CZ380197A3 - Stabilní činidla pro přípravu radiofarmak - Google Patents
Stabilní činidla pro přípravu radiofarmak Download PDFInfo
- Publication number
- CZ380197A3 CZ380197A3 CZ973801A CZ380197A CZ380197A3 CZ 380197 A3 CZ380197 A3 CZ 380197A3 CZ 973801 A CZ973801 A CZ 973801A CZ 380197 A CZ380197 A CZ 380197A CZ 380197 A3 CZ380197 A3 CZ 380197A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- group
- substituted
- independently
- occurrence
- alkyl
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
- C07D213/81—Amides; Imides
- C07D213/82—Amides; Imides in position 3
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/082—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins the peptide being a RGD-containing peptide
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/088—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins conjugates with carriers being peptides, polyamino acids or proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
- C07B59/00—Introduction of isotopes of elements into organic compounds ; Labelled organic compounds per se
- C07B59/008—Peptides; Proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- C07K14/75—Fibrinogen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2123/00—Preparations for testing in vivo
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
Předložená přihláška je pokračováním části naší související projednávané přihlášky U.S.S.N. 08/040,336 podané 28.března 1994, která je pokračováním části přihlášky U.S.S.N. 08/218,861, podané 30.března 1993, které jsou v příloze včleněny do tohoto textu odkazem.
Vynález se týká nových činidel pro přípravu radiofarmak vhodných jako zobrazovacích prostředků v diagnostice kardiovaskulárních chorob, infekce, zánětu a rakoviny, diagnostických kitů obsahujících uvedená činidla a meziproduktových sloučenin vhodných pro přípravu těchto činidel. Tato činidla obsahují stabilní hydrazonem modifikované biologicky aktivní molekuly, které reagují s radioisotopy emitujícími gama záření za tvorby radiofarmak, která se selektivně lokalizují v místech choroby a použitím gama scintigrafie je tak umožněno tato místa zobrazit.
Dosavadní stav techniky
V současné době existuje potřeba nových způsobů neinvasivních diagnos různých chorob jako je tromboembo1 ická choroba, aterosklerosa, infekce a rakovina. Tento účel mohou splnit radiofarmaka obsahující biologicky aktivní molekuly značené radionuklidem emitujícím gama zářeni. Uvedené biologicky aktivní molekuly slouží k lokalizaci radionuklidů v místech choroby a tak umožňují vizualizaci těchto míst pomocí gama scintigrafie. Tyto molekuly mohou být proteiny, protilátky, fragmenty protilátek, peptidy nebo polypeptidy, nebo peptidomimetika. Tyto molekuly interagují s receptorem nebo s vazebným místem exprimovaným v místech choroby, nebo s receptorem nebo vazebným místem v endogenní krevní složce jako jsou destičky a leukocyty, které se v těchto místech akumulují. Tato interakce má za následek selektivní lokalizaci podílu injektovaného radiofarmaka, zatímco zbytek se vyloučí bud renálním nebo hepatobi1iárním systémem. Lokalizované radiofarmakum se pak zobrazí externě použitím gama scinti graf ie. Relativní stupně lokalizace, klírens a rozpadu radionuklidu určují snadnost vizualizace, často vyjadřované pomocí poměru cíl-pozadí. Často se k receptorům váží pouze určité části těchto biologicky aktivních látek; tyto části se označují jako poznávací sekvence nebo j ednotky.
Ve vývoji je mnoho radiofarmak obsahujících radionuklidem značené proteiny, protilátky nebo fragmenty protilátek, nicméně v současnosti existuje pouze jedno, schválené Food and Drug Administration. Toto nízké číslo vyplývá z kombinace faktorů, které činí vývoj těchto radiofarmak obtížný a které zahrnují problémy spojené s jejich výrobou a kontrolou kvality, neoptimální vylučování a hodnoty klírens, a výskyt antigenních a alergických reakcí na tato radiofarmaka. Tyto problémy jsou převážně způsobeny makromolekulární podstatou těchto proteinů, protilátek a fragmentů protilátek. Jejich vysoká molekulová hmotnost činí přímou chemickou syntézu v praxi neproveditelnou a je nutné je tedy syntetizovat rekombinantními nebo klonovacími technikami, které obvykle poskytují nízké výtěžky a současně vyžadují rozsáhlé izolační a čistící postupy. Jejich molekulová hmotnost může zpomalovat jejich stupeň lokalizace a omezovat jejich klírens aktivním eliminačním mechanismem přes ledviny nebo játra, z čehož vyplývá prodloužená retence těchto látek v cirkulačním systému působící vysoké hodnoty pozadí během zobrazování. Také imunitní systém organismu má sklon účinněji rozpoznávat větší exogenní prvky.
Použití peptidů , polypeptidů nebo peptidomimetik o nižší molekulové hmotnosti jako biologicky aktivních molekul předchází mnoha těmto problémům. Tyto molekuly lze syntetizovat přímo, použitím klasických chemických způsobů nebo pomocí automatizovaného syntetizéru peptidů. Lze je připravit ve vysokých výtěžcích a v těchto postupech se používají méně složité způsoby čištění. Tyto látky mají sklon se rychleji vylučovat z oběhu aktivní eliminační cestou což vede k nižšímu pozadí při zobrazování. Rovněž obvykle nejsou imunogenní. První radiofarmakum, obsahující radionuklidem značený polypeptid, bylo nedávno schváleno Food and Drug Administrati on.
Existují dva obecné způsoby značení biologicky aktivních molekul radionuklidy pro použití jako radiofarmaka, označované jako značení přímé a značení nepřímé. Přímé značení zahrnuje připojení radionuklidu k atomům biologicky aktivní molekuly; zatímco nepřímé značení zahrnuje připojení radionuklidu přes chelatační činidlo. Toto chelatační činidlo se může připojit k biologicky aktivní molekule před reakcí s radíonuklidem nebo se radionuklidem značená část chelatačního činidla může připojit k biologicky aktivní molekule. Tyto značící postupy jsou uvedeny v několika současných přehledech, které jsou do tohoto textu včleněny odkazem: S.Jurisson a sp., Chem.Rev., 1993, 93, 1137; A. Verbruggen, Eur.J.Nuc.Med., 1990, 17, 346; a M. Derwanjee, Semin.Nuc.Med., 1990, 20.
Použití hydrazinů a hydrazidů jako chelatačních činidel k modifikaci proteinů pro značení s radionuklidy bylo nyní uvedeno v U.S.patentu 5,206,370, Schwartz a sp. Protein se modifikuje reakcí s bifunkčními aromatickými hydraziny nebo hydrazidy majícími protein-reaktivní substituent. Pro značení s techneciem-99m se hydrazinem modifikovaný protein nechá reagovat s redukovanými formami technecia vzniklými reakcí technecistanu s redukčním činidlem za přítomnosti chelatačního dikyslíkového ligandu. Technecium se navazuje na protein přes jak se předpokládá, hydrazidové nebo diazenidové spojení s koordinační sférou dotvořenou doplňkovými dikys1íkatými ligandy. Příklady těchto doplňkových dikys1íkatých ligandů zahrnují glukoheptonat, glukonat, 2-hydroxyisohutyrat a laktat.
Podle jednoho provedení vynálezu autorů Schwartz a sp., je bifunkční aromatický hydrazin v chráněné formě jako nižší alkylhydrazon. To se provádí k zamezení křížové reakce mezi hydrazinem nebo hydrazidem a protein-reaktivním substituentem, protože při nepřítomnosti chránící skupiny bifunkční sloučenina reaguje s proteinem za tvorby proteinu modifikovaného hydrazonem. Volná hydrazinová nebo hydrazidová skupina na proteinu pak vznikně dialýzou v kyselém pufru (pH 5,6) a smísením s vhodnými formami kovu, jako jsou redukované druhy technecia, se získá značkovaný protein.
Ačkoliv nižší alkylová skupina chránící hydrazon zabraňuje křížové reakci mezi hydrazinem nebo hydrazidem a protein-reaktivním substituentem, může dojít k náhradě jinými aldehydy a ketony za tvorby jiných hydrazonů. To je vážná a významná nevýhoda. Přítomnost dalších aldehydů a ketonů v malých množstvích je v komerční farmaceutické výrobě nevyhnutelná, protože se vyluhují z různých plastových a pryžových materiálů a často se používají jako obvyklé desinfekční prostředky. Zvláště běžně se vyskytují malá množství formaldehydu. Proto činidla obsahující nižším alkylem chráněný hydrazon-bio 1ogicky aktivní molekuly mohou degradovat na mnoho druhů jiných hydrazonů v závislosti na počtu a množství dalších aldehydů a ketonů se kterými přijdou do styku při zpracování nebo výrobě nebo při skladování po výrobě. To představuje významný problém pro zachování čistoty těchto činidel a činidla s nižší alkylovou • ·
chránící skupinou nemají z tohoto důvodu perspektivu se stát obchodně atraktivními výrobky.
Podstata vynálezu
Vynález poskytuje nová činidla pro přípravu radiofarmak obsahující stabilní hydrazonem modifikované biologicky aktivní molekuly. Tyto stabilní hydrazony nereagují ve znatelné míře s dalšími aldehydy a ketony, čímž se během výroby zachovává jejich čistota. Překvapivě však tato stabilní hydrazonová činidla jsou stále ještě dost reaktivní pro značení radionuklidy jako je technec ium-99m.
Vynález se týká nových činidel pro přípravu radiofarmak vhodných jako zobrazovacíc prostředku pro diagnosu kardiovaskulárních chorob, infekce, zánětu a rakoviny. Tato činidla se skládají ze stabilních hydrazonem modifikovaných biologicky aktivních molekul, které reagují s radioisotopy emitujícími gama záření za tvorby radiofarmak, která se selektivně lokalizují na místech choroby a pomocí gama scintigrafie lze tímto způsobem získat obraz těchto míst. Tento stabilní hydrazon slouží jako chránící skupina pro chelatační nebo vazebnou jednotku činidel a zabraňuje rozkladu nebo degradaci během výrobního procesu. Tento vynález rovněž poskytuje diagnostické kity obsahující tato činidla. Vynález také poskytuje nové meziproduktové sloučeniny vhodné pro přípravu uvedených činidel.
Popis obrázků na připojených nákresech
Na obrázku 1 je uvedeno srovnání stability sloučeniny podle příkladu 1 za přítomnosti 10 ekvivalentů formaldehydu vzhledem k nižší alky1-hydrazonové sloučenině, cyklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp φ φ φ φ
Mamb(hydraz inonikot iny1-5-Aca))propionaldehydhydrazonu
Podrobný popis vynálezu
Vynález poskytuje nová činidla pro přípravu radiofarmak vhodných jako zobrazovací prostředky pro diagnosu kardiovaskulárních chorob, zánětu a rakoviny, diagnostické kity obsahující uvedená činidla a meziproduktové sloučeniny vhodné pro přípravu uvedených činidel. Tato činidla obsahují stabilní hydrazonem modifikované biologicky aktivní molekuly, které reagují s radioisotopy emitujícími gama záření za tvorby radiofarmak, která se lokalizují na chorobných místech a tak umožňují pomocí gama scintigrafie získávat obraz těchto míst.
(1) Podle jednoho provedení podle vynálezu činidlo pro přípravu radiofarmaka obsahuje biologicky aktivní skupinu připojenou na stabilní hydrazonovou skupinu, případně zahrnující spojovací skupinu mezi uvedeným stabilním hydrazonem a uvedenou biologicky aktivní skupinou.
(2) Dalším provedením podle vynálezu je činidlo provedení (1) mající spojovací skupinu mezi uvedeným hydrazonem a uvedenou biologicky aktivní skupinou.
podl e stabilním (3) Dalším provedením podle vynálezu je činidlo podle provedení (2) mající vzorec:
(Q)ďLn-Hz a jeho farmaceuticky přijatelné soli, kde
Q znamená biologicky aktivní skupinu;
• · • · • · ······ • · · · · · · · · · · • · · ···· · · · · • · ·· · ·· ···· · • · ·· · · · · ··· ··· ·· ··· ·· ·· d' znamená 1-20;
Ln znamená spojovací skupinu vzorce:
M1 - [Y1 (CR5 5R5 6) f (Z i) f Ύ2] f '-M2 , kde :
Mi znamená -[(CH2)gZi]g--(CR55R5&)g --;
M2 znamená -(CR55R56)g ’-[Z1(CH2)ε]g’-;
g nezávisle znamená 0-10;
g' nezávisle znamená 0-1;
g1' nezávisle znamená 0-10;
f nezávisle znamená 0-10;
f' nezávisle znamená 0-10;
f1' nezávisle znamená 0-1;
Y1 a Y2 se při každém výskytu nezávisle zvolí ze skupiny zahrnující:
vazbu, O, NR56, C=O, C(=O)O, OC(=O)O, C(=O)NH-, C=NR56, S, SO, S02, S03,
NHC(=O), (NH)2C(=O), (NH)2C=S;
Z1 se při každém výskytu nezávisle zvolí ze skupiny zahrnující:
• · ······ · · · · ·· * · · · · ···· • · ····· ···· • · ·· · ·· ···· · • · · · · ··· ··· ··· ·· ··· ·· ··
Ce —Ci4 nasycený, částečně nasycený, nebo aromatický karbocyklický kruhový systém, substituovaný 0-4 R57; a heterocyklický kruhový systém substituovaný 0-4 R57;
R55 a R56 se při každém výskytu nezávisle zvolí ze skupiny zahrnující;
vodík; Ci-Cio alkyl substituovaný 0-5 R57 alkaryl, kde aryl je substituován 0-5 R57
R57 se při každém výskytu nezávisle zvolí ze skupiny zahrnující:
vodík, OH, NHR58, C(=O)R58, OC(=O)R58, OC(=O)OR58, C(=O)OR58, C(=O)NR58, C=N, SR58, SOR58, SO2R58, NHC(=O)R58,
NHC(=0)NHR58, NHC(=S)NHR58; nebo alternativně při připojení k další molekule Q se R 57 nezávisle zvolí při každém výskytu ze skupiny zahrnující:
O, NR58, C=O, C(=O)O, OC(=O)O, C(=O)N~, C=NR58, S, SO, S02, S03, NHC(=O), (NH)2C(=O), (NH)2C=S; a
R58 se při každém výskytu nezávisle zvolí ze skupiny zahrnující:
vodík, Ci-Cď alkyl; benzyl a fenyl;
Hz je stabilní hydrazon vzorce:
• · ······ ·· ·· ·· ·· · · · ···· • · ····· ···· • · * · · ·· · · · ♦ · • · ·· · · · · ··· ··· ·· ··· ·· ··
R80 z
N=C
R*°-N R81 kde
R40 se při každém výskytu nezávisle zvolí ze skupiny zahrnuj ící:
vazbu na Ln, C1-C10 alkyl substituovaný 0-3 R52, ary1substituovaný 0-3 R52, cykloalkyl substituovaný 0-3 R52, heterocyklus substituovaný 0-3 R52, heterocykloalkyl substituovaný 0-3 R52, aralkyl substituovaný 0-3 R52 a alkaryl substituovaný 0-3 R52;
R41 se nezávisle zvolí ze skupiny zahrnující vodík, aryl substituovaný 0-3 R52, C1-C10 alkyl substituovaný 0-3 R52, a heterocyklus substituovaný 0-3 R52;
R52 se nezávisle zvolí při každém výskytu ze skupiny zahrnující: vazbu na Ln, =0, F,
Cl, Br, I, -CF3, -CN, -CO2R53, -C(=O)R53, -C(=0)N(R53)2 , -CHO, -CH2OR53( -OC(=O)R53 -OC(=O)OR53a, -OR53, -OC(=0)N(R53)2, -NR53C(=O)R53, —NR54C(=0)OR53a,
-NR53C(=0)N(R53)2, -NR54SO2N(R53)2, -NR54SO2R53a, -SO3H, -SO2R53a,-SR53, -S(=O)R53a, -SO2N(R53)2, N(R53)2,
-NHC(=NH)NHR53, -C(=NH)NHR53, =NOR53,
NO2, -C(=O)NHOR53, -C(=O)NHNR53R53a,
-OCH2CO2H, 2-(1-morfolino)ethoxy;
R53, R53a a R54 se každý při každém výskytu nezávisle zvolí ze skupiny zahrnující: vodík, C1-C6 alkyl a vazbu na Ln ;
R80 R81 se nezávisle zvolí ze skupiny zahrnující:
H;
Ci-Cio alkyl;
-CN;
-CO2R85;
-C(O)R85;
-C(=0)N(R85)2;
C2-C10 1-alken substituovaný 0-3 R84;
C2-C10 1-alkin substituovaný 0-3 R84; aryl substituovaný 0-3 R84;
nenasycený heterocyklus substituovaný 0-3 R84; a nenasycený karbocyklus substituovaný 0-3 R84; s výhradou, že jestliže jeden ze substituentu R80 a p>81 znamená H nebo alkyl, tak druhý neznamená H nebo alkyl;
nebo alternativně se mohou R80 a R81 spojit se znázorněným divalentním radikálem uhlíku za tvorby:
ve kterém:
• ·» ··«· • · · 4 4 • · r ··· • · · · · • · · · · · · · 4 4 4 • · · 4 • · · · • · · · • · · 4 · • 4 ·
4 4 4
R82 a p83 se mohou nezávisle vybrat ze skupiny zahrnuj ící:
H;
R8 4 ;
Ci-Cio alkyl substituovaný 0-3 R84;
C2-C10 alkenyl substituovaný 0-3 R84;
C2-C10 alkinyl substituovaný 0-3 R84; aryl substituovaný 0-3 R84;
heterocyklus substituovaný 0-3 R84; a karbocyklus substituovaný 0-3 R84;
nebo alternativně se R82, R83 mohou spojit za tvorby kondenzovaného aromatického nebo heterocyklického kruhu;
a a b indikují polohy případných dvojných vazeb a n j e 0 nebo 1,
R84 se nezávisle při každém výskytu zvolí ze skupiny zahrnující: =0, F, Cl,
Br, I, -CF3, -CN, -CO2R85, -C(=O)R85, -C(=O)N(R85)2, -N(R85)3+, -CH2OR85, -OC(=O)R85, -OC(=O)OR85a, -OR88,
-OC(=0)N(R85)2 , -NR85C(=0)R85, -NR8&C(=O)OR85a, -NR85C(=O)N(RS5)2,
-NR8&SO2N(R85)2, -NR86SO2R85a,
-SO3H, -SO2R85a, -SR88, -S(=O)R88a, -SO2N(R88)2, -N(R88)2,
-NHC(=NH)NHR88, -C(=NH)NHR88, =NOR88, -C(=0)NHOR88, -OCH2CO2H,
2-(1-morfolino)ethoxy; a
R88, R85a( a p86 se každý nezávisle při ·· · • · · · ·· »··· • · · • · ··· • · · · • · · ·· ··· ·· ·· • · · · • · ·· • *»·· · • · · *· ·· každém výskytu zvolí ze skupiny zahrnující: vodík. Ci-Cď alkyl.
(4) Dalším provedením vynálezu je činidlo podle provedení (3), kde
Q je biologicky aktivní molekula vybraná ze skupiny zahrnující: antagonisty receptoru Ilb/IIIa, ligandy receptorů Ilb/IIIa, peptidy vázající fibrin, peptidy vázající leukocyty, chemotaktické peptidy, analogy somatostatinu, a peptidy vázající selektin;
d' je 1 až 3;
Ln znamená:
-(CR55R56)g.,-[Yl(CR55R56)fγ2]f.-(CR55R56)g.
kde g ' ' je 0-5;
f je 0-5;
f’je 1-5;
Y1 a Y2 jsou nezávisle, při každém výskytu zvoleny ze skupiny zahrnující:
O, NR56, c=O, C(=O)O, 0C(=0)0, C(=O)NH-, C=NR56 S, SO, SO2, SO3, NHC(=O), (NH)2C(=O), (NH)2C=S;
R55 a R56 jsou nezávisle, při každém výskytu zvoleny ze skupiny zahrnující: vodík, C1-C10 alkyl, a • · · ···· · · · · • · ·· · ·· ···· · • · · · · ··· ··· ··· 9t ··· ·· ·· alkary1;
Hz je stabilní hydrazon vzorce
R80
N=C r40-n R81 'r41 kde
R40 je nezávisle, při každém výskytu zvolen ze skupiny zahrnující: aryl substituovaný 0-3 R52, heterocyklus substituovaný 0-3 R52;
R41 je nezávisle zvolen ze skupiny zahrnující: vodík, aryl substituovaný 0-1 R52, C1-C3 alkyl substituovaný 0-1 R52 a heterocyklus substituovaný 0-1 R52;
R52 je nezávisle, při každém výskytu vybrán ze skupiny zahrnující: vazbu na Ln,-CO2R53-CH2OR53, -SO3H, -SO2R53a, -N(R53)2,
-NHC(=NH)NHR53 a-OCH2CO2H;
R53, R53a jsou nezávisle při každém výskytu vybrány ze skupiny zahrnující: vodík a C1-C3 alkyl;
R80 je nezávisle, při každém výskytu zvolen ze skupiny zahrnující:
-CO2R85;
C2-C5 1-alken substituovaný 0-3 R84;
··· · · · · · ···
C2-C5 1-alkin substituovaný 0-3 R84; aryl substituovaný 0-3 R84;
nenasycený heterocyklus substituovaný 0-3 R84;
R81 je nezávisle, při každém výskytu zvolen ze skupiny zahrnující: H a C1-C5 alkyl;
nebo alternativně, R80 a R81 mohou společně s uvedeným divalentním uhlíkovým radikálem tvořit
kde R82 a R83 mohou být nezávisle zvoleny ze skupiny zahrnující; H a R84; nebo alternativně R82, R83 mohou společně tvořit kondensovaný aromatický nebo heterocyklický kruh;
a a b označují polohy případných dvojných vazeb a n j e 0 nebo 1,
R84 je nezávisle, při každém výskytu zvolen ze skupiny zahrnující: -CO2R85, -C(=O)N(R85)2, -CH2OR85, -OC(=O)R85, OR85, -SO3H, -N(R85)2, -OCH2CO2H;
R85 je nezávisle, při každém výskytu zvolen ze skupiny zahrnující vodík, C1-C3 alkyl.
(5) Dalším provedením vynálezu je činidlo podle provedení (4), kde
Q je biologicky aktivní molekula vybraná ze skupiny zahrnující: antagonisty receptoru Ilb/IIIa a chemotaktické peptidy;
ď je 1 ;
Ln znamená:
-(CR55R56)g,.-[Yl(CR55R56)fY2]f·-(CR55R56)g'·-, kde g 1 1 je 0-5;
f je 0-5;
f ' je 1-5;
Y1 a Y2 jsou nezávisle, při každém výskytu zvoleny ze skupiny zahrnující:
0, NR56, C=0, C(=0)0, 0C(=0)0, C(=0)NH-, C=NR5&, S, NHC(=O), (NH)2C(=O), (NH)2C=S;
R55 a p56 znamenají vodík;
Hz je stabilní hydrazon vzorce
R80
N=C
R40·^ R81
R41 kde
R40 je nezávisle, při každém výskytu zvolen ze skupiny zahrnuj ící:
heterocyklus substituovaný 0-3 R52;
R41 znamená vodík;
R52 znamená vazbu na Ln;
R80 je nezávisle, při každém výskytu zvolen ze skupiny zahrnující:
-CO2R85;
C2-C3 1-alken substituovaný 0-3 R84; aryl substituovaný 0-1 R84;
nenasycený heterocyklus substituovaný 0-1 R84;
R81 znamená vodík;
R84 je nezávisle, při každém výskytu zvolen ze skupiny zahrnující:
-CO2R85;
-OR88;
-SO3H;
-N(R85)2;
• · • · · · • · · · • · ·· «
R85 je nezávisle, při každém výskytu zvolen ze skupiny zahrnující: vodík a methyl.
(6) Další provedení podle vynálezu jsou činidla podle provedení (3) kterými jsou:
NH
!
• · · · · · · · * • · · · · • · · · · · · • · · · · · · > · · · · • · · · · · · ·
NH
I
H^N
SO3Na • · · * • · • ··· • · · · • · ··
COOH ·· ·· • · · · • · ·· • · · · · * · · ·· ··
o
co2h
• · » · · • · ··· · • » • · β
(7) Další provedení podle vynálezu je kit pro přípravu radiofarmaka zahrnující:
(a) předem určené množství sterilního, farmaceuticky přijatelného činidla podle kteréhokoli z nároků 1-6;
(b) předem určené množství jednoho nebo více sterilního, farmaceuticky přijatelného, doplňkového ligandu (ligandu);
(c) předem stanovené množství sterilního, farmaceuticky přijatelného redukčního činidla; a (d) předem stanovené množství sterilní, farmaceuticky přijatelné složky vybrané ze skupiny zahrnující: přenosové ligandy, pufry, lyofilisační prostředky, stabilizační prostředky, solubi1 izátory a bakteriostatika.
(8) Další provedení podle vynálezu je kit pro přípravu radiofarmaka zahrnující:
(a) předem určené množství sterilního, farmaceuticky přijatelného činidla podle kteréhokoli z nároků 1-6;
(b) předem určené množství dvou sterilních, farmaceuticky přijatelných, doplňkových ligandů;
(c) předem stanovené množství sterilního, farmaceuticky přijatelného redukčního činidla; a (d) předem stanovené množství sterilní, farmaceuticky přijatelné složky vybrané ze skupiny zahrnující: přenosové ligandy, pufry, lyofilisační prostředky, stabilizační prostředky, solubi1 izátory a bakteriostatika.
• · ·· ·· • · • · • · ··· ··* «4 44·· · · · ··· • · * 4· 4
444 • 4 ·· • 4 4 ·
4 4· • 4 4 4 4 4 • 4 4 • 4 ·· (9) Další provedení podle vynálezu je stabilní hydrazonová sloučenina vhodná pro syntézy činidel podle provedení (1-6) mající vzorec:
R44(C=O)s(R45)N-N=CR80R8i kde s j e 0 nebo 1
R44 je vybrán ze skupiny zahrnující: aryl substituovaný 1 R59; a heterocyklus substituovaný 1 R59;
R45 je vybrán ze skupiny zahrnující: vodík a Ci-Ce alkyl,
R59 je chemicky reaktivní složka vybraná ze skupiny zahrnuj ící:
alkyl substituovaný halogenem;
anhydrid kyseliny;
halid kyseliny;
aktivní ester;
i sothiokyanatan;
maleinimid;
R80 a psi jsou nezávisle vybrány ze skupiny zahrnující: H;
Ci-Cio alkyl;
-CN;
-CO2R85;
-C(=O)R85;
• f ······ ·· ·· •» · v ··· ···· • · 9 9 9 99 9 9 9 9 • · ·· · ·· · · · · · • · ·· · · · · ··· ··· ·· ··· 99 99
-C(=O)N(R85)2;
C2-C10 1-alken substituovaný 0-3 R84;
C2-C10 1-alkin substituovaný 0-3 R84; aryl substituovaný 0-3 R84;
nenasycený heterocyklus substituovaný 0-3 R84; a nenasycený karbocyklus substituovaný 0-3 R84; s výhradou, že jestliže jeden z R80 a R81 znamená vodík nebo alkyl, tak ten druhý neznamená vodík nebo alkyl;
nebo alternativně mohou R80 a R81 společně se znázorněným divalentním uhlíkovým radikálem tvořit:
kde:
R82 a R83 se nezávisle a při každém výskytu zvolí ze skupiny zahrnující:
H;
R84 ;
C1-C10 alkyl substituovaný 0-3 R84; C2-C10 aíkenyl substituovaný 0-3 R84; C2-C10 alkinyl substituovaný 0-3 R84; aryl substituovaný 0-3 R84;
heterocyklus susbtituovaný 0-3 R84; a karbocyklus substituovaný 0-3 R84;
nebo alternativně mohou R82 a R83 společně tvořit kondensovaný aromatický nebo heterocyklický kruh; a a a b indikují polohy případných dvojných vazeb;
n j e 0 nebo 1,
R84 se nezávisle a při každém výskytu zvolí ze skupiny zahrnující: =0, F, Cl, Br, I,
-CF3, -CN, -CO2R85, -C(=O)R85,
-C(=O)N(R85)2, -CH2OR85, -OC(=O)R85, -0C(=0)0R85a, -OR89, -0C(=0)N(R85)2,
-NR85C(=0)R85, -NR86C(=0)OR85a,
-NR85C(=0)N(R85)2, -SO3Na, -NR86SO2N(R85)2, -NR8&SO2R85a, -SO3H, -SO2R85a, -SR89,
-S(=O)R89a, ~S02N(R85)2, -N(R85)2, N(R89)3+ -NHC(=NH)NHR89, -C(=NH)NHR89, =NOR89,
-C(=0)NHOR89, -OCH2CO2H,
2-(l-morfolino)ethoxy;
R89, R89a a R86 se zvolí nezáisle a při každém výskytu ze skupiny zahrnující; vodík,
Ci-C6 alkyl.
(10) Dalším provedením tohoto vynálezu je sloučenina provedení (9) kde:
s = 0;
R se zvolí ze skupiny:
O
O • · · · · a a a a a a a • · · · · · · · a·· ··· · · · ·· * · · ’
R80 se nezávisle zvolí ze skupiny:
-CO2R85;
C2-C5 1-alken substituovaný 0-3 R84;
C2-C5 1-alkin substituovaný 0-3 R84; aryl substituovaný 0-3 R84;
nenasycený heterocyklus substituovaný 0-3 R84;
R81 se nezávisle zvolí ze skupiny: vodík a C1-C5 alkyl;
nebo alternativně R80 a R83 mohou společně se znázorněným divalentním uhlíkovým radikálem tvořit
n kde R82 a R83 se nezávisle zvolí ze skupiny:
H a R84;
nebo alternativně R82, R83 mohou společně tvořit kondensovaný aromatický nebo heterocyklický kruh; a a a b indikují polohy případných dvojných vazeb;
n j e 0 nebo 1,
R84 se nezávisle zvolí při každém výskytu ze skupiny: -CO2R85, -C(=O)N(R85)2, -CH2OR85, -OC(=O)R85, ··
4 «
4 4
4 4 4 ► 4 4 » · · · · · Τι · 4 4 44··
OR85, -SO3H, -SO3Na, -N(R85)2j -OCH2CO2H;
R85 se nezávisle zvolí při každém výskytu ze skupiny vodík, C1-C3 alkyl.
(11) Dalším provedením podle vynálezu je sloučenina provedení (10) kde:
R80 se nezávisle zvolí ze skupiny zahrnující:
-CO2R85;
C2-C3 1-alken substituovaný 0-1 R84; aryl substituovaný 0-1 R84;
nenasycený heterocyklus substituovaný 0-1 R84;
R81 znamená H;
R84 se nezávisle zvolí při každém výskytu ze skupiny: -CO2R85, -OR85, -SO3H, -SOsNa, -N(R85)2;
R88 se nezávisle zvolí při každém výskytu ze skupiny: H a methyl.
(12) Dalším provedením podle vynálezu jsou sloučeniny podle provedení (9), kterými jsou:
O
O • ···· · · ·· • · ·· · · · · « • · · · · · «· ··· «· ··
Jestliže kterýkoli z volitelných parametrů se vyskytuje více než jedenkrát v jakékoli složce nebo v kterémkoli vzorci, jeho definice při každém výskytu je nezávislá na jeho definici v ostatních vyskytujících se případech. Tak například, je-li uvedeno, že skupina má být substituována 0-2 R52, tak uvedená skupina může být případně substituována až 2 R52 a R52 při každém výskytu se zvolí nezávisle podle definovaného seznamu volitelných R52. Jako příklad lze také uvést skupinu -(R53)2, kde každý ze dvou substituentů na N se nezávisle zvolí z definovaného seznamu možných R53. Kombinace substituentů a/nebo proměnných jsou možné pouze tehdy, jestliže vedou ke stabilním sloučeninám.
Výraz stabilní sloučenina nebo stabilní struktura v tomto textu znamená sloučeninu, která je dostatečně robustní, aby odolala izolaci z reakční směsi ve vhodném stupni čistoty a rovněž zpracování do účinného diagnostického prostředku.
Výraz hydrazon použitý v tomto textu znamená složku, skupinu nebo sloučeninu definovanou tak, že obsahuje nejméně jeden divalentní uhlíkový radikál (nebo methylenovou skupinu) navázaný na atom dusíku hydrazinu nebo hydrazidu dvojnou vazbou.
Výraz substituovaný použitý v tomto textu znamená, že jeden nebo více vodíků určeného atomu nebo skupiny je nahrazen vybraným substituentem z definované skupiny za předpokladu, že u určeného atomu nebo skupiny nedojde k překročení normální valence a že substituce vede ke stabilní sloučenině. Jestliže substituentem je ketoskupina (t.j. =0), pak jsou na uvedeném atomu nahrazeny dva vodíky.
Výraz vazba použitý v tomto textu znamená jednoduchou, dvojnou nebo trojnou vazbu.
44 • · 4 • · 4 • 4 4 4 · • · · «4 β 4
Výraz alkyl použitý v tomto textu je míněn tak že zahrnuje jak rozvětvené tak přímé řetězce nasycených alifatických uhlovodíkových skupin majících specifikovaný počet atomů uhlíku; cykloalkyl nebo karbocyklus je míněn tak, že zahrnuje nasycené kruhové skupiny včetně mono-, bi- nebo po 1ycyk1 ických kruhových systémů jako je cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, cykloheptyl, cyklooktyl a adamantyl; bicykloalky1 je míněn tak, že zahrnuje nasycené bicyklické kruhové skupiny jako [3.3.Ojbicyklooktan, [4.3.0]bicyklononan, [4.4.0]bicyklodekan (dekalin), [2.2.2]bicyklooktan a tak dále.
Výraz alken nebo alkenyl použitý v tomto textu je míněn tak, že zahrnuje jak rozvětvené tak přímé řetězce skupin vzorce CnH2n-i majících specifikovaný počet atomů uhlíku. Výraz 1-alken nebo 1-alkenyl znamená, že dvojná vazba je z hlediska připojení mezi prvním a druhým atomem uhlíku.
Výraz alkin nebo alkinyl použitý v tomto textu je míněn tak, že zahrnuje jak rozvětvené tak přímé řetězce skupin vzorce CnH2n-3 majících specifikovaný počet atomů uhlíku. Výraz 1-alkin nebo 1-alkinyl znamená, že trojná vazba je z hlediska připojení mezi prvním a druhým atomem uhlíku.
Výraz aryl nebo aromatický zbytek je míněn tak, že zahrnuje fenyl nebo naftyl, které jsou-li substituovány, mohou mít substituenty v kterékoli poloze.
Výraz heterocyklus nebo heterocyklický kruhový systém použitý v tomto textu je míněn tak, že zahrnuje stabilní 5- až 7členný monocyklický nebo bicyklický nebo 7- až 10- členný bicyklický heterocyklický kruh, který může být nasycený, částečně nenasycený, nebo aromatický, který obsahuje atomy uhlíku a od 1 ·· ···· · · «· « · · · · · · • ···· · · ·· • « · ·· ···· * • « · · · · • · ··· ·· · · do 4 heteroatomů vybraných nezávisle ze skupiny zahrnující N, 0, a S, přičemž dusíkový a sírový heteroatom mohou být případně oxidovány a atom dusíku může být kvarterní, a zahrnuje jakoukoli bicyklickou skupinu ve které některý z výše definovaných heterocyklických kruhů je kondenzován na benzenový kruh. Heterocyklický kruh může být připojen na skupinu na kterou je substituován kterýmkoli heteroatomem nebo atomem uhlíku vedoucím k tvorbě stabilní struktury. Zde popsané heterocyk1 ické kruhy mohou být substituovány na atomu uhlíku nebo na atomu dusíku jestliže tato substituce vede k tvorbě stabilní sloučeniny. Příklady takovýchto heterocyklů zahrnují, ale nejsou na ně omezeny, benzopyranyl, thiadiazin, tetrazolyl, benzofurany 1, benzothiofeny1, indolen, chinolin, isochino1 iny1 nebo benzimidazolyl , piperidinyl, 4-piperidon, 2-pyrrolidon, tetrahydrofuran, tetrahydrochinolin, tetrahydroisochinolin, dekahydrochino1in, oktahydroisochinolin, azocin, triazin (zahrnuje 1,2,3-, 1,2,4-, a 1,3,5-triazin), 6H-1,2,5-thiadiazin, 2H,6H-1,2,5-dithiazin, thiofen, tetrahydrothiofen, thianthren, furan, pyran, isobenzofuran, chromen, xanthen, fenoxanthin, 2H-pyrrol , pyrrol, imidazol, pyrazol, thiazol, isothiazol, oxazol (zahrnuje 1,2,4- a 1,3,4-oxazol) , isoxazol, triazol, pyridin, pyrazin, pyrimidin, pyridazin, indolizin, isoindol, 3H-indol, indol, ΙΗ-indazol, purin, 4H-chino1 i zin, isochinolin, chinolin, ftalazin, naftyridin, chinoxalin, chinazolin, cinnolin, pteridin, 4aH-karbazol, karbazol, β-karbolin, fenanthridin, akridin, perimidin, fenanthrolin, fenazin, fenarsazin, fenothiazin, furazan, fenoxazin, isochroman, chroman, pyrrolidin, pyrrolin, imidazo1idin, imidazolin, pyrazolidin, pyrazolin, piperazin, indolin, isoindolin, chinuklidin, nebo morfolin. Výraz rovněž zahrnuje sloučeniny s kondenzovaným kruhem a spiro-s1oučeniny obsahující výše uvedené heterocykly.
Výraz nenasycený karbocyklus použitý v tomto textu k • · · · · · · • · · · · · · · · • · · · · · · · * • · * · · · popisu substituentů R80 a R81 znamená karbocyklus, který má nejméně jednu vícenásobnou vazbu, kde tato vícenásobná vazba je mezi atomem uhlíku připojeným k divalentnímu uhlíkovému radikálu spécifikovánému ve vzorci pro stabilní hydrazinovou skupinu a sousedním atomem uhlíku.
Výraz nenasycený heterocyklus použitý v tomto textu znamená heterocyklus, který má nejméně jednu vícenásobnou vazbu, kde tato vícenásobná vazba je mezi atomem uhlíku připojeným k divalentnímu uhlíkovému radikálu specifikovanému ve vzorci pro stabilní hydrazinovou skupinu a sousedním atomem uhlíku. Aromatický heterocyklus se pokládá za nenasycený heterocyklus.
Výraz sůl, použitý v tomto textu se používá podle definice uvedené v CRC Handbook of Chemistry and Physics, 65.vydání, CRC Press, Boča Raton, Fla, 1984, pro každou substanci která tvoří ionty, jiné než ionty vodíku nebo hydroxylové ionty.
Redukční činidlo je sloučenina, která reaguje s rádionuklidem, což je obvykle sloučenina relativně nereaktivní ve vysokém oxidačním stupni, za snížení jeho oxidačního stupně přenosem elektronu (elektronů), čímž se radionuklid stane reaktivnější. Redukční činidla vhodná pro přípravu radiofarmak a zahrnutá v diagnostických kitech určených pro přípravu uvedených radiofarmak zahrnují, ale nejsou na ně omezeny chlorid cínatý, fluorid cínatý, kyselinu formamidinsulfinovou, kyselinu askorbovou, cystein, fosfiny, a mědné nebo železnaté soli. Další redukční činidla jsou uvedena v práci Bordack a sp., PCT Application 94/22496, která je do tohoto textu včleněna odkazem.
Výraz přenosový ligand se vztahuje k ligandu, který tvoří meziproduktový komplex s radionuklidem, a který je dostatečně stabilní aby zabraňoval nežádoucím vedlejším reakcím, ale který ··
je dostatečně labilní, aby byl převeden na radiofarmakum. Tvorba meziproduktového komplexu je podporována kineticky, zatímco tvorba radiofarmaka je podporována termodynamicky. Přenosové ligandy vhodné pro přípravu radiofarmak a obsažené v diagnostických kitech vhodných pro přípravu uvedených radiofarmak zahrnují ale nejsou na ně omezeny glukonat, glukoheptonat, mannitol, glukarat, kyselinu Ν,Ν,Ν',N'-ethylendiamintetraoctovou, pyrofosforečnan a methyldifosfonat. Obecně přenosové ligandy obsahují kyslíkové nebo dusíkové donorové atomy.
Výraz donorový atom se týká atomu přímo připojenému ke kovu chemickou vazbou.
Výraz doplňkový nebo ko-ligandy se týká ligandů, které jsou včleněny do radiofarmaka během jeho syntézy. Tyto ligandy slouží ke kompletaci koordinační sféry radionuklidu společně s chelatační nebo vazebnou jednotkou činidla vázající radionuklid.
U radiofarmak majících binární ligandový systém, obsahuje radionuklidová koordinační sféra jeden nebo více chelatačních nebo vazebných jednotek z jednoho nebo více činidel a jeden nebo více doplňkových ligandů nebo ko-ligandů za předpokladu, že systém bude obsahovat celkem dva typy ligandů, chelatačních nebo vazebných jednotek. Například rádiofarmakum obsahující jednu chelatační nebo vazebnou jednotku z jednoho činidla a dva stejné doplňkové ligandy nebo ko-ligandy a rádiofarmakum obsahující dvě chelatační nebo vazebné jednotky z jednoho nebo dvou činidel a jeden doplňkový ligand nebo ko-ligand se obě pokládají za radiofarmaka s binárním ligandovým systémem.
U radiofarmak obsahujících ternární ligandový systém obsahuje koordinační sféra radionuklidu jednu nebo více chelatačních nebo vazebných jednotek z jednoho nebo více činidel a jeden nebo více různých doplňkových ligandů nebo ko-ligandů za předpokladu celkového počtu tří typů ligandů, chelatačních nebo vazebných ·· jednotek. Například rádiofarmakum obsahující jednu chelatační nebo vazebnou jednotku z jednoho činidla a dva různé doplňkové ligandy nebo ko-ligandy se pokládá za radiofarmakum s ternárním ligandovým systémem. Doplňkové ligandy jsou uvedeny a popsány v projednávané přihlášce U.S.S.N. 08/415,908,908 která je sem včleněna odkazem.
Výraz chelatační nebo vazebná jednotka je složka nebo skupina činidla, která se váže na kovový radionuklid tvorbou chemických vazeb s jedním nebo více donorovými atomy.
Výraz vazebné místo znamená místo které in vivo váže biologicky aktivní molekulu.
Doplňkové ligandy nebo ko-ligandy vhodné pro přípravu radiofarmak a pro diagnostické kity vhodné pro přípravu uvedených radiofarmak obsahují jeden nebo více donorových atomů kyslíku, dusíku, uhlíku, síry, fosforu, arsenu, selenu a teluru. Ligand může být přenosový ligand při syntéze radiofarmaka a může také sloužit jako doplňkový ligand nebo ko-ligand pro jiné radiofarmakum. Zda bude ligand přenosový nebo doplňkový nebo ko-ligand závisí na tom, jestli ligand zůstane v koordinační sféře radionuklidu v radiofarmaku, což se určí koordinační chemií radionuklidu a chelatačních nebo vazebných jednotek činidla nebo činidel.
Výraz diagnostický kit zahrnuje soupravu komponent daného složení v jedné nebo více lahvičkách které použije v běžné praxi na klinice nebo v lékárně konečný uživatel k syntéze radiofarmaka. Tento kit obsahuje všechny potřebné komponenty k syntéze a použití radiofarmaka s výjimkou těch, které jsou v běžné v praxi konečnému uživateli dostupné jako je voda nebo solný roztok pro injekci, a zahrnují roztok radionuklidu, zařízení pro • · · · • · 999 ohřev kitu během syntézy radiofarmaka je-li to potřebné, prostředky nutné pro podávání radiofarmaka pacientovi jako jsou injekční stříkačky a kryty, a zobrazovací prostředky.
Výraz pufr znamená sloučeninu, která se používá k řízení hodnoty pH kitu během jeho výroby a během syntézy radiofarmaka.
Výraz prostředek podporující lyofilisaci znamená složku, která má příznivé fyzikální vlastnosti pro lyofilizaci jako teplotu skelného přechodu, a přidává se do diagnostického kitu pro zlepšení fyzikálních vlastností kombinace všech složek kitu určených k lyofilizaci.
Výraz stabilizační prostředek znamená složku, která se přidává k radiofarmaku nebo k diagnostickému kitu bučí ke stabilizaci radiofarmaka již připraveného nebo k prodloužení doby použitelnosti kitu po jejímž uplynutí nesmí být použit. Stabilizační prostředky mohou být antioxidanty, redukující činidla nebo akceptory radikálu, které mohou poskytnout zlepšenou stabilitu přednostní reakcí s faktory degradujícími jiné složky nebo radiofarmakum.
Výraz solubi1 i začni prostředek znamená složku která zlepšuje rozpustnost jedné nebo více dalších složek v prostředí potřebném pro syntézu radiofarmaka.
Výraz bakteriostatikum znamená složku, která inhibuje růst bakterií v diagnostickém kitu bud během jeho skladování před použitím, nebo po použití tohoto kitu k syntéze radiofarmaka.
V této přihlášce se používají následující zkratky:
Acm acetamidomethyl ·· ···· ·· ·· • · · · · · • · ··· · · ·· • · · ·· ····
D-ABu
5-Aca b-Ala, b-Ala nebo bAla Boc
Boc-j od-Mamb
Boc-Mamb
Boc-ON
Cl2Bzl
CBZ, Cbz nebo Z
DCC
DIEA di-NMeOrn
DMAP
HBTU
Hyni c
NMeArg nebo
MeArg
NMeAmf
NMeAsp
NMeGly nebo
MeGly
NMe-Mamb
NMM
OcHex
Obz 1 oSu pNP kyselina D-2-aminomáselná
5-aminokapronamid(5-aminohexanamid) kyselina 3-aminopropionová terč.butyloxykarbony1 kyselina terč.butyloxykarbonyl-3-aminomethyl 4-j od-benzoová kyselina terč. bu tylo xy karbony 1-3-aminoni ethyl benzoová [2-(terč.butyloxykarbonyloxylimino)-2fenylacetonitril di chlorbenzy1 karbobenzyloxy dicyklohexylkarbdi imid di isopropy1ethylamin
N-aMe-N-gMe-orni thin
4-dimethylaminopyridin
2-(lH-benzotriazol-l-yl)-l,1,3,3-tetramethyluroniumhexafluorfosfat hydrazinonikot inyl a-N-methylarginin
N-methylaminomethylfeny1alanin kyselina a-N-methylaspartová
N-methylglycin kyselina N-methyl-3-aminomethylbenzoová
N-methylmorf olin
O-cyklohexyl
O-benzy1
O-sukcinimidyl p-ni trof enyl • · · · • · ·· «
TBTU 2-(ΙΗ-benzotriazo1-1 —y1) — 1,1,3,3-tetramethyluronium tetrafluorborat
Teoc 2-(trimethylsilyl)e thy1oxykarbony1
Tos tosyl
TPPTS trojsodná sůl tris(sulfonatofeny1)fosfi nu
Tr trityl
V textu se používají následující běžné třípísmenové zkratky aminokyselin; obvyklé jednopísměnové zkratky aminokyselin se v tomto textu nepoužívají:
»···
| Ala | = | alanin |
| Arg | = | arginin |
| Asn | = | asparag i n |
| Asp | = | kyselina aspartová |
| Cys | = | cystein |
| Gin | = | glutamin |
| Glu | = | kyselina glutamová |
| Gly | = | glycin |
| His | = | histidin |
| Ile | = | i soleuc in |
| Leu | = | leucin |
| Lys | = | lysin |
| Met | = | methionin |
| Nle | = | nor 1euc i n |
| Phe | = | f enylalanin |
| Phg | = | f enylglycin |
| Pro | = | pro 1 in |
| Ser | = | ser in |
| Thr | = | threonin |
| Trp | = | tryptof an |
| Tyr | = | tyros in |
| Val | = | val in |
• · ···· ··
Biologicky aktivní molekula Q může být protein, protilátka, fragment protilátky, peptid nebo polypeptid, nebo peptidomimetikum, obsahující rozpoznávací sekvenci nebo jednotku pro receptor nebo vazebné míto exprimované v místě choroby nebo pro receptor nebo vazebné místo exprimované v krevních destičkách nebo v leukocytech. Přesné chemické složení Q se zvolí na základě stavu choroby která má být diagnostikována, mechanismu lokalizace který bude použit a optimální kombinace zahrnující stupně lokalizace, vylučování a rozpadu radionuklidu.
Pro účely tohoto vynálezu výraz tromboembolická choroba je chápan tak, aby zahrnoval jak žilní tak tepenné poruchy a pulmonární embolii které vyplývají z tvorby krevních sraženin.
Pro účel diagnosy tromboembolických poruch nebo aterosklerosy se Q zvolí ze skupiny zahrnující cyklické sloučeniny s antagonisujíčími účinky na Ilb/IIIa receptor které jsou popsány v současně projednávané přihlášce U.S.seriál č. 08/415,908,861 (ekvivalentní WO 94/22494); peptidy obsahující RGD popsané v U.S.patentech 4,578,079, 4,792,525, přihláškách PCT US88/04403, PCT US89/01742, PCT US90/03788, PCT US91/02356 v práci Ojima a sp., 204th Meeting of the Amer.Chem.Soc., 1992, Abstract 44; peptidy které jsou antagonisty receptorů fibrinogenu a které jsou popsány v Evropských patentových přihláškách
90202015.5, 90202030.4, 90202032.2, 90202032.0, 90311148.2,
90311151.6, 90311537.6, specificky vázající peptidy a polypeptidy popisované jako ligandy receptorů Ilb/IIIa, ligandy polymer izačního místa fibrinu, deriváty lamininu, ligandy fibrinogenu, nebo ligandy thrombinu popsané v PCT WO 93/23085 (s vyloučením skupin vázajících technecium); oligopeptidy které odpovídají lila proteinu popsané v PCT WO 90/00178; peptidy na bázi hirudinu popsané v PCT WO 90/03391; ligandy receptorů ·· ··*· ·· ·· • · ·· • ··· · · • · · ·· ··
Ilb/IIIa popsané v PCT WO 90/15818; peptidy vázající trombus, krevní destičky nebo aterosklerotický plak popsané v PCT WO 92/13572 (s vyloučením skupin vázajících technecium) nebo v GB 9313965.7; fibrin vázající peptidy popsané v U.S.patentech 4.427,646 a 5,270,030; peptidy na bázi hirudinu popsané v U.S.patentu 5,279,812; nebo fibrin vázající proteiny popsané v U.S.patentu 5,217,705; guaninové deriváty vázající se na Ilb/IIIa receptor popsané v U.S.patentu 5,086,069; nebo deriváty tyrosinu popsané v Evropské patentové přihlášce 04778328A1, a v práci Hartman a sp., J.Med.Chem., 1992, 35, 4640; nebo oxidovaný lipoprotein nízké density (LDL).
Pro účely diagnosy infekce, zánětu nebo rejekce transplantátu se Q vybere ze skupiny zahrnující peptidy vázající leukocyty popsané v PCT WO 93/17719 (s vyloučením skupiny vázající technecium), v PCT WO 92/13572 (s vyloučením skupiny vázající technecium) nebo v U.S.seriál č. 08-140000; chemotaktické peptidy popsané v Evropské patentové přihlášce 90108734.6 nebo v práci A.Fischman a sp., Semin.Nuc.Med., 1994, 24, 154; nebo 1eukostimu1ační prostředky popsané v U.S.patentu 5,277,892.
Pro účely diagnosy rakoviny se Q vybere ze skupiny zahrnující analogy somatostatinu popsané v UK přihlášce 8927255.3 nebo PCT WO 94/00489, selektin vázající peptidy popsané v PCT WO 94/05269, biologické funkční domény popsané v PCT WO 93/12819, faktor krevních destiček 4 nebo růstové faktory (PDGF, EGF, FGF, TNF, MCSF nebo 111-8).
Q může také znamenat proteiny, protilátky, fragmenty protilátek, peptidy, polypeptidy, nebo pept idomimet ika, které se váží na receptory nebo na vazebná místa na jiných tkáních, orgánech, enzymech nebo tekutinách. Jejich příklady zahrnují β-amyloidní proteiny u kterých bylo zjištěno, že se akumulují u
·· ···· ► * · » · ··· » · • · 9 99
99
9 9 9
9 99
9 9 9
9 9
99 pacientů s Alzheimerovou chorobou, peptidy odvozené od atrial naturetic factor které se váží ne receptory myokardu a renální receptory, antimyosinové protilátky, které se váží na infarktové tkáně, nebo deriváty nitroimidazolu, které se lokalizují v in vivo hypoxických oblastech.
Činidla podle předloženého vynálezu obsahují biologicky aktivní skupinu Q připojenou ke stabilnímu hydrazonu Hz a případně obsahují mezi uvedenou biologicky aktivní skupinou a mezi uvedeným stabilním hydrazonem spojovací skupinu Ln. Stabilní hydrazon je chráněná forma hydrazinové nebo hydrazidové chelatační nebo vazebná jednotky, označované jako Ch v současně projednávané U.S.S.N. 08/415,908,861, který je bud přímo připojen na skupinu Q nebo je připojen ke spojovací skupině Ln, která je připojena ke Q. Chelatační nebo vazebná jednotka se naváže na radionuklid (a v navázaném stavu se v U.S.S.N 08/415,908,908 označuje Ch) při syntéze rad i of armak za použití činidel podle vynálezu.
Substituenty R80 a R81 podle vynálezu se volí pro zlepšení stability hydrazonu které lze docílit u hydrazonu se substituenty zahrnujícími pouze vodík nebo nižší alkyl. Tato zlepšená stabilita je nutná, protože hydrazony ve kterých tyto substituenty znamenají pouze vodík nebo nižší alkyl reagují s jinými aldehydy a ketony z nichž mnoho se běžně vyskytuje ve farmaceutických výrobních provozech. Zvláště se obvykle vyskytující aldehyd je formaldehyd, který se běžně používá jako desinfekční prostředek. Reakce nižší alky1-hydrazonu s aldehydem nebo ketonem může probíhat podle schématu 1.
·· ···· o
Ct /
N=C*
-N \ \ schéma 1
Stabilní chráněná hydrazonová činidla podle vynálezu lze využít obchodně jako prekursory radiofarmak. Hydrazony chráněné nižším alkylem obchodně využít nelze vzhledem k jejich přirozené nestabilitě. Jestliže nižší alky1-hydrazon, znázorněný na schématu 1 tvoří část činidla pro přípravu radiofarmaka , bude podléhat znázorněné reakci s jinými aldehydy nebo ketony a bude se rozkládat nebo bude degradovat na jeden nebo více hydrazonů v závislosti na počtu aldehydů a ketonů se kterými se dostane do kontaktu. Tyto rozkladné produkty tvoří v činidle nečistoty, které musí být minimalizovány, nebo je nutné je vyloučit. Eliminace všech těchto aldehydů a ketonů je ve farmaceutickém výrobním procesu velmi obtížná, protože mohou být extrahovány z mnoha materiálů, zejména plastických hmot a pryžových zátek používaných ve výrobním procesu a jsou také přítomny v obvyklých desinfekčních prostředcích. Použití stabilních hydrazonů v nových činidlech podle vynálezu, která obsahují stabilními hydrazony modifikované biologicky aktivní molekuly tento problém odstraňuje. Stabilní hydrazonová činidla podle vynálezu mají tedy vůči alkylem chráněným hydrazonům dosud známým v oboru významnou výhodu spočívající ve zvýšené stabilitě těchto stabilních hydrazonových činidel, která umožňuje jejich obchodní využití.
·· ···· • · ·· · ·· ·· • · · · • · ·· • · · · · • · · ·· ··
Tato stabilní hydrazonová skupina Hz vzorce -N(R4°R41)N=C(R8°R81) se liší od nižší alky1-hydrazonů v tom, že jeden ze substituentu R80 a R81 je vybrán ze skupiny zahrnující: nitril, karboxylové kyseliny, estery karboxy1ových kyselin, karboxamidy, 1-alkeny, 1-alkiny, aryl, nenasycený heterocyklus, a nasycený karbocyklus; nebo dva substituenty R80 a R81 mohou společně tvořit kruhový systém. Tyto substituenty ve skupině slouží ke stabilizaci hydrazonu poskytnutím konjugovaného it systému bud ve formě dvojné vazby uhlík-uhlík, dvojné vazby uhlík-kys1ík, trojné vazby uhlík-uhlík, trojné vazby uhlík-dusík, nebo aromatického kruhu. Stabilitu lze také poskytnout chelatačním účinkem jestliže substituenty R80 a R81 budou společně vytvářet kruhový systém.
činidla podle vynálezu lze syntetizovat různými způsoby.
Tyto hydrazinové a hydrazidové prekurzory lze připravit způsoby popsanými v současně projednávané přihlášce U.S.S.N. 08/415,908, 861. Stabilní hydrazonovou skupinu Hz lze zavést v kterémkoli stupni syntézy činidla za předpokladu, že bude stabilní vůči následným reakčním podmínkám. Jeden ze způsobů syntézy zahrnuje reakci stabilní hydrazonové skupiny mající funkční složku schopnou kopulace s biologicky aktivní molekulou Q popřípadě mající spojovací skupinu Ln. Kopulace schopná funkční složka je chemicky reaktivní část schopná reakce s biologicky aktivní molekulou případně nesoucí spojovací skupinu za navázání tohoto stabilního hydrazonu na tuto molekulu. U biologicky aktivních molekul nesoucích spojovací skupinu je stabilní hydrazon navázán na tuto spojovací skupinu.
Reakci stabilního hydrazonu majícího chemicky reaktivní složku s biologicky aktivní molekulou nebo biologicky aktivní molekulou modifikovanou spojovací sloučenina lze provést přímým spojením těchto dvou reakčních činidel ve vhodném rozpouštědle a
4« ···· ·4
4 4 4 • 4 44 • 4 4 4 4
4 ·
44 za vhodných reakčních podmínek. Rozpouštědlo nebo podmínky reakce jsou vhodné tehdy, jestliže stabilní hydrazon-bio 1ogicky aktivní molekulu nebo stabilní hydrazon-spojovací sloučenina-biologicky aktivní molekulu obsahující činidlo se připraví bez významné ztráty biologické aktivity způsobené použitím uvedeného rozpouštědla nebo podmínek reakce.
Příklady chemicky reaktivních složek zahrnují alkylskupinu mající dobře odštěpitelnou skupinu jako je halogenid, karbonylovou skupinu jako je anhydrid kyseliny, halogenid kyseliny, nebo aktivní ester, isothikyanatan nebo substituovaný isothiokyanatan, nebo maleinimid. Aktivní ester je ester, který je více reaktivní v nuk 1eofi 1 ních substitučních reakcích, jako tetrafluorfenyl, N-sukcinimidyl a nitrofenyl. V reakcích mezi stabilním hydrazonem majícím chemicky reaktivní složku a biologicky aktivní molekulou nebo biologicky aktivní molekulou modifikovanou spojovací sloučeninou může každá z obou reagujících látek být nukleofilním činidlem. Podrobnější popisy těchto kopulačních reakcí lze nalézt v práci Brinkley, Μ., Bi oconj ugat e Chemistry, 1992, Vol.3, č.l, která je včleněna do tohoto textu odkazem. Také U.S.patent 5,206,370, který je do textu rovněž včleněn, uvádí další příklady chemicky reaktivních složek.
Jiný způsob syntézy zahrnuje tvorbu stabilního hydrazonů v posledním stupni syntézy činidla. Sloučeniny vzorce (Q)d’-Ln-Ch, ve kterých Ch znamená -R40R4lNNH2, jejichž syntéza je popsána v projednávané U.S.S.N. 08/415,908,861 mohou reagovat se sloučeninami obsahujícími karbonyl vzorce R80C(=O)R81 ve vhodném rozpouštědle a za vhodných reakčních podmínek. Rozpouštědlo nebo reakční podmínky jsou vhodné tehdy, jestliže činidlo vznikne bez význámné ztráty biologické aktivity způsobené použitím uvedeného rozpouštědla nebo stavu.
·· 99 ) · · <
··«·
Stabilní hydrazony mající chemicky reaktivní skupinu vhodnou pro syntézy činidel podle vynálezu lze syntetizovat podle znázorněného schématu 2.
schéma 2
Kyselina hydrazinonikotinová reaguje s karbony1-obsahující sloučeninou R8OC(=O)R81 v dimethylformamidu za tvorby příslušného stabilního hydrazonu kyseliny nikotinové. Reakce roztoku stabilního hydrazonu s N-hydroxysukcinimidem (NHS) v přítomnosti dicyklohexylkarbdiimidu (DCC) vede k sukcinimidylesteru příslušného stabilního hydrazonu kyseliny nikotinové. Syntézy specifických stabilních hydrazonu majících sukcinimidylesterovou chemicky reaktivní složku jsou popsány v příkladech provedení vynálezu.
Stabilní hydrazony mající sukcinimidylovou esterovou složku lze použít k přípravě činidel podle vynálezu reakcí s aminoskupinou na biologicky aktivní molekule nebo na biologicky aktivní molekule modifikované spojovací sloučeninou za tvorby amidové vazby. Tyto syntézy činidel pomocí reakce se spojovací sloučeninou modifikovanými cyklickými antagonisty receptoru Ilb/IIIa jsou znázorněny na schématu 3.
·« «·4· »· ·· • c · ♦ · · · • · ··· · · ·· • · β · * · · · · · • · · · · · • · ««· · * 4·
I \
schéma 3 ·· ···· • · • ··· ·· · • · · · • · · ·«· · · « · · · · · 9 9 9 9 9 9 9
Roztok hydrazonu, majícího sukcinimidylovou složku, v dimethylformamidu se spojí s cyklickým antagonistou receptoru Ilb/IIIa modifikovaným spojovací sloučeninou, cyklo-(D-ValNMeArg-Gly-Asp-Mamb(5-Aca)), rozpuštěným v DMF za tvorby činidla, cyklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(Hz-5-Aca)). Cyklo-(D-ValNMeArg-Gly-Asp-Mamb(5-Aca)) se syntetizuje způsobem popsaným v současně projednávané U.S.S.N. 08/415,908,861. Surové činidlo se může přečistit preparativní vysokoúčinnou kapalinovou chromatografii (HPLC) nebo mnohajinými způsoby známými pracovníkům zkušeným v oboru jako je rekrystalizace, sloupcová chromatografie a extrakce rozpouštědlem.
Alternativní způsob syntézy činidla podle vynálezu zahrnuje reakci karbonyl-obsahující sloučeniny vzorce R80C(=O)R81 se sloučeninou vzorce (Q)a’-Ln-Ch, kde Ch znamená -R40R41NNH2, který je znázorněn na schématu 4.
h2n
Rb°C(=O)R81
schéma 4
Cyklický antagonista receptoru Ilb/IIIa, cyklo-(D-ValNMeArg-Gly-Asp-Mamb(Hynic-5-Aca), který lze syntetizovat způsobem popsaným v součesně projednávané U.S.S.N. 08/415,908,861, reaguje s karbony1-obsahující sloučeninou vzorce P80(C=O)R81 v dimethylformamidu za tvorby činidla, cyklo-(D-Val-NMeArg-GlyAsp-Mamb(Hz-5-Aca)). Surové činidlo lze přečistit preparativní vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií (HPLC) nebo mnoha dalšími způsoby známými pracovníkům zkušeným v oboru jako je rekrystalizace, sloupcová chromatografie a extrakce rozpouštědlem.
Tato činidla podle vynálezu vzorce (q)d'-Ln-Hz jsou vhodná pro přípravu radiofarmak uváděných v současně projednávané patentové přihlášce 08/415,908,908, vzorce:
[(Q)ďLn-Ch- ]x-Mt(ALl)y(AL2)z (2) , kde Q, d',a Ln jsou definovány výše a Ch' je chelatační nebo vazebná jednotka kovového radionuklidu navázaná na ·· ··· ·· ·· přechodový kovový radionuklid Mt, vzorce R40N=N+=, R40R41N-N=, R40N=, nebo R40N=N(H)-, Ali je první doplňkový ligand nebo koligand, Al2 je druhý doplňkový ligand nebo ko-ligand, x a y nezávisle znamenají 1 nebo 2 a z znamená nezávisle číslo od 0 do 4. Přechodový kovový radionuklid Mt lze vybrat ze skupiny zahrnující: technecium-99m, rhenium-186 a rhenium-188.
Skupina Ch' znamená hydrazidovou (vzorce R40R41N-N=), diazenidovou (vzorce R40N=N+= nebo R40N=N(H)~) nebo imidovou (vzorce R40N=) skupinu a slouží jako bod připojení radionuklidu ke zbytku radiofarmaka označeného vzorcem (Q)d'-Ln Diazenidová skupina může být bud koncová (pouze jeden atom skupiny je navázán na radionuklid) nebo chelatační. Aby tato diazenidová skupina byla také chelatační, musí nejméně jeden další atom skupiny, umístěný na R40 být také vázán k radionuklidu. Atomy vázané na kov se označují jako donorové atomy. Hydrazidové a imidové skupiny jsou výlučně koncové.
Koordinační sféra radionuklidu obsahuje všechny ligandy nebo skupiny navázané na radionuklid. U radionuklidu tvořeného přechodovým kovem, který má být stabilní je obvyklé koordinační číslo zahrnující čísla větší nebo rovná 5 a menší nebo rovná 7; to znamená že obsahuje 5 až 7 atomů navázaných na kov a má tak úplnou koordinační sféru. Jestliže chelatační nebo vazebná jednotka neposkytne všechny atomy potřebné ke stabilizaci kovového radionuklidu obsazením jeho koordinační sféry, obsazení koordinační sféry se dokončí donorovými atomy z jiných ligandů nazývaných doplňkové ligandy nebo ko-ligandy, které mohou být rovněž bud koncové nebo chelatační.
Jako doplňkové ligandy nebo ko-ligandy lze využít mnoho ligandů, jejichž výběr se stanoví na základě různých kriterií, jako je snadnost syntézy radiofarmaka, chemické a fyzikální • · · 4 4 4 4 · 4 4 4 • · · · · · · ···· • · · · · 4 4
444 4·· 44 444 44 44 vlastnosti pomocného ligandu, rychlost tvorby, výtěžek, počet isomerních forem výsledných radiofarmak, schopnost podání uvedeného doplňkového ligandu nebo ko-ligandu pacientovi bez vzniku nežádoucích fyziologických následků u tohoto pacienta, a kompatibilita ligandu v lyofi 1 izovaném kitu. Náboj a lipofilnost doplňkového ligandu budou ovlivňovat náboj a lipofilnost radiofarmak. Například použití 4,5-dihydroxy-l-3-benzendisulfonatu vede k rad iofarmakům s dalšími dvěmi aniontovými skupinami, protože sulfonatové skupiny budou za fyziologických podmínek v aniontově formě. Použití N-alkyl substituovaných 3,4-hydroxypyridinonů vede k rádiofarmakům o různých stupních lipofilnosti v závislosti na velikosti alkylového substituentu.
Radiofarmaka připravená z činidel podle vynálezu mohou obsahovat jeden nebo dva doplňkové ligandy nebo ko-ligandy označené Ali v binárním ligandovém systému. Tento jeden nebo dva doplňkové ligandy nebo ko-ligandy které obsahují radiofarmaka lze nezávisle vybrat ze skupiny zahrnující: dikyslíkové ligandy, funkcionalizované aminokarboxylaty a halogenidy; za předpokladu že koordinační sféra radionuklidu bude kompletní.
Dikyslíkové pomocné ligandy zahrnují ligandy, které se přiřazují k iontu kovu přes nejméně dva donorové atomy kyslíku. Jejich příklady zahrnují ale nejsou na ně omezeny: glukoheptonat, glukonat, 2-hydroxyisobutyrat, laktat, vinan, mannitol, glukarat, maltol, kyselinu kojovou, kyselinu 2,2-bis(hydroxymethyl)propionovou, 4,5-dihydroxy-1,3-benzen-disulfonat, nebo substituované nebo nesubstituované 1,2 nebo 3,4 hydroxypiridinony, nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.
Funkcionalizované aminokarboxylaty zahrnují ligandy které mají kombinaci donorových atomů dusíku a kyslíku. Jejich příklady zahrnují, ale nejsou na ně omezeny: kyselinu iminodioctovou,
kyselinu 2,3-diaminopropionovou, kyselinu ni trilotrioctovou, kyselinu Ν,Ν'-ethylendiamindioctovou, kyselinu Ν,Ν,Ν'-ethylediamintrioctovou, kyselinu hydroxyethylethylendiamintrioctovou, N,N'-ethy1endiamin-bis-hydroxyfenylglycin, nebo ligandy uvedené v evropské patentové přihlášce 93302712.0 nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.
Halogenidy mohou být chlorid, bromid, fluorid nebo jodid, nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.
Zvláště přínosná jsou radiofarmaka připravená z činidel podle vynálezu která obsahují dva různé typy doplňkových ligandů nebo ko-ligandů, jeden nebo dva ligandy určené jako první doplňkový ligand nebo ko-ligand nebo ligandy Ali, nezávisle vybrané ze skupiny zahrnující: dikyslíkové ligandy, funkcionalizované aminokarboxy1aty a halogenidy; a jeden až čtyři ligandy určené jako druhý doplňkový ligand nebo ko-ligand nebo ligandy Al2 vybrané ze skupiny zahrnující: trisubstituované fosfiny, trisubstituované arsiny, tetrasubstituované difosfiny a tetrasubstituované diarsiny v ternárním ligandovém systému. V současně projednávaném U.S.S.N. 08/415,908 autoři vynálezu uvádějí, že radiofarmaka vzorce [ (Q) a'Ln-Ch']xMt(Ali)y(Al2)z obsahující jeden nebo více doplňkových ligandů nebo ko-ligandů Al2 jsou stabilnější ve srovnání s uvedenými radiofarmaky která neobsahují jeden nebo více doplňkoových ligandů Al2! to znamená, že obsahují minimální počet isomerních forem, jejichž relativní zastoupení se významně nemění s časem a zůstávají při ředění v podstatě intaktní.
Hydrazonová skupina Hz musí být převedena na chelatační nebo vazebnou jednotku Ch kterou je bud hydrazinová skupina R40R41NNH2 nebo diazinová skupina vzorce R40N=NH která může nebo nesmí být protonizována tak aby se vytvořila s kovovým • · · · · · ··· • · · · ···· · • · · · · · • · ··· 4 9 9 4 rádionuklidem Mt chelatační nebo vazebná jednotka Ch'.
Chelatační nebo vazebná jednotka Ch se po navázání na kovový radionuklid Mt označuje Ch ' . Konverze hydrazonové skupiny Hz na chelatační nebo vazebnou jednotku Ch může proběhnout před reakcí s rádionuklidem a v tomto případě se radionuklid a doplňkový ligand nebo ko-ligand nebo ligandy nespojují s činidlem ale s hydro lyžovanou formou činidla nesoucího chelatační nebo vazebnou jednotku Ch, nebo v přítomnosti rad ionuklidu, a v tomto případě se činidlo přímo spojí s rádionuklidem a doplňkovým ligandem nebo ko-ligandem nebo ligandy. V tomto druhém případě musí být pH reakční směsi neutrální nebo kyselé.
Radiofarmaka vzorce [(Q)d’Ln-Ch’]x-Mt(Ali)y lze snadno připravit z činidel podle vynálezu smísením soli radionuklidu, činidla vzorce 1, doplňkového ligandů Ali, a redukčního činidla, ve vodném roztoku při teplotách od teploty místnosti do 100 °C. Alternativně lze tato radiofarmaka připravit tak, že se nejprve smísí ve vodném roztoku při teplotách od teploty místnosti do 100 °C sůl rádionuklidu, pomocný ligand Ali a redukční činidlo za tvorby meziproduktového rádionuklidového komplexu s doplňkovým ligandem Ali a pak se přidá činidlo vzorce 1 a reakce se nechá dále probíhat při teplotách od teploty místnosti do 100 °C.
Radiofarmaka vzorce [(Q)d·Ln-Ch']x-ht(Ali)y(Al2)z lze snadno připravit z činidel podle vynálezu smísením soli radionuklidu, činidla vzorce 1, doplňkového ligandů Ali, doplňkového ligandů Al2 a případně redukčního činidla, ve vodném roztoku při teplotách od teploty místnosti do 100 °C. Alternativně lze tato radiofarmaka připravit tak, že se nejprve smísí ve vodném roztoku při teplotách od teploty místnosti do 100 °C sůl radionuklidu, doplňkový ligand Ali, činidlo vzorce 1 a redukční činidlo za tvorby meziproduktového rádionuklidového komplexu a pak se přidá doplňkový ligand Al2 a reakce se nechá dále
probíhat při teplotách od teploty místnosti do 100 °C.
Celková doba přípravy se bude měnit v závislosti na druhu radionuklidu, druzích a množstvích reagujících složek a způsobu použitého pro přípravu. Tyto přípravky lze připravit ve výtěžku > 80 % radiofarmaka za 1 minutu, nebo příprava může být delší. Je-li nutná nebo žádoucí vyšší čistota radiofarmak, lze tyto produkty přečišťovat některým z mnoha technických způsobů známých v oboru, jako je kapalinová chromatografie, extrakce pevnou fází, extrakce rozpouštědlem, dialýza nebo ultrafi 1trace
Použití činidla podle vynálezu pro syntézu radiofarmaka určeného k zobrazení trombosy zahrnujícího stabilní hydrazon-spojovací sloučeninou módifikovaného-cyklického antagonistu receptoru Ilb/IIIa je znázorněnona schématu 5. Binární ligandový systém je tvořen diazenidovou vazebnou jednotkou Ch ' a dvěma tricinovými doplňkovými Iigandy Ali. Znázorněná struktura je pouze jednou z mnoha možných isomerních forem tohoto radiofarmaka vznikajících koordinační isomerií diazenidové vazebné jednotky a dvou tricinových ligandů.
Íe9mTcO4' tricin Sn(ll) ·· ···· ·· ·· • · · · · · · • ···· · · · · • · · · · · · · · · • · · · · ·
schéma 5
Použití činidla podle vynálezu pro syntézu radiofarmaka určeného pro zobrazení trombosy zahrnujícího stabilní hydrazonspojovací sloučeninou módifikovaného-cyklického antagonistu receptorů Ilb/IIIa a majícího ternární ligandový systém je znázorněno na schématu 6. Ternární ligandový systém radionuklidu technecia-99m je tvořen diazenidovou vazebnou jednotkou Ch', jedním tricinovým doplňkovým ligandem Ali a jedním trisubstituovaným fosfinovým doplňkovým ligandem Al2. Znázorněná struktura je jednou ze dvou možných isomerních forem tohoto radiofarmaka způsobených koordinační isomerií diazenidové vazebn j ednotky.
TFA· Gly N-MeArg^* Asp / \
TcO/ tricin
TPPTS
schéma 6 • · ······ · · ··
9 9 9 9 9 9 ···· • · · ···· · ··· • · · · · ·»···· • · · · · ··· ··· ··· ·· ··· ·· 99
Radionuklidy, které lze použít s činidly podle vynálezu k syntéze radiofarmak jsou vybrány ze skupiny zahrnující 99mTc, 186Pe, nebo188Re. Pro diagnostické účely je výhodným isotopem 99mTc. Jeho š es t i hod inový poločas a emisní energie gama záření jsou téměř ideální pro zavedená gama scinti graf ická zařízení a postupy dobře známé pracovníkům v oboru. Isotopy rhenia mají rovněž emisní energie gama záření kompatibilní pro gama scintigrafi i, nicméně tyto isotopy emitují beta částice o vysoké energii které více poškozují živé tkáně. Tyto emise beta částic lze využít pro terapeutické účely například pro radioterapii rakoviny.
V chemické formě jsou techneciové a rheniové radionuklidy výhodné jako technecistan nebo rhenistan a jejich farmaceuticky přijatelný kationt. Technecistanová sůl je výhodně technecistan sodný, jako je technecistan získaný z obchodně dostupných generátorů Tc-99m. Množství technecistanu použité k přípravě radiofarmak podle vynálezu může být v rozmezí od 0,1 mCi do 1 Ci , nebo výhodněji od 1 do 200 mCi.
Množství činidel podle vynálezu použité k přípravě radiofarmak se může pohybovat v rozmezí od 0,1 pg do 10 mg nebo výhodněji od 0,5 pg do 100 pg. Toto použité množství se bude řídit podíly ostatních reagujících složek a druhem radiofarmak vzorce 2 určenými k přípravě.
Množství doplňkových ligandů Ali použité k přípravě se může pohybovat od 0,1 mg do 1 g nebo výhodněji od 1 mg do 100 mg. Přesné množství pro jednotlivé rádiofarmakum bude záviset na • · · · • · · · · 4 • · • · · · » · 4 » · 4 • · · · · druhu radiofarmak vzorce 2 určených k přípravě, použitých postupech a množstvích a druzích ostatních reagujících složek. Příliš velké množství Ali bude mít za následek tvorbu vedlejších produktů tvořených z techneciem značeného Ali bez biologicky aktivní molekuly nebo vedlejších produktů tvořených techneciem značených biologicky aktivních molekul s pomocnými ligandy Ali ale bez doplňkových ligandů Al2. Příliš malé množství Ali bude mít za následek další vedlejší produkty, jako je redukované hydro 1yzované technecium nebo techneciový koloid.
Množství doplňkových ligandů Al2 se může použít v rozmezí od 0,001 mg do 1 g, nebo výhodněji od 0,01 mg do 10 mg. přesné množství pro jednotlivé rádiofarmakum bude záviset na druhu radiofarmak vzorce 2 určených k přípravě, použitých postupech a množstvích a druzích ostatních reagujících složek. Příliš velké množství Al2 bude mít za následek tvorbu vedlejších produktů tvořených techneciem značeného Al2 bez biologicky aktivní molekuly nebo vedlejších produktů tvořených techneciem značené biologicky aktivní molekuly s doplňkovým ligandem Al2 ale bez pomocného 1igandu Ali.
Pro syntézu radiofarmak vzorce 2 , která obsahují doplňkový ligand Al2 může být popřípadě použito redukční činidlo. Vhodná redukční činidla zahrnují cínaté soli, borohydridové soli, a kyselinu formamidinsulfinovou, přičemž soli mohou být v jakékoli farmaceuticky přijatelné formě. Výhodným redukčním činidlem je chlorid cínatý. Použití redukčního činidla je volitelné, protože doplňkový ligand Al2 může rovněž sloužit k redukci Tc-99mtechnecistanu. Množství použitého redučního činidla se může pohybovat v rozmezí od 0,001 mg do 10 mg, nebo výhodněji od 0,005 mg do 1 mg.
Dalším aspektem vynálezu jsou diagnostické kity pro přípravu • φ φφφφφφ φφ φφ · · Φ φ Φ Φ ΦΦΦΦ
Φ Φ Φ ΦΦΦΦ Φ ΦΦΦ • · φ Φ Φ ΦΦ Φ·Φ· Φ radiofarmak vhodných jako zobrazovací prostředky k diagnose kardiovaskulárních chorob, infekčních chorob, zánětlivých chorob a rakoviny. Diagnostické kity podle vynálezu obsahují jednu nebo více lahviček obsahujících sterilní, apyrogenní přípravek složený z předem stanoveného množství činidla vzorce (Q)d'-Ln-Hz, jednoho nebo dvou doplňkových ligandů nebo ko-ligandů a popřípadě další složky jako jsou redukující činidla, přenosové ligandy, pufry, lyofilizační prostředky, stabilizátory, solubi1 izátory a bakteriostatika. Včlenění jedné nebo více z těchto volitelných složek do přípravku často zlepší snadnost syntézy radiofarmaka v praxi konečného uživatele, výrobu kitu, dobu použitelnosti kitu, nebo stabilitu a dobu použitelnosti radiofarmaka. Zlepšení dosažená včleněním případné další složky do přípravku je nutné posoudit vzhledem k přidané složitosti přípravy a cenovému navýšení výroby kitu. Jedna nebo více lahviček obsahujících všechny části nebo část přípravku mohou nezávisle být ve formě sterilního roztoku nebo lyofi 1 izované pevné látky.
Pufry vhodné pro přípravu radiofarmak a diagnostických kitů určených pro přípravu uvedených radiofarmak zahrnují ale nejsou na ně omezeny, fosforečnan, citrát, sulfošal icylat a acetat. Úplnější seznam lze nalézt v United States Pharmacopoei a.
Lyofilizační prostředky vhodné pro přípravu diagnostických kitů určených pro přípravu radiofarmak zahrnují, ale nejsou na ně omezeny, mannitol, laktosu, sorbitol, Ficoll, a polyvinylpyrrol idon (PVP).
Stabilizátory vhodné pro přípravu radiofarmak a diagnostických kitů určených pro přípravu uvedených radiofarmak zahrnují, ale nejsou na ně omezeny, kyselinu askorbovou, cystein, monothioglycerol, hydrogensiřičitan sodný, metabisulfit sodný, kyselinu gentisinovou a inositol.
·· ··· ·· Μ
Solubi1 izátory vhodné pro přípravu radiofarmak a diagnostických kitů určených pro přípravu uvedených radiofarmak zahrnují, ale nejsou na ně omezeny, ethanol, glycerin, polyěthylenglykol, propy1eng1yko1, polysorbaty a lecithin.
Bakteriostatika vhodná pro přípravu radiofarmak adiagnostických kitu určených pro přípravu uvedených radiofarmak zahrnují, ale nejsou na ně omezena, benzylalkohol, benzalkoniumchlorid, chlorbutanol, a methyl-, propyl- nebo butylparaben.
Některá složka v diagnostickém kitu může také sloužit k více než jednomu účelu. Redukční činidlo může sloužit jako stabilizátor, pufr může sloužit jako přenosový ligand, doplňkový ligand nebo ko-ligand atd.
Předem stanovená množství každé složky v přípravku se určí posouzením různých okolností, které jsou v některých případech specifické pro tuto složku a v jiných případech závisí na množství další složky nebo přítomnosti a množství volitelné složky. Obecně se použije nejmenší množství každé složky které poskytne požadovaný účinek přípravku. Požadovaný účinek přípravku znamená, že konečný uživatel může v praxi syntetizovat radiofarmakum s vysokým stupěm jistoty, že toto radiofarmakum lze bezpečně injekčně aplikovat pacientovi a že získá diagnostickou informaci o stavu choroby pacienta.
Diagnostické kity podle vynálezu také obsahují písemné instrukce pro konečného uživatele v praxi k provedení syntézy radiofarmaka. Tyto instrukce mohou být upevněny na jedné nebo na více lahvičkách nebo na obalu do kterého je lahvička nebo jsou lahvičky vloženy při přepravě, nebo se jedná o oddělenou • · * · · • · · ·· ·· vložku určenou jako příbalovou vložku.
Další aspekt vynálezu se vztahuje ke způsobu zobrazení místa trombotické choroby pacienta který zahrnuje: (1) syntézu radiofarmaka za použití činidla podle vynálezu, které se lokalizuje v místě trombotické choroby choroby účinky interakce mezi biologicky aktivní skupinou Q radiofarmaka a receptorem nebo vazebným místem exprimovanými v místě choroby nebo s receptorem nebo vazebným místem v endogenní krevní složce která se v tomto místě akumuluje; (2) podání uvedeného radiofarmaka injekčně nebo infusí; (3) zobrazení pacienta použitím planární nebo SPÉCT gama sc int igraf i e.
Další aspekt vynálezu se vztahuje ke způsobu zobrazení místa infekce nebo infekční choroby pacienta který zahrnuje; (1) syntézu radiofarmaka za použití činidla podle vynálezu, které se lokalizuje v místě infekce nebo infekční choroby účinky interakce mezi biologicky aktivní skupinou Q radiofarmaka a receptorem nebo vazebným místem exprimovanými v místě choroby nebo s receptorem nebo vazebným místem v endogenní krevní složce která se v tomto místě akumuluje; (2) podání uvedeného radiofarmaka injekčně nebo infusí; (3) zobrazení pacienta použitím planární nebo SPÉCT gama scintigrafie.
Další aspekt vynálezu se vztahuje ke způsobu zobrazení místa zánětu u pacienta který zahrnuje: (1) syntézu radiofarmaka za použití činidla podle vynálezu, které se lokalizuje v místě zánětu účinky interakce mezi biologicky aktivní skupinou Q radiofarmaka a receptorem nebo vazebným místem exprimovanými v místě choroby nebo s receptorem nebo vazebným místem v endogenní krevní složce která se v tomto místě akumuluje; (2) podání uvedeného radiofarmaka injekčně nebo infusí; (3) zobrazení pacienta použitím planární nebo SPÉCT gama scintigrafie.
·· ·· • · · • · · • · · · · • · ·
00
Další aspekt vynálezu se vztahuje ke způsobu zobrazení místa rakoviny u pacienta který zahrnuje: (1) syntézu radiofarmaka za použití činidla podle vynálezu, které se lokalizuje v místě rakovi ny účinky interakce mezi biologicky aktivní skupinou Q radiofarmaka a receptorem nebo vazebným místem exprimovanými v místě choroby nebo s receptorem nebo vazebným místem v endogenní krevní složce která se v tomto místě akumuluje; (2) podání uvedeného radiofarmaka injekčně nebo infusí; (3) zobrazení pacienta použitím planární nebo SPÉCT gama scintigrafie.
Příklady provedení vynálezu
Složky použité k syntéze činidel podle vynálezu popsané v následujících příkladech se získájí následujícím způsobem.
Syntéza cyklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(5-Aca)) a cyklo(D-Va1-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(Hynic-5-Aca) se provede způsobem popsaným v projednávané U.S.ser.č.08/415,908,861 (ekvivalentní WO 94/22494). Následující složky lze získat z obchodních zdrojů a použít jako takové: kyselina hydrazinonikotinová,
N-hydroxysukcinimid (NHS), dicyklohexylkarbdiimid (DCC), tricin, trojsodná sůl tris(3-sulfonatofeny1)fosfinu (TTPPTS), dihydrat chloridu cínatého, dimethylformamid (DMF), kyselina trifluoroctová (TFA), acetonitril, 4-pyridinkarboxaldehyd, octan amonný, dihydrogenfosforečnan sodný, 2-formylbenzensulfonat sodný, triethylamin, mannitol, krotonaldehyd,
4-karboxybenzaldehyd, a kyselina glyoxylová. Používá se deionizovaná voda z Mi 11i-Q-Water System o kvalitě > 18 ΜΩ. Tc-99m-technecistan (®TcO4~) se získá z generátoru DuPont Pharma Mo/99wTc.
Příklad 1 • · · · ··
I <
• ·
Syntéza benzaldehyd-hydrazonu cyklo-(D-Val-NMeArg-Gly-AspMamb(hydrazinonikot inyl-5-Aca)).
K roztoku 20 mg (0,0215 mmol) cyklo-(D-Val-NMeArg-Gly-AspMamb(5-Aca)).2 TFA 7,5 mg (0,0222 mmol) sukcinimidyl6-(2-benzaldehydhydrazino)nikotinatu v DMF (1 ml) se přidá Et3N (10 μΐ) a reakční směs se míchá 42 hodin při teplotě místnosti.
Pak se reakční směs zahustí, rozpustí se v 50% CH3CN/H2O a lyofilizací se získá surová titulní sloučenina (23,5 mg) ve formě bělavého prášku. Přečištění se provede na preparativní koloně HPLC s reverzní fází Vydac C18 (2,5 x 25 cm) za použití gradientově eluce s 6 až 72% acetonitrilu obsahujícího 0,1 % kyseliny trifluoroctové při průtokové rychlosti 15 ml/min, a získá se tak TFA sůl titulní sloučeniny (17,5 mg, 71 %) ve formě chmýří té bílé pevné látky; !H NMR (Dď-DMSO) 11,30 (br s, OH),
10,02 (s, NH), 8,94 (d, 1H), 8,61 (d, 1H), 8,55 (d, 1H), 8,41 (m, 2H), 8,10 (s, =CH), 8,09 (m, 1H), 7,70 (m, 4H), 7,61 (m, 1H), 7,52 (t,lH), 7,42 (m, 3H), 7,27 (d, 1H), 7,07 (s, 1H), 5,18 (dd,
1H), 4,53 (m, 2H), 4,34 (dd, 1H), 4,20 (dd, 1H), 4,02 (dd, 1H),
3,25 (q, 2H), 3,13 (q, 2H), 2,99 (s, NCH3), 2,72 (dd, 1H), 2,50 (m, 1H), 2,33 (t, 2H), 2,10 (m, 2H), 1,60 (m, 5H), 1,35 (m, 4H), 1,10 (d, CH3), 0,92 (d, CH3); FAB (NBA)-MS: [M+H] = 926,4625 (vypočteno pro C45H60N13O9 = 926,4637).
Příklad 2
Syntéza hydrazonu 2-formylbenzensulfonové kyseliny cyklo-(D-Va1NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hydrazinonikotinyl-5-Aca)).
2-formylbenzensulfonat sodný (3,9 mg, 0,019 mmol) a cyklo(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hydrazinonikotinyl-5-Aca)) (10 mg,
0,0094 mmol) se rozpustí v 0,05 M pufru fosforečnanu sodného pH 7,0 (1,0 ml) a směs se nechá stát 1,5 hodiny při teplotě ·♦ *··· • ·
I · · · ·
Β · · » · · ·· ··· ·· ·· • · · · • · · · • · · · · • · · • · · · místnosti, po kterých se celá reakční směs změní v gel. Tento gel se rozpustí v 1,0 ml 10% acetonitrilu obsahujícího 0,1 M NHzíOAc a přečistí se HPLC s reverzní fází s preparativní kolonou Zorbax-RX C18 (21,2 x 250 mm) s průtokovou rychlostí 15 ml/min za použití 10% acetonitrilu obsahujícího 0,1 M NHáOAc po dobu 2 minut a následující gradientovou eluci 4,44 %/min 10 až 50% acetonitrilu obsahujícího 0,1 M NHáOAc. Frakce obsahující produkt se lyofilizuje a získá se tak titulní sloučenina ve formě chmýřité bezbarvé pevné látky (7 mg, 74 %). Analytickou HPLC za použití kolony Zorbax-RX C18 (4,6 x 250), průtokové rychlosti 1,5 ml/min a gradientově eluce 4,0 %/min 10 až 50% acetonitrilu obsahujícího 0,05 M NHaOAc, lze indikovat 97,3 % čistotu produktu. DCI-MS:
[M+H] = 1006,3.
Příklad 3
Syntéza p-dimethylaminobenzaldehyd-hydrazonu cyklo-(D-ValNMeArg-Gly-Asp-Mambíhydrazinonikot iny1-5-Aca) .
Titulní sloučenina se připraví obecným postupem popsaným pro benzaldehydový hydrazon cyklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hydrazinonikotiny1-5-Aca)) (příklad 1).Kopulací cyklické sloučeniny (32 mg, 0,0344 mmol) a sukcinimidyl-6-(2-(4-dimethylamino)-benzaldehydhydrazino)nikotinatu (13,5 mg, 0,0354 mmol) se získá surová titulní sloučenina (47 mg) ve formě žlutého prášku. Přečištění se provede pomocí HPLC s reverzní fází, na preparativní koloně Vydac C18 (2,5 x 25 cm) s gradientovou eluci 9 až 72% acetonitri 1em s obsahem 0,1 % kyseliny trifluoroctové při průtokové rychlosti 15 ml/min, a získá se tak TFA sůl titulní sloučeniny (29,7 mg, 72 %) ve formě chmýřité bílé pevné látky; iH NMR (D&-DMSO) 10,03 (s, NH), 8,94 (d, IH), 8,55 (d, IH), 8,50 (s, IH), 8,42 (t, IH), 8,15 (br s, IH), 8,06 (s, IH), 7,70 (d,
2H), 7,61 (m, 4H), 7,16 (d, IH), 7,07 (s, IH), 7,00 (br s, 2H), • · ·
6,76 (d, 2H), 5,17 (dd, 1H), 4,52 (m, 2H), 4,33 (dd, 1H), 4,20 (dd, 1H) , 3,25 (q, 2H), 3,12 (q, 2H), 2,98 (s, 3 NCH3), 2,72 (dd,
1H), 2,50 (m, 1H), 2,33 (t, 2H) , 2,10 (m, 2H) , 1,60 (m, 5H), 1,35 (m, 4H), 1,10 (d, CH3), 0,92 (d, CH3); FAB(NBA)-MS: [M+H] =
969,5043 (vypočteno pro C47H65N14O9 = 969,5059).
Příklad 4
Syntéza 4-karboxybenzaldehyd-hydrazonu cyklo-(D-Val-NMeArg-GlyAsp-Mamb)hydraz inonikot inyl-5-Aca)).
Směs cyklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hydraž inonikotinyl5-Aca)).2 HBr (50 mg, 50 pmol) a 4-karboxybenzaldehydu (70,35 pmol) se míchá v dimethylformamidu (1 ml) při teplotě místnosti 4 hodiny v atmosféře dusíku. Pak se rozpouštědlo odstraní ve vakuu, zbytek se rozpustí ve směsi acetonitril-voda a lyofilizuje se do sucha. Surová směs se přečistí HPLC s reverzní fází za použití preparativní kolony Zorbax-RX C18 (21,2 x 250 mm) při průtokové rychlosti 15 ml/min, za použití jako mobilní fáze rozpouštědla A (50 mM octan amonný), rozpouštědla B (50 mM octan amonný v 50 % acetonitrilu) a s použitím následujícího gradientu: 0-2 min, % B; 30 min, 50 % B (nemění se až do 32 min); 35 min, 100 % B (nemění se až do 38 min); 40 min, 20 % B. Výtěžek přečištěného produktu je 7 mg (14 %). DCI-MS (vysoké rozlišení) [M+H] = 970,453526 (vypočtená molekulová hmotnost 969,445702).
Příklad 5
Syntéza krotonaldehyd-hydrazonu cyklo-(D-Val-NmeArg-Gly-AspMamb(hydrazinonikotinyl-5-Aca) .
Titulní sloučenina se syntetizuje způsobem uvedeným pro
4-karboxybenzaldehyd-hydrazon cyklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp65 ··· · · * · · · · • « «·· · · ·· ·· · · · » · · · · • · · · · · ·· ··· ·♦ · ·
Mamb(hydrazinonikotiny1-5-Aca)) (příklad 4) s tím že se použije krotonaldehyd místo 4-karboxybenzaldehydu. Surový produkt se přečistí preparativní HPLC s použitím následujícího gradientu:
0-2 min, 20 % B; 4 min, 55 % B (nemění se až do 5 min); 30 min, % B (nemění se až do 32 min); 35 min, 100 % B (nemění se až do 38 min); 40 min, 20 % B; a získá se tak 4,5 mg (10 %) přečištěného produktu. DCI-MS (vysoké rozlišení) [M+H] = 890,463696 (vypočtená molekulová hmotnost 889,455872).
Příklad 6
Syntéza hydrazonu kyseliny kyseliny glyoxylové cyklo-(D-Va1NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hydraz inoni kot inyl-5-Aca)).
Titulní sloučenina se syntetizuje způsobem uvedeným pro 4karboxybenzaldehyd-hydrazon cyklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hydrazinonikotinyl-5-Aca)) (příklad 4) s tím, že se použije kyselina glyoxylová místo 4-karboxybenzaldehydu. Surový produkt se přečistí preparativní HPLC za použití následující gradientově eluce: 0-5 min, 20 % B; 40 min, 50 % B (nemění se až do 42 min); 45 min, 100 % B (nemění se až do 46 min); 48 min, 20 % B, a získá se tak 4,6 mg (10 %) přečištěného produktu.DCI-MS (vysoké rozlišení) [M+H] = 894,42225 (vypočtená molekulová hmotnost 893,414402) .
Příklad 7
Syntéza acetofenon-hydrazonu cyklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hydrazinonikotiny1-5-Aca)).
K roztoku 82 mg (0,1075 mmol) surového cyklo-(D~ValNMeArg-Gly-Asp-Mamb(5-Aca)).HOAc, TFA (16,6 μΐ, 0,215 mmol) a 38 mg (0,1075 mmol) sukcinimidyl 6-(2-acetofenonhydrazino)66 • « ······ · * ·· ·· 0·· ···· • 0 « 0··· · · · 0 0 « 0 0 0 ··♦···· 0 0 0· 0 000 φ·0 Μ· «· ··· ·· *· nikotinatu v DMF (5ml) se přidá Et3N (75 μΐ) a reakční směs se míchá při teplotě místnosti 42 hodin. Pak se reakční směs zahustí, rozpustí se v 50 % CH3CN/H2O a lyofilizací se získá surová titulní sloučenina (130 mg) ve formě světle žlutého prášku. Přečištěním tohoto produktu HPLC s reverzní fázi na preparativní koloně Vydac C18 (2,5 x 25 cm) gradientovou elucí 2 až 90% acetonitri lem s obsahem 0,1 % kyseliny trifluoroctové při průtokové rychlosti 15 ml/min ze získá TFA sůl titulní sloučeniny ve formě chmýřité bílé pevné látky; !H NMP (Dď-DMSO) 10,03 (s,
NH), 8,93 (d, IH), 8,62 (s, IH), 8,55 (d, IH), 8,42 (m, 2H), 8,13 (br s, IH), 7,87 (d, 2H), 7,70 (m, 2H), 7,55 (m, 2H), 7,40 (m,
4H), 7,07 (s, IH), 5,17 (dd, IH), 4,52 (m, 2H), 4,33 (dd, IH), 4,20 (dd, IH), 4,02 (dd, IH), 3,63 (dd, IH), 3,26 (q, 2H), 3,12 (q, 2H), 2,98 (s, NCH3), 2,72 (dd, IH), 2,50 (m, IH), 2,35 (s, CH3), 2,33 (m, 2H), 2,10 (m, 2H), 1,60 (m, 5H), 1,35 (m, 4H),
1,10 (d, CH3), 0,92 (d, CH3); FAB(NBA)-MS: [M+H] = 940,4818 (vypočteno pro C46H62N13O9 = 940,4793).
Příklad 8
Syntéza 1-(methoxykarbonyl)acetaldehyd-hydrazonu cyklo-(D-ValNMeArg-Gly-Asp-Mamb(hydrazinonikotinyl-5-Aca)).
Titulní sloučenina se připraví obecným způsobem uvedeným výše pro acetofenon-hydrazon cyklo-(D-Val-NMeArg-Gly-AspMamb(hydrazinonikotinyl-5-Aca)) (příklad 7). Kopulací surové cyklické sloučeniny (82 mg, 0,1075 mmol) a sukcinimidyl 6-(2(1-methoxy-karbonyl)acetaldehydhydrazino)nikotinatu (36 mg,
0,1077 mmol) se získá surová titulní sloučenina (123 mg) ve formě světle žlutého prášku. Přečištění části tohoto produktu se provede HPLC na reverzní fázi za podmínek popsaných v příkladu 8 za získání TFA soli titulní sloučeniny ve formě chmýřité bílé pevné látky; 3Η NMR (D&-DMSO) 10,69 (s, NH), 10,02 (s, NH), 8,92 • 4 ···· • · « · · <·· ··· ·· ·· • 9 9 9 • · ·* ·· · · « • · · ·· ··
| (d, | ÍH) , | 8,70 | (d, ÍH), 8,55 (d, | ÍH), 8,44 | (m, 2H) | , 8 | ,14 (dd | Ϊ |
| ÍH) , | 7,70 | (s , | 2H), 7,56 (m, 2H) | , 7,28 (d, | ÍH), 7, | 07 | (s, ÍH) | , 5, |
| (dd, | ÍH) , | 4,52 | (m, 2H), 4,33 (d | d, ÍH), 4, | 19 (dd, | ÍH) | , 4,04 | (ra, |
| ÍH) , | 3,76 | (s, | OCH3), 3,63 (dd, | ÍH), 3,26 | (q, 2H), | 3, | 13 (q, | 2H) , |
| 2,99 | (s , | NCH3) | , 2,72 (dd, ÍH), | 2,50 (m, 1 | Η), 2,33 | (t | , 2H), | 2,13 |
(s, CH3), 1,60 (m, 5H), 1,35 (m, 4H), 1,10 (d, CH3), 0,92 (d, CH3); FAB-MS: [M+H] = 922,4539 (vypočteno pro Ca2H6oNi3Oii = 922,4539) .
Příklad 9
Syntéza cyklopentanon-hydrazonu cyklo-(D-ValNMeArg-Gly-Asp-Mamb(hydrazinonikotinyl-5-Aca)).
Titulní sloučenina se připraví obecným způsobem uvedeným výše pro acetofenon-hydrazon cyklo-(D-Val-NMeArg-Gly-AspMamb(hydrazinonikotinyl-5-Aca)) (příklad 7). Kopulací surové cyklické sloučeniny (82 mg, 0,1075 mmol) a sukcinimidyl 6-(2cyklopentanon-hydrazino)nikotinatu (35 mg, 0,1106 mmol) se získá surová titulní sloučenina (131 mg) ve formě světle žlutého prášku Přečištění části tohoto produktu se provede HPLC na reverzní fázi za podmínek popsaných v příkladu 8 za získání TFA soli titulní sloučeniny ve formě chmýřité bílé pevné látky; NMR (D&-DMSO) 10,02 (s, NH), 8,93 (d, ÍH), 8,61 (d, ÍH), 8,55 (d, ÍH), 8,51 (s, ÍH), 8,41 (t, ÍH), 8,10 (m, ÍH), 7,70 (s, 2H), 7,55 (m, ÍH), 7,52 (t, ÍH), 7,10 (br s, 3H), 7,06 (s, ÍH), 5,17 (dd, ÍH), 4,52 (m, 2H), 4,33 (dd, ÍH), 4,19 (dd, ÍH), 4,02 (dd, ÍH), 3,62 (d, ÍH), 3,24 (q, 2H), 3,12 (q, 2H), 2,99 (s, NCH3), 2,72 (dd, ÍH), 2,50 (m, ÍH), 2,41 (m, 4H), 2,33 (t, 2H), 2,10 (m, 2H), 1,75 (m, 3H),
1,68 (m, 4H), 1,34 (m, 4H), 1,10 (d, CH3), 0,92 (d, CH3); FAB (NBA/TFA)-MS: [M+H] = 904,5136 (vypočteno pro C43H62Ni3O9 = 904,4793).
·· ·· • · • · • · ··« ·4· ·· ···· • · · • · *·· • · · • · ·
4· ··· ·· ·· • · · · • · ·· • ··· · · « · · ·· ··
Příklad 10
Syntéza 2-(methoxykarbonyl)cyklopentanon-hydražonu cyklo-(D-ValNMeArg-Gly-Asp-Mamb(Hynic-5-Aca)).
Titulní sloučenina se připraví obecným způsobem uvedeným výše pro acetofenon-hydrazon cyklo-(D-Val-NMeArg-Gly-AspMamb(hydrazinonikotiny1-5-Aca)) (příklad 7). Kopulací surové cyklické sloučeniny (82 mg, 0,1075 mmol) a sukcinimidyl 6-(2(2-methoxykarbonyl)cyklopentanon-hydrazino)nikotinatu (41 mg, 0,1095 mmol) se získá surová titulní sloučenina (138 mg) ve formě světle žlutého prášku. Přečištění části tohoto produktu se provede HPLC na reverzní fázi za podmínek popsaných v příkladu 8 za získání TFA soli titulní sloučeniny ve formě chmýřité bílé pevné látky; lH NMR (D&-DMSO) 10,01 (s, NH), 8,90 (m, 1H), 8,57 (m, 2H), 8,39 (m, 2H), 8,07 (d,lH), 7,71 (s, 2H), 7,59 (m, 2H), 7,09 (m, 2H), 5,17 (dd, 1H), 4,52 (m, 2H), 4,34 (dd, 1H), 4,20 (dd, 1H), 4,02 (d, 1H), 3,67 (s, OCH3), 3,24 (q, 2H), 3,12 (m, 2H) , 2,99 (s, NCH3) 2,71 (dd, 1H), 2,50 (m, 1H), 2,34 (t, 2H), 2,10 (m, 4H), 1,60 (m, 5H), 1,34 (m, 3H), 1,25 (m, 2H), 1,10 (d, CH3), 0,93 (d, CH3); ESI-MS: [M+H] = 962 (vypočteno pro C45H64N13O11 = 962,4848).
Příklad 11
Syntéza 4-pyridinkarboxaldehyd-hydrazonu cyklo-(D-ValNMeArg-Gly-Asp-Mamb(hydrazinonikotinyl-5-Aca)).
4-pyridinkarboxaldehyd (1,14 mg, 0,0106 mmol) a cyklo(D-Vla-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(Hynic-5-Aca)) (10 mg, 0,0094 mmol) se rozpustí v 0,05 M pufru fosforečnanu sodného pH 7 (5,0 ml) a nechá se stát při teplotě místnosti 72 hodin. Pak se slabě žlutý roztok lyofilizuje do sucha a získaná pevná látka se přečistí
HPLC na reverzní fázi s použitím preparativní kolony Zorbax-RX C18 (21,2 x 250 mm), při průtoku 15 ml/min a elucí 10% aceton itri 1em obsahujícím 0,1 M NHíOAc trvající dvě minuty a potom gradientovou elucí 4,44 %/min 10% až 50% acetonitri 1em obsahujícím 0,1 M NH/iOAc. Frakce obsahující produkt (retenční čas 10-12 minut) se lyofilizuje a získá se tak titulní sloučenina ve formě chmýřité bezbarvé pevné látky (8 mg, 74 %) . Analytickou HPLC na koloně Zorbax-RX C18 (4,6 x 250 mm), při průtoku 1,5 ml/min a gradientově eluce 4,0 %/min 10% až 50% acetoni tri.1 em obsahujícím 0,05 M NHaOAc se zjistí 98,7% čistota produktu.
V následujících příkladech jsou uvedeny syntézy stabilních hydrazonu majících chemicky reaktivní složku, vhodné pro syntézu výše uvedených činidel.
Příklad 12
Syntéza sukcinimidyl 6-(2-benzaldehydhydrazi no)nikotinatu
K suspenzi kyseliny 6-hydrazinonikotinové (1,00 g, 6,5 mmol) v DMF (40 ml) se přidá benzaldehyd (0,70 ml, 6,9 mmol) a reakční směs se míchá 3 hodiny při teplotě místnosti. K homogenní reakční směsi se přidá N-hydroxysukcinimid (752 mg, 6,5 mmol) a DCC (3,00 ml, 13,4 mmol) a reakční směs se míchá 18 hodin při teplotě místnosti. Pak se reakční směs zfiltruje, zahustí se, zředí se EtOAc (50 ml) a pak se směs zahřívá při teplotě zpětného toku 1 hodinu. Filtrací horké směsi se získá titulní sloučenina (1,78 g, 81 %) ve formě světle žlutého prášku. Tento produkt se dále použije bez dalšího čičtění. *Η NMR (Dď-DMSO) 11,86 (s, NH), 8,82 (dd, Py-H), 8,20 (dd, Py-H), 8,20 (s, =CH), 7,75 (dd, 2 Ar-H),
7,43 (m, Py-H & 3 Ar-H), 2,89 (s, 2 CH2); DCI (NH3)-MS:
[M+H] = 339,1084 (vypočteno pro C17H15N4O4 = 339.1093).
• · • · · · · 4 4 4 4 4 4 4 · 4 • · * ···· · 4 4 4 * · 44 4 44 · · · 4 4
4 4 4 4 444
444 444 44 444 44 44
Příklad 13
Syntéza sukcinimidyl 6-(2-acetofenonhydrazino)nikotinatu
Titulní sloučenina se připraví podle obecného způsobu popsaného výše pro sukcinimidyl 6-(2-benzaldehydhydrazino)nikotinat (příklad 12). Filtrací ze směsi s EtOAc se získá titulní sloučenina (1,26 g, 55 % s obsahem stop DCU) ve formě špinavě bí.lého prášku. Cisty vzorek titulní sloučeniny (853 mg, 37 %) se získá z filtrátu ve formě krystalů zlatého zbarvení. IH NMR (D&-DMSO) 10,86 (s, NH), 8,84 (dd, Py-H), 8,21 (dd, Py-H), 7,86 (dd, 2 Ar-H), 7,41 (m, Py-H & 3 Ar-H), 2,89 (s, 2 CH2), 2,39 (s, CH3); DCI (NH3)-MS: [M+H] = (Vypočteno pro C18H17N4O4 = 353,1250).
Příklad 14
Syntéza sukcinimidyl 6-(2-(4-dimethylamino)benzaldehydhydraž ino)nikot inatu
Titulní sloučenina se připraví obecným způsobem popsaným výše pro přípravu sukcinimidyl 6-(2-benzaldehydhydrazino)nikotinatu (příklad 12) s tou výhradou, že se použije pouze 1 ekvivalent DCC (1,5 ML, 6,7 mmol). Filtrací za horka směsi s EtOAc se získá titulní sloučenina (1,20 g, 48 %) ve formě žlutého prášku. Tento produkt se použije bez dalšího čištění. iH NMR (Dď-DMSO) 11,58 (s, NH), 8,76 (dd, Py-H), 8,13 (dd, Py-H), 8,07 (s, =CH), 7,54 (d, 2 Ar-H), 7,29 (d, Py-H), 6,75 (d, 2 Ar-H),
2,97 (s, 2 NCH3), 2,88 (s, 2 CH2); DCI (NH3)-MS: [M+H] = 382,1513 (vypočteno pro C19H20N5O4 = 382,1515).
Příklad 15 • · · · • 9
• · · ·
Syntéza sukcinimidyl 6-(2-(l-methoxykarbonyl)acetaldehydohydrazino)nikot inatu
Titulní sloučenina se připraví obecným způsobem uvedeným pro pro přípravu sukcinimidyl 6-(2-benzaldehydhydrazino)ni kotinatu (příklad 12). Filtrací směsi s EtOAc se získá titulní sloučenina (552 mg, 25 % se stopami DCU) ve formě světlého bílého prášku. Tento produkt se použije bez dalšího čištění. Zahuštěním filtrátu a triturací s EtOAc se získá titulní sloučenina (349 mg, 16 %, se stomai DCU). 1H NMR (D&-DMSO) 11,21 (s, NH), 8,91 (dd, Py-H),
8,33 (dd, Py-H), 7,42 (d, Py-H), 3,78 (s, OCH3), 2,89 (s, 2 CH2) , 2,18 (s, CH3); DCI (NH3)-MS: [M+H] = (vypočteno pro
C14H15N4O6 = 335,0991).
Příklad 16
Syntéza sukcinimidyl 6-(2-cyklopentanonhydrazino)nikotinatu
Titulní sloučenina se připraví obecným způsobem uvedeným pro pro přípravu sukcinimidyl 6-(2-benzaldehydhydrazino)nikotinatu (příklad 12). Filtrací směsi s EtOAc se získá titulní sloučenina (1,78 g, 86 % se stopami DCU) ve formě světle žlutého prášku. Rekrystalizací tohoto produktu z EtOAc se získá přečištěný vzorek titulní sloučeniny (530 mg, se stopami DCU). Tento produkt se použije bez dalšího čištění. !H NMR (D6-DMS0) 10,33 (s, NH), 8,76 (dd, Py-H), 8,11 (dd, Py-H), 7,15 (d, Py-H), 2,88 (s, 2 CH2),
2,41 (q, 2 CH2), 1,75 (m, 2 CH2); DCI (NH3)-MS: [M+H] = (vypočteno pro C15H17N4O4 = 317,1250).
Příklad 17
Syntéza sukcinimidyl 6-(2-(2-methoxykarbony1)cyklopentanonhydraz ino) nikot inatu • · ···· ·· · ·
I · · · · · * » ···· · · · · , · · · · · · · ’ » · · · · I ·· · · · ·· · *
Titulní sloučenina se připraví obecným způsobem uvedeným pro pro přípravu sukcinimidyl 6-(2-benzaldehydhydrazino)nikotinatu (příklad 12). Filtrací směsi s EtOAc se získá titulní sloučenina (627 mg, 26 % se stopami DCU) ve formě špinavě bílého prášku. Zahuštěním filtrátu a triturací s EtOAc se získá titulní sloučenina (1,17 g, 48 %, se stopami DCU). Tento produkt se použije bez dalšího čištění. 1H NMR (D6-DMSO) 10,56 (s, NH), 8,79 (dd, Py-H), 8,15 (dd, Py-H), 7,11 (d, Py-H), 3,67 (s, OCHs), 3,55 (t, CH), 2,88 (s, 2 CH2), 2,50 (m, CH2), 1,90 (m, 2 CH2); DCI (NH3)-MS: [M+H] = (vypočteno pro C17H19N4O6 = 375,1304).
Příklad 18
Syntéza sukcinimidyl 6-(2-(2-sulfo)benzaldehydhydrazino)nikotinatu-sodné soli
Titulní sloučenina se připraví obecným způsobem uvedeným pro pro přípravu sukcinimidyl 6-(2-benzaldehydhydrazino)nikotinatu (příklad 12). Filtrací směsi s EtOAc se získá titulní sloučenina ve formě žluté pevné látky, jejíž polovina se zředí EtOAc (50 ml) a směs se zahřívá 1 hodinu při teplotě zpětného toku. Filtrací horké směsi se získá titulní sloučenina (1,63 g, 85 %) ve formě světle žlutého prášku. Tento produkt se použije bez dalšího čištění. iH NMR (De-DMSO) 11,91 (s, NH), 9,16 (s, =CH), 8,79 (dd, Py-H), 8,16 (dd, Py-H), 8,03 (dd, Ar-H), 7,79 (dd, Ar-H), 7,35 (m, Py-H & 2 Ar-H), 2,88 (s, 2 CH2); FAB (NBA)-MS: [M+H] = 419,2240 (vypočteno pro C17H15N4O7S = 419,0661); analýza, vypočteno pro C17H14NaN407S.(H2O)1,5: C, 43,69; H, 3,45; N,
11,99; Na, 4,92; S, 6,86. Nalezeno: C, 43,62, 43,71; H, 3,59, 3,64; N, 12,13, 12,08; Na, 4,83, 4,67; S, 6,56, 6,30;
Hodnocení stability hydrazonů • · · • ···
Stabilita činidel podle vynálezu se zkouší smísením roztoků těchto činidel s roztoky formaldehydu a sledováním této směsi metodou HPLC,způsobem 1.
HPLC, způsob 1;
kolona:
teplota kolony: průtoková rychlost rozpouštědlo A: rozpouštědlo B:
Zorbax RX C18 (4,6mm x 25 cm),
OC,
1,5 ml/min, mM octan amonný mM octan amonný/acetonitri 1 50/50
| gradient: | t = t = t = t = | 0 | 20 100 100 20 | % % % % | B B B B | |
| 20 22 23 | min min min | |||||
| vlnová délka: | 240 | nm. |
Činidlo podle příkladu 1 se rozpustí v 0,05 m fosoforečnanovém pufru pH 7 (0,1 mg/ml) a přidá se 10 ekvivalentů formaldehydu (0,1 M ve fosforečnanovém pufru). Reakční směs se analyzuje každou 0,5 hodiny metodou HPLC. Změna plochy píku odpovídajícímu činidlu podle příkladu 1, vyjádřená v procentech původní hodnoty před přidáním formaldehydu je znázorněna na obrázku 1. Pro srovnání byl rovněž hodnocen nižší alky1-hydrazon, cyklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hydraz inonikot iny1-5-Aca)) propionaldehyd-hydrazon. Činidlo podle vynálezu během 2,5 hodiny s formaldehydem nereaguje, zatímco nižší alkyl-hydrazon během 2 hodin reaguje > než z 90 %.
Kromě toho bylo více činidel generováno in šitu reakcí 1 ekvivalentu příslušného aldehydu nebo ketonu s cyklo-(D-ValNMeArg-Gly-Asp-Mamb(hydrazinonikotiny-5-Aca) v 0,05 M
fosforečnanovém pufru PH 7,0 (0,1 mg/ml) a potom hodnocena jejich stabilita po přídavku jednoho ekvivalentu formaldehydu, sledováním těchto roztoků metodou HPLC. Výsledky těchto stabilitních zkoušek jsou uvedeny v tabulce 1.
Tabulka 1
Stabilita činidel vůči formaldehydu Příklad formaldehydový test % úbytku *
0
0
0
0
0 < 1
0
0 fenylacetaldehyd 25 glykolaldehyd 40 nižší alkyl 77 * za 2 hodiny
Podíl činidel podle příkladů 1-6, 9 a 11 klesá o <1% během 2 hodinové expozice jednoho ekvivalentu formaldehydu, což ukazuje na jejich velkou stabilitu. Na rozdíl od toho, podíl nižšího alky1-hydrazonu, cyklo-(D-Val-NMeArg-Gly-AspMamb (hy draž i non i kot i ny 1-5-Aca) )propionaldehyd-hydrazonu, označeného jako nižší alkyl, vykazuje snížení za stejných podmínek 77 %. V tabulce 1 jsou také zahrnuty výsledky s dalšími hydrazony, cyklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hydrazinoni kotinyl5-Aca))fenylacetaldehyd-hydrazonem, označeném fenylacetaldehyd, a
cyklo-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(hydrazinonikot inyl-5-Aca)) glykolaldehyd-hydrazonem, označeném glykolaldehyd, jejichž ta struktury nejsou zahrnuty v nárocích tohoto vynálezu. C
Fenylacetaldehyd-hydrazon, ve kterém je benzylová skupina připojena na methylenický hydrazonový atom uhlíku vykazuje poněkud lepší stabilitu se snížením o 25 %, zatímco glykolaldehydhydrazon, ve kterém je hydroxymethylová skupina připojena k methylenickému hydrazonovému atomu uhlíku vykazuje jen mírné zlepšení stability, se snížením o 40 %. Z těchto údajů vyplývá, že pro vysokou stabilitu hydrazonu, jakou mají činidla podle vynálezu, musí být hydrazon konjugován s π systémem nebo musí být být částí kruhového systému. Fenylskupina fenylacetaldehydhydrazonu není konjugovaná s C=N vazbou, protože chybí jeden atom uhlíku. Glykolaldehyd-hydrazon neobsahuje další π systém.
Syntézu radiofarmaka vzorce 2, vhodného jako prostředku pro zobrazení trombu, z činidel podle předcházejících příkladů lze provést způsoby popsanými níže.
Radioznačení činidel s použitím chloridu cínatého
Do lahvičky objemu 10 ml se vnese 0,4 ml roztoku tricinu (40 mg) ve vodě, potom 0,2 ml roztoku činidla ve vodě (10-20 pg), pak 0,5 ml roztoku 99®TcO4~ (~ 50 mCi), 0,2 ml roztoku TPPTS (1 mg) ve H2O a 20 pl roztoku SnCl2.H2O (20 pg v 0,1 N HCI). Je-li to nutné upraví se hodnota pH roztoku na 4. Reakční směs se zahřívá při 50-80 °C 30 minut a analyzuje se radio-HPLC za použití způsobu 2 nebo 3.
Radioznačení činidel bez použití chloridu cínatého
Do lahvičky objemu 10 ml se vnese 0,1 ml roztoku tricinu (10 mg) ve vodě, 0,4 ml roztoku činidla (20-40 pg) ve vodě, 0,5 ml • · · · • · • · • · · · · • · » ·· ·· projednávané U.S.S.N. 08/415,908, syntetizovaným pomocí nehydrazonového činidla cyk1 o-(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mambhydrazinonikotinyl-5-Aca), jehož syntéza je uvedena v současně projednávané U.S.S.N.08/415,908,861, u kterého byla demonstrována jeho vhodnost pro použití jako zobrazovacího prostředku trombú. Toto radiofarmakum vzniká při použití činidel popsaných v příkladech 1-6 a 8 v > 80% výtěžku (vztaženém na Tc-99m).
Tabulka 2
Výtěžky radiofarmak s použitím uvedených činidel příklad RCP %
11 *
* * zahřáto na 50 °C
Skutečnost, že tato radiofarmaka lze připravit z činidel podle vynálezu v dobrém výtěžku je překvapující, protože tato činidla se ukázala být velmi stabilní a nadto musí být hydrolyzována in sítu pro tvorbu těchto radiofarmak. Činidla podle vynálezu nereagují s aldehydy a ketony, které se často vyskytují ve farmaceutických provozech například při výrobě diagnostických kitu, a během výrobního procesu si tak výrazně uchovávají svoji čistotu na rozdíl od činidel obsahujících nižší alky1-hydrazony.
Claims (12)
1. Činidlo pro přípravu radiofarmaka obsahující biologicky aktivní skupinu připojenou na stabilní hydrazonovou skupinu, popřípadě mající mezi uvedenou stabilní hydrazonovou skupinou a uvedenou biologicky aktivní skupinou spojovací skupinu.
2. Činidlo podle nároku 1 mající mezi uvedenou stabilní hydrazonovou skupinou a uvedenou biologicky aktivní skupinou spojovací skupinu.
3. Činidlo podle nároku 2 mající vzorec:
(Q)ďLn-Hz, a jeho farmaceuticky přijatelná sůl, kde
Q znamená biologicky aktivní skupinu;
d je 1-20;
Ln je spojovací skupina vzorce:
Μ1-[Υ1(CR55R5&)f(Zl)f··Υ2]f.-M2,
Mi znamená -[(CH2)gZi]g·-(CR55R56)g''-;
• · · · · · · • ···· · ··· • · · · ···· · • · · · · ·
M2 znamená — (CR55R56)ε· · — [Z 1(CH2)s]g' — ;
g nezávisle znamená 0-10;
g' nezávisle znamená 0-1;
g''nezávisle znamená 0-10;
f nezávisle znamená 0-10;
f' nezávilse znamená 0-10 f''nezávisle znamená 0-1;
Y1 a Y2 jsou při každém výskytu nezávisle zvoleny ze skupiny zahrnující:
vazbu, O, NR56, C=0, C(=O)O, OC(=O)O, OC(=O)NH-, C=NR56, S, SO, SO2, SO3, NHC(=O), (NH)2C(=O), (NH)2C=S;
Z1 je nezávisle při každém výskytu zvolen ze skupiny zahrnující C6-C14 nasycený, částečně nasycený nebo aromatický karbocyklický kruhový systém, substituovaný 0-4 R57; a heterocyklický kruhový systém substituovaný 0-4 R57;
R55 a R56 jsou nezávisle, při každém výskytu zvoleny ze skupiny zahrnující: vodík; C1-C10 alkyl substituovaný 0-5 R57; alkaryl, kde aryl je substituovaný 0-5 R57;
R57 je nezávisle při každém výskytu zvolen ze skupiny zahrnující:
• · · · 4 • · ·· ·· • · · · • I • 4 » ·« · vodík, OH, NHR58, C(=O)R58, OC(=O)R58, OC(=O)OR58, C(=O)OR58, C(=O)NR58, C=N, SR58, SOR58, SO2R58, NHC(=O)R58, NHC(=O)NHR58,
NHC(=S)NHR58; nebo alternativně, při připojení k další molekule Q, R57 se nezávisle zvolí při každém výskytu ze skupiny zahrnující: O, NR58, C=O, C(=O)O, OC(=O)O, C(=O)N-, C=NR58, S, SO, SO2, SO3, NHC(=O), (NH)2C(=O), (NH)2C=S; a
R58 je nezávisle při každém výskytu zvolen ze skupiny zahrnující: vodík; Ci-Cď alkyl; benzyl a fenyl ;
H2 je stabilní hydrazon vzorce:
R80
N=C
R40-^ R81
R41 kde
R40 je nezávisle při každém výskytu zvolen ze skupiny zahrnující: vazbu na Ln, C1-C10 alkyl substituovaný 0-3 R52, aryl substituovaný 0-3 R52, cykloalkyl substituovaný 0-3 R52, heterocyklus substituovaný 0-3 R52, heterocykloalkyl substituovaný 0-3 R52, aralkyl substituovaný 0-3 R52 a alkaryl substituovaný 0-3 R52;
R41 je nezávisle zvolen ze skupiny zahrnující: vodík, aryl substituovaný 0-3 R52, C1-C10 alkyl substituovaný 0-3 R52, a heterocyklus substituovaný • · ··· ·
R52 je nezávisle při každém výskytu zvolen ze skupiny zahrnující: vazbu na Ln, =0, F, Cl,
Br, I, -CF3, -CN, -CO2R53, -CO2R53,
-C(=O)R93, -C(=O)N(R53)2, -CHO, CH2OR93,
-OC(=O)R93, —OC(=0)OR93a, -OR93,
-OC(=0)N(R93)2, -NR93C(=O)R93, —NR94C(=0)OR93a, —NR93C(=0)N(R93)2; —NR94SO2N(R93)2, -NR94SO2R53a, -SO3H, -SO2R53a, -SR93, -S(=O)R93a, -SO2N(R93)2, -N(R93)2, -NHC(=NH)NHR93, -C(=NH)NHR93, =NOR93, NO2, ~C(=O)NHOR93, -C(=0)NHNR93R93a, -OCH2CO2H, 2-(1-morfolino)ethoxy;
R93, R53a5 a R54 jsou každý nezávisle při každém výskytu vybrány ze skupiny zahrnující: vodík, C1-C6 alkyl a vazbu na Ln;
R80 a R81 jsou nezávisle vybrány ze skupiny zahrnující:
H;
C1-C1o alkyl;
-CN;
-CO2R89;
-C(=O)R89;
-C(=O)N(R89)2;
C2-C10 1-alken substituovaný 0-3 R84;
C2-C10 1-alkin substituovaný 0-3 R84; aryl substituovaný 0-3 R84;
nenasycený heterocyklus substituovaný 0-3 R84; a nenasycený karbocyklus substituovaný 0-3 R84; s výhradou, že jestliže jeden z R88 a R81 znamená H nebo alkyl, pak ten druhý neznamená H nebo alkyl;
·· ···· • · · * ··· ···· • · · · · · · · ··· • · ·· · ·· ···· · • · · · · · · · ··· ··· ·· ··· ·· ·· nebo alternativně se mohou R88 a R81 spojit se znázorněným divalentním radikálem uhlíku za tvorby:
n kde
R82 a R83 lze nezávisle zvolit ze skupiny zahrnuj ící:
H;
R84 ;
C1-C10 alkyl substituovaný 0-3 R84;
C2-C10 alkenyl substituovaný 0-3 R84;
C2-C10 alkinyl substituovaný 0-3 R84; aryl substituovaný 0-3 R84;
heterocyklus substituovaný 0-3 R84; a karbocyklus substituovaný 0-3 R84;
nebo alternativně R82, R83 mohou společně tvořit kondenzovaný aromatický nebo heterocyklický kruh;
a a b označují polohy případných dvojných vazeb a n je 0 nebo 1,
R84 znamená nezávisle při každém výskytu skupinu zahrnující: =0, F, Cl, Br, I, -CF3, -CN, -CO2R85, -C(=O)R85, ·· ···· • · • · · · • · • · • · · • · • · · • · · · · • · · ·· ··
-C(=0)N(R85)2, ~N(R85)3 +, -CH2OR85, -OC(=O)R85, —OC(=0)OR85a, -OR85,
-OC(=0)N(R85)2, -NR85C(=0)R85, -NR86C(=O)OR85a, -NR85C(=O)N(R85)2, —NR85SO2N(R85)2, -NR86SO2R85a, -SO3H, -SO2R85a, -SR85, -S(=O)R85a, -SO2N(R85)2, -N(R85)2, -NHC(=NH)NHR85, -C(=NH)NHR85, =NOR85, -C(=O)NHOR85, -OCH2CO2H,
2-(1-morfolino)ethoxy; a
R85j p85a( a R86 každý nezávisle znamenají při každém výskytu skupinu zahrnující: vodík, Ci-Cď alkyl.
4. Činidlo podle nároku 3 , kde :
Q znamená biologicky aktivní molekulu vybranou ze skupiny : antagonistů receptoru Ilb/IIIa, ligandů receptoru Ilb/IIIa, peptidů vázajících fibrin, peptidů vázajících leukocyty, chemotaktických peptidů, analogů somatostatinu, a peptidů vázajících selektin;
ď j e 1 až 3
Ln znamená:
-(CR55R5 6)g' -[Y1(CR55R56)fY2]f'-(CR55R56)g' ·f je 0-5;
• · ·· φφφφ φφ ·· ·· Φ Φ Φ Φ Φ 9 9 9 9
9 9 9 9 ··· 9 9 99
9 9 9 9 9 · · 99 9 9 · • · Φ Φ · ΦΦΦ ·*· ΦΦΦ ΦΦ ΦΦΦ ΦΦ ·· f' je 1-5
Υ1 a Υ2 nezávisle znamenají skupinu vybranou ze skupiny zahrnuj ící:
0, NR56, C=0, C(=0)0, OC(=O)O, C(=O)NH~, C-NR56, S, SO, S02, S03, NHC(=O), (NH)2C(O), (NH)2C=S;
R55 a R5& nezávisle znamenají při každém výskytu skupinu vybranou ze skupiny zahrnující : vodík, alkyl, a alkaryl;
Hz znamená stabilní hydrazon vzorce:
R80 z
N=C
R40·^ 'r81
R41 kde
R40 nezávisle znamená při každém výskytu skupinu vybranou ze skupiny zahrnující: aryl substituovaný 0-3 R52, a heterocyklus substituovaný 0-3 R52;
R4 1 nezávisle znamená skupinu vybranou ze skupiny zahrnující: vodík, aryl substituovaný 0-1 R52,
C1-C3 alkyl substiuovaný 0-1 R52, a heterocyklus substituovaný 0-1 R52;
R52 nezávisle znamená při každém výskytu skupinu vybranou ze skupiny zahrnující: vazbu na Ln,
-CO2R53( -CH2OR53, -SO3H, -SO2R53aj -N(R53)2j ·· • · · · • · ·· • · * · · • · · ·· ·· • · ··· • · · • · ·· ···
-NHC(=NH)NHR53, a -OCH2CO2H;
R53, R53a každý nezávisle znamenají při každém výskytu skupinu vybranou ze skupiny zahrnující: vodík a C1-C3 alkyl;
R80 nezávisle znamená při každém výskytu skupinu vybranou ze skupiny zahrnující:
-CO2R85;
C2-C5 1-alken substituovaný 0-3 R84;
C2-C5 1-alkin substituovaný 0-3 R84; aryl substituovaný 0-3 R84;
nenasycený heterocyklus substituovaný 0-3 R84;
R81 nezávisle znamená při každém výskytu skupinu vybranou ze skupiny zahrnující: H a C1-C5 alkyl;
nebo alternativně R80 a R81 se mohou spojit se znázorněným divalentním radikálem uhlíku za tvorby kde R82 a R83 mohou být nezávisle zvoleny ze skupiny zahrnující : H a R84;
nebo alternativně R82 a R83 mohou společně tvořit kondenzovaný aromatický nebo heterocyklický kruh;
« · ······ ·· ·· n ·· ··· ···· • · · · ··· · · ·· • ···· ····♦·· • · ·· · · · · ··· ··· ·· ··· ·· ·· a a b označují polohy případných dvojných vazeb a n je 0 nebo 1;
R84 nezávisle znamená při každém výskytu skupinu vybranou ze skupiny zahrnující: -CO2R85, -C(=O)N(R85)2, -CHzORSS, -OC(=O)R85, -OR85,
-SO3H, -N(R85)2, -OCH2CO2H;
R85 nezávisle znamená při každém výskytu skupinu vybranou ze skupiny zahrnující: vodík, Ci-C3 alkyl.
5. Činidlo podle nároku 4, kde :
Q znamená biologicky aktivní molekulu vyhranou ze skupiny: antagonistů receptoru Ilb/IIIa a chemotaktických peptidů;
ď je;
Ln znamená :
-(CR5 5R56) g . .-[Yl (CR5 5R5 6) fγ2] f .-(CR55R56) g , kde :
g ' ' je 0-5;
f je 0-5;
f' je 0-5;
Y1 a Y2 nezávisle znamenají při každém výskytu skupinu ze • « ··*··· · · • « · Φ «·· φ φ · φ Φ · · ··· · *
4 φ · · · · « ·· Φ · « • φ ·· Φ ΦΦΦ ··· ··· ·· ··· ·· *· skupiny zahrnující:
Ο, NR56, C=O, C(=O)O, OC(=O)O, C(=O)NH-, C=NR56, S, NHC(=O), (NH)2C(O), (NH)2C=S;
R55 a R56 znamenají vodík;
Hz je stabilní hydrazon vzorce:
R80 /
N = C R4°.N' 'r81
R41 kde
R40 nezávisle znamená při každém výskytu skupinu ze skupiny zahrnující: heterocyklus susbtituovaný R52;
R41 znamená vodík;
R52 znamená vazbu na Ln;
R80 nezávisle znamená skupinu zvolenou ze skupiny zahrnuj ící:
-CO2R85;
C2-C3 1-alken substituovaný 0-1 R84; aryl substituovaný 0-1 R84;
nenasycený heterocyklus substituovaný 0-1 R84;
R81 znamená H;
R84 nezávisle znamená při každém vyskýtu skupinu zvolenou ze skupiny zahrnující:
-CO2R85;
-OR85;
-SO3H;
-N(R85)2;
R85 nezávisle znamená při každém výskytu skupinu vybranou ze skupiny zahrnující:
H a methyl.
6. Činidla podle nároku 3, kterými jsou
NH
HO
HN
O
SO3Na
COOH
7. Kit pro přípravu radiofarmaka obsahující:
(a) předem stanovené množství sterilního, farmaceuticky přijatelného činidla podle kteréhokoli z nároků 1-6;
(b) předem stanovené množství jednoho nebo více, sterilního, farmaceuticky přijatelného doplňkového ligandu (li gandů);
(c) předem stanovené množství sterilního, farmaceuticky přijatelného redukčního činidla; a (d) případně předem stanovené množství sterilní, farmaceuticky přijatelné složky, vybrané ze skupiny zahrnující: přenosové ligandy, pufry, lyofilizační prostředky, stabilizátory, solubi1 izátory a bakteriostat ika.
8. Kit pro přípravu radiofarmaka obsahující:
(a) předem stanovené množství sterilního, farmaceuticky přijatelného činidla podle kteréhokoli z nároků 1-6;
(b) předem stanovené množství dvou sterilních farmaceuticky přijatelných doplňkových ligandů;
(c) předem stanovené množství sterilního, farmaceuticky při jatelného redukčního činidla; a (d) případně předem stanovené množství sterilní, farmaceuticky přijatelné složky, vybrané ze skupiny zahrnující; přenosové ligandy, pufry, lyofilizační prostředky, stabilizátory, solubi1 izátory a • ·
I · · 4 • · · • · · · « • · « • · · · bakteriostat ika.
9. Stabilní hydrazonová sloučenina vhodná pro syntézy činidel podle nároku 1 mající vzorec:
R44(C=O)s(R45)N-N=CR80R8i kde s j e 0 nebo 1;
R44 je vybrán ze skupiny zahrnující: aryl substituovaný 1 R59; a heterocyklus substituovaný 1 R59;
R45 je vybrán ze skupiny zahrnující: vodík a Ci-Ce alkyl;
R59 je chemicky reaktivní skupina vybraná ze skupiny zahrnuj ící:
alkyl substituovaný halogenem;
anhydrid kyseliny;
halogenid kyseliny;
aktivní ester;
i sothi okyanatan;
maleinimid;
R80 a R8l nezávisle znamenají skupinu vybranou ze ze skupiny zahrnuj ící:
H;
Ci-Cio alkyl;
-CN;
-CO2R85;
-C(=O)R85;
-C(=0)N(R85)2;
C2-C10 1-alken substituovaný 0-3 R84;
C2-C10 1-alkin substituovaný 0-3 R84; aryl substituovaný 0-3 R84;
nenasycený heterocyklus substituovaný 0-3 R84; a nenasycený karbocyklus substituovaný 0-3 R84; s výhradou, že jestliže jeden z R80 a R81 znamená H nebo alkyl, pak ten druhý neznamená H nebo alkyl;
nebo alternativně, R80 a R81 se mohou spojit se znázorněným divalentním radikálem uhlíku za tvorby:
kde :
R82 a R83 nezávisle znamenají při každém výskytu skupinu vybranou ze skupiny zahrnující:
H;
R84 ;
C1-C10 alkyl substituovaný 0-3 R84;
C2-C10 alkenyl substituovaný 0-3 R84;
C2-C10 alkinyl substituovaný 0-3 R84; aryl substituovaný 0-3 R84;
heterocyklus substituovaný 0-3 R84; karbocyklus substituovaný 0-3 R84;
nebo alternativně,
R82 a R83 mohou společně vytvářet kondenzovaný aromatický nebo heterocyklický kruh; a • · · ···· · ··· • · · * · ·· ···· • · · · · · · ··· ··* ·· ··· ·· ·· a a b označují polohy případných dvojných vazeb;
n j e 0 nebo 1,
R84 nezávisle znamená při každém výskytu skupinu vybranou ze skupiny zahrnující: =0, F, Cl, Br, I, -CF3, -cn, -CO2R85, -C(=O)R85, -C(=O)N(R85)2, -CH2OR85, -OC(=O)R85, -OC(=O)OR85a, —OR85,
-OC(=0)N(R85)2, -NR85C(=0)R85, -NR86C(=0)OR85a, -NR85C(=0)N(R85)2, S03Na, -NR86SO2N(R85)2, -NR86SO2R85a, -SO3H, -SO2R85a, -SR85, -S(=O)R85a, -SO2N(R85)2, -N(R85)2, N(R85)3 +, -NHC(=NH)NHR85, -C(=NH)NHR85, =NOR85, -C(=0)NHOR85, -OCH2CO2H,
2-(1-morfolino)ethoxy;
R85, R85as a R86 nezávisle znamenají při každém výskytu skupinu vybranou ze skupiny zahrnující: vodík, Ci-Ce alkyl.
10. Sloučenina podle nároku 9 ve které:
R59 znamená skupinu vybranou ze skupiny zahrnující:
N-0
O
O • · · · • · • · · · • « • 4 ft · · · • ·
I 4 » 4 • ·
R80 nezávisle znamená skupinu vybranou ze skupiny zahrnuj ící:
-CO2R85;
C2-C5 1-alken substituovaný 0-3 R84;
C2-C5 1-alkin substituovaný 0-3 R84; aryl substituovaný 0-3 R84;
nenasycený heterocyklus substituovaný 0-3 R84;
R81 nezávisle znamená skupinu vybranou ze skupiny zahrnující: H a C1-C5 alkyl;
nebo alternativně R80 a R81 se mohou spojit se znázorněným divalentním radikálem uhlíku za tvorby:
n kde R82 a R83 mohou nezávisle znamenat skupinu vybranou ze skupiny zahrnující: H a R84;
nebo alternativně, R82, R83 se mohou spojit a vytvářet kondenzovaný aromatický nebo heterocyklický kruh; a a a b označují polohy případných dvojných vazeb;
n j e 0 nebo 1,
R84 nezávisle znamená při každém výskytu skupinu • · ·· ·· ··· vybranou ze skupiny zahrnující: -CO2R85, -C(=O)N(R85)2, -CH2OR85, -OC(=O)R85, -OR85, -SO3H, -SO3Na, -N(R85)2, -OCH2CO2H;
R85 nezávisle znamená při každém výskytu skupinu vybranou ze skupiny zahrnující: vodík a C1-C3 alkyl.
11. Sloučenina podle nároku 10, ve které:
R80 nezávisle znamená skupinu vybranou ze skupiny zahrnuj ící:
-CO2R85;
C2-C3 1-alken substituovaný 0-1 R84; aryl substituovaný 0-1 R84;
nenasycený heterocyklus substituovaný 0-1 R84;
R81 znamená H;
R84 nezávisle znamená při každém výskytu skupinu vybranou ze skupiny zahrnující: -CO2R85, -OR85 -SO3H, -SO3Na, ~(R85)2;
R85 nezávisle znamená při každém výskytu skupinu vybranou ze skupiny zahrnující:
H a methyl;
12. Sloučeniny podle nároku 9, kterými jsou:
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/476,296 US5750088A (en) | 1993-03-30 | 1995-06-07 | Stable hydrazones linked to a peptide moiety as reagents for the preparation of radiopharmaceuticals |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ380197A3 true CZ380197A3 (cs) | 1998-07-15 |
Family
ID=23891282
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ973801A CZ380197A3 (cs) | 1995-06-07 | 1996-06-07 | Stabilní činidla pro přípravu radiofarmak |
Country Status (29)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US5750088A (cs) |
| EP (1) | EP0832068B1 (cs) |
| JP (1) | JPH11507364A (cs) |
| KR (1) | KR19990022573A (cs) |
| CN (1) | CN1192733A (cs) |
| AR (1) | AR003959A1 (cs) |
| AT (1) | ATE233241T1 (cs) |
| AU (1) | AU718683B2 (cs) |
| BR (1) | BR9609003A (cs) |
| CA (1) | CA2222183A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ380197A3 (cs) |
| DE (1) | DE69626392T2 (cs) |
| EA (1) | EA000742B1 (cs) |
| EE (1) | EE9700313A (cs) |
| ES (1) | ES2193245T3 (cs) |
| HR (1) | HRP960250A2 (cs) |
| HU (1) | HUP9901469A3 (cs) |
| IL (1) | IL118468A0 (cs) |
| LT (1) | LT4380B (cs) |
| LV (1) | LV12044B (cs) |
| MX (1) | MX9709126A (cs) |
| MY (1) | MY133974A (cs) |
| NO (1) | NO975678L (cs) |
| NZ (1) | NZ310799A (cs) |
| PL (1) | PL323995A1 (cs) |
| SI (1) | SI9620076B (cs) |
| SK (1) | SK163497A3 (cs) |
| WO (1) | WO1996040637A1 (cs) |
| ZA (1) | ZA964854B (cs) |
Families Citing this family (43)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0888130B1 (en) * | 1996-03-13 | 2003-07-02 | Bristol-Myers Squibb Pharma Company | New ternary radiopharmaceutical complexes |
| DE69722038T2 (de) * | 1996-10-07 | 2004-02-19 | Bristol-Myers Squibb Pharma Co. | Radiopharmazeutische mittel zur bildgebung von infektionen und entzündungen |
| US6416733B1 (en) * | 1996-10-07 | 2002-07-09 | Bristol-Myers Squibb Pharma Company | Radiopharmaceuticals for imaging infection and inflammation |
| US20030124053A1 (en) * | 1996-10-07 | 2003-07-03 | Barrett John Andrew | Radiopharmaceuticals for imaging infection and inflammation |
| US6403054B1 (en) | 1997-05-28 | 2002-06-11 | Bristol-Myers Squibb Pharma Company | Ternary ligand complexes useful as radiopharmaceuticals |
| US6537520B1 (en) * | 1998-03-31 | 2003-03-25 | Bristol-Myers Squibb Pharma Company | Pharmaceuticals for the imaging of angiogenic disorders |
| US6524553B2 (en) | 1998-03-31 | 2003-02-25 | Bristol-Myers Squibb Pharma Company | Quinolone vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals |
| CA2326978A1 (en) * | 1998-04-03 | 1999-10-14 | Milind Rajopadhye | Radiopharmaceuticals for imaging infection and inflammation and for imaging and treatment of cancer |
| HRP990317A2 (en) * | 1998-10-13 | 2000-06-30 | Du Pont Pharm Co | A process for the preparation of a thrombus imaging agent |
| US6511649B1 (en) | 1998-12-18 | 2003-01-28 | Thomas D. Harris | Vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals |
| AU766822B2 (en) | 1998-12-18 | 2003-10-23 | Du Pont Pharmaceuticals Company | Vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals |
| WO2000035887A2 (en) * | 1998-12-18 | 2000-06-22 | Du Pont Pharm Co | Vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals |
| US6794518B1 (en) * | 1998-12-18 | 2004-09-21 | Bristol-Myers Squibb Pharma Company | Vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals |
| AU4027800A (en) * | 1999-03-26 | 2000-10-16 | Du Pont Pharmaceuticals Company | Method for localization of blood clots |
| US6808698B1 (en) | 1999-03-26 | 2004-10-26 | Bristol-Myers Squibb Pharma Company | Method for localization of blood clots |
| US6656448B1 (en) | 2000-02-15 | 2003-12-02 | Bristol-Myers Squibb Pharma Company | Matrix metalloproteinase inhibitors |
| US20030220646A1 (en) * | 2002-05-23 | 2003-11-27 | Thelen Sarah L. | Method and apparatus for reducing femoral fractures |
| US6534038B2 (en) | 2000-04-07 | 2003-03-18 | Bristol-Myers Squibb Pharma Company | Ternary ligand complexes useful as radiopharmaceuticals |
| HUP0400758A3 (en) * | 2000-11-03 | 2005-02-28 | Bristol Myers Squibb Pharma Co | Simultaneous dual isotope imaging of cardiac perfusion and cardiac inflammation |
| GB0031592D0 (en) * | 2000-12-28 | 2001-02-07 | Nycomed Amersham Plc | Stabilised radiopharmaceutical compositions |
| US6838074B2 (en) | 2001-08-08 | 2005-01-04 | Bristol-Myers Squibb Company | Simultaneous imaging of cardiac perfusion and a vitronectin receptor targeted imaging agent |
| AU2002331042B2 (en) * | 2001-08-08 | 2007-10-25 | Bristol-Myers Squibb Pharma Company | Simultaneous imaging of cardiac perfusion and a vitronectin receptor targeted imaging agent |
| US7297709B2 (en) | 2003-05-22 | 2007-11-20 | Abbott Laboratories | Indazole, benzisoxazole, and benzisothiazole kinase inhibitors |
| US7319149B2 (en) * | 2003-06-13 | 2008-01-15 | Bristol-Myers Squibb Pharma Company | Chelants and macrocyclic metal complex radiopharmaceuticals thereof |
| US7317104B2 (en) | 2003-06-13 | 2008-01-08 | Bristol-Myers Squibb Pharma Company | Chelants and macrocyclic metal complex radiopharmaceuticals thereof |
| CA2783275A1 (en) * | 2003-07-24 | 2005-02-03 | Bracco Imaging S.P.A. | Stable radiopharmaceutical compositions and methods for their preparation |
| US20050106100A1 (en) * | 2003-09-03 | 2005-05-19 | Harris Thomas D. | Compounds containing matrix metalloproteinase substrates and methods of their use |
| WO2007005491A1 (en) * | 2005-06-30 | 2007-01-11 | Bristol-Myers Squibb Pharma Company | Hydrazide conjugates as imaging agents |
| WO2007046411A1 (ja) * | 2005-10-19 | 2007-04-26 | Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. | イソキサゾール化合物の安定化方法 |
| US7465795B2 (en) * | 2005-12-20 | 2008-12-16 | Astrazeneca Ab | Compounds and uses thereof |
| ES2391472T3 (es) * | 2005-12-20 | 2012-11-27 | Astrazeneca Ab | Derivados de cinnolina sustituidos como moduladores del receptor de GABAA y método para su síntesis |
| WO2008083491A1 (en) | 2007-01-11 | 2008-07-17 | Critical Outcome Technologies Inc. | Compounds and method for treatment of cancer |
| US8138191B2 (en) * | 2007-01-11 | 2012-03-20 | Critical Outcome Technologies Inc. | Inhibitor compounds and cancer treatment methods |
| TW200911760A (en) * | 2007-06-19 | 2009-03-16 | Astrazeneca Ab | Compounds and uses thereof |
| WO2009079797A1 (en) | 2007-12-26 | 2009-07-02 | Critical Outcome Technologies, Inc. | Compounds and method for treatment of cancer |
| ES2511917T3 (es) * | 2008-12-29 | 2014-10-23 | Sanofi | Derivados de 2-piridin-2-il-pirazol-3(2H)-ona, su preparación y su aplicación en terapéutica |
| JP5734870B2 (ja) | 2008-12-29 | 2015-06-17 | サノフイ | ２−ピリジン−２−イル−ピラゾール−３（２ｈ）−オンの誘導体、これらの調製およびｈｉｆ活性化剤としての治療用途 |
| FR2940652B1 (fr) * | 2008-12-29 | 2011-02-11 | Sanofi Aventis | Derives de 2-pyridin-2-yl-pyrazol-3(2h)-one,leur preparation et leur application en therapeutique |
| FR2949468B1 (fr) * | 2009-08-28 | 2011-09-30 | Sanofi Aventis | Derives de 2-pyridin-2-yl-pyrazol-3(2h)-one, leur preparation et leur application en therapeutique |
| CA2999435A1 (en) | 2010-04-01 | 2011-10-06 | Critical Outcome Technologies Inc. | Compounds and method for treatment of hiv |
| FR2967671A1 (fr) * | 2010-11-24 | 2012-05-25 | Pf Medicament | Complexe de technetium 99m en tant qu'outil de diagnostic in vivo des tumeurs cancereuses |
| CN110818624B (zh) * | 2019-11-22 | 2022-11-22 | 华东理工大学 | 吡啶季铵盐腙类化合物及制备方法与在抗菌或香料缓释中的应用 |
| CN112999369B (zh) * | 2021-03-03 | 2022-02-25 | 江苏元本生物科技有限公司 | 一种her2亲合体放射性核素标记物组合物及其应用 |
Family Cites Families (36)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4427646A (en) | 1981-04-02 | 1984-01-24 | Research Corporation | Use of radiolabeled peptide derived from crosslinked fibrin to locate thrombi in vivo |
| US4792525A (en) | 1982-08-04 | 1988-12-20 | La Jolla Cancer Research Foundation | Tetrapeptide |
| US4578079A (en) | 1982-08-04 | 1986-03-25 | La Jolla Cancer Research Foundation | Tetrapeptide |
| CA1300608C (en) * | 1985-05-10 | 1992-05-12 | Edward A. Deutsch | 99 mtc (iii) myocardial imaging agents which are non-reducable in vivo |
| GB8624272D0 (en) * | 1986-10-09 | 1986-11-12 | Amersham Int Plc | Cationic complexes of tc-99m |
| US5217705A (en) | 1987-09-25 | 1993-06-08 | Neorx Corporation | Method of diagnosing blood clots using fibrin-binding proteins |
| DE3855458T2 (de) | 1987-12-10 | 1996-12-05 | Jolla Cancer Res Found | Verfahren zur herstellung von conformationnell stabilisierten zelladhäsionspeptiden |
| JPH07110869B2 (ja) * | 1988-03-09 | 1995-11-29 | セ・イ・エス・ビオ・アンテルナシヨナル | 放射性医薬品として使用できる９９ｍＴｃ、１８６Ｒｅまたは１８８Ｒｅの窒化物錯体の製造方法 |
| GB8808414D0 (en) * | 1988-04-11 | 1988-05-11 | Amersham Int Plc | Ligands & cationic complexes thereof with technetium-99m |
| EP0412115A4 (en) | 1988-04-29 | 1991-11-13 | New England Deaconess Hospital Corporation | Hybrid peptides and methods of their use |
| US5002754A (en) * | 1988-06-15 | 1991-03-26 | University Of Cincinnati | Technetium (III/II) imaging agents |
| WO1990003391A1 (en) | 1988-09-29 | 1990-04-05 | Biogen, Inc. | Hirudin peptides |
| US5066789A (en) * | 1988-09-30 | 1991-11-19 | Neorx Corporation | Targeting substance-diagnostic/therapeutic agent conjugates having Schiff base linkages |
| US5270030A (en) | 1988-12-29 | 1993-12-14 | Bio-Technology General Corp. | Fibrin binding domain polypeptide and method of producing |
| GB8902362D0 (en) * | 1989-02-03 | 1989-03-22 | Amersham Int Plc | Cationic complexes of technetium-99m |
| IL93432A (en) * | 1989-02-24 | 1994-02-27 | Johnson Mathey Inc | Hydrazines and hydrazides, their conjugates with macromolecules, and such conjugates labeled with metallic ions |
| US5206370A (en) * | 1989-02-24 | 1993-04-27 | Johnson Matthey, Inc. | Certain pyridyl hydrazines and hydrazides useful for protein labeling |
| US4957728A (en) * | 1989-05-19 | 1990-09-18 | University Of Cincinnati | Kit for preparing Tc (III)-99m myocardial imaging agents that are effective in humans |
| US4917879A (en) * | 1989-05-19 | 1990-04-17 | University Of Cincinnati | 99MTC(III) myocardial imaging agents that are effective in humans |
| GB8914020D0 (en) | 1989-06-19 | 1989-08-09 | Antisoma Ltd | Synthetic peptides for use in thrombus detection |
| EP0410537A1 (en) | 1989-07-28 | 1991-01-30 | Merck & Co. Inc. | Fibrinogen receptor antagonists |
| GB8919488D0 (en) * | 1989-08-29 | 1989-10-11 | Amersham Int Plc | New cores for technetium radiopharmaceuticals |
| ZA907743B (en) | 1989-10-03 | 1991-07-31 | Merrell Dow Pharma | Radiolabeled anticoagulant peptides |
| US5086069A (en) | 1990-02-05 | 1992-02-04 | Rorer Pharmaceutical Corporation | Anti-thrombotic peptide and pseudopeptide derivatives |
| US5137877B1 (en) * | 1990-05-14 | 1996-01-30 | Bristol Myers Squibb Co | Bifunctional linking compounds conjugates and methods for their production |
| FR2664166A1 (fr) * | 1990-07-04 | 1992-01-10 | Cis Bio Int | Procede de preparation de complexes nitruro de metaux de transition utilisables comme produits radiopharmaceutiques ou pour la synthese de nouveaux produits radiopharmaceutiques. |
| IL99537A (en) | 1990-09-27 | 1995-11-27 | Merck & Co Inc | Fibrinogen receptor antagonists and pharmaceutical preparations containing them |
| AU8730691A (en) * | 1990-09-28 | 1992-04-28 | Neorx Corporation | Polymeric carriers for release of covalently linked agents |
| US5112594A (en) * | 1991-04-04 | 1992-05-12 | Mallinckrodt Medical, Inc. | Kit for preparing a technetium-99m myocardial imaging agent |
| DE69230525T2 (de) | 1991-02-08 | 2000-06-21 | Diatide Inc | Technetium-99m markierte Polypeptide zur Bildformung |
| FR2679452B1 (fr) * | 1991-07-22 | 1993-11-12 | Cis Bio International | Produit radiopharmaceutique ayant notamment un tropisme cerebral, comportant un complexe nitruro d'un metal de transition, et son procede de preparation. |
| US5362852A (en) * | 1991-09-27 | 1994-11-08 | Pfizer Inc. | Modified peptide derivatives conjugated at 2-hydroxyethylamine moieties |
| DK0641222T3 (da) | 1992-05-21 | 2000-12-11 | Diatide Inc | Peptider mærket med technetium-99m til trombeafbildning |
| GB2268494B (en) | 1992-07-08 | 1996-08-21 | Kenneth Francis Prendergast | Imaging compositions |
| FR2698272B1 (fr) * | 1992-11-20 | 1994-12-30 | Cis Bio Int | Procédé de marquage cellulaire au moyen de complexes nitruro-bis (dithiocarbamato)Tc-99m et trousse pour la mise en Óoeuvre de ce procédé. |
| US5879657A (en) * | 1993-03-30 | 1999-03-09 | The Dupont Merck Pharmaceutical Company | Radiolabeled platelet GPIIb/IIIa receptor antagonists as imaging agents for the diagnosis of thromboembolic disorders |
-
1995
- 1995-06-07 US US08/476,296 patent/US5750088A/en not_active Expired - Fee Related
-
1996
- 1996-05-30 IL IL11846896A patent/IL118468A0/xx unknown
- 1996-06-04 HR HR08/476,296A patent/HRP960250A2/hr not_active Application Discontinuation
- 1996-06-06 MY MYPI96002227A patent/MY133974A/en unknown
- 1996-06-07 EE EE9700313A patent/EE9700313A/xx unknown
- 1996-06-07 KR KR1019970709054A patent/KR19990022573A/ko not_active Application Discontinuation
- 1996-06-07 AU AU61661/96A patent/AU718683B2/en not_active Ceased
- 1996-06-07 MX MX9709126A patent/MX9709126A/es unknown
- 1996-06-07 CA CA002222183A patent/CA2222183A1/en not_active Abandoned
- 1996-06-07 EP EP96919289A patent/EP0832068B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-07 AR ARP960103028A patent/AR003959A1/es not_active Application Discontinuation
- 1996-06-07 CN CN96196141A patent/CN1192733A/zh active Pending
- 1996-06-07 PL PL96323995A patent/PL323995A1/xx unknown
- 1996-06-07 AT AT96919289T patent/ATE233241T1/de not_active IP Right Cessation
- 1996-06-07 SI SI9620076A patent/SI9620076B/sl unknown
- 1996-06-07 JP JP9501990A patent/JPH11507364A/ja not_active Ceased
- 1996-06-07 EA EA199800025A patent/EA000742B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1996-06-07 HU HU9901469A patent/HUP9901469A3/hu unknown
- 1996-06-07 DE DE69626392T patent/DE69626392T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-07 ES ES96919289T patent/ES2193245T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-07 CZ CZ973801A patent/CZ380197A3/cs unknown
- 1996-06-07 ZA ZA9604854A patent/ZA964854B/xx unknown
- 1996-06-07 WO PCT/US1996/009766 patent/WO1996040637A1/en not_active Application Discontinuation
- 1996-06-07 NZ NZ310799A patent/NZ310799A/xx unknown
- 1996-06-07 BR BR9609003-0A patent/BR9609003A/pt not_active Application Discontinuation
- 1996-06-07 SK SK1634-97A patent/SK163497A3/sk unknown
-
1997
- 1997-10-23 US US08/956,313 patent/US6015904A/en not_active Expired - Fee Related
- 1997-12-05 LT LT97-191A patent/LT4380B/lt not_active IP Right Cessation
- 1997-12-05 NO NO975678A patent/NO975678L/no not_active Application Discontinuation
-
1998
- 1998-01-28 LV LVP-97-247A patent/LV12044B/en unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ380197A3 (cs) | Stabilní činidla pro přípravu radiofarmak | |
| US5744120A (en) | Ternary radiopharmaceutical complexes | |
| US5879659A (en) | Ternary radiopharmaceutical complexes | |
| US6524554B1 (en) | Radiopharmaceuticals for imaging infection and inflammation and for imaging and treatment of cancer | |
| EP0888130B1 (en) | New ternary radiopharmaceutical complexes | |
| US7319149B2 (en) | Chelants and macrocyclic metal complex radiopharmaceuticals thereof | |
| HRP970139A2 (en) | New ternary radiopharmaceutical complexes |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic |