množstve ktoré leží v rozmedzí 0,0025 až 1000 mg;

(iii) táto formulácia je s kontrolovaným uvoľňovaním, kde aspoň jeden skôr uvedený člen je uvoľňovaný vopred danou rýchlosťou.

Vo farmaceutických formuláciách tohoto vynálezu sa používajú farmaceutický prijateľné rozpúšťadlá, ochranné látky, solubilizátory, emulgátory, pomocné látky a nosiče, ktoré sú bežne používané vo farmaceutických a veterinárnych formuláciách. Tieto farmaceutické formulácie sa môžu prispôsobiť na podávanie ľudom a/alebo zvieratám.

Na ústne podávanie môžu sa farmaceutické formulácie použiť ako napr.

tablety, kapsule, emulzie,, roztoky, sirupy alebo suspenzie. Na parenterálne podávanie sa môžu formulácie použiť ako ampuly, alebo inak ako suspenzie,

-9roztoky alebo emulzie vo vodnom alebo olejovom nosiči. Potreba suspendujúcich, stabilizujúcich a/alebo disperzných prostriedkov bude samozrejme počítať so skutočnou rozpustnosťou, alebo inak aktívnych zložiek, v nosičoch, ktoré sú použité v jednotlivých uskutočneniach. Formulácie môžu navyše obsahovať napr. fyziologicky kompatibilné ochranné prostriedky a antioxidanty.

Tieto farmaceutické formulácie môžu sa tiež použiť ako čapíky s bežnými základmi čapíkov ako je kakaové maslo alebo iné glyceridy. Alternatívne môžu byť formulácie dostupné vdepotnej forme, z ktorej sa pomaly uvoľňuje aktívna kompozícia do tela počas vopred vybranej doby.

Zlúčeniny tohoto vynálezu môžu sa ďalej podávať za použitia transbukálnych, intrapulmonárnych alebo transdermálnych dopravných systémov.

Prostredníctvom ďalšej elaborácie alebo vysvetlenia podmienok, čo sa teraz zamýšľa, môže byť prístupné liečenie podávaním týchto zlúčenín, medzi takéto podmienky patrí benígny a nádorový rast prostatý, a impotencie; kardiovaskulárne poruchy včítane hypertenzie, prevencie koagulácie krvi a ochrana pred ischemickými záchvatmi; poruchy centrálneho nervového systému a psychiatrické poruchy, napr. poruchy spánku, epilepsie a ďalšie kŕčové poruchy, úzkosť, psychiatrické nemoci, neuropatia; neurodegeneratívne poruchy, napr. Alzheimerova choroba, Parkinsonova choroba, horúčka a znížená vnímavosť bolesti; chronobiologicky odvodené poruchy, napr. desynchronizmus, denné poruchy spánku, ako je syndróm oneskorenej fázy spánku, problémy s pracou na smený a sezónne spojené poruchy, napr. sezónna efektná porucha (SAD); endokrinná indikácia, napr. antikoncepcia a neplodnosť, predčasná puberta, premenstruačný syndróm, hyperproiaktinémia a nedostatok rastového hormónu; protizápalové indikácie napr. reumatická artritída; neoplastické choroby vrátane napr. rakoviny a ďalšie proliferatívne choroby; poruchy imunitného systému vrátane AIDS; stavy spojené so starnutím; očné choroby; alergické choroby napr. astma; bolesť hlavy, migréna; účinky anti-Tardive dyskinézie, poruchy stabilizácie cukrovky a poruchy s nadváhou (leptín, obezita); a ako pomoc pri chovu zvierat, napr. regulácia plodnosti, puberty, farby srsti.

Ďalej sa zamýšľa, že tieto zlúčeniny (a najmä tie, kde vo vzorci (I) je

Y prípadne substituovaný styryl ako je definované vyššie a vo vzorci (II) je Z prípadne substituovaný cinnamoyloxy, môžu mať potencionálne použitie z dôvodu toho, že majú antioxidačnú aktivitu a aktivitu zachytávať radikály, a vynález preto

- 10obsahuje pokožku chrániace a kozmetické kompozície na topickú aplikáciu, ako sú (len prostredníctvom ilustratívnych príkladov) masti, krémy, balzamy a pleťové vody, ktoré obsahujú aspoň jednu zlúčeninu z tohoto vynálezu, spolu s aspoň jedným rozpúšťadlom, nosičom a pomocnou látkou.

Vynález je ilustrovaný nasledujúcimi príkladmi.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

5-metoxv-3-(2-(tetrahvdro-2-furamido)etyl)indol (MLP-79)

5-metoxytryptamín (540 mg, 2,84 mmol) sa suspenduje v benzéne (5 ml). Zmes sa ochladí v ľadovom kúpeli a pomaly sa pridá. roztok tetrahydro-2furoylchloridu (390 μΙ, 3,7 mmol) v benzéne (5 ml). Reakčná zmes sa mieša, pri teplote miestnosti počas 15 hodín a zriedi sa éterom (25 ml). Extrahuje sa vodou (25 ml), roztokom NaHCO₃ (2x25 ml) a nasýteným roztokom NaCI (25 ml), vysuší sa (MgSCU) a rozpúšťadlo sa odstráni vákuom. Ďalšie prečistenie sa vykoná stĺpcovou chromatografiou na silikagéli. Rozpúšťadlo je 50% etylacetát v CH2CI2. Zhromaždujú sa 10 ml frakcie a produkt sa eluuje vo frakciách 19-32. Získa sa produkt ako olej. Výťažok je 220 mg (-30%).

NMR (CDCb): δ = 1,71 - 22,8 (m, 4H, CH₂CH₂); 2,94 (t, J = 6,8 Hz, 2H, CH2CH2); 3,59 (q, J = 6,8 Hz, 2H, CH₂NH); 3,70-3,82 (m, 2H, CH₂O); 3,81 (s, 3H, OCH₃); 4,32 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 5,8 Hz, 1H, C=OCHO); 6,75 (široké s, 1H, CH₂NH); 6,85 (dd, J1 = 8,75 Hz, J2 = 2,45 Hz, 1H, aromatický H); 7,05 (s, 1H, C=CH); 7,10 (dd, J1=3,45Hz, J2 = 0,72 Hz, 1H, aromatický H); 7,26 (d, J1 = 8,75 Hz, 1H, aromatický H); 8,17 (s, 1H, NH).

IR (čistý): v = 3395 (NH), 3302 (NH), 2936, 2868, 1651, (CO amid), 1532 (CH=CH), 1484, 1215, 1066.

-11Príklad 2

5-metoxy-3-(2-(2-furamido)etvl)indol (MLP-76)

5-metoxytryptamín (300 mg, 1,57 mmol) sa suspenduje v benzéne (5 ml). Zmes sa ochladí v ľadovom kúpeli a pomaly sa pridá roztok 2-furoylchloridu (190 μΙ, 1,9 mmol) v benzéne (5 ml). Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti po dobu 15 hodín a zriedi sa éterom (25 ml). Extrahuje sa vodou (25 ml), roztokom NaHCO3 (2x25 ml) a nasýteným roztokom NaCl (25 ml),' vysuší (MgSO4) a rozpúšťadlo sa odstráni vákuom. Ďalšie prečistenie sa dosiahne stĺpcovou chromatografiou na silikagéli. Rozpúšťadlo je 50% etylacetát v CH2CI2. Zhromaždí sa 10 ml frakcia a produkt sa eluuje vo frakciách 10-18. Obdrží sa produkt ako olej, ktorý rekryštalizuje z CH2CI2 (0,5 ml) pri -8 °C. Výťažok je 220 mg (50%), teplota topenia 89 až 90 °C.

NMR (CDCb): δ = 3,03 (t, J = 6,75 Hz, 2H, CH₂CH₂); 3,75 (q, J = 6,2 Hz, 2H,

CH₂NH); -3,81 (s, 3H, OCH₃); 6,52 (široké s, 1H, CH₂NH); 6,46 (dd, J1 = 3,46 Hz,

J2 = 1,75Hz, '1 H, CH=CH-CH); 6,86 (dd, J1 = 8,75 Hz, J2 = 2,45 Hz, 1H, aromatický H); 7,04 (d, J = 1,76 Hz, 1H, CH=CH-CH); 7,05 (s, 1H, C=CH); 7,10 (dd, J1 = 3,45 Hz, J2 = 0,72 Hz, 1H, aromatický H); 7,26 (d, J1 = 8,75 Hz, 1H, aromatický H); 8,17 (s, 1H, NH).

IR (KBr): v = 3361 (NH), 3260 (NH), 1630 (CO amid), 1594 (CH=CHO), 1535, (CH-CHO), 1295, 1211. ''

Príklad 3

5-metoxv-3-(2-(tetrahvdro-2-furvlmetvlamino)etyl)indol (MLP-92)

- 12Tetrahydro-2-furoylchlorid (0,56 g, 4,2 mmol) v suchom THF sa pridá po kvapkách k miešanému roztoku 5-metoxytryptamínuHCI (90,94 g, 4,15 mol) a trietylamínu (1,2 ml, 8,2 mmol) v THF (10 ml). Roztok sa mieša pri teplote miestnosti po dobu 20 hodín. Pridá sa etylacetát (25 ml) a roztok sa premyje vodou, 5% HCI, 5% NaHCO3, vodou a nasýteným roztokom NaCl. Vysuší sa nad MgSO₄a rozpúšťadlo sa potom oddelí za zníženého tlaku. Zvyšok (0,3 g, 30% výťažok) sa identifikuje ako amid. Roztok amidu (0,285 g, 0,99 mmol) v suchom THF (10 ml) sa po kvapkách pridáva do miešanej suspenzie LiAIH₄ (94 mg) v suchom THF (10 ml) pod argónovou atmosférou. Reakčná zmes sa zahrieva za refluxu po dobu 18 hodín a ochladí na 0 °C. Pridá sa voda (1 ml); nerozpustné soli sa oddelia filtráciou a premyjú éterom (3x10 ml). Organické časti sa premyjú nasýteným roztokom NaCl (20 ml) a rozpúšťadlo sa vysuší (MgSO4) a oddelí. Zvyšok (0,178 g, 65% výťažok) sa prečistí flash chromatografiou za použitia silikagélu (eluované pomocou CH2CI2: CH3OH 92:8 obsahujúci asi 0,03%'NH₃). Frakcie po 10 ml sa zbierajú a produkt sa eluuje vo frakciách 11-18. Produkt sa získal ako svetlo žltý olej,

NMR (CDCI3): δ = 1,45-2,23 (m, 4H, CH₂CH₂O); 1,75 (ws*, 2H, 2NH₂); 2,65 - 2,85 (m, 2H, CH₂NH); 2,99 (s, 4H, CH₂CH₂NH); 3,70 - 3,86 (m, 2H, CH₂O-); 3,86 (s, 3H, OCH3); 3,88-4,16 (m, 1H, CHO-); 6,85 . (dd**, J1 = 8,75 Hz, J2 = 2,45 Hz, 1H, aromatický H); 7,05 (s, 1H, C=CH); 7,05 (dd, J1 = 4,85 Hz, JŽ = 2,45 Hz, 1H, aromatický H); 7,26 (d, J = 11,25 Hz, 1H, aromatický H); 7,98 (s, 1H, NH). Prídavok trifluóroctovej kyseliny zmenil spektrum takým spôsobom, aký sa očakáva pri transformácii voľných amínov na amóniové deriváty. Hlavnou zmenou bolo vymiznutie amínových píkov pri 1,75 a 7,98.

IR (čistý): v = 3397 (NH), 3292 (NH), 2936, 2828, 1624, (CH=CH), 1585, 1486, 1455, 1441, 1215, 1066.

ws* = široký singlet; dd** = dublet dubletov

- 13Príklad 4

5-metoxv-3-(2-(2-acetoxvbénzamido)etyl)indol (MLP-77)

5-metoxytryptamín (400 mg, 2,1 mmol) sa suspenduje v benzéne (5 ml). Zmes sa ochladí v ľadovom kúpeli a pomaly sa pridá roztok acetylsalicyloylchloridu (500 mg, 2,5 mmol) v benzéne (5 ml). Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti po dobu 15 hodín a zriedi sa éterom (25 ml). Extrahuje sa vodou (25 ml), roztokom NaHCO3 (2x25 ml) a nasýteným roztokom ₍ NaCl (25 ml), vysuší (MgSOJ a rozpúšťadlo sa odstráni vákuom. Ďalšie prečistenie sa dosiahne stĺpcovou chromatografiou na silikagéli. Rozpúšťadlo je etylacetát:CH2CI2 (4:5). Zhromažďujú sa frakcie po 10 ml a produkt sa eluoval vo frakciách 7-10. Získa sa produkt ako olej, ktorý sa nechá rekryštalizovať z CH2CI2 (0,5 ml) pri -8 °C. Výťažok je 270 mg (40%), teplota topenia 120 až 121 °C.

NMR (CDCI3): δ = 1,95 (s, 3H, CH₃CO); 3,03 (t, J = 6,6 Hz, 2H, CH₂CH₂); 3,79 (q, J = 5,6 Hz, 2H, CH₂NH), 3,81 (s, 3H, OCH₃); 6,42 (široké s, 1H, CH₂NH); 6,86 (dd**, J1 = 8,75 Hz, J2 = 2,45 Hz, 1H, aromatický H); 7,05 (s, 1H, C=CH); 7,04 (d, J1 = 8,75 Hz, 1 H, aromatický H); 7,29 -7,23 (m, 2H, aromatický H); 7,71 (td***, J1 =8,75 Hz, J2 = 2,45Hz, J3 = 1,25Hz, 1H, aromatický H); 7,43 (dd, J1=9Hz, J2 = 6,5 Hz, aromatický H); 8,05 (s, 1H, NH).

IR (KBr): v = 3421 (NH), 3344 (NH), 1745, (C=O ester), 1642 (C=O amid), 1530, (CH=CH), 1485, 1218.

dd** = dublet dubletov; td*** = dublet tripletov.

- 14Príklad 5

3,4-dihydroxyskohcová kyselina (1,13 g, 6,27 mmol) sa rozpustí v tionylchloride (25 ml) a roztok sa mieša po dobu 5 hodín pri 40 až 60 °C. Rozpúšťadlo sa odstráni a zvyšok sa rozpustí v dôkladne vysušenom etylacetáte a roztok sa pomaly pridá do roztoku 5-metoxytryptamínu (1,2 g) v benzéne, ktorý tiež obsahoval etylamín (1 ml). Zmes sa mieša cez noc, pridá sa voda (10 ml) a zmes sa opäť mieša po dobu 15 minút. Rozpúšťadlo sa oddelí, zvyšok sa rozpustí v etylacetáte a roztok sa postupne premyje vodou, nasýteným roztokom NaHCO3, vodou a soľným roztokom a potom sa vysuší nad Na₂SO₄. Rozpúšťadlo sa oddelí a produkt sa prečistí stĺpcovou chromatografiou za použitia 1:9 metanol/dichlórmetánu. Čistiaci proces sa trikrát opakuje, aby sa oddelili vedľajšie produkty. Frakcia identifikovaná ako kyseliny 5-metoxytryptamid kávovej sa ďalej prečistí rekryštalizáciou z etylacetát/hexánového roztoku. Zlúčenina sa získa vo forme bielych kryštálov (výťažok asi 60%).

NMR (CD₃OD): d = 2,85 (t, 2H, J = 7,25 Hz, CH₂NH); 3,43 (t, 2H, J = 7,25 Hz, CH₂CH₂NH); 3,69 (s, 3H, OCH₃); 6,23 (d, 1H, J = 15,5 Hz, =CHCONH); 6,64 (dd, J1 = 11,25 Hz, J2 = 2,5 Hz, 1H, aromatický H, kávový); 6,63 (dd,

J1=8,75Hz, J2 = 2,5 Hz, 1H, aromatický H tryptyl); 6,78 (dd, J1 = 8,75 Hz,

J2 = 2,5 Hz, 1H, aromatický H, tryptyl c); 6,95 (s, 1H, -N-C=CH); 6,92 (dd,

J1=19,5Hz, J2 = 2,45 Hz, 1H, aromatický H, kávový); 7,10 (d, J = 7 Hz, 1H, aromatický H, kávový); 7,28 (d, J = 15,5 Hz, 1H, CH=CH). Protón OH a NH skupín nie je možné vidieť, pretože spektrum sa snímalo v metanole, kde sa tieto protóny vymenia s deutériom z rozpúšťadla.

Aktivita zachytávať radikály sa skúmala na duplikátoch podľa Blois, M.S.,

Náture, 1958, 181:1199. Reakčná zmes obsahovala 3 ml 0,1 mM DPPH (v 95% etanole) a 0,5 ml testovanej zlúčeniny. Po 20 minútach inkubácie pri teplote miestnosti

- 15sa určil A517. Aktivita zachytenia sa merala ako pokles A517 u DPPH radikálu vyjadrená ako percentá kontrolnej hodnoty. Výsledky sú uvedené v nasledujúcej tabuľke.

Tabuľka 1: Aktivita zachytenia na DPPH radikáloch (antioxidačny účinok)

Prídavok (10 μΜ)	relatívny pomer aktivity zachytenia v porovnaní s vitamínom E (tokoferol)
vitamín E (tokoferol)	1
kyselina kávová	2,8
5-metoxytryptamid kys. kávovej	3,2
Vitamín C (kys. askorbová)	1
melatonín	0,254

Príklad 6

5-metoxytryptofolester kyseliny kávovej

Tento sa pripraví analogicky ako Príklad 5 pri nahradení ekvivalentného množstva 5-metoxytryptofolu za 5-metoxytryptamín. Produkt má štruktúru:

Príklad 7

2-(p-(2,4-dioxotiazolidin-5-vlmetvl)fenoxv)etvl-5-metoxyindol

- 16(a) Príprava východiskového materiálu

Vo vhodne vybavenej banke sa rozpustí 25 g (0,131 mol) 5-metoxytryptofolu v 300 ml dimetylacetamidu (DMA) a k tomuto roztoku sa pridá 17,1 g (0,138 mol) pfluórbenzaldehydu a 36,2 g uhličitanu draselného a ďalších 120 ml DMA. Zmes sa mieša po dobu 30 minút pri teplote miestnosti a potom pri 100 °C po dobu 264 hodín. Zmes sa potom ochladí, naleje do 500 ml vody a dôkladne sa mieša po dobu asi jednej hodiny, kde sa vytvorí svetlo žltá tuhá látka. Suspenzia sa extrahuje celkovým množstvom asi 2,5 I etylacetátu za prídavku NaCI do vodnej vrstvy pre lepšiu separáciu. Zmiešaná organická vrstva sa vysuší síranom sodným a zahustí vo vákuu za poskytnutia asi 110 g tmavej hnedej kvapaliny, ktorá stále obsahuje trochu DMA. Kvapalina sa rozpustí v 500 ml toluénu, filtruje a k filtrátu sa pridá 500 ml vody a mieša sa. Pridá sa niekoľko kvapiek 20% NaOH, aby vzniklo zásadité pH, potom sa pridá NaCI, aby sa zabránilo tvorbe emulzie. Po miešaní po dobu jednej hodiny sa organická vrstva oddelí. Extrakcia toluénom sa dvakrát opakuje. Zmiešané organické vrstvy sa odparia do sucha vo vákuu za poskytnutia g hnedého oleja, ktorý sa prečistí chromatografiou na 500 g silikagélu, za použitia nasledujúceho gradientu eluentu: 1 I chloroform; 1 I 95:5 chloroform/acetón;

90:10 chloroform/acetón; 500 ml 84:16 chloroform/acetón; 11 80:20 chloroform/acetón; 200 ml 50:50 chloroform/acetón; 300 ml 40:60 chloroform/acetón. Zmiešané frakcie obsahujúce 3-(2-p-formylfenoxyetyl)-5metoxyindol (TLC: 90:10 chloroform/acetón Rf = 0,21; žltá škvrna) sú odparené vo vákuu za poskytnutia 12,3 g hnedého oleja, ktorý sa použije v ďalšom kroku.

(b) Príprava medziproduktu

K 12,3 g (0,0417 mol) produktu z kroku (a) rozpustenému v 500 ml toluénu vo vhodne vybavenej banke sa pridá 8,4 g (0,0717 mol) 2,4-tiazolidíndiónu a zmes sa mieša po dobu 30 minút za prídavku 50 ml toluénu pre lepšie rozpúšťanie. Pridá sa piperidín (5,2 ml) a teplota sa zvýši na 110 °C a zmes sa mieša po dobu asi troch hodín pri tejto teplote. Po ochladení sa vyzráža žltá tuhá látka; táto sa odfiltruje, premyje etylacetátom a vysuší za poskytnutia 11 g žltej látky 2-(p-(2,4dioxotiazolidin-5-ylidénmetyl)fenoxy)etyl-5-metoxyindol vzorca

- 17i i

I í

I

(c) 2-(p-(2,4-dioxotiazolidin-5-ylmetyl)fenoxy)etyl-5-metcxyindol

Pod argónovou atmosférou sa vo vhodne vybavenej banke refluxuje 70 ml

1,4-dioxánu, pridá sa 1 g produktu z kroku (b) za poskytnutia čistého roztoku po asi 30 minútach, ktorý sa ochladí na 50 °C, nasleduje prídavok 70 ml metanolu za udržovania teploty banky na 50 °C. V druhej banke je pod argónovou atmosférou umiestnený 1 g Mg triesok ponorených v metanole; pridajú ša dva kryštály jódu a po začiatku penenia sa zmes mieša dokiaľ jódová farba nezmizne. Obsah prvej banky sa naleje do druhej banky a teplota stúpne na 64 °C. Počas ďalších štyroch hodín sa pridá ďalších 1,4 g Mg triesok a reakčná zmes sa refluxuje ďalších 5 dní, dokiaľ nie je konverzia detekovaná pomocou UV >95%. Zmes sa ochladí a naleje do 500 ml 20% roztoku NH4CI, extrahuje sa 3x200 ml dichlórmetánu, premyje 5% vodným roztokom kyseliny citrónovej a odparí rotačnou odparkou za poskytnutia tuhej látky, ktorá sa rozpustí v metanole a kryštalizuje pri-18°C. Obdržalo sa 400 mg titulnej zlúčeniny ako žltých kryštálov.

Biologické testovanie zlúčenín tohoto vynálezu

Experiment 1 . Skúmali sa účinky ústne podávaných zlúčenín tohoto vynálezu MLP-76, 77, 79 a 92, na androgénne závislý opätovný rast prostaty u dospelých vykastrovaných samcov krýs. Samce krýs (staré 2,5 mesiaca) sa v anestézii kastrovali a nechali zotaviť po dobu 7 dní. Počas tejto doby sa priemerná hmotnosť prostaty znížila približne o 75 %. Od siedmeho dňa po kastrácii sa krysám začali dávať subkutánne injekcie buď s olejovým nosičom (kontrolné) alebo s olejovým nosičom obsahujúcim testosterónpropionát (1 mg/kg telesnej hmotnosti/deň) po dobu 4 dní 1 hodinu pred zhasnutím svetla. Jedna skupina krýs sa rozdelila do podskupín, (3-4 na klietku), každej podskupine sa dávala buď zlúčenina podľa tohoto vynálezu, melatonín

- 18(10 mg rozpustených v 100 μΙ etanolu na liter pitnej vody) alebo len nosič (100 μΙ etanolu na liter pitnej vody) v pitnej vode. Druhá skupina krýs sa rozdelila do podskupín (3-4 na klietku), každej podskupine sa dával buď MLP-92, melatonín (0,1 alebo 0,01 mg rozpustených v 100 μΙ etanolu na liter pitnej vody) alebo len nosič (100 μΙ etanolu na liter pitnej vody) v pitnej vode. Odhadovalo sa, že každá krysa v podskupinách požívajúca zlúčeninu podľa tohoto vynálezu mala príjem približne 4 ml roztoku, t.j. asi 40 pg derivátu na deň. Ráno po poslednej injekcii sa krysy usmrtili a semenné váčky a ventrálne prostaty sa oddelili a zvážili.

Výsledky sú uvedené v tabuľkách 2 a 3. Testosterón zvýšil hmotnosť semenných váčkov a ventrálnych prostát u kastrovaných zvierat v porovnaní s neošetrovanými kontrolnými zvieratami. Melatonín a štyri zlúčeniny tohoto vynálezu výrazne znížili testosterónom sprostredkovaný opätovný rast žľazy . ventrálnej prostaty za prítomnosti testosterónu (tabuľka 2). MLP-92 a MLP-76 sú účinnejšie než MLP-79, MLP-77 a melatonín. Vplyv melatonínu i MLP-92 na opätovný rast prostaty bol závislý na dávke, pričom melatonín bol menej účinný než vynájdená zlúčenina (IC50 = 88 nM, 230 nM, pre MLP-92 a melatonín v tomto poradí).

Tento experiment ukazuje priamu inhibičnú účinnosť ústne podávaných zlúčenín podľa tohoto vynálezu na rast prostaty u dospelých krýs, čo sa podobá účinku melatonínu.

Tabuľka 2: Účinky testosterónu a zlúčenín podľa vynálezu na hmotnosť ventrálnej prostaty a semenných váčkov kastrovaných krýs

(10 mg/l pitné vody)	prostata (mg/g telesnej hmotnosti)	A	semenné váčky (mg/g telesnej hmotnosti)	B
Kontrolná vzorka (n=3)	0,27±0,07		0,73±0,05.
Testosterón (n=4)	0,77±0,02		2,38±0,16
Testosterón + MLP-92 (n=4)	0,49±0,04	66	1,54±0,21	51
Testosterón + MLP-77 (n=4)	0,57±0,05	40	2,69±0,49	-18
Testosterón + MLP-76 (n=4)	0,49±0,09	66	1,82±0,25	44
Testosterón + MLP-79 (n=3)	0,50±0,04	54	2,00±0,39	23
Testosterón + Melatonín (n=3)	0,55±0,08	44	1,88±0,03	30

A = % inhibícia testosterónom-stimulovaného rastu (prostata)

- 19Β = % inhibícia testosterónom-stimulovaného rastu (semenné váčky)

Tabuľka 3: Účinky testosterónu a rôznych dávok MLP-92 na hmotnosť ventrálnej prostaty a semenných váčkov u kastrovanych krýs

	prostata (mg/g telesnej hmotnosti)	A	Semenné váčky (mg/g telesnej hmotnosti)	B
Kontrolná vzorka (n=4)	0,36±0,11		0,59±0,03
Testosterón (n=4)	0,62±0,1		1,95±0,24
Testosterón (n=3) + MLP-92 0,01 mg/l	0,57±0,04	19	1,57±0,25	28
Testosterón (n=3) + MLP-92 0,1 mg/l	0,46±0,1	62	1,45±0,13	37
Testosterón (n=3) + Melatonín 0,01 mg/l	0,66±0,08	-15	1,81 ±0,28	10
Testosterón (n=3) + Melatonín 0,1 mg/l	0,54±0,09	³¹	1,55±0,24	30

A = % inhibícia testosterónom-stimulovaného rastu (prostata)

B = % inhibícia testosterónom-stimulovaného rastu (semenné váčky)

Experiment 2

Skúmala sa distribúcia MLP-92 a MLP-77 v rôznych orgánoch krýs. 10Ó pl fyziologického roztoku obsahujúcich 1x10⁶dpm ¹²⁵l-značených zlúčenín tohoto vynálezu (značenie podľa Vakkuri a kol., Acta Endocrinol., 106, 152-7, 1984) sa injektuje (ip) do dospelých samcov krýs. Po 1 hodine sa krysy usmrtia a vyberú sa rôzne orgány a zvážia sa. Obsah rádioaktívnych derivátov v orgánoch krýs (mozog, hypotalamus, hypofýza, oči, štítna žľaza, srdce, pľúca, ľadviny, slezina, varlata, prostata a semenné váčky) sa určí pomocou gamačítača a výsledky sa prezentujú ako dpm/g orgánu mokrej hmotnosti. Pre porovnanie sú tiež ukázané výsledky z obdobného experimentu (Withyachumnarnkul a kol., Life Sci., 38:1757-65, 1986) za použitia ³H-melatonínu (tabuľka 4).

Výsledky ukazujú selektívnu akumuláciu MLP-92, 79 a 77 v prostate v porovnaní s vysokou akumuláciou melatonínu v hypofýze. Tieto retenčné obrázky zvyšujú možnosť, že tieto zlúčeniny môžu mať potenciálne terapeutické použití na liečenie benígneho a tumorového rastu prostaty.

-20Tabuľka 4; Distribúcia ^,25l-značeného MLP-92 a 125-1 MLP-77 v tele samca dospelej krysy 1 hodinu po IP injekcii o 6x10⁶ dpm.

	^JH-melatonín dpmX10³/100 g mokrého tkaniva	^i2íjI-MLP-92 dpmX1000/g mokrého tkaniva	^ual-MLP-77 dpmX1000/g mokrého tkaniva	^1zal-MLP-79 dpmX1000/g mokrého tkaniva
Hypotalamus	0,6	1,02	3,3	0,6
mozgový kmeň		23	1,51	0,43
prední mozog		0,33	0,75	0,53
hypofýza	1,84	5	8,9	0,73
oko		1	6,7	1
štítna žľaza		1,54	10,9	2,5
srdce		1	7,42	1,66
Pľúca	0,74	1,77	14,4	1,83
pečeň		1,57	9	1,46
slezina		1,2	10	1,43
Ľadvina		2	15,3	2,46
Varlata	0,6	1	8,9	1,4
Prostata	1,0	6,14	18	2,23
Semenné váčky	1,0	0,8	5,6	1

Zatiaľ čó bol tento vynález opísaný hlavne s ohľadom na určité uskutočnenia, pre odborníkov je zjavné, že je možné uskutočniť mnoho modifikácií a variácií. Vynález preto nemá byť chápaný tak, že by bol akokoľvek obmedzený na tieto uskutočnenia, skôr má byť jeho koncept chápaný podľa ducha a rozsahu patentových nárokov, ktoré nasledujú.

Claims

1. Zlúčeniny majúce všeobecné vzorce (I) a (II):

T- A-NH-X-Y j A-Z / S-* 4 N (R)m< d) (H)

a ich soli vznikíé kyslou adíciou, kde zlúčeniny sú zásadité, pričom: každé R je nezávisle vybrané zo skupiny halogén, Ci-4-aikyl, Ci-₄-alkoxy,

NR’R”, nitro, aryl, aryl-Ci^-alkyl alebo aryl-Ci^-alkoxy, a každé z R’ a R” je nezávisle H alebo Ci_₄-alkyl, alebo R’ = R” = CICH2CH2, alebo NR’R” tvorí nasýtený heterocyklický kruh obsahujúci 3 až 8 členov Kruhu a m je 0 až 4;

R¹ je vybrané zo skupiny zahrnujúcej vodík, Ci^-alkyl, Ci_₄-alkanoyl, aryl-Ci₄--alkanoyl alebo aryl-Ci-4-alkyl;

R² je vybrané zo skupiny zahrnujúcej vodík, halogén, Ci.₄-alkyl, Ci-₄-alkoxy, aryl, aryl-Ci.₄-alkyl, aryl-Ci.₄-alkoxy a NR’R” jak je definované vyššie;

A je Ci-₄-alkylén; X je >CH₂, >C=O alebo >C=S;

Y je 2-furyl, 2-dihydrofuryl, 2-tetrahydrofuryl alebo (2-R°-COO-)fenyl, kde ktorýkoľvek z nich môže byť substituovaný 1 až 2 substituentami vybranými z Ci.₄alkyl, Ci-₄-alkoxy, OH, NR’R” jak je definované,vyššie alebo nitro, alebo Y je styryl, ktorý je substituovaný na kruhu až dvoma substituentami nezávisle vybranými zo skupiny zahrnujúcej halogén, C-i-₄-alkyl, Ci-₄-alkoxy, OH, NR’R” jak je definované vyššie, nitro, aryl, aryl-Ci-₄-alkyl alebo aryl-Ci-₄-alkoxy; okrem nasledujúceho prípadu, kde X je >C=O, najmä p-chlórstyryl, p-hydroxystyryl, p-metoxystyryl a 4hydroxy-3-metoxystyry I;

R° je C1 -₄-alkyl alebo NR’R” ako je definované vyššie;

Zje vybrané z 2-(p-(3,5-dioxoizoxazolidin-4-ylmetyl)fenoxy)etylamino, p--(3,5dioxoizoxazolidin-4-ylmetyl)fenoxy, 2-(p-(2,4-dioxotiazolidin-5-ylmetyl)fenoxy)etylamino, p-(2,4-dioxotiazolidin-5-ylmetyl)fenoxy, 2-(p-(3,5-dioxoizoxazolidin-4-ylidenmetyl)fenoxy)etylamino, p-(3,5-dioxoizoxazolidin-4-ylidenmetyl)fenoxy, 2-(p-(2,4-dioxotiazolidin-5-ylidenmetyl)fenoxy)etylamino, p-(2,4-dioxotiazolidin-5-ylidenmetyl)fenoxy, 3,5-dioxoizoxazolidin-4-ylmetylamino, 2,4-dioxotia-22zolidin-5-ylmetylamino a cinnamoyloxy, ktorý je substituovaný na kruhu až dvoma substituentami nezávisle vybranými zo skupiny zahrnujúcej halogén, Ci^-alkyl, Ci-4-alkoxy, OH, NR’R” ako je definované vyššie, nitro, aryl, aryl-Ci^-alkyl alebo aryl-Ci ^-alkoxy, pod podmienkou, že keď m je 1, R je 5-metoxy a R¹ = R² = H, tak Z-A- môžu byť tiež 2-(p-(2,4-dioxotiazolidin-5-ylmetyl)fenoxy)etyl; a každý aryl je fenyl, ktorý je nesubstituovaný alebo je substituovaný 1 až 3 substituentami vybranými zo skupiny zahrnujúcej halogén, Ci-4-alkyl a Ci-4-alkoxy.

2. Zlúčeniny podľa nároku 1, kde: Y je 2-furyl, 2-dihydrofuryl, 2-tetrahydrofuryl alebo (2-R°-COO-)fenyl, kde ktorýkoľvek z nich môže byť substituovaný 1 až 2 substituentami vybranými zo skupiny zahrnujúcej Ci^-alkyl, Ci-4-alkoxy, OH, NR’R” ako je definované vyššie alebo nitro; Z je vybrané z 2-(p-(3,5dioxoizoxazolidin-4-yl-metyl)fenoxy)etylamino, p-(3,5-dioxoiuoxazolidin-4ylmetyl)fenoxy, 3,5-dioxo-izoxäzolidin-4-ylmetylamino, 2-(p-(2,4-dioxotiazolidin5-ylmetyl)fenoxy)etyl-amino a 2,4-dioxotiazolidin-5-ylmetylamino; a R, NR’R”, m, R¹, R², A, X, R° a aryl sú všetky definované v nároku 1.

3. Zlúčeniny podľa nároku 2, kde m je 1 a R je substituent v polohe 5 indolového kruhu.

4. Zlúčeniny podľa nároku 2, kde sa aplikuje aspoň jedna z nasledujúcich podmienok: m je 1 a R je 5-metoxy; a/alebo A je CH2CH2.

5. Zlúčenina podlá nároku 2, ktorá je 5-metoxy-3-(2-(2-furamido)etyl)indol vzorca

- 23

6. Zlúčenina podľa nároku 2, ktorá je 5-metoxy-3-(2-(tetrahydro-2 -furamido)etyl)indol vzorca

7. Zlúčenina podľa nároku 2, ktorá je 5-metoxy-3-(2-(tetrahydro-2-furylmetyl amino)etyl)indol vzorca

8. Zlúčenina podľa nároku 2, ktorá je 5-metoxy-3-(2-(2-acetoxybenz amido)etyl)indol vzorca

-249. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorá je 5-metoxytryptamid kyseliny kávovej vzorca

10. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorá je 5-metoxytryptofolester kyseliny kávovej vzorca

11. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorá je 2-(p-(2,4-dioxotiazolidin-5-ylmetyl)fenoxy)etyl-5-metoxyindol vzorca

12. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorá je 2-(p-(2,4-dioxotiazolidin-5-ylidenmetyl)fenoxy)etyl-5-metoxyindol vzorca

13. Farmaceutická formulácia, ktorá obsahuje aspoň jedno farmaceutický prijateľné rozpúšťadlo, ochrannú látku, solubilizátor, emulgátor, pomocnú látku, a/alebo

-25nosič a aspoň jeden člen zo skupiny tvorenej zlúčeninami definovanými v nároku 1 a jeho farmaceutický prijateľnými soľami.

14. Farmaceutická formulácia podľa nároku 13, kde aspoň jeden člen je vybraný zo zlúčenín definovaných v nároku 2 a jeho farmaceutický prijateľných solí.

15. Farmaceutická formulácia podľa nároku 13, ktorá sa vyznačuje aspoň jedným z nasledujúcich znakov:

(i) je, prispôsobená na orálne, rektálne, parenterálne, transbukálne, intrapulmonárne alebo transdermálne podávanie;

(ii) je vo forme jednotlivých dávok, pričom každá z jednotlivých dávok obsahuje aspoň jeden člen v množstve, ktoré leží v rozmedzí 0,0025 až 1000 mg;, (iii) je to formulácia s kontrolovaným uvoľňovaním, kde ten aspoň jeden člen je uvoľňovaný vopred určenou kontrolovanou rýchlosťou.

16. Farmaceutická formulácia podľa nároku 14, ktorá sa vyznačuje aspoň jedným z nasledujúcich znakov:

(i) je prispôsobená na orálne, rektálne, parenterálne, transbukálne, intrapulmonárne alebo transdermálne podávanie;

(ii) je vo forme jednotlivých dávok, pričom každá z jednotlivých dávok obsahuje ten aspoň jeden člen v množstve, ktoré leží v rozmedzí 0,0025 až 1000 mg;

(iii) je to formulácia s kontrolovaným uvoľňovaním, kde ten aspoň jeden člen je uvoľňovaný vopred určenou kontrolovanou rýchlosťou.

17. Kompozícia vybraná z pokožku chrániacich a kozmetických kompozícií na lokálnu aplikáciu, ktorá obsahuje aspoň jednu zlúčeninu podľa nároku 1 majúca aktivitu vybranú z antioxidačnej a radikály zachytávajúcej aktivity, spolu s aspoň jedným rozpúšťadlom, nosičom a pomocnou látkou.

-2618. Zlúčenina podľa nároku 17, kde vo vzorci (I) je Y prípadne substituovaný styryl, ako je definované v nároku 1, vo vzorci (II) je Z prípadne substituovaný cinnamoyloxy, ako je definované v nároku 1, a ostatné symboly majú zmysel definovaný v nároku 1.

(nový nárok)

19. Použitie aspoň jedného člena skupiny tvorenej zlúčeninami všeobecných vzorcov (I) a (II) ako sú definované nižšie a ich farmaceutický prijateľnými soľami, kde zlúčeniny sú zásadité, na výrobu liečiva na použitie pri chove zvierat alebo na prevenciu alebo liečbu stavov prostaty, impotencie, kardiovaskulárnych porúch, porúch centrálneho nervového systému a psychiatrických porúch, chronobiologicky založených porúch, endokrinných indikácií, neoplastických stavov, imunitného systému, stavov spojených so starnutím, očných chorôb, bolestí, hlavy, migrény alebo kožných chorôb, kde u zlúčenín vzorcov (I) a (II):

každé R je nezávisle vybrané zo skupiny zahrnujúcej halogén, Ci-4-alkyl, Cv 4--alkoxy, NR’R”, nitro, aryl, aryl-CM-alkyl, alebo aryl-Ci-4-alkoxy, a každé z R’ a R” je nezávisle H alebo Ci^-alkyl, alebo R’ = R” = CICH2CH2, alebo NR’R” a tvorí nasýtený heterocyklický kruh obsahujúci 3 až 8 členov kruhu a m je 0 až 4;

R¹ je vybrané zo skupiny zahrnujúcej vodík, Ci^-alkyl, CM-alkanoyl, aryl-Ci4-alkanoyl alebo aryl-Ci-4-alkyl;

R² je vybrané zo skupiny zahrnujúcej vodík, halogén, Ci-4-alkyl, Ci.₄-alkoxy, aryl, aryl-CM-alkyl, aryl-Cw-alkoxy a NR’R” ako je definované vyššie;

A je Ci-4-alkyíén;

Xje >CH₂₎ >C=O alebo >C=S;

Y je 2-furyl, 2-dihydrofuryl, 2-tetrahydrofuryl alebo (2-R°-COO-)fenyl, kde ktorýkoľvek z nich môže byť substituovaný 1 až 2 substituentami vybranými z C1-4C '· Γ λ r -r * f v e v r · r r

-27- ,. t , ; í ·; ,- alkyl, Cw-alkoxy, OH, NR’R” ako je definované vyššie alebo, nitro, alebo Y je styryl, ktorý môže byť substituovaný na kruhu až dvoma substituentami nezávisle vybranými zo skupiny zahrnujúcej halogén, Ci^t-alkyl, Ci-4-alkoxy, OH, NR’R” ako je definované vyššie, nitro, aryl, aryl-Ci-4-alkyl alebo aryl-Cwalkoxy;

R° je CM-alkyl alebo NR’R” ako je definované vyššie;

Zje vybrané z 2-(p-(3,5-dioxoizoxazolidin-4-ylmetyl)fenoxy)etylamino, p--(3,5dioxoizoxazolidin-4-ylmetyl)fenoxy, 2-(p-(2,4-dioxotiazolidin-5-ylmetyl)fenoxy)etylamino, p-(2,4-dioxotiazolidin-5-ylmetyl)fenoxy, 2-(p-(3,5-dioxoizoxazolidin-4-ylidenmetyl)fenoxy)etylamino, p-(3,5-dioxoizoxazolidin-4-ylidenmetyl)fenoxy, 2-(p-(2,4-dioxotiazolidin-5-ylidenmetyl)fenoxy)etylamino, p-(2,4-dioxotiazolidin-5-ylidenmetyl)fenoxy, 3,5-dioxoizoxazolidin-4-ylmetylamino, 2,4-dioxotiazolidin-5-ylmetylamino a cinnamoyloxy, ktorý môže byť substituovaný na kruhu až x

dvoma substituentmi nezávisle vybranými z halogén, Ci-4-alkyl, C₁^-alkoxy, OH, NR’R jak je definované vyššie, nitro, aryl, aryl-Ci-4-alkyl alebo aryl-CM-alkoxy; a každý aryl je fenyl, ktorý je nesubstituovaný alebo je substituovaný 1 až 3 substituentmi vybranými zo skupiny halogén, Ci-4-alkyl a C1 ^-alkoxy.