RU2674704C1 - Гемостатическая инъекционная игла с покрытием из сшитого хитозана, содержащего пирокатехиновую группу и окисленную пирокатехиновую группу - Google Patents
Гемостатическая инъекционная игла с покрытием из сшитого хитозана, содержащего пирокатехиновую группу и окисленную пирокатехиновую группу Download PDFInfo
- Publication number
- RU2674704C1 RU2674704C1 RU2017138235A RU2017138235A RU2674704C1 RU 2674704 C1 RU2674704 C1 RU 2674704C1 RU 2017138235 A RU2017138235 A RU 2017138235A RU 2017138235 A RU2017138235 A RU 2017138235A RU 2674704 C1 RU2674704 C1 RU 2674704C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- injection needle
- group
- pyrocatechol
- hemostatic
- chitosan
- Prior art date
Links
- 239000007924 injection Substances 0.000 title claims abstract description 195
- 238000002347 injection Methods 0.000 title claims abstract description 195
- YCIMNLLNPGFGHC-UHFFFAOYSA-N catechol Chemical group OC1=CC=CC=C1O YCIMNLLNPGFGHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 103
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 title claims abstract description 65
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 title claims abstract description 29
- 238000000576 coating method Methods 0.000 title claims abstract description 29
- 229940030225 antihemorrhagics Drugs 0.000 title description 4
- 230000000025 haemostatic effect Effects 0.000 title 1
- 230000002439 hemostatic effect Effects 0.000 claims abstract description 123
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 claims abstract description 42
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 35
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 35
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 22
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 claims abstract description 21
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims abstract description 21
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 10
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 78
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 12
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 abstract 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 14
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 10
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 7
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 7
- DZAUWHJDUNRCTF-UHFFFAOYSA-N 3-(3,4-dihydroxyphenyl)propanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC1=CC=C(O)C(O)=C1 DZAUWHJDUNRCTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 239000007888 film coating Substances 0.000 description 6
- 238000009501 film coating Methods 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 6
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 6
- 210000004304 subcutaneous tissue Anatomy 0.000 description 6
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical compound CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 210000003752 saphenous vein Anatomy 0.000 description 4
- 238000004626 scanning electron microscopy Methods 0.000 description 4
- 208000031220 Hemophilia Diseases 0.000 description 3
- 208000009292 Hemophilia A Diseases 0.000 description 3
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 3
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000011319 anticancer therapy Methods 0.000 description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 3
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 125000004403 catechin group Chemical group 0.000 description 2
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011651 chromium Substances 0.000 description 2
- 239000011247 coating layer Substances 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000002149 energy-dispersive X-ray emission spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 239000002874 hemostatic agent Substances 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 108010080379 Fibrin Tissue Adhesive Proteins 0.000 description 1
- 206010018852 Haematoma Diseases 0.000 description 1
- 241000872931 Myoporum sandwicense Species 0.000 description 1
- 240000007711 Peperomia pellucida Species 0.000 description 1
- 206010040880 Skin irritation Diseases 0.000 description 1
- 239000004830 Super Glue Substances 0.000 description 1
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 1
- -1 and thus Substances 0.000 description 1
- 239000000227 bioadhesive Substances 0.000 description 1
- 239000000560 biocompatible material Substances 0.000 description 1
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229950001002 cianidanol Drugs 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000012567 medical material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 108010004563 mussel adhesive protein Proteins 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000011587 new zealand white rabbit Methods 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 125000004043 oxo group Chemical group O=* 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Chemical group 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 230000036556 skin irritation Effects 0.000 description 1
- 231100000475 skin irritation Toxicity 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L31/00—Materials for other surgical articles, e.g. stents, stent-grafts, shunts, surgical drapes, guide wires, materials for adhesion prevention, occluding devices, surgical gloves, tissue fixation devices
- A61L31/08—Materials for coatings
- A61L31/10—Macromolecular materials
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L31/00—Materials for other surgical articles, e.g. stents, stent-grafts, shunts, surgical drapes, guide wires, materials for adhesion prevention, occluding devices, surgical gloves, tissue fixation devices
- A61L31/14—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L31/00—Materials for other surgical articles, e.g. stents, stent-grafts, shunts, surgical drapes, guide wires, materials for adhesion prevention, occluding devices, surgical gloves, tissue fixation devices
- A61L31/14—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
- A61L31/145—Hydrogels or hydrocolloids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L31/00—Materials for other surgical articles, e.g. stents, stent-grafts, shunts, surgical drapes, guide wires, materials for adhesion prevention, occluding devices, surgical gloves, tissue fixation devices
- A61L31/14—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
- A61L31/16—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/20—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials
- A61L2300/23—Carbohydrates
- A61L2300/236—Glycosaminoglycans, e.g. heparin, hyaluronic acid, chondroitin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2400/00—Materials characterised by their function or physical properties
- A61L2400/04—Materials for stopping bleeding
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2420/00—Materials or methods for coatings medical devices
- A61L2420/02—Methods for coating medical devices
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Surgery (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Infusion, Injection, And Reservoir Apparatuses (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к гемостатической инъекционной игле, к способу её изготовления, к способу выполнения гемостатической инъекции и гидрогелю для нанесения покрытия на инъекционную иглу, предупреждающего кровопотерю во время выполнения инъекции, который содержит хитозан с введенной в него пирокатехиновой группой, в котором –OH группа пирокатехиновой группы гидрогеля частично окислена до =O группы, а затем сшита путем реакции дегидратации-конденсации с -NHгруппой, содержащейся в хитозане, причем процент окисления пирокатехиновой группы составляет от 1 до 20% (молярное отношение) от пирокатехиновых групп, содержащихся в гидрогеле. Группа изобретений обеспечивает эффективное подавление кровопотери во время и после выполнения инъекции. 4 н. и 4 з.п. ф-лы, 5 ил., 2 пр.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к гемостатической инъекционной игле с покрытием из хитозана, в который введены и сшиты пирокатехиновая группа и окисленная пирокатехиновая группа.
Уровень техники
Разработка стандартных гемостатических и адгезивных продуктов была ориентирована на их применение для хирургических операций. Обычные медицинские гемостатические средства и адгезивные средства включают в себя адгезивные средства на основе цианоакрилата, одобренные Управлением по контролю за продуктами питания и лекарственными средствами (FDA), и фибриновый клей на основе белка, участвующего в свертывании крови in vivo. Однако такие гемостатические и адгезивные продукты не удовлетворяют всем требованиям адгезионной прочности, длительного сохранения свойств после применения, низкой токсичности, иммунных реакций in vivo и т.д. Таким образом, в процессе разработки гемостатических средств поиск биосовместимых материалов, обладающих при этом высокой адгезией к тканям, превратился в серьезную проблему.
Между тем, хитозан широко известен в качестве биополимера, обладающего превосходной гемостатической способностью. Однако у хитозана имеются недостатки, заключающиеся в том, что в нейтральных растворах он крайне мало растворим, а растворяется только в кислых растворах. Вследствие этих недостатков применение хитозана в качестве медицинского материала ограничено.
Соответственно, были опубликованы исследования по введению важной пирокатехиновой функциональной группы, которая способствует адгезии клея мидий, повышая в результате растворимость хитозана и адгезию хитозана к слизистой оболочке и ткани. Например, в международной патентной публикации № WO2013-077475 описана адгезионная гидрогелевая композиция, включающая хитозан, связанный с пирокатехиновой группой, и Плюроник, содержащий терминально-связанную тиольную группу. Более конкретно, в данной публикации описана адгезионная композиция, которая стабильна в условиях in vivo и in vitro, чувствительна к температуре, обладает превосходным гемостатическим действием и, следовательно, может использоваться в качестве биоадгезионного средства, а также описано адгезионное средство, антиадгезионное средство и средство, предотвращающее адсорбцию, предназначенные для медицинского применения и содержащие эту адгезионную композицию. Кроме того, гидрогель или пленка, образующаяся при использовании хитозана, связанного с пирокатехиновой группой, обладает превосходным действием, так что она может быть заменой для обычно используемых гемостатических средств, применяемых при хирургических операциях.
Однако описанный выше состав представляет собой форму, разработанную с учетом удобства использования для хирургических операций, и его проблема состоит в том, что он не удовлетворяет всем требованиям адгезионной прочности, длительного сохранения свойств после применения, низкой токсичности, иммунных реакций in vivo и т.д.
Соответственно, авторы настоящего изобретения провели исследования, направленные на разработку гемостатической инъекционной иглы, которая представляет собой медицинское устройство нового типа, не приводящее к кровопотере, и, в результате, обнаружили, что инъекционная игла с покрытием из хитозана, в который введены и сшиты катехиновая группа
и окисленная катехиновая группа
способна эффективно подавлять кровопотерю во время и после выполнения инъекции, сделав, таким образом, настоящее изобретение.
Сущность изобретения
Цель настоящего изобретения заключается в получении гидрогеля для покрытия инъекционной иглы для предупреждения кровопотери во время и после инъекции.
Следующая цель настоящего изобретения заключается в получении гемостатической инъекционной иглы, содержащей описанный выше гидрогель для покрытия инъекционной иглы, нанесенный на ее поверхность.
Еще одна цель настоящего изобретения заключается в разработке способа получения описанной выше гемостатической инъекционной иглы.
Еще одна цель настоящего изобретения заключается в разработке способа выполнения инъекции с использованием описанной выше гемостатической инъекционной иглы, не приводящего к кровопотере.
Для осуществления указанной выше цели в настоящем изобретении описан гидрогель, предназначенный для нанесения на инъекционную иглу, который предупреждает кровопотерю во время выполнения инъекции и содержит хитозан, в который введена пирокатехиновая группа, причем по меньшей мере часть пирокатехиновых групп окислена и сшита.
В настоящем изобретении также описана гемостатическая инъекционная игла, состоящая из описанной выше инъекционной иглы, содержащей гидрогель, нанесенный на ее поверхность.
В настоящем изобретении также описан способ изготовления описанной выше гемостатической инъекционной иглы, при этом данный способ включает в себя стадии:
(1) приготовления раствора хитозана, в который введены и частично сшиты пирокатехиновая группа
и по меньшей мере частично окисленная пирокатехиновая группа 
;
и
(2) нанесения на поверхность инъекционной иглы раствора со стадии (1).
В настоящем изобретении также описан способ выполнения инъекции, не приводящий к кровопотере, при этом данный метод включает в себя стадии:
(1) приготовления раствора хитозана, в который введены и частично сшиты пирокатехиновая группа
и по меньшей мере частично окисленная пирокатехиновая группа ;
(2) подготовки гемостатической инъекционной иглы путем нанесения на поверхность инъекционной иглы раствора со стадии (1), и
(3) осуществления инъекции человеку или животному с использованием гемостатической инъекционной иглы, подготовленной на стадии (2).
Краткое описание чертежей
На фиг. 1 представлены изображения, полученных методом сканирующей электронной микроскопии, проведенной для анализа формы и компонентов гемостатической инъекционной иглы, приготовленной в примере 1.
Фиг. 2 представляет собой график, на котором показана толщина пленки, нанесенной на каждую из гемостатических инъекционных игл, приготовленных в примерах 1-3, а на изображении в нижней части фиг. 2 показана форма пленок, как она определена методом сканирующей электронной микроскопии.
На фиг. 3 показаны эксперименты ex vivo, проведенные для подтверждения гемостатического механизма действия гемостатической инъекционной иглы, приготовленной в примере 1.
На фиг. 4(A) показаны данные спектроскопии в УФ и видимой областях для раствора хитозана-пирокатехина (красного), используемого для изготовления гемостатической инъекционной иглы. Синий спектр соответствует раствору хитозана-пирокатехина, используемому в качестве контроля, в котором не было индуцировано частичное окисление и сшивание пирокатехина.
На фиг. 4(B) показаны спектры протонного магнитного резонанса раствора хитозана-пирокатехина (красного), используемого для изготовления гемостатической инъекционной иглы.
Фиг. 4(C) представляет собой график зависимости реологических свойств, наблюдаемых при воздействии на пленки, каждая из которых получена из раствора хитозана-пирокатехина, физиологического раствора (сверху: раствор хитозана-пирокатехина, в котором не было индуцировано частичное окисление и сшивание пирокатехина; снизу: раствор хитозана-пирокатехина, используемый в примерах 1-3).
На фиг. 5 показаны результатов экспериментов in vivo с использованием гемостатической инъекционной иглы, приготовленной в примере 1. В частности, на фиг. 5(A) представлена оценка гемостатического эффекта на модели подкожной вены мыши; фиг. 5(B) представляет собой график, на котором показан объем кровопотери, наблюдаемый при использовании модели подкожной вены мыши; а на фиг. 5(C) представлена оценка гемостатического эффекта на модели ушной вены кролика.
Наилучший способ осуществления изобретения
Если не указано иное, все технические и научные термины, использованные в настоящем описании, имеют те же значения, что и обычно понимаемые специалистом в области, к которой относится данное изобретение. Как правило, использованная номенклатура и экспериментальные методы, которые будут описаны ниже, хорошо известны и обычно применяются в данной области.
Далее настоящее изобретение будет описано подробно.
В настоящем изобретении описывается гидрогель для нанесения покрытия на инъекционную иглу, предупреждающего кровопотерю во время инъекции, который содержит хитозан, в который введена пирокатехиновая группа, и по меньшей мере часть пирокатехиновых групп окислена и сшита.
В настоящем описании -OH группа пирокатехиновой группы в гидрогеле частично окислена до =O группы, а затем сшита путем реакции дегидратации-конденсации с -NH2 группой хитозана, а процент окисления пирокатехиновой группы предпочтительно составляет от 1 до 20% (молярное отношение) пирокатехиновых групп, содержащихся в гидрогеле. Если процент окисления пирокатехиновой группы составляет менее 1% от пирокатехиновых групп, содержащихся в гидрогеле, то возникнет сложность, заключающаяся в том, что сшивание с -NH2 группой хитозана будет недостаточным, а если процент окисления пирокатехиновой группы превышает 20%, но составляет не более 80% от количества пирокатехиновых групп, содержащихся в гидрогеле, то нанесение покрытия на иглу будет возможно, но проблема будет заключаться в том, что возрастет степень отверждения пленочного покрытия, так что данная пленка не сможет проявлять гемостатический эффект. Если процент окисления пирокатехиновой группы превышает 80% от количества пирокатехиновых групп, содержащихся в гидрогеле, возникнет проблема, заключающаяся в увеличении степени отверждения за счет сшивания и, таким образом, появятся свойства, нежелательные для покрытия иглы.
Выражение «сшивание за счет реакции дегидратации-конденсации» означает, как показано на следующей схеме реакции 1, что оксогруппа (=O) окисленной пирокатехиновой группы взаимодействует с аминогруппой (-NH2), находящейся в хитозане в подходящей ориентации, с образованием связи.
Схема реакции 1
где в соединении, представленном формулой 1, показана аминогруппа (-NH2) хитозана, в который введена пирокатехиновая группа и окисленная пирокатехиновая группа ,
где в соединении, представленном формулой 2, показана окисленная пирокатехиновая группа хитозана, в который введена пирокатехиновая группа и окисленная пирокатехиновая группа ,
где соединение, представленное формулой 3, представляет собой соединение, полученное реакцией дегидратации-конденсации соединения, представленного формулой 1, с соединением, представленным формулой 2; и
где L представляет собой одинарную связь, C1-8 линейный или разветвленный алкилен или -C(=O)-R1-, где R1 представляет собой одинарную связь или C1-8 линейный или разветвленный алкилен.
Более конкретно, предшественник хитозана с введенными пирокатехиновой группой и окисленной пирокатехиновой группой представляет собой хитозан без введенной окисленной пирокатехиновой группы, а конкретная химическая структуры хитозана с введенной пирокатехиновой группой, использованного в описанных ниже примерах, представлена следующей формулой 4:
Формула 4
где соотношение x:y:z предпочтительно равно 6:1:3.
В настоящем изобретении также описана гемостатическая инъекционная игла, содержащая описанный выше гидрогель для покрытия инъекционной иглы, нанесенный на ее поверхность. В настоящем изобретении толщина гидрогеля, нанесенного на гемостатическую инъекционную иглу, предпочтительно составляет от 2 до 30 мкм. При толщине меньше 2 мкм возникнет сложность, заключающаяся в том, что гидрогель введен в количестве, недостаточном для предупреждения кровопотери во время и после выполнения инъекции, и, таким образом, кровопотеря не будет предупреждаться эффективно, а если толщина превышает 30 мкм, возникнет сложность, заключающаяся в том, что гидрогель образует слишком толстое покрытие на инъекционной игле и поэтому гидрогель не попадет в организм вместе с инъекционной иглой и будет отталкиваться кожей, что означает, что кровопотеря не будет предотвращаться эффективно.
Кроме того, в настоящем изобретении описан способ изготовления описанной выше гемостатической инъекционной иглы, включающий стадии:
(1) получения раствора хитозана, в который введены и частично сшиты пирокатехиновая группа и по меньшей мере частично окисленная пирокатехиновая группа , и
2) нанесения на поверхность инъекционной иглы раствора со стадии (1).
Далее способ изготовления гемостатической инъекционной иглы будет описан подробно и поэтапно.
В способе изготовления гемостатической инъекционной иглы согласно настоящему изобретению стадия (1) представляет собой стадию приготовления раствора хитозана с введенными и частично сшитыми пирокатехиновой группой и по меньшей мере частично окисленной пирокатехиновой группой .
В этом случае данный раствор можно получить, растворяя в растворителе хитозан с введенной пирокатехиновой группой, и выдерживая раствор хитозана, чтобы вызвать частичное окисление и сшивание пирокатехиновой группы. При этом температура выдерживания хитозана предпочтительно составляет от 0 до 20°С, более предпочтительно от 2 до 10°С, еще более предпочтительно от 3 до 5°С, наиболее предпочтительно 4°С. Кроме того, продолжительность выдерживания хитозана предпочтительно составляет от 1 до 5 дней, более предпочтительно от 2 до 4 дней, наиболее предпочтительно 3 дня. Хитозан с введенной пирокатехиновой группой предпочтительно содержится в количестве от 1 до 2% мас., более предпочтительно от 1,3 до 1,7% мас., наиболее предпочтительно 1,5% мас. из расчета на общую массу раствора.
В случае, когда температура и продолжительность хранения хитозана и содержание хитозана с введенной пирокатехиновой группой выходят за пределы определенных выше диапазонов, может возникнуть сложность, заключающаяся в том, что не будут достигнуты физические свойства пленки, необходимой для покрытия гемостатической инъекционной иглы.
В способе получения гемостатической инъекционной иглы согласно настоящему изобретению стадия (2) представляет собой стадию нанесения на поверхность инъекционной иглы раствора со стадии (1). Более конкретно, стадия (2) представляет собой стадию, на которой на инъекционную иглу наносят раствор, а затем равномерно покрывают им поверхность инъекционной иглы при вращении инъекционной иглы с определенной скоростью.
В этом случае толщину покрытия на инъекционной игле можно регулировать в зависимости от количества используемого раствора и таким образом можно наносить покрытие на инъекционные иглы различного диаметра.
В настоящем изобретении также описан способ выполнения инъекции, не приводящий к кровопотере, при этом данный способ включает в себя стадии:
(1) получения раствора хитозана с введенными и частично сшитыми пирокатехиновой группой и по меньшей мере частично окисленной пирокатехиновой группой ;
(2) подготовки гемостатической инъекционной иглы путем нанесения на поверхность инъекционной иглы раствора со стадии (1); и
(3) выполнения инъекции человеку или животному с использованием гемостатической инъекционной иглы, полученной на стадии (2).
Далее инъекционный метод, не приводящий к кровотечению, будет описан подробно и поэтапно.
В способе выполнения инъекции, не приводящем к кровопотере, согласно настоящему изобретению, стадия (1) представляет собой стадию получения раствора хитозана с введенными в него и частично сшитыми пирокатехиновой группой и по меньшей мере частично окисленной пирокатехиновой группой .
В этом случае данный раствор можно получить, растворяя в растворителе хитозан с введенной пирокатехиновой группой, и выдерживая раствор хитозана, чтобы вызвать частичное окисление и сшивание пирокатехиновой группы. При этом температура выдерживания хитозана предпочтительно составляет от 0 до 20°С, более предпочтительно от 2 до 10°С, еще более предпочтительно от 3 до 5°С, наиболее предпочтительно 4°С. Кроме того, продолжительность выдерживания хитозана предпочтительно составляет от 1 до 5 дней, более предпочтительно от 2 до 4 дней, наиболее предпочтительно 3 дня. Хитозан с введенной пирокатехиновой группой предпочтительно содержится в количестве от 1 до 2% мас., более предпочтительно от 1,3 до 1,7% мас., наиболее предпочтительно 1,5% мас. из расчета на общую массу раствора.
В случае, когда температура и продолжительность хранения хитозана и содержание хитозана с введенной пирокатехиновой группой выходят за пределы определенных выше интервалов, может возникнуть сложность, заключающаяся в том, что не будут достигнуты физические свойства пленки, необходимые для покрытия гемостатической инъекционной иглы.
В способе выполнения инъекции, не приводящем к кровопотере, согласно настоящему изобретению стадия (2) представляет собой стадию подготовки гемостатической инъекционной иглы путем нанесения на поверхность инъекционной иглы раствора со стадии (1). Более конкретно, стадия (2) представляет собой стадию, на которой на инъекционную иглу наносят раствор, а затем равномерно покрывают им поверхность инъекционной иглы при вращении инъекционной иглы с определенной скоростью.
В этом случае толщину покрытия на инъекционной игле можно регулировать в зависимости от количества используемого раствора и таким образом можно наносить покрытие на инъекционные иглы различного диаметра.
В способе выполнения инъекции, не приводящем к кровопотере, согласно настоящему изобретению стадия (3) представляет собой стадию выполнения инъекции человеку или животному с использованием гемостатической инъекционной иглы, полученной на стадии (2).
При этом способ выполнения инъекции, не приводящий к кровопотере, характеризуется тем, что слой покрытия на поверхности гемостатической инъекционной иглы подвергается воздействию водорастворимой окружающей среды in vivo и претерпевает фазовый переход с образованием гидрогеля, который герметизирует место укола при инъекции, предотвращая, таким образом, кровопотерю. Чтобы обеспечить время, достаточное для превращения в гидрогель, гемостатическую инъекционную иглу предпочтительно оставляют во введенном состоянии в течение от 10 до 30 секунд после выполнения инъекции. Если период времени, в течение которого гемостатическую инъекционную иглу оставляют in vivo, составляет менее 10 секунд, возникнет сложность, состоящая в том, что не обеспечивается достаточное время для превращения в гидрогель и, следовательно, кровопотеря не предупреждается эффективно, а если время, в течение которого гемостатическая инъекционная игла остается in vivo, составляет более 30 секунд, то обеспечивается достаточное время для превращения в гидрогель, но возникает проблема, связанная с образованием гематомы вследствие раздражения кожи.
Для оценки гемостатической способности гемостатической инъекционной иглы согласно настоящему изобретению были проведены следующие эксперименты.
Прежде всего, гемостатическую инъекционную иглу, изготовленную в примере 1, исследовали при помощи сканирующего электронного микроскопа. В результате данного исследования было обнаружено, что гемостатическая инъекционная игла, приготовленная в примере 1, сохраняет свою форму, а поверхность инъекционной иглы имеет равномерное покрытие. Кроме того, был проведен анализ компонентов покрытия на поверхности гемостатической инъекционной иглы, изготовленной в примере 1, методом энергодисперсионной рентгеновской спектрометрии. В результате данного анализа на поверхности инъекционной иглы, не содержащей покрытия, были обнаружены такие элементы, как хром, железо и т.д., составляющие материал инъекционной иглы, в то время как на поверхности гемостатической инъекционной иглы, приготовленной в примере 1, были обнаружены углерод, азот, кислород и т.д., представляющие собой основные элементы, содержащиеся в хитозане, функционализированном пирокатехином (см. фиг. 1 в экспериментальном примере 1).
Кроме того, для анализа толщины покрытия на поверхности гемостатической инъекционной иглы, изготовленной в каждом из примеров 1-3, пленку снимали и измеряли ее толщину при помощи сканирующего электронного микроскопа. По данным измерений было найдено, что по мере увеличения толщины гемостатической инъекционной иглы, толщина образующейся хитозан-пирокатехиновой пленки уменьшалась за счет поверхностного натяжения на гемостатической инъекционной игле. Более конкретно, было обнаружено, что толщина пленки на поверхности гемостатической инъекционной иглы, приготовленной в примерах 1-3, составляла 25,2 ± 2,8 мкм, 26,6 ± 3,0 мкм, и 3,8 ± 0,7 мкм соответственно (см. фиг. 2 в экспериментальном примере 2).
Кроме того, для оценки гемостатической способности гемостатической инъекционной иглы, изготовленной в примере 1, был проведен эксперимент еx vivo. В результате данного эксперимента было обнаружено, что в случае обычной инъекционной иглы происходит утечка физиологического раствора, тогда как в случае гемостатической инъекционной иглы, приготовленной в примере 3, место укола в подкожной ткани герметизируется и вытекание физиологического раствора предотвращается вследствие превращения пленочного покрытия на инъекционной игле в гидрогель, которое происходит через 15-20 секунд после прокола подкожной ткани (см. фиг. 3 в экспериментальном примере 3).
Кроме того, для доказательства превращения пленки на поверхности гемостатической инъекционной иглы в гидрогель, что подтверждено в экспериментальном примере 3, был проведен анализ свойств раствора хитозан-пирокатехина, используемого при изготовлении гемостатической инъекционной иглы, методом спектроскопии в УФ и видимой областях (см. фиг. 4(A) в экспериментальном примере 4).
Кроме того, для доказательства превращения пленочного покрытия, образующегося на поверхности гемостатической инъекционной иглы в гидрогель, как показано в экспериментальном примере 3, был проведен анализ методом протонного ядерного магнитного резонанса. В результате было найдено, что при частичном окислении пирокатехина образуется промежуточное соединение (см. фиг. 4(B) в экспериментальном примере 4).
Помимо этого, было обнаружено, что при подвергании пленки, образующейся при высушивании 300 мкл раствора хитозана-пирокатехина, используемого в примерах, действию физиологического раствора в течение от 15 до 20 секунд, образующийся материал обладал свойством гидрогеля (см. фиг. 4(C) в экспериментальном примере 4).
Кроме того, для оценки гемостатической способности гемостатической инъекционной иглы, приготовленной в примере 1, был проведен эксперимент in vivo. В результате данного эксперимента было обнаружено, что покрытие на гемостатической инъекционной игле, приготовленной в примере 1, образующееся из раствора хитозана-пирокатехина, превращается в гидрогель и набухает, что указывает на то, что гемостатическая инъекционная игла обладает значительно более высоким гемостатическим эффектом по сравнению с обычной инъекционной иглой (см. фиг. 5(A) в экспериментальном примере 5).
Кроме того, было обнаружено, что в случае обычной инъекционной иглы общий объем кровопотери составляет 31,3 мкл по сумме трех экспериментов (n=3), в то время как гемостатическая инъекционная игла, изготовленная в примере 1, вообще не приводит к кровотечению (смотри фиг. 5(B) в экспериментальном примере 5). Кроме того, было обнаружено, что обычная инъекционная игла вызывает кровопотерю во время и после выполнения инъекции в ушную вену у кролика, тогда как гемостатическая инъекционная игла, приготовленная в примере 2, вообще не приводит к кровопотере во время и после выполнения инъекции (смотри фиг. 5(С) в экспериментальном примере 5).
Таким образом, гемостатическая инъекционная игла согласно настоящему изобретению способна предупреждать кровопотерю во время и после выполнения инъекции и, следовательно, может эффективно использоваться для выполнения инъекций не только пациентам, включая пациентов с диабетом, пациентов, получающих противораковую терапию, и пациентов с гемофилией, обладающих низкой гемостатической способностью, но и пациентам с реакциями отторжения крови, а также детям.
Далее настоящее изобретение будет описано более подробно со ссылкой на примеры и экспериментальные примеры.
Специалисту в данной области техники будет очевидно, что данные примеры и экспериментальные примеры приведены только с целью иллюстрации и не подразумевают ограничения объема настоящего изобретения.
Пример получения 1. Получение хитозана, функционализированного пирокатехином
В 292 мл раствора HCl (pH = 2) растворяли 3 г хитозана, ацетилированного примерно на 30% (хитозан 70/100, модель: 24204, производство Heppe Medical Chitosan) в течение 6 часов. рН раствора хитозана доводили до 5,5, медленно прибавляя 8 мл 0,5 N раствора NaOH. Полученный 1%-ный раствор хитозана стабилизировали в течение 12 часов.
К полученному раствору хитозана прибавляли 2,37 г 3-(3,4-дигидроксифенил)пропановой кислоты. Затем в качестве реагента для образования амидной связи (-CONH-) между аминогруппой (-NH2) хитозана и карбоксильной группой (-COOH) 3-(3,4-дигидроксифенил)пропановой кислоты, к раствору хитозана прибавляли 2,02 г 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (EDC), растворенного в 50 мл этанола. Затем рН раствора доводили до 4,5, после чего оставляли для взаимодействия на 1 час. В результате получали хитозан, функционализированный пирокатехином.
Для удаления непрореагировавшей 3-(3,4-дигидроксифенил)пропановой кислоты и 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (EDC) раствор после реакции диализировали в 4,5 л трижды дистиллированной воды, содержащей хлорид натрия и 3 мл 5 N HCl с использованием диализной мембраны (отсечение по молекулярной массе: 12000-15000) в течение 3 дней. Кроме того, раствор диализировали в 4,5 л трижды дистиллированной воды, содержащей 3 мл 5 N HCl в течение 2 дней. Наконец, раствор диализировали в трижды дистиллированной воде в течение 6 часов, а затем подвергали лиофильной сушке, получая в результате хитозан, функционализированный пирокатехином (x:y:z = 6:1:3).
Пример 1. Приготовление 1 гемостатической инъекционной иглы (26G)
1,5 мл хитозана, функционализированного пирокатехином, полученного в примере получения 1, растворяли в 100 мкл трижды дистиллированной воды, а затем выдерживали при 4°C в течение 3 дней, чтобы вызвать частичное окисление и сшивание пирокатехиновой группы. В результате получали раствор хитозана (называемый в дальнейшем «раствор хитозана-пирокатехина», с введенными и частично сшитыми пирокатехиновой группой 
и окисленной пирокатехиновой группой .
Процент окисления пирокатехиновой группы в растворе хитозана-катехина определяли путем измерения поглощения при длине волны 500 нм методом спектроскопии в УФ и видимой области. При образовании поперечных связей между окисленной пирокатехиновой группой и аминогруппой хитозана возникает поглощение при длине волны 500 нм. Таким образом, исходя из поглощения, возникающего при обработке раствора хитозана-пирокатехина NaIO4 (то есть окислителем, вызывающим окисление раствора хитозана-пирокатехина в максимально возможной степени), взятом в трехкратном молярном избытке относительно пирокатехиновой группы, оценивали процент окисления раствора хитозана-пирокатехина. В результате было показано, что процент окисления раствора хитозана-пирокатехина составляет от 4,5 до 5,5%.
Тем временем для получения стабильного покрытия при помощи полученного раствора хитозана-пирокатехина, инъекционную иглу толщиной 26G выдерживали в кислородном пламени в течение 10 минут. После этого на инъекционную иглу помещали 6,5 мкл раствора хитозана-пирокатехина и покрывали ее этим раствором при комнатной температуре и скорости вращения 40 об./мин в течение 1 часа и сушили в течение 2 часов. Данную процедуру повторяли дважды, получая в результате гемостатическую инъекционную иглу.
Пример 2. Приготовление 2 гемостатической инъекционной иглы (23G)
Гемостатическую инъекционную иглу изготавливали так же, как и в примере 1, за исключением того, что вместо инъекционной иглы толщиной 26G использовали инъекционную иглы толщиной 23G, а раствор хитозана-пирокатехина использовали в количестве 9 мкл вместо 6,5 мкл.
Пример 3. Приготовление 3 гемостатической инъекционной иглы (18G)
Гемостатическую инъекционную иглу изготавливали так же, как и в примере 1, за исключением того, что вместо инъекционной иглы толщиной 26G использовали инъекционную иглы толщиной 18G, а раствор хитозана-пирокатехина использовали в количестве 20 мкл вместо 6,5 мкл.
Экспериментальный пример 1. Исследование формы гемостатических инъекционных игл
Гемостатическую инъекционную иглу, изготовленную в примере 1, исследовали при помощи сканирующего электронного микроскопа (Hitachi S-4800), и результаты наблюдения представлены на фиг. 1.
На фиг. 1 приведены изображения, полученные методом сканирующей электронной микроскопии для анализа формы и компонентов гемостатической инъекционной иглы, изготовленной в примере 1.
Как показано на фиг. 1, гемостатическая инъекционная игла, изготовленная в примере 1, сохраняла свою форму, и раствор хитозана-пирокатехина образовывал равномерное покрытие на поверхности инъекционной иглы.
Кроме того, проводили анализ компонентов гемостатической инъекционной иглы, изготовленной в примере 1, методом энергодисперсионной рентгеновской спектрометрии. При использовании энергодисперсионного спектрометра в соединении со сканирующим электронным микроскопом, при измерении слоя покрытия на поверхности гемостатической инъекционной иглы, изготовленной в примере 1, было выявлено флуоресцентное рентгеновское излучение, и проведен анализ элементов, определенных в течение 120 секунд.
В результате, как показано на графике под фиг. 1, на поверхности инъекционной иглы, не содержащей покрытия, были обнаружены такие элементы, как хром, железо и т.д., составляющие материал инъекционной иглы, в то время как на поверхности гемостатической инъекционной иглы, изготовленной в примере 1, был обнаружены углерод, азот, кислород и т.д., являющиеся основными элементами, содержащимися в хитозане, функционализированном пирокатехином.
Таким образом, было показано, что действительно была изготовлена гемостатическая инъекционная игла согласно настоящему изобретению.
Экспериментальный пример 2. Анализ толщины
Для анализа толщины пленочного покрытия на поверхности гемостатической инъекционной иглы, изготовленной в примере 1, пленку отделяли и измеряли ее толщину при помощи сканирующего электронного микроскопа (Hitachi S-4800). Результаты измерения представлены на фиг. 2.
Фиг. 2 представляет собой график, на котором приведена толщина пленки, покрывающей каждую из гемостатических инъекционных игл, изготовленных в примерах 1-3, а на изображении в нижней части фиг. 2 показана форма пленок, измеренных при помощи сканирующей электронной микроскопии.
Из фиг. 2 видно, что по мере увеличения толщины гемостатической инъекционной иглы толщина образующейся хитозан-пирокатехиновой пленки уменьшалась за счет поверхностного натяжения на гемостатической инъекционной игле. Однако поскольку разница в толщине между гемостатической инъекционной иглой примера 1 (26G) и гемостатической инъекционной иглой примера 2 (23G) была невелика, не было большого различия и в толщине пленки на поверхности для примера 1 и примера 2. Более конкретно, толщина пленочного покрытия гемостатической инъекционной иглы, изготовленной в примерах 1-3, составляла 25,2 ± 2,8 мкм, 26,6 ± 3,0 мкм и 3,8 ± 0,7 мкм соответственно.
Экспериментальный пример 3. Оценка гемостатической способности ex vivo
Для оценки гемостатической способности гемостатической инъекционной иглы, изготовленной в примере 3, был проведен эксперимент ex vivo, как показано на фиг. 3. Более конкретно, один конец каждого цилиндра шприца закрывали подкожной тканью бестимусных мышей (бестимусные мыши BALBc, 8 недель, самцы, от 23 до 25 г), и заполняли цилиндр каждого шприца физиологическим раствором. После этого подкожную ткань прокалывали гемостатической инъекционной иглой (18G), изготовленной в примере 3, или обычной инъекционной иглой, и наблюдали, будет ли происходить вытекание физиологического раствора через прокол.
На фиг. 3 показаны эксперименты ex vivo, проведенные для доказательства гемостатического механизма действия гемостатической инъекционной иглы, изготовленной в примере 1.
Из фиг. 3 видно, что в случае обычной инъекционной иглы вытекание физиологического раствора имеет место, тогда как в случае гемостатической инъекционной иглы, изготовленной в примере 3, прокол в подкожной ткани герметизируется, и вытекание физиологического раствора предотвращается, благодаря превращению пленочного покрытия на инъекционной игле в гидрогель, происходящему через 15-20 секунд после прокалывания подкожной ткани.
Экспериментальный пример 4. Анализ свойств пленки для доказательства гемостатического механизма
Чтобы убедиться в превращении пленки на поверхности гемостатической инъекционной иглы в гидрогель, что подтверждается в экспериментальном примере 3, проводили анализ свойств раствора хитозана-пирокатехина, использованного для изготовления гемостатической инъекционной иглы, методом спектрометрии в УФ и видимой области (HP8453, Hewlett Packard). Результаты данного анализа представлены на фиг. 4(A).
На фиг. 4(A) представлены данные спектрометрии в УФ и видимой области раствора хитозана-пирокатехина (красного), использованного для изготовления гемостатической инъекционной иглы. Синий спектр соответствует раствору хитозана-пирокатехина, используемому в качестве контрольного, в котором не было индуцировано частичное окисление и сшивание пирокатехина.
Как показано на фиг.4(A), по данным спектрометрии в УФ и видимой области, наблюдается поглощение при длине волны 500 нм и, таким образом, пирокатехин в растворе хитозана-пирокатехина частично окислен.
Кроме того, было проведено исследование методом протонного ядерного магнитного резонанса (Bruker AV-300). В результате, как показано на фиг. 4(B), частичное окисление пирокатехина приводило к образованию промежуточного соединения.
На фиг. 4(B) представлены данные анализа протонного ядерного магнитного резонанса раствора хитозана-пирокатехина (красного), использованного для изготовления гемостатической инъекционной иглы.
Кроме того, пленку, полученную при высушивании 300 мкл раствора хитозана-пирокатехина, подвергали действию физиологического раствора в течение от 15 до 20 секунд, а затем проводили анализ полученного материала при помощи вискозиметра (Bohlin Advanced Rheometer, Malvern Instruments). В результате, как показано на фиг. 4(C), полученное вещество обладало свойством гидрогеля.
Фиг. 4(C) представляет собой график, на котором представлены реологические свойства, наблюдаемые при подвергании пленок, каждая из которых получена из раствора хитозана-пирокатехина, действию физиологического раствора (сверху: раствор хитозана-пирокатехина, в котором не проводили частичное окисление и сшивание пирокатехина, снизу: раствор хитозана-пирокатехина, использованный в примерах 1-3).
Более конкретно, пленку, полученную из раствора хитозана-пирокатехина, использованного в примерах 1-3, помещали в держатель образца вискозиметра и анализировали степень деформации, исходя из динамического модуля упругости (G') и модуля механических потерь (G'') при приложении сдвигового напряжения 100 Па с частотой 0,1-10 радиан/секунду при использовании плоскопараллельной пластины толщиной 20 мм. Динамический модуль упругости (G') и модуль механических потерь (G'') рассчитывали по следующему уравнению 1:
Уравнение 1
где σ представляет собой сдвиговое напряжение, прикладываемое к материалу,
γ0 представляет собой максимальную амплитуду сдвигового напряжения, возникающую при деформации материала,
G' представляет собой динамический модуль упругости,
G'' представляет собой модуль механических потерь,
ω представляет собой частоту, и
t представляет собой время.
Как видно из верхней части фиг. 4(C), для пленки, полученной из раствора хитозана-пирокатехина, в котором не проводили окисления и частичного сшивания пирокатехина, модуль механических потерь (G'') больше динамического модуля упругости (G') на большей части поверхности, что указывает на отсутствие образования гидрогеля.
Однако как видно из нижней части фиг. 4(C), для пленки, полученной из раствора хитозана-пирокатехина, использованного в примерах 1-3, динамический модуль упругости (G') больше модуля механических потерь (G'') на всей поверхности, что указывает на образование гидрогеля.
Экспериментальный пример 5. Оценка гемостатической способности in vivo.
Для оценки гемостатической способности гемостатических инъекционных игл, изготовленных в примерах 1 и 2, проводили следующий эксперимент.
Сначала готовили модели подкожной вены на мышах (бестимусные мыши BALBc, 8-недельные самцы, от 23 до 25 г) и модели ушной вены на кроликах (новозеландские белые кролики, 12-14-недельные самки, от 2,5 до 3,0 кг). Кроме того, для обеспечения достаточно длительного времени, в течение которого пленка, нанесенная на поверхность гемостатической инъекционной иглы, изготовленной в примерах 1 или 2, превратится в гидрогель, инъекционную иглу удаляли спустя 20 секунд после выполнения инъекции. Результаты представлены на фиг. 5.
На фиг. 5 представлены результаты эксперимента in vivo с использованием гемостатической инъекционной иглы, изготовленной в примере 1 или 2. Более конкретно, на фиг. 5(A) показана оценка гемостатического эффекта в случае модели подкожной вены на мышах при использовании инъекционной иглы, изготовленной в примере 1; фиг. 5(B) представляет собой график, на котором показан объем кровопотери, наблюдаемый при использовании модели подкожной вены на мышах; а на фиг.5(C) показана оценка гемостатического эффекта в случае модели ушной вены на кроликах при использовании инъекционной иглы, изготовленной в примере 2.
Как видно из фиг. 5(A), в случае гемостатической инъекционной иглы, изготовленной в примере 1, покрытие, образовавшееся из раствора хитозана-пирокатехина, превратилось в гидрогель и набухло, что указывает на значительно более высокий гемостатический эффект по сравнению с обычной инъекционной иглой.
Кроме того, как показано на фиг. 5(B), в случае обычной инъекционной иглы общий объем кровопотери составлял 31,3 мкл по сумме трех экспериментов (n=3), в то время как гемостатическая инъекционная игла, изготовленная в примере 1, вообще не вызвала кровотечения.
Кроме того, как показано на фиг. 5(C), использование обычной инъекционной иглы привело к кровопотере во время и после выполнения инъекции в ушную вену кролика, тогда как использование гемостатической инъекционной иглы, изготовленной в примере 2, не приводило к кровопотере во время или после выполнения инъекции.
Таким образом, гемостатическая инъекционная игла, содержащая покрытие из раствора хитозана, в который введены и частично сшиты пирокатехиновая группа и окисленная пирокатехиновая группа , согласно настоящему изобретению, способна подавлять кровопотерю во время и после выполнения инъекции и, следовательно, может эффективно использоваться для выполнения инъекций не только пациентам, включая пациентов с диабетом, пациентов, получающих противораковую терапию, и пациентов с гемофилией, обладающих низкой гемостатической способностью, но и пациентам с реакциями отторжения крови, а также детям.
Промышленная применимость
Гемостатическая инъекционная игла согласно настоящему изобретению способна подавлять кровопотерю во время и после выполнения инъекции и, таким образом, может эффективно использоваться для выполнения инъекций не только пациентам, включая пациентов с диабетом, пациентов, получающих противораковую терапию, и пациентов с гемофилией, обладающих низкой гемостатической способностью, но и пациентам с реакциями отторжения крови, а также детям.
Несмотря на то, что настоящее изобретение было подробно описано со ссылками на конкретные признаки, специалистам в данной области техники будет понятно, что такое описание предназначено лишь для предпочтительного варианта осуществления и не ограничивает объем настоящего изобретения. Таким образом, основной объем настоящего изобретения будут определяться прилагаемой формулой изобретения и ее эквивалентами.
Claims (13)
1. Гидрогель для нанесения покрытия на инъекционную иглу, предупреждающий кровопотерю во время выполнения инъекции, который содержит хитозан с введенной в него пирокатехиновой группой, в котором –OH группа пирокатехиновой группы гидрогеля частично окислена до =O группы, а затем сшита путем реакции дегидратации-конденсации с -NH2 группой, содержащейся в хитозане, причем процент окисления пирокатехиновой группы составляет от 1 до 20% (молярное отношение) от пирокатехиновых групп, содержащихся в гидрогеле.
2. Гемостатическая инъекционная игла, содержащая гидрогель для нанесения покрытия на инъекционную иглу по п. 1, нанесенный на ее поверхность.
3. Гемостатическая инъекционная игла по п. 2, в которой толщина гидрогеля, нанесенного на гемостатическую инъекционную иглу, составляет от 2 до 30 мкм.
4. Способ изготовления гемостатической инъекционной иглы по п. 2, включающий:
(1) получение раствора хитозана, в который введены и частично сшиты пирокатехиновая группа 
и окисленная пирокатехиновая группа 
, причем процент окисления пирокатехиновой группы составляет от 1 до 20% (молярное отношение) от пирокатехиновых групп, содержащихся в растворе; и
(2) покрытие поверхности инъекционной иглы раствором со стадии (1).
5. Способ по п. 4, в котором стадия (2) включает в себя стадию нанесения на инъекционную иглу раствора хитозана, в который введены и частично сшиты пирокатехиновая группа и окисленная пирокатехиновая группа, с последующим нанесением покрытия на поверхность инъекционной иглы при вращении инъекционной иглы с заранее определенной скоростью.
6. Способ по п. 4, в котором толщину покрытия инъекционной иглы регулируют в зависимости от количества раствора хитозана.
7. Способ выполнения гемостатической инъекции, включающий:
(1) получение раствора хитозана, в котором введены и частично сшиты пирокатехиновая группа и окисленная пирокатехиновая группа , причем процент окисления пирокатехиновой группы составляет от 1 до 20% (молярное отношение) от пирокатехиновых групп, содержащихся в растворе;
(2) подготовка гемостатической инъекционной иглы путем нанесения на поверхность инъекционной иглы раствора со стадии (1); и
(3) выполнение инъекции человеку или животному с использованием гемостатической инъекционной иглы, полученной на стадии (2).
8. Способ выполнения гемостатической инъекции по п. 7, где место укола от инъекции герметизируется и предупреждается кровопотеря из этого места за счет гидрогеля, в который превращается покрытие на поверхности гемостатической инъекционной иглы под действием водорастворимой среды в условиях in vivo.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020150047329A KR101576503B1 (ko) | 2015-04-03 | 2015-04-03 | 카테콜 기 및 산화된 카테콜 기가 도입되어 가교된 키토산으로 코팅된 무출혈 주사바늘 |
| KR10-2015-0047329 | 2015-04-03 | ||
| PCT/KR2016/003451 WO2016159734A1 (ko) | 2015-04-03 | 2016-04-04 | 카테콜 기 및 산화된 카테콜 기가 도입되어 가교된 키토산으로 코팅된 무출혈 주사바늘 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2674704C1 true RU2674704C1 (ru) | 2018-12-12 |
Family
ID=55020728
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017138235A RU2674704C1 (ru) | 2015-04-03 | 2016-04-04 | Гемостатическая инъекционная игла с покрытием из сшитого хитозана, содержащего пирокатехиновую группу и окисленную пирокатехиновую группу |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9931443B1 (ru) |
| EP (1) | EP3278820B1 (ru) |
| JP (1) | JP6410988B2 (ru) |
| KR (1) | KR101576503B1 (ru) |
| CN (2) | CN107530477A (ru) |
| AU (1) | AU2016241211B2 (ru) |
| BR (1) | BR112017020978B1 (ru) |
| CA (1) | CA2980116C (ru) |
| ES (1) | ES2767717T3 (ru) |
| IL (1) | IL254614B (ru) |
| MX (1) | MX2017012688A (ru) |
| RU (1) | RU2674704C1 (ru) |
| SA (1) | SA517390074B1 (ru) |
| WO (1) | WO2016159734A1 (ru) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101576503B1 (ko) | 2015-04-03 | 2015-12-11 | 주식회사 이노테라피 | 카테콜 기 및 산화된 카테콜 기가 도입되어 가교된 키토산으로 코팅된 무출혈 주사바늘 |
| KR101818229B1 (ko) * | 2016-09-23 | 2018-01-12 | 한국과학기술원 | 즉각적인 지혈능을 보유한 무출혈 주사바늘의 제조방법 |
| CN111787892A (zh) * | 2017-12-29 | 2020-10-16 | 金珂生物医疗公司 | 抵抗溶解的组织粘附脱乙酰壳多糖材料 |
| CN108310473A (zh) * | 2018-01-31 | 2018-07-24 | 采纳科技股份有限公司 | 注射针硅油涂层材料及涂覆此涂层的注射针 |
| CN109620999A (zh) * | 2019-01-12 | 2019-04-16 | 王若梅 | 一种复合止血医用组织胶的制备方法 |
| KR102222519B1 (ko) | 2019-12-31 | 2021-03-04 | 주식회사 이노테라피 | 자기실링이 가능한 안구의 누공억제용 주사바늘 및 그 제조방법 |
| CN112972749B (zh) * | 2021-03-05 | 2022-04-12 | 武汉纺织大学 | 基于壳聚糖纤维的高效止血材料及其制备方法 |
| CN113101264B (zh) * | 2021-04-08 | 2022-05-03 | 西南交通大学 | 一种具有ros响应的水凝胶及其制备方法和应用 |
| CN113180788B (zh) * | 2021-04-20 | 2023-03-21 | 上海交通大学医学院附属仁济医院 | 一种止血针的制备方法 |
| CN114181327A (zh) * | 2021-12-16 | 2022-03-15 | 四川大学 | 一种水溶性改性壳聚糖及其制备方法、应用 |
| CN114209889B (zh) * | 2021-12-24 | 2023-03-10 | 中山大学附属第三医院（中山大学肝脏病医院） | 一种改性壳聚糖/功能性短肽复合水凝胶及其制备方法和应用 |
| CN114767918B (zh) * | 2022-03-21 | 2023-04-07 | 东莞市人民医院 | 一种促凝止血蛋白材料、促凝止血抗菌材料及其制备方法 |
| CN116059437B (zh) * | 2023-02-27 | 2023-12-19 | 南通大学 | 一种抗收缩血液接触组织粘合材料的制备方法及应用 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2433828C1 (ru) * | 2010-10-14 | 2011-11-20 | Закрытое акционерное общество "БИОМИР сервис" | Инъекционный гетерогенный биополимерный гидрогель для заместительной и регенеративной хирургии и способ его получения |
| KR20130011354A (ko) * | 2011-07-21 | 2013-01-30 | 연세대학교 산학협력단 | 점착성 고분자-카테콜 접합체를 이용한 생체 모방형 다층 하이드로겔 코팅 방법 |
| KR20130055847A (ko) * | 2011-11-21 | 2013-05-29 | 한국과학기술원 | 카테콜기가 결합된 키토산 또는 폴리아민 및 말단에 티올기가 결합된 폴락소머를 포함하는 하이드로젤 및 이의 제조방법 및 이를 이용한 지혈제 |
Family Cites Families (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101103423B1 (ko) * | 2009-09-04 | 2012-01-06 | 아주대학교산학협력단 | 생체 주입형 조직 접착성 하이드로젤 및 이의 생의학적 용도 |
| US8496625B2 (en) * | 2010-05-26 | 2013-07-30 | Nxstage Medical, Inc. | Safe needle methods, apparatus, and systems |
| US8715719B2 (en) | 2010-06-16 | 2014-05-06 | Abbott Vascular, Inc. | Stable chitosan hemostatic implant and methods of manufacture |
| JP6053682B2 (ja) * | 2010-08-30 | 2016-12-27 | プレジデント・アンド・フェロウズ・オブ・ハーバード・カレッジ | 高強度キチン複合材料および製造方法 |
| ES2632188T3 (es) * | 2010-09-13 | 2017-09-11 | Chemetall Gmbh | Procedimiento para recubrir superficies y utilización de los objetos recubiertos de acuerdo con este procedimiento |
| KR101257996B1 (ko) * | 2010-11-01 | 2013-04-30 | 아주대학교산학협력단 | 폴리페놀산화효소를 이용한 생리활성 물질의 표면 고정화 방법 |
| JP5968447B2 (ja) * | 2011-09-27 | 2016-08-10 | ポステック アカデミー−インダストリー ファンデーション | 物性が強化されたキトサンおよび／またはキチン複合体およびその用途 |
| US20130261567A1 (en) * | 2012-03-29 | 2013-10-03 | John Lewis Hogan, III | Coagulant substance which will be found at the base of a needle to reduce leakage of fluids, mainly blood from around the insertion base of a needle |
| CN102813963A (zh) * | 2012-09-10 | 2012-12-12 | 高长有 | 一种以多巴胺为桥连的生物医用材料表面固定功能分子的方法 |
| JP5188646B1 (ja) | 2012-09-20 | 2013-04-24 | 株式会社フジコーポレーション | 無機廃棄物固化シールド構造体および無機廃棄物固化シールド構造体の製造方法 |
| CN103191467B (zh) * | 2013-04-07 | 2014-07-02 | 西南交通大学 | 医用金属表面固定多种细胞生长因子抗菌涂层的制备方法 |
| US9581536B2 (en) * | 2013-05-09 | 2017-02-28 | University Of Maryland | Analytical micro-devices for mental health treatment monitoring |
| CN103520766A (zh) * | 2013-09-25 | 2014-01-22 | 高敏 | 贻贝粘蛋白液体产品、其制备方法及其应用 |
| KR101783448B1 (ko) * | 2014-05-15 | 2017-09-29 | 포항공과대학교 산학협력단 | 표면 처리된 나노섬유를 포함하는 하이드로젤 및 이의 제조방법 |
| WO2015174643A1 (ko) * | 2014-05-15 | 2015-11-19 | 포항공과대학교 산학협력단 | 표면 처리된 나노섬유를 포함하는 하이드로젤 및 이의 제조방법 |
| CN104004231A (zh) * | 2014-06-12 | 2014-08-27 | 东南大学 | 一种生物大分子互穿网络水凝胶及其制备方法 |
| CN104013990A (zh) * | 2014-06-18 | 2014-09-03 | 海南建科药业有限公司 | 具有儿茶酚基改性的壳聚糖及其制成的生物医学材料 |
| KR101576503B1 (ko) * | 2015-04-03 | 2015-12-11 | 주식회사 이노테라피 | 카테콜 기 및 산화된 카테콜 기가 도입되어 가교된 키토산으로 코팅된 무출혈 주사바늘 |
-
2015
- 2015-04-03 KR KR1020150047329A patent/KR101576503B1/ko active IP Right Grant
-
2016
- 2016-04-04 EP EP16773515.8A patent/EP3278820B1/en active Active
- 2016-04-04 JP JP2018503448A patent/JP6410988B2/ja active Active
- 2016-04-04 AU AU2016241211A patent/AU2016241211B2/en active Active
- 2016-04-04 CA CA2980116A patent/CA2980116C/en active Active
- 2016-04-04 ES ES16773515T patent/ES2767717T3/es active Active
- 2016-04-04 CN CN201680024490.6A patent/CN107530477A/zh active Pending
- 2016-04-04 MX MX2017012688A patent/MX2017012688A/es unknown
- 2016-04-04 US US15/559,414 patent/US9931443B1/en active Active
- 2016-04-04 CN CN202010373487.3A patent/CN111603617B/zh active Active
- 2016-04-04 BR BR112017020978-0A patent/BR112017020978B1/pt active IP Right Grant
- 2016-04-04 RU RU2017138235A patent/RU2674704C1/ru active
- 2016-04-04 WO PCT/KR2016/003451 patent/WO2016159734A1/ko active Application Filing
-
2017
- 2017-09-20 IL IL254614A patent/IL254614B/en active IP Right Grant
- 2017-10-01 SA SA517390074A patent/SA517390074B1/ar unknown
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2433828C1 (ru) * | 2010-10-14 | 2011-11-20 | Закрытое акционерное общество "БИОМИР сервис" | Инъекционный гетерогенный биополимерный гидрогель для заместительной и регенеративной хирургии и способ его получения |
| KR20130011354A (ko) * | 2011-07-21 | 2013-01-30 | 연세대학교 산학협력단 | 점착성 고분자-카테콜 접합체를 이용한 생체 모방형 다층 하이드로겔 코팅 방법 |
| KR20130055847A (ko) * | 2011-11-21 | 2013-05-29 | 한국과학기술원 | 카테콜기가 결합된 키토산 또는 폴리아민 및 말단에 티올기가 결합된 폴락소머를 포함하는 하이드로젤 및 이의 제조방법 및 이를 이용한 지혈제 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN111603617B (zh) | 2022-05-24 |
| CN111603617A (zh) | 2020-09-01 |
| MX2017012688A (es) | 2018-04-11 |
| JP2018510750A (ja) | 2018-04-19 |
| CA2980116C (en) | 2019-04-30 |
| EP3278820A4 (en) | 2018-12-05 |
| JP6410988B2 (ja) | 2018-10-24 |
| IL254614A0 (en) | 2017-11-30 |
| EP3278820B1 (en) | 2019-11-27 |
| US9931443B1 (en) | 2018-04-03 |
| EP3278820A1 (en) | 2018-02-07 |
| AU2016241211A1 (en) | 2017-10-12 |
| BR112017020978B1 (pt) | 2021-05-11 |
| SA517390074B1 (ar) | 2021-06-24 |
| AU2016241211B2 (en) | 2019-02-14 |
| BR112017020978A2 (pt) | 2018-07-10 |
| ES2767717T3 (es) | 2020-06-18 |
| KR101576503B1 (ko) | 2015-12-11 |
| CN107530477A (zh) | 2018-01-02 |
| CA2980116A1 (en) | 2016-10-06 |
| IL254614B (en) | 2021-03-25 |
| US20180085500A1 (en) | 2018-03-29 |
| WO2016159734A1 (ko) | 2016-10-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2674704C1 (ru) | Гемостатическая инъекционная игла с покрытием из сшитого хитозана, содержащего пирокатехиновую группу и окисленную пирокатехиновую группу | |
| Hong et al. | A strongly adhesive hemostatic hydrogel for the repair of arterial and heart bleeds | |
| Yang et al. | A bio-inspired swellable microneedle adhesive for mechanical interlocking with tissue | |
| CN108472405B (zh) | 外科用密封剂 | |
| JP5980905B2 (ja) | 生体適合性接着剤材料及び方法 | |
| AU2013387206B2 (en) | Gel-forming system for removing urinary calculi and fragments thereof | |
| US20180200403A1 (en) | Film, manufacturing method thereof, and application thereof | |
| KR101818229B1 (ko) | 즉각적인 지혈능을 보유한 무출혈 주사바늘의 제조방법 | |
| Smeets et al. | Tissue adhesives in reconstructive and aesthetic surgery—application of silk fibroin-based biomaterials | |
| KR20210104339A (ko) | 생체 고분자 기반 광가교형 조직 접착제 제조 | |
| Sun et al. | Injectable‐Hydrogel‐Based Tissue Sealant for Hemostasis, Bacteria Inhibition, and Pro‐Angiogenesis in Organ Bleeding Wounds and Therapeutic Outcome Monitoring Via NIR‐II Optical Imaging | |
| Han et al. | Ultrasound Nanobubble Coupling Agent for Effective Noninvasive Deep‐Layer Drug Delivery | |
| KR20160101957A (ko) | 제어가능하게 분해가능한 조성물 및 방법 | |
| US20110021973A1 (en) | Formulations for cosmetic and wound care treatments with photosensitizers as fluorescent markers | |
| US20090162423A1 (en) | Formulations for cosmetic and wound care treatments with photosensitizes as fluorescent markers | |
| Ghosh | Light-Activated Biomaterials for Soft Tissue Sealing and Wound Repair | |
| CN117338703B (zh) | 凝胶靶向递送系统及其制备方法和应用 | |
| Liu et al. | Bionic double-crosslinked hydrogel of poly (γ-glutamic acid)/poly (N-(2-hydroxyethyl) acrylamide) with ultrafast gelling process and ultrahigh burst pressure for emergency rescue | |
| TWI639704B (zh) | 用以偵測及清除自由基之複合材料及其用途 | |
| WO2016115133A1 (en) | Polymer microbubbles as x-ray dark field contrast agents | |
| CN117100880A (zh) | 一种超声纳米微泡耦联剂及其制备方法与应用 | |
| WO2016133135A1 (ja) | 医用組成物、医用キット、及び止血剤 | |
| WO2023002017A1 (en) | Bio-adhesive | |
| CN115029126A (zh) | 近红外二区量子点微球及制备方法、标记胶原蛋白的方法 | |
| WO2008088810A2 (en) | Formulations for cosmetic and wound care treatments with photosensitizers as fluorescent markers |