CZ281075B6 - Deriváty žlučových kyselin, způsob jejich výroby a jejich použití jako léčiva - Google Patents

Abstract

Deriváty žlučových kyselin obecného vzorce I, kde G1 a G2 znamenají zbytky žlučových kyselin popřípadě modifikované zbytky žlučových kyselin ve formě volných kyselin, esterů nebo amidů, ve formě solí, jakož i v jejich formách derivatizovaných na alkoholových skupinách a X představuje můstkovou skupinu nebo jednoduchou kovalentní vazbu, přičemž G1 a G2 mohou být libovolně spojeny přes X. Sloučeniny vykazují vysokou afinitu ke specifickému systému transportu žlučových kyselin v tenkém střevu a inhibují resorpci žlučových kyselin na koncentraci závislým a kopetitivním způsobem.ŕ

Description

Dimerní deriváty žlučových kyselin, způsob jejich výroby, jejich použití a farmaceutický prostředek, tyto látky obsahující

Oblast vynálezu

Vynález se týká dimerních derivátů žlučových kyselin, způsobu jejich výroby a použití těchto sloučenin jako léčiv a farmaceutického prostředku tyto látky obsahujícího.

Dosavadní stav techniky

Žlučové kyseliny mají důležitou fyziologickou funkci při odbourávání tuků, například jako kofaktory pankreatických lipáz a jako přírodní detergenty pro solubilzaci tuků a vitaminů rozpustných v tucích. Jako konečný produkt přeměny cholesterolu jsou syntetizovány v játrech, ukládány ve žlučníku a z něj uvolňovány stahy do tenkého střeva, kde naplňují své fyziologické působení. Nejvtší část secernovaných žlučových kyselin je získávána zpět enterohepatálním oběhem. Vrací se přes mesenteriálné vény tenkého střeva a portální systém opět do jater. Při zpětné resorpci ve střevu hraje úlohu jak aktivní, tak pasivní způsob. Hlavní množství žlučových kyselin se zpětně resorbuje na konci tenkého střeva, specifickým Na⁺ - závislým transportním systémem a navrací mesenteriální venosní krví přes portální žílu do jater. V enterohepatálním oběhu vystupují žlučové kyseliny jako volné kyseliny, ale i ve formě konjugátů s glycerinem a taurinem.

Neresorbovatelné, nerozpustné, bázícké, zesítěné polymery se používají již dlouho pro navázání žlučových kyselin a na základě těchto vlastností se využívají terapeuticky. Objekty terapie jsou všechny choroby, při kterých se objevuje potlačení resorpce žlučových kyselin ve střevu, zejména tenkém střevu. Příklady jsou chologenní diarrhoea po resekci ilea, nebo je také možno tímto způsobem léčit zvýšený obsah cholesterolu v krvi.

V případě zvýšeného obsahu cholesterolu v krvi může být zásahem do enterohepatálního oběhu dosaženo snížení této hladiny. Snížením poolu žlučových kyselin, nacházejících se v enterohepatálním oběhu, se vyvolá odpovídající nová syntéza žlučových kyselin z cholesterolu v játrech. K pokrytí potřeby cholesterolu v játrech, je vzat zpět LDL-cholesterol (Low Density Lipoprotein), nacházející se v krevním oběhu, přičemž hepatické LDL-receptory působí ve zvýšeném počtu. Následující urychlení LDL-katabolismu působí snížení podílu atherogenního cholesterolu v krvi. Dosud představovaly polymery, nerozpustné iontovýménné pryskyřice (dále označované jako pryskyřice) jedinou možnost, jak ovlivňovat zvýšený stav žlučových kyselin v enterohepatálním krevním oběhu a tak i následující pokles obsahu cholesterolu v krvi.

Účinná denní dávka je při použití pryskyřic jako léčiv, například colestyraminu (obsahuje kvarterní amoniové skupiny) nebo colestipolu (obsahuje sekundární popřípadě terciární aminoskupiny) příliš vysoká. Například pro colestyramin činí 12 až 24 g, nejvyšší denní dávka 32 g, 15 až 30 g je doporučená dávka colestipolu. Vedle vysokých dávek jsou pro pacienta nepříjemná chuť a zápach.

-1CZ 281075 B6 .· ·

Známé vedlejší účinky zpětné působí u pryskyřic nedostatečnou selektivitu (například avitaminosu), kterou je také třeba brát v úvahu při dávkování současně podávaných léčiv, ale také pokles žlučových kyselin, který vyvolává různé gastrointestinální poruchy (obstipace, stearrhoea) různého stupně. Pro oba tyto preparáty byl popsán terapeutický význam kombinace s hypolipidemicky účinnými farmaky fibráty, inhibitory HMG-CoA-reduktázy, probucol (srov. Μ. N. Cayen. Pharmac. Ther. 29, 187/1985) a 8. International Symposium on Atherosclerosis, Řím, 9.13. říjen, 1988, Abstracts str. 544, 608, 710), přičemž dosažené účinky umožňují také terapii těžkých hyperlipidemií. Proto se jeví významným nalézt pro uvedený princip účinnosti vhodné látky bez nevýhod v současnosti užívaných přípravků.

Zlepšit je třeba následující charakteristiky uvedených preparátů a zejména colestipolu:

- Vysoké denní dávky, které zpětně vedou k relativné nízké rychlosti vazby při neutrálním pH v isotonickém médiu a (částečnému) uvolňování adsorbovaných žlučových kyselin.

- Kvalitativní posun ve složení žlučových kyselin ve žluči se sklonem ke klesání množství kyseliny chenodesoxycholové, a s tím spojeným nebezpečím cholelithiázy.

- Oslabení vlivu střevních bakterií na látkovou výměnu cholesterolu.

- Příliš vysoká rychlost vázání vitaminů a farmak vyvolává potřebu náhrady těchto látek a eventuálního obrazu.

- Vazbou žlučových kyselin na pryskyřici již ve dvanáctníku a horním tenkém střevě nejsou žlučové kyseliny pro trávení tuků k dispozici v dostatečném množství, takže dochází k poruchám v odbourávání tuků.

*

- Podávaná forma je dosud považována za nedostatečnou.

Vyvstává proto úloha nalézt léčivo, které by snižovalo obsah atherogenního cholesterolu v krvi, popřípadě ovlivňovala enterohepatální krevní oběh významně zvýšeném vylučováním žlučových kyselin a následným snížením hladiny cholesterolu v krvi, které by však nemělo nevýhody dosud používaných pryskyřic.

Podstata vynálezu

Předmětem předloženého vynálezu jsou dimerní deriváty žlučových kyselin obecného vzorce I

G1 - X - G2 (I), kde

G1 značí sloučeniny obecného vzorce II

-2CZ 281075 B6

kde

Y znamená volnou valenci k vazbě skupiny X nebo má následující významy

-OL, -NHL, NL₂, přes aminoskupinu navázaný zbytek aminokyseliny nebo aminosulfonové kyseliny, jako například

-nhch₂-co₂h, -nh-ch₂ch₂-so₃-h, -n-ch₂ch₂-so₃h ch₃ -N-CH.,C0_oH, -NH-CHCO_oH

I I ^ch3 ^r6 a jejich (C^-^)-alkylestery a soli s alkalickými kovy a kovy alkalických zemin, -OKa, kde Ka znamená kation jako například kation alkalického kovu nebo kovu alkalických zemin nebo také kvarterní amoniový ion, přičemž

L znamená H, nasycený nebo nenasycený alkylový zbytek s i až 10 atomy uhlíku, který je rozvětvený nebo nerozvětvený, cykloalkylový zbytek se 3 až 8 atomy uhlíku, fenylový zbytek, který je nesubstituovaný nebo je 1 až 3krát substituovaný F, Cl, Br, (Cj-C^j)-alkylem nebo (C^-^)-alkoxylem, benzylový zbytek, který je nesubstituovaný nebo je 1 až 3krát substituovaný F, Cl, Br, (C₁-C₄)alkylem nebo (Cj-C₄)alkoxylem a

R⁶ znamená methyl, isopropyl, isobutyl, 2-butyl, benzyl, 4-hydroxybenzyl, hydroxymethyl, 1-hydroxyethyl, h₃csch₂ch₂-, ho₂cch₂-, hocch₂ch₂-,

-3CZ 281075 B6

R¹ znamená volnou valenci k navázání skupiny X nebo H, nasycený nebo nenasycený alkylový zbytek s 1 až 10 atomy uhlíku, který je rozvětvený nebo nerozvětvený, cykloalkylový zbytek se 3 až 8 atomy uhlíku, fenylový zbytek, který je nesubstituovaný nebo je 1 až 3krát substituovaný F, Cl, Br, (Cj-C4)-alkoxylem, -N⁺H3, -OPO₃“, benzylový zbytek, který je na jádru nesubstituovaný nebo je 1 až 3krát substituovaný F, Cl, Br, (^-04)-alkoxy lem, -N⁺H3, -0P03- nebo fenylem, který sám je 1 až 3krát substituovaný F, Cl, Br, (^-04)-alkylem nebo (Ci“C4)-alkoxylem, -n⁺h3, -opo₃, bifenylmethylový zbytek, který je nesubstituovaný nebo je 1 až 3krát substituovaný F, Cl, Br, (C₁-C₄)-alkylem nebo (C^-C₄)-alkoxylem, -N⁺H₃,-OPO₃“, trifenylmethylový zbytek, který je nesubstituovaný nebo je 1 až 3krát substituovaný F, Cl, Br, (^-04)-alkylem nebo (^ci^_c4)-alkoxylem, -N⁺H₃,-OPO₃”,

1- nebo 2-naftylmethylový zbytek, který je nesubstituovaný nebo 1 až 3krát substituovaný F, Cl, Br, (C,-C₄)-alkylem nebo (C^-C₄)-alkoxylem, -N⁺H3,-0P03“, 9-fluorfenylový zbytek, který je nesubstituovaný nebo je 1 až 3krát substituovaný F, Cl, Br, (Cj-C4)-alkylem nebo (Cj-C4)-alkoxylem, -N⁺H3, -0P0₃”,

2- , 3- nebo 4-pyridylový zbytek, nebo

0 II zbytek vzorce -P-OL , 1	0 0 I II -S-OL nebo -C-L II 0
OL

kde L má shora uvedený význam,

R² až R⁵, kde R² a R³, popřípadě R⁴ a R⁵ společně znamenají kyslík karbonylové skupiny, nebo jednotlivě a nezávisle na sobě znamenaj í

	0 11	0 II	0 · II
Η, OT, II 0	ST, -NHT, -O-C-T,	-S-C-T,	-NH-C-T,
0
	II
-O-P-OT, I	-O-S-OT, -T II
1 OL	n
kde L má	shora uvedený význam a
T · -má	význam uvedený pro L	nebo znamená	volnou valenci

k navázání skupiny X,

-4CZ 281075 B6 omezením, že celkem je přítomna pouze jedna valence ázání skupiny X, ná jednoduchou vazbu nebo skupinu obecného vzorce lil

O kde

znamená alkylenový řetězec, který je rozvětvený nebo nerozvětvený, nasycený nebo nenasycený a může být popřípadě v řetězci přerušen -0-, -S- nebo arylenem, zejména fenylenem, přičemž spojení je provedeno přes i

ézec má celkem 2 až 12, výhodně 2 až 6 členů řetězce p, znamená alkylenový řetězec, který je rozvětvený nebo nerozvětvený nasycený nebo nenasycený a je v řetězci popřípadě přerušen -0-, -S- nebo arylenem, zejména fenylenem, přičemž napojení je provedeno přes q r s t q r s t řetězec obsahuje celkem 2 až 18, výhodné 2 až 12členný řetězec n,

L,, L, jsou stejné nebo rozdílné a mají význam uvedený pro L, znamená 0-5, znamená 0 nebo 1, znamená 0 nebo 1 a znamená (/ nebo 1 a lená sloučeninu obecného vzorce IV

-5CZ 281075 B6 kde

Y a R¹ mají význam uvedený pod Gl a

R⁷ až R¹⁰, kde R⁷ a R⁸ popřípadě R⁹ a R lík karbonylově skupiny nebo znamenají Η, OT,

-ST,

NHT, znamenají společně jednotlivě a nezávisle na kyssobě o ο-ϋ-τ,

O

II -S-C-T,

-O-P-OT

CL íí T^0T' o

kde L a T mají význam uvedený pod

Gl, také s omezením, že celkem pro G2 je přítomna jen jedna volná valence k navázání skupiny X,

-6CZ 281075 B6

Uvedené sloučeniny obecného vzorce I vykazují vysokou afinitu ke specifickému transportnímu systému žlučových kyselin v tenkém střevě a potlačují resorpci žlučových kyselin n koncentraci závislým a kompetitivním způsobem.

Dále se sloučeniny podle předloženého vynálezu samy resorbují a nepřecházejí do krevního oběhu. Použitím tohoto nového principu účinku může být specificky a účinně přerušen enterohepatální krevní oběh žlučových kyselin, a tím dosaženo vyšší účinnosti v enterohepatálním krevním oběhu, než dosud umožňovaly uvedené pryskyřice.

Použitím sloučenin podle předloženého vynálezu, které pracují na shora uvedeném novém principu, mohou být úplně odstraněny uvedené nevýhody obchodně dostupných, interohepatální systém ovlivňujících pryskyřic*'. Reverzibilní inhibicí resorpce žlučových kyselin v tenkém střevu se podstatně efektivnějším způsobem snižuje koncentrace žlučových kyselin, nacházejících se v enterohepatálním oběhu, takže dochází ke snížení hladiny cholesterolu v séru. K avitaminozám dochází při použití sloučenin podle vynálezu tak málo, jako k ovlivňování resorpce jiných léčiv nebo k negativnímu působení na střevní floru. Navíc nejsou pozorovány známé vedlejší účinky (obstipace, steatorrhoea), tj. odbourávání tuků není negativně ovlivňováno. Vzhledem k vysoké afinitě sloučenin podle vynálezu k vysoce specifickému transportnímu systému v tenkém střevě mohou tyto být na rozdíl od pryskyřic používány ve značně snížených denních dávkách, takže jsou akceptovány lékaři i pacienty a jejich přijímatelnost pacienty je velmi vysoká.

Výhodné jsou sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých kruh A zbytku žlučové kyseliny G2, který znamená žlučovou kyselinu, modifikovanou žlučovou kyselinu, zejména formu modifikovanou na alkoholových skupinách není spojen s kruhem A zbytku žlučové ky

-7CZ 281075 B6 seliny Gl, který také znamená žlučovou kyselinu nebo modifikovanou žlučovou kyselinu.

Výhodné tedy je nesymetrické spojení zbytku Gl a G2, tj. spojení různých kruhů.

Zejména výhodné jsou sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém zbytek žlučové kyseliny Gl znamená žlučovou kyselinu, modifikovanou žlučovou kyselinu, zejména na alkoholových skupinách modifikovanou formu, je přes atom uhlíku C-24 (kruh D) spojen spojovacím členem X, X znamená můstkovou skupinu a zbytek žlučové kyseliny G2 znamená žlučovou kyselinu, modifikovanou žlučovou kyselinu, zejména na alkoholových skupinách modifikovanou formu, je s X spojen přes polohu C-3 (kruh A), C-7 (kruh B) nebo C-12 (kruh C).

Výhodné jsou sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých je spojení obou sloučenin Gl a G2 skupinou X provedeno jinak než před kruh Am obou sloučenin Gl a G2.

Zvláště jsou výhodné sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých je spojení skupinou X provedeno jinak než přes identické kruhy sloučenin Gl a G2. Zejména výhodné jsou sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých je spojení skupinou X provedeno nesymetricky přes kruh A, popřípadě D, sloučenin Gl a G2.

Předmětem vynálezu je dále způsob výroby dimerních derivátů žlučových kyselin obecného vzorce I, jehož podstata spočívá v tom, že

a) v případě, že X = jednoduchá vazba, se uvedou známým způsobem do reakce reakceschopné formy Gl a G2, nebo

b) v případě, že X = můstková skupina, se uvedou do reakce známým způsobem

a) reakceschopné formy Gl-X s G2 popřípadě β) reakceschopné formy G2-X s Gl nebo

c) z Gl-Xl a G2-X2 se známým způsobem vyrobí sloučeniny obecného vzorce I (G1-X-G2), přičemž X vznikne z XI a X2 vytvořením kovalentní vazby, zejména kondenzační nebo substituční reakcí.

Žlučové kyseliny Gl se používají buď ve volné formé, nebo v chráněné formě. Po spojení s G2, které jsou také ve volné nebo chráněné formě, následuje popřípadě odštěpení chránících skupin a přeměna C-24 karboxylové funkce na shora uvedený derivát. Jako chránící skupiny pro alkoholové skupiny jsou vhodné výhodné formyl, acetyl, tetrahydropyranyl nebo terc.butyldimethylsilyl. Jako chránící skupiny pro C-24 karboxylovou skupinu přicházejí v úvahu různé alkylové estery nebo benzylester, ale také například orthoester.

Například žlučová kyselina reaguje výhodné v poloze 3, ale také v poloze 7 s aktivovanými formami karboxylových skupin, jako jsou chloridy kyselin nebo směsné anhydridy za přídavku bází jako je trialkylamin, pyridin ale také hydroxid sodný, při teplotě místnosti ve vhodném rozpouštědle jako je tetrahydrofuran,

-8CZ 281075 B6 methylenchlorid nebo octan, ale také dimethylformamid (DMF) nebo dimethoxyethan (DME).

Různé isomery mohou být děleny například chromatografíčky.

Použitím vhodných chránících skupin je možno reakci provádět selektivně. Analogicky se nechají odpovídající aminožlučové kyseliny převést na odpovídající amidy. Také zde je možno reakci provádět buď s chráněnými, nebo volnými žlučovými kyselinami.

Analogicky je možno připravit známými standardními způsoby další sloučeniny podle vynálezu.

b) X znamená můstkovou skupinu

Pod a) uvedené způsoby se používají také pro provedení spojení Gl-X s G2, popřípadě G1 s X-G2.

Účelné se i zde používá podíl žlučové kyseliny buď chráněný, nebo nechráněný.

Výhodný způsob výroby spočívá v tom, že se reakce schopiié formy G1 nechají reagovat s reakceschopnými formami X-G2. Popřípadě se po spojení provede odštěpení chránících skupin a přeměna C-24 karboxylu na derivát.

Výroba reakceschopných prvků pro výstavbu žlučových kyselin X-G je uvedena ve schématu 1 až 4 na příkladu kyseliny cholové (například r = 0).

Výroba prvků vhodných pro výstavbu struktury žlučových kyselin X-G2 například kyseliny cholové, schéma 1 až 4.

-9CZ 281075 B6

Schéma 1: X-G2 bez chránící skupiny

kyselina cholová

Hs- CHjS02

-10CZ 281075 B6

Schéma 2: X-G2 s THP chránící skupinou (THP = tetrahydropyranyl)

CDjCH] methylester kyseliny cholové

AcjO Pyr

MeOH

CCbC-^ '

(H₂C)

EMSO , Pd/C

-11CZ 281075 B6

Schéma 3: X-G2 s t-BuMe2Si chránící skupinou

11) NaNj, EMSO j2) H_2|Pd/C

XVII

-12CZ 281075 B6

Schéma 4: X-G2 s α-konfigurací na 3-C

CO₂CH₃ l-PrEt₂N *

methylester kyseliny cholové

XVIII

1) EH^ hebojhexylboran

2) NaCH/H^

XXI

-13CZ 281075 B6

Výměna 3-OH skupin za diol H0(CH₂)_n0H se podařila reakcí odpovídající mesylátu s odpovídajícími dioly, které se výhodně používají v přebytku, za přídavku bází jako je pyridin, lutidin, ale také triethylamin.

Primární OH-skupiny sloučenin vzorce VI a XIII mohou dále reagovat standardními způsoby. Tak může být například sloučenina obecného vzorce XIII převedena na odpovídající karboxylovou sloučeninu obecného vzorce XXII (s R(ll) rovno THP), výhodně za působení sloučenin šestimocného chrómu nebo různých systémů s obsahem manganistanu draselného. Pro toto jsou vhodné také jiné chránící skupiny.

Sloučeniny XG2 (IX, XV, XVII nebo XXI) mohou reagovat bud přímo s G1 popřípadě jejími deriváty, nebo po převedení na X2-G2 s odpovídající modifikovanou Gl-Xl na sloučeninu obecného vzorce I (G1-X-G2).

Poslední uvedený případ je popsán v části c).

c) Pro výrobu sloučenin typu X2-G2 se jako zde například jedná ze sloučenin IX, XV, XVII nebo XXI, nechá reagovat s reakceschopnými formami karboxylových kyselin, například směsných anhydridů, chloridů kyselin nebo například v případě, že g = 2 s anhydridem kyseliny jantarové ve vhodném rozpouštědle, jako je například dichlormethan, toluen, nebo pyridin a za přítomnosti triethylaminu při -20 °C až teplotě místnosti, na karboxylové kyseliny vzorce XXIII.

HO-CCHg CHg C

A.

-14CZ 281075 B6

R(12) = Η, THP, t-BuMe₂Si, acetyl, benzyl, benzyloxykarbonyl (Z)

Sloučeniny (XXIII) mohou nyní být sloučeninami IX, XV, XVII nebo XXI (zde: typ Gl-Xl) převedeny na sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých S = O (zde sloučenina XXIV).

(XXIV)

Jestliže mají sloučeniny obecného vzorce I být ty, ve kterých s=l, nechají se například reagovat sloučeniny obecného vzorce II se sloučeninami vzorce H-N-A-N-H

Li L₂ kde A, L-j_ a L₂ mají shora uvedený vyznám. V případě esteru (tj. V je esterová funkce), reaguje tento

O přímo se sloučeninou H-N-A-N-H, v případě volné kyseliny ^L1 ^L2

O

A OH), musí být tyto ještě převedeny na reakce schopné deriváty kyseliny, jako například směsné anhydridy, chloridy kyseliny. Tímto způsobem se získané sloučeniny typu Gl-Xl se nyní převedou se sloučeninami typu G2-X2 na sloučeniny typu G1-X-G21.

Shora uvedená provedení výroby sloučenin typu G1-X-G2, ve kterých je spojení obou žlučových kyselin GI a G2 uskutečněno přes jejich A-kruhy, je také možno provést odpovídajícími, odborníkům známými metodami pro spojení A-D, A-B, A-G jakož i D-D, B-B, C-C, B-D, C-D.

Substituenty žlučové kyseliny GA popřípadě G2, R¹ až R¹⁰ mohou být zavedeny před spojením GI s G2 přes X nebo také po tomto spojení. Zavádění substituentů prováděné po spojení GI s G2 je možné jen tehdy, když odpovídající substituenty samy nejsou účastny na můstkové vazbě mezi GI popřípadě G2 a X. Proto je výhodné zavádět tyto substituenty před spojovací reakcí GI a G2 pomocí X.

-15CZ 281075 B6

Vynález se dále týká použití sloučenin podle vynálezu k výrobě léčiva.

Za tímto účelem se sloučeniny obecného vzorce I rozpustí nebo suspendují ve farmakologicky přijatelných organických rozpouštědlech jako jsou jedno- a vícesytné alkoholy jako například ethanol nebo glycerin, v triacetinu, olejích jako je například slunečnicový olej, rybí tuk, ethery jako například diethylenglykoldimethylether nebo také polyethery jako například polyethylenglykol, nebo také v přítomnosti jiného farmakologicky přijatelného polymerního nosiče jako je například polyvinylpyrrolidon nebo jiné farmaceuticky přijatelné přísady jako škroby, cyklodextrin nebo polysacharidy. Dále mohou být sloučeniny podle vynálezu podávány v kombinaci s jinými léčivy.

Sloučeniny obecného vzorce I se podávají v různých dávkových formách, výhodně orálně ve formě tablet, kapslí nebo kapalin. Denní dávka se pohybuje v závislosti na tělesné hmotnosti a stavu pacienta v rozsahu od 3 mg do 5 000 mg, výhodně však v oblasti dávky 10 až 1 000 mg.

Farmakologické údaje zahrnují sérii testů, ve kterých byla hodnocena interakce sloučenin podle vynálezu s intestinálním transportním systémem žlučových kyselin v terminálním tenkém střevu:

1: Příprava membránových vesikul kartáčového lemu z ilea králíků

Příprava membránových vesikul kartáčového lemu ze střevních buněk tenkého střeva byla provedena tak zvanou Mg²⁺ - srážecí metodou. Samci Novozélandských králíků (2 až 2,5 kg tělesná hmotnost) byli usmrceni intravenozní injekcí 0,5 ml vodného roztoku 2,5 mg tetracain HC1, 100 T 61^R a 25 mg mebezoniumjodidu. Tenké střevo bylo vyňato a promyto ledovým fyziologickým roztokem chloridu sodného. Terminálních 7/10 tenkého střeva (měřeno ve směru orální - rektální), tj. terminální ileum, které obsahuje aktivní Na⁺-závislý transportní systém žlučových kyselin) bylo použito pro přípravu membránových vesikul kartáčového lemu. Střeva byla ve váčcích z umělé hmoty pod dusíkem zmražena při -80 ’C. Při přípravě membránových vesikul byla zmražená střeva roztavena při 30 *C ve vodní lázni. Mukosa byla odškrábána a suspendována v 60 ml ledově studeného 12 mM Tris/HCl-pufru (pH 7,1) (300 mM mannit, 5 mM EGTA) 10 mg/1 fenylmethylsulfonylfluorid/1 mg trypsin inhibitor v. sojové boby /32 U/mg/0,5 mg/1 trypsin inhibitor v. hovězí plíce /193 U/mg/5 mg 1 bacitracin. Po zředění na 300 ml ledovou vodou se homogenizuje v Oltraturaxu (10-tyčí, 5KA Werk Staufen, NSR) 3 minuty při -75 % max. výkonu pod chlazením ledem. Po přídavku 3 ml 1 M roztoku MgCl₂ /konečná koncentrace 10 mM/ se nechá 1 minutu stát při 0 ’C. Přídavkem Mg²⁺ buněčné membrány agregují a sráží se s výjimkou membrán kartáčového lemu. Po 15minutovém odstředfování při 3 000 x g /5 000 ot.min^-1, SS-34-rotor/ se sraženina odloží a supernatant, který obsahuje vesikuly kartáčového lemu se odstřečťuje 30 minut při 26 700 x g /15 000 ot.min^-1, SS-34-rotor/. Supernatant se odloží, sraženina se rehomogenizuje v 60 ml 12 mM Tris/HCL-pufru /pH 71//60 mM mannit,

-16CZ 281075 B6 mM EGTA Potter Elvejhem homogenizátorem /Braun, Melsungen, 900 ot.min^-1, 10 zdvihů/. Po přídavku 0,1 ml 1 M roztoku chloridu hořečnatého a 15minutové inkubaci při 0 ’C se znovu odstřeluje 15 minut při 3 000 x g. Supernatant se nakonec ostředfuje ještě jednou 30 minut při 46 000 x g /15 000 ot.min^-1, SS-34-rotor/. Sraženina se vyjme do 30 ml 10 mM Tris/Hepespufru /pH 7,4//300 mM mannit a homogenně resuspenduje 20 zdvihy v homogenozátoru Potter Elvejhem při 1 000 ot.min^-3·. Po 30 minutovém odstřelování při 4 800 g /20 000 ot. min^-1, SS-34-rotor/ se sraženina vyjme do 0,5 až 2 ml Tris/Hepes-pufru /pH 7,4// 280 mM mannitu /konečná koncentrace 20 mg/ml/ a resuspenduje pomocí tuberkulinové stříkačky s jehlou 27 Gauge. Vesikuly se použijí budf bezprostředně po přípravě pro výzkum transportu, nebo se uchovávají při -196 °C po 4 mg podílech v kapalném dusíku.

x o

2. Inhibice příjmu Na -závislého/^JH/ taurocholátu v membránové vesikule kartáčového lemu ilea

Příjem substrátů v membránové vesikule kartáčového lemu byl stanoven tak zvanou filtrační membránovou technikou. 10 μΐ sušpenze vesikulí (100 μΐ proteinu) bylo pipetováno jako kapky na stěnu polystyrénových inkubačních trubiček (11 x 70 mm), které obsahovaly inkubační médium s odpovídajícími ligandy (90 μΐ). Inkubační médium obsahuje 0,75 μΐ = 0,75 μ(?ί /³H/G/. Taurocholát /specifická aktivita: 2,1 Ci/mmol/, /0,5 μΐ 10 mM taurocholát/8,75 μΐ natrium-transpor-pufru /10 mM Tris/Hepes, /pH 7,4//100 mM mannit/100 mM NaCl//Na-T-P/ popřípadě 8,75 μΐ kalium-transportu-pufru /10 mM Tris/hepes /pH 7,4//100 mM Mannitu/100 mM KC1/ /K-T-P/ a 80 μΐ uvedeného roztoku inhibitoru. Rozpustí se v Na-T-pufru popřípadě K-T-pufru. Inkubační médium se filtruje polyvinylidenfluoridovým membránovým filtrem /STHV LO 4NS, 0,45 μιη, mm O, Milipore, Eschborn, NSR/. Smísením vesikulí s inkubačním médiem se nastartuje měření transportu. Koncentrace taurocholátu na počátku inkubace činí 50 μΜ. Po požadované době inkubace (obvykle 1 min) se transport přeruší přídavkem 1 ml ledové chladného roztoku pro toto přerušeni 10 mM Tris/HEPES, /pH 7,4//150 mM KC1/. Vzniklá směs se ihned odsaje ve vakuu 25 až 35.10² Pa přes membránový filtr z nitrátu celulózy /ME 25, 0,45 μΜ, 25 mm průměr, Schleicher « Schuell, Dassell, NSR/. Filtr se potom promyje ml ledově chladného přerušovacího roztoku.

Pro měření příjmu radioaktivního značeného taurocholátu se membránový filtr rozpustí 4 ml Szintillators Quickszint 361 (Zinser Analytik GmbH, Frankfurt, NSR) a měří se radioaktivita scintilačním měřením kapaliny v zařízení TriCarb 2500- (Canberra, Packard GmbH Frankfurt, NSR). Naměřené hodnoty byly po kalibraci zařízení za pomoci standardních vzorků a po korektuře případné chemiluminiscence získány jako dpm /decompositions per minuté/.

Kontrolní hodnoty byly vždy stanoveny v Na-Z-P a K-T-P, rozdíl mezi příjmem v Na-T-P a K-T-P poskytuje Na⁺-závislý transportní podíl. Jako IC₅₀Na⁺ byly označeny ty koncentrace inhibitoru, u kterých byl Na⁺- závislý transportní podíl potlačen

-17CZ 281075 B6 o 50 % vztaženo na kontrolu; odpovídajícím způsobem jsou stanoveny hodnoty IC₂₅ a IC₇₅. Výsledky jsou shrnuty v tabulce 60.

Následující příklady popisují vynález, aniž by jej jakkoliv omezovaly.

Příklady provedení vynálezu

16,9 g (40 mmol) methylesteru kyseliny cholové se umístí do 120 ml M-ethyldiisopropylaminu, nechá reagovat s 11,9 g (48 mmol) difenyl, ethylbromidu a míchá 4 hodiny při 100 ’C. Po ochlazení se přidá 250 g ledu/20 ml kyseliny sírové a extrahuje se ethylacetátem (3x). Spojené organické fáze se suší nad síranem hořečnatým a odpaří. Chromatografií na silikagelu (n-heptan/ethylacetát = 3/1) se získají 11,8 g (20 mmol, 50 %) příklad 1 ^C38^H52°5^/588/MS/FAB' 3-NBA/LiCl: 595 (mLÍ⁺).

Analogicky příkladu 1 se získají příklady uvedené v tabulkách 1 až 4.

-18CZ 281075 B6

Tabulka

Příklad

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

^C32^H48°5 <⁵¹²)' ⁵¹⁹ (M+LÍ⁺)

^C44^H56°5 <⁶⁶⁴)'· ⁶⁷¹ (M+LÍ⁺)

Cl

^C32^H47^C1O5 (⁵⁴⁶)' ⁵⁵³ (M+LÍ⁺)

^C34^H52°5 (⁵⁴⁰>'· ⁵⁴⁷ (M+LÍ⁺) ^C32^H46^C12°5 (⁵⁸⁰>' ⁵⁸⁷ (M+LÍ⁺)

^C33^H50°6 <⁵⁴²)'* ⁵⁴⁹ (M+LÍ⁺)

-19CZ 281075 B6

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

Tabulka 1

pokračováni

Příklad

8 9	CA CCA	C31H47NO5 <513)'· 520 (M+LÍ+) C36H50°5 (562)' 569 (M+L1+)
Tabulka 2
		H,C
	CS f	Η [A
	. i TH		OCS3
	R1 - o H
Příklad	R1		MS (FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LiJ)

10	CA	C32H48°4	(496);	503	(M+LÍ+)
		ň z
11		KM	C44H56°4	(648);	655	(M+LÍ+)
		j
	f
12		jj m	C38H52°4	(572);	579	(M+LÍ+)

*

-20CZ 281075 B6

Tabulka 2 - pokračování
Příklad	R1	MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LÍJ)
13	CH3	C32H47C1O4 <53°)' 537 (M+LÍ+)
14	ÓC„, Cl 1	C34H52°4 <524>' 531 (M+Li+)
15		C32H46C12°4 (564)'* 571 (M+LÍ+)

^C33^H50°5 <⁵²⁶)^{; 533} (M+Li⁺) ^C31^H47^NO4 <⁴⁹⁷)'* ⁵⁰⁴ (M+Li⁺) ^C36^H50°4 <⁵⁴⁶>'’ ⁵⁵³ (M+Li⁺)

-21Tabulka

Příklad

R¹

(FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ) ^C32^H48°4 <⁴⁹⁶>'' ⁵⁰³ (M+Li⁺) ^C44^H56°4 i⁶⁴⁸)'* ⁶⁵⁵ (M+Li⁺) ^C38^H52°4 <⁵⁷²>' ⁵⁷⁹ (M+LÍ⁺) ^C32^H47^C1O4 (⁵³°)' ⁵³⁷ (M+LÍ⁺) ^C34^H52°4 <⁵²⁴>'’ ⁵³¹ (M+LÍ⁺) ^C32^H46^C12°4 <⁵⁶⁴>'’ ⁵⁷¹ (M+LÍ⁺)

-22CZ 281075 B6

Tabulka	3 - pokračování
Příklad	R1	(FAB,3-NBA/LÍCl	nebo LiJ)
25	rr	C33H50°5 (526);	533 (M+Li+)
	H3C0

^C31^H47^NO4 <⁴⁹⁷>'* ⁵⁰⁴ (M+Li⁺) ^C36^H50°4 <⁵⁴⁶>'* ⁵⁵³ (M+Li⁺)

Tabulka 4

Příklad

MS (FAB,3-NBA/LÍCl nebo LÍJ)

^C32^H48°3 (⁴⁸°)^{; 487} (M+Li⁺)

^C38^H52°3 (⁵⁵⁶>^{; 563} (M+LÍ⁺)

-23CZ 281075 B6

MS (FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LÍJ)

Tabulka

Příklad

- pokračování

^C44^H56°3 (⁶³²)' ⁶³⁹ (M+LÍ⁺) ^C32^H47^C1O3 i⁵¹⁴)' ⁵²¹ (M+LÍ⁺) ^C34^H52°3 í⁵⁰⁸>’ ⁵¹⁵ (M+LÍ⁺) ^C32^H46^C12°3 <⁵⁴⁸)'* ⁵⁵⁵ (M+Li⁺) ^C33^H50°4 ⁵¹⁷ <M+Li⁺)

-24CZ 281075 B6

Příklad 37

300 g (0,71 mol) methylesteru kyseliny cholové se míchá pod refluxem se 2,5 1 1,3-diaminopropanu 5 hodin.

Směs se odpaří, zpracuje se 2 1 ledové vody a míchá intenzivně 1 hodinu. Zbytek se odsaje a suší 1 den ve vakuové sušárně při 75 °C.

Výtěžek: 306 g (0,65 mol, 92 %) ^C27^H48^N2°4/⁴⁶⁴// ^ms /FAB, 3-NBA/LÍC1/: 471/M⁺LÍ⁺/

Analogicky příkladu 37 se získají příklady uvedené v tabulkách 5 až 8.

-25CZ 281075 B6

Tabulka

Příklad

MS (FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LiJ)

^C34^H54^N2°4 i⁵⁵⁴)'’ ⁵⁶¹ (M+LÍ⁺) ^C40^H58^N2°4 <⁶³°)'· ⁶³⁷ (M+LÍ⁺) ^C46^H62^N2°4 <⁷⁰⁶)' ⁷¹³ (M+LÍ⁺) ^C34^H53^C1N2°4 <⁵⁸⁸)'’ ⁵⁹⁵ (M+LÍ⁺) ^C36^H58^N2°4 (⁵⁸²>'· ⁵⁸⁹ (M+LÍ⁺) ^C32^H52^C12^N2°4 i⁶²²)'* ⁶²⁹ <M+LÍ⁺)

-26CZ 281075 B6

Tabulka 5 - pokračování

Příklad R¹ MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

44	„.-cr	C32H56N2°4	(584);	591	(M+LÍ+)
45	CX	C33H53N3°4	(555);	562	(M+Li+)
46		C38H56N2°4	(604);	611	(M+LÍ+)

Tabulka 6

Příklad

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LÍJ)

C27H48N2°3	(448) ;	455	(M+LÍ+)
C34H54N2°3	(538);	545	(M+LÍ+)
C40H58N2°3	(614);	621	(M+LÍ+)

-27CZ 281075 B6

Tabulka 6 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LiJ)

^C46^H62^N2°3 (⁶⁹⁰>' ⁶⁹⁷ (M+LÍ⁺) ^C34^H53^C1N2°3 í⁵⁷²>' ⁵⁷⁹ (M+LÍ⁺) ^C36^H58^N2°3 <⁵⁶⁶>'· ⁵⁷³ (M+Li⁺) ^C34^H52^C12^N2°3 <⁶⁰⁶)'* ⁶¹³ (M+LÍ⁺)

54		C35H56N2°4 <568)'· 575 (M+LÍ+)
55		C33H53N3°3 <539)'· 546 (M+LÍ+)
56	00r	C38H56N2°3 <588)’’ 595 (M+LÍ+)

-28CZ 281075 B6

Tabulka 7

Příklad

MS (FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LiJ)

H ⁵⁸ cc

C27H48N2°3	(488);	455	(M+LÍ+)
C34H54N2°3	(538) ;	545	(M+LÍ+)
C40H58N2°3	(614) ;	621	(M+LÍ+)
C46H62N2°3	(690) ;	697	(M+LÍ+)

^C34^H53^C1N2°3 <⁵⁷²>'· ⁵⁷⁹ (M+Li⁺) ^C36^H58^N2°3 <⁵⁶⁶)'· ⁵⁷³ (M+LÍ⁺) ^C34^H52^C12^N2°3 (⁶⁰⁶>'* ⁶¹³ (M+LÍ⁺)

-29CZ 281075 B6

Tabulka 7 - pokračování

Příklad	R1	MS (FAB,3-NBA/LÍCl nebo LÍJ)
64		C35K56H2°4 <5S8>-·	575	(M+LÍ+)
65		C33H53N3°3 <539>'*	546	(M+LÍ+)
66	OCr	C38H56N2°3 <588>'	595	(M+LÍ+)

Tabulka 8

Příklad

MS (FAB,3-NBA/LÍCl nebo LÍJ)

H ⁶⁸

C27H48N2°2	(432);	439	(M+LÍ+)
C34H54N2°2	(522);	529	(M+LÍ+)
C40H58N2°2	(598);	605	(M+LÍ+)
C46H62N2°2	(674);	681	(M+LÍ+)

-30CZ 281075 B6

Tabulka 8 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LiJ)

^C34^H53^C1N2°2 í⁵⁵⁶)'* ⁵⁶³ (M+LÍ⁺) ^c36^H58^N2°2 <⁵⁵°)' ⁵⁵⁷ (M+Li⁺)

^C34^H52^C12^N2°3 <⁵⁹⁰)'* ⁵⁹⁷ (M+Li⁺)

74	„XT-	C35H56N2°3 í552)'* 559 (M+LÍ+)
75	CX	C33H53N3°2 <523)' 530 (M+LÍ+)
76	CCr	C38H56N2°2 (572>7 579 (M+LÍ+)

Analogicky příkladům uvedeným v tabulkách 6 až 8 byly získány příklady uvedené v tabulkách 9 až 11.

-31CZ 281075 B6

Tabulka 9

Příklad X¹

MS(FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

37	nh(ch2)3nh2	C27H48N2°4	(464);	471	(M+Lí+)
77	nh(ch2)4nh2	C28H50N2°4	(478);	485	(M+LÍ+)
78	nh(ch2)5nh2	C29H52N2°4	(492);	499	(M+LÍ+)
79	nh(ch2)6nh2	C30H54N2°4	(506);	513	(M+LÍ+)
80	nh(ch2)7nh2	C31H56N2°4	(520);	527	(M+LÍ+)
81	nh(ch2)8nh2	C32H58N2°4	(534);	541	(M+LÍ+)
82	nh(ch2)9nh2	C33H60N2°4	(548);	555	(M+LÍ+)
83	nh(ch2)10nh2	C34H62N2°4	(562);	569	(M+Li+)
84	nh(ch2)11nh2	C35H64N2°4	(576);	583	(M+Li+)
85	nh(ch2)12nh2	C36H66N2°4	(590);	597	(M+LÍ+)
86	NH(CH2)2o(CH2)2o(CH2)2NH2	C30H54N2°6	(538);	545	(M+Li+)
87	NH(C6H4)CH2(C6H4)NH2	C37H52N2°4	(588);	595	(M+LÍ+)
88	NH(C6H4)O(C6H4)NH2	C36H50N2°5	(590);	597	(M+LÍ+)

-32CZ 281075 B6

Tabulka 10

Příklad X¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

89	nh(ch2)3nh2	C27H48N2°3	(448); 455	(M+LÍ+)
90	nh(ch2)4nh2	C28H50N2°3	(462); 469	(M+Li+)
91	nh(ch2)5nh2	C29H52N2°3	(476); 483	(M+LÍ+)
92	nh(ch2)6nh2	C30H54N2°3	(490); 497	(M+LÍ+)
93	nh(ch2)7nh2	C31H56N2°3	(504); 511	(M+Li+)
94	nh(ch2)8nh2	C32H58N2°3	(518); 525	(M+Li+)
95	nh(ch2)9nh2	C33H60N2°3	(532); 539	(M+Li+)
96	nh(ch2)10nh2	C34H62N2°3	(546); 553	(M+LÍ+)
97	Nh(ch 2)iiNH2	C35H64N2°3	(560); 567	(M+LÍ+)
98	nh(ch2)12nh2	C36H66N2°3	(574); 581	(M+Li+)
99	NH(CH2)20(CH2)20(CH2)2NH2	C30H54N2°5	(522); 529	(M+LÍ+)
100	nh(c6h4)ch2(c6h4)nh2	C37H52N2°3	(572); 579	(M+LÍ+)
101	nh(c6h4)0(c6h4)nh2	C36H50N2°4	(574); 581	(M+LÍ+)

-33CZ 281075 B6

Tabulka 11

Příklad X¹

MS(FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LÍJ)

102	nh(ch2)3nh2	C27H48N2°3	(448);	455	(M+LÍ+)
103	nh(ch2)4nh2	C28H50N2°3	(462);	469	(M+LÍ+)
104	nh(ch2)5nh2	C29H52N2°3	(476);	483	(M+Li+)
105	nh(ch2)6nh2	C30H54N2°3	(490);	497	(M+LÍ+)
106	nh(ch2)7nh2	C31H56N2°3	(504);	511	(M+LÍ+)
107	nh(ch2)8nh2	C32H58N2°3	(518);	525	(M+LÍ+)
108	nh(ch2)9nh2	C33H60N2°3	(532);	539	(M+LÍ+)
109	nh(ch2)10nh2	C34H62N2°3	(546);	553	(M+Li+)
110	nh(ch2)11nh2	C35H64N2°3	(560);	567	(M+LÍ+)
111	nh(ch2)12nh2	C36H66N2°3	(574);	581	(M+Li+)
112	NH(CH2)2O(CH2)2O(CH2)2NH2	C30H54N2°5	(522);	529	(M+LÍ+)
113	nh(c6h4)ch2(c6h4)nh2	C37H52N2°3	(572);	579	(M+Li+)
114	NH(C6H4)O(C6H4)NH2	C36H50N2°4	(574);	581	(M+LÍ+)

-34CZ 281075 B6

Tabulka 12

Příklad X¹

MS(FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LÍJ)

115	nh(ch2)3nh2	C27H48N2°2	(432);	439	(M+LÍ+)
116	nh(ch2)4nh2	C28H50N2°2	(446);	453	(M+Li+)
117	nh(ch2)5nh2	C29H52N2°2	(460) ;	467	(M+LÍ+)
118	nh(ch2)6nh2	C30H54N2°2	(474);	481	(M+LÍ+)
119	nh(ch2)7nh2	C31H56N2°2	(488);	495	(M+LÍ+)
120	nh(ch2)8nh2	C32H58N2°2	(502);	509	(M+LÍ+)
121	nh(ch2)9nh2	C33H60N2°2	(516);	523	(M+LÍ+)
122	nh(ch2)10nh2	C34H62N2°2	(530);	537	(M+LÍ+)
123	nh(ch2)11nh2	C35H64N2°2	(544);	551	(M+LÍ+)
124	nh(ch2)12nh2	C36H66N2°2	(558);	565	(M+LÍ+)
125	NH(CH2)2O(CH2)2°(CH2)2NH2	C30H54N2°4	(506);	513	(M+Li+)
126	NH(C6 h4 )^3(^4)¾	C37H52N2°2	(556);	563	(M+Li+)
127	nh(c6h4)0(c6h4)nh2	C36H50N2°3	(558);	565	(M+LÍ+)

-35CZ 281075 B6

Příklad 128

Ke 100 g (0,245 mol) kyseliny cholové v 500 ml pyridinu se při 0 ’C přikape 23,1 ml (0,294 mol) chloridu kyseliny methansulfonové. Potom se míchá 30 min při 0 *C a 2 h při teplotě místnosti. Směs se nalije na 3 000 ml vody/400 ml konc. kyseliny sírové a extrahuje octanem (3x). Spojené organické fáze se suší síranem hořečnatým a odpaří. Chromatografií na silikagelu (octan/cyklohexan HOAc = 5:5:1) se kvantitativně získá Příklad 128. Pro preparativní účely nebylo nutné další čištění.

I

-36CZ 281075 B6

Příklad 129

ethylenglykolu/100 ml pyridinu

C0₂CH₃

a) 119 g (0,245 mol) Příkladu 128 se v 500 ml/zahřívá 2 h na 100 *C. Směs se nalije do 1 500 ml vody/100 ml konc. kyseliny sírové a extrahuje octanem (3x). Spojené organické fáze se suší síranem hořečnatým a odpaří.

b) Pro esterifikací se zbytek rozpustí ve 1 100 ml methanolické kyseliny chlorovodíkové (vyrobena přikapáním 100 ml acetylchloridu ke 1 000 ml methanolu) a míchá se přes noc při teplotě místnosti. Roztok se nalije do 2 000 ml vody a extrahuje se etherem (3x). Spojené organické fáze se promyjí nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a suší síranem hořečnatým. Odpařením rozpouštědla a rychlou chromatografii na silikagelu (octan, pak octan/MeOH=10/l) se získá 37,1 g (0,08 mol, 33 %) Příkladu 129. C₂₇H₄₆O₆ (466), MS (FAB, 3-NBA/LÍJ): 473 (M+LÍ⁺).

Produkt obsahuje až 10 % 3 α-isomerů, který je popřípadě možno oddělit po odpovídající derivatizaci. *

Analogicky příkladu 129 se vyrobí sloučeniny uvedené v tabulce 13. (Vedle malých podílů α-isomerů obsahují převážně β-isomery).

-37CZ 281075 B6

nebo LÍCI)

130	ho-(ch2)3-o-	H	C28H48°6	(480),	487	(M+Lí+)
131	ho-(ch2)4-o-	H	C29H50°6	(494),	501	(M+LÍ+)
132	ho-(ch2)5-o-	H	C30H52°6	(508),	515	(M+Li+)
133	ho-(ch2)6-o-	H	C31H54°6	(522),	529	(M+Li+)
134	ho(ch2)10-o-	H	C35H62°6	(578),	585 601	(M+LÍ+) (M+Na+)
135	HO-(CH2)2-O-(CH2)2-O-	H	C29H50°7	(510),	617	(M+LÍ+)
136	H3C-CH-CH-O-	H	C28H48°6	(480) ,	487	(M+LÍ+)

OH

Příklad 137

cq₂ch₃

-38CZ 281075 B6

Ke 37,1 g (0,08) Příkladu 129 ve 150 ml pyridinu se při 0 *C přikape 6,6 mol (0,084 mol) chloridu kyseliny methansulfonové. Míchá se 15 min při 0 ’C a 1 h při teplotě místnosti. Reakčni směs se nalije do 500 ml vody a extrahuje octanem (3x). Spojené organické fáze se suší síranem hořečnatým, rozpouštědlo se odtáhne a chromatografií na silikagelu se získá octan/cyklohexan = 3 (1) 37,7 g (0,07 mol, 87 %) mesylátu Příkladu 137. ^C28^C48°8^S í⁵⁴⁴>' MS/FAB, 3-NBA(LÍJ):551(M+LÍ⁺).

co₂ch₃

-39CZ 281075 B6

37,7 g¹ (0,07 mol) mesylátu Příkladu 137 se míchá se 4,95 g (0,076 mol) azidu sodného ve 150 ml sušeného DMF 2 h při 70 ’C. Reakční směs se nalije do vody a extrahuje octanem (3x). Spojené organické fáze se suší (síran hořečnatý) a odpaří. Zbytek se vyjme do toluenu a toluen se opět odpaří v rotační odparce (2x). Výtěžek 34,5 g Příkladu 138 (kvantitativní). Azid se použije bez dalšího čištění přímo pro další stupeň.

co₂ch₃

31,1 g (0,063 mol) Příkladu 138 se hydrogenuje v 500 ml octanu se 20 g Pd/C (10/V) při teplotě místnosti a za normálního tlaku. Katalyzátor se odfiltruje a filtrát se odpaří. Chromatograf ií na silikagelu (octan/methanol/NEt₃5/1/1) se získá 21,0 g (0,45 mol, 71 %) aminu Příkladu 139.

^C27^H47^NO5 <⁴⁶⁵>' MS (FAB, 3-NBA/LÍJ): 472 (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladům 137-139 se vyrobí sloučeniny uvedené v tabulce 14.

-40CZ 281075 B6

Tabulka 14

Příklad	-X2	-X2	MS (FAB,	3-NBA/Lij)
140	h2n-(ch2)3-o-	H	C38H49NO5	(479), 486 (M+Li+)
141	h2n-(ch2)4-o-	H	C29H51NO5	(493), 500 (M+Li+)
142	h2n-(ch2)5-0-	H	C30H53NO5	(507), 514 (M+Li+)
143	h2n-(ch2)6-o-	H	C31H55NO5	(521), 528 (M+Li+)
144	h2n-(ch2)10-o-	H	C35H63NO5	(577), 584 (M+Li+)
145	h2n-(ch2)2-o-(ch2;	)2-°- H	C29H51NO6	(509), 516 (M+LÍ+)
146	h3c-ch-ch2-o-	H	C28N49NO5	(479), 486 (M+LÍ+)

nh₂

Analogicky jako kyselina žlučové kyseliny odpovídající sloučeniny uvedené v tabulkách cholová se nechají reagovat jiné příkladům 15 až 17.

128 až 146 a získají se

a) vychází se z kyseliny desoxycholové:

Tabulka 15

-41CZ 281075 B6

Příklad	β-Χ2	a-X2	MS (FAB,	3-NBA/LiJ)
146	HO-(CH2)2-O-	H	C27H46°5	(450),	457	(M+Lí+)
148	ho-(ch2)3-o-	H	C28H48°5	(464) ,	471	(M+LÍ+)
149	ho-(ch2)5-o-	H	C30H52°5	(492) ,	499	(M+LÍ+)
150	HO-(CH2)10-O-	H	C35H62°5	(562) ,	569	(M+LÍ+)
151	h2n-(ch2)2-o-	H	c 27H47°5	(449),	456	(M+LÍ+)
152	h2n(ch2)5-0-	H	C30H53NO4	(491)	, 498	(M+LÍ+)

b) vychází se z kyseliny chenodesoxycholové

Tabulka 16

Příklad	-X2	-x2/	MS (FAB,	3-NBA/LiJ)
153	HO-(CH2)2-O-	H	C27H46°5	(450),	457	(M+LÍ+)
154	HO-(CH2)3-O-	H	C28H48°5	(464) ,	471	(M+LÍ+)
155	ho-(ch2)5-o-	H	C30H52°5	(492) ,	499	(M+LÍ+)
156	HO-(CH2)10-O-	H	C35H62°5	(562),	569	(M+LÍ+)
157	h2n-(ch2)2-o-	H	C27H47NO4	(449)	, 456	(M+LÍ+)
158	h2n-(ch2)5-o-	H	C30H53NO4	(491)	, 498	(M+LÍ+)

c) vychází se z kyseliny lithocholové

-42CZ 281075 B6

Tabulka 17

klad

159	HO-(CH2	)2-o-	H	C27H46°4	(434),	441	(M+Li+)
160	HO-(CH2	)3-o-	H	C28H48°4	(448),	455	(M+Li+)
161	ho-(ch2	)5-o-	Η	C30H52°4	(476),	483	(M+Li+)
162	ho-(ch2	>io-°-	Η	C35H62°4	(546),	653	(M+Li+)

163 H₂N-(CH₂)₂-OH ^C27^H47^NO3 <⁴³³>/ ⁴⁴⁰ (M+Li⁺)

-43CZ 281075 B6

Příklad 124 (X:g=2an=2)

2,0 g (4,3 mmol) Příkladu 139 se míchá ve 25 ml THF/5 ml triethylaminu se 430 mg (4,3 mmol) anhydridu kyseliny jantarové 30 minut při teplotě místnosti. Reakční směs se nalije na 2N HC1 a extrahuje octanem (3x). Sušením organických fází (síran hořečnatý) a oddestilováním rozpouštědel se získá 2,4 g (4,2 mmol), 98 Příkladu 165.

42,2 g (0,1 mol) methylesteru kyseliny cholové, 300 ml (1,8 mol) N-ethyldiisopropylaminu a 10 ml (0,12 mol) allylbromidu se zahřívá 8 hodin pod refluxem. Po každé hodině reakční doby se vždy přidá 5 ml allylbromidu (DG-kontrola, cyklohexan/octan = 1:1). Reakční směs se nalije na 400 ml konc. kyseliny sírové/2 000 ml vody a extrahuje se octanem (3x). Spojené organické fáze se promyjí jednou IN HC1, vodou a nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Sušením (síran hořečnatý), oddestilováním rozpouštědel a chromatografií zbytku na silikagelu (n-heptan/« octan = 4:1 -> 3:1 -> 2:1) se získá 21,91 g (0,047 mol, 47 %) Příkladu 166.

^C28^H46°5 <⁴⁶²>' MS/FAB, 3-NBA/LiCl/: 469 (M+Lí⁺)

-44CZ 281075 B6

Příklad 167

1) Výroba Thexylboranu: Pod atmosférou argonu se při 0 °C přikape k 85 ml 1 molárního BH₃.THF roztoku (THF) 85 ml 1 molárního roztoku 2,3-dimethylbutenu (THF). Míchá se pak při 0 ’C.

2) Hydroborace: K roztoku připraveného pod 1 se při 0 °C přikape

8,6 g (18,59 mmol) olefinu Příkladu 166 ve 25 ml THF. Po 3 hodinách při 0 ‘C se nechá teplota vystoupit na teplotu místnosti (DG-kontrola). Po 16 h při teplotě místnosti se přikape čerstvě připravený roztok thexylboranu (THF). Znovu se míchá při teplotě místnosti. Když není detegovatelný žádný výchozí materiál, přenese se reakční směs opatrné pod atmosférou argonu za intenzivního míchání do vodného roztoku hydroxidu sodného (na ekvivalent boranu 1 ekvivalent NaOH). Nakonec se za chlazení ledem přikape 30% roztok peroxidu vodíku (2 ekvivalenty na 1 ekvivalent boranu). Po 20 min při 0 *C se 30 min zahřívá na 50 °C. Pro lepší oddělení fází se přidá nasycený roztok chloridu sodného. Vodn fáze se extrahuje ethylacetátem (2x) a spojené organické fáze se promyjí nasyceným roztokem bisulfitu sodného (2x) a nakonec roztokem chloridu sodného (lx). Suší se síranem hořečnatým, po oddestilování rozpouštědla a chromatograf*! na silikagelu (ethylacetát —> ethylacetát/MeOH = 20:1) se získá 5,0 g (10,4 mmol, 56 %) Příkladu 167.

Rf (ethylacetát): 0,18 ^C28^H48°6 <⁴⁸°)' ^MS /^FAB' 3-NAB/LÍCl/: 487 (M+LÍ⁺)

-45CZ 281075 B6

Mimoto byl získán 1 g sekundárního aminu. Rf (ethylacetát): 0,27

Příklad 168

Analogicky příkladům 137-146 byl z příkladu 167 získán příklad 168.

(X-G s a-kongigurací na 3-C) ^C28^H49^NO5 <⁴⁷⁹>/ ^MS (FAB, 3-NBA/LiI), 486 (M+LÍ⁺)

Sloučenina podle příkladu 168 byla nakonec převedena na svůj monoamid dikarboxylové kyseliny podle příkladu 165.

Konečné sloučeniny

Příklad 169

Krok a)

-46CZ 281075 B6

565 mg (1 mmol) Příkladu 165 se rozpustí ve 20 ml tetrahydrof uranu a 5 ml triethylaminu a při 0 “C se k němu nastříkne při 0 ‘C 96 μΐ (1 mmol) ethylesteru kyseliny chlormravenčí. Míchá se 15 minut při 0 'C, nakonec se přidá 630 mg (1 mmol) Příkladu 39”. Míchá se 5 h při teplotě místnosti. Reakčni roztok se 10 minut intenzivně míchá s 10 ml 1 molární kyseliny chlorovodíkové, potom se extrahuje octanem (3x). Spojené organické fáze se promyjí nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a suší nad síranem hořečnatým).

Odpařením rozpouštědla a rychlou chromagrafií na silikagelu /octan/ethanol = 3/1/ se získá 765 mg (0,65 mmol, 65 %) Příkladu 169.

^C71^H107^3°ll i¹¹⁷⁷³' MS/FAB, 3-NBA/LÍC1/, 1184 (M+Li⁺)

Příklad 170

Stupeň b) Zmýdelnéní

707 mg (0,6 nnnol) Příkladu 169 se míchá s 10 ml ethanolu a 5 ml 1 molárního hydroxidu sodného 1,5 h při teplotě místnosti, nakonec se 10 minut intenzivně míchá s 10 g dihydrogenfosforečnanu sodného, extrahuje octanem/ethanolem = 3/l/3x/. Spojené organické fáze se suší (MGSO₄).

Odpařením rozpouštědla, rozetřením v n-heptanu a odsátím se získá 665 mg (0,57 mmol/95 %) Příkladu 170.

^C70^H105^N3°ll <¹¹⁶³>' MS/FAB,3-NBA/LÍCl, 1170 (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladům 169 a 170 se připraví sloučeniny uvedené v tabulce 18.

-47CZ 281075 B6

Tabulka 18

Příklad R¹

MS (FAB, 3-NBA/LÍC1 nebo LiJ)

171 H

172

173

174

175

176

^C57^H95^N3°11 ¹⁰⁰⁴ (M+Li⁺) ^C64^H101^N3°ll (¹⁰⁹⁷)' ¹⁰⁹⁴ (M+LÍ⁺) ^C76^H109^N3°ll <¹²³⁹)/ 1245(M+LÍ⁺) ^C64^H100^C1N3°ll <¹¹²³·)/ 1128 (M+LÍ⁺) ^C66^H105^N3°ll <¹¹¹⁵), ¹¹²² (M+LÍ⁺) ^C65^H103^N3°12 <¹¹¹⁷)' ¹¹²⁴ (M+LÍ⁺) ^C64^H99^C12^N3°11 <¹¹⁵⁵)' ¹¹⁶² (M+LÍ⁺)

177

-48CZ 281075 B6

Tabulka 18 - pokračování

^C68^H103^N3°ll^{P 1144} (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladům 169 a 170 se připraví sloučeniny uvedené v tabulce 19 (vychází se z příkladu 151).

Tabulka 19

Přiklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LiJ)

^C57^H95^N3°10 <⁹⁸¹)^{; 988} <M+Lí⁺) ^C64^H101^N3°10 ¹⁰⁷⁸ (M+LÍ⁺) ^C76^H109^N3°10 (¹²²³)'· ¹²³⁰ (M+LÍ⁺)

183 JCT'	C64H100C1N3°10 1112 (M+LÍ+)
Cl

-49CZ 281075 B6

MS (FAB,3-NBA/LÍCl nebo LÍJ)

Tabulka 19 - pokračování

Příklad R¹

184

185

186

^C66^H105^N3°10 ¹¹⁰⁶ (M+LÍ⁺) ^C65^H103^N3°ll ¹¹⁰⁸ (M+LÍ⁺) ^C64^H99^C12^N3°10 <¹¹³⁹)7 H46 (M+LÍ⁺)

187		C63H100N4°10	(1072);	1079	(M+LÍ+)
188	uu	C68H103N3°10	(1121);	1128	(M+LÍ+)
189	U 13	C70H105N3°10	(1147);	1154	(M+Li+)

Analogicky příkladům 169 a 170 se připraví sloučeniny uvedené v tabulce 20 (vychází se z příkladu 16).

Tabulka 20

-50CZ 281075 B6

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

190

191

H

^57^95^3θ10 (981); 988 (M+Li^) ^C64^H101^N3°10 <¹⁰⁷¹)'· ¹⁰⁷⁸ (M+Li⁺) ^C76^H109^N3°10 <¹²²³)'* ¹²³⁰ (M+Li⁺)

^C64^H100^C1N3°10 <¹¹⁰⁵>'· ¹¹¹² (M+Li⁺) ^C66^H105^N3°10 (M+Li⁺)

195

^C65^H103^N3°ll C¹¹⁰¹)' ¹¹⁰⁸ (M+LÍ⁺)

^C64^H99^C12^N3°10 (¹¹³⁹)' ¹¹⁴⁶ (M+Li⁺)

^C63^H100^N4°10 i¹⁰⁷²)'’ ¹⁰⁷⁹ (M+Li⁺)

C68H103N3°10	(1121);	1128	(M+Li+)
C70H105N3°10	(1147);	1154	(M+Li+)

Analogicky příkladům 169 a 170 se připraví sloučeniny uvedené

-51CZ 281075 B6

Analogicky příkladům 169 a 170 se připraví sloučeniny uvedené v tabulce 21.

Tabulka 21

Příklad R¹

200

MS (FAB,3-NBA/LÍCl nebo LiJ) ^C57^H95^N3°9 <⁹⁶⁵>'* ⁹⁷² (M+Li⁺) cr ^C64^H101^N3°9 (¹⁰⁵⁵)'* ¹⁰⁶² (M+Li⁺)

^C76^H109^N3°9 (¹²⁰⁷)'· ¹²¹⁴ (M+Li⁺) ^C64^H100^C1N3°10 <¹⁰⁸⁹)'' ¹⁰⁹⁶ (M+Li⁺) ^C66^H105^N3°9 <¹⁰⁸³)'’ ¹⁰⁹⁰ (M+Li⁺) ^C65^H103^N3°10 (¹⁰⁸⁵>'‘ ¹⁰⁹² (M+Li⁺)

-52CZ 281075 B6

Tabulka 21 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍCl nebo LÍJ)

^C64^H99^C12^N3°9 ¹¹³⁰ (M+Li⁺)

207	cr	C63H100N4°9	(1056) ;	1063	(M+LÍ+)
208	cxr	C68H103N3°9	(1105);	1112	(M+LÍ+)
209		C70H105N3°9	(1131);	1138	(M+LÍ+)

Analogicky příkladům 169 a 170 se připraví sloučeniny uvedené v tabulce 22.

Tabulka 22

Příklad R¹

210 H

MS (FAB, 3-NBA/LÍCl nebo LÍJ) ^C57^H95^N3°10 i⁹⁸¹)' ⁹⁸⁸ (M+LÍ⁺) ^C64^H101^N3°10 i¹⁰⁷¹)'’ ¹⁰⁷⁸ (M+Li⁺)

Tabulka 22 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB, 3-NBA/LÍC1 nebo LÍJ)

212

213

214

₂₁₅ Π Xjp

Cl

C76H109N3°10	(1223 ) ;	1230	(M+LÍ+)
C64H100C1N3°	10 (1105)	l; 1112 (M+Li+
C66H105N3°10	(1099);	1106	(M+LÍ+)
C65N103N3°10	(1101);	1108	(M+LÍ+)
C64H99C12N3°10 (1139>	; 1146 (M+Li+:
C63H100N4°10	(1072);	1079	(M+LÍ+)
C68H103N3°10	(1121);	1128	(M+LÍ+)
C70H105N3°10	(1147);	1154	(M+Li+)

Analogicky příkladům 169 a 170 se připraví sloučeniny uvedené v tabulce 23.

-54CZ 281075 B6

Tabulka 23

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LÍJ)

220 ^C57^H95^N3°9 (⁹⁶⁵)'* ⁹⁷² (M+L1⁺)

222 cr ^C64^H101^N3°9 <¹⁰⁵⁵)'* ¹⁰⁶² (M+LÍ⁺)

^C76^H109^N3°9 í¹²⁰⁷)'* ¹²¹⁴ (M+LÍ⁺)

^C64^H100^C1N3°10 (¹⁰⁸⁹)'* ¹⁰⁹⁶ (M+Li⁺) ^C66^H105^N3°9 <¹⁰⁸³)'’ ¹⁰⁹⁰ (M+LÍ⁺) ^C65^H103^N3°10 (¹⁰⁸⁵>'' ¹⁰⁹² (M+Li⁺) ^C64^H99^C12^N3°9 <¹¹²³)' ¹¹³⁰ <M+LÍ⁺)

-55CZ 281075 B6

Tabulka 23 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

^C63^H100^N4°9 (¹⁰⁵⁶>'* ¹⁰⁶³ (M+LÍ⁺)

^C68^H103^N3°9 ¹¹¹² (M+LÍ⁺)

^C70^H105^N3°9 <¹¹³D'· ¹¹³⁸ (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladům 169 a 170 se připraví sloučeniny uvedené v tabulce 24.

Tabulka 24

Příklad R¹

230 H ²³¹ cr

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ) ^C57^H95^N3°9 i⁹⁶⁵)'' ⁹⁷² (M+LÍ⁺) ^C64^H101^N3°9 i¹⁰⁵⁵)'* ¹⁰⁶² (M+LÍ⁺) ^C76^H109^N3°9 <¹²⁰⁷>^{? 1214} (M+Li⁺)

-56CZ 281075 B6

Tabulka 24 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ) ^{233 C}64^H100^C1N3°9 i¹⁰⁸⁹)'' ¹⁰⁹⁶ (M+LÍ⁺)

^C66^H105^N3°9 (¹⁰⁸³)'· ¹⁰⁹⁰ (M+Li⁺) ^C65^H105^N3°10 <¹⁰⁸⁵)' ¹⁰⁹² (M+LÍ⁺)

237

238

239

Cl

^C64^H99^C12^N3°9 í¹¹²³>'' ¹¹³⁰ (M+LÍ⁺) ^C63^H100^N4°9 ^C68^H103^N3°9 ^C70^H105^N3°9 (1056) (1105) (1131)

1063

1112

1138 (M+Li⁺) (M+LÍ⁺) (M+Li⁺)

Analogicky příkladům 160 a 170 se připraví sloučeniny uvedené v tabulce 25.

-57CZ 281075 B6

Tabulka 25

Příklad R¹

MS (FAB, 3-NBA/LiCl nebo LiJ) ^C57^H95^N3°8 <⁹⁴⁹)'* ⁹⁵⁶ (M+LÍ⁺)

240 H

^C64^H101^N3°8 i¹⁰³⁹)'' ¹⁰⁴⁶ (M+LÍ⁺)

^C76^H109^N3°8 <¹¹⁹¹)'· ¹¹⁹⁸ (M+LÍ⁺)

^C64^H100^C1N3°8 <¹⁰⁷³)'* ¹⁰⁸⁰ (M+LÍ⁺) ^C66^H105^N3°8 i¹⁰⁶⁷)'* ¹⁰⁷⁴ (M+LÍ⁺)

245

^C65^H103^N3°9 (¹⁰⁶⁹)' ¹⁰⁷⁶ (M+Lí⁺)

Cl ^{246 C}64^H99^C12^N3°8 <¹¹⁰⁷)'' ¹¹¹⁴ (M+LÍ⁺)

-58CZ 281075 B6

Tabulka 25 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB, 3-NBA/LiCl nebo LiJ) ^C63^H100^N4°8 (¹⁰⁴°)'' 1047 (M+LÍ⁺) ^C68^H103^N3°8 (¹⁰⁸⁹>' ¹⁰⁹⁶ (M+Li⁺)

^C70^H105^N3°8 (1115)

1122 (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladům 169 a 170 se připraví sloučeniny uvedené v tabulce 26.

Tabulka 26

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

250 H ^C57^H95^N3°10 <⁹⁸¹)'· ⁹⁸⁸ (M+Li⁺)

251

^C64^H101^N3°10 <¹⁰⁷¹)'· ¹⁰⁷⁸ (M+LÍ⁺)

252

^C76^H109^N3°10 (¹²²³>'· ¹²³⁰ (M+LÍ⁺)

-59CZ 281075 B6

Tabulka 26 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LÍJ)

253

^C64^H100^C1N3°10 <¹¹⁰⁵)'· ¹¹¹² (M+LÍ⁺)

254 óc., ^C66^H105^N3°10 1106 (M+LÍ⁺)

255

^C65^H103^N3°ll (HOD⁷ H°⁸ (M+LÍ⁺) ^C64^H99^C12^N3°10 (H³⁹)'* H⁴⁶ (M+LÍ⁺) ^C63^H100^N4°10 (I⁰⁷²)'^- 1°⁷⁹ (M+Li⁺) ^C68^H103^N3°10 (1121)» H28 (M+LÍ⁺) ^C70^H105^N3°10 (II⁴⁷)⁷ II⁵⁴ (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladům 169 a 170 se připraví sloučeniny uvedené v tabulce 27.

-60CZ 281075 B6

Tabulka 27

Příklad	R1	MS (FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LiJ)
260	H	C57H95N3°9 <965)' 972 (M+LÍ+)
261	cr	C64H101N3°9 <1055)'· ΙΟ82 (M+LÍ+)
262	ΟψΟ 0	C76H109N3°9 i1207)'- 1214 (M+Li+)

^C64^H100^C1N3°9 i¹⁰⁸⁹)'* ¹⁰⁹⁶ (M+Li⁺) ch₃ óc ^ch₃ ^C66^H105^N3°9 (Ι⁹⁸³)' ¹⁰⁹⁰ (M+Li⁺)

^C65^H103^N3°10 <¹⁰⁸⁵>'’ ¹⁰⁹² (M+LÍ⁺) ^C64^H99^C12^N3°9 <¹¹²³)' ¹¹³⁰ (M+LÍ⁺)

-61CZ 281075 B6

Tabulka 27 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍCl nebo LÍJ)

267

^C63^H100^N4°9 f¹⁰⁵⁶)' ¹⁰⁶³ (M+Lí⁺)

^C68^H103^N3°9 ί¹¹⁰⁵)'* I¹³-² (M+Li⁺) ^C70^H105^N3°9 d¹⁰⁵)' HI² (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladům 169 a 170 se připraví sloučeniny uvedené v tabulce 28.

Tabulka 28

Příklad R¹

MS (FAB), 3-NBA/LÍCl nebo LÍJ)

^C57^H95^N3°9 <⁹⁶⁵>'* ⁹⁷² (M+Li⁺) ^C64^H101^N3°9 <1°⁵⁵)'’ 1062 (M+Li⁺)

272

^C76^H109^N3°9 d²⁰⁷)' 1214 (M+Li⁺)

-62CZ 281075 B6

Tabulka 28 - pokračování

Příklad R¹ MS (FAB), 3-NBA/LiCl nebo LiJ)

273	„xr	C64H100C1N3°9 <1089)'· I898 (M+LÍ+)
274	óC ch3	CggH^Q^N^Og (1083); 1090 (M+Lí4)
275	vXr	C65H103N3°10 <1085)'' 1092 (M+LÍ+)
	Cl
276		C64H99C12N3°9 (1123)'' 1130 (M+Li+)
277		C63H100N4°9 (1056); 1063 (M+LÍ+)
278		C68H103N3°9 dl°5); H12 (M+Li+)
279		C70H105N3°9 (1131)? H38 (M+Li+)

Analogicky příkladům 160 a 170 se připraví sloučeniny uvedené v tabulce 29.

-63CZ 281075 B6

Tabulka 29

Příklad R¹

280 H ²⁸¹ cr

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ) ^C57^H95^N3°8 <⁹⁴⁹>^{; 956} (M+LÍ⁺) ^C64^H101^N3°8 <¹⁰³⁹)'' 1046 (M+LÍ⁺)

282

^C76^H109^N3°8 <¹¹⁹¹)'* ¹¹⁹⁸ (M+LÍ⁺)

283	eXT	C64H100C1N3°8 i1073)'* 1080 (M+LÍ+)
	ch3
284	a? ^ch3	C66H105N3°8 <1067)'· 1074 (M+LÍ+)
285	H3C0-a^x’	C65H103N3°9 <1069); 1076 (M+LÍ+)
	Cl
286		C64H99C12N3°8 (1107,; 1114 (M+LÍ+>

-64CZ 281075 B6

Tabulka 29 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍCl nebo LÍJ)

287

^C63^H100^N4°8 (1040);

1047 (M+LÍ⁺)

288

^C68^H103^N3°8 (1089);

1096 (M+LÍ⁺)

(M+Li⁺)

289 příkladům 169

Tabulka

Analogicky v tabulce 30.

uvedené

Příklad

MS (FAB,3-NBA/LÍCl nebo LiJ)

290

291

292

64^H101^N3°9 i¹⁰⁵⁵)'* ¹⁰⁶² (M+LÍ⁺)

76^H109^N3°9 (¹²⁰⁷>'* ¹²¹⁴ (M+LÍ⁺)

57^H95^N3°9 <⁹⁶⁵)'' ⁹⁷² (M+LÍ⁺)

Tabulka 30 - pokračování

Příklad R¹ MS (FAB,3-NBA/LÍCl nebo LÍJ)

293		C64H100C1N3°9 <1089)'· I888 (M+LÍ+)
294	CO ^ch3	C66H105N3°9 (I083)/ 1090 (M+LÍ+)
295		C65H103N3°10 (I085)'* 1092 (M+LÍ+)
	Cl i
296		C64H99C12N3°9 (H23)'* H30 (M+Li+)
297	on	C63H100N4°9 (I056)? 1063 (M+LÍ+)
298	COn	C68H103N3°9 CH05) ? m2 (M+LÍ+)
299	u u	C68H105N3°9 (HOD ' H38 (M+LÍ+)

Analogicky příkladům 160 a 170 se připraví sloučeniny uvedené v tabulce 31.

-66CZ 281075 B6

Tabulka 31

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍCl nebo LÍJ)

^C57^H95^N3°8 <⁹⁴⁹>'‘ ⁹⁵⁶ (M+LÍ⁺) ^C64^H101^N3°8 (¹⁰³⁹>'· ¹⁰⁴⁶ (M+LÍ⁺)

302

^C76^H109^N3°8 <¹¹⁹D'’ ¹¹⁹⁸ (M+LÍ⁺)

^C64^H100^C1N3°8 <¹⁰⁷³)'· Ιθθθ (M+LÍ⁺) ^C66^H105^N3°8 (I⁰⁸⁷); 1074 (M+LÍ⁺) ^C65^H103^N3°9 (1°⁶⁹)'· 1076 (M+LÍ⁺) ^C64^H99^C12^N3°8 ^{(1107)í 1114} <^M+Li⁺)

-67CZ 281075 B6

Tabulka 31 - pokračování

Příklad R¹ MS (FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LiJ)

307		C63H100N4°8	(1040); 1047	(M+LÍ+)
308	UV	C68H103N3°8	(1089); 1096	(M+LÍ+)
309	V V	C70H105N3°8	(1115); 1022	(M+LÍ+)

Analogicky příkladům 169 a 170 se připraví sloučeniny uvedené v tabulce 32.

Tabulka 32

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LiJ)

310 H ^C57^H95^N3°8 049); 956 (M+Li⁺) ^{311 C}64^H101^N3°8 (¹⁰³⁹); 1046 (M+LÍ⁺)

312

^C76^H109^N3°8 (¹¹⁹D; 1198 (M+LÍ⁺)

-68CZ 281075 B6

Tabulka 32 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LÍJ)

^C64^H100^C1N3°8 (¹⁰⁷³)'* ¹⁰⁸⁰ (M+LÍ⁺) ^C66^H105^N3°8 d⁰⁶⁷); ΙΟ⁷⁴ (M+Li⁺) ^C65^H103^N3°9 (1069); 1076 (M+LÍ⁺)

Cl ³¹⁶ d-ώ^ ^C64^H99^C12^N3°8 d¹⁰⁷)? 1114 (M+LÍ⁺)

317	O	C63H100N4°8 (1°40)'*	1047	(M+Li+)
318	'O	C68H103N3°8 (1089);	1096	(M+LÍ+)
319	0/3	C70H105N3°8 (IH5 ) '	1122	(M+Li+)

Analogicky příkladu 169 a uvedené v tabulce 3 3.

170 se připraví následující sloučeniny

H

-69CZ 281075 B6

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LÍJ)

320 H ³²¹ or

^C57^H95^N3°7 (⁹³³)' ⁹⁴⁰ (M+LÍ⁺) ^C64^H101^N3°7 <¹⁰²³)'* 1θ³θ (M+LÍ⁺) ^C76^H109^N3°7 ¹⁰⁸² (M+LÍ⁺)

^C64^Hioo^c1N3°7 (1057); 1064 (M+Li⁺) * ^C66^H105^N3°7 í¹⁰⁵¹)'* 1058 (M+LÍ⁺) ^C35^H1O3^N3°8 (¹⁰⁵³)'* ¹⁰⁶⁰ (M+LÍ⁺) ^C64^H99^C12^N3°7 (¹⁰⁹¹)'’ ¹⁰⁹⁸ (M+Li⁺)

^C63^H100^N4°7 Η⁰²⁴)' ¹⁰³¹ (M+LÍ⁺)

^C68^H103^N3°7 (¹⁰⁷³)' ¹⁰⁸⁰ (M+LÍ⁺)

-70CZ 281075 B6 *

Tabulka 33 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍCl nebo LÍJ)

^C70^H105^N3°7 (1099); 1106 (M+LÍ⁺)

Přiklad 330

g (17 mmol) Příkladu 1 se rozpustí v 10 ml ethanolu, přidá se 50 ml 1 molárního hydroxidu sodného a míchá se 2 h při teplotě místnosti, nakonec se intenzivně promíchá se 100 g dihydrogenfosforečnanu sodného, extrahuje (3x) octanem/ethanolem = 5/1. Spojené organické fáze se suší (síran hořečnatý).

Odpařením rozpouštědla, rozetřením s diisopropyletherem a odsátím se získá 9,08 g (15,8 mmol, 93 %) Příkladu 330 .

^C37^H50°5 <⁵⁷⁴>' MS/FAB,2-NBA (LÍCI): 581 (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladu 330 se získají příklady v tabulkách 34 až 37.

-71CZ 281075 B6

Tabulka 34

	H,C
		HO
		®,(hT>
		ji —	OH
	R1 - 0	'ZH,«
Příklad	R1		MS (FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LiJ)

^C31^H46°5 (⁴⁹⁸)'* ⁵⁵⁰ (M+Li⁺)

332

333

^C43^H54°5 (650); 657 (M+LÍ⁺) ^C31^H45^C1O5 <⁵³²)'* ⁵³⁹ (M+Li⁺)

334

335

^C33^H50°5 (526); 553 (M+Li⁺) ^C31^H44^C12°5 (⁵⁵⁶>'’ ⁵⁷³ (M+LÍ⁺)

^C32^H48°6 (⁵²⁸)' ⁵³⁵ (M+Li⁺)

-72CZ 281075 B6

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LÍJ) ^C30^H45^NO5 (499); 506 (M+Li⁺)

^C35^H48°5 í⁵³⁸)' ⁵⁴⁵ (M+LÍ⁺)

Tabulka 35

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LÍJ)

339

340

^C31^H46°4 (482); 489 (M+LÍ⁺) ^C43^H54°4 i⁶³⁴)' ⁶⁴¹ (M+LÍ⁺)

341 „O ^C31^H45^C1O4 <⁵¹⁶>^{; 523} (M+LÍ⁺)

342

^C33^H50°4 (⁵¹°)^{; 517} (M+LÍ⁺)

-73CZ 281075 B6

Tabulka 35 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LÍJ)

	Cl
343		C31H44C12°4 (55°)'	557 (M+Li+)
344		C3 2H48°5 <512>'· 53-9	(M+LÍ+)
345	H iTh	C30H45N04 (483)? 490 (M+LÍ+)
346		C35H48°4 i522)'' 529	(M+Li+)
347	X	C37H50°4 (558>'· 565	(M+LÍ+)

Tabulka 36
		ch3
			\ 0
R1 - 0			OH
H	CH
Příklad R1			MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LÍJ)

^C31^H46°4 (⁴⁸²>^{; 489} (M+LÍ⁺)

-74CZ 281075 B6

Tabulka 36 - pokračování

350	„-cr	C31H45C1O4 <516)' 523 (M+LÍ+)
351	ch3	C33H50°4 <510>'· 517 (M+LÍ+)
352	Cl C.JČT	C31H44C12°4 <55°)'· 557 (M+LÍ+)
353		C32H48°5 <512)'* 519 (M+LÍ+)
354		C30H45NO4 <483>'' 490 (M+LÍ+)
355	uCO	C35H48°4 <522>; 529 (M+LÍ+)
356		C37H50°4 <558>'· 565 (M+LÍ+)

-75- *

Tabulka 37

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LiJ)

357

358

^C31^H46°3 (⁴⁶⁶)' ⁴⁷³ (M+Lí⁺) ^C43^H54°3 (⁶¹⁸>'· ⁶²⁵ (M+LÍ⁺)

359

^C31^H45^C1O3 í⁵⁰°)' ⁵⁰⁷ (M+LÍ⁺)

360

^C33^H50°3 <⁴⁹⁴)'* ⁵⁰¹ (M+LÍ⁺)

361

Cl

^C31^H44^C12°3 (⁵³⁴>' ⁵⁴¹ (M+LÍ⁺)

^C32^H48°4 i⁴⁹⁶)'' ⁵⁰³ (M+LÍ⁺)

-76CZ 281075 B6

Tabulka 37 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

^C30^H45^NO3 <⁴⁶⁷)'* ⁴⁷⁴ (M+LÍ⁺)

^C35^H48°3 i⁵⁰⁶)'’ ⁵¹³ (M+LÍ⁺)

^C37^H50°3 <⁵⁴²)^{; 549} (M+Li⁺)

Příklad 366

Stupeň a)

rozpustí ve 20 ml tetra0 ’C se přidá stříkačkou chlormravenčí. Míchá se 465 mg (1 mmol) Příkladu

574 mg (1 mmol) Příkladu 330 se hydrofuranu a 5 ml triethylaminu a při 108 μΐ (1,1 mmol) ethylesteru kyseliny 15 minut při 0 ^eC, nakonec se přidá 139.

-77CZ 281075 B6

Míchá se 4 h při teplotě místnosti.

Reakční roztok se intenzivně promíchá 10 minut s 10 ml 1 molární kyseliny chlorovodíkové a potom se extrahuje octanem (3x). Spojené organické fáze se promyjí nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a suší (síran hořečnatý).

Odpařením rozpouštědla a rychlou chromatografií na silikagelu (óctan/ethanol=9/l) se získá 755 mg (0,74 mmol, 74 %) Příkladu 366.

^C64^H96^N09 MS(FAB,3-NBA/LÍC1), 1028 (M+LÍ⁺)

Stup, b) Zmýdelnění

715 mg (0,7 mmol) Příkladu 366 se míchá s 10 ml ethanolu a 5 ml molárního hydroxidu sodného, nakonec se intenzivně rozmíchá s 10 g dihydrogenfosforečnanu sodného po 10 minut a extrahuje octanem/ethanolem = 3/1 (3x). Spojené organické fáze se suší (MgSO₄).

Odpařením rozpouštědel, rozetřením s diisopropyletherem a odsátím se získá 670 mg (0,67 mmol, 95 % ) Příkladu 367.

^C63^H93^NO9 <¹⁰⁰⁷)/ MS/FAB, 3-NBA(LÍCl), 1014 (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladům 325 a 326 se získají sloučeniny uvedené v tabulce 35.

-78CZ 281075 B6

Přiklad 368

024 mg (1,1 mmol) Příkladu 328 se rozpustí v 5 ml ethanolu, přidá se 200 mg palladia na uhlí (10%) a třepe se 1 h při teplotě místnosti pod atmosférou vodíku.

Při zpracování se odfiltruje katalyzátor a filtrát se odpaří. Chromatografií na silikagelu (ethylacetát/ethanol = 1/1) se získá 780 mg (0,92 mmol), 84 % Příkladu 490.

^C5O^H83^NO9 <⁸⁴¹h MS(FAB,3-NBA/LiCl), 848 (M+Li⁺)

Analogicky příkladům 366 a 367 byly připraveny sloučeniny uvedené v tabulce 38.

-79CZ 281075 B6

Tabulka 38

Příklad R¹ MS (FAB,3-NBA/LÍCl nebo LÍJ) cr ^C57^H89^NO9 ⁹³⁸ (M+LÍ⁺)

370

^C69^H97^NO9 <¹⁰⁸³)'* ¹⁰⁹⁰ (M+LÍ⁺)

371

372

^C57^H88^C1NO9 i⁹⁶⁵)'^{- 972} (M+LÍ⁺) ^C59^H9₃N°9 (959); 966 (M+LÍ⁺)

^C58^H91^NO10 (⁹⁶¹>^{; 968} (M+Li⁺)

374

Cl

Ar ^C57^H87^C12^NO9 <⁹⁹⁹)'’ ¹⁰⁰⁶ (M+LÍ⁺)

-80CZ 281075 B6

Tabulka 38 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

^C56^H88^N2°9 (⁹³²>'' ⁹³⁹ (M+LÍ⁺) ^C61^H91^NO9 <⁹⁸¹)'* ⁹⁸⁸ (M+Li⁺)

Analogicky příkladům 366, 367 a 368 byly připraveny sloučeniny uvedené v tabulce 39.

Tabulka 39

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LiJ)

377 H ^C50^H83^NO8 <⁸²⁵)' ⁸³² (M+Li⁺)

^C57^H89^NO8 (⁹¹⁵>^{; 922} (M+LÍ⁺) ^C63^H93^NO8 (I)'* ⁹⁹⁸ (M+Li⁺)

-81CZ 281075 B6

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍCl nebo LÍJ)

380

^C69^H97^NO8 <¹⁰⁶⁷)'* ¹⁰⁷⁴ (M+Li⁺)

381

^C57^H88^C1no ₈ (949); 956 (M+LÍ⁺)

382

^C58^H94^NO8 <⁹⁴³>'* ⁹⁵⁰ (M+LÍ⁺)

383

384

Cl

^C57^H87^C12^N°8 (983); 990 (M+LÍ⁺)

^C58^H91^N09 <⁹⁴⁵)'* ⁹⁵² (M+LÍ⁺)

^C56^H88^N2°8 <⁹¹⁶>'' ⁹²³ (M+LÍ⁺) ^C61^H91^NO8 (⁹⁶⁵)'* ⁹⁷² (M+Li⁺)

Analogicky příkladům 366, 367 a 368 byly připraveny sloučeniny uvedené v tabulce 40.

-82CZ 281075 B6

Tabulka 40

Příklad R¹ MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

387 H ³⁸⁸ cr

C50H83NO8	(825);	832	(M+LÍ+)
C57H89N08	(915);	922	(M+LÍ+)
C63H93NO8	(991);	998	(M+LÍ+)

390

391

392

^C69^H97^NO8 <¹⁰⁶⁷)'' ¹⁰⁷⁴ (M+LÍ⁺) ^C57^H88^C1NO8 <⁹⁴⁹>'* ⁹⁵⁶ (M+LÍ⁺) ^C59^H9₄N°8 (943); 950 (M+LÍ⁺)

393

Cl

^C57^H87^C12^NO8 <⁹⁸³)'* ⁹⁹⁰ (M+LÍ⁺)

-83CZ 281075 B6

Tabulka 40 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

^C58^H91^N09 (⁹⁴⁵)' ⁹⁵² (M+LÍ⁺) ^C56^H88^N2°8 (⁹¹⁶>^{; 923} (M+Li⁺) ^C61^H91^NO9 (⁹⁶⁵)' ⁹⁷² (M+Li⁺)

Analogicky příkladům 366, 367 a 368 byly připraveny sloučeniny uvedené v tabulce 41.

Tabulka 41

Příklad R¹

397 H

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ) ^C50^H83^NO7 í⁸⁰⁹)'* ⁸¹⁶ (M+Li⁺) ^C57^H89^NO7 í⁸⁹⁹)'* ⁹⁰⁶ (M+Li⁺)

-84CZ 281075 B6

Tabulka 41 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

^C63^H93^NO7 <⁹⁷⁵)'’ ⁹⁸² (M+Li⁺) ^C69^H97^NO7 (¹⁰⁵¹)'· 1058 (M+LÍ⁺) ^C57^H88^C1NO7 <⁹³³)'* ⁹⁴⁰ (M+LÍ⁺) ^C59^H9₄N°7 (927); 934 (M+Li⁺) ^C57^H87^C12^NO7 <⁹⁶⁷>'* ⁹⁷⁴ (M+LÍ⁺) ^C58^H91^NO8 <⁹²⁹)'* ⁹³⁶ (M+LÍ⁺) ^C56^H88^N2°7 (⁹⁰°)'’ ⁹⁰⁷ (M+LÍ⁺) ^C61^H91^NO7 (⁹⁴⁹>'· ⁹⁵⁶ (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladům 366, 367 a 368 byly získány sloučeniny uvedené v tabulce 42.

-85CZ 281075 B6

Tabulka 42

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

407 H

408

409

410

^,n

412

C50H83NO8	(825); 832	(M+LÍ+)
C57H89NO8	(915); 922	(M+LÍ+)
C63H93NO8	(991); 998	(M+Li+)
C69H97NO8	(1067); 1074 (M+LÍ+)
C57H88C1NO	8 (949); 956 (M+LÍ+)
C59H94NO8	(943); 950	(M+Lí+)

^C57^H87^C12^NO8 <⁹⁸³)'* ⁹⁹⁰ (M+LÍ⁺)

-86CZ 281075 B6

Tabulka 42 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LÍJ)

414 ^H3^C

^C58^H91^NO9 <⁹⁴⁵>'' ⁹⁵² (M+Li⁺)

^C56^H88^N2°8 <⁹¹⁶)'* ⁹²³ (M+LÍ⁺) ^C61^H91^NO8 <⁹⁶⁵)' ⁹⁷² (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladům 366, 367 a uvedené v tabulce 43.

368 byly připraveny sloučeniny

Tabulka 43

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ) ^C50^H83^N07⁽⁸⁰⁹⁾’* ⁸¹⁶ (^M+Li+) ^C57^H ₈₉ ^NO7 (899); 906 (M+Li⁺) ^C63^H93^NO7 <⁹⁷⁵>^{; 982} (M+Li⁺)

-87CZ 281075 B6

Tabulka 43 - pokračování

Příklad R¹

420

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LÍJ) ^C69^H97^NO7 <¹⁰⁵¹)' ¹⁰⁵⁸ (M+LÍ⁺)

^C57^H88^C1N07 i⁹³³)'' ⁹⁴⁰ (M+LÍ⁺) ^C59^H94^N07 <⁹²⁷)'· ⁹³⁴ (M+Li⁺) ^C57^H87^C12^NO7 (^96?)' ⁹⁷⁴ (M+LÍ⁺) ^C58^H91^NO8 <⁹²⁹)'· ⁹³⁶ (M+Li⁺) ^C56^H88^N2°7 (⁹⁰°)' ⁹⁰⁷ (M+LÍ⁺) ^C61^H91^NO7 (⁹⁴⁹)' ⁹⁵⁶ (M+Li⁺)

Analogicky příkladům 366, 367 a 368 byly připraveny sloučeniny uvedené v tabulce 44.

-88CZ 281075 B6

Tabulka 44

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

427 H ^C50^H83^NO7 <⁸⁰⁹)'’ ⁸¹⁶ (M+Li⁺)

^C57^H89^NO7 <⁸)'* ⁹⁰⁶ (M+LÍ⁺)

429

430

^C63^H93^NO7 (⁹⁷⁵)'* ⁹⁸² (M+LÍ⁺) ^C69^H97^NO7 1058 (M+Li⁺)

^C57^H88^C1NO7 <⁹³³>'* ⁹⁴⁰ (M+LÍ⁺) ^C59^H94^NO7 <⁹²⁷)'’ ⁹³⁴ (M+LÍ⁺) ^C57^H87^C12^NO7 <⁹⁶⁷>'* ⁹⁷⁴ (M+Lí⁺)

-89CZ 281075 B6

Tabulka 44 - pokračování Příklad R1	MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)
434 HjCO-C^	C58H91NO8 i929)' 936 (M+LÍ+)
435 N	C56H88N2°7 <900>'* 907 (M+LÍ+)

436

^C61^H91^NO7 í⁹⁴⁹)' ⁹⁵⁶ (M+Li⁺)

Analogicky příkladům 366, uvedené v tabulce 45.

367 a

368 byly připraveny sloučeniny

Tabulka 45

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

C50H83NO6	(793) ;	800	(M+LÍ+)
C57H89NO6	(883);	890	(M+LÍ+)
C63H93NO6	(959);	966	(M+LÍ+)

-90CZ 281075 B6

Tabulka 45 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LiJ)

440

^C69^H97^NO6 (¹⁰³⁵>'' ¹⁰⁴² (M+LÍ⁺)

^C57^H88^C1NO6 <⁹¹⁷)' ⁹²⁴ (M+LÍ⁺)

442

443

444

^C59^H94^NO6 <⁹¹¹)'* ⁹¹⁸ (M+LÍ⁺) ^C57^H87^C12^NO6 (⁹⁵¹>^{; 958} (M+Li⁺) ^C58^H91^NO7 <⁹¹³)'* ⁹²⁰ (M+Li⁺)

^C56^H88^N2°6 (⁸⁸⁴)'* ⁸⁹¹ (M+LÍ⁺) ^C61^H91^NO6 (⁹³³)' ⁹⁴⁰ (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladům 366, 367 a 368 byly připraveny sloučeniny uvedené v tabulce 46.

-91CZ 281075 B6

Tabulka 46

Příklad R¹ MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

447 H

448

450

^C50^H83^NO9 <⁸²⁵)' ⁸³² (M+LÍ⁺) ^C57^H89^NO8 (⁹¹⁵>^{; 922} (M+LÍ⁺) ^C63^H93^NO8 <⁹⁹¹)'’ ⁹⁹⁸ (M+LÍ⁺) ^C69^H97^NO8 (I⁰⁶⁷)'* 1074 (M+Lí⁺) ^C57^H88^C1NO8 <⁹⁴⁹)' ⁹⁵⁶ (M+LÍ⁺) ^C59^H94^NO8 (⁹⁴³)' ⁹⁵⁰ (M+LÍ⁺) ^C57^H87^C12^NO8 (⁹⁸³>^{; 990} (M+Li⁺)

-92$1

Tabulka 46 - pokračováni

Příklad R¹ MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

454		C58H91NO9	(945); 952	(M+Li+)
455	ζΓ'	C56H88N2°8	(916); 923	(M+LÍ+)
456		C61H91NO8	(965); 972	(M+LÍ+)

Analogicky příkladům 366, uvedené v tabulce 47.

367 a

368 byly připraveny sloučeniny

Tabulka 47

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LÍJ)

457	H	C50H83NO7	(809);	816	(M+LÍ+)
458		C57H89NO7	(899) ;	906	(M+LÍ+)
459		C63H93NO7	(975);	982	(M+LÍ+)

f

-93CZ 281075 B6

Tabulka 47 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LÍJ)

460

^C69^H97^N07 (I⁰⁵¹)'* 1058 (M+LÍ⁺)

464

^C57^H88^C1NO7 <⁹³³>? ⁹⁴⁰ (M+LÍ⁺)

C₅₉ ^H94^NO7 (927); 934 (M+LÍ⁺) ^C57^H87^C12^NO7 <⁹⁶⁷)'' ⁹⁷⁴ (M+LÍ⁺) ^C58^H91^NO8 (⁹²⁹>'· ⁹³⁶ (M+LÍ⁺) ^C56^H88^N2°7 <⁹⁰⁰)'· ⁹⁰⁷ (^M+Li+) ^C61^H91^NO7 i⁹⁴⁹)'' ⁹⁵⁶ (M+Lí⁺)

Analogicky příkladům 366, 367 a 368 byly připraveny sloučeniny uvedené v tabulce 48.

-94CZ 281075 B6

Tabulka 48

Příklad R¹ MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

467 H

469

470

^C50^H83^NO7 <⁸⁰⁹)'· ⁸¹⁶ (M+LÍ⁺) ^C57^H89^NO7 <⁸); ⁹⁰⁶ (M+LÍ⁺) ^C63^H93^NO7 <⁹⁷⁵>'* ⁹⁸² (M+LÍ⁺) ^C69^H97^N07 (¹⁰⁵¹)» 1058 (M+LÍ⁺) ^C57^H88^C1NO7 <⁹³³)' ⁹⁴⁰ (M+LÍ⁺) ^C59^H94^N07 <⁹²⁷>'’ ⁹³⁴ (M+LÍ⁺) ^C57^H87^C12^N°7 (967); 974 (M+LÍ⁺)

-95CZ 281075 B6

Tabulka 48 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍCl nebo LÍJ)

474

H

^C58^H91^NO8 <⁹²⁹)'* ⁹³⁶ (M+LÍ⁺)

475

^C56^N88^N2°7 (⁹⁰°)'’ ⁹⁰⁷ (M+LÍ⁺)

476

^C61^H91^N07 <⁹⁴⁹>'* ⁹⁵⁶ (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladům 366, uvedené v tabulce 49.

367 a

368 byly připraveny sloučeniny

Tabulka 49

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍCl nebo LÍJ)

C50H83NO6	(793);	800	(M+LÍ+)
C57H89NO6	(883) ;	890	(M+Li+)
C63H93NO6	(959);	966	(M+LÍ+)

-96CZ 281075 B6

Tabulka 49 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

^C69^H97^NO6 i¹⁰³⁵)'* 1042 (M+Li⁺)

JOT ch₃ ^{483 C}57^H88^C1NO6 (⁹¹⁷>'” ⁹²⁴ (M+LÍ⁺) ^C59^H94^NO6 <⁹¹¹>'· ⁹¹⁸ (M+Li⁺) ^C57^H87^C12^NO6 í⁹⁵¹)' ⁹⁵⁸ (M+LÍ⁺)

484

^C58^H91^N°7 (913); 920 (M+LÍ⁺)

^C56^H88^N2°6 <⁸⁸⁴)'* ⁸⁹¹ (M+LÍ⁺) ^C61^H91^NO6 <⁹³³)' ⁹⁴⁰ (M+Li⁺)

Analogicky příkladům 366, 367 a 368 byly připraveny sloučeniny uvedené v tabulce 50.

-97CZ 281075 B6

Tabulka 50

Příklad R¹ MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

487

488

H

^C50^H8₃N°7 (809); 816 (M+LÍ⁺) ^C57^H89^N07 í⁸)'* ⁹⁰⁶ (M+LÍ⁺) ^C63^H93^NO7 i⁹⁷⁵)' ⁹⁸² (M+LÍ⁺) ^C69^H97^NO7 i¹⁰⁵¹)'' ¹⁰⁵⁸ (M+LÍ⁺) ^C57^H88^C1NO7 i⁹³³)? 940 (M+LÍ⁺) ^C59^H94^NO7 (⁹²⁷)'* ⁹³⁴ (M+Li⁺) ^C57^H87^C12^NO7 (⁹⁶⁷)'‘ ⁹⁷⁴ (M+Li⁺)

-98CZ 281075 B6

Tabulka 50 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍCl nebo LiJ)

^C58^H91^NO8 <⁹²⁹>'* ⁹³⁶ (M+Li⁺)

495

^C56^H88^N2°7 <⁹⁰°)'’ ⁹⁰⁷ (M+LÍ⁺)

^C61^H91^NO7 <⁹⁴⁹)'' ⁹⁵⁶ (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladům 366, 367 a 368 byly připraveny sloučeniny uvedené v tabulce 51.

Tabulka 51

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍCl nebo LÍJ)

497	H	C50H83NO6	(793);	800	(M+LÍ+)
498		C57H89NO6	(883);	890	(M+LÍ+)
499		C63H93NO6	(959);	966	(M+LÍ+)

-99CZ 281075 B6

Tabulka 51 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LÍJ)

^C69^H97^NO6 <¹⁰³⁵)'· 1042 (M+LÍ⁺) ^C57^H88^C1NO6 <⁹¹⁷>'· ⁹²⁴ (M+LÍ⁺)

502

503

^C59^H94^NO6 <⁹¹¹>' ⁹¹⁸ (M+LÍ⁺) ^C57^H87^C12^NO6 (⁹⁵¹>^{; 958} (M+Li⁺)

^C58^H91^NO7 <⁹¹³)' ⁹²⁰ (^M+Lí⁺) ^C56^H88^N2°6 <⁸⁸⁴)' ⁸⁹¹ (M+LÍ⁺) ^C61^H91^NO6 (⁹³³)' ⁹⁴⁰ (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladům 366, 367 a 368 byly získány sloučeniny uvedené v tabulce 52.

♦

-100CZ 281075 B6

Tabulka 52

Příklad R¹ MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

507 H

C50H83NO6	(793);	800	(M+LÍ+)
C57H89NO6	(883);	890	(M+LÍ+)
C63H93NO6	(959);	966	(M+LÍ+)

510

^C69^H97^NO6 <¹⁰³⁵)' ¹⁰⁴² (M+Lí⁺)

^C57^H8₈C1NO₆ (917); 924 (M+LÍ⁺) ^C59^H94^NO6 ⁹¹⁸ (M+LÍ⁺) ^C57^H87^C12^NO6 <⁹⁵¹>'* ⁹⁵⁸ (M+Li⁺)

-101CZ 281075 B6

Tabulka 52 - pokračováni

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

514

^C58^H91^NO7 <⁹¹³)'· ⁹²⁰ (M+Li⁺) ^C56^H88^N2°6 <⁸⁸⁴)'· ⁸⁹¹ (M+LÍ⁺)

516

940 (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladům 368, 367 a 366 byly získány sloučeniny uvedené v tabulce 53.

Tabulka 53

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

517	H	C50H83NO5	(777); 784	(M+Li+)
518		C57H89NO5	(867); 874	(M+LÍ+)
519		C63H93NO5	(943); 950	(M+LÍ+)

-102CZ 281075 B6

Tabulka 53 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

520

^C69^H97^NO5 (¹⁰¹⁹)'· 1026 (M+Li⁺)

521 ^C57^H88^C1NO5 (⁹°1)'· ⁹⁰⁸ (M+Li⁺)

522

Cl ^C59^H94^NO5 i⁸⁹⁵)' ⁹⁰² (M+Li⁺)

523

^C57^H ₈₇ ^C12^NO5 (935); 942 (M+Li⁺)

525

524

^C58^H91^NO6 (^89?)'* ⁹⁰⁴ (M+Li⁺)

^C56^H88^N2°5 (⁸⁶⁸>^{; 875} (M+Li⁺)

^C61^H91^N05 (⁹¹⁷>^{; 924} (M+Li⁺)

-103CZ 281075 B6

116 mg (0,1 mmol) Příkladu 170 se předloží do 5 ml tetrahydrof uranu, stříkačkou se přidá 28,2 μΐ (0,2 mmol) triethylaminu, ochladí se na 0 ’C, stříkačkou se přidá 14,5 μ.1 (0,15 mmol) ethylesteru kyseliny chlormravenčí, míchá se 15 minut při teplotě místnosti, nakonec se rozpustí 44 mg (0,35 mmol) taurinu ve 3 ml 0,1 molárního roztoku hydroxidu sodného a přikape se ke směsi, míchá se 1 h při teplotě místnosti, rozmíchá s 10 g dihydrogenfosf orečnanu sodného po 10 minut a extrahuje ethylacetátem/ethanolem 4/1 (3x). Spojené organické fáze se suší (síran hořečnatý) a odpaří. Chromatografli na silikagelu (ethylacetát/ethanol = 3/2) se získá 76 mg (0,06 mmol, 60 %) Příkladu 527.

^C72^HH0^N4^SO13 (1270), MS (FAB,3-NBA/LÍI), 1277 (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladu 527 byly příklady v tabulkách 18 až 33 převedeny na taurinový konjugát.

Přiklad 528

-104CZ 281075 B6

116 mg (0,1 mmol) Příkladu 170 se předloží do 5 ml tetrahydrofuranu, stříkačkou se přidá 28,2 μΐ (0,2 nunol) triethylaminu, ochladí se na 0 ’C, stříkačkou se přidá 14,5 μΐ (0,15 mmol) ethylesteru kyseliny chlormravenčí, míchá se 15 minut při teplotě místnosti a nakonec se přikape 26,5 mg (0,35 mmol) glycinu rozpuštěného ve 3 ml 0,1 molárního hydroxidu sodného. Míchá se potom 1 h při teplotě místnosti, rozmíchá 10 minut s 10 g dihydrogenfosforečnanu sodného a (3x) extrahuje ethylacetátem/ethanolem 4/1. Spojené organické fáze se suší (síran hořečnatý) a odpaří. Chromatografií na silikagelu (ethylacetát/ethanol = 3/2) se získá 74 mg (0,0606 mmol, 60,6 % ) Příkladu 528.

^C72^H108^N4°12 (1220),

MS (FAB,3-NBA/LÍI), 1227 (M+LÍ⁺)

202 mg (0,2 mmol) Příkladu 367 hydrofuranu, přidá se stříkačkou 56,5 se předloží do 10 ml tetraμΐ (0,4 mmol) triethylaminu,

-105CZ 281075 B6 ochladí se na 0 “·, přidá se stříkačkou 29 μΐ (0,3 mmol) ethylesteru kyseliny chlormravenčí, míchá se 15 minut při teplotě místnosti a nakonec se přikape 88 mg (0,7 mmol) taurinu v 6 ml 0,1 molárního hydroxidu sodného. Míchá se 1 h při teplotě místnosti, rozmíchá se 20 g dihydrogenfosforečnanu sodného po 10 minut a extrahuje ethylacetátem/ethanolem 4/1 (3x). Spojené organické fáze se suší (síran hořečnatý) a odpaří. Chromatografií na silikagelu (ethylacetát/ethanol = 3/2) se získá 194 mg (0,17 mmol, 87 %) Příkladu 529.

^C65^H98^N2°11^S MS/FAB, 3-NBA(LÍI), 1121 (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladu 529 18-33.

byly provedeny příklady v tabulkách

202 mg (0,2 mmol) Příkladu 367 se předloží do 10 ml tetrahydrofuranu, stříkačkou se přidá 56,6 μΐ (0,4 mmol) triethylaminu, ochladí se na 0 ’C, stříkačkou se přidá 29 μΐ (0,3 mmol) ethylesteru kyseliny chlormravenčí, míchá se 15 minut při teplotě místnosti a nakonec se přikape 53 mg (0,7 mmol) glycinu, rozpuštěného v 6 ml 0,1 molárního hydroxidu sodného. Míchá se 1 h při teplotě místnosti, rozmíchává 10 minut se 20 g dihydrogenfosforečnanu sodného a extrahuje (3x) ethylacetátem/ethanolem 4/1. Spojené organické fáze se suší (síran hořečnatý) a odpaří. Chromatograf ií na silikgelu (ethylacetát/ethanol=3/2) se získá 181 mg (0,17 mmol, 85 % Příkladu 530.

^C65^H96^N2°10 (í°⁶⁴)/ MS/FAB,3-NBA(LÍCI): 1071 (M+Li⁺) ♦

-106CZ 281075 B6

Analogicky příkladu 530 se převedou příklady z tabulek 38 až 53 na glycinové konjugáty.

Příklad 531

565 mg (1 mmol) Příkladu 165, rozpuštěného ve 20 ml tetrahydrofuranu a 5 ml triethylaminu, se použije jako výchozí roztok, kte kterému se při 0 ’C stříkačkou přidá 96 μΐ (1 mmol) ethylesteru kyseliny chlormravenčí. Míchá se 15 minut při 0 °C. Nakonec se přikape 465 mg (1 mmol) Příkladu 139, rozpuštěného v 10 ml tetrahydrofuranu. Míchá se 1,5 h při teplotě místnosti. Reakční roztok se nalije na 1 molární kyselinu chlorovodíkovou, potom se extrahuje (3x) octanem. Spojené organické fáze se promyjí nasyceným roztokem NaHCO₃ a suší se (MgSO₄). Odpařením rozpouštědla a rychlou chromatografií na silikagelu (octan/methanol = 5/1) se získá 608 mg (0,601 mmol, 60,1 %) Příkladu 531.

^C58^H96^N2°12 <¹⁰¹²h MS/FAB,3-NBA (LÍCI): 1019 (M+Li⁺)

-107CZ 281075 B6

Příklad 532

b)

300 mg (0,296 mmol) Příkladu 531 se rozpustí v 10 ml ethanolu a po přídavku 3 ml molárního hydroxidu sodného se 24 hodin míchá při teplotě místnosti, nakonec se intenzivně promíchá se 6 g dihydrogenfosforečnanu sodného (15 minut) a extrahuje octanem/ethanolem = 4/1 (3x). Spojené organické fáze se suší (síran hořečnatý). Odpařením rozpouštědla, rozetřením s diisopropyletherem a odsátím se získá 268 mg (0,272 mmol, 92 %) Příkladu 532.

^C56^H92^N2°12 í⁹⁸⁴>' ^MS (FAB,3NB(LÍCI), 991 (M+Li⁺)

Analogicky příkladu 531 a 532 se připraví sloučeniny uvedené v tabulce 54.

Tabulka 54

Příklad G²

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo Li)

^C56^H92^N2°11 (⁹⁶⁸)'* ⁹⁷⁵ (M+Li⁺)

553

-108CZ 281075 B6

Tabulka 54 - pokračování

535	CH,	Γη		0 CH	C56H92N2°10 <952)'· 959 (M+Li+)
		hJ	H
-0^	H
Analogicky	příkladu	531	a 532	se připraví sloučeniny uvedené
v tabulce 55	a

τ Tabulka 55

P]

5Z

Příklad G²

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo Li)

^C56^H92^N2°10 <⁹⁵²)'* ⁹⁵⁹ (M+Li⁺)

536

-109CZ 281075 B6

Tabulka 55 - pokračování

Analogicky příkladům 531 v tabulce 56.

a 532 se připraví sloučeniny uvedené

Tabulka 56

-110CZ 281075 B6

Tabulka 56 - pokračování

Příklad G²

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo Li)

540

^C56^H92^N2°9 <⁹³⁶>'’ ⁹⁴³ (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladu 531 a v tabulce 57.

532 se připraví sloučeniny uvedené

Tabulka 57

Příklad G²

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo Li)

541

^C56^H92^N2°8 (⁹²⁰>’* ⁹²⁷ (M+LÍ⁺)

Jako další variace skupiny X byly vyrobeny následující sloučeniny (L = H)

-111CZ 281075 B6

Tabulka

Příklad

542 («₂)₃ P _ H

Η H o (CH₂)4

543 ,(¾) 5

H

544

H

545

-112CZ 281075 B6

Tabulka 58 - pokračování

Příklad

546

II O

H (CS₂)₄

547 (ch₂)₁₂

H .0

H/W?“

548 li

O

549

-N·

H

550

-N k

o

1« (Οί₂)ι₀•\ch₂)₃551

-113CZ 281075 B6

Tabulka 58 - pokračování

Příklad

552

553

554 přímá vazba

555

556

-N ή ^/<CH2,4-hX^A_n/^(CH2)^ A ή

557

Tabulka 59 ukazuje sloučeniny z tabulky 58, ve kterých navíc byly změněny , L₂ a L₃

-114CZ 281075 B6

Tabulka 59

Příklad X

559

558

ch₃c«₃H^C3^H7-

560 561	H- c3h7-	H- H-	C5H11 €>
562	H-	O	0^2-
563	ch3-	C2H5- C1	C2H5-
564	C2H5-	6-	ch3-

Tabulka 60 představuje IC_5Q a IC₅₀ Ka hodnoty některých dimerních žlučových kyselin:

Tabulka 60

Sloučenina z příkladu ^IC50 ^IC50^Na

527	20	10
191 (taurinový kon.)	18	14
170	25	14
528	26	16
191 (glycinový kon.)	27	18
172 (taurinový kon.)	32	20
368 (glycinový kon.)	48	16
368	45	18
369 (taurinový kon.)	50	18
369	55	20
191	58	29
531	>50	18
532	30	10

-115CZ 281075 B6

g (123 mmol) methylesteru kyseliny desoxycholové se rozpustí ve 300 ml pyridinu a ochladí se na 5 °C. Za míchání se přikape 15 ml (193 mmol) methansulfonylchloridu a nakonec se míchá 12 h při teplotě místnosti. Nalije se do vody a extrahuje se octanem. Po sušení a odpaření organické fáze še chromatografuje na silikagelu (octan). Výtěžek 29,5 g (49 %) Příkladu 565.

^C26^H44°6^S (⁴⁸⁴)' MS(FAB, 3-NBA/LiCl): 491 (M+Li⁺).

Příklad 566

-116CZ 281075 B6

28,0 (57,8 mmol) Příkladu 565 se míchá ve 350 ml DMF za přítomnosti 7,5 g (115 mmol) azidu sodného 1,5 h při 130 °C. Nalije se do vody a extrahuje se octanem. Po sušeni a oddestilování organické fáze se filtruje přes silikagel (cyklohexan/octan 1:1). Výtěžek 18,5 g (74 %) Příkladu 566.

^C25^H41^N3°3 (431), MS/FAB, 3-NBA(LiCl): 438 (M+Li⁺)

5,0 g (11,6 mmol) Příkladu 566 se hydrogenuje ve 150 ml octanu za přítomnosti 0,5 g Pd/C (10 %) při teplotě místnosti za normálního tlaku. Katalyzátor se odfiltruje a rozpouštědlo se odtáhne. Chromatografli na silikagelu (methanol, potom methanol/triethylamin) se získá 3,1 g (66 %) Příkladu 567.

^C25^H43^NO3 (405), MS (FAB,3-NBA/LiCl): 412 (M+Li⁺)

Analogicky příkladům 565 až 567 byly vyrobeny příklady 568 a 569.

Příklad

MS(FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

-117CZ 281075 B6

Příklad

MS(FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

K roztoku, který byl připraven z 5,75 g (0,25 mol) sodíku a 400 ml methanolu se přidá 14,4 g (28,4 mmol) methylesteru kyseliny 3a,7p-diacetoxy-cholanové kyseliny ve 100 ml methanolu a míchá se při teplotě místnosti. Po 15 minutách se přidá nasycený roztok dihydrogenfosforečnanu sodného a vícekrát se extrahuje octanem. Sušením a odehnáním organické fáze se získá 1,18 g (90 %) Příkladu 570, který se bez dalšího čištění použije pro reakci.

^C27^H44^NO ₅, MS (FAB,3-NBA/LiCl): 455 (M+LÍ⁺)

Příklad 571

-118CZ 281075 B6

Analogicky příkladům 565 a 566 se získá z příkladu 570 Příklad 571.

^c ₂7^H43^N3°4 (473), MS (FAB, 3-NBA/LÍCl): 480 (M+Li⁺)

5,7 g (12,0 mmol) Příkladu 571 se zahřívá ve 300 ml 2M roztoku methylátu sodného v methanolu 1 h pod refluxem. Ve zpracování se dále postupuje podle způsobu, popsaného v příkladu 570. Chromatografií na silikagelu (cyklohexan/octan 1:1) se získá 4,3 g (83 %) Příkladu 572.

^C25^H41^N3°3 (⁴³¹)' ^Ms (FAB, 3-NBA/LÍCl): 438 (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladu 567 se z příkladu 572 vyrobí Příklad 573.

^C25^H43^NO3 (⁴⁰⁵>' ^MS (FAB, 3-NBA/LÍCl), 412 (M+LÍ⁺).

-119CZ 281075 B6

1,0 g (2,45 mmol) kyseliny cholové, 1,03 g (2,45 mmol) 3a-amino-7a,12a-dihydroxycholanové kyseliny ve formě methylesteru a 550 mg (4,07 mmol) hydroxybenzotriazolu se míchá ve 40 ml THF 20 min při teplotě místnosti. Po ochlazení na 0 ’C se přikape 610 mg (2,96 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu v 10 ml THF a dále se míchá 12 h při teplotě místnosti. Pevné látky se odfiltrují, odpaří se rozpouštědlo a zbytek se chromatografuje přes silikagel (CHCl₃/methanol 9:1). Výtěžek 1,2 g (60 %) Příkladu 574.

^C49^H81^NO8 (⁸¹¹)' ^MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 818 (M+Lí⁺)

-120CZ 281075 B6

530 mg (0,65 mmol) Příkladu 574 se míchá v 10 ml ethanolu a 2 ml 1M roztoku hydroxidu sodného 18 h při teplotě místnosti. Po přídavku vody se alkohol oddestiluje. Vodný roztok se okyselí 1,3 ml 2M HC1. Sraženina se odsaje a suší, získá se 510 mg (98 %) Příklad 575.

^C48^H79^NO8 (⁷⁹⁷)' ^MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 804 (M+Li⁺).

Analogicky příkladům 574 a 575 bulce 61.	byly vyrobeny příklady v ta-
Tabulka 61
H 0
1 \ >°	0 H
G 1 - 'Q H H

Příklad G1

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ ) ^C48^H79^NO7 ^{(781) 788} <^M+Li+)

576

-121CZ 281075 B6

Tabulka 61 - pokračování

Příklad GI

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LÍJ) ^C48^H79^NO7 (⁷⁸¹> ⁷⁸⁸ (M+Li⁺) ^C48^H79^NO7 <⁷⁸¹> ⁷⁸⁸ (M+Li⁺) ^C48^H79^N06 (⁷⁶⁵> ⁷⁷² (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladům 574 a 575 se připraví sloučeniny uvedené v tabulce 62.
Tabulka 62	HO	IXo^oh
	G 1 - H	4

-122CZ 281075 B6

Příklad G1

MS (FAB,3-NBA/LÍC1 nebo LiJ)

^C48^H79^NO7 (⁷⁸¹) ⁷⁸⁸ (M+LÍ⁺) ^C48^H79^NO6 <⁷⁶⁵) ⁷⁷² (M+LÍ⁺) ^C48^H79^NO6 (⁷⁶⁵) ⁷⁷² (M+LÍ⁺) ^C48^H79^NO6 <⁷⁶⁵> ⁷⁷² (M+LÍ⁺)

C₄₈H₇₉NO₅ (749) 756 (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladům 574 a 575 se připraví sloučeniny uvedené v tabulce 63.

-123CZ 281075 B6

Tabulka 63

Příklad Gl

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

^C48^H7₉N°7 (781) 788 (M+LÍ⁺)

^C48^H79^NO6 (^?65) ⁷⁷² (M+Li⁺)

^C48^H79^NO6 (⁷⁶⁵) ⁷⁷² (M+LÍ⁺)

C₄₈ ^H79^NO6 (765) 772 (M+LÍ⁺)

-124CZ 281075 B6

Tabulka 63 - pokračování

Příklad G1

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ) ^C48^H79^NO5 <⁷⁴⁹> ⁷⁵⁶ (M+Li⁺)

Analogicky příkladům 574 a 575 se připraví sloučeniny uvedené v tabulce 64.

Tabulka 64

Příklad G1

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

^C48^H79^NO7 (⁷⁸¹> ⁷⁸⁸ (M+Li⁺)

^C48^H79^NO6 ^{(765) 772} (^M+Li+)

-125CZ 281075 B6

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

Tabulka 64 - pokračování

Příklad G1

^C48^H79^NO6 (⁷⁶⁵> ⁷⁷² (M+LÍ⁺) ^C48^H79^NO6 (⁷⁶⁵> ⁷⁷² (M+LÍ⁺) ^C48^H79^NO5 ^{(749) 756} <^M+Li+)

Analogicky příkladům 574 a 575 byly připraveny sloučeniny uvedené v tabulce 65.

Tabulka 65

-126CZ 281075 B6

Příklad G1

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

^C48^H79^NO6 <⁷⁶⁵> ⁷⁷² (M+Li⁺)

598

597

599

^C48^H79^N°5 (749) 756 (M+Li⁺) ^C48^H79^NO5 (⁷⁴⁹> ⁷⁵⁶ (M+Li⁺) ^C48^H79^NO4 <⁷³³> ⁷⁴⁰ (M+Li⁺)

-127CZ 281075 B6

Příklad 600

K roztoku 15,0 g (31,5 mmol) methylesteru 3β-(2-azidoethoxy)-7a-hydroxycholenové kyseliny ve 150 ml pyridinu se při 0 °C přikape 25 ml (0,31 mol) chloridu kyseliny methansulfonové. Po 3 h při teplotě místnosti se směs nalije do ledové vody a extrahuje esterem. Po sušení a zahuštění se organická fáze chromatografuje přes silikagel (cyklohexan/octan 2:1). Získá se 13,8 g (79 %) Příkladu 600.

^C28^H47^N3°6^S (⁵⁵³>/ ^MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 560 (M+Li⁺).

16,8 g (237 mmol) K0₂ a 7,2 g (27,2 mmol) 18-crown-6 se spolu míchá ve 300 ml DMSO 15 min při teplotě místnosti. Při 0 °C se přikape 13,0 g (23,5 mmol) příkladu 600 v 50 ml DMSO. Po 1,5 h při teplotě místnosti se opět ochladí na 0 ’C, pomalu se přidá nasycený roztok chloridu sodného a okyselí se 2N HC1. Po vícená

-128CZ 281075 B6 sobné extrakci octanem se organické fáze suší a zahustí. Surový produkt se esterifikuje roztokem připraveným ze 130 ml methanolu a 13 ml acetylchloridu. Po zpracování se surový produkt chromatograf uje na silikagelu (cyklohexan/octan 6:4). Výtěžek 5,65 g (51 %) Příkladu 601.

^C27^H45^N3°4 (⁴⁷⁵)' ^MS (FAB,3-NBA/LiCl): 482 (M+Li⁺)

Příklad 602

Analogicky příkladu 567 se z Příkladu 601 vyrobí Příklad 602 .

^C27^H47^NO4 <⁴⁴⁹>' ^MS (FAB,3-NBA/LiCl): 456 (M+Li⁺)

Analogicky příkladům 600 až 602 se vyrobí příklady uvedené v tabulce 66.

Příklad -X²

-X²' MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

603

604

H₂N-(CH₂)₃-O- H ^C28^H49^NO4 (463), 470 (M+Li⁺)

H₂N-(CH₂)₄-O- H ^2^51^4 (477), 484 (M+Li⁺)

-129CZ 281075 B6

Tabulka 66 - pokračování

Příklad	-X2	-X2/	MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)
605	h2n-(ch2)5-o-	H	C30H53NO4 (491), 498 (M+LÍ+)
606	H2 n-(CH2)6-°-	H	C31H55NO4 (505), 512 (M+LÍ+)
607	h2n-(ch2)10-o-	H	C25H63NO4 (561b 568 (M+LÍ+)
608 H2N-	(ch2)2-0-(ch2)2-0-	H	C29H51NO5 (493>' 500 (M+LÍ+)
609	h3c—ch—ch2—o—	H	C29H49N°4 (463), 470 (M+LÍ+)

nh₂

Z 1,21 g (2,69 mmol) Příkladu 602 a 1,0 g (2,45 mmol) kyseliny cholové se s 0,55 g (4,07 mmol) hydroxybenzotriazolu a 0,61 g (2,96 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu způsobem popsaným v příkladu 574 vyrobí 1,7 g (82 %) Příkladu 610.

^C51^H85^NO8 (⁸³⁹h ^MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 836 (M+Li⁺)

-130CZ 281075 B6

1,5 g (1,79 mmol) Příkladu 610 se způsobem popsaným v příkladu 575 zmýdelní na 1,14 g (77 %) Příkladu 611.

^C50^H83^NO3 (⁸²⁵>' ^MS (FAB,3-NBA/LiCl): 832 (M+Li⁺)

Analogicky příkladům 610 a 611 se získají příklady uvedené v tabulce 67.

-131CZ 281075 B6

Tabulka 67 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LÍJ)

614

615

^C6g^H97^NO8 (1067), 1074 (M+LÍ⁺) ^C57^H88^C1NO8 <⁹⁴⁹h ⁹⁵⁶ (M+Li⁺)

616

^C59^H94^NO8 <⁹⁴⁴>' 951(M+Li⁺)

^C58^H91^NO9 <⁹⁴⁵>' ⁹⁵² (M+Li⁺)C₅₇H₈₇C1₂NOq (983), 990 (M+LÍ⁺) ^C56^H88^N2°8 (⁹¹⁶>' ⁹²³ (M+Li⁺) ^C61^H91^NO8 (⁹⁶⁵>' ⁹⁷² (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladům 610 a 611 byly získány sloučeniny vedené v tabulce 68.

-132CZ 281075 B6

Tabulka 68

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍCl nebo LÍJ)

621

622

623

624

626

C50H83NO7	(809) ,	816	(M+LÍ+)
C57H89N07	(899) ,	906	(M+LÍ+)
C63H93NO7	(975),	982	(M+LÍ+)
C69H97NO7	(1051),	1058 (M+Lí
C57H88C1NO	7 (933)	, 940 (M+LÍ
C59H94NO7	(928) ,	935	(M+LÍ+)

-133CZ 281075 B6

Tabulka 68 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

^C58^H91^NO8 (⁹²⁹>' ⁹³⁶ (M+Li⁺)

628

^C57^H87^C12^N07 <⁹⁶⁷>' ⁹⁷⁴ (M+LÍ⁺)

^C56^H88^N2°7 (⁹⁰°)' ⁹⁰⁷ (M+Lí⁺)

Analogicky příkladům 610 a 611 se získají příklady uvedené v tabulce 69.

Tabulka 69

-134CZ 281075 B6

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

631

632

633

634

635

C50H83NO7	(809),	816	(M+LÍ+)
C57H89N07	(899) ,	906	(M+LÍ+)
C63H93NO7	(975),	982	(M+LÍ+)

^C69^H97^NO7 <¹⁰⁵¹h 1058 (M+Li⁺) ^C57^H88^C1NO7 (⁹³³h ⁹⁴⁰ (M+LÍ⁺)

^C59^H84^N07 <⁹²⁸>' ⁹³⁵ (M+LÍ⁺) ^C58^H91^NO8 (⁹²⁹>/ ⁹³⁶ (M+Lí⁺) ^C56^H88^N2°7 (⁹⁰⁰>' ⁹⁰⁷ (M+LÍ⁺)

639

^C57^H87^C12^NO7 (967), 974 (M+Lí⁺)

-135CZ 281075 B6

Tabulka 69 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LÍCl nebo LÍJ) ^C61^H91^NO7 <⁹⁴⁹h ⁹⁵⁶ (M+Li⁺)

Analogicky příkladům 610 a 611 byly získány příklady v tabulce 70.

-136CZ 281075 B6

Tabulka 70 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

^C69^H97^N07 ¹⁰⁵⁸ (M+Lí⁺)

^C57^H88^C1NO7 (⁹³³)/ 940 (M+LÍ⁺)

^C59^H94^N07 (⁹²⁸)' ⁹³⁵ (M+LÍ⁺) ^C59^H94^NO8 <⁹²⁹>/ ⁹³⁶ (M+LÍ⁺)

^C57^H87^C1NO7 (⁹⁶⁷>' ⁹⁷⁴ (M+LÍ⁺) ^C56^H88^N2°7 ⁽⁹⁰⁰⁾' ⁹⁰⁷ <^M+Li+) ^C61^H91^NO7 <⁹⁴⁹>' ⁹⁵⁶ (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladům 610 a 611 byly získány příklady v tabulce 71.

-137CZ 281075 B6

Tabulka 71

651 H

652

653

656

^C50^H83^NO6 <⁷⁹³h ⁸⁰⁰ (M+LÍ⁺) ^C57^H89^NO6 (⁸⁸³h ⁸⁹⁰ (M+LÍ⁺) ^c ₆₃ ^H93^NO6 (959), 966 (M+LÍ⁺) ^C69^H97^NO6 (¹⁰³⁵h ¹⁰⁴² (M+Li⁺) ^C57^H88^C1NO6 <⁹¹⁷)' ⁹²⁴ (M+Li⁺) ^C59^H94^NO6 (⁹¹²>' ⁹¹⁹ (M+Li⁺)

-138CZ 281075 B6

Tabulka 71 - pokračování

Příklad R¹

MS (FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

^C58^H91^NO7 (⁹¹³>' ⁹²⁰ (M+Lí⁺)

658

^C57^H87^C12^NO6 <⁹⁵¹)' ⁹⁵⁸ (M+LÍ⁺)

^C56^H88^N2°6 <⁸⁸⁴)' ⁸⁹¹ (M+LÍ⁺) ^C61^H91^N06 <⁹³³h ⁹⁴⁰ (M+Li⁺)

Příklad 661

Ke 200 mg (0,25 mmol) Příkladu 575 a 0,052 ml (0,38 mmol) triethylaminu ve 30 ml THF se přikape při 0 ’C 0,036 mmol (0,38 mmol) ethylesteru kyseliny chlormravenčí. Po 15 minutách při 0 *C se přikape roztok 66 mg (0,88 mmol) glycinu v 7,55 ml 0,1 M NaOH a míchá se ještě 5 hodin při teplotě místnosti. Přidá se nasycený roztok dihydrogenfosforečnanu sodného a extrahuje se 3x THF. Po sušení a zahuštění organických fází se zbytek chromatograf uje na silikagelu CHCl₃/methanol/kys. octová 16:4:1. Výtěžek 180 mg (84 %) Příklad 661.

-139CZ 281075 B6 ^C50^H82^N2°9 (θ⁵⁴)' ^MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 861 (M+Li⁺).

Ke 300 mg (0,38 mmol) Příkladu 611 a 0,19 ml (1,38 mmol) triethylaminu v 50 ml THF se přikape při 0 °C 0,13 ml (1,36 mmol) ethylesteru kyseliny chlormravenčí. Po 15 minutách při 0 °C se přidá roztok 300 mg (2,4 mmol) taurinu ve 12 ml 1M NaOH. Po 24 hodinách při teplotě místnosti se zpracuje směs stejným způsobem jako v příkladu 661. Získá se 200 mg (59 %) Příkladu 662.

^C52^H88^N2°10^S (⁹³²>' MS(FAB,3-NBA/LiCl): 939 (M+Li⁺).

Analogicky příkladu 662 se příklady uvedené v tabulkách 61 až 71 převedou na odpovídající taurinové deriváty.

Příklad 663

-140CZ 281075 B6

1,0 g (1,84 mmol) Příkladu 137, 170 mg (0,91 mmol) 4,4'-dihydroxybifenylu a 400 mg (2,9 mmol) uhličitanu draselného se míchá ve 20 ml DMSO při 60 ’C 5 h. Přidá se voda a extrahuje se octanem. Po sušení a odehnání organické fáze se zbytek chromatografuje na silikagelu (cyklohexan/octan 1:4). Výtěžek 340 mg (34 %) Příkladu 663.

^C66^H98°12 <¹⁰⁸²h MS(FAB,3-NBA/LiCl) : 1089 (M+Li⁺).

Příklad 663 se zmýdelní způsobem popsaným pro příklad 663, získá se Příklad 664.

^C64^H94°12 <¹⁰⁵⁴h MS(FAB, 3-NBA/LiCl): 1061 (M+Li⁺)

Příklad 665

530 mg (1,16 mmol) hydrochloridu methylesteru 3-amino-7a,12a-dihydroxycholanové kyseliny, 600 mg (1,19 mmol) methylesteru

-141CZ 281075 B6

7α,12a-diacetoxy-3-ketocholanové kyseliny a 180 mg (2,86 mmol) kyanoborohydridu sodného se míchá ve 30 ml absolutního methanolu 24 hodin při teplotě místnosti. Nalije se do vody, pH se upraví na 90,1 M NaOH a extrahuje se octanem. Organické fáze se suší a odpaří. Chromatografií na silikagelu (cyklohexan/octan/triethylamin 50:50:2) se získá 360 mg (34 %) Příkladu 665.

^C54^H87^N010 (⁹⁰⁹h MS(FAB,4-NBA/LÍC1): 916 (M+LÍ⁺).

Příklad 666

200 mg (0,22 mmol) Příkladu 665 se zahřívá v 5 ml ethanolu/10 ml 5M NaOH 3 hodiny pod refluxem. Nakonec se alkohol odpaří, okyselí se 1M HC1 a vzniklá sraženina se odsaje a suší. Získá se 170 mg (97 %) Příkladu 666.

^C49^H79^N08 <⁷⁹⁷>' MS(FAB,3-NBA/LiCl): 804 (M+LÍ⁺).

1,0 g (1,98 mmol) 7α,12a-diacetoxy-3-ketocholanové kyseliny ve formě methylesteru, 130 mg (0,98 mmol) dihydrochloridu 1,2-diaminoethanu a 300 mg (4,8 mmol) kyanoborohydridu sodného se nechá reagovat postupem popsaným pro příklad 665. Získá se 740 mg (71 %) Příklad 667.

^C58^H91^NO12 (⁹⁹³)' MS(FAB,3-NBA/LiCl): 1000 (M+Lí⁺)

-142CZ 281075 B6

200 mg (1,93 mmol) Příkladu 667 se zmýdelní způsobem popsaným pro příklad 666. Získá se 140 mg (86 %) Příkladu 668.

^C50^H84^N2°8 <⁸⁴°)' MS(FAB,3-NBA/LiCl): 847 (M+LÍ⁺)

Analogicky příkladům 667 a 668 se získají příklady uvedené v tabulce 72.

Příklad	X	MS(FAB,3-NBA/LiCl	nebo Lil)
669	-(ch2)3-	C51H86N2°8	(854),	(861) (M+LÍ+)
670	-(ch2)6-	C54H92N2°8	(896) ,	903 (M+Lí+)
671	-<CH2>12	C60H104N2°8	(980)	, 987 (M+LÍ+)
672	-(ch2)2-0-(ch2)2-	C52H88N2°9	(884) ,	891 (M+LÍ+)

-143CZ 281075 B6

4,0 g (9,8 mmol) kyseliny cholové, 1,0 g (5 mmol) 1,12-diaminododekanu a 2,46 (10 mmol) 2-ethoxy-l-ethoxy-karbonyl-l,2-dihydrochinolinu se zahřívá 3 h v 80 ml toluenu na teplotu refluxu. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se chromátografuje na silikagelu (chloroform/methanol 6:1). Výtěžek 3,0 g (63 %) Příkladu 673.

^C60^H104^N2°2 í⁹⁸⁰>' MS(FAB,3-NBA/LiCl): 987 (M+Li⁺)

Analogicky příkladu 673 se připraví příklady uvedené v tabulce 73.

Příklad

MS(FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

674 ^C51^H88^N2°8 (⁸⁵⁶>' ⁸⁶³ (M+Li⁺)

675 ^C54^H94^N2°8 <⁸⁹⁸)' ⁹⁰⁵ (M+Li⁺)

676

Ίί

H

P •I o

58^H100^N4°10 ¹⁰¹⁹ (M+Li⁺)

-144CZ 281075 B6

Tabulka 73 - pokračování

Příklad

MS(FAB,3-NBA/LiCl nebo LiJ)

677

^C56^H98^N2°11 <⁹⁷⁴>' ⁹⁸¹ (M+Li⁺)

675A 678

2,2 g (0,055 mol) 60% suspenze hydridu sodného se pod argonem přidá ke 150 ml sušeného methanolu. Přikape se za chlazení 9 ml (0,055 mol) diethylesteru kyanmethanfosfonové kyseliny v 50 ml methanolu. Po 1 h při teplotě místnosti se přidá 20,7 g (0,05 mol) 678 A ve 300 ml methanolu a míchá se pod DC-kontrolou 1 až 2 h při teplotě místnosti. Směs se za studená odpaří a potom se rozdělí mezi vodu a dichlormethan. Po oddělení se extrahuje dichlormethanem, organické fáze se promyjí, suší a odpaří. Zbytek se přečistí chromatografií na SiO₂.

Výtěžek 17,5 g (82 %), 678 MS(FAB,3-NBA/LiCl): 434 (M+Li⁺)

Příklad 679

COOCH^

-145CZ 281075 B6

Analogicky 678 ze 679A. výtěžek 49 %, MS(FAB,3-NBA/LiCl): 434 (M+LÍ⁺)

Po chromatografii se získá isomerní produkt na dvojné vazbě 679 B se stejnou molekulovou hmotností, který se dále popsanou hydrogenací převede stejně jako sloučenina 679.

Příklad 680

678

g (0,035 mol) 678 se rozpustí v 500 ml methanolu a po přídavku 5 g 10% palladia na uhlí se při teplotě místnosti se hydrogenuje v třepací kachně. Oddělí se katalyzátor, rozpouštědlo se odežene a zbytek se chromatografuje na SiO₂· Výtěžek 13,7 g (91 %) 680 (3a-isomer podle analýzy 684).

MS(FAB,3-NBA/LiCl): 436 (M+LÍ⁺).

Příklad 681

679

Analogicky 680 ze 679. Výtěžek 85 % MS(FAB,3-NBA/LiCl): 436 (M+LÍ⁺) (3a-isomer podle údaje pro 685)

-146CZ 281075 B6

Příklad 682

680

H

g (0,028 mol) 680 se rozpustí ve 300 ml methanolu a hydrogenuje se po přídavku 30 ml koncentrovaného roztoku amoniaku a 3,5 g 5% rhodia na oxidu hlinitém při 2 MPa a při teplotě místnosti 24 h. Po oddělení katalyzátoru, odpaření a chromatografii zbytku (SiO₂) se získá 682. Výtěžek 9,8 g (81 %)

MS(FAB,3-NBA/LiCl): 440 (M+Li⁺), 434 (M+H⁺) (3a-isomer podle analýzy pro 684).

Příklad 683

681

Analogicky 682 ze 681. Výtěžek 6,1 (67 %) MS (FAB,3-NBA,LÍCI): 440 (M+Li⁺), 434 (M+H⁺) (3a-isomer podle analýzy 685).

-147CZ 281075 B6

Příklad 684

678

g (0,035 mol) 678 se rozpustí v 50 ml methanolu a po přídavku 50 ml konc. roztoku amoniaku a 4 g 5% rhodia na A1₂O₃ se hydrogenuje při 2,5 MPa a teplotě místnosti 24 h. Získá se po zpracování 682 jako surový produkt, který se přečistí chromatograf ií na SiO₂ systémem dichlormethan/methanol/konc. roztok amoniaku = 100:15:5. Získá se 6,4 g (42 %) méně polárního 3β-684 a 4,2 g (27,6 %) polárnějšího 3a-684.

MS(FAB,3-NBA/LiCl): 440 (M+Li⁺), 424 (M+H⁺).

Porovnání s 682 pomocí chromatografie na tenké vrstvě potvrzuje identitu s 3a-684 a rozdíl ve srovnání s 3β-684.

Příklad 685

Analogicky k 684 z 679. Výtěžek 35 % (méně polární) 3β-685 a 29 % (polárnější) 3a-685. DC-porovnáni s 683 potvrzuje identitu s 3a-685.

MS(FAB,3-NBA/LiCl): 440 (M+Li⁺), 434 (M+H⁺)

-148CZ 281075 B6

899,4 mg (2 mmol) aminu 678 se rozpustí v 15 ml směsi dioxan/voda = 2/1 a za chlazení ledem se nechá reagovat s 5 ml IN NaOH. Ke směsi se přidá 0 ’C 480 mg (2,2 mmol) di-terc.butylesteru pyrouhličité kyseliny a míchá se 30 min při teplotě místnosti. Po ukončení reakce se dioxan odtáhne ve vakuu, vodná vrstva se převrství octanem a při chlazení ledem se okyselí až na pH 2 zředěným roztokem KHSO₄. Neutralizuje se, extrahuje, zahustí a čistí se získaný zbytek chromatografií na SiO₂. Výtěžek 792 mg (72 %) Příkladu 686, MS(FAB,3-NBA,LÍCl): 566 (M+Li⁺).

Příklad 687

686

2,75 g (5 mmol) 686 se rozpustí ve 20 ml methanolu a mícift se se 2 ml 2N NaOH přes noc při teplotě místnosti. Zředí se vodou, methanol se odstraní ve vakuu a okyselí se přikapáním KHSO₄ roztoku až se tvoří sraženina. Tato se odsaje a zbytek se zfiltruje přes SiO₂. Výtěžek 1,79 g (67 %). MS(FAB,3-NBA,LiCl): 543 (M+Li⁺).

-149CZ 281075 B6

Příklad 688

1,35 g (3 mmol) 686 A se rozpustí v 50 ml octanu a nechá reagovat s 0,5 ml triethylaminu. Přidá se 0,85 g ethylesteru 1,2-dihydro-2-ethoxychinolin-l-karboxylové kyseliny (EEDQ) a 1,6-g (3 mmol) 687 a míchá se 4 až 5 h pod refluxem. Po ukončení reakce se zředí směs octanem, promyje nasyceným roztokem hydrogensíranu draselného a vodou, suší, odpaří a zbytek se chromatografuje na SiO₂. Výtěžek 2,46 g (85 %) 688.

MS(FAB,3-NBA,LÍCI): 974 (M+LÍ⁺).

Příklad 689

g (2,07 mmol) 688 se zmýdelní ve 20 ml methanolu 2 ml 2N NaOH, jak je popsáno pod 687.

Výtěžek 1,66 g (84 %) 689. MS(FAB,3-NBA,LÍCI): 960 (M+Li⁺)

Analogicky reakčnímu sledu 686 A —> 686 —> 687 —> byly vyrobeny následující příklady:

-150CZ 281075 B6

MS(FAB,3-NBA,LiCl): 944 (M+Li⁺)

Příklad 691 ze 683

-151CZ 281075 B6

Příklad 692

692 g (0,067 mol) 692 A se rozpustí vil methanolu a hydrogenuje analogicky příkladu 684. Chromatografické dělení surového produktu poskytlo vedle hlavního produktu 1,28 g (4,3 %) 692.

MS(FAB,3-NBA,LÍCI): 889 (M+Li⁺)

Příklad 693

692

693

1,2 (1,36 mmol) 692 se rozpustí v 10 ml methanolu a zmýdelňuje se 1 ml 2N NaOH za míchání přes noc. Zředí se vodou, methanol se ve vakuu odstraní a produkt se vyloučí přídavkem 2N HC1. Surový produkt se čistí filtrací na sloupci. Výtěžek 0,96 g (83 %) 693.

MS(FAB,3-NBA,LÍCI): 861 (M+Li⁺).

-152CZ 281075 B6

Příklad 694

694

449 (1 mmol) 686 A se rozpustí v 15 ml suchého methanolu. Přidá se k němu 420 mg (1 mmol) 694 A a 80 mg (1,3 mmol) kyanoborohydridu sodného a míchá se přes noc při teplotě místnosti. Potom se odpaří, zbytek se rozdělí mezi vodu a dichlormethan a zbytek organické fáze se přečistí chromatografii (SiO₂).

Výtěžek 450 mg (53 %) 694.

MS(FAB,3-NBA,LÍCl): 861 (M+Li⁺)

Příklad 695

200 mg (0,23 mmol) 694 se rozpustí v 5 ml methanolu a zmýdelni 0,5 ml 2N NaOH jak je popsáno pod 693. Výtěžek 180 mg (95 %) 695.

MS(FAB,3-NBA,LÍCI): 823 (M+Li⁺) 827 (M+H⁺)

-153CZ 281075 B6

Přiklad 696

686A

4,49 mg (1 mmol) 686 s 0,15 ml triethylaminu, 273 kyseliny cholové a zahřívá se 4 h na teplotu refluxu, reakce se zředí asi 100 ml octanu, promyje se roztokem a zbytek organické fáze se čistí chromatografíčky. Výtěžek (71 %) 696.

A se smísí s 30 ml suchého octanu mg (1,1 mol) EEDQ a 408 mg (1 mmol) Po ukončení khso₄

597 mg

MS(FAB,3-NBA,LÍCI): 847 (M+LÍ⁺)

Příklad 697

696

500 mg 2N NaOH jak (0,6 mmol) 696 se zmýdelni v je popsáno pod 693. Výtěžek 452 ml ethanolu mg (91 %) 697

1,5 ml

MS(FAB,3-NBA,LiCl): 833 (M+Li⁺)

-154CZ 281075 B6

Příklad 698

697

413 mg (0,5 mmol) 697 se rozpustí ve 3 až 5 ml suchého methanolu a smísí s jedním ekvivalentem 1M roztoku NaOH v methanolu. Přídavkem suchého etheru se vyloučí sodná sůl 698, která se potom odsaje a vysuší. Výtěžek 390 mg (92 %) 698.

MS(FAB,3-NBA): 849 (M+LÍ⁺)

Analogicky reakčnímu sledu 686 A —> 696 —> 687 se vyrobí následující substance (699 až 713).

Příklad

Edukt: 686 A + MS(FAB,3NBA,LiCl)

Chenodesoxy- 817 (M+Li⁺) cholová kyselina

Ursodesoxy cholová kyselina

817 (M+Li⁺)

-155CZ 281075 B6

Příklad

Edukt: 686 A + MS(FAB,3NBA,LÍC1)

8Q1 (M+Li⁺)

Příklad

Edukt: kys. cholová +

702

NH

682

MS(FAB,3NBA,LÍCI)

817 (M+LÍ⁺)

703

683

817 (M+Li⁺)

-156CZ 281075 B6

Příklad 704

z kys. chenodesoxycholové + 682

MS(FAB,3-NBA,LÍCI): 801 (M+Li⁺)

Příklad 705

z kys.ursodesoxycholové + 683

MS(FAB,3-NBA,LÍCI) : 801 (M+LÍ⁺)

Příklad 706

MS(FAB,3-NBA,LÍCI): 801 (M+Li⁺) z kyseliny ursodesoxycholové + 682

-157CZ 281075 B6

Příklad R MS(FAB,3-NBA,

LÍCI)

Příklad R

+ kyselina 817 (M+Li⁺) ursodesoxycholová

-158CZ 281075 B6 + kys. chenodesoxy- 817 (M+Li⁺) cholová

Příklad R

710

+ kyseliny lithocholová

801 (M+Li⁺)

Příklad 711

+3β-684 MS(FAB,3-NBA,LÍCI): 817 (M+LÍ⁺) z kyseliny cholové

-159CZ 281075 B6

Příklad 712

+ 3β-685 MS(FAB,3-NBA,LÍCI): 817 (M+Li⁺) z kyseliny cholové

z ursodesoxycholové kyseliny + 3β-685 MS(FAB,3-NBA,LiCl):

(M+Li⁺)

801

Příklad 714

-160CZ 281075 B6

446 mg (1 mmol) 714 A se ve 40 ml ethanolu zmýdelní polokoncentrovaným hydroxidem sodným za míchání přes noc. Zředí se potom vodou, ve vakuu se odstraní ethanol a vyloučí se 714 okyselením zředěnou kyselinou chlorovodíkovou. Produkt se odsaje, promyje vodou a suší. Výtěžek: 420 mg (97 %).

MS(FAB,3-NBA,LÍCI): 438 (M+Li⁺)

OOCH-j

449 mg (1 mmol) 686 A se rozpustí ve 30 ml suchého THF a smísí s 0,14 ml triethylaminu a 1,1 mol EEDQ. Přidá se 432 mg (1 mmol) 714 a zahřívá se 6 h pod refluxem. Po ukončené reakci se oddestiluje rozpouštědlo, zbytek se vyjme do octanu a promyje se roztokem KHSO₄ a vodou. Zbytek organické fáze se přečistí chromatograf íčky. Získá se 587 mg (68 %) 715.

MS(FAB,3-NBA,LÍCI): 870 (M+Li⁺)

Příklad 716 a

g (2,3 mol) 715 se hydrogenuje v 50 ml methanolu a 5 ml koncentrovaného roztoku NH₃ s 0,3 g 5% rhodia na A1₂O₃ při 2 MPa při teplotě místnosti po 24 h. Katalyzátor se odsaje, rozpouštědlo se oddestiluje a zbytek se čistí chromatografií. Výtěžek 1,5 g (75 %) 716. *

-161CZ 281075 B6

MS(FAB,3-NBA,LÍCI): 874 (M+LÍ⁺)

Příklad 716 b

688 ----------> 716

484 mg (0,5 mmol) 688 se přidá k za chlazení připravené směsi 25 ml methanolu v 1,5 ml acetylchloridu a míchá se při teplotě místnosti 2 h (kontrola reakce chromatografií na tenké vrstvě (DC)). Po ukončení reakce se směs neutralizuje roztokem NH₃, odpaří se ve vakuu a zbytek se chromatografuje (SiO₂), čímž se přečistí. Získá se 247 mg (58 %) 716, podle DC a MS shodného produktu se substancí, vyrobenou v odstavci a.

Přiklad 717

1,2 g (1,38 mmol) 716 se rozpustí ve 20 ml methanolu a zmýdelní se 2 ml polokoncentrovaného hydroxidu sodného mícháním přes noc. Potom se zředí vodou, methanol se odstraní ve vakuu a aminokyselina 717 se vyloučí opatrným okyselením. Sraženina se odsaje, promyje se vodou a suší. Výtěžek 1,1 g (93 %).

MS(FAB,3-NBA,LÍCI): 860 (M+LÍ⁺)

Analogicky reakčnímu sledu (714A) —> 714 —> 715 —> 716 —> 717 se vyrobí následující substance (718-725).

-162CZ 281075 B6

Gl - NH - G2

Přiklad Gl G2 Edukt MS(FAB,3-NBA,

LÍCI oder LiJ)

-163CZ 281075 B6

Edukt MS(FAB,3-NBA,

LÍCI oder LiJ)

Příklad G1

G2

681 +

683

828 (M+Li⁺)

Příklad 724

432 mg (0,5 mmol) 715

12N NaOH jak je popsáno pod se zmýdelní v 15 ml methanolu 1,5 ml

717. Výtěžek 318 mg (75 %) 724.

MS(FAB,3-NBA,LÍCl): 856 (M+Li⁺)

Analogicky reakčnímu sledu 714 —> 715 —> 724 se vyrobí následující příklady substancí (725-729).

G1 - NH - G2

Příklad G1

G2

Redukt MS(FAB,3-NBA, LÍCI oder LiJ)

714 + 856 (M+Li⁺)

686 B

-164CZ 281075 B6

Redukt MS(FAB,3-NBA,

LÍCI oder LÍJ)

Příklad G1

G2

681 + 840 (M+LÍ⁺)

686 A

-165CZ 281075 B6

ooch₃ (4 mmol)

730

1,1

2,1 s 0,6 ml kyseliny hustí, vyjme do octanu, roztok se promyje roztokem hydrogensíranu draselného a vodou a zbytek organické fáze fícky. Výtěžek 2,48 g (68 %) 730.

g triethylaminu, cholové 8 hodin pod se zahřívá v (4,4 mmol) EEDQ refluxem. Po ukončení reakce se za50 ml suchého THF a 1,64 g (4 mmol) se čistí chromatográMS(FAB,3-NBA,LÍCI): 919 (M+Li⁺)

g (2,2 mmol) 730 se zmýdelní ve 30 ml methanolu 3 ml 2N NaOH jako je popsáno pod 724. Výtěžek 168 g (85 %) 731.

MS(FAB,3-NBA,LÍCI): 905 (M+LÍ⁺)

Analogicky reakčnímu sledu 730 A —> 730 —> 731 se vyrobí následující příklady substancí (732-734).

G l-N

H

-166CZ 281075 B6

MS(FAB,3-NBA,

LÍCI oder LiJ)

Příklad G1

Edukt

Příklad 735

C00CH₃

3,1 g (7,4 mmol) refluxem s roztokem

735A se smísí ve 30 ml isopropanolu pod

2,33 g hydroxylaminhydrochloridu a 4,57 g

-167CZ 281075 B6 octanu sodného v 10 ml vody a zahřívá se 4 hodiny na teplotu refluxu. Po ukončení reakce se přidá voda, isopropanol se částečně odpaří ve vakuu a vytřepe se do dichlormethanu. Zbytek organické fáze se přečisti chromatograficky. Výtěžek 2,7 g (84 %) 735.

MS(FAB,3-NBA,LÍCI): 442 (M+LÍ⁺), 436 (M+LÍ⁺)

Přiklad 736

g (4,6 mmol) 735 se v 50 ml methanolu hydrogenuje se 200 mg 10% palladia na uhlí při 2 MPa H₂ při teplotě místnosti po dobu 24 hodin. Katalyzátor se oddělí a zbytek se chromatograficky přečistí. Výtěžek· 1,56 g (80 %) 736. MS(FAB,3-NBA,LÍCI): 428 (M+LÍ⁺), 422 (M+H⁺).

736 není podle DC (SiO₂: dichlormethan/methanol.konc. roztok NH₃ = 100:15:5/identický s 3-pisomerním aminem.

737

842 mg (2 mmol) se zahřívá v 50 ml sušeného THF s 0,15 ml triethylaminu, 2,2 mmol EEDQ a 820 mg (2 mmol) kyseliny cholové •6 hodin na teplotu refluxu. Oddestiluje se, vyjme do octanu a třepe s roztokem KHSO₄ a vodou a zbytek organické fáze se čistí

-168CZ 281075 B6 chromatograficky. Výtěžek 926 mg (57 %).

MS(FAB,3-NBA,LÍCI): 819 (M+Li⁺)

200 mg (0,25 mmol) 737 se zmýdelní polokoncentrovaným NaOH (1,5 ml) v 15 ml methanolu. Výtěžek 162 mg (82 %) 738.

MS(FAB,3-NBA): 798,6 (M+H⁺)

Analogicky reakčnímu sledu 735 A —> 735 —> 736 —> 738 byly získány následující složky.

Gl

NH )Unn·'·

G2

Příklad Gl

G2

Edukt MS(FAB,3-NBA)

736 + 783 (M+H⁺)

Chenodesoxycholová kyselina

740

		OH T	COOH
	H

736 + 783 (M+H⁺)

Ursodesoxycholová kyselina

-169CZ 281075 B6

Příklad GI

G2

Edukt MS(FAB,3-NBA)

741

678 A + kyselina cholová

783 (M+H⁺)

679 A + 783 (M+H⁺) kyselina cholová

Příklad 743

g kyseliny cholové (2,45 mmol) se v 15 ml sušeného THF při 0 ’C smísí se 4 ekvivalenty anhydridu kyseliny trifluoroctové a míchá se 2 h při teplotě místnosti. Za chlazeni ledem se přidá 1,04 g (2,01 mmol) benzylesteru kyseliny cholové a míchá se přes noc při teplotě místnosti. Po chlazení ledem se přidá asi 2,5 ml koncentrovaného roztoku NH₃ a míchá se více hodin pod kontrolou

-170CZ 281075 B6

DC. Po ukončení reakce se provede oddestilování za studená a zby- . tek se rozdělí mezi ether a roztok NaHCO₃. Organická fáze se promyje roztokem NaHC0₃ a vodou, zahustí se a zbytek se čistí chromatograf ií, výtěžek 1,14 g (64 %) 743.

MS(FAB,3-NBA,LÍCI): 896 (M+H⁺)

Příklad 744

743

COOH g (1,12 mmol) 743 se v 10 ml THF hydrogenuje se 200 mg 10% palladia na uhlí v třepací kachně při teplotě místnosti. Po ukončení reakce se katalyzátor oddělí, zahustí se a zbytek se přečistí chromatografií.

Výtěžek: 828 mg (92 %) 744.

MS(FAB,3-NBA,LÍCI): 806 (M+LÍ⁺)

Analogicky reakčnímu sledu 743 A ---> 743 ---> 744 se vyrobí následující substance (745-747):

COOH

-171CZ 281075 B6

Příklad Gl edukt MS(FAB,3-NBA,LÍCI):

743+ kyselina chenodesoxycholová

743A+ kyselina lithocholová

Příklad 747

MS(FAB,3-NBA,LÍCI): 806 (M+Li⁺) z benzylesteru kyseliny 3-3-OH-cholové

-172CZ 281075 B6

Příklad 748

826 mg (1 mmol) 707 a 1,4 mmol EDQ se rozpustí v 8 ml sušeného, přečištěného dimethylformamidu a přidá se 0,18 ml triethylaminu a 140 mg (1 mmol) taurinu. Roztok se 15 min zahřívá ha 90 ’C. Po ochlazení se přidá 40 ml sušeného etheru. Vylučování produktu se ukončí stáním přes noc. Roztok se dekantuje, sraženina se promyje etherem, odsaje a suší na vzduchu. Produkt se rozpustí v 5 ml 0,2N methanolického NaOH, k roztoku se přidá 40 ml sušeného etheru a míchá se 1 h za chlazení ledem. Vytvořená sraženina se odsaje a suší v exsikátoru. Další čištění se provádí chromatografií s reverzní fází.

Výtěžek 806 mg (84 %) 748.

MS(FAB,3-NBA,LÍCI): 956 (M+H⁺)

Analogicky reakčnímu sledu 707 ---> 748 se vyrobí následující substance.

-173CZ 281075 B6

-174CZ 281075 B6

Příklad R Edukt MS(FAB,3-NBA)

708

940 (M+H⁺)

-175CZ 281075 B6

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Dimerní deriváty žlučových kyselin obecného vzorce I

kde	G1	- X - G2	(I) ,
G1	značí	sloučeniny obecného vzorce II

kde

Y znamená volnou valenci k vazbě skupiny X nebo má následující významy:

-OL, -NHL, NL₂, přes aminoskupinu navázaný zbytek aminokyseliny nebo aminosulfonové kyseliny, jako například

-nhch₂-co₂h, -nh-ch₂ch₂-so₃-h, -n-ch₂ch₂-so₃h, ch₃

-N-CH_oCO_oH, -NH-CHCO,H

I ^{2 2} I ² ch₃ r₆ a jejich (C,-C₄)-alkylestery a soli s alkalickými kovy a kovy alkalických zemin, -OKa, kde Ka znamená kation, jako například kation alkalického kovu nebo kovu Alkalických zemin nebo také kvarterní amoniový ion, přičemž

L znamená H, nasycený nebo nenasycený alkylový zbytek s 1 až 10 atomy uhlíku, který je rozvětvený nebo nerozvětvený, cykloalkylový zbytek se 3 až 8 atomy uhli-176CZ 281075 B6 ku, fenylový zbytek, který je nesubstituovaný nebo je až 3krát substituovaný F, Cl, Br, (Cj-C₄)-alkylem nebo (C₁-C₄)-alkoxylem, benzylový zbytek, který je nesubstituovaný nebo je 1 až 3krát substituovaný F, Cl,

Br, (C₁-C₄)alkylem nebo (C₁~C₄)alkoxylem a

R⁶ znamená methyl, isopropyl, isobutyl, 2-butyl, benzyl, 4-hydroxybenzyl, hydroxymethyl, 1-hydroxyethyl, h₃csch₂ch₂-, ho₂cch₂-, hocch₂ch₂-,

R³· znamená volnou valenci k navázání skupiny X nebo H, nasycený nebo nenasycený alkylový zbytek s 1 až 10 atomy uhlíku, který je rozvětvený nebo nerozvětvený, cykloalkylový zbytek se 3 až 8 atomy uhlíku, fenylový zbytek, který je nesubstituovaný nebo je 1 až 3krát substituovaný F, Cl, Br, (C1-C4)-alkoxylem, -N⁺H3, -OPO₃, benzylový zbytek, který je na jádru nesubstituovaný nebo je 1 až 3krát substituovaný F, Cl, Br, (C₁~C₄)-alkoxylem, -N⁺H3, -0P03” nebo fenylem, který sám je 1 až 3krát substituovaný F, Cl, Br, (C1~C4)-alkylem nebo (C3-C4)-alkoxylem, -N⁺H3-OPO₃“ bifenylmethylový zbytek, který je nesubstituovaný nebo je 1 až 3krát substituovaný F, Cl, Br, (C₁~C₄)-alkylem nebo (Ci”^c4)-alkoxylem, -N⁺H₃, -0P0₃“, trifenylmethylový zbytek, který je nesubstituovaný nebo je 1 až 3krát substituovaný F, Cl, Br, (C₁-C₄)-alkylem nebo (C₁-C₄)-alkoxylem, -N⁺H₃, -0P0₃“,

1- nebo 2-naftylmethylový zbytek, který je nesubstituovaný nebo 1 až 3krát substituovaný F, Cl, Br, (C₁-C₄)-alkylem nebo (C^-C₄)-alkoxylem, -N⁺H₃, -0P0₃”,

9-fluorenylový zbytek, který je nesubstituovaný nebo je 1 až 3krát substituovaný F, Cl, Br, (Cj-C₄)-alkylem nebo (Ci”^c4)-alkoxylem, -N⁺H₃, -OPO₃”,

2- , 3- nebo 4-pyridylový zbytek, nebo

0 II	0	0
II zbytek vzorce -P-OL, I	II -S-OL	nebo	-C-L ,
1 OL	0

kde L má shora uvedený význam,

R² až R⁵, kde R² a R³, kyslík karboxylové na sobě znamenaj í popřípadě R⁴ a R⁵ společně znamenají skupiny, nebo jednotlivě a nezávisle

-177CZ 281075 B6

H, OT, -ST, -ΝΗΤ,

0 II	0 II	0 II
II -0-C-T,	II -S-C-T,	II -NH-C-T,

Ο

II

-Ο-Ρ-ΟΤ,

I OL

Ο

II

-O-S-OT,

-τ kde L má shora uvedený význam a

T má význam uvedený pro L nebo znamená volnou valenci k navázání skupiny X, s tím omezením, že celkem je přítomna pouze jedna valence k navázání skupiny X, znamená jednoduchou vazbu nebo skupinu obecného vzorce III

O

II 1 (N)_S-A-N-C-(CH₂)_q-c-]_r-N-B_t-

kde

A znamená alkylenový řetězec, který je rozvětvený nebo nerozvětvený, nasycený nebo nenasycený a může být popřípadě v řetězci -0-, —S— nebo arylenem, zejméně fenylenem, přičemž spojení je provedeno přes

a řetězec má celkem 2 až 12, výhodně 2 až 6 členů řetězce p,

B znamená alkylenový řetězec, který je rozvětvený nebo nerozvětvený, nasycený nebo nenasycený a je v řetězci popřípadě přerušen -0-, -S- nebo arylenem, zejména feny lenem, přičemž napojení je provedeno přes

řetězec obsahuje celkem 2 až 18, výhodně 2 až 12 členů řetězce n,

Claims (6)

1. ^Ll» ^L2' ^l3 3^sou stejné nebo rozdílné a mají význam uvedený pro L, q znamená 0 až 5, r znamená 0 nebo 1, s znamená 0 nebo 1 a t znamená 0 nebo 1 a G2 znamená sloučeninu obecného vzorce IV

   (IV), kde

   Y a R¹ mají význam uvedený pod G1 a

   R⁷ až R¹⁰, kde R⁷ a R⁸ popřípadě R⁹ a R¹⁰ znamenají společně kyslík karbonylové skupiny nebo jednotlivě a nezávisle na sobě znamenají Η, OT, -ST, NHT,

   0 II 0 || 0 II 0 II 0 II 0 II II O-C-T, II -S-C-T, II -NH-C-T, II -O-P-OT | II -O-S-OT, || II -S-OT || 1 CL II 0 II 0

   O

   II

   -P-OT,

   II o

   kde L a T maj í význam uvedený pod G1, také s omezením, že celkem pro G2 je přítomna jen jedna volná valence k navázání skupiny X, přičemž vyloučené jsou deriváty žlučových kyselin vzorců

   -179CZ 281075 B6

   U· kde R znamená H, nebo OH.
2. 2. Dimerní deriváty žlučových kyselin podle nároku 1, obecného vzorce I, kde spojení zbytků GI a G2 je nesymetrické, tedy je uskutečněno přes různé kruhy.
3. 3. Dimerní deriváty žlučových kyselin podle nároku 1, obecného vzorce I, kde spojení zbytku GI je uskutečněno C-24 (kruhem D) přes X v jedné z poloh C-3 (kruh A), C-7 (kruh B) nebo C-12 (kruh G) zbytku G2.
4. 4. Způsob výroby dimerních derivátů žlučových kyselin podle jednoho nebo několika nároků 1 až 3, vyznačující se tím, že

   a) v případě, že X = jednoduchá vazba, se uvedou známým způsobem do reakce reakceschopné formy GI a G2, nebo

   -180CZ 281075 B6

   b) v případě, že X = můstková skupina, se uvedou do reakce známým způsobem

   a) reakceschopné formy Gl-X s G2 popřípadě β) reakceschopné formy G2-X s G1 nebo

   c) z Gl-Xl a G2-X2 se známým způsobem vyrobí sloučeniny obecného vzorce I (G1-X-G2), přičemž X vznikne z XI a X2 vytvořením kovalentní vazby, zejména kondenzační nebo substituční reakcí.
5. 5. Dimerni deriváty žlučových kyselin obecného vzorce I podle nároků 1 až 3 pro výrobu léčiv.
6. 6. Farmaceutický prostředek pro ovlivnění systému transportu žlučových kyselin, vyznačující se tím, že jako účinnou látku obsahuje alespoň jeden dimerni derivát žlučových kyselin podle nároků 1 až 3.