RU2011111747A - Гидролазы, кодирующие их нуклеиновые кислоты и способы их получения и применения - Google Patents

Гидролазы, кодирующие их нуклеиновые кислоты и способы их получения и применения Download PDF

Info

Publication number
RU2011111747A
RU2011111747A RU2011111747/10A RU2011111747A RU2011111747A RU 2011111747 A RU2011111747 A RU 2011111747A RU 2011111747/10 A RU2011111747/10 A RU 2011111747/10A RU 2011111747 A RU2011111747 A RU 2011111747A RU 2011111747 A RU2011111747 A RU 2011111747A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
oil
polypeptide
nucleic acid
seq
amino acid
Prior art date
Application number
RU2011111747/10A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2525675C2 (ru
Inventor
Кристофер Л. Г. ДЕЙТОН (US)
Кристофер Л. Г. Дейтон
Нельсон БАРТОН (US)
Нельсон Бартон
Аналиа БУЭНО (US)
Аналиа Буэно
Джослин Г. КУЭНКА (US)
Джослин Г. КУЭНКА
Тим ХИТЧМЭН (US)
Тим Хитчмэн
Кэти А. КЛАЙН (US)
Кэти А. Клайн
Джонатан ЛАЙОН (US)
Джонатан Лайон
Марк Л. МИЛЛЕР (US)
Марк Л. Миллер
Марк А. УОЛЛ (US)
Марк А. Уолл
Original Assignee
Бандж Ойлз, Инк. (Us)
Бандж Ойлз, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Бандж Ойлз, Инк. (Us), Бандж Ойлз, Инк. filed Critical Бандж Ойлз, Инк. (Us)
Publication of RU2011111747A publication Critical patent/RU2011111747A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2525675C2 publication Critical patent/RU2525675C2/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6436—Fatty acid esters
    • C12P7/6445—Glycerides
    • C12P7/6472—Glycerides containing polyunsaturated fatty acid [PUFA] residues, i.e. having two or more double bonds in their backbone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23D—EDIBLE OILS OR FATS, e.g. MARGARINES, SHORTENINGS, COOKING OILS
    • A23D7/00—Edible oil or fat compositions containing an aqueous phase, e.g. margarines
    • A23D7/02—Edible oil or fat compositions containing an aqueous phase, e.g. margarines characterised by the production or working-up
    • A23D7/04—Working-up
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23D—EDIBLE OILS OR FATS, e.g. MARGARINES, SHORTENINGS, COOKING OILS
    • A23D9/00—Other edible oils or fats, e.g. shortenings, cooking oils
    • A23D9/02—Other edible oils or fats, e.g. shortenings, cooking oils characterised by the production or working-up
    • A23D9/04—Working-up
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
    • C11B3/00—Refining fats or fatty oils
    • C11B3/003—Refining fats or fatty oils by enzymes or microorganisms, living or dead
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11C—FATTY ACIDS FROM FATS, OILS OR WAXES; CANDLES; FATS, OILS OR FATTY ACIDS BY CHEMICAL MODIFICATION OF FATS, OILS, OR FATTY ACIDS OBTAINED THEREFROM
    • C11C1/00—Preparation of fatty acids from fats, fatty oils, or waxes; Refining the fatty acids
    • C11C1/02—Preparation of fatty acids from fats, fatty oils, or waxes; Refining the fatty acids from fats or fatty oils
    • C11C1/04—Preparation of fatty acids from fats, fatty oils, or waxes; Refining the fatty acids from fats or fatty oils by hydrolysis
    • C11C1/045—Preparation of fatty acids from fats, fatty oils, or waxes; Refining the fatty acids from fats or fatty oils by hydrolysis using enzymes or microorganisms, living or dead
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11C—FATTY ACIDS FROM FATS, OILS OR WAXES; CANDLES; FATS, OILS OR FATTY ACIDS BY CHEMICAL MODIFICATION OF FATS, OILS, OR FATTY ACIDS OBTAINED THEREFROM
    • C11C3/00—Fats, oils, or fatty acids by chemical modification of fats, oils, or fatty acids obtained therefrom
    • C11C3/04—Fats, oils, or fatty acids by chemical modification of fats, oils, or fatty acids obtained therefrom by esterification of fats or fatty oils
    • C11C3/08—Fats, oils, or fatty acids by chemical modification of fats, oils, or fatty acids obtained therefrom by esterification of fats or fatty oils with fatty acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11C—FATTY ACIDS FROM FATS, OILS OR WAXES; CANDLES; FATS, OILS OR FATTY ACIDS BY CHEMICAL MODIFICATION OF FATS, OILS, OR FATTY ACIDS OBTAINED THEREFROM
    • C11C3/00—Fats, oils, or fatty acids by chemical modification of fats, oils, or fatty acids obtained therefrom
    • C11C3/12—Fats, oils, or fatty acids by chemical modification of fats, oils, or fatty acids obtained therefrom by hydrogenation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/16—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
    • C12N9/18—Carboxylic ester hydrolases (3.1.1)
    • C12N9/20—Triglyceride splitting, e.g. by means of lipase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6409—Fatty acids
    • C12P7/6418—Fatty acids by hydrolysis of fatty acid esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6409—Fatty acids
    • C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6409—Fatty acids
    • C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
    • C12P7/6431—Linoleic acids [18:2[n-6]]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6409—Fatty acids
    • C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
    • C12P7/6432—Eicosapentaenoic acids [EPA]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6409—Fatty acids
    • C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
    • C12P7/6434—Docosahexenoic acids [DHA]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6436—Fatty acid esters
    • C12P7/6445—Glycerides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6436—Fatty acid esters
    • C12P7/6445—Glycerides
    • C12P7/6454—Glycerides by esterification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6436—Fatty acid esters
    • C12P7/6445—Glycerides
    • C12P7/6458—Glycerides by transesterification, e.g. interesterification, ester interchange, alcoholysis or acidolysis

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Fats And Perfumes (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Bakery Products And Manufacturing Methods Therefor (AREA)

Abstract

1. Способ гидролиза масла или жира, включающий стадии: ! (а) получение композиции, содержащей масло или жир, где масло или жир можно гидролизовать посредством полипептида, обладающего гидролазной активностью, указанный полипептид выбран из группы, состоящей из выделенных, синтетических и рекомбинантных полипептидов, обладающих гидролазной активностью, и указанный полипептид или ! i. кодируется либо ! (1) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность нуклеиновой кислоты, обладающую по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №1 и включающую изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3 или таблице 4, где нуклеиновая кислота кодирует по меньшей мере один полипептид, обладающий гидролазной активностью, либо ! (2) нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, которая гибридизуется при строгих условиях с нуклеиновой кислотой, содержащей SEQ ID №1 и включающей изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3 или таблице 4, где нуклеиновая кислота кодирует полипептид, обладающий гидролазной активностью; или ! ii. обладает по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №2 на участке длиной по меньшей мере приблизительно 100 остатков и включает изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех аминокислотных остатков, указанные в таблице 3 или таблице 4, или ! iii. содержит аминок�

Claims (67)

1. Способ гидролиза масла или жира, включающий стадии:
(а) получение композиции, содержащей масло или жир, где масло или жир можно гидролизовать посредством полипептида, обладающего гидролазной активностью, указанный полипептид выбран из группы, состоящей из выделенных, синтетических и рекомбинантных полипептидов, обладающих гидролазной активностью, и указанный полипептид или
i. кодируется либо
(1) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность нуклеиновой кислоты, обладающую по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №1 и включающую изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3 или таблице 4, где нуклеиновая кислота кодирует по меньшей мере один полипептид, обладающий гидролазной активностью, либо
(2) нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, которая гибридизуется при строгих условиях с нуклеиновой кислотой, содержащей SEQ ID №1 и включающей изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3 или таблице 4, где нуклеиновая кислота кодирует полипептид, обладающий гидролазной активностью; или
ii. обладает по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №2 на участке длиной по меньшей мере приблизительно 100 остатков и включает изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех аминокислотных остатков, указанные в таблице 3 или таблице 4, или
iii. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка D61A; D61E; R72E; R72K; Е116А; E116Q; E116R; Е116Т; E116V; S133A; I151G; I151A; V163R; D164R или их сочетание, или
iv. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка I20L; V62S; G77P; V83C; D88H; Y113G; Е116Т; E116G; Н140K; K146S; I167S; L180E; Е194М; A211Q; S212Y; G215C; G215V; G215W; А218Н; A218S; V223A; А225М; A225Q или их комбинацию;
(b) добавление полипептида со стадии (а) в композицию, содержащую указанное масло или жир, в достаточном количестве и в достаточных условиях для того, чтобы вызвать гидролиз масла или жира, посредством чего гидролизуют масло или жир.
2. Способ по п.1, где указанное гидролизованное масло или жир обладает сниженным содержанием насыщенных жирных кислот относительно указанного масла или жира перед гидролизом.
3. Способ по п.п.1 или 2, где указанное гидролизованное масло или жир обладает сниженным содержанием транс-изомеров жирных кислот относительно указанного масла или жир перед гидролизом.
4. Способ по п.п.1 или 2, где указанное масло или жир содержит масло водорослей, животное масло, растительное масло, масло, обладающее измененным составом жирных кислот, масло с низким содержанием насыщенных жирных кислот, рыбий жир или их сочетание.
5. Способ по п.4, где указанное масло включает масло Neochloris oleoabundans, масло Scenedesmus dimorphus, масло Euglena gracilis, масло Phaeodactylum tricornutum, масло Pleurochrysis carterae, масло Prymnesium parvum, масло Tetraselmis chui, масло Tetraselmis suecica, масло Isochrysis galbana, масло Nannochloropsis salina, масло Botryococcus braunii, масло Dunaliella tertiolecta, масло видов Nannochloris, масло видов Spirulina, масло Chlorophycease, масло Bacilliarophy, масло канолы, касторовое масло, кокосовое масло, кориандровое масло, кукурузное масло, хлопковое масло, масло лесного ореха, масла других орехов, конопляное масло, льняное масло, масло пенника лугового, оливковое масло, пальмовое масло, косточковое пальмовое масло, арахисовое масло, рапсовое масло, рисовое масло, сафлоровое масло, масло сасанквы, сезамовое масло, соевое масло, масло подсолнечника, талловое масло, масло цубаки, сало, лярд, жир коровьего масла, куриный жир или смесь из любых указанных жиров или масел.
6. Способ по п.4, где измененная жирная кислота включает масло с высоким содержанием олеиновой кислоты, масло с низким содержанием линоленовой кислоты или их сочетание.
7. Способ по п.4, где масло с низким содержанием насыщенных жирных кислот включает масло канолы с высоким содержанием олеиновой кислоты, соевое масло с низким содержанием линоленовой кислоты, масло подсолнечника с высоким содержанием стеариновой кислоты или их сочетание.
8. Способ по п.4, где рыбий жир включает жир тихоокеанского талеихта, жир печени трески, жир хоплостета, жир сардины, жир сельди, жир менхадена или их сочетание.
9. Способ по п.1, где указанные жиры или масла содержат молекулы, содержащие триацилглицеридный остов, и где в ходе указанного гидролиза жирные кислоты удаляются по меньшей мере с некоторых триацилглицеридных остовов.
10. Способ по п.9, где указанные жирные кислоты содержат одну или несколько кислот из числа уксусной, масляной, капроновой, каприловой, ундекановой, лауриновой, миристиновой, пентадекановой, пальмитиновой, маргариновой, стеариновой, арахиновой или бегеновой кислоты.
11. Способ по п.9, где указанные жирные кислоты избирательно удаляются из положений Sn1, Sn2 или Sn3 на триацилглицеридном остове.
12. Способ по п.1, где указанное масло или жир присутствует в корме или продукте питания, и указанный гидролиз выполняют до употребления указанного корма или продукта питания животным или индивидуумом.
13. Способ по п.1, где указанное масло или жир содержит одно или несколько веществ из триацилглицерина, диацилглицерина или моноацилглицерина, и где указанный полипептид со стадии (а) приводят в контакт с указанным маслом или жиром в условиях, в которых указанный полипептид гидролизует один или несколько указанных триацилглицерина, диацилглицерина или моноацилглицерина.
14. Способ по п.13, где указанный гидролиз ведет к снижению количества триацилглицерина, диацилглицерина или моноацилглицерина в композиции.
15. Способ по п.1, где масло или жир содержит глицериновый эфир полиненасыщенной жирной кислоты.
16. Способ по п.1, где указанное гидролизованное масло или жир содержит любое одно или несколько веществ из масла или жира с низким содержанием насыщенных жирных кислот, масла или жира, не содержащего транс-изомеры жирных кислот, липида, содержащего незаменимые жирные кислоты, липида, содержащего мононенасыщенные жирные кислоты, липида, содержащего фосфохолин, липида, содержащего фосфосерин, липида, содержащего фитостерол, 1,3-диацилглицерида, 2-моноацилглицерида и триацилглицерида.
17. Способ по п.1, где указанная композиция включает диетическую композицию на основе молока или на растительной основе, где полипептид может гидролизовать масло или жир в композиции, посредством чего снижать в ней содержание жира.
18. Способ биокаталитического синтеза структурированного липида, который включает следующие стадии:
(а) получение полипептида, обладающего гидролазной активностью, причем указанный полипептид выбран из группы, состоящей из выделенных, синтетических и рекомбинантных полипептидов, обладающих гидролазной активностью, и указанный полипептид или
i. кодируется либо
(1) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность нуклеиновой кислоты, обладающую по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №1 и включающую изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3 или таблице 4, где нуклеиновая кислота кодирует по меньшей мере один полипептид, обладающий гидролазной активностью, либо
(2) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность, которая гибридизуется в строгих условиях с нуклеиновой кислотой, содержащей SEQ ID №1 и включающей изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3 или таблице 4, где нуклеиновая кислота кодирует полипептид, обладающий гидролазной активностью; или
ii. обладает по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №2 на участке длиной по меньшей мере приблизительно 100 остатков и содержит изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех аминокислотных остатков, указанные в таблице 3 или таблице 4, или
iii. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка D61A; D61E; R72E; R72K; Е116А; E116Q; E116R; Е116Т; E116V; S133A; I151G; I151A; V163R; D164R или их сочетание, или
iv. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка I20L; V62S; G77P; V83C; D88H; Y113G; Е116Т; E116G; Н140K; K146S; I167S; L180E; Е194М; A211Q; S212Y; G215C; G215V; G215W; А218Н; A218S; V223A; А225М; A225Q или их сочетание;
(b) получение композиции, содержащей триацилглицерид (ТАГ);
(c) приведение полипептида со стадии (а) в контакт с композицией со стадии (b) в условиях, в которых полипептид гидролитически отщепляет остаток карбоновой кислоты в положении Sn2 триацилглицерида (ТАГ), посредством чего получают 1,3-диацилглицерид (ДАГ);
(d) получение R1-сложного эфира;
(e) получение R1-специфической гидролазы, и
(f) приведение 1,3-ДАГ со стадии (с) в контакт с R1-сложным эфиром со стадии (d) и R1-специфической гидролазой со стадии (е) в условиях, в которых R1-специфическая гидролаза катализирует этерификацию положения Sn2, посредством чего получают структурированный липид.
19. Способ по п.18, где R1-специфическая гидролаза представляет собой Sn2-специфическую липазу.
20. Способ по п.18, где структурированный липид выбран из группы, состоящей из альтернативы масла какао (СВА), синтетического масла какао, натурального масла какао, 1,3-дипальмитоил-2-олеоилглицерина (POP), 1,3-дистеароил-2-олеоилглицерина (SOS), 1-пальмитоил-2-олеоил-3-стеароилглицерина (POS) и 1-олеоил-2,3-димиристоилглицерина (ОММ).
21. Способ по п.18, где указанный R1-сложный эфир содержит менее насыщенную жирную кислоту, чем указанный гидролитически отщепленный остаток карбоновой кислоты.
22. Способ по п.18, где указанный R1-сложный эфир может содержать одно или несколько веществ из омега-3 жирной кислоты, омега-6 жирной кислоты, омега-9 жирной кислоты, мононенасыщенной жирной кислоты, фосфогруппы, сложного эфира фитостерина или оризанола.
23. Способ по п.18, где указанный R1-сложный эфир содержит фрагмент, выбранный из группы, состоящей из α-линоленовой кислоты, стеаридоновой кислоты, эйкозапентаеновой кислоты, докозагексаеновой кислоты, γ-линоленовои кислоты, дигомо-γ-линоленовой кислоты, арахидоновой кислоты, олеиновой кислоты, пальмолеиновой кислоты, холина, серина, β-ситостерина, куместрола и диэтилстильбэстрола.
24. Способ по п.18, где указанный синтезированный структурированный липид обладает сниженным содержанием насыщенных жирных кислот относительно указанного триацилглицерида.
25. Способ по п.18, где указанный синтезированный структурированный липид обладает сниженным содержанием транс-изомеров жирных кислот относительно указанного триацилглицерида.
26. Способ биокаталитического синтеза структурированного липида, включающий следующие стадии:
(а) получение полипептида, обладающего гидролазной активностью, указанный полипептид выбран из группы, состоящей из выделенных, синтетических и рекомбинантных полипептидов, обладающих гидролазной активностью, и указанный полипептид или
i. кодируется либо
(1) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность нуклеиновой кислоты, обладающую по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №1 и включающую изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3 или таблице 4, где нуклеиновая кислота кодирует по меньшей мере один полипептид, обладающий гидролазной активностью, либо
(2) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность, которая гибридизуется при строгих условиях с нуклеиновой кислотой, включающей SEQ ID №1 и включающей изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3 или таблице 4, где нуклеиновая кислота кодирует полипептид, обладающий гидролазной активностью; или
ii. обладает по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №2 на участке длиной по меньшей мере приблизительно 100 остатков и включает изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех аминокислотных остатков, указанные в таблице 3 или таблице 4, или
iii. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка D61A; D61E; R72E; R72K; Е116А; E116Q; E116R; Е116Т; E116V; S133A; I151G; I151A; V163R; D164R или их комбинацию, или
iv. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка I20L; V62S; G77P; V83C; D88H; Y113G; Е116Т; E116G; H140K; K146S; I167S; L180E; Е194М; A211Q; S212Y; G215C; G215V; G215W; А218Н; A218S; V223A; А225М; A225Q или их сочетание;
(b) получение композиции, содержащей триацилглицерид (ТАГ);
(c) приведение полипептида со стадии (а) в контакт с композицией со стадии (b) в условиях, в которых полипептид гидролитически отщепляет остаток карбоновой кислоты в положении Sn1 или Sn3 триацилглицерида (ТАГ), посредством чего получают 1,2-ДАГ или 2,3-ДАГ; и
(d) промотирование перегруппировке остатка карбоновой кислоты в 1,2-ДАГ или 2,3-ДАГ со стадии (с) в кинетически контролируемых условиях, посредством чего получают 1,3-ДАГ.
27. Способ по п.26, включающий дополнительную стадию получения R1-сложного эфира и R1-специфической липазы и приведения 1,3-ДАГ со стадии (а) в контакт со R1-сложным эфиром и R1-специфической липазой в условиях, в которых R1-специфическая липаза катализирует этерификацию положения Sn2, посредством чего получают структурированный липид.
28. Способ по п.27, где указанная R1-специфическая липаза представляет собой Sn1- или Sn3-специфическую липазу.
29. Способ по п.27, где указанный структурированный липид выбран из группы, состоящей из альтернативы масла какао (СВА), синтетического масла какао, натурального масла какао, 1,3-дипальмитоил-2-олеоилглицерина (POP), 1,3-дистеароил-2- олеоилглицерина (SOS), 1-пальмитоил-2-олеоил-3-стеароилглицерина (POS) или 1-олеоил-2,3-димиристоилглицерина (ОММ).
30. Способ по п.27, где указанный R1-сложный эфир содержит менее насыщенную жирную кислоту, чем указанный гидролитически отщепленный остаток карбоновой кислоты.
31. Способ по п.30, где указанный R1-сложный эфир может содержать одно или несколько веществ из омега-3 жирной кислоты, омега-6 жирной кислоты, мононенасыщенной жирной кислоты, фосфогруппы, сложного эфира фитостерина и оризанола.
32. Способ по п.30, где указанный R1-сложный эфир содержит фрагмент, выбранный из группы, состоящей α-линоленовой кислоты, эйкозапентаеновой кислоты, докозагексаеновой кислоты, γ-линоленовой кислоты, дигомо-γ-линоленовой кислоты, арахидоновой кислоты, олеиновой кислоты, пальмолеиновой кислоты, холина, серина, β-ситостерина, куместрола, диэтилстильбэстрола и оризанола.
33. Способ по п.26, где стадия (d) дополнительно включает использование ионообменных смол.
34. Способ по п.26, где указанные кинетически контролируемые условия на стадии (d) включают неравновесные условия, ведущие к образованию конечного продукта, обладающего отношением 1,3-ДАГ к 2,3-ДАГ, превышающим 2:1.
35. Способ по п.27, где указанный синтезированный структурированный липид обладает сниженным содержанием насыщенных жирных кислот относительно указанного триацилглицерида.
36. Способ по п.27, где указанный синтезированный структурированный липид обладает сниженным содержанием транс-изомеров жирных кислот относительно указанного триацилглицерида.
37. Способ катализа реакции переэтерификации для получения новых триацилглицеридов, включающий следующие стадии:
(а) получение композиции, содержащей полипептид, обладающий 1,3-специфической липазной активностью, указанный полипептид выбран из группы, состоящей из выделенных, синтетических или рекомбинантных полипептидов, обладающих гидролазной активностью, и указанный полипептид или
i. кодируется либо
(1) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность нуклеиновой кислоты, обладающую по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №1 и включающую изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3 или таблице 4, где нуклеиновая кислота кодирует по меньшей мере один полипептид, обладающий гидролазной активностью, либо
(2) нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, которая гибридизуется при строгих условиях с нуклеиновой кислотой, включающей SEQ ID №1 и включающей изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3 или таблице 4, где нуклеиновая кислота кодирует полипептид, обладающий гидролазной активностью; или
ii. обладает по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №2 на участке длиной по меньшей мере приблизительно 100 остатков и включает изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех аминокислотных остатков, указанные в таблице 3 или таблице 4, или
iii. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка D61A; D61E; R72E; R72K; Е116А; E116Q; E116R; Е116Т; E116V; S133A; I151G; I151A; V163R; D164R или их комбинацию, или
iv. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка I20L; V62S; G77P; V83C; D88H; Y113G; Е116Т; E116G; H140K; K146S; I167S; L180E; Е194М; A211Q; S212Y; G215C; G215V; G215W; А218Н; A218S; V223A; А225М; A225Q или их комбинацию;
(b) получение смеси триацилглицеридов и свободных жирных кислот;
(c) обработка композиции со стадии (b) полипептидом в условиях, в которых полипептид может катализировать обмен свободных жирных кислот и ацильных групп триацилглицеридов, посредством чего получают новые триацилглицериды, обогащенные указанными жирными кислотами.
38. Способ по п.37, где указанная композиция со стадии (b) содержит 1,3-дипальмитоил-2-монолеин (POP) и новые триацилглицериды со стадии (с) содержат одно или два вещества из 1-пальмитоил-3-стеароил-2-монолеина (POSt) и 1,3-дистеароил-2-монолеина (StOSt).
39. Способ по п.37, где указанные новые триацилглицериды со стадии (с) обладают сниженным содержанием насыщенных жирных кислот относительно указанных триацилглицеридов со стадии (b).
40. Способ по п.37, где указанные новые триацилглицериды со стадии (с) обладают сниженным содержанием транс-изомеров жирных кислот относительно указанных триацилглицеридов со стадии (b).
41. Способ переэтерификации для получения продукта питания, корма или масла, включающий следующие стадии:
(a) получение реакционной смеси для переэтерификации, которая содержит вещество источника стеариновой кислоты, выбранное из группы, состоящей из стеариновой кислоты, сложных стеариновых моноэфиров низкомолекулярных одноатомных спиртов и их смесей,
(b) получение продукта питания, корма или масла, содержащего триацилглицерид;
(c) получение полипептида, обладающего гидролазной активностью, указанный полипептид выбран из группы, состоящей из выделенных, синтетических и рекомбинантных полипептидов, обладающих гидролазной активностью, и указанный полипептид или
i. кодируется либо
(1) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность нуклеиновой кислоты, обладающую по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №1 и включающую изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3 или таблице 4, где нуклеиновая кислота кодирует по меньшей мере один полипептид, обладающий гидролазной активностью, либо
(2) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность, которая гибридизуется в строгих условиях с нуклеиновой кислотой, содержащей SEQ ID №1 и включающей изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3 или таблице 4, где нуклеиновая кислота кодирует полипептид, обладающий гидролазной активностью; или
ii. обладает по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №2 на участке длиной по меньшей мере приблизительно 100 остатков и включает изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех аминокислотных остатков, указанные в таблице 3 или таблице 4, или
iii. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка D61A; D61E; R72E; R72K; Е116А; E116Q; E116R; Е116Т; E116V; S133A; I151G; I151A; V163R; D164R или их комбинацию, или
iv. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка I20L; V62S; G77P; V83C; D88H; Y113G; Е116Т; E116G; Н140K; K146S; I167S; L180E; Е194М; A211Q; S212Y; G215C; G215V; G215W; А218Н; A218S; V223A; А225М; A225Q или их комбинацию;
(d) переэтерификация вещества источника стеариновой кислоты и триацилглицерида из продукта питания, корма или масла и
(е) отделение компонентов свободных жирных кислот от переэтерифицированных глицеридных компонентов смеси для переэтерификации, чтобы предоставить переэтерифицированный продукт масла и смесь жирных кислот, содержащую жирные кислоты, сложные моноэфиры жирных кислот или их смеси, высвобожденные из продукта питания, корма или масла.
42. Способ по п.41, где указанную реакцию переэтерификации продолжают до достижения по существу равновесия сложноэфирных групп в положениях 1 и 3 глицеридного компонента и компонентов неглицеридных жирных кислот реакционной смеси.
43. Способ по п.41, включающий дополнительную стадию гидрогенизации смеси жирных кислот.
44. Способ по п.41, где указанные переэтерифицированные триацилглицериды обладают сниженным содержанием насыщенных жирных кислот относительно указанных триацилглицеридов со стадии (b).
45. Способ по п.41, где указанные переэтерифицированные триацилглицериды обладают сниженным содержанием транс-изомеров жирных кислот относительно указанных триацилглицеридов со стадии (b).
46. Способ получения ДАГ, включающий следующие стадии:
(a) получение композиции масел, содержащей некоторое количество ТАГ,
(b) получение полипептида, обладающего гидролазной активностью, указанный полипептид выбран из группы, состоящей из выделенных, синтетических и рекомбинантных полипептидов, обладающих гидролазной активностью, и указанный полипептид или
i. кодируется либо
(1) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность нуклеиновой кислоты, обладающую по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №1 и включающую изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3 или таблице 4, где нуклеиновая кислота кодирует по меньшей мере один полипептид, обладающий гидролазной активностью, либо
(2) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность, которая гибридизуется в строгих условиях с нуклеиновой кислотой, содержащей SEQ ID №1 и включающей изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3 или таблице 4, где нуклеиновая кислота кодирует полипептид, обладающий гидролазной активностью; или
ii. обладает по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №2 на участке длиной по меньшей мере приблизительно 100 остатков и включает изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех аминокислотных остатков, указанные в таблице 3 или таблице 4, или
iii. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка D61A; D61E; R72E; R72K; Е116А; E116Q; E116R; Е116Т; E116V; S133A; I151G; I151A; V163R; D164R или их комбинацию, или
iv. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка I20L; V62S; G77P; V83C; D88H; Y113G; Е116Т; E116G; H140K; K146S; I167S; L180E; Е194М; A211Q; S212Y; G215C; G215V; G215W; А218Н; A218S; V223A; А225М; A225Q или их комбинацию;
(с) приведение указанной композиции масел со стадии (а) в контакт с указанным полипептидом со стадии (b) в условиях, достаточных для гидролитического отщепления полипептидом остатка карбоновой кислоты на ТАГ для получения ДАГ.
47. Способ по п.46, где указанный полипептид является Sn2-специфическим и указанный ДАГ представляет собой 1,3-ДАГ.
48. Способ по п.46, где указанный полипептид является Sn1- или Sn3-специфическим и указанный ДАГ представляет собой 1,2-ДАГ или 2,3-ДАГ.
49. Способ по п.46, где указанный остаток карбоновой кислоты содержит насыщенную жирную кислоту, а указанный ДАГ представляет собой менее насыщенный жир, чем указанный ТАГ.
50. Способ по п.46, где указанный остаток карбоновой кислоты содержит транс-изомер жирной кислоты, а указанный ДАГ представляет собой жир со сниженным содержанием транс-изомеров жирных кислот относительно указанного ТАГ.
51. Композиция, содержащая масло или жир, гидролизованные способом по п.1.
52. Композиция по п.51, где указанная композиция выбрана из маргарина, разрыхлителя, майонеза, заправки, которую можно наливать, заправки, которую можно черпать ложкой, соуса, маринада, приправы, масла для смазывания разбрызгиванием, кулинарного масла, масла для жарки, масла для салата, кондитерских изделий, альтернативы масла какао, заменителя масла какао, заместителя масла какао, эквивалента масла какао, продукта питания, пищевой добавки или любого производственного промежуточного соединения для любого указанного выше.
53. Способ гидролиза масла или жир, включающий реакцию масла или жира с ферментом пальмитазой в присутствие эмульгатора, ГЛБ которого превышает 12, где фермент пальмитазу кодирует последовательность нуклеиновой кислоты, обладающая по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №1 и включающая i) нуклеотидную замену (или ее эквивалент), кодирующую аминокислотный остаток в положении 95 (или в его эквиваленте), как указано в таблице 9, ii) нуклеотидные замены (или их эквиваленты), кодирующие аминокислотные остатки в положениях 85 и 172 (или в их эквивалентах), как указано в таблице 15, iii) нуклеотидную замену (или ее эквивалент), кодирующую аминокислотный остаток в положении 83 (или в его эквиваленте), как указано в таблице 16, и iv) следующие молчащие мутации 35GCT, 102GTT, 108AGT, 117СТТ, 126AGG, 133ТСТ и 188ACG.
54. Способ по п.53, где последовательность нуклеиновой кислоты представляет собой последовательность SEQ ID №1 и включает i) нуклеотидную замену (или ее эквивалент), кодирующую аминокислотный остаток в положении 95 (или в его эквиваленте), как указано в таблице 9, ii) нуклеотидные замены (или их эквиваленты), кодирующие аминокислотные остатки в положениях 85 и 172 (или в их эквивалентах), как указано в таблице 15, iii) нуклеотидную замену (или ее эквивалент), кодирующую аминокислотный остаток в положении 83 (или в его эквиваленте), как указано в таблице 16, и iv) следующие молчащие мутации 35GCT, 102GTT, 108AGT, 117СТТ, 126AGG, 133ТСТ и 188ACG.
55. Способ по п.53, где эмульгатор выбран из олеата натрия, олеата калия, линолеата натрия, линолеата калия, линолената натрия, линолената калия, лауреата натрия, лауреата калия, стеарата натрия, стеарата калия, пальмитата натрия, пальмитата калия, натриевой соли жирной кислоты пальмового масла, калиевой соли жирной кислоты пальмового масла или их комбинации.
56. Способ по п.53, где реакцию проводят при температуре приблизительно от 20 до 70°С.
57. Способ по п.53, где реакционная смесь содержит приблизительно от 1 до 20% воды от общей массы реагентов.
58. Способ по п.53, где реакция дает масло или жир, содержащий приблизительно 5% пальмитата от общей массы масла или жира.
59. Способ по п.53, где реакция дает масло или жир, содержащий приблизительно 1% пальмитата от общей массы масла или жира.
60. Способ по п.53, где масло представляет собой рафинированное масло.
61. Способ по п.53, где реакция дополнительно включает добавление фосфолипида.
62. Способ гидролиза масла или жира, включающий следующие стадии:
(а) получение композиции, содержащей масло или жир, где масло или жир можно гидролизовать посредством полипептида, обладающего гидролазной активность, указанный полипептид выбран из группы, состоящей из выделенных, синтетических и рекомбинантных полипептидов, обладающих гидролазной активностью, и указанный полипептид или
i. кодируется либо
(1) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность нуклеиновой кислоты, обладающую по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №1 и включающую изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3, таблице 4, таблице 9, таблице 10, таблице 11, таблице 16 или таблице 23, где нуклеиновая кислота кодирует по меньшей мере один полипептид, обладающий гидролазной активностью, либо
(2) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность, которая гибридизуется в строгих условиях с нуклеиновой кислотой, содержащей SEQ ID №1 и включающей изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3, таблице 4, таблице 9, таблице 10, таблице 11, таблице 16 или таблице 23, где нуклеиновая кислота кодирует полипептид, обладающий гидролазной активностью; или
ii. обладает по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №2 на участке длиной по меньшей мере приблизительно 100 остатков и включает изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех аминокислотных остатков, указанные в таблице 3, таблице 4, таблице 9, таблице 10, таблице 11, таблице 16 или таблице 23, или
iii. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка D61A; D61E; R72E; R72K; Е116А; E116Q; E116R; Е116Т; E116V; S133A; I151G; I151A; V163R; D164R или их комбинацию, или
iv. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка I20L; V62S; G77P; V83C; D88H; Y113G; Е116Т; E116G; Н140K; K146S; I167S; L180E; Е194М; A211Q; S212Y; G215C; G215V; G215W; А218Н; A218S; V223A; А225М; A225Q или их комбинацию;
(b) добавление полипептида со стадии (а) в композицию, содержащую указанное масло или жир, в достаточном количестве и в достаточных условиях для того, чтобы вызвать гидролиз масла или жира, посредством чего гидролизуют масло или жир.
63. Способ биокаталитического синтеза структурированного липида, включающий следующие стадии:
(а) получение полипептида, обладающего гидролазной активностью, причем указанный полипептид выбран из группы, состоящей из выделенных, синтетических и рекомбинантных полипептидов, обладающих гидролазной активностью, и указанный полипептид или
i. кодируется либо
(1) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность нуклеиновой кислоты, обладающую по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №1 и включающую изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3, таблице 4, таблице 9, таблице 10, таблице 11, таблице 16 или таблице 23, где нуклеиновая кислота кодирует по меньшей мере один полипептид, обладающий гидролазной активностью, либо
(2) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность, которая гибридизуется в строгих условиях с нуклеиновой кислотой, содержащей SEQ ID №1 и включающей изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3, таблице 4, таблице 9, таблице 10, таблице 11, таблице 16 или таблице 23, где нуклеиновая кислота кодирует полипептид, обладающий гидролазной активностью; или
ii. обладает по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №2 на участке длиной по меньшей мере приблизительно 100 остатков и включает изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех аминокислотных остатков, указанные в таблице 3, таблице 4, таблице 9, таблице 10, таблице 11, таблице 16 или таблице 23, или
iii. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка D61A; D61E; R72E; R72K; Е116А; E116Q; E116R; Е116Т; E116V; S133A; I151G; I151A; V163R; D164R или их комбинацию, или
iv. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка I20L; V62S; G77P; V83C; D88H; Y113G; Е116Т; E116G; H140K; K146S; I167S; L180E; Е194М; A211Q; S212Y; G215C; G215V; G215W; А218Н; A218S; V223A; А225М; A225Q или их комбинацию;
(b) получение композиции, содержащей триацилглицерид (ТАГ);
(c) приведение полипептида со стадии (а) в контакт с композицией со стадии (b) в условиях, в которых полипептид гидролитически отщепляет остаток карбоновой кислоты в положении Sn2 триацилглицерида (ТАГ), посредством чего получают 1,3-диацилглицерид (ДАГ);
(d) получение R1-сложного эфира;
(e) получение R1-специфической гидролазы, и
(f) приведение 1,3-ДАГ со стадии (с) в контакт с R1-сложным эфиром со стадии (d) и R1-специфической гидролазой со стадии (е) в условиях, в которых R1-специфическая гидролаза катализирует этерификацию положения Sn2, посредством чего получают структурированный липид.
64. Способ биокаталитического синтеза структурированного липида, включающий следующие стадии:
(а) получение полипептида, обладающего гидролазной активностью, указанный полипептид выбран из группы, состоящей из выделенных, синтетических и рекомбинантных полипептидов, обладающих гидролазной активностью, и указанный полипептид или
i. кодируется либо
(1) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность нуклеиновой кислоты, обладающую по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №1 и включающую изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3, таблице 4, таблице 9, таблице 10, таблице 11, таблице 16 или таблице 23, где нуклеиновая кислота кодирует по меньшей мере один полипептид, обладающий гидролазной активностью, либо
(2) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность, которая гибридизуется в строгих условиях с нуклеиновой кислотой, содержащей SEQ ID №1 и включающей изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3, таблице 4, таблице 9, таблице 10, таблице 11, таблице 16 или таблице 23, где нуклеиновая кислота кодирует полипептид, обладающий гидролазной активностью; или
ii. обладает по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №2 на участке длиной по меньшей мере приблизительно 100 остатков и включает изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех аминокислотных остатков, указанные в таблице 3, таблице 4, таблице 9, таблице 10, таблице 11, таблице 16 или таблице 23, или
iii. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка D61A; D61E; R72E; R72K; Е116А; E116Q; E116R; Е116Т; E116V; S133A; I151G; I151A; V163R; D164R или их комбинацию, или
iv. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка I20L; V62S; G77P; V83C; D88H; Y113G; Е116Т; E116G; H140K; K146S; I167S; L180E; Е194М; A211Q; S212Y; G215C; G215V; G215W; А218Н; A218S; V223A; А225М; A225Q или их комбинацию;
(b) получение композиции, содержащей триацилглицерид (ТАГ);
(c) приведение полипептида со стадии (а) в контакт с композицией со стадии (b) в условиях, в которых полипептид гидролитически отщепляет остаток карбоновой кислоты в положении Sn1 или Sn3 триацилглицерида (ТАГ), посредством чего получают 1,2-ДАГ или 2,3-ДАГ; и
(а) промотирование перегруппировке остатка карбоновой кислоты в 1,2-ДАГ или 2,3-ДАГ со стадии (с) в кинетически контролируемых условиях, посредством чего получают 1,3-ДАГ.
65. Способ катализа реакции переэтерификации для получения новых триацилглицеридов, включающий следующие стадии:
(а) получение композиции, содержащей полипептид, обладающий 1,3-специфической липазной активностью, указанный полипептид выбран из группы, состоящей из выделенных, синтетических или рекомбинантных полипептидов, обладающих гидролазной активностью, и указанный полипептид или
i. кодируется либо
(1) нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность нуклеиновой кислоты, обладающую по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №1 и включающую изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3, таблице 4, таблице 9, таблице 10, таблице 11, таблице 16 или таблице 23, где нуклеиновая кислота кодирует по меньшей мере один полипептид, обладающий гидролазной активностью, либо
(2) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность, которая гибридизуется в строгих условиях с нуклеиновой кислотой, содержащей SEQ ID №1 и включающей изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3, таблице 4, таблице 9, таблице 10, таблице 11, таблице 16 или таблице 23, где нуклеиновая кислота кодирует полипептид, обладающий гидролазной активностью; или
ii. обладает по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №2 на участке, длиной по меньшей мере приблизительно 100 остатков и включает изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех аминокислотных остатков, указанные в таблице 3, таблице 4, таблице 9, таблице 10, таблице 11, таблице 16 или таблице 23, или
iii. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка D61A; D61E; R72E; R72K; Е116А; E116Q; E116R; Е116Т; E116V; S133A; I151G; I151A; V163R; D164R или их комбинацию, или
iv. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка I20L; V62S; G77P; V83C; D88H; Y113G; Е116Т; E116G; H140K; K146S; I167S; L180E; Е194М; A211Q; S212Y; G215C; G215V; G215W; А218Н; A218S; V223A; А225М; A225Q или их комбинацию;
(b) получение смеси триацилглицеридов и свободных жирных кислот;
(c) обработка композиции со стадии (b) полипептидом в условиях, в которых полипептид может катализировать обмен свободных жирных кислот и ацильных групп триацилглицеридов, посредством чего получают новые триацилглицериды, обогащенные указанными жирными кислотами.
66. Способ переэтерификации для получения продукта питания, корма или масла, включающий следующие стадии:
(a) получение реакционной смеси для переэтерификации, которая содержит вещество источника стеариновой кислоты, выбранное из группы, состоящей из стеариновой кислоты, сложных стеариновых моноэфиров низкомолекулярных одноатомных спиртов и их смесей,
(b) получение продукта питания, корма или масла, содержащего триацилглицерид;
(c) получение полипептида, обладающего гидролазной активностью, указанный полипептид выбран из группы, состоящей из выделенных, синтетических и рекомбинантных полипептидов, обладающих гидролазной активностью, и указанный полипептид или
i. кодируется либо
(1) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность нуклеиновой кислоты, обладающую по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №1 и включающую изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3, таблице 4, таблице 9, таблице 10, таблице 11, таблице 16 или таблице 23, где нуклеиновая кислота кодирует по меньшей мере один полипептид, обладающий гидролазной активностью, либо
(2) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность, которая гибридизуется в строгих условиях с нуклеиновой кислотой, содержащей SEQ ID №1 и включающей изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3, таблице 4, таблице 9, таблице 10, таблице 11, таблице 16 или таблице 23, где нуклеиновая кислота кодирует полипептид, обладающий гидролазной активностью; или
ii. обладает по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №2 на участке длиной по меньшей мере приблизительно 100 остатков и включает изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех аминокислотных остатков, указанные в таблице 3, таблице 4, таблице 9, таблице 10, таблице 11, таблице 16 или таблице 23, или
iii. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка D61A; D61E; R72E; R72K; Е116А; E116Q; E116R; Е116Т; E116V; S133A; I151G; I151A; V163R; D164R или их комбинацию, или
iv. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка I20L; V62S; G77P; V83C; D88H; Y113G; Е116Т; E116G; H140K; K146S; I167S; L180E; Е194М; A211Q; S212Y; G215C; G215V; G215W; А218Н; A218S; V223A; А225М; A225Q или их комбинацию;
(d) переэтерификация вещества источника стеариновой кислоты и триацилглицерида продукта питания, корма или масла и
(e) отделение компонентов свободных жирных кислот от переэтерифицированных глицеридных компонентов смеси для переэтерификации, чтобы предоставить переэтерифицированный продукт масла и смесь жирных кислот, содержащую жирные кислоты, сложные моноэфиры жирных кислот или их смеси, высвобожденные из продукта питания, корма или масла.
67. Способ получения ДАГ, включающий следующие стадии:
(a) получение композиции масел, содержащей некоторое количество ТАГ,
(b) получение полипептида, обладающего гидролазной активностью, указанный полипептид выбран из группы, состоящей из выделенных, синтетических и рекомбинантных полипептидов, обладающих гидролазной активностью, и указанный полипептид или
i. кодируется либо
(1) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность нуклеиновой кислоты, обладающую по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №1 и включающую изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3, таблице 4, таблице 9, таблице 10, таблице 11, таблице 16 или таблице 23, где нуклеиновая кислота кодирует по меньшей мере один полипептид, обладающий гидролазной активностью, либо
(2) нуклеиновой кислотой, содержащей последовательность, которая гибридизуется в строгих условиях с нуклеиновой кислотой, содержащей SEQ ID №1 и включающей изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех остатков оснований, указанные в таблице 3, таблице 4, таблице 9, таблице 10, таблице 11, таблице 16 или таблице 23, где нуклеиновая кислота кодирует полипептид, обладающий гидролазной активностью; или
ii. обладает по меньшей мере 50% идентичностью последовательностей с SEQ ID №2 на участке длиной по меньшей мере приблизительно 100 остатков и включает изменения одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти, одиннадцати или двенадцати или более или всех аминокислотных остатков, указанные в таблице 3, таблице 4, таблице 9, таблице 10, таблице 11, таблице 16 или таблице 23, или
iii. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка D61A; D61E; R72E; R72K; Е116А; E116Q; E116R; Е116Т; E116V; S133A; I151G; I151A; V163R; D164R или их комбинацию, или
iv. содержит аминокислотную последовательность, как указано в SEQ ID №2, но также включает по меньшей мере одну модификацию аминокислотного остатка I20L; V62S; G77P; V83C; D88H; Y113G; Е116Т; E116G; H140K; K146S; I167S; L180E; Е194М; A211Q; S212Y; G215C; G215V; G215W; А218Н; A218S; V223A; А225М; A225Q или их комбинацию;
(с) приведение указанной композиции масел со стадии (а) в контакт с указанным полипептидом со стадии (b) в условиях, достаточных для гидролитического отщепления полипептидом остатка карбоновой кислоты на ТАГ для получения ДАГ.
RU2011111747/10A 2008-08-29 2009-08-28 Гидролазы, кодирующие их нуклеиновые кислоты и способы их получения и применения RU2525675C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US12/202,204 US8153391B2 (en) 2008-08-29 2008-08-29 Hydrolases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
US12/202,204 2008-08-29
PCT/US2009/004904 WO2010024924A2 (en) 2008-08-29 2009-08-28 Hydrolases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2011111747A true RU2011111747A (ru) 2012-10-10
RU2525675C2 RU2525675C2 (ru) 2014-08-20

Family

ID=41664688

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2011111747/10A RU2525675C2 (ru) 2008-08-29 2009-08-28 Гидролазы, кодирующие их нуклеиновые кислоты и способы их получения и применения

Country Status (13)

Country Link
US (6) US8153391B2 (ru)
EP (1) EP2329032B1 (ru)
CN (1) CN102325891B (ru)
AR (2) AR073236A1 (ru)
BR (1) BRPI0917220B1 (ru)
CA (1) CA2735265C (ru)
ES (1) ES2484919T3 (ru)
MX (1) MX2011002226A (ru)
MY (1) MY162662A (ru)
PL (1) PL2329032T3 (ru)
RU (1) RU2525675C2 (ru)
UA (1) UA101214C2 (ru)
WO (1) WO2010024924A2 (ru)

Families Citing this family (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10307167B2 (en) 2012-12-14 2019-06-04 Corquest Medical, Inc. Assembly and method for left atrial appendage occlusion
US10813630B2 (en) 2011-08-09 2020-10-27 Corquest Medical, Inc. Closure system for atrial wall
US10314594B2 (en) 2012-12-14 2019-06-11 Corquest Medical, Inc. Assembly and method for left atrial appendage occlusion
BR112014031377B1 (pt) 2012-06-14 2020-09-01 Bunge Global Innovation Llc Processo para a produção de óleos saturados baixos
US20140142689A1 (en) 2012-11-21 2014-05-22 Didier De Canniere Device and method of treating heart valve malfunction
US9566443B2 (en) 2013-11-26 2017-02-14 Corquest Medical, Inc. System for treating heart valve malfunction including mitral regurgitation
CN106591386A (zh) * 2014-07-07 2017-04-26 嘉必优生物技术（武汉）股份有限公司 含有2‑棕榈酸甘油酯的组合物的制备方法
US10842626B2 (en) 2014-12-09 2020-11-24 Didier De Canniere Intracardiac device to correct mitral regurgitation
US20170049121A1 (en) 2015-08-20 2017-02-23 Bunge Oils, Inc. High stearic high oleic shortening compositions and methods of making and using the same
CN109929820B (zh) * 2017-12-19 2022-10-11 丰益(上海)生物技术研发中心有限公司 新型的甘油单-二酰酯脂肪酶
CN108034647B (zh) * 2018-01-31 2020-08-04 江南大学 一种饱和脂肪酸特异性脂肪酶突变体及其应用
JP7359539B2 (ja) * 2018-03-29 2023-10-11 日清オイリオグループ株式会社 油脂組成物、加熱調理用油脂組成物、加熱調理用油脂組成物の製造方法、並びに、油脂組成物における酸価上昇及び色調上昇の抑制方法
WO2019213754A1 (en) * 2018-05-07 2019-11-14 Gates Ian D Method of enzymatic biotransformation of petroleum hydrocarbon
CN112534050A (zh) * 2018-05-18 2021-03-19 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 突变体脂肪酶及其用途
WO2020123614A1 (en) * 2018-12-13 2020-06-18 Cargill, Incorporated Modified triglyceride including omega-3 fatty acid residue
JP2023540734A (ja) 2020-09-07 2023-09-26 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 夾雑リパーゼ活性を検出する方法
AU2023232901A1 (en) 2022-03-09 2024-08-01 Boehringer Ingelheim International Gmbh Method for detecting contaminating carboxylesterase activity
WO2024033465A1 (en) * 2022-08-10 2024-02-15 Boehringer Ingelheim International Gmbh Artificial mirnas targeting multiple hydrolases

Family Cites Families (138)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3949105A (en) 1974-03-25 1976-04-06 Lever Brothers Company Margarine fat
US4261868A (en) 1979-08-08 1981-04-14 Lever Brothers Company Stabilized enzymatic liquid detergent composition containing a polyalkanolamine and a boron compound
US4458066A (en) 1980-02-29 1984-07-03 University Patents, Inc. Process for preparing polynucleotides
IE52535B1 (en) 1981-02-16 1987-12-09 Ici Plc Continuous release pharmaceutical compositions
US4404128A (en) 1981-05-29 1983-09-13 The Procter & Gamble Company Enzyme detergent composition
IE54838B1 (en) 1982-04-30 1990-02-28 Unilever Plc Improvements in and relating to interesterification of triglycerides of fatty acids
DK402583D0 (da) 1983-09-05 1983-09-05 Novo Industri As Fremgangsmade til fremstilling af et immobiliseret lipasepraeparat og anvendelse deraf
US4707364A (en) 1984-01-27 1987-11-17 Miles Laboratories, Inc. Composition for accelerating cheese aging
US5204015A (en) 1984-05-29 1993-04-20 Genencor International, Inc. Subtilisin mutants
US5087571A (en) 1984-06-22 1992-02-11 President And Fellows Of Harvard College Method for providing a cell culture from a transgenic non-human mammal
US5691181A (en) 1984-08-21 1997-11-25 Celltech Limited DNA encoding lipase from human gastric mucosal tissue
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
US4683195A (en) 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
EP1186660A3 (fr) 1985-03-30 2002-03-20 KAUFFMAN, Stuart A. Procédé d'obtension d'ADN, ARN, peptides, polypeptides ou protéines, par une technique de recombination d'ADN
US4752483A (en) 1986-05-30 1988-06-21 Campbell Soup Company Method for producing a highly flavored cheese ingredient
US4962028A (en) 1986-07-09 1990-10-09 Dna Plant Technology Corporation Plant promotors
CH671155A5 (ru) 1986-08-18 1989-08-15 Clinical Technologies Ass
US4946778A (en) 1987-09-21 1990-08-07 Genex Corporation Single polypeptide chain binding molecules
US4987071A (en) 1986-12-03 1991-01-22 University Patents, Inc. RNA ribozyme polymerases, dephosphorylases, restriction endoribonucleases and methods
US5015580A (en) 1987-07-29 1991-05-14 Agracetus Particle-mediated transformation of soybean plants and lines
US5573933A (en) 1987-04-14 1996-11-12 Luminis Pty, Ltd. Transgenic pigs
US4897268A (en) 1987-08-03 1990-01-30 Southern Research Institute Drug delivery system and method of making the same
US4944944A (en) 1987-11-19 1990-07-31 Oklahoma Medical Research Foundation Dietary compositions and methods using bile salt-activated lipase
US6054270A (en) 1988-05-03 2000-04-25 Oxford Gene Technology Limited Analying polynucleotide sequences
US5700637A (en) 1988-05-03 1997-12-23 Isis Innovation Limited Apparatus and method for analyzing polynucleotide sequences and method of generating oligonucleotide arrays
US5000975A (en) 1988-12-29 1991-03-19 American Home Products Corporation Randomized palm oil fat composition for infant formulas
US5217879A (en) 1989-01-12 1993-06-08 Washington University Infectious Sindbis virus vectors
US5069810A (en) 1989-03-16 1991-12-03 Olin Corporation Cleaning composition comprising microbial lipase SD2 and sodium dodecylbenzene sulfonate
US5800992A (en) 1989-06-07 1998-09-01 Fodor; Stephen P.A. Method of detecting nucleic acids
US5744101A (en) 1989-06-07 1998-04-28 Affymax Technologies N.V. Photolabile nucleoside protecting groups
US5527681A (en) 1989-06-07 1996-06-18 Affymax Technologies N.V. Immobilized molecular synthesis of systematically substituted compounds
US5143854A (en) 1989-06-07 1992-09-01 Affymax Technologies N.V. Large scale photolithographic solid phase synthesis of polypeptides and receptor binding screening thereof
US5288619A (en) 1989-12-18 1994-02-22 Kraft General Foods, Inc. Enzymatic method for preparing transesterified oils
US5387742A (en) 1990-06-15 1995-02-07 Scios Nova Inc. Transgenic mice displaying the amyloid-forming pathology of alzheimer's disease
US5641664A (en) 1990-11-23 1997-06-24 Plant Genetic Systems, N.V. Process for transforming monocotyledonous plants
IE914504A1 (en) 1990-12-20 1992-07-01 Ixsys Optimization of binding proteins
US6110700A (en) 1991-03-11 2000-08-29 The General Hospital Corporation PRAD1 cyclin and its cDNA
DE4115938A1 (de) 1991-05-16 1992-11-19 Metallgesellschaft Ag Enzymatisches verfahren zur verminderung des gehaltes an phosphorhaltigen bestandteilen in pflanzlichen und tierischen oelen
US5922854A (en) 1991-06-14 1999-07-13 Kumar; Ramesh Purifying Human Hemogloblin from transgenic pig red cells and plasmids containing pig globin nucleic acids
CA2075135A1 (en) 1991-08-02 1993-02-03 David E. Ellis Particle-mediated transformation of gymnosperms
US5632957A (en) 1993-11-01 1997-05-27 Nanogen Molecular biological diagnostic systems including electrodes
JPH05236997A (ja) 1992-02-28 1993-09-17 Hitachi Ltd ポリヌクレオチド捕捉用チップ
US5902617A (en) 1992-05-19 1999-05-11 Pabst; Patrea L. Enzyme supplemented baby formula
US5445955A (en) 1992-05-25 1995-08-29 The Nisshin Oil Mills, Ltd. Immobilization of lipase on a polymer carrier containing epoxy and tertiary amino groups
CA2097000A1 (en) 1992-05-27 1993-11-28 Norio Moriya Alkaline lipase, method for producing the same, microorganism producing the same and detergent composition containing alkaline lipase
AU5676394A (en) 1992-11-20 1994-06-22 Agracetus, Inc. Transgenic cotton plants producing heterologous bioplastic
JPH08511159A (ja) 1993-05-20 1996-11-26 ロダース・クロックラーン・ビー・ブイ 固定化リパーゼ
JP2859520B2 (ja) 1993-08-30 1999-02-17 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ リパーゼ及びそれを生産する微生物及びリパーゼ製造方法及びリパーゼ含有洗剤組成物
JPH08509871A (ja) 1993-09-30 1996-10-22 アグラシータス インコーポレイテッド 異種ペルオキシダーゼを生産するトランスジェニック綿植物
US6045996A (en) 1993-10-26 2000-04-04 Affymetrix, Inc. Hybridization assays on oligonucleotide arrays
US5965452A (en) 1996-07-09 1999-10-12 Nanogen, Inc. Multiplexed active biologic array
US6468742B2 (en) 1993-11-01 2002-10-22 Nanogen, Inc. Methods for determination of single nucleic acid polymorphisms using bioelectronic microchip
US6117679A (en) 1994-02-17 2000-09-12 Maxygen, Inc. Methods for generating polynucleotides having desired characteristics by iterative selection and recombination
US5834252A (en) 1995-04-18 1998-11-10 Glaxo Group Limited End-complementary polymerase reaction
US5605793A (en) 1994-02-17 1997-02-25 Affymax Technologies N.V. Methods for in vitro recombination
US5837458A (en) 1994-02-17 1998-11-17 Maxygen, Inc. Methods and compositions for cellular and metabolic engineering
US5639940A (en) 1994-03-03 1997-06-17 Pharmaceutical Proteins Ltd. Production of fibrinogen in transgenic animals
AU692841B2 (en) 1994-03-09 1998-06-18 Abbott Laboratories Transgenic animals producing oligosaccharides and glycoconjugates
WO1995024494A1 (en) 1994-03-09 1995-09-14 Abbott Laboratories Humanized milk
DE69534464T2 (de) 1994-03-29 2006-09-28 Novozymes A/S Alkalische amylase aus bacellus
US5750870A (en) 1994-06-17 1998-05-12 Agritope, Inc. Plant genetic transformation methods and transgenic plants
US5807522A (en) 1994-06-17 1998-09-15 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods for fabricating microarrays of biological samples
US5959171A (en) 1994-08-17 1999-09-28 Pharming B.V. Method for the production of biologically active polypeptides in a mammal's
JPH10504964A (ja) 1994-09-01 1998-05-19 メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド 家族性型ヒトアミロイド前駆タンパク質を発現するトランスジェニック動物
US6111166A (en) 1994-09-19 2000-08-29 Medarex, Incorporated Transgenic mice expressing human Fcα and β receptors
US5795737A (en) 1994-09-19 1998-08-18 The General Hospital Corporation High level expression of proteins
US5880327A (en) 1994-09-21 1999-03-09 American National Red Cross Transgenic mammals expressing human coagulation factor VIII
US5556752A (en) 1994-10-24 1996-09-17 Affymetrix, Inc. Surface-bound, unimolecular, double-stranded DNA
EP0713917A1 (fr) * 1994-11-28 1996-05-29 Societe Des Produits Nestle S.A. Procédé d'hydrolyse des triglycérides d'acides gras polyinsaturés
US6187992B1 (en) 1994-12-05 2001-02-13 Merck & Co., Inc. Transgenic mouse having a disrupted amyloid precursor protein gene
US5830645A (en) 1994-12-09 1998-11-03 The Regents Of The University Of California Comparative fluorescence hybridization to nucleic acid arrays
US5633440A (en) 1994-12-20 1997-05-27 Dna Plant Technology Corporation P119 promoters and their uses
US6093562A (en) 1996-02-05 2000-07-25 Novo Nordisk A/S Amylase variants
US5959098A (en) 1996-04-17 1999-09-28 Affymetrix, Inc. Substrate preparation process
US6313081B1 (en) 1995-04-28 2001-11-06 Henkel Kommanditgesellschaft Auf Aktien (Kgaa) Detergents comprising cellulases
US5552317A (en) 1995-05-26 1996-09-03 Industrial Technology Research Institute Method for preparing optically active homophenylalanine and esters thereof using lipase from wheat germ or Candida lipolytica
EP0832183B1 (en) * 1995-05-31 2005-08-24 Cognis IP Management GmbH Improved fat splitting process
US5856174A (en) 1995-06-29 1999-01-05 Affymetrix, Inc. Integrated nucleic acid diagnostic device
US5958672A (en) 1995-07-18 1999-09-28 Diversa Corporation Protein activity screening of clones having DNA from uncultivated microorganisms
US5830696A (en) 1996-12-05 1998-11-03 Diversa Corporation Directed evolution of thermophilic enzymes
US5939250A (en) 1995-12-07 1999-08-17 Diversa Corporation Production of enzymes having desired activities by mutagenesis
US6171820B1 (en) 1995-12-07 2001-01-09 Diversa Corporation Saturation mutagenesis in directed evolution
US6238884B1 (en) 1995-12-07 2001-05-29 Diversa Corporation End selection in directed evolution
US6740506B2 (en) 1995-12-07 2004-05-25 Diversa Corporation End selection in directed evolution
US6361974B1 (en) 1995-12-07 2002-03-26 Diversa Corporation Exonuclease-mediated nucleic acid reassembly in directed evolution
US6537776B1 (en) 1999-06-14 2003-03-25 Diversa Corporation Synthetic ligation reassembly in directed evolution
US5965408A (en) 1996-07-09 1999-10-12 Diversa Corporation Method of DNA reassembly by interrupting synthesis
US6358709B1 (en) 1995-12-07 2002-03-19 Diversa Corporation End selection in directed evolution
US6022963A (en) 1995-12-15 2000-02-08 Affymetrix, Inc. Synthesis of oligonucleotide arrays using photocleavable protecting groups
US6013440A (en) 1996-03-11 2000-01-11 Affymetrix, Inc. Nucleic acid affinity columns
US6096548A (en) 1996-03-25 2000-08-01 Maxygen, Inc. Method for directing evolution of a virus
US6197070B1 (en) 1996-05-15 2001-03-06 The Procter & Gamble Company Detergent compositions comprising alpha combination of α-amylases for malodor stripping
US6322595B1 (en) 1996-07-30 2001-11-27 The Procter & Gamble Company Detergent composition comprising two cellulase components, with and without a cellulose-binding domain
US6326341B1 (en) 1996-09-11 2001-12-04 The Procter & Gamble Company Low foaming automatic dishwashing compositions
US5834259A (en) 1996-10-28 1998-11-10 Monsanto Company Process and composition for preparing D-aspartic acid
SK80799A3 (en) 1996-12-19 2000-03-13 Unilever Nv Immobilized enzyme and its use for the processing of triglyceride oils
US6069122A (en) 1997-06-16 2000-05-30 The Procter & Gamble Company Dishwashing detergent compositions containing organic diamines for improved grease cleaning, sudsing, low temperature stability and dissolution
US6326204B1 (en) 1997-01-17 2001-12-04 Maxygen, Inc. Evolution of whole cells and organisms by recursive sequence recombination
CA2276064C (en) 1997-01-17 2013-12-17 Maxygen, Inc. Evolution of whole cells and organisms by recursive sequence recombination
DE19703364A1 (de) 1997-01-30 1998-08-06 Henkel Ecolab Gmbh & Co Ohg Pastenförmiges Wasch- und Reinigungsmittel
US6153410A (en) 1997-03-25 2000-11-28 California Institute Of Technology Recombination of polynucleotide sequences using random or defined primers
US6826296B2 (en) 1997-07-25 2004-11-30 Affymetrix, Inc. Method and system for providing a probe array chip design database
CN100367023C (zh) 1997-09-11 2008-02-06 生物风险公司 制备高密度阵列的方法
US6465178B2 (en) 1997-09-30 2002-10-15 Surmodics, Inc. Target molecule attachment to surfaces
WO1999023211A1 (en) 1997-10-30 1999-05-14 Novo Nordisk A/S α-AMYLASE MUTANTS
EP1032644B1 (en) 1997-11-10 2003-03-19 The Procter & Gamble Company Process for preparing a detergent tablet
DE69828574T2 (de) 1997-11-14 2005-10-06 Sankyo Co., Ltd. Transgenes Tier als Modell für Allergie und seine Verwendung
US6506559B1 (en) 1997-12-23 2003-01-14 Carnegie Institute Of Washington Genetic inhibition by double-stranded RNA
US6156952A (en) 1998-04-09 2000-12-05 Constituent Institution Of The University Of Maryland System HIV transgenic animals and uses therefor
EP1082482A1 (en) 1998-05-01 2001-03-14 Novozymes A/S Enhancers such as n-hydroxyacetanilide
US6048695A (en) 1998-05-04 2000-04-11 Baylor College Of Medicine Chemically modified nucleic acids and methods for coupling nucleic acids to solid support
DE19824705A1 (de) 1998-06-03 1999-12-09 Henkel Kgaa Amylase und Protease enthaltende Wasch- und Reinigungsmittel
JP4335995B2 (ja) 1998-07-22 2009-09-30 昭 神谷 環境保全型粒状洗浄用組成物
GB2340755B (en) 1998-08-24 2002-09-25 Cannon Rubber Ltd Breast pump insert
US6277628B1 (en) 1998-10-02 2001-08-21 Incyte Genomics, Inc. Linear microarrays
US6277489B1 (en) 1998-12-04 2001-08-21 The Regents Of The University Of California Support for high performance affinity chromatography and other uses
US6436675B1 (en) 1999-09-28 2002-08-20 Maxygen, Inc. Use of codon-varied oligonucleotide synthesis for synthetic shuffling
US6376246B1 (en) 1999-02-05 2002-04-23 Maxygen, Inc. Oligonucleotide mediated nucleic acid recombination
US6368861B1 (en) 1999-01-19 2002-04-09 Maxygen, Inc. Oligonucleotide mediated nucleic acid recombination
US6399121B1 (en) 1999-03-16 2002-06-04 Novozymes A/S Process for producing cheese
US6511824B1 (en) 1999-03-17 2003-01-28 Exelixis, Inc. Nucleic acids and polypeptides of invertebrate TWIK channels and methods of use
US6309871B1 (en) 1999-03-31 2001-10-30 Novozymes A/S Polypeptides having alkaline α-amylase activity
US6221653B1 (en) 1999-04-27 2001-04-24 Agilent Technologies, Inc. Method of performing array-based hybridization assays using thermal inkjet deposition of sample fluids
US6653151B2 (en) 1999-07-30 2003-11-25 Large Scale Proteomics Corporation Dry deposition of materials for microarrays using matrix displacement
US6337187B1 (en) 1999-11-05 2002-01-08 Millennium Pharmaceuticals, Inc. 18891, a novel human lipase
US20010008765A1 (en) 1999-12-06 2001-07-19 Fuji Photo Film Co., Ltd. DNA chip and reactive solid carrier
US6531644B1 (en) 2000-01-14 2003-03-11 Exelixis, Inc. Methods for identifying anti-cancer drug targets
AU1166502A (en) 2000-10-12 2002-04-22 Exelixis Inc Human ect2 and methods of use
US6309872B1 (en) 2000-11-01 2001-10-30 Novozymes Biotech, Inc Polypeptides having glucoamylase activity and nucleic acids encoding same
MXPA04007886A (es) 2002-02-13 2004-10-15 Dow Global Technologies Inc Sobre-expresion de genes de extremozimo en pseudomonadas y bacterias estrechamente relacionadas.
FI115842B (fi) * 2002-03-27 2005-07-29 Valio Oy Menetelmä konjugoidun linolihapon valmistamiseksi
CA3007908A1 (en) * 2003-03-07 2005-04-14 Dsm Ip Assets B.V. Hydrolases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
JP5087741B2 (ja) 2003-11-19 2012-12-05 フェネックス インコーポレイテッド 改良タンパク質発現系
EP1805302B1 (en) * 2004-10-08 2012-08-15 Novozymes A/S Hydrolysis of ester bonds with lipase
DE102005012113A1 (de) * 2004-12-27 2006-07-27 BSH Bosch und Siemens Hausgeräte GmbH Geschirrspülmaschine mit einer Trocknungsvorrichtung
WO2006096834A2 (en) * 2005-03-08 2006-09-14 Diversa Corporation Hydrolases, nucleic acids encoding them and methods for improving paper strength
US8569015B2 (en) 2006-05-30 2013-10-29 Pfenex Inc. RPA optimization
UA97127C2 (ru) 2006-12-06 2012-01-10 Бандж Ойлз, Инк. Способ непрерывной ферментативной обработки композиции, содержащей липид, и система для его осуществления

Also Published As

Publication number Publication date
US8349578B2 (en) 2013-01-08
PL2329032T3 (pl) 2014-09-30
US8541191B2 (en) 2013-09-24
ES2484919T3 (es) 2014-08-12
BRPI0917220B1 (pt) 2018-11-21
US8313918B2 (en) 2012-11-20
CN102325891B (zh) 2015-01-07
US20110287495A1 (en) 2011-11-24
WO2010024924A2 (en) 2010-03-04
US8153391B2 (en) 2012-04-10
US8420342B2 (en) 2013-04-16
US8227215B2 (en) 2012-07-24
CN102325891A (zh) 2012-01-18
MX2011002226A (es) 2011-04-05
RU2525675C2 (ru) 2014-08-20
CA2735265C (en) 2019-04-23
MY162662A (en) 2017-06-30
CA2735265A1 (en) 2010-03-04
EP2329032A2 (en) 2011-06-08
WO2010024924A3 (en) 2010-04-29
US20110287136A1 (en) 2011-11-24
AR073236A1 (es) 2010-10-20
US20110287496A1 (en) 2011-11-24
AR105958A2 (es) 2017-11-29
EP2329032B1 (en) 2014-04-30
UA101214C2 (ru) 2013-03-11
US20100055234A1 (en) 2010-03-04
US20120276618A1 (en) 2012-11-01
BRPI0917220A2 (pt) 2015-08-11
US20110281312A1 (en) 2011-11-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2011111747A (ru) Гидролазы, кодирующие их нуклеиновые кислоты и способы их получения и применения
Wang et al. From microalgae oil to produce novel structured triacylglycerols enriched with unsaturated fatty acids
JP7213184B2 (ja) グリセリドの形態におけるｎ－３脂肪酸の酵素的濃縮
Castejón et al. Enzymatic modification to produce health-promoting lipids from fish oil, algae and other new omega-3 sources: A review
JP4290162B2 (ja) 対称型トリグリセリドの製造方法
Gupta et al. Lipase mediated upgradation of dietary fats and oils
US9695384B2 (en) Process for producing a glyceride composition
RU2422498C2 (ru) Способ получения диолеоил пальмитоил глицерида
JP4530311B2 (ja) リパーゼを用いたグリセライドの製造方法
US9476008B2 (en) Process for separating polyunsaturated fatty acids from long chain unsaturated or less saturated fatty acids
RU2010113506A (ru) Способ получения твердого масла
US11840714B2 (en) Enriching DHA in glyceride fractions
EP2956010B1 (en) Fat composition
US20080248187A1 (en) Mixture containing fatty acid glycerides
Yue et al. UPU structured lipids and their preparation methods: A mini review
Jala et al. Designer and functional food lipids in dietary regimes: Current trends and future prospects
CN111787807A (zh) 2位富含棕榈酸的油脂组合物的制造方法
Ju et al. Efficient synthesis of stearidonic acid enriched triacylglycerol from ahiflower seed oil via a two-step enzyme reaction
KR101969467B1 (ko) 효소적 알코올리시스를 이용하여 모노아실글리세롤을 제조하는 개선된 방법
Liu et al. Production of structured triacylglycerols containing palmitic acids at sn-2 position and docosahexaenoic acids at sn-1, 3 positions
KR20180138232A (ko) 효소적 에스테르화의 효율을 향상시키는 방법
JP7528407B2 (ja) β位パルミチン酸含有油脂の製造方法
Kahveci et al. Enzymatic processing of omega 3 long chain polyunsaturated fatty acid oils
Piazza et al. Lipase-catalyzed harvesting and/or enrichment of industrially and nutritionally important fatty acids
Ferreira et al. Literature Review: What Has Been Explored About Enzymatic Synthesis of ST and SD?

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20200829