PL201081B1 - Związek karbaminianowy, zawierająca go kompozycja farmaceutyczna i jego zastosowania - Google Patents

Związek karbaminianowy, zawierająca go kompozycja farmaceutyczna i jego zastosowania

Info

Publication number
PL201081B1
PL201081B1 PL358430A PL35843001A PL201081B1 PL 201081 B1 PL201081 B1 PL 201081B1 PL 358430 A PL358430 A PL 358430A PL 35843001 A PL35843001 A PL 35843001A PL 201081 B1 PL201081 B1 PL 201081B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
compound
mhz
nmr
dmso
compounds
Prior art date
Application number
PL358430A
Other languages
English (en)
Other versions
PL358430A1 (pl
Inventor
David Bebbington
Jean-Damien Charrier
David Kay
Ronald Knegtel
Julian Golec
Michael Mortimore
John Studley
Original Assignee
Vertex Pharma
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Vertex Pharma filed Critical Vertex Pharma
Publication of PL358430A1 publication Critical patent/PL358430A1/pl
Publication of PL201081B1 publication Critical patent/PL201081B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/14—Drugs for dermatological disorders for baldness or alopecia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A61P25/32—Alcohol-abuse
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A61P31/06—Antibacterial agents for tuberculosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/08—Indoles; Hydrogenated indoles with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/56—Ring systems containing three or more rings
    • C07D209/80—[b, c]- or [b, d]-condensed
    • C07D209/82—Carbazoles; Hydrogenated carbazoles
    • C07D209/86—Carbazoles; Hydrogenated carbazoles with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to carbon atoms of the ring system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D221/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom, not provided for by groups C07D211/00 - C07D219/00
    • C07D221/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom, not provided for by groups C07D211/00 - C07D219/00 condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D221/04—Ortho- or peri-condensed ring systems
    • C07D221/06—Ring systems of three rings
    • C07D221/10—Aza-phenanthrenes
    • C07D221/12—Phenanthridines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D223/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D223/14—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D223/18—Dibenzazepines; Hydrogenated dibenzazepines
    • C07D223/22—Dibenz [b, f] azepines; Hydrogenated dibenz [b, f] azepines
    • C07D223/24—Dibenz [b, f] azepines; Hydrogenated dibenz [b, f] azepines with hydrocarbon radicals, substituted by nitrogen atoms, attached to the ring nitrogen atom
    • C07D223/26—Dibenz [b, f] azepines; Hydrogenated dibenz [b, f] azepines with hydrocarbon radicals, substituted by nitrogen atoms, attached to the ring nitrogen atom having a double bond between positions 10 and 11
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D223/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D223/14—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D223/18—Dibenzazepines; Hydrogenated dibenzazepines
    • C07D223/22—Dibenz [b, f] azepines; Hydrogenated dibenz [b, f] azepines
    • C07D223/24—Dibenz [b, f] azepines; Hydrogenated dibenz [b, f] azepines with hydrocarbon radicals, substituted by nitrogen atoms, attached to the ring nitrogen atom
    • C07D223/28—Dibenz [b, f] azepines; Hydrogenated dibenz [b, f] azepines with hydrocarbon radicals, substituted by nitrogen atoms, attached to the ring nitrogen atom having a single bond between positions 10 and 11
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D279/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom and one sulfur atom as the only ring hetero atoms
    • C07D279/10—1,4-Thiazines; Hydrogenated 1,4-thiazines
    • C07D279/14—1,4-Thiazines; Hydrogenated 1,4-thiazines condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D279/18—[b, e]-condensed with two six-membered rings
    • C07D279/22—[b, e]-condensed with two six-membered rings with carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D279/30—[b, e]-condensed with two six-membered rings with carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with acyl radicals attached to the ring nitrogen atom

Abstract

Przedmiotem wynalazku jest zwi azek karbaminianowy o wzorze I, lub jego farmaceutycznie dopuszczalna sól, w którym to wzorze: Z oznacza tlen; R 1 oznacza CH 2 Y; Y oznacza fluorowiec; R 2 oznacza CO 2 H, CH 2 CO 2 H, CO 2 (C 1-6 alkil), CH 2 CO 2 (C 1-6 alkil), CO 2 (C 3-10 cykloalkil), CH 2 CO 2 (C 3-10 cykloalkil), CONH (C 1-6 alkil), CH 2 CONH(C 1-6 alkil), CON(C 1-6 alkil) 2 , CH 2 CON(C 1-6 alkil) 2 , CONH-(C 1-4 alkil)- -NH(C 1-4 alkil), CONH-(C 104 alkil)-N(C 1-4 alkil) 2 , R 3 oznacza C 1-4 alkil; a R 4 i R 5 , razem z lezacym mi edzy nimi atomem azotu, tworz a bi- lub tricykliczny uk lad heteropier scieniowy, wybrany spo sród pier scieni karbazolu, indolu, fenotiazyny, dihydrofenantrydyny, dibenzoazepiny, dihydrodibenzoaze- piny lub indoliny, przy czym pier scie n jest ewentualnie podstawiony fluorowcem, C 1-6 alkilem lub grup a CF 3 . Zwi azki te dzia laj a jako inhibitory kaspaz, które bior a udzia l w apop- tozie komórek i zapaleniu. W zakres wynalazku wchodzi te z kompozycja farmaceutyczna zawieraj aca zwi azek wed lug wynalazku oraz zastosowanie zwi azków wed lug wynalazku do wytwarzania leku do leczenia chorób, które s a zale zne od aktywno sci kaspazy, wymienionych konkretnie w za- strze zeniu patentowym, a tak ze zastosowanie do konser- wacji komórek i produktów krwiopochodnych. PL PL PL PL

Description

(12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 201081 (13) B1 (21) Numer zgłoszenia: 358430 (22) Data zgłoszenia: 29.03.2001 (86) Data i numer zgłoszenia międzynarodowego:
29.03.2001, PCT/US01/10182 (87) Data i numer publikacji zgłoszenia międzynarodowego:
04.10.2001, WO01/72707 PCT Gazette nr 40/01 (51) Int.Cl.
C07D 209/08 (2006.01) C07D 209/86 (2006.01) C07D 209/88 (2006.01) C07D 221/12 (2006.01) C07D 279/30 (2006.01) C07D 223/22 (2006.01) C07D 403/12 (2006.01) A61K 31/395 (2006.01) A61P 43/00 (2006.01)
(54) Związek karbaminianowy, zawierająca go kompozycja farmaceutyczna (54) i jego zastosowania
(73) Uprawniony z patentu: VERTEX PHARMACEUTICALS INCORPORATED,Cambridge,US
(30) Pierwszeństwo:
29.03.2000,US,60/192,826 (72) Twórca(y) wynalazku:
(43) Zgłoszenie ogłoszono: David Bebbington,Pewsey,GB Jean-Damien Charrier,Bishop's Itchington,GB David Kay,Purton,GB
09.08.2004 BUP 16/04 Ronald Knegtel,Abingdon,GB
(45) O udzieleniu patentu ogłoszono: Julian Golec,Ashbury,GB Michael Mortimore,Westbridgefored,GB John Studley,Abingdon,GB
31.03.2009 WUP 03/09 (74) Pełnomocnik: Janina Kossowska, PATPOL Sp. z o.o.
(57) Przedmiotem wynalazku jest związek karbaminianowy o wzorze I, lub jego farmaceutycznie dopuszczalna sól, w którym to wzorze: Z oznacza tlen; R1 oznacza CH2Y; Y oznacza fluorowiec; R2 oznacza CO2H, CH2CO2H, CO2(C1-6alkil), CH2CO2(C1-6alkil), CO2(C3-10cykloalkil),
CH2CO2(C3-10cykloalkil), CONH (C1-6alkil), CH2CONH(C1-6alkil), CON(C1-6alkil)2, CH2CON(C1-6alkil)2, CONH-(C1-4alkil)-NH(C1-4alkil), CONH-(C104alkil)-N(C1-4alkil)2, R3 oznacza C1-4alkil; a R4 i R5, razem z leżącym między nimi atomem azotu, tworzą bi- lub tricykliczny układ heteropierścieniowy, wybrany spośród pierścieni karbazolu, indolu, fenotiazyny, dihydrofenantrydyny, dibenzoazepiny, dihydrodibenzoazepiny lub indoliny, przy czym pierścień jest ewentualnie podstawiony fluorowcem, C1-6alkilem lub grupą CF3. Związki te działają jako inhibitory kaspaz, które biorą udział w apoptozie komórek i zapaleniu. W zakres wynalazku wchodzi też kompozycja farmaceutyczna zawierająca związek według wynalazku oraz zastosowanie związków według wynalazku do wytwarzania leku do leczenia chorób, które są zależne od aktywności kaspazy, wymienionych konkretnie w zastrzeżeniu patentowym, a także zastosowanie do konserwacji komórek i produktów krwiopochodnych.
PL 201 081 B1
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest związek karbaminianowy, zawierająca go kompozycja farmaceutyczna i jego zastosowania.
Dziedziną niniejszego wynalazku jest chemia medyczna i dotyczy on nowych związków oraz kompozycji farmaceutycznych, które hamują kaspazy pośredniczące w apoptozie komórek i zapaleniu. Przedmiotem wynalazku są również zastosowania związków według wynalazku do leczenia chorób, które są zależne od aktywności kaspazy.
Apoptoza, albo programowana śmierć komórek, stanowi główny mechanizm, za pomocą którego organizmy eliminują niepożądane komórki. Rozregulowanie apoptozy, nadmierna apoptoza, bądź brak procesu apoptozy, jest przyczyną wielu chorób, takich jak nowotwór, ostre choroby zapalne i autoimmunizacyjne, choroby niedokrwienne i niektóre zaburzenia neurodegeneracyjne (patrz ogólnie Science, 1998, 281, 1283-1312; Ellis i in., Ann. Rev. Cell. Biol., 1991, 7, 663).
Kaspazy stanowią rodzinę enzymów, proteaz cysteinowych, będących kluczowymi czynnikami pośredniczącymi w szlakach sygnalizacji dla apoptozy i rozpadu komórek (Thornberry, Chem. Biol., 1998, 5, R97-R103). Te szlaki sygnalizacji zmieniają się w zależności od typu komórki i bodźca, ale, jak się wydaje, wszystkie szlaki apoptozy zbiegają się na wspólnym szlaku efektora, prowadzącym do proteolizy kluczowych białek. Kaspazy biorą udział zarówno w fazie efektorowej szlaku sygnalizacji, a następnie powyżej miejsca jej zapoczątkowania. Kaspazy wcześniejsze biorące udział w zjawiskach inicjacji aktywują się, aktywując z kolei inne kaspazy, które uczestniczą w późniejszych fazach apoptozy.
Kaspaza-1, zidentyfikowana jako pierwsza spośród kaspaz, znana jest również jako enzym konwertujący interleukinę lub „ICE”. Kaspaza-1 konwertuje prekursor interleukiny-1 β („pIL-1 β) do prozapalnej formy aktywnej przez swoiste cięcie pIL-1 β pomiędzy Asp-116 i Ala-117. Oprócz kaspazy-1 znanych jest również jedenaście innych ludzkich kaspaz, z których wszystkie przecinają swoiście przy resztach aspartylowych. Jak obserwowano, mają one również surowe wymagania dla co najmniej czterech reszt aminokwasowych na N-końcowej stronie miejsca cięcia.
Kaspazy zaklasyfikowano do trzech grup w zależności od sekwencji aminokwasowej, która jest korzystnie lub głównie rozpoznawana. Jak wykazano, grupa kaspaz obejmująca kaspazy 1, 4 i 5, preferuje hydrofobowe aromatyczne aminokwasy w pozycji 4 po N-końcowej stronie miejsca cięcia. Inna grupa obejmująca kaspazy 2, 3 i 7 rozpoznaje reszty aspartylowe w obydwu pozycjach 1 i 4 po N-końcowej stronie miejsca cięcia, a korzystnie sekwencję Asp-Glu-X-Asp. Trzecia grupa obejmująca kaspazy 6, 8, 9 i 10, toleruje wiele aminokwasów w głównej sekwencji rozpoznawanej, ale, jak się wydaje, preferuje reszty z rozgałęzionymi alifatycznymi łańcuchami bocznymi, takie jak walina i leucyna w pozycji 4.
Kaspazy pogrupowano również zgodnie z ich obserwowaną funkcją. Pierwsza podrodzina obejmuje kaspazy-1 (ICE), 4 i 5. Jak wykazano, kaspazy te biorą udział w obróbce prozapalnych cytokin, a zatem odgrywają ważną rolę w zapaleniu. Najlepiej zbadany enzym z tej klasy, kaspaza-1, aktywuje prekursor IL-1 β przez proteolityczne cięcie. Tak więc, enzym ten pełni kluczową rolę w odpowiedzi zapalnej. Kaspaza-1 bierze także udział w obróbce czynnika indukującego γ-interferon (IGIF lub IL-18), który stymuluje wytwarzanie interferonu gamma, kluczowego immunoregulotora modulującego prezentację antygenu, aktywację limfocytów T i adhezję komórkową.
Pozostałe kaspazy wchodzą w skład drugiej i trzeciej podrodziny. Enzymy te odgrywają centralną rolę w szlakach sygnalizacji śródkomórkowej, prowadzących do apoptozy. Jedna z podrodzin obejmuje enzymy uczestniczące w zdarzeniach początkujących szlak apoptozy, obejmujących transdukcję sygnałów z błony komórkowej. Do członków tej podrodziny należą kaspazy-2, 8, 9 i 10. Inna podrodzina obejmuje kaspazy efektorowe 3, 6 i 7, które biorą udział w końcowych zjawiskach cięcia, które prowadzą do systematycznego rozpadu i śmierci komórki przez apoptozę. Kaspazy biorące udział we wcześniejszym przekazywaniu sygnałów aktywują późniejsze kaspazy, które następnie uszkadzają mechanizmy naprawcze DNA, fragmentują DNA, trawią cytoszkielet komórki i w końcu fragmentują komórkę.
Dla substratów enzymu określono cztery sekwencje aminokwasowe głównie rozpoznawane przez kaspazy. Talanian i in., J. Biol. Chem. 272, 9677-9682 (1977); Thornberry i in., J. Biol. Chem. 272, 17907-17911 (1997). Znajomość czterech sekwencji aminokwasów głównie rozpoznawanych przez kaspazy wykorzystano do projektowania inhibitorów kaspazy. Wytworzono odwracalne inhibitory tetrapeptydowe o strukturze CH3CO-[P4]-[P3]-[P2]-CH(R)CH2CO2H, w której P2 do P4 oznaczają optymalną rozpoznawaną sekwencję aminokwasów, a R oznacza aldehyd, nitryl lub keton zdolny do wiązania się z sulfhydrylem cysteiny kaspazy. Rano i Thornberry, Chem. Biol. 4, 149-155 (1997); Mjalli i in., Bioorg. Med. Chem. Lett. 3, 2689-2692 (1993); Nicholson i in., Nature 376, 37-43 (1995). Wytworzono nieodwracalne inhibitory oparte na
PL 201 081 B1 analogicznej tetrapeptydowej rozpoznawanej sekwencji, w której R oznacza keton acyloksymetylowy
-COCH2OCOR'.R' przykładowo oznacza ewentualnie podstawiony fenyl, taki jak 2,6-dichloro-benzoiloksyl, a R oznacza COCH2X, gdzie X oznacza grupę opuszczającą, taką jak F lub Cl. Thornberry i in., Biochemistry 33, 3934 (1994); Dolle i in., J. Med. Chem. 37, 563-564 (1994).
Przydatność inhibitorów kaspazy do leczenia różnych stanów chorobowych u ssaków, które związane są ze wzrostem apoptozy komórek, wykazano stosując peptydowe inhibitory kaspazy. Przykładowo, w modelu gryzoni wykazano, że inhibitory kaspazy zmniejszają wielkość zawału i hamują apoptozę mięśnia sercowego po zawale, zmniejszają objętość zmian i deficytów neurologicznych wskutek udaru, zmniejszają apoptozę pourazową i uszkodzenia neurologiczne w pourazowych uszkodzeniach mózgu, są skuteczne w leczeniu piorunującego zniszczenia wątroby i zwiększają przeżycie po wstrząsie endotoksycznym. Yaoita i in., Circulation, 97, 276 (1998); Endres i in., J. Cerebral Blood Flow and Metabolizm, 18, 238 (1998); Cheng i in., J. Clin. Invest., 101, 1992 (1998); Yakovlev i in., J. Neuroscience, 17, 7415 (1997); Rodriquez i in., J. Exp. Med., 184, 2067 (1996); Grobmyer i in., Mol. Med., 5, 585 (1999).
Opisane powyżej peptydowe inhibitory mają na ogół bardzo silne działanie w stosunku do niektórych kaspaz. Jednakże, działanie to nie zawsze miało odbicie w komórkowych modelach apoptozy. Ponadto, inhibitory peptydowe na ogół charakteryzują się niepożądanymi własnościami farmakologicznymi, takimi jak słaba absorpcja po podaniu doustnym, słaba stabilność i szybki metabolizm. Plattner i Norbeck, w Drug Discovery Technologies, wyd. Clark i Moos, (Ellis Hoorwood, Chichester, Anglia, 1990).
Donoszono o zmodyfikowanych inhibitorach peptydowych. W publikacjach WO 91/15577 i WO 93/05071 ujawniono peptydowe inhibitory ICE o wzorze:
Z-Q2-Asp-Q1 w którym Z oznacza N-końcową grupę ochronną; Q2 oznacza 0 do 4 aminokwasów; a Q1 oznacza grupę opuszczającą z ładunkiem ujemnym.
W publikacji WO 99/18781 ujawniono dipeptydowe inhibitory kaspazy o wzorze:
'CO2R3 y-wgi>3
-AA-jAp2 π n w którym Z oznacza N-końcową grupę ochronną; AA oznacza resztę naturalnego α-aminokwasu lub β-aminokwasu; R2 oznacza H lub CH2R4, gdzie R4 oznacza grupę opuszczającą o ładunku ujemnym, a R3 oznacza alkil lub wodór.
W WO 99/47154 ujawniono dipeptydowe inhibitory kaspazy o wzorze:
w którym R1 oznacza N-końcową grupę ochronną; AA oznacza resztę nie występującego w naturze α-aminokwasu lub β-aminokwasu; a R2 oznacza ewentualnie podstawiony alkil lub wodór.
W publikacji WO 00/023421 ujawniono zawierające (podstawioną) grupę acylową dipeptydowe inhibitory apoptozy o wzorze:
RMC-fCHA fl (CH2)q o H o ,co2r8 w którym n oznacza 0, 1 lub 2; q oznacza 1 lub 2; A oznacza resztę naturalnego lub nie występującego w naturze aminokwasu; B oznacza atom wodoru, atom deuteru, prostołańcuchowy lub rozgałęziony C1-10alkil, cykloalkil, fenyl, podstawiony fenyl, naftyl, podstawiony naftyl, 2-benzoksazolil, podstawiony 2-oksazolil, (CH2)m cykloalkil, (CH2)m fenyl, (CH2)m (podstawiony fenyl), (CH2)m (1- lub 2-naftyl), (CH2)m heteroaryl, halogenometyl, CO2R13, CONR14R15, CH2ZR16, CH2OCOaryl, CH2OCO (podstawiony aryl), CH2OCO(heteroaryl), CH2OCO(podstawiony heteroaryl) lub CH2OPO(R17)R18, gdzie R13, R14, R15, R16, R17 i R18 mają znaczenia podane w zgłoszeniu; R2 jest wybrany z grupy obejmującej wodór, alkil, cykloalkil, fenyl, podstawiony fenyl,
PL 201 081 B1 (CH2) m NH2; R3 oznacza wodór, alkil, cykloalkil, (cykloalkilo)alkil, fenyloalkil lub podstawiony fenyloalkil; X oznacza CH2, C=O, O, S, NH, C=ONH lub CH2OCONH; a Z oznacza atom tlenu lub siarki.
W publikacji WO 97/24339 ujawniono inhibitory enzymu konwertującego interlekinę-1 β o wzorze:
1 2 w którym R oznacza H, alkil, alkoksyl, karbocykl, heterocykl i różne inne grupy; AA i AA oznaczają pojedyncze wiązania lub aminokwasy; a Y oznacza grupę o wzorze
w której pierścień Tet oznacza pierścień tetrazolowy; a Z oznacza, między innymi, alkilen, alkenylen,
O, S, SO i SO2.
W patencie EP 618223 ujawniono inhibitory ICE o wzorze:
R-A1-A2-X-A3 w którym R oznacza H, grupę ochronną lub PhCH2O ewentualnie podstawiony w pierścieniu; A1 oznacza resztę α-hydroksy- lub α-aminokwasu; A2 oznacza resztę α-hydroksykwasu lub α-aminokwasu, albo i A2 tworzą razem resztę pseudodipeptydu lub dipeptydomimetyku; X oznacza resztę pochodzącą od Asp; A; oznacza CH2X1COY1, CH2OY2, CH2SY3 lub CH2(CO)m Y6, gdzie X1 oznacza O lub S, m oznacza 0 lub 1, a Y1, Y2, Y3 i Y6 oznaczają ewentualnie podstawie cykliczne grupy alifatyczne lub arylowe.
W publikacji 98/16502 ujawniono, między innymi, inhibitory ICE o wzorze:
w którym R1 i R2 mają znaczenia podane w tym zgłoszeniu, a pierścień pirolidynowy jest podstawiony różnymi grupami.
Aczkolwiek opisano wiele inhibitorów kaspazy, nie jest jasne, czy mają one odpowiednie własności farmakologiczne, aby mogły być użyteczne terapeutycznie. A zatem, nadal istnieje zapotrzebowanie na małocząsteczkowe inhibitory kaspazy, które mają silne działanie, są trwałe i przenikają przez błony komórkowe, skutecznie hamując apoptozę in vivo. Takie związki byłyby wyjątkowo przydatne do leczenia wymienionych wyżej chorób, w których odgrywają rolę kaspazy.
Stwierdzono obecnie, że związki według wynalazku oraz zawierające je kompozycje farmaceutyczne są skuteczne jako inhibitory kaspaz i apoptozy komórkowej. Związki według wynalazku obejmują związki, które mają ogólny wzór I:
w którym:
Z oznacza tlen;
R1 oznacza -CH2Y;
Y oznacza fluorowiec;
R2 oznacza CO2H, CH2CO2H, CO2 (C1-6alkil), CH2CO2 (C1-6alkil), CO2 (C3-10cykloalkil), CH2CO2 (C3-10cykloalkil), CONH (C1-6alkil), CH2CONH(C1-6alkil), CON (C1-6alkil)2, CH2CON (C1-6alkil)2, CONH-(C1-4alkil)-NH (C1-4alkil), CONH- (C1-4alkil)-N (C1-4alkil)2,
PL 201 081 B1
3
R3 oznacza C1-4alkil; a
R4 i R5, razem z leżącym między nimi atomem azotu, tworzą bi- lub tricykliczny układ heteropierścieniowy, wybrany spośród pierścieni karbazolu, indolu, fenotiazyny, dihydrofenantrydyny, dibenzoazepiny, dihydrodibenzoazepiny i indoliny, przy czym pierścień jest ewentualnie podstawiony fluorowcem, C1-6alkilem lub grupą CF3, oraz ich farmaceutycznie dopuszczalne sole.
Związki według wynalazku mają silne własności hamujące wobec szerokiego zakresu docelowych kaspaz oraz dobrą skuteczność w komórkowych modelach apoptozy. Ponadto, związki te lepiej przenikają do komórek i mają dobre własności farmakokinetyczne, a w konsekwencji lepszego działania są bardziej skuteczne wobec chorób, w które zaangażowane są kaspazy.
Należy rozumieć, że związki według wynalazku ograniczają się jedynie do tych, które mogą istnieć w naturze jako chemicznie trwałe związki.
Jeśli nie stwierdzono inaczej, stosowane tu określenia mają następujące znaczenia. Określenie „alkil”, stosowane samo lub jako część większej reszty, odnosi się do łańcuchów prostych i rozgałęzionych zawierających jeden do sześciu atomów węgla. Określenie „fluorowiec” oznacza F, Cl, Br lub J.
Określenie „grupa karbocykliczna” odnosi się nasyconych monocyklicznych lub policyklicznych węglowych układów pierścieniowych zawierających trzy do dziesięciu atomów węgla, które mogą być skondensowane z grupami arylowymi lub heterocyklicznymi. Przykłady obejmują cykloheksyl, cyklopentyl, cyklobutyl, cyklopropyl, itp.
Gdy grupa R2 jest w postaci estru lub amidu, wówczas związki według wynalazku ulegają metabolicznemu rozszczepieniu do odpowiednich kwasów karboksylowych, które są aktywnymi inhibitorami kaspazy. Z uwagi na rozszczepienie metaboliczne, dokładny charakter grupy estrowej lub amidowej nie jest istotny dla niniejszego wynalazku. Struktura grupy R2 może mieć zakres od stosunkowo prostego dietyloamidu do steroidalnego estru. Przykłady R2 jako estrów kwasów karboksylowych obejmują, ale nie wyłącznie, estry C1-10alifatyczne, takie jak C1-6alkilowe lub C3-10cykloalkilowe.
Amidy kwasów karboksylowych jako R2 mogą być pierwszorzędowe, drugorzędowe lub trzeciorzędowe. Odpowiednie podstawniki przy amidowym atomie azotu obejmują, ale nie wyłącznie, jedną lub więcej grup niezależnie wybranych z grup obejmującej grupy alifatyczne, w tym cykloalkilowe. Związki według wynalazku mogą być również w postaci proleków. Patrz Bradley D. Anderson, „Prodrugs for Improved CNS Delivery” w Advanced Drug Delivery Reviews (1996), 19, 171-202.
R3 oznacza grupę zdolną do wpasowania się w podmiejscy S2 kaspazy. Znane są struktury kilku kaspaz obejmujących podmiejsca S-2. Odniesienia do struktury kaspazy można znaleźć w nastę pują cych publikacjach: H. Blanchard i in., J. Mol. Biol. 302(1), 9-16 (2000); Y. Wei i in., Chem. Biol. 7(6):423-32 (2000); D. Lee i in., J. Biol. Chem. 275(21):16007-14 (2000); H. Blanchard i in., Structure Fold Des. 7(9):1125-33 (1999); Y. Okamoto i in., Chem. Pharm. Bull. (Tokio) 47(1):11-21 (1999); N. Margolin i in., J. Biol. Chem. 272(11):7223-8 (1997); NP Walker i in., Cell 78(2):343-52 (1994); oraz KP Wilson i in., Nature 370 (6487):270-5 (1994).
Związkami według wynalazku, w których R2 oznacza COOH, są gamma-ketokwasy, które mogą występować w roztworze jako forma otwarta 1 lub w formie cyklizowanego hemiketalu 2. Jeśli przedstawiono tu jedną postać izomeryczną oznacza to, że zakresem wynalazku objęto także drugą. Podobnie, gdy R2 oznacza CH2COOH, może również wystąpić cyklizacja i gdy jest tu przedstawiona postać o otwartym pierścieniu, należy rozumieć, że w zakres wynalazku wchodzą wszystkie takie cyklizowane izomery.
Dla specjalistów w tej dziedzinie techniki oczywiste będzie, że niektóre związki według wynalazku mogą być w postaci tautomerów lub w postaci uwodnionej i w zakres niniejszego wynalazku
PL 201 081 B1 wchodzą wszystkie takie formy związków. Jeśli nie stwierdzono inaczej, opisane tu struktury obejmują wszystkie formy stereochemiczne, tj. konfiguracje R i S dla każdego asymetrycznego centrum. A zatem, zakresem wynalazku objęto pojedyncze izomery stereochemiczne, jak również mieszaniny enancjomerów i diastereomerów związków według wynalazku. Jeśli nie stwierdzono inaczej, opisane tu struktury obejmują także związki, które różnią się jedynie obecnością jednego lub więcej izotopowe wzbogaconych atomów. Przykładowo, w zakres wynalazku wchodzą związki o przedstawionych tu strukturach, w których atom wodoru zastąpiono deuterem lub trytem lub atom węgla zastąpiono wzbogaconym atomem 13C lub 14C.
Kluczową cechą związków według wynalazku jest układ heteropierścieniowy utworzony przez
R4, R5 i leżący między nimi atom azotu.
Korzystnie R4 i R5, razem z leżącym między nimi atomem azotu, tworzą bicykliczny lub tricykliczny układ pierścieniowy wybrany z grupy obejmującej karbazol, indol, fenotiazynę, dihydrofenantrydynę, 5H-dibenzo[b,f]azepinę, 10,11-dihydro-5H-dibenzo[b,f]azepinę i indolinę. Wśród związków z takimi pierścieniami korzystny jest związek, w którym R1 oznacza -CH2F. Jeszcze korzystniej układ pierścieniowy jest wtedy wybrany z grupy obejmującej karbazol, fenotiazynę lub 10,11-dihydrofenantrydynę, a najkorzystniej jest pierścieniem karbazolu.
3
W związkach z korzystnymi pierścieniami R korzystnie oznacza etyl, izopropyl lub izobutyl.
Konkretne przykłady korzystnych związków o wzorze I przedstawiono w Tablicy 1.
Tablica 1. Przykłady związków o wzorze I (Z oznacza tlen)
PL 201 081 B1
Nr Struktura
5 Cl
/T 9 ^co2h
Π γ i a AA ° /\ PP> 0
6 ,γγΥ
/T 9 ^co2h
Ayy/oA, (ii Y i a (f^F O
7 r^Y
/t 9 .CĄH
Al /N. A. X Pf Y i a γρ O
8 A
/T 9 .co2h
pf Y l a o ° \ iAp 0
9 Y
/T 9 .co2h
A/YY-A / Pf Y YY M o Y~p 0
10 AJCI
AprY AA o \ ,CO,H 0
PL 201 081 B1
PL 201 081 B1
Nr Struktura
17 YY. zCOjH zA χΝχ zOx JL z-\ Z-\ fr Y YYYYF Y ° A, 0
18 Yó ,o ° 5—je—co2h Y O F
19 Yj-cą» i Y 0 F
20 Y 9 YH YyYY - /\ ~
21 f^Y/rk AA ° a °
22 (YrYfi'^'' AA o A θ
PL 201 081 B1
PL 201 081 B1
Szczególnie korzystne są związki 1, 12 i 17.
Po zbadaniu wielu pierścieni heterocyklicznych R4-N-R5, stwierdzono, że związki tricykliczne, w których końcowe pierścienie są zasadniczo koplanarne, mają zadziwiająco lepszą aktywność w stosunku do szerokiego zakresu kaspaz w porównaniu z ich acyklicznymi analogami oraz z innymi tricyklicznymi układami pierścieniowymi, które zasadniczo nie są koplanarne. Taką zasadniczą koplanarność można uzyskać, gdy środkowy pierścień tricyklicznego układu pierścieniowego stanowi pierścień 5- lub 6-członowy, taki jak pierścień karbazolowy lub fenotiazynowy.
Ponadto, taka zasadnicza koplanarność tricyklicznych, jak również bicyklicznych układów pierścieniowych, takich jak indol i indolina, nadaje szerszą aktywność wobec kaspaz, niż w przypadku związków, w których heterocykliczny pierścień R4-N-R5 jest monocykliczny, taki jak piperydyna, piperazyna lub morfolina.
A zatem, w korzystnym wykonaniu wynalazek dotyczy związków o wzorze I, w którym R4-N-R5 oznacza tricykliczny układ pierścieniowy, zawierający 1 lub 2 heteroatomy, wybrane spośród azotu i siarki, przy czym w układzie tym zewnętrzne pierścienie zawierają 6 atomów, a środkowy pierścień zawiera 5 lub 6 atomów.
W jednym z aspektów wykonanie to dotyczy związków o wzorze II:
2 3 w którym X oznacza wiązanie lub -S-, a Z, R1, R2 i R3 mają wyżej podane znaczenia.
Związki według wynalazku można wytworzyć zasadniczo sposobami znanymi specjalistom w tej dziedzinie techniki dla analogicznych związków, jak zilustrowano na poniższym schemacie i w zamieszczonych dalej przykładach wytwarzania.
PL 201 081 B1
Schemat I
Reagenty: (a) R5-N=C=Z (2); (b) NaOH/THF/H2O; (c) EDC/DMAP/HOBt; (d) i. nadjodynian Dess-Martina, (ii) TFA/DCM
Na powyższym Schemacie I przedstawiono drogę syntezy związków, w których R4 oznacza wodór. W wyniku reakcji izocyjanianu lub tioizocyjanianu 2 z pochodną kwasu mlekowego 1 uzyskuje się karbaminian 3. Grupę estrową związku 3 hydrolizuje się zasadą albo, gdy grupą estrową jest grupa tertbutylowa, stosuje się kwas trifluorooctowy i uzyskuje się kwas 4, który następnie sprzęga się z aminoalkoholem 5. W zależności od charakteru R1 i R2 zamiast aminoalkoholu można stosować aminoketon, który nie wymaga następnego etapu utleniania. W przypadku ketonów fluorometylowych, 1 w których R1 oznacza CH2F, aminoalkohol 5 można otrzymać sposobem według Revesz i in., Tetrahedron Lett., 1994, 35, 9693. Na końcu, grupę hydroksylową związku 6 utlenia się i otrzymany związek poddaje się obróbce odpowiedniej do charakteru R2. Przykładowo, gdy w produkcie I R2 oznacza kwas karboksylowy, wówczas w związku 6 R2 korzystnie stanowi ester, a końcową obróbką na schemacie jest hydroliza.
Wyjściowe izocyjaniany lub tioizocyjaniany 1 są dostępne na rynku lub można je wytworzyć przez reakcję aminy z fosgenem lub równoważnikiem fosgenu (albo tiofosgenem, w przypadku wytwarzania tioizocyjanianów) w obecności zasady, takiej jak trietyloamina. Pochodne mleczanowe są dostępne na rynku lub można je wytworzyć przez reakcję aminokwasu z reagentem diazującym, takim jak NaNO2.
Schemat II
HO^GOaR 2-.Y
O R3
7
Reagenty: (a) CDI/THF; (b) MeOTf /CH2CI2; (c) R4R5NH (8)/THF.
Na powyższym schemacie II przedstawiono syntezę związków o wzorze I według wynalazku, w których R4 i R5 tworzą pierścień. W wyniku reakcji pochodnej mleczanowej 1 z 1,1'-karbonylodiimidazolem (CDI) uzyskuje się imidazolan 7. Związek 7 metyluje się stosując trifluorometanosulfonian metylu, a następnie poddaje się reakcji z aminą 8 (patrz J. Med. Chem. (1996), 39, 982) i uzyskuje się związek przejściowy 3. Sposób przeprowadzenia związku 3 w związek I przedstawiono na schemacie I. Schemat III
Reagenty: (a) COCl2/CH2Cl2; (b) 1/THF.
PL 201 081 B1
HO^-CO2R
Lo o R3
Na powyższym schemacie III przedstawiono alternatywną drogę syntezy związków o wzorze I według wynalazku, w których R4 i R5 tworzą pierścień. Na aminę 8 działa się fosgenem, z wytworzeniem przejściowego chlorku karbamoilu 9. Chlorek 9 poddaje się reakcji z pochodną mleczanową 1, uzyskując przejściowy związek 3.
Schemat IV
R4 r5''nY'°'Y'c°zR o A3
10 3
Reagenty: (a) Cl3COC (O) Cl/THF; (b) R4R5NH (8), NaOH, Bu4NBr.
Na Schemacie IV przedstawiono drogę syntezy związków według wynalazku, w których R4 oznacza wodór lub grupę alkilową, lub w których R4 i R5 razem tworzą pierścień. Hydroksyester 1 poddaje się reakcji z fosgenem lub równoważnikiem fosgenu, takim jak difosgen lub trifosgen, uzyskując przejściowy chloromrówczan 10. Związek 10 poddaje się reakcji z aminą 8, z wytworzeniem związku przejściowego 3.
Związki według niniejszego wynalazku są przeznaczone do hamowania kaspaz. Tak więc, związki według wynalazku można zbadać pod kątem ich zdolności do hamowania apoptozy, uwalniania IL-1 β lub hamowania aktywności kaspazy bezpośrednio. Badania dla każdego rodzaju aktywności są znane w technice i opisano je szczegółowo poniżej w części dotyczącej badań.
W zakres wynalazku wchodzi też kompozycja zawierająca związek o wzorze I lub jego farmaceutycznie dopuszczalną sól, oraz farmaceutycznie dopuszczalny nośnik.
Gdy w kompozycjach stosuje się farmaceutycznie dopuszczalne sole związków według wynalazku, korzystnie sole te pochodzą od nieorganicznych lub organicznych kwasów i zasad. Zakresem takich soli z kwasami objęte są następujące sole: octan, adypinian, alginian, asparaginian, benzoesan, benzenosulfonian, wodorosiarczan, maślan, cytrynian, kamforan, kamforosulfonian, cyklopentanopropionian, diglukonian, dodecylosiarczan, etanosulfonian, fumaran, glukoheptanian, glicerofosforan, hemisiarczan, heptanian, heksanian, chlorowodorek, bromowodorek, jodowodorek, 2-hydroksyetanosulfonian, mleczan, maleinian, metanosulfonian, 2-naftalenosulfonian, nikotynian, szczawian, pamoesan, pektynian, nadsiarczan, 3-fenylopropionian, pikrynian, piwalinian, propionian, bursztynian, winian, tiocyjanian, tosylan i undekanian. Sole z zasadami obejmują sole amonowe, sole metali alkalicznych, takie jak sole sodu i potasu, sole metali ziem alkalicznych, takie jak sole wapnia i magnezu, sole z organicznymi zasadami, takie jak sole dicykloheksyloaminy, N-metylo-D-glukaminy, oraz sole z aminokwasami, takimi jak arginina, lizyna, itd.
Grupy zawierające zasadowy azot można również czwartorzędować, stosując czynniki takie jak niższe halogenki alkilowe, takie jak chlorki, bromki i jodki metylu, etylu, propylu i butylu; siarczany dialkilowe, takie jak siarczan dimetylu, dietylu, dibutylu i diamylu; długołańcuchowe halogenki, takie jak chlorki, bromki i jodki decylu, laurylu, mirystylu i stearylu; halogenki aralkilowe, takie jak bromek benzylu i fenetylu i inne. W ten sposób uzyskuje się produkty rozpuszczalne lub dyspergowalne w wodzie lub w oleju.
Związki stosowane w kompozycjach według wynalazku można również modyfikować przez dołączenie odpowiednich grup funkcyjnych w celu zwiększenia selektywnych własności biologicznych. Modyfikacje takie są znane specjalistom w tej dziedzinie techniki i obejmują modyfikacje, które zwiększają penetrację biologiczną do danego układu biologicznego (np. do krwi, układu limfatycznego, ośrodkowego układu nerwowego), zwiększają dostępność przy podawaniu doustnym, zwiększają rozpuszczalność w celu umożliwienia podawania przez wstrzykiwanie, zmieniają metabolizm lub szybkość wydalania.
Farmaceutycznie dopuszczalne nośniki, które można stosować w kompozycjach według wynalazku, obejmują, ale nie wyłącznie, wymieniacze jonowe, tlenek glinu, stearynian glinu, lecytynę, białka surowicy, takie jak albumina surowicy ludzkiej, substancje buforujące, takie jak fosforany, glicynę, kwas sorbinowy, sorbinian potasu, mieszaniny częściowych glicerydów nasyconych roślinnych kwasów tłuszczowych, wodę, sole lub elektrolity, takie jak siarczan protaminy, wodorofosforan disodu, wodorofosforan potasu, chlorek sodu, sole cynku, koloidalną krzemionkę, trikrzemian magnezu, poliwinylopirolidon, substancje oparte na celulozie, glikol polietylenowy, sól sodową karboksymetylocelulozy, poliakrylany, woski, polimery blokowe polietylen-polioksypropylen, glikol polietylenowy i lanolinę.
PL 201 081 B1
Zgodnie z korzystnym wykonaniem farmaceutyczne kompozycje według wynalazku formułuje się do postaci odpowiednich do podawania ssakowi, a korzystnie człowiekowi.
Kompozycje farmaceutyczne według wynalazku można podawać doustnie, pozajelitowo, przez inhalację, miejscowo, doodbytniczo, donosowo, dopoliczkowo, dopochwowo lub z wszczepionego zbiorniczka. Stosowane tu określenie „pozajelitowe” obejmuje wstrzykiwanie podskórne, dożylne, domięśniowe, dostawowe, wewnątrzmaziówkowe, domostkowe, dooponowe, dowątrobowe, do miejsca chorobowo zmienionego, doczaszkowe oraz techniki infuzji. Korzystnie kompozycje podaje się doustnie lub dożylnie.
Sterylne nadające się do wstrzykiwania postaci kompozycji farmaceutycznych według wynalazku mogą być wodnymi lub olejowymi zawiesinami. Zawiesiny takie sporządza się sposobami znanymi w technice, stosując odpowiednie środki zwilżające lub dyspergujące i środki zawieszające. Sterylnym preparatem do wstrzykiwania może być również roztwór lub zawiesina w nietoksycznym nadającym się do podawania pozajelitowego rozcieńczalniku lub rozpuszczalniku, na przykład, roztwór w 1,3-butanodiolu. Jako dopuszczalne rozcieńczalniki i rozpuszczalniki można stosować wodę, roztwór Ringera oraz izotoniczny roztwór chlorku sodu. Ponadto, jako rozpuszczalnik lub ośrodek zawieszający powszechnie stosuje się również sterylne, ciekłe oleje. Do tego celu można stosować każdy niedrażniący ciekły olej, łącznie z syntetycznymi mono- lub diglicerydami. Do wytwarzania preparatów do wstrzyknięć przydatne są również kwasy tłuszczowe, takie jak kwas oleinowy i jego glicerydowe pochodne, jak również naturalne farmaceutycznie dopuszczalne oleje, takie jak olej z oliwek lub olej rycynowy, zwłaszcza w ich polioksyetylenowanych odmianach. Takie olejowe roztwory lub zawiesiny mogą również zawierać długołańcuchowy alkohol jako rozcieńczalnik lub środek dyspergujący, taki jak karboksymetyloceluloza lub podobne środki dyspergujące, które są stosowane powszechnie do wytwarzania farmaceutycznie dopuszczalnych postaci użytkowych obejmujących emulsje i zawiesiny. W kompozycjach według wynalazku można również stosować inne powszechnie stosowane środki powierzchniowo czynne, takie jak Tween'y, Span'y i inne czynniki emulgujące lub zwiększające biodostępność, które na ogół stosuje się do wytwarzania farmaceutycznie dopuszczalnych stałych, ciekłych lub innych postaci użytkowych.
Kompozycje farmaceutyczne według wynalazku można podawać doustnie w każdej nadającej się do podawania doustnego postaci użytkowej obejmującej, ale nie wyłącznie, kapsułki, tabletki oraz wodne zawiesiny i roztwory. W tabletkach do podawania doustnego jako nośniki powszechnie stosuje się laktozę i skrobię kukurydzianą. Na ogół dodaje się również środki smarujące, takie jak stearynian magnezu. W kapsułkach do podawania doustnego użytecznymi nośnikami są laktoza i wysuszona skrobia kukurydziana. Gdy doustnie podaje się wodne zawiesiny, składnik aktywny łączy się wówczas z czynnikami emulgują cymi i zawieszają cymi. W razie potrzeby, moż na również dodać substancje słodzące, smakowo-zapachowe lub barwniki.
Alternatywnie, kompozycje farmaceutyczne według wynalazku można podawać w postaci czopków do podawania doodbytniczego. Można je wytworzyć przez zmieszanie związku według wynalazku z odpowiednią niedraż nią cą substancją pomocniczą , która jest stał a w temperaturze pokojowej, ale ciekła w temperaturze odbytu, a zatem będzie topić się w odbycie, uwalniając lek. Substancje takie obejmują, ale nie wyłącznie, masło kakaowe, wosk pszczeli i glikole polietylenowe.
Kompozycje farmaceutyczne według wynalazku można również podawać miejscowo, zwłaszcza w przypadkach, gdy żądane leczenie obejmuje powierzchnie lub narządy łatwo dostępne przy podawaniu miejscowym, obejmujących choroby oczu, skóry, dolnych odcinków przewodu pokarmowego. Dla każdej z tych powierzchni lub dla każdego narządu można łatwo wytworzyć odpowiednie preparaty do podawania miejscowego.
Przy podawaniu miejscowym do dolnych odcinków przewodu pokarmowego można stosować preparat doodbytniczy w postaci czopków (patrz powyżej) lub odpowiedni preparat w postaci wlewu. Można również stosować plastry przezskórne do podawania miejscowego.
Kompozycje farmaceutyczne do podawania miejscowego można sporządzić w postaci odpowiedniej maści zawierającej składnik aktywny zawieszony lub rozpuszczony w jednym lub więcej nośnikach. Nośniki do podawania miejscowego związków według wynalazku obejmują, ale nie wyłącznie, olej mineralny, ciekłą naftę, białą wazelinę, glikol propylenowy, polioksyetylen, polioksypropylen, emulgujący wosk i wodę. Alternatywnie, kompozycja farmaceutyczna może być w postaci lotionu lub kremu zawierającego związki aktywne zawieszone lub rozpuszczone w jednym lub więcej farmaceutycznie dopuszczalnych nośnikach. Odpowiednie nośniki obejmują, ale nie wyłącznie, olej mineralny,
PL 201 081 B1 monostearynian sorbitanu, polysorbate 60, woski typu estrów cetylowych, alkohol cetearylowy, 2-oktylododekanol, alkohol benzylowy i wodę.
W zastosowaniach do oczu kompozycje farmaceutyczne można przygotować w postaci mikronizowanych zawiesin w izotonicznym roztworze soli fizjologicznej o odpowiednim pH lub, korzystnie, w postaci roztworów w izotonicznym roztworze soli fizjologicznej o odpowiednim pH, bez środka konserwującego lub zawierających środek konserwujący, taki jak chlorek benzalkonium. Alternatywnie, do zastosowań do oczu kompozycje można sporządzić w maści, takiej jak wazelina.
Kompozycje farmaceutyczne według wynalazku można również podawać przez rozpylanie do nosa lub inhalację. Kompozycje takie wytwarza się sposobami dobrze znanymi w technice wytwarzania preparatów farmaceutycznych i można je sporządzić w postaci roztworu w soli fizjologicznej, stosując alkohol benzylowy lub inne odpowiednie substancje konserwujące, promotory absorpcji zwiększające biodostępność, fluorowęglowodory i/lub inne znane w technice czynniki solubilizujące lub dyspergujące.
Wynalazek obejmuje też zastosowanie związków według wynalazku do wytwarzania leku do leczenia zapalenia trzustki, reumatoidalnego zapalenia stawów, zapalenia kostno-stawowego, przewlekłego aktywnego zapalenia wątroby, zapalenia wątroby typu B, zapalenia wątroby typu C, lub zapalenia wątroby typu G, choroby zapalnej jelita grubego, choroby Crohna, łuszczycy, posocznicy, wstrząsu septycznego, niedokrwienia mózgu, udaru, niedokrwienia mięśnia sercowego, zawału mięśnia sercowego, stwardnienia rozsianego, uszkodzeń neurologicznych po udarze, pourazowego uszkodzenia mózgu, odrzucenia przeszczepu narządu, ostrej niewydolności oddechowej dorosłych, stwardnienia bocznego zanikowego, miażdżycy tętnic, powikłań związanych z przeszczepem bypassów wieńcowych, ostrej niewydolności nerek i choroby przeszczep przeciwko gospodarzowi.
Związki są szczególnie przydatne do wytwarzania leku do leczenia powikłań związanych z zabiegiem bypassów naczyń wieńcowych oraz leku do immunoterapii do leczenia różnych postaci raka.
Ilość związku obecna w opisanych powyżej kompozycjach powinna być wystarczająca do spowodowania wykrywalnego zmniejszenia zaawansowania choroby lub aktywności kaspazy i/lub apoptozy komórek, co można zmierzyć stosując testy opisane w przykładach.
Związki według wynalazku są również użyteczne w sposobach konserwowania komórek, które są konieczne przy przeszczepie narządu lub przy konserwacji produktów krwiopochodnych. Opisywano już podobne zastosowania inhibitorów kaspazy (Schierle i in., Nature Medicine, 1999, 5, 97). Wynalazek obejmuje zatem takie zastosowanie związków według wynalazku. Sposoby te polegają na traktowaniu komórek lub tkanek, które mają być konserwowane, roztworem zawierającym inhibitor kaspazy. Ilość stosowanego inhibitora kaspazy zależy od skuteczności danego inhibitora wobec danego typu komórek i od długości czasu wymaganego do ochrony komórek przed śmiercią wskutek apoptozy.
Kompozycje według wynalazku mogą ponadto zawierać inny środek terapeutyczny. Środki takie obejmują, ale nie wyłącznie, czynniki trombolityczne, takie jak aktywator plazminogenu tkankowego i streptokinaza. Gdy stosuje się drugi środek, wówczas można go podawać w postaci oddzielnej dawki lub jako część jednej dawki ze związkami i kompozycjami według wynalazku.
Należy rozumieć, że konkretna dawka oraz schemat dawkowania dla danego pacjenta zależne będą od różnych czynników, obejmujących aktywność konkretnego stosowanego związku, wiek, ciężar ciała, ogólny stan zdrowia, płeć, dietę, czas podawania, szybkość wydalania, kombinacje z innymi lekami, osąd lekarza prowadzącego i zaawansowanie leczonej choroby. Ilość składników aktywnych będzie również zależeć od konkretnego związku i, jeśli jest obecny, od innego środka terapeutycznego w kompozycji.
Związki i kompozycje według wynalazku oraz leki wytworzone zgodnie z zastosowaniem według wynalazku są przydatne w leczeniu ssaka cierpiącego na jedną z opisanych powyżej chorób, które polega na podawaniu ssakowi opisanej powyżej farmaceutycznie dopuszczalnej kompozycji. Gdy pacjent przyjmuje inny środek terapeutyczny lub inhibitor kaspazy, środek ten można dostarczać razem ze związkiem według wynalazku w jednej dawce lub w postaci dawek oddzielnych. Gdy stosuje się dawki oddzielne, wówczas inny inhibitor kaspazy lub środek można podawać przed, w tym samym czasie lub po podaniu kompozycji farmaceutycznej zawierającej związek według wynalazku.
W celu lepszego zrozumienia niniejszego wynalazku przedstawiono poniżej następujące przykłady. Przykłady te jednakże zamieszczono jedynie w celach ilustracyjnych i w żaden sposób nie ograniczają one zakresu wynalazku.
Przykłady syntezy
W następujących przykładach opisano sposoby syntezy dla wybranych związków według wynalazku.
PL 201 081 B1
P r z y k ł a d 1
Kwas [3S/R]-5-fluoro-4-okso-3-[(S)-3-metylo-2-(karbazolokarbamoiloksy-butyryloamino]-pentanowy
Metoda A:
Ester tert-butylowy kwasu (S)-2-(chlorokarbamoiloksy)-3-metylomasłowego
Do roztworu difosgenu (4,55 g) w THF (34 ml) w temperaturze 0°C dodano roztworu estru tert-butylowego kwasu (S)-2-hydroksy-3-metylomasłowego (sposób wytwarzania opisano w Tetrahedron Lett., (1993), 7409) (4,0 g) i w ciągu 25 minut wkroplono pirydynę (1,82 g) w THF (34 ml). Otrzymaną mieszaninę pozostawiono, aby ogrzała się do temperatury pokojowej w ciągu 4 godzin. Następnie mieszaninę przesączono przez Celite i przesącz zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość ponownie rozpuszczono w eterze dietylowym (200 ml) i znowu przesączono przez Celite. Przesącz zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i otrzymano związek z podtytułu w postaci bladożółtego oleju (5,27 g): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0,98-1,10 (6H, m), 1,55 (9H, s), 2,30 (1H, m), 4,83 (1H, m). Metoda B:
Ester tert-butylowy kwasu (S)-3-metylo-2-(karbazolo-karbamoiloksy)-masłowego
Do roztworu karbazolu (15,15 g) w dichlorometanie (180 ml) i THF (142 ml) w temperaturze 0°C dodano granulowanego wodorotlenku sodu (5,45 g), a następnie bromku tetrabutyloamoniowego (2,93 g). Otrzymaną mieszaninę mieszano przez 30 minut, a następnie w ciągu 55 minut wkroplono roztwór chloromrówczanu (21,41 g) w THF (81 ml). Następnie mieszaninę pozostawiono, aby ogrzała się do temperatury pokojowej przez noc. Dodano dichlorometanu (1 l) i wody (350 ml) i fazę organiczną usunięto. Fazę wodną ekstrahowano dichlorometanem (2 x 250 ml) i połączone fazy organiczne przemyto wodą (200 ml), następnie solanką (200 ml), wysuszono (siarczan magnezu), przesączono i zatężono. Pozostałość oczyszczono metodą szybkiej chromatografii (0-5% octan etylu/heksan) i otrzymano związek z podtytułu w postaci bezbarwnego oleju (29,3 g): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,15-1,23 (6H, m), 1,55 (9H, s), 2,52 (1H, m), 5,27 (1H, d), 7,36-7,57 (4H, m), 8,03 (2H, d), 8,47 (2H, d). Metoda C:
Kwas (S)-3-metylo-2-(karbazolo-karbamoiloksy)-masłowy
Do oziębionego lodem roztworu estru tert-butylowego kwasu (S)-3-metylo-2-(karbazolo-karbamoiloksy)-masłowego (4,11 g) w bezwodnym DCM (300 ml) podczas mieszania wkroplono kwas trifluorooctowy (84 ml). Mieszaninę mieszano w temperaturze 0°C przez 2 godziny, a następnie w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Mieszaninę zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość rozpuszczono w suchym DCM i rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Aby usunąć nadmiar kwasu trifluorooctowego, czynność tę powtarzano kilka razy. Otrzymano kwas
PL 201 081 B1 w postaci bladozielonej ż ywicowatej substancji (3,30 g): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,12-1,37 (6H, m), 2,70 (1H, m), 5,47 (1H, m), 7,32-7,56 (4H, m), 8,00 (2H, d), 8,37 (2H, d).
Metoda D:
Ester tert-butylowy kwasu [3S/R,4S/R]-5-fluoro-4-hydroksy-3-((S)-3-metylo-2-(karbazolo)-karbamoiloksy-butyryloamido)-pentanowego
Mieszaninę kwasu (S)-3-metylo-2-(karbazolo)-karbamoiloksy-masłowego (3,30 g), estru tert-butylowego kwasu 3-amino-5-1luoro-4-hydroksy-pentanowego (2,42 g), HOBt (1,58 g), DMAP (1,49 g) i THF (80 ml) podczas mieszania oziębiono do temperatury 0°C, a następnie dodano EDC (2,24 g). Mieszaninę pozostawiono, aby ogrzała się do temperatury pokojowej przez 16 godzin, po czym zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość oczyszczono metodą szybkiej chromatogra1ii (15-45% octan etylu/heksan) i otrzymano związek z podtytułu w postaci białej piany (4,60 g): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,09-1,50 (15H, m), 2,49-2,80 (3H, m), 3,20-3,62 (1H, m), 3,92-4,58 (4H, m), 5,32-5,42 (1H, d), 6,86 (1H, szer.m), 7,40-7,55 (4H, m), 8,02 (2H, d), 8,35 (2H, m); 19F NMR (376 MHz, CDCl3) -229,6, -229,7, -230,8, -231,4.
Metoda E:
Ester tert-butylowy kwasu [3S/R]-5-Huoro-4-okso-3-[(S)-3-metylo-2-(karbazolo-karbamoiloksy-butyryloamino]-pentanowego
Roztwór estru tert-butylowego kwasu [3S/R,4S/R]-5-1luoro-4-hydroksy-3-((S)-3-metylo-2-(karbazolo)-karbamoiloksy-butyryloamido)-pentanowego (4,60 g) w bezwodnym DCM (100 ml) podczas mieszania w temperaturze 0°C potraktowano 1,1,1-triacetoksy-1,1-dihydro-1,2-benzjodoksol-3(1H)-onem (4,68 g). Wytworzoną mieszaninę utrzymywano w temperaturze 0°C przez 2 godziny, rozcieńczono octanem etylu, a następnie przelano do mieszaniny 1:1 nasyconego wodnego roztworu wodorowęglanu sodu i nasyconego wodnego roztworu tiosiarczanu sodu. Warstwę organiczną usunięto i warstwę wodną ekstrahowano octanem etylu. Połączone ekstrakty organiczne wysuszono (siarczan magnezu) i zatężono. Pozostałość oczyszczono metodą szybkiej chromatogra1ii (10-40% octan etylu/heksan) i otrzymano związek z podtytułu w postaci białej substancji stałej (3,96 g): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,85 (4,5H, s), 1,94-1,31 (6H, m), 1,36 (4,5H, s), 2,59 (1H, m), 2,70-3,11 (2H, m), 4,91-5,31 (3H, m), 5,40-5,49 (1H, m), 7,25 (1H, szer.s), 7,42 (2H, m), 7,53 (2H, m), 8,04 (2H, m), 8,35 (2H, m); 19F NMR (376 MHz, CDCl3) -232,0, -232,1.
P r z y k ł a d 1A
Kwas [35/R]-5-fluoro-4-okso-3-[(S)-3-metylo-2-(karbazolo)-karbamoiloksy-butyryloamino]-pentanowy
Związek ten wytworzono sposobem podobnym do opisanego w powyższej metodzie C. Produkt wyodrębniono w postaci białej substancji stałej (88% w ostatnim etapie): IR (substancja stała) 1721,2,
1695,6, 1664,9, 1449,8, 1378,1, 1198,9, 1040,1, 758,5 cm-1; 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 1,10 (6H, szer.m), 2,41 (1H, m), 2,54-3,04 (2H, m), 4,31-4,82 (1,6H, m, CH2F), 5,10-5,41 (2,4H, m), 7,45 (2H, m), 7,57 (2H, m), 8,22 (2H, m), 8,30 (2H, m), 8,51-8,99 (1H, szer.m), 12,60 (1H, szer.s); 13C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 19,0, 19,1, 19,3, 30,4, 30,5, 30,6, 32,9, 34,5, 34,7, 47,3, 47,4, 52,0, 52,3, 80,4,
PL 201 081 B1
80,8, 83,2, 83,4, 85,1, 85,2, 116,2, 116,3, 124,1, 125,7, 125,9, 137,9, 151,7, 151,9, 152,0, 168,0,
169,0, 169,2, 172,0, 172,1, 173,1, 173,2, 202,2, 202,4, 202,5, 202,6; 19F NMR (376 MHz, d6-DMSO)
-226,6 (t), -226,8 (t), -230,5 (t), -230,9 (t), -232,9 (t), -233,0 (t); MS (ESI +ve) 443 (M+H).
P r z y k ł a d 2
Kwas [3S/R]-5-fluoro-4-okso-3-[(S)-3-metvlo-2-(3-chlorokarbazolo)-karbamoiloksv-butvrvloamino]-pentanowv
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w powyższych metodach A-E. Produkt wvodrębniono w postaci białej substancji stałej (99% w ostatnim etapie): IR (substancja stała)
1721,1, 1690,5, 1664,9, 1444,7, 1367,9, 1209,1, 1040,1 cm-1; 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 1,021,13 (6H, m), 2,40 (1H, m), 2,50-2,99 (2H, m), 4,30-4,85 (1,6H, m), 5,09-5,48 (2,4H, m), 7,48 (1H, m), 7,56-7,66 (2H, m), 8,20-8,32 (3H, m), 8,39 (1H, m), 8,55-8,99 (1H, szer.m), 12,5 (1H, szer.); 13C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 18,1, 18,9, 19,1, 30,4, 30,5, 33,0, 34,5, 34,7, 47,4, 52,0, 52,3, 80,6, 80,9, 81,1,
83,4, 83,43, 85,1, 85,2, 103,8, 104,0, 117,0, 119,3, 121,3, 122,3, 124,3, 124,7, 127,2, 127,4, 127,9,
128,5, 136,6, 138,4, 151,5, 151,6, 151,7, 168,7, 168,9. 169,0, 169,1, 172,0, 172,1, 173,1, 173,2,
202,2, 202,4, 202,44, 202,8 (C); 19F NMR (376 MHz, d6-DMSO) -226,6 (t), -226,8 (t), -230,4 (t), -230,9 (t), -231,0 (t), -232,8 (t), -232,84 (t), -232,9 (t); MS (ESI +ve) 477 (M+H).
P r z v k ł a d 3
Kwas [3S/R]-5-fluoro-4-okso-3-[(S)-3-metvlo-2-(3,6-dichlorokarbazolo)-karbamoiloksv-butvrvloamino]-pentanowv
Związek ten wvtworzono sposobami podobnvmi do opisanvch w powvższvch metodach A-E. Produkt wvodrębniono w postaci białej substancji stałej (99% w ostatnim etapie): IR (substancja stała)
1721,2, 1659,7, 1470,3, 1434,3, 1367,9, 1209,1, 1075,9, 1045,2 cm-1; 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 0,98-1,14 (6H, m), 2,30-2,50 (1H, m), 2,50-3,01 (2H, m), 4,29-4,84 (1,5H, m), 5,09-5,41 (2,5H, m), 7,66 (2H, m), 8,19-8,29 (2H, m), 8,45 (2H, m), 8,57-8,99 (1H, szer.m), 12,60 (1H, szer. OH); 13C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 15,5, 19,1, 19,2, 30,4, 30,45, 30,6, 33,0, 34,5, 34,7, 47,3, 47,5, 52,0, 52,3,
80.8, 81,1, 81,2, 83,4, 84,43, 85,1, 85,2, 117,8, 121,1, 126,3, 128,4, 128,7, 136,9, 151,2, 151,4, 168,6,
168.8, 168,9, 168,95, 172,0, 172,04, 173,1, 173,14, 202,2, 202,3, 202,4, 202,6; 19F NMR (376 MHz, d6-DMSO) -226,6 (t), -226,8 (t), -230,4 (t), -230,8 (t), -232,8 (t), -232,9 (t); MS (ESI +ve) 511/513 (M+H).
P r z v k ł a d 4
Kwas [3S/R]-5-fluoro-4-okso-3-[(S)-3-metvlo-2-(2-chlorokarbazolo)-karbamoiloksv-butvrvloamino]-pentanowv
PL 201 081 B1
Metoda F:
Do roztworu 2-bromonitrobenzenu (646 mg) w THF (17 ml) pod azotem dodano tetrakis(trifenylofosfino)palladu (0) (900 mg). Wytworzoną mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 20 minut, a następnie dodano roztworu kwasu 4-chlorofenyloborowego (1,0 g) w etanolu (17 ml) i otrzymaną mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Następnie dodano 2M roztworu węglanu sodu (17 ml) i mieszaninę reakcyjną ogrzewano do wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 2 godziny, po czym oziębiono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozpuszczono w octanie etylu (100 ml) i warstwę wodną usunięto. Fazę organiczną przemyto solanką (20 ml), wysuszono (siarczan magnezu), przesączono i zatężono. Pozostałość oczyszczono metodą szybkiej chromatografii (0-10% octan etylu/heksan) i otrzymano związek z podtytułu w postaci żółtej substancji stałej (646 mg); 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,24-7,31 (2H, m), 7,41-7,47 (3H, m), 7,52 (1H, m), 7,65 (1H, m), 7, 90 (1H, d).
Metoda G:
2-chlorokarbazol
Mieszaninę 4'-chloro-2-nitrobifenylu (640 mg) i fosforynu trietylu (1,9 ml) ogrzewano w temperaturze 150°C przez 3 godziny. Następnie mieszaninę oziębiono i oczyszczono metodą szybkiej chromatografii (5-10% octan etylu/heksan), uzyskując związek z podtytułu w postaci białej substancji stałej (382 mg):
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 7,12-7,23 (2H, m), 2,40 (1H, m), 7,46-7,54 (2H, m), 8,12 (2H, d).
Kwas [3S/R]-5-fluoro-4-okso-3-[(S)-3-metylo-2-(2-chlorokarbazolo)-karbamoiloksy-butyryloamino]-pentanowy
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w powyższych metodach A-E. Produkt wyodrębniono w postaci białej substancji stałej (99% w ostatnim etapie): IR (substancja stała)
1731,4, 1659,6, 1664,9, 1424,2, 1367,9, 1326,9, 1193,7, 1045,2 cm-1; 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 1,58-1,70 (6H, m), 2,85-3,10 (1H, m), 3,10-3,54 (2H, m), 4,85-5,39 (1,4H, m), 5,65-5,98 (2,6H, m), 7,94-8,20 (3H, m), 8,73-8,90 (4H, m), 9,10-9,56 (1H, szer.m), 13,2 (1H, szer.); 13C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 17,7, 17,9, 19,0, 19,1, 19,2, 30,4, 33,0, 34,5, 34,7, 52,0, 52,3, 80,6, 80,9, 81,1, 83,4, 83,43, 85,1, 85,2, 104,0, 117,1, 121,0, 122,1, 124,2, 124,4, 124,6, 124.8, 129,0, 132,0, 138,2, 138,4,
151,6, 151,61, 168,7, 168.9, 169,0, 172,0, 172,05, 202,4, 202,42, 202,6; 19F NMR (376 MHz, d6-DMSO) -225,5 (t), -226,6 (t), -229,8 (t), -230,3 (t), -232,3 (t), -232,4 (t); MS (ESI +ve) 477 (M+H).
PL 201 081 B1
P r z y k ł a d 5
Kwas [3S/R]-5-fluoro-4-okso-3-[(S)-3-metylo-2-(2,3-dichlorokarbazolo)-karbamoiloksy-butyryloamino]-pentanowy
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w powyższych metodach A-E.
2,3-dichlorokarbazol wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w metodach F i G. Produkt wyodrębniono w postaci białej substancji stałej (98% w ostatnim etapie): IR (substancja stała) 1721,4, 1659,7, 1434,4, 1367,9, 1204,0, 1188,6, 1045,2 cm-1; 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 1,04-1,14 (6H, m), 2,29-2,48 (1H, m), 2,53-3,00 (2H, m), 4,30-4,84 (1,7H, m), 5,09-5,41 (2,3H, m), 7,49 (1H, m), 7,63 (1H, m), 8,20-8,33 (2H, m), 8,42-8,49 (1H, m), 8,62 (1H, m), 8,80-9,00 (1H, szer.m), 12,5 (1H, szer.); 13C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 17,7, 17,9, 19,0, 19,1, 30,5, 33,0, 34,5, 34,7, 47,5, 52,0, 52,3, 80,8, 81,0, 81,2, 83,4, 85,1, 85,2, 116,3, 117,9, 121,5, 122,4, 124,1, 124,6, 126,1, 126,6, 129,0, 129,7,
136,8, 138,5, 151,4, 151,45, 168,6, 168,9, 172,0, 172,03, 173,1, 202,2, 202,3, 202,4, 202,5; 19F NMR (376 MHz, d6-DMSO) -226,6 (t), -226,8 (t), -230,3 (t), -230,8 (t), -232,9 (t); MS (ESI +ve) 513 (M+H).
P r z y k ł a d 6
Kwas [3S/R]-5-fluoro-4-okso-3-[(S)-3-metylo-2-(2-trifluorometylo)-karbazolo-karbamoiloksy-butyryloamino]pentanowy
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w powyższych metodach A-E. 2-trifluorometylokarbazol wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w metodach F i G. Produkt wyodrębniono w postaci białej substancji stałej (85% w ostatnim etapie): IR (substancja stała) 1731,4,
1695,6, 1695,7, 1434,4, 1321,8, 1198,9, 1122,1, 1065,7 cm-1; 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 1,06-1,15 (6H, m), 2,42 (1H, m), 2,50-3,01 (2H, m), 4,29-4,83 (1,6H, m), 5,08-5,42 (2,4H, m), 7,53 (1H, m), 7,68 (1H, m), 7,83 (2H, m), 8,48 (1H, m), 8,64 (1H, m), 8,80-9,01 (1H, m), 12,60 (1H, szer.s); 13C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 17,4, 17,6, 19,0, 19,1, 30,4, 31,0, 32,9, 34,5, 34,7, 52,0, 52,3, 80,7, 80,9, 81,1, 81,1, 83,4, 85,1, 113,3, 116,3, 120,7, 120,9, 123,6, 124,4, 126,2, 127,2, 127,5, 127,8, 128,1, 128,9, 137,2,
138,9, 151,6, 168,6, 169,0, 172,0, 202,2, 202,3, 202,4, 202,6; 19F NMR (376 MHz, d6-DMSO) -60,4 (s), -226,6 (t), -226,8 (t), -229,9 (t), -230,4 (t), -231,0 (t), -232,9 (t), -233,0 (t); MS (ESI +ve) 511 (M+H).
P r z y k ł a d 7
Kwas [3S/R]-5-fluoro-4-okso-3-[(S)-3-metylo-2-(2-metylokarbazolo)-karbamoiloksy-butyryloamino]-pentanowy
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w powyższych metodach A-E. Produkt wyodrębniono w postaci białej substancji stałej (90% w ostatnim etapie): IR (substancja stała)
1726,3, 1700,7, 1664,9, 1552,2, 1460,0, 1552,2, 1460,0, 1367,9, 1332,0, 1209,1, 1193,7, 1040,1 cm-1; 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 1,01-1,19 (6H, m), 2,30-3,00 (6H, m), 4,29-4,85 (1,5H, m), 5,11-5,52 (2,5H, m), 7,29 (1H, m), 7,45 (1H, m), 7,55 (1H, m), 8,05-8,18 (3H, m), 8,27 (1H, m), 8,50-9,10 (1H, szer.m), 12,50 (1H, szer.s); 13CNMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 17,7, 18,0, 19,0, 19,1, 19,2, 22,2, 30,4,
30,5, 30,6, 30,6, 33,0, 34,5, 34,7, 47,4, 52,0, 52,3, 52,7, 80,3, 80,6, 80,7, 80,8, 83,2, 83,4, 83,5, 85,2,
85,2, 103,8, 104,0, 116.2, 116,3, 116,6, 120,3, 120,4, 123,4, 124,0, 125,2, 125,8, 127,3, 137,5, 137,9,
PL 201 081 B1
138,2, 151,7, 151,9, 151,9, 168,8, 169,0, 169,2, 169,2, 172,0, 172,1, 173,1, 173,2, 202.3, 202,4,
202,5, 202,6; 19F NMR (376 MHz, d6-DMSO) -226,55 (t), -226,76 (t), -230,43 (t), -230,89 (t), -232,84 (t),
-232,97 (t).
P r z y k ł a d 8
Kwas [3S/R]-5-fluoro-4-okso-3-[(S)-2-(karbazolo-karbamoiloksy)-butyryloamino]-pentanowy
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w powyższych metodach A-E. Chloromrówczan wytworzono z estru tert-butylowego kwasu (S)-2-hydroksybutanowego, jak opisano w metodzie A. Produkt wyodrębniono w postaci białej substancji stałej (90% w ostatnim etapie): IR (substancja stała) 1716,1, 1654,6, 1449,8, 1372,9, 1326,9, 1204,0, 1050,4, 1029 cm-1; 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 1,03-1,12 (3H, m), 1,96-2,15 (2H, m), 2,50-3,01 (2H, m), 4,31-4,82 (1,8H, m), 5,11-5,43 (2,2H, m), 7,45 (2H, m), 7,59 (2H, m), 8,18-8,32 (4H, m), 8,58-9,05 (1H, szer.m), 12,60 (1H, szer.s); 13C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 9,8, 9,9, 9,94, 24,9, 25,1, 25,2, 33,0, 34,6, 34,7, 47,4, 52,0,
52,3, 77,1, 77,3, 77,4, 77,45, 83,4, 83,5, 85,2, 85,22, 116,3, 120,6, 124,0, 125,7, 127,9, 137,9, 151,5, 151,7, 169,5, 169,8, 172,0, 172,1, 173,1, 202,3, 202,4, 202,5, 202,6; 19F NMR (376 MHz, d6-DMSO) -226,6 (t), -226,8 (t), -230,4 (t), -231,0 (t), -232,9 (t), -233,0 (t).
P r z y k ł a d 9
Kwas [3S/R]-5-fluoro-4-okso-3-[(S)-3,3-dimetylo-2-(karbazolokarbamoiloksy)-butyryloamino]-pentanowy
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w powyższych metodach A-E. Chloromrówczan wytworzono z estru tert-butylowego kwasu (S)-2-hydroksy-3,3-dimetylobutanowego (sposób wytwarzania, patrz Tetrahedron Lett., (1993), 7409), jak opisano w metodzie A. Produkt wyodrębniono w postaci białej substancji stałej (94% w ostatnim etapie): IR (substancja stała) 1782,7,
1721,2, 1526,6, 1444,7, 1373,0, 1332,0, 1301,3, 1198,9, 1117,0, 1040,1, 753,3 cm-1; 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 1,15 (9H, s), 2,50-2,98 (2H, m), 7,59 (2H, m), 8,23 (2H, m), 8,33 (2H, m), 8,50-8,97 (1H, szer.m), 12,50 (1H, szer.s); 13C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 27,3, 33,4, 34,5, 34,6, 34,7, 34,8, 35,1, 52,5, 52,9, 53,5, 83,9, 84,0, 84,1, 84,3, 85,7, 85,73, 116,7, 116,8, 121,2, 124,6, 124,64, 126,2,
128,4, 138,4, 152,2, 152,4, 152,5, 168,4, 168,7, 168,8, 168,9, 172,6, 172,65, 173,6, 202,6, 202,8,
202,9, 203,0; 19F NMR (376 MHz, d6-DMSO) -226,5 (t), -226,6 (t), -230,9 (t), -231,5 (t), -232,9 (t), -233,0 (t); MS (ESI +ve) 457 (M+H).
P r z y k ł a d 10
Kwas [3S/R]-5-fluoro-4-okso-3-[(S)-2-(2-chlorokarbazolokarbamoiloksy-butyryloamino]-pentanowy
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w powyższych metodach A-E. Chloromrówczan wytworzono z estru tert-butylowego kwasu (S) -2-hydroksybutanowego, jak opisano w metodzie A. 2-chlorokarbazol wytworzono jak opisano w metodach F-G. Produkt wyodrębniono w postaci białej substancji stałej (77% w ostatnim etapie): IR (substancja stała) 1733,08, 1699,89, 1662,97, 1448,18, 1423,38, 1369,84, 1332,48, 1215,16, 1199,62, 1052,26, 1033,17, 764,57, 747,53, 720,08, 651,85 cm-1; 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 1,06-1,10 (3H, m), 2,01-2,09 (2H, m), 2,53-2,98 (2H, m), 4,34-4,78 (1,6H, m), 5,14-5,39 (2,4H, m), 7,45-7,61 (3H, m), 8,24-8,31 (4H, m), 8,63-8,99
PL 201 081 B1 (1H, szer.m) , 12,50 (1H, szer.s); 13C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 9,7, 23,7, 25,0, 31,3, 34,6, 34,8,
52,0, 52,3, 77,4, 77,6, 83,4, 85,2, 110,9, 111,6, 116,2, 116,3, 119,0, 119,4, 120,7, 120,9, 121,9, 122,1,
124,2, 124,3, 124,6, 124,8, 126,3, 128,3, 130,2, 132,0, 138,1, 138,4, 151,3, 169,6, 172,1; 19F NMR (376 MHz, d6-DMSO) -226,60 (t), -226,83 (t), -230,34 (t), -231,88 (t), -232,84 (t), -232,99
P r z y k ł a d 11
Kwas [3S/R]-5-fluoro-4-okso-3-[(S)-3-metylo-2-(indolo')-karbamoiloksy-butyryloamino]-pentanowy
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w powyższych metodach A-E. Produkt wyodrębniono w postaci białej substancji stałej (92% w ostatnim etapie): IR (substancja stała)
1731,4, 1664,9, 1536,8, 1454,9, 1393,5, 1326,9, 1239,8, 1035,0 cm-1; 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 1,30-1,62 (6H, m), 2,79 (1H, m), 3,00-3,48 (2H, m), 4,77-5,04 (1,6H, m), 5,42-5,88 (2,4H, m), 7,29 (1H, m), 7,70-7,90 (2H, m), 8,10-8,31 (2H, m), 8,51-8,63 (1H, m), 8,91-9,45 (1H, m), 13,0 (1H, szer.s); 13C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 15,5, 17,3, 17,6, 18,9, 19,2, 30,6, 32,9, 34,5, 34,7, 47,4, 52,0, 52,3,
65,3, 80,0, 80,3, 80,5, 83,4, 83,41, 85,1, 85,2, 104,02, 108,7, 108,71, 108,8, 114,9, 122,0, 123,5, 125,0, 126,3, 130,5, 135,0, 150,4, 168,8, 169,0, 169,14, 172,0, 172,1, 173,1, 202,2, 202,4, 202,5, 202,6; 19F NMR (376 MHz, d6-DMSO) -226,1 (t), -226,3 (t), -230,0 (t), -232,3 (t), -232,4 (t), -232,6 (t); MS (ESI +ve) 393 (M+H).
P r z y k ł a d 12
Kwas [3S/R]-5-11uoro-4-okso-3-[(S)-3-metvlo-2-(fenotiazyno)-karbamoiloksy-butyrvloamino]-pentanowy
Metoda H:
Ester tert-butylowy kwasu (S)-3-metylo-2-(fenotiazyno)-karbamoiloksy-masłowego
Do roztworu estru tert-butylowego kwasu (S)-2-hydroksy-3-metylomasłowego (sposób wytwarzania, patrz Tetrahedron Lett., (1993), 7409) (300 mg) w THF (5 ml) podczas mieszania w temperaturze 0°C dodano wodorku sodu (60% zawiesina w oleju mineralnym, 72 mg). Otrzymaną mieszaninę mieszano przez 30 minut, a następnie dodano chlorku 1enotiazyno-10-karbonylu (450 mg) i mieszaninę pozostawiono, aby ogrzała się do temperatury otoczenia w ciągu 12 godzin. Następnie mieszaninę reakcyjną rozcieńczono octanem etylu (15 ml) i wodą (3 ml). Fazę organiczną oddzielono i 1azę wodną ekstrahowano 2 x 5 ml octanu etylu. Połączone 1azy organiczne przemyto solanką (5 ml), wysuszono (siarczan magnezu), przesączono i zatężono. Pozostałość oczyszczono metodą szybkiej chromatogra1ii (0-10% octan etylu/heksan) i otrzymano związek z podtytułu w postaci bezbarwnego oleju (528 mg): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0,75-0,96 (6H, m), 1,58 (9H, s), 2,20 (1H, m), 4,86 (1H, d), 7,12-7,45 (6H, m), 7,70 (2H, m).
Kwas (S)-3-metylo-2-(fenotiazyno)-karbamoiloksy-masłowy
PL 201 081 B1
Ester tert-butylowy kwasu (S)-3-metylo-2-(fenotiazyno)-karbamoiloksy-masłowego (528 mg) odblokowano stosując kwas trifluorooctowy, jak opisano w metodzie C, i otrzymano kwas w postaci białej substancji stałej (440 mg): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0,77-1,0-0 (6H, m), 2,29 (1H, m), 5,02 (1H, d),
7,15-7,48 (6H, m), 7,70 (2H, m).
Kwas [3S/R]-5-fluoro-4-okso-3-[(S)-3-metylo-2-(fenotiazyno)-karbamoiloksy-butyryloamino]-pentanowy
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w powyższych metodach C-E. Produkt wyodrębniono w postaci białej substancji stałej (98% w ostatnim etapie): IR (substancja stała)
1782,7, 1710,9, 1521,5, 1465,2, 1260,3, 1219,4, 1168,1, 1045,2, 758,5 cm-1; 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 0,64-0,87 (6H, m), 1,96-2,16 (1H, m), 2,40-2,98 (2H, m), 4,50-5,42 (4H, m), 7,28 (2H, m), 7,39 (2H, m), 7,49 (2H, m), 7,68 (2H, szer.m), 7,88-8,91 (1H, szer.m), 12,61 (1H, szer.s); 13C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 16,8, 17,1, 19,0, 19,2, 30,3, 30,5, 33,0, 33,2, 34,5, 34,8, 47,3, 52,0, 52,4, 79,3, 79,6, 79,7,
83,4, 83,5, 85,1, 85,2, 103,8, 127,1, 127,2, 127,3, 127,4, 131,4, 138,0, 138,1, 152,6, 152,8, 158,82, 169,3,
169,5, 169,7, 172,0, 172,1, 172,13, 202,3, 202,4, 202,6, 202,8; 19F NMR (376 MHz, d6-DMSO) -226,6 (t), -226,8 (t), -230,3 (t), -231,3 (t), -232,9 (t), -233,0 (t); MS (ESI +ve) 475 (M+H).
P r z y k ł a d 13
Kwas [3S/R]-5-fluoro-4-okso-3-[(S)-3-metylo-2-(2-chlorofenotiazyno)-karbamoiloksy-butyryloamino]-pentanowy
Metoda I:
Chlorek 2-chlorofenotiazynokarbamylu
Do zawiesiny 2-chlorofenotiazyny (2 g) w ksylenie (20 ml) dodano difosgenu (3,4 g). Mieszaninę ogrzewano do temperatury 140°C przez 18 godzin, a następnie oziębiono i ksylen usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość oczyszczono metodą szybkiej chromatografii (2-5% octan etylu/heksan) i otrzymano związek z podtytułu w postaci brązowej substancji stałej (2,04 g). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,26-7,43 (4H, m), 7,45-7,51 (1H, m), 7,59-7,68 (2H, m).
Kwas [3S/R]-5-fluoro-4-okso-3-[(S)-3-metylo-2-(2-chlorofenotiazyno)-karbamoiloksy-butyryloamino]pentanowy
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w powyższych metodach C-E. Produkt wyodrębniono na drodze HPLC z odwróconymi fazami w postaci białej substancji stałej (61% w ostatnim etapie): IR (substancja stała) 1732, 1460, 1365, 1207 cm-1; 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 0,70-0,87 (6H, m), 2,02-2,10 (1H, m), 2,58-2,90 (2H, m), 4,34-5,37 (4H, m), 7,27-7,88 (7H, m), 8,31-8,81 (1H, m); 13C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 16,7/16,9, 18,9/19,1, 30,3/30,3, 34,5/34,8, 52,0/52,4, 79,6/80,0, 84,2/84,3, 127,0, 127,3, 127,3, 127,6, 128,0, 129,0 130,5, 131,7, 137,5/137,5, 139,1/139,1,
PL 201 081 B1
152,3/152,5, 169,6/169,7, 172,0/172,1, 202,3/202,7 (2d, J 14,1/14,0; 19F NMR (376 MHz, d6-DMSO)
-226,6 (t), -226,8 (t), -233,0 (t), 233,1 (t)
P r z y k ł a d 14
Kwas [3S/R] -5-fluoro-4-okso-3-[(S)-3-metylo-2-(3-chlorofenotiazyno)-karbamoiloksy-butyryloamino]-pentanowy
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w powyższych metodach H, I oraz C-E. Fenotiazynę wytworzono sposobem opisanym w J. Chem. Soc. (1970), 2437-2441. Produkt wyodrębniono w postaci białej substancji stałej (89% w ostatnim etapie): IR (substancja stała) 1717, 1527, 1469, 1350, 1322, 1217, 1042 cm-1; 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 0,67-0,85 (6H, m), 2,00-2,06 (1H, m), 2,58-2,87 (2H, m), 4,33-4,86 (2,6H, m), 5,12-5,36 (1,4H, m), 7,27-7,30 (1H, m), 7,38-7,51 (3H, m), 7,63-7,68 (3H, m), 8,24-8,82 (1H, m); 13C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 17,3/17,6 (CH3), 19,4/19,5 (CH3), 30,8/30,8, 35,0/35,3, 52,5/52,9, 80,0/80,1, 84,7/84,8, 127,2, 127,3, 127,6, 127,9, 128,6,
130,7, 131,2, 133,7, 136,9/137,0, 137,8/137,8, 153,0/153,2, 170,1/170,2, 172,5/172,6, 202,9/203,2; 19F NMR (376 MHz, d6-DMSO) -226,7 (szer.), -226,9 (szer.), -233,0 (t); MS (ESI +ve) 509/511 (M+H).
P r z y k ł a d 15
Kwas [3S/R]-5-fluoro-4-okso-3-[(S)-3-metvlo-2-(3,7-dichlorofenotiazyno)-karbamoiloksy-butyrvloamino]-pentanowy
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w powyższych metodach H, I oraz C-E. Fenotiazynę wytworzono sposobem opisanym w J. Chem. Soc. (1970), 2437-2441. Produkt wyodrębniono na drodze HPLC z odwróconymi fazami w postaci białej substancji stałej (76% w ostatnim etapie): IR (substancja stała) 1793, 1721, 1521, 1465, 1317, 1214, 1086, 1044 cm-1; 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 0,71-0,76 (3H, m), 0,84-0,88 (3H, m), 2,05-2,12 (1H, m), 2,58-2,92 (2H, m), 4,31 -4,87 (2,5H, m), 5,09-5,36 (1,5H, m), 7,47-7,56 (2H, m), 7,67-7,71 (2H, m), 7,72-7,81 (1H, m), 8,39-8,87 (1H, m); 13C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 16,7/16,7/17,0, 19,0/19,1/19,2/19,3, 30,3/30,3/30,4, 34,5/34,8, 52,0/52,4, 79,8/80,1, 84,2/84,3, 127,3, 127,4, 127,7, 128,5, 129,2, 129,7, 131,4/131,4, 132,0, 133,1/133,2, 136,4/136,5, 138,8/138,9, 152,2/152,3, 169,5/169,6, 172,0/172,1, 202,4/202,5; 19F NMR (376 MHz, d6-DMSO) -226,5 (szer.), -226,8 (t), -232,9 (t); -233,0 (szer.).
P r z y k ł a d 16
Kwas [3S/R]-5-fluoro-4-okso-3-[(S)-3-metylo-2-(3,4-dichlorofenotiazyno)-karbamoiloksy-butyryloamino]-pentanowy
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w powyższych metodach H, I oraz C-E. Fenotiazynę wytworzono sposobem opisanym w J. Chem. Soc. (1970), 2437-2441. Produkt wyodrębniono na drodze HPLC z odwróconymi fazami w postaci białej substancji stałej (58% w ostatnim etapie): IR (substancja stała) 1736, 1436, 1365, 1222, 1050 cm-1; 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ
PL 201 081 B1
0,66-0,85 (3H, m), 2,00-2,08 (1H, m), 2,57-2,93 (2H, m), 4,30-5,35 (4H, m), 7,31-7,71 (6H, m), 8,27-8,83 (1H, m); 13C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 16,8/17,1, 19,0/19,1, 30,3, 34,5/34,8, 52,0/52,4,
79,7/80,0, 84,2/84,3, 179,2/178,6, 127,1, 127,3, 127,5, 128,2, 128,5, 128,5, 129,6, 130,0, 133,7,
137,3/137,3, 137,6/137,6, 152,5, 169,5/169,5, 172,0/172,1, 203,3; 19F NMR (376 MHz, d6-DMSO)
-226,6 (t), -226,8 (t), -232,9 (t).
P r z v k ł a d 17
Kwas [3S/R]-5-fluoro-4-okso-3-[(S)-3-metvlo-2-(9,10-dihvdrofenantrvdvno)-karbamoiloksv-butvrvloamino]-pentanowv
Związek ten wvtworzono sposobami podobnvmi do opisanvch w powvższvch metodach H, I oraz C-E. 9,10-dihvdrofenantrvdvnę wvtworzono, jak opisano w J. Chem. Soc. (1951), 3207-3211. Produkt wvodrębniono na drodze HPLC z odwróconvmi fazami w postaci białej substancji stałej (56% w ostatnim etapie): IR (substancja stała) 1732, 1365, 1226, 1212, 1203 cm-1; 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 0,84 (6H, m), 2,05 (1H, m), 2,55-2,90 (2H, m), 4,28-5,36 (6H, m), 7,26-7,43 (5H, m), 7,75-7,77 (1H, m), 7,89-7,91 (2H, m), 8,24-8,81 (1H, m); 13C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 17,1/17,4, 18,9/19,0, 30,3/30,4, 34,4/34,8, 46,9, 51,9/52,4, 79,0/79,4, 84,2/84,3, 123,8, 124,3, 125,1, 125,7,
126,2, 128,0, 128,2, 128,3, 128,5, 131,5, 134,1, 136,9, 153,1, 170,0/170,1, 172,0/172,1, 202,4/202,8; 19F NMR (376 MHz, d6-DMSO) -226,7 (szer.), -226,9 (szer.), -233,1 (t); MS (ESI -ve) 455 (M-H).
P r z v k ł a d 18
Ester 1-(1-karboksvmetvlo-3-fluoro-2-okso-propvlokarbamoilo)-2-metvlo-propvlowv kwasu dibenzo[b,f]-azepino-5-karboksvlowego
Związek ten wvtworzono sposobami podobnvmi do opisanvch w powvższvch metodach H, I oraz C-E. Produkt wvodrębniono w postaci białej substancji stałej (100% w ostatnim etapie): IR (substancja stała) 1791,2, 1714,9, 1683,4, 1525,6, 1492,6, 1370,1, 1325,6, 1229,3, 1212,5, 1053,4, 1032,7, 798,4 cm-1; 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 0,50 +0,68 (6H, 2 x m), 1,90 (1H, m), 2,54-2,93 (2H, m), 4,20-5,44 (4H, m), 7,02 (2H, s), 7,30-7,80 (8H, m); 13C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 18,73, 19,17 30,34, 34,56, 52,18, 84,37, 127,92, 128,61, 128,69, 129,63, 130,83, 134,40, 153,90, 169,64, 172,23, 202,29, 202,43, 202,63, 202,76; 19F NMR (376 MHz, d6-DMSO) -226,83 (t), -226,87 (t), -232,93 (t), -233,07 (t), -233,10 (t), -233,32 (t); MS (ESI +ve) 469 (M+H).
P r z v k ł a d 19
Ester 1-(1-karboksvmetvlo-3-fluoro-2-okso-propvlokarbamoilo)-2-metvlo-propvlowv kwasu 10,11-dihvdro-dibenzo[b, f]azepino-5-karboksvlowego
Związek ten wvtworzono sposobami podobnvmi do opisanvch w powvższvch metodach H, I oraz C-E. Produkt wvodrębniono w postaci białej substancji stałej (100% w ostatnim etapie): IR (substancja
PL 201 081 B1 stała) 1796,9, 1683,9, 1521,8, 1491,5, 1368,3, 1324,8, 1278,6, 1213,4, 1201,9, 1108,0, 1056,4, 931,1,
776,5, 746,7 cm-1; 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 0,50-0,95 (6H, m), 1,90 (1H, m), 2,55-3,00 (2H, m), 4,20-5,30 (8H, m), 7,10-7,50 (8H, m); 13C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 15,24, 16,79, 39,44, 52,43, 78,36, 84,34, 126,80, 1227,89, 128,43, 130,29, 136,29, 154,09, 169,58, 170,03, 172,19, 173,12, 202,28, 202,42; 19F NMR (376 MHz, d6-DMSO) -226,76 (t), -233,01 (t), -233,11 (t), -233,38 (t); MS (ESI +ve) 471 (M+H).
P r z y k ł a d 20
Kwas [3S/R]-5-fluoro-4-okso-3-((S)-2,3-dihydroindolo-1-karbamoiloksy-3-metylo-butyryloamino)-pentanowy
Metoda J:
Ester benzylowy kwasu (S)-2-(imidazolokarbamoiloksy)-3-metylomasłowego
Do roztworu estru benzylowego kwasu (S)-2-hydroksy-3-metylomasłowego (sposób wytwarzania, patrz J. Med. Chem., (1996), 39, 982, 1,5 g) w THF (20 ml) podczas mieszania dodano karbonylodiimidazolu (1,17 g) i wytworzoną mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 12 godzin. Mieszaninę reakcyjną zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość rozpuszczono w octanie etylu (30 ml). Roztwór przemyto 1% roztworem kwasu fosforowego (2 x 10 ml), następnie solanką (10 ml), wysuszono (siarczan magnezu), przesączono i zatężono, uzyskując związek z podtytułu w postaci bezbarwnego oleju (1,89 g): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,02 (3H, d), 1,11 (3H, d), 2,47 (1H, m), 5,15 (1H, d), 5,18-5,32 (2H, m), 7,11 (1H, s), 7,18-7,60 (6H, m), 8,20 (1H, m).
Metoda K:
Ester benzylowy kwasu (S)-(2,3-dihydroindolo-1-karbamoiloksy)-3-metylomasłowego
Do roztworu estru benzylowego kwasu (S)-2-(imidazolo-karbamoiloksy)-3-metylomasłowego (355 mg) w THF (7 ml) podczas mieszania w temperaturze 0°C dodano trifluorometanosulfonianu metylu (0,13 ml). Otrzymany roztwór mieszano przez 30 minut. Następnie dodano indoliny (280 mg) i mieszaninę pozostawiono, aby ogrzała się do temperatury pokojowej przez 12 godzin. Mieszaninę reakcyjną zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość rozpuszczono w octanie etylu (30 ml). Roztwór przemyto nasyconym roztworem wodorowęglanu sodu (5 ml), 1M kwasem solnym (2x5 ml), a następnie solanką (5 ml), wysuszono (siarczan magnezu), przesączono i zatężono. Pozostałość oczyszczono metodą szybkiej chromatografii (5-7% octan etylu/heksan) i otrzymano związek z podtytułu w postaci bezbarwnego oleju (342 mg): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0,86-1,18 (6H, m), 2,35 (1H, m), 3,08-3,25 (2H, m), 4,05-4,25 (2H, m), 4,95-5,32 (3H, m), 6, 95-7, 91 (9H, m).
Metoda L:
Kwas (S)-(2,3-dihydroindolo-1-karbamoiloksy)-3-metylomasłowy
Do roztworu estru benzylowego kwasu (S)-(2,3-dihydroindolo)-1-karbamoiloksy)-3-metylomasłowego (342 mg) w metanolu (25 ml) podczas mieszania dodano 10% palladu na węglu (80 mg). Mieszaninę uwodorniano w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Następnie mieszaninę przesączono przez Celite i przesącz zatężono, uzyskując związek z podtytułu w postaci bezbarwnego oleju (255 mg): 1H NMR
PL 201 081 B1 (400 MHz, CDCl3) δ 0,95-1,21 (6H, m), 2,40 (1H, m), 3,20 (2H, m), 4,01-4,25 (2H, m), 4,95-5,15 (1H, m), 6,97-7,99 (4H, m).
Kwas [3S/R]-5-fluoro-4-okso-3-((S)-2,3-dihydroindolo-1-karbamoiloksy-3-metylo-butyryloamino)-pentanowy
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w powyższych metodach C-E. Produkt wyodrębniono w postaci białej substancji stałej (94% w ostatnim etapie): IR (substancja stała)
1680.2, 1485,6, 1413,9, 1137,4, 1050,4, 758,5 cm-1; 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 0,95 (6H, szer.m), 2,17 (1H, szer.m), 2,50-2,94 (2H, m), 3,12 (2H, szer.m), 3,84-4,23 (2H, szer.m), 4,27-5,38 (4H, m), 6,98 (1H, m), 7,22 (2H, m), 7,67 (1H, szer.m), 7,79-8,30 (1H, szer.m), 12,50 (1H, szer.s); 13C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 17,2, 19,0, 19,2, 27,3, 30,4, 30,6, 32,9, 34,5, 34,6, 47,3, 47,35, 52,0,
52.2, 78,3, 83,4, 85,1, 104,0, 114,2, 123,0, 125,4, 127,5, 131,7, 170,0, 172,07, 172,1, 173,2, 173,25, 202,3, 202,5, 202,6; 19FNMR (376 MHz, d6-DMSO) -226,7 (t), -226,8 (t), -233,1 (t), -233,3 (t); MS (ESI +ve) 395 (M+H).
P r z y k ł a d 21
Dietyloamid kwasu [3S/R]-5-fluoro-4-okso-3-[(S)-3-metylo-2-(karbazolo)-karbamoiloksy-butyryloamino]-pentanowego
Metoda M:
Do roztworu kwasu (z przykładu 1, wytworzony jak opisano w metodach A-E) (100 mg) w THF (2 ml) podczas mieszania w temperaturze 0°C dodano dietyloaminy (16 mg) w THF (0,5 ml), a następnie chlorowodorku 1-(3-dimetyloaminopropylo)-3-etylokarbodiimidu (EDC, 48 mg). Następnie mieszaninę ogrzewano do temperatury pokojowej przez 12 godzin. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość oczyszczono metodą szybkiej chromatografii (50-60% octan etylu/heksan) i otrzymano amid w postaci białej substancji stałej (54 mg); 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0,69-1,38 (12H, m), 2,42-3,37 (7H, m), 4,85-4,92 (1H, m), 5,01-5,55 (3H, m), 7,31-7,70 (5H, m), 7,90-8,05 (2H, m), 8,25-8,42 (2H, m); 19F NMR (376 MHz, CDCl3) -232,6 (t), -232,8 (t); MS (ESI, +ve) 498 (M+H).
P r z y k ł a d 22
Etyloamid kwasu [3S/R]-5-fluoro-4-okso-3-[(S)-3-metylo-2-(karbazolo)-karbamoiloksy-butyryloamino]-pentanowego
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w metodzie M. Produkt wyodrębniono w postaci białej substancji stałej (62%): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0,96-1,31 (9H, m), 2,21-2,45 (1H, m), 2,48-2,80 (2H, m), 3,15-3,48 (2H, m), 4,23-4,76 (3H, m), 5,05-5,42 (1H, m), 6,42-6,84 (1H, m), 7,38-7,60 (4H, m), 7,95-8,09 (2H, m), 8,20-8,41 (2H, m); 19F NMR (376 MHz, CDCl3) -223,8 (t), -224,5 (t), -226,5 (t), -227,1 (t), -231,9 (t), -232 (t); MS (ESI +ve) 452 (M+H2O).
PL 201 081 B1
P r z y k ł a d 23
Piperazynoamid kwasu [3S/R]-5-11uoro-4-okso-3-[(S)-3-metylo-2-(karbazolo)-karbamoiloksy-butyrvloamino]-pentanowego
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w metodzie M. Produkt wyodrębniono w postaci białej substancji stałej (78%): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,10-1,35 (6H, m), 1,80-3,55 (14H, m), 4,82-4,98 (1H, m), 5,00-5,45 (3H, m), 7,38-7,60 (5H, m), 7,95-8,08 (2H, m), 8,27-8,45 (2H, m); 19F NMR (376 MHz, CDCl3) -232,5 (t), -232,7 (t); MS (ESI +ve) 525 (M+H).
P r z y k ł a d 24
N,N-dimetyloaminoetyloamid kwasu [3S/R]-5-Huoro-4-okso-3-[(S)-3-metylo-2-(karbazolo)-karbamoiloksy-butyryloamino]-pentanowego
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w metodzie M. Produkt wyodrębniono w postaci białej substancji stałej (49%): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,14-1,31 (6H, m), 1,88-3,04 (13H, m), 3,88-4,41 (3H, m), 4,57-4,74 (1H, m), 5,33-5,61 (1H, m), 6,86-7,12 (1H, m), 7,33-7,56 (4H, m), 8,01-8,05 (2H, m), 8,27-8,41 (2H, m); 19F NMR (376 MHz, CDCl3) -222,4 (t), -222,5 (t); MS (ESI +ve) 513 (M+H).
P r z y k ł a d 25
[3S/R]-5-1^uoro-4-okso-3-[(S^)-3-metvlo-2-(karbazolo^)-karbamoiloksy-butyrvloamino]-pentanoamid
Metoda N:
Do roztworu kwasu pS/R^-fluoro^-okso^-KS^-metylo^-fkarbazolo-karbamoiloksy-butyryloamino]-pentanowego z przykładu 1 (150 mg) w dichlorometanie (1,5 ml) i dimetylo1ormamidzie (0,075 ml) podczas mieszania dodano karbonylodiimidazolu (66 mg). Mieszaninę mieszano przez 2 godziny, po czym oziębiono do temperatury 0°C z jednoczesnym barbotowaniem amoniakiem. Mieszaninę rozcieńczono układem octan etylu/10% roztwór wodorosiarczanu potasu. Fazę organiczną usunięto i fazę wodną ekstrahowano octanem etylu. Połączone fazy organiczne wysuszono nad siarczanem magnezu, przesączono i zatężono. Pozostałość oczyszczono metodą szybkiej chromatografii (5% metanol/dichlorometan) i otrzymano amid w postaci białej substancji stałej (80 mg); 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,10-1,28 (6H, m), 2,12-2,75 (3H, m), 4,10-4,85 (4H, m), 5,29 (1H, m), 6,36, 6,55, 6,78, 6,98 (1H, 4 x s), 7,17 (1H, m), 7,42 (2H, m), 7,50 (2H, m), 7,99 (2H, m), 8,29 (2H, m); 19F NMR (376 MHz, CDCl3) -225,47 (t), -226,00 (t), -227,33 (t), -227,50 (t), -228,43 (t); MS (ESI +ve) 424 (M-H2O+H).
P r z y k ł a d 26
Ester cykloheksylowy kwasu ^S/Ry-fluoro^-okso^-W-metylo^-fkarbazolol-karbamoiloksy-butyryloamino]-pentanowego
PL 201 081 B1
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w metodzie M. Produkt wyodrębniono w postaci białej substancji stałej (37%): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0,90-1,80 (16H, m), 2,59 (1H, m), 2,75-3,15 (2H, m), 4,40 (0,5H, m), 4,64 (0,5H, m), 4,95-5,45 (4H, m), 7,25 (1H, m), 7,42 (2H,
m), 7,62 (m, 2H) , 8,05 (2H, m), 8,36 (2H, m); 19F NMR (376 MHz, CDCl3) -231,95 (t), -232,08 (t).
P r z y k ł a d 27
Ester n-propylowy kwasu i3S/Rl-5-fluoro-4-okso-3-i(S)-3-metylo-2-(karbazolo)-karbamoiloksy-butyryloaminol-pentanowego
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w metodzie M. Produkt wyodrębniono w postaci białej substancji stałej (82%): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0,80 (3H, m), 1,13-1,36 (6H, m), 1,42 (1H, m), 1,58 (1H, m), 2,60 (1H, m), 2,80-3,08 (2H, m), 3,70 (1H, m), 3,98 (1H, m), 4,925,50 (4H, m), 7,21 (1H, m), 7,40 (2H, m), 7,50 (2H, m), 8,00 (2H, m), 8,32 (2H, m); 19F NMR (376 MHz, CDC13) -232,00 (t), -232,01 (t); MS (ESI +ve) 485 (M+H).
P r z y k ł a d 28
Ester izopropylowy kwasu [3S/Rl-5-fluoro-4-okso-3-i(S)-3-metylo-2-(karbazolo)-karbamoiloksy-butyryloaminol-pentanowego
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w metodzie M. Produkt wyodrębniono w postaci białej substancji stałej (7%): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0,90-1,33 (12H, m), 2,55 (1H, m), 2,78-3,15 (2H, m), 4,80-5,50 (5H, m), 7,25 (1H, szer.s), 7,43 (2H, m), 7,55 (2H, m), 8,05 (2H, m), 8,36 (2H, m); 19F NMR (376 MHz, CDCl3) -232,00 (t), -232,03 (t).
P r z y k ł a d 29
Ester metylowy kwasu i3S/Rl-5-fluoro-4-okso-3-i(S)-3-metylo-2-(karbazolo)-karbamoiloksy-butyryloaminol-pentanowego
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w metodzie M. Produkt wyodrębniono w postaci białej substancji stałej (81%): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,20 (6H, m), 2,58 (1H, m), 2,80-3,05 (2H, m), 3,42, 3,61 (3H, 2 x s), 4,98-5,26 (3H, m), 5,41 (1H, m), 7,20 (1H, szer.s), 7,45 (2H, m), 7,55 (2H, m), 8,04 (2H, m), 8,35 (2H, m), 19F NMR (376 MHz, CDCl3) -231,99 (t), -232,00 (t); MS (ESI +ve) 457 (M+H).
P r z y k ł a d 30
Ester cholesterolowy kwasu [3S/Rl-5-fluoro-4-okso-3-[(S)-3-metylo-2-(karbazolo)-karbamoiloksy-butyryloaminol-pentanowego
PL 201 081 B1
Związek ten wytworzono sposobami podobnymi do opisanych w metodzie N, stosując karbonylodiimidazol jak reagent sprzęgający. Produkt wyodrębniono w postaci białej substancji stałej (12%): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0,65-2,35 (47H, m), 2,58 (1H, m), 2,57-3,15 (2H, m), 4,25 (0,5H, m), 4,48 (0,5H, m), 4,97-5,46 (5H, m), 7,30 (1H, m), 7,44 (2H, m), 7,58 (2H, m), 8,05 (2H, m), 8,33 (1H, m); 19F NMR (376 MHz, CDCl3) -231,91 (t), -232,03 (t). Wyodrębniono również odpowiedni ketal w postaci białej substancji stałej (21%): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0,65-2,10 (48H, m), 2,35-3,15 (2H, 3xm), 3,42-3,69 (1H, m), 4,10-4,96 (4H, m), 5,15-5,65 (2H, m), 6,78 (1H, m), 7,45 (2H, m), 7,57 (2H, m), 8,05 (2H, m), 8,34 (2H, m); 19F NMR (376 MHz, CDC13) -230,57 (t), -230,67 (t).
Metody badań
Badania enzymatyczne
Badania zahamowania kaspazy oparto na cięciu fluorogennego substratu przez rekombinantowe oczyszczone ludzkie kaspazy -1, -3, 7 lub -8. Badania prowadzono zasadniczo w taki sam sposób, jak opisali Garcia-Calvo i in., (J. Biol. Chem. 273 (1998), 32608-32613), stosując substrat swoisty dla każdego enzymu. Substratem dla kaspazy-1 jest acetylo-Tyr-Val-Ala-Asp-amino-4-metylokumaryna. Substratem dla kaspaz -3, -7 i -8 jest acetylo-Asp-Glu-Val-Asp-amino-4-metylokumaryna.
Zaobserwowaną szybkość inaktywacji enzymu przy danym stężeniu inhibitora, kobsr obliczono przez bezpośrednie dopasowanie danych do równania Thornberry'ego i in. (Biochemistry 33 (1994), 3943-3939), stosując program komputerowy oparty na nieliniowej analizie najmniejszych kwadratów (PRISM 2.0; Gra-phPad software). W celu uzyskania stałej szybkości drugiego rzędu, kinact, wartości kobs wykreślono w stosunku do odpowiednich stężeń inhibitora i następnie metodą komputerowej regresji liniowej obliczono wartości kinact. Dla wielu badanych związków według wynalazku wartości kinact wobec kaspazy-1 mieściły się w zakresie 25 000 - 1 500 000 M-1s-1; wobec kaspazy-3 w zakresie 9 000 - 1 500 000 M-1s-1; a wobec kaspazy-8 w zakresie pomiędzy 10 000 - 700 000 M-1s-1.
Zahamowanie wydzielania IL-1 β z mieszanej populacji jednojądrzastych komórek krwi obwodowej (PBMC)
Obróbkę pre-IL-1 β przez kaspazę-1 można zmierzyć w hodowli komórkowej stosując różne źródła komórek. Ludzkie PBMC uzyskane od zdrowych dawców dostarczają mieszanej populacji limfocytów i komórek jednojądrzastych, które wytwarzają spektrum interleukin i cytokin w odpowiedzi na różnej klasy stymulatory fizjologiczne.
Procedura badawcza
Badany związek rozpuszczono w sulfotlenku dimetylu (DMSO, Sigma #D-2650) i otrzymano 100 mM roztworu podstawowego. Roztwór ten rozcieńczono w kompletnym ośrodku obejmującym RPMI zawierającą 10% inaktywowaną ciepłem FCS (Gibco BRL #10099-141), 2 mM L-glutaminy (Sigma, #G-7513), 100 U penicyliny i 100 μg/ml streptomycyny (Sigma #P-7539). Końcowe stężenie badanego związku było w zakresie od 100 μM do 6 nM w ośmiu etapach rozcieńczania. Najwyższe stężenie badanego w teście związku jest równoważne 0,1% DMSO.
Ludzkie PBMC wyizolowano z kożuszka krwi otrzymanej z banku krwi po odwirowaniu w ośrodku do oddzielania leukocytów Ficoll-Paque (Amersham, #17-1440-02) i badanie komórek prowadzono na sterylnej 96-studzienkowej płaskodennej płytce (Nunc). Każda studzienka zawierała 100 μl zawiesiny komórek, 1 x 105 komórek, 50 μl rozcieńczeń związku i 50 μl LPS (Sigma #L-3012) przy końcowym stężeniu 50 ng/ml. Próby kontrolne zawierały komórki +/- stymulacja LPS oraz seryjne rozcieńczenia DMSO, które przygotowano w taki sam sposób jak rozcieńczenia związku. Płytki inkubowano przez 16-18 godzin w temperaturze 37°C w atmosferze 5% CO2 i 95% wilgotności.
Po 16-18 godzinach po odwirowaniu płytek przy 100 x g w 18°C przez 15 minut supernatanty zebrano i oceniano na zawartość IL-1 β. Pomiary dojrzałej IL-1 β w supernatancie prowadzono stosując zestawy Quantikine kits (R&D Systems), zgodnie z instrukcjami producenta. W studzienkach z kontrolą pozytywną PBMC zaobserwowane poziomy dojrzałej IL-1 β wynosiły około 600-1500 pg/ml.
Moc hamującą związków można przedstawić jako wartość IC50, która oznacza stężenie inhibitora, przy którym w supernatancie wykrywa się 50% dojrzałej IL-1 β w porównaniu z kontrolami pozytywnymi. W Tablicy 5 przedstawiono zahamowanie wydzielania IL-1 β z monojądrzastych komórek krwi obwodowej przez wybrane związki według wynalazku, zgodnie z opisaną powyżej metodą.
W badaniu tym testowano wybrane związki i wykazano, że wartości IC50 dla hamowania uwalniania IL-1 β przez te związki mieściły się w zakresie 0,04 μM do 20 μM.
Badanie apoptozy wywołanej anty-Fas
Apoptozę komórkową można wywołać przez związanie ligandu Fas (FasL) z jego receptorem, CD95 (Fas). CD95 jest jednym z rodziny receptorów pokrewnych, znanych jako receptory śmierci,
PL 201 081 B1 które mogą wywołać apoptozę w komórkach przez aktywację kaskady enzymatycznej kaspazy. Proces ten rozpoczyna się od wiązania cząsteczki adaptora FADD/MORT-1 z cytoplazmatyczną domeną kompleksu receptor CD-95-ligand. Następnie, kaspaza-8 wiąże FADD i aktywuje się, inicjując kaskadę wydarzeń, które obejmują aktywowanie wcześniejszych kaspaz i następnie apoptozę komórkową. Apoptoza może być również wywołana w komórkach wyrażających CD95, np. w komókach Jurkat E6.1 i w linii komórkowej chłoniaka limfocytów T, bardziej przy użyciu przeciwciała niż FasL, z usieciowaniem powierzchni komórkowej CD95. Apoptoza wywołana anty-Fas jest również wyzwalana przez aktywację kaspazy-8. Dostarcza to podstawy do badań na komórkach prowadzących do skriningu związków, które hamują szlak apoptotyczny, w którym pośredniczy kaspaza-8.
Procedura eksperymentalna
Komórki Jurkat E6.1 hodowano w kompletnej pożywce zawierającej RPMI-1640 (Nr Sigma) + 10% płodową surowicę cielęcą (Gibco BRL Nr 10099-141) + 2 mM L-glutaminy (Sigma nr G-7513). Komórki zebrano w logarytmicznej fazie wzrostu. 100 ml komórek przy 5-8x105 komórek/ml przeniesiono do sterylnych probówek wirówki Falcon i wirowano przez 5 minut przy 100 x g w temperaturze pokojowej. Supernatant usunięto i połączone osady komórkowe ponownie zawieszono w 25 ml kompletnej pożywki. Komórki policzono i gęstość doprowadzono, stosując kompletną pożywkę, do 20x106 komórek/ml.
Badany związek rozpuszczono w sulfotlenku dimetylu (DMSO) (Sigma Nr D-2650) i otrzymano 100 mM roztworu podstawowego. Roztwór ten rozcieńczono do 400 mM w kompletnej pożywce, a następnie przed dodaniem do płytki do badań komórek rozcieńczano seryjnie na 96-studzienkowej płytce.
Do każdej studzienki sterylnej 96-studzienkowej okrągłodennej płytki (Costar Nr 3790) dodano 100 μl zawiesiny komórek (2x106 komórek). Do studzienek dodano 50 μl roztworu związku w odpowiednim rozcieńczeniu i 50 μl przeciwciała anty-Fas, klon CH-11 (Kamiya Nr MC-060) do końcowego stężenia 10 ng/ml. Do studzienek kontrolnych nie dodawano przeciwciała i związku, a dodawano jedynie DMSO w seryjnych rozcieńczeniach jako nośnik kontrolny. Płytki inkubowano przez 16-18 godzin w temperaturze 37°C przy 5% CO i 95% wilgotności.
Apoptozę komórkową zmierzono przez obliczenie fragmentacji DNA, stosując test „Cell Death Detection Assay” z firmy Boehringer-Mannheim, nr 1544, 675. Po inkubacji przez 18-16 godzin płytki do badań odwirowano przy 100xg w temperaturze pokojowej przez 5 minut. 150 μl supernatantu usunięto i zastąpiono 150 μl świeżej kompletnej pożywki. Następnie komórki zebrano i do każdej studzienki dodano 200 μl buforu do lizy dostarczonego w zestawie do badań. W celu zapewnienia całkowitej lizy komórki roztarto i inkubowano przez 30 minut w temperaturze 4°C. Następnie płytki odwirowano przy 1900xg przez 10 minut i supernatanty rozcieńczono 1:20 buforem do inkubacji. 100 μl otrzymanego roztworu badano zgodnie z instrukcją producenta dołączoną do zestawu. Po 20 minutach od dodania końcowego substratu zmierzono wartości OD405 nm, stosując czytnik płytek SPECTRAmax Plus (Molecular Devices).
Wartości OD405 wykreślono w funkcji stężenia związku, a wartości IC50 obliczono stosując program dopasowania krzywej SOFT-mas Pro (Molecular Devices) dla opcji czterech dopasowanych parametrów.
Jak wykazano, testowane w tym badaniu związki hamują apoptozę wywołaną Fas w komórkach Jurkat z wartościami w zakresie 0,001 μΜ - 0,15 μΜ.
Aczkolwiek opisano wiele wykonań wynalazku, oczywiste jest, że w oparciu o te wykonania można wprowadzać różne zmiany, uzyskując inne rozwiązania, w których stosuje się produkty i sposoby według wynalazku. A zatem, należy rozumieć, że zakres wynalazku określony jest załączonymi zastrzeżeniami i nie ogranicza się do konkretnych wykonań, przedstawionych jedynie przykładowo.

Claims (14)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Związek karbaminianowy o wzorze I:
    PL 201 081 B1 lub jego farmaceutycznie dopuszczalna sól, w którym to wzorze:
    Z oznacza tlen;
    R1 oznacza -CH2Y;
    Y oznacza fluorowiec;
    R2 oznacza CO2H, CH2CO2H, CO2 (C1-6alkil), CH2CO2 (C1-6alkil), CO2 (C3-10cykloalkil), CH2CO2 (C3-10cykloalkil), CONH (C1-6alkil) CH2CONH(C1-6alkil), CON (C1-6alkil)2, CH2CON (C1-6alkil)2, CONH-(C1-4alkil)-NH(C1-4alkil),
    CONH-(C1-4alkil)-N (C1-4alkil)2,
    R3 oznacza C1-4alkil; a
    R4 i R5, razem z leżącym między nimi atomem azotu, tworzą bi- lub tricykliczny układ heteropierścieniowy, wybrany spośród pierścieni karbazolu, indolu, fenotiazyny, dihydrofenantrydyny, dibenzoazepiny, dihydrodibenzoazepiny i indoliny, przy czym pierścień jest ewentualnie podstawiony fluorowcem, C1-6 alkilem lub grupą CF3.
  2. 2. Związek według zastrz. 1, w którym R4 i R5, razem z leżącym między nimi atomem azotu, tworzą bicykliczny lub tricykliczny układ pierścieniowy wybrany z grupy obejmującej karbazol, indol, fenotiazynę, dihydrofenantrydynę, 5H-dibenzo[b, f]azepinę, 10, 11-dihydro-5H-dibenzo[b, f]azepinę i indolinę.
  3. 3. Związek według zastrz. 2, znamienny tym, że R1 oznacza -CH2F.
  4. 4. Związek według zastrz. 3, w którym układ pierścieniowy jest wybrany z grupy obejmującej karbazol, fenotiazynę lub 10, 11-dihydrofenantrydynę.
  5. 5. Związek według zastrz. 4, w którym układ pierścieniowy jest pierścieniem karbazolu.
  6. 6. Związek według zastrz. 4 albo 5, w którym R3 oznacza etyl, izopropyl lub izobutyl.
  7. 7. Związek wybrany spośród związków przedstawionych w Tablicy 1:
    Nr Struktura 1 /i ϊ Y fyNYi aXF 0 z\ 0 2 /*γ o χ°*Η ΧΑγα M o z\ 0 3 Χρ o ΛυΧρ ΥΥ 0 0 4 iAfcl kJ 0 .cąH X¥X
    PL 201 081 B1 Nr Struktura 5 Cl /T 9 ^co2h Π γ i a AA ° /\ γρ 0 6 ,γγΥ /T 9 xCO2H ALpypY. Pf Y i a ° /\ (f^F O 7 AY /t 9 .CĄH pAiy pX X Pf Y i a P ° z\ γρ O 8 Y /T 9 .co2h ΑρρτΑχ Pf y ty p ° \ γρ 0 9 Y /T 9 .co2h App A /- Pf Y YY P o pap 0 10 Aycl YrY Y 0 \ ,CO,H Y 0
    PL 201 081 B1
    PL 201 081 B1 Nr Struktura 17 .CCI Η 4>. /N. .<x 44 4\ fr v YAPF kA ° a ° 18 Ao ° 5—je—co2h Aa O F 19 Αχ 1 Aa 0 F 20 /A 9 AąH σΎχΥ 21 r^A/rk kA 0 a ° 22 4αΑ/Χ kA ° a °
    PL 201 081 B1
    PL 201 081 B1
  8. 8. Związek według zastrz. 7, znamienny tym, że jest wybrany spośród następujących związków:
  9. 9. Kompozycja farmaceutyczna zawierająca substancję czynną oraz farmaceutycznie dopuszczalny nośnik, znamienna tym, że jako substancję czynną zawiera związek określony w zastrz. 1.
  10. 10. Zastosowanie związku o wzorze I określonym w zastrz. 1-do wytwarzania leku do leczenia zapalenia trzustki, reumatoidalnego zapalenia stawów, zapalenia kostno-stawowego, przewlekłego aktywnego zapalenia wątroby, zapalenia wątroby typu B zapalenia wątroby typu C lub zapalenia wątroby typu G, choroby zapalnej jelita grubego, choroby Crohna, łuszczycy, posocznicy, wstrząsu septycznego, niedokrwienia mózgu, udaru, niedokrwienia mięśnia sercowego, zawału mięśnia sercowego, stwardnienia rozsianego, uszkodzeń neurologicznych po udarze, pourazowego uszkodzenia mózgu, odrzucenia przeszczepu narządu, ostrej niewydolności oddechowej dorosłych, stwardnienia bocznego zanikowego, miażdżycy tętnic, powikłań związanych z przeszczepem bypassów wieńcowych, ostrej niewydolności nerek i choroby przeszczep przeciwko gospodarzowi.
    PL 201 081 B1
  11. 11. Zastosowanie według zastrz. 10, znamienne tym, że lek stosuje się do leczenia powikłań związanych z przeszczepem bypassów naczyń wieńcowych.
  12. 12. Zastosowanie związku o wzorze I określonym w zastrz. 1 do konserwacji komórek sposobem obejmującym etap kąpieli komórek w roztworze związku lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej pochodnej.
  13. 13. Zastosowanie związku o wzorze I określonym w zastrz. 1 do przeszczepu narządów lub konserwacji produktów krwiopochodnych.
  14. 14. Zastosowanie związku o wzorze I określonym w zastrz. 1 do wytwarzania leku do immunoterapii do leczenia raka.
PL358430A 2000-03-29 2001-03-29 Związek karbaminianowy, zawierająca go kompozycja farmaceutyczna i jego zastosowania PL201081B1 (pl)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US19282600P 2000-03-29 2000-03-29

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL358430A1 PL358430A1 (pl) 2004-08-09
PL201081B1 true PL201081B1 (pl) 2009-03-31

Family

ID=22711181

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL358430A PL201081B1 (pl) 2000-03-29 2001-03-29 Związek karbaminianowy, zawierająca go kompozycja farmaceutyczna i jego zastosowania

Country Status (32)

Country Link
US (2) US6689784B2 (pl)
EP (1) EP1268425B1 (pl)
JP (2) JP4298200B2 (pl)
KR (1) KR100858640B1 (pl)
CN (2) CN1994298A (pl)
AR (1) AR027993A1 (pl)
AT (1) ATE384695T1 (pl)
AU (2) AU2001249619B2 (pl)
BG (1) BG107136A (pl)
BR (1) BR0109588A (pl)
CA (1) CA2403959A1 (pl)
CZ (1) CZ20023227A3 (pl)
DE (1) DE60132567T2 (pl)
DK (1) DK1268425T3 (pl)
EA (1) EA005740B1 (pl)
EE (1) EE200200550A (pl)
ES (1) ES2296742T3 (pl)
HK (1) HK1052355B (pl)
HR (1) HRP20020782A2 (pl)
HU (1) HUP0301472A3 (pl)
IL (2) IL151829A0 (pl)
MX (1) MXPA02009633A (pl)
NO (1) NO325062B1 (pl)
NZ (1) NZ521639A (pl)
PE (1) PE20011267A1 (pl)
PL (1) PL201081B1 (pl)
PT (1) PT1268425E (pl)
SK (1) SK13922002A3 (pl)
TW (1) TWI318207B (pl)
WO (1) WO2001072707A2 (pl)
YU (1) YU73702A (pl)
ZA (1) ZA200207483B (pl)

Families Citing this family (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MXPA01010127A (es) 1999-04-09 2002-08-20 Cytovia Inc Inhibidores de la caspasa y el uso de los mismos.
BR0013666A (pt) 1999-08-27 2002-05-14 Cytovia Inc "alfa"-hidróxi-ácidos substituìdos inibidores de caspases e o seu uso
CN1994298A (zh) * 2000-03-29 2007-07-11 沃泰克斯药物股份有限公司 氨基甲酸酯天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶抑制剂及其用途
PE20011350A1 (es) 2000-05-19 2002-01-15 Vertex Pharma PROFARMACO DE UN INHIBIDOR DE ENZIMA CONVERTIDORA DE INTERLEUCINA-1ß (ICE)
US20040192889A1 (en) * 2001-03-30 2004-09-30 Dale Bredesen Cytotoxic peptides and peptidomimetics based thereon, and methods for use thereof
US7351702B2 (en) * 2001-05-23 2008-04-01 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Caspase inhibitors and uses thereof
EP1485107A1 (en) 2002-02-11 2004-12-15 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Phospholipids as caspase inhibitor prodrugs
EP1499898A2 (en) * 2002-04-19 2005-01-26 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Regulation of tnf-alpha
EP1447093A1 (en) * 2003-02-14 2004-08-18 Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts Inhibition of the CD95 ligand/receptor system for the treatment of neurological disorders and injuries
US20060217299A1 (en) * 2003-02-24 2006-09-28 Hirofumi Doi Degradation inhibitor for hepatitis b virus x interacting protein
AU2003902704A0 (en) * 2003-05-29 2003-06-19 Crc For Waste Management And Pollution Control Limited Of Unsw Process for producing a nanoscale zero-valent metal
KR101135765B1 (ko) 2004-03-12 2012-04-23 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 아스파르트산 아세탈 카스파아제 억제제의 제조를 위한방법 및 중간체
US7544855B2 (en) * 2004-04-23 2009-06-09 Buck Institute Transgenic mouse whose genome comprises an APP having a mutation at amino acid 664
JP4848367B2 (ja) * 2004-05-15 2011-12-28 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド Ｉｃｅインヒビターを使用した発作の処置
KR100619440B1 (ko) 2004-05-20 2006-09-08 한기종 포름아마이드 유도체 제조방법
EP2295054A1 (en) 2004-05-27 2011-03-16 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Ice inhibitors for the treatment of autoinflammatory diseases
KR100619439B1 (ko) 2004-05-27 2006-09-08 한기종 포밀기 도입된 아민유도체의 제조방법
US8012751B2 (en) * 2005-03-31 2011-09-06 Wisconsin Alumni Research Foundation Differentiation of pluripotent embryonic stem cells
CA2616337A1 (en) * 2005-07-28 2007-02-08 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Caspase inhibitor prodrugs
US8073703B2 (en) 2005-10-07 2011-12-06 Panasonic Corporation Acoustic signal processing apparatus and acoustic signal processing method
EP1956898A2 (en) 2005-11-30 2008-08-20 Massachusetts Institute of Technology Pathogen-detecting cell preservation systems
CA2649877A1 (en) * 2006-04-24 2007-12-21 Gloucester Pharmaceuticals Gemcitabine combination therapy
CA2656487A1 (en) * 2006-07-07 2008-01-17 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Selective caspase inhibitors
WO2008021745A2 (en) * 2006-08-16 2008-02-21 Itherx Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c virus entry inhibitors
WO2008063727A2 (en) * 2006-08-21 2008-05-29 United Therapeutics Corporation Combination therapy for treatment of viral infections
WO2008106167A1 (en) * 2007-02-28 2008-09-04 Conatus Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy comprising matrix metalloproteinase inhibitors and caspase inhibitors for the treatment of liver diseases
WO2008137567A1 (en) * 2007-05-01 2008-11-13 Cedars-Sinai Medical Center Caspase inhibitors in the treatment of infection-associated preterm delivery
KR101009588B1 (ko) * 2008-06-04 2011-01-20 거진산업주식회사 미세여과막을 이용한 부유고형물 처리장치
JP2012051804A (ja) * 2008-12-26 2012-03-15 Kyoto Univ Ｅｇ５阻害剤
KR101010350B1 (ko) * 2009-03-26 2011-01-25 삼성중공업 주식회사 역세척 여과장치
US20140309172A1 (en) 2010-11-05 2014-10-16 Dagmar Ringe Ice inhibiting compounds and uses thereof
TW201236239A (en) * 2010-11-16 2012-09-01 Solvay Rechargeable metal or metal-ion cell
EP2490021A1 (en) 2011-02-18 2012-08-22 Biotempt B.V. Modulators of PRR and GPCR signalling
US9956260B1 (en) 2011-07-22 2018-05-01 The J. David Gladstone Institutes Treatment of HIV-1 infection and AIDS
WO2015175381A1 (en) 2014-05-12 2015-11-19 Conatus Pharmaceuticals, Inc. Treatment of the complications of chronic liver disease with caspase inhibitors
WO2017079566A1 (en) 2015-11-05 2017-05-11 Conatus Pharmaceuticals, Inc. Caspase inhibitors for use in the treatment of liver cancer
KR20180101418A (ko) 2015-12-31 2018-09-12 코나터스 파마슈티칼스, 인크. 간 질환의 치료에서의 카스파제 억제제의 사용 방법
CA3039283A1 (en) 2016-10-05 2018-04-12 Novartis Ag Combination compositions comprising fxr agonists for treating or preventing a fibrotic,cirrhotic disease or disorder
CN110944985B (zh) * 2017-05-24 2022-12-13 特拉维夫大学拉玛特有限公司 用于蛋白酶的成像/检测的化学发光探针
WO2022123062A1 (en) 2020-12-11 2022-06-16 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Blocking caspase and/or fasl for preventing fatal outcome in covid-19 patients

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1991015577A1 (en) 1990-04-04 1991-10-17 Black, Roy, A. INTERLEUKIN 1'beta' PROTEASE
HU220098B (hu) 1991-08-30 2001-10-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Interleukin-1 béta proteáz enzim, és interleukin-1 béta proteáz inhibitorok
EP0618223A3 (en) 1993-03-08 1996-06-12 Sandoz Ltd Peptides, the release of Interleukin 1-Bêta, useful as anti-inflammatory agents.
WO1996030395A2 (en) 1995-03-31 1996-10-03 Takeda Chemical Industries, Ltd. Cysteine protease inhibitor
WO1997024339A1 (fr) 1995-12-27 1997-07-10 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Derives de tetrazole et medicaments les contenant a titre d'ingredients actifs
JP3492703B2 (ja) 1996-09-12 2004-02-03 アイドゥン ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド システインプロテアーゼのＩＣＥ／ｃｅｄ―３ファミリーの阻害剤としてのＣ―末端変性（Ｎ―置換）―２―インドリルジペプチド
BR9712987A (pt) * 1996-10-11 2000-04-18 Warner Lambert Co Inibidores de enzima de conversão de interleucina-1beta de sulfonamida
WO1998016502A1 (en) 1996-10-11 1998-04-23 Warner-Lambert Company ASPARTATE ESTER INHIBITORS OF INTERLEUKIN-1β CONVERTING ENZYME
US6184210B1 (en) 1997-10-10 2001-02-06 Cytovia, Inc. Dipeptide apoptosis inhibitors and the use thereof
CN1138472C (zh) 1997-10-10 2004-02-18 西托维亚公司 二肽型编程性细胞死亡抑制剂及其用途
JP2002506829A (ja) 1998-03-16 2002-03-05 サイトビア インコーポレイテッド ジペプチドのアポトーシスインヒビターおよびそれらの使用
US6242422B1 (en) 1998-10-22 2001-06-05 Idun Pharmacueticals, Inc. (Substituted)Acyl dipeptidyl inhibitors of the ice/ced-3 family of cysteine proteases
DE60030097T2 (de) 1999-03-16 2007-03-08 Cytovia, Inc., San Diego Substituierte 2-aminobenzamin caspase inhibitoren und ihre verwendung
MXPA01010127A (es) 1999-04-09 2002-08-20 Cytovia Inc Inhibidores de la caspasa y el uso de los mismos.
BR0013666A (pt) * 1999-08-27 2002-05-14 Cytovia Inc "alfa"-hidróxi-ácidos substituìdos inibidores de caspases e o seu uso
CN1994298A (zh) * 2000-03-29 2007-07-11 沃泰克斯药物股份有限公司 氨基甲酸酯天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶抑制剂及其用途

Also Published As

Publication number Publication date
PT1268425E (pt) 2008-04-01
JP2008266348A (ja) 2008-11-06
SK13922002A3 (sk) 2003-09-11
DE60132567T2 (de) 2009-01-22
PL358430A1 (pl) 2004-08-09
WO2001072707A3 (en) 2002-05-23
AU4961901A (en) 2001-10-08
WO2001072707A2 (en) 2001-10-04
US20040053920A1 (en) 2004-03-18
KR20020086711A (ko) 2002-11-18
EA200201030A1 (ru) 2003-02-27
DE60132567D1 (de) 2008-03-13
HRP20020782A2 (en) 2004-12-31
CA2403959A1 (en) 2001-10-04
NO325062B1 (no) 2008-01-28
EA005740B1 (ru) 2005-06-30
MXPA02009633A (es) 2003-03-10
ATE384695T1 (de) 2008-02-15
CZ20023227A3 (cs) 2003-01-15
HK1052355A1 (en) 2003-09-11
PE20011267A1 (es) 2001-12-15
NZ521639A (en) 2004-05-28
IL151829A0 (en) 2003-04-10
JP2003528855A (ja) 2003-09-30
BR0109588A (pt) 2003-02-04
ZA200207483B (en) 2003-09-18
AR027993A1 (es) 2003-04-23
KR100858640B1 (ko) 2008-09-17
EP1268425B1 (en) 2008-01-23
CN1422253A (zh) 2003-06-04
NO20024661D0 (no) 2002-09-27
TWI318207B (en) 2009-12-11
BG107136A (bg) 2003-05-30
US6689784B2 (en) 2004-02-10
HUP0301472A2 (hu) 2003-08-28
DK1268425T3 (da) 2008-05-05
HUP0301472A3 (en) 2005-04-28
YU73702A (sh) 2006-03-03
CN1994298A (zh) 2007-07-11
NO20024661L (no) 2002-11-26
EP1268425A2 (en) 2003-01-02
ES2296742T3 (es) 2008-05-01
CN100358869C (zh) 2008-01-02
AU2001249619B2 (en) 2006-08-17
JP4298200B2 (ja) 2009-07-15
EE200200550A (et) 2004-02-16
HK1052355B (zh) 2008-06-27
IL151829A (en) 2012-03-29
US20020028803A1 (en) 2002-03-07
US7074782B2 (en) 2006-07-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL201081B1 (pl) Związek karbaminianowy, zawierająca go kompozycja farmaceutyczna i jego zastosowania
AU2001249619A1 (en) Carbamate caspase inhibitors and uses thereof
US7442790B2 (en) Caspase inhibitors and uses thereof
US6800619B2 (en) Caspase inhibitors and uses thereof
US20030096737A1 (en) Caspase inhibitors and uses thereof
CZ176298A3 (cs) Sloučeniny inhibující proteázy retrovirů
IL213397A (en) Protection module with buffer zone and method for creating it
EP1923386A2 (en) Carbamate caspase inhibitors and uses thereof

Legal Events

Date Code Title Description
LAPS Decisions on the lapse of the protection rights

Effective date: 20100329