PL219566B1 - Pochodna podstawionej azaindolooksacetylopiperazyny i jej zastosowanie oraz kompozycja farmaceutyczna ją zawierająca - Google Patents

Pochodna podstawionej azaindolooksacetylopiperazyny i jej zastosowanie oraz kompozycja farmaceutyczna ją zawierająca

Info

Publication number
PL219566B1
PL219566B1 PL375360A PL37536003A PL219566B1 PL 219566 B1 PL219566 B1 PL 219566B1 PL 375360 A PL375360 A PL 375360A PL 37536003 A PL37536003 A PL 37536003A PL 219566 B1 PL219566 B1 PL 219566B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
aids
hiv
compounds
compound
mmol
Prior art date
Application number
PL375360A
Other languages
English (en)
Other versions
PL375360A1 (pl
Inventor
Tao Wang
Zhongxing Zhang
Nicholas A. Meanwell
John F. Kadow
Zhiwei Yin
Qiufen May Xue
Alicia Regueiro-Ren
John D. Matiskella
Yasutsugu Ueda
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=31714265&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=PL219566(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Publication of PL375360A1 publication Critical patent/PL375360A1/pl
Publication of PL219566B1 publication Critical patent/PL219566B1/pl

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/427—Thiazoles not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4402—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof only substituted in position 2, e.g. pheniramine, bisacodyl
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/472—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/472—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine
    • A61K31/4725—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/513—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cytosine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A61K31/52—Purines, e.g. adenine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/536—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/63—Compounds containing para-N-benzenesulfonyl-N-groups, e.g. sulfanilamide, p-nitrobenzenesulfonyl hydrazide
    • A61K31/635—Compounds containing para-N-benzenesulfonyl-N-groups, e.g. sulfanilamide, p-nitrobenzenesulfonyl hydrazide having a heterocyclic ring, e.g. sulfadiazine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A61K31/7072—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid having two oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. uridine, uridylic acid, thymidine, zidovudine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
    • A61K31/708—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid having oxo groups directly attached to the purine ring system, e.g. guanosine, guanylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)

Abstract

Niniejszy wynalazek zapewnia związki o właściwościach leku i oddziaływania biologicznego, ich kompozycji farmaceutycznych i sposobu stosowania. W szczególności, wynalazek dotyczy pochodnych azaidolooksoacetylopiperazyny. Związki te wykazują znakomitą aktywność przeciwwirusową, niezależnie czy są stosowane same lub w połączeniu z innymi środkami przeciwwirusowymi, przeciwzakaźnymi, immunomodulatorami lub inhibitorami wejścia HIV. Bardziej szczegółowo, niniejszy wynalazek dotyczy leczenia HIV i AIDS.

Description

Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest pochodna podstawionej azaindolooksaacetylopiperazyny i jej zastosowanie oraz kompozycja farmaceutyczna ją zawierająca. Związki według wynalazku charakteryzują się niespotykanym działaniem przeciwwirusowym. Dokładniej, przedmiotem wynalazku są związki przydatne do leczenia HIV i AIDS.
Zakażenie HIV-1 (ludzkim wirusem niedoboru odporności-1) stanowi duży problem medyczny. Szacuje się, że pod koniec 2002 roku na całym świecie były 42 miliony zakażonych ludzi. Szybko wzrasta liczba przypadków HIV i AIDS (zespół nabytego niedoboru odporności). W roku 2002, donoszono o około 5,0 miliona nowych zakażeń, a 3,1 miliony ludzi zmarło na AIDS. Obecnie dostępne leki do leczenia HIV obejmują dziewięć nukleozydowych inhibitorów odwrotnej transkryptazy (RT) lub zatwierdzone kombinacje pojedynczych leków (zydowudyna czyli AZT (czyli Retrovir®), didanozyna (czyli Videx®), stawudyna (czyli Zerit®), lamiwudyna (czyli 3TC lub Epivir®), zalcytabina (czyli DDC lub Hivid®), bursztynian abakawiru (czyli Ziagen®), sól fumaranu dizoproksylu tenofowiru (czyli Viread®), Combivir® (zawiera -3TC plus AZT), Trizivir® (zawiera abakawir, lamiwudynę i zydowudynę); trzy nienukleozydowe inhibitory odwrotnej transkryptazy: newirapina (czyli Viramune®), delawirdyna (czyli
Rescriptor®) i efawirenz (czyli Sustiva®) i osiem peptydomimetycznych inhibitorów proteaz lub prepara® ty zatwierdzone: sakwinawir, indinawir, ritonawir, nelfinawir, amprenawir, lopinawir, Kaletra® (lopinawir i Ritonavir®), oraz atazanawir (Reyataz®). Każdy z tych leków stosowany samodzielnie może jedynie przejściowo hamować replikację wirusową. Jednakże, stosowane w połączeniu, leki te wywierają znaczny wpływ na wiremię i postęp choroby. Faktycznie, ostatnio udokumentowano znaczący spadek liczby zgonów pośród pacjentów z AIDS jako rezultat powszechnego stosowania leczenia łączonego. Jednakże, pomimo tych imponujących wyników, 30 do 50% pacjentów ostatecznie nie odpowiada zadowalająco na leczenie łączone. Niewystarczająca moc leku, nie stosowanie się do zaleceń, ograniczona penetracja tkankowa i ograniczenia właściwe danemu lekowi względem pewnych rodzajów komórek (np. większość analogów nukleozydów nie ulega fosforylacji w komórkach w fazie spoczynku) mogą stanowić przyczynę niecałkowitego hamowania podatnych wirusów. Ponadto, występowanie niższych niż optymalne stężeń leku przy dużej szybkości replikacji i szybki obrót wirusowy HIV-1 wraz z częstym występowaniem mutacji, prowadzi do pojawiania się szczepów lekoopornych i niepowodzeń w leczeniu (Larder i Kemp; Gulick; Kuritzkes; Morris-Jones i in.; Schinazi i in.; Vacca i Condra; Flexner; Berkhout i Ren i in.; (odsyłacz literaturowy 6-14)). W celu zapewnienia większej ilości opcji terapeutycznych, potrzeba zatem nowych środków przeciw HIV wykazujących wyraźną oporność i korzystny profil farmakokinetyczny, a zarazem bezpiecznych.
Pośród obecnie znajdujących się na rynku leków przeciw HIV-1 dominują albo nukleozydowe inhibitory odwrotnej transkryptazy albo peptydomimetyczne inhibitory proteaz. W ostatnim czasie wzrosła rola nienukleozydowych inhibitorów odwrotnej transkryptazy (NNRTI) w leczeniu zakażenia HIV (Pedersen & Pedersen, odsyłacz literaturowy 15). W piśmiennictwie opisano co najmniej 30 różnych klas NNRTI (De Clercq, odsyłacz literaturowy 16), a kilka NNRTI badano w próbach klinicznych. Do stosowania klinicznego zatwierdzono dipirydodiazepinon (newirapina), benzoksazinon (efawirenz) i pochodne bis(heteroarylo)piperazyny (delawirdyna). Jednakże, główną wadą rozwoju i stosowania NNRTI jest ich właściwość powodująca szybkie powstawanie szczepów lekoopornych, zarówno w hodowli tkankowej jak i u leczonych osobników, szczególnie tych, poddawanych monoterapii. W wyniku tego, istnieje znaczny nacisk w kierunku odkrycia NNRTI mniej podatnych na rozwój oporności (Pedersen & Pedersen, odsyłacz literaturowy 15).
Jako inhibitory odwrotnej transkryptazy HIV-1 opisano kilka pochodnych indolu obejmujących indolo-3-sulfony, piperazynoindole, pirazynoindole i pochodne 5H-indolo[3,2-b]-[1,5]benzotiazepiny (Greenlee i in., odsyłacz literaturowy 1; Williams i in., odsyłacz literaturowy 2; Romero i in., odsyłacz literaturowy 3; Font i in., odsyłacz literaturowy 17; Romero i in., odsyłacz literaturowy 18; Young i in., odsyłacz literaturowy 19; Genin i in., odsyłacz literaturowy 20; Silvestri i in., odsyłacz literaturowy 21). 2-karboksyamidy indolu opisywano także jako inhibitory adhezji komórkowej i zakażenia HIV (Boschelli i in., US 5424329, odsyłacz literaturowy 4). Na koniec, ujawniono 3-podstawione indole jako naturalne produkty (Semicochliodinol A i B, didemetyloasterrichinone i izocochliodinol) jako inhibitory proteazy HIV-1 (Fredenhagen i in., odsyłacz literaturowy 22). W zgłoszeniu PCT WO 00/76521 ujawniono inne pochodne indolu wykazujące działanie przeciwwirusowe przydatne w leczeniu HIV (odsyłacz literaturowy 93). Pochodne indolu ujawniono także w zgłoszeniu PCT WO 00/71535 (odsyłacz literaturowy 94).
PL 219 566 B1
Dotychczas, ujawniono strukturalnie pokrewne pochodne azaindoloamidu (Kato i in., odsyłacz literaturowy 23; Levacher i in., odsyłacz literaturowy 24; Dompe Spa, WO-09504742, odsyłacz literaturowy 5(a); SmithKline Beecham PLC, WO-09611929, odsyłacz literaturowy 5(b); Schering Corp., US-05023265, odsyłacz literaturowy 5(c)). Jednakże, te struktury różnią się od tych zastrzeganych w tym wynalazku, ponieważ są to raczej pochodne azaindolomonoamidu, niż niesymetryczne pochodne azaindolopiperazynodiamidu i nie wspomniano o zastosowaniu tych związków w leczeniu zakażeń wirusowych, a szczególnie HIV. Inne azaindole ujawniono także w Wang i in., odsyłacz literaturowy 95. W czterech różnych zgłoszeniach PCT i wydanym zgłoszeniu patentowym St. Zjedn. Ameryki ujawniono pochodne zawierające indol i azaindolo-piperazynę (odsyłacz literaturowy 93-95, 106). W tych odsyłaczach literaturowych nie ma nic, co można by uznać za ujawnienie lub sugestię nowych związków według wynalazku i ich zastosowania do hamowania zakażenia HIV.
W US 2002/0061892 ujawniono związki 1H-pirolo[2,3-c]pirydynowe do leczenia zakażeń wirusem HIV i AIDS. Związki mogą dodatkowo zawierać skuteczną przeciwwirusową ilość środka do leczenia AIDS wybranego z grupy obejmującej środek do leczenia AIDS, środek przeciwwirusowy, immunomodulator i inhibitory wnikania HIV.
Związki według wynalazku różnią się od związków znanych z US 2002/0061892 przez podstawienie 1,2,3-triazolem lub 3-metylo-1,2,3-triazolem zamiast podstawienia Cl. Wyżej cytowane publikacje nie ujawniają ani nie sugerują nowych związków według wynalazku i ich zastosowania do hamowania zakażenia wirusem HIV.
Wspomniane odsyłacze literaturowe
Dokumenty patentowe
1. Greenlee, W.J.; Srinivasan, P.C. Indole reverse transcriptase inhibitors, opis patentowy St. Zjedn. Ameryki Płn. nr 5124327.
2. Williams, T.M.; Ciccarone, T.M.; Saari, W. S.; Wai, J.S.; Greenlee, W.J.; Balani, S.K.; Goldman, Μ.Ε.; Theohrides, A.D. Indoles as inhibitors of HIV reverse transcriptase. Patent europejski
530907.
3. Romero, D.L.; Thomas, R.C.; Preparation of substituted indoles as anti-AIDS pharmaceuticals. Zgłoszenie PCT WO 937/01181.
4. Boschelli, D.H.; Connor, D.T.; Unangst, P.C. Indole-2-carboxamides as inhibitors of cell adhesion. Opis patentowy St. Zjedn. Ameryki Płn. nr 5424329.
5. (a) Mantovanini, M.; Melillo, G.; Daffonchio, L. Tropyl 7-azaindol-3-ylcarboxyamides as antitussive agents.
Zgłoszenie PCT WO 95/04742 (Dompe Spa), (b) Cassidy, F.; Hughes, I.; Rahman, S.; Hunter, D. J. Bisheteroaryl-carbonyl and carboxamide derivatives with 5HT 2C/2B antagonists activity. Zgłoszenie PCT WO 96/11929. (c) Scherlock, Μ. Η.; Tom, W. C. Substytuted 1H-pyrrolopyridine-3-carboxamides. Opis patentowy St. Zjedn. Ameryki nr 5023265.
Inne publikacje
6. Larder, B.A.; Kemp, S.D. Multiple mutations in the HIV-1 reverse transcriptase confer highlevel resistance to zidovudine (AZT). Science, 1989, 246, 1155-1158.
7. Gulick, R.M. Current antiretroviral therapy: An overview. Quality of Life Research, 1997, 6,
471-474.
8. Kuritzkes, D.R. HIV resistance to current therapies. Antiviral therapy, 1997, 2 (suplement 3),
61-67.
9. Morris-Jones, S.; Moile, G.; Easterbrook, PJ. Antiretroviral therapies in HIV-1 infection. Expert Opinion on Investigational Drugs, 1997, 6(8), 1049-1061.
10. Schinazi, R.F.; Larder, B.A.; Mellors, J.W. Mutations in retroviral genes associated with drug resistance. International Antiviral News, 1997, 5, 129-142.
11. Vacca, J.P.; Condra, J.H. Clinically effective HIV-1 protease inhibitors. Drug Discovery Today, 1997, 2, 261-272.
12. Flexner, D. HIV-protease inhibitors. Drug Therapy, 1998, 338, 1281-1292.
13. Berkhout, B. HIV-1 evolution under pressure of protease inhibitors: Climbing the stairs of viral fitness. J. Biomed. Sci, 1999, 6, 298-305.
14. Ren, S.; Lien, E. J. Development of HIV protease inhibitors: A survey. Prog. Drug Res.,
1998, 57, 1-31.
15. Pedersen, O.S.; Pedersen, E. B. Non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors: the NNRTI boom. Antiviral Chem. Chemother. 1999, 70, 285-314.
PL 219 566 B1
16. (a) De Clercq, E. The role of non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors (NNRTIs) in the therapy of HIV-1 infection. Antiviral Research, 1998, 38, 153-179. (b) De Clercq, E. Perspectives of non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors (NNRTIs) in the therapy of HIV infection. IL. Farmaco, 1999, 54, 26-45.
17. Font, M.; Monge, A.; Cuartero, A.; Elorriaga, A.; Martinez-Irujo, J.J.; Alberdi, E.; Santiago, E.; Prieto, I; Lasarte, J.J.; Sarobe, P. i Borras, F. Indoles and pyrazino[4,5-b]indoles as nonnucleoside analog inhibitors of HIV-1 reverse transcriptase. Eur. J. Med. Chem., 1995, 30, 963-971.
18. Romero, D.L.; Morge, R.A.; Genin, M.J.; Biles, C.; Busso, M,; Resnick, L.; Althaus, I.W.; Reusser, F.; Thomas, R. C i Tarpley, W.G. Bis(heteroaryl)piperazine (BHAP) reverse transcriptase inhibitors: structure-activity relationships of nowel substituted indole analogues and the identification of 1-[(5-methanesulfonamido-1H-indol-2-yl)carbonyl]-4-[3-[1-methylethyl)amino]pyridinyl]piperazine monomethansulfonate (U-90152S), a second generation clinical candidate. J. Med. Chem., 1993, 36, 1505-1508.
19. Young, S.D.; Amblard, M.C.; Britcher, S.F.; Grey, V.E.; Tran, L.O.; Lumma, W.C.; Huff, J.R.; Schleif, W.A.; Emini, E.E.; O'Brien, J.A.; Pettibone, DJ. 2-Hetorocyclic indole-3-sulfones as inhibitors of HIV-reverse transcriptase. Bioorg. Med. Chem. Lett., 1995, 5, 491-496.
20. Genin, M.J.; Poel, T.J.; Yagi, Y.; Biles, C.; Althaus, L; Keiser, B.J.; Kopta, L.A.; Friis, J.M.; Reusser, F.; Adams, W.J.; Olmsted, R.A.; Voorman, R.L.; Thomas, R.C. i Romero, D.L. Synthesis and bioactivity of novel bis(heteroaryl)piperazine (BHAP) reverse transcriptase inhibitors: structure-activity relationships and increased metabolic stability of novel substituted pyridine analogs. J. Med. Chem., 1996, 39, 5267-5275.
21. Silvestri, R.; Artico, M.; Bruno, B.; Massa, S.; Novellino, E.; Greco, G.; Marongiu, M.E.; Pani, A.; De Montis, A i La Colla, P. Synthesis and biological evaluation of 5H-indolo[3,2-b][1,5]benzothiazepine derivatives, designed as conformationally constrained analogues of the human immunodeficiency virus type I reverse transcriptase inhibitor L-737126. Antiviral Chem. Chemother. 1998, 9, 139-148.
22. Fredenhagen, A.; Petersen, F.; Tintelnot-Blomley, M.; Rosel, J.; Mett, H and Hug, P. J. Semicochliodinol A and B: Inhibitors of HIV-1 protease and EGF-R protein Tyrosine Kinase related to Asterriquinones produced by the fungus Chrysosporium nerdarium. Antibiotics, 1997, 50, 395-401.
23. Kato, M.; Ito, Κ.; Nishino, S.; Yamakuni, H.; Takasugi, H. New 5-HT3 (Serotonin-3) receptor antagonists. IV. Synthesis and structure-activity relationships of azabicycloalkaneacetamide derivatives. Chem. Pharm. Bull., 1995, 43, 1351-1357.
24. Levacher, V.; Benoit, R.; Duflos, J; Dupas, G.; Bourguignon, J.; Queguiner, G. Broadening the scope of NADH models by using chiral and non chiral pyrrolo [2,3-b] pyridine derivatives. Tetrahedron, 1991, 47, 429-440.
25. Shadrina, L.P.; Dormidontov, Yu.P.; Ponomarev, V,G.; Lapkin, I.I. Reactions of organomagnezium derivatives of 7-aza- and benzoindoles with diethyl oxalate and the reactivity of ethoxalylindoles. Khim. Geterotsikl. Soedin., 1987, 1206-1209.
26. Sycheva, T.V.; Rubtsov, N.M.; Sheinker, Yu.N.; Yakhontov, L.N. Some reactions of 5-cyano-6-chloro-7-aza-indoles and lactam-lactim tautomerism in 5-cyano-6-hydroksy-7-azaindolines. Khim. Geterotsikl. Soedin., 1987, 100-106.
27. (a) Desai, M.; Watthey, J.W.H.; Zuckerman, M. A convenient preparation of 1-aroylpiperazines. Org. Prep. Proced. Int., 1976, 8, 85-86. (b) Adamczyk, M.; Fino, J.R. Syntesis of procainamide metabolites. N-acetyl desethylprocainamide and desethylprocainamide. Org. Prep. Proced. Int. 1996, 28, 470-474. (c) Rossen, K.; Weissman, S. A.; Sager, J.; Reamer, R.A.; Askin, D.; Volante, R.P.; Reider, P.J. Asymmetric Hydrogenation of tetrahydropyrazines: Synthesis of (S)-piperazie 2-tert-butylcarboxamide, an intermediate in the preparation of the HIV protease inhibitor Indinavir. Tetrahedron Lett., 1995, 36, 6419-6422. (d) Wang, T.; Zhang, Z.; Meanwell, N.A. Benzoylation of Dianions: Preparation of mono-Benzoylated Symmetric Secondary Diamines. J. Org. Chem., 1999, 64, 7661-7662.
28. Li, H.; Jiang, X.; Ye, Y.-H.; Fan, C.; Romoff, T.; Goodman, M. 3-(Diethoxyphosphoryloxy)-1,2,3-benzotriazin-4(3H)-one (DEPBT): A new coupling reagent with remarkable resistance to racemization. Organic Lett., 1999, 7, 91-93.
29. Harada, N.; Kawaguchi, T.; Inoue, I.; Ohashi, M.; Oda, K.; Hashiyama, T.; Tsujihara, K. Synthesis and antitumor activity of quaternary salts of 2-(2'-oxoalkoxy)-9-hydroxy-ellipticines. Chem. Pharm. Bull., 1997, 45, 134-137.
PL 219 566 B1
30. Schneller, S. W.; Luo, J.-K. Synthesis of 4-amino-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridine (1,7-Dideazaadenine) and 1H-pyrroIo[2,3-b]pyridin-4-ol (1,7-Dideazahypoxanthine). J. Org. Chem., 1980, 45, 4045-4048.
31. Shiotani, S.; Tanigochi, K. Furopirydynas. XXII [1]. Elaboration of the C-substituents alpha to the heteronitrogen atom of furo [2,3-b]-, -[3,2-b]-, -[2,3-c]- and -[3,2-c] pyridine . J. Het. Chem., 1997, 34, 901-907.
32. Minakata, S.; Komatsu, M.; Ohshiro, Y. Regiosesective functionalization of 1H-pyrrolo[2,3-b]pyridine via its N-oxide. Synthesis, 1992, 661-663.
33. Klemm, L. H.; Hartling, R. Chemistry of thienopyridines. XXIV. Two transformations of thieno[2,3-b]pyridine 7-oxide (1). J. Het. Chem., 1976, 13, 1197-1200.
34. Antonini, I; Claudi, F.; Cristalli, G.; Franchetti, P.; Crifantini, M.; Martelli, S. Synthesis of 4-amino-1-?-D-ribofuranosyl-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridine (1-Deazatubercidin) as a potential antitumor agent. J. Med. Chem., 1982, 25, 1258-1261.
35. (a) Regnouf De Vains, J.B.; Papet, A.L.; Marsura, A. New symmetric and unsymmetric polyfunctionalized 2,2'-bipyridines. J. Het. Chem., 1994, 31, 1069-1077. (b) Miura, Y.; Yoshida, M.; Hamana, M. Synthesis of 2,3-fused quinolines from 3-substituted quinoline 1-oxides. Part II, Heterocycles, 1993, 36, 1005-1016. (c) Profit, V.E.; Rolle, W. Uber 4-merkaptoverbindungendes 2-methylopyridins. J. Prakt. Chem., 1960, 285 (11) , 22-34 .
36. Nesi, R.; Giomi, D.; Turchi, S.; Tedesehi, P., Ponticelli, F. A new one step synthetic approach to the isoxazolo[4,5-b]pyridine system. Synth. Comm., 1992, 22, 2349-2355.
37. (a) Wal ser, A.; Zenchoff, G.; Fryer, R.I. Quinazolines and 1,4-benzodiazepines. 75. 7-Hydroxyamino-benzodiazepines and derivatives. J. Med. Chem., 1976, 19, 1378-1381. (b) Barker, G.; Ellis, G.P. Benzopyrone. Part I. 6-Amino- and 6-hydroxy-2-substituted chromones. J. Chem. Soc., 1970, 2230-2233.
38. Ayyangar, N.R.; Lahoti, R J.; Daniel, T. An alternative synthesis of 3,4-diaminobenzophenone and mebendazole. Org. Prep. Proced. Int., 1991, 23, 627-631.
39. Mahadevan, I.; Rasmussen, M. Ambident heterocyclic reactivity: The alkylation of pyrrolopyridines (azaindoles, diazaindenes). Tetrahedron, 1993, 49, 7337-7352.
40. Chen, B.K.; Saksela, K.; Andino, R.; Baltimore, D. Distinct modes of human immunodeficiency type 1 proviral latency revealed by superinfection of nonproductiveIy infected cell lines with recombinant luciferase-encoding viruses. J. Virol, 1994, 68, 654-660.
41. Bodanszky, M.; Bodanszky, A. „The Practice of Peptide Synthesis 2nd Ed., Springer-Verlag: Berlin Heidelberg, Germany, 1994.
42. Albericio, F. i in. J. Org. Chem. 1998, 63, 9678.
43. Knorr, R. i in. Tetrahedron Lett. 1989, 30, 1927.
44. (a) Jaszay Z. M. i in. Synth. Commun., 1998, 28, 2761 i odsyłacze literaturowe tam przytoczone; (b) Bernasconi, S. i in. Synthesis, 1980, 385.
45. (a) Jaszay Z. M. i in. Synthesis, 1989, 745 i odsyłacze literaturowe tam przytoczone; (b) Nicolaou, K. C. i in. Angew. Chem. Int. Ed. 1999, 38, 1669.
46. Ooi, T. i in. Synlett. 1999, 729.
47. Ford, R. E. i in. J. Med. Chem. 1986, 29, 538.
48. (a) Yeung, K.-S. i in. Bristol-Myers Squibb niepublikowane wyniki, (b) Wang, W. i in. Tetrahedron Lett. 1999, 40, 2501.
49. Brook, M. A. i in. Synthesis, 1983, 201.
50. Yamazaki, N. i in. Tetrahedron Lett. 1972, 5047.
51. Barry A. Bunin „The Combinatorial Index 1998 Academic Press, San Diego / London str.
78-82.
52. Richard C. Larock Comprehensive Organic Transormations 2nd Ed. 1999, John Wiley and Sons New York.
53. M. D. Mullican i in. J. Med. Chem. 1991, 34, 2186-2194.
54. Protective groups in organic synthesis 3rd ed. / Theodora W. Greene i Peter G.M. Wuts. New York : Wiley, 1999.
55. Katritzky, Alan R. Lagowski, Jeanne M. The principles of heterocyclic Chemistry New York: Academic Press, 1968.
56. Paquette, Leo A. Principles of modern heterocyclic chemistry New York: Benjamin.
PL 219 566 B1
57. Katritzky, Alan R.; Rees, Charles W.; Comprehensive heterocyclic chemistry: the structure, reactions, synthesis, and uses of heterocyclic compounds wyd. 1 Oxford (Oxfordshire); New York: Pergamon Press, 1984. 8 v.
58. Katritzky, Alan R. Handbook of heterocyclic 1st ed Oxford (Oxfordshire); New York: Pergamon Press, 1985.
59. Davies, David I Aromatic Heterocyclic Oxford ; New York : Oxford University Press, 1991.
60. Ellis, G. P. Synthesis of fused Chichester [Sussex]; New York: Wiley, c1987-c1992. Chemistry of heterocyclic compounds; v. 47.
61. Joule, J. A Mills, K., Smith, G. F. Heterocyclic Chemistry, 3rd ed London; New York Chapman Sc Hall, 1995.
62. Katritzky, Alan R., Rees, Charles W., Scriven, Eric F. V. Comprehensive heterocyclic chemistry II: a review of the literature 1982-1995.
63. The structure, reactions, synthesis, and uses of heterocyclic compounds wyd. 1 Oxford ; New York: Pergamon, 1996, 11 v. in 12: ilustrowany; 28 cm.
64. Eicher, Theophil, Hauptmann, Siegfried. The chemistry of heterocycles: structure, reactions, syntheses, and applications Stuttgart; New York : G. Thieme, 1995.
65. Grimmett, M. R. Imidazole and benzimidazole Synthesis London; San Diego: Academic Press, 1997.
66. Advances in heterocyclic chemistry. Opublikowane w Nowym Yorku przez Academic Press, począwszy od 1963 do chwili obecnej.
67. Gilchrist, T. L. (Thomas Lonsdale) Heterocyclic chemistry 3rd ed. Harlow, Essex : Longman, 1997, 414 str.: ilustrowany; 24 cm.
68. Farina, Vittorio; Roth, Gregory P. Recent advances in the Stille reaction; Adv. Met.-Org. Chem. 1996, 5, 1-53.
69. Farina, Vittorio; Krishnamurmy, Venkat; Scott, William J. The Stille reaction; Org. React. (N. Y.) (1997), 50, 1-652.
70. Stille, J. K. Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1986, 25, 508-524.
71. Norio Miyaura i Akiro Suzuki Chem Rev. 1995, 95, 2457.
72. Home, D.A. Heterocycles 1994, 39, 139.
73. Kamitori, Y. i in. Heterocycles, 1994, 37(7), 153.
74. Shawali, J. Heterocyclic Chem. 1976, 13, 989.
75. a) Kende, A.S.i in. Org. Photochem. Synth. 1972, 1, 92. b) Hankes, L.V.; Biochem. Prep. 1966, 11, 63. c) Synth. Meth. 22, 837.
76. Hulton i in. Synth. Comm. 1979, 9, 789.
77. Pattanayak, B.K. i in. Indian J. Chem. 1978, 16, 1030.
78. Chemische Berichte 1902, 35, 1545.
79. Chemische Berichte Ibid 1911, 44, 493.
80. Moubarak, L, Vessiere, R. Synthesis 1980, tom 1, 52-53.
81. Ind J. Chem. 1973, 11, 1260.
82. Roomi i in. Can J. Chem. 1970, 48, 1689.
83. Sorrel, T.N. J. Org. Chem. 1994, 59, 1589.
84. Nitz, T.J. i in. J. Org. Chem. 1994, 59, 5828-5832.
85. Bowden, K. i in. J. Chem. Soc. 1946, 953.
86. Nitz, T.J. i in. J. Org. Chem. 1994, 59, 5828-5832.
87. Scholkopf i in. Angew. Int. Ed. Engl. 1971, 10(5), 333.
88. (a) Behun, J. D.; Levine, R. J. Org. Chem. 1961, 26, 3379. (b) Rossen, K.; Weissman, S.A.; Sager, J.; Reamer, R.A.; Askin, D.; Volante, R.P.; Reider, P.J. Asymetrie Hydrogenation of tetrahydropyrazines: Synthesis of (S)-piperazine 2-tert-butylcarboxyamide, an intermediate in the preparation of the HIV protease inhibitor Indinavir. Tetrahedron Lett., 1995, 36, 6419-6422. (c) Jenneskens, L. W.; Mahy, J.; den Berg, E. M. M. de B.-v.; Van der Hoef, L; Lugtenburg, J. Reel. Trav. Chim. Pays-Bas 1995, 114, 97.
89. Wang, T.; Zhang, Z.; Meanwell, N.A. Benzoylation of Dianions: Preparation of monoBenzoylated Symmetric Secondary Diamines. J. Org. Chem., 1999, 64, 7661-7662.
90. (a) Adamczyk, M.; Fino, J.R. Synthesis of procainamide metabolites. N-acetyl desethylprocainamide and desethylprocainamide. Org. Prep. Proced. Int. 1996, 28, 470-474. (b)
PL 219 566 B1
Wang, T.; Zhang, Z.; Meanwell, N.A. Regioselective mono-Benzoylation of Unsymmetrical Piperazines. J. Org. Chem. 2000, 65, 4740.
91. Masuzawa, K.; Kitagawa, M.; Uchida, H. Bull Chem. Soc. Jpn. 1967, 40, 244-245.
92. Furber, M.; Cooper, M. E.; Donald, D. K. Tetrahedron Lett. 1993, 34, 1351-1354.
93. Blair, Wade S.; Deshpande, Milind; Fang, Haiquan; Lin, Pin-fang; Spicer, Timothy P.; Wallace, Owen B.; Wang, Hui; Wang, Tao; Zhang, Zhongxing; Yeung, Kap-sun. Preparation of antiviral indoleoxoacetyl piperazine derivatives. Opis patentowy St. Zjedn. Ameryki nr 64 6 9006. Preparation of antiviral indoleoxoacetyl piperazine derivatives. Międzynarodowe zgłoszenie PCT (PCT/US00/14359), zgłoszenie WO 0076521 A1, złożone 24 maja, 2000, opublikowane 21 grudnia, 2000.
94. Wang, Tao; Wallace, Owen B.; Zhang, Zhongxing; Meanwell, Nicholas A.; Bender, John A. Antiviral azaindole derivatives. Opis patentowy St. Zjedn. Ameryki nr. 6476034 i Wang, Tao; Wallace, Owen B.; Zhang, Zhongxing; Meanwell, Nicholas A.; Bender, John A. Preparation of antiviral azaindole derivatives. Międzynarodowe zgłoszenie PCT (PCT/US01/02009), zgłoszenie WO 0162255 A1, złożone 19 stycznia, 2001, opublikowane 30 sierpnia, 2001.
95. Wallace, Owen B.; Wang, Tao; Yeung, Kap-Sun/Pearce, Bradley C.; Meanwell, Nicholas A.; Qiu, Zhilei; Fang, Haiquan; Xue, Qiufen May; Yin, Zhiwei. Composition and antiviral activity of substituded indoleoxoacetic piperazine derivatives. Opis patentowy St. Zjedn. Ameryki Płn. nr 10/027612 złożone 19 grudnia, 2001, będące częściową kontynuacją zgłoszenia St. Zjedn. Ameryki nr. 09/888686 złożonego 25 czerwca, 2001 (odpowiadającego Międzynarodowe zgłoszenie PCT (PCT/US01/20300), zgłoszenia WO 0204440 A1, złożonego 26 czerwca, 2001, opublikowanego 17 stycznia, 2002.
96. J. L. Marco, S. T. Ingate, i P. M. Chinchon Tetrahedron 1999, 55, 7625-7644.
97. C. Thomas, F. Orecher, i P. Gmeiner Synthesis 1998, 1491.
98. M. P. Pavia, S. J. Lobbestael, C. P. Taylor, F. M. Hershenson, i D. W. Miskell.
99. Buckheit, Robert W., Jr. Expert Opinion on Investigational Drugs 2001, 10(8), 1423-1442.
100. Balzarini, J.; De Clercq, E.. Antiretroviral Therapy 2001, 31-62.
101. E. De clercq Journal of Clinical Virology, 2001, 22, 73-89.
102. Merour, Jean-Yves; Joseph, Benait. Curr. Org. Chem. (2001), 5(5), 471-506.
103. T. W. von Geldern i in. J. Med. Chem. 1996, 39, 968.
104. M. Abdaoui i in. Tetrahedron 2000, 56, 2427.
105. W. J. Spillane i in. J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 1982, 3, 677.
106. Wang, Tao; Wallace, Owen B.; Zhang, Zhongxing; Meanwell, Nicholas A.; Kadow, John F. Yin, Zhiwei. Composition and Ativiral Activity of Substituted Azaindoleoxoacetic Piperazine Derivatives. Opis patentowy St. Zjedn. Ameryki Płn. nr 10/214982 złożony 7 sierpnia, 2002, będący częściową kontynuacją zgłoszenia St. Zjedn. Ameryki nr. 10/038306 złożonego 2 stycznia, 2002 (odpowiadającego Międzynarodowe zgłoszenie PCT (PCT/US02/00455), zgłoszenia WO 02/062423 A1, złożonego 2 stycznia, 2002, opublikowanego 15 sierpnia, 2002.
Wynalazek dotyczy pochodnej podstawionej azaindolooksoacetylopiperazyny o wzorze
i jej farmaceutycznie dopuszczalnych soli.
Dalszym aspektem wynalazku jest pochodna podstawionej azaindolooksoacetylopiperazyny o wzorze
PL 219 566 B1
i jej farmaceutycznie dopuszczalnych soli.
Wynalazek dotyczy także kompozycji farmaceutycznej zawierającej farmaceutycznie dopuszczalny nośnik i substancję czynną, która według wynalazku zawiera jako substancję czynną przeciwwirusowo skuteczną ilość jednego z wyżej przedstawionych związków według wynalazku.
Korzystna jest kompozycja farmaceutyczna według wynalazku, która dodatkowo zawiera przeciwwirusowo skuteczną ilość środka do leczenia AIDS, wybranego z grupy obejmującej:
(a) środek przeciwwirusowy do leczenia AIDS;
(b) środek przeciwzakaźny;
(c) immunomodulator; i (d) inhibitory wnikania HIV.
Przedmiotem wynalazku jest wyżej określony związek stosowany do leczenia ssaków zakażonych wirusem HIV.
Dalszym aspektem wynalazku jest wyżej określony związek stosowany do leczenia ssaków zakażonych wirusen HIV, który dodatkowo obejmuje zastosowanie przeciwwirusowo skutecznej ilości środka do leczenia AIDS, wybranego z grupy obejmującej:
(a) środek przeciwwirusowy do leczenia AIDS;
(b) środek przeciwzakaźny;
(c) immunomodulator; i (d) inhibitory wnikania HIV.
Tak więc, rozwiązanie według wynalazku stanowi preparat farmaceutyczny zawierający w skutecznej przeciwwirusowo ilości związek według wynalazku, łącznie z jego farmaceutycznie dopuszczalnymi solami i farmaceutycznie dopuszczalnym nośnikiem. W przypadku stosowania do leczenia infekcji HIV, preparat może ewentualnie ponadto zawierać w skutecznej przeciwwirusowo ilości środek do leczenia AIDS wybrany z grupy obejmującej: środki przeciwwirusowe przeciwko AIDS; środek przeciwzakaźny; immunomodulator; i inhibitory wnikania HIV.
Dalsze rozwiązanie według wynalazku stanowi związek według wynalazku do zastosowania w metodzie leczenia ssaków zainfekowanych wirusem, takim jak HIV, obejmująca podawanie takiemu ssakowi w skutecznej przeciwwirusowo ilości związku według wynalazku, w tym jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli, farmaceutycznie dopuszczalnego nośnika, ewentualnie w połączeniu ze środkiem do leczenia AIDS w skutecznej przeciwwirusowo ilości, przy czym środek ten jest wybrany z grupy obejmującej: (a) środek przeciwwirusowy przeciwko AIDS; (b) środek przeciwzakaźny; (c) immunomodulator; i (d) inhibitory wnikania HIV.
Ponieważ związki według niniejszego wynalazku mogą posiadać centra asymetrii oraz występowe w postaci mieszaniny diastereomerów i enancjomerów, niniejsze ujawnienie obejmuje poszczególne diastereoizomeryczne i enancjomeryczne formy związków według wynalazku oraz ich mieszaniny.
Fizjologicznie dopuszczalne sole związków tu ujawnionych mieszczą się w zakresie wynalazku. Stosowany tu i w zastrzeżeniach patentowych termin „farmaceutycznie dopuszczalna sól, zgodnie z zamiarem obejmuje nietoksyczne sole addycyjne z zasadami. Odpowiednie sole obejmują pochodzące od organicznych i nieorganicznych kwasów, takich jak, bez ograniczenia, kwas chlorowodorowy, kwas bromowodorowy, kwas fosforowy, kwas siarkowy, kwas metanosulfonowy, kwas octowy, kwas winowy, kwas mlekowy, kwas sulfinowy, kwas cytrynowy, kwas maleinowy, kwas fumarowy,
PL 219 566 B1 kwas sorbinowy, kwas akonitowy, kwas salicylowy, kwas ftalowy, itp. Stosowany tu termin „farmaceutycznie dopuszczalna sól, zgodnie z zamiarem obejmuje także sole grup kwasowych, takie jako karboksylan, z takimi przeciwjonami jak amoniowy, sole z metalem alkalicznym, szczególnie sodem lub potasem, metalem ziem alkalicznych, szczególnie wapniem lub magnezem, oraz sole z odpowiednimi organicznymi zasadami, takimi jak niższe alkiloaminy (metyloamina, etyloamina, cykloheksyloamina, itp.) lub z podstawionymi niższymi alkiloaminami (np. hydroksyloalkiloaminy, takie jak dietanoloamina, trietanoloamina lub tris-(hydroksymetylo)aminometano), lub z zasadami, takimi jak piperydyna lub morfolina.
Stosowany tu termin „ilość skuteczna przeciwwirusowo oznacza całkowitą ilość każdego aktywnego składnika według sposobu, która wystarcza do wykazania konkretnej korzyści u pacjenta, np. gojenie stanów ostrych charakteryzujące się ograniczaniem zakażenia HIV. W przypadku podawania samego aktywnego składnika osobnikowi, termin ten odnosi się do tego składnika. W przypadku stosowania połączenia, termin ten odnosi się do łącznych ilości aktywnych składników, powodujących efekt terapeutyczny, czy to podawanych w połączeniu, kolejno czy jednocześnie. Stosowane tutaj terminy „leczyć, leczenie, sposób leczenia” oznaczają zapobieganie lub łagodzenie choroby związanej z zakażeniem HIV.
Tak więc, wynalazek dotyczy także połączeń związków z jednym lub więcej środkami przydatnymi w leczeniu AIDS. Przykładowo, związki według wynalazku można skutecznie podawać, w okresach przed ekspozycją na wirus i/lub po ekspozycji, w połączeniu ze środkami przeciwwirusowymi przeciwko AIDS, immunomodulatorami, środkami przeciwzakaźnymi, lub szczepionkami w skutecznych ilościach, takimi jak te w poniższej tablicy.
Środki przeciwwirusowe
Nazwa leku Producent Wskazania
097 Hoechst/Bayer Zakażenie HIV, AIDS, ARC (nienukleozydowy inhibitor odwrotnej transkryptazy (RT))
Amprenawie 141 W94 GW 141 Glaxo Wellcome Zakażenie HIV, AIDS, ARC (inhibitor proteazy)
Abakawir (1592U89) GW 1592 Glaxo Wellcome Zakażenie HIV, AIDS, ARC (inhibitor RT)
Acemannan Acyklowir Carrington Labsa (Irving, TX) Burroughs Wellcome ARC Zakażenie HIV, AIDS, ARC, w połączeniu z AZT
AD-439 Tanox Biosystems Zakażenie HIV, AIDS, ARC
AD-519 Tanox Biosystems Zakażenie HIV, AIDS, ARC
Dipiwoksyl adefowiru AL.-721 Gilead Sciences Ethigen (Los Angeles, CA) Zakażenie HIV, ARC, HIV-dodatnie PGL, AIDS
Interferon alfa Glaxo Wellcome Mięsak Kaposi'ego, HIV, w połączeniu z Retrowirem
Ansamycyna LM 427 Adria Laboratories (Dublin, OH) Erbamont (Stamford, CT) ARC
Przeciwciało neutralizujące pHlabilny nietypowy interferon alfa Advanced Biotherapy Concepts (Rockville, MD) AIDS, ARC
AR 177 Aronex Pharm Zakażenie HIV, AIDS, ARC
Beta-fluoro-ddA Nat'l Cancer Institute Choroby związane z AIDS
BMS-232623 (CGP-73547) Bristol-Myers Squibb/Novartis Zakażenie HIV, AIDS, ARC (inhibitor proteazy)
PL 219 566 B1 cd. tabeli
BMS-234475 (CGP-61755) Bristol-Myers Squibb/Novartis Zakażenie HIV, AIDS, ARC (inhibitor proteazy)
CI-1012 Warner-Lambert Zakażenie HIV-1
Cydofowir Gilead Science Cytomegalowirusowe zapalenie siatkówki, opryszczka, wirus brodawczaka
Siarczan beta-1,3-glukanu (curdlan) AJI Pharma USA Zakażenie HIV
Immunoglobulina cytomegalowirusowa MedImmune Cytomegalowirusowe zapalenie siatkówki
Cytovene Syntex zagrożenie utraty wzroku
Gancyklowir CMV obwodowe cytomegalowirusowe zapalenie siatkówki
Delawirdyna Pharmacia-Upjohn Zakażenie HIV, AIDS, ARC (inhibitor RT)
Siarczan dekstranu Ueno Fine Chem. Ind. Ltd. (Osaka, Japonia) AIDS, ARC, HIV-dodatnie bezobjawowe
ddC Dideoksycytydyna Hoffman-La Roche Zakażenie HIV, AIDS, ARC
ddl Dideoksyinozyna Bristol-Myers Squibb Zakażenie HIV, AIDS, ARC; połączenie z AZT/d4T
DMP-450 AVID (Camden, NJ) Zakażenie HIV, AIDS, ARC (inhibitor proteazy)
Efawirenz (DMP 266) (-) 6-chloro-4-(S)cyklopropyletynylo-4 (S)trifluorometylo-1,4-dihydro-2H-3,1benzooksazyn-2-on, STOCRINE DuPont Merck Zakażenie HIV, AIDS, ARC (nienukleozydowy inhibitor RT)
EL10 Elan Corp, PLC (Gainesville, GA) Zakażenie HIV
Famcyklowir Smith Kline Półpasiec, opryszczka
FTC Emory University Zakażenie HIV, AIDS, ARC (inhibitor odwrotnej transkryptazy)
GS 840 Gilead Zakażenie HIV, AIDS, ARC (inhibitor odwrotnej transkryptazy)
HBY097 Hoechst Marion Roussel Zakażenie HIV, AIDS, ARC (nienukleozydowy inhibitor odwrotnej transkryptazy)
Hiperycyna VIMRx Pharm. Zakażenie HIV, AIDS, ARC
Rekombinowany ludzki interferon beta Triton Biosciences (Almeda, CA) AIDS, mięsak Kaposi'ego, ARC
Interferon alfa-n3 Interferon Sciences ARC, AIDS
Indinawir Merck Zakażenie HIV, AIDS, ARC, zakażenie bezobjawowe HIV-dodatnie, także w połączeniu z AZT/ddI/ddC
PL 219 566 B1 cd. tabeli
ISIS 2922 ISIS Pharmaceuticals Cytomegalowirusowe zapalenie siatkówki
KNI-272 Nat'l Cancer Institute Choroby związane z HIV
Lamiwudyna, 3TC Glaxo Wellcome Zakażenie HIV, AIDS, ARC (inhibitor odwrotnej transkryptazy); także razem z AZT
Lobukawir Bristol-Myers Squibb Zakażenie cytomegalowirusem
Nelfinawir Agouron Pharmaceuticals Zakażenie HIV, AIDS, ARC (inhibitor proteazy)
Newirapina Boeheringer Ingleheim Zakażenie HIV, AIDS, ARC (inhibitor RT)
Novapren Novaferon Labs, Inc. (Akron, OH) Inhibitor HIV
Oktapeptydowa sekwencja peptydu T Peninsula Labs (Belmont, CA) AIDS
Fosfonomrówczan trisodowy Astra Pharm. Products, Inc. Cytomegalowirusowe zapalenie siatkówki, zakażenie HIV, inne zakażenia CMV
PNU-140690 Pharmacia Upjohn Zakażenie HIV, AIDS, ARC (inhibitor proteazy)
Probukol Vyrex Zakażenie HIV, AIDS
RBC-CD4 Sheffield Med. Tech (Houston, TX) Zakażenie HIV, AIDS, ARC
Ritonawir Abbot Zakażenie HIV, AIDS, ARC (inhibitor proteazy)
Sakwinawir Hoffmann-LaRoche Zakażenie HIV, AIDS, ARC (inhibitor proteazy)
Stawudyna; d4T didehydrodeoksy- tymidyna Bristol-Myers Squibb Zakażenie HIV, AIDS, ARC
Walacyklowir Glaxo Wellcome Zakażenie narządów płciowych wirusem opryszczki i CMV
Virazole Rybawiryna Viratek/ICN (Costa Mesa, CA) Zakażenie bezobjawowe HIVdodatnie, LAS, ARC
VX-478 Vertex Zakażenie HIV, AIDS, ARC
Zalcytabina Hoffmann-LaRoche Zakażenie HIV, AIDS, ARC, razem z AZT
Zydowudyna; AZT Glaxo Wellcome Zakażenie HIV, AIDS, ARC, mięsak Kaposi'ego, w połączeniu z innymi terapiami
Sól Dumaranu dizoproksylu tenofowiru (Viread®) Gilead Zakażenie HIV, AIDS, (inhibitor odwrotnej transkryptazy)
Combivir® GSK Zakażenie HIV, AIDS, (inhibitor odwrotnej transkryptazy)
bursztynian abakawiru (czyli Ziagen®) GSK Zakażenie HIV, AIDS, (inhibitor odwrotnej transkryptazy)
REYATAZ® (czyli atazanawir) Bristol-Myers Squibb Zakażenie HIV, AIDS, inhibitor proteazy
FUZEON (czyli T-20) Roche/Trimeris Zakażenie HIV, AIDS, inhibitor fuzji wirusowej
PL 219 566 B1
Immunomodulatory
Nazwa leku Producent Wskazania
AS-101 Wyeth-Ayerst AIDS
Bropirymina Pharmacia Upjohn Zaawansowany AIDS
Acemannan Carrington Labs, Inc. (Irving, TX) AIDS, ARC
CL246, 738 American Cyanamid Lederle Labs AIDS, mięsak Kaposi'ego
EL10 Elan Corp, PLC (Gainesville, GA) Zakażenie HIV
FP-21399 Fuki ImmunoPharm Blokuje fuzję HIV z komórkami CD4+
Interferon gamma Genentech ARC, w połączeniu z TNF (czynnik martwicy nowotworu)
Czynnik pobudzający wzrost kolonii granulocytów i makrofagów Genetics Institute Sandoz AIDS
Czynnik pobudzający wzrost kolonii granulocytów i makrofagów Hoechst-Roussel Immunex AIDS
Czynnik pobudzający wzrost kolonii granulocytów i makrofagów Schering-Plogh AIDS, w połączeniu z AZT
Substancja immunostymulująca cząstki rdzeniowe HIV Rorer Serododatni HIV
IL-2 Interleukina-2 Cetus AIDS, w połączeniu z AZT
IL-2 Interleukina-2 Hoffman-LaRoche Immunex AIDS, ARC, HIV, w połączeniu z AZT
IL-2 Interleukina-2 (aldesleukina) Chiron AIDS, zwiększa liczbę komórek CD4
Dożylna postać immunoglobuliny (ludzkiej) Cutter Biological (Berkeley, CA) AIDS u dzieci, w połączeniu z AZT
IMREG-1 Imreg (New Orleans, LA) AIDS, mięsak Kaposi'ego, ARC, PGL
IMREG-2 Imreg (New Orleans, LA) AIDS, mięsak Kaposi'ego, ARC, PGL
Dietyloditiokarbaminian sodu (imutiol) Merieux Institute AIDS, ARC
Interferon alfa-2 Schering Plough Mięsak Kaposi'ego z AZT, AIDS
Metioninaenkefalina TNI Pharmaceutical (Chicago, IL) AIDS, ARC
MTP-PE Ciba-Geigy Corp. Mięsak Kaposi'ego
Muramylotripeptyd czynnik pobudzający wzrost kolonii granulacytów Amgen AIDS, w połączeniu z AZT
Remune Immune Response Corp. Środek immunoterapeutyczny
rCD4 rekombinowany rozpuszczalny ludzki CD4 Genentech AIDS, ARC
PL 219 566 B1 cd. tabeli
Hybrydy rDC4-IgG AIDS, ARC
Rekombinowany rozpuszczalny ludzki CD4 Biogen AIDS, ARC
Interferon alfa-2a Hoffman-LaRoche Mięsak Kaposi'ego AIDS, ARC, w połączeniu z AZT
SK&F106528 rozpuszczalny T4 Smith Kline Zakażenie HIV
Tymopentyna Immunobiology Research Institute (Annandale, NJ) Zakażenie HIV
Czynnik martwicy nowotworu; TNF Genentech ARC, w połączeniu z interferonem gamma
Środki przeciwzakaźne
Nazwa leku Producent Wskazanie
Klindamycyna z prymachiną Pharmacia Upjohn PCP
Flukonazol Pfizer Kryptokokowe zapalenie opon mózgowych, drożdżyca
Pastylka nystatyna w pastylce Squibb Corp. Zapobieganie drożdżycy jamy ustnej
Eflornityna ornidylu Merrell Dow PCP
Pentamidine isethionate (im oraz iv) LyphoMed (Rosemont, IL) Leczenie PCP
Trimetoprym Przeciwbakteryjny
Trimetoprym/sulfa Przeciwbakteryjny
Pirytreksym Burroughs Wellcome Leczenie PCP
Isetionat pentamidyny do inhalacji Fisons Corporation Profilaktyka PCP
Spiramycyna Rhone-Poulenc biegunka wywołana cryptosporidium
Intrakonazol R51211 Janssen-Pharm. Histoplazmoza; kryptokokowe zapalenie opon mózgowych
Trimetreksat Warner-Lambert PCP
Daunorubicyna NeXstar, Sequus Mięsak Kaposi'ego
Rekombinowana ludzka erytropoetyna Ortho Pharm. Corp. Ciężka anemia związana z leczeniem AZT
Rekombinowany ludzki hormon wzrostu Serono Wyniszczenie związane z AIDS, kacheksja
Octan megestrolu Bristol-Myers Squibb Leczenie anoreksji związanej z AIDS
Testosteron Alza, Smith Kline Wyniszczenie związane z AIDS
Całkowite żywienie dojelitowe Norwich Eaton Pharmaceuticals Biegunka i zaburzenia wchłaniania związane z AIDS
Ponadto, związki według wynalazku można stosować w leczeniu AIDS w połączeniu z inną klasą środków nazwanych inhibitorami wnikania HIV. Przykłady takich inhibitorów wnikania HIV omówiono w DRUGS OF THE FUTURE 1999, 24(12), str. 1355-1362; CELL, tom 9, str. 243-246, październik 29, 1999; i DRUG DISCOVERY TODAY, tom 5, nr 5, maj 2000, str. 183-194.
Powinno być zrozumiałe, że zakres połączeń związków według wynalazku ze środkami przeciwwirusowymi przeciwko AIDS, immunomodulatorami, środkami przeciwzakaźnymi, inhibitorami wni14
PL 219 566 B1 kania HIV lub szczepionkami nie jest ograniczony do listy w powyższej tablicy, ale obejmuje w zasadzie jakiekolwiek połączenie dowolnej kompozycji farmaceutycznej przydatne do leczenia AIDS.
Korzystnym połączeniem jest jednoczesne lub naprzemienne leczenie związkiem według wynalazku i inhibitorem proteazy HIV i/lub nienukleozydowym inhibitorem odwrotnej transkryptazy HIV. Ewentualnym czwartym składnikiem w tym połączeniu jest nukleozydowy inhibitor odwrotnej transkryptazy HIV, taki jak AZT, 3TC, ddC lub ddl. Korzystnym inhibitorem proteazy HIV jest indinawir, który jest siarczanem enolanu N-(2(R)-hydroksy-1-(S)-indanylo)-2(R)-fenylometylo-4-(S)-hydroksy-5-(1-(4-(3-pirydylometylo)-2(S)-N'-(t-butylokarboksarnido)piperazynylo))pentanoamidu który syntetyzuje się według opisu patentowego St. Zjedn. Ameryki nr. 5413 999. Indinawir jest na ogół podawany trzy razy dziennie w dawce 800 mg. Innymi korzystnymi inhibitorami proteaz są nelfinawir i ritonawir. Innym korzystnym inhibitorem proteazy HIV jest sakwinawir, który podaje się w dawce 600 lub 1200 mg trzy razy dziennie. Korzystne nienukleozydowe inhibitory odwrotnej transkryptazy HIV obejmują efawirenz. Wytwarzanie ddC, ddl i AZT opisano także w EPO 0484071. Połączenia te mogą mieć nieoczekiwany wpływ na ograniczenie rozprzestrzeniania i stopnień zakażenia HIV. Korzystne połączenia obejmują takie z następującymi związkami (1) indinawir z efawirenzem i, ewentualnie, AZT i/lub 3TC i/lub ddl i/lub ddC; (2) indinawir i dowolny z AZT i/lub ddl i/lub ddC i/lub 3TC, w szczególności, indinawir i AZT i 3TC; (3) stawudyna i 3TC i/lub zydowudyna; (4) zydowudyna i lamiwudyna i 141W94 i 1592U89; (5) zydowudyna i lamiwudyna.
W takich połączeniach związek według wynalazku i inny środek aktywny można podawać oddzielnie lub łącznie. Ponadto, podawanie jednej składowej może poprzedzać, być równoczesne, lub późniejsze względem podawania innego środka (innych środków).
Procedury preparatywne i aktywność przeciw HIV-1 związków według wynalazku podsumowano poniżej.
Stosowane skróty
W dalszym ciągu opisu wynalazku i przykładów stosuje się następujące skróty, z których większość stanowi typowe skróty, dobrze znane w dziedzinie. Pewne użyte skróty mają następujące znaczenia:
h = godzina (godziny) rt = temperatura pokojowa mol = mol (mole) mmol = milimol (milimole) g = gram (gramy) mg = miligram (miligramy) mL = mililitr (mililitry)
TFA = kwas trifluorooctowy
DCE = 1,2-dichloroetan
CH2CI2 = dichlorometan
TPAP = perrutenian tetrapropyloamoniowy
THF = tetrahydofuran
DEPBT = 3-(dietoksyfosforyloksy)-1,2,3-benzotriazyn-4(3H)-on
DMAP = 4-dimetyloaminopirydyna
P-EDC = 1-(3-dimetyloaminopropylo)-3-etylokarbodiimid na nośniku polimerowym
EDC = 1-(3-dimetyloaminopropylo)-3-etylokarbodiimid
DMF = N,N-dimetyloformamid
Zasada Hunig'a = N,N-diizopropyloetyloamina mCPBA = kwas meta-chloronadbenzoesowy azaindol = 1H-pirolopirydyna
4-azaindol = 1H-pirolo[3,2-b]pirydyna
5-azaindol = 1H-pirolo[3,2-c]pirydyna
6-azaindol = 1H-pirolo[2,3-c]pirydyna
7-azaindol = 1H-pirolo[2,3-b]pirydyna
PMB = 4-metoksybenzyl
DDQ = 2,3-dichloro-5,6-dicyjano-1,4-benzochinon
OTf = trifluorometanosulfonoksy
NMM = 4-metylomorfolina
PIP-COPh = 1-benzoilopiperazyna
PL 219 566 B1
NaHMDS = heksametylodisilazydek sodu
EDAC = 1-(3-dimetyloaminopropylo)-3-etylokarbodiimid
TMS = trimetylosilil
DCM = dichlorometan
DCE = dichloroetano
MeOH = metanol
THF = tetrahrdrofuran
EtOAc = octan etylu
LDA = diizopropylamidek litu
TMP-Li = 2,2,6,6-tetrametylopiperydynylolit
DME = dimetoksyetan
DIB ALH = wodorek diizobutyloglinu
HOBT = 1-hydroksybenzotriazol
CBZ = benzyloksykarbonyl
PCC = chlorochromian pirydyniowy
Me = metyl
Ph = fenyl
Synteza chemiczna
Wynalazek obejmuje związki według wynalazku, ich preparaty farmaceutyczne i ich zastosowanie u pacjentów cierpiących lub podatnych na infekcję HIV. Związki według wynalazku obejmują ich farmaceutycznie dopuszczalne sole.
Ogólne sposoby syntezy podstawionych azaindolopiperazynodiamidów według wynalazku i związków pośrednich przydatnych w ich syntezie przedstawia następujący schemat.
Schemat 1 przedstawia korzystną metodę wytwarzania związku według przykładu 1. Syntezę 2-hydroksy-3-nitro-5-fluoropirydyny 5-80 prowadzi się ogólnie metodami wskazanymi przez: A. Marfat i R.P. Robinson, opis patentowy St. Zjedn. Ameryki Płn. nr 5811432 (kolumna 25, przykład 5) i Nesnow i Heidleberger (J. Heterocyclic Chem. 1973, 10, str. 779), z tym wyjątkiem, że do każdego etapu wskazanego w opisie wprowadzono wiele poprawek. 2-hydroksy-5-fluoropirydyna 4-80 jest także dostępna na rynku. Wytwarzanie tetrafluoroboranu diazoniowego 2-80 z 5-amino-2-metoksypirydyny 1-80 przebiega z ilościową w zasadzie wydajnością i produkt oddziela się przez filtrację. Reakcja Schiemann'a przebiega z małą wydajnością pożądanej 2-metoksy-fluoropirydyny w warunkach opisanych w literaturze, a to głównie ze względu na znaczne zanieczyszczenie 3-fluoro-1-(N)-metylopirydonem, i innymi produktami ubocznymi. Jednakże, przystosowanie procedury podobnej do tej, którą opisał Sanchez, J. P.; Rogowski, J. W.; J Heterocycl Chem 1987, 24, 215, dla pokrewnego związku daje z bardzo dużymi wydajnościami w zasadzie czystą, lecz lotną 2-metoksy-5-fluoropirydynę 3-80 w postaci roztworu w toluenie. Dla celów badawczych, demetylowanie przeprowadzono w dużej skali, stosując wodny roztwór HCl w butlach ciśnieniowych w temperaturze 140°C w ciągu 1 godziny. Przed ogrzewaniem, roztwór toluenu mieszano z wodnym roztworem HCl, a następnie toluen usunięto przez dekantację. Wskazana w literaturze metoda przeprowadzenia tego etapu z zastosowaniem HBr w temperaturze 100°C zapewniła powodzenie w małej skali i stworzyła zaletę uniknięcia stosowania butli ciśnieniowych. Nitrowanie związku 4-80 opisane przez Marfat'a przebiega z mniejszymi niż oczekiwano wydajnościami, a zatem procedurę nieznacznie zmodyfikowano, stosując wytyczne, które podał A.G. Burton, P.J. Hallis, i A.R. Katritzky (Tetrahedron Letters 1971, 24, 2211-2212), w zakresie kontroli konfiguracji regiostereochemicznej podczas nitrowania pirydonów, poprzez zmiany kwasowości środowiska. Wydajności 2-hydroksy-3-nitro-5-fluoropirydyny 5-80 zostały znacznie poprawione przez zastosowanie procedury, opisanej w części doświadczalnej. Sporadycznie produkt nie wytrącał się podczas obróbki i wówczas konieczne były znaczne nakłady w celu wydzielenia silnie rozpuszczalnego w wodzie związku z warstwy wodnej. Stosując POBr3 z dużym nadmiarem, związek 5-80 przekształcono w 2-bromo-3-nitro-5-fluoropirydynę 6, którą można stosować bez dalszego oczyszczania w późniejszej reakcji tworzenia azaindolu. Dodanie pirydyny 6 do bromku winylomagnezu (nadmiar) w THF w niskiej temperaturze daje pożądany 4-fluoro-7-bromo-6-azaindol (prekursor 2i) z wydajnościami do 35%, po obróbce kwasem i wydzieleniu metodą krystalizacji. Niedogodnością tej metody jest trudna obróbka z powodu dużych ilości soli powstających jako produkty uboczne i mała konwersja do czystego produktu. Reakcja jest także egzotermiczna i dlatego wymaga dużej uwagi przy realizacji w dużej skali. Pomimo umiarkowanych wydajności, jak wymieniono powyżej reakcja przebiega z dużą czystością, dając czysty prekursor 2i bez stosowania chromatografii, dzięki czemu oczekuje
PL 219 566 B1 się, że bardziej szczegółowe badania jej chemizmu doprowadzą do zwiększenia wydajności. Selektywne podstawienie pochodnej 7-bromowej dostępnym na rynku 1,2,3-triazolem, z zastosowaniem układu miedź/węglan potasu, daje mieszaninę triazoli w stosunku około 1:1, z której związek 7-80 wydziela się chromatograficznie z wydajnością 25-35%. W celu przeprowadzenia podobnych przekształceń można raczej stosować sproszkowany bronz zamiast sproszkowanej miedzi. Nie można dopuścić do przegrzania w trakcie tej reakcji gdyż może przebiegać, co jest obserwowane, jednoczesne podstawienie atomu fluoru. Acylowanie przebiega najskuteczniej w warunkach, w których z nadmiarem wykorzystuje się jonową ciecz zakwaszonego chloroglinianu imidazoliowego, z wytworzeniem silnie zaktywowanego odczynnika glioksylującego (K.S. Yeung i in. Tetrahedron Lett. 2002, 43, 5793). Acylowanie związku 7-80 zazwyczaj nie przebiega do końca i zazwyczaj osiąga się konwersję około 75% (na podstawie pomiaru LC/MS). Zaletą takiego prowadzenia reakcji jest to, że typowy następny etap, tj. hydroliza estru przebiega in situ dając pożądany kwas 8-80, który wydziela się bezpośrednio przez wytrącanie podczas dalszej obróbki. Stwierdzono, że sprzęganie piperazynobenzamidu zachodzi z większą czystością i większymi wydajnościami związku według przykładu 1, z zastosowaniem raczej sprzęgania przy użyciu wskazanego HATU niż innych standardowych reagentów sprzęgania, takich jak EDC i DEPBT.
PL 219 566 B1
Prekursor 2a
Typowa procedura wytwarzania azaindolu z nitropirydyny: wytwarzanie 7-chloro-6-azaindolu, prekursora 2a. 2-Chloro-3-nitropirydynę (5,0 g, 31,5 mmola) rozpuszczono w suchym THF (200 ml). Następnie roztwór ochłodzono do temperatury -78°C i wkroplono bromek winylomagnezu (1,0M
PL 219 566 B1 w THF, 100 ml). Mieszaninę reakcyjną utrzymywano w temperaturze -78°C przez 1 godzinę, i następnie w temperaturze -20°C przez jeszcze 12 godzin, po czym reakcję zatrzymano dodając 20% wodny roztwór NH4CI (150 ml). Fazę wodną ekstrahowano EtOAc (3 x 150 ml). Połączone warstwy organiczne osuszono nad MgSO4, przesączono i przesącz zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, uzyskując pozostałość, którą oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (EtOAc/heksan, 1/10), uzyskując 1,5 g (31%) 7-chloro-6-azaindolu, prekursora 2a.
1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 7,84 (d, 1H, J=10,7 Hz), 7,55 (dd, 1H, J=10,9, 5,45 Hz), 6,62 (d, 1H, J=5,54 Hz), 4,89 (s, 1H). MS m/z: (M+H)+ obliczone dla C7H5CIN2: 153,02; znalezione 152,93. HPLC czas retencji: 0,43 minuty (kolumna A).
Prekursor 2d
Prekursor 2d, 4-fluoro-7-chloro-6-azaindol (powyżej), wytworzono według następującego schematu:
A) dymiący HNO3, H2SO4;
B) POCI3/DMF, 110°C;
C) bromek winylomagnezu, THF, -78°C do -20°C
Należy zwrócić uwagę, że 2-chloro-5-fluoro-3-nitropirydynę, zz3', można wytworzyć sposobem opisanym w przykładzie 5B jak opisał Marfat, A.; i Robinson, R. P.; ,,Azaoxindole Derivatives zgłoszenie St. Zjedn. Ameryki nr 5811432 z 1998. Poniżej opisano szczegółowo pewne rozwiązania, które zwiększają wydajność tej metody.
Według etapu A, związek zz1' (1,2 g, 0,01 mola) rozpuszczono w kwasie siarkowym (2,7 ml) w temperaturze pokojowej. Wstępnie zmieszany dymiący kwas azotowy (1 ml) i kwas siarkowy wkroplono w temperaturze 5-10°C do roztworu związku zz1'. Mieszaninę reakcyjną następnie ogrzewano w temperaturze 85°C przez 1 godzinę, ochłodzono do temperatury pokojowej i wylano na lód (20 g). Żółty osad zebrano przez filtrację, przemyto wodą i osuszono powietrzem, uzyskując 1,01 g związku zz2'.
Według etapu B, związek zz2' (500 mg, 3,16 mmola) rozpuszczono w tlenochlorku fosforu (1,7 ml, 18,9 mmola) i dimetoksyetanie w temperaturze pokojowej. Mieszaninę reakcyjną ogrzewano w temperaturze 110°C przez 5 godzin. Nadmiar tlenochlorku fosforu następnie usunięto przez zatężenie mieszaniny pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość poddano chromatografii na żelu krzemionkowym, eluowano chloroformem (100%), uzyskując 176 mg produktu zz3'.
Według etapu C, związek zz3' (140 mg, 0,79 mmola) rozpuszczono w THF (5 ml) i ochłodzono do temperatury -78°C w atmosferze azotu. Do tego roztworu wkroplono roztwór bromku winylomagnezu (1,2 mmola, 1,0M w eterze dietylowym, 1,2 ml). Mieszaninę reakcyjną następnie utrzymywano w temperaturze -20°C przez 15 godzin, a następnie reakcję zatrzymano nasyconym chlorkiem amonu i mieszaninę ekstrahowano octanem etylu. Połączone warstwy organiczne przemyto solanką, osuszono nad siarczanem magnezu, przesączono i przesącz zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość poddano chromatografii z zastosowaniem krzemionki, uzyskując 130 mg prekursora 2d.
PL 219 566 B1 1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 7,78 (s, 1H), 7,60 (d, 1H, J=3,0 Hz), 6, 71 (d, 1H, J=3,05 Hz). MS m/z: (M+H)+ obliczone dla C7H5CIFN2: 171,10; znalezione 171,00. HPLC czas retencji: 1,22 minuty (kolumna A).
Prekursor 2d, 4-fluoro-7-chloro-6-azaindol, wytworzono postępując według takiej samej metody jak dla prekursora 2a, wychodząc z 2-chloro-3-nitro-5-fluoropirydyny, którą wytworzono według powyższej procedury. Eksperymentalne szczegóły tego wytwarzania podał Wang i inni w zgłoszeniu
PCT WO 01/62255.
1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 7,78 (s, 1H), 7,60 (d, 1H, J=3,0 Hz), 6,71 (d, 1H, J=3,05 Hz). MS m/z: (M+H)+ obliczone dla C7H5CIFN2: 171,10; znalezione 171,00. HPLC czas retencji: 1,22 minuty (kolumna A).
Prekursor 2e wytworzono stosując poniższą metodę A lub metodę B:
Metoda A: mieszaninę 4-bromo-7-chloro-6-azaindolu (1 g), CuI (0,65 g) i NaOMe (4 ml, 25% w metanolu) w MeOH (16 ml) ogrzewano w uszczelnionej rurce, w temperaturze 110-120°C, przez 16 godzin. Po oziębieniu do temperatury pokojowej, mieszaninę reakcyjną zobojętniono stosując 1N HCl do pH 7. Wodny roztwór ekstrahowano EtOAc (3 x 30 ml). Następnie połączone warstwy organiczne osuszono nad MgSO4, przesączono i przesącz zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, uzyskując pozostałość, którą oczyszczono metodą chromatografii na żelu krzemionkowym, uzyskując 0,3 g 4-metoksy-7-chloro-6-azaindolu, prekursora 2e. MS m/z: (M+H)+ obliczone dla C8H8ClN2O: 183,03; znalezione 18 3,09. HPLC czas retencji: 1,02 minuty (kolumna B).
Metoda B: mieszaninę 4-bromo-7-chloro-6-azaindolu (6 g), CuBr (3,7 g) i NaOMe (30 ml, 5% w MeOH) ogrzewano w uszczelnionej rurce, w temperaturze 110°C, przez 24 godziny. Po oziębieniu do temperatury pokojowej, mieszaninę reakcyjną dodano do nasyconego wodnego roztworu NH4Cl. Uzyskany wodny roztwór ekstrahowano EtOAc (3 x 30 ml). Połączone warstwy organiczne osuszono nad MgSO4, przesączono i przesącz zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, uzyskując pozostałość, którą oczyszczono metodą chromatografii na żelu krzemionkowym, uzyskując 1,8 g 4-metoksy-7-chloro-6-azaindolu, prekursora 2e.
Prekursor 2i, 4-fluoro-7-bromo-6-azaindol, wytworzono postępując według takiej samej metody jak dla prekursora 2e, stosując POBr3 w etapie B zamiast POCl3. MS m/z: (M+H)+ obliczone dla C7H5BrFN2: 214,96; znalezione 214,97. HPLC czas retencji: 1,28 minuty (kolumna G).
Prekursor 3a
PL 219 566 B1
Typowa procedura acylowania azaindolu: wytwarzanie (7-chloro-6-azaindol-3-ilo)oksooctanu metylu. 7-Chloro-6-azaindol, prekursor 2a (0,5 g, 3,3 mmola) dodano do zawiesiny AlCl3 (2,2 g, 16,3 mmola) w CH2CI2 (100 ml). Mieszanie kontynuowano w temperaturze pokojowej przez 10 minut, po czym wkroplono chlorooksooctan metylu (2,0 g, 16,3 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 8 godzin. Reakcję zatrzymano oziębionym lodem wodnym roztworem NH4OAc (10%, 200 ml). Fazę wodną ekstrahowano CH2CI2 (3 x 100 ml). Połączone warstwy organiczne osuszono nad MgSO4, przesączono i przesącz zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, uzyskując pozostałość, którą stosowano w następnym etapie bez dalszego oczyszczania. Prekursor 3a, (7-chloro-6-azaindol-3-ilo)oksooctan metylu: MS m/z: (M+H)+ obliczone dla C10H8CIN2O3: 239,02; znalezione 238,97. HPLC czas retencji: 1,07 minuty (kolumna A).
Typowa procedura hydrolizy estru: wytwarzanie (7-chloro-6-azaindol-3-ilo)oksooctanu potasu, prekursora 4a. Surowy (7-chloro-6-azaindol-3-ilo)oksooctan metylu, prekursor 3a, i K2CO3 w nadmiarowej ilości (2 g) rozpuszczono w MeOH (20 ml) oraz H2O (20 ml). Po upływie 8 godzin, roztwór zatężono i pozostałość oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym, uzyskując 200 mg (7-chloro-6-azaindol-3-ilo)oksooctanu potasu. MS m/z: (M+H)+ wskazuje odpowiedni kwas. Obliczone dla C9H5CIN2O3: 225,01; znalezione 225,05. HPLC czas retencji: 0,83 minuty (kolumna A).
Prekursor 5a
Typowa procedura sprzęgania pochodnej piperazyny i kwasu azaindolowego: wytwarzanie
1-benzoilo-3-(R)-metylo-4-[(7-chloro-6-azaindol-3-ilo)oksoacetylo]piperazyny, prekursora 5. 7-chloro-6-azaindolo-3-glioksylan potasu, prekursor 4a, (100 mg, 0,44 mmola), 3-(R)-metylo-1-benzoilopiperazynę (107 mg, 0,44 mola), 3-(dietoksyfosforyloksy)-1,2,3-benzotriazyn-4(3H)-on (DEPBT) (101 mg, 0,44 mola) i zasadę Hunig'a (diizopropyloetyloamina, 0,5 ml) połączono w 5 ml DMF. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 8 godzin. DMF usunięto poprzez odparowanie pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość oczyszczono metodą preparatywnej HPLC z zastosowaniem zautomatyzowanego systemu Shimadzu'ego, uzyskując 1-(benzoilo)-3-(R)-metylo-4-[(7-chloro-6-azaindol-3-ilo)oksoacetylo]piperazynę (70 mg, 39%). MS m/z: (M+H)+ obliczone dla C21H20CIN4O3: 411,12; znalezione 411,06. HPLC czas retencji: 1,32 minuty (kolumna A).
Prekursor 5b
PL 219 566 B1
Prekursor 5b, 1-benzoilo-4-[(7-chloro-4-metoksy-6-azaindol-3-ilo)oksoacetylo]piperazynę, wytworzono postępując według takiej samej metody jak dla prekursora 5a, wychodząc z (7-chloro-4-metoksy-6-azaindol-3-ilo)oksooctanu potasu, prekursora 4d, oraz 1-benzoilopiperazyny. MS m/z:
(M+H)+ obliczone dla C21H20CIN4O4: 427,12; znalezione 427,12. HPLC czas retencji: 1,28 minuty (kolumna A).
Po dodaniu do roztworu trichlorku glinu w dichlorometanie, mieszając, w temperaturze otoczenia, prekursora 2d, a następnie po upływie 30 minut, szczawianu chlorometylu lub chloroetylu (zgodnie ze sposobem opisanym dla prekursora 3a) otrzymano odpowiednio ester metylowy lub etylowy. Po hydrolizie z zastosowaniem KOH (według typowej procedury hydrolizy opisanej dla prekursora 4a) otrzymano (7-chloro-4-fluoro-6-azaindol-3-ilo)oksooctan potasu. (7-chloro-4-fluoro-6-azaindol-3-ilo)oksooctan potasu następnie poddano reakcji z 1-benzoilopiperazyną w obecności DEPBT w warunkach standardowych (jak opisano dla prekursora 5a) z wytworzeniem 1-benzoilo-4-[(4-fluoro-7-chloro-6-azaindol-3-ilo)oksoacetylo]piperazyny, prekursora 5i. 1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 8,40 (s, 1H),
8,04 (s, 1H), 7,46 (bs, 5H), 3,80-3,50 (m, 8H); LC/MS (ES+) m/z (M+H)+ 415 obserwowano; czas retencji 1,247 minuty; LC/MS metoda: YMC ODS-A C18 S7 3,0 x 50 mm kolumna; początek %B=0, koniec %B=100, czas stosowania gradientu = 2 minuty; szybkość przepływu: 5 ml/minutę; detektor długości fal = 220 nm.
P r z y k ł a d 1
Związek według przykładu 1 wytworzono z prekursora 5i i 1,2,3-triazolu zgodnie z procedurą opisaną powyżej. 1H NMR (500 MHz, CDCl3): 11,16 (bs, 1H); 8,75 (s, 1H); 8,37-8,37 (s, 1H); 8,15 (s, 1H); 7,92 (s, 1H); 7,43 (bs, 5H); 3,99-3,48 (m, 8H). LC/MS: (ES+) m/z (M+H)+=448. Rt=1,28 minuty.
PL 219 566 B1
Eksperymentalne metody syntezy stosowane do korzystnego wytwarzania związku według przykładu 1 (schemat 1)
Do mieszanej mieszaniny absolutnego etanolu (280 ml) i HBF4 (48% w wodzie, 172 ml) dodano 5-amino-2-metoksypirydynę (50 g, 0,4 mola) i roztwór ochłodzono do temperatury 0°C. W wodzie (52 ml) rozpuszczono azotyn sodu (129 g) i dodano porcjami w czasie 1 godziny. Mieszanie kontynuowano w temperaturze 0°C przez 2 godziny. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono eterem (1 I). Ciało stałe zebrano przez filtrację i przemyto 500 ml mieszaniny 50:50 EtOH/eter i później kilka razy eterem do uzyskania słabo różowawej barwy produktu. Jasnoróżowe ciało stałe 90 g (około 100% wydajność) trzymano w desykatorze nad P2O5.
Taką samą procedurę stosowano, aby przeprowadzić reakcję na większą skalę:
(1) (200 g, 1,6 mola); HBF4 (688 ml); NaNO2 (116 g); EtOH (1,12 I); H2O (208 ml)
Reakcję prowadzono 4 razy (ogółem 800 gram (1-80)). Produkt suszono nad P2O5 przez 48 godzin. (Pierwszy zbiór tylko 24 godziny).
Ogółem otrzymano 1,293 g związku (2-80), (91% wydajność).
Ref: J. Heterocyclic Chem., 10, 779, 1973 (dla powyższych reakcji, obejmuje dane analityczne)
Rozkład soli diazoniowej prowadzono w 3 porcjach:
206 g, 219 g i 231 g stosując odpowiednio 1,3 I, 1,4 I i 1,6 I bezwodnego toluenu.
Toluen wstępnie ogrzano w atmosferze azotu do temperatury 100°C (temperatura wewnętrzna) w 2 I trójszyjnej okrągłodennej kolbie wyposażonej w mieszadło mechaniczne. Ciało stałe dodano porcjami łyżeczką poprzez lejek do proszku, który przyłączono do adaptera utrzymując nieznaczny
PL 219 566 B1 przepływ azotu. Podczas dodawania, temperaturę utrzymywano pomiędzy 99-102°C (ustawiono na 100°C) i energicznie mieszano. Całkowity czas dodawania wynosił 60 minut dla dwóch mniejszych porcji oraz 70 minut dla ostatniej. Po dodaniu, każdą mieszaninę reakcyjną ogrzewano w temperaturze 110°C przez 1 godzinę. Płaszcz grzewczy usunięto i mieszanie zatrzymano. Mieszaniny pozostawiono do odstania na czas 2 godzin (temperatura otoczenia). Należy zwrócić uwagę na to, że mieszanina zawierała BF3, więc praca z gorącą mieszaniną spowodowała podrażnienie skóry u niektórych ludzi wystawionych na działanie pary. Nie odnotowano takich przypadków prowadząc reakcję w temperaturze otoczenia (6 różnych osób). Gorący toluen z mieszaniny reakcyjnej wylano do 4 I kolby Erlenmeyer'a (ciemnobrunatny olej i pozostałość pozostały w kolbie). Pozostałość przemyto 50 ml toluenu i wylano do pierwotnych ekstraktów toluenu.
Do warstwy toluenu dodano 1,5 I 1N NaOH, ekstrahowano i przemyto około 100 ml nasyconego roztworu NaCl.
NaCl połączono z warstwą NaOH, ponownie ekstrahowano 150 ml toluenu, przemyto 50 ml nasyconego roztworu NaCl.
Połączono warstwy toluenu.
Dodano 1 I 1N NaOH do pozostałości w kolbie reakcyjnej i odwirowano w celu rozpuszczenia możliwie największej ilości pozostałości, a następnie dodano 500 ml Et2O i zlano do kolby Erlenmeyer'a.
Do kolby dodano jeszcze około 500 ml 1N roztworu NaOH i odwirowano z około 500 ml Et2O.
W kolbie Erlenmyer'a połączono ciemny roztwór Et2O i popłuczyny NaOH.
Mieszaninę Et2O/Na0H wylano poprzez lejek do proszku z wkładem z waty szklanej, w celu zebrania ciemnego lepkiego ciała stałego. W celu przemycia do 6 I rozdzielacza dodano jeszcze około 500 ml eteru.
Ekstrahowano. Warstwę eterową przemyto około 200 ml H2O i następnie 100 ml nasyconego roztworu NaCl.
Wszystkie popłuczyny połączono z pierwotnym wodnym roztworem NaOH i ponownie ekstrahowano 500 ml eteru. Przemyto 100 ml H2O i 100 ml NaCl.
Połączono ekstrakty eterowe. Ekstrakty toluenu i eteru zanalizowano pod względem czystości metodą LC/MS.
Eter zatężono w wyparce obrotowej i pozostałość połączono z ekstraktami toluenu w celu wytworzenia homogenicznego roztworu, który stosowano w następnym etapie jako taki.
Następne dwa rzuty połączono i poddano obróbce takim samym sposobem. Wszystkie warstwy wodne zanalizowano metodą LC/MS = brak produktu.
Ref: J. Heterocyclic Chem., 10, 779, 1973 (dla powyższych reakcji, obejmuje dane analityczne)
Ogółem 4,6 I roztworu toluenu zawierającego związek 3-80 umieszczono w kilku uszczelnionych rurkach i traktowano 900 ml 35% HCl w temperaturze 145°C przez 2 godziny. Analizy LC/MS wykazały brak obecności substancji wyjściowej, tylko 4. Roztwór toluenu zdekantowano i odrzucono. Fazę wodną przemyto EtOAc i zatężono w celu usunięcia części lotnych, uzyskując brunatne ciało stałe zawierające pożądaną fluorohydroksypirydynę 4-80.
Ogółem zebrano 244 g tego ciała stałego i stosowano w następnym etapie jako takie (nie było ono całkowicie suche).
Należy zwrócić uwagę na to, że po tym doświadczeniu zdekantowano warstwę toluenu przed ogrzewaniem w celu zmniejszenia objętości. Taką samą reakcję prowadzono z zastosowaniem HBr (48% w H2O) w temperaturze 100°C przez 6 godzin z podobnym wynikiem jak otrzymano według procedury opisanej w literaturze, wydajność 49%.
Ref: J. Heterocyclic Chem., 10, 779, 1973 (dla powyższych reakcji, obejmuje dane analityczne)
PL 219 566 B1
Ciało stałe otrzymane powyżej (4-80) podzielono na 4 porcje i potraktowano H2SO4 oraz dymiącym HNO3 jak pokazano poniżej. Stosowane ilości:
porcja 1 porcja 2 porcja 3 porcja 4
(1) 25 g 54 g 75 g 90 g
dymiący HNO3 20,8 ml 45 ml 62,4 ml 75 ml
H2SO4 (dodany) 5,6 ml+ 12 ml+ 16,8 ml+ 20 ml+
(do rozpuszczenia) 56 ml 120 ml 168 ml 200 ml
Związek 4-80 rozpuszczono w kwasie siarkowym (większe ilości od wskazanych powyżej) w temperaturze pokojowej i następnie ogrzano do temperatury 65°C. Wkroplono przygotowany wcześniej roztwór dymiącego kwasu azotowego i kwasu siarkowego (mniejsze ilości od wskazanych powyżej). Temperaturę utrzymywano pomiędzy 65°C i 80°C (przebieg był egzotermiczny i chociaż temperatura łaźni wynosi 65°C, temperatura zwiększa się, zazwyczaj do 75°C, czasem 80°C). Po zakończeniu dodawania, mieszaninę reakcyjną ogrzewano w temperaturze 65°C jeszcze przez godzinę. Mieszaninę reakcyjną następnie ochłodzono do temperatury pokojowej i wylano do kolby zawierającej lód) (20 g lodu/gram związku, nastąpiło wydzielanie się gazu). Ciało stałe wytrącono i zebrano przez filtra1 cję (1HNM wykazały obecność związku 4-80 i innych substancji (odrzuconych)).
Warstwę wodną kilka razy ekstrahowano AcOEt (3-5) i zatężono w wyparce obrotowej pod zmniejszonym ciśnieniem, uzyskując ciało stałe, które roztarto z eterem, uzyskując związek 5-80 w postaci jasnożółtego ciała stałego. Ogółem w pierwszym zbiorze zebrano 117 g pożądanego produktu (wydajność 27% z soli diazoniowej). Część nie krystalizowała: ten olej roztarto z MeOH i Et2O, uzyskując 3,6 g związku 5-80; po innym wytrąceniu z cieczy macierzystej uzyskano dodatkowe 6,23 g pożądanego produktu, związku 5-80.
Ogółem: 117,0+3,6+6,23=126,83. 30,4%). Wydajność w 3 etapach (rozkład soli diazoniowej; odbezpieczenie i nitrowanie).
Zarejestrowane dane analityczne: 53877-115: 1H NMR (δ, MeOD) : 8,56-8,27 (dd, J=7,5, 3,3
Hz, 1H) , 8,01 (d, J=3,3 Hz, 1H); LC/MS (M+1)+=158,9; Rt=0,15 minuty.
Należy zwrócić uwagę na to, że część wodnego roztworu kwasu zabrano i zobojętniano Na2CO3 do zaniku wydzielania się gazu i następnie ekstrahowano AcOEt. Otrzymano różne produkty. Nie wykryto pożądanego produktu w tych ekstraktach.
Ogółem 117 g związku 5-80 podzielono na 4 porcje: 30 g x 3 i 27 g x 1, potraktowano POBr3 (3 równoważniki; 163 g x 3 i 155 g x 1) i DMF w katalitycznej ilości (15 ml), w temperaturze pokojowej (DMF dodano ostrożnie, wydzielał się gaz). Po upływie 5 minut w temperaturze pokojowej, roztwory ogrzewano w temperaturze 110°C przez 3 godziny. Analizy LC/MS wykazały zużycie substancji wyjściowych. Mieszaniny reakcyjne pozostawiono do ochłodzenia do temperatury pokojowej. Kolby umieszczono w łaźni lodowej i następnie bardzo powoli i ostrożnie porcjami dodano lód, z uwagi na
PL 219 566 B1 powstawanie HBr wydzielał się gaz; otrzymaną ciecz i czarne ciało stałe wylano do zlewki z lodem. Dodano EtOAc i mieszaninę następnie ekstrahowano kilka razy EtOAc. Warstwę organiczną przemyto nasyconym wodnym roztworem NaHCO3; H2O i solanką; osuszono nad Na2SO4 i przesączono. Produkt suszono stosując pompę w czasie nocy, uzyskując 123 g związku 6-80 w postaci brunatnego ciała stałego (wydajność 77%).
Należy zwrócić uwagę na to, że reakcję zakończono w ciągu 1 godziny.
1H NMR (δ, CDCl3): 8,52 (m, 1H), 7,93 (m, 1H).
800 ml bromku winylomagnezu (1M w THF, Aldrich) ochłodzono do temperatury poniżej -60°C energicznie mieszając w atmosferze azotu. Przez wkraplacz wkroplono 2-bromo-5-fluoro-3-nitropirydynę (43,3 g, 0,196 mola) w 200 ml THF, z taką szybkością, aby temperatura reakcji utrzymywała się poniżej -60°C. Zajęło to około 1,25 godziny. Mieszaninę reakcyjną ogrzano do temperatury -40 do -50°C i mieszano jeszcze przez 1 godzinę. Następnie powoli i ostrożnie dodano 1 I nasyconego wodnego roztworu NH4Cl. Początkowo nastąpiło pienienie i było obecne ciało stałe, lecz w istocie uległo rozpuszczeniu wraz z zakończeniem dodawania i substancję ogrzano do temperatury pokojowej. Warstwy oddzielono i warstwę wodną ekstrahowano 3 razy octanem etylu. Organiczne ekstrakty przemyto solanką, osuszono nad Na2SO4 przesączono i zatężono uzyskując około 50 g czarnego gumowego ciała stałego. HPLC wykazała 57-58% produktu. Do tego dodano CH2Cl2 i ciało stałe zebrano przez filtrację oraz przemyto CH2Cl2, uzyskując 12,5 g produktu w postaci brunatnego ciała stałego. Reakcję powtórzono dokładnie w takiej samej skali i produkt poddano obróbce w taki sam sposób. Po roztarciu z CH2Cl3 otrzymano 12,4 g prekursora 2i (czystość według HPLC 97%). Surowy produkt odzyskano i pozostawiono do odstania w dichlorometanie. Po odstaniu oddzielono jeszcze 3,6 g produktu i oddzielono metodą filtracji.
Wydajność całkowita = 29,5 g (35%).
1H NMR (δ, CDCl3): 8,69 (bs, 1H), 7,92 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,41 (m, 1H), 6,77 (m, 1H); LC/MS (M+1)+=216.-217,9; Rt=1,43 minuty.
PL 219 566 B1
Mieszaninę reakcyjną umieszczono w 250 ml kolbie (po ogrzaniu wystąpiło pienienie, więc korzystne jest zastosowanie kolby o dużym rozmiarze). Mieszaninę prekursora 2i (3 g, 13,95 mmola), 1,2,3-triazolu (15 g, 217,6 mmola, 15 równoważników, K2CO3 (1,9 g, 13,95 mmola, 1 równoważnik) i Cu(O) (0,9 g, 13,9 mmola, 1 równoważnik) ogrzewano w temperaturze 160°C przez 7 godzin (od temperatury pokojowej do 160°C, ogółem 7 godzin) w atmosferze azotu (zależnie od jakości Cu(O), czas reakcji może zmieniać się od 2 godzin do 7 godzin). Uzyskaną mieszaninę rozcieńczono MeOH, przesączono przez bibułę filtracyjną (w celu usunięcia miedci). Przemyto MeOH (20 ml) i wodą (30 ml).
Przesącz zatężono (rozpuszczalnik usunięto w wyparce obrotowej) i rozcieńczono octanem etylu. Warstwę wodną ekstrahowano octanem etylu. Połączone warstwy organiczne osuszono nad siarczanem sodu, przesączono i zatężono. Pozostałość rozpuszczono w MeOH (20 ml), związek 7-80 (750 mg) wykrystalizowano z metanolu w postaci białego ciała stałego i zebrano przez filtrację. (Gradient o małej objętości, żel krzemionkowy heksan/AcOEt (0->18%) macierzystej cieczy zazwyczaj daje 5-10% więcej związku 7-80.
1H NMR (δ, CDCl3): 10,47 (bs, 1H), 8,76 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7, 89 (s, 1H), 7,53 (m, 1H), 6,78 (m, 1H); LCMS (M+1)+=204; Rt=1,29 minuty.
Chlorek etylometyloimidazolu (4,3 g, 29,6 mmola, 3 równoważniki) umieszczono w 250 ml kolbie. Do kolby w jednej porcji dodano AlCl3 (11,8 g, 8 8,6 mmola, 9 równoważników). Powstała ciekła zawiesina (część AICI3 pozostała w formie ciała stałego). Po wymieszaniu przez 5-10 minut związek (1) (2,0 g, 9,85 mmola) dodano w jednej porcji, a następnie powoli dodano (za pomocą strzykawki) chlorooksaloctan etylu (3,3 ml, 29,6 mmola, 3 równoważniki). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 20 godzin. Analiza LCMS wykazała obecność związku 8-80 oraz związku 7-80 w stosunku 6:2. (Związek I wykazywał silną absorpcję UV). Reakcję zatrzymano ostrożnie dodając wodę z lodem (około 75 ml) w temperaturze 0°C, czemu towarzyszyło wytrącenie żółtego ciała stałego. Uzyskaną zawiesinę przesączono i ciało stałe przemyto wodą. MeOH, octan etylu (w celu usunięcia nieprzereagowanego SM) i ciało stałe osuszono w powietrzu. (czystość zbadana metodą LCMS 70% do 80%). Otrzymano 2 g ciała stałego zawierającego związek 8-80, który stosowano w następnym etapie bez dalszego oczyszczania. LCMS (M+1)+=276; Rt=0,97 minuty.
Mieszaninę związku 8-80 (4,9 g, 17,8 mmola) i chlorowodorku N-benzoilopiperazyny 8a-80 (chlorowodorek; 6,0 g, 26,7 mmola, 1,5 równoważnika) w DMF (30 ml) mieszano w temperaturze poPL 219 566 B1 kojowej przez noc (16 godzin). Powstała rzadka zawiesina, do której dodano jeszcze 20 ml DMF. Dodano HATU (12,2 g, 26,7 mmola, 1,5 równoważnika), a następnie DMAP (4,3 g, 35,6 mmola, 2 równoważniki). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 30 minut. Analiza LCMS wykazała, że substancja wyjściowa 8-80 została całkowicie przekształcona w produkt (przykład 1). Uzyskaną mieszaninę przesączono i ciało stałe przemyto wodą. Przesącz zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Do pozostałości dodano wodę i ciało stałe zebrano przez filtrację. Ciało stałe połączono i przemyto wodą, MeOH i EtOAc, a następnie osuszono w powietrzu. Analizy LCMS i HPLC wykazały BMS-585248, czystość >99%. Ciało stałe następnie oczyszczono przez wytrącanie i krystalizację z 5-10% CH3OH/CHCl3.
Oczyszczanie związku według przykładu 1
Surowy związek według przykładu 1 otrzymany według powyższego opisu (15,3 g) rozpuszczono w 10% MeOH/CHCl3 (600 ml). Powstała jasnobrunatna zawiesina, którą przesączono przez bibułę filtracyjną i dwukrotnie przemyto MeOH. Brunatnawe ciało stałe odrzucono (około 1,2 g). Związek według przykładu 1 krystalizowano z przesączu, ciało stałe zebrano przez filtrację i białe ciało stałe osuszono w powietrzu. Przesącz użyto aby powtórzyć krystalizację kilka razy. Ciało stałe otrzymane z każdej filtracji zanalizowano metodą HPLC. Wszystkie czyste frakcje połączono. Frakcje, które nie wykazywały dostatecznej czystości ponownie poddano krystalizacji z MeOH oraz CHCI3. Ogółem, po krystalizacji i wytrącaniu, otrzymano 12,7 g związku według przykładu 1. Ciecz macierzystą zatężono i oczyszczono stosując kolumnę wypełnioną żelem krzemionkowym (EtOAc, następnie CHCl3/MeOH (0-2%)), uzyskując 506 mg produktu w postaci białego ciała stałego.
1H NMR (d, DMSO) 13,1 (bs, 1H), 9,0 (s, 1H), 8,4 (s, 1H), 8,3 (s, 1H), 8,2 (s, 1H), 7,4 (bs, 5H), 3,7 (bs, 4H), 3,5 (bs, 4H); MS m/z 448 (MH). Anal: obliczone dla C22H18FN7O3; C 59,05, H 4,05, N 21,91, F 4,24. znalezione: C 57,28, H 4,14, N 21,22; F 4,07%.
Schemat 2 obrazuje korzystną metodę wytwarzania związków według przykładu 2.
PL 219 566 B1
Procedura: stałą mieszaninę hydrazydu mrówkowego (68 g, 1,13 mola) i tioacetamidu (85 g,
1,13 mola) w 500 ml RBF ogrzewano mieszając w temperaturze 150°C (temp. łaźni olejowej) przez
1,5 godziny, w łagodnym strumieniu azotu, usuwając H2S oraz wodę (zebrano około 18 ml cieczy) wytworzone podczas reakcji. Mieszaninę reakcyjną oddestylowano pod zmniejszonym ciśnieniem, zbierając, po usunięciu ciekłego przedgonu, 60,3 g (0,726 mola, wydajność 63,3%) tytułowego związ1 ku w temperaturze 102°C/0,35-1 mmHg, w postaci białego ciała stałego: H NMR (CDCl3) δ ppm 2,51 (3H, s, 3-Me), 8,03 (1H, s, 5-H), 9,5 (1H, br, NH); TLC Rf (10% MeOH/CH2Cl2)=0,3 (stosowano fosfonomolibdenian, biała plama).
Ref.: Vanek, T.; Velkova, V.; Gut, Jiri Coll. Czech. Chem. Comm. 1985, 49, 2492.
Wytwarzanie związków 3-81
Procedura: do 500 ml okrągłodennej kolby wprowadzono 4-metoksy-7-chloro-6-azaindol 2e jako prekursor (9,1 g, 50 mmoli; osuszono pod zmniejszonym ciśnieniem), węglan potasu (13,8 g, 100 mmoli, 2 równoważniki), sproszkowaną miedź (6,35 g, 100 mmoli, 2 równoważniki) i 3-metylo-1,2,4-triazol (83 g, 1,0 mola, 20 równoważników). Stałą mieszaninę ogrzewano w temperaturze topnienia, 170-175°C (temperatura zewnętrznej łaźni olejowej) w łagodnym strumieniu bezwodnego azotu przez 12 godzin, po którym to czasie analiza HPLC wskazała pik dla substancji wyjściowej odpowiadający 5-30%, a pik dla pożądanego produktu wskazywał około 45%, przy czym dla izomerycznego produktu ubocznego - 15%. Po oziębieniu, do mieszanej ciepłej mieszaniny powoli dodano MeOH (150 ml). Po oziębieniu, nierozpuszczalną substancję (sproszkowana miedź) odsączono za pomocą warstwy celitu i przepłukano metanolem. Przesącz zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem do gęstej pasty, którą rozcieńczono wodą (1 l) i ekstrahowano EtOAc (3 x 150 ml). Ekstrakty EtOAc osuszono (MgSO4), przesączono i zatężono uzyskując około 8 g surowej pozostałości, którą krystalizowano przez rozpuszczenie w gorącym CH3CN (50 ml), następnie przez rozcieńczenie wodą (100 ml) i oziębienie w temperaturze 0°C w celu zebrania 1,45 g (12,7%) tytułowego związku w postaci białego ciała stałego. Przesącz oczyszczono na kolumnie C-18 w układzie faz odwróconych z zastosowaniem żelu krzemionkowego (YMC ODS-A 75 μm), eluując układem 15-30% CH3CN/H2O. Odpowiednie frakcje połączono i wodny roztwór, po usunięciu CH3CN za pomocą wyparki obrotowej, liofilizowano, uzyskując dodatkowe 1,15 g tytułowego związku 3-81. Warstwę wodną następnie kilka razy ekstrahowano EtOAc. Ekstrakty octanu etylu osuszono (MgSO4), przesączono, zatężono i krystalizowano z MeOH, uzyskując dodatkowe 200 mg tytułowego związku 3-81. Ogólna wydajność: 2,8 g (12,2 mmola, wydajność 24,5%); MS m/z 230 (MH), HRMS (ESI) m/z obliczone dla C11H12N5O (M+H), 230,1042, znalezione 230,1038 (Δ -1,7 ppm); 1H NMR (CDCl3) δ ppm 2,54 (3H, s, CH3), 4,05 (3H, s, OCH3), 6,73 (1H, s, H-3), 7,40 (1H, s, H-2), 7,56 (1H, s, H-5), 9,15 (1H, s, triazol-H-5); 13C NMR (CDCl3, 125,7 MHz) δ
PL 219 566 B1 ppm 14,2 (triazol-Me), 56,3 (OMe), 100,5 (C-3), 116,9 (C-5), 123,5, 127,2, 127,5 (C-2), 129,5 (C-7), 141,2 (C-5'), 149,5 (C-4), 161,8 (C-3'); wartości obliczone dla C11H11N5O: C 57,63, H 4,83, N 30,55, znalezione: C 57,37, H 4,64, N 30,68.
Budowę potwierdzono przeprowadzając badanie krystalograficzne z zastosowaniem promieniowania rentgenowskiego o jednolitej energii kryształów otrzymanych z frakcji z kolumny C-18. Część frakcji z kolumny C-18 zawierających mieszaninę pożądanego analogu 3-metylo-1,2,4-triazolilu 3-81 i izomerycznego analogu 5-metylo-1,2,4-triazolilu 4-81 następnie oczyszczono w kolumnie C-18 w układzie faz odwróconych, eluując układem 8-10% CH3CN/H2O. Odpowiednie frakcje ekstrahowano CH2Cl2 i po wolnym odparowaniu rozpuszczalnika uzyskano krystaliczną substancję, izomeryczny 7-(5-metylo-1,2,4-triazolilo)-4-metoksy-6-azaindol (4-81): MS m/z 230 (MH), 1H NMR (CDCl3) δ ppm 3,05 (3H, s, CH3), 4,07 (3H, s, OCH3), 6,74 (1H, q, J=2,4, H-2), 7,37 (1H, t, J=2,4, H-3), 7,65 (1H, s, H-5), 8,07 (1H, s, triazol-H-3). Budowę potwierdzono przeprowadzając badanie krystalograficzne z zastosowaniem promieniowania rentgenowskiego o jednolitej energii.
Wytwarzanie związku 5-81
Procedura: AlCl3 (40 g, 0,3 mola, 15 równoważników) rozpuszczono w roztworze CH2CI2 (100 ml) i nitrometanie (20 ml) w atmosferze suchego azotu. Do tego roztworu, mieszając w atmosferze azotu, dodano związek 3-81 (4,58 g, 0,02 mola), a następnie chlorooksooctan metylu (9,8 g, 0,08 mola, 4 równoważniki). Mieszaninę reakcyjną mieszano w atmosferze azotu, w temperaturze pokojowej przez 1,5 godziny. Mieszaninę wkroplono do zimnego i mieszanego roztworu 20% wodnego roztworu octanu amonu (750 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 20 minut i uzyskany osad odsączono, przemyto starannie wodą i osuszono pod zmniejszonym ciśnieniem, uzyskując 4,7 g (0,015 mola, wydajność 75%) tytułowego związku 5-81 w postaci białego ciała stałego: MS m/z 316 (MH); HRMS (ESI) m/z obliczone dla C14H14N5O4 (M+H), 316,1046; znalezione 316,1041 (Δ -1,6 ppm); 1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ ppm 2,58 (3H, s, CH3), 3,96 (3H, s, OCH3), 4,05 (3H, s, OCH3), 7,76 (1H, s, H-5), 8,34 (1H, d, J=3Hz, H-2), 9,15 (1H, s, triazol-H-5), 11,0 (1H, brs, NH). Więcej tytułowego związku 5-81 i zhydralizowanego kwasu 6-81 można otrzymać z przesączu przez ekstrakcję kwas-zasada z zastosowaniem EtOAc.
Wytwarzanie związku 6-81
Procedura: do zawiesiny estru metylowego 5-81 (2,2 g, 7,0 mmola) w MeOH (50 ml) dodano w temperaturze pokojowej 0,25M roztwór NaOH w wodzie (56 ml, 14 mmoli, 2 równoważniki) i mieszaninę reakcyjną mieszano przez 15 minut, po którym to czasie analiza HPLC wskazała koniec hydrolizy. Mieszaninę szybko zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem w celu usunięcia MeOH i do pozostałego roztworu, w celu zobojętnienia mieszaniny, mieszając dodano wodę (100 ml) i 1N HCl (14 ml). Uzyskany drobny osad odsączono, przemyto wodą i osuszono pod zmniejszonym ciśnieniem, uzyskując 1,98 g (6,58 mmola, wydajność 94%) tytułowego związku 6-81 w postaci białawego ciała stałego: MS m/z 302 (MH); 1H NMR (DMSO-d6, 500 MHz) δ ppm 2,50 (3H, s, piki zachodzące z DM30
PL 219 566 B1
SO), 3,98 (3H, s, CH3O), 7,87 (1H, s, H-5), 8,29 (1H, d, J=3,5Hz, H-2), 9,25 (1H, s, triazol-H-5), 12,37 (1H, s, NH).
Alternatywna procedura: do zawiesiny estru metylowego 5-81 (10,7 g, 34 mmole) w MeOH (150 ml) dodano 0,25M roztwór NaOH w wodzie (272 ml, 68 mmoli, 2 równoważniki) w temperaturze pokojowej i mieszaninę reakcyjną mieszano przez 20 minut, po którym to czasie analiza HPLC wykazała zakończenie hydrolizy. W celu usunięcia MeOH, mieszaninę szybko zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i w celu usunięcia dowolnych obojętnych zanieczyszczeń, pozostały roztwór ekstrahowano EtOAc. W celu zobojętnienia produktu, do fazy wodnej dodano 1N HCl (68 ml, 68 mmoli). Uzyskaną mieszaninę zamrożono i liofilizowano, uzyskując 14,1 g (33,7 mmola, wydajność 99,2%) tytułowego związku 6-81, zawierającego 2 równoważniki molowe NaCl w postaci białawego ciała stałego. Tę substancję użyto w późniejszej reakcji bez dalszego oczyszczania. Sól sodową tytułowego związku 6-81 otrzymano, działając wodorowęglanem sodu, a następnie przeprowadzając chromatografię na kolumnie C-18 w układzie faz odwróconych: HPLC >97% (AP, UV przy 254 nm); HRMS (sól sodowa, ESI-) m/z obliczone dla C13H10N5O4 (M-H), 300,0733; znalezione 300,0724 (Δ -3 ppm); 1H NMR (Na sól, DMSO-d6, 500 MHz) 8 ppm 2,37 (3H, s, Me), 3,83 (3H, s, CH3O), 7,56 (1H, s, H-5), 8,03 (1H, s, H-2), 9,32 (1H, s, triazol-H-5); 13C NMR (Na sól, DMSO-d6, 125,7 MHz) δ ppm 13,8 (triazol-Me), 57,2 (OMe), 114,8 (C-3), 120,0 (C-5), 125,1, 143,5 (C-5'), 149,8 (C-4), 160,0 (C-3'), 171,7, 191,3.
Wytwarzanie związku według przykładu 2
Procedura: do roztworu kwasu 6-81 (3,01 g, 10 mmoli) i chlorowodorku benzoilopiperazyny (3,39 g, 15 mmoli) w DMF (50 ml) dodano trietyloaminę (10,1 g, 100 mmoli, 10 równoważników), a następnie, w atmosferze azotu, chlorowodorek 1-[3-(dimetyloamino)propylo]-3-etylokarbodiimidu (EDC; 5,75 g, 30 mmoli) i mieszaninę reakcyjną, po sonikowaniu i ogrzewaniu w temperaturze 40°C przez 2 godziny, mieszano w temperaturze pokojowej przez 22 godziny. Mieszaninę zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem w celu usunięcia DMF oraz TEA i do pozostałego roztworu, mieszając i sonikując, dodano wodę (200 ml). Utworzone osady zebrano, przemyto wodą i osuszono pod zmniejszonym ciśnieniem, uzyskując 2,8 g (5,9 mmola, wydajność 59%) tytułowego związku według przykładu 2 w postaci białawego ciała stałego. Przesącz ekstrahowano CH2Cl2 (x2). Ekstrakty CH2Cl2 osuszono (Na2SO4), przesączono i zatężono do żywicy, którą roztarto z Et2O, uzyskując ciało stałe. Ciało stałe zawieszono i roztarto z MeOH, uzyskując 400 mg tytułowego związku według przykładu 2, w postaci białawego ciała stałego. Ogólna wydajność: 3,2 g (6,8 mmola, wydajność 68%): MS m/z 474 (MH); HRMS (ESI) m/z obliczone dla C24H24N7O4 (M+H) 474,1890, znalezione 474,1884 (Δ -1,2 ppm); 1H NMR (DMSO-d6) δ ppm 2,50 (3H, s, piki zachodzące z DMSO), 3,43 (4H, br, CH2N), 3,68 (4H, br, CH2N), 3,99 (3H, s, CH3O), 7,46 (5H, br, s, Ar-Hs), 7,88 (1H, s, indolo-H-5), 8,25 (1H, s, indolo-H-2), 9,25 (1H, s, triazol-H-5), 12,40 (1H, s, NH); 13C-NMR (DMSO-d6) δ ppm 13,78, 40,58, 45,11, 56,78, 114,11, 120,95, 122,71, 123,60, 126,98, 128,34, 129,6, 135,43, 138,52, 142,10, 149,15, 161,29, 166,17, 169,22, 185,42; UV (MeOH) Xmax 233,6 nm (ε 3,43 x 104), 314,9 nm (ε 1,73 x 104); Anal: obliczone dla C24H24N7O4. 1/5 H2O; C 60,42, H 4,94, N 20,55, znalezione: C 60,42, H 5,03, N 20,65; KF (H2O) 0,75%.
Tę reakcję można także przeprowadzić z zastosowaniem HATU i DMAP, uzyskując bardziej zgodne wydajności tytułowego związku: do zawiesiny kwasu 6-81 (15,6 mmola) i HATU [heksafluorofosfonian O-(7-azabenzotriazol-1-ilo)-Ν,Ν,Ν',N'-tetrametylouroniowy] (8,90 g, 23,4 mmola; 1,5 równoważnika) w DMF (60 ml) i CH2Cl2 (60 ml) dodano mieszaninę DMAP (5,72 g, 46,8 mmola, 3 równoważniki) oraz chlorowodorku benzoilopiperazyny (5,30 g, 23,4 mmola; 1,5 równoważnika) w DMF (60 ml) w temperaturze pokojowej i mieszaninę reakcyjną mieszano w atmosferze azotu przez 4 godziny.
PL 219 566 B1
Mieszaninę zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem w celu usunięcia CH2Cl2 oraz większości DMF, a do pozostałego roztworu, mieszając i sonikując, dodano wodę. Utworzone osady zebrano, przemyto wodą i osuszono pod zmniejszonym ciśnieniem, uzyskując 5,38 g (11,4 mmola, wydajność 72,8%) tytułowego związku według przykładu 2 w postaci białawego ciała stałego: HPLC >95% (AP, UV przy 254 nm).
Alternatywny sposób wytwarzania związku według przykładu 2
Mieszaninę prekursora 5b (150 mg, 0,35 mmola), 3-metylo-1,2,4-triazolu (581 mg, 7 mmoli; 20 równoważników) wytworzono sposobem według Coll. Czech. Chem. Comm. 1985, 49, 2492), sproszkowanej miedzi (45 mg, 0,7 mmola; 2 równoważniki), węglanu potasu (97 mg, 0,7 mmola; 2 równoważniki) przepłukano bezwodnym azotem i ogrzewano w uszczelnionej rurce w temperaturze 160°C przez 11 godzin. Po oziębieniu, do mieszaniny dodano MeOH, i nierozpuszczalne substancje odsączono. Przesącz zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i oczyszczono na kolumnie C-18 w układzie odwróconych (układ preparatywny, eluowanie MeOH-woda zawierającym 0,1% TFA), uzyskując 19 mg (0,040 mmola, wydajność 11%) tytułowego związku według przykładu 2, jako bezpostaciowy proszek (TFA sól): MS m/e 474 (MH); 1H NMR (DMSO-d6) δ ppm 2,50 (3H, s, piki zachodzące z DMSO), 3,44 (4H, br, CH2N), 3,68 (4H, br, CH2N), 4,00 (3H, s, CH3O), 7,46 (5H, br. s, Ar-Hs), 7,89 (1H, s), 8,25 (1H, s), 9,24 (1H, s), 12,41 (1H, s, NH).
Biologia ,^m oznacza mikromolowe;
„ml oznacza mililitr;
„μΓ oznacza mikrolitr;
„mg oznacza miligram;
Poniżej opisano materiały i metody doświadczalne zastosowane w celu uzyskania wyników przedstawionych poniżej.
Komórki:
• Otrzymywanie wirusów - ludzką embrionalną linię komórek nerki, 293, namnażano w podłożu Eagle'a w modyfikacji Dulbecco (Life Technologies, Gaithersburg, MD) zawierającym 10% płodową surowicę bydlęcą (FBS, Sigma, St. Louis, MO).
• Infekcja wirusem - linię ludzkich komórek nabłonkowych, HeLa, eksprymujących receptory CD4 i CCR5 dla HIV-1 namnażano w podłożu Eagle'a w modyfikacji Dulbecco (Life Technologies, Gaithersburg, MD) zawierającym 10% płodową surowicę bydlęcą (FBS, Sigma, St. Louis, MO) i uzupełnionym 0,2 mg/ml genetycyny (Life Technologies, Gaithersburg, MD) i 0,4 mg/ml zeocyny (Invitrogen, Carlsbad, CA).
Zakaźny wirus reporterowy dla jednego cyklu zakażenia otrzymano kotransfekując ludzkie embrionalne komórki nerki 293 wektorem ekspresyjnym DNA w osłonce HIV-1 i prowirusowym cDNA zawierającym delecję w genie dla białka osłonki oraz genem reporterowym lucyferazy wprowadzonym zamiast sekwencji nef HIV-1 (Chen i in., odsyłacz literaturowy 41). Transfekcje przeprowadzono stosując odczynnik IipofectAMINE PLUS zgodnie z instrukcjami producenta (Life Technologies, Gaithersburg, MD).
Doświadczenie
1. Do komórek HeLa CD4 CCR5 wysianych na 96-studzienkowe płytki w gęstości komórek 5 x 104 komórek na studzienkę w 100 μl podłoża Eagle'a w modyfikacji Dulbecco zawierającego 10% płodową surowicę bydlęcą w stężeniu <20 μm dodano związek.
2. Do wysianych komórek dodano dalej 100 μl zakaźnego wirusa reporterowego dla jednego cyklu zakażenia w podłożu Eagle'a w modyfikacji Dulbecco oraz związek, przy przybliżonej krotności
PL 219 566 B1 zakażenia (MOT) 0,01, uzyskując w efekcie objętość końcową 200 μl na studzienkę i stężenie końcowe związku <10 μm.
3. Próbki zebrano 72 godzin po infekcji.
4. Infekcję wirusową monitorowano określając ekspresję lucyferazy z wirusowego DNA w zainfekowanych komórkach stosując zestaw testowy dla genu reporterowego lucyferazy (Roche Molecular Biochemicals, Indianapolis, 1N). Supernatanty znad zainfekowanych komórek usunięto i na studzienkę dodano po 50 μl podłoża Eagle'a w modyfikacji Dulbecco (bez czerwieni fenolowej) i 50 μl odczynnika do testu z zastosowaniem lucyferazy odtworzonego zgodnie z instrukcjami producenta (Roche Molecular Biochemicals, Indianapolis, 1N). Później określono ilościowo aktywność lucyferazy oceniając luminescencję z zastosowaniem licznika scyntylacyjnego promieniowania beta Wallac Microbeta Scintillation Counter.
5. Procent hamowania dla każdego związku obliczono określając ilościowo poziom ekspresji lucyferazy w komórkach zainfekowanych w obecności każdego związku, jako procent ekspresji obserwowanej dla komórek zainfekowanych nie potraktowanych związkiem i odejmując tak określoną wartość od 100.
6. EC50 stanowi metodę porównania przeciwwirusowej mocy związków według wynalazku. Stężenie skuteczne dla pięćdziesięciu procent hamowania (EC50) obliczono za pomocą programu dopasowania krzywych Microsoft Excel Xlfit. Dla każdego związku, krzywe uzyskiwano z procentu hamowania obliczonego przy 10 różnych by stosując czteroparametryczny model logistyczny (model 205). Dane EC50 dla związków pokazano w tablicach 2-4. Tablica 1 stanowi klucz dla danych w tablicach 2-4.
Testy cytoksyczności przeprowadzono z użyciem takich samych komórek HeLa stosując metodologię dobrze znaną w dziedzinie. Metodę tę opisano w literaturze (S Weislow, R Ki ser, DL Drobn, J Bader, RH Shoemaker i MR Boyd: New soluble-formazan assay for HIV-1 cytopathic effects: application to high-flux screening of synthetic and natural products for AIDS-antiviral activity. Journal of the National Cancer Institute. 81(8):577-586, 1989.
Komórki inkubowano z lekiem przez sześć dni, po czym określono żywotność komórkową stosując test redukcji barwnika (MTT) i określono jako CC50.Test ten służy do pomiaru wewnątrzkomórkowej aktywności redukującej występującej w aktywnie oddychających komórkach.
Wyniki
T a b l i c a 1. Klucz do danych biologicznych dla EC50
Związki* o EC50 > 5 μιτι Związki o EC50 > 1 μm but < 5 μm Związki o EC50 > 50 nM lecz nie badane jeszcze przy większych stężeniach Związki o EC50 < 1 μm
Grupa C Grupa B Grupa A' Grupa A
Związki według przykładów 1 i 2 należą do związków Grupy A.
Badania trwałości metabolicznej związków w mikrosomach wątrobowych. Trwałość metaboliczną związków zbadano względem ludzkich mikrosomów wątrobowych. Ludzkie mikrosomy wątrobowe otrzymano z BD Gentest (Lot #16, Woburn, MA) o stężeniu białka 20 mg/ml i całkowitym stężeniu cytochromu P450 (CYP) 0,55 nmol/mg białka.
Roztwór podstawowy leku wytworzono w acetonitrylu 1 mM. Próbkę roztworu podstawowego dodano do podłoży do inkubacji uzyskując stężenie końcowe 3 pM leku, a stężenie acetonitrylu nie przekraczało 1% w mieszaninie inkubacyjnej. Podłoża do inkubacji składały się z buforu w postaci fosforanu potasu (0,1 M, pH 7,4), mikrosomów wątrobowych (stężenie końcowe 0,9 mg/ml), chlorku magnezu (0,033 mM), i układu regenerującego NADPH. Kofaktory układu regenerującego NADPH obejmowały NADPH (stężenie końcowe 0,425 mg/ml), glukozo-6-fosforan (stężenie końcowe 0,512 mg/ml), i dehydrogenaza glukozo-6-fosforanowa (stężenie końcowe 0,6 jednostki/ml). Związek testowy inkubowano wstępnie w podłożach przez 2 minuty. Reakcję zapoczątkowano dodając kofaktory. Inkubację prowadzono w temperaturze 37°C przez 10 minut. Reakcję zakończono pobierając z mieszaniny inkubacyjnej próbkę 100 μl i dodając do 200 μl acetonitrylu zawierającego związek odniesienia jako zewnętrzny analityczny standard. Po wymieszaniu na wytrząsarce do probówek i odwirowaniu, próbkę 10 μl supernatantu zanalizowano metodą LC/MS.
Do skategoryzowania substancji testowych jako nisko, średnio lub wysoko oczyszczonych związków można posłużyć się wytycznymi.
PL 219 566 B1
Szybkość (nmol/minutę/mg) Ocena klirensu
0-0,100 niski
0,101-0,200 średni
0,201-0,300 wysoki
Badania farmakokinetyczne u szczura:
Do badań farmakokinetyki związków podawanych dożylnie (IV) i doustnie (PO) u szczura, związek rozpuszczono w PEG-400/etanol (90/10) w postaci roztworu.
Szczur. Użyto samców szczura Sprague-Dawley (300-350 g, zwierzęta z Hilltop Lab, Inc., Scottdale, PA) z kaniulami implantowanymi do żyły szyjnej. W badaniach farmakokinetycznych PO szczury głodzono przez noc. Pobrano 0,3 ml próbki krwi z żyły szyjnej do probówek Microtainer zawierających EDTA (Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ), a następnie odwirowano w celu oddzielenia osocza.
W badaniu IV, związek testowy podano w dawce 1 mg/kg w postaci bolusa w przeciągu 0,5 minuty (n=3). Przed podaniem bolusa, oraz 2, 10, 15, 30, 45, 60, 120, 240, 360, 480 i 1440 minut po podaniu pobrano seryjne próbki krwi.
W badaniu PO związku testowego, szczury (n=3) otrzymały doustnie BMS-585248 w dawce 5 mg/kg. Przed podaniem oraz 15, 30, 45, 60, 120, 240, 360, 480 i 1440 minut po podaniu związku pobrano seryjne próbki krwi.
Oznaczenie ilościowe związków w osoczu. Jednakowej objętości próbki osocza szczura badano przygotowano do analizy wytrącając białka osocza z zastosowaniem dwóch objętości acetonitrylu zawierającego wewnętrzny standard podobnego związku. Uzyskane supernatanty oddzielono od wytrąconych białek wirując przez 10 minut i przeniesiono do fiolek autosamplera. Próbki pobrano ręcznie, lub za pomocą zautomatyzowanego ramienia do przenoszenia płynów Tomtec. Do analizy wstrzykiwano próbkę 5 pl.
System HPLC składał się z dwóch pomp Shimadzu LC10AD (Columbia, MD), autosamplera Shimadzu SIL-HTC (Columbia, MD), i przedziału kolumnowego Hewlett Packard Series 1100 (Palo Alto, CA). Kolumnę YMC Pro C18 (2,0 x 50 mm, cząstki 3 pm, Waters Co., Milford, MA), utrzymywano w temperaturze 60°C a szybkość przepływu wynosiła 0,3 ml/minutę. Faza ruchoma składała się z 10 mM mrówczanu amoniowego i 0,1% kwasu mrówkowego w wodzie (A) i 100% 10 mM mrówczanu amoniowego i 0,1% kwasu mrówkowego w metanolu (B). Początkowy skład fazy ruchomej stanowił 95% odczynnik A. Po wstrzyknięciu próbki, fazę ruchoma zmieniono na mieszaninę 15% A/85% B na 2 minuty i utrzymywano ten skład jeszcze przez 1 minutę. Fazę ruchomą przywrócono następnie do warunków początkowych i przez 1 minutę ponownie kalibrowano kolumnę. Całkowity czas analizy wynosił 4 minuty.
HPLC sprzężono z urządzeniem Micromass Quattro LC. Jako gaz rozpylający i czynnik do desolwacji (odparowanie rozpuszczalnika z aerozolu do drobnych kropelek spektoskopia płomieniowa) użyto ultra wysokiej czystości azot przy szybkości przepływu 100 l/godzinę dla rozpylania i 1100 l/godzinę dla osiągnięcia desolwacji. Temperatura desolwacji wynosiła 300°C, a temperatura źródła 150°C. Do zebrania danych zastosowano monitoring wybranych reakcji (SRM). Jony reprezentujące (M+H)+ dla związku i wewnętrznego standardu wybrano w MSI i kolizyjnie zdysocjowano stosując argon pod ci-3 -3 śnieniem 0,3 x 10-3 kPa (2 x 10-3 torra) uzyskując jony specyficznego produktu, które później monitorowano stosując MS2.
Związki według wynalazku można podawać doustnie, pozajelitowo (w tym w postaci iniekcji podskórnych, zastrzyków lub wlewów dożylnie, domięśniowo, domostkowo), wziewnie za pomocą spraju, lub doodbytniczo, w jednostkowych postaciach dawkowania preparatów zawierających stosowane zazwyczaj, nietoksyczne, farmaceutycznie dopuszczalne nośniki, środki wspomagające i rozczynniki.
Tak więc, w zakres wynalazku wchodzi związek według wynalazku i jego kompozycja farmaceutyczna do leczenia zakażeń wirusowych takich jak zakażenie HIV i AIDS. Leczenie polega na podawaniu pacjentowi wymagającemu takiego leczenia kompozycji farmaceutycznej zawierającej nośnik farmaceutyczny i związek według wynalazku w ilości skutecznej terapeutycznie.
Kompozycja farmaceutyczna może występować w postaci zawiesiny do podawania doustnie lub tabletek; sprajów donosowych, sterylnych preparatów do wstrzykiwania, np. w postaci sterylnych wodnych lub w oleju zawiesin do wstrzykiwania lub czopków.
Przy podawaniu doustnie w postaci zawiesiny, kompozycje te wytwarza się według technik dobrze znanych w dziedzinie preparatów farmaceutycznych. Mogą one zawierać celulozę mikrokrysta34
PL 219 566 B1 liczną dla nadania objętości, kwas alginowy lub alginian sodu jako środek zawieszający, metylocelulozę jako substancję zwiększającą lepkość oraz znane w dziedzinie słodziki/środki smakowe. W postaci tabletek o natychmiastowym uwalnianiu, kompozycje te mogą zawierać celulozę mikrokrystaliczną, difosforan wapnia, skrobię, stearynian magnezu i laktozę i/lub inne rozczynniki, spoiwa, obciążacze, substancje rozsadzające, rozcieńczalniki i środki poślizgowe znane w dziedzinie.
Roztwory lub zawiesiny do wstrzykiwania można komponować według znanych sposobów, stosując odpowiednie nietoksyczne rozcieńczalniki lub rozpuszczalniki dopuszczalne do stosowania pozajelitowo, takie jak mannitol, 1,3-butandiol, woda, roztwór Ringera lub izotoniczny roztwór chlorku sodu, albo odpowiednie środki rozsadzające lub zwilżające i emulgatory, takie jak sterylne, nie drażniące, oleje utwardzone, obejmujące syntetyczne mono- lub diglicerydy oraz kwasy tłuszczowe, obejmujące kwas oleinowy.
Związki według wynalazku można podawać doustnie u ludzi w zakresie dawkowania od 1 do 100 mg/kg masy ciała w dawkach podzielonych. Jeden z korzystnych zakresów dawkowania wynosi od 1 do 10 mg/kg masy ciała doustnie w dawkach podzielonych. Inny korzystny zakres dawkowania wynosi od 1 do 20 mg/kg masy ciała doustnie w dawkach podzielonych. Wiadomo jednak, że konkretna wielkość dawek i częstotliwość dawkowania dla danego pacjenta może być różna i zależy od różnorodnych czynników w tym od aktywności danego stosowanego związku, trwałości metabolicznej i długości działania tego związku, wieku, masy ciała, ogólnego stanu zdrowia, płci, diety, sposobu i czasu podawania, szybkości wydalania, zestawienia leków, stanu zaawansowania danego schorzenia i od leczonego osobnika.
Ujawnienie obejmuje izomery, diasteroizomery, stereoizomery i enancjomery o przedstawionych wzorach, w przypadku gdy w cząsteczkach występuje jeden lub więcej asymetrycznych atomów węgla. Asymetryczny atom węgla to taki atom, w którym węgiel połączony jest z czterema różnymi podstawnikami. Ujawnienie dotyczy izomerów lub pojedynczego enancjomeru, szczególnie wtedy, gdy jeden enancjomer wykazuje lepsze właściwości. Enancjomery różnią się od siebie nawzajem tym, że układ przestrzenny podstawników wokół centrów chiralności asymetrycznych atomów węgla powoduje, że każda cząsteczka jest nie nakładającym się lustrzanym odbiciem drugiej cząsteczki. Według stosowanej od lat 60-tych nomenklatury Cahn-Ingold-Prelog, konfigurację podstawników wokół asymetrycznego atomu węgla określono w sposób jednoznaczny jako albo (R), który jest standardowym symbolem oznaczającym po łacinie rectus, czyli prawy lub (S), który jest standardowym symbolem od łacińskiego słowa sinister, lewy. Standardowe zasady określania konfiguracji tych centrów można znaleźć w dowolnym podręczniku do podstaw chemii organicznej. W tym zgłoszeniu i na podstawie wstępnych przykładów, gdy W zawiera pojedynczą grupę metylową jak to przedstawiono poniżej, gdy węgiel połączony z grupą metylową jest w konfiguracji (R), może to decydować o jego mocy względem enancjomera (S). Sporadycznie, (R)-metylopiperazyna może wykazywać korzystną moc względem niepodstawionej piperazyny. Obserwacje te dotyczą konkretnych związków i nie stanowią reguły. Niepodstawiona piperazyna i enancjomery (S) nadal pozostają silnymi związkami przeciwwirusowymi, pomimo tego, że czasem wykazują się słabszym działaniem niż enancjomer (R).
W przypadku gdy, jak przedstawiono poniżej, metylopiperazyna ma konfiguracją (R), to grupa metylowa może poprawiać trwałość metaboliczną sąsiadującego amidu w porównaniu z (S)-metylopiperazyną lub z niepodstawioną piperazyną. Jednakże, trwałość metaboliczna wiązania amidowego zależy od konkretnego związku i podstawnik metylowy nie jest niezbędny dla uzyskania optymalnych właściwości.
PL 219 566 B1
(równoważnik)
Ostatnio, nieoczekiwanie stwierdzono, że związki według wynalazku są szczególnie skuteczne w hamowaniu HIV. Zagadnienie to omówiono bardziej szczegółowo poniżej.
Skuteczne zwalczanie HIV i innych wirusów wymaga związków, które są silnymi inhibitorami danego wirusa, są swoiste dla danego wirusa i mają właściwości umożliwiające im bezpieczne osiągnięcie i utrzymanie stężenia w osoczu, będącego maksymalną wielokrotnością stężenia minimalnie hamującego wirus. Wyższe stężenia hamują replikację wirusową, a wolniejsze tempo replikacji oznacza, wolniejsze powstawanie szczepów wirusa opornych na leczenie danym lekiem. Silne leki osiągające mniejsze stężenie lub stosowane w mniejszej dawce charakteryzują się działaniem porównywalnym do tego osiąganego przez słabszy lek. Leki, które charakteryzują się większą mocą w porównywalnej dawce na modelach zwierzęcych lub u pacjentów (co określa się pomiarami farmakokinetycznymi takimi jak AUC (suma stężenia leku w czasie), Cmax, lub Cmin) przyniosą także większą korzyść pacjentowi. Leki o większej trwałości wobec szlaków metabolicznych i enzymów będą utrzymały się dłużej w odpowiednim stężeniu, a więc wymagać będą rzadszego dawkowania lub dawkowania w mniejszych ilościach. U zwierząt lub ludzi często mierzonym parametrem do oceny tej właściwości jest klirens, choć stosuje się także średni czas retencji. Dla dokładności, określa się hamowanie wirusa za pomocą EC50; ale zazwyczaj przyjmuje się, że minimalne stężenie leku w osoczu, które powinno utrzymywać się u pacjenta jest co najmniej cztery lub pięć razy większe. Zatem, kandydaci na leki przeciwwirusowe lub przeciw HIV, które najprawdopodobniej osiągną maksymalne korzyści u pacjentów, czyli te, które obecnie usilnie opracowywuje się w badaniach przedklinicznych będą charakteryzować się 1) maksymalną siłą 2) brakiem ogólnej cytotoksyczności względem linii komórkowej stosowanej w testach 3) przewidywaną małą szybkością metabolizmu u człowieka na podstawie modeli in vitro 4) osiąganiem wysokich stężeń przy dawkowaniu doustnie. W celu określenia które związki najprawdopodobniej wykażą optymalną skuteczność u człowieka pod uwagę bierze się wiele właściwości potencjalnych kandydatów, ale związki według wynalazku określono wstępnie pod kątem następujących cech:
1) Siła względem HIV określana za pomocą EC50 w początkowym teście dla pseudotypu, jak opisano w części biologicznej.
2) Brak ogólnej cytotoksyczności względem linii komórkowej HeLa. Za poziom bezpieczny przyjęto >100 μΜ.
3) Pomiar szybkości metabolizmu względem preparatów mikrosomalnych wątroby ludzkiej, a z danych tych przewidywanie klirensu u człowieka. Niższy uznaje się za lepszy.
4) Szacowanie potencjalnego stężenia u człowieka za pomocą parametrów takich jak AUC i klirens przy podawaniu doustnie i dożylnie u szczura. Optymalnie, uzyskuje się wysokie stężenie i niski klirens.
W dwóch seriach zgłoszeń patentowych ujawniono azaindolooksoacetylopiperazynoamidy. W pierwszej serii ujawniono pochodne azaindolu, obiecujące jako środki przeciwwirusowe Wang, Tao i in., opis patentowy St. Zjedn. Ameryki nr. 6476034 i zgłoszenie WO 0162255 A1, złożone 19 stycznia, 2001, opublikowane 30 sierpnia, 2001 (poniżej określane jako ref. 94). W drugiej serii (poniżej określanej jako ref. 106) Wang, Tao, i in., ujawniono działanie przeciwwirusowe względem HIV pochodnych azaindolooksacetylopiperazyny podstawionej w zgłoszeniu patentowym St. Zjedn. Ameryki Płn. nr 10/214982 złożonym 7 sierpnia, 2002, które jest częściową kontynuacją zgłoszenia patentowego St. Zjedn. Ameryki nr. 10/038306 złożonego 2 stycznia, 2002 (które odpowiada międzynarodowemu zgłoszeniu PCT. (PCT/US02/00455), zgłoszeniu WO 02/062423 A1, złożonemu 2 stycznia, 2002, opublikowanemu 15 sierpnia, 2002. Wszystkie odsyłacze literaturowe dotyczące tych dwóch serii załączona się tu na zasadzie odsyłacza, ref. 106 opisuje po części C-7 heteroaryl, aryl lub pod36
PL 219 566 B1 stawione 4,5,6 lub 7-azaindole jako środki przeciwwirusowe i jest najistotniejszą z dotychczasowych publikacji.
Autorzy wynalazku oszacowali właściwości wielu związków wchodzących w zakres ref. 94 i 106 i stwierdzili, że związki mające C-7, N-związane grupy triazolowe są zaskakująco nieoczekiwane lepsze.
Przy zastosowaniu testu pseudotypu, opisanego w części biologicznej tego zgłoszenia, wstępnie oszacowano związki w celu określenia, które charakteryzują się maksymalną siłą lub najniższym EC50. Największe zainteresowanie wzbudziły związki o EC50 poniżej 0,20 nM, ponieważ są one najsilniejsze i odpowiadały za zmienność wyników testu badania wstępnego. W celu określenia trwałości metabolicznej związków, oszacowano także ich trwałość za pomocą inkubacji w preparatach in vitro mikrosomów wątrobowych człowieka (HLM). Jest to jeden z powszechnie stosowanych systemów prognostycznych do oceny wpływu metabolizmu i przewidywaniu klirensu u człowieka. Szukano związków o niskim klirensie. Osiągnięcie optymalnego schematu dawkowania u człowieka związków o średnim i wysokim klirensie mogłoby okazać się bardziej problematyczne w porównaniu ze związkami o niskim klirensie. Nie zajmowano się dalej także związkami, których właściwości nie udało się dokładniej oszacować.
Nieoczekiwanie stwierdzono, że u szczurów przy ocenie właściwości farmakokinetycznych najbardziej obiecujących według kryteriów siły i trwałości metabolicznej związków, jedna klasa podstawników C-7, N-związanych triazoli według wynalazku wykazała bardzo niski klirens i bardzo wysokie AUC (stężenie) w porównaniu do związków z ref. 94 i 106.
Tak więc, C-7 N-związane triazole według wynalazku wykazały nieoczekiwane właściwości jako że, spośród związków dotychczas oszacowanych, okazały się one w zasadzie równoważne co do siły działania w porównaniu do najsilniej działających związków opisanych w ref. 94 i 106. Wykazały one trwałość metaboliczną w obecności mikrosomów wątrobowych człowieka, równoważną tej, jaką wykazywały najlepsze związki tamtego zgłoszenia. Nieoczekiwanie, u szczurów wykazały one klirens o wiele niższy, zazwyczaj 10 krotnie niższy, niż najlepsze związki spośród opisanych zgłoszeniach według ref. 94 i były najlepsze ze związków oszacowanych w ref.u 106. Co więcej, były jedyną klasą związków wykazujących znacznie większe stężenia u szczurów, co potwierdzono za pomocą AUC.
Podsumowując, te N-związane triazole według wynalazku wykazały nieoczekiwane zestawienie właściwości, które nie wypływa w sposób oczywisty z danych ujawnionych w ref. 94 i 106. W zgłoszeniu WO 02/06423 ujawniono zaledwie jeden triazol. Związek ten ma podstawnik R4, który jest C-związanym triazolem, a nie N-związanym triazolem, oraz wykazuje siłę nieporównywalną z N-związanymi triazolami według wynalazku. W przykładach opublikowanego zgłoszenia PCT według ref. 106 nie opisano żadnego N-związanego triazolu.
W poniższych tablicach danych podsumowano siłę, przewidywany klirens u człowieka na podstawie mikrosomów wątrobowych człowieka, oraz określono AUC i klirens za pomocą badania farmakokinetycznego u szczurów dla N-związanych triazoli według tego wynalazku w porównaniu do przedstawicieli związków i ich bliskich analogów wskazanych w zgłoszeniu PCT WO 02/062423 A1, złożonym 2 stycznia, 2002, opublikowanym 15 sierpnia, 2002 i opublikowanych zgłoszeń i opisów patentowych zawartych w ref. 94. Jak widać w poniższych tablicach, N-związane triazole określone tu jako najkorzystniejsza grupa, wykazują niespodziewaną wyższość, szczególnie co do maksymalnej siły działania, trwałość metaboliczną porównywalną z najlepszymi w klasie i wyjątkowo wysokie AUC (stężenie) oraz niski klirens u szczurów, określone za pomocą podawania doustnie i iv w dawce, odpowiednio, 5 mg/kg i 1 mg/kg. Model szczurzy jest wstępnym modelem zastosowanym do określenia potencjalnych stężeń osiąganych u człowieka.
Użyteczność związków w klasie triazoli zależy w zaskakującym stopniu od sposobu podstawienia. Przykładowo, 1,2,3-triazole przyłączone przy pozycji 2 atomu azotu, wykazywały dotychczas znacznie zmniejszone AUC (stężenie) u szczurów w porównaniu do przedstawionych związków. Ponadto, przeniesienie grupy E, gdy E oznacza metyl, w 1,2,4-N-związanym triazolu z pozycji 3 do 5 powoduje powstanie związków o znacznie mniejszej sile działania. Jak przedstawiono w tablicy A2, określone N-związane triazole wykazywały dużą siłę działania we wstępnym teście przeciwwirusowym.
Jak przedstawiono w tablicach A3-A5 porównawczych związków, trwałość metaboliczna N-związanych związków triazolowych według wynalazku w sposób nieoczekiwany okazała się porównywalna lub lepsza w porównaniu z trwałością któregokolwiek związku przedstawionego w obu seriach opublikowanych zastosowań azaindolu (tj. w ref. 94 i 106).
PL 219 566 B1
Jak widać wyraźnie w tablicach, obserwowany u szczurów niski klirens i wysokie stężenie związków z tablicy A2 było nieoczekiwane i zaskakujące ponieważ dotychczasowe piśmiennictwo zakładało brak związków wykazujących te właściwości.
Stosowane w poniższych tabelach terminy mają następujące znaczenia:
„NT oznacza nie badano.
„Trudności oznacza, że nie udało się zinterpretować wyników (tj. w teście HLM).
Wyniki
T a b l i c a A1. Legenda danych biologicznych dla wartości EC50 w tabelach A2-A7
Związki* o EC50 > 1 pM Związki o EC50 > 0,2 nM ale < 1 pM Związki o EC50 < 0,20 nM
Grupa 3 Grupa 2 Grupa 1
T a b l i c a A2. N-związane triazole jako R4 o nieoczekiwanie lepszych właściwościach
Numer przykładu Kategoria EC50 CC50 > 100 pM Klirens u człowieka przewidziany na podstawie HLM AUC 24 h (u pg-godz/ml) Klirens, iv (ml/min/kg)
1 1 Tak Niski 32 ± 12 1,6 ± 0,2
2 1 Tak Niski 52 ± 12 1,3 ± 0,19
T a b l i c a A3. Niektóre inne alternatywnie podstawione w R4 N-związane triazole jako związki porównawcze
Numer przykładu Kategoria EC50 CC50 > 100 pM Klirens u człowieka przewidziany na podstawie HLM 24-godzinne AUC (pg-godz-/ml) Klirens, iv (ml/min/kg)
139 2 Tak Wysoki
T a b l i c a A4. Niektóre istotne C-związane hetero arylowe związki porównawcze
Numer przykładu Kategoria EC50 CC50 > 100 pM Klirens u człowieka przewidziany na podstawie HLM 24-godzinne AUC (pg-godz-/ml) Klirens, iv (ml/min/kg)
40 2 Nie Niski
42 2 Tak Niski
22 1 Nie Pośredni
35 1 Tak Pośredni
37 1 Nie NT
38 1 Nie Niski
39 2 Nie Pośredni
28 3 Nie NT
29 2 Nie Wysoki
22 2 Nie Wysoki
146 2 Tak Pośredni
PL 219 566 B1
T a b l i c a A5. Niektóre istotne związki porównawcze i dane z opisu patentowego St. Zjedn. Ameryki nr 6476034 (ref. 94)
Numer związku odniesienia Kategoria EC50 CC50 > 100 μιτι Klirens u człowieka przewidziany na podstawie HLM 24-godzinne AUC ^g-godz-/ml) Klirens, iv (ml/min/kg)
1 2 Tak Niski 0,5 32 ± 1,8
2 3 Tak Pośredni
3 2 Tak Niski 6,3 ± 2,7 13 ± 4,0
4 2 Tak Niski
5 1 Tak Pośredni
6 2 Tak Niski 1,7 ± 0,58 31 ± 5,9
7 1 Tak Niski 2,6 ± 0,12* 19,3 ± 0,65
8 1 Tak Niski 1,03 ± 0,07* 47,2 ± 11,5
9 2 Tak Niski 5,9 ± 2,2 5,9 ± 2,2
10 2 Tak Niski 2,9 ± 0,3 11,7 ± 1,0
11 1 Tak 1,4 ± 0,2* 24,8 ± 0,41
12 1 Tak Niski 4,7 ± 1,1 11,9 ± 1,8
13 2 Tak NT
Budowa związków odniesienia, kluczowa dla tablicy A5
Związek odniesienia 1
PL 219 566 B1
T a b l i c a A8 (budowa związków odniesienia 2-9)
PL 219 566 B1
T a b l i c a A7 (związki odniesienia 10-12)
Numer związku odniesienia R2 R3 R4 RH A
10 MeO H X2~OMe (R) -Me
11 MeO H NHa χ2—ζ 0 (R)-Me X4-O
12 MeO H χ2~ 0 (R) -Me Ύ)
W tablicach A6 i A7, X2 i X4 odnoszą się do punktu przyłączenia.
Związki przedstawione w tablicach A3-A7 ujawniono i wytworzono zgodnie z WO 02/062 423.

Claims (8)

1. Pochodna podstawionej azaindolooksoacetylopiperazyny o wzorze i jej farmaceutycznie dopuszczalne sole.
PL 219 566 B1
2. Pochodna podstawionej azaindolooksoacetylopiperazyny o wzorze i jej farmaceutycznie dopuszczalne sole.
3. Kompozycja farmaceutyczna zawierająca farmaceutycznie dopuszczalny nośnik i substancję czynną, znamienna tym, że zawiera jako substancję czynną przeciwwirusowo skuteczną ilość związku jak określono w zastrz. 1.
4. Kompozycja farmaceutyczna zawierająca farmaceutycznie dopuszczalny nośnik i substancję czynną, znamienna tym, że zawiera jako substancję czynną przeciwwirusowo skuteczną ilość związku jak określono w zastrz. 2.
5. Kompozycja farmaceutyczna według zastrz. 3 albo 4, znamienna tym, że dodatkowo zawiera przeciwwirusowo skuteczną ilość środka do leczenia AIDS, wybranego z grupy obejmującej:
(a) środek przeciwwirusowy do leczenia AIDS;
(b) środek przeciwzakaźny;
(c) immunomodulator; i (d) inhibitory wnikania HIV.
6. Związek jak określono w zastrz. 1 stosowany do leczenia ssaków zakażonych wirusem HIV.
7. Związek jak określono w zastrz. 2 stosowany do leczenia ssaków zakażonych wirusem HIV.
8. Związek według zastrz. 6 albo 7 stosowany do leczenia ssaków zakażonych wirusen HIV, który dodatkowo obejmuje zastosowanie przeciwwirusowo skutecznej ilości środka do leczenia AIDS, wybranego z grupy obejmującej:
(a) środek przeciwwirusowy do leczenia AIDS;
(b) środek przeciwzakaźny;
(c) immunomodulator; i (d) inhibitory wnikania HIV.
PL375360A 2002-08-07 2003-08-05 Pochodna podstawionej azaindolooksacetylopiperazyny i jej zastosowanie oraz kompozycja farmaceutyczna ją zawierająca PL219566B1 (pl)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US10/214,982 US20030207910A1 (en) 2001-02-02 2002-08-07 Composition and antiviral activity of substituted azaindoleoxoacetic piperazine derivatives

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL375360A1 PL375360A1 (pl) 2005-11-28
PL219566B1 true PL219566B1 (pl) 2015-05-29

Family

ID=31714265

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL375360A PL219566B1 (pl) 2002-08-07 2003-08-05 Pochodna podstawionej azaindolooksacetylopiperazyny i jej zastosowanie oraz kompozycja farmaceutyczna ją zawierająca

Country Status (31)

Country Link
US (1) US20030207910A1 (pl)
EP (4) EP2497770B1 (pl)
KR (1) KR101045154B1 (pl)
CN (2) CN101229164B (pl)
AR (1) AR041190A1 (pl)
AU (2) AU2003261367B2 (pl)
BR (1) BRPI0313286B8 (pl)
CA (1) CA2494832C (pl)
CY (3) CY1113413T1 (pl)
DK (3) DK2801576T3 (pl)
ES (4) ES2560844T3 (pl)
GE (1) GEP20084284B (pl)
HK (4) HK1174037A1 (pl)
HR (1) HRP20050123B8 (pl)
HU (1) HUE027396T2 (pl)
IL (1) IL166512A (pl)
IS (1) IS2919B (pl)
MX (1) MXPA05001441A (pl)
MY (1) MY146549A (pl)
NO (1) NO331591B1 (pl)
NZ (1) NZ537930A (pl)
PE (1) PE20040772A1 (pl)
PL (1) PL219566B1 (pl)
PT (3) PT2497770E (pl)
RS (1) RS53428B (pl)
RU (1) RU2325389C2 (pl)
SI (3) SI2801576T1 (pl)
TW (1) TWI328452B (pl)
UA (1) UA82199C2 (pl)
WO (1) WO2004014380A1 (pl)
ZA (1) ZA200501018B (pl)

Families Citing this family (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0307834D0 (en) * 2003-04-04 2003-05-14 Ta Contrast Ab Composition
US20050075364A1 (en) * 2003-07-01 2005-04-07 Kap-Sun Yeung Indole, azaindole and related heterocyclic N-substituted piperazine derivatives
US20050124623A1 (en) * 2003-11-26 2005-06-09 Bender John A. Diazaindole-dicarbonyl-piperazinyl antiviral agents
US7745625B2 (en) 2004-03-15 2010-06-29 Bristol-Myers Squibb Company Prodrugs of piperazine and substituted piperidine antiviral agents
US20050215544A1 (en) * 2004-03-24 2005-09-29 Pin-Fang Lin Methods of treating HIV infection
US7776863B2 (en) * 2004-03-24 2010-08-17 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating HIV infection
DE602005010698D1 (de) 2004-06-09 2008-12-11 Glaxo Group Ltd Pyrrolopyridinderivate
US20060100209A1 (en) * 2004-11-09 2006-05-11 Chong-Hui Gu Formulations of 1-(4-benzoyl-piperazin-1-yl)-2-[4-methoxy-7-(3-methyl-[1,2,4]triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl]-ethane-1,2-dione
US20060100432A1 (en) * 2004-11-09 2006-05-11 Matiskella John D Crystalline materials of 1-(4-benzoyl-piperazin-1-yl)-2-[4-methoxy-7-(3-methyl-[1,2,4]triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl]-ethane-1,2-dione
US7183284B2 (en) * 2004-12-29 2007-02-27 Bristol-Myers Squibb Company Aminium salts of 1,2,3-triazoles as prodrugs of drugs including antiviral agents
US7601715B2 (en) 2005-06-22 2009-10-13 Bristol-Myers Squibb Company Process for preparing triazole substituted azaindoleoxoacetic piperazine derivatives and novel salt forms produced therein
US7598380B2 (en) * 2005-08-03 2009-10-06 Bristol-Myers Squibb Company Method of preparation of azaindole derivatives
US7851476B2 (en) * 2005-12-14 2010-12-14 Bristol-Myers Squibb Company Crystalline forms of 1-benzoyl-4-[2-[4-methoxy-7-(3-methyl-1H-1,2,4-triazol-1-YL)-1-[(phosphonooxy)methyl]-1H-pyrrolo[2,3-C]pyridin-3-YL]-1,2-dioxoethyl]-piperazine
US7807671B2 (en) 2006-04-25 2010-10-05 Bristol-Myers Squibb Company Diketo-piperazine and piperidine derivatives as antiviral agents
US7504399B2 (en) * 2006-06-08 2009-03-17 Bristol-Meyers Squibb Company Piperazine enamines as antiviral agents
US8318941B2 (en) * 2006-07-06 2012-11-27 Bristol-Myers Squibb Company Pyridone/hydroxypyridine 11-beta hydroxysteroid dehydrogenase type I inhibitors
EP2346508B1 (en) 2008-09-26 2016-08-24 Intellikine, LLC Heterocyclic kinase inhibitors
GB0910667D0 (en) * 2009-06-19 2009-08-05 Glaxo Wellcome Mfg Pte Ltd Novel compounds
WO2012019003A1 (en) * 2010-08-06 2012-02-09 Bristol-Myers Squibb Company Substituted indole and azaindole oxoacetyl piperazinamide derivatives
ES2585396T3 (es) * 2010-12-02 2016-10-05 VIIV Healthcare UK (No.5) Limited Alquilamidas como inhibidores de la unión del VIH
CN102718692B (zh) * 2012-07-03 2014-01-08 苏州和健医药科技有限公司 一种7位甲基-5位氧取代吲哚化合物的制备方法
WO2016004272A1 (en) 2014-07-02 2016-01-07 Pharmacyclics Llc Inhibitors of bruton's tyrosine kinase
EP3194387B1 (en) * 2014-09-17 2019-07-31 Celgene Quanticel Research, Inc. Histone demethylase inhibitors
CA2983927A1 (en) 2015-05-06 2016-11-10 The Regents Of The University Of California K-ras modulators
EP4340839A1 (fr) * 2021-05-21 2024-03-27 Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS) Nouveaux derives azaindole en tant qu'agents antiviraux

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2761201A (en) 1952-05-02 1956-09-04 Griffin Wheel Co Renewing molds
US3830602A (en) 1973-03-14 1974-08-20 Commercial Shearing Rotary pumps and motors
US5023265A (en) * 1990-06-01 1991-06-11 Schering Corporation Substituted 1-H-pyrrolopyridine-3-carboxamides
IL99843A0 (en) 1990-11-01 1992-08-18 Merck & Co Inc Synergistic combination of hiv reverse transcriptase inhibitors
US5811432A (en) 1990-11-09 1998-09-22 Pfizer Inc Azaoxindole derivatives
JP3119485B2 (ja) 1991-07-03 2000-12-18 ファルマシア・アンド・アップジョン・カンパニー 抗−エイズ薬としての置換インドール類
US5124327A (en) * 1991-09-06 1992-06-23 Merck & Co., Inc. HIV reverse transcriptase
WO1993005020A1 (en) 1991-09-06 1993-03-18 Merck & Co., Inc. Indoles as inhibitors of hiv reverse transcriptase
US5413999A (en) 1991-11-08 1995-05-09 Merck & Co., Inc. HIV protease inhibitors useful for the treatment of AIDS
IT1265057B1 (it) 1993-08-05 1996-10-28 Dompe Spa Tropil 7-azaindolil-3-carbossiamidi
US5424329A (en) * 1993-08-18 1995-06-13 Warner-Lambert Company Indole-2-carboxamides as inhibitors of cell adhesion
GB9420521D0 (en) 1994-10-12 1994-11-30 Smithkline Beecham Plc Novel compounds
IL146309A0 (en) 1999-05-21 2002-07-25 Scios Inc Indole-type derivatives as inhibitors of p38 kinase
US6469006B1 (en) 1999-06-15 2002-10-22 Bristol-Myers Squibb Company Antiviral indoleoxoacetyl piperazine derivatives
US6476034B2 (en) 2000-02-22 2002-11-05 Bristol-Myers Squibb Company Antiviral azaindole derivatives
US20020061892A1 (en) 2000-02-22 2002-05-23 Tao Wang Antiviral azaindole derivatives
ES2250422T3 (es) 2000-07-10 2006-04-16 Bristol-Myers Squibb Company Composicion y actividad antiviral de derivados de piperazina indoloxoaceticos sustituidos.
US6403211B1 (en) 2000-07-18 2002-06-11 3M Innovative Properties Company Liquid crystal polymer for flexible circuits
EE05424B1 (et) * 2001-02-02 2011-06-15 Bristol-Myers Squibb Company Asendatud asaindooloksoatseetpiperasiini derivaadid, neid sisaldav ravimpreparaat ning nende kasutamine ravis
AU2003217604A1 (en) * 2002-02-23 2003-09-09 Bristol-Myers Squibb Company Method of treating hiv infection by preventing interaction of cd4 and gp120

Also Published As

Publication number Publication date
PT2497770E (pt) 2014-07-18
CY1117217T1 (el) 2017-04-05
EP2801576B1 (en) 2015-12-09
CY1113413T1 (el) 2016-06-22
HK1220181A1 (zh) 2017-04-28
UA82199C2 (uk) 2008-03-25
CN1688311A (zh) 2005-10-26
JP2006504669A (ja) 2006-02-09
HUE027396T2 (en) 2016-09-28
US20030207910A1 (en) 2003-11-06
RU2325389C2 (ru) 2008-05-27
EP2975038A1 (en) 2016-01-20
TW200410696A (en) 2004-07-01
KR20060021811A (ko) 2006-03-08
CN101229164A (zh) 2008-07-30
CA2494832A1 (en) 2004-02-19
EP1549313B9 (en) 2012-11-21
HRP20050123B8 (hr) 2015-04-10
BRPI0313286A8 (pt) 2018-05-08
DK2801576T3 (en) 2016-03-07
CY1115580T1 (el) 2017-01-04
PT1549313E (pt) 2012-09-05
ES2481044T3 (es) 2014-07-29
ES2560844T3 (es) 2016-02-23
WO2004014380A1 (en) 2004-02-19
KR101045154B1 (ko) 2011-07-04
BRPI0313286B8 (pt) 2021-05-25
IL166512A0 (en) 2006-01-15
AR041190A1 (es) 2005-05-04
BRPI0313286A2 (pt) 2005-07-05
IS2919B (is) 2015-01-15
RS53428B (en) 2014-12-31
SI2497770T1 (sl) 2014-11-28
NO20050514L (no) 2005-03-18
PT2801576E (pt) 2016-03-03
PL375360A1 (pl) 2005-11-28
AU2003261367B2 (en) 2009-03-12
EP2801576A1 (en) 2014-11-12
DK2497770T3 (da) 2014-07-28
HRP20050123A2 (en) 2006-02-28
CN101229164B (zh) 2013-01-02
AU2009202361A1 (en) 2009-07-02
EP1549313A1 (en) 2005-07-06
MXPA05001441A (es) 2005-06-06
BRPI0313286B1 (pt) 2019-02-05
TWI328452B (en) 2010-08-11
EP1549313B1 (en) 2012-06-27
DK1549313T3 (da) 2012-10-01
PE20040772A1 (es) 2004-11-20
NO331591B1 (no) 2012-01-30
HK1202530A1 (en) 2015-10-02
IL166512A (en) 2014-12-31
EP2497770B1 (en) 2014-05-14
ES2388919T3 (es) 2012-10-19
ES2641893T3 (es) 2017-11-14
ZA200501018B (en) 2006-09-27
RS20050108A (en) 2007-09-21
AU2009202361B2 (en) 2011-10-13
IS7682A (is) 2005-02-01
CN100379421C (zh) 2008-04-09
NZ537930A (en) 2008-01-31
JP4430539B2 (ja) 2010-03-10
EP2497770A1 (en) 2012-09-12
EP2975038B1 (en) 2017-07-12
EP1549313A4 (en) 2010-08-04
SI1549313T1 (sl) 2013-01-31
MY146549A (en) 2012-08-15
GEP20084284B (en) 2008-01-10
HK1174037A1 (en) 2013-05-31
RU2005106350A (ru) 2005-11-20
HRP20050123B1 (hr) 2014-04-25
AU2003261367A1 (en) 2004-02-25
HK1072731A1 (en) 2005-09-09
SI2801576T1 (sl) 2016-03-31
CA2494832C (en) 2012-07-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2975038B1 (en) Composition and antiviral activity of substituted azaindoleoxoacetic piperazine derivatives
US7531552B2 (en) Indole, azaindole and related heterocyclic pyrrolidine derivatives
EP1257276B1 (en) Antiviral azaindole derivatives
US6900323B2 (en) Antiviral azaindole derivatives
US8039486B2 (en) Indole, azaindole and related heterocyclic N-substituted piperazine derivatives
EP1499319B1 (en) Bicyclo 4.4.0 antiviral derivatives
AU2001232895A1 (en) Antiviral azaindole derivatives
US20060094717A1 (en) Indole, azaindole and related heterocyclic ureido and thioureido piperazine derivatives
US6900206B2 (en) Indole, azaindole and related heterocyclic sulfonylureido piperazine derivatives
EP1751161B1 (en) Diazaindole-dicarbonyl-piperazinyl antiviral agents