TWI285634B

TWI285634B - Indole derivatives

Info

Publication number: TWI285634B
Application number: TW089110620A
Authority: TW
Inventors: Nava Zisapel; Moshe Laudon
Original assignee: Neurim Pharma 1991
Priority date: 1999-05-27
Filing date: 2000-05-31
Publication date: 2007-08-21
Also published as: DK1189583T3; MXPA01012041A; CN100425592C; SK285173B6; IL130169A; EP1189583A4; NZ515867A; BR0012184A; CZ20014191A3; EA008907B1; PL351884A1; CZ300126B6; PT1189583E; ATE299876T1; NO20015737D0; IL130169A0; EE04675B1; JP2003517460A; JP3840378B2; BG65379B1

Description

1285634 A7 B7 五、發明説明（i ) 發明範圍及背景 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本發明係關於吲哚衍生物之新穎的化合物，含彼之醫藥調製物，及該化合物在製造藥劑用於治療多種疾病之用途。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本文揭示的新穎化合物是與一種主要由松果腺製造的荷爾蒙之褪黑激素，3 -（2 -乙醯胺基乙基）一 5 -甲氧基吲哚，在結構及功能上相關，在全部的脊椎動物中，褪黑激素是松果腺分泌之主要荷爾蒙，在迄今硏究的哺乳動物中，明顯地在夜間經由松果腺增加製造褪黑激素，身體製造褪黑激素可經由光快速抑制，褪黑激素牽涉調整與光照期間相關的歷程及生理歷程，動物或人類對於褪黑激素訊號之回應能力決定於褪黑激素受體，褪黑激素作用在C N S，經由位在腦部之受體影響神經機制，另外，多個硏究指出褪黑激素經由末梢褪黑激素受體，對末梢器官存在直接的影響，褪黑激素存在於心臟、肺、前列腺、生殖腺、白血球、視網膜、垂體、甲狀腺、腎、腸及血管，放射性褪黑激素注射至大田鼠後，滯留模式顯示褪黑激素聚集在腦部、垂體、肺、心臟、生殖腺及附屬的性器官（Withyachumnarnkul et al.，Life Sci， 12:1757-65， 1986) 〇褪黑激素之合成及分泌顯現晝夜節律，並隨著季節及年齡變化例如青春期及衰老期，很強烈的證據顯示褪黑激素對於多種神經及內分泌功能之調節很重要，尤其是顯現晝夜及一年節律者。褪黑激素與許多人類疾病相關，部份已知是與生物時間的不正常有關，褪黑激素曾經用藥至與當地光照循環不同相本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -4- 1285634 A7 __B7 五、發明説明（2 ) 者而再同步化晝夜節律，例如在快速通過時區之睡眠/覺醒障礙（時差現象）或延遲的睡眠時相徵候群（D S P S )之病人，改變工作排班、或盲人感受的症狀，可用褪黑激素或褪黑激素同系物治療（參見頒佈給Short et al之美國專利 4,6 0 0,7 2 3 及 4,6 6 6,08 6 號及 Lewy et al 之 5,2 4 2，9 4 1號），但是褪黑激素在正常的人類患者也顯不有直接的鎭靜/催眠效應（例如W a 1 d h a u s e r e t a 1.， Psychopharmacology，100: 222-226，1990; Vollrath et al.， Bioscience, 29:327-3 29, 1 98 1; Dollins et al.? Proc. Natl.

Acad. Sci，99: 1 824- 1 828，1994; D’Orlando et al 之美國專利 5 ，4 0 3 ，8 5 1號），迄今有三種褪黑激素受體副型 mt-l、MT-2 及 Mel lc 經確認（Barrett et al.，Biol. Signals Recept.，1 999，8: 6-14)，ΜΤ·2主要是位在中樞神經系統，且 mt-1是位在 CNS及末梢器官例如腎及泌尿生殖道 (Duboco vich et al.，IUPHAR media, London，UK， 1 87-93, 1 998)，目前已知的副型不足以評定多種褪黑激素效應，必須等待發現其他受體副型。褪黑激素在多個齧齒類動物實驗範例中證明同時具有減輕焦慮（Golus and King，Pharmacol. Biochem. Behav.， 4 1:405-408，1 992, Naranjo-Rodriguez et al., Soc. Neurosci. Abst.，1 8:1 1 67, 1 992; Golombek et al., Eur. J. Pharmacol, 23 7:23 1 -23 6， 1 993)及抗癲癇活性（Brallowsky,

Electroencephalo. Clin. Neurophysiol., 41:314-319, 1976;

Fariello et al·，Neurology，27:567-570, 1 977; Rudeen et al.，本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） — (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -5 ~ 1285634 A7 B7 五、發明説明（3 )

Epilepsia, 21:149-154， 1 9 8 0; Sugden, J. Pharmacol. Exp.

Ther.， 227:587-59 1， 1 9 8 3; Golombek et al·， Eur. J. (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

Pharmacol, 2 1 0:253-25 8, 1 992卜褪黑激素可有效地治療叢集性頭痛及偏頭痛（Claiistrat et al.，Headache，29:24 1-4，1 989)，在其他精神病情形尤其是憂鬱症以及躁狂與精神分裂症，褪黑激素也扮演一個角色 (見 Dobocovich， “Antidepressant Agents”；美國專利 5,093,3 52號；Miles and Philbrick, Biol. Psychiatry，23:405-425，1 9 8 8; Sandyk and Kay, Schizophr. Bull·，1 6:653-662, 1 990 )，在部份情形下，精神病障礙可能有潛在的生物時間病因（例如季節性發生之障礙），且爲褪黑激素治療之當然選擇。經濟部智慧財產局w工消費合作社印製褪黑激素與體溫之晝夜及年度變化之調節相關，將外源性褪黑激素用藥至人類後，可降低核心體溫（Strassman et a 1., J. Appl. Physiol, 71:2178-2182，1991; Cagnacci et al.，J. Clin. Endocrinol. Merab.，75:447-452，1992 )，褪黑激素也具有止痛性質（81^(^11，1.?11&1*111&。〇1.£乂0.!'1161*.，227:587-591，1 98 3 )，因此，類似褪黑激素之化合物可作爲非類固醇的抗發炎劑、抗熱劑例如阿斯匹靈、撲熱息痛 (acetaminophen)及布洛勞（ibuprofen)之替代品使用。已知褪黑激素的量隨著年齡增加而下降（Sack et al.，J. Pineal Res.，4:3 79-3 88，1 986; Waldhauser et al·，J. Clin. Endocrinol. Met ab., 66:648-652，1988; Van Coavorden et al.， Am. J. Physiol.，260··Ε65 1 -66 1，1991)並可導致部份疾病，神本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） -6 - 1285634 A7 ____B7_ 五、發明説明（4 ) 經變性疾病通常與老化有關，例如阿爾茲海默氏症及巴金森氏症，可用褪黑激素能的化合物治療（Maurizi，Med. Hypotheses, 3 1:233-242，1990; Sandyk，Int. J. Neurosci., 50:37-53，1 990; Skene et al.，Brain Rev.，528:170-174，1990) o 老年人之睡眠障礙顯示對褪黑激素之治療有回應（ Garfinkel et al., Lancet，346:54 1-543，1 995; Zisapel 之美國專利5，4 9 8，4 2 3號），經報導人類經由靜脈、鼻內及口服用藥褪黑激素（0 · 3 - 2 4 0毫克）後有催眠效應，除了其催眠效應以外，外源性褪黑激素可經由其對生物時鐘之時相重定作用而影響睡眠，在延遲睡眠徵候群之病人在睡前用藥褪黑激素，且提供盲人病患日夜循環之同步化睡眠，褪黑激素（〇 . 3 - 5毫克/口）用於治療失眠症之功效經在主要是老年人病患、用阿替洛爾（atenolol )治療的病人及慢性心臟病的病人進行的實驗證實，大部分病人有低度或扭曲的褪黑激素節律，在部份這些硏究中，使用在夜間釋出褪黑激素之調製物，以便先行快速淸除荷爾蒙並模擬其內生的槪略性質（Nutrition，1998，14:1-2; The Aging Male， 1 9 9 8，1 : 1 一 8 )，給與睡眠障礙及癡呆的病人3毫克褪黑激素經2 1天，明顯地增加睡眠品質及降低覺醒發作之次數，同時大幅降低夜間（太陽落下）焦慮不安的行爲（ Biol. Signals Recept·，1999，8(1-2): 126-3 1 )。我們最近發現褪黑激素治療不只對改進睡眠品質有益，而且還導致改善糖尿病人之一般狀態，可由長期治療後的本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） --------Φ II (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1285634 A7 B7 五、發明説明（5 )

HbAlc値下降證明。從中年（10個月）開始並持續至老年（22個月），經由飮水在4微克/毫升的劑量下每日補充褪黑激素給雄性 Spraque-Dawley大田鼠，恢復與年齡相關的增加相對（體重之％ )腹膜外及附睪之脂肪量以及血漿胰島素與勒帕茄鹼量至青年期（4 個月）（Rasmussen et al·，Endocrinology, 1999， 140(2): 1009-12) ° 即使是骨質疏鬆症也可用藥褪黑激素能成份（Sandyk al.，Int. J. Neurosci.，62:2 1 5-225，1992)，事實上，褪黑激素經建議是抗老化、抗壓力荷爾蒙（Armstrong and Redman， Med. Hypotheses, 34:300-309, 1 99 1; Reiter, Bioassays, 14: 1 69- 1 75，1 992)，此係由於其作爲自由基淸除劑之作用 (Pooggeler et al.，J. Pineal Res.，14:151-168，1 993)或其與免疫系統之作用（Maestroni and Conti, J. Neuroimmun.，28:167-176，1 9 9 0; Fraschini et al.，Acta. Oncol.，29:775-776，1990; Guerrero and Reiter, Endocr. Res.，18:91-113，1992)，褪黑激素可保護防止缺血性休克（Cho et al., Brain Research，75 5: 3 3 5 -3 3 8，1997)，降低阿爾茲海默氏症之細胞死亡（Pappola et al.，J. Neurosci，17:1683-90，1997)及用低內生褪黑激素量可降低嬰兒SIDS之風險（以色列專利1 1 586 1/2號及Laudon 61&1之美國專利5,500,225號）。與上述相關的是發現褪黑激素在多種癌症具有抑制腫瘤之性質，最常硏究的是其在雌激素受體陽性乳癌之效應 (Blasak and Hill, J. Neural. Transm. Suppl., 21 :433-449, 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） <請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -III衣. 訂經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -8- 1285634 A7 B7 五、發明説明（6 ) 1 9 8 6; Gonzalez et al.，Melanoma. Res·， 1:23 7-243， 1991;

Lissoni et al., Eur. J. Cancer, 29A:185-189, 1 993; Shellard et al.，Br. J. Cancer，60:288-290，1 989; Philo and Berkowitz， J. Urol.，139·· 1099-1 102，1 988;見 Clemens et al 之美國專利 5，1 96,43 5 號及 Fraschini et al.之 5,272，141號），褪黑激素在非癌症細胞也可能有抗增殖效應且可作爲治療良性腫瘤及增殖性疾病例如BPH (Zisapel之美國專利5,750,55 7號及歐洲專利EP 05 6 5 296B號）及牛皮癖使用。硏究褪黑激素之主要部份是專注於硏究生殖效應，尤其是季節性繁殖的物種（例如大頰鼠及羊），其中已知褪黑激素可調節生育力及動情期、冬眠及毛色，這些效應對於動物農事用途有明顯的重要性，褪黑激素在人類之生育性內分泌用途包括：避孕及生育力藥劑、治療早熟的動情期、治療經前徵候群及高催乳激素血症（Pevre et al.，J. Clin. Endocrinol. Met ab. 5 4 7:1 3 8 3 - 1 3 86，1 978; Purry et al., Am. J. Psychiatry, 144:762-766， 1 987; Waldhauser et al., Clin. Endocrinol.

Met ab.，73:793-796，1991; Bispink et al.，Pineal Res·，8:97-106， 1 990 ; C agnacci et al., J. Clin. Endocrinol. Met ab. 5 73:210-220,1991 ; Voordouw et al., J. Clin. Endocrinol.

Metab.，74:107- 108，1 992;見 Cohen et al 之美國專利 4,85 5,3 05及 4,945，103 號；及 Fraschini et al 之 5,272，141號），很可能褪黑激素化合物也可用於其他內分泌情形，尤其是牽涉生長荷爾蒙（〇^&1116161&1.，人126116丨111-?(^8(：11，26:1076-1078, 1976; Wright et al., Clin. Endocrinol., 24:375-382, 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）衣-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -9- 1285634 A7 _B7 五、發明説明（7 ) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1 9 8 6; Paccotti et al.，Chronobiologica，15:279-288，1 988; Valcavi et al.? Clin. Endocrinol.，3 9: 1 3 9- 1 99，1 993)，褪黑激素可用於減少前列腺肥大（見上述Zisapel之美國及歐洲專利 )，口服用藥褪黑激素至閹割的幼年大田鼠，可抑制腹部前列腺及精囊的與雄激素相關的成長（Gilad et al.，J. of Urol.， 1 59:1 069-73，1 998)，最近，我們證明人類良性前列腺上皮細胞之高親和力褪黑激素受體，可影響細胞生長及生存力 (Endocrinology, 137:1412-17，1 996)。除了松果腺之外，眼睛也合成褪黑激素，最近褪黑激素經揭示與眼內壓力之控制有關且可用在青光眼（Samples et al.，Curr.Eye Res.，7:649-653,1 988; Rhode et al.，Ophthalmic. Res.，25: 1Q-15，1 993)。腎也表現褪黑激素受體，且褪黑激素經顯示可影響血管加壓素及尿排泄（Song et al.，FASEB J. 1 1:93 - 1 00，1 997; Yasin et al·，Brain Res· Bull，39:1-5，1997) 〇經濟部智慧財產局8工消費合作社印製褪黑激素之醫療用途明顯地存在寬廣的範圍，據此，持續有興趣於鑑定可與褪黑激素能系統作用並作爲有用的醫療藥劑之新穎化合物，這些化合物可提供褪黑激素更長的持續時間、選擇性地定位及更大的功效。與褪黑激素相關但是藥理或藥物動力學異於褪黑激素之新穎化合物，很可能是重要的新藥劑，例如見美國專利 5，4 0 3，8 5 1號，其揭示經取代之色胺、苯基烷基胺及相關的化合物之用途，以便治療多種藥劑適應症包括睡眠障礙、內分泌適應症、免疫系統障礙等，P C T專利申請W〇本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -10- 1285634 A7 B7 五、發明説明（8) 8 7 / 0 0 4 3 2號揭示用於治療或預防牛皮癬之組成物，其中含褪黑激素或相關的化合物，歐洲專利申請案 0 3 3 0 6 2 5A2號揭示褪黑激素及其同系物之製造，用於多種醫療目的包括用藥褪黑激素並結合疊氮胸苷以治療 A I D S，基於生物排泄性萘環及吲哚環之褪黑激素同系物揭示在 J. Med. Chem.，1 992，3 5:1 484- 1 485; Depreux et al 之 EP 662471 A2 95071 2; Ladlow et al 之 WO 9529 1 73 A1 951102;11〇1'1161&1之美國專利5，151，446號；八(11*丨61^61&1之 5,194,614號及1^8161^61玨1之 5,276,05 1 號。證據顯示褪黑激素刺激劑及拮抗劑對於多種疾病及情形具有潛在的醫療用途，本發明係針對比褪黑激素更有醫療選擇性的化合物之需求。. 上述提到的專利、專利申請案及文獻的整份內容，視爲倂於本文供參考。發明槪述在一方面，’本發明提供式（I )及（I I )之化合物：本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） I -- (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 -11 - 1285634 A7 B7 五、發明説明（9)

R1 (I)

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製及其酸加成鹽（當該化合物爲鹼性），其中各R獨立地選自齒基、Ci-4烷基、Ci — 4烷氧基、 NR’R”、硝基、芳基、芳基Ci-4烷基或芳基Ci-4烷氧基，且各R’及R”獨立地爲只或（：1-4烷基，或R，=R，，= C 1 CH2CH2，或NR’R”組成含3 - 8個環員之飽和雜環，且m爲0 — 4 ; R1是選自氫、Ci-4烷基、Ci-4烷醯基、.芳基烷醯基或芳基Ci-4烷基；R2是選自氫、鹵基、烷基、Ci-4烷氧基、芳基、芳基C^4烷基、芳基烷氧基及上述定義之NR’R”；是C 1 - 4伸院基；是〉CH2、>C = 〇或〉c = s ; 是2—呋喃基、2 -二氫咲喃基、2 —四氫咲喃基或 R° — C〇〇一）苯基，任何其可經1一2個選自 C 1 - 4 C 1 - 4 C 1 - 4 A X Y (2 —

C 1 - 4 硝基之立地選義之N 烷基、Ci-4烷氧基、0H、上述定義之nR，R，，或取代基取代，或Y是苯乙烯基旗幟多可經至多兩個獨自鹵基、Ci-4院基、Cl-4院氧基、〇H、上述定 R’R”、硝基、芳基、芳基Ci-4烷基或芳基Ci_4 各紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 4衣------、打------ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -12- 1285634 A7 B7 五、發明説明（10) 烷氧基之取代基環取代；只°是（：i-4烷基或上述定義之nr，r，，； Z是選自2 —(對一（3，5 -二氧代異uf唑啶—4 一基甲基）苯氧基）乙胺基、對一（3，5 -二氧代異腭唑n定 —4 —基甲基）苯氧基、2 —(對一（2，4 一二氧代噻0坐口定一 5 -基甲基）苯氧基）乙胺基、對一（2，4 —二氧代噻唑啶一 5 —基甲基）苯氧基、2 -（對一（3，5 -二氧代亞異噚唑啶一 4 一基甲基）苯氧基）乙胺基、對一（3， 5 —二氧代亞異nf唑啶—4 一基甲基）苯氧基、2 -（對— (2，4 —二氧代亞噻d坐啶—5 -基甲基）苯氧基）乙胺基、對一（2，4 —二氧代亞噻唑啶一 5 —基甲基）苯氧基、 3，5 -二氧代異噚唑啶—4 —基甲基胺基、2，4 一二氧代噻唑啶一 5 -基甲基胺基及肉桂醯氧基其可經至多兩個獨立地選自鹵基、Ci-4烷基、Ci-4烷氧基、0H、上述定義之NR’R”、硝基、芳基、芳基Ci-4烷基或芳基Ci-4 烷氧基之取代基環取代；且各芳基是苯基其爲未經取代或經1 - 3個選自鹵基、 C 1-4烷基及C 烷氧基之取代基取代。在本發明之特定具體實施例中，Y可爲苯乙烯基，視需要經至多兩個獨立地選自鹵基、Cl· - 4烷基、Ci- 4烷氧基、〇H、上述定義之NR’R，，、硝基、芳基、芳基Ci — 4烷基或芳基C i — 4烷氧基之取代基環取代；及/或Z可爲肉桂隨氧基’視需要經至多兩個獨立地選自豳基、C 1 - 4焼基、 Ci-4烷氧基、〇H、上述定義之NR’R”、硝基、芳基、本紙張尺度適用中關家標準（CNS )八4規格（2ωχ297公釐） -- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -13- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1285634 A7 ____B7_ 五、發明説明（^) 芳基C 烷基或芳基C i-4烷氧基之取代基環取代。在另一方面，本發明提供一種醫藥調製物，其中含至少一種藥學上可接受之稀釋劑、防腐劑、溶解劑、乳化劑、輔劑、及/或載劑，及至少一員包括本發明上述定義之化合物及其藥學上可接受之鹽類。在又另一方面，本發明提供至少一員包括本發明上述定義之化合物及其藥學上可接受的鹽類之用途，製造藥劑用於動物生育、或用於預防或治療前列腺情形、陽痿、心血管障礙、中樞神經系統及精神病障礙、生物時間之障礙、內分泌適應症、贅瘤情形、免疫系統、與衰老相關的情形、眼科疾病、叢集性頭痛、偏頭痛及皮膚疾病。發明之詳細說明不偏愛本發明化合物之一般性，定義目前較佳的化合物副族之事實是在式（I )中，m是1且R是在吲哚環的5〜位置之取代基，定義另一副族之事實是在式（I )中，至少適用一個下列情形，也就是：m是1且R是5 —甲氧基；及 /或A是CH2CH2，且在此副族中，本發明化合物之說明性具體實施例，尤其是其中R 1 = R 2 = Η，爲下列： X是一C0 —且Υ是2 —呋喃基；或X是一C0 —且Υ 是2-四氫呋喃基；或 X是—C Η 2 —且Υ是2 —四氫咲喃基；或X是一C〇 -且Υ是2 —乙醯氧基苯基；或 X是-C〇一且Υ是3，4 —二羥苯乙烯基；或Ζ是3 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ^ -14- I--------------訂------ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁} 1285634 A7 B7 五、發明説明（12) ，4 一二羥肉桂醯氧基。根據本發明之醫藥調製物較宜具有至少一個下列特徵： (i )調製成供口服、直腸、不經腸道、經頰、肺內（例如經由吸入）或經皮用藥； (ii )其是在單元劑量形式，各單元劑量含該至少一員的量其範圍介於0·0025-1000毫克； (iii)其係一種控制釋出之調製物，其中該至少一員是在預先決定的控制速率下釋出。在本發明之醫藥調製物中，藥學上可接受之稀釋劑、防腐劑、溶解劑、乳化劑、輔劑及載劑爲在藥學及動物用調製物中的慣用化合物，本發明之醫藥調製物可調製用於人類及 /或動物。對於口服用藥，本發明之醫藥調製物可作爲例如片劑、膠囊劑、乳化液、容易、漿劑或懸浮液使用，對於不經腸道用藥，該調製物可作爲安瓿、或作爲在水或油性媒劑中的懸浮液、溶液或乳化液使用，需要懸浮、安定及/或分散劑時，當然將要考慮活性化合物在特定具體實施例使用之媒劑中的溶解度，該調製物可另外含例如生理上相容的防腐劑及抗氧化劑。本發明之醫藥調製物也可作爲栓劑使用其含慣用的栓劑基質例如可可奶油、或其他甘油酯，或者是，該調製物也可製成貯存形式使其在體內緩慢釋出活性組成物歷經預先選擇之時間。本發明化合物也可經由使用經頰、肺內或經皮輸送系統本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Μ規格（210X297公釐） --------•衣！ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂經濟部智慧財產局W工消費合作社印製 -15- 1285634 A7 B7 五、發明説明（13) 用藥。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經由進一步周延或說明目前預期可經由用藥本發明化合物治療之情形，這些情形包括良性及惡性前列腺生長、及陽痿；心血管障礙包括高血壓、預防性血液凝結及保護防止缺血休克；中樞神經系統及精神疾病例如睡眠障礙、癲癇及其他痙攣性障礙、焦慮症、精神病、神經病變、神經變性疾病例如阿爾茲海默氏症、巴金森氏症、發燒及止痛；生物時間本質之障礙例如時差現象、晝夜睡眠障礙例如遲發性睡眠徵候群、輪班工作問題及季節性相關的問題例如季節性發作的疾病（S A D );內分泌適應症例如避孕及生育、早熟動情期、經前徵候群、高催乳激素血症、及成長荷爾蒙缺乏；抗發炎適應症例如類風溼性關節炎；，贅瘤疾病包括例如癌症及其他增殖性疾病；免疫系統障礙包括A I D S ;與衰老相關的情形；眼睛疾病；過敏性疾病例如氣喘；叢集性頭痛、偏頭痛；抗一 Tardive Dyskensia效應、糖尿病安定化及體重增加障礙（瘦、肥胖）；以及作爲輔助動物生育，例如調節生育力、動情期、毛皮顏色。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製進一步預期本發明化合物（且特別是其中在式（I ) Y 如同上述定義視需要經取代之苯乙烯基，且在式（I I ) Z 是視需要經取代之肉桂醯氧基）由於含有抗氧化劑及游離基淸除之活性而有潛在的用途，且本發明因此包括供局部使用之皮膚保護及化妝組成物例如（僅供說明用之實例）軟膏、乳膏、油膏及洗劑，其中含至少一種根據本發明之化合物，以及至少一種稀釋劑、載劑及輔劑。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -16- 1285634 A7 B7

14J 五、發明説明（本發明將經由下列實例說明。貫例1 · 5 -甲氧基一 3 —（2 —（四氫—2 —呋喃醯基）乙基）吲哚（M L P - 7 9 )

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製將5 -甲氧基色胺（540毫克，2 . 84毫莫耳）懸浮在苯（5毫升），將混合物在冰浴中冷卻並緩慢加入四氫一 2 -呋喃醯基氯，（.3. 9 〇微升，3 · 7毫莫耳）在苯（5 毫升）中的溶液，將反應混合物在室溫下攪拌1 5小時後用乙醚（25毫升）稀釋，用水（25毫升）、NaHC〇3 溶液（2 X 2 5毫升）及飽和的N a C 1溶液（2 5毫升）萃取，乾燥（M g S〇4 )並在真空下將溶劑去除，在矽膠上經由管柱層析法得到進一步純化，溶劑爲在C Η 2 C 1 2 中的5 0 %醋酸乙酯，收集1 〇毫升之溶離份且產物是在溶離份1 9 一 3 2流洗出，得到產物之油，產量爲2 2 0毫克 (〜3 0 % )。 N M R ( C D C 13) - 5 = 1.71-2. 28( m 5 4 Η » C Η 2 C Η 2 ) ，2.94(t，J = 6.8Hz j 2H 5 CH2CH2) ，3.59(q，J=6.8Hz ，2H，CH2NH) ，3.70 — 3.82 (m，2H，本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） -17- 1285634 A7 B7 五、發明説明（ 15^ CH2〇），3.81(s，3H，〇CH3)，4· (dd，Jl=8.3Hz，J2 = 5.8Hz，lH = 〇CH〇），6.75(寬3，11~1，（：1121^：9：):

2 C 6 . 8 5 ( d d，J 1 Η z，1 Η，芳族 Η ) ，7 · 1 Ο ( d d，J Η z，1 Η，芳族 Η ) Η z，1 Η，芳族 Η ) I R (純質）·· υ 8.75Hz，J2 = 2. 4 7.05(s，lH，C = C = 3.45Hz，J2 = 0· 7.26(d，Jl 二 8.7 8.17(s，lH，NH) H ) 7 2 3 3 9 5 ( N H ) ，3302 N H ) ，2936，2868，1651 (C〇醯胺） 1532 (CH-CH) ，1484，1215，10 6 6 實例2 . 5 —甲氧基一 3 —（2 -（2 —呋喃醯基）乙基）吲哚（M L P — 7 6 ) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

將5 —甲氧基色胺（3 0 0毫克，1 . 5 7毫莫耳）懸浮在苯（5毫升），將混合物在冰浴中冷卻並緩慢加入2 -呋喃醯基氯（190微升，1 · 9毫莫耳）在苯（5毫升）本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） -18 1285634 A7 _ B7__ 五、發明説明（16) 中的溶液，將反應混合物在室溫下攪拌1 5小時後用乙醚（ 25毫升）稀釋，用水（25毫升）、NaHC03溶液（2 X 2 5毫升）及飽和的N a C 1溶液（2 5毫升）萃取，乾燥 (M g S〇4 )並在真空下將溶劑去除，在矽膠上經由管柱層析法得到進一步純化，溶劑爲在C Η 2 C 1 2中的5 0 % 醋酸乙酯，收集1 〇毫升之溶離份且產物是在溶離份1 〇 -1 8流洗出，得到產物之油，其從CH2C12 ( 0 · 5毫升）在一 8 °C結晶，產量爲220毫克（50%)，熔點89 -9 0 〇C。

NMR(CDC13):5二3.03(t，J= 6.75Hz，2H，CH2CH2) ，3.75(q，J (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 6 z 8 z H TI 3 2 H • c 6 〇 4 7 3 H N 2 H c H 2 8 s 寬 /fv 2 5 6

H Η 3 s ) ( Η IN 2 Η c 1 d II d 2 ( ， TJ ， 8 1 z · ， H 6 z 6 ， H 4)5 • H 4 3 c . II - 2 1 Η II J c 2 ， II J d H ， d c z(，H 6 H 5

Η II LO 一—I 7 J H 族芳訂經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

Ho c i—1 II . H 7 c ，， ) Η H 1 c , II z c H ， 6 H 7 1 1 s I 一 ( _—> 5 ， o d . ( 7 4 ， o ,\)/ .H 7 c ，H d 族 d 芳

z H 2 7 0 II 2 <~a z H 5 4 3 II 1 J z H 5 7 8 II r—I >—j d rv 6 2 7

H

芳 H 0 6 2 3 Nix H 〇 N rv HI N 6 ， 3 H 3 1 II ， V s : ( ) 7 r 1 B • K 8 ( ， R 1 H 族

H N 〇 c /IV o 3 6 c II H c rv 5 3 5

胺 ◦ 醯 H 〇 H c II H c /(V 4 9 5 9 5 2 rH 2 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -19- 1285634 A 7 B7 五、發明説明（彳7) 實例3 · 5 -甲氧基一 3 —（2 —（四氫—2 -呋喃基甲胺基）乙基）吲哚（M L P - 9 2 )

將在無水THF中的四氫一2-呋喃醯基氯（〇·56 克，4 · 2毫莫耳）在逐滴方式下添加至5 -甲氧基色胺 HC1 (90.94克，4.15莫耳）及三乙胺（1.2 毫升，8 . 2毫莫耳）在THF (10毫升）中的攪拌溶液，將溶液在室溫下攪拌2 0小時，加入醋酸乙酯.（2 5毫升 )，將溶液用水、5 % H C 1、5 % N a H C 0 3、水及飽和的N a C 1溶液淸洗，經由M g S Ο 4乾燥並在減壓下將溶劑去除，殘留物（0 . 3克，3 0 %產量）經鑑定爲醯胺，在氬氣壓下將醯胺（0 · 285克，0 · 99毫莫耳）在無水THF ( 1 〇毫升）中的溶液在逐滴方式下添加至 L i A 1 Η4 (94毫克）在無水THF (10毫升）中的攪拌溶液，使反應混合物在迴流下加熱1 8小時並冷卻至0 °C，加入水（1毫升），經由過濾將不溶解的鹽去除並用乙醚（3 X 1 0毫升）淸洗，有機部份用飽和的N a C 1溶液 (2 0毫升）淸洗，將溶劑乾燥（M g S〇4 )並去除，殘留物（0 . 1 7 8克，6 5 %產量）在矽膠上經由快速層析本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ----------^^衣-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -20- 1285634 五、發明説明（ 18) A7 B7 法純化（用含約0 · 〇 3 % N Η 3之C Η 2 C 1 2 : C Η 3 Ο Η 9 2 ·’ 8流洗），收集1 〇毫升之溶離份且產物是在溶離份1 1 - 1 8流洗出，得到淡黃色之油。

N M R ( C D C .45~ 2 · 23 (in 2 Η，2 C Η 2 Ν Η ) ，3 · 7 Ο - 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製，4Η，CH2CH2〇），丄· 7 5 (ws NH2)’2.65〜2.85(m，2H ，2.99(s，4H，CH2CH2NH: 3.86( m，2H，CH2 〇 -），3.86(s，3H ’〇CH3) ，3.88 — 4.16(m，lH，CH〇一 )’6.85(dd“，J]L=：8.75Hz，J2 = 2 · 4 5 H z ’ 1 H，芳族 h ) ，7 · 〇 5 ( s，i h，C 二 CH) ，7.05(dd，J1=4.85Hz，j2 = 2·45ΗΖ，1Η，芳族H) , 7 . 2 6 ( d ^ J = 11·25Ηζ，1η，芳族H) ，7.98(S，1H， N H ) 加Λ三m醋酸後，圖譜在從自由態鹼轉化成銨衍生物之預期方式下改變’主要變化是消失在1 . 7 5及 7 . 9 8之胺基峰。 IR (純質）：w = 3397(NH) ，3292 (N Η)，2936，2828，1624(CH=CH)， 1585，1486，1455，1441，1215， 1 Ο 6 6 ο ws* =寬單峰，dd** =雙雙裂峰實例4 . 甲氧基—3 —（2 -（2 —乙醯氧基苄醯胺基本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -·

*1T -21 - 1285634 A7 _______B7 五、發明説明（19) )乙基）吲哚（M L P — 7 7 )

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製將5 —甲氧基色胺（400毫克，2 · 1毫莫耳）懸浮在苯（5毫升），將混合物在冰浴中冷卻並緩慢加入乙醯基水楊醯基氯（500毫克，2 · 5毫莫耳）在苯（5毫升）中的溶液，將反應混合物在室溫下攪拌1 5小時後用乙醚（ 25毫升）稀釋，用水（25毫升）、NaHC〇3溶液（2 X 2 5毫升）及飽和的N a C 1溶液(2 5毫升）萃取，乾燥 (M g S〇4 )並在真空下將溶劑去除，在矽膠上經由管柱層析法得到進一步純化，溶劑爲醋酸乙酯：C H 2 C 1 2 ( 4:5)，收集10毫升之溶離份且產物是在溶離份7-1 0流洗出，得到產物之油，其從CH2C12 ( 0 · 5毫升）在一 8 °C結晶，產量爲2 7 0毫克（4 0 % )，熔點1 2 0 — 12 1。。。 N M R ( C D C Is) :5=1.95(s，3H， C Η 3 C Ο ) ，3.03(t，J = 6.6Hz，2H， C Η 2 C Η 2 ) ，3.79(q，J = 5.6Hz，2H， C H 2 N H ) ，3.81(s，3H，〇CH3)， 6.42as，lH，CH2NH) ，6.86(dd** ，J 1=8 . 75Hz，J2 = 2.45Hz，1H，芳族本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21〇Χ297公釐） -22- 1285634 A7 B7 五、發明説明（ 20> H)，7.05(s，1H，C = CH)，7.04(d， j1=8.75Hz，1H，芳族Η) ，7.29-7.23 (m，2H，芳族 Η) ，7·71 (td***，J 1 = 8 · 7 5 Η ζ，Jl=8.75Hz，12 = 2-45 Hz’J3=l.25Hz，lH，芳族Η) ，7·43( dd，J 1=9Ηζ，J2 = 6 · 5Ηζ，1Η，芳族Η) ，8·〇5(δ，1Η，ΝΗ)。 IR (KBr) = ’ 3344 ( ΝΗ) ，1745 (C = 〇酯），1642 (C = 〇醯胺） ’153〇(CH = CH)，1485，1218。 d d** =雙雙裂峰，t 雙三裂峰貫例5 ·咖啡酸5 一甲氧基色醯胺 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

CH，CH，

將3，4〜二羥基肉桂酸（1 · 13克，6 · 27毫莫耳）溶解在亞硫醯基氯（2 5毫升）並將溶液在4 〇 - 6 0 °C下攪拌5小時，將溶劑去除，將殘留物充分溶解在無水醋酸乙酯，將溶液緩慢添加至5 一甲氧基色胺（1 · 2克）在苯中的溶液，其中也含乙胺（1毫升），將混合物攪拌 '過夜 -23- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨0'〆297公釐） 1285634 A7 B7 五、發明説明（21) ，加入水（1 0毫升）並將混合物再度攪拌1 5分鐘，將溶劑去除，將殘留物溶解在醋酸乙酯並將溶液依序用水、飽和的N a H C〇3溶液、水及鹽水淸洗，然後經由N a 2 S〇4 乾燥，將溶劑去除，經由管柱層析法使用1 : 9甲醇/二氯甲烷純化產物，重複純化過程三次以去除副產物，證實爲咖啡酸5 -甲氧基色醯胺之溶離份經由再結晶法從醋酸乙酯/ 己烷溶液進一步純化，溶劑爲醋酸乙酯：C H 2 C 1 2 ( 4 :5)，收集10毫升之溶離份且產物是在溶離份7-10 流洗出，得到化合物之白色晶體（產量約6 0 % )。

N M R ( C D 3 0 D ) :5 = 2.85 (t，2H，J = 7.25Hz，CH2NH)，3.43(t，2H，J =7 . 25 Hz > CH2CH2NH)，3.69(s，3 H，〇CH3) ，6.23(d，lH，J = 15.5Hz ，=CHC〇NH)，6.64(dd，Jl = 11.25 H z，J 2 = 2 · 5 H z，1 H，芳族 H，咖啡酸）， 6 · 63 (dd，Jl = 8.75Hz，J 2 = 2 . 5 H z ，114，芳族11，色胺基），6.78(dd，Jl =

8 · 75Hz，J2 = 2 · 5Hz，1H，芳族H，色胺基 c)，6.95(s，lH，_ N- C = CH)，6.92 (dd，Jl = i9.5Hz，J2 = 2.45Hz，lH ’芳族 H，咖啡酸），7 . 1 0 ( d，J 二 7 H z，1 H ’ 芳族 H，咖啡酸），7 · 2 8 ( d，J = 1 5 · 5 H z，1 H，CH=CH)，〇H及NH基之質子無法觀察到，因爲圖譜是在甲醇中取得，其中這些質子與溶劑之氘交換。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） --------—丨 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -24- 1285634 A7 B7 五、發明説明（22) 實例6 .咖啡酸5 -甲氧基色醇酯 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 類似於實例5製備此化合物，用等當量之5 -甲氧基色醇取代5 -甲氧基色胺，產物之結構爲：

Q

Η NMR (CDC13) λ (ppm) 7.9 (bs，ΝΗ)，7.6 (d5 Η-4)， 7.4 (m，H-l，H-3)，7.25 (m，H-9, H-10)， 7.05 (m，H-2，H-ll)，6.85 (d，H-8)，6.37 (d5 H-5)， 4.48 (tr，2H-6), 3.86 (s, 3H-Ome)，3.13 (tr，2H-7)， 2.3 1 (s5 6H-Oac)。實例7 · 2 -（對一（2，4 一二氧代噻唑啶—5—基甲基 )苯氧基）乙基一 5 -甲氧基吲哚

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (a )製備起始物質在適當配備之燒瓶中，將2 5克（0 _ 1 3 1莫耳）的本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（ 210X297公釐） -25- 1285634 A7 B7 五、發明説明（ 23」經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 5 -甲氧基色醇溶解在3 0 0毫升二甲基乙醯胺（DMA) ，在此溶液中加入17 · 1克（〇 · 138莫耳）的對氟苯甲醛及3 6 · 2克碳酸鉀以及120毫升DMA，將混合物在室溫下攪拌3 0分鐘，然後在1 〇〇 t攪拌2 6 4小時，然後將混合物冷卻，倒入5 0 0毫升水中並激烈攪拌約1小時，淡黃色固體形成，用總計約2 · 5升的醋酸乙酯萃取懸浮液’將部份N a C 1加入水層使幫助分離，合倂的有機層用硫酸鈉乾燥並在真空下濃縮，得到約1 1 〇克仍然含有部份DMA之深棕色的液體，將液體溶解在5 0 0毫升甲苯，過濾並在過濾液中加入5 0 0毫升水並攪拌，加入數滴2 0 % N a〇Η而得到鹼性p Η，然後加入N a C 1以防止形成乳化液，擾拌1小時後，將有機層分離.，重複甩甲苯萃取兩次，在真空下將合倂的有機層蒸乾，得到3 0克棕色油，在 5 0 0克矽膠上用下列梯度之流洗液層析純化：1升氯仿； 1升95 :5氯仿/丙酮；3升90:10氯仿/丙酮； 500毫升84 ·· 16氯仿/丙酮；1升80 : 20氯仿/ 丙酮；200毫升50:50氯仿/丙酮；300毫升40 :60氯仿/丙酮，含3—(2-對甲醯基苯氧基乙基）一 5 —甲氧基吲哚（TLC:90: 10氯仿/丙酮，Rf = 〇· 2 1 ;黃色點）之合倂的溶離份在真空下蒸發後得到 2 克棕色油，其在下一步驟使用 b )製備中間物在適當配備之燒瓶中，將12·3克（0·0417莫衣紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 衣. 訂 -26- 1285634 A7 B7 五、發明説明（24) 耳）步驟（a )之產物溶解在5 00毫升甲苯，加入8 · 4 克（0 · 0717莫耳）2，4 一噻唑啶二酮，將混合物攪拌3 0分鐘，加入5 0毫升甲苯使幫助溶解’加入六氫吡啶 (5 . 2毫升），將溫度上升至1 1 〇 °C並將混合物在此溫度下攪拌約3小時，冷卻後，黃色固體沈澱，將其過濾，用醋酸乙酯淸洗並乾燥，得到黃色固體1 1克下式之2 -（對一（2，4 一二氧代亞噻唑啶一 5 -基甲基）苯氧基）乙基 —5 -甲氧基吲哚 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部智慧財產局R工消費合作社印製 lU NMR (DMSO-d6, 200MHz) d 2.90 (t3 J = 5.6 Hz, 2H? CH2CH2)，3.78 (t，J =5.6 Hz，2H，CH2CH2)，3.82 (s，3H， OCH3)，6.84 (dd，J1 = 1.8 Hz，J2 = 5.5Hz，lH，芳族 H)， 7.15 (d，J = 1.8 Hz，1H，芳族 H)，7.4 9 (br s，1H，NH)， 7.57 (dd，1H，J1 = 1.0 Hz，J2 = 6.0 Hz, CH = )，7.62-7.85 (m， 6H，芳族 H)。此方法不夠靈敏所以偵測不到第二個NH質子。 13C NMR (DMSO-d6, 50MHz) d 28.45 (CH2), 5 5.42 (CH3)，61.04 (CH2)，101.48 (CH，芳族 C)， 111.55 (CH，芳族 C)，112.18 (CH，芳族 C)，本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -27- 1285634 A7 ___B7_ 五、發明説明（25) 115.44 (C，芳族 C), 122.64 (CH，芳族 C)， 1 25.92 (CH，芳族 C)，1 29.75 (2C，1 芳族 C 與 1C = )， 1 3 0.3 8 (C，芳族 C)，1 30.60 (CH，芳族 C)， 1 30.65 (C，芳族 C)，131.58 (CH，芳族 CH)， 131.62 (CH，CH = )，1 40.5 8 (C，芳族 C)， 1 54.23 (C，芳族 C)，168.02 (C，C = 0)，168.12 (C，C = 0)。 (c) 2—(對一（2，4 一二氧代噻唑啶一 5-基甲基）苯氧基）乙基一 5 -甲氧基吲哚在氬氣壓下，將7 0毫升1，4 一二nf烷在適當配備之燒瓶中迴流，加入1克步驟（b )之產物，約3 0分鐘後得到澄淸的溶液，將其冷卻至5 0 °C，隨後加入7 0毫升甲醇，將此燒瓶保持在5 0°C，在第二個燒瓶中，在氬氣壓下放入1克鎂條並用甲醇覆蓋，加入兩個碘結晶，開始發泡後攪拌混合物至碘顏色消失，然後將第一個燒瓶之內含物倒入第二個燒瓶內，溫度上升至6 4 °C，再加入1 · 4克鎂條歷時 4小時，並使反應混合物迴流5天，直到用U V測定之轉化率> 9 5%，使混合物冷卻並倒入5 0 0毫升2 0% NH4C1溶液，用3x200毫升二氯甲烷萃取，用5% 檸檬酸水溶液及水淸洗，旋轉蒸發後得到固體，將其溶解在甲醇並在- 1 8 °C下結晶，得到4 0 0毫克標題化合物之黃色晶體。 lR NMR (DMSO-d63 200MHz) d 2.88 (t, J = 5.6 Hz, 2H, CH2CH2)，3.20 (dd，J1 =6.2 Hz，J2 = 8.8 Hz，1H，CH2CH)，本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 -^1. 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -28- 1285634 A7 B7 五、發明説明（26) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 3.27 (brs, 1H5 NH), 3.46 (dd5 J1 = 3.1 Hz? J2 = 8.8 Hz, 1H, CH2CH)，3.73 (t, J = 5 · 6 Hz，2H，CH2CH2)，3.82 (s，3H， 0CH3)，4.10 (brs，1H，NH)，4.95 (dd5 J1 = 3.1 Hz, J2 = 6.2 Hz，1H，CHCH2)，6.82 (dd，J1 = 1.8 Hz，J2 = 5.5 Hz，1H，芳族 H)，7.13 (d，J = 1·8 Hz，1H，芳族 H)，7.3 5-7.5 5 (m，6H，芳族 H)。本發明化合物之生化與生物測試實驗1 :游離基淸除活性與脂質過氧化活性游離基已知爲細胞老化之成因，特別是對皮膚而言。游離基主要來自分子氧，且由例如大氣污染及/或紫外線輻射而誘發（Stohs SJ，The role of free radicals in toxicity and disease. J Basic Clin Physiol Pharmacol 1 995 ;6(3-4): 205,28) o 另外亦例示脂過氧化物自由基，其爲細胞膜脂質與細胞外鐵之氧化產物，藉由與積聚在細胞外的過氧化氫與超氧化物陰離子基反應而促成氫氧自由基的產生。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製根據 Blois，M.S.，Nature，1 95 8，181:1199，重複實驗進行測定游離基淸除活性，反應混合物含3毫升0 · 1毫莫耳濃度D P P Η (在9 5 %乙醇中）及0 . 5毫升測試化合物，經2 0分鐘室溫下培養，測定Α 5 i 7。以D Ρ Ρ Η游離基之A 5 i 7下降測量淸除活性，以對照値之百分比表示，結果列在下表1。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -29- 1285634 A7 B7 五、發明説明（27) 表1 :對D P P Η游離基之淸除活性（抗氧化劑效應）添加（10微莫耳濃度）與維他命E(生育酚）比較之淸除活性之相對比率維他命E (生育酚） 1 咖啡酸 2.8 咖啡酸5-甲氧基色醯胺 3.2 維他命C (抗壞血酸） 1 褪黑激素 0.25 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慈財產局員工消費合作社印製實驗2 :游離基淸除活性：A B T S法 · 根據 N.J.Miller，C.Castelluccio，L.Tijburg，C.Rice-Evans，FEB S Letters，1 996，Vol. 3 92，p . 40-44，測量游離基陽離子2，2 / -連氮基二（3 —乙基苯並噻唑啉一 6 —磺酸根）（A B T S )淸除活性。ABTSo由正鐵肌紅蛋白於 A B T S存在下之過氧化作用而產生（使用正鐵肌紅蛋白（ 2 · 5 μ Μ ) ，Η2〇2(75μΜ)與 ABTS(150 μ Μ )(終濃度））。視待測物之游離基淸除能力，游離基淸除劑降低ABTS4至某一程度，可由ABTS4吸收之抑制而測出。A Β 丁 S測試之檢量線由T r ο 1 ο X 0.5 m Μ，1 m Μ，1. 5 mM，2.5mM與5mM乙醇測試液之活性製成。結果如表1 A所示。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21〇X29<7公釐） -30- 1285634 A7 ____ B7 五、發明説明（28) 表 1 A ·· 添加（10微莫耳濃度）與維他命E(生育酚）比較之淸除活性之相對比率（Trolox) 維他命E (生育酚） 1 咖啡酸5_甲氧基色醯胺 3.0 咖啡酸5-甲氧基色醇酯 3.7 褪黑激素 4.4 實驗3 :脂質過氧化分析隨意餵養之雄性SPRD(CDBR)大田鼠（1 80-220克）斷首後迅速取出腦部（減腦）置入冰冷之Krebs緩衝液（pH7.4)。腦部以剪刀剪碎後，於10倍體積Krebs緩衝液（pH7.4,)中以玻璃/鐵弗龍勻漿機勻漿化。在所有硏究中勻漿物均即刻使用。令勻漿物於lmL Krebs緩衝液（pH7.4，含各種濃度之MLP-88與參考化合物BHT)在37°C培養20分鐘。添加Fe + +而起始反應。鐵溶液於要用時才製得並且即刻使用。添加50μΙ^90%三氯乙酸而終止培養，並再加入lOOpL 100mM ΒΗΤ以避免進一步之鐵催化的TBAR形成。離心（I200g，10分鐘）後，取出0.5mL上淸液試樣加至0.5mL0.97% w/v硫代巴比妥酸中。反應混合物於沸水浴中培養20分鐘，冷卻後，以Shimadzu RF-5001螢光儀（Ex : 5 3 2nm，Em : 5 5 3 3 nm)測量硫代巴比妥酸反應性氧化產物（TBAR)。咖啡酸5-甲氧基色醯胺之貯液（ImM)係以 DMSO配製。咖啡酸5-甲氧基色醯胺對鐵依存性脂質過氧化效應之IC5〇値係用線性回歸由濃度-回應曲線得出。該IC50爲本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）丨 ^^衣-- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -31 - 1285634 A7 ___B7 五、發明説明（29) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 〇·85μΜ，顯示咖啡酸5-甲氧基色醯胺對抑制脂質過氧化有很強的效力，所以能夠防止鐵離子誘發之脂質過氧化。已知過量的鐵會誘發大規模的氧化傷害。脂質過氧化即爲此氧化傷害的結果，且其已被發現與許多人類病因有關（Halliwell Β. Role of free radicals in the neuro degenerative diseases: therapeutic implications for antioxidant treatment. Drugs Aging 2001; 1 8(9):685-7 1 6)。在上述實驗1，2與3中，本發明二個化合物的游離基淸除活性於多個測試中顯現，故有效地證明其保護皮膚以及免於游離基誘發之疾病的有效用途，相較於習知抗氧化劑，本案化合物顯現高效力。實驗4 :雄性激素相關之前列腺再生長經濟部智慈財產局員工消費合作社印製將本發明化合物MLP — 76、77、79及92 口服用藥至成年閹割的雄性大田鼠，測試其在與雄性激素相關的前列腺再生長之效應。將雄性大田鼠（2 · 5個月）在麻醉下閹割並放置使其恢復7天，在此期間，前列腺之平均重量下降約7 5 %，閹割後第7天開始，每天在關燈前經由皮下注射給與大田鼠油性媒劑（對照組）或含丙酸畢酮之油性媒劑（每天1毫克/公斤體重）歷經4天，一組大田鼠分成副組（每個籠子3 - 4隻），各副組經由飮水給與本發明化合物，褪黑激素（每升飮水中含1 〇毫克溶解在1 〇〇微升乙醇）或只有媒劑（每升飮水中含1 〇〇微升乙醇），第二組大田鼠分成副組（每個籠子3 - 4隻 >，各副組經由飮水給本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -32- 1285634 五、發明説明（3〇) 與MLP - 92，褪黑激素（每升飮水中含0 . 1或 0 . 0 1毫克溶解在1 0 0微升乙醇）或只有媒劑（每升飮水中含1 0 0微升乙醇）。估計在副組中的每隻大田鼠攝取約4毫升的溶液而接受本發明化合物。也就是每天約4 0 m c g衍生物。在最後注射後的早上，將大田鼠殺死，取出精囊及腹部前列腺並秤重。 (10毫克/升飮水）前列腺（毫克/ 克體重） A 精囊（毫克/ 克體重） Β 對照組（n = 3) 0.27土0.07 0.73土0.05 睪酮（n = 4) 0.77士0,02 2.38 士 0·16 睪酮 +MLP-92 (n = 4) 0.49 + 0.04 66 1.54 + 0.21 5 1 睾酮 +MLP-77 (n = 4) 0.57 + 0.05 40 2.69 + 0.49 -18 睪酮 +MLP-76 (n = 4) 0.49 + 0.09 66 1.82 + 0.25 44 睪酮 +MLP-79 (n = 3) 050+0,04 54 2.00 + 0.39 23 睪酮+褪黑激素（n = 3) 0.55 + 0.08 44 1.88 + 0.03 30 結果列在表2及3。表2 ··睾酮及本發明化合物對閹割大田鼠的腹部前列腺及精囊重量之效應_ __ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A二睪酮刺激的生長之抑制％ (前列腺） B =睪酮刺激的生長之抑制％ (精囊）本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -33- 1285634 A7 B7 五、發明説明（3彳）表3 ··睪酮及不同劑量的M L P - 9 2對閹割大田鼠的腹部前列腺及精囊重量之效應_ 前列腺（毫克/克體重） A 精囊（毫克/ 克體重） B 對照組（n = 4) 0.36土0」1 〇.59士0.〇3 睪酮（n = 4) 0.62士0.1 1.95士0.24 睪酮（n = 3) + MLP-92 0.01毫克/升 0.57 + 0.04 19 1.57 + 0.25 28 睪酮（n = 3) + MLP-92 0.1毫克/升 0.46 + 0.1 62 1.45 + 0.13 37 睪酮（n = 3) +褪黑激素〇.〇1毫克/升 0.66 + 0.08 -15 1.81+0,28 10 睾酮（n = 3) +褪黑激素〇.1毫克/升 0.54 + 0.09 3 1 1.55 + 0.24 30 -- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 、11 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A =睪酮刺激的生長之抑制％ (前列腺） B =睾酮刺激的生長之抑制％ (精囊）與未經處理的對照組比較，睪酮在閹割動物中可增加精囊及腹部前列腺之重量，褪黑激素及本發明之四種化合物明顯降低在睾酮存在下的腹部前列腺之睪酮引發的再生長（表2 ) ，MLP—92&MLP—76&MLP—79、MLP— 7 7及褪黑激素更有效，褪黑激素及M L P - 9 2在前列腺再生長之效應是與劑量相關，而褪黑激素之效應低於本發明化合物（M L Ρ - 9 2及褪黑激素之I C 5。分別是8 8毫本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） -34- 1285634 A7 _B7_ 五、發明説明（32) 微莫耳濃度及2 3 0毫微莫耳濃度）。此實驗指出口服用藥本發明化合物至成年大田鼠後，對前列腺生長之直接抑制活性類似於褪黑激素之效應。實驗5 檢視MLP - 9 2及MLP - 7 7在大田鼠不同器官之分佈，將lOOmc 1鹽水含lxl06dpm125I-標示的本發明化合物（根據Vakkuri et al·，Acta Endovrinol.， 106，15 2-7，1 9 84之揭示標示）注射（腹膜內）至成年雄性大田鼠，注射後1小時將大田鼠殺死，解剖取出各器官並秤重，使用r計數器測定大田鼠器官（腦、下丘腦、垂體、眼睛、甲狀腺、心臟、肺、腎、脾V，睪九、前列腺及精囊）內的放射性衍生物含量，結果以d p m/克器官濕重量表不’ 爲了比較，也顯示使用3 Η -褪黑激素之類似實驗結果（

Withyachumnarnkul et al.，Life Sci.，3 8: 1 757-65，1986 )(表 4) 〇衣-- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -訂經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -35 - 1285634 Β7 五、發明説明（33) 表4:125I-標示的MLP-92及125I-標示的MLP-77在成年雄性大田鼠經腹膜注射6xl00dpm後1小時之分佈 3Η-褪黑激素 dpmx 103/100 克濕組織 125I-MLP-92 dpm x 1 000/ 克濕組織 125I-MLP-77 dpm x 1 000/ 克濕組織 125i-mlp- 79 dpm xlOOO/ 克濕組織下丘腦 0.6 1.02 3.3 0.6 腦幹 23 1.5 1 0.43 前腦 0.33 0.75 0.53 垂體 1.84 5 8.9 0.73 眼睛 1 6.7 1 甲狀腺 1.54 10:9 2.5 心臟 1 7.42 1.66 肺 0.74 1.77 14.4 1.83 肝 1.57 9 1.46 脾 1.2 10 1.43 腎 2 15.3 2.46 睾九 0.6 1 8.9 1.4 前列腺 1.0 6.14 18 2.23 精囊 1.0 0.8 5.6 1 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製結果顯示M L P - 9 2、7 9及7 7選擇性地聚集在前列腺，而褪黑激素大量聚集在垂體，這些滯留樣式提高本發明化合物用於治療良性及惡性前列腺生長的潛在醫療用途之可能性。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） -36- 1285634 Α7 Β7 五、發明説明（34) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 實驗6 :海馬細胞株（HT22)中穀胺酸鹽誘發之氧化應力的預防根據 Nuydens et al，1999，L of Neuroscience;92, 153-9 ，測量粒線體膜電位的變化，基於螢光探子5，5’，6，6·-四氯-1，1·，3，3'-四乙基苯並咪唑羰花青碘（JC-1)之比値特性。將小鼠海馬細胞（HT-22)保存於Dulbecco改質最小必需介質（DMEM)中，該介質並補充有10%胎牛血淸，且已經過胰蛋白酶處理。細胞（3000/96盤孔）與含5mM穀胺酸鹽之 DMEM —同培養24小時後以1(Τ7Μ測試化合物處理。然後改變培養介質爲含有lg/L葡萄糖與ΙΟμΜ JC-1之磷酸鹽緩衝食鹽水（PBS)而載入JC-1，於37 °.培養10分鐘後淸洗一次。然經濟部智慈財產局員工消費合作社印製後於盤讀取計中以480/530與53 0/590測量螢光。螢光強度的比値爲粒線體膜電位的指示。530/590 : 480/53 0比値的降低表示粒線體膜因缺氧或其他導致細胞凋亡的致病狀況而去極化。結果（表5)顯示螢光比値因榖胺酸鹽而降低。褪黑激素與二個本發明化合物顯著地增加了該穀胺酸鹽對粒腺體的傷害變化。MLP-88與MLP-77較有效，相較於MLP-92，2-(對-(2，4-二氧代噻唑啶-5-基甲基）苯氧基）乙基-5-甲氧基吲哚 (**)與褪黑激素。這些數據顯示本發明MLP化合物預防了腦衍生神經細胞之榖胺酸鹽誘發之氧化傷害。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） -37- 1285634 五、發明説明（35) 表 5 正常條件 +穀胺酸鹽 5mM JC-1 比値 JC-1 比値榖胺酸鹽產生的變化百分比（％) 對照組 2.46 對照組 2.09 85 褪黑激素 2.48 褪黑激素 2.44 98 MLP-88 2.02 MLP-88 2.25 1 12 MLP-77 1.98 MLP-77 1.96 99 MLP-92 3.03 MLP-92 2.02 59 1.97 氺* 1.80 91 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製實驗7: 5 -甲氧基-3-(2-(2-乙醯氧基苯甲醯胺基）乙基）-吲哚 (MLP-77)於小鼠zymosan誘發腳掌水腫分析中之消炎功效小鼠各組（n = 8)各以載劑、piroxicam(l〇mg/kg)或是下列不同劑量之5-甲氧基-3-(2-(2-乙醯氧基苯甲醯胺基）乙基）-吲哚，即，20、50或100mg/kg，治療。所有治療均是口服投予，化合物的投予遵循亞急性治療療程。在zymosan注射前第 1天與第2天，於上午9點與下午4點給予治療。動物在上午的治療與下午3點間可以自由攝食。在實驗當天，上午9點進行第五次治療，然後於上午10點IP注射zymosan，接著監看所引起的水腫歷24小時（見下）。此實驗進行兩次，故動物總數爲每組16隻。將0.0 5mL的2°/〇zymosan皮下注入右後腿腳掌。刺激引起的腫脹以汞體積描記器定量。在zymosan剛注射本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -38- 1285634 A7 ___ B7_ 五、發明説明（36) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 後即讀出腳掌體積，然後每小時記錄共6小時，並記錄第24 小時。腳掌體積以單位體積表之，每單位體積指〇〇丨3 mL，故1.0mL = 75單位。結果（表6)顯示MLP-77之消炎功效。表6 相較於對照組（食鹽水）對腳掌體積增加之平均抑制治療時間. lh 2h 4h 24h Piroxicam 10mg/kg 46* 52* 67* 22* 5-甲氬某-3-(2-(2-乙醯 13 23 * 11 19* 氧基苯甲醯胺基）乙基 D引 0朵 20mg/kg 5-甲氬某-3-ί2-ί2-乙醯 20 37* 14* 19* 氧基苯甲醯胺基）乙基 11引晚 5 0mg/kg 5-甲氣某-3-(2-(2-乙醯 37* 37* 17* 23 * 氧基苯甲醯胺基）乙基）- 吲哚 100mg/kg *= P<0.05 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製實驗8:5-甲氣某-3-(2-(2-乙醯氯某苯甲醯胺某）乙基朵於兔中抑制血小板凝集之功效於阿斯匹靈治療組中使用5隻動物，測試化合物治療組使用7隻動物。此實驗爲自我對照，凝集率之變化係以同一本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） -39- 1285634 五、發明説明（37) 動物治療前之對照値作爲參考。於給藥前，自兔耳靜脈取得對照血樣，加入檸檬酸鈉（1 : 9)中，然後每小時取樣共歷5 小時。全血凝集分析時，令500 μΙ>檸檬酸化血液以500 μΐ^食鹽水稀釋。凝集分析係於雙頻全血凝集器（Chrono-Log Mod 54 0VF)中進行。將10μί誘發物-花生四烯酸[Sigmaa，溶於人類白蛋白（l〇〇mg/mL)至60mM]加至1000μΙ>全血-食鹽水混合物，以阻抗法（impedance method)測量。以Strip Chart記錄器記錄凝集曲線的幅度。於第1與第6分鐘（分別爲0與100%凝集）讀出數値。化合物的功效相比於對照値（動物治療前）且以 %表示（表7)。 --------Φ|丨 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂表7 小時血小板凝集（抑制％) 5-甲氢某-3-(2-(2-乙醯阿斯匹靈（Aspirin) 1 00mg/kg 氯某苯甲醯胺基）乙基）-吲哚 50mg/kg 1 36 + 4 100 + 0 2 56+12 100 + 0 3 44+12 97 + 2 4 22+10 96 + 2 5 16 + 9 88 + 2 MLP-77顯示爲有效之血小板凝集抑制劑，所以有可能用作爲抗凝血劑。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） _ -40 - 1285634 A7 __B7 _ 五、發明説明（38) 命9: ml-1褪黑激素夸體之結合 __所用動物爲1 2天齡之小雞（Gallus domesticus)。在其到 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 達後第1 3 00至1 700小時間宰殺。迅速取出腦部，於-200°C 冷凍後貯存於-8 0°C。依據Yuan與Pang所述方法（J0urnai 〇f Endocrinology, 128. pages 475-482，1991)製得膜。令2-(ι25Ι)碘褪黑激素於膜存在時在緩衝溶液（pH 7.4)中，25。<：培養60分鐘。結束後將膜懸浮液過濾（Whatman GF/C)。保留於過濾器上的放射活性使用Beckman.RTM. LS 6000液體閃爍計數器測量。本發明特定化合物所得結果（表 8)如下所示。

袠 B 化合物測試濃度 (M) 對照組特異性結合之抑制％咖啡酸 5-曱氧基色醯胺 1.0E-06 53% 5-甲氧基-3-(2-(2-乙醯氧基苯甲醯胺基）乙基）-吲哚 1.0E-07 8 8% 5-甲氧基- 3- (2-(2 -糖醯胺基）乙基）-吲哚 1.0E-06 5 5% 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製所有本發明三個化合物均顯示結合至褪黑激素ml-1受體之效力。實驗10: MLP-92對體重、脂肪與纖瘦激素（leptin)之功效本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -41 - 1285634 表9 A7 B7 五、發明説明（39) _硏究雄性大田鼠口服本發明化合物MLP-92後之體重、脂肪與纖瘦激素影響。雄性大田鼠（2.5月齡）分成副組（每籠5 隻），經由飮水投予MLP-92 (lmg溶於lOOpL乙醇/升飮水）或只有載劑（i〇〇pL乙醇/升飮水）。70天治療後宰殺大田鼠，取出內臟脂肪與棕色脂肪秤重。血漿中的纖瘦激素以RIA套組 (得自 Linco Research，Inc. (St. Charles，MO))測量。結果如表9所示。體重腹內內臟脂肪 /體重xlOO 棕色脂肪/ 體重xlOO 纖瘦激素 (Leptin) ng/ml 對照組 425+24 0.73 + 0.09 0.53 + 0.04 10.82+1.33 MLP-92 413+48 0.63 + 0.15 0.58 + 0.07 6.07+1.71 P値：t 0.52 0.07 0.06 0.05 測試 MLP-92(lmg/L)增加棕色脂肪的重量（相較於未治療之對照組），抑制腹內內臟脂肪與血漿纖瘦激素，但對體重沒有影響。此實驗顯示口服本發明MLP-92對內臟肥胖之直接抑制作用，類似於褪黑激素（Wolden-Hanson et al，Endocrinology， 2000 ;14 1 :487-97) ° 實驗ll:MLP-88於小鼠之強制游泳涮試（Porsolt’s測試）中之_ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -42- 1285634 A7 B7 經濟部智慧財產局W工消費合作社印製五、發明説明（40) 抗抑鬱功效雄性Albino-Swiss小鼠（25-29 g)每籠1〇隻群居，循環爲 121^/120(7:00- 1 9:00亮燈），恆定室溫（22 + /-2。(：），可以自由攝食（標準的實驗室九粒，LSM，Bacutil)與飮水。從早上8 點至下午4點進行硏究。各組由1〇隻小鼠組成。將MLP-88懸浮於1% Tween 80的水溶液中，分別經腹膜內地（i.p.)投予0.3 、3、30、100 mg/kg的劑量。對照組的動物依相同的時間表接受載劑。於測試前1小時給予化合物。在投予化合物1小時後，將小鼠丟入裝有6cm3水（2卜 23 °C)深的玻璃燒杯中。於6分鐘測試的最後4分鐘評估固定時間（Porsolt et al.31977)。對每隻小鼠，玻璃燒杯中的水每次都要換（Porsolt R.D.5Bertin A., Jalfre M. .Behavioral despair in mice: a primary screening test for antidepressants .Arch.Int.Pharmacodyn.，1 977，327-336) ° 結果表爲10隻動物之平均+/-SEM。數據以單向ANOVA 分析，其中顯著者以Dunnett測試進行post-hoc比較（表1 0) 〇 3 mg/kg劑量的MLP-8S降低固定時間，相似於作爲參考化合物之丙咪秦（Imipramine)。3 0 mg/kg劑量的MLP-88具有類似功效，但未達統計上的顯著性。其他劑量的MLP-8 8對固定時間沒有影響。於小鼠之強制游泳測試中，3 mg/kg劑量的MLP-88顯示類似抗抑·的功效（相似於丙咪秦（Imipramine)，30 mg/kg)。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) :^^衣· 訂 ^1. 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -43- 1285634 A 7 B7 五、發明説明（41) 表10. MLP-88於小鼠之強制游泳測試（Porsolt’s測試）中之抗抑鬱功效化合物（mg/kg i.p.) 固定時間 (秒）平均 +Λ SEM 載劑 196.8 +/- 1.8 丙咪秦（Imipramine) (30) 163.4 +/- 7.4 <0.05 MLP-88 (0.3) 171.9 +/- 9.0 η. s. MLP-88 (3) 167.9 + /- 8.4 <0.05 MLP-88 (3 0) 168.9 +/- 8.8 n. s. MLP-88 ( 1 00) 180.4+/-7.8 n. s. F(5,54)=2.531 α = 0.0 5 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製咖啡酸5-甲氧基色醇酯（實例6)與2-(對-(2，4-二氧代-5- 基甲基）苯氧基）乙基）-5-甲氧基吲哚（實例7)之生物數據如實驗1 2所示。實驗12:咖啡酸5-甲氧某色醇酯與2“對J2，4-二氧代-5-某甲基）苯氧基）乙基5-甲氣某吲哚於C6大鼠神經膠質細朐瘤中的抗增生活件大鼠神經膠質細胞瘤細胞（5 6000細胞/孔）置於96孔盤上以MEM(補充有 10% v/v新生小牛血淸）培養。化合物溶於乙醇中配成濃度爲1 OmM。將此貯液以培養介質稀釋而得到最終濃度。以順鉑（cisplatin)作爲陽性對照組。培養24或本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X29*7公釐） -44- 1285634 A7 __B7 五、發明説明（42)

4 8小時後’加入MTT溶液歷2小時。最後用溶解緩衝液將細胞溶解（依一般方法）。孔盤於37。放置過夜，然後於570 nM 計數。結果_ 結果顯示這些化合物顯著降低神經膠質細胞瘤細胞（C6) 之增生。夷11:咖咙酸5-甲氬某色醇酯與2-(對-(2，4-二氬代-5-基甲某）苯氧基丄乙基5-甲氣某吲哚的抗增生活件 _ 測試化合物_ 24小時後之 4 8小時後之細胞存活率細·胞存活率咖啡酸5-甲氧基色醇酯 5 2.5% 50 μΜ 3 3.8% 50μΜ 82% 10 μΜ 4 8.5% ΙΟμΜ 2-(對-(2，4-二氧代-5-基甲基） 68% 50 μΜ 44% 50 μΜ 苯氧基）乙基）-5-甲氧基吲哚順舶（cisplatin) (60 μΜ) 67% 4 8% 雖然本發明經由參見部份具體實施例而特定地說明，熟諳此藝者很明顯地了解可進行許多修改及變化，本發明據此不能以任何方式侷限在這些具體實施例中，而是根據下述申請專利範圍之精神及範圍。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） -- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 ^1. 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -45-

Claims

1285634 A8 B8 C8 D8 公告表

六、申請專利範圍附件2 A : 第891 10620號專利申請中文申請專利範圍替換本民國95年1〇月18日修正 1 · 一種下式（IIA)之化合物， 21 R2 (IIA) 及其酸加成鹽（若該化合物爲鹼性），其中：各R獨立地選自鹵基、Ci-4烷基、Ci — 4院氧基、 N R ’R ”、硝基、芳基、芳基C : 4烷基或芳基c i _ 4烷氧基，且各R’及R”獨立地爲Η或Ci-4院基，或R，= R”=C 1 CH2CH2 ’或NR’R，，組成含3 - 8個環員之飽和雑環’且m爲〇 — 4 ; R 1是氫； R2是選自氫、鹵基、Cl〜4烷基、Cl-4烷氧基、方基、方基C 1-4丨兀基、方基C 1-4院氧基及上述定義之 N R ’ R，，； Z1 是選自一 NH — X — Y、2 —（對一（3 ，5 — 二氧代異嗎D坐D定—4 一基甲基）苯氧基）乙胺基、對一（ 3，5 -二氧代異噚唑啶一 4 一基甲基）苯氧基、2 一（對一（2，4 一二氧代噻唑啶一 5〜基甲基）苯氧基）乙胺基、2 —（對一（3，5 —二氧代亞異鸣唑啶—4 一基本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ..^訂------^ (請先閲,背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1285634 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍甲基）苯氧基）乙胺基、對一（3，5 —二氧代亞異DfD坐 π定一 4 一基甲基）苯氧基、2 —（對一（2，4一二氧代亞噻唑啶一 5 -基甲基）苯氧基）乙胺基、3 ，5 —二氧代異哼唑啶一 4 一基甲基胺基、2，4 —二氧代噻d坐u定— 5 -基甲基胺基及經至多兩個獨立地選自鹵基、c i 4院基、Ci-4烷氧基、0H、上述定義之NR’r，，、硝基、芳基、芳基C 1-4院基或芳基C 1-4院氧基之取代基環取代之肉桂醯氧基； .A是C 1 - 4伸院基； X 是〉CH2、 >(：=〇或>〇 = 5 ; Y是2 -咲喃基、2 —二氫13夫喃基、2 —四氫d夫喃基或（2 — R° — C〇〇一）苯基，前述任一者可經χ 一2 個選自Cx-4烷基、烷氧基、0H、上述定義之 N R ’ R ”或硝基之取代基取代，或Y是經至多兩個獨立地選自幽基、Cl-4院基、Cl-4院氧基、〇H、上述定義之NR’R”、硝基、芳基、芳基Ci-4烷基或芳基Ci-4 烷氧基之取代基環取代之苯乙烯基；但當X爲> C =〇時，則Y不爲間氯苯乙烯基、對氯苯乙烯基、鄰羥苯乙烯基、對羥苯乙烯基、對甲氧基苯乙烯基、3 ，4一二甲氧基苯乙烯基以及4 一羥基一 3 -甲氧基苯乙烯基；尺°是<：烷基或上述定義之NR’R”；惟當ηι爲1 ，R爲5 —甲氧基，時，則Z1 — A -亦可爲2 —（對一（2，4 一二氧代_卩坐d定一 5 —基甲基）苯氧基）乙基或2 —（對一 2 ，4 一二氧本紙張尺度適用中國國家揉準（CNS ) Α4規格（210X297公釐）-2 - ：----^-- (請先閱·#背面之注意事項再填寫本頁) *1T 線- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1285634 A8 B8 C8 D8 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製六、申請專利範国代亞11卩坐B定一 5 —基甲基）苯氧基）乙基；各方基是苯基，其爲未經取代或經1 一 3個選自鹵基、C ! - 4烷基及C ! _ 4烷氧基之取代基取代。 2 ·根據申請專利範圍第1項之化合物，其中： Y是2—呋喃基、2—二氫呋喃基、2-四氫呋喃基或（2 — R。— c〇〇一）苯基，前述任—者可經個選自C!-4烷基' c】-4烷氧基、〇h'上述定義之 N R ’ R ”或硝基之取代基取代； z 1是選自2 —（對一（3，5 -二氧代異Df唑啶一 4 一基甲基）苯氧基）乙胺基、對一（3 ，$ 一二氧代異吗哗d定一 4 一基甲基）苯氧基、3，5 —二氧代異Df唑D定一 4 一基甲基胺基、2 —（對一（2，4 一二氧代噻哗D定一 5 —基甲基）苯氧基）乙胺基、及2，4 一二氧代噻〇坐 D定一5—基甲基胺基；且 R' NR，R”、m、R1、R2、A、X、R。及芳基各相同於申請專利範圍第1項之定義。 3 ·根據申請專利範圍第2項之化合物，其中m是工且R是在啤I D朵環5 -位置之取代基。 4 ·根據申請專利範圍第2項之化合物，其中g _ 個下列情形適用，也就是：m是1且R是5 —甲氧基；及 /或 A 是 CH2CH2。 5 ·根據申請專利範圍第2項之化合物，其是下式之 5 —甲氧基一 3 —（2 — (2 —呋喃醯胺基）乙基）卩引D朵本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）-3 - ----^------訂------^ (請先閲·#背面之注意事項再填寫本頁) 1285634 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍

之基式乙下 } 是基其胺，醯物喃合呋化 I 之 2 項 I 2 氫第四圍 ^ 範 I 利 2 專 C 請 I 申 3 據 I 根基 •氧 6 甲哚 I 吲 5 )

之 3 式基下胺是基其甲 , 基物喃合呋化 I 之 2 項 I 2 氫第四圍 C 範 I 利 2 專 C 請 I 申 3 據 I 根基哚 . 氧吲 T 甲 I 基 5 乙 (請先閲脅背面之注意事項再填寫本頁) •裝. *11 線經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

之乙式 3 下基是胺其醯，甲物苯合基化氧之醯項乙 2 | 第 2 圍 C 範一利 2 專 ^ 請一申 3 據 I 根基 . 氧哚 8 甲间 I 5 基本紙張尺度適用中國國家摞準（CNS ) A4規格（21〇X297公釐）-4 - 1285634 A8 B8 C8 D8

六、申請專利範圍

9 ·根據申請專利範圍第1項之化合物，其是下式之咖啡酸5 —甲氧基色醯胺 CH,CH.NH· OH 1 0 ·根據申請專利範圍第1項之化合物，其是下式之咖啡酸5 -甲氧基色醇酯 (請先閲却背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1 1 .根據申請專利範圍第1項之化合物，其是下式之2 — （對一（2，4 一二氧代噻唑啶一 5 —基甲基）苯氧基）乙基一 5 —甲氧基吲哚本紙張尺度適用中國國家樣準（CNS ) A4規格（210X297公釐）-5 - 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1285634 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍

1 2 ·根據申請專利範圍第1項之化合物，其是下式之2 -（對一（2，4 一二氧代亞噻唑啶一 5 -基甲基）苯氧基）乙基一 5 —甲氧基吲哚

13·—種用於治療可由與褪黑激素系統交互作用之治療所作用的情形或疾病之醫藥組成物，其係包含至少一種藥學上可接受之稀釋劑、防腐劑、溶解劑、乳化劑、輔劑及/或載劑，及至少一員根據申請專利範圍第1項之式 (IIA)化合物及其藥學上可接受之鹽類。 1 4 ·根據申請專利範圍第1 3項之醫藥組成物，其中該至少一員是選自根據申請專利範圍第2項定義之化合物及其藥學上可接受之鹽類。 1 5 · —種供局部使用之化妝及/或皮膚保護組成物，其係包含至少一種具有選自抗氧化劑的活性及游離基清除活性之根據申請專利範圍第1項之式（IIA)化合物，以及至少一種稀釋劑、載劑及輔劑。本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）· 6 - , . i 、 ------：----^------訂------^--- (請先聞·«背面之注意事項再填寫本頁) 1285634 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 ~ 1 6 ·根據申請專利範圍第1 5項之組成物，其係包a根據申Bra專利車B圍弟1項之式（IIA)化合物及其酸力口成鹽，其中Z1爲經至多兩個獨立地選自鹵基、〇1_4院基、c 1 - 4烷氧基、ο Η、如申請專利範圍第1項定義之NR，R”、硝基、芳基、芳基Ci — 4烷基或芳基Cl_4 烷氧基之取代基環取代之肉桂醯氧基，或者z 1爲—NH 一 X — γ，γ爲經至多兩個獨立地選自鹵基、Cl_4烷基、c 1 - 4院氧基、Ο Η、如申請專利範圍第1項定義之 NR，R”、硝基、芳基、芳基Ci-4烷基或芳基Cl-4烷氧基之取代基環取代之苯乙烯基，且其他代號具有如申請專利範圍第1項所述定義。 1 7 · —種用於治療可由與褪黑激素系統交互作用之治療所作用的情形或疾病之醫藥組成物，其係包含至少一員下述（IIA)化合物及其酸加成鹽（若該化合物爲鹼性），其中該式（IIA)化合物爲

各R獨立地選自鹵基、Ci-4烷基、Ci-4烷氧基、 NR，R”、硝基、芳基、芳基Ci-4烷基或芳基Ci-4烷氧基，且各R，及R”獨立地爲烷基，或R’ = R ” = C 1 C Η 2 C Η 2，或N R ’ R，，組成含3 - 8個環員之飽和雜環，且m爲0 - 4 ; 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）-7 - I ! I n^n ,. I n n n ^ I l n n n I— ^ I n I (請先聞部背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1285634 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 R 1是氫； R2是選自氫、鹵基、烷基、c]-4烷氧基、 (請先Μ·«背面之注意事項再填寫本頁) 芳基、芳基Ci-4院基、芳基Ciq烷氧基及上述定義之 N R ’ R，，； Z1 是選自一 NH - X-Y、2 —（對一（3，5 - 二氧代異吗嗤卩定一 4 一基甲基）苯氧基）乙胺基、對一（ 3，5 —二氧代異鳄唑啶一 4 一基甲基）苯氧基、2 -（對一（2，4 一二氧代噻唑啶一基甲基）苯氧基）乙經濟部智蕙財產局員工消費合作社印製胺基、2 —（對—（3，5 —二氧代亞異nfD坐π定一 4 一基甲基）苯氧基）乙胺基、對一（3，5 —二氧代亞異卩琴η坐陡一 4 一基甲基）苯氧基、2 -（對一（2，4 一二氧代亞噻唑啶一 5 -基甲基）苯氧基）乙胺基、對一（2，4 一二氧代亞噻唑啶一 5 —基甲基）苯氧基、3 ，5 —二氧代異鸣唑啶一 4 —基甲基胺基、2，4 一二氧代噻唑啶一 5 -基甲基胺基及可經至多兩個獨立地選自鹵基、c 院基、Ci— 4院氧基、0Η、上述定義之N R ’ R ”、硝基、芳基、芳基Ci-4烷基或芳基Ci-4烷氧基之取代基環取代之肉桂醯氧基； A是C 1 - 4伸焼基； X 是〉CH2、 >0 =〇或>〇=3 ; Y是2-呋喃基、2-二氫呋喃基、2—四氫呋喃基或（2 — R° - C〇〇一）苯基，前述任一者可經1 一 2 個選自烷基、烷氧基、〇H、上述定義之 N R ’ R ”或硝基之取代基取代，或Y是可經至多兩個獨立本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X 297公釐）-8 - 1285634 A8 Βδ C8 D8 六、申請專利範圍地選自鹵基、C!-4烷基、Ci-4烷氧基、〇H、上述定義之NR’R”、硝基、芳基、芳基烷基或芳基C】 -4烷氧基之取代基環取代之苯乙烯基； R°是C1-4烷基或上述定義之NR’R”；惟當m爲1 ，R爲5 —甲氧基，時，則Z 1 - A -亦可爲2 —(對一（2，4 一二氧代噻唑啶一5—基甲基）苯氧基）乙基；各芳基是苯基，其爲未經取代或經1 - 3個選自鹵基、Ci-4烷基及Ci-4烷氧基之取代基取代。 I---^------訂------0 (請先閲靖背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）-9 -