PT824515E

PT824515E - Fenilamidinas substituidas medicamentos contendo estes compostos e processo para a sua preparacao

Info

Publication number: PT824515E
Application number: PT96912018T
Authority: PT
Inventors: Helmut Pieper; Volkhard Austel; Johannes Weisenberger; Gunter Linz; Frank Himmelsbach; Brian Guth
Original assignee: Boehringer Ingelheim Pharma
Priority date: 1995-04-27
Filing date: 1996-04-18
Publication date: 2001-09-28
Also published as: HUP9801228A3; TR199701258T1; EE9700292A; US5958952A; SK144397A3; DE19515500A1; DK0824515T3; HUP9801228A2; BG63385B1; SK282232B6; BG101983A; EP0824515B1; EP0824515A1; NZ306451A; HU222050B1; DE59606725D1; CZ340697A3; NO974945D0; NO309422B1; AU703946B2

Description

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DESCRIÇÃO "FENILAMIDINAS SUBSTITUÍDAS, MEDICAMENTOS CONTENDO ESTES COMPOSTOS E PROCESSO PARA A SUA PREPARAÇÃO"

Na literatura encontram-se já descritos antagonistas de receptor de fibrinogénio.

Assim, os compostos da presente invenção estão abrangidos pela EP-A-0,483,667, mas não estão nela explicitamente descritos. Além disso, estes compostos distinguem-se dos da EP-A-0,381,033 pelo grupo 1,4-fenileno não presente, uma vez que o grupo B corresponde ao grupo Y no presente pedido, e dos da EP-A-0,528,369 pelo grupo X4, uma vez que X4 não pode representar um grupo -NH-CO-X, bem como dos da EP-A-0,539,343 pelo respectivo segundo grupo -NH-CO.

Verificou-se então que as fenilamidinas de fórmula geral I,

(I) , os seus tautómeros, os seus estereoisómeros incluindo as respectivas misturas e sais, em especial os seus sais fisiologicamente toleráveis com ácidos ou bases inorgânicos ou orgânicos, também possuem valiosas propriedades farmacológicas, de preferência efeitos inibidores da agregação. 1 Ο objectivo da presente invenção são os compostos de fórmula geral I acima referidos, medicamentos contendo estes compostos, sua utilização e processos para a sua preparação.

Na fórmula geral I acima referida os símbolos têm os seguintes significados: X um grupo etileno, que pode estar substituído por um ou dois grupos metilo, Z um grupo metileno, que pode estar substituído por um ou dois grupos metilo, por um grupo piridilo ou fenilo, em que o grupo fenilo pode ainda estar adicionalmente substituído por um átomo de flúor, cloro ou bromo, por um grupo metilo, metoxi ou trifluorometilo, Y um grupo 1,4-ciclo-hexileno, 1,4-piperidinileno, 2-oxo-l,4-piperidinileno, 1,4-piperazinileno, 2-oxo-l,4-piperazinileno, 2,3-dioxo-l,4-piperazinileno ou 2,5-dioxo-l,4-piperazinileno, R1 um átomo de hidrogénio, um grupo alquiloxicarbonilo com um total de 2 ou 3 átomos de carbono ou um grupo benziloxicarbonilo e R5 um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo com 1 a 4 átomos de carbono ou um grupo ciclo-hexilo.

Os compostos preferenciais da anterior fórmula geral I são contudo aqueles em que X significa um grupo etileno, Z significa um grupo metileno, 2

\l ' Υ significa um grupo 1,4-piperidinileno, R1 significa um átomo de hidrogénio e R5 significa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo com 1 ou 2 átomos de carbono ou um grupo ciclo-hexilo, os respectivos tautómeros, estereoisómeros, incluindo as misturas, e sais. A título de exemplo referem-se compostos de fórmula geral I particularmente valiosos: 4-[2-[(4-amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-carboximetil-piperidina, 4- [2-[(4-amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-[(etoxicarbonil)-metil]-piperidina e 4-[2-[(4-amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-[(ciclo-hexil-oxicarbonil)metil]-piperidina, em especial contudo 4-[2-[(4-amidinofenil)aminocarbonil]-etil]-1-carboximetil-piperidina e respectivos sais.

De acordo com a invenção preparam-se os novos compostos de fórmula geral I, por exemplo pelo processo seguinte:

Reacção de um composto de fórmula geral

3 (II) ,

I f em que R1 se define como anteriormente, com um composto de fórmula geral o HO-C-X-Y-Z-CO-OR5 (III), em que R5, X, Y e Z se definem como anteriormente, ou com os seus derivados reactivos e eventual transformação subsequente do grupo R5 num átomo de hidrogénio.

Como derivados reactivos de um composto de fórmula geral III referem-se por exemplo os respectivos cloretos de acilo, azidas de ácido, anidridos mistos com ácidos carboxílicos alifáticos ou aromáticos ou com monoésteres de ácidos carbónicos, os respectivos imidazoletos e respectivos ésteres como os ésteres alquilicos, arilicos e arilalquilicos, como os ésteres metilicos, etílicos, isopropílicos, pentílicos, fenílicos, nitrofenílicos ou benzílicos. A reacção efectua-se convenientemente num solvente ou numa mistura de solventes como cloreto de metileno, dimetilformamida, sulfóxido dimetílico, benzeno, tolueno, clorobenzeno, tetra-hidrofurano, piridina, piridina/dimetilformamida, benzeno/tetra-hidrofurano ou dioxano, conforme o caso em presença de um agente desidratante, por exemplo na presença de éster butílico do ácido clorofórmico, cloreto de tionilo, trimetilclorossilano, ácido sulfúrico, ácido metanossulfónico, ácido p-toluenossulfónico, tricloreto de fósforo, pentóxido de fósforo, N,Ν'-diciclo-hexilcarbodiimida, N,Ν'-diciclo-hexilcarbodiimida/N-hidroxi- succinimida, sais de 2-(lH-benzotriazolil)-1,1,3,3-tetrametil-urónio, N,N'-carbonildiimidazole, N,N'-tionildiimidazole ou trifenilfosfina/tetracloreto de carbono, conforme o caso na 4

V

t presença de dimetilaminopiridina ou 1-hidroxibenzotriazole e/ou de uma base como trietilamina, N-etildiisopropilamina, piridina ou N-metilmorfolina, por conveniência a temperaturas entre -10 e 180°C, de preferência a temperaturas entre 0 e 120°C. A transformação subsequente do grupo R5 num átomo de hidrogénio efectua-se convenientemente quer na presença de um ácido como ácido clorídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido acético, ácido tricloroacético, ácido trifluoroacético ou suas misturas, quer na presença de uma base como hidróxido de litio, hidróxido de sódio ou hidróxido de potássio, num solvente apropriado como água, água/metanol, água/etanol, água/isopropanol, metanol, etanol, água/tetra-hidrofurano ou água/dioxano, a temperaturas entre -10 e 120°C, por exemplo a temperaturas entre a temperatura ambiente e a temperatura de ebulição da mistura reaccional.

Nas reacções acima descritas podem, conforme o caso, proteger-se grupos reactivos presentes como grupos carboxilo, amino, alquilamino, imino ou amidino, durante a reacção, por meio de grupos protectores usuais, que se podem remover depois da reacção.

Por exemplo, refere-se como grupo protector para um grupo carboxilo o grupo trimetilsililo, metilo, etilo, tert-butilo, benzilo ou tetra-hidropiranilo.

Como grupo protector para um grupo amidino eventualmente substituído por um grupo alquilo refere-se o grupo benziloxicarbonilo.

Finalmente, como grupo protector para um grupo amino, alquilamino ou imino, refere-se o grupo formilo, acetilo, 5

trifluoroacetilo, etoxicarbonilo, tert-butoxicarbonilo, benziloxicarbonilo, benzilo, metoxibenzilo ou 2,4-dimetoxibenzilo, e para o grupo imino ainda o grupo metilo e para o grupo amino ainda o grupo ftalilo. A eventual remoção subsequente de um grupo protector utilizado efectua-se por exemplo por hidrólise num solvente aquoso, por exemplo em água, isopropanol/água, ácido acético/água, tetra-hidrofurano/água ou dioxano/água, na presença de um ácido como ácido trifluoroacético, ácido clorídrico ou ácido sulfúrico, ou na presença de uma base alcalina como hidróxido de sódio ou hidróxido de potássio, ou por meio de cisão de éteres, por exemplo na presença de iodotrimetilsilano, a temperaturas entre 0 e 120°C, de preferência a temperaturas entre 10 e 100°C. Ά remoção de um grupo benzilo, metoxibenzilo ou benziloxicarbonilo efectua-se contudo por exemplo por hidrogenólise, por exemplo com hidrogénio na presença de um catalisador como paládio sobre carvão, num solvente como metanol, etanol, acetato de etilo ou ácido acético, conforme o caso sob adição de um ácido como ácido clorídrico, a temperaturas entre 0 e 100°C, de preferência contudo a temperaturas entre 20 e 60°C, e a uma pressão de hidrogénio de 1 a 7 bar, de preferência contudo de 3 a 5 bar. A remoção de um grupo 2,4-dimetoxibenzilo efectua-se contudo de preferência em ácido trifluoroacético na presença de anisole. A remoção de um grupo tert-butilo ou tert-butiloxicarbonilo efectua-se de preferência por tratamento com um ácido como ácido trifluoroacético ou ácido clorídrico ou por tratamento com iodotrimetilsilano, conforme o caso utilizando um solvente como cloreto de metileno, dioxano, metanol ou éter. 6

V

t A remoção de um grupo trifluoroacetilo efectua-se de preferência por tratamento com um ácido como ácido clorídrico, conforme o caso na presença de um solvente como ácido acético ou metanol, a temperaturas entre 50 e 120°C, ou por tratamento com hidróxido de sódio, conforme o caso na presença de um solvente como tetra-hidrofurano ou metanol, a temperaturas entre 0 e 50°C. A remoção de um grupo ftalilo efectua-se de preferência na presença de hidrazina ou de uma amina primária como metilamina, etilamina ou n-butilamina, num solvente como metanol, etanol, isopropanol, tolueno/água ou dioxano, a temperaturas entre 20 e 50°C.

Além disso, os compostos de fórmula geral I obtidos, podem encontrar-se eventualmente, como já referido, nas suas formas enanteoméricas e/ou diastereoméricas. Assim, podem por exemplo separar-se misturas cis/trans nos respectivos isómeros cis e trans e compostos com pelo menos um átomo de carbono quiral nos seus enanteómeros.

Podem assim separar-se por exemplo as misturas cis/trans obtidas, por cromatografia, nos seus isómeros cis e trans. Os compostos de fórmula geral I obtidos, que ocorrem na forma de racematos, podem separar-se de acordo com métodos em si conhecidos (ver Allinger N.L. e Eliel E.L. em "Topics in Stereochemistry(, Vol. 6, Wiley Interscience, 1971) nos seus antípodas ópticos e compostos de fórmula geral I com pelo menos dois átomos de carbono dissimétricos, com base nas suas diferentes propriedades físico-químicas, por métodos em si conhecidos, por exemplo por cromatografia e/ou cristalização fraccionada, nos seus diastereómeros, que, caso ocorram em forma racémica, podem em seguida ser separados nos seus enanteómeros como acima mencionado. 7

A separação de enanteómeros efectua-se de preferência por separação em coluna em fases quirais ou por recristalização de solventes opticamente activos, ou por reacção com uma substância opticamente activa que forme com o composto racémico sais ou derivados como por exemplo ésteres ou amidas, em especial com ácidos e seus derivados activados, ou com álcoois, e separação da mistura diastereomérica de sais ou de derivados desta forma obtida, por exemplo com base em diferentes solubilidades, podendo a partir dos sais ou dos derivados diastereomericamente puros libertar-se os antípodas livres por acção de agentes adequados. Ácidos opticamente activos particularmente úteis são por exemplo as formas D e L do ácido tartárico ou do ácido dibenzoiltartárico, do ácido di-o-toliltartárico, do ácido málico, do ácido mandélico, do ácido canfossulfónico, do ácido glutâmico, do ácido asparagínico ou do ácido quínico. Como álcool opticamente activo refere-se por exemplo (+)- ou (-)-mentol e como grupo acilo opticamente activo em amidas (+)- ou (-)-mentiloxicarbonilo.

Além disso, os compostos de fórmula I obtidos podem transformar-se nos seus sais, em especial para a aplicação farmacêutica nos seus sais fisiologicamente toleráveis, com ácidos inorgânicos ou orgânicos. Como ácidos referem-se para este fim por exemplo o ácido clorídrico, o ácido bromídrico, o ácido sulfúrico, o ácido fosfórico, o ácido fumárico, o ácido succínico, o ácido láctico, o ácido cítrico, o ácido tartárico ou o ácido maleico.

Além disso, os novos compostos de fórmula I assim obtidos, caso contenham um grupo carboxilo, podem transformar-se em seguida, caso se deseje, nos seus sais com bases inorgânicas ou orgânicas, em especial para a aplicação farmacêutica, nos seus sais fisiologicamente toleráveis. Como bases referem-se para tal fim por exemplo hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, 8

arginina, ciclo-hexilamina, etanolamina, dietanolamina e trietanolamina.

Os compostos utilizados como reagentes de partida são em parte conhecidos da literatura ou preparam-se de acordo com processos conhecidos da literatura (ver exemplos).

Como já mencionado acima, as novas fenilamidinas de fórmula geral I e os respectivos sais, em especial os sais fisiologicamente toleráveis com ácidos ou bases inorgânicos ou orgânicos, possuem valiosas propriedades. Assim, os novos compostos de fórmula geral I apresentam valiosas propriedades farmacológicas, para além de um efeito anti-inflamatório e inibidor da degradação dos ossos, em especial efeitos anti-trombóticos, anti-agregatórios e inibidores de tumores e metastases.

Por exemplo, testaram-se os compostos de fórmula geral I, em relação aos seus efeitos biológicos, do modo seguinte: 1. Inibição da ligação de 3Η-ΒΙΒϋ 52 a trombócitos humanos:

Incuba-se uma suspensão de eritrócitos humanos em plasma com 3H-BIBU 52 [= (3S,5S)-5-[(4'-amidino-4-bifenilil)oxometil]-3- [(carboxi)metil]-2-pirrolidinona [3-3H-4-bifenililo]], que substitui o ligando 125I-fibrinogénio conhecido da literatura (ver DE-A-4,214.245) e várias concentrações da substância a testar. Separa-se o ligando livre e ligado por centrifugação e determina-se quantitativamente por contagem de cintilação. A partir dos valores medidos determina-se a inibição pela substância testada da ligação de 3H-BIBU 52. 9

Para tal retira-se sangue do dador a partir de uma veia anticubital e impede-se a coagulação com citrato trissódico (concentração final 13 mM). Centrifuga-se o sangue durante 10 minutos a 170 x g e recolhe-se o plasma sobrenadante rico em plaquetas (PRP). O sangue residual centrifuga-se intensamente mais uma vez para a obtenção do plasma. Dilui-se o PRP com plasma autólogo a 1:10. Incubam-se 750 μΐ com 50 μΐ de soro fisiológico, 100 μΐ de solução da substância a testar, 50 μΐ de sacarose-14C (3.700 Bq) e 50 μΐ de 3H-BIBU 52 (concentração final: 5 nM), à temperatura ambiente durante 20 minutos. Para a medição da ligação não especifica empregam-se em vez da substância a testar 5 μΐ de BIBU 52 (concentração final: 30 μΐ). As amostras centrifugam-se durante 20 segundos a 10000 x g e remove-se o sobrenadante. Medem-se 100 μΐ deste para a determinação do ligando livre. O peletizado dissolve-se em 500 μΐ de NaOH 0,2N, misturam-se 450 μΐ com 2 ml de cintilador e 25 μΐ de HC1 5N e mede-se. 0 plasma residual ainda existente no peletizado determina-se a partir do teor em 14C, e o ligando ligado a partir da medição de 3H. Após retirar a ligação não específica representa-se a reactividade do peletizado em função da concentração da substância em teste e determina-se a concentração necessária para uma inibição a 50% da ligação. 2. Efeito anti-trombotico:

Metodologia A agregação de trombócitos mede-se segundo o método de Born e Cross (J. Physiol. 170, 397 (1964)) em plasma rico em plaquetas de pessoas saudáveis. Para impedir a coagulação mistura-se o sangue com citrato de sódio a 3,14% numa proporção volumétrica de 1:10. 10 Γ L-i, ^3*-

Agregação induzida por colagénio 0 decurso da diminuição da densidade óptica da suspensão de plaquetas mede-se fotometricamente após adição da substância que desencadeia a agregação e regista-se. A partir do declive da curva de densidade conclui-se a velocidade da agregação. 0 ponto da curva ao qual corresponde a maior transmitância de luz utiliza-se para o cálculo da "densidade óptica". A quantidade de colagénio deve ser tão pequena quanto possível, mas de modo a originar uma curva de reacção de percurso irreversível. Utiliza-se o colagénio comercial da firma Hormonchemie, Munique.

Antes da adição de colagénio incuba-se sempre o plasma durante 10 minutos com a substância a 37°C. A partir dos valores medidos determina-se graficamente um valor de EC50, que corresponde a uma variação de 50% da "densidade óptica" no sentido de uma inibição de agregação. A Tabela seguinte apresenta os resultados obtidos:

Substância Teste de ligação a Inibição da agregação (Exemplo N.°) 3H-BIBU~52 de plaquetas IC50 [nM] EC50 [nM] 1 3,7 37 1(1) 51 310

Devido ao seu efeito inibitório sobre os metabolismos célula-célula ou célula-matriz, os novos derivados cíclicos de ureia de fórmula geral I e os seus sais fisiologicamente toleráveis são 11

apropriados para o tratamento ou profilaxia de doenças nas quais ocorrem maiores ou menores agregados de células ou em que as interacções cálula-matriz desempenham um papel, por exemplo no tratamento ou prevenção de tromboses venosas e arteriais, de doenças cerebrovasculares, de embolias pulmonares, do infarte cardíaco, da arteriosclerose, da osteoporose e da metastatização de tumores, e na terapia de perturbações da interacção de células entre si ou com estruturas sólidas de origem genética ou adquiridas. Além disso, estes compostos são apropriados para a terapia de acompanhamento da trombólise com fibrinolíticos ou de intervenções nos vasos como angioplastia transluminal ou ainda para a terapia de estados de choque, da psoríase, da diabetes e de inflamações.

Para o tratamento ou prevenção das doenças acima mencionadas a dose situa-se entre 0,1 μρ e 30 mg/kg de peso corporal, de preferência entre 1 μg e 15 mg/kg de peso corporal, até 4 tomas por dia. Para tal, os compostos de fórmula I preparados de acordo com a invenção podem incorporar-se conforme o caso com outras substâncias activas, como antagonistas de receptor de tromboxano e inibidores da síntese de tromboxano ou suas combinações, antagonistas de seretonina, antagonistas de receptor a, nitratos de alquilo como trinitrato de glicerina, inibidores da fosfodiesterase, prostaciclina e seus análogos, fibrinolíticos como tPA, pro-uroquinase, uroquinase, estreptoquinase, ou anticoagulantes como heparina, sulfato de dermatano, proteína C activada, antagonistas de vitamina K, hirudina, inibidores da trombina ou de outros factores de coagulação activados, juntamente com um ou mais veículos e/ou aditivos inertes usuais, por exemplo com amido de milho, lactose, açúcar de cana, celulose microcristalina, estearato de magnésio, polivinilpirrolidona, ácido cítrico, ácido tartárico, 12 ]

água, água/etanol, água/glicerina, água/sorbite, água/polietilenoglicol, propilenoglicol, álcool estearílico, carboximetilcelulose ou substâncias gordurosas como gordura sólida ou suas misturas apropriadas, em composições galénicas usuais como comprimidos, drageias, cápsulas, pós, suspensões, soluções, "sprays" ou supositórios.

Os exemplos seguintes destinam-se a ilustrar mais detalhadamente a invenção:

Exemplo I

Cloridrato de 4-[2-(clorocarbonil)etil]-1- [(etoxicarbonil)metil]-piperidina A 1,46 g de 4-(2-carboxietil)-1-(etoxicarbonil)metil]-piperidina em 10 ml de cloreto de metileno adiciona-se sob agitação 1 ml de uma solução etérea saturada de ácido clorídrico. Adicionam-se 1,2 g de cloreto de tionilo e agita-se durante 3 horas à temperatura ambiente. Concentra-se a mistura reaccional e mistura-se o resíduo duas vezes com tolueno voltando a concentrar de cada vez. 0 produto bruto utiliza-se sem mais purificação para reacção nos exemplos 1 e 2.

De modo análogo ao do exemplo I, preparam-se os seguintes compostos: (1) cloridrato de 1-[2-(clorocarbonil)etil]-4- [(metoxicarbonil)metil]-piperidina (2) cloridrato de 4-[2-(clorocarbonil)etil]-1-[(ciclo- hexiloxicarbonil)metil]-piperidina 13

Exemplo II 4-[2-(Carboxi)etil]-1-[(etoxicarbonil)metil]-piperidlna

Hidrogenam-se 10 g de 4-[2-(benziloxicarbonil)etil]-ΙΕ (etoxicarbonil)metil]-piperidina em 150 ml de tetra- hidrofurano, durante 4 horas à temperatura ambiente e a uma pressão de hidrogénio de 50 psi na presença de 1,3 g da paládio sobre carvão activado. Concentra-se a mistura reaccional e cristaliza-se com éter dietílico e um pouco de acetona. Rendimento: 5,8 g (79% do teórico),

Ponto de fusão: 65-67°C.

De modo análogo ao do exemplo II, prepara-se o seguinte composto: (1) 4-(2-carboxietil)-1-[(ciclo-hexiloxicarbonil)metil]-piperidina

Ponto de fusão: 85-88°C.

Exemplo III 4-[2-(benziloxicarbonil)etil]-1-[(etoxicarbonil)metil]- piperidina A 9,0 g de 4-[2-(benziloxicarbonil)etil]-piperidina e 5,2 g de N-etil-diisopropilamina em 70 ml de acetonitrilo adicionam-se gota a gota sob agitação em banho de gelo 6,35 g de éster etílico do ácido bromoacético em 20 ml de acetonitrilo e agita-se durante 18 horas à temperatura ambiente. Concentra-se a mistura reaccional e extrai-se rapidamente o resíduo com éter tert-butilmetílico, água gelada e 10 ml de hidróxido de sódio 2N. Separa-se a fase orgânica, lava-se com água gelada e com uma solução saturada de cloreto de sódio, seca-se e concentra-se. 14

Rendimento: 10,05 g (83% do teórico),

Valor de Rf: 0,84 (sílica gel; cloreto de metileno/metanol/amoníaco aquoso concentrado = 95:5:1).

De modo análogo ao do exemplo III, prepara-se o seguinte composto: (1) 4-[2-(benziloxicarbonil)etil]-1-[(ciclo-hexiloxicarbonil)metil]-piperidina Valor de Rf: 0,44 (sílica gel; cloreto de metileno/metanol/amoníaco aquoso concentrado = 98:2:0,5).

Exemplo IV 4-[2-(benziloxicarbonil)etil]-piperidina

Aquecem-se 9,7 g de cloridrato de 4-(2-carboxietil)-piperidina (Ponto de fusão: 240-250°C, preparado por hidrogenação do ácido 3-(4-piridil)-acrílico em ácido acético na presença de óxido de platina seguida por tratamento com ácido clorídrico), 30 ml de álcool benzílico, 3 g de ácido p-toluenossulfónico e 50 ml de tolueno, durante 75 minutos em banho de água. Concentra-se a mistura reaccional em vácuo, mistura-se o resíduo com 50 ml de água gelada e extrai-se três vezes com éter tert-butilmetílico. A fase aquosa torna-se alcalina e extrai-se com éter tert-butilmetílico. Lava-se o extracto com uma solução de cloreto de sódio, seca-se e concentra-se.

Rendimento: 9,0 g (73% do teórico),

Valor de Rf: 0,18 (sílica gel; cloreto de metileno/metanol/amoníaco aquoso concentrado = 95:5:1). 15

Exemplo V

Cloridrato de 1-(2-carboxietil)-4-[(metoxicarbonil)metil]-piperidina A 2,9 g de 1-[2-(tert-butoxicarbonil)etil]-4- [(metoxicarbonil)metil]-piperidina em 20 ml de cloreto de metileno adicionam-se 10 ml de ácido trifluoroacético e agita-se durante a noite à temperatura ambiente. Concentra-se a mistura reaccional, toma-se o resíduo em acetona, mistura-se com ácido clorídrico etéreo e concentra-se novamente. Toma-se novamente em acetona, mistura-se com ácido clorídrico etéreo e concentra-se. Agita-se o resíduo com éter tert-butilmetílico, ao qual se adicionou um pouco de acetona, filtra-se e seca-se.

Rendimento: 2,45 g (92% do teórico),

Valor de Rf: 0,73 (sílica gel em fase reversa; metanol/solução aquosa de cloreto de sódio a 5% = 6:4).

Exemplo VI 1-[2-(tert-butoxicarbonil)etil]-4-((metoxicarbonil)metil]-piperidina

Aquece-se a refluxo durante a noite uma mistura de 9 ml de éster tert-butílico do ácido acrílico, 10 g de cloridrato de 4-[(metoxicarbonil)metil]-piperidina e 7,2 ml de trietilamina em 150 ml de metanol. Concentra-se a mistura reaccional, toma-se o resíduo em cloreto de metileno e lava-se duas vezes com uma solução saturada de hidrogenocarbonato de sódio. Separa-se a fase orgânica, concentra-se e purifica-se o resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel com cloreto de metileno/metanol (35:5).

Rendimento: 12,6 g (86% do teórico), 16

Valor de Rf: 0,68 (sílica gel; cloreto de metileno/metanol 9:1) .

Exemplo 1 4-[2-[(4-amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-carboximetil-piperidina x 0,2 H20 A 420 mg de cloridrato de 4-aminobenzamidina e 20 mg de 4-dimetilaminopiridina numa mistura de 1,5 ml de dimetilformamida e 1,5 ml de piridina, adicionam-se 720 mg de cloridrato de 4 —(2— (clorocarbonil)etil]-1-[(etoxicarbonil)metil]-piperidina e agita-se durante 1,3 horas a 100°C. Arrefece-se a mistura reaccional, mistura-se com éter, torna-se alcalina com hidróxido de sódio e extrai-se com éter tert-butilmetílico e cloreto de metileno. A fase aquosa leva-se a um valor de pH de 3-4 com ácido clorídrico e evapora-se até à secura num banho a 70°C de temperatura. Aquece-se o resíduo à ebulição com 100 ml de etanol, filtra-se após arrefecimento e concentra-se o filtrado. O resíduo de evaporação aquece-se com 30 ml de etanol, arrefece-se e filtra-se o material sólido. O sólido agita-se com 15 ml de tetra-hidrofurano e 4,5 ml de hidróxido de sódio 1 N. A mistura adiciona-se a 2,75 ml de ácido clorídrico IN e agita-se num banho de gelo. Lava-se o precipitado com água e tetra- hidrof urano e concentra-se em vácuo.

Rendimento: 144 mg (21% do teórico),

Ponto de fusão: 283°C (com decomposição)

Valor de Rf: 0,76 (sílica gel em fase reversa; metanol/solução aquosa de cloreto de sódio a 5% = 6:4).

Calculado: C 60,77 H 7,32 N 16,67 Encontrado: C 60,55 H 7,26 N 16,83 Espectro de massa: (M+H+) = 333. 17 Γ u

De modo análogo ao do exemplo 1, preparam-se os seguintes compostos: (1) 1-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-4-carboxi-

metil-piperidina x 2 H2O

Ponto de fusão: 192-200°C (com sinterização e decomposição). Valor de Rf: 0,77 (sílica gel em fase reversa; metanol/solução aquosa de cloreto de sódio a 5% = 6:4)

Calculado: C 55,42 H 7,66 N 15,21 Encontrado: 55,02 7,38 14,95 (2) 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-carboximetil-piperazina (3) 4-[2-[(4-Amidinofeníl)aminocarbonil]etil]-l-carboximetil-2-oxo-piperidina (4) 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-l-carboximetil-2-oxo-piperazina (5) 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-l-carboximetil-3-metil-2-oxo-piperazina (6) 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-l-carboximetil-2,3 dioxo-piperazina (7) 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-l-carboximetil-2,5 dioxo-piperazina (8) 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-l-carboximetil-3-oxo-piperazina (9) 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-carboximetil-ciclo-hexano (10) 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-(1-carboxi-etil)-piperidina 18

(11) Ácido a-[4-[2-[(4-amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-piperidinil]-fenilacétíco (12) Ácido a-[4-[2-[(4-amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-piperidinil]-(3-piridil)acético (13) 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]propil]-1-carboxi-metil-piperidina (14) 4-[2- [ (4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-carboximetil-3,3-dimetil-2-oxo-piperazina (15) Ácido a-[4-[2-[(4-amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-piperidinil]-(4-fluorofenil)acético (16) Ácido a-[4-[2-[(4-amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-piperidinil]-(4-metoxifenil)acético (17) 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-(2-carboxi-etil)-piperidina

Exemplo 2

4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-[(etoxicarbonil)-metil]piperidina x 2,15 HC1 x 0,7 H2O A 625 mg de 4-aminobenzamidina e 30 mg de 4-dimetilaminopiridina em 5 ml de piridina adicionam-se 950 mg de cloridrato de 4-[2-(clorocarbonil)etil]-1-[(etoxicarbonil)metil]-piperidina e agita-se durante 1 hora a 100°C. Adicionam-se 2 ml de dimetilformamida e agita-se durante mais 1,2 horas a 100°C. Concentra-se a mistura reaccional e agita-se o resíduo duas vezes com éter tert-butilmetílico, decantando-se e rejeitando-se o solvente de cada vez. O resíduo purifica-se por cromatografia em óxido de alumínio com etanol. Dissolve-se o produto em etanol, acidifica-se ligeiramente com ácido clorídrico etéreo e 19

Lc, )==*».......^ concentra-se. Agita-se o resíduo com acetona, filtra-se o sólido e seca-se.

Rendimento: 335 mg (25% do teórico),

Valor de Rf: 0,35 (óxido de alumínio; etanol/solução aquosa concentrada de amoníaco = 99:1)

Calculado: C 50,55 H 7,04 N 12,41 Cl 16,88 Encontrado: 50,02 6,96 12,51 17,27

Espectro de massa: (M+H+) = 361.

De modo análogo ao do exemplo 2, preparam-se os cloridratos dos seguintes compostos: (1) 1-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-4-[ (etoxicarbonil)metil]-piperidina (2) 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1- [(etoxicarbonil)metil]-piperazina (3) 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-[(etoxicarbonil)metil]-2-oxo-piperidina (4) 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-[(etoxicarbonil)metil]-2-oxo-piperazina (5) 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-[(etoxicarbonil)metil]-3-metil-2-oxo-piperazina (6) 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-[(etoxicarbonil)metil]-2,3-dioxo-piperazina (7) 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-[(etoxicarbonil)metil]-2,5-dioxo-piperazina (8) 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-ΙΕ (etoxicarbonil)metil]-3-oxo-piperazina 20

ΐ (9) 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-[(etoxicarbonil)metil]-ciclo-hexano (10 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-[1-(etoxi-carbonil)etil]-piperidina (11) éster etílico do ácido a-[4-[2-[(4- amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-piperidinil]-fenilacético (12) éster etílico do ácido oc-[4-[2-[ (4-amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-piperidinil]-(3-piridil)acético (13) 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]propil]-1-[(etoxi-carbonil)metil]-piperidina (14) 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-[(etoxi-carbonil)metil]-3,3-dimetil-2-oxo-piperazina (15) éster etílico do ácido a—[4—[2—[(4— amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-piperidinil]-(4-fluorofenil)acético (18) 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-[(ciclo- (16) éster etílico do ácido oc-[4-[2-[(4-amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-piperidinil]-(4-metoxifenil)acético (17) 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-[2-(etoxí-carbonil)etil]-piperidina hexiloxicarbonil)metil]-piperidina x 2,3 HC1 x 2 H20 Ponto de fusão: a partir de 170°C (decomposição). 21 L. |,|| ,| || \

Valor de R^: 0,58 (sílica gel em fase reversa; metanol/solução aquosa de cloreto de sódio a 5% = 6:4)

Calculado: C 51,69 H 7,60 N 10,48 Cl 15,26 Encontrado: 51,69 7,46 10,44 15,17

Exemplo 3

Ampolas secas com 2,5 mg de ingrediente activo por 1 ml_

Composição: Ingrediente activo Manitol Água para injecções até 2,5 mg 50,0 mg 1,0 ml

Preparação:

Dissolvem-se o ingrediente activo e o manitol em água. Após o enchimento líofiliza-se. A dissolução para obter uma solução pronta a usar efectua-se com água para injecções.

Exemplo 4

Ampolas secas com 35 mg de ingrediente activo por 2 ml_

Composição:

Ingrediente activo 35,0 mg

Manitol 100,0 mg Água para injecções até 2,0 ml

Preparação:

Dissolvem-se o ingrediente activo e o manitol em água. Após o enchimento liofiliza-se. A dissolução para obter uma solução pronta a usar efectua-se com água para injecções. 22 Γ u

Exemplo 5

Comprimidos com 50 mg de ingrediente activo

Composição: 50.0 mg 98.0 mg 50.0 mg 15,0 mg 2.0 mg 215.0 mg (1) Ingrediente activo (2) Lactose (3) Amido de milho (4) Polivinilpirrolidona (5) Estearato de magnésio

Preparação:

Misturam-se (1), (2) e (3) e granulam-se com uma solução aquosa de (4). Ao granulado seco mistura-se (5). A partir desta mistura preparam-se comprimidos biplanares, bifacetados e com ranhura de divisão de um só lado.

Diâmetro dos comprimidos: 9 mm.

Exemplo 6

Comprimidos com 350 mg de ingrediente activo_

Composição: 350.0 mg 136.0 mg 80.0 mg 30,0 mg 4.0 mg 600.0 mg (1) Ingrediente activo (2) Lactose (3) Amido de milho (4) Polivinilpirrolidona (5) Estearato de magnésio

Preparação:

Misturam-se (1), (2) e (3) e granulam-se com uma solução aquosa de (4). Ao granulado seco mistura-se (5). A partir desta mistura preparam-se comprimidos biplanares, bifacetados e com ranhura de divisão de um só lado. 23

Diâmetro dos comprimidos: 12 mm.

Exemplo 7 Cápsulas com 50 mg de ingrediente activo

Composição: 50.0 mg 58.0 mg 50.0 mg 2.0 mg (1) Ingrediente activo (3) Amido de milho seco (4) Lactose pulverizada (5) Estearato de magnésio 160,0 mg

Preparação:

Moem-se conjuntamente (1) e (3). Esta moagem adiciona-se intensamente à mistura de (2) e (4).

Coloca-se esta mistura pulverulenta numa máquina de enchimento de cápsulas em cápsulas de gelatina dura de tamanho 3.

Exemplo 8 Cápsulas com 350 mg de ingrediente activo_

Composição: (1) Ingrediente activo 350,0 mg (3) Amido de milho seco 46,0 mg (4) Lactose pulverizada 30,0 mg (5) Estearato de magnésio 4,0 mg 430,0 mg

Preparação:

Coloca-se esta mistura pulverulenta numa máquina de enchimento de cápsulas em cápsulas de gelatina dura de tamanho 0.

Lisboa, 27 de Junho de 2001

O AGENTE·: OFICIAL DA PROPRIEDADE INDUSTRIAL

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Claims

REIVINDICAÇÕES 1. Fenilamidinas de fórmula geral 0

R1 II N-C-X-Y-Z-CO-OR5 (!) / H em que X significa um grupo etileno, que pode estar substituído por um ou dois grupos metilo, Z significa um grupo metileno, que pode estar substituído por um ou dois grupos metilo, por um grupo piridilo ou fenilo, em que o grupo fenilo pode ainda estar adicionalmente substituído por um átomo de flúor, cloro ou bromo, por um grupo metilo, metoxi ou trifluorometilo, Y significa um grupo 1,4-ciclo-hexileno, 1,4-piperidinileno, 2-oxo-l,4-piperidinileno, 1,4-piperazinileno, 2-oxo-l,4-piperazinileno, 2,3-dioxo-l,4-piperazinileno ou 2,5-dioxo- 1,4-piperazinileno, R1 significa um átomo de hidrogénio, um grupo alquiloxicarbonilo com um total de 2 ou 3 átomos de carbono ou um grupo benziloxicarbonilo e R5 significa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo com 1 a 4 átomos de carbono ou um grupo ciclo-hexilo, os respectivos tautómeros, estereoisómeros incluindo as misturas destes e respectivos sais. 1

u
2. Fenilamidinas de fórmula geral I, de acordo com a reivindicação 1, em que X significa um grupo etileno, Z significa um grupo metileno, Y significa um grupo 1,4-piperidinileno, R1 significa um átomo de hidrogénio e R5 significa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo com 1 ou 2 átomos de carbono ou um grupo ciclo-hexilo, os respectivos tautómeros, estereoisómeros, incluindo as misturas destes e respectivos sais.
3. Os seguintes compostos de fórmula geral I, de acordo com a reivindicação 1: 4-[2-[(4-amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-carboximetil-piperidina, 4- [2-[(4-amidinofenil)aminocarbonil]etil]-ΙΕ (etoxicarbonil)-metil]-piperidina e 4-[2-[(4-amidinofenil)aminocarbonil]etil]-1-[(ciclo-hexil-oxicarbonil)metil]-piperidina, bem como os respectivos sais. 2
4. 4-[2-[(4-Amidinofenil)aminocarbonil]- etil]-1-carboximetil-piperidina e respectivos sais.
5. Sais fisiologicamente toleráveis dos compostos de acordo com pelo menos uma das reivindicações 1 a 4 com ácidos ou bases inorgânicos ou orgânicos.
6. Medicamento, contendo um composto de acordo com pelo menos uma das reivindicações 1 a 4 ou um sal f isiologicamente tolerável de acordo com a reivindicação 5, para além de, conforme o caso, um ou mais veículos e/ou aditivos inertes.
7. Utilização de um composto de acordo com pelo menos uma das reivindicações 1 a 5 para a preparação de um medicamento apropriado para o tratamento ou prevenção de doenças em que ocorrem em maior ou menor grau agregados de células ou em que as interacções célula-matriz desempenham um papel importante.
8. Processo para a preparação de um medicamento de acordo com a reivindicação 6, caracterizado por se incorporar por via não química um composto de acordo com pelo menos uma das reivindicações 1 a 5 com um ou mais veículos e/ou aditivos inertes.
9. Processo para a preparação dos compostos de fórmula geral I, de acordo com as reivindicações 1 a 5, caracterizado por se fazer reagir um composto de fórmula geral

em que 3 (ii), R1 se define como anteriormente, com um composto de fórmula geral o It HO-C-X-Y-Z-CO-OR5 (III) em que Rs, X, Y e Z se definem como nas reivindicações 1 a 4, ou com os seus derivados reactivos, e se transformar em seguida um composto de fórmula geral I assim obtido, em que R5 não representa um átomo de hidrogénio, num composto de fórmula geral I em que R5 representa um átomo de hidrogénio, e/ou caso seja necessário, se remover um grupo protector utilizado nas reacções acima descritas, e/ou caso se deseje, se separar um composto de fórmula geral I assim obtido nos seus estereoisómeros, e/ou se transformar um composto de fórmula geral I assim obtido nos seus sais, em especial para a aplicação farmacêutica, nos seus sais fisiologicamente toleráveis. Lisboa, 27 de Junho de 2001 O AUHNTI·: OFICIAL DA PROPRIEDADE INDI ISTki A

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