PL212956B1 - Zastosowanie zwiazku o wzorze I lub II, zwiazek o wzorze II, oraz kompozycja farmaceutyczna zawierajaca zwiazek o wzorze II - Google Patents

Zastosowanie zwiazku o wzorze I lub II, zwiazek o wzorze II, oraz kompozycja farmaceutyczna zawierajaca zwiazek o wzorze II

Info

Publication number
PL212956B1
PL212956B1 PL365683A PL36568301A PL212956B1 PL 212956 B1 PL212956 B1 PL 212956B1 PL 365683 A PL365683 A PL 365683A PL 36568301 A PL36568301 A PL 36568301A PL 212956 B1 PL212956 B1 PL 212956B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
ch2och
compound
och
ch2ch3
ch2och2ch3
Prior art date
Application number
PL365683A
Other languages
English (en)
Other versions
PL365683A1 (pl
Inventor
Diane E. Gingrich
Robert L. Hudkins
Original Assignee
Cephalon
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Cephalon filed Critical Cephalon
Publication of PL365683A1 publication Critical patent/PL365683A1/pl
Publication of PL212956B1 publication Critical patent/PL212956B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/407—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with other heterocyclic ring systems, e.g. ketorolac, physostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)

Description

Dziedzina wynalazku
Przedmiotem niniejszego wynalazku są wybrane skondensowane pirolokarbazole o wzorze I lub II, dokładniej zastosowanie związku o wzorze I lub II, związek o wzorze II, oraz kompozycja farmaceutyczna zawierająca związek o wzorze II.
Podstawa wynalazku
Udało się otrzymać różne syntetyczne małe cząsteczki organiczne, biologicznie aktywne i znane w tej dziedzinie ogólnie jako „skondensowane pirolokarbazole (patrz opisy patentowe Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 5475110; 5591855; 5594009 i 5616724). Ponadto w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki Płn. nr 5705511 ujawniono skondensowane związki pirolokarbazolowe o różnej czynnościowej aktywności farmakologicznej. Ujawniono wiele zastosowań skondensowanych pirolokarbazoli obejmujących: wzmacnianie działania i/lub przeżycia komórek pochodzenia neuronalnego, samodzielnie lub w połączeniu z czynnikiem (czynnikami) neurotroficznym i/lub indolokarbozolami; wzmacnianie aktywności wywoływanej przez czynnik troficzny; hamowanie aktywności kinazy białkowej C („PKC); hamowanie aktywności kinazy tyrozynowej trk; hamowanie proliferacji linii komórek raka prostaty; hamowanie szlaków komórkowych zaangażowanych w proces zapalny; i wydłużenie przeżycia komórek nerwowych, którym grozi obumarcie.
Ze stanu techniki, z publikacji WO 00/18407 znane są różne metody zapobiegania lub leczenia różnych schorzeń, polegające na podawaniu skondensowanych pirolokarbazoli. Metody te obejmują zapobieganie utracie słuchu, zapobieganie utracie równowagi, zapobieganie utracie ślimakowych neuronów. Publikacja ujawnia także metody zapobiegania obumieraniu komórek rzęsek słuchowych, jak również metody leczenia uszkodzonych komórek rzęsek słuchowych, gdzie uszkodzenie jest wynikiem urazu na skutek hałasu, infekcji, toksyczności leku. Publikacja WO 00/47583 dotyczy cyklicznych skondensowanych podstawionych pirolokarbazoli i izoindolonów, sposobów ich wytwarzania i ich zastosowania w regulowaniu kinazy protein. Publikacja ta ujawnia także kompozycje farmaceutyczne zawierające te związki stosowane do zapobiegania lub leczenia zaburzeń prostaty, powstawania nowotworu, reumatoidalnego zapalenia stawów, zwłóknień płucnych, miażdżycy tętnic, nawrotu zwężenia.
Zgłaszający stwierdzili, że pewne wybrane skondensowane pirolokarbazole o wzorach ogólnych podanych w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki Płn. nr 5705511, lecz które nie zostały w nim specyficznie ujawnione, mają zaskakujące i nieoczekiwane aktywności biologiczne w porównaniu do związków ujawnionych w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki Płn. Nr 57 05511.
Streszczenie wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest zastosowanie związku pirolokarbazolowego o ogólnym wzorze I lub II,
w których
PL 212 956 B1
R1 i R2 mają takie same lub różne znaczenia i są niezależnie wybrane z grupy obejmującej takie jak atom H lub alkil obejmujący 1-8 atomów węgla (włącznie), podstawiony przez -OH lub -OR4 gdzie R4 oznacza alkil obejmujący 1-4 atomów węgla (włącznie), aryl lub reszta aminokwasu po usunięciu grupy hydroksylowej z grupy karboksylowej oraz
R3 oznacza -CH2OR7;
R7 oznacza alkil obejmujący 1-4 atomów węgla. Związki znajdują zastosowanie do wytwarzania leku przeznaczonego do leczenia schorzeń stercza, zaburzeń naczyniowych, zaburzeń patologicznych, chorób i zaburzeń neurodegeneracyjnych, choroby Alzheimera, stwardnienia zanikowego bocznego, choroby Parkinsona, udaru, niedokrwienia, choroby Huntingtona, otępienia związanemu z AIDS, padaczki, stwardnienia rozsianego, neuropatii obwodowej, neuropatii obwodowej wywołanej chemioterapią, neuropatii obwodowej związanej z AIDS, lub urazów mózgu lub rdzenia kręgowego, szpiczaka mnogiego i białaczki.
Korzystnie stosowane są związki wybrane są z tabeli I.
T a b e l a I
Związek R1 R2 R3
1 CH2CH2CH2OH H CH2OCH2CH3
2 CH2CH2CH2OH H CH2OCH3
3 CH2CH2CH2OH H CH2OCH(CH3)2
4 CH2CH2CH2OH Z CH2OCH(CH3)CH2CH3
5 CH2CH2CH2OH H (S)-CH2OCH(CH3)CH2CH3
6 CH2CH2CH2OH H (R)-CH2OCH(CH3)CH2CH3
7 CH2CHOHCH3 H CH2OCH2CH3
8 CH2CH2CH2OH H CH2OCH2CH2CH3
9 CH2CH2CH2OH H CH2OCH2CH2CH2CH3
14 H CH2CHOHCH3 CH2OCH2CH3
17 CH2CH2CH2OH H CH2OC(CH3)3
18 CH2CH2CH2OCOCH2NH2 H CH2OCH(CH3)2
19 CH2CH2CH2OCOCH(NH2)CH2- CH2CH2CH2NH2 H CH2OCH(CH3)2
20 CH2CH2CH2OCOCH2CH2NH2 H CH2OCH(CH3)2
21 CH2CH2CH2OCOCH2CH2- CH2N(CH3)2 H CH2OCH(CH3)2
22 CH2CH2CH2OCOCH2N(CH3)2 H CH2OCH(CH3)2
23 CH2CH2CH2OCOCH2CH2CH2- CH2CH2NH2 H CH2OCH(CH3)2
31 H H CH2OCH2CH3
32 H H CH2OCH(CH3)2
40 CH2CH2CH2OH CH2OH CH2OCH(CH3)2
Korzystnie, zastosowanie obejmuje schorzenia stercza obejmują rak stercza lub łagodny przerost stercza.
Korzystnie, zastosowanie dotyczy zaburzeń naczyniowych obejmujących złośliwe guzy lite, choroby oka, zwyrodnienie plamki żółtej, endometriozę, retinopatię cukrzycową, łuszczycę lub hemangioblastomę.
PL 212 956 B1
Korzystnie zastosowanie dotyczy zaburzeń patologicznych obejmujących powstawanie nowotworu, reumatoidalne zapalenie stawów, przewlekłe zapalenie stawów, zwłóknienie płuc, zwłóknienie szpiku, nieprawidłowe gojenie ran, miażdżycę naczyń lub restenozę.
Korzystnie zastosowanie dotyczy białaczki, która jest ostrą białaczką szpikową, przewlekłą białaczką szpikową, ostrą białaczką limfocytową lub przewlekłą białaczką limfocytową.
Przedmiotem niniejszego wynalazku są także nowe związki o wzorze II, wybrane z tabeli I', w której określono dokładnie podstawniki R1, R2 i R3.
T a b e l a I'
Związek R1 R2 R3
2 CH2CH2CH2OH H CH2OCH3
3 CH2CH2CH2OH H CH2OCH(CH3)2
4 CH2CH2CH2OH Z CH2OCH(CH3)CH2CH3
5 CH2CH2CH2OH H (S)-CH2OCH(CH3)CH2CH3
6 CH2CH2CH2OH H (R)-CH2OCH(CH3)CH2CH3
7 CH2CHOHCH3 H CH2OCH2CH3
8 CH2CH2CH2OH H CH2OCH2CH2CH3
9 CH2CH2CH2OH H CH2OCH2CH2CH2CH3
14 H CH2CHOH CH3 CH2OCH2CH3
17 CH2CH2CH2OH H CH2OC(CH3)3
18 CH2CH2CH2OCOCH2NH2 H CH2OCH(CH3)2
19 CH2CH2CH2OCOCH(NH2)CH2- CH2CH2CH2NH2 H CH2OCH(CH3)2
20 CH2CH2CH2OCOCH2CH2NH2 H CH2OCH(CH3)2
21 CH2CH2CH2OCOCH2CH2- CH2N(CH3)2 H CH2OCH(CH3)2
22 CH2CH 2CH2OCOCH2N(CH3)2 H CH2OCH(CH3)2
23 CH2CH2CH2OCOCH2CH2CH2- CH2CH2NH2 H CH2OCH(CH3)2
31 H H CH2OCH2CH3
32 H H CH2OCH(CH3)2
40 CH2CH2CH2OH CH2OH CH2OCH(CH3)2
Przedmiotem niniejszego wynalazku jest także kompozycja farmaceutyczna zawierająca jako substancję czynną związek o wzorze II, wybrany z tabeli I.
Korzystnie skondensowane pirolokarbazole o wzorze II charakteryzują wzory strukturalne przedstawione w tablicy II:
PL 212 956 B1
Tablica II
Związek Wzór strukturalny
I H
1 k
o
ryZo^
kNHJU
2 \
0 < y=o
Ąo
3 4 H 1 ,NS__
0
JO<0
k^
+/-
4 .N. _
o xfto
1 ''OH
(S) ćr°
5 'Λ
JL / \ JLz^
l^~'OH
PL 212 956 B1 cd. tablicy II
Związek Wzór strukturalny
6 CR) H
N =0
Ctk
X o X
7 XO ,N. i 7=°
c ryn
^OH
8 λ 0 Λ°
u ΓΜΪ
I^OH
9 H
o A=°
Y^i
14 ''O Η ćr°
P- ryn
H /OH
17 o- A=°
rPn \ OH
PL 212 956 B1 cd. tablicy II
Związek Wzór strukturalny
18 Λ H 1 ,NK / y=o
X o VoA/Nh,
19 Λ n
V- jcmzO
S i Ύ°\ΧΗ,
20 Λ ?%=°
A— CTMX)
^nh2
21 Jo Ą=O
γΟό
\.θΛ^-ΝΜ02
22 o- -\ H Λ=°
23 A »ί Λ=Ο
Λο
\οΛ^_νη2
PL 212 956 B1 cd. tablicy II
Związek Wzór strukturalny
31 —0 θ ł H
32 —<o <N>=o 1 H
40 i ' ^o < >=O Ą ΌΗ '-'OH
Szczególnie korzystne związki przedstawione w tablicy II obejmują związki 1, 3, 4, 5, 6, 7 i 22, przy czym związki 3 i 22 są najbardziej korzystne.
Związki o wzorze I i II oraz przedstawione w tablicach I i II mogą się także odnosić do opisanych tu „związków”, „związku według niniejszego wynalazku”, „skondensowanego pirolokarbazolu”, „skondensowanego pirolokarbazolu według nieniejszego wynalazku” itp.
Niektóre związki według opisu patentowego Stanów Zjednoczonych Ameryki Płn. Nr 5705511 przedstawiono w tablicy IIa
Tablica Ila
Związek Wzór strukturalny
H
A Ń i 7=°
'ιΤΛ-ΥΡΓΊ
Λ. \ JL > OH
B H A
γλΖγ~Ο
^OH
PL 212 956 B1 cd. tablicy IIa
Związek Wzór strukturalny
C H 1 N o Ρχ-γ nh2 X
D H 1 N o 1 H
Stosowany tu w definicjach R1 i R2 termin „aminokwas” obejmuje cząsteczkę zawierającą zarówno grupę aminową jak i karboksylową. Termin ten obejmuje „α-aminokwas”, którym jest zazwyczaj kwas karboksylowy z grupą aminową na węglu sąsiadującym z grupą karboksylową. α-aminokwasy mogą być naturalne lub syntetyczne. Aminokwasy obejmują także „dipeptydy”, które zdefiniowano tu jako dwa aminokwasy połączone wiązaniem peptydowym. Zatem składniki dipeptydów nie ograniczają się do α-aminokwasów, może to być dowolna cząsteczka zawierająca zarówno grupę aminową jak i grupę karboksylową. Korzystne są α-aminokwasy, dipeptydy takie jak lizyno-e-alanina i aminokwasy alkanokarboksylowe składające się z 2-8 atomów węgla, np. kwas 3-dimetyloaminomasłowy.
Farmaceutycznie dopuszczalne sole skondensowanych pirolokarbazoli według niniejszego wynalazku także wchodzą w zakres związków ujawnionych w tym opisie. Stosowany tu termin farmaceutycznie dopuszczalne sole obejmuje nieorganiczną sól addycyjną z kwasem taką jak chlorowodorek, siarczan i fosforan, lub sól addycyjną z kwasem organicznym taką jak octan, maleinian, fumaran, winian i cytrynian. Przykładami farmaceutycznie dopuszczalnych soli metali są sole z metalem alkalicznym takie jak sól sodowa i sól potasowa, sole metali ziem alkalicznych takie jak sól magnezowa i sól wapniowa, sól glinowa i sól cynkowa. Przykładami farmaceutycznie dopuszczalnych soli amoniowych są sól amoniowa i sól tetrametyloamoniowa. Przykładami farmaceutycznie dopuszczalnych soli addycyjnych z aminami organicznymi są sole z morfoliną i piperydyną. Przykładami farmaceutycznie dopuszczalnych aminowych soli addycyjnych z aminokwasami są sole z lizyną, glicyną i fenyloalaniną.
Związki przedstawiane w tym opisie można komponować w kompozycje farmaceutyczne poprzez zmieszanie z farmaceutycznie dopuszczalnymi nietoksycznymi rozczynnikami lub nośnikami. Jak wskazano powyżej, takie kompozycje można skomponować do zastosowania pozajelitowego, szczególnie w postaci ciekłych roztworów lub zawiesin; lub doustnego, szczególnie w postaci tabletek lub kapsułek; lub donosowego, szczególnie w postaci proszków, kropli donosowych lub aerozoli; lub przezskornego, poprzez np. opatrunki przezskórne.
Zgodnie z tym, innym aspektem niniejszego wynalazku są kompozycje farmaceutyczne zawierające związek o wzorze II, według niniejszego wynalazku, ewentualnie w mieszance z jednym lub więcej farmaceutycznie dopuszczalnymi rozczynnikami lub nośnikami. Niektóre korzystne kompozycje farmaceutyczne służą do hamowania jednej lub więcej spośród aktywności kinazy trk, aktywności kinazy VEGFR, aktywności PKC lub PDGFR, przy czym kompozycja zawiera związek o wzorze I, wzorze II, z tablicy I lub tablicy II i ewentualnie jeden lub więcej farmaceutycznie dopuszczalny nośnik (nośniki). Inne korzystne kompozycje farmaceutyczne służą do wzmacniania aktywności czynnika troficznego lub ChAT rdzenia kręgowego, przy czym kompozycja zawiera związek o wzorze I, wzorze II, z tablicy I lub tablicy II i farmaceutycznie dopuszczalny nośnik.
PL 212 956 B1
Inne korzystne kompozycje farmaceutyczne służą do leczenia lub zapobiegania angiogenezie i zaburzeniom naczyniowym takim jak zł o ś liwe guzy lite, endometrioza, retinopatia, retinopatia cukrzycowa, łuszczyca, hemangioblastoma, choroby oka lub zwyrodnienie plamki żółtej. Inne korzystne kompozycje farmaceutyczne służą do leczenia lub zapobiegania powstawaniu nowotworu, reumatoidalnemu zapaleniu stawów, zwłóknieniu płuc, zwłóknieniu szpiku, nieprawidłowemu gojeniu ran, miażdżycy naczyń lub restenozie. Inne korzystne kompozycje farmaceutyczne służą do leczenia lub zapobiegania chorobom i zaburzeniom neurodegeneracyjnym, chorobie Alzheimera, stwardnieniu zanikowemu bocznemu, chorobie Parkinsona, udarowi, niedokrwieniu, chorobie Huntingtona, otępieniu związanemu z AIDS, padaczce, stwardnieniu rozsianemu, obwodowej neuropatii, chemioterapii wywołanej obwodową neuropatią, neuropatii obwodowej związanej z AIDS lub urazom mózgu lub rdzenia kręgowego. Inne korzystne kompozycje farmaceutyczne służą do leczenia lub zapobiegania schorzeniom stercza takim jak rak stercza lub łagodny przerost stercza. Jeszcze inne korzystne kompozycje farmaceutyczne stosuje się do leczenia lub zapobiegania szpiczakowi mnogiemu i białaczkom obejmującym m.in. ostrą białaczkę szpikową, przewlekłą białaczkę szpikową, ostrą białaczkę limfocytową i przewlekłą białaczkę limfocytową.
Kompozycje można dogodnie podawać w jednostkowej postaci dawkowania i można je otrzymywać z zastosowaniem dowolnej z metod dobrze znanych w dziedzinie farmacji, np. opisanych w Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Pub. Co., Easton, PA, 1980). Preparaty do podawania pozajelitowego mogą zawierać jako zwykłe rozczynniki sterylną wodę lub solankę, glikole polialkilenowe takie jak glikol polietylenowy, oleje pochodzenia roślinnego, uwodornione naftaleny itp. Do kontroli uwalniania substancji czynnych w szczególności mogą być przydatne rozczynniki takie jak biokompatybilny, biodegradowalny polimer laktydowy, kopolimer laktyd/glikolid lub kopolimery polioksyetylenpolioksypropylen. Inne potencjalnie przydatne układy podawania pozajelitowego tych substancji czynnych obejmują cząstki kopolimeru etylen-octan winylu, pompy osmotyczne, wszczepialne systemy do wlewów i liposomy. Preparaty do podawania inhalacyjnie jako rozczynniki zawierają np. laktozę, mogą być to również roztwory wodne zawierające np. polietoksylowany (9) eter laurylowy, glikocholan i deoksycholan, lub roztwory olejowe do podawania w postaci kropli donosowych lub jako żel do stosowania donosowego. Preparaty do podawania pozajelitowego mogą także zawierać glikocholan do podawania podpoliczkowego, salicylan do podawania doodbytniczego lub kwas cytrynowy do podawania dopochwowego. Preparaty do opatrunków przezskórnych są korzystnie emulsjami lipofilowymi.
Stężenia związków według wynalazku w kompozycji terapeutycznej lub farmaceutycznej będą się zmieniać zależnie od niektórych czynników, w tym dawki podawanego leku, właściwości chemicznych (np. hydrofobowości) stosowanych związków i sposobu podawania. Ujmując ogólnie, związki według wynalazku można podawać w wodnym fizjologicznym roztworze buforowym zawierającym około 0,1 do 10% wagowo-objętościowych związku do podawania pozajelitowego. Typowe zakresy dawek wynoszą od około 1 μg/kg do około 1 g/kg masy ciała dziennie; korzystny zakres dawek wynosi od około 0,01 mg/kg do 100 mg/kg masy ciała dziennie. Korzystny sposób dawkowania podawanego leku zależy prawdopodobnie od takich zmiennych jak rodzaj i zakres postępu choroby lub zaburzenia, ogólny stan zdrowia konkretnego pacjenta, względna efektywność biologiczna wybranego związku i użyte w preparacie rozczynniki i jego sposób podawania.
Przedmiotem niniejszego wynalazku jest zastosowanie przedmiotowych związków do wytwarzania leku do leczenia lub zapobiegania schorzeniom stercza. W korzystnym rozwiązaniu, chorobą stercza jest rak stercza lub łagodny przerost stercza.
Przedmiotowe związki mają zastosowanie do wytwarzania leku do leczenia lub zapobiegania zaburzeniom naczyniowym, w których do stanów patologicznych przyczynia się aktywność kinazy VEGFR. W korzystnym rozwiązaniu, zaburzeniami naczyniowymi są złośliwe guzy lite, choroby oka, zwyrodnienie plamki żółtej, endomtrioza, retmopatia cukrzycowa, łuszczyca lub hemangioblastoma.
Przedmiotowe związki mają zastosowanie do wytwarzania leku do leczenia lub zapobiegania zaburzeniom, w których do stanów patologicznych przyczynia się aktywność PDGFR. W korzystnych rozwiązaniach, zaburzeniem patologicznym jest nowotwór, reumatoidalne zapalenie stawów, przewlekłe zapalenie stawów, zwłóknienie płuc, zwłóknienie szpiku, nieprawidłowe gojenie ran, miażdżyca naczyń lub restenoza.
Przedmiotowe związki mają zastosowanie do wytwarzania leku do leczenia lub zapobiegania zaburzeniom charakteryzujących się nieprawidłową aktywnością komórek wrażliwych na czynnik troficzny. W korzystnych rozwiązaniach, aktywność komórek wrażliwych na czynnik troficzny obejmuje aktywność ChAT. W innym rozwiązaniu przedmiotem niniejszego wynalazku jest sposób leczenia lub
PL 212 956 B1 zapobiegania chorobom i zaburzeniom neurodegeneracyjnym, chorobie Alzheimera, stwardnieniu zanikowemu bocznemu, chorobie Parkinsona, udarowi, niedokrwieniu, chorobie Huntingtona, otępieniu związanemu z AIDS, padaczce, stwardnieniu rozsianemu, obwodowej neuropatii, chemioterapii wywołanej obwodową neuropatią, neuropatii obwodowej związanej z AIDS lub urazom mózgu lub rdzenia kręgowego.
Stosowany tu termin „działanie w celu zmodyfikowania terminów „funkcja i „przeżycie oznacza pozytywną lub negatywną przemianę lub zmianę. Działanie pozytywne jest tu opisywane jako „wzmacnianie lub „zwiększanie, a działanie negatywny jest tu opisywane jako „zahamowanie lub „hamowanie.
Stosowane tu terminy „zwiększanie lub „wzmacnianie w celu zmodyfikowania terminów „funkcja lub „przeżycie oznaczają, że obecność skondensowanych pirolokarbazoli ma dodatni wpływ na działanie i/lub przeżycie komórki wrażliwej na czynnik troficzny w porównaniu z brakiem stosowania skondensowanych pirolokarbazoli. Przykładowo, co nie stanowi ograniczenia, jeżeli chodzi o przeżycie np. neuronu cholinergicznego skondensowane pirolokarbazole wydłużałby przeżycie populacji neuronów cholinergicznych, którym grozi obumarcie (z uwagi np. na uszkodzenie, stan chorobowy, stan zwyrodnieniowy lub naturalne starzenie) w porównaniu z populacją neuronów cholinergicznych nie poddanych działaniu takich skondensowanych pirolokarbazoli, w przypadku gdy okazałoby się, że leczona populacja charakteryzuje się porównywalnie większym okresem funkcjonowania niż populacja nie leczona. Następnym przykładem, ponownie nie stanowiącym ograniczenia, w odniesieniu do działania np. neuronu czuciowego, skondensowane pirolokarbazole dowodziłyby wzmacniania działania (np. wydłużenia neurytu) populacji neuronów czuciowych w porównaniu z populacją neuronów czuciowych nie poddanych działaniu takich skondensowanych pirolokarbazoli, jeśli okazałoby się, że wydłużenie neurytu leczonej populacji jest porównywalnie większe od wydłużenia neurytu populacji nie leczonej.
Stosowane tu terminy „hamują i „hamowanie oznaczają, że specyficzna odpowiedź wskazanej substancji (np. aktywność enzymatyczna) jest porównywalnie mniejsza w obecności skondensowanych pirolokarbazoli według niniejszego wynalazku.
Stosowane tu terminy „neuron, „komórka pochodzenia nerwowego i „komórka nerwowa obejmują, lecz nie ograniczają się do niej, heterogeniczną populację typów nerwowych mających pojedyncze lub liczne transmitery i/lub pojedyncze lub liczne funkcje; korzystnie są to neurony cholinergiczne i neurony czuciowe. Stosowane tu wyrażenie „neuron cholinergiczny obejmuje neurony ośrodkowego układu nerwowego (CNS) i obwodowego układu nerwowego (PNS), których neurotransmiterem jest acetylocholina; przykładami są podstawne neurony przodomózgowia i rdzenia kręgowego. Stosowane tu wyrażenie „neuron czuciowy obejmuje neurony odpowiadające na bodźce środowiskowe (np. temperaturę, ruch) np. ze skóry, mięśni i stawów; przykładem jest neuron z DRG.
Stosowany tu termin „czynnik troficzny obejmuje cząsteczkę, która bezpośrednio lub pośrednio wpływa na przeżycie lub funkcję komórki wrażliwej na czynnik troficzny. Przykładowe czynniki troficzne obejmują rzęskowy czynnik neurotroficzny (CNTF), zasadowy czynnik wzrostu fibroblastów (bFGF), insulinę i insulinopodobne czynniki wzrostu (np. IGF-I, IGF-II, IGF-III), interferony, interleukiny, cytokiny i neurotrofiny obejmujące czynnik wzrostu nerwu (NGF), neurotrofinę-3 (NT-3), neurotrofię-4/5 (NT-4/5) i czynnik wzrostu pochodzenia mózgowego (BDNF).
„Komórka wrażliwa na czynnik „wzrostu w tym opisie obejmuje komórkę zawierającą receptor, z którym czynnik troficzny może się specyficznie łączyć; przykłady obejmują neurony (np. cholmergiczne i neurony czuciowe) i komórki nie nerwowe (np. monocyty i komórki nowotworowe).
Stosowane tu terminy „aktywność czynnika troficznego i „aktywność wywołana przez czynnik troficzny są określone jako dowolna odpowiedź, która bezpośrednio lub pośrednio wynika z wiązania czynnika troficznego (np. NGF) z komórką zawierającą receptor czynnika troficznego (np. neuron zawierający trk). W przypadku np. wiązania NGF z trk przykładowa odpowiedź obejmowałaby autofosforylację reszt tyrozyny trk, prowadząc do zwiększonej aktywności ChAT, której wynikiem jest wzmacnianie przeżycia i/lub działania neuronu.
Stosowany w wyrażeniach „aktywność czynnika troficznego i „aktywność wywołana przez czynnik troficzny termin „czynnik troficzny obejmuje zarówno endogenne jak i egzogenne czynniki troficzne, przy czym „endogenny odnosi się do czynnika troficznego występującego w układzie, a „egzogenny odnosi się do czynnika troficznego wprowadzanego do układu. „Aktywno ść wywoł ana przez czynnik troficzny obejmuje aktywność wywołaną przez (1) endogenne czynniki troficzne; (2) egzogenne czynniki troficzne; i (3) kombinację endogennych i egzogennych czynników troficznych.
PL 212 956 B1
Stosowany tu termin „trk obejmuje rodzinę receptorów neurotrofiny o wysokim powinowactwie zawierającej obecnie trk A, trk B i trk C i inne białka związane z błoną, z którymi może łączyć się neurotrofina.
Stosowane tu wyrażenie „stan hiperproliferacyjny w odniesieniu do terminu „komórek dotyczy komórek, których nie uregulowany i/lub nieprawidłowy wzrost może prowadzić do rozwoju niepożądanego stanu, np. stanu rakowatego lub stanu łuszczycowego.
Stosowane tu terminy „rak i „rakowaty odnoszą się do dowolnej złośliwej proliferacji komórek u ssaka. Przykłady obejmują raka stercza, łagodny przerost stercza, raka jajnika, sutka i inne rozpoznane raki. Stosowany tu termin „łuszczyca i stan łuszczycowy odnosi się do zaburzeń polegających na nadmiernym rozroście keratynocytów, naciekaniu komórek zapalnych i przemianie cytokin.
Stosowane tu wyrażenie „którym grozi obumarcie w połączeniu z materiałem biologicznym, np. komórką taką jak neuron, oznacza stan lub warunki, które ujemnie wpływają na materiał biologiczny tak, że występuje zwiększone prawdowodobieństwo obumarcia materiału z uwagi na taki stan lub warunki. Np. ujawnione tu związki mogą „ocalić lub zwiększyć przeżycie neuronów ruchowych, którym naturalnie grozi obumarcie w modelu in ovo programowanej śmierci komórki. Podobnie np. neuronowi może grozić obumarcie z uwagi na naturalny proces starzenia się, który powoduje śmierć neuronu, lub z uwagi na uszkodzenie, takie jak uraz głowy, który może być taki, że np. neuronom i/lub glejowi pod wpływem takiego urazu może grozić obumarcie. Ponadto np. neuronowi może grozić obumarcie z uwagi na stan lub warunki chorobowe, jak w przypadku neuronów, którym grozi obumarcie powodowane przez chorobę ALS. Zatem, przez wydłużenie przeżycia komórki, której grozi obumarcie poprzez zastosowanie związku zgłaszanego wynalazku rozumie się, że taki związek zmniejsza lub zapobiega ryzyku śmierci komórki.
Stosowany tu termin „kontaktowanie oznacza bezpośrednie lub pośrednie działanie, powodujące zbliżenie do siebie grup tak, aby bezpośrednio lub pośrednio związały się fizycznie ze sobą, dzięki czemu osiąga się pożądany rezultat. Zatem, w tym opisie, można „kontaktować komórkę docelową ze związkiem według wynalazku, nawet jeśli związek i komórka niekoniecznie fizycznie łączą się ze sobą (jak np. w przypadku, w którym fizycznie łączą się ze sobą ligand i receptor), jeżeli tylko osiąga się pożądany rezultat (np. wydłużenie przeżycia komorki). Kontaktowanie obejmuje zatem takie działanie jak umieszczenie grup razem w zbiorniku (np. poprzez wprowadzenie związku według wynalazku do zbiornika zawierającego komórki do badań in vitro), jak również podawanie związku jednostce docelowej (np. wstrzykiwanie związku według wynalazku zwierzęciu laboratoryjnemu do badania in vivo lub ludziom w celach terapeutycznych lub leczniczych).
Skondensowane pirolokarbazole według niniejszego wynalazku mają ważne czynnościowe aktywności farmakologiczne, które znajdują zastosowanie w różnych układach, w tym zarówno w badawczych jak i terapeutycznych. W celu ułatwienia prezentami i aby nie ograniczać zakresu zastosowań tych związków, na ogół aktywności skondensowanych pirolokarbazoli są następujące:
Hamowanie aktywności enzymatycznej
Wpływ na działanie i/lub przeżycie komórek wrażliwych na czynnik troficzny
Hamowanie odpowiedzi związanej z zapaleniem
Hamowanie wzrostu komórki związanego ze stanami hiperproliferacyjnymi
Hamowanie rozwojowo zaprogramowanej śmierci neuronów ruchowych
Hamowanie aktywności enzymatycznej można określić stosując np. testy hamowania VEGFR (np. hamowanie VEGFR2), hamowania MLK (np. hamowanie MLK1, MLK2 lub MLK3), hamowania kinazy PDGFR, fosforylacji trk stymulowanej przez NGF, hamowania PKC lub hamowania kinazy tyrozynowej trk. Wpływ na działanie i/lub przeżycie komórek wrażliwych na czynnik troficzny, np. komórek pochodzenia nerwowego, można ustalić stosując dowolny z następujących testów: (1) test hodowanej acetylotransferazy choliny („ChAT) rdzenia kręgowego; (2) test wydłużenia hodowanego neurytu zwoju korzenia grzbietowego („DRG); (3) test aktywności ChAT hodowanego neuronu podstawy przodomózgowia („BFN). Hamowanie odpowiedzi związanej z zapaleniem można ustalić stosując test 2,3-dioksygenazy indolaminowej („IDO) mRNA. Hamowanie wzrostu komórki związane ze stanami hiperproliferacyjnymi można określić przez pomiar wzrostu rozważanych linii komórkowych, takich jak linia AT2 w przypadku raka stercza. Hamowanie rozwojowo zaprogramowanej śmierci neuronów ruchowych można ocenić in ovo, stosując somatyczne neurony ruchowe zarodka kurzego, których komórki ulegają naturalnej śmierci pomiędzy dniem 6 i 10 życia zarodka, i analizując hamowanie takiej naturalnie występującej śmierci komórki, w którym pośredniczą związki ujawnione w tym opisie.
PL 212 956 B1
Hamowanie aktywności enzymatycznej przez skondensowane związki pirolokarbazolowe według niniejszego wynalazku można określić stosując np. następujące testy:
Test hamowania VEGFR
Test hamowania MLK
Test hamowania aktywności PKC
Test hamowania aktywności kinazy tyrozynowej trkA
Hamowanie fosforylacji trk stymulowanej przez NGF w preparacie całych komórek
Test hamowania receptora czynnika wzrostu płytek (PDGFR)
Szczególnie hamowanie receptora czynnika wzrostu śródbłonka naczyń (VEGFR) sugeruje przydatność np. w chorobach, gdzie angiogeneza odgrywa ważną rolę, takich jak złośliwe guzy lite, endometrioza, retinopatia cukrzycowa, łuszczyca, hemangioblastoma, jak również inne choroby oka i raki. Hamowanie MLK sugeruje przydatność np. w chorobach neurologicznych. Natomiast hamowanie trk sugeruje przydatność np. w chorobach stercza takich jak rak stercza i łagodny przerost stercza, i leczeniu bólu w zapaleniu. Hamowanie receptora czynnika wzrostu płytek (PDGFR) sugeruje przydatność np. w różnych formach nowotworzenia, reumatoidalnym zapaleniu stawów, zwłóknieniu płuc, zwłóknieniu szpiku, nieprawidłowym gojeniu ran, chorobach z sercowo-naczyniowymi punktami końcowymi, takich jak miażdżyca naczyń, restenoza, restenoza po angioplastyce, itp.
Wykazano także, że skondensowane pirolokarbazole mają dodatni wpływ na działanie i przeżycie komórek wrażliwych na czynnik troficzny przez wydłużenie przeżycia neuronów. W przypadku przeżycia neuronu cholinergicznego, związek może np. zabezpieczać przeżycie populacji neuronów cholinergicznych, którym grozi obumarcie (z uwagi np. na uszkodzenie, stan chorobowy, stan zwyrodnieniowy lub naturalny postęp) w porównaniu z populacją neuronów cholinergicznych nie potraktowanych takim związkiem, jeśli potraktowana populacja wykazuje porównywalnie dłuższy okres funkcyjności niż populacja nie potraktowana.
Dla rozmaitych zaburzeń neurologicznych charakterystyczne są komórki nerwowe, które obumierają, są uszkodzone, czynnościowo upośledzone, podlegają degeneracji aksonów, zagrożone obumarciem itp. Te zaburzenia obejmują m.in. choroby i zaburzenia neurologiczne, chorobę Alzheimera; zaburzenia neuronu ruchowego (np. stwardnienie zanikowe boczne); chorobę Parkinsona; zaburzenia naczyniowo-mózgowe (np. udar, niedokrwienie); chorobę Huntingtona; otępienie związane z AIDS; padaczkę; stwardnienie rozsiane; neuropatie obwodowe (np. atakujące neurony DRG w neuropatii obwodowej związanej z chemioterapią) obejmujące neuropatię cukrzycową i neuropatię obwodową związaną z AIDS; zaburzenia wywołane przez aminokwasy pobudzające; i zaburzenia związane z urazami mózgu lub rdzenia krę gowego wstrzą sowymi lub przenikają cymi.
Te związki są przydatne nie tylko do wzmacniania aktywności wywołanej przez czynnik troficzny komórek wrażliwych na czynnik troficzny, np. neuronów cholinergicznych, lecz także mogą działać jako środki zwiększające przeżycie innych typów komórek nerwowych, np. dopaminergicznych lub glutaminergicznych. Czynnik wzrostu może regulować przeżycie neuronów przez przekazywanie sygnałów w dół kaskad małych białek wiążących GTP: ras, rac i cdc42 (Denhardt, D.T., Biochem. J., 1996, 318, 729). Specyficznie, aktywacja ras prowadzi do fosforylacji i aktywacji pozakomórkowej kinazy aktywowanej przez receptor (ERK), która jest związana z biologicznymi procesami wzrostu i róż nicowania.
Stymulacja rac/cdc42 prowadzi do zwiększenia aktywacji INK i p38, odpowiedzi związanych ze stresem, apoptozą i zapaleniem. Chociaż odpowiedzi związane z czynnikiem wzrostu odbywają się zasadniczo poprzez szlak ERK, wpływanie na te ostatnie procesy może prowadzić do alternatywnych mechanizmów przeżycia komórek nerwowych, które mogą naśladować właściwości czynnika wzrostu wydłużające przeżycie (Xia i in., Science, 1995, 270, 1326). Związki według niniejszego wynalazku mogą także działać jako środki wydłużające przeżycie dla komórek nerwowych i nie nerwowych przez mechanizmy związane z - lecz także różne od - przeżycia, w których pośredniczy czynnik wzrostu, np. hamowanie szlaków JNK i p38 MAPK, które może prowadzić do przeżycia przez hamowanie apoptotycznych procesów śmierci komórkowej. Przedstawione związki są także przydatne w leczeniu zaburzeń związanych z obniżoną aktywnością ChAT lub śmiercią, uszkodzeniem neuronów ruchowych rdzenia kręgowego, a także mają przydatność np. w chorobach związanych z apoptotyczną śmiercią komórki ośrodkowego i obwodowego układu nerwowego, układu immunologicznego i w chorobach zapalnych. ChAT katalizuje syntezę neurotransmitera acetylocholiny i przyjmuje się, że jest enzymatycznym znacznikiem dla czynnościowego neuronu cholinergicznego. Neuron czynnościowy jest także zdolny do przeżycia. Przeżycie neuronu testuje się przez oznaczanie ilościowe specyficznego
PL 212 956 B1 wychwytu i enzymatycznej konwersji barwnika (np. kalceiny AM) przez żywe neurony. Związki opisane w tym opisie mogą także znajdować zastosowanie w leczeniu stanów chorobowych, w które jest zaangażowana złośliwa proliferacja komórek, takich jak wiele raków.
Ze względu na ich różnorodne użyteczne zastosowania, właściwości izomerycznych skondensowanych pirolokarbazoli i izoindolonów można wykorzystywać w innych układach, takich jak badanie. Np. związki można stosować do opracowywania modeli in vitro przeżycia, działania, identyfikacji komórek nerwowych lub do klasyfikowania innych syntetycznych związków, które mają aktywności podobne do aktywności izomerycznych skondensowanych pirolokarbazoli i izoindolonów. Zatem związki według tego wynalazku są przydatne jako związki standardowe lub związki wzorcowe do stosowania w testach lub próbach do określania aktywności środka w farmaceutycznym programie badawczym.
Związki można także stosować w celu badania, definiowania i określania celów cząsteczkowych związanych z odpowiedziami czynnościowymi. Np. przez znakowanie radioaktywne izomerycznego skondensowanego związku pirolokarbazolowego lub izoindolonowego związanego specyficzną funkcją komórkową (np. procesem wywoływania mitozy), jednostkę docelową, z którą łączy się pochodna, można zidentyfikować, wydzielić i oczyścić w celu scharakteryzowania. Tytułem dalszego zilustrowania, związki można stosować do opracowywania testów i modeli służących do dalszego badania ról, jakie odgrywa hamowanie serynowotreoninowej lub tyrozynowej kinazy białkowej (np. PKC, kinaza tyrozynowa trk) w mechanistycznych aspektach związanych z nimi zaburzeń i chorób. Zatem związki według niniejszego wynalazku są przydatne jako reagenty diagnostyczne w testach diagnostycznych, takich jak testy wymienione w tym opisie.
Wyniki otrzymane w testach VEGFR i MLK przedstawiono poniżej. Opisano także bardziej szczegółowo inne testy. Nie mają one na celu ograniczenia zakresu tego ujawnienia, ani nie powinny być interpretowane jako takie. Niektóre skróty użyte do opisania poniższych wyników mają następujące znaczenia: ,^g” oznacza mikrogram, „mg oznacza miligram, „g” oznacza gram, „μΓ oznacza mikrolitr, „ml oznacza mililitr, „l oznacza litr, „nM oznacza nanomol, „μΜ oznacza mikromol, „mM oznacza milimol, „M oznacza mol i „nm oznacza nanometr.
Synteza
Związki według niniejszego wynalazku można wytworzyć wieloma sposobami dobrze znanymi fachowcom w tej dziedzinie. Związki można zsyntetyzować sposobami opisanymi na Schematach poniżej lub też wprowadzając do nich zmiany, co jest oczywiste dla fachowców w tej dziedzinie. Odpowiednie modyfikacje i podstawienia są oczywiste i dobrze znane lub można je łatwo wprowadzić zgodnie z naukową literaturą dla fachowców w dziedzinie. Wszystkie sposoby ujawnione w połączeniu z niniejszym wynalazkiem rozpatruje się do praktycznego zastosowania w dowolnej skali, obejmującej miligramy, gramy, multigramy, kilogramy, multikilogramy lub skalę przemysłową.
Należy zauważyć, że związki według niniejszego wynalazku mogą zawierać jeden lub więcej asymetrycznie podstawionych atomów węgla, więc można je wydzielić w optycznie czynnych lub racemicznych formach. Zatem wszystkie chiralne, diastereomeryczne, racemiczne formy oraz wszystkie geometryczne izomeryczne formy są objęte zakresem wynalazku, jeśli szczególnie nie wskazano specyficznej stereochemii lub formy izomerycznej. Fachowcy w dziedzinie dobrze znają metody otrzymywania takich optycznie czynnych form. Mieszaniny stereoizomerów np. można rozdzielać stosując standardowe techniki, obejmujące, lecz nie ograniczające się do nich, rozdzielanie racemicznych form w układzie z odwróconymi fazami, oraz chromatografię chiralną, korzystnie tworzenie soli, rekrystalizację itp. lub syntezę chiralną albo z aktywnych substancji wyjściowych lub przez odpowiednio dostosowaną chiralną syntezę pożądanych centrów.
Łatwo można wywnioskować, że grupy funkcyjne występujące w związkach według niniejszego wynalazku mogą zawierać grupy zabezpieczające. Np. podstawniki w łańcuchu bocznym aminokwasu mogą być podstawione przez grupy zabezpieczające takie jak benzyloksykarbonyl lub t-butoksykarbonyl. Grupy zabezpieczające są znane jako chemiczne grupy funkcyjne, które można selektywnie wprowadzać i usuwać z grup funkcyjnych, takich jak hydroksylowa i karboksylowa.Te grupy występujące w związku chemicznym uniewrażliwiają grupy funkcyjne na chemiczne warunki reakcji, na które związek jest narażony. Według niniejszego wynalazku można stosować dowolne rozmaite grupy zabezpieczające. Korzystne grupy zabezpieczające obejmują benzyloksykarbonyl (Cbz; Z) i tert-butyloksykarbonyl (Boc). Inne korzystne grupy zabezpieczające według wynalazku przedstawił Greene, T.W. i Wuts, P.G.M., w „Protective Grups In Organic Systhesis” wyd. 2, Wiley & Sons, 1991.
PL 212 956 B1
PL 212 956 B1
PL 212 956 B1
PL 212 956 B1
Przykład 40
Schemat 7
Przykład 3
Tri ton B/pirydyna paraform aldehyd iPrOH, TMSCI
TBSO
Przykład
TBSCI.EtjN DMAP, DMF
TBS = tBuMe2SiXVIII
Schemat
TBSO
Przykład 18 R=CH2NH2
Przykład 19 R=CH(NH2)(ch2) i 4NH2
Przykład 20 R=(CH2)2NH2
Przykład 21 R=(CH2)3N(CH3) '2
Przykład 22 R=CH2N(CH3)2
Przykład 23 R=(CH2)5NH2
PL 212 956 B1
Opis syntezy
Związki A i B wytworzono poprzez alkilowanie indolu I z zastosowaniem eteru 2-bromoetylobenzylowego (A) lub eteru 3 bromopropylobenzylowego (B), stosując NaH w DMF, a następnie przez odbenzylowanie (Pd(OH)2/H2) opisane w zgłoszeniu patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki Płn. nr 5705511. Związek odniesienia C wytworzono przez sprzęganie związku B z Boc-leucyną, a nastę pnie odbezpieczenie grupy BOC z zastosowaniem standardowych metod znanych fachowcom w dziedzinie syntezy organicznej. Związek B można także wytwarzać przez redukcję estru IV z zastosowaniem środków redukujących takich jak LiBH4, a następnie przez usunięcie benzhydrolowej grupy zabezpieczającej. Metody otrzymywania eterów benzylowych i eterów tiolowych przedstawiono na schematach. Do otrzymywania 3-hydroksymetylowych związków pośrednich 28-30, 33-35 stosuje się dwie metody. Schemat 1 (Metoda A) przedstawia karbonylowanie, podczas gdy schemat 2 (Metoda B) obejmuje formylowanie. Na schemacie 1 w wyniku Reakcji Michael'a I z zastosowaniem akrylanu etylu i zasady takiej jak DBU otrzymuje się zwią zek II, a następnie przez zabezpieczenie azotu laktamu, stosując dimetoksybenzhydrol uzyskuje się związek III.
Redukcja estru etylowego z zastosowaniem środków redukujących takich jak borowodorek litu, a nastę pnie bromowanie z zastosowaniem N-bromosukcynoimidu, daje zwi ą zek poś redni V z dobrą ogólną wydajnością. Karbonylowanie związku V w metoksyetanolu katalizowane palladem daje ester metoksyetoksylowy VI. Po odbezpieczeniu do związku VII, ester można redukować z zastosowaniem środków redukujących, np. wodorku diizobutyloglinu (DIBAL-H), z wytworzeniem diolu 29. Do formylowania związków hydroksymetylowych (metoda B, schemat 2) stosuje się np. HMTA w TFA lub eter α,α-dichlorometylometylowy i kwas Lewisa. Aldehydy można redukować do związków hydroksymetylowych z zastosowaniem środków redukujących takich jak borowodorek sodu lub wodorek diizobutyloglinu. Eter metylowy lub tioeter przykładowo można wytworzyć stosując ogólną procedurę przedstawioną na Schemacie 4. Według jednego rozwiązania np. diol 29 można przekształcić do trifluorooctanowego związku pośredniego z zastosowaniem bezwodnika trifluorooctowego i zasady takiej jak trietyloamina, a następnie przez traktowanie tego związku pośredniego odpowiednim alkoholem alkilowym lub tiolem alkilowym bezpośrednio z wytworzeniem eteru benzylowego (1-25, 27, 31, 32, 36-40). W niektórych przypadkach można wydzielić ester trifluorooctanowy pierwszorzędowego alkoholu. W tych przykładach alkohol można wydzielić przez traktowanie trifluorooctanu zasadą taką jak wodorotlenek litu. Według innego rozwiązania, etery i tioetery można wytworzyć poprzez poddanie reakcji diolu, np. 28 lub 29, z alkoholem i kwasowym katalizatorem, takim jak kwas p-toluenosulfonowy lub kwas kamforosulfonowy w rozpuszczalniku, np. chlorku metylenu, toluenu lub 1,2-dichloroetanu.
Alkohole 33-35 użyto do otrzymywania eterów obejmujących związki z przykładów 10-13, 15, 16 i 36. Związki z przykładów 33-35 wytworzono z ketonów XI i XII, co przedstawiono na schemacie 3. Etery i tioetery wytworzono z zastosowaniem metod opisanych uprzednio i przedstawionych na schemacie 4.
Związek z przykładu 7 wytworzono zgodnie ze Schematem 5. Związek z przykładu 31 alkilowano stosując glicydol mezylowy, z wytworzeniem związku XIII. Po redukcji z zastosowaniem trietyloborowodorku w THF otrzymano drugorzędowy alkohol 7. Związek z przykładu 14 wytworzono (schemat 6) przez traktowanie związku XIV węglanem cezu i acetaldehydem w chlorku metylenu/metanolu. Związek z przykładu 40 wytworzono zgodnie ze Schematem 7. Związek XVIII zabezpieczony di-TBS alkilowano z zastosowaniem paraformaldehydu, stosując triton B/pirydynę, a następnie odbezpieczono stosując TMSCl z wytworzeniem związku z przykładu 40. Estry aminokwasów, związki z przykładów 18-23 wytworzono stosując związek 3 i odpowiedni kwas karboksylowy w standardowej reakcji sprzęgania znanej fachowcom w dziedzinie syntezy organicznej.
Inne cechy wynalazku staną się oczywiste po przeanalizowaniu następujących opisów przykładowych rozwiązań. Przykłady te podano w celu zilustrowania wynalazku i nie ograniczają one zakresu wynalazku.
Przykłady
Niektóre skróty tu stosowane mają następujące znaczenia: „°C stopnie Celsiusa, „d dublet, „dd dublet dubletów, „t tryplet, „m multiplet, „eq równoważnik, „g gram lub gramy, „mg miligram lub miligramy, „ml mililitr lub mililitry, „H atom wodoru lub atomy wodoru, „hr godzina lub godziny, „m” dla multiplet, „M masa molowa, „min minuta lub minuty, „MHz megahertz, „MS spektroskopia masowa, „nmr” lub „NMR” spektroskopia jądrowego rezonansu magnetycznego.
Wytwarzanie związku II:
Do zawiesiny związku I (8,0 g, 0,258 moli) w acetonitrylu (300 ml) w temperaturze pokojowej w atmosferze azotu dodano akrylan etylu (4,19 ml, 0,387 moli), a następnie 1,8-diazabicyklo[5,4,0]20
PL 212 956 B1 undek-7-en (DBU) (1,93 ml, 0,013 moli). Po dodaniu całości DBU, mieszanina reakcyjna zmieniła kolor z pomarańczowego na zielony. Mieszaninę reakcyjną ogrzewano w temperaturze wrzenia przez noc. Mieszanina pozostawała heterogeniczna podczas przebiegu reakcji i uzyskała ciemne zabarwienie. Po 18 godzinach pobrano małą próbkę i ciało stałe zebrano przez filtrację. Analiza 1H NMR próbki wykazała brak substancji wyjściowej. Mieszaninę reakcyjną ochłodzono do temperatury pokojowej i ciało stałe zebrano przez filtrację. Ciało stałe przemyto kilka razy zimnym acetonitrylem i osuszono pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze 55°C uzyskując jasnopomarańczowe ciało stałe (5,4 g, wydajność 78%). 1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): δ 9,72(t, 3H, J=6,8), 2,87(m, 2H), 3,89(q, 2H, J=6,8), 4,49(s, 2H), 4,88(s, 2H), 4,92(m, 2H), 7,29-7,48(m, 3H), 7,50-7,73 (m, 3H), 7,96(d, 1H, J=7,33), 8,56(s, 1H), 9,47(d, 1H, J=7,33).
Wytwarzanie związku III:
Do zawiesiny związku II (5,62 g, 0,0137 moli) w benzenie (300 ml) i N-metylopirolidynie (NMP) (60 ml) w temperaturze pokojowej w atmosferze azotu dodano monohydrat kwasu p-toluenosulfonowego (2,48 g, 0,013 moli) i 4,4'-dimetoksybenzhydrol (3,19 g, 0,013 moli). Zawartość kolby ogrzewano w temperaturze wrzenia przez 8 godzin. Po 45 minutach, początkowo heterogeniczna mieszanina reakcyjna stała się homogeniczna. Mieszaninę reakcyjną ochłodzono do temperatury pokojowej, rozcieńczono octanem etylu (300 ml) i przemyto nasyconym roztworem wodorowęglanu, wodą i solanką. Warstwę organiczną osuszono nad siarczanem magnezu, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem uzyskując pomarańczowe ciało stałe (8,31 g, wydajność 95%). 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): 81,18(t, 3H, J=7,1), 2,84(m, 2H), 3,80(6H, s), 4,12(q, 2H, J=7,1), 4,38(s, 2H), 4,72(2H, s), 4,94(m, 2H), 6,90(d, 4H, J=8,5), 6,955(s, 1H), 7,26(d, 4H, J=8,5), 7,34-7,49(m, 5H), 7,61(d, 1H, J=7,4), 7,69(d, 1H, J=7,7), 9,65(d, 1H, J=7,8).
Wytwarzanie związku IV:
Do mieszanego roztworu związku III (7,8 g, 0,0122 moli) w THF (480 ml) i metanolu (93 ml) dodawano kroplami borowodorek litu (18,9 ml 2,0 M roztworu, 0,0379 moli). Mieszanina reakcyjna była początkowo homogeniczna, jednakże, podczas przebiegu reakcji, stała się heterogeniczna. Gdy cała substancja wyjściowa została zużyta, mieszaninę reakcyjną ochłodzono w łaźni lodowej i ostrożnie zatrzymano dodając 2N roztwór HCl (60 ml). Mieszanina reakcyjna stała się homogeniczna i przyjęła jasnopomarańczowe zabarwienie. Do mieszaniny dodano wodę (750 ml) i utworzył się mleczno biały osad. Osad zebrano przez filtrację i osuszono pod zmniejszonym ciśnieniem uzyskując puszyste białe ciało stałe (7,2 g, wydajność 99%). 1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): δ 1,93(m, 2H), 3,66(m, 2H), 3,71(s, 6H), 4,55(s, 2H), 4,73(m, 2H), 4,79(s, 2H), 6,70(s, 1H), 6,93(d, 4H, J=8,44), 7,22(d, 4H, J=8,4), 7,26(m, 1H), 7,34-7,46(m, 2H), 7,49(m, 1H), 7,65(d, 1H, J=7,01), 7,70(d, 1H, J=8,26), 7,86(d, 1H, J=7,82), 9,49(d, 1H, J=7,49).
Wytwarzanie związku V:
Do zawiesiny związku IV (2,02 g, 0,0034 moli) w THF (131 ml) w temperaturze pokojowej w atmosferze azotu dodano jednorazowo N-bromosukcynoimid (0,63 g, 0,0036 moli). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem uzyskując jasnożółtego ciało stałe. Ciało stałe roztarto z zimnym metanolem i zebrano przez filtrację. Następnie ciało stałe osuszono pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując jasnożółte ciało stałe (1,98, wydajność 87%). 1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): δ 1,91(m, 2H), 3,44(m, 2H), 3,72 (s, 6H), 4,53(3, 2H), 474(m, 2H), 4,87(s, 2H), 6,71(s, 1H), 6,93(d, 4H, J=8,14), 7,25(d, 4H, J-8,1), 7,37(m, 2H), 7,59-7,69(m, 3H), 8,08(s, 1H), 9,50(d, 1H, J=7,01).
Wytwarzanie związku VI:
W probówce Schlenk'a umieszczono zwią zek V (0,79 g, 0,0017 moli) w metoksyetanolu (25 ml), a następnie octan sodu (0,57 g, 0,00702 moli) i dichlorobis (trifenylofosfino)-pallad(II) (0,082 g, 0,000117 moli). Probówkę opróżniono i wypełniono monotlenkiem węgla. Mieszaninę reakcyjną ogrzewano w uszczelnionej probówce w temperaturze 155°C w łaźni olejowej przez 3 godziny. Mieszaninę reakcyjną ochłodzono do temperatury pokojowej i dodano dodatkową ilość monotlenku węgla. Mieszaninę ponownie ogrzewano w temperaturze 150°C przez kolejne 3 godziny. Dodatkową ilość CO i PdCl2(PPh3)2 wprowadzono i mieszaninę ogrzewano przez 4 godziny. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono chlorkiem metylenu i przepłukano poprzez warstwę Celitu. Przesącz zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem uzyskując pozostałość, którą rozpuszczono w octanie etylu i przemyto wodą. Warstwę organiczną osuszono nad siarczanem magnezu, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując ciało stałe, które roztarto z eterem etylowym i zebrano przez filtrację uzyskując jasnopomarańczowe ciało stałe (0,7 g, wydajność 85%). 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ 2,14(m, 2H),
PL 212 956 B1
3,44(s, 3H), 3,67-3,78(m, 4H), 3,81(s, 6H), 4,44(s, 2H), 4,51(m, 2H), 4,81(m, 4H), 6,91(d, 4H, J= 8,53), 6,98(s, 1H), 7,26(d, 4H, 8,6), 7,34-7,61(m, 4H), 8,21(d, 1H, J=8,32), 8,42(s, 1H), 9,67 (d, 1H, J=7,61).
Wytwarzanie związku VII:
Do roztworu związku VI (0,96 g, 0,00138 moli) w CH2Cl2 (30 ml) w temperaturze 0°C w atmosferze azotu dodano tioanizol (3,2 ml, 0,110 moli), a następnie kwas trifluorooctowy (TFA) (8,5 ml, 0,0276 moli). Po dodaniu całości TFA, mieszanina reakcyjna uzyskała czerwone zabarwienie. Mieszaninę mieszano w temperaturze 0°C przez 1 godzinę i ogrzewano w temperaturze pokojowej przez noc. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując ciemnoczerwony olej. Do oleju dodano eter etylowy i mieszanina reakcyjna uzyskała żółte zabarwienie, przy czym z roztworu wytrąciło się brązowe ciało stałe. Ciało stałe zebrano przez filtrację (0,6 g, wydajność 92%). 1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): δ 2,29(m, 2H), 3,3(m, 2H), 3,73(m, 2H), 4,45(m, 2H), 4,54(m, 3H), 4,82(m, 2H), 4,99(s, 2H), 7,40(m, 2H), 7,58(d, 1H), 7,85(d, 1H), 8,13(d, 1H), 8,52(s, 1H), 8,6(s, 1H), 9,49(d, 1H).
Przykład 29 (metoda A): Do mieszanej zawiesiny związku VII (4,4 g, 0,00935 moli) w CHCl2 (220 ml) w temperaturze 0°C w atmosferze azotu dodawano powoli kroplami DIBAL-H. Mieszanina reakcyjna stopniowo stała się homogeniczna. Pomarańczowo zabarwioną mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze 0°C przez 1 godzinę, a następnie ogrzano do temperatury pokojowej i mieszano przez 6 godzin. Mieszaninę ochłodzono do temperatury 0°C w łaźni lodowej i dodawano bardzo powoli wodę (50 ml). Zaobserwowano energiczne wydzielanie się gazu. Dodano wodny roztwór NaOH (1M, 300 ml) i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Wytrącił się osad, który zebrano przez filtrację, uzyskując brązowe ciało stałe (3,6 g, 96%). 1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): δ 1,92(m, 2H), 3,46(m, 2H), 4,50(s, 2H), 4,65(s, 2H), 4,71(m, 2H), 4,88(s, 2H), 7,32-7,39(m, 2H), 7,47(d, 1H, J=8,34), 7,65(m, 2H), 7,89(s, 1H), 8,53(s, 1H), 9,46(d, 1H, J=7,44).
Wytwarzanie związku X:
Do mieszanego roztworu związku II (2,77 g, 6,75 mmoli) w chlorku metylenu/toluenie (3:1,
30/10 ml dodano chlorek cyny (15 równoważników) i eter α,α-dichlorometylometylowy (20 równoważników). Mieszanina zmieniła kolor z pomarańczowego na ciemnozielony. Mieszaninę, reakcyjną monitorowano metodą HPLC, aż do zużycia substancji wyjściowej. Mieszaninę ochłodzono do temperatury 0°C i zatrzymano dodając wodny roztwor HCl. Substancję przeniesiono do okrągłodennej kolby i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem uzyskując zielonobrunatny olej. Dodano dodatkową ilość HCl i octanu etylu i substancję ponownie zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Z roztworu wytrąciło się brunatnawo-różowe ciało stałe. Ciało stałe roztarto z heksanami i rozpuszczalnik zdekantowano. Procedurę powtórzono 5 razy. Ciało stałe zebrano przez filtrację i osuszono uzyskując 2,65 g jasnoróżowobrunatnego ciała stałego (wydajność 90%). MS (ESI): m/e 439 (M+H)+, 1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): δ 1,00(t, 3H), 2,94(m, 2H), 3,93(q, 2H), 4,50(s, 2H), 4,97(m, 4H), 7,37(m, 2H), 7,65(d, 1H), 7,96(d, 1H), 8,03(d, 1H), 8,52(s, 1H), 8,67(s, 1H), 9,48(d, 1H), 10,49(s, 1H).
Przykład 29 (metoda B):
Do zawiesiny związku X (2,37 g, 0,005 mola) w THF (50 ml) w temperaturze 0°C w atmosferze azotu dodano borowodorek litu (10 równoważników) Jasnobrunatną mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 3,5 godziny, po którym to czasie analiza HPLC wykazała brak substancji wyjściowej. Mieszaninę ochłodzono do temperatury 0°C i bardzo powoli dodawano metanol, aż do zaprzestania wydzielania się gazu. Mieszanina stała się homogeniczna i następnie wytrącił się osad. Mieszaninę zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem uzyskując jasnożółte ciało stałe, które roztarto z wodą i zebrano przez filtrację uzyskując 2,0 g produktu (wydajność 96%).
Wytwarzanie związku VIII:
Do zawiesiny związku 29 (1,13 mmola, 1 równoważnik) w chlorku metylenu (30 ml) w temperaturze 0°C w atmosferze azotu dodano bezwodnik trifluorooctowy (3 równoważniki), a następnie trietyloaminę (3 równoważniki). Mieszanina reakcyjna stopniowo stała się homogeniczna, po czym mieszano ją w temperaturze 0°C przez 1 godzinę, a następnie ogrzewano w temperaturze pokojowej przez noc. Mieszaninę rozcieńczono chlorkiem metylenu i przemyto wodą oraz solanką. Fazę organiczną osuszono nad siarczanem magnezu, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem uzyskując ciało stałe. Tę substancję przeniesiono bez oczyszczania.
Ogólna procedura wytwarzania eteru (Ogólny wzór strukturalny IX):
Związek VIII rozpuszczono w odpowiednim alkoholu (0,025 M) i ogrzano do temperatury 80°C w łaźni olejowej. Mieszaninę reakcyjną monitorowano, aż do zużycia substancji wyjściowej. Miesza22
PL 212 956 B1 ninę ochłodzono do temperatury pokojowej i rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując ciało stałe. Uzyskane ciało stałe roztarto z eterem i zebrano przez filtrację. W niektórych przypadkach, produkty następnie oczyszczono stosując techniki chromatograficzne.
Według powyżej ogólnej procedury wytworzono następujące związki:
Przykład 1: R5=Oet, wydajność po oczyszczeniu 18%; MS (m/z): 427 (M++1); 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 1,148(t, 3H), 1,94(m, 2H), 3,46-3,52(m, 4H), 4,53(s, 2H), 4,60(s, 2H), 4,73(m, 2H), 4,91(s, 2H), 7,36(m, 3H), 7,48(d, 1H), 7,64(m, 2H), 7,90(s, 1H), 8,55(s, 1H), 9,47(d, 1H).
Przykład 2: R5 = Ome, wydajność 95%; MS (m/z): 413 (MM), 435 (M++Na); 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 1,99(m, 2H), 3,36(s, 3H), 3,54(m, 2H), 4,58(s, 2H), 4,66(s, 2H), 4,79(m, 2H), 4,96 (s, 2H), 7,40-7,49(m, 2H), 7,52(d, 1H), 7,65-7,84(m, 2H), 7,98(s, 1H), 8,60(s, 1H), 9,51(d, 1H).
Przykład 3: R5=OiPr, wydajność 31%; MS (m/z): 441 (M++1); 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 1,15(d, 6H, 1,92(m, 2H), 3,45(m, 2H), 3,67(m, 1H), 4,52(s, 2H), 4,61(s, 2H), 4,73(m, 2H), 4,89(s, 2H), 7,3-7,39(m, 2HO, 7,47(d, 1H), 7,62-7,69(m, 2H), 7,89(s, 1H), 8,54(s, 1H), 9,47(d, 1H).
Przykład 4: R5=OCH(CH3)CH2CH3, wydajność 25%; MS (m/z): 455 (M++1); 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ (ppm): 0,98(t, 3H), 1,26(d, 3H), 1,65(m, 2H), 2,03(m, 2H), 3,56(m, 2H), 4,095(m, 1H), 4,24 (s, 2H), 4,57(m 2H), 4,70(m, 2H), 4,71(s, 2H), 6,12(s, 1H), 7,33(t, 1H), 7,42-7,58(m, 4H), 7,75(s, 1H), 9,48(d, 1H).
Przykład 5: R5=(R)-OCH(CH3)CH2CH3, wydajność 61%; MS (m/z): 455 (M++1); 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ (ppm): 0,98(t, 3H), 1,26(d, 3H), 1,65(m, 2H), 2,03(m, 2H), 3,56(m, 2H), 4,095(m, 1H), 4,24 (s, 2H), 4,57(m, 2H), 4,70(m, 2H), 4,71(s, 2H), 6,12(s, 1 Η), 7,33 (t, 1H), 7,42-7,58(m, 4H), 7,75(s, 1H), 9,48(d, 1H).
Przykład 6: R5=(S)-OCH(CH3)CH2CH3, wydajność 93%; MS (m/z) : 455 (M++1); 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ (ppm): 0,98(t, 3Η), 1,26(d, 3Η), 1,65(m, 2Η), 2,03 (m, 2Η), 3,56(m, 2Η), 4,095(m, 1 Η), 4,24(s, 2Η), 4,57(m, 2Η), 4,70(m, 3Η), 4,71(s, 2Η), 6,12(s, 1 Η), 7,33(t, 1 Η), 7,42-7,58(m, 4Η), 7,75(s, 1H), 9,48(d, 1 Η).
Przykład 8: R5=O-nPr, wydajność 62%; MS (m/z): 441 (M++1), 462 (M++Na); 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 0,88 (t, 3H), 1,55(m, 2H), 1,933(m, 2H), 3,36-3,58(m, 4H), 4,53(s, 2H), 4,61(s, 2H), 4,73(m, 3H), 4,90(s, 2H), 7,33-7,39(m, 2H), 7,47(d, 1H), 7,62-7,70(m, 2H), 8,54(s, 1H), 9,47(d, 1H).
Przykład 9: R5=O-nBu, wydajność 92%; MS (m/z): 455 (M++1); 1H NMR (300 MHz, DMS0-d6) δ (ppm): 0,854(t, 3H), 1,34(m, 2H), 1,52(m, 2H), 1,93(m, 2H), 3,48(m, 2H), 4,52(s, 2H), 4,60(s, 2H), 4,73(m, 3H), 4,89(s, 2H), 7,30-7,42(m, 2H), 7,47(d, 1H), 7,62-7,70(m, 2H), 7,89(s, 1H), 8,54(s, 1H), 9,47(d, 1H).
Przykład 17: R5=O-LBu, wydajność 35%; MS (m/z):
455 (M++1), 477(M++Na); 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 1,28(s, 9H), 1,97(m, 2H), 3,62(m, 2H), 4,56(s, 2H), 4,52(s, 2H), 4,77(m, 3H), 4,94(s, 2H), 7,35-7,72(3m, 3H), 7,72(m, 2H), 7,90 (s, 1H), 8,8,57(s, 1H), 9,50(d, 1H).
Przykład 25: R6=Set, wydajność 96%; MS (m/z): 443 (M++1); 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 1,17(t, 3H), 1,93(m, 2H), 2,42(q, 2H), 3,48(m, 2H), 3,93(s, 2H), 4,52(s, 2H), 4,72(m, 3H), 4,89(s, 2H), 7,33-7,49(m, 3H), 7,65(m, 2H), 7,88(s, 1H), 8,56(s, 1H), 9,46(d, 1Η).
Przykład 26: R6=SOCH(CH3)2, MS (m/z): 494 (M++Na); 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 1,21(dd, 6H), 1,93(m, 2H), 2,82(m, 1H), 3,49(m, 2H), 4,12(d, 1H), 4,23(d, 1H), 2,52(s, 2H), 4,75 (m, 3H), 4,88(s, 2H), 7,33-7,45(m, 2H), 7,55(d, 1H), 7,65(d, 1H), 7,71(d, 1H), 7,94(s, 1H), 8,58(s, 1H), 9,47(d, 1H).
Przykład 27: R6=SCH(CH3)2, MS (m/z): 457 (M'+1), 479(M++Na); 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ (ppm): 1,31(d, 6H), 2,34(m, 2H), 2,86(m, 1H), 3,98(s, 2H), 4,29(s, 2H), 4,45(m, 1H), 4,74(m, 2H), 4,92(s, 2H), 6,07(s, 1H), 7,39(m, 2H), 7,51(m, 2H), 7,57(m, 1H), 7,80(s, 1H), 9,53(d, 1H).
Przykład 37: R6=nPrS (trifluorooctan), wydajność 66%; 1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): δ 0,92 (t, 3H), 1,58(q, 2H), 2,29(m, 2H), 2,44(t, 2H), 3,95(s, 2H), 4,53(m, 4H), 4,82(m, 2H), 4,93(s, 2H), 7,41(m, 2H), 7,52(d, 1H), 7,60(d, 1H), 7,72(d, 1H), 7,93(s, 1H), 8,62(s, 1H), 9,51(d, 1H).
Przykład 38: R6=S(C5H4N), wydajność 51%; MS (ESI): m/e 514 (M+Na)+, 1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): δ 1,014(m, 2H), 3,45(m, 2H), 4,51(s, 2H), 4,60(s, 2H), 4,72(m, 3H), 4,85(s, 2H), 7,11(m, 1H), 7,30-7,41(m, 3H), 7,54-7,67(m, 4H), 8,02(s, 1H), 8,48(d, 1H, J=3,97), 8,55(s, 1H), 9,46(d, 1H, J=7,36).
Przykład 39: R6=S(C4H3N2), wydajność 52%; MS (m/z): 493 (M++H); 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 1,93(m, 2H), 3,45(m, 2H), 4,51(s, 3H), 4,60(s, 2H), 4,72(m, 2H), 4,88(s, 2H), 7,22(t, 1H), 7,32-7,68(m, 6H), 8,05(s, 1H), 8,55(s, 1H), 8,66(d, 1H), 9,46(d, 1H).
PL 212 956 B1
Przykład 30: R5-H, wydajność 44%; 1H NMR (300 MHz, DMS0-d6) δ (ppm): 4,13(s, 2H), 4,64 (s, 2H), 4,89(s, 2H), 7,28-7,42(m, 3H), 7,53(d, 1H), 7,64(d, 1H), 7,89(s, 1H), 8,49(s, 1H), 9,34(d, 1H), 11,83(s, 1H).
Przykład 31: R5=Oet, wydajność 83%; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 1,18(t, 3H), 3,55(q, 2H), 4,62(s, 2H), 4,93(s, 2H), 7,34-7,46(m, 3H), 7,58(d, 1H), 7,68(d, 1H), 7,92(s, 1H), 8,54 (s, 1H), 9,39(d, 1H), 11,91(s, 1H).
Przykład 32: R5=OiPr, wydajność po oczyszczeniu 41%; 1H NMR (300 MHz, DMS0-d6) δ (ppm): 1,15(d, 6H), 3,68(m, 1H), 4,13(s, 2H), 4,59(s, 2H), 4,89(s, 2H), 7,28-7,42(m, 3H), 7,54(d, 1H), 7,64(d, 1H), 7,88(s, 1H), 8,49(s, 1H), 9,35(d, 1H), 11,87(s, 1H).
Wytwarzanie związku XI:
Do zawiesiny chlorku glinu (3 równoważniki) w 1,2-dichloroetanie/chlorku metylenu (1:1,8 ml) dodano chlorek acetylu (3 równoważniki) w atmosferze azotu. Mieszanina reakcyjna stała się homogeniczna, po czym ochłodzono ją do temperatury 0°C w łaźni lodowej. Kroplami dodano zawiesinę związku B (0,84 mmola, 1 równoważnik) w chlorku metylenu (3 ml) i mieszanina uzyskała brunatne zabarwienie. Łaźnię lodową usunięto i mieszaninę reakcyjną ogrzano do temperatury pokojowej. Mieszaninę ogrzewano w temperaturze wrzenia przez 2 godziny, a następnie ochłodzono do temperatury pokojowej. Analiza HPLC wykazała brak substancji wyjściowej. Mieszaninę wlano na lód i dodano stężony roztwór HCl (5 ml). Wytrącił się osad, który zebrano przez filtrację i osuszono. 340 mg (wydajność 89%), MS (m/z): 453 (M++1); 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 2,02(s, 3H), 2,18(m, 2H), 2,74(s, 3H), 4,12(m, 2H), 4,56(s, 2H), 4,83(m, 2H), 5,05(s, 2H), 7,43(m, 2H), 7,68(d, 1H), 7,86(d, 1H), 8,17(d, 1H), 8,56(s, 1H), 8,72(1H), 9,53(d, 1H).
Przykład 33: Do zawiesiny związku XI (0,18 mmola, 1 równoważnik) w THF (6 ml) w atmosferze azotu dodano borowodorek litu (10 równoważników) w temperaturze 0°C. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze 0°C przez 1 godzinę, a następnie ogrzano do temperatury pokojowej przez 4 godziny. Mieszaninę ochłodzono do temperatury 0°C i powoli kroplami dodawano metanol. Podczas dodawania nadmiarowego borowodorku zaobserwowano energiczne wydzielanie się gazu. Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono octanem etylu i przemyto wodą i solanką. Warstwę organiczną osuszono nad siarczanem magnezu, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem uzyskując białe ciało stałe, 69 mg (wydajność 90%). MS (m/z): 413 (M++1), 435 (M++Na); 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 1,41(d, 3H), 1,92 (m, 2H), 3,46(m, 2H), 4,52(s, 2H), 4,71(m, 3H), 4,89(s, 3H), 5,18(s, 1H), 7,32-7,39(m, 2H), 7,50(d, 1H), 7,64 (m, 2DH), 7,89 (s, 1H), 8,55(s, 1H), 9,46(d, 1H).
Według ogólnej procedury wytwarzania eterów z zastosowaniem tri-trifluorooctanowych związków pośrednich wytworzono następujące związki:
Przykład 10: R5=Oet, wydajność 68%; MS (m/z): 441 (MM), 395 (M+-OCH2CH3); 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 1,08(t, 3H), 1,41(d, 3Η), 1,93(m, 2Η), 3,47(m, 2Η), 4,52(s, 2Η), 4,60(m, 1Η), 4,73(m, 2Η), 4,90(m, 2Η), 7,33-7,39(m, 2Η), 7,47(d, 1Η), 7,63(d, 1Η), 7,69(d, 1H), 7,86(s, 1Η), 8,55(s, 1H), 9,47(d, 1H).
Rozdzielanie związku 10 w układzie z odwróconymi fazami metodą HPLC dało izomery 11 i 12.
Przykład 11 (chiralny): R5=Oet, MS (m/z): 441 (M++1), 395 (M+-OCH2CH3).
Przykład 12 (chiralny): R5=Oet, MS (m/z) 441 (M++1), 395 (M+-OCH2CH3).
Przykład 15: R5=Obu, wydajność 73%; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 0,81(t, 3H), 1,27-1,43(m, 7H), 1,93(m, 2H), 3,48(m, 2H), 4,53(s, 2H), 4,58(m, 1H), 4,73(m, 4H), 4,92(m, 2H), 7,337,39(m, 2H), 7,46(d, 1H), 7,63(d, 1H), 7,69(d, 1H), 7,86(s, 1H), 8,55(s, 1H), 9,47(d, 1H).
Przykład 16: R5=OiPr, wydajność 63%; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 1,01(d, 3H), 1,10(d, 3H), 1,38(d, 3H), 1,95(m, 2H), 3,47(m, 2H), 3,98(q, 1H), 4,26(m, 1H), 4,52(s, 2H), 4,74(m, 3H), 4,90(m, 2H), 7,33-7,39(m, 2H), 7,48(d, 1H), 7,62-7,69(m, 2H), 7,87(s, 1H), 8,54(s, 1H), 9,47(d, 1H).
Przykład 35: R5=H, wydajność 98%; MS (m/z): 455 (M++1), 337 (M+-H2O); 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 1,45(d, 3H), 4,25(m, 3H), 4,86(s, 2H), 5,16(d, 1H), 7,28-7,39(m, 2H), 7,43(d, 1H), 7,56(d, 1H), 7,66(d, 1H), 7,92(s, 1H), 8,49(s, 1H), 9,35(d, 1H), 11,78(s, 1H).
Przykład 36: R5=Ome, wydajność 50%; MS (m/z): 369 (M++1); 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 1,43(d, 3H), 3,16(s, 3H), 4,15(m, 2H), 4,49(m, 1H), 4,93(s, 2H), 7,32-1,40(m, 3Η), 7,58(d, 1H), 7,67(d, 1H), 7,84(s, 1H), 8,50(s, 1H), 9,44(d, 1H), 11,87(s, 1H).
Przykład 34: R5=H, (wydajność 77% po 2 etapach); MS (m/z): 427 (M++1), 409 (M+-H2O); 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 0,848(t, 3H), 1,70(m, 2H), 1,93(m, 2H), 3,47(m, 2H), 4,52 (s, 2H),
PL 212 956 B1
4,61(m, 1H), 4,72(m, 3H), 4,89(s, 2H), 5,14(s, 1H), 7,29-7,39(m, 2H), 7,44(d, 1H), 7,64(m, 2H), 7,87 (s, 1H), 8,54(s, 1H), 9,46(d, 1H).
Ogólna procedura wytwarzania estru według przykładu 3:
Do osuszonej w piecu, 3 l trójszyjnej, okrągłodennej kolby zaopatrzonej w mechaniczne mieszadło, trójdrogowy zawór odcinający przyłączony do balonu z argonem i z zanurzonym termometrem wprowadzono związek 3 (148,6 mmola), a następnie kolejno dodawano bezwodny N,N-dimetyloacetamid (654 ml), 4-(dimetyloamino)pirydynę (DMAP) (0,5 równoważnika), aminokwas (2,5 równoważnika) i chlorowodorek 1-[3-(dimetyloamino)-propylo]-3-etylokarbodiimidu (2,5 równoważnika) w temperaturze 35°C i uzyskano klarowny zabarwiony na czerwono roztwór. Zawiesinę ogrzewano w temperaturze 42-45°C przez 2 godziny, po czym dodano kolejno dodatkowe ilości DMAP (0,08 równoważnika), aminokwasu (0,5 równoważnika) i chlorowodorku 1-[3-(dimetyloamino)propylo]-3-etylokarbodiimidu (0,5 równoważnika). Po 1,5 godzinie, mieszaninę reakcyjną ochłodzono do temperatury 0-5°C i zatrzymano dodając wodę. Łaźnię chłodzącą usunięto i uzyskaną jasnożółtą zawiesinę mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Zawiesinę przesączono, przemyto wodą do wartości pH= 8 i osuszono przez noc stosują c próż nię . Jasnoż ó ł te ciał o stał e nie osuszone całkowicie, rozpuszczono w chlorku metylenu, po czym wodną warstwę oddzielono. Fazę organiczną przemyto solanką , osuszono nad MgSO4, przesączono przez celit i zatężono na wyparce obrotowej uzyskując surowe ciało stałe. Surową substancję ponownie rozpuszczono w chlorku metylenu i przeniesiono do 3 l, trójszyjnej, okrągłodennej kolby zaopatrzonej w mechaniczne mieszadło. Ciągle mieszając mieszaninę dodawano kroplami octan etylu (1 l) w temperaturze pokojowej przez 70 minut, aż do uzyskania klarownego zabarwionego na czerwono roztworu. Po dodaniu całości octanu etylu (15 ml), wytrącił się osad. Zawiesinę mieszano przez 2,5 godziny, a następnie ciało stałe zebrano przez filtrację. Osad przemyto kolejno octanem etylu, mieszaniną octan etylu/eter metylo-tert-butylowy (3:2) i następnie eterem metylo-tert-butylowym, po czym osuszono uzyskując białawe ciało stałe. Wydajność 78%
Przykład 18 : MS (m/z) 498 (M + + 1)
Przykład 19 : MS (m/z) 566 (M + + 1)
Przykład 20 : MS (m/z) 569 (M + + 1)
Przykład 21 : MS (m/z) 512 (M + + 1)
Przykład 22 : MS (m/z) 554 (M + + 1)
Przykład 23 : MS (m/z) 526 (M + + 1)
Przykład 24 : MS (m/z) 554 (M + + 1)
Wytwarzanie związku XIII:
Związek z przykładu 31 (0,33 mmola) rozpuszczono w DMF (10 ml) i połowę objętości usunięto przez oddestylowanie. Kolbę ochłodzono do temperatury pokojowej i dodano wodorek sodu (1 równoważnik), po czym mieszaninę mieszano przez 1 godzinę. Dodano glicydol mezylowy (1,5 równoważnika) i mieszaninę ogrzewano w temperaturze 50°C przez 24 godziny, a następnie ochłodzono do temperatury pokojowej. Mieszaninę przesączono i rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Mieszaninę reakcyjną oczyszczono metodą kolumnowej chromatografii na żelu krzemionkowym, uzyskując związek XIII z wydajnością 73%. 1,19(t, 3H), 2,78(t, 1H), 3,53(m, 4H), 4,53(s, 2H), 4,65 (s, 2H), 4,78(dd, 1H), 4,96(s, 2H), 5,20(d, 1H), 7,35-7,47(m, 2H), 7,51(d, 1H), 7,68(d, 1H), 7,75(d, 1H), 7,95(s, 1H), 8,62(s, 1H), 9,55(d, 1H).
Przykład 7: Związek XIII (100 mg) rozpuszczono w THF (10 ml) i dodano kroplami borowodorek trietylu (2 ml). Mieszaninę reakcyjną ogrzewano w temperaturze 70°C przez 4 godziny. Mieszaninę ochłodzono do temperatury pokojowej i dodano 1N HCl. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i substancję rozpuszczono w mieszaninie metanol/woda. Uzyskany osud zebrano przez filtrację i osuszono. 1,19(t, 3H), 1,25(d, 3H), 3,55(q, 2H), 4,13(m, 2H), 4,58(s, 2H), 4,61(s, 2H), 4,64(s, 2H), 4,93(s, 2H), 4,97(t, 1H), 7,34-7,45(m, 2H), 7,49(d, 1H), 7,69(t, 2H), 7,92(s, 1H), 8,57(s, 1H), 9,50(d, 1H).
Przykład 14: Do zawiesiny związku XIV (0,75 mmola) w chlorku metylenu/metanolu/HMPA (4:2:1 ml) dodano węglan cezu (4,0 równoważniki). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 30 minut, po czym dodano acetaldehyd. Dodatkową ilość acetaldehyd dodano i nie analiza TLC nie wykazała żadnej znaczącej zmiany. Mieszaninę rozcieńczono chlorkiem metylenu i przemyto wodą oraz solanką. Fazę organiczną osuszono nad siarczanem magnezu, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt XV wydzielono metodą kolumnowej chromatografii (wydajność 33%).
Związek XV (0,3 mmola) rozpuszczono w chlorku metylenu i ochłodzono do temperatury 0°C. Do roztworu dodano etanotiol (2 krople) i kwas trifluorooctowy (TFA)(1 kropla) i mieszaninę mieszano w temperaturze 0°C przez 1 godzinę . Mieszaninę ogrzano do temperatury pokojowej i mieszano przez
PL 212 956 B1 godzinę. Dodatkową ilość TFA (2 krople) dodano do mieszaniny reakcyjnej i po upływie 30 minut reakcja zakończyła się. Produkt oczyszczono metodą kolumnowej chromatografii na żelu krzemionkowym stosując chlorek metylenu/octan etylu. Pojedynczy diastereomer wydzielono w ilości 65 mg (53%). 0,52(d, 3H), 1,21(t, 3H), 2,47(q, 2H), 3,96(s, 2H), 4,49(s, 1H), 4,86(m, 1H), 4,94(s, 2H), 6,18 (s, 1H), 7,35-7,45(m, 3H), 7,64(d, 1H), 7,72(d, 1H), 7,92(s, 1H), 8,57(s, 1H), 9,41(d, 1H), 10,99(s, 1H).
Wytwarzanie związku XVII:
Do roztworu heksametylenotetraaminy (1,6 g, 11,4 mmola) w TFA dodano związek XVI (2,0 g, 4,6 mmola) w temperaturze 60-65°C. Po wymieszaniu przez 2 godziny, mieszaninę reakcyjną ochłodzono do temperatury pokojowej, a następnie kroplami dodano do 2N roztworu H2SO4-aceton (150 ml) (2:1). Ciało stałe zebrano, zawieszono w dioksolanie (150 ml) i ogrzewano w temperaturze wrzenia przez 30 minut. Nierozpuszczoną substancję usunięto przez filtrację i rozpuszczalnik zatężono do ilości w przybliżeniu 25 ml. Dodano MeOH (50 ml) w celu wytrącenia produktu, który zebrano osuszono uzyskując 700 mg żółtego ciała stałego. MSES+ 467(M+1).
Przykład 28: Zawiesinę związku XVII (500 mg, 1,1 mmola) w CHCl3/metanol (60 ml, 5/1) dodano do stałego NaBH4 (200 mg). Roztwór mieszano w temperaturze pokojowej przez 4 godziny. CHCl3 usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem, a następnie dodano 2N roztwór HCl. Roztwór mieszano przez godziny, zebrano i osuszono uzyskując 420 mg białawego ciała stałego. MS (ES+) 469 (M+1). Surowy alkohol zawieszono w CHCl3-MeOH (25 ml + 10 ml), po czym dodano 0,7 ml 1M roztworu NaOMe, a następnie mieszaninę mieszano przez 12 godzin w temperaturze pokojowej. Rozpuszczalnik zatężono, ciało stałe roztarto z MeOH i produkt zebrano uzyskując 420 mg diolu (84%). 1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): δ 3,8(m, 2Η), 4,55(s, 2H), 4,63(d, 2H), 4,75(m, 2H), 4,97(s, 2H), 5,0(m, 1H), 5,23(m, 1H), 7,34-7,51(m, 4H), 7,68(m, 2H), 7,94(s, 1H), 8,57(s, 1H), 9,51(d, 1H). MS (ES+) 385 (M+1).
Przykład 24: Do zawiesiny związku otrzymanego według przykładu 28 (50 mg, 0,13 mmola) w CHCl3 dodano kwas kamforosulfonowy (30 mg, 0,26 mmola) i etanotiol (0,39 mmola), a następnie mieszano przez 12 godzin w atmosferze azotu. Dodano w nadmiarze CHCl3 i następnie roztwór przemyto 2M roztworem Na2CO3, wodą, solanką i osuszono (MgSO4). Rozpuszczalnik zatężono i produkt zebrano po rozcieraniu z MeOH. 1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): δ 1,1,2,3(m, 2H), 3,85(m, 2H), 4,0(s, 2H), 5,5(s, 2H), 4,8(m, 2H), 4,9(s, 2H), 5,0(t, 1H), 7,35-7,5(m, 4H), 7,7(m, 2H), 8,6(s, 1H), 9,5 (d, 1H), (m, 3H), MS (ES+) 429, 451(M+1, +23).
Przykład 40: Do roztworu związku otrzymanego według przykładu 3 (210 mg, 0,48 mmola) w DMF (10 ml) dodano DMAP (1 mg), Et3N (267 gl, 1,92 mmola) i tBDMSCl (220 mg, mmola). Po wymieszaniu przez 20 godzin, mieszaninę rozpuszczono w EtOAc i kolejno przemyto wodnym roztworem NaHCO3, wodą i solanką. Warstwę organiczną osuszono nad MgSO4, przesączono i odparowano uzyskując pozostałość, którą oczyszczono metodą kolumnowej chromatografii (żel krzemionkowy, 10% EtOAc/heksan) uzyskując 225,1 mg związku pośredniego XVIII (70%). Mieszaninę związku XVIII (68,1 mg, 0,10 mmola) i paraformaldehydu (63,1 mg, 2,1 mmola) w pirydynie (4 ml) potraktowano 0,25 M roztworem Tritonu B w pirydynie (100 gl, 0,025 mmola). Po wymieszaniu przez 2 godziny, dodano dodatkową ilość Tritonu B w pirydynie (150 gl, 0,038 mmola). Po 1 godzinie, mieszaninę rozpuszczono w EtOAc i gruntownie przemyto wodnym roztworem CuSO4. Po myciu wodą, wodnym roztworem NaHCO3 i solanką, warstwę organiczną osuszono nad MgSO4, przesączono i odparowano uzyskując pozostałość, którą oczyszczono metodą kolumnowej chromatografii (żel krzemionkowy, 22% EtOAc/heksan) uzyskując 45,2 mg związku IXX (64%), który wykazuje następujące właściwości spektralne: 1H NMR (DMS0-d6) δ 9,42(d, 1H, J=7,7), 7,97(s, 1H), 7,75-7,72(m, 2H), 7,52(d, 1H, J=8,5), 7,44 (dd, 1H, J=7,7-7,5), 7,36 (dd, 1H, J=7,7-7,5), 5,13(m, 1H), 5,04(s, 2H), 4,77(m, 1H), 4,70(s, 2H), 4,10(m, 1H), 3,76(sep, 1H, J=6,1), 3,54(m, 1H), 3,44(m, 1H), 3,31(m, 3H), 1,79(m, 2H), 1,22(m, 6H), 1,07(s, 9H), 0,85(s, 9H), 0,52(s, 6H), 0,00(s, 3H), -0,03(s, 3H); MS m/z 699 (M+H).
Do roztworu związku XXI (22,5 mg, 0,032 mmola) w iPrOH (10 ml) dodano TMSCl (100 gl) i mieszaninę mieszano przez 2,5 godziny. Po odparowaniu rozpuszczalnika, pozostałość roztarto z eterem (3x1 ml) i osuszono uzyskując 10,8 mg związku według przykładu 40 (72%), który wykazuje następujące właściwości spektralne: NMR (DMSO-d6) 9,49(d, 1H, J=7,7), 8,59(s, 1H), 7,96(s, 1H), 7,80(d, 1H, J=7,3), 7,77(d, 1H, J=8,5) 7,55(d, 1H, J=7,3), 7,45(m, 1H), 7,37(m, 1H), 4,98(m, 3H), 4,78(m, 2H), 4,70(s, 2H), 4,20-4,16(m, 2H), 3,76 (sep, 1H, J=6,1), 3,38(m, 1H), 3,36-3,25(m, 2H), 1,80(m, 2H), 1,23(d, 6H, J= 6,1); MS m/z 471 (M+H).
PL 212 956 B1
Hamowanie aktywności kinazy receptora śródbłonkowego czynnika wzrostu naczyń
Skondensowane związki pirolokarbazolowe badano pod względem ich działania hamującego aktywność kinazową domeny kinazy receptora VEGF wyrażonego na bakulowirusie (ludzki flk-1, KDR, VEGFR2), stosując procedurę testu ELISA kinazy trkA opisaną poniżej. Mieszaninę reakcyjną kinazy, składającą się z 50 mM Hepes, pH 7,4, 40 μΜ ATP, 10 mM MnCl2, 0,1% BSA, 2% DMSO i różnych stężeń inhibitora, przeniesiono do płytek pokrytych PLC-y/GST. Dodano kinazę VEGFR i pozostawiono do przereagowania przez 15 minut, w temperaturze 37°C. Wykrywanie fosforylowanego produktu przeprowadzono dodając przeciwciało przeciw fosfotyrozynie (UBI). W celu wychwycenia kompleksu przeciwciało-fosforylowany PLC-y/GST wprowadzono drugorzędowe przeciwciało sprzężone z enzymem. Aktywność związanego enzymu zmierzono poprzez wzmocniony system wykrywania (Gibco-BRL). Dane dotyczące hamowania zanalizowano stosując sigmoidalne równanie dawkaodpowiedź (o zmiennym nachyleniu) w programie GraphPad Prism. Wyniki zestawiono w tabeli III.
T a b e l a III: Hamowanie VEGFR
Związek VEGFR2 (IC50 lub % hamowanie @ 300 nM)
A 107
B 48
C 17%
D 200
1 4
2 17
3 7
4 12
5 12
6 19
7 25
8 13
9 18
14 72
17 11
18 23
19 60%
20 31
21 48%
22 18
23 57%
31 77
32 33%
40 16
Hamowanie aktywności kinazy-1 mieszanego pochodzenia (MLK1)
Aktywność kinazową MLK1 oszacowano stosując format Milipore Multiscreen TCA „na płytce opisany dla kinazy białkowej C (Pitt & Lee, J. Biomol. Screening, I: 47-51, 1996). W skrócie, każde 50^l mieszaniny testowej zawierało 20 mM Hepes, pH 7,2, 5 mM EGTA, 15 mM MgCl2, 25 mM β-glicerofosforanu, 60 μΜ ATP, 0,25 μ Ci [y-32P]ATP, 0,1% BSA, 500 μg/ml zasadowego białka mielinowego (UBI #13-104), 2% DMSO, 1 μΜ związku testowego i 1 pg/ml bakulowirusowego GST-MLK1kd. Próbki
PL 212 956 B1 inkubowano przez 15 minut w temperaturze 37°C. Reakcję zatrzymano przez dodanie lodowatego 50% TCA i pozostawiono na 30 minut w temperaturze 4°C w celu wytrącenia białka. Płytki przemyto następnie lodowatym 25% TCA. Dodano koktajl scyntylacyjny Supermix i pozostawiono do zrównoważenia na 1-2 godziny przed zliczaniem z zastosowaniem licznika scyntylacyjnego Wallac MikroBeta
1450 PLUS.
Hamowanie aktywności kinazy-2 mieszanego pochodzenia (MLK2)
Testy przeprowadzono stosując format Milipore Multiscreen „na płytce opisany dla MLK1. Każde 50 ul mieszaniny testowej zawierało 20 mM Hepes, pH 7,2, 5 mM EGTA, 15 mM MgCl2, 25 mM β-glicerofosforanu, 100 μΜ ATP, 0,25 nCi [y-32P]ATP, 0,1% BSA, 500 μg/ml zasadowego białka mielinowego (UBI #13-104), 2% DMSO, różne stężenia związku testowego i 3 μg/ml bakulowirusowego GST-MLK2KDL2. Próbki inkubowano przez 15 minut w temperaturze 37°C. Reakcję zatrzymano przez dodanie lodowatego 50% TCA i pozostawiono przez 30 minut w temperaturze 4°C w celu wytrącenia białka. Następnie płytki przemyto lodowatym 25% TCA. Dodano koktajl scyntylacyjny Supermix i pozostawiono do zrównoważenia na 1-2 godziny przed zliczaniem.
Hamowanie aktywności kinazy-3 mieszanego pochodzenia (MLK3)
Testy przeprowadzono stosując format Milipore Multiscreen „na płytce opisany dla MLK1. W skrócie, każde 50^l mieszaniny testowej zawierało 20 mM Hepes, pH 7,2, 5 mM EGTA, 15 mM MgCl2, 25 mM β-glicerofosforanu, 100 μΜ ATP, 0,25 nCi [y-32P]ATP, 0,1% BSA, 500 ul/ml zasadowego białka mielinowego (UBI #13-104), 2% DMSO, różne stężenia związku testowego i 2 ng/ml bakulowirusowego GST-MLKSKD. Próbki inkubowano przez 15 minut w temperaturze 37°C. Reakcję zatrzymano przez dodanie lodowatego 50% TCA i pozostawiono przez 30 minut w temperaturze 4°C w celu wytrącenia białka. Następnie płytki przemyto lodowatym 25% TCA. Dodano koktajl scyntylacyjny Supermix i pozostawiono do zrównoważenia na 1-2 godziny przed zliczaniem.
T a b e l a IV: Hamowanie MLK IC50 (nM) lub % hamowanie @ 100 nM
Związek MLK1 MLK2 MLK3
1 2 3 4
A 22 39% 8
B 31 46% 17
C 8% 0% 30%
D 45 43%
1 21 4
2 15 8
3 17 9
4 15 4
5 27 45% 16
6 38 51% 19
7 85% 30
8 19 76% 13
9 26 15
14 93% 9
17 35 50%
18 47 23
19 44% 28%
20 42 229 32
21 40%
PL 212 956 B1 cd. tabeli IV
1 2 3 4
22 74 170 28
23 31%
31 46 29
32 24 19
40 21 86
Hamowanie aktywności kinazy tyrozynowej trkA
Wybrane izomeryczne skondensowane związki pirolokarbazolowe i izoindolonowe można badać pod względem ich zdolności do hamowania aktywności kinazowej domeny cytoplazmatycznej wyrażonej na bakulowirusie ludzkiej trkA stosując test oparty na ELISA jak uprzednio opisano (Angeles i in., Anal. Blochem. 236: 49-55, 1996). W skrócie, 96-studzienkową płytkę do mikromiareczkowania pokrywa się roztworem substratu (białko fuzyjne rekombinowanej ludzkiej fosfolipazy C i S-transferazy γΐ/glutationu (Rotin i in., EMBO J., 11: 559-567, 1992). Badania hamowania przeprowadza się w 100^l mieszaninach testowych zawierających 50 mM Hepes, pH 7,4, 40 μΜ ATP, 10 mM MnCl2, 0,1% BSA, 2% DMSO, i różne stężenia inhibitora. Reakcję rozpoczyna się dodając kinazę trkA i pozostawia się do przereagowania przez 15 minut w temperaturze 37°C. Następnie dodaje się przeciwciało dla fosfotyrozyny (UBI), a następnie drugorzędowe przeciwciało sprzężone z enzymem, kozią antymysią IgG znakowaną fosfatazą zasadową (Bio-Rad). Aktywność związanego enzymu mierzy się poprzez wzmocniony system wykrywania (Gibco-BRL). Dane dotyczące hamowania zanalizowano stosując sigmoidalne równanie dawka-odpowiedź (o zmiennym nachyleniu) w programie GraphPad Prism. Stężenie, które dawało w wyniku 50% hamowanie aktywności kinazowej opisuje się jako „IC50·
Hamowanie fosforylacji trk stymulowanej przez NGF w preparacie całych komórek
Hamowanie stymulowanej przez NGF fosforylacji trk przez związki według niniejszego wynalazku można przeprowadzić stosując opisaną poniżej procedurę zmodyfikowaną w stosunku do uprzednio opisanej (patrz opis patentowy Stanów Zjednoczonych Ameryki Płn. nr 5516771). Komórki NIH3T3 transfekowane trkA hoduje się na 100 mm płytkach. Niemal zlane komórki pozbawia się surowicy przez zastąpienie ośrodka 0,05% BSA-DMEM pozbawionym surowicy zawierającym związek (100 nM i 1 DM) lub DMSO (dodany do kontroli) przez jedną godzinę w temperaturze 37°C. Następnie do komórek dodaje się NGF (Harlan/Bioproducts for Science) w stężeniu równym 10 ng/ml przez 5 minut. Komórki poddaje się lizie w buforze zawierającym detergent i inhibitory proteazy. Oczyszczone lizaty komórek normalizuje się pod względem zawartości białka stosując metodę BCA i następnie przeprowadza się immunoprecypitację z zastosowaniem przeciwciała przeciw trk. Polikionalne przeciwciało przeciw trk wytwarza się przeciw peptydowi odpowiadającemu 14 aminokwasom przy końcu karboksylowym trk (Martin-Zanca i in., Mol. Cell. Biol. 9: 24-33, 1989).
Kompleksy immunologiczne zbiera się na peletki sefarozowe z białkiem (Sigma Chem. Co., St. Lois, MO), oddziela metodą elektroforezy na żelu poliakryloamidowym SDS (SDS-PAGE) i przenosi na filtr z difluorku poliwinylidenu (PVDF). Błonę pokrywa się immunologicznie przeciwciałem przeciw fosfotyrozynie (UBI), a następnie inkubuje z kozią anty-mysią IgG sprzężoną z peroksydazą chrzanową (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA). Fosforylowane białka obrazuje się stosując ECL (Amersham Life Science, Inc., Arlington Heights, IL). Następnie mierzy się powierzchnię pasma białka trk i porównuje ze stymulowaną przez NGF kontrolą. Można stosować następujący system punktacji hamowania, na bazie procentowego zmniejszenia pasma białka trk: 0=brak zmniejszenia; 1=1-25%; 2=26-49%; 3=50-75%; 4=76-100%.
Hamowanie aktywności kinazowej receptora czynnika wzrostu płytek
Izomeryczne skondensowane związki pirolokarbazolowe i izoindolonowe można badać pod względem ich wpływów hamujących na aktywność kinazową domeny kinazy receptora z ekspresją w bakulowirusie PDGFf5, stosując test ELISA dla kinazy trkA opisany powyżej. Testy przeprowadza się w 96-studzienkowych płytkach do mikromiareczkowania pokrytych substratem (PLC-y/GST). Każde 100 μl mieszaniny reakcyjnej zawiera 50 mM HEPES, pH 7,4, 20 μΜ ATP, 10 mM MnCl2, 0,1% BSA, 2% DMSO i różne stężenia inhibitora. Reakcję rozpoczyna się dodając prefosforylowany rekombinowany ludzki enzym (10 ng/ml PDGFRP) i pozostawia do przereagowania przez 15 minut w temperaturze 37°C. Prefosforylowany enzym przygotowuje się przed użyciem przez inkubację kinazy w buforze zawierającym 20 μΜ ATP i 10 mM MnCl2 przez 1 godzinę w temperaturze 4°C. Wykrywanie fosforyloPL 212 956 B1 wanego produktu przeprowadza się przez dodanie przeciwciała przeciw fosfotyrozynie (UBI) sprzężonego z peroksydazą chrzanową (HRP). Później dodaje się roztwór substratu HRP zawierający 3,3',5,5'-tetrametylobenzydenę i nadtlenek wodoru, i płytki inkubuje się przez 10 minut w temperaturze pokojowej. Reakcję zatrzymuje się kwasem i odczytuje się absorbancję mieszaniny reakcyjnej przy długości fali 450 nm, stosując czytnik Microplate Biokinetics Reader (Bio-Tek Instrument EL 312e). Dane dotyczące hamowania analizuje się stosując sigmoidalne równanie dawka-odpowiedź (o zmiennym nachyleniu) w programie GraphPad Prism.

Claims (8)

1. Zastosowanie związku o wzorze I lub II, w którym:
R1 i R2 mają takie same lub różne znaczenia i są niezależnie wybrane z grupy obejmującej takie jak atom H lub alkil obejmujący 1-8 atomów węgla (włącznie), podstawiony przez -OH lub -OR4 gdzie R4 oznacza alkil obejmujący 1-4 atomów węgla (włącznie), aryl lub reszta aminokwasu po usunięciu grupy hydroksylowej z grupy karboksylowej oraz
R3 oznacza CH2OR7;
R7 oznacza alkil obejmujący 1-4 atomów węgla;
do wytwarzania leku przeznaczonego do leczenia schorzeń stercza, zaburzeń naczyniowych, zaburzeń patologicznych, chorób i zaburzeńm neurodegeneracyjnych, choroby Alzheimera, stwardnienia zanikowego bocznego, choroby Parkinsona, udaru, niedokrwienia, choroby Huntingtona, otępienia związanemu z AIDS, padaczki, stwardnienia rozsianego, neuropatii obwodowej, neuropatii obwodowej wywołanej chemioterapią, neuropatii obwodowej związanej z AIDS, lub urazów mózgu lub rdzenia kręgowego, szpiczaka mnogiego i białaczki.
2. Zastosowanie według zastrz. 1, gdzie związek wybrany jest z tabeli I.
T a b e l a I Związek R1 R2 R3 1 2 3 4 1 CH2CH2CH2OH H CH2OCH2CH3 2 CH2CH2CH2OH H CH2OCH3 3 CH2CH2CH2OH H CH2OCH(CH3)2 4 CH2CH2CH2OH Z CH2OCH(CH3)CH2CH3 5 CH2CH2CH2OH H (S)-CH2OCH(CH3)CH2CH3 6 CH2CH2CH2OH H R-CH2OCH(CH3)CH2CH3 7 CH2CHOHCH3 H CH2OCH2CH3 8 CH2CH2CH2OH H CH2OCH2CH2CH3 9 CH2CH2CH2OH H CH2OCH2CH2CH2CH3 14 H CH2CHOHCH3 CH2OCH2CH3
PL 212 956 B1 cd. tabeli I 1 2 3 4 17 CH2CH2CH2OH H CH2OC(CH3)3 18 CH2CH2CH2OCOCH2NH2 H CH2OCH(CH3)2 19 CH2CH2CH2OCOCH(NH2)CH2 CH2CH2CH2NH2 H CH2OCH(CH3)2 20 CH2CH2CH2OCOCH2CH2NH2 H CH2OCH(CH3)2 21 CH2CH2CH2OCOCH2CH2CH2N(CH3)2 H CH2OCH(CH3)2 22 CH2CH2CH2OCOCH2N(CH3)2 H CH2OCH(CH3)2 23 CH2CH2CH2OCOCH2CH2CH2- CH2CH2NH2 H CH2OCH(CH3)2 31 H H CH2OCH2CH3 32 H H CH2OCH(CH3)2 40 CH2CH2CH2OH CH2OH CH2OCH(CH3)2
3. Zastosowanie według zastrz. 1, gdzie schorzenia stercza obejmują rak stercza lub łagodny przerost stercza.
4. Zastosowanie według zastrz. 1, gdzie zaburzenia naczyniowe obejmują złośliwe guzy lite, choroby oka, zwyrodnienie plamki żółtej, endometriozę, retinopatię cukrzycową, łuszczycę lub hemangioblastomę.
5. Zastosowanie według zastrz. 1, gdzie zaburzenia patologiczne obejmują powstawanie nowotworu, reumatoidalne zapalenie stawów, przewlekłe zapalenie stawów, zwłóknienie płuc, zwłóknienie szpiku, nieprawidłowe gojenie ran, miażdżycę naczyń lub restenozę.
6. Zastosowanie według zastrz. 1, gdzie białaczką jest ostra białaczka szpikowa, przewlekła białaczka szpikowa, ostra białaczka limfocytowa lub przewlekła białaczka limfocytowa.
7. Związek o wzorze II:
T a b e l a I' wybrany jest z tabeli I;
Związek R1 R2 R3 1 2 3 4 2 CH2CH2CH2OH H CH2OCH3 3 CH2CH2CH2OH H CH2OCH(CH3)2 4 CH2CH2CH2OH Z CH2OCH(CH3)CH2CH3 5 CH2CH2CH2OH H (S)-CH2OCH(CH3)CH2CH3 6 CH2CH2CH2OH H (R)-CH2OCH(CH3)CH2CH3 7 CH2CHOHCH3 H CH2OCH2CH3
PL 212 956 B1 cd. tabeli I' 1 2 3 4 8 CH2CH2CH2OH H CH2OCH2CH2CH3 9 CH2CH2CH2OH H CH 2OCH2CH2CH2CH3 4 H CH2CHOH CH3 CH2OCH2CH3 17 CH2CH2CH2OH H CH2OC(CH3)3 18 CH2CH2CH2OCOCH2NH2 H CH2OCH(CH3)2 19 CH2CH2CH2OCOCH(NH2)CH2- CH2CH2CH2NH2 H CH2OCH(CH3)2 20 CH2CH2CH2OCOCH2CH2NH2 H CH2OCH(CH3)2 21 CH2CH2CH2OCOCH2CH2-CH2N(CHa)2 H CH2OCH(CH3)2 22 CH2CH2CH2OCOCH2N(CHs)2 H CH2OCH(CH3)2 23 CH2CH2CH2OCOCH2CH2CH2- CH2CH2NH2 H CH2OCH(CH3)2 31 H H CH2OCH2CH3 32 H H CH2OCH(CH3)2 40 CH2CH2CH2OH CH2OH CH2OCH(CH3)2
8. Kompozycja farmaceutyczna, znamienna tym, że jako substancja czynna zawiera związek o wzorze II określony tak jak w zastrz. 7.
PL365683A 2000-08-25 2001-08-23 Zastosowanie zwiazku o wzorze I lub II, zwiazek o wzorze II, oraz kompozycja farmaceutyczna zawierajaca zwiazek o wzorze II PL212956B1 (pl)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US22780300P 2000-08-25 2000-08-25
US27845501P 2001-03-23 2001-03-23
US09/935,285 US6630500B2 (en) 2000-08-25 2001-08-22 Selected fused pyrrolocarbazoles

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL365683A1 PL365683A1 (pl) 2005-01-10
PL212956B1 true PL212956B1 (pl) 2012-12-31

Family

ID=27397767

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL365683A PL212956B1 (pl) 2000-08-25 2001-08-23 Zastosowanie zwiazku o wzorze I lub II, zwiazek o wzorze II, oraz kompozycja farmaceutyczna zawierajaca zwiazek o wzorze II

Country Status (26)

Country Link
US (3) US6630500B2 (pl)
EP (1) EP1311263B1 (pl)
JP (1) JP5399598B2 (pl)
KR (1) KR100810190B1 (pl)
CN (1) CN1298323C (pl)
AR (1) AR034143A1 (pl)
AT (1) ATE306920T1 (pl)
AU (1) AU8520501A (pl)
BG (1) BG66103B1 (pl)
BR (1) BR0113776A (pl)
CA (1) CA2420592C (pl)
CZ (1) CZ303707B6 (pl)
DE (1) DE60114215T2 (pl)
DK (1) DK1311263T3 (pl)
EA (1) EA006371B1 (pl)
ES (1) ES2250463T3 (pl)
HK (1) HK1053989A1 (pl)
HU (1) HU230128B1 (pl)
IL (2) IL154590A0 (pl)
MX (1) MXPA03001562A (pl)
NO (1) NO325689B1 (pl)
NZ (1) NZ524288A (pl)
PL (1) PL212956B1 (pl)
SK (1) SK287498B6 (pl)
TW (1) TWI299731B (pl)
WO (1) WO2002017914A2 (pl)

Families Citing this family (82)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6811992B1 (en) * 1998-05-14 2004-11-02 Ya Fang Liu Method for identifying MLK inhibitors for the treatment of neurological conditions
UA80447C2 (en) 2002-10-08 2007-09-25 Methods for treating pain by administering nerve growth factor antagonist and opioid analgesic
ATE497391T1 (de) 2002-10-08 2011-02-15 Rinat Neuroscience Corp Verfahren zur behandlung von postoperativen schmerzen durch verabreichung eines antikörpers gegen nervenwachstumsfaktor und diesen enthaltende zusammensetzungen
ZA200504866B (en) 2002-12-24 2006-11-29 Rinat Neuroscience Corp Anti-ngf antibodies and methods using same
US9498530B2 (en) 2002-12-24 2016-11-22 Rinat Neuroscience Corp. Methods for treating osteoarthritis pain by administering a nerve growth factor antagonist and compositions containing the same
US7569364B2 (en) 2002-12-24 2009-08-04 Pfizer Inc. Anti-NGF antibodies and methods using same
CA2516454A1 (en) 2003-02-19 2004-09-02 Rinat Neuroscience Corp. Methods for treating pain by administering a nerve growth factor antagonist and an nsaid and compositions containing the same
CN103880955A (zh) 2003-07-18 2014-06-25 安姆根有限公司 肝细胞生长因子的特异性结合物
US7169802B2 (en) * 2003-12-23 2007-01-30 Cephalon, Inc. Fused pyrrolocarbazoles
US7241779B2 (en) * 2003-12-23 2007-07-10 Cephalon, Inc. Fused pyrrolocarbazoles
KR20060135060A (ko) 2004-04-07 2006-12-28 리나트 뉴로사이언스 코퍼레이션 신경성장인자 길항제의 투여에 의한 골암 통증의 치료방법
EP1827434B1 (en) 2004-11-30 2014-01-15 Amgen Inc. Quinolines and quinazoline analogs and their use as medicaments for treating cancer
US20060134175A1 (en) * 2004-12-22 2006-06-22 Stephen Bartels Drug eluting pharmaceutical delivery system for treatment of ocular disease and method of use
US20060134176A1 (en) * 2004-12-22 2006-06-22 Bausch & Lomb Incorporated Pharmaceutical delivery system and method of use
US20060134174A1 (en) * 2004-12-22 2006-06-22 Bausch & Lomb Incorporated Pharmaceutical delivery system and method of use
US20060216288A1 (en) * 2005-03-22 2006-09-28 Amgen Inc Combinations for the treatment of cancer
US20060293378A1 (en) * 2005-06-28 2006-12-28 Mcintire Gregory Method of lowering intraocular pressure
AR059066A1 (es) 2006-01-27 2008-03-12 Amgen Inc Combinaciones del inhibidor de la angiopoyetina -2 (ang2) y el inhibidor del factor de crecimiento endotelial vascular (vegf)
US8217177B2 (en) 2006-07-14 2012-07-10 Amgen Inc. Fused heterocyclic derivatives and methods of use
PE20080403A1 (es) 2006-07-14 2008-04-25 Amgen Inc Derivados heterociclicos fusionados y metodos de uso
US20080021013A1 (en) * 2006-07-21 2008-01-24 Cephalon, Inc. JAK inhibitors for treatment of myeloproliferative disorders
AU2007338792B2 (en) 2006-12-20 2012-05-31 Amgen Inc. Substituted heterocycles and methods of use
US7759344B2 (en) 2007-01-09 2010-07-20 Amgen Inc. Bis-aryl amide derivatives and methods of use
AU2008219166B2 (en) 2007-02-16 2013-05-16 Amgen Inc. Nitrogen-containing heterocyclyl ketones and their use as c-Met inhibitors
CA2693694A1 (en) * 2007-06-08 2008-12-11 University Of Massachusetts Mixed lineage kinases and metabolic disorders
CA2696761C (en) 2007-08-21 2017-02-14 Amgen Inc. Human c-fms antigen binding proteins
WO2010059795A1 (en) * 2008-11-19 2010-05-27 Cephalon, Inc. Novel forms of an indazolo [5,4-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole compound
EP2192121A1 (en) 2008-11-27 2010-06-02 Cephalon France Regioselective reduction of fused pyrrolocarbazoles-5,7-diones
KR101038055B1 (ko) * 2010-06-10 2011-06-01 송광섭 수중 마사지장치
WO2011161217A2 (en) 2010-06-23 2011-12-29 Palacký University in Olomouc Targeting of vegfr2
EP2688887B1 (en) 2011-03-23 2015-05-13 Amgen Inc. Fused tricyclic dual inhibitors of cdk 4/6 and flt3
WO2013025939A2 (en) 2011-08-16 2013-02-21 Indiana University Research And Technology Corporation Compounds and methods for treating cancer by inhibiting the urokinase receptor
AR090263A1 (es) 2012-03-08 2014-10-29 Hoffmann La Roche Terapia combinada de anticuerpos contra el csf-1r humano y las utilizaciones de la misma
US9505749B2 (en) 2012-08-29 2016-11-29 Amgen Inc. Quinazolinone compounds and derivatives thereof
JP7041515B2 (ja) 2015-01-08 2022-03-24 ザ ボード オブ トラスティーズ オブ ザ レランド スタンフォード ジュニア ユニバーシティー 骨、骨髄、及び軟骨の誘導を提供する因子及び細胞
CN110366550A (zh) 2016-12-22 2019-10-22 美国安进公司 作为用于治疗肺癌、胰腺癌或结直肠癌的KRAS G12C抑制剂的苯并异噻唑、异噻唑并[3,4-b]吡啶、喹唑啉、酞嗪、吡啶并[2,3-d]哒嗪和吡啶并[2,3-d]嘧啶衍生物
JOP20190272A1 (ar) 2017-05-22 2019-11-21 Amgen Inc مثبطات kras g12c وطرق لاستخدامها
AR112797A1 (es) 2017-09-08 2019-12-11 Amgen Inc Inhibidores de kras g12c y métodos para utilizarlos
CA3099118A1 (en) 2018-05-04 2019-11-07 Amgen Inc. Kras g12c inhibitors and methods of using the same
US11090304B2 (en) 2018-05-04 2021-08-17 Amgen Inc. KRAS G12C inhibitors and methods of using the same
CA3099045A1 (en) 2018-05-10 2019-11-14 Amgen Inc. Kras g12c inhibitors for the treatment of cancer
CA3098885A1 (en) 2018-06-01 2019-12-05 Amgen Inc. Kras g12c inhibitors and methods of using the same
EP4268898A3 (en) 2018-06-11 2024-01-17 Amgen Inc. Kras g12c inhibitors for treating cancer
AU2019336588B2 (en) 2018-06-12 2022-07-28 Amgen Inc. KRAS G12C inhibitors encompassing a piperazine ring and use thereof in the treatment of cancer
JP2020090482A (ja) 2018-11-16 2020-06-11 アムジエン・インコーポレーテツド Ｋｒａｓ ｇ１２ｃ阻害剤化合物の重要な中間体の改良合成法
AU2019384118A1 (en) 2018-11-19 2021-05-27 Amgen Inc. KRAS G12C inhibitors and methods of using the same
JP7377679B2 (ja) 2018-11-19 2023-11-10 アムジエン・インコーポレーテツド がん治療のためのｋｒａｓｇ１２ｃ阻害剤及び１種以上の薬学的に活性な追加の薬剤を含む併用療法
MX2021007158A (es) 2018-12-20 2021-08-16 Amgen Inc Heteroarilamidas utiles como inhibidores de kif18a.
WO2020132651A1 (en) 2018-12-20 2020-06-25 Amgen Inc. Kif18a inhibitors
JP2022513971A (ja) 2018-12-20 2022-02-09 アムジエン・インコーポレーテツド Ｋｉｆ１８ａ阻害剤として有用なヘテロアリールアミド
WO2020132648A1 (en) 2018-12-20 2020-06-25 Amgen Inc. Kif18a inhibitors
US20230096028A1 (en) 2019-03-01 2023-03-30 Revolution Medicines, Inc. Bicyclic heterocyclyl compounds and uses thereof
WO2020180768A1 (en) 2019-03-01 2020-09-10 Revolution Medicines, Inc. Bicyclic heteroaryl compounds and uses thereof
EP3738593A1 (en) 2019-05-14 2020-11-18 Amgen, Inc Dosing of kras inhibitor for treatment of cancers
SG11202112855WA (en) 2019-05-21 2021-12-30 Amgen Inc Solid state forms
AU2020326627A1 (en) 2019-08-02 2022-03-17 Amgen Inc. KIF18A inhibitors
CA3147451A1 (en) 2019-08-02 2021-02-11 Amgen Inc. Kif18a inhibitors
US20220372018A1 (en) 2019-08-02 2022-11-24 Amgen Inc. Kif18a inhibitors
JP2022542319A (ja) 2019-08-02 2022-09-30 アムジエン・インコーポレーテツド Ｋｉｆ１８ａ阻害剤
CA3155857A1 (en) 2019-10-24 2021-04-29 Amgen Inc. PYRIDOPYRIMIDINE DERIVATIVES USEFUL AS KRAS G12C AND KRAS G12D INHIBITORS IN THE TREATMENT OF CANCER
EP4054719A1 (en) 2019-11-04 2022-09-14 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
WO2021091956A1 (en) 2019-11-04 2021-05-14 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
JP2022553857A (ja) 2019-11-04 2022-12-26 レボリューション メディシンズ インコーポレイテッド Ｒａｓ阻害剤
EP4055017A1 (en) 2019-11-08 2022-09-14 Revolution Medicines, Inc. Bicyclic heteroaryl compounds and uses thereof
CA3158188A1 (en) 2019-11-14 2021-05-20 Amgen Inc. Improved synthesis of kras g12c inhibitor compound
AR120456A1 (es) 2019-11-14 2022-02-16 Amgen Inc Síntesis mejorada del compuesto inhibidor de g12c de kras
JP2023505100A (ja) 2019-11-27 2023-02-08 レボリューション メディシンズ インコーポレイテッド 共有ｒａｓ阻害剤及びその使用
CN114929279A (zh) 2020-01-07 2022-08-19 锐新医药公司 Shp2抑制剂给药和治疗癌症的方法
WO2021257736A1 (en) 2020-06-18 2021-12-23 Revolution Medicines, Inc. Methods for delaying, preventing, and treating acquired resistance to ras inhibitors
IL301062A (en) 2020-09-03 2023-05-01 Revolution Medicines Inc Use of SOS1 inhibitors to treat malignancies with SHP2 mutations
PE20231207A1 (es) 2020-09-15 2023-08-17 Revolution Medicines Inc Derivados indolicos como inhibidores de ras en el tratamiento del cancer
CA3203111A1 (en) 2020-12-22 2022-06-30 Kailiang Wang Sos1 inhibitors and uses thereof
WO2022235870A1 (en) 2021-05-05 2022-11-10 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors for the treatment of cancer
WO2022235864A1 (en) 2021-05-05 2022-11-10 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
CN117500811A (zh) 2021-05-05 2024-02-02 锐新医药公司 共价ras抑制剂及其用途
AR127308A1 (es) 2021-10-08 2024-01-10 Revolution Medicines Inc Inhibidores ras
WO2023114954A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Genzyme Corporation Pyrazolopyrazine compounds as shp2 inhibitors
EP4227307A1 (en) 2022-02-11 2023-08-16 Genzyme Corporation Pyrazolopyrazine compounds as shp2 inhibitors
WO2023172940A1 (en) 2022-03-08 2023-09-14 Revolution Medicines, Inc. Methods for treating immune refractory lung cancer
WO2023212596A1 (en) 2022-04-27 2023-11-02 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Treatment of arthropathy based upon stratification of osteoarthritis polygenic risk score
WO2023240263A1 (en) 2022-06-10 2023-12-14 Revolution Medicines, Inc. Macrocyclic ras inhibitors
WO2024081916A1 (en) 2022-10-14 2024-04-18 Black Diamond Therapeutics, Inc. Methods of treating cancers using isoquinoline or 6-aza-quinoline derivatives

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4552842A (en) 1983-01-28 1985-11-12 Bristol-Myers Company Process for producing rebeccamycin
US5438050A (en) 1988-02-06 1995-08-01 Godecke Aktiengesellschaft Indolocarbazole derivatives, processes for their preparation and compositions containing them
US5185260A (en) 1991-08-29 1993-02-09 The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy Method for distinguishing normal and transformed cells using G1 kinase inhibitors
US5591855A (en) 1994-10-14 1997-01-07 Cephalon, Inc. Fused pyrrolocarbazoles
US5475110A (en) 1994-10-14 1995-12-12 Cephalon, Inc. Fused Pyrrolocarbazoles
US5705511A (en) * 1994-10-14 1998-01-06 Cephalon, Inc. Fused pyrrolocarbazoles
US5594009A (en) 1994-10-14 1997-01-14 Cephalon, Inc. Fused pyrrolocarbazoles
US5705711A (en) * 1995-08-17 1998-01-06 Huntsman Specialty Chemicals Corporation Manufacture of methyl tertiary butyl ether in reactive distillation column
US5808060A (en) 1995-12-11 1998-09-15 Cephalon, Inc. Fused isoindolones
US5616724A (en) 1996-02-21 1997-04-01 Cephalon, Inc. Fused pyrrolo[2,3-c]carbazole-6-ones
JP2000516250A (ja) 1996-08-22 2000-12-05 ブリストルーマイヤーズ スクイブ カンパニー インドロピロロカルバゾールの細胞毒性アミノ糖および関連する糖誘導体
US6127401A (en) 1998-06-05 2000-10-03 Cephalon, Inc. Bridged indenopyrrolocarbazoles
CN1329034C (zh) 1998-09-25 2007-08-01 赛福伦公司 预防/治疗感觉毛细胞和耳蜗神经元损伤的药物
US6841567B1 (en) 1999-02-12 2005-01-11 Cephalon, Inc. Cyclic substituted fused pyrrolocarbazoles and isoindolones

Also Published As

Publication number Publication date
NZ524288A (en) 2005-04-29
US20030203957A1 (en) 2003-10-30
US20060135590A1 (en) 2006-06-22
JP5399598B2 (ja) 2014-01-29
JP2004507500A (ja) 2004-03-11
WO2002017914A8 (en) 2002-07-11
HK1053989A1 (en) 2003-11-14
TWI299731B (en) 2008-08-11
BG66103B1 (bg) 2011-04-29
US7115613B2 (en) 2006-10-03
IL191104A0 (en) 2008-11-03
DK1311263T3 (da) 2006-02-13
WO2002017914A2 (en) 2002-03-07
HU230128B1 (hu) 2015-08-28
CN1449287A (zh) 2003-10-15
WO2002017914A3 (en) 2002-04-18
ATE306920T1 (de) 2005-11-15
CA2420592C (en) 2011-01-11
HUP0303103A3 (en) 2004-11-29
CA2420592A1 (en) 2002-03-07
PL365683A1 (pl) 2005-01-10
US6630500B2 (en) 2003-10-07
MXPA03001562A (es) 2004-12-13
ES2250463T3 (es) 2006-04-16
EP1311263A2 (en) 2003-05-21
US20020061920A1 (en) 2002-05-23
EA006371B1 (ru) 2005-12-29
DE60114215T2 (de) 2006-07-13
CZ2003539A3 (cs) 2003-10-15
NO20030845D0 (no) 2003-02-24
KR100810190B1 (ko) 2008-03-06
EA200300293A1 (ru) 2003-08-28
HUP0303103A2 (hu) 2003-12-29
SK287498B6 (sk) 2010-12-07
AR034143A1 (es) 2004-02-04
KR20030036727A (ko) 2003-05-09
BR0113776A (pt) 2004-02-03
CN1298323C (zh) 2007-02-07
IL154590A0 (en) 2003-09-17
NO20030845L (no) 2003-04-16
CZ303707B6 (cs) 2013-03-27
EP1311263B1 (en) 2005-10-19
DE60114215D1 (de) 2006-03-02
US7230026B2 (en) 2007-06-12
NO325689B1 (no) 2008-07-07
AU8520501A (en) 2002-03-13
SK2192003A3 (en) 2003-11-04
BG107659A (bg) 2004-01-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL212956B1 (pl) Zastosowanie zwiazku o wzorze I lub II, zwiazek o wzorze II, oraz kompozycja farmaceutyczna zawierajaca zwiazek o wzorze II
JP4481493B2 (ja) 架橋インデノピロロカルバゾール
KR20020038730A (ko) 이성질체 접합 피롤로카르바졸 및 이소인돌론
EA023444B1 (ru) Циклобутановые и метилциклобутановые производные, композиции на их основе и способы их применения
EA012295B1 (ru) Конденсированные пирролокарбазолы
IE910770A1 (en) &#34;New imidazo [1,2-c] quinazoline derivatives process for preparing these and pharmaceutical compositions containing them&#34;
US20090005398A1 (en) Methods For The Treatment of Central Nervous System Tumors
JP4405667B2 (ja) Ｋ−２５２ａの３’−エピマー誘導体
EP3049400B1 (en) New pi3k/akt/mtor inhibitors and pharmaceutical uses thereof
AU2001285205B2 (en) Fused pyrrolocarbazoles against inflammation
AU2001285205A1 (en) Fused pyrrolocarbazoles against inflammation
JP2009519954A (ja) 抗癌剤として有用な６−［（置換）フェニル］トリアゾロピリミジンの二量体および付加物
MXPA00012019A (en) Bridged indenopyrrolocarbazoles