RU2002119630A

RU2002119630A - Способ ускоренного пептидного синтеза в растворе

Info

Publication number: RU2002119630A
Application number: RU2002119630/04A
Authority: RU
Inventors: Иво Франси ЭГГЕН (NL); Иво Франси ЭГГЕН; КОРТЕНАР Паулус Бернардус Вильхельмус ТЕН (NL); КОРТЕНАР Паулус Бернардус Вильхельмус ТЕН; Корнелис Альберт Грюсон ХАСНОТ (NL); Корнелис Альберт Грюсон ХАСНОТ
Original assignee: Акцо Нобель Н.В. (NL); Акцо Нобель Н.В.
Priority date: 2001-07-19
Filing date: 2002-07-18
Publication date: 2004-01-20
Also published as: PT1291356E; HRP20020609A2; NO324245B1; KR100861031B1; DE60205693D1; BRPI0202783B1; JP4142907B2; US7435791B2; HK1050904A1; HU0202369D0; ATE302792T1; CA2390358C; NO20023446D0; AR034869A1; US20030018164A1; PE20030214A1; US20060063918A1; CN1254483C; RU2237673C2; NO20023446L

Claims

1. Способ ускоренного пептидного синтеза в растворе в органическом растворителе или в смеси органических растворителей, включающий повторяющиеся циклы стадий (a)-(d):

(a) стадию конденсации с использованием избытка активированного карбоксильного компонента, который ацилирует аминокомпонент;

(b) стадию погашения, в которой используется акцептор для удаления остаточных активированных карбоксильных функций, при том, что данный акцептор может также использоваться для деблокирования наращиваемого пептида;

(c) одну или более водных экстракций; и

необязательно, (d) отдельную стадию деблокирования, после одной или более водных экстракций,

отличающийся тем, что включает, по меньшей мере, одну стадию (b), названную стадией (b’), в которой амин, включающий свободный анион или латентный анион, используется в качестве акцептора остаточных активированных карбоксильных функций.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что на стадии (а) молярные количества используемых реагентов представлены в убывающем порядке: карбоксильный компонент, конденсирующая добавка>конденсирующий реагент>аминокомпонент.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что на стадии (а) используется преактивированный карбоксильный компонент.

4. Способ по любому из пп.1-3, отличающийся тем, что на стадии (b’) амин, включающий латентный анион, используется в качестве акцептора.

5. Способ по п.4, отличающийся тем, что латентный анион в акцептирующем амине несет временную защитную группу, которая может быть селективно удалена в присутствии любых перманентных защитных групп, присоединенных к наращиваемому пептиду.

6. Способ по п.4 или 5, отличающийся тем, что латентный анион в акцептирующем амине несет временную защитную группу, которая проявляет лабильность, аналогичную лабильности временной защитной группы, представленной на N-конце наращиваемого пептида.

7. Способ по п.5 или 6, отличающийся тем, что временные защитные группы представляют собой гидрогенолитически удаляемые группы, а перманентные защитные группы представляют собой ацидолитически удаляемые группы.

8. Способ по п.7, отличающийся тем, что временные защитные группы представляют собой группы бензильного типа.

9. Способ по любому из п.4-8, отличающийся тем, что акцептор представляет собой первичный амин, включающий свободный анион или латентный анион.

10. Способ по п.9, отличающийся тем, что первичный амин представляет собой аминокислотное производное, блокированное на С-конце.

11. Способ по п.10, отличающийся тем, что аминокислота представляет собой β-аланин или его производное.

12. Способ по п.11, отличающийся тем, что акцептор представляет собой бензил-β-аланинат или его соль.

13. Способ по любому из пп.1-8, отличающийся тем, что тиол, включающий свободный или латентный анион, используется в качестве акцептора вместо амина, включающего свободный или латентный анион.

14. Способ по любому из пп.1-13, отличающийся тем, что включает один или более циклов, в котором на стадии (b) полиамин используется в качестве акцептора.

15. Способ по любому из пп.1-14, включающий один или более циклов, в котором на стадии (b) деблокирование не происходит, а следующая стадия (с) включает последовательные щелочную, кислотную и щелочную экстракции.

16. Способ по п.15, отличающийся тем, что экстракции осуществляют в присутствии хлорида натрия или нитрата калия.

17. Способ по п.15 или 16, включающий следующую стадию (d), которая включает деблокирование и последовательные щелочную и нейтральную экстракции.

18. Способ по п.17, отличающийся тем, что экстракции осуществляют в присутствии хлорида натрия или нитрата калия.

19. Способ по любому из пп.1-14, включающий один или более циклов, в котором на стадии (b) происходит погашение и деблокирование, а следующая стадия (с) включает последовательные щелочную и нейтральную экстракции.

20. Способ по п.19, отличающийся тем, что экстракции осуществляют в присутствии хлорида натрия и нитрата калия.

21. Способ по любому из пп.1-20, отличающийся тем, что в последнем цикле на стадии (а) защитные группы карбоксильного компонента проявляют лабильность, аналогичную лабильности перманентных защитных групп наращиваемого пептида, а на стадии (b) акцептор представляет собой полиамин.

22. Способ по любому из пп.1-21, отличающийся тем, что органический растворитель, или смесь органических растворителей, представляет собой этилацетат или смесь этилацетата и дихлорметана, смесь этилацетата и 1-метил-2-пирролидинона, смесь этилацетата и N,N-диметилформамида или смесь этилацетата и тетрагидрофурана.

23. Способ по любому из пп.1-22, отличающийся тем, что осуществляется в температурном диапазоне от 0 до 50°С.

24. Способ по п.23, отличающийся тем, что осуществляется при температуре окружающей среды.

25. Способ комбинационного синтеза библиотеки пептидов с использованием способа расщепления и смешивания, в котором применяют способ по любому из пп.1-24.

26. Способ автоматизированного пептидного синтеза в растворе, в котором применяют способ по любому из пп.1-25.

27. Пептид или смесь пептидов, получаемые в соответствии со способом, включающим способ по любому из пп.1-26.