JP5445456B2 - ジベンゾフルベンの除去方法 - Google Patents
ジベンゾフルベンの除去方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5445456B2 JP5445456B2 JP2010523889A JP2010523889A JP5445456B2 JP 5445456 B2 JP5445456 B2 JP 5445456B2 JP 2010523889 A JP2010523889 A JP 2010523889A JP 2010523889 A JP2010523889 A JP 2010523889A JP 5445456 B2 JP5445456 B2 JP 5445456B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- protected
- amino acid
- peptide
- fmoc
- group
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 72
- ZYASLTYCYTYKFC-UHFFFAOYSA-N 9-methylidenefluorene Chemical compound C1=CC=C2C(=C)C3=CC=CC=C3C2=C1 ZYASLTYCYTYKFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 11
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 171
- -1 amino acid compound Chemical class 0.000 claims description 152
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 66
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 claims description 56
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 55
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 claims description 47
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 claims description 46
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 claims description 42
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 37
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 36
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 31
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 30
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 29
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 28
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 claims description 27
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 claims description 27
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 claims description 27
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 26
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 25
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 24
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 17
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 14
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- LTEKQAPRXFBRNN-UHFFFAOYSA-N piperidin-4-ylmethanamine Chemical group NCC1CCNCC1 LTEKQAPRXFBRNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000012190 activator Substances 0.000 claims description 11
- VHRGRCVQAFMJIZ-UHFFFAOYSA-N cadaverine Chemical compound NCCCCCN VHRGRCVQAFMJIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000005580 one pot reaction Methods 0.000 claims description 8
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 5
- YFJAIURZMRJPDB-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpiperidin-4-amine Chemical compound CN(C)C1CCNCC1 YFJAIURZMRJPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- SSJXIUAHEKJCMH-UHFFFAOYSA-N cyclohexane-1,2-diamine Chemical compound NC1CCCCC1N SSJXIUAHEKJCMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 150000004985 diamines Chemical class 0.000 claims description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 158
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 131
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 131
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 69
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 57
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Substances CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 52
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 46
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical compound CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 44
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 39
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 39
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 34
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 33
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 27
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 26
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 25
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 23
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 22
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 22
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 19
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 19
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 19
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 17
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 17
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 17
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 16
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 15
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 15
- 125000004213 tert-butoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(O*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 15
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 13
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 13
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 12
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 12
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 11
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 11
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical class O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 11
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 11
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 11
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 9
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 9
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 8
- GQHTUMJGOHRCHB-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,6,7,8,9,10-octahydropyrimido[1,2-a]azepine Chemical compound C1CCCCN2CCCN=C21 GQHTUMJGOHRCHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 7
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 7
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XSJVWZAETSBXKU-UHFFFAOYSA-N 2-ethoxypropane Chemical compound CCOC(C)C XSJVWZAETSBXKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 6
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 6
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 6
- PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N carbonyldiimidazole Chemical compound C1=CN=CN1C(=O)N1C=CN=C1 PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 6
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 6
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 6
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 6
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 6
- 238000010626 work up procedure Methods 0.000 description 6
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- FPIRBHDGWMWJEP-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxy-7-azabenzotriazole Chemical compound C1=CN=C2N(O)N=NC2=C1 FPIRBHDGWMWJEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 5
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 5
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 5
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 5
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 5
- 125000000467 secondary amino group Chemical group [H]N([*:1])[*:2] 0.000 description 5
- GMKMEZVLHJARHF-UHFFFAOYSA-N 2,6-diaminopimelic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CCCC(N)C(O)=O GMKMEZVLHJARHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- TZCYLJGNWDVJRA-UHFFFAOYSA-N 6-chloro-1-hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=C(Cl)C=C2N(O)N=NC2=C1 TZCYLJGNWDVJRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 4
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 4
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 4
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 4
- NOOJLZTTWSNHOX-UWVGGRQHSA-N Melanostatin Chemical compound NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 NOOJLZTTWSNHOX-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 4
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 4
- REITVGIIZHFVGU-IBGZPJMESA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]propanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](COC(C)(C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 REITVGIIZHFVGU-IBGZPJMESA-N 0.000 description 3
- KSDTXRUIZMTBNV-INIZCTEOSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)butanedioic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 KSDTXRUIZMTBNV-INIZCTEOSA-N 0.000 description 3
- HNICLNKVURBTKV-NDEPHWFRSA-N (2s)-5-[[amino-[(2,2,4,6,7-pentamethyl-3h-1-benzofuran-5-yl)sulfonylamino]methylidene]amino]-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)pentanoic acid Chemical compound C12=CC=CC=C2C2=CC=CC=C2C1COC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)NS(=O)(=O)C1=C(C)C(C)=C2OC(C)(C)CC2=C1C HNICLNKVURBTKV-NDEPHWFRSA-N 0.000 description 3
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BMTZEAOGFDXDAD-UHFFFAOYSA-M 4-(4,6-dimethoxy-1,3,5-triazin-2-yl)-4-methylmorpholin-4-ium;chloride Chemical compound [Cl-].COC1=NC(OC)=NC([N+]2(C)CCOCC2)=N1 BMTZEAOGFDXDAD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N Pyrrolidine Chemical compound C1CCNC1 RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000008065 acid anhydrides Chemical class 0.000 description 3
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 3
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 3
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 3
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 3
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 3
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 3
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 3
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 3
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 3
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 3
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 3
- ZUSSTQCWRDLYJA-UHFFFAOYSA-N n-hydroxy-5-norbornene-2,3-dicarboximide Chemical compound C1=CC2CC1C1C2C(=O)N(O)C1=O ZUSSTQCWRDLYJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000000538 pentafluorophenyl group Chemical group FC1=C(F)C(F)=C(*)C(F)=C1F 0.000 description 3
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 3
- GVIXTVCDNCXXSH-AWEZNQCLSA-N (2s)-2-amino-5-[[amino-[(2,2,4,6,7-pentamethyl-3h-1-benzofuran-5-yl)sulfonylamino]methylidene]amino]pentanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)NS(=O)(=O)C1=C(C)C(C)=C2OC(C)(C)CC2=C1C GVIXTVCDNCXXSH-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 2
- RGNVSYKVCGAEHK-GUBZILKMSA-N (3s)-3-[[2-[[(2s)-2-[(2-aminoacetyl)amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]acetyl]amino]-4-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RGNVSYKVCGAEHK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- CFMZSMGAMPBRBE-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxyisoindole-1,3-dione Chemical compound C1=CC=C2C(=O)N(O)C(=O)C2=C1 CFMZSMGAMPBRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PECYZEOJVXMISF-UHFFFAOYSA-N 3-aminoalanine Chemical compound [NH3+]CC(N)C([O-])=O PECYZEOJVXMISF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HJBLUNHMOKFZQX-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxy-1,2,3-benzotriazin-4-one Chemical compound C1=CC=C2C(=O)N(O)N=NC2=C1 HJBLUNHMOKFZQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RPNUMPOLZDHAAY-UHFFFAOYSA-N Diethylenetriamine Chemical compound NCCNCCN RPNUMPOLZDHAAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N Dimethylamine Chemical compound CNC ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XPDWGBQVDMORPB-UHFFFAOYSA-N Fluoroform Chemical compound FC(F)F XPDWGBQVDMORPB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SCCPDJAQCXWPTF-VKHMYHEASA-N Gly-Asp Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O SCCPDJAQCXWPTF-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N Guanidine Chemical compound NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007821 HATU Substances 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VQTUBCCKSQIDNK-UHFFFAOYSA-N Isobutene Chemical compound CC(C)=C VQTUBCCKSQIDNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 108010064699 MSH Release-Inhibiting Hormone Proteins 0.000 description 2
- 108010007013 Melanocyte-Stimulating Hormones Proteins 0.000 description 2
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N Morpholine Chemical compound C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012317 TBTU Substances 0.000 description 2
- CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N [benzotriazol-1-yloxy(dimethylamino)methylidene]-dimethylazanium Chemical compound C1=CC=C2N(OC(N(C)C)=[N+](C)C)N=NC2=C1 CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000006242 amine protecting group Chemical group 0.000 description 2
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000003857 carboxamides Chemical class 0.000 description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- 125000005982 diphenylmethyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])(*)C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 2
- 108010034892 glycyl-arginyl-glycyl-aspartyl-serine Proteins 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000002815 homogeneous catalyst Substances 0.000 description 2
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 2
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NUJOXMJBOLGQSY-UHFFFAOYSA-N manganese dioxide Chemical compound O=[Mn]=O NUJOXMJBOLGQSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UKVIEHSSVKSQBA-UHFFFAOYSA-N methane;palladium Chemical compound C.[Pd] UKVIEHSSVKSQBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- WGYKZJWCGVVSQN-UHFFFAOYSA-N propylamine Chemical compound CCCN WGYKZJWCGVVSQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AOJFQRQNPXYVLM-UHFFFAOYSA-N pyridin-1-ium;chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC=[NH+]C=C1 AOJFQRQNPXYVLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N sarcosine Chemical compound C[NH2+]CC([O-])=O FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000013341 scale-up Methods 0.000 description 2
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 2
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N (+/-)-DABA Natural products NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QOWBXWFYRXSBAS-UHFFFAOYSA-N (2,4-dimethoxyphenyl)methanamine Chemical compound COC1=CC=C(CN)C(OC)=C1 QOWBXWFYRXSBAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JXGVXCZADZNAMJ-NSHDSACASA-N (2s)-1-phenylmethoxycarbonylpyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)OCC1=CC=CC=C1 JXGVXCZADZNAMJ-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- PWGJDPKCLMLPJW-UHFFFAOYSA-N 1,8-diaminooctane Chemical compound NCCCCCCCCN PWGJDPKCLMLPJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XBNGYFFABRKICK-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,5,6-pentafluorophenol Chemical compound OC1=C(F)C(F)=C(F)C(F)=C1F XBNGYFFABRKICK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LBLYYCQCTBFVLH-UHFFFAOYSA-N 2-Methylbenzenesulfonic acid Chemical compound CC1=CC=CC=C1S(O)(=O)=O LBLYYCQCTBFVLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WOXFMYVTSLAQMO-UHFFFAOYSA-N 2-Pyridinemethanamine Chemical compound NCC1=CC=CC=N1 WOXFMYVTSLAQMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DOGYSAWVOSELAN-UHFFFAOYSA-N 2-dibenzofuran-2-ylacetic acid Chemical compound C1=CC=C2C3=CC(CC(=O)O)=CC=C3OC2=C1 DOGYSAWVOSELAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RIWRBSMFKVOJMN-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-1-phenylpropan-2-ol Chemical compound CC(C)(O)CC1=CC=CC=C1 RIWRBSMFKVOJMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JBSYDIKKOAPATG-UHFFFAOYSA-N 4-methoxy-n-(4-methoxyphenyl)-n-methylaniline Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1N(C)C1=CC=C(OC)C=C1 JBSYDIKKOAPATG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N Diisopropyl ether Chemical compound CC(C)OC(C)C ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 238000010268 HPLC based assay Methods 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical class Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000998 L-alanino group Chemical group [H]N([*])[C@](C([H])([H])[H])([H])C(=O)O[H] 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 125000000393 L-methionino group Chemical group [H]OC(=O)[C@@]([H])(N([H])[*])C([H])([H])C(SC([H])([H])[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000510 L-tryptophano group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2N([H])C([H])=C(C([H])([H])[C@@]([H])(C(O[H])=O)N([H])[*])C2=C1[H] 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 239000000637 Melanocyte-Stimulating Hormone Substances 0.000 description 1
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N N-methyl-guanidine Natural products CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010077895 Sarcosine Proteins 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010724 Wisteria floribunda Nutrition 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- QYCSNMDOZNUZIT-UHFFFAOYSA-N benzhydrylidenehydrazine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=NN)C1=CC=CC=C1 QYCSNMDOZNUZIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- 229940000635 beta-alanine Drugs 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 238000010531 catalytic reduction reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N dimethylaminoamidine Natural products CN(C)C(N)=N SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000012776 electronic material Substances 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- SRCZQMGIVIYBBJ-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;ethyl acetate Chemical compound CCOCC.CCOC(C)=O SRCZQMGIVIYBBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZKQFHRVKCYFVCN-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;hexane Chemical compound CCOCC.CCCCCC ZKQFHRVKCYFVCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WDCDAAMJNUHOIY-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;2-propan-2-yloxypropane Chemical compound CCOC(C)=O.CC(C)OC(C)C WDCDAAMJNUHOIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;hexane Chemical compound CCCCCC.CCOC(C)=O OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- 238000010667 large scale reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-M methanesulfonate group Chemical class CS(=O)(=O)[O-] AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 description 1
- HNTDJKLSENGQMG-UHFFFAOYSA-N methylsulfanylbenzene;trifluoromethanesulfonic acid Chemical compound CSC1=CC=CC=C1.OS(=O)(=O)C(F)(F)F HNTDJKLSENGQMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 1
- UDGSVBYJWHOHNN-UHFFFAOYSA-N n',n'-diethylethane-1,2-diamine Chemical compound CCN(CC)CCN UDGSVBYJWHOHNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MDKQJOKKKZNQDG-UHFFFAOYSA-N n,n'-dimethylhexane-1,6-diamine Chemical compound CNCCCCCCNC MDKQJOKKKZNQDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 1
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 125000006503 p-nitrobenzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1[N+]([O-])=O)C([H])([H])* 0.000 description 1
- NFHFRUOZVGFOOS-UHFFFAOYSA-N palladium;triphenylphosphane Chemical compound [Pd].C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 NFHFRUOZVGFOOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IZUPBVBPLAPZRR-UHFFFAOYSA-N pentachloro-phenol Natural products OC1=C(Cl)C(Cl)=C(Cl)C(Cl)=C1Cl IZUPBVBPLAPZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M potassium hydrogencarbonate Chemical compound [K+].OC([O-])=O TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000011403 purification operation Methods 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006340 racemization Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000001226 reprecipitation Methods 0.000 description 1
- 229940043230 sarcosine Drugs 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N serine phosphoethanolamine Chemical compound [NH3+]CCOP([O-])(=O)OCC([NH3+])C([O-])=O UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- PXQLVRUNWNTZOS-UHFFFAOYSA-N sulfanyl Chemical class [SH] PXQLVRUNWNTZOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001273 sulfonato group Chemical class [O-]S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N tri(propan-2-yl)silicon Chemical compound CC(C)[Si](C(C)C)C(C)C ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 239000003021 water soluble solvent Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
- C07B51/00—Introduction of protecting groups or activating groups, not provided for in the preceding groups
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
- C07B63/00—Purification; Separation; Stabilisation; Use of additives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C227/00—Preparation of compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
- C07C227/38—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
- C07C227/40—Separation; Purification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C231/00—Preparation of carboxylic acid amides
- C07C231/22—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/06—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents
- C07K1/061—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents using protecting groups
- C07K1/063—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents using protecting groups for alpha-amino functions
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/06—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents
- C07K1/061—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents using protecting groups
- C07K1/064—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents using protecting groups for omega-amino or -guanidino functions
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
このような背景から、スケールアップが容易であり、ペプチド医薬品などの工業的生産に適した液相法において、保護基としてFmoc基を使用した場合に、ジベンゾフルベンアミン付加体を効率的に除去できる方法の開発が望まれている。
しかし、この方法は操作性が悪く、大スケールでは再現性が得られない場合もあり、工業的生産には不向きである。また、目的の脱保護されたペプチドが油状物の場合にはこの方法は用いることができず、該ペプチドが結晶化することが必要である。さらに、ペプチド鎖が短い段階ではペプチド自体が炭化水素溶媒に溶解してしまい回収率が低下するなどの問題もある。
すなわち、本発明は以下を包含する。
該反応混合物を二酸化炭素と接触させる工程、およびジベンゾフルベンアミン付加体の炭酸塩を除去する工程
を含むことを特徴とする方法。
[2]Fmoc基で保護されたアミノ酸化合物の脱保護により生成するジベンゾフルベンを除去する方法であって、
脱保護反応中または反応後の反応混合物に、窒素原子が少なくとも一つの水素原子を有するアミン化合物を混合してジベンゾフルベンアミン付加体を含む混合物を得る工程、該混合物を二酸化炭素と接触させる工程、およびジベンゾフルベンアミン付加体の炭酸塩を除去する工程
を含むことを特徴とする方法。
[3]ジベンゾフルベンアミン付加体の炭酸塩を、酢酸エステル、クロロホルム、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、アセトンおよびエーテルから選ばれる少なくとも一種を含む溶媒中で析出させる、上記[1]または[2]記載の方法。
[4]ジベンゾフルベンアミン付加体の炭酸塩を濾過により除去する、上記[3]記載の方法。
[5]窒素原子が少なくとも一つの水素原子を有するアミン化合物が、ジアミン類である上記[1]〜[4]のいずれかに記載の方法。
[6]窒素原子が少なくとも一つの水素原子を有するアミン化合物が、4−アミノメチルピペリジン、4−ジメチルアミノピペリジン、1,5−ジアミノペンタンおよび1,2−ジアミノシクロヘキサンから選ばれる、上記[5]記載の方法。
[7]Fmoc基で保護されたアミノ酸化合物が、Fmoc基で保護されたアミノ酸エステル、Fmoc基で保護されたアミノ酸アミド又はFmoc基で保護されたペプチドである、上記[1]〜[6]のいずれかに記載の方法。
[8]上記[7]記載の方法を含む、液相合成法によるペプチドの製造方法。
[9](1)C−保護ペプチド、C−保護アミノ酸またはC−保護アミノ酸アミドを、N−Fmocアミノ酸と、縮合剤の存在下縮合させる工程、および/または
(2)C−保護ペプチド、C−保護アミノ酸またはC−保護アミノ酸アミドを、N−Fmocアミノ酸活性エステルと縮合させる工程
を含む上記[8]記載の方法。
[10]上記[9]の(1)記載の工程において、さらに活性化剤を存在させる、上記[9]記載の方法。
[11]上記[1]記載の工程で得られた中間体ペプチドを固体として単離せずに上記[9]記載の工程に供することを含む、上記[9]または[10]記載の方法。
[12]ワンポット合成で行う、上記[8]〜[11]のいずれかに記載の方法。
特に、本発明の方法をペプチドの液相合成法に適用した場合、ジベンゾフルベンアミン付加体を濾過のみで簡便に除去し、さらに必要に応じて塩酸塩などにすることにより、脱保護により得られるN末端無保護のペプチドを簡便に精製することができる。したがって、次工程のペプチド伸長反応へそのまま繋ぐことができるので、ペプチドのワンポット合成が可能となり、工業的生産に特に好適である。
(1)Boc:tert−ブトキシカルボニル
(2)Z:ベンジルオキシカルボニル
(3)Fmoc:9−フルオレニルメトキシカルボニル
(4)Bsmoc:1,1−ジオキソベンゾ[b]チオフェン−2−イルメトキシカルボニル
(5)Alloc:アリルオキシカルボニル
(6)Ac:アセチル
(7)Pbf:2,2,4,6,7−ペンタメチルジヒドロベンゾフラン−5−スルホニル
(8)Me:メチル
(9)Et:エチル
(10)iPr:イソプロピル
(11)tBu:tert−ブチル
(12)Bzl:ベンジル
(13)Fm:9−フルオレニルメチル
(14)Trt:トリチル
(15)Dpm:ジフェニルメチル
(16)Bpr:1,1−ジメチル−2−フェニル−エチル
(17)Dmb:2,4−ジメトキシベンジル
(18)HOBt:1−ヒドロキシベンゾトリアゾール
(19)6−Cl−HOBt(HOCt):6−クロロ−1−ヒドロキシベンゾトリアゾール
(20)HOAt:1−ヒドロキシ−7−アザベンゾトリアゾール
(21)HOOBt(HODhbt):3−ヒドロキシ−3,4−ジヒドロ−4−オキソ−1.2.3−ベンゾトリアジン
(22)HOSu:N−ヒドロキシスクシンイミド
(23)HOPht:N−ヒドロキシフタルイミド
(24)HONb:N−ヒドロキシ−5−ノルボルネン−2,3−ジカルボキシイミド
(25)Bt:ベンゾトリアゾール−1−イル
(26)Ct:6−クロロベンゾトリアゾール−1−イル
(27)At:7−アザベンゾトリアゾール−1−イル
(28)Dhbt:3,4−ジヒドロ−4−オキソ−1.2.3−ベンゾトリアジン−3−イル
(29)Su:スクシンイミドイル
(30)Pht:フタルイミドイル
(31)Nb:5−ノルボルネン−2,3−ジカルボキシイミドイル
(32)DCC:ジシクロヘキシルカルボジイミド
(33)EDC:1−エチル−3−(3−ジメチルアミノプロピル)−カルボジイミド
(34)EDC.HCl:1−エチル−3−(3−ジメチルアミノプロピル)−カルボジイミド塩酸塩
(35)DIPC:ジイソプロピルカルボジイミド
(36)BOP:1−ベンゾトリアゾリルオキシ−トリス−ジメチルアミノ−ホスホニウム ヘキサフルオロホスフェート
(37)PyBOP:1−ベンゾトリアゾリルオキシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウム ヘキサフルオロホスフェート
(38)PyBroP:ブロモ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウム ヘキサフルオロホスフェート
(39)HBTU:O−(ベンゾトリアゾール−1−イル)−1,1,3,3−テトラメチルウロニウム ヘキサフルオロホスフェート
(40)TBTU:O−ベンゾトリアゾール−1−イル−1,1,3,3−テトラメチルウロニウム テトラフルオロボレート
(41)HCTU:O−(6−クロロベンゾトリアゾール−1−イル)−1,1,3,3−テトラメチルウロニウム ヘキサフルオロホスフェート
(42)HATU:O−(7−アザベンゾトリアゾール−1−イル)−1,1,3,3−テトラメチルウロニウム ヘキサフルオロホスフェート
(43)CDI:カルボニルジイミダゾール
(44)DBU:1,8−ジアザビシクロ〔5,4,0〕−7−ウンデセン
(45)DMT−MM:4−(4,6−ジメトキシ−1,3,5−トリアジン−2−イル)−4−メチルモルホリニウム クロリド
(46)AAn:アミノ酸残基(下付のnは1以上の任意の整数であり、ペプチドC末端からの順番を示す。)
(47)PG0:ペプチドのC末端カルボキシル基またはC末端アミド基の保護基
(48)PGn:アミノ基の保護基(下付のnは1以上の任意の整数であり、AAnのアミノ基の保護基であることを示す。)
(49)HOE:活性化剤
(50)E:活性エステル基
(51)Gly:グリシン
(52)Ala:アラニン
(53)Val:バリン
(54)Leu:ロイシン
(55)Ile:イソロイシン
(56)Met:メチオニン
(57)Phe:フェニルアラニン
(58)Tyr:チロシン
(59)Trp:トリプトファン
(60)His:ヒスチジン
(61)Lys:リジン
(62)Arg:アルギニン
(63)Ser:セリン
(64)Thr:トレオニン
(65)Asp:アスパラギン酸
(66)Glu:グルタミン酸
(67)Asn:アスパラギン
(68)Gln:グルタミン
(69)Cys:システイン
(70)Pro:プロリン
(71)Orn:オルニチン
(72)Sar:サルコシン
(73)β−Ala:β−アラニン
(74)GABA:γ−アミノ酪酸
(75)Dap:2,3−ジアミノプロパン酸
PG0で示されるC末端アミド基の保護基としては、Dmb、ビス(4−メトキシフェニル)メチル、トリチル等が挙げられる。
PGnで示されるアミノ基の保護基としては、Boc、Z、Fmoc、Bsmoc、Alloc、Ac等が挙げられる。
Eで示される活性エステル基とは、アミノ基による求核攻撃を受けて「EO−」として容易に脱離し、アミド結合を生成させ得る基を意味し、Bt、Ct、At、OBt、Su、Pht、Nb、ペンタフルオロフェニル等が挙げられる。
本発明のジベンゾフルベンアミンの除去方法は、Fmoc基で保護されたアミノ酸化合物を窒素原子が少なくとも一つの水素原子を有するアミン化合物と反応させることにより脱保護して得られる反応混合物を、二酸化炭素と接触させ、ついで生成するジベンゾフルベンアミン付加体の炭酸塩を除去する工程を含むことを特徴とする。また、Fmoc基で保護されたアミノ酸化合物を窒素原子が水素原子を含まないDBUなどと反応させることにより脱保護して得られる反応混合物に、反応中もしくは反応後に窒素原子が少なくとも一つの水素原子を有するアミン化合物を加えることによりジベンゾフルベンアミン付加体を生成させ、続く二酸化炭素との接触により生成するジベンゾフルベンアミン付加体の炭酸塩を除去する工程を採ることもできる。
かかる操作により、意外なことに脱保護されたアミノ酸化合物が有機溶媒に溶解し、かつ、ジベンゾフルベンアミン付加体の炭酸塩は有機溶媒にほとんど溶解することなく固体として取り扱うことが可能となるため、濾過等の簡便な固液分離手段で分離することにより、ジベンゾフルベンアミン付加体を除去することができる。したがって、結晶化やクロマトグラフィーなどの操作によることなく、所望のアミノ酸化合物を簡便に精製または単離することができる。
ここで、ペプチド、アミノ酸エステル、アミノ酸アミドは、N末端としての1級アミノ基または2級アミノ基の他に、アミン性の側鎖官能基(アミノ基、インドール、グアニジン等)を有していてもよく、これらアミン性の側鎖官能基は保護基で保護されていても良い。またペプチドのC末端のカルボキシル基、アミド基も保護されていても、保護されていなくてもよい。またペプチド、アミノ酸エステル、アミノ酸アミドがカルボキシル基、アミド基及びアミノ基以外の側鎖官能基を有する場合、該側鎖官能基は保護されていても、保護されていなくてもよい。
カルボキシル基が保護されている場合、好ましいカルボキシル基の保護基としてはメチル、エチル、tert−ブチル等の炭素数1〜6のアルキル、ベンジル、p−ニトロベンジル、p−メトキシベンジル、Dpm、アリル、Bpr等が挙げられる。
アミド基が保護されている場合、好ましいアミド基の保護基としてはDmb、ビス(4−メトキシフェニル)メチル等が挙げられる。
「Fmoc基で保護されたアミノ酸化合物」は、N末端アミノ基がFmoc基で保護されており、アミン性の側鎖官能基がある場合、該アミン性の側鎖官能基はFmoc基以外のアミノ保護基で保護されている態様が好ましい。
該窒素原子が少なくとも一つの水素原子を有するアミン化合物は、ジベンゾフルベンアミン付加体が炭酸塩を良好に形成し、該炭酸塩の溶媒中での良好な結晶性の観点から、多価アミン類が好ましく、特に、4−アミノメチルピペリジン、4−ジメチルアミノピペリジン、1,5−ジアミノペンタン、1,2−ジアミノシクロヘキサン、ジエチレントリアミン等が好ましい。
(a)Fmoc基で保護されたアミノ酸化合物と窒素原子が少なくとも一つの水素原子を有するアミン化合物を、有機溶媒中で混合し、アミノ酸化合物とジベンゾフルベンアミン付加体を含む反応混合物を得る工程、
(b)該反応混合物を二酸化炭素と接触させて、ジベンゾフルベンアミン付加体を炭酸塩にする工程、および
(c)ジベンゾフルベンアミン付加体の炭酸塩を反応混合物から除去する工程
により行うことができる。
また、本発明のジベンゾフルベンアミンの除去方法の第二の態様としては、
(a’)Fmoc基で保護されたアミノ酸化合物と窒素原子が水素原子を有さないアミン化合物を、有機溶媒中で混合し、アミノ酸化合物とジベンゾフルベンを含む反応混合物を得る工程、
(b’)工程(a’)の反応中または反応終了後の反応混合物と窒素原子が少なくとも一つの水素原子を有するアミン化合物を、有機溶媒中で混合し、アミノ酸化合物とジベンゾフルベンアミン付加体を含む反応混合物を得る工程、
(c’)該反応混合物を二酸化炭素と接触させて、ジベンゾフルベンアミン付加体を炭酸塩にする工程、および
(d’)ジベンゾフルベンアミン付加体の炭酸塩を反応混合物から除去する工程
により行うこともできる。
「窒素原子が水素原子を有さないアミン化合物」としては、DBUなどが挙げられる。
工程(b’)は、工程(a’)の反応中または反応終了後の反応混合物に窒素原子が少なくとも一つの水素原子を有するアミン化合物を加え、攪拌することにより行うことができる。窒素原子が少なくとも一つの水素原子を有するアミン化合物の使用量、その他の条件は、工程(a)と同様である。
二酸化炭素を接触させる方法としては、特に限定されず、例えば、二酸化炭素の気体を、管を通して吹き込む方法、炭酸水を加える方法、ドライアイスを加える方法等が挙げられ、操作性の観点から、二酸化炭素の気体を管を通して吹き込む方法が好ましい。
固液分離手段としては、濾過、遠心分離、デカントなどの通常の方法を制限なく採用することができ、操作性の観点から濾過が好ましい。
このようにして得られた溶液を濃縮することにより、Fmoc基が脱保護されたアミノ酸化合物を単離することができ、また、アミノ酸化合物の溶液をそのまま、後述のペプチド液相合成法の原料として用いることもできる。
さらに、必要に応じて、該溶液に酸(塩化水素、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、臭化水素酸、トリフルオロ酢酸等)を添加することにより、アミノ酸化合物を酸付加塩(塩酸塩、トルエンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、臭化水素酸塩、トリフルオロ酢酸塩等)として単離してもよい。
工程(c’)および(d’)は、工程(b)および(c)とそれぞれ同様に行うことができる。
アミノ酸化合物がペプチド、アミノ酸エステル又はアミノ酸アミドである場合、本発明のジベンゾフルベンアミンの除去方法は、ペプチドの液相合成法に好適に適用できる。以下、本発明のジベンゾフルベンアミンの除去方法をペプチドの液相合成法に適用した一態様(以下、本明細書において、「本発明のペプチド液相合成法」という。)について説明するが、本発明がこれに限定されないことはいうまでもない。
本発明のペプチド液相合成法に使用される用語の意義について説明する。
本発明のペプチド液相合成法において「ペプチド」とは、C末端がカルボキシル基またはアミド基である場合の両方が含まれる。
本発明のペプチド液相合成法において「Fmoc基で保護されたペプチド、アミノ酸エステル、アミノ酸アミド」の脱保護は、ペプチドの液相合成法に含まれるFmoc基の脱保護であれば、特に限定されない。例えば、後掲のN末端脱保護工程であってもよいし、最終脱保護における側鎖アミノ基の脱保護であってもよい。好ましくは、後掲のペプチド伸長反応において、次工程のカップリングの対象となるアミノ基を生成させる脱保護である。
この場合において、例えば、カルボキシル基が保護されている場合は、「H−AA−OPG0」と表示され、アミノ基が保護されている場合は、「PGn−AA−OH」と表示される。
アミノ基が保護されたアミノ酸のカルボキシル基が活性エステル化されている場合は、「PGn−AA−OE」と表示される。
PGn−AA−OHの対称酸無水物は、「(PGn−AA)2−O」と表示される。
この場合において、例えば、アミド基が保護されている場合は、「H−AA−NHPG0」と表示され、アミノ基が保護されている場合は、「PGn−AA−NH2」と表示される。
この場合において、例えば、C末端が保護されている場合は、「H−AAn’−AAn’−1−・・・−AA1−(OPG0 or NHPG0)」と表示し、さらにN末端が保護されている場合は、「PGn’−AAn’−AAn’−1−・・・−AA1−(OPG0 or NHPG0)」と表示するものとする。
天然アミノ酸としては、Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Ser、Thr、Asn、Gln、Asp、Glu、Lys、Arg、Cys、Met、Phe、Tyr、Trp、His、Pro、Orn、Sar、β−Ala、GABA等又はそのアミド体が挙げられる。
非天然アミノ酸としては、Dap等が挙げられる。
また、当該アミノ酸が側鎖に官能基を有する場合に、該官能基を保護基により保護したアミノ酸とすることもできる。かかる側鎖保護アミノ酸としては、例えば、Gluのγ位又はAspのβ位のカルボキシル基をベンジル基で保護したγ-Bzl−Glu又はβ−Bzl−Asp;Gluのγ位又はAspのβ位のカルボキシル基をtert−ブチル基で保護したγ-tBu−Glu又はβ−tBu−Asp;Lysのε位のアミノ基を保護したε−Z−Lys、ε−Boc−Lys、ε−iPr−ε−Boc−Lys;CysのSH基をフェニルカルバモイル基で保護したS−フェニルカルバモイル−Cys;CysのSH基をトリチル基で保護したS−Trt−Cys;Tyr,Thr及びSerの水酸基をBzlで保護した誘導体;Tyr,Thr及びSerの水酸基をtBuで保護した誘導体;Argのグアニジル基をPbfで保護した誘導体等が挙げられる。
本発明のペプチド液相合成法において「N−保護アミノ酸アミド」とは、アミノ基が保護されており、アミド基が無保護のアミノ酸アミドを意味し、上記表記法によれば、「PGn−AA−NH2」と表示される。
本発明のペプチド液相合成法において「N−保護アミノ酸活性エステル」とは、アミノ基が保護され、カルボキシル基がEにより活性エステル化されたアミノ酸を意味し、上記表記法によれば、「PGn−AA−OE」と表示される。
なお、N−保護アミノ酸活性エステルとして単離可能なものは、Eがペンタフルオロフェニル、SuまたはNbであるものであり、その他のN−保護アミノ酸活性エステルは、N−保護アミノ酸を縮合剤(例えば、EDC)と活性化剤(例えば、HOBt)と反応させることにより、反応系中で生成される。
本発明のペプチド液相合成法において「N−Fmocアミノ酸アミド」とは、アミノ基がFmocで保護されており、アミド基が無保護のアミノ酸残基を意味し、上記表記法によれば、「Fmoc−AA−NH2」と表示される。
本発明のペプチド液相合成法において「N−Fmocアミノ酸活性エステル」とは、アミノ基がFmocで保護され、カルボキシル基がEにより活性エステル化された任意のアミノ酸残基を意味し、上記表記法によれば、「Fmoc−AA−OE」と表示される。
N−Fmocアミノ酸活性エステルとして単離可能なものは、Eがペンタフルオロフェニル、SuまたはNbであるものであり、その他のN−Fmocアミノ酸活性エステルは、N−Fmocアミノ酸を縮合剤(例えば、EDC)と活性化剤(例えば、HOBt)と反応させることにより、反応系中で生成される。
本発明において「C−保護アミノ酸」とは、カルボキシル基が保護されており、アミノ基が保護されていないアミノ酸を意味し、上記表記法によれば、「H−AA−OPG0」と表示される。
本発明において「C−保護アミノ酸アミド」とは、アミド基が保護されており、アミノ基が保護されていないアミノ酸を意味し、上記表記法によれば、「H−AA−NHPG0」と表示される。
本発明のペプチド液相合成法において「N,C−ジ保護ペプチド」とは、N末端とC末端の両方が保護されている任意の個数のアミノ酸残基を有するペプチド意味し、上記表記法によれば、「PGn’−AAn’−AAn’−1−・・・−AA1−(OPG0 or NHPG0)」(n’は2以上の整数を示す)と表示される。また、例えば、N末端がFmocで保護されていて、C末端が保護されているN,C−ジ保護ペプチドは「N−Fmoc−C−保護ペプチド」と表示するものとする。
本発明のペプチド液相合成法において「中間体ペプチド」とは、ペプチド液相合成における各工程で得られる合成中間体であるペプチドであって、最終的に目的とするペプチドよりアミノ酸残基数が少ないものを意味する。好ましい中間体ペプチドは、後掲のN末端脱保護後に得られるC−保護ペプチドである。
本発明のペプチド液相合成法において「活性化剤」とは、縮合剤との共存化でカルボキシル基を活性エステル、対称酸無水物などに導いてアミド結合を形成させやすくする試薬であり、「HOE」で示される。具体的には、HOBt、HOCt、HOAt、HOOBt、HOSu、HOPht、HONB、ペンタフルオロフェノール等が挙げられる。
本発明のペプチド液相合成法により最終的に合成されるペプチドは特に限定されるものはないが、合成医薬ペプチド、化粧品、電子材料(有機ELなど)、食品などの合成に好適に利用可能である。
該ペプチドの構成アミノ酸残基数は特に限定されないが、一般的な合成ペプチドにみられる2〜20残基程度が好適である。
また、本発明のペプチド液相合成法は、アミノ酸側鎖官能基および/またはC末端保護基が酸で脱保護される保護基で保護されたC−保護ペプチド(例えば、ε−Boc−Lys、S−tBu−Cysなどを含むペプチド)を使用したペプチド液相合成法などに適している。
具体的には、下記スキームに示す方法、すなわち、
(1)C−保護ペプチド(Pn’)(n’は、2以上の任意の整数を示し、アミノ酸残基がn’個のペプチドであることを意味する。以下、同様。)または一回目のペプチド伸長においてはC−保護アミノ酸又はC−保護アミノ酸アミド(A1)(以下、本明細書において「C−保護ペプチド(Pn)等」(nは、1以上の任意の整数を示し、nが1の場合は、C−保護アミノ酸又はC−保護アミノ酸アミド(A1)を意味する。以下、同様。)と総称する。)を、N−保護アミノ酸(PAn+1)と、縮合剤(および好ましくは活性化剤)の存在下、縮合させるか、あるいは
(2)C−保護ペプチド(Pn)等を、N−保護アミノ酸活性エステル(PAEn+1)と縮合させて、
アミノ酸残基が一つ伸長したN,C−ジ保護ペプチド(PPn+1)を得る工程(以下、本明細書においてそれぞれ「カップリング工程(1)」および「カップリング工程(2)」という。)、
得られたN,C−ジ保護ペプチド(PPn+1)のアミノ保護基を脱保護してC−保護ペプチド(Pn+1)を得る工程(以下、本明細書において「N末端脱保護工程」という。)を1サイクルとする反応(以下、本明細書において「ペプチド伸長反応」という。)の繰り返しからなる方法であり、
最終段階で、C−保護ペプチド(Pm)のカルボキシ保護基又はアミド保護基および側鎖官能基が保護されている場合は当該保護基を脱保護することにより(以下、本明細書において「最終脱保護工程」という。)、目的のペプチド(P)が得られる。
本発明のペプチド合成法において、n番目のペプチド伸長反応を「ペプチド伸長反応(n)」、ペプチド伸長反応(n)を構成する各工程をそれぞれ「カップリング工程(1−n)」、「カップリング工程(2−n)」および「N末端脱保護工程(n)」と表示するものとする。
本発明のペプチド液相合成法は、一連のペプチド伸長反応の少なくとも一回で、N−Fmocアミノ酸を使用してカップリング工程(1)を行うか、またはN−Fmocアミノ酸活性エステルを使用してカップリング工程(2)を行いN−Fmoc−C−保護ペプチドを得、
続くN末端脱保護工程でN−Fmoc−C−保護ペプチドを、本発明のジベンゾフルベンの除去方法、例えば第一態様においては、窒素原子が少なくとも一つの水素原子を有するアミン化合物と反応させることにより脱保護して、C―保護ペプチド(Pn+1)とジベンゾフルベンアミン付加体を含む混合物を得、その後のワークアップにおいて、該混合物を二酸化炭素と接触させてジベンゾフルベンアミン付加体を炭酸塩とし、該炭酸塩を除去することを特徴とする(以下、「本発明のペプチド伸長反応」といい、n回目のペプチド伸長反応を「本発明のペプチド伸長反応(n)」と表示する。)。以下、本発明のジベンゾフルベンの除去方法の第一態様を適用した場合を説明するが、第二態様も同様に行うことができることはいうまでもない。
本発明のペプチド液相合成法において、少なくとも1回、本発明のペプチド伸長反応が含まれていればよいが、全ての工程を本発明のペプチド伸長反応で行うことが好ましく、それにより目的のペプチドまでワンポットで合成することができる。
以下に、本発明のペプチド伸長反応(n)のスキームを示す。
2−2−1.カップリング工程(1)
本発明のペプチド伸長反応のカップリング工程(1)においては、例えば、溶媒中において、N−Fmocアミノ酸(FAn+1)、C−保護ペプチド(Pn)等および縮合剤を(好ましくは、活性化剤と共に)混合することによって一つアミノ酸残基が伸長したN−Fmoc−C−保護ペプチド(FPn+1)が得られる。添加順序は特に限定はないが、C−保護ペプチド(Pn)等が一つ前のペプチド伸長反応(n−1)によって得られたものである場合は、反応容器中のC−保護ペプチド(Pn)等の溶液にN−Fmocアミノ酸(FAn+1)および縮合剤を添加すればよい。
活性化剤は上記で例示したものを制限無く使用することができ、HOBt、HOOBt、HOCt、HOAt、HONb、HOSu等が好ましい。活性化剤の使用量は、N−Fmocアミノ酸(FAn+1)に対して通常、0〜4.0当量、好ましくは0.1〜1.5当量である。
本発明のペプチド伸長反応のカップリング工程(2)においては、例えば、溶媒中において、N−Fmocアミノ酸活性エステル(FAEn+1)およびC−保護ペプチド(Pn)等を混合することによってN−Fmoc−C−保護ペプチド(FPn+1)が得られる。添加順序は特に限定はないが、C−保護ペプチド(Pn)等が一つ前のペプチド伸長反応(n−1)によって得られたものである場合は、反応容器中のC−保護ペプチド(Pn)等の溶液にN−Fmocアミノ酸活性エステル(FAEn+1)を添加すればよい。
また、塩基、溶媒およびその使用量、反応温度、反応時間等のその他の反応条件は、カップリング工程(1)と同様である。
カップリング工程(1)および(2)の反応終了後、N−Fmocアミノ酸活性エステル(FAEn+1)、N−Fmocアミノ酸のイソウレアエステル、N−Fmocアミノ酸の対称酸無水物などのアミン成分と縮合し得る反応混合物中の残留物や副生成物を除去するため、メルカプト基担持シリカゲル等の固相求核剤除去試薬(例えば、SHシリカ(富士シリシア社製)など)を加え、攪拌後、濾去してもよい。また、洗浄工程にて、炭酸ナトリウムなど弱アルカリ性の水溶液で洗浄して、積極的に活性エステルを失活させてもよい。
本発明のペプチド伸長反応におけるN末端脱保護工程においては、N−Fmoc−C―保護ペプチド(FPn+1)を、溶媒中、アミン化合物(窒素原子が少なくとも一つの水素原子を有するアミン化合物および窒素原子が水素原子を有さないアミン化合物を含む。)と反応させることによりC―保護ペプチド(Pn+1)が得られる。具体的には、カップリング工程で得られたN−Fmoc−C―保護ペプチド(FPn+1)の溶液中にアミンを添加すればよい。
該脱保護反応によって得られる反応混合物を本発明のジベンゾフルベンの除去方法、例えば、C―保護ペプチド(Pn+1)とジベンゾフルベンアミン付加体の混合物を二酸化炭素と接触させて、ジベンゾフルベンアミン付加体の炭酸塩を析出させ、濾去することにより、ジベンゾフルベンアミン付加体を除去することができる。
伸長反応開始時はC−保護ペプチド(Pn)等がC−保護アミノ酸又はC−保護アミノ酸アミドとなる。該C−保護アミノ酸又はC−保護アミノ酸アミドの調製は以下のようにして行うことができる。すなわちN−Fmocアミノ酸のカルボキシル基を常法によりエステル化又はアミド化し、N−Fmoc−C−保護アミノ酸又はN−Fmoc−C−保護アミノ酸アミドを得る。上記と同様、得られたN−Fmoc−C−保護アミノ酸又はN−Fmoc−C−保護アミノ酸アミドを、溶媒中、アミン化合物と反応させることによりC−保護アミノ酸(アミノ酸エステル)又はC−保護アミノ酸アミド(アミノ酸アミド)が得られる。上記と同様に、該脱保護反応によって得られる、C−保護アミノ酸又はC−保護アミノ酸アミドとジベンゾフルベンアミン付加体の混合物を二酸化炭素と接触させてジベンゾフルベンアミン付加体の炭酸塩を析出させ、濾去することにより、ジベンゾフルベンアミン付加体を除去することができる。かかるN−Fmoc−C−保護アミノ酸又はN−Fmoc−C−保護アミノ酸アミドのFmoc基の脱保護も、ここでいうN末端脱保護工程に含まれる。
N末端脱保護工程により単離されたC―保護ペプチド(Pn+1)の溶液を濃縮するか、または濃縮することなく、次のペプチド伸長反応にそのまま用いることができる。
以上のように、本発明の方法により、N末端脱保護工程において、Fmoc基で保護されたアミノ酸化合物をアミン化合物と反応させることにより脱保護して得られる反応混合物からジベンゾフルベンアミン付加体を簡便に除去できるため、ペプチドの液相合成法において、次の縮合工程、すなわち次のペプチド伸長反応を、中間体ペプチドを反応容器から取り出すことなく行うことができる。すなわち、得られた中間体ペプチドを晶析等により固体として単離せずに次の縮合工程を行うことができる。このように、本発明の方法によれば、ペプチドの液相合成法により、目的とする最終ペプチドをワンポット合成することが可能である。
本発明のペプチド合成で、目的のペプチドまで構築されたC−保護ペプチド(Pm)のPG0や側鎖保護基を脱保護することにより、目的のペプチド(P)を得ることができる。
最終脱保護工程は、PG0または側鎖保護基の種類に応じた自体公知の脱保護法を特に制限なく採用することができる。
例えば、Me、Etなどの低級アルキル基の場合は、水又は水性有機溶媒などの溶媒中、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなどの塩基と、−20〜40℃で、0.5〜10時間反応させることができる。
tBu、Pbf、Dmb、ビス(4−メトキシフェニル)メチル等の場合は、クロロホルム、塩化メチレン、酢酸エチル、ジオキサンなどの溶媒中、トリフルオロ酢酸、塩酸、メタンスルホン酸、トシル酸、ギ酸などの酸と、−20〜40℃で、0.5〜10時間反応させることにより脱保護することができる。
Zの場合は、メタノール、DMF、酢酸などの溶媒中、パラジウム炭素などの触媒を用いて、0〜40℃で、0.5〜100時間、水素化反応させるか、あるいはフッ化水素、トリフルオロメタンスルホン酸などの強酸と、−20〜40℃で、0.5〜10時間反応させることにより脱保護することができる。
Alloc基の場合は、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム等の0価パラジウム均一系触媒と反応させる。0価パラジウム均一系触媒は、0.01〜1.0当量、好ましくは、0.05〜0.5当量使用される。
最終脱保護工程において、Fmoc基で保護された側鎖アミノ基を脱保護する場合も、N末端脱保護工程と同様にワークアップにおいて本発明のジベンゾフルベンアミンの除去方法が適用できる。
フィブロネクチン活性フラグメント(Fibronectin active fragment: Gly−Arg−Gly−Asp−Ser)の合成
ベンゾフェノンヒドラゾン(37.5g,0.191mol)の塩化メチレン(450ml)溶液に、無水硫酸マグネシウム(33.0g)と二酸化マンガン(75.0g,0.863mol)を加えて室温で2時間攪拌した。不溶物を濾去した後、濾液を減圧濃縮した。得られた固体残渣をアセトン(375ml)に溶かし、Fmoc−Ser(tBu)(36.6g,95.5mmol)を加えて、室温で22時間攪拌した。反応液にヘキサンを加えて析出した固体を濾取し、ヘキサンで洗浄して、表題化合物を41.5g得た。母液を減圧濃縮し、ヘキサンで固化し、表題化合物を5.97g得た。収量47.5g(86.4%)。
Fmoc−Ser(tBu)−ODpm (16.5 g, 30.0 mmol)のDMF (150 ml)溶液に、4−ジメチルアミノピペリジン(18.0 ml, 0.150mol)を加え、室温で30分間攪拌した。 反応液に酢酸エチル(1.00l)を加え、室温で攪拌しながら二酸化炭素を10分間導入した。 析出した固体を濾去し、濾液を2回水洗した後、硫酸マグネシウムで乾燥した。0.5 N HCl/酢酸エチル(72.0 ml, 36.0 mmol)を加え、酢酸エチル層を減圧濃縮した。 残渣にヘキサンを加え濾取し、ヘキサンで洗浄して表題化合物を9.12 g (83.7%)得た。
Ser(tBu)−ODpm・HCl (9.12 g, 25.1 mmol)、Fmoc−Asp(OtBu) (10.3 g, 25.1 mmol)および1−ヒドロキシベンゾトリアゾール(HOBt) (3.56 g, 26.4 mmol)をDMF (100ml)に溶かし、氷冷攪拌下に1−エチル−3−(3−ジメチルアミノプロピル)−カルボジイミド (EDC) (4.68 ml,26.4 mmol)を滴下した。 氷冷で30分、室温で18時間攪拌した後、反応液に水を加え析出した固体を濾取、水洗した。
これを酢酸エチルに溶かし、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩水、10%クエン酸水、飽和食塩水で順次洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。酢酸エチル層を減圧濃縮し、残渣にヘキサンを加えて濾取して表題化合物を17.7g (97.8%)得た。
Fmoc−Asp(OtBu)−Ser(tBu)−ODpm (17.8 g, 24.7 mmol)をDMF (125 ml)に溶かし、4−アミノメチルピペリジン(14.8 ml, 0.124mol)を加えて室温で30分間攪拌した。 反応液に酢酸エチル(1.00l)を加え、室温で攪拌しながら二酸化炭素を10分間導入した。 析出した固体を濾去し、濾液を2回水洗した後、硫酸マグネシウムで乾燥した。0.5 N HCl/酢酸エチル(59.3ml, 29.6 mmol)を加え、酢酸エチル層を減圧濃縮した。油状残渣をヘキサンで洗浄して表題化合物を12.5 g (83.7%)得た。
Asp(OtBu)−Ser(tBu)−ODpm・HCl (12.5 g, 20.5 mmol)、 Fmoc−Gly (6.09g, 20.5 mmol)およびHOBt(2.91g, 21.5 mmol)をDMF(80.0 ml)に溶かし、氷冷攪拌下にEDC (3.81 ml, 21.5mmol)を滴下した。 氷冷で30分、室温で18時間攪拌した後、反応液に水を加え析出した固体を濾取、水洗した。これを酢酸エチルに溶かし、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩水、10%クエン酸水、飽和食塩水で順次洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。酢酸エチル層を減圧濃縮し、固体残渣にヘキサンを加えて濾取し、表題化合物を15.1g (95.0%)得た。
Fmoc−Gly−Asp(OtBu)−Ser(tBu)−ODpm (15.1 g, 19.3 mmol)をDMF (100 ml)に溶かし、4−アミノメチルピペリジン(11.6 ml, 96.7mmol)を加えて室温で30分間攪拌した。 反応液に酢酸エチル(800ml)を加え、室温で攪拌しながら二酸化炭素を10分間導入した。
析出した固体を濾去し、濾液を2回水洗した後、硫酸マグネシウムで乾燥した。0.5 N HCl/酢酸エチル(46.3ml, 23.2 mmol)を加え、酢酸エチル層を減圧濃縮した。油状残渣をヘキサンで洗浄して、表題化合物を10.1 g (88.6%)得た。
Gly−Asp(OtBu)−Ser(tBu)−ODpm・HCl (10.1 g,16.0 mmol)、 Fmoc−Arg(Pbf) (10.4 g, 16.0 mmol)およびHOBt (2.27 g, 16.8 mmol)をDMF (60.0ml)に溶かし、氷冷攪拌下にEDC (2.98 ml,16.8 mmol)を滴下した。
氷冷で30分、室温で18時間攪拌した後、反応液に水を加え析出した固体を濾取、水洗した。これを酢酸エチルに溶かし、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩水、10%クエン酸水、飽和食塩水で順次洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。酢酸エチル層を減圧濃縮し、固体残渣にヘキサンを加えて濾取し、表題化合物を18.2 g (95.8%)得た。
Fmoc−Arg(Pbf)−Gly−Asp(OtBu)−Ser(tBu)−ODpm(15.1 g, 19.3 mmol)をDMF (100 ml)に溶かし、4−アミノメチルピペリジン(11.6 ml, 96.7mmol)を加えて室温で30分間攪拌した。 反応液に酢酸エチル(800ml)を加え、室温で攪拌しながら二酸化炭素を10分間導入した。 析出した固体を濾去し、濾液を2回水洗した後、硫酸マグネシウムで乾燥した。0.5 N HCl/酢酸エチル(46.3ml, 23.2 mmol)を加え、酢酸エチル層を減圧濃縮した。固体残渣を酢酸エチル/ヘキサンより再沈殿して、表題化合物を11.3g (77.9%)得た。
Arg(Pbf)−Gly−Asp(OtBu)−Ser(tBu)−ODpm・HCl(11.3 g, 10.8 mmol)、 Boc−Gly (1.89g, 10.8 mmol)およびHOBt(1.53 g, 11.3 mmol)をDMF (50.0 ml)に溶かし、氷冷攪拌下にEDC(2.00 ml, 11.3mmol)を滴下した。 氷冷で30分、室温で18時間攪拌した後、反応液に水を加え析出した固体を濾取、水洗した。これを酢酸エチルに溶かし、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩水、10%クエン酸水、飽和食塩水で順次洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。酢酸エチル層を減圧濃縮し、固体残渣にヘキサンを加えて濾取し、表題化合物を10.6 g (87.6%)得た。
Boc−Gly−Arg(Pbf)−Gly−Asp(OtBu)−Ser(tBu)−ODpm(10.5g,9.40mmol)に90%トリフルオロ酢酸水溶液(74.4ml)を加え、室温で1時間攪拌した。エーテルを加え析出した固体を濾取した。
この固体に90%トリフルオロ酢酸水溶液(74.4ml)を加え、更に室温で1時間攪拌した。エーテルを加え析出した固体を濾取し、水に溶かして凍結乾燥した。凍結乾燥粉末を0.1%トリフルオロ酢酸水溶液(100ml)に溶かし、1/3量ずつをYMC−PakODSカラム[サイズ:30x250mm,溶出条件:流速,20ml/分;検出,220nm;溶離液,1%アセトニトリル/0.1%トリフルオロ酢酸(30分)−1−80%アセトニトリル/0.1%トリフルオロ酢酸(40分:リニヤーグラジエント)]で精製し、凍結乾燥品6.56g得た。凍結乾燥品の0.5N酢酸(150ml)溶液を強塩基性イオン交換樹脂ムロマック1x4(200ml,酢酸型)に適用し、0.5N酢酸(400ml)で溶出した。溶出液を集め、凍結乾燥し、表題化合物を4.51g得た。これを1%酢酸(45ml)/エタノール(225ml)から再沈殿し,表題化合物を4.12g得た。
アミノ酸分析(6N塩酸,110℃で22時間加水分解):Asp 1.00 (1),Ser 0.88 (1),Gly 1.97 (2),Arg 0.99 (1);
元素分析:実測値 C, 39.63;H, 6.39;N, 19.69% C19H30N8O9・1.4H2O・0.9CH3CO2Hとしての計算値C, 39.63;H, 6.44;N, 19.67%
ESI MS:m/z 491.2 (M+H,491.2)
Fmoc−Val−Gly−Pro−OBprの合成
Z−Pro (19.4 g, 77.7 mmol)のDMF (200 ml)溶液に、2−メチル−1−フェニル−プロパン−2−オール (12.5 ml, 81.5mmol)、4−(ジメチルアミノ)ピリジン (DMAP) (2.85 g, 23.3 mmol)を加えた後、氷冷化にEDC・HCl (15.6 g, 81.5 mmol)を加えた。 氷冷化に30分、さらに室温で終夜攪拌した。 EDC・HCl (7.45 g,38.9 mmol)を追加し、室温で4時間攪拌した。反応液を減圧濃縮し、残渣を酢酸エチル (400 ml)に溶解した後、10%クエン酸水溶液、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水で順次洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮して、表題化合物を淡黄色油状物として25.4 g (85.8%)得た。
Z−Pro−OBpr (3.20 g, 8.39 mmol)をメタノール(30 ml)に溶かし、5% Pd−炭素(500 mg)を加えて、室温で水素ガスを1時間導入した。 触媒を濾去し、濾液を減圧濃縮した。 残渣にトルエンを加え減圧濃縮する操作を5回繰り返した。 DMF (20 ml)に得られた残渣、Fmoc−Gly (2.49 g, 8.39 mmol)、HOBt (1.19 g, 8.81 mmol)を溶かし、氷冷攪拌下にEDC・HCl (1.69 g, 8.81 mmol)を加えた後、室温で終夜攪拌した。 反応液を氷水(100 ml)に注ぎ、酢酸エチル(70 ml)で抽出した。 有機層を2.5%炭酸水素ナトリウム水溶液、水、0.5N塩酸水、水、飽和食塩水で順次洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。 酢酸エチル層を減圧濃縮し、表題化合物の固体を4.10 g (92.5%)得た。
Fmoc−Gly−Pro−OBpr (3.00 g, 5.69 mmol)をDMF(17 ml)に溶かし、氷冷攪拌下に4−アミノメチルピペリジン(4.36ml, 56.9 mmol)を滴下した。DMF (20 ml)を反応液に追加し、室温で30分攪拌した。 酢酸エチル(300ml)を反応液に加え、これに二酸化炭素を10分間導入した。 析出した固体を濾去し、酢酸エチル(50ml x 2)で洗浄した。 濾液を集め、水(150 ml x 2)で洗浄した。 水層に食塩を飽和した後、酢酸エチル(50 ml x 2)で抽出した。 有機層を集め、硫酸マグネシウムで乾燥した。酢酸エチル層に4.7 N塩酸/ジオキサン(1.21 ml, 5.69mmol)を加え、減圧濃縮し油状物(HPLCでの検定で収率85%)を得た。 DMF(25 ml)に得られた油状物(4.84 mmol)、Fmoc−Val (1.72 g, 5.08 mmol)、HOBt (0.719 g, 5.32 mmol)を溶かし、冷却(−10℃)攪拌下にEDC (0.974 ml, 5.32 mmol)を滴下した。室温で終夜攪拌した後、反応液を酢酸エチル(200 ml)と水(200 ml)に注ぎ、分配した。 酢酸エチル層を2.5%炭酸水素ナトリウム水溶液、水、飽和食塩水で順次洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。酢酸エチル層を減圧濃縮し、残渣をエーテル-ヘキサンより結晶化して、表題化合物を2.41 g (80.9%)得た。Fmoc−Val−Gly−Pro−OBpr(1.0 mg)をトリフルオロ酢酸(100 μl)で処理すると、室温15分でBpr基は完全に切断された。
メラノサイト刺激ホルモン−放出阻害因子(MIF: Pro−Leu−Gly−NH2)の合成
2,4−ジメトキシベンジルアミン(4.54 g, 27.1 mmol)をDMF (60 ml)に溶かし、氷冷攪拌下に4.7 N塩酸/ジオキサン(5.76 ml, 27.1 mmol)を加えた。これにFmoc−Gly (8.07 g, 27.1 mmol)、HOBt (3.66 g, 27.1 mmol)を加え、氷冷攪拌下にEDC (4.95 ml,27.1 mmol)を滴下した。 室温で終夜攪拌した。 反応液を氷水(500 ml)に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。 酢酸エチル層を減圧濃縮し、析出した結晶にイソプロピルエチルエーテルとヘキサンを加え濾取した。これを酢酸エチル/イソプロピルエチルエーテルから再結晶して、表題化合物を11.3 g (93.5%)得た。
Fmoc−Gly−NHDmb (5.00g, 11.2 mmol)のDMF (50ml)溶液を氷冷し、4−アミノメチルピペリジン(13.4 ml, 0.112 mol)を加えた後、30分攪拌した。反応液にクロロホルム(450 ml)を加え、二酸化炭素を30分間導入しながら室温で攪拌した。 析出した固体を濾去し、濾液を水洗した後、硫酸マグネシウムで乾燥した。 氷冷した酢酸エチル層に4.7N塩酸/ジオキサン(4.77 ml, 22.4 mmol)を加え、減圧濃縮した。残渣にイソプロピルエチルエーテルを加え結晶化し、表題化合物を2.82 g (96.6%)得た。
Gly−NHDmb・HCl (2.69g, 10.3 mmol)、Fmoc−Leu(3.82 g, 10.8 mmol)、HOBt (1.46 g, 10.8 mmol)をDMF/NMP (1:1, 50 ml)に溶かし、氷冷攪拌下にEDC(1.98 ml, 10.8mmol)を滴下した。 さらに室温で1.5時間攪拌した後、反応液を水(400 ml)に注いだ。 遊離した油状物を酢酸エチル(50 ml x 2)で抽出し、これを飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水、10%クエン酸水溶液、水、飽和食塩水で順次洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧濃縮した。 油状残渣にエーテルを加え結晶化して、表題化合物を2.99 g (51.9%)得た。
Fmoc−Leu−Gly−NHDmb (2.00 g, 3.60 mmol)のDMF (20 ml)溶液を氷冷し、4−アミノメチルピペリジン(4.30ml, 36.0 mmol)を加えて30分攪拌した。反応液に酢酸エチル(200 ml)を加え、室温で二酸化炭素を1時間導入した。 析出した固体を濾取し、濾液を水洗した。 濾取した固体をクロロホルムに懸濁し、濾取した。クロロホルム層を濃縮し、残渣を酢酸エチルに溶かした。 酢酸エチル層を集め、水洗した後、硫酸マグネシウムで乾燥した。酢酸エチル層を減圧濃縮し、油状残渣にイソプロピルエチルエーテルを加え結晶化して、表題化合物を0.95 g (70.4%)得た。
Leu−Gly−NHDmb・HCl (0.70 g, 1.9 mmol)、Boc−Pro (0.45 g, 2.1 mmol)、HOBt (0.28 g, 2.1 mmol)をDMF (10 ml)に溶かし、氷冷攪拌下にEDC(0.38 ml, 2.1mmol)を加えた。 室温で終夜攪拌した後、水(80 ml)に注ぎ、遊離した油状物を酢酸エチルで抽出した。 有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水、10%クエン酸水、水で順次洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。酢酸エチル層を減圧濃縮し、残渣にイソプロピルエチルエーテルを加え結晶化し、表題化合物を0.84g (82%)得た。
Boc−Pro−Leu−Gly−NHDmb (0.50 g, 0.94 mmol)をm−クレゾール(2.0 ml)存在下、1Mトリフルオロメタンスルホン酸−チオアニソール/トリフルオロ酢酸(21ml)で、氷冷2時間処理した。 反応液にエーテル、イソプロピルエチルエーテルを加え、析出した沈殿を濾取した。この粉末を少量のトリフルオロ酢酸に溶かし、エーテル、イソプロピルエチルエーテルを加え再沈殿した。 粗ペプチドをODSカラム(30 x 250 mm)を用いてHPLCにより精製し(溶離液A = 0.1% TFA/水,B = 0.1% TFA/アセトニトリル,溶出勾配A : B = 95.5 : 0.5から85 : 15まで80分の直線勾配)、表題化合物のフリー体を0.27 g得た。 これを1%酢酸水溶液(15 ml)に溶かし、強塩基性イオン交換樹脂ムロマック1x4 (酢酸型,15 ml)カラムに適用した。 さらに1%酢酸水溶液(80 ml)で溶出し、溶出液を凍結乾燥して、表題化合物を0.22 g (68.1%)得た。
ESI MS: m/z 285.2 (M+H,285.3)
メラノサイト刺激ホルモン-放出阻害因子(MIF: Pro−Leu−Gly−NH2)の合成
Fmoc−Gly (6.43 g, 21.6 mmol)、HCTU (8.79 g,21.2 mmol)、6−Cl−HOBt (3.59 g, 21.2 mmol)を溶かしたDMF (40 ml)溶液を−5℃で冷却攪拌した。 この溶液にDIEA (7.00 ml,41.2 mmol)を加え、2分後にビス(4−メトキシフェニル)メチルアミン/DMF(40 ml)溶液を加えた。 反応液を室温で終夜攪拌した。 反応液に水を注ぎ、析出した固体を濾取し水で洗浄した。 固体をクロロホルム/メタノール(3:1, v/v)に溶かしエーテルを加え再沈殿して、表題化合物を9.88 g (91.9%)得た。
Fmoc−Gly−NHCH(PhOMe)2(9.53 g, 18.2 mmol)のDMF (80 ml)溶液を氷冷し、4−アミノメチルピペリジン(21.8ml,0.182 mol)を加えて30分攪拌した。反応液に酢酸エチル(600 ml)を加え、室温で攪拌しながら二酸化炭素を10分間導入した。 析出した固体を濾去し、濾液を2回水洗した後、硫酸マグネシウムで乾燥した。 4.7N HCl/ジオキサン(7.74 ml,31.4 mmol)を加え、酢酸エチル層を減圧濃縮した。 固体残渣にエーテルを加えて、濾取した。 酢酸エチル−イソプロピルエーテルより再結晶し、表題化合物を5.02 g (81.9%)得た。
Gly−NHCH(PhOMe)2・HCl (4.72 g, 14.0 mmol)、Fmoc−Leu (5.20 g, 14.7 mmol)、HOBt (1.99 g, 14.7 mmol)をDMF (60 ml)に溶かし、氷冷攪拌下にEDC(2.69 ml, 14.7mmol)を滴下した。 室温で3時間攪拌した後、反応液に水を注いだ。 析出した固体を濾取し、水で洗浄した。 固体を酢酸エチル−ヘキサンより再結晶し、表題化合物を10.5 g* (117%)得た。 (*溶媒が付着している。)
Fmoc−Leu−Gly−NHCH(PhOMe)2(9.74 g, 13.0 mmol)のDMF (60 ml)溶液を氷冷し、4−アミノメチルピペリジン(15.6ml, 0.130 mol)を加えて30分攪拌した。反応液に酢酸エチル(500 ml)を加え、室温で攪拌しながら二酸化炭素を10分間導入した。 析出した固体を濾去し、濾液を2回水洗した後、硫酸マグネシウムで乾燥した。 4.7N HCl/ジオキサン(5.53 ml,26.0 mmol)を加え、酢酸エチル層を減圧濃縮した。 油状残渣にエーテルを加えて、結晶化した。 酢酸エチル−エーテルより再結晶し、表題化合物を5.09 g (87.0%)得た。
Leu−Gly−NHCH(PhOMe)2・HCl (2.25 g, 5.00 mmol)、Boc−Pro (1.18 g, 5.50 mmol)、HOBt (0.740 g, 5.50 mmol)をDMF (30 ml)に溶かし、氷冷攪拌下にEDC(1.01 ml, 5.50mmol)を滴下した。 室温で2時間攪拌した後、反応液に水を注いだ。 遊離した油状物を酢酸エチルで抽出した。 有機層を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水、10%クエン酸水、水で順次洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。酢酸エチル層を減圧濃縮し、油状残渣にイソプロピルエーテルを加え結晶化し、表題化合物を2.72g (89.2%)得た。
Boc−Pro−Leu−Gly− NHCH(PhOMe)2(0.50 g, 0.82 mmol)をトリイソプロピルシラン(0.25 ml)、水(0.25 ml)存在下、トリフルオロ酢酸(9.5 ml)で、室温5時間処理した。反応液を減圧濃縮し、油状残渣にエーテルを加え、析出した沈殿を濾取した。 この粉末を水に溶かし、凍結乾燥し、粗ペプチドを得た(0.35g)。 粗ペプチドをODSカラム(30 x 250 mm)を用いてHPLCにより精製し(溶離液A= 0.1% TFA/水,B = 0.1% TFA/アセトニトリル,溶出勾配A: B = 95.5 : 0.5から85 : 15まで80分の直線勾配)、表題化合物のフリー体を0.26 g得た。 これを1%酢酸水溶液(10 ml)に溶かし、強塩基性イオン交換樹脂ムロマック(酢酸型,10 ml)カラムに適用した。さらに1%酢酸水溶液(70 ml)で溶出し、溶出液を凍結乾燥して、表題化合物を0.23 g (81%)得た。
ESI MS: m/z 285.2 (M+H,285.3)
本願は、日本で出願された特願2008−203635を基礎としており、その内容は本明細書にすべて包含されるものである。
Claims (12)
- Fmoc基で保護されたアミノ酸化合物を、窒素原子が少なくとも一つの水素原子を有するアミン化合物と反応させることにより脱保護して得られる反応混合物からジベンゾフルベンアミン付加体を除去する方法であって、
該反応混合物を二酸化炭素と接触させる工程、およびジベンゾフルベンアミン付加体の炭酸塩を除去する工程
を含むことを特徴とする方法。 - Fmoc基で保護されたアミノ酸化合物の脱保護により生成するジベンゾフルベンを除去する方法であって、
脱保護反応中または反応後の反応混合物に、窒素原子が少なくとも一つの水素原子を有するアミン化合物を混合してジベンゾフルベンアミン付加体を含む混合物を得る工程、該混合物を二酸化炭素と接触させる工程、およびジベンゾフルベンアミン付加体の炭酸塩を除去する工程
を含むことを特徴とする方法。 - ジベンゾフルベンアミン付加体の炭酸塩を、酢酸エステル、クロロホルム、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、アセトンおよびエーテルから選ばれる少なくとも一種を含む溶媒中で析出させる、請求項1または2記載の方法。
- ジベンゾフルベンアミン付加体の炭酸塩を濾過により除去する、請求項3記載の方法。
- 窒素原子が少なくとも一つの水素原子を有するアミン化合物が、ジアミン類である請求項1〜4のいずれか一項に記載の方法。
- 窒素原子が少なくとも一つの水素原子を有するアミン化合物が、4−アミノメチルピペリジン、4−ジメチルアミノピペリジン、1、5−ジアミノペンタンおよび1、2−ジアミノシクロヘキサンから選ばれる、請求項5記載の方法。
- Fmoc基で保護されたアミノ酸化合物が、Fmoc基で保護されたアミノ酸エステル、Fmoc基で保護されたアミノ酸アミド又はFmoc基で保護されたペプチドである、請求項1〜6のいずれか一項に記載の方法。
- 請求項7記載の方法を含む、液相合成法によるペプチドの製造方法。
- (1)C−保護ペプチド、C−保護アミノ酸またはC−保護アミノ酸アミドを、N−Fmocアミノ酸と、縮合剤の存在下縮合させる工程、および/または
(2)C−保護ペプチド、C−保護アミノ酸またはC−保護アミノ酸アミドを、N−Fmocアミノ酸活性エステルと縮合させる工程
を含む請求項8記載の方法。 - 請求項9の(1)記載の工程において、さらに活性化剤を存在させる、請求項9記載の方法。
- 請求項1記載の工程で得られた中間体ペプチドを固体として単離せずに請求項9記載の工程に供することを含む、請求項9または10記載の方法。
- ワンポット合成で行う、請求項8〜11のいずれか一項に記載の方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2010523889A JP5445456B2 (ja) | 2008-08-06 | 2009-08-06 | ジベンゾフルベンの除去方法 |
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2008203635 | 2008-08-06 | ||
JP2008203635 | 2008-08-06 | ||
PCT/JP2009/063959 WO2010016551A1 (ja) | 2008-08-06 | 2009-08-06 | ジベンゾフルベンの除去方法 |
JP2010523889A JP5445456B2 (ja) | 2008-08-06 | 2009-08-06 | ジベンゾフルベンの除去方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2010016551A1 JPWO2010016551A1 (ja) | 2012-01-26 |
JP5445456B2 true JP5445456B2 (ja) | 2014-03-19 |
Family
ID=41663764
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2010523889A Expired - Fee Related JP5445456B2 (ja) | 2008-08-06 | 2009-08-06 | ジベンゾフルベンの除去方法 |
Country Status (4)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US8703912B2 (ja) |
EP (1) | EP2322498B1 (ja) |
JP (1) | JP5445456B2 (ja) |
WO (1) | WO2010016551A1 (ja) |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
PT1737889E (pt) | 2004-10-19 | 2010-12-13 | Lonza Ag | Método para síntese de péptidos em fase sólida |
US9409122B2 (en) | 2011-04-18 | 2016-08-09 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Gas capture process |
WO2013089241A1 (ja) * | 2011-12-15 | 2013-06-20 | 味の素株式会社 | Fmoc基の除去方法 |
DK3778621T5 (da) | 2018-04-13 | 2024-08-19 | Jitsubo Co Ltd | Peptidsyntesefremgangsmåde |
WO2024096023A1 (ja) * | 2022-11-01 | 2024-05-10 | 中外製薬株式会社 | ジベンゾフルベンまたはジベンゾフルベン誘導体の除去方法 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2007008887A (ja) * | 2005-07-01 | 2007-01-18 | Ne Chemcat Corp | 9−フルオレニルメトキシカルボニル基の脱保護基方法 |
JP2007211013A (ja) * | 2006-02-10 | 2007-08-23 | Cem Corp | ペプチド合成におけるマイクロ波により向上されたn−fmoc脱保護 |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
BR9909018A (pt) * | 1998-03-23 | 2001-10-16 | Trimeris Inc | Processo para a sìntese de um peptìdeo, conjunto de fragmentos de peptìdeo, e, peptìdeo |
US20020058788A1 (en) * | 2000-08-25 | 2002-05-16 | Sheppeck James E. | Facile deprotection of Fmoc protected amino groups |
WO2012033986A2 (en) * | 2010-09-09 | 2012-03-15 | Exxonmobil Research And Engineering Company | Non-aqueous amine scrubbing for removal of carbon dioxide |
-
2009
- 2009-08-06 WO PCT/JP2009/063959 patent/WO2010016551A1/ja active Application Filing
- 2009-08-06 JP JP2010523889A patent/JP5445456B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2009-08-06 EP EP09805034.7A patent/EP2322498B1/en not_active Not-in-force
-
2011
- 2011-02-04 US US13/020,838 patent/US8703912B2/en not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2007008887A (ja) * | 2005-07-01 | 2007-01-18 | Ne Chemcat Corp | 9−フルオレニルメトキシカルボニル基の脱保護基方法 |
JP2007211013A (ja) * | 2006-02-10 | 2007-08-23 | Cem Corp | ペプチド合成におけるマイクロ波により向上されたn−fmoc脱保護 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2010016551A1 (ja) | 2010-02-11 |
US8703912B2 (en) | 2014-04-22 |
US20110190475A1 (en) | 2011-08-04 |
JPWO2010016551A1 (ja) | 2012-01-26 |
EP2322498B1 (en) | 2014-04-16 |
EP2322498A4 (en) | 2013-03-20 |
EP2322498A1 (en) | 2011-05-18 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5515738B2 (ja) | ジベンゾフルベン誘導体の淘汰方法 | |
CN111971293B (zh) | 肽合成方法 | |
WO2007099656A1 (ja) | ペプチドの製造方法 | |
JP6703669B2 (ja) | リュープロレリンの製造方法 | |
JP2018512415A (ja) | エテルカルセチドの調製のための液相方法 | |
JP6136934B2 (ja) | Fmoc基の除去方法 | |
JP6011528B2 (ja) | ペプチドの製造方法 | |
EP3864032B1 (en) | Process for the manufacture of glp-1 analogues | |
JP5445456B2 (ja) | ジベンゾフルベンの除去方法 | |
JP5212371B2 (ja) | ペプチドの製造方法 | |
Mhidia et al. | Exploration of an imide capture/N, N-acyl shift sequence for asparagine native peptide bond formation | |
AU2014282839B9 (en) | Peptide-resin conjugate and use thereof | |
US4965343A (en) | Method of peptide synthesis | |
Ruczyński et al. | Problem of aspartimide formation in Fmoc‐based solid‐phase peptide synthesis using Dmab group to protect side chain of aspartic acid | |
CN113614100A (zh) | 用于制备地加瑞克的方法 | |
JP6858950B2 (ja) | 液相法によるセレノグルタチオンの製造方法 | |
CN108148113A (zh) | 一种nmda受体调控剂四肽衍生物的固相合成方法 | |
CN114945580B (zh) | 用于合成南吉博肽的方法 | |
WO2021132336A1 (ja) | ペプチドの製造方法 | |
KR20160147235A (ko) | 선별적 용해도를 갖는 트리페닐메탄 유도체 및 그의 용도 | |
WO2004018501A1 (en) | Method for synthesizing peptides | |
CA3238634A1 (en) | Synthetic process for production of modified gcc receptor agonists | |
EP2343309A1 (en) | Method for producing a peptide | |
JPH0525196A (ja) | 環状ペプチドの合成方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20120704 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20131126 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20131209 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5445456 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |