SI9620076A - Stabilni reagenti za pripravo radiofarmacevtikov - Google Patents

Stabilni reagenti za pripravo radiofarmacevtikov Download PDF

Info

Publication number
SI9620076A
SI9620076A SI9620076A SI9620076A SI9620076A SI 9620076 A SI9620076 A SI 9620076A SI 9620076 A SI9620076 A SI 9620076A SI 9620076 A SI9620076 A SI 9620076A SI 9620076 A SI9620076 A SI 9620076A
Authority
SI
Slovenia
Prior art keywords
group
substituted
independently selected
occurrence
alkyl
Prior art date
Application number
SI9620076A
Other languages
English (en)
Other versions
SI9620076B (sl
Inventor
Michael Sworin
Milind Rajopadhye
Thomas David Harris
David Scott Edwards
Edward Hollister Cheesman
Shuang Liu
Original Assignee
Dupont Pharmaceuticals Company
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Dupont Pharmaceuticals Company filed Critical Dupont Pharmaceuticals Company
Publication of SI9620076A publication Critical patent/SI9620076A/sl
Publication of SI9620076B publication Critical patent/SI9620076B/sl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/81—Amides; Imides
    • C07D213/82—Amides; Imides in position 3
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
    • A61K51/082—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins the peptide being a RGD-containing peptide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
    • A61K51/088—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins conjugates with carriers being peptides, polyamino acids or proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B59/00—Introduction of isotopes of elements into organic compounds ; Labelled organic compounds per se
    • C07B59/008—Peptides; Proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
    • C07K14/75—Fibrinogen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2123/00—Preparations for testing in vivo

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Ta izum zagotavlja nove reagente za pripravo radiofarmacevtikov, ki so koristni kot sredstva za slikanje za diagnozo kardiovaskularnih motenj, infekcije, vnetja in raka, diagnostične komplete, ki obsegajo navedene reagente in intermediarne spojine, koristne za pripravo navedenih reagentov. Reagenti so sestavljeni iz s stabilnim hidrazonom modificiranih biološko aktivnih molekul, ki reagirajo z radioizotopi, ki emitirajo gama žarke, da se tvorijo radiofarmacevtiki, ki se selektivno lokalizirajo na mesta bolezni in tako omogočajo, da se z uporabljanjem gama scintigrafije dobi slika teh mest.ŕ

Description

-1-
STABILNI REAGENTI ZA PRIPRAVO RADIOFARMACEVTIKOV NAPOTITEV K SORODNIM PRIJAVAM
Pričujoča prijava je deloma nadaljevanje naše prijave U.S.S.N. 08/040,336, ki je sočasno v teku, vložene 28. marca, 1994, ki je deloma nadaljevanje U.S.S.N. 08/218,861 vložene 30. marca, 1993, katere razkritja so tu vključena z referenco.
PODROČJE IZUMA
Ta izum se nanaša na nove reagente za pripravo radiofarmacevtikov, ki so koristni kot sredstva za slikanje za diagnozo kardiovaskularnih motenj, infekcije, vnetja in raka, na diagnostične komplete (angl. kits), ki obsegajo navedene reagente in na intermediarne spojine, koristne za pripravo navedenih reagentov. Reagenti so sestavljeni iz s stabilnim hidrazonom modificiranih biološko aktivnih molekul, ki reagirajo z radioizotopi, ki emitirajo gama žarke, da se tvorijo radiofarmacevtiki, ki se selektivno lokalizirajo na mesta bolezni in tako omogočajo, da se z uporabljanjem gama scintigrafije dobi slika teh mest.
OZADJE IZUMA
Obstaja stalna potreba po novih metodah za neinvazivno diagnozo različnih bolezni, kot so tromboembolična bolezen, ateroskleroza, infekcija in rak. Radiofarmacevtiki, sestavljeni iz biološko aktivnih molekul, ki so označene z radionuklidi, ki emitirajo gama žarke, lahko zadovoljijo to potrebo. Biološko aktivne molekule služijo zato, da radionuklide lokalizirajo na mesta bolezni in tako omogočajo, da ta mesta postanejo vidna z gama scintigrafijo. -2-
Molekule so lahko bodisi proteini, protitelesa, fragmenti protiteles, peptidi ali polipeptidi, ali peptidomimetiki. Molekule vzajemno delujejo z receptorskim ali vezavnim mestom, izraženim na mestih bolezni ali z receptorskim ali vezavnim mestom na endogeni krvni komponenti, kot so trombociti in levkociti, ki se akumulirajo na teh mestih. To vzajemno delovanje rezultira v selektivni lokalizaciji deleža injiciranega radiofarmacevtika, medtem ko se preostanek očisti bodisi skozi ledvični ali jetrnožolčni sistem. Lokaliziran radiofarmacevtik je potem slikan eksterno, z uporabljanjem gama scintigrafije. Relativne hitrosti lokaliziranja, očiščevanja in razpada radionuklida določajo težavnost vizualizacije, pogosto izražene kot razmerje tarča proti ozadju. Pogosto se na receptorje vežejo samo določeni deleži biološko aktivnih molekul; ti deleži se imenujejo razpoznavne sekvence ali enote. Število radiofarmacevtikov, sestavljenih iz radionuklidno označenih proteinov, protiteles ali fragmentov protiteles raste, vendar je bil do danes pri Food and Drug Administration odobren samo en radiofarmacevtik. Ta redka registracija je posledica kombinacije faktorjev, ki otežujejo razvijanje teh radiofarmacevtikov, vključno s problemi s pripravljanjem in kontrolo kvalitete, neoptimalnimi hitrostmi sekvestriranja in očiščevanja, in pojavom antigenskih ali alergičnih odzivov na radiofarmacevtike. Do teh problemov v glavnem pride zaradi makromolekularne narave proteinov, protiteles in fragmentov protiteles. Njihova velika molekularna teža povzroča, da je direktna kemijska sinteza nepraktična, zato morajo biti sintetizirani z rekombinantnimi tehnikami ali tehnikami kloniranja, ki tipično dajejo nizke dobitke in zahtevajo ekstenzivne postopke izolacije in čiščenja. Molekularna teža omenjenih molekul lahko upočasni njihove hitrosti lokaliziranja in ovira njihovo očiščevanje z aktivnim eliminacijskim mehanizmom preko ledvic ali jeter, kar rezultira v podaljšanem zadrževanju v obtoku, ter med slikanjem -3- povzroča visok nivo ozadja. Tudi telesni imunski sistem teži k temu, da bi bolj učinkovito prepoznal večje eksogene vrste.
Uporaba peptidov, polipeptidov ali peptidomimetikov z manjšo molekularno težo, kot biološko aktivnih molekul, odstranjuje številne od teh problemov. Te molekule so lahko sintetizirane direktno z uporabljanjem klasične kemije raztopin ali z avtomatiziranim peptidnim sintetizatorjem. Lahko se tvorijo v večjih dobitkih in zahtevajo manj zapletene postopke čiščenja. Te molekule težijo k temu, da bi se z aktivno eliminacijsko potjo hitreje odstranile iz obtoka, kar se v slikah kaže v zmanjšanem ozadju. Običajno tudi niso imunogene. Food and Drug Administration je pred kratkim odobrila prvi z radionuklidom označeni polipeptidni radiofarmacevtik.
Obstajata dve splošni metodi za označevanje biološko aktivnih molekul z radionuklidi za uporabo kot radiofarmacevtikov, imenovani direktno in indirektno označevanje. Direktno označevanje vključuje povezovanje radionuklida na atome biološko aktivne molekule; medtem ko indirektna metoda vključuje povezovanje radionuklida preko kelatorja. Kelator se lahko bodisi na biološko aktivno molekulo poveže pred reakcijo z radionuklidom ali pa se lahko na biološko aktivno molekulo poveže z radionuklidom označeni del kelatorja. Več piscev je v svojih novejših preglednih člankih opisalo te metode označevanja in so tu vključene z referenco: S. Jurisson s sod., Chem. Rev., 1993, 93, 1137; A. Verbruggen, Eur. J. Nuc. Med., 1990, 17, 346; in M. Dervvanjee, Semin. Nuc. Med., 1990, 20, 5.
Uporaba hidrazinov in hidrazidov, kot kelatorjev, da modificirajo proteine za označevanje z radionuklidi, je bila pred kratkim razkrita v U.S. patentu 5,206,370, Schvvartza s sodelavci. Protein je modificiran z reakcijo z bifunkcionalnimi aromatskimi hidrazini ali hidrazidi, ki imajo proteinsko -4- reaktiven substituent. Za označevanje s tehnecijem-99m, hidrazino modificiran protein zreagira z reducirano vrsto tehnecija, tvorjeno z reagiranjem pertehnetata z reducentom v prisotnosti dikisikovega iiganda, ki kelira. Tehnecij se na protein poveže preko vezi, ki so verjetno hidrazido ali diazenido vezi s koordinacijsko sfero zaključeno s pomožnimi dikisikovimi ligandi. Primeri pomožnih dikisikovih ligandov vključujejo glukoheptonat, glukonat, 2-hidroksiizobutirat, in laktat. V eni izvedbi izuma, opisani v Schvvartz s sod., je bifunkcionalni aromatski hidrazin ali hidrazid zaščiten kot nižji alkil hidrazon. To je bilo narejeno zato, da je bila preprečena navzkrižna reakcija med hidrazinom ali hidrazidom in proteinsko reaktivnim substituentom, zato ker v odsotnosti zaščitne skupine bifunkcionalna spojina reagira s proteinom, da se tvori s hidrazonom modificiran protein. Prosta hidrazinska ali hidrazidna skupina na proteinu se potem tvori z dializo v kisel (pH 5.6) pufer in v kislem mediju zmeša z ustrezno vrsto kovine, kot je reducirana vrsta tehnecija, da nastane označen protein. Čeprav nižja alkil hidrazonska zaščitna skupina preprečuje navzkrižno reakcijo med hidrazinom ali hidrazidom in proteinsko reaktivnim substituentom je lahko premeščena z drugimi aldehidi in ketoni, da se tvorijo različni hidrazoni. To je resna in pomembna pomanjkljivost. V majhnih količinah je prisotnost drugih aldehidov in ketonov v komercialnem farmacevtskem proizvodnem okolju neizogibna, zato ker se ekstrahirajo iz različnih plastičnih in gumastih materialov in se uporabljajo tudi v običajnih razkužilih. Še posebno so povsod navzoče majhne količine formaldehida. Reagenti, ki so sestavljeni iz biološko aktivnih molekul zaščitenih z nižjim alkil hidrazonom se zato lahko razgradijo v številne različne vrste, ki vsebujejo hidrazon, odvisno od števila in količin drugih aldehidov in -5- ketonov na katere so izpostavljeni med procesiranjem ali izdelovajanjem ali shranjevanjem po izdelavi. To predstavlja pomemben problem pri ohranjanju čistosti reagentov in tako kaže reagente zaščitene z nižjim alkilom nezanimive kot komercialne kandidate.
Pričujoči izum zagotavlja nove reagente za pripravo radiofarmacevtikov, sestavljene iz s stabilnim hidrazonom modificiranih biološko aktivnih molekul. Stabilni hidrazoni ne reagirajo z drugimi aldehidi in ketoni tako, da bi bilo to vredno upoštevati, in med izdelovanjem ohranjajo čistost reagentov. Presenetljivo pa so ti stabilni hidrazonski reagenti še vedno dovolj reaktivni za označevanje z radionuklidi, kot je tehnecij-99m.
POVZETEK IZUMA
Izum se nanaša na nove reagente za pripravo radiofarmacevtikov, ki so koristni kot sredstva za slikanje za diagnozo kardiovaskularnih motenj, infekcije, vnetja in raka. Reagenti so sestavljeni iz s stabilnim hidrazonom modificiranih biološko aktivnih molekul, ki reagirajo z radioizotopi, ki emitirajo gama žarke, da se tvorijo radiofarmacevtiki, ki se selektivno lokalizirajo na mesta bolezni in tako omogočajo, da se s pomočjo gama scintigrafije dobi slika teh mest. Stabilni hidrazoni služijo kot zaščitna skupina za kelator ali vezno enoto reagentov in med postopkom izdelovanja preprečujejo razpad ali degradacijo. Ta izum tudi zagotavlja diagnostične komplete, ki obsegajo take reagente. Ta izum tudi zagotavlja nove intermediarne spojine, ki so koristne za pripravo navedenih reagentov.
Kratek opis slik -6-
Slika 1. Primerjava stabilnosti reagenta opisanega v Primeru 1, na 10 ekvivalentov formaldehida, s stabilnostjo nižje alkil hidrazonske spojine, ciklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hidrazino-nikotinil-5-Aca)) propionaldehid hidrazona.
PODROBEN OPIS IZUMA
Ta izum zagotavlja nove reagente za pripravo radiofarmacevtikov, ki so koristni kot sredstva za slikanje za diagnozo kardiovaskularnih motenj, infekcije, vnetja in raka, diagnostične komplete, ki obsegajo navedene reagente in intermediarne spojine, koristne za pripravo navedenih reagentov. Reagenti so sestavljeni iz s stabilnim hidrazonom modificiranih biološko aktivnih molekul, ki reagirajo z radioizotopi, ki emitirajo gama žarke, da se tvorijo radiofarmacevtiki, ki se selektivno lokalizirajo na mesta bolezni in tako omogočajo, da je z uporabljanjem gama scintigrafije dobljena slika teh mest.
[1] Ena izvedba tega izuma je reagent za pripravljanje radiofarmacevtika, ki obsega biološko aktivno skupino povezano na stabilno hidrazonsko skupino, ki ima opcijsko povezovalno skupino med navedeno stabilno hidrazonsko in navedeno biološko aktivno skupino.
[2] Druga izvedba tega izuma je reagent po izvedbi [1], ki ima povezovalno skupino med navedeno stabilno hidrazonsko in navedeno biološko aktivno skupino.
[3] Druga izvedba tega izuma je reagent po izvedbi [2], ki ima formulo: (Q)d’Ln-Hz, -7- in njegove farmacevtsko sprejemljive soli pri čemer, je Q biološko aktivna skupina; je d’ 1 - 20; je Ln povezovalna skupina s formulo: M1-[Y1 (CR55R56)f(Z1)f>Y2]f-M2, pri čemer: je M1 -[(CH2)gZ1]g>-(CR55R56)g„-; je M2 -(CR55R56)g„.[Zi(CH2)g]g.-; je g neodvisno 0-10; je g’ neodvisno 0-1; je g” neodvisno 0-10; je f neodvisno 0-10; je f’ neodvisno 0-10; je f” neodvisno 0-1; -8- sta Y1 in Υ2 ob vsakem pojavu neodvisno izbrana iz: vezi, O, NR56, C=0, C(=0)0, 0C(=0)0, C(=0)NH-, C=NR56, S, SO, S02, S03, NHC(=0), (NH)2C(=0), (NH)2C=S; je Z1 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz C6-C14 nasičenega, delno nasičenega, ali aromatskega karbocikličnega obročnega sistema, substituiranega z 0-4 R57; in heterocikličnega obročnega sistema, substituiranega z 0-4 R57; sta R55 in R56 ob vsakem pojavu neodvisno izbrana iz: vodika; C-|-C10 alkila substituiranega z 0-5 R57; alkarila pri čemer je aril substituiran z 0-5 R57; je R57 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: vodika, OH, NHR58, C(=0)R58, 0C(=0)R58, 0C(=0)0R58, C(=0)0R58, C(=0)NR58, C^N, SR58, SOR58, S02R58, NHC(=0)R58, NHC(=0)NHR58, NHC(=S)NHR58; ali alternativno, ko je vezan na dodatno molekulo Q, je R57 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: O, NR58, C=0, 0(=0)0, 00(=0)0, C(=0)N-, C=NR58, S, SO, S02, S03, NHC(=0), (NH)2C(=0), (NH)2C=S; in, -9- je R58 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: vodika; CrC6 alkila; benzila; in fenila; je Hz stabilen hidrazon s formulo: R80 /
N=C R^-N R81 R41 pri čemer, je R40 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: vezi do Lp, C^C-io alkila substituiranega z 0-3 R52, arila substituiranega z 0-3 R52, cikloalkila substituiranega z 0-3 R52, heterocikla substituiranega z 0-3 R52, heterocikloalkila substituiranega z 0-3 R52, aralkila substituiranega z 0-3 R52 in alkarila substituiranega z 0-3 R52; je R41 neodvisno izbran iz skupine: vodika, arila substituiranega z 0-3 R52, ΟΓΟ10 alkila substituiranega z 0-3 R52, in heterocikla substituiranega z 0-3 R52; je R52 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: vezi do Ln, =0, F, Cl, Br, J, -CF3, -CN, -COgR53, -C(=0)R53, -C(=0)N(R53)2, -CHO, -CHjjOR53, -0C(=0)R53, -0C(=0)0R53a, -OR53, -0C(=0)N(R53)2, -NR53C(=0)R53, -NR54C(=O)OR53a, -NR53C(=0)N(R53)2, -10- -NR54S02N(R53)2, -NR54S02R53a, -S03H, -S02R53a, -SR53, -S(=0)R53a, -S02N(R53)2, -NiR53)^ -NHC(=NH)NHR53, -C(=NH)NHR53, =NOR53, N02, -C(=0)NH0R53, -C(=0)NHNR53R53a, -0CH2C02H, 2-(1-morfolino)etoksi; so R53, R53a in R54 vsak, ob vsakem pojavu, neodvisno izbrani iz skupine: vodika, CrC6 alkila, in vezi do Lpi sta R80 in R81 neodvisno izbrana iz skupine: H; C1-C10 alkila-, -CN; -C02R85; -C(=0)R85; 'C(=0)N(R85)2; C2-Cio 1 -alkena substituiranega z 0-3 R84; C2-Ci0 1-alkina substituiranega z 0-3 R84; arila substituiranega z 0-3 R84; nenasičenega heterocikla substituiranega z 0-3 R84; in nenasičenega karbocikla substituiranega z 0-3 R84; pod pogojem da, ko je eden od R80 in R81 H ali alkil, potem drugi ni H ali alkil; ali, alternativno, sta R80 in R81 lahko združena s prikazanim dvovalentnim ogljikovim radikalom, da se tvori:
-11- R R
r62 RB3 pri čemer: sta R82 in R83 lahko neodvisno izbrana iz skupine: H; R84; C-i-C10 alkila substituiranega z 0-3 R84; C2-C10 alkenila substituiranega z 0-3 R84; C2-C10 alkinila substituiranega z 0-3 R84; arila substituiranega z 0-3 R84; heterocikla substituiranega z 0-3 R84; in karbocikla substituiranega z 0-3 R84; ali, alternativno, R82, R83 sta lahko združena, da se tvori združen aromatski ali heterociklični obroč; a in b kažeta položaja opcijskih dvojnih vezi in n je 0 ali 1, je R84 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: =0, F, Cl, Br, J, -CF3, -CN, -C02R85, -C(=0)R85, -C(=0)N(R85)2i -N(R85)3+, -CH2OR85, -0C(=0)R85, -0C(=0)0R85a, -OR85, -0C(=0)N(R85)2, -NR85C(=0)R85, -NR86C(=0)0R85a, -NR85C(=0)N(R85)2, -12- -NR86S02N(R85)2, -NR86S02R85a, -S03H, -SOgR85®, -SR85, -S(=0)R85a, -S02N(R85)2, -N(R85)2, -NHC(=NH)NHR85, -C{=NH)NHR85, =NOR85, -C(=0)NH0R85, -0CH2C02H, 2-(1-morfolino)etoksi; in so R85, R85a in R86 vsak, ob vsakem pojavu, neodvisno izbrani iz skupine: vodika, C-|-C6 alkila.
[4] Druga izvedba tega izuma je reagent po izvedbi [3], pri čemer: je Q biološko aktivna molekula izbrana iz skupine: llb/llla receptorskih antagonistov, llb/llla receptorskih ligandov, peptidov, ki vežejo fibrin, peptidov, ki vežejo levkocite, kemotaktičnih peptidov, somatostatinskih analogov, in peptidov, ki vežejo selektin; je d’ 1 do 3; je Ln. .(CR55R56)g,-[Yl(CR55R56)fY2]f.(CR55R56)g„.) pri čemer: je g” 0-5; je f 0-5; -13- je f’ 1-5; sta Y1 in Υ2 ob vsakem pojavu neodvisno izbrana iz: O, NR56 C=0, C(=0)0, 0C(=0)0, C(=0)NH-, C=NR56, S, SO, S02) S03, NHC(=0), (NH)2C(=0), (NH)2C=S; sta R55 in R56 ob vsakem pojavu neodvisno izbrana iz: vodika, Ci-Ci0 alkila, in alkarila;
Hz je stabilen hidrazon s formulo: R80 /
N=C R81 R41 pri čemer, je R40 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: arila substituiranega z 0-3 R52, in heterocikla substituiranega z 0-3 R52; je R41 neodvisno izbran iz skupine: vodika, arila substituiranega z 0-1 R52, C1-C3 alkila substituiranega z 0-1 R52, in heterocikla substituiranega z 0-1 R52; je R52 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: vezi do Ln, -C02R53, -CH2OR53, -SO3H, -S02R53a, -N(R53)2, -NHC(=NH)NHR53, in -OCH2C02H; -14- sta R53, R53a vsak, ob vsakem pojavu, neodvisno izbrana iz skupine: vodika in CrC3 alkila; je R80 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: -C02R85; C2-C5 1-alkena substituiranega z 0-3 R84; C2-C5 1-alkina substituiranega z 0-3 R84; arila substituiranega z 0-3 R84; nenasičenega heterocikla substituiranega z 0-3 R84; je R81 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: H in C1-C5 alkila; ali, alternativno, ko sta R80 in R81 združena s prikazanim dvovalentnim ogljikovim radikalom tvorita
n pri čemer sta R82 in R83 lahko neodvisno izbrana iz skupine: H ali, alternativno, R82, R83 sta lahko združena, da se tvori združen aromatski ali heterociklični obroč; a in b kažeta položaja opcijskih dvojnih vezi in n je 0 ali 1, -15- je R84 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: -C02R85, -C(=0)N(R85)2i -CH2OR85, -0C(=0)R85, -OR85, -SOgH, -N(R85)2, -0CH2C02H; je R85 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: vodika, CrC3 alkila.
[5] Druga izvedba tega izuma je reagent po izvedbi [4], pri čemer: Q predstavlja biološko aktivno molekulo izbrano iz skupine: llb/llla receptorskih antagonistov in kemotaktičnih peptidov; je d’ 1; je Ln: -(CR55R56)g>-[Y1 (CR55R56)fY2]r(CR55R56)g->-, pri čemer: je g” 0-5; je f 0-5; je f’ 1-5; sta Y1 in Υ2 ob vsakem pojavu neodvisno izbrana iz: -16- 0, NR56, C=0, C(=0)0, 0C(=0)0, C(=0)NH-, C=NR56, S, NHC(=0), (NH)2C(=0), (NH)2C=S; sta R55 in R56 vodik; je Hz stabilen hidrazon s formulo: R80
N=C R40·^ R81 R41 pri čemer, je R40 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: heterocikla substituiranega z R52; je R41 vodik; je R52 vez do Ln; je R80 neodvisno izbran iz skupine: -C02R85; C2-C3 1-alkena substituiranega z 0-1 R84; arila substituiranega z 0-1 R84; nenasičenega heterocikla substituitanega z 0-1 R84; je R81 H; je R84 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: -17- -C02R85; -OR85; -S03H; -N(R85)2; je R85 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: H in metila.
[6] Druga izvedba tega izuma so reagenti po izvedbi [3], ki so:
NH
j -18- ΝΗ
Η^Ν S03Na -19-
COOH -20-ΝΗ
1 -21- ΝΗ
co2h -22-
ΝΗ
OCH3 -23- [7] Druga izvedba tega izuma je komplet za pripravljanje radiofarmacevtika, ki obsega: (a) vnaprej določeno količino sterilnega, farmacevtsko sprejemljivega reagenta po kateremkoli od zahtevkov 1-6; (b) vnaprej določeno količino enega ali več sterilnih, farmacevtsko sprejemljivih pomožnih ligandov; (c) vnaprej določeno količino sterilnega, farmacevtsko sprejemljivega reducenta; in (d) opcijsko, vnaprej določeno količino sterilne, farmacevtsko sprejemljive komponente izbrane iz skupine: prenašalnih ligandov, pufrov, liofilizacijskih sredstev, stabilizacijskih sredstev, sredstev za raztapljanje in bakteriostatikov.
[8] Druga izvedba tega izuma je komplet za pripravljanje radiofarmacevtika, ki obsega: (a) vnaprej določeno količino sterilnega, farmacevtsko sprejemljivega reagenta po kateremkoli od zahtevkov 1-6; (b) vnaprej določeno količino dveh sterilnih, farmacevtsko sprejemljivih pomožnih ligandov; (c) vnaprej določeno količino sterilnega, farmacevtsko sprejemljivega reducenta; in -24- (d) opcijsko, vnaprej določeno količino sterilne, farmacevtsko sprejemljive komponente izbrane iz skupine: prenašalnih ligandov, pufrov, liofilizacijskih sredstev, stabilizacijskih sredstev, sredstev za raztapljanje in bakteriostatikov.
[9] Druga izvedba tega izuma je stabilna hidrazonska spojina, ki je koristna za sintezo reagentov po izvedbi [1-6], ki ima formulo: R44(C=O)s(R45)N-N=CR80R81 pri čemer: je s 0 ali 1; je R44 izbran iz skupine: arila substituiranega z 1 R59; in heterocikla substituiranega z 1 R59; je R45 izbran iz skupine: vodika in C-|-C6 alkila, je R59 kemijsko reaktiven del molekule izbran iz skupine: alkila substituiranega s halogenom; kislinskega anhidrida; kislinskega halida; aktivnega estra; izotiocianata; maleimida; -25- sta R80 in R81 neodvisno izbrana iz skupine: H;
CrCio aikiia; -CN; -C02R85; -C(=0)R85; -C(=0)N(R85)2; C2-C10 1-alkena substituiranega z 0-3 R84; C2-Ci0 1-alkina substituiranega z 0-3 R84; arila substituiranega z 0-3 R84; nenasičenega heterocikla substituiranega z 0-3 R84; in nenasičenega karbocikla substituiranega z 0-3 R84; pod pogojem da, ko je eden od R80 in R81 H ali alkil, potem drugi ni H ali alkil; ali, alternativno, sta R80 in R81 lahko združena s prikazanim dvovalentnim ogljikovim radikalom, da se tvori:
pri čemer: sta R82 in R83 ob vsakem pojavu neodvisno izbrana iz skupine: -26- Η; R84;
CrC10 alkila substituiranega z 0-3 R84; C2-C10 alkenila substituiranega z 0-3 R84; C2-C10 alkinila substituiranega z 0-3 R84; arila substituiranega z 0-3 R84; heterocikla substituiranega z 0-3 R84; in karbocikla substituiranega z 0-3 R84; ali, alternativno, sta R82, R83 lahko združena, da se tvori združen aromatski ali heterociklični obroč; in a in b kažeta položaja opcijskih dvojnih vezi; je n 0 ali 1, je R84 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: =0, F, Cl, Br, J, -CF3, -CN, -C02R85, -C(=0)R85, -C(=0)N(R85)2, -CH2OR85, -0C(=0)R85, -0C(=0)0R85a, -OR85, -0C(=0)N(R85)2, -NR85C(=0)R85, -NR86C(=O)OR85a, -NR85C(=0)N(R85)2, -S03Na, -NR86S02N(R85)2, -NR86S02R85a, -S03H, -S02R85a, -SR85, -S(=0)R85a -S02N(R85)2, -N(R85)2, N(R85)3+, -NHC(=NH)NHR85, -C(=NH)NHR85, =NOR85, -C(=0)NH0R85, -0CH2C02H, 2-(1-morfolino)etoksi; -27- so R85, R85a, in R86 ob vsakem pojavu neodvisno izbrani iz skupine: vodika, CrC6 alkila.
[10] Druga izvedba tega izuma je spojina po izvedbi [9], pri čemer: s=0; je R59 izbran iz skupine:
je R80 neodvisno izbran iz skupine: -C02R85; C2-C5 1-alkena substituiranega z 0-3 R84; C2-C5 1-alkina substituiranega z 0-3 R84; arila substituiranega z 0-3 R84; nenasičenega heterocikla substituiranega z 0-3 R84; je R81 neodvisno izbran iz skupine: H in C-|-C5 alkila; ali, alternativno, sta R80 in R81 lahko združena s prikazanim dvovalentnim ogljikovim radikalom, da se tvori -28-
η pri čemer sta R82 in R83 lahko neodvisno izbrana iz skupine: H in R84; ali, alternativno, R82, R83 sta lahko združena, da se tvori združen aromatski ali heterociklični obroč; in a in b kažeta položaja opcijskih dvojnih vezi; je n 0 ali 1, je R84 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: -C02R85, -C(=0)N(R85)2, -CH2OR85, -0C(=0)R85, -OR85, -S03H, -S03Na, -N(R85)2, -0CH2C02H; je R85 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: vodika in CrC3 alkila.
[11] Druga izvedba tega izuma je spojina po izvedbi [10], pri čemer: je R80 neodvisno izbran iz skupine: -C02R85; C2-C3 1-alkena substituiranega z 0-1 R84; -29- arila substituiranega z 0-1 R84; nenasičenega heterocikla substituiranega z 0-1 R84; je R81 H; je R84 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: -C02R85, -OR85, -S03H, -S03Na, -N(R85)2; je R85 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: H in metila.
[12] Druga izvedba tega izuma so spojine po izvedbi [9], ki so:
H H -30-
NMe2
OCH3
OCH3 -31-
Kadar se katerakoli spremenljivka v katerikoli komponenti ali v katerikoli formuli pojavi več kot enkrat, je njena definicija ob vsakem pojavu neodvisna od njene definicije ob vsakem drugem pojavu. Tako, na primer, če je pokazano, da je skupina substituirana z 0-2 R52, potem je lahko navedena skupina opcijsko substituirana z do dvema R52 in je R52 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz določenega seznama možnih R52. Tudi, kot primer za skupino -N(R53)2, je vsak od dveh R53 substituent na N neodvisno izbran iz določenega seznama možnih R53. Kombinacije substituent in/ali spremenljivk so dovoljene samo, če take kombinacije rezultirajo v stabilnih spojinah. S "stabilno spojino" ali "stabilno strukturo" je tu mišljena spojina, ki je dovolj robustna, da do uporabne stopnje čistosti prestane izolacijo iz reakcijske mešanice, in formulacijo v učinkovito diagnostično sredstvo.
Izraz "hidrazon", kot je tu uporabljen pomeni, da so tako opisani del molekule, skupina ali spojina sestavljeni iz vsaj enega dvovalentnega ogljikovega radikala (ali metilenske skupine), ki je preko dvojne vezi vezan na dušikov atom na hidrazinu ali hidrazidu.
Izraz "substituiran", kot je tu uporabljen pomeni, da je eden ali več vodikov na določenem atomu ali skupini nadomeščen z izborom iz prikazane skupine, pod pogojem, da normalna valenca določenega atoma ali skupine ni presežena, in da substitucija rezultira v stabilni spojini. Kadar je substituent keto ( npr., =0), potem sta na atomu nadomeščena dva vodika.
Izraz "vez", kot je tu uporabljen, pomeni bodisi enojno, dvojno ali trojno vez. -32-
Kot je uporabljeno tu, je mišljeno, da "alkil" vključuje oboje, razvejane in ravne verige nasičenih alifatskih ogljikovodikovih skupin, ki imajo točno določeno število ogljikovih atomov; je mišljeno, da "cikloalkil" ali "karbocikel" vključuje nasičene obročne skupine, vključno mono-, bi- ali poli-ciklične obročne sisteme, kot ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptil, ciklooktil in adamantil; je mišljeno, da "bicikloalkil" vključuje nasičene biciklične obročne skupine, kot [3.3.0]biciklooktan, [4.3.0]biciklononan, [4.4.0]biciklodekan (dekalin), [2.2.2]biciklooktan, in tako dalje;
Kot je tu uporabljen, je mišljeno da izraz “alken" ali "alkenil" vključuje oboje, razvejane skupine in skupine z ravnimi verigami s formulo CnH2n-i, ki imajo specificirano število ogljikovih atomov. Izraz Ί -alken" ali "1-alkenil" pomeni, da je dvojna vez med prvim in drugim ogljikovim atomom od točke povezave.
Kot je tu uporabljen, je mišljeno da izraz “alkin" ali "alkinil" vključuje oboje, razvejane skupine in skupine z ravnimi verigami s formulo CnH2n-3, ki imajo specificirano število ogljikovih atomov. Izraz "1-alkin" ali "1-alkinil" pomeni, da je trojna vez med prvim in drugim ogljikovim atomom od točke povezave.
Kot je tu uporabljen, je mišljeno, da "aril" ali "aromatski ostanek" pomeni fenil ali naftil, ki ima potem ko je substituiran, lahko substitucijo na kateremkoli položaju.
Kot je tu uporabljen, je mišljeno da izraz "heterocikel" ali "heterociklični obročni sistem" pomeni stabilen 5- do 7- členski monociklični ali biciklični -33- ali 7- do 10- členski biciklični heterociklični obroč, ki je lahko nasičen, deloma nenasičen, ali aromatski, in ki je sestavljen iz ogljikovih atomov in od 1 do 4 heteroatomov, neodvisno izbranih iz skupine, ki jo sestavljajo N, O in S, pri čemer sta dušikov in žveplov heteroatom lahko opcijsko oksidirana, in je dušik lahko opcijsko kvaterniziran, in vključuje vsako biciklično skupino v kateri je katerikoli od zgoraj definiranih heterocikličnih obročev združen v benzenov obroč. Heterociklični obroč je lahko na svojo privesno skupino vezan pri vsakem heteroatomu ali ogljikovem atomu, ki rezultira v stabilni strukturi. Tu opisani heterociklični obroči so lahko substituirani na ogljikovem ali na dušikovem atomu, če je nastala spojina stabilna. Primeri takih heterociklov vključujejo, toda niso omejeni na, benzopiranil, tiadiazin, tetrazolil, benzofuranil, benzotiofenil, indolen, kinolin, izokinolinil ali benzimidazolil, piperidinil, 4-piperidon, 2-pirolidon, tetrahidrofuran, tetrahidrokinolin, tetrahidroizokinolin, dekahidrokinolin, oktahidroizokinolin, azocin, triazin (vključno 1,2,3-, 1,2,4-, in 1,3,5-triazin), 6H-1,2,5-tiadiazin, 2H,6H-1,5,2-ditiazin, tioten, tetrahidrotiofen, tiantren, furan, piran, izobenzofuran, kromen, ksanten, fenoksatin, 2H-pirol, pirol, imidazol, pirazol, tiazol, izotiazol, oksazol (vključno 1,2,4- in 1,3,4-oksazol), izoksazol, triazol, piridin, pirazin, pirimidin, piridazin, indolizin, izoindol, 3H-indol, indol, 1H-indazol, purin, 4H-kinolizin, izokinolin, kinolin, ftalazin, naftiridin, kinoksalin, kinazolin, cinolin, pteridin, 4aH-karbazol, karbazol, β-karbolin, fenantridin, akridin, perimidin, fenantrolin, fenazin, fenarsazin, fenotiazin, furazan, fenoksazin, izokroman, kroman, pirolidin, pirolin, imidazolidin, imidazolin, pirazolidin, pirazolin, piperazin, indolin, izoindolin, kinuklidin, ali morfolin. Vključeni so tudi združen obroč in spiro spojine, ki na primer vsebujejo zgornje heterocikle.
Kot je tu uporabljen za opisovanje substituent R80 in R81, izraz "nenasičen karbocikel" pomeni karbocikel, ki ima vsaj eno multiplo vez, da je ena -34- multipla vez med ogljikovim atomom vezanim na dvovalentni ogljikov radikal, specificiran v formuli stabilnega hidrazonskega dela molekule in sosednjim ogljikovim atomom.
Kot je tu uporabljen, za opisovanje substituent R80 in R81, izraz “nenasičen heterocikel" pomeni heterocikel, ki ima vsaj eno multiplo vez, da je ena multipla vez med ogljikovim atomom vezanim na dvovalentni ogljikov radikal, specificiran v formuli stabilnega hidrazonskega dela in sosednjim ogljikovim atomom. Smatra se, da je aromatski heterocikel nenasičen heterocikel.
Izraz "Sol", kot je tu uporabljen, je uporabljen kot je definirano v CRC Handbook of Chemistry and Phvsics, 65th Edition. CRC Press, Boca Raton, Fla, 1984, kot vsaka substanca, ki daje ione, ki so drugačni kot vodikovi ali hidroksilni ioni. "Reducent" je spojina, ki reagira z radionuklidom, ki je tipično dobljen kot relativno nereaktivna spojina z visokem oksidacijskim stanjem, da zniža njegovo oksidacijsko stanje s prenosom elektrona oziroma elektronov k radionuklidu in ga s tem dela bolj reaktivnega. Reducenti, ki so koristni pri pripravljanju radiofarmacevtikov in v diagnostičnih kompletih koristnih za pripravo navedenih radiofarmacevtikov vključujejo, toda niso omejeni na, kositrov klorid, kositrov fluorid, formamidin sulfinsko kislino, askorbinsko kislino, cistein, fosfine, in bakrove ali železove soli. Drugi reducenti so opisani v Brodack s sod., PCT prijava 94/22496, ki je tu vključena z referenco. "Prenašalni ligand" je ligand, ki z radionuklidom tvori intermediarni kompleks, ki je dovolj stabilen, da prepreči neželene stranske reakcije, -35- toda dovolj labilen, da se pretvori v radiofarmacevtik. Tvorba intermediarnega kompleksa je kinetično favorizirana reakcija, medtem ko je tvorba radiofarmacevtika termodinamično favorizirana. Prenašalni ligandi, ki so koristni pri pripravljanju radiofarmacevtikov in v diagnostičnih kompletih, koristnih za pripravo navedenih radiofarmacevtikov vključujejo, toda niso omejeni na, glukonat, glukoheptonat, manitol, glukarat, Ν,Ν,Ν’,Ν’- etilendiamintetraocetno kislino, pirofosfat in metilendifosfonat. V splošnem so prenašalni ligandi sestavljeni iz kisikovih ali dušikovih donornih atomov.
Izraz "donorni atom" se nanaša na atom, ki je s kemijsko vezjo direktno vezan na kovino. "Pomožni" ali "ko-ligandi" so ligandi, ki so v radiofarmacevtik inkorporirani med njegovo sintezo. Služijo zato, da skupaj s kelatorjem ali radionuklidno vezno enoto reagenta, zaključijo koordinacijsko sfero radionuklida. Za radiofarmacevtike, sestavljene iz binarnega ligandnega sistema, je koordinacijska sfera radionuklida sestavljena iz enega ali več kelatorjev ali veznih enot, iz enega ali več reagentov in enega ali več pomožnih ali ko-ligandov, pod pogojem, da sta v celoti dve vrsti ligandov, kelatorjev ali veznih enot. Na primer, radiofarmacevtik, sestavljen iz enega kelatorja ali vezne enote, iz enega reagenta in dveh enakih pomožnih ali ko-ligandov in radiofarmacevtik, sestavljen iz dveh kelatorjev ali vezavnih enot, iz enega ali dveh reagentov in enega pomožnega ali ko-liganda se oba smatrata, da sta sestavljena iz binarnih ligandnih sistemov. Za radiofarmacevtike, ki so sestavljeni iz ternarnega ligandnega sistema, je koordinacijska sfera sestavljena iz enega ali več kelatorjev ali veznih enot, iz enega ali več reagentov in enega ali več izmed dveh različnih vrst pomožnih ali ko- ligandov, pod pogojem, da so v celoti tri vrste ligandov, kelatorjev ali veznih enot. Na primer, radiofarmacevtik, ki je sestavljen iz enega kelatorja -36- ali vezne enote, iz enega reagenta in dveh različnih pomožnih ali ko-ligandov se smatra, da je sestavljen iz ternarnega ligandnega sistema.
Prijava U.S.S.N. 08/415,908,908, ki je sočasno v teku, in ki je tu vključena z referenco, govori o pomožnih ligandih in jih razkriva. "Kelator" ali "vezna enota" je del ali skupina na reagentu, ki se na kovinski radionuklid veže preko tvorbe kemijskih vezi z enim ali več donornimi atomi.
Izraz "vezavno mesto" pomeni mesto in vivo, ki veže biološko aktivno molekulo.
Pomožni ali ko-ligandi, ki so koristni pri pripravi radiofarmacevtikov in v diagnostičnih kompletih, koristnih za pripravo navedenih radiofarmacevtikov, so sestavljeni iz enega ali več kisikovih, dušikovih, ogljikovih, žveplovih, fosfornih, arzenovih, selenovih, in telurjevih donornih atomov. Ligand je lahko prenašalni ligand pri sintezi radiofarmacevtika in služi tudi kot pomožni ali ko-ligand pri drugem radiofarmacevtiku. Ali se ligand imenuje prenašalni ali pomožni ali ko-ligand je odvisno od tega, ali v radiofarmacevtiku ostaja v koordinacijski sferi radionuklida, ki je določena s koordinacijsko kemijo radionuklida in kelatorja ali vezne enote reagenta ali reagentov. "Diagnostični komplet" obsega kolekcijo komponent, imenovanih formulacija, v eni ali več stekleničkah (angl. vials), ki jih v kliničnem ali lekarniškem okolju uporabi izvajalni končni uporabnik, da sintetizira radiofarmacevtik. Komplet zagotavlja vse potrebne komponente za sintezo in uporabo radiofarmacevtika, razen tistih, ki so izvajalnemu končnemu uporabniku navadno dosegljive, kot voda ali raztopina slane vode za injiciranje, -37- raztopina radionuklida, oprema za segrevanje kompleta med sintezo radiofarmacevtika, če je to potrebno, potrebna oprema za dajanje radiofarmacevtika pacientu, kot injekcijske brizgalke in zaščita pred radiacijo, ter oprema za slikanje. “Pufer" je spojina, ki se uporablja za kontroliranje pH kompleta med njegovo izdelavo in med sintezo radiofarmacevtika. "Liofilizacijsko sredstvo" je komponenta, ki ima za liofilizacijo ugodne fizikalne lastnosti, take kot je tranzicijska temperatura stekla in je v diagnostičen komplet dodana zato, da izboljša fizikalne lastnosti kombinacije vseh komponent kompleta za liofilizacijo. "Stabilizacijsko sredstvo" je komponenta, ki je dodana radiofarmacevtiku ali v diagnostičen komplet bodisi, da stabilizira radiofarmacevtik takoj ko je ta sintetiziran ali da podaljša čas shranjevanja kompleta, preden mora biti uporabljen. Stabilizacijska sredstva so lahko antioksidanti, reducenti ali čistilci radikalov in lahko poskrbijo za povečano stabilnost s prednostnim reagiranjem z vrstami, ki degradirajo druge komponente ali radiofarmacevtik. "Sredstvo za raztapljanje" je komponenta, ki izboljšuje topnost ene ali več drugih komponent v mediju, ki je potreben za sintezo radiofarmacevtika. "Bakteriostatik" je komponenta, ki v diagnostičnem kompletu inhibira rast bakterij bodisi med njegovim shranjevanjem pred uporabo ali potem ko je komplet uporabljen zato, da se sintetizira radiofarmacevtik. V tej prijavi so uporabljene sledeče okrajšave: -38-
Acm acetamidometil D-Abu D-2-aminobutirična kislina 5-Aca 5-aminokaproamid(5-aminoheksanamid) b-Ala, b-Ala ali bAla 3-aminopropionska kislina Boc t-butiloksikarbonil Boc-jodo-Mamb t-butiloksikarbonil-3-aminometil-4-jodo-benzojska kislina Boc-Mamb t-butiloksikarbonil-3-aminometilb0nzojska kislina Boc-ON [2-(terc-butiloksikarboniloksilimino)-2-fenilacetonitril CI2Bzl diklorobenzil CBZ, Cbz ali Z Karbobenziloksi DCC dicikloheksilkarbodiimid DIEA diizopropiletilamin di-NMeOm N-aMe-N-gMe-ornitin DMAP 4-dimetilaminopiridin HBTU 2-(1 H-Benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluranov heksafluorofosfat Hynic hidrazinonikotinil NMeArg ali MeArg a-N-metil arginin NMeAmf N-Metilaminometilfenilalanin NMeAsp a-N-metil aspartinska kislina NMeGly ali MeGly N-metil glicin NMe-Mamb N-metil-3-aminometilbenzojska kislina NMM N-metilmorfolin OcHex O-cikloheksil OBzl O-benzil -39- oSu O-sukcinimidil pNP p-nitrofenil TBTU 2-(1 H-Benzotriazol-1 -il)-1,1,3,3-tetrametiluranov tetrafluoroborat
Teoc 2-(Trimetilsilil)etiloksikarbonil
Tos tožil TPPTS tris(3-sulfonatofenil)fosfin trinatrijeva sol
Tr tritil
Tu so uporabljene sledeče konvencionalne tri črkovne okrajšave za aminokisline; konvencionalne eno črkovne okrajšave za aminokisline tu niso uporabljene:
Ala = alanin Arg = arginin Asn = asparagin Asp = aspartinska kislina Cys = cistein Gin = glutamin Glu = glutaminska kislina Gly = glicin His = histidin lle = izoleucin Leu = leucin Lys = lizin Met =. metionin Nle = norleucin Phe — fenilalanin -40-
Phg = fenilglicin Pro = prolin Ser = serin Thr = treonin Trp = triptofan Tyr — tirozin Val = valin
Biološko aktivna molekula Q je lahko protein, protitelo, fragment protitelesa, peptid ali polipeptid, ali peptidomimetik, ki je sestavljen iz prepoznavne sekvence ali enote za receptor ali vezavno mesto, izraženo na mestu bolezni, ali za receptor ali vezavno mesto izraženo na trombocitih ali levkocitih. Točna kemična zgradba molekule Q je izbrana na osnovi bolezenskega stanja, ki ga je potrebno diagnozirati, mehanizma lokalizacije, ki ga je potrebno uporabiti in tako, da zagotavlja optimalno kombinacijo hitrosti lokaliziranja, očiščevanja in radionuklidnega razpada.
Za namene tega izuma je izraz tromboembolična bolezen vzet zato, da vključuje oboje, venozne in arterialne motnje in pljučni embolizem, ki nastane kot posledica tvorbe krvnih strdkov.
Za diagnozo tromboemboličnih motenj ali ateroskleroze, je molekula Q izbrana iz skupine, ki vključuje ciklične llb/llla receptorske antagonistne spojine, opisane v U.S. serijska št.08/415,908,861 (ekvivalentno WO 94/22494), ki je sočasno v teku; peptide, ki vsebujejo RGD (Arg-Gly-Asp sekvence), opisane v U.S. patentih 4,578,079, 4,792,525, prijavah PCT US88/04403, PCT US89/01742, PCT US90/03788, PCT US91/02356 in prispevku Ojima s sod., 204th Meeting of the Amer. Chem. Soc., 1992, Abstract 44; peptide, ki so fibrinski receptorski antagonisti, opisane v -41- evropskih patentnih prijavah 90202015.5, 90202030.4, 90202032.2, 90202032.0, 90311148.2, 90311151.6, 90311537.6, specifične vezavne peptide in polipeptide opisane kot llb/llla receptorski ligandi, ligandi za polimerizacijsko mesto fibrina, derivati laminina, ligandi za fibrinogen ali ligandi trombina v PCT WO 93/23085 (ki ne upošteva skupin, ki vežejo tehnecij); oligopeptide, ki ustrezajo lila proteinu opisane v PCT VV090/00178; peptide osnovane na hirudinu, opisane v PCT VV090/03391; llb/llla receptorske ligande opisane v PCT VVO90/15818; peptide, ki vežejo trombus, trombocite ali peptide, ki vežejo oblogo, ki se nahaja na stenah arterij (angl. atherosclerotic plaque) opisane v PCT VV092/13572 (ki ne upošteva skupine, ki veže tehnecij) ali GB 9313965.7; peptide, ki vežejo fibrin opisane v U.S. patentih 4,427,646 in 5,270,030; peptide, ki so osnovani na hirudinu opisane v U.S patentu 5,279,812; ali proteine, ki vežejo fibrin opisane v U.S. patentu 5,217,705; derivate gvanina, ki se vežejo na llb/llla receptor opisane v U.S. patentu 5,086,069; ali derivate tirozina opisane v evropski patentni prijavi 0478328A1, in ki jih je opisal Hartman s sod., v J. Med. Chem., 1992, 35, 4640; ali oksidirane lipoproteine z nizko gostoto (LDL).
Za diagnozo infekcije, vnetja ali zavrnitve transplantata, je Q izbrana iz skupine, ki vključuje peptide, ki vežejo levkocite in so opisani v PCT VV093/17719 (ki ne upošteva skupine, ki veže tehnecij), PCT VV092/13572 (ki ne upošteva skupine, ki veže tehnecij) ali U.S. serijska št. 08-140000; kemotaktične peptide opisane v evropski patentni prijavi 90108734.6 ali objavi A. Fischermana s sod., Semin. Nuc. Med., 1994, 24, 154; ali levkostimulatorna sredstva opisana v U.S. patentu 5,277,892.
Za diagnozo raka je Q izbrana iz skupine somatostatinskih analogov opisanih v UK prijavi 8927255.3 ali PCT VV094/00489, peptidov, ki vežejo -42- selektin, opisanih v PCT VVO94/05269, biološko funkcionalnih domen opisanih v PCT VV093/12819, trombocitnega faktorja 4 ali rastnih faktorjev (PDGF, EGF, FGF, TNF, MCSF ali 111-8). Q lahko predstavlja tudi proteine, protitelesa, fragmente protiteles, peptide, polipeptide, ali peptidomimetike, ki se vežejo na receptorje ali vezavna mesta v drugih tkivih, organih, encimih ali tekočinah. Primeri vključujejo β-amiloidne proteine, za katere je bilo pokazano, da se akumulirajo pri bolnikih z Alzheimerjevo boleznijo, peptide, ki izhajajo iz ene od družin sorodnih peptidnih hormonov imenovane atrialni natriuretični faktor, ki se vežejo na miokardijske ali ledvične receptorje, antimiozinska protitelesa, ki se vežejo na področja tkiv, ki jih je prizadel infarkt, ali derivate nitroimidazola, ki se in vivo lokalizirajo v hipoksičnih področjih.
Reagenti pričujočega izuma so sestavljeni iz biološko aktivne skupine, Q, vezane na stabilen hidrazon, Hz, in opcijsko obsegajo povezovalno skupino, Ln, med navedeno biološko aktivno skupino in navedenim stabilnim hidrazonom. Stabilen hidrazon je zaščitena oblika hidrazinskega ali hidrazidcega kelatorja ali vezne enote, v U.S.S.N. 08/415,908,861, ki je sočasno v teku, označene kot Ch, ki je bodisi direktno vezana na del Q ali pa je vezana na povezovalno skupino Ln, ki je vezana na Q. Kelator ali vezna enota se na radionuklid poveže (in je v povezanem stanju v U.S.S.N 08/415,908,908 označena kot Ch·) v radiofarmacevtikih sintetiziranih z uporabljanjem reagentov pričujočega izuma.
Substituenta R80 in R81 tega izuma sta izbrana tako, da izboljšata stabilnost hidrazona preko tiste stabilnosti, ki je dosegljiva z uporabljanjem substituentov, sestavljenih samo iz vodika ali nižjega alkila. Izboljšana stabilnost je nujna zato, ker so hidrazoni pri katerih so substituenti samo -43- vodik ali nižji alkil reaktivni z drugimi aldehidi in ketoni, številne od teh pa navadno najdemo v farmacevtskem izdelovalnem okolju. Še posebno povsod navzoč aldehid je formaldehid, ki se navadno uporablja v razkužilih. Reakcija nižjega alkil hidrazona z aldehidom ali ketonom se lahko nadaljuje kot je prikazano v Shemi 1.
—N H \
/ N= C* -N' \ \
Shema 1 S stabilnim hidrazonom zaščiteni reagenti tega izuma se lahko komercializirajo kot radiofarmacevtski prekurzorji. Z nižjim alkilom zaščiteni hidrazoni se zaradi svoje inherentne nestabilnosti ne morejo tako komercializirati. Če je nižji alkil hidrazon, ki je narisan v Shemi 1, del reagenta za pripravo radiofarmacevtika, bo, ko bo podvržen prikazani reakciji z drugimi aldehidi in ketoni razpadel ali pa se bo degradiral v enega ali več drugih hidrazonov, odvisno od števila aldehidov in ketonov s katerimi bo prihajal v kontakt. Ti razpadni produkti v reagentu predstavljajo nečistoče, ki jih mora biti čim manj ali pa se jim je potrebno izogniti. Odstranitev vseh aldehidov in ketonov je v okolju izdelovanja zelo težka, zato, ker se lahko ekstrahirajo iz številnih materialov, posebno plastike in gumijastih zamaškov, uporabljenih pri izdelovalnem postopku, in ker so prisotni v običajnih razkužilih. Uporaba stabilnih hidrazonov v novih reagentih pričujočega izuma, ki so sestavljeni iz s stabilnim hidrazonom modificiranih biološko aktivnih molekul, preprečuje ta problem. Tako stabilni hidrazonski reagenti tega izuma uživajo veliko prednost pred z nižjim alkilom zaščitenimi hidrazoni, razkritimi v prejšnjem izumu, in to zaradi -44- povečane stabilnosti stabilnih hidrazonskih reagentov, kar jih naredi zmožne komercializacije.
Stabilna hidrazonska skupina, HZI s formulo -N(R40R41)N=C(R80R81), se razlikuje od nižjih alkil hidrazonov v tem, da je eden od substituentov R80 in R81 izbran iz skupine: nitrila, karboksilnih kislin, estrov karboksilnih kislin, karboksamidov, 1-alkenov, 1-alkinov, arila, nenasičenega heterocikla, in nenasičenega karbocikla; ali pa sta dva substituenta R80 in R81 združena, da se tvori obročni sistem. Substituenti v skupini služijo zato, da stabilizirajo hidrazon z zagotavljanjem konjugiranega π sistema bodisi kot ogljik-ogljik dvojne vezi, ogljik-kisik dvojne vezi, ogljik-ogljik trojne vezi, ogljik-dušik trojne vezi ali aromatskega obroča. Stabilnost je lahko zagotovljena tudi s kelatnim efektom, če sta substituenta R80 in R81 združena, da tvorita obročni sistem.
Reagenti pričujočega izuma so lahko sintetizirani z različnimi metodami. Hidrazinski in hidrazidni prekurzorji so lahko pripravljeni kot je opisano v prijavi U.S.S.N. 08/415,908,861, ki je sočasno v teku. Stabilna hidrazonska skupina Hz je lahko v reakcijo vpeljana na katerikoli stopnji v sintezi reagenta, pod pogojem, da je stabilna na poznejše reakcijske pogoje. En pristop k sintezi vključuje reakcijo stabilne hidrazonske skupine, ki nosi povezovalno funkcionalnost, z biološko aktivno molekulo Q, ki opcijsko nosi povezovalno skupino Povezovalna funkcionalnost je kemijsko reaktiven del, sposoben reagiranja z biološko aktivno molekulo, ki opcijsko nosi povezovalno skupino, da se nanjo veže stabilen hidrazon. Pri biološko aktivnih molekulah, ki nosijo povezovalno skupino, je stabilen hidrazon povezan na povezovalno skupino. -45-
Reakcija stabilnega hidrazona, ki nosi kemijsko reaktiven del molekule, z biološko aktivno molekulo ali z linkerjem modificirano biološko aktivno molekulo je lahko izvedena z direktno kombinacijo dveh reaktantov v primernem topilu in pod primernimi reakcijskimi pogoji. Topilo ali reakcijski pogoj je primeren, če je reagent stabilen hidrazon-biološko aktivna molekula ali stabilen hidrazon-linker-biološko aktivna molekula tvorjen brez znatne izgube biološke aktivnosti zaradi uporabe navedenega topila ali pogoja.
Primeri kemijsko reaktivnih delov molekul vključujejo alkilno skupino, ki nosi dobro zapuščujočo skupino, kot halid, karbonilno skupino, kot kislinski anhidrid, kislinski halid, ali aktivni ester, izotiocianat ali substituiran izotiocianat, ali maleimid. Aktivni ester je ester, ki je bolj reaktiven v nukleofilnih substitucijskih reakcijah, kot tetrafluorofenil, N-sukcinimidil, in nitrofenil. V reakciji med stabilnim hidrazonom, ki nosi kemijsko reaktiven del molekule in biološko aktivno molekulo ali z linkerjem modificirano biološko aktivno molekulo, lahko oba reaktanta služita kot nukleofil. Bolj podrobne opise teh povezovalnih reakcij se lahko najde v Brinkley, M., Bioconiuaate Chemistrv. 1992, vol. 3, št. 1, ki je tu vključen z referenco. Tudi tu vključen U.S. patent 5,206,370, razkriva druge primere kemijsko reaktivnih delov molekul.
Drug pristop k sintezi vključuje tvorbo stabilnega hidrazona kot zadnje stopnje v sintezi reagenta. Spojine s formulo (Q)d-Ln-Ch, pri čemer je Ch -R40R41NNH2, katerih sinteze so opisane v U.S.S.N. 08/415,908,861, ki je sočasno v teku, lahko v primernem topilu pod primernimi reakcijskimi pogoji reagirajo s karbonil vsebujočimi spojinami s formulo R80C(=O)R81. Topilo ali reakcijski pogoj je primeren, če se reagent tvori brez znatne izgube biološke aktivnosti zaradi uporabe navedenega topila ali pogoja. -46-
Stabilni hidrazoni, ki nosijo kemijsko reaktivno skupino, ki je koristna pri sintezi reagentov pričujočega izuma, so lahko sintetizirani kot prikazuje Shema 2.
Shema 2
Hidrazinonikotinska kislina v dimetilformamidu zreagira s karbonil vsebujočo spojino, R80C(=O)R81, da nastane odgovarjajoč stabilen hidrazon nikotinske kisline. Reakcija raztopine stabilnega hidrazona z N-hidroksisukcinimidom (NHS) v prisotnosti dicikloheksilkarbodiimida (DCC) rezultira v sukcinimidilnem estru odgovarjajočega stabilnega hidrazona nikotinske kisline. Sinteze specifičnih stabilnih hidrazonov, ki nosijo sukcinimidil esterski kemijsko reaktiven del molekule so opisane v Sekciji s primeri.
Stabilne hidrazone, ki nosijo sukcinimidil esterski del se lahko uporabi, da se pripravi reagente pričujočega izuma z reakcijo z amino skupino na biološko aktivni molekuli ali z linkerjem modificirano biološko aktivno molekulo, da se tvori amidna vez. Sinteza reagentov z reakcijo z linkerjem modificiranih cikličnih llb/llla receptorskih antagonistov je prikazana v Shemi 3. -47-
Shema 3
Dimetilformamidna raztopina hidrazona, ki nosi sukcinimidil esterski de! molekule je združena z linkerjem modificiranim cikličnim llb/llla receptorskim antagonistom ciklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb{5-Aca)), raztopljenem v DMF, da se tvori reagent, ciklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(H2-5-Aca)). -48-
Ciklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(5-Aca)) je sintetiziran kot je opisano v U.S.S.N. 08/415,908,861, ki je sočasno v teku. Surovi reagent je lahko očiščen s preparativno tekočinsko kromatografijo visoke ločljivosti (HPLC) ali s številnimi drugimi metodami, poznanimi strokovnjakom na tem področju, kot so kristalizacija, kolonska kromatografija in ekstrakcija s topilom.
Alternativni pristop za sintezo reagenta pričujočega izuma vključuje reakcijo karbonil vsebujoče spojine s formulo R80C(=O)R81, s spojino s formulo (COd-Ln-Ch, pri čemer je Ch -R40R41NNH2, kot je prikazano v Shemi 4. -49- TFA* N-MeArg / D-Val
NH
Shema 4
Ciklični llb/llla receptorski antagonist, ciklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(Hynic-5-Aca)), ki je lahko sintetiziran kot je opisano v U.S.S.N. 08/415,908,861, ki je sočasno v teku, v dimetilformamidu zreagira s karbonil-vsebujočo spojino s formulo R80(C=O)R81, da nastane reagent ciklo(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(Hz-5-Aca)). Surovi reagent je lahko očiščen s preparativno tekočinsko kromatografijo visoke ločljivosti (HPLC) ali s številnimi drugimi metodami, poznanimi strokovnjakom na tem -50- področju, kot so kristalizacija, kolonska kromatografija in ekstrakcija s topilom.
Reagenti pričujočega izuma s formulo (Q)d-Ln-Hz, so koristni za pripravo radiofarmacevtikov, razkritih v patentni prijavi 08/415,908,908, ki je sočasno v teku, s formulo: [(Q)d.Ln-Ch.]x-Mt(AL1)y(AL2)z (2), pri čemer so Q, d’, in Ln kot je definirano zgoraj in je Ch· radionuklidni kovinski kelator ali vezna enota povezana na radionuklid kovine prehoda, Mt, s formulami R4on=N+=, R40R41N-N=, R40N=, ali R40N=N(H)-, AL1 je prvi pomožni ali ko-ligand, je drugi pomožni ali ko-ligand, x in y sta neodvisno 1 ali 2, in z je neodvisno celo število od 0 do 4. Radionuklid kovine prehoda, Mt, je lahko izbran iz skupine: tehnecij-99m, renij-186 in renij-188.
Skupina Ch- se imenuje hidrazido (s formulo R40R41N-N=), diazenido (s formulo R40N=N+= ali R40N=N(H)-) ali imido (s formulo R40N=) skupina in služi kot točka povezave radionuklida na ostanek radiofarmacevtika, določenega s formulo (Q)d>-Ln. Diazenido skupina je lahko bodisi terminalna (samo en atom skupine je vezan na radionuklid) ali kelirajoča. Da bi imeli kelirajočo diazenido skupino, mora biti tudi vsaj še en drug atom skupine, nameščene na R40, vezan na radionuklid. Atomi, ki so vezani na kovino se imenujejo donorni atomi. Hidrazido in imido skupine so samo terminalne.
Koordinacijska sfera radionuklida vključuje vse ligande ali skupine, vezane na radionuklid. Da je radionuklid kovine prehoda, Mt, stabilen, ima tipično koordinacijsko število sestavljeno iz celega števila, večjega od ali enakega -51- 5 in manjšega od ali enakega 7; to je, da je 5 do 7 atomov vezanih na kovino in se reče, da ima radionuklid zaključeno koordinacijsko sfero. Če kelator ali vezna enota Ch· ne zagotovi vseh atomov, ki so potrebni, da stabilizirajo kovinski radionuklid z zaključitvijo njegove koordinacijske sfere, je koordinacijska sfera zaključena z donornimi atomi iz drugih ligandov, imenovanih pomožni ali ko-ligandi, ki so tudi lahko bodisi terminalni ali kelirajoči.
Veliko število ligandov lahko služi kot pomožni ali ko-ligandi, katerih izbira pa je določena z različnimi premisleki, kot so lahkost sinteze radiofarmacevtika, kemijske in fizikalne lastnosti pomožnega liganda, hitrost tvorbe, dobitek, in število izomernih oblik nastalih radiofarmacevtikov, sposobnost, da se naveden pomožni ali ko-ligand da pacientu brez škodljivih fizioloških posledic za navedega pacienta, in kompatibilnost liganda v liofilizirani formulaciji v kompletu. Naboj in lipofilnost pomožnega liganda bo vplival na naboj in lipofilnost radiofarmacevtikov. Na primer uporaba 4,5-dihidroksi-1,3-benzen disulfonata rezultira v radiofarmacevtikih z dvema dodatnima anionskima skupinama, zato ker bodo sulfonatne skupine pod fiziološkimi pogoji anionske. Uporaba N-alkil substituiranih 3,4-hidroksipiridinonov rezultira v radiofarmacevtikih z variirajočimi stopnjami lipofilnosti, odvisnimi od velikosti alkilnih substituentov.
Radiofarmacevtiki, pripravljeni iz reagentov pričujočega izuma so lahko sestavljeni iz enega ali dveh pomožnih ali ko-ligandov, imenovanih Ali» v binarnem ligandnem sistemu. Eden ali dva pomožna ali ko-liganda AL1, ki sestavljata radiofarmacevtike sta lahko neodvisno izbrana iz skupine: dikisikovih ligandov, funkcionaliziranih aminokarboksilatov in halidov; pod pogojem, da je koordinacijska sfera radionuklida zaključena. -52-
Pomožni dikisikovi ligandi vključujejo ligande, ki koordinirajo na kovinski ion preko vsaj dveh kisikovih donornih atomov. Primeri vključujejo, toda niso omejeni na: glukoheptonat, glukonat, 2-hidroksiizobutirat, laktat, tartrat, manitol, glukarat, maltol, kojično kislino, 2,2-bis(hidroksimetil)propionsko kislino, 4,5-dihidroksi-1,3-benzen disulfonat, ali substituirane ali nesubstituirane 1,2 ali 3,4 hidroksipiridinone, ali njihove farmacevtsko sprejemljive soli.
Funkcionaiizirani aminokarboksilati vključujejo ligande, ki imajo kombinacijo dušikovih in kisikovih donornih atomov. Primeri vključujejo, toda niso omejeni na: iminodiocetno kislino, 2,3 diaminopropionsko kislino, nitrilotrrocetno kislino, Ν,Ν’-etilendiamin diocetno kislino, Ν,Ν,Ν’-etilendiamin triocetno kislino, hidroksietiletilendiamin triocetno kislino, Ν,Ν’-etilendiamin bis-hidroksifenilglicin, ali ligande opisane v evropski patentni prijavi 93302712.0, ali njihove farmacevtsko sprejemljive soli.
Halidi so lahko klorid, bromid, fluorid ali jodid ali njihove farmacevtsko sprejemljive soli.
Posebno koristni so radiofarmacevtiki, pripravljeni iz reagentov pričujočega izuma, sestavljeni iz dveh različnih vrst pomožnih ali ko-ligandov, enega ali dveh ligandov, imenovanih prvi pomožni ali ko-ligand ali liganda, in neodvisno izbranih iz skupine: dikisikovih ligandov, funkcionaliziranih aminokarboksilatov in halidov; in enega do štirih ligandov imenovanih drugi pomožni ali koligand ali ligandi, A^, izbranih iz skupine: trisubstituiranih fosfinov, trisubstituiranih arzinov, tetrasubstituiranih difosfinov in tetrasubstituiranih diarzinov, v ternarnem ligandnem sistemu. V U.S.S.N. 08/415,908, ki je sočasno v teku smo razkrili, da so radiofarmacevtiki s formulo [(Q)d’Ln‘Ch’]x-Mt(AL1)y(AL2)z sestavljeni iz enega ali več pomožnih ali -53- ko-ligandov stabilni v primerjavi z navedenimi radiofarmacevtiki, ki niso sestavljeni iz enega ali več pomožnih ligandov, A^; to je, imajo minimalno število izomernih oblik, katerih relativna razmerja se s časom znatno ne spreminjajo, in da ostanejo po razredčitvi snovno intaktni.
Hidrazonska skupina, Hz, mora biti konvertirana v kelatorsko ali vezno enoto, Ch, ki je bodisi hidrazinska skupina s formulo R40R41NNH2 ali diazinska skupina s formulo R40N=NH, ki je zato, da bi se s kovinskim radionuklidom, Mt, tvorila kelatorska ali vezna enota lahko protonirana ali pa lahko tudi ni protonirana. Kelatorska ali vezna enota, Ch je, ko je vezana na kovinski radionuklid, Mt, imenovana Ch-. Pretvorba hidrazonske skupine, Hz, v kelatorsko ali vezno enoto, Ch, se lahko dogodi bodisi pred reakcijo z radionuklidom, v tem primeru radionuklid in pomožni ali ko-ligand ali ligandi niso povezani z reagentom, ampak s hidrolizirano obliko reagenta, ki nosi kelatorsko ali vezno enoto, Ch, ali v prisotnosti radionuklida, v tem primeru je reagent sam povezan z radionuklidom in pomožnim ali ko-ligandom ali ligandi. V drugem primeru mora biti pH reakcijske mešanice nevtralen ali kisel.
Radiofarmacevtiki s formulo [(Q)d-Ln-Ch-]x-Mt(AL1)y so lahko brez težav pripravljeni iz reagentov pričujočega izuma s pomešanjem soli radionuklida, reagenta s Formulo 1, pomožnega liganda ALi, in reducenta v vodni raztopini pri temperaturah od sobne temperature do 100 °C. Alternativno so radiofarmacevtiki lahko pripravljeni najprej s pomešanjem soli radionuklida, pomožnega liganda AL1, in reducenta v vodni raztopini pri temperaturah od sobne temperature do 100 °C, da se s pomožnim ligandom AL1 tvori intermediarni radionuklidni kompleks, potem dodajanjem reagenta s Formulo 1 in nadaljnjim reagiranjem pri temperaturah od sobne temperature do 100 °C. -54-
Radiofarmacevtiki s formulo [(0)^-0^^(^.1)7(^2)2 so lahko brez težav pripravljeni iz reagentov pričujočega izuma z pomešanjem soli radionuklida, reagenta s Formulo 1, pomožnega Uganda AL1, pomožnega liganda A^, in opcijsko reducenta, v vodni raztopini pri temperaturah od sobne temperature do 100 °C. Alternativno so radiofarmacevtiki lahko pripravljeni najprej s pomešanjem soli radionuklida, pomožnega liganda AL1, reagenta s Formulo 1, in reducenta v vodni raztopini pri temperaturah od sobne temperature do 100 °C, da se tvori intermediarni radionuklidni kompleks, in nato dodajanjem pomožnega liganda A|_2 in nadaljnjim reagiranjem pri temperaturah od sobne temperature do 100 °C.
Celoten čas priprave bo variiral odvisno od identitete radionuklida, identitet in količin reaktantov in postopka, ki je bil uporabljen za pripravo. Pripravki, ki rezultirajo v > 80% dobitku radiofarmacevtika so lahko dokončani v 1 minuti ali pa lahko potrebujejo več časa. Če so potrebni ali zaželeni radiofarmacevtiki, ki so bolj čisti, so lahko produkti očiščeni z vsako od številnih tehnik, ki so dobro poznane strokovnjakom na tem področju, kot tekočinska kromatografija, ekstrakcija v trdni fazi, ekstrakcija s topilom, dializa ali ultrafiltracija.
Uporaba reagenta pričujočega izuma za sintezo radiofarmacevtika za slikanje tromboze, ki obsega stabilen hidrazon-linker modificiran-ciklični llb/llla receptorski antagonist je prikazana v Shemi 5. Binarni ligandni sistem tehnecij-99m radionuklida je sestavljen iz diazenido vezne enote Ch-in dveh tricinskih pomožnih ligandov, AL-|. Prikazana struktura je zaradi koordinacijskega izomerizma diazenidne vezne enote in dveh tricinskih ligandov samo ena od številnih možnih izomernih oblik radiofarmacevtika. -55-/ \
TFA· Gly N-MeArg Asp D-Val N H
D-Val N H
Shema 5
Uporaba reagenta pričujočega izuma za sintezo radiofarmacevtika za slikanje tromboze, ki obsega stabilen hidrazon-linker modificiran-ciklični llb/llla receptorski antagonist, in ki ima ternami ligandni sistem je prikazana v Shemi 6. Ternami ligandni sistem tehnecij-99m radionuklida je sestavljen iz diazenido vezne enote Ch·, enega tricinskega pomožnega liganda, AL1, -56- in enega trisubstituiranega fosfinskega pomožnega liganda, A^. Prikazana struktura je zaradi koordinacijskega izomerizma diazenido vezne enote ena od dveh možnih izomernih oblik radiofarmacevtika.
-56- TFA* Gly N-MeArg^ Asp / \ D-Val N H
D-Val N H
Shema 6 -57-
Radionuklidi, ki so lahko uporabljeni z reagenti pričujočega izuma, da se sintetizirajo radiofarmacevtiki, so izbrani iz skupine "mTc, 186Re, ali 188Re. Za diagnostične namene je prednosten izotop 99mTc. Njegova 6 urna razpolovna doba in 2.24x10‘14 J energije emisije gama žarkov sta skoraj idealna za gama scintigrafijo z uporabljanjem opreme in postopkov, ki so dobro uveljavljeni za tiste, ki so strokovnjaki na tem področju. Tudi izotopi renija imajo energije emisije gama žarkov, ki so kompatibilne z gama scintigrafijo, vendar ti žarki emitirajo tudi visoko energijske beta delce, ki so za živa tkiva bolj škodljivi. Emisije teh beta delcev se lahko uporabijo za terapevtske namene, na primer, za radioterapijo raka.
Tehnecijevi in renijevi radionuklidi so prednostno v kemijski obliki pertehnetata ali perrenata in farmacevtsko sprejemljivega kationa. Oblika pertehnetatne soli je prednostno natrijev pertehnetat, kot je dobljen iz komercialnih Tc-99m generatorjev. Količina pertehnetata, ki se uporablja za pripravo radiofarmacevtikov pričujočega izuma se lahko giblje od 0.37x107 Bq do 3.7x1010 Bq ali bolj prednostno od 3.7x107 do 740x107 Bq.
Za pripravo radiofarmacevtikov uporabljena količina reagentov pričujočega izuma, se lahko giblje od 0.1 μg do 10 mg, ali bolj prednostno od 0.5 μθ do 100 pg. Uporabljeno količino bodo narekovale količine drugih reaktantov in identiteta radiofarmacevtikov s Formulo 2, ki jih bo potrebno pripraviti.
Uporabljene količine pomožnih ligandov AL1 se lahko gibljejo od 0.1 mg do 1 g, ali bolj prednostno od 1 mg do 100 mg. Točna količina za določen radiofarmacevtik je funkcija identitete radiofarmacevtikov s Formulo 2, ki jih bo potrebno pripraviti, uporabljenega postopka in količin in identitet drugih reaktantov. Prevelika količina AL1 bo rezultirala v tvorbi -58- stranskih produktov, sestavljenih iz s tehnecijem označenega ALi, brez biološko aktivne molekule ali stranskih produktov, sestavljenih iz s tehnecijem označenih biološko aktivnih molekul s pomožnim ligandom AL1, toda brez pomožnega liganda A^. Premajhna količina AL1 bo rezultirala v drugih stranskih produktih, kot reduciranem hidroliziranem tehneciju, ali tehnecijevem koloidu.
Uporabljene količine pomožnih ligandov A|_2 se lahko gibljejo od 0.001 mg do 1 g, ali bolj prednostno od 0.01 mg do 10 mg. Točna količina za določen radiofarmacevtik je funkcija identitete radiofarmacevtikov s Formulo 2, ki jih bo potrebno pripraviti, uporabljenega postopka in količin in identitet drugih reaktantov. Prevelika količina A^ bo rezultirala v tvorbi stranskih produktov, sestavljenih iz s tehnecijem označenega Al2 brez biološko aktivne molekule ali stranskih produktov, sestavljenih iz s tehnecijem označenih biološko aktivnih molekul s pomožnim ligandom Ai_2, toda brez pomožnega liganda AL1.
Opcijsko se lahko za sintezo radiofarmacevtikov s Formulo 2, ki so sestavljeni iz pomožnega liganda A^, uporablja tudi reducent. Primerni reducenti vključujejo kositrove soli, ditionitne ali bisulfitne soli, borohidridne soli, in formamidinsulfinsko kislino, pri čemer so soli vsake farmacevtsko sprejemljive oblike. Prednosten reducent je kositrov klorid. Uporaba reducenta je opcijska zato, ker pomožni ligand A^ tudi lahko služi za reduciranje Tc-99m-pertehnetata. Uporabljena količina pertehnetata se lahko giblje od 0.001 mg do 10 mg, ali bolj prednostno od 0.005 mg do 1 mg.
Drugi vidik pričujočega izuma so diagnostični kompleti za pripravo radiofarmacevtikov, ki so koristni kot sredstva za slikanje za diagnozo kardiovaskularnih motenj, infekcijske bolezni, vnetne bolezni in raka. -59-
Diagnostični kompleti pričujočega izuma obsegajo eno ali več stekleničk, ki vsebujejo sterilno, nepirogeno formulacijo, sestavljeno iz vnaprej določene količine reagenta s formulo (Q)d>-Ln-Hz, enega ali dveh pomožnih ali ko-ligandov in opcijsko drugih komponent, kot reducentov, prenašalnih ligandov, pufrov, liofilizacijskih sredstev, stabilizacijskih sredstev, sredstev za raztapljanje in bakteriostatikov. Vključitev ene ali več opcijskih komponent v formulacijo bo pogosto za izvajalnega končnega uporabnika izboljšala lahkoto sinteze radiofarmacevtika, lahkoto izdelovanja kompleta, čas shranjevanja kompleta, ali stabilnost in čas shranjevanja radiofarmacevtika. Izboljšanje, doseženo z vključitvijo opcijske komponente v formulacijo mora biti pretehtano nasproti dodani kompleksnosti formulacije in dodanemu strošku k izdelavi kompleta. Ena ali več stekleničk, ki vsebujejo vso ali del formulacije je lahko neodvisno v obliki sterilne raztopine ali liofilizirane trdne snovi.
Pufri, ki so koristni v pripravi radiofarmacevtikov in v diagnostičnih kompletih, koristnih za pripravo navedenih radiofarmacevtikov vključujejo, toda niso omejeni na fosfat, citrat, sulfosalicilat, in acetat. Bolj kompleten seznam se lahko najde v United States Pharmacopeia.
Liofilizacijska sredstva koristna v pripravi diagnostičnih kompletov, koristnih za pripravo radiofarmacevtikov vključujejo, toda niso omejena na manitol, laktozo, sorbitol, dekstran, fikol, in polivinilpirolidin(PVP).
Stabilizacijska sredstva koristna v pripravi radiofarmacevtikov in v diagnostičnih kompletih koristnih za pripravo navedenih radiofarmacevtikov vključujejo, toda niso omejena na askorbinsko kislino, cistein, monotioglicerol, natrijev bisulfit, natrijev metabisulfit, gentisično kislino, in inozitol. -60-
Sredstva za raztapljanje koristna v pripravi radiofarmacevtikov in v diagnostičnih kompletih koristnih za pripravo navedenih radiofarmacevtikov vključujejo, toda niso omejena na etanol, glicerin, polietilen glikol, propilen glikol, polisorbate in lecitin.
Bakteriostatiki koristni v pripravi radiofarmacevtikov in v diagnostičnih kompletih koristnih za pripravo navedenih radiofarmacevtikov vključujejo, toda niso omejeni na benzil alkohol, benzalkonijev klorid, klorbutanol, in metil, propil ali butil paraben.
Komponenta v diagnostičnem kompletu ima lahko tudi več kot eno funkcijo. Reducent lahko služi tudi kot stabilizacijsko sredstvo, pufer lahko služi tudi kot prenašalni ligand, liofilizacijsko sredstvo lahko služi tudi kot prenašalni, pomožni ali ko-ligand in tako dalje.
Vnaprej določene količine vsake komponente v formulaciji so določene po različnih premislekih, ki so v nekaterih primerih specifični za tisto komponento in v drugih primerih odvisni od količine druge komponente ali prisotnosti in količine opcijske komponente. Na splošno se uporablja minimalna količina vsake komponente, ki bo dala želen učinek formulacije. Želen učinek formulacije je, da bo izvajalni končni uporabnik lahko sintetiziral radiofarmacevtik in imel visoko stopnjo gotovosti, da se radiofarmacevtik lahko varno injicira v pacienta in da bo zagotovil diagnostično informacijo o bolezenskem stanju tega pacienta.
Diagnostični kompleti pričujočega izuma bodo za izvajalnega končnega uporabnika vsebovali tudi napisana navodila, da bo le-ta sledil navodilom za sinteziranje radiofarmacevtikov. Ta navodila so lahko pritrjena na eno ali -61- več stekleničk ali pa na embalažo v kateri je za pošiljanje pakirana steklenička ali stekleničke ali pa so lahko vstavljena posebej in se to imenuje vstavek v embalaži.
Drug vidik pričujočega izuma v pacientu proučuje metodo slikanja mesta trombotične bolezni, ki vključuje: (1) sintetiziranje radiofarmacevtika z uporabljanjem reagenta pričujočega izuma, ki se lokalizira na mestu trombotične bolezni zaradi interakcije med biološko aktivno skupino, Q, radiofarmacevtika in receptorskim ali vezavnim mestom izraženim na mestu bolezni ali z receptorskim ali vezavnim mestom na endogeni krvni komponenti, ki se akumulira na tem mestu; (2) dajanje navedenega radiofarmacevtika pacientu z injekcijo ali infuzijo; (3) slikanje pacienta z uporabljanjem bodisi planarne ali SPECT gama scintigrafije.
Drug vidik pričujočega izuma v pacientu proučuje metodo slikanja mesta infekcije ali infekcijske bolezni, ki vključuje: (1) sintetiziranje radiofarmacevtika z uporabljanjem reagenta pričujočega izuma, ki se lokalizira na mestu infekcije ali infekcijske bolezni zaradi interakcije med biološko aktivno skupino, Q, radiofarmacevtika in receptorskim ali vezavnim mestom izraženim na mestu bolezni ali z receptorskim ali vezavnim mestom na endogeni krvni komponenti, ki se akumulira na tem mestu; (2) dajanje navedenega radiofarmavevtika pacientu z injekcijo ali infuzijo; (3) slikanje pacienta z uporabljanjem bodisi planarne ali SPECT gama scintigrafije.
Drug vidik pričujočega izuma v pacientu proučuje metodo slikanja mesta vnetja, ki vključuje: (1) sintetiziranje radiofarmacevtika z uporabljanjem reagenta pričujočega izuma, ki se lokalizira na mestu vnetja zaradi interakcije med biološko aktivno skupino, Q, radiofarmacevtika in -62- receptorskim ali vezavnim mestom izraženim na mestu vnetja ali z receptorskim ali vezavnim mestom na endogeni krvni komponenti, ki se akumulira na tem mestu; (2) dajanje navedenega radiofarmacevtika pacientu z injekcijo ali infuzijo; (3) slikanje pacienta z uporabljanjem bodisi planarne ali SPECT gama scintigrafije.
Drug vidik pričujočega izuma v pacientu proučuje metodo slikanja mesta raka, ki vključuje: (1) sintetiziranje radiofarmacevtika, z uporabljanjem reagenta pričujočega izuma, ki se lokalizira na mestu bolezni zaradi interakcije med biološko aktivno skupino, Q, radiofarmacevtika in receptorskim ali vezavnim mestom izraženim na mestu raka ali z receptorskim ali vezavnim mestom na endogeni krvni komponenti, ki se akumulira na tem mestu; (2) dajanje navedenega radiofarmacevtika pacientu z injekcijo ali infuzijo; (3) slikanje pacienta z uporabljanjem bodisi planarne ali SPECT gama scintigrafije. -63-
SEKCIJA S PRIMERI
Materiale, ki so bili uporabljeni za sintetiziranje reagentov pričujočega izuma, opisanih v sledečih primerih smo dobili, kot sledi. Ciklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(5-Aca)) in ciklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(Hynic-5-Aca)) smo sintetizirali kot je opisano v U.S. serijska št. 08/415,908,861, ki je sočasno v teku (ekvivalentno WO 94/22494). Sledeče spojine smo dobili iz komercialnih virov in jih kot take tudi uporabili: hidrazinonikotinsko kislino, N-hidroksisukcinimid (NHS), dicikloheksilkarbodiimid (DCC), tricin, tris(3-sulfonatofenil)fosfin trinatrijevo sol (TPPTS), kositrov klorid dihidrat, dimetilformamid (DMF), trifluoroocetno kislino (TFA), acetonitril, 4-piridinkarboksaldehid, amonijev acetat, natrijev dihidrogen fosfat, natrijev 2-formilbenzensulfonat, trietilamin, manitol, krotonaldehid, 4-karboksibenzaldehid, in glioksilno kislino. Deionizirano vodo smo dobili iz Milli-Q vodnega sistema in je bila kvalitete >18 ΜΩ. Tc-99m-pertehnetat (99mjc04") smo dobili iz DuPont Pharma 99mMo/"mTc generatorja.
Primer 1
Sinteza benzaldehid hidrazona ciklo-fD-Val-NMeAra-GIv-Asp-Mamb(hidrazinonikotinil-5-Aca11. K raztopini 20 mg (0.0215 mmol) ciklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(5-Aca))*2TFA in 7.5 mg (0.0222 mmol) sukcinimidil 6-(2-benzaldehidhidrazino)nikotinata v DMF (1 ml) smo dodali Et3N (10 μΙ), in reakcijsko mešanico pustili, da se je pri sobni temperaturi mešala 42 ur. Reakcijsko mešanico smo koncentrirali, raztopili v 50% CH3CN/H20, in liofilizirali, da je nastala surova naslovna spojina (23.5 mg), kot neizrazito bel prah. Čiščenje smo izvršili s HPLC z reverzno fazo na preparativni Vydac C18 koloni (2.5 X 25 cm) z uporabljanjem gradienta 6 do 72% -64- acetonitrila, ki je vseboval 0.1% trifluoroocetne kisline, pri pretoku 15 ml/min, da je nastala TFA sol naslovne spojine (17.5 mg, 71%), kot puhasta bela trdna snov; 1H NMR (D6-DMSO) 11.30 (br s, OH), 10.02 (s, NH), 8.94 (d, 1 H), 8.61 (d, 1H), 8.55 (d, 1H), 8.41 (m, 2H), 8.10 (s, =CH), 8.09 (m, 1 H), 7.70 (m, 4H), 7.61 (m, 1H), 7.52 (t, 1H), 7.42 (m, 3H), 7,27 (d, 1H), 7.07 (s, 1H), 5.18 (dd, 1H), 4.53 (m, 2H), 4.34 (dd, 1H), 4.20 (dd, 1H), 4.02 (dd, 1H), 3.25 (q, 2H), 3.13 (q, 2H), 2.99 (s, NCH3), 2.72 (dd, 1H), 2.50 (m, 1H), 2.33 (t, 2H), 2.10 (m, 2H), 1.60 (m, 5H), 1.35 (m, 4H), 1.10 (d, CH3), 0.92 (d, CH3); FAB(NBA)-MS: [M+Η]=926.4625 (Izračunano za C45H6oN1309=926.4637).
Primer 2
Sinteza 2-formilbenzensulfonsko kislinskega hidrazona ciklo-(D-Val-NMeAra-Glv-Asp-Mamb(hidrazinonikotinil-5-Aca11.
Natrijev 2-formilbenzensulfonat (3.9 mg, 0.019 mmol) in ciklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hidrazinonikotinil-5-Aca)) (10 mg, 0.0094 mmol) smo raztopili v 0.05 M natrijevem fosfatnem pufru, pH 7.0 (1.0 mL) in pustili 1.5 h stati pri sobni temperaturi, v tem času se je celotna reakcija spremenila v gel. Gel smo raztopili v 1.0 mL 10% acetonitrila, ki je vseboval 0.1 M NH4OAc in očistili z uporabljanjem HPLC z reverzno fazo s preperativno Zorbax-RX C18 kolono (21.2 X 250 mm), pri pretoku 15 mL/min z uporabljanjem 10% acetonitrila, ki je vseboval 0.1 M NH4OAc, 2 minuti, s 4.44%/min je sledil gradient 10 do 50% acetonitrila, ki je vseboval 0.1 M NH4OAc. Frakcije produkta smo liofilizirali, da je nastala naslovna spojina, kot puhasta brezbarvna trdna snov (7 mg, 74%). Analitska HPLC z Zorbax-RX C18 kolono (4.6 X 250 mm) pri pretoku 1.5 ml/min z uporabljanjem 4.0%/min gradienta 10 do 50% acetonitrila, ki je vseboval 0.05M NH4OAc je pokazala 97.3% čistost produkta. DCI-MS: [M+H]=1006.3. -65-
Primer 3
Sinteza p-dimetilaminobenzaldehid hidrazona ciklo-(D-Val-NMeAra-Gly-Asp-Mamb(hidrazinonikotinil-5-Aca11.
Naslovno spojino smo pripravili po splošnem postopku, ki je bil zgoraj opisan za benzaldehid hidrazon ciklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hidrazinonikotinil-5-Aca)) (Primer 1). Združitev ciklične spojine (32 mg, 0.0344 mmol) in sukcinimidil 6-(2-(4-dimetilamino)- benzaldehidhidrazinojnikotinata (13.5 mg, 0.0354 mmol) je dala surovo naslovno spojino (47 mg), kot rumen prah. Čiščenje smo izvršili s HPLC z reverznO fazo na preparativni Vydac C18 koloni (2.5 X 25 cm), z uporabljanjem gradienta 9 do 72% acetonitrila, ki je vseboval 0.1% trifluoroocetne kisline, pri pretoku 15 ml/min, da je nastala TFA sol
naslovne spojine (29.7 mg, 72%), kot puhasta bela trdna snov; 1H NMR (D6-DMSO) 10.03 (s, NH), 8.94 (d, 1H), 8.55 (d, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.42 (t, 1H), 8.15 (br s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.70 (d, 2H), 7.61 (m, 4H), 7.16 (d, 1H), 7.07 (s, 1H), 7.00 (br s, 2H), 6.76 (d, 2H), 5.17 (dd, 1H), 4.52 (m, 2H), 4.33 (dd, 1H), 4.20 (dd, 1H), 3.25 (q, 2H), 3.12 (q, 2H), 2.98 (s, 3 NCH3), 2.72 (dd, 1H), 2.50 (m, 1H), 2.33 (t, 2H), 2.10 (m, 2H), 1.60 (m, 5H), 1.35 (m, 4H), 1.10 (d, CH3), 0.92 (d, CH3); FAB(NBA)-MS: [M+Η]=969.5043 (Izračunano za C47H65N14O9=969.5059).
Primer 4
Sinteza 4-karboksibenzaldehid hidrazona ciklo-fD-Val-NMeAra-GIv-Asp-Mamb(hidrazinonikotinil-5-Aca11.
Mešanico ciklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hidrazinonikotinil-5-Aca))»2HBr (50 mg, 50 μιτιοί) in 4-karboksibenzaldehida (70.35 μιτιοΙ) smo pri sobni -66- temperaturi, pod dušikom, 4 ure mešali v dimetilformamidu (1 mL). Topilo smo odstranili pod vakuumom, ostanek pa smo raztopili v mešanici acetonitril-voda, in liofilizirali do suhega. Surovo mešanico smo očistili s HPLC z reverzno fazo s preparativno Zorbax-RX C18 kolono (21.2 X 250 mm), pri pretoku 15 mL/min, z uporabljanjem mobilne faze topila A (50 mM amonijev acetat), topila B (50 mM amonijev acetat v 50% acetonitrilu) in sledečega gradienta: Uporabili smo sledeči gradient: 0-2 min, 20% B; 30 min, 50% B (zadržanega do 32 min); 35 min, 100% B (zadržanega do 38 min); 40 min, 20% B. Dobitek očiščenega produkta je bil 7 mg (14%). DCI-MS (visoka ločljivost) [M+Η]=970.453526 (izračunana molekularna teža 969.445702).
Primer 5
Sinteza krotonaldehid hidrazona ciklo-fD-Val-NMeAra-GIv-Asp-Mamb(hidrazinonikotinil-5-Aca)1
Naslovno spojino smo sintetizirali kot je bilo opisano za 4- karboksibenzaldehid hidrazon ciklo(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-
Mamb(hidrazinonikotinil-5-Aca)) (Primer 4), s substituiranjem krotonaldehida
za 4-karboksibenzaldehid. Surovi material smo očistili s preparativno HPLC z uporabljanjem sledečega gradienta: 0-2 min, 20% B; 4 min, 55% B (zadržanega do 5 min); 30 min, 70% B (zadržanega do 32 min); 35 min, 100% B (zadržanega do 38 min); 40 min, 20% B; da je nastalo 4.5 mg (10%) očiščenega produkta. DCI-MS (visoka ločljivost) [M+Η]=890.463696 (izračunana molekularna teža 889.455872).
Primer 6
Sinteza alioksilno kislinskega hidrazona ciklo-fD-Val-NMeAra-GIv-Aso-Mambfhidrazinonikotinil-5-Aca)). -67-
Naslovno spojino smo sintetizirali kot je bilo opisano za 4- karboksibenzaldehid hidrazon ciklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-
Mamb(hidrazinonikotinii-5-Aca)) (Primer 4), s substituiranjem glioksilne kisline za 4-karboksibenzaldehid. Surovi material smo očistili s preparativno HPLC z uporabljanjem sledečega gradienta: 0-5 min, 20% B; 40 min, 50% B (zadržanega do 42 min); 45 min, 100% B (zadržanega do 46 min); 48 min, 20% B, da je nastalo 4.6 mg (10%) očiščenega produkta. DCI-MS (visoka ločljivost) [M+Η]=894.422225 (izračunana molekularna teža 893.414402),
Primer 7
Sinteza acetofenon hidrazona ciklo-CD-Val-NMeAra-GIv-Asp-Mamb (hid razinonikotinil-5-Aca^, K raztopini 82 mg (0.1075 mmol) surovega ciklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(5-Aca))»HOAc, TFA (16.6 μΙ, 0.215 mmol), in 38 mg (0.1075 mmol) sukcinimidil 6-(2-acetofenonhidrazino)nikotinata v DMF (5 ml) smo dodali Et3N (75 μΙ), in reakcijsko mešanico pustili, da se je pri sobni temperaturi mešala 42 ur. Reakcijsko mešanico smo koncentrirali, raztopili v 50% CH3CN/H20, in liofilizirali, da je nastala surova naslovna spojina (130 mg), kot bledo rumen prah. Čiščenje dela tega materiala smo izvršili s HPLC z reverzno fazo na preparativni Vydac C18 koloni (2.5 X 25 cm) z uporabljanjem gradienta 2 do 90% acetonitrila, ki je vseboval 0.1% trifluoroocetne kisline, pri pretoku 15 ml/min, da je nastala TFA sol naslovne spojine, kot puhasta bela trdna snov; 1H NMR (D6-DMSO) 10.03 (s, NH), 8.93 (d, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.55 (d, 1H), 8.42 (m, 2H), 8.13 (br s, 1H), 7.87 (d, 2H), 7.70 (m, 2H), 7.55 (m, 2H), 7.40 (m, 4H), 7.07 (s, 1H), 5.17 (dd, 1H), 4.52 (m, 2H), 4.33 (dd, 1H), 4.20 (dd, 1H), 4.02 (dd, 1H), -68- 3.63 (dd, 1H), 3.26 (q, 2H), 3.12 (q, 2H), 2.98 (s, NCH3), 2.72 (dd, 1H), 2.50 (m, 1H), 2.35 (s, CH3), 2.33 (m, 2H), 2.10 (m, 2H), 1.60 (m, 5H), 1.35 (m, 4H), 1.10 (d, CH3), 0.92 (d, CH3); FAB(NBA)-MS: [Μ+Η]=940.4818 (Izračunano za C46H62N13O9=940.4793).
Primer 8
Sinteza l-frnetoksikarbonihacetaldehid hidrazona ciklo-(D-Val-NMeAra-Glv-Asp-Mamb(hidrazinonikotinil-5-Acah.
Naslovno spojino smo pripravili po splošnem postopku, ki je bil zgoraj opisan za acetofenon ciklo*(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hidrazinonikotinil-5-Aca)) hidrazon (Primer 7). Združitev surove ciklične spojine (82 mg, 0.1075 mmol) in sukcinimidil 6-(2-(1-metoksi-karbonil)acetaldehidhidrazino)nikotinata (36 mg, 0.1077 mmol) je dala surovo naslovno spojino (123 mg), kot bledo rumen prah. Čiščenje dela tega materiala smo izvedli s HPLC z reverzno fazo z uporabljanjem pogojev, opisanih v Primeru 8, da je nastala TFA sol naslovne spojine, kot puhasta bela trdna snov.; 1H NMR (D6-DMSO) 10.69 (s, NH), 10.02 (s, NH), 8.92 (d, 1H), 8.70 (d, 1H), 8.55 (d, 1H), 8.44 (m, 2H), 8.14 (dd, 1H), 7.70 (s, 2H), 7.56 (m, 2H), 7.28 (d, 1H), 7.07 (s, 1H), 5.17 (dd, 1H), 4.52 (m, 2H), 4.33 (dd, 1H), 4.19 (dd, 1H), 4.04 (m, 1H), 3.76 (s, OCH3), 3.63 (dd, 1H), 3.26 (q, 2H), 3.13 (q, 2H), 2.99 (s, NCH3), 2.72 (dd, 1H), 2.50 (m, 1H), 2.33 (t, 2H), 2.13 (s, CH3), 1.60 (m, 5H), 1.35 (m, 4H), 1.10 (d, CH3), 0.92 (d, CH3); FAB-MS: [M+S]=922.4539 (Izračunano za C42H60N13O11 =922.4535).
Primer 9
Sinteza ciklopentanon hidrazona ciklo-(D-Val-NMeAra-Gly-AsD-Mamb(hidrazinonikotinil-5-Acah. -69-
Naslovno spojino smo pripravili po splošnem postopku, ki je bil zgoraj opisan za acetofenon ciklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hidrazinonikotinil-5-Aca)) hidrazon (Primer 7). Združitev surove ciklične spojine (82 mg, 0.1075 mmol in sukcinimidil 6-(2-ciklopentanon-hidrazino)nikotinata (35 mg, 0.1106 mmol) je dala surovo naslovno spojino (131 mg), kot bledo rumen prah. Čiščenje dela tega materiala smo izvedli s HPLC z reverzno fazo z uporabljanjem pogojev opisanih v Primeru 8, da je nastala TFA sol naslovne spojine, kot puhasta bela trdna snov; 1H NMR (D6-DMSO) 10.02 (s, NH), 8.93 (d, 1H), 8.61 (d, 1H), 8.55 (d, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.41 (t, 1H), 8.10 (m, 1H), 7.70 (s, 2H), 7.55 (m, 1H), 7.52 (t, 1H), 7.10 (br s, 3H), 7.06 (s, 1H), 5.17 (dd, 1H), 4.52 (m, 2H), 4.33 (dd, 1H), 4.19 (dd, 1H), 4.02 (dd, 1H), 3.62 (d, 1H), 3.24 (q, 2H), 3.12 (q, 2H), 2.99 (s, NCH3), 2.72 (dd, 1H), 2.50 (m, 1H), 2.41 (m, 4H), 2.33 (t, 2H), 2.10 (m, 2H), 1.75 (m, 3H), 1.68 (m, 4H), 1.34 (m, 4H), 1.10 (d, CH3), 0.92 (d, CH3); FAB(NBA/TFA)-MS: [M+H]=904.5136 (Izračunano za C43H62Ni3O9=904.4793).
Primer 10
Sinteza 2-fmetoksikarboninciklopentanon hidrazona ciklo-fD-Val-NMeAra-GIv-Asp-MambfHynic-5-Aca)1.
Naslovno spojino smo pripravili po splošnem postopku, ki je bil zgoraj opisan za acetofenon ciklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hidrazinonikotinil-5-Aca)) hidrazon (Primer 7). Združitev surove ciklične spojine (82 mg, 0.1075 mmol) in sukcinimidil 6-(2-(2-metoksikarbonil)ciklopentanonhidrazino)nikotinata (41 mg, 0.1095 mmol) je dala surovo naslovno spojino (138 mg), kot bledo rumen prah. Čiščenje dela tega materiala smo izvršili s HPLC z reverzno fazo z uporabljanjem pogojev, opisanih v Primeru 8, da je nastala TFA sol naslovne spojine, kot puhasta bela trdna snov; 1H NMR (D6- -70- DMSO) 10.01 (s, NH), 8.90 (m, 1H), 8.57 (m, 2H), 8.39 (m, 2H), 8.07 (d, 1H), 7.71 (s, 2H), 7.59 (m, 2H), 7.09 (m, 2H), 5.17 (dd, IH), 4.52 (m, 2H), 4.34 (dd, 1H), 4.20 (dd, 1H), 4.02 (d, 1H), 3.67 (s, OCH3), 3.24 (q, 2H), 3.12 (m, 2H), 2.99 (s, NCH3), 2.71 (dd, 1H), 2.50 (m, 1H), 2.34 (t, 2H), 2.10 (m, 4H), 1.60 (m, 5H), 1.34 (m, 3H), 1.25 (m, 2H), 1.10 (d, CH3), 0.93 (d, CH3); ESI-MS: [M+H]=962 (Izračunano za C45H64N13O11=962.4848).
Primer 11
Sinteza 4-piridinkarboksaldehid hidrazona ciklo-fD-Val-NMeAra-GIv-Asp-Mamb(hidrazinonikotinil-5-Aca11. 4-Piridinkarboksaldehid (1.14 mg, 0.0106 mmol) in ciklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(Hynic-5-Aca)) (10 mg, 0.0094 mmol) smo raztopili v 0.05 M natrijevem fosfatnem pufru, pH 7 (5.0 ml_) in pustili stati pri sobni temperaturi 72 h. Sedaj rahlo rumeno raztopino smo liofilizirali do suhega in nastalo trdno snov očistili z uporabljanjem HPLC z reverzno fazo s preparativno Zorbax-RX C18 kolono (21.2 X 250 mm), pri pretoku 15 ml/min z uporabljanjem 10% acetonitrila, ki je vseboval 0.1 M NH4OAc za 2 minuti, čemur je 4.44%/min sledil gradient 10 do 50% acetonitrila, ki je vseboval 0.1 M NH4OAc. Frakcijo produkta (zadrževalni čas 10-12 min) smo liofilizirali, da je nastala naslovna spojina kot puhasta brezbarvna trdna snov (8 mg, 74%). Analitska HPLC z Zorbax-RX C18 kolono (4.6 X 250 mm), pri pretoku 1.5 mL/min, z uporabljanjem 4.0%/min gradienta 10 do 50% acetonitrila, ki je vseboval 0.05M NH4OAc je pokazala 98.7% čistost produkta.
Sledeči primeri ponazarjajo sintezo stabilnih hidrazonov, ki nosijo kemijsko reaktiven del, koristen pri sintezi zgoraj opisanih reagentov. -71-
Primer 12
Sinteza sukcinimidil 6-(2-benzaldehidhidrazino1nikotinata K suspenziji 6-hidrazinonikotinske kisline (1.00 g, 6.5 mmol) v DMF (40 ml) smo dodali benzaldehid (0.70 ml, 6.9 mmol), in reakcijsko mešanico pustili, da se je pri sobni temperaturi mešala 3 ure. K homogeni reakcijski mešanici smo dodali N-hidroksisukcinimid (752 mg, 6.5 mmol) in DCC (3.00 ml, 13.4 mmol), in reakcijsko mešanico pustili, da se je 18 ur mešala pri sobni temperaturi. Reakcijsko mešanico smo filtrirali, koncentrirali, razredčili z EtOAc (50 ml), in mešanico 1 uro segrevali pri refluksu. Filtracija vroče mešanice je dala naslovno spojino (1.78 g, 81%), kot bledo rumen prah. Ta material smo uporabili brez nadaljnjega čiščenja. 1H NMR (D6-DMSO) 11.86 (s, NH), 8.82 (dd, Py-H), 8.20 (dd, Py-H), 8.20 (s, =CH), 7.75 (dd, 2 Ar-H), 7.43 (m, Py-H & 3 Ar-H), 2.89 (s, 2 CH2); DCI(NH3)-MS: [M+Η]=339.1084 (Izračunano za C17H15N4O4=339.1093).
Primer 13
Sinteza sukcinimidil 6-(2-acetofenonhidrazino)nikotinata
Naslovno spojino smo pripravili po splošnem postopku, ki je bil zgoraj opisan za sukcinimidil 6-(2-benzaldehidhidrazino)nikotinat (Primer 12). Filtracija EtOAc mešanice je dala naslovno spojino (1.26 g, 55%, vsebuje sledove DCU), kot neizrazito bel prah. Čist vzorec naslovne spojine (853 mg, 37%) smo dobili iz filtrata kot zlatorumene kristale. 1H NMR (D6-DMSO) 10.86 (s, NH), 8.84 (dd, Py-H), 8.21 (dd, Py-H), 7.86 (dd, 2 Ar-H), 7.41 (m, Py-H & 3 Ar-H), 2.89 (s, 2 CH2), 2.39 (s, CH3); DCI(NH3)-MS: [M+H]= (Izračunano za C18H17N4O4=353.1250). -72-
Primer 14
Sinteza sukcinimidil 6-(2-(4-dimetilamino1benzaldehidhidrazino1nikotinata
Naslovno spojino smo pripravili po splošnem postopku, ki je bil zgoraj opisan za sukcinimidil 6-(2-benzaldehidhidrazino)nikotinat (Primer 12), razen tega, da smo uporabili samo 1 ekvivalent DCC (1.5 ml, 6.7 mmol). Vroča filtracija EtOAc mešanice je dala naslovno spojino (1.20 g, 48%), kot rumen prah. Ta material smo uporabili brez nadaljnjega čiščenja. 1H NMR (D6-DMSO) 11.58 (s, NH), 8.76 (dd, Py-H), 8.13 (dd, Py-H), 8.07 (s, =CH), 7.54 (d, 2 Ar-H), 7.29 (d, Py-H), 6.75 (d, 2 Ar-H), 2.97 (s, 2 NCH3), 2.88 (s, 2 CH2); DCI(NH3)-MS: [M+H]=382.1513 (Izračunano za
Ci9H20N5O4=382.1515).
Primer 15
Sinteza sukcinimidil 6-(2-(1-metoksikarboninacetaldehidhidrazinolnikotinata
Naslovno spojino smo pripravili po splošnem postopku, ki je bil zgoraj opisan za sukcinimidil 6-(2-benzaldehidhidrazino)nikotinat (Primer 12). Filtracija EtOAc mešanice je dala naslovno spojino (552 mg, 25%, vsebuje sledove DCU), kot bledo bel prah. Ta material smo uporabili brez nadaljnjega čiščenja. Koncentriranje filtrata in zdrobitev v prah z EtOAc je dalo naslovno spojino (349 mg, 16%, vsebuje sledove DCU). 1H NMR (D6-DMSO) 11.21 (s, NH), 8.91 (dd, Py-H), 8.33 (dd, Py-H), 7.42 (d, Py-H), 3.78 (s, OCH3), 2.89 (s, 2 CH2), 2.18 (s, CH3); DCI(NH3)-MS: [M+H]= (Izračunano za Ci4H15N4O6=335.0991).
Primer 16
Sinteza sukcinimidil 6-(2-ciklopentanonhidrazino1nikotinata -73-
Naslovno spojino smo pripravili po splošnem postopku, ki je bil zgoraj opisan za sukcinimidil 6-(2-benzaldehidhidrazino)nikotinat (Primer 12). Filtracija EtOAc mešanice je dala naslovno spojino (1.78 g, 86%, vsebuje sledove DCU), kot bledo rumen prah. Rekristalizacija tega materiala iz EtOAc je dala očiščen vzorec naslovne spojine (530 mg, vsebuje sledove DCU). Ta material smo uporabili brez nadaljnjega čiščenja. 1NMR (D6-DMSO) 10.33 (s, NH), 8.76 (dd, Py-H), 8.11 (dd, Py-H), 7.15 (d, Py-H), 2.88 (s, 2 CH2), 2.41 (q, 2 CH£, 1.75 (m, 2 CH2); DCI(NH3)-MS: [M+H]= (Izračunano za Ci5Hi7N404=317.1250).
Primer 17
Sinteza sukcinimidil 6-(2-(2-metoksikarboni0ciklopentanonhidrazino1nikotinata
Naslovno spojino smo pripravili po splošnem postopku, ki je bil zgoraj opisan za sukcinimidil 6-(2-benzaldehidhidrazino)nikotinat (Primer 12). Filtracija EtOAc mešanice je dala naslovno spojino (627 mg, 26%, vsebuje sledove DCU), kot neizrazito bel prah. Koncentriranje filtrata in zdrobitev v prah z EtOAc sta dala naslovno spojino (1.17 g, 48%, vsebuje sledove DCU). Ta material smo uporabili brez nadaljnjega čiščenja. 1H NMR (D6-DMSO) 10.56 (s, NH), 8.79 (dd, Py-H), 8.15 (dd, Py-H), 7.11 (d, Py-H), 3.67 (s, OCH3), 3.55 (t, CH), 2.88 (s, 2 CH2), 2.50 (m, CH2), 1,90 (m, 2 CH2); DCI(NH3)-MS: [M+H]= (Izračunano za C17H19N4O6=375.1304).
Primer 18
Sinteza sukcinimidil 6-(2-(2-sulfo1benzaldehidhidrazino1nikotinat natrijeve soli
Naslovno spojino smo pripravili po splošnem postopku, ki je bil zgoraj opisan za sukcinimidil 6-(2-benzaldehidhidrazino)nikotinat (Primer 12). -74-
Filtracija EtOAc mešanice je dala rumeno trdno snov, polovico tega materiala smo razredčili z EtOAc (50 ml), in mešanico pri refluksu segrevali 1 uro. Filtracija vroče mešanice je dala naslovno spojino (1.63 g, 85%), kot bledo rumen prah. Ta material smo uporabili brez nadaljnjega čiščenja. 1H NMR (D6-DMSO) 11.91 (s, NH), 9.16 (s, =CH), 8.79 (dd, Py-H), 8.16 (dd, Py-H), 8.03 (dd, Ar-H), 7.79 (dd, Ar-H), 7.35 (m, Py-H & 2 Ar-H), 2.88 (s, 2 CH2); FAB(NBA)-MS: [M+Η]-419.2240 (Izračunano za
Ci7H15N4O7S=419.0661); Anal. izračunano za C17H14NaN407S*(H20)i.5: C, 43.69; H, 3.45; N, 11.99; Na, 4.92; S, 6.86. Ugotovljeno: C, 43.62, 43.71; H, 3.59, 3.64; N, 12.13, 12.08; Na, 4.83, 4.67; S, 6.56, 6.30.
Testiranje stabilnosti hidrazona
Stabilnost reagentov pričujočega izuma smo testirali z združevanjem raztopine reagentov in raztopine formaldehida in spremljanjem mešanice s HPLC z uporabljanjem Metode 1. HPLC Metoda 1:
Kolona: Zorbax Rx C18 (4.6 mm x 25 cm)
Temperatura kolone: 50 °C
Pretok: 1.5 mL/min
Topilo A: 50 mM amonijev acetat
Topilo B: 50/50 50 mM amonijev acetat/acetonitril Gradient: t=0 20% B t=20 min 100% B t=22 min 100% B t=23 min 20% B
Valovna dolžina: 240 nm -75-
Reagent po Primeru 1 smo raztopili v 0.05 M fosfatnem pufru, pH 7, (0.1 mg/mL) in dodali 10 ekvivalentov formaldehida (0.1 M v fosfatnem pufru). Reakcijsko mešanico smo s HPLC analizirali vsake 0.5 h. Sprememba v površini pika za reagent po Primeru 1, izražena kot procent začetne vrednosti pred dodatkom formaldehida je prikazana v Sliki 1. Za primerjavo smo testirali tudi nižji alkil hidrazon, ciklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hidrazino-nikotinil-5-Aca)) propionaldehid hidrazon. Reagent po Primeru 1, v teku 2.5 h ne reagira s formaldehidom, medtem ko > 90% nižjega alkil hidrazona v teku 2 h reagira s formaldehidom.
Poleg tega, smo z reakcijo 1 ekvivalenta posameznega aldehida ali ketona s ciklo(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hidrazinonikotinil-5-Aca) v 0.05 M fosfatnem pufru, pH 7.0 (0.1 mg/mL) in situ proizvedli številne reagente in potem njihovo stabilnost testirali z dodatkom enega ekvivalenta formaldehida in spremljanjem raztopine s HPLC. Rezultati stabilnostnega testa so prikazani v Tabeli 1.
Tabela 1 Stabilnost reagentov na formaldehid
Primer Formaldehidni test % zmanjšanja* 1 0 2 0 3 0 4 0 5 0 6 < 1 9 0 11 0 -76- fenilacetaldehid 25 glikolaldehid 40 nižji alkil 77 * pri 2 h
Količine reagentov po Primerih 1 - 6, 9 in 11 se v teku 2 h izpostavitve na en ekvivalent formaldehida zmanjšajo < 1%, kar kaže, da so ti reagenti zelo stabilni. Nasprotno pa se količina nižjega alkil hidrazona, ciklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hidrazino-nikotinil-5-Aca)) propionaldehid hidrazona, imenovanega nižji alkil, pod enakimi pogoji zmanjša 77%. V Tabeli 1 sta vključena tudi rezultata za dva druga hidrazona, ciklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hidrazinonikotinil-5-Aca)) fenilacetaldehid hidrazon, imenovanega fenilacetaldehid, in ciklo-(D-Va!-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hidrazinonikotinil-5-Aca)) glikolaldehid hidrazon, imenovanega glikolaldehid, katerih strukture s tem izumom niso opisane. Fenilacetaldehid hidrazon, v katerem je benzilna skupina vezana na metilenski ogljikov atom hidrazona, kaže nekoliko boljšo stabilnost, s 25% zmanjšanjem, medtem ko glikolaldehid hidrazon, v katerem je hidroksimetilna skupina vezana na metilenski ogljikov atom hidrazona, kaže marginalno izboljšano stabilnost, s 40% zmanjšanjem. Ti podatki kažejo, da zato, da je hidrazon zelo stabilen, kot so stabilni reagenti pričujočega izuma, mora v njem obstajati bodisi konjugiran π-sistem ali pa mora biti hidrazon del obročnega sistema. Fenilna skupina fenilacetaldehid hidrazona ni konjugirana na C=N vez, zato ker je odstranjen en ogljikov atom. Glikolaldehid hidrazon ne vsebuje drugega π-sistema.
Sinteza radiofarmacevtika s Formulo 2, ki je koristen kot sredstvo za slikanje trombusa, iz reagentov, ki so bili opisani v prejšnjih primerih se lahko izvede kot je opisano spodaj. -77-
Radiološko označevanje reagentov z uporabljanjem kositrovega klorida V 10 mL stekleničko smo dali 0.4 ml_ raztopine tricina (40 mg) v H20, tej so sledili 0.2 mL raztopine reagenta v H20 (10-20 μg), 0.5 mL "mTc04· raztopine (~185x107 Bq), 0.2 mL TPPTS raztopine (1 mg) v H20 in 20 μΙ SnCI22H20 raztopine (20 μg v 0.1 N HCI). Če je bilo potrebno smo pH raztopine naravnali na 4. Reakcijsko mešanico smo pri 50-80 °C segrevali 30 min, in jo analizirali z radio-HPLC z uporabljanjem Metode 2 ali 3.
Radiološko označevanje reagentov brez kositrovega klorida V 10 ml stekleničko smo dali 0.1 mL raztopine tricina (10 mg) v H20, 0.4 mL raztopine reagenta (20 - 40 μg) v H20, 0.5 mL "mTc04 (~185x107 Bq) v raztopini vode in soli, 0.2 mL raztopine manitola (20 mg) v H20, in 0.20 mL TPPTS raztopine (7.0 mg) v H20. Z uporabljanjem 0.1 N HCI smo pH naravnali na 4. Reakcijsko mešanico smo pri 50-80 °C segrevali 30 min in jo nato analizirali z radio-HPLC z uporabljanjem Metode 2 ali 3. HPLC Metoda 2
Kolona: Vydac C18, 250 mm x 4.6 mm, velikost por 300 A Topilo A: 10 mM natrijev monofosfat, pH 6.0 Topilo B: 100% acetonitril Gradient:
0% B 30% B 75% B 0% B 0’ 15’ 25’ 30’
Pretok: 1.0 mL/min Detekcija s preiskavo z NaJ -78- HPLC Metoda 3
Kolona: Vydac C-|8, 250 mm x 4.6 mm, velikost por 300 A
Topilo A: 10 mM natrijev monofosfat, pH 6.0
Topilo B: 100% acetonitril
Temperatura kolone: 50 °C
Gradient:
5% B 13% B 20% B 75% B 5% B 0’ 15’ 20’ 25’ 30’
Pretok: 1.0 mL/min Detekcija s preiskavo z NaJ
Tvorjeni radiofarmacevtik 99mTc(tricin) (TPPTS) (ciklo(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-
Mamb(hidrazinonikotinil-5-Aca)), je identičen radiofarmacevtiku, opisanem v Primeru 1 U.S.S.N 08/415,908, ki je sočasno v teku, sintetiziranem iz ne-hidrazonskega reagenta ciklo(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hidrazinonikotinil-5-Aca), katerega sinteza je opisana v U.S.S.N 08/415,908,861, ki je sočasno v teku, za katerega je bilo nazorno prikazano, da je koristen kot sredstvo za slikanje trombusa. Radiofarmacevtik je tvorjen v > 80% dobitku (osnovanem na Tc-99m) z uporabljanjem reagentov, opisanih v Primerih 1 -6 in 8.
Tabela 2. Dobitki radiofarmacevtikov z uporabljanjem reagentov
Primer RCP % 1 94 2 91 3 86* 4 87 -79- 5 83 6 91* 7 45 8 87 11 30*
* segreto na 50 °C
Dejstvo, da je radiofarmacevtik lahko z dobrim dobitkom tvorjen iz reagentov pričujočega izuma je presenetljiv rezultat, ker smo za reagente pokazali, da so zelo stabilni in vendar morajo biti zato, da se tvori radiofarmacevtik hidrolizirani in situ. Reagenti pričujočega izuma ne reagirajo z aldehidi in ketoni na katere v farmacevtskem izdelovalnem okolju pogosto naletimo, kot uporabljene pri izdelavi diagnostičnih kompletov, in tako ohranjajo njihovo čistost med izdelovalnim postopkom v izrazitem kontrastu z reagenti, sestavljenimi iz nižjih alkil hidrazonov.

Claims (11)

  1. -80- ZAHTEVKI 1. Reagent za pripravljanje radiofarmacevtika, ki obsega biološko aktivno skupino, povezano na stabilno hidrazonsko skupino, ki ima opcijsko povezovalno skupino med navedeno stabilno hidrazonsko in navedeno biološko aktivno skupino.
  2. 2. Reagent po zahtevku 1, ki ima povezovalno skupino med navedeno stabilno hidrazonsko in navedeno biološko aktivno skupino.
  3. 3. Reagent po zahtevku 2, ki ima formulo: (Q)d.Ln-Hz, in njegove farmacevtsko sprejemljive soli pri čemer, je Q biološko aktivna skupina; je d' 1 - 20; je Ln povezovalna skupina s formulo: M1-[Y1 (CR55R56)f (Z1 )f Ύ^-Μ2, pri čemer: je M1 -[(CH^gZ1 ]g-(CR55R56)g"-; je M2 -(CRSSR^g-piCHsjgjg.-; -81- je g neodvisno 0-10; je g’ neodvisno 0-1; je g” neodvisno 0-10; je f neodvisno 0-10; je f neodvisno 0-10; je f” neodvisno 0-1; sta Y1 in Υ2 ob vsakem pojavu neodvisno izbrana iz: vezi, O, NR56, C=0, C(=0)0, 0C(=0)0, C(=0)NH-, C=NR56, S, SO, S02, S03, NHC(=0), (NH)2C(=0), (NH)2C=S; je Z1 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz C6-C-|4 nasičenega, delno nasičenega, ali aromatskega karbocikličnega obročnega sistema, substituiranega z 0-4 R57; in heterocikličnega obročnega sistema, substituiranega z 0-4 R57; sta R55 in R56 ob vsakem pojavu neodvisno izbrana iz: vodika; C-rC-ιο alkila substituiranega z 0-5 R57; alkarila pri čemer je aril substituiran z 0-5 R57; -82- je R57 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: vodika, OH, NHR58, C(=0)R58, 0C(=0)R58, 0C(=0)0R58, C(=0)0R58, C(=0)NR58, C=N, SR58, SOR58, S02R58, NHC(=0)R58, NHC(=0)NHR58, NHC(=S)NHR58; ali, alternativno, ko je vezan na dodatno molekulo Q, je R57 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: O, NR58, C=0, 0(=0)0, 0C(=0)0, C(=0)N-, C=NR58, S, SO, S02, S03, NHC(=0), (NH)2C(=0), (NH)2C=S; in, je R58 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: vodika; CrC6 alkila; benzila; in fenila; je Hz stabilen hidrazon s formulo: R80 N = C R40·^ R81 R41 pri čemer, je R40 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: vezi do Ln, C-i-C^ alkila substituiranega z 0-3 R52, arila substituiranega z 0-3 R52, cikloalkila substituiranega z 0-3 R52, heterocikla substituiranega z 0-3 R52, heterocikloalkila substituiranega z 0-3 R52, aralkila -83- substituiranega z 0-3 R52 in alkarila substituiranega z 0-3 R52; je R41 neodvisno izbran iz skupine: vodika, arila substituiranega z 0-3 R52, CrC10 alkila substituiranega z 0-3 R52, in heterocikla substituiranega z 0-3 R52; je R52 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: vezi do L-n, =0, F, Cl, Br, J, -CF3, -CN, -C02R53, -C(=0)R53, -C(=0)N(R53)2, -CHO, -CHgOR53, -0C(=0)R53, -0C(=0)0R53a, -OR53, -0C(=0)N(R53)2, -NR53C(=0)R53, -NR54C(=0)0R53a, -NR53C(=0)N(R53)2, -NR54S02N(R53)2, -NR54S02R53a, -S03H, -S02R53a, -SR53, -S(=0)R53a, -S02N(R53)2, -N(R53)2i -NHC(=NH)NHR53 -C(=NH)NHR53, =NOR53, N02, -C(=0)NH0R53, -C(=0)NHNR53R53a, -0CH2C02H, 2-(1-morfolinojetoksi; so R53, R53a, in R54 vsak, ob vsakem pojavu, neodvisno izbrani iz skupine: vodika, C-|-C6 alkila, in vezi do Ln; sta R80 in R81 neodvisno izbrana iz skupine: H; Oi*Cio alkila,' -CN; -C02R85; -84- -C(=0)R85; -C(=0)N(R85)2; C2-Cio 1-alkena substituiranega z 0-3 R84; C2-Ci0 1-alkina substituiranega z 0-3 R84; arila substituiranega z 0-3 R84; nenasičenega heterocikia substituiranega z 0-3 R84; in nenasičenega karbocikla substituiranega z 0-3 R84; pod pogojem da, ko je eden od R80 in R81 H ali alkil, potem drugi ni H ali alkil; ali, alternativno, R80 in R81 sta lahko združena s prikazanim dvovalentnim ogljikovim radikalom, da se tvori:
    n pri čemer: sta R82 in R83 lahko neodvisno izbrana iz skupine:
    CrC10 alkila substituiranega z 0-3 R84; C2-C-|0 alkenila substituiranega z 0-3 R84; C2-C10 alkinila substituiranega z 0-3 R84; arila substituiranega z 0-3 R84; heterocikia substituiranega z 0-3 R84; in karbocikla substituiranega z 0-3 R84; -85- ali, alternativno, R82, R83 sta lahko združena, da se tvori združen aromatski ali heterociklični obroč; a in b kažeta položaja opcijskih dvojnih vezi in n je 0 ali 1, je R84 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: =0, F, Cl, Br, J, -CF3, -CN, -C02R85, -C(=0)R85, -C(=0)N(R85)2, -N(R85)3+, -CH2OR85, -0C(=0)R85, -0C(=0)0R85a, -OR85, -0C(=0)N(R85)2, -NR85C(=0)R85, -NR86C(=0)0R85a, -NR85C(=0)N(R85)2, -NR86S02N(R85)2i -NR86S02R85a, -S03H, -S02R85a, -SR85, -S(=0)R85a, -S02N(R85)2, -N(R85)2, -NHC(=NH)NHR85, -C(=NH)NHR85, =NOR85, -C(=0)NH0R85, -0CH2C02H, 2-(1-morfolino)etoksi; in so R85, R85a, in R86 vsak, ob vsakem pojavu, neodvisno izbrani iz skupine: vodika, C-|-C6 alkila. Reagent po zahtevku 3, pri čemer: je Q biološko aktivna molekula izbrana iz skupine: llb/llla receptorskih antagonistov, llb/llla receptorskih ligandov, peptidov, ki vežejo fibrin, peptidov, ki vežejo levkocite, kemotaktičnih peptidov, somatostatinskih analogov, in peptidov, ki vežejo selektin; -86- je d’ 1 do 3; je Ln: -(CR55R5®)g”-[Y1 (CR55R5®)fY^]f-(CR55R56)g”-, pri čemer: je g” 0-5; je f 0-5; je f 1-5; sta Y1 in Υ2 ob vsakem pojavu neodvisno izbrana iz: O, NR56, C=0, C(=0)0, 0C(=0)0, C(=0)NH-, C=NR56, S, SO, S02, S03l NHC(=0), (NH)2C(=0), (NH)2C=S; sta R55 in R56 ob vsakem pojavu neodvisno izbrana iz: vodika, CrC10 aikila, in alkarila; je Hz stabilen hidrazon s formulo: R80 / N=C R*°-H R81 pri čemer, V’ -87- je R40 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: arila substituiranega z 0-3 R52, in heterocikla substituiranega z 0-3 R52; je R41 neodvisno izbran iz skupine: vodika, ariia substituiranega z 0-1 R52, C-i-C3 alkila substituiranega z 0-1 R52, in heterocikla substituiranega z 0-1 R52; je R52 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: vezi do Ln, -C02R53, -CH2OR53, -S03H, -S02R53a, -N(R53)2, -NHC(=NH)NHR53, in -0CH2C02H; sta R53, R533 vsak, ob vsakem pojavu, neodvisno izbrana iz skupine: vodika in CrC3 alkila; je R80 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: -C02R85; C2-C5 1-alkena substituiranega z 0-3 R84; C2-C5 1-alkina substituiranega z 0-3 R84; arila substituiranega z 0-3 R84; nenasičenega heterocikla substituiranega z 0-3 R84; je R81 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: H in Cr C5 alkila; ali, alternativno, R80 in R81, ko sta združena s prikazanim dvovalentnim ogljikovim radikalom tvorita -88-
    η pri čemer sta R82 in R83 lahko neodvisno izbrana iz skupine: H in R84; ali, alternativno, R82, R83 sta lahko združena, da se tvori združen aromatski ali heterociklični obroč; a in b kažeta položaja opcijskih dvojnih vezi in je n 0 ali 1, je R84 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: -C02R85, -C(=0)N(R85)2j -CH2OR85, -0C(=0)R85, -OR85, -S03H, -N(R85)2, -0CH2C02H; je R85 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: vodika, CrC3 alkila.
  4. 5. Reagent po zahtevku 4, pri čemer: Q predstavlja biološko aktivno molekulo izbrano iz skupine: llb/llla receptorskih antagonistov in kemotaktičnih peptidov; je d’ 1; je L-r,: -89- -(CR55R56)g„-[Y1(CR55R56)fY2]f-(CR55R56)g,-> pri čemer: je g” 0-5; je f 0-5; je f 1-5; sta Y1 in Υ2 ob vsakem pojavu neodvisno izbrana iz: O, NR56, C=0, C(=0)0, 0C(=0)0, C(=0)NH-, C=NR56, S, NHC(=0), (NH)2C(=0), (NH)2C=S; sta R55 in R56 vodik; je Hz stabilen hidrazon s formulo: r80 / N=C R40·^ R81 R41 pri čemer, je R40 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: heterocikla substituiranega z R52; je R41 vodik; -90- je R52 vez do Ln; je R80 neodvisno izbran iz skupine: -C02R85; C2-C3 1-alkena substituiranega z 0-1 R84; arila substituiranega z 0-1 R84; nenasičenega heterocikla substituiranega z 0-1 R84; je R81 H; je R84 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: -C02R85; -OR85; -SO3H; -N(R85)2; je R85 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: H in metila. -91-
  5. 6. Reagenti po zahtevku 3, ki so NH
    -92-
    ΝΗ
    -93-
    NMe2 -94-
    COOH -95-
    -96- ΝΗ
    C02H -97- ΝΗ
    ΝΗ
    ΟΗ OCH, -98-
  6. 7. Komplet za pripravljanje radiofarmacevtika, ki obsega: (a) vnaprej določeno količino sterilnega, farmacevtsko sprejemljivega reagenta po kateremkoli od zahtevkov 1-6; (b) vnaprej določeno količino enega ali več sterilnih, farmacevtsko sprejemljivih pomožnih ligandov; (c) vnaprej določeno količino sterilnega, farmacevtsko sprejemljivega reducenta; in (d) opcijsko, vnaprej določeno količino sterilne, farmacevtsko sprejemljive komponente, izbrane iz skupine: prenašalnih ligandov, pufrov, liofilizacijskih sredstev, stabilizacijskih sredstev, sredstev za raztapljanje in bakteriostatikov.
  7. 8. Komplet za pripravljanje radiofarmacevtika, ki obsega: (a) vnaprej določeno količino sterilnega, farmacevtsko sprejemljivega reagenta po kateremkoli od zahtevkov 1-6; (b) vnaprej določeno količino dveh sterilnih, farmacevtsko sprejemljivih pomožnih ligandov; (c) vnaprej določeno količino sterilnega, farmacevtsko sprejemljivega reducenta; in (d) opcijsko, vnaprej določeno količino sterilne, farmacevtsko sprejemljive komponente, izbrane iz skupine: prenašalnih ligandov, -99- pufrov, liofilizacijskih sredstev, stabilizacijskih sredstev, sredstev za raztapljanje in bakteriostatikov.
  8. 9. Stabilna hidrazonska spojina koristna za sintezo reagentov po zahtevku 1, ki ima formulo: R44(C=O)s(R45)N-N=CR80R81 pri čemer: je s 0 ali 1; je R44 izbran iz skupine: arila substituiranega z 1 R59; in heterocikla substituiranega z 1 R59; je R45 izbran iz skupine: vodika in CrC6 alkila, je R59 kemijsko reaktiven del molekule izbran iz skupine: alkila substituiranega s halogenom; kislinskega anhidrida; kislinskega halida; aktivnega estra; izotiocianata; maleimida; sta R80 in R81 neodvisno izbrana iz skupine: -100- Η; CrCi0 alkila; -CN; -C02R85; -C(=0)R85; -C(=0)N(R85)2; C2-C10 1-alkena substituiranega z 0-3 R84; C2-C10 1-alkina substituiranega z 0-3 R84; arila substituiranega z 0-3 R84; nenasičenega heterocikla substituiranega z 0-3 R84; in nenasičenega karbocikla substituiranega z 0-3 R84; pod pogojem da, ko je eden od R80 in R81 H ali alkil, potem drugi ni H ali alkil; ali, alternativno, sta R80 in R81 lahko združena s prikazanim dvovalentnim ogljikovim radikalom, da se tvori:
    n pri čemer: sta R82 in R83 ob vsakem pojavu neodvisno izbrana iz skupine:
    -101- CrCi0 alkila substituiranega z 0-3 R84; C2-C10 alkenila substituiranega z 0-3 R84; C2-C10 alkinila substituiranega z 0-3 R84; arila substituiranega z 0-3 R84; heterocikla substituiranega z 0-3 R84; in karbocikla substituiranega z 0-3 R84; ali, alternativno, sta R82, R83 lahko združena, da se tvori združen aromatski ali heterociklični obroč; in a in b kažeta položaja opcijskih dvojnih vezi; je n 0 ali 1, je R84 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: =0, F, Cl, Br, J, -CF3, -CN, -C02R85, -C(=0)R85, -C(=0)N(R85)2, -CH2OR85, -0C(=0)R85, -0C(=0)0R85a, -OR85, -0C(=0)N(R85)2, -NR85C(=0)R85, - N R86C (=O) OR85a, -NR85C(=0)N(R85)2, -S03Na, -NR86S02N(R85)2, -NR86S02R85a, -S03H, -S02R85a, -SR85, -S(=0)R85a, -S02N(R85)2, -N(R85)2, N(R85)3+j -NHC(=NH)NHR85, -C(=NH)NHR85, =NOR85, -C(=0)NH0R85, -0CH2C02H, 2-(1-morfolino)etoksi; so R85, R85a, in R86 ob vsakem pojavu neodvisno izbrani iz skupine: vodika, CrC6 alkila. -102-
  9. 10. Spojina po zahtevku 9, pri čemer: s = 0; R59 je izbran iz skupine: o o
    c— o o
    o je' R80 neodvisno izbran iz skupine: -C02R85; C2-C5 1-alkena substituiranega z 0-3 R84; C2-C5 1-alkina substituiranega z 0-3 R84; arila substituiranega z 0-3 R84; nenasičenega heterocikla substituiranega z 0-3 R84; je R81 neodvisno izbran iz skupine: H in CrC5 alkila; ali, alternativno, sta R80 in R81 lahko združena s prikazanim dvovalentnim ogljikovim radikalom, da se tvori
    n -103- pri čemer sta R82 in R83 lahko neodvisno izbrana iz skupine: H in R84; ali, alternativno, R82, R83 sta lahko združena, da se tvori združen aromatski ali heterociklični obroč; in a in b kažeta položaja opcijskih dvojnih vezi; n je 0 ali 1, je R84 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: -C02R85, -C(=0)N(R85)2, -CH2OR85, -0C(=0)R85, -OR85, -S03H, -S03Na, -N(R85)2, -0CH2C02H; je R85 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: vodika in CrC3 alkila.
  10. 11. Spojina po zahtevku 10, pri čemer: je R80 neodvisno izbran iz skupine: -C02R85; C2-C3 1-alkena substituiranega z 0-1 R84; arila substituiranega z 0-1 R84; nenasičenega heterocikla substituiranega z 0-1 R84; je R81 H; -104- je R84 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: -C02R85, -OR85, -S03H, -S03Na, -N(R85)2; je R85 ob vsakem pojavu neodvisno izbran iz skupine: H in metila.
  11. 12. Spojine po zahtevku 9, ki so:
    -105-
    NMe2
    -106- STABILNI REAGENTI ZA PRIPRAVO RADIOFARMACEVTIKOV IZVLEČEK Ta izum zagotavlja nove reagente za pripravo radiofarmacevtikov, ki so koristni kot sredstva za slikanje za diagnozo kardiovaskularnih motenj, infekcije, vnetja in raka, diagnostične komplete, ki obsegajo navedene reagente in intermediarne spojine, koristne za pripravo navedenih reagentov. Reagenti so sestavljeni iz s stabilnim hidrazonom modificiranih biološko aktivnih molekul, ki reagirajo z radioizotopi, ki emitirajo gama žarke, da se tvorijo radiofarmacevtiki, ki se selektivno lokalizirajo na mesta bolezni in tako omogočajo, da se z uporabljanjem gama scintigrafije dobi slika teh mest.
SI9620076A 1995-06-07 1996-06-07 Stabilni reagenti za pripravo radiofarmacevtikov SI9620076B (sl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/476,296 US5750088A (en) 1993-03-30 1995-06-07 Stable hydrazones linked to a peptide moiety as reagents for the preparation of radiopharmaceuticals
PCT/US1996/009766 WO1996040637A1 (en) 1995-06-07 1996-06-07 Stable reagents for the preparation of radiopharmaceuticals

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SI9620076A true SI9620076A (sl) 1998-08-31
SI9620076B SI9620076B (sl) 2000-02-29

Family

ID=23891282

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SI9620076A SI9620076B (sl) 1995-06-07 1996-06-07 Stabilni reagenti za pripravo radiofarmacevtikov

Country Status (29)

Country Link
US (2) US5750088A (sl)
EP (1) EP0832068B1 (sl)
JP (1) JPH11507364A (sl)
KR (1) KR19990022573A (sl)
CN (1) CN1192733A (sl)
AR (1) AR003959A1 (sl)
AT (1) ATE233241T1 (sl)
AU (1) AU718683B2 (sl)
BR (1) BR9609003A (sl)
CA (1) CA2222183A1 (sl)
CZ (1) CZ380197A3 (sl)
DE (1) DE69626392T2 (sl)
EA (1) EA000742B1 (sl)
EE (1) EE9700313A (sl)
ES (1) ES2193245T3 (sl)
HR (1) HRP960250A2 (sl)
HU (1) HUP9901469A3 (sl)
IL (1) IL118468A0 (sl)
LT (1) LT4380B (sl)
LV (1) LV12044B (sl)
MX (1) MX9709126A (sl)
MY (1) MY133974A (sl)
NO (1) NO975678L (sl)
NZ (1) NZ310799A (sl)
PL (1) PL323995A1 (sl)
SI (1) SI9620076B (sl)
SK (1) SK163497A3 (sl)
WO (1) WO1996040637A1 (sl)
ZA (1) ZA964854B (sl)

Families Citing this family (43)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0888130B1 (en) * 1996-03-13 2003-07-02 Bristol-Myers Squibb Pharma Company New ternary radiopharmaceutical complexes
DE69722038T2 (de) * 1996-10-07 2004-02-19 Bristol-Myers Squibb Pharma Co. Radiopharmazeutische mittel zur bildgebung von infektionen und entzündungen
US6416733B1 (en) * 1996-10-07 2002-07-09 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Radiopharmaceuticals for imaging infection and inflammation
US20030124053A1 (en) * 1996-10-07 2003-07-03 Barrett John Andrew Radiopharmaceuticals for imaging infection and inflammation
US6403054B1 (en) 1997-05-28 2002-06-11 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Ternary ligand complexes useful as radiopharmaceuticals
US6537520B1 (en) * 1998-03-31 2003-03-25 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Pharmaceuticals for the imaging of angiogenic disorders
US6524553B2 (en) 1998-03-31 2003-02-25 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Quinolone vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals
CA2326978A1 (en) * 1998-04-03 1999-10-14 Milind Rajopadhye Radiopharmaceuticals for imaging infection and inflammation and for imaging and treatment of cancer
HRP990317A2 (en) * 1998-10-13 2000-06-30 Du Pont Pharm Co A process for the preparation of a thrombus imaging agent
US6511649B1 (en) 1998-12-18 2003-01-28 Thomas D. Harris Vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals
AU766822B2 (en) 1998-12-18 2003-10-23 Du Pont Pharmaceuticals Company Vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals
WO2000035887A2 (en) * 1998-12-18 2000-06-22 Du Pont Pharm Co Vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals
US6794518B1 (en) * 1998-12-18 2004-09-21 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals
AU4027800A (en) * 1999-03-26 2000-10-16 Du Pont Pharmaceuticals Company Method for localization of blood clots
US6808698B1 (en) 1999-03-26 2004-10-26 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Method for localization of blood clots
US6656448B1 (en) 2000-02-15 2003-12-02 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Matrix metalloproteinase inhibitors
US20030220646A1 (en) * 2002-05-23 2003-11-27 Thelen Sarah L. Method and apparatus for reducing femoral fractures
US6534038B2 (en) 2000-04-07 2003-03-18 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Ternary ligand complexes useful as radiopharmaceuticals
HUP0400758A3 (en) * 2000-11-03 2005-02-28 Bristol Myers Squibb Pharma Co Simultaneous dual isotope imaging of cardiac perfusion and cardiac inflammation
GB0031592D0 (en) * 2000-12-28 2001-02-07 Nycomed Amersham Plc Stabilised radiopharmaceutical compositions
US6838074B2 (en) 2001-08-08 2005-01-04 Bristol-Myers Squibb Company Simultaneous imaging of cardiac perfusion and a vitronectin receptor targeted imaging agent
AU2002331042B2 (en) * 2001-08-08 2007-10-25 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Simultaneous imaging of cardiac perfusion and a vitronectin receptor targeted imaging agent
US7297709B2 (en) 2003-05-22 2007-11-20 Abbott Laboratories Indazole, benzisoxazole, and benzisothiazole kinase inhibitors
US7319149B2 (en) * 2003-06-13 2008-01-15 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Chelants and macrocyclic metal complex radiopharmaceuticals thereof
US7317104B2 (en) 2003-06-13 2008-01-08 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Chelants and macrocyclic metal complex radiopharmaceuticals thereof
CA2783275A1 (en) * 2003-07-24 2005-02-03 Bracco Imaging S.P.A. Stable radiopharmaceutical compositions and methods for their preparation
US20050106100A1 (en) * 2003-09-03 2005-05-19 Harris Thomas D. Compounds containing matrix metalloproteinase substrates and methods of their use
WO2007005491A1 (en) * 2005-06-30 2007-01-11 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Hydrazide conjugates as imaging agents
WO2007046411A1 (ja) * 2005-10-19 2007-04-26 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. イソキサゾール化合物の安定化方法
US7465795B2 (en) * 2005-12-20 2008-12-16 Astrazeneca Ab Compounds and uses thereof
ES2391472T3 (es) * 2005-12-20 2012-11-27 Astrazeneca Ab Derivados de cinnolina sustituidos como moduladores del receptor de GABAA y método para su síntesis
WO2008083491A1 (en) 2007-01-11 2008-07-17 Critical Outcome Technologies Inc. Compounds and method for treatment of cancer
US8138191B2 (en) * 2007-01-11 2012-03-20 Critical Outcome Technologies Inc. Inhibitor compounds and cancer treatment methods
TW200911760A (en) * 2007-06-19 2009-03-16 Astrazeneca Ab Compounds and uses thereof
WO2009079797A1 (en) 2007-12-26 2009-07-02 Critical Outcome Technologies, Inc. Compounds and method for treatment of cancer
ES2511917T3 (es) * 2008-12-29 2014-10-23 Sanofi Derivados de 2-piridin-2-il-pirazol-3(2H)-ona, su preparación y su aplicación en terapéutica
JP5734870B2 (ja) 2008-12-29 2015-06-17 サノフイ ２−ピリジン−２−イル−ピラゾール−３（２ｈ）−オンの誘導体、これらの調製およびｈｉｆ活性化剤としての治療用途
FR2940652B1 (fr) * 2008-12-29 2011-02-11 Sanofi Aventis Derives de 2-pyridin-2-yl-pyrazol-3(2h)-one,leur preparation et leur application en therapeutique
FR2949468B1 (fr) * 2009-08-28 2011-09-30 Sanofi Aventis Derives de 2-pyridin-2-yl-pyrazol-3(2h)-one, leur preparation et leur application en therapeutique
CA2999435A1 (en) 2010-04-01 2011-10-06 Critical Outcome Technologies Inc. Compounds and method for treatment of hiv
FR2967671A1 (fr) * 2010-11-24 2012-05-25 Pf Medicament Complexe de technetium 99m en tant qu'outil de diagnostic in vivo des tumeurs cancereuses
CN110818624B (zh) * 2019-11-22 2022-11-22 华东理工大学 吡啶季铵盐腙类化合物及制备方法与在抗菌或香料缓释中的应用
CN112999369B (zh) * 2021-03-03 2022-02-25 江苏元本生物科技有限公司 一种her2亲合体放射性核素标记物组合物及其应用

Family Cites Families (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4427646A (en) 1981-04-02 1984-01-24 Research Corporation Use of radiolabeled peptide derived from crosslinked fibrin to locate thrombi in vivo
US4792525A (en) 1982-08-04 1988-12-20 La Jolla Cancer Research Foundation Tetrapeptide
US4578079A (en) 1982-08-04 1986-03-25 La Jolla Cancer Research Foundation Tetrapeptide
CA1300608C (en) * 1985-05-10 1992-05-12 Edward A. Deutsch 99 mtc (iii) myocardial imaging agents which are non-reducable in vivo
GB8624272D0 (en) * 1986-10-09 1986-11-12 Amersham Int Plc Cationic complexes of tc-99m
US5217705A (en) 1987-09-25 1993-06-08 Neorx Corporation Method of diagnosing blood clots using fibrin-binding proteins
DE3855458T2 (de) 1987-12-10 1996-12-05 Jolla Cancer Res Found Verfahren zur herstellung von conformationnell stabilisierten zelladhäsionspeptiden
JPH07110869B2 (ja) * 1988-03-09 1995-11-29 セ・イ・エス・ビオ・アンテルナシヨナル 放射性医薬品として使用できる９９ｍＴｃ、１８６Ｒｅまたは１８８Ｒｅの窒化物錯体の製造方法
GB8808414D0 (en) * 1988-04-11 1988-05-11 Amersham Int Plc Ligands & cationic complexes thereof with technetium-99m
EP0412115A4 (en) 1988-04-29 1991-11-13 New England Deaconess Hospital Corporation Hybrid peptides and methods of their use
US5002754A (en) * 1988-06-15 1991-03-26 University Of Cincinnati Technetium (III/II) imaging agents
WO1990003391A1 (en) 1988-09-29 1990-04-05 Biogen, Inc. Hirudin peptides
US5066789A (en) * 1988-09-30 1991-11-19 Neorx Corporation Targeting substance-diagnostic/therapeutic agent conjugates having Schiff base linkages
US5270030A (en) 1988-12-29 1993-12-14 Bio-Technology General Corp. Fibrin binding domain polypeptide and method of producing
GB8902362D0 (en) * 1989-02-03 1989-03-22 Amersham Int Plc Cationic complexes of technetium-99m
IL93432A (en) * 1989-02-24 1994-02-27 Johnson Mathey Inc Hydrazines and hydrazides, their conjugates with macromolecules, and such conjugates labeled with metallic ions
US5206370A (en) * 1989-02-24 1993-04-27 Johnson Matthey, Inc. Certain pyridyl hydrazines and hydrazides useful for protein labeling
US4957728A (en) * 1989-05-19 1990-09-18 University Of Cincinnati Kit for preparing Tc (III)-99m myocardial imaging agents that are effective in humans
US4917879A (en) * 1989-05-19 1990-04-17 University Of Cincinnati 99MTC(III) myocardial imaging agents that are effective in humans
GB8914020D0 (en) 1989-06-19 1989-08-09 Antisoma Ltd Synthetic peptides for use in thrombus detection
EP0410537A1 (en) 1989-07-28 1991-01-30 Merck & Co. Inc. Fibrinogen receptor antagonists
GB8919488D0 (en) * 1989-08-29 1989-10-11 Amersham Int Plc New cores for technetium radiopharmaceuticals
ZA907743B (en) 1989-10-03 1991-07-31 Merrell Dow Pharma Radiolabeled anticoagulant peptides
US5086069A (en) 1990-02-05 1992-02-04 Rorer Pharmaceutical Corporation Anti-thrombotic peptide and pseudopeptide derivatives
US5137877B1 (en) * 1990-05-14 1996-01-30 Bristol Myers Squibb Co Bifunctional linking compounds conjugates and methods for their production
FR2664166A1 (fr) * 1990-07-04 1992-01-10 Cis Bio Int Procede de preparation de complexes nitruro de metaux de transition utilisables comme produits radiopharmaceutiques ou pour la synthese de nouveaux produits radiopharmaceutiques.
IL99537A (en) 1990-09-27 1995-11-27 Merck & Co Inc Fibrinogen receptor antagonists and pharmaceutical preparations containing them
AU8730691A (en) * 1990-09-28 1992-04-28 Neorx Corporation Polymeric carriers for release of covalently linked agents
US5112594A (en) * 1991-04-04 1992-05-12 Mallinckrodt Medical, Inc. Kit for preparing a technetium-99m myocardial imaging agent
DE69230525T2 (de) 1991-02-08 2000-06-21 Diatide Inc Technetium-99m markierte Polypeptide zur Bildformung
FR2679452B1 (fr) * 1991-07-22 1993-11-12 Cis Bio International Produit radiopharmaceutique ayant notamment un tropisme cerebral, comportant un complexe nitruro d'un metal de transition, et son procede de preparation.
US5362852A (en) * 1991-09-27 1994-11-08 Pfizer Inc. Modified peptide derivatives conjugated at 2-hydroxyethylamine moieties
DK0641222T3 (da) 1992-05-21 2000-12-11 Diatide Inc Peptider mærket med technetium-99m til trombeafbildning
GB2268494B (en) 1992-07-08 1996-08-21 Kenneth Francis Prendergast Imaging compositions
FR2698272B1 (fr) * 1992-11-20 1994-12-30 Cis Bio Int Procédé de marquage cellulaire au moyen de complexes nitruro-bis (dithiocarbamato)Tc-99m et trousse pour la mise en Óoeuvre de ce procédé.
US5879657A (en) * 1993-03-30 1999-03-09 The Dupont Merck Pharmaceutical Company Radiolabeled platelet GPIIb/IIIa receptor antagonists as imaging agents for the diagnosis of thromboembolic disorders

Also Published As

Publication number Publication date
PL323995A1 (en) 1998-04-27
DE69626392T2 (de) 2004-04-22
BR9609003A (pt) 1999-12-14
US6015904A (en) 2000-01-18
WO1996040637A1 (en) 1996-12-19
CN1192733A (zh) 1998-09-09
EE9700313A (et) 1998-06-15
AR003959A1 (es) 1998-09-30
AU6166196A (en) 1996-12-30
IL118468A0 (en) 1996-09-12
EP0832068B1 (en) 2003-02-26
ZA964854B (en) 1997-12-08
EP0832068A1 (en) 1998-04-01
EA199800025A1 (ru) 1998-06-25
CZ380197A3 (cs) 1998-07-15
AU718683B2 (en) 2000-04-20
SK163497A3 (en) 1998-10-07
HUP9901469A3 (en) 2000-02-28
US5750088A (en) 1998-05-12
JPH11507364A (ja) 1999-06-29
NO975678D0 (no) 1997-12-05
CA2222183A1 (en) 1996-12-19
SI9620076B (sl) 2000-02-29
MX9709126A (es) 1998-03-31
LV12044B (en) 1998-09-20
DE69626392D1 (de) 2003-04-03
LT4380B (lt) 1998-09-25
HUP9901469A2 (hu) 1999-08-30
ATE233241T1 (de) 2003-03-15
NZ310799A (en) 2000-01-28
KR19990022573A (ko) 1999-03-25
ES2193245T3 (es) 2003-11-01
LV12044A (lv) 1998-05-20
NO975678L (no) 1998-02-06
EA000742B1 (ru) 2000-02-28
LT97191A (en) 1998-04-27
MY133974A (en) 2007-11-30
HRP960250A2 (en) 1997-12-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SI9620076A (sl) Stabilni reagenti za pripravo radiofarmacevtikov
US5744120A (en) Ternary radiopharmaceutical complexes
US6713042B2 (en) Ascorbic acid analogs for metalloradiopharmaceuticals
US5879659A (en) Ternary radiopharmaceutical complexes
US6524554B1 (en) Radiopharmaceuticals for imaging infection and inflammation and for imaging and treatment of cancer
EP0888130B1 (en) New ternary radiopharmaceutical complexes
US7319149B2 (en) Chelants and macrocyclic metal complex radiopharmaceuticals thereof
US20030152512A1 (en) Imaging thrombus with glycoprotein llb/llla antagonists
HRP970139A2 (en) New ternary radiopharmaceutical complexes