SI9520031A - Method of preparing unsymmetrical phosphoric acid diesters and their salts - Google Patents

Method of preparing unsymmetrical phosphoric acid diesters and their salts Download PDF

Info

Publication number
SI9520031A
SI9520031A SI9520031A SI9520031A SI9520031A SI 9520031 A SI9520031 A SI 9520031A SI 9520031 A SI9520031 A SI 9520031A SI 9520031 A SI9520031 A SI 9520031A SI 9520031 A SI9520031 A SI 9520031A
Authority
SI
Slovenia
Prior art keywords
halogen
phosphoric acid
hydrogen
hydroxy
acid
Prior art date
Application number
SI9520031A
Other languages
English (en)
Inventor
Einhard Kiegel
Harald Zilch
Original Assignee
Boehringer Mannheim Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Boehringer Mannheim Gmbh filed Critical Boehringer Mannheim Gmbh
Publication of SI9520031A publication Critical patent/SI9520031A/sl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/06—Pyrimidine radicals
    • C07H19/10—Pyrimidine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C07F9/08—Esters of oxyacids of phosphorus
    • C07F9/09—Esters of phosphoric acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/16—Purine radicals
    • C07H19/20—Purine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Fuel Cell (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

Boehringer Mannheim GmbH
Postopek za pripravo nesimetričnih diestrov fosforjeve kisline in njihovih soli
Predloženi izum se nanaša na postopek za pripravo diestrov fosforjeve kisline z dvema neidentičnima organskima ostankoma.
Postopek v smislu predloženega izuma za pripravo diestrov fosforjeve kisline je označen s tem, da (a) ester fosforjeve kisline s formulo I:
R1-O-P(O)(OH)2 (I), v katerem R1 pomeni lipidni ostanek s splošno formulo (IV):
ch2-a
CH-B (IV),
I CH2v katerem sta lahko A in B enaka ali različna in pomenita vodik, C1-C18-alkil, C^C^alkoksi, C^C^-alkiltio, C^C^-alkilsulfinil ali C^C^-alkilsulfonil, ali v katerem R1 pomeni ravnoverižno ali razvejeno, nasičeno ali nenasičeno alkilno verigo z 10-20 atomi ogljika, ki je v danem primeru lahko enkrat ali večkrat substituirana s halogenom, C1-C6-alkoksi, C]-C6-alkilmerkapto, kondenziramo z alkoholom s formulo II:
R2-OH (II) v katerem R2 pomeni organski ostanek, v prisotnosti klorida arilsulfonske kisline in organske baze, (b) nastali diester forsforjeve kisline z dodatkom raztopine, ki vsebuje zemeljskoalkalijske ione, oborimo kot težko topno sol in izoliramo, (c) težko topno sol s suspendiranjem v organskem topilu, ki se ne meša z vodo, in v razredčeni vodni mineralni kislini, izoliramo kot prosto kislino v organskem topilu.
Nastali produkt nato dalje očistimo. To lahko npr. poteka tako, da surovi produkt, dobljen po stopnji (c), očistimo s preparativno kromatografijo na ustrezni koloni, npr. koloni z reverzno fazo (RP=reverzna faza) (stopnja (d)) in nato spojino, dobljeno v obliki proste kisline, pretvorimo v poljubno sol (stopnja (e)).
V določenih primerih, kjer npr. vsebuje alkohol s formulo II poleg primarne OH skupine še nadaljnje sekundarne OH skupine, je lahko prednostno, da izvedemo reakcijo estra fosforjeve kisline s formulo I s kloridom arilsulfonske kisline v prisotnosti organske baze (pridobivanje mešanega anhidrida) in šele nato dodamo alkohol s formulo II.
Predloženi postopek je posebno primeren za pripravo liponukleotidov, kjer R2 pomeni nukleozidni ostanek.
V WO 92/03462 so prikazani trije različni postopki za pripravo lipidnih derivatov nukleozidov:
1. Presnova diklorida lipidfosfata z nukleozidom v prisotnosti organske baze.
2. Encimatska kataliza reakcije monoholinestra lipidfosforjeve kisline z nukleozidom (fosfolipaza D iz Streptomyces).
?3. Kondenzacija lipidfosfata z nukleozidom v prisotnosti DCC (dicikloheksilkarbodiimid).
Vse tri variante so primerne tako za vezavo internukleotidnih vezi kot tudi za kondenzacijo nukleozidov s lipidfosfati in so navedene v literaturi.
V J. Med. Chem. 34,1408 (1991), Biochem. Biophys. Res. Commun. 171, 451 (1990) in US 5,149,794 je opisana kondenzacija lipidfosfata in nukleozida z DCC. V Biochem. 31, 4757 (1992), EP 0 457 570, EP 0 262 876 in WO 92/17487 je opisana encimatsko katalizirna kondenzacija fosfoholina z nukleozidom v prisotnosti fosfolipaze D iz Streptomyces. Poleg tega opisujejo Khorana et al. v različnih publikacijah [npr. J. Am. Chem. Soc. 88. 829 (1966), dto. 86, 1630 (1964)] kloride arilsulfonske kisline za sintezo internukleotidnih vezi, zlasti sterično oviran klorid
2,4,6-triizopropilbenzensulfonske kisline. Za kondenzacijo fosfolipidov z nukleozidi uporabimo reagent od Hostetlerja et al., ki je opisan med drugim v J. Biol. Chem. 265, 6112 (1990), dto. 266, 11714 (1991). Analogno uspe tudi kondenzacija nukleozidnih monofosfotov s primarnimi lipidnimi alkoholi, kot je opisano v J. Biol. Chem. 267.20288 (1992).
V EP-A-0575717 in WO-A-9115494 so opisane kalcijeve soli glicerilfosforilserinov. Te kalcijeve soli karboksilnih kislin so dobro topne. V WO-91-12256 je opisana dobro topna kalcijeva sol nesimetričnega diestra fosforjeve kisline. Patentni spis DD-A-138213 opisuje pretvorbo diestrov fosforjeve kisline v barijevo sol.
Opisane metode pa imajo to pomanjkljivost, da je možno pripraviti lipidne derivate le z nezadovoljivimi dobitki. Nadaljnja pomanjkljivost je poleg tega tudi nezadostna čistota produktov in za to potrebni čistilni postopki, ki otežujejo tehnizacijo večjih količin, npr. večkilogramskih. Reprodukcija objavljenih postopkov ne da navedenih dobitkov pri nastavitvi večjih postopkov.
S postopkom v smislu predloženega izuma lahko premagamo te težave. Nadaljnja naloga predloženega izuma je, da damo na razpolago postopek, s katerim bi lahko očistili površinsko aktivni diester fosforjeve kisline. Končni produkt postopka bi omogočil poleg tega tudi direktno mletje.
Posebno je predmet predloženega izuma postopek za pripravo lipidnih derivatov, označen s tem, da
4.(a) ester fosforjeve kisline s formulo I, v katerem R1 pomeni organski ostanek, kot je npr. poseben lipidni del, kondenziramo s 5’-nezaščitenim nukleozidom v prisotnosti klorida arilsulfonske kisline in organske baze, kot npr. piridina, (b) po hidrolizi uparjalni ostanek zmešamo z organskim topilom (npr. Dipe, MTB), nastalo piridinijevo sol arilsulfonske kisline skoraj popolnoma kristaliziramo in recikliramo, (c) liponukleotid z dodatkom, npr. vodne raztopine kalcijevega acetata, oborimo kot težkotopno sol in izoliramo, (d) težkotopno sol s suspendiranjem v organskem topilu, ki se ne meša z vodo in razredčeni vodni mineralni kislini izoliramo kot prosto kislino v organskem topilu (uparjalni ostanek >95% površine po HPLC).
Surovi produkt nato očistimo s preparativno kromatografijo na RP-koloni in prosto kislino pretvorimo v poljubno sol.
Po HPLC je v danem primeru možno vmesno izoliranje iz frakcij, ki vsebujejo produkt, z obarjanjem kalcijeve soli, čemur sledi pretvorba v prosto kislino in v natrijevo sol (kot je opisano zgoraj).
Samo ta posebna kombinacija različnih stopenj postopka ima odločilen napredek, ki dopušča ekonomično proizvodnjo ustreznih spojin v večkilogramskem merilu.
Kondenzacija v prisotnosti klorida arilsulfonske kisline uspe tudi z uporabo nukleozidnega monofosfata in lipidnega alkohola, pri čemer so kasnejše stopnje postopka identične.
Uporabljeni lipidfosfat lahko uporabimo kot surovi produkt ne da bi znatno vplival na čistoto produkta ali dobitek glede na nukleozid. Kot baze sta primerna npr. piridin ali lutidin v inertnem organskem topilu, kot npr. toluenu ali pa izvedemo presnovo direktno v bazi brez nadaljnjega topila.
Kot kloridi arilsulfonske kisline pridejo v poštev kloridi benzen-, toluen-, 2,4,6trimetilbenzen-, 2,6-dimetilbenzen-, 2,4,6-triizopropilbenzen- ali 2,6diizopropilbenzen-sulfonske kisline. Čim večji substituenti so v orto legah, tem manj
5' z - -- - :
stranskih produktov lahko pričakujemo.
Namesto klorida arilsulfonske kisline lahko v nekaterih primerih uporabimo tudi sterično oviran klorid karboksilne kisline ali klorid fosforjeve kisline.
Kot klorid karboksilne kisline, ki je primeren za uporabo, naj omenimo pivaloil klorid. Kot aktivna vmesna stopnja za kondenzacijo z nukleozidom je ob uporabi klorida fosforjeve kisline lahko tudi spojina s formulo III, ki je navadno anhidrid fosfata s formulo I.
R1-O-P(O)(OH)-O-P-(O)-(OH)-O-R1 (III)
Za oborjenje težko topne soli uporabimo prednostno kalcij v obliki njegovega acetata, hidroksida, karbonata ali hidrida, z ozirom na njegovo dobro fiziološko prenesljivost in slabo topnost soli v organskem topilu.
Kromatografsko čiščenje prednostno izvedemo na reverzni fazi z metanolom/pufrno raztopino kot eluirnim sredstvom. V končni stopnji pretvorimo izolirano prosto kislino v fiziološko prenesljivo sol, npr. kalijevo, litijevo ali natrijevo sol.
V smislu predloženega izuma je R1 prednostno lipidni ostanek s splošno formulo IV:
ch2-a
I
CH-B (IV),
I ch2v katerem sta A in B enaka ali različna in pomenita vodik, C1-C18-alkil, Cx-C18alkoksi, C1-Clg-alkiltio, C1-Clg-alkilsulfinil ali C^C^-alkilsulfonil, ali je R1 ravnoverižna ali razvejena, nasičena ali nenasičena alkilna veriga z 10-20 atomi ogljika, ki je v danem primeru lahko enkrat ali večkrat substituirana s halogenom, Cx-C6-alkoksi, C1-C6-alkilmerkapto.
R2 prednostno pomeni 5’-nukleozidni ostanek s splošno formulo V:
—CH? o B
5*
R R (V).
v kateri
R3 pomeni vodik, halogen ali hidroksi skupino,
R4, R5 pomenita vsakokrat vodik, ali eden od ostankov R4 in R5 lahko pomeni halogen, hidroksi, ciano, amino ali azido skupino, razen tega pa R3 in R4 lahko pomenita nadaljnjo vez med C-2’ in C-3’,
R5’ pomeni vodik, hidroksi, azido, amino, ciano ali halogen, ali seko-nukleozidni ostanek s splošno formulo V a:
v katerem
\
R (V a)
R pomeni atom vodika ali v danem primeru s hidroksi, halogenom ali azido substituirano Cj-Cg alkilno skupino, in
B pomeni eno od naslednjih spojin:
1·) . ' :
kjer je lahko
R6 vodik, alkilna veriga z 1 - 4 atomi ogljika, ki je lahko substituiran s halogenom, alkenilni oz. alkinilni ostanek z 2 - 6 atomi ogljika, ki je lahko v danem primeru substituiran s halogenom, ali halogen,
2·)
NH2
R
N
kjer je lahko
R7 vodik, alkilna veriga z 1 do 4 atomi ogljika, ki je lahko substituirana s halogenom, ali halogen,
3·)
O
kjer je lahko
R8 vodik, alkilna veriga z 1 do 4 atomi ogljika, halogen ali hidroksi ali amino skupina,
4.)
R10 kjer je lahko
R9 vodik, halogen ali amino skupina, in je
R10 vodik, halogen, merkapto, C^C^alkoksi, C^C^alkilmerkapto ali amino skupina, ki je lahko mono ali disubstituirana s Cj-C6-alkilnimi, Cj-C^-alkoksi, hidroksi-C2-C6alkilnimi in/ali C3-C6-cikloalkilnimi, arilnimi, hetarilnimi, aralkilnimi ali hetarilalkilnimi skupinami, ki so lahko v danem primeru v arilnem ali hetarilnem ostanku substituirane še z eno ali več hidroksi, metoksi ali alkilnimi skupinami ali halogenom, ali alil, ki je lahko v danem primeru substituiran z mono- ali dialkilnimi ali alkoksi skupinami.
Prednostno pomeni R2 npr. ostanek izbran iz skupine, ki jo sestavljajo:
-2’,3’didezoksi-3’-azidouridin
-2’,3’didezoksiinozin
-2’,3’didezoksigvanozin
-2’,3’didezoksicitidin
-2’,3’didezoksiadenozin
-3’-dezoksitimidin
-2’,3’-didezoksi-2’,3’-didehidro-N6-(o-metilbenzil)-adenozin
-2’,3’-didezoksi-2’,3’-didehidro-N6-(2-metilpropil)-adenozin
-2’,3’-didezoksi-3’-azidogvanozin
-3’-dezoksi-3’-azido-timidin
-2’,3’-didezoksi-3’-fluor-5-kloruridin
-3’-dezoksi-3’-fluortimidin
-2’,3’-didezoksi-3’-fluoradenozin
-2’,3’-didezoksi-3’-fluor-2,6-diaminopurinribozid
-2’,3’-didezoksi-2’,3’-didehidrocitidin
-3’-dezoksi-2’,3’-didehidrotimidin
-3’-dezoksi-3’-azidotimidin
-5-fluoruridin
-5-trifluormetil-2’-dezoksiuridin
-6-merkaptopurin-9-j8-D-ribofuranozid
-6-metilmerkaptopurin-9-/3-D-ribofuranozid
-2-fluoradenin-9-/3-D-arabinofuranozid
-2-klor-2’-dezoksiadenozin
-aciklovir
-ganciklovir
Primer 1
Priprava surovega produkta ^-dezoksi-SLazido-timidinj^-fosforieve kisline-(3dodeciltio-2-deciloksi-)propilestra
509 g (0,95 mol) 3-dodeciltio-2-deciloksi-propanol-l-monofosfata raztopimo v 2,84 1 suhega piridina pri sobni temperaturi. Raztopini dodamo 443,8 g (1,467 mol) triizopropilbenzensulfoklorida nato pa 229 g (0,857 mol) AZT; po približno 10 minutah mešanja pri sobni temperaturi je vse raztopljeno. Rjavo raztopino mešamo pri sobni temperaturi preko noči. Nato dodamo 1,43 1 vode in mešamo 30 minut pri sobni temperaturi; pri dodatku vode postane zmes motna, vendar se pri ponovnem mešanju spet zbistri. Raztopino uparimo pri temperaturi kopeli približno 60°C v vakuumu v rotacijskem uparjalniku in uparjalni ostanek dvakrat ponovno destiliramo z 2,8 1 toluena da odstranimo piridin. Poltrdi uparjalni ostanek prelijemo s 5,7 1 diizopropiletra in mešamo v ledeni kopeli približno 1 uro. Sol odsesamo (piridinijeva sol triizopropilbenzensulfonske kisline) in izperemo s 700 ml diizopropiletra po deležih. Sol posušimo pri 50°C (615 g) in shranimo oz. recikliramo. Etrni filtrat stresemo trikrat z 1,8 1 2n HCl. Če ne dosežemo dobre ločitve faz, emulzijsko plast previdno presesamo preko plasti fibracela. Organsko fazo posušimo z natrijevim sulfatom in uparimo do konstantne mase.
Dobitek 677 g surovega diestra fosforjeve kisline (106% teor. glede na AZT) HPLC: pribl. 76 Fl.% (površinski odstotki).
Primer 2
Čiščenje surovega diestra fosforjeve kisline s tvorbo kalcijeve soli
283 g (0,38 mol) surovega produkta iz primera 1 raztopimo v 1,73 1 metanola in 850 ml vode ob mešanju pri sobni temperaturi. Po kapljicah dodamo raztopino kalcijevega acetat hidrata (60,1 g) v 400 ml vode pri sobni temperaturi v pribl. 45 minutah ob mešanju; nastane oborina, ki je najprej mazava in jo nato dalj časa (npr. preko noči) mešamo. Pri tem postane oborina praškasta. Kalcijevo sol odsesamo in vlažno iz nuče intenzivno mešamo z 11 acetona pri sobni temperaturi pribl. 30 minut. Odsesamo in posušimo. Dobitek 192 g.
Kalcijevo sol suspendiramo v 1,2 1 metil-terc.butiletra in 276 ml 2n HCI in intenzivno mešamo da sol razpade in nastane lahno motna vodna faza. Po ločitvi faz speremo MTB-fazo 2x s po 250 ml nasičene raztopine NaCl, posušimo nad Na2SO4 in uparimo.
Uparjalni ostanek: 179,1 g (63,2% uporabljene količine) HPLC 90,46 Fl.%.
Primer 3
Čiščenje surovega produkta s preparativno HPLC
Preparativni sistem:
Stacionarna faza: Merck LiChroprep RP 18; 15-25 μ
Mobilna faza: 0,02 molarna raztopina NaH2PO412,5% + metanol 87,5%.
125 g surovega produkta iz primera 2 raztopimo pri pribl. 35°C v 750 ml metanola. Dodamo 1,5 1 mobilne faze in naravnamo pH na 5 s konc. NaOH. Raztopino filtriramo in filtrat dopolnimo z mobilno fazo do 2,5 1. To raztopino kromatografiramo v 500 ml deležih.
Frakcioniramo od maksimuma glavnega pika in odločimo frakcijo 1,2 1. Združene čiste frakcije od 5 ločitev (61) uparimo v rotacijskem uparjalniku v vakuumu pri temperaturi kopeli 40°C do viskoznega ostanka. Ostanek po deležih izperemo s skupno 500 ml vode iz aparature in s polkonc. HCI naravnamo pH na 2.
Ekstrahiramo z metil-terc.butiletrom (1x2 1; 2x 1 1); ločijo se pretežno čiste faze, lahko pa so lahno motne. Pri tretji ekstrakciji sta praviloma obe fazi bistri.
Združene MTB ekstrakte stresamo za odstranitev vode z 2x po 250 ml nasičene raztopine NaCl. Organsko fazo posušimo nad Na2SO4 in uparimo do konstantne mase. Dobitek: pribl. 70 g, HPLC: pribl. 99,5 Fl.%.
Primer 4
Priprava natrijeve soli
278,3 g (0,327 mol) HPLC očiščenega produkta iz primera 3 raztopimo v 4,8 1 metanola pri sobni raztopini; raztopini dodamo 760 ml vode (postane mlečna). Z ln NaOH (pribl. 300 ml) naravnamo pH na 5,8 glede na meritveno elektrodo in odsesamo motno raztopino preko Seitzove filtrirne plošče. Bistri filtrat uparimo v rotacijskem uparjalniku v vakuumu. Uparjalni ostanek štirikrat ponovno destiliramo s toluenom. Suhi uparjalni ostanek prelijemo s 5,8 1 acetona in mešamo pribl. 1 uro pri sobni temperaturi. Odsesamo, izperemo z nekaj acetona in sušimo pri pribl. 50°C.
Dobitek: 278 g (97% teor. glede na očiščeno prosto kislino) HPLC: 99,45 Fl.%).
Primer 5
Priprava natrijeve soli z obarjaniem iz raztopine toluena g (0,0978 mol) očiščene proste kisline iz primera 3 raztopimo v 500 ml toluena. Rahlo motno raztopino filtriramo preko Seitzovega filtra. Toluenski raztopini dodamo ob mešanju 30 % raztopino natrijevega metilata v količini, potrebni za tvorbo soli (le-to pred tem določimo na alikvotnem delu). Bistro rahlo rumeno raztopino počasi po kapljicah ob mešanju dodajamo v 3 1 acetona. Ponovno mešamo, v danem primeru preko noči, dokler oborina ne postane praškasta. Oborino odsesamo; proti koncu sesanja se lahko nuča zlepi. Izperemo z nekaj acetona in posušimo rahlo lepljiv produkt pri 50°C.
Dobitek: 66,2 g (88,1% teor.)
Primer 6
Priprava (3,-dezoksi-3’-azido-timidin)-5>-fosforieve kisline (3-dodeciltio-2-deciloksi)propilestra ob uporabi benzensulfoklorida
17,3 g (0,034 mol) 3-dodeciltio-2-deciloksi-propanol-l-monofosfata raztopimo v 100 ml abs. piridina analogno primeru 1, dodamo 6,5 ml (0,051 mol) benzensulfoklorida in ponovno mešamo 4 ure pri sobni temperaturi. Nato dodamo 8 g (0,03 mol) AZT in postopamo dalje analogno primeru 1. Surovi produkt (24,5 g, 109% teor. glede na AZT) pretvorimo v natrijevo sol, analogno primerom 3 do 5. Dobitek 12,2 g (52,9% teor. glede na AZT) HPLC: 99,43 Fl.%.
Primer 7
Priprava kalcijeve soli (3’-dezoksi-3’-azido-timidin)-5’-fosforieve kisline (3dodeciltio-2-deciloksi)-propilestra ob uporabi 2.4.6-trimetilbenzensulfoklorida
86,8 g (0,17 mol) 3-dodeciltio-2-deciloksi-propanol-l-monofosfata pustimo reagirati v 515 ml abs. piridina z 57,7 g (0,26 mol) 2,4,6-trimetilbenzensulfoklorida, analogno primeru 6 in nato presnovimo analogno primeru 1 z 41,2 g (0,154 mol) AZT. Surovi produkt, dobljen analogno primeru 1 (138 g; 119 % teor. glede na AZT), pretvorimo v surovo kalcijevo sol, analogno primeru 2. Dobitek 98,2 g (83,2% teor. glede na AZT).
Primer 8
Priprava natrijeve soli (3>-dezoksi-3>-fluor-timidin)-5,-fosforjeve kisline (3dodeciltio-2-deciloksi)-propilestra
Analogno primeru 1 presnovimo 78,9 g (0,159 mol) 3-dodeciltio-2-deciloksipropanol-l-monofosfata v 480 ml abs. piridina v prisotnosti 72,55 g (0,239 mol)
2,4,6-triizopropilbenzensulfoklorida s 35 g (0,143 mol) 3’-dezoksi-3’-fluor-timidina (FLT). Dobitek: 136 g surovega produkta (130% glede na FLT). Surovi produkt oborimo kot kalcijevo sol, analogno primeru 2, oborino pretvorimo v prosto kislino, očistimo s preparativno kolonsko kromatografijo na RP-18, analogno primeru 3 in analogno primeroma 4 + 5 pretvorimo v natrijevo sol. Dobitek 74 g (69% teor. glede na FLT), HPLC: 99,41 Fl.%.
Primer 9
Priprava natrijeve soli (2\3’-didezoksi-inozin)-5'-fosforjeve kisline (3-dodeciltio-2deciloksi)-propilestra
Analogno primeru 6 zmešamo 15,8 g (32 mmol) 3-dodeciltio-2-deciloksi-propanol-lmonofosfata v 100 ml abs. piridina s 14,5 g (48 mmol) 2,4,6triizopropilbenzensulfoklorida in po 4 urah privedemo do reakcije s 6,77 g (29 mmol)
2’,3’-didezoksi-inozina (DDI). Surovi produkt pretvorimo v natrijevo sol, analogno primerom 3 do 5. Dobitek: 13,04 g (61% teor. glede na DDI), HPLC: 99,4 Fl.%.
.--.
Primer 10
Priprava natrijeve soli f3’-dezoksi-3’-azido-timidirO-5’-fosforieve kisline-[2,3-bis(undeciloksij-propilestra
Analogno primeru 1 raztopimo 15,8 g (32 mmol) 2,3-bis-(undeciloksi)-propanol-lmonofosfata v 96 ml abs. piridina v prisotnosti 14,5 g (48 mmol) 2,4,6triizopropilbenzensulfoklorida privedemo do reakcije s 6,77 g (29 mmol) 3’-azido-3’dezoksi-timidina (AZT). Surovi produkt pretvorimo v natrijevo sol, analogno primerom 3 do 5. Dobitek: 17,15 g (77% teor. glede na AZT), HPLC: 99,7 Fl.%.
Primer 11
Naslednje spojine pripravimo kot surovi produkt, analogno primeru 1, koncentriramo preko kalcijeve soli, analogno primeru 2, očistimo s preparativno HPLC, analogno primeru 3 in pretvorimo v natrijevo sol, analogno primeru 5:
1. Natrijeva sol (3’-dezoksi-3’-azidotimidin)-5’-fosforjeve kisline(3-undecilmerkapto-2-undeciloksi)propilestra
Tal.: 218-222°C razp., Rf = 0,55 (eluirno sredstvo: izopropanol/butilacetat/voda = 5/3/2)
2. Natrijeva sol (3’-dezoksi-3’-azidotimidin)-5’-fosforjeve kisline(3-dodeciloksi-2-deciloksi)propilestra
Tal.: 2 0 5 - 2 1 1 °C razp., Rf = 0,60 (eluirno sredstvo:izopropanol/butilacetat/voda = 5/3/2)
3. Natrijeva sol (3’-dezoksi-3’-azidotimidin)-5’-fosforjeve kisline(3-decilmerkapto-2-dodeciloksi)propilestra
Tal.: >206°C razp., Rf = 0,24 (eluirno sredstvo:MeOH/H2O = 8/2)
4. Natrijeva sol (3’-dezoksi-3’-azidotimidin)-5’-fosforjeve kisline(3-decilmerkapto-2-deciloksi)propilestra
Tal.: >207°C razp., Rf = 0,45 (eluirno sredstvo:izopropanol/butilacetat/voda = 5/3/2)
5. Natrijeva sol (3’-dezoksi-3’-azidotimidin)-5’-fosforjeve kislineheksadecil-estra
Tal.: 227-230°C razp., Rf = 0,55 (eluirno sredstvo:izopropanol/butilacetat/voda = 5/3/2)
6. Natrijeva sol (3’-dezoksi-3’-azidotimidin)-5’-fosforjeve kisline(3-tetradecilmerkapto-2-deciloksi)propilestra
Tal.: 155°C Rf = 0,30 (eluirno sredstvo:etilacetat/metanol = 3/1)
7. Natrijeva sol (3’-dezoksi-3’-azidotimidin)-5’-fosforjeve kisline(3-dodecilmerkapto)propilestra
Tal.: >200°C razp., Rf = 0,20 (eluirno sredstvo:etilacetat/metanol = 3/1)
8. Natrijeva sol (3’-dezoksi-3’-azidotimidin)-5’-fosfoijeve kisline(3-dodecilmerkapto-2-dodeciloksi)propilestra
Tal.: >170°CRf = 0,25 (eluirno sredstvo:etilacetat/metanol = 3/1)
9. Natrijeva sol (3’-dezoksi-3’-azidotimidin)-5’-fosforjeve kisline(3-decilmerkapto-2-heksadeciloksi)propilestra
Tal.: 135°C Rf = 0,35 (eluirno sredstvo:etilacetat/metanol = 3/1)
10. Natrijeva sol (3’-dezoksi-3’-azidotimidin)-5’-fosforjeve kisline(2-dodeciloksi)tetradecilestra
Tal.: 83°C Rf = 0,35 (eluirno sredstvo:etilacetat/metanol = 3/1)
11. Natrijeva sol (3’-dezoksi-3’-azidotimidin)-5’-fosforjeve kisline(3-tridecilmerkapto-2-deciloksi)propilestra
Tal.: >190°C razp., Rf = 0,20 (eluirno sredstvo:etilacetat/metanol = 3/1)
12. Natrijeva sol (3’-dezoksi-3’-azidotimidin)-5’-fosforjeve kisline(3-dodecilmerkapto-2-oktiloksi)propilestra
Tal.: >200°C razp., Rf = 0,60 (eluirno sredstvo: metilenklorid/metanol/voda = 65/25/4)*
13. Natrijeva sol (3’-dezoksi-3’-azidotimidin)-5’-fosforjeve kisline(3-undecilmerkapto-2-deciloksi)propilestra
Tal.: >200°C razp., Rf = 0,25 (eluirno sredstvo: etilacetat/metanol = 3/1
14. Natrijeva sol (3’-dezoksi-timidin)-5’-fosforjeve kisline(3-dodecilmerkapto-2-deciloksi)propilestra
Tal.: > 175°C razp., Rf = 0,45 (eluirno sredstvo: izopropanol/butilacetat/voda = 5/3/2)
15. Natrijeva sol timidin-5’-fosforjeve kisline(3-dodecilmerkapto-2-deciloksi)propilestra
Tal.: 251-254°C razp., Rf = 0,45 (eluirno sredstvo: n-propanol/voda = 9/1)
16. Natrijeva sol (6-merkaptopurin-9-/J-D-ribofuranozid)5’-fosforjeve kisline- (3-dodecilmerkapto-2-deciloksi)propilestra
Tal.: >200°C razp., Rf = 0,45 (eluirno sredstvo: izopropanol/butilacetat/konc. amoniak/voda = 50/30/5/15)
17. Natrijeva sol (5-fluororuridin)5’-fosforjeve kisline- (3-dodecilmerkapto-2-deciloksi)propilestra
Tal.: >210°C razp., Rf = 0,55 (eluirno sredstvo: metilenklorid/metanol/voda = 65/25/4)
18. Natrijeva sol (2’,3’-didezoksi-citidin)5’-fosforjeve kisline- (3-dodecilmerkapto-2-deciloksi)propilestra
Tal.: 202-205°C razp., Rf = 0,50 (eluirno sredstvo:
izopropanol/butilacetat/voda = 5/3/2)
19. Natrijeva sol (3’-dezoksi-3’-fluortimidin)5’-fosforjeve kisline- (3-undecilmerkapto-2-undeciloksi)propilestra Tal.: >200°C razp., Rf = 0,15 (eluirno sredstvo: CH^L/MeOH = 8/2)
20. Natrijeva sol (6-metilmerkaptopurin-9-/3-D-ribofuranozid)5’-fosforjeve kisline- (3-dodecilmerkapto-2-deciloksi)propilestra
Tal.: >170°C razp., Rf = 0,22 (eluirno sredstvo: izopropanol/butilacetat/voda/konc. amoniak= 50/30/15/5)
21. Natrijeva sol 2’-(9{[(l-hidroksimetil)etoksi]metil}gvanin)-fosforjeve kisline (3-dodecilmerkapto-2-deciloksi)-propilester
Rf = 0,73 (eluirno sredstvo: H2O/MeOH 0,5/9,5 na RP-8),
Rf = 0,30 (eluirno sredstvo: CHj-C^/MeOH/F^O 6,5/2,5/0,4 na silikagelu)
22. Natrijeva sol 2’-[9-(etoksimetil)gvanin]-fosforjeve kisline (3-dodecilmerkapto-2-deciloksi)propilestra Rf = 0,77 (eluirno sredstvo: H2O/MeOH 0,5/9,5 na RP-8)
Rf = 0,35 (CH^Clj/MeOH/HjO 6,5/2,5/0,4 na silikagelu).
Za
Boehringer Mannheim GmbH:

Claims (6)

  1. PATENTNI ZAHTEVKI
    1. Postopek za pripravo nesimetričnih diestrov fosforjeve kisline, označen s tem, da (a) ester fosforjeve kisline s formulo I:
    ΐυ-Ο-Ρ(Ο)(ΟΗ)2 (I), v katerem R1 pomeni lipidni ostanek s splošno formulo (IV):
    C1L-A
    I
    CH-B (IV),
    I ch2v katerem sta lahko A in B enaka ali različna in pomenita vodik, Cj-C^-alkil, Cj-C^-alkoksi, C^C^-alkiltio, C^C^-alkilsulfinil ali C^Cjg-alkilsulfonil, ali v katerem R1 pomeni ravnoverižno ali razvejeno, nasičeno ali nenasičeno alkilno verigo z 10-20 atomi ogljika, ki je v danem primeru lahko enkrat ali večkrat substituirana s halogenom, C^Cg-alkoksi, C^C^alkilmerkapto, kondenziramo s spojino s formulo II:
    R2-OH (II) v kateri R2 pomeni organski ostanek, v prisotnosti klorida arilsulfonske kisline, sterično oviranega klorida karboksilne ali fosforjeve kisline in organske baze, (b) nastali diester forsforjeve kisline z dodatkom raztopine, ki vsebuje zemeljskoalkalijske ione, oborimo kot težko topno sol in izoliramo,
    18, (c) težko topno sol s suspendiranjem v organskem topilu, ki se ne meša z vodo, in v razredčeni vodni mineralni kislini, izoliramo kot prosto kislino v organskem topilu, (d) po stopnjah (a) - (c) dobljeni surovi produkt očistimo s preparativno kromatografijo in nato (e) spojino, dobljeno kot prosto kislino, pretvorimo v poljubno fiziološko prenesljivo sol.
  2. 2. Postopek po zahtevku 1, označen s tem, da je raztopina, ki vsebuje zemeljskoalkalijske ione raztopina, ki vsebuje kalcijeve ione.
  3. 3. Postopek po enem od zahtevkov 1 ali 2, označen s tem, da kot klorid arilsulfonske kisline uporabimo klorid benzen-, toluen-, 2,4,6-trimetilbenzen-, 2,6dimetilbenzen-, 2,4,6-triizopropilbenzen- ali 2,6-diizopropilbenzen-sulfonske kisline.
  4. 4. Postopek po enem od zahtevkov 1 do 3, označen s tem, da uporabimo ester fosforjeve kisline, v katerem R1 pomeni lipidni ostanek s splošno formulo IV, v katerem sta A in B različna eden od drugega in pomenita C10-C16-alkoksi in C10-C16alkiltio.
  5. 5. Postopek po enem od zahtevkov 1 do 4, označen s tem, da uporabimo spojino s formulo II, v kateri R2 pomeni 5’-nukleozidni ostanek s splošno formulo V
    R R
    5' (V).
    v kateri
    R3 pomeni vodik, halogen ali hidroksi skupino,
    R4, R5 pomenita vsakokrat vodik, ali eden od ostankov R4 in R5 lahko pomeni halogen, hidroksi, ciano, amino ali azido skupino, razen tega pa R3 in R4 lahko pomenita nadaljnjo vez med C-2’ in C-3’,
    R5’ pomeni vodik, hidroksi, azido, amino, ciano ali halogen, ali seko-nukleozidni ostanek s splošno formulo V a:
    R (V a), v katerem
    R pomeni atom vodika ali v danem primeru s hidroksi, halogenom ali azido substituirano Cj-Cj alkilno skupino, in
    B pomeni eno od naslednjih spojin:
    1.)
    O nV
    H kjer je lahko
    R6 vodik, alkilna veriga z 1 - 4 atomi ogljika, ki je lahko substituiran s halogenom, alkenilni oz. alkinilni ostanek z 2 - 6 atomi ogljika, ki je lahko v danem primeru substituiran s halogenom, ali halogen,
    NH2
    2.) kjer je lahko
    R7 vodik, alkilna veriga z 1 do 4 atomi ogljika, ki je lahko substituirana s halogenom, ali halogen,
    3·)
    R
    N >
    kjer je lahko
    R8 vodik, alkilna veriga z 1 do 4 atomi ogljika, halogen ali hidroksi ali amino skupina,
    4.)
    R kjer je lahko
    R9 vodik, halogen ali amino skupina, in je
    R10 vodik, halogen, merkapto, Cx-C6-alkoksi, Cx-C6-alkilmerkapto ali amino skupina, ki je lahko mono ali disubstituirana s C^C^alkilnimi, Cx-C6-alkoksi, hidroksi-C2-C6alkilnimi in/ali C3-C6-cikloalkilnimi, arilnimi, hetarilnimi, aralkilnimi ali hetarilalkilnimi skupinami, ki so lahko v danem primeru v arilnem ali hetarilnem ostanku substituirane še z eno ali več hidroksi, metoksi ali alkilnimi skupinami ali halogenom, ali alil, ki je lahko v danem primeru substituiran z mono- ali dialkilnimi ali alkoksi skupinami.
  6. 6. Postopek po zahtevku 5, označen s tem, da uporabimo spojino s formulo II, v kateri R2 pomeni 3’-dezoksi-3’-azidotimidinski, 3’-dezoksi-3’-fluortimidinski,
    5-fluoruridinski, 6-merkaptopurin-9-/3-D-ribofuranozidni, 6-metilmerkaptopurin-92l· /J-D-ribofuranozidni, 9-{[(l-hidroksimetil)etoksi]metil}gvaninski ali 9-(etoksimetil)gvaninski ostanek.
SI9520031A 1994-01-28 1995-01-21 Method of preparing unsymmetrical phosphoric acid diesters and their salts SI9520031A (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE4402492A DE4402492A1 (de) 1994-01-28 1994-01-28 Verfahren zur Herstellung von unsymmetrischen Phosphorsäurediestern

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SI9520031A true SI9520031A (en) 1997-04-30

Family

ID=6508875

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SI9520031A SI9520031A (en) 1994-01-28 1995-01-21 Method of preparing unsymmetrical phosphoric acid diesters and their salts

Country Status (17)

Country Link
US (1) US5734042A (sl)
EP (1) EP0741740B1 (sl)
JP (1) JP3609411B2 (sl)
KR (1) KR100242357B1 (sl)
AT (1) ATE178610T1 (sl)
AU (1) AU1417195A (sl)
BR (1) BR9506654A (sl)
CA (1) CA2181474C (sl)
DE (2) DE4402492A1 (sl)
DK (1) DK0741740T3 (sl)
ES (1) ES2132618T3 (sl)
FI (1) FI115836B (sl)
HU (1) HU222438B1 (sl)
PL (1) PL179560B1 (sl)
SI (1) SI9520031A (sl)
TW (1) TW399059B (sl)
WO (1) WO1995020596A1 (sl)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0791056B1 (de) * 1994-11-12 2005-03-30 Heidelberg Pharma GmbH Lipidspaltender enzymkomplex
US7026469B2 (en) 2000-10-19 2006-04-11 Wake Forest University School Of Medicine Compositions and methods of double-targeting virus infections and cancer cells
GB0608876D0 (en) 2006-05-05 2006-06-14 Medivir Ab Combination therapy
DE112020006626A5 (de) 2020-03-30 2022-12-08 Chiracon Gmbh Fosalvudin und Fozivudintidoxil zur Anwendung bei der Behandlung der Krankheit Covid-19 und die Verwendung von deren strukturvereinfachten Derivaten

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5289681A (en) * 1976-01-22 1977-07-27 Yamasa Shoyu Co Ltd Preparation of aracytidine -5# phosphoric acid ester derivatives
JPS552602A (en) * 1978-06-20 1980-01-10 Yamasa Shoyu Co Ltd 1-beta-d-arabinofranosylcytosine-5'-phosphoric acid oleyl ester
JPS552601A (en) * 1978-06-20 1980-01-10 Yamasa Shoyu Co Ltd Anti-tumor agent for non-injection use
DD138213A1 (de) * 1978-08-03 1979-10-17 Hans Brachwitz Verfahren zur herstellung von 1-0-alkyl(acyl)-3-chlor-3-desoxy-glycero-2-phosphorsaeure-omega-halogenalkylestern
DE3263939D1 (en) * 1981-12-09 1985-07-04 Teijin Ltd 5-fluoro-2'-deoxyuridine derivatives and a process for the preparation thereof
IT1238683B (it) * 1990-02-09 1993-09-01 Istituto Chemioterapico Procedimento di preparazione di l-a-glicerilfosforil-d-myoinositolo e suoi sali da fosfatidi grezzi o parzialmente purificati
IT1240614B (it) * 1990-03-30 1993-12-17 Istituto Chemioterapico Italiano Fine Chimicals Procedimento per la separazione dei principali componenti di una miscela di fosfolipidi grezzi deacilati
IT1254991B (it) * 1992-06-24 1995-10-11 Chemi Spa Procedimento per la preparazione di glicerofosfolipidi
DE4226279A1 (de) * 1992-08-08 1994-02-10 Boehringer Mannheim Gmbh Liponucleotide von Seco-Nucleosiden, deren Herstellung sowie deren Verwendung als antivirale Arzneimittel
DE4321978A1 (de) * 1993-07-01 1995-01-12 Boehringer Mannheim Gmbh Liponucleotide von Desoxynucleosiden, deren Herstellung sowie deren Verwendung als antivirale Arzneimittel

Also Published As

Publication number Publication date
JP3609411B2 (ja) 2005-01-12
HUT74709A (en) 1997-02-28
ATE178610T1 (de) 1999-04-15
ES2132618T3 (es) 1999-08-16
US5734042A (en) 1998-03-31
KR100242357B1 (ko) 2000-02-01
PL179560B1 (pl) 2000-09-29
FI963005A0 (fi) 1996-07-29
CA2181474C (en) 2008-04-29
FI115836B (fi) 2005-07-29
DK0741740T3 (da) 1999-10-18
PL315671A1 (en) 1996-11-25
AU1417195A (en) 1995-08-15
JPH09508135A (ja) 1997-08-19
CA2181474A1 (en) 1995-08-03
WO1995020596A1 (de) 1995-08-03
BR9506654A (pt) 1997-09-16
HU9602062D0 (en) 1996-09-30
DE4402492A1 (de) 1995-08-03
HU222438B1 (hu) 2003-07-28
FI963005A (fi) 1996-07-29
TW399059B (en) 2000-07-21
EP0741740B1 (de) 1999-04-07
DE59505592D1 (de) 1999-05-12
EP0741740A1 (de) 1996-11-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6555676B2 (en) Biologically active phosphotriester-type compounds
JPH05507279A (ja) グリセロールジ―およびトリホスフェート誘導体の合成
US20080300399A1 (en) Processes related to making capecitabine
US5780617A (en) Synthesis of liponucleotides
KR20020093824A (ko) 포스포네이트 뉴클레오티드 화합물
US5849905A (en) Biologically active phosphotriester-type nucleosides and methods for preparing same
US8288545B2 (en) Reactive pyrophosphoric and bisphosphonic acid derivatives and methods of their use
EP0081386B1 (en) 5-fluoro-2'-deoxyuridine derivatives and a process for the preparation thereof
US5770725A (en) Phosphotriester type biologically active compounds
SI9520031A (en) Method of preparing unsymmetrical phosphoric acid diesters and their salts
CA2212877A1 (en) Specific lipid conjugates of nucleoside diphosphates and their use as drugs
US20070172925A1 (en) Ribonucleic acid compound and method of liquid-phase synthesis of oligonucleic acid compound
CA1254887A (en) 2'-deoxy-3'-phosphonylmethyl nucleosides
US6020482A (en) Phosphotriester type biologically active compounds
JPH0696590B2 (ja) 新規な５−フルオロ−２′−デオキシウリジン−３′−ホスフエ−ト誘導体およびその塩
WO2016066283A1 (en) Improved fluorination process
US3541079A (en) Process for the manufacture of nucleosides
WO2024185734A1 (ja) ポリリン酸化ヌクレオシド、ポリリン酸化ヌクレオシドの合成に用いられるリン酸部活性化ヌクレオチド及びその合成方法、ならびにリン酸部活性化ヌクレオチドを用いたポリリン酸化ヌクレオシドの合成方法
AU647164B2 (en) Synthesis of glycerol di- and triphosphate derivatives
JP4118357B2 (ja) Ａｍｐアルキルエステル誘導体の製造方法
CZ201126A3 (cs) Zpusob výroby substituovaných diamidu fosfonových kyselin
JPH04261191A (ja) ヌクレオシド−５’−アルキルフォスフォネート類の合成方法

Legal Events

Date Code Title Description
IF Valid on the event date
KO00 Lapse of patent

Effective date: 20110831