RU2458072C2 - Антитела к dr5 и их применения - Google Patents
Антитела к dr5 и их применения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2458072C2 RU2458072C2 RU2007132876/10A RU2007132876A RU2458072C2 RU 2458072 C2 RU2458072 C2 RU 2458072C2 RU 2007132876/10 A RU2007132876/10 A RU 2007132876/10A RU 2007132876 A RU2007132876 A RU 2007132876A RU 2458072 C2 RU2458072 C2 RU 2458072C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antibody
- cancer
- antibodies
- binding fragment
- antigen
- Prior art date
Links
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims abstract description 122
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 121
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 115
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 86
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 86
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 86
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 70
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 55
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 54
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims abstract description 37
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 claims abstract description 31
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 claims abstract description 17
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 190
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 55
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 50
- 102220510527 Retinoic acid receptor alpha_L102Y_mutation Human genes 0.000 claims description 46
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 38
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 37
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 claims description 34
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 claims description 32
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 32
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 31
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 30
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 30
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 claims description 28
- 102220582002 Phospholipid-transporting ATPase ABCA3_N53Q_mutation Human genes 0.000 claims description 28
- 229960004562 carboplatin Drugs 0.000 claims description 28
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 claims description 28
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 claims description 28
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 26
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 23
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 22
- 102220320590 rs1554306309 Human genes 0.000 claims description 22
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 claims description 20
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 19
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 claims description 18
- 102220470494 Proteasome subunit beta type-3_M34L_mutation Human genes 0.000 claims description 17
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 17
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 16
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 16
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 claims description 16
- 102220004887 rs121913664 Human genes 0.000 claims description 15
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 claims description 14
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 claims description 14
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 claims description 13
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 12
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 claims description 12
- UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N irinotecan Chemical compound C1=C2C(CC)=C3CN(C(C4=C([C@@](C(=O)OC4)(O)CC)C=4)=O)C=4C3=NC2=CC=C1OC(=O)N(CC1)CCC1N1CCCCC1 UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N 0.000 claims description 12
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 10
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 claims description 10
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 10
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 claims description 9
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 9
- 102220644061 Prostaglandin E synthase 3_E12V_mutation Human genes 0.000 claims description 8
- 108010035587 R13Q Proteins 0.000 claims description 8
- 102220477411 Zinc finger protein 280A_K51A_mutation Human genes 0.000 claims description 8
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 claims description 8
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 claims description 7
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 7
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 claims description 7
- 102220469751 Voltage-dependent L-type calcium channel subunit beta-2_G50K_mutation Human genes 0.000 claims description 7
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 7
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 claims description 7
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 claims description 7
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 claims description 7
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 7
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 claims description 7
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 claims description 7
- 206010052747 Adenocarcinoma pancreas Diseases 0.000 claims description 6
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 6
- 201000000053 blastoma Diseases 0.000 claims description 6
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 6
- 201000008184 embryoma Diseases 0.000 claims description 6
- 229960005277 gemcitabine Drugs 0.000 claims description 6
- SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N gemcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1C(F)(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N 0.000 claims description 6
- 201000002094 pancreatic adenocarcinoma Diseases 0.000 claims description 6
- 102200016465 rs104894275 Human genes 0.000 claims description 6
- 102200088023 rs1554239543 Human genes 0.000 claims description 6
- 102220243676 rs1555601019 Human genes 0.000 claims description 6
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 claims description 5
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 claims description 5
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 claims description 5
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 claims description 5
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 claims description 5
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 claims description 5
- 102220041275 rs587778692 Human genes 0.000 claims description 5
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 claims description 4
- 206010017993 Gastrointestinal neoplasms Diseases 0.000 claims description 4
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 claims description 4
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 4
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 claims description 4
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 claims description 4
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 claims description 4
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 201000003914 endometrial carcinoma Diseases 0.000 claims description 4
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 claims description 4
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 claims description 4
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 claims description 4
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 102220618022 Arginine-glutamic acid dipeptide repeats protein_S93Y_mutation Human genes 0.000 claims description 3
- 206010052360 Colorectal adenocarcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 claims description 3
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 230000006882 induction of apoptosis Effects 0.000 claims description 3
- 229960004768 irinotecan Drugs 0.000 claims description 3
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 claims description 3
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 210000004392 genitalia Anatomy 0.000 claims description 2
- 102220029066 rs374766360 Human genes 0.000 claims 5
- 102220492950 Nuclear RNA export factor 1_R91A_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 190000008236 carboplatin Chemical compound 0.000 claims 1
- 230000006659 positive regulation of apoptotic process Effects 0.000 claims 1
- 102220064391 rs786205838 Human genes 0.000 claims 1
- 230000005909 tumor killing Effects 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 58
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 34
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 19
- 101000610604 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10B Proteins 0.000 abstract description 16
- 230000006698 induction Effects 0.000 abstract description 6
- 102100040112 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10B Human genes 0.000 abstract description 5
- 230000009471 action Effects 0.000 abstract description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 93
- 102000046283 TNF-Related Apoptosis-Inducing Ligand Human genes 0.000 description 77
- 108700012411 TNFSF10 Proteins 0.000 description 77
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 61
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 60
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 56
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 54
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 53
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 53
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 51
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 49
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 49
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 46
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 46
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 41
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 38
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 37
- 102000002259 TNF-Related Apoptosis-Inducing Ligand Receptors Human genes 0.000 description 35
- 108010000449 TNF-Related Apoptosis-Inducing Ligand Receptors Proteins 0.000 description 35
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 35
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 34
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 34
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 33
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 32
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 31
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 30
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 30
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 29
- VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N azanide;cyclobutane-1,1-dicarboxylic acid;platinum(2+) Chemical compound [NH2-].[NH2-].[Pt+2].OC(=O)C1(C(O)=O)CCC1 VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 101100369992 Homo sapiens TNFSF10 gene Proteins 0.000 description 27
- 230000004044 response Effects 0.000 description 27
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 26
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 26
- 101000610605 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10A Proteins 0.000 description 24
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 24
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 24
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 24
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 24
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 24
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 23
- 102100040113 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10A Human genes 0.000 description 22
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 22
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 22
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 21
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 21
- -1 OX-40 Proteins 0.000 description 21
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 21
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 21
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 21
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 19
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 19
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 19
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 19
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 18
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 17
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 17
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 17
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 17
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 17
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 17
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 16
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 16
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 15
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 15
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 15
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 14
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 14
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 14
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 14
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 13
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 13
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 13
- 230000006870 function Effects 0.000 description 13
- 102000053594 human TNFRSF10B Human genes 0.000 description 13
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 13
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 13
- 239000000047 product Substances 0.000 description 13
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 12
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 12
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 12
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 12
- 230000034994 death Effects 0.000 description 12
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 12
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 12
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 12
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 12
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 11
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 11
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 11
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 11
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 11
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 11
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 10
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 10
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 10
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 10
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 10
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 10
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 10
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 10
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 10
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 10
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 10
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 10
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 10
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 10
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 9
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 9
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 9
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 9
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 9
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 9
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 9
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 9
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 9
- 229940124452 immunizing agent Drugs 0.000 description 9
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 9
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 9
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 9
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 9
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 9
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 9
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 8
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 8
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 8
- 101000610609 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10D Proteins 0.000 description 8
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 8
- 102100040110 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10D Human genes 0.000 description 8
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 8
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 8
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 8
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 8
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 8
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 8
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 8
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 8
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 8
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 8
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 8
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 8
- 150000002482 oligosaccharides Polymers 0.000 description 8
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 8
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 8
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 8
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 8
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 8
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 8
- 102100024746 Dihydrofolate reductase Human genes 0.000 description 7
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 7
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 7
- 101000610602 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10C Proteins 0.000 description 7
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 7
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 7
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 7
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 7
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 7
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 7
- 102100040115 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10C Human genes 0.000 description 7
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 7
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 7
- WZSDNEJJUSYNSG-UHFFFAOYSA-N azocan-1-yl-(3,4,5-trimethoxyphenyl)methanone Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC(C(=O)N2CCCCCCC2)=C1 WZSDNEJJUSYNSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 7
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 7
- 108020001096 dihydrofolate reductase Proteins 0.000 description 7
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 7
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 7
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 7
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 7
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 7
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 7
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 7
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 7
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 7
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 7
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 7
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 7
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 7
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 7
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 6
- 102000010170 Death domains Human genes 0.000 description 6
- 108050001718 Death domains Proteins 0.000 description 6
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 6
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 6
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 6
- 108010035042 Osteoprotegerin Proteins 0.000 description 6
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 6
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 6
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 6
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 description 6
- 102100032236 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 11B Human genes 0.000 description 6
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 6
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 6
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 6
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 description 6
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 6
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 6
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 description 6
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 6
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 6
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 6
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 6
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 6
- XXUPLYBCNPLTIW-UHFFFAOYSA-N octadec-7-ynoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCC#CCCCCCC(O)=O XXUPLYBCNPLTIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 6
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 6
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 6
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 6
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 6
- 230000001603 reducing effect Effects 0.000 description 6
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 6
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 6
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 description 6
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 5
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 5
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 5
- 102000007644 Colony-Stimulating Factors Human genes 0.000 description 5
- 108010071942 Colony-Stimulating Factors Proteins 0.000 description 5
- 102100026693 FAS-associated death domain protein Human genes 0.000 description 5
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102220602069 Glycophorin-C_R91A_mutation Human genes 0.000 description 5
- 206010053759 Growth retardation Diseases 0.000 description 5
- 101000911074 Homo sapiens FAS-associated death domain protein Proteins 0.000 description 5
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 5
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 5
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 5
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 5
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 5
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 5
- 102000004083 Lymphotoxin-alpha Human genes 0.000 description 5
- 108090000542 Lymphotoxin-alpha Proteins 0.000 description 5
- 201000002481 Myositis Diseases 0.000 description 5
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 5
- 102220541402 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 6_T28A_mutation Human genes 0.000 description 5
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 5
- 230000001270 agonistic effect Effects 0.000 description 5
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 5
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 5
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 5
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 5
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 5
- 229940047120 colony stimulating factors Drugs 0.000 description 5
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 5
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 5
- 239000006167 equilibration buffer Substances 0.000 description 5
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 5
- 231100000001 growth retardation Toxicity 0.000 description 5
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 5
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 5
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 5
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 5
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 5
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 5
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 5
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 5
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 5
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 5
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 5
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 5
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 5
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 5
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 5
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 5
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 5
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 5
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 5
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 5
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 5
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 5
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 4
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 4
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 4
- 108090000397 Caspase 3 Proteins 0.000 description 4
- 102000004068 Caspase-10 Human genes 0.000 description 4
- 108090000572 Caspase-10 Proteins 0.000 description 4
- 102100029855 Caspase-3 Human genes 0.000 description 4
- 102100026548 Caspase-8 Human genes 0.000 description 4
- 108090000538 Caspase-8 Proteins 0.000 description 4
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 4
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 4
- 208000016192 Demyelinating disease Diseases 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010061486 HLA-B27 Antigen Proteins 0.000 description 4
- 108010073807 IgG Receptors Proteins 0.000 description 4
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 4
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 4
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 4
- 241000235649 Kluyveromyces Species 0.000 description 4
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 4
- 102100029185 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Human genes 0.000 description 4
- 108090000157 Metallothionein Proteins 0.000 description 4
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 4
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 4
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 4
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 208000006045 Spondylarthropathies Diseases 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- 201000009594 Systemic Scleroderma Diseases 0.000 description 4
- 206010042953 Systemic sclerosis Diseases 0.000 description 4
- NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N Tamoxifen Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN(C)C)=CC=1)/C1=CC=CC=C1 NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 4
- FOCVUCIESVLUNU-UHFFFAOYSA-N Thiotepa Chemical compound C1CN1P(N1CC1)(=S)N1CC1 FOCVUCIESVLUNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 4
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100022203 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 25 Human genes 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 4
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 4
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 4
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 4
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 4
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 4
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 4
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 4
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 4
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 4
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 4
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 4
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 4
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 4
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 4
- 208000005252 hepatitis A Diseases 0.000 description 4
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 4
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 4
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 4
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 4
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 4
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 4
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 4
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 4
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 4
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 4
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 4
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 4
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 4
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 4
- 238000012552 review Methods 0.000 description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 4
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 4
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 4
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 4
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N tioguanine Chemical compound N1C(N)=NC(=S)C2=C1N=CN2 WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 4
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 4
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 4
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 4
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 3
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108090000672 Annexin A5 Proteins 0.000 description 3
- 102000004121 Annexin A5 Human genes 0.000 description 3
- 101100112922 Candida albicans CDR3 gene Proteins 0.000 description 3
- 102000011727 Caspases Human genes 0.000 description 3
- 108010076667 Caspases Proteins 0.000 description 3
- 102100025064 Cellular tumor antigen p53 Human genes 0.000 description 3
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 3
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 3
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 3
- 102000036364 Cullin Ring E3 Ligases Human genes 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 3
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 3
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 3
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 3
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 3
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 102000012153 HLA-B27 Antigen Human genes 0.000 description 3
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 description 3
- 208000035186 Hemolytic Autoimmune Anemia Diseases 0.000 description 3
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 3
- 101000679903 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 25 Proteins 0.000 description 3
- 108010091358 Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase Proteins 0.000 description 3
- 102100029098 Hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase Human genes 0.000 description 3
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 description 3
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 description 3
- 208000003456 Juvenile Arthritis Diseases 0.000 description 3
- 208000011200 Kawasaki disease Diseases 0.000 description 3
- 241001138401 Kluyveromyces lactis Species 0.000 description 3
- 102000003792 Metallothionein Human genes 0.000 description 3
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 3
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 3
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 3
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 3
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 3
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 3
- 102220475755 Probable ATP-dependent RNA helicase DDX6_R100A_mutation Human genes 0.000 description 3
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 3
- 108020005091 Replication Origin Proteins 0.000 description 3
- 230000018199 S phase Effects 0.000 description 3
- 238000011579 SCID mouse model Methods 0.000 description 3
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 3
- 241000607720 Serratia Species 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 208000004732 Systemic Vasculitis Diseases 0.000 description 3
- 101150006914 TRP1 gene Proteins 0.000 description 3
- COYHRQWNJDJCNA-NUJDXYNKSA-N Thr-Thr-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O COYHRQWNJDJCNA-NUJDXYNKSA-N 0.000 description 3
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 3
- 208000031981 Thrombocytopenic Idiopathic Purpura Diseases 0.000 description 3
- 108010009583 Transforming Growth Factors Proteins 0.000 description 3
- 102000009618 Transforming Growth Factors Human genes 0.000 description 3
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 3
- 102100024598 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 10 Human genes 0.000 description 3
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 3
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 3
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 description 3
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 238000012867 alanine scanning Methods 0.000 description 3
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 3
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 3
- 201000000448 autoimmune hemolytic anemia Diseases 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 3
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 3
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 3
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 3
- 230000006957 competitive inhibition Effects 0.000 description 3
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 3
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 3
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 3
- 238000012866 crystallographic experiment Methods 0.000 description 3
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 3
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 3
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 3
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 3
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 3
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 3
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 3
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 3
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 3
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 3
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 3
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 3
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N mercaptopurine Chemical compound S=C1NC=NC2=C1NC=N2 GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 3
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 3
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 3
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 3
- 208000001725 mucocutaneous lymph node syndrome Diseases 0.000 description 3
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 3
- 201000009732 pulmonary eosinophilia Diseases 0.000 description 3
- 238000002708 random mutagenesis Methods 0.000 description 3
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 102220274413 rs143950084 Human genes 0.000 description 3
- 102220267369 rs760252179 Human genes 0.000 description 3
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 3
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 3
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 201000005671 spondyloarthropathy Diseases 0.000 description 3
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 3
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 3
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 3
- 210000001258 synovial membrane Anatomy 0.000 description 3
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 3
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 3
- 229960001196 thiotepa Drugs 0.000 description 3
- 206010043554 thrombocytopenia Diseases 0.000 description 3
- 206010043778 thyroiditis Diseases 0.000 description 3
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 3
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 description 3
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 3
- FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N (E)-dacarbazine Chemical compound CN(C)\N=N\c1[nH]cnc1C(N)=O FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 1-prop-2-ynoxypropan-2-ol Chemical group CC(O)COCC#C GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WEEMDRWIKYCTQM-UHFFFAOYSA-N 2,6-dimethoxybenzenecarbothioamide Chemical compound COC1=CC=CC(OC)=C1C(N)=S WEEMDRWIKYCTQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 4'-epidoxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 0.000 description 2
- 108010082808 4-1BB Ligand Proteins 0.000 description 2
- 102000002627 4-1BB Ligand Human genes 0.000 description 2
- TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 4-aminofolic acid Chemical compound C1=NC2=NC(N)=NC(N)=C2N=C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 2
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 2
- 101710154825 Aminoglycoside 3'-phosphotransferase Proteins 0.000 description 2
- APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N Amphotericin-B Natural products O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1C=CC=CC=CC=CC=CC=CC=C[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N 0.000 description 2
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 2
- KHCNTVRVAYCPQE-CIUDSAMLSA-N Asn-Lys-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O KHCNTVRVAYCPQE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- 241000972773 Aulopiformes Species 0.000 description 2
- 206010071155 Autoimmune arthritis Diseases 0.000 description 2
- 206010050245 Autoimmune thrombocytopenia Diseases 0.000 description 2
- 241000194108 Bacillus licheniformis Species 0.000 description 2
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 2
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000008439 Biliary Liver Cirrhosis Diseases 0.000 description 2
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 2
- 241000255789 Bombyx mori Species 0.000 description 2
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010017987 CD30 Ligand Proteins 0.000 description 2
- 102000004634 CD30 Ligand Human genes 0.000 description 2
- KLWPJMFMVPTNCC-UHFFFAOYSA-N Camptothecin Natural products CCC1(O)C(=O)OCC2=C1C=C3C4Nc5ccccc5C=C4CN3C2=O KLWPJMFMVPTNCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 2
- GAGWJHPBXLXJQN-UORFTKCHSA-N Capecitabine Chemical compound C1=C(F)C(NC(=O)OCCCCC)=NC(=O)N1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O1 GAGWJHPBXLXJQN-UORFTKCHSA-N 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 108010084457 Cathepsins Proteins 0.000 description 2
- 102000005600 Cathepsins Human genes 0.000 description 2
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 2
- 231100000023 Cell-mediated cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 206010057250 Cell-mediated cytotoxicity Diseases 0.000 description 2
- 208000030939 Chronic inflammatory demyelinating polyneuropathy Diseases 0.000 description 2
- 241000557626 Corvus corax Species 0.000 description 2
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 2
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 206010012305 Demyelination Diseases 0.000 description 2
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 2
- 206010012442 Dermatitis contact Diseases 0.000 description 2
- 108090000204 Dipeptidase 1 Proteins 0.000 description 2
- 241000255925 Diptera Species 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- 102000007989 Effector Caspases Human genes 0.000 description 2
- 108010089510 Effector Caspases Proteins 0.000 description 2
- 102220498103 Electron transfer flavoprotein subunit beta_G99A_mutation Human genes 0.000 description 2
- 102220498105 Electron transfer flavoprotein subunit beta_N53A_mutation Human genes 0.000 description 2
- HTIJFSOGRVMCQR-UHFFFAOYSA-N Epirubicin Natural products COc1cccc2C(=O)c3c(O)c4CC(O)(CC(OC5CC(N)C(=O)C(C)O5)c4c(O)c3C(=O)c12)C(=O)CO HTIJFSOGRVMCQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 2
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 description 2
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 description 2
- 108010008165 Etanercept Proteins 0.000 description 2
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 2
- 208000004332 Evans syndrome Diseases 0.000 description 2
- 108010021468 Fc gamma receptor IIA Proteins 0.000 description 2
- 108010021472 Fc gamma receptor IIB Proteins 0.000 description 2
- 241000724791 Filamentous phage Species 0.000 description 2
- 102000012673 Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 description 2
- 108010079345 Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 description 2
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 2
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 2
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 2
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- 208000003807 Graves Disease Diseases 0.000 description 2
- 208000015023 Graves' disease Diseases 0.000 description 2
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 2
- 208000035895 Guillain-Barré syndrome Diseases 0.000 description 2
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 2
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 2
- 208000005331 Hepatitis D Diseases 0.000 description 2
- 108010088652 Histocompatibility Antigens Class I Proteins 0.000 description 2
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 2
- 101100100117 Homo sapiens TNFRSF10B gene Proteins 0.000 description 2
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 description 2
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 description 2
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 description 2
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000009794 Idiopathic Pulmonary Fibrosis Diseases 0.000 description 2
- IOVUXUSIGXCREV-DKIMLUQUSA-N Ile-Leu-Phe Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 IOVUXUSIGXCREV-DKIMLUQUSA-N 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 2
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 2
- 108010009817 Immunoglobulin Constant Regions Proteins 0.000 description 2
- 102000009786 Immunoglobulin Constant Regions Human genes 0.000 description 2
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 2
- 102000012745 Immunoglobulin Subunits Human genes 0.000 description 2
- 108010079585 Immunoglobulin Subunits Proteins 0.000 description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 2
- 208000029523 Interstitial Lung disease Diseases 0.000 description 2
- 206010059176 Juvenile idiopathic arthritis Diseases 0.000 description 2
- 244000285963 Kluyveromyces fragilis Species 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- 102220497573 Leukotriene B4 receptor 1_N52A_mutation Human genes 0.000 description 2
- 102220497574 Leukotriene B4 receptor 1_N52Q_mutation Human genes 0.000 description 2
- 102100029205 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-b Human genes 0.000 description 2
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 2
- 102000009151 Luteinizing Hormone Human genes 0.000 description 2
- 108010073521 Luteinizing Hormone Proteins 0.000 description 2
- 102100026894 Lymphotoxin-beta Human genes 0.000 description 2
- 108090000362 Lymphotoxin-beta Proteins 0.000 description 2
- 230000027311 M phase Effects 0.000 description 2
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 2
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 102220486635 Mannose-1-phosphate guanyltransferase beta_S56A_mutation Human genes 0.000 description 2
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 2
- 206010049567 Miller Fisher syndrome Diseases 0.000 description 2
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 2
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 2
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 2
- ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N N-debenzoyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N 0.000 description 2
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 2
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 2
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 description 2
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 description 2
- 230000004989 O-glycosylation Effects 0.000 description 2
- 108020005187 Oligonucleotide Probes Proteins 0.000 description 2
- 102000043276 Oncogene Human genes 0.000 description 2
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 241001631646 Papillomaviridae Species 0.000 description 2
- 208000030852 Parasitic disease Diseases 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 102220489100 Phosphatidylinositol transfer protein alpha isoform_N89L_mutation Human genes 0.000 description 2
- 206010035742 Pneumonitis Diseases 0.000 description 2
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 2
- 229920000776 Poly(Adenosine diphosphate-ribose) polymerase Polymers 0.000 description 2
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010037075 Protozoal infections Diseases 0.000 description 2
- 239000012564 Q sepharose fast flow resin Substances 0.000 description 2
- 239000012614 Q-Sepharose Substances 0.000 description 2
- 208000009921 Rheumatoid Nodule Diseases 0.000 description 2
- 206010039085 Rhinitis allergic Diseases 0.000 description 2
- DKGRNFUXVTYRAS-UBHSHLNASA-N Ser-Ser-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O DKGRNFUXVTYRAS-UBHSHLNASA-N 0.000 description 2
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 206010040943 Skin Ulcer Diseases 0.000 description 2
- 102100038803 Somatotropin Human genes 0.000 description 2
- 241000256251 Spodoptera frugiperda Species 0.000 description 2
- 201000002661 Spondylitis Diseases 0.000 description 2
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000036693 Thrombopoietin Human genes 0.000 description 2
- 108010041111 Thrombopoietin Proteins 0.000 description 2
- 102000006601 Thymidine Kinase Human genes 0.000 description 2
- 108020004440 Thymidine kinase Proteins 0.000 description 2
- 108010034949 Thyroglobulin Proteins 0.000 description 2
- 102000009843 Thyroglobulin Human genes 0.000 description 2
- 102000011923 Thyrotropin Human genes 0.000 description 2
- 108010061174 Thyrotropin Proteins 0.000 description 2
- 102100036922 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13B Human genes 0.000 description 2
- 102100031988 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 6 Human genes 0.000 description 2
- 206010053613 Type IV hypersensitivity reaction Diseases 0.000 description 2
- 208000024780 Urticaria Diseases 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 2
- 102220469752 Voltage-dependent L-type calcium channel subunit beta-2_G50D_mutation Human genes 0.000 description 2
- IXKSXJFAGXLQOQ-XISFHERQSA-N WHWLQLKPGQPMY Chemical group C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C1=CNC=N1 IXKSXJFAGXLQOQ-XISFHERQSA-N 0.000 description 2
- 238000012452 Xenomouse strains Methods 0.000 description 2
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical group [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 208000033017 acquired idiopathic inflammatory myopathy Diseases 0.000 description 2
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 2
- 230000009824 affinity maturation Effects 0.000 description 2
- 201000010105 allergic rhinitis Diseases 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 2
- 229960003896 aminopterin Drugs 0.000 description 2
- APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N amphotericin B Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N 0.000 description 2
- 229960003942 amphotericin b Drugs 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012131 assay buffer Substances 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 2
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 2
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000006635 beta-lactamase Human genes 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 description 2
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 208000019748 bullous skin disease Diseases 0.000 description 2
- 229960002092 busulfan Drugs 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N camptothecin Chemical compound C1=CC=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 2
- 229940127093 camptothecin Drugs 0.000 description 2
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 2
- 230000005890 cell-mediated cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 2
- 229960004630 chlorambucil Drugs 0.000 description 2
- JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N chlorambucil Chemical compound OC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 239000013611 chromosomal DNA Substances 0.000 description 2
- 208000019069 chronic childhood arthritis Diseases 0.000 description 2
- 201000005795 chronic inflammatory demyelinating polyneuritis Diseases 0.000 description 2
- 230000004186 co-expression Effects 0.000 description 2
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 2
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 2
- 208000010247 contact dermatitis Diseases 0.000 description 2
- PSNOPSMXOBPNNV-VVCTWANISA-N cryptophycin 1 Chemical compound C1=C(Cl)C(OC)=CC=C1C[C@@H]1C(=O)NC[C@@H](C)C(=O)O[C@@H](CC(C)C)C(=O)O[C@H]([C@H](C)[C@@H]2[C@H](O2)C=2C=CC=CC=2)C/C=C/C(=O)N1 PSNOPSMXOBPNNV-VVCTWANISA-N 0.000 description 2
- PSNOPSMXOBPNNV-UHFFFAOYSA-N cryptophycin-327 Natural products C1=C(Cl)C(OC)=CC=C1CC1C(=O)NCC(C)C(=O)OC(CC(C)C)C(=O)OC(C(C)C2C(O2)C=2C=CC=CC=2)CC=CC(=O)N1 PSNOPSMXOBPNNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 2
- 229960003901 dacarbazine Drugs 0.000 description 2
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 description 2
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 2
- 201000001981 dermatomyositis Diseases 0.000 description 2
- 229960000633 dextran sulfate Drugs 0.000 description 2
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 2
- 125000002228 disulfide group Chemical group 0.000 description 2
- VSJKWCGYPAHWDS-UHFFFAOYSA-N dl-camptothecin Natural products C1=CC=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)C5(O)CC)C4=NC2=C1 VSJKWCGYPAHWDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- VLCYCQAOQCDTCN-UHFFFAOYSA-N eflornithine Chemical compound NCCCC(N)(C(F)F)C(O)=O VLCYCQAOQCDTCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 201000009580 eosinophilic pneumonia Diseases 0.000 description 2
- 229960001904 epirubicin Drugs 0.000 description 2
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 2
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 description 2
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 description 2
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 2
- 210000001508 eye Anatomy 0.000 description 2
- XRECTZIEBJDKEO-UHFFFAOYSA-N flucytosine Chemical compound NC1=NC(=O)NC=C1F XRECTZIEBJDKEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004413 flucytosine Drugs 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- 229940028334 follicle stimulating hormone Drugs 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 2
- CHPZKNULDCNCBW-UHFFFAOYSA-N gallium nitrate Chemical compound [Ga+3].[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O CHPZKNULDCNCBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 2
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 description 2
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 2
- 102000006602 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 2
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 2
- 239000012561 harvest cell culture fluid Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 2
- 201000010284 hepatitis E Diseases 0.000 description 2
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 2
- 102000056173 human TNFRSF10A Human genes 0.000 description 2
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001101 ifosfamide Drugs 0.000 description 2
- HOMGKSMUEGBAAB-UHFFFAOYSA-N ifosfamide Chemical compound ClCCNP1(=O)OCCCN1CCCl HOMGKSMUEGBAAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008076 immune mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 2
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 2
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 2
- 238000005462 in vivo assay Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 108091008042 inhibitory receptors Proteins 0.000 description 2
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 2
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 2
- 208000036971 interstitial lung disease 2 Diseases 0.000 description 2
- 230000031146 intracellular signal transduction Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 201000002215 juvenile rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 2
- 206010023332 keratitis Diseases 0.000 description 2
- 201000010666 keratoconjunctivitis Diseases 0.000 description 2
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 2
- 229940040129 luteinizing hormone Drugs 0.000 description 2
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 2
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N mechlorethamine Chemical compound ClCCN(C)CCCl HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004961 mechlorethamine Drugs 0.000 description 2
- SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N melphalan Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- 229960001924 melphalan Drugs 0.000 description 2
- 229960001428 mercaptopurine Drugs 0.000 description 2
- HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N micophenolic acid Natural products OC1=C(CC=C(C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 2
- 229960001156 mitoxantrone Drugs 0.000 description 2
- KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N mitoxantrone Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCCNCCO)=CC=C2NCCNCCO KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZAHQPTJLOCWVPG-UHFFFAOYSA-N mitoxantrone dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCCNCCO)=CC=C2NCCNCCO ZAHQPTJLOCWVPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 2
- 229960000951 mycophenolic acid Drugs 0.000 description 2
- HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N mycophenolic acid Chemical compound OC1=C(C\C=C(/C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N 0.000 description 2
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 2
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 2
- 210000004248 oligodendroglia Anatomy 0.000 description 2
- 239000002751 oligonucleotide probe Substances 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- 210000001428 peripheral nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 210000001322 periplasm Anatomy 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 2
- 208000005987 polymyositis Diseases 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 238000009117 preventive therapy Methods 0.000 description 2
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 2
- 208000005069 pulmonary fibrosis Diseases 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 208000002574 reactive arthritis Diseases 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000001373 regressive effect Effects 0.000 description 2
- 210000005084 renal tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- 102200153431 rs1060501000 Human genes 0.000 description 2
- 102220069325 rs141790557 Human genes 0.000 description 2
- 102220275989 rs1556435940 Human genes 0.000 description 2
- 102200092684 rs371769427 Human genes 0.000 description 2
- 235000019515 salmon Nutrition 0.000 description 2
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 2
- 238000013391 scatchard analysis Methods 0.000 description 2
- 230000008054 signal transmission Effects 0.000 description 2
- 230000007781 signaling event Effects 0.000 description 2
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 2
- 231100000019 skin ulcer Toxicity 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 2
- 229960002385 streptomycin sulfate Drugs 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 2
- 229960001603 tamoxifen Drugs 0.000 description 2
- RCINICONZNJXQF-XAZOAEDWSA-N taxol® Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(CC(C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3(C21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-XAZOAEDWSA-N 0.000 description 2
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 2
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 2
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 2
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 2
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 2
- 229960002175 thyroglobulin Drugs 0.000 description 2
- 229960003087 tioguanine Drugs 0.000 description 2
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 2
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 2
- 230000003966 vascular damage Effects 0.000 description 2
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 2
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 2
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GBABOYUKABKIAF-IELIFDKJSA-N vinorelbine Chemical compound C1N(CC=2C3=CC=CC=C3NC=22)CC(CC)=C[C@H]1C[C@]2(C(=O)OC)C1=CC([C@]23[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]4(CC)C=CCN([C@H]34)CC2)(O)C(=O)OC)N2C)=C2C=C1OC GBABOYUKABKIAF-IELIFDKJSA-N 0.000 description 2
- 229960002066 vinorelbine Drugs 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 2
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000003952 β-lactams Chemical class 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NNJPGOLRFBJNIW-HNNXBMFYSA-N (-)-demecolcine Chemical compound C1=C(OC)C(=O)C=C2[C@@H](NC)CCC3=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C3C2=C1 NNJPGOLRFBJNIW-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 1
- UVGHPGOONBRLCX-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 6-[5-(2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl)pentanoylamino]hexanoate Chemical compound S1CC2NC(=O)NC2C1CCCCC(=O)NCCCCCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O UVGHPGOONBRLCX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DIGQNXIGRZPYDK-WKSCXVIASA-N (2R)-6-amino-2-[[2-[[(2S)-2-[[2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2R,3S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[2-[[2-[[2-[(2-amino-1-hydroxyethylidene)amino]-3-carboxy-1-hydroxypropylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxybutylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1,5-dihydroxy-5-iminopentylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxybutylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]hexanoic acid Chemical compound C[C@@H]([C@@H](C(=N[C@@H](CS)C(=N[C@@H](C)C(=N[C@@H](CO)C(=NCC(=N[C@@H](CCC(=N)O)C(=NC(CS)C(=N[C@H]([C@H](C)O)C(=N[C@H](CS)C(=N[C@H](CO)C(=NCC(=N[C@H](CS)C(=NCC(=N[C@H](CCCCN)C(=O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)N=C([C@H](CS)N=C([C@H](CO)N=C([C@H](CO)N=C([C@H](C)N=C(CN=C([C@H](CO)N=C([C@H](CS)N=C(CN=C(C(CS)N=C(C(CC(=O)O)N=C(CN)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O DIGQNXIGRZPYDK-WKSCXVIASA-N 0.000 description 1
- FLWWDYNPWOSLEO-HQVZTVAUSA-N (2s)-2-[[4-[1-(2-amino-4-oxo-1h-pteridin-6-yl)ethyl-methylamino]benzoyl]amino]pentanedioic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1C(C)N(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FLWWDYNPWOSLEO-HQVZTVAUSA-N 0.000 description 1
- KYBXNPIASYUWLN-WUCPZUCCSA-N (2s)-5-hydroxypyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound OC1CC[C@@H](C(O)=O)N1 KYBXNPIASYUWLN-WUCPZUCCSA-N 0.000 description 1
- CGMTUJFWROPELF-YPAAEMCBSA-N (3E,5S)-5-[(2S)-butan-2-yl]-3-(1-hydroxyethylidene)pyrrolidine-2,4-dione Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H]1NC(=O)\C(=C(/C)O)C1=O CGMTUJFWROPELF-YPAAEMCBSA-N 0.000 description 1
- TVIRNGFXQVMMGB-OFWIHYRESA-N (3s,6r,10r,13e,16s)-16-[(2r,3r,4s)-4-chloro-3-hydroxy-4-phenylbutan-2-yl]-10-[(3-chloro-4-methoxyphenyl)methyl]-6-methyl-3-(2-methylpropyl)-1,4-dioxa-8,11-diazacyclohexadec-13-ene-2,5,9,12-tetrone Chemical compound C1=C(Cl)C(OC)=CC=C1C[C@@H]1C(=O)NC[C@@H](C)C(=O)O[C@@H](CC(C)C)C(=O)O[C@H]([C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](Cl)C=2C=CC=CC=2)C/C=C/C(=O)N1 TVIRNGFXQVMMGB-OFWIHYRESA-N 0.000 description 1
- XRBSKUSTLXISAB-XVVDYKMHSA-N (5r,6r,7r,8r)-8-hydroxy-7-(hydroxymethyl)-5-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydrobenzo[f][1,3]benzodioxole-6-carboxylic acid Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@H](O)[C@@H](CO)[C@@H]2C(O)=O)=C1 XRBSKUSTLXISAB-XVVDYKMHSA-N 0.000 description 1
- INAUWOVKEZHHDM-PEDBPRJASA-N (7s,9s)-6,9,11-trihydroxy-9-(2-hydroxyacetyl)-7-[(2r,4s,5s,6s)-5-hydroxy-6-methyl-4-morpholin-4-yloxan-2-yl]oxy-4-methoxy-8,10-dihydro-7h-tetracene-5,12-dione;hydrochloride Chemical compound Cl.N1([C@H]2C[C@@H](O[C@@H](C)[C@H]2O)O[C@H]2C[C@@](O)(CC=3C(O)=C4C(=O)C=5C=CC=C(C=5C(=O)C4=C(O)C=32)OC)C(=O)CO)CCOCC1 INAUWOVKEZHHDM-PEDBPRJASA-N 0.000 description 1
- RCFNNLSZHVHCEK-IMHLAKCZSA-N (7s,9s)-7-(4-amino-6-methyloxan-2-yl)oxy-6,9,11-trihydroxy-9-(2-hydroxyacetyl)-4-methoxy-8,10-dihydro-7h-tetracene-5,12-dione;hydrochloride Chemical compound [Cl-].O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)C1CC([NH3+])CC(C)O1 RCFNNLSZHVHCEK-IMHLAKCZSA-N 0.000 description 1
- NOPNWHSMQOXAEI-PUCKCBAPSA-N (7s,9s)-7-[(2r,4s,5s,6s)-4-(2,3-dihydropyrrol-1-yl)-5-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-6,9,11-trihydroxy-9-(2-hydroxyacetyl)-4-methoxy-8,10-dihydro-7h-tetracene-5,12-dione Chemical compound N1([C@H]2C[C@@H](O[C@@H](C)[C@H]2O)O[C@H]2C[C@@](O)(CC=3C(O)=C4C(=O)C=5C=CC=C(C=5C(=O)C4=C(O)C=32)OC)C(=O)CO)CCC=C1 NOPNWHSMQOXAEI-PUCKCBAPSA-N 0.000 description 1
- FPVKHBSQESCIEP-UHFFFAOYSA-N (8S)-3-(2-deoxy-beta-D-erythro-pentofuranosyl)-3,6,7,8-tetrahydroimidazo[4,5-d][1,3]diazepin-8-ol Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NCC2O)=C2N=C1 FPVKHBSQESCIEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LKJPYSCBVHEWIU-KRWDZBQOSA-N (R)-bicalutamide Chemical compound C([C@@](O)(C)C(=O)NC=1C=C(C(C#N)=CC=1)C(F)(F)F)S(=O)(=O)C1=CC=C(F)C=C1 LKJPYSCBVHEWIU-KRWDZBQOSA-N 0.000 description 1
- AGNGYMCLFWQVGX-AGFFZDDWSA-N (e)-1-[(2s)-2-amino-2-carboxyethoxy]-2-diazonioethenolate Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CO\C([O-])=C\[N+]#N AGNGYMCLFWQVGX-AGFFZDDWSA-N 0.000 description 1
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.C=CC1=CC=CC=C1C=C CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BTOTXLJHDSNXMW-POYBYMJQSA-N 2,3-dideoxyuridine Chemical compound O1[C@H](CO)CC[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 BTOTXLJHDSNXMW-POYBYMJQSA-N 0.000 description 1
- BOMZMNZEXMAQQW-UHFFFAOYSA-N 2,5,11-trimethyl-6h-pyrido[4,3-b]carbazol-2-ium-9-ol;acetate Chemical compound CC([O-])=O.C[N+]1=CC=C2C(C)=C(NC=3C4=CC(O)=CC=3)C4=C(C)C2=C1 BOMZMNZEXMAQQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IMSODMZESSGVBE-UHFFFAOYSA-N 2-Oxazoline Chemical compound C1CN=CO1 IMSODMZESSGVBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QCXJFISCRQIYID-IAEPZHFASA-N 2-amino-1-n-[(3s,6s,7r,10s,16s)-3-[(2s)-butan-2-yl]-7,11,14-trimethyl-2,5,9,12,15-pentaoxo-10-propan-2-yl-8-oxa-1,4,11,14-tetrazabicyclo[14.3.0]nonadecan-6-yl]-4,6-dimethyl-3-oxo-9-n-[(3s,6s,7r,10s,16s)-7,11,14-trimethyl-2,5,9,12,15-pentaoxo-3,10-di(propa Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N=C2C(C(=O)N[C@@H]3C(=O)N[C@H](C(N4CCC[C@H]4C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]3C)=O)[C@@H](C)CC)=C(N)C(=O)C(C)=C2O2)C2=C(C)C=C1 QCXJFISCRQIYID-IAEPZHFASA-N 0.000 description 1
- 125000000979 2-amino-2-oxoethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C(=O)N([H])[H] 0.000 description 1
- FDAYLTPAFBGXAB-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-n,n-bis(2-chloroethyl)ethanamine Chemical compound ClCCN(CCCl)CCCl FDAYLTPAFBGXAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FRUNNMHCUYUXJY-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-n,n-bis(2-chloroethyl)propan-1-amine Chemical compound CC(Cl)CN(CCCl)CCCl FRUNNMHCUYUXJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AOPRXJXHLWYPQR-UHFFFAOYSA-N 2-phenoxyacetamide Chemical group NC(=O)COC1=CC=CC=C1 AOPRXJXHLWYPQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LSBDFXRDZJMBSC-UHFFFAOYSA-N 2-phenylacetamide Chemical class NC(=O)CC1=CC=CC=C1 LSBDFXRDZJMBSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YIMDLWDNDGKDTJ-QLKYHASDSA-N 3'-deamino-3'-(3-cyanomorpholin-4-yl)doxorubicin Chemical compound N1([C@H]2C[C@@H](O[C@@H](C)[C@H]2O)O[C@H]2C[C@@](O)(CC=3C(O)=C4C(=O)C=5C=CC=C(C=5C(=O)C4=C(O)C=32)OC)C(=O)CO)CCOCC1C#N YIMDLWDNDGKDTJ-QLKYHASDSA-N 0.000 description 1
- NDMPLJNOPCLANR-UHFFFAOYSA-N 3,4-dihydroxy-15-(4-hydroxy-18-methoxycarbonyl-5,18-seco-ibogamin-18-yl)-16-methoxy-1-methyl-6,7-didehydro-aspidospermidine-3-carboxylic acid methyl ester Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 NDMPLJNOPCLANR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PWMYMKOUNYTVQN-UHFFFAOYSA-N 3-(8,8-diethyl-2-aza-8-germaspiro[4.5]decan-2-yl)-n,n-dimethylpropan-1-amine Chemical compound C1C[Ge](CC)(CC)CCC11CN(CCCN(C)C)CC1 PWMYMKOUNYTVQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSJPPGNTCRNQQC-UWTATZPHSA-N 3-phospho-D-glyceric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)COP(O)(O)=O OSJPPGNTCRNQQC-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- DODQJNMQWMSYGS-QPLCGJKRSA-N 4-[(z)-1-[4-[2-(dimethylamino)ethoxy]phenyl]-1-phenylbut-1-en-2-yl]phenol Chemical compound C=1C=C(O)C=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN(C)C)=CC=1)/C1=CC=CC=C1 DODQJNMQWMSYGS-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 1
- 101710169336 5'-deoxyadenosine deaminase Proteins 0.000 description 1
- IDPUKCWIGUEADI-UHFFFAOYSA-N 5-[bis(2-chloroethyl)amino]uracil Chemical compound ClCCN(CCCl)C1=CNC(=O)NC1=O IDPUKCWIGUEADI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NMUSYJAQQFHJEW-KVTDHHQDSA-N 5-azacytidine Chemical compound O=C1N=C(N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 NMUSYJAQQFHJEW-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FHIDNBAQOFJWCA-UAKXSSHOSA-N 5-fluorouridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(F)=C1 FHIDNBAQOFJWCA-UAKXSSHOSA-N 0.000 description 1
- 229940117976 5-hydroxylysine Drugs 0.000 description 1
- 102220496119 5-hydroxytryptamine receptor 3B_F27A_mutation Human genes 0.000 description 1
- WYXSYVWAUAUWLD-SHUUEZRQSA-N 6-azauridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=N1 WYXSYVWAUAUWLD-SHUUEZRQSA-N 0.000 description 1
- VVIAGPKUTFNRDU-UHFFFAOYSA-N 6S-folinic acid Natural products C1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2N(C=O)C1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 VVIAGPKUTFNRDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZGXJTSGNIOSYLO-UHFFFAOYSA-N 88755TAZ87 Chemical compound NCC(=O)CCC(O)=O ZGXJTSGNIOSYLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZOZKYEHVNDEUCO-DKXJUACHSA-N Aceglatone Chemical compound O1C(=O)[C@H](OC(C)=O)[C@H]2OC(=O)[C@@H](OC(=O)C)[C@H]21 ZOZKYEHVNDEUCO-DKXJUACHSA-N 0.000 description 1
- 102000013563 Acid Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108010051457 Acid Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 108010059616 Activins Proteins 0.000 description 1
- 102000005606 Activins Human genes 0.000 description 1
- 102100036664 Adenosine deaminase Human genes 0.000 description 1
- 102220604157 Adenosine deaminase_K64A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 241000256118 Aedes aegypti Species 0.000 description 1
- 241000256173 Aedes albopictus Species 0.000 description 1
- WQVFQXXBNHHPLX-ZKWXMUAHSA-N Ala-Ala-His Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(O)=O WQVFQXXBNHHPLX-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ala-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- YYAVDNKUWLAFCV-ACZMJKKPSA-N Ala-Ser-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O YYAVDNKUWLAFCV-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- 101710187573 Alcohol dehydrogenase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101710133776 Alcohol dehydrogenase class-3 Proteins 0.000 description 1
- 208000032671 Allergic granulomatous angiitis Diseases 0.000 description 1
- 102100023635 Alpha-fetoprotein Human genes 0.000 description 1
- CEIZFXOZIQNICU-UHFFFAOYSA-N Alternaria alternata Crofton-weed toxin Natural products CCC(C)C1NC(=O)C(C(C)=O)=C1O CEIZFXOZIQNICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010002412 Angiocentric lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 description 1
- 102220491290 Annexin A1_S34A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 101100107610 Arabidopsis thaliana ABCF4 gene Proteins 0.000 description 1
- PTVGLOCPAVYPFG-CIUDSAMLSA-N Arg-Gln-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O PTVGLOCPAVYPFG-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 206010003232 Arteritis coronary Diseases 0.000 description 1
- 206010003267 Arthritis reactive Diseases 0.000 description 1
- 102000009133 Arylsulfatases Human genes 0.000 description 1
- PTNFNTOBUDWHNZ-GUBZILKMSA-N Asn-Arg-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O PTNFNTOBUDWHNZ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- MECFLTFREHAZLH-ACZMJKKPSA-N Asn-Glu-Cys Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N MECFLTFREHAZLH-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 241000351920 Aspergillus nidulans Species 0.000 description 1
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 1
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- 241001203868 Autographa californica Species 0.000 description 1
- 208000032116 Autoimmune Experimental Encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 206010003827 Autoimmune hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 241000713842 Avian sarcoma virus Species 0.000 description 1
- 208000037157 Azotemia Diseases 0.000 description 1
- 108091008875 B cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010028006 B-Cell Activating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000019260 B-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010012919 B-Cell Antigen Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- 206010004146 Basal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000009137 Behcet syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010004659 Biliary cirrhosis Diseases 0.000 description 1
- 208000033222 Biliary cirrhosis primary Diseases 0.000 description 1
- 239000004135 Bone phosphate Substances 0.000 description 1
- 102100033640 Bromodomain-containing protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 102220562905 Bromodomain-containing protein 1_I51K_mutation Human genes 0.000 description 1
- 206010066091 Bronchial Hyperreactivity Diseases 0.000 description 1
- MBABCNBNDNGODA-LTGLSHGVSA-N Bullatacin Natural products O=C1C(C[C@H](O)CCCCCCCCCC[C@@H](O)[C@@H]2O[C@@H]([C@@H]3O[C@H]([C@@H](O)CCCCCCCCCC)CC3)CC2)=C[C@H](C)O1 MBABCNBNDNGODA-LTGLSHGVSA-N 0.000 description 1
- KGGVWMAPBXIMEM-ZRTAFWODSA-N Bullatacinone Chemical compound O1[C@@H]([C@@H](O)CCCCCCCCCC)CC[C@@H]1[C@@H]1O[C@@H]([C@H](O)CCCCCCCCCC[C@H]2OC(=O)[C@H](CC(C)=O)C2)CC1 KGGVWMAPBXIMEM-ZRTAFWODSA-N 0.000 description 1
- KGGVWMAPBXIMEM-JQFCFGFHSA-N Bullatacinone Natural products O=C(C[C@H]1C(=O)O[C@H](CCCCCCCCCC[C@H](O)[C@@H]2O[C@@H]([C@@H]3O[C@@H]([C@@H](O)CCCCCCCCCC)CC3)CC2)C1)C KGGVWMAPBXIMEM-JQFCFGFHSA-N 0.000 description 1
- BHKSYEZGBQDNRW-SCGRZTRASA-N C(CCC(=O)O)(=O)O.N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)O.N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)O Chemical compound C(CCC(=O)O)(=O)O.N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)O.N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)O BHKSYEZGBQDNRW-SCGRZTRASA-N 0.000 description 1
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 1
- 102000007499 CD27 Ligand Human genes 0.000 description 1
- 108010046080 CD27 Ligand Proteins 0.000 description 1
- 102100027207 CD27 antigen Human genes 0.000 description 1
- 108010029697 CD40 Ligand Proteins 0.000 description 1
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 description 1
- 108010065524 CD52 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 102000013135 CD52 Antigen Human genes 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 1
- GAGWJHPBXLXJQN-UHFFFAOYSA-N Capecitabine Natural products C1=C(F)C(NC(=O)OCCCCC)=NC(=O)N1C1C(O)C(O)C(C)O1 GAGWJHPBXLXJQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010006303 Carboxypeptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000005367 Carboxypeptidases Human genes 0.000 description 1
- DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N Carmustine Chemical compound ClCCNC(=O)N(N=O)CCCl DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000567 Caspase 7 Proteins 0.000 description 1
- 102100038902 Caspase-7 Human genes 0.000 description 1
- 102100026550 Caspase-9 Human genes 0.000 description 1
- 108090000566 Caspase-9 Proteins 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 1
- 102220583903 Cellular tumor antigen p53_V97A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000006082 Chickenpox Diseases 0.000 description 1
- JWBOIMRXGHLCPP-UHFFFAOYSA-N Chloditan Chemical compound C=1C=CC=C(Cl)C=1C(C(Cl)Cl)C1=CC=C(Cl)C=C1 JWBOIMRXGHLCPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282552 Chlorocebus aethiops Species 0.000 description 1
- MKQWTWSXVILIKJ-LXGUWJNJSA-N Chlorozotocin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C=O)NC(=O)N(N=O)CCCl MKQWTWSXVILIKJ-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 1
- 102100021809 Chorionic somatomammotropin hormone 1 Human genes 0.000 description 1
- 208000006344 Churg-Strauss Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108090000746 Chymosin Proteins 0.000 description 1
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 1
- 108091028732 Concatemer Proteins 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- 229930188224 Cryptophycin Natural products 0.000 description 1
- 102000000311 Cytosine Deaminase Human genes 0.000 description 1
- 108010080611 Cytosine Deaminase Proteins 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N D-alanine Chemical compound C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical group 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N D-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N D-thyroxine Chemical compound IC1=CC(C[C@@H](N)C(O)=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 1
- 239000012624 DNA alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 1
- 238000007399 DNA isolation Methods 0.000 description 1
- 229940124087 DNA topoisomerase II inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 108010092160 Dactinomycin Proteins 0.000 description 1
- WEAHRLBPCANXCN-UHFFFAOYSA-N Daunomycin Natural products CCC1(O)CC(OC2CC(N)C(O)C(C)O2)c3cc4C(=O)c5c(OC)cccc5C(=O)c4c(O)c3C1 WEAHRLBPCANXCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009058 Death Domain Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010049207 Death Domain Receptors Proteins 0.000 description 1
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102220548588 Delta and Notch-like epidermal growth factor-related receptor_L28A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 102220548598 Delta and Notch-like epidermal growth factor-related receptor_Y32A_mutation Human genes 0.000 description 1
- AUGQEEXBDZWUJY-ZLJUKNTDSA-N Diacetoxyscirpenol Chemical compound C([C@]12[C@]3(C)[C@H](OC(C)=O)[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1C=C(C)CC[C@@]13COC(=O)C)O2 AUGQEEXBDZWUJY-ZLJUKNTDSA-N 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 208000002699 Digestive System Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 241000255601 Drosophila melanogaster Species 0.000 description 1
- 101100044298 Drosophila melanogaster fand gene Proteins 0.000 description 1
- 102000043859 Dynamin Human genes 0.000 description 1
- 108700021058 Dynamin Proteins 0.000 description 1
- 241000588914 Enterobacter Species 0.000 description 1
- 241000588921 Enterobacteriaceae Species 0.000 description 1
- 101710146739 Enterotoxin Proteins 0.000 description 1
- 208000018428 Eosinophilic granulomatosis with polyangiitis Diseases 0.000 description 1
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- 102400001368 Epidermal growth factor Human genes 0.000 description 1
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OBMLHUPNRURLOK-XGRAFVIBSA-N Epitiostanol Chemical compound C1[C@@H]2S[C@@H]2C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@H]21 OBMLHUPNRURLOK-XGRAFVIBSA-N 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 241000588698 Erwinia Species 0.000 description 1
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 1
- 241001522878 Escherichia coli B Species 0.000 description 1
- 241001302584 Escherichia coli str. K-12 substr. W3110 Species 0.000 description 1
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N Ethyl urethane Chemical compound CCOC(N)=O JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000009386 Experimental Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 101150064015 FAS gene Proteins 0.000 description 1
- 108010039471 Fas Ligand Protein Proteins 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 208000028387 Felty syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102000018233 Fibroblast Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 108050007372 Fibroblast Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 1
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000010190 G1 phase Effects 0.000 description 1
- 206010017711 Gangrene Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 208000034826 Genetic Predisposition to Disease Diseases 0.000 description 1
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 1
- 208000007465 Giant cell arteritis Diseases 0.000 description 1
- WQWMZOIPXWSZNE-WDSKDSINSA-N Gln-Asp-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O WQWMZOIPXWSZNE-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- YYOBUPFZLKQUAX-FXQIFTODSA-N Glu-Asn-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O YYOBUPFZLKQUAX-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- 108010073178 Glucan 1,4-alpha-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- 102100022624 Glucoamylase Human genes 0.000 description 1
- 102000030595 Glucokinase Human genes 0.000 description 1
- 108010021582 Glucokinase Proteins 0.000 description 1
- 102100031132 Glucose-6-phosphate isomerase Human genes 0.000 description 1
- 108010070600 Glucose-6-phosphate isomerase Proteins 0.000 description 1
- 108010068370 Glutens Proteins 0.000 description 1
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 102100023849 Glycophorin-C Human genes 0.000 description 1
- 102000051366 Glycosyltransferases Human genes 0.000 description 1
- 108700023372 Glycosyltransferases Proteins 0.000 description 1
- 102000006771 Gonadotropins Human genes 0.000 description 1
- 108010086677 Gonadotropins Proteins 0.000 description 1
- BLCLNMBMMGCOAS-URPVMXJPSA-N Goserelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](COC(C)(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NNC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 BLCLNMBMMGCOAS-URPVMXJPSA-N 0.000 description 1
- 108010069236 Goserelin Proteins 0.000 description 1
- 244000299507 Gossypium hirsutum Species 0.000 description 1
- 206010018691 Granuloma Diseases 0.000 description 1
- 206010072579 Granulomatosis with polyangiitis Diseases 0.000 description 1
- 102000006390 HLA-B Antigens Human genes 0.000 description 1
- 108010058607 HLA-B Antigens Proteins 0.000 description 1
- 101100082540 Haemophilus influenzae (strain ATCC 51907 / DSM 11121 / KW20 / Rd) pcp gene Proteins 0.000 description 1
- 208000001204 Hashimoto Disease Diseases 0.000 description 1
- 102000002812 Heat-Shock Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010004889 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000002250 Hematologic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 208000037319 Hepatitis infectious Diseases 0.000 description 1
- 208000009889 Herpes Simplex Diseases 0.000 description 1
- 102000005548 Hexokinase Human genes 0.000 description 1
- 108700040460 Hexokinases Proteins 0.000 description 1
- 241000545744 Hirudinea Species 0.000 description 1
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 1
- 208000021519 Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 description 1
- 101000914511 Homo sapiens CD27 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101000935040 Homo sapiens Integrin beta-2 Proteins 0.000 description 1
- 101001054334 Homo sapiens Interferon beta Proteins 0.000 description 1
- 101000795167 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13B Proteins 0.000 description 1
- 101000801234 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18 Proteins 0.000 description 1
- 101000611023 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 6 Proteins 0.000 description 1
- 101000851376 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Proteins 0.000 description 1
- 101001115218 Homo sapiens Ubiquitin-40S ribosomal protein S27a Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 241000701109 Human adenovirus 2 Species 0.000 description 1
- 241000701024 Human betaherpesvirus 5 Species 0.000 description 1
- VSNHCAURESNICA-UHFFFAOYSA-N Hydroxyurea Chemical compound NC(=O)NO VSNHCAURESNICA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000257303 Hymenoptera Species 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MPBVHIBUJCELCL-UHFFFAOYSA-N Ibandronate Chemical compound CCCCCN(C)CCC(O)(P(O)(O)=O)P(O)(O)=O MPBVHIBUJCELCL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N Idarubicin Chemical compound C1[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2C[C@@](O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N 0.000 description 1
- XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N Idarubicin Natural products C1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2CC(O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010021245 Idiopathic thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 1
- 102100026120 IgG receptor FcRn large subunit p51 Human genes 0.000 description 1
- 101710177940 IgG receptor FcRn large subunit p51 Proteins 0.000 description 1
- FCWFBHMAJZGWRY-XUXIUFHCSA-N Ile-Leu-Met Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)N FCWFBHMAJZGWRY-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 description 1
- 102000003746 Insulin Receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010001127 Insulin Receptor Proteins 0.000 description 1
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 1
- 108090001117 Insulin-Like Growth Factor II Proteins 0.000 description 1
- 102100037852 Insulin-like growth factor I Human genes 0.000 description 1
- 102100025947 Insulin-like growth factor II Human genes 0.000 description 1
- 108010008212 Integrin alpha4beta1 Proteins 0.000 description 1
- 102100025390 Integrin beta-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010064593 Intercellular Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 description 1
- 102100037877 Intercellular adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 1
- 238000012695 Interfacial polymerization Methods 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 1
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 1
- 108090000177 Interleukin-11 Proteins 0.000 description 1
- 102000003815 Interleukin-11 Human genes 0.000 description 1
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 1
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 1
- 102100039064 Interleukin-3 Human genes 0.000 description 1
- 108010002386 Interleukin-3 Proteins 0.000 description 1
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 102100039897 Interleukin-5 Human genes 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 1
- 102100021592 Interleukin-7 Human genes 0.000 description 1
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 1
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 description 1
- 102000000585 Interleukin-9 Human genes 0.000 description 1
- 108010036012 Iodide peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 206010022941 Iridocyclitis Diseases 0.000 description 1
- 241000581650 Ivesia Species 0.000 description 1
- 206010023198 Joint ankylosis Diseases 0.000 description 1
- 102220475982 Keratin, type I cytoskeletal 10_Q24A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 241000588748 Klebsiella Species 0.000 description 1
- 241000235058 Komagataella pastoris Species 0.000 description 1
- 150000007649 L alpha amino acids Chemical class 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N L-homocysteine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCS FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 125000000510 L-tryptophano group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2N([H])C([H])=C(C([H])([H])[C@@]([H])(C(O[H])=O)N([H])[*])C2=C1[H] 0.000 description 1
- 241000481961 Lachancea thermotolerans Species 0.000 description 1
- 241000235651 Lachancea waltii Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 1
- 229920001491 Lentinan Polymers 0.000 description 1
- JKSIBWITFMQTOA-XUXIUFHCSA-N Leu-Ile-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O JKSIBWITFMQTOA-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000032514 Leukocytoclastic vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 108010000817 Leuprolide Proteins 0.000 description 1
- GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N Lomustine Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)NC1CCCCC1 GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100029204 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-a Human genes 0.000 description 1
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 1
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 1
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 101001133631 Lysinibacillus sphaericus Penicillin acylase Proteins 0.000 description 1
- 239000007993 MOPS buffer Substances 0.000 description 1
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 1
- 239000004907 Macro-emulsion Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 102000009112 Mannose-Binding Lectin Human genes 0.000 description 1
- 108010087870 Mannose-Binding Lectin Proteins 0.000 description 1
- 108010090665 Mannosyl-Glycoprotein Endo-beta-N-Acetylglucosaminidase Proteins 0.000 description 1
- VJRAUFKOOPNFIQ-UHFFFAOYSA-N Marcellomycin Natural products C12=C(O)C=3C(=O)C4=C(O)C=CC(O)=C4C(=O)C=3C=C2C(C(=O)OC)C(CC)(O)CC1OC(OC1C)CC(N(C)C)C1OC(OC1C)CC(O)C1OC1CC(O)C(O)C(C)O1 VJRAUFKOOPNFIQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930126263 Maytansine Natural products 0.000 description 1
- 108010054862 Member 10c Tumor Necrosis Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000001780 Member 10c Tumor Necrosis Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010061593 Member 14 Tumor Necrosis Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102220480557 Metabotropic glutamate receptor 3_Y98A_mutation Human genes 0.000 description 1
- VFKZTMPDYBFSTM-KVTDHHQDSA-N Mitobronitol Chemical compound BrC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CBr VFKZTMPDYBFSTM-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 229930192392 Mitomycin Natural products 0.000 description 1
- 102000013967 Monokines Human genes 0.000 description 1
- 108010050619 Monokines Proteins 0.000 description 1
- 101100293737 Mus musculus Nde1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100191385 Mus musculus Prkdc gene Proteins 0.000 description 1
- 208000010428 Muscle Weakness Diseases 0.000 description 1
- 206010048654 Muscle fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 208000029549 Muscle injury Diseases 0.000 description 1
- 206010028372 Muscular weakness Diseases 0.000 description 1
- 102100038895 Myc proto-oncogene protein Human genes 0.000 description 1
- 102220595762 Myc proto-oncogene protein_S62A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 108010083674 Myelin Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000006386 Myelin Proteins Human genes 0.000 description 1
- 102220561259 Myocardin-related transcription factor B_L96A_mutation Human genes 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N N-Acetyl-D-Galactosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N N-acetyl-D-galactosamine Natural products CC(=O)NC(C=O)C(O)C(O)C(O)CO MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-RTRLPJTCSA-N N-acetyl-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-RTRLPJTCSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 1
- 102220506264 N-alpha-acetyltransferase 50_Y31A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 230000004988 N-glycosylation Effects 0.000 description 1
- 102220477724 NF-kappa-B inhibitor alpha_D31A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 102220573906 Natural resistance-associated macrophage protein 2_N89A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 102000007072 Nerve Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 241000221960 Neurospora Species 0.000 description 1
- 241000221961 Neurospora crassa Species 0.000 description 1
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 1
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 1
- SYNHCENRCUAUNM-UHFFFAOYSA-N Nitrogen mustard N-oxide hydrochloride Chemical compound Cl.ClCC[N+]([O-])(C)CCCl SYNHCENRCUAUNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KGTDRFCXGRULNK-UHFFFAOYSA-N Nogalamycin Natural products COC1C(OC)(C)C(OC)C(C)OC1OC1C2=C(O)C(C(=O)C3=C(O)C=C4C5(C)OC(C(C(C5O)N(C)C)O)OC4=C3C3=O)=C3C=C2C(C(=O)OC)C(C)(O)C1 KGTDRFCXGRULNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000636 Northern blotting Methods 0.000 description 1
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229930187135 Olivomycin Natural products 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700005126 Ornithine decarboxylases Proteins 0.000 description 1
- 102000052812 Ornithine decarboxylases Human genes 0.000 description 1
- 102000016979 Other receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 206010056872 Palpable purpura Diseases 0.000 description 1
- 241000282579 Pan Species 0.000 description 1
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 1
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 description 1
- 241000282520 Papio Species 0.000 description 1
- 102000003982 Parathyroid hormone Human genes 0.000 description 1
- 108090000445 Parathyroid hormone Proteins 0.000 description 1
- 208000000733 Paroxysmal Hemoglobinuria Diseases 0.000 description 1
- 241001606201 Patia Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 108010073038 Penicillin Amidase Proteins 0.000 description 1
- 101710123388 Penicillin G acylase Proteins 0.000 description 1
- 239000004107 Penicillin G sodium Substances 0.000 description 1
- 108010087702 Penicillinase Proteins 0.000 description 1
- 241000228143 Penicillium Species 0.000 description 1
- 108010057150 Peplomycin Proteins 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 102000015731 Peptide Hormones Human genes 0.000 description 1
- 108010038988 Peptide Hormones Proteins 0.000 description 1
- 102000000447 Peptide-N4-(N-acetyl-beta-glucosaminyl) Asparagine Amidase Human genes 0.000 description 1
- 108010055817 Peptide-N4-(N-acetyl-beta-glucosaminyl) Asparagine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 206010034620 Peripheral sensory neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 240000007377 Petunia x hybrida Species 0.000 description 1
- 101100237801 Phaeosphaeria nodorum (strain SN15 / ATCC MYA-4574 / FGSC 10173) MLNS gene Proteins 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- WEMYTDDMDBLPMI-DKIMLUQUSA-N Phe-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N WEMYTDDMDBLPMI-DKIMLUQUSA-N 0.000 description 1
- KIQUCMUULDXTAZ-HJOGWXRNSA-N Phe-Tyr-Tyr Chemical compound N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(=O)N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(O)=O KIQUCMUULDXTAZ-HJOGWXRNSA-N 0.000 description 1
- 102100036050 Phosphatidylinositol N-acetylglucosaminyltransferase subunit A Human genes 0.000 description 1
- 102000001105 Phosphofructokinases Human genes 0.000 description 1
- 108010069341 Phosphofructokinases Proteins 0.000 description 1
- 102000012288 Phosphopyruvate Hydratase Human genes 0.000 description 1
- 108010022181 Phosphopyruvate Hydratase Proteins 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 108010003044 Placental Lactogen Proteins 0.000 description 1
- 239000000381 Placental Lactogen Substances 0.000 description 1
- 101100335198 Pneumocystis carinii fol1 gene Proteins 0.000 description 1
- 229920000805 Polyaspartic acid Polymers 0.000 description 1
- 241001505332 Polyomavirus sp. Species 0.000 description 1
- 229920002685 Polyoxyl 35CastorOil Polymers 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- HFVNWDWLWUCIHC-GUPDPFMOSA-N Prednimustine Chemical compound O=C([C@@]1(O)CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)[C@@H](O)C[C@@]21C)COC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 HFVNWDWLWUCIHC-GUPDPFMOSA-N 0.000 description 1
- 208000012654 Primary biliary cholangitis Diseases 0.000 description 1
- 102220475756 Probable ATP-dependent RNA helicase DDX6_S30A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 108010076181 Proinsulin Proteins 0.000 description 1
- 102000003946 Prolactin Human genes 0.000 description 1
- 108010057464 Prolactin Proteins 0.000 description 1
- 102220574921 Prolyl hydroxylase EGLN2_M34A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 241000588769 Proteus <enterobacteria> Species 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 101100084022 Pseudomonas aeruginosa (strain ATCC 15692 / DSM 22644 / CIP 104116 / JCM 14847 / LMG 12228 / 1C / PRS 101 / PAO1) lapA gene Proteins 0.000 description 1
- 206010037457 Pulmonary vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 108010011939 Pyruvate Decarboxylase Proteins 0.000 description 1
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 1
- 102000004879 Racemases and epimerases Human genes 0.000 description 1
- 108090001066 Racemases and epimerases Proteins 0.000 description 1
- 102220500205 Ragulator complex protein LAMTOR4_R29A_mutation Human genes 0.000 description 1
- AHHFEZNOXOZZQA-ZEBDFXRSSA-N Ranimustine Chemical compound CO[C@H]1O[C@H](CNC(=O)N(CCCl)N=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AHHFEZNOXOZZQA-ZEBDFXRSSA-N 0.000 description 1
- 208000033464 Reiter syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108090000103 Relaxin Proteins 0.000 description 1
- 102000003743 Relaxin Human genes 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- PLXBWHJQWKZRKG-UHFFFAOYSA-N Resazurin Chemical compound C1=CC(=O)C=C2OC3=CC(O)=CC=C3[N+]([O-])=C21 PLXBWHJQWKZRKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWPCHSCAPHNHAV-UHFFFAOYSA-N Rhizoxin Natural products C1C(O)C2(C)OC2C=CC(C)C(OC(=O)C2)CC2CC2OC2C(=O)OC1C(C)C(OC)C(C)=CC=CC(C)=CC1=COC(C)=N1 OWPCHSCAPHNHAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NSFWWJIQIKBZMJ-YKNYLIOZSA-N Roridin A Chemical compound C([C@]12[C@]3(C)[C@H]4C[C@H]1O[C@@H]1C=C(C)CC[C@@]13COC(=O)[C@@H](O)[C@H](C)CCO[C@H](\C=C\C=C/C(=O)O4)[C@H](O)C)O2 NSFWWJIQIKBZMJ-YKNYLIOZSA-N 0.000 description 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 1
- 101100068078 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) GCN4 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 241000293869 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium Species 0.000 description 1
- 241000235347 Schizosaccharomyces pombe Species 0.000 description 1
- 241000311088 Schwanniomyces Species 0.000 description 1
- 241001123650 Schwanniomyces occidentalis Species 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- QMCDMHWAKMUGJE-IHRRRGAJSA-N Ser-Phe-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O QMCDMHWAKMUGJE-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 241000607768 Shigella Species 0.000 description 1
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 1
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010058141 Skin graft rejection Diseases 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 238000002105 Southern blotting Methods 0.000 description 1
- 206010041660 Splenomegaly Diseases 0.000 description 1
- 241000269319 Squalius cephalus Species 0.000 description 1
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 1
- 101000895926 Streptomyces plicatus Endo-beta-N-acetylglucosaminidase H Proteins 0.000 description 1
- 108090000787 Subtilisin Proteins 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- BXFOFFBJRFZBQZ-QYWOHJEZSA-N T-2 toxin Chemical compound C([C@@]12[C@]3(C)[C@H](OC(C)=O)[C@@H](O)[C@H]1O[C@H]1[C@]3(COC(C)=O)C[C@@H](C(=C1)C)OC(=O)CC(C)C)O2 BXFOFFBJRFZBQZ-QYWOHJEZSA-N 0.000 description 1
- CGMTUJFWROPELF-UHFFFAOYSA-N Tenuazonic acid Natural products CCC(C)C1NC(=O)C(=C(C)/O)C1=O CGMTUJFWROPELF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000255588 Tephritidae Species 0.000 description 1
- 108020005038 Terminator Codon Proteins 0.000 description 1
- 208000024313 Testicular Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010057644 Testis cancer Diseases 0.000 description 1
- 108090001109 Thermolysin Proteins 0.000 description 1
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 1
- 206010043540 Thromboangiitis obliterans Diseases 0.000 description 1
- 206010043561 Thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 1
- 102220481238 Thymocyte selection-associated high mobility group box protein TOX_F29A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 102000014267 Thyroid peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 241001149964 Tolypocladium Species 0.000 description 1
- 239000000317 Topoisomerase II Inhibitor Substances 0.000 description 1
- IWEQQRMGNVVKQW-OQKDUQJOSA-N Toremifene citrate Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O.C1=CC(OCCN(C)C)=CC=C1C(\C=1C=CC=CC=1)=C(\CCCl)C1=CC=CC=C1 IWEQQRMGNVVKQW-OQKDUQJOSA-N 0.000 description 1
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 1
- 108700009124 Transcription Initiation Site Proteins 0.000 description 1
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 1
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 1
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- 102400001320 Transforming growth factor alpha Human genes 0.000 description 1
- 101800004564 Transforming growth factor alpha Proteins 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 241000223259 Trichoderma Species 0.000 description 1
- UMILHIMHKXVDGH-UHFFFAOYSA-N Triethylene glycol diglycidyl ether Chemical compound C1OC1COCCOCCOCCOCC1CO1 UMILHIMHKXVDGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FYAMXEPQQLNQDM-UHFFFAOYSA-N Tris(1-aziridinyl)phosphine oxide Chemical compound C1CN1P(N1CC1)(=O)N1CC1 FYAMXEPQQLNQDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVTKHGUGBGNBPL-UHFFFAOYSA-N Trp-P-1 Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C2=C1C(C)=C(N)N=C2C LVTKHGUGBGNBPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940122618 Trypsin inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 101710162629 Trypsin inhibitor Proteins 0.000 description 1
- 206010048302 Tubulointerstitial nephritis Diseases 0.000 description 1
- 108700025716 Tumor Suppressor Genes Proteins 0.000 description 1
- 102000044209 Tumor Suppressor Genes Human genes 0.000 description 1
- 108050002568 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 6 Proteins 0.000 description 1
- 102100029675 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13B Human genes 0.000 description 1
- 102100028785 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 14 Human genes 0.000 description 1
- 102100033728 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18 Human genes 0.000 description 1
- 101710187743 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1A Proteins 0.000 description 1
- 102100033732 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1A Human genes 0.000 description 1
- 102100033733 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1B Human genes 0.000 description 1
- 101710187830 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1B Proteins 0.000 description 1
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 description 1
- 102100040403 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 6 Human genes 0.000 description 1
- 102100036857 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Human genes 0.000 description 1
- 108091005956 Type II transmembrane proteins Proteins 0.000 description 1
- KHPLUFDSWGDRHD-SLFFLAALSA-N Tyr-Tyr-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)NC(=O)[C@H](CC3=CC=C(C=C3)O)N)C(=O)O KHPLUFDSWGDRHD-SLFFLAALSA-N 0.000 description 1
- 102100023341 Ubiquitin-40S ribosomal protein S27a Human genes 0.000 description 1
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 244000000188 Vaccinium ovalifolium Species 0.000 description 1
- 206010046980 Varicella Diseases 0.000 description 1
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 1
- 206010047124 Vasculitis necrotising Diseases 0.000 description 1
- 229940122803 Vinca alkaloid Drugs 0.000 description 1
- 108020005202 Viral DNA Proteins 0.000 description 1
- 102220479831 Voltage-dependent L-type calcium channel subunit beta-2_P55K_mutation Human genes 0.000 description 1
- 206010047741 Vulval cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000004354 Vulvar Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 238000002441 X-ray diffraction Methods 0.000 description 1
- 208000005946 Xerostomia Diseases 0.000 description 1
- 241000235013 Yarrowia Species 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- IFJUINDAXYAPTO-UUBSBJJBSA-N [(8r,9s,13s,14s,17s)-17-[2-[4-[4-[bis(2-chloroethyl)amino]phenyl]butanoyloxy]acetyl]oxy-13-methyl-6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-decahydrocyclopenta[a]phenanthren-3-yl] benzoate Chemical compound C([C@@H]1[C@@H](C2=CC=3)CC[C@]4([C@H]1CC[C@@H]4OC(=O)COC(=O)CCCC=1C=CC(=CC=1)N(CCCl)CCCl)C)CC2=CC=3OC(=O)C1=CC=CC=C1 IFJUINDAXYAPTO-UUBSBJJBSA-N 0.000 description 1
- IHGLINDYFMDHJG-UHFFFAOYSA-N [2-(4-methoxyphenyl)-3,4-dihydronaphthalen-1-yl]-[4-(2-pyrrolidin-1-ylethoxy)phenyl]methanone Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C(CCC1=CC=CC=C11)=C1C(=O)C(C=C1)=CC=C1OCCN1CCCC1 IHGLINDYFMDHJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 229930183665 actinomycin Natural products 0.000 description 1
- 239000000488 activin Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 1
- 239000000674 adrenergic antagonist Substances 0.000 description 1
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 description 1
- 238000003314 affinity selection Methods 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 108010035879 albumin-bilirubin complex Proteins 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940045714 alkyl sulfonate alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 150000008052 alkyl sulfonates Chemical class 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N all-trans-retinoic acid Chemical compound OC(=O)\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 108010026331 alpha-Fetoproteins Proteins 0.000 description 1
- 229960000473 altretamine Drugs 0.000 description 1
- 238000003277 amino acid sequence analysis Methods 0.000 description 1
- 229960003437 aminoglutethimide Drugs 0.000 description 1
- ROBVIMPUHSLWNV-UHFFFAOYSA-N aminoglutethimide Chemical compound C=1C=C(N)C=CC=1C1(CC)CCC(=O)NC1=O ROBVIMPUHSLWNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940126574 aminoglycoside antibiotic Drugs 0.000 description 1
- 239000002647 aminoglycoside antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 229960002749 aminolevulinic acid Drugs 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 229960001220 amsacrine Drugs 0.000 description 1
- XCPGHVQEEXUHNC-UHFFFAOYSA-N amsacrine Chemical compound COC1=CC(NS(C)(=O)=O)=CC=C1NC1=C(C=CC=C2)C2=NC2=CC=CC=C12 XCPGHVQEEXUHNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- BBDAGFIXKZCXAH-CCXZUQQUSA-N ancitabine Chemical compound N=C1C=CN2[C@@H]3O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]3OC2=N1 BBDAGFIXKZCXAH-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 1
- 229950000242 ancitabine Drugs 0.000 description 1
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 1
- 229940030486 androgens Drugs 0.000 description 1
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 201000004612 anterior uveitis Diseases 0.000 description 1
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 description 1
- 230000005809 anti-tumor immunity Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 239000000051 antiandrogen Substances 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011394 anticancer treatment Methods 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 230000007503 antigenic stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000013059 antihormonal agent Substances 0.000 description 1
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 description 1
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 description 1
- 229940045687 antimetabolites folic acid analogs Drugs 0.000 description 1
- 229940045719 antineoplastic alkylating agent nitrosoureas Drugs 0.000 description 1
- 229940045713 antineoplastic alkylating drug ethylene imines Drugs 0.000 description 1
- 230000005756 apoptotic signaling Effects 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000008209 arabinosides Chemical class 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003886 aromatase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940046844 aromatase inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 210000001188 articular cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 125000000613 asparagine group Chemical group N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 208000010927 atrophic thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- 208000037979 autoimmune inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000006472 autoimmune response Effects 0.000 description 1
- 201000003710 autoimmune thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 1
- 230000005784 autoimmunity Effects 0.000 description 1
- 229960002756 azacitidine Drugs 0.000 description 1
- 150000001541 aziridines Chemical class 0.000 description 1
- 210000000227 basophil cell of anterior lobe of hypophysis Anatomy 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- FCPVYOBCFFNJFS-LQDWTQKMSA-M benzylpenicillin sodium Chemical compound [Na+].N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C([O-])=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 FCPVYOBCFFNJFS-LQDWTQKMSA-M 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010051210 beta-Fructofuranosidase Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 229960000997 bicalutamide Drugs 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000036782 biological activation Effects 0.000 description 1
- 210000002459 blastocyst Anatomy 0.000 description 1
- 239000002981 blocking agent Substances 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 108010006025 bovine growth hormone Proteins 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 230000036427 bronchial hyperreactivity Effects 0.000 description 1
- 229960005520 bryostatin Drugs 0.000 description 1
- MJQUEDHRCUIRLF-TVIXENOKSA-N bryostatin 1 Chemical compound C([C@@H]1CC(/[C@@H]([C@@](C(C)(C)/C=C/2)(O)O1)OC(=O)/C=C/C=C/CCC)=C\C(=O)OC)[C@H]([C@@H](C)O)OC(=O)C[C@H](O)C[C@@H](O1)C[C@H](OC(C)=O)C(C)(C)[C@]1(O)C[C@@H]1C\C(=C\C(=O)OC)C[C@H]\2O1 MJQUEDHRCUIRLF-TVIXENOKSA-N 0.000 description 1
- MUIWQCKLQMOUAT-AKUNNTHJSA-N bryostatin 20 Natural products COC(=O)C=C1C[C@@]2(C)C[C@]3(O)O[C@](C)(C[C@@H](O)CC(=O)O[C@](C)(C[C@@]4(C)O[C@](O)(CC5=CC(=O)O[C@]45C)C(C)(C)C=C[C@@](C)(C1)O2)[C@@H](C)O)C[C@H](OC(=O)C(C)(C)C)C3(C)C MUIWQCKLQMOUAT-AKUNNTHJSA-N 0.000 description 1
- MBABCNBNDNGODA-LUVUIASKSA-N bullatacin Chemical compound O1[C@@H]([C@@H](O)CCCCCCCCCC)CC[C@@H]1[C@@H]1O[C@@H]([C@H](O)CCCCCCCCCC[C@@H](O)CC=2C(O[C@@H](C)C=2)=O)CC1 MBABCNBNDNGODA-LUVUIASKSA-N 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 108700002839 cactinomycin Proteins 0.000 description 1
- 229950009908 cactinomycin Drugs 0.000 description 1
- 229910052792 caesium Inorganic materials 0.000 description 1
- TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N caesium atom Chemical compound [Cs] TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- HXCHCVDVKSCDHU-LHTKNVSWSA-N calicheamicin gamma1(I) Chemical compound C1[C@H](OC)[C@@H](NCC)CO[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@@H]2C\3=C(NC(=O)OC)C(=O)C[C@@](C/3=C/CSSSC)(O)C#C\C=C/C#C2)O[C@@H](C)[C@@H](NO[C@@H]2O[C@H](C)[C@@H](SC(=O)C=3C(=C(OC)C(O[C@H]4[C@@H]([C@H](OC)[C@@H](O)[C@H](C)O4)O)=C(I)C=3C)OC)[C@@H](O)C2)[C@@H]1O HXCHCVDVKSCDHU-LHTKNVSWSA-N 0.000 description 1
- IVFYLRMMHVYGJH-PVPPCFLZSA-N calusterone Chemical compound C1C[C@]2(C)[C@](O)(C)CC[C@H]2[C@@H]2[C@@H](C)CC3=CC(=O)CC[C@]3(C)[C@H]21 IVFYLRMMHVYGJH-PVPPCFLZSA-N 0.000 description 1
- 229950009823 calusterone Drugs 0.000 description 1
- 229960004117 capecitabine Drugs 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- FPPNZSSZRUTDAP-UWFZAAFLSA-N carbenicillin Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)C(C(O)=O)C1=CC=CC=C1 FPPNZSSZRUTDAP-UWFZAAFLSA-N 0.000 description 1
- 229960003669 carbenicillin Drugs 0.000 description 1
- 238000012511 carbohydrate analysis Methods 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- 229960005243 carmustine Drugs 0.000 description 1
- 238000012219 cassette mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 230000001925 catabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 1
- 239000012930 cell culture fluid Substances 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 230000022534 cell killing Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003570 cell viability assay Methods 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 208000010353 central nervous system vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 125000003636 chemical group Chemical group 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 229960001480 chlorozotocin Drugs 0.000 description 1
- 208000003167 cholangitis Diseases 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 238000011098 chromatofocusing Methods 0.000 description 1
- 229940080701 chymosin Drugs 0.000 description 1
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000005354 coacervation Methods 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 230000009137 competitive binding Effects 0.000 description 1
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 230000037020 contractile activity Effects 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 108010006226 cryptophycin Proteins 0.000 description 1
- 108010089438 cryptophycin 1 Proteins 0.000 description 1
- 108010090203 cryptophycin 8 Proteins 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 229960000684 cytarabine Drugs 0.000 description 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 description 1
- 230000006240 deamidation Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N delta-DL-hydroxylysine Natural products NCC(O)CCC(N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ATWWYGQDYGSWQA-UHFFFAOYSA-N demecolceine Natural products C1=C(O)C(=O)C=C2C(NC)CCC3=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C3C2=C1 ATWWYGQDYGSWQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005052 demecolcine Drugs 0.000 description 1
- 230000003210 demyelinating effect Effects 0.000 description 1
- 206010061811 demyelinating polyneuropathy Diseases 0.000 description 1
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- WVYXNIXAMZOZFK-UHFFFAOYSA-N diaziquone Chemical compound O=C1C(NC(=O)OCC)=C(N2CC2)C(=O)C(NC(=O)OCC)=C1N1CC1 WVYXNIXAMZOZFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 208000010643 digestive system disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 239000003534 dna topoisomerase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229960003668 docetaxel Drugs 0.000 description 1
- AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N dolastatin Chemical compound CC(C)C(N(C)C)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)N(C)C(C(C)C)C(OC)CC(=O)N1CCCC1C(OC)C(C)C(=O)NC(C=1SC=CN=1)CC1=CC=CC=C1 AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930188854 dolastatin Natural products 0.000 description 1
- NOTIQUSPUUHHEH-UXOVVSIBSA-N dromostanolone propionate Chemical compound C([C@@H]1CC2)C(=O)[C@H](C)C[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H](OC(=O)CC)[C@@]2(C)CC1 NOTIQUSPUUHHEH-UXOVVSIBSA-N 0.000 description 1
- 229950004683 drostanolone propionate Drugs 0.000 description 1
- 206010013781 dry mouth Diseases 0.000 description 1
- 229960005501 duocarmycin Drugs 0.000 description 1
- VQNATVDKACXKTF-XELLLNAOSA-N duocarmycin Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=C2NC(C(=O)N3C4=CC(=O)C5=C([C@@]64C[C@@H]6C3)C=C(N5)C(=O)OC)=CC2=C1 VQNATVDKACXKTF-XELLLNAOSA-N 0.000 description 1
- 229930184221 duocarmycin Natural products 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 210000003162 effector t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960002759 eflornithine Drugs 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- XOPYFXBZMVTEJF-PDACKIITSA-N eleutherobin Chemical compound C(/[C@H]1[C@H](C(=CC[C@@H]1C(C)C)C)C[C@@H]([C@@]1(C)O[C@@]2(C=C1)OC)OC(=O)\C=C\C=1N=CN(C)C=1)=C2\CO[C@@H]1OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1OC(C)=O XOPYFXBZMVTEJF-PDACKIITSA-N 0.000 description 1
- XOPYFXBZMVTEJF-UHFFFAOYSA-N eleutherobin Natural products C1=CC2(OC)OC1(C)C(OC(=O)C=CC=1N=CN(C)C=1)CC(C(=CCC1C(C)C)C)C1C=C2COC1OCC(O)C(O)C1OC(C)=O XOPYFXBZMVTEJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 229950000549 elliptinium acetate Drugs 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 210000002308 embryonic cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 229940073621 enbrel Drugs 0.000 description 1
- 230000002357 endometrial effect Effects 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 208000037902 enteropathy Diseases 0.000 description 1
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 description 1
- 230000006862 enzymatic digestion Effects 0.000 description 1
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 1
- 229950002973 epitiostanol Drugs 0.000 description 1
- 229930013356 epothilone Natural products 0.000 description 1
- 150000003883 epothilone derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N erythro-5-hydroxy-L-lysine Chemical compound NC[C@H](O)CC[C@H](N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 1
- 235000020774 essential nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 229960001842 estramustine Drugs 0.000 description 1
- FRPJXPJMRWBBIH-RBRWEJTLSA-N estramustine Chemical compound ClCCN(CCCl)C(=O)OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 FRPJXPJMRWBBIH-RBRWEJTLSA-N 0.000 description 1
- 239000000328 estrogen antagonist Substances 0.000 description 1
- 229960000403 etanercept Drugs 0.000 description 1
- 238000012869 ethanol precipitation Methods 0.000 description 1
- QSRLNKCNOLVZIR-KRWDZBQOSA-N ethyl (2s)-2-[[2-[4-[bis(2-chloroethyl)amino]phenyl]acetyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoate Chemical compound CCOC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 QSRLNKCNOLVZIR-KRWDZBQOSA-N 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol Natural products OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005237 etoglucid Drugs 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 208000012997 experimental autoimmune encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 230000034725 extrinsic apoptotic signaling pathway Effects 0.000 description 1
- 208000024711 extrinsic asthma Diseases 0.000 description 1
- 229940043168 fareston Drugs 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 229940126864 fibroblast growth factor Drugs 0.000 description 1
- 230000003176 fibrotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000010408 film Substances 0.000 description 1
- 229960000390 fludarabine Drugs 0.000 description 1
- GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N fludarabine phosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC(F)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 229960002074 flutamide Drugs 0.000 description 1
- MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N flutamide Chemical compound CC(C)C(=O)NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C(C(F)(F)F)=C1 MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000002224 folic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000008191 folinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011672 folinic acid Substances 0.000 description 1
- VVIAGPKUTFNRDU-ABLWVSNPSA-N folinic acid Chemical compound C1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2N(C=O)C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 VVIAGPKUTFNRDU-ABLWVSNPSA-N 0.000 description 1
- 229960004783 fotemustine Drugs 0.000 description 1
- YAKWPXVTIGTRJH-UHFFFAOYSA-N fotemustine Chemical compound CCOP(=O)(OCC)C(C)NC(=O)N(CCCl)N=O YAKWPXVTIGTRJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 229940044658 gallium nitrate Drugs 0.000 description 1
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- BRZYSWJRSDMWLG-CAXSIQPQSA-N geneticin Natural products O1C[C@@](O)(C)[C@H](NC)[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C(C)O)O2)N)[C@@H](N)C[C@H]1N BRZYSWJRSDMWLG-CAXSIQPQSA-N 0.000 description 1
- 102000018146 globin Human genes 0.000 description 1
- 108060003196 globin Proteins 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 235000021312 gluten Nutrition 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000002414 glycolytic effect Effects 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 239000002622 gonadotropin Substances 0.000 description 1
- 229960002913 goserelin Drugs 0.000 description 1
- 201000007192 granulomatous hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000035474 group of disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037824 growth disorder Diseases 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- 201000001505 hemoglobinuria Diseases 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 230000001553 hepatotropic effect Effects 0.000 description 1
- 229940022353 herceptin Drugs 0.000 description 1
- UUVWYPNAQBNQJQ-UHFFFAOYSA-N hexamethylmelamine Chemical compound CN(C)C1=NC(N(C)C)=NC(N(C)C)=N1 UUVWYPNAQBNQJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011577 humanized mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001600 hydrophobic polymer Polymers 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002349 hydroxyamino group Chemical group [H]ON([H])[*] 0.000 description 1
- 229960001330 hydroxycarbamide Drugs 0.000 description 1
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012872 hydroxylapatite chromatography Methods 0.000 description 1
- 229920003063 hydroxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229940031574 hydroxymethyl cellulose Drugs 0.000 description 1
- 230000000642 iatrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940015872 ibandronate Drugs 0.000 description 1
- 229960000908 idarubicin Drugs 0.000 description 1
- 238000010191 image analysis Methods 0.000 description 1
- 230000014726 immortalization of host cell Effects 0.000 description 1
- 230000001571 immunoadjuvant effect Effects 0.000 description 1
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 1
- 239000000568 immunological adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000002637 immunotoxin Effects 0.000 description 1
- 229940051026 immunotoxin Drugs 0.000 description 1
- 239000002596 immunotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000608 immunotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 230000008676 import Effects 0.000 description 1
- DBIGHPPNXATHOF-UHFFFAOYSA-N improsulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCNCCCOS(C)(=O)=O DBIGHPPNXATHOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950008097 improsulfan Drugs 0.000 description 1
- 238000007901 in situ hybridization Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000000893 inhibin Substances 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 1
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 1
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 201000006334 interstitial nephritis Diseases 0.000 description 1
- 208000028774 intestinal disease Diseases 0.000 description 1
- 230000008069 intimal proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000008863 intramolecular interaction Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 239000001573 invertase Substances 0.000 description 1
- 235000011073 invertase Nutrition 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 229910052741 iridium Inorganic materials 0.000 description 1
- GKOZUEZYRPOHIO-UHFFFAOYSA-N iridium atom Chemical compound [Ir] GKOZUEZYRPOHIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- YWXYYJSYQOXTPL-SLPGGIOYSA-N isosorbide mononitrate Chemical compound [O-][N+](=O)O[C@@H]1CO[C@@H]2[C@@H](O)CO[C@@H]21 YWXYYJSYQOXTPL-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000366 juvenile effect Effects 0.000 description 1
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 1
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 1
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 1
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 1
- 108010011519 keratan-sulfate endo-1,4-beta-galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 208000022013 kidney Wilms tumor Diseases 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 238000011813 knockout mouse model Methods 0.000 description 1
- BRHPBVXVOVMTIQ-ZLELNMGESA-N l-leucine l-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O.CC(C)C[C@H](N)C(O)=O BRHPBVXVOVMTIQ-ZLELNMGESA-N 0.000 description 1
- 210000004561 lacrimal apparatus Anatomy 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 1
- 229940115286 lentinan Drugs 0.000 description 1
- 229960001691 leucovorin Drugs 0.000 description 1
- GFIJNRVAKGFPGQ-LIJARHBVSA-N leuprolide Chemical compound CCNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 GFIJNRVAKGFPGQ-LIJARHBVSA-N 0.000 description 1
- 229960004338 leuprorelin Drugs 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 229960002247 lomustine Drugs 0.000 description 1
- 229960003538 lonidamine Drugs 0.000 description 1
- WDRYRZXSPDWGEB-UHFFFAOYSA-N lonidamine Chemical compound C12=CC=CC=C2C(C(=O)O)=NN1CC1=CC=C(Cl)C=C1Cl WDRYRZXSPDWGEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150074251 lpp gene Proteins 0.000 description 1
- 201000005249 lung adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000005265 lung cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000005243 lung squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000037841 lung tumor Diseases 0.000 description 1
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 208000006116 lymphomatoid granulomatosis Diseases 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004137 magnesium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000157 magnesium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960002261 magnesium phosphate Drugs 0.000 description 1
- 235000010994 magnesium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- MQXVYODZCMMZEM-ZYUZMQFOSA-N mannomustine Chemical compound ClCCNC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CNCCCl MQXVYODZCMMZEM-ZYUZMQFOSA-N 0.000 description 1
- 229950008612 mannomustine Drugs 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 1
- 231100000682 maximum tolerated dose Toxicity 0.000 description 1
- WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N maytansine Chemical compound CO[C@@H]([C@@]1(O)C[C@](OC(=O)N1)([C@H]([C@@H]1O[C@@]1(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](C)N(C)C(C)=O)CC(=O)N1C)C)[H])\C=C\C=C(C)\CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 208000037843 metastatic solid tumor Diseases 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- VJRAUFKOOPNFIQ-TVEKBUMESA-N methyl (1r,2r,4s)-4-[(2r,4s,5s,6s)-5-[(2s,4s,5s,6s)-5-[(2s,4s,5s,6s)-4,5-dihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-4-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-4-(dimethylamino)-6-methyloxan-2-yl]oxy-2-ethyl-2,5,7,10-tetrahydroxy-6,11-dioxo-3,4-dihydro-1h-tetracene-1-carboxylat Chemical compound O([C@H]1[C@@H](O)C[C@@H](O[C@H]1C)O[C@H]1[C@H](C[C@@H](O[C@H]1C)O[C@H]1C[C@]([C@@H](C2=CC=3C(=O)C4=C(O)C=CC(O)=C4C(=O)C=3C(O)=C21)C(=O)OC)(O)CC)N(C)C)[C@H]1C[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O1 VJRAUFKOOPNFIQ-TVEKBUMESA-N 0.000 description 1
- DFTAZNAEBRBBKP-UHFFFAOYSA-N methyl 4-sulfanylbutanimidate Chemical compound COC(=N)CCCS DFTAZNAEBRBBKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002025 microglial effect Effects 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 239000011785 micronutrient Substances 0.000 description 1
- 235000013369 micronutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 230000003228 microsomal effect Effects 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 210000000110 microvilli Anatomy 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 229960005485 mitobronitol Drugs 0.000 description 1
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- 229960003539 mitoguazone Drugs 0.000 description 1
- MXWHMTNPTTVWDM-NXOFHUPFSA-N mitoguazone Chemical compound NC(N)=N\N=C(/C)\C=N\N=C(N)N MXWHMTNPTTVWDM-NXOFHUPFSA-N 0.000 description 1
- VFKZTMPDYBFSTM-GUCUJZIJSA-N mitolactol Chemical compound BrC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CBr VFKZTMPDYBFSTM-GUCUJZIJSA-N 0.000 description 1
- 229950010913 mitolactol Drugs 0.000 description 1
- 229960000350 mitotane Drugs 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- FOYWNSCCNCUEPU-UHFFFAOYSA-N mopidamol Chemical compound C12=NC(N(CCO)CCO)=NC=C2N=C(N(CCO)CCO)N=C1N1CCCCC1 FOYWNSCCNCUEPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950010718 mopidamol Drugs 0.000 description 1
- 210000002346 musculoskeletal system Anatomy 0.000 description 1
- 210000005012 myelin Anatomy 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- GNOLWGAJQVLBSM-UHFFFAOYSA-N n,n,5,7-tetramethyl-1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-1-amine Chemical compound C1=C(C)C=C2C(N(C)C)CCCC2=C1C GNOLWGAJQVLBSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- 239000002088 nanocapsule Substances 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 230000031942 natural killer cell mediated cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002956 necrotizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000031990 negative regulation of inflammatory response Effects 0.000 description 1
- QZGIWPZCWHMVQL-UIYAJPBUSA-N neocarzinostatin chromophore Chemical compound O1[C@H](C)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](NC)[C@H]1O[C@@H]1C/2=C/C#C[C@H]3O[C@@]3([C@@H]3OC(=O)OC3)C#CC\2=C[C@H]1OC(=O)C1=C(O)C=CC2=C(C)C=C(OC)C=C12 QZGIWPZCWHMVQL-UIYAJPBUSA-N 0.000 description 1
- 230000009826 neoplastic cell growth Effects 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 208000004235 neutropenia Diseases 0.000 description 1
- 229960002653 nilutamide Drugs 0.000 description 1
- XWXYUMMDTVBTOU-UHFFFAOYSA-N nilutamide Chemical compound O=C1C(C)(C)NC(=O)N1C1=CC=C([N+]([O-])=O)C(C(F)(F)F)=C1 XWXYUMMDTVBTOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001420 nimustine Drugs 0.000 description 1
- VFEDRRNHLBGPNN-UHFFFAOYSA-N nimustine Chemical compound CC1=NC=C(CNC(=O)N(CCCl)N=O)C(N)=N1 VFEDRRNHLBGPNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YMVWGSQGCWCDGW-UHFFFAOYSA-N nitracrine Chemical compound C1=CC([N+]([O-])=O)=C2C(NCCCN(C)C)=C(C=CC=C3)C3=NC2=C1 YMVWGSQGCWCDGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950008607 nitracrine Drugs 0.000 description 1
- 230000000422 nocturnal effect Effects 0.000 description 1
- KGTDRFCXGRULNK-JYOBTZKQSA-N nogalamycin Chemical compound CO[C@@H]1[C@@](OC)(C)[C@@H](OC)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=C(O)C=C4[C@@]5(C)O[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]5O)N(C)C)O)OC4=C3C3=O)=C3C=C2[C@@H](C(=O)OC)[C@@](C)(O)C1 KGTDRFCXGRULNK-JYOBTZKQSA-N 0.000 description 1
- 229950009266 nogalamycin Drugs 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001216 nucleic acid method Methods 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 229950005848 olivomycin Drugs 0.000 description 1
- CZDBNBLGZNWKMC-MWQNXGTOSA-N olivomycin Chemical compound O([C@@H]1C[C@@H](O[C@H](C)[C@@H]1O)OC=1C=C2C=C3C[C@H]([C@@H](C(=O)C3=C(O)C2=C(O)C=1)O[C@H]1O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](OC2O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](O)C2)C1)[C@H](OC)C(=O)[C@@H](O)[C@@H](C)O)[C@H]1C[C@H](O)[C@H](OC)[C@H](C)O1 CZDBNBLGZNWKMC-MWQNXGTOSA-N 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 230000002138 osteoinductive effect Effects 0.000 description 1
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- QUANRIQJNFHVEU-UHFFFAOYSA-N oxirane;propane-1,2,3-triol Chemical compound C1CO1.OCC(O)CO QUANRIQJNFHVEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006213 oxygenation reaction Methods 0.000 description 1
- 108700025694 p53 Genes Proteins 0.000 description 1
- 238000002559 palpation Methods 0.000 description 1
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 1
- 238000004091 panning Methods 0.000 description 1
- 239000000199 parathyroid hormone Substances 0.000 description 1
- 229960001319 parathyroid hormone Drugs 0.000 description 1
- 201000003045 paroxysmal nocturnal hemoglobinuria Diseases 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000008756 pathogenetic mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 235000019369 penicillin G sodium Nutrition 0.000 description 1
- 229940056360 penicillin g Drugs 0.000 description 1
- 229950009506 penicillinase Drugs 0.000 description 1
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 1
- 229960002340 pentostatin Drugs 0.000 description 1
- FPVKHBSQESCIEP-JQCXWYLXSA-N pentostatin Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(N=CNC[C@H]2O)=C2N=C1 FPVKHBSQESCIEP-JQCXWYLXSA-N 0.000 description 1
- QIMGFXOHTOXMQP-GFAGFCTOSA-N peplomycin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCCN[C@@H](C)C=1C=CC=CC=1)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1NC=NC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C QIMGFXOHTOXMQP-GFAGFCTOSA-N 0.000 description 1
- 229950003180 peplomycin Drugs 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 125000001151 peptidyl group Chemical group 0.000 description 1
- 208000008494 pericarditis Diseases 0.000 description 1
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 230000008855 peristalsis Effects 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150009573 phoA gene Proteins 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 229960000952 pipobroman Drugs 0.000 description 1
- NJBFOOCLYDNZJN-UHFFFAOYSA-N pipobroman Chemical compound BrCCC(=O)N1CCN(C(=O)CCBr)CC1 NJBFOOCLYDNZJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NUKCGLDCWQXYOQ-UHFFFAOYSA-N piposulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCC(=O)N1CCN(C(=O)CCOS(C)(=O)=O)CC1 NUKCGLDCWQXYOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950001100 piposulfan Drugs 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003057 platinum Chemical class 0.000 description 1
- 208000008423 pleurisy Diseases 0.000 description 1
- 229920000233 poly(alkylene oxides) Polymers 0.000 description 1
- 108010054442 polyalanine Proteins 0.000 description 1
- 201000006292 polyarteritis nodosa Diseases 0.000 description 1
- 108010064470 polyaspartate Proteins 0.000 description 1
- 239000008389 polyethoxylated castor oil Substances 0.000 description 1
- 229920002704 polyhistidine Polymers 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 description 1
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 description 1
- 229940124606 potential therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 229960004694 prednimustine Drugs 0.000 description 1
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 208000022256 primary systemic amyloidosis Diseases 0.000 description 1
- CPTBDICYNRMXFX-UHFFFAOYSA-N procarbazine Chemical compound CNNCC1=CC=C(C(=O)NC(C)C)C=C1 CPTBDICYNRMXFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000624 procarbazine Drugs 0.000 description 1
- 229940097325 prolactin Drugs 0.000 description 1
- 108010087851 prorelaxin Proteins 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 201000001474 proteinuria Diseases 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 1
- WOLQREOUPKZMEX-UHFFFAOYSA-N pteroyltriglutamic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(=O)NC(CCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C(O)=O)C(O)=O)C=C1 WOLQREOUPKZMEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 229960004622 raloxifene Drugs 0.000 description 1
- GZUITABIAKMVPG-UHFFFAOYSA-N raloxifene Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=C(C(=O)C=2C=CC(OCCN3CCCCC3)=CC=2)C2=CC=C(O)C=C2S1 GZUITABIAKMVPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002185 ranimustine Drugs 0.000 description 1
- 102000016914 ras Proteins Human genes 0.000 description 1
- 238000011552 rat model Methods 0.000 description 1
- BMKDZUISNHGIBY-UHFFFAOYSA-N razoxane Chemical compound C1C(=O)NC(=O)CN1C(C)CN1CC(=O)NC(=O)C1 BMKDZUISNHGIBY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000460 razoxane Drugs 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000022983 regulation of cell cycle Effects 0.000 description 1
- 201000003233 renal Wilms' tumor Diseases 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 229930002330 retinoic acid Natural products 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- OWPCHSCAPHNHAV-LMONGJCWSA-N rhizoxin Chemical compound C/C([C@H](OC)[C@@H](C)[C@@H]1C[C@H](O)[C@]2(C)O[C@@H]2/C=C/[C@@H](C)[C@]2([H])OC(=O)C[C@@](C2)(C[C@@H]2O[C@H]2C(=O)O1)[H])=C\C=C\C(\C)=C\C1=COC(C)=N1 OWPCHSCAPHNHAV-LMONGJCWSA-N 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MBABCNBNDNGODA-WPZDJQSSSA-N rolliniastatin 1 Natural products O1[C@@H]([C@@H](O)CCCCCCCCCC)CC[C@H]1[C@H]1O[C@@H]([C@H](O)CCCCCCCCCC[C@@H](O)CC=2C(O[C@@H](C)C=2)=O)CC1 MBABCNBNDNGODA-WPZDJQSSSA-N 0.000 description 1
- IMUQLZLGWJSVMV-UOBFQKKOSA-N roridin A Natural products CC(O)C1OCCC(C)C(O)C(=O)OCC2CC(=CC3OC4CC(OC(=O)C=C/C=C/1)C(C)(C23)C45CO5)C IMUQLZLGWJSVMV-UOBFQKKOSA-N 0.000 description 1
- 102220053806 rs121918461 Human genes 0.000 description 1
- 102220282491 rs1555601010 Human genes 0.000 description 1
- 102220244279 rs373241693 Human genes 0.000 description 1
- 102220098908 rs774768866 Human genes 0.000 description 1
- 102220280441 rs776730435 Human genes 0.000 description 1
- 102220072507 rs794729056 Human genes 0.000 description 1
- VHXNKPBCCMUMSW-FQEVSTJZSA-N rubitecan Chemical compound C1=CC([N+]([O-])=O)=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 VHXNKPBCCMUMSW-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 1
- 210000003079 salivary gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000037390 scarring Effects 0.000 description 1
- 230000011218 segmentation Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000001235 sensitizing effect Effects 0.000 description 1
- 201000005572 sensory peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 210000000717 sertoli cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 125000005629 sialic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 102000035025 signaling receptors Human genes 0.000 description 1
- 108091005475 signaling receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 206010040882 skin lesion Diseases 0.000 description 1
- 231100000444 skin lesion Toxicity 0.000 description 1
- 230000033398 smooth muscle atrophy Effects 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J sodium diphosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 229940048086 sodium pyrophosphate Drugs 0.000 description 1
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 229940074404 sodium succinate Drugs 0.000 description 1
- ZDQYSKICYIVCPN-UHFFFAOYSA-L sodium succinate (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)CCC([O-])=O ZDQYSKICYIVCPN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 229950006315 spirogermanium Drugs 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- ICXJVZHDZFXYQC-UHFFFAOYSA-N spongistatin 1 Natural products OC1C(O2)(O)CC(O)C(C)C2CCCC=CC(O2)CC(O)CC2(O2)CC(OC)CC2CC(=O)C(C)C(OC(C)=O)C(C)C(=C)CC(O2)CC(C)(O)CC2(O2)CC(OC(C)=O)CC2CC(=O)OC2C(O)C(CC(=C)CC(O)C=CC(Cl)=C)OC1C2C ICXJVZHDZFXYQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 230000036435 stunted growth Effects 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 210000004304 subcutaneous tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 108060007951 sulfatase Proteins 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000008093 supporting effect Effects 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 201000004595 synovitis Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229940063683 taxotere Drugs 0.000 description 1
- 206010043207 temporal arteritis Diseases 0.000 description 1
- NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N teniposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@@H](OC[C@H]4O3)C=3SC=CC=3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N 0.000 description 1
- 229960001278 teniposide Drugs 0.000 description 1
- 208000001608 teratocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000003120 testicular cancer Diseases 0.000 description 1
- 229960005353 testolactone Drugs 0.000 description 1
- BPEWUONYVDABNZ-DZBHQSCQSA-N testolactone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(OC(=O)CC4)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 BPEWUONYVDABNZ-DZBHQSCQSA-N 0.000 description 1
- 235000019818 tetrasodium diphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001577 tetrasodium phosphonato phosphate Substances 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000006016 thyroid dysfunction Effects 0.000 description 1
- 229940034208 thyroxine Drugs 0.000 description 1
- XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N thyroxine-binding globulin Natural products IC1=CC(CC([NH3+])C([O-])=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YFTWHEBLORWGNI-UHFFFAOYSA-N tiamiprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC(N)=NC2=C1NC=N2 YFTWHEBLORWGNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950011457 tiamiprine Drugs 0.000 description 1
- 229940044693 topoisomerase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- UCFGDBYHRUNTLO-QHCPKHFHSA-N topotecan Chemical class C1=C(O)C(CN(C)C)=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 UCFGDBYHRUNTLO-QHCPKHFHSA-N 0.000 description 1
- XFCLJVABOIYOMF-QPLCGJKRSA-N toremifene Chemical compound C1=CC(OCCN(C)C)=CC=C1C(\C=1C=CC=CC=1)=C(\CCCl)C1=CC=CC=C1 XFCLJVABOIYOMF-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 1
- 229960005026 toremifene Drugs 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000010474 transient expression Effects 0.000 description 1
- 238000003146 transient transfection Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 229950001353 tretamine Drugs 0.000 description 1
- IUCJMVBFZDHPDX-UHFFFAOYSA-N tretamine Chemical compound C1CN1C1=NC(N2CC2)=NC(N2CC2)=N1 IUCJMVBFZDHPDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001727 tretinoin Drugs 0.000 description 1
- 229960004560 triaziquone Drugs 0.000 description 1
- PXSOHRWMIRDKMP-UHFFFAOYSA-N triaziquone Chemical compound O=C1C(N2CC2)=C(N2CC2)C(=O)C=C1N1CC1 PXSOHRWMIRDKMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 229960001670 trilostane Drugs 0.000 description 1
- KVJXBPDAXMEYOA-CXANFOAXSA-N trilostane Chemical compound OC1=C(C#N)C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@@]32O[C@@H]31 KVJXBPDAXMEYOA-CXANFOAXSA-N 0.000 description 1
- 229950000212 trioxifene Drugs 0.000 description 1
- 229960000875 trofosfamide Drugs 0.000 description 1
- UMKFEPPTGMDVMI-UHFFFAOYSA-N trofosfamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)OCCCN1CCCl UMKFEPPTGMDVMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 description 1
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 108010087967 type I signal peptidase Proteins 0.000 description 1
- 230000005951 type IV hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 208000027930 type IV hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 229960001055 uracil mustard Drugs 0.000 description 1
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 description 1
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 1
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000012991 uterine carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229910052720 vanadium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 231100000216 vascular lesion Toxicity 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 229960004355 vindesine Drugs 0.000 description 1
- UGGWPQSBPIFKDZ-KOTLKJBCSA-N vindesine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(N)=O)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1N=C1[C]2C=CC=C1 UGGWPQSBPIFKDZ-KOTLKJBCSA-N 0.000 description 1
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 1
- 201000005102 vulva cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 229940053867 xeloda Drugs 0.000 description 1
- 238000012447 xenograft mouse model Methods 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 230000004572 zinc-binding Effects 0.000 description 1
- 229950009268 zinostatin Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2878—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30, CD40, CD95
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии. Описано антитело к DR5 или его антигенсвязывающий фрагмент, включающее тяжелую и легкую цепи, где указанное антитело содержит по меньшей мере одну замену в последовательности полноразмерного антитела 16Е2. Представлена фармацевтическая композиция для лечения рака, содержащая описанное антитело. Предложен способ индукции апоптоза, включающий в себя воздействие на злокачественные клетки млекопитающих описанного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента. Предложен способ лечения злокачественной опухоли, включающий в себя введение млекопитающему эффективного количества описанного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента. Изобретение расширяет арсенал средств, направленных против рака. 11 н. и 34 з.п. ф-лы, 37 ил., 13 табл., 10 пр.
Description
ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Изобретение в основном относится к антителам к DR5, включая агонистические антитела, и к способам применения таких антител к DR5.
ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В данной области выявлены различные лиганды и рецепторы, принадлежащие к суперсемейству фактора некроза опухоли (TNF). В число таких лигандов включены фактор некроза опухоли-альфа ("TNF-альфа"), фактор некроза опухоли-бета ("TNF-бета или "лимфотоксин-альфа"), лимфотоксин-бета ("LT-бета"), лиганд CD30, лиганд CD27, лиганд CD40, лиганд OX-40, лиганд 4-1BB, LIGHT, лиганд Apo-1 (также обозначаемый как лиганд Fas или лиганд CD95), лиганд Apo-2 (также обозначаемый как Apo2L или TRAIL), лиганд Apo-3 (также обозначаемый как TWEAK), APRIL, лиганд OPG (также обозначаемый как лиганд RANK, ODF или TRANCE) и TALL-1 (также обозначаемый как BlyS, BAFF или THANK) (см., например, Ashkenazi, Nature Review. 2:420-430 (2002); Ashkenazi and Dixit, Science, 281:1305-1308 (1998); Ashkenazi and Dixit, Curr. Opin. Cell Biol., 11:255-260 (2000); Golstein, Curr. Biol., 7:750-753 (1997) Wallach, Cytokine Reference, Academic Press, 2000, pp.377-411; Locksley et al. Cell, 104:487-501 (2001); Grass and Dower, Blood, 85:3378-3404 (1995); Schmid et al., Proc. Natl. Acad. Sci., 83:1881 (1986); Dealtry et al., Eur. J. Immunol., 17:689 (1987); Pitti et al., J. Biol. Chem., 271:12687-12690 (1996); Wiley et al., Immunity, 3:673-682 (1995); Browning et al., Cell, 72:847-856 (1993); Arrnitage et al. Nature, 357:80-82 (1992), WO 97/01633, опубликованную 16 января 1997 года; WO 97/25428, опубликованную 17 июля 1997 года; Marsters et al., Curr. Biol., 8:525-528 (1998); Chicheportiche et al., Biol. Chem., 272:32401-32410 (1997); Hahne et al., J. Exp. Med., 188:1185-1190 (1998); WO 98/28426, опубликованную 2 июля 1998 года; WO 98/46751, опубликованную 22 октября 1998 года; WO 98/18921, опубликованную 7 мая 1998 года; Moore et al., Science, 285:260-263 (1999); Shu et al., J. Leukocyte Biol., 65:680 (1999); Schneider et al., J. Exp. Med., 189:1747-1756 (1999); Mukhopadhyay et al., J. Biol. Chem., 274:15978-15981 (1999)).
Как правило, индукцию различных видов клеточного ответа, опосредованного такими лигандами семейства TNF, вызывает их связывание со специфичными клеточными рецепторами. Некоторые, но не все, лиганды семейства TNF связываются с "рецепторами смерти" на поверхности клетки и индуцируют посредством их различные виды биологической активности, активируя каспазы или ферменты, приводящие к гибели клетки или осуществляющие каскад реакций апоптоза (Salvesen et al., Cell, 91:443-446 (1997)). В число выявленных к настоящему времени представителей суперсемейства рецепторов TNF входят TNFR1, TNFR2, TACI, GITR, CD27, OX-40, CD30, CD40, HVEM, Fas (также обозначаемый как Apo-1 или CD95), DR4 (также обозначаемый как TRAIL-R1), DR5 (также обозначаемый как Apo-2 или TRAIL-R2), DcR1, DcR2, остеопротегерин (OPG), RANK и Apo-3 (также обозначаемый как DR3 или TRAMP) (см., например, Ashkenazi, Nature Reviews, 2:420-430 (2002); Ashkenazi and Dixit, Science, 281:1305-1308 (1998); Ashkenazi and Dixit, Curr. Opin. Cell Biol., 11:255-260 (2000); Golstein, Curr. Biol., 7:750-753 (1997); Wallach, Cytokine Reference. Academic Press, 2000, pp.377-411; Locksley et al. Cell, 104:487-501 (2001); Grass and Dower, Blood, 85:3378-3404 (1995); Hohman et al., J. Biol. Chem., 264:14927-14934 (1989); Brockhaus et al., Proc. Natl. Acad. Sci., 87:3127-3131 (1990); EP 417563, опубликованную 20 марта 1991 года; Loetscher et al., Cell, 61:351 (1990); Schall et al., Cell, 61:361 (1990); Smith et al., Science, 248:1019-1023 (1990); Lewis et al., Proc. Natl. Acad. Sci., 88:2830-2834 (1991); Goodwin et al., Mol. Cell. Biol., 11:3020-3026 (1991); Stamenkovic et al., EMBO J., 8:1403-1410 (1989); Mallett et al., EMBO J., 9:1063-1068 (1990); Anderson et al., Nature, 390:175-179 (1997); Chicheportiche et al., J. Biol. Chem., 272:32401-32410 (1997); Pan et al., Science, 276:111-113 (1997); Pan et al., Science, 277:815-818 (1997); Sheridan et al., Science, 277:818-821 (1997); Degli-Esposti et al., J. Exp. Med., 186:1165-1170 (1997); Marsters et al. Curr. Biol., 7:1003-1006 (1997); Tsuda et al., BBRC, 234:137-142 (1997); Nocentini et al., Proc. Natl. Acad. Sci., 94:6216-6221 (1997); vonBulow et al., Science, 278:138-141 (1997)).
Большинство этих представителей семейства рецепторов TNF обладает обычной структурой рецепторов клеточной поверхности, включая внеклеточную, трансмембранную и внутриклеточную области, тогда как у других рецепторов, встречающихся в природе в виде растворимых белков, отсутствуют трансмембранный и внутриклеточный домены. Внеклеточный участок типичных TNFR, начиная с NH2-конца, содержит повторяющийся характерный участок аминокислотной последовательности из множества богатых цистеином доменов (CRD).
Несколько лет назад как представитель семейства цитокинов TNF был идентифицирован лиганд, обозначаемый как Apo-2L или TRAIL (см., например, Wiley et al., Immunity, 3:673-682 (1995); Pitti et al., J. Biol. Chem., 271:12697-12690 (1996); WO 97/01633; WO 97/25428; патент США №5763223, выданный 9 июня 1998 года; патент США №6284236, выданный 4 сентября 2001 года). Полноразмерная природная последовательность полипептида Apo2L/TRAIL человека представляет собой трансмембранный белок II типа, длиной в 281 аминокислоту. Некоторые клетки могут продуцировать природную растворимую форму полипептида посредством ферментативного отщепления внеклеточной области полипептида (Mariani et al., J. Cell. Biol., 137:221-229 (1997)). Кристаллографические исследования растворимых форм Apo2L/TRAIL выявили гомотримерную структуру, сходную со структурами TNF и других родственных белков (Hymowitz et al., Molec. Cell, 4:563-571 (1999); Cha et al., Immunity, 11:253-261 (1999); Mongkolsapaya et al., Nature Structural Biology, 6:1048 (1999); Hymowitz et al., Biochemistry, 39:633-644 (2000)). Однако было обнаружено, что в отличие от других представителей семейства TNF, Apo2L/TRAIL обладает уникальным структурным свойством в том, что три остатка цистеина (в положении 230 каждой субъединицы в гомотримере) вместе координируют атом цинка и что связывание цинка важно для стабильности и биологической активности тримера (Hymowitz et al., выше; Bodmer et al., J. Biol. Chem., 275:20632-20637 (2000)).
В литературе было описано, что Apo2L/TRAIL может играть роль в регуляции иммунной системы, в том числе при аутоиммунных заболеваниях, таких как ревматоидный артрит (см., например, Thomas et al., J. Immunol, 161:2195-2200 (1998); Johnsen et al., Cytokine, 11:664-672 (1999); Griffith et al., J. Exp. Med., 189:1343-1353 (1999); Song et al., J. Exp. Med., 191:1095-1103 (2000)).
Также было описано, что растворимые формы Apo2L/TRAIL индуцируют апоптоз во множестве раковых клеток, включая опухоли толстой кишки, легких, молочной железы, предстательной железы, мочевого пузыря, почек, яичников и головного мозга, а также меланому, лейкоз и множественную миелому (см., например, Wiley et al., выше; Pitti et al., выше; патент США № 6030945, выданный 29 февраля 2000 года; патент США № 6746668, выданный 8 июня 2004 года; Rieger et al., FEBS Letters, 427:124-128 (1998); Ashkenazi et al., J. Clin. Invest., 104:155-162 (1999); Walczak et al., Nature Med., 5:157-163 (1999); Keane et al., Cancer Research, 59:734-741 (1999); Mizutani et al., Clin. Cancer Res., 5:2605-2612 (1999); Gazitt, Leukemia, 13:1817-1824 (1999); Yu et al., Cancer Res., 60:2384-2389 (2000); Chinnaiyan et al., Proc. Natl. Acad. Sci., 97:1754-1759 (2000)). Исследования на моделях опухолей на мышах in vivo позволили предположить, что Apo2L/TRAIL, отдельно или в сочетании с химиотерапией или лучевой терапией, может оказывать значительные противоопухолевые эффекты (см., например, Ashkenazi et al., выше; Walzcak et al., выше; Gliniak et al., Cancer Res., 59:6153-6158 (1999); Chinnaiyan et al., выше; Roth et al., Biochem. Biophys. Res. Comm., 265:1999 (1999); заявка PCT США/00/15512; заявка PCT США/01/23691). В отличие от многих типов злокачественных клеток у большинства обычных типов клеток человека наблюдают устойчивость к индукции апоптоза определенными рекомбинантными формами Apo2L/TRAIL (Ashkenazi et al., выше; Walzcak et al., выше). Jo et al. описывали, что меченная полигистидином растворимая форма Apo2L/TRAIL индуцировала апоптоз in vitro в нормальных выделенных гепатоцитах человека, но не в не принадлежащих человеку гепатоцитах (Jo et al., Nature Med., 6:564-567 (2000); см. также Nagata, Nature Med., 6:502-503 (2000)). Полагают, что определенные препараты рекомбинантного Apo2L/TRAIL могут различаться по биохимическим свойствам и биологической активности в отношении патологических клеток по сравнению с нормальными, в зависимости, например, от наличия или отсутствия молекулы-метки, содержания цинка и % содержания тримера (см., Lawrence et al., Nature Med., Letter to the Editor, 7:383-385 (2001); Qin et al., Nature Med., Letter to the Editor, 7:385-386 (2001)).
Обнаружено, что Apo2L/TRAIL связывает, по меньшей мере, пять различных рецепторов. По меньшей мере, два из рецепторов, связывающихся с Apo2L/TRAIL, содержат функциональный цитоплазматический домен смерти. Один такой рецептор был обозначен как "DR4" (а альтернативно как TR4 или TRAIL-R1) (Pan et al., Science, 276:111-113 (1997); см. также WO 98/32856, опубликованную 30 июля 1998 года; WO 99/37684, опубликованную 29 июля 1999 года; WO 00/773349, опубликованную 7 декабря 2000 года; патент США №6433147, выданный 13 августа 2002 года; патент США №6461823, выданный 8 октября 2002 года, и патент США №6342383, выданный 29 января 2002 года).
Другой такой рецептор для Apo2L/TRAIL был обозначен как DR5 (также он был альтернативно обозначен как Apo-2; TRAIL-R или TRAIL-R2, TR6, Tango-63, hAPO8, TRICK2 или KILLER) (см., например, Sheridan et al., Science, 277:818-821 (1997), Pan et al., Science, 277:815-818 (1997), WO 98/51793, опубликованную 19 ноября 1998 года; WO 98/41629, опубликованную 24 сентября 1998 года; Screaton et al., Curr. Biol., 7:693-696 (1997); Walczak et al., EMBO J., 16:5386-5387 (1997); Wu et al., Nature Genetics, 17:141-143 (1997); WO 98/35986, опубликованную 20 августа 1998 года; EP870827, опубликованную 14 октября 1998 года; WO 98/46643, опубликованную 22 октября 1998 года; WO 99/02653, опубликованную 21 января 1999 года; WO 99/09165, опубликованную 25 февраля 1999 года; WO 99/11791, опубликованную 11 марта 1999 года; патент США №2002/0072091, выданный 13 августа 2002 года; патент США №2002/0098550, выданный 7 декабря 2001 года; патент США №6313269, выданный 6 декабря 2001 года; патент США №2001/0010924, выданный 2 августа 2001 года; патент США №2003/01255540, выданный 3 июля 2003 года; патент США №2002/0160446, выданный 31 октября 2002 года; патент США №2002/0048785, выданный 25 апреля 2002 года; патент США №6342369, выданный в феврале 2002 года; патент США №6569642, выданный 27 мая 2003 года; патент США №6072047, выданный 6 июня 2000 года; патент США №6642358, выданный 4 ноября 2003 года; патент IS 6743625, выданный 1 июня 2004 года). Описано, что, подобно DR4, DR5 содержит три богатых цистеином домена в своей внеклеточной части и один цитоплазматический домен смерти и способен передавать сигнал апоптоза при связывании лиганда (или при связывании молекулы, такой как антитело-агонист, воспроизводящей активность лиганда). Кристаллическая структура комплекса, формируемого Apo-2L/TRAIL и DR5, описана в Hymowitz et al., Molecular Cell, 4:563-571 (1999).
При связывании лиганда DR4 и DR5 способны запускать апоптоз независимо от вовлечения и активации инициатора апоптоза, каспазы-8, посредством содержащей домен смерти вспомогательной молекулы, которую обозначают как FADD/Mort1 (Kischkel et al., Immunity, 12:611-620 (2000); Sprick et al., Immunity, 12:599-609 (2000); Bodmer et al., Nature Cell Biol., 2:241-243 (2000)). В частности, DR5 передает сигнал апоптоза через "внешний по отношению к клетке" путь, независимый от опухолевого супрессорного гена p53 (Ashkenazi and Dixit, Science 281:1305-8 (1998); Ashkenazi, Nat. Rev. Cancer 2:420-30 (2002)). Активация этого пути включает в себя формирование воздействия индуцирующего смерть сигнального комплекса (DISC) на цитоплазматический домен смерти активированного рецептора. Сначала адаптерная молекула FADD связывается с DR5 посредством гомофильного взаимодействия доменов смерти (Kischkel et al., выше, Sprick et al., выше, Bodmer et al., выше). Затем FADD привлекает инициирующие апоптоз протеазы каспазу-8 и каспазу-10, опосредуя их активацию посредством индуцированного сближения. Каспаза-9 и каспаза-10 претерпевают самопроцессинг с высвобождением растворимых активных субъединиц каспаз в цитоплазму, где они собираются и расщепляют эффекторные каспазы, такие как каспаза-3 и каспаза-7. Расщепление приводит к активации эффекторных каспаз, осуществляющих клеточную программу апоптоза (Thornberry and Lazebnik, Science 281:1312-6 (1998)).
Было описано, что Apo2L/TRAIL также связывает те рецепторы, которые обозначены как DcR1, DcR2 и OPG, как предполагают, функционирующие, в качестве ингибиторов, а не передатчиков сигнала (например, см., DcR1 (также обозначаемый как TRID, LIT или TRAIL-R3) (Pan et al., Science, 276:111-113 (1997); Sheridan et al., Science, 277:818-821 (1997); McFarlane et al., J. Biol. Chem., 272:25417-25420 (1997); Schneider et al., FEBS Letters, 416:329-334 (1997); Degli-Esposti et al., J. Exp. Med., 186:1165-1170 (1997) и Mongkolsapaya et al., J. Immunol., 160:3-6 (1998)); DcR2 (также называемый TRUNDD или TRAIL-R4) (Marsters et al., Curr. Biol., 7:1003-1006 (1997); Pan et al., FEBS Letters, 424:41-45 (1998); Degli-Esposti et al., Immunity, 7:813-820 (1997)) [Simonet et al., выше], а также OPG. В отличие от DR4 и DR5, рецепторы DcR1 и DcR2 не передают сигнал апоптоза.
В литературе были описаны определенные антитела, связывающиеся с рецепторами DR4 и/или DR5. Например, антитела к DR4, направленные к рецептору DR4 и обладающие агонистической или апоптотической активностью в определенных клетках млекопитающих, описаны, например, в WO 99/37684, опубликованной 29 июля 1999 года; WO 00/73349, опубликованной 12 июля 2000 года; WO 03/066661, опубликованной 14 августа 2003 года. См. также, например, Griffith et al., J. Immunol., 162:2597-2605 (1999); Chuntharapai et al., J. Immunol., 166:4891-4898 (2001); WO 02/097033, опубликованную 2 декабря 2002 года; WO 03/042367, опубликованную 22 мая 2003 года; WO 03/038043, опубликованную 8 мая 2003 года; WO 03/037913, опубликованную 8 мая 2003 года. Также были описаны некоторые антитела против DR5, например, см. WO 98/51793, опубликованную 8 ноября 1998 года; Griffith et al., J. Immunol., 162:2597-2605 (1999); Ichikawa et al., Nature Med., 7:954-960 (2001); Hylander et al., "An Antibody to DR5 (TRAIL-Receptor 2) Suppresses the Growth of Patient Derived Gastrointestinal Tumors Grown in SCID mice", Abstract, 2d International Congress on Monoclonal Antibodies in Cancers, Aug. 29-Sept. 1, 2002, Banff, Alberta, Canada; WO 03/038043, опубликованную 8 мая 2003 года; WO 03/037913, опубликованную 8 мая 2003 года. Кроме того, были описаны некоторые антитела, обладающие перекрестной реактивностью в отношении обоих рецепторов DR4 и DR5 (см., например, патент США №6252050, выданный 26 июня 2001 года).
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Изобретение относится к антителам к DR5, которые способны к специфическому связыванию с DR5 человека и/или способны к регуляции биологической активности, ассоциированной с DR5 и/или его лигандом(ами), в частности апоптоза, и, таким образом, пригодны для лечения различных заболеваний и патологических состояний, включая злокачественную опухоль или связанные с иммунной системой заболевания.
В одном из аспектов изобретение относится к антителу к DR5, несущему, по меньшей мере, одну мутацию в тяжелой и/или легкой цепи полноразмерного антитела 16E2 (SEQ ID NO: 11 и 13, соответственно), или его фрагменту, где антитело или фрагмент антитела демонстрирует, по меньшей мере, такую же аффинность к DR5 и/или проявляет, по меньшей мере, такую же биологическую активность и/или эффективность, как антитело 16E2. В конкретном варианте осуществления антитело или фрагмент антитела связываются по существу с тем же эпитопом, что и полноразмерное антитело 16E2. В другом варианте осуществления антитело к DR5 проявляет большую аффинность к DR5, чем полноразмерное антитело 16E2, и/или демонстрирует увеличенную биологическую активность и/или увеличенную эффективность по отношению к полноразмерному антителу 16E2. В еще одном варианте осуществления антитела и фрагменты антител к DR5 по настоящему изобретению демонстрируют, по меньшей мере, такую же аффинность к DR5 и/или проявляют, по меньшей мере, такую же биологическую активность и/или эффективность, как и антитело к DR5 с одной цепью Fc 16E2, описанное в WO 98/51793.
В одном из вариантов осуществления антитело к DR5 содержит тяжелую и/или легкую цепь, по меньшей мере, с одной заменой из перечисленных в любой из таблиц с 1 по 7 и 9-12 или их фрагмент.
В другом варианте осуществления антитело к DR5 несет одну или несколько мутаций в каркасной области вариабельного домена тяжелой цепи антитела 16E2.
В еще одном варианте осуществления антитело к DR5 несет мутацию в каркасной области, выбранную из группы, состоящей из Q6E, V11L, E12V, R13Q и K105Q.
В дополнительном варианте осуществления антитело к DR5 несет все мутации в каркасной области Q6E, V11L, E12V, R13Q и K105Q.
В еще одном дополнительном варианте осуществления антитело к DR5 несет, по меньшей мере, одну мутацию в тяжелой цепи (SEQ ID NO: 11) полноразмерного антитела 16E2 или его фрагмента.
В другом варианте осуществления антитело к DR5 несет, по меньшей мере, одну мутацию в аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 11 или ее фрагменте, выбранную из группы, состоящей из T28A, G33A, M34L, M34A, M34I, M34S, N53Q, N53Y и L102Y.
В другом варианте осуществления антитело к DR5 несет, по меньшей мере, одну из мутаций G99A и R100A в аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 11 или ее фрагменте.
В еще одном варианте осуществления антитело к DR5 в аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 11 или ее фрагменте несет набор мутаций, выбранный из группы, состоящей из (i) N53Q, L102Y; (ii) M34L, N53Q, L102Y; (iii) N53Y, L102Y; (iv) M34L, N53Y, L102Y; (v) G33A, N53Q, L102Y; (vi) M34L, N53Y, L102Y; (vii) G33A, N53Q, L102Y; (viii) G33A, N53Y, L102Y; (ix) T28A, N53Q, L102Y и (x) T28A, N53Y, L102Y.
В дополнительном варианте осуществления антитело к DR5 несет, по меньшей мере, одну мутацию в легкой цепи (SEQ ID NO: 13) полноразмерного антитела 16E2 или его фрагменте.
В конкретном варианте осуществления легкая цепь представляет собой лямбда-цепь.
В другом конкретном варианте осуществления мутация в легкой цепи находится в L1 CDR.
В дополнительном варианте осуществления мутация в легкой цепи в аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 13 выбрана из группы, состоящей из Q24A, Q24S, G25A, D26E, S27A, L28A, R29A, S30A, Y31A, Y31K, Y32H, A33G, S34A и S34Y.
В еще одном дополнительном варианте осуществления мутация в легкой цепи в аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 13 выбрана из группы, состоящей из (i) Q24S, D26E, Y31K, S34Y и (ii) D26E, Y31K.
В другом варианте осуществления мутация в легкой цепи находится в L2 CDR.
Например, таким образом, мутацию можно выбрать из группы, состоящей из G50A, G50K, G50S, K51D, N52A, N52S, N52L, N52Q, N53A, N53E, N53Q, N53S, P55A и S56A в аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 13.
В другом варианте осуществления антитело может нести набор мутаций, выбранных из группы, состоящей из (i) G50K, K52S, N53E; (ii) G50S, K51D, N52S, N53E; (ii) N52S, N53E и (iv) N52Q, N53S в аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 13.
В дополнительном варианте осуществления мутация в легкой цепи находится в L3 CDR.
В еще одном дополнительном варианте осуществления антитело несет, по меньшей мере, одну мутацию, выбранную из группы, состоящей из N89A, N89L, N89Q, R91A, S93A, N95aA, N95aT, N95aQ, H95bA, N95bY, V96A, V97A в SEQ ID NO: 13.
Альтернативно антитело к DR5 может нести набор мутаций, выбранных из группы, состоящей из (i) N89L, R91A, N95aT, H95bY и (ii) N95aT, H95bY в последовательности SEQ ID NO: 13.
В дополнительном варианте осуществления антитело к DR5 несет набор мутаций в легкой цепи, выбранный из группы, состоящей из (i) Q24S, G50K, K51D, H95bY; (ii) Q24S, K51A, D92S, S93Y и (iii) Q24S, K51A, R91A в аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 13, и может дополнительно нести набор мутаций в тяжелой цепи, выбранный из группы, состоящей из (i) M34L, N53Q, L102Y; (ii) M34L, N53Y, L102Y; (iii) G33A, N53Q, L102Y; (iv) G33A, N53Y, L102Y; (v) M34L, N53Q, L102Y; (vi) M34L, N53Y, L103Y; (vii) G33A, N53Q, L102Y; (viii) G33A, N53Y, L102Y и (ix) T28A, N53Q, L102Y в аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 11, и, необязательно, набор мутаций в каркасной области, перечисленных в таблице 5.
В конкретном варианте осуществления антитело к DR5 несет следующие мутации: G33A, N53Q, L102Y в последовательности SEQ ID NO: 11 и Q24S, K51A, R91A в последовательности SEQ ID NO: 13, и может дополнительно нести, по меньшей мере, одну мутацию в каркасной области, которая может представлять собой, например, по меньшей мере, один из остатков 6, 11, 12, 13 и 105 SEQ ID NO: 11.
В конкретном варианте осуществления антитело к DR5 выбрано из группы, состоящей из Apomab 1.1, 2.1, 3.1, 4.1, 5.1, 6.1, 7.1, 8.1, 9.1, 1.2, 2.2, 3.2, 4.2, 5.2, 6.2, 7.2, 8.2, 9.2, 1.3, 2.2, 3.3, 4.3, 5.3, 6.3, 7.3, 8.3 и 9.3.
В конкретном варианте осуществления антитело к DR5 выбрано из группы, состоящей из Apomab 5.2, 5.3, 6.2, 6.3, 7.2, 7.3, 8.3 и 25.3.
В еще одном конкретном варианте осуществления антитело к DR5 представляет собой Apomab 7.3 или Apomab 8.3, особенно Apomab 7.3.
В еще одном дополнительном варианте осуществления антитело к DR5 представляет собой фрагмент антитела, который можно выбрать из группы, состоящей из фрагментов Fab, Fab', F(ab')2 и Fv, димерных антител, одноцепочечных молекул антител и полиспецифических антител, сформированных из фрагментов антител.
В других вариантах осуществления антитело может представлять собой одноцепочечное антитело.
Например, антитела к DR5 могут обладать активностью в отношении злокачественных опухолей, например, такой, что они могут обладать способностью активировать или стимулировать апоптоз в злокачественных клетках.
Злокачественная опухоль включает в себя, например, карциному, лимфому, бластому, саркому и лейкоз.
Более конкретные примеры злокачественной опухоли включают плоскоклеточный рак, мелкоклеточный рак легких, немелкоклеточный рак легких (NSCLC), неходжкинскую лимфому, бластому, желудочно-кишечный рак, рак почек, рак яичников, рак печени, рак желудка, рак мочевого пузыря, гепатому, рак молочной железы, рак толстой кишки, колоректальный рак, рак поджелудочной железы, карциному эндометрия, карциному слюнной железы, рак почки, рак печени, рак предстательной железы, рак женских наружных половых органов, рак щитовидной железы, печеночную карциному и рак головы и шеи.
Конкретные группы злокачественных опухолей включают в себя рак легких (например, немелкоклеточную карциному легких - NSCLC) или аденокарциному, которая может представлять собой, например, колоректальную аденокарциному, аденокарциному поджелудочной железы или метастатическую аденокарциному. Также включены злокачественные опухоли гематологического происхождения.
В объем настоящего документа включены химерные, гуманизированные антитела и антитела человека, такие как антитела, опосредующие обусловленную антителами клеточную цитотоксичность (ADCC).
В предпочтительном варианте осуществления антитело к DR5 представляет собой Apomab 7.3 или Apomab 8.3 или его фрагмент.
Антитела могут находиться в димерной форме и/или в форме, перекрестно связанной, например, с Fc-областью IgG к антителам человека.
В других вариантах осуществления антитела к DR5 по настоящему документу слиты с последовательностью эпитопной метки.
В другом аспекте изобретение относится к химерной молекуле, содержащей антитело или фрагмент антитела к DR5 по настоящему документу, слитые с гетерологичной аминокислотной последовательностью, где гетерологичная аминокислотная последовательность, например, может содержать иммуноглобулиновую последовательность, такую как Fc-область IgG к антителам человека.
В еще одном аспекте изобретение относится к выделенным молекулам нуклеиновой кислоты, кодирующим антитела или фрагменты антител к DR5 по настоящему документу, векторам, несущим такие молекулы нуклеиновой кислоты, клеткам-хозяевам, несущим такие молекулы нуклеиновой кислоты, и способам получения антител и фрагментов антител по настоящему документу.
Изобретение дополнительно относится к композиции, содержащей антитело к DR5, как определено выше в настоящем документе, и носитель.
Носитель может представлять собой фармацевтически приемлемый носитель, а композиция может дополнительно содержать дополнительное противораковое средство и/или дополнительное антитело к DR5.
В дополнительном аспекте изобретение относится к способу индукции апоптоза, включающему в себя воздействие на злокачественные клетки млекопитающих антитела к DR5, как определено выше в настоящем документе.
В еще одном дополнительном аспекте изобретение относится к способу лечения злокачественной опухоли, включающему в себя введение млекопитающему эффективного количества антитела к DR5, как определено выше.
Во всех аспектах субъект может представлять собой пациента-человека, а злокачественная опухоль может представлять собой любую злокачественную опухоль, включая злокачественные опухоли, перечисленные выше.
В дополнительном аспекте изобретение относится к промышленному изделию, содержащему контейнер и композицию, содержащуюся в указанном контейнере, где композиция содержит антитело к DR5 по настоящему изобретению. Промышленное изделие может дополнительно содержать инструкции по применению антитела к DR5 in vitro или in vivo. В предпочтительном варианте осуществления инструкции относятся к лечению злокачественной опухоли.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
На фиг.1 приведена нуклеотидная последовательность кДНК лиганда Apo-2 человека (SEQ ID NO: 2) и выведенная из нее аминокислотная последовательность (SEQ ID NO: 1). "N" в положении нуклеотида 447 (в SEQ ID №2) используют для указания того, что нуклеотидное основание может представлять собой "T" или "G".
На фиг.2A-2C приведена нуклеотидная последовательность кДНК (SEQ ID NO: 4) полноразмерного рецептора DR4 человека и полученная из нее аминокислотная последовательность (SEQ ID NO: 3). О соответствующих нуклеотидной и аминокислотной последовательностях рецептора DR4 человека также сообщалось Pan et al., Science, 276:111 (1997).
На фиг.3A-3C приведена последовательность DR5 человека из 411 аминокислот рецептора (SEQ ID NO: 5), как опубликовано в WO 98/51793 19 ноября 1998 года, и кодирующая нуклеотидная последовательность (SEQ ID NO: 6).
На фиг.4A-4C приведена последовательность DR5 человека из 440 аминокислот (SEQ ID NO: 7) и кодирующая нуклеотидная последовательность (SEQ ID NO: 8), как также опубликовано в WO 98/35986 20 августа 1998 года.
На фиг.5 приведена нуклеотидная последовательность одноцепочечного антитела к DR5 16E2 (scFv 16E2) (SEQ ID NO: 9).
На фиг.6 приведена аминокислотная последовательность одноцепочечного антитела к DR5 16E2 (scFv 16E2) (SEQ ID NO: 10), где показаны сигнальная последовательность и CDR тяжелой и легкой цепей.
На фиг.7 приведена аминокислотная последовательность тяжелой цепи полноразмерного антитела 16E2 (SEQ ID NO: 11).
На фиг.8 приведена нуклеотидная последовательность тяжелой цепи полноразмерного антитела 16E2 (SEQ ID NO: 12).
На фиг.9 приведена аминокислотная последовательность легкой цепи полноразмерного антитела 16E2 (SEQ ID NO: 13).
На фиг.10 приведена нуклеотидная последовательность легкой цепи полноразмерного антитела 16E2 (SEQ ID NO: 14).
На фиг.11A и B приведена последовательность плазмиды pDR1 (SEQ ID NO: 15, 5391 п.н.) для экспрессии легких цепей иммуноглобулинов. pDR1 содержит последовательности, кодирующие не относящееся к изобретению антитело, легкую цепь гуманизированного антитела к CD3 (Shalaby et al., J. Exp. Med. 175:217-225 (1992)), старт- и стоп-кодоны которого указаны жирным шрифтом и подчеркнуты.
На фиг.12A и B приведена последовательность плазмиды pDR2 (SEQ ID NO: 16) для экспрессии тяжелых цепей иммуноглобулинов. pDR2 содержит последовательности, кодирующие не относящееся к изобретению антитело, тяжелую цепь гуманизированного антитела к CD3 (Shalaby et al., выше), старт- и стоп-кодоны которого указаны жирным шрифтом и подчеркнуты.
На фиг.13 приведена нуклеотидная последовательность тяжелой цепи Apomab 7.3 (SEQ ID NO: 17).
На фиг.14 приведена аминокислотная последовательность тяжелой цепи Apomab 7.3 (SEQ ID NO: 18).
На фиг.15 приведена нуклеотидная последовательность легкой цепи Apomab 7.3 (SEQ ID NO: 19).
На фиг.16 приведена аминокислотная последовательность легкой цепи Apomab 7.3 (SEQ ID NO: 20).
На фиг.17A и B приведено выравнивание тяжелых цепей 16E2 и Apomab 7.3.
На фиг.18 приведено выравнивание легких цепей 16E2 и Apomab 7.3.
Фиг.19 представляет собой модель гомологии для тяжелой цепи антитела к DR5.
Фиг.20 представляет собой модель гомологии для легкой цепи антитела к DR5.
На фиг.21 показана противораковая активность одной интраперитонеальной (и/п) дозы Apomab 5.3, 6.3 и 8.3 по сравнению с полноразмерным антителом 16E2 (версия 1) в модели рака толстой кишки человека у бестимусной мыши "nude" с ксенотрансплантатом Colo205.
На фиг.22 показана противораковая активность одной и/п дозы Apomab 5.2, 6.2, 5.3, 7.2 и 7.3 по сравнению с полноразмерным антителом 16E2 (версия 1) в модели рака толстой кишки человека у бестимусной мыши "nude" с ксенотрансплантатом Colo205.
На фиг.23 показана противораковая активность одной и/п дозы Apomab 5.2, 7.3 и 8.3 по сравнению с полноразмерным антителом 16E2 (версия 1) в модели рака толстой кишки человека у бестимусной мыши "nude" с ксенотрансплантатом Colo205.
На фиг.24 показана противораковая активность Apomab 23.3 и 25.3 по сравнению с Apomab 7.3 в модели рака толстой кишки человека у бестимусной мыши "nude" с ксенотрансплантатом Colo205.
На фиг.25 показана противораковая активность Apomab 7.3, полученного из стабильной клеточной линии, по сравнению с транзиторной клеточной линией в модели рака толстой кишки человека у бестимусной мыши "nude" с ксенотрансплантатом Colo205.
На фиг.26 показана противораковая активность Apomab 7.3 отдельно и в сочетании с CPT-11 в модели рака легких на ксенотрансплантате HCT15.
На фиг.27 показана противораковая активность Apomab 7.3 отдельно и в сочетании с CPT-11 в модели саркомы человека на ксенотрансплантате LS180.
На фиг.28 показана противораковая активность Apomab 7.3 отдельно и в сочетании с RITUXAN® (ритуксимаб) в модели неходжкинской лимфомы у мышей SCID CB17 ICR с ксенотрансплантатом BJAB.
На фиг.29 показана противораковая активность Apomab 7.3 отдельно и в сочетании с гемцитабином в модели аденокарциномы поджелудочной железы человека у бестимусных мышей "nude" с ксенотрансплантатом BxPC3.
На фиг.30 показана противораковая активность Apomab 7.3 отдельно и в сочетании с карбоплатином и таксолом в модели рака легких человека на ксенотрансплантате H460.
На фиг.31 показана противораковая активность Apomab 7.3 отдельно и в сочетании с карбоплатином и таксолом в модели рака легких человека на ксенотрансплантате H2122.
На фиг.32 приведена кривая доза-ответ Apomab 7.3 в модели рака легких человека на ксенотрансплантате H2122.
На фиг.33 показана противораковая активность Apomab 23.3 и 25.3 по сравнению с Apomab 7.3 в модели рака толстой кишки человека на ксенотрансплантате Colo205.
На фиг.34 приведены средний рост опухоли и диаграмма Каплана-Майера для Apo2L.0 отдельно, Apomab 7.3 отдельно и различных сочетаний по отношению к ксенотрансплантатам карциномы толстой кишки Colo205 у мышей "nude".
На фиг.35 и 36 приведены средний рост опухоли и диаграмма Каплана-Майера для Apo2L.0 отдельно, Apomab 7.3 отдельно и различных сочетаний по отношению к модели немелкоклеточной карциномы легких (NSCLC) человека у бестимусных мышей "nude" с ксенотрансплантатом клеток SKMES-I.
На фиг.37 приведены средний рост опухоли и диаграмма Каплана-Майера для Apo2L.0 отдельно, Apomab 7.3 отдельно и различных сочетаний в модели карциномы толстой кишки человека на ксенотрансплантате Colo205.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНЫХ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ
I. Определения
Термины "лиганд Apo-2", "Apo-2L", "Apo2L", "лиганд Apo-2/TRAIL" и "TRAIL" в настоящем документе применяют взаимозаменяемо для обозначения полипептидной последовательности, содержащей аминокислотные остатки 114-281, включительно, 95-281, включительно, остатки 92-281, включительно, остатки 91-281, включительно, остатки 41-281, включительно, остатки 39-281, включительно, остатки 15-281, включительно, или остатки 1-281, включительно, аминокислотной последовательности, приведенной на фиг.1 (SEQ ID NO: 1), а также биологически активных фрагментов, делеционных, инсерционных и/или замещенных вариантов указанных выше последовательностей. В одном из вариантов осуществления полипептидная последовательность содержит остатки 114-281 из фиг.1 (SEQ ID NO: 1). Необязательно полипептидная последовательность содержит остатки 92-281 или остатки 91-281 из фиг.1 (SEQ ID NO: 1). Полипептиды Apo-2L может кодировать природная нуклеотидная последовательность, приведенная на фиг.1 (SEQ ID NO: 2). Необязательно кодон, кодирующий остаток Pro119 (фиг.1; SEQ ID NO: 2), может представлять собой "CCT" или "CCG". Необязательно фрагменты или варианты являются биологически активными и обладают, по меньшей мере, приблизительно 80% идентичностью аминокислотных последовательностей, или, по меньшей мере, приблизительно 90% идентичностью последовательностей, или, по меньшей мере, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью последовательностей с любой из указанных выше последовательностей. Определение включает в себя заместительные варианты лиганда Apo-2, в которых, по меньшей мере, одна из его природных аминокислот замещена другой аминокислотой, такой как аланиновый остаток. Определение также включает в себя природную последовательность лиганда Apo-2, выделенную из источника лиганда Apo-2 или полученную рекомбинантными и/или синтетическими способами. Лиганд Apo-2 по изобретению включает в себя полипептиды, обозначаемые как лиганд Apo-2 или TRAIL, описанные в WO 97/01633, опубликованной 16 января 1997 года, WO 97/25428, опубликованной 17 июля 1997 года, WO 99/36535, опубликованной 22 июля 1999 года, WO 01/00832, опубликованной 4 января 2001 года, WO02/09755, опубликованной 7 Февраля 2002 года, WO 00/75191, опубликованной 14 декабря 2000 года, и в патенте США №6030945, выданном 29 февраля 2000 года. Термины, как правило, используют для обозначения форм лиганда Apo-2, которые включают в себя мономерные, димерные, тримерные, гексамерные или высоко олигомерные формы полипептида. Если не указано иначе, при нумерации аминокислотных остатков, указанных в последовательности Apo-2L, используют нумерацию в соответствии с фиг.1 (SEQ ID NO: 1).
"Рецептор лиганда Apo-2" включает в себя рецепторы, обозначаемые в данной области как "DR4" и "DR5", полинуклеотидные и полипептидные последовательности которых показаны на фиг.2A-2C (SEQ ID NO: 4 и 3) и 3A-3C (SEQ ID NO: 6 и 5), соответственно. У Pan et al. описан представитель семейства рецептора TNF, обозначаемый как "DR4" (Pan et al., Science, 276:111-113 (1997); также см. WO 98/32856, опубликованную 30 июля 1998 года; WO 99/37684, опубликованную 29 июля 1999 года; WO 00/73349, опубликованную 7 декабря 2000 года; патент США №6433147, выданный 13 августа 2002 года; патент США №6461823, выданный 8 октября 2002 года, и патент США №6342383, выданный 29 января 2002 года). У Sheridan et al., Science, 277:818-821 (1997), и Pan et al., Science, 277:815-818 (1997), описан другой рецептор для Apo2L/TRAIL (также см., WO 98/51793, опубликованную 19 ноября 1998 года; WO 98/41629, опубликованную 24 сентября 1998 года). Этот рецептор обозначают как DR5 (этот рецептор также альтернативно обозначают как Apo-2; TRAIL-R, TR6, Tango-63, hAPO8, TRICK2 или KILLER; Screaton et al., Curr. Biol., 7:693-696 (1997); Walczak et al., EMBO J., 16:5386-5387 (1997); Wu et al., Nature Genetics, 17:141-143 (1997); WO 98/35986, опубликованная 20 августа 1998 года; EP 870827, опубликованный 14 октября 1998 года; WO 98/46643, опубликованная 22 октября 1998 года; WO 99/02653, опубликованная 21 января 1999 года; WO 99/09165, опубликованная 25 февраля 1999 года; WO 99/11791, опубликованная 11 марта 1999 года; US 2002/0072091, опубликованная 13 августа 2002 года; US 2002/0098550, опубликованная 7 декабря 2001 года; патент США №6313269, выданный 6 декабря 2001 года; US 2001/0010924, опубликованная 2 августа 2001 года; US 2003/01255540, опубликованная 3 июля 2003 года; US 2002/0160446, опубликованная 31 октября 2002 года, US 2002/0048785, опубликованная 25 апреля 2002 года; патент США №6569642, выданный 27 мая 2003 года, патент США №6072047, выданный 6 июня 2000 года, патент США №6642358, выданный 4 ноября 2003 года). Как описано выше, другие рецепторы для Apo-2L включают в себя DcR1, DcR2 и OPG (см. Sheridan et al., выше; Marsters et al., выше, и Simonet et al., выше). Когда применяют в настоящем документе, термин "рецептор Apo-2L" относится к природной последовательности рецептора и вариантам рецептора. Эти термины относятся к рецептору Apo-2L, экспрессируемому у ряда млекопитающих, включая людей. Рецептор Apo-2L может быть эндогенно экспрессируемым, как происходит в природе в ряде тканевых линий человека, или может экспрессироваться рекомбинантным или синтетическим способами. "Рецептор Apo-2L с природной последовательностью" содержит полипептид с такой же аминокислотной последовательностью, что и рецептор Apo-2L, полученный в природных условиях. Таким образом, рецептор Apo-2L с природной последовательностью может обладать аминокислотной последовательностью встречающегося в природе рецептора Apo-2L любого млекопитающего, включая людей. Такой рецептор Apo-2L с природной последовательностью можно выделять в природных условиях или можно получать рекомбинантными или синтетическими способами. Термин "рецептор Apo-2L с природной последовательностью", в частности, относится к встречающимся в природе укороченным или секретируемым формам рецептора (например, растворимая форма, содержащая, например, последовательность внеклеточного домена), встречающимся в природе вариантным формам (например, формы альтернативного сплайсинга) и встречающимся в природе аллельным вариантам. Варианты рецептора могут включать в себя фрагменты и делеционные мутанты рецептора Apo-2L с природной последовательностью. На фиг.3A-3C показана последовательность DR5 человека из 411 аминокислот, как опубликовано в WO 98/51793 19 ноября 1998 года. В данной области известен вариант сплайсинга продукта транскрипции DR5 человека. Этот вариант сплайсинга DR5 кодирует последовательность DR5 человека из 440 аминокислот, как показано на фиг.4A-4C, вместе с ее нуклеотидной последовательностью (SEQ ID NO: 7 и 8), и как опубликовано в WO 98/35986 20 августа 1998 года.
"Антитело к рецептору смерти" применяют в настоящем документе в основном для обозначения антитела или антител к рецептору, входящему в суперсемейство рецептора фактора некроза опухоли и содержащему домен смерти, способный к передаче сигнала апоптоза, и такие антитела включают в себя антитело к DR5 и антитело к DR4.
"Антитело к рецептору DR5", "антитело к DR5" или "антитело против DR5" используют в широком смысле для обозначения антител, связывающихся, по меньшей мере, с одной формой рецептора DR5 или его внеклеточного домена. Необязательно антитело к DR5 слито или связано с гетерологичной последовательностью или молекулой. Предпочтительно гетерологичная последовательность позволяет антителу формировать комплексы более высокого порядка или олигомерные комплексы или способствует этому. Необязательно антитело к DR5 связывается с рецептором DR5, но не связывается или не вступает в перекрестную реакцию с любым дополнительным рецептором Apo-2L (например, DR4, DcR1 или DcR2). Необязательно антитело представляет собой агонист сигнальной активности DR5. Термин "антитело против DR5" и его грамматические эквиваленты, в частности, относится к антителам, описанным в примерах, и включает в себя в качестве неограничивающих примеров антитела "Apomab", перечисленные в таблицах 11 и 12, например, такие как Apomab 1.1, 2.1, 3.1, 4.1, 5.1, 6.1, 7.1, 8.1, 9.1, 1.2, 2.2, 3.2, 4.2, 5.2, 6.2, 7.2, 8.2, 9.2, 1.3, 2.2, 3.3, 4.3, 5.3, 6.3, 7.3, 8.3 и 9.3, предпочтительно Apomab 7.3.
Необязательно антитело к DR5 по изобретению связывается с рецептором DR5 в диапазоне концентраций от приблизительно 0,1 нМ до приблизительно 20 мМ, как измерено в анализе связывания BIAcore. Необязательно антитела к DR5 по изобретению демонстрируют значение Ic50 от приблизительно 0,6 нМ до приблизительно 18 мМ, как измерено в анализе связывания BIAcore.
"Антитело к рецептору DR4", "антитело к DR4" или "антитело против DR4" используют в широком смысле для обозначения антител, связывающихся, по меньшей мере, с одной формой рецептора DR4 или его внеклеточного домена. Необязательно антитело к DR4 слито или связано с гетерологичной последовательностью или молекулой. Предпочтительно гетерологичная последовательность позволяет антителу формировать комплексы более высокого порядка или олигомерные комплексы или способствует этому. Необязательно антитело к DR4 связывается с рецептором DR4, но не связывается или не вступает в перекрестную реакцию с любым дополнительным рецептором Apo-2L (например, DR5, DcR1 или DcR2). Необязательно антитело представляет собой агонист сигнальной активности DR4.
Необязательно антитело к DR4 по изобретению связывается с рецептором DR4 в диапазоне концентраций от приблизительно 0,1 нМ до приблизительно 20 мМ, как измерено в анализе связывания BIAcore. Необязательно антитела к DR4 по изобретению демонстрируют значение Ic 50 от приблизительно 0,6 нМ до приблизительно 18 мМ, как измерено в анализе связывания BIAcore.
Термин "агонист" используют в самом широком смысле, и он включает в себя любую молекулу, которая частично или полностью усиливает, стимулирует или активирует один или несколько видов биологической активности Apo2L/TRAIL, DR4 или DR5 in vitro, in situ или in vivo. Примеры таких видов биологической активности связывания Apo2L/TRAIL с DR4 или DR5 включают в себя апоптоз, а также виды биологической активности, описанные в литературе. Агонист может действовать прямым или непрямым образом. Например, агонист может действовать, частично или полностью усиливая, стимулируя или активируя один или несколько видов биологической активности DR4 или DR5 in vitro, in situ или in vivo, в результате его прямого связывания с DR4 или DR5, что вызывает активацию рецептора и передачу сигнала. Агонист также может действовать непрямым образом, частично или полностью усиливая, стимулируя или активируя один или несколько видов биологической активности DR4 или DR5 in vitro, in situ или in vivo, например, в результате стимуляции другой эффекторной молекулы, которая затем вызывает активацию DR4 или DR5 или передачу сигнала. Полагают, что агонист может действовать как энхансерная молекула, которая действует непрямым образом, усиливая или повышая активацию или активность DR4 или DR5. Например, агонист может усиливать активность эндогенного Apo-2L у млекопитающего. Это можно осуществлять, например, посредством предварительного образования комплексов DR4 или DR5 или посредством стабилизации комплексов соответствующего лиганда с рецептором DR4 или DR5 (такой как стабилизация природного комплекса, формируемого между Apo-2L и DR4 или DR5).
Термин "внеклеточный домен" или "ECD" относится к форме лиганда или рецептора, в которой по существу отсутствуют трансмембранный и цитоплазматический домены. Как правило, растворимый ECD содержит менее 1% таких трансмембранных и цитоплазматических доменов, а предпочтительно содержит менее 0,5% таких доменов.
Когда применяют в настоящем документе, термин "маркированный эпитопом" относится к химерному полипептиду, содержащему белок, такой как лиганд Apo-2 или рецептор DR5, или его часть или антитело, которое связывается с таким лигандом или рецептором, слитый с "маркерным полипептидом". Маркерный полипептид содержит достаточное количество остатков для образования эпитопа, к которому можно получать антитело, а также достаточно короток, так что он не препятствует активности лиганда или рецептора. Предпочтительно маркерный полипептид также в достаточной степени уникален, так что антитело по существу не вступает в перекрестные реакции с другими эпитопами. Подходящие маркерные полипептиды, как правило, состоят, по меньшей мере, из шести аминокислотных остатков, а обычно приблизительно из аминокислотных остатков в количестве от 8 до 50 (предпочтительно, приблизительно от 10 до 20 остатков).
"Выделенный", когда применяют для описания различных описанных в настоящем документе белков, означает белок, который идентифицирован и отделен от компонентов его природного окружения и/или выделен из них. Загрязняющими компонентами его природного окружения являются вещества, которые обычно могут мешать диагностическим или терапевтическим применениям белка, и они могут включать в себя ферменты, гормоны и другие белковые и небелковые растворы. В предпочтительных вариантах осуществления белок очищают (1) до степени, достаточной для получения, по меньшей мере, 15 остатков N-концевой или внутренней аминокислотной последовательности при применении секвенатора с вращающимся стаканом, или (2) до гомогенности при SDS-PAGE в невосстанавливающих или восстанавливающих условиях с применением красителя кумасси синего или, предпочтительно, серебра. Выделенный белок включает в себя белок в рекомбинантных клетках in situ, так как отсутствует, по меньшей мере, один компонент природного окружения лиганда Apo-2. Однако, как правило, выделенный белок получают посредством, по меньшей мере, одной стадии очистки.
"Процент (%) идентичности аминокислотной последовательности" по отношению к последовательностям, идентифицированным в настоящем документе, определен как процент аминокислотных остатков в последовательности-кандидате, которые идентичны аминокислотным остаткам в сравниваемой последовательности лиганда, рецептора или антитела после выравнивания последовательностей и внесения, если необходимо, пропусков, для достижения максимального процента идентичности последовательностей, и не рассматривая никакие консервативные замены как часть идентичности последовательностей. Выравнивание с целью определения процента идентичности аминокислотных последовательностей можно получать различными способами, известными специалистам в данной области, которые могут определить подходящие параметры для оценки выравнивания, включающие в себя определенные алгоритмы, необходимые для достижения максимального выравнивания между сравниваемыми полноразмерными последовательностями. Для целей по настоящему документу значения процента идентичности аминокислот можно получать с применением компьютерной программы сравнения последовательностей ALIGN-2, созданной в Genentech, Inc. исходный код которой подан вместе с документацией для пользователя в U.S. Copyright Office, Washington D.C., 20559, зарегистрированный под U.S. Copyright Registration No. TXU510087. Программа ALIGN-2 общедоступна в Genentech, Inc., South San Francisco, California. Все параметры сравнения последовательностей устанавливаются программой ALIGN-2 и не изменяются. Затем процент идентичности аминокислотных последовательностей подсчитывают относительно более длинной последовательности. Таким образом, даже если более короткая последовательность полностью содержится в более длинной последовательности, идентичность последовательностей будет составлять менее 100%.
Термин "контрольные последовательности" относится к последовательностям ДНК, необходимым для экспрессии функционально связанной кодирующей последовательности в конкретном организме-хозяине. Контрольные последовательности, подходящие для прокариот, например, включают в себя промотор, необязательно, операторную последовательность и участок связывания рибосомы. Известно, что эукариотические клетки используют промоторы, сигналы полиаденилирования и энхансеры.
Нуклеиновая кислота "функционально связана", когда она находится в функциональной связи с другой последовательностью нуклеиновой кислоты. Например, ДНК предпоследовательности или секреторной лидирующей последовательности функционально связана с ДНК для полипептида, если он экспрессируется как пребелок, участвующий в секреции полипептида; промотор или энхансер функционально связан с кодирующей последовательностью, если он воздействует на транскрипцию последовательности; или участок связывания рибосомы функционально связан с кодирующей последовательностью, если он расположен так, чтобы облегчать трансляцию. Как правило, "функционально связанный" означает, что связанные последовательности ДНК являются смежными, а в случае секреторной лидирующей последовательности являются смежными и находятся в одной рамке считывания. Однако энхансеры не являются смежными. Связывание осуществляют лигированием по подходящим участкам рестрикции. Если такие участки не существуют, используют синтетические олигонуклеотидные адаптеры или линкеры в соответствии с традиционной практикой.
Когда применяют в настоящем документе, термин "полиол" в широком смысле относится к многоатомным спиртовым соединениям. Полиолы могут представлять собой, например, любой водорастворимый поли(алкиленоксид)ный полимер и могут обладать линейной или разветвленной цепью. Предпочтительные полиолы включают в себя полиолы, замещенные в одном или нескольких гидроксильных положениях химическими группами, такими как алкильная группа с количеством атомов углерода от одного до четырех. Как правило, полиол представляет собой поли(алкиленгликоль), предпочтительно поли(этиленгликоль) (PEG). Однако специалистам в данной области понятно, что при использовании способов для конъюгации, описанных в настоящем документе для PEG, можно применять другие полиолы, например, такие как поли(пропиленгликоль) и сополимеры полиэтилен-полипропиленгликоля. Полиолы включают в себя хорошо известные в данной области и общедоступные полиолы, такие как полиолы из коммерчески доступных источников, таких как Nektar® Corporation.
Термин "конъюгат" в настоящем документы применяют в его наиболее широком определении для обозначения соединенного или связанного вместе. Молекулы "конъюгированы", когда они действуют или функционируют, как если они соединены.
"Строгость" реакций гибридизации легко определяется специалистом в данной области, и, как правило, она представляет собой эмпирический расчет, зависящий от длины зонда, температуры отмывки и концентрации солей. Как правило, для более длинных зондов для правильного отжига необходимы более высокие температуры, тогда как для коротких зондов необходимы более низкие температуры. Как правило, гибридизация зависит от способности денатурированной ДНК к повторному отжигу, когда комплементарные цепи находятся в среде с температурой ниже температуры плавления. Чем выше степень желаемой гомологии между зондом и гибридизуемой последовательностью, тем выше относительная температура, которую можно использовать. В результате, отсюда следует, что более высокие относительные температуры приводят к формированию более строгих условий реакции, тогда как более низкие температуры уменьшают строгость условий реакции. Для дополнительных подробностей и объяснения строгости реакций гибридизации см. Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, Wiley Interscience Publishers (1995).
Как определено в настоящем документе, "строгие условия" или "условия с высокой строгостью" определяют как условия, в которых: (1) применяют низкую ионную силу и высокую температуру для отмывки, например 0,015 M хлорид натрия/0,0015 M цитрат натрия/0,1% додецилсульфат натрия при 50°C; (2) в течение гибридизации применяют денатурирующее средство, такое как формамид, например 50% (об./об.) формамид с 0,1% бычьим сывороточным альбумином/0,1% фиколлом/0,1% поливинилпирролидоном/50 мМ натрий-фосфатным буфером при pH 6,5 с 750 мМ хлоридом натрия, 75 мМ цитратом натрия при 42°C; или (3) применяют 50% формамид, 5×SSC (0,75 M NaCl, 0,075 M цитрат натрия), 50 мМ фосфат натрия (pH 6,8), 0,1% пирофосфат натрия, 5× раствор Денхардта, разрушенную ультразвуком ДНК спермы лосося (50 мкг/мл), 0,1% SDS и 10% декстрансульфат при 42°C, с отмывкой при 42°C в 0,2×SSC (хлорид натрия/цитрат натрия) и 50% формамиде при 55°C с последующей отмывкой с высокой строгостью в растворе, состоящем из содержащей 0,1×SSC ЭДТА при 55°C.
"Умеренно строгие условия" можно определить, как описано в Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, New York: Cold Spring Harbor Press, 1989, и они включают в себя применение отмывочного раствора и условий гибридизации (например, температура, ионная сила и % SDS), менее строгих, чем описанные выше условия. Пример умеренно строгих условий представляет собой инкубацию в течение ночи при 37°C в растворе, содержащем: 20% формамид, 5×SSC (150 мМ NaCl, 15 мМ трехосновный цитрат натрия), 50 мМ фосфат натрия (pH 7,6), 5× раствор Денхардта, 10% декстрансульфат и 20 мг/мл денатурированной расщепленной ДНК спермы лосося с последующей отмывкой фильтров в 1×SSC приблизительно при 37-50°C. Специалисты в данной области знают, как отрегулировать температуру, ионную силу и т.д., как необходимо для приведения в соответствие с такими факторами, как длина зонда и т.п.
Термины "аминокислота" и "аминокислоты" относятся ко всем встречающимся в природе L-альфа-аминокислотам. Это определение предназначено для включения норлейцина, орнитина и гомоцистеина. Аминокислоты идентифицируют посредством их однобуквенных или трехбуквенных обозначений:
Asp D аспарагиновая кислота | Ile I изолейцин |
Thr T треонин | Leu L лейцин |
Ser S серин | Tyr Y тирозин |
Glu E глутаминовая кислота | Phe F фенилаланин |
Pro P пролин | His H гистидин |
Gly G глицин | Lys K лизин |
Ala A аланин | Arg R аргинин |
Cys C цистеин | Trp W триптофан |
Val V валин | Gln Q глутамин |
Met M метионин | Asn N аспарагин |
На фигурах могут применяться некоторые другие однобуквенные и трехбуквенные обозначения для обозначения и идентификации двух или более аминокислот или нуклеотидов в данном положении последовательности.
Термин "антитело" применяют в самом широком смысле, и он конкретно относится к отдельным моноклональным антителам к DR5 (включающим в себя агонистические, антагонистические и нейтрализующие или блокирующие антитела) и композициям антител к DR5 с полиэпитопной специфичностью. Как применяют в настоящем документе, "антитело" включает в себя молекулы интактных иммуноглобулинов или антител, поликлональные антитела, полиспецифические антитела (т.е. биспецифические антитела, сформированные, по меньшей мере, двумя интактными антителами) и фрагменты иммуноглобулинов (такие как Fab, F(ab')2 или Fv), при условии, они проявляют желаемые агонистические или антагонистические свойства, описанные в настоящем документе.
Как правило, антитела представляют собой белки или полипептиды, проявляющие специфичность связывания с конкретным антигеном. Природные антитела, как правило, являются гетеротетрамерными гликопротеинами, состоящими из двух идентичных легких (L) цепей и двух идентичных тяжелых (H) цепей. Как правило, каждая легкая цепь связана с тяжелой цепью одной ковалентной дисульфидной связью, тогда как количество дисульфидных связей у тяжелых цепей различных изотипов иммуноглобулинов варьирует. Каждая тяжелая и легкая цепь также обладает расположенными с равными интервалами дисульфидными мостиками внутри цепи. На одном из концов каждой тяжелой цепи находится вариабельный домен (VH), а за ним следует ряд константных доменов. У каждой легкой цепи на одном из концов находится вариабельный домен (VL), а на другом конце - константный домен; константный домен легкой цепи расположен параллельно первому константному домену тяжелой цепи, а вариабельный домен легкой цепи расположен параллельно вариабельному домену тяжелой цепи. Полагают, что область контакта между вариабельными доменами легкой цепи и тяжелой цепи формируют конкретные аминокислотные остатки [Chothia et al., J. Mol. Biol., 186:651-663 (1985); Novotny and Haber, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82:4592-4596 (1985)]. Легкие цепи антител любого вида позвоночного на основе аминокислотных последовательностей их константных доменов можно отнести к одному из двух отчетливо различимых типов, называемых каппа и лямбда. В зависимости от аминокислотной последовательности константного домена их тяжелых цепей иммуноглобулины можно отнести к различным классам. Существует пять главных классов иммуноглобулинов: IgA, IgD, IgE, IgG и IgM, а некоторые из них можно дополнительно разделить на подклассы (изотипы), например IgG-1, IgG-2, IgG-3 и IgG-4; IgA-1 и IgA-2. Константные домены тяжелых цепей, соответствующие различным классам иммуноглобулинов, обозначают альфа, дельта, эпсилон, гамма и мю, соответственно.
"Фрагменты антител" содержат часть интактного антитела, как правило, антигенсвязывающую или вариабельную область интактного антитела. Примеры фрагментов антител включают в себя фрагменты Fab, Fab', F(ab')2 и Fv, димерные антитела, молекулы одноцепочечных антител и полиспецифические антитела, сформированные из фрагментов антител.
Термин "вариабельный" в настоящем документе используют для описания определенных частей вариабельных доменов, которые отличаются по последовательности у разных антител и используются для связывания каждого конкретного антитела с его конкретным антигеном и для формирования специфичности каждого конкретного антитела к его конкретному антигену. Однако вариабельность не всегда одинаково распределена в вариабельных доменах антител. Как правило, она концентрируется в трех участках вариабельных доменов легких цепей и тяжелых цепей, называемых определяющими комплементарность областями (CDR) или гипервариабельными областями. Более высококонсервативные части вариабельных доменов называют каркасом (FR). Каждый из вариабельных доменов природных тяжелых и легких цепей содержит четыре FR области, главным образом принимающие конфигурацию β-слоя, соединенные тремя гипервариабельными областями, формирующими петли, соединяющие β-слои, а в некоторых случаях, формирующие часть структуры β-слоя. CDR в каждой цепи удерживаются вместе в непосредственной близости с помощью FR областей и, совместно с CDR другой цепи, вносят вклад в формирование антигенсвязывающего участка антитела [см. Kabat, E.A. et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1987)]. Константные домены непосредственно не участвуют в связывании антитела с антигеном, но осуществляют различные эффекторные функции, такие как участие антитела в антителозависимой клеточной цитотоксичности.
Как применяют в настоящем документе, термин "моноклональное антитело" относится к антителу, полученному из совокупности по существу гомогенных антител, т.е. отдельные антитела, составляющие совокупность, являются идентичными, за исключением возможных встречающихся в природе мутаций, которые могут присутствовать в незначительных количествах. Моноклональные антитела являются высокоспецифичными, являясь направленными к одному антигенному участку. Кроме того, в отличие от традиционных препаратов (поликлональных) антител, которые включают в себя различные антитела, направленные к различным детерминантам (эпитопам), каждое моноклональное антитело направлено к одной детерминанте на антигене.
Моноклональные антитела по настоящему документу включают в себя химерные, гибридные и рекомбинантные антитела, полученные посредством соединения вариабельного (включая гипервариабельный) домена антитела к DR5 с константным доменом (например, "гуманизированные" антитела), или легкой цепи с тяжелой цепью, или цепи одного вида с цепью другого вида, или посредством слияний с гетерологичными белками, вне зависимости от вида происхождения или обозначения класса или подкласса иммуноглобулина, а также фрагменты антител (например, Fab, F(ab')2 и Fv) при условии, что они проявляют желательную биологическую активность или свойства. См., например, патент США №4816567 и Mage et al., in Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications, pp.79-97 (Marcel Defcker, Inc.: New York, 1987).
Таким образом, модификатор "моноклональное" указывает на характеристику антитела как полученного из по существу гомогенной совокупности антител, и его не следует истолковывать как требующего получение антител каким-либо конкретным способом. Например, моноклональные антитела для применения по настоящему изобретению можно получать гибридомным способом, впервые описанным в Kohler and Milstein, Nature, 256:495 (1975), или их можно получать способами рекомбинантных ДНК так, как описано в патенте США №4816567. "Моноклональные антитела" также можно выделять из фаговых библиотек, полученных с применением способов, описанных, например, в McCafferty et al., Nature, 348:552-554 (1990).
"Гуманизированные" формы не являющихся человеческими (например, мышиных) антител представляют собой специфические химерные иммуноглобулины, цепи иммуноглобулинов или их фрагменты (такие как Fv, Fab, Fab' F(ab')2 или другие антигенсвязывающие подпоследовательности антитела), которые содержат минимальную последовательность, полученную из не являющегося человеческим иммуноглобулина. Преимущественно, гуманизированные антитела являются иммуноглобулинами человека (реципиентное антитело), в которых остатки из определяющей комплементарность области (CDR) реципиента заменены остатками из CDR не являющихся человеком видов (донорное антитело), таких как мышь, крыса или кролик, с желательной специфичностью, аффинностью и емкостью. В некоторых случаях соответствующими остатками, не принадлежащими человеку, заменены остатки каркасной области (FR) иммуноглобулина человека. Кроме того, гуманизированное антитело может содержать остатки, которых нет ни в реципиентном антителе, ни в импортируемых CDR или каркасных последовательностях. Эти модификации производят для дальнейшего улучшения и оптимизации характеристик антитела. Как правило, гуманизированное антитело содержит по существу все, по меньшей мере, из одного или, как правило, двух вариабельных доменов, в которых все или по существу все области CDR соответствуют областям CDR не принадлежащего человеку иммуноглобулина, а все или по существу все области FR представляют собой области FR консенсусной последовательности иммуноглобулина человека. Гуманизированное антитело также оптимально содержит, по меньшей мере, часть константной области или домена (Fc) иммуноглобулина, как правило, часть константной области или домена иммуноглобулина человека.
"Антитело человека" представляет собой антитело, которое обладает аминокислотной последовательностью, которая соответствует аминокислотной последовательности антитела, полученного у человека и/или полученного с применением любого из способов получения антител человека, известных в данной области, или как описано в настоящем документе. Это определение антитела человека включает в себя антитела, содержащие, по меньшей мере, один полипептид тяжелой цепи человека или, по меньшей мере, один полипептид легкой цепи человека, например антитело, содержащее полипептиды легкой цепи мыши и тяжелой цепи человека. Антитела человека можно получать с применением различных известных в данной области способов. В одном из вариантов осуществления антитело человека выбрано из фаговой библиотеки, где эта фаговая библиотека экспрессирует антитела человека (Vaughan et al. Nature Biotechnology, 14:309-314 (1996): Sheets et al. PNAS, (USA) 95:6157-6162 (1998)); Hoogenboom and Winter, J. Mol. Biol. 227:381(1991); Marks et al., J. Mol. Biol. 222:581 (1991)). Антитела человека также можно получать посредством введения локусов иммуноглобулина человека трансгенным животным, например мышам, у которых эндогенные гены иммуноглобулинов частично или полностью инактивированы. При антигенной стимуляции наблюдают продукцию антител человека, которая во всех аспектах, включая перестройку, сборку генов и репертуар антител, очень похожа на ту, которую наблюдают у людей. Этот подход описан, например, в патентах США №№5545807; 5545806; 5569825; 5625126; 5633425; 5661016 и в следующих научных публикациях: Marks et al., Bio/Technology, 10:779-783 (1992); Lonberg et al., Nature, 368:856-859 (1994); Morrison, Nature, 368:812-13 (1994); Fishwild et al., Nature Biotechnology, 14:845-51 (1996); Neuberger, Nature Biotechnology, 14:826 (1996); Lonberg and Huszar, Intern. Rev. Immunol. 13:65-93 (1995). Альтернативно антитело человека можно получать посредством иммортализации B-лимфоцитов человека, продуцирующих антитела, направленных к антигену-мишени (такие B-лимфоциты можно получать у индивидуума, или они могут быть иммунизированы in vitro). См., например, Cole et al., Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, p.77 (1985); Boerner et al., J. Immunol. 147 (1):86-95 (1991), и патент США №5750373.
Термин "Fc-область" используют для определения C-концевой области тяжелой цепи иммуноглобулина, которую можно получить посредством расщепления интактного антитела папаином. Fc-область может представлять собой Fc-область с природной последовательностью или вариант Fc-области. Хотя границы Fc-области тяжелой цепи иммуноглобулина могут варьировать, Fc-область тяжелой цепи IgG человека, как правило, определяют как располагающуюся от аминокислотного остатка в положении приблизительно Cys226 или приблизительно от положения Pro230 до C-конца Fc-области (применяя в настоящем документе систему нумерации по Kabat et al., выше). Fc-область иммуноглобулина, как правило, содержит два константных домена, домен CH2 и домен CH3, и необязательно содержит домен CH4.
Под "цепью Fc-области" в настоящем документе подразумевают одну из двух полипептидных цепей Fc-области.
"Домен CH2" Fc-области IgG человека (также обозначаемый как домен "Cγ2"), как правило, расположен от аминокислотного остатка в положении приблизительно 231 до аминокислотного остатка в положении приблизительно 340. Домен CH2 является уникальным в том, что он не образует тесной пары с другим доменом. Вместо этого, между двумя доменами CH2 интактной природной молекулы IgG расположены две N-связанные разветвленные углеводные цепи. Предполагают, что углевод может обеспечивать замену спариванию домен-домен и помогать стабилизации домена CH2. Burton, Molec. Immunol., 22:161-206 (1985). Домен CH2 по настоящему документу может представлять собой домен CH2 с природной последовательностью или вариант домена CH2.
"Домен CH3" содержит участок остатков в Fc-области с C-конца от домена CH2 (т.е. от аминокислотного остатка в положении приблизительно 341 до аминокислотного остатка в положении приблизительно 447 IgG). Область CH3 по настоящему документу может представлять собой домен CH3 с природной последовательностью или вариант домена CH3 (например, домен CH3 с введенным в одну его цепь "выступом" и соответствующей "полостью", введенной в другую его цепь; см. патент США №5821333). Такие вариантные домены CH3 можно использовать для получения полиспецифичных (например, биспецифичных) антител, как описано в настоящем документе.
Как правило, "шарнирная область" определена как участок приблизительно от Glu216 или приблизительно от Cys226 до приблизительно Pro230 IgG1 человека (Burton, Molec. Immunol. 22:161-206 (1985)). Шарнирные области других изотипов IgG можно выравнивать с последовательностью IgG1 посредством помещения предшествующих и последующих остатков цистеина, формирующих S-S-мостики между тяжелыми цепями в тех же положениях. Шарнирная область по настоящему документу может представлять собой шарнирную область с природной последовательностью или вариант шарнирной области. Две полипептидные цепи варианта шарнирной области, как правило, содержат, по меньшей мере, один цистеиновый остаток на полипептидную цепь так, чтобы две полипептидные цепи варианта шарнирной области могли формировать дисульфидную связь между двумя цепями. Предпочтительная шарнирная область по настоящему документу представляет собой шарнирную область с природной последовательностью человека, например шарнирную область с природной последовательностью IgG1 человека.
A "функциональная Fc-область" обладает, по меньшей мере, одной "эффекторной функцией" Fc-области с природной последовательностью. Примеры "эффекторной функции" включают в себя связывание C1q; обусловленную комплементом цитотоксичность (CDC); связывание Fc-рецептора; обусловленную антителами опосредованную клетками цитотоксичность (ADCC); фагоцитоз; снижение экспрессии рецепторов клеточной поверхности (например, B-клеточного рецептора; BCR) и т.д. Такие эффекторные функции, как правило, требуют, чтобы Fc-область была присоединена к домену связывания (например, вариабельному домену антитела), и их можно оценивать с применением известных в данной области различных анализов для оценки таких эффекторных функций антител.
"Fc-область с природной последовательностью" содержит аминокислотную последовательность, идентичную аминокислотной последовательности Fc-области, находящейся в природе. "Вариант Fc-области" содержит аминокислотную последовательность, которая отличается от аминокислотной последовательности Fc-области с природной последовательностью благодаря, по меньшей мере, одной модификации аминокислоты. Предпочтительно, вариант Fc-области по сравнению с Fc-областью с природной последовательностью или с Fc-областью исходного полипептида несет, по меньшей мере, одну замену аминокислоты, например приблизительно от одной до приблизительно десяти замен аминокислот, а предпочтительно приблизительно от одной до приблизительно пяти замен аминокислот в Fc-области с природной последовательностью или в Fc-области исходного полипептида. Вариант Fc-области по настоящему документу предпочтительно обладает, по меньшей мере, приблизительно 80% идентичностью последовательности с Fc-областью с природной последовательностью и/или с Fc-областью исходного полипептида, а наиболее предпочтительно, по меньшей мере, приблизительно 90% идентичностью последовательности с ними, более предпочтительно, по меньшей мере, приблизительно 95% идентичностью последовательности с ними.
"Обусловленная антителами опосредованная клетками цитотоксичность" и "ADCC" относятся к опосредованной клетками реакции, в которой неспецифические цитотоксические клетки, экспрессирующие Fc-рецепторы (FcR) (например, натуральные киллерные (NK) клетки, нейтрофилы и макрофаги), распознают связанное на клетке-мишени антитело и впоследствии вызывают лизис клетки-мишени. Первичные клетки для осуществления ADCC, NK-клетки, экспрессируют только FcγRIII, тогда как моноциты экспрессируют FcγRI, FcγRII и FcγRIII. Экспрессия FcR на гематопоэтических клетках подытожена в таблице 3 на странице 464 Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol., 9:457-92 (1991). Для оценки активности ADCC представляющей интерес молекулы можно провести анализ ADCC in vitro, такой как анализ ADCC, описанный в патентах США №№5500362 или 5821337. Подходящие для таких анализов эффекторные клетки включают в себя мононуклеарные клетки периферической крови (PBMC) и натуральные киллерные (NK) клетки. Альтернативно или дополнительно активность ADCC представляющей интерес молекулы можно оценивать in vivo, например, в модели на животных, такой как модель на животных, описанная в Clynes et al. PNAS (USA), 95:652-656 (1998).
"Эффекторные клетки человека" представляют собой лейкоциты, экспрессирующие один или несколько FcR и выполняющие эффекторные функции. Предпочтительно клетки экспрессируют, по меньшей мере, FcγRIII и выполняют эффекторную функцию ADCC. Примеры лейкоцитов человека, опосредующих ADCC, включают в себя мононуклеарные клетки периферической крови (PBMC), натуральные киллерные (NK) клетки, моноциты, цитотоксические T-клетки и нейтрофилы; где предпочтительны клетки PBMC и NK. Эффекторные клетки можно выделять из их природного источника, например из крови или PBMC, как описано в настоящем документе.
Термины "Fc-рецептор" и "FcR" используют для описания рецептора, связывающегося с Fc-областью антитела. Предпочтительный FcR представляет собой природную последовательность FcR человека. Кроме того, предпочтительным FcR является FcR, который связывает антитело IgG (рецептор гамма) и включает в себя рецепторы подклассов FcγRI, FcγRII и FcγRIII, включающие в себя аллельные варианты и формы альтернативного сплайсинга этих рецепторов. Рецепторы FcγRII включают в себя FcγRIIA ("активирующий рецептор") и FcγRIIB ("ингибирующий рецептор"), которые обладают сходными аминокислотными последовательностями, которые отличаются в основном своими цитоплазматическими доменами. Активирующий рецептор FcγRIIA содержит в своем цитоплазматическом домене активирующий мотив иммунорецептора на основе тирозина (ITAM). Ингибирующий рецептор FcγRIIB содержит в своем цитоплазматическом домене ингибирующий мотив иммунорецептора на основе тирозина (ITIM) (рассмотрено в Daëron, Annu. Rev. Immunol. 15:203-234 (1997)). FcR рассмотрены в Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9:457-492 (1991); Capel et al., Immunomethods 4:25-34 (1994), и de Haas et al., J. Lab. Clin. Med. 126:330-41 (1995). В настоящем документе термин "FcR" относится к другим FcR, включающим в себя FcR, которые будут определены в будущем. Термин также относится к неонатальному рецептору, FcRn, ответственному за перенос материнских IgG плоду (Guyer et al., J. Immunol. 117:587 (1976), и Kim et al., J. Immunol. 24:249 (1994)).
"Обусловленная комплементом цитотоксичность" и "CDC" относятся к лизису мишени в присутствии комплемента. Активация пути комплемента начинается при связывании первого компонента системы комплемента (C1q) с молекулой (например, антителом), образующей комплекс с распознаваемым ею антигеном. Для оценки активации комплемента можно проводить анализ CDC, например, как описано в Gazzano-Santoro et al., J. Immunol. Methods 202:163 (1996).
"Аффинно зрелое" антитело представляет собой антитело с одним или несколькими изменениями в его одной или нескольких CDR, приводящих к увеличению аффинности антитела к антигену по сравнению с исходным антителом, в котором нет этого (этих) изменения(ий). Предпочтительные аффинно зрелые антитела обладают наномолярными или даже пикомолярными аффинностями к антигену-мишени. Аффинно зрелые антитела получают известными в данной области способами. В Marks et al. Bio/Technology 10:779-783 (1992) описано созревание аффинности посредством перестановки доменов VH и VL. Случайный мутагенез CDR и/или каркасных остатков описан в: Barbas et al. Proc Nat. Acad. Sci, USA 91:3809-3813 (1994); Schier et al. Gene 169:147-155 (1995); Yelton et al. J. Immunol., 155:1994-2004 (1995); Jackson et al., J. Immunol., 154(7):3310-9 (1995), и Hawkins et al., J. Mol. Biol., 226:889-896 (1992).
Термин "иммуноспецифичный", как используют, например, в "иммуноспецифичном связывании антител" относится к специфичному для антигена связывающему взаимодействию, которое происходит между антигенсвязывающим участком антитела и конкретным антигеном, распознаваемым антителом.
"Биологически активный" и "желательная биологическая активность" для целей настоящего документа означает обладание способностью регулировать активность DR5 или активацию DR5, включая в качестве примера апоптоз (или агонистическим или стимулирующим образом или антагонистическим или блокирующим образом), по меньшей мере, в одном типе клеток млекопитающего in vivo или ex vivo, связывание с лигандом Apo-2 (TRAIL) или регуляцию активации одной или нескольких молекул во внутриклеточном пути передачи сигнала, таких как каспаза 3, каспаза 8, каспаза 10 или FADD. В данной области известны анализы для определения активации таких внутриклеточных молекул, например, см. Boldin et al., J. Biol. Chem., 270:7795-7798 (1995); Peter, Cell Death Differ., 7:759-760 (2000); Nagata, Cell, 88:355-365 (1998); Ashkenazi et al., Science, 281:1305-1308 (1999).
Термины "агонист" и "агонистический", когда применяют в настоящем документе, обозначают или описывают молекулу, способную, прямо или опосредованно, в значительной степени индуцировать, стимулировать или усиливать биологическую активность или активацию DR5. Необязательно, "агонистическое антитело к DR5" представляет собой антитело с активностью, сравнимой с лигандом DR5, известным как лиганд Apo-2 (TRAIL), или способное к активации рецептора DR5, что приводит к активации одного или нескольких внутриклеточных путей передачи сигнала, что может включать в себя активацию каспазы 3, каспазы 8, каспазы 10 или FADD.
Термины "антагонист" и "антагонистический", когда применяют в настоящем документе, обозначают или описывают молекулу, способную, прямо или опосредованно, в значительной степени нейтрализовать, снижать или ингибировать биологическую активность DR5 или активацию DR5. Необязательно антагонист представляет собой молекулу, нейтрализующую биологическую активность, являющуюся результатом активации DR5 или формирования комплекса между DR5 и ее лигандом, таким как лиганд Apo-2.
Термины "апоптоз" и "апоптотическая активность" применяются в широком смысле и обозначают запланированную или контролируемую форму клеточной гибели у млекопитающих, которая, как правило, сопровождается одним или несколькими характерными изменениями в клетке, включая конденсацию цитоплазмы, потерю микроворсинок плазматической мембраной, сегментацию ядра, деградацию хромосомной ДНК или снижение функционирования митохондрий. Эту активность можно определять и измерять, например, посредством анализов жизнеспособности клетки, анализов связывания аннексина V, анализов PARP, анализа FACS или электрофореза ДНК, где все они известны в данной области. Необязательно апоптотическую активность определяют посредством аннексина V или анализа PARP.
Термины "злокачественная опухоль", "раковый" и "злокачественный" обозначают или описывают физиологическое состояние у млекопитающих, которое, как правило, характеризуется нерегулируемым ростом клеток. Примеры злокачественной опухоли включают в себя в качестве неограничивающих примеров, карциному, включая аденокарциному, лимфому, бластому, меланому, глиому, саркому, миелому (такую как множественная миелома) и лейкоз. Более конкретные примеры таких злокачественных опухолей включают в себя плоскоклеточный рак, мелкоклеточный рак легких, немелкоклеточный рак легких, аденокарциному легких и сквамозную карциному легких, желудочно-кишечный рак, ходжкинскую и неходжкинскую лимфомы, рак поджелудочной железы, глиобластому, рак шейки матки, глиому, рак яичников, злокачественную опухоль печени, такую как печеночная карцинома и гепатома, рак мочевого пузыря, рак молочной железы, рак толстой кишки, колоректальный рак, карциному эндометрия или матки, карциному слюнных желез, рак почки, такой как почечноклеточный рак и опухоли Вильмса, базально-клеточный рак, меланому, рак предстательной железы, рак женских наружных половых органов, рак щитовидной железы, рак яичка, рак пищевода и различные типы злокачественных опухолей головы и шеи.
Термин "связанное с иммунной системой заболевание" означает заболевание, в котором какой-либо компонент иммунной системы млекопитающего вызывает, опосредует или другим образом вносит вклад в заболеваемость млекопитающего. Также включены заболевания, где стимуляция иммунного ответа или вмешательство в него оказывает благоприятный эффект на развитие заболевания. В этот термин включены аутоиммунные заболевания, опосредованные иммунной системой воспалительные заболевания, не опосредуемые иммунной системой воспалительные заболевания, инфекционные заболевания и иммунодефициты. Примеры связанных с иммунной системой заболеваний и воспалительных заболеваний, некоторые из которых являются опосредованными иммунными или T-клетками, которые можно подвергать лечению по изобретению, включают в себя системную красную волчанку, ревматоидный артрит, ювенильный ревматоидный артрит, спондилоартропатию, системный склероз (склеродермию), идиопатические воспалительные миопатии (дерматомиозит, полимиозит), синдром Шегрена, системный васкулит, саркоидоз, аутоиммунную гемолитическую анемию (иммунную панцитопению, пароксизмальную ночную гемоглобинурию), аутоиммунную тромбоцитопению (идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру, опосредованную иммунной системой тромбоцитопению), тиреоидит (болезнь Грэйва, тиреоидит Хашимото, ювенильный лимфоцитарный тиреоидит, атрофический тиреоидит), сахарный диабет, опосредованное иммунной системой почечное заболевание (гломерулонефрит, тубулоинтерстициальный нефрит), демиелинизирующие заболевания центральной и периферической нервной систем, такие как рассеянный склероз, идиопатическая демиелинизирующая полиневропатия или синдром Гийена-Барре, и хроническую воспалительную демиелинизирующую полиневропатию, гепатобилиарные заболевания, такие как инфекционный гепатит (гепатит A, B, C, D, E и другие негепатотропные вирусы), аутоиммунный хронический активный гепатит, первичный биллиарный цирроз, гранулематозный гепатит, склерозирующий холангит, воспалительные и фиброзные легочные заболевания, такие как воспалительное заболевание кишечника (язвенный колит, болезнь Крона), глютензависимая энтеропатия и синдром Уипла, аутоиммунные или опосредованные иммунной системой заболевания кожи, включая буллезные заболевания кожи, полиморфную эритему и контактный дерматит, псориаз, аллергические заболевания, такие как астма, аллергический ринит, атопический дерматит, гиперчувствительность к пище и крапивница, иммунологические заболевания легких, такие как эозинофильные пневмонии, идиопатический фиброз легких и гиперчувствительный пневмонит, связанные с трансплантацией заболевания, включая отторжение трансплантата и реакцию "трансплантат против хозяина". Инфекционные заболевания включают в себя СПИД (инфекция ВИЧ), гепатит A, B, C, D и E, бактериальные инфекции, грибковые инфекции, протозойные инфекции и паразитарные инфекции.
"Аутоиммунное заболевание" в настоящем документе используют в широком, общем смысле для обозначения заболеваний или состояний у млекопитающих, у которых разрушение нормальных или здоровых тканей происходит вследствие гуморального или клеточного иммунного ответа конкретного млекопитающего на его или ее собственные тканевые компоненты. Примеры включают в себя в качестве неограничивающих примеров обыкновенную волчанку, тиреоидит, ревматоидный артрит, псориаз, рассеянный склероз, аутоиммунный диабет и воспалительное заболевание кишечника (IBD).
Когда применяют в настоящем документе, "ингибирующее рост средство" относится к соединению или композиции, которые ингибируют рост клетки in vitro и/или in vivo. Таким образом, ингибирующее рост средство может представлять собой средство, которое специфически уменьшает процент клеток в S-фазе. Примеры ингибирующих рост средств включают в себя средства, блокирующие прохождение клеточного цикла (в точке, отличной от S-фазы), такие как средства, индуцирующие арест в G1-фазе и арест в M-фазе. Классические блокаторы M-фазы включают в себя алкалоиды барвинка (винкристин и винбластин), ТАКСОЛ® и ингибиторы топоизомеразы II, такие как доксорубицин, эпирубицин, даунорубицин, этопозид и блеомицин. Средства, осуществляющие арест в G1, также имеют побочным результатом арест в S-фазе, например алкилирующие ДНК средства, такие как тамоксифен, преднизон, дакарбазин, мехлоретамин, цисплатин, метотрексат, 5-фторурацил и ara-C. Дополнительную информацию можно найти в The Molecular Basis of Cancer, Mendelsohn and Israel, eds., глава 1, озаглавленная "Cell cycle regulation, oncogenes, and antineoplastic drugs" by Murakami et al. (WB Saunders: Philadelphia, 1995), особенно стр.13.
Как применяют в данной заявке, термин "пролекарство" относится к предшественнику или производной форме фармацевтически активного вещества, которые менее цитотоксичны для злокачественных клеток по сравнению с исходным лекарственным средством и способны к ферментативной активации или конверсии в более активную исходную форму. Например, см. Wilman, "Prodrugs in Cancer Chemotherapy" Biochemical Society Transactions, l4, pp.375-382, 615th Meeting Belfast (1986), и Stella et al.," Prodrugs: A Chemical Approach to Targeted Drug Delivery," Directed Drug Delivery, Borchardt et al., (ed.), pp.247-267, Humana Press (1985). Пролекарства по данному изобретению включают в себя в качестве неограничивающих примеров содержащие фосфаты пролекарства, содержащие тиофосфаты пролекарства, содержащие сульфаты пролекарства, содержащие пептиды пролекарства, модифицированные D-аминокислотами пролекарства, гликозилированные пролекарства, содержащие бета-лактамы пролекарства, содержащие необязательно замещенные феноксиацетамиды пролекарства или содержащие необязательно замещенные фенилацетамиды пролекарства, 5-фторцитозиновые и другие 5-фторуридиновые пролекарства, которые можно конвертировать в более активное цитотоксическое свободное лекарственное средство. Примеры цитотоксических лекарственных средств, которые можно дериватизировать в пролекарственную форму для применения по настоящему изобретению, включают в себя в качестве неограничивающих примеров те химиотерапевтические средства, которые описаны ниже.
Как применяют в настоящем документе, термин "цитотоксическое средство" относится к веществу, которое ингибирует или предотвращает функционирование клеток и/или вызывает разрушение клеток. Термин предназначен для включения в него радиоактивных изотопов (например, At211, I131, I125, Y90, Re186, Re188, Sm153, Bi212, P32 и радиоактивных изотопов Lu), химиотерапевтических средств и токсинов, таких как низкомолекулярные токсины или ферментативно активные токсины бактериального, грибкового, растительного или животного происхождения, включая их фрагменты и/или варианты.
"Химиотерапевтическое средство" представляет собой химическое соединение, пригодное для лечения состояний, таких как злокачественная опухоль. Примеры химиотерапевтических средств включают в себя алкилирующие средства, такие как тиотепа и циклофосфамид (CYTOXAN™); алкилсульфонаты, такие как бусульфан, импросульфан и пипосульфан; азиридины, такие как бензодопа, карбоквон, метуредопа и уредопа; этиленимины и метиламеламины, включающие в себя алтретамин, триэтиленмеламин, триэтиленфосфорамид, триэтилентиофосфорамид и триметилоломеламин; ацетогенины (особенно буллатацин и буллатацинон); камптотецин (включающий в себя синтетический аналог топотекан); бриостатин; каллистатин; CC-1065 (включающий его адолезиновые, карзелезиновые и бизелезиновые синтетические аналоги); криптофицины (особенно криптофицин 1 и криптофицин 8); доластатин; дуокармицин (включая его синтетические аналоги, KW-2189 и CBI-TMI); элеутеробин; панкратистатин; саркодиктиин; спонгистатин; азотистые иприты, такие как хлорамбуцил, хлорнафазин, холофосфамид, эстрамустин, ифосфамид, мехлоретамин, гидрохлорид оксида мехлоретамина, мелфалан, новэмбихин, фенестерин, преднимустин, трофосфамид, урамустин; нитрозомочевины, такие как кармустин, хлорозотоцин, фотемустин, ломустин, нимустин, ранимустин; антибиотики, такие как ендииновые антибиотики (например, калихимицин, особенно калихимицин γ1 I и калихимицин ωI I (см., например, Agnew, Chem Intl. Ed. Engl., 33:183-186 (1994)); динемицин, включая динемицин A; эсперамицин; а также хромофор неокарциностатин и родственные хромопротеиновые ендииновые антибиотические хромофоры), аклациномизины, актиномицин, аутрамицин, азасерин, блеомицины, кактиномицин, карабицин, карминомицин, карцинофилин, хромомицины, дактиномицин, даунорубицин, деторубицин, 6-диазо-5-оксо-L-норлейцин, доксорубицин (включая морфолинодоксорубицин, цианоморфолинодоксорубицин, 2-пирролинодоксорубицин и дезоксидоксорубицин), эпирубицин, эзорубицин, идарубицин, марцелломицин, митомицины, микофеноловая кислота, ногаламицин, оливомицины, пепломицин, потфиромицин, пуромицин, квеламицин, родорубицин, стрептонигрин, стрептозоцин, туберцидин, убенимекс, циностатин, зорубицин; антиметаболиты, такие как метотрексат и 5-фторурацил (5-FU); аналоги фолиевой кислоты, такие как деноптерин, метотрексат, птероптерин, триметрексат; аналоги пурина, такие как флударабин, 6-меркаптопурин, тиамиприн, тиогуанин; аналоги пиримидина, такие как анцитабин, азацитидин, 6-азауридин, кармофур, цитарабин, дидезоксиуридин, доксифлуридин, эноцитабин, флоксуридин, 5-FU; андрогены, такие как калустерон, пропионат дромостанолона, эпитиостанол, мепитиостан, тестолактон; антиадренергические средства, такие как аминоглутетимид, митотан, трилостан; компенсаторы фолиевой кислоты, такие как фролиновая кислота; ацеглатон; гликозид альдофосфамида; аминолевулиновая кислота; амсакрин; бестрабуцил; бизантрен; эдатраксат; дефофамин; демеколцин; диазиквон; эльфорнитин; ацетат эллиптиния; эпотилон; этоглюцид; нитрат галлия; гидроксимочевина; лентинан; лонидамин; майтанзиноиды, такие как майтанзин и анзамитоцины; митогуазон; митоксантрон; мопидамол; нитракрин; пентостатин; фенамет; пирарубицин; подофилиновая кислота; 2-этилгидразид; прокарбазин; PSK®; разоксан; ризоксин; сизофиран; спирогерманий; тенуазоновая кислота; триазиквон; 2,2',2''-трихлортриэтиламин; трихотецены (особенно токсин T-2, верракурин A, роридин A и ангуидин); уретан; виндезин; дакарбазин; манномустин; митобронитол; митолактол; пипоброман; гацитозин; арабинозид ("Ara-C"); циклофосфамид; тиотепа; таксоиды, например паклитаксел (TAXOL®, Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, NJ) и доцетаксел (TAXOTERE®, Rhône-Poulenc Rorer, Antony, France); хлорамбуцил; гемцитабин; 6-тиогуанин; меркаптопурин; метотрексат; аналоги платины, такие как цисплатин и карбоплатин; винбластин; платина; этопозид (VP-16); ифосфамид; митомицин C; митоксантрон; винкристин; винорелбин; навелбин; новантрон; тенипозид; дауномицин; аминоптерин; кселода; ибандронат; CPT-11; ингибитор топоизомеразы RFS 2000; дифторметилорнитин (DMFO); ретиноевая кислота; капецитабин и фармацевтически приемлемые соли, кислоты или производные любого из указанного выше. Также в это определение включены антигормональные средства, регулирующие или ингибирующие действие гормонов на опухоли, такие как антиэстрогенные средства, например, включающие в себя тамоксифен, ралоксифен, ингибирующие ароматазу 4(5)-имидазолы, 4-гидрокситамоксифен, триоксифен, коксифен, LY117018, онапристон и торемифен (фарестон); и антиандрогенные средства, такие как флутамид, нилутамид, бикалутамид, лейпролид и гозерелин; и фармацевтически приемлемые соли, кислоты или производные любого из указанного выше.
Термин "цитокин" представляет собой общий термин для белков, высвобождаемых одной группой клеток и действующих на другие клетки в качестве межклеточных медиаторов. Примерами таких цитокинов являются лимфокины, монокины и обычные полипептидные гормоны. Цитокины включают в себя гормон роста, такой как гормон роста человека, N-метионил гормон роста человека и бычий гормон роста; паратиреоидный гормон; тироксин; инсулин; проинсулин; релаксин; прорелаксин; гликопротеиновые гормоны, такие как фолликулостимулирующий гормон (FSH), тиреотропный гормон (TSH) и лютеинизирующий гормон (LH); фактор роста печени; фактор роста фибробластов; пролактин; плацентарный лактоген; факторы некроза опухоли-альфа и -бета; мюллерова ингибирующая субстанция; ассоциированный с гонадотропином пептид мыши; ингибин; активин; фактор роста эндотелия сосудов; интегрин; тромбопоетин (TPO); факторы роста нервов, такие как NGF-альфа; фактор роста тромбоцитов; трансформирующие факторы роста (TGF), такие как TGF-альфа и TGF-бета; инсулиноподобный фактор роста-I и -II; эритропоэтин (EPO); остеоиндуктивные факторы; интерфероны, такие как интерферон-альфа, -бета и -гамма; колониестимулирующие факторы (CSF), такие как макрофагальный CSF (M-CSF); гранулоцитарно-макрофагальный CSF (GM-CSF) и гранулоцитарный CSF (G-CSF); интерлейкины (IL), такие как IL-1, IL-1альфа, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12; фактор некроза опухоли, такой как TNF-альфа или TNF-бета, и другие полипептидные факторы, включая LIF и лиганд kit (KL). Как применяют в настоящем документе, термин цитокин включает в себя белки из природных источников или из культуры рекомбинантных клеток и биологически активные эквиваленты цитокинов с природной последовательностью.
Как применяют в настоящем документе, термины "лечение" и "терапия" относятся к лечебной терапии, профилактической терапии и превентивной терапии.
Термин "терапевтически эффективное количество" относится к количеству лекарственного средства, эффективному для лечения заболевания или нарушения у млекопитающего. В случае злокачественной опухоли терапевтически эффективное количество лекарственного средства может уменьшать количество злокачественных клеток; уменьшать размер опухоли; ингибировать (т.е. до некоторой степени замедлять, а предпочтительно останавливать) инфильтрацию злокачественных клеток в периферические органы; ингибировать (т.е. до некоторой степени замедлять, а предпочтительно останавливать) метастазирование опухоли; до некоторой степени ингибировать рост опухоли и/или до некоторой степени облегчать один или несколько симптомов, ассоциированных с нарушением. По той степени, в которой лекарственное средство может предотвращать рост существующих злокачественных клеток и/или уничтожать их, оно может быть цитостатическим и/или цитотоксическим. Для терапии злокачественных опухолей эффективность in vivo можно измерять, например, посредством оценки массы или объема опухоли, времени до прогрессирования заболевания (TTP) и/или определения доли ответивших (RR).
Как применяют в настоящем документе, термин "млекопитающее" относится к любому млекопитающему, классифицируемому как млекопитающее, включая людей, высших приматов, коров, лошадей, собак и кошек. В предпочтительном варианте осуществления изобретения млекопитающее представляет собой человека.
Термин "объективный ответ" определяют как полный или частичный ответ субъекта на лечение, как определяют, применяя критерий оценки ответа в солидных опухолях (Response Evaluation Criteria in Solid Tumors) (RECIST) (J. Nat. Cancer Inst. 92(3):205-216 (2000)).
Термин "длительность ответа" в настоящем документе используют для указания времени от начального полного или частичного ответа до момента прогрессирования заболевания или смерти.
Термин "продолжительность жизни без прогрессирования" в настоящем документе используют для указания времени от первых суток лечения до прогрессирования заболевания или гибели, смотря по тому, что произойдет сначала.
Термин "полная регрессия (CR)" используют для указания того, что объем опухоли в трех последовательных измерениях составляет ≤13,5 мм3.
Термин "частичная регрессия (PR)" указывает на то, что объем опухоли в трех последовательных измерениях составляет ≤50% от ее объема в первые сутки и ≥13,5 мм3 в одном или нескольких из этих измерений.
II. Композиции и способы по изобретению
A. Антитела к DR5
В одном из вариантов осуществления изобретения предоставлены антитела к DR5. Примеры антител включают в себя поликлональные, моноклональные, гуманизированные, биспецифические и гетероконъюгированные антитела. Эти антитела могут представлять собой агонистические, антагонистические или блокирующие антитела.
1. Поликлональные антитела
Антитела по изобретению могут включать в себя поликлональные антитела. Способы получения поликлональных антител известны специалистам в данной области. Поликлональные антитела можно индуцировать у млекопитающего, например, посредством одной или нескольких инъекций иммунизирующего вещества и, при желании, адъюванта. Как правило, иммунизирующее вещество и/или адъювант инъецируют животному посредством нескольких подкожных или интраперитонеальных инъекций. Иммунизирующее вещество может содержать полипептид DR5 (или ECD DR5) или его слитный белок. Может быть эффективным конъюгировать иммунизирующее вещество с белком, для которого известно, что он иммуногенен у иммунизируемого животного. Примеры таких иммуногенных белков включают в себя в качестве неограничивающих примеров гемоцианин морского блюдца, сывороточный альбумин, бычий тиреоглобулин и ингибитор трипсина сои. Примеры адъювантов, которые можно применять, включают в себя полный адъювант Фрейнда и адъювант MPL-TDM (монофосфорил липид A, синтетический дикориномиколат трегалозы). Специалист в данной области может выбрать протокол иммунизации без излишнего экспериментирования. Затем у млекопитающего можно взять кровь и проанализировать сыворотку на титр антитела к DR5. При желании млекопитающего можно повторно стимулировать до тех пор, пока титр антитела увеличивается или находится на плато.
2. Моноклональные антитела
Антитела по изобретению альтернативно могут представлять собой моноклональные антитела. Моноклональные антитела можно получить с применением гибридомных способов, таких как описанные в Kohler and Milstein, Nature, 256:495 (1975). В гибридомном способе мышь, хомяка или другого подходящего животного-хозяина, как правило, иммунизируют иммунизирующим веществом для стимуляции лимфоцитов, которые продуцируют или способны продуцировать антитела, которые будут специфически связываться с иммунизирующим веществом. Альтернативно лимфоциты можно иммунизировать in vitro.
Иммунизирующее вещество, как правило, включает в себя полипептид DR5 (или ECD DR5) или его слитный белок, такой как слитный белок ECD DR5-IgG. Иммунизирующее вещество альтернативно может содержать фрагмент или часть DR5 с одной или несколькими аминокислотами, принимающими участие в связывании Apo-2L с DR5. В предпочтительном варианте осуществления иммунизирующее вещество содержит последовательность внеклеточного домена DR5, слитую с последовательностью IgG.
Как правило, используют или лимфоциты периферической крови ("PBL"), если желательны клетки человеческого происхождения, или клетки селезенки или клетки лимфоузлов, если желательны источники из не относящихся к человеку млекопитающих. Затем лимфоциты сливают с иммортализованной клеточной линией с использованием подходящего вызывающего слияние клеток вещества, такого как полиэтиленгликоль, с получением гибридомной клетки [Goding, Monoclonal antibodies: Principles and Practice, Academic Press, (1986) pp.59-103]. Иммортализованные клеточные линии, как правило, представляют собой трансформированные клетки млекопитающих, в частности миеломные клетки, происходящие от грызунов, коров и человека. Как правило, применяют миеломные клеточные линии крыс или мышей. Гибридомные клетки можно культивировать в подходящей среде для культивирования, предпочтительно содержащей одно или несколько веществ, ингибирующих рост или выживание неслитых иммортализованных клеток. Например, если в родительских клетках отсутствует фермент гипоксантин-гуанин-фосфорибозилтрансфераза (HGPRT или HPRT), среда для культивирования гибридомы, как правило, будет содержать гипоксантин, аминоптерин и тимидин ("среда HAT"), которые предотвращают рост дефектных по HGPRT клеток.
Предпочтительными иммортализованными линиями клеток являются клетки, которые эффективно сливаются, поддерживают высокий уровень экспрессии антитела выбранными продуцирующими антитела клетками и являются чувствительными к такой среде, как среда HAT. Более предпочтительными иммортализованными линиями клеток являются линии миеломы мышей, которые можно получить, например, из Salk Institute Cell Distribution Center, San Diego, California и American Type Culture Collection, Manassas, Virginia. Примером такой мышиной линии миеломных клеток является P3X63Ag8U.1 (ATCC CRL 1580). Описано также получение моноклональных антител в линиях клеток миеломы человека и гетеромиеломы мыши-человека [Kozbor, J. Immunol., 133:3001 (1984); Brodeur et al., Monoclonal antibody Production Techniques and Applications, Marcel Dekker, Inc., New York, (1987) pp.51-63].
Затем среду для культивирования, в которой культивируют гибридомные клетки, можно анализировать на присутствие моноклональных антител, направленных против DR5. Предпочтительно специфичность связывания моноклональных антител, полученных посредством гибридомных клеток, определяют посредством иммунопреципитации или анализа связывания in vitro, такого как радиоиммунный анализ (RIA) или твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA). Такие способы и анализы известны в данной области. Например, аффинность связывания моноклонального антитела можно определять анализом Скэтчарда по Munson and Pollard, Anal. Biochem., 107:220 (1980).
После идентификации желательных гибридомных клеток клоны можно субклонировать посредством серийных разведений и выращивать традиционными способами [Goding, выше]. Подходящие для данной цели среды для культивирования включают в себя, например, среду Игла, модифицированную Дульбекко и среду RPMI-1640. Альтернативно гибридомные клетки можно выращивать у млекопитающего in vivo в виде асцитов.
Секретируемые субклонами моноклональные антитела можно выделять или очищать из среды для культивирования или асцитной жидкости традиционными способами очистки иммуноглобулинов, например, такими как, очистка на белок А-сефарозе, хроматография на гидроксилапатите, гель-электрофорез, диализ или аффинная хроматография.
Моноклональные антитела также можно получить способами рекомбинантных ДНК, такими как описаны в патенте США №4816567. ДНК, кодирующие моноклональные антитела по изобретению, можно легко выделять и секвенировать с применением традиционных способов (например, с применением олигонуклеотидных зондов, способных специфически связываться с генами, кодирующими тяжелые и легкие цепи моноклональных антител). Гибридомные клетки по изобретению служат в качестве предпочтительного источника такой ДНК. После выделения ДНК, для обеспечения синтеза моноклональных антител в рекомбинантных клетках-хозяевах, ее можно поместить в экспрессирующие векторы, которые затем трансфицируют в клетки-хозяева, такие как клетки E.coli, клетки COS обезьяны, клетки яичников китайского хомяка (CHO) или миеломные клетки, которые иначе не продуцируют белок иммуноглобулина. ДНК также можно модифицировать, например, посредством замены кодирующими последовательностями константных доменов тяжелых и легких цепей человека гомологичных последовательностей мыши, Morrison, et al., Proc. Nat. Acad. Sci. 81, 6851 (1984), или ковалентным присоединением к кодирующей последовательности иммуноглобулина всей или части кодирующей последовательности неиммуноглобулинового полипептида. Таким образом, получают "химерные" или "гибридные" антитела, которые обладают специфичностью связывания моноклонального антитела против DR5 по настоящему изобретению.
Как правило, такими неиммуноглобулиновыми полипептидами замещают константные домены антитела по изобретению или ими замещают вариабельные домены одного антигенсвязывающего участка антитела по изобретению с получением химерного бивалентного антитела, содержащего один антигенсвязывающий участок со специфичностью к DR5 и другой антигенсвязывающий участок со специфичностью к другому антигену.
Химерные или гибридные антитела также можно получать in vitro с применением известных способов химии синтеза белков, включая способы, включающие в себя использование сшивающих средств. Например, с применением реакции дисульфидного замещения или посредством формирования тиоэфирной связи можно конструировать иммунотоксины. Примеры подходящих для этой цели реагентов включают в себя иминотиолат и метил-4-меркаптобутиримидат.
Также можно получать одноцепочечные фрагменты Fv так, как описано в Iliades et al., FEBS Letters, 409:437-441 (1997). Связывание таких одноцепочечных фрагментов с применением различных линкеров описано в Kortt et al., Protein Engineering, 10:423-433 (1997). В данной области хорошо известен ряд способов рекомбинантных получения и обработки антител. Иллюстративные примеры таких способов, которые, как правило, применяют специалисты в данной области, более подробно описаны ниже.
(i) Гуманизированные антитела
Как правило, гуманизированное антитело несет один или несколько аминокислотных остатков, введенных в него из не принадлежащего человеку источника. Эти не принадлежащие человеку аминокислотные остатки часто обозначают как "импортируемые" остатки, которые, как правило, берут из "импортируемого" вариабельного домена. Гуманизирование по существу можно проводить способом Winter с коллегами [Jones et al., Nature, 321:522-525 (1986); Riechmann et al., Nature, 332:323-327 (1988); Verhoeyen et al., Science, 239:1534-1536
(1988)], посредством замены CDR грызунов или последовательностей CDR на соответствующие последовательности антитела человека.
Таким образом, такие "гуманизированные" антитела представляют собой химерные антитела, где по существу соответствующими последовательностями из не являющихся человеком видов замещено менее одного исходного вариабельного домена человека. На практике гуманизированные антитела, как правило, представляют собой антитела человека, в которых некоторые остатки CDR и, возможно, некоторые остатки FR замещены на аналогичные участки из антител грызунов.
Важно, чтобы антитела гуманизировали с сохранением высокой аффинности к антигену и других благоприятных биологических свойств. Для достижения этой цели в соответствии с предпочтительным способом гуманизированные антитела получают способом анализа исходных последовательностей и различных воображаемых гуманизированных продуктов с применением трехмерных моделей исходной и гуманизированной последовательностей. Трехмерные модели иммуноглобулинов являются общедоступными и хорошо известны специалистам в данной области. Доступны компьютерные программы, которые иллюстрируют и отображают возможные трехмерные конформационные структуры выбранных возможных последовательностей иммуноглобулинов. Исследование этих изображений позволяет проводить анализ возможной роли остатков в функционировании возможной последовательности иммуноглобулина, т.е. анализ остатков, влияющих на способность иммуноглобулина-кандидата связывать его антиген. Таким образом, можно выбрать и объединить остатки FR из консенсусной и импортируемой последовательностей так, чтобы добиться желательной характеристики антитела, такой как увеличенная аффинность к антигену(ам)-мишени. Как правило, непосредственно и наиболее значительно в воздействие на связывание антигена вовлечены остатки CDR.
(ii) Антитела человека
Моноклональные антитела человека можно получать гибридомным способом. Для получения моноклональных тел человека описаны линии клеток миеломы человека и гетеромиеломы мыши-человека (Kozbor, J. Immunol., 133:3001 (1984), и Brodeur et al., Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications, pp.51-63 (Marcel Dekker, Inc., New York, 1987)).
В настоящее время можно получать трансгенных животных (например, мышей), которые после иммунизации способны к продукции спектра антител человека в отсутствие продукции эндогенных иммуноглобулинов. Например, описано, что гомозиготная делеция гена соединительной области (JH) тяжелой цепи антитела у химерных и мутантных по зародышевой линии мышей приводит к полному ингибированию продукции эндогенных антител. Перенос набора генов иммуноглобулинов зародышевой линии человека таким мутантным по зародышевой линии мышам приводит при стимуляции антигеном к продукции антител человека. Например, см. Jakobovits et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 90:2551-255 (1993); Jakobovits et al., Nature, 362:255-258 (1993).
Mendez et al. (Nature Genetics 15: 146-156 [1997]) дополнительно улучшили этот способ и получили линию трансгенных мышей, обозначенную как "Xenomouse II", которая при стимуляции антигеном продуцировала высокоаффинные полностью человеческие антитела. Этого достигли посредством интеграции в зародышевую линию мышей с делецией в эндогенном сегменте JH, как описано выше, локусов тяжелой цепи и легкой цепи размером в миллион пар нуклеотидов. Xenomouse II несет 1020 т.п.н. локуса тяжелой цепи человека, содержащего приблизительно 66 генов VH, целые области DH и JH и три другие константные области (µ, δ и χ), а также несет 800 т.п.н. локуса κ человека, содержащего 32 гена Vκ, сегменты Jκ и гены Cκ. Полученные у этих мышей антитела во всех аспектах, включая перестановку генов, сборку и спектр, имеют высокое сходство с антителами, наблюдаемыми у человека. Антитела человека экспрессируются предпочтительнее, чем эндогенные антитела, вследствие делеции в эндогенном сегменте JH, предотвращающей перестановку генов в локусе мыши.
Альтернативно, для получения антител и фрагментов антител человека in vitro из репертуара генов вариабельных (V) доменов иммуноглобулинов от неиммунизированных доноров можно применять технологию фагового дисплея (McCafferty et al., Nature, 348, 552-553 (1990)). В соответствии с этим способом гены V-доменов антител клонируют в рамку считывания гена главного или минорного белка оболочки нитевидного бактериофага, такого как M13 или fd, и представляют в виде функциональных фрагментов антител на поверхности фаговой частицы. Так как нитевидная частица содержит одноцепочечную копию ДНК фагового генома, отбор на основе функциональных свойств антитела также приводит к отбору гена, кодирующего антитело, проявляющее эти свойства. Таким образом, фаг имитирует некоторые из свойств B-клетки. Фаговый дисплей можно проводить множеством способов; для их обзора см., например, Johnson, Kevin S. and Chiswell, David J., Current Opinion in Structural Biology 3, 564-571 (1993). Для фагового дисплея можно использовать несколько источников сегментов V-генов. Clackson et al., Nature, 352, 624-628 (1991), выделили набор различных антител к оксазолину из малой библиотеки случайно комбинированных V-генов, полученных из селезенки иммунизированных мышей. Можно сконструировать репертуар V-генов от неиммунизированных доноров-людей, а антитела к набору разнообразных антигенов (включая собственные антигены) можно выделять по существу способом, описанным у Marks et al., J. Mol. Biol. 222, 581-597 (1991), или Griffith et al., EMBO J. 12, 725-734 (1993). При естественном иммунном ответе гены антител с высокой скоростью накапливают мутации (соматическое гипермутирование). Некоторые из вносимых изменений обеспечивают большую аффинность, а B-клетки, экспонирующие поверхностный иммуноглобулин с высокой аффинностью, реплицируются и дифференцируются при последующей стимуляции антигеном более предпочтительно. Этот природный процесс можно имитировать с применением способа, известного как "перестановка цепей" (Marks et al., Bio/Technol. 10, 779-783 [1992]). В данном способе аффинность "первичного" антитела человека, полученного посредством фагового дисплея, можно улучшить посредством последовательного замещения V-областями генов тяжелых и легких цепей со спектром встречающихся в природе вариантов (репертуаров) генов V-доменов, полученных от неиммунизированных доноров. Этот способ обеспечивает получение антител и фрагментов антител с аффинностями в нМ диапазоне. Стратегия получения очень больших репертуаров фаговых антител (также известная как "материнская библиотека") описана в Waterhouse et al., Nucl. Acids Res. 21, 2265-2266 (1993). Перестановку генов также можно использовать для получения антитела человека из антитела грызуна, где антитело человека обладает сходными аффинностями и специфичностями с исходным антителом грызуна. В соответствии с этим способом, который также обозначают как "импринтинг эпитопа", ген V-домена тяжелой или легкой цепи антитела грызуна, полученный способом фагового дисплея, заменяют спектром генов V-доменов человека, получая химеры грызуна-человека. Отбор на антигене приводит к выделению вариабельного домена человека, способного к восстановлению функционального антигенсвязывающего участка, т.е. эпитоп направляет (закрепляет) выбор партнера. Когда процесс повторяют для замены оставшегося V-домена грызуна, получают антитело человека (см. патентную заявку PCT WO 93/06213, опубликованную 1 апреля 1993 года). В отличие от традиционного гуманизирования антител грызунов посредством пересадки CDR, этот способ обеспечивает полностью человеческие антитела, в которых нет остатков каркаса или CDR, происходящих от грызуна.
Как подробно обсуждается ниже, антитела по изобретению необязательно могут включать в себя мономерные антитела, димерные антитела, а также поливалентные формы антител. Специалисты в данной области могут сконструировать такие димерные или поливалентные формы известными в данной области способами и с применением антител к DR5 по настоящему документу. В данной области также хорошо известны способы получения моновалентных антител. Например, один из способов включает в себя рекомбинантную экспрессию легкой цепи и модифицированной тяжелой цепи иммуноглобулина. Тяжелая цепь, как правило, укорочена в любой точке в Fc-области так, чтобы предотвратить перекрестное связывание тяжелых цепей. Альтернативно для предотвращения перекрестного связывания соответствующие остатки цистеина замещают другим аминокислотным остатком или удаляют.
(iii) Биспецифические антитела
Биспецифические антитела представляют собой моноклональные, предпочтительно человеческие или гуманизированные, антитела со специфичностями связывания, по меньшей мере, для двух различных антигенов. В настоящем случае одна из специфичностей связывания представляет собой специфичность для рецептора DR5, другая специфичность представляет собой специфичность для другого антигена, а предпочтительно для других рецептора или субъединицы рецептора. Например, в объем настоящего изобретения входят биспецифические антитела, специфически связывающие рецептор DR5 и другой рецептор апоптоза/передачи сигнала.
Способы получения биспецифических антител известны в данной области. Как правило, рекомбинантное получение биспецифических антител основано на совместной экспрессии двух пар тяжелых цепей-легких цепей иммуноглобулинов, где две тяжелые цепи обладают различными специфичностями (Millstein and Cuello, Nature 305, 537-539 (1983)). Вследствие случайной сортировки тяжелых и легких цепей иммуноглобулинов эти гибридомы (квадромы) продуцируют потенциальную смесь из 10 различных молекул антител, из которых только одна обладает корректной биспецифической структурой. Очистка правильной молекулы, которую обычно проводят посредством стадий аффинной хроматографии, является довольно трудоемкой, а выход продуктов является низким. Сходные способы описаны в публикации заявки PCT № WO 93/08829 (опубликованной 13 мая 1993 года) и в Traunecker et al., EMBO 10, 3655-3659 (1991).
В соответствии с другим и более предпочтительным подходом вариабельные домены антител с желательными специфичностями связывания (антигенсвязывающие участки антител) сливают с последовательностями константных доменов иммуноглобулинов. Предпочтительно слияние проводят с константным доменом тяжелой цепи иммуноглобулина, содержащим, по меньшей мере, часть областей шарнира, области CH2 и CH3. Предпочтительно, чтобы, по меньшей мере, на одном из слитных белков присутствовала первая константная область тяжелой цепи (CH1), содержащая участок, необходимый для связывания легкой цепи. ДНК, кодирующие слитные белки тяжелых цепей иммуноглобулинов и, при желании, легких цепей иммуноглобулина, вставляют в отдельные экспрессирующие векторы и котрансфицируют в подходящий организм-хозяин. Это предоставляет большую гибкость для регулировки соответствующих пропорций трех полипептидных фрагментов в вариантах осуществления, когда используемые при получении неравные соотношения трех полипептидных цепей обеспечивают оптимальный выход желательного биспецифического антитела. Однако когда экспрессия, по меньшей мере, двух полипептидных цепей в равных соотношениях приводит к высоким выходам или когда соотношения существенно не влияют на выход желательного сочетания цепей, кодирующие последовательности для двух или всех трех полипептидных цепей можно вставлять в один экспрессирующий вектор. В предпочтительном варианте осуществления этого подхода биспецифические антитела состоят из гибрида тяжелой цепи иммуноглобулина с первой специфичностью связывания на одном плече и гибрида из пары тяжелой цепи-легкой цепи иммуноглобулина (обеспечивающего вторую специфичность связывания) на другом плече. Обнаружено, что эта асимметрическая структура облегчает отделение желательного биспецифического соединения от нежелательных сочетаний иммуноглобулиновых цепей, так как наличие легкой цепи иммуноглобулина только в одной половине биспецифической молекулы обеспечивает легкий способ разделения. Этот подход описан в публикации PCT № WO 94/04690, опубликованной 3 марта 1994 года.
Более подробно о получении биспецифических антител см., например, Suresh et al., Methods in Enzymology 121, 210 (1986).
(iv) Гетероконъюгированные антитела
В объем настоящего изобретения также входят гетероконъюгированные антитела. Гетероконъюгированные антитела состоят из двух ковалентно связанных антител. Такие антитела предложены, например, для направления клеток иммунной системы к нежелательным клеткам (патент США №4676980) и для лечения ВИЧ-инфекции (публикации PCT №№ WO 91/00360, WO 92/200373 и EP 03089). Гетероконъюгированные антитела можно получать с применением подходящих способов перекрестного связывания. Подходящие сшивающие средства хорошо известны в данной области и описаны в патенте США №4676980, вместе с рядом способов перекрестного связывания.
(v) Фрагменты антител
В определенных вариантах осуществления антитело к DR5 (включая мышиные, человеческие и гуманизированные антитела и варианты антител) представляет собой фрагмент антитела. Для получения фрагментов антител разработаны различные способы. Как правило, эти фрагменты получают посредством протеолитического расщепления интактных антител (см., например, Morimoto et al., J. Biochem. Biophys. Methods 24:107-117 (1992), и Brennan et al., Science 229:81 (1985)). Однако эти фрагменты в настоящее время можно получать непосредственно из рекомбинантных клеток-хозяев. Например, фрагменты Fab'-SH можно непосредственно выделять из E.coli и химически связывать с формированием фрагментов F(ab')2 (Carter et al., Bio/Technology 10:163-167 (1992)). В другом варианте осуществления F(ab')2 формируют с применением для обеспечения сборки молекулы F(ab')2 лейциновой молнии GCN4. В соответствии с другим подходом фрагменты Fv, Fab или F(ab')2 можно выделять непосредственно из культуры рекомбинантных клеток-хозяев. Практикующим специалистам очевиден ряд способов получения фрагментов антител. Например, можно осуществлять расщепление с применением папаина. Примеры расщепления папаином описаны в WO 94/29348, опубликованной 12/22/94 и патенте США №4342566.
Расщепление антител папаином, как правило, дает два идентичных антигенсвязывающих фрагмента, называемых фрагментами Fab, каждый с одним антигенсвязывающим участком и остаточным фрагментом Fc. Обработка пепсином приводит к фрагменту F(ab')2 с двумя антигенсвязывающими участками, все еще способному к перекрестному связыванию антигена.
Полученные при расщеплении антитела фрагменты Fab также содержат константные домены легкой цепи и первый константный домен (CH1) тяжелой цепи. Фрагменты Fab' отличаются от фрагментов Fab добавлением небольшого количества остатков на С-конце домена CH1 тяжелой цепи, включая один или несколько остатков цистеина из шарнирной области антитела. Fab'-SH в настоящем документе представляет собой обозначение для Fab', в котором цистеиновый остаток(ки) константных доменов несут свободную тиольную группу. Фрагменты антител F(ab')2 исходно получали как пары фрагментов Fab' с остатками цистеинов шарнира между ними. Также известны другие способы химического связывания фрагментов антител.
(vi) Варианты аминокислотной последовательности антител
Варианты аминокислотной последовательности антител к DR5 получают введением в ДНК антитела к DR5 соответствующих изменений нуклеотидов или посредством пептидного синтеза. Такие варианты включают в себя, например, делеции, и/или инсерции, и/или замены остатков в пределах аминокислотных последовательностей антител к DR5 из примеров в настоящем документе. Для получения конечной конструкции можно осуществлять любое сочетание делеции, инсерции и замены при условии, что конечная конструкция обладает желательными характеристиками. Замены аминокислоты также могут изменять посттрансляционные процессы гуманизированных или вариантных антител к DR5, такие как изменение количества и положения участков гликозилирования.
Пригодный способ идентификации определенных остатков или областей антитела к DR5, которые представляют собой предпочтительные участки для мутагенеза, называется "мутагенез сканирования аланином", как описано в Cunningham and Wells, Science, 244:1081-1085 (1989). В статье определяют остаток или группу целевых остатков (например, заряженные остатки, такие как arg, asp, his, lys и glu) и заменяют нейтральной или отрицательно заряженной аминокислотой (наиболее предпочтительно аланином или полиаланином) для воздействия на взаимодействие аминокислот с антигеном DR5. Затем те положения аминокислот, которые продемонстрировали функциональную чувствительность к заменам, уточняют посредством внесения дополнительных или других изменений в участках замены или для них. Таким образом, хотя участок для внесения изменения в аминокислотной последовательности предопределен, характер мутации по существу не нуждается в предопределении. Например, для анализа характеристики мутации в данном участке, в целевом кодоне или области проводят сканирование ala или случайный мутагенез и экспрессированные варианты антител против DR5 скринируют на желательную активность.
Вставки в аминокислотную последовательность включают в себя слияния на N- и/или C-конце в диапазоне длины от одного остатка до полипептидов, содержащих сто или более остатков, а также вставки внутри последовательности одного или нескольких аминокислотных остатков. Примеры концевых вставок включают в себя антитело к DR5 с N-концевым остатком метионина или антитело, слитое с эпитопным маркером. Другие инсерционные варианты молекулы антитела к DR5 включают в себя слияние с N- или C-концом антитела к DR5 фермента, или полипептида, или полиола, увеличивающих время полужизни антитела в сыворотке.
Другим типом вариантов является вариант замены аминокислот. Эти варианты несут в молекуле антитела к DR5, по меньшей мере, один аминокислотный остаток, замещенный другим остатком. Участки наибольшего интереса для замещающего мутагенеза включают в себя гипервариабельные области, но также рассматривают изменения в FR. Консервативные замены представлены в таблице 1 под заголовком "предпочтительные замены". Если такие замены приводят к изменению биологической активности, тогда можно проводить более основательные изменения, обозначенные в таблице 1 как "допустимые замены", или как дополнительно описано ниже в отношении классов аминокислот, а продукты скринировать.
Таблица 1 | ||
Исходный остаток | Допустимые замены | Предпочтительные замены |
Ala (A) | Val; Leu; Ile | Val |
Arg (R) | Lys; Gln; Asn | Lys |
Asn (N) | Gln; His; Asp, Lys; Arg | Gln |
Asp (D) | Glu; Asn | Glu |
Cys (C) | Ser; Ala | Ser |
Gln (Q) | Asn; Glu | Asn |
Glu (E) | Asp; Gln | Asp |
Gly (G) | Ala | Ala |
His (H) | Asn; Gln; Lys; Arg | Arg |
Ile (I) | Leu; Val; Met; Ala; Phe; норлейцин | Leu |
Leu (L) | норлейцин; Ile; Val; Met; Ala; Phe | Ile |
Lys (K) | Arg; Gln; Asn | Arg |
Met (M) | Leu; Phe; Ile | Leu |
Phe (F) | Leu; Val; Ile; Ala; Tyr | Tyr |
Pro (P) | Ala | Ala |
Ser (S) | Thr | Thr |
Thr (T) | Ser | Ser |
Trp (W) | Tyr; Phe | Tyr |
Tyr (Y) | Trp; Phe; Thr; Ser | Phe |
Val (V) | Ile; Leu; Met; Phe; Ala; норлейцин | Leu |
Значительные модификации биологических свойств антитела осуществляют посредством выбора замен, которые значительно отличаются по своему воздействию на поддержание (a) структуры полипептидного каркаса в области замены, например, такой как конформации слоя или спирали, (b) заряда или гидрофобности молекулы в намеченном участке или (c) объема боковой цепи. Встречающиеся в природе остатки разделяют на группы на основе общих свойств боковых цепей:
(1) гидрофобные: норлейцин, met, ala, val, leu, ile;
(2) нейтральные гидрофильные: cys, ser, thr;
(3) кислые: asp, glu;
(4) основные: asn, gln, his, lys, arg;
(5) остатки, влияющие на ориентацию цепи: gly, pro; и
(6) ароматические: trp, tyr, phe.
Неконсервативные замены влекут за собой замену представителя одного из этих классов на представителя другого класса.
Также можно замещать любой цистеиновый остаток, не вовлеченный в поддержание правильной конформации гуманизированного или вариантного антитела к DR5, как правило, серином, для увеличения устойчивости молекулы к окислению и предотвращения аберрантного перекрестного связывания. С другой стороны, в антитело можно добавлять цистеиновую связь(и) для увеличения ее стабильности (особенно когда антитело представляет собой фрагмент антитела, такой как фрагмент Fv).
Особенно предпочтительный тип заместительных вариантов включает в себя замену одного или нескольких остатков гипервариабельной области исходного антитела (например, гуманизированного или человеческого антитела). Как правило, полученный вариант(ы), отбираемый для дальнейшего преобразования, обладает улучшенными биологическими свойствами относительно исходного антитела, из которого его получают. Удобный способ получения таких заместительных вариантов включает в себя созревание аффинности с применением фагового дисплея. В кратком изложении, несколько участков гипервариабельной области (например, 6-7 участков) подвергают мутированию с получением всех возможных аминокислотных замен в каждом из участков. Полученные таким образом варианты антител в моновалентном виде экспонируют на частицах нитевидного фага в виде слитных белков с продуктом гена III M13, упакованных в каждую частицу. Затем экспонированные на фагах варианты скринируют на их биологическую активность (например, связывающую активность), как описано в настоящем документе. Для идентификации участков гипервариабельных областей, являющихся кандидатами для модификации, можно провести мутагенез сканирования аланином для идентификации остатков гипервариабельной области, значительным образом участвующих в связывании антигена. Альтернативно или дополнительно может быть полезным анализировать кристаллическую структуру комплекса антиген-антитело для идентификации точек контакта между антителом и DR5 человека. Такие контактирующие остатки и расположенные рядом остатки являются кандидатами для замены в соответствии с разработанными по настоящему документу способами. После получения таких вариантов набор вариантов подвергают скринингу, как описано в настоящем документе, и антитела с наилучшими свойствами в одном или нескольких соответствующих анализах можно выбирать для дальнейшего усовершенствования.
(vii) Варианты гликозилирования антител
Антитела гликозилируются в консервативных положениях в их константных областях (Jefferis and Lund, Chem. Immunol. 65:111-128 [1997]; Wright and Morrison, TibTECH 15:26-32 [1997]). Олигосахаридные боковые цепи иммуноглобулинов влияют на функции белков (Boyd et al., Mol. Immunol. 32:1311-1318 [1996]; Wittwe and Howard, Biochem. 29:4175-4180 [1990]) и на внутримолекулярное взаимодействие между частями гликопротеина, что может влиять на конформацию и презентируемую трехмерную поверхность гликопротеина (Jefferis and Lund, выше; Wyss and Wagner, Current Opin. Biotech. 7:409-416 [1996]). Олигосахариды также могут служить для направления данного гликопротеина к определенным молекулам на основе специфических распознающих структур. Например, сообщалось, что в агалактозилированном IgG олигосахаридный остаток "перебрасывается" из внутреннего пространства CH2 и концевые остатки N-ацетилглюкозамина становятся доступными для связывания со связывающим маннозу белком (Malhotra et al., Nature Med. 1:237-243 [1995]). Удаление гликопептидазой олигосахаридов из CAMPATH-1H (рекомбинантное гуманизированное мышиное моноклональное антитело IgG1, распознающее антиген CDw52 лимфоцитов человека), продуцируемого в клетках яичника китайского хомяка (CHO), приводило к полному подавлению опосредованного комплементом лизиса (CMCL) (Boyd et al., Mol. Immunol. 32:1311-1318 [1996]), тогда как селективное удаление остатков сиаловой кислоты с применением нейраминидазы не приводило к утрате DMCL. Также сообщалось, что гликозилирование антител влияет на обусловленную антителами клеточную цитотоксичность (ADCC). В частности, сообщалось, что клетки CHO с регулируемой тетрациклином экспрессией β-(1,4)-N-ацетилглюкозаминилтрансферазы III (GnTIII), гликозилтрансферазы, катализирующей формирование разветвленных GlcNAc, обладают улучшенной активностью ADCC (Umana et al., Mature Biotech. 17:176-180 [1999]).
Варианты гликозилирования антител представляют собой варианты, в которых изменен профиль гликозилирования антител. Под изменением подразумевают делецию одной или нескольких молекул углеводов, находящихся в антителе, добавление одной или нескольких молекул углеводов к антителу, изменения состава гликозилирования (профиль гликозилирования), степени гликозилирования и т.д. Например, варианты гликозилирования можно получать, удаляя, изменяя и/или добавляя в кодирующей антитело последовательности нуклеиновой кислоты один или несколько участков гликозилирования.
Гликозилирование антител, как правило, является или N-связанным, или O-связанным. N-связанное относится к присоединению молекулы углевода к боковой цепи остатка аспарагина. Распознаваемыми последовательностями для ферментативного присоединения молекулы углевода к боковой цепи аспарагина являются трипептидные последовательности аспарагин-X-серин и аспарагин-X-треонин, где X представляет собой любую аминокислоту за исключением пролина. Таким образом, присутствие в полипептиде любой из этих трипептидных последовательностей создает потенциальный участок гликозилирования. O-связанное гликозилирование относится к присоединению одного из сахаров: N-ацетилгалактозамина, галактозы или ксилозы, к гидроксиаминокислоте, чаще всего серину или треонину, хотя также можно использовать 5-гидроксипролин или 5-гидроксилизин.
Добавление участков гликозилирования к антителу удобно проводить посредством изменения аминокислотной последовательности так, чтобы она содержала одну или несколько описанных выше трипептидных последовательностей (для N-связанных участков гликозилирования). Изменение также можно проводить посредством добавления к последовательности исходного антитела одного или нескольких остатков серина или треонина или замены в последовательности исходного антитела на один или несколько остатков серина или треонина (для O-связанных участков гликозилирования).
Молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие варианты аминокислотной последовательности антитела к DR5, получают рядом известных в данной области способов. Эти способы включают в себя в качестве неограничивающих примеров выделение из природного источника (в случае встречающихся в природе вариантов аминокислотной последовательности) или получение олигонуклеотид-опосредованным (или сайт-специфическим) мутагенезом, мутагенезом ПЦР и кассетным мутагенезом ранее полученных вариантов или безвариантной версии антитела к DR5.
Гликозилирование (включая профиль гликозилирования) антител также можно изменять без изменения лежащей в основе нуклеотидной последовательности. Гликозилирование в основном зависит от клетки-хозяина, используемой для экспрессии антитела. Так как тип клеток, используемых для экспрессии в качестве потенциальных терапевтических средств рекомбинантных гликопротеинов, например антител, крайне редко представляет собой природную клетку, можно ожидать значительных вариаций в профиле гликозилирования антител (см., например, Hse et al., J. Biol. Chem. 272:9062-9070 [1997]). Кроме выбора клеток-хозяев, факторы, влияющие на гликозилирование при рекомбинантной продукции антител, включают в себя способ роста, состав сред, плотность культуры, оксигенацию, pH, схемы очистки и т.п. Для изменения профиля гликозилирования, достигаемого в конкретном организме-хозяине, предложены различные способы, включая вставку или сверхэкспрессию определенных ферментов, вовлеченных в продукцию олигосахаридов (патенты США №№5047335; 5510261 и 5278299). Гликозилирование или определенные типы гликозилирования можно удалить из гликопротеина ферментативно, например, с применением эндогликозидазы H (Endo H). Кроме того, рекомбинантную клетку-хозяина можно сконструировать генетически, сделав ее дефектной по процессингу определенных типов полисахаридов. Эти и подобные способы хорошо известны в данной области.
Структуру гликозилирования антител можно легко анализировать общепринятыми способами анализа углеводов, включая хроматографию лектинов, ЯМР, масс-спектрометрию, ВЭЖХ, GPC, анализ состава моносахаридов, последовательное ферментативное расщепление и HPAEC-PAD, где для разделения олигосахаридов на основе заряда применяют анионообменную хроматографию с высоким pH. Способы выделения олигосахаридов для аналитических целей также известны и включают в себя в качестве неограничивающих примеров ферментативную обработку (как правило, проводимую с применением пептид-N-гликозидазы F/эндо-β-галактозидазы), элиминирование с применением жестких щелочных условий в основном для высвобождения O-связанных структур и химические способы с применением безводного гидразина для высвобождения N- и O-связанных олигосахаридов.
(viii) Иллюстративные антитела
Описанное в настоящем документе изобретение имеет ряд иллюстративных вариантов осуществления. Ниже описано множество типичных вариантов осуществления изобретения. Следующие ниже варианты осуществления предложены только в целях иллюстрации и никоим образом не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения.
Как описано в примерах ниже, идентифицирован ряд моноклональных антител к DR5. В одном из вариантов осуществления антитела к DR5 по изобретению обладают теми же биологическими характеристиками, как любые антитела к DR5, в частности описанные в настоящем документе.
Термин "биологические характеристики" применяют для обозначения активности или свойств моноклональных антител in vitro и/или in vivo, таких как способность специфически связываться с DR5 или блокировать, индуцировать или усиливать активацию DR5 (или связанные с DR5 виды активности). Свойства и виды активности антител к DR5 дополнительно описаны в примерах ниже.
Необязательно моноклональные антитела по настоящему изобретению обладают такими же биологическими характеристиками, как антитело 16E2 или любое из антител, перечисленных в таблицах 11-13, и/или связываются с тем же эпитопом(ами), что и антитело 16E2 или любые из антител, перечисленных в таблицах 11-13, в частности Apomab 7.3 или Apomab 8.3. Это можно определить, проводя различные анализы так, как описано в настоящем документе и в примерах. Например, для определения того, обладает ли моноклональное антитело такой же специфичностью, что и антитела к DR5, в частности указанные в настоящем документе, можно сравнить их активность в анализах конкурентного связывания или анализах индукции апоптоза, таких как анализы, описанные в примерах ниже. Кроме того, эпитоп, с которым связывается конкретное антитело к DR5, можно определить посредством кристаллографического исследования комплекса между DR5 и рассматриваемым антителом.
Таким образом, кристаллографическое исследование комплекса между фрагментом Fab Apomab 7.3 и внеклеточным доменом DR5 с применением рентгенографии показало, что Apomab 7.3 связывается с эпитопом DR5, который перекрывается с участком связывания Apo2L/TRAIL на рецепторе DR5, все еще отличаясь от него.
Человеческие, химерные, гибридные или рекомбинантные антитела к DR5 (а также, например, димерные антитела или тримерные антитела, описанные в настоящем документе) могут образовывать антитело с полноразмерными тяжелыми и легкими цепями или их фрагментами, такими как фрагменты Fab, Fab', F(ab')2 или Fv, мономер или димер такой легкой или тяжелой цепи, одноцепочечный Fv, в котором такая тяжелая или легкая цепь(и) соединены линкерной молекулой, или с вариабельными доменами (или гипервариабельными доменами) такой легкой или тяжелой цепи(ей), связанными с другими типами доменов антител.
Как описано в настоящем документе, антитела к DR5 необязательно обладают одним или несколькими желательными видами биологической активности или свойствами. Такие антитела к DR5 могут включать в себя в качестве неограничивающих примеров химерные, гуманизированные, человеческие и аффинно зрелые антитела. Как описано выше, антитела к DR5 для достижения этих желательных видов активности или свойств можно синтезировать или конструировать с применением различных способов. В одном из вариантов осуществления антитело к DR5 обладает аффинностью связывания рецептора DR5 величиной, по меньшей мере, 105 M-1, предпочтительно, по меньшей мере, в диапазоне от 106 до 107 M-1, более предпочтительно, по меньшей мере, в диапазоне от 108 до 1012 M-1 и даже более предпочтительно, по меньшей мере, в диапазоне от 109 до 1012 M-1. Аффинность связывания антитела к DR5 можно без лишнего экспериментирования определять тестированием антитела к DR5 в соответствии с известными в данной области способами, включая анализ Скэтчарда (см. Munson et al., выше).
В другом варианте осуществления антитело к DR5 по изобретению может связываться с тем же эпитопом на DR5, с которым связывается Apo-2L, или связываться с эпитопом на DR5, который совпадает или перекрывается с эпитопом на DR5, с которым связывается Apo-2L, как, например, антитело, обозначенное Apomab 7.3. Антитело к DR5 также может взаимодействовать таким образом, чтобы создавать стерическую конформацию, предотвращающую связывание лиганда Apo-2 с DR5. Как указано выше, свойство антитела к DR5 по настоящему изобретению связывать эпитоп можно определять с применением известных в данной области способов. Например, для определения способности антитела к DR5 блокировать или ингибировать связывание Apo-2L с DR5 антителом к DR5 можно тестировать в анализе in vitro, таком как анализ конкурентного ингибирования. Необязательно антитело к DR5 можно тестировать в анализе конкурентного ингибирования для определения способности антитела к DR5 ингибировать связывание полипептида Apo-2L с конструкцией DR5-IgG или с клеткой, экспрессирующей DR5. Необязательно антитело к DR5 способно к блокированию или ингибированию связывания Apo-2L с DR5, по меньшей мере, на 50%, предпочтительно, по меньшей мере, на 75% и даже более предпочтительно, по меньшей мере, на 90%, что в качестве примера можно определить посредством анализа конкурентного ингибирования in vitro с применением растворимой формы лиганда Apo-2 (TRAIL) (такой как последовательность внеклеточного домена из аминокислот 114-281, описанная в Pitti et al., J. Biol. Chem., выше, также обозначаемой как Apo2L.0) и ECD DR5-IgG. Свойство антитела к DR5 связывать эпитоп также можно определить с применением анализов in vitro для тестирования способности антитела к DR5 блокировать индуцированный Apo-2L апоптоз или посредством кристаллографических исследований.
В дополнительном варианте осуществления антитело к DR5 является антителом-агонистом с активностью, сравнимой с лигандом Apo-2 (TRAIL). Предпочтительно, такое агонистическое антитело к DR5 индуцирует апоптоз, по меньшей мере, в одном типе злокачественной опухоли, или линии опухолевых клеток, или первичной опухоли. Апоптотическую активность агонистического антитела к DR5 можно определить с применением известных анализов in vitro или in vivo. Примеры ряда таких анализов in vitro и in vivo хорошо известны в данной области. In vitro апоптотическую активность можно определять с применением таких известных способов, как связывание аннексина V. In vivo апоптотическую активность можно определять, например, измерением уменьшения массы или объема опухоли.
Как указано выше, описанные в настоящем документе антитела обладают рядом свойств, включающих в себя способность регулировать некоторые физиологические взаимодействия и/или процессы. Как показано в примерах ниже, описанные в настоящем документе антитела способны индуцировать опосредованный DR5 апоптоз и демонстрируют мощные противоопухолевые свойства в различных моделях злокачественной опухоли на ксенотрансплантатах у мышей. В конкретном варианте осуществления изобретения агонистическую активность антитела увеличивают посредством связывания антитела с Fc IgG против антител человека. В предпочтительном варианте осуществления изобретения этот усиленный апоптоз сравним с апоптотической активностью Apo-2L.
Дополнительные варианты осуществления изобретения включают в себя описанное в настоящем документе антитело к рецептору DR5, которое связано с одним или несколькими небелковыми полимерами, выбранными из группы, состоящей из полиэтиленгликоля, полипропиленгликоля и полиоксиалкилена. В альтернативном варианте осуществления описанное в настоящем документе антитело к рецептору DR5 связано с цитотоксическим средством или ферментом. Еще в одном варианте осуществления описанное в настоящем документе антитело к рецептору DR5 связано с радиоактивным изотопом, флуоресцентным соединением или хемилюминесцентным соединением. Необязательно описанное в настоящем документе антитело к рецептору DR5 является гликозилированным или, альтернативно, дегликозилированным.
Как подробно обсуждается ниже, антитела по изобретению можно использовать в ряде способов регулирования физиологических процессов. Один такой вариант осуществления изобретения включает в себя способ индукции апоптоза в клетках млекопитающих, включающий в себя воздействие на клетки млекопитающих, экспрессирующие рецептор DR5, терапевтически эффективного количества выделенного моноклонального антитела к рецептору DR5, представляющего собой связывающееся с рецептором DR5 антитело, приведенное на фиг.3A-3C (411 аминокислот) или фиг.4A-4C (440 аминокислот), особенно с его внеклеточным доменом. В таких способах клетки млекопитающих, как правило, представляют собой злокачественные клетки. В предпочтительных вариантах осуществления используемое в этих способах антитело к рецептору DR5 представляет собой описанное в примерах ниже антитело Apomab, такое как антитело Apomab 7.3 или Apomab 8.3.
Еще один вариант осуществления изобретения представляет собой способ индукции апоптоза в клетках млекопитающих, включающий в себя воздействие на экспрессирующие рецептор DR5 клетки млекопитающих терапевтически эффективного количества выделенного моноклонального антитела к рецептору DR5, представляющего собой антитело, связывающееся с рецептором DR5, как определено выше в настоящем документе, или с его внеклеточным доменом.
3. Тримерные антитела
Также в объеме изобретения находятся тримерные антитела. Такие антитела описаны, например, в Iliades et al., выше, и Kortt et al., выше.
4. Другие модификации
В настоящем документе рассматривают другие модификации антител к DR5. Антитела по настоящему изобретению можно модифицировать посредством конъюгации антитела с цитотоксическим средством (таким как молекула токсина) или с активирующим пролекарство ферментом, который конвертирует пролекарство (например, пептидильное химиотерапевтическое средство, см. WO 81/01145) в активное противораковое лекарственное средство. См., например, WO 88/07378 и патент США №4975278. Эту технологию также обозначают как "антителозависимая опосредованная ферментами пролекарственная терапия" (ADEPT).
Ферментативный компонент иммуноконъюгата, пригодного для ADEPT, включает в себя фермент, способный действовать на пролекарство таким образом, что оно конвертируется в его более активную цитотоксическую форму. Ферменты, пригодные для этого способа по данному изобретению, включают в себя в качестве неограничивающих примеров щелочную фосфатазу, пригодную для преобразования в свободные лекарственные средства пролекарств, содержащих фосфаты; арилсульфатазу, пригодную для преобразования в свободные лекарственные средства пролекарств, содержащих сульфаты; цитозиндезаминазу, пригодную для преобразования в противораковое лекарственное средство, 5-фторурацил, нетоксического 5-фторцитозина; протеазы, такие как протеазы Serratia, термолизин, субтилизин, карбоксипептидазы и катепсины (такие как катепсины B и L), пригодные для преобразования в свободные лекарственные средства пролекарств, содержащих пептиды; каспазы, такие как каспаза-3; D-аланилкарбоксипептидазы, пригодные для преобразования пролекарств, содержащих заместители из D-аминокислот; расщепляющие углеводы ферменты, такие как β-галактозидаза и нейраминидаза, пригодные для преобразования в свободные лекарственные средства гликозилированных пролекарств; бета-лактамазу, пригодную для преобразования в свободные лекарственные средства лекарственных средств, дериватизированных β-лактамами; и пенициллинамидазы, такие как пенициллин V амидаза или пенициллин G амидаза, пригодные для преобразования в свободные лекарственные средства лекарственных средств, дериватизированных по их азотам аминов феноксиацетильными или фенилацетильными группами, соответственно. Альтернативно, для преобразования пролекарств в свободные лекарственные средства можно применять антитела с ферментативной активностью, также известные в данной области как "абзимы" (см., например, Massey, Nature 328:457-458 (1987)). Конъюгаты антитело-абзим можно получать, как описано в настоящем документе, для доставки абзима в популяцию опухолевых клеток.
Ферменты можно ковалентно связывать с антителами посредством хорошо известных в данной области способов, таких как применение гетеробифункциональных сшивающих средств. Альтернативно, с применением хорошо известных в данной области способов рекомбинантных ДНК, можно сконструировать слитные белки, содержащие, по меньшей мере, антигенсвязывающую область антитела по изобретению, связанную, по меньшей мере, с функционально активной частью фермента по изобретению (см., например, Neuberger et al., Nature 312:604-608 (1984)).
Рассмотрены дополнительные модификации антител. Например, антитело можно связывать с одним из множества небелковых полимеров, например полиэтиленгликолем, полипропиленгликолем, полиоксиалкиленами или сополимерами полиэтиленгликоля и полипропиленгликоля. Антитело также можно заключать в микрокапсулы, полученные, например, посредством способов коацервации или межфазной полимеризации (например, гидроксиметилцеллюлозные или желатиновые микрокапсулы и поли(метилметацилатные) микрокапсулы, соответственно), в коллоидные системы доставки лекарственного средства (например, липосомы, альбуминовые микросферы, микроэмульсии, наночастицы и нанокапсулы) или в макроэмульсии. Такие способы описаны в Remington's Pharmaceutical Sciences, 16th edition, Oslo, A., Ed., (1980). Для увеличения времени полужизни антитела в сыворотке в антитело можно вставлять эпитоп связывания рецептора спасения (особенно во фрагмент антитела), например, как описано в патенте США №5739277. Как применяют в настоящем документе, термин "эпитоп связывания рецептора спасения" относится к эпитопу Fc-области молекулы IgG (например, IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4), ответственному за увеличение времени полужизни молекулы IgG в сыворотке in vivo.
Описанные в настоящем документе антитела к DR5 также можно составлять в виде иммунолипосом. Содержащие антитело липосомы получают известными в данной области способами так, как описано в Epstein et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82:3688 (1985); Hwang et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 77:4030 (1980); патентах США №№4485045 и 4544545. В патенте США №5013556 описаны липосомы с увеличенным временем циркуляции. Особенно пригодные липосомы можно получать способом обращенно-фазового выпаривания липидной композиции, содержащей фосфатидилхолин, холестерин и дериватизированный PEG фосфатидилэтаноламин (PEG-PE). Липосомы экструдируют через фильтры с определенным размером пор с получением липосом с желательным диаметром. Фрагменты Fab' антитела по настоящему изобретению можно конъюгировать с липосомами, как описано в Martin et al., J. Biol. Chem. 257:286-288 (1982), посредством реакции дисульфидного обмена. В липосоме необязательно содержится химиотерапевтическое средство (такое как доксорубицин). См. Gabizon et al., J. National Cancer Inst. 81(19):1484 (1989).
Антитела по изобретению включают в себя "сшитые" антитела к DR5. Как применяют в настоящем документе, термин "сшитый" относится к связыванию, по меньшей мере, двух молекул IgG вместе с формированием одной (или отдельной) молекулы. Антитела к DR5 можно сшивать различными линкерными молекулами, предпочтительно антитела к DR5 сшивают с применением молекулы антитела к IgG, комплемента, химической модификации или молекулярной инженерии. Специалистам в данной области понятно, что комплемент обладает относительно высокой аффинностью к молекулам антител после связывания антител с клеточной поверхностной мембраной. Таким образом, полагают, что комплемент можно использовать как сшивающую молекулу для связывания двух или более антител к DR5, связанных с клеточной поверхностной мембраной.
5. Рекомбинантные способы
Изобретение также относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим антитела к DR5, как описано в настоящем документе, векторам и клеткам-хозяевам, содержащим нуклеиновую кислоту, и рекомбинантным способам получения антител.
Для рекомбинантного получения антитела кодирующую его нуклеиновую кислоту выделяют и вставляют в реплицирующийся вектор для дальнейшего клонирования (амплификации ДНК) или для экспрессии. Кодирующую антитело ДНК легко выделять и секвенировать с применением общепринятых способов (например, с применением олигонуклеотидных зондов, способных специфически связываться с генами, кодирующими антитело). Доступно множество векторов. Компоненты векторов, как правило, включают в себя в качестве неограничивающих примеров один или несколько из следующего: сигнальная последовательность, участок начала репликации, один или несколько маркерных генов, энхансерный элемент, промотор и последовательность терминации транскрипции.
Способы по настоящему документу включают в себя способы получения химерных или рекомбинантных антител к DR5, включающих в себя стадии получения вектора, содержащего последовательность ДНК, кодирующую легкую цепь или тяжелую цепь антитела к DR5 (или и легкую цепь, и тяжелую цепь), трансфекции или трансформации клетки-хозяина вектором и культивирования клетки(ок)-хозяина в условиях, достаточных для получения продукта в виде рекомбинантного антитела к DR5.
(i) Компонент сигнальной последовательности
Антитело к DR5 по данному изобретению можно получать рекомбинантным способом не только непосредственно, но и в виде слитного белка с гетерологичным полипептидом, которой предпочтительно представляет собой сигнальную последовательность или другой полипептид со специфическим участком расщепления на N-конце зрелого белка или полипептида. Выбираемая гетерологичная сигнальная последовательность предпочтительно представляет собой сигнальную последовательность, которая распознается и процессируется (т.е. расщепляется сигнальной пептидазой) клеткой-хозяином. Для прокариотических клеток-хозяев, которые не распознают и не процессируют природную сигнальную последовательность антитела, сигнальную последовательность заменяют прокариотической сигнальной последовательностью, например, выбранной из группы лидирующих последовательностей щелочной фосфатазы, пенициллиназы, lpp или термостабильного энтеротоксина II. Для секреции в дрожжах природную сигнальную последовательность можно заменять, например, на лидирующую последовательность дрожжевой инвертазы, лидирующую последовательность α-фактора (включая лидирующие последовательности α-фактора Saccharomyces и Kluyveromyces) или лидирующую последовательность кислой фосфатазы, лидирующую последовательность глюкоамилазы C.albicans или сигнальную последовательность, описанную в WO 90/13646. Для экспрессии в клетках млекопитающих доступны сигнальные последовательности млекопитающих, а также секреторные лидирующие последовательности вирусов, например сигнальная последовательность gD вируса простого герпеса.
ДНК для такой предшествующей области лигируют в рамку считывания кодирующей антитело ДНК.
(ii) Компонент участка начала репликации
И экспрессирующие, и клонирующие векторы содержат последовательность нуклеиновой кислоты, позволяющую векторам реплицироваться в одной или нескольких выбранных клетках-хозяевах. Как правило, в клонирующих векторах эта последовательность представляет собой последовательность, которая позволяет вектору реплицироваться независимо от хромосомной ДНК хозяина и включает в себя участки начала репликации или автономно реплицирующиеся последовательности. Такие последовательности хорошо известны для множества бактерий, дрожжей и вирусов. Участок начала репликации из плазмиды pBR322 подходит для большинства грамотрицательных бактерий, точка начала репликации плазмиды 2μ подходит для дрожжей, а различные вирусные точки начала репликации (SV40, полиомы, аденовируса, VSV или BPV) подходят для клонирования векторов в клетках млекопитающих. Как правило, компонент участка начала репликации для экспрессирующих векторов млекопитающих не нужен (участок начала репликации SV40, как правило, можно использовать только потому, что он содержит ранний промотор).
(iii) Компонент селективного гена
Экспрессирующие и клонирующие векторы, как правило, содержат селективный ген, также называемый селективным маркером. Типичные селективные гены кодируют белки, которые (a) обеспечивают устойчивость к антибиотикам или другим токсинам, например ампициллину, неомицину, метотрексату или тетрациклину, (b) дополняют ауксотрофный дефицит или (c) обеспечивают необходимые питательные вещества, недоступные из комплексных сред, например ген, кодирующий D-аланинрацемазу для Bacilli.
В одном из примеров схемы селекции используют лекарственное средство для ареста роста клетки-хозяина. Те клетки, которые успешно подверглись трансформации гетерологичным геном, продуцируют белок, придающий устойчивость к лекарственному циклу и, таким образом, выживают в режиме селекции. В примерах такой доминантной селекции используют лекарственные средства неомицин, микофеноловую кислоту и гигромицин.
Другим примером подходящих селективных маркеров для клеток млекопитающих являются селективные маркеры, обеспечивающие идентификацию клеток, способных захватывать кодирующую антитело нуклеиновую кислоту, такие как DHFR, тимидинкиназа, металлотионеин-I и -II, предпочтительно гены металлотионеина приматов, аденозиндезаминаза, орнитиндекарбоксилаза и т.д.
Например, клетки, трансформированные селективным геном DHFR, сначала идентифицируют посредством культивирования всех трансформантов в среде для культивирования, содержащей метотрексат (Mtx), конкурентный антагонист DHFR. Подходящей клеткой-хозяином при применении DHFR дикого типа является клеточная линия яичника китайского хомяка (CHO) с дефицитом активности DHFR.
Альтернативно клетки-хозяева (в особенности хозяева дикого типа, несущие эндогенную DHFR), трансформированные или котрансформированные последовательностями ДНК, кодирующими антитело к DR5, белок DHFR дикого типа и другой селективный маркер, такой как аминогликозид-3'-фосфотрансфераза (APH), можно отбирать по росту клеток в среде, содержащей селективное вещество для селективного маркера, такое как аминогликозидный антибиотик, например канамицин, неомицин или G418. См. патент США №4965199.
Подходящий селективный ген для применения в дрожжах представляет собой ген trp1, находящийся в дрожжевой плазмиде YRp7 (Stinchcomb et al., Nature, 282:39 (1979)). Ген trp1 предоставляет селективный маркер для мутантного штамма дрожжей с отсутствующей способностью расти на триптофане, например ATCC №44076 или PEP4-1. Jones, Genetics, 85:12 (1977). Таким образом, наличие повреждения trp1 в геноме дрожжевой клетки-хозяина обеспечивает эффективные условия для детекции трансформации посредством роста в отсутствие триптофана. Подобным образом, дефектные по Leu2 штаммы дрожжей (ATCC 20622 или 38626) комплементируют известными плазмидами, несущими ген Leu2.
Кроме того, для трансформации Kluyveromyces yeasts можно применять векторы, полученные из 1,6 мкм кольцевой плазмиды pKD1. Альтернативно для K.lactis представлена экспрессирующая система для крупномасштабного получения телячьего химозина. Van den Berg, Bio/Technology, 8:135 (1990). Также описаны стабильные мультикопийные экспрессирующие векторы для секреции зрелого рекомбинантного сывороточного альбумина промышленными штаммами Kluyveromyces. Fleer et al., Bio/Technology, 9:968-975 (1991).
(iv) Промоторный компонент
Экспрессирующие и клонирующие векторы, как правило, содержат промотор, распознаваемый организмом хозяина и функционально связанный с кодирующей антитело нуклеиновой кислотой. Промоторы, подходящие для применения в прокариотических хозяевах, включают в себя промотор phoA, промоторные системы β-лактамазы и лактозы, щелочной фосфатазы, промоторную систему триптофана (trp) и гибридные промоторы, такие как промотор tac. Однако подходят и другие известные бактериальные промоторы. Промоторы для применения в бактериальных системах также содержат последовательность Шайна-Дальгарно (S.D.), функционально связанную с кодирующей антитело к DR5 ДНК.
Известны промоторные последовательности для эукариот. Фактически все эукариотические гены имеют AT-богатую область, расположенную приблизительно от 25 до 30 основаниями выше участка инициации транскрипции. Другая последовательность, находящаяся на расстоянии от 70 до 80 оснований выше старта транскрипции множества генов, представляет собой область CNCAAT, где N может представлять собой любой нуклеотид. На 3'-конце большинства эукариотических генов находится последовательность AATAAA, которая может представлять собой сигнал добавления поли-A хвоста на 3'-конце кодирующей последовательности. Соответственно, все эти последовательности вставлены в эукариотические экспрессирующие векторы.
Примеры подходящих промоторных последовательностей для применения с дрожжевыми хозяевами включают в себя промоторы для 3-фосфоглицераткиназы или других гликолитических ферментов, таких как енолаза, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа, гексокиназа, пируватдекарбоксилаза, фосфофруктокиназа, глюкозо-6-фосфатизомераза, 3-фосфоглицератмутаза, пируваткиназа, триозофосфатизомераза, фосфоглюкозоизомераза и глюкокиназа.
Другие дрожжевые промоторы, которые являются индуцибельными промоторами с дополнительным преимуществом транскрипции, контролируемой условиями роста, представляют собой промоторные области алкогольдегидрогеназы 2, изоцитохрома C, кислой фосфатазы, катаболических ферментов, связанных с метаболизмом азота, металлотионеина, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы и ферментов, отвечающих за утилизацию мальтозы и галактозы. Подходящие векторы и промоторы для применения при экспрессии в дрожжах дополнительно описаны в EP 73657. С дрожжевыми промоторами также успешно применяются дрожжевые энхансеры.
Транскрипция антитела к DR5 с векторов в клетках-хозяевах млекопитающих контролируется, например, промоторами, полученными из геномов вирусов, таких как вирус полиомы, вирус куриной оспы, аденовирус (такой как аденовирус 2), вирус папилломы крупного рогатого скота, вирус саркомы птиц, цитомегаловирус, ретровирус, вирус гепатита B и вирус обезьян 40 (SV40), из гетерологичных промоторов млекопитающих, например промотора актина или промотора иммуноглобулина и из промоторов белков теплового шока, при условии, что такие промоторы совместимы с системами клетки-хозяина.
Ранний и поздний промоторы вируса SV40 удобно получать в виде рестрикционного фрагмента SV40, который также содержит участок начала репликации вируса SV40. Предранний промотор цитомегаловируса человека удобно получать в виде рестрикционного фрагмента E HindIII. Система для экспрессии ДНК в хозяевах-млекопитающих с применением вируса папилломы крупного рогатого скота описана в патенте США №4419446. Модификация этой системы описана в патенте США №4601978. Также см. Reyes et al., Nature 297:598-601 (1982), об экспрессии кДНК интерферона β человека в клетках мыши под контролем промотора тимидинкиназы из вируса простого герпеса. Альтернативно в качестве промотора можно использовать длинный концевой повтор вируса саркомы Рауса.
(v) Компонент энхансерного элемента
Транскрипцию высшими эукариотами кодирующей антитело к DR5 по данному изобретению ДНК часто усиливают посредством вставки в вектор энхансерной последовательности. В настоящее время известно множество энхансерных последовательностей из генов млекопитающих (глобин, эластаза, альбумин, α-фетопротеин и инсулин). Однако, как правило, используют энхансер из вируса эукариотических клеток. Примеры включают в себя энхансер SV40 в поздней области от точки начала репликации (100-270 п.н.), энхансер раннего промотора цитомегаловируса, энхансер полиомы в поздней области от точки начала репликации и энхансеры аденовирусов. Также об энхансерных элементах для активации эукариотических промоторов см. Yaniv, Nature 297:17-18 (1982). Энхансер можно вставлять в вектор в положении 5' или 3' от кодирующей последовательности антитела, но предпочтительно он расположен в положении 5' от промотора.
(vi) Компонент терминации транскрипции
Экспрессирующие векторы, используемые в эукариотических клетках-хозяевах (дрожжи, грибы, насекомые, растения, животные, человек или ядросодержащие клетки других многоклеточных организмов), также содержат последовательности, необходимые для терминации транскрипции и для стабилизации мРНК. Такие последовательности обычно доступны из 5' и иногда из 3' нетранслируемых областей эукариотической или вирусной ДНК или кДНК. Эти области содержат нуклеотидные сегменты, транскрибируемые в виде полиаденилированных фрагментов в нетранслируемой части мРНК, кодирующей поливалентное антитело. Один из пригодных компонентов терминации транскрипции представляет собой область полиаденилирования гормона роста крупного рогатого скота. См. WO 94/11026 и описанный в ней экспрессирующий вектор.
(vii) Отбор и трансформация клеток-хозяев
Подходящие для клонирования или экспрессии ДНК в векторах по настоящему документу клетки-хозяева представляют собой клетки прокариот, дрожжей или высших эукариот, описанные выше. Подходящие для этой цели прокариоты включают в себя эубактерии, такие как грамотрицательные или грамположительные организмы, например Enterobacteriaceae, такие как Escherichia, например E.coli, Enterobacter, Erwinia, Klebsiella, Proteus, Salmonella, например Salmonella typhimurium, Serratia, например Serratia marcescans и Shigella, а также Bacilli, такие как B.subtilis и B.licheniformis (например, B.licheniformis 41P, описанная в DD 266710, опубликованной 12 апреля 1989 года), Pseudomonas, такие как P.aeruginosa, и Streptomyces. Один из предпочтительных для клонирования хозяев E.coli представляет собой E.coli 294 (ATCC 31446), хотя подходят и другие штаммы, такие как E.coli B, E.coli X1776 (ATCC 31537) и E.coli W3110 (ATCC 27325). Эти примеры являются иллюстративными, а не лимитирующими.
Кроме прокариот, подходящими хозяевами для клонирования или экспрессии кодирующих антитела к DR5 векторов являются эукариотические микроорганизмы, такие как нитевидные грибы или дрожжи. Наиболее часто используемым низшим эукариотическим микроорганизмом-хозяином являются Saccharomyces cerevisiae. Однако широкодоступным и подходящим по настоящему документу является ряд других родов, видов и штаммов, таких как Schizosaccharomyces pombe; хозяева Kluyveromyces, например, такие как K.lactis, K.fragilis (ATCC 12424), K.bulgaricus (ATCC 16045), K.wickeramii (ATCC 24178), K.waltii (ATCC 56500), K.drosophilarum (ATCC 36906), K.thermotolerans и K.marxianus; yarrowia (EP 402226); Pichia pastoris (EP 183070); Candida; Trichoderma reesia (EP 244234); Neurospora crassa; Schwanniomyces, такие как Schwanniomyces occidentalis и нитевидные грибы, например, такие как Neurospora, Penicillium, Tolypocladium, и хозяева Aspergillus, такие как A.nidulans и A.niger.
Подходящие клетки-хозяева для экспрессии гликозилированных антител получают из многоклеточных организмов. Примеры клеток беспозвоночных включают в себя клетки растений и насекомых. Идентифицировано множество бакуловирусных штаммов и вариантов и соответствующие пермиссивные клетки-хозяева насекомых таких организмов, как Spodoptera frugiperda (пиявка), Aedes aegypti (комар), Aedes albopictus (комар), Drosophila melanogaster (плодовая мушка) и Bombyx mori. Общедоступным является ряд вирусных штаммов для трансфекции, например вариант L-1 NPV Autographa californica и штамм Bm-5 NPV Bombyx mori, и такие вирусы по настоящему документу можно использовать в качестве вируса по настоящему изобретению, особенно для трансфекции клеток Spodoptera frugiperda.
В качестве хозяев также можно использовать культуры растительных клеток хлопка, кукурузы, картофеля, сои, петунии, томата и табака.
Однако наибольший интерес представляют клетки позвоночных, и культивирование клеток позвоночных в культуре (тканевая культура) стало обычным способом. Примеры подходящих хозяйских клеточных линий млекопитающих представляют собой линия CV1 почек обезьяны, трансформированная SV40 (COS-7, ATCC CRL 1651); линия эмбриональной почки человека (293 или клетки 293, субклонированные для роста в суспензионной культуре, Graham et al., J. Gen Virol. 36:59 (1977)); клетки почки детеныша хомяка (BHK, ATCC CCL 10); клетки яичника китайского хомяка/-DHFR (CHO, Urlaub et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216 (1980)); клетки Сертоли мыши (TM4, Mather, Biol. Reprod. 23:243-251 (1980)); клетки почки обезьяны (CV1 ATCC CCL 70); клетки почки африканской зеленой мартышки (VERO-76, ATCC CRL-1587); клетки карциномы шейки матки человека (HELA, ATCC CCL 2); клетки почки собаки (MDCK, ATCC CCL 34); клетки печени буйволовой крысы (BRL 3A, ATCC CRL 1442); клетки легкого человека (W138, ATCC CCL 75); клетки печени человека (Hep G2, HB 8065); опухоль молочной железы мыши (MMT 060562, ATCC CCL 51); клетки TRI (Mather et al., Annals N.Y. Acad. Sci. 383:44-68 (1982)); клетки MRC 5; клетки FS4 и линия гепатомы человека (Hep G2) и миеломные или лимфомные клетки (например, клетки Y0, J558L, P3 и NS0) (см. патент США №5807715).
Клетки-хозяева трансформируют описанными выше экспрессирующими или клонирующими векторами для продукции антител и культивируют в общепринятых питательных средах, соответствующим образом модифицированных для индукции промоторов, отбора трансформантов или амплификации генов, кодирующих желательные последовательности.
(viii) Культивирование клеток-хозяев
Клетки-хозяева, используемые для получения антител по данному изобретению, можно культивировать в ряде сред. Для культивирования клеток-хозяев подходят коммерчески доступные среды, такие как Ham's F10 (Sigma), минимальная поддерживающая среда ((MEM), Sigma)), RPMI-1640 (Sigma) и модифицированная по Дульбекко среда Игла ((DMEM), Sigma)). Кроме того, в качестве сред для культивирования клеток-хозяев можно использовать любую из сред, описанных в Ham et al., Meth. Enz. 58:44 (1979), Barnes et al., Anal. Biochem. 102:255 (1980), патентах США №№4767704; 4657866; 4927762; 4560655 или 5122469; WO 90/03430; WO 87/00195 или ссылке на патент США 30985. Любую из этих сред можно по мере необходимости дополнять гормонами и/или другими факторами роста (такими как инсулин, трансферрин или эпидермальный фактор роста), солями (такими как хлорид натрия, кальция, магния и фосфат), буферами (такими как HEPES), нуклеотидами (такими как аденозин и тимидин), антибиотиками (такими как лекарственное средство GENTAMYCIN™), микроэлементами (определенными как неорганические соединения, как правило, присутствующие в конечных концентрациях в микромолярном диапазоне) и глюкозой или эквивалентным источником энергии. Также можно добавлять любые другие необходимые добавки в подходящих концентрациях, которые известны специалистам в данной области. Условия культивирования, такие как температура, pH и т.п., представляют собой условия культивирования, используемые ранее для клеток-хозяев, отбираемых по экспрессии, и они, как правило, очевидны специалистам в данной области.
(ix) Очистка
При применении рекомбинантных способов антитело может продуцироваться внутриклеточно, в периплазматическом пространстве или непосредственно секретироваться в среду. Если антитело продуцируется внутриклеточно, в качестве первой стадии удаляют дебрис из макрочастиц из клеток-хозяев или из фрагментов лизиза, например, центрифугированием или ультрацентрифугированием. В Carter et al., Bio/Technology 10:163-167 (1992), описан способ выделения антител, секретируемых в периплазматическое пространство E.coli. В кратком изложении, клеточную массу размораживают в присутствии ацетата натрия (pH 3,5), ЭДТА и фенилметилсульфонилфторида (PMSF) в течение приблизительно 30 мин. Клеточный дебрис можно удалять центрифугированием. Когда антитело секретируется в среду, супернатанты из таких систем экспрессии, как правило, вначале концентрируют с применением коммерчески доступного фильтра для концентрации белков, например устройства для ультрафильтрации Amicon или Millipore Pellicon. На любой из указанных выше стадий для ингибирования протеолиза можно добавлять ингибитор протеаз, такой как PMSF, а также можно добавлять антибиотики для предотвращения роста случайных загрязнителей.
Композиции антител, полученные из клеток, можно очищать с применением, например, хроматографии на гидроксиапатите, гель-электрофореза, диализа и аффинной хроматографии, где аффинная хроматография является предпочтительным способом очистки. Пригодность белка A в качестве аффинного лиганда зависит от вида и изотипа какого-либо домена Fc иммуноглобулина, который присутствует в антителе. Белок A можно использовать для очистки антител, основанных на тяжелых цепях γ1, γ2 или γ4 человека (Lindmark et al., J. Immunol. Meth. 62:1-13 (1983)). Белок G рекомендован для всех изотипов мышей и для γ3 человека (Guss et al., EMBO J. 5:1567-1575 (1986)). Матрикс, к которому прикреплен аффинный лиганд, чаще всего представляет собой агарозу, но также доступны другие матриксы. Механически устойчивые матриксы, такие как стекло с контролируемым размером пор или поли(стиролдивинил)бензол, обеспечивают более высокие скорости потока и более короткое время обработки, чем те, которые можно достичь с применением агарозы. Когда антитело содержит домен CH3, для очистки подходит смола Bakerbond ABX™ (J. T. Baker, Phillipsburg, NJ). В зависимости от антитела для восстановления также доступны другие способы очистки белков, такие как разделение на ионообменной колонке, осаждение этанолом, ВЭЖХ с обращенной фазой, хроматография на силикагеле, хроматография на SEPHAROSE™ с гепарином, хроматография на анионо- или катионообменной смоле (такой как колонка с полиаспарагиновой кислотой), хроматофокусирование, SDS-PAGE и осаждение сульфатом аммония.
B. Применения антител к DR5
Антитела к DR5 по изобретению имеют различные применения.
Известно, что DR5 опосредует передачу сигнала апоптоза. Хотя DR5 экспрессируют несколько типов нормальных клеток, по-видимому, передача сигнала апоптоза через этот рецептор в основном ограничена злокачественными клетками, которые становятся более чувствительными к опосредованному рецептором смерти апоптозу в случае их трансформации такими онкогенами, как MYC или RAS (Wang et al., Cancer Cell 5:501-12 (2004); Nesterov et al., Cancer Res. 64:3922-7 (2004)). DR5 часто экспрессируется линиями злокачественных клеток человека, а также первичными опухолями. Таким образом, антитела к DR5 находят применение при диагностике и лечении злокачественных опухолей. Например, агонистические антитела к DR5 можно использовать в способах лечения злокачественных опухолей у млекопитающих, включая людей. В этих способах антитело к DR5, предпочтительно агонистическое антитело, вводят млекопитающему отдельно или в сочетании с другими терапевтическими средствами или способами. Злокачественная опухоль может представлять собой экспрессирующую DR5 злокачественную опухоль любого типа, включая солидные опухоли, в частности развитые или метастатические солидные опухоли, прогрессировавшие до терапии или для которых не известно эффективной терапии. Отдельные типы злокачественных опухолей включают в себя в качестве неограничивающих примеров колоректальный рак, немелкоклеточный рак легких (NSCLC), рак поджелудочной железы, рак яичников, рак молочной железы, неходжкинскую лимфому (NHL), глиобластому или меланому, предпочтительно колоректальный рак, NSCLC или NHL.
Кроме того, антитела к DR5 пригодны в диагностике и лечении других ассоциированных с DR5 патологических состояний, таких как связанные с иммунной системой заболевания у млекопитающих, включая людей.
Диагноз различных патологических состояний млекопитающих, описанных в настоящем документе, может быть поставлен практикующими специалистами. В данной области доступны способы диагностики, позволяющие, например, диагностировать или выявлять злокачественную опухоль или связанное с иммунной системой заболевание у млекопитающего. Например, злокачественные опухоли можно определять способами, включающими в себя, в качестве неограничивающих примеров, пальпацию, анализ крови, рентгенограмму, ЯМР и т.п.
Связанные с иммунной системой заболевания также можно легко выявить.
При системной красной волчанке основным медиатором заболевания является продукция аутореактивных антител к собственным белкам/тканям и последующее формирование опосредованного иммунной системой воспаления. Клинически поражены несколько органов и систем, включая почки, легкие, костно-мышечную систему, кожно-слизистую систему, глаза, центральную нервную систему, сердечно-сосудистую систему, желудочно-кишечный тракт, костный мозг и кровь.
Ревматоидный артрит (RA) представляет собой хроническое системное аутоиммунное воспалительное заболевание, которое в основном затрагивает синовиальную мембрану нескольких суставов, с формирующимся в результате повреждением суставного хряща. Патогенез зависит от T-лимфоцитов и связан с образованием ревматоидных факторов, аутоантител, направленных против собственных IgG, с образующимися в результате иммунными комплексами, которые достигают высоких уровней в суставной жидкости и крови. Эти комплексы в суставе могут индуцировать заметный инфильтрат лимфоцитов и моноцитов в синовиальной оболочке и последующие заметные изменения в синовиальной оболочке; суставное пространство/жидкость инфильтрировано сходными клетками с добавлением многочисленных нейтрофилов. Поражаемые ткани в основном представляют собой сосуды, часто симметричным образом. Однако также происходит внесуставное поражение в виде двух основных форм. Одна из форм представляет собой развитие внесуставных очагов повреждения с постоянно прогрессирующим поражением сосудов и типичными очагами фиброза легких, васкулита и кожных язв. Вторая форма внесуставного поражения представляет собой так называемый синдром Фелти, который возникает на поздних стадиях течения RA, иногда после того как поражение суставов становится неактивным, и включает в себя наличие нейтропении, тромбоцитопении и спленомегалии. Это может сопровождаться васкулитом в нескольких органах с формированием инфарктов, язв кожи и гангрены. Часто у пациентов в подкожной ткани над пораженными суставами также развиваются ревматоидные узелки; узелки поздних стадий содержат некротические центры, окруженные инфильтратом разнородных воспалительных клеток. Другие проявления, которые могут происходить при RA, включают в себя перикардит, плеврит, коронарный артериит, интерстициальный пневмонит с фиброзом легких, сухой кератоконъюнктивит и ревматоидные узелки.
Ювенильный хронический артрит представляет собой хроническое идиопатическое воспалительное заболевание, часто начинающееся в возрасте менее 16 лет. Его фенотип имеет некоторые сходства с RA; некоторых пациентов, положительных по ревматоидному фактору, классифицируют как пациентов с ювенильным ревматоидным артритом. Заболевание подразделяют на три основных категории: малосуставное, полисуставное и системное. Артрит может быть тяжелым и, по меньшей мере, деструктивным и приводит к анкилозу суставов и задержке роста. Другие проявления могут включать хронический передний увеит и системный амилоидоз.
Спондилоартропатии представляют собой группу заболеваний с некоторыми общими клиническими признаками и общей связью с экспрессией продукта гена HLA-B27. Заболевания включают в себя анкилозирующий спондилит, синдром Рейтера (реактивный артрит), артрит, ассоциированный с воспалительным заболеванием кишечника, спондилит, ассоциированный с псориазом, спондилоартропатией с началом в юношеском возрасте и недифференцированной спондилоартропатией. Дифференциальные характеристики включают в себя сакроилеит со спондилитом или без; воспалительный ассиметричный артрит; ассоциацию с HLA-B27 (серологически определенный аллель локуса HLA-B MHC I класса); воспаление глаз и отсутствие аутоантител, ассоциированных с другим ревматоидным заболеванием. Клетка, наиболее вовлеченная в качестве ключа в индукцию заболевания, представляет собой CD8+ T-лимфоцит, клетку, направленную к антигену, представляемому молекулами MHC I класса. CD8+ T-клетки могут реагировать против аллеля HLA-B27 MHC I класса, как если бы он был чужеродным пептидом, экспрессированным молекулами MHC I класса. Выдвинуто предположение, что эпитоп HLA-B27 может имитировать бактериальный или другой микробный антигенный эпитоп и, таким образом, индуцировать ответ CD8+ T-клеток.
Этиология системного склероза (склеродермии) неизвестна. Отличительной чертой этого заболевания является уплотнение кожи; вероятно, это индуцировано активным воспалительным процессом. Склеродермия может быть локализованной или системной; частыми являются повреждения сосудов, и повреждение эндотелиальных клеток в микроциркуляторном русле является ранним и важным событием в развитии системного склероза; повреждение сосудов может быть обусловлено иммунной системой. Иммунологическое основание полагают вследствие присутствия в острых очагах повреждения инфильтратов мононуклеарных клеток и наличия у многих пациентов антител к содержимому ядер. Часто на поверхности фибробластов в очагах повреждения на коже повышена экспрессия ICAM-1, позволяя предположить, что в патогенезе заболевания может играть роль взаимодействие с этими клетками T-клеток. Другие вовлеченные органы включают в себя желудочно-кишечный тракт: атрофию гладкой мускулатуры и фиброз, приводящий к аномальной перестальтике/сократительной активности; почки: концентрическая эндотелиальная пролиферация интимы, влияющая на малые дуговые и междольковые артерии, с происходящим в результате снижением почечного коркового кровотока, приводящего к протеинурии, азотемии и гипертензии; скелетная мускулатура: атрофия, интерстициальный фиброз, воспаление; легкие: интерстициальный пневмонит и интерстициальный фиброз; и сердца, некроз сократительных волокон, образование рубцов/фиброз.
Идиопатические воспалительные миопатии, включающие в себя дерматомиозит, полимиозит и другие, представляют собой нарушения в виде хронического мышечного воспаления неизвестной этиологии, приводящие к мышечной слабости. Повреждение/воспаление мышц часто является симметричным и прогрессирующим. С большинством форм ассоциированы аутоантитела. Эти специфичные для миозита аутоантитела направлены против и ингибируют функционирование компонентов, белков и РНК, вовлеченных в синтез белков.
Синдром Шегрена возникает вследствие иммуноопосредованного воспаления и последующей функциональной деструкции слезных и слюнных желез. Заболевание может быть ассоциировано с воспалительными заболеваниями соединительной ткани и сопровождаться ими. Это заболевание ассоциировано с продукцией антител к антигенам Ro и La, которые оба представляют собой небольшие комплексы РНК-белок. Повреждение приводит к сухому кератоконъюнктивиту, ксеростомии с другими проявлениями или корреляциями, включая биллиарный цирроз, периферическую или сенсорную нейропатию и пальпируемую пурпуру.
Системный васкулит включает заболевания, в которых первичное повреждение представляет собой воспаление и последующее повреждение кровеносных сосудов, приводящее к ишемии/некрозу/дегенерации тканей, питаемых пораженными сосудами, а в некоторых случаях - к возможной дисфункции конечных органов. Васкулиты также могут возникать как вторичное повреждение или осложнение при других иммунных воспалительных заболеваниях, таких как ревматоидный артрит, системный склероз и т.д., особенно при заболеваниях, также ассоциированных с формированием иммунных комплексов. Заболевания в группе первичных системных васкулитов включают в себя системный некротизирующий васкулит: узелковый полиартериит, аллергический васкулит и гранулематоз, полиангиит; гранулематоз Вегенера; лимфоматоидный гранулематоз и гигантоклеточный артериит. Прочие васкулиты включают в себя слизисто-кожный лимфоузелковый синдром (MLNS или болезнь Кавасаки), изолированный васкулит ЦНС, болезнь Бехчета, облитерирующий тромбангиит (болезнь Бюргера) и кожный некротизирующий венулит. Полагают, что патогенетический механизм большинства типов перечисленных васкулитов, в основном, основан на отложении комплексов иммуноглобулинов в сосудистой стенке и последующей индукции противовоспалительного ответа посредством ADCC, активации комплемента или обоих.
Саркоидоз представляет собой состояние неизвестной этиологии, характеризующееся наличием эпителиоидных гранулем почти во всех тканях организма; наиболее часто вовлекаются легкие. Патогенез включает в себя персистенцию активированных макрофагов и лимфоидных клеток в очагах заболевания с последующими хроническими последствиями, приводящими к высвобождению локально и системно активных продуктов, высвобождаемых этими типами клеток.
Аутоиммунная гемолитическая анемия, включающая в себя аутоиммунную гемолитическую анемию, иммунную панцитопению и пароксизмальную ночную гемоглобинурию, является результатом продукции антител, реагирующих с антигенами, экспрессируемыми на поверхности красных кровяных клеток (а в некоторых случаях - других клеток крови, включая также и тромбоциты), и представляет собой отражение удаления этих покрытых антителами клеток вследствие опосредованного комплементом лизиса и/или опосредованных ADCC/Fc-рецептором механизмов.
При аутоиммунной тромбоцитопении, включающей в себя тромбоцитопеническую пурпуру и опосредованную иммунной системой тромбоцитопению в других клинических условиях, происходит разрушение/удаление тромбоцитов в результате прикрепления к тромбоцитами антител или комплемента и последующего удаления посредством лизиса комплементом, ADCC или опосредованными FC-рецептором механизмами.
Тиреоидит, включающий в себя болезнь Грейва, тиреоидит Хашимото, ювенильный лимфоцитарный тиреоидит и атрофический тиреоидит, представляет собой результат аутоиммунного ответа на антигены щитовидной железы с продукцией антител, которые реагируют с белками, представленными на щитовидной железе и часто специфичными для нее. Существуют экспериментальные модели, включающие в себя модели с самопроизвольным началом заболевания: крысы (BUF и крысы BB) и куры (линия тучных кур); модели с индуцируемым началом заболевания: иммунизация животных или тиреоглобулином, или антигеном микросомальной фракции щитовидной железы (пероксидаза щитовидной железы).
Сахарный диабет I типа или инсулинозависимый диабет представляет собой аутоиммунное разрушение β-клеток островков поджелудочной железы; это разрушение опосредовано аутоантителами и аутореактивными T-клетками. Антитела к инсулину или инсулиновому рецептору также могут давать фенотип неотвечаемости на инсулин.
Опосредованные иммунной системой заболевания почек, включающие в себя гломерулонефрит и тубулоинтерстициальный нефрит, являются результатом опосредованного антителами или T-лимфоцитами повреждения ткани почек или непосредственно, как результат продукции аутореактивных антител или T-клеток против почечных антигенов, или опосредованно, как результат депонирования в почках антител и/или иммунных комплексов, реактивных в отношении других, непочечных антигенов. Таким образом, другие опосредованные иммунной системой заболевания, приводящие к формированию иммунных комплексов, также могут индуцировать опосредованное иммунной системой заболевание почек в виде непрямого осложнения. Прямые и непрямые иммунные механизмы приводят к воспалительному ответу, продуцирующему/индуцирующему развитие повреждения в почечной ткани с возникающей в результате функциональной недостаточностью, а в некоторых случаях - с прогрессированием до почечной недостаточности. В патогенез повреждения могут быть вовлечены и гуморальные, и клеточные иммунные механизмы.
Полагают, что демиелинизирующие заболевания центральной и периферической нервной системы, включающие в себя рассеянный склероз; идиопатическую демиелинизирующую полинейропатию или синдром Гийена-Барре и хроническую воспалительную демиелинизирующую полинейропатию, имеют аутоиммунное основание и приводят к демиелинизации нервов в результате повреждения, причиняемого олигодендроцитам или непосредственно миелину. При РС существуют основания полагать, что индукция и прогрессирование заболевания зависят от T-лимфоцитов. Рассеянный склероз представляет собой демиелинизирующее заболевание, являющееся T-лимфоцитзависимым, и обладает или ремитирующим курсом течения, или хронически прогрессирующим курсом течения. Этиология РС неизвестна; однако вклад вносят вирусные инфекции, генетическая предрасположенность, окружающая среда и аутоиммунность. Очаги повреждения содержат инфильтраты, преимущественно опосредованные T-лимфоцитами, микроглиальные клетки и инфильтрирующие макрофаги; преобладающим клеточным типом в очагах повреждения являются CD4+ T-лимфоциты. Механизм клеточной гибели олигодендроцитов и последующей демиелинизации неизвестен, но, вероятно, он управляется T-лимфоцитами.
Воспалительное и фиброзное заболевание легких, включающее в себя эозинофильные пневмонии; идиопатический легочный фиброз и гиперчувствительный пневмонит, могут включать в себя нерегулируемый иммунный воспалительный ответ. Ингибирование этого ответа может быть терапевтически полезным.
Аутоиммунное или опосредованное иммунной системой кожное заболевание, включающее в себя буллезные заболевания кожи, полиморфную эритему и контактный дерматит, опосредованы антителами, происхождение которых зависит от T-лимфоцитов.
Псориаз представляет собой опосредованное T-лимфоцитами воспалительное заболевание. Очаги повреждения содержат инфильтраты из T-лимфоцитов, макрофагов и процессирующих антиген клеток и некоторого количества нейтрофилов.
Аллергические заболевания, включающие в себя астму; аллергический ринит; атопический дерматит; гиперчувствительность к пище и крапивницу, зависят от T-лимфоцитов. Эти заболевания преимущественно опосредованы индуцированным T-лимфоцитами воспалением, опосредованным IgE воспалением или сочетанием обоих.
Связанные с трансплантацией заболевания, включающие в себя отторжение трансплантата и реакцию трансплантат-против-хозяина (GVHD), зависят от T-лимфоцитов; ингибирование функционирования T-лимфоцитов приводит к улучшению.
Другими заболеваниями, при которых вмешательство иммунного и/или воспалительного ответа может быть полезным, являются инфекционные заболевания, включающие в себя в качестве неограничивающих примеров вирусную инфекцию (включающую в себя в качестве неограничивающих примеров СПИД, гепатит A, B, C, D, E), бактериальную инфекцию, грибковые инфекции и протозойные и паразитические инфекции (молекулы (или дериваты/агонисты), которые стимулируют MLR, можно использовать терапевтически для усиления иммунного ответа на возбудители инфекции), иммунодефицитные состояния (молекулы/дериваты/агонисты), стимулирующие MLR, можно использовать терапевтически для усиления иммунного ответа на унаследованные, приобретенные, индуцированные инфекциями (как при ВИЧ-инфекции) или ятрогенные (т.е. в результате химиотерапии) состояния и неоплазию.
Антитело предпочтительно вводят млекопитающему в носителе; предпочтительно фармацевтически приемлемом носителе. Подходящие носители и их составы описаны в Remington's Pharmaceutical Sciences, 16th ed., 1980, Mack Publishing Co., под редакцией Oslo et al. Как правило, подходящее количество фармацевтически приемлемой соли применяют в составе для придания составу изотоничности. Примеры носителя включают в себя физиологический раствор, раствор Рингера и раствор декстрозы. pH раствора предпочтительно составляет от приблизительно 5 до приблизительно 8, а более предпочтительно от приблизительно 7 до приблизительно 7,5. Дополнительные носители включают в себя препараты с замедленным высвобождением, такие как полупроницаемые матриксы твердых гидрофобных полимеров, содержащие антитело, где эти матрицы находятся в форме профилированный изделий, например пленок, липосом или микрочастиц. Специалистам в данной области понятно, что определенные носители могут быть более предпочтительными, например, в зависимости от маршрута введения и концентрации вводимого антитела.
Антитело можно вводить млекопитающему посредством инъекции (например, внутривенной, интраперитонеальной, подкожной, внутримышечной, интрапортальной) или другими способами, такими как вливание, которые обеспечивают его доставку в кровоток в эффективной форме. Антитело также можно вводить способами изолированной перфузии, такими как изолированная тканевая перфузия, для оказания локального терапевтического действия. Предпочтительны локальная и внутривенная инъекции.
Эффективные дозировки и протоколы введения антитела можно определять эмпирически, и осуществление таких определений известно специалистам в данной области. Специалистам в данной области понятно, что дозировка антитела, которую необходимо вводить, варьирует в зависимости, например, от млекопитающего, получающего антитело, маршрута введения, конкретного типа используемого антитела и других лекарственных средств, вводимых млекопитающему. Руководство по выбору подходящих доз для антитела находится в литературе по терапевтическому применению антител, например Handbook of Monoclonal Antibodies, Ferrone et al., eds., Noges Publications, Park Ridge, NJ., (1985), ch. 22 and pp.303-357; Smith et al., Antibodies in Human Diagnosis and Therapy, Haber et al., eds., Raven Press, New York (1977), pp.365-389. Типичная суточная доза антитела, применяемого отдельно, может находиться в диапазоне приблизительно от 1 мкг/кг до 100 мг/кг массы тела или более в сутки, в зависимости от указанных выше факторов.
Антитело также можно вводить млекопитающему в сочетании с эффективными количествами одного или нескольких других терапевтических средств. При лечении злокачественной опухоли это особенно верно, так как многие опухоли приобретают устойчивость к химиотерапии или радиотерапии вследствие инактивации гена p53, супрессирующего опухоли. Так как DR5 стимулирует апоптоз независимо от p53, ожидают, что он будет клинически полезным не только в качестве отдельного средства, но также и в сочетании с другими типами противоракового лечения, такими как, например, химиотерапия (химиотерапевтические средства), лучевая терапия, иммуноадъюванты, ингибирующие рост средства, цитотоксические средства и/или цитокины. Также можно применять другие средства, для которых известно, что они индуцируют апоптоз в клетках млекопитающих, и такие средства включают в себя TNF-альфа, TNF-бета, лиганд CD30, лиганд 4-1BB и лиганд Apo-2, а также другие антитела, которые могут индуцировать апоптоз. Одно или несколько других лекарственных средств могут включать в себя терапевтические антитела (отличные от антитела к DR5), и такие антитела могут включать в себя антитела к рецептору Her (такие как Herceptin® (трастузумаб), Genentech, Inc.), антитела к VEGF, антитела к CD20 (такие как Rituxan® (ритуксимаб), Genentech, Inc.) и антитела к другим рецепторам лиганда Apo-2, такие как антитела к DR4, или антитела к другим представителям семейства рецептора TNF, такие как ENBREL® (этанерцепт) (Immunex).
Рассматриваемые в изобретении химиотерапевтические препараты включают в себя химические вещества или лекарственные средства, которые известны в данной области и коммерчески доступны, такие как доксорубицин, 5-фторурацил, этопозид, камптотецин, лейковорин, цитозинарабинозид, циклофосфамид, тиотепа, бусульфан, цитоксин, таксол, метотрексат, цисплатин, мелфалан, винбластин и карбоплатин. Состав и схемы дозирования для такой химиотерапии можно применять по инструкциям производителя или как определено эмпирически практикующими специалистами. Состав и схемы дозирования для такой химиотерапии также описаны в Chemotherapy Service Ed., M.C. Perry, Williams & Wilkins, Baltimore, MD (1992).
Химиотерапевтический препарат предпочтительно вводят в фармацевтически приемлемом носителе, таком как описанные выше носители. Способ введения млекопитающему химиотерапевтического препарата может быть таким же, как применяют для антитела к DR5, или его можно вводить другим способом. Например, млекопитающему антитело к DR5 можно инъецировать, тогда как химиотерапевтическое средство вводят перорально.
Радиационную терапию можно проводить млекопитающему согласно протоколам, обычно используемым в данной области и известным специалистам в данной области. Такая терапия может включать в себя радиоактивное излучение цезия, иридия, йода или кобальта. Радиационная терапия может представлять собой облучение всего тела, или ее можно применять локально к конкретному участку или ткани в организме или на теле. Как правило, радиационную терапию проводят импульсами в течение периода времени от приблизительно 1 до приблизительно 2 недель. Однако радиационную терапию можно проводить в течение более длительных периодов времени. Необязательно, радиационную терапию можно проводить в виде однократной дозы или в виде множества последовательных доз.
Антитело можно вводить последовательно или одновременно с одним или несколькими другими терапевтическими средствами. Количества антитела и терапевтического средства зависят, например, от типа применяемых лекарственных средств, подвергаемого лечению патологического состояния и схемы и путей введения, но, как правило, составляют менее, чем если их использовать по отдельности.
После введения антитела млекопитающему физиологическое состояние млекопитающего можно контролировать различными способами, хорошо известными практикующим специалистам.
Полагают, что в терапии также можно использовать антагонистические или блокирующие антитела к DR5. Например, антитело к DR5 можно вводить млекопитающему (так, как описано выше) для блокирования связывания рецептора DR5 с Apo-2L, таким образом, увеличивая биодоступность Apo-2L, вводимого при терапии Apo-2L, для индукции апоптоза у злокачественных клеток.
Терапевтические эффекты антител к DR5 по изобретению можно контролировать в анализах in vitro и с применением моделей на животных in vivo. Для дальнейшего понимания роли определенных в настоящем документе антител к DR5 в развитии и патогенезе, например, злокачественной опухоли или связанных с иммунной системой заболеваний и для тестирования эффективности терапевтических средств-кандидатов можно использовать ряд хорошо известных моделей на животных. In vivo характер таких моделей делает их особенно предсказательными в отношении ответа у пациентов, являющихся людьми.
Модели связанных с иммунной системой заболеваний на животных включают в себя нерекомбинантных и рекомбинантных (трансгенных) животных. Модели на нерекомбинантных животных включают в себя, например, грызунов, например модели на мышах. Такие модели можно получать посредством введения клеток сингенным мышам с применением стандартных способов, например подкожной инъекции, инъекции в хвостовую вену, имплантации в селезенку, интраперитонеальной имплантации и имплантации под почечную капсулу.
Модели на животных, например, для реакции трансплантат-против-хозяина известны. Реакция трансплантат-против-хозяина происходит, когда иммуносупрессированным или толерантным пациентам трансплантируют иммунокомпетентные клетки. Донорные клетки распознают антигены хозяина и отвечают на них. Ответ может варьировать от опасного для жизни тяжелого воспаления до мягкой формы диареи и потери массы. Модели реакции трансплантат-против-хозяина обеспечивают средства для оценки реактивности T-клеток в отношении антигенов MHC и второстепенных антигенов трансплантации. Подходящая процедура подробно описана в Current Protocols in Immunology, unit 4.3.
Модель на животном для отторжения кожного трансплантата представляет собой средство для тестирования T-клеток на способность опосредовать разрушение ткани in vivo, что является показателем и мерой их роли в противовирусном и противоопухолевом иммунитете. В самых распространенных и признанных моделях используют трансплантаты кожи хвоста мышей. Повторные эксперименты показали, что отторжение аллотрансплантатов кожи опосредуется T-клетками, хелперными T-клетками и киллерными-эффекторными T-клетками, а не антителами [Auchincloss, H. Jr. and Sachs, D. H., Fundamental Immunology, 2nd ed., W. E. Paul ed., Raven Press, NY, 1989, 889-992]. Подходящая процедура подробно описана в Current Protocols in Immunology, unit 4.4. Другие модели отторжения трансплантата, которые можно использовать для тестирования композиций по изобретению, представляют собой модели аллогенной трансплантации сердца, описанные в Tanabe, M. et al., Transplantation, (1994) 58:23, и Tinubu, S. A. et al., J. Immunol. (1994) 4330-4338.
Модели на животных для гиперчувствительности замедленного типа также обеспечивают анализ опосредованных клетками функций иммунной системы. Реакции гиперчувствительности замедленного типа представляют собой опосредованный T-клетками иммунный ответ in vivo, характеризующийся воспалением, которое не достигает пика до окончания промежутка времени, прошедшего после стимуляции антигеном. Эти реакции также происходят при тканеспецифических аутоиммунных заболеваниях, таких как рассеянный склероз (РС) и экспериментальный аутоиммунный энцефаломиелит (EAE, модель для РС). Подходящая процедура подробно описана в Current Protocols in Immunology, unit 4.5.
Модель на животных для артрита представляет собой индуцированный коллагеном артрит. Эта модель обладает клиническими, гистологическими и иммунологическими характеристиками аутоиммунного ревматоидного артрита человека и представляет собой приемлемую модель для аутоиммунного артрита человека. Мышиные и крысиные модели характеризуются синовиитом, эрозией хряща и подхрящевой кости. Антитела к DR5 по изобретению можно тестировать на активность против аутоиммунного артрита с применением протоколов, описанных в Current Protocols in Immunology, выше, units 15.5. Также см. модель с применением моноклонального антитела к интегринам CD18 и VLA-4, описанную в Issekutz, A. C. et al., Immunology, (1996) 88:569.
Описана модель для астмы, в которой индуцированную антигеном гиперреактивность бронхов, легочную эозинофилию и воспаление индуцируют посредством сенсибилизации животного овальбумином, а затем стимулируя животного тем же белком, вводимым посредством аэрозоля. Некоторые модели на животных (морская свинка, крыса, не являющийся человеком примат) демонстрируют симптомы, сходные с атопической астмой у людей при стимуляции аэрозольными антигенами. Модели на мышах обладают многими свойствами астмы человека. Подходящие процедуры для тестирования композиций по изобретению на активность и эффективность лечения астмы описаны в Wolyniec, W. W. et al., Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. (1998) 18:777, и, цитируемых в ней ссылках.
Кроме того, антитела к DR5 по изобретению можно тестировать в моделях на животных для заболеваний, подобных псориазу. Антитела к DR5 по изобретению можно тестировать на мышиной модели scid/scid, описанной в Schon, M. P. et al., Nat. Med. (1997) 3:183, где мыши демонстрируют гистопатологические очаги повреждения кожи, сходные с псориазом. Другую подходящую модель представляет собой химерная мышь Scid/кожа человека, полученная, как описано у Nickoloff, B. J. et al., Am. J. Path. (1995) 146:580.
Для тестирования безопасности и противораковой активности терапевтической композиции-кандидата хорошо известны различные модели на животных. Они включают в себя ксенотрансплантацию опухоли человека бестимусным мышам nude или мышам scid/scid или генетические модели опухолей у мышей, такие как мыши с нокаутом p53.
Рекомбинантные (трансгенные) модели на животных можно конструировать посредством введения кодирующей части определяемых в настоящем документе молекул в геном представляющих интерес животных с применением стандартных способов получения трансгенных животных. Животные, которые могут служить в качестве мишени для трансгенных манипуляций, включают в себя в качестве неограничивающих примеров мышей, крыс, кроликов, морских свинок, овец, коз, свиней и не являющихся человеком приматов, например бабуинов, шимпанзе и мартышек, таких как яванская макака. Известные в данной области способы введения трансгена такому животному включают в себя микроинъекцию в пронуклеус (Hoppe and Wanger, патент США №4873191); опосредуемый ретровирусами перенос генов в зародышевые линии (например, Van der Putten et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82, 6148-615 [1985]); воздействие на гены в эмбриональных стволовых клетках (Thompson et al., Cell, 56, 313-321 [1989]); электропорацию эмбрионов (Lo, Mol. Cel. Biol., 3, 1803-1814 [1983]); опосредованный спермием перенос гена (Lavitrano et al., Cell, 57, 717-73 [1989]). Для обзора см., например, патент США №4736866.
Для целей настоящего изобретения трансгенные животные включают в себя животных, которые несут трансген только в части своих клеток ("мозаичные животные"). Трансген может быть интегрирован в виде одного трансгена или в конкатемеры, например в тандемы "голова-к-голове" или "голова-к-хвосту". Селективное введение трансгена в конкретный тип клеток также возможно, например, способом Lasko et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89, 6232-636 (1992).
Экспрессию трансгена у трансгенных животных можно контролировать стандартными способами. Например, для подтверждения интеграции трансгена можно использовать анализ "саузерн"-блот или амплификацию ПЦР. Затем можно анализировать уровень экспрессии мРНК с применением таких способов, как гибридизация in situ, анализ "нозерн"-блот, ПЦР или иммуногистохимия. Животных можно дополнительно проверять на патологические признаки иммунного заболевания, например, посредством гистологической проверки для определения инфильтрации иммунных клеток в конкретную ткань или на присутствие раковой или злокачественной ткани.
Альтернативно, можно получать животное с "нокаутом", которое несет дефектный или измененный ген, кодирующий полипептид, определяемый в настоящем документе, как результат гомологичной рекомбинации между эндогенным геном, кодирующим полипептид, и измененной геномной ДНК, кодирующей тот же пептид, введенный в эмбриональную клетку животного. Например, кодирующую конкретный полипептид кДНК можно применять для клонирования кодирующей этот полипептид геномной ДНК в соответствии с широко известными способами. Часть кодирующей конкретный полипептид геномной ДНК можно удалить или заменить другим геном, таким как ген, кодирующий селективный маркер, который можно применять для контроля интеграции. Как правило, в вектор включают несколько тысяч оснований неизмененной фланкирующей ДНК (с 5'- и 3'-концов) [для описания векторов для гомологичной рекомбинации см., например, Thomas and Capecchi, Cell, 51:503 (1987)]. Вектор вводят в линию эмбриональных стволовых клеток (например, посредством электропорации) и отбирают клетки, в которых введенная ДНК подверглась гомологичной рекомбинации с эндогенной ДНК [см. например, Li et al., Cell, 69:915 (1992)]. Затем отобранные клетки инъецируют в бластоцисту животного (например, мыши или крысы) с образованием агрегационных химер (см., например, Bradley, in Teratocarcinomas and Embryonic Stem Cells: A Practical Approach, E. J. Robertson, ed. (IRL, Oxford, 1987), стр. 113-152]. Затем химерный эмбрион можно имплантировать в подходящую псевдобеременную приемную самку животного и доводить эмбрион до нормального срока окончания беременности с получением животного с "нокаутом". Потомство, несущее в своих зародышевых клетках ДНК, подвергшуюся гомологичной рекомбинации, можно идентифицировать стандартными способами и применять для выведения животных, у которых все клетки животного содержат гомологично рекомбинированную ДНК. Животных с нокаутом можно отличать по их способности противостоять определенным патологическим состояниям и по развитию у них патологических состояний вследствие отсутствия полипептида.
В другом варианте осуществления изобретения предоставлены способы для применения антитела в диагностических анализах. Например, антитела можно применять в диагностических анализах для детекции экспрессии или сверхэкспрессии DR5 в конкретных клетках и тканях. Можно использовать различные известные в данной области способы диагностического анализа, такие как анализ изображений in vivo, анализ конкурентного связывания in vitro, прямой и непрямой сэндвич-анализ и анализ иммунопреципитации, проводимый в гетерогенной или гомогенной фазах [Zola, Monoclonal Antibodies: A Manual of Techniques, CRC Press, Inc. (1987), pp.147-158]. Применяемые в диагностических анализах антитела можно метить детектируемой группой. Детектируемая группа может быть способной к прямой или непрямой продукции детектируемого сигнала. Например, детектируемая группа может представлять собой радиоактивный изотоп, такой как 3H, 14C, 32P, 35S или 125I, флуоресцентное или хемилюминесцентное соединение, такое как флуоресцеинизотиоцианат, родамин или люциферин, или фермент, такой как щелочная фосфатаза, бета-галактозидаза или пероксидаза хрена. Можно применять любой известный в данной области способ конъюгации антитела с детектируемой группой, включая способы, описанные в Hunter et al., Nature, 144:945 (1962); David et al., Biochemistry, 13:1014-1021 (1974); Pain et al., J. Immunol. Meth., 40:219-230 (1981), и Nygren, J. Histochem. and Cytochem., 30:407-412 (1982).
Антитела к DR5 также пригодны для аффинной очистки DR5 из культуры рекомбинантных клеток или природных источников. В этом способе антитела к DR5 иммобилизуют на подходящей подложке, такой как смола сефадекс или фильтровальная бумага, с применением хорошо известных в данной области способов. Затем иммобилизованное антитело приводят в контакт с образцом, содержащим DR5 для очистки, а затем подложку промывают подходящим растворителем, который по существу удаляет все вещество в образце, за исключением DR5, который связывается с иммобилизованным антителом. В конце подложку промывают другим подходящим растворителем, который высвобождает DR5 из антитела.
В дополнительном варианте осуществления изобретения предоставлены промышленные изделия и наборы, содержащие вещества, пригодные для лечения патологических состояний или детекции или очистки DR5. Промышленное изделие содержит контейнер с этикеткой. Подходящие контейнеры включают, например, пызырьки, флаконы и тестовые пробирки. Контейнеры можно производить из ряда материалов, таких как стекло или пластик. Контейнер содержит композицию с активным веществом, эффективным для лечения патологических состояний или для детекции или очистки DR5. Активное вещество в композиции представляет собой антитело к DR5 и предпочтительно содержит моноклональные антитела, специфичные к DR5. Этикетка на контейнере указывает, что композицию применяют для лечения патологических состояний или детекции или очистки DR5, и может также указывать способы применения in vivo или in vitro, такие как описанные выше способы.
Набор по изобретению содержит описанный выше контейнер и второй контейнер, содержащий буфер. Он может дополнительно содержать другие материалы, желательные с коммерческой и пользовательской точек зрения, включая другие буферы, разбавители, фильтры, иглы, шприцы и вкладыши в упаковку с инструкциями по применению.
Следующие примеры предложены только в целях иллюстрации и никаким образом не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения.
Все патенты и литературные ссылки, цитируемые в настоящем описании, таким образом, включены в виде ссылки в полном объеме.
ПРИМЕРЫ
Если не указано иначе, указываемые в примерах коммерчески доступные реагенты применяли по инструкциям производителя. Источником клеток, определяемых в следующих ниже примерах и на всем протяжении спецификации посредством инвентарных номеров ATCC, является American Type Culture Collection, Manassas, Virginia. Ряд реагентов и протоколов, описанных в настоящем документе, дополнительно описаны в WO 99/37684, WO 00/73349, WO 98/32856, WO 98/51793 и WO 99/64461, содержание которых, таким образом, включено в виде ссылки в полном объеме.
Пример 1
Конструирование и тестирование вариантов антител к DR5
Антитело к DR5 16E2 получено в форме scFv из библиотеки фагового дисплея антител человека и описано в WO 98/51793, опубликованной 19 ноября 1998 года (см. пример 14). Нуклеотидная и аминокислотная последовательности 16E2 scFv показаны на фиг.5 (SEQ ID NO: 9) и фиг.6 (SEQ ID NO: 10), соответственно. На фиг.6 указана сигнальная последовательность и области CDR тяжелой и легкой цепи (области CDR1, CDR2 и CDR3 подчеркнуты).
Материалы и методы
Конструирование полноразмерного антитела к DR5 16E2
Для описанных ниже экспериментов конструировали полноразмерные IgG. Таким образом, вариабельные домены 16E2 клонировали в ранее описанные векторы pRK, подходящие для экспрессии полноразмерных антител IgG1 в клетках млекопитающих (Gorman et al., DNA Prot. Eng. Tech. 2:3-10 (1990)). Сравнение аминокислотной последовательности вариабельного домена 16E2 с базой данных Kabat (Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, U.S. Dept. of Health and Human Services, NIH, 5th edition) показало, что вариабельная область легкой цепи (VL) 16E2 получена из семейства генов легкой цепи лямбда человека. Таким образом, вариабельный домен 16E2 первый субклонировали в вектор, содержащий константный домен лямбда. Сконструировали праймеры ПЦР для добавления участков распознавания рестрикционных ферментов SfiI и MscI, а затем амплифицированный вариабельный домен расщепили этими двумя ферментами. Этот фрагмент вставили в подобным образом расщепленный вектор, содержащий константный домен лямбда. Так как этот вектор конструировали для экспрессии Fab в E.coli, для экспрессии IgG область, кодирующую целую легкую цепь, снова подвергали амплификации ПЦР с применением праймеров для добавления участка рестрикции AgeI на 5'-конце кодирующей области и HindIII на 3'-конце. Затем этот фрагмент от AgeI до HindIII вставляли в подобным образом расщепленный вектор, pDR1 (Clontech). Полная последовательность плазмиды pDR1 показана на фиг.11 (SEQ ID NO: 15).
Для тяжелой цепи версии 1 вариабельный домен (VH) тяжелой цепи scFv 16E2 подвергали амплификации ПЦР с применением праймеров, сконструированных для добавления участка PvuII на 5'-конце и участка ApaI на 3'-конце домена. Этот фрагмент клонировали по участкам PvuII/ApaI вектора pDR2 (Clontech) для экспрессии целой тяжелой цепи (домены VH-CH1-CH2-CH3). Полная последовательность плазмиды pDR2 показана на фиг.12 (SEQ ID NO: 16).
Нуклеотидная и аминокислотная последовательности тяжелой и легкой цепей полноразмерного антитела 16E2 показаны на фиг.7-10 (SEQ ID NO: 11-14), соответственно, в частности, на фиг.7 и 8 (SEQ ID NO: 11 и 12) показаны аминокислотная и нуклеотидная последовательности полноразмерной тяжелой цепи 16E2, а на фиг.9 и 10 (SEQ ID NO: 13 и 14) показаны аминокислотная и нуклеотидная последовательности полноразмерной легкой цепи 16E2. Тяжелая и легкая цепи полноразмерного антитела 16E2 далее в настоящем документе также обозначают как "Версия 1."
Конструирование вариантов IgG. Варианты конструировали из легкой и тяжелой цепей отдельно с применением сайт-специфического мутагенеза (Kunkel et al., Proc. Natl. Acad. Sci USA 82:488-492 (1985)). Плазмиду pDR1, кодирующую легкую цепь версии 1, или pDR2, кодирующую тяжелую цепь версии 1, трансформировали в штамм E.coli CJ236 (BioRad, Joyce and Grindley, J. Bacteriol. 158:636-643 (1984)) для получения дезоксирибонуклеотидсодержащих одноцепочечных матриц ДНК. Аликвоты реакционных смесей мутагенеза трансформировали в штамм E.coli XL-I Blue (Stratagene, San Diego, CA) для очистки двухцепочечных ДНК. Для каждого варианта ДНК, кодирующие легкую или тяжелую цепь, полностью секвенировали с применением автоматического секвенатора ДНК ABI377x1 или ABI3730x1 (Perkin-Elmer Corp.).
Для каждого варианта IgG проводили транзиторную трансфекцию посредством котрансфекции экспрессирующей легкую цепь плазмиды с экспрессирующей тяжелую цепь плазмидой в трансформированную аденовирусом клеточную линию 293 эмбриональной почки человека (Graham et al., J. Gen. Virol, 36:59-74, (1977)). В кратком изложении, клетки 293 за день до трансфекции разделяли и высевали в содержащую сыворотку среду. На следующий день из двухцепочечной ДНК легкой или тяжелой цепей получали кальций-фосфатный преципитат вместе с pAdVantage™DNA (Promega, Madison, WI) и капельно добавляли в планшеты. Клетки инкубировали в течение ночи при 37°C, затем отмывали PBS и культивировали в среде без сыворотки в течение 4 суток, после чего собирали кондиционированную среду. Антитела очищали из супернатантов культуры с применением белка A-сефарозы CL-4B, затем буфер заменяли на 10 мМ сукцинат натрия, 140 мМ NaCl, pH 6,0, и концентрировали с применением Centricon-10 (Amicon). Концентрации белков определяли посредством измерения поглощения при 280 нм или посредством количественного аминокислотного анализа.
Электрохемилюминесцентный анализ связывания DR5. Относительное связывание антител к DR5 определяли в фазе раствора в формате конкуретного ELISA. Слитный белок DR5-Fc биотинилировали с применением биотина-X-NHS (Research Organics, Cleveland, OH), а стандартное антитело (версии 1 или Apomab 7.3) метили сложным эфиром ORI-TAG NHS (IGEN International, Gaithersburg, MD) по указаниям производителя. Для проведения анализа связывания образцы тестируемого антитела серийно разводили в буфере для анализа (PBS, pH 7,4, содержащий 0,5% BSA и 0,5% Tween-20). Равные объемы (каждый по 25 мкл) образца антитела (концентрации в диапазоне от 50000 до 0,85 нг/мл), стандартного антитела с ORI-TAG (150 нг/мл) и биотинилированного DR5 человека-Fc (15 нг/мл) добавляли в 96-луночные полипропиленовые планшеты и инкубировали в течение 1,5 ч при комнатной температуре со слабым перемешиванием. Затем добавляли магнитные бусы со стрептавидином (IGEN International) (25 мкл/лунку), а затем планшеты инкубировали, как указано выше, в течение дополнительных 30 минут. Добавляли буфер для анализа для доведения конечного объема до 250 мкл на лунку и планшеты считывали с применением устройства ORIGEN M384 (IGEN International). Подсчитывали значения IC50 с применением четырех параметров, соответствующих выборочным кривым.
Биологический анализ: ингибирование роста/уничтожение опухолевых клеток. Истинную активность каждого варианта антитела определяли в анализе уничтожения опухолевых клеток in vitro. Клеточную линию карциномы толстой кишки человека Colo205 культивировали в среде RPMI, содержащей 10% эмбриональной телячьей сыворотки. В 96-луночных планшетах для тканевых культур, содержащих среду со сшивающим антителом (аффинно очищенные козьи F(ab')2 к Fc человека) в концентрации 10 микрограммов/мл или без него, проводили двукратные серийные разведения стандарта (или версия 1, или Apomab 7.3) и образцов. Затем в планшеты добавляли клетки (20000/лунка). Планшеты инкубировали при 37°C всего в течение 48 ч. В течение последних 3 часов инкубации к лункам добавляли AlamarBlue. Показатели флуоресценции считывали с применением флуорометра с возбуждением при 530 нм и испусканием 590 нм. Данные анализировали с применением программы обработки кривых с четырьмя параметрами.
Результаты
Общей целью данной работы являлось сконструировать антитела к DR5 с улучшенными биологическими свойствами и увеличенной эффективностью без ухудшения безопасности.
Для достижения желательных улучшений использовали некоторые подходы, включая замены аминокислот в тяжелой и легкой цепях DR5 для увеличения химической и термической стабильности; фолдинга; сканирование аланином остатков CDR для определения того, какие остатки могут быть важными для связывания или фолдинга и, таким образом, могут быть заменены для увеличения аффинности; и применение библиотек фагового дисплея CDR для идентификации клонов с увеличенной активностью. Также изучали изменения в каркасных областях на их положительное влияние на иммуногенность и биологическую активность.
Модели гомологии (фиг.19 и 20) использовали в качестве помощи для селекции множества из этих изменений.
Варианты тяжелой цепи
Ряд 1
Версия 2 тяжелой цепи несет 5 замен в версии 1. Эти изменения (Q6E, V11L, E12V, R13Q и K105Q) находятся в каркасной области вариабельного домена и добавлены для того, чтобы сделать каркас ближе к консенсусной последовательности VHIII человека. В таблице 1 показаны первые варианты, сконструированные с заменами в CDR тяжелой цепи. Матрицей оцДНК для этих мутантов была версия 2. Замену Leu на Tyr в положении 102 проводили для улучшения укладки и, таким образом, стабильности. В сочетании с этой заменой Asn53 заменяли на Gln или Tyr для удаления потенциального участка дезамидирования. Met34 заменяли на Leu для удаления потенциального участка окисления. Эти варианты тяжелой цепи экспрессировали с исходной легкой цепью с получением вариантов 20-23 (таблица 1). Тяжелая цепь, содержащая три мутации M34L, N53Q и L102Y, и замены в каркасе, как в версии 2, обозначается в дальнейшем как "тяжелая цепь с тройной заменой один" или TH1, тогда как тяжелая цепь с тремя мутациями M34L, N53Y и L102Y и каркасом из версии 2 подобным образом обозначается TH2.
Таблица 1 | ||||
Варианты CDR тяжелой цепи | ||||
Версияa | Замены | IC50 варианта IC50 v1b | Активность в биологическом анализе со связываниемc | Активность в биологическом анализе без связыванияd |
20 | N53Q, L102Y | 0,11 | 0,24 | * |
21 | M34L, N53Q, L102Y | 0,42 | 0,54 | <1 |
22 | N53Y, L102Y | 0,08 | 1,30 | слабая |
23 | M34L, N53Y, L102Y | 0,28 | 4,47 | отсутствует |
a Матрица: версия 2 b Анализ конкурентного связывания DR5 человека Origen® c Анализ ингибирования опухолевых клеток d Анализ ингибирования опухолевых клеток |
Так как при проведении мутации M34L (т.е. v21 по сравнению с v20, v23 по сравнению с v22, таблица 1) происходила потеря связывания и клеточной киллерной активности in vitro, в CDR1 тяжелой цепи с применением в качестве матрицы тяжелой цепи версии 20 проведен ряд дополнительных мутаций, замещающих или аланин, или другие остатки, предположение о которых сделано при сканировании базы данных Kabat. Эти тяжелые цепи экспрессировали с легкой цепью версии 1. Подвергавшиеся мутации аминокислоты, получаемое в результате связывание относительно v1 и данные биологического анализа для этих версий приведены в таблице 2. Замена Gly33 на Ala приводила к усилению связывания, а также к увеличенной эффективности. Эту тяжелую цепь, содержащую три мутации, G33A, N53Q и L102Y, обозначили TH3. Подобным образом сконструирована TH4, содержащая G33A, N53Y и L102Y. Замена Thr28 на Ala также приводила к увеличенной активности по сравнению с v1, и тяжелую цепь, содержащую T28A, N53Q, L102Y, обозначили TH9. Замены в CDR в TH1, TH2, TH3, TH4 и TH9 суммированы в таблице 5. Эти пять тяжелых цепей изучали далее после коэкспрессии их с сочетаниями легких цепей (см. ниже).
Таблица 2 | ||||
Варианты в CDR H1 | ||||
Версияa | Мутация | IC50 мутанта, IC50 v1b | Активность в биологическом анализе со связываниемc | Активность в биологическом анализе без связыванияd |
111 | G26A | 0,11 | 0,42 | Отсутствует |
F27A | н.о. | н.о. | н.о. | |
112 | T28A | 0,19 | 0,8 | Такая же, как v1 |
127 | F29A | 7,6 | Отсутствует | |
55 | D30A | 2,2 | н.о. | н.о. |
54 | D30S | 2,1 | н.о. | н.о. |
57 | D31A | >10 | н.о. | н.о. |
56 | D31S | 4,3 | н.о. | н.о. |
113 | Y32A | 1,65 | >100 | Отсутствует |
58 | G33A | 0,1 | 0,097 | Слабая |
59 | M34A | 0,8 | 3,49 | Слабая |
49 | M34I | 1,2 | 14,6 | Отсутствует |
50 | M34S | 1,0 | 13,8 | Отсутствует |
S35H | н.о. | н.о. | н.о. | |
130 | S35A | н.о. | н.о. | н.о. |
a Матрицей для всех вариантов является версия 20 b Анализ конкурентного связывания DR5 человека Origen® c Анализ ингибирования опухолевых клеток d Анализ ингибирования опухолевых клеток |
Ala-сканирование CDRH2 и CDRH3. Для дальнейшего выяснения вклада каждой аминокислоты из CDR2 и CDR3 тяжелой цепи получали мутанты с заменой каждого из этих остатков аланином. С применением тяжелой цепи версии 1 в качестве матрицы проводили сайт-специфический мутагенез с синтетическими олигонуклеотидами, кодирующими замену аланином. Эти тяжелые цепи экспрессировали с применением легкой цепи версии 1. Изменения наблюдаемой аффинности и эффективности полученных в результате антител приведены в таблицах 3 и 4. Каждая из Gly99Ala и Arg100Ala приводила к увеличенной активности, и, следовательно, эти замены можно применять для конструирования дополнительных комбинаторных мутантов тяжелой цепи.
Таблица 3 | ||||
Сканирование аланином в CDR H2 | ||||
Версияa | Мутация | Коэффициент связывания относительно v1b | Активность в биологическом анализе со связываниемc | Активность в биологическом анализе без связыванияd |
139 | G50A | 3,55 | 1,91 | Отсутствует |
140 | I51A | н.о. | н.о. | н.о. |
141 | N52A | 2,42 | н.о. | н.о. |
W52aA | н.о. | н.о. | н.о. | |
142 | N53A | н.о. | 0,19 | Слабая |
160 | G54A | 1,49 | н.о. | н.о. |
151 | G55A | 1,0 | 0,86 | в >100 раз ниже |
143 | S56A | 1,1 | 0,81 | ~ равная v1 |
144 | T57A | 1,2 | 0,54 | в >100 раз ниже |
152 | G58A | 0,55 | 1,24 | ~ в 5 раз ниже |
153 | Y59A | 2,22 | 3,42 | Отсутствует |
154 | A60A | 0,55 | 0,49 | в >100 раз ниже |
158 | D61A | 0,725 | н.о. | н.о. |
155 | S62A | 0,65 | 0,73 | в >100 раз ниже |
156 | V63A | 0,041 | н.о. | ~ в 3 раза ниже |
159 | K64A | н.о. | н.о. | н.о. |
G65A | н.о. | н.о. | н.о. | |
a Матрица: версия 1 b Анализ конкурентного связывания DR5 человека Origen® c Анализ ингибирования опухолевых клеток d Анализ ингибирования опухолевых клеток |
Таблица 4 | ||||
Сканирование аланином в CDR H3 | ||||
Версияa | Мутация | Коэффициент связывания относительно v1b | Активность в биологическом анализе со связываниемc | Активность в биологическом анализе без связыванияd |
108 | K102A | 1,82 | >10 | Отсутствует |
109 | I95A | 8,38 | Отсутствует | Отсутствует |
(1040) | L96A | н.о. | н.о. | н.о. |
126 | G97A | 8,52 | Отсутствует | Отсутствует |
110 | Y98A | 24,2 | Отсутствует | Отсутствует |
128 | G99A | 0,09 | 0,43 | ~ в 8 раз выше |
129 | R100A | 0,47 | 0,128 | ~ в 4 раза выше |
116 | G100aA | 2,84 | Отсутствует | Отсутствует |
117 | W100bA | Na | Отсутствует | Отсутствует |
118 | Y100cA | 10,85 | Отсутствует | Отсутствует |
119 | F100dA | Na | Отсутствует | Отсутствует |
120 | D101A | 1,83 | ~1 | Отсутствует |
a Матрица: версия 1 b Анализ конкурентного связывания DR5 человека Origen® c Анализ ингибирования опухолевых клеток d Анализ ингибирования опухолевых клеток |
Ряд 2
С применением тех же CDR, что и в версиях TH1, TH2, TH3 и TH4, в которых каркасные остатки E6, L11, V12, Q13 и Q105 заменяли на аминокислоты, присутствующие в версии 1, т.е. Q6, V1l, E12, R13 и K105, конструировали второй ряд тяжелых цепей. Эти тяжелые цепи обозначили как TH5, TH6, TH7 и TH8 (см. таблицу 5).
Таблица 5 | ||||
Варианты тяжелой цепи с мутациями во всех петлях CDR | ||||
Состав тяжелой цепи | Мутация в CDR H1 | Мутация в CDR H2 | Мутация в CDR H3 | Каркасные остатки в 6, 11, 12, 13, 105 |
TH1 | M34L | N53Q | L102Y | E, L, V, Q, Q |
TH2 | M34L | N53Y | L102Y | E, L, V, Q, Q |
TH3 | G33A | N53Q | L102Y | E, L, V, Q, Q |
TH4 | G33A | N53Y | L102Y | E, L, V, Q, Q |
TH5 | M34L | N53Q | L102Y | Q, V, E, R, K |
TH6 | M34L | N53Y | L102Y | Q, V, E, R, K |
TH7 | G33A | N53Q | L102Y | Q, V, E, R, K |
TH8 | G33A | N53Y | L102Y | Q, V, E, R, K |
TH9 | T28A | N53Q | L102Y | E, L, V, Q, Q |
Варианты легких цепей
Сканирование аланином CDR легких цепей
Для лучшего понимания вклада остатков CDR легкой цепи в связывание и биологическую активность каждую аминокислоту с применением сайт-специфического мутагенеза заменяли на аланин. Каждый из вариантов легкой цепи объединяли с тяжелой цепью v1 для транзиторной экспрессии IgG, как описано выше. Полученные при сканировании CDR легких цепей аланином результаты подытожены в таблице 6. Представляет интерес, что в отличие от многих других антител, создается впечатление, что CDR L1 играет важную роль в связывании антигена. Эта легкая цепь представляет собой цепь лямбда, и модель, представленная на фиг.20, позволяет предположить, что CDR1 может формировать альфа-спираль. Замены в L2 и L3 на аланин более допустимы, за исключением G50A в CDR2, разрушающей связывание. Напротив, некоторые замены на ala, особенно R91A и K51A, усиливали связывание и биологическую активность.
Замены остатков из семейства генов
Второй тип прямых мутантов использовали для исследования легкой цепи. При этом подходе остатки CDR, которые в модели находились с одной из сторон петель и, таким образом, могут играть поддерживающую роль, а не быть напрямую вовлеченными в связывание антигена, заменяли на остатки в соответствующих положениях в других близкородственных семействах лямбда-генов. Эти мутанты также экспрессировали с использованием тяжелой цепи v1, а результаты суммированы в таблице 7. В CDR L2 сочетания G50K, K51D приводили к значимому увеличению связывания и биологической активности, а сочетание, содержащее четыре мутации G50K, K51D, N52S, N53E, также являлось улучшенным по сравнению с v1. Другие более консервативные замены в этой же области, включающие только одну замену основания, были недопустимы.
a Матрица: версия 1
b Анализ конкурентного связывания DR5 человека Origen®
c Анализ ингибирования опухолевых клеток
d Анализ ингибирования опухолевых клеток
Аффинный отбор в фаговых библиотеках антител
Для каждой из CDR L1, L2 и L3 отдельно сконструированы библиотеки фагового дисплея и проводился отбор на клоны с увеличенной аффинностью к DR5-Ig. Исследование модели (фиг.20) указало, какие остатки CDR, вероятно, были экспонированы, и эти остатки выбирали для рандомизации. Целый домен легкой цепи лямбда и домен VH версии 1 клонировали в вектор фагового дисплея pS1602, указанный в Vajdos et al., J. Mol. Biol. 320:415-428 (2002), и дополнительно описанный в Sidhu et al., Curr. Opin. Biotechnol. 11:610-616 (2002). Для конструирования библиотек использовали мутагенез по Kunkel. Для получения одноцепочечных ДНК фагмиду v1 трансформировали в штамм E.coli CJ236 и для получения библиотечных матриц использовали олигонуклеотиды, содержащие кодоны TAA в каждом участке, выбранном для рандомизации. Затем для получения библиотек использовали олигонуклеотиды с вырожденным кодоном NNS (где N представляет собой смесь одинакового количества G, A, T и C, а S представляет собой смесь одинакового количества G и C). CDRL1 подвергали мутированию с использованием олигонуклеотида стоп-матрицы CA945 и библиотечного олигонуклеотида CA946. CDRL2 подвергали мутированию с использованием олигонуклеотида стоп-матрицы CA947 и библиотечного олигонуклеотида CA948. CDRL3 подвергали мутированию с использованием олигонуклеотида стоп-матрицы CA949 и библиотечного олигонуклеотида CA950. Конструирование библиотеки суммировано в таблице 8.
Продукты реакций случайного мутагенеза посредством электропорации вводили в клетки E.coli XLI-Blue (Stratagene) и амплифицировали посредством роста в течение 14-16 часов с фагом-помощником M13K07. Размер библиотеки оценивали посредством серийного разведения и посева на чашках, если исходную трансформацию проводили на чашках с карбенициллином, и он составлял от 1,9×109 до 2,2×109 клонов.
Библиотеки подвергали пэннингу в течение 4 циклов в растворе с применением биотинилированных DR5-Ig (Genentech). Приблизительно 1011 фагов блокировали в одном мл раствора 3% обезжиренного сухого молока, 0,2% Tween в PBS (блокирующий фаг раствор) на карусельном столе в течение 1 часа при RT. Для уменьшения неспецифического связывания к блокирующему раствору добавляли DR4-IG и CD4-IG в концентрации 1 мкМ. Затем в концентрации 100 нМ для первого цикла добавляли биотинилированный антиген и связыванию позволяли происходить в течение 2 часов. В последующих циклах пэннинга концентрацию антигена снижали до 10, 5 и 1 нМ.
Для захвата антигенсвязывающего фага покрытые стрептавидином магнитные гранулы (Dynal) сначала три раза отмывали блокирующим фаг раствором, а затем блокировали в одном мл блокирующего фаг раствора в течение 1 часа при КТ. Гранулы концентрировали с применением магнита и добавляли в раствор антиген-фаг в течение 15 минут. Затем магнит использовали для извлечения комплексов гранулы-антиген-фаг из раствора. Затем эти частицы 3 раза отмывали в блокирующем фаг растворе, 3 раза в PBS-Tween (0,02% Tween) и 1 раз в PBS. Фаги элюировали с гранул 100 микролитрами 0,1 M HCl в течение 10 мин и нейтрализовали с применением NaOH. Элюированные фаги использовали для инфицирования E.coli XL1Blue и выращивали, как указано выше, для последующих циклов. В каждом цикле увеличивали строгость.
Клоны из каждой библиотеки секвенировали. Для библиотек L1 получали последовательности только дикого типа, подтверждая идею о том, что эта CDR важна для связывания антигена или конформации антитела и допустимо только небольшое количество мутаций в потенциальной спирали. Для библиотек в L2 консенсусных последовательностей выявлено не было, что позволяет предположить, что для связывания с DR5 приемлемы несколько последовательностей CDRL2. Для библиотек L3 некоторые последовательности встречались несколько раз, и эти последовательности вставили в вектор с полноразмерной легкой цепью с применением сайт-специфического мутагенеза. Экспрессию IgG снова проводили в клетках 293 с применением для котрансфекции тяжелой цепи версии 1. В таблице 9 описаны последовательности L3, экспрессируемые в качестве полноразмерных антител, и результаты связывания и биологических анализов. Две из тестируемых последовательностей, вставленные в версии 69 и 70, приводили к антителам с улучшенными по сравнению с версией 1 связыванием и биологической активностью.
Таблица 9 | ||||
Белковые последовательности CDR3 легкой цепи, полученные из фаговой библиотеки | ||||
Версияa | Последовательность CDR L3 |
Коэффициент связывания относительно v1b | Активность в биологи-ческом анализе со связываниемc | Активность в биологи-ческом анализе без связыванияd |
68 | 1,3 | 0,973 | 1,0 | |
69 | 0,1 | 0,143 | **** | |
70 | 0,2 | 0,152 | *** | |
a Матрица: версия 1 b Анализ конкурентного связывания DR5 человека Origen® c Анализ ингибирования опухолевых клеток d Анализ ингибирования опухолевых клеток |
Комбинаторные легкие цепи
Как описано выше, в каждой CDR легкой цепи идентифицированы мутации, которые по отдельности увеличивают связывание и гибель опухолевых клеток in vitro. Затем эти мутации комбинировали с получением нескольких легких цепей с улучшениями в каждой из CDR. Их обозначили TL1, TL2 и TL3, т.е. "легкая цепь с тройной заменой 1" и т.д., и они описаны в таблице 10. Таким образом, TL1 содержит мутантную L1, идентифицированную в версии 44, в сочетании с мутантной L2, идентифицированной в версии 26, и мутантной L3 из версии 29. Подобным образом, TL2 содержит мутантную L1 из версии 44 с мутантной L2 из v65 и мутантной L3 из v69, тогда как TL3 сочетает L1 из v44 с L2 из v65 и L3 из v74.
Таблица 10 | |||
Сочетания мутаций в легкой цепи | |||
Комбинация легкой цепи | Мутация, CDR L1 |
Мутация, CDR L2 |
Мутация, CDR L3 |
TL1 | Q24S | G50K, K51D, N52S, N53E | H95bY |
TL2 | Q24S | K51A | D92S, S93Y |
TL3 | Q24S | K51A | R91A |
Кроме того, антитела Apomab приведены в таблице 12.
*такой же каркас, как в версии 1
**такой же каркас, как в консенсусной VH-III человека
Экспрессия Apomab
После получения тяжелых цепей с тройной заменой и легких цепей с тройной заменой получили сеть 9×3 сочетанных антител посредством котрансфекции каждой из трех легких цепей с каждой из девяти тяжелых цепей в клетки 293 и очистки полученных антител, как описано выше. Исследования in vitro этих Apomab показали, что определенные версии были достаточно эффективны в биологических анализах. Таким образом, получили материал, который подходил для исследований в моделях опухоли на мышах in vivo.
Восстановление и очистка Apomab
Описан способ восстановления и очистки антител Apomab из жидкости, собранной из клеточной культуры (HCCF), как указано ниже.
Хроматография на Prosep Protein A - жидкость, собранную из клеточной культуры (HCCF), полученную из клеток яичника китайского хомяка (CHO), доводили до pH 7,0 с применением основания 1,5 M Tris, а затем наносили на колонку Prosep Protein A (Millipore, U.S.A.), уравновешенную 25 мМ NaCl/25 мМ Tris/5 мМ EDTA, pH 7,5. Несвязавшиеся белки проходили через колонку и удалялись отмывкой уравновешивающим буфером с последующей второй стадией отмывки с применением 0,5 M TMAC в уравновешивающем буфере и третьей отмывкой с применением уравновешивающего буфера. Антитело Apomab элюируют из колонки с белком A с применением этапа элюции 0,1 M уксусной кислотой. Элюент колонки контролируют при A280. Пик антитела Apomab объединяют.
Хроматография с применением SP-Sepharose Fast Flow - объединенный объем антитела Apomab со стадии Prosep Protein A доводят до pH 5,5 с применением основания 1,5 M Tris, а затем помещают на колонку с SP-Sepharose Fast Flow (Amersham Pharmacia, Sweden), уравновешенную 25 мМ MOPS, pH 7,1. После сбора образцов колонку промывают уравновешивающим буфером до исходного уровня при A280. Антитело Apomab элюируют из колонки с применением линейного градиента от 0 до 0,2 M хлорида натрия в уравновешивающем буфере, pH 8, объемом 12 колонок. Элюент колонки контролируют при A280. Фракции собирают, и те из них, которые содержат правильно уложенное антитело Apomab, как определяют посредством анализа SEC-HPLC, объединяют.
Хроматография с применением Q-Sephrose Fast Flow - затем объединенный объем фракций после SP-Sepharose наносят на колонку с Q-Sepharose FF (Amersham pharmacia, Sweden), уравновешенную 50 мМ хлорида натрия/25 мМ буфером Tris, pH 8. Колонку промывают уравновешивающим буфером, а антитело Apomab собирают в стоке колонки.
Состав UF/DF - объединенный объем после Q-Sepharose концентрируют ультрафильтрацией на мембране с отделением молекулярной массы приблизительно от 10000 дальтон. Затем концентрированный объединенный объем после Q-Sepharose FF подвергают диафильтрации 10 объемами 10 мМ гистидина/8% сахарозы, pH 6. Подвергнутый диафильтрации объединенный объем после Q-Sepharose кондиционируют 10% полисорбатом 20 до достижения конечной концентрации полисорбата 20 0,02%. Полученный объем фильтруют через стерильный 0,22 мкм фильтр и хранят при 2-8°C или -70°C. Конечную чистоту антител Apomab определяют посредством SDS-PAGE, SEC-HPLC и анализа аминокислотной последовательности.
Секвенирование проводят на устройствах для определения последовательности ABI3700 или ABI3730 Applied Biosystems. Хроматограммы секвенирования анализируют посредством программного обеспечения по анализу последовательностей Sequencer (GeneCodes, Ann Arbor, MI).
Тестирование активности Apomab in vitro
Перед началом исследований in vivo с применением Apomab, каждую серию тестировали на активность in vitro, как описано выше. Эти результаты приведены в таблице 13.
Таблица 13 | |||
Активность Apomab in vitro | |||
Версия Apomab | Величина усиления наблюдаемой аффинности относительно версии 1 (v1) | Величина усиления наблюдаемой эффективности, со связыванием, относительно версии 1 (v1) | Наблюдаемая эффективность, без связывания, относительно версии 1 (v1) |
1,1 | 11,30 | 24 | Отсутствует |
1,2 | 52,10 | 14 | Отсутствует |
1,3 | 13,10 | 6,5 | Отсутствует |
2,1 | 12,80 | 5,5 | Отсутствует |
2,2 | 9,60 | 3 | Отсутствует |
2,3 | 29,00 | 6,5 | Отсутствует |
3,1 | 15,00 | 14 | Отсутствует |
3,2 | 29,20 | 22 | Отсутствует |
3,3 | 15,00 | 8 | Отсутствует |
4,1 | 25,70 | 11 | Отсутствует |
4,2 | 23,10 | 6 | Отсутствует |
4,3 | 10,30 | 12 | Отсутствует |
5,2 | 26,90 | 22 | ~ в 8 раз выше |
5,3 | 2,80 | 10 | ~ в 2,4 раз ниже |
6,2 | 31,60 | 6 | ~ в 2 раз выше |
6,3 | 1,50 | 4 | ~ в 4 раз ниже |
7,2 | 31,20 | 22 | ~ в 5 раз выше |
7,3 | 4,30 | 16 | ~ в 2 раз ниже |
8,2 | 28,60 | 9 | Очень слабая |
8,3 | 8,30 | 11 | ~ в 8 раз ниже |
9,1 | 21,90 | 36 | Отсутствует |
9,2 | 29,90 | 48 | Отсутствует |
9,3 | 10,00 | н.о. | Отсутствует |
ПРИМЕР 2
Оценка противоопухолевой активности Apomab в модели карциномы толстой кишки человека на ксенотрансплантате Colo205 и других моделях колоректального рака на ксенотрансплантатах
Часто используемые в этом и последующих примерах сокращения представляют собой следующее:
CR | полная регрессия |
PR | частичная регрессия |
MTD | максимальная переносимая доза |
MTV | средний объем опухоли |
NTR | не связанная с лечением гибель |
LTTFS | долгоживущий выживший без опухоли |
PBS | фосфатно-солевой буфер |
q3d×4 | однократно каждые трое суток всего четыре дозы |
qd×1 | одна доза, вводимая на сутки 1 |
qd×5 | однократно в сутки в течение пяти суток |
TFS | выживший без опухоли |
TR | связанная с лечением гибель |
TTE | время до конечной точки |
T-C | разница, в сутках, между средними значениями TTE подвергнутых лечению и контрольных животных |
TGD | задержка опухолевого роста; T-C; увеличение среднего TTE для подвергаемой лечению группы, по сравнению с контрольной группой, обычно выражаемое как % от контроля |
Время до 2×Vo | время удвоения (DT); время, в течение которого удваивается объем опухоли |
Логарифм уничтожения клеток=log10 разница между логарифмом фактического объема опухоли на момент лечения, log10(V до) и log10(V после) (Chenevert et al., Clin. Cancer Res. 3:1457-1466 (1997)
Бестимусным мышам "nude" в возрасте 6-8 недель (Charles River Laboratories) инокулировали 5 миллионов клеток Colo205 на мышь в объеме 0,2 мл на мышь, подкожно, сзади в область правого бока. Всем мышам сделали ушную метку для идентификации. После того как объем опухоли достиг приблизительно 100-200 мм3, несущих опухоль Colo205 мышей случайным образом группировали и проводили лечение.
Схема лечения представляла собой одну дозу интраперитонеально с дозами носителя для контроля или стандартных и тестовых антител, при 3 мг/кг/мышь или 10 мг/кг/мышь. В некоторых случаях 3 или 4 мышей из групп с носителем и 10 мг/кг подвергали эвтаназии и собирали сыворотку и образцы опухоли через 5 минут, 24 часа или 48 часов после лечения для исследования концентрации лекарственного средства в сыворотке и гистологии опухоли. У оставшихся мышей измерения опухоли проводили дважды в неделю в первые 2 недели, затем один раз в неделю в течение следующих 4 недель.
Полученные результаты для модели на бестимусных мышах "nude" с ксенотрансплантатом Colo205 приведены на фиг.21-25.
На фиг.21 показано, что каждый из Apomab 5.3, 6.3 и 8.3 был высокоэффективен для уменьшения среднего объема опухоли при всех тестируемых дозировках, и их эффективность была по существу такой же, как эффективность антитела 16E2 версии 1.
Эффективность единичных интраперитонеальных доз Apomab 5.2, 6.2, 5.3, 7.2 и 7.3 тестировали на модели на бестимусных мышах "nude" с ксенотрансплантатом Colo205, а результаты показаны на фиг.22. Все тестируемые Apomab были высокоэффективны в отношении уменьшения объема опухоли, и их эффективность была по существу такой же, как эффективность антитела 16E2 версии 1.
Подобным образом, результаты, приведенные на фиг.23, показывают, что Apomab 5.2, 7.3 и 8.3 были эффективны в отношении уменьшения объема опухоли в этой модели колоректального рака. В этом эксперименте Apomab и 16E2 вводили в дозах 1 мг/кг и 3 мг/кг, но в остальном лечили, как описано выше. Эффективность Apomab 7.3 и 8.3 особенно необычна и не демонстрировала какой-либо реверсии в течение 20-суточного тестового периода.
Как показано на фиг.24, противораковая активность Apomab 7.3 значительно превосходит активность Apomab 23.3 и 25.3 в модели с ксенотрансплантатом Colo205.
На фиг.25 проиллюстрированы результаты анализа сравнения противоопухолевой активности Apomab 7.3, полученного из стабильных и транзиторных клеточных линий в модели на мышах с ксенотрансплантатом Colo205. В кратком изложении, самкам бестимусных мышей "nude" в возрасте 6-8 недель инокулировали 5 миллионов клеток Colo205 на мышь в объеме 0,2 мл на мышь, подкожно сзади в область правого бока, как описано выше. Дозы приведены на фигуре. Данные на фиг.25 показывают, что Apomab 7.3, полученный из стабильных и транзиторных клеточных линий, соответственно, равным образом эффективен в модели на мышах с ксенотрансплантатом Colo205.
На фиг.26 приведены результаты эксперимента тестирования противораковой активности Apomab 7.3 (в дозировке 10 мг/кг) в качестве монотерапии или в качестве комбинированного лечения с 80 мг/кг CPT-11 (иринотекан, известное лекарственное средство для лечения колоректального рака) в модели колоректального рака на ксенотрансплантате HCT15. Как продемонстрировано приведенными результатами, хотя и Apomab 7.3, и CPT-11 были эффективны при самостоятельном введении, комбинация из данных двух лекарственных средств продемонстрировала превосходный эффект, превышающий активность Apomab 7.3 и CPT-11, вводимых в качестве монотерапии.
Результаты репрезентативного эксперимента у несущих ксенотрансплантаты LS180 мышей "nude", обработанных Apomab 7.3 в сочетании с CPT-11 (иринотекан), показаны на фиг.27. Снова обнаружено, что комбинированное лечение было лучше относительно введения Apomab 7.3 или CPT-11 в качестве единственного средства, и различия являлись статистически значимыми (вторая панель). Для всех сравниваемых пар по тесту Тьюки-Крамера P<0,05.
ПРИМЕР 3
Оценка противораковой активности Apomab 7.3 в модели неходжкинской лимфомы на ксенотрансплантате BJAB
Противораковую активность Apomab 7.3 (10 мг/кг 1 р/неделя) отдельно и в сочетании с Rituxan® (ритуксимаб, Genentech. Inc.) (4 мг/кг, 1 р/неделя) оценивали на модели неходжкинской лимфомы на ксенотрансплантате BJAB. Так как известно, что клетки лимфомы лучше растут у мышей SCID, для данного исследования использовали мышей SCID (Charles River Laboratory) в возрасте 6-8 недель. Параметры лечения и результаты показаны на фиг.28. Apomab 7.3 и Rituxan® при введении в виде комбинации продемонстрировали синергическую активность.
ПРИМЕР 4
Оценка противораковой активности Apomab 7.3 на модели аденокарциномы поджелудочной железы человека на ксенотрансплантате BxPC3
Противораковую активность Apomab 7.3 (10 мг/кг, в/в) отдельно и в сочетании с гемцитабином (160 мг/кг, в/в) исследовали на модели аденокарциномы поджелудочной железы человека на ксенотрансплантате BxPC3 у самок бестимусных мышей "nude" (Charles River Laboratory). Параметры лечения и результаты показаны на фиг.29. Данные показывают, что противораковая активность Apomab 7.3, вводимого в качестве монотерапии, была значительно лучше относительно эффективности гемцитабина. Комбинированное введение Apomab 7.3 и гемцитабина приводило к дополнительному увеличению эффективности.
ПРИМЕР 5
Оценка противораковой активности Apomab 7.3 отдельно и в сочетании с карбоплатином и таксолом на модели рака легких человека на ксенотрансплантате H460
Противораковую активность Apomab 7.3 (10 мг/кг, 1 р/неделя, в/в) отдельно и в сочетании с карбоплатином и таксолом оценивали относительно носителя в качестве контроля и комбинации из карбоплатина и таксола. Шестидесяти самкам бестимусных мышей "nude" (Charles River Laboratory) инокулировали 5 миллионов клеток H460 на мышь в объеме 0,2 мл на мышь, подкожно сзади в область правого бока. Всем мышам сделали ушную метку для идентификации. Опухолям позволяли достичь среднего размера опухоли 100-200 мм3 и обрабатывали, как показано на фиг.30. В кратком изложении, мышей делили на четыре группы. Группа 1 представляла собой контрольную группу, обрабатываемую носителем (10 мМ гистидин, 8% сахароза и 0,02% Tween 20 (pH 6)). Группу 2 обрабатывали Apomab 7.3 в дозе 10 мг/кг/мышь, в/в, 1 р/неделю в течение 2 недель. Группе 3 вводили карбоплатин (100 мг/кг/мышь, в/в, одну дозу на сутки 0) + таксол (6,25 мг/кг/мышь, п/к, ежедневно в течение 5 последовательных суток в течение 2 недель). Группа 4 получала Apomab 7.3 (дозу 10 мг/кг/мышь, в/в, 1 р/неделю в течение 2 недель) + карбоплатин (100 мг/кг/мышь, в/в, одну дозу на сутки 0) + таксол (6,25 мг/кг/мышь, п/к, ежедневно в течение 5 последовательных суток в течение 2 недель). Противораковая активность Apomab 7.3, вводимого в качестве монотерапии, была сравнима с противораковой активностью сочетания карбоплатин + таксол. Обнаружено, что комбинированное введение Apomab 7.3 + карбоплатин + таксол является лучшим по сравнению с другими формами лечения.
ПРИМЕР 6
Оценка противораковой активности Apomab 7.3 отдельно и в сочетании с карбоплатином и таксолом на модели рака легких человека на ксенотрансплантате H2122
В данном исследовании самкам бестимусных мышей "nude" (Charles River Laboratory, 10 мышей/группу) инокулировали 5 миллионов клеток H2122 на мышь в объеме 0,2 мл на мышь, подкожно сзади в область правого бока. Всем мышам сделали ушную метку для идентификации. Опухолям позволяли достичь среднего размера опухоли 100-200 мм3, мышей случайным образом группировали в четыре группы (6 мышей/группу) и обрабатывали, как показано на фиг.31. Группа 1 представляла собой контрольную группу, обрабатываемую носителем (10 мМ гистидин, 8% сахароза и 0,02% Tween 20 (pH 6)). Группе 2 вводили карбоплатин (100 мг/кг/мышь, в/в, одну дозу на сутки 0) + таксол (6,25 мг/кг/мышь, п/к, ежедневно в течение 5 последовательных суток в течение 2 недель). Группа 3 получала Apomab 7.3 (в дозе 10 мг/кг/мышь, в/в, 1 р/неделю в течение 2 недель). Группа 4 получала Apomab 7.3 (дозу 10 мг/кг/мышь, в/в, 1р/неделю в течение 2 недель) + карбоплатин (100 мг/кг/мышь, в/в, одну дозу на сутки 0) + таксол (6,25 мг/кг/мышь, п/к, ежедневно в течение 5 последовательных суток в течение 2 недель). Как показано на фиг.31, комбинация карбоплатин + таксол не продемонстрировала значимой противораковой активности относительно обрабатываемой носителем контрольной группы. Напротив, Apomab 7.3, вводимый в качестве монотерапии, продемонстрировал заметную противоопухолевую активность. Все шесть мышей, обработанных Apomab 7.3, продемонстрировали полный ответ (CR) без какой-либо реверсии в течение 70-суточного периода лечения. Подобную активность выявили в группе, обрабатываемой сочетанием Apomab 7.3 + карбоплатин + таксол.
Для определения максимума эффективной дозы Apomab 7.3 в этой модели самкам бестимусных мышей "nude" (Charles River Laboratory) в возрасте 6-8 недель инокулировали 5 миллионов клеток H2122 на мышь в объеме 0,2 мл на мышь, подкожно сзади в область правого бока. Всем мышам сделали ушную метку для идентификации. Опухолям позволяли достичь среднего размера опухоли 100-200 мм3, мышей случайным образом группировали (13 мышей/группу) и обрабатывали, как описано ниже. Каждую мышь, исключаемую из групп обработки, подвергали эвтаназии.
Группа A представляла собой контрольную группу, обрабатываемую носителем (0,5 M аргининсукцинат, 20 мМ Tris, 0,02% Tween 20, pH 7,2). Носитель вводили 5 р/неделю, в/в в течение одной недели. Группе B вводили Apomab 7.3 в одной в/в дозе 1 мг/кг/мышь. Группе C вводили Apomab 7.3 в одной в/в дозе 3 мг/кг/мышь. Группе D вводили Apomab 7.3 в одной в/в дозе 10 мг/кг/мышь. Через 48 часов после первой обработки трех мышей из каждой из групп B, C и D подвергали эвтаназии и их опухоли собирали, как указано ниже. Одну из опухолей фиксировали в 10% формалине для гистологического исследования. Одну из опухолей замораживали в жидком азоте для исследований РНК. Одну из опухолей замораживали в жидком азоте для "вестерн"-блоттинга. Измерения опухолей проводили 2 р/неделю в течение первых 2 недель, а затем 1 р/неделю в течение следующих 4 недель. По окончании 6 недель или после того, как опухоль достигнет объема приблизительно 800-1000 мм3, всех оставшихся мышей подвергали эвтаназии. Кривые доза-ответ, показанные на фиг.32, первая панель, указывают на то, что Apomab 7.3 эффективен при всех тестируемых дозах, но дозы 3 мг/кг и 10 мг/кг продемонстрировали явное (хотя и статистически незначимое) улучшение относительно дозы 1 мг/кг. Для всех сравниваемых пар по тесту Тьюки-Крамера P<0,05 (см., фиг.32, вторая панель).
ПРИМЕР 7
Оценка противораковой активности Apomab 23.3, 25.3 и 7.3 на модели колоректального рака человека на ксенотрансплантате Colo205
В данном исследовании самкам бестимусных мышей "nude" (Charles River Laboratory) инокулировали 5 миллионов клеток Colo205 на мышь в объеме 0,2 мл на мышь, подкожно сзади в область правого бока. Всем мышам сделали ушную метку для идентификации. Опухолям позволяли достичь среднего размера опухоли 100-200 мм3, мышей случайным образом группировали на семь групп (10 мышей/группу) и обрабатывали, как показано на фиг.33. Группа 1 представляла собой контрольную группу, обрабатываемую носителем (10 мМ гистидин, 8% сахароза и 0,02% Tween 20 (pH 6)). Группе 2 вводили одну дозу 3 мг/кг/мышь, в/в, Apomab 7.3. Группе 3 вводили одну дозу 10 мг/кг/мышь, в/в, Apomab 7.3. Группе 4 вводили одну дозу 3 мг/кг/мышь, в/в, Apomab 23.3. Группе 5 вводили одну дозу 10 мг/кг/мышь, в/в, Apomab 23.3. Группе 6 вводили одну дозу 3 мг/кг/мышь, в/в, Apomab 25.3. Группе 7 вводили одну дозу 10 мг/кг/мышь, в/в, Apomab 25.3. Через 24 часа после обработки мышей взвешивали. Опухоли измеряли 2р/неделю в течение первых 2 недель, а затем каждую неделю в течение следующих 4 недель. Через 6 недель или когда опухоль достигала размера >1000 мм3 мышей умерщвляли.
Результаты показаны на фиг.33. Как проиллюстрировано данными через 25 суток и Apomab 7.3, и Apomab 25.3 продемонстрировали в этой модели значимую противораковую активность.
ПРИМЕР 8
Оценка противораковой активности моноклонального антитела Apomab 7.3 в отношении ксенотрансплантатов карциномы толстой кишки человека Colo205 мышам "nude"
Животные
Самки бестимусных мышей "nude" (nu/nu, Harlan) на сутки 1 исследования находились в возрасте 11 или 12 недель. Животных снабжали ad libitum водой и NIH 31 Modified and Irradiated Lab Diet®, состоящей из 18,0% общего белка, 5,0% общего жира и 5,0% сырой клетчатки. Животных содержали на облученных ALPHA-Dri® bed-o'cobs® Laboratory Animal Bedding в статических микроизоляторах при 12-часовом световом цикле при 21-22°C и 40-60% влажности.
Имплантация опухоли
Ксенотрансплантаты происходили из культивируемых клеток карциномы толстой кишки человека Colo205. Опухолевые клетки растили до фазы середины логарифмического роста в RPMI-1640, дополненной 10% инактивированной нагреванием эмбриональной телячьей сывороткой, 100 единиц/мл пенициллином G натрия, 100 мкг/мл стрептомицинсульфатом, 0,25 мкг/мл амфотерицином B и 25 мкг/мл гентамицином, 2 мМ глутамином, 1 мМ пируватом натрия, 10 мМ HEPES и 0,075% бикарбонатом натрия. Клеточные культуры содержали во флаконах для тканевых культур во влажном инкубаторе при 37°C, в атмосфере 5% CO2 и 95% воздуха. В сутки имплантации опухолевых клеток клетки Colo205 собирали и ресуспендировали в 50% матриксе Matrigel (BD Biosciences) в PBS при концентрации 5×106 клеток/мл. Каждая мышь в тесте получала 1×106 клеток Colo205, имплантированных подкожно в правый бок, и контролировали рост опухоли, когда средний размер достигнет от 100 до 300 мм3. Через тринадцать суток, обозначенных как сутки 1 исследования, индивидуальные объемы опухолей находились в диапазоне от 126 до 288 мм3, и животных сортировали на шесть групп, где каждая состояла из десяти мышей со средним объемом опухоли 188 мм3.
Тестируемые вещества и лечение
Тестируемые вещества в течение дозирования хранили на льду, а дозируемые растворы впоследствии хранили при 4°C. В контрольной группе с носителем (группа 1) мыши получали носитель, вводимый интраперитонеально раз в сутки в течение пяти суток с последующими двумя сутками отдыха, затем один раз в сутки в течение дополнительных пяти суток. В тестовых группах (группы 2-4) животных обрабатывали лигандом Apo2L.0 (60 мг/мг и/п по схеме 5/2/5), Apomab 7.3 (3 мг/кг в/в на сутки 1, 8) и мышиным моноклональным антителом к VEGF B20-4.1 (10 мг/кг и/п на сутки 1 и 8). Группы 5 и 6 получали сочетание B20-4.1 с Apo2L.0 и B20-4.1 с Apomab 7.3, соответственно. Каждую дозу вводили в объеме 0,2 мл на 20 г массы тела (10 мл/кг), в соответствии с массой животного.
Конечная точка
Опухоли измеряли дважды в неделю с применением циркулей. Каждое животное подвергали эвтаназии, когда размер его опухоли достигал объема 2000 мм3 или после конечной точки исследования на сутки 68, в зависимости от того, что произойдет первым. Конечный объем опухоли 1000 мм3 выбрали для анализа задержки опухолевого роста вследствие того, что ряд опухолей не достигал размера 2000 мм3. Время до конечной точки (TTE) для каждой мыши рассчитывали на основании следующего уравнения:
где b представляет собой пересечение, а M представляет собой угловой коэффициент линии, получаемой посредством линейной регрессии множества данных опухолевого роста. Множество данных содержало первое наблюдение, превышающее конечный объем исследования, и три последовательных наблюдения, которые непосредственно предшествовали достижению конечного объема. У животных, не достигавших конечной точки, значение TTE приравнивали последней дате исследования. У животных, погибших вследствие связанной с лечением гибели или не связанной с лечением гибели вследствие метастазов, значение TTE приравнивали суткам гибели. Животных, погибших вследствие не связанной с лечением гибели или гибели с неизвестной причиной, исключали из расчетов TTE.
Исход лечения оценивали по задержке опухолевого роста (TGD), которую определяли как увеличение среднего времени до конечной точки (TTE) в группе, получавшей лечение, по сравнению с контрольной группой:
TGD=T-C,
выраженной в сутках, или как процент средней TTE контрольной группы
где T=среднее TTE для группы, получавшей лечение,
C=среднее TTE для контрольной группы.
Лечение может вызывать частичную регрессию (PR) или полную регрессию (CR) опухоли у животного. При PR-ответе объем опухоли составляет 50% или менее от ее объема на сутки 1 для трех последовательных измерений в течение исследования и равен или больше 13,5 мм3 для одного или нескольких из этих трех измерений. При CR-ответе объем опухоли составляет менее 13,5 мм3 для одного или нескольких из этих трех измерений в течение исследования. Животное с CR-ответом при завершении исследования дополнительно классифицируют как выжившее без опухоли (TFS). Ответы с регрессией контролировали и записывали.
Отбор образцов
У животных из каждой группы получали образцы опухолей в конечной точке. Этих животных подвергали эвтаназии посредством смещения шейных позвонков точно перед отбором образцов. Опухоли трех животных из группы собирали, разрезали и фиксировали в 10% формалине в нейтральном буфере в течение срока от 12 до 24 часов при комнатной температуре.
Статистический и графический анализы
Для анализа значимости различий между значениями TTE подвергаемых лечению и контрольной групп использовали логарифмический ранговый тест. Проводили двусторонний статистический анализ на уровне значимости P=0,05, с результатами, считающимися значимыми при 0,01≤P≤0,05 и высоко значимыми при P<0,01.
Кривые среднего опухолевого роста представляют групповые средние объемы опухоли как функцию времени. Когда животное выходило из исследования из-за размера опухоли, конечный объем опухоли, записываемый для животного, включали в данные, используемые для расчета группового среднего объема опухоли в последующие временные точки. Для демонстрации доли животных, остающихся в исследовании, как функции времени строили графики Каплана-Мейера. Для этих графиков использовали то же множество данных, что и для логарифмического рангового теста.
Результаты
На фиг.34 приведены кривые группового среднего опухолевого роста (верхняя панель) и графики Каплана-Мейера (нижняя панель) для каждой группы в этом исследовании. Среднее TTE контрольных мышей, обрабатываемых носителем, составляло 10,0 суток, с одной опухолью (из десяти), не достигшей 1000 мм3 конечного объема опухоли. B20-4.1, вводимое при 10 мг/кг и/п на сутки 1 и 8, приводило к умеренной TGD в размере 19,9 суток (113%), которая было статистически незначимой. Монотерапия Apo2L.0 и Apomab 7.3 были эффективными против Colo205, приводя к задержке опухолевого роста в размере 28,4 суток (190%) и 53,0 суток (355%), соответственно. Добавление B20-4.1 к Apo2L.0 или Apomab 7.3 не увеличивало эффективности лечения в отношении TGD или ответов с регрессией.
ПРИМЕР 9
Оценка противораковой активности моноклонального антитела Apomab 7.3 в качестве монотерапии и в сочетании с карбоплатином и паклитакселом против SKMES-1 NSCLC человека
Тестировали противоопухолевую активность лиганда Apo2L.0 и Apomab 7.3 в качестве монотерапии и в сочетании с карбоплатином и паклитакселом против SKMES-1 NSCLC человека.
Животные
Самки бестимусных мышей "nude" (nu/nu, Harlan) на сутки 1 исследования находились в возрасте от 9 до 10 недель и обладали массой тела от 17,4 до 25,4 г. Животных снабжали ad libitum водой и NIH 31 Modified and Irradiated Lab Diet®, состоящей из 18,0% общего белка, 5,0% общего жира и 5,0% сырой клетчатки. Животных содержали на облученных ALPHA-Dri® bed-o'cobs® Laboratory Animal Bedding в статических микроизоляторах при 12-часовом световом цикле при 21-22°C и 40-60% влажности.
Имплантация опухоли
Ксенотрансплантаты происходили из опухолей легких SKMES-1, поддерживаемых серийными трансплантациями при PRC. Каждая мышь в тесте получала фрагмент опухоли SKMES-1 объемом 1 мм3, имплантируемый подкожно в правый бок, и рост опухоли контролировали. Через тринадцать суток, обозначенных как сутки 1 исследования, индивидуальные объемы опухолей находились в диапазоне от 63 до 144 мм3, и животных сортировали на четыре группы, где каждая состояла из десяти мышей, и две группы, состоящие из девяти мышей. Средний объем опухолей составлял от 93 до 95 мм3.
Тестируемые вещества и лечение
Все тестируемые вещества предоставляли готовыми к дозированию при 0,1 мл на 20 г массы тела (5 мл/кг) и после получения хранили при -80°C. Тестируемые вещества оттаивали на первые сутки дозирования, хранили на льду в течение дозирования, затем хранили при 4°C. Карбоплатин (инъекция Paraplatin®, Bristol Myers Squibb) разводили 5% декстрозой в воде (D5W) с получением желаемой дозы в объеме 0,2 мл на 10 г массы тела (10 мл/кг). Паклитаксел (Natural Pharmaceuticals, Inc.) разбавляли D5W на каждые сутки дозирования из 10× исходного раствора с получением носителя, содержащего 5% этанола и 5% кремофора EL в 90% D5W (5% носитель EC) так, что желаемую дозу доставляли в 0,1 мл на 20 г массы тела.
Группа 1 (носитель для контроля) мышей получала носитель, вводимый интраперитонеально один раз в сутки в течение пяти суток (и/п, qd×5), и служила в качестве контролей опухолевого роста. Мышам в группах 2 и 3 проводили монотерапию Apo2L.0 (60 мг/кг, п/к qd×5) и Apomab 7.3 (10 мг/кг, в/в qd×1), соответственно. Мышам в группе 4 вводили комбинацию карбоплатина (100 мг/кг, и/п qd×1) и паклитаксела (6,25 мг/кг, п/к qd×5). Мышам в группе 5 и 6 вводили карбоплатин и паклитаксел в сочетании с Apo2L или Apomab 7.3, соответственно. Каждую дозу вводили в объеме, указанном в предыдущем разделе, и приводили в соответствие с массой тела животного.
Отбор образцов и статистический анализ в конечной точке
Конечную точку определяли и отбор образцов и статистический анализ проводили, как описано в предыдущем примере 8.
Результаты
На фиг.35 и 36 показаны кривые группового среднего опухолевого роста и графики Каплана-Мейера для групп, обрабатываемых Apo2L.0 и Apomab 7.3, соответственно.
Опухоли всех обработанных носителем контрольных мышей росли до конечного объема 1500 мм3 со средним TTE 18,9 суток. Таким образом, максимальный TGD, достижимый в этом 45-суточном исследовании, составлял 26,1 суток (138%). Кривая среднего опухолевого роста и график Каплана-Мейера для контрольной группы включены в верхние и нижние панели на фиг.35 и 36.
Для обработанной Apo2L.0 группы (группа 2), среднее TTE составляло 22,9 суток и соответствовало TGD в размере 4,0 суток (21%) и статистически незначимой активности. На фиг.28 (верхняя панель) показано, что средние объемы опухолей в группе 2 сокращаются в течение периода лечения, затем восстанавливается быстрый рост опухоли.
Среднее TTE в группе 3 составляло 2,0 суток и соответствовало TGD в размере 7,1 суток (38%) и статистически высокозначимой активности (P=0,005). Не зарегистрировано ни одного регрессивного ответа, и все опухоли достигали конечного объема 1500 мм3. Кривая среднего опухолевого роста группы 3 показывает, что существует исходная задержка опухолевого роста относительно контролей.
Среднее TTE группы мышей 4, обработанных карбоплатином и паклитакселом, составляло 26,5 суток и соответствовало TGD в размере 7,6 суток (40%) и статистически значимой активности (P=0,01). Все опухоли в группе 4 росли до конечного объема 1500 мм3, и не зарегистрировано ни одного регрессивного ответа. Кривая среднего опухолевого роста для группы мышей 4 указывает на умеренную задержку роста опухоли относительно контрольных мышей (см. фиг.35 и 36, верхние панели).
Обработка тройным сочетанием Apo2L.0, карбоплатина и паклитаксела приводила к среднему TTE 32,7 суток, что соответствовало TGD 13,9 суток (73%) и высокозначимой активности относительно группы 1 (P=0,002). Среднее TTE в размере 32,7 суток при применении этого тройного сочетания было длиннее, чем среднее TTE в размере 22,9 суток группы с монотерапией Apo2L.0 или среднее TTE в размере 16,5 суток при контрольной химиотерапевтической обработке, но различия при логарифмическом ранговом тесте не достигали статистической значимости. Несмотря на отсутствие статистической значимости кривые среднего опухолевого роста указывали большую активность с сочетанием из группы 5 по сравнению с монотерапией Apo2L.0 или химиотерапией карбоплатин и паклитаксел (см. фиг.28, верхняя панель).
Лечение тройным сочетанием Apomab 7.3 (группа 6), карбоплатина и паклитаксела приводило к 3/10 TR смерти, таким образом, эту группу не оценивали на TGD. Однако кривые среднего опухолевого роста указывали на большую активность с сочетанием из группы 6 по сравнению с монотерапией Apomab 7.3 или химиотерапией карбоплатин и паклитаксел (см. фиг.37, верхняя панель).
Вывод
Несмотря на относительно высокую смертность в этом эксперименте данные показывают, что Apo2L.0 и Apomab 7.3 могут добавлять противоопухолевое воздействие при лечении карбоплатином и паклитакселом.
ПРИМЕР 10
Оценка противораковой активности моноклонального антитела Apomab 7.3 в качестве монотерапии и в сочетании с антителом к VEGF в модели ксенотрансплантата карциномы Colo205
Животные
Самки бестимусных мышей "nude" (nu/nu, Harlan) на сутки 1 исследования находились в возрасте 7-8 недель. Животных снабжали ad libitum водой и NIH 31 Modified and Irradiated Lab Diet®, состоящей из 18,0% общего белка, 5,0% общего жира и 5,0% сырой клетчатки. Животных содержали на облученных ALPHA-Dri® bed-o'cobs® Laboratory Animal Bedding в статических микроизоляторах при 12-часовом световом цикле при 21-22°C и 40-60% влажности.
Культура опухолевых клеток
Клетки карциномы толстой кишки человека Colo205 культивировали в среде RPMI-1640, содержащей 100 единиц/мл пенициллина G натрия, 100 мкг/мл стрептомицинсульфата, 0,25 мкг/мл амфотерицина B и 25 мкг/мл гентамицина. Среду дополняли 10% инактивированной нагреванием эмбриональной телячьей сывороткой, 2 мМ глутамином и 1 мМ бикарбонатом натрия. Опухолевые клетки культивировали во флаконах для тканевых культур во влажном инкубаторе при 37°C, в атмосфере 5% CO2 и 95% воздуха.
Имплантация in vivo
Клетки карциномы человека Colo205, применяемые для имплантации, собирали в течение логарифмической фазы роста и ресуспендировали в 50% matrigel в концентрации 5×106 клеток/мл. Каждой мыши п/к в правый бок инъецировали 1×106 клеток (0,2 мл клеточная суспензия). Опухоли проверяли дважды в неделю, а затем ежедневно, когда их объем приближался к 100-300 мм3. На сутки 1 исследования животных сортировали на группы обработки с размерами опухолей 108,0-220,5 мм3 и групповым средним размером опухоли 149,8 мм. Массу опухоли рассчитывали в предположении, что 1 мг эквивалентен 1 мм3 объема опухоли.
Тестируемые вещества и лечение
Тестируемые вещества предоставляли готовыми для дозирования. Дозируемые растворы хранили при 4°C.
Мышей сортировали на шесть групп с десятью мышами на группу. Все средства для лечения вводили интраперитонеально (и/п).
Apo2L.0 и его носитель вводили один раз в сутки на сутки 1-5 (qd×5). Apomab 7.3 и мышиное антитело к VEGF к G6 вводили один раз на сутки 1 (qd×1). Мышей контрольной группы 1 обрабатывали носителем для Apo2L.0. Группе 2 проводили монотерапию Apo2L.0 при 60 мг/кг. Группе 3 проводили монотерапию Apomab 7.3 при 3 мг/кг. Группе 4 проводили монотерапию BY4 при 5 мг/кг. Группам 5 и 6 вводили Apo2L.0 при 60 мг/кг и Apomab 7.3 при 3 мг/кг, соответственно, каждое в сочетании с антителом к G6 при 5 мг/кг. Во всех группах объем дозирования 0,2 мл/20 г массы мыши приводили в соответствие с массой тела каждого животного.
Отбор образцов и статистические анализы в конечной точке
Конечную точку определяли и отбор образцов и статистические анализы проводили, как описано в предыдущем примере 8.
Результаты
Результаты показаны на фиг.37, где кривые на верхней панели демонстрируют групповые средние объемы опухолей в зависимости от времени, а график Каплана-Мейера на нижней панели демонстрирует долю оставшихся в каждой группе поддающихся оценке животных в зависимости от времени.
Мыши контрольной группы 1 получали носитель Apo2L.0 и служили в качестве контроля для всех групп, получавших лечение. Опухоли у всех десяти мышей росли до конечного объема 1500 мм3 со средним TTE 20,8 суток. Таким образом, максимально возможное TGD в этом 61-суточном исследовании составляло 193%.
Группе 2 проводили монотерапию Apo2L.0 при 60 мг/кг. Эта обработка приводила к высокозначимой противоопухолевой активности относительно контрольной группы, получавшей носитель (P<0,001), и среднему TTE в размере 53,6 суток. Это среднее TTE соответствовало T-C в размере 32,8 суток и TGD 158%. Средний объем опухоли на сутки 61 для пяти мышей составлял 1,210 мм3. Зафиксирован один LTTFS.
Группе 3 проводили монотерапию Apomab 7.3 при 3 мг/кг. Эта обработка приводила к высокозначимой активности (P<0,001) с максимально возможным TGD в размере 193% и MTV (6) 776 мм3. Зафиксирован один LTTFS, один транзиторный CR-ответ и три FR-ответа.
Группе 4 проводили монотерапию антителом к G6 при 5 мг/кг. Эта обработка приводила к высокозначимой активности (P<0,01), с 86% TGF и MTV(3) 1,224 мм3. Регрессивных ответов не зафиксировано.
Группа 5 получала Apo2L.0 при 60 мг/кг в сочетании с антителом к G6 при 5 мг/кг. Комбинированное лечение приводило к 138% TGD. Противоопухолевая активность была высокозначимой относительно обработки носителем (P<0,001), но незначимой относительно обоих видов монотерапии. В группе 5 MTV(3) составлял 1,080 мм3, и зафиксирован один PR-ответ.
Группе 6 проводили комбинированное лечение с применением Apomab 7.3 при 3 мг/кг и антитела к G6 при 5 мг/кг. Это лечение приводило к максимально возможным 193% TGD. Противоопухолевая активность была высокозначимой относительно обработки носителем (P<0,001), значимой относительно монотерапии антителом к G6, но незначимой относительно монотерапии Apomab 7.3. В группе 6 MTV(8) составлял 208 мм3, и зафиксировано пять PR-ответов.
Выводы
Опухоли хорошо отвечали на монотерапию Apomab 7.3 в концентрации 3 мг/кг qd×1 (группа 3). Это лечение приводило к высокозначимой активности относительно контрольной группы с применением носителя и максимально возможным 193% TGD. Из шести мышей, которые выжили до суток 61 с MTV 776 мм3, у пяти животных наблюдали регрессию опухоли. Эта монотерапия приводила к одному LTTFS, одному транзиторному CR-ответу и трем PR-ответам. Средний объем опухоли не увеличивался до окончания суток 15 (фиг.37).
Комбинированное лечение с применением Apomab 7.3 и мышиного антитела к VEGF к G6 приводило к более сильной активности, чем наблюдалась с применением Apomab 7.3 или антитела к G6 отдельно. Это комбинированное лечение приводило к восьми выжившим в течение 61 суток и позволяло получить наименьший MTV в исследовании, 208 мм3. Кривая среднего опухолевого роста демонстрирует уменьшение опухоли или состояние покоя до суток 33 с последующим очень медленным ростом опухоли (фиг.37). Сочетание приводило к значимо большей активности, чем при монотерапии антителом к G6, но значимо не отличалось от результатов монотерапии Apomab 7.3, кроме того, сочетание приводило к пяти PR-ответам, тогда как пять регрессивных ответов, полученных с применением монотерапии Apomab 7.3, включали в себя один CR и один LTTFS.
Все лекарственные средства хорошо переносились. В исследовании не наблюдали потери массы или другой явной токсичности.
Таким образом, комбинированное лечение Apomab 7.3/антитело к G6 приводило к большему числу выживших в течение 61 суток и меньшему MTV, чем лечение с применением любых соответствующих способов монотерапии. Однако сочетание Apomab 7.3/антитело к G6 не приводило к лечебной активности, которую наблюдали при применении монотерапии Apomab 7.3.
Claims (45)
1. Антитело к DR5, включающее тяжелую и легкую цепи, где указанное антитело содержит по меньшей мере одну замену в последовательности полноразмерного антитела 16Е2 (SEQ ID NO: 11 и 13 соответственно), где замена в тяжелой цепи выбрана из группы, состоящей из:
(a) M34L, N53Q, L102Y;
(b) M34L, N53Y, L102Y;
(c) G33A, N53Q, L1-2Y;
(d) G33A, N53Y, L102Y;
(e) M34L, N53Q, L102Y;
(f) M34L, N53Y, L102Y;
(g) G33A, N53Q, L102Y;
(f) G33A, N53Y, L102Y;
(g) T28A, N53Q, L102Y; и
замена в легкой цепи выбрана из группы, состоящей из:
(h) Q24S, G50K, K51D, N52S, N53, H95bY;
(i) Q24S, K51A, D92S, S93Y;
(j) Q24S, K51A, R91A,
или его антигенсвязывающий фрагмент,
при этом расположение аминокислотных замен указана по нумерации Kabat.
(a) M34L, N53Q, L102Y;
(b) M34L, N53Y, L102Y;
(c) G33A, N53Q, L1-2Y;
(d) G33A, N53Y, L102Y;
(e) M34L, N53Q, L102Y;
(f) M34L, N53Y, L102Y;
(g) G33A, N53Q, L102Y;
(f) G33A, N53Y, L102Y;
(g) T28A, N53Q, L102Y; и
замена в легкой цепи выбрана из группы, состоящей из:
(h) Q24S, G50K, K51D, N52S, N53, H95bY;
(i) Q24S, K51A, D92S, S93Y;
(j) Q24S, K51A, R91A,
или его антигенсвязывающий фрагмент,
при этом расположение аминокислотных замен указана по нумерации Kabat.
2. Антитело к DR5 по п.1, обладающее большей аффинностью к DR5, чем указанное полноразмерное антитело 16Е2, и/или проявляет большую биологическую активность и/или эффективность, чем указанное полноразмерное антитело 16Е2 или его антигенсвязывающий фрагмент.
3. Антитело к DR5 по п.1 или 2, где указанное антитело, по существу, связывается с тем же эпитопом, что и полноразмерное антитело 16Е2 или его антигенсвязывающий фрагмент.
4. Антитело к DR5 по п.1, несущее один или несколько наборов мутаций в каркасной области вариабельного домена тяжелой цепи полноразмерного антитела 16Е2 (SEQ ID NO: 11), где мутация в каркасной области выбрана из группы, состоящей из
(i) Q6E, V11L, E12V, R13Q, K105Q,
(ii) Q6E, V11L, E12V, R13Q,
(iii) Q6E, K105Q;
(iv) V11L, E12V, R13Q;
(v) K105Q;
(vi) Q6E;
(vii) VHL;
(viii) R13Q;
(ix) E12V, R13Q;
(x) E12V;
(xi) E12N;
(xii) VHL, R12V,
или его антигенсвязывающий фрагмент,
где расположение мутаций в каркасной области указана по нумерации Kabat.
(i) Q6E, V11L, E12V, R13Q, K105Q,
(ii) Q6E, V11L, E12V, R13Q,
(iii) Q6E, K105Q;
(iv) V11L, E12V, R13Q;
(v) K105Q;
(vi) Q6E;
(vii) VHL;
(viii) R13Q;
(ix) E12V, R13Q;
(x) E12V;
(xi) E12N;
(xii) VHL, R12V,
или его антигенсвязывающий фрагмент,
где расположение мутаций в каркасной области указана по нумерации Kabat.
5. Антитело к DR5 по п.1, где антитело выбрано из группы, состоящей из 5.2, 5.3, 6.2, 7.2, 7.3, 8.3, 23.3, 2.3, или его антигенсвязывающий фрагмент.
6. Антитело к DR5 по п.5, где антитело представляет собой антитело 7.3 или его антигенсвязывающий фрагмент.
7. Антитело к DR5 по п.1, 5 или 6, где указанный антигенсвязывающий фрагмент выбран из группы, состоящей из фрагментов Fab, Fab', F(ab')2, и Fv, димерных антител, молекул одноцепочечных антител и полиспецифических антител, формирующихся из фрагментов антител.
8. Антитело к DR5 по п.7, где указанное антитело представляет собой одноцепочечное антитело.
9. Антитело к DR5 по п.7, где указанный антигенсвязывающий фрагмент представляет собой фрагмент Fv.
10. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела к DR5 по п.2, где указанная биологическая активность представляет собой противораковую активность.
11. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела к DR5 по п.2, где указанная биологическая активность представляет собой активацию или стимуляцию апоптоза в злокачественных клетках.
12. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела к DR5 по п.10 или 11, где злокачественная опухоль выбрана из группы, состоящей из карциномы, лимфомы, бластомы, саркомы и лейкоза.
13. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела к DR5 по п.10 или 11, где указанная злокачественная опухоль выбрана из группы, состоящей из плоскоклеточного рака, мелкоклеточного рака легких, немелкоклеточного рака легких (NSCLC), неходжкинской лимфомы, бластомы, желудочно-кишечного рака, рака почек, рака яичников, рака печени, рака желудка, рака мочевого пузыря, гепатомы, рака молочной железы, рака толстой кишки, колоректального рака, рака поджелудочной железы, карциномы эндометрия, карциномы слюнной железы, рака почки, рака печени, рака предстательной железы, рака женских наружных половых органов, рака щитовидной железы, печеночной карциномы и рака головы и шеи.
14. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела к DR5 по п.13, где указанная злокачественная опухоль представляет собой NSCLC, неходжкинскую лимфому, колоректальный рак или рак поджелудочной железы.
15. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела к DR5 по п.12, где указанная злокачественная опухоль представляет собой аденокарциному.
16. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела к DR5 по п.15, где указанная аденокарцинома представляет собой колоректальную аденокарциному, аденокарциному поджелудочной железы или метастазирующую аденокарциному.
17. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела к DR5 по п.2, где указанную эффективность определяют в анализе уничтожения опухоли in vitro.
18. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела к DR5 по п.1, которые представляют собой химерное, гуманизированное или человеческое антитело.
19. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела к DR5 по п.1, опосредующие обусловленную антителами клеточную цитотоксичность (ADCC).
20. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела к DR5 по п.1, 5 или 6, или антигенсвязывающий фрагмент указанной тяжелой цепи.
21. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела к DR5 по п.1, 5 или 6, или антигенсвязывающий фрагмент указанной легкой цепи.
22. Вектор экспрессии, содержащий нуклеиновую кислоту по п.20.
23. Вектор экспрессии, содержащий нуклеиновую кислоту по п.21.
24. Клетка-хозяин, содержащая нуклеиновую кислоту по п.20 и 21, и способная к их экспрессии.
25. Способ получения антитела к DR5 или его антигенсвязывающего фрагмента, включающий в себя культивирование клетки-хозяина по п.24, в условиях, в которых экспрессируются нуклеиновые кислоты.
26. Фармацевтическая композиция для лечения рака, содержащая антитело к DR5 по п.1, 5 или 6, или его антигенсвязывающий фрагмент, и фармацевтически приемлемый носитель.
27. Композиция по п.26, содержащая, кроме того, дополнительное противораковое средство.
28. Композиция по п.27, где указанное дополнительное противораковое средство представляет собой антитело.
29. Композиция по п.28, где указанное антитело выбрано из группы, состоящей из дополнительного антитела к DR5, ритуксимаба и антитела к VEGF.
30. Композиция по п.27, где указанное дополнительное противораковое средство представляет собой химиотерапевтическое средство.
31. Композиция по п.30, где указанное химиотерапевтическое средство выбрано из группы, состоящей из СРТ-11 (иринотекана), гемцитабина, карбоплатина, таксола и паклитаксела.
32. Композиция по п.27, где указанное дополнительное противораковое средство представляет собой лиганд Apo2L, содержащий аминокислоты 114-281 согласно фиг.1 (SEQ ID NO: 1).
33. Способ индукции апоптоза, включающий в себя воздействие на злокачественные клетки млекопитающих антитела к DR5 по п.1, 5 или 6, или его антигенсвязывающего фрагмента.
34. Способ по п.33, где указанное антитело представляет собой химерное, гуманизированное или человеческое антитело.
35. Способ по п.33, где указанные злокачественные клетки млекопитающих подвергают воздействию средства, активирующего DR5.
36. Способ лечения злокачественной опухоли, включающий в себя введение млекопитающему эффективного количества антитела к DR5 по п.1, 5 или 6, или его антигенсвязывающего фрагмента.
37. Способ по п.36, где указанное млекопитающее представляет собой человека.
38. Способ по п.37, где указанная злокачественная опухоль выбрана из группы, состоящей из плоскоклеточного рака, мелкоклеточного рака легких, немелкоклеточного рака легких (NSCLC), неходжкинской лимфомы, бластомы, желудочно-кишечного рака, рака почек, рака яичников, рака печени, рака желудка, рака мочевого пузыря, гепатомы, рака молочной железы, рака толстой кишки, колоректального рака, рака поджелудочной железы, карциномы эндометрия, карциномы слюнной железы, рака почки, рака печени, рака предстательной железы, рака женских наружных половых органов, рака щитовидной железы, печеночной карциномы и рака головы и шеи.
39. Способ по п.38, где указанная злокачественная опухоль представляет собой NSCLC, колоректальный рак, неходжкинскую лимфому или рак поджелудочной железы.
40. Способ по п.36, где указанная злокачественная опухоль представляет собой аденокарциному.
41. Способ по п.40, где указанная аденокарцинома представляет собой колоректальную аденокарциному, аденокарциному поджелудочной железы или метастазирующую аденокарциному.
42. Способ по любому из пп.36-41, дополнительно включающий в себя введение дополнительного противоракового средства.
43. Набор для лечения рака, включающий в себя контейнер и композиции, содержащиеся в указанном контейнере, где композиция включает антитело к DR5 по п.1, 5 или 6, или его антигенсвязывающий фрагмент.
44. Набор по п.43, дополнительно содержащее инструкции по применению антитела к DR5 in vitro или in vivo.
45. Набор по п.44, где указанные инструкции относятся к лечению злокачественной опухоли.
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US64955005P | 2005-02-02 | 2005-02-02 | |
US60/649,550 | 2005-02-02 | ||
US11/344,564 US8029783B2 (en) | 2005-02-02 | 2006-01-30 | DR5 antibodies and articles of manufacture containing same |
US11/344,564 | 2006-01-30 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2007132876A RU2007132876A (ru) | 2009-03-10 |
RU2458072C2 true RU2458072C2 (ru) | 2012-08-10 |
Family
ID=36777882
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2007132876/10A RU2458072C2 (ru) | 2005-02-02 | 2006-01-31 | Антитела к dr5 и их применения |
Country Status (17)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US8029783B2 (ru) |
EP (1) | EP1844077B1 (ru) |
JP (3) | JP5886509B2 (ru) |
KR (1) | KR101297467B1 (ru) |
CN (1) | CN101247825B (ru) |
AT (1) | ATE526987T1 (ru) |
AU (1) | AU2006210779B2 (ru) |
BR (1) | BRPI0606891A2 (ru) |
CA (1) | CA2594918C (ru) |
ES (1) | ES2374301T3 (ru) |
HK (1) | HK1109638A1 (ru) |
IL (1) | IL184617A (ru) |
MX (1) | MX2007009215A (ru) |
NO (1) | NO341791B1 (ru) |
NZ (1) | NZ556478A (ru) |
RU (1) | RU2458072C2 (ru) |
WO (1) | WO2006083971A2 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2731717C2 (ru) * | 2013-05-03 | 2020-09-08 | ФУДЖИФИЛМ ДИОСИНТ БАЙОТЕКНОЛОДЖИЗ ЮКей ЛИМИТЕД | Способ экспрессии |
RU2735956C1 (ru) * | 2017-03-21 | 2020-11-11 | Тон-А Ст Ко., Лтд. | Анти-dr5-антитело и его применение |
Families Citing this family (80)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004003144A2 (en) * | 2002-07-01 | 2004-01-08 | Human Genome Sciences, Inc. | Antibodies that specifically bind to reg iv |
AU2005227322A1 (en) | 2004-03-23 | 2005-10-06 | Biogen Idec Ma Inc. | Receptor coupling agents and therapeutic uses thereof |
KR100847010B1 (ko) | 2006-07-05 | 2008-07-17 | 아주대학교산학협력단 | 세포사멸 수용체 5 (dr5)에 특이적으로 결합하는 항체 및이를 포함하는 암 예방 또는 치료용 조성물 |
KR101643514B1 (ko) | 2007-07-09 | 2016-07-27 | 제넨테크, 인크. | 폴리펩티드의 재조합 생산 동안의 디술피드 결합 환원의 방지 |
CA2695991A1 (en) * | 2007-08-09 | 2009-02-12 | Daiichi Sankyo Company, Limited | Immunoliposome inducing apoptosis into cell expressing death domain-containing receptor |
WO2010047509A2 (ko) * | 2008-10-24 | 2010-04-29 | 아주대학교 산학협력단 | 친화도와 안정성이 향상된 항 dr5 항체, 및 이를 포함하는 암 예방 또는 치료용 조성물 |
US9528160B2 (en) | 2008-11-07 | 2016-12-27 | Adaptive Biotechnolgies Corp. | Rare clonotypes and uses thereof |
US8748103B2 (en) | 2008-11-07 | 2014-06-10 | Sequenta, Inc. | Monitoring health and disease status using clonotype profiles |
US8628927B2 (en) | 2008-11-07 | 2014-01-14 | Sequenta, Inc. | Monitoring health and disease status using clonotype profiles |
US9506119B2 (en) | 2008-11-07 | 2016-11-29 | Adaptive Biotechnologies Corp. | Method of sequence determination using sequence tags |
US9365901B2 (en) | 2008-11-07 | 2016-06-14 | Adaptive Biotechnologies Corp. | Monitoring immunoglobulin heavy chain evolution in B-cell acute lymphoblastic leukemia |
SG195652A1 (en) | 2008-11-07 | 2013-12-30 | Sequenta Inc | Methods of monitoring conditions by sequence analysis |
HUE029424T2 (en) | 2009-01-15 | 2017-02-28 | Adaptive Biotechnologies Corp | Adaptive immunity profiling and a method for producing monoclonal antibodies |
US20120070432A1 (en) * | 2009-05-28 | 2012-03-22 | Amgen Inc. | Treatment of pancreatic cancer using a dr5 agonist in combination with gemcitabine |
US20100316639A1 (en) | 2009-06-16 | 2010-12-16 | Genentech, Inc. | Biomarkers for igf-1r inhibitor therapy |
JP2012531202A (ja) | 2009-06-25 | 2012-12-10 | フレッド ハチンソン キャンサー リサーチ センター | 適応免疫を測定する方法 |
WO2011004899A1 (en) * | 2009-07-06 | 2011-01-13 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Cancerous disease modifying antibodies |
KR20180010324A (ko) * | 2009-08-11 | 2018-01-30 | 제넨테크, 인크. | 글루타민-비함유 세포 배양 배지에서의 단백질의 생성 |
GB0914691D0 (en) | 2009-08-21 | 2009-09-30 | Lonza Biologics Plc | Immunoglobulin variants |
JP2013505944A (ja) * | 2009-09-24 | 2013-02-21 | シアトル ジェネティックス, インコーポレイテッド | Dr5リガンド薬物結合体 |
PL2483310T3 (pl) * | 2009-09-29 | 2015-01-30 | Roche Glycart Ag | Bispecyficzne przeciwciała agonistyczne dla receptora śmierci |
BR112012010698A2 (pt) | 2009-11-05 | 2016-11-29 | Uab Research Foundation | método para tratamento de um sujeito com câncer, método de triagem de uma célula de câncer de mama, e , anticorpo |
WO2011084623A1 (en) | 2009-12-16 | 2011-07-14 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Method of sensitizing cancer cells to the cytotoxic effects of death receptor ligands in cancer treatment |
US9284350B2 (en) | 2010-02-12 | 2016-03-15 | Pharmascience Inc. | IAP BIR domain binding compounds |
JP2013528599A (ja) * | 2010-05-14 | 2013-07-11 | アムジェン インコーポレイテッド | 増強デスレセプター・アゴニスト |
JP2013537414A (ja) * | 2010-08-05 | 2013-10-03 | アナプティスバイオ インコーポレイティッド | Il−17に対する抗体 |
SI2636736T1 (sl) * | 2010-10-29 | 2016-09-30 | Daiichi Sankyo Company, Limited | Novo anti-dr5 protitelesce |
WO2012106281A2 (en) | 2011-01-31 | 2012-08-09 | The General Hospital Corporation | Multimodal trail molecules and uses in cellular therapies |
EP3138581B1 (en) | 2011-03-17 | 2019-01-02 | The University of Birmingham | Re-directed immunotherapy |
JP2014513128A (ja) * | 2011-05-03 | 2014-05-29 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | 血管破壊剤とその使用 |
US10385475B2 (en) | 2011-09-12 | 2019-08-20 | Adaptive Biotechnologies Corp. | Random array sequencing of low-complexity libraries |
EP2768982A4 (en) | 2011-10-21 | 2015-06-03 | Adaptive Biotechnologies Corp | QUANTIFICATION OF ADAPTIVE IMMUNOCELL GENOMES IN A COMPLEX MIX OF CELLS |
EP2788509B1 (en) | 2011-12-09 | 2018-07-11 | Adaptive Biotechnologies Corporation | Diagnosis of lymphoid malignancies and minimal residual disease detection |
US9499865B2 (en) | 2011-12-13 | 2016-11-22 | Adaptive Biotechnologies Corp. | Detection and measurement of tissue-infiltrating lymphocytes |
EP2823060B1 (en) | 2012-03-05 | 2018-02-14 | Adaptive Biotechnologies Corporation | Determining paired immune receptor chains from frequency matched subunits |
EP2831116A1 (en) * | 2012-03-28 | 2015-02-04 | Amgen Inc. | Dr5 receptor agonist combinations |
DK2831276T3 (da) | 2012-05-08 | 2016-08-01 | Adaptive Biotechnologies Corp | Sammensætninger og fremgangsmåde til at måle og kalibrere amplifikations-bias i multipleks-PCR-reaktioner |
US9500639B2 (en) | 2012-07-18 | 2016-11-22 | Theranos, Inc. | Low-volume coagulation assay |
EP2877572B1 (en) | 2012-07-24 | 2018-11-28 | The General Hospital Corporation | Oncolytic virus therapy for resistant tumors |
US9605074B2 (en) * | 2012-08-30 | 2017-03-28 | The General Hospital Corporation | Multifunctional nanobodies for treating cancer |
ES2749118T3 (es) | 2012-10-01 | 2020-03-19 | Adaptive Biotechnologies Corp | Evaluación de la inmunocompetencia por la diversidad de los receptores de inmunidad adaptativa y caracterización de la clonalidad |
WO2015160439A2 (en) | 2014-04-17 | 2015-10-22 | Adaptive Biotechnologies Corporation | Quantification of adaptive immune cell genomes in a complex mixture of cells |
UA118028C2 (uk) | 2013-04-03 | 2018-11-12 | Рош Глікарт Аг | Біспецифічне антитіло, специфічне щодо fap і dr5, антитіло, специфічне щодо dr5, і спосіб їх застосування |
US9708657B2 (en) | 2013-07-01 | 2017-07-18 | Adaptive Biotechnologies Corp. | Method for generating clonotype profiles using sequence tags |
US10457976B2 (en) * | 2013-11-25 | 2019-10-29 | Seattle Genetics, Inc. | Preparing antibodies from CHO cell cultures for conjugation |
WO2015134787A2 (en) | 2014-03-05 | 2015-09-11 | Adaptive Biotechnologies Corporation | Methods using randomer-containing synthetic molecules |
US11299528B2 (en) | 2014-03-11 | 2022-04-12 | D&D Pharmatech Inc. | Long acting TRAIL receptor agonists for treatment of autoimmune diseases |
US10066265B2 (en) | 2014-04-01 | 2018-09-04 | Adaptive Biotechnologies Corp. | Determining antigen-specific t-cells |
US9616114B1 (en) | 2014-09-18 | 2017-04-11 | David Gordon Bermudes | Modified bacteria having improved pharmacokinetics and tumor colonization enhancing antitumor activity |
CA2966201A1 (en) | 2014-10-29 | 2016-05-06 | Adaptive Biotechnologies Corp. | Highly-multiplexed simultaneous detection of nucleic acids encoding paired adaptive immune receptor heterodimers from many samples |
US10246701B2 (en) | 2014-11-14 | 2019-04-02 | Adaptive Biotechnologies Corp. | Multiplexed digital quantitation of rearranged lymphoid receptors in a complex mixture |
US11066705B2 (en) | 2014-11-25 | 2021-07-20 | Adaptive Biotechnologies Corporation | Characterization of adaptive immune response to vaccination or infection using immune repertoire sequencing |
CN107207600A (zh) * | 2015-01-08 | 2017-09-26 | 协和发酵麒麟株式会社 | 与trailr2和psma结合的双特异性抗体 |
SG10202001779UA (en) | 2015-01-20 | 2020-04-29 | Igm Biosciences Inc | Tumor necrosis factor (tnf) superfamily receptor binding molecules and uses thereof |
EP3250601A4 (en) | 2015-01-26 | 2018-07-11 | MacroGenics, Inc. | Multivalent molecules comprising dr5-binding domains |
WO2016122701A1 (en) * | 2015-01-26 | 2016-08-04 | Macrogenics, Inc. | Anti-dr5 antibodies and molecules comprising dr5-binding domains thereof |
AU2016222788B2 (en) | 2015-02-24 | 2022-03-31 | Adaptive Biotechnologies Corp. | Methods for diagnosing infectious disease and determining HLA status using immune repertoire sequencing |
AU2016242967B2 (en) | 2015-04-01 | 2021-07-01 | Adaptive Biotechnologies Corp. | Method of identifying human compatible T cell receptors specific for an antigenic target |
EP3337505A4 (en) * | 2015-08-19 | 2019-02-27 | Sinotau Pharmaceuticals Group | TRAIL-RECEPTOR BINDING AGENTS AND USES THEREOF |
CN109195626B (zh) * | 2015-10-30 | 2022-09-13 | 银河生物技术有限责任公司 | 结合死亡受体4和死亡受体5的抗体 |
US10407510B2 (en) | 2015-10-30 | 2019-09-10 | Genentech, Inc. | Anti-factor D antibodies and conjugates |
CA3008392C (en) | 2015-12-17 | 2021-11-09 | The Johns Hopkins University | Ameliorating systemic sclerosis with death receptor agonists |
WO2017139485A1 (en) | 2016-02-09 | 2017-08-17 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Method of sensitizing cancer cells to the cytotoxic effects of apoptosis inducing ligands in cancer treatment |
JP7281795B2 (ja) * | 2016-04-07 | 2023-05-26 | ザ・ジョンズ・ホプキンス・ユニバーシティー | 膵炎および疼痛をデス受容体アゴニストで処置するための組成物および方法 |
US10428325B1 (en) | 2016-09-21 | 2019-10-01 | Adaptive Biotechnologies Corporation | Identification of antigen-specific B cell receptors |
US11129906B1 (en) | 2016-12-07 | 2021-09-28 | David Gordon Bermudes | Chimeric protein toxins for expression by therapeutic bacteria |
US11180535B1 (en) | 2016-12-07 | 2021-11-23 | David Gordon Bermudes | Saccharide binding, tumor penetration, and cytotoxic antitumor chimeric peptides from therapeutic bacteria |
EP3360898A1 (en) | 2017-02-14 | 2018-08-15 | Boehringer Ingelheim International GmbH | Bispecific anti-tnf-related apoptosis-inducing ligand receptor 2 and anti-cadherin 17 binding molecules for the treatment of cancer |
CN110831978A (zh) | 2017-06-30 | 2020-02-21 | 酵活有限公司 | 稳定的嵌合fab |
KR101951025B1 (ko) * | 2017-08-17 | 2019-02-21 | 서울대학교산학협력단 | 세포사멸 수용체 저해제를 유효성분으로 포함하는 cx3cl1 케모카인 과발현으로 인한 질환 예방 또는 치료용 조성물 |
CN109810194B (zh) * | 2017-11-21 | 2020-11-03 | 深圳市中科艾深医药有限公司 | 抗dr5的抗体及其制备方法和应用 |
CN109810193B (zh) * | 2017-11-21 | 2020-11-03 | 深圳市中科艾深医药有限公司 | 抗dr5的抗体及其制备方法和应用 |
WO2019100193A1 (zh) * | 2017-11-21 | 2019-05-31 | 深圳先进技术研究院 | 抗dr5的抗体及其制备方法和应用 |
WO2019100194A1 (zh) * | 2017-11-21 | 2019-05-31 | 深圳先进技术研究院 | 抗dr5的抗体及其制备方法和应用 |
US11254980B1 (en) | 2017-11-29 | 2022-02-22 | Adaptive Biotechnologies Corporation | Methods of profiling targeted polynucleotides while mitigating sequencing depth requirements |
CN109957025A (zh) * | 2017-12-25 | 2019-07-02 | 深圳宾德生物技术有限公司 | 一种靶向dr5的单链抗体、嵌合抗原受体t细胞及其制备方法和应用 |
AU2019284405A1 (en) * | 2018-06-13 | 2021-02-04 | Genex Health Co.,Ltd | Colorectal cancer solid tumour primary cell and colorectal cancer ascitic fluid primary tumour cell culturing method, and matching reagent |
KR20210105890A (ko) | 2018-12-17 | 2021-08-27 | 레비토프 리미티드 | 트윈 면역 세포 인게이저 |
WO2022154664A1 (en) | 2021-01-15 | 2022-07-21 | Stichting Het Nederlands Kanker Instituut-Antoni van Leeuwenhoek Ziekenhuis | Inducers of senescence, in combination with a selective death receptor 5 (dr5) agonist, for use in a method of treating cancer |
CN113493510A (zh) * | 2021-07-07 | 2021-10-12 | 上海交通大学 | 一种牛源抗金黄色葡萄球菌LukD毒力因子的单链抗体及其制备和应用 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6113898A (en) * | 1995-06-07 | 2000-09-05 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Human B7.1-specific primatized antibodies and transfectomas expressing said antibodies |
Family Cites Families (96)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2413974A1 (fr) | 1978-01-06 | 1979-08-03 | David Bernard | Sechoir pour feuilles imprimees par serigraphie |
WO1981001145A1 (en) | 1979-10-18 | 1981-04-30 | Univ Illinois | Hydrolytic enzyme-activatible pro-drugs |
US4342566A (en) | 1980-02-22 | 1982-08-03 | Scripps Clinic & Research Foundation | Solid phase anti-C3 assay for detection of immune complexes |
US4419446A (en) | 1980-12-31 | 1983-12-06 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Recombinant DNA process utilizing a papilloma virus DNA as a vector |
US4873191A (en) | 1981-06-12 | 1989-10-10 | Ohio University | Genetic transformation of zygotes |
US4485045A (en) | 1981-07-06 | 1984-11-27 | Research Corporation | Synthetic phosphatidyl cholines useful in forming liposomes |
US4601978A (en) | 1982-11-24 | 1986-07-22 | The Regents Of The University Of California | Mammalian metallothionein promoter system |
US4560655A (en) | 1982-12-16 | 1985-12-24 | Immunex Corporation | Serum-free cell culture medium and process for making same |
US4657866A (en) | 1982-12-21 | 1987-04-14 | Sudhir Kumar | Serum-free, synthetic, completely chemically defined tissue culture media |
US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
US4544545A (en) | 1983-06-20 | 1985-10-01 | Trustees University Of Massachusetts | Liposomes containing modified cholesterol for organ targeting |
US4767704A (en) | 1983-10-07 | 1988-08-30 | Columbia University In The City Of New York | Protein-free culture medium |
US4736866B1 (en) | 1984-06-22 | 1988-04-12 | Transgenic non-human mammals | |
US5807715A (en) | 1984-08-27 | 1998-09-15 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Methods and transformed mammalian lymphocyte cells for producing functional antigen-binding protein including chimeric immunoglobulin |
GB8516415D0 (en) | 1985-06-28 | 1985-07-31 | Celltech Ltd | Culture of animal cells |
US4676980A (en) | 1985-09-23 | 1987-06-30 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Target specific cross-linked heteroantibodies |
US4927762A (en) | 1986-04-01 | 1990-05-22 | Cell Enterprises, Inc. | Cell culture medium with antioxidant |
IL85035A0 (en) | 1987-01-08 | 1988-06-30 | Int Genetic Eng | Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same |
GB8705477D0 (en) | 1987-03-09 | 1987-04-15 | Carlton Med Prod | Drug delivery systems |
US4975278A (en) | 1988-02-26 | 1990-12-04 | Bristol-Myers Company | Antibody-enzyme conjugates in combination with prodrugs for the delivery of cytotoxic agents to tumor cells |
ATE135397T1 (de) | 1988-09-23 | 1996-03-15 | Cetus Oncology Corp | Zellenzuchtmedium für erhöhtes zellenwachstum, zur erhöhung der langlebigkeit und expression der produkte |
GB8823869D0 (en) | 1988-10-12 | 1988-11-16 | Medical Res Council | Production of antibodies |
US5047335A (en) | 1988-12-21 | 1991-09-10 | The Regents Of The University Of Calif. | Process for controlling intracellular glycosylation of proteins |
ES2096590T3 (es) | 1989-06-29 | 1997-03-16 | Medarex Inc | Reactivos biespecificos para la terapia del sida. |
EP1132471A3 (de) | 1989-09-12 | 2001-11-28 | F. Hoffmann-La Roche Ag | TNF-bindende Proteine |
US5013556A (en) | 1989-10-20 | 1991-05-07 | Liposome Technology, Inc. | Liposomes with enhanced circulation time |
US5278229A (en) * | 1990-02-01 | 1994-01-11 | Nippon Gohsei Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Polyolefin composition and the use thereof |
US5545806A (en) | 1990-08-29 | 1996-08-13 | Genpharm International, Inc. | Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5661016A (en) | 1990-08-29 | 1997-08-26 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
US5633425A (en) | 1990-08-29 | 1997-05-27 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5625126A (en) | 1990-08-29 | 1997-04-29 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
EP0546073B1 (en) | 1990-08-29 | 1997-09-10 | GenPharm International, Inc. | production and use of transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5122469A (en) | 1990-10-03 | 1992-06-16 | Genentech, Inc. | Method for culturing Chinese hamster ovary cells to improve production of recombinant proteins |
EP0564531B1 (en) | 1990-12-03 | 1998-03-25 | Genentech, Inc. | Enrichment method for variant proteins with altered binding properties |
US5278299A (en) | 1991-03-18 | 1994-01-11 | Scripps Clinic And Research Foundation | Method and composition for synthesizing sialylated glycosyl compounds |
US6407213B1 (en) | 1991-06-14 | 2002-06-18 | Genentech, Inc. | Method for making humanized antibodies |
EP0605522B1 (en) | 1991-09-23 | 1999-06-23 | Medical Research Council | Methods for the production of humanized antibodies |
WO1993008829A1 (en) | 1991-11-04 | 1993-05-13 | The Regents Of The University Of California | Compositions that mediate killing of hiv-infected cells |
AU3144193A (en) | 1991-11-21 | 1993-06-15 | Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Controlling degradation of glycoprotein oligosaccharides by extracellular glycosisases |
CA2140280A1 (en) | 1992-08-17 | 1994-03-03 | Avi J. Ashkenazi | Bispecific immunoadhesins |
DK0669836T3 (da) | 1992-11-13 | 1996-10-14 | Idec Pharma Corp | Terapeutisk anvendelse af kimære og radioaktivt mærkede antistoffer og humant B-lymfocytbegrænset differentieringsantigen til behandling af B-cellelymfom |
RU2139092C1 (ru) | 1993-06-03 | 1999-10-10 | Терапьютик Антибодиз Инк. | Фрагменты антител в терапии |
CA2141907A1 (fr) | 1994-02-04 | 1995-08-05 | Herve Perron | Virus msrv1 et agent pathogene et/ou infectant msrv2 associes a la sclerose en plaques, leurs constituants nucleiques et leurs applications |
US5731168A (en) | 1995-03-01 | 1998-03-24 | Genentech, Inc. | Method for making heteromultimeric polypeptides |
US5739277A (en) | 1995-04-14 | 1998-04-14 | Genentech Inc. | Altered polypeptides with increased half-life |
US6284236B1 (en) | 1995-06-29 | 2001-09-04 | Immunex Corporation | Cytokine that induces apoptosis |
JP4435304B2 (ja) | 1995-06-29 | 2010-03-17 | イミュネックス・コーポレーション | アポトーシスを誘導するサイトカイン |
US6998116B1 (en) | 1996-01-09 | 2006-02-14 | Genentech, Inc. | Apo-2 ligand |
US6030945A (en) | 1996-01-09 | 2000-02-29 | Genentech, Inc. | Apo-2 ligand |
BR9612752A (pt) | 1996-10-25 | 2000-01-18 | Human Genome Sciences Inc | Neutrocina |
EP0944662A1 (en) | 1996-12-13 | 1999-09-29 | Du Pont-Toray Company, Ltd. | Polyestercarbonate-polyurethaneurea fibers |
EP0951551B9 (en) | 1996-12-23 | 2012-12-26 | Immunex Corporation | Ligand for receptor activator of nf-kappa b, ligand is member of tnf superfamily |
ES2284199T5 (es) | 1997-01-28 | 2011-11-14 | Human Genome Sciences, Inc. | Receptor 4 que contiene dominio de muerte (dr4: receptor 4 de muerte), miembro de la superfamilia de receptores de tnf y unión a trail (apo-2l). |
US6433147B1 (en) | 1997-01-28 | 2002-08-13 | Human Genome Sciences, Inc. | Death domain containing receptor-4 |
US6072047A (en) | 1997-02-13 | 2000-06-06 | Immunex Corporation | Receptor that binds trail |
US20020160446A1 (en) * | 2000-11-14 | 2002-10-31 | Holtzman Douglas A. | Novel genes encoding proteins having prognostic diagnostic preventive therapeutic and other uses |
US6313269B1 (en) | 1997-03-14 | 2001-11-06 | Smithkline Beecham Corporation | Tumor necrosis factor related receptor, TR6 |
US20010010924A1 (en) | 1997-03-14 | 2001-08-02 | Keith Charles Deen | Tumor necrosis factor related receptor, tr6 polynecleotides |
JP4330180B2 (ja) | 1997-03-17 | 2009-09-16 | ヒューマン ジノーム サイエンシーズ, インコーポレイテッド | 死ドメイン含有レセプター5 |
US6872568B1 (en) | 1997-03-17 | 2005-03-29 | Human Genome Sciences, Inc. | Death domain containing receptor 5 antibodies |
EA003636B1 (ru) | 1997-04-16 | 2003-08-28 | Амген Инк. | Остеопротегеринсвязующие белки и рецепторы |
JP2002512515A (ja) | 1997-04-16 | 2002-04-23 | ミレニアム ファーマシューティカルズ インク. | 腫瘍壊死因子受容体関連蛋白質TANGO−63dおよびTANGO−63e |
DE69838249T3 (de) | 1997-05-15 | 2012-01-19 | Genentech, Inc. | Anti-apo-2 antikörper |
US5896768A (en) * | 1997-05-15 | 1999-04-27 | Ut Automotive Dearborn, Inc. | Electronic child security door lock system |
US6342369B1 (en) | 1997-05-15 | 2002-01-29 | Genentech, Inc. | Apo-2-receptor |
AU8400398A (en) | 1997-07-11 | 1999-02-08 | Trustees Of The University Of Pennsylvania, The | Nucleic acid encoding a novel chemotherapy-induced protein, and methods of use |
WO1999009165A1 (en) | 1997-08-15 | 1999-02-25 | Idun Pharmaceuticals, Inc. | Trail receptors, nucleic acids encoding the same, and methods of use thereof |
WO1999011791A2 (en) | 1997-09-05 | 1999-03-11 | University Of Washington | Tumor necrosis factor family receptors and ligands, encoding nucleic acids and related binding agents |
JP2002508962A (ja) | 1998-01-15 | 2002-03-26 | ジェネンテク・インコーポレイテッド | Apo−2リガンド |
US6468532B1 (en) | 1998-01-22 | 2002-10-22 | Genentech, Inc. | Methods of treating inflammatory diseases with anti-IL-8 antibody fragment-polymer conjugates |
ES2368823T3 (es) | 1998-01-26 | 2011-11-22 | Genentech, Inc. | Anticuerpos del receptor 4 de muerte (dr4) y usos de los mismos. |
US6252050B1 (en) | 1998-06-12 | 2001-06-26 | Genentech, Inc. | Method for making monoclonal antibodies and cross-reactive antibodies obtainable by the method |
JP2002517223A (ja) | 1998-06-12 | 2002-06-18 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | モノクローナル抗体、交叉反応性抗体およびそれを生成する方法 |
ES2694002T3 (es) * | 1999-01-15 | 2018-12-17 | Genentech, Inc. | Polipéptido que comprende una región Fc de IgG1 humana variante |
GB9908533D0 (en) * | 1999-04-14 | 1999-06-09 | Novartis Ag | Organic compounds |
CA2374599A1 (en) | 1999-05-28 | 2000-12-07 | Genentech, Inc. | Dr4 antibodies and uses thereof |
ES2267547T3 (es) | 1999-06-09 | 2007-03-16 | Genentech, Inc. | Sinergia de antagonista de receptores del ligando apo-2l y de cpt-11. |
MXPA01013236A (es) | 1999-06-28 | 2002-06-21 | Genentech Inc | Metodos para hacer ligando apo-2 mediante el uso de iones metalicos divalentes. |
EP1248772B1 (fr) | 2000-01-20 | 2006-03-22 | Rhodia Chimie | Procede d'obtention de polyisocyanate(s) ramifie(s) faiblement colore(s), et composition en decoulant |
JP2001259961A (ja) | 2000-03-15 | 2001-09-25 | Disco Abrasive Syst Ltd | 加工装置 |
TWI318983B (en) | 2000-05-02 | 2010-01-01 | Uab Research Foundation | An antibody selective for a tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand receptor and uses thereof |
US7279160B2 (en) | 2000-05-02 | 2007-10-09 | The Uab Research Foundation | Combinations of DR5 antibodies and other therapeutic agents |
ES2317924T3 (es) | 2000-07-27 | 2009-05-01 | Genentech, Inc. | Administracion secuencial de cpt-11 y polipeptido apo-2l. |
US7960670B2 (en) * | 2005-05-03 | 2011-06-14 | Kla-Tencor Corporation | Methods of and apparatuses for measuring electrical parameters of a plasma process |
CN100475848C (zh) | 2001-05-18 | 2009-04-08 | 麒麟麦酒株式会社 | 抗trail-r抗体 |
CA2446723C (en) | 2001-05-25 | 2014-01-21 | Human Genome Sciences, Inc. | Antibodies that immunospecifically bind to trail receptors |
ATE433996T1 (de) | 2001-07-03 | 2009-07-15 | Genentech Inc | Humane dr4-antikörper und deren anwendungen |
DE60238560D1 (de) | 2001-11-01 | 2011-01-20 | Uab Research Foundation | Kombinationen aus anti-dr5-antikörpern und anti-dr4-antikörpern und weiteren therapeutischen agentien |
ES2357225T3 (es) | 2001-11-01 | 2011-04-20 | Uab Research Foundation | Combinaciones de anticuerpos anti-dr5 y anticuerpos anti-dr4 y otros agentes terapéuticos. |
AU2002352676A1 (en) | 2001-11-14 | 2003-05-26 | Human Genome Sciences, Inc. | Antibodies that immunospecifically bind to trail receptors |
WO2003054216A2 (en) | 2001-12-20 | 2003-07-03 | Human Genome Sciences, Inc. | Antibodies that immunospecifically bind to trail receptors |
ATE455127T1 (de) | 2003-05-31 | 2010-01-15 | Micromet Ag | Humane anti-humane cd3-bindungsmoleküle |
KR20070010046A (ko) | 2004-04-06 | 2007-01-19 | 제넨테크, 인크. | Dr5 항체 및 그의 용도 |
JO3000B1 (ar) * | 2004-10-20 | 2016-09-05 | Genentech Inc | مركبات أجسام مضادة . |
PE20071101A1 (es) | 2005-08-31 | 2007-12-21 | Amgen Inc | Polipeptidos y anticuerpos |
CN101074261A (zh) | 2006-04-30 | 2007-11-21 | 北京同为时代生物技术有限公司 | Trail受体1和/或trail受体2特异性抗体及其应用 |
-
2006
- 2006-01-30 US US11/344,564 patent/US8029783B2/en active Active
- 2006-01-31 AU AU2006210779A patent/AU2006210779B2/en active Active
- 2006-01-31 MX MX2007009215A patent/MX2007009215A/es active IP Right Grant
- 2006-01-31 JP JP2007554188A patent/JP5886509B2/ja active Active
- 2006-01-31 ES ES06734171T patent/ES2374301T3/es active Active
- 2006-01-31 CA CA2594918A patent/CA2594918C/en active Active
- 2006-01-31 NZ NZ556478A patent/NZ556478A/en unknown
- 2006-01-31 EP EP06734171A patent/EP1844077B1/en active Active
- 2006-01-31 KR KR1020077019924A patent/KR101297467B1/ko active IP Right Grant
- 2006-01-31 RU RU2007132876/10A patent/RU2458072C2/ru active
- 2006-01-31 WO PCT/US2006/003577 patent/WO2006083971A2/en active Application Filing
- 2006-01-31 BR BRPI0606891-0A patent/BRPI0606891A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2006-01-31 CN CN200680009970.1A patent/CN101247825B/zh active Active
- 2006-01-31 AT AT06734171T patent/ATE526987T1/de active
- 2006-10-10 US US11/546,133 patent/US8030023B2/en active Active
-
2007
- 2007-07-15 IL IL184617A patent/IL184617A/en active IP Right Grant
- 2007-08-31 NO NO20074446A patent/NO341791B1/no unknown
-
2008
- 2008-04-10 HK HK08104047.7A patent/HK1109638A1/xx unknown
-
2011
- 2011-09-07 US US13/227,391 patent/US8409570B2/en active Active
-
2012
- 2012-10-31 JP JP2012239879A patent/JP2013027407A/ja active Pending
-
2015
- 2015-04-28 JP JP2015091261A patent/JP2015133985A/ja active Pending
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6113898A (en) * | 1995-06-07 | 2000-09-05 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Human B7.1-specific primatized antibodies and transfectomas expressing said antibodies |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
РЫБАЛЬСКИЙ Н.Г., СЕРОВА М.А, ИГНАТЬЕВА Г.А, СТАРЧЕУС А.П. Моноклональные антитела и гибридомы. - М.: ВАСХНИЛ, 1989. * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2731717C2 (ru) * | 2013-05-03 | 2020-09-08 | ФУДЖИФИЛМ ДИОСИНТ БАЙОТЕКНОЛОДЖИЗ ЮКей ЛИМИТЕД | Способ экспрессии |
RU2735956C1 (ru) * | 2017-03-21 | 2020-11-11 | Тон-А Ст Ко., Лтд. | Анти-dr5-антитело и его применение |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2458072C2 (ru) | Антитела к dr5 и их применения | |
AU2005201915B2 (en) | DR4 antibodies and uses thereof | |
US7744881B2 (en) | Human DR4 antibodies and uses thereof | |
US20050043516A1 (en) | TACI antibodies and uses thereof | |
US20080095700A1 (en) | DR4 antibodies and uses thereof | |
JP2005517021A5 (ru) | ||
TWI419903B (zh) | Dr5抗體及其用途 |