RU2014129727A - Комбинации элементов экспрессионного вектора, новые способы получения клеток-продуцентов и их применение для рекомбинантного получения полипептидов - Google Patents

Комбинации элементов экспрессионного вектора, новые способы получения клеток-продуцентов и их применение для рекомбинантного получения полипептидов Download PDF

Info

Publication number
RU2014129727A
RU2014129727A RU2014129727A RU2014129727A RU2014129727A RU 2014129727 A RU2014129727 A RU 2014129727A RU 2014129727 A RU2014129727 A RU 2014129727A RU 2014129727 A RU2014129727 A RU 2014129727A RU 2014129727 A RU2014129727 A RU 2014129727A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
nucleic acid
acid encoding
expression
antibody
expression cassette
Prior art date
Application number
RU2014129727A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2639519C2 (ru
Inventor
Петер Михель ХЮЛЬСМАНН
Хендрик НЁТГЕН
Original Assignee
Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг filed Critical Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг
Publication of RU2014129727A publication Critical patent/RU2014129727A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2639519C2 publication Critical patent/RU2639519C2/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2851—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the lectin superfamily, e.g. CD23, CD72
    • C07K16/2854—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the lectin superfamily, e.g. CD23, CD72 against selectins, e.g. CD62
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
    • C07K16/468—Immunoglobulins having two or more different antigen binding sites, e.g. multifunctional antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
    • C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
    • C12N2830/36—Vector systems having a special element relevant for transcription being a transcription termination element
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
    • C12N2830/42—Vector systems having a special element relevant for transcription being an intron or intervening sequence for splicing and/or stability of RNA
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2840/00—Vectors comprising a special translation-regulating system
    • C12N2840/20—Vectors comprising a special translation-regulating system translation of more than one cistron
    • C12N2840/203—Vectors comprising a special translation-regulating system translation of more than one cistron having an IRES

Abstract

1. Способ селекции рекомбинантных клеток млекопитающих, включающий следующие этапы:a) трансфекция клеток млекопитающего экспрессионным вектором, содержащим- первую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ промотор hCMV, нуклеиновую кислоту, кодирующую легкую цепь антитела, bGH поли(А)-сигнальную последовательность и последовательность терминатора hGT,- вторую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ промотор hCMV, нуклеиновую кислоту, кодирующую тяжелую цепь антитела, bGH поли(А)-сигнальную последовательность и последовательность терминатора hGT, итаким образом, получение множества рекомбинантных клеток млекопитающего,b) селекция из множества рекомбинантных клеток млекопитающего (единичных) рекомбинантных клеток млекопитающего.2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела и/или нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела, содержит по меньшей мере один интрон.3. Способ по любому из пп. 1 или 2, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела и/или нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела, представляет собой кДНК.4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что первая экспрессионная кассета и вторая экспрессионная кассета расположены в одном направлении для селекции стабильно трансфецированных клеток.5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что первая экспрессионная кассета и вторая экспрессионная кассета расположены в разных направлениях для селекции кратковременно трансфецированных клеток.6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что экспрессионная плазмида дополнительно содержит селекционный маркер.7. Способ по п. 6, отличающийся тем, что экспрессионн

Claims (108)

1. Способ селекции рекомбинантных клеток млекопитающих, включающий следующие этапы:
a) трансфекция клеток млекопитающего экспрессионным вектором, содержащим
- первую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ промотор hCMV, нуклеиновую кислоту, кодирующую легкую цепь антитела, bGH поли(А)-сигнальную последовательность и последовательность терминатора hGT,
- вторую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ промотор hCMV, нуклеиновую кислоту, кодирующую тяжелую цепь антитела, bGH поли(А)-сигнальную последовательность и последовательность терминатора hGT, и
таким образом, получение множества рекомбинантных клеток млекопитающего,
b) селекция из множества рекомбинантных клеток млекопитающего (единичных) рекомбинантных клеток млекопитающего.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела и/или нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела, содержит по меньшей мере один интрон.
3. Способ по любому из пп. 1 или 2, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела и/или нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела, представляет собой кДНК.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что первая экспрессионная кассета и вторая экспрессионная кассета расположены в одном направлении для селекции стабильно трансфецированных клеток.
5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что первая экспрессионная кассета и вторая экспрессионная кассета расположены в разных направлениях для селекции кратковременно трансфецированных клеток.
6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что экспрессионная плазмида дополнительно содержит селекционный маркер.
7. Способ по п. 6, отличающийся тем, что экспрессионные кассеты и селекционный маркер расположены в одном направлении.
8. Способ по п. 6, отличающийся тем, что экспрессионные кассеты расположены в последовательности LC-HC-SM.
9. Способ по п. 1, отличающийся тем, что клетки млекопитающих выбраны из клеток CHO, HEK, BHK, NS0 и клеток SP2/0.
10. Способ по п. 1, отличающийся тем, что клетки млекопитающих представляют собой клетки CHO для селекции стабильно трансфецированных клеток.
11. Способ по п. 1, отличающийся тем, что клетки млекопитающих представляют собой клетки НЕК для селекции кратковременно трансфецированных клеток.
12. Способ получения антитела, включающий следующие этапы:
a) культивирование клеток млекопитающих, содержащих
- первую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ промотор hCMV, нуклеиновую кислоту, кодирующую легкую цепь антитела, bGH поли(А)-сигнальную последовательность и hGT последовательность терминатора,
- вторую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ промотор hCMV, нуклеиновую кислоту, кодирующую тяжелую цепь антитела, bGH поли(А)-сигнальную последовательность и hGT последовательность терминатора, и
b) получение антитела из клетки или культуральной среды.
13. Способ по п. 12, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела и/или нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела, содержит по меньшей мере один интрон.
14. Способ по любому из п.п. 12-13, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела и/или нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела, представляет собой кДНК.
15. Способ по п. 12, отличающийся тем, что первая экспрессионная кассета и вторая экспрессионная кассета расположены в одном направлении для стабильной продукции антитела.
16. Способ по п. 12, отличающийся тем, что первая экспрессионная кассета и вторая экспрессионная кассета расположены в разных направлениях для кратковременной продукции антитела.
17. Способ по п. 12, отличающийся тем, что экспрессионная плазмида дополнительно содержит селекционный маркер.
18. Способ по п. 17, отличающийся тем, что экспрессионные кассеты и селекционный маркер расположены в одном направлении.
19. Способ по п. 17, отличающийся тем, что экспрессионные кассеты расположены в последовательности LC-HC-SM.
20. Способ по п. 12, отличающийся тем, что клетки млекопитающих выбраны из клеток CHO, HEK, BHK, NS0 и клеток SP2/0.
21. Способ по п. 12, отличающийся тем, что клетки млекопитающих представляют собой клетки CHO для стабильной продукции антитела.
22. Способ по п. 12, отличающийся тем, что клетки млекопитающих представляют собой клетки HEK для кратковременной продукции антитела.
23. Экспрессионный вектор, содержащий
- первую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ промотор hCMV, нуклеиновую кислоту, кодирующую легкую цепь антитела, bGH поли(А)-сигнальную последовательность и hGT последовательность терминатора,
- вторую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ промотор hCMV, нуклеиновую кислоту, кодирующую тяжелую цепь антитела, bGH поли(А)-сигнальную последовательность и hGT последовательность терминатора.
24. Экспрессионный вектор по п. 23, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела, и/или нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела, содержит по меньшей мере один интрон.
25. Экспрессионный вектор по любому из пп. 23 или 24, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела и/или нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела, представляет собой кДНК.
26. Экспрессионный вектор по п. 23, отличающийся тем, что первая экспрессионная кассета и вторая экспрессионная кассета расположены в одном направлении для селекции стабильно трансфецированных клеток.
27. Экспрессионный вектор по п. 23, отличающийся тем, что первая экспрессионная кассета и вторая экспрессионная кассета расположены в разных направлениях для селекции кратковременно трансфецированных клеток.
28. Экспрессионный вектор по п. 23, отличающийся тем, что экспрессионная плазмида дополнительно содержит селекционный маркер.
29. Экспрессионный вектор по п. 28, отличающийся тем, что экспрессионные кассеты и селекционный маркер расположены в одном направлении.
30. Экспрессионный вектор по п. 28, отличающийся тем, что экспрессионные кассеты расположены в последовательности LC-HC-SM.
31. Способ селекции рекомбинантных клеток млекопитающих, содержащий следующие этапы:
a) трансфекция клеток млекопитающих при помощи экспрессионного вектора, содержащего
- первую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ промотор hEF1alpha, нуклеиновую кислоту, кодирующую легкую цепь антитела и bGH поли(А)-сигнальную последовательность,
- вторую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ промотор hEF1alpha, нуклеиновую кислоту, кодирующую тяжелую цепь антитела, bGH поли(А)-сигнальную последовательность, и
таким образом, получение множества рекомбинантных клеток млекопитающих,
b) селекция из множества рекомбинантных клеток млекопитающих (единичных) рекомбинантных клеток млекопитающих.
32. Способ по п. 31, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела и/или нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела, содержит по меньшей мере один интрон.
33. Способ по любому из пп. 31 или 32, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела и/или нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела, представляет собой кДНК.
34. Способ по п. 31, отличающийся тем, что первая экспрессионная кассета и вторая экспрессионная кассета расположены в одном направлении для селекции стабильно трансфецированных клеток.
35. Способ по п. 31, отличающийся тем, что первая экспрессионная кассета и вторая экспрессионная кассета расположены в разных направлениях для селекции кратковременно трансфецированных клеток.
36. Способ по п. 31, отличающийся тем, что экспрессионная плазмида дополнительно содержит селекционный маркер.
37. Способ по п. 36, отличающийся тем, что экспрессионные кассеты и селекционный маркер расположены в одном направлении.
38. Способ по п. 36, отличающийся тем, что экспрессионные кассеты расположены в последовательности LC-HC-SM.
39. Способ по п. 31, отличающийся тем, что промотор фактора элонгации человека 1 альфа содержит интрон А.
40. Способ по п. 31, отличающийся тем, что экспрессионный вектор не содержит какие-либо последовательностей терминатора транскрипции.
41. Способ по п. 40, отличающийся тем, что последовательность терминатора представляет собой последовательность hGT.
42. Способ по п. 31, отличающийся тем, что клетки млекопитающих выбраны из клеток CHO, HEK, BHK, NS0 и клеток SP2/0.
43. Способ по п. 42, отличающийся тем, что клетки млекопитающих представляют собой клетки CHO для селекции стабильно трансфецированных клеток.
44. Способ по п. 42, отличающийся тем, что клетки млекопитающих представляют собой клетки HEK для селекции кратковременно трансфецированных клеток.
45. Способ получения антитела, содержащий следующие этапы: а) культивирование клеток млекопитающих, содержащих
- первую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ промотор hEF1alpha, нуклеиновую кислоту, кодирующую легкую цепь антитела и bGH поли(А)-сигнальную последовательность,
- вторую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ промотор hEF1alpha, нуклеиновую кислоту, кодирующую тяжелую цепь антитела и bGH поли(А)-сигнальную последовательность, и
b) получение антитела из клеток или культуральной среды.
46. Способ по п. 45, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела и/или нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела, содержит по меньшей мере один интрон.
47. Способ по любому из пп. 45 или 46, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела и/или нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела, представляет собой кДНК.
48. Способ по п. 45, отличающийся тем, что первая экспрессионная кассета и вторая экспрессионная кассета расположены в одном направлении для селекции стабильно трансфецированных клеток.
49. Способ по п. 45, отличающийся тем, что первая экспрессионная кассета и вторая экспрессионная кассета расположены в разных направлениях для селекции кратковременно трансфецированных клеток.
50. Способ по п. 45, отличающийся тем, что экспрессионная плазмида дополнительно содержит селекционный маркер.
51. Способ по п. 50, отличающийся тем, что экспрессионные кассеты и селекционный маркер расположены в одном направлении.
52. Способ по п. 50, отличающийся тем, что экспрессионные кассеты расположены в последовательности LC-HC-SM.
53. Способ по п. 45, отличающийся тем, что промотор фактора элонгации 1 альфа человека содержит интрон А.
54. Способ по п. 45, отличающийся тем, что экспрессионный вектор не содержит каких-либо последовательностей терминатора транскрипции.
55. Способ по п. 54, отличающийся тем, что последовательность терминатора представляет собой последовательность hGT.
56. Способ по п. 45, отличающийся тем, что клетки млекопитающих выбраны из клеток CHO, HEK, BHK, NS0 и клеток SP2/0.
57. Способ по п. 56, отличающийся тем, что клетки млекопитающих представляют собой клетки CHO для стабильной продукции антитела.
58. Способ по п. 56, отличающийся тем, что клетки млекопитающих представляют собой клетки HEK для кратковременной продукции антитела.
59. Экспрессионный вектор, содержащий
- первую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ промотор hEF1alpha, нуклеиновую кислоту, кодирующую легкую цепь антитела и bGH поли(А)-сигнальную последовательность, и
- вторую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ промотор hEF1alpha, нуклеиновую кислоту, кодирующую тяжелую цепь антитела и bGH поли(А)-сигнальную последовательность.
60. Экспрессионный вектор по п. 59, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела и/или нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела, содержит по меньшей мере один интрон.
61. Экспрессионный вектор по любому из пп. 59 или 60, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела, и/или нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела, представляет собой кДНК.
62. Экспрессионный вектор по п. 59, отличающийся тем, что первая экспрессионная кассета и вторая экспрессионная кассета расположены в одном направлении для селекции стабильно трансфецированных клеток.
63. Экспрессионный вектор по п. 59, отличающийся тем, что первая экспрессионная кассета и вторая экспрессионная кассета расположены в разных направлениях для селекции кратковременно трансфецированных клеток.
64. Экспрессионный вектор по п. 59, отличающийся тем, что экспрессионная плазмида дополнительно содержит селекционный маркер.
65. Экспрессионный вектор по п. 64, отличающийся тем, что экспрессионные кассеты и селекционный маркер расположены в одном направлении.
66. Экспрессионный вектор по п. 64, отличающийся тем, что экспрессионные кассеты расположены в последовательности LC-HC-SM.
67. Экспрессионный вектор по п. 59, отличающийся тем, что промотор фактора элонгации 1 альфа человека содержит интрон А.
68. Экспрессионный вектор по п. 59, отличающийся тем, что экспрессионный вектор не содержит каких-либо последовательностей терминатора транскрипции.
69. Экспрессионный вектор по п. 68, отличающийся тем, что последовательность терминатора представляет собой последовательность hGT.
70. Применение экспрессионного вектора, содержащего
- первую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ первый промотор, нуклеиновую кислоту, кодирующую легкую цепь антитела, первую поли(А)-сигнальную последовательность и возможно последовательность первого терминатора транскрипции,
- вторую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ второй промотор, нуклеиновую кислоту, кодирующую тяжелую цепь антитела, вторую поли(А)-сигнальную последовательность и возможно последовательность второго терминатора транскрипции, и
- третью экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ третий промотор, нуклеиновую кислоту, придающую устойчивость к селекционному агенту, третью поли(А)-сигнальную последовательность и возможно последовательность третьего терминатора транскрипции, где три экспрессионные кассеты расположены в одном направлении и в последовательности: первая экспрессионная кассета-вторая экспрессионная кассета-третья экспрессионная кассета, для стабильной рекомбинантной продукции антитела в клетках млекопитающих.
71. Применение по п. 70, характеризующееся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела, и/или нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела, содержит по меньшей мере один интрон.
72. Применение по любому из пп. 70 или 71, характеризующееся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела, и/или нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела, представляет собой кДНК.
73. Применение по п. 70, характеризующееся тем, что первый и второй промотор представляют собой промотор hCMV, первая и вторая поли(А)-сигнальная последовательность представляют собой bGH поли(А)-сигнальную последовательность и последовательность терминатора транскрипции присутствует и представляет собой hGT последовательность терминатора.
74. Применение по п. 70, характеризующееся тем, что первый и второй промотор представляют собой промотор hEF1alpha, первая и вторая поли(А)-сигнальная последовательность представляют собой bGH поли(А)-сигнальную последовательность и экспрессионные кассеты не содержат последовательности терминатора транскрипции.
75. Применение по п. 70, характеризующееся тем, что клетки млекопитающих выбраны из клеток CHO, HEK, BHK, NS0 и клеток SP2/0.
76. Применение по п. 70, характеризующееся тем, что клетки млекопитающих представляют собой клетки CHO.
77. Экспрессионный вектор, содержащий
- первую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ первый промотор, нуклеиновую кислоту, кодирующую легкую цепь антитела, первую поли(А)-сигнальную последовательность и возможно последовательность первого терминатора транскрипции,
- вторую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ второй промотор, нуклеиновую кислоту, кодирующую тяжелую цепь антитела, вторую поли(А)-сигнальную последовательность и возможно последовательность второго терминатора транскрипции, и
- третью экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ третий промотор, нуклеиновую кислоту, придающую устойчивость к селекционному агенту, третью поли(А)-сигнальную последовательность и возможно последовательность третьего терминатора транскрипции,
где три экспрессионные кассеты расположены в одном направлении и в последовательности: первая экспрессионная кассета-вторая экспрессионная кассета-третья экспресионная кассета.
78. Экспрессионный вектор по п. 77, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела, и/или нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела, содержит по меньшей мере один интрон.
79. Экспрессионный вектор по любому из п.п. 77-78, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела, и/или нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела, представляют собой кДНК.
80. Экспрессионный вектор по п. 77, отличающийся тем, что первый и второй промотор представляют собой промотор hCMV, первая и вторая поли(А)-сигнальная последовательность представляют собой bGH поли(А)-сигнальную последовательность, и последовательность терминатора транскрипции присутствует и представляет собой hGT последовательность терминатора.
81. Экспрессионный вектор по п. 77, отличающийся тем, что первый и второй промотор представляют собой промотор hEF1alpha, первая и вторая поли(А)-сигнальные последовательности представляют собой bGH поли(А)-сигнальную последовательность, и экспрессионные кассеты не содержат последовательности терминатора транскрипции.
82. Применение экспрессионного вектора, содержащего
- первую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ первый промотор, нуклеиновую кислоту, кодирующую легкую цепь антитела, первую поли(А)-сигнальную последовательность и возможно последовательность первого терминатора транскрипции,
- вторую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ второй промотор, нуклеиновую кислоту, кодирующую тяжелую цепь антитела, вторую поли(А)-сигнальную последовательность и возможно последовательность второго терминатора транскрипции, и
- третью экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ третий промотор, нуклеиновую кислоту, придающую устойчивость к селекционному агенту, третью поли(А)-сигнальную последовательность и возможно последовательность третьего терминатора транскрипции,
где экспрессионные кассеты расположены в разных направлениях, таким образом, первая экспрессионная кассета и вторая экспрессионная кассета расположены в противоположном направлении для кратковременной рекомбинантной продукции антитела в клетках млекопитающих.
83. Применение по п. 82, характеризующееся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела и/или нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела, содержит по меньшей мере один интрон.
84. Применение по любому из пп. 82 или 83, характеризующееся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела и/или нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела, представляет собой кДНК.
85. Применение по п. 82, характеризующееся тем, что первый и второй промотор представляют собой промотор hCMV, первая и вторая поли(А)-сигнальная последовательность представляет собой bGH поли(А)-сигнальную последовательность, и последовательность терминатора транскрипции присутствует и представляет собой hGT последовательность терминатора.
86. Применение по п. 82, характеризующееся тем, что первый и второй промотор представляют собой промотор hEF1alpha, первая и вторая поли(А)-сигнальная последовательность представляют собой bGH поли(А)-сигнальную последовательность и экспрессионные кассеты не содержат последовательности терминатора транскрипции.
87. Применение по п. 82, характеризующееся тем, что клетки млекопитающих выбраны из клеток CHO, HEK, BHK, NS0 и клеток SP2/0.
88. Применение по п. 82, характеризующееся тем, что клетки млекопитающих представляют собой клетки HEK.
89. Экспрессионный вектор, содержащий
- первую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ первый промотор, нуклеиновую кислоту, кодирующую легкую цепь антитела, первую поли(А)-сигнальную последовательность и возможно последовательность первого терминатора транскрипции,
- вторую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ второй промотор, нуклеиновую кислоту, кодирующую тяжелую цепь антитела, вторую поли(А)-сигнальную последовательность и возможно последовательность второго терминатора транскрипции, и
- третью экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ третий промотор, нуклеиновую кислоту, придающую устойчивость к селекционному агенту, третью поли(А)-сигнальную последовательность и возможно последовательность третьего терминатора транскрипции,
где экспрессионные кассеты расположены в разных направлениях, таким образом, первая экспрессионная кассета и вторая экспрессионная кассета расположены в противоположных направлениях.
90. Экспрессионный вектор по п. 89, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела, и/или нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела, содержит по меньшей мере один интрон.
91. Экспрессионный вектор по любому из пп. 89 или 90, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь антитела, и/или нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь антитела, представляет собой кДНК.
92. Экспрессионный вектор по п. 89, отличающийся тем, что первый и второй промотор представляют собой промотор hCMV, первая и вторая поли(А)-сигнальная последовательность представляют собой bGH поли(А)-сигнальную последовательность, и последовательность терминатора транскрипции присутствует и представляет собой hGT последовательность терминатора.
93. Экспрессионный вектор по п. 89, отличающийся тем, что первый и второй промотор представляют собой промотор hEF1alpha, первая и вторая поли(А)-сигнальные последовательности представляют собой bGH поли(А)-сигнальную последовательность и экспрессионные кассеты не содержат последовательности терминатора транскрипции.
94. Экспрессионная плазмида, содержащая в направлении 5′-3′ последовательность промотора, нуклеиновую кислоту, кодирующую тяжелую цепь антитела или легкую цепь антитела, IRES элемент, нуклеиновую кислоту, кодирующую селекционный маркер и поли(А)-сигнальную последовательность, где IRES элемент представляет собой EMCV-IRES элемент.
95. Применение экспрессионной кассеты, содержащей в направлении 5′-3′ последовательность промотора, нуклеиновую кислоту, кодирующую тяжелую цепь антитела или легкую цепь антитела, IRES элемент, нуклеиновую кислоту, кодирующую селекционный маркер, и поли(А)-сигнальную последовательность для селекции клеток, продуцирующих антитело, где IRES элемент представляет собой EMCV-IRES элемент.
96. Способ селекции эукариотических клеток, экспрессирующих антитело, включающий следующие этапы:
- культивирование эукариотических клеток, содержащих i) экспрессионную плазмиду по п. 94 и ii) нуклеиновую кислоту, кодирующую соответствующую другую цепь антитела, не кодируемую экспрессионной плазмидой по п. 94,
- селекция клеток, экспрессирующих детектируемый полипептид.
97. Экспрессионная плазмида, содержащая в направлении 5′-3′ последовательность промотора, нуклеиновую кислоту, кодирующую легкую цепь антитела, IRES элемент, нуклеиновую кислоту, кодирующую тяжелую цепь антитела, и поли(А)-сигнальную последовательность, где IRES элемент представляет собой EV71-IRES элемент.
98. Применение экспрессионой плазмиды, содержащей в направлении 5′-3′ последовательность промотора, нуклеиновую кислоту, кодирующую легкую цепь антитела, IRES элемент, нуклеиновую кислоту, кодирующую тяжелую цепь антитела, и поли(А)-сигнальную последовательность для экспрессии антитела, где IRES элемент представляет собой EV71-IRES элемент.
99. Способ селекции эукариотических клеток, экспрессирующих антитело, включающий следующие этапы:
- культивирование эукариотических клеток, содержащих i) экспрессионную плазмиду по п. 97 и ii) нуклеиновую кислоту, кодирующую соответствующую другую цепь антитела, не кодируемую экспрессионной плазмидой по п. 97,
- селекция клеток, экспрессирующих детектируемый полипептид.
100. Экспрессионная плазмида по п. 94 или 97 или применение по любому из пп. 70, 82, 95 и 98 или способ по любому из пп. 1, 12, 31, 45, 96 и 99, отличающийся тем, что экспрессионный вектор содержит или
- первую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ промотор, нуклеиновую кислоту, кодирующую первую легкую цепь антитела, поли(А)-сигнальную последовательность и возможно последовательность терминатора,
- вторую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ промотор, нуклеиновую кислоту, кодирующую вторую легкую цепь антитела, поли(А)-сигнальную последовательность и возможно последовательность терминатора,
- третью экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ промотор, нуклеиновую кислоту, кодирующую первую тяжелую цепь антитела, поли(А)-сигнальную последовательность и возможно последовательность терминатора,
- четвертую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ промотор, нуклеиновую кислоту, кодирующую вторую тяжелую цепь антитела, поли(А)-сигнальную последовательность и возможно последовательность терминатора,
или
- первую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ промотор, нуклеиновую кислоту, кодирующую легкую цепь антитела, поли(А)-сигнальную последовательность и возможно последовательность терминатора,
- вторую экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ промотор, нуклеиновую кислоту, кодирующую первую тяжелую цепь антитела, поли(А)-сигнальную последовательность и возможно последовательность терминатора, и
- третью экспрессионную кассету, содержащую в направлении 5′-3′ промотор, нуклеиновую кислоту, кодирующую вторую тяжелую цепь антитела, поли(А)-сигнальную последовательность и возможно последовательность терминатора,
где легкая цепь антитела является общей легкой цепью для обеих тяжелых цепей.
101. Экспрессионная плазмида по п. 94 или 97 или применение по любому из пп. 70, 82, 95 и 98 или способ по любому из пп. 1, 12, 31, 45, 96 и 99, отличающийся тем, что экспрессионный вектор кодирует биспецифичное антитело.
102. Экспрессионная плазмида или применение или способ по п. 101, отличающийся тем, что биспецифичное антитело обладает первой специфичностью связывания или сайтом связывания, который специфично связывается с первым антигеном или первым эпитопом на антигене, и биспецифическое антитело обладает второй специфичностью связывания или сайтом связывания, который специфически связывается с вторым антигеном или вторым эпитопом антигена.
103. Экспрессионная плазмида или применение или способ по п. 100, отличающийся тем, что экспрессионный вектор содержит
- экспрессионную кассету легкой цепи антитела,
- экспрессионную кассету первой тяжелой цепи антитела,
- экспрессионную кассету второй тяжелой цепи антитела, и
- экспрессионную кассету селекционного маркера.
104. Экспрессионная плазмида или применение или способ по п. 100, отличающийся тем, что экспрессионный вектор содержит
- экспрессионную касету первой легкой цепи антитела,
- экспрессионную касету второй легкой цепи антитела,
- экспрессионную касету первой тяжелой цепи антитела,
- экспрессионную касету второй тяжелой цепи антитела, и
- экспрессионную касету селекционного маркера.
105. Экспрессионная плазмида или применение или способ по п. 100, отличающийся тем, что одна из экспрессионных кассет тяжелой цепи антитела кодирует тяжелую цепь антитела, содержащую hole-мутацию.
106. Экспрессионная плазмида или применение или способ по п. 100, отличающийся тем, что одна из экспрессионных кассет тяжелой цепи антитела кодирует тяжелую цепь антитела, содержащую knob-мутацию.
107. Экспрессионная плазмида или применение или способ по п. 100, отличающийся тем, что одна из экспрессионных кассет легкой цепи антитела кодирует вариант легкой цепи антитела, содержащей вариабельный домен легкой цепи антитела и СН1 домен тяжелой цепи антитела в качестве константного домена, и/или одна из экспрессионных кассет легкой цепи антитела кодирует легкую цепь антитела, содержащую вариабельный домен легкой цепи антитела и CL домен легкой цепи антитела в качестве константного домена.
108. Экспрессионная плазмида или применение или способ по п. 100, отличающийся тем, что одна из экспрессионных кассет тяжелой цепи антитела кодирует вариант тяжелой цепи антитела, содержащей в качестве первого константного домена антитела константный домен легкой цепи антитела (CL), и/или одна из экспрессионных кассет тяжелой цепи антитела кодирует тяжелую цепь антитела, содержащую в качестве первого константного домена СН1 домен тяжелой цепи антитела.
RU2014129727A 2011-12-22 2012-12-19 Комбинации элементов экспрессионного вектора, новые способы получения клеток-продуцентов и их применение для рекомбинантного получения полипептидов RU2639519C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP11195361 2011-12-22
EP11195361.8 2011-12-22
PCT/EP2012/076203 WO2013092743A2 (en) 2011-12-22 2012-12-19 Expression vector element combinations, novel production cell generation methods and their use for the recombinant production of polypeptides

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2017140661A Division RU2756910C2 (ru) 2011-12-22 2012-12-19 Комбинации элементов экспрессионного вектора, новые способы получения клеток-продуцентов и их применение для рекомбинантного получения полипептидов

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2014129727A true RU2014129727A (ru) 2016-02-20
RU2639519C2 RU2639519C2 (ru) 2017-12-21

Family

ID=47504950

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2014129727A RU2639519C2 (ru) 2011-12-22 2012-12-19 Комбинации элементов экспрессионного вектора, новые способы получения клеток-продуцентов и их применение для рекомбинантного получения полипептидов
RU2017140661A RU2756910C2 (ru) 2011-12-22 2012-12-19 Комбинации элементов экспрессионного вектора, новые способы получения клеток-продуцентов и их применение для рекомбинантного получения полипептидов

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2017140661A RU2756910C2 (ru) 2011-12-22 2012-12-19 Комбинации элементов экспрессионного вектора, новые способы получения клеток-продуцентов и их применение для рекомбинантного получения полипептидов

Country Status (14)

Country Link
US (2) US20160208284A1 (ru)
EP (2) EP2794651B1 (ru)
JP (4) JP6096802B2 (ru)
KR (4) KR102048556B1 (ru)
CN (4) CN113881702A (ru)
CA (2) CA2854249C (ru)
ES (1) ES2930215T3 (ru)
HK (1) HK1200848A1 (ru)
HR (1) HRP20221383T1 (ru)
MX (2) MX355624B (ru)
PL (1) PL2794651T3 (ru)
RU (2) RU2639519C2 (ru)
SG (3) SG11201403443WA (ru)
WO (1) WO2013092743A2 (ru)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11046975B2 (en) 2013-10-07 2021-06-29 Prestige Biopharma Pte. Ltd. Bicistronic expression vector for antibody expression and method for producing antibody using same
CN105255867A (zh) * 2015-10-19 2016-01-20 北京益生合生物科技有限公司 一种防止启动子在传代培养中逐渐灭活的基因序列及其应用
US11028410B2 (en) 2016-01-27 2021-06-08 Just-Evotec Biologics, Inc. Hybrid promoter and uses thereof
US11261462B2 (en) 2016-01-27 2022-03-01 Just-Evotec Biologics, Inc. Inducible expression from transposon-based vectors and uses
US11098310B2 (en) 2016-01-27 2021-08-24 Just-Evotec Biologics, Inc. Expression from transposon-based vectors and uses
EP3528852A4 (en) 2016-10-20 2020-06-03 Sangamo Therapeutics, Inc. METHODS AND COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF FABRY'S DISEASE
WO2018211529A1 (en) * 2017-05-19 2018-11-22 Council Of Scientific & Industrial Research A method for producing refolded recombinant humanized ranibizumab
JP7081139B2 (ja) * 2017-12-20 2022-06-07 東ソー株式会社 新規プロモーターおよびそれを含む発現ベクター
CA3206669A1 (en) 2021-01-29 2022-08-04 Mark A. BROWER Compositions of programmed death receptor 1 (pd-1) antibodies and methods of obtaining the compositions thereof
KR102640929B1 (ko) 2023-06-02 2024-02-27 (주) 멥스젠 미세생체조직시스템 형성 장치

Family Cites Families (92)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0173552B1 (en) 1984-08-24 1991-10-09 The Upjohn Company Recombinant dna compounds and the expression of polypeptides such as tpa
US5168062A (en) 1985-01-30 1992-12-01 University Of Iowa Research Foundation Transfer vectors and microorganisms containing human cytomegalovirus immediate-early promoter-regulatory DNA sequence
US4676980A (en) 1985-09-23 1987-06-30 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Target specific cross-linked heteroantibodies
US6548640B1 (en) 1986-03-27 2003-04-15 Btg International Limited Altered antibodies
JP3101690B2 (ja) 1987-03-18 2000-10-23 エス・ビィ・２・インコーポレイテッド 変性抗体の、または変性抗体に関する改良
EP0368684B2 (en) 1988-11-11 2004-09-29 Medical Research Council Cloning immunoglobulin variable domain sequences.
US5266491A (en) 1989-03-14 1993-11-30 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. DNA fragment and expression plasmid containing the DNA fragment
JP3051411B2 (ja) 1989-03-14 2000-06-12 持田製薬株式会社 新規ｄｎａならびにそれを含有する発現プラスミド
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
US5959177A (en) 1989-10-27 1999-09-28 The Scripps Research Institute Transgenic plants expressing assembled secretory antibodies
US6075181A (en) 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US6150584A (en) 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5770429A (en) 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
DK0564531T3 (da) 1990-12-03 1998-09-28 Genentech Inc Berigelsesfremgangsmåde for variantproteiner med ændrede bindingsegenskaber
US5571894A (en) 1991-02-05 1996-11-05 Ciba-Geigy Corporation Recombinant antibodies specific for a growth factor receptor
LU91067I2 (fr) 1991-06-14 2004-04-02 Genentech Inc Trastuzumab et ses variantes et dérivés immuno chimiques y compris les immotoxines
GB9114948D0 (en) 1991-07-11 1991-08-28 Pfizer Ltd Process for preparing sertraline intermediates
CA2116774C (en) 1991-09-19 2003-11-11 Paul J. Carter Expression in e. coli antibody fragments having at least a cysteine present as a free thiol. use for the production of bifunctional f(ab') 2 antibodies
US5587458A (en) 1991-10-07 1996-12-24 Aronex Pharmaceuticals, Inc. Anti-erbB-2 antibodies, combinations thereof, and therapeutic and diagnostic uses thereof
WO1993008829A1 (en) 1991-11-04 1993-05-13 The Regents Of The University Of California Compositions that mediate killing of hiv-infected cells
CA2372813A1 (en) 1992-02-06 1993-08-19 L.L. Houston Biosynthetic binding protein for cancer marker
RU2201449C2 (ru) * 1994-10-14 2003-03-27 Сембайозис Дженетикс Инк. Слитый полипептид, способный к целенаправленному переносу к масляному телу, химерная днк-контрукция, экспрессирующая кассета
US5789199A (en) 1994-11-03 1998-08-04 Genentech, Inc. Process for bacterial production of polypeptides
US5840523A (en) 1995-03-01 1998-11-24 Genetech, Inc. Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
US5869046A (en) 1995-04-14 1999-02-09 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
GB9603256D0 (en) 1996-02-16 1996-04-17 Wellcome Found Antibodies
US5888809A (en) 1997-05-01 1999-03-30 Icos Corporation Hamster EF-1α transcriptional regulatory DNA
WO1998058964A1 (en) 1997-06-24 1998-12-30 Genentech, Inc. Methods and compositions for galactosylated glycoproteins
US6040498A (en) 1998-08-11 2000-03-21 North Caroline State University Genetically engineered duckweed
WO1999022764A1 (en) 1997-10-31 1999-05-14 Genentech, Inc. Methods and compositions comprising glycoprotein glycoforms
US6610833B1 (en) 1997-11-24 2003-08-26 The Institute For Human Genetics And Biochemistry Monoclonal human natural antibodies
IL136544A0 (en) 1997-12-05 2001-06-14 Scripps Research Inst Humanization of murine antibody
DK1071700T3 (da) 1998-04-20 2010-06-07 Glycart Biotechnology Ag Glykosylerings-modifikation af antistoffer til forbedring af antistofafhængig cellulær cytotoksicitet
DK2270150T4 (da) 1999-04-09 2019-08-26 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd Fremgangsmåde til at kontrollere aktiviteten af immunologisk funktionelt molekyle.
US7125978B1 (en) 1999-10-04 2006-10-24 Medicago Inc. Promoter for regulating expression of foreign genes
MXPA02003456A (es) 1999-10-04 2002-10-23 Medicago Inc Metodo para regular la transcripcion de genes foraneos.
CA2388245C (en) 1999-10-19 2012-01-10 Tatsuya Ogawa The use of serum-free adapted rat cells for producing heterologous polypeptides
EP1240319A1 (en) 1999-12-15 2002-09-18 Genentech, Inc. Shotgun scanning, a combinatorial method for mapping functional protein epitopes
CN101289511A (zh) 2000-04-11 2008-10-22 杰南技术公司 多价抗体及其应用
KR100408844B1 (ko) 2000-07-29 2003-12-06 한국산업기술평가원 동물세포 발현벡터
PL218428B1 (pl) 2000-10-06 2014-12-31 Kyowa Hakko Kogyo Kk Komórka, sposoby wytwarzania przeciwciał, leki zawierające przeciwciała, komórka CHO i przeciwciało klasy IgG
US7064191B2 (en) 2000-10-06 2006-06-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Process for purifying antibody
US6946292B2 (en) 2000-10-06 2005-09-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity
US6596541B2 (en) 2000-10-31 2003-07-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
DE60131456T2 (de) 2000-11-30 2008-07-10 Medarex, Inc., Milpitas Transchromosomale transgen-nagetiere zur herstellung von humanen antikörpern
KR20100018071A (ko) 2001-08-03 2010-02-16 글리카트 바이오테크놀로지 아게 항체 의존적 세포 독성이 증가된 항체 글리코실화 변이체
US7053202B2 (en) 2001-10-19 2006-05-30 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Immunoglobulin DNA cassette molecules, monobody constructs, methods of production, and methods of use therefor
KR100988949B1 (ko) 2001-10-25 2010-10-20 제넨테크, 인크. 당단백질 조성물
JP2005535282A (ja) * 2001-11-16 2005-11-24 アイデック ファーマシューティカルズ コーポレイション 抗体のポリシストロニック発現
US20040093621A1 (en) 2001-12-25 2004-05-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Antibody composition which specifically binds to CD20
AU2003236018A1 (en) 2002-04-09 2003-10-20 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. METHOD OF ENHANCING ACTIVITY OF ANTIBODY COMPOSITION OF BINDING TO FcGamma RECEPTOR IIIa
JPWO2003084569A1 (ja) 2002-04-09 2005-08-11 協和醗酵工業株式会社 抗体組成物含有医薬
US7749753B2 (en) 2002-04-09 2010-07-06 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd Cells in which activity of the protein involved in transportation of GDP-fucose is reduced or lost
US20050031613A1 (en) 2002-04-09 2005-02-10 Kazuyasu Nakamura Therapeutic agent for patients having human FcgammaRIIIa
CA2481657A1 (en) 2002-04-09 2003-10-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells of which genome is modified
JPWO2003085118A1 (ja) 2002-04-09 2005-08-11 協和醗酵工業株式会社 抗体組成物の製造方法
NZ556507A (en) 2002-06-03 2010-03-26 Genentech Inc Synthetic antibody phage libraries
ES2347241T3 (es) 2002-12-16 2010-10-27 Genentech, Inc. Variantes de inmunoglobulina y sus utilizaciones.
CN100383244C (zh) * 2003-01-07 2008-04-23 西福根有限公司 用于生产重组多克隆蛋白质的方法
AU2004205631A1 (en) 2003-01-16 2004-08-05 Genentech, Inc. Synthetic antibody phage libraries
EP1688439A4 (en) 2003-10-08 2007-12-19 Kyowa Hakko Kogyo Kk HYBRID PROTEIN COMPOSITION
AU2004280065A1 (en) 2003-10-09 2005-04-21 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Process for producing antibody composition by using RNA inhibiting the function of alpha1,6-fucosyltransferase
US9296820B2 (en) 2003-11-05 2016-03-29 Roche Glycart Ag Polynucleotides encoding anti-CD20 antigen binding molecules with increased Fc receptor binding affinity and effector function
WO2005053742A1 (ja) 2003-12-04 2005-06-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. 抗体組成物を含有する医薬
CN1961003B (zh) 2004-03-31 2013-03-27 健泰科生物技术公司 人源化抗TGF-β抗体
US7785903B2 (en) 2004-04-09 2010-08-31 Genentech, Inc. Variable domain library and uses
SG172616A1 (en) 2004-04-13 2011-07-28 Hoffmann La Roche Anti-p-selectin antibodies
CN101001953B (zh) * 2004-06-17 2013-03-13 惠氏公司 具有三个完整转录单元的质粒和用于诱导hiv免疫反应的免疫原性组合物
BRPI0617688A2 (pt) * 2005-10-21 2011-06-07 Hoffmann La Roche método para expressão recombinante de um polipeptìdeo
EP2465870A1 (en) 2005-11-07 2012-06-20 Genentech, Inc. Binding polypeptides with diversified and consensus VH/VL hypervariable sequences
EP1973951A2 (en) 2005-12-02 2008-10-01 Genentech, Inc. Binding polypeptides with restricted diversity sequences
EP2016101A2 (en) 2006-05-09 2009-01-21 Genentech, Inc. Binding polypeptides with optimized scaffolds
DK2059533T3 (da) 2006-08-30 2013-02-25 Genentech Inc Multispecifikke antistoffer
JP2010512765A (ja) * 2006-12-22 2010-04-30 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー 選択方法
US20080226635A1 (en) 2006-12-22 2008-09-18 Hans Koll Antibodies against insulin-like growth factor I receptor and uses thereof
CA2681581A1 (en) * 2007-03-30 2008-10-09 Abbott Laboratories Recombinant expression vector elements (reves) for enhancing expression of recombinant proteins in host cells
EP1995309A1 (en) 2007-05-21 2008-11-26 Vivalis Recombinant protein production in avian EBx® cells
CN100592373C (zh) 2007-05-25 2010-02-24 群康科技(深圳)有限公司 液晶显示面板驱动装置及其驱动方法
AU2008271658B8 (en) * 2007-06-29 2013-07-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Promoter
US20090162359A1 (en) 2007-12-21 2009-06-25 Christian Klein Bivalent, bispecific antibodies
US9266967B2 (en) 2007-12-21 2016-02-23 Hoffmann-La Roche, Inc. Bivalent, bispecific antibodies
US8227577B2 (en) 2007-12-21 2012-07-24 Hoffman-La Roche Inc. Bivalent, bispecific antibodies
US8242247B2 (en) 2007-12-21 2012-08-14 Hoffmann-La Roche Inc. Bivalent, bispecific antibodies
DK2235064T3 (en) 2008-01-07 2016-01-11 Amgen Inc A process for the preparation of heterodimeric Fc molecules using electrostatic control effects
WO2010022961A1 (en) * 2008-08-28 2010-03-04 Novartis Ag Cell surface display of polypeptide isoforms by stop codon readthrough
GB0903207D0 (en) * 2009-02-25 2009-04-08 Ucb Pharma Sa Method for expressing multimeric proteins
CN102369215B (zh) 2009-04-02 2015-01-21 罗切格利卡特公司 包含全长抗体和单链Fab片段的多特异性抗体
PT2417156E (pt) 2009-04-07 2015-04-29 Roche Glycart Ag Anticorpos trivalentes, biespecíficos
SG176219A1 (en) 2009-05-27 2011-12-29 Hoffmann La Roche Tri- or tetraspecific antibodies
US9676845B2 (en) 2009-06-16 2017-06-13 Hoffmann-La Roche, Inc. Bispecific antigen binding proteins
US8703132B2 (en) 2009-06-18 2014-04-22 Hoffmann-La Roche, Inc. Bispecific, tetravalent antigen binding proteins

Also Published As

Publication number Publication date
KR20210031002A (ko) 2021-03-18
MX355624B (es) 2018-04-25
KR102166824B1 (ko) 2020-10-19
CA2854249A1 (en) 2013-06-27
JP2020054372A (ja) 2020-04-09
SG11201403443WA (en) 2014-07-30
JP2015500656A (ja) 2015-01-08
CN104011075A (zh) 2014-08-27
CA3149402A1 (en) 2013-06-27
HK1200848A1 (en) 2015-08-14
ES2930215T3 (es) 2022-12-07
CN107119073A (zh) 2017-09-01
HRP20221383T1 (hr) 2023-01-06
KR20190132702A (ko) 2019-11-28
EP2794651A2 (en) 2014-10-29
KR20200032240A (ko) 2020-03-25
MX2014007359A (es) 2014-08-01
RU2639519C2 (ru) 2017-12-21
EP3354660A1 (en) 2018-08-01
CN113896787A (zh) 2022-01-07
MX370481B (es) 2019-12-16
EP2794651B1 (en) 2022-09-21
KR102285184B1 (ko) 2021-08-03
RU2756910C2 (ru) 2021-10-06
CA2854249C (en) 2022-05-03
US20210024952A1 (en) 2021-01-28
RU2017140661A (ru) 2019-02-12
SG10201700169PA (en) 2017-02-27
BR112014014239A2 (pt) 2017-12-26
JP2017108753A (ja) 2017-06-22
CN104011075B (zh) 2017-06-06
JP7096806B2 (ja) 2022-07-06
KR20140106585A (ko) 2014-09-03
JP6417436B2 (ja) 2018-11-07
WO2013092743A3 (en) 2013-10-03
RU2017140661A3 (ru) 2021-08-09
WO2013092743A2 (en) 2013-06-27
JP6096802B2 (ja) 2017-03-15
CN113881702A (zh) 2022-01-04
JP2019030311A (ja) 2019-02-28
KR102048556B1 (ko) 2019-11-26
KR102229491B1 (ko) 2021-03-18
PL2794651T3 (pl) 2022-12-27
SG10201900915WA (en) 2019-03-28
US20160208284A1 (en) 2016-07-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2014129727A (ru) Комбинации элементов экспрессионного вектора, новые способы получения клеток-продуцентов и их применение для рекомбинантного получения полипептидов
JP2015500656A5 (ru)
Hu et al. The N-terminal transactivation domain confers target gene specificity of hypoxia-inducible factors HIF-1α and HIF-2α
Priceman et al. Co-stimulatory signaling determines tumor antigen sensitivity and persistence of CAR T cells targeting PSCA+ metastatic prostate cancer
Endler et al. A mechanism for sustained cellulose synthesis during salt stress
EP3623463B1 (en) Tale transcriptional activators
AU2018229482B2 (en) Treatment of fibrosis
Meder et al. A genome-wide association study identifies 6p21 as novel risk locus for dilated cardiomyopathy
Cheng et al. Annexin A1 is associated with gastric cancer survival and promotes gastric cancer cell invasiveness through the formyl peptide receptor/extracellular signal‐regulated kinase/integrin beta‐1‐binding protein 1 pathway
Kathiriya et al. Investigating the transcriptional control of cardiovascular development
DK2152872T3 (da) Fremgangsmåde til fremstilling af et rekombinant polyklonalt protein
JP2012115275A5 (ru)
JP2007529223A5 (ru)
RU2013102596A (ru) МЫШИ, ЭКСПРЕССИРУЮЩИЕ ЛЕГКУЮ ЦЕПЬ С ВАРМАБЕЛЬНОЙ ОБЛАСТЬЮ α-ЧЕЛОВЕКА И КОНСТАНТНОЙ ОБЛАСТЬЮ МЫШИ
Jin et al. Angiotensin II, focal adhesion kinase, and PRX1 enhance smooth muscle expression of lipoma preferred partner and its newly identified binding partner palladin to promote cell migration
Asano et al. Cyclic stretch enhances reorientation and differentiation of 3-D culture model of human airway smooth muscle
RU2015151626A (ru) Способ экспрессии
JP2019514417A5 (ru)
RU2019131113A (ru) Способ получения мультиспецифических антител
RU2017127208A (ru) Строение экспрессионного вектора, новые способы получения клеток-продуцентов и их применение для рекомбинантного получения полипептидов
JP2016517691A5 (ru)
Xiong et al. CircSETD3 (hsa_circ_0000567) inhibits proliferation and induces apoptosis in cholangiocarcinoma cells via downregulation of microRNA-421 expression
JP2016506239A5 (ru)
Demircioglu et al. Purification and structural analysis of SUN and KASH domain proteins
Keeton et al. The excision proteins of CTnDOT positively regulate the transfer operon