RS55858B1 - Inhibitori replikacije virusa gripa - Google Patents

Inhibitori replikacije virusa gripa

Info

Publication number
RS55858B1
RS55858B1 RS20170273A RSP20170273A RS55858B1 RS 55858 B1 RS55858 B1 RS 55858B1 RS 20170273 A RS20170273 A RS 20170273A RS P20170273 A RSP20170273 A RS P20170273A RS 55858 B1 RS55858 B1 RS 55858B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
fluoro
mmol
compound
minutes
pyrrolo
Prior art date
Application number
RS20170273A
Other languages
English (en)
Inventor
Paul S Charifson
Michael P Clark
Upul K Bandarage
Randy S Bethiel
Michael J Boyd
Ioana Davies
Hongbo Deng
John P Duffy
Luc J Farmer
Huai Gao
Wenxin Gu
Joseph M Kennedy
Brian Ledford
Mark W Ledeboer
Francois Maltais
Emanuele Perola
Tiansheng Wang
Original Assignee
Vertex Pharma
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=46650922&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS55858(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Vertex Pharma filed Critical Vertex Pharma
Publication of RS55858B1 publication Critical patent/RS55858B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/351—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom not condensed with another ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/444—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring heteroatom, e.g. amrinone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6561—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

SRODNE PRIJAVE
[0001]Ova prijava se poziva na prioritet SAD privremene prijave br. 61/513,793, podnete 1. av gusta 2011.
OSNOVA PRONALASKA
[0002]Grip se širi svetom kao sezonska epidemija, rezultujući u smrti stotina hiljada godišnje - miliona u godinama pandemije. Na primer, tri pandemije gripa dogodile su se u 20 veku i ubile su desetine miliona ljudi, pri čemu je svaka od ovih pandemija bila uzrokovana pojavom novog soja virusa kod ljudi. Cesto, ovi novi sojevi su rezultat širenja postojećeg virusa gripa sa drugih vrsta životinja na ljude.
[0003]Grip se primarno prenosi sa osobe na osobu preko velikih kapljica sa virusima koje se stvaraju kada inficirana osoba kašlje ili kija; ove velike kapljice se mogu smestiti na mukozne površine gornjih disajnih puteva osetljivih pojedinaca koji su u blizini (npr. oko 1.80 metara) inficiranih osoba. Prenošenje se takođe može dogoditi preko direktnog kontakta ili indirektnog kontakta sa respiratornim sekretima, kao što je dodirivanjem površina zaraženih sa virusom gripa i zatim dodirivanjem očiju, nosa ili usta. Odrasli mogu širiti grip na druge od 1 dana pre ispoljavanja simptoma do oko 5 dana nakon početka javljanja simptoma. Mala deca i osobe sa oslabljenim imunim sistemom mogu biti infektivni 10 ili više dana od početka simptoma.
[0004]Virusi gripa su RNK virusi familije Orthomyxoviridae, koja obuhvata pet rodova: virus gripa tipa A, virus gripa tipa B, virus gripa tipa C, Isavirus i Thogoto virus.
[0005]Rod virusa gripa A ima jednu vrstu, virus gripa tipa A. Divlje vodene ptice su prirodni domaćini za veliki broj različitih virusa gripa tipa A. Povremeno, virusi se prenose na druge vrste i mogu zatim izazvati razarajuće epidemije domaće živine ili dovesti do pandemije gripa kod ljudi. Virusi tipa A su najvirulentniji humani patogeni od tri tipa gripa i izazivaju najteže bolesti. Virus gripa tipa A može se podeliti na različite serotipove na osnovu odgovora antitela na ove viruse. Serotipovi koji su potvrđeni kod ljudi, poredani po broju poznatih smrti ljudi usled pandemije, su: HINI (koji je izazvao Španski grip 1918), H2N2 (koji je izazvao Azijski grip 1957), H3N2 (koji je izazvao Honkoški grip 1968), H5N1 (pandemijska pretnja 2007-08 sezone gripa), H7N7 (koji ima neobičan potencijal za zoonoze), H1N2 (endemičan kod ljudi i svinja), H9N2, H7N2 , H7N3 i H10N7.
[0006]Virus gripa B ima jednu vrstu, virus gripa tipa B. Grip tipa B skoro isključivo inficira ljude i manje je zastupljen od gripa tipa A. Jedina poznata životinja za koju se zna da je osetljiva na infekciju gripa B je foka. Ovaj tip gripa mutira sa stopom koja je 2-3 puta sporija od tipa A i kao posledica ima manji genetski diverzilet, sa samo jednim serotipom gripa B. Kao rezultat nedostatka antigenskog diverziteta, određen stepen imuniteta na grip B se obično stiče u ranom dobu. Međutim, grip tipa B mutira dovoljno da nije moguć dugotrajni imunitet. Ova smanjena stopa antigene promene, kombinovana sa ograničenim opsegom domaćina (inhibirajući prenošenje antigena između vrsta), obezbeđuje da se ne dešava pandemija gripa
B.
[0007]Rod virusa gripa C ima jednu vrstu, virus gripa tipa C, koji inficira ljude i svinje i može izazvati tešku bolest i lokalne epidemije. Međutim, grip tipa C je redi od ostalih tipova i izgleda da obično izaziva blagu bolest kod dece.
[0008]Virusi gripa tipa A, B i C su veoma slični po strukturi. Virusna čestica je prečnika 80-120 nanometara i obično grubo sferična, iako se mogu pojaviti filamentozni oblici. Neobično za virus, njegov genom nije od jednog dela nukleinske kiseline; umesto toga, sadrži sedam ili osam delova segmentisane negativni-sens RNK. Genom influence kodira 11 proteina: hemaglutinin (HA), neuraminidazu (NA), nukleoprotein (NP), Ml, M2, NS1, NS2(NEP), PA, PB1.PB1-F2 iPB2.
[0009]HA i NA su veliki glikoproteini sa spoljašnje strane virusnih čestica. HA je lektin koji posreduje vezivanje virusa za ciljne ćelije i ulazak virusnog genoma u ciljnu ćeliju, dok je NA uključen u oslobađanje potomstva virusa iz zaraženih ćelija, sečenjem šećera koji vezuju zrele čestice virasa. Stoga, ovi proteini su bili ciljne strukture za antivirusne lekove. Dodatno, oni su antigeni na koje se mogu izazvati antitela. Influenca virusi su klasifikovani u podtipove na osnovu odgovora antitela na HA i NA, što obrazuje osnovu za razlikovanje H i N( vide suprd)u, na primer, H5N1.
[0010]Grip proizvodi direktne troškove usled gubitka produktivnosti i povezanih medicinskih tretmana, kao i indirektnih troškova preventivnih mera. U Sjedinjenim državama, grip je odgovoran za ukupne troškove od preko 10 milijardi dolara godišnje, procenjuje se da buduća pandemija može dovesti do stotina milijardi dolara u direktnim i indirektnim troškovima. Troškovi prevencije su takođe veliki. Vlade širom sveta su potrošile milijarde SAD dolara pripremajući se i planirajući potencijalnu pandemiju ptičijeg gripa tipa H5N1, sa troškovima vezanim za kupovinu lekova i vakcina kao i sa razvojem obuke za katastrofe i strategija za poboljšanu kontrolu granica.
[0011]Sadašnje opcije za tretman gripa uključuju vakcinaciju, i hemoterapiju ili hemoprofilaksu sa antivirusnim lekovima. Vakcinacija protiv gripa sa vakcinom za grip često se preporučuje visoko rizičnim grupama, kao što su deca i starije osobe, ili kod ljudi sa astmom, dijabetesom, ili srčanim oboljenjem. Međutim, moguće je vakcinisati se i ipak dobiti grip. Vakcina je reformulisana svake sezone za nekoliko specifičnih sojeva gripa, ali ne može uključiti sve sojeve koji aktivno inficiraju ljude u svetu za tu sezonu. Proizvođačima je potrebno oko šest meseci da formulišu i proizvedu milione doza za sezonske epidemije; povremeno, novi ili previđeni soj postaje prominentan tokom tog vremena i inficira ljude iako su vakcinisani (kao sa sezonom 2003-2004 H3N2 Fuđen gripa). Takođe je moguće inficirati se neposredno pre vakcinacije i razboleti se sa istim sojem koji vakcina treba da spreči, jer je vakcini neophodno oko dve nedelje da postane efikasna.
[0012]Dodatno, efikasnost ovih vakcina protiv gripa je promenljiva. Usled visoke stope mutacije virusa, određena vakcina protiv gripa obično daje zaštitu ne više od nekoliko godina. Vakcina formulisana za jednu godinu može biti neefikasna sledeće godine, jer se virus gripa brzo menja tokom vremena, i različiti sojevi postaju dominantni .
[0013]Takođe, usled nedostatka enzima koji proveravaju RNK, RNK-zavisna RNK polimeraza ili influenca vRNA pravi grešku u ubacivanju jednog nukleotida približno svakih 10 hiljada nukelotida, što je približna dužina vRNA gripa. Stoga, skoro svaki novoproizvedeni virus gripa je mutant-antigenski đrift. Razdvajanje genoma u osam zasebnih segmenata vRNA omogućava mešanje ili rearanžman vRNAs ukoliko je više od jedne virusne linije inficiralo jednu ćeliju. Rezultujuća brza promena virusne genetike proizvodi promene antigena i omogućava virusu da inficira nove vrste domaćina i brzo prevaziđe zaštitni imunitet.
[0014]Antivirusni lekovi se takođe mogu koristiti za lečenje gripa, pri čemu su inhibitori nauraminidaze naročito efikasni, ali virusi mogu razviti rezistenciju na standardne antivirusne lekove.
[0015]Stoga, i dalje postoji potreba za lekovima za tretiranje infekcija gripom, kao što je za lekovima sa prošrenim mogućnostima tretmana, i/ili smanjenom osetljivošću na virusni titar. WO2010/148197 se odnosi na pirolopiridinska jedinjenja i kompozicije koje sadrže pomenuta jedinjenja, koja su korisna za tretiranje gripa.
REZIME PRONALASKA
[0016] Ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenje formule:
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0017] Ovaj pronalazak se takođe odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje formule:
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv nosač, ađuvant, ili prenosilac.
[0018] Ovaj pronalazak se dalje odnosi na postupak inhibiranja replikacije virusa gripa uin vitrobiološkom uzorku koji obuhvata korak primene na pomenuti biološki uzorak efikasne količine jedinjenja formule:
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli
[0019] Postupak može dodatno sadržati ko-primenu dodatnog terapeutskog sredstva. Dodatno terapeutsko sredstvo se može izabrati od antivirusnog sredstva ili vakcine protiv gripa.
[0020]Ovaj pronalazak se dalje odnosi na jedinjenje formule:
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotrebu u lečenju gripa.
[0021] Ovaj pronalazak se dalje odnosi na postupak za pripremanje jedinjenja formule:
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, koji sadrži korake:
i) reakcije jedinjenja 6a:
sa jedinjenjem 7a: da bi se formiralo jedinjenje 8a: ii) dcprotckcijc Ts grupe jedinjenja 8a pod pogodnim uslovima da bi se formiralo jedinjenje 9a
i
iii) tretiranje jedinjenja 9a sa pogodnim reagensom da bi se stvorilo jedinjenje
[0022]Ovde su opisana jedinjenja i kompozicije koji se mogu iskoristiti za upotrebu u lečenju gripa, inhibiciju replikacije virusa gripa, i smanjenje količine virusa gripa.
[0023] Opis opisuje jedinjenje predstavljeno Strukturnom Formulom (I), uže definisano u patentnim zahtevima
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, gde:
X<1>je -F, -Cl, -CF3, -CN, ili CH3;
X2je-H, -F, ili -Cl;
Z1 je N ili CH;
Z2jeNili CR°;
Z3jeCH ili N;
Y je -C(R<4>R<5>)-[C(R<6>R<7>)]n-Q ili -C(R<4>)=C(R<6>)-Q;
R°je-H, -F, iliCN;
R<1>, R<2>, i R<3>su svaki i nezavisno -CH3, -CH2F, -CF3, -C2H5, -CH2CH2F, -CH2CF3; ili izborno R~ i R<J>, ili R<1>, R<2>i R<3>, zajedno sa ugljenikovim atomom za koji su vezani, formiraju 3-10 člani karbociklični prsten;
R<4>i R<5>su svaki i nezavisno -H;
R<6>i R<7>su svaki i nezavisno -H, -OH, -CH3, ili -CF3; ili
izborno, R<5>i R<7>zajedno sa ugljenikovim atomima za koje su vezani formiraju ciklopropanski prsten; i
svaki Q je nezavisno -C(0)OR, -OH, -CH2OH, -S(0)R', -P(0)(OH)2, -S(0)2R', - S(0)2-NR"R'", ili 5-člani heterociklus izabran iz grupe koja se sastoji od:
JQje-H, -OH ili -CH2OH;
Rje-H ili Cm alkil;
R' je -OH, Ci.4 alkil, ili -CH2C(0)OH;
R" je -H ili -CH3;
R'" je -H, 3-6-člani karbociklični prsten, ili C1.4alkil izborno supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halogena, - OR<a>i -C(0)OR<a>;
Ra je-H ili C1.4 alkil; i
n je 0 ili 1.
[0024]Opis opisuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži ovde opisano jedinjenje (npr., jedinjenje predstavljeno bilo kojom Strukturnom Formulom (I) - (X), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so) i farmaceutski prihvatljiv nosač, ađuvant ili prenosilac.
[0025]Opis dalje opisuje postupak inhibicije replikacije virusa gripa u biološkom uzorku, koji sadrži korak primene na pomenuti biološki uzorak efikasne količine ovde opisanog jedinjenja (npr., jedinjenja predstavljenog bilo kojom od Strukturnih Formula (I) - (X), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli). Opis dalje opisuje ovde opisano jedinjenje za upotrebu u inhibiciji replikacije virusa gripa kod pacijenta.
[0026]Opis smanjenja količine influenca virusa u biloškom uzorku ili u pacijentu, koji sadrži primenu na pomenuti biološki uzorak ili pacijenta efikasne količine ovde opisanog jedinjenja (npr., jedinjenja predstavljenog bilo kojom od Strukturnih Formula (I) - (X), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli).
[0027]Ovde je dalje opisano ovde opisano jedinjenje (npr., jedinjenje predstavljeno bilo kojom od Strukturnih Formula (I) - (X), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so), za upotrebu u lečenju gripa kod pacijenta.
[0028]Ovde je takođe opisana upotreba ovde opisanih jedinjenja za inhibiciju replikacije virusa gripa u biološkom uzorku ili pacijentu, za smanjenje količine virusa gripa u biološkom uzorku ili pacijentu, ili za tretiranje gripa kod pacijenta.
[0029]Ovde je takođe opisana upotreba ovde opisanih jedinjenja za proizvodnju medikamenta za tretiranje gripa kod pacijenta, za smanjenje količine virusa gripa u biološkom uzorku ili pacijentu, ili za inhibiciju replikacije virusa gripa u biološkom uzorku ili pacijentu.
[0030]Ovde su takođe opisana jedinjenja predstavljena Strukturnom Formulom (XX):
ili njihove farmaceutski prihvatljive soli. Bez vezivanja za određenu teoriju, jedinjenja Strukturne Formule(XX)mogu se koristiti za sintezu jedinjenja Formule(I).Prornenljive Strukturne Formule (XX) su svaka i nezavisno kao što je ovde definisano; i kada Z<1>je N, G je tritil (tj., C(Ph)3gde Ph je fenil), i kada Z1 je CH, G je tozil (Ts: CH3C6H4S02) ili tritil.
[0031]Ovde su takođe opisani postupci za pripremanje jedinjenja predstavljenog Strukturnom Formulom(I)ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. U jednom primeru izvođenja, postupci koriste korake:
i) reakcije jedinjenja A:
sa jedinjenjem B: da bi se formiralo jedinjenje predstavljeno Strukturnom Formulom (XX):
i
ii) deprotekcije G grupe jedinjenja Strukturne Formule(XX)pod odgovarajućim uslovima da bi se formiralo jedinjenje Strukturne Formule(I),gde: promenljive Strukturne Formule(I)i (XX), i jedinjenja (A) i(B)su nezavisno kao što su ovde definisani; i
L je halogen; i
kada Z<1>je N, G je tritil; kada Z<l>je CH, G je tozil ili tritil.
[0032]U sledećem primeru izvođenja, postupci koriste korake:
i) reakcije jedinjenja K iliL:
sa jedinjenjemD:NH2-Z<3>(C(R<1>R2R<J>))-Y da bi se formiralo jedinjenje predstavljeno Strukturnom Formulom (XX): ii) deprotekcije G grupe jedinjenja Strukturne Formule (XX) pod odgovarajućim uslovima da bi se formiralo jedinjenje Strukturne Formule (I),gde: promenljive Strukturne Formule (I) i (XX), i jedinjenja (L), (K), i (D) su svaka i nezavisno kao što je ovde definisano; i
kada Z<1>je N, G je tritil; kada Z<1>je CH, G je tozil ili tritil.
[0033] U sledećem primeru izvođenja, postupci koriste korake:
i) reakcije Jedinjenja (G) sa Jedinjenjem (D):
pod odgovarajućim uslovima da bi se formiralo jedinjenje predstavljeno Strukturnom Formulom (XX):
i
ii) deprotekcije G grupe jedinjenja Strukturne Formule (XX) pod odgovarajućim uslovima da bi se formiralo jedinjenje Strukturne Formule(I),gde: promenljive Strukturne formule(I)i (XX), i Jedinjenja (G) i(D)su svaka i nezavisno kao što je ovde definisano;
L<1>je halogen; i
kada Z<1>je N, G je tritil; kada Z<1>je CH, G je tozil ili tritil.
KRATAK OPIS CRTEŽA
[0034]SL. 1 prikazuje određena jedinjenja pronalaska.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
[0035]Jedinjenja pronalaska su kao što su opisana u patentnim zahtevima. LT nekim primerima izvođenja, jedinjenja pronalaska su predstavljena bilo kojom Strukturnom Formulom(I)- (X), ili njihovim farmaceutski prihvatljivim solima, gde su promenljive svaka i nezavisno kao što je opisano u bilo kom od patentnih zahteva. U nekim primerima izvođenja, ovde opisana jedinjenja predstavljena su bilo kojom od hemijskih formula prikazanih u Tabeli 1 i SL. 1, ili njihovim farmaceutski prihvatljivim solima. U nekim primerima izvođenja, ovde opisana jedinjenja predstavljena su Strukturnim Formulama(I)-
(X), ili njihovim farmaceutski prihvatljivim solima, gde su promenljive svaka i nezavisno kao što su prikazane u hemijskim formulama u Tabeli 1 i SL. 1.
[0036]Opis opisuje jedinjenja predstavljena Strukturnom Formulom(I)ili njihove farmaceutski prihvatljive soli:
gde su vrednosti promenljivih Strukturnih Formula(I)kao što je opisano u nastavku.
[0037]Prvi set promenljivih Strukturne Formule(I) jekao što sledi: X<1>je -F, -Cl, -CF3, -CN, ili CH3. U jednom aspektu, X<1>je -F, -Cl, ili -CF3. U sledećem aspektu, X<1>je -F ili -CL X2 je -H, -F, -Cl, ili -CF3. U jednom aspektu, X<2>je -F, -Cl, ili -CF3. U sledećem aspektu, X" je -F ili -Cl.
Z<1>je N ili CH. U jednom aspektu, Z<1>je CH. U sledećem aspektu, Z<1>je N.
Z<2>je N ili CR°. U jednom aspektu, Z<2>je N, C-F, ili C-CN. U sledećem aspektu, Z2 je
N.
Z3 je CH ili N. U jednom aspektu, Z3 je CH.
Y je -C(R<4>R<5>)-[C(R<6>R<7>)]n-Q ili -C(R<4>)=C(R<6>)-Q.
R°je-H, -F, ili CN.
R1,R<2>, i R<3>su svaki i nezavisno -CH3, -CH2F, -CF3, -C2H5, -CH2CH2F, -CH2CF3; ili izborao R i
R , ili R , R<z>i R"', zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, formiraju 3-10 člani karbociklični prsten (uključujući premošćeni karbociklični prsten, kao što je adamantil prsten). U jednom aspektu, R 1, R 2 , i R ^ su svaki i nezavisno -CH3, ili -C2H5, ili izborno
2 3 12^
R i R , ili R , R i R~, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, formiraju 3-10 člani karbociklični prsten. U sledećem aspektu, svaki od R , R", i R je nezavisno - CH3, -CH2F, -CF3, ili -C2H5; ili R<1>je -CH3, i R<2>i R<3>zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani formiraju 3-6 člani karbociklični prsten. U sledećem aspektu, R<1>, R", i R<J>su svaki i nezavisno -CH3, -CH2F, -CF3, ili -C2H5. U sledećem aspektu, R<1>, R^, i R<3>su svaki i nezavisno -CH3, ili izborno R<2>i R<3>, ili R<1>, R<2>i R<J>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, formiraju 3-6 člani karbociklični prsten. Specifični primeri karbocikličnog prstena uključuju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, i premošćene prstenove, kao što je adamantil grupa. U sledećem aspektu, R , R<z>, i R" su svaki i nezavisno -CH3.
R<4>i R<3>su svaki i nezavisno -H.
R<6>i R<7>su svaki i nezavisno -H, -OH, -CH3, ili -CF3; ili izborno, R<5>i R<7>zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani formiraju ciklopropanski prsten. U jednom aspektu, R<6>i R<7>su svaki i nezavisno -H, -OH, -CH3, ili -CF3. U sledećem aspektu, R<6>i R7 su svaki i nezavisno -H.
Svaki Q je nezavisno -C(0)OR, -OH, -CH2OH, -S(0)R', -P(0)(OH)2, -S(0)2R', - S(0)2-NR"R"', ili 5-člani heterociklus izabran iz grupe koja se sastoji od: gde je -H, -OH ili -CH2OH. Specifični primeri 5-članih heterociklusa uključuju:
U jednom aspektu, svaki Q je nezavisno -C(0)OR, -OH, -CH2OH, -S(0)2R\ -S(0)2-NR"R"', ili 5-člani heterociklus izabran iz grupe koja se sastoji od:
U sledećem aspektu, svaki Q je nezavisno -C(0)OH, -OH, -CH2OH, -S(0)2R\ -S(0)2-NR"R"', ili 5-člani heterociklus izabran iz grupe koja se sastoji od:
U sledećem aspektu, svaki Q je nezavisno -C(0)OR, -OH, -S(0)2R<!>, ili -S(0)2-NR"R"'. U sledećem aspektu, svaki
Q je nezavisno -C(0)OH, -OH, -S(0)2R', ili -S(0)2-NR"R"'.
Rje -H ili C]-4 alkil. U jednom aspektu, Rje -H.
R' je -OH, Ci-4 alkil, ili -CH2C(0)OH. U jednom aspektu, R' je -OH ili - CH2C(0)OH.
R" je -H ili -CH3. U jednom aspektu, R" je -H.
R<!>" je -H, 3-6 člani karbociklični prsten, ili C1-4alkil izborno supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halogena, -OR<a>i -C(0)OR<a>. U jednom aspektu, R'" je -H, 3-6 člani karbociklični prsten, ili izborno supstituisani C1-4alkil. U sledećem aspektu, R'" je -H ili izborno supstituisani Ci-4alkil.
Ra jc -H ili C1-4alkil. U jednom aspektu, R<a>jc -H.
nje 0 ili 1.
[0038JDrugi set promenljivih Strukturne Formule(I) jekao što sledi :
X<1>je -F ili -Cl.
X2 je -F ili -Cl.
[0039]Vrednosti drugih promenljivih su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano u prvom setu vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
[0040]Treći set promenljivih Strukturne Formule(I) jekao što sledi:
X<1>je -F ili -Cl.
Z<1>je CH.
[0041]Vrednosti drugih promenljivih su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano u prvom setu vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
[0042]Četvrti set promenljivih Strukturne Formule(I) jekao što sledi:
X2 je -F ili -Cl.
Z<l>je CH.
[0043]Vrednosti drugih promenljivih su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano u prvom setu vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
[0044]Peti set promenljivih Strukturne Formule(I) jekao što sledi:
X1je-F ili -Cl.
Z<1>je N
[0045]Vrednosti drugih promenljivih su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano u prvom setu vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
[0046]Šesti set promenljivih Strukturne Formule(I) jekao što sledi:
X2je-F ili -Cl.
Z'jeN
[0047]Vrednosti drugih promenljivih su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano u prvom setu vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
[0048]Sedmi set promenljivih Strukturne Formule(I)je kao što sledi :
X<1>je -F ili -Cl.
X2je-F ili -Cl.
Z^jeCH.
[0049]Vrednosti drugih promenljivih su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano u prvom setu vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
[0050]Osmi set promenljivih Strukturne Formule(I) jekao što sledi:
X<1>je -F ili -Cl.
X2je-F ili -Cl.
z'jeN.
[0051]Vrednosti drugih promenljivih su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano u prvom setu vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
[0052]Deveti set promenljivih Strukturne Fonnule(I) jekao što sledi:
X<1>je -F ili -Cl.
Z2jeN, C-F, ili C-CN.
[0053]Vrednosti drugih promenljivih su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano u prvom setu vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
[0054]Deseti set promenljivih Strukturne Formule(I) jekao što sledi:
X2je-F ili-Cl
Z2jeN, C-F, ili C-CN.
[0055]Vrednosti drugih promenljivih su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano u prvom setu vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
[0056]Jedanaesti set promenljivih Strukturne Formule(I) jekao što sledi:
Z<1>je CH.
Z2jeN, C-F, ili C-CN.
[0057]Vrednosti drugih promenljivih su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano u prvom setu vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
[0058]Jedanaesti set promenljivih Strukturne Formule(I) jekao što sledi:
z'jeN.
Z2jeN, C-F, ili C-CN.
[0059]Vrednosti drugih promenljivih su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano u prvom setu vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
[0060]Dvanaesti set promenljivih Strukturne Formule(I) jekao što sledi:
X<1>je -F ili -Cl.
X2 je -F ili -Cl.
Z<1>je N.
Z2jeN, C-F, ili C-CN.
[0061]Vrednosti drugih promenljivih su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano u prvom setu vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
[0062]Trinaesti set vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I) jakao što sledi: 12 1 ^
X , X ,Z, i Z" su svaki i nezavisno kao što je prethodno opisano u bilo kom od prvog do dvanaestog seta vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
Svaki od R<1>, R<2>, i R<5>je nezavisno -CH3, -CH2F, -CF3, ili -C2H5; ili R<1>je -CH3, i R<2>i R<J>zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani formiraju 3-6 člani karbociklični prsten.
Vrednosti drugih promenljivih su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano u prvom setu vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
[0063]Četrnaesti set vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I) jekao što sledi: X ] , X"^ , Z 1 , Z"^ , R 1 , R"^ , i R' 3 su svaki i nezavisno kao što su prethodno opisani u bilo kojem od prvog do trinaestog seta vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
R<6>i R<7>su svaki i nezavisno -H, -OH, -CH3, ili -CF3.
Vrednosti drugih promenljivih su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano u prvom setu vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
[0064]Petnaesti set vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I) jekao što sledi: 121^1216 7 X<1>, X<z>, Z\ Z\ R , R<\>R , R , i R su svaki i nezavisno kao što su prethodno opisani u bilo kojem od prvog do četrnaestog seta vrednosti promenljivih Strukturne Formule
a).
Svaki Q je nezavisno -C(0)OR, -OH, -CH2OH, -S(0)2R', -S(0)2-NR"R'", ili 5-člani
heterociklus izabran iz grupe koja se sastoji od:
[0065]Vrednosti drugih promenljivih su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano u prvom setu vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
[0066] Šesnaesti set vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I) jekao što sledi: ] 2 J *^ 1 3 f 7
X', X<z>, Z<1>, Z-, R ,R-,R<J>, R°, i R' su svaki i nezavisno kao što su prethodno opisani u bilo kojem od prvog do četrnaestog seta vrednosti promenljivih Strukturne Formule
(I).
Svaki Q nezavisno je -C(0)OR, -OH, -S(0)2R', ili -S(0)2-NR"R"'.
Vrednosti drugih promenljivih su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano u prvom setu vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
[0067] Sedamnaesti set vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I) jekao što sledi:
1'-^ 1212 3 6 7X,X",Z, Z , R , R , R, R<1>, i R su svaki i nezavisno kao što su prethodno opisani u bilo kojem od prvog do četrnaestog seta vrednosti promenljivih Strukturne Formule(1).
Svaki Q nezavisno je -C(0)OH, -OH, -S(0)2R\ ili -S(0)2-NR"R"'.
Vrednosti drugih promenljivih su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano u prvom setu vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
[0068]Osamnaesti set vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I) jekao što sledi: 121^1^36 7 X , X , Z , Z<r>, R , R", R , R , i R su svaki i nezavisno kao što su prethodno opisani u bilo kojem od prvog do četrnaestog seta vrednosti promenljivih Strukturne Formule
a).
Svaki Q nezavisno je -C(0)OH, -S(0)2R\ ili -S(0)2-NR"R"\
Vrednosti drugih promenljivih su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano u prvom setu vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
[0069]Deventaesti set vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I) jekao što sledi: 1 212 12^67 X, X,Z,Z,R,R,R~,R,R,iQsu svaki i nezavisno kao što su prethodno opisani u bilo kojem od prvog do šesnaestog seta vrednosti promenljivih Stmkturne Formule
(I).
R' je -OH ili -CH2C(0)OH.
R" je-H.
R'" je -H, 3-6 člani karbociklični prsten, ili izborno supstituisani C1-4alkil.
Vrednosti drugih promenljivih su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano u prvom setu vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
[0070]Dvadeseti set vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I) jekao što sledi: 1^1212^6 7 X<I>, X', Z1, Z\R,R", R-, R°, 1 R' su svaki i nezavisno kao što su prethodno opisani u bilo kojem od prvog do šesnaestog seta vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).Svaki Q nezavisno je -C(0)OH, -S(0)2OH, -S(0)2CH2C(0)OH, -S(0)2-NH(Cj-4alkil). Vrednosti drugih promenljivih su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano u prvom setu vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
[0071]Opis opisuje jedinjenja predstavljena bilo kojom od Stmktumih Formula(II)-(V),ili njihove farmaceutski prihvatljive soli: gde su vrednosti promenljivih Strukturnih Formula(II)- (V) svaka i nezavisno kao što su prethodno opisani u bilo kojem od prvog do dvadesetog seta vrednosti promenljivih Strukturne Formule(I).
[0072] Opis dalje opisuje jedinjenja predstavljena bilo kojim Strukturnim Formulama (VI) -
(X), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli:
ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, gde: R 1, R 2 , i R 3 su svaki i nezavisno -CH3, -CH2F, - CF3, -C2H5, -CH2CH2F, -CH2CF3; i prsten P je 3-6 člani karbociklični prsten; i gde vrednosti drugih promenljivih Strukturnih Formula (VI) i (X) su svaka i nezavisno kao što su prethodno opisani u bilo kojem od prvog do dvadesetog seta vrednosti promenljivih Strukturne Formule
(I).
[0073]Dvadeset prvi set vrednosti promenljivih Strukturne Formule (II) - (X) je kao što sledi: RjeH;
R' je -OH ili -CH2C(0)OH.
R"je -H.
R'" je -H, 3-6 člani karbociklični prsten, ili izborno supstituisani Ci-4 alkil. Vrednosti drugih promenljivih su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano.
[0074]Napominje se da se, na primer, Strukturne Formule(VI), (VIII),i (IX) mogu takođe prikazati kao što sledi, respektivno:
[0075]Opis dalje opisuje jedinjenja predstavljena bilo kojim od Strukturnih Formula (I) - (X) ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, gde su vrednosti promenljivih svaka i nezavisno kao sto je prikazano jedinjenjima u Tabeli 1 ili SL. 1.
[0076]Jedinjenja su predstavljena bilo kojim strukturnim formulama prikazanim u Tabeli 1 i SL. 1, ili njihovim farmaceutski prihvatljivim solima.
[0077]Kao što je ovde korišćeno, referenca na jedinjenje (jedinjenja) opisana ovde (na primer, jedinjenje (jedinjenja) Strukturne Formule (I), ili jedinjenje prema patentnom zahtevu 1) uključiće njihove farmaceutski prihvatljive soli.
[0078]Ovde opisana jedinjenja mogu se pripremiti bilo kojim pogodnim postupkom poznatim u tehnici. Na primer, mogu se pripremiti u skladu sa procedurama opisanim u WO 2005/095400, WO 2007/084557, WO 2010/011768, WO 2010/011756, WO 2010/011772, WO 2009/073300, i PCT/US2010/038988 podnetim 17 juna 2010. Na primer, jedinjenja prikazana u Tabeli 1 i SL. 1 i specifična jedinjenja prethodno prikazana mogu se pripremiti bilo kojim pogodnim postupkom poznatim u tehnici, na primer, WO 2005/095400, WO 2007/084557, WO 2010/011768, WO 2010/011756, WP 2010/011772, WO 2009/073300, i PCT/US2010/038988, i sintezom datom primerom u nastavku u okviru Primera.
[0079]Ovde su opisani postupci za pripremanje jedinjenja predstavljenog Strukturnim Formulama (I) - (X). U jednom primeru izvođenja, jedinjenja se mogu pripremiti kao što je prikazano u Opštim Šemama 1-4. Bilo koji pogodni uslov(i) poznat u tehnici može se upotrebiti u pronalasku za svaki korak prikazan u šemama.
[0080]U specifičnom primeru izvođenja, kao što je prikazano na Opštoj Šemi 1, postupci sadrže korak reakcije Jedinjenja (A) sa Jedinjenjem (B) pod odgovarajućim uslovima da bi se formiralo jedinjenje Strukturne Formule (XX), gde svaki od L 1 i L 2 nezavisno je halogen (F, Cl, Br, ili I), G je tritil i preostale promenljive Jedinjenja (A), (B) i Strukturne Formule (XX) su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano za Strukturne Formule (I) - (X). Tipični primeri za L 1 i L 2 su svaki i nezavisno Cl ili Br. Postupci dalje sadrže korak deprotekcije G grupe pod odgovarajućim uslovima da bi se formirala jedinjenja Strukturne Formule (I). Bilo koji odgovarajući uslov(i) poznat u tehnici može se upotrebiti u pronalasku za svaki korak prikazan na šemama. Na primer, bilo koji odgovarajući uslov opisan u WO 2005/095400 i WO 2007/084557 za kuplovanje dioksaboraolana sa hloro-pirimidinom može se upotrebiti za reakciju između Jedinjenja (A) i (B). Specifično, reakcija između jedinjenja (A) i (B) može se izvesti u prisustvu Pd(PPh3)4ili Pd2(dba)3(dba je dibenziliden aceton). Na primer, de-tritilacioni korak može se izvesti pod kiselim uslovima (npr., trifluorosirćetna kiselina (TFA)) u prisustvu, na primer, Et3SiH (Et je etil). Specifični primeri uslova opisani su u nastavku u okviru Primera.
[0081]Izborno, postupak dalje sadrži korak pripreme Jedinjenja (A) reakcijom Jedinjenja (E) sa Jedinjenjem (D). Bilo koji pogodni uslovi poznati u tehnici mogu se upotrebiti u ovom koraku, i Jedinjenja (E) i (D) se mogu pripremiti bilo kojim pogodnim postupkom poznatim u tehnici. Specifični primeri uslova opisani su u okvira Primera u nastavku.
[0082] U sledećem specifičnom primeru izvođenja, kao što je prikazano na Opštoj Šemi 2, postupci sadrže korak reakcije Jedinjenja (G) sa Jedinjenjem (D) pod odgovarajućim uslovima da bi se formiralo jedinjenje Strukturne Formule (XX), gde svaki od L<1>i L<2>nezavisno je halogen (F, Cl, Br, ili I), G je tritil, i preostale promenljive Jedinjenja (G),(D)i Strukturne Formule (XX) su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano za Strukturne Formule(I)-(X).Tipični primeri za L 1 i L" ^ su svaki i nezavisno Cl ili Br. Postupci dalje sadrže korak deprotekcije G grupe pod odgovarajućim uslovima da bi se formirala jedinjenja Strukturne Formule(I).Bilo koji pogodni uslov(i) poznati u tehnici mogu se upotrebiti u pronalasku za svaki korak prikazan u šemama. Na primer, bilo koji odgovarajući uslov za aminaciju poznat u tehnici se može upotrebiti u pronalasku za reakciju Jedinjenja (G)i (D),i bilo koji odgovarajući uslov za deprotekciju Tr grupe može se upotrebiti u pronalasku za korak deprotekcije. Na primer, korak aminacije može se izvesti u prisustvu baze, kao što je NEt3ili NfiPrhEt. Na primer, de-tritilacioni korak može se izvesti pod kiselim uslovima (npr., trifluorosirćetna kiselina (TFA)) u prisustvu, na primer, EtiSiH (Et je etil). Dodatni specifični primeri uslova opisani su u okviru Primera u nastavku.
[0083]Izborno, postupak dalje sadrži korak pripreme Jedinjenja(G)reakcijom Jedinjenja (E) sa Jedinjenjem(B).Bilo koji odgovarajući uslov poznat u tehnici može se upotrebiti u ovom koraku. Na primer, bilo koji odgovarajući uslov opisan u WO 2005/095400 i WO 2007/084557 za kuplovanje dioksaboralana sa hloro-pirimidinom može se upotrebiti za reakciju između Jedinjenja (E)i (B).Specifično, reakcija između jedinjenja (E)i (B)može se izvesti u prisustvu Pd(PPh.3)4 ili Pd2(dba)3(dba je dibenziliden aceton). Specifični primeri uslova opisani su u okvira Primera u nastavku.
[0084]U sledećem specifičnom primeru izvođenja, kao što je prikazano na Opštoj Šemi 3, postupci sadrže korak reakcije Jedinjenja(K)sa Jedinjenjem(D)pod odgovarajućim uslovima da bi se formiralo jedinjenje Strukturne Formule(XX),gde G je tritil i preostale promenljive Jedinjenja(K), (D)i Strukturne Formule(XX)su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano za Strukturne Formule(I)-(X).Postupci dalje sadže korak deprotekcije G grupe pod odgovarajućim uslovima da bi se formirala jedinjenja Strukturne Formule(I).Bilo koji odgovarajući uslov(i) poznati u tehnici mogu se upotrebiti u pronalasku za svaki korak prikazan na šemama. Na primer, bilo koji pogodni reakcioni uslov poznat u tehnici, na primer, u WO 2005/095400 i WO 2007/084557 za kuplovanje amina sa sulfinil grupom može se upotrebiti za reakciju Jedinjenja(K)sa Jedinjenjem(D).Na primer, Jedinjenja(D)i(K)mogu reagovati u prisustvu baze, kao što je NEt3ili N(iPr)2(Et). Na primer, de-tritilacioni korak može se izvesti u kiselim uslovima (npr., trifluorosirćetna kiselina (TFA)) u prisustvu, na primer, Et3SiH (Et je etil). Dodatni specifični primeri uslova su opisani u okviru Primera u nastavku.
[0085]Izborno, postupak dalje sadrži korak pripremanja Jedinjenja(K)oksidacijom Jedinjenja (J), na primer, tretmanom sa meta-hloroperbenzojevom kiselinom.
[0086]Izborno, postupak dalje sadrži korak pripreme Jedinjenja(J)reakcijom Jedinjenja(H)sa Jedinjenjem(B).Bilo koji odgovarajući uslovi poznati u tehnici mogu se upotrebiti u ovom koraku. Na primer, bilo koji odgovarajući uslov opisan u WO 2005/095400 i WO 2007/084557 za kuplovanje dioksaboraolana sa hloro-pirimidinom mogu se upotrebiti za reakciju između Jedinjenja(H) i (B).Specifično, reakcija između jedinjenja(H) i (B)može se izvesti u prisustvu Pd(PPh3)4ili Pd2(dba)3(dba je dibenziliden aceton). Specifični primeri uslova opisani su u okviru Primera u nastavku.
[0087]U sledećem specifičnom primeru izvođenja, kao što je prikazano na Opštoj Šemi 4, postupci sadrže korak reakcije Jedinjenja (L) sa Jedinjenjem (D) pod odgovarajućim uslovima da bi se formiralo jedinjenje Strukturne Formule (XX), gde G je tritil i preostale promenljive Jedinjenja (L), (D) i Strukturnih Formula (XX) su svaka i nezavisno kao što je prethodno opisano za Strukturne Formule (I) - (X). Postupci dalje sadrže korak deprotekcije G grupe pod odgovarajućim uslovima da bi se formirala jedinjenja Strukturne Formule (I). Bilo koji odgovarajući uslov(i) poznati u tehnici mogu se upotrebiti u pronalsku za svaki korak prikazan na šemama. Na primer, bilo koji odgovarajući reakcioni uslov poznat u tehnici, na primer, u WO 2()()5/()9540() i WO 2007/084557 za kuplovanje amina sa sulfonil grupom mogu se upotrebiti za reakciju Jedinjenja (L) sa Jedinjenjem (D). Na primer, Jedinjenja (D) i (L) mogu reagovati u prisustvu baze, kao što je NEt3ili N(iPr)i(Et). Na primer, de-tritilacioni korak može se izvesti u kiselim uslovima (npr., trifluorosirćetna kiselina (TFA)) u prisustvu, na primer, Et^SiH (Et je etil). Dodatni specifični primeri uslova su opisani u okviru Primera u nastavku.
[0088] Izborno, postupak dalje sadrži korak pripreme Jedinjenja (L) oksidacijom Jedinjenja (J), na primer, tretmanom sa meta-hloroperbenzojevom kiselinom.
[0089] Izborno, postupak dalje sadrži korak pripreme Jedinjenja (J) reakcijom Jedinjenja (H) sa Jedinjenjem (B). Reakcioni uslovi su kao što je prethodno opisano za Opštu Šemu 3.
[0090]Jedinjenja (A)-(K) mogu se pripremiti bilo kojim pogodnim postupkom poznatim u tehnici. Specifični primeri sintetičkih postupaka ovih jedinjenja opisani su u nastavku u okviru Primera. U jednom primeru izvođenja, Jedinjenja (A), (G), (J), (K) i (L) mogu se pripremiti kao što je opisano u Opštim Šemama 1-4.
[0091] U nekim primerima izvođenja, ovaj pronalazak je usmeren na jedinjenja predstavljena Strukturnom Formulom (XX), gde promenljive Strukturne Formule (XX) su svaka i nezavisno kao što je definisano prema bilo kom od patentnih zahteva i G je tritil. Specifični primeri jedinjenja predstavljenih Strukturnom Formulom (XX) prikazani su u nastavku u okviru Primera. Neki specifični primeri uključuju: Jedinjenja3a, 8a, 28a, 34a, 39a, 42a, 51a,
57a, 80a, 84a, 90a, 101a, 119a, 144a, 148a, 154a, 159a, 170a, 176a, 182a, 184a, 191a, 197a,
207a, i 218a,koja su prikazana u okviru Primera u nastavku.
Definicije i opšta terminologija
[0092]Za svrhe ovog pronalaska, hemijski elementi su identifikovani u skladu sa Periodnim sistemom elemenata, CAS version, Handbook of Chemistrv i Phvsics, 75th Ed. Dodatno, opšti principi organske hernije su opisani u "Organic Chemistrv", Thomas Sorell, Universitv Science Books, Sausolito: 1999, i "March's Advanced Organic Chemistrv", 5th Ed., Ed.: Smith, M.B. i March, J., John Wiley & Sons, New York: 2001.
[0093]Kao što je ovde opisano, jedinjenja pronalaska mogu biti izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata, kao što je generalno ilustrovano u nastavku, ili kao što je dato primerom za određene klase, potklase, i vrste pronalaska. Biće jasno da je izraz "izborno supstituisan" korišćen naizmenično sa izrazom "supstituisan ili nesupstituisan." Generalno, termin "supstituisan", bilo da mu prethodni termin "izborno" ili ne, odnosi se na zamenu jednog ili više radikala vodonika u datoj strukturi sa radikalom specifičnog supstituenta. Ukoliko nije drugačije naznačeno, izborno supstituisana grupa može imati substituent na svakoj poziciji grupe koja se može zameniti. Kada više od jedne pozicije u datoj strukturi može biti supstituisano sa više od jednog supstituenta izabranog iz specifične grupe, supstituent može biti ili isti ili različit na svakoj poziciji. Kada termin "izborno supstituisan" prethodi spisku, pomenuti termin se odnosi na sve sledeće grupe u toj listi koje se mogu supstituisati. Ukoliko radikal supstituent ili struktura nije identifikovan ili definisan kao "izborno supstituisan", supstituent radikal ili struktura je nesupstituisan. Na primer, ukoliko je X izborno supstituisani Ci-Cialkil ili fenil; X može biti ili izborno supstituisani C1-C3alkil ili izborno supstituisani fenil. Slično tome, ukoliko termin "izborno supstituisan" sledi nakon spiska, pomenuti tennin se takođe odnosi na sve grupe koje se mogu supstituisati u prethodnom spisku ukoliko nije drugačije naznačeno. Na primer: ukoliko X je Ci-C3alkil ili fenil gde X je izborno i nezavisno supstituisan sa J<x>, onda oba Ci-C3alkil i fenil mogu biti izborno supstituisani sa J<x>.
[0094]Izraz "do", kao što je ovde korišćeno, odnosi se na nula ili bilo koji ceo broj koji je jednak ili manji od broja koji sledi nakon izraza. Na primer, "do 3" označava bilo koji od 0, 1, 2, i 3. Kao što je ovde opisano, naznačeni brojni opseg atoma uključuje u sebi bilo koji ceo broj. Na primer, grupa koja ima od 1-4 atoma može imati 1, 2, 3, ili 4 atoma.
[0095] Izbor supstituenata i kombinacija supstituenata predviđenih ovim pronalaskom su oni koji rezultuju u formiranju stabilnih ili hemijski izvodljivih jedinjenja. Termin "stabilan", kao što je ovde korišćeno, odnosi se na jedinjenja koja nisu značajno izmenjena kada su povrgnuta uslovima koji omogućavaju njihovu proizvodnju, detekciju, i, specifično, njihovu rekuperaciju, prečišćavanje, i upotrebu za jednu ili više ovde opisanih svrha. U nekim primerima izvođenja, stabilno jedinjenje ili hemijsko izvodljivo jedinjenje je ono koje nije značajno izmenjeno kada se drži na temperaturi od 40°C ili manje, u odsustvu vlage ili drugih hemijski reaktivnih uslova, najmanje nedelju dana. Predviđeni su samo oni izbori i kombinacije supstituenata koji rezultuju u stabilnoj strukturi. Takvi izbori i kombinacije biće očigledni stručnjaku i mogu se odrediti bez nepotrebnog eksperimentisanja.
[0096] Termin "alifatični" ili "alifatična grupa", kao što je ovde korišćeno, označava linearni (tj., negranati), ili granati, ugljovodonični lanac koji je potpuno zasićen ili koji sadrži jedan ili više jedinica nezasićenosti, ali je ne-aromatičan. Ukoliko nije drugačije naznačeno, alifatične grupe sadrže 1-20 alifatičnih atoma ugljenika. U nekim primerima izvođenja, alifatične grupe sadrže 1-10 alifatičnih atoma ugljenika. U drugim primerima izvođenja, alifatične grupe sadrže 1-8 alifatičnih atoma ugljenika. U drugim primerima izvođenja, alifatične grupe sadrže 1-6 alifatičnih atoma ugljenika, i u drugom primeru izvođenja, alifatične grupe sadrže 1-4 alifatičnih atoma ugljenika. Alifatične grupe mogu biti linearne ili granate, supstituisane ili nepstituisane alkil, alkenil, ili alkinil grupe. Specifični primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, metil, etil, izopropil, n-propil, sek-butil, vinil, n-butenil, etinil, i terc-butil i acetilen.
[0097] Termin "alkil" kao što je ovde korišćeno označava zasićeni linearni ili granati ugljovodonični lanac. Termin "alkenil" kao što je ovde korišćeno označava linearni ili granati ugljvodonični lanac koji sadrži jednu ili više dvogubih veza. Termin "alkinil" kao što je ovde korišćeno označava linearni ili granati ugljvodonični lanac koji sadrži jednu ili više trogubih veza. Svaki od "alkil", "alkenil" ili "alkinil" kao što je ovde korišćeno može biti izborno supstituisan kao što je dato u nastavku. U nekim primerima izvođenja, "alkil" je Ci-Cealkil ili C1-C4alkil. U nekim primerima izvođenja, "alkenil" je C2-C6alkenil ili C2-C4alkenil. U nekim primerima izvođenja, "alkinil" je C2-C6alkinil ili C2-C4alkinil.
[0098] Termin "cikloalifatični" (ili "karbociklus" ili "karbociklil" ili "karbociklični") odnosi se na ne-aromatični sistem prstena samo sa ugljenikom koji može biti zasićen ili sadržati jednu ili više jedinica nezasićenosti, sa tri do četrnaest atoma ugljenika prstena. U nekim primerima izvođenja, broj ugljenikovih atoma je 3 do 10. U drugim primerima izvođenja, broj ugljenikovih atoma je 4 do 7. U drugim primerima izvođenja, broj ugljenikovih atoma je 5 ili 6. Termin uključuje monociklične, biciklične ili policiklične, fuzionisane, spiro ili premošćene karbociklične sisteme prstena. Tennin takođe uključuje policiklične sisteme prstena u kojima karbociklični prsten može biti "fuzionisan" sa jednim ili više ne-aromatičnih karbocikličnih ili heterocikličnih prstenova ili jedan ili više aromatičnih prstenova ili njihovih kombinacija, gde je radikal ili tačka vezivanja na karbocikličnom prstenu. "Fuzionisani" biciklični sitemi prstena sadrže dva prstena koja dele dva susedna atoma prstena. Premošćena biciklična grupa sadrži dva prstena koji dele tri ili četiri susedna atoma prstena. Spiro biciklični sistemi prstena dele samo jedan atom prstena. Primeri cikloalifatičnih grupa uključuju, ali nisu ograničeni na, cikloalkil i cikloalkenil grupe. Specifični primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, cikloheksil, ciklopropenil, i ciklobutil.
[0099] Termin "heterociklus" (ili "heterociklil", ili "heterociklično" ili "ne-aromatični heterociklus") kao što je ovde korišćeno odnosi se na ne-aromatični sistem prstena koji može biti zasićen ili sadržati jednu ili više jedinica nezasićenosti, sa tri do četrnaest atoma prstena u kome je jedan ili više ugljenika prstena zamenjeno heteroatomom kao što su, N, S, ili O i svaki prsten u sistemu sadrži 3 do 7 članova. U nekim primerima izvođenja, ne-aromatični heterociklični prstenovi sadrže do tri heteroatoma izabrana od N, S i O unutar prstena. U drugim primerima izvođenja, ne-aromatični heterociklični prstenovi sadrže do dva heteroatoma izabrana od N, S i O unutar sistema prstena. U drugom primeru izvođenja, ne-aromatični heterociklični prstenovi sadrže do dva heteroatoma izabrana od N i O unutar sistema prstena. Termin uključuje monociklične, biciklične ili policiklične fuzionisane, spiro ili premošćene heterociklične sisteme prstena. Termin takođe uključuje policiklične sisteme prstena u kojima heterociklični prsten može biti fuzionisan sa jednim ili više ne-aromatičnih karbocikličnih ili heterocikličnih prstenova ili jednim ili više aromatičnih prstenova ili njhovih kombinacija, gde je radikal ili tačka vezivanja na heterocikličnom prstenu. Primeri heterociklusa uključuju, ali nisu ograničeni na, piperidinil, piperizinil, pirolidinil, pirazolidinil, imidazolidinil, azepanil, diazepanil, triazepanil, azokanil, diazokanil, triazokanil, oksazolidinil, izoksazolidinil, tiazolidinil, izotiazolidinil, oksazokanil, oksazepanil, tiazepanil, tiazokanil, benzimidazolonil, tetrahidrofuranil, tetrahidrofuranil, tetrahidrotiofenil, tetrahidrotiofenil, morfolino, uključujući, na primer, 3-morfolino, 4-morfolino, 2-tiomorfolino, 3-tiomorfolino, 4-tiomorfolino, 1-pirolidinil, 2-pirolidinil, 3-pirolidinil, 1-tetrahidropiperizinil, 2-tetrahidropiperizinil, 3-tetrahidropiperizinil, 1-piperidinil, 2-piperidinil, 3-piperidinil, 1-pirazolinil, 3-pirazolinil, 4-pirazolinil, 5-pirazolinil, 1-piperidinil, 2-piperidinil, 3-piperidinil, 4-piperidinil, 2-tiazolidinil, 3-tiazolidinil, 4-tiazolidinil, 1-imidazolidinil, 2-imidazolidinil, 4-imidazolidinil, 5-imidazolidinil, indolinil, tetrahidrohinolin.il, tetrahidroizohinolinil, benzotiolanil, benzoditianil, 3-( 1 -alkil)-benzimidazol-2-onil, i l,3-dihidro-imidazol-2-onil.
[0100] Termin "aril" (ili "aril prsten" ili "aril grupa") korišćeni zasebno ili kao deo veće grupe kao u "aralkil", "aralkoksi", ili "ariloksialkil" odnosi se na karbociklične aromatične sisteme prstena. Termin "aril" može se koristiti naizmenično sa terminima "aril prsten" ili "aril grupa".
[0101] Grupe "karbocikličnog aromatičnog prstena" imaju samo atome ugljenika u prstenu (tipično šest do četrnaest) i uključuju monociklične aromatične prstenove kao što su fenil i fuzionisani policiklični aromatični sistemi prstena u kojima su dva ili više karbocikličnih aromatičnih prstenova međusobno fuzionisani. Primeri uključuju 1-naftil, 2-naftil, 1-antracil i 2-antracil. Takođe je unutar obima termina "karbociklični aromatični prsten" ili "karbociklični aromatik", kao što je ovde korišćeno, grupa u kojoj je aromatični prsten "fuzionisan" sa jednim ili više ne-aromatičnih prstenova (karbocikličnih ili heterocikličnih), kao što je u indanil, ftalimidil, naftimidil, fenantridinil, ili tetrahidronaftil, gde je radikal ili tačka vezivanja na aromatičnom prstenu.
[0102] Termini "heteroaril", "heteroaromatični", "heteroaril prsten", "heteroaril grupa", "aromatični heterociklus" ili "heteroaromatična grupa", korišćeni zasebno ili kao deo veće grupe kao u "heteroaralkil" ili "heteroarilalkoksi", odnosi se na heteroaromatične grupe prstena koje imaju pet do četrnaest članova, uključujući monociklične heteroaromatične prstenove i policiklične aromatične prstenove u kojima je monociklični aromatični prsten fuzionisan sa jednim ili više drugih aromatičnih prstenova. Heteroaril grupe imaju jedan ili više heteroatoma prstena. Takođe je unutar obima termina "heteroaril", kao što je ovde korišćeno, grupa u kojoj je aromatični prsten "fuzionisan" sa jednim ili više ne-aromatičnih prstenova (karbocikličnih ili heterocikličnih), gde je radikal ili tačka vezivanja na aromatičnom prstenu. Biciklični 6,5 heteroaromatični prsten je, kao što je ovde korišćeno, na primer, šestočlani heteroaromatični prsten fuzionisan sa drugim petočlanim prstenom, gde je radikal ili tačka vezivanja na šestočlanom prstenu. Primeri heteroaril grupa uključuju piridil, pirazinil, pirhmdinil, piridazinil, imidazolil, pirolil, pirazolil, triazolil, tetrazolil, oksazolil, izoksazolil, oksadiazolil, tiazolil, izotiazolil ili tiadiazolil uključujući, na primer, 2-furanil, 3-furanil, N-imidazolil, 2-imidazolil, 4-imidazolil, 5-imidazolil, 3-izoksazolil, 4-izoksazolil, 5-izoksazolil, 2-oksadiazolil, 5-oksadiazolil, 2-oksazolil, 4-oksazolil, 5-oksazolil, 3-pirazolil, 4-pirazolil, 1-pirolil, 2-pirolil, 3-pirolil, 2-piridil, 3-piridil, 4-piridil, 2-pirimidinil, 4-pirimidinil, 5-pirimidinil, 3-piridazinil, 2-tiazolil, 4-tiazolil, 5-tiazolil, 2-triazolil, 5-triazolil, tetrazolil, 2-tienil, 3-tienil, karbazolil, benzimidazolil, benzotienil, benzofuranil, indolil, benzotriazolil, benzotiazolil, benzoksazolil, benzimidazolil, izohinolinil, indolil, izoindolil, akridinil, benzizoksazolil, izotiazolil, 1,2,3-oksadiazolil, 1,2,5-oksađiazolil, 1,2,4-oksadiazolil, 1,2,3-triazolil, 1,2,3-tiadiazolil, 1,3,4-tiadiazolil, 1,2,5-tiadiazolil, purinil, pirazinil, 1,3,5-triazinil, hinolinil (npr., 2-hinolinil, 3-hinolinil, 4-hinolinil), i izohinolinil (npr., 1-izohinolinil, 3-izohinolinil, ili 4-izohinolinil).
[0103]Kao što je ovde korišćeno, "ciklo", "ciklično", "ciklična grupa" ili "ciklični ostatak", uključujući mono-, bi-, i tri-ciklične sisteme prstena uključujući cikloalifatični, heterocikloalifatični, karbociklični aril, ili heteroaril, od kojih je svaki prethodno definisan.
[0104]Kao što je ovde korišćeno, "biciklični sistem prstena" uključuje 8-12 (npr., 9, 10, ili 11) člane strukture koje formiraju dva prstena, gde dva prstena imaju najmanje jedan zajednički atom (npr., 2 zajednička atoma). Biciklični sistemi prstena uključuju bicikloalifatike (npr., bicikloalkil ili bicikloalkenil), bicikloheteroalifatike, biciklične karbociklične arile, i biciklične heteroarile.
[0105]Kao što je ovde korišćeno, "premošćeni biciklični sistem prstena" odnosi se na biciklični heterocikloalifatični sistem prstena ili biciklični cikloalifatični sistem prstena u kojem su prstenovi premošćeni. Primeri premošćenih bicikličnih sistema prstena uključuju, ali nisu ograničeni na, adamantanil, norbornanil, biciklo[3.2.1]oktil, biciklo[2.2.2]oktil, biciklo[3.3.1]nonil, biciklo[3.2.3]nonil, 2-oksa-biciklo[2.2.2]oktil, l-aza-biciklo[2.2.2]oktil, 3-aza-biciklo[3.2.1]oktil, i 2,6-dioksatriciklo[3.3.1.03,7]nonil. Premošćeni biciklični sistem prstena može biti izborno supstituisan sa jednim ili više supstituenata kao što su alkil (uključujući karboksialkil, hidroksialkil, i haloalkil kao što je trifluorometil), alkenil, alkinil, cikloalkil, (cikloalkil)alkil, heterocikloalkil, (heterocikloalkil)alkil, karbociklični aril, heteroaril, alkoksi, cikloalkiloksi, heterocikloalkiloksi, (karbociklični aril)oksi, heteroariloksi, aralkiloksi, heteroaralkiloksi, aroil, heteroaroil, nitro, karboksi, alkoksikarbonil, alkilkarboniloksi, aminokarbonil, alkilkarbonilamino, cikloalkilkarbonilamino, (cikloalkilalkil)karbonilamino, (karbociklični aril)karbonilamino, aralkilkarbonilamino, (heterocikloalkil)karbonilamino, (heterocikloalkilalkil)karbonilamino, heteroarilkarbonilamino, heteroaralkilkarbonilamino, cijano, halo, hidroksi, acil, merkapto, alkilsulfanil, sulfoksi, urea, tiourea, sulfamoil, sulfamid, okso, ili karbamoil.
[0106]Kao što je ovde korišćeno, "most" se odnosi na vezu ili atom ili na negranati lanac atoma koij vezuje dva različita dela molekula. Dva atoma koja su povezana preko mosta (obično ali ne uvek, dva tercijarna atoma ugljenika) su označeni kao "čeoni delovi mosta".
[0107]Kao što je ovde korišćeno, termin "spiro" odnosi se na sisteme prstena koji imaju jedan atom (obično kvaternemi ugljenik) kao jedini zajednički atom između dva prstena.
[0108]Termin "atom prstena" je atom kao što je C, N, O ili S koji je u prstenu aromatične grupe, cikloalkil grupe ili ne-aromatičnog heterocikličnog prstena.
[0109]"Atom prstena koji se može supstituisati" u aromatičnoj grupi je atom ugljenika ili azota prstena vezan za atom vodonika. Vodonik može biti izborno zamenjen sa pogodnom supstituentskom grupom. Stoga, termin "atom prstena koji se može supstituisati" ne uključuje atome azota ili ugljenika prstena koji se dele kada su dva prstena fuzionisana. Dodatno, "atom prstena koji se može supstituisati" ne uključuje atome ugljenika ili azota prstena kad struktura prikazuje da su oni već vezani za grupu različitu od vodonika.
[0110]Termin "heteroatom" označava jedan ili više od kiseonika, sumpora, azota, fosfora, ili silicijuma (uključujući, bilo koji oksidovani oblik azota, sumpora, fosfora, ili silicijuma; kvaternizovani oblik bilo kog baznog azota ili; azot heterocikličnog prstena koji se može supstituisati, na primer N (kao u 3,4-dihidro-2H-pirolil), NH (kao u pirolidinil) ili NR+ (kao u N-supstituisanom pirolidinil)).
[0111]Kao što je ovde korišćeno izborno supstituisani aralkil može biti supstituisan i na alkil i na aril delovima. Ukoliko nije drugačije naznačeno kao što je ovde korišćeno izborno supstituisani aralkil je izborno supstituisan na aril delu.
[0112]U nekim primerima izvođenja, alifatična ili heteroalifatična grupa, ili ne-aromatični heterociklični prsten može sadržati jedan ili više supstituenata. Pogodni supstituenti na zasićenom ugljeniku alifatične ili heteroalifatične grupe, ili heterocikličnog prstena izabrani su od onih prethodno navedenih. Drugi pogodni supstituenti uključuju one navedene kao pogodne za nezasićeni ugljenik karbociklične aril ili heteroaril grupe i dodatno uključuje sledeće: =0, =S, =NNHR<*>, =NN(R<*>)2, =NNHC(0)R<*>, =NNHC02(Ci-4alkil), =NNHS02(Ci-4alkil), ili =NR<*>, gde svaki R<*>je nezavisno izabran od vodonika ili izborao supstituisanog Ci-6alifatika. Izborni supstituenti na alifatičnoj grupi R<*>su izabrani od NH2, NH(Cj-4aliphatika), N(Ci-4alifatika)2, halogena, C1-4alifatika, OH, 0(Ci-4alifatika), N02, CN, C02H, C02(Ci-4alifatika), 0(halo C1-4alifatik), ili halo(Cj-4alifatik), gde je svaka od prethodnih Ci-4 alifatičnih grupa od R* je nesupstituisana.
[0113]U nekim primerima izvođenja, izborni supstituenti na azotu heterocikličnog prstena uključuju one korišćene prethodno. Drugi pogodni supstituenti uključuju -R<+>, -N(R )2, - C(0)R<+>, -C02R<+>, -C(0)C(0)R<+>, -C(0)CH2C(0)R<+>, -S02R<+>, -S02N(R<+>)2, -C(=S)N(R<r>)2, - C(=NH)-N(R )2, ili -NR<+>S02R<+>; gde R<+>je vodonik, izborno supstituisani C1-6alifatik, izborao supstituisani fenil, izborno supstituisani -O(Ph), izborno supstituisani -CH2(Ph), izborao supstituisani -(CH2)j.2(Ph); izborno supstituisani -CH=CH(Ph); ili nesupstituisani 5-6 člani heteroaril ili heterociklični prsten sa jednim do četiri heteroatoma nezavi sno izabrana od kiseonika, azota, ili sumpora, ili, dva nezavisna pojavljivanja R<f>, na istom supstituentu ili različitim supstituentima, uzetim zajedno sa atomom (atomima) za koje je svaka R<+>grupa vezana, formira 5-8-člani heterociklil, karbociklični aril, ili heteroaril prsten ili 3-8-člani cikloalkil prsten, gde pomenuti heteroaril ili heterociklil prsten ima 1-3 heteroatoma nezavisno izabranih od azota, kiseonika, ili sumpora. Izborni supstituenti na alifatičnoj grupi ili fenil prsten R<+>su izabrani od NH2, NH(Ci-4alifatik), N(Ci-4alifatik)2, halogena, C1-4alifatik, OH, 0(Ci-4alifatik), N02, CN, C02H, C02(Ci-4alifatik), 0(halo C1-4alifatik), ili halo(Ci-4alifatik), gde svaki od prethodnih Ci-4alifatičnih grupa R<+>je nesupslituisana.
[0114]U nekim primerima izvođenja, aril (uključujući aralkil, aralkoksi, ariloksialkil i slično) ili heteroaril (uključujući heteroaralkil i heteroarilalkoksi i slično) grupa može sadržati jedan ili više supstituenata. Pogodni supstituenti na nezasićenom ugljenikovom atomu karbociklične aril ili heteroaril grupe su izabrani od onih prethodno navedenih. Drugi pogodni supstituenti uključuju: halogen; -R°; -OR°; -SR°; 1,2-metilendioksi; 1,2-etilendioksi; fenil (Ph) izborno supstituisani sa R°; -O(Ph) izborno supstituisani sa R°; -(CH2)i_2(Ph), izborno supstituisani sa R°; -CH=CH(Ph), izborno supstituisani sa R°; -N02; -CN; -N(R°)2; -NR°C(0)R<0>; - NR°C(S)R°; -NR°C(0)N(R°)2; -NR<0>C(S)N(R°)2; -NR°C02R°; -NR<o>NR°C(0)R<o>; - NR<o>NR°C(0)N(R<o>)2; -NR°NR°C02R°; -C(0)C(0)R°; -C(0)CH2C(0)R°; -C02R°; -C(0)R°; -C(S)R°; -C(0)N(R<0>)2; -C(S)N(R°)2; -OC(0)N(R°)2; -OC(0)R°; -C(0)N(OR°) R°; -C(NOR°) R°; -S(0)2R°; -S(0)3R<c>; -S02N(R°)2; -S(0)R°; -NR°S02N(R°)2; -NR°S02R°; -N(OR°)R°; - C(=NH)-N(R<0>)2; ili -(CH2)0-2NHC(O)R<o>; gde svaka nezavisna pojava R° je izabrana od vodonika, izborno supstituisanog C1-6 alifatik, nesupstituisanog 5-6 članog heteroaril ili heterocikličnog prstena, fenil, -O(Ph), ili -CH2(Ph), ili, dve nezavisne pojave R°, na istom supstituentu ili različitim supstituentima, uzeti zajedno sa atomom (atomima) za koje je svaka R° grupa vezana, formiraju 5-8-člani heterociklil, karbociklični aril, ili heteroaril prsten ili 3-8-člani cikloalkil prsten, gde pomenuti heteroaril ili heterociklil prsten ima 1-3 heteroatoma nezavisno izabranih od azota, kiseonika, ili sumpora. Izborni supstituenti na alifatičnoj grupi R° su izabrani od NH2, NH(Ci-4alifatik), N(Ci-4alifatik)2, halogena, Ci-4alifatik, OH, 0(Ci-4alifatik), N02, CN, C02H, C02(Ci-4alifatik), 0(haloCi-4alifatik), ili haloCi-4alifatik, CHO, N(CO)(Ci-4alifatik), C(0)N(C1-4alifatik), gde svaka od prethodnih Ci-4alifatičnih grupa R° je nesupstituisana.
[0115]Ne-aromatični heterociklični prstenovi koji sadrže azot koji su supstituisani na azotu prstena i vezani za ostatak molekula na ugljenikovom atomu prstena označeni su kao N supstituisani. Na primer, N alkil piperidinil grupa je vezana za ostatak molekula na drugoj, trećoj, ili četvrtoj poziciji piperidinil prstena i supstituisana na azotu prstena sa alkil grupom. Ne-aromatični heterociklični prstenovi koji sadrže azot kao što je pirazinil koji su supstituisani na azotu prstena i vezani za ostatak molekula na dragom azotovom atomu prstena označeni su kao N' supstituisani-N-heterociklusi. Na primer, N' acil N-pirazinil grupa je vezana za za ostatak molekula na jednom azotovom atomu prstena i supstituisana na drugom azotovom atomu prstena sa acil grupom.
[0116]Termin "nezasićena", kao što je ovde korišćeno, označava da grupa ima jednu ili više jedinica nezasićenosti.
[0117]Kao što je prethodno detaljno dato, u nekim primerima izvođenja, dve nezavisne instance R° (ili R<+>, ili bilo koje promenljive ovde slično definisane), mogu se uzeti zajedno sa atomom (atomima) za koji je svaka promenljiva vezana da formira 5-8-člani heterociklil, karbociklični aril, ili heteroaril prsten ili 3-8-člani cikloalkil prsten. Primeri prstena koji su formirani kada su dve nezavisne instance R° (ili R<f>, ili bilo koje promenljive ovde slično definisane) su uzeti zajedno sa atomom (atomima) za koji je svaka promenljiva vezana uključuju, ali nisu ograničeni na sledeće: a) dve nezavisne instance R<c>(ili R<+>, ili bilo koje promenljive ovde slično definisane) koje su vezane za isti atom i uzete zajedno sa tim atomom da formiraju prsten, na primer, N(R°)2, gde su obe instance R° uzete zajedno sa azotovim atomom da formiraju piperidin-l-il, piperazin-l-il, ili morfolin-4-il grupu; i b) dve nezavisne instance R° (ili R<+>, ili bilo koje promenljive ovde slično definisane) koje su vezane za različite atome i uzete su zajedno sa oba ova atoma da formiraju prsten, na primer gde je fenil grupa supstituisana sa dve instance OR° ove dve instance R° su uzete zajedno sa atomima kiseonika za koje su vezani da fonniraju fuzionsani 6-člani prsten koji sadrži kiseonik:
Biće jasno da se raznovrsni drugi prstenovi mogu formirati kada su dve nezavisne instance R°
(ili R+, ili bilo koje promenljive ovde slično definisane) uzete zajedno sa atomom (atomima) za koje je svaka promenljiva vezana i da nije namera da prethodni detaljni primeri budu ograničavajući.
[0118]Termin "hidroksifili "hidroksi" ili "alkohol grupa" odnosi se na -OH.
[0119]Kao što je ovde korišćeno, "alkoksikarbonil," koji je obuhvaćen tenninom karboksi, korišćen zasebno ili u vezi sa drugom grupom odnosi se na grupu kao što je (alkil-O)-C(O)-.
[0120]Kao što je ovde korišćeno, "karbonu" se odnosi na -C(O)-.
[0121]Kao sto je ovde korišćeno, "okso" se odnosi na =0.
[0122]Kao što je ovde korišćeno, termin "alkoksi", ili "alkiltio", kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu, kao što je prethodno definisano, vezanu za molekul preko kiseonika ("alkoksi" npr., -O-alkil) ili atoma sumpora ("alkiltio" npr., -S-alkil).
[0123]Kao što je ovde korišćeno, termini "halogen", "halo", i "hal" označava F, Cl, Br, ili I.
[0124]Kao sto je ovde korišćeno, termin "cijano" ili "nitril" odnosi se na -CN ili -C=N.
[0125] Termini "alkoksialkil", "alkoksialkenil", "alkoksialifatik", i "alkoksialkoksi" označava alkil, alkenil, alifatik ili alkoksi, kao što može biti slučaj, supstituisane sa jednom ili više alkoksi grupa.
[0126]Termini "haloalkil", "haloalkenil", "haloalifatik", i "haloalkoksi" označavaju alkil, alkenil, alifatik ili alkoksi, kao što može biti slučaj, supstituisane sa jednim ili više halogenih atoma. Ovaj termin uključuje perfluorovane alkil grupe, kao što su -CF3i -CF2CF3.
[0127]Termini "cijanoalkil", "cijanoalkenil", "cijanoalifatik", i "cijanoalkoksi" označavaju alkil, alkenil, alifatik ili alkoksi, kao što može biti slučaj, supstituisane sa jednim ili više cijano grupa. U nekim primerima izvođenja, cijanoalkil je (NC)-alkil-.
[0128]Teimini "aminoalkil", "aminoalkenil", "aminoalifatik", i "aminoalkoksi" označavaju alkil, alkenil, alifatik ili alkoksi, kao što može biti slučaj, supstituisane sa jednom ili više amino grupa, gde je amino grupa kao što je prethodno definisano. U nekim primerima izvođenja, aminoalifatik je Ci-Cćalifatik grupa supstituisana sa jednom ili više -NH2grupa. U nekim primerima izvođenja, aminoalkil se odnosi na strukturu (R<x>R<Y>)N-alkil-, gde svaki od R<x>i R<Y>nezavisno je kao što je prethodno definisano. U nekim specifičnim primerima izvođenja, aminoalkil je C\- C(, alkil supstituisan sa jednom ili više -NF£2 grupa. U nekim specifičnim prtimerima izvođenja, aminoalkenil je Ci-Cr, alkenil supstituisan sa jednom ili više -NH2grupa. U nekim specifičnim primerima izvođenja, aminoalkenil je Ci-Cealkenil supstituisan sa jednom ili više -NH2grupa. U nekim primerima izvođenja, aminoalkoksi je - 0(Ci-C6alkil) gde je alkil grupa supstitui sana sa jednom ili više -NH2grupa.
[0129]Termini "hidroksiaikil", "hidroksialifatik", i "hidroksialkoksi" označavaju alkil, alifatik ili alkoksi, kao što može biti slučaj, supstituisan sa jednom ili više -OH grupa.
[0130]Termini "alkoksialkil", "alkoksialifatik", i "alkoksialkoksi" označavaju alkil, alifatik ili alkoksi, kao što može biti slučaj, supstituisane sa jednom ili više alkoksi grupa. Na primer, "alkoksialkil" odnosi se na alkil grupu kao što je (alkil-O)-alkil-, gde alkil je kao što je prethodno definisano.
[0131] Termin "karboksialkil" označava alkil supstituisan sa jednom ili više karboksi grupa, gde alkil i karboksi su kao što je prethodno definisano.
[0132] Termin "zaštitna grupa" i "zaštićujuća grupa" kao što je ovde korišćeno, su međusobno zamenjivi i odnose se na sredstvo korišćeno da privremeno blokira jednu ili više željenih funkcionalnih grupa ujedinjenju sa višestrukim reaktivnim mestima. U određenim primerima izvođenja, zaštitna grupa ima jednu ili više, ili specifično sve, od sledećih karakteristika: a) dodata je selektivno funkcionalnoj grupi u dobrom prinosu da bi dala zaštićeni supstrat koji je b) stabilan u odnosu na reakcije koje se odigravaju na jednom ili više drugih reaktivnih mesta; i c) može se selektivno ukloniti u dobrom prinosu reagensima koji ne napadaju regenerisanu, deprotektovanu funkcionalnu grupu. Kao što će stručnjaku biti jasno, u nekim slučajevima, reagensi ne napadaju druge reaktivne grupe u jedinjenju. U drugim slučajevima, reagensi mogu takođe reagovati sa drugim reaktivnim grupama u jedinjenju. Primeri zaštitnih grupa su detaljno dati u Greene, T. W., Wuts, P. G in "Protective Grupa in Organic Svnthesis", Third Edition, John Wiley & Sons, New York: 1999 (i drugim izdanjima knjige). Termin "zaštitna grupa za azot", kao što je ovde korišćeno, odnosi se na sredstvo korišćeno da privremeno blokira jedno ili više reaktivnih mesta azota u multifunkcionalnom jedinjenju. Pogodna zaštitna grupa za azot takođe poseduje karakteristike prethodno date primerima za zaštitne grupe, i određeni primeri zaštitnih grupa za azot su takođe detaljno dati u Poglavlju 7 u Greene, T.W., Wuts, P. G in "Protective Grupa in Organic Synthesis", Third Edition, John Wiley & Sons, New York: 1999.
[0133] Kao što je ovde korišćeno, termin "grupa koja se može zameniti" ili "odlazeća grupa" odnosi se na grupu koja je povezana sa alifatičnom ili aromatičnom grupom kao što je ovde definisano i deo je koji se može zameniti nukleofilnim napadom od strane nukleofila.
[0134] Ukoliko nije drugačije naznačeno, ovde prikazane strukture takođe uključuju sve izomerne (npr., enantiomerne, dijastereomeme, cis-trans, konformacione, i rotacione) oblike strukture. Na primer, R i S konfiguracije za svaki asimetrični centar, (Z) i (E) izomeri dvogube veze, i (Z) i (E) konformacioni izomeri su uključeni u ovaj pronalazak, osim ukoliko nije samo jedan od izomera specifično nacrtan. Stručnjaku će biti jasno da, supstituent može slobodno rotirati oko bilo kojih veza oko kojih može rotirati. Na primer, supstituent nacrtan kao takođe predstavlja
[0135]Stoga, pojedinačni stereohemijski izomeri kao i enantiomerne, dijastereomerne, cis/trans, konfonnacione i rotacione smeše ovih jedinjenja su unutar obima pronalaska.
[0136] Ukoliko nije drugačije naznačeno, svi tautomerni oblici jedinjenja pronalaska su unutar obima pronalaska.
[0137] Dodatno, ukoliko nije naznačeno drugačije, ovde prikazane strukture takođe uključuju jedinjenja koja se razlikuju samo u prisustvu jednog ili više izotopski obogaćenih atoma. Na primer, jedinjenja koja imaju ove strukture osim zamene vodonika sa deuterijumom ili tricijumom, ili zamenu ugljenika sa<13>C- ili<14>C-obogaćenim ugljenikom su unutar obima ovog pronalaska. Takva jedinjenja su korisna, na primer, kao analitički alati ili probe u biološkim testovima. Takva jedinjenja, naročito analozi deuterijuma, mogu takođe biti terapeutski korisni.
[0138] Termini "veza" i "odsutni" korišćeni su naizmenično da označe daje grupa odsutna.
[0139] Jedinjenja pronalaska su ovde definisana njihovim hemijskim strukturama i/ili hemijskim nazivima. Gde je jedinjenje pomenuto i sa hemijskom strukturom i sa hemijskim nazivom, i konfliktom hemijske strukture i hemijskog naziva, hemijska struktura određuje identitet j edinj enj a.
Farmaceutski prihvatljive soli , solvati , klafrati , prolekovi i druži derivati
[0140] Ovde opisana jedinjenja mogu postojati u slobodnom obliku, ili, gde je odgovarajuće, kao soli. One soli koje su farmaceutski prihvatljive su od naročitog interesa jer su korisne u primeni jedinjenja opisanih u nastavku za medicinske svrhe. Soli koje nisu farmaceutski prihvatljive korisne su u procesima proizvodnje, za svrhe izolacije i prečišćavanja, i u nekim slučajevima, za upotrebu u razdvajanju stereoizomernih oblika jedinjenja pronalaska ili njihovih intermedijera.
[0141]Kao što je ovde korišćeno, termin "farmaceutski prihvatljiva so" odnosi se na soli jedinjenja koje su, unutar obima racionalne medicinske procene, pogodne za upotrebu u kontaktu sa tkivima ljudi i nižih životinja bez neposrednih sporednih efekata, kao što su, toksičnost, iritacija, alergijski odgovor i slično, i koji su srazmerni sa racionalnim odnosom benefita/rizika.
[0142]Farmaceutski prihvatljive soli su dobro poznate u tehnici. Na primer, S. M. Berge et al., detaljno opisuju farmaceutski prihvatljive soli u J. Phannaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19. Farmaceutski prihvatljive soli ovde opisanih jedinjenja uključuju one izvedene iz pogodnih neorganskih i organskih kiselina i baza. Ove soli se mogu pripremitiin situtokom finalne izolacije i prečišćavanja jedinjenja.
[0143]Gde ovde opisano jedinjenje sadrži baznu grupu, ili dovoljno bazne bioizostere, mogu se pripremiti kisele adicione soli 1) reakcijom prečišćenog jedinjenja u obliku njegove slobodne baze sa pogodnom organskom ili neorganskom kiselinom i 2) izolovanjem tako formirane soli. U praksi, kisele adicione soli mogu biti pogodniji oblik za upotrebu i upotreba soli predstavlja upotrebu oblika slobodne baze.
[0144]Primeri farmaceutski prihvatljivih, ne-toksičnih kiselih adicionih soli amino grupe formiranih sa neorganskim kiselinama kao što su hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, fosforna kiselina, sumporna kiselina i perhlorna kiselina ili sa organskim kiselinama kao što je sirćetna kiselina, oksalna kiselina, maleinska kiselina, vinska kiselina, limunska kiselina, ćilibarna kiselina ili malonska kiselina ili upotrebom drugih postupaka korišćenih u tehnici kao što je izmena jona. Druge farmaceutski prihvatljive soli uključuju adipat, alginat, askorbat, aspartat, benzensulfonat, benzoat, bisulfat, borat, butirat, kamforat, kamforsulfonat, citrat, ciklopentanpropionat, diglukonat, dodecilsulfat, etansulfonat, format, fumarat, glukoheptonat, glicerofosfat, glikolat, glukonat, glikolat, hemisulfat, heptanoat, heksanoat, hidrohlorid, hidrobromid, hidrojodid, 2-hidroksi-etansulfonat, laktobionat, laktat, laurat, lauril sulfat, malat, maleat, malonat, metansulfonat, 2-naftalensulfonat, nikotinat, nitrat, oleat, oksalat, palmitat, palmoat, pektinat, persulfat, 3-fenilpropionat, fosfat, pikrat, pivalat, propionat, salicilat, stearat, sukcinat, sulfat, tartarat, tiocijanat, p-toluensulfonat, undekanoat, valerat soli, i slično.
[0145]Gde ovde opisano jedinjenje sadrži karboksi grupu ili dovoljno kisele bioizostere, bazne adicione soli mogu se pripremiti 1) reakcijom prečišćenog jedinjenja u obliku njegove kiseline sa pogodnom organskom ili neorganskom bazom i 2) izolovanjem tako formirane soli. U praksi, upotreba bazne adicione soli može biti pogodnija i upotreba oblika soli suštinski se svodi na upotrebu oblika slobodne kiseline. Soli izvedene iz odgovarajućih baza uključuju soli alkalnih metala (npr., natrijuma, litijuma, i kalijuma), zemnoalkalnih metala (npr., magnezijuma i kalcijuma), amonijum i N<+>(Ci-4alkil)4soli. Ovaj pronalazak takođe predviđa kvateraizaciju bilo koje bazne grupe koja sadrži azot ovde opisanih jedinjenja. Proizvodi rastvorljivi u vodi ili ulju ili proizvodi za disperziju mogu se dobiti takvom kvatemizacijom.
[0146] Bazne adicione soli uključuju farmaceutski prihvatljive soli metala i amina. Pogodne soli metala uključuju soli natrijuma, kalijuma, kalcijuma, barijuma, cinka, magnezijuma i aluminijuma. Obično su poželjne soli natrijuma i kalijuma. Dodatne farmaceutski prihvatljive soli uključuju, kada je odgovarajuće, netoksični aluminijum, kvaternerni amonijum, i amin katjone formirane korišćenjem protivjona kao što su halid, hidroksid, karboksilat, sulfat, fosfat, nitrat, niži alkil sulfonat i aril sulfonat. Pogodne neorganske bazne adicione soli pripremljene su od baza metala koje uključuju natrijum hidrid, natrijum hidroksid, kalijum hidroksid, kalcijum hidroksid, aluminijum hidroksid, litijum hidroksid, magnezijum hidroksid, cink hidroksid i slično. Pogodne aminske bazne adicione soli pripremljene su od amina koji se često koriste u medicinskoj herniji zbog njihove niske toksičnosti i prihvatljivosti za medicinsku upotrebu. Amonijak, etilendiamin, N-metil-glukamin, lizin, arginin, ornitin, holin, N, N'-dibenziletilendiamin, hloroprokain, dietanolamin, prokain, N-benzilfenetilamin, di.etil.amin, piperazin, tris(hidroksimetil)-aminometan, tetrametilamonijum hidroksid, trietilamin, dibenzilamin, efenamin, dehidroabietilamin, N-etilpiperidin, benzilamin, tetrametilamonijum, tetraetilamonijum, metilamin, dimetilamin, trimetilamin, etilamin, bazne aminokiseline, dicikloheksilamin i slično.
[0147] Druge kiseline i baze, iako same po sebi nisu farmaceutski prihvatljive, mogu se upotrebiti za pripremu soli korisnih kao intermedijeri za dobijanje ovde opisanih jedinjenja i njihovih fannaceutski prihvatljivih kiselih ili baznih adicionih soli.
[0148] Podrazumeva se da ovaj pronalazak uključuje smeše/kombinacije različitih farmaceutski prihvatljivih soli i takođe smeše/kombinacije jedinjenja u slobodnom obliku i farmaceutski prihvatljive soli.
[0149] Ovde opisana jedinjenja mogu takođe postojati kao fannaceutski prihvatljivi solvati (npr., hidrati) i klatrati. Kao što je ovde korišćeno, termin "farmaceutski prihvatljiv solvat," je solvat fonniran od asocijacije jednog ili više fannaceutski prihvatljivih molekula rastvarača sa jednim od ovde opisanih jedinjenja. Termin solvat uključuje hidrate (npr., hemihidrat, monohidrat, dihidrat, trihidrat, tetrahidrat, i slično).
[0150]Kao što je ovde korišćeno, tennin "hidrat" označava ovde opisano jedinjenje ili njegovu so koja dodatno uključuje stehiometrijsku ili nestehiometrijsku količinu vode vezanu ne-kovalentnim intermolekulskim silama.
[0151]Kao što je ovde korišćeno, termin "klatrat" označava ovde opisano jedinjenje ili njegovu so u obliku kristalne rešetke koja sadrži prostore (npr., kanale) koje imaju "gostujuće" molekule (npr., solvent ili vodu) zarobljene unutar njih.
[0152]Dodatno ovde opisanim jedinjenjima, fannaceutski prihvatljivi derivati ili prolekovi ovih jedinjenja mogu se takođe upotrebiti u kompozicijama za lečenje ili prevenciju ovde identifikovanih poremećaja.
[0153]"Farmaceutski prihvatljiv derivat ili prolek" uključuje bilo koji fannaceutski prihvatljivi estar, so estra ili drugi derivat ili njegovu so ovde opisanog jedinjenja koji je po primeni na primaoca, sposoban da obezbedi, bilo direktno ili indirektno, ovde opisano jedinjenje ili inhibitorno aktivni metabolit ili njegov ostatak. Naročito poželjni derivati ili prolekovi su oni koji povećavaju bioraspoloživost jedinjenja kada se takva jedinjenja primenjuju na pacijenta (npr., omogućavajući da oralno primenjeno jedinjenje bude lakše apsorbovano u krv) ili koje poboljšava dopremanje ishodnog jedinjenja u biološki kompartman (npr., mozak ili limfni sistem) u odnosu na ishodnu vrstu.
[0154]Kao što je ovde korišćeno i ukoliko nije drugačije naznačeno, termin "prolek" označavaju derivat jedinjenja koji može podleći hidrolizi, oksidaciji, ili na dragi način reagovati pod biološkim uslovima( in vitroiliin vivo)da obezbedi ovde opisano jedinjenje. Prolekovi mogu postati aktivni nakon takve reakcije pod biološkim uslovima, ili mogu biti aktivni u njihovim oblicima koji nisu reagovali. Primeri prolekova predviđeni u ovom pronalasku uključuju, ali nisu ograničeni na, analoge ili derivate jedinjenja pronalaska koja sadrže grupe koje mogu podleći biohidrolizi kao što su biohidrolizabilni amidi, biohidrolizabilni estri, biohidrolizabilni karbamati, biohidrolizabilni karbonati, biohidrolizabilni ureidi, i biohidrolizabilni analozi fosfata. Dragi primeri prolekova uključuju derivate ovde opisanih jedinjenja koja sadrže - NO, -NO2, -ONO, ili -ONO2grupe. Prolekovi se mogu tipično pripremiti korišćenjem dobro poznatih postupaka, kao što su one opisane u BURGER'S MEDICINAL CHEMISTRY i DRUG DISCOVERY (1995) 172-178, 949-982 (Manfred E. Wolff ed., 5th ed).
[0155]"Farmaceutski prihvatljiv derivat" je adukt ili derivat koji je, nakon primene na pacijenta kome je to potrebno, sposoban da obezbedi, direktno ili indirektno, jedinjenje koje je inače ovde opisano, ili njegov metabolit ili ostatak. Primeri fannaceutski prihvatljivih derivata uključuju, ali nisu ograničeni na, estre i soli takvih estara. Farmaceutski prihvatljivi prolekovi ovde opisanih jedinjenja uključuju, bez ograničenja, estre, estre aminokiselina, fosfatne estre, soli metala i sulfonatne estre.
Upotrebe opisanih jedinjenja
[0156]Ovde je generalno opisana upotreba ovde opisanih jedinjenja ili farmaceutski prihvatljivih soli, ili farmaceutski prihvatljivih kompozicija koje sadrže takvo jedinjenje ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za inhibiranje replikacije virusa gripa u biološkom uzorku ili u pacijentu, za smanjenje količine virusa gripa (smanjenje virusnog titra) u biološkom uzorku ili u pacijentu, i za tretiranje gripa kod pacijenta.
[0157]Ovde je generalno opisana upotreba jedinjenja predstavljenih bilo kojom od Strukturnih Formula(I)-(X),ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli za bilo koje prethodno naznačene upotrebe.
[0158]Dodatno je ovde opisana upotreba bilo kog jedinjenja izabranog od jedinjenja prikazanih u Tabeli 1 ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, za bilo koje prethodno opisane upotrebe.
[0159]U nekim primerima izvođenja, jedinjenja su predstavljena bilo kojom od Stmkturnih Formula(1)-(X),i promenljive su svaka nezavisno kao što su prikazane u jedinjenjima u Tabeli 1.
[0160]U sledećem primeru izvođenja, ovde opisana jedinjenja ili njihove farmaceutski prihvatljive soli mogu se koristiti za smanjenje virusnog titra u biološkom uzorku (npr. inficiranoj kulturi ćelija) ili u ljudima (npr. plućni virusni titar kod pacijenta).
[0161]Termini "stanje posredovano virusom gripa", "infekcija gripom", ili "grip", kao što je ovde korišćeno, naizmenično su korišćeni da označavaju bolest izazvanu infekcijom sa virusom gripa.
[0162]Grip je infektivna bolest koja pogađa ptice i sisare izazvana virusom gripa. Virusi gripa su RNK virusi familije Orthomyxoviridae, koja sadrži pet rodova: virus gripa tipa A, virus gripa tipa B, virus gripa tipa C, Izavirus i Togotovirus. Rod virusa gripa A ima jednu vrstu, virus gripa A koji se može podeliti u različite serotipove u zavisnosti od odgovora antitela na ove viruse: HINI, H2N2, H3N2, H5N1, H7N7, H1N2, H9N2, H7N2 , H7N3 i H10N7. Rod virusa gripa tipa B ima jednu vrstu, virus gripa tipa B. Virus gripa tipa B skoro isključivo inficira ljude i manje je uobičajen od virusa gripa tipa A. Rod virusa gripa tipa C ima jednu vrstu, virus gripa tipa C, koja inficira ljude i svinje i može izazvati tešku bolest i lokalne epidemije. Međutim, virus gripa tipa C je manje uobičajen od drugih tipova i izgleda da obično izaziva blagu bolest kod dece.
[0163]U nekim primerima izvođenja pronalaska, grip ili virus gripa su povezani sa virusom gripa A ili B. U nekim primerima izvođenja pronalaska, grip ili virusi gripa povezani su sa virusom gripa tipa A. U nekim specifičnim primerima izvođenja pronalaska, virus gripa tipa A je HINI, H2N2, H3N2 ili H5N1.
[0164]Kod ljudi, uobičajeni simptomi gripa su jeza, temepratura, faringitis, bolovi u mišićima, teška glavobolja, kašljanje, slabost, i opšta nelagodnost. U ozbiljnijim slučajevima, grip izaziva upalu pluća, koja može biti fatalna, naročito kod mlađe dece i starijih osoba, lako se često meša sa običnom prehladom, grip je mnogo teža bolest i izazvan je različitim tipom virusa. Grip može proizvesti mučninu i povraćanje, naročito kod dece, ali su ovi simptomi karakteristični]'i za nevezani gastroenteritis, koji se ponekad naziva "stomačni grip" ili "24-časovni grip".
[0165]Simptomi gripa mogu početi veoma iznenadno jedan do dva dana nakon infekcije. Obično su prvi simptomi jeza ili osećaj jeze, ali je temperatura takođe veoma uobičajena u ranoj fazi infekcije, sa telesnom temperaturom u opsegu od 38-39°C (oko 100-103 °F). Mnogo ljudi je toliko bolesno da su vezani za krevet nekoliko dana, sa teskobama i bolovima u ćelom telu, koji su jači u njihovim leđima i nogama. Simptomi gripa mogu uključivati: bolove u telu, naročito zglobovi i grlo, ekstremna hladnoća i temperatura, umor, glavobolja, iritirane vlažne oči, crvenilo očiju, kože (naročito lica), usta, grla i nosa, bol u abdomenu (kod dece sa virusom gripa tipa B). Simptomi gripa su nespecifični, i preklapaju se sa mnogim patogenima ("bolest slična gripu). Obično, laboratorijski podaci su potrebni da bi se potvrdila dijagnoza.
[0166]Termini, "bolest", "poremećaj", i "stanje" ovde se mogu koristiti naizmenično da označe medicinska ili patogena stanja posredovana virusom gripa.
[0167]Kao što je ovde korišćeno, termini "subjekat" i "pacijent" su korišćeni naizmenično. Termini "subjekat" i "pacijent" odnose se na životinju (npr., pticu kao što je kokoška, prepelica ili ćurka, ili sisar), specifično "sisara" uključujući ne-primata (npr., krava, svinja, konj, ovca, zec, zamorac, pacov, mačka, pas, i miš) i primata (npr., majmun, šimpanza i čovek), i specifičnije čovek. U jednom primeru izvođenja, subjekat je ne-humana životinja kao što je domaća životinja (npr., konj, krava, svinja ili ovca), ili kućni ljubimac (npr., pas, mačka, zamorče, svinja ili zec). U poželjnom primeru izvođenja, subjekat je "čovek".
[0168]Tennin "biološki uzorak", kao što je ovde korišćeno, uključujući, bez ograničenja, ćelijske kulture ili njihove ekstrakte; materijal sa biopsije uzet od sisara ili njegovi ekstrakti; kn', pljuvačka, urin, feces, sperma, suze, ili druge telesne tečnosti ili njihovi ekstrakti.
[0169]Kao što je ovde korišćeno, "multiplicitet infekcije" ili "MOI" je odnos infektivnih agenasa (npr. faga ili virusa) prema ciljnim strakturama infekcije (npr. ćelija). Na primer, kada se pominje grupa ćelija inokulisanih sa infektivnim česticama virusa, multiplicitet infekcije ili MOI je odnos definisan brojem infektivnih čestica virusa deponovanih u komorici podeljeno sa brojem ciljnih ćelija prisutnih u toj komorici.
[0170]Kao što je ovde korišćeno termin "inhibicija replikacije virusa gripa" uključuje i smanjenje količine virusne replikacije (npr. smanjenje najmanje 10 %) i potpuno zaustavljanje replikacije virusa (tj., 100% smanjenje količine replikacije virusa). U nekim primerima izvođenja, replikacije virusa gripa su inhibirane sa najmanje 50%, najmanje 65%, najmanje 75%, najmanje 85%, najmanje 90%, ili najmanje 95%.
[0171]Replikacija virusa gripa može se izmeriti bilo kojim pogodnim postupkom poznatim u tehnici. Na primer, može se meriti titar virusa gripa u biološkom uzorku (npr. inficiranoj ćelijskoj kulturi) ili kod ljudi (npr. plućni virusni titar kod pacijenta). Specifičnije, za testove zasnovane na ćelijama, u svakom slučaju ćelije su kultivisanein vift- o,virus je dodat u kulturu u prisustvu ili odsustvu test agensa, i nakon pogodnog vremenskog perioda virusno-zavisna završna tačka je procenjena. Za tipične testove, mogu se koristiti Madin-Darby ćelije psećeg bubrega (MDCK) i standardna kultura tkiva adaptirana na soj gripa, A/Puerto Rico/8/34. Prvi tip ćelijskog testa koji se može korisiti u pronalasku zavisi od smrti inficiranih ciljnih ćelija, procesa nazvanog citopatski efekat (CPE), gde virusna infekcija izaziva iscrpljivanje ćelijskih resursa i eventualnu lizu ćelije. U prvom tipu ćelijskog testa, mala frakcija ćelija u komoricama mikrotitarske ploče je inficirana (tipično 1/10 do 1/1000), virusu je omogućeno da prođe nekoliko rundi replikacije tokom 48-72 časova, zatim je merena količina ćelijske smrti korišćenjem smanjenja u ćelijskom sadržaju ATP u poređenju sa neinficiranhn kontrolama. Drugi tip ćelijskog testa koji se može upotrebiti u pronalasku zavisi od umnožavanja virus-specifičnih RNK molekula u inficiranim ćelijama, pri čemu se nivoi RNK direktno mere korišćenjem postupka hibridizacije DNK granatog lanca (bDNA). U drugom tipu ćelijskog testa, mali broj ćelija je inicijalno inficiran u komoricama mikrotitarske ploče, dozvoljeno je da se virus replicira u inficiranim ćelijama i proširi na dodatne runde ćelija, zatim su ćelije lizirane i merenje sadržaj virusne RNK. Ovaj test je rano zaustavljen, obično nakon 18-36 časova, dok su sve ciljne ćelije još uvek vijabilne. Virusna RNK je kvantifikovana hibridizacijom sa specifičnim oligonukleotidnim probama fiksiranim za komorice test ploče, zatim je signal amplifikovan hibridizacijom sa dodatnim probama vezanim za reporter enzim.
[0172]Kao što je ovde korišćeno "virusnii titar (ili titar)" je mera koncentracije virusa. Testiranje titra može koristiti serijska razblaženja da bi se dobila približna kvantitativna informacija iz analitičke procedure koja se suštinski procenjuje samo kao pozitivno ili negativno. Titar odgovara najvećem faktoru razblaženja koji i dalje daje pozitivno očitavanje; na primer, pozitivna očitavanja u prvih 8 serijskih dvostrukih razblaženja prevode se u titar od 1:256. Specifični primer je virusni titar. Da bi se odredio titar, pripremiće se nekoliko razblaženja, kao što su 10-1, 10-2, 10-3,...,10-8. Najniža koncentracija virusa koja još uvek inficira ćelije je titar virusa.
[0173]Kao što je ovde korišćeno, termini "tretirati", "tretman" i "tretiranje" odnose se i na terapeutske i na profilaktičke tretmane. Na primer, terapeutski tretmani uključuju smanjenje ili ublažavanje napredovanja, težine i/ili trajanja stanja posredovanih virusima gripa, ili ublažavanje jednog ili više simptoma (specifično, jednog ili više primetnih simptoma) stanja posredovanih virusima gripa, što je rezultat primene jedne ili više terapija (npr., jednog ili više lerapeutskih sredstava kao što je jedinjenje ili kompozicija pronalaska). U specifičnim primerima izvođenja, terapeutski tretman uključuje ublažavanje najmanje jednog fizički merljivog parametra stanja posredovanog virusom gripa. U drugim primerima izvođenja terapeutski tretman uključuje inhibiciju napredovanja stanja posredovanog virusom gripa, bilo fizički preko, npr., stabilizacije primetnog simptoma, fiziološki preko, npr., stabilizacije fizičkog parametra, ili oba. U drugim primerima izvođenja terapeutski tretman uključuje smanjenje ili stabilizaciju infekcija posredovanih virusima gripa. Antivirusni lekovi mogu se koristiti u okviru zajednice da bi se tretirali ljudi koji već imaju grip da bi se smanjila težina simptoma i smanjio broj dana koji su bolesni.
[0174]Termin "hemoterapija" odnosi se na korišćenje medikamenata, npr. lekova malih molekula (pre nego "vakcina") za tretiranje poremećaja ili bolesti.
[0175]Termini "profilaksa" ili "profilaktička upotreba" i "profilaktički tretman" kao što je ovde korišćeno, odnosi se na medicinsku ili zdravstvenu proceduru čija je svrha da spreči, pre nego tretira ili izleči bolest. Kao što je ovde korišćeno, termini "sprečiti", "prevencija" i "sprečavanje" odnose se na smanjenje rizika dobijanja ili razvijanja određenog stanja, ili smanjenja ili inhibicije povratka pomenutog stanja kod subjekta koji nije bolestan, ali koji je bio ili može biti blizu osobe koja ima bolest. Termin "hemoprofilaksija" odnosi se na korišćenje medikamenata, npr. lekova malih molekula (preko nego "vakcina") za prevenciju poremećaja ili bolesti.
[0176]Kao što je ovde korišćeno, profilaktička upotreba uključuje upotrebu u situacijama u kojima je otkriveno pojavljivanje, za spečavanje zaraze ili širenja infekcije na mestima gde živi mnogo ljudi u međusobnoj blizini koji su u visokom riziku od ozbiljnih komplikacija gripa (npr. u bolnicama, centrima za dnevnu negu, zatvoru, staračkom domu, itd). Ona takođe uključuje upotrebu u populacijama koje zahtevaju zaštitu od gripa, ali koji ili ne dobijaju zaštitu nakon vakcinacije (npr. usled slabog imunog sistema), ili kada im je nedostupna vakcina, ili kada ne mogu dobiti vakcinu zbog sporednih efekata. Ona takođe uključuje upotrebu tokom dve nedelje nakon vakcinacije, jer je tokom tog vremena vakcina još uvek neefikasna. Profilaktička upotreba može takođe uključiti tretiranje osobe koji nije bolestan od gripa ili se ne smatra da je u visokom riziku od komplikacija, da bi se smanjila verovatnoća infekcije sa gripom i njegovog prenošenja na osobu sa visokim riziku koja je sa njim u bliskom kontaktu (na primer, zaposleni u bolnicama, zaposleni u staračkim domovima, itd).
[0177] Prema US CDC, "pojava" gripa je definisana kao iznenadni porast akutne febrilne respiratorne bolesti (AFRI) koja se javlja u periodu od 48 do 72 časa, u grupi ljudi koji su međusobno blizu (npr. u istoj oblasti ustanove za tuđu negu i pomoć, u istom domaćinstvu, itd) u odnosu na uobičajeni nivo ili kada je bilo koji analizirani pojedinac u populaciji pozitivan na testu za grip. Jedan slučaj potvrđenog gripa bilo kojim postupkom testiranja smatra se pojavom.
[0178] "Klaster" je definisan kao grupa od tri ili više slučajeva AFRI koji se pojavljuju u okviru perioda od 48 do 72 časova, u grupi ljudi koji su međusobno blizu (npr. u istoj oblasti ustanove za tuđu negu i pomoć, u istom domaćinstvu, itd).
[0179] Kao što je ovde korišćeno, "indeksni slučaj", "primarni slučaj" ili "nulti pacijent" je inicijalni pacijent u uzorku populacije epidemiološkog istraživanja. Kada se generalno koristi u odnosu na takve pacijente u epidemiološkim istraživanjima, termin nije dat velikim slovima. Kada se termin koristi u odnosu na specifičnu osobu umesto imena osobe u izveštaju specifičnog istraživanja, tennin je dat velikim slovima kao Nulti Pacijent. Cesto naučnici traže indeksni slučaj da bi odredili kako se bolest širi i koji rezervoar održava bolest između izbijanja. Treba napomenuti da je indeksni slučaj prvi pacijent koji ukazuje na prisustvo izbijanja. Mogu se naći raniji slučajevi i obeleženi su kao primarni, sekundarni, tercijerni, itd.
[0180] U jednom primeru izvođenja, postupci pronalaska su preventivne ili "preemptivne" mere za pacijenta, specifično čoveka, koji ima predispozicije za komplikacije koje su rezultat infekcije virusom gripa. Tennin "preemptivno" kao što je ovde korišćeno kao na primer u preemptivnoj upotrebi, "preemptivno", itd, je profilaktička upotreba u situacijama u kojima je "indeksni slučaj" ili "izbijanje" potvrđeno, da bi se sprečilo širenje infekcije u ostatku zajednice ili populacionoj grupi.
[0181] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja i kompozicije pronalaska su primenjene kao "preemptivna" mera za članove zajednice ili populacione grupe, specifično ljudi, da bi se sprečilo širenje infekcije.
[0182] Kao što je ovde korišćeno, "efikasna količina" odnosi se na količinu dovoljnu da izazove željeni biološki odgovor. U ovom pronalasku željeni biološki efekat je inliibicija replikacije virusa gripa, smanjenje količine virusa gripa ili smanjenje ili ublažavanje težine, trajanja, napredovanja, ili početka infekcije virusom gripa, prevencija napredovanja infekcije virusima gripa, prevencija povratka, razvoja, početka ili napredovanja simptoma povezanih sa infekcijom virusa gripa, ili pojačavanje ili poboljšavanje profilaktičkog ili terapeutskog efekta (efekata) druge terapije protiv infekcija gripom. Tačna količina jedinjenja primenjenog na subjekta zavisiće od načina primene, tipa i težine infekcije i od karakteristika subjekta, kao što je opšte zdravstveno stanje, starost, pol, telesna težina i tolerancija na lekove. Stručnjak će moći da odredi odgovarajuće doze u zavisnosti od ovih i drugih faktora. Kada se ko-primenjuju sa drugim antivirusnim sredstvima, npr., kada su ko-primenjeni sa medikamentima protiv gripa, "efikasna količina" drugog sredstva će zavisiti od tipa leka koji je korišćen. Pogodne doze su poznate za odobrena sredstva i mogu se podesiti od strane stručnjaka u skladu sa stanjem subjekta, tipa stanja (ili više njih) koje se tretira i količine ovde opisanog jedinjenja koje se koristi. U slučajevima gde količina nije izričito navedena, treba pretpostaviti efikasnu količinu. Na primer, ovde opisana jedinjenja mogu se primeniti na subjekta u doznom opsegu od između oko 0.01 do 100 mg/kg telesne težine/dan za terapeutski ili profilaktički tretman.
[0183] Generalno, dozni režimi mogu se izabrati u skladu sa raznovrsnim faktorima uključujući poremećaj koji se tretira i težina poremećaja; aktivnosti specifičnog upotrebljenog jedinjenja; specifične primenjene kompozicije; starosti, telesne težine, opšteg zdravstvenog stanja, pola i ishrane pacijenta; vremena primene, puta primene, i stope ekskrecije specifičnog primenjenog jedinjenja; funkcije bubrega i jetre kod subjekta; i određenog primenjenog jedinjenja ili njegove soli, trajanja tretmana; lekova korišćenih u kombinaciji ili slučajno sa specifičnim primenjenim jedinjenjem, i sličnih faktora dobro poznatih u medicinskoj tehnici. Stručnjak može lako odrediti i prepisati efikasnu količinu ovde opisanih jedinjenja neophodnih za tretman, prevenciju, inhibiciju (potpunu ili delimičnu) ili zaustavljanje napredovanja bolesti.
[0184]Doze ovde opisanih jedinjenja mogu biti u opsegu od između oko 0.01 do oko 100 mg/kg telesne težine/dan, oko 0.01 do oko 50 mg/kg telesne težine/dan, oko 0.1 do oko 50 mg/kg telesne težine/dan, ili oko 1 do oko 25 mg/kg telesne težine/dan. Podrazumeva se da se ukupna količina na dan može primeniti u jednoj dozi ili može biti primenjena u višestrukim dozama, kao što je dva puta dnevno (npr., svakih 12 časova), tri puta dnevno (npr., svakih 8 časova), ili četiri puta dnevno (npr., svakih 6 časova).
[0185]Za terapeutski tretman, ovde opisana jedinjenja mogu se primeniti na pacijenta unutar, na primer, 48 časova (ili unutar 40 časova, ili manje od 2 dana, ili manje od 1.5 dana, ili unutar 24 časa) od pojave simptoma (npr., začepljenja nosa, bola u grlu, kašlja, bolova, umora, glavobolja, i jeza/znojenja). Terapeutski tretman može trajati koliko je pogodno, na primer, 5 dana, 7 dana, 10 dana, 14 dana, itd. Za profilaktički tretman tokom izbijanja zaraze u zajednici, ovde opisana jedinjenja mogu se primeniti na pacijenta unutar, na primer, 2 dana od pojave simptoma u indeksnom slučaju, i mogu se nastaviti u bilo kom pogodnom trajanju, na primer, 7 dana, 10 dana, 14 dana, 20 dana, 28 dana, 35 dana, 42 dana, itd.
[0186]Različiti tipovi postupaka primene mogu se upotrebiti u pronalasku, i detaljno su opisani u nastavku u poglavlju nazvanom "Postupci primene."
Kombinovana terapija
[0187]Efikasna količina može se postići u postupku ili farmaceutskoj kompoziciji pronalaska koja koristi jedinjenje pronalaska (uključujući njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat (npr., hidrat)) zasebno ili u kombinaciji sa dodatnim pogodnim terapeutskim sredstvom, na primer, antivirusnim sredstvom ili vakcinom. Kada se koristi "kombinovana terapija", efikasna količina može se postići korišćenjem prve količine jedinjenja pronalaska i druge količine dodatnog pogodnog terapeutskog sredstva (npr. antivirusnog sredstva ili vakcine).
[0188]U sledećem primeru izvođenja ovog pronalaska, jedinjenje pronalaska i dodatni terapeutski agens, su svaki primenjeni u efikasnoj količini (tj., svaki u količini koja bi bila terapeutski efikasna ukoliko je primenjena zasebno). U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska i dodatni terapeutski agens, su svaki primenjeni u količini koja sama ne obezbeđuje terapeutski efekat (sub-terapeutska doza). U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska može se primeniti u efikasnoj količini, dok je dodatni terapeutski agens primenjen u sub-terapeutskoj dozi. U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska može se primeniti u sub-terapeutskoj dozi, dok je dodatni terapeutski agens, na primer, pogodni kancer-terapeutski agens, primenjen u efikasnoj količini.
[0189]Kao što je ovde korišćeno, termini "u kombinaciji" ili "ko-primeni" mogu se koristiti naizmenično u odnosu na upotrebu više od jedne terapije (npr., jedan ili više profilaktičkih i/ili terapeutskih agenasa). Upotreba termina ne ograničava redosled po kojem su terapije (npr., profilaktički i/ili terapeutski agensi) primenjeni na subjekta.
[0190] Koprimena obuhvata primenu prvih i drugih količina jedinjenja koprimene suštinski istovremeno, kao što je u jednoj farmaceutskoj kompoziciji, na primer, kapsula ili tableta sa fiksnim odnosom prvih i drugih količina, ili u višestrukim, zasebnim kapsulama ili tabletama za svake. Dodatno, takva koprimena takođe obuhvata upotrebu svakog jedinjenja na sekvencijalni način u bilo kom redosledu.
[0191] U jednom primeru izvođenja, ovde su opisani postupci kombinovane terapije za inhibiciju replikacije virusa gripa u biološkim uzorcima ili pacijentima, ili za tretiranje ili prevenciju infekcija virusom gripa kod pacijenata korišćenjem jedinjenja ili farmaceutskih kompozicija pronalaska. Shodno tome, farmaceutske kompozicije pronalaska takođe uključuju one koje sadrže inhibitor replikacije virusa gripa ovog pronalaska u kombinaciji sa anti-virusnim jedinjenjem koje pokazuje aktivnost protiv virusa gripa.
[0192] Postupci upotrebe jedinjenja i kompozicija pronalaska uključuju kombinaciju hemoterapije sa jedinjenjem ili kompozicijom pronalaska, ili sa kombinacijom jedinjenja ili kompozicije ovog pronalaska sa drugim anti-virusnim sredstvom i vakcinacijom sa vakcinom protiv gripa.
[0193] Kada koprimena uključuje zasebnu primenu prve količine jedinjenja pronalaska i drugu količinu dodatnog terapeutskog sredstva, jedinjenja su primenjena dovoljno vremenski blizu da bi imali željeni terapeutski efekat. Na primer, vremenski period između svake primene koji može rezultovati u željenom terapeutskom efektu, može biti u opsegu od minuta do časova i može se odrediti uzimajući u obzir osobine svakog jedinjenja kao što je potencija, rastvorljivost, bioraspoloživost, polu-život u plazmi i kinetički profil. Na primer, jedinjenje pronalaska i drugo terapeutsko sredstvo može se primeniti u bilo kom redosledu unutar oko 24 časa međusobno, unutar oko 16 časova međusobno, unutar oko 8 časova međusobno, unutar oko 4 časova međusobno, unutar oko 1 časa međusobno ili unutar oko 30 minuta međusobno.
[0194] Specifičnije, prva terapija (npr., profilaktičko ili terapeutsko sredstvo kao što je jedinjenje pronalaska) može se primeniti pre (npr., 5 minuta, 15 minuta, 30 minuta, 45 minuta, 1 čas, 2 časa, 4 časa, 6 časova, 12 časova, 24 časa, 48 časova, 72 časa, 96 časova, 1 nedelju, 2 nedelje, 3 nedelje, 4 nedelje, 5 nedelja, 6 nedelja, 8 nedelja, ili 12 nedelja pre), istovremeno sa, ili nakon (npr., 5 minuta, 15 minuta, 30 minuta, 45 minuta, 1 čas, 2 časa, 4 časa, 6 časova, 12 časova, 24 časa, 48 časova, 72 časa, 96 časova, 1 nedelju, 2 nedelje, 3 nedelje, 4 nedelje, 5 nedelja, 6 nedelja, 8 nedelja, ili 12 nedelja nakon) primene druge terapije (npr., profilaktičkog ili terapeutskog sredstva kao sto je anti-kancer sredstvo) na subjekta.
[0195]Podrazumeva se da postupak koprimene prve količine jedinjenja pronalaska i druge količine dodatnog terapeutskog sredstva može rezultovati u pojačanom ili sinergističkom terapeutskom efektu, gde je kombinovani efekat veći od aditivnog efekta koji bi rezultovao iz zasebnih primena prve količine jedinjenja pronalaska i druge količine dodatnog terapeutskog sredstva.
[0196]Kao stoje ovde korišćeno, termin "sinergistički" se odnosi na kombinaciju jedinjenja pronalaska i druge terapije (npr., profilaktičkog ili terapeutskog sredstva), koji je efikasnije od aditivnih efekata terapije. Sinergistički efekat kombinovanih terapija (npr., kombinacije profilaktičkih ili terapeutskih sredstava) može dozvoliti upotrebu nižih doza jedne ili više terapija i/ili manje učestale primene pomenutih terapija na subjekta. Mogućnost korišćenja nižih doza terapije (npr., profilaktičkog ili terapeutskog sredstva) i/ili primena pomenute terapije manje učestalo može smanjiti toksičnost povezanu sa primenom pomenute terapije na subjekta bez smanjenja efikasnosti pomenute terapije u prevenciji, kontrolisanju ili tretmanu poremećaja. Dodatno, sinergistički efekat može rezultovati u poboljšanoj efikasnosti sredstava u prevenciji, kontrolisanju ili tretmanu poremećaja. Konačno, sinergistički efekat kombinovane terapije (npr., kombinacije profilaktičkih ili terapeutskih sredstava) može izbeći ili smanjiti štetne ili neželjene sporedne efekte povezane sa upotrebom svake terapije zasebno.
[0197]Kada kombinovana terapija koja koristi jedinjenja ovog pronalaska je u kombinaciji sa vakcinom protiv gripa, oba terapeutska sredstva mogu se primeniti tako da vremenski period između svake primene može biti duži (npr. dani, nedelje ili meseci).
[0198]Prisustvo sinergističkog efekta može se odrediti korišćenjem pogodnih postupaka za procenjivanje interakcije lekova. Pogodni postupci uključuju, na primer, Sigmoid-Emax jednačinu (Holford, N.H.G. i Scheiner, L.B., Clin. Pharmacokinet. 6: 429-453 (1981)), Loevve jednačinu aditivnosti (Loewe, S. i Muischnek, H., Arch. Exp. Pathol Pharmacol. 114: 313-326
(1926)) i jednačinu efekta medijane (Chou, T.C. i Talalay, P., Adv. Enzvme Regul. 22: 27-55
(1984)). Svaka prethodno navedena jednačina može se primeniti sa eksperimentalnim podacima da bi se generisao odgovarajući grafik kao pomoć pri proceni efekata kombinacije lekova. Odgovarajući grafici povezani sa prethodno navedenim jednačinama su krive koncentracija-efekat, izobologram kriva i indeksna kriva kombinacije, respektivno. Specifični primeri koji se mogu koprimeniti sa ovde opisanim jedinjenjem uključuju inhibitore neuraminidaze, kao što je oseltamivir (Tamiflu®) i Zanamivir (Rlenza®), blokatori virusnih jonskih kanala (M2 protein), kao što je amantadin (Svmmetrel®) i rimantadin (Flumadine®), i antivirusni lekovi opisani u WO 2003/015798, uključujući T-705 u razvoju od strane Toyama Chemical iz Japana. (Videti takođe Ruruta et al., Antiviral Reasearch, 82: 95-102
(2009), "T-705 (flavipiravir) and related compounds: Novel broad-spectrum inhibitors of RNA viral infections.") U nekim primerima izvođenja, ovde opisana jedinjenja mogu se primeniti sa tradicionalnim vakcinama protiv gripa. U nekim primerima izvođenja, ovde opisana jedinjenja mogu se koprimeniti sa Zanamivirom. U nekim primerima izvođenja, ovde opisana jedinjenja mogu se koprimeniti sa oseltamivirom. U nekim primerima izvođenja, ovde opisana jedinjenja mogu se koprimeniti sa T-705.
Farmaceutske kompozicije
[0199]Ovde opisana jedinjenja mogu se formulisati u farmaceutske kompozicije koje dodatno sadrže fannaceutski prihvatljiv nosač, razblaživač, ađuvant ili prenosilac. U jednom primera izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na farmaceutske kompozicije koje sadrže prethodno opisano jedinjenje pronalaska, i farmaceutski prihvatljiv nosač, razblaživač, ađuvant ili prenosilac. U jednom primera izvođenja, ovaj pronalazak je fannaceutska kompozicija koja sadrži efikasnu koilčinu jedinjenja ovog pronalaska ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i fannaceutski prihvatljiv nosač, razblaživač, ađuvant ili prenosilac. Farmaceutski prihvatljivi nosači uključuju, na primer, farmaceutske razblaživače, ekscipijente ili nosače pogodno izabrane u odnosu na nameravani oblik primene, i u saglasnosti sa konvencionalnom farmaceutskom praksom.
[0200]"Efikasna količina" uključuje "terapeutski efikasnu količinu" i "profilaktički efikasnu količinu". Termin "terapeutski efikasna količina" odnosi se na količinu efikasnu u tretiranju i/ili ublažavanju infekcije virusom gripa kod pacijenta inficiranog sa gripom. Tennin "profilaktički efikasna količina" odnosi se na količinu efikasnu u sprečavanju i/ili značajnom smanjenju verovatnoće ili veličine izbijanja zaraze virusom gripa. Specifični primeri efikasnih količina prethodno su opisani u poglavlju pod naslovom Upotreba opisanih jedinjenja.
[0201]Farmaceutski prihvatljiv nosač može sadržati inertne sastojke koji nepotrebno ne inhibiraju biološku aktivnost jedinjenja. Farmaceutski prihvatljivi nosači treba da budu biokompatibilni, npr., netoksični, neinflamatorni, neimunogeni ili lišeni drugih neželjenih reakcija ili sporednih efekata nakon primene na subjekta. Mogu se upotrebiti standardne tehnike farmaceutske formulacije.
[0202]Fannaceutski prihvatljiv nosač, ađuvant ili prenosilac, kao što je ovde korišćeno, uključuje bilo koji i sve rastvarače, razblaživače, ili druge tečne prenosioce, pomoćna sredstva za disperziju ili suspenziju, površinski aktivna sredstva, izotonična sredstva, sredstva za zgušnjavanje ili sredstva za stvaranje emulzije, konzervanse, čvrsta vezujuća sredstva, lubrikante i slično, kao što je pogodno za određeni željeni dozni oblik. Remington's Pharmaceutical Sciences, Sixteenth Edition, E. W. Martin (Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1980) opisuje različite nosače korišćene za formulisanje fannaceutski prihvatljivih kompozicija i poznate tehnike za njihovo pripremanje. Osim ukoliko bilo koji nosački medijum nije nekompatibilan sa ovde opisanim jedinjenjima, kao što je da proizvodi bilo koji neželjeni biološki efekat ili na dmgi način interaguje štetno sa bilo kojom drugom komponentom (komponentama) farmaceutski prihvatljive kompozicije, njegova upotreba je predviđena unutar obima ovog pronalaska. Kao što je ovde korišćeno, izraz "sporedni efekti" obuhvataju neželjene i štetne efekte terapije (npr., profilaktičkog ili terapeutskog sredstva). Sporedni efekti su uvek neželjeni, ali neželjeni efekti ne moraju uvek biti štetni. Štetni efekat terapije (npr., profilaktičkog ili terapeutskog sredstva) može biti štetan ili neprijatan ili rizičan. Sporedni efekti uključuju, ali nisu ograničeni na groznicu, jezu, letargiju, gastrointestinalne toksičnosti (uključujući želudačne i intestinalne ulceracije i erodiranje), mučninu, povraćanje, neurotoksičnosti, nefrotoksičnosti, renalne toksičnosti (uključujući takva stanja kao što je papilama nekroza i hronični intersticijalni nefritis), toksičnosti u odnosu na jetru (uključujući povećanje nivoa enzima jetre u serumu), mijelotoksičnosti (uključujući leukopeniju, mijelosupresiju, trombocitopeniju i anemiju), suva usta, metalni ukus, produženje gestacije, slabost, pospanost, bol (uključujući bol u mišićima, bol u kostima i glavobolju), gubitak kose, asteniju, vrtoglavicu, ekstrapiramidalne sindrome, akatiziju, kardiovaskularne poremećaje i seksualnu disfunkciju.
[0203] Neki primeri materijala koji mogu služiti kao farmaceutski prihvatljivi nosači uključuju, ali nisu ograničeni na, jonoizmenjivače, glinu, aluminijum stearat, lecitin, proteine seruma (kao što je humani serum albumin), puferske supstance (kao što su twin 80, fosfati, glicin, sorbinska kiselina, ili kalijum sorbat), parcijalne gliceridne smeše zasićenih biljnih masnih kiselina, vodu, soli ili elektroliti (kao što je protamin sulfat, dinatrijum hidrogen fosfat, kalijum hidrogen fosfat, natrijum hlorid, ili soli cinka), koliodni silicijum dioksid, magnezij um trisilikat, polivinil pirolidon, poliakrilate, voskove, polietilen-polioksipropilen-blok polimere, metilcelulozu, hidroksipropil metilcelulozu, lanolin, šećere kao što je laktoza, glukoza i saharoza; škrobove kao što su kukuruzni škrob i škrob krompira; celulozu i njene derivate kao što je natrijum karboksimetil celuloza, etil celuloza i celuloza acetat; tragant u prahu; slad; želatin; talk; ekscipijente kao što su kakao puter i voskovi za supozitorije; ulja kao što je ulje kikirikija, ulje pamuka; ulje suncokreta; ulje sušama; maslinovo ulje; kukuruzno ulje; glikole; kao što su propilen glikol ili polietilen glikol; estre kao što su etil oleat i etil laurat; agar; puferujuća sredstva kao što su magnezijum hidroksid i aluminijum hidroksid; alginsku kiselinu; vodu bez pirogena; izotonični fiziološki rastvor; Prstener-ov rastvor; etil alkohol, i rastvore fosfatnog pufera, kao i druge netoksične kompatibilne lubrikante kao što je natrijum lauril sulfat i magnezijum stearat, kao i sredstva za bojenje, sredstva za oslobađanje, sredstva za oblaganje, zaslađivači, aromatizeri i sredstva za davanje mirisa, konzervansi i antioksidansi mogu takođe biti prisutni u kompoziciji, prema proceni onoga ko priprema foraiulaciju.
Postupci primene
[0204]Prethodno opisana jedinjenja i farmaceutske kompozicije mogu se primeniti na ljude i druge životinje oralno, rektalno, parenteralno, intracisternalno, intravaginalno, intraperitonealno, topikalno (kao putem praškova, masti, ili kapi), bukalno, kao oralni ili nazalni sprej, ili slično, zavisno od težine infekcije koja se tretira.
[0205]Tečni dozni oblici za oralnu primenu uključuju, ali nisu ograničeni na, fannaceutski prihvatljive emulzije, mikroemulzije, rastvore, suspenzije, sirupe i eliksire. Kao dodatak aktivnim jedinjenjima, tečni dozni oblici mogu sadržati inertne razblaživače uobičajeno korišćene u tehnici kao što su, na primer, voda ili drugi rastvarači, sredstva za povećanje rastvorljivosti i emulzifikatori kao što je etil alkohol, izopropil alkohol, etil karbonat, etil acetat, benzil alkohol, benzil benzoat, propilen glikol, 1,3-butilen glikol, dimetilformamid, ulja (naročito, ulje pamuka, kikirikija, kukuruza, klica, maslinovo, ricinusa, i sušama), glicerol, tetrahidrofurfuril alkohol, polietilen glikoli i estri masnih kiselina sorbitana, i njihove smeše. Osim inertnih razblaživača, oralne kompozicije mogu takođe uključivati ađuvante kao što su sredstva za vlaženje, sredstva za stvaranje emulzije i suspenzije, zaslađivači, aromatizeri, i sredstva za davanje mirisa.
[0206]Injektabilni preparati, na primer, sterilne injektabilne vodene ili masne suspenzije mogu se formulisati prema poznatoj tehnici korišćenjem pogodnih sredstava za disperziju ili vlaženje i sredstva za suspenziju. Sterilni injektabilni preparat može takođe biti sterilni injektabilni rastvor, suspenzija ili emulzija u netoksičnom parenteralno prihvatljivom razblaživaču ili rastvaraču, na primer, kao rastvor u 1,3-butandiolu. Među prihvatljivim prenosiocima i rastvaračima koji se mogu upotrebiti su voda, Prstener-ov rastvor, U.S.P. i izotonični rastvor natrijum hlorida. Dodatno, sterilna, neisparljiva ulja se konvencionalno koriste kao rastvarači ili medijum za suspenziju. U ovu svrhu mogu se upotrebiti meka neisparljiva ulja uključujući sintetičke mono- ili digliceride. Dodatno, masne kiseline kao što je oleinska kiselina koriste se u pripremi injektabilnih sredstava.
[0207] Injektabilne formulacije se mogu sterilizovati, na primer, filtracijom kroz filter koji zadržava bakterije, ili inkorporacijom sredstava za sterilizaciju u obliku sterilnih čvrstih kompozicija koje se mogu rastvoriti ili dispergovati u sterilnoj vodi ili drugom sterilnom injektabilnom medijumu pre upotrebe.
[0208] Da bi se produžio efekat ovde opisanih jedinjenja, često je poželjno usporiti apsorpciju jedinjenja iz potkožne ili intramuskularne injekcije. Ovo se može postići upotrebom tečne suspenzije kristalnog ili amorfnog materijala sa slabom rastvorljivošću u vodi. Stopa apsorpcije jedinjenja tada zavisi od stope njegovog rastvaranja koja, zauzvrat, može zavisiti od veličine kristala i kristalnog oblika. Alternativno, odložena apsorpcija oblika parenteralno primenjenog jedinjenja postignuta je rastvaranjem ili suspenzijom jedinjenja u uljanom prenosiocu. Injektabilni depo oblici stvaraju se formiranjem mikroinkapsuliranih matriksa jedinjenja u biorazgradivim polimerima kao što je polilaktid-poliglikolid. U zavisnosti od odnosa jedinjenja prema polimeru i prirode određenog upotrebljenog polimera, stopa oslobađanja jedinjenja se može kontrolisati. Primeri drugih biorazgradivih polimera uključuju poli(ortoestre) i poli(anhidride). Depo injektabilne fonnulacije se takođe pripremaju zarobljavanjem jedinjenja u lipozomima ili mikroemulzijama koji su kompatibilni sa tkivima tela.
[0209] Kompozicije za rektalnu ili vaginalnu primenu su specifično supozitorije koje se mogu pripremiti mešanjem ovde opisanih jedinjenja sa pogodnim ne-iritirajućim ekscipijentima ili nosači kao što je kakao puter, polietilen glikol ili vosak za supozitorije koji su čvrsti na ambijentalnoj, ali tečni na telesnoj temperaturi i stoga se tope u rektalnoj ili vaginalnoj šupljini i oslobađaju aktivno jedinjenje.
[0210] Čvrsti dozni oblici za oralnu primenu uključuju kapsule, tablete, pilule, praškove, i granule. U takvim čvrstim doznim oblicima, aktivno jedinjenje je pomešano sa najmanje jednim inertnim, fannaceutski prihvatljivim ekscipijentom ili nosačem kao što je natrijum citrat ili dikalcijum fosfat i/ili a) punioci ili ekstenderi kao što su škrobovi, laktoza, saharoza, glukoza, manitol, i silicijumova kiselina, b) vezujuća sredstva kao što su, na primer, karboksimetilceluloza, alginati, želatin, polivinilpirolidinon, saharoza, i akacija c) humektanti kao što je glicerol, d) sredstva za raspadanje kao što je agar—agar, kalcijum karbonat, škrob krompira ili tapioke, alginska kiselina, određeni silikati, i natrijum karbonat, e) sredstva za usporavanje rastvaranja kao što je parafin, f) ubrzivači apsorpcije kao što su kvaternerna amonijum jedinjenja, g) sredstva za vlaženje kao što su, na primer, cetil alkohol i glicerol monostearat, h) absorbenti kao što su kaolin i bentonit glina, i i) lubrikanti kao što su talk, kalcijum stearat, magnezijum stearat, čvrsti polietilen glikoli, natrijum lauril sulfat, i njihove smeše. U slučaju kapsula, tableta i pilula, dozni oblik takođe može sadržati puferujuća sredstva.
[0211] Čvrste kompozicije sličnog tipa mogu se takođe upotrebiti kao punioci u mekim i čvrstim želatinskim kapsulama korišćenjem takvih ekscipijenata kao što su laktoza ili mlečni šećer kao i polietilen glikoli velike molekulske težine i slično. Čvrsti dozni oblici tableta, , dražeja, kapsula, pilula, i granula mogu se pripremiti sa oblogama i omotačima kao što su enteričke obloge i druge obloge dobro poznate u tehnici farmaceutskog fonnulisanja. One mogu izborno sadržati agense za postizanje neprozirnosti i takođe mogu biti takvog sastava da oslobađaju samo aktivni sastojak (sastojke), ili poželjno, u određenom delu intestinalnog trakta, izborno, na odloženi način. Primeri kompozicija sa utiskivanjem koje se mogu koristi uključuju polimerne supstance i voskove. Čvrste kompozicije sličnog tipa takođe se mogu upotrebiti kao punioci u mekim i čvrstim želatinskim kapsulama koristeći takve ekscipijente kao što su laktoza ili mlečni šećer kao i polietilen glikoli velike molekulske težine i slično.
[0212]Ova aktivna jedinjenja mogu takođe biti u mikroinkapsuliranom obliku sa jednim ili više ekscipijenata kao što je prethodno napomenuto. Čvrsti dozni oblici tableta, dražeja, kapsula, pilula i granula mogu se pripremiti sa oblogama i omotačima kao što su enteričke obloge, obloge koje kontrolišu oslobađanje i druge obloge dobro poznate u tehnici farmaceutskog formulisanja. U takvim čvrstim doznim oblicima aktivno jedinjenje može biti domešano sa najmanje jednim inertnim razblaživačem kao što je saharoza, laktoza ili škrob. Takvi dozni oblici mogu takođe sadržati, što je uobičajena praksa, dodatne supstance različite od inertnih razblaživača, npr., lubrikante za formiranje tableta i druga pomoćna sredstva za pravljenje tableta kao što je magnezijum stearat i mikrokristalna celuloza. U slučaju kapsula, tableta i pilula, dozni oblici mogu takođe sadržati puferujuća sredstva. Oni takođe mogu izborno sadržati agense za zatamnjivanje i takođe mogu biti takvog sastava da oslobađaju samo aktivni sastojak (sastojke), ili poželjno, u određenom delu intestinalnog trakta, izborno, na odloženi način. Primeri kompozicija sa utiskivanjem koje se mogu koristi uključuju polimerne supstance i voskove.
[0213] Dozni oblici za topikalnu ili transdermalnu primenu ovde opisanih jedinjenja uključuju masti, paste, kreme, losione, gelove, praškove, rastvore, sprejeve, inhalaciona sredstva ili flastere. Aktivna komponenta je domešana pod sterilnim uslovima sa farmaceutski prihvatljivim nosačem i bilo kojim potrebnim konzervansima ili puferima koji mogu biti neophodni. Oftalmička formulacija, kapi za uši, i kapi za oči su takođe predviđeni unutar obima ovog pronalaska. Dodatno, ovaj pronalazak predviđa upotrebu transdermalnih flastera, koji imaju dodatnu prednost obezbeđivanja kontrolisanog dopremanja jedinjenja u telo. Takvi dozni oblici mogu se napraviti rastvaranjem ili raspodelom jedinjenja u odgovarajućem medijumu. Takođe se mogu koristiti pojačivači apsorpcije da bi se povećao protok jedinjenja kroz kožu. Stopa se može kontrolisati ili obezbeđivanjem membrane koja kontroliše stopu ili raspodelom jedinjenja u polimernom matriksu ili gelu.
[0214] Ovde opisane kompozicije mogu se primeniti oralno, parenteralno, inhalacionim sprejem, topikalno, rektalno, nazalno, bukalno, vaginalno ili preko ugrađenog rezervoara. Termin "parenteralno" kao što je ovde korišćeno uključuje, ali nije ograničeno na, potkožnu, intravensku, intramuskulamu, intra-artikularnu, intra-sinovijalnu, intrasternalnu, intratekalnu, intrahepatičku, intralezionu i intrakranijalnu injekciju ili infuzione tehnike. Specifično, kompozicije su primenjene oralno, intraperitonealno ili intravenski.
[0215] Sterilni injektabilni oblici ovde opisanih kompozicija mogu biti vodene ili uljane suspenzije. Ove suspenzije se mogu formulisati prema tehnikama poznatim u tehnici korišćenjem pogodnih dispergujućih ili sredstava za vlaženje i sredstava za suspenziju. Sterilni injektabilni preparat može takođe biti sterilni injektabilni rastvor ili suspenzija u netoksičnom parenteralno-prihvatljivom razblaživaču ili rastvaraču, na primer kao rastvor u 1,3-butandiolu. Između prihvatljivih prenosilaca i rastvarača koji se mogu upotrebiti su voda, Prstener-ov rastvor i izotonični rastvor natrijum hlorida. Dodatno, pogodno se upotrebljavaju sterilna, neisparljiva ulja kao rastvarač ili medijum za suspenziju. U tu svrhu, bilo koje meko neisparljivo ulje može se upotrebiti uključujući sintetičke mono- ili di-gliceride. Masne kiseline, kao što je oleinska kiselina i njeni gliceridni derivati su korisni u pripremanju injektabilnih sredstava, kao što su prirodna fannaceutski prihvatljiva ulja, kao što je maslinovo ulje ili ulje ricinusa, naročito u njihovim polioksietilovanim verzijama. Ovi uljani rastvori ili suspenzije mogu takođe sadržati alkoholni razblaživač ili disperzant sa dugačkim lancem, kao što je karboksimetil celuloza ili slični disperzioni agensi koji se uobičajeno koriste u formulaciji farmaceutski prihvatljivih doznih oblika uključujući emulzije i suspenzije. Drugi uobičajeno korišćeni surfaktanti, kao što su Tvveens, Spans i druga sredstva za stvaranje emulzije ili sredstva za poboljšanje bioraspoloživosti koja su uobičajeno korišćena u proizvodnji fannaceutski prihvatljivih čvrstih, tečnih, ili drugih doznih oblika mogu takođe biti korišćeni za svrhe formulisanja.
[0216]Ovde opisane farmaceutske kompozicije mogu biti oralno primenjene u bilo kom oralno prihvatljivom doznom obliku ukljjučujući, ali ne ograničavajući se na, kapsule, tablete, vodene suspenzije ili rastvore. U slučaju tableta za oralnu upotrebu, uobičajeno korišćeni nosači uključuju, ali nisu ograničeni na, laktozu i kukuruzni škrob. Lubrikanti, kao što je magnezijum stearat, takođe se tipično dodaju. Za oralnu primenu u obliku kapsule, korisni razblaživači uključuju laktozu i suvi kukuruzni škrob. Kada su za oralnu upotrebu zahtevane vodene suspenzije, aktivni sastojak je kombinovan sa sredstvima za emulziju i suspenziju. Ukoliko je poželjno, određeni zaslađivači, aromatizeri ili sredstva za bojenje mogu se takođe dodati.
[0217] Alternativno, ovde opisane fannaceutske kompozicije mogu se primeniti u obliku supozitorija za rektalnu primenu. One se mogu pripremiti mešanjem sredstva sa pogodnim neiritirajućim ekscipijentom koji je čvrst na sobnoj temperaturi, ali je tečan na rektalnoj temperaturi i stoga će se istopiti u rektumu da oslobodi lek. Takvi materijali uključuju, ali nisu ograničeni na, kakao puter, pčelinji vosak i polietilen glikole.
[0218] Ovde opisane farmaceutske kompozicije mogu se takođe primeniti topikalno, naročito kada cilj tretmana uključuje oblasti ili organe lako pristupačne sa topikalnom primenom, uključujući bolesti oka, kože, ili donjeg dela intestinalnog trakta. Pogodne topikalne formulacije se lako pripremaju za svaku od ovih oblasti ili organa.
[0219] Topikalna primena za donji intestinalni trakt može se izvesti u formulaciji rektalne supozitorije (videti prethodno) ili u pogodnoj formulaciji klistira. Takođe se mogu koristiti topikalni-transdennalni flasteri.
[0220] Za topikalne primene, farmaceutske formulacije mogu se formulisati u pogodnoj masti koja sadrži aktivnu komponentu suspendovanu ili rastvorenu u jednom ili više nosača. Nosači za topikalnu primenu jedinjenja ovog pronalaska uključuju, ali nisu ograničeni na, mineralna ulja, tečni vazelin, beli vazelin, propilen glikol, polioksietilen, polioksipropilensko jedinjenje, vosak za emulziju i vodu. Alternativno, farmaceutske kompozicije se mogu formulisati u pogodnom losionu ili kremi koja sadrži aktivne komponente suspendovane ili rastvorene u jednom ili više farmaceutski prihvatljivih nosača. Pogodni nosači uključuju, ali nisu ograničeni na, mineralno ulje, sorbitan monostearat, polisorbat 60, vosak cetil estara, cetearil alkohol, 2 oktildodekanol, benzil alkohol i vodu.
[0221] Za oftalmičku upotrebu, fannaceutske kompozicije mogu biti fonnulisane kao mikronizovane suspenzije u izotoničnom, pH podešenom sterilnom fiziološkom rastvoru, ili, specifično, kao rastvori u izotoničnom, pH podešenom sterilnom fiziološkom rastvoru, bilo sa ili bez konzervansa kao što je benzilalkonijum hlorid. Alternativno, za oftalmičke upotrebe, farmaceutske kompozicije mogu biti formulisane u masti kao stoje vazelin.
[0222] Farmaceutske kompozicije se takođe mogu primeniti kao nazalni aerosol ili inhalacija. Takve kompozicije su pripremljene prema tehnikama dobro poznatim u tehnici farmaceutske formulacije i mogu se pripremiti kao rastvori u fiziološkom rastvoru, koji koriste benzil alkohol ili druge pogodne konzervanse, sredstva za poboljšanje apsorpcije da bi povećali bioraspoloživost, fluorougljovodonike, i/ili druga konvencionalna sredstva za poboljšanje rastvorljivosti ili sredstva za disperziju.
[0223] Jedinjenja za upotrebu u postupcima pronalaska mogu se formulisati u jediničnom doznom obliku. Tennin "jedinični dozni oblik" odnosi se na fizički zasebne jedinice pogodne kao jedinične doze za subjekte pod tretmanom, pri čemu je svaka jedinica koja sadrži predetenninisanu količinu aktivnog materijala izračunatu da proizvede željeni terapeutski efekat, izborno zajedno sa pogodnim farmaceutskim nosačem. Jedinični oblik doze može biti za jednu dnevnu dozu ili jednu od više dnevnih doza (npr., oko 1 do 4 ili više puta na dan). Kada se koristi više doza, jedinični dozni oblik može biti isti ili različit za svaku dozu.
PRIMERI
Primer 1: Sinteza jedinjenja 2 i referentnih jedinjenja
[0224] Ovde opisana jedinjenja mogu se pripremiti bilo kojim pogodnim postupkom poznatim u tehnici, na primer, WO 2005/095400, WO 2007/084557, WO 2010/011768, WO 2010/011756, WP 2010/011772, WO 2009/073300, i PCT/US2010/038988 podnetim 17. juna 2010. Na primer, jedinjenja prikazana u Tabeli 1 i SL. 1 mogu se pripremiti bilo kojim postupkom poznatim u tehnici, na primer, WO 2005/095400, WO 2007/084557, WO 2010/011768, WO 2010/011756, WP 2010/011772, WO 2009/073300, i PCT/LJS2010/038988, i primerom sinteze opisane u nastavku. Generalno, jedinjenja pronalaska se mogu pripremiti kao što je prikazano u tim sintezama izborno sa bilo kojom odgovarajućom modifikacijom.
Metodologija za sintezu i karakterizaciju jedinjenja
[0225] Sinteze određenih primera jedinjenja pronalaska su prikazana u nastavku. NMR i podaci sa masene spektrometrije određenih specifičnih jedinjenja rezimirani su u Tabeli 1. Kao što je ovde korišćeno termin RT (min) odnosi se na LCMS retenciono vreme, u minutima, povezano sa jedinjenjem.
Priprema Jedinjenja 1
[0226] (a) Na2C03, THF, CH3CN, mikrotalasi, 135°C; (b)NaOMe, MeOH, 0°C;
Formiranje (J?)-3-(2-(5-hloro-l-tozil-lfl-pirolo[2,3-ž»]piridin-3-il)-5-fluoro-pirimidin-4-
ilamiiio)-4,4-dimeti]pentanske kiseline (3a)
[0227]U rastvor 5-liloro-3-(5-fluoro-4-metilsulfinil-pirimidin-2-il)-l-(/;-tolilsulfonil)pirolo[2,3-b]piridina,la,(0.100 g, 0.215 mmol: pripremljenog na sličan način kao što je u nastavku opisano za Jedinjenje25ana šemi 4) i (/?)-3-amino-4,4-dimetilpentanske kiseline,2a,(0.031 g, 0.215 mmol) u tretrahidrofuranu (1.66 mL) dodat je sveže samleveni Na2C03(0.068 g, 0.645 mmol) nakon čega je dodat acetonitril (0.331 mL). Reakciona smeša je zagrevana na 135°C 30 minuta u mikrotalasnom reaktoru. Reakciona smeša je polako sipana u 75 mL IN HC1. pH finalnog rastvora je podešena na 1. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3 X 5 mL), ispran fiziološkim rastvorom, osušen preko Na2SO-4 i filtriran da bi se dobio sirovi čvrsti ostatak. Sirovi ostatak prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-10% MeOH-CFLCL gradijent) dao je 78 mg željenog proizvoda3a:LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, C18/ACN, RT = 3.9 minuta (M+H) 546.22.
(/f)-3-(2-(5-Hloro-l//-pirolo[2,3-A]piridin-3-il)-5-fluoropirimidin-4-ilamino)-4,4-
dimetilpentanska kiselina (l)
[02281Hladnom (0°C) rastvoru (^)-3-(2-(5-hloro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)-5-fluoro-pirimidin-4-ilamino)-4,4-dimetilpentanske kiseline,3a,(0.08 g, 0.14 mmol) u MeOH (2.6 mL) dodat je natrijum metanolat (2.91 mL 25%tež/zapr, 13.46 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 30 min i zatim ugašena razblaživanjem u zasićenom vodenom rastvoru amonijum hlorida. MeOH je uparenin vacuoi rezultujuća vodena faza je razblažena sa EtOAc, zatim ekstrahovana sa EtOAc (3X). Organski slojevi su osušeni (Na2S04), filtrirani i koncentrovaniin vacuo.Rekristalizacija iz MeOH obezbedila je 52 mg željenog proizvoda 1 kao belog praha: 'H NMR (ć/6-DMSO) 5 12.25 (s, IH): 12.0 (bs, IH): 8.8 (s, IH): 8.3 (s, IH): 8.25 (s, IH); 8.1 (s, IH): 7.45 (d, IH); 4.75 (t, IH); 2.5 (m, 2H), 1.0 (s, 9H); LCMS gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, C18/ACN, RT = 2.06 minuta (M+H) 392.21.
Pripremanje jedinjenja 2 , 43 , 89 i 90
[0229] (a) AcCl, MeOH, refluks; (b) 2,4-dihloro-5-lfuoropirimidin, Et3N, EtOH, THF, 55°C; (c) 5-fluoro-l-(p-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l ,3,2-dioksaborolan-2il)pirolo[2,3-b]piridin,7a,Pd2(dba)3)Xphos, K3PO4,2-MeTHF, H20, 115°C; (d) HC1, dioksan, acetonitril, 65°C; (e) LiOH, THF, H20, 50°C.
Formiranje (/?)-l-metoksi-4,4-dimetil-l-oksopentan-3-aminijum hlorida (5a)
[0230](i?)-3-amino-4,4-dimetilpentanska kiselina, 2a, je rastvorena u metanolu (1.4 L). Rastvor je hlađen u ledenom kupatilu i ukapavanjem je dodat acetil hlorid (67.0 mL, 947.0 mmol) (održavajući temperaturu ispod 10°C). Reakciona smeša je zagrevana do 65°C i mešana na toj temperaturi 3 č. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i zatim isprana sa toluenom da bi se uklonile isparljive supstance. Sirovi materijal je korišćen bez daljeg prečišćavanja:<*>H NMR (400 MHz, MeOH-rf,) 8 3.75 (s, 3H), 3.41 (t, IH), 2.88 (dd, IH), 2.64 - 2.46 (m, IH), 1.04 (s, 9H).
Formiranje (tf)-metil 3-((2-hloro-5-fluoropirimidin-4-i])amino)-4,4-dinietilpentanoata
(6a)
[0231](i?)-l-metoksi-4,4-dimetil-l-oksopentan-3-aminijum hlorid,5a,(37 g, 189 mmol) rastvoren je u smeši tetrahidrofurana (667 mL) i EtOH (74 mL). Rastvor je ohlađen u ledenom kupatilu. Dodat je 2,4-dihloro-5-fluoro-pirimidin (35 g, 208 mmol), nakon čega je u kapima dodat trietilamin (85 mL, 606 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 55°C 17 č. Reakciona smeša je zatim ohlađena do sobne temperature nakon čega su dodati voda (625 mL) i dihlorometan (625 mL). Faze su razdvojene i vodeni sloj je ispran sa dihlorometanom (625 mL). Organski slojevi su kombinovani i isprani sa fiziološkim rastvorom. Rastvarači su uklonjeni i ostatak je prečišćen na silika gelu (EtOAc/Heksans): LCMS gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5min, C18/ACN, RT = 3.10 minuta (M+H) 291.02.
Formiranje (Zf)-metil 3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-
il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-dimetilpentanoata (8a)
[0232]2-MeTHF (253 mL)/vodi (56 mL) rastvor 5-fluoro-l-0;-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridina,7a,(24.3 g, 58.3 mmol), metil (R)-metil 3-((2-hloro-5-fluoropirimidin-4-il)amino)-4,4-dimetilpentanoata,6a,(14.1 g, 48.6 mmol) i K3PO4(30.9 g, 146 mmol) prečišćen je sa azotom 0.75 č. Dodati su XPhos (2.8 g, 5.8 mmol) i Pd2(dba)3(1.1 g, 1.2 mmol) i reakciona smeša je mešana na 115°C u zapečaćenoj epruveti 2 č. Reakciona smeša je ohlađena i uklonjena je vodena faza. Organska faza je filtrirana kroz Celite jastučić i smeša je koncentrovana do sušenja. Ostatak je prečišćen na silika gelu (EA/Hex) da bi se obezbedio željeni proizvod,8a,(23.2g): LCMS gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5min, Cl 8/ACN, RT = 2.18 minuta (M+H) 245.28.
Formiranje (^f)-metil 3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-lfl-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-
il)amino)-4,4-dimetilpentanoata (9a)
[0233]U rastvor (R)-metil 3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-dimetilpentanoata,8a,(21 g, 39 mmol) u acetonitrilu (157 mL) dodata je 4M HC1 u dioksanu (174 mL). Reakciona smeša je zagrevana do 65°C 4 č. Rastvor je ohlađen do sobne temperature i rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom. Smeša je isprana sa acetonitrilom nakon čega su dodati dihlorometan (lOOmL), zas. vodeni rastvor NaHCOs(355 mL) i etil acetat (400 mL). Faze su razdvojene i vodeni rastvor je ispran sa etil acetatom (500 mL). Organski slojevi su kombinovani, osušeni (Na^SO^, filtrirani i koncentrovaniin vacuo.Rezultujući ostatak je prečišćen na silika gelu (EtOAc/Heksani) da bi se obezbedio željeni proizvod,9a,(12.lg): LCMS gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5min, Cl 8/ACN, RT = 2.26 minuta (M+H) 391.05.
Formiranje (/f)-3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-lJW-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-
il)amino)-4,4-dimetilpentanske kiseline (2)
[0234](7?)-Metil 3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-dimetilpentanoat,9a,(18.4 g, 47.1 mmol) je rastvoren u tetrahidrofuranu (275 mL) i dodat je vodeni rastvor IM LiOH (141 mL). Smeša je zagrevana do 50°C 3.5 č. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i dodato je 180 mL vode. Tetrahidrofuran je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je zatim ispran dva puta sa heksanima. Dodat je dietiletar (60 mL) i slojevi su razdvojeni. pH vodenog sloja je podešena na 6 sa IN HC1. Etil acetat (540 mL) je dodat, slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom (720 mL), zatim ponovo sa etil acetatom (300 mL). Organski slojevi su kombinovani, isprani sa fiziološkim rastvorom (100 mL) i osušeni (Na2S04). Rastvarači su uklonjeni uz ispiranje sa heptanima da bi se obezbedio željeni proizvod,2,(17.5g):<X>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 12.23 (s, IH), 12.03 (s, IH), 8.68 - 8.52 (m, IH), 8.27 (s, IH), 8.19 (d,J= 2.5 Hz, IH), 8.13 (d,J =4. 0 Hz, IH), 7.39 (d,J =9.2 Hz, IH), 4.83( t, J=9.3 Hz, IH), 2.71 - 2.51 (m, 2H), 0.97 (s, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5min, Cl 8/ACN, RT = 1.96 minuta (M+H) 377.02.
Sledeći analog je pripremljen na sličan način kao u prethodno opisanoj proceduri za Jedinjenje 2:
(/f)-3-((5-lfuoro-2-(5-(trifluorometil)-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-dimetilpentanska kiselina (43)
[0235]<!>H NMR (300 MHz, CDC13) 5 11.16 (s, IH), 8.70 (s, IH), 8.04 (d,J=3.2 Hz, IH), 7.96 (s, IH), 7.87 (s, IH), 5.02 (d,/= 8.1 Hz, IH), 4.80 (t,J= 9.6 Hz, IH), 2.81 (d,J= 9.9 Hz, IH), 2.34 (t,J= 11.3 Hz, IH), 1.14 (s, 9H); LCMS gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, retenciono vreme = 2.49 minuta (M+H) 426.47.
(/f)-3-((5-fluoro-2-(5-metil-l^T-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-
dimetilpentanska kiselina (90)
[02361<f>H NMR (300 MHz, CDCI3) 5 8.68 (s, IH), 8.43 (d, J= 14.1 Hz, 2H), 8.23 (s, IH), 4.96 (s, 2H), 2.88 - 2.55 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 1.00 (s, 9H); LCMS gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, C18/ACN, retenciono vreme =1.8 minuta (M+H) 372.5.
(/f)-3-((2-(5-cijano-l^-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)-5-fluoropirimidin-4-il)amino)-4,4-
dimetilpentanska kiselina(89)
[0237]LCMS gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, retenciono vreme = 2.1 minuta (M+H) 383.38.
(5^-3-((5-lfuoro-2-(5-fluoro-l^-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-
dimetilpentanskakiselina(4)
[0238]LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 1.93 minuta (M+H) 376.21.
(5)-3-((2-(5-hloro-l^-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)-5-lfuoropirimidin-4-il)amino)-4,4-
dimetilpentanska kiselina(3)
[0239]LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.06 minuta (M+H) 392.21.
Priprema jedinjenja 69
[0240] (a) 2,4-dihloro-5-fluoropirimidin, Et3N, DMF; (b) oksalil hlorid, DMF, DMSO, Et3N, CH2C12; (c) [(PrO)2PO]CH2, NaH, THF; (d) 5-lluoro-l-(p-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridin, 7a, Pd2(dba)3, Xphos, K3P04, 2-MeTHF, H20, 100°C; (e) NaOMe, MeOH; (f) H2, Pd/C, MeOH, 40 psi; (g) trimetilsililjodid, CH2C12.
Formiranje (5)-2-((2-hloro-5-fluoropirimidin-4-il)amino)-3,3-dimetilbutan-l-ola (14a)
[0241]Smeši (25)-2-amino-3,3-dimetil-butan-l-ola (5.0 g, 42.7 mmol) i 2,4-dihloro-5-fluoro-pirimidina (5.7 g, 42.7 mmol) u DMF (50 mL) dodat je trietilamin (7.1 mL, 51.2 mmol). Nakon 90 minuta, reakcija je razblažena u zasićenom vodenom rastvoru NH4CI i dva puta ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovane organske faze su isprane dva puta sa fiziološkim rastvorom, osušene (MgS04), filtrirane i koncentrovanein vacuo.Sirovi ostatak je prečišćen preko hromatografije na silika gelu (0-10% MeOH/'CH2Cl2Gradijent) da bi se dobilo 6.7 g željenog proizvoda, 1, kao lepljiva čvrsta supstanca: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 2.48 minuta (M+H) 248.32.
Formiranje (5)-2-((2-hloro-5-fluoropirimidin-4-il)amino)-3,3-dimetilbutanala (15a)
[0242]Hladnom (-78°C) rastvoru oksalil hlorida (1.06 mL, 12.11 mmol) u dihlorometanu (10 mL) u kapima je dodat dimetil sultbksid (1.43 mL, 20.18 mmol). Nakon mešanja smeše 10 minuta na -78°C, dodata je suspenzija (21S<r>)-2-[(2-hloro-5-fluoro-pirimidin-4-il)amino]-3,3-dimetil-butan-l-ola,14a,(1.0 g, 4.04 mmol) u dihlorometanu (10 mL). Reakciona smeša je mešana 30 minuta na -78°C i dodat je trietilamin (3.38 mL, 24.22 mmol). Smeša je polako zagrevana do 0°C tokom 2 časa. Smeša je razblažena u vodenom zasićenom rastvoru NaHCOi i dva puta ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovane organske faze su osušene (MgS04), filtrirane i koncentrovanein vacuo.Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-15% EtOAc/CHzCfj Gradijent) da bi se dobilo 680 mg željenog proizvoda kao bela čvrsta supstanca.
Formiranje (/f^-diizopropil (3-((2-hloro-5-fluoropirimidin-4-il)amino)-4,4-dimetilpent-
l-en-l-il)fosfonata (16a)
[0243]Hladnoj (0°C) suspenziji natrijum hidrida (0.163 g, 7.083 mmol) u THF (8.0 mL) dodat je 2-(diizopropoksifosforilmetil(izopropoksi)fosforil)-oksipropan (1.220 g, 3.542 mmol). Nakon 15 minuta, u kapima je dodat rastvor (S)-2-((2-hloro-5-lfuoropirimidin-4-il)amino)-3,3-dimetilbutanala,15a,(0.580 g, 2.361 mmol) u THF (4 mL). Reakciona smeša je polako zagrevana do sobne temperature tokom 1 časa. Smeša je razblažena u vodenom zasićenom rastvoru NH4CI i ekstrahovana sa EtOAc. Organska faza je sušena (MgS04), filtrirana i koncentrovanain vacuo.Rezultujući sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (10-50% EtOAc/CH^Cl?Gradijent) da bi se dobilo 810 mg željenog proizvoda: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 3.28 minuta (M+H) 408.36.
Formiranje (/?^)-diizopropil (3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-
il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-dimetilpent-l-en-l-il)fosfonata (17a)
[0244]U rastvor (/?,£)-diizopropil (3-((2-hloro-5-fluoropirimidin-4-il)amino)-4,4-dimetilpent-l-en-l-il)fosfonata, 16a, (0.81 g, 1.99 mmol) i 5-fluoro-l-(/'-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrarnetil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridina, 7a, (1.24 g, 3.00 mmol) u 2-Me-THF (16 mL) dodat je K3PO4(1.27 g, 3.00 mmol) i voda (4 mL). Dvofazna smeša je degazirana pod strujom azota 15 minuta. Zatim, smeši su dodati X-Phos (0.11 g, 0.24 mmol) i Pd2(dba)3(0.06 g, 0.06 mmol). Nakon degaziranja sa azotom dodatnih 5 minuta, boca je zapečaćena i zagrevana na 100°C 2 časa. Smeša je hlađena do sobne temperature i razblažena sa EtOAc, filtrirana kroz celit. Filtrat je ispran sa fiziološkim ratvorom, osušen (MgS04), filtriran i koncentrovanin vacuo.Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-50% Et0Ac/CH2Ci2Gradijent) da bi se dobilo 1.123 g željenog proizvoda:<!>H NMR (400 MHz, ć/e-DMSO) 5 8.55 - 8.42 (m, 3H), 8.31 (d,J=3.7 Hz, IH), 8.06 (d,J =8.3 Hz, 2H),7.73 ( d, J =8.9 Hz, IH), 7.44( d, J =8.4 Hz, 2H), 6.80(ddd, J =22.2, 17.1, 6.9 Hz, IH), 5.99(dd, J= 20.3,17.1 Hz, IH), 4.95(t, J = 7. 6 Hz,IH), 4.51 -4.32 (m, 2H), 2.35 (s, 3H), 1.19 - 1.14 (m, 6H), 1.11 (dd,J=6.0, 4.4 Hz, 6H), 1.02 (s, 9H).); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 4.06 minuta (M+H) 662.35.
Formiranje (R,E)-diizopropil (3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-
il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-dimetilpent-l-en-l-il)fosfonata (18a)
[0245]U rastvor (^,iT)-diizopropil (3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-lH-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-dimetilpent-l-en-l-il)fosfonata,17a,(1.0 g, 1.51 mmol) u metanolu (30 mL) dodat je natrijum metoksid (8.2 mL 25% tež. rastvora u MeOH). Nakon 3 minuta, smeša je razblažena u vodenom zasićenom rastvoru NH4CI i dva puta ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovane organske faze su osušene (MgS04), filtrirane i koncentrovanein vacuo.Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-15% MeOH/CH2Cl2Gradijent) da bi se dobilo 724 mg željenog proizvoda: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, C18/ACN, RT = 2.76 minuta (M+H) 508.13.
Formiranje (fl)-diizopropi]-(3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-
il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-dimetilpentil)fosfonata (19a)
[0246]U rastvor (R,E)-diizopropil (3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-dimetilpent-l-en-l-il)fosfonata,18a,(0.36 g, 0.71 mmol) u MeOH (7 mL) dodat je Pd na ugljeniku (10%, vlažnosti, Degussa, 0.07 g, 0.07 mmol). Reakciona smeša je mešana u bočici za Parr hidrogenizaciju pod 50 psi vodonika preko noći. Smeša je razblažena sa EtOAc i filtrirana kroz celit. Filtrat je koncentrovanin vacuoda bi se dobio željeni proizvod kao tamno siva čvrsta supstanca: *H NMR (400 MHz, ^-DMSO) 5 12.28 (s, IH), 8.46 (dd,J =9.9, 2.7 Hz, IH), 8.30 - 8.21 (m, 2H), 8.15 (d,J =3.9 Hz, IH), 7.29 (d,J =9.5 Hz, IH), 4.51(dt, J=12.3, 6.2 Hz, 2H), 4.37 (t,J=9.8 Hz, IH), 1.95 - 1.60
(m, 3H), 1.59 - 1.35 (m, IH), 1.24 - 1.09 (m, 12H), 0.99 (s, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 2.46 minuta (M+H) 510.56.
Formiranj e( R )-(3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirolo [2,3-b] piridin-3-il)pirimidin-4-
il)amiiio)-4,4-dimetilpentil)fosfonska kiselina (69)
[02471U rastvor (i?)-diizopropil-(3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-dimetilpentil)fosfonata,19a,(0.16 g, 0.32 mmol) u dihlorometanu (8 mL) dodat je jodotrimetilsilan (0.45 mL, 3.18 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 1 časa, LCMS je pokazao da reakcija nije završena. Dodatnih 0.90 mL jodotrimetilsilana (0.64 mmol) je dodato reakcionoj smeši. Nakon 5 časova, smeša je koncentrovanain vacuoi rezultujući ostatak je prečišćen preko preparativne HPLC (CH3CN/1% vodeni ratsvor TFA) da bi se dobilo 8 mg fosfonske kiseline, 69, i 34 mg
fosfonata, 21a.
[0248]Spektralni podaci za fosfonsku kiselinu, 69:<*>H NMR (300 MHz, MeOD) 5 8.59 - 8.39 (m, 2H), 8.32 (t,J =5.3 Hz, 2H), 4.59 (d,J =9.5 Hz, 2H), 2.21 (s, IH), 1.79 (dddd,J =28.6, 23.0, 13.2, 6.9 Hz, 3H), 1.11 (d,J =9. 5 Hz, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 1.81 minuta (M+H) 426.09.
[0249]Spektralni podaci za fosfonat21a:<!>H NMR (300 MHz, MeOD) 5 8.57 - 8.41 (m, 2H), 8.32( d, J=5.6 Hz, 2H), 4.73 - 4.41 (m, 2H), 2.25(d, J=25.7 Hz, IH), 2.06 - 1.43 (m, 3H), 1.32 - 1.20 (m, 6H), 1.11( d. J=11.2 Hz, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 2.06 minuta (M+H) 468.13.
Pripremanje Jedinjenja 16 i 17
(a) NaH, TsCl, DMF; (b) KOAc, PdCl2(dppf), dioksan, voda, refluks; (c) Pd(PPh3)4, Na2C03, DME, voda; (d) morfolin-4-karbonil hlorid, ^Net, CH2C12
Formiranje 3-bromo-5-fluoro-l-(p-tolilsulfonil)pirolo[2,3-b]piridina (22a)
[0251]3-bromo-5-lfuoro-l//-pirolo[2,3-b]piridin (5.0 g, 23.3 mmol) je rastvoren u DMF (37.5 mL) i ohlađen do 0°C. Dodat je natrijum hidrid (1.5 g, 37.2 mmol) i reakciona smeša je mešana 10 minuta i zatim tretirana sa tozil hloridom (6.6 g, 34.9 mmol). Smeša je mešana 30 minuta na 0°C i zatim na sobnoj temperaturi dodatnih 90 minuta. Reakciona smeša je sipana u vodu (100 mL) i rezultujuća čvrsta supstanca je sakupljena, isprana sa vodom i heksanima tri puta i osušenain vacuoda bi se dobilo 8.26 g 3-bromo-5-fluoro-l-(p-tolilsulfonil)pirolo[2,3-b]piridin,22a:<*>H NMR (300 MHz, DMSO-ak) 5 8.48 (s, IH), 8.31 (s, IH), 8.01 (d,J =8.3 Hz, 2H), 7.92 (dd,J =8.4, 2.7 Hz, IH), 7.44 (d,J =8.5 Hz, 2H), 2.35 (s, 3H).
Formiranje 5-fluoro-l-(p-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,352-dioksaborolaii-2-
il)pirolo[2,3-b]piridina (7a)
[0252]3-bromo-5-fluoro-l-(j;-tolilsiilfonil)pirolo[2,3-b]piridin,22a,(4.0 g, 10.8 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-2-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)-l,3,2-dioksaborolan (8.3 g, 32.5 mmol) i kalijum acetat (3.2 g, 32.5 mmol) su preneti u dioksan (40 mL) sa nekoliko kapi vode. Nakon prečišćavanja sa azotom 30 minuta, dodat je PdChfđppf) (0.8 g, 1.1 mmol). Prečišćavanje azotom je nastavljeno dodatnih 40 minuta, zatim je reakciona smeša zagrevana do refluksa preko noći. Nakon hlađenja, smeša je filtrirana kroz Florisil (60g), isprana sa dihlorometanom (220 mL) i koncentrovanain vacuoda bi se obezbedilo braon ulje. Sirovi proizvod je prenet u heksan (40 mL) i TBME (14 mL) i zagrevan do refluksa. Nakon hlađenja do sobne temperature, rezultujuća suspenzija je filtrirana da bi se obezbedilo 2.6 g željenog proizvoda kao bela čvrsta supstanca:<l>llNMR (300 MHz, DMSO-^) 5 8.42 (dd,J=2.7, 1.4 Hz, IH), 8.14 (s, IH), 8.06 (d,./ = 8.4 Hz, 2H), 7.85 (dd,J =8.6, 2.8 Hz, IH), 7.44 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 2.36 (s, 3H), 1.32 (s, 12H).
Formiranje 5-fluoro-3-(5-fluoro-4-metilsulfanil-pirimidin-2-il)-l-(p-tolilsulfonil)pirolo
[2,3-b] piridin (24a)
[0253]2-hloro-5-fluoro-4-metilsulfanil-pirimidin (1.6 g, 9.0 mmol), 5-lluoro-l-(/?-lolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridin, 7a, (2.5 g, 6.0 mmol) i Na2CCh (1.9 g, 18.0 mmol) rastvoreni su u DME (37.5 mL) i vodi (7.5 mL). Smeša je prečišćena sa azotom 20 minuta, tretirana sa Pd(PPh3)4, prečišćena sa azotom dodatnih 20 minuta i zagrevana do refluksa preko noći. Nakon hlađenja do sobne temperature, dodata je voda (35 mL) i rezultujuća suspenzija je mešana 30 minuta. Talog je sakupljen filtracijom, ispran sa vodom i acetonitrilom i osušen preko noći na 50°C, dajući 2.3 g (88.5%) željenog proizvoda kao bela čvrsta supstanca:<l>U NMR (300 MHz, DMSO-ć/6) 5 8.70 - 8.57 (m, 2H), 8.55 - 8.42 (m, 2H), 8.09 (d,J=8.4 Hz, 2H), 7.45 (d,J=8.4 Hz, 2H), 2.76 (s, 3H), 2.36 (s, 3H).
Formiranje 5-fluoro-3-(5-fluoro-4-metilsulfinil-pirimidin-2-il)-l-(p-tolilsulfonil)pirolo
[2,3-b] piridina (25a)
[0254]5-fluoro-3-(5-fluoro-4-metilsulfanil-pirimidin-2-il)-l-(/;-tolilsulfonil)pirolo[2,3-bjpiridin,24a,(2.30 g, 5.32 mmol) rastvoren je u dihlorometanu (107 mL) i tretiran u delovima sa 3-hloroperbenzojevom kiselinom (1.19 g, 5.30 mmol), uz održavanje temperature ispod 20°C. Nakon mešanja 2 časa, dodat je sledeći deo 3-hloroperbenzojeve kiseline (0.18 g, 0.80 mmol), i mešanje je nastavljeno još jedan čas. Dodat je treći deo 3-hloroperbenzojeve kiseline (0.07 g, 0.05 mmol) i mešanje je nastavljeno 30 minuta. Reakciona smeša je tretirana sa vodenim rastvorom 15% K2CO3(30 mL) i slojevi su razdvojeni. Organski sloj je ispran sa 15% K2CO3i fiziološki rastvor, osušen (Na2S04), filtriran i koncentrovanin vacuoda bi se dobilo 2.3 g (96%) željenog proizvoda kao žuta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez daljeg prečišćavanja:<l>UNMR (300 MHz, DMSO-</6) 5 9.12(d, J =1.5 Hz, I H), 8.70 (s, I H), 8.67(dd, J= 9.1, 2.8 Hz, IH), 8.53 (d, J =1.5 Hz, IH), 8.11 (d,J =8.4 Hz, 2H), 7.46(d, J=8.2 Hz, 2H), 3.05 (s, 3H), 2.36 (s, 3H).
Sledeći analog je pripremljen na sličan način kao u proceduri prethodnoj opisanoj za sulfoksid,25a:
5-hloro-3-(5-fluoro-4-(metilsulifnil)pirimidin-2-il)-l-tozil-lH-pirolo[2,3-b]piridin(la)
[0255]<*>H NMR (300 MHz, t/6-DMSO) 5 9.12 (d,J= 1.3 Hz, IH), 8.90 (d,J=2.4 Hz, IH), 8.68 (s, IH), 8.53(d, J =2.4 Hz,IH), 8.12 ( d,J = 8.4 Hz, 2H),7.46 ( d, J =8.4 Hz, 2H), 2.54 - 2.48 (m, 3H), 2.36 (s, 3H).
Formiranje 2,2-dimetilbutanala (26a)
[0256]U rastvor 1,1-dimetilpropil magnezijum hlorida (20.0 mL 1 M, 20.0 mmol) u etru (25 mL) dodat je /V-metil-TV-fenil formamid (5.26 mL, 20.0 mmol) u jednom delu (egzotermno). Žuti rastvor je nežno refluksovan dva časa i mešan na sobnoj temperaturi tri časa. Na kraju ovog perioda Grignard kompleks je ugašen sipanjem na 500 g izmrvljenog leda i 20 ml koncentrovane sumporne kiseline. Etarski sloj je razdvojen i vodena faza je ekstrahovana tri puta sa 50 mL delovima etra. Kombinovani etarski ekstrakti su osušeni (MgS04) i koncentrovaniin vacuo.Sirovi ostatak je prečišćen destilacijom kratkog puta da bi se dobilo 1.0 g čistog 2,2-dimetilbutanala kao bezbojno ulje:<!>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 4.17 (q,J =7.1 Hz, 2H), 3.03 (dd,./ =10.9, 2.3 Hz, IH), 2.53(dd,./ =15.3, 2.3 Hz, IH), 2.15 (dd,J =15.3, 10.9 Hz, IH), 1.50 - 1.33 (m, 3H), 1.28(dd, J =9.0, 5.3 Hz, 3H), 1.26 - 1.17 (m, IH), 0.85 (d, .7=5.8 Hz, 6H).
Formiranjeetil 3-amino-4,4-dimetilheksanoata (27a)
[0257] Smeša 2,2-dimetilbutanala, 26a, (3.00 g, 26.75 mmol), malonske kiseline (2.08 g, 1.29 mL, 20.00 mmol), amonijum acetata (3.08 g, 40.00 mmol) u etanolu (5 mL) refluksovana je tri časa. Talog je uklonjen filtracijom i ispran sa etanolom. Rastvor je korišćen bez daljeg prečišćavanja.
[0258] Sumporna kiselina (1.962 g, 1.066 mL, 20.00 mmol) dodata je prethodnom etanolnom rastvoru i rezultujuća smeša je zagrevana do refluksa dva časa. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirovom ostatku su dodati voda (20 mL) i etar (10 mL). Vodeni sloj je razdvojen i ispran sa etrom (10 mL). Organski slojevi su odbačeni. Vodeni rastvor je neutralisan sa rastvorom natrijum hidroksida (6N) i zasićenim rastvorom natrijum bikarobonata do baznog, i ekstrahovano je sa etil acetatom (3 x 10 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa vodom (10 mL), fiziološkim rastvorom (lOmL), filtrirani, osušeni (MgSO^, filtrirani i koncentrovaniin vacuoda bi se dobilo 0.5 g željenog proizvoda kao svetio žuto lepljivo ulje, koji je po stajanju očvrsnulo. Sirovi proizvod je korišćen bez daljeg prečišćavanja:<l>HNMR (400 MHz, CDC13) 5 4.17 (q,J= 7.1 Hz, 2H), 3.03 (dd,J =10.9, 2.3 Hz, IH), 2.53 (dd,./=15.3, 2.3 Hz, IH), 2.15 (dd,J= 15.3, 10.9 Hz, IH), 1.50 - 1.33 (m, 3H), 1.28 (dd, 7= 9.0, 5.3 Hz, 3H), 1.26 - 1.17 (m, IH), 0.85 (d,/= 5.8 Hz, 6H).
Formiranje etil 3-((5-fluoro-2-(5-lfuoro-l-tozil-li/-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-dimetilheksanoata (28a)
[0259] Suspenziji etil 3-amino-4,4-dimetilheksanoata, 27a, (0.19 g. 1.00 mmol) i 5-fluoro-3-(5-fluoro-4-metilsulfmil-pirimidin-2-il)-l-(^-tolilsulfonil)pirolo[2,3-b]piridina, 25a, (0.54 g, 1.20 mmol) u THF (14.4 mL) dodat je A<r>,A<r->diizopropiletilamin (0.26 mL, 1.50 mmol). Smeša je refluksovana na 80°C preko noći. Nakon uklanjanja rastvarača pod sniženim pritiskom, sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-50% EtOAc/Heksan Gradijent) da bi se dobilo 155 mg željenog proizvoda kao svetio žuto ulje:<l>HNMR (300 MHz, CDCL) 5 8.61(dd, J= 9.0, 2.9 Hz,IH), 8.56 (s, IH), 8.33(dd, .7=2.7,1.0 Hz, 1 H), 8 .11( d, .7=8.4 Hz, 2H), 7.30 (d, J= 8.2 Hz, 2H), 5.19 (dd, J=10.1,2.2 Hz,IH), 4.94 (td, J =10.0, 3.7 Hz, IH), 3.99 (dt,/= 13.7, 6.8 Hz, 2H), 2.40 (s, 3H),1.42 (dt, J =14.1, 6.9 Hz, 2H),1.05 ( t, J =7.1 Hz, 3H), 1.01 - 0.94 (m, 8H); 19F NMR (282 MHz, CDC13) 5 -130.39 - 133.75 (dd,J=9.0, 1.1 Hz, IF), -158.56 (s, IF); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 4.18 minuta (M+H) 572.07.
Formiranje 3-((5-fluoro-2-(5-lfuoro-lfl-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-dimetilheksanske kiseline (16,17)
[0260]U rastvor etil 3-((5-fluoro-2-(5-lfuoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-*]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-dimetilheksanoata,28a,(0.16 g, 0.27 mmol) u THF (6 mL) dodat je LiOH (1.50 mL 1 M solution, 1.50mmol). Reakciona smeša je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 130°C trideset minuta. Reakcija je ugašena sa dodavanjem zasićenog vodenog rastvora NH4CI. Rezultujući beli talog je sakupljen i ispran vodom, acetonitrilom i etrom. Kombinovane organske faze su zatim koncentrovanein vacuoda bi se dobila čista željena karboksilna kiselina kao čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je rastvorena sa hlorovodoničnom kiselinom (2 mL IN rastvora) i liofilizovana da bi se dobilo 110 mg željenog proizvoda kao hidrohloridna so (svetio žuti prah):<l>H NMR (300 MHz, MeOD) 5 8.73 (d,J=9.5 Hz, IH), 8.16 (s, IH), 8.15 - 8.10 (m, IH), 7.93 (d,J= 4.0 Hz, IH), 5.02 (d,J= 6.4 Hz, IH), 3.75 (ddd,J=6.7, 4.2, 2.5 Hz, 3 H), 2.66 (d,J= 11.2 Hz, IH), 2.45 (dd,J =14.0, 9.9 Hz, IH), 1.93 - 1.83 (m, 3H), 1.46 (d,J= 7.5 Hz, 2H), 1.05 - 0.93 (m, 9H); 19F NMR (282 MHz, MeOD) 5-139.17 (s, IF), -160.86 (s, IF); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 2.04 minuta (M+H) 390.23.
[0261]Racemska smeša je podvrgnuta SFC hiralnom razdvajanju da bi se dobili pojedinačni enantiomeri,16,i17.
Pripremanje Jedinjenja 14 i 15
[0262]
a) LiHMDS, Mel, THF -78°C; b) DIBAL, CH2C12, -78°C; malonska kiselina, amonijum acetat, etanol, 80°C; d) T^Net, THF, 80°C; e) LiOH, THF-H20 (3:1), 130°C, mikrotalasi; f)
SFC hiralno razdvajanje
Formiranje 1-metilciklopentankarbonitrila (31a)
[0263]Hladnom (-78°C) rastvoru LiHMDS (48.0 mL 1 M rastvora u tetrahidrofuranu, 48.0 mmol) u tetrahidrofuranu u kapima je dodat rastvor ciklopentankarbonitrila (3.81 g, 40.0 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) tokom perioda od 5 minuta. Nakon mešanja na -78<C>C trideset minuta, u jednom delu je dodat metil jodid (3.74 mL, 60.00 mmol). Dozvoljeno je da se reakcija zagreje do sobne temperature preko noći. Rastvor je ohlađen do 0°C, dodati su etil acetat (50 mL) i zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida (20 mL). Dodato je još vode (10 mL) da bi se rastvorila čvrsta supstanca. Organski sloj je razdvojen i ispran sa zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida (20 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom (2 X 20 mL). Kombinovane organske faze su isprane sa fiziološkim rastvorom, osušene
(MgSCM), filtrirane i koncentrovanein vacuoda bi se dobilo 4.7g žutog ulja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja:<!>H NMR (400 MHz, CDC13) 8 2.04 - 1.93 (m, 2H), 1.77- 1.65 (m, 2H), 1.66 - 1.55 (m, 2H), 1.54 (m, 2H), 1.25 (s, 3H).
Formiranje 1-metilciklopentankarbaldehida (32a)
[02641Hladnom (-78°C) rastvoru diizobutilaluminijum hidrida (100.0 mL 1 M rastvor, 100.0 mmol) u dihlorometanu u kapima je dodat rastvor 1-metilciklopentankarbonitrila,31a,(4.3 g, 40.0 mmol) u dihlorometanu (5 mL). Reakcija je držana na -78°C trideset minuta. Kupatilo sa suvim ledom je uklonjeno i dodat je metanol (1 mL) da bi se reakcija ugasila. Dodat je rastvor kalijum natrijum tartarata (30 m L, 10% rastvor) i smeša je snažno mešana. Organski sloj je razdvojen i vodeni sloj je ekstrahovan sa dihlorometanom (3 X 20 mL). Kombinovane organske faze su isprane sa fiziološkim rastvorom, osušene preko natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovanein vacuoda bi se dobilo 3 g svetio žutog ulja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja:<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 2.04 - 1.93 (m, 2H), 1.77- 1.65 (m, 2H), 1.66 - 1.55 (m, 2H), 1.54 (m, 2H), 1.25 (s, 3H).
Formiranje etil 3-amino-3-(l-metilciklopentil)propanoata (33a)
[0265JSmeša 1-metilciklopentankarbaldehida,32a,(3.00 g, 26.75 mmol), malonske kiseline (1.29 mL, 20.00 mmol) i amonijum acetata (3.08 g, 40.00 mmol) u etanolu (5 mL) refluksovana je 12 časova. Talog je uklonjen filtracijom i ispran sa etanolom. Filtrat je korišćen bez daljeg prečišćavanja.
[0266]Sumporna kiselina (1.07 mL, 20.00 mmol) je dodata prethodnom etanolnom rastvoru i zagrevana do refluksa 2 č. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Ostatak je razblažen sa vodom (20 mL) i etrom (10 mL). Vodeni sloj je razdvojen i ispran sa etrom (10 mL). Organski slojevi su odbačeni. Vodeni sloj je neutralisan sa rastvorom natrijum hidroksida (6N) do baznog, i ekstrahovan sa etil acetatom (3x10 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa vodom (10 mL), fiziološkim rastvorom (10 mL), filtrirani, osušeni (MgS04), filtrirani i koncentrovaniin vacuoda bi se dobilo 1.5 g svetio žutog lepljivog ulja koje je po stajanju očvrsnulo. Sirovi proizvod je korišćen bez daljeg prečišćavanja: *H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 4.25 - 4.14 (q, 2H), 3.40 (bs, 2H), 3.20 - 3.09 (m, IH), 2.48 (ddd,J=26.2, 16.0, 6.6 Hz, 2H), 1.77- 1.58 (m, 4H), 1.52 (m, 2H), 1.47 - 1.32 (m, 2H), 1.25 (m, 3H), 0.94 (s, 3H).
Formiranje etil 3-((5-fluoro-2-(5-lfuoro-l-tozil-lfl-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-
il)amino)-3-(l-metilciklopentil)propanoata (34a)
[0267]Suspenzija etil 3-amino-3-(l-metilciklopentil)propanoata,33a,(0.20 g, 1.00 mmol), 5-fluoro-3-(5-lfuoro-4-metilsulfinil-pirimidin-2^^25a(0.54 g, 1.20 mmol), i iV.JV-diizopropiletilamina (0.26 mL, 1.50 mmol) u THF (14.4 mL) refluksovana je na 80°C preko noći. Nakon uklanjanja rastvaračain vacuo,sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-50% EtOAc/Heksani Gradijent) da bi se dobilo 300 mg željenog proizvoda kao svetio žuta čvrsta supstanca:<!>H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 8.49 (dd, J= 9.0, 2.8 Hz, IH), 8.46 (s, IH), 8.23( d, J=1.5 Hz,IH), 8.02 ( d, J = 8.3 Hz, 2H),7.99( d, J= 3.1 Hz, IH), 7.20 (d,J =7.8 Hz, 2H), 5.23(d, J= 8.9 Hz, IH), 4.80 (td,./ = 9.7, 3.6 Hz, IH), 4.04 (q,J =7.1 Hz, IH), 3.91 (q,J =7.1 Hz, 2H), 2.73 - 2.58 (m, IH), 2.44 ( ddj = 14.7, 9.6 Hz, IH), 2.33 - 2.21 (m, 3H), 1.72 - 1.46 (m, 7H), 1.42 - 1.31 (m, IH), 1.28(t, J=6.1 Hz, IH), 1.17(dd, J= 13.4, 6.2 Hz, 2H), 0.98 (t,J =7.1 Hz, 6H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 4.25 minuta (M+H) 584.29.
Formiranje etil 3-((5-fluoro-2-(5-lfuoro-l-tozil-l//-pirolo|2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-
il)amino)-3-(l-metilciklopentil)propanoata (14,15)
[0268]U rastvor etil 3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l/V-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-3-(l-metilciklopentil)propanoata,34a,(0.16 g, 0.27 mmol) u THF (6 mL) dodat je LiOH (1.50 mL 1 M rastvor, 1.50 mmol). Reakciona smeša je zračena u mikrotalasnom reaktoru 30 minuta na 130°C. Zasićeni vodeni rastvor NH4CI je dodat da acidifikuje smešu. Rezultujući beli talog je sakupljen i ispran vodom, acetonitrilom i etrom. Čvrsta supstanca je zatim osušenain vacuoda bi se dobila čista željena kiselina. Čvrstoj supstanci je dodata hlorovodonična kiselina (2 mL IN rastvor) i smeša je liofilizovana da bi se dobilo 120 mg željenog proizvoda kao hidrohloridna so (svetio žuti prah):<l>RNMR (400 MHz, MeOD) 5 8.64( d, J =9.3 Hz, IH), 8.14 (d,J= 8.3 Hz, 2H), 7.97 (d,J =3.6 Hz, IH), 4.99( d, J =6.3 Hz, IH), 3.37 (s, IH), 2.75 (dd, J = 14.9, 3.6 Hz, IH), 2.55 (dd, ./= 14.8, 9.7 Hz, IH), 1.83 - 1.57 (m, 6H), 1.54 - 1.42 (m, IH), 1.37 (dd, J= 11.9, 5.6 Hz, IH), 1.11 (d,J=19.2 Hz, 3H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 2.10 minuta (M+H) 401.94.
[0269]Racemska smeša karboksilnih kiselina podvrgnuta je SFC hiralnom razdvajanju da bi se dobili pojedinačni enatiomeri, 14 i 15.
Priprema Jedinjenja 20 i 23
[02701
(a) etil-2-triienilfosforanilidenacetat, CH2C12; (b) 5-fluoro-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)-l-tozil-17<y->pirolo[2,3-b]piridin,7a,vod. K3P04, 2-Me-THF, H20, Xphos, Pd2(dba)3; (c) H2, 10% Pd/C, MeOH; (d) CH3CN, 4N HCL/Dioksan
Formiranje (/f,£)-etil 4-((2-hloro-5-fluoropirimidin-4-il)amino)-5,5-dimetilheks-2-enoata
(37a)
[0271]U rastvor (5)-2-((2-hloro-541uoropirimidin-4-il)amino)-3,3-dimetilbutanala,15a,(0.45 g, 1.84 mmol) u dihlorometanu (9.0 mL) dodat je etil 2-trifenilfosforanilidenacetat (0.96 g, 2.75 mmol). Nakon ostavljanja da se reakciona smeša meša na sobnoj temperaturi preko noći, oko polovine rastvarača je uklonjeno pod sniženim pritiskom. Preostala sirova smeša je prečišćena direktnim punjenjem na kolonu silika gela (0-100% EtOAc/heksani) da bi se dobilo 535 mg željenog proizvoda: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1 % mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 3.41 minuta (M+H) 316.32.
Formiranje( R, E)- etft4-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l/f-pirolo[2,3-b]piridin-3-
il)pirimidin-4-il)amino)-5,5-dimetilheks-2-enoata (38a)
[0272]K3P04(1.078 g, 5.079 mmol) je rastvoren u vodi (3.2 mL) i dodat u rastvor (i?,£)-etil 4-((2-hloro-5-fluoropirimidin-4-il)amino)-5,5-dimetilheks-2-enoata,37a,(0.534 g, 1.693 mmol) u 2-metil-THF (10.7 mL) i smeša je prečišćena sa azotom 30 minuta. Dodat je 5-fluoro-l-(p-tolilsulfonil)-3-(4,^
7a,(0.775 g, 1.862 mmol) i prečišćavanje azotom je nastavljeno dodatnih 15 min. Dodati su X-Phos (0.048 g, 0.102 mmol) i Pd2(dba)3(0.031 g, 0.034 mmol) i smeša je zagrevana na 80°C preko noći. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Slojevi su razdvojeni i organska faza je isprana sa fiziološkim rastvorom, osušena preko MgS04, filtrirana i uparena do sušenja. Sirovi ostatak je rastvoren u minimalnoj zapremini dihlorometana i prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-100% EtOAc/heksani Gradijent) da bi se dobilo 650 mg željenog proizvoda:<J>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.57 - 8.38 (m, 2H), 8.30 (s, IH), 8.11( dd, J =10.5, 5.5 Hz, 3H), 7.08 (dt,J =36.7,18.3 Hz, IH), 6.01( d, J= 15.7 Hz, IH), 5.11( d, J=8.7 Hz, IH), 4.97 - 4.77 (m, IH), 4.19(q, J=7.1 Hz, 2H), 2.39 (d,J=10.7 Hz, 3H), 1.27(q, J = 1AHz, 4H), 1.10 (s, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 3.99 minuta (M+H) 570.01.
Formiranje (/?)-etil 4-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l^-pirolo[2,3-bJpiridin-3-
il)pirimidin-4-il)amino)-5,5-dimetilheksanoata (39a)
[0273]U azotom prečišćenu bocu napunjenu sa 10% PdVC (0.033 g, 0.310 mmol) dodato je dovoljno metanola da bi se pokrio katalizator. Ovoj smeši je dodat rastvor (/?,£)-etil 4-((5-fluoro-2-(5-fluoro-1 -tozil- l//-pirolo [2,3 -b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-5,5-dimetilheks-2-enoata,38a,(0.330 g, 0.579 mmol) u MeOH. Napomena, mala količina EtOAc je dodata da bi se potpuno solubilizovao početni materijal. Reakciona smeša je zatim mešana pod 1 atmosferom vodonika 3 časa. LCMS pokazuje prisustvo značajnih količina početnog materijala. Sadržaj reakcione smeše je prenesen u bocu pod pritiskom koja sadrži svež izvor paladijuma (0.033 g, 0.310 mmol). Reakciona smeša je mešana u boci za Parr hidrogenizaciju pod 46 psi vodonika preko noći. Smeša je razblažena sa metanolom i filtrirana kroz celit. Filtrat je koncentrovanin vacuoda bi se dobilo 331 mg željenog proizvoda koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1 % mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 3.75 minuta (M+H) 572.35.
Formiranje (y?)-4-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirolo [2,3-b] piridin-3-il)pirimidin-4-
il)amino)-5,5-dimetilheksanske kiseline (20)
[0274]U rastvor (i?)-etil 4-((5-fluoro-2-(5-fhioro-l-tozil- l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-5,5-dimetilheksanoata,39a,(0.30 g, 0.53 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodata je HC1 (0.70 mL 4 M rastvor u dioksanu, 2.80 mmol). Reakciona smeša je mešana na 60°C 3 časa i zatim zagrevana do 80°C 6 časova da bi se završila reakcija. Nakon hlađenja do sobne temperature, smeša je zatim mešana preko noći. LCMS je pokazao da je preostao početni materijal. Dodata je sveza HC1 (0.7 mL 4 M rastvor u dioksanu, 2.80 mmol) i smeša je zagrevana do 80°C preko noći. Sve isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom i ostatak je razblažen sa EtOAc i zasićenim vodenim rastvorom NaIIC03. Slojevi su razdvojeni i organska faza je isprana sa fiziološkim rastvorom, osušena preko MgS04, filtrirana i uparena do sušenja. Sirovi ostatak je prečišćen sa hromatografijom na silika gelu (0-100% EtOAc/heksani Gradijent) da bi se dobilo 144 mg (tf)-etil 4-((5-fluoro-2-(5-fluoro-lH-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-5,5-dimetilheksanoata,23,i 29 mg( R)- 4-((5 -fluoro-2-(5 -fluoro- l//-pirolo [2,3 -b]piridin-3 -il)pirimidin-4-il)amino)-5,5 - dimetilheksanske kiseline, 20. Spektralni podaci 20:<l>H NMR (400 MHz, DMSO) 5 12.23 (s, IH), 11.93 (s, IH), 8.48( d, J=9.9 Hz, IH), 8.33 - 8.07 (m, 3H), 7.18( d, J=9.3 Hz, IH), 4.39(t, J=10.2 Hz, IH), 2.38 - 2.07 (m, 2H), 1.99 - 1.92 (m, IH), 1.80 - 1.64 (m, IH), 1.00(d, J =20.2 Hz, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 2.14 minuta (M+H) 390.06.
Priprema Jedinjenja 59
[0275]
Formiranje (/f,£)-4-((5-fluoro-2-(5-fluoro-li/-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-5,5-dimetilheks-2-enoinske kiseline (59)
[0276]Početni etil estar,42a,pripremljen je na isti način kao enantiomerni etil estar,38a,prikazan na Šemi sinteze 7.
[0277]U rastvor (5,£)-etil 4-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-5,5-dimetilheks-2-enoata,42a,(0.064 g, 0.112 mmol) u dioksanu (2 mL) dodat je LiOH (2 mL 2N rastvor). Nakon zagrevanja do 100°C 2 časa, smeša je acidifikovana do pH 6 sa 2N HC1. Vodena faza je ekstrahovana sa etil acetatom (3x), osušena (MgSO-4), filtrirana i koncentrovanain vacuo.Rezultujući ostatak je prečišćen preko preparativne IIPLC (CH3CN/H2O - TFA modifikator) da bi se dobilo 35 mg željenog proizvoda kao TFA-so:<*>H NMR (300 MHz, MeOD) 5 8.54 (s, IH), 8.50 - 8.18 (m, 3H), 7.18 (dd, J = 15.7, 7.1 Hz, IH), 6.08 (dd, J = 15.7, 1.3 Hz, IH), 5.21 (t, J = 22.5 Hz, IH), 1.12 (s, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, (M+H) 388.23.
Pripremanje Jedinjenja 44
[0278]
(a) Piridinijum hlorohromat, CH2CI2; (b) etil-2-trifenil-fosforanilidenacetat, CH2CI2; (c)N-benzilhidroksilamin, Et3N, CH2Cl2(d) H2, paladijum hidroksid, EtOH (e) diazometil-trimetilsilan, MeOH, benzen (f) 2,4-dililoro-5-fluoro-pirimidin, Et3N, THF, EtOH (g) 5-nuoro-3-(4,4,5,5-tetranietil-l,3,2-dioksaborolan-2-i])-]-tozil-17/-pirolo[2,3-b]piridin,7a,vod. K3PO4, 2-Me-THF, H20, X-Phos, Pd2(dba)3, 80°C; (h) MeOH, NaOMe (i) vod. NaOH, THF, MeOH
Formiranje ciklobutankarbaldehida (45a)
[0279]Mešanoj suspenziji piridinijum hlorohromata (14.9 g, 69.1 mmol) u dihlorometanu (150 mL) dodat je rastvor ciklobutilmetanola (4.0 g, 46.4 mmol) u dihlorometanu (60 mL). Reakciona smeša je pocmela za nekoliko minuta i dozvoljeno je da se meša na sobnoj temperaturi 1 čas. Smeša je razblažena sa dietil etrom (500 mL) i filtrirana kroz sloj llorisila (100-200 sito). Sirovi materijal je korišćen bez daljeg prečišćavanja. Napomena: proizvod je isparljiv, rastvarač je prenesen sa proizvodom u sledeći korak.
Formiranje (£)-etil 3-ciklobutilakrilata (46a)
[0280]Etil 2-trifenilfosforanilidenacetat (9.32 g, 26.74 mmol) je dodat u rastvor ciklobutankarbaldehida,45a,(1.50 g, 17.83 mmol) u dihlorometanu (30 mL). Reakciona smeša je kratko prečišćena sa azotom i poklopljena i dozvoljeno je da se meša na sobnoj temperaturi preko noći. Sve isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u Et20 (100 mL) i heksanima (25mL). Rezultujući roze talog je otfiltriran i odbačen. Rastvarač je uklonjen iz filtrata pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-20% EtOAc/Heksani Gradijent) da bi se dobilo 646 mg (23%) željenog proizvoda:<*>H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 7.05 (dd,J=15.6, 6.8 Hz, IH), 5.73 (dd,J =15.6, 1.4 Hz, IH), 4.29 - 4.09 (m, 2H), 3.20 - 2.98 (m, IH), 2.28 - 2.09 (m, 2H), 2.04 - 1.78 (m, 4H), 1.36-1.18 (m, 3H).
Formiranje 2-benzil-3-ciklobutilizoksazolidin-5-ona (47a)
[0281]N-benzilhdroksilamin hidrohlorid (0.77 g, 4.82 mmol) i trietilamin (0.76 mL, 5.45 mmol) su sukcesivno dodati u rastvor (£)-etil 3-ciklobutilakrilata,46a,(0.65 g, 4.19 mmol) u suvom dihlorometanu (23.5 mL). Dozvoljeno je da se reakciona smeša meša na sobnoj temperaturi pod atmosferom azota 3 dana. Smeša je razblažena sa 75 mL vode i slojevi su razdvojeni. Vodena faza je re-ekstrahovana još dva puta sa dihlorometanom (50 mL). Kombinovane organske faze su osušene preko MgS04, filtrirane i uparene do sušenja. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-100% EtOAc/Heksans Gradijent) da bi se dobilo 834 mg (86%) željenog proizvoda: 'H NMR (400 MHz, CDC13) 5 7.38 - 7.26 (m, 5H), 4.64 (s, IH), 3.82 (q, J = 13.5 Hz, 2H), 3.37 - 3.18 (m, IH), 2.80 - 2.52 (m, 2H), 2.33( dd, J=14.5, 5.1 Hz, IH), 2.22 - 2.09 (m, IH), 2.01 - 1.68 (m, 5H).
Formiranje (+/-)-3-amino-3-ciklobutilpropionskekiseline(48a)
[0282J Dihidroksipaladijum (0.252 g, 1.794 mmol) je napunjen u bocu i ispran sa azotom. Etanol (30 mL) je dodat i zatim rastvor 2-benzil-3-ciklobutil-izoksazolidin-5-ona,47a,(0.834 g, 3.605 mmol) u oko 90 mL etanola. Reakciona smeša je podvrgnuta 50 psi vodonika 4 časa. Pritisak je ventilisan i katalizator je otfiltriran. Sve isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. JH NMR pokazuje prisustvo početnog materijala,47a.Smeša je rastvorena u oko 100 mL MeOH i dodata u 83 mg 10%Pd'C koji je ovlažen sa 20 mL MeOH. Smeša je podvrgnuta 50 psi H:preko noći. Pritisak je ventilisan i katalizator je otfiltriran. Sve isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 340 mg proizvod. Rezultujući sirovi ostatak je korišćen bez daljeg prečišćavanja:<!>H NMR (400 MHz,df,-DMSO) 5 3.06 - 2.83 (m, IH), 2.28 (ddd,J= 23.7, 11.8, 7.7 Hz, IH), 2.19 - 1.99 (m, 2H), 1.99- 1.56 (m, 6H).
Formiranje (+/-)-metil 3-amiiio-3-ciklobutilpropanoata (49a)
[02831FJ rastvor racemata 3-amino-3-ciklobutil-propionske kiseline,48a,(0.34 g, 2.38 mmol) u MeOH (10.2 mL) i benzena (10.2 mL) dodat je diazometiltrimetil-silan (3.56 mL 2 M rastvora, 7.13 mmol) i dozvoljeno je da se reakciona smeša meša na sobnoj temperaturi pod atmosferom azota preko noći. Smeša je razblažena sa EtOAc i fiziološkim rastvorom. Slojevi su razdvojeni i organska faza je sušena (MgS04), filtrirana i koncentrovanain vacuoda bi se dobilo 354 mg (95%) sirovog proizvoda koji je korišćen bez dodatnog prečišćavanja: 'h NMR (400 MHz, CDCI3) 8 3.71 - 3.66 (m, 3H), 3.18 - 2.98 (m, IH), 2.46 - 2.32 (rn, 2H), 2.27 - 1.63 (m, 10H).
Formiranje metil (+/-)-3-((2-hloro-5-fluoropirimidin-4-il)amino)-3-ciklobutilpropanoata
(50a)
[0284]Racem.sk.om rastvoru metil 3-amino-3-ciklobutilpropanoata,49a,(0.354 g, 2.252 mmol) i 2,4-dihloro-5-fluoro-pirimidina (0.414 g, 2.477 mmol) u THF (10 mL) i etanolu (1 mL) dodat je trietilamin (0.628 mL, 4.504 mmol). Reakciona smeša je zagrevana i mešana na 70°C 5 časova. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovanin vacuodo oko 5 mL finalne zapremine. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-100% EtOAC/heksani Gradijent) da bi se dobilo 289 mg (45%) željenog proizvoda:<L>H NMR (300 MHz, CDC13) 5 7.87 (s, IH), 5.80 (s, IH), 4.71 - 4.38 (m, IH), 3.68 (s, 3H), 2.84 - 2.37 (m, 3H), 2.23 - 1.67 (m, 6H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 3.08 minuta (M+H) 287.98.
Formiranje (+/-)-3-ciklobutil-3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolol2,3-b]piridin-3-
il)pirimidin-4-il)amino)propanoata (51a)
[0285]Rastvor trikalijum fosfata (0.640 g, 3.021 mmol) u vodi (1.735 mL) dodat je rastvoru racemata metil 3-[(2-hloro-5-fluoro-pirimidin-4-il)amino]-3-ciklobutil-propanoata,50a,(0.289 g, 1.005 mmol) u 2-metiltetrahidrofuranu (5.782 mL). Smeša je zatim prečišćena sa azotom 20 minuta. Dodat je 5-fluoro-l-(/?-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridin, 7a, (0.460 g, 1.106 mmol) i smeša je prečišćena sa azotom dodatnih 10 minuta. Dodati su dicikloheksil-[2-(2,4,6-triizopropilfenil)fenil]fosfan (X-Phos: 0.029 g, 0.060 mmol) i Pd2{dba}3(0.018 g, 0.020 mmol) i reakciona smeša je zagrejana do 80°C i mešana na ovoj temperaturi 5 časova. Dozvoljeno je da se smeša hladi do sobne temperature. Reakciona smeša je razblažena sa vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Slojevi su razdvojeni i organska faza je isprana sa fiziološkim rastvorom, osušena preko MgS04, filtrirana i uparena do sušenja. Sirova supstanca je rastvorena u minimalnoj zapremini dihlorometana i prečišćena preko hromato grafije na silika gelu (0-100%EtOAc/Heksani).da bi se dobilo 385 mg (71%) željenog proizvoda: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 3.68 minuta (M+H) 542.27.
Formiranje (+/-)-metil 3-ciklobutil-3-((5-fluoro-2-(5-lfuoro-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-
il)pirimidin-4-il)amino)propanoata (52a)
[0286]Racemskom rastvoru metil 3-ciklobutil-3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-A]piridin-3-il)pirimidin-4-i])amino)proparioata,51a,(0.151 g, 0.280 mmol) u metanom (1.5 mL) dodat je NaOMe (1.5 mL of 25 % tež/zapr rastvora, 6.941 mmol). Nakon mešanja reakcione smeše na sobnoj temperaturi 5 minuta, smeša je ugašena sa zasićenim vodenim rastvorom NH4CI i razblažena sa EtOAc i vodom. Slojevi su razdvojeni i organska faza je isprana sa fiziološkim rastvorom, osušena (MgS04), filtrirana i uparena do sušenja. Rezultujući sirovi ostatak je rastvoren u minimalnoj zapremini dihlorometana i prečišćen preko hromatografije na silika gelu (0-100%EtOAc/Heksani Gradijent) da bi se dobilo 108 mg željenog proizvoda: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 2.29 minuta (M+H) 388.07.
Formiranje (+/-)-3-ciklobutil-3-((5-lfuoro-2-(5-fluoro-l^-pirolo[2,3-A]piridin-3-
il)pirimidin-4-il)amino)popionske kiseline (44)
[0287]Racemskom rastvoru metil 3-ciklobutil-3-((5-fluoro-2-(5-ftuoro-l//-pirolo[2,3-i]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)propanoata (0.042 g, 0.109 mmol) u THF (1.5 mL) i MeOH (0.5 mL) dodat je NaOH (0.300 mL 2 M rastvor, 0.600 mmol) i reakciona smeša je zagrejana do 50°C. Nakon mešanja reakcione smeše 1 čas, smeša je razblažena sa zasićenim vodenim rastvorom NH4CI i EtOAc. Organski sloj je sušen (MgS04), filtriran i uparen do sušenja da bi se dobilo 36 mg željenog proizvoda koji je kori šćen bez dodatnog prečišćavanja:<!>H NMR (400 MHz, rf6-DMSO) 5 12.26 (s, 2H), 8.55 (d, /= 9.7 Hz, IH), 8.19 (dd,J =45.1, 15.8 Hz, 3H), 7.48 (d,J =8.1 Hz, IH), 4.79 (s, IH), 2.58 (dd,J =20.6, 12.2 Hz, 2H), 1.85 (ddd,J =29.4, 26.5, 21.1 Hz, 7H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 2.10 minuta (M+H) 374.02.
Priprema Jedinjenja 10 . 11 . 19 . 21 . 22 , 32 . 33 . 34 . 35 , 38 . 39 . 40 , 49 . 57 , i 58
[0288] (a) 5-nuoro-l-(p-tolilsulfonil)-^^ b]piridin, 7a, K3P04, X-Phos, Pd2(dba)3, 2-MeTHF, voda, 120°C: (b) MsCl. CH2C12; (c) KOAc, DMF, 80°C; (d) 30% H202, HCOOH, RT, 2 č; (e) oksalil hlorid, DMF, CH2C12; (f) (i) metilamin, THF (ii) 4M HC1, CH3CN, 65°C.
(5)-2-(5-tluoro-2-(5-tluoro-l-tozil-l//-pirolo [2,3-b] piridin-3-il)piridin-4-ilamino)-3,3-
dimetilbutan-l-ol (54a).
[0289]Smeša 5-fluoro-l-(>-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridina, 7a, (11.09 g, 26.64 mmol), (5)-2-((2-hloro-5-fl.uoropirimidin-4-il)amino)-3,3-dimetilbutan-l-ola,14a,(6.00 g, 24.22 mmol) i K3P04(15.42 g, 72.66 mmol) u 2-metil THF (90 mL) i vodi (12.00 mL) je prečišćena sa azotom 30 minuta. Dodati su X-Phos (0.92 g, 1.94 mmol) i Pd2(dba)3(0.44 g, 0.48 mmol) i reakciona smeša je zagrevana do 120°C u vijalici pod pritiskom 2 č. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana i koncentrovanain vacuo.Ostatak je rastvoren u EtOAc (100 mL) i ispran vodom. Organski sloj je sušen (MgS04), filtriran i koncentrovanin vacuo.Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-40% EtOAc/Heksani Gradijent) da bi se dobilo 10 g željenog proizvoda kao penasta čvrsta supstanca: 'h NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.54 -8.40
(m, 2H), 8.22 (s, IH), 8.09 - 8.00 (m, 3H), 7.29- 7.16 (m, 2H), 5.15 (m, IH), 4.32 - 4.14 (m, IH), 3.98 (m, IH), 3.70 (m, IH), 2.30 (s, 3H), 1.01 (m, 9H); LC/MS (60-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA, C4)m/ z502.43 (M+H) RT = 1.52 min.
(S)-2-(5-tluoro-2-(5-tluoro-l-tozil-l//-pirolo [2,3-b] piridin-3-il)piridin-4-ilamino)-3,3-dimetilbutil metansulfonat (55a).
[0290] Metansulfonil hlorid (1.83 mL, 23.67 mmol) je dodat hladnom (0°C) rastvoru( S)- 2-( 5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l/7-pirolo[2,3-b] piridin-3-il)piridin-4-ilamino)-3,3-dimetilbutan-l-ola, 54a, (9.50 g, 18.94 mmol) i trietilamina (3.30 mL, 23.67 mmol) u dihlorometanu (118 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je razblažen sa vodom (100 mL) i EtOAc (200 mL). Organski sloj je razdvojen, osušen (MgS04), filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 10.5 g željenog proizvoda kao bledo žuta pena: LC/MS (60-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA, C4)m/ z580.41 (M+H) RT = 2.00 minuta. (5)-2-(5-fluoro-2-(5-lfuoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b|piridin-3-il)piridin-4-ilamino)-3,3-dimetilbutil etantioat (56a).
[0291] U rastvor (5)-2-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-17<y->pirolo[2,3-b] piridin-3-il)piridin-4-ilamino)-3,3-dimetilbutil metansulfonata, 55a, (10.5 g, 18.11 mmol) u suvom DMF (200 mL) dodat je kalijum tioacetat (3.1 g, 27.1 mmol). Braon rastvor je zagrevan sa mešanjem na 80°C 1 čas. Gusta braon suspenzija je sipana u vodu i ekstrahovana sa EtOAc (3x 100 mL). Kombinovane organske faze su osušene (MgS04), filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen na hromatografiji na silika gelu (0-30% EtOAc/Heksani Gradijent) da bi se dobilo 6.8 g željenog proizvoda, 56a, kao bledo braon čvrsta supstanca:<J>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.41 (m, 2H), 8.23 (s, IH), 8.01 (m, 3H), 7.23 -7.16 (m, 2H), 4.99(d, J=10.1 Hz, IH), 4.37 (m, IH), 3.21(dd, J =13.8,2.3 Hz, IH), 3.09 - 2.95 (m, IH), 2.31 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 1.02 (s,9H); LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)m/ z560.99 (M+H) RT = 4.14 minuta. (5)-2-(5-tluoro-2-(5-tluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)piridin-4-ilamino)-3,3-dimetilbutan-l-sulfonska kiselina (57a).
[0292]Hladnom (0°C) rastvoru mravlje kiseline (103.4 mL, 2.7 mol) dodat je H202(34.2 mL 30% rastvor, 0.3 mol). Rastvor je mešan na 0°C 1 čas. U kapima je dodat rastvor ( S)- 2-( 5-fluoro-2-(5 -fluoro-1 -tozil-1 //-pirolo [2,3 -b]piridin-3-il)piridin-4-ilamino)-3,3-dimetilbutil etantioata, 56a, (6.7 g, 12.0 mmol) u mravljoj kiselini (20.0 mL). Rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa da bi se dobio žuti rastvor. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da bi se dobio željeni proizvod kao penasta bledo žuta čvrsta supstanca koja je korišćena bez dodatnog prečišćavanja:<!>H NMR (400 MHz, MeOD) 5 8.72 (m, 2H), 8.31 (s, IH), 8.21 (d,J= 4.8 Hz, IH), 8.06 (d,J =8.1 Hz, 2H), 7.39 (d,J =8.0 Hz, 2H), 5.08 (d,J=10.0 Hz,lH), 3.19 (m, 2H), 2.36 (s, 3H), 1.04(m, 9H); LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% TFA, C18)mlz566.0 (M+H) RT = 2.66 minuta.
(5)-2-(5-fluoro-2-(5-lfuoro-l-tozil-lff-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)piridin-4-ilamino)-3,3-
dimetilbutan-l-sulfonil hlorid (58a).
[0293]Oksalil hlorid (3.5 mL, 38.7 mmol) je dodat u rastvor (5)-2-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l-lozil-l/^-pirolo[2,3-b]piridin-3il)piridin-4-ilamino)-3,3-dimetilbutan-l-sulfonske kiseline, 57a, (7.3 g, 12.9 mmol) u dihlorometanu (130 mL), nakon čega je polako, u kapima dodat DMF (2 mL). Žuto obojeni rastvor mešan je na sobnoj temperaturi 1 čas. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 8.4 g željenog proizvoda kao penasta žuta čvrsta supstanca: LC/MS (60-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz585.72 (M+H) RT = 2.30 minuta.
(5)-2-(5-tluoro-2-(5-tluoro-l/7-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4ilamino)-7V,3,3-trimetilbutan-l-sulfonamid (19)
[0294]Metilamin (0.75 mL 2M rastvora, 1.53 mmol) dodat je u rastvor f^-2-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-li7-piro]o[2,3-b] piridin-3-il)piridin-4-ilamino)-3,3-dimetilbutan-l-sulfonil hlorida, 58a, (0.15 g, 0.26 mmol) u THF (1 mL). Rastvor je mešan 1 čas na sobnoj temperaturi i rastvarač je zatim uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirovi sulfonamid je rastvoren u acetonitrilu (3 mL) i dodat je HC1 (2 mL 4M rastvora u dioksanu). Smeša je zagrevana na 65°C 3 časa i zatim ohlađena do sobne temperature. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i rezultujući čvrsti ostatak je prečišćen preparativnom HPLC hromatografijom (10-80% CH3CN/voda, 0.5% TFA, 15 min) da bi se dobilo 26 mg željenog proizvoda kao bela čvrsta supstanca: 'H NMR (400 MHz, CDC13) 5 9.75 (s, IH), 8.12( d, J =9.3 Hz, IH), 7.94 (s, IH), 7.73 (s, 2H), 7.67 (brs, IH), 4.93 - 4.78 (m, 2H), 3.08 (m, IH), 2.76 (s, 3H), 0.99 (m,9H); LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)m/ z425.3 (M+H), RT = 2.0 minuta.
[0295] Sledeća jedinjenja mogu se pripremiti na sličan način kao u prethodno opisanoj proceduri za Jedinjenje19:
(,5)-N-Ciklopropil-2-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l/T-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-
ilamino)-3,3-dimetilbutan-l-sulfonamid (21)
[0296]'HNMR (400 MHz, CDC13) S 8.68 (dd,J=9.6, 2.5 Hz, IH), 8.24 - 8.11 (m, 2H), 8.03 (d,J=3.8 Hz, IH), 5.12( d, J =8.5 Hz, IH), 3.48( d, J= 9.2 Hz, 2H), 2.60 - 2.47 (m, IH), 1.13 (s, 9H), 0.68 - 0.48 (m, 4H): LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)rniz451.14 (M+H) RT = 2.2 minuta.
(5)-2-(5-Fluoro-2-(5-lfuoro-l/r-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-ilamino)-iV-(2-
metoksietil)-3,3-dimetilbutan-l-sulfonamid (35)
[0297] LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz469.28 (M+H) RT = 2.11 minuta.
(S)-2-(5-Fluoro-2-(5-lfuoro-17/-pirolof2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-ilamino)-3,3-dimetil-A<r->propilbutan-l-sulfonamid (34)
[0298]<l>UNMR (400 MHz, CDC13) 5 9.84 (s, IH), 8.10(d, J =9.5 Hz, IH), 7.92 (d,J = 1.2Hz, IH), 7.72( d, J =14.2 Hz, 2H), 4.92 (m, IH), 4.81 (m, IH), 3.41( d, J =15.0 Hz, IH), 3.19 - 2.84 (m, 3H), 1.59 - 1.38 (m, 3H), 0.98 (s, 9H), 0.84 (t, J= 7.4 Hz, 3H): LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz453.44 (M+H) RT = 2.42 minuta.
(5)-2-(5-Fluoro-2-(5-fluoro-l/^-pirolol2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-ilamino)-A"-
izopropil-3,3-dimetil-jV-propilbiitan-l-sulfonamid (39)
[0299]<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 9.89 (s, IH), 8.07 (d,J=8.9 Hz, IH), 7.90 (s, IH), 7.68 (s, 2H), 4.96(t, J =9.8 Hz, IH), 4.76 (d,J =9.8 Hz, IH), 3.60 (dd,J= 13.0, 6.6 Hz, IH), 3.42 (m, IH), 3.09 - 2.86 (m, IH), 1.20( d, J=4.9 Hz, 6H), 0.97 (s, 9H); LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz453.19 (M+H) RT = 2.22 minuta.
(5)-2-(5-Fluoro-2-(5-lfuoro-l W-<p>irolo[2,3-b]<p>iridin-3-il)<p>irimidin-4-ilamino)-A"-^rc-
butil-3,3-dimetil-A^-propilbutan-l-sulfonamid (40)
[0300] LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz467.20 (M+H) RT = 2.36 minuta.
^5)-jV-Etil-2-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l^-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)piirmidin-4-ilamino)-3,3-dimetilbutan-l-sulfonamid (33)
[0301]<*>H NMR (400 MHz, CDCU) 5 9.89 (brs, IH), 8.07 (d,J=9.3 Hz, IH), 7.89 (s, IH), 7.66 (m, 2H), 4.95 (t, J= 10.2 Hz, IH), 4.80 (d, J = 9.6 Hz, IH), 3.38 (m, IH), 3.18 - 2.96 (m, 3H), 1.35 - 1.12 (m, 3H), 0.90 (m, 9H); LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz439.30 (M+H) RT = 2.25 minuta.
(5)-j\-(2,2-difluoroetil)-2-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirolo[2,3-A]piridin-3-il)pirimidin-4-
ilamino)-3,3-dimetUbutan-l-sulfonamid (57)
[0302]<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.05 (d,J =7.9 Hz, IH), 7.81 (d,J =2.1 Hz, IH), 7.63 (s, IH), 7.55 (s, IH), 5.87 (t,J =54.9 Hz, IH), 5.03 (t,J =10.4 Hz, IH), 4.86 (m, IH), 3.68 (brs, IH), 3.43 (m, 2H), 3.19 (m, IH), 0.94 (s, 9H); LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz475.23 (M+H) RT = 2.26 minuta.
(5)-2-(5-fluoro-2-(5-lfuoro-l^-pirolo[2,3-6]piridin-3-il)pirimidin-4-ilamino)-3,3-dimetil-A<r->(2,2,2-trinuoroetil)butan-l-sulfonamid (58)
[0303]<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.03 (dd,J=9.3, 2.4 Hz, I H), 7.82 (t,J=11.2 Hz, I H), 7.59 (s, IH), 7.46 (s, IH), 5.07 (t,J =10.6 Hz, IH), 4.77 (m, IH), 3.45 (m, IH), 3.16 - 2.99 (m, IH), 0.97 - 0.86 (m, 9H); LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz493.31 (M+H) RT = 2.37 minuta.
(5)-2-(5-lfuoro-2-(5-fluoro-l//-pirolol23-^]piridin-3-il)pirimidin-4-ilamiiio)-3,3-
dimetilbutan-l-sulfonamid (22)
[0304] Koncentrovani NH4OH (1.0 mL, 25.7 mmol) je dodat u kapima u rastvor (5)-2-(5-maoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b] piridin-3-il)piridin-4-ilamino)-3,3-dimetilbutan-l-sulfonil hlorid, 58a, (0.3 g, 0.5 mmol) u THF (3 mL). Reakciona smeša je mešana 15 minuta na sobnoj temperaturi, rezultirajući u 1-prema-1 smeši željenog sulfonamida i sulfonske kiseline. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatogralijom na silika gelu (0-70% EtOAc/Heksani Gradijent) da bi se dobilo 93 mg tozilovanog sulfonamidnog intermedijera kao penasta čvrsta supstanca.
[0305] Tozilovani sulfonamid (93 mg) je rastvoren u THF (10 mL) i dodat je rastvor NaOMe (0.15 mL 25% rastvoru u MeOH, 0.66 mmol). Rezultujući žuti rastvor mešan je na sobnoj temperaturi 15 minuta i zatim je razblažen u zasićenom vodenom rastvoru NH4CI (5 mL). Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u vodi (10 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3x10 mL) i osušen (MgS04), filtriran, i koncentrovanin vacuo.Sirovi ostatak je prečišćen sa HPLC preparativnom hromatografijom (10-80% CHsCN/voda, 0.5% TFA, 15 min) da bi se dobilo 40 mg željenog proizvoda, 22, kao bela čvrsta supstanca:<*>H NMR (400 MHz, MeOD) 5 8.65 (d,J=9.3,IH), 8.47 (s, IH), 8.34 (m, 2H), 5.28 (d,J =10.4 Hz, IH), 3.55 (m, 2H), 1.10 (m, 9H); LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz411.0,1.96 (M+H) RT = 1.96 minuta. (/f)-2-((5-lfuoro-2-(5-fluoro-l/Y-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-i])amino)-Ar,3,3-trimetilbutan-l-sulfonamid (38) [03061<l>H NMR (300 MHz, *fc-DMSO) 5 12.21 (s, IH), 8.55 (dd,J=10.0, 2.8 Hz, IH), 8.29 - 8.23 (m, IH), 8.19 (d, J= 2.7 Hz,IH), 8.15 (d, J= 4.0 Hz,IH), 7.47(d,J=8.4Hz, IH), 6.77 - 6.69 (m, IH), 4.88 (t,J=9.1 Hz, IH), 3.49 - 3.36 (m, IH), 3.36 - 3.28( m, J=10.5 Hz, IH), 2.55 (t,J =5.6 Hz, 3H), 0.98 (s, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 2.11 minuta (M+H) 425.03.
(5)-2-(5-tluoro-2-(5-tluoro-l^-pirolo[2,3-6]piridin-3-il)pirimidin-4-ilamino)-3,3-
dimetilbutan-l-ol (32)
[0307] Alkohol, 32, sintetisan je na sličan način kao jedinjenje 70a korišćenjem iste procedure za deprotekciju, počinjući od jedinjenja 54a:<!>H NM R (400 MHz, CDCL) 8 10.77 (brs, IH), 8.25 (d,J =8.4 Hz, IH), 8.07 (s,lH), 8.03 (s, IH), 7.88 (s, IH), 5.59 (brs, IH), 4.36 (t,J =8.3 Hz, 2H), 4.11 (m, IH), 3.72 (m, 2H), 1.06 (s, 9H); LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz348.13 (M+H) RT = 1.83 minuta.
(5)-2-((2-(5-hloro-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-U)-5-lfuoropirimidin-4-il)amino)-3,3-
dimetilbutan-l-ol (49)
[0308]Alkohol, 49, sintetisan je na sličan način kao jedinjenje 32:<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 10.77 (brs, IH), 8.25( d, J =8.4 Hz, IH), 8.07 (s,lH), 8.03 (s, IH), 7.88 (s, IH), 5.59 (brs, IH), 4.36 (t,J=8.3 Hz, 2H), 4.11 (m, IH), 3.72 (m, 2H), 1.06 (s, 9H); LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz348.13 (M+H) RT = 1.83 minuta.
(5)-2-(5-fluoro-2-(5-lfuoro-l/T-pirolo[2,3-ž»]piridin-3-il)piriniidin-4-ilamino)-3,3-
dimetilbutan-1-sultanska kiselina (11)
[0309]Sulfonska kiselina,11,sintetisana je na sličan način kao prethodno opisano Jedinjenje25,korišćenjem jedinjenja, 57a, kao početnog materijala:<!>H NMR (400 MHz, MeOD) 5 8.44 (s, IH), 8.34 (dd, ./= 9.2, 2.6 Hz,IH), 8.22 (d, J= 5.7 Hz,IH), 8.13 (s, IH), 5.16( d, J = 4.1Hz, IH), 3.46 - 3.33 (m, 2H), 1.10 (d, 9H); LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% TFA, C18)mlz412.19 (M+H) Retenciono vreme = 1.91 minuta.
(5)-2-((2-(5-hloro-l^-pirolo[2,3-b]piridin-3-U)-5-lfuoropirimidin-4-il)amino)-3,3-
dimetilbutan-l-sulfonska kiselina (10)
[0310]Sulfonska kiselina,10,sintetisana je na sličan način kao jedinjenje11,korišćenjem 5-hloro-3-(4,4,5,54etrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)-l-tozil-li/-pirolo[2,3-b]piridina umesto boronatnog estra,7a,kao počrtnog materijala:<*>H NMR (400 MHz, MeOD) 5 8.44 (s, IH), 8.34(dd, .7=9.2,2.6 Hz, IH), 8.22(d,J=5.7Hz, IH), 8.13 (s,IH), 5.16 (d, J= 4.1Hz, IH), 3.46 - 3.33 (m, 2H), 1.10 (d, 9H); LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% TFA, Cl8)mlz412.19 (M+H) Retenciono vreme = 1.91 minuta.
Priprema Jedinjenja 46
[0311]
(a) MsCl. CH2C12; (b) KOAc, DMF; (c) NaOMe, MeOH; (d) Mel, K2C03, aceton, 70°C; (e) Okson, voda, MeOH, 3 č, RT; (f) 5-fmoro-l -(/;;-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-
dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridin, 7a, K3PO4X-Phos, Pd2(dba)3, 2-MeTHF, voda, 120°C, 3 č zatim 80°C, 1 č; (g) NaOMe, MeOH.
(5r)-2-(2-hloro-5-fluoropirimidin-4-ilamino)-3,3-dimetilbutil metansulfonat (75a).
[0312] Hladnom (0°C) rastvoru (S)-2-((2-hloro-5-fluoropirirnidin-4-il)amino)-3,3-dimetilbutan-l-ola, 14a, (1.95 g, 7.87 mmol) i trietilamina (1.37 mL, 9.84 mmol) u dihlorometanu (25 mL) dodat je metansulfonil hlorid (0.76 mL, 9.84 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 1 čas. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i dodati su voda (100 mL) i EtOAc (50 mL). Organska faza je razdvojena, osušena (MgS04) i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 2.55 g željenog proizvoda kao bledo žuta penasta čvrsta supstanca: LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA, C4)mlz326.99 (M+H) RT = 2.96 mintues.
(5<r>)-5-2-(2-hloro-5-fluoropirimidin-4-ilamino)-3,3-dimetilbutil etantioat (76a).
[0313] Kalijum tioacetat (1.30 g, 11.51 mmol) je dodat mešanom rastvoru (,S)-2-(2-hloro-5-fluoropirimidin-4-ilamino)-3,3-dimetilbutil metansulfonata, 75a, (2.50 g, 7.67 mmol) u suvom DMF (50 mL). Rezultujući braon rastvor je zagrevan uz mešanje na 78°C 1 čas. Braon suspenzija je sipana u vodu i ekstrahovana sa EtOAc (3x 100 mL). Kombinovane organske faze su osušene (MgS04), filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen sa hromatografijom na silika gelu (0-30% EtOAc/Heksani Gradijent) da bi se dobilo 2.1 g jedinjenja 76a kao bledo braon čvrsta supstanca:<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 7.81 (s, IH), 5.12 (m, IH), 4.21 (t,J= 9.1 Hz, IH), 3.15-2.90 (m, 2H), 2.23 (s, 3H), 0.95 (m, 9H); LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz306.02 (M+H) RT = 3.32 min.
(5r)-2-(2-hloro-5-fluoropirimidin-4-ilamino)-3,3-dimetilbutan-l-tiol (77a)
[0314] Azotom prečišćenom rastvoruflS<1>)-tS'-2-(2-hloro-5-fluoropirimidin-4-ilamino)-3,3-dimetilbutil etantioata, 76a, (1.00 g, 3.27 mmol) u metanolu (20 mL) dodat je NaOMe (1.457 mL 25% rastvora u MeOH, 6.540 mmol) i rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 1 čas. Reakciona smeša je koncentrovanain vacuoi ostatak je rastvoren u vodi (25 mL) i polako acidifikovan sa 2N HC1 da bi se dobio beli talog koji je ekstrahovan dva puta sa EtOAc. Kombinovane organske faze su osušene (MgS04), filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 0.85 g željenog proizvoda kao bledo bež čvrsta supstanca: LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz264.92 (M+H) RT = 3.32 min.
(5r)-2-hloro-Ar-(3,3-dimetil-l-(metiltio)butan-2-il)- 5-fluoropirimidin-4-amin (78a)
[0315] Suspenziji (,S)-2-(2-hloro-5-fluoropirimidin-4-ilamino)-3,3-dimetilbutan-l-tiola, 77a, (0.85 g, 3.60 mmol) i K2CO3(2.26 g, 16.35 mmol) u acetonu dodat je jodometan (0.82 mL, 13.08 mmol). Suspenzija je zagrevana na 70°C 1.30 časova i zatim ohlađena do sobne temperature. Čvrsta supstanca je filtrirana i rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-10% EtOAc/Heksani Gradijent) da bi se dobilo 310 mg željenog proizvoda kao bela čvrsta supstanca:<l>R NMR (400 MHz, CDCI3) 5 7.81 (s, IH), 5.12 (m, IH), 4.21 (t,J=9.1 Hz, IH), 3.15-2.90 (m, 2H), 2.23 (s, 3H), 0.95 (m, 9H); LC/MS (60-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz278.29 (M+H) RT = 1.35 minuta.
(5)-2-hloro-A'<r->(3,3-diinetil-l-(metilsulfonil)butan-2-il)-5-fluoropiriiTiidin-4-aniiii (79a)
[0316] Hladnom (0°C) rastvoru (5<r>)-2-hloro-/v<r->(3,3-dimetil-l-(metilthio)butan-2-il)- 5-fluoropirhnidin-4-amina, 78a, (0.15 g, 0.54 mmol) u metanom (10 mL) dodat je Okson (0.50 g, 0.81 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 3 časa. Rastvor je koncentrovanin vacuoda bi se dobio beli ostatak koji je rastvoren u vodi (10 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3x10 mL). Kombinovane organske faze su osušene (MgS04), filtrirane i koncentrovanein vacuoda bi se dobilo 150 mg željenog proizvoda kao bela čvrsta supstanca: LC/MS (60-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz310.31 (M+H) RT = 2.60 minuta.
(5)-jV-(3,3-dimetil-l-(metilsulfonil)butan-2-il)-5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-amin. (80a)
[0317] Rastvor f5)-2-hloro-<y>V-(3,3-dimetil-l-(metilsulfonil)butan-2-il)-5-fluoropirimidin-4-amina, 79a, (0.15 g, 0.48 mmol), 5-fluoro-l-(/?-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridina (0,24 g, 0.58 mmol), i K3PO4(0.25 g, 1.16 mmol) u 2-metil THF (5 mL) i vodi (1 mL) prečišćen je sa azotom 30 minuta. Dodat je X-Phos (0.015 g, 0.031 mmol) i Pd2(dba)3(0.007 g, 0.008 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 120°C u vijalici pod pritiskom 2 časa. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana i koncentrovanain vacuo.Ostatak je rastvoren u EtOAc (50 mL) i ispran vodom. Organski sloj je osušen (MgS04), filtriran i koncentrovanin vacuo.Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-40% EtOAc/Heksani Gradijent) da bi se dobilo 210 mg željenog proizvoda kao bela penasta čvrsta supstanca:<J>H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 8.54 - 8.43 (m, 2H), 8.24 (d,J=1.3 Hz, IH), 8.09 (s, IH), 8.03 (d,J=8.2 Hz, 2H), 7.23 (s, IH), 4.99 (dt,J =20.3, 10.1 Hz, 2H), 3.37 (d,J=14.4 Hz, IH), 3.07 (dt,J= 31. 3, 15. 7 Hz,IH), 2.83 (s, 3H), 2,33( d, J=19.0 Hz, 3H), 0.98 (d,J=20.7 Hz, 9H); LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA, C4)mlz564.20 (M+H) RT = 3.70 minuta.
(^-^-(S^-dimetil-l^metilsulfonUJbutan-l-iO-S-fluoro-Ž^S-lfuoro-l^-pirolo^^-
b]piridin-3-il)pirimidin-4-amin (46)
[0318]U rastvor (5)-JV-(3,3-dimetil-l-(metilsulfonil)butan-2-il)-5-fluoro-2-(5-fiuoro-l-tozil-l/^-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-amina,80a,(0.21 g, 0.37 mmol) u THF (10 mL) dodat je NaOMe (0.33 mL of 25% rastvor u MeOH, 1.45 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 10 minuta, zatim razblažen u zasićenom vodenom rastvoru NH4CI. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u vodi (10 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3x10 mL), osušen (MgS04), filtriran i koncentrovanin vacuo.Proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-10% MeOH/CH2Ci2 Gradijent) da bi se dobilo 109 mg željenog proizvoda kao bela čvrsta supstanca:<l>HNMR (400 MHz, CDCL) 5 9.38 (s, IH), 8.53 (d,J=6.9 Hz, IH), 8.16 (m, 2H), 8.06 (s, IH), 5.09 - 4.89 (m, IH), 3.42 - 3.31 (m, IH), 3.1 l(m, IH), 2.84 (s, 3H), 1.00 (s, 9H); LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)m/ z410.19 (M+H) RT = 2.03 minuta.
Priprema Jedinjenja 62
[0319]
(a) LiBH4, THF, IN HC1; (b) 2-jodoksibenzojeva kiselina, THF, refluks; (c) Toluen; (d)
Br2, HBr, AcOH, 65°C; (e) NaOH, hidroksiurea, MeOH.
Formiranje (+/-)-3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-llf-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-
il)amino)-4,4-dimetilpentan-l-ola (82a)
[0320]Hladnom (0°C) ratsvoru racemskog metil 3-((5-fluoro-2-(5-lfuoro-l-tozil-l//- pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-dimetilpentanoata (4.00 g, 7.36 mmol) u THF (160 mL) i MeOH (10 mL) u kapima je dodat litijum borohidrid (29.44 mL 2 M rastvor, 58.87 mmol) tokom 30 minuta. Reakciona smeša je polako zagrejana do sobne temperature i zatim ponovo ohlađena do 0°C. U kapima je dodat rastvor IN HC1 (294 mL, 294 mmol). Smeša je mešana 15 minuta i zatim razblažena sa dihlorometanom. Faze su razdvojene i vodena faza je ponovo ekstrahovana sa dihlorometanom. Kombinovane organske faze su isprane sa zasićenim vodenim ratvorom NaHCOii fiziološkim rastvorom, osušene (Na2S04), filtrirane i koncentrovanein vacuo.Rezultujući ostatak je prečišćen preko hromatografije na silika gelu (EtOAc/Hcksani) da bi se dobilo 3.79 g željenog proizvoda.
Formiranje (+/-)-3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-lJW-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-
il)amino)-4,4-dimetilpentanala (83a)
[0321]U rastvor racemata 3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-dirnetilpentari-l-ola,82a,(1.60 g, 3.10 mmol) u THF (64 mL) dodata je 2-jodoksibenzojeva kiselina (Ibx) (3.86 g, 6.21 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do refluksa pod atmosferom azota 30 minuta. Nakon hlađenja mešavine do sobne temperature, čvrste supstance su filtrirane. Filtratu je dodat zasićeni vodeni rastvor NaHCOsi dvofazna smeša je mešana 30 minuta. Smeša je dodatno razblažena sa dihlorometanom i faze su razdvojene. Vodeni sloj je ekstrahovan ponovo sa dihlormetanom. Kombinovane organske faze su osušene (Na2S04), filtrirane i koncentrovanein vacuo.Rezultujući ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 1.59 g željenog proizvoda.
Formiranje (+/-)-metil 5-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-
il)pirimidin-4-il)amino)-6,6-dimetilliept-2-enoata (84a)
[0322]U rastvor 3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-1 -tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-dimetilpentanala,83a,(0.295 g, 0.574 mmol) u toluenu (5.9 mL) dodat je metil 2-(trifenilfosforaniliden)acetat (0.300 g, 0.862 mmol). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi i zatim prečišćena direktno na silika gelu (EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 278 mg željenog proizvoda: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 2.54 minuta (M+H) 584.12.
Formiranje (+/-)-metil 2,3-dibromo-5-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l /7-pirolo[2,3-b]piridin-3-
il)pirimidin-4-il)amino)-6,6-dimetilheptanoata (85a)
[0323]U rastvor racemskog metil 5-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-6,6-dimetilhept-2-enoata,84a,(0.278 g, 0.476 mmol) sirćetne kiseline (2.5 mL) dodat je brom (0.099 g, 0.620 mmol) nakon čega je dodat HBr (0.085 mL 5.6 M rastvor u AcOH). Reakciona smeša je zagrevana na 65°C preko noći. Smeša je razblažena u dihlorometanu i zasićenom vodenom rastvoru natrijum bikarbonata. Faze su razdvojene i vodeni sloj je ispran sa dihlorometanom. Organski slojevi su kombinovani i rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (EtOAc/Heksani) da bi se dobio željeni proizvod: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 3.00 minuta (M+H) 590.94.
Formiranje (+/-)-5-(2-((5-fluoro-2-(5-lfuoro-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-
il)amino)-3,3-dimetilbutil)izoksazol-3-ola (62)
[03241U rastvor NaOH (0.015 g) rastvoren u vodi (0.410 mL) dodata je hidroksiurea (0.008 g, 0.100 mmol). Rezultujuća smeša je mešana 30 minuta pre dodavanja u kapima metil 2,3-dibromo-5-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l/7-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-6,6-dimetilheptanoata,85a,(0.064 g, 0.110 mmol) u MeOH (0.150 mL). Rastvor je mešan 6 časova pre dodavanja AcOH (0.031 mL). Ostatak je prečišćen sa preparativnom HPLC reverzne faze da bi se dobio željeni proizvod:<*>H NMR (300 MHz, MeOD) 5 8.57 (dd,J =9.7, 2.8 Hz, IH), 8.16 (d,J=5.5 Hz, 2H), 8.00 (d,J=4.1 Hz, IH), 5.68 (s, IH), 3.03 (ddd,J= 27.4, 15.4, 12.3 Hz, 2H), 1.10(d, J=3.3 Hz, 11H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 2.15 minuta (M+H) 416.04.
Priprema Jedinjenja 45
[0325]
(a) LiOH, dioksan, H20, 100°C.
Formiranje (+/-)-3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-li/-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-
il)amino)-4,4-dimetilpentan-l-ola (45)
[0326]U rastvor racemata 3-((5-fluoro-2-(5-fliioro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pinmidin-4-il)amino)-4,4-dimetilpentari-l-ola,82a,(0.187 g, 0.363 mmol) u dioksanu (4 mL) dodat je LiOH (0.91 mL 2 M rastvor, 1.81 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 100°C 2 časa. Smeša je razblažena sa vodom (30 mL) i ekstrahovana dva puta sa EtOAc. Kombinovane organske faze su isprane sa fiziološkim rastvorom, osušene (MgS04), filtrirane i koncentrovanein vacuo.Sirovi ostatak je ispran sa heksanima da bi se dobilo 76 mg željenog proizvoda: 'h NMR (300 MHz, CDC13) 8 10.42 (s, IH), 8.47 (dd,J=9.3, 2.7 Hz, IH), 8.13( d, J=11.2 Hz, IH), 8.10 (s, IH), 8.04(d, J=3.2 Hz, IH), 4.89(d, J=9.0 Hz, IH), 4.26 (t,./ = 9.9 Hz, IH), 3.65(d, J=9.2 Hz, IH), 3.54 (td,./= 11.4, 2.9 Hz, IH), 2.17 - 1.99 (m, IH), 1.40 (dd,J=14.0, 11.9 Hz, IH), 0.96 (d,J =18.4 Hz, 9H), 0.90 - 0.73 (m, IH); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, (M+H ) 362.
Priprema Jedinjenja 50 , 51 , i 52
[0327] (a) 2-nitrofenilselenocijanat, Bu3P, THF; (b) mCPBA, CHC13; (c) Rh2(OAc)4, N2CH2C02Et, CH2C12; (d) LiOH, dioksan, H2().
Formiranje (+/-)-jV-(4,4-dimetil-l-((2-nitrofenil)selanil)pentan-3-il)-5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo|2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-amina (88a)
[0328]U rastvor racemata 3-[[5-fluoro-2-[5-nuoro-l-(^-tolilsulfonil)pirolo[2,3-b]piridin-3-il]pirimidin-4-il]amino]-4,4-dimetil-pentan-l-ola,82a,(1.093 g, 2.120 mmol) i (2-nitrofenil) selenocijanata (0.722 g, 3.180 mmol) u THF (8 mL) dodat je tributilfosfan (0.792 mL, 3.180 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen preko silika gela (0 do 100% EtOAc/Heksani Gradijent) da bi se dobilo 1.20 g željenog proizvoda.
Formiranje (+/-)-A<r->(4,4-dimetilpent-l-en-3-il)-5-lfuoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l/f-pirolo[2,3-b|piridin-3-il)pirimidin-4-amina (89a)
[0329]Hladnom (0°C) rastvoru racemata Af-(4,4-dimetil-l-((2-nitrofenil)selanil)pentan-3-il)-5-fluoro-2-(5-fluoro-l4ozil-l//-pnolo[2,3^88a,(1.01 g, 1.45 mmol) uhloroformu (15 mL) dodat je mCPBA (0.40 gof 77%,1. 79 mmol). Nakon mešanja 1 čas na sobnoj temperaturi, smeša je razblažena sa dihlorometanom (100 mL) i rezultujući rastvor je ispran sa vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organska faza je osušena (MgS04), filtrirana i koncentrovanain vacuo.Sirovi ostatak je prečišćen m-omatografijom sa silika gelom (0 do 100% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 623 mg željenog proizvoda: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, (M+H) 496.76.
Formiranje 2-(l-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-
il)amino)-2,2-dimetilpropil) ciklopropankarboksilne kiseline (50, 51, i 52)
[0330]Racemat AH4,4-dimetilpent-l-en-3-il)-5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-amina,89a,(0.105 g, 0.211 mmol) i rodijum(II) acetata (0.019 g, 0.042 mmol) u dihlorometanu (6.2 mL) dodat je u kapima rastvoru etil 2-diazoacetata (0.181 g, 0.166 mL, 1.582 mmol) u 2 mL dihlorometana tokom 30 minuta. Dodat je Pd(OAc)2(0.019 g, 0.042 mmol) u dihlorometanu (2 mL) nakon čega je u kapima dodat etil 2-diazoacetat (0.181 g, 0.166 mL, 1.582 mmol) u dihlorometanu (2 mL). Reakcija je mešana preko noći i rastvarač je koncentrovanin vacuo.Rezultujući sirovi ostatak je prečišćen sa hromatografijom na silika gelu (0 do 100% EtOAc/Heksani Gradijent) da bi se dobila racemska smeša dijastereomernih estara,90a.Smeša estara je rastvorena u dioksanu (2 mL) i 2N LiOH (1 mL). Nakon zagrevanja na 100°C 2 č i hlađenja do sobne temperature, smeša je acidifikovana do pH 6.5 sa 2N HC1. Vodena faza je ekstrahovana dva puta sa EtOAc i jednom sa dihlorometanom. Kombinovane organske faze su sušene (MgS04), filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (0-20% MeOH/EtOAc Gradijent) da bi se izolovala smeša dijastereomernih kiselina, koje su dodatno prečišćene sa preparativnom HPLC (CH?CN/H20 - TFA modiflkator) da bi se dobilo 3 dijastereomera. Dva dijastereomera, 51i 52,su izolovana svaki kao jedan dijastereomer. Treći dijastereomer, 50, izolovan je kao smeša dijastereomera. Sva tri dijastereomera pokazivala su isti LCMS: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, (M+H) 402.45.
Prva frakcija- Smeša dijastereomera sa 4 pika na 1.8, 1.9, 2.06 i 2.16 minuta - sadrži 50; Druga frakcija - jedan pik na 2.06 minuta - ( 51)
Treća frakcija -jedan pik na 2.16 minuta - (52)
Priprema Jedinjenja 41
[03311
(a)<i>Pr2NEt, EtOH, 75°C; (b) Pd2(dba)3, XPhos, K3PO4, THF, H2(), 135°C, mikrotalasi.
Formiranje (+/-)-2-hloro-5-fluoro-6-(l-hydroksi-4,4-dimetilpentan-3-ilamino)piridin-3-
karbonitrila (95a)
[0332]U rastvor 3-amino-4,4-dimetilpentan-l-ola (2.00 g, 8.64 mmol) u etanolu (20 mL) dodat je racemat 2,6-dihloro-5-fluoro-piridin-3-karbonitrila (1.65 g, 8.64 mmol) i 5 mLN,N-diizopropi leti lamina. Rastvor je mešan na 75°C 12 časova i koncentrovanin vacuo.Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (metilen hlorid), dajući 2.2 g 2-hloro-5-lfuoro-6-(l-hidroksi-4,4-dimetilpentan-3-ilamino)piridin-3-karbonitrila, 95a: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 3.02 minuta (M+H) 286.16
Formiranje (+/-)-5-lfuoro-2-(5-fluoro-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)-6-(l-hidroksi-4,4 - dimetilpentan-3-ilamino) piridin-3-karbonitrila (41)
[0333] Racemskom rastvoru 2-hloro-5-fluoro-6-(l-hidroksi-4,4-dimetilpentan-3-ilamino)piridin-3-karbonitrila, 95a, (0.20 g, 0.70 mmol) i 5-fluoro-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)-l-tozil-l//-pirolo[2,3-Z?]piridina, 7a, (0.44 g, 1.05 mmol) u THF (15 mL) dodat je rastvor kalijum fosfata (0.45 g) u 3 mL vode. Rezultujuća smeša je degazirana pod strujom azota 15 minuta. Zatim je smeši dodat X-Phos (0.03 g, 0.07 mmol) i Pd2(dba)3(0.02 g, 0.04 mmol). Reakcija je zagrejana do 135°C preko mikrotalasnog zračenja 15 minuta i zatim ekstrahovana u EtOAc (3x15 mL) nasuprot vodi. Organski slojevi su kombinovani i koncentrovaniin vacuou tamno ulje koje je ponovo rastvoreno u 20 mL THF. Rastvoru je dodato 5 mL 2 N LiOH i reakcija je zagrejana do 65°C 12 č i zatim koncentrovanain vacuo.Rezultujući ostatak je prečišćen preko hromatografije na silika gelu (EtOAc) da bi se dobilo 108 mg željenog proizvoda, 41, kao žuta čvrsta supstanca:<r>H NMR (300 M Hz, afe-DMSO) 5 12.40 (s, H), 8.63 (dd,J=2.8, 10.1 Hz, H), 8.37 - 8.32 (m, H), 7.83 (d,J=11.4 Hz, H), 7.31 (d,J=9.7 Hz, H), 4.56 - 4.50 (m, H), 4.41 (dd,J =4.1, 5.2 Hz, H), 3.69 (s, H), 3.57 (s, H), 3.49 (t,J=6.6 Hz, H), 3.48 (s, H), 3.36 - 3.28 (m, H), 2.50 (qn,J=1.8 Hz, H), 1.86 - 1.67 (m, 2 H), 1.21 (dd,J=7.0, 16.1 Hz, H) i 0.94 (s, 9 H) ppm; LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 3.09 minuta (M+H) 386.39.
Pripremanje Jedinjenja 11 , 24 , 25 26 , 2 7 , 28 , 29 , 30 , i 31
[0334]
(a) 2-hloro-5,6-difluoropiridin-3-karbonitril,<i>Pr2NEt,THF, MeOH, 95°C; (b) 5-fluoro-l-(^-tolilsulfoni])-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridin,7a, K3PO4,X-Phos, Pd2(dba)3, 2-Me THF, voda, 120°C; (c) MsCl. CH2C12; (d) KOAc, DMF, 80°C; (e) 30% H202, HCOOH; (f) (COCl)2, DMF, CH2C12. (g) i. Amin, THF; ii. 4M HC1, CH3CN, 65°C.(5)-2-hloro-5-fluoro-6-((I-hidroksi-3,3-dimetilbutaii-2-i])amino)iiikotinoiiitril (97a).
[0335]Smeša 2-hloro-5,6-difluoropiridin-3-karbonitrila (6.52 g, 34.13 mmol), (2lS)-2-amino-3,3-dimetil-butan-l-ola (4.00 g, 34.13 mmol) i trietilamina (9.51 mL, 68.26 mmol) u CH3CN (50 mL) i THF (50 mL) zagrevana je na 80°C 4 časa. Smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-60% EtOAc/Heksani Gradijent) da bi se dobilo 6.7 g željenog proizvoda kao prljavo bela čvrsta supstanca:<l>HNMR (400 MHz, CDC13) 8 7.25 (d,J =9.7 Hz, IH), 5.32 (m, IH), 4.19-4.08 (m, IH), 3.95-3.83 (m, IH), 3.74 -3.51 (m, IH), 0.92 (s, 9H); LC/MS (60-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlzllim (M+H), Retenciono vreme 1.02 minuta.
(5)-5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l/T-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)-6-((l-hidroksi-3,3-
dimetilbutan-2-il)amino)nikotinonitril (98a).
[0336]Rastvor 5-fluoro-l -(/?-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridina,7a,(1.84 g, 4.42 mmol), (5>2-hloro-5-fluoro-6-((l-hidroksi-3,3-dimetilbutan-2-il)amino)nikotinonitrila, 97a, (1.00 g, 3.68 mmol) i K3P04(2.40 g, 11.22 mmol) u 2-metil-THF (12 mL) i vodi (2 mL) prečišćen je sa azotom 30 minuta. Dodati su X-Phos (0.14 g, 0.294 mmol) i Pd2(dba)3(0.07 g, 0.07 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 120°C u vijalici pod pritiskom 2 časa. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana i koncentrovanain vacuo.Ostatak je rastvoren u EtOAc (50 mL) i ispran vodom. Organski sloj je osušen (MgS04), filtriran i koncentrovanin vacuo.Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-40% EtOAc/Heksani Gradijent) da bi se dobilo 1.88 g kao penasta čvrsta supstanca:<l>R NMR (300 MHz, CDC13) 5 8.64 (s, IH), 8.36 (d,J =2.0 Hz, IH), 8.26 (m, IH), 8.14 (d,J=8.4 Hz, 2H), 7.46 (d,J=12 Hz, 2H), 7.33 (d,J=7.5 Hz, IH), 5.34 (m, IH), 4.42-4.31 (m, IH), 4.02 (m, IH), 3.75 (m, IH), 2.40 (s, 3H), 1.26(s, 9H); LC/MS (60-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA, C4)mlz526.49 (M+H), Retenciono vreme =1.83 minuta.
(5)-2-((5-cijano-3-fluoro-6-(5-lfuoro-l-tozi]-l//-piro]o[2,3-b]piridin-3-il)piridin-2-
il)amino)-3,3-dimetilbutil metansulfonat (99a).
[0337]Hladnom (0°C) rastvoru (5)-5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)-6-((l-hidroksi-3,3-dimetilbutan-2-il)amino)nikotinonitrila,98a,(3.77 g, 7.17 mmol) i trietilamina (1.25 mL, 8.96 mmol) u dihlorometanu (75 mL) dodat je metansulfonil hlorid (0.69 mL, 8.96 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 1 čas. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i dodati su voda (100 mL) i EtOAc (200 mL). Organska faza je razdvojena, osušena (MgS04), filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 4.22 g željenog proizvoda kao žuta penasta čvrsta supstanca koja je korišćena bez dodatnog prečišćavanja: LC/MS (60-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA, C4)mlz604.45 (M+H) Retenciono vreme = 2.03 minuta.
(5')-2-(5-Cijano-3-fluoro-6-(5-lfuoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridin-2ilamino)-3,3-
dimetilbutil etantiolat (100a).
[0338]Kalijum tioacetat (1.2 g, 10.5 mmol) dodat je u rastvor (5)-2-((5-cijano-3-fluoro-6-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[23-b]piridin-3-il)piridin-2-il)amino)-3,3-dimetilbutil etansulfonata,99a,(4.22 g, 6.99 mmol) u suvom DMF (90 mL). Braon rastvor je zagrejan uz mešanje na 80°C 1 čas. Gusta braon suspenzija je sipana u vodu i ekstrahovana sa EtOAc (3x 100 mL). Organski slojevi su osušeni (MgS04), filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-30% EtOAc/Heksani Gradijent) da bi se dobilo 6.8 g željenog proizvoda kao bledo braon čvrsta supstanca: 'h NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.57 (s, IH), 8.28 (d,J=1.3 Hz, IH), 8.11 (dd,J=8.5, 2.3 Hz, IH), 8.05 (d,J=8.3 Hz, 2H), 7.33 (d, J = 10.2 Hz, IH), 7.24 (d, .1 = 8.3 Hz, 2H), 5.11 (m, IH), 4.31 (m, IH), 3.19 (dd, J = 14.0, 3.0 Hz, IH), 3.03 (dt,J=13.6, 6.9 Hz, IH), 2.31 (s, 3H), 2.10 (m, 3H), 10.97(s, 9H); LC/MS (60-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz584.0 (M+H) Retenciono vreme = 2.66 minuta.
(5')-2-(5-Cijano-3-fluoro-6-(5-lfuoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-A]piridiii-2ilamino)-3,3-
dimetilbutan-l-sulfonska kiselina (101a).
[0339]Hladnom (0°C) rastvoru mravlje kiseline (22.2 mL, 588.5 mmol) dodat je H202(7.35 mL 30% rastvor, 71.96 mmol). Smeša je mešana na 0°C 1 čas. Rastvor ftS)-».S'-2-(5-cijano-3-fluoro-6-(5-fluoro-l-tozil-l/^pirolo[2,3-b]piridin-2ilamino)-3,3-dimetilbutil etantiolat,99a,(1.5 g, 2.57 mmol) u mravljoj kiselini (5 mL) dodat je u kapima reakcionoj smeši. Rezultujući rastvor je mešan 2 časa na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom 1.72 g željene sulfonske kiseline kao bledo žuta čvrsta supstanca: LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz586 (M+H) Retenciono vreme = 3.95 minuta.
(5)-2-(5-Cijano-3-fluoro-6-(5-lfuoro-l-tozil-l//-pirolol2,3-A]piridin-2ilamiiio)-3,3-
dimetilbutan-l-sulfonil hlorid (102a).
[0340]U rastvor (5)-2-(5-cijano-3-fluoro-6-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-Z)]piridin-2ilamino)-3,3-dimetilbutan-l-sulfonske kiseline,101a,(1.5 g, 2.54 mmol) i DMF (0.5 mL) u dihlorometanu (30 mL) u kapima je dodat oksalil dihlorid (0.68 mL, 7.63 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temepraturi 1 čas. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 1.6 g željenog proizvoda kao žuta čvrsta supstanca: LC/MS (60-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz608 (M+H) Retenciono vreme = 2.40 minuta.
(S)-2-(5-Cijano-3-fluoro-6-(5-fluoro-l^-pirolo[2,3-A]piridin-3-il)piridin-2ilamino)-A<T>,3,3-trimetilbutan-l-sulfonamid (26)
[0341]Metil amin (0.41 mL 2M rastvora, 0.82 mmol) dodat je u rastvor (S)-2-(5-cijano-3-fluoro-6-(5 -fluoro-1 -tozil-1 77-pirolo [2,3 -6]piridin-2ilamino)-3,3 -dimetilbutan-1 -sulfonil
hlorida,102a,(0.10 g, 0.16 mmol) u THF (1 mL). Rastvor je mešan 1 čas na sobnoj temperaturi i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirovi sulfonamid je rastvoren u CH3CN (3 mL) i dodata je HC1 (2 mL 4M rastvor u dioksanu). Reakciona smeša je zagrevana na 65°C 3 časa i zatim ohlađena do sobne temperature. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i rezultujući ostatak je prečišćen preparativnom HPLC hromatografijom (10-80% CH3CN/voda, 0.5% TFA, 15 min) da bi se dobilo 26 mg željenog proizvoda kao bela čvrsta supstanca:<l>R NMR (400 MHz, CDC13) 5 9.68 (s, IH), 8.45 - 8.33 (m, IH), 8.17 (d,J=2.8 Hz, IH), 7.88 (s,IH), 7.36 ( d, J=10.3 Hz, IH), 6.47(d,/=4.9Hz,IH), 5.11 (d, .7=7.8 Hz,IH), 4.90 (d, J=10.4 Hz, IH), 3.52 (s,IH), 3.04 (dd,J=15.0, 10.5 Hz, IH), 2.67(d, J=5.0 Hz, 3H), 1.02 (s, 9H); LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz449.22 (M+H) Retenciono vreme = 2.97 minuta.
[0342]Sledeća jedinjenja se mogu pripremiti na sličan način kao u prethodno opisanoj proceduri za Jedinjenje26:
C5)-2-(5-Cijano-3-fluoro-6-(5-fluoro-lH-pirolo[2,3-A]piridin-3-il)piridin-2ilamino)-AyV,3,3-tetrametilbutan-l-sulfonamid (27)
[0343]<J>H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 8.59 (dd,J =9.7, 2.6 Hz, IH), 8.38 (s, IH), 8.21 (s, IH), 7.31 (m, IH), 5.12 (brs, IH), 4.97 (brs, IH), 3.33 (m, IH), 2.70 (s, 6H), 0.95 (m, 9H); LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz463.49 (M+H) Retenciono vreme = 3.12 minuta.
f5)-2-(5-Cijano-3-fluoro-6-(5-fliioro-l^-pirolo[2,3-A]piridin-3-il)pii"idin-2ilamino)-A'-
aA/<?/7/-fl/7<7-3,3-dimetilbutan-l-sulfonamid (28)
[0344] LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz475.0 (M+H) Retenciono vreme = 3.12 minuta.
(5)-2-((5-cijano-3-fluoro-6-(5-fluoro-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)piridin-2-il)amino)-j'V-(2-metoksieti])-3,3-dimetilbutan-l-sulfonamid (29)
[0345]<!>H NMR (400 MHz, MeOD) S 8.71 (dd,J=9.7, 2.6 Hz, IH), 8.37 (s, IH), 8.20 (s, IH), 7.57 (d,J=10.9 Hz, IH), 5.08 (d,J=8.8 Hz, IH), 3.54 - 3.40 (m, 2H), 3.32 (m, 5H), 3.15 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 1.03 (s,9H); LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz493.50 (M+H) Retenciono vreme = 3.05 minuta.
(5)-2-((5-cij ano-3-fluoro-6-(5-fluoro-l/7-pirolo [2,3-b] piridin-3-il)piridin-2-il)amino)-3,3-dimetil-N-propilbutan-l-sulfonamid (31)
[0346]LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz477. 65 (M+H) Retenciono vreme = 3.27 minuta.
(5)-2-((5-cijano-3-fluoro-6-(5-fluoro-lJH-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)piridin-2-il)amino)-3,3-
dimetilbutan-l-sulfonamid (30)
[03471LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% FA)mlz435.46 (M+H) Retenciono vreme = 2.80 minuta.
(5)-5-fluoro-2-(5-fluoro-l/Y-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)-6-((l-hidroksi-3,3-dimetilbutan-2-
il)amiiio)nikotinoiiitril (24)
[03481Alkohol,24,sintetisan je na način sličan jedinjenju32korišćenjem iste procedure deprotekcije, počinjući sa jedinjenjem98a:<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 8 10.27 (brs, IH), 8.25 (d,.7=9.4 Hz, IH), 8.17 (s, IH), 8.11 (s, IH), 7.23(d,./ =10.3 Hz, IH), 5.20(d, ./ =9.6Hz, IH), 4.41 (t, 7=7.4 Hz,IH), 4.09 (d, .7=11.3 Hz,IH), 3.82 - 3.58 (m,IH), 0.99 (d, J =19.5 Hz, 9H).
(5}-2-(5-cijano-3-fluoro-6-(5-fluoro-l/J-pirolo[2,3-Z>]piridin-3-il)piridin-2-ilamino)-3,3-
dimetilbutan-l-sulfonska kiselina (25)
[0349]U rastvor (S)-2-((5-cijano-3-fluoro-6-(5-fluoro-l-to^^ il)piridin-2-il)amino)-3,3-dimetilbutan-l-surfonske kiseline,101a,(0.12 g, 0.21 mmol) u CH3CN (5 mL) dodata je HC1 (2 mL 4M rastvora u dioksanu). Reakciona smeša je zagrevana na 100°C 18 časova u vijalici pod pritiskom i zatim hlađena do sobne temperature. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i proizvod je prečišćen preparativnom HPLC hromatografijom (10-80% CH^CN/voda, 0.5% TFA, 15 min) da bi se dobilo 42 mg željenog proizvoda kao prljavo bela čvrsta supstanca:<l>UNMR (400 MHz, MeOD) 8 8.44 (s, IH), 8.34(dd, J=9. 2, 2.6 Hz, IH), 8.22 (d,J=5.7 Hz, IH), 8.13 (s, IH), 5.16 (m, IH), 3.46 - 3.33 (m, 3H), 1.10 (s, 9H); LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% TFA, C1S)mlz449.22 (M+H).
(5)-2-((5-lfuoro-2-(5-fluoro-17/-piroloI2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-3,3-
dimetilbutan-l-sulfonska kiselina (11)
[0350]Sulfonska kiselina,11,sintetisana je na način sličan jedinjenju30,korišćenjem jedinjenja 57a:<*>H NMR (400 MHz, MeOD) 8 8.44 (s, IH), 8.34 (dd,J= 9.2, 2.6 Hz, IH),8.22 (d, J= 5.7 Hz,IH), 8.13 (s,IH), 5.16 (d, .7=4.1Hz, IH), 3.46 - 3.33 (m, 2H), 1.10 (d, 9H); LC/MS (10-90% ACN/voda 5 min sa 0.9% TFA, Cl 8)mlz412.19 (M+H) retenciono vreme = 1.91 minuta.
Pripremanje Jedinjenja 62 , 87 , i 88
[0351] (a) LDA, Mel, THF; (b) L1AIH4, eter; (c) PCC, CH2C12; fd) 2-(trifenilfosforaniliden)acetat, CH2C12; (e) iV-benzilhidorksilamin-HCl, CH2C12; (f) H2, Pd/C, MeOH; (g) AcCl, MeOH, refluks; (h) 2,4-dihloro-5-fluoropirimidin, Et3N, EtOH, THF, 55°C; (i) 5-fluoro-l-(p-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pii-olo-[2,3-b]piridin,7a,Pd2(dba)3, XPhos, K3P04, 2-MeTHF, H20, 115°C; 0') HC1, dioksan, acetonitril, 65°C; (k) LiOH, THF, H20, 50°C.
Formiranje etil 1-metilciklobutankarboksilata (lila)
[0352]Rastvor etil ciklobutankarboksilata (20.0 g, 156.0 mmol) u THF (160 mL) u kapima je dodat hladnom (-78°C) rastvoru LDA (164 mmol 2M rastvora) u THF (40 mL). Rastvor je zagrejan do 0°C i zatim ponovo ohlađen do -40°C pre dodavanja jodometana (10.2 mL, 163.8 mmol). Rastvor je polako zagrevan do sobne temeprature i mešan preko noći. Reakcija je ugašena sa zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida i dodat je etar. Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ispran sa etrom. Kombinovani organski slojevi su isprani sa IN HC1, zatim osušeni preko MgSCv Proizvod je prečišćen destilacijom:<*>H NMR (400 MHz, MeOD) 5 4.20 - 4.05 (m, 2H), 2.57 - 2.33 (m, 2H), 2.08 - 1.94 (m, IH), 1.94 - 1.77 (m, 3H),
1.40 (s, 3H), 1.27 (tt,J= 7.1, 1.5 Hz, 3H).
Formiranje (l-metilciklobutil)metanola (112a)
[0353]Litijum aluminijum hidrid (2.1 g, 59.4 mmol) je suspendovan u etru (150 mL) i ohlađen do 0°C. Rastvor etil 1-metilciklobutankarboksilata,lila,(13.0 g, 91.4 mmol) u etru (60 mL) dodat je u kapima suspenziji L1AIH4. Smeša je mešana 2 časa u ledenom kupatilu zatim polako ugašena sa IN HC1. Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ispran sa etrom. Kombinovani organski slojevi su isprani sa fiziološkim rastvorom i isparljive supstance su uklonjene sa blagom strujom azota da bi se dobio željeni proizvod koji je korišćen bez dodatnog prečišćavanja:<!>H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 3.54 - 3.39 (m, 4H), 1.99 - 1.74 (m, 8H), 1.74- 1.62 (m, 4H), 1.46- 1.18 (m, 3H),1.13 (d, J= 1.7 Hz, 6H).
Formiranje 1-metilciklobutankarbaldehida (113a) i metil 3-(l-metilciklobutil)akrilata
(114a)
[0354]Rastvor (1-metilciklobutil)metanola,112a,(1.00 g, 9.98 mmol) u dihlorometanu (25 mL) dodat je suspenziji PCC (2.69 g, 12.50 mmol) i Celita (2.70 g) u dihlorometanu (25 mL). Reakciona smeša je mešana 2 časa i filtrirana kroz jastučić od silika gela (eluiranjem sa dihlorometanom). Rastvarači su uklonjeni sa strujom azota do zapremine od približno 20 mL. 2-(trifenilfosforaniliden)acetat (0.98 g, 10.00 mmol) dodat je u jednom delu i smeša je mešana 7 časova. Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom i dodat je rastvor 10% heksani/etar. Rezultujuća čvrsta supstanca je otfiltrirana i odbačena. Rezultujući rastvor je sipan direktno na silika gel i eluiran sa EtOAc/Heksani da bi se dobio željeni proizvod:<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 7.05 (d, / = 15.8 Hz, IH), 5.66 (dd,J=15.8, 1.3 Hz, IH), 4.21 - 4.00 (m, 2H), 2.12 - 1.73 (m, 7H), 1.29 - 1.17 (m, 6H).
Formiranje (+/-)-2-benzil-3-(l-metilciklobutil)izoksazolidin-5-ona (115a)
[0355]iV-benzilhidroksilamin (hlorovodonična kiselina) (0.28 g, 1.80 mmol) i trietilamin (0.28 mL, 2.00 mmol) su dodati u rastvor metil 3-(l-metilciklobutil)akrilata,11.4a,(0.26 g, 1.50 mmol) u dihlorometanu (9.5 mL). Reakciona smeša je mešana na 50°C preko noći. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i i smeša je razblažena sa dihlorometanom i vodom. Slojevi su razdvojeni sa faznim separatorom i vodeni rastvor je ispran sa dihlorometanom. Organski slojevi su kombinovani i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na silika gelu (EtOAc/Heksani) da bi se dobio željeni proizvod kao racemska smeša: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 1.47 minuta (M+H) 246.10.
Formiranje (+/-)-3-amino-3-(l-metilciklobutil)propionske kiseline (116a)
[0356]Rastvor racemata 2-benzil-3-(l-metilciklobutil)izoksazolidin-5-ona,115a,(0.18 g, 1.28 mmol) u MeOH (2.9 mL) šejkiran je preko noći pod 50 psi vodonika u prisustvu 50 mg katalizatora paladijum hidroksida. Smeša je filtrirana kroz Celite i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom da bi se dobio željeni proizvod koji je korišćen bez dodatnog prečišćavanja:<!>H NMR (400 MHz, MeOD) 5 3.42 (dd,J=11.0, 1.9 Hz, IH), 2.26 (ddd,J=27.8, 16.7, 6.5 Hz, 2H), 1.86(dddd, J= 36.9,26.3, 11.2, 7.6 Hz, 6H), 1.18 (s, 3H).
Formiranje(+/-)-metil3-((2-hloro-5-fluoropirimidin-4-il)amino)-3-(l-metilciklobutil)propanoata (118a)
[0357]Racemska 3-amino-3-(l-metilciklobutil)propionska kiselina,116a,(2.3 g, 14.4 mmol) rastvorena je u metanolu (104 mL). Rastvor je ohlađen u ledenom kupatilu i u kapima je dodat acetil hlorid (5.6 g, 71.9 mmol) (Temp je održavana <10°C). Reakciona smeša je zagrevana do 65°C i mešana na toj temperaturi 3 časa. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i zatim isprana sa toluenom da se uklone isparljive supstance. Sirovi racemat 3-metoksi-l-(l-metilciklobutil)-3-oksopropan-l-aminijum hlorida,117a,korišćen je bez dodatnog prečišćavanja.
[0358]Racemat 3-metoksi-l-(l-metilciklobutil)-3-oksopropan-l-aminijum hlorida,117a,(3.3 g, 15.9 mmol) rastvoren je u smeši 59 mL THF i 6.6 mL EtOH i rastvor je ohlađen u ledenom kupatilu. Dodat je 2,4-Dihloro-5-fluoropirimidin (2.9 g, 18.0 mmol) nakon čega je u kapima dodat trietilamin (5.1 g, 51.0 mmol). Reakciona smeša je mešana na 55°C 17 časova. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature nakon čega su dodati voda i dihlorometan. Faze su razdvojene i vodeni sloj je ispran sa dihlorometanom. Organski slojevi su kombinovani i isprani sa fiziološkim rastvorom. Rastvarači su uklonjeni i ostatak je prečišćen preko hromatografije na silika gelu (EtOAc/Heksani) da bi se dobio željeni proizvod: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 3.23 minuta (M+H) 302.35.
Formiranje (+/-)-metil 3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozi]-l//-pirolo[2,3-b]piridiii-3-
il)pirimidin-4-il)amino)-3-(l-metilciklobutil)propanoata (119a)
[0359]Rastvor 5-fluoro-l-(1o-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridina, 7a, (3.31 g, 7.95 mmol), racemat metil 3-((2-hloro-5-fluoropirimidin-4-il)amino)-3-(l-metilciklobutil)propanoata,118a,(2.00 g, 6.63 mmol) i K3P04(4.22 g, 20.00 mmol) u 2-MeTHF (253 mL) i vodi (56 mL) prečišćeni su sa azotom 0.75 č. XPhos (0.38 g, 0.80 mmol) i Pd2(dba)3(0.15 g, 0.17 mmol) su dodati i reakciona smeša je mešana na 115°C u zapečaćenoj epruveti 2 časa. Reakciona smeša je ohlađena i vodena faza je uklonjena. Organska faza je filtrirana kroz jastučić od Celita i smeša je koncentrovana do sušenja. Ostatak je prečišćen preko hromatografije na silika gelu (EtOAc/Heksani) da bi se dobio željeni proizvod: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 2.32 minuta (M+H) 556.44.
Formiranje (+/-)-metil 3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-lfl-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-
il)amino)-3-(l-metilciklobutil)propanoata (120a)
[0360]Racemskom rastvoru metil 3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-3-(l-metilciklobutil)propanoata,119a,(3.3 g, 5.9 mmol) u acetonitrilu (25 mL) dodata je HC1 (26 mL 4N rastvora u dioksanu). Reakciona smeša je zagrevana do 65<C>C 4 časa. Rastvor je ohlađen do sobne temperature i rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom. Smeša je isprana sa acetonitrilom nakon čega su dodati vodeni rastvor natrijum bikarbonata i etil acetata. Faze su razdvojene i vodeni sloj je ispran sa etil acetatom. Kombinovane organske faze su osušene sa Na2S04, filtrirane i koncentrovanein vacuo.Rezultujući ostatak je prečišćen .hromatografijom na silika gelu (EtOAc/Heksani) da bi se dobio željeni proizvod: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 2.34 minuta (M+H) 403.11.
Formiranje 3-((5-fluoro-2-(5-lfuoro-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-3-(l-metilciklobutil)propionske kiseline (87 i 88)
[0361JU rastvor metil 3-((5-fluoro-2-(5-nuoro-l/^-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidiri-4-il)amino)-3-(l-metilciklobutil)propanoata (11) (1.75 g, 4.36 mmol) u THF (25 mL) dodat je vodeni rastvor IN LiOH (13.1 mL). Smeša je zagrevana do 50°C 3.5 časa. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i razblažena sa vodom. THF je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je zatim ispran dva puta sa heksanima. Dodat je etar i slojevi su razdvojeni (etarski sloj je odbačen). pH je podešena do 5.5 sa IN HC1 i rezultujuća čvrsta supstanca je filtrirana i isprana vodom. Čvrsta supstanca je isprana sa heptanima i osušena preko P2O5da bi se dobilo željeni proizvod:<!>H NMR (400 MHz, DMSO) 6 12.17 (d,J=60.2 Hz, 2H), 8.59 (d,J=8.4 Hz, IH), 8.39 - 8.05 (m, 3H), 7.52 (s, IH), 5.00 (s, IH), 2.23 (d,J= 1. 1Hz, IH), 2.00 (s, IH), 1.81 (d,J =48.3 Hz, 2H), 1.62 (s, IH), 1.46 (s, IH), 1.21 (s, 3H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 2.08 minuta (M+H) 388.46. Racemska smeša je podvrgnuta SFC hiralnoj separaciji da bi se dobili pojedinačni enantiomeri, 87 i 88.
Priprema Jedinjenja 65
[0362] (a) AlMe3, NH4CI, toluen; (b) hidroksilamin, DMSO, 140°C; (c) CDI,<i>Pr2NEt, THF.
Formiranje (+/-)-3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-li/-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-dimetilpentannitrila (124a)
[0363] Amonijum hlorid (0.12 g, 2.30 mmol) je suspendovan u toluenu (4.5 mL). Smeša je ohlađena u ledenom kupatilu i u kapima je dodat AlMe3(1.15 mL 2 M rastvor u toluenu, 2.30 mmol). Smeša je mešana 30 minuta i još 30 min na sobnoj temperaturi. Dodat je rastvor racemata metil 3-[[5-nuoro-2-[5-fluoro-l-(p-tolilsulfonil)pirolo[2,3-b]piridin-3-il]pirimidin-4-il]amino]-4,4-dimetil-pentanoata (0.25 g, 0.46 mmol) u 4.5 mL toluena i rezultujuća smeša je mešana 60°C preko noći. Reakciona smeša je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena sa IN HC1. Smeša je ekstrahovana sa dihlorometanom i filtrirana kroz fazni separator. Ostatak je prečišćen na silika gelu (EA/Hex): LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 2.04 minuta (M+H) 511.42.
Formiranje (+/-)-3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l //-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-A '-hidroksi-4,4-dimetilpentanimidamida (125a)
[0364] U rastvor racemata 3-[[5-fluoro-2-[5-fluoro-l-(p-tolilsulfonil)pirolo[2,3-b]piridin-3-il]pirimidin-4-il]amino]-4,4-dimetil-pentannitrila, 124a, (0.059 g, 0.116 mmol) u DMSO (0.500 mL) dodat je hidroksilamin (0.031 g, 0.470 mmol). Smeša je zagrevana mikrotalasima 140°C 30 minuta. Ostatak je prečišćen na C18 koloni (acetonitril/0.1% mravlja kiselina) da bi se dobilo željeni proizvod: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 1.58 minuta (M+H) 390.06.
Formiranje (+/-)-3-(2-((5-fluoro-2-(5-lfuoro-li/-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-3,3-dimetilbutil)-l,2,4-oksadiazol-5(2//)-ona (65)
[0365] U rastvor racemata 3-[[5-fluoro-2-(5-f]uoro-l/V-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il]amino]-N'-hidroksi-4,4-dimetil-pentanamidina, 125a, (0.034 g, 0.087 mmol) i karbonil diimidazola (0.014 g, 0.087 mmol) u THF (1 mL) dodat je Ar,A-diizopropiletilamin (0.045 mL, 0.260 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 48 časova. Vodeni rastvor amonijum hlorida i dihlorometana su dodati i slojevi su razdvojeni sa faznim separatorom. Ostatak je prečišćen na Cl8 koloni (acetonitril/0.1% mravlja kiselina) da bi se dobilo finalni proizvod:<1>H NMR (400 MHz, Acetone) 5 11.23 (s, IH), 8.54 (dd,J=9.8, 2.8 Hz, IH), 8.36 (s, IH), 8.20 (s, IH), 8.13 (d,J =3.7 Hz, IH), 6.81 (s, IH), 5.00(d, J =11.2 Hz, IH), 3.15 (d,J=14.8 Hz, 3H), 2.94 (dd,J =14.4, 11.9 Hz, 2H), 1.16 (s, 8H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 1.58 minuta (M+H) 390.06.
Priprema Jedinjenja 47
[0366]
(a) Na2C03, CH3CN-THF, 125-150°C; (b) 4M HC1, l,4-dioksan-CH3CN, 60°C
(/?)-3-((2-(5-fluoro-l-tozi]-l//-piro]o[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-i])amino)-4,4-
dimetilpentanska kiselina (128a).
[0367]Sulfoksid,127a,pripremljen je na isti način kao sulfoksid,25a,(videti Šemu sinteze 4) korišćenjem 2,4-dihloropirimidina umesto 2-hloro-5-lfuoro-4-metilsulfanil-pirimidina.
[0368]Smeša 5-fluoro-3-(4-(metilsulfinil)pirimidin-2-il)-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridina,127a,(0.052 g, 0.121 mmol) i (3i?)-3-amino-4,4-dimetil-pentanske kiseline,2a,(0.035 g, 0.242 mmol) zajedno sa Na2C03(0.051 g, 0.483 mmol) u smeši THF (0.780 mL) i acetonitrila (0.260 mL) zagrevana je do 125°C 30 minuta pod mikrotalasnim zračenjem. Zatim, temperatura je povećana do 150°C dodatna 2.5 časa. Smeša je neutralisana sa vodenim rastvorom 2N HC1 i ekstrahovana sa nekoliko delova EtOAc. Organski rastvarači su upareniin vacuo.Prečišćavanje "flash" hromatografijom (Si02, 0-100 % heksani-EtOAc (sa 10% MeOH)) obezbedilo je 19 mg željenog materijala (31% prinos), koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% trifluorosirćetna kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 2.70 minuta (M+H) 512.00.
(/f)-3-((2-(5-fluoro-l/J-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-
dimetilpentanska kiselina(47).
[03691U rastvor (^)-3-((2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-dimetilpentanske kiseline,128a(0.019 g, 0.037 mmol) u acetonitrilu (0.6 mL) dodata je HC1 (0.15 mL 4 M u dioksanu, 0.60 mmol). Rastvor je zagrevan do 60°C 18 časova. Zatim, dodatna HC1 (0.36 mL 4 M u dioksanu) je dodata i zagrevanje je nastavljeno 4 časa. Smeša je ohlađena i koncentrovanain vacuo.Trituracija sa Et20 praćena prečišćavanjem sa preparativnom HPLC obezbedila je 17.5 mg željenog proizvoda kao TFA so: NMR je ukazivala na 4 prema 1 odnos atropizomera:<*>H NMR (400 MHz, MeOD, glavni atropizomer) lS 8.70 (dd, J = 8.9, 2.3 Hz, IH), 8.50 (s, IH), 8.35 (s, IH), 7.99 (d, J = 7.3 Hz, IH), 6.60 (d, J = 7.2 Hz, IH), 5.05 (d, J = 10.7 Hz, IH), 2.93 (dd, J = 15.9, 1.8 Hz, IH), 2.53 (dd, J = 15.9, 11.2 Hz, IH), 1.08 (d, J = 0.8 Hz, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% trifluorosirćetna kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 2.17 minuta (M+H) 358.02.
Priprema Jedinjenja 48
[03701
(a) (C0)2C12, DMF/CH2CI2, NH4OH; (b) Et3N, TFAA, CH2C12(c) N2H4H20, nBuOH, refluks; (d) tBuN02, Br3CH, 60-90°C; (e) Ph3CCl, K2C03, DMF; (f) KOAc, 4,4,5,5-tetrametil-2-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)-l,3,2-dioksaborolan, Pd(dppf)2Cl2, DMF, 100°C; (g) 2-hloro-4-metilsulfanil-pirimidin, Pd2(dba)3, XPhos, K3P04, 2-MeTHF, H20, 115°C; (h) mCPBA, CH2C12, 0°C; (i) Na2C03, CH3CN-THF, 125-150°C; (c) Et3SiH, TFA, CH2CI2.
Formiranje 2-hloro-5-fluoropiridin-3-karboksamida (130a)
[0371]Suspenziji 2-hloro-5-fluoropiirdin-3-karboksilne kiseline (37.0 g, 210.8 mmol) u dihlorometanu (555 mL) dodat je oksalil hlorid (56.2 g, 442.7 mmol) pod azotom. DMF (1.54 g, 21.08 mmol) je polako dodat reakcionoj smeši. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 č i dihlorometan je uklonjen pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u THF (300 mL) i ohlađen do 0°C sa ledenim kupatilom. Amonijum hidroksid je dodat u jednom delu (28-30%, 113.0 mL, 1.8 mmol). Smeša je mešana dodatnih 15 min. Smeša je razblažena u etil acetatu (300 mL) i voda (300 mL) i faze su razdvojene. Organski sloj je ispran sa fiziološkim rastvorom i osušen preko Na2S04, filtriran, i koncentrovanin vacuoda bi se dobilo 29.8 g željenog proizvoda kao bela čvrsta supstanca:<l>RNMR (300 MHz, DMSO-t4) 8 8.53 (d,./ = 3.0 Hz, IH), 8.11 (s, IH), 8.00 (dd,J =8.0, 3.0 Hz, IH), 7.89 (s, IH); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, RT = 1.11 minuta, (M+H) 175.02.
Formiranje 2-hloro-5-fluoropiridin-3-karbonitrila (131a)
[0372]Suspenziji 2-hloro-5-fluoropiridin-3-karboksamida,130a,(29.8 g, 170.4 mmol) u dihlorometanu (327 mL) dodat je trietilamin (52.3 mL, 374.9 mmol). Ova smeša je ohlađena do 0°C. Anhidrid trifluorosirćetne kiseline (26.1 mL, 187.4 mmol) dodat je polako tokom perioda od 15 min. Smeša je mešana na 0°C 90 min. Smeša je razblažena u dihlorometanu (300 mL) i rezultujuća organska faza je isprana sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03(300 mL) i fiziološkim rastvorom (300 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran, koncentrovanin vacuo.Proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (40% do 60% etil acetat/heksani Gradijent) dajući 24.7 g proizvoda kao bela čvrsta supstanca:<!>H NMR (300 MHz, CDC13) 5 8.50 (d,J=3.0 Hz, IH), 7.77 (dd,J=6.8, 3.0 Hz, IH); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.50 minuta, (M+H) 157.06.
Formiranje 5-fluoro-l//-pirazolo[3,4-A]piridin-3-amina (132a)
[0373]Smeši 2-hloro-5-fluoropiridin-3-karbonitrila,131a,(29.6 g, 157.1 mmol) u «-butanolu (492 mL) dodat je hidrazin hidrat (76.4 mL, 1.6 mol). Ova smeša je zagrevana do refluksa 4.5 č i ohlađena. «-Butanol je uklonjen pod sniženim pritiskom i voda (300 mL) je dodata što je rezultovalo u žutom talogu. Suspenzija je filtrirana i isprana dva puta sa vodom, nakon čega je isprana sa MTBE, Žuta čvrsta supstanca je osušena u vakuum peći da bi se dobilo 18 g željenog proizvoda:<*>H NMR (300 MHz, DMSO-ć/6) 5 12.08 (s, IH), 8.38 (dd, J= 2.7, 1.9 Hz, IH), 7.97 (dd,J=8.8, 2.7 Hz, IH), 5.56 (s, 2H). LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, C18/ACN, Retenciono vreme = 1.25 minuta (M+H) 152.95.
Formiranje 3-bromo-5-fluoro-1/7-pirazolo[3,4-6]piridina (133a)
[0374]Smeši 5-fluoro-l//-pirazolo[3,4-ž)]piridin-3-ainina,132a,(0.88 g, 5.79 inmol) u bromoformu (8.8 mL) dodat je terc-butil nitrit (1.38 mL, 11.57 mmol). Ova smeša je zagrevana do 61°C 1 č i zatim je zagrevana do 90°C još jedan čas. Smeša je ohlađena do sobne temperature i bromoform je uklonjen pod sniženim pritiskom. Rezultujući sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (5-50% etil acetat/heksani) da bi se dobilo 970 mg željenog proizvoda kao bela čvrsta supstanca:<!>H NMR (300 MHz, DMSO-4) 8 14.22 (s, IH), 8.67 (dd,J =2.7, 1.9 Hz, IH), 8.07 (dd,J =8.2, 2.7 Hz, IH); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1 % mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.42 minuta (M+H) 216.11.
Formiranje 3-bromo-5-tluoro-l-tritil-l//-pirazolol3,4-A]piridina (134a)
[0375]Smeša 3-bromo-5-fluoro-l//-pirazolo[3,4-/;]piridina,133a,(0.97 g, 4.49 mmol) i K2C03(1.86 g, 13.47 mmol) u DMF (9.7 mL) hlađena je do 0°C. Dodat je hlorodifenilmetilbenzen (1.38 g, 4.94 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je razblažena u etil acetatu (40 mL) i vodi (30 mL) i slojevi su razdvojeni. Organski sloj je ispran sa fiziološkim rastvorom, osušen preko Na?S04, filtriran i koncentrovanin vacuo.Proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (40% etil acetat/heksani) da bi se dobilo 1.68 g željenog proizvoda kao bela čvrsta supstanca: [H NMR (300 MHz, DMSO-£/6) 8 8.45 - 8.38 (m, IH), 8.04 (dd,J=8.0, 2.7 Hz, IH), 7.35 - 7.16 (m, 15H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 3.03 minuta (M+H) 459.46.
Formiranje 5-fluoro-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)-l-tritil-l/J-pirazolo[3,4-b]piridin (135a)
[0376]Rastvor 3-bromo-5-fluoro-l-tritil-pirazolo[3,4-b]piridin,134a(3.43 g, 7.48 mmol), KOAc (2.20 g, 22.45 mmol) i 4,4,5,5-tetrametil-2-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)-l,3,2-dioksaborolana (2.85 g, 11.23 mmol) u DMF (50 ml) je degaziran pod strujom azota 40 min. Smeši je dodat Pd(dppf)2Cl2(0.610 g, 0.748 mmol) Reakciona smeša je zagrevana na 100°C 90 minuta. Reakciona smeša je filtrirana preko jastučića Celite. Rezultujućem filtratu je dodat etar i fiziološki rastvor. Organska faza je sušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovanain vacuoda bi se dobilo 4.0 g sirovog proizvoda koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja (napomena, produkt se razlaže ukoliko se pokuša prečišćavanje preko hromatografije na silika gelu).
Formiranje 5-fluoro-3-(4-(metilthio)pirimidin-2-il)-l-tritil-l//-pirazolol3,4-b]piridina
(136a)
[0377]Rastvor 2-hloro-4-metilsulfanil-pirimidina (0.25 g, 1.56 mmol), K3PO4(0.99 g, 4.67 mmol) i 5-fluoro-3-(4,4,5,5-tetrametil-l ,3,2-dioksaborolan-2-il)-l -tritil-1 //-pirazolo[3,4-b]piridina,135a,(0.87 g, 1.71 mmol) u vodi (1 mL) i 2-metiltetrahidrofuranu (9 mL) degaziran je pod strujom azota 15 minuta. Zatim, dodat je Pd2(dba)3(0.04 g, 0.05 mmol) i smeša je degazirana dodatna 2-3 minuta. Boca je zapečaćena i zagrevana do 95°C preko noći. Nakon razdvajanja slojeva, organska faza je isprana sa vodom. Rezultutjuća čvrsta supstanca je filtrirana i isprana sa etrom i MeTHF. Filtrirana je kroz PSA kertridž sa MeOH/đihlorometan smešom da bi se dobio željeni proizvod kao bela čvrsta supstanca: LCMS Gradijent 60-98%, 0.1% mravlja kiselina, 7min, C4/ACN, Retenciono vreme = 2.68 min (M+Na) 526.1.
Formiranje 5-fluoro-3-(4-(metilsulfinil)pirimidin-2-il)-l-tritil-lfl-pirazolo[3,4-b]piridina
(137a)
[0378]Hladnoj (0°C) smeši 5-fluoro-3-(4-(metilthio)pirimidin-2-il)-l-tritil-l//-pirazolo[3,4-b]piridina,135a,(0.70 g, 1.38 mmol) u dihlorometanu (10.4 mL) dodat je mCPBA (0.43 g, 1.93 mmol). Nakon 30 minuta, smeša je razblažena sa dihlorometanom i isprana sa 2N NaOH i fiziološkim rastvorom. Organska faza je sa fiziološkim rastvorom osušena preko Na2S04, filtrirana i dva puta rektifikovana sa CH3CN da bi se dobilo 660 mg željenog proizvoda koji je korišćen bez dodatnog prečišćavanja: LCMS Gradijent 60-98%, 0.1% mravlja kiselina, 7min, C4/ACN, Retenciono vreme = 2.68 minuta (M+H) 520.
(/f)-3-((2-(5-fluoro-l-tritil-17/-pirazolol3,4-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-
dimetilpentanska kiselina (138a).
[0379]Mešana suspenzija 5-fluoro-3-(4-(metilsulfinil)pirimidin-2-il)-l-tritil- 17/-indazola,137a,(0.09 g, 0.18 mmol), (3#)-3-amino-4,4-dimetil-pentanske kiseline (0.05 g, 0.36 mmol) i Na2C03(0.76 g, 0.72 mmol) u acetonitrilu (0.62 mL) i 2-MeTHF (0.31 mL) zagrevana je do 125°C u mikrotalasnom reaktoru 1 čas. Nakon hlađenja do sobne temperature, smeša je razblažena sa EtOAc, neutralisana sa HC1 (0.72 mL 2 M rastvora, 1.42 mmol) i proizvod je ekstrahovan sa nekoliko delova EtOAc i CH2CI2. Uparavanje kombinovanih organskih faza obezbedilo je 109 mg željenog sirovog proizvoda koji je korišćen u sledećoj reakciji bez dodatnog prečišćavanja: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% trifluorosirćetna kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 3.08 minuta (M+H) 601.05.
(/?)-3-((2-(5-fluoro-l^-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-
dimetilpentanska kiselina(48)
[0380]U rastvor sirove (tf)-3-((2-(5-fluoro-l-tritil-l#-pira^ il)amino)-4,4-dimetilpentanske kiseline,138a,(0.11 g, 0.21 mmol) u CH2CI2dodat je trietilsilan (0.15 mL, 0.94 mmol) a zatim trifluorosirćetna kiselina (0.15 mL, 1.95 mmol). Nakon mešanja rezultujućeg rastvora na sobnoj temperaturi 1 čas, reakciona smeša je držana ispod 5°C preko noći (frižider). Zatim je dozvoljeno da se smeša zagreje do sobne temperature i držana je na toj temperaturi dodatnih 5 časova. Ratsvor je razblažen sa toluenom i koncentrovanin vacuo.Trituracija sa Et20 praćena prečišćavanjem sa preparativnom HPLC obezbedila je 15 mg željenog proizvoda kao TFA so.<!>H NMR ukazivala je na 3 prema 1 smešu atropizomera:<*>H NMR (400 MHz, MeOD, glavni izomer) 5 8.63 - 8.45 (m, 2H), 7.96 (d,J=7.3 Hz, 2H), 6.66 (d,J=7.3 Hz, 2H), 4.95 (d,J=10.6 Hz, 2H), 2.84 (dd,J=15.4, 2.4 Hz, 2H), 2.44 (dd,J =15.9, 10.7 Hz, 2H), 0.98 (s, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% trifluorosirćetna kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.12 minuta (M+H) 359.02.
Pripremanje Jedinjenja 42
[03811
(a) 2-hloro-5,6-difluoropiridin-3-karbonitril, EtiN, THF, EtOH; (b) 5-fluoro-l-(p-tolilsultbnil)-3-(4,4,5,54etrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b] piridin, 7a, X-phos, Pd2(dba)3, K3PO4, 2-metil THF, H20, 130°C; c) NaOMe, THF; d) LiOH, THF, H20.
Formiranje (R)-etil 3-(6-hloro-5-cijano-3-fluoropiridin-2-ilamino)-3-(l-metilciklopentil)propanoata (143a)
[0382]U rastvor racemata etil 3-amino-3-(l-metilciklopentil)propanoata,33a,(0.40 g, 2.01 mmol) i 2,6-dihloro-5-fluoro-piridin-3-karbonitrila (0.46 g, 2.41 mmol) u THF (20 mL) dodat je trietilamin (0.67 mL, 4.82 mmol). Reakciona smeša je mešana na 90°C u epruveti pod pritiskom 18 časova. Reakciona smeša je filtrirana i rezultujući filtrat je koncentrovanin vacuo.Proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (25% EtOAc/heksani) da bi se dobilo 380 mg željenog proizvoda kao racemska smeša:<!>H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 7.31 (d,J=9.7 Hz, IH), 5.56 (d,J=8.9 Hz, IH), 4.68 (td,J=9.6, 3.6 Hz, IH), 4.07 (q,J=7.1 Hz, 2H), 2.68(dd, J=14.8, 3.7 Hz, IH), 2.46(dd, J=14.8, 9.3 Hz, IH), 1.77 - 1.62 (m, 4H), 1.61 - 1.49 (m, 2H), 1.47 - 1.37 (m, IH), 1.35 - 1.26 (m, IH), 1.19 (t,J =7.1 Hz, 3H), 1.01 (s, 3H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 3.81 minuta (M+H) 354.98. Racemska smeša je podvrgnuta SFC hiralnoj separaciji da bi se dobili pojedinačni enantiomeri,143ai143b.(R)-enantiomer,143a,je prenet u sledeći korak sinteze.
Formiranje (/f)-etil 3-(5-cijano-3-fluoro-6-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-
il)piridiii-2-ilaniino)-3-(l-metilciklopentil)propanoata (144a)
[03831Rastvor 5-fluoro-l-(/?-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridina,7a,(0.155 g, 0.373 mmol), racemat etil 3-[(6-hloro-5-cijano-3-fluoro-2-piridil)amino]-3-(l-metilciklopentil)propanoata,143a,(0.120 g, 0.339 mmol) i K3PO4(0.288 g, 1.357 mmol) u 2-metil THF (10.0 mL) i H20 (0.24 mL) je degazirana pod strujom azota 30 minuta. Smeši je dodat X-phos (0.020 g, 0.041 mmol) i Pd2(dba)3(0.008 g, 0.008 mmol). Reakciona smeša je mešana na 130°C u epruveti pod pritiskom 45 minuta. Organska faza je filtrirana preko jastučića od celita i koncentrovanain vacuo.Rezultujući sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (30% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 150 mg željenog proizvoda:<*>H NMR (400 MHz, CDCL) 5 8.67 (s, IH), 8.44 (dt,J=15.3, 7.7 Hz, IH), 8.37(d, J= 1.5Hz,IH), 8.13 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.41 (d,J=10.3 Hz, IH), 7.32 (d,
J=7.5 Hz, 2H), 5.38(t, J=9.7 Hz, IH), 4.89 (td,J=10.1, 3.3 Hz, IH), 4.02 - 3.91 (m, 2H), 2.74 (dd,./= 15.1, 3.5 Hz, IH), 2.52(dd, J =15.1, 10.2 Hz, IH), 2.40 (s, 3H), 1.61(ddt, J =32.0, 20.7, 7.7 Hz, 7H), 1.49 - 1.30 (m, 3H), 1.27 (t,J =7.1 Hz, 3H), 1.08 - 0.97 (m, 3H). LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 4.22 min (M+H) 608.29.
Formiranje (^?)-metil 3-(5-cijano-3-fluoro-6-(5-fluoro-l f/-pirolo[2,3-bjpiridin-3-
il)piridin-2-ilamino)-3-(l-metilciklopentil)propanoata (145a)
[0384]U rastvor racemata etil 3-(5-cijano-3-fluoro-6-(5-fluoro-l-tozil-li7/-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)piridin-2-ilamino)-3-(l-metilciklopentil)propanoata,144a,(0.150 g, 0.247 mmol) u THF (20 mL) dodat je natrijum metoksid (0.053 mL 25% tež rastvora u MeOH, 0.247 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03i EtOAc. Organska faza je sušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovanain vacuo.Proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (40% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 90 mg željenog proizvoda kao smeša etil i metil estara. Smeša je preneta u sledeći korak bez dodatnog prečišćavanja:<1>HNMR (400 MHz, CDC13) 5 10.18 (s, IH), 8.65(dd, J=9.6, 2.5 Hz, IH), 8.48(d, J=2.8 Hz, IH), 8.32 (s,IH), 7.37 (t,J=14.1 Hz, IH), 5.38 (d, J=7.9Hz, IH), 5.02(td, J=9.8, 3.5Hz, IH), 3.54 (s, 3H), 2.80(dt, J=15.8, 7.9 Hz, I H), 2.57(dd,/=14.9, 9.8 Hz, IH), 1.80 - 1.57 (m, 7H), 1.43 (ddd,J =24.5, 14.1, 6.0 Hz, 3H), 1.08 (s, 3H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 3.60 minuta (M+H) 440.26.
Formiranje (/f)-3-(5-cijano-3-lfuoro-6-(5-fluoro-lJH-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)piridin-2-
ilamino)-3-(l-metilciklopentil)propionske kiseline (42)
[0385]U rastvor racemata metil 3-(5-cijano-3-lfuoro-6-(5-fiuoro-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)piridin-2-ilamino)-3-(l-metilciklopentil)propanoata,145a,(0.090 g, 0.204 mmol) u THF (30 mL) dodat je rastvor litijum hidroksida (0.035 g, 0.819 mmol) u H20 (10 mL). Reakciona smeša je mešana na 70°C preko noći. Organska faza je uklonjena pod sniženim pritiskom i rezultujući ostatak je prečišćen preparativnom HPLC. Odgovarajuće HPLC frakcije su ekstrahovane sa EtOAc, i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom: 'H NMR (400 MHz, MeOD) 5 8.64 (dd,J=8.4, 2.4 Hz, IH), 8.57 (s, IH), 8.24 (d,J=4.4 Hz, IH), 5.19 (d,J =8.7 Hz, IH), 2.78(qd, J=15.9, 6.6 Hz, 2H), 1.85 - 1.57 (m, 6H), 1.48(dd, J=11.8, 6.0 Hz, IH), 1.36 (dt,J=12.0, 6.0 Hz, IH), 1.11 (s, 3H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 3.21 minuta (M+H) 426.25.
Priprema Jedinjenja 5. 6 i 12
[0386] (a) Et3N, THF, EtOH; (b) 5-fluoro-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)-l-tritil-lH-pirazolo[3,4-b]piridin,135a,X-phos, Pd2(dba)3, K3P04, 2-metil THF, H20, 135°C; (c) Et3SiH, TFA, CH2C12; (d) LiOH, THF, H20.
Formiranje(+/-)-etil3-(2-hloro-5-fluoropirimidin-4-ilamino)-3-(l-metilciklopentil)propanoata (147a)
[0387]U rastvor 2,4-dihloro-5-fluoro-pirimidina (0.184 g, 1.100 mmol) i racemata etil 3-amino-3-(l-metilciklopentil)propanoata,33a,(0.199 g, 1.000 mmol) u THF (10 mL) i etanola (1 mL) dodat je trietilamin (0.307 mL, 2.200 mmol). Reakciona smeša je mešana na 70°C 5 časova. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovanin vacuo.Rezultujući ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (25% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 180 mg željenog proizvoda:<!>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 7.88( d, J=2.7 Hz, IH), 5.54 (d,J=9. 2 Hz, IH), 4.74 - 4.54 (m, IH), 4.08 (q,J=7.2 Hz, 2H), 2.68 (dd,J =14.8, 3.7 Hz, IH), 2.46 (dd,J =14.8, 9.3 Hz, IH), 1.69 (dd,J=12.8, 8.8 Hz, 4H), 1.63 - 1.50 (m, 2H), 1.46 - 1.38 (m, IH), 1.37 - 1.23 (m, IH), 1.23 - 1.14 (m, 3H), 1.00 (s, 3H). LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, C18/ACN, Retenciono vreme = 3.54 minuta (M+H) 330.17.
Formiranje (+/-)-etil 3-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tritil-l//-pirazolo[3,4-b]piridin-3-
il)pirimidin-4-ilamino)-3-(l-metilciklopentil)propanoata (148a)
[03881Rastvor K3P04(0.464 g, 2.183 mmol), racemat etil 3-[(2-hloro-5-fluoro-pirimidin-4-il)amino]-3-(l-metilciklopentil)propanoata,147a,(0.180 g, 0.546 mmol) i 5-fluoro-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)-l-tritil-pirazolo[3,4-b]piridina,135a,(303.4 mg, 0.6004 mmol) u 2-Metil THF (3.240 mL) i H20 (0.360 mL) degaziran je pod strujom azota 30 minuta. Ovoj smeši je dodat X-phos (0.031 g, 0.066 mmol) i Pd2(dba)3(0.013 g, 0.014 mmol). Reakciona smeša je mešana na 135°C u epruveti pod pritiskom 1 čas. Organska faza je filtrirana preko jastučića od celita i koncentrovanain vacuo.Rezultujući ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (30% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 240 mg željenog proizvoda:<l>KNMR (400 MHz, CDC13) 6 8.55 (dd,J=8.5, 2.7 Hz, IH), 8.15(d, J =2.4 Hz, 2H), 7.27(dd, J=11.0, 5.0 Hz, 15H), 5.38(d, J= 9.7 Hz,IH), 4.89(dd, Jr= 9.7,6.0 Hz, IH), 3.99 (q,J= 7.1 Hz, 2H), 2.73 (dd,J =14.7, 3.8 Hz, IH), 2.52 (dd,J =14.8, 9.4 Hz, IH), 1.68 (dd,J=12.0, 6.6 Hz, 2H), 1.64 - 1.52 (m, 4H), 1.47 - 1.36 (m, IH), 1.30 (dt, J= 14.3, 7.2 Hz, 2H), 1.11 - 0.99 (m, 4H). LCMS Gradijent 60-98%, mravlja kiselina, 7 minuta, Cl 8/can, Retenciono vreme = 3.24 minuta (M+H) 672.85.
Formiranje (+/-)-etil 3-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirazolo[3,4-b] piridin-3-il)pirimidin-4-
ilamino)-3-(l-metilciklopentil)propanoata (149a)
[03891U rastvor racemata etil 3-[[5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tritil-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il]amino]-3-(l-metilciklopentil)propanoata,148a,(0.240 g, 0.357 mmol) u dihlorometanu (20 mL) dodat je trietilsilan (0.285 mL, 1.784 mmol) nakon čega je dodata trifluorosirćetna kiselina (0.275 mL, 3.567 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temepraturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovanain vacuoi rezultujući sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (5% MeOH'CH2Cl2) da bi se dobio željeni proizvod:<l>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 11.80 (s, 2H), 8.59 (d,J=12.3 Hz, 2H), 8.48(d, J =7.9 Hz, IH), 6.60 (d,J=8.3 Hz, IH), 5.07 (s, IH), 4.09 (q,J=7.0 Hz, 2H), 2.97 - 2.59 (m, 2H), 1.70 (dd, .7=27.7, 13.9 Hz, 6H), 1.57 - 1.33 (m, 2H), 1.16 (dd, .7= 18.1, 11.1 Hz, 6H);
LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.97 minuta (M+H) 431.24.
Formiranje (+/-)-3-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il)pirimidin-4-
ilamiiio)-3-(l-metilciklopentil)propionske kiseline (12)
[03901U rastvor racemata etil 3-[[5-fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il]amino]-3-(l-metilciklopentil)propanoata,149a,(0.110 g, 0.256 mmol) u THF (30 mL) dodat je rastvor litijum hidroksid hidrata (0.043g, 1.022 mmol) u H20 (20 mL). Reakciona smeša je mešana na 70°C preko noći. Organski rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i preostala vodena faza je korišćena direktno u prečišćavanju preko preparativne HPLC. Rezultujuće HPLC frakcije su ekstrahovane sa EtOAc. Organska faza je sušena preko MgS04, filtrirana i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da bi se dobio željeni proizvod:<!>H NMR (400 MHz, MeOD) 5 8.64 (dd,J=8.4, 2.4 Hz, IH), 8.57 (s, IH), 8.24 (d,J=4.4 Hz, IH), 5.19 (d,J=8.7 Hz, IH), 2.78 (qd,J=15.9, 6.6 Hz, 2H), 1.85 - 1.57 (m, 6H), 1.48(dd,./11.8, 6.0 Hz, IH), 1.36 (dt,J=12.0, 6.0 Hz, IH), 1.11 (s, 3H). LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.37 min, (M+H) 403.22.
[0391]Sledeća jedinjenja mogu se pripremiti na sličan način kao u prethodno opisanoj proceduri za Jedinjenje12:
(/f)-3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-li^-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-
dimetilpentanska kiselina (5)
[0392]Jedinjenje 5 je sintetisano na način sličan jedinjenju12,počinjući sa jedinjenjem 6a:<J>H NMR (400 MHz, </6-DMSO) 5 12.65 (s, IH), 9.43 (s, IH), 9.15 (s, IH), 8.44 (d, J = 4.7 Hz, IH), 8.41 - 8.29 (m, 2H), 3.93 (s, IH), 3.54 (s, IH), 1.19 (d,J =20.0 Hz, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, C18/ACN, Retenciono vreme = 2.70 min, (M+H) 393.32.
(/?)-3-((3,5-difluoro-6-(5-fluoro-l//-pirazolo[3,4-b]piridin-3-i])piridin-2-il)amino)-4,4-
dimetilpentanska kiselina (6)
[0393]Jedinjenje 6 je sintetisano na način sličan jedinjenju12,korišćenjem (7?)-etil 3-((6-bromo-3,5-difluoropiridin-2-il)amino)-4,4-dimetilpentanoata kao intermedijera za Suzuki kuplovanje. (i?)-etil 3-((6-bromo-3,5-difluoropiridin-2-il)amino)-4,4-dimetil-pentanoat je pripremljen na isti način kao intermedijer,143a,korišćenjem 2-bromo-3,5,6-trifluoropiridina kao početnog materijala umesto 2-hloro-5,6-difluoropiridin-3-karbonitrila:<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.31(d, J= 6.4 Hz, IH), 8.06 (s, IH), 7.06 (t,J =9.7 Hz, IH), 4.58 (s, 2H), 2.80 (d,J =13.2 Hz, IH), 2.29 (dd,J =13.3, 8.7 Hz, IH), 0.98 (s, 9H).; LCMS Gradijent 10-90%, 0.1 % mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.92 min, (M+H) 394.19.
(/?)-3-((2-(5-hloro-lJH-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il)-5-fluoropirimidin-4-il)amino)-4,4-
dimetilpentanska kiselina (97) i metilestar (96)
[0394]Jedinjenja96 i 97su sintetisana na način sličan jedinjenju12,počinjući sa jedinjenjem6a:<*>H NMR (300 MHz, MeOD) za Jedinjenje97:5 8.95 (d,J=2.3 Hz, IH), 8.66 (d,J =2.3 Hz, IH), 8.35 (d,J =5.2 Hz, IH), 5.12 (dd,J =10.7, 2.9 Hz, IH), 2.93 (dd,J =16.5, 2.9 Hz, IH), 2.73 (dd,J=16.4, 10.7 Hz, IH), 1.10 (s, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.79 min, (M+H) 407.37.
Priprema jedinjenja 54 , 56 i 53
[0395] (a) terc-butilhidrazin-HCl, Et3N, THF, EtOH; (b) 2-bromoetil acetat, K2C03, CH3CN; (c) 3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)-l-tozil-5-(trilfuorometil)-l//-pirolo[2,3-b]piridin,153a,X-phos, Pd2(dba)3, K3P04, THF, H20; (d) TBAF/THF; (e) LiOH, H20, THF.
Formiranje 4-(2-terc-butilhidrazinil)-2-hloro-5-fluoropirimidina (151a)
[0396]U rastvor 2,4-dihloro-5-lfuoro-pirimidina (1.84 g, 11.00 mmol) ifcrc-butilhidrazin hidrohlorida (1.25 g, 10.00 mmol) u THF (50 mL) i EtOH (5 mL) dodat je trietilamin (4.18 mL, 30.00 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je filtrirana da bi se uklonila trietilamin HC1 so i filtrat koncentrovaoin vacuo.Rezultujući ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 1.7g željenog proizvoda:<!>H NMR (400 MHz, CDC3) 5 7.82 (d,J =2.8 Hz, IH), 6.47 (s, IH), 4.60 (d, ./ = 5.8 Hz, IH), 1.09 (s, 9H). LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.19 minuta (M+H) 218.81.
Formiranje etil 2-(l-/e?-c-butil-2-(2-liloro-5-fluoropirimidin-4-il)hidrazinil)etanoata
(152a)
[0397]Suspenziji 4-(2-fcrc-butilhidrazmil)-2-hloro-5-fluoropirimidina,151a,(1.50 g, 6.86 mmol) u acetonitrilu (68 mL) dodat je 2-bromoetil acetat (0.84 mL, 7.55 mmol) i K2CO3(2.28 g, 16.46 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je razblažena sa EtOAc i fiziološkim rastvorom. Organska faza je osušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovanain vacuo.Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (30%EtOAc/Heksani) da bi se dobio 1 g željenog proizvoda:<*>H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 7.96(d, J=3.1 Hz, IH), 4.16(dt, J=7.1, 5.9 Hz, 2H), 3.74 (s, 2H), 1.30 - 1.23 (m, 3H), 1.20 (s, 9H). LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.69 minuta (M+H) 305.09.
Formiranje etil 2-(l-te/-f-butil-2-(5-fluoro-2-(l-tozil-5-(trifluorometil)-lH-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)hidrazinil)etanoata (154a)
[0398]Boronatni estar,153a,pripremljen je na isti način kao boronatni estar,7a,(videti Šemu sinteze 4) korišćenjem 3-bromo-5-(trifluorometil)-lH-pirolo[2,3-b]piridina umesto 3-bromo-5 -fluoro-1 77-pirolo [2,3 -b]piridina.
[0399]Rastvor l-(p-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)-5-(trifluorometil)pirolo[2,3-b]piridina,153a,(0.551 g, 1.181 mmol), etil 2-(l-/erc-butil-2-(2-hloro-5-fluoropirimidin-4-il)hidrazinil)etanoata,152a,(0.300 g, 0.984 mmol) i K3PO4(0.627 g, 2.953 mmol) u 2-MetilTHF (26 mL) i H20 (5 mL) degaziran je pod strujom azota 45 minuta. Reakcionoj smeši je dodat X-phos (0.056 g, 0.118 mmol) i Pd2(dba)3(0.022 g, 0.025 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 120°C 75 minuta. Vodena faza je uklonjena i organska faza je filtrirana preko jastučića od celita, koncentrovanain vacuoi prečišćena hromatografijom na silika gelu (30% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 540 mg željenog proizvoda:<!>H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 9.49 (s, IH), 8.71(t, J=7.0 Hz, IH), 8.63( d, J =11.1 Hz, IH), 8.16 - 8.11 (m, 3H), 7.31(d, J =8.2 Hz, 2H), 7.11(d, J= 21.4 Hz,IH), 4.10(dd, J =13.4, 6.3 Hz, 2H), 3.79 (s, 2H), 2.39 (s, 3H), 1.24 (s, 9H), 1.17(t,./= 7.1 Hz, 3H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 4.18 minuta (M+H) 609.37.
Formiranje etil 2-(l-(terc-butil)-2-(5-fluoro-2-(5-(trifluorometil)-lH-pirolo[2.3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)hidrazinil)acetata (155a)
[0400]U rastvor etil 2-(l-/erc-butil-2-(5-nuoro-2-(l-tozil-5-(trilfuorometil)-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)piriniidin-4-il)hidrazinil)etanoata,154a,(0.54 g, 0.89 mmol) u THF (20 mL) dodat je tetrabutilamonijum fluorid (1.78 mL of 1 M, 1.78 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakciona smeša je razblažena u EtOAc i fiziološkom rastvora. Organska faza je sušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovanain vacuo.Rezultujući ostatak je prečišćen bromatografijom na silika gelu (70%EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 300 mg željenog proizvoda.<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 8 10.59 (s, IH), 9.55 (s, IH), 8.66 (s, IH), 8.29 (d,J =2.2 Hz, IH), 8.13 (dd,J= 3.8, 1.5 Hz, IH), 7.14 (s, IH), 4.20 - 4.04 (m, 2H), 3.85 (s, 2H), 1.28 (d, J = 9.1 Hz, 9H), 1.19 (dt,J=7.1, 3.6 Hz, 3H). LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.93 min, (M+H) 455.43.
Formiranje 2-(l-(/e/,c-butil)-2-(5-fluoro-2-(5-(trilfuorometil)-lJH-pirolo[2,3-b]piridin-3-
il)pirimidin-4-il)hidrazinil)sirćetne kiseline (54)
[0401]U rastvor etil 2-[^rc-butil-[[5-lfuoro-2-[5-(trifluorometil)-lH-pirolo[2,3-b]piridin-3-il]pirimidin-4-il]amino]amino]acetata,155a,(0.200 g, 0.440 mmol) u THF (40 mL) dodat je rastvor litijum hidroksid hidrata (0.074 g, 1.760 mmol) u H:0 (4 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovanain vacuoda bi se uklonio THF. Preostala vodena faza je razblažena do 8 mL i rastvor je korišćen direktno u preparativnoj H PLC. Proizvod je istaložen kada je frakcija koncentrovana na rotavaporatoru. Čvrsta supstanca je filtrirana i sušena u desikatoru sa P2O5da bi se dobilo 120 mg željenog proizvoda:<!>H NMR (400 MHz, afe-DMSO) 5 12.65 (s, IH), 12.41 (s, IH), 9.28 (s, IH), 8.86 (s, IH), 8.65 (s, IH), 8.30( d, J =3.5 Hz, 2H), 3.97 - 3.70 (m, IH), 3.51 (s, IH), 1.18 (s, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.92 min, (M+H) 427.40
[0402]Sledeća jedinjenja mogu biti pripremljena na sličan način kao postupak opisan u prethodnom tekstu za jedinjenje54:
Formiranje soli 2-(l-(fc?-c-butil)-2-(2-(5-hloro-l/r-pirolo[2,3-6]piridin-3-il)-5-fluoropirimidin-4-il)hidrazinil)sirćetne kiseline-TFA (trifluorosirćetne kiseline) (56) [04031<l>H NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 12.65 (s, IH), 9.43 (s, IH), 9.15 (s, IH), 8.44 (d, J = 4.7 Hz, IH), 8.41 - 8.29 (m, 2H), 3.93 (s, IH), 3.54 (s, IH), 1.19 (d,J=20.0 Hz, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, C18/ACN, Retenciono vreme = 2.70 min, (M+H) 393.32.
Formiranje soli 2-(l-(terc-butil)-2-(5-tluoro-2-(5-fluoro-lH-pirolo[2,3-bjpiridin-3-
il)pirimidin-4-il)hidrazinil)sirćetne kiseline-TFA (53)
[0404]<*>H NMR (400 MHz, ć4-DMSO) 5 12.57 (s, IH), 9.40 (s, IH), 8.88 (s, IH), 8.40 (d, J = 18.7 Hz, 2H), 8.34 (s, IH), 3.93 (s, IH), 3.52 (s, IH), 1.20 (s, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, C18/ACN, retenciono vreme = 2.50 min, (M+H) 377.42.
Priprema jedinjenja 7 , 8 i 18
[0405]
(a) 2,6-dihloro-5-fluoro-piridin-3-karbonitril, Et3N, acetonitril; (b) 5-fluoro-l-(/?-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tctramctil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridin,7a,Pd2(dba)3, X-Phos, K3PO4, 2-MeTHF, H20, 125°C; (c) LiOH, TH F, H20
Formiranje etil 3-[(6-hloro-5-cijano-3-fluoro-2-piridil)amino]-4,4-dimetil-heksanoata
(158a)
[0406]Rastvor etil 3-amino-4,4-dimetil-heksanoata,27a,(0.24 g, 1.28 mmol), 2,6-dihloro-5-fluoro-piridin-3-karbonitrila (0,29 g, 1,53 mmol) i E13N (0.43 mL, 3.07 mmol) u acetonitrilu (4.8 mL) je mešan na 70°C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovanain vacuoi prečišćena hromatografijom na silika gelu (gradijent 10-40% EtOAc/Heksana) da bi se dobilo 205 mg etil 3-[(6-hloro-5-cijano-3-fluoro-2-piridil)amino]-4,4-dimetil-heksanoata; LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 3.75 minuta (M+H) 342.04.
Formiranje etil 3-[[5-cijano-3-lfuoro-6-[5-fluoro-l-(p-tolilsiilfonil)pirolo[2,3-b] piridin-3-
il]-2-piridil]amino]-4,4-dimetil-heksanoata (159a)
[0407]Rastvor etil 3-[(6-liloro-5-cijano-3-fluoro-2-piridil)amino]-4,4-dimetil-heksanoata,158a,(0.21 g, 0.600 mmol), 5-fluoro-l-(p-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridina,7a,(0.30 g, 0.72 mmol) i K3PO4(0.51 g, 2.40 mmol) u 2-metil THF (20.5 mL) i H2O (2.7 mL) je degaziran 45 minuta i tretiran sa X-phos (0.03 g, 0.07 mmol) i Pd2(dba)3(0.01 g, 0.02 mmol). Reakciona posuda je hermetički zatvorena i zagrevana do 125°C u trajanju od 90 minuta. Posle hlađenja do sobne temperature, vodena faza je uklonjena i organska faza je filtrirana i koncentrovanain vacuo.Sirovi ostatak je prečišćen m-omatografijom na silika gelu (gradijent 0-40% EtOAc/Heksana) da bi se dobilo 270 mg željenog proizvoda:<*>H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 8.69 (s, IH), 8.51 (dd,J=9.1, 2.7 Hz,IH), 8.37 (d, J=1.8 Hz,IH), 8.15 (d,/= 8.4 Hz, 2H), 7.41 ( d, J=10.3 Hz, IH), 7.33 (d,/ =8.1 Hz, 2H), 5.28 - 5.22 (m, IH), 4.92(td, J =10.4, 3.2 Hz, IH), 4.03 - 3.91 (m, 2H), 2.75(dd, J=14.9, 3.5 Hz,IH), 2.45 (dd, J =12.6, 8.2 Hz, IH), 2.40(s, J=4.7Hz, 3H),1.36 (q,J = 7.4 Hz, 2H), 1.01 (t,J =7.1 Hz, 3H), 0.92 (d,J =8.8 Hz, 6H), 0.88 (t,J =7.5 Hz, 3H). LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, C18/ACN, Retenciono vreme = 2.86 minuta (M+H) 596.02.
Formiranje 3-[[5-cijano-3-fluoro-6-(5-fluoro-l//-pirolo[2,3-b]piridiii-3-il)-2-
piridil] amino] -4,4-dimetil-heksanske kiseline (18)
[0408]Etil 3-[[5-cijano-3-fluoro-6-[5-fliioro-l-(j?-tolilsulfonil)pirolo[2,3-b]piridin-3-il]-2-piridil]amino]-4,4-dimetil-heksanoat,159a,(0.27 g, 0.45 mmol) je rastvorenu THF (7 mL) i tretiran sa LiOH (4.50 mL od 1 M, 4.50 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do 70°C u trajanju od 10 časova. Posle hlađenja do sobne temperature, dodati su voda (20 mL) i etil acetat (20 mL) i slojevi su razdvojeni. Vodeni sloj je doveden do neutralne pH dodavanjem IN HC1, i dobijeni talog je sakupljen filtracijom, ispran vodom i koncentrovanin vacuoda bi se dobilo 77 mg željenog proizvoda:<J>H NMR (400 MHz, DMSO-^) 5 12.37 (s, IH), 12.12 (s, IH), 8.75( d, J =9. 9 Hz, IH), 8.32 (s, 2H), 7.83 (d,J =11.4 Hz, IH), 7.48 (d,J= 9.5 Hz, IH), 5.00 (t,J =9.1 Hz, IH), 2.71 - 2.54 (m, 2H), 1.30 (d,J = 1AHz, 2H), 0.80 (t,J =18.7 Hz, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 3.14 minuta (M+H) 414.31.
[0409]Sledeća jedinjenja mogu biti pripremljena na sličan način kao postupak opisan u prethodnom tekstu za jedinjenje18:
Formiranje (/f)-3-(5-cijano-3-lfuoro-6-(5-fluoro-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)piridin-2-
ilamino)-4,4-dimeti]pentanske kiseline(7)
[04101<J>H NMR (400 MHz, MeOD) S 8.81 (dd,J= 9.8, 2.7 Hz, IH), 8.36 (s, IH), 8.20 (s, IH), 7.53 (d,J =11.0 Hz, IH), 5.04( d, J =8.7 Hz, IH), 2. 80 (dd,J =15.2, 2.5 Hz, IH), 2.59 (dd,J= 15.0, 11.0 Hz, IH), 0.99 (s, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 3.0 minuta (M+H) 400.39.
Formiranje (/f)-3-(5-cijano-3-lfuoro-6-(5-fluoro-li/-pirolol2,3-b]piridin-3-il)piridin-2-
ilamino)-3-(l-metilciklopentil)propionske kiseline (8)
[0411]<*>H NMR (300 MHz, CDCL) 5 10.70 (s, IH), 8.42 (dd,J=9.6, 2.6 Hz, IH), 8.05 (s, IH), 7.73 (s, IH), 7.40 (t,J =8.4 Hz, IH), 5.32 (d,J =6.6 Hz, IH), 4.83 (t, / = 9.4 Hz, IH), 2.89(d, J=5.3 Hz, IH), 2.34(dd, J=12.8, 9.6 Hz, IH), 1.92 - 1.37 (m, 8H), 1.32 - 1.24 (m, IH), 1.20 - 1.06 (m, 3H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1 % mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 3.27 minuta (M+H) 426.31.
Priprema jedinjenja 55
[0412] (a) (i) NH3, HBTU, THF, (ii) 2N LiOH, MeOH; (b) TFAA, piridin; (c) Bu3SnN3, dioksan, 130°C;
Formiranje (+/-)-3-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirolo[2,3-A]piridin-3-il)pirimidin-4-
ilamino)-4,4-dimetilpentanamida (164a)
[0413]U rastvor racemske 3-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-lH-pirolo[2,3-Zj]piridin-3-il)pirimidin-4-ilamino)-4,4-dimetilpentanske kiseline, 163a, (0.50 g, 0.94 mmol) u 15 mL THF dodat je HBTU (0.36 g, 0.95 mmol). Reakcija je mešana 15 minuta i zatim je amonijačni gas barbotiran kroz reakciju u trajanju od 5 minuta. Reakcija je ostavljena da se meša 12 časova i zatim koncentrovana do sušenja. Ostatak je ponovo rastvoren u 20 mL MeOH i tretiran sa 3 mL 2N LiOH. Reakcija je zagrevana do 60°C u trajanju od 3 časa i zatim koncentrovana do sušenja. Ostatak je prečišćen m-omatografijom na silika gelu (EtOAc) da bi se dobilo 250 mg željenog proizvoda: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 1.78 minuta (M+H) 375.45.
Formiranje (+/-)-3-(5-fluoro-2-(5-fluoro-lJH-pirolo[2,3-Z»]piridin-3-il)pirimidin-4-
ilamino)-4,4-dimetilpentan nitrila (165a)
[0414]Rastvor racemskog 3-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirolo[2,3-7)]piridin-3-il)pirimidin-4-ilamino)-4,4-dimetilpentanamida,164a,(0.250 g, 0.668 mmol) u piridinu hlađen je do 0°C i tretiran anhidridom trifluorosirćetne kiseline (0.278 mL, 2.003 mmol). Posle 2 časa na 0°C, reakcija je koncentrovana do sušenja i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (EtOAc) da bi se dobilo 150 mg željenog proizvoda: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, C18/ACN, Retenciono vreme = 2.41 minuta (M+H) 357.47.
Formiranje (+/-)-A-(3,3-dimetil-l-(2/^-tetrazol-5-il)butan-2-il)-5-nuoro-2-(5-lfuoro-l//-
pirolo[2,3-6]piridin-3-il)pirimidin-4-amina (55)
[0415]U rastvor racemskog 3-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirolo[2,3-i]piridin-3-il)pirimidin-4-ilamino)-4,4-dimetilpentan nitrila,165a,(0.150 g, 0.420 mmol) u 10 mL dioksana dodat je azido-tributilstanan (0.221 g, 0.668 mmol). Reakciona posuda je hermetički zatvorena i zagrevana do 130°C u trajanju od 12 časova. Posle hlađenja, reakcija je koncentrovana do sušenja i dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu da bi se dobilo 48 mg željenog proizvoda: 'HNMR (300.0 MHz, J6-DMSO) 5 12.23 (s, H), 8.49( đ, J=9.6 Hz, H), 8.26 - 8.05 (m, H), 4.03( d. J=7.1 Hz, H), 3.48 - 3.35 (m, H), 3.17 (s, H), 2.50 (s, H), 1.99 (s, H), 1.13 (dt,J=25.1, 8.0 Hz, H), 1.01 (s, H), 0.96 (s, H) i 0.87 (d,J=6.6 Hz, H) ppm; LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 1.94 minuta (M+H) 400.46.
Priprema jedinjenja 60 i 61
[0416] (a) terc-butilbromoacetat, K2CO3, aceton; (b) okson, voda, MeOH; (c) 5-fluoro-l-(p-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridin, 7, K3PO4X-Phos, Pd2(dba)3, 2-Me THF, voda, 120<C>C; (d) 25% NaOMe, MeOH; (e) TFA, CH2C12, 50°C.
Formiranje( S)- terc- Jiiitil2-(2-(2-hloro-5-fluoropirimidin-4-ilammo)-3,3-dimetil-
butiltio)etanoata (168a)
[0417]U mešajuću suspenziju (5<r>)-2-((2-hloro-5-fluoropiriniidin-4-il)amino)-3,3-dimetilbutan-l-tiola, 77a, (1.50 g, 5.69 mmol) i K2C03(2.36 g, 17.06 mmol) u acetonu (15 mL) dodat je terc-butil bromoacetat (1.26 mL, 8.53 mmol). Suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi 18 časova. Dobijena čvrsta supstanca je filtrirana, isprana acetonom i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent 0-30% EtOAc/heksana) da bi se dobilo 1.6 g željenog proizvoda kao prljavo bela čvrsta supstanca: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 3.81 minuta (M+H) 378.06.
Formiranje( S)- terc- Butil2-(2-(2-hloro-5-fluoropirimidin-4-ilamino)-3,3-dimetilbutil-
sulfonil)etanoata (169a)
[0418]Okson (5.37 g, 8.73 mmol) je dodat u rastvor( S)- terc- Butil2-(2-(2-hloro-5-fluoropirimidin-4-ilamino)-3,3-dimetil-butilthio)etanoata,168a,(1.10 g, 2.91 mmol) u metanolu (50 mL) i vodi (20 mL) i rastvor je mešan 3 časa na sobnoj temperaturi. Rastvor je koncentrovanin vacuoda bi se dobio beli ostatak koji je rastvoren u vodi (100 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3x 50 mL) i spojene organske faze su sušene (MgSO^), filtrirane i koncentrovanein vacuoda bi se dobilo 750 mg željenog proizvoda kao bela čvrsta supstanca: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 1.29 minuta (M+H) 410.19.
Formiranje( S)- terc- Butil2-(2-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-i!»]piridin-3-
il)pirimidin-4-ilamino)-3,3-dimetilbutilsulfonil)etanoata (170a)
[0419]Rastvor 5 -fluoro-1 -(/>tolilsulfonil)-3 -(4,4,5,5 -tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2 - il)pirolo[2,3-b]piridina, 7a, (0.76 g, 1.83 mmol),( S)- terc- Butil2-(2-(2-hloro-5-fluoropirimidin-4-ilamino)-3,3-dimetilbutil-sulfonil)etanoata, 169a, (0.75 g, 1.83 mmol) i K3PO4(0.93 g, 4.39 mmol) u 2-metil THF (10 mL) i vodi (2 mL) je degaziran pod strujom azota u trajanju od 30 minuta. Dodati su X-Phos (0.06 g, 0.12 mmol) i Pd2(dba)3(0.03 g, 0.03 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 115°C u vijalici pod pritiskom u trajanju od 2.5 časa. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature, filtrirana i koncentrovanain vacuo.Ostatak je rastvoren u EtOAc (50 mL) i ispran vodom. Organski sloj je sušen (MgS04), filtriran i koncentrovanin vacuo.Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent 0-60% EtOAc/Heksana) da bi se dobilo 1.0 g željenog proizvoda kao penasta čvrsta supstanca: LCMS Gradijent 60-98% ACN/voda, 0.9% mravlja kiselina, 7 minuta, C4, Retenciono vreme = 2.39 minuta (M+H) 564.34.
Formiranje (5)-2-(2-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirolo [2,3-b] piridin-3-il)pirimidin-4-
ilamino)-3,3-dimetilbutilsulfonil)sirćetna kiselina (60)
[0420]U rastvor( S)- terc- butil2-(2-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-ilamino)-3,3-dimetilbutilsulfonil)etanoata,170a,(1.00 g, 1.50 mmol) u THF (50 mL) dodat je NaOMe (1.30 mL od 25% rastvora u MeOH, 1.45 mmol). Žuto obojeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 30 minuta i zatim je smeša razblažena vodenim zasićenim rastvorom NH4CI. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u vodi (50 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3x50 mL) i sušen (MgS04), filtriran i koncentrovanin vacuo.Proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent 0-10% MeOH/CH2Cl2) da bi se dobilo 0.50 g detozilovanog estarskog intermedijera kao bela čvrsta supstanca.
[0421]Estar (0.50 g) je rastvoren u CH2CI2(4 mL) i dodata je trifluorosirćetna kiselina (2 mL). Rastvor je zagrevan na 5()°C u trajanju od 2 časa. Rastvarač je isparavan pod sniženim pritiskom. Ostatak je razblažen vodom (10 mL) i rastvor je neutralizovan vodenim zasićenim rastvorom NaHC03. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (3x 10 mL), sušena (MgS04), filtrirana i koncentrovanain vacuo.Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent 0-15% MeOH/CH2Ci2) da bi se dobilo 204 mg željenog proizvoda,60,kao bela čvrsta supstanca: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.01 minuta (M+H) 454.21.
[0422]Sledeća jedinjenja mogu biti pripremljena na isti način upotrebom postupka opisanog u prethodnom tekstu:
^-2-(2-(2-(5-hloro-l/f-pirolof2,3-6]piridin-3-il)-5-fluoropirimidin-4-ilamino)-3,3-
dimetilbutilsulfonil)sirćetna kiselina(61)
[0423]<*>H NMR (300 MHz, MeOD) 5 8.95 (s, IH), 8.29 - 8.14 (m, 2H), 8.08 (d,J=4.0 Hz, IH), 5.26 (m, IH), 4.21 (d,J= 15.3 Hz, IH), 3.92 (dd,J= 30.0, 14.5 Hz, 2H), 3.77 - 3.57 (m, IH), 1.10 (s, 9H); LCMS Gradijent 60-98% ACN/voda, 0.9% mravlja kiselina, 7 minuta, C4, Retenciono vreme = 2.23 minuta (M+H) 470.14.
Priprema jedinjenja 64
[0424] (a) Okson, MeOH; (b) 5-fluoro-l-(p-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridin, 7a, K3PO4X-Phos, Pd2(dba=3, 2-Me THF, voda, 120°C; (c) NaOMe,
MeOH, THF.
Formiranje^/■c-butil-((5)-2(2-hloro-5-lfuoropirimidin-4-ilamino)-3,3-
dimetilbutilsulfinil)etanoata (175a)
[0425]Okson (1.04 g, 1.69 mmol) je dodat u mešajući rastvor( S)- terc- Butii2-(2-(2-hloro-5-fluoropirimidin-4-ilamino)-3,3-dimetil-butiltio)etanoata,168a,(0.53 g, 1.41 mmol) u metanolu (20 mL). Rastvor je mešan 15 minuta na sobnoj temperaturi. Rastvor je koncentrovan da bi se dobio beli ostatak koji je rastvoren u vodi (50 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3x 25 mL) i organski sloj je sušen (MgS04), filtriran i koncentrovanin vacuoda bi se dobilo 540 mg željenog proizvoda kao bela čvrsta supstanca: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 3.05 minuta (M+H) 394.28.
tere-Butil2-((5')-2-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-A]piridin-3-il)pirimidin-4-
ilamino)-3,3-dimetUbutilsulfinil)etanoat (176a)
[0426]Rastvor 5-fluoro-l-(>-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridina,7a,(0.66 g, 1.58 mmol),^erc-butil((S)-2(2-hloro-5-fluoropirimidin-4-ilamino)-3,3-dimetilbutilsulfinil)etanoata,175a,(0.50 g, 1.27 mmol) i K3P04(0.65 g, 3.05 mmol) u 2-metil THF (10 mL) i vodi (2 mL) je degaziran pod strujom azota u trajanju od 30 minuta. Dodati su X-Phos (0.04 g, 0.08 mmol) i Pd2(dba)3(0.02 g, 0.02 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 115°C u bočici pod pritiskom u trajanju od 4 časa. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature, filtrirana i koncentrovanain vacuo.Ostatak je rastvoren u EtOAc (50 mL) i ispran vodom. Organski sloj je sušen (MgS04), filtriran i koncentrovanin vacuo.Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent 0-60% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 450 mg željenog proizvoda kao bela penasta čvrsta supstanca: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 3.91 minuta (M+H) 648.40.
2-('(5'j)-2-(5-tluoro-2-(5-tluoro-lJH-pirolo[2,3-6]piridin-3-il)pirimidiii-4-ilamino)-3,3-
dimetilbutusulfinil)sirćetna kiselina (64)
[0427]U rastvor/erc-butil 2-((5)-2-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l -tozil-l/7-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-ilamino)-3,3-dimetilbutilsulfinil)etanoata,176a,(0.42 g, 0.64 mmol) u THF(10 mL) dodat je NaOMe (0.21 mL od 25% rastvora u MeOH, 0.96 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta. Dodat je vodeni zasićeni rastvor NH4C1 i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u vodi (20 mL) i vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3 x 20 mL). Spojene organske faze su sušene (MgS04), filtrirane i koncentrovanein vacuo.Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent 0-15% MeOH/CH2Cl2) da bi se dobilo 36 mg željenog proizvoda kao bela čvrsta supstanca:<l>R NMR (400 MHz, MeOD) 5 8.60 - 8.52 (m, IH), 8.46 (s, IH), 8.32 (d,J =5.3 Hz, 2H), 5.16 (m, 2H), 4.00( d, J= 14.7 Hz, IH), 3.80( d, J =14.7 Hz, IH), 3.59(d,J =13.9, IH), 1.12 (s, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 1.93 minuta (M+H) 438.25.
Priprema jedinjenja 66 , 67 , 72 i 73
[0428] (a) i. TMS-CF3, CsF, THF, ii. TFA, CH2C12; (b) 5-fluoro-l-(p-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridm, 7a, X-phos, Pd2(dba)3, K3PO4, 120°C: (c) NaOMe, THF; (d) TBAF, THF.
Formiranje (4if)-4-((2-hloro-5-fluoropirimidin-4-i])amino)-l,l,l-trifluoro-5,5-
dimetilheksan-2-ola (180a) i (181a)
[0429]U rastvor (3i?)-3-[(2-hloro-5-fluoro-pirimidin-4-il)amino]-4,4-dimetil-pentanala (0.212 g, 0.817 mmol) i (trifluorometil)trimetilsilana (1.96 mL, 0.980 mmol) u THF (20 mL) dodat je cezijum fluorid (0.001 g, 0.008 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Reakciona smeša je razblažena u fiziološkom rastvoru i EtOAc. Organska faza je sušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovanain vacuo.Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (EtOAc/heksani) da bi se dobilo 190 mg sililovanog alkohola. Ovaj intermedijer je razblažen sa dihlorometanom (10 mL) i u smešu je dodata trifluorosirćetna kiselina (1 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakciona smeša je koncentrovanain vacuoi dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (60% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 60 mg dijastereomera180ai 100 mg dijastereomera181a.Svaki dijastereomer je posebno dalje korišćen kroz preostalu sintetičku sekvencu. [04301Dijastereomer,180a:<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 6 7.93 (dd,J= 43.4, 2.6 Hz, IH), 5.10( d, J= 8.9 Hz, IH), 4.13 (dd,J= 15.8,5.8 Hz, IH), 3.94 - 3.71 (m, IH), 2.05 (ddd,J =13.7, 9.2, 2.1 Hz, IH), 1.64 (t,J=12.9 Hz, IH), 1.05 (s, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, C18/ACN, Retenciono vreme = 3.18 minuta (M+H) 330.42.
[0431]Dijastereomer,181a:<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 7.79 (d,J=2.7 Hz, IH), 5.30 (d,J =11.6 Hz, IH), 4.22 -4.07 (m, 2H), 2.19 (ddd,J=28.7, 15.3, 13.4 Hz, IH), 1.74 - 1.59 (m, IH), 1.04 (s, 9H). LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 3.26 minuta (M+H) 330.42.
Formiranje (4/f)-l,l,l-trifluoro-4-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-6]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-5,5-dimetilheksan-2-ola (182a)
[0432]Rastvor 5-fluoro-l-(/?-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridina (0.091 g, 0.218 mmol), 7a, (4^)-4-[(2-hloro-5-ifuoro-pirimidin-4-il)amino]-l,l,l-trifluoro-5,5-dimetil-heksan-2-ola,180a,(0.060 g, 0.182 mmol) i K3P04(0.116 g, 0.546 mmol) u 2-metil THF (5 mL) i H2O (1.5 mL) je degaziran pod strujom azota u trajanju od 45 minuta. U reakcionu smešu je dodat X-phos (0.010 g, 0.022 mmol) i Pd2(dba)3(0.004 g, 0.005 mmol). Reakciona smeša je mešana na 120°C u epruveti pod pritiskom u trajanju od 2 časa. Vodena faza je uklonjena. Organska faza je filtrirana kroz čep od celita i koncentrovanain vacuo.Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (40% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 60 mg željenog proizvoda:<l>K NMR (400 MHz, CDCI3) 5 8.41 (s,IH), 8.37 (dd, J= 8.9, 2.8 Hz,IH), 8.24( t, J=8.7 Hz,IH), 8.16 (d, J = 2. 9 Hz,IH), 8.00(d, J=8.4 Hz, 2H), 7.24(d, J=8.1 Hz, 2H), 4.92(t, J=7.8 Hz, 2H), 4.44(t, J=10.3 Hz, IH), 4.06 (s, IH), 2.34 (s, 3H), 2.13(dt, J=13.6, 4.9 Hz, IH), 1.66(dd,./=23.0, 9.3 Hz, IH), 1.07 (d,J =8.4 Hz, 9H). LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 4.02 min (M+H) 584.41.
[0433]Dragi dijastereomemi alkohol,181a,je takođe reagovao na isti način da bi se proizveo dijastereomerni Suzuki proizvod.184a:<l>RNMR (400 MHz, CDC13) 5 8.53 (s, IH), 8.47 (dt,J=11.5, 5.7 Hz, IH), 8.30( d, J =1.9 Hz, IH), 8.11 - 8.06 (m, IH), 7.29 - 7.24 (m, IH), 5.30 - 5.21 (m, IH), 4.61 (d,J=4.1 Hz, IH), 4.29 - 4.16 (m, 2H), 2.43 - 2.33 (m, 4H), 1.75 - 1.66 (m, IH), 1.09 (d,J =10.8 Hz, 9H). LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 4.02 minuta (M+H) 584.44.
Formiranje (4/f)-l,l,l-trifluoro-4-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-
il)pirimidin-4-il)amino)-5,5-dimetilheksan-2-ola (66 i 67)
[0434]U rastvor( 4R)-1,1,1 -trifluoro-4-((5-fluoro-2-(5-lfuoro-l -tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-5,5-dimetilheksan-2-ola,182a,(0.053 g, 0.091 mmol) dodat je NaOMe (0.019 g od 25% rastvora u MeOH, 0.091 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 5 minuta. Reakciona smeša je razblažena u EtOAc i vodeni zasićeni rastvor NaHC03. Organska faza je sušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovanain vacuo.Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 26 mg željenog proizvoda, 66:<*>H NMR (400 MHz, CDCL) 5 9.40 (s, IH), 8.47 (dd,J= 9.3, 2.7 Hz, IH), 8.15 (s, IH), 8.10 (d,J =2.7 Hz, IH), 7.99 (d,J =2.8 Hz, IH), 5.54 (s, IH), 4.84( d, J=7.5 Hz, IH), 4.23(t, J=9.9 Hz, IH), 3.91 (s, IH), 2.07 - 1.97 (m, IH), 1.62 (t,J=13.0 Hz, IH), 1.01 (s, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, retenciono vreme = 2,42 minuta (M+H) 430.44.
[0435]Dragi dijastereomerni proizvod, 67, je pripremljen uklanjanjem tozil-zaštitne grupe na intermedijera,184a,upotrebom sledećeg postupka: U rastvor (47?)-l, 1,1 -trinuoro-4-[[5-fluoro-2-[5-fluoro-l -(/5-tolilsulfonil)pirolo[2,3-b]piridin-3-il]pirimidin-4-il]amino]-5,5-dimetil-heksan-2-ola,184a,(0.060 g, 0.103 mmol) u THF (5 m L) dodat je tetrabutilamonijum fluorid (0.411 m L od 1 M rastvora, 0.412 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta. Reakciona smeša je razblažena u EtOAc i vodenom zasićenom rastvora NaHCOs. Organska faza je sušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovanain vacuo.Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (50% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 30 mg željenog proizvoda.<l>HNMR (400 MHz, CDC13) 5 10.15 (s, IH), 8.49 (dd,J=9.3, 2.6 Hz, IH), 8.16 (s, IH), 8.10 (d,J =2.6 Hz, IH), 8.06( d, J =3.0 Hz, I H), 5.30( d, J =15.0 Hz, I H), 5.19 - 5.10 (m, IH), 4.32 - 4.24 (m, IH), 4.23 - 4.17 (m, IH), 2.37 (dt,J =14.9, 3.4 Hz, IH), 1.85 - 1.71 (m, 2H), 1.09 (s, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.37 minuta (M+H) 430.47.
[0436] Sledeća dva dijastereomera mogu biti pripremljena na sličan način kao postupak opisan u prethodnom tekstu:
(4/f)-4-((5-Fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-5,5-
dimetilheksan-2-ol (72 i 73)
[0437] Dijastereomer 72:<!>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 9.99 (s, IH), 8.60 (dd,J=9.4, 2.7 Hz, IH), 8.26 (s, IH), 8.20 (d,J =2.6 Hz, IH), 8.10 (d,J =3.2 Hz, IH), 5.06 (t,J= 12.3 Hz, IH), 4.28 (dd,J= 9.6, 7.2 Hz, IH), 3.96 (d,J =5.7 Hz, IH), 2.71 (s, IH), 1.97 (ddd,J =14.2,5.8,2.9 Hz, IH), 1.66-1.58 (m, IH), 1.28(dd, J =6.5, 5.5 Hz, 4H), 1.04 (d,J= 10.1 Hz, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 1.93 minuta (M+H) 376.46.
[0438] Dijastereomer 73:<l>HNMR (400 MHz, CDC13) 5 10.81 (s, IH), 8.47(dd, J =9.3, 2.7 Hz, IH), 8.14 (s, IH), 8.05 (dd,J =8.4, 2.9 Hz, 2H), 4.95 (s, IH), 4.81 (d,J =8.3 Hz, IH), 4.31-4.14 (m, IH), 3.72(dd, J=8.9, 6.0 Hz, IH), 1.83-1.70 (m, IH), 1.48-1.32 (m, IH), 1.24-1.11 (m, 4H), 0.98 (s, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.01 minuta (M+H) 376.46.
Priprema jedinjenja 70 i 71
[0439]
(a) Ph3P-Br, LiHMDS, THF; (b) Os04, 4-metilmorfolin 4-oksid, THF, H20; (c) X-phos, Pd2(dba)3, K3P04, 2-metil THF, H20; (d) MeONa, THF; (e) 5-fluoro-l-(p-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridin, 7a, X-phos, Pd2(dba)3, K3P04, 2-metil THF, H20, 120°C; (f) MeONa, THF
Formiranje (/fj-l-hloro-A^^jž-dimetilheks-S-en-S-^-S-fluoropirimidin^-amina (188a):
[0440]U rastvor metil(trilenil)fosfonijum bromida (0.983 g, 2.753 mmol) u THF (40 mL) dodat je LiHMDS (2.753 mL od 1 M rastvora, 2.753 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Rastvor (3R)-3-[(2-hloro-5-fluoro-pirimidin-4-il)amino]-4,4-dimetil-pentanala (0.550 g, 2.118 mmol) u THF (20 mL) je dodat u reakcionu smešu rezultirajući u formiranju značajnog taloga. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 45 minuta. Reakciona smeša je razblažena u EtOAc i vodenom zasićenom rastvoru NH4C1. Organska faza je razdvojena, sušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovanain vacuo.Rezultujući ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 180 mg željenog proizvoda: 'H NMR (400 MHz, CDC13) 5 7.80 (d,J=2.8 Hz, IH), 5.76 - 5.60 (m, IH), 5.05 - 4.91 (m, 2H), 4.82(t, J=22.1 Hz, IH), 4.26 - 4.11 (m, IH), 2.58 - 2.48 (m, IH), 2.07 - 1.92 (m, IH), 0.94 (s, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, retenciono vreme = 3.60 minuta (M+H) 258.38.
Formiranje(4if)-4-((2-hloro-5-fluoropirimidin-4-il)amino)-5,5-dimetilheksan-l,2-diola
(189a) i (190a):
[0441]U rastvor (^)-2-hloro-A<L>(2,2-dimetilheks-5-en-3-il)-5-fluoropirimidin-4-amina,188a,(0.140 g, 0.543 mmol) u THF (10 mL) i H20 (10 mL) dodat je osmijum tetraoksid (0.138 g, 0.014 mmol) i 4-metilmorfolin-4-oksid (0.085 mL, 0.815 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2.5 časa. Smeša je razblažena vodenim zasićenim rastvorom Na2S203. Dobijena smeša je mešana 20 minuta i ekstrahovana sa EtOAc. Organska faza je sušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovanain vacuo.Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (MeOH/CI-LCl:) da bi se dobilo 90 mg prvog dijastereomera,189a,i 65 mg dragog dijastereomera,190a. [04421 Dijastereomer 189a:'H NMR (400 MHz, CDC13) 5 7.86 (d,J=2.6 Hz, IH), 5.00 (d,J=9.2 Hz, IH), 4.17 (s, IH), 4.08 - 3.96 (m, IH), 3.49 (dd,J =19.2, 8.4 Hz, 3H), 2.15 (s, IH),1.74 (ddd,J=13.2, 10.8,2.2 Hz, IH),1.27(dd,./=19.3, 7.0 Hz,IH), 0.92 (d,./ =10.5 Hz, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, retenciono vreme = 2.24 minuta (M+H) 292.36.
[0443] Dijastereomer 190a:<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 7.88 (d,J=2.7 Hz, IH), 5.29( d, J=8.9 Hz, IH), 4.12 - 4.02 (m, IH), 3.74 (d,J =9.0 Hz, 2H), 3.50 (s, IH), 3.22 (s, IH), 2.12 (s, IH), 1.95 (dt,J =14.7, 4.2 Hz, IH), 1.56 (ddd,J =14.8, 9.2, 7.4 Hz, IH), 0.99 (s, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.24 minuta (M+H) 292.39.
Formiranje (4/f)-4-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-
il)amino)-5,5-dimetilheksan-l,2-diola (191a)
[0444]U rastvor (4i?)-4-[(2-hloro-5-fluoro-pirimidin-4-il)amino]-5,5-dimetil-heksan-l,2-diola,189a,(0.090 g, 0.309 mmol), 5-fluoro-l-0D-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pu-olo[2,3-b]piridina (0.167 g, 0.401 mmol) i K3P04(0.196 g, 0.926 mmol) u 2-Metil THF (15 mL) i H2O (2 mL) je degaziran pod strujom azota u trajanju od 45 minuta. U reakcionu smešu dodat je X-phos (0.018 g, 0.037 mmol) i Pd2(dba)3(0.007 g, 0.008 mmol). Reakciona smeša je mešana na 120°C u epruveti pod pritiskom u trajanju od 2 časa. Vodena faza je uklonjena i organska faza je filtrirana kroz čep od celita i koncentrovanain vacuo.Dobijeni sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (60% EtOAc/heksani) da bi se dobilo 140 mg željenog proizvoda,191a:<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.51 (dt,J =7.6, 3.8 Hz, IH), 8.48 (s, IH), 8.32 (d,J =1.7 Hz, IH), 8.12 (dd,J =7.2, 5.7 Hz, 3H), 7.30( d, J=8.1 Hz, 2H), 4.99( d, J=10.1 Hz, IH), 4.42 - 4.28 (m, 2H), 3.72 - 3.47 (m, 3H), 2.40 (s, 3H), 2.19 - 2.09 (m, IH), 1.97 - 1.83 (m, IH), 1.49 - 1.34 (m, IH), 1.06 (s, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 3.53 minuta (M+H) 546.49.
[0445]Drugi dijastereomerni 1,2-diol,190a,je takođe reagovao na isti način da bi se proizveo dijastereomerni Suzuki proizvod.193a:<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 6 8.56 - 8.49 (m, 2H), 8.32 (dd, .7=2.8, 1.1 Hz, IH), 8.15 - 8.02 (m, 3H), 7.30(d, .7=9.2Hz, 2H), 5.21 - 5.12 (m, 1 H), 4.27(td,./ =9.7, 3.0 Hz, IH), 3.93 - 3.74 (m, 2H), 3.55(d,./ =7.7 Hz, IH), 3.11 (s, IH), 2.39 (s, 3H), 2.01 (m, IH), 1.65 - 1.50 (m, IH), 1.05 (s, 9H). LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 3.54 minuta (M+H) 546.49.
Formiranje (4/?)-4-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l/7-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-
il)amino)-5,5-dimetilheksan-l,2-diola (70, 71)
[0446] U rastvor(47^)-4-[[5-fluoro-2-[5-fluoro-l-(/;-tolilsulfonil)pirolo[2,3-b]piridin-3-il]pirimidin-4-il]amino]-5,5-dirnetil-heksan-l,2-diola,191a,(0.140 g, 0.257 mmol) u THF (10 mL) dodat je natrijum metoksid (0.055 g od 25% tež./tež. rastvora, 0.257 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 5 minuta. Reakciona smeša je razblažena u EtOAc i vodenom zasićenom rastvoru NaHC03. Organska faza je sušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovanain vacuo.Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (MeOH/C^Ch), a zatim pomoću preparativne HPLC da bi se dobilo 10 mg čistog željenog proizvoda:<*>H NMR (400 MHz, fifc-DMSO) 5 8.61 (dd, .7= 9.9, 2.6 Hz, IH), 8.26 (s, IH), 8.18 (s, IH), 8.11 (d,J=4.1 Hz,IH), 4.66 (d, J =10.4 Hz, IH), 4.43 (s, IH), 4.29(d, 7 =4.1 Hz, IH), 4.04 (s, IH), 3.35 (s, IH), 3.26(d, J =6.1 Hz, 2H), 1.69(t, J =12.3 Hz, IH), 1.59-1.45 (m, IH), 0.96 (s, 9H). LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 1.76 minuta (M+H) 392.46.
[0447]Drugi dijastereomerni 1,2-diol,193a,je takođe reagovao na isti način da bi se proizveo finalni dijastereomerni proizvod:<*>H NMR (400 MHz, CDCI3) 6 8.61 (dd,J= 9.6, 2.7 Hz, IH), 8.17 (s, 2H), 8.01( d, J= 4.1 Hz, IH), 4.53( d, J= 10.0 Hz, IH), 3.75 - 3.56 (m, 2H),3.48 (dd, J=11.0, 6.3 Hz, IH), 2.08 - 1.97 (m, IH), 1.75 (dt, .7=28.7, 9.4 Hz, IH), 1.04 (s, 9H). LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 1.79 minuta (M+H) 392.46.
Priprema jedinjenja 75 , 76 , 79 , 85 , 93 i 95
[0448]
(a) i. karbonil diimidazol, CH2CI2; ii. Kalijum etil malonat, MgCb, DMAP, EUN, THF, CH3CN; (b) i. amonijum acetat, EtOH, refluks; ii. natrijum cijanoborohidrid, AcOH, EtOAc; iii. 2,4-dihloro-5-fluoropirimidin,<i>Pr2NEt, EtOH; (c) 5-fluoro-l-(p-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridin, 7a, X-phos, Pd2(dba)3, K3PO4, 2-metil THF, H20, 135°C, mikrotalasna; (d) LiOH, MeOH, 65°C.
Formiranje etil 3-okso-3-(l-(trifluorometil)ciklopentil)propanoata (195a).
[04491U rastvor l-(trifluorometil)ciklopentankarboksilne kiseline (1.30 g, 7.14 mmol) u dihlorometanu (14 mL) dodat je karbonil diimidazol (5.46 g, 33.68 mmol). Posle mešanja 5 časova na sobnoj temperaturi, reakcija je koncentrovanain vacuodo ostataka.
[0450]U sledećoj posudi, 3-etoksi-3-okso-propanoat (kalijum jon) (2.03 g, 11.90 mmol) je mešan sa dihloromagnezijumom (1.13 g, 11.90 mmol) i DMAP (72.65 mg, 0.59 mmol) u THF (23.13 mL) i acetonitrilu (11.57 mL). Posle 3 časa, dodat je gore navedeni sirovi rastvor u THF (10 m L), a zatim trietilamin (1.66 mL, 11.90 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša na 25°C u trajanju od 8 časova. Sirovi proizvod je izolovan ekstrakcijom u etil acetatu (2 x 100 mL) prema IN HC1 (100 mL), sušen preko natrijum sulfata i koncentrovanin vacuoda bi se dobilo 1.0 g željenog proizvoda kao žuto ulje:<l>H NMR (300 MHz, CDCI3) 5 12.58 (s, H), 5.32 (s, H), 4.27 - 4.18 (m, 2 H), 2.33 - 2.14 (m, 2 H), 2.05 - 1.85 (m, 4 H), 1.77 - 1.69 (m, 2 H)i 1.30 (td, .7=7.1, 3.2 Hz, 3 H) ppm.
Formiranje (+/-)-etil 3-(2-hloro-5-fluoropirimidin-4-ilamino)-3-(l-(trifluorometil)-ciklopentil)propanoata (196a)
[0451]Rastvor etil 3-okso-3-(l-(trifluorometil)ciklopentil)propanoata, 195a, (0.500 g, 1.982 mmol) i amonijum acetata (0.458 g, 5.946 mmol) u EtOH (20 mL) je zagrevan do refluksa 3 časa. Sirova reakcija je koncentrovanain vacuodo ostataka i ponovo rastvorena u EtOAc (20 mL). Nova smeša je hlađena do 0°C, i u smešu su dodati sirćetna kiselina (0.338 mL, 5.946 mmol) i natrijum cijanoborohidrid (0.498 g, 7.928 mmol, 4 ekviv.). Reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature i mešana preko noći. Reakcija je ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (10 mL) i ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 20 mL). Organska faza je koncentrovanain vacuoi ponovo rastvorena u EtOH (20 mL). U rastvor je dodat 2,4-dihloro-5-fluoro-pirimidin (0.496 g, 2.973 mmol) i A<r>,iV-diizopropiletilamin baza (2.0 mL). Reakcija je refluksovana 12 časova i zatim koncentrovanain vacuo.Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (EtOAc) proizvodeći 84 mg željenog proizvoda kao žuto ulje: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 3.54 minuta (M+H) 384.40.
Formiranje (+/-)-etil 3-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-6]piridin-3-
il)pirimidin-4-ilamino)-3-(l-(trilfuorometil)ciklopentil)propanoata (197a)
[0452]U rastvor racemata etil 3-(2-hloro-5-fluoropirimidin-4-ilamino)-3-(l-(trifluorometil)ciklopentil)propanoata, 196a, (0.084 g, 0.219 mmol) u THF (10 mL) i vodi (1 mL) dodat je 5-fluoro-l-(p-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridin, 7a, (0.137 g, 0.328 mmol) i kalijum fosfat (0.140 g, 0.657 mmol). Dobijena smeša je degazirana pod atrujom azota 10 minuta. U reakciju je zatim dodat X-Phos (0.010 g, 0.021 mmol) i Pd2(dba)3(0.010 g, 0.011 mmol). Reakcija je zračena 15 minuta na 135°C u mikrotalasnoj. Dobijena smeša je koncentrovanain vacuodo braon ulja koje je prečišćeno liromatografijom na silika gelu (EtOAc/C^CL.) da bi se dobilo 80 mg željenog proizvoda kao svetio žuta čvrsta supstanca: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 4.22 minuta (M+H) 638.42.
Formiranje (+/-)-3-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirolo[2,3-6]piridin-3-il)pirimidin-4-
ilamino)-3-(l-(trifluorometil)ciklopentil)propionske kiseline (75)
[0453]U rastvor racemata etil 3-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-17/-pirolo[2,3-Z)]piridin-3-il)pirimidm-4-ilamino)-3-(l-(trifluoromctil)ciklopentil)propanoata, 197a, (0.080 g, 0.120 mmol) u THF (10 mL) dodat je litijum hidroksid (2 mL od 2N rastvora). Reakcija je refluksovana 3 časa i hlađena do sobne temperature. Nevodeni rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i vodeni sloj je podešen do pH 4. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom (2 x 20 mL). Spojene organske faze su koncentrovanein vacuoda bi se dobilo 16 mg željenog proizvoda kao svetio žuta čvrsta supstanca:<*>H NMR (300 MHz, afc-DMSO) 5 8.51 (s, H), 8.25 - 7.97 (m, 2 H), 7.58 - 7.42 (m, 2 H), 7.12 (d,J=7.5 Hz, H), 4.35 (m, H), 2.85 (m, 2 H) i 1.27 - 0.70 (m, 8 H) ppm; LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.55 minuta (M+H) 456.45.
[0454]Sledeći analozi mogu biti pripremljeni na sličan način kao postupak opisan u prethodnom tekstu za jedinjenje 75:
(+/-)-5,5,5-Trifluoro-3-(5-fluoro-2-(5-tluoro-I//-pirolo[2,3-A]piridin-3-il)piriraidin-4-
ilamino)-4,4-dimetilpentanska kiselina (79)
[0455]<*>H NMR (300 MHz, MeOD) 5 8.66 (d,J=8.9 Hz, H), 8.29 (s, H), 8.22 - 8.18 (m, 2 H), 4.16 - 4.06 (m, H), 2.97 (s, H), 2.92 (s, H), i 1.27 - 1.21 (m, 6 H) ppm; LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.22 minuta (M+H) 430.41.
(+/-)-5-Fluoro-3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-dimetilpentanska kiselina (76)
[0456]'H NMR (300 MHz, MeOD) 5 8.70 (dd,J=9.7, 2.8 Hz, IH), 8.15 (dd,J=6.1, 4.0 Hz, 2H), 8.02 (d, J = 4.1 Hz, IH), 5.23 (dd,J= 10.7, 3.1 Hz, IH), 4.30(d, J= 47.9 Hz, 2H), 3.63(d, J=18.2 Hz, IH), 3.31(dt, 7=3.3,1.6 Hz, 3H), 2.83(dd, / =15.3, 3.3 Hz, IH), 2.63 (dd,
./ = 15.3, 10.8 Hz, IH), 1.07 (s, 6H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, (M+H) 394.
(/?)-3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l W-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)piriiriidin-4-il)amino)-3-(l-metilciklopropil)propionska kiselina (91)
[0457]LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, (M+H) 374.
(+/-)-3-((5-Fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-3-(l-(tritluorometil)ciklopropil)propionska kiselina (93)
[0458]LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.37 minuta (M+H) 428.49.
(+/-)-3-(Biciklo[2.2.1]heptan-l-U)-3-(5-nuoio-2-(5-nuoro-l//-pirolo[2,3-6]piridin-3-
il)pirimidin-4-ilamino)propionska kiselina (95)
[0459]<l>U NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.62(dd, J=9.3, 2.6 Hz, IH), 8.48( t, J=5.4 Hz, IH), 8.32 (s, IH), 8.29( d, J=5.5 Hz, IH), 5.42(dd, J=10.0, 3.4 Hz, IH), 2.84 (m, 2H), 2.18 (s, IH), 1.65 (m, 4H), 1.39 (m, 6H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta. Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.12 minuta (M+H) 414.28.
(+/-)-5-Fluoro-3-((5-fluoro-2-(5-fluoro-lH-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-
il)amino)-4-(fluorometil)-4-metilpentanska kiselina (84)
[0460]<!>H NMR (300 MHz, MeOD) 5 8.67 (dd,J=9.6, 2.8 Hz, IH), 8.16 (m, 2H), 8.04 (d,J= 4.0 Hz, IH), 5.38 (dd,J =10.8, 3.2 Hz, IH), 4.72 - 4.23 (m, 4H), 2.86 (dd,J =15.5, 3 .3 Hz, IH), 2.70 (dd,J =15.5, 10.9 Hz, IH), 1.15(s, 3H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, (M+H) 412.
(+/-)-3-((5-hloro-2-(5-fluoro-l/J-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4,4-
dimetilpentanska kiselina (85)
[0461]Karboksilna kiselina,203,pripremljena je na isti način kao karboksilna kiselina, 4, (videti Šema sinteze 1) upotrebom 5-hloro-3-(5-hloro-4-(metilsulfinil)pirimidin-2-il)-l-tozil-lH-pirolo[2,3-b]piridina umesto sulfbksida, 1:<l>HNMR (400 MHz, MeOD) 5 8.68 (dd,J=9.3, 2.7 Hz, IH), 8.47 (s, IH), 8.38 (s, IH), 8.32 (s, IH), 5.17 (dd,7=9.8, 3.5 Hz, IH), 2.87
(m, 2H), 1.06 (s, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.1 minuta (M+H) 383.38.
Priprema jedinjenja 77 , 78 , 83 , 86 i 94
[0462] (a) NH4OAC, malonska kiselina, EtOH, refluks; (b) 2,4-dihloro-5-fluoropirimidin, 'P^NEt, THF, MeOH, 95°C; (c) 5-fluoro-l-(/?-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridin, K3PO4X-Phos, Pd2(dba)3, 2-MeTHF, voda, 120°C; (d) 4N HC1, CH3CN, 65°C; (e) LiOH, voda THF.
Formiranje (+/-)-etil-3-amino-3-(l-metilcikloheksil)propanoata (205a)
[0463]Rastvor 1-metilcikloheksankarbaldehida (2.75 g, 21.79 mmol), malonske kiseline (2.27 g, 21.79 mmol) i amonijum acetata (3.36 g, 43.58 mmol) u apsolutnom etanolu (5 mL) je zagrevan na refluksu u trajanju od 4 časa. čvrsta supstanca je filtrirana i isprana etanolom (10 mL). Filtrat je koncentrovanin vacuoda bi se dobilo gusto ulje koje je razblaženo sa CH2CI2(50 mL). Istaložena čvrsta supstanca je filtrirana i filtrat je koncentrovanin vacuoda bi se dobilo 4.3 grama žutog ulja. Koncentrovana sumporna kiselina (1.16 mL, 21.79 mmol) je dodata u rastvor sirovog materijala u apsolutnom etanolu (25 mL) i smeša je refluksovana 12 časova. Rastvor je hlađen do sobne temperature i koncentrovanin vacuoda bi se dobilo gusto ulje. Dodata je voda (10 mL) i rastvor je neutralizovan sa 2N NaOH. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3x 25 mL), sušen (MgS04), filtriran i koncentrovanin vacuoda bi se dobilo 2.4 grama željenog proizvoda: LCMS Gradijent 10-90%, 0.1 % mravlja kiselina, 5 minuta, C18/ACN, Retenciono vreme = 1.54 minuta (M+H) 214.14.
Formiranje (+/-)-etil 3-(2-hloro-5-fluorropirimidin-4-ilamino)-3-(l-metilcikloheksil)propanoata (206a)
[0464]Smeša 2,4-dmloro-5-fluoro-pirimidina (1.83 g, 85.33 mmol), racemskog etil-3-amino-3- (l-metilcikloheksii)propanoata,205a,(2.34 g, 11.0 mmol) i Af,A<r->diizopropiletilamina (4.79 g, 27.50 mmol) u THF (40 mL) i metanolu (10 mL) zagrevana je na 95°C u trajanju od 3 časa. Rastvor je hlađen do sobne temperature i rastvarač je ispravan pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent 0-60% EtOAc/heksana) da bi se dobilo 620 mg željenog proizvoda kao bela penasta čvrsta supstanca:<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 7.80 (d,J=2.6 Hz, IH), 5.37 (m, IH), 4.59 (m, IH), 4.00 (q, 7.2 Hz, 2H), 2.62 (dd,J= 14.7, 3.8 Hz, IH), 1.67 (m,lH), 1.17 (m, 10H), 1.10 (t,J =7.1 Hz, 3H), 0.85 (s, 3H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, C18/ACN, retenciono vreme = 3.69 minuta (M+H) 344.39.
Formiranje (+/-)-etil 3-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-6]piridin-3-
il)pirimidin-4-ilamino)-3-(l-metilcikloheksil)propanoata (207a)
[0465]Rastvor 5-fluoro-l-(/7-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridina,7a,(0.51 g, 1.22 mmol), racemskog etil 3-(2-hloro-5-fluoropirimidin-4- ilamino)-3-(l-metilcikloheksil)propanoata,206a,(0.35 g, 1.02 mmol) i K3PO4(0.52 g, 2.44 mmol) u 2-metil THF (8 mL) i vodi (2 mL) je degaziran pod strujom azota u trajanju od 30 minuta. Dodati su X-Phos (0.03 g, 0.07 mmol) i Pd2(dba)3(0.02 g, 0.02 mmol) i dobijena smeša je zagrevana na 115°C u bočici pod pritiskom u trajanju od 4 časa. Reakciona smeša hlađena do sobne temperature, filtrirana i koncentrovanain vacuo.Ostatak je rastvoren u EtOAc (50 mL) i ispran vodom. Organski sloj je sušen (MgS04), filtriran i koncentrovanin vacuo.Sirovi ostatak je prečišćen hromatografiojom na silika gelu (gradijent 0-35% EtOAc/heksani) da bi se dobilo 486 mg željenog proizvoda kao bela čvrsta supstanca: 'H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 8.50 (m, IH), 8.48 (s, IH), 8.24( d, J=1.7 Hz, IH), 8.01 (m, 3H), 7.20(m, 2H), 5.12 (m, IH), 4.88 (m, IH), 3.89(q, J= 7.4 Hz, 2H), 2.71 (dd,J=14.5, 3.8 Hz, IH), 2.39 ? 2.32 (m, IH), 2.31 (s, 3H), 1.60-1.32 (m 10H), 0.95 (t,J =7. 43H). 0.87 (s, 3H); LCMS Gradijent 60-98%, 0.1% mravlja kiselina, 7 minuta, C18/ACN, Retenciono vreme = 2.81 minuta (M+H) 599.19.
Formiranje (+/-)-etil 3-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l/J-pirolo[2,3-6]piridin-3-il)pirimidin-4-
ilamino)-3-(l-metilcikloheksil)propanoata (77)
[0466]U rastvor etil 3-(5-fluoro-2-(5-fluoro-1 -tozil-l//-pirolo[2,3-A]piridin-3-il)pirimidin-4-ilamino)-3-(l-metilcikloheksil)propanoata, 207a, (0.49 mg, 0.81 mmol) u CH3CN (3 mL) dodata je HC1 (2.0 mL 4M rastvora u dioksanu, 8.1 mmol). Rastvor je zagrevan na 70°C u trajanju od 3 časa i zatim hlađen do sobne temperature. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i proizvod je neutralizovan vodenim zasićenim rastvorom NaHCCh. Talog je ekstrahovan sa EtOAc (3x10 mL). Rastvarač je sušen (MgS04), filtriran i koncentrovanin vacuo.Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu (gradijent 0-70%EtOAc/heksani) da bi se dobilo 230 mg željenog proizvoda kao prljavo bela čvrsta supstanca:<*>H NMR (400 MHz, CDChj 5 9.55 (s, IH), 8.58 (dd, J= 9.3, 2.5 Hz, IH), 8.18 (s, 2H), 8.00 (d,J =2.7 Hz, IH), 5.13 (brs, IH), 4.95 (t,J =8.2 Hz, IH), 3.84 (m, 2H), 2.72 (m, IH), 2.38 (m, IH), 1.67 - 1.15 (m, 10H), 0.94 (m, 3H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, C18/ACN, Retenciono vreme = 2.77 minuta (M+H) 444.36.
3-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirolo|2,3-6]piridin-3-il)pirimidin-4-ilamino)-3-(l-metilcikloheksil)propionska kiselina (78)
[0467]LiOH (0.118 mg, 4.927 mmol) je dodat u rastvor etil 3-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l/7-pirolo[2,3-Z)]piridin-3-il)pirimidin-4-ilamino)-3-(l-metilcikloheksil)-propanoat, 77, (0.23 g, 0.49 mmol) u vodi (5 mL) i THF (5 mL). Rastvor je mešan na 95°C u trajanju od 18 časova i zatim hlađen do sobne temperature. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Ostatak je razblažen sa vodom (10 mL) i neutralizovan sa 2N HC1. Dobijeni talog je ekstrahovan sa EtOAc (3x10 mL). Organska faza je sušena (MgS04), filtrirana i koncentrovanain vacuoda bi se dobilo 210 mg željenog proizvoda kao prljavo bela čvrsta supstanca:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 8.78 (dd,J=9.7, 2.7 Hz, IH), 8.16 (s, 2H), 7.99( d, J=4.1 Hz, IH), 5.20 (d,J=9.9 Hz, IH), 2.86 - 2.69 (m, IH), 2.53 (dd,J=14.7, 11.0 Hz, IH), 1.76 - 1.56 (m, 2H), 1.53 (m, 4H), 1.29 (m, 4H), 1.02 (s, 3H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2,20 minuta (M+H) 416.27.
(+/-)-3-(2-(5-Hloro-l//-pirolo[2,3-6]piridin-3-il)-5-^
metilcikloheksil)propionska kiselina (83)
[0468]Jedinjenje 83 je sintetisano na način sličan 3-(5-fluoro-2-(5-fluoro-l//-pirolo[2,3-A]piridin-3-il)pirimidin-4-ilamino)-3-(l -metilcikloheksil)propionskoj kiselini,78,upotrebom 5-hloro-l-(p-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridina umesto boronatnog estra,7a:<l>H NMR (400 MHz, MeOD) 5 9.05 (d,J=2.1 Hz, IH), 8.39 - 8.24 (m, 2H), 8.16 (d,J =4.9 Hz, IH), 5.23 (d,J =10.4 Hz, IH), 2.86 (d,J =15.6 Hz, IH), 2.65 (m, IH), 1.58 (m, 7H), 1.37 (m, 3H), 1.05 (s, 3H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, retenciono vreme = 2.37 minuta (M+H) 442.36.
(+/-)-3-(l-Adamaiitil)-3-[[5-fluoro-2-(5-tluoro-177-pirolo[2,3-A]piridin-3-il)pirimidin-4-
il] amino]propionska kiselina (86)
[0469]Jedinjenje86je sintetisano na način sličan 3-(5-fluoro-2-(5-fluoro-lii/-pirolo[2,3-d]piridin-3-il)pirimidin-4-ilamino)-3-(l-metilcikloheksil)propionskoj kiselini,78,upotrebom adamantin-l-karbaldehida kao početnog materijala:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 8.75 (dd,/ =9.7, 2.7 Hz, IH), 8.18 (s, 2H), 8.00( d, J =4.2 Hz, IH), 2.81 (dd,J =15.2, 3.1 Hz, IH), 2.55 (dd,J=15.2, 10.8 Hz, IH), 2.00 (m, 3H), 1.82 -1.49 (m, 12H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, C18/ACN, Retenciono vreme = 2.40 minuta (M+H) 454.34.
(+/-)-3-(l-Adamantil)-3- [ [2-(5-hloro-l//-pirolo [2,3-b] piridin-3-il)-5-fluoro-pirimidin-4-
il]amiiio]propionska kiselina (94)
[0470]Jedinjenje94je sintetisano na način sličan 3-(l-Adamantil)-3-[[5-fluoro-2-(5-fluoro-l//-pnolo[23-b]piridin-3-il)piirmidin-4-il]amino]propionskoj kiselini,86,upotrebom 5-hloro-l-(^-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-^ umesto boronatnog estra,7a:<l>R NMR (400 MHz, CD3OD) 5 9.02( d, J=2.3 Hz, IH), 8.40 -8.24 (m, 2H), 8.18 (d, J= 5.0 Hz,IH), 4.91(d, J =11.6 Hz,IH), 2.88 (dd, J =16.0, 2.8 Hz, IH), 2.65( dd, J=15.9, 11.0 Hz, IH), 2.01 (s, 3H), 1.77(dd, J= 27. 9,11.9 Hz, 12H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.60 minuta (M+H) 470.27.
Priprema jedinjenja 68
[04711
(a) NAN3, DMF, 70°C; (b) propargil alkohol, THF, toluen, 120°C; (c) 5-fluoro-l-(/j-tolilsulfonil)-3-(4,4,5,5-tctramctil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-piridin], K3P04, X-Phos, Pd2(dba)3, 2-MeTHF, voda, 120°C; (d) 4N HC1, CH3CN, 65°C.
Formiranje^-^-(l-azido-S^-dimetilbutan-Ž-ilJ-l-hloro-S-fluoropirimidin^-amina
(216a)
[0472] Smeša (5)-2-((2-hloro-5-lluoropirimidiri-4-il)amino)-3,3-dimetilbutil metansulfonata, 75a, (2.37 g, 7.26 mmol) i natrijum azida (1.89 g, 29.07 mmol) u DMF (50 mL) je zagrevana na 70°C u trajanju od 6 časova. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature i sipana u vodu. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (2x 25 mL), osušena (MgS04), filtrirana i koncentrovanain vacuo.Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent 0-20% EtOAc/heksani) da bi se dobilo 1.2 g željenog proizvoda kao bela kristalna čvrsta supstanca:<l>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 7.86 (dd,J=2.6, 1.1 Hz, IH), 5.07 (m, IH), 4.32-4.09 (m, IH), 3.60 (dd,J=12.8, 3.9 Hz, IH), 3.34 (dd,J=12.8, 7.6 Hz, IH), 0.96 (m, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 3.28 minuta (M+H) 273.14.
Formiranje (5)-(l-(2-((2-hloro-5-fluoropirimidin-4-il)amino)-3,3-dimetilbutil)-l//-l,2,3-triazol-4-il)metanola (217a)
[0473] Smeša prop-2-in-l-ola (0.22 g, 3.85 mmol) i (,S)-vV-(l-azido-3,3-dimetilbutan-2-il)-2-hloro-5-fluoropirimidin-4-amina, 216a, (0.21 g, 0.77 mmol) u THF (4 mL) i toluena (4 mL) zagrevana je u bočici pod pritiskom na 120°C u trajanju od 8 časova. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod koji je sadržao dva regioizomera je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-5% MeOH/CHoC^ Gradijent) da bi se dobilo 100 mg željenog regioizomera, 217a, kao i 70 mg manjeg regioizomera (5-hidroksimetil triazol).
[0474] 4-Hidroksimetil triazol regioizomer 217a:<l>K NMR (400 MHz, CDCI3) 5 7.71 (d,J=2.6 Hz, IH), 7.19 (s, IH), 5.31 -5.16 (m, IH), 4.86 (m, IH), 4.79-4.60 (m, 2H), 4.44 (m, IH), 1.07 (s, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 2.26 minuta (M+H) 329.31.
Formiranje (5)-(l-(2-((5-fluoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l//-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-3,3-dimetilbutil)-lfl-l,2,3-triazol-4-il)metanola (218a)
[0475]Rastvor 5-fluoro-l-(/;-tolilsiilfonil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)pirolo[2,3-b]piridina, 7a, (0.158 g, 0.380 mmol), (6,)-(l-(2-((2-hloro-5-fluoropiirmidiri-4-il)amino)-3,3-dimetilbutil)-l//-l,2,3-triazol-4-il)metanola, 217a, (0.100 g, 0.304 mmol) i K3PO4(0.520 g, 2.440 mmol) u 2-metil THF (8 mL) i vodi (2 mL) je degaziran pod strujom azota u trajanju od 30 minuta. Dodati su X-Phos (0.008 g, 0.018 mmol) i Pd2(dba)3(0.006 g, 0.006 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 115°C u bočici pod pritiskom u trajanju od 4 časa. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature i filtrirana. Filtrat je koncentrovanin vacuo.Ostatak je rastvoren u EtOAc (50 mL) i ispran vodom. Organski sloj je sušen (MgS04), filtriran i koncentrovanin vacuo.Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent 0-70% EtOAc/heksani) da bi se dobilo 120 mg željenog proizvoda kao bela penasta čvrsta supstanca:<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.3 (s,lH), 8.33 (s, I H), 8.21 (s, IH), 8.03 (d,J =8.4 Hz, 2H), 7.90 (d,J =3.0 Hz, IH), 5.37(m, IH), 4.92 ? 4.83 (m, IH), 4.78 - 4.69 (m, 2H), 4.44 (dd,J=13.9, 11.3 Hz, IH), 2.32 (s, 3H), 1.11 (s, 9H); LCMS Gradijent 60-98%, 0.1% mravlja kiselina, 7 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 1.29 minuta (M+H) 583.33
Formiranje (5)-(l-(2-((5-fluoro-2-(5-lfuoro-l//-pirolo[2,3-A]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-3,3-dimetilbutil)-l//-l,2,3-triazol-4-il)metanol (68)
[0476] U rastvor (6')-(l-(2-((5-t]uoro-2-(5-fluoro-l-tozil-l/7-pirolo[2,3-/;]piridin-3-il)pirimidin-4-il)amino)-3,3-dimetilbutil)-l//-l,2,3-triazol-4-il)metanola, 218a, (0.11 g, 0.19 mmol) u THF (5 mL) dodat je NaOMe (0.17 mL 25% rastvor u MeOH, 0.75 mmol). Posle mešanja reakcione smeše na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta, smeša je razblažena u zasićenom vodenom rastvoru NH4CI (5 mL) i EtOAc (10 mL). Organski sloj je razdvojen, sušen (MgS04), filtriran i koncentrovanin vacuo.Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-10% Me-OH/C^CL;) da bi se dobilo 41 mg željenog proizvoda kao prljavo bela čvrsta supstanca:<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) S 8.51 (d,J= 8.0 Hz, IH), 8.16 (s, IH), 8.09 (s, IH), 7.93 (d,J =3.5 Hz, IH), 7.38 (s, IH), 5.08 (m, IH), 5.00-4.90 (m, IH), 4.74 (s, 2H), 4.60 (m, IH), 1.2 (s, 9H); LCMS Gradijent 10-90%, 0.1% mravlja kiselina, 5 minuta, Cl 8/ACN, Retenciono vreme = 1.90 minuta (M+H) 429.26.
Primer 2: Antivirusni test za virus sripa
[0477] Antivirusni testovi su izvedeni korišćenjem dva postupka zasnovana na ćelijama: Razvijena je modifikovana verzija standardnog testa citopatskog efekta (CPE) sa 384-komornom mikrotitarskom pločom, sličan onom od strane Noah, et al. (Antiviral Res. 73:50-60, 2006). Ukratko, MDCK ćelije su inkubirane sa test jedinjenjima i virusom gripa tipa A (A/PR/8/34), na niskom multiplicitetu infekcije (oko MOI=0.005), 72 časa na 37°C, i vijabilnost ćelija je merena korišćenjem ATP detekcije (CellTiter Glo, Promega Inc.). kontrolne komorice sa ćelijama i virusom pokazuju smrt ćelija dok komorice sa ćelijama, virusom i aktivnim antivirusnim jedinjenjem pokazuju preživljavanje ćelija (zaštitu ćelija). Različite koncentracije test jedinjenja su procenjivane, u kvadriplikatu, na primer, duž opsega od približno 20 mM do 1 nM. Krive odgovora na dozu su pripremljene korišćenjem postupaka standardnog 4-parametarskog fitovanja krive, i koncentracija test jedinjenja koja je rezultovala u 50% zaštiti ćelija, ili preživljavanju ćelija jednakom 50% neinficiranih komorica, registrovana je kao IC50. Razvijen je drugi antivirusni test zasnovan na ćelijama koji zavisi od umnožavanja virus-specifičnih RNK molekula u inficiranim ćelijama, pri čemu su RNK nivoi direktno mereni korišćenjem postupka hibridizacije DNK granatog lanca (bDNA), (Wagamanet al,J. Virol Meth, 105:105-114, 2002). U ovom testu, ćelije su inicijalno inficirane u komoricama 96-komorne mikrotitarske ploče, dozvoljeno je da se virus replicira u inficiranim ćelijama i proširi na dodatne runde ćelija, zatim su ćelije lizirane i meren je sadržaj virusne RNK. Ovaj test je zaustavljen pre CPE testa, obično nakon 18-36 časova, dok su sve ciljne ćelije još uvek bile vijabilne. Virusna RNK je kvantifikovana hibridizacijom lizata iz komorica sa specifičnim oligonukleotidnim probama fiksiranim za komorice test ploče, zatim je sledila amplifikacija signala preko hibridizacije sa dodatnim probama vezanim za reporter enzim, prema instrukcijama proizvođača kompleta (Quantigene 1.0, Panomics, Inc.). Virusna RNK sa minus-lancem je merena korišćenjem proba dizajniranih za konsenzus tip A hemaglutinacionog gena. Kontrolne komorice sa ćelijama i virusom korišćene su za definisanje 100% nivoa replikacije virusa, i krive odgovora na dozu za antivirusna test jedinjenja analizirane su korišćenjem postupaka 4-parametarskog fitovanja krive. Koncentracija test jedinjenja koja je rezultovala u nivoima virusne RNK jednakim onim od 50% kontrolnih komorica registrovana je kao
EC50.
[0478JPostupci za virusnu i ćelijsku kulturu: Madin-Darbv ćelije bubrega psa (CCL-34 American Type Culture Collection) su održavane u Dulbecco's Modfied Eagle medijumu
(DMEM) sa dodatkom 2mM L-glutamina, 1,000 U/ml penicilina, 1,000 ug/ml streptomicina, 10 mM HEPES, i 10% goveđeg fetalnog medijuma. Za CPE test, dan pre testa, ćelije su suspendovane tripsinizacijom i 10,000 ćelija po komorici je distribuirano u komorice 384 komorne ploče u 50 ul. Na dan testa, zalepljene ćelije su isprane sa tri promene DMEM sa lug-inl TPCK tretiranim tripsinom, bez goveđeg fetalnog seruma. Testovi su inicirani sa dodatkom 30 TCID50virusa i test jedinjenja, u medijumu sa 1 u,g/ml TPCK-tretiranim tripsinom, u finalnoj zapremini od 50 ul. Ploče su inkubirane 72 časa na 37<C>C u vlažnoj, 5% CO2atmosferi. Alternativno, ćelije su rasle u DMEM + goveđem fetalnom serumu kao prethodno, ali su na dan testa tripsinizovane, isprane 2 puta i suspendovane u EX-Cell MDCK ćelijskom medijumu bez seruma (SAFC Biosciences, Lenexa, KS) i postavljene na komorice ploče sa 20,000 ćelija po komorici. Ove komorice su zatim korišćene za test nakon 5 časova inkubacije, bez potrebe za ispiranjem.
[0479]Virus gripa, soj A/PR/8/34 (adaptiran na kulturu tkiva) dobijen je od ATCC (VR-1469). Nisko pasažirani virusni stokovi su pripremljeni u MDCK ćelijama korišćenjem standardnih postupaka (WHO Manual on Animal Influenza Diagnosis and Surveillance, 2002), i TCID50merenja su izvedena testiranjem serijskih razblaženja na MDCK ćelijama u 384-komornom formatu CPE testa, prethodno, i izračunavajući rezultate korišćenjem Karber postupka.
[0480]Srednje IC50vrednosti (srednja vrednost svih) za određena specifična jedinjenja rezimirane su u Tabeli 1: A: IC50(srednja vrednost svih) < 0.3 mM;
B 0.3 mM < IC50(srednja vrednost svih) < 3.3 mM;
C IC50(srednja vrednost svih) >3.3 mM.
[0481]Srednje EC50vrednosti (srednja vrednost svih) za određena jedinjenja su takođe rezimirane u Tabeli 1: A: EC50(srednja vrednost svih) < 0.3 mM;
B 0.3 mM < EC50(srednja vrednost svih) < 3.3mM;
C EC50(srednja vrednost svih) > 3.3 mM.
[0482]Srednje EC99vrednosti (srednja vrednost svih) za određena jedinjenja su takođe rezimirane u Tabeli 1: A: EC99(srednja vrednost svih) < 0.3 mM;
B 0.3 mM < EC99(srednja vrednost svih) < 3.3mM;
C EC99(srednja vrednost svih) > 3.3 mM.
[0483]Neki primeri podataka su kao što sledi: Jedinjenje 1: IC5o=0.006 mM, ECso=0.009 mM, EC99=().()094 mM; Jedinjenje 2: IC5o=0.004 mM, EC5o=0.009 mM, EC99=0.0()63 mM; Jedinjenje 6: IC50=0.004 mM, EC5O=0.015 mM, EC99=0.082 mM; Jedinjenje 69: IC50=2.31 mM, EC50=0.8 mM, EC99=8.4 mM; Jedinjenje 76: 1C50=0.423 mM, EC50=0.25 mM, EC99=1.4 mM.
[0484]U svrhu poređenja, neka jedinjenja opisana u WO2005/095400 su takođe testirana protiv virusa gripa korišćenjem testova bDNA i MDCK zaštite ćelija, i njihove IC50, EC50, i EC99vrednosti su rezimirane u Tabeli 2.
Primer 3: In Vivo analiza
[0485]Za ispitivanja efikasnosti, Balb/c miševi (4-5 nedelje starosti) su imunizovani sa 5x10 " TCID50u ukupnoj zapremini od 50 \ i\ putem intranazalnog ulivanja (25 ul/nozdrvi) pod opštom anestezijom (Ketamin/ksilazin). Neinficirane kontrole su imunizovane sa podlogom za kultura tkiva (DMEM, 50 ul ukupna zapremina), 48 časova posle infekcije započet je tretman miševa sa jedinjenjima 1 i 2 u 30 mg/kg dva puta dnevno u trajanju od 10 dana. Telesne težine i preživljavanje je ocenjivano jednom dnevno u trajanju od 21 dana. Pored toga, pletizmografija celog tela je izvedena približno svakog trećeg dana posle imunizacije i prikazana je kao povećana pauza (Penh). Objavljeni su ukupno preživljavanje, procenat gubitka na telesnoj težini 8. dana posle imunizacije i Penh na dan ispitivanja 6/7.
Primer 4: Analize sinergizma / antagonizma
[0486]Za analizu sinergije/antagonizma, test jedinejnja su procenjivana u trodnevnoj analizi MDCK ćelija na bazi CPE, inficiranih sa A/Puerto Rico/8/34 u MOI od 0.01, u kombinovanim eksperimentima sa inhibitorima neuraminidaze, oseltamivir karboksilatom ili zanamivirom, ili inhibitorom polimeraze T-705 (videti, npr., Ruruta et al., Antiviral Reasearch, 82: 95-102 (2009), "T-705 (flavipiravir) and related compounds: Novel broad-spectrum inhibitors of RNA viral infections"), upotrebom postupka nezavisnosti Bliss (Macsynergy, Pritchard i Shipman, 1990). Videti, npr., Prichard, M.N. i C. Shipman, Jr., A three-dimensional model to analvze drug-drug interactions. Antiviral Res, 1990. 14(4-5): p. 181-205. Ovaj standardni postupak obuhvata testiranje različitih kombinacija koncentracija inhibitora po principu šahovske table i veličina sinergije je izračunavana poređenjem zabeležene površine odgovora sa očekivanim rezultatom izračunatim iz jednostavnog sabiranja samih pojedinačnih sredstava. Veličine sinergije veće od 100 se smatraju jakom sinergijom i veličine između 50 i 100 se smatraju umerenom sinergijom. Veličine sinergije nula predstavljaju aditivinost i negativne veličine sinergije predstavljaju antagonizam između sredstava.
[0487]Kao što su ovde korišćene, sve skraćenice, simobili i konvencije su u skladu sa onima korišćenim u savremenoj naučnoj literaturi. Videti, npr., Janet S. Dodd, ed., The ACS Style Guide: A Manual for Authors i Editors, 2nd Ed., VVashington, D.C.: American Chemical Society, 1997.

Claims (7)

1. Jedinjenje fonnule: ili njegova fannaceutski prihvatljiva so.
2. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje fonnule: ili njegovu fannaceutski prihvatljivu so i farmaceutski prihvatljiv nosač, adjuvant ili prenosilac.
3. Postupak za inhibiciju replikacije virusa gripa uin vitrobiološkom uzorku koji sadrži korak primene na navedeni biološki uzorak efikasne količine jedinjenja fonnule: ili njegove fannaceutski prihvatljive soli.
4. Postupak prema patentnom zahtevu 3, koji dalje sadrži ko-primenu dodatnog terapeutskog sredstva.
5. Postupak prema patentnom zahtevu 4, naznačen time što je dodatno terapeutsko sredstvo izabrano od antivirusnog sredstva ili vakcine protiv gripa.
6. Jedinjenje formule: ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u lečenju gripa.
7. Postupak za pripremu jedinjenja formule ili njegove fannaceutski prihvatljive soli, koji sadrži korake: i) reagovanja jedinjenja 6a: sa j cdinj cnj cm 7a: da bi se formiralo jedinjenje 8a: s ii) deprotekcije Ts grupe jedinjenja 8a pod stabilnim uslovima da bi se formiralo jedinjenje 9a i iii) tretiranja jedinjenja 9a sa pogodnim reagensom da bi se generisalo jedinjenje
RS20170273A 2011-08-01 2012-08-01 Inhibitori replikacije virusa gripa RS55858B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161513793P 2011-08-01 2011-08-01
PCT/US2012/049097 WO2013019828A1 (en) 2011-08-01 2012-08-01 Inhibitors of influenza viruses replication
EP12746215.8A EP2739623B1 (en) 2011-08-01 2012-08-01 Inhibitors of influenza viruses replication

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS55858B1 true RS55858B1 (sr) 2017-08-31

Family

ID=46650922

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20170273A RS55858B1 (sr) 2011-08-01 2012-08-01 Inhibitori replikacije virusa gripa

Country Status (37)

Country Link
US (5) US9051319B2 (sr)
EP (2) EP2739623B1 (sr)
JP (3) JP5917692B2 (sr)
KR (1) KR101967172B1 (sr)
CN (3) CN105503862B (sr)
AP (1) AP3867A (sr)
AR (1) AR087418A1 (sr)
AU (2) AU2012290127B2 (sr)
CA (1) CA2844054C (sr)
CL (1) CL2014000245A1 (sr)
CO (1) CO6940412A2 (sr)
CY (1) CY1118726T1 (sr)
DK (1) DK2739623T3 (sr)
EA (3) EA027210B1 (sr)
EC (1) ECSP14013189A (sr)
ES (2) ES2618919T3 (sr)
GE (2) GEP201706698B (sr)
HK (1) HK1223915A1 (sr)
HR (1) HRP20170421T1 (sr)
HU (1) HUE033752T2 (sr)
IL (2) IL230618A (sr)
IN (1) IN2014CN00562A (sr)
LT (1) LT2739623T (sr)
ME (1) ME02638B (sr)
MX (1) MX339149B (sr)
PE (1) PE20141209A1 (sr)
PH (1) PH12014500257A1 (sr)
PL (1) PL2739623T3 (sr)
PT (1) PT2739623T (sr)
RS (1) RS55858B1 (sr)
SG (2) SG10201503833SA (sr)
SI (1) SI2739623T1 (sr)
TW (3) TWI594997B (sr)
UA (2) UA118010C2 (sr)
UY (1) UY34234A (sr)
WO (1) WO2013019828A1 (sr)
ZA (2) ZA201400604B (sr)

Families Citing this family (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ564065A (en) * 2005-05-20 2011-03-31 Vertex Pharma Pyrrolopyridines useful as inhibitors of protein kinase
EP2262498A2 (en) * 2008-03-10 2010-12-22 Vertex Pharmceuticals Incorporated Pyrimidines and pyridines useful as inhibitors of protein kinases
GEAP202213376A (en) 2009-06-17 2022-02-25 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Us Inhibitors of influenza viruses replication
NZ619699A (en) 2011-07-05 2016-03-31 Vertex Pharma Processes and intermediates for producing azaindoles
UA118010C2 (uk) 2011-08-01 2018-11-12 Вертекс Фармасьютікалз Інкорпорейтед Інгібітори реплікації вірусів грипу
US9296727B2 (en) 2013-10-07 2016-03-29 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods of regioselective synthesis of 2,4-disubstituted pyrimidines
LT3068776T (lt) 2013-11-13 2019-08-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Gripo virusų replikacijos inhibitoriai
HUE052178T2 (hu) 2013-11-13 2021-04-28 Vertex Pharma Eljárások influenzavírus-replikáció inhibitorainak elõállítására
CN103922966B (zh) * 2014-04-14 2015-10-21 武汉大学 作为甲型流感病毒抑制剂的甲酰胺和异腈类化合物及其制备与应用
MA40547A (fr) * 2014-08-08 2017-06-14 Janssen Sciences Ireland Uc Indoles pouvant être utilisés dans l'infection par le virus influenza
SI3191489T1 (sl) * 2014-09-08 2021-02-26 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Pirolopirimidini za uporabo pri okužbi z virusom gripe
MA40773A (fr) 2014-10-02 2017-08-08 Vertex Pharma Variants du virus influenza a
MA40772A (fr) * 2014-10-02 2017-08-08 Vertex Pharma Variants du virus de la grippe a
JP6857617B2 (ja) 2015-05-13 2021-04-14 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッドＶｅｒｔｅｘ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ インフルエンザウイルスの複製の阻害剤
WO2016183116A1 (en) 2015-05-13 2016-11-17 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods of preparing inhibitors of influenza viruses replication
CA3005514A1 (en) 2015-11-27 2017-06-01 Janssen Sciences Ireland Uc Heterocyclic indoles for use in influenza virus infection
JP6952695B2 (ja) 2015-12-09 2021-10-20 サンシャイン・レイク・ファーマ・カンパニー・リミテッドＳｕｎｓｈｉｎｅ Ｌａｋｅ Ｐｈａｒｍａ Ｃｏ．，Ｌｔｄ． インフルエンザウイルス複製の阻害剤、その適用方法および使用
KR20180099839A (ko) * 2016-01-07 2018-09-05 얀센 사이언시즈 아일랜드 유씨 인플루엔자 바이러스 감염에서 사용하기 위한 작용화된 펜탄산
DK3405466T3 (da) 2016-01-20 2021-02-01 Janssen Sciences Ireland Unlimited Co Arylsubstituerede pyrimidiner til anvendelse ved influenzavirusinfektion
US11414413B2 (en) 2016-07-26 2022-08-16 Suzhou Longbiotech Pharmaceuticals Co., Ltd. Heterocyclic compound as JAK inhibitor, and salts and therapeutic use thereof
WO2018033082A1 (en) 2016-08-16 2018-02-22 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Inhibitors of influenza virus replication, application methods and uses thereof
WO2018041091A1 (en) * 2016-08-30 2018-03-08 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Inhibitors of influenza virus replication, application methods and uses thereof
CN106478460B (zh) * 2016-09-28 2018-06-12 衢州学院 一种手性N-Boc-3-氨基-4-芳基-丁酸的合成方法
EP3555095B1 (en) 2016-12-15 2023-04-12 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Inhibitors of influenza virus replication and uses thereof
WO2018127096A1 (en) * 2017-01-05 2018-07-12 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Inhibitors of influenza virus replication and uses thereof
US10927118B2 (en) 2017-03-02 2021-02-23 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Inhibitors of influenza virus replication and uses thereof
EP3596202A4 (en) 2017-03-14 2021-01-27 The Regents of the University of California GENOME-SCALE IDENTIFICATION OF IMMUNE EVASURE FUNCTIONS IN A VIRUS
CN109384783A (zh) * 2017-08-09 2019-02-26 银杏树药业(苏州)有限公司 新型杂环化合物及其作为抗流感病毒抑制剂的医药用途
EP3829719B1 (en) * 2018-07-27 2025-04-02 Cocrystal Pharma, Inc. Pyrrolo[2,3-b]pyridin derivatives as inhibitors of influenza virus replication
CN112979647B (zh) * 2021-03-12 2022-05-20 浙江大学 含氮杂氨基酸的氮杂吲哚衍生物及制备和应用

Family Cites Families (168)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4349552A (en) 1978-10-30 1982-09-14 Fujisawa Pharmaceutical Company, Ltd. 5-Fluorouracil derivatives, and their pharmaceutical compositions
NZ221717A (en) 1986-09-10 1990-08-28 Sandoz Ltd Azaindole and indolizine derivatives and pharmaceutical compositions
WO1990007926A1 (en) 1989-01-20 1990-07-26 Pfizer Inc. 3-(1,2,5,6-tetrahydropyridyl)-pyrrolopyridines
US5304121A (en) 1990-12-28 1994-04-19 Boston Scientific Corporation Drug delivery system making use of a hydrogel polymer coating
FR2687402B1 (fr) 1992-02-14 1995-06-30 Lipha Nouveaux azaindoles, procedes de preparation et medicaments les contenant.
DE4304455A1 (de) 1993-02-15 1994-08-18 Bayer Ag Heterocyclisch substituierte Phenyl-cyclohexan-carbonsäurederivate
US5886026A (en) 1993-07-19 1999-03-23 Angiotech Pharmaceuticals Inc. Anti-angiogenic compositions and methods of use
IL129871A (en) * 1994-05-06 2003-11-23 Pharmacia & Upjohn Inc Process for preparing 4-phenyl-substituted octanoyl-oxazolidin-2-one intermediates that are useful for preparing pyran-2-ones useful for treating retroviral infections
WO1995033748A1 (en) 1994-06-09 1995-12-14 Smithkline Beecham Corporation Endothelin receptor antagonists
US6099562A (en) 1996-06-13 2000-08-08 Schneider (Usa) Inc. Drug coating with topcoat
GB9721437D0 (en) 1997-10-10 1997-12-10 Glaxo Group Ltd Heteroaromatic compounds and their use in medicine
WO2000040581A1 (en) 1999-01-07 2000-07-13 American Home Products Corporation 3,4-dihydro-2h-benzo[1,4]oxazine derivatives
EP1147083B1 (en) 1999-01-07 2004-06-16 Wyeth Arylpiperazinyl-cyclohexyl indole derivatives for the treatment of depression
US6313126B1 (en) 1999-01-07 2001-11-06 American Home Products Corp Arylpiperazinyl-cyclohexyl indole derivatives for the treatment of depression
US6265403B1 (en) 1999-01-20 2001-07-24 Merck & Co., Inc. Angiogenesis inhibitors
AR028475A1 (es) 1999-04-22 2003-05-14 Wyeth Corp Derivados de azaindol y uso de los mismos para la manufactura de un medicamento para el tratamiento de la depresion.
US20030153560A1 (en) 1999-04-23 2003-08-14 Salituro Francesco G. Inhibitors of c-Jun N-terminal kinases (JNK)
JP2003503456A (ja) 1999-07-02 2003-01-28 スチュアート エイ． リプトン 神経傷害またはアポトーシスを軽減する方法
GB9919843D0 (en) 1999-08-20 1999-10-27 Smithkline Beecham Plc Novel compounds
DE19948417A1 (de) 1999-10-07 2001-04-19 Morphochem Ag Imidazol-Derivate und ihre Verwendung als Arzneimittel
EP1246823A1 (en) 1999-12-28 2002-10-09 Pharmacopeia, Inc. Pyrimidine and triazine kinase inhibitors
US20020065270A1 (en) 1999-12-28 2002-05-30 Moriarty Kevin Joseph N-heterocyclic inhibitors of TNF-alpha expression
MXPA02007957A (es) 2000-02-17 2002-11-29 Amgen Inc Inhibidores de cinasas.
US7041277B2 (en) 2000-03-10 2006-05-09 Cadbury Adams Usa Llc Chewing gum and confectionery compositions with encapsulated stain removing agent compositions, and methods of making and using the same
CA2308994A1 (en) 2000-05-19 2001-11-19 Aegera Therapeutics Inc. Neuroprotective compounds
NZ524192A (en) 2000-08-14 2005-02-25 Ortho Mcneil Pharm Inc Substituted pyrazoles
HK1053129A1 (zh) 2000-09-06 2003-10-10 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. 治疗变态反应的方法
ES2309088T3 (es) 2000-09-06 2008-12-16 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Uso de pirazoles sustituidos para el tratamiento de alergias.
UY26942A1 (es) 2000-09-20 2002-04-26 Abbott Lab N-acilsulfonamidas promotoras de la apoptosis
JP4307073B2 (ja) 2000-12-22 2009-08-05 ワイス ５−ヒドロキシトリプトアミン−６リガンドとしてのヘテロサイクルインダゾールおよびアザインダゾール化合物
CA2439263C (en) 2001-03-02 2012-10-23 Frank Becker Three hybrid assay system
PT1392697E (pt) 2001-03-14 2005-01-31 Wyeth Corp Antidepressivos derivados aza-heterociclilmetilo de 2,3- di-hidro-1,4-dioxino[2,3-f]quinolina
US7081454B2 (en) 2001-03-28 2006-07-25 Bristol-Myers Squibb Co. Tyrosine kinase inhibitors
EP1381600A1 (en) 2001-04-24 2004-01-21 Wyeth, A Corporation of the State of Delaware Antidepressant azaheterocyclylmethyl derivatives of 2,3-dihydro-1,4-benzodioxan
US6656950B2 (en) 2001-04-25 2003-12-02 Wyeth Antidepressant azaheterocyclylmethyl derivatives of 1,4-dioxino[2,3-b]pyridine
BR0209408A (pt) 2001-04-26 2004-07-06 Wyeth Corp Antidepressivos de azaheterociclilmetila derivados de 7,8-dihidro-3h-6,9-dioxa-1,3-diaza-ciclopenta[a]naftal eno, método de tratamento usando tais compostos e processo para prepará-los
US6593350B2 (en) 2001-04-26 2003-07-15 Wyeth Antidepressant indoletetrahydropyridine derivatives of 2,3-dihydro-7H-[1,4]dioxino[2,3-e]indole
JP2004527563A (ja) 2001-04-26 2004-09-09 ワイス 抗うつ作用を有する、２，３−ジヒドロ−１，４−ジオキシノ［２，３−ｆ］キノキサリンのアザへテロシクリルメチル誘導体
EP1381612A1 (en) 2001-04-26 2004-01-21 Wyeth Antidepressant aza-heterocyclylmethyl derivatives of 2,3-dihydro-1,4-dioxino[2,3-f]quinazoline
JP2004532236A (ja) 2001-04-26 2004-10-21 ワイス 抗うつ作用を持つ、オキサヘテロ環結合［１、４］−ベンゾジオキサンのアザヘテロシクリルメチル誘導体
US6555560B2 (en) 2001-04-30 2003-04-29 Wyeth Antidepressant azaheterocyclylmethyl derivatives of 1,4,5-trioxa-phenanthrene
CN1256337C (zh) 2001-04-30 2006-05-17 惠氏公司 抗抑郁的7,8－二氢－1,6,9－三氧杂－3－氮杂－环戊二烯并[a]萘的氮杂环基甲基衍生物
GB0111186D0 (en) 2001-05-08 2001-06-27 Smithkline Beecham Plc Novel compounds
MXPA03010524A (es) 2001-05-17 2005-03-07 Wyeth Corp Proceso para la sintesis de derivados de la 2,3-dihidro-1,4-dioxino-[2,3-f]-quinolina.
US6825190B2 (en) 2001-06-15 2004-11-30 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Protein kinase inhibitors and uses thereof
GB0115109D0 (en) 2001-06-21 2001-08-15 Aventis Pharma Ltd Chemical compounds
WO2003010169A1 (en) 2001-07-25 2003-02-06 Wyeth Antidepressant azaheterocyclylmethyl derivatives of 7, 8-dihydro-6h-5-oxa-1-aza-phenanthrene
KR100894167B1 (ko) 2001-08-14 2009-04-22 토야마 케미칼 컴퍼니 리미티드 신규의 바이러스 증식저해 ·살바이러스방법 및 신규의피라진뉴클레오티드 ·피라진뉴클레오시드 유사체
US20040236110A1 (en) 2001-09-26 2004-11-25 Ladouceur Gaetan H Substituted 3-pyridyl indoles and indazoles as c17,20 lyase inhibitors
WO2003031439A1 (en) 2001-10-05 2003-04-17 Wyeth Antidepressant chroman and chromene derivatives of 3-(1,2,3,6-tetrahydro-4-pyridinyl)-1h-indole
US7361671B2 (en) 2001-11-15 2008-04-22 The Institute For Pharmaceutical Discovery, Inc. Substituted heteroarylalkanoic acids
TW200306819A (en) 2002-01-25 2003-12-01 Vertex Pharma Indazole compounds useful as protein kinase inhibitors
DE60302150D1 (en) 2002-04-26 2005-12-08 Pfizer Prod Inc N-substituiete heteroaryloxy-aryl-spiro-pyrimidine-2,4,6-trion metalloproteinase inhibitoren
US7304061B2 (en) 2002-04-26 2007-12-04 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Heterocyclic inhibitors of ERK2 and uses thereof
CN1656079A (zh) 2002-05-31 2005-08-17 卫材株式会社 吡唑化合物和含有该化合物的药物组合物
UA78999C2 (en) 2002-06-04 2007-05-10 Wyeth Corp 1-(aminoalkyl)-3-sulfonylazaindoles as ligands of 5-hydroxytryptamine-6
DE60308387T2 (de) 2002-08-02 2007-09-20 Vertex Pharmaceuticals Inc., Cambridge Pyrazolenthaltende zusammensetzungen und ihre verwendung als gsk-3 inhibitoren
AU2002368154A1 (en) 2002-08-08 2004-02-25 Ribapharm Inc. Improved synthesis for hydroxyalkylated heterocyclic bases
SE0202463D0 (sv) 2002-08-14 2002-08-14 Astrazeneca Ab Novel compounds
US7262200B2 (en) 2002-10-25 2007-08-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Indazolinone compositions useful as kinase inhibitors
UA80743C2 (en) 2003-02-26 2007-10-25 Boehringer Ingelheim Pharma Dihydropteridinones, method for the production and use thereof in the form of drugs
EP2295433A3 (en) 2003-03-06 2011-07-06 Eisai R&D Management Co., Ltd. JNK inhibitors
JP2006520796A (ja) 2003-03-17 2006-09-14 タケダ サン ディエゴ インコーポレイテッド ヒストンデアセチラーゼインヒビター
GB0308466D0 (en) 2003-04-11 2003-05-21 Novartis Ag Organic compounds
WO2005000813A1 (en) 2003-05-30 2005-01-06 Imclone Systems Incorporated Heteroarylamino-phenylketone derivatives and their use as kinase inhibitors
WO2004106298A1 (en) 2003-05-30 2004-12-09 Janssen Pharmaceutica N.V. Indole derivatives with an improved antipsychotic activity
AR045595A1 (es) 2003-09-04 2005-11-02 Vertex Pharma Composiciones utiles como inhibidores de proteinas quinasas
WO2005044181A2 (en) 2003-09-09 2005-05-19 Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education Protection of tissues and cells from cytotoxic effects of ionizing radiation by abl inhibitors
WO2005033072A2 (en) 2003-09-30 2005-04-14 Scios Inc. Heterocyclic amides and sulfonamides
CN1897950A (zh) 2003-10-14 2007-01-17 惠氏公司 稠合芳基和杂芳基衍生物及其使用方法
CN1925855B (zh) 2003-12-19 2010-06-16 普莱希科公司 开发Ret调节剂的化合物和方法
US20070066641A1 (en) 2003-12-19 2007-03-22 Prabha Ibrahim Compounds and methods for development of RET modulators
GB0405055D0 (en) 2004-03-05 2004-04-07 Eisai London Res Lab Ltd JNK inhibitors
NZ584499A (en) * 2004-03-30 2011-08-26 Vertex Pharma Azaindoles Useful as Inhibitors of Jak and Other Protein Kinases
TW200604168A (en) 2004-04-02 2006-02-01 Vertex Pharma Azaindoles useful as inhibitors of rock and other protein kinases
ITMI20040874A1 (it) 2004-04-30 2004-07-30 Ist Naz Stud Cura Dei Tumori Derivati indolici ed azaindolici con azione antitumorale
KR100476851B1 (ko) 2004-05-18 2005-03-17 (주)성신엔지니어링 중력식 섬유여과기
CA2570817A1 (en) 2004-06-17 2006-01-26 Plexxikon, Inc. Azaindoles modulating c-kit activity and uses therefor
DE102004029784A1 (de) 2004-06-21 2006-01-05 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Neue 2-Benzylaminodihydropteridinone, Verfahren zur deren Herstellung und deren Verwendung als Arzneimittel
US7173031B2 (en) 2004-06-28 2007-02-06 Bristol-Myers Squibb Company Pyrrolotriazine kinase inhibitors
US20060122213A1 (en) 2004-06-30 2006-06-08 Francoise Pierard Azaindoles useful as inhibitors of protein kinases
US7361763B2 (en) 2004-07-27 2008-04-22 Sgx Pharmaceuticals, Inc. Pyrrolo-pyridine kinase modulators
GB0420719D0 (en) 2004-09-17 2004-10-20 Addex Pharmaceuticals Sa Novel allosteric modulators
CA2582235A1 (en) 2004-10-04 2006-04-20 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Lactam compounds useful as protein kinase inhibitors
WO2006038001A1 (en) 2004-10-06 2006-04-13 Celltech R & D Limited Aminopyrimidine derivatives as jnk inhibitors
WO2006050076A1 (en) 2004-10-29 2006-05-11 Janssen Pharmaceutica, N.V. Pyrimidinyl substituted fused-pyrrolyl compounds useful in treating kinase disorders
EP1812440B1 (en) 2004-11-04 2010-09-22 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Pyrazolo[1,5-a]pyrimidines useful as inhibitors of protein kinases
EP1814883A1 (en) 2004-11-22 2007-08-08 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Bicyclic inhibitors or rho kinase
US20090233955A1 (en) 2004-12-08 2009-09-17 Frazee James S 1H-Pyrrolo[2,3-B]Pyridnes
EP1831168B1 (en) 2004-12-16 2014-07-02 Vertex Pharmaceuticals Inc. Pyrid-2-ones useful as inhibitors of tec family protein kinases for the treatment of inflammatory, proliferative and immunologically-mediated diseases.
US20060161001A1 (en) 2004-12-20 2006-07-20 Amgen Inc. Substituted heterocyclic compounds and methods of use
RU2434871C2 (ru) 2005-02-03 2011-11-27 Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед Пирролопиримидины, применимые в качестве ингибиторов протеинкиназы
AU2006247322A1 (en) 2005-05-16 2006-11-23 Irm Llc Pyrrolopyridine derivatives as protein kinase inhibitors
NZ564065A (en) 2005-05-20 2011-03-31 Vertex Pharma Pyrrolopyridines useful as inhibitors of protein kinase
PL2395004T3 (pl) 2005-06-22 2016-08-31 Plexxikon Inc Pochodne pirolo[2,3-b]pirydyny jako inhibitory kinazy białkowej
GB0516156D0 (en) 2005-08-05 2005-09-14 Eisai London Res Lab Ltd JNK inhibitors
EP2532667A1 (en) 2005-09-30 2012-12-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Deazapurines useful as inhibitors of janus kinases
EP2514751A1 (en) 2005-11-15 2012-10-24 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Azaindazoles useful as inhibitor of kinases
US20130096302A1 (en) 2005-11-22 2013-04-18 Hayley Binch Pyrrolopyrazines and pyrazolopyrazines useful as inhibitors of protein kinases
AR060316A1 (es) 2006-01-17 2008-06-11 Vertex Pharma Azaindoles de utilidad como inhibidores de janus quinasas
CA2652648C (en) 2006-02-14 2016-10-25 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Dihydrodiazepines useful as inhibitors of protein kinases
CA2641254A1 (en) 2006-02-14 2007-08-23 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrrolo(3,2-c) pyridines useful as inhibitors of protein kinases
DE102006012617A1 (de) 2006-03-20 2007-09-27 Merck Patent Gmbh 4-(Pyrrolopyridinyl)-pyrimidinyl-2-amin-derivate
CN101460499A (zh) 2006-04-05 2009-06-17 沃泰克斯药物股份有限公司 可用作janus激酶抑制剂的去氮杂嘌呤
US8252792B2 (en) 2006-04-26 2012-08-28 F. Hoffman-La Roche Ag Pyrimidine derivatives as PI3K inhibitors
WO2007129195A2 (en) 2006-05-04 2007-11-15 Pfizer Products Inc. 4-pyrimidine-5-amino-pyrazole compounds
US20090017444A1 (en) 2006-06-09 2009-01-15 Wisconsin Alumni Research Foundation Screening method for modulators of viral transcription or replication
EP2038272B8 (en) 2006-06-30 2013-10-23 Sunesis Pharmaceuticals, Inc. Pyridinonyl pdk1 inhibitors
TW200808325A (en) 2006-07-06 2008-02-16 Astrazeneca Ab Novel compounds
BRPI0714908B8 (pt) 2006-08-08 2021-05-25 Chugai Pharmaceutical Co Ltd derivados de pirimidina como inibidor de pi3k, composição farmacêutica e agente preventivo ou agente terapêutico de uma doença proliferativa que os compreende
WO2008023159A1 (en) 2006-08-24 2008-02-28 Astrazeneca Ab Morpholino pyrimidine derivatives useful in the treatment of proliferative disorders
US20130310418A1 (en) 2006-11-15 2013-11-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Azaindazoles useful as inhibitors of kinases
CA2672612A1 (en) 2006-12-14 2008-06-26 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds useful as protein kinase inhibitors
US8247421B2 (en) 2006-12-21 2012-08-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated 5-cyano-4-(pyrrolo [2,3B] pyridine-3-yl)-pyrimidine derivatives useful as protein kinase inhibitors
TW200840581A (en) 2007-02-28 2008-10-16 Astrazeneca Ab Novel pyrimidine derivatives
EP2137183B1 (en) 2007-03-09 2011-09-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Aminopyrimidines useful as inhibitors of protein kinases
EP2134709A1 (en) 2007-03-09 2009-12-23 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Aminopyridines useful as inhibitors of protein kinases
WO2008112642A1 (en) 2007-03-09 2008-09-18 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Aminopyrimidines useful as inhibitors of protein kinases
CN102746175B (zh) 2007-03-22 2014-01-15 武田药品工业株式会社 可用作plk1抑制剂的取代的嘧啶并二氮杂*
RU2339637C1 (ru) 2007-04-05 2008-11-27 Андрей Александрович Иващенко Блокаторы гистаминного рецептора для фармацевтических композиций, обладающих противоаллергическим и аутоиммунным действием
JP5580731B2 (ja) 2007-04-05 2014-08-27 アンドレイ・アレクサンドロビッチ・イワシェンコ 置換された２，３，４，５−テトラヒドロ−１ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール、その製造のための方法及び使用
AR067762A1 (es) 2007-07-31 2009-10-21 Vertex Pharma Proceso para preparar 5-fluoro-1h-pirazolo (3,4-b) piridin-3-amina y derivados de la misma
US8461149B2 (en) 2007-08-15 2013-06-11 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds useful as protein kinase inhibitors
EP2610256B1 (en) 2007-09-28 2016-04-27 Cyclacel Limited Pyrimidine derivatives as protein kinase inhibitors
SG185289A1 (en) 2007-10-09 2012-11-29 European Molecular Biology Lab Embl Soluble fragments of influenza virus pb2 protein capable of binding rna-cap
CA2704266A1 (en) 2007-11-02 2009-06-11 Vertex Pharmaceuticals Incorporated [1h- pyrazolo [3, 4-b] pyridine-4-yl] -phenyle or -pyridin-2-yle derivatives as protein kinase c-theta
SI2207775T1 (sl) 2007-11-05 2012-05-31 Novartis Ag benzilamino karboksiacil piperidinski derivati kot inhibitorji CETP uporabni za zdravljenje bolezni kot je hiperlipidemija ali arterioskleroza
MX2010008198A (es) 2008-02-25 2010-08-23 Hoffmann La Roche Inhibidores de cinasa de pirrolopirazina.
EP2262498A2 (en) 2008-03-10 2010-12-22 Vertex Pharmceuticals Incorporated Pyrimidines and pyridines useful as inhibitors of protein kinases
US20110033473A1 (en) 2008-04-09 2011-02-10 Yoram Reiter Anti influenza antibodies and uses thereof
MX2011000026A (es) 2008-06-23 2011-02-24 Vertex Pharma Inhibidores de proteina cinasas.
MX2011000021A (es) 2008-06-23 2011-02-24 Vertex Pharma Inhibidores de proteina cinasas.
KR20110033299A (ko) 2008-07-23 2011-03-30 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 트리-사이클릭 피라졸로피리딘 키나제 억제제
AU2009274017A1 (en) 2008-07-23 2010-01-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazolopyridine kinase inhibitors
JP5631310B2 (ja) 2008-07-23 2014-11-26 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッドＶｅｒｔｅｘ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ 三環式ピラゾロピリジンキナーゼ阻害剤
US8569337B2 (en) 2008-07-23 2013-10-29 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Tri-cyclic pyrazolopyridine kinase inhibitors
EP2318407B1 (en) 2008-07-23 2013-01-02 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazolopyridine kinase inhibitors
WO2010129668A1 (en) 2009-05-06 2010-11-11 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazolopyridines
GEAP202213376A (en) * 2009-06-17 2022-02-25 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Us Inhibitors of influenza viruses replication
WO2011000566A2 (en) 2009-06-30 2011-01-06 Savira Pharmaceuticals Gmbh Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of negative-sense ssrna virus infections
CA2767089A1 (en) 2009-07-15 2011-01-20 Abbott Laboratories Pyrrolopyridine inhibitors of kinases
JP5685895B2 (ja) * 2009-12-11 2015-03-18 株式会社リコー 画像処理装置、画像処理方法およびプログラム
CN102933206A (zh) 2010-04-07 2013-02-13 弗特克斯药品有限公司 3-(6-(1-(2，2-二氟苯并[d][1，3]二氧杂环戊烯-5-基)环丙烷甲酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸的固体形式
PH12012502046A1 (en) 2010-04-14 2017-07-26 Array Biopharma Inc 5,7-substituted~imidazo[1,2-c]pyrimidines as inhibitors of jak kinases
WO2011137022A1 (en) 2010-04-27 2011-11-03 Merck Sharp & Dohme Corp. Azaindoles as janus kinase inhibitors
EP2651941A1 (en) 2010-12-16 2013-10-23 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of influenza viruses replication
JP2013545818A (ja) 2010-12-16 2013-12-26 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド インフルエンザウイルス複製阻害物質
CN103492381A (zh) 2010-12-16 2014-01-01 沃泰克斯药物股份有限公司 流感病毒复制的抑制剂
NZ619699A (en) 2011-07-05 2016-03-31 Vertex Pharma Processes and intermediates for producing azaindoles
UA118010C2 (uk) * 2011-08-01 2018-11-12 Вертекс Фармасьютікалз Інкорпорейтед Інгібітори реплікації вірусів грипу
MX2014005565A (es) 2011-11-07 2014-05-30 Vertex Pharma Metodos para tratar enfermedades inflamatorias y composiciones farmaceuticas utiles para los mismos.
EP2858984A1 (en) 2012-06-08 2015-04-15 Vertex Pharmaceuticals Inc. Inhibitors of influenza viruses replication
AU2014318832B2 (en) 2013-09-12 2018-11-29 Janssen Biopharma, Inc. Aza-pyridone compounds and uses thereof
US9296727B2 (en) 2013-10-07 2016-03-29 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods of regioselective synthesis of 2,4-disubstituted pyrimidines
HUE052178T2 (hu) 2013-11-13 2021-04-28 Vertex Pharma Eljárások influenzavírus-replikáció inhibitorainak elõállítására
LT3068776T (lt) 2013-11-13 2019-08-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Gripo virusų replikacijos inhibitoriai
AU2014348762A1 (en) 2013-11-13 2016-05-26 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Formulations of azaindole compounds
MA40547A (fr) 2014-08-08 2017-06-14 Janssen Sciences Ireland Uc Indoles pouvant être utilisés dans l'infection par le virus influenza
SI3191489T1 (sl) 2014-09-08 2021-02-26 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Pirolopirimidini za uporabo pri okužbi z virusom gripe
MA40772A (fr) 2014-10-02 2017-08-08 Vertex Pharma Variants du virus de la grippe a
MA40773A (fr) 2014-10-02 2017-08-08 Vertex Pharma Variants du virus influenza a
WO2016183116A1 (en) 2015-05-13 2016-11-17 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods of preparing inhibitors of influenza viruses replication
JP6857617B2 (ja) 2015-05-13 2021-04-14 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッドＶｅｒｔｅｘ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ インフルエンザウイルスの複製の阻害剤
CA3005514A1 (en) 2015-11-27 2017-06-01 Janssen Sciences Ireland Uc Heterocyclic indoles for use in influenza virus infection
KR20180099839A (ko) 2016-01-07 2018-09-05 얀센 사이언시즈 아일랜드 유씨 인플루엔자 바이러스 감염에서 사용하기 위한 작용화된 펜탄산
DK3405466T3 (da) 2016-01-20 2021-02-01 Janssen Sciences Ireland Unlimited Co Arylsubstituerede pyrimidiner til anvendelse ved influenzavirusinfektion
WO2017223231A1 (en) 2016-06-21 2017-12-28 Alios Biopharma, Inc. (s)-8-(benzhydryl )-6-isopropyl-3,5-dioxo- 5, 6,7,8,-tetrahydro-3h-pyrazino-[1,2-b]pyridazin-yl-isobutyrate antiviral agent for use in treating influenza
JP2020516634A (ja) 2017-04-12 2020-06-11 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッドＶｅｒｔｅｘ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ インフルエンザウイルス感染の処置方法および併用療法

Also Published As

Publication number Publication date
JP2016121196A (ja) 2016-07-07
TWI619715B (zh) 2018-04-01
EA201692506A2 (ru) 2017-06-30
IL244597B (en) 2018-01-31
US9394302B2 (en) 2016-07-19
HK1194736A1 (zh) 2014-10-24
AP3867A (en) 2016-10-31
JP2018062516A (ja) 2018-04-19
ZA201409246B (en) 2016-05-25
MX339149B (es) 2016-05-13
CN105503862A (zh) 2016-04-20
EP2739623A1 (en) 2014-06-11
US10875855B2 (en) 2020-12-29
SI2739623T1 (sl) 2017-07-31
TW201313713A (zh) 2013-04-01
CL2014000245A1 (es) 2014-08-18
IL230618A (en) 2016-04-21
PT2739623T (pt) 2017-04-03
AU2012290127B2 (en) 2016-10-27
SG10201503835TA (en) 2015-06-29
ES2763535T3 (es) 2020-05-29
KR20140064812A (ko) 2014-05-28
US9051319B2 (en) 2015-06-09
AU2016228190B2 (en) 2018-11-08
ZA201400604B (en) 2015-10-28
CN103764654A (zh) 2014-04-30
CN105503862B (zh) 2018-02-02
TW201738241A (zh) 2017-11-01
US20140094473A1 (en) 2014-04-03
CO6940412A2 (es) 2014-05-09
EA027210B1 (ru) 2017-06-30
TW201629061A (zh) 2016-08-16
MX2014001067A (es) 2014-03-27
ME02638B (me) 2017-06-20
US20150191468A1 (en) 2015-07-09
JP2014521688A (ja) 2014-08-28
US20210040092A1 (en) 2021-02-11
WO2013019828A1 (en) 2013-02-07
CA2844054A1 (en) 2013-02-07
JP5917692B2 (ja) 2016-05-18
UA122808C2 (uk) 2021-01-06
CN103764654B (zh) 2016-01-20
US20160355512A1 (en) 2016-12-08
CA2844054C (en) 2020-09-01
UA118010C2 (uk) 2018-11-12
AP2014007402A0 (en) 2014-01-31
HUE033752T2 (en) 2017-12-28
CY1118726T1 (el) 2017-07-12
AU2016228190A1 (en) 2016-10-27
IL244597A0 (en) 2016-04-21
EA037372B1 (ru) 2021-03-22
US20180155342A1 (en) 2018-06-07
US9908878B2 (en) 2018-03-06
TWI594997B (zh) 2017-08-11
EA023423B1 (ru) 2016-06-30
LT2739623T (lt) 2017-04-10
PH12014500257A1 (en) 2017-04-07
KR101967172B1 (ko) 2019-04-09
EA201500265A1 (ru) 2015-10-30
IL230618A0 (en) 2014-03-31
DK2739623T3 (en) 2017-04-24
EP3147284B1 (en) 2019-09-25
GEP201706698B (en) 2017-07-10
UY34234A (es) 2013-02-28
ECSP14013189A (es) 2014-11-28
PE20141209A1 (es) 2014-09-19
HRP20170421T1 (hr) 2017-06-02
SG10201503833SA (en) 2015-06-29
NZ620086A (en) 2016-05-27
NZ716783A (en) 2017-08-25
HK1223914A1 (zh) 2017-08-11
PL2739623T3 (pl) 2017-07-31
EA201490396A1 (ru) 2014-06-30
EP2739623B1 (en) 2017-01-11
GEP201606531B (en) 2016-08-25
EA201692506A3 (ru) 2017-10-31
EP3147284A1 (en) 2017-03-29
IN2014CN00562A (sr) 2015-04-03
ES2618919T3 (es) 2017-06-22
JP6259855B2 (ja) 2018-01-10
AU2012290127A1 (en) 2013-05-02
AR087418A1 (es) 2014-03-19
TWI537268B (zh) 2016-06-11
CN105481853A (zh) 2016-04-13
HK1223915A1 (zh) 2017-08-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10875855B2 (en) Inhibitors of influenza viruses replication
KR20140014110A (ko) 인플루엔자 바이러스 복제의 억제제
KR20130128436A (ko) 인플루엔자 바이러스 복제의 억제제
AU2011343647A1 (en) Inhibitors of influenza viruses replication
OA19823A (en) Inhibitors of influenza viruses replication.
NZ620086B2 (en) Inhibitors of influenza viruses replication
OA17028A (en) Inhibitors of influenza viruses replication.
NZ716783B2 (en) Inhibitors of influenza viruses replication