SI9111899A - Derivati žolčnih kislin, postopke za njihovo pripravo in uporaba teh spojin kot zdravila - Google Patents

Abstract

Izum se nanaša na derivate žolčnih kislin s splošno formulo I G1-X-G2, v kateri pomenijo G1 in G2 ostanke žolčnih kislin oz. modificiranih žolčnih kislin v obliki prostih kislin, estrov ali amidov, v obliki soli kot tudi v oblikah, derivatiziranih na alkoholnih skupinah, in X mostno skupino ali enojno kovalentno vez, pri čemer sta lahko G1 in G2 poljubno povezana preko X. Spojine v smislu izuma imajo veliko afiniteto do specifičnega sistema tankega črevesa za transport žolčnih kislin in zavirajo resorpcijo žolčnih kislin na kompetitiven in od koncentracije odvisen način.ŕ

Description

Derivati žolčnih kislin, postopek za njihovo pripravo in uporaba teh spojin kot zdravila

Žolčne kisline imajo važno fiziološko funkcijo pri prebavi maščob, npr. kot kofaktorji pankreasnih lipaz in kot naravni detergenti za solubiliziranje maščob in v maščobah topnih vitaminov. Kot končni produkt presnove holesterola se sintetizirajo v jetrih in zbirajo v žolčniku, kijih s krčenjem oddaja v tanko črevo, kjer razvijajo svoj fiziološki učinek. Večji del secerniranih žolčnih kislin se ponovno pridobi prek enterohepatičnega obtoka. Preko mezenterijskih ven tankega črevesa in portalnega venskega sistema pridejo spet nazaj v jetra. Pri ponovni resorpciji v črevesu igrajo določeno vlogo tako aktivni kot tudi pasivni transportni procesi. Glavna množina žolčnih kislin se preko specifičnega, od Na⁺-odvisnega transportnega sistema ponovno resorbira na koncu tankega črevesa v terminalnem ileumu in pride s krvjo iz mezenterijskih ven preko portalne vene nazaj v jetra, da bi jih jetrne celice znova secemirale v celico. V enterohepatičnem obtoku se pojavljajo žolčne kisline tako kot proste kisline kot tudi v obliki konjugatov z glicerinom in tavrinom.

Netopne bazične premrežene polimere, ki se ne morejo resorbirati, uporabljajo že nekaj časa za vezavo žolčnih kislin in zaradi teh lastnosti jih uporabljajo v terapiji. Kot objekt terapije smatrajo vse bolezni, pri katerih se zdi zaželeno zaviranje ponovne resorpcije žolčnih kislin v črevesu, zlasti v tankem črevesu. Na ta način zdravijo npr. hologeno diaerejo po resekciji ileuma ali tudi zvišanje nivoja holesterola v krvi.

V primeru zvišanja nivoja holesterola v krvi lahko s posegom v enterohepatični obtok dosežejo znižanje tega nivoja. Znižanje poola žolčnih kislin, ki se nahajajo v enterohepatičnem obtoku, izsili ustrezno novo sintezo žolčnih kislin iz holesterola v jetrih. Za kritje potreb po holesterolu v jetrih pride do poseganja po LDLholesterolu (Low Density Lipoprotein), ki se nahaja v krvnem obtoku, pri čemer delujejo hepatični LDL-receptorji v povečanem številu. Pospešenje katabolizma LDL, do katerega pride tako, ima za posledico zmanjšanje deleža aterogenega holesterola v krvi. Doslej so predstavljale te polimerne netopne ionske izmenjevalne smole (v nadaljevanju označene kot resins) edino možnost vplivanja na enterohepatični obtok glede povečanega izločanja žolčnih kislin in znižanja nivoja holesterola, kije posledica le-tega.

Pri tem je smotrna dnevna doza resins, ki so v uporabi kot zdravila, npr. colestyramina (vsebuje kvartarne amonijeve skupine) ali colestipola (vsebuje sekundarne oz. terciarne amino skupine) zelo velika. Za colestyramin znaša npr. 12-24 g, maksimalna dnevna doza pa je 32 g; za colestipol je priporočena doza 15-30 g. Poleg visokega doziranja otežujeta bolnikom compliance okus in vonj.

Vzrok za znane stranske učinke resins je treba pripisati pomanjkljivi selektivnosti (npr. avitaminoze), ki jih je treba upoštevati tudi pri doziranju istočasno dajanih zdravil, pa tudi osiromašenju na žolčnih kislinah, ki povzroča različne gastrointestinalne motnje (obstipacija, steatoreja) različnih stopenj. Za oba preparata so opisali terapevtski pomen s kombinacijo z drugimi, hipolipidemično učinkujočimi zdravili, kot fibratenom, inhibotorji HMG-CoA-reduktaze, probucolom (prim. npr. M.N.Cayen, Pharmac. Ther. 29, 187 (1985) in 8-th International Symposium on Atherosclerosis, Rim, okt. 9-13, 1988, Abstracts str. 544, 608, 710), pri čemer omogočajo doseženi učinki tudi zdravljenje težkih hiperlipidemij. Zato se zdi pomembno najti pri danem principu učinkovanja primerne snovi brez pomanjkljivosti preparatov, ki jih uporabljajo sedaj.

Kot izboljšanja vredne je treba smatrati tele značilnosti navedenih preparatov in zlasti colestipola:

Velike dnevne doze, ki jih je treba pripisati sorazmerno majhni stopnji vezave pri nevtralnem pH v izotonem mediju in (delnemu) ponovnemu sproščanju adsorbiranih žolčnih kislin.

Kvalitativni premik v sestavi žolčnih kislin v žolču s pojemajočo tendenco za henodeoksiholno kislino in s tem povezana povečana nevarnost za holelitiazo.

Odsotnost zaviralnega učinka na presnovo holesterola črevesnih bakterij.

Prevelika stopnja vezave vitaminov in zdravil povzroči, da je morebiti potrebna potreba po nadomestitvi teh snovi in kontrole nivoja v krvi.

Zaradi vezave žolčnih kislin na resins že v dvanajstniku in gornjem tankem črevesu so za prebavo maščob na razpolago nezadostne množine žolčnih kislin tako, da nastopijo motnje v prebavi maščob.

Treba je smatrati, da dosedanja oblika za dajanje ni bila zadostna.

Zato je obstajala naloga najti zdravilo, ki bi bilo sposobno zmanjšati delež aterogenega holesterola v krvi oz. vplivati na enteropatski obtok glede povečanja izločanja žolčnih kislin in iz tega sledečega znižanja nivoja holesterola, ki pa ne bi imelo pomanjkljivosti preparatov, kijih uporabljajo sedaj.

Presenetljivo smo sedaj našli derivate žolčne kisline s splošno formulo

Gl-X-G2 (I), v kateri pomenijo

Gl in G2 ostanke žolčnih kislin oz. modificiranih žolčnih kislin v obliki prostih kislin, estrov ali amidov, v obliki soli kot tudi v oblikah, derivatiziranih na alkoholnih skupinah, in

X mostno skupino ali enojno kovalentno vez, pri čemer sta lahko Gl in

G2 poljubno povezana preko X.

Spojine v smislu izuma s formulo I imajo veliko afiniteto do specifičnega sistema za transport žolčnih kislin v tankem črevesu in zavirajo resorpcijo žolčnih kislin na kompetitiven in od koncentracije odvisen način.

Nadalje se spojine v smislu izuma same ne resorbirajo in zato ne pridejo v krvni obtok. Z uporabo tega novega principa učinkovine lahko sedaj mnogo bolj specifično in učinkovito prekinemo enterohepatični obtok žolčnih kislin in posežemo v enterohepatični obtok z večjo učinkovitostjo, kot so doslej omogočale resins.

Z uporabo spojin v smislu izuma, ki delajo po opisanem novem principu učinkovanja, lahko povsem obidemo naštete pomanjkljivosti resins, ki posegajo v enterohepatični obtok in ki se nahajajo na tržišču. Z reverzibilno inhibicijo ponovne resorpcije žolčnih kislin v tankem črevesu zmanjšamo na bistveno učinkovitejši način koncentracijo žolčnih kislin, ki se nahaja v enterohepatičnem obtoku tako, da pride od znižanja nivoja holesterola v serumu. Pri uporabi spojin v smislu izuma potem prav tako ni pričakovati niti avitaminoz niti vplivanja na resorpcijo drugih zdravil ali tudi negativnega učinka na črevesno floro. Nadalje ni opaziti znanih stranskih učinkov (obstipacija, steratoreja), to pomeni, da ni negativnega vpliva na prebavo maščob. Zaradi velike afinitete spojin v smislu izuma do zelo specifičnega sistema za transport žolčnih kislin v tankem črevesu shajamo v nasprotju z resins z res mnogo manjšimi dnevnimi dozami tako, da je akceptanca takih zdravil pri zdravniku in pacientu in compliance pacienta zelo velika.

Prednostne so spojine s formulo I, v katerih obroč A ostanka žolčne kisline G2, ki pomeni žolčno kislino, modificirano žolčno kislino, zlasti na alkoholnih skupinah modificirano obliko, ni povezan z obročem A ostanka žolčne kisline Gl, ki prav tako pomeni žolčne kisline ali modificirano žolčno kislino.

Razen tega je prednostna nesimetrična povezava ostankov Gl in G2, to je povezava preko različnih obročev.

Zlasti prednostne so spojine s formulo I, v katerih je ostanek žolčne kisline Gl, ki pomeni žolčno kislino, modificirano žolčno kislino, zlasti na alkoholnih skupinah modificirano obliko, povezan preko atoma ogljika C-24 (obroč D) z veznim členom

X, X je mostna skupina, in ostanek žolčne kisline G2, ki pomeni žolčno kislino, modificirano žolčno kislino, zlasti na alkoholnih skupinah modificirano obliko, je preko ene od leg C-3 (obroč A), C-7 (obroč B) ali C-12 (obroč C) povezan z X.

Posebno prednostne so spojine s formulo I, v katerih

Gl pomeni spojino s formulo II

pri čemer

Y pomeni prosto valenco za vezavo skupine X ali ima ta-le pomen

-OL, -NHL, -NL₂, pomeni preko amino skupine vezano amino kislino ali aminosulfonsko kislino, kot npr.

-NHCH₂-C0₂H, -NH-CH₂CH₂-S0₃H, -N-CH₂CH_zSO₃H,

I ch₃

-n-ch₂co₂h, -nh-chco₂h ch₃ r⁶ in njihove (Cj-CJ-alkil estre in alkalijske in zemeljsko alkalijske soli, -OKa, pri čemer Ka pomeni kation, kot npr. alkalijski ali zemeljsko alkalijski ion ali tudi kvartarni amonijev ion in pri čemer L pomeni

H, nasičen» ali nenasičen alkilni ostanek z 1 do 10 atomi C, ki je razvejen ali nerazvejen, cikloalkflni ostanek s 3 do 8 atomi C, fenilni ostanek, ki je nesubstituiran ali 1 do 3-krat substituiran z F, CI, Br, (C₁-C₄)-alkilom ali (Cj-C^-alkoksi, benzilni ostanek, ki je nesubstituiran ali 1-3-krat substituiran z F, Cl, Br, (C^CJ-alkilom ali (C₁-C₄)-alkoksi in R⁶ pomeni metil, izopropil, izobutil, 2-butil benzil, 4-hidroksibenzil, hidroksimetil, hidroksietil, H₃CSCH₂CH₂-, HO₂CCH₂, HO^CH^-,

R¹ pomeni prosto valenco za vezavo skupine X ali H, nasičen ali nenasičen alkilni ostanek z 1-10 atomi C, ki je razvejen ali nerazvejen, cikloalkilni ostanek s 3-8 atomi C, fenilni ostanek, kije nesubstituiran ali 1-3-krat substituiran z F, Cl, Br, (Cj-C^-alkilom ali (C₁-C₄)-alkoksi,-⁺NH₃, -OPO/, benzilni ostanek, ki je v jedru nesubstituiran ali 1-3-krat substituiran z F, Cl, Br, (C₁-C₄)-alkilom, (C₁-C₄)-alkoksi, -⁺NH3, -OPO/ ali fenilom, ki je lahko po svoji plati 1-3-krat substituiran z F, Cl, Br, (Cj-C^-alkilom, (C1-C4)-alkoksi, -⁺nh3, -opo₃ , bifenilmetilni ostanek, ki je nesubstituiran ali 1-3-krat substituiran z F, Cl, Br, (Cj-C^-alkilom, (Cj-C₄)-alkoksi, -⁺NH₃, -OPO₃, trifenilmetilni ostanek, ki je nesubstituiran ali 1-3-krat substituiran z F, Cl, Br, (Cj-Cp-alkilom, (C₁-C₄)-alkoksi, -⁺NH₃, -OPO/,

1- ali 2-naftil metilni ostanek, ki je nesubstituiran ali 1-3-krat substituiran z F, Cl, Br, (C₁-C₄)-alkilom, (C₁-C₄)-alkoksi, -⁺NH₃, -OPO₃,

9-fluorenilni ostanek, ki je nesubstituiran ali 1-3-krat substituiran z F, Cl, Br, (Cj-Cjj-alkilom, (C^C^-alkoksi,

O O

II II ostanek -P-OL, -S-OL ali

O

II

-C-L

OL O pri čemer ima L zgoraj navedeni pomen,

R² do R⁵ pri čemer R² in R³ oz. R⁴ in R⁵ skupaj vsakič kisik karbonilne skupine ali posamič in vsakič neodvisno drug od drugega

Η, ΟΤ, -ST, -ΝΗΤ, O-C-T, -S-C-T, -NH-C-T,

Ο Ο

II

-Ο-Ρ-ΟΤ, -O-S-OT, -τ I

OL Ο pri čemer ima L zgoraj navedeni pomen in ima T pomen L ali ima prosto valenco za vezavo skupine X, z omejitvijo, da izhaja iz Gl v celem samo ena prosta valenca za \ ezavo skupine X,

X enojno vez ali skupino s formulo III

O 0

-[-(N)_s - A - N - C - (CH₂)_p - C -]_r - N - B, - (III),

I I I

Li k Lg pri čemer pomeni

A alkilensko verigo, ki je razvejena ali nerazvejena, nasičena ali nenasičena in v verigi v danem primeru lahko prekinjena z -0-, -S- ali arilenom, zlasti fenilenom, pri čemer se vrši povezava tako-le

-θ· - -θ ^θΗ ¢3 in obsega veriga v celem 2 do 12, prednostno 2 do 6 verižnih členov p,

B alkilensko verigo, ki je razvejena ali nerazvejena, nasičena ali nenasičena in v verigi v danem primeru lahko prekinjena z -O-, -S- ali arilenom, zlasti fenilenom, pri čemer se vrši povezava tako-le

-0-' 0 ^au 0 in obsega veriga v celem 2 do 18, prednostno 2 do 12 verižnih členov n, LI, L2 in L3 so enaki ali različni in imajo enak pomen kot L, in pomenijo q 0-5, r 0 ali 1 in s 0 ali 1 in t 0 ali 1,

G2 pomeni spojino s splošno formulo IV

pri čemer imata

Y in R¹ pod Gl navedeni pomen in pomenijo

R⁷inR⁸ oz. R⁹ in R¹⁰ skupaj vsakič kisik karbonilne skupine ah posamič in vsakič neodvisno drug od drugega H, -DT, -ST, -NHT, pri čemer imata L in T pod Gl navedeni pomen, prav tako z omejitvijo, da izhaja iz G2 v celem samo ena prosta valenca za vezavo skupine X.

Prednostne so spojine s splošno formulo I, pri katerih se povezava obeh spojin Gl in G2 preko skupine X ne vrši preko obročev A obeh spojin Gl in G2.

Posebno prednostne so spojine s splošno formulo I, pri katerih se povezava preko skupine X ne vrši preko identičnih obročev spojin Gl in G2.

Zlasti prednostne so spojine s splošno formulo I, pri katerih se vrši povezava preko skupine X nesimetrično preko obročev A oz. D spojin Gl in G2.

Izum se nadalje nanaša na postopek za pripravo spojin s splošno formulo I, ki je označen s tem, da

a) v primeru X = enojna vez presnovimo med seboj primerne reakcijsko sposobne oblike Gl in G2 po postopkih, ki so v principu znani, ali

b) v primeru X = mostna skupina presnovimo med seboj po postopkih, ki so v principu znani, a) reakcijsko sposobne oblike Gl-X z G2 oz.

J3) reakcijsko sposobne oblike G2-X z Gl,

c) iz G1-X1 pripravimo po znanih ali, v kolikor niso znani, po spodaj podrobneje opisanih postopkih spojine s splošno formulo I (Gl-X-G2), pri čemer nastane X iz XI in X2 z nastankom kovalentne vezi, zlasti s kondenzacijsko ali substitucijsko reakcijo.

a) X = enojna vez

Žolčne kisline Gl uporabimo bodisi v prosti obliki ali v zaščiteni obliki. Po vezavi z G2, ki se prav tako nahaja v prosti ali zaščiteni obliki, se vrši v danem primeru odcepitev zaščitnih skupin in pretvorba karboksilne funkcije na C-24 v zgoraj naveden derivat. Kot zaščitne skupine za alkoholne skupine so smotrno primerne formil, acetil, tetrahidropiranil ali t-butildimetilsilil. Kot zaščitne skupine za karboksilno skupino na C-24 pridejo v poštev različni alkilni ali benzilni estri, pa tudi npr. orto estri.

Žolčna kislina reagira npr. prednostno v legi 3, pa tudi v legi 7, z aktiviranimi oblikami karboksilnih kislin, kot kislinskimi kloridi ali mešanimi anhidridi, ob dodatku baz, kot trialkilamina, piridina, pa tudi NaOH, pri sobni temperaturi v primernih topilih, kot tetrahidrofuranu, metilenkloridu ali etilacetatu, pa tudi v dimetilformamidu (DMF) ali dimetoksietanu (DME).

Različne izomere lahko ločimo npr. kromatografsko.

Z uporabo primernih zaščitnih skupin se da reakcijo izvesti selektivno. Analogno se da ustrezne aminožolČne kisline prevesti v ustrezne amide. Tudi tu lahko reakcijo izvedemo bodisi z zaščitenimi ali prostimi žolčnimi kislinami. Analogno se da po znanih standardnih postopkih povezati nadaljnje spojine v smislu izuma.

b) X = mostna skupina

Pod a) navedene postopke uporabimo tudi, da izvedemo povezavo Gl-X z G2 oz. Gl z X-G2. Smotrno uporabimo tudi tu žolčnokislinski del bodisi zaščiten bodisi nezaščiten.

Prednostni postopek za pripravo obstoji v tem, da reakcijsko sposobne oblike Gl presnovimo z reakcijsko sposobnimi oblikami X-G2. V danem primeru sledi povezavi odcepitev zaščitnih skupin in pretvorba karboksila na C-24 v derivate.

Priprava reakcijsko sposobnih gradbenih elementov žolčnih kislin X-G je prikazana v formulski shemi 1-4 na primeru holne kisline (npr. r=o).

Priprava reakcijsko sposobnih gradbenih elementov žolčnih kislin X-G2 na primeru holne kisline, shema 1-4.

Shema 1: X-G2 brez zaščitne skupine .5

BO

COjH

CHjSOjCl piridin

holna kislina

Ms« CH3SO2

1) HO(CH-) OH piridin,

NaN₃

DMSO

Ψ

VIII

IX

- 72 Shema 2: X-G2 s THP zaščitno skupino (THP = tetrahidropiranil)

metil ester holne kisline

υ

2) K2CO3»

N2t₃

LKjCO^MeOH

XV aiema

- 13 - ;

3: X-G2 s t-BuMe2Si zaščitno skupino

Ks>(E₂)

XVII

-1.4 .Siema 4: X-G2 z o(.-konfiguracijo na 3-C

CO₂CH₃

i-PrEt₂N

metil ester holne kisline

XVIII

1) BH₃ ali teksilboran

2) NaCH/H₂O₂

M_Sr/V\o''’

XX o₂ch₃ ch₃co₂ci

Pyr ^Η?<^<^θ2^εΗ3 CHj fH

1. NqN₃ DMSO

2. K₂ Pd/C

HO

XIX

XXI co₂ch35

Zamenjava treh OH-skupin z dioli HO(CH₂)_nOH se posreči s presnovo ustreznih mezilatov z ustreznimi dioli, kijih uporabimo prednostno v prebitku, ob dodatku baz, kot piridina, lutidina, pa tudi trietilamina.

Primarne OH-skupine spojin VI in XIII se da dalje presnoviti po standardnih postopkih. Tako lahko npr. prevedemo XIII z oksidacijskimi sredstvi v ustrezno karboksilno kislino XXII [z R(ll) je enako ΤΗΡ], prednostno z kromovimi VI reagenti ali različnimi sistemi s kalijevim permanganatom. Ustrezno so primerne tudi druge zaščitne skupine.

R(ll)^s THP, benzil *t-BuMe₂Si, benziloksikarbonil (Z), acetil

Spojine XG2 (IX, XV, XVII ali XXI) lahko presnovimo samo direktno z Gl oz. njegovimi derivati ali po prevedbi v X2-G2 z ustrezno modificiranim G1-X1 v spojino s splošno formulo I (Gl-X-G2).

Zadnje navedeni primer je opisan v delu c).

c) Za pripravo spojine tipa X2-G2, kot tu na primeru ene od spojin IX, XV, XVII ali XXI, presnovimo z reakcijsko sposobnimi oblikami karboksilnih kislin, npr. mešanimi anhidridi, kislinskimi kloridi ali npr. v primeru g=2 z anhidridom jantarne kisline v primernem topilu, kot npr. diklormetanu, toluolu ali piridinu in v prisotnosti trietilamina pri -20°C do sobne temperature, v karboksilne kisline XXIII.

HO-CCH₂C3i₂C A N- (CHJ H

XXIII

R(12)= H, THP, t-BuMe₂Si, acetil, benzil, benziloksikarbonil (Z)

Spojino (XXIII) pa lahko po njeni plati spet presnovimo s spojinami IX, XV, XVII ali XXI (tukaj: tip G1-X1) v spojine s splošno formulo I, v katerih velja S=O (tukaj spojina XXIV).

Če hočemo pripraviti spojine s splošno formulo I, v katerih velja s=l, presnovimo npr. spojine s splošno formulo II s spojinami H-N-A-N-H

I I L, k pri čemer imajo A, Lj in L₂.

V primeru estrov (tj-, o i^e estrska funkcija) jih presnovimo direktno s H-N-A-N-H

I I

L, 1-2 v primeru proste kisline O r^OH) je treba le-to presnoviti še v reakcijsko sposobne kislinske derivate, kot npr. mešane anhidride ali kislinske kloride. Na ta način nastale spojine tipa G1-X1 sedaj prevedemo s spojinami tipa G2-X2 v spojine tipa Gl-X-G2.

Zgoraj navedene izvedbe za pripravo spojin tipa Gl-X-G2, v katerih se vrši povezava obeh žolčnih kislin Gl in G2 preko njunih vsakokratnih obročev A, veljajo tudi v ustreznih, strokovnjaku znanih modificiranih metodah za povezavo A-D, A-B, A-G kot tudi D-D, B-B, C-C, B-D, B-C, C-D.

Substituente žolčne kisline Gl oz. G2, R¹ do R¹⁰, lahko uvedemo tako pred povezavo Gl z G2 preko X ali pa tudi potem. Uvedba substituentov, ki se vrši po povezavi Gl z G2, je možna le, če ustrezni substituenti niso tudi sami udeleženi na tvorbi mosta med Gl oz. G2 in X. Prednostno zato izvedemo te substitucije pred samimi reakcijami povezovanja Gl in G2 preko X.

Izum se nadalje nanaša na uporabo spojin v smislu izuma za pripravo zdravila.

V ta namen spojine s splošno formulo I raztopimo ali suspendiramo v farmakološko neoporečnih organskih topilih, kot enovalentnih ali večvalentnih alkoholih, kot npr. etanolu ali glicerinu, v triacetinu, oljih, kot npr. sončničnem olju, ribjem olju, etrih, kot npr. dietilenglikoldimetiletru ali tudi polietrih, kot npr. polietilenglikolu, ali tudi v prisotnosti drugih farmakološko neoporečnih polimermih nosilcev, kot npr. polivinilpirolidona, ali drugih farmacevtsko sprejemljivih dodatkov, kot škroba, ciklodekstrina ali polisaharidov. Dalje lahko spojine v smislu izuma dajemo v kombinacijah z drugimi zdravili.

Spojine s splošno formulo I dajemo v različnih dozirnih oblikah, prednostno oralno v obliki tablet, kapsul ali tekočin. Dnevna doza se giblje v odvisnosti od telesne teže in konstitucije pacienta 7 območju od 3 mg do 5000 mg, prednostno pa v dozirnem območju od 10 do 1000 mg.

Farmakološki podatki obsegajo serijo testov, v kateri smo preiskali medsebojno učinkovanje spojin v smislu izuma in intestinalnega sistema transporta žolčnih kislin v terminalnem tankem črevesu.

1.

Prepariranje brush-border” membranskih vezikul iz ileuma koncev

Prepariranje ^,fbrush-border membranskih vezikul iz črevesnih celic tankega črevesa smo izvedli s t.im. Mg²⁺-precipitacijsko metodo. Samce novozelandskih kuncev (telesna masa 2-2,5 kg) smo usmrtili z intravensko injekcijo 0,5 ml vodne raztopine tetrakain hidroklorida, 100 T 61^R in 25 mg mebezonijevega jodida. Tanko črevo smo odstranili in sprali z ledeno mrzlo fiziološko raztopino kuhinjske soli. Terminalnih 7/10 tankega črevesa (merjeno v rektalni smeri, to pomeni terminalni ileum, ki vsebuje od Na⁺ odvisni sistem transporta žolčnih kislin) smo uporabili za prepariranje brush-border membranskih vezikul. Čreva smo v vrečkah iz umetne snovi zamrznili pod dušikom pri -80°C. Za prepariranje membranskih vezikul smo zmrznjena čreva odtalili pri 30°C v vodni kopeli. Mukozo smo postrgali in jo suspendirali v 60 ml ledeno mrzlega tris/HCl puferja (pH 7,1)/300 mM manita, 5 mM EGTA/10mg/fenilmetilsulfonilfluorida/l mg/1 inhibitorja tripsina iz soje (32 U/mg)/0,5mg/l inhibitorja tripsina iz govejih pljuč (193 U/mg)/5 mg~I bacitracina. Po razredčenju na 300 ml z ledeno mrzlo destilirano vodo smo homogenizirali v UltraTurraxu (18-palični, 5KA Werk Staufen, Nemčija) 3 minute pri -75% maksimalne zmogljivosti ob hlajenju z ledom. Po dodatku 3 ml 1 M raztopine MgCl2 (končna koncentracija 10 mM) smo pustili stati natančno 1 minuto pri 0°C. Pri dodatku Mg²⁺ so z izjemo brush-border membran celične membrane agregirale in se oborile. Po 15minutnem centrifugiranju pri 3000 x g (5000 vrt/min, SS-34-rotor) smo oborino zavrgli in supernatant, ki je vseboval brush-border membrane, centrifugirali 30 min pri 267000 x b (15000 vrt/min, SS-34-Rotor). Supernatant smo zavrgli, oborino pa ponovno homogenizirali v 60 ml 12 mM tris/HCl pufeija (pH 7,1)/60 mM manita, 5 mM EGTA v homogenizatoiju Potter Elvejhem (Braun, Melsungen, 900 vrt./min, 10 hodov). Po dodatku 0,1 ml 1 M raztopine MgCl2 in 15 minutnem inkubacijskem času pri 0°C smo znova centrifugirali 15 min pri 3000 x g. Supernatant smo nato centrifugirali še enkrat 30 minut pri 46000 x g (15000 vrt./min, SS-34-rotor). Oborino smo prevzeli v 30 ml 10 mM tris/hepes puferja (pH 7,4)/300 mM manita in z 20 hodi v homogenizatorju Potter Elvejhem pri 1000 vrt./min ponovno homogeno suspendirali. Po 30 minutnem centrifugiranju pri 48000 (20000 vrt./min, SS-34-rotor) smo oborino prevzeli v 0,5 do 2 ml tris/hepes-puferja (pH 7,4)/280 mM manita (končna koncentracija 20 mg/ml) in ponovno suspendirali s pomočjo tuberkulinske brizge z iglo kalibra 27. Vezikule smo uporabili za preiskave transporta bodisi neposredno po prepariranju ali jih shranili pri -196°C v 4 mg obrokih v tekočem dušiku.

2. Zaviranje od Na⁺ odvisnega privzema [³H]tavroholata v brush-border membranskih vezikulah ileuma

Privzem substratov v brush-border membranskih vezikulah smo določili s t.im. tehniko membranske filtracije. 10 gl suspenzije vezikul (100 gg proteina) smo pipetirali kot kapljico na steno polistirolne inkubacijske epruvete (11 x 70 mm), ki je vsebovala inkubacijski medij z ustreznimi ligandi (90 gl). Inkubacijski medij je vseboval 0,75 gl = 0,75 -gCi [³H(G)) tavroholata (specifična aktivnost: 2,1 Ci/mmol), /0,5 gl 10 mM tavroholata/8,75 gl natrijevega transportnega puferja (10 mM tris/hepes, (pH 7,4)/100 mM manita/100 mM NaCl) (Na-T-P) oz. 8,75 gl kalijevega transportnega pufeija (10 mM tris/hepes (pH 7,4) 100 mM manita/100 mM KC1) (K-T-P) in 80 gl raztopine ustreznega inhibitorja, raztopljene v odvisnosti od eksperimenta v Na-T-puferju oz. K-T-puferju. Inkubacijski medij smo filtrirali skozi polivinilidenfluoridni membranski filter (STHV LO 4NS, 0,45 gm, 4 mm 0, Millipore, Eschborn, Nemčija). Merjenje transporta smo začeli s tem, da smo pomešali vezikule z inkubacijskim medijem. Koncentracija tavroholata v inkubacijskem nastavku je znašala 50 gM. Po želenem inkubacijskem času (običajno 1 min) smo transport prekinili z dodatkom 1 ml ledeno mrzle stop raztopine (10 mM tris/hepes, (pH 7,4)/150 mM KC1). Nastalo mešanico smo takoj odsesali pri vakuumu od 25 do 35 mbarov preko membranskega filtra iz celuloznega nitrata (ME 25, 0,45 gm, premer 25 mm, Schleicher & Schuell, Dassell, Nemčija). Filter smo sprali s 5 ml ledeno mrzle stop raztopine.

Za merjenje privzema radioaktivno oznamovanega tavroholata smo membranski filter raztopili s 4 ml scintilatorja Quickszint 361 (Zinsser Analytik GmbH, Frankfurt, Nemčija) in radiaktivnost izmerili z merjenjem tekočinske scintilacije v merilni aparaturi TriCarb 2500-(Canberra, Packard GmbH Frankfurt, Nemčija). Izmerjene vrednosti smo po umeritvi aparature s pomočjo standardnih vzorcev in po korekturi morebitno prisotne kemijske luminiscence dobili kot dpm (decompositions per minute).

Kontrolne vrednosti smo vsakokrat določili v Na-T-P in K-T-P. Razlika med privzemom v Na-T-P in K-T-P je dala od Na⁺ odvisni transportni delež. Kot IC50 Na⁺ smo označili tisto koncentracijo inhibitorja, ki je zavrla od Na⁺ odvisni transportni delež za 50% - računano na kontrolo -; ustrezno velja za podatke o IC^- in IC75vrednosti. Rezultati so zbrani v tabeli 60.

Naslednji primeri opisujejo izum, ne da bi ga omejevali.

Primer 1

16,9 g (40 mmolov) metilestra holne kisline smo dali v 120 ml N-etildiizopropilamina, dodali 11,9 g (48 mmolov) difenilmetilbromida in mešali 4 ure pri 100°C. Za predelavo smo po ohladitvi dodali 250 g ledu/20 ml žveplove kisline in ekstrahirali z etilacetatom (3x). Združene organske faze smo posušili z magnezijevim sulfatom in uparili. Kromatografija na silikagelu (n-heptan/etilacetat = 3/1) je dala 11,8 g (20 mmolov, 50 %) primera 1 C₃₈H₅₂O₅(588)MS(FAB,3-NBA/LiCl: 595 (mLi⁺).

Analogno primeru 1 smo dobili primere v tabelah 1 do 4.

- 22Tabela 1

^C32^H48°5<⁵¹²>i ⁵¹⁹ (M+Li⁺) ^c44^h56°₅(664); 671 (M+Li⁺) ^C32^H47^C105<⁵⁴⁶>^{; 553} (M+Li⁺)

C₃₄ ^h5₂ ⁰5(⁵4°); 547 (M+Li*)

C2₂H₄gCl₂Og(580); 587 (M+Li*)

- 23 nadaljevanje tabele 1

MS (FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ) primer

7		C33H50°6<542); 549 (M+Li+)
8	er	C31H47N05(513); 520 (M+Li+)

^c36^h50°5<⁵⁶²>; ⁵⁶⁹ (M⁺Li⁺)

- 24 Tabela

.primer

MS (FAB,3-NBA/LICI ali LIJ)

^C32^H48°4<⁴⁹⁶>^{; 503} (M⁺Li⁺)

C₄₄ ^h56⁰4(⁶48); 655 (M+Li⁺)

C₃₈H₅₂O₄(572); 579 (M+Li⁺) ^C32^H47^Cl04(⁵³°)i ⁵³⁷ (M⁺Li⁺)

C₃₄ ^h52°₄(⁵24); 531 (M+Li⁺)

- 25 nadaljevanje tabele 2

primer	R1	MS (FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)
15	Gl	C32H46C12°4<564>; 571 (M+Li+)
16		c33h5005(526); 533 (M+L1+)
17	cr	C31H47NO4<497>'* 504 (M+Li+)
18	ar	C36h5o°4(546); 553 (M+Li+)

Tabela 3

primer__ms (FAB,3-NBA/L1C1 ali LiJ)

C₃₂H₄₈0₄(496); 503 (M+Li⁺)

C₄₄ ^h56⁰4(648); 655 (M+Li⁺)

C₃₈ ^h52°₄(⁵⁷²); 579 (M+Li⁺) ^C32^H47C1⁰4(⁵³0); 537 (M+Li⁺) ^c34^hS2°₄(⁵²4); 531 (M+Li⁺)

- 27 nadaljevanje tabele 3 primer__MS (FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)

	Cl 1
24	Qxr	C32H46Cl2 04(564)i 571 (M+Li*)
25	xr H3CO	c33h50O5(526); 533 (M+Li*)
26	CT	C31H47N04<497>; 504 (M+Li+)
27	ccr	C36 H5004(546); 553 (M+Li*)

- 28 Tabela 4

^C32^H48°3<⁴⁸°)^{; 487} (^M+^i⁺)

C₃₈ ^h52°3(⁵⁵6); 563 (M+Li⁺)

C₄₄ ^H56⁰3(632); 639 (M+Li⁺) ^c32^h47^c103<⁵¹⁴)? ⁵²¹ (M+Li⁺) ^C34^H52°3<⁵⁰⁸)i ⁵¹⁵ (M+Li⁺)

- 29 nadaljevanje tabele 3 primer__MS (FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)

	C32H46C12O3(548); 555 (M+Li+)
· xr	c33h50°4(51°); 517 (M+Li+)
H3CO
35	C31H47N°3(48Dj 488 (M+Li+)

^C36^H50°3<⁵³°>'

537 (M+Li⁺)

- 30 Primer 37

300 g (0,71 propana pod mmola) metilestra holne kisline smo mešali z 2,5 1 refluksom.

1,3-diaminoZa predelavo smo nastanek uparili, mu dodali 2 1 ledene vode in intenzivno mešali 1 uro. Preostanek smo odsesali in sušili 1 dan v vakuumskem sušilniku pri 75°C.

Dobitek: 306 g (0,65 mola, 92 %) ^C27^H48^H2°4 ⁽⁴⁶⁴⁾’ ^(FAB’ 3-NBA/LiCI) : 471 (M⁺LI⁺)

Analogno primeru 37 smo dobili primere v tabelah 5 do 8.

- 31 Tabela 5

primgn

R¹

MS (FAB,3-NBA/L1C1 ali LIJ)

^c34^h54N₂°4(⁵⁵4); 561 (M+Li⁺) ^40^53^04( 630; 637 (M+Li⁺) r

^C46^H62^N2°4<⁷⁰⁶)· ⁷¹³ (M+Li⁺) ^C34^H53^C1N2°4(⁵⁸⁸)'· ⁵⁹⁵ (M+Li⁺) ^C36^H58ⁿ2°4(⁵⁸²>· ⁵⁸⁹ (M+Li⁺)

- 32 nadaljevanje tabele 5 primer

MS (FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)

^C32^H52^C12^N2°4<⁶²²>'’ ⁶²⁹ <^M+Li+)

^C32^H56^N2°4i⁵⁸⁴>^{; 591} (^M+Li+) ^C33^H53N₃ ^O4(5⁵⁵); 562 (M+Li⁺)

C38^h56N₂ ⁰4(604); 611 (M+Li⁺)

primer R¹_MS (FAB,3-NBA/L1C1 ali LIJ) ^C27^H48^N2⁰3<^44B)^{J 455} (M⁺I*i⁺) *

48	cr	c34H54n2°3<538> · 545	(M+Li*)
49	o/	C40H58N2°3(614); 621	(M+Li*)
50	o	C46H62N2°3<690> '· 697	(M+Li*)
	0
51	.-Cr	c34h53c1N2°3(572); 579 (M+Li
	Z,
52	0C	C36H58N2°3<566>'· 573	(M+Li*)

nadaljevanje tabele 6 primer

R¹ :i

Cl

- 34MS (FAB,3-NBA/L1C1 ali LiJ) t

^C34^h52^c12ⁿ2°3<⁶⁰⁶)* ⁶¹³ (M+Li*) ^c35^h56ⁿ2°4(⁵⁶⁸); 575 (M+Li⁺) ^C33^H53^N3^O3<⁵³⁹)' ⁵⁴⁶ (M⁺Li⁺) ^C38^H56^N2°3<⁵⁸⁸>^{; 595} (M⁺Li⁺)

- 35 Tabela 7

primer

R¹ ‘MS (FAB,3-NBA/LiCl LiJ)

H C₂₇H₄₈N₂O₃(448); 455 (M+Li*)

O' ^C34^H54ⁿ2°3⁽⁵³⁸)^{; 545} <^M+Li+)

^C40^H58^N2°3(614); 621 (M+Li*) ^c46^H62^N2°3<⁶⁹°b ⁶⁹⁷ (M+Li*) ^C34^H53C1N2°3(^{* 57}2); 579 (M+Li*) ^C36^H58^N2^O3<⁵⁶⁶)J ⁵⁷³ (M+Li*)

- 36 nadaljevanje tabele 7 primer R¹_ MS (FAB,3-NBA/L1C1 _a1l· LiJ)

63	Cl	C34H52C12N2°3<6C)6> *’ 613 (M+L
64		c35H56N2°4<568>i 575 (M+Li+)
65	cr	c33H53N3°3<539>i 548 (M+Li+)
66	ecr	C38H56N2°3(588)' 595 (M+Li+)

- 37 Tabela 8

primer

MS (FAB,3-NBA/L1C1 ali LiJ) ^C27^H48^N2°2(⁴³²>'· «9 (M+Li*)

C₃₄ ^h54N₂°2(⁵²²); 529 (M+Li*)

^40^58^2θ2(5®®)· 505 (M+Li*) ^C46^H62^N2°2<⁶⁷⁴>'· ⁶⁸¹ <M+Li⁺>

^C34^H53^C1N2°2<⁵⁵⁶)* ⁸⁶³ (M+Li*) ^C36^H58^N2°2(⁵⁵°)^{j 557} (M*Li*)

- 38 nadaljevanje tabele 8 primer

MS (FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ) ^c34^H52^cl2^N2°3(⁵⁹⁰>i ⁵⁹⁷ (M+Li⁺)

C₃5^h5₆N₂ ⁰3(⁵⁵2); 559 (M+Li⁺) ^c33^h53ⁿ3°2⁽⁵²³)^{; 530} <^M+Li+) ^c38^h56ⁿ2°2<⁵⁷²)^{j 579} (M⁺Li⁺)

- 39 Analogno primerom v tabelah 5 do 8 smo dobili primere v tabelah 9 do 12.

Tabela 9

primer	X1	MS(FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)
37	NH(CH2)3NH2	ε27Η4βΝ2°4<464η
		471(M+Li*)
77	NH(CH2)4NH2	c28H50N2°4<478>’
		485(M+Li+)
78	NH(CH2)sNH2	C29HS2N2°4<492>’
		499(M+Li+)
79	NH(CH2)6NH2	C30H54»f204<506)i
		513(M+Li+)
80	NH(CH2)7NH2	c31H56N2°4<S20>’
		527(M+Li+)
81	NH(CH2)gNH2	C32H58N204(534);
		541(M+Li+)
. 82	NH(CH2)9NH2	c33H60N2°4<548>;
		555(M+Li+,
83	NH{CH2)1oNH2	C34H62N2°4<562>'·
		569(M+Li+)
84	NH(CH2)x1NH2	c35h64N2°4<576> ·
		583(M+Li*)
85	NH(CH2)12NH2	C36H66N2°4<590>·
		597(M+Li+,
86	NH (CH2) 20 { CH2 ) 20 (CH2 ) 2^¾	c30H54N2°6t538);
		545(M+Li+)
87	nh(c6h4)ch2(c6h4)nh2	c37H52N2°4<588)i
		595{M+Li*)
88	NH(C6H4)O(C6H4)NH2	C36HS0N2°5<590>’
		597(M+Li+)

uo _

Tabela 10

primer	X1	MS(FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)
89	NH(CH2)3NH2	C27H4SM2°3<448> · 455(M*Li*)
90	NH(CH2)4NH2	c28H50N2°3 ^462)' 469(M+Li+)
91	NH(CH2)5NH2	C29H52N2°3<476> 483(M+Li+)
92	NH(CH2)6NH2	c30H54N2°3(49°)' 497(M+Li+) .
93	NH(CH2)7NH2	c31h56n2°3<504)' 511(M+Li+)
94	NH(CH2)8NH2	C32 h58N2°3(518); 525(M+Li+)
95	NH(CH2)gNH2	c33h60n2°3^532^' 539(M+Li+)
96	NH(CH2)1oNH2	C34H62N2°3<546>· 553(M+Li+)
97	NH(ČH2)hNH2	c35H64n2°3<560> · 567(M+Li+)
98	NH(CH2)12NH2	C36H66N2°3<574>’ 581(Μ+ΙΛ+)
99	NH(CH2)2o(CH2)2o(CH2)2NH2	c30h54N2°5 (522 ) · 529{M+Li+)
100	NH(C6H4)CH2(C6H4)NH2	c37H52n2°3(572)J 579(M+Li+)
101	NH(C6H4)O(C6H4)NH2	C36 hsoN2°4<574>> 581(M+Li+)

-'41 11

X1	MS(FAB,3-NBA/LiCl Ali UJ)
NH(CH2)3NH2	C27H48N2°3<448>* 455(M+Li+)
NH(CH2)4NH2	C28 H5oN2 03(462); 469(M+Li+)
NH(CH2)sNH2	C29H52N2°3(476>i 483(M+Li+)
NH(CH2)6NH2	c30H54N2°3<490>· 497(M+Li+)
NH(CH2)7NH2	C31H56N2°3<504>' 511(M+Li+)
NH(CH2)8NH2	c32h58N2°3<518>' 525(H+Li*)
NH(CH2)gNH2	c33H60N2°3<532>; * 539(M+Li+)
NH( CH2)1QNH2	c34H62N2°3<546>· 553(M+Li+)
NH( ch2)hNh2	C35®64N2°3 i880 )· 567(M+Li*)
NH(CH2)12NH2	C36H66N2°3<574>· 581(M+Li*)
NH(CH2)20(CH2)20(CH2)2NH2	c30H54N2°5<522>ί 529(M+Li*)
NH(C6H4)CH2(C6H4)NH2	C37H52N203(572); 579(M+L1+)
NH(C6H4)O(C6H4)NH2	C36H50N2°4<574>* 581(M+Li+)

X¹ MS(FAB,3-NBA/LiCl

LU)

NH(CH2)3NH2	C27h48N2O1(432); 439(M+Li*)
NH(CH2)4NH2	c28H50N2°2^446^' 453(M+Li+)
NH(CH2)5NH2	c29H52N2°2<460>· 467(M+Li*)
NH(CH2)6NH2	c30H54N2°2<474>' 481(M+Li+)
NH(CH2)7NH2	C31H56N2°2<488>' 495(M+Li*)
NH(CH2)8NH2	C32H58N2°2<502>· 509(M+Li*)
NH(CH2)9NH2	C33H60N2°2<516)i 523(M+I»i+)
NH (CH2)1QNH2	c34H62N2°2<530>' 537(M+Li+)
NH(CH2)1XNH2	C35 h64N2°2(544); 551(M+Li+)
nh(ch2)12nh2	θ36Η66Ν2°2<558>ί
	565(M+Li+)
NH(CH2)2O(CH2)2O(CH2)2NH2	C30H54N2°4<506>i 513(M+Li+)
NH(C6H4)CH2(C6H4)NH2	C37H52N2°2<556>· 563(M+Li+)
NH(C6H4)O(C6H4)NH2	C36H50N2°3<558>· 565(M+Li+)

Primer 128

K 100 g (0,245 mola) holne kisline v 500 ml piridina smo dokapali pri 0°C 23,1 ml (0,294 mola) klorida metansulfonske kisline. Mešali smo 30 min pri 0°C in 2 h pri sobni temperaturi. Zmes smo zlili na 3000 ml vode/400 ml konc. H₂SO₄ in ekstrahirali z etilacetatom (3 x). Združene organske faze smo posušili z MgSO₄ in uparili. Kromatografija na silikagelu (etilacetat/cikloheksan/HOAc = 5:5:1) je dala kvantitativno primer 128. Za preparativne namene dodatno čiščenje ni bilo potrebno.

Primer 129

a) 119 g (0,245 mola) primera 128 smo segrevali v 500 ml etilenglikola/100 ml piridina 2 h na 100°C. Zmes smo zlili na 1500 ml vode/100 ml konc. H₂SO₄ in ekstrahirali z etilacetatom (3x). Združene organske faze smo posušili (MgSO₄) in uparili.

b) Za zaestrenje smo ostanek raztopili v 1100 ml metanolne HC1 (pripravljene z dokapavanjem 100 ml acetilklorida v 1000 ml metanola) in preko noči mešali pri sobni temperaturi. Raztopino smo zlili na 2000 ml vode in ekstrahirali z etrom (3x). Združene organske faze smo sprali z nasičeno vodno raztopino NaHCO₃ in posušili (MgSO₄). Odparjenje topila in bliskovita kromatografija na silikagelu (etilacetat, nato acetilacetat/MeOH = 10/1) je dala 37,1 g (0,08 mola, 33%) primera 129.

C₂₇H₄₆O₆ (466), MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 473 (M⁺Li⁺)

Produkt vsebuje do 10 % 3a-izomera, ki ga lahko v danem primeru po ustreznem derivatiziranju ločimo.

Analogno primeru 129 smo pripravili spojine iz tabele 13. (Poleg manjših deležev α-izomera smo dobili pretežno /3-izomere).

Tabela 13

Tabela 13

primer	8-Χ2	σ-Χ2	MS (FAB, 3-NBA/LiJ	ali LiC
130	ho-(ch2)3-o-	H	c28H48°6^480^	487	(M+Li*)
131	ho-(ch2)4-o-	H	C29H50°6<494>	501	(M+Li*)
132	ho-{ch2)5-o-	H	C30hS2°6(508>	515	(M+Li*)
133	ho-(ch2)6-o-	H	C31H54°6<522>	529	(M+Li*)
134	HO-(CH2)1q-O-	H	C35H62°6^578^	585	(M+Li*)
				601	(M+Na*)
135 HO-	(ch2)2-o-(ch2)2-	O- H	C2gH5o07(510)	517	(M+Li*)
136	h3c-ch-ch2-o-	H	c28H48°6<48°)	487	(M+Li*)

I

OH

Primer 137

K 37,1 g (0,08 mola) primera 129 v 150 ml piridina smo pri 0°C dokapali 6,6 ml (0,084 mola) klorida metansulfonske kisline. Mešali smo 15 min pri 0°C in 1 h pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes smo zlili na 500 ml vode in ekstrahirali z etilacetatom (3x). Sušenje združenih organskih faz (MgSO₄), odstranitev topila in kromatografija na silikagelu (etilacetat/cikloheksan = 3/1) je dala 37,7 g (0,07 mola, 87 %) mezilata primera 137,

C^H_4gO₈S (544), MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 551 (M + Li⁺).

Primer 138

ii cn

37,7 g (0,07 mola) mezilata primera 137 smo mešali s 4,95 g (0,076 mola) natrijevega azida v 150 ml suhega DMF 2 h pri 70°C. Reakcijsko zmes smo zlili na vodo in ekstrahirali z etilacetatom (3x). Združene organske faze smo posušili (MgSO₄) in uparili. Preostanek smo prevzeli s toluolom in toluol spet odstranili v rotacijskem uparjalniku (2x). Dobitek: 34,5 g primera 138 (kvantitativen). Azid smo brez dodatnega čiščenja presnovili neposredno v naslednjo stopnjo.

Primer 139

31,1 g (0,063 mola) primera 138 smo hidrirali v 500 ml etilacetata z 20 g Pd/C (10 %) pri sobni temperaturi in normalnem tlaku. Katalizator smo odfiltrirali in filtrat uparili. Kromatografija na silikagelu (etilacetat/metanol/NEt₃ 5/1/1) je dala 21,0 g (0,45 mola, 71 %) amina primera 139.

C₂₇H₄₇NO₅ (465), MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 472 (M + Li⁺).

Analogno primerom 137-139 smo pripravili spojine iz tabele 14.

Tabela 14

primer β-Χ² · e-X²*

140	h2n- <ch2)3-o-	H
141	h2n-(CH2)4-O-	H
142	H2N-(CH2)5-O-	H
143	h2n-(ch2)6-o-	H
144	h2n-(ch2)10-o-	H
145	h2n- ( ch2 ) 2- 0- { ch2 ) 2- 0-	H
146	h3c-ch2-ch2-o-	H

MS (FAB, 3-NBA/LiJ)_

C₂₈H₄gNO₅(479); ⁴⁸⁶ (M+Li*) ^C29^H51^N05<⁴⁹³><’ ⁵⁰⁰ (M+Li*) ^C30^H53^N05<⁵⁰⁷>J ⁵¹⁴ (M+Li*) ^C31^HS5^N05(⁵²¹)i ⁵²⁸ (^M+Li*) ^C35^H63^N05(⁵⁷⁷)i ⁵⁸⁴ (M+Li*) C29H51N06(509); 516 (M+Li*) C28^h49N°5(479 > i 486 (M+Li*) nh₂

Analogno holni kislini smo presnovili druge žolčne kisline ustrezno primerom 128 146 in dobili spojine iz primerov v tabelah 15-17.

a) iz deoksiholne kisline:

Tabela 15

2 primer Β-Χ	a-X2’	MS (FAB, 3-.NBA/L1J)
147	ho-(ch2)2-o-	H	C27H46°5<450>'* 457 <M+Li+>
148	HO-(CH2)3-O-	H	c28H48°5(464)i 471 (M+Li+)
149	ho-(ch2)5-o-	H	c30H52°5(492); 499 (M+Li+)
150	ho-(ch2)10-o-	H	C35H62°5<562>; 569 (M+Li+)
151	H2N-(CH2)2-O-	H	C27H47N04(449); 456 (M+Li*)
152	h2n-(ch2)5-o-	H	C30H53N04<491); 498 (M+Li+)

b) iz henodeoksiholne kisline

2 primer β-Χ	a-X2*	MS(FAB, 3-NBA/L1J)
153 HO-(CH2)2-O-	H	C27H46°5(45°)i 457 (M+Li*)
154 HO-(CH2)3-O-	H	c28H48°5<464)i <71 (M+Li+)
155 HO-(CH2)5-O-	H	C30H5205(492); 499 (M+Li+)
156 HO-(CH2)10-O-	H	C35H62O5(562); 569 (M+Li*)
157 H2N-(CH2)2-O-	H	C27H47NO4(449)j 456 (M+Li*)
158 H2N-(CH2)5-O-	H	C3QH53N04(491)j 498 (M+I»i+)

c) iz litoholne kisline

Tabela 17

primer fl-X2	e-X2*	MA (FAB, 3-NBA/LiJ)
159 HO-(CH2)2-O-	H	c27h46°4(434); 441 (M+Li+)
160 H0-(CH2)3-0-	H	C28 h48°4(448); 455 (M+Li*)
161 H0-(CH2)5-0-	H	C3oh52°4(476); 483 (M+Li*)
162 HO-(CH2)1q-O-	H	C35H62°4<546>’ 653 (M+Li*)
163 H2N-(CH2)2-O-	H	C27H47NO3(433); 440 (M+Li*)
164 H2N-(CH2)5-O-	H	C30H53N03<475>'’ 482 (M+Li*)

Primer 165

Primer 124 (X:g = 2 in n=2)

2,0 g (4,3 mmola) primera 139 smo v 25 ml THF/5 ml trietilamina mešali pri sobni temperaturi 30 min s (430 mg 4,3 mmola) anhidrida jantarne kisline. Reakcijsko zmes smo zlili na 2 n HCl in ekstrahirali z etilacetatom (3x). Sušenje združenih organskih faz (MgSO₄) in odstranitev topila je dalo 2,4 g (4,2 mmola, 98 primera 165 C₃₁H₅₁NO₈ (565): MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 578 (Μ+2Π+-Η)

Prav tako smo pripravili spojine, v katerih je v ostanku X q = 0,1, 3 in 5 in n = 3 do 18 SiH.

Primer 166

42,2 g (0,1 mola) metilestra holne kisline, 300 ml (1,8 mola) N-etildiizopropilamina in 10 ml (0,12 mola) alilbromida smo segrevali pod refluksom 8 h. Po vsaki uri reakcijskega časa smo ponovno dodali vsakič 5 ml alilbromida (DG-kontrola, cikloheksan/etilacetat = 1:1). Reakcijsko zmes smo zlili na 400 ml konc. H₂S0₄/2000 ml vode in ekstrahirali z etilacetatom (3x). Združene organske faze smo vsakokrat sprali po enkrat z 1 N HCl, vodo in nasičeno raztopino NaHCO₃. Sušenje (MgSO₄), odtegnitev topila in kromatografija preostanka na silikagelu (n-heptan/etilacetat = 4:1 3:1 -> 2:1) je dalo 21,91 g (0,047 mola, 47%) primera 155.

^C26^H46°₅ (462), MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 469 (M+Li⁺)

Primer 167

. {j ČH

OB (1) Priprava teksilborana: pod atmosfero argona smo pri 0°C dokapali k 85 ml 1 molame raztopine BH₃. THF (THF) 85 ml 1 molarne raztopine 2,3-dimetilbutena (THF). Mešali smo pri 0°C.

(2) Hidroboriranje: k raztopini, pripravljeni po (1), smo pri 0°C dokapali 8,6 g (18,59 mmola) olefina primera 166 v 25 ml THF. Po 3h pri 0°C smo pustili segreti na sobno temperaturo (DG-kontrola). Po 16h pri sobni temperaturi smo dokapali sveže pripravljeno raztopino tekstilborana (THF). Znova smo mešali pri sobni temperaturi. Potem, ko ni bilo več mogoče dokapati izhodnega materiala, smo reakcijsko zmes pod atmosfero argona previdno prenesli ob intenzivnem mešanju v vodni natrijev lug (na ekvivalent borana 1 ekvivalent NaOH). Nato smo ob hlajenju z ledom dokapavali 30 %-no raztopino vodikovega peroksida (2 ekvivalenta na 1 ekvivalent borana). Po 20 min pri 0°C smo segrevali 30 min na 50°C. Za boljše ločenje faz smo dodali nasičeno raztopino kuhinjske soli. Vodno fazo smo ekstrahirali z etilacetatom (2x) in združene organske faze sprali z nasičeno raztopino natrijevega bisulfita (2x) in nato z raztopino natrijevega klorida (lx). Sušenje z MgSO₄, odtegnitev topila in kromatografija na silikagelu (etilacetat -> etilacetat/MeOH = 20:1) je dalo 5,0 g (10,4 mmola, 56%) primera 167.

Rf (etilacetat): 0,18

C28^H4A>(480); MS (FAB, 3-NBA/LiCI); 487 (M + Li*)

Poleg tega smo dobili 1,0 g sekundarnega alkohola.

Rf (etilacetat): 0,27

Primer 168

Analogno primerom 137-146 smo iz primera 167 dobili primer 168”.

(X-G z «(-konfiguracijo na 3-C)

C₂₈H₄₉N0₅ (479); MS (FAB, 3NBA/LH): 486 (M + Li*)

Spojino po primeru 168 smo nato prevedli po primeru 165 v njen monoamid dikarboksilne kisline.

Končne spojine

Primer 169

Predložili smo 565 mg (1 mmol) primera 165, raztopljenega v 20 ml tetrahidrofurana in 5 ml trietilamina, in pri 0°C dobrizgali 96 μΐ (1 mmol) etilestra klormravljinčne kisline. Mešali smo 15 min pri 0°C, in nato dodali 630 mg (1 mmol) trdnega primera 39. Mešali smo 5 h pri sobni temperaturi. Reakcijsko raztopino smo močno žvrkljali 10 minut z 10 ml 1 molame solne kisline in nato ekstrahirali z etilacetatom (3x). Združene organske faze smo sprali z nasičeno vodno raztopino NaHCO₃ in posušili (MgSO₄).

Odpaijenje topila in bliskovita kromatografija na silikagelu (etilacetat/etanol = 3/1) je dala 765 mg (0,65 mmola, 65 %) primera 169.

C₇₁H₁₀₇N₃O_n (1177), MS (FAB, 3-NBA/LiCI): 1184 (M+Li⁺)

Primer 170

Stopnja b) Umiljenje

HjC

707 mg (0,6 mmola) primera 169 smo mešali 1,5 h pri sobni temperaturi z 10 ml etanola in 5 ml 1 molarnega natrijevega luga, nato intenzivno žvrkljali 10 minut z 10 g natrijevega dihidrogenfosfata in ekstrahirali z etilacetatom/etanolom = 3/1 (3x). Združene organske faze smo posušili (MgSO₄).

Odparjenje topila, zdrgnjenje z n-heptanom in odsesanje je dalo 665 mg (0,57 mmola 95 %) primera 170

C₇₀H₁₀₅N₃O_n (1163), MS (FAB, 3-NBA/LiCI): 1170 (M+Li⁺).

- 5Τ Analogno primeroma 169 in

170 smo dobili spojine iz tabele 18.

Tabela 18

primer_bA_MS (FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)

171 H ^c57^H95^N3°ll(⁹⁹⁷)^; 1004 (M+Li*)

172

^C64^H101^N3°ll<¹⁰⁹⁷>· ¹⁰⁹⁴ (M+Li*)

^c76^H109^N3°ll(¹²³⁹)^{; 1246} (^M+Li⁺) ^C64^H100^C1N3°ll <¹¹²¹ > '· ¹¹²⁸ (M+Li*) ^C66^H105^N3°ll(¹¹¹⁵>/ ¹¹²² (M+Li*)

175

- 55nadaljevanje tabele 18 primer__MS (FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)

^C65^H103^N3°12(¹¹¹⁷>* ¹¹²⁴ (M+Li*)

C^HggCl^OuillSS); 1162 (M+Li*)

178

^C63^H100^N4°ll(¹⁰⁸⁸)^{J 1095} (^M+Li⁺)

179

^c68^H103^N3°ll(¹¹³⁷>; ¹¹⁴⁴ (M+Li*) rt

- 56 Analogno primeroma 169 in 170 smo iz primera 151 dobili spojine iz tabele 19. . .

Tabela 19

primer

MS (FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)

180 ^c57^h95N3⁰i0(^9B1); 988 (M+Li*)

181

182

^C64^H101^N3°10<¹⁰⁷¹>· ¹⁰⁷⁸ (M+Li*) °76^Η109^Ν3°1θ(¹²²³)ϊ ¹²³⁰ (M+Li*)

183 xr

Cl ^C64^H100^C1N3°10(¹¹⁰⁵)*· ¹¹¹² (M+Li*) θ66Ηΐ05^Ν3°1θ(^3,888)» (M+Li*)

184

- 57 nadaljevanje tabele 19 primer

MS (FAB_/3-NBA/LiCl aU LiJ)

185

186

^c65^Hio3N₃ ⁰ii(l¹⁰l)i 1108 (M+L1+) ^C64^H99^C12^N3°10(¹¹³⁹)i ¹¹⁴⁶ (^M+Li+)

187

^c63^H100^N4°10<¹⁰⁷²>* ¹⁰⁷⁹ <^M+Li+)

188 ^C68^H103^N3°10<¹¹²¹>· ¹¹²⁸ (^M+Li+>

189

^c7O^Hio5^N3°lo(¹¹⁴⁷>; ¹¹⁵⁴ (M⁺Li⁺)

I

- 58 Analogno primeroma 169 in

170 smo iz primera 116 dobili spojine iz tabele 20.

Tabela 20

P^rimer_R^_MS (FAB,3-NBA/LiCI ali LiJ)

190 H

191

192

^57®95^3θΐθ(⁹®1)^; 98® (M+Li⁺) ^C64^H101^N3°10<¹⁰⁷¹>ϊ ¹⁰⁷⁸ <M+Li⁺)

C₇₆ ^hio9N3°io(¹223); 1230 (M+Li⁺)

193

^C64^H100^C1N3°10<^11C)5> > ¹¹¹² <^M+Li*)

^c66^H105^N3°10<¹⁰⁹⁹>· ¹¹⁰⁶ <M⁺Li+)

194

- 59 nadaljevanje tabele 20 primer

R¹

MS (FAB,3-NBA/L1C1 ali LIJ)

195

196

^c65^H103^N3°ll(¹¹⁰¹)'· ¹¹⁰⁸ (^M+Li+>

^C64^H99^C12^N3°1O<¹¹³⁹>* ¹¹⁴⁶ <^M+Li+>

197

^C63^H100^N4°10<¹⁰⁷²>· ¹⁰⁷⁹ (M⁺Li⁺)

198 ^C68^H103^N3°10<¹¹²¹)· ¹¹²⁵ (M⁺Li⁺)

199

C7oHlO5^N3°lO<^il47H ¹¹⁵⁴ (^M+Li+) t

-60-- Analogno primerama 169 in 170 smo iz primera 163 dobili spojine iz tabele 21.

Tabela 21

primer_R¹ _ MS (FAB,3-NBA/LICI ali LiJ)

200 H C₅₇H₉₅N₃O₉(965); 972 (M+Li*)

201

^C64^H101^N3°9(¹⁰⁵⁵>'‘ ¹⁰⁶² (^M+Li+)

202

^C76^H109^N3°9(¹²⁰⁷)^{J 1214} (M+Li*)

203 ^c64^H100^clN3°10(¹⁰⁸⁹>i ¹⁰⁹⁶ (M+Li*)

^^C66^H105^N3°9(¹⁰⁸³)'· ¹⁰⁹⁰ (M+Li*)

204

- 61 nadaljevanje tabele 21 .Primer_lA_MS (FAB,3-NBA/LiCl aji LiJ)

205	h3co*a^ CI	c65H103N3°10<108S>'·	1092	(M+Li*
206		C64Hg9Cl2N3O9(1123)	j 1130 (M+Li
207	cr	^63H100N4°9(1056);	1063	(M+Li*)
208	«r	C68H103N3°9(1105)i	1112	(M+Li*)
209		c70H105N3°9(1131)·	1138	(M+Li*)

- 62 Analogno primeroma 169 in 170 smo dobili spojine iz tabele 22.

Tabela 22

primer_F*_MS (FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)

210 H

211 ^c57^h95ⁿ3°10(⁹⁸¹)^{; 988} (M+Li*) ^C64^H101^N3°10<¹⁰⁷¹>' ¹⁰⁷⁸ (M+Li⁺)

212

^C76^H109^N3°10(¹²²³)· ¹²³⁰ <^M+Li+)

213

^C64^H100^C1N3°10(¹¹⁰⁵>· .¹¹¹² <^M+Li+ >

^C66^H105^N3°10<¹⁰⁹⁹>i 1106 (M+Li*)

214

- 63 nadaljevanje tabele 22

A primer

MS (FAB,3-NBA/LiCl _a1l· LiJ)

215

216

^C65^H103^N3°10<¹¹⁰¹>! ^{1108 C}64^H99^C12^N3°10<¹¹³⁹>^{; 1146} (^M+Li+)

217

^C63^H100^N4°10 (¹⁹⁷²);

1079 (M+Li*)

218

^C68^H103^N3°10<¹¹²¹>'· ¹¹²⁸ <M⁺Li⁺>

^c70^H105^N3°10(¹¹⁴⁷>i ¹¹⁵⁴ (M⁺Li⁺)

219

- 64--Analogno primeroma 169 in 170 smo dobili spojine iz tabele 23.

Tabela 23

primer_R*_MS (FAB,3-NBA/LiCl ali LIJ)

220 H C₅₇H_g5N₃O₉(965); 972 (M+Li*)

221

222

^c64^h101ⁿ3°9<¹⁰⁵⁵>^{; 1062} (M+Li*) ^C76^H109^N3⁰9<¹²⁰⁷>7 ¹²¹⁴ (M+Li*)

223 ^C64^H100^C1N3°10(¹⁰⁸⁹>i ¹⁰⁹⁶ (M+Li*)

224

CH,

T, ^c66^H105ⁿ3⁰9(¹⁰⁸³)7 ¹⁰⁹⁰ (M+Li*)

- 65 nadaljevanje tabele 23

E£i£££__MS (FAB^-NBA/LiCi ali LiJ)

225		C65H103N3°10(1085)i 1092 (M+Li*)
226	Cl	C64H99C12N3°9(1123)< 1130 (M+Li*) 1
227	cr	C63H100N4°9<1056); 1063 (M+Li*)
228	con	c68H103N3°9<1105>'· 1112 (M+Li*)
229	οΛη	c70h105N3°9(1131) '· 1138 (M+Li*)

- 66 Analogno primeroma 169 in 170 smo dobili spojine iz tabele 24.

Tabela 24

Primer_R^_MS (FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)

230 H

231 ^c57^h95ⁿ3°9(^θ65)'* ⁹⁷² (M+Li⁺) ^C64^H101^N3°9(¹⁰⁵⁵)' ¹⁰⁶² (M+Li⁺)

232

^C76^H109^N3°9<¹²⁰⁷>'’ ¹²¹⁴ (M+Li⁺)

233

^c64^H100^clN3°9(¹⁰⁸⁹); ¹⁰⁹⁶ (M+Li⁺) ^c66^H105^N3°9(¹⁰⁸³b ¹⁰⁹⁰ (M+Li⁺)

234

- 67 nadaljevanje tabele 24

Primer__MS (FAB,3-NBA/L1C1 ali LIJ)

I

235	,,c„xr	c65h105n3°10(1085); 1092 (M+Li+) • · ·
236		C64H99C12N3°9(1123)J 1130 (M+Li+)
237	or	C63H100N4°9 <1056)! 1063· (M+Li*) ♦»
238	OOr	C68H10'3N3°9(1105> '· 1112 (M+Li+)
239	C/O	C70h105n3°9<1131)J 1138 (M+Li+)

- 68 Analogno primeroma 169 in 170 smo dobili spojine iz tabele 25.

Tabela 25

primer

MS (FAB,3-NBA/L1C1 ali LiJ)

240

C₅₇H₉₅N₃O₈(949); 956 (M+Li)

241 ^c64^H101^N3°8<¹⁰³⁹>i ¹⁰⁴⁶

242

^C76^H109^N3°8(¹¹⁹¹>· ¹¹⁹⁸ (M+Li⁺)

243

244 ^C64^H100^C1N3°8<¹⁰⁷³)' ¹⁰⁸⁰ (M⁺Li⁺)

CH^c66^H105^N3°8<¹⁰⁶⁷>'· ¹⁰⁷⁴ (M+Li⁺)

CH- 69 nadaljevanje tabele 25 primer _R^_MS (FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)

^c65^Hi03^N3°9(¹⁰⁶⁹b 1076 (M+Li*)

C₆₄ ^Hgg^cl2N₃°g(^llc>7); 1114 (M+Li*)

247		C63H100N4°8<1040>'·	1047	(M+Li*)
248	OX	C68H103N3°8 1089· «	1096	(M+Li*)
249		c70H105n3°8<1115> ·	1122	(M+Li*)

u

- 70 Analogno primeroma 16a in 170 smo dobili spojine iz tabele 26.

Tabela 26

primer R¹_MS (FAB,3-NBA/LiClali LiJ)

250 H ^C57^H95^N3°10<⁹⁸¹>' ⁹⁸⁸

251

^C64^H101^N3°10<¹⁰⁷¹>· ¹⁰⁷⁸ (M+Li*)

252

^C76^H109^N3°10<¹²²³)' ¹²³⁰ (M*Li⁺)

253 ^C64^H100^C1N3°10<¹¹⁰⁵>i ¹¹¹² (M+Li*) ch₃ ^C66^H105^N3°10<¹⁰⁹⁹>· ¹¹⁰⁶ (M+Li*)

254

- 71 nadaljevanje tabele 26 primer

R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl ^ald LiJ)

255

256

257

^C65^H103^N3°ll<¹¹⁰¹>i ¹¹⁰⁸ (M+Li⁺) ^C64^H99^Ci2^N3°10(¹¹³⁹>^{J 1146} (^M+Li+) ^C63^H100^N4°10<¹⁰⁷²>· ¹⁰⁷⁹ (M+Li⁺)

258 is

^c68^H103^N3°10<¹¹²¹b ¹¹²⁸ (M+Li*)

259 ^C70^H105^N3°10(¹¹⁴⁷)i ¹¹⁵⁴ (M+Li*)

- 72 Analogno primeroma 169 in 170 smo dobili spojine iz tabele 27.

Tabela 27

primer

R¹

260 H

MS (FAB, 3-NBA/LiCl al i LiJ) ^C57^H95^N3°9<⁹⁶⁸)'* ⁹⁷² <^M+Li+>

261

262

263

^c64^H101^3°9(l°⁵⁵)* ¹⁰⁶² (^M+L1+)

C₇₆H₁₀₉N₃O_g(1207); 1214 (M+Li*) ^c64^H100^clN3°9<¹⁰⁸⁹)i ¹⁰⁹⁶ (M+Li*) ^C66^H105^N3⁰9<¹⁰⁸³>*· ¹⁰⁹⁰ (M+Li*) »·

264

- 73 nadaljevanje tabele 27

P^rimer_ R¹ _MS (FAB,3-NBA/LiCl ali LIJ)

265	„,=xr Cl	C65H103N3°10<1085>i 1092 (M+L*+>
266	c;/r	C64H99C12N3°9<1123>; 1130 (M+Li+)
267	0'·	c63HiooN4°9(1056)'· 1063 (M+Li+)
268	or	c68H103N3°9<1105>'’ 1112 (M+Li+)
269		• c70h105N3°9<1105)' 1112 (M+Li+)

- 74 Analogno primeroma 169 in

170 smo dobili spojine iz tabele 28.

Tabela 28

primer . R^

270 H

MS (FAB,3-NBA/LiClali~ LiJ) ^C57^H95^N3°9<⁹⁶⁵)7 ⁹⁷² (M+Li*)

271

^c64^H101^N3°9(¹⁰⁵⁵)^{; 1062} (^M+Li*)

272

Č₇₆H₁₀₉N₃O_g(1207); 1214 (M+Li*)

273

^C64^H1OO^C1N3°9 <¹⁰⁸⁹)i ¹⁰⁹⁶ (^M+Li⁺)

^c66^H105^N3°9(¹⁰⁸³)'· ¹⁰⁹⁰ (M+Li⁺)

274

- 75 nadaljevanje tabele 28

primer	R1	MS (FAB,3-NBA/LiCl ali	LiJ)
275	,=xr	C65H103N3°10<1085>· 1092	(M+Li*)
276	Cl eZr	c64H99cl2N3°9d123b 1130 (M+Li*)
277	cr	C63H100N409(1056>i 1063	(M+Li*)
278	ocr	α68Η103Ν3<Μ1105> i 1112	(M+Li*)
279	0^0	C7oH1o5N3 09(1131); 1138	(M+Li*)

- 76 Analogno primeroma 160 in 170 smo dobili spojine iz tabele 29.

Tabela 29

primer

MS (FAB/3-NBA/L1C1 ali LiJ)

280 ^C57^H95^N3°8<⁹⁴⁹b ⁹⁵⁶ (M+Li⁺)

281 ^C64^H101^N3°8t¹⁰³⁹>^{; 1046} (M+Li⁺)

282

Cr

^C76^H109^N3°ei¹¹⁹¹)^{? 1198} (^M+Li+)

283 ^c64^H100^c1N3°8<¹⁰⁷³^ ¹⁰⁸⁰ (M+Li*)

CHČČ • CH.

^c66^H105^N3°8(¹⁰⁶⁷)i ¹⁰⁷⁴

284

- 77 nadaljevanje tabele 29 primer

R¹

MS(FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)

285

286

^C65^H103^N3°9(¹⁰⁶⁹)i ¹⁰⁷⁶ (M+Li*) ^C64^H99^C12^N3°e(¹¹⁰⁷)i ¹¹¹⁴ (M+Li*)

287

^C63^H100^N4°8(¹⁰⁴°)? 1047 (M+Li*) .

288

x ^C68^H103^N3°8(¹⁰⁸⁹)? 1096-(M+Li*)

289

A ^C70^H105^N3°8 (¹¹¹⁵)

1122 (M+Li*)

- 78 Analogno primeroma 169 in

170 smo dobili spojine iz tabele 30.

Tabela 30

primer_R¹ _MS (FAB, 3-NBA/LiCl_ai i LiJ)

290 H C₅₇Hg₅N₃O_g(965); 972 (M+Li*)

291

^c64^hioiN₃ ⁰9(¹⁰⁵⁵); 1062 (M+Li*)

292

I ^c64^H100^clN3°9(¹⁰⁸⁹)? ¹⁰⁹⁶ (M+Li*) ^c66^H105^N3°9(¹⁰⁸³)** ¹⁰⁹⁰ (M+Li*)

- 79 nadaljevanje tabele 30 primer

R¹

MS (FAB,3-NBA/LiClali LiJ)

296.

297

298

295

H

=xr	c65h103n3°10<1085>* 1092 <M+Li+)
Cl
	C64H99C12N3°9<1123>J 1130 (M+Li+) t
Or	c63hioon4°9(1056); 1063 (M+Li+)
OCr	C68H103N309(1105); 1112 (M+Li+)

^c68^H105^N3°9(¹¹³¹)i ¹¹³⁸ (M⁺Li⁺)

299

X

- 80Analogno primeroma 160 in 170 smo dobili spojine iz tabele 31

Tabela 31

Primer_r1_MS (FAB,3-NBA/LiClali LiJ)

300 H

C₅₇Hg₅N₃O₈(949); 956 (M+Li⁺)

301	cr	C64H101N3°8<1039)i 1046 <M+Li+)
302		C76H109N3°8<1191>i 1198 <M+Li*>
303	CH·, 6? ^CH3	C64H100C1N3°8(1073>J 1080 (M+Li+)
304	CggHjQ5N3Og(1067)j 1074 (M+Li+)

- 81 nadaljevanje tabele 31- .

—B^rimer_R^_;_MS (FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)

305	h3co^0	c65H103N399<1069>'· 1076	(M+Li+)
306	Cl	c64H99cl2N3°8(1107>'· 1114 <M+Li t
307	ςτ	C63H100N4°8<104°)i 1047	(M+Li*)
308	COr	C68H103N3°8<1089>? 1096 <	(M+Li+)
309	0Č3	C70H105N3°8(1115)? 1022	(M+Li+)

r

- 82 Analogno primeroma 169 in

170 smo dobili spojine iz tabele 32.

Tabela 32

primer

310 H

MS (FAB/3-NBA/L1C1^ali LiJ) ^C57^H95^N3°81⁹⁴⁹ >* ⁹⁵⁶ (H⁺Li⁺)

^c64^H101^N3°8<¹⁰³⁹)i ¹⁰⁴⁶ (M⁺Li*)

^c76^H109^N3°8<¹¹⁹¹b ¹¹⁹⁸ (M+Li⁺)

313

^C64^H100^c1N3⁰8<¹⁰⁷³>J ¹⁰⁸⁰ (M+Li⁺) ^c66^H105^N3°8<¹⁰⁶⁷>; ¹⁰⁷⁴ (M+Li⁺)

314

- 83 nadaljevanje tabele 32 primer_r!_._MS (FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ) ³¹⁵ Ji M ^C65H₁₀₃N₃0₉(1069)i 1076 (M+Li⁺) h₃co*^a^

CI

316 Or ^ε64^Η99^ύ12^Ν3°8(^11θ7>^{; 1114} (^M+Li*)

317

C₆₃H₁₀₀N₄0₈(1040); 1047 (M+Li⁺)

318 ^C68^H103^N3°8<¹⁰⁸⁹)' 1096'(M+Li*) ^C70^H105^3⁰8<1¹¹⁵)* ¹¹²² (M+Li⁺)

319

- 84 Analogno primeroma 169 in 170 smo dobili spojine iz tabele 33.

Tabela 33

primer

MS (FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)

320 ^C57^H95^N3°7<⁹³³)' ⁹⁴⁰ (M+Li*)

322 ^C64^H101^N3°7(¹⁰²³)i ¹⁰³⁰ (M+Li*)

323

^C76^H109^N3°7(¹¹⁷¹)/* ¹⁰⁸² (M+Li*)

324 ^c64^H100^clN3°7(¹⁰⁵⁷); ¹⁰⁶⁴ (M+Li*)

CH.

325

C₈₈H^q₈N₃0₇(1051)j 1058 (M+Li*)

- 85 nadaljevanje tabele 33 primer_R¹ _MS (FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)

325	h3cctC^ Cl	c65H103N3°8(1053)i	1060	(M+Li*)
326	tlZr	c64H99cl2N3°7<1091>	; 1098 (M+Li
327	cr	C63Hl00N4°7(1024)'	1031	(M+Li*)
328	ccr	C68H103N3°7 C1073)·	1080	(M+Li*)
329		C70H105N3°7<10)i	1106	(M+Li*)

Primer 330

g (17 mmolov) primera 1 smo raztopili v 10 ml etanola, dodali 50 ml 1 molarnega natrijevega luga in mešali 2h pri sobni temperaturi, nakar smo intenzivno mešali 15 minut s 100 g natrijevega dihidrogenfosfata in ekstrahirali z etilacetatom/etanolom = 5/1 (3x). Združene organske faze smo posušili (MgSO₄).

Odpaijenje topila, zdrgnjenje z diizopropiletrom in odsesanje je dalo 9,08 g (15,8 mmola, 93 %) primera 330 C_3?H₅₀O₅(574),

MS(FAB, 2-NBA/LiCl); 581 (M+Li⁺)

Analogno primeru 330 smo dobili primere v tabelah 34-37.

- 87 Tabela 34

primer

R¹

331

332

333

MSfFAB^-NBA/LlCl¹¹ LiJ) ^C31^H46°5<⁴⁹⁸)i 505(M+Li⁺) ^C43^H54°5 <⁶⁵⁰)i ⁶⁵⁷(M+Li⁺) ^C31^H45^C1O5(⁵³²)J 539(M+Li⁺)

334

335

^c33^h50°5 <⁵²⁶)· ⁵³³(M⁺Li⁺) ^C31^H44^C12°5(⁵⁶⁶)i 573(M+Li*)

336 „XT ^C32^H48⁰6<⁵²⁸)i 535(M+Li*)

338 ocr

C₃5^H48⁰5(⁵³8); 545(M+Li*)

337 cr ^C30^H45^NO5<⁴⁹⁹>i 506(M+Li⁺)

Tabela 35 primer

339

340

341

342

343

R*_MS (FAB, 3-NBA/L1C1 ali LIJ)

^c31^h4₆°4(482),· 489(M+Li*) ^C43^H54°4<⁶³⁴>'* 641(M+Li*)

C₃i^h4₅C1⁰4(⁵¹6); 523(M+Li*) ^c33^H50°4 <⁵¹⁰ >· ⁵¹⁷(M+Li*) ^c31^h44^c12°4(⁵⁵°)? 557(M+Li*)

344

^C32^H48°51⁵¹² >· ⁵¹⁹(M+Li*)

- 89 nadaljevanje, tabele 35 primer

MS(FAB,3-NBA/LiCLaIi LiJ)

345

^C30^H45^N04<⁴⁸³)J 490(M+Li⁺)

346

ί| K ^c35^h48°4(⁵22); 529(M+Li⁺)

^c37^H50°4(^55B)i 565(M+Li⁺)

347

Tabela 36

348 ^c31^h4₆°4(482)j 489(M+^Li⁺)

349

^C43^H54°4(⁶³⁴)J 641(M+Li*)

350 xr ^C31^H45^C1°4(⁵¹⁶)i 523(M+Li*)

351 ch₃

^C33^H50°4(⁵¹°)i 517(M+Li*)

352 ^c31^H44^cl2°4<⁵⁵⁰>* 557(M+Li*)

353

^C32^H48°5(⁵¹²)i 519(M+Li*)

- 91 nadaljevanje tabele 36 h

primer'

354

MS(FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ) ^3ο^η45Ν°₄(483); 490(M+Li*)

355

^c35^h4₈O₄(522); 529(M+Li*)

356

^37^50θ₄(558); 565(M+Li*) '

- 92 Tabela 37

primer . · R¹_MS(FAB,3-NBA/LiCI _ali LiJ)

357	CT	c31h46O3(466); 473(M+Li*)
358		c43h54°3(618)J 625(M+Li*)
359	,ΧΓ	C31^45(:103(500),- 507(M+Li*)
360	CH, če vxch3	C33H50°3(494)· 501(M+Li*)
	Cl 1
361	„4r	c31H44Cl2°3(534); 541(M+Li*)
362	..co-Or	c32H4804<496b 503Qi+Li*)

- 93 nadaljevanje-tabele 37 primer j^l

363

MS(FAB,3-NBA/LiCl ^ali LiJ) ^C30^H45^N03<⁴⁶⁷)i 474(M+Li*)

364 ^c35^h48°3<⁵⁰⁶>· S13(M+Li*)

365 ^c37^h50°3(⁵⁴²); 549(M+Li*)

X

Primer 366 Stopnja a)

Predložili smo 574 mg (1 mmol) primera 330, raztopljenega v 20 ml tetrahidrofurana, in 5 ml trietilamina in pri 0°C dobrizgali 108 μΐ (1,1 mmola) etilestra klormravljinčne kisline. Mešali smo 15 minut pri 0°C in nato dodali 465 mg (1 mmol) trdnega primera 139.

Mešali smo 4 h pri sobni temperaturi.

Reakcijsko raztopino smo 10 minut močno žvrkljali z 10 ml 1 molarne solne kisline in nato ekstrahirali z etilacetatom (3x). Združene organske faze smo sprali z nasičeno vodno raztopino NaHCO₃ in posušili (MgSO₄).

Odparjenje topila in bliskovita kromatografija na silikagelu (etilacetat/etanol = 9/1) je dala 755 mg (0,74 mmola, 74 %) primera 366.

C^H^NO, (1021), MS(FAB, 3-NBA/LiCl): 1028 (M+Li⁺)

Stopnja b)

Umiljenje

Primer 367

715 mg (0,7 mmola) primera 366 smo mešali z 10 ml etanola in 5 ml 1 molarnega natrijevega luga 1,5 h pri sobni temperaturi, nato 10 minut intenzivno žvrkljali z 10 g natrijevega dihidrogenfosfata in ekstrahirali z etilacetatom/etanolom = 3/1 (3x). Združene organske faze smo posušili (MgsO₄).

Odpaijenje topila, zdrgnjenje z diizopropiletrom in odsesanje je dalo 670 mg (0,67 mmola, 95 %) primera 367.

^C63^C93^NO9 (^1θθ7)’ MS(FAB, 3-NBA/LiCl): 1014 (M+Li+)

Analogno primeroma 325 in 326 smo dobili spojine iz tabele 35.

1024 mg (1,1 mmola) primera 328 smo raztopili v 5 ml etanola, dodali 200 mg paladija na oglju (10 %-nega) in 1 h stresali pri sobni temperaturi pod atmosfero vodika.

Za predelavo smo katalizator odfiltrirali in filtrat uparili. Kromatografija na silikagelu (etilacetat/etanol = 1/1) je dala 780 mg (0,92 mmola, 84 % primera 490 ^^0,(841), MS(FAB, 3-NBA/LiCl); 848 (M+Li⁺)

- 97 Analogno primeroma 366 in 367 smo dobili spojine iz tabele 38.

Tabela 38

primer

MS (FAB, 3-NBA A id ali LiJ)

369

C₅₇H₈₉NO_g(931)j 938(M+Li*)

370

^ε69^Η97^ΝΟ9<^1θ83)^; 1090(M+Li⁺) ^c57^H88^c1N09 <⁹⁶⁵)· ⁹⁷²(^M+Li+)

373 ch₃ a?

ch₃ ^C59^H93^NO9(⁹⁵⁹); ⁹⁶⁶(M+Li*)

,.cXr °58^Η91^Νθ10<⁹⁶¹>* 968(M+Li*)

- 98 nadaljevanje tabele 38

primer	R1	MS(FAB,3-NBA/LiCl ali fciJ)
374	Cl	C57H87C12NO9(999)J 1006(M+Li*)
375	ζτ	G56H88N2O9(932)j 939(M+Li*)
376	'V'	c6lH9lN°9(981); 988(M+Li*)

--99Analogno primerom 366, 367 iri 368 smo dobili spojine iz tabele 39.

Tabela 39

primer ___MS(FAB,3-NBA/LiCI _a1l- LiJ)

377 H C₅₀H₈₃N0₈(825); 832(M+Li*)

378

^c57^h8₉N⁰8(915); 922(M+Li*)

379

380

^C63^H93^N08 <⁹⁹¹)· ⁹⁹⁸(M+Li*) ^C69^H97^N08(^106?)J 1074(M+Li*)

Cl

C₅₇H₈₈C1NO₈{949); 956(M+Li*)

381

100 nadaljevanje tabele 39 ^Primer_Fj;_MS(FAB,3-NBA/LiCl ^ali LiJ)

382	ch3 Cl Jr	C58H94N08 <943 >· 950(M+Li*)
383	C57H87C12NO8<983)? 990(M*Li+)
384	,,,.r	c58H9iN°9(945); 952(M+Li+)
385	or	C56H88N2°8<916>· 923(M+Li+)
386	oor	c6iH9iN°8(965); 972(M+Li+)

1

Analogno primerom 366, 367 in 368 smo dobili spojine iz tabele 40.

Tabela 40 - '
			CH,
	CH,
			CH» ΓηΤ? I 1*1*	CH
		NZS/0’	L ±H± H ^^♦'CR
	JhTh	H	H
R1 - CT
primer	R1		ES(FAB,3-NBA/LiCl ali

387	H	C50H83N08 <825)· 832(M+Li+)
388	cr	C57H89NO8(915); 922{M+Li+)
389	Οόο	c63H93N08(991),· 998(M+Li+)
390	T	C69H97N08(1067); 1074(M+Li
391	„jsr	C57H88C1NO8(949 b 956(M+Li

102 nadaljevanje tabele 40 primer

392

393

MS(FAB,3-NBA/L1C1 ali LiJ) ^c59^H94^N08 <⁹⁴³ >· ⁹⁵⁰(M+Li*) ^c57^h87^c12^no8 <⁹⁸³)· ⁹⁹⁰(^M+Li+)

394

395

^C58^H91^N09 <⁹⁴⁵ >· ⁹⁵²(M⁺Li⁺) ^C56^H88^N2°8<⁹¹⁶)· 923(M+Li⁺)

396

^c61^H91^N09<⁹⁶⁵)J 972(M+Li⁺)

Analogno

Tabela primer

397

398

399

400

10.3 primerom 366, 367 in 368 smo dobili spojine iz tabele 41.

R¹

R1	MS(FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)
H	C50H83N07(809); 816(M+Li*)
	C57H89N07<899b 906(M+Li*)
	C63H93NO7(975)i 982(M+Li*)
T	c69h97N°7(1051); 1058(M+Li*)
	C57H88C1NO7(933)? 940(M+Li*)

401

104 nadaljevanje tabele 41 primer

R¹

MS(FAB,3-NBA/LiCl ali

402

403

^C59^H94^NO7 ί⁹²⁷ >· ⁹³⁴(M+Li*) ^C57^H87^C12^NO7(⁹⁶⁷>i 974(M+Li*)

404

405

^c58^h91^no8 <⁹²⁹)’ ⁹³⁶(M+Li*) ^C56^H88^N2°7(⁹⁰°)' 907(M+Li*)

406 ^c61^h91^no7(⁹⁴⁹)i ⁹⁵⁶(M+Li*)

5

Analogno primerom 366, 367 in 368 smo dobili spojine iz tabele 42.

Tabela 42

primer

407

408

MS(FAB,3-NBA/L1C1 ali LiJ) ^C50^H83^no8<⁸²⁵)J ⁸³²(M+Li*)

C₅₇H₈₉NO₈(915); 922(M+Li⁺)

409 ^C63^H93^N08 <⁹⁹¹)J ⁹⁹⁸(M+Li⁺)

410

^C69^H97^N08(¹⁰⁶⁷ > i ¹⁰⁷⁴(M+Li⁺) ^C57^Hee^clN08 <⁹⁴⁹> ί ⁹⁵⁶(M+Li⁺)

411

6 nadaljevanje tabele 42

primer	R1	MS(FAB,3-NBA/LiClali Li,
412	ch3	C59H94N08 <943)· 950(M+Li*)
413	ch3 Cl	C57H87C12N08< 983)j 990(M+Li
414	,,=xr	c58h9iN09(945); 952(M+Li*)
415	fr ir	c56H88N2°8<916b 923(M+Li+)
416	or	c61H91N08(965b 972(M+Li*)

107

Analogno primerom 366, 367 in 368 smo dobili spojine iz tabele 43.

Tabela 43 ' . '

primer	R1	MS(FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)
417	H	C50H83N07<809); 816(M+Li*)
418		C57H89N07{899); 906(M+Li*)
419	C03	c63H93N07<975)i 982(M+Li*)
420		C69H97N07 C1051)j 1058(M+Li*)
421	c,<r	C57H88C1NO7 < 933 ) i 940 )

108 nadaljevanje tabele 43 primer

R¹

MS(FAB,3-NBA/L1C1 ali

422

423

^C59^H94^N07<⁹²⁷>* 934(M+Li⁺) ^C57^H87^C12^NO7<⁹⁶⁷)^J 9⁷⁴(M⁺Li⁺)

424

425

^C58^H91^N08(⁹²⁹)· 936(M+Li⁺) ^C56^H88^N2°7<⁹⁰⁰)*' 907(M*Li⁺)

426

^C61^H91^NO7<⁹⁴⁹>^; 956(M+Li⁺)

09

Analogno primerom 366, 367 in 368 smo dobili spojine iz tabele 44.

Tabela 44

primer

MS(FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)

427 ^c50^He3N0₇(⁸⁰⁹)i 816(M+Li*)

428

Or

C₅₇H₈₉NO₇(899); 906(M+Li⁺)

429

430

C₆₃H₉₃NO₇(975); 982(M+Li⁺) ^C69^H97^N07(¹⁰⁵¹)i 1058(M+Li⁺)

431

..or ^C57^H88^C1N07(⁹³³)i 940(M+Li⁺)

110 primer__ MS(FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ) nadaljevanje tabele 44

	?H3
432	ός	C59 h94N°7(927); 934(M+Li*)
	Cl 1
433		c57h87c12N07 (967)? 974(M+Li*)
434	,,χη	c5gH9lN°g(929)i 936(M+Li*)
435	er	°56Η88Ν2°7(9θθ)ϊ 907(M+Li*)
436	ox	C6iH9iN°7(949); 956(M+Li*)

1 a

Analogno primerom 366, 367 in 368 smo dobili spojine iz tabele 45.

Tabela 45

primer_ R¹_MS(FAB,3-NBA/LiCl _aij LiJ)

437 ^c50^H83^no6(⁷⁹³)<* 800(M+Li⁺)

438

C₅₇H₈₉N0₆(883); 890(M+Li⁺)

439

440

^c63^H93^N06(⁹⁵⁹)' ⁹⁶⁶(M+Li⁺) ^C69^H97^no6 <¹⁰³⁵)· ¹⁰⁴²(M+Li⁺) ^C57^H88C1N°₆(93.7); 924(M+Li⁺)

441 nadaljevanje tabele 45 primer _rA__MS(FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)

2

442

^C59^H94^N06 <⁹¹¹)f ⁹¹⁸(M+Li*)

443

^C57^H87^C12^N06(⁹⁵¹)· 958(M+Li*)

444

^c58^H91^N07(⁹¹³)i 920(M+Li*)

445

^C56^H88^N2°6<⁸⁸⁴>· B91(M+Li*)

N' ul· t

C₆i^H9iN°6(⁹³3); 940(M+Li*)

446

113 .

Analogno primerom 366, 367 in 368 smo dobili spojine iz tabele 46.

Tabela 46

primer	R1	MS (FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)
447	H	C50H83N09 <825>· 832(M+Li*)
448		C57H89N08 <915)· 922(M+Li+)
449		C63H93N08 <991)· 998(M+Li+)
450		C69H97NO8 <1067 > '· 1074 (M+Li*
451	„-cr	C57H88C1NO8(949); 956(M+Li*

114

R¹ MS(FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ) nadaljevanje tabele 46 primer

452

453

454

455 ?^H3

G? eh3	C59H94N08 <943)· 950(M+Li*)
Cl 1
c.-ČT' '	C57H87C12NO8(983)’· 990(M+Li*)
	C5gH91N0g(945); 952(M+Li*)
cr	C56H88N2°8(918) '· 923(M+Li*) f« •
CCr	c61H9lN°8(965); 972(M+Li*)

456

5 t

Analogno primerom 366, 367 in 368 smo dobili spojine iz tabele 47.

Tabela 47

Primer_bA_MS(FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)

457

458 ^c50^H83^N07<⁸⁰⁹b 816(M+Li*) ^C57^H89^NO7(⁸⁹⁹ b 906(M+Li*)

459

460

^C63^H93^N07(9^?5)i 982(M+Li*) ^C69^H97^N07<¹⁰⁵¹)J 1058(M+Li*)

C₅₇Hg₈ClNO₇(933); 940(M+Li*)

461

116 nadaljevanje tabele 47 primer

R¹

MS(FAB,3-NBA/LiCl ^ali LiJ)

462

463

^c59^h94N°7(92⁷); 934(M+Li⁺) ^C57^H87^C12^NO7<⁹⁶⁷>* 974(M+Li+)

464

465

^C58^H91^N08<⁹²⁹)i 936(M+Li⁺) ^C56^H88^N2°7<⁹⁰°)i ?07(M+Li+)

466 ^c61^H91^N07/⁹⁴⁹)i 956(M+Li⁺) ί1 7

Analogno primerom 366, 367 in 368 smo dobili spojine iz tabele 48.

Tabela 48

primer

MS(FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)

467 ^C50^H83^NO7 <⁸⁰⁹) ⁸¹⁶ (M⁺Li⁺)

468

Cr ^Ο57^ή89^ΝΟ7<⁸⁹⁹)^{? 9}06(M+Ll⁺)

469

^c63^h93^no7(⁹⁷⁵)J ⁹⁸²(M+Li*)

470

^c69^H97^N07<¹⁰⁵¹)i 1058(M+Li⁺)

471 jer ^C57^H88^C1N07(⁹³³ b ⁹⁴⁰(M+Li⁺)

18 nadaljevanje tabele 48 primer_r1_MS(FAB,3-NBA/L1C1 ^ali LIJ)

472

473

474

475

ch3 0C	σ59Η94Νθ7(927)'* 934(M+Li+)
Cl	c57H87cl2N07l967)J 974(M+Li+)
	C58HgiN08(929); 936(M+Li*)
er	c56H88N2°7<900>? 907(M+Li*)
ccr	C61H91N07(949); 956(M+Li*)

476

1.19

Analogno primerom 366, 367 in 368 smo dobili spojine iz tabele 49.

Tabela 49

primer	R1	MS(FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)
477	H	C50H83NO6(793); 800(M+Li+)
478	cr	C57H89N°6(883); 890(M+Li+)
479		C63H93NO6 <959)J 966(M+Li+)
480	T	c69h97no6 <1035)* 10<2(M+Li+)
481		C57H88C1N06(917 >f 924)

12.0 nadaljevanje tabele 49 primer

482

483

MS(FAB,3-NBAAiCl ali LiJ) ^c59^h94^N06<⁹¹¹)J 918(M+Li⁺) ^C57^H87^C12^NO6 <⁹⁵¹)i ⁹⁵⁸(M+Li⁺)

484 h₃co

^c58^H9iN°₇(⁹13); 920(M+Li⁺)

485 n

N' ^C56^H88^N2°6<⁸⁸⁴)· 891(M+Li⁺)

486

^c6i^H9iN°₆(⁹33); 940(M+Li⁺) t

1

Analogno primerom 366,

367 in 368 smo dobili spojine iz tabele 50.

Tabela 50

primer , · R¹_MS(FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)

487 ^c50^H83^N07(⁸⁰⁹b 816(M+Li*)

488

CT ^C57^H89^N07 <⁸⁹⁹b 906(M+Li*)

489

^C63^H93^NO7 <⁹⁷⁵) '· ⁹⁸² (M+Li*)

490

^C69^H97^N07 <¹⁰⁵¹>· ¹⁰⁵⁸(M+Li*) ^C57^H88^C1NO7(⁹³³ b ?40(M+Li*)

491

2 nadaljevanje tabele 50 primer

492

493

MS(FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ) ^C59^H94^NO7 (⁹²⁷) ί ⁹³⁴ (M+Li⁺) ^C57^H87^C12^NO7(⁹⁶⁷)^; 974(M+Li⁺)

496

C₅₈H_giNOg(929); 936(M+Li⁺) ^C56^H88^N2°7(⁹⁰°)i 907(M+Li⁺) ^c61^h91^no7 (⁹⁴⁹ > '· ⁹⁵⁶ (^M+Li+) f

j

3 :

Analogno primeram 366, 367 in 368 smo dobili spojine iz tabele 51.

Tabela 51

Primer_r!_MS (FAB, 3-NBA/LiCl ali LiJ)

497 ^C50^H83^N06(⁷⁹³)ϊ ⁸⁰⁰(M+Li*)

498

499

500

^C57^H89^N06(⁸⁸³)J ⁸⁹⁰(M+Li*) ^C63^H93^NO6(⁹⁵⁹>^; 966(M+Li*) ^c69^H97^N06<¹⁰³⁵)' 1042(M+Li*)

Č₅₇H₈₈C1NO₆(917)j 924(M+Li*)

501

124

MS(FAB,3-NBA/LiCl ali LIJ) ^c59^h94^no6(⁹¹¹>· ⁹¹⁸(M+Li*) nadaljevanje tabele 51 primer

502

503

^C57^H87^C12^N06(⁹⁵¹)ί ⁹⁵⁸(M+Li*)

504 ^c58^h91^no7(⁹¹³ >' ⁹²⁰(M+Li*)

505

^C56^H88^N2°6<⁸⁸⁴)ⁱ 891(M+Li*)

506 ^c6i^H9iN°6(⁹33); 940(M+Li*)

- 125 Analogno primerom 366, 367 in 368 smo dobili spojine iz tabele 52.

Tabela 52

primer

MS(FAB,3-NBA/LiCI ali, LiJ)

507 ^C50^H83^N06<⁷⁹³>5 800(M+Li*)

508 ^ϋ57^Η89^Ν06<⁸⁸³>ί 890(M+Li*)

509

'F

JJ Ujj C_mH₉₃NO₆(9S9) ; 966(M+Li⁺)

510

^C69^H97^NO6 <¹⁰³⁵ > '· ¹⁰⁴² (M+Li* )

511

C₅₇H₈₈C1HO₆(917) · 924(M+Li⁺)

- 126 MS (FAB, 3-NBA/LiCl ali LiJ) nadaljevanje primer

512 tabele 52

R¹

513

C₅₉H₉₄N0₆(911); 918(M+Li⁺) ^c57^H87^cl2^N06^i951); 958(M+Li⁺)

515

514

H

^c58^H91^N07 <⁹¹³ >· ⁹²⁰(^M+Li+) ^C56^H88^N2°6<⁸⁸⁴>' KM+Li*)

516

^c6i^h9iN⁰6(⁹³³); 940(M+Li⁺)

- 127 Analogno primerom 366, 367 in 368 smo dobili spojine iz tabele 53.

Tabela 53

primer_R^;____MS(FAB,3-NBA/LiCl ali LiJ)

517

518

519

520

521

CI ^C50^H8*3^N05 ( ⁷⁷⁷) · ⁷⁸⁴ (M+Li*) ^C57^H89^NO5(⁸⁶⁷)· ⁸⁷⁴(M+Li*) ^c63^H93^N05(⁹⁴³>^; 950(M+Li*) ^c69^H97^N05 (¹⁰¹⁹)» ¹⁰²⁶(M+Li*) ^C57^H88^C1N05<⁹⁰¹)^{} 908}(M+Li*)

128 -nadaljevanje tabele 53 primer pl

MS(FAB,3-NBA/LiCl ^ali LiJ)

522

523

524

525 ch₃

Cl ^c59^h94^no5(⁸⁹⁵ b 902(M+Li*)

C₅₇H₈₇C1₂NO₅(935); 942(M+Li*) ^C58^H91^NO6 <⁸⁹⁷ b 904(M+Li*) ^C56^H88^N2°5<⁸⁶⁸b 875(M+Li*)

526

^C61^H91^N05(⁹¹⁷ b 924(M+Li*)

Primer 527

Predložili smo 116 mg (0,1 mmola) primera 170 v 5 ml tetrahidrofurana, dobrizgali

28,2 μΐ (0,2 mmola) trietilamina, ohladili na 0°C, dobrizgali 14,5 gl (0,15 mmola) etilestra klormravljinčne kisline, mešali 15 minut pri sobni temperaturi, nato dokapali 44 mg (0,35 mmola) tavrina, raztopljenega v 3 ml 0,1 molarnega natrijevega luga, mešali 1 h pri sobni temperaturi, žvrkljali 10 minut z 10 g natrijevega dihidrogenfosfata in ekstrahirali z etilacetatom/etanolom 4/1 (3x). Združene organske faze smo posušili (MgSO₄) in uparili. Kromatografija na silikagelu (etilacetat/etanol = 3/2) je dala 76 mg (0,06 mmola, 60 %) primera 527.

^C72^Hiio^N4^SOi₃(¹²⁷⁰)’ MS(FAB, 3-NBA/LiI); 1277(M+Li⁺)

Analogno primeru 527 smo primere iz tabel 18 - 33 prevedli v konjugate s tavrinom.

129

Primer 528

*-COjH

Predložili smo 116 mg (0,1 mmola) primera 170 v 5 ml tetrahidrofurana, dobrizgali

28,2 gl (0,2 mmola) trietilamina, ohladili na 0°C, dobrizgali 14,5 μ\ (0,15 mmola) etilestra klormravljinčne kisline, mešali 15 minut pri sobni temperaturi in nato dokapali 26,5 mg (0,35 mmola) glicina, raztopljenega v 3 ml 0,1 molamega natrijevega luga. Nato smo mešali 1 h pri sobni temperaturi, žvrkljali 10 minut z 10 g natrijevega dihidrogenfosfata in ekstrahirali z etilacetatom/etanolom 4/1 (3x). Združene organske faze smo posušili (MgSO₄) in uparili. Kromatografija na silikagelu (etilacetat/etanol = 3/2) je dala 74 mg (0,0606 mmola, 60,6 %) primera 528.

C₇₂H_mN₄O₁₂(1220), MS(FAB, 3-NBA/LiI); 1227(M+Li⁺)

Analogno primeru 528 smo prevedli primere iz tabel 18-33 v konjugate z glicinom.

130

Primer 529

Predložili smo 202 mg (0,2 mmola) primera 367 v 10 ml tetrahidrofurana, dobrizgali 56,5 μ\ (0,4 mmola) trietilamina, ohladili na 0°C, dobrizgali 29 μΐ (0,3 mmola) etilestra klormravljinčne kisline, mešali 15 minut pri sobni temperaturi in nato dokapali 88 mg (0,7 mmola) tavrina, raztopljenega v 6 ml 0,1 molarnega natrijevega luga. Mešali smo 1 h pri sobni temperaturi, žvrkljali 10 minut z 20 g natrijevega dihidrogenfosfata in ekstrahirali z etilacetatom/etanolom 4/1 (3x). Združene organske faze smo posušili (MgSOJ in uparili. Kromatografija na silikagelu (etilacetat/etanol = 3/2) je dala 194 mg (0,17 mmola, 87 %) primera 529. ^Η^ΛθιΑ¹¹¹⁴)’ MS(FAB, 3-NBA/LiI); 1121 (M+Li⁺)

Analogno primeru 529 smo prevedli primere iz tabel 18 - 33 v konjugate s tavrinom.

131

Primer 530

ΙΟ

Predložili smo 202 mg (0,2 mmola) primera 367 v 10 ml tetrahidrofurana, dobrizgali 56,5 μλ (0,4 mmola) trietilamina, ohladili na 0°C, dobrizgali 29 μϊ (0,3 mmola) etilestra klormravljinčne kisline, mešali 15 minut pri sobni temperaturi in nato dokapali 53 mg (0,7 mmola) glicina, raztopljenega v 6 ml 0,1 molamega natrijevega luga. Mešali smo 1 h pri sobni temperaturi, žvrkljali 10 minut z 20 g natrijevega dihidrogenfosfata in ekstrahirali z etilacetatom/etanolom 4/1 (3x). Združene organske faze smo posušili (MgSOJ in uparili. Kromatografija na silikagelu (etilacetat/etanol = 3/2) je dala 181 mg (0,17 mmola, 85 % primera 530.

^<^65^H96^N2°io(¹⁰⁶⁴)’ MS(FAB, 3-NBA/LiCl); 1071 (M+Li⁺)

Analogno primeru 530 smo prevedli primere iz tabel 38 - 53 v konjugate z glicinom.

132

Primer 531

Predložili smo 565 mg (1 mmol) primera 165, raztopljenega v 20 ml tetrahidrofurana, in 5 ml trietilamina in pri 0°C dobrizgali 96 μ,Ι (1 mmol) etilestra klormravljinčne kisline. Mešali smo 15 minut pri 0°C. Nato smo dodali po kapljicah 465 mg (1 mmol) primera 139, raztopljenega v 10 ml tetrahidrofurana. Mešali smo 1,5 h pri sobni temperaturi. Reakcijsko raztopino smo zlili na 1 molamo solno kislino in nato ekstrahirali z etilacetatom (3x). Združene organske faze smo sprali z nasičeno raztopino NaHCO₃ in posušili (MgSO₄). Odparjenje topila in bliskovita kromatografija na silikagelu (etilacetat/etanol = 5/1) je dala 608 mg (0,601 mmola, 60,1 %) primera 531.

C^N^lOl²), MS(FAB, 3-NBA/LiCl); 1019 (M+Li⁺)

133

Primer 532 Stopnja b) <J1

300 mg (0,296 mmola) primera 531 smo raztopili v 10 ml etanola in dodali 3 ml 1 molamega natrijevega luga, mešali 24 h pri sobni temperaturi, nato 15 minut intenzivno žvrkljali s 6 g natrijevega dihidrogenfosfata in ekstrahirali z etilacetatom/etanolom = 4/1 (3x). Združene organske faze smo posušili (MgSO₄). Odparjenje topila, zdrgnjenje z diizopropiletrom in odsesanje je dalo 268 mg (0,272 mmola, 92%) primera 532.

^C56^H92^N2°i2^⁹⁸⁴)’ MS(FAB, 3-NB/LiCl); 991 (M+Li⁺)

134

- 135 Analogno primeroma 531 in 532 smo dobili primere iz tabele 54.

Tabela 54

533

^C56^H92^N2°11<⁹⁶⁸>i 975(M+Li*’.) ^C56^H92^N2°10(⁹⁵²)i 959(M+Li*)'

535

- 136 Analogno primeroma 531 in 532 smo dobili primere iz tabele 55.

Tabela 55

P^rimer_G?_MS(FAB,3-NBA/LiCl^aU Li)

536

537

^C56^H92^N2°10<^9S2b 959(M+Li⁺) ^C56^H92ⁿ2°9(⁹³⁶)· »«(M+Li*)

538

- 137 Analogno primeroma 531 in 532 smo dobili primere iz tabele 56.

Tabela 56

primer G?MS(FAB,3-NBA/L1C1 ali LI)

539

^C56^H92^N2°10 (⁹⁵²)? ⁹⁵⁹(M+Li*)

H ^C56^H92^N2°9<⁹³⁶) '· 943(M+Li*)

540 ’- 138 Analogno primeroma 531 in 532 smo dobili primere iz tabele 57Tabela 57

primer

H

541

- 139 Za nadaljnjo variiranje skupine X smo pripravili te-le spojine (L = H)

Tabela 58

542

543

544 <“2>6_χ IT N

H H

<CH₂>5

545 /<^CH2>8

-N

H (CH₂)S

-N

H (“2)10 (ch₂)₄

X

546

Ο nadaljevanje tabele 58 primer

547

H H Z

548

549

550

551

552

553

554 direktna vez nadaljevanje tabele 58 primer

555

556

557

1

X

H έ A i ^^2)4

O

II

O ff

/W₂)—

142

Tabela 59 kaže spojine iz-tabele 58, v kateri smo dodatno variirali ^1’ ^L2’ ^3 primer X Lj L₂ L₃

558 t

Li

N N

Hch₃CHo(ch₂)₄

559

560 ch₃- H- c₃h₇ '

H- H- C₅H_X1561

562

563 c₃b₇- hH- (J O² ch₃- c₂h₅- c₂h₅-

564

143

Tabela 60 kaže ICL^ in ICL„ Na-vrednosti nekaterih dimernih žolčnih 50 50 kislin.

Tabela 60

Spojine iz *^c50 *θ50 primera '

527		20	10
191	(konjugat s tavrinom)	18	14
170		25	14
528		26	16
191	(konjugat z glicinom)	27	18
172	(konjugat z tavrinom)	32	20
368	(konjugat z glicinom)	48	16
368		45	18
369	(konjugat z tavrinom)	50	18
369		55	20
191		58	29
531	>	50'	18
532		30	10

Primer 565

g (123 mmolov) metilestra deoksiholne kisline smo raztopili v 300 ml piridina in ohladili na 5°C. Med mešanjem smo dokapali 15 ml (193 mmolov) metansulfonilklorida in nato mešali 12 ur pri sobni temperaturi. Zlili smo na vodo in ekstrahirali z etilacetatom. Po sušenju in uparjenju organske faze smo kromatografirali preko silikagela (etilacetat). Dobitek: 29,5 g (49 %) primera 565. <2^0^(484), MS(FAB, 3-NB/LiCl); 491 (M+Li⁺)

Primer 566

28,0 g (57,8 mmola) primera 565 smo mešali v 350 ml DMF v prisotnosti 7,5 g (115 mmolov) natrijevega azida 1,5 h pri 130°C. Zlili smo na vodo in ekstrahirali z etilacetatom. Po sušenju in uparjenju organske faze smo filtrirali preko silikagela (cikloheksan/etilacetat 1:1). Dobitek: 18,5 g (74 %) primera 566.

C^NjO^l), MS(FAB, 3-NBA/LiCl); 438 (M+Li⁺).

144

Primer 567

5,0 g (11,6 mmola) primera 566 smo hidrirali v 150 ml etilacetata v prisotnosti 0,5 g Pd/C (10 %-nega) pri sobni temperaturi in normalnem tlaku. Katalizator smo odfiltrirali in filtrat uparili. Kromatografija preko silikagela (metanol, nato metanol/trietilamin 98:2) je dala 3,1 g (66 %) primera 567.

C^H^NO^), MS(FAB, 3-NB/LiCl); 412 (M+Li⁺).

Analogno primerom 565 - 567 smo pripravili primera 568 in 569.

>0

primer		MS (FAB, 3-NBA/LiCl ali LiJ
568		j Τλθ^θ M e	C25H43NO3; 412 (M + Li+) 405
		KT >0H
569		j 1) M e	C25H43NO2; 396 (M + Li+) 389

145

Primer 570

OMe

OMe

K raztopini, pripravljeni iz 5,75 g (0,25 mola) natrija in 400 ml metanola smo dodali 14,4 g (28,4 mmola) metilestra 3a,7/3-diacetoksi-holanske kisline v 100 ml metanola in mešali pri sobni temperaturi. Po 15 min smo dodali nasičeno raztopino natrijevega dihidrogenfosfata in večkrat ekstrahirali z etilacetatom. Sušenje in uparjenje organske faze je dalo 1,18 g (90 %) primera 570, ki smo ga dalje presnovili brez dodatnega čiščenja.

C^H^NO/405), MS(FAB, 3-NB/LiCl); 455 (M+Li⁺).

Primer 571

OMe

Analogno primeroma 565 in 566 smo dobili iz primera 570 primer 571. 0^^0/473), MS(FAB, 3-NBA/LiCl); 480 (M+Li⁺).

146

Primer 572

5,7 g (12,0 mmola) primera 571 smo segrevali v 300 ml 2 M raztopine natrijevega metilata v metanolu 1 h pod refluksom. Predelava se je vršila po postopku, opisanem za primer 570. Kromatografija preko silikagela (cikloheksan/etilacetat 1:1) je dala 4,3 g (83 %) primera 572.

C^H^O^l), MS(FAB, 3-NBA/LiCl); 438 (M+Li⁺).

Primer 573

Analogno primeru 567 smo iz primera 572 pripravili primer 573. C^H^O^), MS(FAB, 3-NBA/LiCl); 412 (M+Li⁺).

147

Primer 574

1,0 g (2,45 mmola) holne kisline, 1,03 g (2,45 mmola) metilestra 3jS-amino-7a:,12adihidroholanske kisline in 550 mg (4,07 mmola) hidroksibenzotriazola smo mešali v 40 ml THF 20 min pri sobni temperaturi. Po ohlajenju na 0°C smo dokapali 610 mg (2,96 mmola) dicikloheksilkarbodiimida v 10 ml THF in mešali še 12 h pri sobni temperaturi. Odfiltrirali smo od trdne snovi, topilo uparili in preostanek kromatografirali preko silikagela (CHCl₃/metanol 9:1). Dobitek: 1,2 (60 %) primera 574. Ο^ΝΟ^δΙΙ), MS(FAB, 3-NBA/LiCl); 818 (M+Li⁺).

148

Primer 575

530 mg (0,65 mmola) primera 574 smo mešali v 10 ml etanola in 2 ml 1 M raztopine natrijevega hidroksida 18 h pri sobni temperaturi. Po dodatku vode smo alkohol oddestilirali. Vodno raztopino smo nakisali z 1,3 ml 2 M HC1. Oborino smo odsesali in posušili in dobili 510 mg (98 %) primera 575.

C₄₈H_roNO₈(797), MS(FAB, 3-NBA/LiCl); 804 (M+Li⁺).

Analogno primeroma 574 in 575 smo dobili primere iz tabele 61.

149

150

Tabela 61

primer	G1	MS (FAB, 3-NBA/LiCI ali LiJ)
576	ho H QV'	C48H79NO7 (781) 788 (M + Li+)
577	H	C48H7gNO7 (781) 788 (M + Li+)
578	K	C48H79NO7 (781) 788 (M+Li+)
579	h θ'.. c6^	C48H79NO6 (765) 772 (M + Li+)

151

Analogno primeroma 574 in 575 smo pripravili primere iz tabele 62.

Tabela 62

primer	G1	MS (FAB, 3-NBA/LiCl aii UJ)
580	ho h 0/\AsZ/0 H	θ48Η73ΝΟ7 (781) 788 (M + Li+)
581	H0 H or \Z\/	Ο,,Η,,ΝΟ, (765) 772 (M+Li·)
582	H	C«H79NO6 (765) 772 (M + U+)

152

primer	G1	MS (FAB, 3-NBA/UCI ali LiJ)
583		I I	C«H79NO6 (765) 772 (M + Li+)
	H
584	H 0',Λχ/Λ	I i >°^	C48H79NO5 (749) 756 (M + Li+)

Analogno primeroma 574 in 575 smo pripravili primere iz tabele 63.

Tabela 63

primer	G1	MS (FAB, 3-NBA/LiCI ali LiJ)
		HO Υ^Ί
585		f I >°^	C48H79NO7 (781) 788 (M + LT)
	H O'^	H

15,3

primer	G1	MS (FAB, 3-NBA/LiCI . ali LiJ)
586	H 0xV'	ho o-k I I x	C^H^NO, (765) 772 (M+Li+)
587		/A \ \ >° x	C„H,9NO„ (765) 772 (M + Li’)
	H O' ^	y^Q H
588		I l \° ^	C48H79NO6 (765) 772 (M + Li+)
	H 0' ^	H
589	H0^	<A \ \ x	θ4βΗ79ΝΟ5 (749) 756 (M+Li+)

Analogno primeroma 574 in 575 smo pripravili primere iz tabele 64.

154

Tabela 64

primei	• G1	MS (FAB, 3-NBA/LiCl ali LiJ)
590	h o H 0 H	C48H79NO7 (781) 788 (M + Li+)
591	ho	C48H79NO6 (765) 772 (M + Li+)
592	H 0'	ΟΑβΗ^ΝΟθ (765) 772 (M + Li+)
593	H 0	CA.NO, (765) 772 (M + LP)

155

primer	G1	MS (FAB, 3-NBA/LiCI aliLiJ)
594	H 0	C4eH79NOs (749) 756 (M+Li*)

Analogno primeroma 574 in 575 smo pripravili primere iz tabele 65.

Tabela 65

primer	G1	MS (FAB, 3-NBA/LiCI ali LiJ)
595	ho Υ^Ί H 0' H	C«H79NO6 (765) 772 (M + Li+)
596	ho Υ^ι h	C48H79NO5 (749) 756 (M + Li+)

primer	G1	MS (FAB, 3-NBA/LiCI ali LiJ)
597	H	C^H^NOs (749) 756 (M + U+)
598	H	C48H79NO5 (749) 756 (M + Li+)
599		θ48Η79ΝΟ4 (733) 740 (M + Li+)

Primer 600

K raztopini 15,0 g (31,5 mmola) metilestra 3j3-(2-azidoetoksi)-7a-hidroksiholanske kisline v 150 ml piridina smo pri 0°C dokapali 25 ml (0,32 mola) klorida metansulfonske kisline. Po 3 h pri sobni temperaturi smo zlili na ledeno vodo in ekstrahirali z etilacetatom. Po sušenju in uparjenju organske faze smo kromatografirali preko silikagela (cikloheksan/etilacetat 2:1). Dobili smo 13,8 g (79 %) primera 600. €^^0^(553), MS(FAB, 3-NBA/LiCI); 560 (M+Li⁺).

156

Primer 601

16,8 g (237 mmolov) KO₂ in 7,2 g (27,2 mmola) 18-Crown-6 smo mešali v 300 ml DMSO 15 min pri sobni temperaturi. Pri 0° smo dokapali 13,0 g (23,5 mmola) primera 600 v 50 ml DMSO. Po 1,5 h pri sobni temperaturi smo spet ohladili na 0°C, počasi dodali nasičeno raztopino NaCl in nakisali z 2 N HCl. Po večkratni ekstrakciji z etilacetatom smo organske faze posušili in uparili. Surovi produkt smo zaestrili v raztopini, pripravljeni iz 130 ml metanola in 13 ml acetilklorida. Po predelavi smo surovi produkt kromatografirali preko silikagela (cikloheksan/etilacetat 6:4). Dobitek: 5,65 g (51 %) primera 601.

C₂₇H₄₅N₃O₄(475), MS(FAB, 3-NBA/LiCI); 482 (M+Li⁺).

Primer 602

Analogno primeru 567 smo pripravili iz primera 601 primer 602.

157

158

C₂₇H₄₇NO₄ (449), MS (FAB, 3-NBA/LiCl) : 456 (M + Li⁺)

Analogno primerom 600 - 602 smo pripravili primere tabele 66.

Tabela 66

primer	β-Χ2	σ-Χ2	MS (FAB, 3-NBA/LiCl 'ali LiJ)
603	H2N-(CH2)3-O-	H	C28H49NO4 (463), 470 (M + Li+)
604	H2N-(CH2)4-O-	H	CaH5iNO4 (477), 484 (M + Li+)
605	H2N-(CH2)5-O-	H	C3oH53N04 (491), 498 (M + Li+)
606	H2N-(CH2)6-O-	H	C3iH55NO4 (505), 512 (M + Li+)
607	H2N-(CH2)10-O-	H	C^H^NO, (561), 568 (M + Li+)
608	HzN-(CH2)2-O-(CH2)2-O-	H	C^H^NOs (493), 500 (M + Li+)
609	h3c-ch-ch2-o- I nh2	H	C28H49NO4 (463), 470 (M + U+)

Primer 610

Iz 1,21 g (2,69 mmola) primera 602 in 1,0 g (2,45 mmola) holne kisline smo z 0,55 g (4,07 mmola) hidroksibenzotriazola in 0,61 g (2,96 mmola) dicikloheksilkarbodiimida pripravili po postopku, opisanem za primer 574,1,7 g (82 %) primera 610.

C₅₁H_g5NO₈(839), MS(FAB, 3-NBA/LiCl); 836 (M+Li⁺).

159

Primer 611

1,5 g (1,79 mmola) primera 610 smo po postopku, opisanem za primer 575, umilili v

1,14 g (77 %) primera 611.

C₅₀H_g3NO₃(825), MS(FAB, 3-NBA/LiCl); 832 (M+Li⁺).

Analogno primeroma 610 in 611 smo dobili primere iz tabele 67.

160

16.1

Tabela 67

primer	R1	MS (FAB, 3-NBA/UC; ali UJ)
612	(T	W08 (915), 922 (M + U+)
613		C63H93NO8 (991), 998 (M + Li+)
614		C69H97NO8 (1067), 1074 (M + Li+)

16·2

pr imei	> R1	MS (FAB, 3-NBA/LiCl ali LiJ)
615	C,TT	C57HmCINO8 (949, 956 (M+Li*)
616	h3c ύς	CggH^NC^ (944), 951 (M+LP)
617		C^NOg (945), 952 (M + Li+)
618	C I C	C57H87CI2NO8 (983), 990 (M + Li*)
619	(Τ' N	CseHggNA (916), 923 (M + Li*)

3

primer	R1	MS (FAB, 3-NBA/LiCI ali LiJ)
620	or	C61H91NO8 (965), 972 (M + Li+)

Analogno primeroma 610 in 611 smo dobili primere iz tabele 68.

Tabela 68

primer	R1	MS (FAB, 3-NBA/LiCI aii LiJ)
621	H	ΟΛΝΟ, (809), 816 (M + LP)
622	cr	CszHsgNO, (899), 906 (M + Li+)

164

primer	R1	MS (FAB, 3-NBA/LiCl ali LiJ)
623		C63H93NO7 (975), 982 (M + Li+)
624	e	C69H97NO7 (1051), 1058 (M + Li+)
625	t,ir	C57H8eCINO7 (933), 940 (M + Li+)
626	HjC ČC,	C^NO, (928), 935 (M + Li+)
627	.,tjx	C58H91NO8 (929), 936 (M + Li+)

5

primer	R1	MS (FAB, 3-NBA/LiCl ali LiJ)
628	C I C	C57H87CI2NO7 (967), 974 (M + Li+)
629	cr N	C^NA (900), 907 (M + Li+)
630	CO-

Analogno primeroma 610 in 611 smo pripravili primere iz tabele 69.

166

Tabela 69

primer	R1	MS (FAB, 3-NBA/Licl ali LiJ)
631	H	CsoHmNC^ (809), 816 (M + Li+)
632	cr	C57He9NO7 (899), 906 (M + Li+)
633	J	C^H^NOj (975), 982 (M + Li+)
634		θβ9Η97ΝΟ7 (1051), 1058 (M + Li+)

167

primer	R1	MS (FAB, 3-NBA/Licl ali LiJ)
635		C57HmCINO7 (933), 940 (M + Li+)
636	H3C čc,	Cfl-I^NO, (928), 935 (M + Li+)
637		θ5βΗ91ΝΟ8 (929), 936 (M + Li+)
638	CT'	CmH^O, (900), 907 (M+Li+)
639	C l C	C57H87CI2NO7 (967), 974 (M + Li+)

168

primer	R1	MS (FAB, 3-NBA/Licl ali UJ)
640	CO-	C61H91NO7 (949), 956 (M + Li+)

Analogno primeroma 610 in 611 smo dobili primere iz tabele 70.

Tabela 70

brimer	R1	MS (FAB, 3-NBA/UCl ali LiJ)
641	H	CsAM (809), 816 (M + Li+)
642	O-	C57H89NO7 (899), 906 (M + Li+)

69

primer	R1	MS (FAB, 3-NBA/LiCI ali LiJ)
643	Γ^|Ί	CeaHeaNO, (975), 982 (M + Li+)
644	ά	C69H97NO7 (1051), 1058 (M + Li+)
645	Clxr	C57H88CINO7 (933), 940 (M + Li+)
646	HjC X	C59H94NO7 (928), 935 (M + Li+)
647		θ5βΗ91ΝΟβ (929), 936 (M+Li+)

Ο

primer	R1	MS (FAB, 3-NBA/LiCI ali LiJ)
648	C I C	Cs7He7CI2NO7 (967), 974 (M + Li+)
649	cr N	CaHwN2O7 (900), 907 (M + Li+)
650	ccr	C6iH91NO7 (949), 956 (M + Li+)

Analogno primeroma 610 in 611 smo dobili primere iz tabele 71.

17J

Tabela 71

primer	R’	MS (FAB, 3-NBA/LiCI ali LiJ)
651	H	CsoHajNOe (793), 800 (M + Li+)
652	CP	C57H89NO6 (883), 890 (M + Li+)
653		C63H33NO6 (959), 966 (M+Li+)
654	¢5	C69H97NO6 (1035), 1042 (M + Li+)

2

primer	R1	MS (FAB, 3-NBA/LiCl ali UJ)
655		C^CINOe (917), 924 (M+U+)
656	HjC 00,	C59H94NO6 (912), 919 (M + Li+)
657	,„>o	CmH91NO7 (913), 920 (M + Li+)
658	C 1 C	CS7He7CI2NO6 (951), 958 (M + Li+)
659	0- o	Ca^NA (884), 891 (M + Li+)

>rimer	R1	MS (FAB, 3-NBA/LiCI ali LiJ)
660	CO-	C61H91NO6 (933), 940 (M + Li+)

Primer 661

/OH

K 200 mg (0,25 mmola) primera 575 in 0,052 ml (0,38 mmola) trietilamina v 30 ml THF smo pri 0°C dokapali 0,036 ml (0,38 mmola) etilestra klormravljinčne kisline. Po 15 min pri 0°C smo dokapali raztopino 66 mg (0,88 mmola) glicina v 7,55 ml 0,1 M NaOH in mešali še 5 h pri sobni temperaturi. Dodali smo nasičeno raztopino natrijevega dihidrogenfosfata in 3x ekstrahirali s THF. Po sušenju in uparjenju organske faze smo kromatografirali preostanek preko silikagela (CHCl₃/metanol/ocetna kislina 16:4:1).

Dobitek: 180 mg 884 %) primera 661.

C₅₀Hg₂N₂O₉ (854), MS(FAB, 3-NBA/LiCI); 861 (M+Li⁺).

Analogno primeru 661 smo primere iz tabel 61 - 71 prevedli v ustrezne glicinske derivate.

173

Primer 662

N

H

SO₃H

K 300 mg (0,38 mmola) primera 611 in 0,19 ml (1,38 mmola) trietilamina v 50 ml THF smo pri 0°C dokapali 0,13 ml (1,36 mmola) etilestra klormravljinčne kisline. Po 15 min pri 0°C smo dodali raztopino 300 mg (2,4 mmola) tavrina v 12 ml 1M NaOH. Po 24 h pri sobni temperaturi smo predelali tako, kot je opisano za primer 661. Dobili smo 200 mg (59 %) primera 662.

^C52^H88^N2°io^S(⁹³²)’ MS(FAB, 3-NBA/LiCl; 939 (M+Li⁺).

Analogno primeru 662 smo primere iz tabel 61 - 71 prevedli v ustrezne tavrinske derivate.

174

Primer 663

MsO

M eO

OMe

1,0 g (1,84 mmola) primera 137, 170 mg (0,91 mmola) 4,4’-dihidroksibifenila in 400 mg (2,9 mmola) kalijevega karbonata smo v 20 ml DMSO mešali 5 h pri 60°C. Dodali smo vodo in ekstrahirali z etilacetatom. Po sušenju in upaijenju organske faze smo preostanek kromatografirali preko silikagela (cikloheksan/etilacetat 1:4). Dobitek 340 mg (34 %) primera 663.

0^^0^(1082), MS(FAB, 3-NBA/LiCl); 1089 (M+Li⁺).

Primer 664

MeO'

0H

Primer 663 smo po postopku, opisanem za primer 663, umilili v primer 664. 0^^0^(1054), MS(FAB, 3-NBA/LiCl); 1061 (M+Li⁺).

175

Primer 665

530 mg (1,16 mmola) hidroklorida metilestra 3-amino-7a,12a-dihidroksiholanske kisline, 600 mg (1,19 mmola) metilestra 7a,12a-diacetoksi-3-ketoholanske kisline in 180 mg (2,86 mmola) natrijevega cianoborhidrida smo mešali v 30 ml absolutnega metanola 24 h pri sobni temperaturi. Zlili smo na vodo, z 0,1 M NaOH spravili na pH 9 in ekstrahirali z etilacetatom. Organske faze smo posušili in uparili. Kromatografija preko silikagela (cikloheksan/etilacetat/trietilamin 50:50:2) je dala 360 mg (34 %) primera 665.

^C54^H87°io(⁹⁰⁹)’ MS(FAB, 3-NBA/LiCI); 916 (M+Li⁺).

176

Primer 666

200 mg (0,22 mmola) primera 665 smo v 5 ml etanola/10 ml 5 M NaOH segrevali 3 h pod refluksom. Nato smo alkohol uparili, nakisali z 1 M HC in nastalo oborino odsesali in posušili. Dobili smo 170 mg (97 %) primera 666.

C₄₉H_?9NO₈(797), MS(FAB, 3-NBA/LiCl); 804 (M+Li⁺).

Primer 667

1,0 g (1,98 mmola) metilestra 7a,12a-diacetoksi-3-ketoholanske kisline, 130 mg (0,98 mmola) 1,2-diaminoetan-dihidroklorida in 300 mg (4,8 mmola) natrijevega cianoborhidrida smo presnovili po postopku, opisanem za primer 665. Dobili smo 740 mg (71 %) primera 667.

C_5gH₉₁NO₁₂(993), MS(FAB, 3-NBA/LiCl); 1000 (M+Li⁺).

177

178

Primer· 668

200 mg (1,93 mmola) primera 667 smo umilili tako, kot je opisano za primer 666 Dobili smo 140 mg (86 %) primera 668.

C₅₀H₈₄N₂O₈ (840), MS (FAB, 3-NBA/LiCI) : 847 (M + Li⁺)

Analogno primeroma 667 in 668 smo dobili primere iz tabele 72.

primer	X	MS (FAB, 3-NBA/LiCI ali LiJ)
669	-(CH2)3-	C^NA (854), 861 (M + U+)
670	-(CH2)6-	C54H92N2O8 (896), 903 (M + Li+)
671	-(CH2)12-	C60H104N2O8 (980), 987 (M + Li+)
672	-(CH2)2-O-(CH2)2-	C52H88N2O9 (884), 891 (M + LP)

Primer 673

4,0 g (9,8 mmola) holne kisline, 1,0 g (5 mmolov) 1,12-diaminododekana in 2,46 g (10 mmolov) 2-etoksi-l-etoksi-karbonil-l,2-dihidrokinolina smo segrevali v 80 ml toluola 3 h pod refluksom. Topilo smo uparili in preostanek kromatografirali preko silikagela (kloroform/metanol 6:1). Dobitek: 3,0 g (63 %) primera 673. C^Hj^O^eO), MS(FAB, 3-NBA/LiCl); 987 (M+Li⁺).

Analogno primeru 673 smo dobili primere iz tabele 73.

primer		MS (FAB, 3-NBA/LiCl ali LiJ)
674	-N-(CH2)3-N- 1 1 H H	C5,H«NA (856), 863 (M + Li+)
675	-N-(CH2)6-N- 1 1 H H	CsAAC),, (898), 905 (M + Li+)

179

primer		MS (FAB, 3-NBA/LiCI ali LiJ)
676	H	0 H H 0	H	C5,H,mN4O,0 (1012,1019 (M+Li*)
677				(974), 981 (M + Li+)
	H		H

2,2 g (0,055 mola) 60 %-ne suspenzije natrijevega hidrida smo dodali pod argonom k 150 ml suhega metanola. K temu smo med hlajenjem po kapljicah dodali 9 ml (0,055 mola) dietilestra cianmetanfosfonske kisline v 50 ml metanola. Po 1 h pri sobni temperaturi smo dodali 20,7 g (0,05 mola) 678 A v 300 ml metanola in mešali ob kontroli s TC 1 - 2 h pri sobni temperaturi. Zmes smo uparili v hladnem in nato porazdelili med vodo in diklormetan. Po ločenju smo ekstrahirali z diklormetanom, organsko fazo sprali, posušili in uparili. Preostanek smo očistili s kromatografijo na SiO₂. Dobitek: 17,5 g (82 %) 678 MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 434 (M+Li⁺)

180

Primer 679

Analogno 678 iz 679 A. Dobitek 49 % MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 434 (M+Li⁺)

Po kromatografiji smo dobili s 43 %-nim dobitkom produkt 679 B z izomerijo dvojne vezi z isto molekulsko maso, ki je privedel po niže opisanem hidriranju do iste točke kot 679.

Primer 680

678

g (0,035 mola) 678 smo raztopili v 500 ml metanola in ob dodatku 5 g 10 %-nega paladija na oglju hidrirali pri sobni temperaturi v stresalni rački. Katalizator smo ločili, uparili in preostanek kromatografirali na SiO₂.

Dobitek: 13,7 g (91 %) 680 (3a-izomer po analizi spojine 684)

MS (Fab, 3-NBA, LiCl): 436 (M+Li⁺).

181

Primer 681

679

COOCH

Analogno 680 iz 679. Dobitek: 85 % MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 436 (M+Li⁺) (3a-izomer po podatku 685)

Primer 682

680

g (0,028 mola) 680 smo raztopili v 300 ml metanola in ob dodatku 30 ml koncentrirane raztopine amoniaka in 3,5 g 5 %-nega rodija na Al^ hidrirali pri 20 barih in sobni temperaturi 24 h. Po ločenju katalizatorja, uparjenju in kromatografiji preostanka (SiO₂) smo dobili 682. Dobitek: 9,8 g (81 %) MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 440 (M+Li⁺), 434 (M+H⁺) (3a-izomer po analizi spojine 684).

182

Primer 683

Analogno 682 iz 681. Dobitek: 6,1 g (67 %) MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 440 (M+Li⁺), 434 (M+H⁺) (3a-izomer po analizi spojine 685).

Primer 684

g (0,035 mola) 678 smo raztopili v 50 ml metanola in ob dodatku 50 ml konc. raztopine amoniaka in 4 g 5 %-nega rodija na A1₂O₃ hidrirali pri 25 barih in sobni temperaturi 24 h. Po predelavi kot pri 682 smo dobili surov produkt, ki smo ga očistili s kromatografijo na SiO₂ z diklormetanom/metanolom/konc. raztopino amoniaka = 100:15:5. Dobili smo 6,4 g (42 %) manj polarnega 3)3-684 in4,2 g (27,6 %) bolj polarnega 3a-684»

MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 440 (M+L1⁺), 424 (M+H⁺).

Tankoslojna kromatografska primeijava s 682 kaže identičnost s 3a-684 in različnost od 3)3-684.

183

Primer 685

679

COOCH

685

Analogno 684 iz 679. Dobitek 35 % (manj polarnega) 3J3-685 in 29 % (bolj polarnega) 3a-685. Tankoslojnokromatografska primerjava s 683 pokaže identičnost s 3a685.

MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 440 (M+Li⁺), 434 (M+H⁺)

Primer 686

899,4 mg (2 mmola) amina 678 smo raztopili v 15 ml dioksana/vode = 2/1 in ob hlajenju z ledom dodali 5 ml 1 N NaOH. Temu smo dodali pri 0°C 480 mg (2,2 mmola) di-terc.-butilestra piroogljikove kisline in mešali 30 min pri sobni temperaturi. Po končani presnovi smo dioksan odstranili v vakuumu, vodno fazo preslojili z etilacetatom in ob hlajenju z ledom nakisali z razredčeno raztopino KHSO₄ do pH 2. Ekstrahirali smo do nevtralnosti, posušili, uparili in ostanek očistili s kromatografijo na SiO₂. Dobitek 792 mg (72 %) primera 686, MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 556(M+Li⁺).

184

Primer 687

686

2,75 (5 mmolov) 686 smo raztopili v 20 ml metanola in mešali preko noči pri sobni temperaturi z 2 ml 2 N NaOH. Razredčili smo z vodo, odstranili metanol v vakuumu in nakisali z dokapavanjem raztopine KHSO₄ do tvorbe oborine. Odsesali smo in ostanek filtrirali preko SiO₂.

Dobitek 1,79 g (67 %) 687, MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 543 (M+Li⁺).

Primer 688

H

1,35 g (3 mmole) 686 A smo raztopili v 50 ml etilacetata in dodali 0,5 ml trietilamina. Temu smo dodali 0,85 g etilestra l,2-dihidro-2-etoksikinolin-l-karboksilne kisline (EEDQ) in 1,6 g (3 mmole) 687 in mešali 4 - 5 h pod refluksom. Po končani reakciji smo razredčili z etilacetatom, sprali z nasičeno raztopino kalijevega hidrogensulfata in vodo, posušili, uparili in ostanek kromatografirali na SiO₂. Dobitek: 2,46 g (85 %) 688.

MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 974 (M+Li⁺).

185

Primer 689

g (2,07 mmola) 688 smo umilili v 20 ml metanola z 2 ml 2 N NaOH, kot je opisano pod 687.

Dobitek: 1,66 g (84 %) 689. MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 960 (M+Li⁺).

Analogno reakcijskemu poteku 686 A -► 686 -* 687 -* 688 -> 689 smo pripravili tele primere:

MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 944 (M+Li⁺).

186

MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 944 (M+Li⁺).

Primer 692

g (0,067 mola) 692 A smo raztopili v 11 metanola in hidrirali analogno primeru 684. S kromatografskim ločenjem surovega produkta smo dobili poleg glavnih produktov 1,28 g (4,3 %) 692

MS (FAB, 3-NBA, UCl): 889 (M+Li⁺).

187

Primer 693

1,2 g (1,36 mmola) 692 smo raztopili v 10 ml metanola in umilili z 1 ml 2 N NaOH z mešanjem preko noči. Razredčili smo z vodo, odstranili metanol v vakuumu in produkt oborili z dodatkom 2 N HCl. Surovi produkt smo očistili s kolonsko filtracijo. Dobitek: 0,96 g (83 %) 693.

MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 861 (M+Li⁺).

Primer 694

449 mg (1 mmol) 686A smo raztopili v 15 ml suhega metanola. Temu smo dodali 420 mg (1 mmol) 694A in 80 mg (1,3 mmola) natrijevega cianoborhidrida in mešali preko noči pri sobni temperaturi. Potem smo uparili, preostanek porazdelili med vodo in diklormetanom in preostanek organske faze očistili s kromatografijo (SiO₂).

Dobitek: 450 mg (53 %) 694.

MS (FAB, 3-NBA, UQ): 861 (M+Li⁺).

188

Primer 695

200 mg (0,23 mmola) 694 smo raztopili v 5 ml metanola in umilili z 0,5 ml 2 N NaOH, kot je opisano pod 693. Dobitek: 180 mg (95 %) 695.

MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 823 (M+Li⁺), 827 (M+H⁺)

Primer 696

686

K 4,49 mg (1 mmol) 686 A smo dodali v 30 ml suhega etilacetata 0,15 ml trietilamina, 273 mg (1,1 mola) EEDQ in 408 mg (1 mmol) holne kisline in segrevali 4 h do refluksa. Po končam presnovi smo razredčili z okoli 100 ml etilacetata, sprali z raztopino KHSO₄ in preostanek organske faze očistili s kromatografijo. Dobitek: 597 mg (71%) 696.

MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 847 (M+Li⁺).

189

Primer 697

COOH

697

500 mg (0,6 mmola) 696 smo v 15 ml etanola umilili z 1,5 ml 2 N NaOH, kot je opisano pod 693. Dobitek: 452 mg (91 %) 697.

MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 833 (M+Li⁺).

Primer 698

413 mg (0,5 mmola) 697 smo raztopili v 3 - 5 ml suhega metanola in dodali en ekvivalent 1 M raztopine NaOH v metanolu. Z dodatkom suhega etra smo oborili natrijevo sol 698, jo nato odsesali in posušili. Dobitek: 390 mg (92 %) 698.

MS (FAB, 3-NBA); 849 (M+Li⁺).

Analogno reakcijskemu zaporedju 686 A -* 696 -» 697 smo pripravili te-le snovi (primeri 699 do 713).

190 σ>

193

ΐΟ

....... ο □ < m z I oo co s ω 2	+ □ + T- co
edukti: holna kislina	682
CC	ZC O O /— ° / / 33 Z —7-\ °
primer	702

194

MS (FAB, 3-NBA, LiCl) l	+ Jj + T- 00
edukti: .holna kislin;	683
□C	JU o o /— ° / \ / 7 —7-\ ° ** \z: zc
primer	703

- 195 Primer 704

iz henodeoksiholne kisline + 682

MS (FAB, 3-NBA, LiCl) : 801 (M + Li⁺)

Primer 705

iz ursodeoksiholne kisline + 683

MS (FAB, 3-NBA, LiCl) 801 (M + Li⁺)

196

Primer 706

iz- ursodeoksiholne kisline + 682

MS (FAB, 3-NBA, LiCl) : 801 (M + LF)

Os

COOH

I ec

MS (FAB, 3-NBA, LiCl)	+ -J + Σ co co co
zc CJ o o z— O / \ / x ' }-( O z / \ z N ♦H	+ holne kisline
CC	Z / \ / ' —)—( ° □: / \ O II/ 2-\ o
t. β •ri . ίο.	707

o

Ch

MS (FAB, 3-NBA, LiCl)	+ Zj + f» t— 00	+ + Σ r<- ω
X o o o y— <-> / \ / X —4—( o x / \ j? O H’'( 2 ( X z M •H	+ ursodeoksiholne kisline	+ henodeoksi- holne kisline
oc	/\ 7 —7—\ ° π: o	/ \ / =c 7 —7-\ P ΖΣ. O
primer	708	709

MS (FAB, 3-NBA, LiCl)	+ □ + 2 τ- Ο 00
«c X O o o /— v / \ / X —)—< o X / \ ί o Y—C X z N t'H	+ litoholne kisline
CC	\ '° o
primer	710

200

Primer 711

) iz holne kisi inet- 3B-684 MS (FAB, 3-NBA, LiCl) : 817 (M + Li⁺)

iz holne kisline + 38-685 MS (FAB, 3-NBA, LiCl) : 817 (M + Li⁺)

Primer 713

iz ursodeoksiholne kislinet- 3B-685 MS (FAB, 3-NBA, UCI) : 801 (M + Li⁺)

Primer 714

on

446 mg(l mmol) 714 A smo umilili z mešanjem preko noči v 40 ml etanola z 2 ml polkoncentriranega natrijevega luga. Razredčili smo z vodo, odstranili etanol v vakuumu in z nakisanjem z razredčeno solno kislino oborili 714. Produkt smo odsesali, sprali z vodo in posušili.

Dobitek: 420 mg (97 %).

MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 438 (M+Li⁺).

201

Primer 715

714 + 686 A

CN

449 mg (1 mmol) 686 A smo raztopili v 30 ml suhega THF in dodali 0,14 ml trietilamina in 1,1 mola EEDQ. Temu smo dodali 432 mg (1 mmol) 714 in segrevali 6 h ob refluksu. Po končani reakciji smo uparili, prevzeli z etilacetatom in sprali z raztopino KHSO₄ in vodo. Preostanek organske faze smo očistili kromatografsko. Dobili smo 587 mg (68 %) 715.

MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 870 (M+Li⁺).

Primer 716a

g (2,3 mola) 715 smo v 50 ml metanola in 5 ml koncentrirane raztopine NH₃ hidrirali z 0,3 g 5 %-nega rodija na A1₂O₃ pri 20 barih in sobni temperaturi 24 h. Odsesali smo od katalizatorja, uparili in preostanek kromatografsko očistili.

Dobitek: 1,5 g (75%) 716.

MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 874 (M+Li⁺).

202

Primer 716b

688->716

484 mg (0,5 mmola) 688 smo dodali k zmesi iz 25 mi metanola v 1,5 ml acetilklorida, pripravljeni ob hlajenju, in mešali pri sobni temperaturi 2 h (kontrola reakcije s tankoslojno kromatografijo (TC)). Po končani reakciji smo nevtralizirali s koncentrirano raztopino NH₃, uparili v vakuumu in ostanek kromatografsko očistili (SiO₂). Dobili smo 247 mg (58 %) 716, ki je po TC in MS identičen s snovjo, pripravljeno po a).

Primer 717

1,2 g (1,38 mmola) 716 smo raztopili v 20 ml metanola in umilili z 2 ml polkoncentriranega natrijevega luga z mešanjem preko noči. Razredčili smo z vodo, odstranili metanol v vakuumu in oborili amino kislino 717 s previdnim nakisanjem. Oborino smo odsesali, sprali z vodo in posušili. Dobitek: 1,1 g (93 %).

MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 860 (M+Li⁺).

Analogno reakcijskemu zaporedju (714 A) -* 714 -> 715 -+ 716 717 smo pripravili te-le snovi (primeri 718 - 725).

203

G1 - NH - G2

ID

205

206, <

MS (FAB, 3-NBA, LiCl ali LiJ)	+ Lj + Σ 00 CJ 00
edukti	681 + 683
CJ O Ί- Ο	X o o /— / \ / x ' -i——\ O a: / \ O|h \ )-\ / / \ / x z —7-\ P z «M
primer	723

Primer 724

432 mg (0,5 mmola) 715 smo umilili v 15 ml metanola z 1,5 ml 12 N NaOH, kot je opisano pod 717. Dobitek: 318 mg (75 %) 724.

MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 856 (M+Li⁺).

Analogno reakcijskemu zaporedju 714 -> 715 724 smo pripravili te-le snovi (primeri 725 - 729):

207

G1 - NH - G2

in

209

Primer 730

cooch₅

30 A

H 0

COOCHj

730

2,1 g (4 mmole) 730 A smo v 50 ml suhega THF segrevali z 0,6 ml trietilamina, 1,1 g (4,4 mmola) EEDQ in 1,64 g (4 mmoli) holne kisline 8 h ob refluksu. Po končani reakciji smo uparili, prevzeli z etilacetatom, raztopino sprali z raztopino KHSO₄ in vodo in preostanek organske faze kromatografsko očistili. Dobitek: 2,48 mg (68 %) 730.

MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 919 (M+H⁺).

Primer 731

730

COOH

1 g (2,2 mmola) 730 smo umilili v 30 ml metanola s 3 ml 2 N NaOH, kot je opisano pod 724. Dobitek: 168 g (85 %) 731.

MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 905 (M+Li⁺).

Analogno reakcijskemu zaporedju 730 A -* 730 -> 731 smo pripravili te-le snovi (primeri 732 - 734):

210

211

in

212

Primer 735

K 3,1 g (7,4 mmola) 735 A smo v 30 ml izopropanola pod refluksom dodali raztopino 2,33 g hidroksilaminhidroklorida in 4,57 g natrijevega acetata v 10 ml vode in segrevali 4 h do refluksa. Po končani reakciji smo dodali vodo, izopropanol v vakuumu deloma odstranili in stresali z mnogo diklormetana. Preostanek organske faze smo očistili kromatografsko. Dobitek: 2,7 g (84 %) 735.

MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 442 (M+Li⁺), 436 (M+H⁺).

Primer 736

g (4,6 mmola) 735 smo v 50 ml metanola hidrirali z 200 mg 10 %-nega paladija/oglja pri 20 barih H₂ in sobni temperaturi 24 h. Katalizator smo ločili, uparili in preostanek kromatografsko očistili. Dobitek: 1,56 g (80 %) 736.

MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 428 (M+Li⁺), 422 (M+H⁺).

736 po TC (SiO₂; diklormetan/metanol/konc. raztopina NH₃ = 100:15:5) ni identičen s 3/3-izomernim aminom.

213

Primer 737

842 mg (2 mmola) smo v 50 ml suhega THF segrevali z 0,15 ml trietilamina, 2,2 mmola EEDQ in 820 mg (2 mmola) holne kisline 6 h do refluksa. Uparili smo, prevzeli z etilacetatom in stresali z raztopino KHSO₄ in vodo in preostanek organske faze kromatografsko očistili. Dobitek: 926 mg (57 %).

MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 819 (M+Li⁺).

Primer 738

200 mg (0,25 mmola) 737 smo umilili v 15 ml metanola z 1,5 ml polkoncentriranega luga, kot je opisano pod 724. Dobitek: 162 mg (82 %) 738.

MS (FAB, 3-ΝΒΑ): 798,6 (M+H⁺).

Analogno reakcijskemu zaporedju 735 A -> 735 736 -> 737 -* 738 smo pripravili snovi iz teh-le primerov.

214

in

216

MS (FAB, 3-NBA)	+ z + Σ ω ra N-
•H 43 J* 3 Ό <U	679 A + holna kislina
G1 G2	X 0 0 - \ x° / \ / 1 7 —7—( 0 X / \ £ O h··/ 2-\ ''χ O
primer	742

K 1 g holne kisline (2,45 mmola) smo v 15 ml suhega THF pri 0°C dodali 4 ekvivalente anhidrida trifluorocetne kisline in mešali 2 h pri sobni temperaturi. Ob hlajenju z ledom smo dodali 1,04 g (2,01 mmola) benzilestra holne kisline v THF in mešali pri sobni temperaturi preko noči. Ob hlajenju z ledom smo dodali okoli 2,5 ml koncentrirane raztopine NH₃ in mešali več ur ob kontroli s TC. Po končani reakciji smo daljnosežno uparili v hladnem in preostanek porazdelili med mnogo etra in raztopine NaHCO₃. Organsko fazo smo sprali z raztopino NaHCO₃ in vodo, uparili in preostanek kromatografsko očistili. Dobitek: 1,14 g (64 %) 743.

MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 896 (M+H⁺).

Primer 744

217 g (1,12 mmola) 743 smo v stresalni rački pri sobni temperaturi hidrirali v 10 ml THF z 200 mg 10 %-nega paladija na oglju. Po končani reakciji smo katalizator ločili, uparili in preostanek kromatografsko očistili.

Dobitek: 828 mg (92 %) 744.

MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 806 (M+Li⁺).

Analogno reakcijskemu zaporedju 743 A -> 743 -► 744 smo pripravili te-le snovi (primeri 745 - 747):

primer	G1	. edukt	MS (FAB, 3-NBA, UCI)
745				743 A + henodeoksi- holna kislina
	H 0-Χχ/	H

primer	G1	edzedukt	MS (FAB, 3-NBA, UCI)
746	h θ<	743 A + litoholna kislina

218

110

MS (FAB, 3-NBA, LiCl): 806 (M+Li⁺) iz benzilestra 3-/?-OH-holne kisline + holne kisline

Primer 748

826 mg (1 mmol) 707 in 1,4 mmola EEDQ smo raztopili v 8 ml suhega, očiščenega dimetilformamida, in dodali 0,18 ml trietilamina in 140 mg (1 mmol) tavrina. Raztopino smo segrevali 15 min na 90°C. Po ohlajenju smo dodali 40 ml suhega etra. Obarjanje produkta smo spopolnili s stanjem preko noči v hladilniku. Raztopino smo dekantirali, oborino sprali z etrom, odsesali in posušili na zraku. Produkt smo raztopili v 5 ml 0,2 N metanolnega NaOH, raztopini dodali 40 ml suhega etra in mešali 1 h ob hlajenju z ledom. Nastalo oborino smo odsesali in posušili v eksikatoiju. Nadaljnje čiščenje seje vršilo s kromatografijo z obrnjeno fazo. Dobitek: 806 mg (84 %) 748.

MS (FAB, 3-ΝΒΑ): 956 (M+H⁺).

Analogno reakcijskemu zaporedju 707 -> 748 smo v primerih pripravili te-le snovi.

Claims (8)

1. PATENTNI ZAHTEVKI

   1. Dimemi derivati žolčnih kislin s formulo

   Gl-X-G2 (1) v kateri pomenijo

   Gl in G2 ostanke žolčnih kislin oz. modificiranih žolčnih kislin v obliki prostih kislin, estrov ali amidov, v obliki soli kot tudi v oblikah, derivatiziranih na alkoholnih skupinah, in

   X mostno skupino ali enojno kovalentno vez, pri čemer sta lahko Gl in

   G2 poljubno povezana preko X.
2. 2. Spojina po zahtevku 1, označena s tem, da Gl ni povezan preko svojega obroča A preko X z obročem A v G2.
3. 3. Spojina po zahtevku 1, označena s tem, da Gl pomeni spojino s splošno formulo II

   224 pri čemer

   Y pomeni prosto valenco za vezavo skupine X ali ima ta-le pomen -OL, -NHL, -NL₂, pomeni preko amino skupine vezano amino kislino ali aminosulfonsko kislino, kot npr.

   -NHGH₂-CO₂H, -nh-ch₂ch₂-so₃h, -n-ch₂ch₂-so₃h I ch₃

   -n-ch₂co₂h, -nh-chco₂h

   I I ch₃ r⁶ in njihove (C^-C^-alkil estre in alkalijske in zemeljsko alkalijske soli, -OKa, pri čemer Ka pomeni kation, kot npr. alkalijski ali zemeljsko alkalijski ion ali tudi kvartarni amonijev ion in pri čemer L pomeni

   H, nasičen ali nenasičen alkilni ostanek z 1 do 10 atomi C, ki je razvejen ali nerazvejen, cikloalkilni ostanek s 3 do 8 atomi C, fenilni ostanek, ki je nesubstituiran ali 1 do 3-krat substituiran z F, Cl, Br, (Cj-C₄)-alkilom ali (Cj-CJ-alkoksi, benzilni ostanek, kije nesubstituiran ali 1-3-krat substituiran z F, Cl, Br, (C₁-C₄)-alkilom ali (C^CJ-alkoksi in R⁶ pomeni metil, izopropil, izobutil, 2-butil benzil, 4-hidroksibenzil, hidroksimetil, 1-hidroksietil, H₃CSCH₂CH₂-, HO₂CCH₂, HOCCH^CH^,

   R¹ pomeni prosto valenco za vezavo skupine X ali H, nasičen ali nenasičen alkilni ostanek z 1-10 atomi C, ki je razvejen ali nerazvejen, cikloalkilni ostanek s 3-8 atomi C, fenilni ostanek, kije nesubstituiran ali 1-3-krat substituiran z F, Cl, Br, (Cj-C^-alkilom ali (C₁-C₄)-alkoksi,-⁺NH₃, -OPO₃', benzilni ostanek, ki je v jedru nesubstituiran ali 1-3-krat substituiran z F, Cl, Br, (C₁-C₄)-alkilom, (C₁-C₄)-alkoksi, -⁺NH3, -OPO3' ali fenilom, kije lahko po svoji plati 1-3-krat substituiran z F, Cl, Br, (Cj-CJ-alkilom, (C1-C4)-alkoksi, -⁺NH3, -OPO₃,

   225 bifenilmetilni ostanek, ki je nesubstituiran ali 1-3-krat substituiran z F, Cl, Br, (Cj-C^-alkilom ali (C_fC₄)-alkoksi, -OPO₃, trifenilmetilni ostanek, ki je nesubstituiran ali 1-3-krat substituiran z F, Cl, Br, (C^C^-alkilom ali (C^C^-alkoksi, -⁺NH₃, -OPO₃',

   1- ali 2-naftil metilni ostanek, ki je nesubstituiran ali 1-3-krat substituiran z F, Cl, Br, (C_fC₄)-alkilom ali (C_fC₄)-alkoksi, -+1^, -OPO₃’,

   9-fluorenilni ostanek, ki je nesubstituiran ali 1-3-krat substituiran z F, Cl, Br, (Cj-CJ-alkilom, (C_fC₄)-alkoksi, -⁺NH₃, -OPO₃,

   2- , 3- ali 4-piridilni ostanek,

   0 0 0 ostanek -P-OL

   -S-OL ali -C-L

   OL 0 pri čemer ima L zgoraj navedeni pomen,

   R² do R⁵, pri čemer R² in R³ oz. R⁴ in R⁵ pomenijo skupaj vsakič kisik karbonilne skupine ali posamič in vsakič neodvisno drug od drugega

   0 0 0

   H, OT, -ST, -NHT, O-C-T, -S-C-T, -NH-C-T, 0 0

   -O-P-OT, -O-S-OT, -T

   5 OL 0 pri čemer ima L zgoraj navedeni pomen in ima T pomen L ali ima prosto valenco za vezavo skupine X, z omejitvijo, da izhaja v celem samo ena prosta valenca za vezavo skupine X,

   X enojno vez ali skupino s formulo III

   226 (III) o o

   -l-(N)_s - A - N - C - (CH₂)_q - C -]_r - N - B_t ^L1 ^L2 ^L3 pri čemer pomeni

   A alkilensko verigo, ki je razvejena ali nerazvejena, nasičena ali nenasičena in v verigi v danem primeru lahko prekinjena z -0-, -S- ali arilenom, zlasti fenilenom, pri čemer se vrši povezava tako-le ^aii (aA in obsega veriga v celem 2 do 12, prednostno 2 do 6 verižnih členov p,

   B alkilensko verigo, ki je razvejena ali nerazvejena, nasičena ali nenasičena in v verigi v danem primeru lahko prekinjena z -0-, -S- ali arilenom, zlasti fenilenom, pri čemer se vrši povezava tako-le

   O' * ^ali in obsega veriga v celem 2 do 18, prednostno 2 do 12 verižnih členov n, Ll, L2 in L3 so enaki ali različni in imajo enak pomen kot L, in pomenijo q 0-5, r O ali 1 in s O ali 1 in t Oali 1,

   G2 pomeni spojino s splošno formulo IV

   - 227 -P-OT, -T n 0 pri čemer imata

   Y in R¹ pod Gl navedeni pomen kot tudi R⁷ do R¹⁰, pri čemer pomenijo

   R⁷ in R⁸ oz. R⁹ in R¹⁰ skupaj vsakič kisik karbonilne skupine ali posamič in vsakič neodvisno drug od drugega H, -OT, -ST, -NHT,

   O O O O O O

   U H It « IH

   O-C-T, -S-C-T, -NH-C-T, -O-P-OT, -O-S-OT, -S-OT, i n ·

   OL O O pri čemer imata L in T pod Gl navedeni pomen, prav tako z omejitvijo, da izhaja iz G2 v celem samo ena prosta valenca za vezavo skupine X.
4. 4. Spojina po zahtevkih 1 do 3, označena s tem, da se povezava ostankov Gl in G2 ne vrši simetrično, t.j. ne preko enakih obročev.
5. 5. Spojina po zahtevkih 1 do 4, označena s tem, da se vrši povezava ostanka Gl preko C-24 (obroč D) preko X na eno od leg C-3 (obroč A), C-7 (obroč B) ali C-12 (obroč G) ostanka G2.
6. 6. Postopek za pripravo spojine po enem ali več zahtevkih 1 do 5, označen s tem, da

   a) v primeru X = enojna vez presnovimo po načelno znanih postopkih primerne reakcije sposobne oblike Gl in G2 ali

   b) v primeru X = mostni člen presnovimo po načelno znanih postopkih, a) reakcijsko sposobne oblike Gl-X z G2 oz. β) reakcijsko sposobne oblike G2-X z Gl,

   c) pripravimo po znanih postopkih iz G1-X1 spojine s splošno formulo I (Gl-XG2), pri čemer nastane X iz XI in X2 z izoblikovanjem kovalentne vezi, zlasti pri kondenzacijski ali substitucijski reakciji.

   228

   Ί. Uporaba spojine po zahtevkih 1 do 5 za pripravo zdravila.
7. 8. Spojina po zahtevkih 1 do 5 kot zdravilo.
8. 9. Farmacevtski pripravek, ki vsebuje spojine po zahtevkih 1 do 5.