JPH11217397A - ペプチドチオールエステルの製造方法 - Google Patents

ペプチドチオールエステルの製造方法

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JPH11217397A
JPH11217397A JP10270531A JP27053198A JPH11217397A JP H11217397 A JPH11217397 A JP H11217397A JP 10270531 A JP10270531 A JP 10270531A JP 27053198 A JP27053198 A JP 27053198A JP H11217397 A JPH11217397 A JP H11217397A
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thiol ester
amino acid
peptide
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Abstract

(57)【要約】 【課題】 ９−フルオレニルメトキシカルボニル化アミ
ノ酸（Ｆｍｏｃ化アミノ酸）を用いるペプチドチオール
エステルの製造方法を提供すること。 【解決手段】 ペプチド合成のためのチオールエステル
法において、チオールエステル結合を介して樹脂に固定
されたアミノ酸のアミノ末端に保護基として結合させた
Ｆｍｏｃ基を、特定のＦｍｏｃ基除去試薬を用いて除去
した後、Ｆｍｏｃ化アミノ酸を付加させ、次いでＦｍｏ
ｃ基を除去し、Ｆｍｏｃ化アミノ酸を付加する反応を繰
り返してＦｍｏｃ化ペプチドチオールエステル樹脂を
得、これよりＦｍｏｃ基を除去して樹脂から取り出す
か、樹脂から取り出した後Ｆｍｏｃ基を除去することに
よって、任意の配列でアミノ酸を縮合することを特徴と
するペプチドチオールエステルの製造方法。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、ペプチドチオール
エステルの製造方法に関する。さらに詳しくは、９−フ
ルオレニルメトキシカルボニル化アミノ酸（Ｆｍｏｃ化
アミノ酸）を用いるペプチドチオールエステルの製造方
法に関する。
【０００２】
【従来の技術】従来より、アミノ酸を縮合してペプチド
を合成することが試みられて来た。ペプチドの合成法と
しては、液相法および固相法があるが、液相法は、溶液
反応であることから、アミノ酸を付加して伸張する毎に
逐一反応溶液から中間体を抽出し、精製し、確認を行い
つつ合成を進めるものであって、目的とするペプチドを
合成するまでに多大の時間と労力を必要とするという問
題がある。また、固相法は、アミノ末端を保護したアミ
ノ酸を固定した樹脂に、アミノ末端の保護基を除去しつ
つ、活性化したアミノ酸誘導体を順次縮合させるという
単純な操作により、ペプチド鎖を伸張するものであっ
て、液相法に較べて極めて効率がよく、また簡単なペプ
チド合成法である。
【０００３】固相法のうち、ｔ−ブトキシカルボニル
（以下、Ｂｏｃという。）化アミノ酸を用いる方法は、
Ｂｏｃ化アミノ酸を樹脂に固定した後、アミノ末端の保
護基であるＢｏｃ基を除去しつつ、活性化したＢｏｃ化
アミノ酸を縮合するものであって、Ｂｏｃ基を除去する
際に、トリフルオロ酢酸、塩化メチレンなどのハロゲン
含有化合物を多量に使用し、また最終的に樹脂からペプ
チドを取り出す際に、無水フッ化水素などの強酸を使用
するものである。また、Ｂｏｃ化アミノ酸を用いてペプ
チドチオールエステルを合成することは容易であった。
しかし、上記したように、Ｂｏｃ化アミノ酸を用いる方
法は、ハロゲン化合物や強酸を使用することから、環境
保全上や安全上の問題があった。
【０００４】一方、固相法のうち、９−フルオレニルメ
トキシカルボニル（以下、Ｆｍｏｃという。）化アミノ
酸を用いる方法は、Ｆｍｏｃ基（アミノ末端の保護基）
をピペリジンなどのアミン化合物で除去しつつ、Ｆｍｏ
ｃ化アミノ酸を縮合していくものであって、ペプチド鎖
の伸張反応の際にハロゲン含有化合物を必要としないこ
と、ペプチドの樹脂からの取り出しの際に強酸処理を必
要としないことなどから、現在ペプチド合成の手法とし
て広く使用されている。しかるに、このＦｍｏｃ化アミ
ノ酸を用いる方法は、ペプチドチオールエステルを合成
する場合、環境保全上や安全上、優れた方法であるが、
ペプチドチオールエステルがアミンに対して高い反応性
を有することから、チオールエステル結合が分解されて
ペプチド鎖を伸張させることができないという根本的な
問題があった。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の目的
は、比較的容易かつ環境保全上や安全上の問題を低減さ
せてペプチドチオールエステルを製造する方法を提供す
ることにある。このようなペプチドチオールエステルの
製造方法は、長鎖ペプチド、環状ペプチドなどのペプチ
ドの合成反応において極めて有用な方法であると共に、
ペプチドを原料とする種々の医薬品の開発においても広
く使用することができる。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者は、上記した目
的を達成すべく鋭意研究した結果、チオールエステル結
合を介して樹脂に固定されたアミノ酸のアミノ末端に、
保護基として結合させたＦｍｏｃ基は、特定のＦｍｏｃ
基除去試薬を用いることによって、チオールエステル結
合の分解を伴うことなく除去することができ、ペプチド
鎖を伸張することができることを見出し、本発明を完成
するに至った。
【０００７】すなわち、本発明によれば、化学式（１）
【化１４】Ｈ-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ （１） （式中、Ａ1およびＢはアミノ酸残基である。またＸは
硫黄原子と結合してチオールエステルを構成する成分で
ある。）で表されるペプチドチオールエステルの製造方
法であって、下記の（１）〜（４）の工程からなること
を特徴とするペプチドチオールエステルの製造方法が提
供される。 （１）９−フルオレニルメトキシカルボニル化アミノ酸
誘導体（Ｆｍｏｃ化アミノ酸誘導体）と樹脂とを反応さ
せることによって、化学式（２）
【化１５】Ｆｍｏｃ-Ｂ-Ｓ-Ｘ-樹脂 （２） （式中、Ｆｍｏｃは９−フルオレニルメトキシカルボニ
ル基である。またＢおよびＸは上記と同じである。そし
て樹脂は合成樹脂である。）で表されるＦｍｏｃ化アミ
ノ酸チオールエステル樹脂を生成させる工程。 （２）工程（１）で得られたＦｍｏｃ化アミノ酸チオー
ルエステル樹脂とＦｍｏｃ基除去試薬とを反応させるこ
とによって、化学式（３）
【化１６】Ｈ-Ｂ-Ｓ-Ｘ-樹脂 （３） （式中、Ｂ、Ｘおよび樹脂は上記と同じである。）で表
されるアミノ酸チオールエステル樹脂を生成させる工
程。 （３）工程（２）で得られたアミノ酸チオールエステル
樹脂とＦｍｏｃ化アミノ酸とを反応させることによっ
て、化学式（４）
【化１７】Ｆｍｏｃ-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ-樹脂 （４） （式中、Ｆｍｏｃ、Ａ1、Ｂ、Ｘおよび樹脂は上記と同
じである。）で表されるＦｍｏｃ化ペプチドチオールエ
ステル樹脂を生成させる工程。 （４）工程（３）で得られたＦｍｏｃ化ペプチドチオー
ルエステル樹脂と脱離試薬とを反応させて、化学式
（５）
【化１８】Ｆｍｏｃ-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ （５） （式中、Ｆｍｏｃ、Ａ1、ＢおよびＸは上記と同じであ
る。）で表されるＦｍｏｃ化ペプチドチオールエステル
を生成させ、続いてＦｍｏｃ基除去試薬と反応させる
か、または工程（３）で得られたＦｍｏｃ化ペプチドチ
オールエステル樹脂とＦｍｏｃ基除去試薬とを反応さ
せ、続いて脱離試薬と反応させることによって、化学式
（１）
【化１９】Ｈ-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ （１） （式中、Ａ1、ＢおよびＸは上記と同じである。）で表
されるペプチドチオールエステルを生成させる工程。
【０００８】また、本発明によれば、化学式（６）
【化２０】 Ｈ-Ａn-Ａn-1-・・・-Ａ2-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ （６） （式中、Ａn、Ａn-1、Ａ2、Ａ1およびＢはアミノ酸残基
である。またＸは硫黄原子と結合してチオールエステル
を構成する成分である。そしてｎは正整数である。）で
表されるペプチドチオールエステルの製造方法であっ
て、下記の（１）〜（４）の工程からなることを特徴と
するペプチドチオールエステルの製造方法が提供され
る。 （１）９−フルオレニルメトキシカルボニル化アミノ酸
誘導体（Ｆｍｏｃ化アミノ酸誘導体）と樹脂とを反応さ
せることによって、化学式（２）
【化２１】Ｆｍｏｃ-Ｂ-Ｓ-Ｘ-樹脂 （２） （式中、Ｆｍｏｃは９−フルオレニルメトキシカルボニ
ル基である。またＢおよびＸは上記と同じである。そし
て樹脂は合成樹脂である。）で表されるＦｍｏｃ化アミ
ノ酸チオールエステル樹脂を生成させる工程。 （２）工程（１）で得られたＦｍｏｃ化アミノ酸チオー
ルエステル樹脂とＦｍｏｃ基除去試薬とを反応させるこ
とによって、化学式（３）
【化２２】Ｈ-Ｂ-Ｓ-Ｘ-樹脂 （３） （式中、Ｂ、Ｘおよび樹脂は上記と同じである。）で表
されるアミノ酸チオールエステル樹脂を生成させる工
程。 （３）工程（２）で得られたアミノ酸チオールエステル
樹脂とＦｍｏｃ化アミノ酸とを反応させることによっ
て、化学式（４）
【化２３】Ｆｍｏｃ-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ-樹脂 （４） （式中、Ｆｍｏｃ、Ａ1、Ｂ、Ｘおよび樹脂は上記と同
じである。）で表されるＦｍｏｃ化ペプチドチオールエ
ステル樹脂を生成させ、該Ｆｍｏｃ化ペプチドチオール
エステル樹脂について、工程（２）〜工程（３）に準じ
て、Ｆｍｏｃ基を除去した後、さらにＦｍｏｃ化アミノ
酸を付加する操作を（ｎ−１）回繰り返すことによっ
て、化学式（７）
【化２４】 Ｆｍｏｃ-Ａn-Ａn-1-・・・-Ａ2-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ-樹脂 （７） （式中、Ｆｍｏｃ、Ａn、Ａn-1、Ａ2、Ａ1、Ｂ、Ｘおよ
び樹脂上記と同様である。またｎは正整数である。）で
表されるＦｍｏｃ化ペプチドチオールエステル樹脂を生
成させる工程。 （４）工程（３）で得られたＦｍｏｃ化ペプチドチオー
ルエステル樹脂と脱離試薬とを反応させて、化学式
（８）
【化２５】 Ｆｍｏｃ-Ａn-Ａn-1-・・・-Ａ2-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ （８） （式中、Ｆｍｏｃ、Ａn、Ａn-1、Ａ2、Ａ1、Ｂ、Ｘおよ
びｎは上記と同じである。）で表されるＦｍｏｃ化ペプ
チドチオールエステルを生成させ、続いてＦｍｏｃ基除
去試薬と反応させるか、または工程（３）で得られたＦ
ｍｏｃ化ペプチドチオールエステル樹脂とＦｍｏｃ基除
去試薬とを反応させ、続いて脱離試薬と反応させること
によって、化学式（６）
【化２６】 Ｈ-Ａn-Ａn-1-・・・-Ａ2-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ （６） （式中、Ａn、Ａn-1、Ａ2、Ａ1、Ｂ、Ｘおよびｎは上記
と同じである。）で表されるペプチドチオールエステル
を生成させる工程。
【０００９】
【発明の実施の形態】以下に、本発明を詳細に説明す
る。 [工程（１）]工程（１）は、９−フルオレニルメトキシ
カルボニル化アミノ酸誘導体（Ｆｍｏｃ化アミノ酸誘導
体）と樹脂とを反応させることによって、化学式（２）
【化２７】Ｆｍｏｃ-Ｂ-Ｓ-Ｘ-樹脂 （２） （式中、Ｆｍｏｃは９−フルオレニルメトキシカルボニ
ル基であり、Ｂはアミノ酸残基である。またＸは硫黄原
子と結合してチオールエステルを構成する成分である。
そして樹脂は合成樹脂である。）で表されるＦｍｏｃ化
アミノ酸チオールエステル樹脂を生成させるものであ
る。
【００１０】９−フルオレニルメトキシカルボニル化ア
ミノ酸誘導体（Ｆｍｏｃ化アミノ酸誘導体）と樹脂との
反応は、チオールエステル結合を介して、Ｆｍｏｃ化ア
ミノ酸を樹脂に固定することができるものであれば、特
に限定されるものではない。たとえば、次の化学式
（９）および化学式（１０）などで表される反応であ
る。
【化２８】 Ｆｍｏｃ-ＮＨ-ＣＨＲ1-ＣＯ-Ｓ-ＣＲ2Ｒ3-ＣＨ2-ＣＯ-ＯＨ ＋ ＮＨ2-樹脂 → Ｆｍｏｃ-ＮＨ-ＣＨＲ1-ＣＯ-Ｓ-ＣＲ2Ｒ3-ＣＨ2-ＣＯ-ＮＨ-樹脂 （９） （式中、Ｆｍｏｃおよび樹脂は前記と同じである。また
Ｒ1、Ｒ2およびＲ3はそれぞれ独立して水素原子、アル
キル基またはアリール基から選ばれる基である。）
【化２９】
【００１１】また、化学式（１１）で表される反応でも
よい。
【化３０】 Ｆｍｏｃ-ＮＨ-ＣＨＲ-ＣＯ-ＯＨ ＋ ＨＳ-樹脂 → Ｆｍｏｃ-ＮＨ-ＣＨＲ-ＣＯ-Ｓ-樹脂 （１１） （式中、Ｆｍｏｃ、Ｒおよび樹脂は前記と同じであ
る。）
【００１２】上記したＦｍｏｃ化アミノ酸誘導体と樹脂
との反応は、特に限定するものではなく、公知の反応条
件で行うことができる。通常、１−メチル−２−ピロリ
ジノン（１−メチル−２−ピロリドン）などの溶媒中で
１０〜３０℃で５〜６０分間の反応条件でおこなうこと
ができる。
【００１３】Ｆｍｏｃ化アミノ酸誘導体を構成するアミ
ノ酸は、特に限定されるものではなく、所望とするペプ
チドチオールエステルのアミノ酸配列に基づいて、公知
のアミノ酸から任意に選択して使用することができる。
表１に、天然アミノ酸の例を示す。以下、本明細書にお
いては、アミノ酸化合物またはそのアミノ酸残基を、対
応するアミノ酸の記号で表す。なお、Ｌ型の光学活性を
有するアミノ酸は、Ｌ−の記号を付して表す。
【００１４】
【表１】
【００１５】樹脂は、Ｆｍｏｃ化アミノ酸誘導体を樹脂
に固定できるものであれば、特に限定されるものではな
い。通常、ポリスチレン樹脂、ポリアクリルアミド樹脂
などの合成樹脂にチオール基、アミノ基、ハロゲンなど
を導入したものである。
【００１６】[工程（２）]工程（２）は、工程（１）で
得られたＦｍｏｃ化アミノ酸チオールエステル樹脂とＦ
ｍｏｃ基除去試薬とを反応させることによって、化学式
（３）
【化３１】Ｈ-Ｂ-Ｓ-Ｘ-樹脂 （３） （式中、Ｂ、Ｘおよび樹脂は前記と同じである。）で表
されるアミノ酸チオールエステル樹脂を生成させるもの
である。
【００１７】Ｆｍｏｃ化アミノ酸チオールエステル樹脂
からＦｍｏｃ基を除去する反応においては、特定のＦｍ
ｏｃ基除去試薬を使用することが肝要である。Ｆｍｏｃ
基除去試薬は、１−メチルピロリジンまたはヘキサメチ
レンイミンで代表される塩基性化合物である。このよう
な塩基性化合物は、単独または混合して使用することが
できるし、また１−メチル−２−ピロリジノン（１−メ
チル−２−ピロリドン）、ジメチルスルホキシドなどの
溶媒に溶解して使用することができるし、他の化合物と
混合して使用することもできる。さらに、このＦｍｏｃ
基除去試薬は、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールまた
は２，４−ジニトロフェノールで代表される酸性試薬を
混合して使用することもできる。
【００１８】[工程（３）]工程（３）は、工程（２）で
得られたアミノ酸チオールエステル樹脂とＦｍｏｃ化ア
ミノ酸とを反応させることによって、化学式（４）
【化３２】Ｆｍｏｃ-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ-樹脂 （４） （式中、Ａ1およびＢはアミノ酸残基である。またＦｍ
ｏｃ、Ｘおよび樹脂は前記と同じである。）で表される
Ｆｍｏｃ化ペプチドチオールエステル樹脂を生成させる
ものである。
【００１９】また、工程（３）で得られたＦｍｏｃ化ペ
プチドチオールエステル樹脂について、工程（２）〜工
程（３）に準じて、Ｆｍｏｃ基を除去した後、さらにＦ
ｍｏｃ化アミノ酸を付加する操作を（ｎ−１）回繰り返
すことによって、化学式（７）
【化３３】 Ｆｍｏｃ-Ａn-Ａn-1-・・・-Ａ2-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ-樹脂 （７） （式中、Ａn、Ａn-1、Ａ2、Ａ1、およびＢはアミノ酸残
基である。またＦｍｏｃ、Ｘおよび樹脂は前記と同様で
ある。またｎは正整数である。）で表されるＦｍｏｃ化
ペプチドチオールエステル樹脂を生成させるものであ
る。
【００２０】上記したように、Ｆｍｏｃ基を除去した
後、さらにＦｍｏｃ化アミノ酸を付加する操作を繰り返
すことによって、Ｆｍｏｃ化ペプチドチオールエステル
樹脂のチオールエステル結合を分解することなく、アミ
ノ酸を順次結合してペプチド鎖を伸張することができ
る。縮合するアミノ酸は、所望とするペプチドチオエス
テルのアミノ酸配列に基づいて、公知のアミノ酸から選
択して使用することができる。
【００２１】[工程（４）]工程（４）は、工程（３）で
得られたＦｍｏｃ化ペプチドチオールエステル樹脂と脱
離試薬とを反応させることによって、化学式（５）
【化３４】Ｆｍｏｃ-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ （５） （式中、Ｆｍｏｃ、Ａ1、ＢおよびＸは前記と同じであ
る。）で表されるＦｍｏｃ化ペプチドチオールエステル
を、Ｆｍｏｃ化ペプチドチオールエステル樹脂から取り
出し、続いて、得られたＦｍｏｃ化ペプチドチオールエ
ステルと上記のＦｍｏｃ基除去試薬とを反応させること
によって、化学式（１）
【化３５】Ｈ-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ （１） （式中、Ａ1、ＢおよびＸは上記と同じである。）で表
されるペプチドチオールエステルが製造されるものであ
る。
【００２２】また、工程（４）は、工程（３）で得られ
たＦｍｏｃ化ペプチドチオールエステル樹脂と上記のＦ
ｍｏｃ基除去試薬とを反応させ、続いて脱離試薬と反応
させることによって、化学式（１）
【化３６】Ｈ-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ （１） （式中、Ａ1、ＢおよびＸは上記と同じである。）で表
されるペプチドチオールエステルが製造されるものであ
ってもよい。
【００２３】さらに、工程（４）は、工程（３）におい
て、Ｆｍｏｃ化アミノ酸を付加する操作を繰り返して得
られたＦｍｏｃ化ペプチドチオールエステル樹脂と、脱
離試薬とを反応させることによって、化学式（８）
【化３７】 Ｆｍｏｃ-Ａn-Ａn-1-・・・-Ａ2-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ （８） （式中、Ｆｍｏｃ、Ａn、Ａn-1、Ａ2、Ａ1、Ｂ、Ｘおよ
びｎは前記と同じである。）で表されるＦｍｏｃ化ペプ
チドチオールエステルを、Ｆｍｏｃ化ペプチドチオール
エステル樹脂から取り出し、続いて、得られたＦｍｏｃ
化ペプチドチオールエステルと上記のＦｍｏｃ基除去試
薬とを反応させることによって、化学式（６）
【化３８】 Ｈ-Ａn-Ａn-1-・・・-Ａ2-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ （６） （式中、Ａn、Ａn-1、Ａ2、Ａ1、Ｂ、Ｘおよびｎは前記
と同じである。）で表されるペプチドチオールエステル
が製造されるものである。
【００２４】また、工程（４）は、工程（３）におい
て、Ｆｍｏｃ化アミノ酸を付加する操作を繰り返して得
られたＦｍｏｃ化ペプチドチオールエステル樹脂と、上
記のＦｍｏｃ基除去試薬とを反応させ、続いて脱離試薬
と反応させることによって、化学式（６）
【化３９】 Ｈ-Ａn-Ａn-1-・・・-Ａ2-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ （６） （式中、Ａn、Ａn-1、Ａ2、Ａ1、Ｂ、Ｘおよびｎは前記
と同じである。）で表されるペプチドチオールエステル
が製造されるものであってもよい。
【００２５】脱離試薬としては、トリフルオロ酢酸など
の弱酸を使用することができる。トリフルオロ酢酸は、
所望によって、性能に影響を与えない範囲内で、エタン
ジチオール、フェノール、水、チオアニソールなどを混
合して使用することができる。また、チオール化合物を
Ｆｍｏｃ化ペプチドチオールエステルの取り出しに使用
することもできる。
【００２６】上記した工程（１）〜工程（４）を行うこ
とによって、環境汚染物質の使用を抑え、また合成操作
上の危険を軽減してペプチドチオールエステルを合成す
ることができる。チオールエステル樹脂に縮合されるア
ミノ酸の種類および縮合数は、所望とするペプチドのア
ミノ酸配列に対応するものであって、縮合数は、通常２
〜５０である。また、工程（１）〜工程（４）の反応
を、市販の自動ペプチド合成機を使用して行わせること
によって、容易にペプチドチオールエステルを合成する
こともできる。市販の自動ペプチド合成機としては、た
とえばアドバンスドケムテック社製マルチペプチドシン
セサイザーＡＣＴシリーズ、アプライドバイオシステム
ズ社製ペプチドシンセサイザー４３３型などを挙げるこ
とができる。反応後のペプチドチオールエステルは、通
常欠陥ペプチドなどを含むので純度が低い。このため、
最終的にＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）など
を用いて精製することによって、高純度のＦｍｏｃ化ペ
プチドチオールエステルまたはペプチドチオールエステ
ルを得ることができる。
【００２７】本発明の方法で製造されたペプチドチオー
ルエステルから、公知の化学反応によって、長鎖のペプ
チドを製造することができる。また、環状ペプチドは、
ペプチドチオールエステル樹脂またはペプチドチオール
エステルに、活性エステル構成成分を単独で反応させる
か、または銀イオンを共存させて活性エステル構成成分
を反応させることによって容易に合成することができ
る。活性エステル構成成分としては、たとえばチオフェ
ノールなどを挙げることができる。また、本発明の方法
で得られたペプチドチオールエステルを出発原料とし
て、さらにアミノ酸を高度に縮合したペプチドを製造す
ることもできる。
【００２８】
【実施例】本発明を実施例に基づいて説明する。なお、
本発明は以下の実施例によって何ら限定されるものでは
ない。
【００２９】（実施例１）Ｆｍｏｃ化グリシン（株式会
社ペプチド研究所製）とβ−メルカプトプロピオン酸
（株式会社ナカライテスク製）とから合成したＦｍｏｃ
−Ｇｌｙ−Ｓ−ＣＨ2ＣＨ2−ＣＯ−ＯＨを樹脂（渡辺化
学工業株式会社製）に反応させて、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−
Ｓ−ＣＨ2ＣＨ2−ＣＯ−ＮＨ−樹脂を調製した。得られ
たＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｓ−ＣＨ2ＣＨ2−ＣＯ−ＮＨ−樹
脂を出発原料とした。グリシン含有量は、０．３６ｍｍ
ｏｌ／ｇ樹脂であった。
【００３０】得られたＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｓ−ＣＨ2Ｃ
Ｈ2−ＣＯ−ＮＨ−樹脂１００ｍｇを、ジメチルホルム
アミド１ｍｌを用いて１分間洗浄し、さらに同様にして
４回洗浄した後、次に示す（操作１）〜（操作４）を繰
り返して、ペプチド鎖の伸長操作を行った。Ｆｍｏｃ化
アミノ酸は、Ｌ−Ｖａｌ、Ｌ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)、Ｌ−Ｖ
ａｌ、Ｌ−Ｔｈｒ(Ｂｕt)、Ｌ−Ｐｈｅ、Ｌ−Ｔｈｒ(Ｂ
ｕt)およびＬ−Ａｓｐ(ＯＢｕt)の各Ｆｍｏｃ化物を順
次用いた。ここで、Ｂｏｃはｔ−ブトキシカルボニル基
を表し、Ｂｕtはｔ−ブチル基を表し、ＯＢｕtはｔ−ブ
チルエステル基を表し、いずれもアミノ酸残基の側鎖の
保護基である。
【００３１】（操作１）上記したＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｓ
−ＣＨ2ＣＨ2−ＣＯ−ＮＨ−樹脂に、表２に示されるＦ
ｍｏｃ基除去試薬溶液（Ａ）１ｍｌを加えて、撹拌しな
がら２５℃で２分間反応させた後、さらにＦｍｏｃ基除
去試薬溶液（Ａ）１ｍｌを加えて２５℃で２５分間反応
させて、Ｆｍｏｃ基を除去してＨ−Ｇｌｙ−Ｓ−ＣＨ2
ＣＨ2−ＣＯ−ＮＨ−樹脂を調製する。
【００３２】
【表２】
【００３３】（操作２）（操作１）で得られたＨ−Ｇｌ
ｙ−Ｓ−ＣＨ2ＣＨ2−ＣＯ−ＮＨ−樹脂を、ジメチルホ
ルムアミド（以下、ＤＭＦという。）１ｍｌを用いて２
５℃で１分間洗浄する。さらに、１−メチル−２−ピロ
リジノン（１−メチル−２−ピロリドン：以下、ＮＭＰ
という。）１ｍｌを用いて２５℃で１分間洗浄する操作
を５回繰り返す。
【００３４】（操作３）（操作２）で得られたＨ−Ｇｌ
ｙ−Ｓ−ＣＨ2ＣＨ2−ＣＯ−ＮＨ−樹脂に、Ｆｍｏｃ化
アミノ酸０．３ｍｍｏｌと１−ヒドロキシベンゾトリア
ゾール０．３ｍｍｏｌを含むＮＭＰ溶液（Ａ）０．７５
ｍｌと、ジイソプロピルカルボジイミド０．３ｍｍｏｌ
を含むＮＭＰ溶液（Ｂ）０．２５ｍｌを加えて、２５℃
で５０分間撹拌して反応させる。得られた樹脂をＮＭＰ
１ｍｌを用いて１分間洗浄する操作を３回繰り返し、さ
らに、ＮＭＰ溶液（Ａ）０．７５ｍｌとＮＭＰ溶液
（Ｂ）０．２５ｍｌを加えて、２５℃で５０分間反応さ
せて、アミノ酸を１個付加したＦｍｏｃ化ペプチドチオ
ールエステル樹脂を調製する。
【００３５】（操作４）（操作３）で得られたＦｍｏｃ
化ペプチドチオールエステル樹脂を、ＮＭＰ１ｍｌを用
いて２５℃で１分間洗浄する操作を５回繰り返す。さら
に、ＤＭＦ１ｍｌを用いて２５℃で１分間洗浄する操作
を５回繰り返して洗浄する。
【００３６】（操作１）〜（操作４）を繰り返して、ペ
プチド鎖を伸長させて、次の化学式（１２）
【化４０】 Ｆｍｏｃ-Ｌ-Ａｓｐ(ＯＢｕt)-Ｌ-Ｔｈｒ(Ｂｕt)-Ｌ-Ｐｈｅ -Ｌ-Ｔｈｒ(Ｂｕt)-Ｌ-Ｖａｌ-Ｌ-Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)-Ｌ-Ｖａｌ-Ｇｌｙ-Ｓ -ＣＨ2ＣＨ2-ＣＯ-ＮＨ-樹脂 （１２） で表されるＦｍｏｃ化ペプチドチオールエステル樹脂を
調製した。
【００３７】Ｆｍｏｃ化ペプチドチオールエステルは、
上記したＦｍｏｃ化ペプチドチオールエステル樹脂か
ら、次のようにして調製した。すなわち、Ｆｍｏｃ化ペ
プチドチオールエステル樹脂を、トリフルオロ酢酸８
２．５％、エタンジチオール２．５％、フェノール５
％、水５％、チオアニソール５％の混合溶液４ｍｌを用
いて室温で３時間処理して、側鎖の保護基を除去すると
同時に、Ｆｍｏｃ化ペプチドチオールエステルを樹脂か
ら取り出し、冷ジエチルエーテルを加えて沈殿させた。
得られた沈殿物を、水とアセトニトリルの混合溶液に溶
解させたのち濾別し、濾液を凍結乾燥して粉末状の粗Ｆ
ｍｏｃ化ペプチドチオールエステルを得た。
【００３８】粗Ｆｍｏｃ化ペプチドチオールエステル
を、逆相ＨＰＬＣ（株式会社ナカライテスク製 Ｃｏｓ
ｍｏｓｉｌ ５Ｃ１８ＡＲ）を用いて精製して、次の化
学式（１３）
【化４１】 Ｆｍｏｃ-Ｌ-Ａｓｐ-Ｌ-Ｔｈｒ-Ｌ-Ｐｈｅ-Ｌ-Ｔｈｒ-Ｌ-Ｖａｌ-Ｌ-Ｌｙｓ -Ｌ-Ｖａｌ-Ｇｌｙ-Ｓ-ＣＨ2ＣＨ2-ＣＯ-ＮＨ2 （１３） で表されるＦｍｏｃ化ペプチドチオールエステル４．０
ｍｇを得た。得られたＦｍｏｃ化ペプチドチオールエス
テルの物性値は次のとおりであった。質量分析の結果、
［Ｍ＋Ｈ］+は、１１７５．１（ｍ／ｚ）（計算値：１
１７５．４）であった。また、アミノ酸分析の結果、Ａ
ｓｐ：１．１４、Ｔｈｒ：１．７８、Ｐｈｅ：１．２
４、Ｖａｌ：１．８４、Ｌｙｓ：０．９９、Ｇｌｙ：
１．００であった。
【００３９】（実施例２）Ｆｍｏｃ化グリシン（株式会
社ペプチド研究所製）とＨＳ−Ｃ(ＣＨ3)2ＣＨ2−ＣＯ
−ＯＨ（自家製）とから合成したＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｓ
−Ｃ（ＣＨ3）2ＣＨ2−ＣＯ−ＯＨを樹脂（渡辺化学工
業株式会社製）に反応させて、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｓ−
Ｃ（ＣＨ3）2ＣＨ2−ＣＯ−ＮＨ−樹脂を調製した。得
られたＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｓ−Ｃ（ＣＨ3）2ＣＨ2−Ｃ
Ｏ−ＮＨ−樹脂を出発原料とした。グリシン含有量は、
０．３６ｍｍｏｌ／ｇ樹脂であった。
【００４０】得られたＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｓ−Ｃ（ＣＨ
3）2ＣＨ2−ＣＯ−ＮＨ−樹脂１００ｍｇを、ＤＭＦ１
ｍｌを用いて１分間洗浄し、さらに同様にして４回洗浄
した後、次に示す（操作１）〜（操作４）を繰り返し
て、ペプチド鎖の伸長操作を行った。Ｆｍｏｃ化アミノ
酸は、Ｌ−Ｐｈｅ、Ｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）、Ｌ−Ｖａ
ｌ、Ｌ−Ｔｈｒ（Ｂｕt）、Ｌ−Ｐｈｅ、Ｌ−Ｔｈｒ
（Ｂｕt）、Ｌ−Ａｓｐ（ＯＢｕt）、Ｌ−Ａｓｐ（ＯＢ
ｕt）およびＬ−Ａｓｐ（ＯＢｕt）の各Ｆｍｏｃ化物を
順次用いた。ここで、Ｂｏｃはｔ−ブトキシカルボニル
基を表し、Ｂｕtはｔ−ブチル基を表し、ＯＢｕtはｔ−
ブチルエステル基を表し、いずれもアミノ酸残基の側鎖
の保護基である。
【００４１】（操作１）上記したＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｓ
−Ｃ（ＣＨ3）2ＣＨ2−ＣＯ−ＮＨ−樹脂に、表３に示
されるＦｍｏｃ基除去試薬溶液（Ｂ）１ｍｌを加えて、
撹拌しながら２５℃で２分間反応させた後、さらにＦｍ
ｏｃ基除去試薬溶液（Ｂ）１ｍｌを加えて２５℃で２５
分間反応させて、Ｆｍｏｃ基を除去してＨ−Ｇｌｙ−Ｓ
−Ｃ（ＣＨ3）2ＣＨ2−ＣＯ−ＮＨ−樹脂を調製する。
【００４２】
【表３】
【００４３】（操作２）（操作１）で得られたＨ−Ｇｌ
ｙ−Ｓ−Ｃ（ＣＨ3）2ＣＨ2−ＣＯ−ＮＨ−樹脂を、Ｄ
ＭＦ１ｍｌを用いて２５℃で１分間洗浄する。さらに、
ＮＭＰ１ｍｌを用いて２５℃で１分間洗浄する操作を５
回繰り返す。
【００４４】（操作３）（操作２）で得られたＨ−Ｇｌ
ｙ−Ｓ−Ｃ（ＣＨ3）2ＣＨ2−ＣＯ−ＮＨ−樹脂に、Ｆ
ｍｏｃ化アミノ酸０．３ｍｍｏｌと１−ヒドロキシベン
ゾトリアゾール０．３ｍｍｏｌを含むＮＭＰ溶液（Ａ）
０．７５ｍｌと、ジイソプロピルカルボジイミド０．３
ｍｍｏｌを含むＮＭＰ溶液（Ｂ）０．２５ｍｌを加え
て、２５℃で５０分間撹拌して反応させる。得られた樹
脂をＮＭＰ１ｍｌを用いて１分間洗浄する操作を３回繰
り返し、さらに、ＮＭＰ溶液（Ａ）０．７５ｍｌとＮＭ
Ｐ溶液（Ｂ）０．２５ｍｌを加えて、２５℃で５０分間
反応させて、アミノ酸を１個付加したＦｍｏｃ化ペプチ
ドチオールエステル樹脂を調製する。
【００４５】（操作４）（操作３）で得られたＦｍｏｃ
化ペプチドチオールエステル樹脂を、ＮＭＰ１ｍｌを用
いて２５℃で１分間洗浄する操作を５回繰り返す。さら
に、ＤＭＦ１ｍｌを用いて２５℃で１分間洗浄する操作
を５回繰り返して洗浄する。
【００４６】（操作１）〜（操作４）を繰り返して、ペ
プチド鎖を伸長させて、次の化学式（１４）
【化４２】 Ｆｍｏｃ-Ｌ-Ａｓｐ(ＯＢｕt)-Ｌ-Ａｓｐ(ＯＢｕt)-Ｌ-Ａｓｐ(ＯＢｕt)-Ｌ -Ｔｈｒ(Ｂｕt)-Ｌ-Ｐｈｅ-Ｌ-Ｔｈｒ(Ｂｕt)-Ｌ-Ｖａｌ-Ｌ-Ｌｙｓ(Ｂｏｃ) -Ｌ-Ｐｈｅ-Ｇｌｙ-Ｓ-Ｃ(ＣＨ3)2ＣＨ2-ＣＯ-ＮＨ-樹脂 （１４） で表されるＦｍｏｃ化ペプチドチオールエステル樹脂を
調製した。
【００４７】Ｆｍｏｃ化ペプチドチオールエステルは、
上記したＦｍｏｃ化ペプチドチオールエステル樹脂か
ら、次のようにして得た。すなわち、Ｆｍｏｃ化ペプチ
ドチオエステル樹脂を、トリフルオロ酢酸８２．５％、
エタンジチオール２．５％、フェノール５％、水５％、
チオアニソール５％の混合溶液２ｍｌを用いて室温で３
時間処理して、側鎖の保護基を除去すると同時に、Ｆｍ
ｏｃ化ペプチドチオールエステルを樹脂から取り出し、
冷ジエチルエーテルを加えて沈殿させた。得られた沈殿
物を、水とアセトニトリルの混合溶液に溶解させたのち
濾別して濾液を凍結乾燥し、粉末状の粗Ｆｍｏｃ化ペプ
チドチオールエステルを得た。
【００４８】粗Ｆｍｏｃ化ポリペプチドチオールエステ
ルを、逆相ＨＰＬＣ（株式会社ナカライテスク製 Ｃｏ
ｓｍｏｓｉｌ ５Ｃ１８ＡＲ）を用いて精製して、次の
化学式（１５）
【化４３】 Ｆｍｏｃ-Ｌ-Ａｓｐ-Ｌ-Ａｓｐ-Ｌ-Ａｓｐ-Ｌ-Ｔｈｒ-Ｌ-Ｐｈｅ-Ｌ-Ｔｈｒ- Ｌ-Ｖａｌ-Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｐｈｅ-Ｇｌｙ-Ｓ-Ｃ（ＣＨ3)2ＣＨ2-ＣＯ-ＮＨ2 （１５） で表されるＦｍｏｃ化ペプチドチオールエステル６．０
ｍｇを得た。得られたＦｍｏｃ化ペプチドチオールエス
テルの物性値は次のとおりであった。質量分析の結果、
［Ｍ＋Ｈ］+は、１４８２．１（ｍ／ｚ）（計算値：１
４８１．６）であった。また、アミノ酸分析の結果、Ａ
ｓｐ：２．６７、Ｔｈｒ：１．５３、Ｐｈｅ：１．８
１、Ｖａｌ：０．７６、Ｌｙｓ：０．８５、Ｇｌｙ：
１．００であった。
【００４９】（実施例３）Ｆｍｏｃ化グリシン（株式会
社ペプチド研究所製）とＨＳ−Ｃ（ＣＨ3）2ＣＨ2−Ｃ
Ｏ−ＯＨ（自家製）から合成したＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｓ
−Ｃ（ＣＨ3）2ＣＨ2−ＣＯ−ＯＨを樹脂（渡辺化学工
業株式会社製）に反応させて、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｓ−
Ｃ（ＣＨ3）2ＣＨ2−ＣＯ−ＮＨ−樹脂２００ｍｇを調
製し、これを出発原料とした。グリシン含有量は０．２
０ｍｍｏｌ／ｇ樹脂であった。
【００５０】得られたＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｓ−Ｃ（ＣＨ
3）2ＣＨ2−ＣＯ−ＮＨ−樹脂２００ｍｇをＮＭＰ４ｍ
ｌを用いて室温にて１分間洗浄し、さらに同様にして３
回洗浄した後、次に示す（操作１）〜（操作４）を繰り
返して、ペプチド鎖の伸長操作を行った。この伸張操作
は、アプライドバイオシステムズ（Applied Biosystem
s）社製のペプチド合成機（モデル４３３）を用いて行
った。Ｆｍｏｃ化アミノ酸は、Ｖａｌ、Ｌｙｓ、Ｖａ
ｌ、Ｔｈｒ（Ｂｕt）、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ（Ｂｕt）、Ａｓ
ｐ（ＯＢｕt）、Ａｓｐ（ＯＢｕt）、Ａｓｐ（ＯＢ
ｕt）、Ａｓｎ（Ｔｒｔ）、Ｔｙｒ（Ｂｕt）、Ｌｙｓ、
Ｔｈｒ（Ｂｕt）、Ｔｙｒ（Ｂｕt）、Ｇｌｕ（ＯＢ
ｕt）、Ｖａｌ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ（Ｂｕt）、Ｖ
ａｌ、Ｃｙｓ（Ａｃｍ）、Ａｓｐ（ＯＢｕt）、Ｐｒ
ｏ、Ｔｈｒ（Ｂｕt）の各Ｆｍｏｃ化物を順次用いた。
ここで、Ｂｕtはｔ−ブチル基を表し、ＯＢtはｔ−ブチ
ルエステル基を表し、Ｔｒｔはトリチル基を表し、Ａｃ
ｍはアセトアミドメチル基を表し、いずれもアミノ酸残
基の側鎖の保護基である。
【００５１】（操作１）上記したＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｓ
−Ｃ（ＣＨ3）2ＣＨ2−ＣＯ−ＮＨ−樹脂に、表２に示
されるＦｍｏｃ基除去試薬溶液（Ａ）４ｍｌを加えて、
撹拌しながら２５℃で２．９分間反応させた後、さらに
Ｆｍｏｃ基除去試薬溶液（Ａ）４ｍｌを加えて２５℃で
１８分間反応させて、Ｆｍｏｃ基を除去してＨ−Ｇｌｙ
−Ｓ−Ｃ（ＣＨ3）2ＣＨ2−ＣＯ−ＮＨ−樹脂を調製す
る。
【００５２】（操作２）（操作１）で得られたＨ−Ｇｌ
ｙ−Ｓ−Ｃ（ＣＨ3）2ＣＨ2−ＣＯ−ＮＨ−樹脂を、Ｎ
ＭＰ４ｍｌを用いて室温にて１分間洗浄し、さらに、Ｎ
ＭＰ４ｍｌを用いて２５℃で１分間洗浄する操作を６回
繰り返す。
【００５３】（操作３）（操作２）で得られたＨ−Ｇｌ
ｙ−Ｓ−Ｃ（ＣＨ3）2ＣＨ2−ＣＯ−ＮＨ−樹脂に、次
の溶液を加えて２５℃で１０分間撹拌して反応させる。
すなわち、Ｆｍｏｃ化アミノ酸１ｍｍｏｌを、１−ヒド
ロキシベンゾトリアゾール（以下、ＨＯＢｔという。）
０．９ｍｍｏｌと２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１
−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム六
フッ化リン塩（2-(1H-benzotriazole-1-yl)-1,1,3,3-te
tramethyluronium hexafluorophosphate）（以下、ＨＢ
ＴＵという。）０．９ｍｍｏｌを含むＤＭＦ溶液２ｍｌ
に溶解し、その溶液にさらにジソプロピルエチルアミン
（以下、ＤＩＥＡという。）２ｍｍｏｌを含むＮＭＰ溶
液１ｍｌを加えてＦｍｏｃ化アミノ酸を活性化させた
後、この溶液を、（操作２）で得られたＨ−Ｇｌｙ−Ｓ
−Ｃ（ＣＨ3）2ＣＨ2−ＣＯ−ＮＨ−樹脂に加えて反応
させる。得られた樹脂をＮＭＰ４ｍｌを用いて１分間洗
浄する操作を６回繰り返し、さらに無水酢酸０．５ｍｏ
ｌ、ＤＩＥＡ０．１２５ｍｏｌ、ＨＯＢｔ０．０１５ｍ
ｏｌを含むＮＭＰ溶液を５ｍｌ加えて５．５分間撹拌
し、未反応のアミノ基をアセチル化し、アミノ酸を１個
付加したＦｍｏｃ化ペプチドチオールエステル樹脂を調
製する。
【００５４】（操作４）（操作３）で得られたＦｍｏｃ
化ペプチドチオールエステル樹脂を、ＮＭＰ４ｍｌ用い
て２５℃で１分間洗浄する操作を５回繰り返して洗浄す
る。
【００５５】（操作１）〜（操作４）を繰り返して、ペ
プチド鎖を伸長させた後、得られたＦｍｏｃ化ペプチド
チオールエステル樹脂から、上記の（操作１）と同様に
してＦｍｏｃ基を除去して、次の化学式（１６）
【化４４】 Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ− Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ａｓｎ−Ａｓｐ −Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ− Ｇｌｙ−Ｓ−Ｃ（ＣＨ3）2ＣＨ2−ＣＯ−ＮＨ−樹脂 （１６） で表されるペプチドチオールエステル樹脂（３５０ｍ
ｇ）を調製した。
【００５６】上記したペプチドチオールエステル樹脂か
ら、ペプチドチオールエステルを次のようにして得た。
すなわち、ペプチドチオールエステル樹脂を、トリフル
オロ酢酸８２．５％、エタンジチオール２．５％、フェ
ノール５％、水５％、チオアニソール５％の混合溶液を
用いて室温で３時間処理して、側鎖の保護基を除去する
と同時に、ペプチドチオールエステルを樹脂から取り出
し、冷ジエチルエーテルを加えて沈殿させた。得られた
沈殿物を、水とアセトニトリルの混合溶媒に溶解させた
のち、濾別して濾液を凍結乾燥し、粉末状の粗ペプチド
チオールエステルを得た。
【００５７】粗ペプチドチオールエステルを、逆相ＨＰ
ＬＣ（株式会社ナカライテスク製Ｃｏｓｍｏｓｉｌ ５
Ｃ１８ＡＲ）を用いて精製して、次の化学式（１７）
【化４５】 Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ− Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ａｓｎ−Ａｓｐ −Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ− Ｇｌｙ−Ｓ−Ｃ（ＣＨ3）2ＣＨ2−ＣＯ−ＮＨ2 （１７） で表されるペプチドチオールエステルを、出発物質であ
る樹脂中のグリシン含有量に対して２２％の収率で得
た。得られたペプチドチオールエステルの物性値は次の
通りであった。質量分析の結果、［Ｍ＋Ｈ］+ は２９８
２．２５（ｍ／ｚ）（計算値：２９８２．３５）であっ
た。また、アミノ酸分析値の結果は，Ａｓｐ：４．９
２、Ｔｈｒ：４．５７、Ｇｌｕ：１．１６、Ｇｌｙ：
２．０６、Ｖａｌ：４．１２、Ｔｙｒ：２．２２、Ｐｈ
ｅ：（１），Ｌｙｓ：２．９１、Ｐｒｏ：０．７８、１
／２Ｃｙｓ：非検出であった。
【００５８】（実施例４）４−メチルベンズヒドリルア
ミン樹脂（以下、ＭＢＨＡ樹脂という。）の塩酸塩（ア
ミノ基含有量０．５ｍｍｏｌ／ｇ樹脂）（株式会社ペプ
チド研究所製）４．９５ｇを、ＤＩＥＡ５％のＮＭＰ溶
液４０ｍｌ中で撹拌しながら１分間中和し洗浄した。こ
の操作をさらに２回繰り返し、ＭＢＨＡ樹脂とした。こ
の樹脂をＮＭＰ４０ｍｌで１分間洗浄し、洗浄操作をさ
らに２回繰り返した。次いで、ＮＭＰ１４ｍｌに溶かし
たｔ−ブトキシカルボニル化β−アラニンベンゾトリア
ゾールエステル（以下、Ｂｏｃ−β−Ａｌａ−ＯＢｔと
いう。）（自家製）４．５ｍｍｏｌを樹脂に加えて、
２．５時間撹拌下で反応させた。この反応液にＤＩＥＡ
２．５ｍｍｏｌを添加し、さらに２０時間反応を続け
た。得られた樹脂をＮＭＰ４０ｍｌで１分間撹拌下で洗
浄し、その操作をさらに４回繰り返した。無水酢酸２０
％およびＤＩＥＡ１０％のＮＭＰ４０ｍｌで樹脂を１０
分間処理し、未反応のアミノ基をアセチル化し、Ｂｏｃ
−β−Ａｌａ−ＭＢＨＡ樹脂を得た。
【００５９】この樹脂をＮＭＰ４０ｍｌで１分間洗浄す
る操作を５回繰り返し、さらに塩化メチレン４０ｍｌで
１分間洗浄する操作を３回繰り返したのち、トリフルオ
ロ酢酸５０％の塩化メチレン溶液６０ｍｌで５分処理し
た。トリフルオロ酢酸の塩化メチレン溶液を除去した
後、新たにトリフルオロ酢酸５０％の塩化メチレン溶液
６０ｍｌを加え２０分処理した。得られたＨ−β−Ａｌ
ａ−ＭＢＨＡ樹脂トリフルオロ酢酸塩を、ＮＭＰ４０ｍ
ｌで１分間洗浄する操作を３回、ＮＭＰ４０ｍｌで０．
５分洗浄する操作を１回行ったのち、ＤＩＥＡ５％のＮ
ＭＰ溶液４０ｍｌで１分間中和する操作を３回繰り返し
た。
【００６０】得られたＨ−β−Ａｌａ−ＭＢＨＡ樹脂を
ＮＭＰ４０ｍｌで１分間洗浄する操作を３回繰り返した
のち、この樹脂をＳ−トリチル化メルカプトプロピオン
酸ベンゾトリアゾールエステル（Ｔｒｔ−Ｓ−ＣＨ2Ｃ
Ｈ2−ＣＯ−ＯＢｔ）（自家製）５．０ｍｍｏｌを溶解
したＮＭＰ１５ｍｌに混合し、１６時間室温で処理し
た。得られたＴｒｔ−Ｓ−ＣＨ2ＣＨ2−ＣＯ−β−Ａｌ
ａ−ＭＢＨＡ樹脂を、ＮＭＰ４０ｍｌで１分間洗浄する
操作を５回繰り返したのち、無水酢酸２０％およびＤＩ
ＥＡ１０％のＮＭＰ溶液２０ｍｌで１０分間処理し、未
反応のメルカプト基をアセチル化した。ＮＭＰ４０ｍｌ
で１分洗浄する操作を５回繰り返しＴｒｔ−Ｓ−ＣＨ2
ＣＨ2−ＣＯ−β−Ａｌａ−ＭＢＨＡ樹脂５．６８ｇを
得た。β−Ａｌａの含有量は、０．４０ｍｍｏｌ／ｇ樹
脂であった。
【００６１】得られたＴｒｔ−Ｓ−ＣＨ2ＣＨ2−ＣＯ−
β−Ａｌａ−ＭＢＨＡ樹脂１．００ｇを、５％の１，２
−エタンジチオールを含むトリフルオロ酢酸溶液１０ｍ
ｌを用いて５分間処理した後、トリフルオロ酢酸溶液を
除去した。さらに、処理時間を１０分間、２０分間、３
０分間として同様の処理を順次行った。得られたＨＳ−
ＣＨ2ＣＨ2−ＣＯ−β−Ａｌａ−ＭＢＨＡ樹脂を塩化メ
チレン１０ｍｌで１分間洗浄する操作を３回、ＮＭＰ１
０ｍｌで０．５分間、１度洗浄したのち、５％のＤＩＥ
Ａを含むＮＭＰ溶液１０ｍｌで１分間洗浄する操作を３
回繰り返した。さらにＮＭＰ１０ｍｌで１分間洗浄した
のち、Ｆｍｏｃ化グリシンベンゾトリアゾールエステル
（Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＢｔ）２．０ｍｍｏｌをＮＭＰ
８ｍｌに溶解させ、室温下１４時間反応させた。樹脂を
ＮＭＰ１０ｍｌで１分間洗浄する操作を５回繰り返し、
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｓ−ＣＨ2ＣＨ2−ＣＯ−β−Ａｌａ
−ＭＢＨＡ樹脂１．１２ｇを得た。グリシンの含有量
は、０．３０ｍｍｏｌ／ｇであった。
【００６２】得られたＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｓ−ＣＨ2Ｃ
Ｈ2−ＣＯ−β−Ａｌａ−ＭＢＨＡ樹脂をＮＭＰ４０ｍ
ｌを用いて室温にて１分間洗浄し、さらに同様にして３
回洗浄した後、次に示す（操作１）〜（操作４）を繰り
返して、ペフチド鎖の伸長操作を行った。この伸張操作
は、アプライドバイオシステムズ（Applied Biosystem
s）社製のペプチド合成機（モデル４３３）を用いて行
った。Ｆｍｏｃ化アミノ酸は、Ｐｈｅ、Ｇｌｙ、Ｐｈ
ｅ、Ｐｒｏの各Ｆｍｏｃ化物を順次用いた。
【００６３】（操作１）上記したＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｓ
−ＣＨ2ＣＨ2−ＣＯ−β−Ａｌａ−ＭＢＨＡ樹脂に、表
２に示されるＦｍｏｃ基除去試薬溶液（Ａ）４ｍｌを加
えて、撹拌しながら２５℃で２．９分間反応させた後、
さらにＦｍｏｃ基除去試薬溶液（Ａ）４ｍｌを加えて２
５℃で１８分間反応させて、Ｆｍｏｃ基を除去してＨ−
Ｇｌｙ−Ｓ−ＣＨ2ＣＨ2−ＣＯ−β−Ａｌａ−ＭＢＨＡ
樹脂を調製する。
【００６４】（操作２）（操作１）で得られたＨ−Ｇｌ
ｙ−Ｓ−ＣＨ2ＣＨ2−ＣＯ−β−Ａｌａ−ＭＢＨＡ樹脂
を、ＮＭＰ４ｍｌを用いて室温にて１分間洗浄し、さら
にＮＭＰ４ｍｌを用いて２５℃で１分間洗浄する操作を
６回繰り返す。
【００６５】（操作３）（操作２）で得られたＨ−Ｇｌ
ｙ−Ｓ−ＣＨ2ＣＨ2−ＣＯ−β−Ａｌａ−ＭＢＨＡ樹脂
に、次の溶液を加えて２５℃で１０分間撹拌して反応さ
せる。すなわち、Ｆｍｏｃ化アミノ酸１ｍｍｏｌを、Ｈ
ＯＢｔ０．９ｍｍｏｌとＨＢＴＵ０．９ｍｍｏｌを含む
２ｍｌのＤＭＦ溶液に溶解し、その溶液にさらにＤＩＥ
Ａ２ｍｍｏｌを含むＮＭＰ溶液１ｍｌを加えてＦｍｏｃ
化アミノ酸を活性化した後、この溶液を、（操作２）で
得られたＨ−Ｇｌｙ−Ｓ−ＣＨ2ＣＨ2−ＣＯ−β−Ａｌ
ａ−ＭＢＨＡ樹脂に加えて反応させる。得られた樹脂を
ＮＭＰ４ｍｌを用いて１分間洗浄する操作を６回繰り返
し、さらに無水酢酸０．５ｍｏｌ、ＤＩＥＡ０．１２５
ｍｏｌ、ＨＯＢｔ０．０１５ｍｏｌを含むＮＭＰ溶液を
５ｍｌ加えて５．５分間撹拌し、未反応のアミノ基をア
セチル化したのち、アミノ酸を１個付加したＦｍｏｃ化
ペプチドチオールエステル樹脂を調製する。
【００６６】（操作４）（操作３）で得られたＦｍｏｃ
化ペプチドチオールエステル樹脂を、ＮＭＰ４ｍｌ用い
て２５℃で１分間洗浄する操作を５回繰り返して洗浄す
る。
【００６７】（操作１）〜（操作４）を繰り返して、ペ
プチド鎖を伸長させた後、得られたＦｍｏｃ化ペプチド
チオールエステル樹脂から、上記の（操作１）と同様に
してＦｍｏｃ基を除去して、次の化学式（１８）
【化４６】 Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｓ−ＣＨ2ＣＨ2−ＣＯ−β− Ａｌａ−ＭＢＨＡ樹脂 （１８） で表されるペプチドチオールエステル樹脂を調製した。
【００６８】上記したペプチドチオールエステル樹脂か
ら、環状ペプチドを次のようにして得た。すなわち、ペ
プチドチオールエステル樹脂５．０ｍｇを、チオフェノ
ール５％のＮＭＰ溶液０．１ｍｌに室温あるいは加温下
懸濁させ、１２時間から４８時間撹拌した。得られた粗
環状ペプチドを、逆相ＨＰＬＣ（株式会社ナカライテス
ク製Ｃｏｓｍｏｓｉｌ ５Ｃ１８ＡＲ）を用いて精製し
て、次の化学式（１９）
【化４７】 ｃｙｃｌｏ−（Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ） （１９） で表される環状ペプチドを、出発物質である樹脂中のグ
リシン含有量を基準にして８．６％の収率で得た。
【００６９】得られた環状ペプチドの物性値は次の通り
であった。質量分析の結果、［Ｍ＋Ｈ］+は５０６．４
（ｍ／ｚ）（計算値：５０６．２）であった。また、ア
ミノ酸分析値の結果は、Ｇｌｙ：２、Ｐｒｏ：１．０
４、Ｐｈｅ：２．０４であった。
【００７０】
【発明の効果】以上、詳細かつ具体的に説明したよう
に、本発明のペプチドチオールエステルの製造方法によ
れば、チオールエステル結合を介して樹脂に固定された
アミノ酸のアミノ末端に保護基として結合させたＦｍｏ
ｃ基を、特定のＦｍｏｃ基除去試薬を用いて除去した
後、Ｆｍｏｃ化アミノ酸を付加させ、次いでＦｍｏｃ基
を除去し、Ｆｍｏｃ化アミノ酸を付加する反応を繰り返
してＦｍｏｃ化ペプチドチオールエステル樹脂を得、こ
れよりＦｍｏｃ基を除去して樹脂から取り出すか、樹脂
から取り出した後Ｆｍｏｃ基を除去することによって、
任意のアミノ酸配列を有し、かつ任意のペプチド結合数
を有したペプチドチオールエステルを高精度かつ高純度
で容易に製造することができ、さらに環境汚染を軽減
し、安全に製造することができるという効果を奏する。
また、本発明によって製造したペプチドチオールエステ
ルまたは中間体として得られるＦｍｏｃ化ペプチドチオ
ールエステルを原料とすることによって、長鎖ペプチ
ド、環状ペプチドなどが極めて容易に合成できることか
ら、これらのペプチドを原料とする種々の医薬品の開発
が容易となるという効果を奏する。

Claims (6)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 化学式（１） 【化１】Ｈ-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ （１） （式中、Ａ1およびＢはアミノ酸残基である。またＸは
    硫黄原子と結合してチオールエステルを構成する成分で
    ある。）で表されるペプチドチオールエステルの製造方
    法であって、下記の（１）〜（４）の工程からなること
    を特徴とするペプチドチオールエステルの製造方法。 （１）９−フルオレニルメトキシカルボニル化アミノ酸
    誘導体（Ｆｍｏｃ化アミノ酸誘導体）と樹脂とを反応さ
    せることによって、化学式（２） 【化２】Ｆｍｏｃ-Ｂ-Ｓ-Ｘ-樹脂 （２） （式中、Ｆｍｏｃは９−フルオレニルメトキシカルボニ
    ル基である。またＢおよびＸは上記と同じである。そし
    て樹脂は合成樹脂である。）で表されるＦｍｏｃ化アミ
    ノ酸チオールエステル樹脂を生成させる工程。 （２）工程（１）で得られたＦｍｏｃ化アミノ酸チオー
    ルエステル樹脂とＦｍｏｃ基除去試薬とを反応させるこ
    とによって、化学式（３） 【化３】Ｈ-Ｂ-Ｓ-Ｘ-樹脂 （３） （式中、Ｂ、Ｘおよび樹脂は上記と同じである。）で表
    されるアミノ酸チオールエステル樹脂を生成させる工
    程。 （３）工程（２）で得られたアミノ酸チオールエステル
    樹脂とＦｍｏｃ化アミノ酸とを反応させることによっ
    て、化学式（４） 【化４】Ｆｍｏｃ-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ-樹脂 （４） （式中、Ｆｍｏｃ、Ａ1、Ｂ、Ｘおよび樹脂は上記と同
    じである。）で表されるＦｍｏｃ化ペプチドチオールエ
    ステル樹脂を生成させる工程。 （４）工程（３）で得られたＦｍｏｃ化ペプチドチオー
    ルエステル樹脂と脱離試薬とを反応させて、化学式
    （５） 【化５】Ｆｍｏｃ-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ （５） （式中、Ｆｍｏｃ、Ａ1、ＢおよびＸは上記と同じであ
    る。）で表されるＦｍｏｃ化ペプチドチオールエステル
    を生成させ、続いてＦｍｏｃ基除去試薬と反応させる
    か、または工程（３）で得られたＦｍｏｃ化ペプチドチ
    オールエステル樹脂とＦｍｏｃ基除去試薬とを反応さ
    せ、続いて脱離試薬と反応させることによって、化学式
    （１） 【化６】Ｈ-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ （１） （式中、Ａ1、ＢおよびＸは上記と同じである。）で表
    されるペプチドチオールエステルを生成させる工程。
  2. 【請求項２】 請求項１記載のＦｍｏｃ基除去試薬が、
    １−メチルピロリジンまたはヘキサメチレンイミンから
    選ばれる１種以上を含むものであることを特徴とする請
    求項１記載のペプチドチオールエステルの製造方法。
  3. 【請求項３】 請求項１記載のＦｍｏｃ基除去試薬が、
    １−メチルピロリジンまたはヘキサメチレンイミンから
    選ばれる１種以上と１−ヒドロキシベンゾトリアゾール
    との混合物であることを特徴とする請求項１記載のペプ
    チドチオールエステルの製造方法。
  4. 【請求項４】 化学式（６） 【化７】 Ｈ-Ａn-Ａn-1-・・・-Ａ2-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ （６） （式中、Ａn、Ａn-1、Ａ2、Ａ1およびＢはアミノ酸残基
    である。またＸは硫黄原子と結合してチオールエステル
    を構成する成分である。そしてｎは正整数である。）で
    表されるペプチドチオールエステルの製造方法であっ
    て、下記の（１）〜（４）の工程からなることを特徴と
    するペプチドチオールエステルの製造方法。 （１）９−フルオレニルメトキシカルボニル化アミノ酸
    誘導体（Ｆｍｏｃ化アミノ酸誘導体）と樹脂とを反応さ
    せることによって、化学式（２） 【化８】Ｆｍｏｃ-Ｂ-Ｓ-Ｘ-樹脂 （２） （式中、Ｆｍｏｃは９−フルオレニルメトキシカルボニ
    ル基である。またＢおよびＸは上記と同じである。そし
    て樹脂は合成樹脂である。）で表されるＦｍｏｃ化アミ
    ノ酸チオールエステル樹脂を生成させる工程。 （２）工程（１）で得られたＦｍｏｃ化アミノ酸チオー
    ルエステル樹脂とＦｍｏｃ基除去試薬とを反応させるこ
    とによって、化学式（３） 【化９】Ｈ-Ｂ-Ｓ-Ｘ-樹脂 （３） （式中、Ｂ、Ｘおよび樹脂は上記と同じである。）で表
    されるアミノ酸チオールエステル樹脂を生成させる工
    程。 （３）工程（２）で得られたアミノ酸チオールエステル
    樹脂とＦｍｏｃ化アミノ酸とを反応させることによっ
    て、化学式（４） 【化１０】Ｆｍｏｃ-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ-樹脂 （４） （式中、Ｆｍｏｃ、Ａ1、Ｂ、Ｘおよび樹脂は上記と同
    じである。）で表されるＦｍｏｃ化ペプチドチオールエ
    ステル樹脂を生成させ、該Ｆｍｏｃ化ペプチドチオール
    エステル樹脂について、工程（２）〜工程（３）に準じ
    て、Ｆｍｏｃ基を除去した後、さらにＦｍｏｃ化アミノ
    酸を付加する操作を（ｎ−１）回繰り返すことによっ
    て、化学式（７） 【化１１】 Ｆｍｏｃ-Ａn-Ａn-1-・・・-Ａ2-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ-樹脂 （７） （式中、Ｆｍｏｃ、Ａn、Ａn-1、Ａ2、Ａ1、Ｂ、Ｘ、樹
    脂およびｎは上記と同じである。）で表されるＦｍｏｃ
    化ペプチドチオールエステル樹脂を生成させる工程。 （４）工程（３）で得られたＦｍｏｃ化ペプチドチオー
    ルエステル樹脂と脱離試薬とを反応させて、化学式
    （８） 【化１２】 Ｆｍｏｃ-Ａn-Ａn-1-・・・-Ａ2-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ （８） （式中、Ｆｍｏｃ、Ａn、Ａn-1、Ａ2、Ａ1、Ｂ、Ｘおよ
    びｎは上記と同じである。）で表されるＦｍｏｃ化ペプ
    チドチオールエステルを生成させ、続いてＦｍｏｃ基除
    去試薬と反応させるか、または工程（３）で得られたＦ
    ｍｏｃ化ペプチドチオールエステル樹脂とＦｍｏｃ基除
    去試薬とを反応させ、続いて脱離試薬と反応させること
    によって、化学式（６） 【化１３】 Ｈ-Ａn-Ａn-1-・・・-Ａ2-Ａ1-Ｂ-Ｓ-Ｘ （６） （式中、Ａn、Ａn-1、Ａ2、Ａ1、Ｂ、Ｘおよびｎは上記
    と同じである。）で表されるペプチドチオールエステル
    を生成させる工程。
  5. 【請求項５】 請求項４記載のＦｍｏｃ基除去試薬が、
    １−メチルピロリジンまたはヘキサメチレンイミンから
    選ばれる１種以上を含むものであることを特徴とする請
    求項４記載のペプチドチオールエステルの製造方法。
  6. 【請求項６】 請求項４記載のＦｍｏｃ基除去試薬が、
    １−メチルピロリジンまたはヘキサメチレンイミンから
    選ばれる１種以上と１−ヒドロキシベンゾトリアゾール
    との混合物であることを特徴とする請求項４記載のペプ
    チドチオールエステルの製造方法。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2798180A1 (fr) 1999-07-30 2001-03-09 Unisia Jecs Corp Piston de moteur a combustion interne et procede pour sa realisation
WO2007043615A1 (ja) * 2005-10-14 2007-04-19 Osaka University ペプチドエステル試薬、およびそのライゲーションまたはチオエステル化合物の製造のための使用
WO2008044628A1 (fr) 2006-10-06 2008-04-17 Tokai University Educational System Procédé de production de peptide thioester

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004506221A (ja) * 2000-08-11 2004-02-26 インヴィトロジェン　コーポレーション 高度に均一な電気泳動用分子マーカー
US20040014082A1 (en) * 2000-08-11 2004-01-22 Invitrogen Corporation Highly homogeneous molecular markers for electrophoresis
TWI243826B (en) * 2001-07-19 2005-11-21 Akzo Nobel Nv Process for the preparation of peptides
IL150601A (en) * 2001-07-19 2010-06-30 Organon Nv Process for rapid synthesis of peptides within a solution using the back of an activated carboxyl component and destruction of the residual activated carboxyl component

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3644035B2 (ja) * 1993-12-08 2005-04-27 三菱ウェルファーマ株式会社 新規な合成ペプチド，それを含有する肺サーファクタント及び呼吸窮迫症候群治療剤

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2798180A1 (fr) 1999-07-30 2001-03-09 Unisia Jecs Corp Piston de moteur a combustion interne et procede pour sa realisation
WO2007043615A1 (ja) * 2005-10-14 2007-04-19 Osaka University ペプチドエステル試薬、およびそのライゲーションまたはチオエステル化合物の製造のための使用
WO2008044628A1 (fr) 2006-10-06 2008-04-17 Tokai University Educational System Procédé de production de peptide thioester
JP5119159B2 (ja) * 2006-10-06 2013-01-16 学校法人東海大学 ペプチドチオエステルの製造方法

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