PT1809237E

PT1809237E - Emulsão oftálmica do tipo óleo em água com potencial zeta positivo estável

Info

Publication number: PT1809237E
Application number: PT05795930T
Authority: PT
Original assignee: Novagali Pharma Sa
Priority date: 2004-11-09
Filing date: 2005-10-10
Publication date: 2009-04-09
Also published as: US8273362B2; ATE412400T1; US20070248645A1; EP1655021A1; ATE415942T1; IL182897A0; CN103356481A; EP1655021B1; HK1107938A1; US8372434B2; JP2012162549A; JP2012149102A; CN101056615B; IL181446A0; JP5587936B2; IL182897A; IL190497A; ATE498392T1; JP5773941B2; CN101014317A

Description

ΡΕ1809237 1

DESCRIÇÃO A presente invenção relaciona-se com emulsões oftálmicas catiónicas do tipo óleo em água com um potencial zeta que permanece positivo ao longo do tempo.

Por "emulsão oftálmica", significa-se uma emulsão que é adequada para uma aplicação ocular e que pode ter um efeito farmacêutico ou um efeito cosmético.

As emulsões de acordo com a invenção têm um potencial zeta que permanece positivo ao longo do tempo, isto é, são estáveis com o tempo. A estabilidade é definida como a extensão em que um produto retém, dentro de limites especificados e através do seu período de armazenagem e utilização (i.e., o seu prazo de validade), as mesmas propriedades e carac-terísticas que possuía no momento do fabrico. O objectivo do ensaio de estabilidade é proporcionar provas de como a qualidade de uma substância farmacêutica ou produto farmacêutico varia com o tempo sob a influência de uma variedade de factores ambientais tais como temperatura, humidade e luz, e permite a determinação de condições de armazenagem recomendadas, períodos de repetição de ensaios e prazos de validade.

Embora os estudos de estabilidade em tempo real 2 ΡΕ1809237 incluem uma avaliação dos factores que em última análise afectam a data em que expira a validade dos fármacos, são demorados e dispendiosos. Convencionalmente, são utilizados estudos de estabilidade acelerados para prever o prazo de validade de produtos farmacêuticos. Esses estudos acelerados submetem os sistemas a uma temperatura de 40°C durante pelo menos 6 meses.

De forma a entender o mecanismo de estabilidade intrínseca do sistema por estabelecimento de vias de degradação e identificação dos produtos de degradação prováveis, e desta forma ajustar os procedimentos analíticos a ser utilizados, a requerente desenvolveu ensaio de estabilidade em stresse durante o qual as emulsões são submetidas a condições extremas que é uma temperatura de 80°C durante um período de tempo especificado. São depois utilizadas extrapolações matemáticas, tais como a equação de Arrhenius, para calcular o prazo de validade previsto do produto. A aplicação da equação de Arrhenius em ensaios de estabilidade farmacêutica é directa. No método isotérmico, o sistema a ser investigado é armazenado a várias temperaturas elevadas com todas as outras condições fixas. O excesso de exposição térmica acelera a degradação e permite assim que sejam determinadas constantes de velocidade num período de tempo mais curto.

Em anos recentes, as emulsões do tipo óleo em 3 ΡΕ1809237 água, em particular as emulsões com gotículas de um tamanho submicrométrico (daqui em diante emulsões submicromé-tricas") ganharam importância crescente, em particular como veículos para administração de fármacos hidrófobos.

Contudo, a estabilização de emulsões, incluindo emulsões submicrométricas, pode ser uma preocupação para um especialista na matéria. Uma abordagem conhecida para estabilizar uma emulsão é conferir uma carga electros-tática à superfície das gotículas o que cai resultar num repulsão das gotículas e em menor coalescência das gotículas. As partículas coloidais dispersas numa solução estão carregadas electricamente devido às suas caracterís-ticas iónicas e atributos de dipolos. Esta carga, que pode ser negativa resultando em emulsões aniónicas ou positiva produzindo emulsões catiónicas (Klang et al., Pharm. Dev. Technology 2000, 5, 521-532) é conhecida na arte como o "potencial zeta". 0 potencial zeta é uma medida da magnitude da repulsão ou atracção entre partículas (Washington, Adv. Drug Deliv. Reviews 1996, 20:131-145) .

As formulações de emulsões submicrométricas descritas na literatura são normalmente baseadas numa associação de lecitinas que são misturas de fosfolípidos com várias composições obtidas a partir de fontes naturais, tensoactivos não iónicos ou iónicos e de óleo tal como óleo vegetal. As lecitinas geralmente compreendem como componentes maioritários fosfatidilcolina, que é neutra numa gama ampla de pH, fosfolípidos carregados 4 ΡΕ1809237 negativamente tais como fosfatidilserina e ácido fosfatí-dico e fosfolipidos carregados positivamente tais como fosfatidiletanolamina. Como consequência da sua composição, as partículas coloidais na maioria das emulsões disponíveis à base de fosfolipidos são carregadas negativamente. A adição de quantidades suficientes de agentes catiónicos tais como estearilamina, oleílamina, quitosano, {N-[i-(2,3-dioleoíloxi)propil]-N,N,N-trimetilamónio (DOTAP) ou outros pode inverter esta carga de superfície e produzir um colóide carregado positivamente, como reflec-tido pelo seu potencial zeta (Rabinovich-Guilatt et al., Chem. Phys. Lipids 2004, 131:1-13; Liu et al., Pharm. Res. 1996, 13:1856-1860, Klang et al., Int. J. Pharm. 1996, 132 :33-44) .

Em todos os colóides contendo fosfolipidos (e.g. lipossomas ou emulsões), observa-se um decréscimo significativo do potencial zeta com o tempo, devido à hidrólise de fosfolipidos a ácidos gordos livres (Zuidam e Crommelin, J. Pharm. Sei. 1995, 84:1113-1119) que pode ser uma fonte de efeitos secundários tóxicos após a administração (Varveri et al., J. Photochem. Photobiol. A 1995, 91:121-124). Em colóides de fosfolipidos catiónicos, a redução do potencial zeta evidencia que o sistema não é completamente quimicamente estável (Tamilvanan et ai., STP Pharma Sciences 2001, 11:421-426) e em alguns casos pode resultar na desestabilização física da formulação como reflectido pelo tamanho das gotículas. 5 ΡΕ1809237

Por exemplo, em formulações catiónicas de quito-sano contendo 0,25-1,5% de quitosano, 0-1,5% de fosfolí-pidos, 0-2,5% de poloxâmero em fase de óleo de rícino: soja, só a formulação contendo poloxâmero com quitosano apresentou boa estabilidade durante a autoclavagem, enquanto que a coexistência de quitosano e fosfolípidos resultou numa desestabilização da emulsão durante a esterilização. De acordo com os autores, a interacção entre a quitosano carregada positivamente e fosfolípidos carregados negativamente que resultou numa película emulsionante danificada em torno das gotículas de óleo provocou a coalescência das gotículas (Int. J. Pharm. 1999, 183:175-84). Estas emulsões foram adicionalmente avaliadas quanto à sua actividade antimicrobiana para administração na mucosa ou parentérica (Eur. J. Pharm. Biopharm. 2002, 53:115-23). Têm interesse particular as seguintes patentes que tratam de emulsões catiónicas para administração ocular tópica: A patente US 6 007 826 descreve uma emulsão catiónica de óleo em água que compreende partículas coloidais com uma película interfacial carregada positivamente. A película interfacial é formada por lípidos catiónicos (0,05-3% em peso) tais como C10-C14 alquilaminas primárias (são descritas estearilamina ou oleilamina), Cio~C24 alcanolaminas primárias ou um betaínato de colesterol; fosfolípidos (0,5-3%) e tensoactivos não 6 ΡΕ1809237 iónicos do grupo que consiste em poloxâmeros, tiloxapol, polissorbato, e ésteres de polioxietileno de ácidos gordos (0,05-3%). A concentração do óleo é mantida dentro da gama de 3-20%. A patente US 6 007 826 descreve o potencial zeta de emulsões que não são estáveis ao stresse térmico (ver Tamilvanan et ai., STP Pharma Sciences 2001, 11:421-426 e o Exemplo 12 aqui apresentado adiante). A patente US 6 656 460 de Benita e Lambert descreve um método de tratamento de uma patologia de olho seco por aplicação tópica de uma emulsão submicrométrica positiva contendo 0,1-0,5% de fosfolipidos, 0,5-2% de agente emulsionante como poloxâmero e cloreto de benzal-cónio como conservante. Uma vez que estas preparações contêm 0,1 a 0,5% em peso de fosfolipidos, espera-se que o seu potencial zeta diminua a 80°C (ver Exemplo 12). 0 WO 03/053405 descreve uma emulsão para formar uma película lacrimal compreendendo um fosfolípido não polar, um óleo não polar, um agente emulsionante não tóxico e um lípido catiónico que confere à película lacrimal uma carga líquida positiva. A US 6 007 826 descreve uma emulsão do tipo de óleo em água útil como veículo de administração de substâncias hidrófobas farmaceuticamente ou cosmeticamente activas compreendendo partículas coloidais com um núcleo oleoso rodeado por uma película interfacial, compreendendo a referida película interfacial: 7 ΡΕ1809237 - um lípido catiónico (0,05-2%) - um tensoactivo não iónico (0,05-3%) - um fosfolípido como tensoactivo aniónico (0,5-3%) A EP 0 696 452 descreve uma nanoemulsão do tipo óleo em água útil como veiculo oftálmico, compreendendo: - um óleo (0,1-10%), - um poloxâmero como agente tensoactivo não iónico (0,1-10%) - BAK como conservante (igual a ou menos do que 0,01%) - opcionalmente um agente isotonizante, um agente de modificação da viscosidade, um estabilizador, um tampão e/ou um anti-oxidante. A EP 0 878 197 descreve uma composição compreendendo difluprednato, óleo, água e um emulsionante, por exemplo um tensoactivo, que pode ser administrada no olho, nariz, ouvido e outros semelhantes. A composição também pode incluir um conservante tal como cloreto de benzalcónio. A EP 1 611 879 descreve uma emulsão do tipo óleo em água para injecção intra- e peri-ocular, compreendendo um fosfolípido, tal como lipóide E80.

Embora algumas das emulsões do estado da técnica ΡΕ1809237 possam apresentar uma boa estabilidade física no que respeita ao tamanho das gotículas, há ainda necessidade de emulsões oftálmicas catiónicas que sejam fisicamente estáveis, e que não contenham uma quantidade suficiente de quaisquer substâncias susceptíveis de afectar o potencial zeta com o tempo, ao mesmo tempo que apresentam uma boa tolerabilidade para administração ocular.

As substâncias susceptíveis de afectar o potencial zeta podem ser fosfolípidos, e quaisquer substâncias que se tornam carregadas negativamente na armazenagem. A quantidade de substâncias que afectam o potencial zeta com o tempo tem de ser tal que em qualquer momento, a quantidade de cargas positivas na emulsão está acima da quantidade de cargas negativas.

Por "com o tempo" no sentido desta invenção, significa-se uma duração que excede 1 ano, de preferência que excede 2 anos, mais preferencialmente que excede 3 anos. Nesta invenção, se uma emulsão cumprir qualquer dos requisitos dos ensaios A a D, crê-se que a referida emulsão tem um potencial zeta que não é afectado com o tempo.

Por "boa tolerabilidade" na presente invenção, entende-se que a razão da vantagem terapêutica para o desconforto ocular é aceitável para o doente, e de preferência semelhante a um placebo ou solução de NaCl a 9 ΡΕ1809237 09 Q. O . É genericamente aceite que de forma a apresentar boa tolerabilidade ocular o teor catiónico no seio da formulação não deve exceder 0,1%, de preferência não exceder 0,05% e ainda mais preferencialmente não deve exceder 0,03%. Demonstrou-se que aminas primárias como estearilamina ou oleilamina são seguras para administração ocular a 0,1% ou 0,3% p/p (Klang et ai., J. Pharm. Pharmacol. 1994, 46:986-993).

As aminas quaternárias como o cloreto de benzal-cónio, brometo de benzododecinio e cloreto de benzetónio estão autorizadas pelas autoridades de saúde para administração oftálmica até uma concentração de aproximadamente 0,03% (Furrer et ai., Eur. J. Pharm. Biopharm. 2002, 53:263-280). Embora a presença de uma quantidade importante de agente catiónico em emulsões possa conseguir manter um potencial zeta positivo estável com o tempo por cancelamento de entidades negativas emergentes (ver Exemplo 13), essas emulsões não são compatíveis com a recomendação corrente para composições oftálmicas. As tentativas para reduzir a concentração catiónica iriam conduzir a desestabilização das emulsões (ver Exemplo 14).

Um objecto desta invenção é propor emulsões oftálmicas submicrométricas incluindo quantidades minimas de agente catiónico e ter ainda e manter um potencial zeta positivo estável com o tempo. 10 ΡΕ1809237 A presente invenção relaciona-se com uma emulsão oftálmica do tipo óleo em água, que compreende partículas coloidais que têm um núcleo oleoso rodeado por uma película interfacial, compreendendo a referida emulsão: - 0,001% a 0,1% em peso de pelo menos um agente catiónico seleccionado do grupo que consiste em Ci0-C24 alquilaminas primárias, aminas alifáticas terciárias, compostos de amónio quaternário, lípidos catiónicos, amino álcoois, sais de biguanidas, polímeros catiónicos e uma mistura de dois ou mais destes, - menos de 1% em peso de pelo menos um tensoactivo não iónico seleccionado do grupo que consiste em tiloxapol, polissorbatos, derivados de polioxietileno óleo de rícino, ésteres de sorbitano, polioxil estearatos e uma mistura de dois ou mais destes, - tendo a referida emulsão um potencial zeta positivo e cumprindo os requisitos do Ensaio A de estabilidade do potencial zeta tal como aqui definido adiante, - desde que a emulsão não contenha fosfolípidos.

As emulsões de acordo com a invenção são fisicamente estáveis com o tempo tal como aqui definido acima e mantêm um potencial zeta positivo nas condições de determinação específicas descritas nos Ensaios A, B, C 11 ΡΕ1809237 e/ou D. De acordo com a invenção, as emulsões não contêm uma quantidade suficiente de quaisquer substâncias susceptiveis de afectar o potencial zeta com o tempo.

Potencial zeta O potencial zeta mede uma propriedade física que á apresentada por qualquer partícula em suspensão. O potencial zeta pode ser utilizado para prever o comportamento da suspensão em diferentes ambientes, para optimizar as formulações de suspensões e emulsões bem como prever a estabilidade com o tempo.

De forma a evitar que as gotículas da emulsão se fundam umas com as outras e formem agregados de tamanho sucessivamente crescente, é necessário conferir forças repulsivas às partículas. Uma forma de conferir forças repulsivas a um sistema coloidal é por estabilização electrostática ou de carga. A estabilização electrostática ou de carga tem as vantagens de estabilizar um sistema por simples alteração da concentração de iões no sistema. Este é um processo reversível e barato.

Pode haver muitas origens da cara da superfície dependendo da natureza da partícula e do meio que a rodeia mas os mecanismos mais importantes são a ionização de grupos da superfície ou a adsorção de iões carregados. A interacção de partículas em líquidos polares 12 ΡΕ1809237 não é governada pelo potencial eléctrico na superfície da partícula, mas pelo potencial efectivo da partícula e os seus iões associados. Para utilizar o controlo electrostático de dispersões, é o potencial zeta da partícula que tem de ser medido em vez da sua carga na superfície. As partículas carregadas vão atrair iões de carga oposta no dispersante. Os iões próximos da superfície estão fortemente ligados; os que estão mais afastados formam uma região mais difusa. Dentro desta região há uma fronteira imaginária, conhecida como o plano de deslizamento, dentro do qual a partícula e iões actuam como uma única entidade. O potencial no plano de deslizamento é conhecido como o potencial zeta. Há muito que é reconhecido que o potencial zeta é um índice muito bom da magnitude da interacção entre partículas coloidais e as determinações do potencial zeta são vulgarmente utilizadas para avaliar a estabilidade de sistemas coloidais. O potencial zeta medido num dado sistema é dependente da química da superfície, e também da forma como interactua com o seu ambiente circundante. Portanto o potencial zeta tem sempre de ser estudado num ambiente bem definido (especificamente pH e força iónica).

Mobilidade electroforética

Uma consequência importante da existência de cargas eléctricas na superfície de partículas é que interactuam com um campo eléctrico aplicado. Estes efeitos são colectivamente definidos como efeitos electrociné- 13 ΡΕ1809237 ticos. Se o movimento é induzido numa partícula suspensa num líquido sob a influência de um campo eléctrico aplicado, é mais especificamente designado electroforese. Quando um campo eléctrico é aplicado através de um elec-trólito, as partículas carregadas suspensas no electrólito são atraídas para o eléctrodo de carga oposta. As forças viscosas que actuam sobre as partículas tendem a opor-se a este movimento. Quando á atingido o equilíbrio entre estas duas forças opostas, as partículas movem-se com velocidade constante. A velocidade está dependente da força do campo eléctrico ou do gradiente de voltagem, da constante dieléctrica do meio, da viscosidade do meio e do potencial zeta. A velocidade de uma partícula num campo eléctrico unitário é designada como a sua mobilidade electrofo-rética. 0 potencial zeta está relacionado com a mobilidade electroforética pela equação de Henry:

Ue = 2 ε z f (Ka) 3η em que Ue= mobilidade electroforética, z = potencial zeta, ε = constante dieléctrica, η= viscosidade e f(Ka) = função de Henry.

As determinações electroforéticas de potencial zeta são mais vulgarmente feitas em meios aquosos e concentração de electrólito moderada. O f(Ka) neste caso é 1,5, e isto é referido como a aproximação de Smoluchowski. Portanto o cálculo do potencial zeta a partir da mobilidade é directo para sistemas que se enquadram no modelo 14 ΡΕ1809237 de Smoluchowski, i.e. partículas maiores do que cerca de 0,2 micrometros dispersas em electrólitos contendo mais do que 10-3 molar de sal. Para partículas pequenas em meios com constante dieléctrica baixa (e.g. meios não aquosos), o f(Ka) torna-se 1,0 e permite um cálculo igualmente simples. Isto é referido como a aproximação de Huckel.

Ensaios A, B, C e D O Ensaio A consiste na medição da estabilidade do potencial zeta da emulsão em condições de stresse térmico. 0 potencial zeta da emulsão é medido a T=0, i.e. logo que a emulsão tiver sido preparada, sendo o valor obtido designado Zo. Frascos de vidro (Tipo I) de 10 mL de capacidade efectiva contendo entre 5-10 mL de emulsão e selados sob atmosfera de azoto (sem borbulhar) são armazenados a 80°C.

Em seguida é medido o potencial zeta Zi5h a T=15 horas. 0 valor δΑ = Zi5h~Zo é depois calculado. Para cada determinação do potencial zeta, procede-se como a seguir: 0 potencial zeta da superfície das gotículas da emulsão é determinado por mobilidade electroforética num aparelho como um Zetasizer 2000 de Malvern (Malvern 15 ΡΕ1809237

Instruments, UK) equipado com software apropriado e calibrado com padrão fornecido. A emulsão é diluída com água bidestilada se necessário para se obter a intensidade de dispersão que permite detecção óptima das partículas. A taxa de contagem da amostra deve estar entre 100 a 1000 Pa.s (KCps), em detecção homódina (se se utilizar detecção heteródina, deve ser subtraída a contribuição do feixe de referência). São feitas três determinações consecutivas a 25°C utilizando um impulso da célula de 150 mV. A mobilidade electroforética é convertida em valores de potencial zeta através da equação de Smoluchowsky, utilizado as constantes dieléctricas e a viscosidade da água. O valor determinado corresponde à média dos 3 valores obtidos.

Considera-se que a emulsão cumpre o Ensaio A de estabilidade do potencial zeta se δΑ for inferior ao erro padrão das determinações, de preferência inferior a 10 mV, e ainda mais preferencialmente inferior a 5 mV.

De acordo com uma forma de realização vantajosa, a emulsão oftálmica de acordo com a invenção cumpre o Ensaio B de estabilidade do potencial zeta. O Ensaio B é semelhante ao Ensaio A excepto que a emulsão é armazenada durante 48 horas a 80°C, o potencial zeta Z2 é medido após 48 horas e calcula-se δΒ = Z2 — Z0. A emulsão é considerada como cumprindo os requisi- 16 ΡΕ1809237 tos do Ensaio B de estabilidade do potencial zeta se δΒ for inferior ao erro padrão das medições, de preferência inferior a 10 mV, e ainda mais preferencialmente inferior a 5 mV.

De acordo com uma forma de realização mais vantajosa invenção, a emulsão oftálmica de acordo com a invenção cumpre o Ensaio C de estabilidade do potencial zeta. 0 Ensaio C é semelhante ao Ensaio A excepto que a emulsão é armazenada durante 7 dias a 80°C, o potencial zeta Z7 é determinado no dia 7 e calcula-se ÔC = Z7 - Z0. A emulsão é considerada como cumprindo os requisitos do Ensaio C de estabilidade do potencial zeta se ÔC for inferior ao erro padrão das medições, de preferência inferior a 10 mV, e ainda mais preferencialmente inferior a 5 mV.

De acordo com uma forma de realização ainda mais vantajosa da invenção, a emulsão oftálmica de acordo com a invenção cumpre o Ensaio D de estabilidade do potencial zeta. O Ensaio D é semelhante ao Ensaio A excepto que a emulsão é armazenada durante 14 dias a 80°C, mede-se o potencial zeta Zi4 no dia 14 e calcula-se ÔD = zi2 - z0. É considerado que a emulsão cumpre os requisitos do Ensaio D de estabilidade do potencial zeta se ÔD for inferior ao erro padrão das medições, de preferência inferior a 10 mV, e ainda mais preferencialmente inferior a 5 mV. 17 ΡΕ1809237 A concentração do agente catiónico está compreendida entre 0,001 e 0,1%, de preferência entre 0,002 e 0,05%, e ainda mais preferencialmente entre 0,003 e 0,03% em peso do peso total da emulsão (p/p).

Com vantagem, a concentração do óleo não é superior a 7%, de preferência cerca de 0,5 a 5%, e ainda mais preferencialmente cerca de 1 a 3% em peso do peso total da emulsão (p/p).

Noutra forma de realização da invenção, a proporção em peso de agente catiónico/óleo está compreendida entre 0,0025 e 0,06, de preferência entre 0,005 e 0,04, de preferência de 0,01 a 0,02.

Na emulsão de acordo com a invenção, a concentração de agente não iónico é inferior a 1%, de preferência compreendida entre 0,01 e 0,6% em peso do peso total da emulsão (p/p).

Na emulsão oftálmica de óleo em água de acordo com a invenção, o agente catiónico é seleccionado do grupo que consiste em Ci0-C24 alquilaminas primárias, aminas alifáticas terciárias, compostos de amónio quaternário, lipidos catiónicos, amino álcoois, sais de biguanidas, polímeros catiónicos e uma mistura de dois ou mais destes. A amina primária é de preferência seleccionada 18 ΡΕ1809237 do grupo que consiste em oleílamina e estearilamina; o sal alifático terciário pode ser dimetil lauramina ou dieta-nolamina, o amino álcool pode ser tris(hidroximetil)amino-metano. Numa forma de realização preferida, o agente cati-ónico é um composto de amónio quaternário de preferência seleccionado do grupo que consiste em halogeneto de ben-zalcónio, halogeneto de lauralcónio, cetrimida, halogeneto de hexadeciltrimetilamónio, halogeneto de tetradeciltrime-tilamónio, halogeneto de dodeciltrimetilamónio, halogeneto de cetrimónio, halogeneto de benzetónio, halogeneto de beenalcónio, halogeneto de cetalcónio, halogeneto de cetetildimónio, halogeneto de cetilpiridínio, halogeneto de benzododecinio, halogeneto de cloralil metenamina, halogeneto de miristalcónio, halogeneto de estearalcónio ou uma mistura de dois ou mais destes, sendo halogeneto de preferência cloreto ou brometo. Com vantagem, o referido agente catiónico pode ser seleccionado do grupo que consiste em cloreto de benzalcónio, cloreto de lauralcónio, brometo de benzododecinio, cloreto de benzetónio, brometo de hexadeciltrimetilamónio, brometo de tetradecil-trimetilamónio, brometo de dodeciltrimetilamónio ou uma mistura de dois ou mais destes. O polimero catiónico pode ser quitosano, o lipido catiónico pode ser 1,2-dioleil-3-trimetilamónio-propano, 1,2-dioleoíl-sn-glicero-fosfatidiletanolamina, glicoesfingo-lipidos catiónicos ou derivados de colesterol catiónicos. 19 ΡΕ1809237

Exemplos de sais de biguanidas podem ser selec-cionados do grupo que consiste em clor-hexidina e os seus sais, poliaminopropil-biguanida, fenformina, alquilbi-guanida ou uma mistura de dois ou mais destes.

Exemplos de tensoactivos não iónicos que podem ser incluídos na emulsão da invenção são tiloxapol, polo-xâmeros tais como Pluronic F68LF™ ou Lutrol F68, Pluronic L-G2LF™ e Pluronic L62D™ (BASF Wyandotte Corp., Par-sippany, N.J., EUA), polissorbatos tais como polissorbato 20 e polissorbato 80, derivados de óleo de rícino poli-oxietilenado, ésteres de sorbitano, estearatos polioxi-etilénicos e uma mistura de dois ou mais destes.

Com vantagem, a emulsão de óleo em água de acordo com a presente invenção compreende cloreto de benzalcónio como agente catiónico e tiloxapol como um dos tensoactivos não iónicos.

De acordo com outra forma vantajosa, a emulsão compreende cloreto de benzalcónio como agente catiónico e tiloxapol e poloxâmero como tensoactivos não iónicos.

De acordo com a invenção, as partículas coloi-dais têm um tamanho médio das partículas igual ou menor do que 1 pm, com vantagem igual ou menor do que 3 00 nm, mais vantajosamente na gama de 100 a 250 nm. A fase oleosa da emulsão pode compreender um ou 20 ΡΕ1809237 mais componentes seleccionados do grupo que consiste em óleos vegetais (i.e. óleo de soja, azeite, óleo de sésamo, óleo de sementes de algodoeiro, óleo de rícino, óleo de amêndoas doces), óleo mineral (i.e. vaselina e parafina líquida), triglicéridos de cadeia média (MCT) (i.e. um óleo de triglicéridos em que a cadeia do hidrato de carbono tem cerca de 8-12 átomos), ácidos gordos oleosos, miristato de isopropilo, álcoois gordos oleosos, ésteres de sorbitol e ácidos gordos, ésteres de sacarose oleosos, e em geral qualquer substância oleosa que seja tolerada fisiologicamente. O componente maioritário da fase oleosa vai de preferência ser óleo vegetal e/ou MCT. Ácidos gordos ou álcoois gordos podem ser incluídos em casos em que a substância hidrófoba a ser transportada pela emulsão não é suficientemente solúvel na fase oleosa.

Exemplos de óleo de MCT que pode ser utilizado em emulsões da presente invenção são TCM™ (Société des Oléagineux, França), Miglyol 812™ (Dynamit Novel, Suécia).

Outros compostos opcionais que podem estar presentes na emulsão de acordo com a invenção são por exemplo tensoactivos aniónicos e vários aditivos tais como reguladores da pressão osmótica, e.g. sacarose, glicerina ou manitol; antioxidantes, e.g. alfa-tocoferol, bissulfito de sódio, metassulfito de sódio, tiossulfato de sódio anidro, mono-hidrato do ácido cítrico, palmitato de 21 ΡΕ1809237 ascorbilo e ácido ascórbico; ou conservantes, e.g. tiomersal, clorobutanol, álcool benzílico, fenoxietanol, álcool feniletílico, ácido sórbico, EDTA e metil, etil, ou butil parabeno; os referidos compostos opcionais só podem ser adicionados em concentrações especificas que não prejudica a estabilidade do potencial zeta.

Um pH preferido da fase aquosa da emulsão da invenção é 4,0-8,5, sendo 6,0-8,0 particularmente preferido.

Esta invenção também se relaciona com um processo para a preparação de uma emulsão oftálmica do tipo de óleo em água de acordo com a invenção, que compreende partículas coloidais que têm um núcleo oleoso rodeado por uma película interfacial, compreendendo a referida emulsão pelo menos um agente catiónico, pelo menos um tensoactivo não iónico, tendo a referida emulsão um potencial zeta positivo e cumprindo os requisitos do Ensaio A de estabilidade do potencial zeta, compreendendo o referido processo os passos de mistura com força de corte e depois homogeneização a alta pressão das emulsões grosseiras obtidas por mistura das fases aquosa e oleosa.

As emulsões oftálmicas de acordo com a presente invenção podem ser formuladas em composições farmacêuticas com vários ingredientes activos hidrófobos para um grande número de aplicações farmacêuticas. Também podem ser administrados agentes hidrófilos com estas emulsões. 22 ΡΕ1809237

De acordo com a invenção, a emulsão pode ser formulada para administração ocular dos referidos ingredientes activos. Nesta emulsão de óleo em água, o fármaco insolúvel em água é solubilizado na fase oleosa interna, permanecendo assim no estado molecular preferido. Além disso, a visão enevoada causada por óleos é minimizada pela água na fase externa. Acresce que a concentração do fármaco na fase oleosa pode ser ajustada para maximizar a actividade termodinâmica, aumentando assim a penetração do fármaco em tecidos mais profundos.

Consequentemente, a presente invenção proporciona a utilização de uma emulsão de óleo em água de acordo com a presente invenção para a preparação de um medicamento para prevenção ou tratamento de doenças oftálmicas. A invenção também se relaciona com formulações oftálmicas compreendendo uma emulsão de óleo em água de acordo com a presente invenção e um veiculo farmaceu-ticamente aceitável seleccionado do grupo que consiste numa composição de gotas oftálmicas, pomada oftálmica, gel oftálmico.

As referidas formulações também podem compreender uma quantidade farmaceuticamente eficaz de um ingrediente activo no ou dentro do veiculo farmaceuti-camente aceitável. A presente invenção também proporciona um método de tratamento de patologias oculares compreen- 23 ΡΕ1809237 dendo uma composição farmacêutica compreendendo uma emulsão do tipo de óleo em água tal como definido acima. A invenção também se relaciona com a utilização de uma emulsão de óleo em água de acordo com a presente invenção ou de uma composição oftálmica tal como definido acima para a preparação de um medicamento para o tratamento de doenças oculares.

Uma grande variedade de doenças oculares tais como glaucoma, doenças inflamatórias oculares tais como queratite, uveite, inflamação intra-ocular, alergia e infecções oculares de sindrome de olho seco, alergias oculares, infecções oculares, desenvolvimento canceroso, crescimento de novos vasos originários da córnea, edema retiniano, edema macular, retinopatia diabética, retino-patia de prematuridade, doenças degenerativas da retina (degeneração macular, distrofias retinianas), doenças retinianas associadas a proliferação glial podem ser prevenidas ou tratadas utilizando as emulsões catiónicas de acordo com a presente invenção.

Algumas substâncias adequadas para administração no olho podem incluir, por exemplo, antibióticos (tais como tetraciclina, clortetraciclina, bacitracina, neomi-cina, polimixina, gramicidina, cefalexina, oxitetracicli-na, cloranfenicol, canamicina, rifampicina, tobramicina, gentamicina, ciprofloxacina, aminosidos, eritromicina e penicilina, quinolona, ceftazidima, vancomicina, imipene- 24 ΡΕ1809237 me); antifúngicos tais como amfotericina B e miconazole; antibacterianos tais como sulfonamidas, sulfadiazina, sulfacetamida, sulfametizole e sulfisoxazole, nitrofurazo-na e propionato de sódio; antivirais, tais como idoxuri-dina, trifluorotimidina, aciclovir, ganciclovir, cidofovir e interferão; agentes antibacterianos tais como nitrofura-zona e propionato de sódio; fármacos não antibióticos, anti-infecciosos, anti-bacterianos ou anti-microbianos tais como uma preparação à base de iodo, triclosan, clor-hexidina; antialergénicos tais como cromoglicato de sódio, antazolina, metapirilina, clorfeniramina, cetirizina, pirilamina e profenpiridamina; agentes antiproliferativos tais como talidomida; glucocorticóides sintéticos e mineralocorticóides e mais genericamente formas de hormonas derivadas do metabolismo do colesterol (progestero-na, estrogénios, hormonas androgénicas tais como testoste-rona, DHEA e os seus derivados) ; anti-inflamatórios tais como hidrocortisona, acetato de hidrocortisona, dexameta-sona, 21-fosfato de dexametasona, fluorocinoleno, medriso-na, acetato de prednisolona, fluorometalona, triamcinolona e acetonido de triamcinoleno e os seus derivados; anti-inf lamatórios não esteroidais tais como salicilato, indo-metacina, ibuprofeno, diclofenaco, flurbiprofeno e piroxi-cam e inibidores de COX2 tais como rofecoxib, diclofenaco, nimesulide, nepafenaco; antineoplásicos tais como carmus-tina, cisplatina, mitomicina e fluorouracilo; fármacos imunológicos tais como vacinas e estimulantes imunes; insulina, calcitonina, hormona e péptido paratiróide e factor de libertação de vasopressina do hipotálamo; blo- 25 ΡΕ1809237 queadores beta adrenérgicos tais como maleato de timolol, levobunolol HC1 e betaxolol HC1, timolol base, betaxolol, atenolol, epinefrina, dipivalil, oxonolol, acetazolamida base e metazolamida; citoquinas, interleucinas, e factores de crescimento (factores de crescimento tais como factor de crescimento da epiderme, factor de crescimento de fibroblastos, factor de crescimento derivado de plaquetas, factor de transformação do crescimento, factor de crescimento neurotrófico ciliar, factor neurotrófico derivado da linha celular, NGF, EPO, P1GF); anticorpos ou fragmentos de anticorpos, oligoaptâmeros, aptâmeros e fragmentos de genes (oligonucleotidos, plasmideos, ribozimas, ARN interferente pequeno, fragmentos de ácidos nucleicos, péptidos, sequências antisense); imunossupressores tais como ciclos-porina, sirolimus e tacrolimus, imunomoduladores tais como endoxan, tamoxifeno; agentes antitrombolíticos e vasodila-tadores tais como rtPA, uroquinase, plasmina, doadores de óxido nítrico; anti-oxidantes tais como luteina, vitaminas e/ou os seus derivados; e/ou os seus sais opticamente aceitáveis.

De acordo com uma forma de realização vantajosa, a substância activa é pelo menos um agente imunossu-pressor, de preferência seleccionado do grupo que consiste em ciclosporina, de preferência ciclosporina A, tacrolimus e sirolimus. Com vantagem, nestas emulsões o agente imunossupressor está numa quantidade de 0,01 a 0,4%, de preferência 0,05 a 0,2% (p/p) . Com vantagem, estas emulsões não contêm fosfolípidos. Com vantagem, estas emulsões 26 ΡΕ1809237 da invenção contêm ciclosporina, sirolimus e/ou tacrolimus num veículo que compreende ou consiste em MCT. Sem querer ficar ligado por uma teoria, a utilização de MCT, um óleo vegetal seleccionado entre todos, pode proporcionar estabilidade e biodisponibilidade às emulsões oftálmicas da invenção contendo pelo menos um agente imunossupressor, de preferência ciclosporina A. Verificou-se que o MCT tem boas propriedades solubilizantes de ciclosporina, que pode desempenhar um papel na biodisponibilidade melhorada observada da ciclosporina nas emulsões da invenção. Com vantagem, a quantidade de MCT é de 0,5 a 4% p/p da emulsão. Com vantagem, a emulsão da invenção contém um agente imunossupressor, de preferência seleccionado do grupo que consiste em ciclosporina, de preferência ciclosporina A, tacrolimus e sirolimus, e MCT e tiloxapol. Com vantagem, a quantidade de tiloxapol é de 0,05 a 0,5% p/p da emulsão. De preferência, a proporção em peso de agente imunossupressor para óleo é de 0,0125 a 0,1. Numa forma de realização particular da emulsão a proporção em peso de agente imunossupressor para óleo é de 0,083 a 0,1. Noutra forma de realização particular da emulsão, a proporção em peso de agente imunossupressor para óleo é de 0,0125 a 0,05. As emulsões da invenção contendo pelo menos um agente imunossupressor são particularmente úteis para tratar estados de olho seco, em particular queratocon-juntivite seca (KCS), queratoconjuntivite seca atópica (AKC) e queratoconjuntivite vernal (VKC). A invenção também se relaciona com a utilização 27 ΡΕ1809237 de uma emulsão de óleo em água contendo ou não uma substância activa para a preparação de uma composição oftálmica para tratamento de estados de olho seco. A emulsão de acordo com a invenção também pode ser incluída num dispositivo de administração seleccionado do grupo que consiste em lentes, penso ocular, implante ou inserção. 0 fármaco ou substância activa pode estar presente numa quantidade de cerca de 0, 0001 a 5% em peso da emulsão. Dependendo de se o fármaco é hidrófilo ou hidrófobo, vai estar fisicamente presente na fase oleosa ou no componente aquoso. A melhor forma de realizar e utilizar a presente invenção estão descritas nos exemplos seguintes.

EXEMPLOS

Nos exemplos seguintes, são utilizadas as seguintes abreviaturas: CTAB: mistura de brometo de hexadeciltrimetil amónio, brometo de tetradeciltrimetilamónio e brometo de dodeciltrimetilamónio MCT: TCM™ (Société des Oléagineux, França) BAK: cloreto de benzalcónio BEC: cloreto de benzetónio 28 ΡΕ1809237 BCB: brometo de benzildimetildodecilamónio OA: Oleílamina (Sigma (EUA) SA: Estearilamina (Sigma, EUA)

CsA: Ciclosporina A

Cremophor: Cremophor EL (BASF, França)

Lutrol: Lutrol F68 (BASF, França)

Oxypol (Gattefosse, França)

Montane 20 (SEPPIC, França)

Oxypol: Gattefosse (St Priest, França)

Montane 20 (SEPPIC, França)

Lipoid E80 (LIPOID GmbH, Alemanha)

Exemplo de referência 1: Preparação de emulsões catiónicas em que o agente catiónico é CTAB Métodos:

Componente Z01EM042 Z01EM043 CTAB (agente catiónico) 0, 05% 0,1% MCT (óleo) 2% 2% Alfa-tocoferol (antioxidante) 0, 01% 0,01% Lipoid E80™ (tensoactivo aniónico) 0,32% 0,32% Lipoid F68™ (tensoactivo não iónico) 0,5% 0,5% Glicerina (agente de tonicidade) 2,25% 2,25% Água 94,87% 94,82%

Os componentes da fase oleosa foram sucessivamente pesados no mesmo copo e depois agitados magneticamente com ligeiro aquecimento (40°C) até se obter 29 ΡΕ1809237 uma fase amarela, límpida e ligeiramente viscosa. Os componentes da fase aquosa foram sucessivamente pesados no mesmo copo e depois agitados magneticamente com ligeiro aquecimento (40°C) até se obter uma fase transparente, límpida e fluida. Ambas as fases foram aquecidas a 65°C. A emulsão grossa foi formada por adição rápida da fase aquosa à fase oleosa e depois rapidamente aquecida a 75°C. Os copos da fase aquosa e da emulsão grossa foram protegidos por uma película para evitar qualquer evaporação da água. A emulsão era branca e ligeiramente transparente. O tamanho das gotículas da emulsão reduzido por uma mistura com alto cisalhamento durante 5 minutos com um POLYTRON PT 6100. A emulsão tornou-se leitosa. A temperatura da emulsão foi baixada para 20°C utilizando um banho de gelo.

Obteve-se a emulsão final por homogeneização num microfluidificador (C 5, Avestin) utilizando ciclos contínuos durante 5 min a uma pressão de 10.000 psi. A emulsão era leitosa, muito fluida e não aderiu ao vidro. A temperatura da emulsão foi reduzida para 25°C. Mediu-se o seu pH e depois ajustou-se para 8,00 utilizando uma solução de HC1 0,1 M ou NaOH 0,1 Μ. A emulsão foi acondicionada em frascos de vidro fumados com borbulhamento de azoto e depois esterilizada num autoclave durante 20 minutos a 121°C. O tamanho médio das partículas das emulsões foi determinado por dispersão quase elástica da luz após diluição em água utilizando um aparelho de medição do 30 ΡΕ1809237 tamanho de partículas de alto desempenho (Malvern Instruments, UK) . A mobilidade electroforética foi determinada a 25°C num Zetasizer 2000 da Malvern (Malvern Instruments, UK) após uma diluição de 1:200 em água bidestilada como pormenorizado acima.

Resultados: Z01EM042 Z01EM043 Tamanho das gotículas (nm) 126 128 Potencial zeta (mV) 36,4 49,5

Exemplo 2: Preparação de uma emulsão catiónica em que o agente catiónico é cloreto de benzalcónio Métodos:

Componente Z01EM042 BAK (agente catiónico) 0,02% MCT (óleo) 1% Alfa-tocoferol (antioxidante) 0,005% Tiloxapol (tensoactivo não iónico) 0, 16% Lutrol F68 (tensoactivo não iónico) 0, 5% Glicerina (agente de tonicidade) 2,25% Água 96,07% A preparação foi feita de acordo com o processo descrito no Exemplo de Referência 1. 31 ΡΕ1809237

Resultados : Z01EM093 Potencial zeta (mV) 20,4

Exemplo 3: Estabilidade de uma emulsão catiónica descrita no exemplo 3 A estabilidade da emulsão autoclavada (potencial zeta) a 80°C foi monitorizada durante 15 dias.

Resultados: Z01EM093 T (dias) 0 2 5 7 9 12 14 Potencial zeta (mV) 20, 4 23,2 21,5 21,6 22, 7 21,0 21,3 0 potencial zeta da emulsão apresentada neste exemplo era mais estável do que formulações anteriormente conhecidas (dados não apresentados). A Z01EM093 cumpre os requisitos do ensaio D de estabilidade do potencial zeta.

Exemplo 4: Emulsões catiónicas em que o agente catiónico é oleílamina Métodos: % p/p Z01EM165 Oleílamina 0,05 ΡΕ1809237 32 Óleo mineral 1 Lutrol F68 0,1 Tiloxapol 0,3 Glicerina 2,25 Água Até 100 A preparação é feita de acordo com o processo descrito no Exemplo de Referência 1.

Resultados: T (dias) Z01EM165 Tamanho das Potencial zeta goticulas (nm) (mV) 0 186 51,3 3 184 47,2 8 194 52,1 13 163 48,2 15 175 47,9 A Z01EM165 cumpre os requisitos do ensaio D de estabilidade do potencial.

Exemplo 5: Métodos: % p/p Z01EM092 ΡΕ1809237 33 CTAB 0,005 MCT 1 Vitamina E 0,005 Tiloxapol 0,16 Lutrol 0,25 Glicerina 2,25 Água Até 100 A preparação é feita de acordo com o processo descrito no Exemplo de Referência 1.

Resultados:

Emulsão Z01EM092 T (dias) 0 2 5 7 9 12 14 Potencial zeta (mV) 19, 8 21,9 22, 4 18,5 20,3 18,5 20,5 A Z01ME092 cumpre os requisitos do ensaio D de estabilidade do potencial zeta.

Exemplo 6: Emulsões catiónicas com ΒΆΚ Métodos:

Emulsão Z01EM105 Z01EM155 Z01EM162 Z01EM163 Componentes % (p/p) BAK 0,02 0,02 0, 02 0, 02 MCT 2 1 1 1 34 ΡΕ1809237 Óleo de rícino 0 1 0 0 Cremophor 0 0,25 0,1 0 Tiloxapol 0,32 0 0,3 0,3 Montane 20 0 0 0 0,1 Lutrol 0,5 0,1 0 0 Oxypol 0 0,25 0 0 Vitamina E 0,01 0 0 0 Glicerina 2,25 2,25 2,25 2,25 Água até 100% até 100% até 100% até 100% A estabilidade das emulsões autoclavadas (tamanho das goticulas, potencial zeta) a 80°C foi monitorizado T = O, 7 e 14 dias.

Resultados: T (dias) Z01EM105 Z01EM155 Z01EM162 Z01EM163 Tamanho das 0 nd 288 243 249 goticulas (mm) 7 nd 290 261 262 14 nd nd 264 234 Potencial zeta 0 24,9 29,7 22,3 18,8 (mV) 2 20,7 nd nd nd 7 21,3 14,2 14,7 16,5 10 23,2 nd nd nd 13 22,2 nd nd nd 14 nd nd 17,4 15,7 15 23,2 nd nd nd nd: não determinado 35 ΡΕ1809237 Ζ01ΕΜ105, Ζ01ΕΜ162 e Z01EM163 cumprem os requisitos do Ensaio D de estabilidade do potencial zeta. Ο Z01EM115 cumpre os requisitos do Ensaio C de estabilidade do potencial zeta.

Exemplo 7: Emulsões catiónicas em que o agente catiónico é BEC ou BCB Métodos:

Emulsão Z01EM170 Z01EM171 Componentes % (p/p) BEC 0, 02 0 BCB 0 0, 02 MCT 2 2 Tiloxapol 0,3 0,3 Glicerina 2,25 2,25 Lutrol 0,1 0,1 Água até 100% até 100% A preparação é feita de acordo com o processo do Exemplo de Referência 1.

Resultados: T (dias) Z01EM170 Z01EM171 Tamanho das goticulas (nm) 0 210 239 7 232 250 36 ΡΕ1809237 14 233 nd Potencial zeta 0 23,2 9,1 (mV) 7 22,4 6, 4 14 24,1 7,2 Ζ01ΕΜ170 e Z01EM171 cumprem os requisitos do Ensaio D de estabilidade do potencial zeta.

Exemplo 9: Emulsão catiónica com BAK e óleo mineral Métodos:

Emulsão Z01EM151 Z01EM152 Z01EM153 Z01EM164 Z01EM173 Componentes % (p/p) BAK 0, 02 0, 02 0, 02 0,02 0,02 Óleo mineral 1 1 1 1 1 Tiloxapol 0,3 0,3 0,3 0,3 0,3 Lutrol 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 Glicerina 2,25 2,25 2,25 2,25 2,25 Água até 100% até 100% até 100% 0 0 Tampão 0 0 0 até 100% até 100% A estabilidade das emulsões autoclavadas (tamanho das gotículas, potencial zeta) a 80°C foi monitorizada durante 14 dias.

Resultados: 37 ΡΕ1809237 T Z01EM15 Z01EM15 Z01EM15 Z01EM16 Z01EM17 (dias) 1 2 3 4 3 Tamanho das 0 25,8 26,0 23,4 16,7 20,7 gotículas (mm) 3 22,2 23,0 26,2 18,3 nd 5 23,5 23,8 24,2 nd nd 7 nd nd nd nd 19,7 8 nd nd nd 16,5 nd 10 34,1 20,4 17,7 nd nd 12 23,3 21,7 23,9 nd nd 13 nd nd nd 12,7 nd 14 23,9 23 20,3 nd nd 15 nd nd nd 13,2 17,8 Potencial zeta 0 174 220 185 209 200 (mV) 3 178 215 184 200 nd 5 170 213 182 nd nd 7 nd nd nd 213 200 8 nd nd nd nd nd 10 182 311 186 nd nd 12 176 221 224 nd nd 13 nd nd nd 218 nd 14 168 216 188 nd nd 15 nd nd nd 203 216

Todas as emulsões cumprem os requisitos do Ensaio D de estabilidade do potencial zeta.

Exemplo 9: Emulsões catiónicas contendo Ciclosporina A 38 ΡΕ1809237 (CsA) com substância activa na fase oleosa. Métodos e resultados: A preparação é feita de acordo com o processo descrito no Exemplo de Referência 1, com a ciclosporina adicionada à fase oleosa. A estabilidade das emulsões autoclavadas (tamanho das goticulas, potencial zeta) a 80°C foi monitorizada a T = O, 7 e 15 dias.

Emulsão Z06EM044 Z06EM045 Composição 0,02% BAK 0,02% BAK 1,5% MCT 2% MCT 0,24% Tiloxapol 0,32% Tiloxapol 0,01% vit E 0,01% vit E 0,375% Lutrol 0,5% Lutrol 2,25% Glicerina 2,25% Glicerina Água até 100% Água até 100% CsA 0,1% CsA 0,2% Potencial zeta T0: 224 T0: 216 (mV) T7 : 220 T7 : 214 T15: 239 T15: 211 Tamanho das T0: 25,3 T0: 24,8 goticulas (nm) T7 : 22,9 T7 : 22,2 T15: 21,8 T15: 20,8

Enulsão Z06EMD46 Z06EM)47 Z06EM)48 Z06EMQ49 39 ΡΕ1809237

EmLsão Z06EMD46 Z06EMQ47 Z06EMQ48 Z06EXD49 Gcrtposição 0,02% M 0,02% M 0,02% EPK 0,02% mK 1% M3I 0,75% tCI 2% M3T 1% M3T 0,16% Tiloxapol 0,12% Tiloxapol 0,3% Tiloxapol 0,16% Tiloxapol 0,01% vit E 0,01% vit E 0,01% vit E 0,01% vit E 2,25% Glicerina 0,1% Lutrol 0,1% Lutrol 0,1% Lutrol Agua até 100% 2,25% Glicerina 2,25% Glicerina 2,25% Glicerina CsA 0,05% Água até 100% Água até 100% Água até 100% CsA. 0,025% CsA 0,025% CsA 0,05% Potencial T0: 22,7 T0: 20,9 T0: 19,6 T0: 25,0 zeta (mV) T7: 20,7 T7: 18,9 T7: 19,6 T7: 24,7 T15: 20,7 T15: 16,9 H5: 19,4 T15: 19,2 Tamanho das T0: 188 T0: 165 T0: 212 T0: 159 gotí cuias T7: 186 T7: 188 T7: 193 T7: 173 (nm) T15: 195 T15: 194 T15: 200 T15: 177

Bnulsão Z06EMD50 Z06HMD51 Z06EMD52 Z06EMD53 Ocnposição 0,02% BKK 0,02% BKK 0,02% BKK 0,02% BKK 2% MCI 2% MCI 4% MCI 2% MCI 0,3% Tiloxapol 0,3% Tiloxapol 0,3% Tiloxapol 0,3% Tiloxapol 0,01% vit E 0,01% vit E 0,01% vit E 0,01% vit E 0,1% Lutrol 0,1% Lutrol 0,1% Lutrol 0,1% Lutrol 2,25% GLioerina 2,25% Glicerina 2,25% Glicerina 2,25% Glicerina Água até 100% Água até 100% Água até 100% Água até 100% CsA 0,05% CsA 0,2% CsA 0,2% CsA 0,1% Potencial T0: 17,9 T0: 20,1 T0: 28,4 T0: 23,5 zeta (mV) T7: 20,3 T7: 21,9 T7: 24,5 T7: 23,2 T15: 18,9 T15: 19,0 T15: 23,0 T15: 20,3 40 ΡΕ1809237

Tamanho das TO: 224 TO: 179 TO: 176 T0: 204 goticulas T7: 212 T7: 195 T7: 201 T7: 211 (nm) T15: 221 T15: 206 T15: 195 T15: 226

As emulsões contendo CsA como substância activa satisfazem os requisitos do Ensaio D de estabilidade do potencial zeta.

Exemplo 10: Emulsão catiónica contendo luteina como ingrediente activo. Método: Tal como descrito anteriormente. Z42EM001 Z42EM002 Luteina 0,4 0,4 Óleo de cártamo 1,6 1,6 Tiloxapol 0,3 0, 3 Montane 20 0,1 BAK 0,02 0,02 Poloxâmero 0,1 0,1 Glicerol 2,25 2,25 Água desionizada qsp 100% qsp 100% A preparação é feita de acordo com o processo descrito no Exemplo de Referência 1. Z42EM001 Z42EM002 Tamanho das T0 347 255 41 ΡΕ1809237 goticulas (nm) T7 290 236 T14 285 321 Potencial zeta TO 15, 8 16,0 (mV) T7 8, 8 co T14 7,1 8,9

As emulsões contendo luteína como substância activa satisfazem os requisitos do Ensaio D de estabilidade do potencial zeta.

Exemplo 11: Ensaio de tolerabilidade ocular após administração tópica crónica 0 objectivo deste estudo foi determinar a tolerância ocular de emulsões catiónicas (Z01EM134, Z06EM048, Z06EM050 e Z06EM053; ver composição nos exemplos anteriores) após administrações tópicas diárias múltiplas durante 28 dias consecutivos no olho direito de coelhos albinos. Métodos:

Dez (10) coelhos albinos da Nova Zelândia por grupo (5 machos e 5 fêmeas) foram envolvidos neste estudo. Os tratamentos (40 pL de administrações tópicas oculares) foram administrados quatro vezes por dia durante 28 dias consecutivos. Foram investigados a tolerância geral (peso corporal, consumos de alimentos e água, aspecto geral, 42 ΡΕ1809237 sinais clínicos, hematologia e bioquímica do sangue), tolerância ocular (observações com um oftalmoscópio, exames com lâmpada de fenda e histologia ocular) e necropsia (exame macroscópico, pesos dos orgãos principais). Também foi realizada uma análise estatística (ensaio MANOVA LSD) em pesos corporais e dos orgãos, dados do consumo de alimentos e água, e parâmetros hematológicos e bioquímicos.

Resultados: O comportamento geral, consumo de alimentos e água, peso corporal, pesos dos orgãos, não foram afectados por tratamentos. Não houve observações assinaláveis na necropsia devida ao tratamento. As observações oftalmológicas e exames microscópicos dos olhos e partes acessórias não mostraram efeitos adversos. As reacções oculares foram confinadas a vermelhidão conjuntival leve que foi observada em todos os animais do estudo e é vulgarmente observada em coelhos após múltiplas instilações de produtos oftálmicos.

Lisboa, 24 de Março de 2009

Claims

ΡΕ1809237 1 REIVINDICAÇÕES 1. Emulsão oftálmica do tipo submicrométrico de óleo em água, que compreende partículas coloidais que têm um núcleo oleoso rodeado por uma película interfacial, compreendendo a referida emulsão: - 0,001% a 0,1% em peso de pelo menos um agente catiónico seleccionado do grupo que consiste em C10-C24 alquilaminas primárias, aminas alifáticas terciárias, compostos de amónio quaternário, lípidos catiónicos, amino álcoois, sais de biguanidas, polímeros catiónicos e uma mistura de dois ou mais destes, - menos de 1% em peso de pelo menos um tensoactivo não iónico seleccionado do grupo que consiste em tiloxapol, polissorbatos, derivados de polioxietileno óleo de rícino, ésteres de sorbitano, polioxil estearatos e uma mistura de dois ou mais destes, - tendo a referida emulsão um potencial zeta positivo e cumprindo os requisitos do Ensaio A de estabilidade do potencial zeta tal como definido na descrição, - desde que a emulsão não contenha fosfolípidos.
2. Emulsão oftálmica de acordo com a reivindicação 1, que cumpre o requisito do Ensaio B de estabi- 2 ΡΕ1809237 lidade do potencial zeta tal como definido na descrição.
3. Emulsão oftálmica de acordo com qualquer das reivindicações 1 ou 2, que cumpre o requisito do Ensaio C de estabilidade do potencial zeta tal como definido na descrição.
4. Emulsão oftálmica de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 3, que cumpre o requisito do Ensaio D de estabilidade do potencial zeta tal como definido na descrição.
5. Emulsão oftálmica de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 4, em que a concentração do agente catiónico está compreendida entre 0,002 e 0,05% p/p e ainda mais preferencialmente entre 0,003 e 0,03% p/p.
6. Emulsão oftálmica de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 5, em que a concentração do óleo não é superior a 7% (p/p), de preferência cerca de 0,5 a 5% p/p, e ainda mais preferencialmente cerca de 1% a 3% p/p·
7. Emulsão oftálmica de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 6, em que a proporção em peso de agente catiónico/óleo está compreendida entre 0,0025 e 0,06, de preferência entre 0,005 e 0,04.
8. Emulsão oftálmica de acordo com qualquer 3 ΡΕ1809237 das reivindicações 1 a 7 em que a concentração do tensoactivo não iónico está compreendida de preferência entre 0,01 e 0,6% p/p.
9. Emulsão oftálmica de óleo em água de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 8, em que o agente catiónico é seleccionado do grupo que consiste em C10-C24 alquilaminas primárias, aminas alifáticas terciárias, compostos de amónio quaternário, lipidos catiónicos, amino álcoois, sais de biguanidas, polímeros catiónicos e uma mistura de dois ou mais destes.
10. Emulsão oftálmica de óleo em água de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 9, em que o sal de biguanida é seleccionado do grupo que consiste em clor-hexidina e os seus sais, poliaminopropil biguanida, fenformina, alquilbiguanida ou uma mistura de dois ou mais destes.
11. Emulsão oftálmica de óleo em água de acordo com a reivindicação 9, em que o composto de amónio quaternário é seleccionado do grupo que consiste em halogeneto de benzalcónio, halogeneto de lauralcónio, cetrimida, halogeneto de hexadeciltrimetilamónio, halogeneto de tetradeciltrimetilamónio, halogeneto de dodeciltrimetil-amónio, halogeneto de cetrimónio, halogeneto de benze-tónio, halogeneto de beenalcónio, halogeneto de cetal-cónio, halogeneto de cetetildimónio, halogeneto de cetil-piridínio, halogeneto de benzododecínio, halogeneto de 4 ΡΕ1809237 cloralil metenamina, halogeneto de miristalcónio, halo-geneto de estearalcónio ou uma mistura de dois ou mais destes, sendo halogeneto de preferência cloreto ou brometo .
12. Emulsão oftálmica de acordo com a reivindicação 11, em que o referido agente catiónico é selec-cionado do grupo que consiste em cloreto de benzalcónio, cloreto de lauralcónio, brometo de benzododecinio, cloreto de benzetónio, brometo de hexadeciltrimetilamónio, brometo de tetradeciltrimetilamónio, brometo de dodeciltrimetil-amónio ou uma mistura de dois ou mais destes.
13. Emulsão oftálmica de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 9, em que o agente catiónico é seleccionado de quitosano, 1,2-dioleí1-3-trimetilamónio-propano, 1,2-dioleoíl-sn-glicero-fosfatidiletanolamina, glicoesfingo-lipidos catiónicos ou derivados de colesterol catiónicos, ou misturas de dois ou mais destes.
14. Emulsão oftálmica de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 13 em que o tensoactivo não iónico é seleccionado do grupo que consiste em poloxâmeros, tiloxapol, polissorbatos, derivados de óleo de rícino polioxietilenado, ésteres de sorbitano, estearatos poli-oxietilénicos e uma mistura de dois ou mais destes.
15. Emulsão oftálmica de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 14, compreendendo cloreto de 5 ΡΕ1809237 benzalcónio como agente catiónico e tiloxapol como tenso-activo não iónico.
16. Emulsão oftálmica de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 15, em que a emulsão contém cloreto de benzalcónio como agente catiónico e uma combinação de tiloxapol e poloxâmero como tensoactivos não iónicos.
17. Emulsão oftálmica de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 16, em que as referidas partículas coloidais têm um tamanho médio das partículas igual ou inferior a 1 pm, com vantagem igual ou inferior a 300 nm, mais vantajosamente na gama de 100 a 250 nm.
18. Emulsão oftálmica de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 17, compreendendo uma substância farmaceuticamente activa.
19. Emulsão oftálmica de acordo com a reivindicação 18, em que a substância activa é seleccionada do grupo que consiste em antibióticos (tais como tetra-ciclina, clortetraciclina, bacitracina, neomicina, polimi-xina, gramicidina, cefalexina, oxitetraciclina, cloranfe-nicol, canamicina, rifampicina, tobramicina, gentamicina, ciprofloxacina, aminosidos, eritromicina e penicilina, quinolona, ceftazidima, vancomicina, imipeneme); antifún-gicos tais como amfotericina B e miconazole; antibac-terianos tais como sulfonamidas, sulfadiazina, sulface-tamida, sulfametizole e sulfisoxazole, nitrofurazona e 6 ΡΕ1809237 propionato de sódio; antivirais, tais como idoxuridina, trifluorotimidina, aciclovir, ganciclovir, cidofovir e interferão; agentes antibacterianos tais como nitrofura-zona e propionato de sódio; fármacos não antibióticos, anti-infecciosos, anti-bacterianos ou anti-microbianos tais como uma preparação à base de iodo, triclosan, clor-hexidina; antialergénicos tais como cromoglicato de sódio, antazolina, metapirilina, clorfeniramina, cetirizina, pirilamina e profenpiridamina; agentes antiproliferativos tais como talidomida; glucocorticóides sintéticos e mineralocorticóides e mais genericamente formas de hormonas derivadas do metabolismo do colesterol (progestero-na, estrogénios, hormonas androgénicas tais como testoste-rona, DHEA e os seus derivados) ; anti-inflamatórios tais como hidrocortisona, acetato de hidrocortisona, dexameta-sona, 21-fosfato de dexametasona, fluorocinoleno, medriso-na, acetato de prednisolona, fluorometalona, triamcinolona e acetonido de triamcinoleno e os seus derivados; anti-inf lamatórios não esteroidais tais como salicilato, indometacina, ibuprofeno, diclofenaco, flurbiprofeno e piroxicam e inibidores de COX2 tais como rofecoxib, diclofenaco, nimesulide, nepafenaco; antineoplásicos tais como carmustina, cisplatina, mitomicina e fluorouracilo; fármacos imunológicos tais como vacinas e estimulantes imunes; insulina, calcitonina, hormona e péptido parati-róide e factor de libertação de vasopressina do hipotá-lamo; bloqueadores beta adrenérgicos tais como maleato de timolol, levobunolol HC1 e betaxolol HC1, timolol base, betaxolol, atenolol, epinefrina, dipivalil, oxonolol, 7 ΡΕ1809237 acetazolamida base e metazolamida; citoquinas, interleu-cinas, e factores de crescimento (factores de crescimento tais como factor de crescimento da epiderme, factor de crescimento de fibroblastos, factor de crescimento derivado de plaquetas, factor de transformação do crescimento, factor de crescimento neurotrófico ciliar, factor neurotrófico derivado de linha celular, NGF, EPO, P1GF); anticorpos ou fragmentos de anticorpos, oligoaptâmeros, aptâmeros e fragmentos de genes (oligonucleotidos, plasmi-deos, ribozimas, ARN interferente pequeno, fragmentos de ácidos nucleicos, péptidos, sequências antisense); imunos-supressores tais como ciclosporina, sirolimus e tacro-limus, imunomoduladores tais como endoxan, tamoxifeno; agentes antitromboliticos e vasodilatadores tais como rtPA, uroquinase, plasmina, doadores de óxido nitrico; anti-oxidantes tais como luteína, vitaminas e/ou os seus derivados; e/ou os seus sais opticamente aceitáveis.
20. Emulsão oftálmica de acordo com a reivindicação 18, em que a substância activa é um agente imunossupressor seleccionado do grupo que consiste em ciclosporina, sirolimus e tacrolimus.
21. Emulsão oftálmica de acordo com a reivindicação 20, em que a substância activa é ciclosporina A.
22. Processo de preparação de uma emulsão oftálmica submicrométrica do tipo de óleo em água de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 21, compre- 8 ΡΕ1809237 endendo os passos de mistura com cisalhamento seguida por homogeneização a alta pressão das emulsões em bruto obtidas por mistura da fase aquosa e da oleosa.
23. Utilização de uma emulsão submicrométrica de óleo em água de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 21, para a preparação de uma composição oftálmica para tratamento de doenças de olho seco.
24. Utilização de uma emulsão oftálmica de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 21, para a preparação de uma composição oftálmica para tratamento de doenças oculares tais como glaucoma, doenças inflamatórias oculares tais como queratite, uveite, inflamação intra-ocular, alergia e infecções oculares de sindrome de olho seco, alergias oculares, infecções oculares, desenvolvimento canceroso, crescimento de novos vasos originários da córnea, edema retiniano, edema macular, retinopatia diabética, retinopatia de prematuridade, doenças degenerativas da retina (degeneração macular, distrofias retini-anas), doenças retinianas associadas a proliferação glial.
25. Formulação oftálmica compreendendo uma emulsão submicrométrica de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 21, em associação com um veiculo oftálmico aceitável, estando a referida formulação na forma de gotas oftálmicas, pomada oftálmica ou gel oftálmico.
26. Formulação oftálmica de acordo com a ΡΕ1809237 reivindicação 25, compreendendo uma quantidade farmaceuti-camente eficaz de um ingrediente activo no ou no interior do veiculo oftálmico aceitável.
27. Dispositivo de administração seleccionado do grupo que consiste em lentes, penso ocular, implante, inserção, contendo o referido dispositivo uma emulsão de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 21. Lisboa, 24 de Março de 2009