RU2247393C2 - Способ и кювета для проведения анализа - Google Patents
Способ и кювета для проведения анализа Download PDFInfo
- Publication number
- RU2247393C2 RU2247393C2 RU2003102380/15A RU2003102380A RU2247393C2 RU 2247393 C2 RU2247393 C2 RU 2247393C2 RU 2003102380/15 A RU2003102380/15 A RU 2003102380/15A RU 2003102380 A RU2003102380 A RU 2003102380A RU 2247393 C2 RU2247393 C2 RU 2247393C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- deoxycholate
- hemolytic agent
- cavity
- agent
- microcuvette
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 43
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 title abstract description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 32
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 32
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 claims abstract description 20
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 claims abstract description 20
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims abstract description 19
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 15
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims abstract description 14
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 8
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 claims abstract description 6
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 claims abstract description 3
- 150000002826 nitrites Chemical class 0.000 claims abstract 3
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical class C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 claims description 27
- 239000003219 hemolytic agent Substances 0.000 claims description 23
- 229940009976 deoxycholate Drugs 0.000 claims description 18
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims description 10
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 claims description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 7
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N Morpholine Chemical compound C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 3
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- PAFZNILMFXTMIY-UHFFFAOYSA-O cyclohexylammonium Chemical compound [NH3+]C1CCCCC1 PAFZNILMFXTMIY-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims description 2
- KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N deoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000002563 ionic surfactant Substances 0.000 claims description 2
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 claims description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 10
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 5
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 4
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 4
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 4
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 3
- 108010061951 Methemoglobin Proteins 0.000 description 3
- -1 alkyl dimethylbenzylammonium salts Chemical class 0.000 description 3
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 3
- XTEGARKTQYYJKE-UHFFFAOYSA-M Chlorate Chemical compound [O-]Cl(=O)=O XTEGARKTQYYJKE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001447 compensatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- CPJSUEIXXCENMM-UHFFFAOYSA-N phenacetin Chemical compound CCOC1=CC=C(NC(C)=O)C=C1 CPJSUEIXXCENMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 108010003320 Carboxyhemoglobin Proteins 0.000 description 1
- CXRFDZFCGOPDTD-UHFFFAOYSA-M Cetrimide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C CXRFDZFCGOPDTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 108010064719 Oxyhemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 108010016811 Sulfhemoglobin Proteins 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 108010071981 cyanhemoglobin Proteins 0.000 description 1
- 239000002274 desiccant Substances 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000011363 dried mixture Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000001746 injection moulding Methods 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 229960003893 phenacetin Drugs 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 150000004053 quinones Chemical class 0.000 description 1
- 238000007430 reference method Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- AISMNBXOJRHCIA-UHFFFAOYSA-N trimethylazanium;bromide Chemical compound Br.CN(C)C AISMNBXOJRHCIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/25—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
- G01N21/27—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands using photo-electric detection ; circuits for computing concentration
- G01N21/272—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands using photo-electric detection ; circuits for computing concentration for following a reaction, e.g. for determining photometrically a reaction rate (photometric cinetic analysis)
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/01—Arrangements or apparatus for facilitating the optical investigation
- G01N21/03—Cuvette constructions
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/01—Arrangements or apparatus for facilitating the optical investigation
- G01N21/03—Cuvette constructions
- G01N21/0303—Optical path conditioning in cuvettes, e.g. windows; adapted optical elements or systems; path modifying or adjustment
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/25—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
- G01N21/31—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5094—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for blood cell populations
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/72—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood pigments, e.g. haemoglobin, bilirubin or other porphyrins; involving occult blood
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/01—Arrangements or apparatus for facilitating the optical investigation
- G01N21/03—Cuvette constructions
- G01N2021/0321—One time use cells, e.g. integrally moulded
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/01—Arrangements or apparatus for facilitating the optical investigation
- G01N21/03—Cuvette constructions
- G01N2021/0325—Cells for testing reactions, e.g. containing reagents
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/01—Arrangements or apparatus for facilitating the optical investigation
- G01N21/03—Cuvette constructions
- G01N2021/0346—Capillary cells; Microcells
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/01—Arrangements or apparatus for facilitating the optical investigation
- G01N21/03—Cuvette constructions
- G01N2021/0389—Windows
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pathology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Mathematical Physics (AREA)
- Theoretical Computer Science (AREA)
- Ecology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
- Optical Measuring Cells (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к методам лабораторной диагностики. Способ определения гемоглобина включает этап внесения образца неразведенной цельной крови капиллярным действием в одноразовую микрокювету, имеющую по меньшей мере одну полость для приема образца. Полость свободна от азидов и нитритов и содержит сухой по существу негигроскопичный гемолизирующий агент, который растворяется кровью, гемолизирует эритроциты и высвобождает гемоглобин, содержащийся в эритроцитах. Затем проводят первое измерение поглощения в диапазоне длины волн от 490 до 520 нм непосредственно на образце в микрокювете и выполняют второе измерение поглощения для компенсации фоновой помехи. Также заявлена одноразовая микрокювета для спектрофотометрического определения гемоглобина в неразведенной цельной крови, полость которой свободна от азидов и нитритов и содержит высушенный негигроскопичный гемолизирующий агент. Способ позволяет сократить время для аналитического определения и устраняет проблемы, связанные с гигроскопическими свойствами реагентов. 2 н. и 12 з.п. ф-лы, 1 ил.
Description
ОПИСАНИЕ
Область техники
Настоящее изобретение относится к способу для проведения анализа и кювете для проведения этого анализа. В частности, изобретение относится к способу определения гемоглобина в неразведенной цельной крови и к одноразовой кювете, которая может использоваться при определении.
Предшествующий уровень техники
Одноразовая кювета для взятия образцов жидкости, смешивания образца с реагентом и непосредственного проведения оптических анализов образца, смешанного с реагентом, известна из патента США № 4088448. Указанная кювета имеет несколько преимуществ, поскольку она, во-первых, упрощает процедуру взятия проб, уменьшает количество принадлежностей и значительно улучшает точность анализа, делая процедуру проведения анализа независимой от рабочей методики оператора, осуществляющего анализ. Конструкция кюветы, основанная на том же принципе и имеющая улучшенные характеристики потока, раскрыта в патенте США № 5674457.
Одноразовая кювета в соответствии с этими патентами в настоящее время широко используется для измерения гемоглобина (определения Hb) неразведенной цельной крови. Для этой цели полость кюветы была предварительно обработана реагентом с тем, чтобы, когда образец крови засасывается в кювету, стенки эритроцитов разрушались и осуществлялась химическая реакция.
По результату реакции обеспечивается возможность определения Hb измерением поглощения непосредственно через прозрачные стенки кюветы, которые в зоне измерения, также называемой оптическим окном, имеют заданное и точно определенное расстояние между внутренними поверхностями противоположных плоскостных стенок. Способ измерения основан на модифицированном азидметгемоглобиновом способе в соответствии с публикацией Vanzetti, G., Am.J.Lab.&Clin. Med. 67, 116 (1966).
Спектрофотометрические измерения производятся на длине волн 570 и 880 нм. Данный способ количественного измерения, основанный на сухой химии, имел значительный успех, что можно видеть, например, из статьи von Schenck et al. в Clinical Chemistry, vol. 32, No. 3, 1986, поскольку этот способ дает такие же или даже превосходящие результаты, по сравнению с результатами, полученными при использовании стандартных влажных способов определения Hb. Используемый реагент включает дезоксихолат натрия, который гемолизирует эритроциты, азид натрия и нитрит натрия, которые превращают гемоглобин в азидметгемоглобин.
Вследствие гигроскопических свойств используемых реагентов, срок хранения ограничен, и требуется хранение кювет в герметичных упаковках, включающих осушающий агент. Еще более проблематичным является тот факт, что в странах с высоковлажным климатом кювету следует использовать в пределах нескольких минут после удаления упаковки, поскольку иначе реагенты разрушатся, и измерение будет неточным и, следовательно, бесполезным.
Краткое изложение существа изобретения
Задачей настоящего изобретения является разработка быстрого количественного способа определения гемоглобина в цельной крови, который может выполняться в одноразовой микрокювете, а также разработка микрокюветы для определения гемоглобина в неразведенной цельной крови, причем способ устраняет проблемы, связанные с гигроскопическими свойствами реагентов.
В соответствии с настоящим изобретением способ для определения гемоглобина в цельной крови включает этапы внесения образца неразведенной цельной крови капиллярным действием в одноразовую микрокювету, имеющую по меньшей мере одну полость для приема образца. Полость включает сухой, по существу, негигроскопичный гемолизирующий агент, который растворяется кровью, гемолизирует эритроциты и высвобождает гемоглобин, содержащийся в эритроцитах. Затем непосредственно на образце в микрокювете производится первое измерение поглощения в диапазоне длины волн от 490 до 520 нм и для компенсации фоновой помехи производится второе измерение поглощения.
Таким образом, неожиданно было обнаружено, что количественные определения гемоглобина могут выполняться без упомянутых выше химических реагентов азида натрия и нитрита натрия. Было также обнаружено, что количественные определения гемоглобина могут выполняться на гемолизированной крови при условии, что выбран соответствующий гемолизирующий агент или смесь таких агентов.
Таким образом, в соответствии с настоящим изобретением могут быть устранены гигроскопичные реагенты. Кроме того, можно уменьшить время для аналитического определения. Поскольку анализы проводятся в больших количествах, например, в больницах и банках крови, аспект времени является важным.
Подробное описание предпочтительных вариантов воплощения изобретения
Одноразовая микрокювета, используемая в соответствии с настоящим изобретением, содержит единый корпусной элемент, имеющий по меньшей мере одну полость с оптическим окном (измерительной зоной), причем две плоские или изогнутые поверхности, обращенные к полости, размещены на заданном расстоянии друг от друга и ограничивают заданную длину оптического канала. Это расстояние между поверхностями, ограничивающими измерительную зону, представляет собой параметр, имеющий решающее значение в обеспечении соответствующей длины оптического канала для измерения гемоглобина. В предпочтительном варианте реализации это расстояние составляет от 0,05 до 0,2 мм. Расстояние между внутренними поверхностями остальной полости составляет предпочтительно от 0,1 до 2 мм, что эффективно для обеспечения возможности вхождения образца в полость под действием капиллярной силы через впускное отверстие полости, которое сообщается с наружной поверхностью корпусного элемента. Кроме того, полость имеет заданный фиксированный объем, составляющий менее 25 мкл. Высушенный гемолизирующий агент наносится в виде покрытия на поверхность полости. Гемолизирующий агент предпочтительно присутствует в количестве, превышающем количество, требуемое для гемолизирующей реакции. В соответствии с заявленным способом другие добавки не требуются.
Кюветы в соответствии с настоящим изобретением могут быть изготовлены из любого подходящего материала, который обеспечивает возможность образования необходимых уровней жесткого допуска. Предпочтительно, кювета изготовлена инжекционным формованием прозрачного полимерного материала.
Решающим признаком настоящего изобретения является гемолизирующий агент. Указанный агент должен быть негигроскопичным и легко растворимым в воде или в неразведенной цельной крови. Поскольку важно, чтобы можно было получать воспроизводимые результаты, агент должен предпочтительно иметь определенную химическую структуру. Поскольку гемолизирующий агент вносится в полость кюветы в виде раствора, который в последующем тщательно высушивается, предпочтительно c использованием тепла, удобно, чтобы гемолизирующий агент был легко растворим в органических растворителях, которые его не разрушают и могут легко выпариваться при низких температурах. Поэтому предпочтительно, чтобы гемолизирующий агент был легко растворим в спиртах, таких как метанол.
Другой важный аспект при выборе гемолизирующего агента состоит в том, что в высушенном виде в готовой к использованию микрокювете он обеспечивает возможность быстрого и равномерного внесения цельной крови в кювету. Время для внесения цельной крови в микрокювету должно быть короче, чем время, требуемое для растворения гемолизирующего агента этой кровью в микрокювете.
Особенно предпочтительная группа гемолизирующих агентов содержит ионные и неионные поверхностно-активные вещества с гемолизирующими свойствами. Примеры таких веществ представляют собой четвертичные аммониевые соли, выбранные из группы, состоящей из алкильных солей триэтиламмония, солей алкилдиметилбензиламмония и солей алкилпиридина, состоящих из бромида тетрадецилтриметиламмония (TTAB), хлорида додецилтриметиламмония, бромида цетилтриметиламмония, бромида гексадецилтриметиламмония, хлорида бензалкония и других четвертичных аммониевых солей, натрийлаурилсульфата и солей дезоксихолевой кислоты. Особенно подходящие гемолизирующие агенты, которые должны применяться в соответствии с изобретением, представляют собой дезоксихолат натрия, дезоксихолат калия, дезоксихолат кальция, морфолиндезоксихолат, дезоксихолат циклогексиламмония и дезоксихолат аммония или их комбинации. Наиболее предпочтительным в настоящее время гемолизирующим агентом, который отвечает требованию обеспечения количественного и быстрого определения гемоглобина, является комбинация дезоксихолата натрия и дезоксихолата аммония. Количество дезоксихолата аммония составляет предпочтительно от 20 до 80 мас.%.
Во время экспериментов было обнаружено, что обычно используемая группа агентов для гемолизирования крови, т.е. сапонины, которые представляют собой естественные продукты, широко распространенные в растениях, и содержат смеси различных химических веществ, не дают воспроизводимых результатов. Сапонины представляют собой мощные гемолизирующие агенты даже при очень низких концентрациях.
Существенным признаком способа по сравнению с известным способом определения Hb в микрокюветах является то, что измерение поглощения должно выполняться на другой длине волны. Было обнаружено, что определение поглощения должно проводиться в диапазоне длин волн от 490 до 520, предпочтительно от 500 до 510 нм. Измерение вторичного компенсаторного поглощения предпочтительно выполняется в диапазоне от 850 до 910, предпочтительно от 860 до 900 нм.
Определение поглощения кровью на этих длинах волн раскрыто в патенте США № 5064282, в соответствии с которым измерение проводится в повторно используемой кювете, которая содержит кровь, предварительно гемолизированную сапонином. Этот способ включает помещение капли крови на покровное стекло, перемешивание крови палочкой, содержащей на ней сапонин до получения прозрачной жидкости, и внесение гемолизированной крови в кювету.
Что касается возможной помехи при измерении в соответствии с настоящим изобретением вследствие присутствия метгемоглобина, то следует понимать, что такие помехи будут происходить у пациентов, имеющих очень редкую врожденную ферментную аномалию, в некоторых редких вариантах нормального гемоглобина и после контакта с определенными лекарственными препаратами и химическими веществами, такими как фенацетин, нитраты, хиноны, хлорат. В этих случаях в крови будет присутствовать количество метгемоглобина, достигающее 10-20%, но при возникновении таких помех клинически будет достаточно очевидным указание на необходимость использования вместо него азидного способа, т.е. способа, который в настоящее время используется в микрокюветах, или гемоглобинцианидного способа (эталонный способ Международного комитета стандартизации в гематологии). В этом контексте следует добавить, что данная проблема, если она возникает, также присутствует при использовании повсеместно принятого оксигемоглобинового способа. Помехи могут также быть вызваны высокими концентрациями карбоксигемоглобина у заядлых курильщиков и сульфгемоглобина.
Фотометры, подходящие для выполнения этих измерений, могут быть получены модификацией существующих фотометров подходящими фильтрами и светоизлучающими диодами. В соответствии с предпочтительным вариантом реализации изобретения фотометр измеряет поглощающую способность на двух длинах волн, а встроенный микропроцессор рассчитывает в соответствии с запрограммированным алгоритмом общую концентрацию гемоглобина в крови.
Нижеприведенный пример иллюстрирует способ изобретения.
Гемолизирующий агент, состоящий из равных частей дезоксихолата натрия и аммония, растворяют в метаноле и вносят в одноразовую микрокювету, имеющую описанную выше конструкцию. Затем метанол выпаривают.
При сравнении способа изобретения, выполненного в микрокюветах, содержащих только высушенную смесь дезоксихолата натрия и аммония, и способа определения гемоглобина в известных, используемых в настоящее время микрокюветах HemoCue, содержащих реагент нитрит натрия/азид натрия, а также дезоксихолат натрия, было обнаружено, что период времени для гемолизирования крови составил приблизительно на 15 с меньше при использовании предпочтительного гемолизирующего агента в соответствии с настоящим изобретением. В частности, период для гемолизирования высушенного гемолизирующего агента, присутствующего в микрокювете, должен быть менее чем 40 с. Это обеспечивает возможность дальнейшего уменьшения общего времени определения гемоглобина на 25%, что может иметь преимущества в загруженных больницах и в других ситуациях, где могут проводиться исследования.
При сравнении стабильности в отношении влажности было обнаружено, что стабильность микрокювет, включая упомянутую выше смесь дезоксихолатов, составила 24 ч при температуре воздуха 45°С и относительной влажности 80%, что следует сравнить приблизительно с 2-мя мин для имеющихся в продаже микрокювет HemoCue в тех же условиях.
Оценка нового способа с гемолизирующей смесью (и без каких-либо других химических соединений), по сравнению со стандартным способом ISCH, представлена на чертеже. Оценка проводилась в лабораторных условиях. Как видно, согласованность между способами очень хорошая.
Спектрофотометрические измерения поглощения проводили при длине волн около 570 нм для известного способа и 505 нм для нового способа. Для обоих способов компенсаторные измерения проводили при 880 нм.
Множество модификаций, вариаций и изменений в деталях может быть произведено в пределах диапазона настоящего изобретения.
Claims (14)
1. Способ количественного определения гемоглобина в неразведенной цельной крови, заключающийся в том, что вносят образец неразведенной цельной крови капиллярным действием в одноразовую микрокювету, имеющую по меньшей мере одну полость для приема образца, в которой размещен гемолизирующий агент в сухом виде, отличающийся тем, что полость свободна от азидов и нитритов, при этом используют гемолизирующий агент, который является негигроскопичным, гемолизирующий агент растворяют кровью, при этом агент гемолизирует эритроциты и высвобождает гемоглобин, содержащийся в эритроцитах, осуществляют первое измерение поглощения в диапазоне длины волны от 490 до 520 нм непосредственно на гемолизированном образце в кювете и осуществляют второе измерение поглощения для компенсации фоновой помехи.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что используют гемолизирующий агент, который растворим в органических растворителях.
3. Способ по п.2, отличающийся тем, что в качестве органического растворителя используют спирт, например метанол.
4. Способ по п.3, отличающийся тем, что гемолизирующий агент выбирают таким, что в сухом виде в готовой для использования микрокювете он обеспечивает возможность быстрого внесения цельной крови в кювету.
5. Способ по п.4, отличающийся тем, что время для внесения цельной крови в микрокювету короче, чем время, требуемое для растворения гемолизирующего агента.
6. Способ по п.3, отличающийся тем, что гемолизирующий агент выбирают из группы, состоящей из ионных и неионных поверхностно-активных веществ.
7. Способ по п.6, отличающийся тем, что гемолизирующий агент выбирают из группы, состоящей из солей дезоксихолевой кислоты и четвертичных аммониевых солей.
8. Способ по п.7, отличающийся тем, что гемолизирующий агент выбирают из группы, состоящей из дезоксихолата натрия, дезоксихолата калия, дезоксихолата кальция, морфолиндезоксихолата, дезоксихолата циклогексиламмония и дезоксихолата аммония или их смесей.
9. Способ по п.8, отличающийся тем, что используют гемолизирующий агент, состоящий из смеси дезоксихолата натрия и дезоксихолата аммония.
10. Способ по п.9, отличающийся тем, что количество дезоксихолата аммония составляет 20 - 80 мас.%.
11. Способ по любому из предшествующих пп.1-10, отличающийся тем, что первое измерение поглощения осуществляют в диапазоне 500 - 510 нм.
12. Способ по п.1, отличающийся тем, что второе измерение поглощения осуществляют в диапазоне 850 - 910, предпочтительно 860 - 900 нм.
13. Одноразовая микрокювета для спектрофотометрического определения гемоглобина в неразведенной цельной крови, отличающаяся тем, что в полости микрокюветы размещен высушенный негигроскопичный гемолизирующий агент или комбинация таких агентов, при этом полость, по существу, свободна от азида и нитрита.
14. Микрокювета по п.13, отличающаяся тем, что гемолизирующий агент представляет собой агент, состоящий из смеси дезоксихолата натрия и дезоксихолата аммония, причем количество дезоксихолата аммония составляет 20 - 80 мас.%.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE0002443A SE518539C2 (sv) | 2000-06-28 | 2000-06-28 | Sätt och kyvett för kvantitativ hemoglobinbestämning i outspätt helblod |
| SE0002443-0 | 2000-06-28 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2003102380A RU2003102380A (ru) | 2004-07-10 |
| RU2247393C2 true RU2247393C2 (ru) | 2005-02-27 |
Family
ID=20280294
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2003102380/15A RU2247393C2 (ru) | 2000-06-28 | 2001-06-25 | Способ и кювета для проведения анализа |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6638769B2 (ru) |
| EP (2) | EP1303746B2 (ru) |
| JP (1) | JP4913977B2 (ru) |
| CN (1) | CN100480675C (ru) |
| AT (2) | ATE489614T1 (ru) |
| AU (2) | AU2001274790B2 (ru) |
| BR (1) | BRPI0112078B1 (ru) |
| CA (1) | CA2414316C (ru) |
| DE (3) | DE20014053U1 (ru) |
| DK (2) | DK1903327T4 (ru) |
| ES (2) | ES2322890T5 (ru) |
| NO (1) | NO20026240L (ru) |
| RU (1) | RU2247393C2 (ru) |
| SE (1) | SE518539C2 (ru) |
| WO (1) | WO2002001195A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA200210284B (ru) |
Families Citing this family (34)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE518539C2 (sv) * | 2000-06-28 | 2002-10-22 | Migrata U K Ltd | Sätt och kyvett för kvantitativ hemoglobinbestämning i outspätt helblod |
| US7029628B2 (en) * | 2000-12-28 | 2006-04-18 | Stat-Chem Inc. | Portable co-oximeter |
| SE0104443D0 (sv) | 2001-12-28 | 2001-12-28 | Hemocue Ab | Analysis method and cuvette therefor |
| US7002670B2 (en) * | 2002-06-12 | 2006-02-21 | Baxter International Inc. | Optical sensor and method for measuring concentration of a chemical constituent using its intrinsic optical absorbance |
| US7224448B2 (en) * | 2004-11-16 | 2007-05-29 | Agilent Technologies, Inc. | Apparatus and methods for evaluating an optical property of a liquid sample |
| US7277167B2 (en) * | 2005-09-13 | 2007-10-02 | Agilent Technologies, Inc. | Modular cuvettes and methods for use thereof |
| US20070081159A1 (en) * | 2005-10-11 | 2007-04-12 | Giffin Kristin M | Apparatus and methods for evaluating an optical property of a liquid sample |
| SE530244C2 (sv) * | 2006-05-05 | 2008-04-08 | Hemocue Ab | Förfarande och system för kvantitativ hemoglobinbestämning |
| US20080084559A1 (en) * | 2006-10-10 | 2008-04-10 | C Technologies, Inc. | Microvolume sampling device |
| US7738094B2 (en) | 2007-01-26 | 2010-06-15 | Becton, Dickinson And Company | Method, system, and compositions for cell counting and analysis |
| KR101423770B1 (ko) | 2008-01-08 | 2014-07-25 | 엘지전자 주식회사 | 전혈과 용혈에 의한 헤모글로빈의 정량적 측정 방법 및측정 장치 |
| DE102008039810B3 (de) * | 2008-08-25 | 2010-04-08 | Ekf - Diagnostic Gmbh | Einmal-Mikroküvette zur Bestimmung des Hämoglobingehalts in Vollblut |
| JP5888885B2 (ja) * | 2010-06-23 | 2016-03-22 | アークレイ株式会社 | 測定装置、測定方法、測定プログラム、および測定システム |
| BR112014010718B1 (pt) | 2011-11-16 | 2020-12-22 | Becton, Dickinson And Company | métodos, sistemas, dispositivos e kits para detecção de analito em amostra |
| JP6036212B2 (ja) * | 2012-11-20 | 2016-11-30 | ニプロ株式会社 | ヘモグロビン測定装置およびヘモグロビン測定方法 |
| US9678065B2 (en) | 2013-01-11 | 2017-06-13 | Becton, Dickinson And Company | Low-cost point-of-care assay device |
| US10690684B2 (en) | 2013-05-10 | 2020-06-23 | Majelco Medical, Inc. | Apparatus and system for measuring volume of blood loss |
| US10041960B2 (en) | 2013-05-10 | 2018-08-07 | University Of Utah Research Foundation | Devices, systems, and methods for measuring blood loss |
| WO2015009970A1 (en) | 2013-07-18 | 2015-01-22 | Erythron Llc | Spectroscopic measurements with parallel array detector |
| DE102013218448A1 (de) * | 2013-09-13 | 2015-03-19 | Schülke & Mayr GmbH | Methode zur Bestimmung der Reinigungsleistung von Formulierungen |
| US9797899B2 (en) | 2013-11-06 | 2017-10-24 | Becton, Dickinson And Company | Microfluidic devices, and methods of making and using the same |
| CN105899936B (zh) | 2013-11-13 | 2019-12-24 | 贝克顿·迪金森公司 | 光学成像系统及使用其的方法 |
| WO2015131151A2 (en) | 2014-02-28 | 2015-09-03 | Erythron, Llc | Method and apparatus for determining markers of health by analysis of blood |
| BR122020024355B1 (pt) | 2014-10-14 | 2023-03-14 | Becton, Dickinson And Company | Dispositivo de mistura e transferência de espécime adaptado para receber uma amostra |
| AU2015334044B2 (en) | 2014-10-14 | 2018-02-15 | Becton, Dickinson And Company | Blood sample management using open cell foam |
| AU2016229837B2 (en) | 2015-03-10 | 2018-05-24 | Becton, Dickinson And Company | Biological fluid micro-sample management device |
| EP3282937A4 (en) | 2015-04-14 | 2018-11-21 | Nueon Inc. | Method and apparatus for determining markers of health by analysis of blood |
| EP3782730B1 (en) | 2015-09-01 | 2024-01-10 | Becton, Dickinson and Company | Depth filtration device for separating specimen phases |
| US10782306B2 (en) | 2015-12-24 | 2020-09-22 | Koninklijke Philips N.V. | Method and a system for determinations of cell suspensions |
| WO2017165403A1 (en) | 2016-03-21 | 2017-09-28 | Nueon Inc. | Porous mesh spectrometry methods and apparatus |
| WO2017180656A1 (en) | 2016-04-11 | 2017-10-19 | Alfred Akerman | Apparatus and system for measuring volume of blood loss |
| WO2018085699A1 (en) | 2016-11-04 | 2018-05-11 | Nueon Inc. | Combination blood lancet and analyzer |
| CN106706891B (zh) * | 2017-01-03 | 2019-03-01 | 长沙中生众捷生物技术有限公司 | 血红蛋白的检测试剂及血红蛋白的检测试纸 |
| CN107036866A (zh) * | 2017-05-16 | 2017-08-11 | 新疆畜牧科学院 | 一种可定量测定细菌分泌性溶血素活性的测定方法 |
Family Cites Families (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE399768B (sv) * | 1975-09-29 | 1978-02-27 | Lilja Jan E | Kyvett for provtagning, blandning av, provet med ett reagensmedel och direkt utforande av, serskilt optisk, analys av det med reagensmedlet blandade provet |
| US4185964A (en) † | 1977-02-08 | 1980-01-29 | Central Laboratories of Associated Maryland Pathologists, Ltd. | Lysing reagent |
| DE2819645A1 (de) | 1978-05-05 | 1979-11-08 | Merck Patent Gmbh | Mittel und verfahren zur durchfuehrung kolorimetrischer oder photometrischer bestimmungen |
| US4255385A (en) | 1979-10-23 | 1981-03-10 | Abbott Laboratories | Reagent and test kit for determining glycosylated hemoglobin |
| SE8305704D0 (sv) | 1983-10-18 | 1983-10-18 | Leo Ab | Cuvette |
| US4565688A (en) * | 1983-11-14 | 1986-01-21 | Technicon Instruments Corporation | Quaternized phthalocyanin derivatives |
| US5164598A (en) * | 1985-08-05 | 1992-11-17 | Biotrack | Capillary flow device |
| DK163194C (da) * | 1988-12-22 | 1992-06-22 | Radiometer As | Fremgangsmaade ved fotometrisk in vitro bestemmelse af en blodgasparameter i en blodproeve |
| SE466157B (sv) * | 1989-04-25 | 1992-01-07 | Migrata Uk Ltd | Saett att bestaemma glukoshalten hos helblod samt engaangskuvett foer detta |
| US5472671A (en) | 1989-04-26 | 1995-12-05 | Nilsson; Sven-Erik | Cuvette |
| US5286454A (en) | 1989-04-26 | 1994-02-15 | Nilsson Sven Erik | Cuvette |
| US5064282A (en) | 1989-09-26 | 1991-11-12 | Artel, Inc. | Photometric apparatus and method for measuring hemoglobin |
| JP3340129B2 (ja) * | 1991-06-19 | 2002-11-05 | アボツト・ラボラトリーズ | グリコヘモグロビンの迅速測定 |
| JP3010857B2 (ja) | 1991-11-19 | 2000-02-21 | 三菱化学株式会社 | ゼリー菓子 |
| DE4212280A1 (de) * | 1992-04-11 | 1993-10-14 | Boehringer Mannheim Gmbh | Asymmetrisch poröse Membranen |
| SE504193C2 (sv) * | 1995-04-21 | 1996-12-02 | Hemocue Ab | Kapillär mikrokyvett |
| SE9602237D0 (sv) | 1996-06-05 | 1996-06-05 | Bertil Nilsson | Colour indicator |
| US6106779A (en) * | 1997-10-02 | 2000-08-22 | Biosite Diagnostics, Inc. | Lysis chamber for use in an assay device |
| SE520341C2 (sv) | 1998-01-14 | 2003-06-24 | Hemocue Ab | Metod och förfarande för blandning i ett tunt vätskeskick |
| SE518539C2 (sv) * | 2000-06-28 | 2002-10-22 | Migrata U K Ltd | Sätt och kyvett för kvantitativ hemoglobinbestämning i outspätt helblod |
| WO2009105254A2 (en) * | 2008-02-20 | 2009-08-27 | Actioncam, Llc | Aerial camera system |
-
2000
- 2000-06-28 SE SE0002443A patent/SE518539C2/sv not_active IP Right Cessation
- 2000-08-16 DE DE20014053U patent/DE20014053U1/de not_active Expired - Lifetime
-
2001
- 2001-06-25 DK DK07123140.1T patent/DK1903327T4/da active
- 2001-06-25 DE DE60143553T patent/DE60143553D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-25 AT AT07123140T patent/ATE489614T1/de not_active IP Right Cessation
- 2001-06-25 ES ES01941435T patent/ES2322890T5/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-25 EP EP01941435.8A patent/EP1303746B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-25 ES ES07123140.1T patent/ES2356390T5/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-25 JP JP2002506081A patent/JP4913977B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2001-06-25 AT AT01941435T patent/ATE424553T1/de not_active IP Right Cessation
- 2001-06-25 CN CN01811956.5A patent/CN100480675C/zh not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-25 CA CA2414316A patent/CA2414316C/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-06-25 EP EP07123140.1A patent/EP1903327B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-25 BR BRPI0112078A patent/BRPI0112078B1/pt not_active IP Right Cessation
- 2001-06-25 DK DK01941435.8T patent/DK1303746T4/da active
- 2001-06-25 WO PCT/SE2001/001442 patent/WO2002001195A1/en active IP Right Grant
- 2001-06-25 RU RU2003102380/15A patent/RU2247393C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2001-06-25 AU AU2001274790A patent/AU2001274790B2/en not_active Ceased
- 2001-06-25 AU AU7479001A patent/AU7479001A/xx active Pending
- 2001-06-25 DE DE60137849T patent/DE60137849D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-10-10 US US09/972,918 patent/US6638769B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2002
- 2002-12-19 ZA ZA200210284A patent/ZA200210284B/en unknown
- 2002-12-27 NO NO20026240A patent/NO20026240L/no not_active Application Discontinuation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2247393C2 (ru) | Способ и кювета для проведения анализа | |
| AU2001274790A1 (en) | Analysis method and cuvette therefor | |
| CN106255887B (zh) | 用于定量尿液分析的尿液分析装置和干试剂 | |
| JP4515786B2 (ja) | 全血中の分析対象物の計測に対するヘマトクリットの影響を減らす方法ならびに当該方法で有用な試験キット及び試験用品 | |
| US4871678A (en) | Agent and process for the determination of calcium | |
| EP0517914A1 (en) | REAGENT AND CALCIUM DETERMINATION METHOD. | |
| US3000836A (en) | Stabilized whole blood standard and method of making the same | |
| JPH06103309B2 (ja) | 血中のヘモグロビン測定のための試薬および方法 | |
| CN110398586B (zh) | 果糖胺测定试剂盒 | |
| Gorham et al. | Evaluation of a new colorimetric assay for serum lithium | |
| Hall et al. | Fluoride and iodoacetate interfere with glucose determination with the Yellow Springs Glucose Analyzer. | |
| JP2002527076A (ja) | ヘモグロビン妨害を排除しつつアルカリホスファターゼを測定する方法 | |
| JPS6333661A (ja) | クレアチニン定量用試薬組成物 | |
| US20060177938A1 (en) | Method for analyzing protein and protein analysis reagent to be used therein | |
| JPS62102159A (ja) | 塩化物濃度測定用試験片 | |
| JP2004037431A (ja) | 臨床検体の測定における共存物質の影響阻止方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180626 |