PT87073B

PT87073B - Processo para a preparacao de 4-{4-{4-{4{{2-(2,4-di-fluoro-fenil)-2-(1h-azol-il-metil-1,3-dioxolan-4-il}metoxi}fenil}-1-piperazinil}fenil}triazolonas e de composicoes antimicrobianas que as contem

Info

Publication number: PT87073B
Application number: PT87073A
Authority: PT
Inventors: Louis Jozef Elisabeth Va Veken; Leo Jacobus Jozef Backx; Jan Heeres
Original assignee: Janssen Pharmaceutica Nv
Priority date: 1987-03-25
Filing date: 1988-03-24
Publication date: 1992-07-31
Also published as: AU1358588A; FI881404A0; AU600107B2; ES2044991T3; FI881404A; FI89798B; ZA882118B; EP0283992A3; NO168476C; IE880893L; JPS63277674A; CN1038588C; GR3006420T3; HK50395A; MA21227A1; DK168336B1; DK163288D0; IL85823A0; ATE80626T1; IE61802B1

Description

Antecedentes da Invenção

Na Patente Norte-americana N^ 4 267 179 descrevem-se diversos derivados heterociclicos de (4-fenil-l-piperazinil-aril-oxi-metil-l,3-dioxolan-2-yl)-metil-lH-imidazois e de lH-l,2,4-triazois, admitindo-se que tais compostos possuem propriedades anti-fungicas e anti-bacterianas.

Um tanto inesperadamente verificou-se agora que os análogos de 2-(2,4-difluoro-fenil)-l,3-dioxolano dos compostos descritos na Patente dos Estados Unidos N2 4 267 179 apresentam actividade anti-microbiana melhorada, em particular contra os fungos que pertencem ao género Aspargillus.

Descrição da Invenção

A presente invenção refere-se a 1H

-imidazois e a 1H-1,2,4-triazois que possuem a fórmula:

(I), e aos seus sais de adição de ácido farmaceuticanente aceitáveis e às suas formas estereoquimicamente isoméricas, em que

Q representa N ou CH;

R representa hidrogénio, alquilo (Cq-Cg) ou aril-alquilo(C^-Οθ); e

R·¹* representa hidrogénio, alquilo (Cq-C-g) ou aril-alquilo (Cq-Cg);

em que arilo é fenilo opcionalmente substituído com um máximo de três substituintes seleccionados cada um independentemente entre halogeneo, alquilo(Cq-Cg), alquiloxi(Cq-Cg) e trifluoro-metilo.

Nas definições anteriores o termo halogeneo significa genericamente fluor, cloro, bromo e iodo e o termo ”alquilo(Cq-Cg significa radicais de hidrocarboneto

lineares e ramificados possuindo entre 1 e 6 átomos de carbono tais como por exemplo metilo, etilo, propilo, 1-metil-etilo, 1,1-dimetíl-etilo, 1-metil-propilo, 2-metil-propilo, butilo, pentilo, hexilo e semelhantes.

Os compostos de fórmula (I) em que R representa hidrogénio contém na sua estrutura um sistema tautomérico e consequentemente estes compostos podem estar presentes em qualquer das suas formas tautoméricas, pretendendo-se englobar ambas no âmbito da presente invenção.

Os compostos de fórmula (I) também podem existir em formas hidratadas ou em formas de adição de solvente pretendendo-se englobar as referidas formas no âmbito da presente invenção.

Os compostos preferidos do âmbito da presente invenção são os compostos de fórmula (I) em que R e rI representam independentemente hidrogénio ou alquilo(C^-C^).

Os compostos mais preferenciais são os compostos preferidos em que R^ representa hidrogénio e R representa alquilo (C^-Cg).

Os compostos particularmente preferenciais são os compostos mais preferenciais em que os substituir tes do radical dioxolano possuem uma configuração cis.

Um subgrupo particular de compostos de fórmula (I) é constituído pelos compostos, preferenciais ou particularmente preferenciais, em que Q representa azoto.

Os compostos mais preferenciais escolhem entre o grupo constituído por 018-4-/^4-/^4-/^4-/^2-( 2,4difluoro-fenil)-2-(lH-l,2,4-triazol-l-yl)-metil)-l,3-dioxolan-4-yl7metoxi7fenil/-l-piperazinil7fenil7-2,4-di-h.ici.ro-2-(l-metil-propil)-3H-l,2,4-triazol-3-ona e cis-4-/~4-/~4-/~4- 3 -

2-(2,4-difluoro-fenil)-2-(lH-l,2,4-triazol-l-yl)-metil)-l,3-dioxolan-4-yl7metoxi7fenil7-l-piperazinil7-l-piperazinil7fenil7-2-(l,2-dimetil-propil)-2,4-di-hidro-3H--l,2,4-triazol-3-ona e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

No sentido de se simplificar as representaçóes estruturais dos compostos de fórmula (I) e de alguns materiais de partida e intermediários utilizados na sua preparação, representar-se-á seguidamente o grupo 2-(2,4-difluoro-fenil)-2-(lH-imidazol-l-yl-metilo ou 1H-1,2,4-triazol-l-yl-metil)-l,3-dioxolan-4-ylo, pelo símbolo D:

Os compostos de fórmula (I) podem preparar-se fazendo a Q-alquilação de um fenol adequadamente substituído de fórmula (III) com um reagente de alquilação de fórmula (II).

(II) (III)

Na fórmula (II) e em diversos dos intermediários seguintes, W representa um grupo removível reactivo tal como por exemplo, halogeneo, de preferência cloro, bromo ou iodo, ou um grupo sulfonil-oxi tal como por exemplo, metil-sulfonil-oxi, 2-naftaleno-sulfonil-oxi ou 4-metil-fenil-sulfonil-oxi e semelhantes.

A reacção de alquilação de (II) com (III) pode efectuar-se sob condições conhecidas na especialidade para se efectuarem O-alquilaçSes. A referida reacção de O-alquilação pode efectuar-se convenientemente num solvente adequado inerte à reacção na presença de uma base apropriada. Por exemplo, considera-se um solvente adequado inerte à reacção, um hidrocarboneto aromático, por exemplo benzeno, metil-benzeno, dimetil-benzeno e semelhantes; um hidrocarboneto halogenado, por exemplo dioloro-metano, tricloro-metano e semelhantes; um alcanol inferior, por exemplo metanol, etanol, 1-butanol e semelhantes; uma cetona, por exemplo 2-propanona, 4-metil-2-pentanona e semelhantes; um éter, por exemplo

1,4-dioxano, l,l’-oxi-bis-etano, tetra-hidrofurano e semelhantes; um solvente aprótico dipolar, por exemplo N,N-dimetil-formamida, Ν,Ν-dimetil-acetamida, triamida hexametil-fosfórica, dimetil-sulfóxido, nitro-benzeno, l-metil-2-pirrolidinona e semelhantes; ou uma mistura do referido solvente. 0 ácido que se liberta durante o decurso da reacção pode eliminar-se com uma base apropriada tal como por exemplo um carbonato, hidrogeno-carbonato, hidróxido, alcóxido, hidreto ou amida de metal alcalino ou de metal alcalino-termso, por exemplo carbonato de sódio, carbonato de potássio, hidróxido de sódio, metoxido de sódio, hidreto de sódio, amida de sódio e semelhantes, ou coro uma base orgânica, tal como por exemplo uma amina, por exemplo Ν,Ν-dietil-etanamina, N-(l-roetil-etil)-2-propanatnina, 4-etil-roorfolina e semelhantes. Em alguns casos pode ser vantajoso converter primeiro o fenol substituido (III) num seu sal metálico, de preferência o sal de sódio, pelo processo usual, por exemplo por reacção de (III) com uma base metálica tal como o hidreto de sódio, hidróxido de sódio e semelhantes, e utilizar o sal metálico posteriormente na reacção com (II).

Em alternativa, é possível preparar os compostos de fórmula (I) segundo os procedimentos descritos na Patente dos Estados Unidos N2 4 101 666, a qual se incorpora aqui como referência, por exemplo, através da reacção de

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acetilação de uma cetona de fórmula (IV) com um diol de fórmula (V) na presença de um ácido tal como por exemplo o ácido benzeno-sulfónico, ácido 4-metil-benzeno-sulfónico, ácido metano-sulfónico e ácidos semelhantes.

Ac θ 1—

--)^(I)

1- ;~o

A referida reacção de acetilação pode efectuar-se convenientemente num solvente inerte à reacção tal como por exemplo um hidrocarboneto aromático, por exemplo benzeno, metil-benzeno, um hidrocarboneto halogenado, por exemplo tricloro-metano; um alcanol, por exemplo etanol, propanol e semelhantes, ou uma mistura de tais solventes, De preferência, remove-se a água que se liberta no decurso da reacção por destilação azeotrópica.

Por outro lado, também se podem sintetizar os compostos de fórmula (I) fazendo a N-alquilação de um azol (VI) em que Q possui a significação apresentada para a fórmula (I), com um intermediário de fórmula (VII) em que 1 2

R e R possuem as signif caçães anteriormente definidas.

A referida reacção de K-alquilação pode efectuar-se convenientemente num solvente adequado inerte à reacção du uma mistura de tais solventes na presença de uma base apropriada. Os solventes adequados inertes à reacção são

por exemplo, um hidrooarboneto aromático, por exemplo benzeno, metil-benzeno, dimetil-benzeno, e semelhantes; um alcanol inferior, por exemplo metanol, etanol, 1-butanol e semelhantes; uma cetona, por exemplo 2-propanona, 4-metil-2-pentanona e semelhantes; um éter, por exemplo 1,4-dioxano-l,l'-oxi-bis-etano, tetrat-hidrofurano e semelhantes; um solvente aprótico dipolar, por exemplo N,N-dimetil-formamida, Ν,Ν-dimetil-acetamida, dimetil-sulfóxido, nitro-benzeno, 1-metil-2-pirrolidinona, e semelhantes; um hidrocarboneto halogenado, por exemplo diclõro-metano, tiicloro-metano e semelhantes.

Para se remover o ácido que se liberta no decurso da reacção pode utilizar-se uma base apropriada tal como por exemplo, um carbonato, hidrogeno-carbonato, hidróxido, amida ou hidreto de metal alcalino ou de metal alcalino-terroso, por exemplo hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, carbonato de potássio, hidreto de sódio e semelhantes, ou uma base orgânica tal como por exemplo, N,N-dimetil-4-piridinamina, Ν,Ν-dietil-etanamina ou N-(l-metil-etil)-2-propanamina.

Em alguns casos pode ser vantajoso utilizar um excesso do azol (VI) ou convertê-lo na sua forma de sal metálico, em particular na sua forma de sal de metal alcalino segundo processos conhecidos na especialidade tais como por exemplo, o tratamento do azol (VI) com um hidróxido , alcoxido, amida ou hidreto de metal alcalino.

Os compostos de fórmula (I) também se podem obter por ciclização de um intermediário de fórmula (VIII) com uma benzenamina apropriadamente substituida de fórmula (IX), ou por ciclização de uma benzenamina de fórmula (X) com um reagente de fórmula (XI).

CIClizsção (I)

A referida reacção de ciclização pode efectuar-se por agitação dos reagentes na presença de um solvente polar apropriado, por exemplo água, em mistura com um solvente orgânico apropriado miscível com água, tal como por exemplo, 2-propanol, 2-propanona e semelhantes, de preferência a uma temperatura elevada e mais preferencialmente na presença de um iodeto de metal alcalino ou de metal alcalino-terroso tal como por exemplo o iodeto de potássio.

Além disso, é possível preparar os compostos de fórmula (I) procedendo à N-alquilação de uma piperazina de fórmula (XII) com um benzeno de fórmula (XIII), ou fazendo a N-alquilação de uma piperazina de fórmula (XV) com um benzeno de fórmula (XIV) segundo procedimentos normalizados para N-alquilação. Nas fórmulas (XIII) e (XIV) representa um grupo removível reactivo apropriado, tal como por exemplo, halogeneo, por exemplo cloro ou bromo e em particular o fluor.

A referida N-alquilação pode efectuar-se agitando os reagentes, de preferência a temperaturas bastante elevadas, num solvente orgânico apropriado tal como por exemplo N,N-dimetil-formámida, N,N-dimetil-acetamida, dimetil-sulfóxido e semelhantes, na presença de uma base apropriada tal como por exemplo um hidreto ou carbonato de metal alcalino e bases semelhantes.

Ί5 possível preparar os compostos de fórmula (I) em que R representa hidrogénio, estando os referidos compostos representados pela fórmula (Ι-a), fazendo a ciclização de um intermediário de fórmula (XVI) com um reagente apropriado de fórmula (XVII).

- 9 I

R (I-a) & Na fórmula (XVII) iA e representam ambos um grupo removível apropriado tal como por exemplo, alquiloxi (C^-Οθ), dialquil(C^-C^)-amino e grupos semelhantes e r! possui as significações anteriormente definidas.

A referida reacção de ciclização pode efectuar-se geralmente num solvente adequado inerte à reacção tal como por exemplo um álcool, por exemplo butanol e semelhantes; um éter, por exemplo tetra-hidrofurano, 1-4-dioxano, l,l’-oxi-bis-(2-metoxi-etano); 1,1-dióxido de tetra-hidro-tiofeno e solventes semelhantes. Embora a reacção de ciclização se possa efectuar à temperatura ambiente, são apropriadas temperaturas bastante elevadas para melhorar a velocidade de reacção. De preferência efectua-se a reacção à temperatura de refluxo da mistura de reacção.

Em alternativa é possível preparar os compostos de fórmula (I-a) por ciclização de um intermediário de fórmula (XVIII) com uma amidina apropriada de fórmula (XIX) ou com um seu sal de adição de ácido.

NH ¹¹ + R -C-NH _____\ (I-a ² / (XIX)

(XVIII)

A referida ciclização pode efectuar-se misturando e aquecendo os reagentes, de preferência na presença de um solvente orgânico apropriado inerte à reacção que possua um ponto de ebulição relativamente elevado, tal como por exemplo l,l'-oxi-bis(2-metoxi-etano).

Os compostos de fórmula (I) em que R é diferente de hidrogénio, sendo R representado por R e estando os referidos compostos representados pela fórmula (I-b), podem preparar-se fazendo a N-alquilação de um composto de fórmula (I-a), com um reagente de fórmula (XX) (I-a) + K²-W (XX)

A referida reacção de N-alquilação pode efecdsuar-se facilmente de acordo com o mesmo procedimento indicado para a preparação dos compostos de fórmula (I) a partir de (VI) e (VII). Contudo pode ser vantajoso converter primeiro o composto de fórmula (I-a) num seu sal metálico, de preferência o sal de sódio, pelo processo usual, por exemplo por reacção de (I-a) com uma base metálica tal como o hidreto de sódio, hidróxido de sódio e bases semelhantes, e utilizar-se o referido sal metálico posteriormente na reacção com (XX). Pode ser adequada a adição de um sal iodeto, de preferência um iodeto alcalino. As temperaturas bastante elevadas e agitação podem melhorar a velocidade da reacção.

Os derivados de ΙΗ-imidazol- e de lH-l,2,4-triazol- de fórmula (I), obtidos na forma alcalina nas preparações anteriores, podem converter-se nas suas formas de sal de adição de ácido não tóxicas terapêutica mente activas, por tratamento com ácidos apropriados tais como por - 11 -

exemplo os ácidos inorgânicos, tais como o ácido halogenídrico, por exemplo os ácidos clorídrico, bromídrico e semelhantes, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico e semelhantes; ou ácidos orgânicos, tais como por exemplo o ácido acético, propanóico, hidroxi-acético, 2-hidroxi-propanoico, 2-oxo-propanoioo, etano-dioico, propano-dioioo, butano,dioico, (Z)-2-buteno-dioico, (E)-2-buteno-dioico, 2-hidroxi-butano-dioico, 2,3-di-hidroxi-butano-dioico, 2-hidro xi-l,2,5-propano-tricarboxílico, metano-sulfónico, etano-sulfónico, benzeno-sulfónico, 4-metil-benzeno-sulíónico, ciclo-hexano-sulfâmico, 2-hidroxi-benzóico, 4-amino-2-hidroxi-benzóico e ácidos semelhantes.

Por sua vez convertem-se os sais nas bases livres correspondentes pelo processo usual, isto é, por reacção com hidróxido alcalino, por exemplo hidróxido de sódio ou de potássio.

A partir da fórmula (I) é evidente que os compostos da presente invenção possuem pelo menos dois átomos de carbono assimétricos nas suas estruturas, nomeadamente os qu.e se localizam nas posiçães 2- e 4- do núcleo do dioxolano. Dependendo da estrutura de R e/ou R^ podem estar presentes mais centros assimétricos no referido substituinte R e/ou R¹, e consequentemente os compostos de fórmula (I) podem existir sob diferentes formas estereoquimicamente isoméricas. As formas estereoquimicamente isoméricas de (I) e os seus sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis consideram-se englobados no âmbito da presente invenção.

Os raceraatos diastereoméricos de (I), designados como formas cis e trans de acordo com as regras descritas em J. Org. Chem. 35 (9), 2849-2867 (1970), podem obter-se separadamente por métodos convencionais. Os métodos apropriados que se podem utilizar com vantagem englobam por exemplo, a cristalização selectiva e a separação cromatográfica, por exemplo, a cromatografia em coluna.

Uma vez que a configuração estereoquímica já está fixa em diversos compostos intermeaiários, por exemplo nos intermediários de fórmulas (II), (VII), (VIII), (X), (XII), (XIV), (XVI) e CXVIII), também é possível separar as formas cis e trans nesta fase ou quando possível numa fase mais recente. As formas de (I) diastereoméricas correspondentes podem derivar dali pelo processo anteriormente indicado. A separação das formas cis e trans de tais intermediários pode efectuar-se por métodos convencionais conforme anteriormente referido para a separação das formas cis e trans. dos compostos de fórmula (I).

E evidente que ainda se pode fazer a resolução dos raceraatos cis e trans nos seus isómeros ópticos, cis(+) e cis(-), e trans(+) e trans(-) respectivamente, por aplicação de metodologias conhecidas pelos especialistas na matéria. Xo caso de estarem presentes centros assimétr icos adicionais nos intermediários e/ou compostos anteriormente referidos, ainda é possível separar as misturas resultantes de estereoisómeros por aplicação das metodologias anteriormente indicadas. De preferência, se se desejar uma forma estereoquímica específica, sintetizar-se-á o referido composto por métodos de preparação estereo-selectivos, os quais utilizarão com vantagem materiais de partida enantiomericamente puros.

Diversos intermediários e materiais de partida utilizados nas preparações anteriores, são compostos conhecidos, outros podem preparar-se de acordo com metodologias conhecidas na especialidade para a preparação dos feferidos compostos ou de compostos idênticos, e outros são compostos novos. Seguidamente descrever-se-ão diversos processos de preparação com maior pormenor.

Os intermediários de fórmulas (III), (XVI) e (XVIII), podem preparar-se convenientemente de acordo comprocedimentos análogos aos descritos na Patente dos

Os materiais de partida de fórmula (II), podem ser derivados de uma l-(2,4-difluoro-fenil)-2-halo-etanona fazendo reagir esta com um azol (VI) num solvente inerte à reacção, se apropriado na presença de uma base, e fazendo reagir depois a l-(2,4-difluoro-fenil)-2-(azol-l-il)-etanona (IV) assim obtida, com 1,2,5-propano-triol num meio de acetilazação adequado. Os reagentes de al quilação desejados de fórmula (II) podem preparar-se facilmente convertendo o grupo hidroxi remanescente do intermediário obtido num grupo removível reactivo, de acordo com metodologias conhecidas na especialidade. Em alternativa é possível preparar os referidos derivados reactivos de fórmula (II) de acordo com uma sequência de reacções idênticos às dos procedimentos descritos na Patente dos Estados Unidos N2 4 267 179.

Os intermediários de fórmula (VII) prepararam-se de acordo com procedimentos descritos na Paténte dos Estados Unidos E2 4 101 666, a qual se incorpora aqui como referência, por exemplo fazendo a reacção de acetãlização de um diol de fórmula (V) com uma l-(2,4-difluoro-fenil)-2-halo-etanona. Por sua vez, é possível obter-se os intermediários de fórmula (V) fazendo a O-alquilação de um intermediário de fórmula (III) com (cloro-metil)-o3€irano e posterior hidrólise do epóxido.

Os intermediários e materiais de partida anteriormente descritos também se podem converter uns nos outros de acordo com procedimentos de transformação de grupos funcionais conhecidos na especialidade.

Os compostos de fórmula (I), os seus sais de adição de ácido farmaceut -camente aceitáveis e as suas formas estereoquimicamente isoméricas apresentam actividade anti-microbiana e mais partioularmente possuem acti- 14 -

vidade antifungica superior, Esta última actividade dos compostos de fórmula (I) pode demonstrar-se pelo ensaio tratamento tópico de aandidose vaginal nas ratazanas, pelo ensaio tratamento tópico de microporose nos porcos da índia e pelo ensaio tratamento oral de aspergilose nos ratos.

Tendo em consideração a sua actividade anti-microbiana útil, os compostos em questão podem ser forX mulados em diversas formas farmacêuticas para efeitos de administração.

Para se prepararem composições farmacêuticas da presente invenção combina-se em mistura íntima uma quantidade eficaz do composto particular, opcionalmente na forma de sal de adição de ácido, como ingrediente activo, com um veículo farmaceuticamente aceitável, o qual pode assumir uma ampla diversidade de formas consoante o modo dese jado de administração. Estas composições farmacêuticas apresentam-se de preferência na forma de dosagem unitária adequada para administração oral, rectal ou para injeoção parenteral. Por exemplo, quando se preparam composições na forma de dosagem oral, pode utilizar-se qualquer dos meios farmacêuticos usuais, tais como por exemplo água, glicóis, óleos, álcoois e semelhantes no caso de preparações líquidas orais tais como suspensões, xaropes, elixires e soluções; ou veículos sólidos tais como amidos, açúcares, caolino, lubrificantes, ligantes, agentes de desintegração e semelhantes no caso dos pós, pílulas, cápsulas e pastilhas. Devido à sua fácil administração, as pastilhas e as cápsulas representam a forma unitária de dosagem oral mais vantajosa, utilizando-se evidentemente neste caso veículos farmacêuticos sólidos. Para as composições parenterais, o veículo será normalmente constituído por água esterilizada, pelo menos em grande parte, embora se possam incluir outros ingredientes, por exemplo para auxiliar a solubilidade. Por exemplo, as soluções injectáveis podem preparar-se com veículos consti- 15 -

tituido por uma solução salina, uma solução de glicose ou uma mistura de solução salina e de glicose. As suspensões injectáveis também se podem preparar com veículos líquidos apropriados, agentes de suspensão e semelhantes. Nas composições adequadas para administração percutânea, o veículo é constituído opcionalmente por um agente que facilita a penetração e/ou um agente humectante adequado, combinado opcionalmente com aditivos adequados de qualquer natureza em proporções menores, desde que esses aditivos não originem um efeito prejudicial significativo sobre a pele. Tais aaitivos podem facilitar a administração sobre a pele e/ou podem ser úteis para a preparação das composições desejadas. Estas composições podem administrar-se por diversas vias, por exemplo como emplastro transdermal, pensos, ou como unguentos.Os sais de adição de ácido de (I), devido à sua solubilidade acrescida em água em relação à correspondente forma de base, são evidentemente mais adequados para a preparação de composições aquosas. E especialmente vantajoso formular as anteriormente referidas composições farmacêuticas em formas unitárias de dosagem para facilitar a administração e a uniformidade de dosagem. A forma unitária de dosagem, tal como utilizada na Memória Descritiva e Reivindicações anexas, refere-se a unidades fisicamente discretas adequadas como dosagens unitárias, contendo cada unidade uma quantidade pré determinada de ingrediente activo calculada para produzir o efeito terapêutico desejado, em associação com o veículo farmacêutico necessário. Os exemplos de tais formas unitárias de dosagem são as pastilhas (incluindo as pastilhas entalhadas ou revestidas), cápsulas, pílulas, pacotes de pó, bolachas, soluções ou suspensões injectáveis, colheres de chá, colheres de sopa e semelhantes, e respectivos múltiplos discretos.

Os compostos de fórmula (I), os seus sais de adição de ácido farraaceuticamente aceitável e as suas formas estereoquimicamente isoméricas são agentes úteis para combater fungos e bactérias. Por exemplo, descobriu-se que os referidos compostos são altamente activos contra uma ampla

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variedades de fungos tais como por exemplo, Microsporum canis,Pityrosporum ovale, Ctenomyces mentagrophytes, Triohophyton rubrum, Phialophora verrucosa, Cryptococcus neoformans, Candida tropicalis, Candida albicans, Mucor o— species, Aspergillus fumigatus, Sporotrichum schenckii e Sapr legnia species, e contra bactérias tais como por exemplo,

Erysipelotrix insidiosa, Staphylocococci tais como Staphylococcus hemolyticus e Streptococci tais como Streptococcus pyogenes. Tendo em consideração a sua potência local e sistémica, a actividade anti-raicrobiana dos compostos da presente invenção constitui instrumento tíltil para a des truição ou prevenção do desenvolvimento dos fungos e de bactérias, e mais particularmente, podem utilizar-se com eficácia no tratamento de animais de sangue quente que sofram dessas doenças tais como por exemplo, tinea corporis, tinea cruris, tinea manus, tinea pedis, candidose, pitlria se versicolor, onicomicose, perionyxis, paracoocidioidomicose, histoplasmose, coccicioidomicose, criptococose, cro momicose, mucormicose, esporotricose, erisipelas, stafilocococcose, dermatite seborreica e semelhantes.

Os compostos da presente invenção são particularmente atrativos devido à sua acção grandemente melhorada contra Aspergillus species e por isso são especialmente úteis para o tratamento de aspergilose em animais de sangue quente.

Os especialistas em tratamento de animais de sangue quente que sofram de doenças provocadas por fungos e/ou bactérias podem determinar facilmente a quantidade eficaz a partir dos resultados dos testes aqui apresentados. Em geral, estima-se que uma quantidade eficaz esteja compreendida entre 0,01 mg/kg e 50 mg/kg de peso do corpo, e mais preferencialmente entre 0,05 mg/kg e 20 mg/kg de peso do corpo. Para aplicação tópicas estima-se que uma quantidade eficaz esteja compreendida entre 0,001/ e 5/ (em peso) e mais preferencialmente entre 0,1/ e 1/ (em peso).

Os exemplos seguintes pretendem ilustrar e não limitar o âmbito da presente invenção. Salvo quando especificado de outro modo, todas as partes se consideram em peso.

PARTE EXPERIMENTAL

A. Preparação de Intermediários

Exemplo 1

a) Agitou-se uma mistura de 200 partes de 1,2,5-propano-triol, de 90 partes de 1-(2,4-difluoro-fenil)-2-(lH-l,2,4-triazol-l-il)-etanona, de 600 partes de ácido metano-sulfónico e de 190 partes de benseno, primeiro ao refluxo durante 3 horas utilizando um separador de água, e depois durante a noite à temperatura ambiente. Gota a gota adicionou-se a mistura de reacção a uma solução de hidrogeno-carbonato de sódio. Extraiu-se o produto com tricloro-metano. Lavou-se o extracto com água, secou-se, filtrou-se e evaporou-se. Triturou-se o resíduo com 4-metil-2-pentanona. Filtrou-se o produto e secou-se proporcionando 80 partes (67,2%) de (cis+trans)-2-(2,4-difluoro-fenil)-2-(1H-1,2,4-triazol-l-il-metil)-l,3-dioxolano-4-metanol (intermediário 1).

b) Durante 3 horas agitou-se à temperatura ambiente uma mistura de 69 partes de cloreto de 3,5-dinitro-benzoilo, de 80 partes de (cis+trans)-2-(2,4-difluoro-fenil)-2-(lH-l,2,4-triazol-l-il-metil)-l,3-dioxolano-4-metanol, de 400 partes de piridina e de 520 partes de dicloro-metano. ^vaporou-se a mistura de reacção e removeu-se o resíduo com água. Extraíu-se o produto com tricloro-metano. Secou-se o extracto, filtrou-se e evaporou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna sobre gel de sílica, utilizando uma mistura de tricloro-metano e de metanol (99:1 em volume) como eluente.

Recolheram-se as fracções puras e evaporou-se o eluente proporcionando 90 partes (70,4$) de 3,5-dinitro-benzoato de (cis)-2-(2,4-difluoro-fenil)-2-(lH-l,2,4-triazol-l-il-raetil)-l,3-dioxolano-4-metanol (ester). na forma de um resíduo (intermediário 2).

c) Agitou-se durante a noite à temperatura ambiente uma mistura de 90 partes de 3,5-dinitro-benzoato de (cis-2-(2,4~difluoro-fenil)-2-(lH-l,2,4-triazol-l-il-metil)-l,3-dioxolano-4-metanol (ester), de 16 partes de uma solução de hidróxido de sódio a 50$, de 800 partes de 1,4-dioxano e de 400 partes de água. Verteu-se a mistura de reacção em água. Extraíu-se o produto com dicloro-metano. Lavou-se o extracto com agua, secou-se, filtrou-se e evaporou-se. Triturou-se o resíduo em 4-metil-2-pentanona. Filtrou-se o produto e secou-se, proporcionando 30 partes (56,0$) de Gis-2-(2,4-difluoro-fenil)-2-(lH-l,2,4-triazol-l-il)-metil)-l,3-diosolano-4-metanol, na forma de um resíduo (intermediário 3).

d) Durante 3 horas agitou-se à temperatura ambiente uma mistura de 11,4 partes de cloreto de metano-sulfonilo, de 25 partes de cis-2-(2,4-difluoro-fenil)-2- (1H-1,2,4-triazol-l-il)-met11)-1,3-diosolano-4-metanol, de 300 partes de piridina e de 390 partes de dicloro-metano. Evaporou-se a mistura de reacção e removeu-se o resíduo com tricloro-metano. Secou-se a fase orgânica, filtrou-se e evaporou-se. Triturou-se o resíduo em 2,2’-oxi-bis-propano. Filtrou· -se o produto e secou-se proporcionando 29,4 partes (93,2h) de metano-sulfonato de cis-2-(2,4-difluoro fenil)-2-(lH-1,2,4-triazol-l-il-metil)-l,3~dioxolano-4-metanol (ester) na forma de um resíduo (intermediário 4).

Por um processo idêntico também se preparou:

etanodioato de metano-sulfonato de cis-2-(2,4-difluoro-fenil)-2-(lH-imidazol-l-il-metil)-l,3-dioxolano-4-metanol (ester) (1:1) (intermediário 5).

Exemplo 2

a) A uma solução agitada de 122,0 partes de (cis+trans)-2-(2.4-difluoro-fenil)-2- (1H-1,2,4-triazol-l-il-aietil)-l,5-dioxolano-4-ffletanol e de 1,0 partes de N,N-dimetil-4-piridinamina em 1300 partes de dicloro-metano adicionou-se gota a gota uma solução de 121,2 partes de cloreto de 2-naftaleno-naftaleno-sulfónilo em 100 partes de piridina durante um período de 2 horas. Depois de se completar a adição manteve-se a agitação durante a noite à temperatura ambiente. Lavou-se a mistura de reacção duas vezes com água e evaporou-se no vácuo. Purificou-se o resíduc por cromatografia em coluna sobre gel de sílica utilizando tricloro-metano como eluente. As fracções puras foram recolhidas e evaporou-se o eluente. 0 resíduo cristalizou a partir de 4-metil-2-pentanona. Piltrou-se o produto e secou-se proporcionando 102,3 partes (51,0%) de sulfonato de cis-/~/~2-(2,4-difluoro-fenil)-2-(1H-1,2,4-triasol-l-il-metil) -l,3-dioxolan-4-il7metil/-2-naftaleno;

p.f. 139,5°C (intermediário 6).

Exemplo 3

a) Agitou-se durante a noite a 70°C uma mistura de 9,0 partes de 4-^4-(4-nitro-fenil)-l-piperazinil7-fenol, de 13,6 partes de metano-sulfonato de cis-2-(2,4-difluoro-fenil)-2-(1H-1,2,4-triazol-l-il-metil)-1,3-dioxolano-4-metanol (ester), de 6,0 partes de hidróxido de potássio e de 90 partes de Ν,Ν-dimetil-formamida, sob uma atmosfera de azoto, ^pós o arrefecimento, diluiu-se com água a mistura de reacção. Piltrou-se o produto precipitado e purificou-se por cromatografia em coluna sobre gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tricloro-metano, acetato de etilo, hexano e metanol (500:300:200:0,5 em volume). Recolheram-se as fracçães puras e evaporou-se o eluente. Cristalizou-se o resíduo a partir de 4-metil-2-pentanona₀Piltrou-se o produto e secou-se proporcionando 6,69 partes

(38,5%) de cÍ3-l-/~4-/~/“2-(2,4-difluoro-fenil)-2- (1H-1, 2,4-triazol-l-il-metil)-1,3-dioxolan-4-il7metoxi7-fenil7-4-(4-nitro-fenil)piperazina;

p.f. 169,8°C (intermediário 7).

b) Hidrogenou-se à pressão normal e a 50°C uma mistura de 38,3 partes de cis-l-/*4-/“ f 2-(2,4-difluoro-fenil)-2-(1H-1, 2,4-triazol-l-il-metil)-l,3-dioxolan-4-nl7 metoxi7fenil7-4-(4-nitro-fenil) piperazina, de 2 partes de uma solução de tiofeno em metanol a 4% e de 600 partes de 2-metoxi-etanol, com 2 partes de catalisador de platina em carvão a 5%. Depois de se ter libertado a quantidade calculada de hidrogénio, filtrou-se o catalisador ainda quente e saturou-se o filtrado com água. Após o arrefecimento filtrou-se o produto precipitado, lavou-se com água e com 2-propanol e cristalizou-se a partir de 1,4-dioxano. Filtrou-se o produto e secou-se proporcionando 22,7 partes (g2, 6%) de cis-4-/~4-Z~4-//~2- (2,4-difluoro-fenil)-2- (1H-1, 2,4-triazol-l-il-metil)-1,3-dioxolan-4-il7metoxÍ7fenil7-l-piperszinil7benzenamina;

p.f. 193,0°C (intermediário 8).

Exemplo 4

a) Agitou-se a 60°C sob uma atmosfera de azoto uma mistura de 10 partes de 2,4-di-hidro-4-2f⁴-Z7⁴“ - (4-metoxi-fenil)-l-piperazinil7fenil7-3H-l, 2,4-triazol-3-ona, preparada conforme descrito no Exemplo XVII da Patente dos E_stados Unidos N2 4 267 179, de 1,5 partes de uma dispersão de hidreto de sódio a 50% e de 300 partes de dimetil-sulfóxido, até cessar a formação de espuma. Depois adicionou-se 5,24 partes de 2-bromo-propano e manteve-sc a agitação durante 1 hora a 60°C. Adicionou-se mais 1,5 partes de uma dispersão de hidreto de sódio a 50% e manteve-sc a agitação até cessar a formação de espuma. Adicionou-se mais 5,24 partes de

2-bromo-propano e agitou-se o conjunto durante 1 hora a 60°C. Arrefeceu-se a mistura de reacção e verteu-sc em água. Εχtraíu-se o produto com tricloro-metano. Lavou-se o extracto com água, secou-se, filtrou-se e evaporou-se. P_urificou-se o resíduo por cromatografia em coluna sobre gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tricloro-metano e de metanol (99:1 em volume). Recolheram-se as fracções puras e evaporou-se o eluente. 0 resíduo cristalizou a partir de l-butanol proporcionando 5,2 partes (47%) de 2_t 4-di-hidro-4-_zf*4-/^-4-(4-metoxi-fenil)-l-piperazinil7fenil/-2-(l-metil-etil)-3H-1,2,4-triazol-3-ona;

p.f. 209, 5°C (intermediário 9).

b) Durante 3 horas agitou-se ao refluxo uma mistura de 4,7 partes de 2,4-di-hidro-4~7 4-/ 4- (4-metoxi-fenil)-l-piperazinil7fenil7-2-(1-metil-etil)-3H-1, 2,4-triazol-3-ona e de 75 partes de uma solução a 48% de ácido bromídrico em água. E_vaporou-se a mistura de reacção e dissolveu-se o resíduo numa mistura de metanol e de água. Neutralizou-se o conjunto com uma solução de hidrogeno-carbonato de sódio e extraíu-se o produto com tricloro-metano. Secou-se o extracto. filtrou-se e evaporou-se. Triturou-se o resíduo em 2-propanol proporcionando 3,9 partes (86%) de 2.4-di-hidro-4-/ ⁴~Z 4-(4-hidroxi-fenil)-l-piperazinil7fenil7-2-(1-metil-etil)-3H-l. 2.4-triazol-3-ona,

p.f. 208,4°C (intermediário 10),

P_or um processo idêntico também se preparou:

2,4-di-hidro-4-/~4-/^4-(4-hidroxi-fenil)-l-piperazinil7fenil7

-2- (l-metil-propil)-3H-l, 2.4-triazol-3-ona,·

p.f. 187, 6°C (intermediário 11);

2.4- di-hidro-4-/ 4-/ 4-(4-hidroxi-fenil)-l-piperazinil7f®nil7-2-(3-metil-butil)-3H-1, 2,4-triazol-3-ona;

p.f. 216, 6°C (intermediário 12);

2.4- di-hidro-4-/“4-/“4-(4-hidroxi-fenil)-l-piperazinil7 -fenil7-5-metil-2-(l-metil-propil)-3H-l, 2,4-triazol-3-ona; p.f. 239, 9°C (in ter med i ár io 13);

2.4- di-hidro-4-/~4-/~ 4-(4-hidroxi-fenil)-l-piperazinil7fenil7 -2-propil-3H-l, 2,4-triazol-3-ona como re-íduo sólido (intermediário 14);

2-etil-2,4-di-hidro-4-/“4-/”4-(4-hidroxi-fenil)-l-piperazinil7fenil7-3H-l, 2,4-triazol-3-ona;

p.f. 217°C (intermediário 15); e

2.4- di-hidro-4-/“4-/”4-(4-hidroxi-fenil)-l-piperazinil7fenil7-2-pentil-3H-l,2,4-triazol-3-ona;

p.f. 202.1°C (intermediário 16).

B. Preparação dos Compostos Finais

Exemplo 5

a) Agitou-se e aqueceu-se durante 2 horas a 60°C uma mistura de 9,8 partes de 2,4-di-hidro-4-7“4-/”4-(4-hidroxi-fenil)-l-piperazinil7fenil7-2-(1-metil-propil)-3H-l,2,4-triazol-3-ona, de 12 partes de metano-sulfonato de çis-2-(2,4-difluoro-fenil)-2-(1H-1, 2,4-triazol-l-il-metil)-l,3-dioxolano-4-metanol (ester), de 4,2 partes de hidróxido de potássio e de 135 partes de N, N-dimetil-formamida, sob uma atmosfera de azoto. Evaporou-se a mistura de reacção. Extraíu-se o resíduo com água. Filtrou-se o produto e removeu-se com tricloro-metano. Secou-se a camada orgânica, filtrou-se e evaporou-se. O resíduo cristalizou a partir de acetoni- 23 -

trilo. Filtrou-se o produto e secou-se proporcionando 12,8 partes (76,1%) de cis-4-/~4-/~4-/~4-/~/~2- (2,4-difluoro-fenil)-2- (1H-1, 2,4-triazol-l-il-metil)-l, 3-dioxolan-4-iJL7-metoxi7fenil7-l“piperazinil7fenil7-2,4-di-hidro-2-(1-metil-propil)-3H-1,2,4-triazol-3-ona;

p.f. 189, 5°C (composto 1).

Por um processo idêntico também se preparou;

cis-4-/~4-/4-/ 4-/ /~2-(2,4-difluoro-fenil)-2-(1H-1, 2,4-triazol-l-ilmetil)-l, 3-dioxolan-4-il7metoxi7fenil7-l-piperaziniiyfenil7-2,4-di-hidro-2- (l-metil-etil)-3H-l, 2,4-triazol-3-ona;

p.f. 211.1°C (composto 2)f e cis-4-/ 4-/“4-/4-/”/^-2-(2,4-difluoro-fenil)-2-(lH-imidazol-1-il-metil)-1,3-dioxolan-4-il7metoxi7fenil7-l-piperazinil7 fenil7-2,4-di-hidro-2-(l-metil-etil)-3H-l,2,4-triazol-3-ona;

p.f. 218,8°C (composto 3).

b) A uma solução agitada de 6, 8 partes de cis-4-/4-/“4-/~4-/“Z~2- (2,4-difluoro-fenil) -2- (1H-1, 2, 4-triazol-l-il-metil)-1, 3-dioxolan-4-il7-metoxi7fenil/-l-piperazinil/fenil/-2,4-di-hidro-2- (l-metil-propil)-3H-l, 2,4-triazol-3-ona em 80 partes de 2-propanona adicionou-se 3, 2 partes de ácido metano-sulfónico. Após a adição de 73 partes de 2, 2‘-oxi-propano, filtrou-se o produto cristalizado e recristalizou-se a partir de uma mistura de acetonitrilo e de 2, 2'-oxi-bis-propano. Filtrou-se o produto e secou-se, proporcionando 8,4 partes (92,0%)de metano-sulfonato de cis-4-/ 4-/ 4-/ 4-/ /~ 2- (2,4-difluoro-fenil)-2- (1H-1, 2,4-triazol-l-ilmetil)-l,3-dioxolan-4-il7metoxi7fenil7-l-piperazinil7 -fenil7-2,4-di-hidro-2-(l~metil-propil)-3H-l,2,4-triazol-3-ona (2:5);

p.f. 151, 7°C (composto 4).

Exemplo 6

Durante 4 horas agitou-se a 60°C uma mistura de 4 partes de 2,4-di-hidro-4-/ 4-/ 4-(4-hidroxi-fenil)-l-piperazinil7fenil7-5-metil-2-(l-metil-propil)-3H-1,2,4-triazol-3-ona, de 5,6 partes de sulfonato de cis2- (2,4-difluoro-fenil)-2-( 1H-1, 2,4-triazol-l-il-metil) -1,3-dioxolan-4-il/metil7-2-naftaleno, de 1 parte de grânulos de hidróxido de sódio e de 90 partes de N,N-ãimetil-formamida, sob ama atmosfera de azoto. Adicionou-se 300 partes de água. Filtrou-se o produto precipitado, lavou-se com água e purificou-se por cromatografia em coluna sobre gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tricloro-metano e de metanol (99:1 em volume). Recolheram-se as fracções puras e evaporou-se o eluente. Cristalizou-se o resíduo a partir de 2-propanol. Filtrou-se o produto e secou-se proporcionando 4,7 partes (68,4%) de cis-4-/~4-/~4-/~4-/~2- (2,4-difluoro-fenil)-2- (1H-1, 2,4-triazol-l-il-metil)-1,3-dioxolan-4-il7-metoxI/fenil7-l-piperazinil7-2,4-di-hidro-5-metil-2-(l-metil-propil)-3H-l, 2,4-triazol-3-ona;

p.f. 157, 2°C (composto 5).

Por um processo idêntico também se preparou:

cis-4-/~4-/~~4-/“4-/72-(2,4-difluoro-fenil)-2- (1H-1, 2,4-triazol-l-il-metil)-l, 3-dioxolan-4-il7metoxi7fenil7-l-piperazinil/fenil/-2,4-di-hidro-2-(3-metil-butil)-3H-1,2,4-triazol-3-ona;

p.f. 181, 6°C (Composto 6);

cis-4-/~4-/~4-/“4-/“/~2- (2,4-difluoro-fenil) -2- (1H-1, 2,4-triazol-l-il-metil)-l, 3-dioxolan-4-il7^<:metoxi7fenil7-l-piperazinil7 fenil.72.4-di-hidro-2-propil-3H-l, 2,4-triazol-3-ona;

p.f. 178, 2°C (composto 7); e

ci_s-4-/~ 4-24-24-2~ 2~ 2-(2,4-dif1uoro-fen il)-2-(1H-1,2,4-triazol-l-il-metil)-l, 3-dioxolan-4-ij_;/metox_ii/fenil-l-pipe-razini,l/fenil7-2-etil-2, 4-di-hidro-3H-l, 2,4-triazol-3-ona; p.f. 186,9°C (composto 8).

Exemplo 7

Durante 8 horas agitou-se a 70°C uma mistura de 8,1 partes de 2,4-di-hidro-4-24-2 4-(4-hidroxi-fenil)-l-piperazinil7fenil7-2- (3-metil-butil)-3H-l, 2,4-triazol-3-ona, de 10 partes de mono-cloridrato de metano-sulfonato de cis-2-(2,4-difluoro-fenil)-2-(lH-imidazol-1-il-metil)-l,3-dioxolano-4-metanol (ester), de 3 partes de hidróxido de sódio e de 90 partes de N,N-dimetil-formamida, sob uma atmosfera de azoto. Após a adição de 200 partes de água filtrou-se o produto precipitado, lavou-se com água e com 2-propanol e purificou-se por cromatografia em coluna sobre gel de sílica, utilizando como eluente primeiro uma mistura de tricloro-metano e de metanol (95,5:0,5 em volume) e depois numa mistura de tricloro-metano, de acetato de etilo, de hexano e de metanol (45:30:20:5 em volume). Recolheram-se as fracções puras e evaporou-se o eluente. Cristalizou-se o resíduo a partir de 4-metil-2-pentanona. Filtrou-se o produto e secou-se proporcionando 10,5 partes (76%) de cis-4-2 4-2 4-2 4-22”2-(2,4-difluoro-fenil)-2-(lH-imidazol-l-il-metil) -1,3-dioxolan-4-il7metoxi7fenil7-l-piperazinil7fenil.7“ -2,4-di-hidro-2- (3-metil-butil)-3H-l~2,4-triazol-3-ona;

p.f. 205.0°C (composto 9).

Por um processo idêntico também se preparou:

cis-4-Ζ 4-2~4-2”4-2Z“ 2- (2,4-di f 1 uoro- feni 1)-2-( lH-imidazol-l-il-metil)-l,3-dioxolan-4-il7-metoxi7fenil7-l-piperazinil7 -fenil7-2,4-di-hidro-2-(l-metil-propil)-3H-l, 2,4-triazol-3-ona; p.f. 180,5°C (composto 10); e

cis-4-Γ4-Γ4-Γ4-ΓΓ2- (2,4-difluoro-fenil)-2- (1Η-1, 2,4-triazol-l-il-metil)-l, 3-dioxolan-4-il_i7metoxi_:7fenil7-l-piperazinil7fenil7~2,4-di-hidro-2-pentil-3H-l_/ 2,4-triazol-3-ona; p.f. 172,8°C (composto 11).

Exemplo 8

Agitou-se à temperatura de refluxo uma mistura de 7,6 partes de metano-sulfonato de 1, 2-dimetil-propanol (ester), de 5 partes de cis-4-/~4~/~4-/ 4-/”/*” 2-(2,4-difluoro-fenil)-2-(1H-1, 2,4-triazol-l-il-metil)-l,3-dioxolan-4-il7metoxi7fenil7-l-piperazinil7fenil7-2_/ 4-di-hidro-3H-1,2,4-triazol-3-ona, de 6 partes de carbonato de potássio, de 90 partes de N, N-dimetil-formamida e de 135 partes de benzeno, utilizando um separador de água. Concentrou-se a mistura de reacção por destilação do benzeno e prolongou-se a agitação durante a noite à temperatura de refluxo. Após o arrefecimento verteu-se a mistura de reacção em água e extraiu-se o produto com dicloro-metano. Lavou-se o extracto com água, secou-se, filtrou-se e evaporou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna sobre gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tricloro-metano e de metanol (99:1) em volume). Recolheram-se as fracções puras e evaporou-se o eluente. Cristalizou-se o resíduo a partir de 4-metil-2-pentanona. Filtrou-se o produto e secou-se proporcionando 2,4 partes (43%) de cis-4-/~4-/”4-/4-/“/2-(2,4-difluoro-fenil)-2- (1H-1, 2,4-triazol-l-il-metil)-l,3-dioxolan-4-il7-metoxi7^feniÃ7“l-piperazinil7fenil7-2-(1,2-dimetil-propil)-2,4-di-hidro-3H-l,2,4-triazol-3-ona;

p.f. 160, 7° C (composto 12).

Eyemplo 9

Durante 3 horas agitou-se a 160°C (banho em óleo) uma mistura de 25 partes de /” (dimetil-amino)metileno7-hidrazina-carbo27 -

xilato de etilo, de 58 partes de cis-4-/~4-/ 4-/Z2-(2,4-difluoro-fenil)-2- (1H-1, 2,4-triazol-l-il-metil)-l, 3-dioxolan-4-il7metoxl.7fenil7-l-piperazinil7benzenamina e de 75, 6 partes de 1,1 dióxido de tetra-hidro-tiofeno. A^icionou-se 80 partes de 4-metil-2-pentanona. Após o arrefecimento filtrou· -se o produto precipitado, lavou-se com 4-metil-2-pentanona e secou-se proporcionando 46, 2 partes (70%) de cis-4“Z⁴~Z'⁴“Z~4-Z”Z~2- (2,4-difluoro-fenil)-2- (1H-1, 2,4-triazol-l-il-metil)-l,3-dioxolan-4-i^7metoxi7fenil7-l-piperazinil7 fenil7~2,4-di-hidro-3H-l,2,4-triazol-3-ona (composto 13).

C. Exemplos Farmacológicos

A superior actividade anti-microbiana dos compostos de fórmula (I) é facilmente evidente pelos dados obtidos nas experiências seguintes. Os referidos dados são proporcionados para ilustrar as úteis propriedades anti-microbianas de todos os compostos de fórmula (I) e não para limitar a invenção quer no que diz respeito ao âmbito dos micro-organismos a eles sensíveis, quer no que diz respeito ao âmbito da fórmula (I).

Exemplo 10

a) Tratamento Tópico de Candidose Vaginal nas Ratazanas

Utilizaram-se ratazanas fémeas “Wistar pesando + 100 g. Sobrelas efectuou-se uma ovariotomia e histeroctomia e decorridas 3 semanas de convalcecença, aplicou-se-lhes subcutaneamente 100 pig de undecilato de estrabiol em óleo de sésamo, uma vez por semana, durante 3 semanas consecutivas. Controlou-se o pseudo ciclo menstrual assim induzido por exame microscópico das secreções vaginais. C_olocou-se-lhes à disposição alimentos e água ad libitum. A_s ratazanas 5 <

foram infectadas intravaginalmente com 8 x 10 células de

Candida albiçans, desenvolvidas em caldo de cultura Sabouraud durante 48 horas a 37°C e diluídas em solução salina. Os dados sobre a infecção variaram enise o dia +25 e o dia +32 após a intervenção cirúrgica, dependendo do aparecimento de sinais do pseudo ciclo menstrual induzido. Os fármacos em investigações foram administrados topicamente duas vezes por dia, durante 3 dias consecutivos, a partir do terceiro dia após a infecção. Para cada experiência houva ratazanas de controlo tratadas com placebo. Os resultados foram avaliados extraindo secreções vaginais com um torcilhão esterilizado ao longo de diversos dias após a infecção. C_olocaram-se os torcilhões em caldo de cultura S_abouraud em pratos de Petri e fez-se a incubação durante 48 horas a 37°C. Quando os animais se apresentaram negativos ao fim da experiência, isto é, se já não ocorria qualquer desenvolvimento de Candida albiçans, considerou-se que isto era devido à administração do fármaco porque as ratazanas de controlo tratadas com placebo apresentaram-se sempre positivas. A primeira coluna da T bela I apresenta concentração tópica mínima de fármaco em investigação, que se descobriu ser activa ate 7 dias após a última administração tópica do fármaco.

b) Tratamento Tópico de Microsporose em

Porcos da índia

Prepararam-se porcos da índia adultos da espécie Albino por aplicação de grampos às suas caudas e infectando a pele escarificada com Microsporum canis (estirpe RV 14314) por raspadura de 5 cortes transversais de 3 cm de comprimento. Os animais foram alojados individualmente em gaiolas de rede e colocou-se à sua disposição alimentos e água ad libitum. Os fármacos em investigação foram administrados topicamente uma vez por dia, durante 14 dias consecutivos. a partir do terceiro dia após a infecção. Para cada experiência houve animais de controlo tratados com placebo.

Fez-se um estudo dos animais 21 dias após a infecção, por exame microscópico da pele e em culturas

- 29 λ

de agar Sabouraud contendo um guado e um agente adequado para nantes.

antibiótico bacteriano adeeliminar os fungos contamiA segunda coluna da Tabela I contém a concentração tópica mínima (%) do fármaco em investigação para a qual não se observaram lesSes e para a qual não houve desenvolvimento da cultura.

Tabela I

Comp.

N2

Candidase nas ratazanas Concentração tópica mínima

Microsporose nas ratazanas

Concentração tópica min ~ 0.05

0.016

0.031

0.063 „0.063 ,0.063

0.063

Exemplo 11 : Tratamento Oral de A_gperqilose nos Ratos

Utilizando Agpergillus fumigatus provocou-se infecção em ratos suiços pesando entre 23 e 27 g conforme descrito em Antimicrob. Agents Chemother., 1984, 26, 527-534. Trataram-se os animais por administração com o solve te polietileno-glicol 200) ou com um composto de fórmula (?:) em polietileno-glicol 200 e na mg/kg d.o. (dose oral) durante do dia da infecção. 0 primeiro proporção de 2, 5, 1, 25 dias consecutivos, a tratamento efectuou-se tamente antes da infecção. Fez-se a observação dos durante 28 dias e avaliou-se a eficácia do fármaco de tempo médio de sobrevivência medido em dias. Os animais

- 30 e 0,63 partir imediaanimais em termos

tratados com solvente# infectados com A. fumigatus e que serviram como elemento de controlo# apresentaram um tempo médio de sobrevivência de 5# 33 dias.

Na Tabela II pode encontrar-se o tempo médio de sobrevivência para alguns dos compostos da presente invenção e para cis-4-/~4-/ 4-/~4-/”/~2-(2#4-dicloro-fenil)-2- (1H-1# 2,4-triazol-l-il-metll)-l# 3-dioxolan-4-i_i17netox_ii7 fenil7-l-piperazinil7fenil7-2#4-di-hidro-2-(1-metil-propil)-3H-1#2#4-triazol-3-ona# o qual é geralmente designado por itroconazol e está descrito na Patente dos Estados Unidos Ne 4 267 179.

A partir destes valores pode concluir que os compostos da presente invenção são superiores aos compostos anteriormente conhecidos.

Tabela II

Composto NS	Tempo médio de sobrevivência (dias)
d · o · 2/ 5 mgAg	\| d.o. 1.25 mgAg	d.o.O.63 mgAg
*	15.6 >	7#o	5# 8
1	- 28 >	25# 3	10.9
6	= 28	18	12,8
12 _	-	= 28 —	21/5 ........... 1

* » itraconazol

D) Exemplos de Composição

As formulações seguintes exemplificam composições farmacêuticas típicas em formas unitárias de dosa31 -

gem adequadas para administração sistémica a pacientes animais e humanos, de acordo com a presente invenção. A expressão ingrediente activo (I.A.), tal corno utilizado nos Exemplos, refere-se a um composto de fórmula (I) ou a um seu sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável.

Exemplo 12 : Gotas Or-ais

Dissolveu-se 500 g de I.A. em 0.5 1 de ácido 2-hidroxi-propanóico e em 1,5 1 de polietileno-glicol à temperatura de 6O/8O°C. Depois de arrefecer para 30/ /40°C adicionou-se 35 1 de polietileno-glicol e agitou-se bem a mistura. Depois adicionou-se uma solução de 1750 g de sacarina de sódio em 2,5 1 de água pura e enquanto se agitava adicionou-se 2,5 1 de arôma de cacau e polietileno-glicol q.s. até prefazer um volume de 50 1, proporcionando uma solução de gotas orais contendo 10 mg de I.A. por mililitro. Encheram-se recipientes adequados com a solução resultante.

Exemplo 13 : Snlucão Oral

Dissolveu-se 9 g de 4-hidroxi-benzoato de metilo e 1 g de 4-hidroxi-benzoato de propilo em 4 1 de água pura em ebulição. E_m 3 litros desta solução dissolveu-se primeiro 10 g de ácido 2,3-di-hidroxi-butanodióico e depois 20 g de I.A. Combinou-se a última solução com a parte restante da primeira solução e adicionou-se-lhe 12 1 de 1,2,3-propano-triol e 3 1 de uma solução de sorbitol a 70%. Dissolveu-se 40 g de sacarina de sódio em 0.5 litros de água e adicionou-se 2 ml de essencia de framboesa e 2 ml de eseencia de groselha. C_ombinou-se a última solução com a primeira, adicionou-se água q.s. até prefazer um volume de 20 1 proporcionando uma solução oral contendo 20 mg de ingrediente activo por colher de chá (5 ml). E_ncheram-se recipientes adequados com a solução resultante.

4

Exemplo .14 t Cápsulas

Agitou-se vigorosamente 20 g de ingrediente activo, 6 g de lauril-sulfato de sódio, 56 g de amido, 56 g de lactose, 0,8 g de dióxido de silicio coloidal e 1,2 g de estearato de magnésio. Seguidamente, com a mistura resultante encheram-se 1000 cápsulas de gelatina dura adequada, contendo cada uma 20 mg de ingrediente activo.

Exemplo 15 : Pastilhas Revestidas por Película

Preparação do Núcleo da Pastilha

Misturou-se bem 100 g de I.A., 570 g de lactose e 200 g de amido e depois humidificou-se com uma solução de 5 g de dodecil-sulfato de sódio e 10 g de polivinil-pirrolidona (Kollidon-K 90 em aproximadamente 200 ml de água. Crivou-se a mistura de pó húmido, secou-se e crivou-se novamente. Depois adicionou-se 100 g de celulose micro-cristalina (AvicelÇJy) e 15 g de óleo vegetal hidrogenado (Sterotex (^) ). Misturou-se tudo muito bem e comprimiu-se em pastilhas, proporcionando 10.000 pastilhas contendo cada uma 10 mg de ingrediente activo.

Revestimento

A uma solução de 10 g de metil-celulose (Methocel 60 HG em 75 ml de etanol desnaturado adicionou-se uma solução de 5 g de etil-celulose (Ethocel 22 cps em 150 ml de dicloro-metano. Depois adicionou-se 75 ml de <3i cloro-metano e 2,5 ml de 1,2,4-propano-triol. Fundiram-se 10 g de polietileno-glicol e dissolveram-se em 75 ml de dicloro-metano, A<jicionou-se a última solução à primeira e depois adi· cionou-se 2,5 g de octadecanoato de magnésio, 5 g de polivinil

-pirrolidona e 30 ml de uma suspensão corante concentrada (Opaspray K-l-2109 (^) e homogenou-se o conjunto. Re vestir am-se os núcleos das pastilhas com a mistura assim obtida, num aparelho para revestimento.

Exemplo 16 : Solução Injectável

Dissolveu-se 1,8 g de 4-hidroxi-benzoato de metilo e 0,2 g de 4-hidroxi-benzoato de propilo em aproximadamente 0,5 1 de água em ebulição, para injecçães. Depois de arrefecer para cerca de 50°C adicionou-se com agitação, 4 g de ácido láctico. 0,05 g de propileno-glicol e 4 g de I.A.. Arrefeceu-se a solução até à temperatura ambiente e complementou-se com água para injecçães q.s. até proporcionar o volume de 1 litro, originando uma solução de 4 mg de I.A. por mililitro. Esterilizou-se a solução por filtração (U.S.P. XVII p. 811) e encheram-se recipientes esterilizados.

Exemplo 17 t Supositórios

Dissolveu-se 3 g de I.A. numa solução de 3 g de ácido 2, 3-di-hidroxi-butano-dióico em 25 mililitros de polietileno-glicol 4Q0. Fundiu-se juntamente 12 g de agente tensio-activo (SPAN \_) ) e triglicéridos (Witepsol

555 (5 ) q.s. até prefazer 300 g. Misturou-se a última mistura com a primeira solução. A mistura assim obtida verteu-se em moldes a uma temperatura compreendida entre 37 e 38°G para proporcionar 100 supositórios contendo cada um 30 mg de I.A.

Claims

Processo para a preparação de um composto químico com a fórmula geral:

(D, de um seu sal de adição de ácido farmacêuticamente aceitável ou de uma sua forma estereoquimicamente isómerica, em que Q representa um átomo de azoto ou um grupo CH:

R representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo (C^-Cg) ou arilCCj-Cg)-alquilo; e

R^ representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo (Cl~Cg) ou aril(C^-Cg)alquilo; em que o grupo arilo representa fenilo opcionalmente suhstituido com até 3 substituintes independentemente seleccionados de entre um átomo de halogé neo, alquilo(C₁-Cg), alquiloxiCC^-Cg) e trifluoro-metilo, caracterizado por

a) O-alquilar-se um grupo fenol de fórmula (III), em que R e R^ são como definido anteriormente, com um derivado dioxolano de fórmula

35 r- ^c -i em que W representa um grupo removível reactivo, em presença de uma base num solvente inerte à reacção; acetálizar-se uma cetona de fórmula com um diol de fórmula na presença de um ácido num solvente inerte à reacção, e com remoção concomitante de água;

c) N-alquilar-se um azol de fórmula

H (VI) , em que W representa um grupo removível reactivo;

ciclizar-se um intermediário

CH₂-CH₂-W de fórmula ch₂-ch₂-w ou

W-CH -CH w-ch (XI) com uma benzenamina de fórmula

z.

num solvente polar inerte à reacção;

e) N-alquilar-se uma piperazina de fórmula com um benzeno de fórmula (XIII) (XIV) respectivamente, em que W¹ representa um grupo removível reactivo, num solvente inerte à reacção;

f) ciclizar-se uma benzenamina de fórmula uma hidrazina-carboxamida de fórmula com um reagente de fórmula

0 NH !! II

L²-CR¹=N-NH-C-L·¹ (XVII), ou R¹-C-NH₂ (XIX), respectivamente, 1 2 em que L e L representam um grupo removível, num solvente inerte à reacção proporcionando assim um composto de fórmula

N-alquilar-se opcionalmente, se desejado um composto de fórmula (I-a) com um reagente de alquilação de fórmula

R²-W (XX), em que R representa um grupo alquilo(C^-Cg) ou aril(C^-Cg) alquilo e W representa um grupo removível reactivo, num meio inerte à reacção, proporcionando assim um composto de fórmula e, se ainda desejado, converter-se os compostos de fórmula (I) num sal por tratamento com um ácido farmaceuticamente aceitável adequado; ou inversamente, converter-se o sal na base livre com alcali; e/ou prepararem-se as correspondentes formas estereoquímicamente isoméricas.

-2ê -

Processo de acordo com a reivindicação

1, caracterizado por R e R¹ serem independentemente um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo (C^-Cg).

_ 5&_

Processo de acordo com a reivindicação
2, caracterizado por R³ ser um átomo de hidrogénio e R ser um grupo alquilo(C^-C^).

--

Processo de acordo com a reivindicação 5, caracterizado por os substituintes na parte dioxolano terem uma configuração cis.

- 5δ Processo de acordo com a reivindicação 1, caraeterizado por

Q ser um átomo de azoto.

Processo de acordo com a reivindicação 1, caraeterizado por se obter um composto cis-4-/~4-/~4-/4-/*/ 2-(2,4-difluoro-fenil)-2-(1H-1,2,4-triazol-l-il-metil)-l,3-dioxolan-4“il_7 metoxi/fenil7-l-piperazinil7-fenil7~2,4-di-hidro-2-(1-metil-propil)-3H-1,2,4-triazol-5-ona.

- 7* Processo de acordo com a reivindicação 1, caraeterizado por se obter o composto cis-4-/~4-/~4-/~4-^/”2-(2,4-difluoro-fenil)-2-(1H-1,2,4-triazol-l-ilmetil)—1,3—dioxolan—4—il _7-metoxi7-f enil/-l-piperazinil7fenil7’-2-(1,2-dimetil-propil)-2,4-di-hidr O-3H-1,2,4-triazol-5-ona.

- 8a Processo para a preparação de uma composição com efeito antimicrobiano caraeterizado por se incorporar como ingrediente activo uma quantidade antimiorobanamente eficaz de um composto de fórmula I quando preparado de acordo com a reivindicação 1 em associação com um ou mais veículos inertes.