JP2002506829A - ジペプチドのアポトーシスインヒビターおよびそれらの使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、本明細書においてＲ₁〜Ｒ₂およびＡＡが規定されている一般式（Ｉ）によって示されるそれらの新規なジペプチドに関する。本発明は、式（Ｉ）を有する化合物がカスパーゼおよびアポトーシス性の細胞死の強力なインヒビターであるという発見に関する。従って、本発明のインヒビターは、細胞、組織または器官全体の喪失が生じる種々の臨床条件において、細胞死を遅延またはブロックし得る。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 （発明の背景） （発明の分野） 本発明は、薬化学の分野にある。特に、本発明は、カスパーゼの強力なインヒ
ビターであるジペプチドに関する。本発明はまた、アポトーシス性の細胞死を減
少もしくは処置および／またはインターロイキン１−β産生を減少するためのこ
れらのジペプチドの使用に関する。

【０００２】 （背景技術の説明） 生物は、調節された細胞死、プログラムされた細胞死またはアポトーシスとし
て多様に公知のプロセスにより望ましくない細胞を排除する。このような細胞死
は、動物の発生の正常な局面として、ならびに組織のホメオスターシスおよび加
齢において生じる（Ｇｌｕｃｋｓｍａｎｎ，Ａ．、Ｂｉｏｌ．Ｒｅｖ．Ｃａｍｂ
ｒｉｄｇｅ Ｐｈｉｌｏｓ．Ｓｏｃ．２６：５９−８６（１９５１）；Ｇｌｕｃ
ｋｓｍａｎｎ，Ａ．，Ａｒｃｈｉｖｅｓ ｄｅ Ｂｉｏｌｏｇｉｅ ７６：４１
９−４３７（１９６５）；Ｅｌｌｉｓら、Ｄｅｖ．１１２：５９１−６０３（１
９９１）；Ｖａｕｘら、Ｃｅｌｌ ７６：７７７−７７９（１９９４））。アポ
トーシスは、細胞数を調節し、形態発生を促進し、有害もしくは他の異常な細胞
を除去し、そしてすでにその機能を果たした細胞を排除する。さらに、アポトー
シスは、低酸素または虚血のような種々の生理的ストレスに応答して生じる（Ｐ
ＣＴ公開出願ＷＯ９６／２０７２１）。

【０００３】 調節された細胞死を経験した細胞に共有されている多くの形態学的変化が存在
し、これは血漿および核膜小疱形成、細胞減縮（核細胞質および細胞質の凝結）
、オルガネラ再配置および充填、クロマチン凝結ならびにアポトーシス小体（細
胞内物質を含んだ膜包囲粒子）の産生を含む（Ｏｒｒｅｎｉｕｓ，Ｓ．，Ｊ．Ｉ
ｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２３７：５２９−５３６（１９９５））。

【０００４】 アポトーシスは、細胞自殺の内因性メカニズムを介して達成される（Ｗｙｌｌ
ｉｅ、Ａ．Ｈ．，Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ ｉｎ Ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｐａ
ｔｈｏｌｏｇｙ、ＢｏｗｅｎおよびＬｏｃｋｓｈｉｎ編、Ｃｈａｐｍａｎ ａｎ
ｄ Ｈａｌｌ（１９８１）、９〜３４頁）。細胞は、内在性あるいは外因性シグ
ナルのいずれかの結果として、その内部にコードされた自殺プログラムを活性化
する。この自殺プログラムは、注意深く調節された遺伝子プログラムの活性化を
通して遂行される（Ｗｙｌｉｅら、Ｉｎｔ．Ｒｅｖ．Ｃｙｔ．６８：２５１（１
９８０）；Ｅｌｌｉｓら、Ａｎｎ Ｒｅｖ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏ．７：６６３（１
９９１））。アポトーシス性の細胞および遺骸は、通常、溶解の前に、隣接する
細胞またはマクロファージにより認識され、そして除去される。この除去メカニ
ズムがあるため、多数の細胞の除去にもかかわらず炎症は誘導されない（Ｏｒｒ
ｅｎｉｕｓ，Ｓ．，Ｊ．Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２３７：５２９
−５３６（１９９５））。

【０００５】 哺乳動物インターロイキン−１β（ＩＬ−１β）は、慢性および急性の炎症お
よび自己免疫疾患を含む種々の病理的プロセスにおいて重要な役割を果たす（Ｏ
ｐｐｅｎｈｅｉｍ Ｊ．Ｈ．ら、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｔｏｄａｙ、７，４
５−５６（１９８６））。ＩＬ−１は、ＩＬ−１レセプターに結合できない、そ
して生物学的に不活性である細胞関連前駆体ポリペプチド（ｐｒｏ―ＩＬ−１）
として合成される（Ｍｏｓｌｅｙら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６２：２９４
１−２９４４（１９８７））。ＩＬ−１βを成熟させるために前駆体ＩＬ−１β
の転換を阻害することにより、インターロイキン１の活性は阻害され得る。イン
ターロイキン１β転換酵素（ＩＣＥ）は、インターロイキン１β（ＩＬ−１β）
の活性を担うプロテアーゼである（Ｔｈｏｒｎｂｅｒｒｙ、Ｎ．Ａ．ら、Ｎａｔ
ｕｒｅ ３５６：７６８（１９９２））；Ｙｕａｎ、Ｊ．ら、Ｃｅｌｌ ７５
：６４１（１９９３））。ＩＣＥは不活性なプロインターロイキン１を開裂する
ことで、成熟ＩＬ−１を産生する基質特異的システインプロテアーゼである。Ｉ
ＣＥおよびＣＰＰ３２をコードする遺伝子は、現在、少なくとも１２のメンバー
：ＩＣＥ、ＣＰＰ３２／Ｙａｍａ／Ａｐｏｐａｉｎ、ｍＩＣＥ２、ＩＣＥ４、Ｉ
ＣＨ１、ＴＸ／ＩＣＨ−２、ＭＣＨ２、ＭＣＨ３、ＭＣＨ４、ＦＬＩＣＥ／ＭＡ
ＣＨ／ＭＣＨ５、ＩＣＥ−ＬＡＰ６およびＩＣＥ_re1ＩＩＩを含む哺乳動物ＩＣ Ｅ／Ｃｅｄ−３遺伝子ファミリーのメンバーである。このシステインプロテアー
ゼの（その活性部位（システイン残基）がＩＣＥ−媒介アポトーシスに必須であ
る）ファミリーのタンパク質分解活性は、細胞死の仲介において重要であるよう
である（Ｍｉｕｒａら、Ｃｅｌｌ ７５：６５３−６６０（１９９３））。この
遺伝子ファミリーは、最近、カスパーゼと名付けられており（Ａｌｎｅｒｎｒｉ
、Ｅ．Ｓ．ら、Ｃｅｌｌ，８７：１７１（１９９６）およびＴｈｏｒｎｂｅｒｒ
ｙ，Ｎ．Ａ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２、１７９０７−１７９１１（
１９９７））、そして公知の機能に従って、３つの群に分類される。表Ｉは、こ
れらの公知のカスパーゼをまとめる。

【０００６】

【表１】

【０００７】 ＩＬ−１はまた、炎症、敗血症性ショック、創傷治癒、造血およびある種の白
血病の発達を含む、広い範囲の生物学的反応の媒介に関与するサイトカインであ
る（Ｄｉｎａｒｅｌｌｏ，Ｃ．Ａ．Ｂｌｏｏｄ ７７：１６２７−１６５２（１
９９１）；ｄｉＧｉｏｖｉｎｅら、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｔｏｄａｙ １１
：１３（１９９０））。

【０００８】 多くの強力なカスパーゼインヒビターが、カスパーゼのペプチド基質構造に基
づいて調製された。しかし、インビトロでのそれらの効力と対照的に、アポトー
シスの全細胞モデルにおける良好な効力（ＩＣ₅₀＜１Ｍ）を有するインヒビター
は報告されていない（Ｔｈｏｒｎｂｅｒｒｙ、Ｎ．Ａ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．５
：Ｒ９７−１０３（１９９８））。従って、アポトーシスの全細胞モデルにおい
て効力を示し、そしてアポトーシスの動物モデルで活性である細胞死のインヒビ
ターが必要とされる。従って、これらのインヒビターは、調節された細胞死およ
びＩＬ−１のサイトカイン活性が役割を果たす疾患状態の処置のために治療剤と
して用いられ得る。

【０００９】 ＷＯ９３／０５０７１は、以下の式を有するＩＣＥインヒビターペプチドを開
示し、 Ｚ−Ｑ₂−Ａｓｐ−Ｑ₁ ここで、Ｚは、Ｎ末端保護基である；Ｑ₂は、配列Ｑ₂−Ａｓｐが配列Ａｌａ−Ｔ
ｙｒ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−Ａｓｐの少なくとも一部に対応するように０から４のア
ミノ酸である；Ｑ₁は、電気的陰性の脱離基を含む。例示的なジペプチドは、Ｂ ｏｃ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−ＣＨ₂Ｆ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ−Ａｓｐ−ＣＨ₂Ｆ、Ｂｏｃ−
Ｐｈｅ−Ａｓｐ−ＣＨ₂Ｆ、Ａｃ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−ＣＨ₂Ｆ、Ａｃ−Ｔｙｒ−Ａ
ｓｐ−ＣＨ₂Ｆ、Ａｃ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ−ＣＨ₂Ｆ、Ｃｂｚ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−Ｃ
Ｈ₂Ｆ、Ｃｂｚ−Ｔｙｒ−Ａｓｐ−ＣＨ₂ＦおよびＣｂｚ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ−ＣＨ ₂ Ｆである。

【００１０】 ＷＯ９６／０３９８２は、以下の式を有するＩＣＥインヒビターとしてアスパ
ラギン酸アナログを開示した：

【００１１】

【化８】

【００１２】 ここで、Ｒ₂は、Ｈまたはアルキルである；Ｒ₃は、ハロゲンのような脱離基であ
る；Ｒ₁は、ヘテロアリール−ＣＯまたは一つのアミノ酸残基である。

【００１３】 米国特許第５，５８５，３５７号は、以下の式を有するＩＣＥインヒビターと
してペプチドケトンを開示する：

【００１４】

【化９】

【００１５】 ここで、ｎは、０〜２である：各ＡＡは独立してＬ−バリンまたはＬ−アラニン
である；Ｒ₁は、Ｎ−ベンジルオキシカルボニルおよび他の基からなる群から選 択される；Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀は、各々独立して水素、低級アルキル基および他の基
である。

【００１６】 Ｒｅｖｅｓｚら（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．３５、９６９３−９６
９６、１９９４）は強力なＩＣＥインヒビターである対応する酸のプロドラッグ
として以下のエチルエステルトリペプチドの調製を報告する：

【００１７】

【化１０】

【００１８】 （発明の要旨） 本発明は、以下の式Ｉのジペプチドに関し：

【００１９】

【化１１】

【００２０】 ここで、Ｒ₁は、Ｎ末端保護基であり；ＡＡは非天然アミノ酸、またはアミノ酸 の残基であり；Ｒ₂は、必要に応じて置換されたアルキルまたはＨである。

【００２１】 本発明は、式Ｉにより表される化合物が、カスパーゼの強力なインヒビターで
あるという発見に関する。本発明はまた、アポトーシス性の細胞死が原因因子ま
たは結果のいずれかである疾患を軽減、予防または処置するための本発明のジペ
プチドの使用に関する。本発明のための使用の例としては、以下があげられる：
病巣虚血および全身の虚血後の神経系の保護；アルツハイマー病、ハンティング
トン病、プリオン病、パーキンソン病、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、運
動失調、毛細管拡張症、および脊髄延髄萎縮症のような神経変性障害の処置；心
筋梗塞、うっ血性心不全、および心筋症を含む心疾患の処置；網膜障害の処置；
エリテマトーデス、慢性関節リウマチ、Ｉ型糖尿病、シェーグレン症候群、およ
び糸球体腎炎を含む自己免疫疾患の処置；多発性嚢胞腎疾患、および貧血／赤血
球形成の処置；ＡＩＤＳおよびＳＣＩＤＳを含む免疫系障害の処置；移植の間の
細胞、組織および器官の損傷の軽減または予防；工業的バイオテクノロジーにお
ける細胞株死の軽減または予防；脱毛症（髪の毛がなくなること）の軽減または
予防；ならびに皮膚細胞の成熟前死の軽減。

【００２２】 本発明は、動物におけるアポトーシス性細胞死を軽減するに有効な量の式Ｉの
化合物を含む薬学的組成物を提供する。

【００２３】 本発明はまた、哺乳動物器官もしくは組織のための保存溶液（ｐｒｅｓｓｅｒ
ｖａｔｉｏｎ）もしくは保存（ｓｔｏｒａｇｅ）溶液、または哺乳動物もしくは
酵母細胞のための増殖培地を提供し、ここで有効な量の式Ｉの化合物は、上記の
器官、組織または細胞におけるアポトーシス性細胞死を軽減するために、上記の
溶液または培地に含まれる。

【００２４】 （発明の詳細な説明） 本発明のカスパーゼおよびアポトーシス性細胞死のインヒビターは、以下の一
般式Ｉ：

【００２５】

【化１２】

【００２６】 を有する化合物、またはその薬学的に受容可能な塩もしくはプロドラッグであり
、ここで： Ｒ₁は、ｔ−ブチルオキシカルボニル、アセチル、およびベンジルオキシカル ボニルを含むＮ末端保護基であり；ＡＡは非天然のアミノ酸、またはアミノ酸の
残基であり；Ｒ₂は、必要に応じて置換されたアルキルまたはＨである。

【００２７】 Ｒ₂に関して、好ましいアルキル基は、Ｃ_1-6アルキル基（例えば、メチル基、
エチル基、プロピル基、イソプロピル基、イソブチル基、ペンチル基およびヘキ
シル基）；および置換Ｃ_1-6アルキル基（例えば、ＣＨ₂ＯＣＨ₃およびＣＨ₂ＯＣ
ＯＣＨ₃（ＡＭ））である。

【００２８】 本発明は、式Ｉによって示される化合物が、カスパーゼの強力なインヒビター
であるという知見に関する。これらのインヒビターは、種々の臨床条件および工
業的適用（ここで、細胞、組織、または器官全体の欠失が生じる）における細胞
死を遅延するかまたはブロックする。それゆえ、本発明はまた、アポトーシスが
役割を果たす状態を処置、予防、または軽減する方法に関する。これらの状態は
、より完全に以下に記載される。

【００２９】 本方法は、このような処置の必要な動物に、本発明のインヒビターまたはその
薬学的に受容可能な塩もしくはプロドラッグを、アポトーシス性細胞死を阻害す
るに有効な量で投与する工程を包含する。

【００３０】 カスパーゼのインヒビターとして使用され得る式Ｉの化合物の好ましい実施態
様は、以下の式ＩＩ：

【００３１】

【化１３】

【００３２】 によって示されるか、またはその薬学的に受容可能な塩もしくはプロドラッグで
あり、ここで、Ｒ₁およびＲ₂は、式Ｉに関して先に規定されたものと同様であり
；そして Ｒ₃およびＲ₄は、独立して、ハロアルキル、アリール、複素環、ヘテロアリー
ル、Ｃ_1-10アルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、アラルケニル、ア
ラルキニル、およびヒドロキシアルキルである。

【００３３】 好ましいＲ₁は、ｔ−ブチルオキシカルボニル、アセチルまたはベンジルオキ シカルボニルである。好ましいＲ₂は、Ｈ、Ｍｅ、Ｅｔ、ｔ−ＢｕまたはＡＭで ある。好ましいＲ₃は、Ｃ_1-10アルキル、ハロアルキル、アリールまたはヘテロ アリールであり、そして好ましいＲ₄はＭｅである。

【００３４】 カスパーゼのインヒビターとして使用され得る、式Ｉの化合物の別の好ましい
実施態様は、以下の式ＩＩＩ：

【００３５】

【化１４】

【００３６】 によって示されるか、またはその薬学的に受容可能な塩もしくはプロドラッグで
あり、ここで、Ｒ₁およびＲ₂は、式Ｉに関して先に規定されたものと同様であり
；そして、 Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇およびＲ₈は、独立して、水素、ハロアルキル、アリール、複素
環、炭素環、ヘテロアリール、Ｃ_1-10アルキル、アルケニル、アルキニル、アラ
ルキル、アラルケニル、アラルキニルまたはヒドロキシアルキルであり、ただし
、 Ｒ₅〜Ｒ₈の少なくとも１つは、水素以外である、 好ましいＲ₁はｔ−ブチルオキシカルボニル、アセチル、またはベンジルオキ シカルボニルである。好ましいＲ₂は、Ｈ、Ｍｅ、Ｅｔ、ｔ−ＢｕまたはＡＭで ある。好ましいＲ₅は、水素、Ｃ_1-10アルキル、ハロアルキル、アリールまたは ヘテロアリールである；好ましいＲ₆は、水素またはＭｅである。好ましいＲ₇は
、Ｃ_1-10アルキル、ハロアルキル、アリールまたはヘテロアリールである；好ま
しいＲ₈は、水素またはＭｅである。

【００３７】 カスパーゼのインヒビターとして使用され得る式Ｉの化合物の別の好ましい実
施態様は、以下の式ＩＶ：

【００３８】

【化１５】

【００３９】 によって表されるか、またはその薬学的に受容可能な塩もしくはプロドラッグで
あり、ここで、 Ｒ₁およびＲ₂は、式Ｉに関して先に規定したものと同様であり；そして Ｒ₁₂は水素またはＣ_1-10アルキルであり； Ｂは、アリール、ヘテロアリール、飽和もしくは部分的に不飽和の炭素環また
は飽和もしくは部分的に不飽和の複素環であり、これらのいずれも必要に応じて
、水素、ハロ、Ｃ₁−Ｃ₆ハロアルキル、Ｃ₆−Ｃ₁₀アリール、Ｃ₄−Ｃ₇シクロア ルキル、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₂−Ｃ₆アルケニル、Ｃ₂−Ｃ₆アルキニル、Ｃ₆− Ｃ₁₀アリール（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、Ｃ₆−Ｃ₁₀アリール（Ｃ₂−Ｃ₆）アルケニ ル、Ｃ₆−Ｃ₁₀アリール（Ｃ₂−Ｃ₆）アルキニル、Ｃ₁−Ｃ₆ヒドロキシアルキル 、ニトロ、アミノ、シアノ、Ｃ₁−Ｃ₆アシルアミノ、ヒドロキシ、Ｃ₁−Ｃ₆アシ
ルオキシ、Ｃ₁−Ｃ₆アルコキシ、アルキルチオ、またはカルボキシから選択され
る１つ以上の基によって置換されている。

【００４０】 好ましいＲ₁は、ｔ−ブチルオキシカルボニル、アセチルまたはベンジルオキ シカルボニルである。好ましいＲ₂は、Ｈ、Ｍｅ、Ｅｔ、ｔ−ＢｕまたはＡＭで ある。好ましいＲ₁₂は水素またはＭｅである。好ましいＢは、必要に応じて置換
されたフェニル、チエニル、フリル、ピリジル、シクロヘキシル、シクロペンチ
ル、シクロブチルまたはシクロプロピルである。

【００４１】 カスパーゼのインヒビターとして使用され得る式Ｉの化合物の他の好ましい実
施態様は、以下の式Ｖ：

【００４２】

【化１６】

【００４３】 で表されるか、またはその薬学的に受容可能な塩もしくはプロドラッグであり、
ここで、 Ｒ₁、Ｒ₂、およびＲ₁₂は、式Ｉおよび式ＩＶに関して先に規定されたものと同
様であり；そして Ｒ₉、Ｒ₁₀およびＲ₁₁は、独立して、水素、Ｃ_1-10アルキル、ハロゲン、ハロ アルキル、必要に応じて置換されたアリール、ヘテロアリール、飽和もしくは部
分的に不飽和の炭素環または飽和もしくは部分的に不飽和の複素環であり；ただ
し、 Ｒ₉〜Ｒ₁₁の少なくとも１つは、ハロゲン、ハロアルキル、ヘテロアリール、 飽和もしくは部分的に不飽和の炭素環または飽和もしくは部分的に不飽和の複素
環である。

【００４４】 好適なＲ₁は、ｔ−ブチルオキシカルボニル、アセチルまたはベンジルオキシ カルボニルである。好適なＲ₂は、Ｈ、Ｍｅ、Ｅｔ、ｔ−ＢｕまたはＡＭである 。好適なＲ₁₂は、水素、またはＭｅである。好適なＲ₉、Ｒ₁₀およびＲ₁₁は、独 立して、水素、メチル、クロロ、フルオロ、フルオロメチル、ジフルオロメチル
、トリフルオロメチル、クロロメチル、クロロフルオロメチル、チエニル、フリ
ル、ピリジル、シクロヘキシル、シクロペンチル、シクロブチルおよびシクロプ
ロピルである。

【００４５】 例示の好適なカスパーゼおよびアポトーシスのインヒビターは、式Ｉを有し、
制限されないで以下を含む： Ｂｏｃ−Ｐｈｇ−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｂｏｃ−（２−Ｆ−Ｐｈｇ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｂｏｃ−（Ｆ₃−Ｖａｌ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｂｏｃ−（３−Ｆ−Ｖａｌ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ａｃ−Ｐｈｇ−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ａｃ−（２−Ｆ−Ｐｈｇ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ａｃ−（Ｆ₃−Ｖａｌ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ａｃ−（３−Ｆ−Ｖａｌ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−Ｐｈｇ−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（２−Ｆ−Ｐｈｇ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（Ｆ₃−Ｖａｌ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−Ｃｈｇ−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（２−Ｆｕｇ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（４−Ｆ−Ｐｈｇ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（４−Ｃｌ−Ｐｈｇ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（３−Ｔｈｇ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（２−Ｆｕａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（２−Ｔｈａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（３−Ｆｕａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（３−Ｔｈａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（３−Ｃｌ−Ａｌａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（３−Ｆ−Ａｌａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（Ｆ₃−Ａｌａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（３−Ｆ−３−Ｍｅ−Ａｌａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（３−Ｃｌ−３−Ｆ−Ａｌａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（２−Ｍｅ−Ｖａｌ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（２−Ｍｅ−Ａｌａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（２−ｉ−Ｐｒ−β−Ａｌａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（３−Ｐｈ−β−Ａｌａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（３−ＣＮ−Ａｌａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（１−Ｎａｌ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−Ｃｈａ−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（３−ＣＦ₃−Ａｌａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（４−ＣＦ₃−Ｐｈｇ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（３−Ｍｅ₂Ｎ−Ａｌａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（２−Ａｂｕ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−Ｔｌｅ−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−Ｃｐｇ−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−Ｃｂｇ−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−Ｔｈｚ−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 Ｚ−（３−Ｆ−Ｖａｌ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、および Ｚ−（２−Ｔｈｇ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ。 ここで、Ｚはベンジルオキシカルボニル、ＢＯＣはｔｅｒｔ．−ブトキシカルボ
ニル、Ａｃはアセチル、Ｐｈｇはフェニルグリシン、２−Ｆ−Ｐｈｇは（２−フ
ルオロフェニル）グリシン、Ｆ₃−Ｖａｌは４、４、４−トリフルオロバリン、 ３−Ｆ−Ｖａｌは３−フルオロ−バリン、２−Ｔｈｇは（２−チエニル）グリシ
ン、Ｃｈｇはシクロヘキシルグリシン、２−Ｆｕｇは（２−フリル）グリシン、
４−Ｆ−Ｐｈｇは（４−フルオロフェニル）グリシン、４−Ｃｌ−Ｐｈｇは（４
−クロロフェニル）グリシン、３−Ｔｈｇは（３−チエニル）グリシン、２−Ｆ
ｕａは（２−フリル）アラニン、２−Ｔｈａは（２−チエニル）アラニン、３−
Ｆｕａは（３−フリル）アラニン、３−Ｔｈａは（３−チエニル）アラニン、３
−Ｃｌ−Ａｌａは３−クロロアラニン、３−Ｆ−Ａｌａは３−フルオロアラニン
、Ｆ₃−Ａｌａは３、３、３−トリフルオロアラニン、３−Ｆ−３−Ｍｅ−Ａｌ ａは３−フルオロ−３−メチルアラニン、３−Ｃｌ−３−Ｆ−Ａｌａは３−クロ
ロ−３−フルオロアラニン、２−Ｍｅ−Ｖａｌは２−メチルバリン、２−Ｍｅ−
Ａｌａは２−メチルアラニン、２−ｉ−Ｐｒ−β−Ａｌａは３−アミノ−２−イ
ソプロピルプロピオン酸、３−Ｐｈ−β−Ａｌａは３−アミノ−３−フェニルプ
ロピオン酸、３−ＣＮ−Ａｌａは３−シアノアラニン、１−Ｎａｌは３−（１−
ナフチル）−アラニン、Ｃｈａはシクロヘキシルアラニン、３−ＣＦ₃−Ａｌａ は２−アミノ−４、４、４−トリフルオロ酪酸、４−ＣＦ₃−Ｐｈｇは４−トリ フルオロメチルフェニルグリシン、３−Ｍｅ₂Ｎ−Ａｌａは３−ジメチルアミノ アラニン、２−Ａｂｕは２−アミノ酪酸、Ｔｌｅはｔｅｒｔ−ロイシン、Ｃｐｇ
はシクロペンチルグリシン、Ｃｂｇはシクロブチルグリシン、およびＴｈｚはチ
オプロリンである。これらのアミノ酸誘導体は、鏡像異性的に純粋またはラセミ
混合物であり得る。

【００４６】 有用なアリール基は、Ｃ_6-14アリール、特にＣ_6-10アリールである。代表的な
Ｃ_6-14アリール基は、フェニル、ナフチル、フェナントレニル、アントラセニル
、インデニル、アズレニル、ビフェニル、ビフェニレニルおよびフルオレニル基
を含む。

【００４７】 有用なシクロアルキル基は、Ｃ_3-8シクロアルキルである。代表的なシクロア ルキル基は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキ
シルおよびシクロヘプチルを含む。

【００４８】 有用な飽和または部分飽和炭素環基は、上記に規定したようなシクロアルキル
基、およびシクロペンテニル、シクロヘプテニルおよびシクロオクテニルのよう
なシクロアルケニル基である。

【００４９】 有用なハロまたはハロゲン基は、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードを含
む。

【００５０】 有用なアルキル基は、直鎖および分枝Ｃ_1-10アルキル基、より好適にはＣ_1-6 アルキル基を含む。代表的なＣ_1-10アルキル基は、メチル、エチル、プロピル、
イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、３−ペンチル、ヘ
キシルおよびオクチル基を含む。また、意図されるのは、本発明の化合物のベン
ゼン環上の２つの隣接する位置上で置換されたトリメチレン基である。

【００５１】 有用なアルケニル基は、Ｃ_2-6アルケニル基、好適にはＣ_2-4アルケニル基であ
る。代表的なＣ_2-4アルケニル基は、エテニル、プロペニル、イソプロペニル、 ブテニル、およびｓｅｃ．−ブテニルを含む。

【００５２】 有用なアルキニル基は、Ｃ_2-6アルキニル基、好適にはＣ_2-4アルキニルである
。代表的なＣ_2-4アルキニル基は、エチニル、プロピニル、ブチニル、および２ −ブチニル基を含む。

【００５３】 有用なアリールアルキル基は、上記のＣ_6-14アリール基のいずれかにより置換
された上記のＣ_1-10アルキル基のいずれかを含む。有用な基は、ベンジル、フェ
ネチルおよびナフチルメチルを含む。

【００５４】 有用なアリールアルケニル基は、上記のＣ_6-14アリール基のいずれかにより置
換された上記のＣ_2-4アルケニル基のいずれかを含む。

【００５５】 有用なアリールアルキニル基は、上記のＣ_6-14アリール基のいずれかにより置
換された上記のＣ_2-4アルキニル基のいずれかを含む。有用な基は、フェニルエ チニルおよびフェニルプロピニルを含む。

【００５６】 有用なハロアルキル基は、１つ以上のフッ素、塩素、臭素またはヨウ素原子に
より置換されたＣ_1-10アルキル基、例えば、フルオロメチル、ジフルオロメチル
、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチル、１、１−ジフルオロエチル、ク
ロロメチル、クロロフルオロメチルおよびトリクロロメチル基を含む。

【００５７】 有用なヒドロキシアルキル基は、ヒドロキシにより置換されたＣ_1-10アルキル
基、例えば、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、ヒドロキシプロピルおよび
ヒドロキシブチル基を含む。

【００５８】 有用なアルコキシ基は、上記のＣ_1-10アルキル基の１つにより置換された酸素
を含む。

【００５９】 有用なアルキルチオ基は、上記のＣ_1-10アルキル基の１つにより置換された硫
黄を含む。スルホキシドおよびこのようなアルキルチオ基のスルホキシドもまた
含まれる。

【００６０】 有用なアシルアミノ基は、アミノ窒素に結合した任意のＣ_1-6アシル（アルカ ノイル）、例えば、アセトアミド、プロピオンアミド、ブタノイルアミド、ペン
タノイルアミド、ヘキサノイルアミドおよびアリール置換Ｃ_2-6置換アシル基で ある。

【００６１】 有用なアシルオキシ基は、オキシ（−Ｏ−）基に結合した任意のＣ_1-6アシル （アルカノイル）、例えば、アセトキシ、プロピオノイルオキシ、ブタノイルオ
キシ、ペンタノイルオキシ、ヘキノイルオキシなどである。

【００６２】 有用なアミノ基は、−ＮＨ₂、−ＮＨＲ₁₄、および−ＮＲ₁₄Ｒ₁₅を含み、ここ でＲ₁₄およびＲ₁₅は、上記で規定したように、Ｃ_1-10アルキルまたはシクロアル
キル基である。

【００６３】 有用な飽和または部分飽和な複素環基は、テトラヒドロフラニル、ピラニル、
ピペリディニル（ｐｉｐｅｒｉｄｉｎｙｌ）、ピペリジニル（ｐｉｐｅｒｉｚｉ
ｎｙｌ）、ピロリジニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、インドリニル、
イソインドリニル、キヌクリジニル、モルホリニル、イソクロマニル、クロマニ
ル、ピラゾリジニルおよびピラゾリニル基を含む。

【００６４】 有用なヘテロアリール基は、以下の任意の１つを含む：チエニル、ベンゾ［ｂ
］チエニル、ナフト［２、３−ｂ］チエニル、チアントレニル、フリル、ピラニ
ル、イソベンゾフラニル、クロメニル、キサンテニル、フェノキサンチイニル、
２Ｈ−ピロリル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、ピリジル、ピラジニル
、ピリミジニル、ピリダジニル、インドリジニル、イソインドリル、３Ｈ−イン
ドリル、インドリル、インダゾリル、プリニル、４Ｈ−キノリジニル、イソキノ
リル、キノリル、フタルジニル、ナフチリジニル、キノザリニル、シノリニル、
プテリジニル、カルバゾリル、β−カルボリニル、フェナントリジニル、アクリ
ンジニル、ペリミジニル、フェナントロリニル、フェナジニル、イソチアゾリル
、フェノチアジニル、イソキサゾリル、フラザニル、フェノキサジニル、１、４
−ジヒドロキノキサリン−２、３−ジオニル、７−アミノイソクマリン−イル、
ピリド［１、２−ａ］ピリミジン−４−オニル、１、２−ベンゾイソキサゾール
−３−イル、ベンズイミダゾリル、２−オキシインドリルおよび２−オキソベン
ズイミダゾリル。ヘテロアリール基が環中に窒素原子を含む場合、このような窒
素原子は、Ｎ−オキシドの形態、例えば、ピリジルＮ−オキシド、ピラジニルＮ
−オキシド、ピリミジニルＮ−オキシドなどであり得る。

【００６５】 本発明の特定の化合物は、光学異性体を含む立体異性体として存在し得る。本
発明は、すべての立体異性体、およびこのような立体異性体のラセミ混合物なら
びに当業者に周知である方法に従って分離され得る個々のエナンチオマーを含む
。

【００６６】 薬学的に受容可能な付加塩の例は、塩化水素、臭化水素、リン酸、硫酸、クエ
ン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、フマル酸、マンデル酸およびシュウ酸のような
無機酸および有機酸付加塩；および水酸化ナトリウム、トリス（ヒドロキシメチ
ル）アミノメタン（ＴＲＩＳ、トロメタン）およびグルコサミンのような塩基と
の無機塩基および有機塩基付加塩を含む。

【００６７】 プロドラッグの例としては、式Ｉ〜Ｖの化合物が挙げられ、ここでＲ₂は、ア ルキル基または置換アルキル基（例えば、ＣＨ₂ＯＣＨ₃およびＣＨ₂ＯＣＯＣＨ₃ （ＡＭエステル）である。さらに、ＡＡがカルボン酸基を含む場合、式Ｉ〜Ｖの
プロドラッグの例（ここでＲ₂はＨである）は、カルボキシル基のいずれかまた は両方がエステル化（例えば、Ｃ₁〜₆アルコールを用いて）されているか、また
は対応するアミド（例えば、Ｃ₁〜₆アミンを用いて）の形態である化合物を含む
。本発明の化合物の他のプロドラッグとしては、本発明の化合物のＣ₁〜₆エステ
ル、チオエステルおよびアミドが挙げられ、ここでＲ₃、Ｒ₄、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₁₂ま
たはＢの基の１つが、ヒドロキシ、チオまたはアミノ基で置換されている。エス
テル誘導体、チオエステル誘導体およびアミド誘導体は、親化合物よりも脂溶性
であり、インビボで細胞によって容易に取り込まれることがまた予想される。こ
のエステルおよびチオエステルがインビボで内因性エステラーゼにより切断され
、親ヒドロキシ置換化合物または親メルカプト置換化合物を生じることもまた予
想される。

【００６８】 本発明はまた、アポトーシスの阻害に応答する障害に罹患している動物におい
て、アポトーシスの阻害に応答する障害を処置するための方法に関する。本発明
の方法における使用のための化合物の特に好ましい実施態様は、先に規定した式
Ｉ〜Ｖによって示される。

【００６９】 本発明の化合物は、当業者に公知の方法を使用して調製され得る。特に、式Ｉ
〜Ｖを有する化合物は、スキームＩの例示的反応によって例証されるように調製
され得る。中間体１は、Ｒｅｖｅｓｚら（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．
３５，９６９３〜９６９６、１９９４）に従って調製された。１とＮ保護アミノ
酸（市販されているか、または市販の化合物（例えば、Ｚ−フェニルグリシン−
ＯＨ（Ｚ−Ｐｈｇ−ＯＨ）から調製され得る化合物）のいずれかである）との結
合は、アミド２を生じる。Ｒｅｖｅｓｚら（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ
．３５．９６９３〜９６９６、１９９４）に従うＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ試薬に
よる２の酸化は、ジアステレオマーの混合物として３を生じる。エステルの酸触
媒切断は、遊離酸４を生じる。

【００７０】

【化１７】

【００７１】 本プロセスに使用され得る非天然アミノ酸の他の例としては、２−メチルバリ
ン、２−メチルアラニン、（２−ｉ−プロピル）−β−アラニン、フェニルグリ
シン、４−メチルフェニルグリシン、４−イソプロピルフェニルグリシン、３−
ブロモフェニルグリシン、４−ブロモフェニルグリシン、４−クロロフェニルグ
リシン、４−メトキシフェニルグリシン、４−エトキシフェニルグリシン、４−
ヒドロキシフェニルグリシン、３−ヒドロキシフェニルグリシン、３，４−ジヒ
ドロキシフェニルグリシン、３，５−ジヒドロキシフェニルグリシン、２，５−
ジヒドロフェニルグリシン、２−フルオロフェニルグリシン、３−フルオロフェ
ニルグリシン、４−フルオロフェニルグリシン、２，３−ジフルオロフェニルグ
リシン、２，４−ジフルオロフェニルグリシン、２，５−ジフルオロフェニルグ
リシン、２，６−ジフルオロフェニルグリシン、３，４−ジフルオロフェニルグ
リシン、３，５−ジフルオロフェニルグリシン、２−（トリフルオロメチル）フ
ェニルグリシン、３−（トリフルオロメチル）フェニルグリシン、４−（トリフ
ルオロメチル）フェニルグリシン、２−（２−チエニル）グリシン、２−（３−
チエニル）グリシン、２−（２−フリル）グリシン、３−ピリジルグリシン、４
−フルオロフェニルアラニン、４−クロロフェニルアラニン、２−ブロモフェニ
ルアラニン、３−ブロモフェニルアラニン、４−ブロモフェニルアラニン、２−
ナフチルアラニン、３−（２−キノイル）アラニン、３−（９−アントラセニル
）アラニン、２−アミノ−３−フェニルブタン酸、３−クロロフェニルアラニン
、３−（２−チエニル）アラニン、３−（３−チエニル）アラニン、３−フェニ
ルセリン、３−（２−ピリジル）セリン、３−（３−ピリジル）セリン、３−（
４−ピリジル）セリン、３−（２−チエニル）セリン、３−（２−フリル）セリ
ン、３−（２−チアゾリル）アラニン、３−（４−チアゾリル）アラニン、３−
（１，２，４−トリアゾール−１−イル）−アラニン、３−（１，２，４−トリ
アゾール−３−イル）−アラニン、ヘキサフルオロバリン、４，４，４−トリフ
ルオロバリン、３−フルオロバリン、５，５，５−トリフルオロロイシン、２−
アミノ−４，４，４−トリフルオロ酪酸、３−クロロアラニン、３−フルオロア
ラニン、２−アミノ−３−フルオロ（ｆｌｕｒｏ）酪酸、３−フルオロノルロイ
シン、４，４，４−トリフルオロトレオニン、Ｌ−アリルグリシン、ｔｅｒｔ−
ロイシン、プロパルギルグリシン、ビニルグリシン、Ｓ−メチルシステイン、シ
クロペンチルグリシン、シクロヘキシルグリシン、３−ヒドロキシノルバリン、
４−アザロイシン、３−ヒドロキシロイシン、２−アミノ−３−ヒドロキシ−３
−メチルブタン酸、４−チアイソロイシン、アシビシン、イボテン酸、キスカル
酸、２−インダニルグリシン、２−アミノイソ酪酸、２−シクロブチル−２−フ
ェニルグリシン、２−イソプロピル−２−フェニルグリシン、２−メチルバリン
、２，２−ジフェニルグリシン、１−アミノ−１−シクロプロパンカルボン酸、
１−アミノ−１−シクロペンタンカルボン酸、１−アミノ−１−シクロヘキサン
カルボン酸、３−アミノ−４，４，４−トリフルオロ酪酸、３−フェニルイソセ
リン、３−アミノ−２−ヒドロキシ−５−メチルヘキサン酸、３−アミノ−２−
ヒドロキシ−４−フェニル酪酸、３−アミノ−３−（４−ブロモフェニル）プロ
ピオン酸、３−アミノ−３−（４−クロロフェニル）プロピオン酸、３−アミノ
−３−（４−メトキシフェニル）プロピオン酸、３−アミノ−３−（４−フルオ
ロフェニル）プロピオン酸、３−アミノ−３−（２−フルオロフェニル）プロピ
オン酸、３−アミノ−３−（４−ニトロフェニル）プロピオン酸、および３−ア
ミノ−３−（１−ナフチル）プロピオン酸のエナンチオマー形態およびラセミ形
態を含むがこれらに限定されない。これらの非天然アミノ酸は、以下の商業的な
供給業者（Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｉｇｍａ、Ｆｌｕｋａ、Ｌａｎｃａｓｔｅｒ、Ｉ
ＣＮ、ＴＣＩ、Ａｄｖａｎｃｅｄ ＣｈｅｍＴｅｃｈ、Ｏａｋｗｏｏｄ Ｐｒｏ
ｄｕｃｔｓ、Ｉｎｄｏｆｉｎｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ、ＮＳＣ
Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、ＰＣＲ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、Ｂａ
ｃｈｅｍ、Ａｃｒｏｓ Ｏｒｇａｎｉｃｓ、Ｃｅｌｇｅｇｅ、Ｂｉｏｎｅｔ Ｒ
ｅｓｅａｒｃｈ、Ｔｙｇｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｔｏｃｒｉｓ、Ｒｅｓｅ
ａｒｃｈ Ｐｌｕｓ、Ａｓｈ Ｓｔｅｖｅｎｓ、Ｋａｎｔｏ、Ｃｈｉｒｏｓｃｉ
ｅｎｃｅ、およびＰｅｎｉｎｓｕｌａ Ｌａｂを含む）から市販されている。以
下のアミノ酸は、文献の手順：３，３，３−トリフルオロアラニン（Ｓａｋａｉ
、Ｔ．；ら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ １９９６、５２、２３３）および３，３
−ジフルオロアラニン（Ｄ’Ｏｒｃｈｙｍｏｎｔ，Ｈ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ １
９９３、１０、９６１）に従って合成され得る。Ｚ位に使用され得る他のＮ保護
基としては、アセチル（Ａｃ）、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、メ
トキシカルボニルまたはエトキシカルボニルが挙げられる。

【００７２】 本発明の重要な局面は、式Ｉ〜Ｖを有する化合物がカスパーゼの強力なインヒ
ビターであるという発見である。従って、これらのインヒビターは、細胞、組織
または器官全体の損失が生じる種々の臨床状態における細胞死を遅延またはブロ
ックすることが予測される。

【００７３】 本発明の細胞死インヒビターは、虚血および興奮毒性（発作に起因する病巣虚
血および心停止に起因する全体の虚血、ならびに脊髄損傷（Ｅｍｅｒｙら、Ｊ．
Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ、８９：９１１〜９２０（１９９８））を含むがこれ
らに限定されない）の種々の状態下で、神経系（脳、脊髄、および末梢神経系）
における細胞死を減少または予防するために使用され得る。１つの特定の使用法
は、酸素欠乏の効果を処置することであり、これは高い危険性の分娩または溺水
における乳児の誕生の間に生じ得る。細胞死インヒビターはまた、外傷性損傷（
例えば、頭部外傷）、ウイルス感染または放射線誘導性神経細胞死（例えば、癌
放射線治療の副作用）に起因する神経系の細胞死を減少または予防するために使
用され得る。細胞死インヒビターはまた、アルツハイマー疾患（Ｍａｔｔｓｏｎ
ら、Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ．８０７：１６７〜１７６（１９９８）、ハンチントン
病、パーキンソン病、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、および脊髄延髄萎縮
症を含むがこれらに限定されない、神経変性障害の範囲の細胞死を減少または予
防するために使用され得る。本発明の細胞死インヒビターのインビボでの神経保
護特性は、ラットの一過性の病巣脳虚血モデルにおいて試験され得る（Ｘｕｅら
、Ｓｔｒｏｋｅ ２１：１６６（１９９０））。

【００７４】 本発明の細胞死インヒビターは、潜在的に心筋の死を生じる任意の状態におけ
る細胞死を減少または予防するために使用され得る（Ｂｌａｃｋら、Ｊ．Ｍｏｌ
．Ｃｅｌ．Ｃａｒｄ．３０：７３３〜７４２（１９９８）およびＭａｕｌｉｋら
、Ｆｒｅｅ Ｒａｄｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．２４：８６９〜８７５（１９９８
））。これは、心筋虚血および再灌流、うっ血性心不全および心筋症に起因する
心筋梗塞を含む。１つの特定の適用は、心臓の特定のウイルス感染において生じ
るような心筋細胞死を減少または予防することである。

【００７５】 本発明の細胞死インヒビターのインビボでの活性は、Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚら（
Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚら、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１８４：２０６７〜２０７２（１
９９６））によって記載される「マウス肝臓アポトーシス」モデルを使用して試
験され得る。このモデルにおいて、マウスは、抗Ｆａｓ抗体（これは、肝臓およ
び他の器官における大量のアポトーシスを誘導する）を用いて静脈内（ＩＶ）で
処置され、全身性器官不全および死を導く。このモデルは、本発明の細胞死イン
ヒビターの全身バイオアベイラビリティー、ならびにそれらのインビボでの抗ア
ポトーシス特性を間接的に試験するために有用である。従って、本発明の細胞死
インヒビターは、敗血症（Ｊａｅｓｃｈｋｅら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６０：
３４８０〜３４８６（１９９８））および遺伝性１型チロシン血症（ＨＴ１）（
Ｋｕｂｏら、Ｐｒｏｖ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、９５：９５５２
〜９５５７（１９９８）におけるような肝細胞のアポトーシス（Ｊｏｎｅｓら、
Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ２７：１６３２〜４２（１９９８））を減少または予防
するために使用され得る。本発明の細胞死インヒビターはまた、肝炎を処置する
ために使用され得る（Ｓｕｚｕｋｉ、Ｐｒｏｃ．Ｓｏｃ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍ
ｅｄ．２１７：４５０〜４５４（１９９８））。

【００７６】 本発明の細胞死インヒビターは、眼内圧を上昇する障害（例えば、緑内障）ま
たは加齢プロセスと関連する障害（例えば、加齢関連黄斑変性）において生じ得
るような、網膜ニューロンの細胞死（Ｋｅｒｍｅｒら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．
１８：４６５６〜４６６２（１９９８）およびＭｉｌｌｅｒら、Ａｍ．Ｊ．Ｖｅ
ｔ．Ｒｅｓ．５９：１４９〜１５２（１９９８））を減少または予防するために
使用され得る。このインヒビターはまた、網膜の遺伝性変性障害（例えば、色素
性網膜炎）を処置するために使用され得る。

【００７７】 本発明の細胞死インヒビターはまた、腎臓における細胞死を減少または予防す
るために使用され得る。これは、腎アミロイドーシス（Ｈｉｒａｏｋａら、Ｎｉ
ｐｐｏｎ Ｊｉｎｚｏ Ｇａｋｋａｉ Ｓｈｉ、４０：２７６〜８３（１９９８
））、急性腎不全（Ｌｉｅｂｅｒｔｈａｌら、Ｓｅｍｉｎ Ｎｅｐｈｒｏｌ．１
８：５０５〜５１８（１９９８））、シクロスポリンＡにより誘導されるマウス
の尿細管上皮細胞死（Ｏｒｔｉｚら、Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａ
ｌ Ｓｕｐｐ．６８：Ｓ２５〜Ｓ２９（１９９８））およびＨＩＶ誘導性腎症（
Ｃｏｎａｌｄｉら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１０２：２０４１〜２０４９
（１９９８））を含む。

【００７８】 本発明の細胞死インヒビターはまた、慢性アルコール摂取に起因する頬粘膜の
細胞死を減少または予防するために使用され得る（Ｓｌｏｍｉａｎｙら、Ｂｉｏ
ｃｈｅｍ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｉｎｔ．４５：１１９９〜１２０９（１９９８）
）。

【００７９】 本発明の細胞死インヒビターはまた、病原体に起因する植物細胞死（Ｐｏｚｏ
ら、Ｃｕｒｒ．Ｂｉｏｌ．８：１１２９〜１１３２（１９９８）およびＧｒｅｅ
ｎｂｅｒｇら、Ｃｅｌｌ、７７：５５１〜５６３（１９９４））のような、植物
における細胞死（Ｒｉｃｈｂｅｒｇら、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｌａｎｔ Ｂｉ
ｏｌ．１：４８０〜４８５（１９９８））を減少または予防するために使用され
得る。

【００８０】 本発明の細胞死インヒビターはまた、放射線照射および紫外線照射に起因する
細胞死を減少または予防するために使用され得る（Ｓｈｅｉｋｈら、Ｏｎｃｏｇ
ｅｎｅ、１７：２５５５〜２５６３（１９９８））。

【００８１】 本発明の細胞死インヒビターはまた、脊髄形成異常症候群（ＭＤＳ）における
骨髄細胞のアポトーシス死を減少または予防するために使用され得る（Ｍｕｎｄ
ｌｅら、Ａｍ．Ｊ．Ｈｅｍａｔｏｌ．６０：３６〜４７（１９９９））。

【００８２】 本発明の細胞死インヒビターはまた、免疫系の細胞の成熟前の死を減少または
予防するために使用され得、特に、免疫不全障害（例えば、後天性免疫不全症候
群（ＡＩＤＳ）、重症複合型免疫不全症候群（ＳＣＩＤＳ）および関連疾患）の
処置に有用である。細胞死インヒビターはまた、放射誘導性免疫抑制を処置する
ために使用され得る。

【００８３】 ヒトの器官および組織の移植は、器官不全の一般的な処置である。しかし、移
植プロセスの間に、ドナーの器官または組織は、細胞死の危険にある。なぜなら
、その器官または組織は、宿主に移植される前、その正常な血液供給を奪われる
からである。この虚血状態は、ドナーの器官もしくは組織への注入によって、ま
たは細胞死インヒビターの器官／組織保存液への直接添加によって、細胞死イン
ヒビターを用いて処置され得る。細胞死インヒビターはまた、移植後のドナー器
官／組織における細胞死を軽減または予防するために使用されて、アポトーシス
を誘発することによって標的を殺傷する宿主免疫細胞の効果からドナー器官／組
織を保護し得る。細胞死インヒビターの細胞保護効果はまた、インビトロ受精手
順で使用されるヒトまたは動物の精子および卵の死を予防するために使用され得
る。これらのインヒビターは、採取プロセスの間に使用され得、そして保存液中
にもまた含まれ得る。

【００８４】 哺乳動物細胞株、昆虫細胞および酵母細胞は、産業的または医療的使用のため
の大量の組換えタンパク質（例えば、抗体、酵素またはホルモン）を産生するた
めに一般的に使用される。これらの細胞株のいくつかの寿命は、増殖条件、発現
される組換え分子の性質（いくつかは毒性である）および他の未知の要因に起因
して制限される。産業用細胞株の寿命は、これらの細胞死インヒビターを増殖培
地中に１〜１００Ｍの濃度範囲で含ませることによって延長され得る。

【００８５】 髪の成長および損失を支配する因子は、大部分は未知である。しかし、毛包の
退行（退行期と呼ばれる）が、少なくとも部分的には、アポトーシスに起因し得
るといういくつかの証拠がある。したがって、本発明の細胞死インヒビターを用
いて、種々の状態に起因して起こる髪の損失（雄型禿頭症、照射で誘導されるか
または化学療法で誘導される髪の損失、ならびに心的ストレスに起因する髪の損
失を含むがこれらに限定されない）を処置し得ることが意図される。アポトーシ
スが髪色の抜けにおいて役割を果たし得るという証拠もまた存在する。したがっ
て、本発明の細胞死インヒビターはまた、早期の白髪化という症例を処置または
予防することにおいて使用され得ると意図される。

【００８６】 皮膚上皮細胞の死滅は高レベルの照射、熱、または化学物質への暴露後に生じ
得る。本発明の細胞死インヒビターは、このタイプの皮膚損傷を処置、減少、ま
たは予防するために使用され得ると意図される。ある特定の適用において、この
細胞死インヒビターは、急な日光への過剰な暴露を処置し、そして皮膚の水疱形
成および剥離を予防するための局所処方物（例えば、軟膏）の部分として適用さ
れ得る。

【００８７】 Ｇｏｌｄｂｅｒｇら（Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ １３：４４２−４４
９（１９９６））は最近、ハンティングトン病（ＨＤ）遺伝子のタンパク質産物
であるハンティングチン（ｈｕｎｔｉｎｇｔｉｎ）が、ＣＰＰ３２により切断さ
れ得るが、ＩＣＥによっては切断され得ないことを報告した。ＨＤの根底にある
変異は、ＨＤ遺伝子の５’末端でのＣＡＧトリヌクレオチドの拡張である。３６
反復を超えるこのトリヌクレオチドの拡張が、ＨＤの臨床的な発症に関連してい
る。ＣＡＧ拡張は、ＣＰＰ３２によるハンティングチンの切断を促進し、従って
ＨＤにおけるアポトーシス性細胞死におけるＣＰＰ３２の役割とリンクする。Ｃ
ＰＰ３２阻害活性を備える本発明の化合物は、ＣＰＰ３２誘導アポトーシス性細
胞死をブロックすることにおいて有用であり、従ってトリヌクレオチド反復の拡
張により特徴付けられるＨＤおよび他の障害（例えば、筋緊張性ジストロフィー
、脆弱Ｘ精神遅滞、脊髄延髄筋萎縮症、脊椎小脳性運動失調Ｉ型およびＤｅｎｔ
ａｔｏ−Ｒｕｂｒｏ淡蒼球ルイ体萎縮症）を予防および処置することにおいて有
用である。

【００８８】 本発明の範囲内の組成物には、本発明の化合物が、意図した目的を達成するた
めに有効である量で含まれている、すべての組成物が含まれる。個々の必要性は
変化するが、各成分の有効量の至適範囲の決定は、当業者の技術による。代表的
には、本化合物は、哺乳動物（例えば、ヒト）に、アポトーシス媒介性障害（例
えば、ニューロン細胞死、心疾患、網膜障害、多嚢胞腎臓疾患、および免疫系障
害）について処置される哺乳動物の体重１ｋｇあたり一日に０．００２５〜５０
ｍｇの用量で、または等価な量の薬学的に受容可能なその塩が、経口投与され得
る。好ましくは、約０．０１〜約１０ｍｇ／ｋｇが、このような障害を処置また
は予防するために経口投与される。筋肉内注射については、用量は、一般的に経
口用量の約１／２である。例えば、ニューロン細胞死の処置または予防について
、適切な筋肉内用量は、約０．００２５〜約２５ｍｇ／ｋｇであり、最も好まし
くは約０．０１〜約５ｍｇ／ｋｇである。

【００８９】 単位経口用量は、約０．０１〜約５０ｍｇ、好ましくは約０．１〜約１０ｍｇ
の本化合物を含み得る。この単位用量は、各々が約０．１〜約１０、都合良くは
約０．２５〜５０ｍｇの本化合物またはその溶媒化合物を含む、１つ以上の錠剤
として、毎日１回以上投与され得る。

【００９０】 局所処方物において、本化合物は、キャリア１ｇあたり約０．０１〜１００ｍ
ｇの濃度で存在し得る。

【００９１】 粗化学物質として本化合物を投与することに加えて、本発明の化合物は、薬学
的に使用され得る製剤への本化合物のプロセシングを容易にする賦形剤および補
助剤を含む、適切な薬学的に受容可能なキャリアを含有する薬学的製剤の部分と
して投与され得る。好ましくは、この製剤、特に、経口投与され得る製剤および
好ましい型の投与のために使用され得る製剤（例えば、錠剤、糖剤、およびカプ
セル）ならびにまた、坐薬のような直腸に投与され得る製剤、ならびに注射によ
る投与または経口投与に適切な溶液は、約０．０１〜９９％、好ましくは約０．
２５〜７５％の活性化合物を賦形剤と共に含む。

【００９２】 本発明の化合物の非毒性で薬学的に受容可能な塩もまた、本発明の範囲内に含
まれる。酸付加塩は、塩酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酢酸、クエン酸
、酒石酸、炭酸、リン酸、シュウ酸などのような薬学的に受容可能な非毒性酸の
溶液と、本発明の特定の細胞死インヒビターの溶液を混合することにより形成さ
れる。塩基性塩は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化コリン、炭酸ナ
トリウム、Ｔｒｉｓなどのような薬学的に受容可能な非毒性塩基の溶液と、本発
明の特定の細胞死インヒビターの溶液を混合することにより形成される。

【００９３】 本発明の薬学的組成物は、本発明の化合物の有益な効果を経験し得る任意の動
物に投与され得る。このような動物のうち真っ先に来るのは、哺乳動物、例えば
ヒトであるが、本発明はそのように限定されることを意図しない。

【００９４】 本発明の薬学的組成物は、意図した目的を達成する任意の手段により投与され
得る。例えば、投与は、非経口経路、皮下経路、静脈内経路、筋肉内経路、腹腔
内経路、経皮経路、口腔内経路、鞘内経路、頭蓋内経路、または局所経路による
ものであり得る。二者択一的に、または同時に、投与は経口経路であり得る。投
与される投薬量は、レシピエントの年齢、健康、および体重、（もしあれば）同
時に行われている治療の種類、処置の頻度、ならびに所望の効果の性質に依存す
る。

【００９５】 本発明の薬学的製剤は、それ自体公知である様式で、例えば、従来の混合、顆
粒化、糖剤作成、溶解、または凍結乾燥プロセスにより製造される。従って、経
口使用のための薬学的製剤は、錠剤または糖剤コアを得るために、所望であるか
または必要ならば、適切な補助剤を添加した後、活性化合物を固体賦形剤と組み
合わせ、必要に応じて、得られる混合物を粉砕しそして顆粒の混合物をプロセシ
ングすることにより得られ得る。

【００９６】 適切な賦形剤は、特に、充填剤（例えば、サッカリド（例えば、ラクトースま
たはショ糖）、マンニトールまたはソルビトール、セルロース製剤および／また
はリン酸カルシウム（例えば、リン酸三カルシウム、またはリン酸水素カルシウ
ム））、ならびに結合剤（例えば、とうもろこしデンプン、小麦デンプン、米デ
ンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、ヒ
ドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、
および／またはポリビニルピロリドンを使用するデンプンペースト）である。所
望であれば、上述のデンプン、ならびにまたカルボキシメチルデンプン、架橋ポ
リビニルピロリドン、寒天、あるいはアルギン酸、またはその塩（例えば、アル
ギン酸ナトリウム）などの崩壊剤が添加され得る。補助剤は特に、流量調節薬剤
および潤滑剤（例えば、シリカ、滑石、ステアリン酸またはその塩（例えば、ス
テアリン酸マグネシウムまたはステアリン酸カルシウム）、および／またはポリ
エチレングリコール）である。糖剤コアは、所望であれば胃液に耐性である、適
切なコーティングとともに提供される。この目的には、濃縮サッカリド溶液が使
用され得るが、これは、必要に応じて、アラビアゴム、滑石、ポリビニルピロリ
ドン、ポリエチレングリコールおよび／または二酸化チタン、ラッカー溶液、な
らびに適切な有機溶媒または溶媒混合物を含み得る。胃液に耐性であるコーティ
ングを作製するために、適切なセルロース製剤（例えば、アセチルセルロースフ
タレートまたはヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート）の溶液が使用
される。例えば、識別用、または活性化合物の用量の組合わせを特徴付けるため
に、染料原料または色素が、錠剤または糖剤コーティングに添加され得る。

【００９７】 経口使用され得る他の薬学的製剤には、ゼラチンから作成したプッシュ−フィ
ット（ｐｕｓｈ−ｆｉｔ）カプセル、ならびにゼラチンおよびグリセロールまた
はソルビトールのような可塑剤から作成したソフトシールカプセルが含まれる。
このプッシュ−フィットカプセルは、ラクトースのような充填剤、デンプンのよ
うな結合剤、および／または滑石またはステアリン酸マグネシウムのような潤滑
剤、ならびに必要に応じて安定化剤と混合され得る、顆粒の形態で活性化合物を
含み得る。ソフトカプセルにおいて、活性化合物は、好ましくは、脂肪油または
液体パラフィンのような適切な液体に、溶解または懸濁される。さらに、安定化
剤が添加され得る。

【００９８】 直腸に使用され得る可能な薬学的製剤には、例えば、１つ以上の活性化合物と
坐薬基剤との組み合わせからなる坐薬が含まれる。適切な坐薬基剤は、例えば、
天然または合成のトリグリセリドまたはパラフィン系炭化水素である。さらに、
本活性化合物と基剤との組合わせからなるゼラチン直腸カプセルを使用すること
もまた可能である。可能な基剤物質には、例えば、液体トリグリセリド、ポリエ
チレングリコール、またはパラフィン系炭化水素が含まれる。

【００９９】 非経口投与に適切な処方物には、水溶性形態（例えば、水溶性の塩およびアル
カリ溶液）にある本活性化合物の水溶液を含む。さらに、適切な油状注射懸濁液
のような本活性化合物の懸濁液が投与され得る。適切な親油性溶媒またはビヒク
ルには、脂肪油（例えば、ゴマ油）または合成脂肪酸エステル（例えば、オレイ
ン酸エチル）あるいはトリグリセリドまたはポリエチレングリコール−４００（
本化合物はＰＥＧ−４００に可溶である）が含まれる。水性注射懸濁液は、懸濁
液の粘性を増加させる物質を含み得るが、この物質には、例えば、カルボキシメ
チルセルロースナトリウム、ソルビトール、および／またはデキストランが含ま
れる。必要に応じて、懸濁液はまた、安定化剤を含み得る。

【０１００】 本発明の１つの局面に従えば、本発明の化合物は、局所処方物および非経口処
方物で使用され、そして皮膚損傷、例えば、高レベルの照射（紫外線照射を含む
）、熱、または化学物質への暴露により生じる皮膚損傷の処置に使用される。

【０１０１】 皮膚に対して治療効果を有する１つ以上のさらなる物質もまた、本組成物に組
み込まれ得る。従って、本組成物はまた、皮膚におけるサイクリックＡＭＰレベ
ルを増加させ得る１つ以上の化合物を含み得る。適切な化合物には、約０．１〜
１％の量のアデノシンまたは核酸加水分解物、および約０．５〜５％の量のパパ
ベリンを含む（共に組成物を基準にした重量％である）。約０．１〜２％の量の
βアドレナリン作用性アゴニスト（例えば、イソプロテレノール）、または約０
．１〜１％の量のサイクリックＡＭＰもまた適切である（これもまた共に組成物
を基準にした重量％である）。本発明の組成物に組み込まれ得る他の適切な型の
さらなる活性成分には、皮膚に対し有益な効果を有することが知られる任意の化
合物が含まれる。このような化合物には、約０．００３〜０．３重量％の量のレ
チノイド（例えば、ビタミンＡ）、および約０．１〜１０重量％の量のクロマノ
ール（例えば、ビタミンＥまたはその誘導体）が含まれる（ともに組成物の重量
に基づく）。さらに、抗炎症剤および角質形成剤が、化粧組成物中に組み込まれ
得る。代表的な抗炎症剤は、約０．２５〜５重量％の量のヒドロコルチゾンのよ
うなコルチコステロイドまたはその酢酸塩、あるいは約０．０２５〜０．５重量
％の量のデキサメタゾンのようなコルチコステロイドである（ともに組成物の重
量に基づく）。代表的な角質形成剤は、約０．１〜２０％の量のコールタール、
または約０．０５〜２重量％の量のアントラリンである（ともに組成物の重量に
基づく）。

【０１０２】 本発明の局所組成物は、好ましくは、オイル、クリーム、ローション、軟膏な
どとして、適切なキャリアの選択により処方される。適切なキャリアには、植物
油またはミネラルオイル、白色鉱油（白色ワセリン）、分枝鎖脂肪またはオイル
、動物性脂肪、ならびに高分子量アルコール（Ｃ₁₂を超える）が含まれる。好ま
しいキャリアは、活性成分がそれに可溶性であるキャリアである。乳化剤、安定
化剤、湿潤剤、および抗酸化剤もまた、所望であれば、色または芳香を付与する
薬剤と同様に含まれ得る。さらに、経皮浸透増強剤が、これらの局所処方物に使
用され得る。このような増強剤の例は、米国特許第３，９８９，８１６号、およ
び同第４，４４４，７６２号に見出され得る。

【０１０３】 クリームは、好ましくは、ミネラルオイル、自己乳化蜜ロウ、および水の混合
物から処方され、この混合物には、少量のアーモンドオイルのようなオイルに溶
解した活性成分が混合されている。このようなクリームの代表例は、約４０部の
水、約２０部の蜜ロウ、約４０部のミネラルオイル、および約１部のアーモンド
オイルを含むクリームである。

【０１０４】 軟膏は、アーモンドオイルのような植物油中の活性成分の溶液を、温軟パラフ
ィンと混合し、そしてこの混合物を冷却させることにより処方され得る。このよ
うな軟膏の代表例は、約３０重量％のアーモンドオイルおよび約７０重量％の白
色ワセリンを含む軟膏である。

【０１０５】 ローションは、本活性成分を、プロピレングリコールまたはポリエチレングリ
コールのような適切な高分子量アルコール中に溶解することにより好都合に調製
され得る。

【０１０６】 さらに、これらの組成物は、当業者に公知であるかまたは明らかである他の医
薬、成長因子、創傷シーラント、キャリアなどを含み得る。本発明の組成物は、
その宿主が処置されない場合よりも迅速に治癒プロセスを進行させるに充分な量
で、火傷のような皮膚損傷を既に受けた温血動物（例えば、ヒト）に投与される
。この使用に有効な量は、皮膚損傷の重症度、および処置される患者の全般的な
健康状態に依存する。長期間にわたる維持投薬量は、必要に応じ調整され得る。
獣医学の使用には、必要に応じてより高いレベルが投与され得る。

【０１０７】 髪の成長が減少した動物の場合、本発明の組成物は、髪の成長速度を増加させ
るに充分な量で投与される。この使用に有効な量は、髪の成長減少の程度および
処置される患者の全般的な健康状態に依存する。長期間にわたる維持投薬量は必
要に応じて調整され得る。獣医学の使用には、より高いレベルが必要に応じ投与
され得る。

【０１０８】 本化合物は、植物に投与される場合、植物の葉および／または茎および／また
は花に、例えば、噴霧により適用され得る。本化合物は、微粒子形態で噴霧され
得るか、あるいは適切なキャリア、例えば、水または油−水エマルジョンに溶解
もしくは懸濁され得る。本化合物はまた、植物の土壌と組み合され得る。この実
施態様において、本化合物は、植物の根によって摂取される。

【０１０９】 以下の実施例は、本発明の方法および組成物の例示であって、制限するもので
はない。臨床治療において通常遭遇し、そして当業者に明らかである種々の条件
およびパラメータの他の適切な改変および適応は、本発明の精神および範囲内に
ある。

【０１１０】 （実施例１） （Ｚ−［（Ｓ）−Ｐｈｇ］−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 工程Ａ．Ｚ−（Ｓ）−フェニルグリシン。２Ｎ ＮａＯＨ水溶液（３０ｍＬ）
中の（Ｓ）−（＋）−フェニルグリシン（２．０ｇ、１３．２ｍｍｏｌ）の溶液
に、室温のクロロギ酸ベンジル（２．３ｍＬ、１６．２ｍｍｏｌ）を加えた。得
られた溶液を室温で５時間攪拌し、そしてｐＨ＝１まで酸性にした。得られた白
色固体を濾過により回収し、水で洗浄し、そして減圧下で乾燥させて、標題の化
合物を得た（２．５ｇ、８．８ｍｍｏｌ、６７％）。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）
：δ ８．０５（ｄ，Ｊ＝８．４，１Ｈ）、７．４０−７．２８（ｍ，１０Ｈ）
、５．１２（ｄ，Ｊ＝８．４，１Ｈ）、５．０３（ｓ，２Ｈ）。

【０１１１】 工程Ｂ．ｔｅｒｔ−ブチル５−フルオロ−３−［Ｚ−（Ｓ）−フェニル−Ｇｌ
ｙ−アミド］−４−ヒドロキシペンタノエート。ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のＺ−（
Ｓ）−フェニルグリシン（２０５ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）の溶液に、１−（２
−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣＩ）（１４８
ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（ＨＯＢ
Ｔ）（１１２ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）およびジメチルアミノピリジン（ＤＭＡ
Ｐ）（６１ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で５分間
攪拌し、次いで、これに、ＴＨＦ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル３−アミノ−
５−フルオロ−４−ヒドロキシペンタノエート（９８ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）
の溶液を加えた。得られた混合物を室温で３日間攪拌した。ＴＨＦを減圧下でエ
バポレートして残渣を得、これを５０ｍＬの酢酸エチルに溶解した。この溶液を
２Ｎ ＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ₃、ブラインで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄上で乾燥させ 、減圧下で濃縮し、そして残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／
ヘキサン ６／５）により精製して、無色の油として標題の化合物を得た（２０
０ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ、９０％）。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ ７．３
６−７．２６（ｍ，１０Ｈ）、６．７４−６．４９（ｍ，１Ｈ）、５．９８（ｍ
，１Ｈ）、５．１４−５．０２（ｍ，３Ｈ）、４．５０−３．９１（ｍ，４Ｈ）
、２．６８−２．５１（ｍ，２Ｈ）、１．４１−１．３３（ｍ，９Ｈ）。

【０１１２】 工程Ｃ．Ｚ−［（Ｓ）−Ｐｈｇ］−Ａｓｐ（Ｏｔ−Ｂｕ）−ｆｍｋ。ジクロロ
メタン（１５ｍＬ）中のＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎペリオジナン（０．６７ｇ、１
．５９ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ジクロロメタン（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル
５−フルオロ−３−（Ｚ−フェニル−Ｇｌｙ−アミド）−４−ヒドロキシペンタ
ノエート（１５０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。この混合物を２０
時間還流し、室温まで冷却し、そして１．０ｇのＮａ₂Ｓ₂Ｏ₃を含む２５ｍＬの 飽和重炭酸ナトリウム水溶液を加えた。得られた混合物を１時間攪拌し、１：１
ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（３×２５ｍＬ）で抽出した。合わせられた有機相を、水
およびブラインで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄上で乾燥させ、そして減圧下で濃縮して、
ヒドロスコピックな（ｈｙｄｒｏｓｃｏｐｉｃ）白色固体として標題の化合物を
得た（１４０ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ、９４％）。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：
δ ７．３７−７．３１（ｍ，１０Ｈ）、６．８４（ｄ，Ｊ＝６．９，１Ｈ）、
６．０３−５．９６（ｍ，１Ｈ）、５．２３−４．６５（ｍ，６Ｈ）、３．０３
−２．５８（ｍ，２Ｈ）、１．４０，１．２９（２ｓ，９Ｈ）。

【０１１３】 工程Ｄ．Ｚ−［（Ｓ）−Ｐｈｇ］−Ａｓｐ−ｆｍｋ。５ｍＬのＣＨ₂Ｃｌ₂中の
Ｚ−［（Ｓ）−Ｐｈｇ］−Ａｓｐ（Ｏｔ−Ｂｕ）−ｆｍｋ（１４０ｍｇ、０．３
０ｍｍｏｌ）の溶液に、１ｍＬのＴＦＡを加えた。得られた溶液を室温で１時間
攪拌した。溶媒を減圧下でエバポレートして残渣を得た。この残渣をフラッシュ
クロマトグラフィー（アセトン）により精製して、白色固体として標題の化合物
を得た（１１０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ、８７％）。¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ− ｄ₆）：δ ８．８０（ｍ，１Ｈ）、８．００（ｓ，１Ｈ）、７．９７−７．６ ７（ｍ，１Ｈ）、７．４７−７．２０（ｍ，１０Ｈ）、５．２６−４．９４（ｍ
，２Ｈ）、５．０３（ｓ，２Ｈ）、４．５４（ｓ，１Ｈ）、２．６８−２．５６
（ｍ，２Ｈ）。

【０１１４】 （実施例２） （Ｚ−（２−Ｍｅ−Ｖａｌ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 標題の化合物を、実施例１に記載された４つの工程において、ＤＬ−２−メチ
ルバリンから調製した。¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：δ ８．００（ｂｒｓ
，１Ｈ）、７．３５（ｓ，５Ｈ）、４．９９（ｓ，２Ｈ）、５．１０−４．５３
（ｍ，３Ｈ）、２．８８−２．４８（ｍ，２Ｈ）、１．９５（ｓ，１Ｈ）、１．
３０，１．２７（２ｓ，３Ｈ）、０．８６−０．８０（ｍ，６Ｈ）。

【０１１５】 （実施例３） （Ｚ−（２−Ｍｅ−Ａｌａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 標題の化合物を、実施例１に記載された３つの工程において、Ｚ−ＤＬ−２−
メチルアラニンから調製した。¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：δ ８．００（
ｂｒ ｓ，１Ｈ）、７．３５（ｓ，５Ｈ）、４．９９（ｓ，２Ｈ）、５．１０−
４．５３（ｍ，３Ｈ）、２．８８−２．４８（ｍ，２Ｈ）、１．９５（ｓ，１Ｈ
）、１．３０，１．２７（２ｓ，３Ｈ）、０．８６−０．８０（ｍ，６Ｈ）。

【０１１６】 （実施例４） （Ｚ−（２−ｉ−Ｐｒ−β−Ａｌａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 工程Ａ。エチル２−イソプロピルシアノアセテート。アセトン（３０ｍＬ）中
のシアノ酢酸エチル（２．０ｍＬ、１８．７ｍｍｏｌ）、Ｋ₂ＣＯ₃（４．０ｇ、
２８．９ｍｍｏｌ）および２−ヨードプロパン（３．２ｍＬ、３２．０ｍｍｏｌ
）の混合物を、４８時間還流した。これを、１：１のヘキサン／ＥｔＯＡｃ（１
２０ｍＬ）で希釈し、水およびブラインで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、そして
減圧下で濃縮して表題の化合物を淡黄色オイル（２．７ｇ、１７．４ｍｍｏｌ、
９３％）として得た。

【０１１７】

【数１】

【０１１８】 工程Ｂ。３−アミノ−２−イソプロピルプロピオン酸塩酸塩。エタノール（５
０ｍＬ）中のエチル２−イソプロピルシアノアセテート（２．７ｇ、１７．４ｍ
ｍｏｌ）、濃ＨＣｌ（３．０ｍＬ）およびＰｔＯ₂（１０７ｍｇ）の混合物を、 水素雰囲気（４８．５ｐｓｉ）下で２４時間振盪した。触媒を濾過して除去した
。濾液を減圧下で約５ｍＬになるまで濃縮し、そして２Ｎ ＨＣｌ（１５ｍＬ）
を添加した。得られた溶液を、１：１のヘキサン／ＥｔＯＡｃ（２×２５ｍＬ）
で洗浄した。次いで、この水溶液を２４時間還流し、室温まで冷却し、１：１の
ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で洗浄し、減圧下で濃縮して、生成物を粘性
の液体として得た（１．８ｇ、１０．７ｍｍｏｌ、６１％）。

【０１１９】

【数２】

【０１２０】 次いで、表題化合物を、３−アミノ−２−イソプロピルプロピオン酸塩酸塩（
２−ｉ−Ｐｒ−β−アラニン）から、実施例１に記載されるように４工程で調製
した。

【０１２１】

【数３】

【０１２２】 （実施例５） （Ｚ−（Ｆ₃−Ｖａｌ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、４，４，４−トリフルオロ−ＤＬ−バリン（Ｆ₃−Ｖａｌ）か ら、実施例１に記載されるように４工程で調製した。

【０１２３】

【数４】

【０１２４】 （実施例６） （Ｚ−（２−Ｔｈｇ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、２−チエニル−ＤＬ−グリシン（２−Ｔｈｇ）から、実施例１
に記載されるように４工程で調製した。

【０１２５】

【数５】

【０１２６】 （実施例７） （Ｚ−（２−Ｆ−Ｐｈｇ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、２−フルオロフェニル−ＤＬ−グリシン（２−Ｆ−Ｐｈｇ）か
ら、実施例１に記載されるように４工程で調製した。

【０１２７】

【数６】

【０１２８】 （実施例８） （Ｚ−（Ｌ−２−Ｔｈａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、３−（２−チエニル）−Ｌ−アラニン（２−Ｔｈａ）から、実
施例１に記載されるように４工程で調製した。

【０１２９】

【数７】

【０１３０】 （実施例９） （Ｚ−［（Ｒ）−Ｐｈｇ］−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、（Ｒ）−フェニルグリシン（（Ｒ）−Ｐｈｇ）から、実施例１
に記載されるように４工程で白色固体として調製した。

【０１３１】

【数８】

【０１３２】 （実施例１０） （Ｚ−（３−Ｐｈ−β−Ａｌａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、（ＤＬ）−３−アミノ−３−フェニルプロピオン酸（３−ｐｈ
−β−Ａｌａ）から、実施例１に記載されるように４工程で、白色固体として調
製した。

【０１３３】

【数９】

【０１３４】 （実施例１１） （Ｚ−（４−Ｃｌ−Ｐｈｇ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、（ＤＬ）−２−（４−クロロフェニル）グリシン（４−Ｃｌ−
Ｐｈｇ）から、実施例１に記載されるように４工程で、褐色固体として調製した
。

【０１３５】

【数１０】

【０１３６】 （実施例１２） （Ｚ−（４−Ｆ−Ｐｈｇ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、（ＤＬ）−２−（４−フルオロフェニル）グリシン（４−Ｆ−
Ｐｈｇ）から、実施例１に記載されるように４工程で、褐色固体として調製した
（１０９ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）。

【０１３７】

【数１１】

【０１３８】 （実施例１３） （Ｚ−［（Ｌ）−２−Ｔｈｇ］−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、（Ｌ）−（２−チエニル）グリシン（（Ｌ）−２−Ｔｈｇ）か
ら、実施例１に記載されるように４工程で褐色固体として調製した。

【０１３９】

【数１２】

【０１４０】 （実施例１４） （Ｚ−（３−Ｔｈｇ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、（ＤＬ）−（３−チエニル）グリシン（３−Ｔｈｇ）から、実
施例１に記載されるように４工程で、固体として調製した。

【０１４１】

【数１３】

【０１４２】 （実施例１５） （Ｚ−［（Ｌ）−３−Ｔｈｇ］−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、（Ｌ）−（３−チエニル）グリシン（（Ｌ）−３−Ｔｈｇ）か
ら、実施例１に記載されるように４工程で、固体として調製した。

【０１４３】

【数１４】

【０１４４】 （実施例１６） （Ｚ−［（Ｌ）−３−ＣＮ−Ａｌａ]−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、（Ｌ）−３−シアノ−アラニン（（Ｌ）−３−ＣＮ−Ａｌａ）
から、実施例１に記載されるように４工程で、褐色固体として調製した。

【０１４５】

【数１５】

【０１４６】 （実施例１７） （Ｚ−［（Ｌ）−１−Ｎａｌ］−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、（Ｌ）−３−（ｌ−ナフチル）−アラニンから、実施例１に記
載されるように４工程で、褐色固体として調製した。

【０１４７】

【数１６】

【０１４８】 （実施例１８） （Ｚ−［（Ｌ）−Ｃｈａ］−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、（Ｌ）−３−シクロヘキシルアラニンから、実施例１に記載さ
れるように４工程で、褐色固体として調製した。

【０１４９】

【数１７】

【０１５０】 （実施例１９） （Ｚ−［（Ｌ）−３−Ｃｌ−Ａｌａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、（Ｌ）−３−クロロアラニンから、実施例１に記載されるよう
に４工程で、褐色固体として調製した。

【０１５１】

【数１８】

【０１５２】 （実施例２０） （Ｚ−（３−Ｆ−Ａｌａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、（ＤＬ）−３−フルオロアラニンから、実施例１に記載される
ように４工程で、褐色固体として調製した。

【０１５３】

【数１９】

【０１５４】 （実施例２１） （Ｚ−（３−ＣＦ₃−Ａｌａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、２−アミノ−４，４，４，−トリフルオロ酪酸（３−ＣＦ₃− Ａｌａ）から、実施例１に記載されるように４工程で、褐色固体として調製した
。

【０１５５】

【数２０】

【０１５６】 （実施例２２） （Ｚ−（４−ＣＦ₃−Ｐｈｇ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、４−トリフルオロメチルフェニルグリシン（４−ＣＦ₃−Ｐｈ ｇ）から、実施例１に記載されるように４工程で、固体として調製した。

【０１５７】

【数２１】

【０１５８】 （実施例２３） （Ｚ−（３−Ｍｅ₂Ｎ−Ａｌａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、（ＤＬ）−ジメチルアミノ−アラニン（３−Ｍｅ₂Ｎ−Ａｌａ ）から、実施例１に記載されるように４工程で、固体として調製した。

【０１５９】

【数２２】

【０１６０】 （実施例２４） （Ｚ−［３−Ｆ−３−Ｍｅ−Ａｌａ］−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、２−アミノ−３−フルオロ酪酸（３−Ｆ−３−Ｍｅ−Ａｌａ）
から、実施例１に記載されるように４工程で、固体として調製した。

【０１６１】

【数２３】

【０１６２】 （実施例２５） （Ｚ−［（Ｌ）−Ｃｈｇ］−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、（Ｌ）−シクロヘキシルグリシン（（Ｌ）−Ｃｈｇ）から、実
施例１に記載されるように４工程で、黄色固体として調製した。

【０１６３】

【数２４】

【０１６４】 （実施例２６） （Ｚ−（２−Ｆｕｇ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、２−フリル−Ｇｌｙから、実施例１に記載されるように４工程
で調製した。

【０１６５】

【数２５】

【０１６６】 （実施例２７） （Ｚ−（３−Ｆ−Ｖａｌ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、３−フルオロ−Ｖａｌから、実施例１に記載されるように４工
程で調製した。

【０１６７】

【数２６】

【０１６８】 （実施例２８） （Ｚ−（２−Ａｂｕ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、２−アミノ酪酸（Ａｂｕ）から、実施例１に記載されるように
４工程で、白色固体として調製した。

【０１６９】

【数２７】

【０１７０】 （実施例２９） （Ｚ−Ｔｌｅ−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、ｔｅｒｔ−ロイシン（Ｔｌｅ）から、実施例１に記載されるよ
うに４工程で調製した。

【０１７１】

【数２８】

【０１７２】 （実施例３０） （Ｚ−Ｃｐｇ−Ａｓｐ−ｆｍｋ） 表題化合物を、シクロペンチルグリシン（Ｃｐｇ）から、実施例１に記載され
るように４工程で調製した。

【０１７３】

【数２９】

【０１７４】 （実施例３１） （酵素活性） カスパーゼ−３（ＣＰＰ３２）のインヒビターとしてのＣｂｚ−Ｐｈｇ−Ａｓ
ｐ−ｆｍｋの活性を、蛍光比色酵素アッセイにおいて測定した。組換えカスパー
ゼ−３タンパク質を、昆虫宿主細胞（ｓｆ９細胞）において、バキュロウイルス
をベクターとして用いてこれらの酵素をコードするＤＮＡクローンを発現させる
ことによって調製した。Ｗｅｂｂ、Ｎ．Ｒ．ら、「Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ
ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｕｓｉｎｇ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｂａｃｕｌｏｖｉ
ｒｕｓ」、Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ２：１７３−１８８（１９９０）を参照のこ
と。酵素活性を、蛍光原性脱離基に結合した合成ペプチド基質を用いて測定した
。その酵素による合成基質の切断は、分光蛍光計または蛍光測定マイクロタイタ
ープレートリーダーにおいて読まれる蛍光シグナルを生じる。

【０１７５】 カスパーゼ３活性を、以下の緩衝液条件を用いて測定した：１０％スクロース
、１％ＣＨＡＰＳを有する１００ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．５。カスパーゼ−
３のペプチド基質は、Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ａｓｐ−ＡＭＣである。基質を
、５μＭのＫ_m濃度にて用いた。酵素活性についてのアッセイを、代表的には、 ３０℃にて３０分間行った。

【０１７６】 表ＩＩは、カスパーゼ−３のインヒビターとしてのＣｂｚ−Ｐｈｇ−Ａｓｐ−
ｆｍｋおよび他のジペプチドのＩＣ₅₀を列挙する。

【０１７７】

【表２】

【０１７８】 （実施例３２） （インビボ活性） Ｃｂｚ−Ｐｈｇ−Ａｓｐ−ｆｍｋを、抗Ｆａｓ抗体（クローンＪｏ２）（Ｒｏ
ｄｒｉｇｕｅｚ，Ｉ．ら、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ １８４：２０６７−２０７２（
１９９６））により引き起こされるマウスの致死率に対する保護剤として調べた
。１６〜２０ｇの間の体重のＳｗｉｓｓ Ｗｅｂｓｔｅｒ雌性マウスを用いた。
食餌および水を自由に与えた。リン酸緩衝化生理食塩水中の、精製したハムスタ
ー抗マウスＦａｓモノクローナル抗体（クローンＪｏ２、市販）１ｍｇ／ｍｌを
、６μｇ／マウス（８０μｌ）でｉ．ｖ．投薬した。

【０１７９】 Ｃｂｚ−Ｐｈｇ−Ａｓｐ−ｆｍｋを、ＨＣｌを用いてｐＨ８．５に調整した０
．０５Ｍ Ｔｒｉｓ塩基中に溶解させた。Ｃｂｚ−Ｐｈｇ−Ａｓｐ−ｆｍｋの濃
度を、１〜５μｌ／ｇ体重の容量で、１〜１０ｍｇ／ｍｌで単回のボーラスとし
てｉ．ｖ．投薬した。５つの群のマウスに、マウス１匹あたり６μｇのＦａｓ抗
体を注射した。抗体注射の５分後、マウスにＴｒｉｓビヒクルコントロール、ま
たは１、２．５、１０もしくは５０ｍｇ／ｋｇのＣｂｚ−Ｐｈｇ−Ａｓｐ−ｆｍ
ｋを与えた。マウスの生存を、２４時間を通じて追跡した。

【０１８０】 表ＩＩＩは、Ｃｂｚ−Ｐｈｇ−Ａｓｐ−ｆｍｋで処置したマウスの生存率を列
挙する。

【０１８１】

【表３】

【０１８２】 表ＩＩＩの結果は、本発明の化合物が、マウスにおける抗Ｆａｓ誘導性致死の強
力なインヒビターであることを示す。

【０１８３】 今や本発明を完全に記載したので、当業者は、本発明が、本発明の範囲または
その任意の実施態様に影響を与えることなく、条件、処方物および他のパラメー
ターの広範かつ等価な範囲内で実施され得ることを理解する。本明細書において
引用された全ての特許および刊行物は、本明細書においてその全体が参考として
充分援用される。

【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書

【提出日】平成１２年５月１５日（２０００．５．１５）

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】０００８

【補正方法】変更

【補正内容】

【０００８】 多くの強力なカスパーゼインヒビターが、カスパーゼのペプチド基質構造に基
づいて調製された。しかし、インビトロでのそれらの効力と対照的に、アポトー
シスの全細胞モデルにおける良好な効力（ＩＣ₅₀＜１μＭ）を有するインヒビタ
ーは報告されていない（Ｔｈｏｒｎｂｅｒｒｙ、Ｎ．Ａ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．
５：Ｒ９７−１０３（１９９８））。従って、アポトーシスの全細胞モデルにお
いて効力を示し、そしてアポトーシスの動物モデルで活性である細胞死のインヒ
ビターが必要とされる。従って、これらのインヒビターは、調節された細胞死お
よびＩＬ−１のサイトカイン活性が役割を果たす疾患状態の処置のために治療剤
として用いられ得る。

【手続補正２】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】０００９

【補正方法】変更

【補正内容】

【０００９】 ＷＯ９３／０５０７１は、以下の式を有するＩＣＥインヒビターペプチドを開
示し、 Ｚ−Ｑ₂−Ａｓｐ−Ｑ₁ ここで、Ｚは、Ｎ末端保護基である；Ｑ₂は、配列Ｑ₂−Ａｓｐが配列Ａｌａ−Ｔ
ｙｒ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ（配列番号１）の少なくとも一部に対応するよう
に０から４のアミノ酸である；Ｑ₁は、電気的陰性の脱離基を含む。例示的なジ ペプチドは、Ｂｏｃ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−ＣＨ₂Ｆ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ−Ａｓｐ−Ｃ Ｈ₂Ｆ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ−ＣＨ₂Ｆ、Ａｃ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−ＣＨ₂Ｆ、 Ａｃ−Ｔｙｒ−Ａｓｐ−ＣＨ₂Ｆ、Ａｃ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ−ＣＨ₂Ｆ、Ｃｂｚ−Ｈ
ｉｓ−Ａｓｐ−ＣＨ₂Ｆ、Ｃｂｚ−Ｔｙｒ−Ａｓｐ−ＣＨ₂ＦおよびＣｂｚ−Ｐｈ
ｅ−Ａｓｐ−ＣＨ₂Ｆである。

【手続補正３】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００２６

【補正方法】変更

【補正内容】

【００２６】 を有する化合物、またはその薬学的に受容可能な塩もしくはプロドラッグであり
、ここで： Ｒ₁は、ｔ−ブチルオキシカルボニル、アセチル、およびベンジルオキシカルボ ニルを含むＮ末端保護基であり；ＡＡは非天然のアミノ酸の残基であり；そして
Ｒ₂は、必要に応じて置換されたアルキルまたはＨである。

【手続補正４】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】０１７５

【補正方法】変更

【補正内容】

【０１７５】 カスパーゼ３活性を、以下の緩衝液条件を用いて測定した：１０％スクロース
、１％ＣＨＡＰＳを有する１００ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．５。カスパーゼ−
３についてのこのペプチド基質は、Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ａｓｐ−ＡＭＣ（
配列番号２）である。基質を、５μＭのＫ_m濃度にて用いた。酵素活性について のアッセイを、代表的には、３０℃にて３０分間行った。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 13/12 Ａ６１Ｐ 15/00 15/00 17/02 17/02 25/00 25/00 25/16 25/16 25/28 25/28 37/00 37/00 43/00 43/00 １０５ １０５ １１１ １１１ Ｃ０７Ｋ 5/06 Ｃ０７Ｋ 5/06 5/062 5/062 5/065 5/065 5/078 5/078 Ａ６１Ｋ 37/02 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，Ｅ Ａ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ， ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，Ｇ Ｅ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ， ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，Ｍ Ｎ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ， ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，Ｚ Ｗ (72)発明者 ワン， ヤン アメリカ合衆国 カリフォルニア 92129， サン ディエゴ， ランチョ ペナスキ トス ブールバード 12760 (72)発明者 ウェバー， エッカード アメリカ合衆国 カリフォルニア 92103， サン ディエゴ， ミラー ストリート 4040 Ｆターム(参考） 4C084 AA02 BA01 BA14 ZA021 ZA022 ZA161 ZA162 ZA201 ZA202 ZA221 ZA222 ZA361 ZA362 ZA451 ZA452 ZA511 ZA512 ZA551 ZA552 ZA751 ZA752 ZA811 ZA812 ZA891 ZA892 ZA921 ZA922 ZA941 ZA942 ZA961 ZA962 ZB071 ZB072 ZB151 ZB152 ZB221 ZB222 ZB331 ZB332 ZB351 ZB352 ZC351 ZC352 ZC391 ZC392 ZC551 ZC552 4H045 AA10 AA20 BA11 BA12 BA13 DA56 EA20 FA10

Claims (49)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 以下の式ＩＩ： 【化１】 に示す化合物またはその薬学的に受容可能な塩もしくはプロドラッグであって、
   ここで、 Ｒ₁は、Ｎ−末端保護基であり； Ｒ₂は、必要に応じて置換されたアルキルもしくはＨであり；そして Ｒ₃およびＲ₄は、独立して、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ_{1- 10} アルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、アラルケニル、アラルキニ
   ルまたはヒドロキシアルキルである、 化合物またはその薬学的に受容可能な塩もしくはプロドラッグ。
2. 【請求項２】 前記化合物が以下： Ｚ−（２−Ｍｅ−Ｖａｌ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、および Ｚ−（２−Ｍｅ−Ａｌａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 からなる群より選択される、請求項１に記載の化合物。
3. 【請求項３】 以下の式ＩＩＩ： 【化２】 に示す化合物またはその薬学的に受容可能な塩もしくはプロドラッグであって、
   ここで、 Ｒ₁は、Ｎ−末端保護基であり； Ｒ₂は、必要に応じて置換されたアルキルもしくはＨであり；そして Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇およびＲ₈は、独立して、水素、ハロアルキル、アリール、複素
   環、ヘテロアリール、Ｃ_1-10アルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、
   アラルケニル、アラルキニルまたはヒドロキシアルキルであり、ただし、 Ｒ₅〜Ｒ₈の少なくとも１つは、水素以外である、 化合物またはその薬学的に受容可能な塩もしくはプロドラッグ。
4. 【請求項４】 前記化合物が、以下： Ｚ−（２−ｉ−Ｐｒ−β−Ａｌａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、および Ｚ−（３−Ｐｈ−β−Ａｌａ）−Ａｓｐ−ｆｍｋ、 からなる群より選択される、請求項３に記載の化合物。
5. 【請求項５】 以下の式ＩＶ： 【化３】 に示す化合物またはその薬学的に受容可能な塩もしくはプロドラッグであって、
   ここで、 Ｒ₁は、Ｎ−末端保護基であり； Ｒ₂は、必要に応じて置換されたアルキルもしくはＨであり；そして Ｒ₁₂は水素またはＣ_1-10アルキルであり； Ｂは、アリール、ヘテロアリール、飽和もしくは部分的に不飽和の炭素環また
   は飽和もしくは部分的に不飽和の複素環であり、該炭素環もしくは該複素環は、
   必要に応じて、水素、ハロ、Ｃ₁−Ｃ₆ハロアルキル、Ｃ₆−Ｃ₁₀アリール、Ｃ₄−
   Ｃ₇シクロアルキル、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₂−Ｃ₆アルケニル、Ｃ₂−Ｃ₆アルキ ニル、Ｃ₆−Ｃ₁₀アリール（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、Ｃ₆−Ｃ₁₀アリール（Ｃ₂−Ｃ₆ ）アルケニル、Ｃ₆−Ｃ₁₀アリール（Ｃ₂−Ｃ₆）アルキニル、Ｃ₁−Ｃ₆ヒドロキ シアルキル、ニトロ、アミノ、シアノ、Ｃ₁−Ｃ₆アシルアミノ、ヒドロキシ、Ｃ ₁ −Ｃ₆アシルオキシ、Ｃ₁−Ｃ₆アルコキシ、アルキルチオ、またはカルボキシに
   よって置換されている、 化合物またはその薬学的に受容可能な塩もしくはプロドラッグ。
6. 【請求項６】 前記Ｒ₁が、ｔ−ブチルオキシカルボニル、アセチルまたは ベンジルオキシカルボニルである、請求項５に記載の化合物。
7. 【請求項７】 前記Ｒ₂が、Ｈ、Ｍｅまたはアセトキシメチルである、請求 項５に記載の化合物。
8. 【請求項８】 前記Ｂが、必要に応じて置換されたフェニルまたはシクロヘ
   キシルである、請求項５に記載の化合物。
9. 【請求項９】 前記Ｒ₁₂がＨである、請求項５に記載の化合物。
10. 【請求項１０】 以下： 【化４】 からなる群より選択される、請求項５に記載の化合物。
11. 【請求項１１】 以下の式Ｖ： 【化５】 に示す化合物またはその薬学的に受容可能な塩もしくはプロドラッグであって、
    ここで、 Ｒ₁は、Ｎ−末端保護基であり； Ｒ₂は、必要に応じて置換されたアルキルもしくはＨであり；そして Ｒ₁₂は水素またはＣ_1-10アルキルであり； Ｒ₉、Ｒ₁₀およびＲ₁₁は、独立して、水素、Ｃ_1-10アルキル、ハロゲン、ハロ アルキル、アリール、ヘテロアリール、飽和もしくは部分的に不飽和の炭素環ま
    たは飽和もしくは部分的に不飽和の複素環であり；ただし、 Ｒ₉〜Ｒ₁₁の少なくとも１つは、ハロゲン、ハロアルキル、ヘテロアリール、 飽和もしくは部分的に不飽和の炭素環または飽和もしくは部分的に不飽和の複素
    環である、 化合物またはその薬学的に受容可能な塩もしくはプロドラッグ。
12. 【請求項１２】 前記Ｒ₁がｔ−ブチルオキシカルボニル、アセチルまたは ベンジルオキシカルボニルである、請求項１１に記載の化合物。
13. 【請求項１３】 前記Ｒ₂が、Ｈ、Ｍｅまたはアセトキシメチルである、請 求項１１に記載の化合物。
14. 【請求項１４】 前記Ｒ₁₂がＨである、請求項１１に記載の化合物。
15. 【請求項１５】 前記Ｒ₁₂およびＲ₉がＨであり、Ｒ₁₀がアルキルまたはハ ロアルキルであり、そしてＲ₁₁がＣＦ₃である、請求項１１に記載の化合物。
16. 【請求項１６】 前記Ｒ₁₂がＨであり、Ｒ₉およびＲ₁₀が、独立して、水素 、アルキルまたはハロアルキルであり、そしてＲ₁₁がＦまたはヘテロアリールで
    ある、請求項１１に記載の化合物。
17. 【請求項１７】 以下： 【化６】 からなる群より選択される、請求項１１に記載の化合物。
18. 【請求項１８】 以下： 【化７】 からなる群より選択される化合物。
19. 【請求項１９】 請求項１、３、５、１１または１８に記載の化合物および
    薬学的に受容可能なキャリアを含む、薬学的組成物。
20. 【請求項２０】 細胞または組織の細胞死を阻害する方法であって、請求項
    １、３、５、１１または１８に記載の化合物の有効量と、該細胞または組織を接
    触させる工程を包含する、方法。
21. 【請求項２１】 動物の中枢神経系、末梢神経系、網膜ニューロン、心筋、
    または免疫系の細胞における細胞死を処置または改善する方法であって、そのよ
    うな処置または改善を必要とする該動物に、請求項１、３、５、１１または１８
    に記載の化合物の有効量を投与する工程を包含する、方法。
22. 【請求項２２】 前記細胞死が、中枢神経系または末梢神経系に存在し、そ
    して以下： （ａ）発作に起因する限局性虚血および心停止に起因する全体的虚血からなる
    群より選択される虚血および興奮毒性の状態、 （ｂ）外傷性損傷； （ｃ）ウイルス感染； （ｄ）放射線誘導性神経細胞死； （ｅ）アルツハイマー病、パーキンソン病、プリオン疾患、多発性硬化症、筋
    萎縮性側索硬化症、および脊髄延髄萎縮からなる群より選択される神経変性障害
    ；または （ｆ）脊髄損傷 の一つに起因する、請求項２１に記載の方法。
23. 【請求項２３】 前記細胞死が、中枢神経系または末梢神経系に存在し、そ
    して遺伝子のトリヌクレオチド反復の拡張に起因する、請求項２１に記載の方法
    。
24. 【請求項２４】 前記細胞死が、ハンティングトン病に起因する、請求項２
    １に記載の方法。
25. 【請求項２５】 前記細胞死が、心筋組織に存在し、そして心筋梗塞、鬱血
    性心不全、心筋症または心臓のウイルス感染に起因する、請求項２１に記載の方
    法。
26. 【請求項２６】 前記細胞死が、網膜ニューロンに存在し、そして眼内圧の
    増加、加齢性黄斑変性、または色素性網膜炎に起因する、請求項２１に記載の方
    法。
27. 【請求項２７】 前記細胞死が、免疫系に存在し、そして後天性免疫不全症
    候群、重症複合免疫不全症候群、および放射線誘導免疫抑制からなる群より選択
    される免疫不全障害に起因する、請求項２１に記載の方法。
28. 【請求項２８】 前記細胞死が、全身性エリテマトーデス、慢性関節リウマ
    チ、およびＩ型糖尿病からなる群より選択される自己免疫障害に起因する、請求
    項２１に記載の方法。
29. 【請求項２９】 前記細胞死が、Ｉ型糖尿病に起因する、請求項２１に記載
    の方法。
30. 【請求項３０】 動物において、多発性嚢胞腎疾患、腎アミロイドーシス、
    急性腎不全、シクロスポリンＡ誘導性尿細管上皮細胞死、ＨＩＶ誘導性ニューロ
    パシーまたは貧血／赤血球生成を処置または予防する方法であって、請求項１、
    ３、５、１１または１８に記載の化合物の有効量をそのような処置または予防を
    必要とする該動物に投与する工程を包含する、方法。
31. 【請求項３１】 正常な血液供給の欠乏に起因する細胞死から哺乳動物の器
    官または組織を保護する方法であって、該器官または組織に、請求項１、３、５
    、１１または１８に記載の化合物の有効量を接触させる工程を包含する、方法。
32. 【請求項３２】 前記器官または組織が、哺乳動物への移植の前に保存培地
    に存在する、請求項３１に記載の方法。
33. 【請求項３３】 前記接触する工程が、前記器官もしくは組織への前記化合
    物の注入、または該化合物を含む保存培地中に該器官もしくは組織を浸すことを
    包含する、請求項３１に記載の方法。
34. 【請求項３４】 ドナー器官または組織において、該ドナー器官または組織
    が宿主に移植された後、宿主の免疫細胞の効果に起因する細胞死を減少または予
    防する方法であって、そのような減少または予防を必要とする該宿主へ請求項１
    、３、５、１１または１８に記載の化合物の有効量を投与する工程を包含する、
    方法。
35. 【請求項３５】 インビトロの受精手順において使用される哺乳動物の精子
    または卵子の死を減少または予防する方法であって、該精子または卵子に、請求
    項１、３、５、１１または１８に記載の化合物の有効量を接触させる工程を包含
    する、方法。
36. 【請求項３６】 哺乳動物細胞株または酵母細胞株の寿命を延長する方法で
    あって、請求項１、３、５、１１または１８に記載の化合物を、該細胞株に接触
    させる工程を包含する、方法。
37. 【請求項３７】 前記接触する工程が、細胞増殖培地において前記化合物を
    含ませることを包含する、請求項３６に記載の方法。
38. 【請求項３８】 哺乳動物における毛の喪失または毛の早期の白髪化を処置
    または改善する方法であって、該処置または改善を必要とする該哺乳動物の該毛
    または毛包に、請求項１、３、５、１１または１８に記載の化合物を接触させる
    工程を包含する、方法。
39. 【請求項３９】 毛の喪失が処置され、そして該毛の喪失が、雄性パターン
    の禿、放射線、化学療法または感情的なストレスに起因する、請求項３８に記載
    の方法。
40. 【請求項４０】 高レベルの放射線、熱または化学物質への曝露に起因する
    哺乳動物の皮膚の損傷を処置または改善する方法であって、該処置または改善を
    必要とする該哺乳動物の皮膚へ請求項１、３、５、１１または１８に記載の化合
    物を塗布する工程を包含する、方法。
41. 【請求項４１】 前記化合物が、軟膏の部分として塗布される、請求項４０
    に記載の方法。
42. 【請求項４２】 前記皮膚の損傷が、急性の太陽への過度の曝露に起因し、
    そして前記処置が、皮膚の水疱形成および剥脱を減少させる、請求項４０に記載
    の方法。
43. 【請求項４３】 動物における敗血症を処置または改善する方法であって、
    該処置または改善を必要とする該動物に、請求項１、３、５、１１または１８に
    記載の化合物の有効量を投与する工程を包含する、方法。
44. 【請求項４４】 動物における肝炎を処置または改善する方法であって、該
    処置または改善を必要とする該動物に、請求項１、３、５、１１または１８に記
    載の化合物の有効量を投与する工程を包含する、方法。
45. 【請求項４５】 動物における遺伝性チロシン血症Ｉ型を処置または改善す
    る方法であって、該処置または改善を必要とする該動物に、請求項１、３、５、
    １１または１８に記載の化合物の有効量を投与する工程を包含する、方法。
46. 【請求項４６】 動物における慢性アルコール摂取誘導性の頬粘膜細胞死を
    処置または改善する方法であって、該処置または改善を必要とする該動物に、請
    求項１、３、５、１１または１８に記載の化合物の有効量を投与する工程を包含
    する、方法。
47. 【請求項４７】 植物または花における細胞死を処置または改善する方法で
    あって、該処置または改善を必要とする該植物または花に、請求項１、３、５、
    １１または１８に記載の化合物の有効量を投与する工程を包含する、方法。
48. 【請求項４８】 動物における放射線または紫外線照射が誘導する細胞死を
    処置または改善する方法であって、該処置または改善を必要とする該動物に、請
    求項１、３、５、１１または１８に記載の化合物の有効量を投与する工程を包含
    する、方法。
49. 【請求項４９】 脊髄形成異常症候群（ＭＤＳ）における骨髄細胞のアポト
    ーシス性の死を処置または改善する方法であって、該処置または改善を必要とす
    る該動物に、請求項１、３、５、１１または１８に記載の化合物の有効量を投与
    する工程を包含する、方法。