SE447477B - Merkaptoacylderivat av en substituerad prolin, forfarande for framstellning av denna och en farmaceutiskt aktiv komposition innehallande foreningen - Google Patents
Merkaptoacylderivat av en substituerad prolin, forfarande for framstellning av denna och en farmaceutiskt aktiv komposition innehallande foreningenInfo
- Publication number
- SE447477B SE447477B SE7906722A SE7906722A SE447477B SE 447477 B SE447477 B SE 447477B SE 7906722 A SE7906722 A SE 7906722A SE 7906722 A SE7906722 A SE 7906722A SE 447477 B SE447477 B SE 447477B
- Authority
- SE
- Sweden
- Prior art keywords
- proline
- methyl
- oxopropyl
- cis
- compound according
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D207/12—Oxygen or sulfur atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
- C07D207/22—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/12—Antihypertensives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C327/00—Thiocarboxylic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pyrrole Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
447 477 R5 betecknar Cl_ n betecknar O, l eller 2. 7-alkyl, fenyl eller fenyl-Cl_4-alkyl och Uppfinningen innefattar i sin bredaste aspekt eter- och tio- etermerkaptoacylproliner med formeln I ovan, kompositioner, innehållande sådana föreningar och sätt att använda sådana föreningar som antihypertensiva medel.
Uttrycket Cl_7-alkyl, som användes för definition av symboler- na R, Rl, R2 och R3 utgör raka eller grenade kolvätekedjor med upp till 7 kolatomer, exempelvis metyl, etyl, propyl, isopro- pyl, butyl, isobutyl, t-butyl, pentyl, isopentyl, etc. De föredragna alkylgrupperna har upp till 4 kolatomer och metyl och etyl föredrages mest.
Uttrycket C2_7-alkenyl som användes för definition av symbolen Rl är en monoomättad rak eller grenad kolvätekedja med 2~7 kolatomer såsom etenyl, propenyl, isopropenyl, butenyl och liknande. C2_7-alkynylgrupperna utgör raka eller grenade kol- vätekedjor med 2-7 kolatomer med en trippelbindning, t.ex. propargyl. De föredragna alkenylgrupperna har 2-5 kolatomer och de föredragna alkynylgrupperna har 3-4 kolatomer.
De substituerade fenyl~ och fenyl-lägre alkylen-grupperna som användes för definition av symbolen Rl har en eller två, före- trädesvis en substituent i fenylringen bestående av Cl_4- alkyl, speciellt metyl, Cl_4-alkoxi, speciellt metoxi, Cl_4- alkyltio, speciellt metyltio, halogener, speciellt klor eller fluor, trifluormetyl, acetyloxi och hydroxi. De hydroxisub- stituerade fenyl- och fenyl-Cl_4-alkylgrupperna erhålles genom hydrolys av motsvarande acetyloxisubstituerade fenylförening som sista steg i syntesen.
Uttrycket halogen innefattar de fyra vanliga grupperna klor, brom, fluor och jod, varvid klor, brom och fluro föredrages.
Uttrycket fenyl~Cl_4-alkyl som användes för definition av sym- bolerna R1 och R5 innefattar grupper såsom _(CH2)fi<š§> 447 477 vari m är ett helt tal från l-4. Föredragna fenyl-Cl_4-alkyl- grupper är fenylmetyl och fenyletyl, speciellt fenylmetyl.
De lägre alkanoylgrupperna som åskådliggöres av R5-CO- är sådana med acylradikaler av lägre (C2-C7) fettsyror, exempel- vis acetyl, propionyl, butyryl, isobutyryl och liknande. De lägre alkanoylgrupperna med upp till fyra kolatomer föredra- ges och acetyl föredrages speciellt. När R5 i gruppen R5-CO- är fenyl-lägre alkyl , föredrages bensoyl företrädesvis på motsvarande sätt.
Asterisken i formeln I visar ett asymmetriskt centra, som finns närvarande i prolinringen. Naturligtvis kan ett ytter- T ligare asymmetricentra finnas närvarande i merkaptosido- kedjan beroende på substituenterna R2 och R3. Produkterna med formeln I existerar följaktligen i stereoisomera former eller som racemiska blandningar därav. Alla dessa innefattas inom ramen för uppfinningen. De nedan beskrivna synteserna kan använda racematet eller en av enantiomererna som utgångs- material. När det racemiska utgângsmaterialet användes för syntesen kan stereoisomererna som erhålles i den slutliga produkten separeras genom konventionella kromatografiska eller fraktionskristallisationsmetoder. X-Rl-gruppen ger även upphov till cis-transisomerism.
Företrädesvis är asymmetricentrat i prolinringen i L-kon- figuration eller om det finns ett asymmetricentra i merkapto- acylsidokedjan är detta i D-konfiguration. 447 477 Föredragna föreningar med formeln I är sådana vari R beteck- nar väte, Rl betecknar Cl_3-alkyl eller »ra 2 p R6 vari p betecknar O, l eller 2 och R6 betecknar väte, metyl, metoxi, metyltio, klor, fluor, trifluormetyl eller hydroxi, R2 betecknar väte, metyl eller trifluormetyl, R3 betecknar väte, n betecknar O eller l och R4 betecknar väte. Även före- dragna som mellanprodukter är de ovan angivna föreningarna vari R betecknar acetyl eller bensoyl, företrädesvis 4 acetyl.
De mest föredragna av de ovan angivna föreningarna är de vari X betecknar syre, Rl betecknar metyl eller etyl, speciellt metyl, n betecknar l, R betecknar väte eller metyl, speciellt 2 metyl, R betecknar väte, R4 betecknar och -XRl-gruppen 3 är i 4-position av prolinringen, speciellt de vari -XRl- gruppen är cis-konfiguration.
Etrarna och tioetrarna med formeln I erhålles genom att eter- eller tioeterprolinen med formeln XR H C 1 2| II HN c *_- cooR I H kopplas med en syra eller dess kemiska ekvivalent med formeln R Rs 2 | | III R'4 -S- (cmh- cH-coon vari R'4 betecknar väte eller R5-CO-, till framställning av en produkt med formeln 447 477 s /\ xnl. 1:3 RZ H20 /í I I l Iv R'4 -s- (cmlï- cH-co _ N -- c*-CO0R I n Denna reaktion kan åstadkommas i närvaro av ett kopplingsmedel såsom dicyklohexylkarbodiimid eller liknande, eller syran kan aktiveras genom bildning av dess blandade anhydrid, symmetrisk anhydrid, syrahalogenid, aktiva ester eller med användning av Woodwardreagens K, N-etoxikarbonyl-2-etoxi-l,2-dihydrokinolin eller liknande. Beträffande metoder för acylering jfr. Methoden der Organischen Chemie (Houben-Weyl), volym XV, del II, sid. l et seq. (1974). Företrädesvis får syrahalogeniden,speciellt syrakloriden med formeln III reagera med syran med formeln II.
Esterföreningarna med formeln IV, dvs. R betecknar alkyl, kan överföras till den fria syran, dvs- R betecknar väte, på konventionellt sätt. Exempelvis ger,när R betecknar t-butyl, behandling med trifluorättiksyra och anisol den fria syran.
Produkten med formeln IV isoleras företrädesvis och renas genom kristallisation, t.ex. genom bildning av dicyklohexyl- aminsaltet och efterföljande överföring av saltet till den fria syran genom behandling med en vattenlösning av en syra såsom kaliumvätesulfat.
Produkten med formeln IV;som bär acylgruppen RS-CO-,kan över- föras till produkterna med formeln I vari R4 betecknar väte genom konventionell hydrolys eller genom ammonolys.
Produkterna med formeln I vari R4 betecknar XRI 1» R3 R2 HZC 3 I I I I -s-(cxnrr- cn- co__1q__... <|2,,- COOH H 447 477 erhålles genom direkt oxidering med jod av en produkt med formeln I vari R4 betecknar väte.
Estrarna med formeln I vari R betecknar Cl_7-alkyl kan er- hållas från karboxylsyraföreningarna, dvs. vari R betecknar väte, enligt konventionella förestringsförfaranden, t.ex. genom förestring med en diazoalkan såsom diazometan, l-alkyl-3-p-tolyltriazen, såsom 1-n-butyl-3-p-tolyltriazen eller liknande.
Prolinreaktanterna med formeln II kan framställas på olika sätt. Exempelvis acetyleras en hydroxi- eller merkaptoprolin med formeln XH HZC V HN---C;COOH I H med ett acetyleringsmedel såsom ättiksyraanhydrid, acetyl- klorid, propionsyraanhydrid, smörsyraanhydrid, bensyl- klorfimmnat eller liknande för att skydda kvävet. Rl-gruppen införes därefter genom att den N-skyddade formen av före- ningen med formeln V får reagera med en halogenid, Rl-hal, vari hal betecknar en halogen, företrädesvis jod, i närvaro av silveroxid, natriumhydrid, natriumhydroxid eller liknande till framställning avenlmellanprodukt med formeln XRl H2C Skyddad-N -~ c*- cooRl VI I H Alkalisk hydrolys av mellanprodukten med formeln VI med en bas såsom bariumhydroxid, natriumhydroxid, kaliumhydroxid eller liknande ger först den fria syran (COOH) och därefter ger hydrolys med en mineralsyra såsom svavelsyra utgångs- 447 477 materialet med formeln II.
Ett annat sätt för att framställa prolinreaktanterna med formeln II är genom behandling av den N~skyddade tosyloxi~ prolinestern, företrädesvis metylestern med formeln OTS Hzci: få C;COOa]kyl Vïï I skyddad'N H med natriumsaltet med formeln R -X-Na VIII l till mellanprodukten med formeln H20 /7 :m1 I i IX skyddad-N ïik* I formeln VII betecknar symboleï Ts gruppen ~S0¿{Éš>-CH3 och den N-skyddade gruppen är bensyloxikarbonyl, som före- drages eller andra vanligtvis använda acylskyddande grupper.
Om tosylatgruppen i denna reaktion är i cis-konfiguration kommer XRl-gruppen i trans-konfiguration och om tosyloxigruppen är i trans-konfiguration kommer XRl-gruppen i cis-konfiguration.
Mellanprodukten med formeln IX behandlas därefter för att avlägsna alkylestergruppen och får därefter reagera med brom- väte till HBr-saltet av prolinreaktanten med formeln II som därefter kan kopplas med syran, företrädesvis syrakloriden med formeln III.
Prolinutgângsmaterialen med formeln II vari X,betccknar svavel och XRI-gruppen är bunden i 3-position av prolinen kan även erhållas genom behandling av en l,2-dehydroporlin- ester, företrädesvis t-butylestern med formeln 447 477 ¿::;:1~ C0Oalkyl X med ett acyleringsmedel såsom bensylkloroformat, acetyl- klorid etc., till 4,5-dehydroföreningen.
//”\\ I li XI Skydåad -N---cooa1ky1 vilken därefter får reagera med merkaptanen Rl-SH till F/”\\v,S-Rl skyddaåNÄ-Cooalkyl XII vari -S-Rl-substituenten är i transkonfiguration. De N-skyd- dade och alkylgrupperna avlägsnas därefter för att ge det önskade utgàngsmaterialet.
Prolinutgångsmaterialen med formeln II vari Rl betecknar fenyl, substituerad fenyl, fenyl-lägre alkylen eller substi- tuerad fenyl-lägre alkylen kan även erhållas genom behandling av bensylestern av den N-skyddade prolinen med formeln V med alkoholen Rl karboxylat enligt förfarandet av Bittner et al., Chemistry and Industry, 15 mars 1975, sid. 281. Avlägsnandet av den N-skyddande gruppen och bensylestergruppen ger utgångs- -OH i närvaro av trifenylfosfin och dietylazodi- materialet med formeln II.
Hänvisning göres även till följande publikationer för ytter- ligare illustrativ information med avseende på framställning av utgångsmaterial och mellanprodukter: Ondetti et al, U.S.P 4,046,889, 4,lO5,776 och 4,l54,935, Neuberger, J. Chem.
Soc., 1945, sid. 429-432, Patchett et al, J. Amer. Chem. Soc. 79, sid. 185-192 (1957), Baer et al, Can. J. Biochem. och Phys., 37, sid. 583-587 (1959) Sheehan et al,?J. Amer. Chem.
Soc. 85, sid. 3863-3865 (1963), Magerlein, J. Med, Chem. 10, sid. 1161-1163 (1967). De däri åskådliggjorda förfarandena -kan användas som allmänna metoder för syntes och stereo- 'överföring av föreningar användbara enligt föreliggande upp- finning. 447 477 Ytterligare experimentdetaljer âterfinnes i exemplen, som utgör föredragna utföringsformer av uppfinningen och även tjänar som modell för framställning av andra medlemmar i gruppen.
Föreningarna enligt föreliggande uppfinning bildar basiska salter med en mångfald oorganiska eller organiska baser.
Den saltbildande jonen som härleds från sådana baser kan vara metalljoner, t.ex. aluminium, alkalimetalljoner såsom natrium eller kalium, alkaliska jordartsmetalljoner, såsom kalcium eller magnesium eller en aminsaltjon av vilka ett antal är kända för detta ändamål, exempelvis aralkylaminer såsom dibensylamin, N,N-dibensyletylendiamin, lägre alkylaminer, såsom metylamin, t-butylamin, prokain, lägre alkylpiperidiner såsom N-etylpiperidin, cykloalkylaminer såsom cyklohexylamin eller dicyklohexylamin, l-adamantanamin, bensatin eller salter härledda från aminosyror såsom arginin, lycin eller liknande.
De fysiologiskt acceptabla salterna såsom natrium~ eller kalium- salterna kan användas medicinskt på nedan angivet sätt och utgör föredragna utföringsformer av uppfinningen. Dessa och andra salter som inte nödvändigtvis måste vara fysiologiskt acceptabla kan användas för att isolera eller rena en produkt acceptabel för de nedan angivna ändamålen vilket åskådliggöres med dicyklohexylaminsaltet och cyklohexylaminsaltet i exemplen.
Salterna framställes genom reaktion av syraformen av föreningen med en ekvivalent av basen vilket ger den önskade basjonen i ett medium vari saltet utfälles eller i vattenmedium och efter- följande lyofilisering. Den fria syraformen kan erhållas av saltet genom konventionell neutraliseringsteknik, t.ex. med kaliumbisulfat, saltsyra etc.
Föreningarna enligt föreliggande uppfinning inhiberar över- föreingen av dekapeptidangiotensinen I till angiotensin II och kan därför användas för att reducera eller lindra hyper- tension. Föreningarna enligt föreliggande uppfinning ingri- per i renin -r angiotensinogen -r angiotensin I -V angioten- sin TI-Sckverlsäcxl gr-nffixn :JH iJillilurg-ra .unginluxmínövrørffširundn _.. ........- ...__ V ........-.«.«.-... .V-V-flø-w--ø-M- --- 4-47 477 10 enzym och reducera eller eliminera bildning av pressor- substansen angiotensin II. Genom administration av en hypo- tensivt effektiv mängd av en förening innehållande en eller en kombination av föreningarna med formeln I eller fysiologiskt_ acceptabla salter därav kan således hypertension reduceras eller lindras hos däggdjur som lider därav.
En enkeldos, eller företrädesvis två till fyra uppdelade dagsdoser tillhandahållna i en mängd av ungefär 0,1-lOO mg/kg per dag är lämpad för att reducera blodtrycket såsom anges i djurmodellförsöken som beskrivs av S.L. Engel, T.R. Schaeffer, M.H. Waugh och B. Rubin, Prcc. Soc. Exp. Biol. Med. volym 143 (1973) sid 483. Substansen administreras företrädesvis oralt men parenteral administration såsom subkutant, intramuskulärt, intravenöst eller intraperitonealt kan även användas.
Föreningarna enligt föreliggande uppfinning kan användas för att åstadkomma reduktion av blodtryck i kompositioner såsom tabletter, kapslar eller elixir för oral administration eller i sterila lösningar eller suspensioner för parenteral administration. Ungefär 10-500 mg av en förening eller bland- ning av föreningar med formeln I eller fysiologiskt acceptabla salter därav bearbetas med en fysiologiskt acceptabel vehikel, bärare, excipient, ett bindemedel, ett konserveringsmedel, ett stabiliseringsmedel, ett aromämne etc. i en dosenhets- form för accepterad farmaceutisk praxis. Mängden aktiv substans i dessa kompositioner eller preparat är sådan att en lämplig dagsdos erhålles inom ovan angivet omrâde.
Exempel pâ adjuvanter som kan införlivas i tabletter, kapslar och liknande är följande: bindemedel såsom dragant- gummi, akasia, majsstärkelse eller gelatin; excipienter såsom dikalciumfosfat eller mikrokristallin cellulosa, desintegreringsmedel såsom majsstärkelse, potatisstärkelse, alginsyra och liknande, smörjmedel såsom magnesiumstearat, sötningsmedel såsom sackaros, laktos eller sackarin, arom- ämnen såsom pepparmynt, vintergrönolja eller körsbärsarom.
När dosenhetsformen är en kapsel kan den förutom ovan angivet 447 477 ll material innehålla en flytande bärare såsom en fetthaltig olja. Olika andra material kan finnas närvarande som belägg- ning eller för att på annat sätt modifiera den fysikaliska formen av dosenheten. Exempelvis kan tabletter beläggas med shellack, socker eller båda delarna. En sirap eller ett elixir kan innehålla den aktiva föreningen, sackaros som söt- ningsmedel, metyl- och propylparabener som konserveringsmedel, ett färgämne och ett aromämne såsom körsbär- eller orangearom.
Sterila kompositioner för injektion kan beredas enligt kon- ventionell farmaceutisk praxis genom att man upplöser eller suspenderar den aktiva substansen i en vehikel såsom vatten för injektion, en naturligt förekommande vegetabilisk olja såsom sesamolja, kokosnötolja, jordnötolja, bomullsfröolja EIC. tppfinningen àskâdliggöres närmare medelst följande exempel vari temperaturerna avser Celsiusgrader.
Exemnel l i____ l-f3-acetyltio-l-oxopropyl)-trans-4-metoxi-L-prolin a, N-acetyl-trans-4-hydroxi-L-prolin En omrörd suspension av 26,2 g (0,2 mol) trans-4-hydroxi-L- prolin i 400 ml ättiksyra behandlas med 26 ml ättiksyra- anhydrid. Den fasta substansen upplöstes gradvis efter 2 tim- mars omrörning vid rumstemperatur. Lösningen överföres till en 2-liters kolv och lösningsmedlet avlägsnas på rotationsinduns- tare vid en badtemperatur av 450. Den sirupösa återstoden (57,5 g) spädes med 100 ml eter och ger en kristallin fast substans. Efter kylning över natten filtreras den fasta substansen, tvättas med kall eter och torkar i exsickator.
Detta material (35,7 g) pulveriseras och suspenderas i l00 ml eter, kyles och filtreras och ger 33,8 g (98"%) N-acetyl-trans- -4-hydroxi-L-prolin, 128-1310. Omkristalllsation av 0,5 g av detta material ur 5 ml acetonitril ger 0,45 g färglös fast substans, smältpunkt 130-1320; [a]š5-920 (c, 1% i Et0H). 447 477 12 b) N-acetyl-trans-4-metcxi-L-prolin, metvlester En blandning av 30,0 g (O,l7 mol) N-acety1-trans-4-hydroxi-L- prolin och 130 g silveroxid pulvriseras i en mortel och denna intima blandning sättes till en 1-liters kolv med 300 ml aceton. Uppslamningen omröres, behandlas portionsvis med 130 ml metyljodid och temperaturen hålles under 400 genom kylning med kallt vattenbad. Efter omrörning i 7 timmar får blandningen stå över natten. Den fasta substansen filtreras, tvättas väl med aceton och filtratet koncentreras på rotationsindunstare och ger 38,3 g av en sirupös återstod. Den senare återlöses i 350 ml aceton och behandlas åter med 130 g silveroxid och 130 ml metyljodid och ger 41 g återstod. Den senare destille- ras och ger 32,2 g destillat; kokpunkt 130-1400 (0,3 mm).
Efter digestion i 30 ml cyklohexan och kylning väger den nästan färglösa fasta substansen N-acetyl-trans-4-metoxi-L- prolinmetylester 31,4 g, smältpunkt 71-750. Omkristallisation ur 31 ml etylacetat ger 25,1 g (66 %) färglös fast substans, smältpunkt 76-77°. [a1š5-s3° (a, 1% i ston). c) trans-4-metoxi-L-prolin Till en omrörd lösning av 27,0 g (0,085 mol) bariumhydroxid BHZO i 525 ml vatten (ungefär 3,3 N) tillsättes 11,0 g (0,05 mol) N-acetyl-trans-4-metoxi-L-prolinmetylester. Den erhållna lösningen omröres vid 18-200 i 3 timmar, kyles och behandlas med utspädd svavelsyra (8,8 g koncentrerad HZSO4 i 20 ml vatten). Den surgjorda suspensionen får stå över natten.
Blandningen filtreras genom ett tjockt lager celit och ger ett "mjölkaktigt" filtrat. Det senare koncentreras på rota- tionsindunstare vid 500 med användning av en högvakuumpump och ger en mjölkartad återstod som väger 121 g. Detta material blandas med utspädd svavelsyra (l9,0 g koncentrerad HZSO4 i 75 ml vatten) och den erhållna blandningen omröres och åter- flödeskokas i 3 timmar. Efter kylning till 300 behandlas blandningen portionsvis med 48 g bariumhydroxid . SHZO och blandningens pH justeras därefter från 6,0 till 4,0 med utspädd svavelsyra. Efter att ha stått över natten filtreras blandningen genom ett tjockt lager celit. Det "mjölkaktiga" 447 477 13 filtratet koncentreras på ovan angivet sätt och ger 50 g färglös torr återstod. Den senare behandlas med 200 ml het kloroform och filtreras genom en celitbädd för att avlägsna bariumsulfatet. Det lätt grumliga filtratet koncentreras på rotationsindunstare och ger ett gelatinöst material (l7,7 g), suspenderat i l00 ml eter och filtreras och ger 7,5 g (94%) nästan färglös fast substans, smältpunkt 185-1900 (sönder- delning). Detta material suspenderas i 30 ml varm acetonitril, kyles och filtreras och ger 4,0 g (50%) av en färglös fast trans~4-metoxi-L-prolin, smältpunkt 209-2110 (sönderdelning); [1]š5-75° (C, 1 % 1 ston). d) l-(3-acetyltio-l-oxopropyl)~trans-4-metoxi-L-prolin En lösning av 3,5 g (0.024 mol) trans-4-metoxi-L-prolin i 50 ml vatten omröres, kyles till 50 och 3 g natriumkarbonat tillsättes. Denna blandning behandlas med en lösning av 4,0 g (0,024 mol) 3-acetyltiopropionylklorid i 5 ml eter under loppet av 10 minuter med intermittent tillsats av 3 g natrium- karbonat för att hålla blandningens pH vid ungefär 8,0. Bland~ ningen omröres på isbad i ytterligare en timme, 25 ml vatten tillsättes och därefter en lösning av 5 ml koncentrerad salt- syra i 25 ml vatten (C02-utveckling). Den starkt sura lös- ningen nättas med natriumklorid och extraheras med 50 ml etylacetat (4 gånger). De organiska faserna kombineras, torkas (MgS04), filtreras och lösningsmedlet indunstas och ger 6,0 g (90 %) färglös sirap l-(3-acetyltio-l-oxopropyl)- trans-4-metoxi-L-prolin. Denna syra upplöses i 25 ml etyl- acetat och behandlas med 4,7 g dicyklohexylamin och ger en lösning som snabbt blir en fast massa. Ytterligare 15 ml etylacetat tillsättes och blandningen behandlas på àngbad, kyles och filtreras och ger 8,7 g dicyklohexylaminsalt, smältpunkt 170-1720. Efter omkristallisation ur 60 ml acetonitril väger den färglösa fasta substansen 8,3 g (75 a) smältpunkt 171-173°; [a1š5-35° (C, % 1 ston).
Dicyklohexylaminsaltet överföres till l-(3-acetyltio-l- oxopropyl)trans-4-metoxi-L-prolin genom suspendering av 8,0 g i 60 ml etylacetat kyld på isbad och portionsvis behandling 447 477 14 med 60 ml lO %-ig kaliumbisulfat. De klara skikten separeras och den vattenhaltiga andelen extraheras med 60 ml etyl- acetat (2 gånger). De organiska faserna kombineras, torkas (MgS04), filtreras och lösningsmedlet indunstas och ger 4,6 g (80 %) färglös sirap.
Exempel 2 l-(3-merkapto-leoxopropyl)-trans-4-metoxi-L-prolin Till l-(3-acetyltio-l-oxopropyl)-trans-4-metoxi-L-prolinen erhâllen i exempel l (4,6 g, 0,0l7 mol) sättes en kall lösning av 9 ml koncentrerad ammoniak i 22 ml vatten. Basen upplöses i ungefär 30 minuter och den erhållna lösningen (under argon) får stå i 2 timmar vid rumstemperatur. Denna lösning kyles, extraheras med 25 ml etylacetat (2 X) och etylacetatextraktet kastas. Lösningen skiktas åter med 25 ml etylacetat och sur- göres med l7 ml l:l saltsyra. Blandningen skakas, separeras och vattenfasen extraheras med 25 ml etylacetat (3 X). De organiska faserna kombineras, torkas (MgSO4), filtreras och lösningsmedlet avlägsnas på rotationsindunstare och ger 2,3 g (59 %) färglös sirap, 1-(3-merkapto-l-oxopropyl)-trans-4- ° (c, i ston), Rf 0,49 (meon på silikagel, visualiserad med nitroprussidreagens).
Analys beräknat för C9Hl5NO4S . l/4H2O: C 45,46; H 6,57; N 5,87; S 13,48.
Funnet: C 45,42; H 6,78; N 5,96; S l3,27. -metoxi-L-prolin, [d]š5-60 Ytterligare l,l g av produkten (totalt 3,4 g, 87 %) erhålles genom att vattenfasen mättas med natriumklorid och extraheras med 25 ml etylacetat (2 X).
Natriumsaltet bildas genom behandling av sirapen med vatten- haltig natriumbikarbonat och frystorkning.
Exempel 3 (trans)-l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l~oxopropyl]-4-metoxi-L- -prolin En lösning av 4,3 g (0,029 mol) trans-4-metoxi-L-prolin i 50 ml vatten omröres, kyles till 50 och 3 g natriumkarbonat 447 477 15 tillsättes. Denna lösning behandlas med 5,2 g (0,029 mol) D-3-(acetyltio)-2-metylpropionylklorid i 5 ml eter under loppet av 10 minuter med intermittent tillsats av 3 g natriumkarbonat för att bibehålla blandningens pH vid ungefär 8,0. Denna bland- ning omrördes i isbad i 1,5 timmar, 25 ml vatten tillsättes och därefter en lösning av 6 ml koncentrerad saltsyra i 25 ml vatten (C02 utveckling). Den bildade starkt sura lösningen extraheras med 50 ml etylacetat(4 X). De organiska faserna kombineras, torkas (MgS04), filtreras och lösningsmedlet indunstas och ger 6,1 g (73 %) (trans)-l-[D-3-(acetyltio)-2- -metyl-l-oxopropyl]-4-metoxi-L-prolin som ljust gul sirupös återstod. Denna syra upplöses i 50 ml etylacetat och behand- las med en lösning av 4,0 g dicyklohexylamin i 20 ml etyl- acetat. Produkten börjar kristallisera ur lösningen inom ungefär l minut. Efter kylning över natten filtreras den nästan färglösa fasta substansen och torkas och ger 6,7 g smaitpunkt 175-177° [a]25-55° (a, i ston) . Efter kirstalli- sation ur 60 ml acetoniäril väger det nästan färglösa fasta dicyklohexylaminsaltet 5,6 g (41 %), smältpunkt 179-1810, [oqšf -e2° (c, i ston).
Dicyklohexylaminsaltet överföres till syran genom suspen- dering av 5,5 g i 50 ml etylacetat, kylning i isbad och be- handling med 50 ml 10 %-ig kaliumbisulfat. Skikten separeras och vattenandelen extraheras med 50 ml etylacetat (2 X).
De organiska faserna kombineras, torkas (MgS04), filtreras och lösningsmedlet indunstas och ger 3,4 g (41 %) av den nästan färglösa (trans)-l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]- -4-metoxi-L-prolinen som en sirap.
Exemoel 4 (trans)~4-metoxi-l-(D-3-merkapto-2-metyl-1-oxopropyl)-L-prolin Till (trans)-l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxepropyl]-4-metoxi- L-prolin (3,4 g) sättes en kall lösning av 8 ml koncentrerad ammoniak i 20 ml vatten. Basen upplöses inom ungefär 10 minuter och den erhållna lösningen (under argon) får stå vid rums- temperatur i 2 timmar. Denna lösning kyles, extraheras med 447 477 l6 20 ml etylacetat (2 X), skiktas med 20 ml etylacetat och surgöres med 15 ml l:l saltsyra. Denna blandning mättas med natriumklorid, skikten separeras och vattenfasen extraheras med 20 ml etylacetat (3 X). De organiska faserna kombineras, torkas, (MgSO4), filtreras och lösningsmedlet indunstas och ger 2,9 g (100 %) nästan färglös (trans)-4-metoxi-l- -(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-L-prolin, [a]š5-800 (c, 1% i EtOH); Rf nítroprussidreagens).
Analys beräknad för CloHl7NO4S . l/4H2O: C 47,69; H 6,83; X 5,56; S 12,73.
Funnet: C 47,90; H 6,84; N 5,85; S 12,76. 0,53 (MeOH på silikagel, visualiserad med Exemgel 5 trans)-l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-etoxi-L- -erolin Med användning av förfarandet i exempel 3 men genom att er- sätta ekvivalent mängd trans-émætoxi-L-prolin (J. Med. Chem., Vol. l0, (1967) s. ll6l, med (trans)-4-etoxi-L-prolin erhålles trans)-l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-etoxi-L- -prolin. Produkten renas som dicyklohexylaminsalt, smältpunkt 170-1720 (kristalliserad ur isopropylalkohol); [d]š5-649 (C, l% i EtOH\.
Detta salt (7,75 g) överföres till den fria syran genom be- handling med kaliumbisulfatlösning såsom beskrivits i exempel 4 och ger 4,85 g nästan färglös (trans)-l-[D-3-(acetyltio)-2- metyl-l-oxopropyl]-4-etoxi-L-prolin som en sirap.
Exemgel 6 (trans)-4-etoxi-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropvl)-L-prolin Till materialet från exempel 5 (4,85 g) sättes en kall lös- ning av 9 ml koncentrerad ammoniak i 25 ml vatten (under argon). Blandningen behandlas pâ samma sätt som i exempel 4 och ger 4,2 g (lOO %) nästan färglös (trans)-4-etoxi-l-(D-3- -merkapto~2-mctyl~1-oxnprnpyl)-L-prolín som vn sirap,- 1? -ao° (u, u. i ston), R 0,64 (neon ps. siiikagei, ia f 447 477 17 visualiserad med nitroprussidreagens).
Analys beräknat för CllHl9N04S: C 50,55; H 7,33; N 5,36; S 12,27.
Funnet: C 50,34, H 7,34; N 5,39; S 12,11.
Exemgel 7 (cis)-1-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-Metoxi-L- -prolin a) N-karbobensyloxi-cis-4-hydroxi-L-prolin N-karbobensyloxi-4-keto-L-prolin (10 g, 0,038 mol) upplöses i 300 ml metanol och reduceras med 5,8 g (O,l5 mol) natrium- borhydrid i 20 ml vatten såsom beskrivits i JACS, 79 (1957) s. 189 och ger 8,7 g av en skummande produkt. Detta material upplöses i 30 ml etanol, behandlas med 3,5 g cyklohexylamin i en liten mängd etanol och spädes med 500 ml eter. Genom ympning och rivning separeras snabbt det kristallina cyklo- hexylaminsaltet och ger 10,8 g ; smältpunkt 163-1650. Detta cyklohexylamlnsalt behandlas därefter med 30 ml 2N HCl och extraheras med etylacetat (4 x 50 ml) och ger som ett glas- liknande material 8 g N-karbobensyloxi-cis-4-hydroxi-L-prolin. b) N-karbobensyloxi-cis-4-metoxi-L-prolinmetylester N-karbobensy1oxi~cis-4-hydroxi-L-prolin (l3,9 g, 0,052 mol) behandlas med 40 g silveroxid och 40 ml metyljodid (2 X) i aceton (100 ml initialt, därefter 120 ml) såsom beskrivits i exempel 1 (b) och ger 17,5 g (100 %) N-karbobensyloxi-cis-4- metoxi-L-prolin, metylester som en gul olja. c) N~karbobensy1oxi-Cis-4-metoxi-L-prolin N~karbobensyloxi-cis-4-metoxi-L-prolinmetylestern (17,5 g, ungefär 0,052 mol) upplöses i 135 ml metanol, behandlas drogp- vis vid -1° till 4° med 32 m1 (o,o64 mol) 2N__natriumnyaroxia, hållas därefter vid 00 i en timme och vid rumstemperatur över natten. Efter att ha avlägsnat ungefär hälften av lösnings- medlet på rotationsindunstare spädes lösningen med 300 ml vatten, tvättas med eter (tvättvätskan kastas), surgöres 447 477 l8 under kylning med 12,5 ml 1:1 saltsyra till pH 2 och extra- heras med etylacetat (4 x 150 ml). Extrakten kombineras, torkas (MgSO4), filtreras och lösningsmedlet indunstas och ger 15 g av en orange-gul sirap. Den senare upplöses i 60 ml etanol, behandlas med 6 g cyklohexylamin i 10 ml etanol och spädes till 900 ml med eter. Genom ympning och rivning sepa- reras kristallin N-karbobensyloxi-cis-4-metoxi-L-prolin, cyklohexylaminsalt: vikt efter kylning över natten 10,2 g, smältpunkt 148-1so° (S. 144°), [a1š6 -35° Efter omkristallisation ur 40 ml acetonitril väger den nästan färglösa fasta substansen 8,8 g, smältpunkt 150-1520 (s. 1450), [a1š6-34° (C, 1% 1 etanol). (c, % i etanol).
Cyklohexylaminsaltet behandlas med saltsyra och ger 6,9 g (48 %) N-karbobensyloxi-cis-4-metoxi-L-prolin som ljust gul O (c, 1% i etanol). viskös sirap [a]š6-32 d) cis-4-metoxi-L-prolin En blandning av 6,8 g N-karbobensyloxi-cis-4-metoxi-L-prolin, 210 ml 2:1 metanol och vatten och 2,3 g 5 % Pd-C placeras på en hydrogenatcr vid 3 atmosfärer väte i 4 timmar. Bland- ningen filtreras för att avlägsna katalysatorn och filtratet indunstas och ger 3,15 g av en grâaktig fast substans; smältpunkt 218-2200 (sönderdelning). Provet kristalliseras ur metanol-eter och ger färglös cis-4-metoxi-L-prolin, smält- punkt 224-22s° (sönderdeining), [a1ä5-42° Analys beräknat för C H NO ' C 49,64, H 7,64, N 9,65 6 ll 3' Funnet: C 49,63; H 7,71; N 9,54. (c, l % i metanol). e) (cis)-l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-1-oxopropyll-4-metoxi- L-prolin cis-4-metoxi-L-prolin (3 g, 0,02l mol) och 4,2 g (0,023 mol) D-3-acetyltio-2-metylpropionylklorid i 5 ml eter får reagera i 60 ml vatten i närvaro av natriumbikarbonat såsom beskri- vits i exempel 3. Ungefär 20 ml 25 %-ig natriumkarbonat (vikt/volym) erfordras för att initialt ge ett pH av 8,5 och för att hålla detta vid 7,5 till 8,4 under acyleringen. Den resulterande orena viskösa produkten (6,4 g) upplöses i 50 ml - ,~.._.....f_.-,,., ._ _. ,. ,. -f _ .-_-.-_- f--V . .., _ ,..._, -.._ 447 477 19 etylacetat och behandlas med 3,9 g dicyklohexylamin i 20 ml etylacetat. Produkten kristalliserar ur lösningen och filtreras och torkas och ger 6,6 g dicyklchexylaminsalt, smältpunkt 172-114° (S 17o°), [a1š6-eo° (C, % 1 etanol). 6,5 g av detta material omkristalliseras ur 35 ml acetonitril och ger 6 g färglös fast dicyklohexylaminsalt, smältpunkt 173-1750 (S. 17o°), [a]š6-6o° Analys beräknat för Cl2Hl9NO5S.Cl2H23N: C 61,24; H 9,00; N 5,95; S 6,81.
Funnet: C 61,16; H 8,81; N 5,95; S 6,67. (c, % i etanol).
Med användning av förfarandet enligt exempel 3 överföres dicyklohexylaminsaltet till syran genom att suspendera 5,9 g i 60 ml etylacetat, kyla blandningen på isbad och behandla den med 60 ml 10 %-ig kaliumbisulfat. Skikten separeras och vattenfasen extraheras med 50 ml etylacetat (4 X). De organiska faserna kombineras, torkas (MgSO4), filtreras och lösningsmedlet indunstas och ger 3,5 g (60 %) färglös (cis)-l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-metoxi-L- -prolin; smältpunkt 90-920 (sönderdelad med eter), [d]š6-1390 (c, % i etanol), Rf 0,63 (metanol på silikagel).
Analys beräknat för Cl2Hl9N05S: C 49,81; H 6,62; N 4,84. funnet: C 49,85; H 6,66; N 4,97.
Exemgel 8 (cis)-4-metoxi-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l~oxopropyl)-L-prolin (cis)-l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-metoxi-L- -prolin (2,9 g, 0,01 mol) hydrolyseras i l5 ml vatten inne- hållande 6,5 ml koncentrerad ammoniak såsom beskrivits i exempel 4 och ger 2,3 g (93 %) av en extremt viskös (cis)-4- -metoxi~l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-okopropyl)-L-prolin som blir vaxartad när den får stå; [aláo-88o (c, l% i etanol). -w Lxemgel 8a (cis)-4~metoxi-l~(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-L- -orolin-l-adamantanaminsalt En lösning av 0,55 g (0,0022 mol) cis-4-metoxi-l-(D-3- 447 477 20 -merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-L-prolin i 15 ml etylacetat behandlas under argonatmosfär med en varm lösning av 0,34 g (0,0022 mol) l-adamantanamin i 10 ml etylacetat för att ut- fälla saltet. Efter 3 timmar i kyla filtreras en färglös fast substans under argon (lösningsmedlet hålles klibbigt), tvättas med kall etylacetat och torkas i vakuum i 20 timmar och ger 0,7 g (79 %) (cis)-4-metoxi-l-(D-3-merkapto-2-metyl- -l-oxopropyl)-L-prolin-l-adamantanaminsalt, smältpunkt 21s-217° (s. 21o°, sönaeraelning zzoo), fcqšö-ecP, 1% i metanol).
Exemgel 9 (cis)-4-metoxi-l-(3-merkapto-2-metyl-l-oxonropvl)-L-prolin a) (cis)-4-metoxi-l-[3-(bensoyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-L- prolin Reaktion mellan 3-bensoyltio-2-metylpropionylsyraklorid (framställd genom behandling av 3-bensoyltio-2-metylpropan- syra med tionylklorid) och cis-4-metoxi-L-prolin enligt det allmänna förfarandet i exempel 3 ger (cis)-4-metoxi-l-[3- (bensoyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-L-prolin. b) (cis)-ê-metoxi-l-(3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-L-prolin Hydrolys av (cis)-2-metoxi-l-[3-(bensoyltio)-2-metyl~l-oxo~ propyl]~2-prolin med en vattenhaltig ammoniaklösning enligt det allmänna förfarandet i exempel 4 ger (cis)-4-metoxi-l- -(3~merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-L-prolin.
Exemgel 10 (trans)-l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-propoxi-L- prolin a) N-acetyl-trans-4-propoxi-L-prolinpropylester Reaktion mellan 30 g N-acetyl-trans-4-hydroxi-L-prolin från exempel l (a) och llO g silveroxid och llO ml propyljodid i 300 ml aceton enligt förfarandet i exempel l (b) ger l9,6 g (41 %) ljust gul-orange N-acetyl-trans-4~propoxi-L-prolin- propylester, kokpunkt 155-1650 (0,2 mm). 447 477 21 b) N-acetyl-trans-4-propoxi-L-prolin En lösning av 6 g (0,l5 mol) natriumhydroxid i 150 ml vatten sättes till 19,4 g (0,075 mol) N-acetyl-trans-4-propoxi-L- -prolinpropylester och ger en ljust orangefärgad lösning.
Efter att ha fått stå över natten vid rumstemperatur extra- heras lösningen med 60 ml etylacetat (tvättvätskan kastas), surgöres därefter med 1:1 saltsyra, mättas därefter med natriumklorid och extraheras med 50 ml kloroform (3X). De organiska faserna kombineras, torkas (MgSO4), filtreras och lösningsmedlet indunstas och ger 12,6 g brun olja. Den senare upplöses i 80 ml etylacetat och behandlas med en lösning av 10,7 g dicyklohexylaminsalt i 20 ml etylacetat. Saltet kristal- liserar vid rumstemperatur. Efter att ha fått stå över natten under kylning filtreras dicyklohexylaminsaltet och tvättas med kall etylacetat och ger 17,3 g nästan färglös fast dicyklohexylaminsalt; smältpunkt 148-1530. Omkristallisation av detta material ur 125 ml etylacetat ger 14,5 g färglöst dicyklohexylaminsalt; smältpunkt l57~l59O, [a]š5-300 (c, l% i etanol).
Analys beräknat för ClOHl7N04 . Cl2H23N: C 66,63; H 10,17; N 7,07.
Punnet: C 66,47; H 10,22; N 7,06.
Dicyklohexylaminsaltet (14,4 g) överföras till den fria syran genom pulvrisering, suspenderas i 100 ml etylacetat och upp- slamningen behandlas portionsvis med 100 ml 10 %-ig kalium- bisulfat. Den organiska fasen separeras och vattenfasen extraheras med 100 ml etylacetat (ZX). De organiska faserna kombineras, torkas (MgS04), filtreras och lösningsmedlet indunstas och ger 6,7 g (41 %) N-acety1-trans-4-propoxi~L- -prolin som ljust brun vätska. c) (trans)-1-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-1-oxopropyl]-4- -propoxi~L-prolin -w N-acetyl-trans-4-propoxi-L-prolin (6,4 g, 0,03 mol) behandlas med en lösning av 10 g koncentrerad svavelsyra i 100 ml vatten och den erhållna lösningen omröres och återflödeskokas i 3 timmar. Lösningen kyles därefter till 150, behandlas portions- 4-47 477 22 vis med 12 g natriumkarbonat för att överföra pH-värdet till 8,0 och behandlas därefter med en lösning av 5,4 g (0,03 mol) D-3-acetyltio-2~metylpropionylklorid i 5 ml eter under 10 minuter under det att 7 g natriumkarbonat tillsättes för att hålla pH-värdet vid ungefär 8,0. Blandningen omröres därefter i isbad i 30 minuter och vid rumstemperatur i l timme. Pro- dukten isoleras därefter och renas såsom dicyklohexylamin- salt enligt förfarandet i exempel 3 och ger 6,3 g dicyklo- hexylaminsalt, smältpunkt 165-1670 (ur acetonitril), [a]š5-560 (c, l% i etanol).
Analys beräknat för Cl4H23N05S . Cl2H23N: C 62,62; H 9,30; N 5,6l; S 6,43. ' Funnet: C 62,35; H 9,48; N 5,88; S 6,45.
Dicyklohexylaminsaltet (6,1 g) överföres till den fria syran genom suspendering i 60 ml etylacetat, kylning på isbad och behandling med 60 ml 10 %-ig kaliumbisulfat. Skikten separeras och vattenfasen extraheras med 60 ml etylacetat (2X). De _ organiska faserna kombineras, torkas (MgS04), filtreras och lösningsmedlet indunstas och ger 4,0 g (42 %) (trans)-l-[D- ~3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-propoxi-L-prolin som en nästan färglös sirap.
Exemgel ll 1-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-trans-4-propoxi-L-prolin Hydrolys av 4,0 g (trans)-l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxo- propyl]-4-propoxi-L-prolin med 8 ml koncentrerad ammoniak i 20 ml vatten under argonatmosfär enligt förfarandet i exempel 4 ger 3,42 g (97 %) l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)- -trans-4-propoxi-L-prolin som nästan färglös sirap [d]D -720 (c, % i etanol).
Analys beräknat för Cl2H2N04S l/4 H20: C 51,49; H 7,74; N 5,05; S ll,46 '“ Funnet: C 51,66; H 7,76; N 5,94; S 10,51.
Exemgel 12 l-(3-merkapto-l-oxopropyl)-cis-4-metoxi-L-prolin 447 477 23 a) l-(3-acetyltio-l-oxooropyl)-cis-4-metoxi-L-prolin Enligt förfarandet i exempel l (d) behandlas cis-4-metoxi-L- prolin med en lösning av 3-acetyltiopropylklorid i närvaro av natriumkarbonat och ger l-(3-acetyltio~l-oxopropyl)-cis-4- metoxi-L-prolin. b) l-(3-merkapto-l-oxooropyl)-cis-4-metoxi-L-prolin l-(3-acetyltio-l-oxopropyl)-cis-4-metoxi-L~prolinenehydroly- seras med en vattenlösning av ammoniak enligt förfarandet i exempel 2 och ger l-(3-merkapto-l-oxopropyl)-Cis-4-metoxi- ~L-prolin.
Exemgel 13 (cis)-4-etoxi-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l~oxopropyl)-L-prolin a) cis-4-etoxi-L-Erolin Enligt förfarandet i exempel 7, del (a) till (d) men med an- vändning av etyljodid istället för metyljodiden i del (b) erhålles (cis)-4-etoxi~L-prolin. b) (cis)-l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-etoxi- -L-prolin (cis)-4-etoxi~L-prolinen får reagera med en lösning av D-3- -acetyltio-2-metylpropionylklorid i närvaro av natrium- karbonat enligt förfarandet i exempel 7 (e) och ger (cis)-l- -[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl1-4-etoxi-L-prolin. c) (cis)-4-etoxi-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-L- -prolin cis-l~[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-etoxi-L-prolinen hydrolyseras med en lösning av vattenhaltig ammoniak enligt förfarandet i exempel 8 och ger (cis)-4-etoxi-l-(D-3-merkapto- -2~metyl-l-oxopropyl)-L-prolin.
Exemnel 14 (trans)-4-allyloxi-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-L- -orolin a) (trans)-4-allyloxi-L-prolin 4-47 477 24 Med användning av förfarandet i exempel l, del b, men med an- vändning av allylbromid istället för metyljodid erhålles (trans)-N-acetyl-4-allyl-L~prolinallylestern. Den senare hydrolyseras därefter på det sätt som angetts i exempel l, del c, till (trans)-4-allyloxi-L-prolin. b) (trans)-l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-1-oxopropyl]-4-allyloxi- -L-prolin Reaktion mellan (trans)-4-allyloxi-L-prolin från del (a) med en ekvivalent mängd D-3-(acetyltio)-2-metylpropionylklorid enligt förfarandet i exempel 3 ger (trans)-l-[D-3-(acetyltio)- -2-metyl-l-oxopropyl]-4-allyloxi-L-prolin. c) (trans)-4-allyloxi-l-(D-3-merkapto-2-metyl4l-oxopropyl)- -L-prolin (trans)-l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-allyloxi-L- -prolinen hydrolyseras med en vattenhaltig ammoniaklösning enligt förfarandet i exempel 4 och ger (trans)-4-allyloxi-l- -(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-L-prolin.
Exempel 15 l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-trans-4-propargyloxi-L- -orolin a) (trans)~4-propargyloxi-L-prolin Med användning av förfarandet i exempel l, del b, men med an- vändning av propargylbromid istället för metyljodid erhålles (trans)-N-acetyl-4-propargyl-L-prolinpropargylestern. Den senare hydrolyseras därefter på det sätt som angivits i exempel l, del c, till (trans)-4-propargyloxi-L-prolin. b) (trans)-l~[D-3-(acetyltio)-2-metyl~l-oxopropyl]~4~ -propargvloxi-L-prolin Reaktion mellan (trans)-4-propargyloxi-L-prqlin från del (a) med ekvivalent mängd D-3-(acetyltio)-2-metylpropionylklorid enligt förfarandet i exempel 3 ger (trans)-l-[D-3-(acetyltio)- 1-2-metyl-l-oxopropyl]-4-propargyloxi-L-prolin. 25 c) l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-trans*4-propargyloxi- -L-prolin (trans)-l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-propargyl- -L-prolinen hydrolyseras med en vattenhaltig ammoniaklösning enligt förfarandet i exempel 4 och ger l-[D-3-merkapto-2- -metyl-l-oxopropyl)]-trans-4-propargyloxi-L-prolin.
Exempel 16 (trans)-4-bensyloxi-l-(D-3-merkapto-2-metyl-1-oxopropyl)-L- -prolin a) (trans)-4-bensyloxi-L~prolin Med användning av förfarandet i exempel l, del b, men med an- vändning av bensylklorid istället för metyljodid erhålles (trans)-N-acetyl-4-bensyloxi-L-prolinbensylestern. Den senare hydrolyseras därefter på det sätt som beskrivits i exempel l, del c, till (trans)~4~bensyloxi-L-prolin. b) (trans)-l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-l-4- bensyloxi-L-prolin Reaktion mellan (trans)-4-bensyloxi-L-prolin från del (a) med ekvivalent mängd D-3-(acetyltio)-2-metylpropionylklorid enligt förfarandet i exempel 3 ger (trans)~l~[D-3-(acetyltio)- -2-metyl~l-oxopropyl]-4-bensyloxi-L-prolin. c) (trans)-4-bensyloxi-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)- -L-prolin (trans)-l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-1-oxopropyl]-4-bensyloxyl- -L-prolin hydrolyseras med vattenhaltig ammoniaklösning enligt förfarandet i exempel 4 till (trans)-4-bensyloxi-l-(D-3- -merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-L-prolin.
Exempel 17 l-(D-3-merkapto-2-metyl~l-oxopropyl)-trans-4-fenety1oxi-L- -prolin a) (trans)-4-fenetyloxi-L-prolin Med användning av förfarandet i exempel l, del b,men genom att ersätta metyljodiden med fenetylbromid erhålles 447 477 26 (trans)-N-acetyl-4-fenetyloxi-L-prolinfenetylestern. Den senare hydrolyseras därefter på det sätt som beskrivits i exempel l, del c, till (trans)-4~fenetyloxi~L-prolin. b) (trans)-l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-fenetyl- oxi-L-prolin Reaktion mellan (trans)-4-fenetyloxi-L-prolin från del (a) med ekvivalent mängd D-3-(acetyltio)-2-metylpropionylklorid enligt förfarandet i exempel 3 ger (trans)-l~[D-3~(acetyltio)- -2-metyl-l-oxopropyl]-4-fenetyloxi-L-prolin. c) l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxøpropyl)-trans-4-fenetyloxi- -L-prolin Trans-l-[D-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-fenetyloxi-L- -prolin hydrolyseras med en vattenhaltig ammoniaklösning enligt förfarandet i exempel 4 till l-(D-3-merka§to-2-metyl-l-oxo- propyl)-trans-4-fenetyloxi-L-prolin.
Exempel l8 l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-cis-3-metoxi-L-prolin a) l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-cis-3-metoxi-L- -prolin Med användning av förfarandet i exempel 7 men genom att an- vända ekvivalent mängd (cis)-3-metoxi-L-prolin [J. Amer. Chem.
Soc. 85, (1963) s. 3863] i stället för -prolin erhålles l-[D-3-(acetyltiø)-2-metyl~l-oxopropyl]-cis- (cis)~4-metoxi-L- -3~metoxi-L-prolin. b) l-(D-3-merkapto-2-metyl-1-oxopropyl)-cis-3-metoxi-L- -prolin l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-cis-3-metoxi-L- -prolinen hydrolyseras med en vattenhaltig ammoniaklösning enligt förfarandet i exempel 4 och ger l-(D:3;merkapto-2- -metyl-l-oxopropyl)-cis-3-metoxi-L-prolin.
Exemgel 19 l-(D,L-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-trans-3-metoxi~L-grolin 447 477 27 a) l-[D,L-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-trans-3-metoxi- -L-prolin Reaktion mellan ekvivalenta mängder (trans)-3~metoxi-L-prolin (J. Amer. Chem. Soc. 85, (1963) s. 3863 och D,L-3-(acetyltio)- -2-metylpropionylklorid enligt förfarandet i exempel 3 ger l-[D,L-3-(acetyltio)-2-metyl~l-øxopropyl]~trans-3-metoxi-L- -prolin. bl 1-(D,L-3-merkapto~2-metyl-l-oxopropyl)-trans-3-metoxi- -L-prolin l-[D,L-3-(acetyltic)-2-metyl-l-oxopropyl]-trans-3-metoxi-L- prolinen hydrolyseras med en vattenhaltig ammoniaklösning enligt förfarandet i exempel 4 och ger l-(D,L-3-merkapto-2- -metyl-l-oxopropyl(-trans-3-metoxi-L-prolin.
Exemnel 20 l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxonropyl)-cie~4-metyltio-L-prolin a) l-[D~3-(acetyltio)-2-metyl-1-oxopropyl]-cis-4-metyltio- -L-prolin Reaktion mellan ekvivalenta mängder cis-4-metyltio-L-prolin ïJ. Amer. Chem. Soc., 79, (l957) s. 185] och D-3-(acetyltio)- -2-metylpropionylklorid enligt förfarandet i exempel 3 ger l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-cis-4-metyltio-L- -prolin. b) l~(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-cis-4-metyltio-L- -prolin l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-cis-4-metyltio~L- -prolinen hydrolyseras med en vattenhaltig ammoniumlösning enligt förfarandet i exempel 4 och ger l-(D-3-merkapto-2- -metyl-l-oxopropyl)-cis-4-metyltio-L-prolin.
Exemgel 21 '* l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-trans-4~metyltio-L-prolin a) l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-trans-4-metyltio- -L-prolin 447 477 28 Reaktion mellan ekvivalenta mängder trans-4-metyltio-L-prolin [J. Amer. Chem. Soc., 79, (1957) s. l8fl och D-3-(acetyltio)~2- -metylpropionylklorid enligt förfarandet i exempel 3 ger l~[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-trans-4~metyltio-L- -prolin. b} l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-trans-4-metyltio-L- -prolin l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-1-oxopropyl]-trans-4-metyltio-L- -prolinen hydrolyseras med en vattenhaltig ammoniaklösning enligt förfarandet i exempel 4 och ger l-(D-3-merkapto-2- -metyl-l-oxopropyl)-trans-4-metyltio-L-prolin.
Exempel 22 l-(D-3-merkapto-3-metyl-l-oxopropyl)~cis-4-(4-pentenyltio)- -L-prolin a) (cis)-4-(4-pentenyltio)-L-prolin Reaktion mellan (cis)-N-acetyl-4-merkapto-L-prolin [Chem.
Pharm. Bull., 20, (l972) s. 543] och 5-brom-l-penten i aceton i närvaro av silveroxid enligt förfarandet i exempel l, del b, ger (cis)-N-acetyl-4-(4-pentenyltio-L-prolin-4~pentenyl- estern. Den senare hydrolyseras därefter på det sätt som beskri- vits i exempel 1, del c, och ger cis-4-(4-pentenyltio)-L-prolin. b) LID-3-(acetyltio)-3-metyl-l~oxopropyl]-cis-4-(4-pentenyl- ti0)~L-prolin Reaktion mellan cis-4-(4-pentenyltio)-L-prolin med ekvivalent mängd D-3-(acetyltio)-3-metylpropionylklorid enligt förfaran- det i exempel 3 ger l-[D-3-(acetyltio)-3-metyl-l-oxopropyl]- -cis~4-(4-pentenyltio)-L-prolin. c) l-(D-3-merkapto-3-metyl~l-oxopropyl)-cis-4-(4-pentenyl- tio)-L-prolin _* l-[D-3-(acetyltio)-3-metyl-l-oxopropyl]-cis-4-(4-pentenyltio)- ~L-prolinen hydrolyseras med en vattenhaltig ammoniaklösning enligt förfarandet i exempel 4 och ger l-(D-3-merkapto~3- I ~metyl-l-oxopropyl)-cis-4-(4-pentenyltio)~L-prolin. 447 477 29 Exemgel 23 (trans)-l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-metoxi-L- -prolinmetylester En lösning av materialet från exempel 3 i eter behandlas med ett lätt överskott diazometan. Efter att ha fått stå vid rumstemperatur indunstas lösningsmedlet och ger (trans)-l~[D- -3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-metoxi-L-prolinmetylester.
Pâ samma sätt erhålles med användning av cis-materialet från exempel 7 enligt detta förfarande (cis)-l-[D-3-(acetyltio)-2- -metyl-l-oxopropyl-4-metoxi-L-prolinmetylester.
Exemgel 24 l,l'-[Ditiodi~(l-D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)]-bis- -[(trans)-4-metoxi-L-prolin] En lösning av materialet från exempel 4 upplöses i etanol, omröres och behandlas med en lösning av en ekvivalent jod i etanol. Lösningens pH hålles vid 6-7 genom tillsats av N- -natriumhydroxidlösning. Lösningsmedlet indunstas och åter- stoden extraheras med etylacetat. Efter torkning över MgSO4 filtreras lösningen och lösningsmedlet avlägsnas och ger l,l'-[ditiodi(l-D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)]~bis- -X(trans)-4-metoxi-L-prolin].
På samma sätt men med användning av cis-materialet från exempel 8 erhålles enligt detta förfarande l,l'-[ditiodi-(l- -D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)]-bis~[(cis)-4-metoxi~L- -prolin].
Exemgel 25 Natriumsaltet av (trans)-4-metoxi-l-(D-3~merkapto-2-metyl-l- -oxopropyl)-L-prolin En lösning av 2,5 g av materialet från exemfiël 4 i 25 ml vatten behandlades med 0,85 g natriumbikarbonat. Lösningen frystorkas för att ge natriumsaltet av (trans)-4-metoxi-l- -{D-3-merkapto~2-metyl-l-oxopropyl)-L-prolin. 447 477 30 På samma sätt erhåller man med användning av cis-materialet från exempel 8 enligt detta förfarande natriumsaltet av (cis)- -4-metoxi-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-L-prolin.
Exempel 26 l-(4-merkapto-l-oxcbutyl)-cis-4-metoxi-L-prolin a) (cis)-l-(4-acetyltio-l-oxobutyl)-4-metoxi-L-prolin Reaktion mellan en ekvivalent mängd (cis)-4-metoxi-L-prolin och 4-acetyltiobutyroylklorid enligt förfarandet i exempel l ger (cis)-l-(4-acetyltio-l-oxobutyl)-4-metoxi-L-prolin. b) 1-(4-merkapto-1-oxobutyl)-cis-4-metoxi-L-prolin Hydrolys av (cis)-l-(4-acetyltio-l-oxobutyl)~4-metoxi-L- -prolin med en vattenhaltig ammoniaklösning enligt förfarandet i exempel 2 ger l-(4-merkapto~l-oxobutyl)-cis-4-metoxi-L- -prolin.
Exemgel 27 1-(L-3-merkapto-2-etyl-l-oxopropyl)-trans-4-metoxi-D-prolin a) (trans)-l-[L-(3-acetyltio)-2-etyl-l-oxopropyl]-4-metoxi- -D-nrolin Med användning av förfarandet i exempel l men genom att an- vända (trans)-4-hydroxi-D-prolin istället för (trans)-4- -hydroxi-L-prolinen i del (a) erhålles (trans)-4-metoxi-D- -prolin. Genom att låta den sistnämnda föreningen reagera med L-(3-acetyltio)-2-etylpropionylklorid enligt förfarandet i exempel 3 erhålles (trans)-l-[L-(3-acetyltio)-2-etyl-l-oxo- propyl]-4-metoxi-D-prolin. b) l-(L-3-merkapto-2-etyl-1-oxopropyl)-trans-4-metoxi-fi- -prolin Hydrolys av (trans)-l-[L-(3-acetyltio)-2-etylLl-oxopropyl]- -4-metoxi-D-prolin med en vattenhaltig ammoniaklösning enligt förfarandet i exempel 4 ger 1-(L~3-merkapto-2-etyl-l-oxo- propyl)-trans-4~metoxi-D-prolin. 447 477 31 Exemnel 28 l-(2-merkapto-l-oxoetyl)-trans-4-metoxi-L-prolin a) trans)-l-(2-acetyltio-l-oxoetyl)~4~metoxi-L-prolin Med användning av förfarandet i exempel l men genom att an- vända 2-acetyltioacetylklorid istället för 3-acetyltiopropionyl- kloriden erhålles (trans)-l-(2-acetyltio-l-oxoetyl)-4-metoxi- -L-prolin. b), l-(2-merkapto-l-oxoetyl)-trans-4-metoxi-L-prolin Hydrolys av trans-l-(2~acetyltio-l~oxoetyl)-4-metoxi-L-prolinen med en vattenhaltig ammoniaklösning enligt förfarandet enligt exempel 2 ger l-(2-merkapto-l-oxoetyl)-trans-4-metoxi-L- -prolin.
Exemoel 29 l-(2~merkapto-l-oxoetyl)-cis-4-metoxi-L-prolin a) (cis)-l-(2-acetvltio-l-oxoetyl)-4-metoxi-L-prolin cis-4-metoxi-L-prolin behandlas enligt förfarandet i exempel 28 med en lösning av 2-acetyltioacetylklorid i närvaro av natriumkarbonat till (cis)-l-(2-acetyltio-l-oxoetyl)-4- -metoxi-L-prolin. b) l-(2-merkapto-l-oxoetyl)-cis-4-metoxi-L-prolin Hydrolys av (cis)-l-(2-acetyltio-l-oxoetyl)-4-metoxi-L- -prolin med en vattenhaltig ammoniaklösning ger l-(2-merkapto- -l-oxoetyl)-cis-4-metoxi-L-prolin.
Exemgel 30 l-(2-merkapto-l-oxoetyl)-cis-4-metyltio-L-prolin a) (cis)-l-(2-acetvltio-l-oxoetyl)-4-metyltio-L-prolin Reaktion mellan ekvivalenta mängder (cis)-4-metyltio-L- -prolin [J. Amer. Chem. Soc., 79, (1957) s. l85] och 2~ -acetyltioacotylklcrid enligt förfarandet i exempel l ger (cis)-l-(2-acetyltio-l-oxoetyl)~4~metyltio~L-prolin. 447 477 32 b) l-(2-merkapto-l-oxoetyl)-cis-4-metyltio-L-prolin Hydrolys av (cis)-l-(2-acetyltio-l-oxoetyl)-4-metyltio-L- -prolin med en vattenhaltig ammoniaklösning enligt förfaran- det i exempel 2 ger 1-(2-merkapto-l-oxoetyl)-cis-4-metyltio- -L-prolin.
Exempel 31 l-(D-3-merkapto-3-metyl-l-oxopropyl)-cis-4-(4-pentynyltio]- -L-prolin a) (cis)-l-[D-3-(acetyltio)-3-metyl-l-oxopropyl]-4-(4- -pentynyltio)-L-prolin Reaktion mellan (cis)-N-acetyl-4-merkapto-L-prolin och 5- -klor-l-pentyn i aceton i närvaro av silveroxid enligt för- farandet i exempel l, del b, ger (cis)-N-acetyl-4-(4-pentynyl- tio)-L-prolin~4-pentynylester. Den senare hydrolyseras där- efter på det sätt som angetts i exempel l del c och ger (cis)-N-acetyl-4-(4-pentynyltio)-L-prolin. Reaktion mellan denna förening och en ekvivalent mängd D-3-(acetyltio)-3- -metylpropionylklorid enligt förfarandet i exempel 3 ger (cis)-l-[D-3-(acetyltio)-3-metyl-l-oxopropyl]-4-(4-pentynyl~ tiO)~L-prolin. b) l-(D-3-merkapto-3-metyl-l-oxopropyl)-cis-4-(4-pentynyl- tio)-L-prolin Hydrolys av (cis)-l-[D-3-(acetyltio)-3-metyl-l-oxopropyl]- -4-(4-pentynyltio)-L-prolin med en vattenhaltig ammoniaklös- ning enligt förfarandet i exempel 4 ger l-(D-3-merkapto-3- -metyl-l-oxopropyl)-cis-4-(4-pentynyltio)-L-prolin.
Exempel 32 (cis)-4-bensyltio-l-(D,L,-3-merkapto-3-etyl-l-oxopropyl)-L- ~pro1in aí (cis) -1- in, L-a- (acetyiuio) -3-ety1.-1~oxopropy1] -fz-bensyitio- -L-prolin Reaktion mellan (cis)-N-acetyl~4-merkapto-L-prolin och bensyl- klorid i aceton i närvaro av silveroxid enligt förfarandet i 447 477 33 exempel l, del b ger (cis)-N-acetyl~4-bensyltio~L-prolin- bensylester. Den senare hydrolyseras såsom beskrivits i exempel l, del c och ger (cis)-N-acetyl-4-bensyltio-L-prolin.
Reaktion mellan denna förening och en ekvivalent mängd D,L-3-(acetyltio)valeroylklorid enligt förfarandet i exempel 3 ger (cis)-l-[D,L-3-(acetyltio)-3-etyl-l-oxopropyl]-4- -(bensyltio)-L-prolin. b) (cis)-4~bensyltio-l-(D,L-3-merkapto-3-etyl-l-oxopropyl)- -L-prolin _ Hydrolys av (cis)-l-[D,L-3-(acetyltio)-3-etyl~l-oxopropyl]- -4-(bensyltio)-L-prolin och en vattenhaltig ammoniaklösning enligt förfarandet i exempel 4 ger (cis)-4-bensyltio-l-(D,L-3- -merkapto-3-etyl-l-oxopropyl)-L-prolin.
Exemgel 33 l,l'-[ditiodi-(l~D-3-merkapto-2-metyl-l~oxopropyl)]-bis- -I(trans)-4-metyltio-L-nrolin] Produkten enligt exempel 21 behandlas med jod i etanol enligt förfarandet i exempel 24 och ger l,l'-{ditiodi-(l-D~3-merkapto- -2-metyl-l-oxopropyl)]bis[(trans)-4-metyltio-L~prolin].
Exemgel 34 (cis)41-[D~3-(bensoyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-metyltio-L~ -prolin Reaktion mellan ekvivalenta mängder (cis)-4-metyltio~L~prolin [J. Amer. Chem. Soc., 79, (1957) s. 185] och D~3-(bensoyltio)- -2-metyl-propionylklorid enligt förfarandet i exempel 3 ger (cis)-l-[D-3-(bensoyltio)-2-metyl-l-oxo-propyl]-4-metyltio-L- -prolin.
Exemgel 35 (trans)-l-[D-3-(fenylacetyl)-2~metyl-l-oxoproëyl]-4-metyltio- -L-prolin Reaktion mellan ekvivalenta mängder (trans)~4-metyltio-L~prolin [J. Amer. Chem. Soc., 79, (l957) s. 185] och D-3-(fenylacetyJ- tio)-2-metylpropionylklorid enligt förfarandet i exempel 3 ger 447 477 34 (trans)-l-[D-3-(fenylacetyl)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-metyl- tio-L-prolin.
Exempel då (cis)-4-(4-fluorfenoxi)-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)- -L-orolin a; (cis)-4-(4-fluorfenoxi)-L-prolin Till en lösning av 8,4 g (0,024 mol) N-karbobensoxi-trans- -4-hydroxi-L-prolinbensylester [Baer et al., Can. J. Bioxhem. & Phys., 37, (1959) s. 5831, 4,0 g (0,036 mol) 4-fluorfenol och 9,27 g (0,036 mol) trifenylfosfin i 75 ml torr tetrahydro- furan sättes droppvis under l timme 6,2 g (0,036 mol) dietyl- azodikarboxylat i 25 ml tetrahydrofuran. Lösningen_omröres över natten vid rumstemperatur. Blandningen indunstas till torrhet och lOO ml eter sättes till återstoden. En fällning av trifenylfosfin och dietylazodikarboxylat avfiltreras.
Kolonnkromatografi (silikagel) separerar ut 8,1 g av en CL 'O blandning innehållande ungefär 70 N-karbobensoxi-cis-4- -(4-fluorfenoxi)-L-prolinbensylester.
En lösning av 7,5 g av en blandning innehållande den ovan- nämnda bensylestern hydreras vid en atmosfär (rumstemperatur) med 0,8 g 10 -ig Pd/C. En vit fällning bildas under reak- tionen. När väteupptagningen upphört filtreras blandningen och filterkakan urlakas med tre l25 ml portioner het metanol.
Metanollösningen indunstas till torrhet och ger 3,2 g cis- -4-(4-fluorfenoxi)-L-prolin; smältpunkt 235-2360. lHl2FNO3 . l/3 H20: C 57,14; H 5,48; % Analys beräknat för Cl N 6,06; F 8,22 Funnet: C 56,94; H 5,19; N 5,94; F 7,97. b) l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-cis-4-(4-fluor- fenoxi)-L-prolin _ ~ Till en suspension av 2,25 g (0,0l mol) cis~4-(4-fluorfenoxi)- -L-prolin i 125 ml torr pyridin vid rumstemperatur tillsättes 1,0 g (0,0l nml) trictylamin och 2 g (0,0ll mol) D-3-(acetyL- tio)-2-metylpropionylklorid. Efter omrörning över natten vid 447 477 35 rumstemperatur indunstas blandningen till torrhet. Återstoden upptas i vatten, täckes med eter och surgöres med 10 %-ig salt- syran Vattenskiktet extraheras upprepade gånger med eter, eterskikten kombineras, tvättas med vatten, torkas (Na2SO4) och indunstas till torrhet och ger 3,9 g återstod. Åter- stoden kromatograferas på 250 ml silikagel med eter och ger en fraktion innehållande den önskade produkten. Kolonnen tvättas med metanol och metanoltvättvätskorna återkromatogra- feras på en kort silikagelkolonn för att ge mera av produkten.
Detta förfarande upprepas ännu en gång och ger totalt l,2 g ren l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-cis-4-(4-fluor- fenoxi)-L-prolin. c) (cis)-4-(4-fluorfenoxi)-l-(D-merkapto-2-metyl-l-oxo- propyl)-L-prolin l,2 g l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-cis-4-(4- fluorfenoxi)-L-prolin upplöses i 25 ml metanol och behandlas med 5 ml koncentrerad ammoniak under argonatmosfär i 40 minuter. De flyktiga beståndsdelarna avdrages och återstoden täckes med etylacetat. Vattenskiktet surgöres med 10 %~ig saltsyra. Skikten separeras och det sura skiktet tvättas med etylacetat. De kombinerade organiska skikten avdrages med vatten (2 X), mättad natriumkloridlösning (2 X) och torkas (Na2S04). Lösningsmedlet avdrages och ger l,l g av en fast skumâterstod av cis-4-(4-fluorfenoxi)-l-(D-3-merkapto-2- -metyl-l-oxopropyl)-L-prolin.
Analys beräknat för Cl5Hl8FN04 . l/3 H20: C 54,05; H 5,70; N 4,20; F 5,70; S 9,60; Funnet: C 54,04; H 5,71; N 4,05; F 5,40; S 9,61.
Tunnskiktskromatografi visade produkten vid Rf 0,30 spårad genom UV-ljus, SH-reagens (gul fläck) och vanilj (gul fläck). [a]š5-800 (c, 1% i kloroform).
Exempel 37 l-(3-merkapto-l-oxopropyl)-cis-4-fenoxi-L-prolin a) (cis)~4-fenoxi-L-prolin 447 477 36 Enligt förfarandet i exempel 36 (a) men genom att använda ekvivalent mängd fenol istället för 4-fluorfenyl erhålles (cis)-4-íenoxi-L-prolin. b) l-[3~(acetyltio)-l-oxopropyl]-cis-4-fenoxi-L~prolin (cis)-4-fenoxi-L-prolin får reagera med en lösning av 3- ~acetyltiopropionylklorid i närvaro av natriumkarbonat enligt förfarandet i exempel l och ger l-[3-(acetyltio)-l-oxopropyl]- -cis-4-fenoxi-L-prolin. c) l-(3-merkapto-l-oxopropyl)-cis-4-fenoxi-L~prolin Hydrolys av l-[3-(acetyltio)-l-oxopropyl]-cis-4-fenoxi-L- -prolin med en vattenhaltig ammoniaklösning enligt förfarandet i exempel 2 ger l-(3-merkapto-l-oxopropyl)-cis-4-fenoxi-L- -prolin.
Exempel 38 l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-cis-4-(4-metylbensyloxi)- -L-prolin Enligt förfarandet i exempel 36 men genom att använda ekviva- lent mängd 4-metylbensylalkohol istället för 4-fluorfenolen i del (a) erhålles l~(D-3-merkapto-2fmetyl-1-oxopropyl)-cis- -4-(4-metylbensyloxi)-L-prolin.
Exempel 39 l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-cis-4-fenetyloxi-L-prolin Enligt förfarandet i exempel 36 men genom att använda en ekvivalent mängd fenetylalkohol istället för 4-fluorfenolen i del (a) erhålles le(D-3-merkapto-2-metyl~l-oxopropyl)-cis- -4-fenetyloxi-L-prolin.
Exempel 40 'a l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-cis-4-(3-metyltiofenoxi)- -L-prolin Enligt förfarandet i exempel 36 men genom att använda en ekvivalent mängd 3-metyltiofcnol istället för 4-fluorfenol i 447 477 37 i del (a) erhålles l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropjl)-cis- -4-(3-metyltiofenoxi)-L-prolin.
Exempel 41 (cis)-4-(4-klorfenoxi)-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)- -L-prolin Enligt förfarandet i exempel 36 men genom att använda en ekvivalent mängd 4-klorfenol istället för 4-fluorfenylen i del (a) erhålles (cis)-4-(4-klorfenoxi)-l-(D-3-merkapto-2- -metyl-l-oxopropyl)-L-prolin. ëgemnel 42 l-(2-merkapto~l-oxoetyl)-cis-4-(4~metoxifenoxi)-L~prolin a) (cis)-4-(4-metoxifenoxi)-L-prolin Enligt förfarandet i exempel 36 (a) men genom att använda en ekvivalent mängd 4-metoxifenol istället för 4-fluorfenolen erhålles (cis)-4-(4-metoxifenoxi)-L-prolin. b) l-I2-(acetyltio)-l~oxoetyl]-cis-4-(4-metoxifenoxi)-L- prolin (Cis}-4-(4-metoxifenoxi)-L-prolinen får reagera med en lösning av 2~acetyltioacetylklorid enligt förfarandet i exempel l, del (d) och ger l-[2-(acetyltio)-l-oxoetyl]-cis-4-(4-metoxi- fenoxi)-L-prolin. c) l-(2-merkapto-l-oxoetyl)-cis-4-(4-metoxifenoxi)-L-prolin Hydrolys av l-[2-(acetyltio)-l~oxoetyl]~cis-4-(4-metoxi- fenoxi)-L-prclin med en vattenhaltig ammoniaklösning enligt förfarandet i exempel 2 ger l-(2-merkapto-l-oxoetyl)-cis-4- -(4-metoxifenoxi)-L-prolin.
Exemnel 43 -' (cis)-4-(4-fluørfenylti0)~l-(D-3-merkapto-2-metyl-l~oxo- pronyl)-L-prolin Enligt förfarandet i exempel 36 men genom att använda en ekvivalent mängd 4-fluorfenylmerkaptan istället för 4-fluor- 447 477 38 fenolen i del (a) erhålles (cis)-4-(4~fluorfenyltio)-l-(D- -3-merkapto-2~metyl-l-oxopropyl)-L-prolin.
Exempel 44 l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-cis-4-fenvltio-L-prolin aï N-karbobensyloxi-cis-4-fenyltio-L-prolinmetylester Natriummetall (O,85 g, 0,037 mol) upplöses i 40 ml absolut etanol. Till detta sättes under omrörning 3,7 ml (0,036 mol) tiofenol följd av 7,5 g (0,0l7 mol) N-karbobensyloxitrans-4- -tosyloxi-L-prolinmetylester [J. Am. Chem. Soc., 79, (1957) s. l9l]. Den senare går gradvis i lösning men strax därefter avskiljs en fast produkt. Efter omrörning i 4 timmar och efter att ha fått stâ över natten vid rumstemperatur indunstas huvudmassan av etanolen pâ rotationsindunstare. Det mesta av den fasta återstoden omröres med 120 ml diklormetan och 60 ml vatten. Skikten separeras (en viss mängd metanol tillsättes för att underlätta uppbrytningen av emulsionerna) och vatten- fasen extraheras med ytterligare diklormetan (2 X 60 ml).
De kombinerade organiska faserna tvättas med lOO ml mättad natriumkloridlösning, torkas (MgS04) och lösningsmedlet indunstas och ger 6,5 g (100 %) N-karbobensyloxi-cis-4- -fenyltio-L-prolinmetylester som en ljust gul viskös olja. b) N-karbobensyloxi-cis-4-fenyltio-L-prolin Metylestern från del (a) (6,5 g, 0,017 mol) upplöses i 55 ml metanol, behandlas portionsvis vid -lo till 40 med l3 ml (0,026 mol) 2N natriumhydroxid omröres vid OO i en timme och hålles vid rumstemperatur i ungefär 16 timmar. Efter att ha avlägsnat ungefär hälften av lösningsmedlet på rotations- indunstare spädes den kylda lösningen med lOO ml vatten, tvättas med 60 ml eter (tvättvätskan kastas), skiktas över 70 ml etylacetat, omröres, kyles och surgöres med 4,8 ml lzl saltsyra. Efter separation extraheras vaêtenfasen med ytterligare etylacetat (3 X 40 ml) och de kombinerade organiska skikten torkas (MgSO4) och indunstas och ger 5,9 g av en ljust gul viskös olja. Den senare upplöses i 30 ml etanol, behand- las med l,9 g cyklohexylamin i 3 ml etanol och spädes med 447 477 39 JS ml eter. Vid ympning avskiljes det kristallina cyklo~ hexylaminsaltet. Det senare väger efter kylning i ungefär ie timmar 5,3 g; smäitpunkt 148-151° (s. 1350). Detta material kombineras med 1,5 g identisk produkt från ett tidigare försök, omröres med 200 ml kokande acetonitril och kyles och ger 6,3 g färglöst cyklohexylaminsalt; smältpunkt l52-1550 rs. 1370) [a1â6 -240 (C, % 1 etanøl).
Detta cyklohexylaminsalt suspenderas i 25 ml etylacetat och srröres och behandlas med 25 ml N saltsyra. När två klara skikt erhållits avskiljes dessa och vattenfasen extraheras med ytterligare etylacetat (3 X 25 ml). De kombinerade skikten torkas (MgS04) och lösningsmedlet indunstas och ger 5,0 g (65 %) N-karbobensyloxi-cis-4-fenetyltio-L-prolin som en nästan färglös mycket viskös sirap. c) (cis)-4-fenyltío-L-prolinhydrobromid N-karbobensyloxi-cis-4-fenyltio-L-prolin (4,9 g, 0,014 mol) behandlas med 25 ml bromväte i ättiksyra (30-32 %) pluggas lätt och omröres magnetiskt. Efter l timme utspädes den orangegula lösningen till 250 ml med eter för att utfälla produkten som en tung olja som gradvis kristalliseras när den ympas, rives och kyles. Efter att ha omrörts i isbad l timme filtreras materialet under kvävgasatmosfär, tvättas med eter, suspenderas i färsk eter, kyles i ungefär 16 timmar och filtreras åter och ger 3,2 g (77 %) av en färglös fast substans (cis)-4-fenyltio~L-prolinhydrobromid; smältpunkt o 7 196-1o9° (S. 99°>, [a156-3- (C, s 1 metanol). d) l-[D~3~(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]~cis-4-fenyltio- -L-prolin Reaktion mellan 3,0 q (0,0094 mol) (cis)-4-fenyltio-L-prolin- hydrobromid och 2,0 g (0,0ll mol) D~3-acetyltio-2-metyl~ tropionylklorid i 25 ml vatten såsom beskrinfts i exempel 1, del (d) (med användning av ungefär 15 ml 20 %-ig natrium- karbonatlösning för att hålla pH~värdet vid 8,0 till 8,4) ger 3,3 g av en ljust gul viskös olja. Dicyklohexylaminsaltet 4-47 477 40 (framställd i 30 ml etylacetat med användning av l,8 g dicyklo- hexylamin) väger 2,9 g (isolerad i två skördar); smältpunkt 184-l88O (s. 1800). Efter sönderdelning med 15 ml acetonitril erhålles 2,4 g färglöstfast dicyklohexylaminsalt; smältpunkt 1254-1860 (s. 18o°), [oqâö-vso, (c, 1% i etanol).
Detta dioyklohexylaminsalt behandlas med 30 ml l0 %-ig kalium- bisulfat och extraheras i etylacetat på det sätt som beskri- vits i exempel l och ger 2,0 a (59 %) glasliknande l-[D-3- -(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-cis-4-fenyltio-L~prolin. e) l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-cis-4-fenyltio-L- -orolln l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-cis-4-fenyltio-L- ~prolin (2,0 g., 0,0042 mol) behandlas med 3,5 ml koncentre- rad ammoniak i 8,5 ml vatten enligt förfarandet i exempel 2 ídetfasta ammoniumsaltet av produkten avskiljes ur reaktions- blandfiingen) ger l,35 g (100 %) viskös sirupös l-(D-3-merkapto- -2-metyl-l-oxopropyl)-cis-4-fenyltio-L-prolin, [a]â6-430 gc, l% i etanol).
Exempel 45 l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)~cis-4-(4-klorfenyltio)- -L-prolin Enligt förfarandet i exempel 44 men genom att använda ekviva- lent mängd 4-klorfenylmerkaptan istället för tiofenolen i del (a) erhålles l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-cis-4- -(4-klorfenyltio)-L-prolin.
Exemoel 46 l~(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-cis-4-(3-trifluormetyl~ fenyltio)-L-prolin Enligt förfarandet i exempel 44 men genom att använda ekviva- lent mängd 3-trifluormetylfenylmerkaptan istället för tio- fenolen i del (a) erhålles l-(D-3-merkapto~2-metyl-l-oxo- 5ropyl-cis-(3-Lrilluurmutylfcnyltio)-L-prolln. 447 477 4l Exemoel 47 (cis)-4-(4-hydroxifenyltio)-l-(3-merkapto-l-oxopropyl)-L- -nrolin a) (cis)~4-(4-acetvloxifenyltio)-L-prolinhydrobromid Enligt förfarandet i exempel 44 (a) till (c) men genom att använda en ekvivalent mängd 4-acetyloxifenylmerkaptan istället för tiofenolen i del (a) erhålles (cis)-4-(4-acetyloxifenyltio)~ -1-prolinhydrobromid. b} (cis)~4-(4-acetyloxifenyltio)-l-[3-(acetyltio}-l-oxopropyl]- -L-nrolin Reaktion mellan (cis)-4-(4-acetyloxifenyltio)-L-prolinhydr0- brcmid och 3-acetyltiopropionylklorid enligt förfarandet i exempel 1, del (d) ger (cis)-4-(4~acetyloxifenyltio)-l- -[3~acetyltio)-l-oxopropyl]-L-prolin. c) (cis)-4-(4-hydroxifenyltio)-l-(3-merkapto-l-oxopropyl)- -L-prolin Hydrolys av (cis)-4-(4-acetyloxifenyltio)-l-[3-(acetyltio)-l- -oxopropyl]-l-oxopropyl]-L-prolin med en vattenhaltig ammoniak- lösning enligt förfarandet i exempel 2 ger (cis)-4-(4-hydroxi- fenyltio)-l-(3~merkapto-l-oxopropyl)-L-prolin. ggemsel 48 (cis)~4-bensyloxi-l-(D-3~merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-L- -prolin Enligt förfarandet i exempel 44 men genom att använda ekviva- lent mängd bensylalkohol istället för tiøfenol i del (a) er- hålles (cis)-4-bensyloxi-l-(D-3-merkapto-2~etyl-l-oxopropyl)-L- -prolin.
Exempel 49 -~ (trans)-l-(3-merkapto-l-oxopropyl)-3-metyltio-D,L-prolin a) l,2-dehydroprolin, t-butylester Till vn omrörd lösninq av 34,2 q (O,20 mul) prnlin-l-buLyl~ ester i 600 ml eter vid -50 till Oo sättes droppvis under 447 477 42 10 minuter 21,7 g (23,9 ml, 0,20 mol) nyframställd t-butyl- ägnkhnüt [Org. Syn., Coll. Vol. V, 184 (lQ73)]. Under till- satsen hâlles temperaturen vid -50 till OO. När tillsatsen är fullständig omröres lösningen vid denna temperatur i ytterligare 5 minuter.
Till den noggrant omrörda lösningen sättes snabbt ('v3-5 minuter) en lösning av 7,8 g (O,20 mol) kalium i nydestilleraà torr (CaH2) t-butanol. Efter tillsatsen är reaktionsblandningens temperatur ungefär 180. Reaktionskärlet avlägsnas från kyl- ningsbadet och omröres i 30 minuter. Reaktionsblandningen filtreras genom celit (diatomacejord) och filtratet koncent- reras i vakuum. Återstoden upptas i eter och tvättas med flera portioner vatten. Eterlösningen torkas och koncentreras i vakuum till 31,6 g gul vätska. Spår av hydrokinon tillsättes och den orena produkten destilleras och ger 22,4 g 1,2- dehydroprolin, t-butylester (66 %), kokpunkt 60-620/0,1 mm. b) l-bensyloxikarbonyl-4,5-dihydro-lH-pyrrol-2-karboxylsyra, t-butylester En lösning av 16,9 g (0,1 mol) 1,2-dehydroprolin, t-butylester i 70 ml diklormetan kyles till -100 under argonatmosfär. En lösning av nydestillerad bensylkloroformat [l4,2 ml, 0,1 mol, kokpunkt 62-64O (0,4 mm)] i 70 ml diklormetan tillsättes droppvis under 30 minuter. Efter omrörning under kyla i ytterligare 30 minuter tillsättes en lösning av 15,22 g (0,1 mol) 1,5-diazabicyklo-[5,4,0]undec-5-en i 70 ml diklor- metan under en 20-minuters period. Kylbadet avlägsnas därefter och blandningen omröres vid rumstemperatur i 1 timme. Efter tvättning 2 gånger med kall utspädd saltsyra och 1 gång med mättad natriumkarbonatlösning torkas lösningen i vakuum och ger 18,2 g (60 %) 1-bensyloxikarbonyl-4,5-dihydro-1H-pyrro1- -2-karboxylsyra, t-butylester som ljust gul olja. c) (trans)-l-bensyloxikarbony1-3-metyltio-D,L-prolin, t-butylester ' 1 En lösning av 18,2 g (0,06 mol) 1-bensyloxikarbonyl-4,5-di- hydro-lH-pyrrol-2-karboxylsyra, t~butylester i 180 ml torr 447 477 43 metanol behandlas med 3,24 g (0,06 mol) natriummetoxid och kyles på isbad. Metantiolen bubblas i lösningen sakta under 30 minuter. Blandningen omröres över natten under argon- atmosfär vid rumstemperatur. Utspädd vattenhaltig saltsyra tillsättes tills lösningen är lätt sur. Argon bubblas genom lösningen i l timme innan den överföres nästan till torrhet i vakuum. Etylacetat tillsättes och lösningen tvättas 2 gånger med mättad natriumkarbonatlösning, torkas och befrias från lösningsmedlet i vakuum och ger 17 g gul olja. Denna olja kromatograferas med användning av 300 g silikagel och petroleumeterzeter (4:l) och ger ll.l g (trans)-l-bensyloxi~ karbonyl-3-metyltio-D,L-prolin som en färglös olja. 'd) (trans)-3-metyltio-D,L-prolin 8,4 g (0,024 mol) (trans)-l-bensyloxikarbonyl-3-metyltio-D,L- prolin behandlas med 45 ml 4N bromvätesyra i ättiksyra.
Efter omrörning i l timme vid rumstemperatur torkas lösningen i vakuum. En liten mängd vatten tillsättes och denna tvättas 2 gånger med eter. Vattenlösningen påföres på en kolonn innehållande 300 ml jonbytarharts och vatten passeras genom kolonnen tills eluatet inte längre är starkt surt. Produkten elueras därefter med pH 6,5 (vattenhaltig pyridinacetat) buffert. Fraktioner, positiva mot ninhydrin, kombineras och lyofiliseras och ger 3,4 g (88 %) vitt ludd. Ett litet prov av detta material kristalliseras ur metanol och ger (trans)- -3-metyltio-D,L-prolin; smältpunkt 196-2000 (sönderdelning) <3. 192°).
Analys beräknat för C6HllO2NS: C 44,70; H 6,88; N 8,96; S 19,89.
Funnet: C 44,53; H 7,10; N 8,61; S 19,95. e) (trans)-l-[3-(acetyltio)-l-oxopropyl]-3-metyltio-D,L-prolin 3,05 g (0,0l9 mol) (trans)-3-metyltio-D,L-proïin upplöses i 19 ml lN natriumkarbonat och spädes med 100 ml vatten. Lös- ningen kyles på isbad och under snabb omrörning tillsättes en lösning av 3-acetyltiopropionylklorid i 20 ml eter. pH- värdet hålles vid 8 genom tillsats av lN natriumkarbonat. 447 477 44 Mot slutet av en 30-minutersperiod hâlles pH-värdet konstant och 45 ml natriumkarbonatlösning tillsattes. Skikten avskihs och vattenskiktet tvättas lo %-iq”kaliumbisulfatlösning och l gång med eter. Vattenskiktet surgörs därefter med produkten extraheras i etylacetat, torkas och befrias från lösningsmedlet i vakuum och ger' 5,2 g olja. Materialet kromatograferas på 150 g silikagel med användning av etyl- acetat för eluering. 3,85 g av en något oren (trans)-l-[3- -(acetyltio)-l-oxopropyl]-3-metyltio-D,L-prolin erhålles.
Ett litet prov upplöses i eter och överföres till dicyklo- hexylaminsaltet som omkristalliseras ur etylacetat och ger (trans)-l~[3-(acetyltio)-l-oxopropyl]-3-metyltio-D,L-prolin, dicyklohexylaminsalt; smältpunkt 153-1570.
H O NS: (C6Hll)2NH: ll 17 4 c 58,44; H 8,53; Analys beräknat för C N 5,83; S 13,57.
Funnet: C 58,77; H 8,57; N 5,68; S 13,74. f) (trans)-l-(3-merkapto-l-oxopropyl)-3-metyltio-D,L-prolin 2,05 g (0,007 mol) (trans)-l-[3-(acetyltio)-l-oxopropyl]- -3-metyltio-D,L-prolin kyles i isbad under argonatomsfär och behandlas med en kall argonmättad blandning av 7 ml vatten och 7 ml koncentrerad ammoniak. Efter omrörning i 30 minuter vid OO surgöres lösningen med saltsyra. Produkten extraheras i etylacetat, torkas och befrias från lösningsmedel i vakuum och ger 1,85 g material som blir partiellt kristallint när det får stå. Sönderdelning med eter ger 1,0 g (57 %) vit kristallin produkt. Omkristallisation ur etylacetat (5 ml) ger 0,85 g (trans)-l-(3-merkapto-l-oxopropyl)-3-metyltio- ~D,L-prolin; smältpunkt 89-930.
Analys beräknat för C9Hl5O3NS2: C 43,35; H 6,06; N 5,62; S 25,72.
Funnet: C 43,35; H 6,27; N 5,54; S 25,91.
Exempel 50 (trans)-l-(D-3-merkapto~2-metyl-l-oxopropyl)-3-etyltio- -D,L-prolin 447 477 45 a) (trans)-3-etyltio-D,L-prolin Enligt det allmänna förfarandet i exempel 49 (a) till (d) men genom att ersätta metantiolen med ekvivalent mängd etyl- merkaptan erhålles (trans)-3-etyl-D,L-prolin. b) (trans)-l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxoproçyl)-3-etyl- tio-D,L-prolin Reaktion mellan (trans)-2-etyltiø-D,L-prolin och D-3-acetyl- tio-2-metylpropionylklorid enligt förfarandet i exempel 3 ger (trans)-l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-3-etyltio- -D,L-prolin. c) (trans)-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-3-etyltio- -D,L-prolin Hydrolys av (trans)-l-[D-3-(acetyltio)-2~metyl-l-oxopropyl]- -3-etyltio-D,L-prolin med en vattenhaltig ammoniaklösning enligt förfarandet i exempel 4 ger (trans)-l-(D-3-merkapto- -2-metyl~l-oxopropyl)-3-etyltio-D,L-prolin.
Exemgel 51 (trans)-l-(3-merkanto-l-oxopropyl)-3-fenyltio-D,L-prolin Enligt det allmänna förfarandet i exempel 49 men genom att ersätta metantiolen med ekvivalent mängd tiofenol erhålles (trans)-l-(3-merkapto-l-oxopropyl)-3-fenyltio-D,L-prolin.
Exemgel 52 (cis)-4-metoxi-l-(D-3-merkapto-2-trifluormetyl-l-oxopropyl)- -L-prolin a) 3-(4-metoxibensyl)tio-2-trifluormetylpropionylklørid En ren blandning av l-trifluormetylakrylsyra (3,9 g) och 4~metoxibensyltio (4,3 g) omröres vid 100-llOO i en timme.
Blandningen kyles till rumstemperatur och den fasta substansen omkristalliseras ur cyklohexan och ger 3-(4-metoxibensyl)tio- -2-trifluormetylpropansyra, smältpunkt 72-740.
Behandling av denna syra med tionylklorid ger 3-(4-metoxibunsyÉ- 447 477 46 tio-2~trifluormetylpropionylklorid. b) (cis)~4-metoxi*l-{D-3-(4~metoxibensyl)tio-2-trifluor- metyl-l-oxopropyl]-L-prolin 3-(4-metoxibensyl)tio-2-trifluormetylpropionylkloriden får reagera med (cis)~4-metoxi-L-prolin och ger (cis)-4-metoxi- -l-[D-3-(4-metoxibensyl)tio-2-trifluormetyl-l-cxopropyl]-L- -prolin. c) (cis)-4-metoxi-l-(D-3-merkapto-2-trifluormetyl-l-oxopropyB- -L-prolin (cis)-4-metoxi-l-[D-3-(4-metoxibensyl)tio-2-trifluormetyl-l- -oxopropyl]-L-proiinen blandas med trifluorättiksyra och anisol och omröres under kvävgas. Lösningsmedlet avlägsnas under vakuum och ger som återstod (cis)-4-metoxi-l-(D-3- ~merkapto-2-trifluormetyl-l-oxopropyl)-L-prolin. Égemnel 53' (trans)-4-metoxi-l-(D-3-merkapto-2-trifluormetyl-l-oxopropyl)- -L-prolin Enligt förfarandet i exempel 52 men genom att ersätta cis- isomeren med (trans)-4-metoxi-L~prolinen erhålles (trans)-4- -metoxi-l-(D-3-merkapto~2-trifluormetyl-l-oxopropyl)-L-prolin.
Exemgel 54 (trans)-4-etoxi-l-(D-3-merkapto)-2-trifluormetyl-l-oxopropyl)- -L-prolin a) 3-acetyltio-2-trifluormetylpropionylklorid En blandning av tiolättiksyra och 2-(trifluormetyl)akrylsyra upphettas på ångbad i l timme och lagras därefter i rumstempera- tur i l8 timmar. Reaktionsblandningen avdestilleras i vakuum och ger 3~acetyltio-2-trifluormetylpropansyra.
Behandling av denna syra med tionylklorid ger 3-acetyltio-2- -trifluormetylpropionylklorid. 447 477 47 b) (trans)-4-etoxi-l-[D-3-(acetyltio)-2-trifluormetyl-l- -oxopropyl]-L-prolin Reaktion mellan 3-acetyltio-2-trifluormetylpropionylklorid och trans-4-etoxi-L-prolin enligt förfarandet i exempel 3 ger (trans)-4-etoxi-l-[D-3-(acetyltio)-2-trifluormetyl-l-oxo- propyl]-L-prolin. c) (trans)-4-etoxi-l-(D-3-merkapto-2-trifluormetyl-l-oxo- prgpyl)-L-prolin Behandling av (trans)-4-etoxi-l-[D-3-(acetyltio)-2-trifluor- metyl-l-oxopropyl]-L-prolin med en vattenhaltig ammoniaklös- ning'enligt förfarandet i exempel 4 ger (trans)-4~etoxi-l- -(D-3-merkapto-2-trifluormetyl-l-oxopropyl)-L-prolin. 447 477 48 Exempel 55 (cis)-4-(l,l-dimetyletoxi)-1-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxo- propyl)-L-prolin (a) N-karbobensyloxi-cis-4-(1,1-dimetyletoxi)-L-prolin, metylester En lösning av 6,0 g (0,02l mol) N-karbobensyloxi-cis~4- hydroxi-L-prolin, metylester i 60 ml metylenklorid placeras i en Parr-bomb, omröres magnetiskt, kyles i ett torris-propanol- bad och behandlas med ungefär 40 ml kondenserad isobutylen följt av 0,75 ml koncentrerad svavelsyra. Bomben förseglas och reaktionsblandningen får uppvärmas till rumstemperatur under fortsatt omröring. Ingen mätbar tryckökning registreras. Efter omröring vid rumstemperatur i 4 dagar öppnas bomben och lös- ningen (80 ml) spädes med 120 ml metylenklorid och tvättas med 5 g natriumbikarbonat i 100 ml vatten. Vattenfasen âterextra- heras med 50 ml metylenklorid, de organiska skikten kombineras och torkas (MgSO4) och lösningsmedlet indunstas och ger 7,5 g N-karbobensyloxi-cis-4-(1,1-dimetyletoxi)-L-prolin, metylester som en ljust gul olja; [a]D25 -460 (c, 1% i kloroform). TLC (på silikagel): Rf 0,62 (etylacetat), Rf 0,43 (7:l bensen: ättiksyra); visualiserad: U.V. I2 ånga. (b) N-karbobensyloxi-cis-4-(l,l-dimetyletoxi)-L-prolin En omrörd lösning av metylestern från del (a) (7,2 g, 0,02 mol) i 15 ml eter kyles i isvatten och behandlas portionsvis med 42 ml (0,042 mol) iskall lN natriumhydroxid. Efter omröring och kylning i totalt 6 timmar avlägsnas kylbadet och omrörin- gen fortsätter över natten vid rumstemperatur. Den klara lös- ningen tvättas med 40 ml eter (tvättvätskan kastas), skiktas med 40 ml etylacetat, omröres, kyles och surgöres med 8 ml 6N saltsyra. Efter separation extraheras vattenfasen med ytterli- gare etylacetat (3 x 40 ml), de organiska skikten kombineras och torkas (MgSO4) och lösningsmedlet indunstas och ger 6,8 g ljust gul viskös olja. Denna olja upplöses i 50 ml aceto- nitril och behandlas med en varm lösning av 3,2 g l-adamantan~ amin i 20 ml acetonitril. Det fasta adamantanaminsaltet av- 447 477 49 skiljes snabbt. Efter kylning över natten filtreras det färg- lösa saltet under kväve, tvättas med kall acetonitril och eter och torkas i vakuum och ger 8,8 g N-karbobensyloxi-cis- 4-(l,l-dimetyletoxi)-L-prolin, adamantanaminsalt; smältpunkt 228°-23o° (sönder-delning), s. 21s°, [oqnzs -280 (c, 1% i meta- nol).
Analys. Beräknat för Cl7H23N05.Cl0Hl7N.O,25 H20: C 67,96; H 8,56; N 5,87. Funnet: C 67,77; H 8,54; N 5,93.
Behandling av det ovan angivna adamantanaminsaltet (8,5 g) med syra ger 5,5 g N-karbobensyloxi-cis-4-(1,l-dimetyletoxi)-L- prolin som en nästan färglös viskös sirap. Tunnskiktskromato- grafi: Rf 0,20 (85:l5 toluen:ättiksyra på silikagel; visuali- serad Iz ånga eller PMA plus värme). (c) cis~4-(1,1-dimetoxietoxi)-L-prolin N-karbobensyloxiprodukten från del (b) (5,5 g, 0,017 mol) hydrogeneras i 165 ml 2:1 metano1:vatten under 3 atmosfärer väte i närvaro av 1,7 g 5%-ig palladium/kolkatalysator och ger 3,2 g av en klibbig, delvis fast produkt. Detta material sus- penderas i 30 ml acetonitril, gnides och kyles över natten och ger 1,35 g cis-4-(l,l-dimetyletoxi)-L-prolin som en färglös fast substans; smältpunkt 2400-2420 (sönderde1nin9); före- gången av gradvis mörkning och "scintering“; [d]D25 -360 (c, 0,5% i metanol).
Analys. Beräknat för C H NO .0,25 H O: C 56,37; H 9,20; 9 17 3 2 N 7,31. Funnet: C 56,26; H 9,27; N 7,26. (d) l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-cis-4-(1,1- dimetyletoxi)-L-prolin cis-4-(1,l-dimetyletoxi)-L-prolinen från del (c) (1,3 g, 0,0069 mol) får reagera med 1,4 g (0,0078 mol) D-3-acety1tio- 2-metylpropionylklorid i 20 ml vatten i närvaro av natrium- bikarbonat enligt förfarandet i exempel 3 och gav 2,2 g av en nästan färglös viskös olja. Den erhållna orena produkten upp- löses i 50 ml etylacetat och behandlas med 1,3 g dicyklohexyl- 447 477 50 amin i 20 ml etylacetat. Produkten kristalliserar ur lösningen och filtreras och torkas och ger 2,65 g dicyklohexylaminsalt; emältpnnkt 181°-ls3°, e. l7o°, [o]Dzs -ez° (o, 1% 1 etanol).
Sönderdelning med 15 ml het acetonitril följt av kylning ger 2,4 g färglöst fast dicyklohexylaminsalt; smältpunkt 1830-1850, e. l75° [o1D2s -e5° (o, % 1 etanol).
Analys. Beräknat för Cl5H25N05S.Cl2H23N: C 63,24; H 9,44; N 5,46; S 6,25. Funnet: C 63,22; H 9,61; N 5,41; S 6,02.
Med användning av förfarandet i exempel 3 överföres 2,4 g av dicyklohexylaminsaltet till syran genom att man suspenderar etylacetat, kyler i isbad och behandlar med 30 ml 10%-ig kaliumbisulfat. Skikten separeras och vattenfasen extraheras med 25 ml etylacetat (4 x). När lösningsmedlet avlägsnats gni- des materialet som blivit partiellt kristallint när det fått stå under 10 ml eter för fullständig kristallisation, spädes med 20 ml hexan, gnides och kyles och ger 1,3 g l~[D-3-(acetyl- tio)-2-netyLl-0xopropy1]-cis-4-(1,1-dimetyletoxi)-L-prolin som en färglös fast substans; smältpunkt 960-980 (s. 93o),[d]D25 -lo9° (o, i etanol).
Analys. Beräknat för Cl5H25NO5S: C 54,36; H 7,60; N 4,23; S 9,68. Funnet: C 53,92; H 7,73; N 4,30; S 9,29. (e) cis-4-(1,1-dimetyletoxi)-1-(D-3-merkapto-2-mety1-l- oxopropyl)-L-prolin 1-[D-3-(acetyltio)-2~mety1-1-oxopropyl]~cis-4-(l,l-dimetyl- etoxi)-L-prolinen från del (d) (1,3 g, 0,0039 mol) hydroly- seras med 2,6 ml koncentrerad ammoniumhydroxid i 6 ml vatten och ger 1,1 g av en glasliknande återstod. Ympkristaller upp- träder i produkten när den får stå. Materialet täckes med 8 ml eter, ympas och rives. När den glasartade produkten går i lösning avskiljes gradvis en kristallin fast substans. Efter 2 timmar vid rumstemperatur tillsättes 20 ml hexan och bland- ningen kyles över natten under argonatmosfär. Lösningsmedlet avlägsnas och ger 1,0 g färglös fast cis-4-(1,1-dimety1oxi)~ 1-(D-3-merkapto-2~mety1-l-oxopropyl)-L-prolin; smältpunkt lo6°-los° (a. lo3°) [o1D25 -7a° (o, lt 1 etanol). 447 477 51 Analys. Beräknat för Cl3H23NO4S.0,25 H20: C 53,12; H 8,06; N 4,77; S 10,91. Funnet: C 53,30; H 8,28; N 4,76; S 10,70.
Exempel 56 (cis)-4-[(4-fluorofenyl)tio]-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxo- propyl)-L-prolin, L-arginin (l:l) salt (a) (trans)-l-[D-3-(bensojtio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4- hydroxi-L-prolin, metylester (D)-3-(bensoyhjo)-2-metylpropansyra (56,05 g, 0,25 mol) sus- penderas i 62,5 ml toluen. Temperaturen faller till l5° och därefter tillsättes 0,386 ml dimetylformamid. Därefter till- sättes 32,7 q (0,25 mol + 10% överskott) tionylklorid allt på en gång under omröring. Temperaturen i reaktionsblandningen faller till 120 och behållaren som använts för att mäta tio- nylkloriden sköljes med 21,2 ml toluen, vilken därefter sät- tes till reaktionsblandningen. Temperaturen ökas gradvis till 350 och hålles där i_l timme. Reaktionsblandningen omröres vid rumstemperatur över natten. Lösningsmedlet och överskott tio- nylklorid avlägsnas och återstoden behandlas tvâ gånger med 100 ml toluen varefter toluenen avlägsnas för att ge 63,4 g (D)-3-(bensoyltio)-2-metylpropansyraklorid.
L-4-hydroxiprolin (32,7 g, 0,25 mol) upplöses i 250 ml vatten vid pH 5,8. Ungefär 60 ml 10%-ig natriumkarbonat tillsättes för att överföra pH tiil 9,3. Lösningen värmas till 3o° och en toluenlösning (75 ml) innehållande 63 g (D)-3-(bensoyl- tio)-2-metylpropansyraklorid tillsättes samtidigt med 10%-ig vattenhaltig natriumbikarbonat under 1 timme vid 300 under det att pH hålles vid 9,0. Lösningen omröres vid pH 9,0 i 1,5 timmar och toluenskiktet avskiljes. Vattenskiktet göres starkt surt med koncentrerad HCl och den kristallina fasta substansen filtreras, tvättas med vatten och lufttorkas och ger 71,4 g (trans)-l-[D-3-(bensoyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-hydroxi-L- prolin; smältpunkt 1950-1960. Omkristallisation ur alkohol ger en smältpunkt av 1960-1970; [a]D25 -1390 (c=l, metanol). 447 477 52 Analys. Beräknat för C16Hl9NO5S: N 4,15; C 56,95; H 5,67; S 9,50. Funnet: N 3,96; C 56,56; H 5,77; S 9,50.
En lösning av 33,7 g (0,1 mol) (trans)-l-[D-3-(bensoyltio)-2- metyl-1~oxopropyIk4-hydroxi-L-prolin och 500 mg p-to1uensulfon- syra i 1 liter metanol återloppskokas milt i ungefär 18 tim- mar. Metanolen avlägsnas och ger 37 g av en viskös återstod som upplöses i 1400 ml eter. Eterlösningen tvättas två gånger med 250 ml vatten, tvâ gånger med 250 ml 5%-ig natriumbikarbo- nat och en gång med 250 ml saltlake och torkas över MgSO4.
Etern avlägsnas och ger 27,3 g kristallin produkt (efter sön- delning med petroleumeter); smältpunkt 640-650. Omkristallisa- tion ur eter ger (trans)-l-[D-3-(bensoyltio)-2-metyl-l-oxo- propyl]-4-hydroxi-L-prolin, metylester; smältpunkt 65,50-670; [Q]D25 -580 (c=l, metanol).
Analys. Beräknat för Cl7H2lNO5S: N 3,99; C 58,10; H 6,02; S 9,12. Funnet: N 3,96; C 57,96; H 6,09; S 9,11. (b) N-(p-fluorofenyltio)succinimid Enligt förfarandet enligt Y. Abe et al., Bull. Chem. Soc.
Japan, volym 46, sid 1898 (1973) behandlas en suspension av l2,l g (90,8 mmol) N-klorosuccinimid.i 500 ml bensen under kvävgas med en lösning av 9,7 g (75,7 mmol) p-fluorotiofenol upplöst i 90 ml bensen. En modest temperaturökníng observeras och reaktionsblandningen blir gulorange. Efter 75 minuter ky- les lösningen till 15°C och behandlas med 9,19 g (90,8 mmol) trietylamin i 90 ml bensen tillsatt under en period av 25 minuter. Kylbadet avlägsnas och reaktionsblandningen omröres i 45 minuter, filtreras därefter och den organiska lösningen sköljes med tre 150 ml portioner vatten, saltlake och torkas (MgSO4). När lösningsmedlen avlägnas i vakuum erhålles 15,8 g oren produkt. Omkristallisation ur kloroform/hexan ger ll,6 g N- (p-fluorofenyltio) -succinimidq smältpunkt 13o°-13s° . 447 477 53 (c) (cis)-l-ID-3-(bensoyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-[(4- fluorofenyl)tio]-L-prolin, metylester En lösning av ll,0 g (48,8 mmol) N-(p-fluorofenyltio)succin- imid i 200 ml bensen behandlas under kvävgasatmosfär med 9,87 g (48,8 mmol) tri-n-butylfosfin i 25 ml bensen. Den er- hållna mörka lösningen omröres i 10 minuter vid rumstemperatur och därefter tillsättes 15,6 g (44,4 mmol) (trans)-l-[D-3- (bensoyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-hydroxi-L-prolin, metyl- ester. Efter omröring över natten vid rumstemperatur spädes reaktionsblandníngen med 200 ml eter och sköljes med fyra 75 ml portioner vatten, saltlake och torkas (MgSO4). Lösnings- medlet avlägsnas under vakuum och ger 32,6 g oren produkt, som absorberas på ungefär 70 g silikagel och kromatograferas på 450 g Baker silikagel, packad och eluerad med 2 liter lzl Et2O:hexan, spädes därefter med 2 liter 2:1 Et2O:hexan och slutligen med 100% eter. De fraktioner som innehåller den bästa produkten samlas och ger 16,7 g (cis)-l-[D-3-(bensoyltio)-2- metyl-1-oxopropyl]-4-[(4-fluorofenyl)tio]-L-prolin, metyl- ester som en olja; [a1D25 -80,2 (c=l, kloroform). (d) (cis)-4-[(4-fluorofenyl)tio]-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l- oxopropyl)-L-prolin, L-arginin (l:l) salt En lösning av 15,7 g (34,0 mmol) (cis)-l-[D-3-(bensoyltio)-2- metyl-l-oxopropyl]-4-[(4-fluorofenyl)tio}L-prolin, metylester i en blandning av 50 ml metanol och 150 ml tetrahydrofuran ky- les på isbad under kvävgasatmosfär. Den kalla lösningen behand- las med 71,4 ml lN vattenhaltig natriumhydroxid tillsatt under en period av l0 minuter. Det kalla badet avlägsnas och reaktio- nen omröres vid rumstemperatur i 5,5 timmar, spädes därefter med 300 ml vatten och tvättas med tre 200 ml portioner eter.
Vattenskiktet kyles under kvävgas på isbad och surgöres till pH l-2 med koncentrerad vattenhaltig HCl, extraheras därefter med tre 200 ml portioner eter. De kombinerade organiska extrak- ten sköljes med 200 ml vatten, saltlake och torkas (MgSO4).
Lösningsmedlen avlägsnas i vakuum och ger ll,7 g oren produkt.
Detta material upplöses i eter och behandlas med en lösning av 5,66 g (37,4 mmol) l-adamantanamin i metanol. Utspädning med 447 477 54 eter ger 15,2 g adamantanaminsalt som omkristalliseras genom upplösning i (lzl) kloroformzmetanol och spädes med eter. Detta förfarande ger l3,3 g av adamantanaminsaltet; smältpunkt 2380- 2400 (sönderdelning). Två ytterligare omkristallisationer ur kloroform-metanol-eter ger 10,6 g (cis)-4-[(4-fluorofenyl)- tio]-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-L-prolin, adamantan- aminsalt; smältpunkt 242°~z43° (sönaerdelning), [a1D25 -s1,s° (c=0,5, metanol).
Ett prov av detta adámantanaminsalt extraheras med etylacetatv ur lN vattenhaltig HCl och ger (cis)-4-[(4-fluorofenyl)tio]-1- (D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-L-prolin; [a]D25 -42,50 (c=l, absolut etanol).
En snabbt omrörd blandning av 20 ml lN HCl, 40 ml vatten och 60 ml etylacetat behandlas med 8,0 g (l6,2 mmol) (cis)-4-[(4- fluorofenyl)tio]-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-L-prolin, adamantanaminsalt som tillsättes portionsvis. Ovan angivna förfarande genomföres under kväve med isbadskylning. Vatten- skiktet extraheras med två ytterligare 60 ml portioner etyl- acetat och de kombinerade organiska extrakten sköljes med ut- spädd vattenhaltig HCl, vatten och saltlake. Efter torkning (MgS04) avlägsnas lösningsmedlen i vakuum och ger 5,78 g av den frigjorda syran som en oren olja. Oljan upplöses i en bland- ning av 40 ml etylacetat och 10 ml eter. Denna lösning skakas i en separationstratt med 2,68 g (l5,4 mmol) L-arginin upplöst i 50 ml vatten. Vattenskiktet sköljes åter med eter, placeras på en rotationsindunstare i 15 minuter vid lågvakuum och lyo- filiseras slutligen över natten och ger 7,97 g (cis)-4[(4- fluorofenyl)tio]-l~(D)-3-merkapto-2-metyl~l-oxopropyl)-L~pro- lin, L-argininsalt (l:l); [d]D25 -42,7 (c=l, vatten). Analys.
Beräknat för Cl5Hl8FNO3S2.C6Hl4N4O2 C 47,08; H 6,40; N l3,08; S ll,97; F 3,55; SH 6,16. Funnet: C 47,21; H 6,74; N 13,28; S ll,7l; F 3,38; SH 5,98. 447 477 55 Exempel 57 (cis)~4-[(4-klorofenyl)tio]~l-(D-3-merkapto~2-metyl-l-oxo- propyl)-L-prolin, L-argininsalt (l:l) (a) N-(p-klorofenyltio)succinimid Enligt förfarandet av Y. Abe et al., supra, behandlas 4,3 g (33,2 mmol) N-klorosuccinimid och 1800 ml bensen med 40,0 g (27,7 mmol) p-klorotiofenol upplöst i 360 ml bensen. Efter 1 timme kyles den erhållna orangefärgade lösningen till 150 och 33,6 g (33,2 mmol) trietylamin i 360 ml bensen tillsättes un- der en period av 15 minuter. Kylbadet avlägsnas och reak- tionsblandningen omröres vid rumstemperatur i ytterligare 45 minuter. Reaktionsblandningen filtreras därefter och den or- ganiska lösningen sköljes med tre 500 ml portioner vatten, 500 ml saltlake och torkas (MgSO4). Lösningsmedlen avlägsnas i vakuum och ger 55,1 g oren produkt. Sönderdelning med 900 ml petroleumeter ger 42,0 g N-(p-klorofenyltio)succinimid; smaltpunkt 1359-1529. (b) (cis)-l-[D-3-(bensoyltio)-2-metyl-1-oxopropyl]-[(4-kloro- fenyl)tio]-L-prolin, metylester 12,6 g (62,3 mmol) tri-n-butylfosfin upplöst i 25 ml bensen sättes till en lösning av 15,1 g (62,3 mmol) N-(p-klorofeny1- tio)succinimid i 250 ml bensen vid rumstemperatur under kväv- gasatmosfär. Efter 10 minuter tillsättes 20 9 (56,9 mmol) (trans)-1-[D-3-(bensoyltio)-2-metyl-1-oxopropyl]-4-hydroxi-L- prolin, metylester och reaktionsblandningen hålles vid rums- temperatur under kvävgasatmosfär i 2 dagar. Vid slutet av denna tid spädes reaktionsblandningen med 300 ml eter och sköljes med fyra 100 ml portioner vatten, saltlake och torkas (MgSO4). Lösningsmedlen avlägsnas i vakuum och ger 46 g orent material som absorberas på ungefär 75 g silikagel och kroma- tograferas på en 450 g Baker-silikagelkolonn. Kolonnen packas och elueras med eter och fraktionerna innehållande den bästa produkten samlas och ger 27,2 g produkt. En liten mängd (0,48 g) av ovannämnda produkt "flash"-kromatograferades på 25 g EM9385 silikagel packad och eluerad först med metylen- klorid och därefter med l8:1 metylenkloridzetylacetat varvid 447 477 56 man erhåller 0,28 g (cis)-l-[D-3-(bensoyltio)-2-metyl-l-oxo- propyl]-4-[(4-klorofenyl)tio]-L-prolin, metylester; [d]D25 -86,6o (c=l, kloroform). (c) (cis)-4-[(4-klorofenyl)tio]-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l- oxopropyl)-L-prolin, L-argininsalt (lzl) En lösning av 24,3 g (50,8 mmol) (cis)-[D-3-(bensoyltio)-2- metyl-l-oxopropyl]-4-[(4-klorofenyl)tio]-L-prolin, metyl- ester i en blandning av 80 ml metanol och 220 ml tetrahydro- furan kyles pâ isbad under kvävgasatmosfär och behandlas med 106 ml lN vattenhaltig natriumhydroxid tillsatt under 10 minu- ter. Kylbadet avlägsnas och reaktionsblandningen omröres vid rumstemperatur i 5,5 timmar, spädes därefter med 500 ml vat- ten och sköljes med tre 300 ml portioner eter. Vattenlösnin- gen kyles på isbad under kvävgas och surgöres till pH l-2 med koncentrerad HCl och extraheras tre gånger med 500 ml portio- ner eter. De kombinerade eterextrakten sköljes med 400 ml vat- ten och saltlake, torkas därefter (MgSO4) och koncentreras i vakuum till 18,2 g oren produkt. Detta material upplöses i eter och behandlas med en lösning av 8,5 g (55,9 mmol) l- adamantanamin i metanol. Blandningen utspädes till ungefär 1 liter med eter, kyles i kylskåp i 1,5 timmar och filtreras och ger 20,1 g adamantanaminsalt, smältpunkt 2390-2420. Detta material upplöses i lzl kloroform:metanol och spädes med eter och ger l5,3 g (cis)-4-[(4-klorofenyl)tio]-l-(D-3-merkapto-2- metyl-l-oxopropyl)-L-prolin, l-adamantanaminsalt; smältpunkt 240°-241° (sönderdelningnflflqnzs -5s,4° (c=o,s, metanol).
Ett litet prov av detta adamantanaminsalt (0,5 g, 0,98 mmol) fördelas mellan vattenhaltig HCl och etylacetat och ger mot- svarande fria syra; [a]D25 -38,10 (c=l, absolut etanol).
Till en snabbt omrörd blandning av 18,8 ml lN vattenhaltig HCl, 30 ml vatten och 50 ml etylacetat sättes portionsvis 8 g (l5,6 mmol) av adamantanaminsaltet. Lösningen hålles kall på isbad och förvaras under kvävgasatmosfär. När alla fasta sub- stanser upplösts extraheras vattenskiktet med två ytterligare 447 477 57 50 ml portioner etylacetat. De organiska extrakten kombineras och sköljes med 30 ml 0,5N vattenhaltig HCl, 30 ml vatten och slutligen saltlake. Lösningen torkas (MgSO4) och koncentreras i vakuum och ger 5,6 g frigjord syra. Syran upplöses i en blandning av 50 ml etylacetat och 15 ml eter och skakas med en lösning av 2,57 g (l4,8 mmol) L~arginin upplöst i 65 ml vatten. Vattenskiktet sköljes med 50 ml eter och lyofiliseras över natten och ger 8,0 g (cis)-4-[(4-klorofenyl)tio]-l-(D-3- merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-L-prolin, L-argininsalt (l:l); [agD25 -44,3 (c=l, vatten).
Analys. Beräknat för: Cl5Hl8ClNO3S2.C6Hl4N4O2 C 45,09; H 6,27; N 12,52; S 11,46; Cl 6,34; SH 5,91. Funnet: C 45,34; H 6,34; N 12,57; S 11,48; Cl 6,12; SH 5,44.
Exempel 58 (cis)-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-4-[(4-metylfenyl)- tio]-L-prolin, L-argininsalt (l:l) ^ (a) (cis)-l-[D~3-(bensoyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-[(4- metylfenyl)tio]-L-prolin, metylester En lösning av l2,6 g (62,5 mmol) tri-n-butylfosfin i 20 ml bensen sättes under en femminuters period till en lösning av 20 g (56,8 mmol) (trans)-1-[D-3-(bensoyltio)-2~metyl-l-oxo- propyl]-4-hydroxi-L-prolin, metylester och l5,4 g (62,5 mmol) p-tolyldisulfid i 120 ml bensen vid rumstemperatur under en atmosfär kväve. Efter att ha fått stå över natten spädes reak- tionsblandningen med 300 ml Et2O och den organiska lösningen sköljes med tre gånger 100 ml portioner vatten, saltlake och torkas (MgSO4). Koncentrering i vakuum ger 49 g oren produkt- blandning. Detta material absorberas på 75 g Baker-silikagel och appliceras på en 450 g Baker-silikagelkolonn packad med l:l hexanzeter. Denna kolonn elueras med 3 liter l:l följt av 2 liter 2:l eter:hexan och slutligen med 100% eter. Samman- slagning av de bästa produkthaltiga fraktionerna gav 14,6 g (cis)-l-[D-3-(bensoyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-[(4-metyl- fenyl)tio]~L-prolin, metylester. Ett litet prov renas genom förångningskromatografi på EM9385 silikagel med användning av metylenklorid:etylacetat; [a]D25 -70,80 (c=l, kloroform). 447 477 58 (b) (cis)-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-4-[(4-metyl- fenyl)tio]-L-prolin, L-argininsalt (l:l) En iskall lösning av 13,0 g (28,4 mmol) (cis)-l-[D-3-(bensoyl- tio)-2-mctyl-1-oxopropyl]-4-[(4-metylfenyl)tio]-L-prolin, metylester i en blandning av 40 ml metanol och 130 ml tetra- hydrofuran renas kontinuerligt med kväve under det att 59,6 ml lN vattenhaltig natriumhydroxid tillsättes under 10 minuter.
Vid slutet av denna tid avlägsnas kylningsbadet och reaktions- blandningen omröres under kväve vid rumstemperatur i 5,5 timmar.
Reaktionsblandningen spädes därefter med 250 ml vatten och sköljes tvâ gånger med 200 ml portioner eter. Vattenskiktet kyles därefter i isbad under kväve och surgöres till pH 1-2 med koncentrerad HCl och extraheras med tre 200 ml portioner eter. Det kombinerade organiska extraktet sköljes med 200 ml vatten och saltlake, torkas (MgSO4) och koncentreras i vakuum till 10,6 g färglös olja som är nästan homogen enligt tunn- skiktskromatografi. Produkten löses i eter och behandlas med 4,72 g (3l,2 mmol) l-adamantanamin upplöst i 20 ml metanol.
Fällningen är snabb och läsningen spädes med eter till ungefär 700 ml av den totala volymen och saltet samlas. Ompulverise- ring med varm metanol-eter ger 12,4 g adamantanaminsalt, smält- punkt 2370-2400 (sönderdelning). Detta salt omkristalliseras genom upplösning i en minimal mängd l:l kloroform:metanol och spädning med eter. Efter 10 minuter vid rumstemperatur samlas den fasta substansen och torkas och ger 8,2 g adamantanamin- salt; smältpunkt 24o°-241° (sönaerde1ning); [a]D25 -5s,o° (c=0,5, metanol).
Ett litet prov av detta adamantanaminsalt fördelas mellan vat- tenhaltig HCl och etylacetat och ger (cis)-l-(D-3-merkapto-2- metyl-l-oxopropyl)-4-[(4-metylfenyl)tio]-L-prolin som en olja; [a1D25 -45,1° (c=1, absolut etanol).
Till en blandning av 17,1 ml vattenhaltig lN HCl, 30 ml vatten och 50 ml etylacetat sättes 7,0 g (l4,3 mmol) av ovannämnda adamantanaminsalt i flera portioner. Under tillsatsen kyles lösningen i isbad och hålles täckt med argon. När allt salt 447 477 59 upplösts separeras skikten och etylacetatskiktet kombineras med två ytterligare 50 ml extrakt av den vattenhaltiga lösnin- gen. Det kombinerade etylacetatextraktet sköljes med utspädd HCl, vatten och saltlake, torkas (MgSO4) och koncentreras i vakuum och ger den fria syran. Syran upplöses i en blandning av 40 ml etylacetat och 10 ml eter och skakas med en lösning av 2,37 g (l3,6 mmol) L-arginin i 50 ml vatten. Vattenskiktet sköljes med 50 ml eter och lyofiliseras därefter och ger (cis)- l-(D-3-merkapto-2-metyl-1-oxopropyl)-4-[(4-mety1feny1)tio]-L- prolin, L-argininsalt (l:1); [a]D25 -45,30 (c=l, vatten).
Analys. Beräknat för: Cl6H2lNO3S2.C6Hl4N4O2 C 49,69; H 7,01; N 13,17; S 12,06; SH 6,22. Funnet: C 49,55; H 7,04; N 13,28; S 11,73; SH 5,97. gxempel 59 (cis)-1-(D-3-merkapto-2-metyl-1-oxopropyl)-4-[(4-metoxi- fenyl)tio]-L-prolin, L-argininsalt (1:l) (a) N-(p-metoxifenyltio)succinimid En blandning av 17,1 g (128 mmol) N-klorosuccinimid och 700 ml bensen behandlas med 15 g (107 mmol) p-metoxitiofenol upplöst i 125 ml bensen. Efter 75 minuter kyles den erhållna orange- färgade lösningen till 150 och 13,0 g (128 mmol) trietylamin i 125 ml bensen tillsättes under en period av 25 minuter. Kyl- badet avlägsnas och reaktionsblandningen omröres vid rumstem- peratur i ytterligare 45 minuter.-Reaktionsblandningen filtre- ras därefter och den organiska lösningen sköljes med tre 200nd portioner vatten, 200 ml saltlake och torkas (MgSO4). Lösnings- medlen avlägsnas i vakuum och ger 27,0 g oren produkt. Om- kristallisation ur kloroform/hexan ger 21,2 g N-(p-metoxifenyltio)succinimid; smältpunkt 1000-1060. (b) (cis)-1-[D-3-(bensoyltio)-2-metyl-l-oxopropy1]-4-[(4- metoxi)fenyltio]-L-prolin, metylester Till en lösning av 14,0 g (59,l mmol) N-(p-metoxifenyltio)- succinimid i 250 ml bensen vid rumstemperatur under kväve sät- tes 12,0 g (59,l mmol) tri-n-butylfosfin upplöst i 25 ml ben- 447 477 60 sen. Efter 10 minuter tillsättes 18,9 g (53,7 mmol) (trans)- l-[D-3-(bensoyltio)-2-metyl-1-oxopropyl]-4-hydroxi-L-prolin, metylester och reaktionen får stå vid rumstemperatur under kväve i 25 timmar. Vid slutet av denna tid spädes reaktions- blandningen med 300 ml eter och sköljes med tre 100 ml por- tioner vatten, saltlake och torkas (MgSO4). Lösningsmedlen av- lägsnas i vakuum och ger 40 g onam material som absorberas på ungefär 80 g silikagel och kromatograferas på en 450 Baker- silikagelkolonn. Kolonnen packas och elueras med en 4:l-bland- ning av hexanzeter, följt av 2:1 hexanzeter och slutligen 1:1 hexan:eter. De bästa produkthaltiga fraktionerna samlas och ger 20,6 g produkt. Ett litet prov (0,5 g) av produkten renas ytterligare genom förângningskromatografi på 50 g EM9385 sili- kagel packad och eluerad med eter. De bästa produkthaltiga fraktionerna samlas och ger 480 mg (cis)-l-[D-3-(bensoyltio)- 2-metyl-1-oxopropyl]-4-[(4-metoxifenyl)tio]-L-prolin, metyl- ester; [oqnzs 31 66,9° (c=1, kiomform). (c) (cis)-1-(D-3-merkapto-2-metyl-1-oxopropyl)-4-[(4-metoxi- fenyl)tio]-L-prolin, L-argininsalt (l:l) En lösning av 20,1 g (42,4 mmol) (cis)-l-[D-3-(bensoy1tio)-2- metyl-1-oxopropyl]-4-[(4-metoxifenyl)tio]-L-prolin, metylester i en blandning av 70 ml metanol och 200 ml tetrahydrofuran kyles på isbad under kväve och behandlas med 89 ml lN vatten- haltig natriumhydroxid under 10 minuter. Kylbadet avlägsnas och reaktionsblandningen omröres vid rumstemperatur i 5,5 tim- mar, spädes därefter med 500 ml vatten och sköljes med tre 300 ml portioner eter. Den vattenhaltiga lösningen kyles i is- bad under kväve och surgöres till pH 1 med koncentrerad HCl och mättas med tre 500 ml portioner eter. De kombinerade eter- extrakten sköljes med 400 ml vatten och saltlake, torkas (MgSO4) och koncentreras i vakuum och ger 14,8 g oren produkt.
Detta material upplöses i eter och behandlas med en lösning av 6,34 g (42 mmol) 1-adamantanamin i metanol. Blandningen spädes till ungefär 1 liter med eter, lämnas vid rumstemperatur i 10 minuter och filtreras och ger 12,8 g adamantanaminsalt; smält- punkt 2350-2360 (sönderdelning). Detta material upplöses i 1:1, 447 477 61 kloroformzmetanol under mild upphettning och spädes med eter.
Denna omkristallisation upprepas två ytterligare gånger och ger 12,2 g (cis)-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-4-[(4- metoxifenyl)tio]-L-prolin, l-adamantanaminsalt; smältpunkt 23v°-z39° (sönderaelningn [oqDzs -s2,a°; Ett litet prov av detta 1-adamantanaminsalt (500 mg, 0,99 mmol) fördelas mellan vattenhaltig HCl och etylabetat och ger mot- svarande fria syra; [d]D25 -36,80 (C=l, absolut etanol).
Till en snabbt omrörd blandning av 27,2 ml lN vattenhaltig HCl, Ä5 ml vatten och 75 ml etylacetat tillsättes portionsvis ll,5 g (22,7 mmol) av ovannämnda 1-adamantanaminsalt. Lösnin- gen hålles kall i isbad och täckes med kväve. När all fast substans upplösts extraheras vattenskiktet med två ytterligare 75 ml portioner etylacetat. De organiska extrakten kombineras och sköljes med 50 ml 0,5N vattenhaltig HCl, 50 ml vatten och slutligen saltlake. Lösningen torkas (MgSO4) och koncentreras i vakuum till 8,2 g fri syra. Syran upplöses i en blandning av 75 ml etylacetat och 20 ml eter och skakas med en lösning av 3,76 g (2l,6 mmol) L-arginin upplöst i 100 ml vatten. Vatten- skiktet sköljes med 75 ml eter och lyofiliseras över natten och ger ll,2 g (cis)-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-4- [(4-metoxifenyl)tio]-L-prolin, L-argininsalt (l:l); [d]D25 -46,00 (c=l, vatten).
Analys. Beräknat för Cl6H2lNO4S2.C6Hl4N4O2 C 47,93; H 6,84; N 12,70; S ll,63; SH 6,00. Funnet: C 47,99; H 6,61; N 12,66; S ll,62; SH 6,00.
Exempel 60 (cis)-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-4-(fenyltio)-L- prolin, L-argininsalt (l:l) En lösning av l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-cis-4- fenyltio-L-prolin (5,0 g, 0,0l536 mol) upplöst i 286 ml abso- lut etanol behandlas med en lösning av L-arginin (98%) (2,70 g, 0,0l52 mol) i 28,6 ml vatten till bildning av en klar lösning. Lösningen koncentreras i vakuum till en klar viskös 7 ___..___..........._.-...--uw-_. 447 477 62 olja. Oljan upplöses i 286 ml absolut etanol och koncentreras åter i vakuum till en viskös olja. Oljan rives under 280 ml eter och ger en amorf fast substans. Den fasta substansen om- röres 30 minuter och får sedementera. Supernatanten avlägsnas och behandlingen upprepas. Avlägsning av supernatanten ger 7,7 g amorf fast substans (cis)-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l- oxopropyl)-4-(fenyltio)-L-prolin, L-argininsalt, som blir ett fririnnande pulver vid torkning i vakuum; smältpunkt 1260- 12s°; [a1D2s -43,s° (c=1,o, metanol).
Analys. Beräknat för Cl5Hl9N03S2.C6H14N4O2.åH2O C 50,03; H 6,70; N 13,89; S 12,72. Funnet: C 49,89; H 6,66; N 14,24; S 12,67.
Exempel 61 (cis)-l-(D-3-merkapto-2-metyl-1-oxopropyl)-4-(fenyltio)-L- prolin, etylester En omrörd lösning av 3,9 g (0,0l2 mol) l-(D-3-merkapto-2- metyl-l-oxopropyl)-cis-4-fenyltio-L-prolin i 40 ml etanol be- handlas under argon med 0,3 ml koncentrerad svavelsyra, för- slutes och hålles vid rumstemperatur. Efter 24 timmar behand- las lösningen med ytterligare 0,3 ml koncentrerad svavelsyra och efter att ha fått stå i 3 dagar visar tunnskiktskromato- grafi att reaktionen är fullständig. Huvuddelen av etanolen avlägsnas på rotationsindunstare och oljeâterstoden upptas i 100 ml etylacetat, omröres, kyles och behandlas under argon med 25 ml 5%-ig natriumbikarbonat. Skikten separeras, den or- ganiska fasen tvättas med l5 ml 5%-ig natriumbikarbonat, följt av vatten (2 x 5 ml), torkas (MgSO4) och lösningsmedlet indunstas. Den oljiga återstoden upptas i eter och indunstnin- gen upprepas, slutligen vid 0,2 mm, för att ge 3,8 g nästan färglös viskös oljig (cis)-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxo- propyl)-4-(fenyltio)-L-prolin, etylester; [d]D25 -490 (c=l,O, etanol).
Analys. Beräknat för Cl7H23NO3S2 C 57,76; H 6,56; N 3,96; S 18,14. Funnet: C 57,66; H 6,53; N 3,96; S 18,15. 447 477 63 Bxemoel 62 (cis)-l-[D-3-(bensoyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-(fenyltio)- L~prolin, L-argininsalt (l:l) 2,3 g (0,0054 mol) (cis)-1-[D~3-(bensoyltio)-2-metyl-l~oxo- propyl]-4-(fenyltio)~L-prolin upplöst i 100 ml metanol behand- las med 0,941 g (0,0054 mol) L-arginin. En klar lösning bildas efter omröring i ungefär 10 minuter. Reaktionsblandningen om- röres vid rumstemperatur i ungefär 5 timmar, lösningsmedlet avlägsnas och den erhållna fasta substansen sönderdelas med eter och filtreras och ger 2,5 g (cis)-l-[D-3-(bensoy1tio)-2- metylfl-oxopropyl]-4-(fenyltio)-L-prolin, L-argininsalt (l:l); mjukt vid 1o5°, smältpunkt 11o°-112° (sönderdelning), [oqnzs -2780 (c=l, metanol).
Analys. Beräknat för C22H23NO4S2.C6Hl4N4O2 C 54,88; H 6,25; N 11,43; S 10,47. Funnet: C 54,44; H 6,21; N 11,60; S 10,40.
Exemgel 63 (cis)-1-[D-3-(bensoyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-(fenyltio)- L-prolin, natriumsalt (l:l) En lösning av 4,29 g (0,0l mol) (cis)-[D-3-(bensoyltio)-2- metyl-1-oxopropyl]-4~(fenyltio)-L-prolin i 25 ml metanol och en lösning av 0,540 g (0,0l mol) natriummetoxid i 25 ml meta- nol kombineras. Ungefär 50 ml eter tillsättes och efter om- röring i ungefär 10 minuter börjar en fällníng bildas. Bland- ningen får stå över natten i ett kallt rum. Den gelatinösa fasta substansen filtreras, tvättas med eter och exsickator torkas och ger 2,5 g (cis)-l-[D-3-(bensoyltio)-2-metyl-l- oxopropyl]-4-(fenyltio)-L-prolin, natriumsalt (l:l); smält- punkt 2180-2200 (sönderdelning); [u]D25 -105,2 (c=l, vatten).
Analys. Beräknat för C22H22NO4S2.Na C 57,36; H 5,03; N 3,04; Na 4,99. Funnet: C 57,62; H 5,08; N 3,01; Na 4,68. 447 477 64 Exemoel 64 (cis)-l-[D-3-(bensoyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-(fenyltio)- L-prolin, 2-amino-2-(hydroximetyl)-1,3-prqpandiolsalt (l:l) En lösning av l2l,l4 mg (0,00l mol) tris(hydroximetyl)amino- etan i 5 ml n-butanol och en lösning av 429,5 mg (cis)-l-[D- 3-(bensoyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-(fenyltio)-L-prolin i 5 ml n-butanol kombineras. Den erhållna klara lösningen får stå i 48 timmar. Lösningen ympas och hela massan kristallise- ras. Den får stå i 3 timmar, filtreras, tvättas väl med eter och torkas och ger 400 mg (cis)-l-[D-3-(bensoyltio)-2-metyl- l-oxo6ropyl]-4-(fenyltio)-L-prolin, 2-amino-2-hydroximetyl- 1,3-propanaiolsalt (1=1); smältpunkt 13s°-136°;[@1D2s -20,6 (c=l, vatten).
Analys. Beräknat för C22H23NO4S2.C4HllN03 C 56,70; H 6,22; N 5,09. Funnet: C 56,66; H 6,36; N 5,00.
Exemgel 65 (cis)-l-[D-3-(bensoyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-(fenyltio)- L-prolin, kaliumsalt (l:l) En lösning av 21,5 g (0,05 mol) (cis)-l-[D-3-(bensoyltio)-2- metyl-l-oxopropyl]-4-(fenyltio)-L-prolin i 100 ml etanol och 50 ml lN alkoholhaltig kaliumhydroxid kombineras och en kris- tallin fast substans börjar bildas nästan omedelbart. Bland- ningen får stå över natten i kylrum. Den fasta substansen filtreras, tvättas med 60 ml kall etanol, tvättas med två gånger 100 ml portioner eter, torkas i vakuum över natten och ger 16,5 g produkt innehållande etanol. 14,4 g av detta mate- rial får torka vid rumstemperatur i 60 timmar och ger 14,2 g [ingen alkohol närvarande] (cis)-l-[D-3-(bensoyltio)-2-metyl~ l-oxopropyl]-4-(fenyltio)-L-prolin, kaliumsalt (l:l); smält- punkt 19s°-2os°; [a]D2s -114° (c=l, vatten).
Analys. Beräknat för C H NO S K.l; H O C 53,41; H 5,09; 22 22 4 2 2 2 N 2,83; S 12,96; K 7,88. Funnet: C 53,55; H 4,89; N 2,90; S 12.88; K 8,03. 5447 477 65 Exempel 65a (cis)-l-[D-3-(bensoyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]~4-(fenyltio)- L-prolin kaliumsalt (l:l) Produkten enligt exempel 65 kan även framställas enligt föl- jande förfarande: (a) N-bensoyl-cis-4-fenyltio-L-prolin N-bensoyl-trans-4-tosyloxi-L-prolin, metylester (framställd enligt förfarandet av Portoghese et al., Tetrahedron, volym 27, sid 961-967) (750 g, 1,86 mol) sättes till 2,5 liter metanol och blandningen upphettas och omröres vid 350. 200 ml (l,95 mol) tiofenyl tillsättes följt av en lösning av 78 g natrium- hydroxid (l,95 mol) i 500 ml metanol. Blandningen upphettas till återlopp tills tunnskiktskromatografi visar.att reaktio- nen är fullständig. Blandningen tillåts kallna till rumstempe- ratur och en lösning av 80 g natriumhydroxid i 500 ml vatten tillsättes under kontinuerlig omröring i l timme. Lösningsmed- let avdunstas i vakuüm och det oljeaktiga koncentratet spädes med 2,5 liter vatten och extraheras med 0,7 liter isobutyl- alkohol. Vattenfasens pH justeras till under 2 med 0,2 liter koncentrerad HCl. Den utfällda oljan extraheras med 2 liter isobutylacetat i tre portioner. Det organiska skiktet filtre- ras och vakuumkoncentreras till 650 g N-bensoyl-cis-4-fenyl- tio~L-prolin som tjock sirap. (b) cis-4-fenyltio-L-prolin N-bensoyl-cis-3-fenyltio-L-prolin upphettas på ångbad och 0,5 liter isättika tillsättes. Blandningen omskakas och 0,5 liter vatten följt av 100 ml koncentrerad svavelsyra tillsättes. Den grumliga blandningen upphettas till âterlopp vid en oljebads- temperatur av ungefär 1250 och hålles vid âterlopp tills reak- tionen är fullständig. Reaktionsvätskan kyles till rumstempe- ratur och 0,75 liter isobutylacetat och 3 kg krossad is till- sättes under kraftig omröring. 50 g koncentrerad vattenhaltig natriumhydroxidlösning tillsättes och produkten samlas och tvättas med metanol. Produkten renas ytterligare genom upplös- ning i vattenhaltig natriumhydroxid, behandling med aktiverat 447 477 66 kol, filtrering och noggrann kristallisation med HCl. Kristal- lerna samlas, tvättas med vatten och torkas och ger cis-4- fenyl-tio-L-prolin som ett vitt kristallint pulver; smältpunkt 2400 (sönderdelning); [a]D25 -1180 (C=l, N natriumhydroxid).
Analys. Beräknat för CllHl3NO2S: C 59,17; H 5,87; N 6,27; S 14,36. Funnet: C 58,58; H 5,63; N 6,28; S l4,07. (c) (cis)-l-[D-3-(bensoyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4- (fenyltio)-L-prolin, kaliumsalt (l:l). cis-4-fenyltio-L-prolin acyleras i vatten vid pH 8,3 med en ekvimolär mängd (D)-3-(bensoyltio)-2-metylpropanoylklorid. pH hâlles vid 8-8,5 genom tillsats av SN natriumhydroxidlösning.
Reaktionsblandningen surgöres med saltsyra och produkten extra- heras i isobutylacetat. Koncentration av det saltlaketvättade extraktet ger oren (cis)-l-[D-3-(bensoyltio)-2-metyl-l-oxo- propyl]-4-(fenyltio)-L-prolin som ett klibbigt harts.
Detta hartsaktiga material upplöses i isopropanol och en lös- ning av kalium-2-etylhexanoat i isopropanol tillsättes sakta vid förhöjd temperatur. Isopropyladdukten av det önskade ka- liumsaltet kristalliseras.
Addukten samlas, tvättas med isopropanol och vakuumtorkas.
Exponering av den torkade addukten för fuktig luft medför att isopropanolen utbytes mot vatten och ger (cis)-l-[D-3-bensoyl- tio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-(fenyltio)-L-prolin, kaliumsalt (lzl).
Exemgel 66 (cis)-l-[D-3-(bensoyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-(fenyltio)- L-prolin, magnesiumsalt (2:l) Blandningar av 429,5 mg (0,0l mol) cis-l-[D-3-bensoyltio)-2- metyl-l-oxopropyl]-4-(fenyltio)-L-prolin i 30 ml etanol och 29,1 mg (0,005 mol) magnesiumhydroxid i 30 ml vatten kombine- ras och ger en klar lösning. Lösningen omröres vid rumstempe- ratur över natten. pH är 5,9. Etanolen avlägsnas och en grum- lig blandning bildas. Vattenskiktet extraheras med eter och 447 477 67 befrias därefter från kvarvarande eter genom förângningsin- dunstning och lyofileras och ger 150 mg (cis)-l-[D-3-bensoyl- tio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-(fenyltio)~L-prolin, magnesium- salt (2=1); mjukt vid so°, smäitpunkt 11o°-1zo°.
Analys. Beräknat för C22H22NO4S2.0,5 Mg.2 H20 C 55,42; H 5,49; N 3,05. Funnet: C 55,39; H 4,93; N 2,94.
Exempel 67 (cis)-l-[D-3-(bensoyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-(fenyltio)- L-prolin, kalciumsalt (2:l) Blandningar av 859 mg (0,002 mol) (cis)-l-[D-3-(bensoyltio)-2- metyl-l-oxopropyl]-4-(fenyltio)-L-prolin i 50 ml etanol och 56 mg (0,00l mol) kalciumoxid suspenderad i 50 ml vatten kom- bineras och en klar lösning bildas. Lösningen blir grumlig och omröres vid rumstemperatur över natten. En fast substans finns närvarande. Etanolen avlägsnas genom förângningsindunst- ning och suspensionen extraheras med eter och spår av eter av- lägsnas därefter från den vattenhaltiga suspensionen genom för- ångningsindunstning. Suspensionen lyofiliseras och ger 400 mg (cis)-l-[D-3-(bensoyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-(fenyltio)- L-prolin, kaiciumsalt (2=1); smälcpunkt z35°-237° (sönaerae1- ning).
Analys. Beräknat för C22H22NO4S2.0,5 Ca.0,5 H20 C 55,74; H 5,06; N 3,06. Funnet: C 57,07; H 5,02; N 2,84.
Denna produkt kan även erhållas enligt följande förfarande. (cis)~l~[D-3-(bensoyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-4-(fenyltio)- L-prolin, kaliumsalt upplöses i vatten till en 5%-ig lösning.
Ett moderat överskott 2N vattenhaltig kalciumklorid tillsättes mycket sakta under ympning. Det önskade kalciumsaltet kristal- liseras i form av mycket små plattor. Dessa samlas på ett fil- ter och tvättas med rikliga vattenmängder. Vakuumtorkning vid lätt förhöjd temperatur ger det önskade kalciumsaltet som ett fint vattenfritt pulver; smältpunkt ungefär 2500; [a]D23 -67,60 (c=l, metanol/HCl). 447 477 68 Exempel §§ l,l'-[ditiodi-(l-D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)]bis[(cis)- 4-(fenyltio)-L-prolin] En blandning av 2,9 g (0,089 mol) (cis)-l-(D-3-merkapto-2- metyl-l-oxopropyl)-4-(fenyltio)-L-prolin och 9 ml lN natrium- hydroxid i 70 ml vatten omröres och behandlas droppvis med en lösning av 1,2 g (0,047 mol) jod i 10 ml 95%-ig etanol under det att lösningens pH hålles vid 5,5 till 6,5 med lN natrium- hydroxid. Efter ungefär 15 minuter avlägsnas ett lätt över- skott jodfärg med utspädd natriumtiosulfat och reaktions- blandningen surgöres med 6N HCl och extraheras med etylacetat (3 x 70 ml). De organiska faserna kombineras, torkas (MgSO4), filtreras och lösningsmedlet indunstas och ger 2,4 g gul skum- liknande fast substans, smältpunkt 750-850 (s. 470). Detta material upplöses i 40 ml etylacetat och behandlas med en lös- ning av l,4 g dicyklohexylamin i 5 ml etylacetat. Produkten avskiljes snabbt från ett gelatinöst material. Efter att ha fått stå över natten vid rumstemperatur filtreras den fasta substansen och ger 4,2 g ljust gul fast substans; smältpunkt 2050-2070. Detta material kristalliseras ur 40 ml etanol och ger 2,8 g färglös fast substans l,l'-[ditiodi-(l-D-3-merkapto- 2-metyl-l-oxopropyl)]bis[(cis)-4-(fenyltio)-L-prolin], dicyklo- hexyiaminsalt, smältpunkt 20 7°-2o9° . ' Analys. Beräknat för C30H36N2O6S4.2(Cl2H23) C 64,12; H 8,17; N 5,54; S 12,68. Funnet: C 63,87; H 8,30; N 5,45; S 12,46.
Det ovannämnda dicyklohexylaminsaltet sönderdelas i en mortel, suspenderas i 30 ml etylacetat, behandlas med 30 ml 10%-ig kaliumbisulfat och skakas och ger två skikt. Den organiska fasen avskiljes och vattenfasen extraheras med etylacetat (3 x 30 ml). De organiska faserna kombineras, tvättas två gån- ger med 10 ml vatten, torkas (MgSO4), filtreras och lösnings- medlet indunstas och ger en skumliknande färglös-fast substans.:¿_ Den senare behandlas med 25 ml eter (den fasta substansen ger en olja) och lösningsmedlet indunstas på rotationsindunstare 447 477 69 och ger 1,8 g färglös granulär l,l'-[ditiodi-(l-D-3-merkapto- 2-metyl-l-oxopropyl)]bis[(cis)-4-(fenyltio)-L-prolin]; smält- punkt 75°-9o° (s. 65%; foqDzs -4z° (c=l, etanol).
Analys. Beräknat för C30H36N2O6S4.% H20 C 54,77; H 5,67; N 4,26; S 19,50. Funnet: C 54,79; H 5,95; N 4,01; S 19,52.
Exemgel 69 l,l'-lditiodi-(l-D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)]bis[(cis)- 4-(fenyltio)-L-prolinl, dikaliumsalt En omrörd lösning av 7,0 g (0,0l06 mol) l,l'-[ditiodi-(l-D-3- merkanto-2-metyl-l-oxopropyl)]bis[(cis)-4-(fenyltio)~L-prolin] i 200 ml etanol behandlas med 21,3 ml lN kaliumhydroxid (två ekvivalenter) i etanol. Den erhållna lösningen ympas, får kristallisera vid rumstemperatur i flera timmar och placeras i kylrum över natten. Den fasta substansen filtreras, tvättas med etanol och eter och ger 5,2 g färglös fast substans; smältpunkt 2750 (sönderdelning). Materialet lufttorkas där- efter över natten och ger 5,3 g l,l'-[ditiodi-(l-D-3-merkapto- 2-metyl-l-oxopropyl)]bis[(cis)-4-(fenyltio)-L~prolin], di- kaliumsalt; smältpunkt 2750 (sönderdelning); [a]D25 -2270 (c=l, vatten).
Analys. Beräknat för C30H34N2O6S4.2Kl3 H20 C 46,24; H 5,17; N 3,59; S 16,46; K 10,04. Funnet: C 45,98; H 5,11; N 3,36; S l6,l0; K 10,03, Exemgel 70 (cis)-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-3-fenoxi-D,L-prolin (a) 3-fenoxi-l,2-dehydroprolin, t-butylester En blandning av 9,25 g (50 mmol) 1,2-dehydroprolinf l-butyl- ester i 70 ml toluen med 8,9 g (50 mmol) n-bromosuccinimid upp- hettan vid återlopp under det att den exponeras för en sol- lampa (avstånd 5,1 cm) i l timme. Under denna tid bildas succinimíd och reaktionen kyles till rumstemperatur. Succin- imiden avlägsnas genom filtrering och filtratet indunstas till torrhet. Återstoden destilleras vid 800 och ger 3,5 g oren 3- 447 477 70 bromo-1,2-dehydroprolin, t-butylester.
En blandning av denna orena 3-bromo-1,2-dehydroprolin, t-butyl- cstcr och tallium-fenoxid (3,9 g, 13 mmol) i 30 ml torr dime- tylformamid omröres vid rumstemperatur under argonatmosfär i 24 timmar. Lösningsmedlet avlägsnas under vakuum och återsto- den spädes med eter för utfällning av talliumbromid, som av- lägsnas genom filtrering. Filtratet koncentreras och ger en olja som renas genom destillation. Efter 2 timmar vid 0,005 mm och 800 är 1,48 g 3-fenoxi-l,2-dehydroprolin, t-butylester kvar i destillationskolven. (b) (cis)-3-fenoxi-D,L-prolin En blandning av 1,48 g 3-fenoxi-1,2-dehydroprolin, t-butyl- ester, 5 ml 1N natriumhydroxid och 20 ml 80%-ig dioxan/vatten omröres vid rumstemperatur i 4 timmar. Lösningsmedlet avlägsnas i vakuum och återstoden upplöses i 25 ml vatten och behandlas med 168 mg natriumborhydrid under l timme vid rumstemperatur.
Blandningen surgöres till pH 6 genom tillsats av 2N HCl och lösningen hålles vid 00 i 16 timmar varpå kristaller av (trans)- 3-fenoxi-D,L-prolin utfälles (ungefär 25 mg). Dessa avlägsnas genom filtrering och filtratet avsaltas genom att passeras ge- nom en Dowex 50 WX8 kolonn (l"xl2") med användning av lN ammoniumhydroxid som eluent. De UV-aktiva fraktionerna kombine- ras och koncentreras och ger 616 mg fast (cis)-3-fenoxi-D,L- prolin. (c) (cis)-l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-l-oxopropyl]-3-fenoxi- D,L-prolin 616 mg (cis)-3-fenoxi-D,L-prolin uppslammas i 20 ml vatten vid 50 och pH justeras till 8,0 med fast natriumkarbonat. En lös- ning av 550 mg (2,5 mmol) D-3-acetyltio-2-mety1propanoylsyra- klorid i 1 ml eter tillsättes och reaktionsblandningens pH hålles mellan 7,3 och 8,2 under påföljande 1,5 timmar genom tillsats av natriumkarbonat. Blandningen tvättas med etyl- acetat (2 x 20 ml), surgöres till pH 2 genom tillsats av 10% 447 477 71 HCl och extraheras med etylacetat (3 x 50 ml). Extrakten kom- bineras, torkas (MgSO4) och koncentreras och ger 810 mg av en olja. Denna olja renas genom förångningskromatcgrafí på sili- kagel (LP-1, 300 ml) med användning av 10-20% ättiksyra- toluenblandningar som eluent och ger 530 mg (cis)-l-[D-3-(ace- tyltio)-2-metyl~l-oxopropyl]-3-fenoxi-D,L-prolin. (d) (cis)-l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-3-fenoxi- D,LfBrolin 530 mg (cis)-l-[D-3-(acetyltio)-2-metyl-1-oxopropyl]-3-fenoxi- D,L~prolin upplöses i 50/50 koncentrerad ammoniakhydroxid/vat- ten (avgasad genom att argon bubblas genom lösningen i l5 minuter) under argonatmosfär och omröres vid rumstemperatur i 1,5 timmar. Den lätt grumliga lösningen justeras till pH 6,5 med koncentrerad HCl (viss uppvärmning sker) och extraheras med metylenklorid (2 x 25 ml). pH justeras därefter till l och lösningen extraheras åter med metylenklorid (3 x 50 ml). Extrak- ten kombineras, torkas (MgSO4) och koncentreras och ger 410 mg glasartad förening. Sönderdelning med kloroform ger kristalli- sation. Den fasta substansen omkristalliseras ur etylacetat/ hexan och ger 261 mg (cis)-l-(D~3-merkapto-2~metyl-l-oxopropyl% 3-fenoxi-D,L-prolin; smältpunkt 1340-1550.
Analys. Beräknat för clsnlguoéls c 58,23; H 6,19; N 4,53; S 10,36. Funnet: C 58,07; H 6,18; N 4,45; S 10,16.
Exemgel 71 lOOO tabletter vardera innehållande 100 mg l-(D-3~merkapto- -l-oxopropyl)-trans-4-metoxi-L-prolin, natriumsalt framställes av följande beståndsdelar: l-(3-merkapto-1-oxopropyl)-trans-4-metoxi- ~L-prolin, natriumsalt lOO g Majsstärkelse 50 g Gelatin 7,5 g Avicel (mikrokristallin cellulosa) 25 g Magnesiumstearat 2,5 g 447 477 72 l-(D-3-merkapto-l-oxopropyl)-trans-4-metoxi-L-prolinsaltet och majsstärkelsen blandas med en vattenhaltig lösning av gelatinet. Blandningen torkas och males till ett fint pulver.
Avlcel och därefter magnesiumstearat blandas med granulatet.
Detta pressas därefter i en tablettpress till 1000 tabletter vardera innehållande 100 mg av den aktiva beståndsdelen.
Exemgel 72 Tabletter vardera innehållande 200 mg l-(D-3~merkapto-2-metyl- -l-oxopropyl)-trans-4-metoxi-L-prolin framställes på det i exempel 71 angivna sättet.
Exempel 73 1000 tabletter vardera innehållande 200 mg l-(D-3-merkapto- -2-metyl-l-oxopropyl)-cis-4-metoxi~L-prolin, natriumsalt framställdes av följande beståndsdelar: l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl):cis- -4-metoxi-L-prolin, natriumsalt 50 g Laktos 25 g Avicel 38 g Majsstärkelse 15 g Magnesiumstearat 2 g l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-cis-4-metoxi-L-prolin, natriumsalt, laktos och Avicel blandas, varefter majsstärkelset inblandas. Magnesiumstearat tillsättes. Den torra blandningen pressas i en tablettpress till 1000 tabletter med en vikt av 130 mg vardera innehållande 50 mg aktiv beståndsdel. Tabletter- na belägges med en lösning av Methocel E 15 (metylcellulosa) innefattande som färg ett substrat-pigment innehållande gul nr. 6.
Exempel 74 Två bitar nr. l gelatinkapslar vardera innehållande 100 mg l-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-cis-4-metoxi-L-prolin, natriumsalt fylles med en blandning av följande bestånds- delar: 447 477 73 1-(D-3-merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)-cis- -4-metoxi-L~prolin, natriumsalt 100 mgj Magnesiumstearat 7 mg USP laktos 193 mg Exempel 75 En injicerbar lösning framställes på följande sätt: (trans)-4-metoxi-l-(D-3-merkapto-2- -metyl-l-oxopropyl)-L-prolin 500 mg Metylparaben 5 mg Propylparaben l mg Natriumklorid 25 mg Vatten för injektion qs. 5 mg Den aktiva substansen, konserveringsmedlen och natriumkloriden upplöses i 3 l vatten för injektion och därefter kompletteras volymen till 5 l. Lösningen filtreras genom ett sterilt filter och fylles aseptiskt i försteriliserade flaskor som därefter stänges med försteriliserade gummianordningar. Varje flaska innehåller 5 ml lösning med en koncentration av 100 mg aktiv beståndsdel per ml injektionslösning.
Produkterna i varje exempel kan beredas på samma sätt som i exemplen 71-75.
Claims (5)
1. l-oxopropyl)-L-prolin. 13. Förening enligt patentkravet ll, k ä n n e t e c k n a d d ä r a V, att den utgör (ciàP4-metoxi-l-(3-merkapto-l-oxopro- pyl)-L-prolin. 14. Förening enligt patentkravet 9, k ä n n e t e c k n a d d ä r a v, att prolinringen är i L-konfiguration; och när R2 har annan betydelse än väte är den asymmetriska kolatomen till vilken R2 är bunden i D-konfiguration; och -O-Rl-gruppen är i 4-ställning av prolinringen och i trans-konfiguration. 15. Förening enligt patentkravet 14, k ä n n e t e c k n a d d ä r a v, att Rl är metyl. 16. Förening enligt patentkravet 15, k ä n n e t e c k n a d d ä r a v, att den utgör (trans)-4-metoxi-l-(D-3-merkapto-2-me- tyl-l-oxopropyl)-L-prolin. 17. Förening enligt patentkravet 15, k ä n n e t e c k n a d d ä r a v, att den utgör trans-4-metoxi-l-(3-merkapto-l-oxopro- pyl)-L-prolin. 18. Förening enligt patentkravet 14, k ä n n e t e c k n a^d d ä r a v, att Rl är etyl. ' »J *OJ 447 477 19. Förening enligt patentkravet 18, k ä n n e t e c k - n a d d ä r a v, att den utgör (trans)-4-etoxi-l~(D-3-merkap- to-2-metyl-l-oxopropyl)-l-prolin. 20. Förening enligt patentkravet 14, k ä n n e t e c k - n a d d ä r a v, att Rl är n-propyl. 21. Förening enligt patentkravet 20, k ä n n e t e c k - n a d d ä r a v, att den utgör (trans)-4-propoxi-l-(D~3-mer- Rapto-2-metyl~l~oxopropyl)-1-prolin. 22. Förening enligt patentkravet 8, k ä n n e t e c k n a d d ä r a v, att Rl är -(CH2)É-<šêâ> 3 R6 betecknar väte, R metyl, metoxi, metyltio, klor, fluorš trifluormetyl eller hy- droxi; och p betecknar O, l eller 2. 23. Förening enligt patentkravet 22, k ä n n e t e c k - n a d d ä r a v, att prolinringen är i L-konfiguration och när R, har annan betydelse än väte är den asymmetriska kolatomen till vilken R2 är bunden i D-konfiguration och -O-Rl~gruppen är i 4-ställning av prolinringen. 24. Förening enligt patentkravet 23, k ä n n e t e c k - n a d d ä r a v, att den utgör (cis)-4-(4-fluorfenoxyl)-1- (D-3-merkapto-2-metyl~l-oxopropyl)-L-prolin. 25. Förening enligt patentkravet 6, k ä n n e t e c k n a d d ä r a v, att X är svavel. 26. Förening enligt patentkravet 25, k ä n n e t e c k n a d d ä r a v, att R4 är väte, R2 är väte eller metyl och n är l. 27. Förening enligt patentkravet 26, k ä n n e t e c k n a d d ä r a v, att R1 är lägre alkyl med 1 - 3 kolatomer. 28. Förening enligt patentkravet 27, k ä n n e t e c k n a d d ä r a v, att Rl är metyl. 318 447 477 29. Förening enligt patentkravet 28, k ä n n e t e c k - n a d d ä r a v, att den utgör (trans)-l-(3-merkapto-l-oxo- propyl)-3-metyltio-D,L-prolin. 30. Förening enligt patentkravet 26, k ä n n e t e c k - n a d d ä r a v, att Rl är _(CH )- , R6 betecknar väte, R .6 metyl, metoxi, metyltio, klor, fluor, trifluormetyl eller hy- droxi och p betecknar 0, l eller 2. 31. Förening enligt patentkravet 30, k ä n n e t e c k n a d d ä r a v, att den utgör l-(D-3~merkapto-2-metyl-l-oxopropyl)- cis-4-fenyltio-L-prolin. 32. Förening enligt patentkravet 7, k ä n n e t e c k n a d d ä r a v, att R4 betecknar acetyl, R2 betecknar väte eller me- tyl och n är l. 33. Förening enligt patentkravet 32, k ä n n e t e c k n a d d ä r a v, att Rl betecknar lägre alkyl med l - 3 kolatomer. 34. Förening enligt patentkravet 33, k ä n n e t e c k n a d d ä r a v, att prolinringen är i L-konfiguration och när R2 har annan betydelse än väte är den asymmetriska kolatomen till vil- ken R är bunden i D-konfiguration och -O-Rl-gruppen är i 4-
2. Ställning av prolinringen och i cis-konfiguration. 35. Förening enligt patentkravet 34, k ä n n e t e c k n a d d ä r a v, att Rl är metyl. 36. Förening enligt patentkravet 35, k ä n n e t e c k n a d d ä r a v, att den utgör (cis)-4-metoxi-l-[D~(%cetyltio)-2~me- tyl-1-oxopropyl]-L-prolin. 37. Förening enligt patentkravet 33, k ä n n e t e c k n a d _ d ä r a v, att prolinringen är i L-konfiguration och när R2 har annan betydelse än väte är den asymmetriska kolatomen till vil- ken R2 är bunden i D~konfiguration och -O-Rl-gruppen är i 4v H 447 477 ställning av prolinringen och i transkonfiguration. 38. Förening enligt patentkravet 37, k ä n n e t e c k n a d d ä r a v, att Rl är metyl. 39. Förening enligt patentkravet 37, k ä n n e t e c k n a d d ä r a v, att Rl är etyl. 40. Förening enligt patentkravet 37, k ä n n e t e c k n a d d ä r a v, att Rl är n-propyl. 41. Förening enligt patentkravet 32, k ä n n e t e c k n a d d ä r a v, att Rl är _(CH2)p C) , R6 betecknar väte, metyl, R -I metoxi, metyltio, lor, fluor, trifíuormetyl eller hydroxi och p betecknar 0, l eller 2. 42. Förening enligt patentkravet 25, k ä n n e t e c k n a d d ä r a v, att R4 betecknar acetyl, R2 betecknar väte eller me- tyl och n betecknar l. 43. Förening enligt patentkravet 42, k ä n n e t e c k n a d d ä r a v, att Rl betecknar lägre alkyl med l - 3 kolatomer. 44. Förening enligt patentkravet 42, k ä n n e t e c k n a d d ä r a v, att R betecknar -(CH ) , R6 betecknar väte, l 29 R 6 metyl, metoxi, metyltio, klor, fluor, trifluormetyl eller hy- droxi och p betecknar O, 1 eller 2. 45. Förfarande för framställning av en förening med formeln X-R l /u 1.321, Tz H2? ß N --- *_- COOR _80 447 477 och basiska salter därav, vari gruppen X-Rl är belägen i 3- eller 4-ställning av prolinringen, X betecknar syre eller svavel, R betecknar väte eller Cl_7-alkyl, RI betecknar Cl_7-alkyl, C2_7 en eventuellt med Cl_4-alkyl-, Cl_4-alkoxi~, Cl_4-alkyltio-, -alkenyl, C2_7-alkynyl, halogen-, trifluormetyl-, acetyloxi- eller hydroxisubstituerad fenyl eller fenyl-Cl_4-alkylgrupp, H? och R¿ betecknar oberoende av varandra väte, Cl_7- alkyl eller trilluormetyl, 0 R4 betecknar väte, R5-å- eller X.. »R R H en* Rl 1' 3 2 2 3 I l I -s-(cmrï- ca- co_ N-fiç-COOR ' H R5 betecknar Cl_7-alkyl, fenyl eller fenyl-Cl_4-alkyl och n betecknar 0, l eller 2, k ä n n e t e c k n a t d ä r a v, att en prolinförening med formeln XRl Håï s COOR H kopplas med en syra eller dess kemiska ekvivalent med formeln v t __ __- --coon Rlí-s (CPUn CH _. vari R4' betecknar väte eller R5-CO- till bildning av en pro= dukt vari R4 betecknar väte eller R5CO, och att om så önskas nämnda produkt vari R4 betecknar R5CO hydrolyseras till bildning av en produkt vari R4 betecknar väte och att om så önskas en pro- dukt vari R4 betecknar väte oxideras med jod till bildning av en produkt vari R4 betecknar 81 X-R l H3 RZ h | I H2? 3 -s--(CH)n-~CH--CO--N--|¿-COOR H 46. Förfarande enligt patentkravet 45,k ä n n e t e c k n a t d ä r a v, att en förening med formeln -R H C 1 r _; ZIL H coon får reagera med en syra eller dess kemiska ekvivalent med formeln Ta TZ 4 till bildning av en produkt vari R4 betecknar väte eller R5-CO- R'--s--(cH)n--cñ--aoon 47. Förfarande enligt patentkravet 45, k ä n n e t e c k ~ n a t d ä r a v, att en förening med formeln xa 3 2 | 1 H2 R5co--s--(cH)n--CH--co--N COOR H hydrolyseras till bildning av en produkt vari R4 betecknar väte. 48. Farmaceutisk aktiv komposition innehållande en förening med formeln X~R /4 1:31* “zï ”ä R -5-(CH)--CH--CO - N-- C;*-COOR 4 X1 I H 1 och basiska salter därav, vari gruppen X~R1 är belägen i
3. - eller
4. -ställning av prolinringen, 447 477 X betecknar syre eller svavel, R betecknar väte eller Cl_7-alkyl, Rl betecknar Cl_7-alkyl, C2_7-alkenyl, C2_7-alkynyl, en eventuellt med Cl_4-alkyl-, Cl_4-alkoxi-, Cl_4-alkyltio-, halogen-, trifluormetyl-, acetyloxi- eller hydroxisubstituerad fenyl eller fenyl-Cl_4-alkylgrupp, R2 och R3 betecknar oberoende av varandra väte, Cl_7- alkyl eller triflnormetyl, ¿¿ O ß R4 betecknar väte, R
5. -ë- eller X-R l /G R3 az Hzc 5% Ia -I I as-(öfn- CH- co- N-Jiïf-COOR n H R5 betecknar Cl_7-alkyl, fenyl eller fenyl-Cl_4-alkyl och n betecknar 0, l eller 2 och en farmaceutiskt acceptabel bärare därav.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US93288378A | 1978-08-11 | 1978-08-11 | |
KR1019790002731A KR830002450B1 (ko) | 1978-08-11 | 1979-08-10 | 치환 프로린의 메르캅토아실 유도체의 제조방법 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SE7906722L SE7906722L (sv) | 1980-02-12 |
SE447477B true SE447477B (sv) | 1986-11-17 |
Family
ID=26626596
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SE7906722A SE447477B (sv) | 1978-08-11 | 1979-08-10 | Merkaptoacylderivat av en substituerad prolin, forfarande for framstellning av denna och en farmaceutiskt aktiv komposition innehallande foreningen |
Country Status (30)
Country | Link |
---|---|
JP (2) | JPS5527199A (sv) |
KR (1) | KR830002450B1 (sv) |
AR (1) | AR229081A1 (sv) |
AT (1) | AT379589B (sv) |
AU (1) | AU530690B2 (sv) |
BE (1) | BE878191A (sv) |
CA (1) | CA1144930A (sv) |
CH (1) | CH642064A5 (sv) |
CS (1) | CS228118B2 (sv) |
DD (1) | DD145749A5 (sv) |
DE (1) | DE2932021C2 (sv) |
DK (1) | DK154553C (sv) |
ES (1) | ES483311A1 (sv) |
FI (1) | FI69834C (sv) |
FR (1) | FR2435469A1 (sv) |
GB (1) | GB2028327B (sv) |
GR (1) | GR72420B (sv) |
IE (1) | IE48802B1 (sv) |
IN (1) | IN152712B (sv) |
IT (1) | IT1117782B (sv) |
LU (2) | LU81593A1 (sv) |
NL (2) | NL193374C (sv) |
NZ (1) | NZ191036A (sv) |
PH (1) | PH15030A (sv) |
PT (1) | PT70049A (sv) |
RO (1) | RO78870B (sv) |
SE (1) | SE447477B (sv) |
SU (1) | SU1066460A3 (sv) |
YU (1) | YU41876B (sv) |
ZA (1) | ZA793633B (sv) |
Families Citing this family (45)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4483861A (en) * | 1978-10-31 | 1984-11-20 | Santen Pharmaceutical Co., Ltd. | Antihypertensive sulfur-containing compounds |
CA1132985A (en) * | 1978-12-22 | 1982-10-05 | John Krapcho | Ketal and thioketal derivatives of mercaptoacyl prolines |
US4347371A (en) * | 1978-12-30 | 1982-08-31 | Santen Pharmaceutical Co., Ltd. | Disulfide compounds |
US4234489A (en) * | 1979-06-25 | 1980-11-18 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Pyroglutamic acid derivatives and analogs |
US4288368A (en) * | 1979-07-30 | 1981-09-08 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Dithioacylproline derivatives |
US4291040A (en) * | 1979-10-22 | 1981-09-22 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Mercaptoacyl derivatives of 4-disubstituted prolines and 4-substituted dehydroprolines |
US4692458A (en) * | 1980-03-05 | 1987-09-08 | University Of Miami | Anti-hypertensive agents |
AU542211B2 (en) * | 1980-03-07 | 1985-02-14 | Gruppo Lepetit S.P.A. | Mercaptocycloalkyl carbonyl prolines |
GB2070586A (en) * | 1980-03-21 | 1981-09-09 | Squibb & Sons Inc | Derivatives of Proline or Pipecolic Acid |
US4284624A (en) | 1980-05-02 | 1981-08-18 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Mixed disulfides |
US4390695A (en) * | 1980-06-23 | 1983-06-28 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Imido, amido and amino derivatives of mercaptoacyl prolines and pipecolic acids |
US4578474A (en) * | 1980-06-23 | 1986-03-25 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Imido, amido and amino derivatives of mercaptoacyl prolines and pipecolic acids |
US4316905A (en) * | 1980-07-01 | 1982-02-23 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Mercaptoacyl derivatives of various 4-substituted prolines |
US4332726A (en) * | 1980-08-25 | 1982-06-01 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Purification of mercaptoacyl amino acids |
US4307110A (en) * | 1980-09-12 | 1981-12-22 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Mercaptoacyl derivatives of 3-substituted proline derivatives |
US4311705A (en) * | 1980-10-06 | 1982-01-19 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Carboxyalkanoyl and hydroxycarbamoylalkanoyl derivatives of substituted prolines |
US4312809A (en) | 1980-10-31 | 1982-01-26 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Lactam derivatives of mercaptoacylamino acids |
US4462943A (en) * | 1980-11-24 | 1984-07-31 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Carboxyalkyl amino acid derivatives of various substituted prolines |
US4337201A (en) * | 1980-12-04 | 1982-06-29 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Phosphinylalkanoyl substituted prolines |
US4384123A (en) * | 1980-12-04 | 1983-05-17 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Phosphinylalkanoyl substituted prolines |
US4416831A (en) | 1981-04-27 | 1983-11-22 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Amino and substituted amino phosphinylalkanoyl compounds |
US4374131A (en) | 1981-04-27 | 1983-02-15 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Amino and substituted amino phosphinyl-alkanoyl compounds |
US4381297A (en) | 1981-05-04 | 1983-04-26 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Substituted carbonyl phosphinyl-alkanoyl compounds |
US4416833A (en) | 1981-05-04 | 1983-11-22 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Substituted carbonyl phosphinyl-alkanoyl compounds |
US4497953A (en) * | 1981-06-01 | 1985-02-05 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Imido, amido and amino derivatives of mercaptoacyl prolines and pipecolic acids |
US4377701A (en) * | 1981-09-21 | 1983-03-22 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | 4-Methylene-1-[[(alranoyl or arylcarbonyl)mercapto]acyl]proline and pipecolic acid |
US4555506A (en) * | 1981-12-24 | 1985-11-26 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Phosphorus containing compounds and use as hypotensives |
US4560680A (en) * | 1982-03-15 | 1985-12-24 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Aminoalkyl and related substituted phosphinic acid angiotensin converting enzyme inhibitors |
US4452791A (en) * | 1982-03-15 | 1984-06-05 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Aminoalkyl and related substituted phosphinic acid angiotensin converting enzyme inhibitors |
US4703043A (en) * | 1982-06-23 | 1987-10-27 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Phosphonyl hydroxyacyl amino acid derivatives as antihypertensive |
US4452790A (en) * | 1982-06-23 | 1984-06-05 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Phosphonyl hydroxyacyl amino acid derivatives as antihypertensives |
US4616005A (en) * | 1982-06-23 | 1986-10-07 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Phosphonyl hydroxyacyl amino acid derivatives as antihypertensives |
US4567166A (en) * | 1982-07-14 | 1986-01-28 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Amino and substituted amino phosphinylalkanoyl compounds useful for treating hypertension |
EP0187037A3 (en) * | 1984-12-21 | 1988-03-23 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Piperidine derivatives, their production and use |
AU632596B2 (en) * | 1989-08-21 | 1993-01-07 | E.R. Squibb & Sons, Inc. | Phosphonate substituted amino or imino acids useful as antihypertensives |
JPH05344844A (ja) * | 1992-06-12 | 1993-12-27 | Suzumo Kiko Kk | 焼おむすびせんべいの製造方法 |
EP0640594A1 (en) | 1993-08-23 | 1995-03-01 | Fujirebio Inc. | Hydantoin derivative as metalloprotease inhibitor |
US5435286A (en) * | 1994-05-02 | 1995-07-25 | Cummins Engine Company, Inc. | Ball link assembly for vehicle engine drive trains |
GB0225379D0 (en) * | 2002-10-31 | 2002-12-11 | Pfizer Ltd | Therapeutic proline derivatives |
US7659305B2 (en) | 2002-10-31 | 2010-02-09 | Pfizer Inc. | Therapeutic proline derivatives |
WO2006038119A1 (en) * | 2004-10-08 | 2006-04-13 | Warner-Lambert Company Llc | Stereoselective synthesis of n-protected alkoxy prolines |
GB0715626D0 (en) | 2007-08-10 | 2007-09-19 | Generics Uk Ltd | Crystalline form of zofenopril calcium |
JP5530369B2 (ja) * | 2008-02-27 | 2014-06-25 | ジェネリクス・[ユーケー]・リミテッド | 新規な結晶形 |
US8853421B2 (en) | 2008-02-27 | 2014-10-07 | Generics [Uk] Limited | Crystalline forms of zofenopril calcium |
SI23949A (sl) | 2011-12-19 | 2013-06-28 | Silverstone Pharma | Nove kristalne soli zofenoprila, postopek za njihovo dobivanje in njihova uporaba v terapiji |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2340092A2 (fr) * | 1976-02-09 | 1977-09-02 | Roussel Uclaf | Nouveaux derives de l'acide 3-quinoleine carboxylique, leur procede de preparation et leur application comme medicament |
AU509899B2 (en) * | 1976-02-13 | 1980-05-29 | E.R. Squibb & Sons, Inc. | Proline derivatives and related compounds |
US4116962A (en) * | 1976-12-03 | 1978-09-26 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Pyrrolidine and piperidine-2-carboxylic acid derivatives |
US4113715A (en) * | 1977-01-17 | 1978-09-12 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Amino acid derivatives |
US4108886A (en) * | 1977-03-11 | 1978-08-22 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Thiopropanoylamino acid derivatives |
PH15381A (en) * | 1978-02-21 | 1982-12-17 | Squibb & Sons Inc | Halogen substituted mercaptoacylamino acids |
US4154934A (en) * | 1978-08-11 | 1979-05-15 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Mercaptoacylamino derivatives of heterocyclic carboxylic acids |
-
1979
- 1979-07-16 CA CA000331877A patent/CA1144930A/en not_active Expired
- 1979-07-17 NZ NZ191036A patent/NZ191036A/en unknown
- 1979-07-18 GR GR59635A patent/GR72420B/el unknown
- 1979-07-18 ZA ZA00793633A patent/ZA793633B/xx unknown
- 1979-07-18 IN IN524/DEL/79A patent/IN152712B/en unknown
- 1979-07-24 AU AU49190/79A patent/AU530690B2/en not_active Expired
- 1979-07-30 FR FR7919590A patent/FR2435469A1/fr active Granted
- 1979-08-01 PH PH22842A patent/PH15030A/en unknown
- 1979-08-03 IT IT49954/79A patent/IT1117782B/it active Protection Beyond IP Right Term
- 1979-08-07 YU YU1923/79A patent/YU41876B/xx unknown
- 1979-08-07 DE DE2932021A patent/DE2932021C2/de not_active Expired - Lifetime
- 1979-08-08 AT AT0541679A patent/AT379589B/de not_active IP Right Cessation
- 1979-08-09 CS CS795462A patent/CS228118B2/cs unknown
- 1979-08-09 DD DD79214896A patent/DD145749A5/de not_active IP Right Cessation
- 1979-08-10 IE IE1544/79A patent/IE48802B1/en active Protection Beyond IP Right Term
- 1979-08-10 NL NL7906120A patent/NL193374C/nl active Protection Beyond IP Right Term
- 1979-08-10 JP JP10272279A patent/JPS5527199A/ja active Granted
- 1979-08-10 SU SU792800304A patent/SU1066460A3/ru active
- 1979-08-10 CH CH737579A patent/CH642064A5/de not_active IP Right Cessation
- 1979-08-10 KR KR1019790002731A patent/KR830002450B1/ko active
- 1979-08-10 GB GB7927867A patent/GB2028327B/en not_active Expired
- 1979-08-10 SE SE7906722A patent/SE447477B/sv active Protection Beyond IP Right Term
- 1979-08-10 FI FI792498A patent/FI69834C/fi not_active IP Right Cessation
- 1979-08-10 PT PT70049A patent/PT70049A/pt unknown
- 1979-08-10 BE BE0/196688A patent/BE878191A/fr not_active IP Right Cessation
- 1979-08-10 RO RO98428A patent/RO78870B/ro unknown
- 1979-08-10 LU LU81593A patent/LU81593A1/xx active Protection Beyond IP Right Term
- 1979-08-10 ES ES483311A patent/ES483311A1/es not_active Expired
- 1979-08-10 DK DK335879A patent/DK154553C/da not_active IP Right Cessation
- 1979-08-10 AR AR277678A patent/AR229081A1/es active
-
1988
- 1988-12-21 JP JP63323204A patent/JPH01287069A/ja active Pending
-
1999
- 1999-06-04 LU LU90403C patent/LU90403I2/fr unknown
- 1999-08-04 NL NL990024C patent/NL990024I2/nl unknown
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
SE447477B (sv) | Merkaptoacylderivat av en substituerad prolin, forfarande for framstellning av denna och en farmaceutiskt aktiv komposition innehallande foreningen | |
US4316906A (en) | Mercaptoacyl derivatives of substituted prolines | |
US4105776A (en) | Proline derivatives and related compounds | |
US4217359A (en) | Carbamate derivatives of mercaptoacyl hydroxy prolines | |
US4154840A (en) | Antihypertensive pipecolic acid derivatives | |
US5319082A (en) | N-acylamino acid derivatives | |
EP0525420A1 (en) | Pseudopeptides and dipeptides characterised by a substituted methyl ketone moiety at the C-terminus as thiol protease inhibitors | |
SE426697B (sv) | Forfarande for framstellning av nya terapeutiskt aktiva derivat av azetiden-2-karboxylsyra, prolin och pipekolinsyra | |
CA1132985A (en) | Ketal and thioketal derivatives of mercaptoacyl prolines | |
EP0358305A1 (en) | Mercapto-phenylalcanoylamino acid amides, their preparation and their use as collagenase inhibitors | |
US4241076A (en) | Halogenated substituted mercaptoacylamino acids | |
JPH0134986B2 (sv) | ||
US4252943A (en) | Carbamate derivatives of mercaptoacyl hydroxy prolines | |
CA1103255A (en) | Proline derivatives and related compounds | |
US4330548A (en) | Mercaptoacyl derivatives of keto substituted pipecolic acid | |
NO152650B (no) | Analogifremgangsmaate for fremstilling av terapeutisk aktive prolinderivater. | |
NO800077L (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av merkaptoacyl-hydroksy-proliner | |
CA1138878A (en) | Mercaptoacyl derivatives of keto substituted proline and pipecolic acid | |
GB2070586A (en) | Derivatives of Proline or Pipecolic Acid | |
IE49358B1 (en) | Carbamate derivatives of hydroxy prolines | |
NO800620L (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av prolin- og pipekolsyre-derivater. |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
NAL | Patent in force |
Ref document number: 7906722-9 Format of ref document f/p: F |
|
SPCF | Application for supplementary protection certificate filed |
Free format text: 9990026, 990312 |
|
NUG | Patent has lapsed |
Ref document number: 7906722-9 Format of ref document f/p: F |
|
SPCG | Supplementary protection certificate granted |
Free format text: 9990026, 990312, EXPIRES: 20040810 |