BG107136A - Карбаматни инхибитори на каспазата и тяхното приложение - Google Patents

Карбаматни инхибитори на каспазата и тяхното приложение Download PDF

Info

Publication number
BG107136A
BG107136A BG107136A BG10713602A BG107136A BG 107136 A BG107136 A BG 107136A BG 107136 A BG107136 A BG 107136A BG 10713602 A BG10713602 A BG 10713602A BG 107136 A BG107136 A BG 107136A
Authority
BG
Bulgaria
Prior art keywords
compound
group
use according
nitrogen atom
oxygen
Prior art date
Application number
BG107136A
Other languages
English (en)
Inventor
David Bebbington
Jean-Damien Charrier
David Kay
Ronald Knegtel
Julian Golec
Michael Mortimore
John Studley
Original Assignee
Vertex Pharmaceuticals Incorporated
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Vertex Pharmaceuticals Incorporated filed Critical Vertex Pharmaceuticals Incorporated
Publication of BG107136A publication Critical patent/BG107136A/bg

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/14—Drugs for dermatological disorders for baldness or alopecia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A61P25/32—Alcohol-abuse
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A61P31/06—Antibacterial agents for tuberculosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/08—Indoles; Hydrogenated indoles with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/56—Ring systems containing three or more rings
    • C07D209/80—[b, c]- or [b, d]-condensed
    • C07D209/82—Carbazoles; Hydrogenated carbazoles
    • C07D209/86—Carbazoles; Hydrogenated carbazoles with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to carbon atoms of the ring system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D221/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom, not provided for by groups C07D211/00 - C07D219/00
    • C07D221/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom, not provided for by groups C07D211/00 - C07D219/00 condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D221/04—Ortho- or peri-condensed ring systems
    • C07D221/06—Ring systems of three rings
    • C07D221/10—Aza-phenanthrenes
    • C07D221/12—Phenanthridines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D223/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D223/14—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D223/18—Dibenzazepines; Hydrogenated dibenzazepines
    • C07D223/22—Dibenz [b, f] azepines; Hydrogenated dibenz [b, f] azepines
    • C07D223/24—Dibenz [b, f] azepines; Hydrogenated dibenz [b, f] azepines with hydrocarbon radicals, substituted by nitrogen atoms, attached to the ring nitrogen atom
    • C07D223/26—Dibenz [b, f] azepines; Hydrogenated dibenz [b, f] azepines with hydrocarbon radicals, substituted by nitrogen atoms, attached to the ring nitrogen atom having a double bond between positions 10 and 11
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D223/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D223/14—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D223/18—Dibenzazepines; Hydrogenated dibenzazepines
    • C07D223/22—Dibenz [b, f] azepines; Hydrogenated dibenz [b, f] azepines
    • C07D223/24—Dibenz [b, f] azepines; Hydrogenated dibenz [b, f] azepines with hydrocarbon radicals, substituted by nitrogen atoms, attached to the ring nitrogen atom
    • C07D223/28—Dibenz [b, f] azepines; Hydrogenated dibenz [b, f] azepines with hydrocarbon radicals, substituted by nitrogen atoms, attached to the ring nitrogen atom having a single bond between positions 10 and 11
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D279/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom and one sulfur atom as the only ring hetero atoms
    • C07D279/10—1,4-Thiazines; Hydrogenated 1,4-thiazines
    • C07D279/14—1,4-Thiazines; Hydrogenated 1,4-thiazines condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D279/18—[b, e]-condensed with two six-membered rings
    • C07D279/22—[b, e]-condensed with two six-membered rings with carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D279/30—[b, e]-condensed with two six-membered rings with carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with acyl radicals attached to the ring nitrogen atom

Abstract

Изобретението се отнася до инхибитори на каспазата с формула@@в която Z е кислород или сяра; R1 - водород, -CHN2,-R, -CH2OR, -CH2SR или CH2Y; Y е електроотрицателна отцепваща се група; R2 означава CO2H, CH2CH2H или техни естери, амиди или изостери; R3 е група, способна да се свърже на S2-субпозицияв каспазата; R4 и R5, едновременно с азотния атом, образуват хетероциклен пръстен и R има значение,посочено в описанието. Съединенията са ефективни инхибитори на апоптозата и IL-1бета отделянето.

Description

Настоящото изобретение касае медицинската химия и се отнася до нови съединения и фармацевтични състави на тяхна основа, които инхибират каспазите, представляващи връзката между загубата на клетки и възпалителния процес. Изобретението се отнася, също така, до методи за приложението на съединенията и фармацевтичните състави, съгласно настоящото изобретение, за лечение на заболявания, при които е от значение каспазната активност.
ПРЕДШЕСТВАЩО СЪСТОЯНИЕ НА ТЕХНИКАТА
Апоптозата, или програмираната клетъчна смърт, е принципен механизъм, по който организмът елиминира нежеланите клетки. Неконтролируемостта при апоптозата, която се изразява или в засилена апоптоза, или в липсата й, се наблюдава при редица заболявания, като карцином, остри възпалителни и автоимунни разстройства, исхемични заболявания и някои невродегенеративни разстройства ( виж главно Science, 1998, 281, 1283-1312; Ellis et al., Ann. Rev. Cell. Biol., 1991, 7, 663).
Каспазите представляват фамилия от цистеин протеазни ензими, които са ключови медиатори в сигналните пътища за апоптоза и клетъчно разсейване ( Thombery, Chem. Biol., 1998, 5, R97-R103). Тези сигнални пътища варират в зависимост от клетъчния тип и различните стимули, но всички апоптозни процеси, в края на краищата, довеждат до общ ефекторен процес, водещ от своя страна до протеолиза на ключови протеини. Каспазите са включени както в ефекторната фаза на сигналните процеси, така и при по-нататъшното протичане на процеса в обратна посока на неговото иницииране. Обратните каспази, участващи в иницииращите действия, се активират и от своя страна активират други каспази, включени в по-нататъшни фази на апоптозата.
Каспаза-1, първата единтифицирана каспаза, е също известна като интерлевкин, превръщащ ензим или “ICE”. Каспаза-1 превръща прекурсорния интерлевкин-1β (“pIL”) в провъзпалителна активна форма посредством специфично разцепване на pIL-Ιβ между Asp-116(acnaprHH) и А1а-117(аланин). Освен каспаза-1, съществуват още 11 други човешки каспази, като всички се разцепват специфично при аспартиловите остатъци. Установено е, също така, че е необходимо да има най-малко 4 аминокиселинни остатъка от страната на N-края в мястото на разцепване.
Каспазите са класифицирани в 3 групи в зависимост от аминокиселинния секвент, който е предпочитан или е принципно познат. За групата от каспази, която включва каспаза-1, 4 и 5 е установино, че се предпочитат хидрофобни ароматни киселини в позиция 4 от страната на N-края в мястото на разцепване. Друга група, включваща каспаза 2, 3 и 7 е с аспартилови остатъци в двете позиции 1 и 4 от страната на N-края в мястото на разцепване, като се предпочитат секвенти от типа Asp-Glu-X-Asp. Трета група, която включва каспаза-6, 8, 9 и 10, допуска много аминокиселини в принципно известния секвент, но се предпочитат остатъци с разклонени алифатни странични вериги като валин и левцин в позиция 4.
Каспазите могат също така да бъдат групирани в зависимост от тяхната функция. Първата подгрупа включва капсаза-1 (ICE), 4 и 5. Оказва се, че тези каспази участват в проинфламаторните процеси на цитокините, поради което играят важна роля при възпалението. Най-добре изследваният ензим в тази група, каспаза-1, активира IL-Ιβ прекурсора чрез протеолитично разцепване. По този начин този ензим играе ключова роля при възпалителния отговор. Каспаза-1 участва, също така, в процесите на интерферон-γ индуциращи фактор (IGIF или IL-18), който стимулира получаването на интерферон-γ, ключов имунорегулатор, който регулира антигенното представяне, активирането на Тклетките и клетъчната адхезия.
Останалите каспази образуват втора и трета подгрупи. Тези [7 ** ензими са особено важни за вътреклетъчните сигнални пътища, довеждащи до апоптоза. Едната подгрупа се състои от ензими, участващи в иницииращите процеси на апоптозните пътища, включващи пренасяне на сигналите от клетъчната мембрана. Представители на тази подгрупа са каспаза-2, 8, 9 и 10. Другата подгрупа, включваща ефекторни каспази 3, 6 и 7, участващи в финалните процеси на разцепване, които довеждат до систематично разрушаване и смърт на клетките чрез апоптоза. Каспазите, които вземат участие в началното пренасяне на сигнала, активират w финалното пренасяне на сигнала, което след това разрушава ДНКпоправящите механизми, фрагментира ДНК, разрушава клетъчния цитоскелет и накрая фрагментира клетката.
Четири аминокиселинни секвента, предварително идентифицирани от каспазите, са определени като ензимни субстрати. ( Talanian et al., J. Biol. Chem., 272, 9677-9682, (1997); Thomberry et al., J. Biol. Chem., 272, 17907-17911, (1997). Откриването на тези четири аминокиселинни секвенти, предварително идентифицирани от каспазите, се използва при
описването на инхибиторите на каспазите. Възвратимите тетрапептидни инхибитори са получени със следната структура СН3СО-[Р4]-[Рз]-[Р2]-СН(В)СН2СО2Н, в която Р2 до Р4 представляват оптимален аминокиселинен секвент за идентифициране и R е алдехид, нитрил или кетон, способни да се свързват с каспазния цистеин сулфхидрил. ( Rano and Thomberry, Chem. Biol., 4, 149-155, (1997); Mjalli, et al, Bioorg. Med. Chem. Lett., 3, 2689-2692, (1993); Nicolson et al., Natura, 376, 37-43, (1995). Невъзвратимите инхибитори на основата на аналогови тетрапептидни идентифицирани секвенти, са получени, когато R е ацилоксиметилкетон-СОСН2ОС(Ж’. R’ се илюстрира с един по избор заместен фенил, като например 2, 6-дихлорбензоилокси, а когато R е СОСН2Х, тогава X е отцепваща се група като F или С1. (Biochemistry 33, 3934, (1994); Dolle et all., J. Med. Chem., 37, 563564, (1994).
Използването на инхибитори на каспазата за лечение на различни болестни състояния при бозайници, свързани с увеличаване на клетъчната апоптоза, са демонстриране при използване на протеинни инхибитори на каспазата. Например, при използване на гризачи за модел, инхибиторите на каспазата показват намаление на размерите на инфаркта и инхибират кардиомиоцитна апоптоза след инфаркт на миокарда, намаляват обема на лезиите и неврологичния дефицит, получени след удар, намаляват посттравматичната апоптоза и неврологичния дефицит при травматични мозъчни увреждания, ефективни са при лечение на възпалителни чернодробни деструкции и подобряват преживяването след ендотоксичен шок. (Yaota et all., Circulation, 97, 276, (1998); Endres et all., J. Cerebral Blood Flow andMetabolism, 18, 238, (1998); Cheng et all., J. Clin. Invest., 101, 1992, (1998); Yakovlev et all., J. Neuroscience, 17, 7415, (1997); Rodriguez et all., J. Exp.Med.,184, 2067, (1996); Grobmyer et all., Mol. Med., 5, 585, (1999).
Най-общо, пептидните инхибитори, описани по-горе, са много мощни срещу някои от каспазните ензими. Обаче, тази тяхна активност не винаги рефлектира върху клетъчния модел на апоптозата. Освен това, пептидните инхибитори се характеризират типично като нежелателни фармакологични свойства, например лоша абсорбция при приемане през устата, ниска стабилнаст и бърз метаболизъм. (Plattner and Norbeck, Drug Discovery Technologies, Clark and Moos, Eds., (Ellis Horwood, Chichester, England, 1990).
Съществуват съобщения за различни модифицирани пептидни инхибитори. В WO 91/15577 й WO 93/05071 са описани ICE инхибитори със следната формула:
Z-Q2-Asp-Qi в която Z е защитна група за N-края; Q2 е 0 до 4 аминокиселини и Qi е електроотрицателна отцепваща се група.
WO 99/18781 се отнася до дипептидни инхибитори на каспаза със следната формула:
в която R] е защитна група за N-края; АА е остатък от природна ааминокиселина или β-аминокиселина; R2 е водород или CH2R4, където R4 е електроотрицателна отцепваща се група; и R3 е алкилова група или водород.
WO 99/47154 се отнася до инхибитор на дипептидни инхибитори на каспазата със следната формула:
в която Ri е защитна група за N-края; АА е остатък от синтетична α-аминокиселина или β-аминокиселина; и R2 е по избор заместен алкил или водород.
WO 00/023421 се отнася до заместени ацилови дипептидни апоптозни инхибитори със следната формула:
.СОгЙ3
R2 (СНЖ
в която η е 0, 1 или 2; q е 1 или 2; А е остатък от подходяща натурална или синтетична аминокиселина; В е водороден атом, деутериев атом, Сщо с права или разклонена верига алкил, циклоалкил, фенил, заместен фенил, нафтил, заместен нафтил, 2бензоксазолил, заместен 2-оксазолил, (СН2)т циклоалкил, (СН2)тфенил, (СН2)т(заместен фенил), (СН2)щ(1- или 2- нафтил), (СН2)тхетероарил, халометил, CO2R13, CONRl4R15, CH2ZR16, СН2ОСОарил, СН2ОСО(заместен арил), СН2ОСО(хетероарил), СН2ОСО(заместен хетероарил), или CH2OPO(R17)R18, където R13,
R14, R15, R16, R17 и R18 са дадени в описанието; R2 е избрано от групата, съдържаща водород, алкил, циклоалкил, фенил, заместен фенил, (CH2)mNH2; R3 е водород, алкил, циклоалкил, (циклоалкил)алкил, фенилалкил или заместен фенилалкил; X е СН2, С=О, О, S, NH, C=ONH или CH2OCONH; и Z е кислороден или серен атом.
WO 97/24339 се отнася до инхибитори на интерлевкин-ΐβ обратим ензим със следната формула
А* «Ai-AAj-N-Y
Η в която R1 представлява Н, акил, алкокси, карбоциклена, хетероциклена и други различни групи; АА1 и АА2 са единични връзки или аминокиселини; и У представлява група със следната формула:
в която Tet-пръстенът представлява тетразолов пръстен; и Ζ представлява между другото алкиден, алкенил, О, S, SO и SO2.
ЕР 618223 се отнася до ICE инхибитори със следната формула:
R-ArA2- Х-А3 в която R е Н, защитна група или по избор пръстенен заместен PhCH2O; At е α-хидрокси или α-аминокиселинен остатък; А2 е α-хидроксикиселинен остатък или α-аминокиселина или Αι и А2 образуват заедно псевдодипептид или остатък, имитиращ дипептид; X е остатък, производно на Asp, където А3 е СН2Х1СОУ1, СН2ОУ2, CH2SY3 или СН2(СО)щУб, където Xi е О или S, ш е 0 или 1 и Yj, Y2, Υ3 и Υδ са по избор заместени циклоалифатни или арилови групи.
WO 98/16502 се отнася до, между другото, до ICE инхибитори със следната формула:
в която Ri и R2 са описани по-горе и пиролидиновият пръстен е заместен с различни заместители.
Както бяха описани по-горе каспазните инхибитори, не става ясно дали те притежават подходящите фармакологични свойства, за да се прилагат за лечебнаи цел. Поради това съществува непрекъсната нужда от нискомолекулни инхибитори на каспазата, които да са мощни, стабилни и прониквайки през мембраните да осъществяват ефективно инхибиране на апоптозата in vitro. Такива съединения са изключително полезни при лечение на изброените по-горе заболявания, при които каспазните ензими играят роля.
ТЕХНИЧЕСКА СЪЩНОСТ НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО И ПРЕДИМСТВА
Беше установено, че съединенията, съгласно настоящото изобретение, както и фармацевтичните състави на тази база, имат качества на инхибитори на каспазата, както и на клетъчна апоптоза. Тези съединения са със следната обща формула I:
в която:
Z е кислород или сяра;
R1 е водород, -CHN2, -R, -CH2OR, -CH2SR, или СН2У;
R е Ci_i2 алифатен, арилов, алкилов, хетероцикличен или хетероцикличен арилов радикали;
У е еректроотрицателна отцепваща се група;
R е СО2Н, СН2СН2Н или техни естери, амиди или изостере; R3 е група, способна да се свърже на Бг-субпозиция в каспазата;
R4 и R5 едновременно с азотния атом образуват моно-, ди- и трициклена хетероатомна система с 1-6 хетероатоми, избрани от групата на азот, кислород или сяра.
Съединенията, съгласно настоящото изобретение, притежават свойства на ихибитори върху голям брой таргетни каспази с добра ефективност, когато се използват клетъчни модели на апоптозата. Освен това, тези съединения имат добро клетъчно проникване и фармакокинетични свойства и, като следствие от тези потентни свойства, притежават добра ефективност при заболявания, свързани с каспазата.
ДЕТАЙЛНО РАЗКРИВАНЕ СЪЩНОСТТА НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО
Изобретението се отнася до нови съединения и техните фармацевтично приемливи производни, които се прилагат като инхибитори на каспазата. Изобретението се отнася, също така, до методи за приложение на съединенията, които да инхибират активността на каспазата и да лекуват свързани с каспазата заболявания. Тези съединения са със следната обща формула I:
в която:
Z е кислород или сяра;
R1 е водород, -CHN2, -R, -CH2OR, -CH2SR, или СН2У;
R е С1_12 алифатен, арилов, алкилов, хетероцикличен или хетероцикличен арилов радикали;
У е еректроотрицателна отцепваща се група;
R е СО2Н, СН2СН2Н или техни естери, амиди или изостере;
R3 е група, способна да се свърже на 82-субпозиция в каспазата;
R4 и R5 едновременно c азотния атом образуват моно-, ди- и трициклена хетероатомна система с 1-6 хетероатоми, избрани от групата на азот, кислород или сяра.
Използваните в описанието термини имат следните значения, ако не е посочено изрично нещо друго: Терминът “алифатен” означава въглеводород С1-С12 с права или разклонена верига, които са напълно наситени или съдържат една или повече степени на ненаситеност. Например, подходящите алифатни групи включват
F** наситеви или ненаситени линейни, разклонени или циклични алкилови, алкенилови или алкинилови групи и техни хидриди като (циклоалкил)алкил, (циклоалкенил)алкил или (циклоалкил)алкенил. Терминът “алкил” се използва самостоятелно или като част от поголама сложна група в права или разклонена верига, съдържаща един до дванадесет въглеродни атома. Когато терминът “алкил” се използва като част от по-голяма група, както при групите аралкил или хетероаралкил, алкиловата част, за предпочитане съдържа един до шест въглеродни атома. Терминът “халоген” означава F, С1, Вг w или I. Терминът “арил” означава моноциклични или полициклични ароматни пръстенови групи, съдържащи пет до четиринадесет атома, като фенил, нафтил и антрил. Терминът “хетероциклична група” означава наситен или ненаситени моноциклични или полициклични пръстенни системи, съдържащи един или повече хетероатоми и големина на пръстена три или девет атома, като фуранил, тиенил, пиролил, пиролинил, пиролидинил, диоксоланил, оксазолил, тиазолил, имидазолил, имидазолинил, имидазолидинил, пиразолил, пиразолинил, пиразолидинил, изоксазолил, изотиазолил, оксадиазолил, триазолил, тиадиазолил, пиранил, пиридинил, пиперидинил, диоксанил, морфолинил, дитианил, тиоморфолинил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил, пиперазинил, триазинил, тритианил, индолизинил, индолил, изоиндолил, индолинил, бензофуранил, бензотиофенил, индазолил, бензимидазолил, бензтиазолил, пуринил, хинолизинил, хинолинил, изохинолинил, хинолинил, фталазинил, хиназолинил, хиноксалинил, 1,8нафтиридинил, птеридинил, хинуклидинил, карбазолил, акридинил, С феназинил, фенотиазинил или феноксазинил. “Хетероалкил” означава хетероцикличен пръстен, който е ароматен. Съвсем разбираемо е, че съединенията, съгласно настоящото изобретение, се ограничават до тези от тях, които могат да съществуват в природата като стабилни химически съединения.
Терминът ’’карбоциклична група” включва наситени моноциклични или полициклични въглеродни пръстенови системи, съдържащи три до четиринадасат въглеродни атома, които могат да бъдат кондензирани до арилови или хетероциклични групи, например циклохексил, циклопентил, циклобутил, циклопропил, инданил, тетрахидронафтил и др.
Алифатните групи алкил, арил, хетероарил, хетероциклил, използвани самостоятелно или като част от по-големи групи, могат да бъдат заместени или незаместени. Когато са заместени, тези групи могат да съдържат един или повече заместители. Примери за подходящи заместители са: халоген, -R, -OR, -OH, -SH, -SR, защитена OH (като ацилокси), фенил (Ph), заместен Ph, -OPh, заместен -Oph, -NO2, -CN, -NH2, -NHR, N(R)2, -NHCOR, NHCONHR,
-NHCON(R)2, - NRCOR, -NHCO2R, - CO2R, -CO2H, -COR, -CONHR, -CON(R)2, -S(O)2R, -SONH2, -S(O)R, -SO2NHR, -NHS(O)2R, =0, =S, =NNHR, =NNR2, =N-OR, NNHCOR, =NNHCO2R, =NNHSO2R или =NR, където R е алифатна група или заместена алифатна група.
Азотният атом в хетероцикличния пръстен може да бъде заместен по избор. Подходящи заместители на азотния атом са R, COR, S(O)2R и CO2R, където R е алифатна група или заместена алифатна група.
w Азотът и сярата могат да бъдат в тяхната оксидирана форма.
Терминът “електоотрицателна отцепваща се група” е с известното на специалистите в тази област значение (виж March, Advanced Organic Chemistrv.44h Edition, John Wiley&Sons, 1992). Примери за електоотрицателна отцепваща се група включват халогени, като F, С1, Вг или I, арил и алкилсулфонилокси групи, трифлуорметансулфонилокси, OR, SR, -OC-O(R), -OPO(R6)(R7), където R е алифатна група, арилова група, карбоксициклична група, аликилкарбоксициклична група, хетероциклична група или С алкилхетероциклична група; R6 и R7 са независимо един от друг R или OR.
Когато R е естер или амид, съединенията, съгласно изобретението, претърпяват метаболично разцепване на съответните карбоксикиселини, които са инхибитори на каспазата. Поради това метаболично разцепване, конкретната същност на естерните и амидни групи не е от съществено значение за осъществяване на изобретението. Структурата на групата R2 може да варира от относително простия диетиламид до стероидни естери. Примери за естери от R2 карбоксикиселини включват, но се ограничават само до тях: Cm2 алифатен, като Ci_6 алкил или Сз-ю циклоалкил; арил, като фенил; аралкил, като бензил или фенетил, хетероциклил или 'У хетелоциклилалкил. Примери за подходящи R хетероциклени пръстени включват, но се ограничават само до тях: 5-6 атомни пръстени с един или два хетероатоми, като пиперидинил, пиперазинил или морфолинил.
Амидите от R карбоксикиселините могат да бъдат вторични или третични. Подходящи заместители на азота в амидната група включват, без да се ограничават само до тях-една или повече групи независимо една от друга : алифатна, арилова, аралкилова, хетероциклилова или хетероциклилалкилова, изброени по-горе за R2 естерни алкохоли. Подобно на това, в обема на защита на настоящото изобретение, могат да се включат други пролекарства (виж Bradley D. Anderson, ’’Prodrugs for Improved CNS Delivery Reviews, 1996,19, 171-202).
Изостерите или биоизостерите на R2 карбоксикиселините, естерите и амидите се получават чрез замяна на един атом или група от атоми до образуване на ново съединение с подобни биологични свойства на тези на изходната киселина или естер. Биостеричното изместване може да бъде физикохимично или топохимично. Пример за изостерично заместване за карбоксикиселина е СОЪШБС^алкил), като CONHSO2-Me.
R3 може да бъде всяка група, подходяща за прикрепяне към S2 субпозиция на каспазата. Такива групи са известни от каспазни инхибитори, които са описани (виж WO 91/15577, WO 93/05071, WO 99/18781, WO 99/47154, WO 00/023421, WO 97/24339, ЕР 618223, WO 98/16502). Освен това, структурите на няколко от каспазните ензими, включително S2 субпозициите, са също така известни. Описания на каспазните структури са дадени в: Blanchard Н., et al./ .Mol. Biol., 302(1), 9-16,(2000); Wei Y. et al., Chem. Biol., 7(6):423-32, (2000); Lee D„ et al., J. Biol. Chem., 275(21): 16007-14, (2000); Blanchard H. et al., Structure Fold Des.,'7(9):1125-33 (1999); C Okamoto Y., et al, Chem. Pharm. Bull. (Tokyo) 47(1):11-21(1999);
Margolin an., et al, J. Biol. Chem., 272(11):7223-8 (1997); Walker N. P., et al., Cell 78(2):343-52 (1994); and Wilson K. P. et al., Nature, 370 (6487):270-5 (1994).
Дали една група ще се прикрепи на S2 субпозиция зависи от конкретната каспаза, която ще се обсъжда. Субпозицията варира от ниска S2 субпозиция на каспаза-3, която позволява използването на алифатна група до С4, до относително голяма цифра за субпозицията, което допуска група с молекулно тегло до около 140 Daltons, като нафтиловата група. Субпозицията, както и електронната структура на R'-групага ще влияе на селективността на инхибитора на каспазата. От цитираните реферати по-горе всеки специалист в областта би могъл бързо да прецени дали една група е подходяща за благоприятно закрепване на 82-позиция в каспазата, например, чрез използванена стандартни молекулярни моделиращи програми като Quanta и Macromodel.
R3-групите, включително тези, избрани от групата на водород, странична верига на природна α-аминокиселина или заместена или незаместена група с молекулно тегло до около 140 Daltons, избрана от групата на арилова, аралкилова, хетероциклилова и хетероциклилалкилова групи. Примери за Й-алифатни групи включват метил, етил, пропил, изопропил, циклопропил, бутил, изобутил, втор.бутил, трет.бутил, циклобутил, пентил, циклопетгил, хексил и циклохексил. Примери за R -арилови групи включват фенил, инденил и нафтил. Примери за КАхетероциклични групи включват пиролидинил, пиролинил, имидазолидинил, имидазолинил, пиразолинил, пиразолидинил, пиперидинил, морфолинил, тиоморфолинил, пиперазинил, хомопиперидинил и хинуклидинил. Примери за R’-хетероарилови групи включват фуранил, пиролил, оксазол, тиазолил, пиразолил, изоксазолил, изотиазолил, оксадиазолил, фуразанил, триазолил, тиадиазолил, пиридинил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил, триазинил, индолил, изоиндолил, индолинил, бензофуранил, бензотиофен, индазолил, бензимидазолил, бензтиазолил, пуринил, хинолинил, изохинолинил, хинолизинил, цинолинил, фталазинил, хиназолинил, хиноксалинил, нафтиридинил, птеридинил, хроманил и изохроматил. Всяка група може да съдържа един или повече заместители, както е дадено по-горе.
R4 и R5 заедно с намиращият се между тях азотен атом, формират моно-, ди- и трициклени хетеропръстенни системи с 1-6 хетероатома, за предпочитане 1-4 хетероатома. Тези пръстенни системи включват заместен и незаместен индол, изоиндол, индолин, индазол, пурин, хидропиридин, бензимидазол, имидазол, имидазолин, пирол, пиролидин, пиразол, пиразолин, пиразолидин, триазол, пиперидин, морфолин, тиоморфолин, пиперазин, карбазол, фенотиазин, феноксазин, дихидрофеназин, дихидроцинолин, дихидрохиноксалин, тетрахидро хинолинтетрахидроизохинолин, дихидронафтиридин, тетрахидранафтиридин, 5Ндибензо[Ь,£]азерин, 10,11-дихидро-5Н-дибензо[Ь,£]азерин, βкарболин, пиридо[4,3-Ь]индол, 2,3,9-триазафлуорен, 9-тиа-2,10диазаантрацен, 3,6,9-триазафлуорен, тиено[3,2-Ь]пирол или дихидрофенантридин. Подходящи заместители на R4 и R5 включват една или повече групи независимо една от друга, избрани от групата на: халоген, -R, -OR, -OH, -SH, -SR, защитна OH (като ацилокси), фенил (Ph), заместена Ph, -OPh, заместена -Oph, -NO2, -CN, -NH2, -NHR, -N(R)2, -NHCOR, -NHCONHR, -NHCON(R)2, NRCOR, -NHCO2R, - CO2R, -CO2H, -COR, -CONHR, -CON(R)2, S(O)2R, -SONH2, -S(O)R, -SO2NHR или -NHS(O)2R, където R ca независимо един от друг алифатни групи или заместени алифатни групи.
Съединенията, съгласно настоящото изобретнение, в които R2 е СООН, са γ-кетокиселини, които могат да съществуват в разтвор или като отворената форма 1 или като циклизирана хемикетална форма 2. Представянето на едната форма означава включането и на другата. Аналогично, циклизацията може също така да се осъществи, когато R е СН2СООН, като такива циклизирани изомери е логично да бъдат включени, както присъства отворената пръстенна форма в представената схема по-долу:
w По същия начин, е очевидно за специалиста в тази област, че някои от съединенията, съгласно настоящото изобретение, могат да съществуват като тавтомерни форми или хидратни форми, като всички тези форми на съединенията са в обхвата на изобретението. При все, че погледнато от друга страна, структурите, описани тук, би трябвало да включват всички стереохимични форми структурите; т. е. R и S конфигурациите за всеки изометричен център. Ето защо, всички стереохимични изомери, както и всички енантиомерни и диастереоизомерни смеси от съединенията са също W в обхвата на изобретението. От друга страна, структурите, описани в настоящото описание, също трябва да включват съединенията, които се различават само по присъствието на един или няколко изотропични тежки атоми. Например, съединения, имащи същата структура, но с изместен водороден атом от деутерий или тритий, или с изместен въглероден атом от 13С- или 14С-обогатен въглерод, също са в обхвата на изобретението.
Един вариант на изпълнение на изобретението се отнася до съединения, които притежават едно или повече, за предпочитане всичките, от следните характеристики:
(I) Z е кислород.
(II) R1 е водород, -R, -CH2OR, -CH2SR или -CH2Y, за предпочитане, R1 e -CH2OR, -CH2SR или -CH2Y, като най-добре е, когато R1 е -CH2F.
(III) R е CO2H или негови естер, амид или изостер.
(IV) R е група с молекулно тегло до 140 Daltons, като алифатна или аралкилова група. За предпочитане R3 е С1-С4 алкил, която група се прикрепва на S2 субпозиция в каспазата.
(V) R4 и R5 заедно с намиращият се между тях азотен атом, формират моно-, ди- и трициклени хетероциклени или хетероалови пръстенни системи, в които всеки пръстен от системата съдържа 5-7 хетероатома.
Най-важната характеристика на съединенията, съгласно изобретението, е хетеропръстенната система, образувана от R4 и R5 заедно с намиращият се между тях азотен атом. Бициклените или трициклените хетероциклични или хетероарилови пръстени се предпочитат пред моноциклените пръстени. Съответно, предпочитан вариант на изпълнение се отнася до съединения, притежаващи една или повече, за предпочитане всичките от следващите характеристики: (I) Z е кислород; (II) R1 е водород, -R, -CH2OR, -CH2SR или -CH2Y, за предпочитане, R1 е -CH2OR, CH2SR или -CH2Y, по-добре -R1 да бъде -CH2Y, а най-добре е, когато R1 е -CH2F; (III) R2 е СО2Н или негови естер, амид или
-5 изостер; (IV) R е група с молекулно тегло до 140 Daltons, като алифатна или аралкилова група, за предпочитане R3 е С1-С4 алкил; и/или (V) R4 и R5 заедно с намиращият се между тях азотен атом, формират моно-, ди- и трициклени хетероциклени или хетероалови пръстенни системи, в които всеки пръстен от системата съдържа 5-7 хетероатома.
Примери за моноциклени пръстени включват: триазол, пиперидин, морфолин, тиоморфолин, имидазол, пиролидин, пиразол и пиперазин. Примери за предпочитаните бициклени пръстени включват: индол, изоиндол, индолин, индазол, бензимидазол, тиено[3,2-Ь]пирол, дихидрохиноксалин, дихидроцинолин, дихидронафтиридин, тетрахидронафтиридин, тетрахидрохинолин и тетрахидроизохинолин, най-добре индол или индолин. Примери за предпочитаните трициклени пръстени включват: карбазол, фенотиазин, β-карболин, пиридо[4,3-Ь]индол, 2,3,9-триазафлуорен, 9-тиа-2,10-диазаантрацен, 3,6,9триазафлуорен, феноксазин, дибензоазепин, дихидродибензоазепин, дихидрофеназин, дихидроакридин или дихидрофенантридин, найдобре карбазол, фенотиазин или дихидрофенантридин.
Специфични примери за съединенията от формула I са показани на Таблица 1.
Таблица 1. Примери за съединенията от Формула I (Z е кислород)
No. Структура
1 ϊ ί ^cqH
V ° A V
2 /Т ? ί /-cqH
στΑ V
3 A ^cqH
•
4 (ГоУ xCqH
^1·.,
No. Структура ( /
5 JI I fl .CCfeH
ίίΊ γΛ Y>
° Λ o
6 T ^cqH
ό i—vp o
7 x°4H
111 iT^F
s XB o
8 3
ιίπ П * П
° \ 0
9 ίίπ 3 П s П лх%н
o= 3 ο
10 ίίπ Jj Ц s H β \
ί £*··*.
No. Структура
17
18
19
20
21 Λ#
22 АбК
NO. Структура
29 p p й /\ й
30
31 Ar ° ο Η ο
32 /Т ° Γθθ2” ίι Tyim 4^0» ο Η ο
33 ΐρ Ο ι^Π Λ'Υ'Λ'γ'Ρ n^J ο » ο
34 J1 yAr ° γ002” iSvVySr’ ο Η ο
No. Структура
35 /А ° г“2 СХХА
36 Ар о |>°<%н Ч AS «А и 0
37 /Ч| о >»2Н οχ6V f
38 др о бхбгг
39 л rV 0 /=0^ 0Χ6Χ
40 Д? 0 Хн G1 °(VACH,H °
41 HfQ о Хн iYrVYrF
No. Структура
42 ο Ah °лн °
43 ArQ ο [Ah ° НзсА)НзН 0
44 |Г% o TT 0 П* ίΥχΛΑ » f
45 ¥4. o πθγψ o Ajh lf\'NVO>z^'N^Y^F °НзсАсНзН °
46 z./· f4YNyX,'4r~~N'J><'F θκ,οΛχ,π °
47 0 Лж f4zNV*°Vs»z^,N^V^F ОНзС^НзН O
48 hAtQ O Ah °F
След изследване на голям брой R4-N-R5 хетероциклени пръстени, беше установено, че трициклените съединения, при които крайните пръстени са по същество копланарни, показват изненадващо най-голяма ширина на каспазната активност в сравнение с ацикличните аналози или други трициклени пръстенови системи, които не са по същества копланарни. Тази копланарност може да бъде постигната, когато средният пръстен от трициклената трипръстенова система е 5- или 6-атомен пръстен, както е при карбазоловия или при фенотиазиновия пръстен.
Освен това, тези копланарни трициклени пръстенови системи, както и бициклени пръстенови системи, като индолова и индолинова, показват по-широка каспазна активност, спрямо тази на съответните съединения, в които В4-М-В5-хетероцикленият пръстен е моноцикличен, както е при пиперидина, пиперазина или морфолина.
Във връзка с това, предпочитаният обект на изобретението представлява съединения с формула I, в която R4-N-R5 е трициклена пръстенова система, имаща 1-6 хетероатома, за предпочитане 1-4 хетероатома, избани от групата на азот, кислород и сяра, при което крайните пръстени от пръстеновата система имат 5-7 атома и средният пръстен има 5 или 6 атома.
Един аспект, съгласно това изпълнение, се отнася до съединение с формула II:
в която X е връзка, -S-, -0-, -СН2 или -NH- и Z, R1, R2 и R3 са както е описано по-горе. Когато X е -СН2, всеки водороден атом от метиленовата група може по избор и независимо един от друг да бъде изместен от -OR, -OH, -SR, защитена OH (като ацилокси), -CN, -NH2, -NHR, N(R)2, -NHCOR, NHCONHR, -NHCON(R)2, - NRCOR, NHCO2R, - CO2R, -CO2H, -COR, -CONHR, -CON(R)2, -S(O)2R, SONH2, -S(O)R, -SO2NHR, -NHS(0)2R, =o, =s, =nnhr, =nnr2, =N-OR, =NNHCOR, =NNHCO2R, -NNHSO2R или -NR, където R e См алифатна група. Когато X e -NH-, Н в ΝΗ може да бъде изместен от алкил, СО(алкил),СО2(алкил) или 8О2(алкил). Предпочитаните групи за R1, R2 и R3 са дадени по-долу
Съединенията, съгласно настоящото изобретение, могат да бъдат получени основно по известни на специалистите в тази област на техниката методи за получаване на аналогични съединение, както е илюстрирано чрез схемите и чрез препаративните примери по-долу.
Схема I
HO^-COgR R3 *?* ^Yy^R z R3
R* z R3
Реагенти (a) R5-N=C=Z; (2) (b) NaOH/THF/H2O;
(c) EDC/DMAP/HOBt; (d) i. перйодинан на Dess-Martin, ii. TFA/DCM.
Схема I по-горе илюстрира пътя на синтезата за получаване на съединенията, когато R4 е водород. Реакция между изоцианат или тиоизоцианат (2) и млечна киселина (1) води до получаването на карбамат (3). Естерната група от (3) се хидролизира, като се използва база или, когато групата е t-бутил, се използва трифлуороцетна киселина за получаване на киселината (4), която след това се съединява с аминоалкохол (5). В зависимост от естеството на R1 и R2, може да се използва аминокетон вместо аминоалкохол, с което се избягва последващия окислителен етап. В случая на флуорметилкетони, в които R1 е CH2F, аминоалкохолът (5) може да бъде получен, съгласно метода на Revesz et al., Tetrahedron Lett., 1994, 35, 9693. И накрая, хидроксилната група в съединение (6) се оксидира и полученото съединение се обработва по подходящ начин в зависимост от естеството на R2. Например, ако продуктът I изисква R2 да бъде карбоксигрупа, тогава R2 в (6) е за предпочитане естер, като крайният етап в схемата е хидролиза.
Когато се излиза от изоцианат или тиоизоцианат (1), те се получават или от търговската мрежа или чрез реакция между амин и фосген или еквивалент на фосгена ( или тиофосен за получаване на тиоизоцианатите) в присъствие на база, като триетиламин. Производното на млечната киселина се намира в търговската мрежа или може да бъди получено от аминокиселина и диазотиращ реагент, като NdNO2.
Схема II:
HO^COgR а r3 ------>
№ R4 b,c * ρ5*Νγ(χτ»2Η
OR3 Z R3 з
Реагенти : (a) CDI/THF; (b) MeOTf/CH2Cl2 ; (с) R4R5NH(8)/THF.
Схема II по-горе илюстрира пътя на синтезата за получаване на съединения I, съгласно изобретението, в които R4 е алкилова група и когато R4 и R5 едновременно образуват пръстен. Реакцията между лактата (2) и 1,Г-карбонилдиимидазол (CDI) води до получаването на имидазолата (7). Метилирането на 7 с метил трифлат, последвано от взаимодействие с амин 8 (виж J. Med. Med., 1996, 39, 982) води до получаването на междинното съединение 3. Схема I илюстрира как 3 може да се превърне в I.
Схема III;
Z R3
9 3
Реагенти : (a) СОС12/СН2С12; (b) 1 /THF.
Една алтернативна синтеза за получаване на съединенията I, съгласно настоящото изобретение, където R4 е алкилова група или R4 и R5 едновременно образуват пръстен, е илюстрана на Схема III по-горе. Взаимодействието на амина 8 с фосген дава междинното w съединение 9 карбамоилхлорид. Взаимодействието на 9 с лактата 1 води до получаването на междинното съединение 3.
Схема IV:
о й8
Реагенти : (a) C13COC(O)C1/THF; (b) R^NH^), NaOH,
BtuNBr.
Схема IV по-горе илюстрира пътя на синтезата за получаване на съединения I, съгласно изобретението, в които R4 е алкилова група и когато R4 и R5 едновременно образуват пръстен. Реакцията между хидроксиестерра 1 и фосген или еквивалент на фосгена, като дифосген или трифосген води до получаването на междинното съединение 3 - хлорформиата.
Съединенията, съгласно настоящото изобретение, са означени като инхибитори на каспазата. Поради това, тези съединения могат да се изследват за техните възможности да инхибират апоптозата, освободена от IL-Ιβ или директно каспазната активност. Тези изследвания дадени по-долу в раздела тестване и са също известни на специалистите в тази област.
Друг обект на изобретението се отнася до състави, включващи съединение с формула I или фармацивтично приемлива негова сол, и фармацевтично приемливи носители.
Фармацевтично приемливите соли на съединенията, съгласно настоящото изобретение, се прилагат в тези състави, като тези соли са за предпочитане производни на неорганични или органични киселини и основи. Такива кисели соли са : ацетат, адипат, алгинат, аспартат, бензоат, бензилсулфонат, бисулфат, бутарат, цитрат, камфорат, камфорсулфонат, циклопентан пропионат, диклюконат, додецилсулфат, етансулфонат, фумарат, глюкохептаноат, глицерофосфат, хемисулфат, хептаноат, хексаноат, хидрохлорид, хидробромид, хидройодид, 2-хидроксиетансулфонат, лактат, малеат, метансулфонат, 2-нафталинсулфонат, никотинат, оксалат, памоат, пектинат, персулфат, 3-фенилпропионат, пикрат, пивалат, пропионат, сукцинат, тартрат, тиоцианат, тозилат и ундеканат. Основните соли включват : соли на алкалните метали, като натриева и калиева сол, соли на алкалоземните метали, като калциеви и магнезиеви соли, соли на органични бази, като дициклохексиламин, М-метил-О-глюкамин и соли с аминокиселини, като аргинин, лизин и т. н.
Също така, базичните азотсъдържащи групи могат да се кватернизират с помощта на реагенти като низши алкилхалиди, като метил, етил, пропил и бутилхлориди, бромиди и йодиди; диалкилсулфати, като диметил, диетил, дибутил и диамилсулфати, халиди с дълга верига, като децил, лаурил, меристил и стеарилхлориди, бромиди и йодиди, аралкилхалиди, като бензил и фенетилбромиди и др. По този начин се получават водо- или маслоразтворими или диспергируеми продукти.
Съединенията, използваеми в съставите и методите, съгласно настоящото изобретение, могат също така да бъдат модифицирани чрез допълнителни подходящи действия за да се засилят селективните биологични качества. Такива модификации са известни на специалистите в областта и се състоят в увеличаване биопроникването в дадена биосистема (напр. кръв, лимфна система, централна нервна система), повишаване поносимостта при орално приложение, повишаване разтворимостта при инжекционно въвеждане, промяна на метаболизма и скоростта на отделяне.
Фармацевтично приемливите носители, които могат да се използват при тези състави включват, но без да се ограничават само до тях : йонообменни вещества, алуминий, алуминиев стеарат, лецитин, серумни протеини, човешки серумалбумин, буфери, като фосфати, глицини, сорбинова киселина, калиев сорбат, смес от частични глицериди на наситени растителни мастни киселини, вода, соли или електролити, като калиев сулфат, кисел натриев или калиев фосфат, натриев хлорид, цинкови соли, колоидален силиций, магнезиев трисиликат, поливинилпиролидон, субстанция на основата на целулоза, полиетиленгликол, натриева сол на карбоксиметилцелулозата, полиакрилати, парафини, полиетиленполиоксипропилен блоксъполимери, полиетиленгликол и ланолин.
Съгласно един предпочитан вариант на изпълнение, съставите, съгласно настоящото изобретение, са изготвени за фармацевтично въвеждане в млекопитаещи, за предпочитане хора.
Такива фармацевтични състави , съгласно изобретението, могат да бъдат въвеждане орално, парентерално, чрез инхалаторен спрей, локално, ректално, назално, букално, вагинално или чрез имплантирани резервуари. Терминът “парентерално” се използва в описанието, като включва подкожни, интравенозни, мускулни, интраартикуларни, интрасинувиални, интрастернални, интратекални, инрахепатични, интралезионални и интракранални инжекционни и инфузионни техники. За предпочитане е съставите да се въвеждат орално или интравенозно.
Стерилните инжекционни форми на база съставите, съгласно изобретението, могат да бъдат водни или маслени суспензии. Тези суспензии могат да бъдат получени по известни техники, като се използват подходящи диспергиращи и омокрящи агенти. Стерилните инжекционни състави могат да бъдат също стерилни
инжекционни разтвори или суспензии в нейоногенни парентерално приемливи разредители и разтворители, например разтвор в 1,3бутандиол. Приемливите носители и разтворители могат да бъдат вода, разтвор на Ringer и изотоничен разтвор на натриев хлорид. Допълнително могат да се използват стерилни нелетливи конвенционални масла, като разтворители или суспензионна среда. За целта, всяко меко нелетливо масло може да бъде използвано, включително синтетични моно- и диглицериди. Мастни киселини, като олеинова киселина, както и нейните глицериди са приложими при парентералните инжекции, каквито са натуралните фармацевтичноприемливи масла, като маслинено масло или рициново масло, по-специално техните полиоксиетилирани производни. Тези маслени разтвори или суспензии могат също така да съдържат разтворител или диспергатор, представляващ алкохол с дълга верига, като карбоксиметилцелулоза или подобни диспергатори, които обикновено се използват при приготвянето на фармацевтично приемливите дозажни форми, включително емулсии и суспензии. Други обикновено използвани диспергатори, като Tweens, Spans и други емулгатори и биологичнопоносими активатори, които обикновено се използват при приготвянето на фармацевтично приемливите твърди, течни или други дозажни форми, могат да се прилагат за целите на производството на лекарствените форми.
Фармацевтичните състави, съгласно изобретението, могат да бъдат въвеждани орално чрез орално приемливи дозажни форми, включващи, но без да се ограничават само до тях : калсули, таблети, водни суспензии или разтвори. В случая на таблети за орално приложение, носителите, които обикновено се използват включват лактоза и царевично нишесте. Лубрикаторите, като магнезиев стеарат също се добавят обикновено. При орално въвеждане на капсули, разредителите, които са подходящи са лактоза и сухо нишесте. Когато се препоръчват водни суспензии за орално приложение, активните инградиенти се комбинират с емулгатори и суспендиращи средства. По желание се добавят също подходящи подсладители, ароматизатори и оцветители.
Като вариант, фармацевтичният състав, съгласно настоящото изобретение, може да бъде въведен под формата на супозитории за ректално приложение. Те могат да се приготвят чрез смесване на агента с подходящ недразнещ ексципиент, който е твърд при стайна температура, но течен при температурата в ануса, поради което ще се стопи там, освобождавайки лекарството. Такива вещества санапример : какаово масло, пчелен восък и полиетиленгликоли.
Фармацевтичните състави, съгласно изобретението, могат да w се въвеждат също така локално, по-специално когато обектът за третиране включва области на повърхността на тялото или органи, лесно достъпни за локално прилагане, като при заболявания на очите, кожата или крайните части на гастроинтестиналния тракт. Подходящите състави за локално приложение бързо се приготвят за прилагане върху тези повърхности и органи.
Локалното приложение за крайните части на гастроинтестиналния тракт можеда бъде осъществено посредством състави на ректални супозитории (виж по-горе) или състави за клизми. Локалните трансдермални пластири могат да се използват също така.
Фармацевтичните състави за локално приложение могат да се приготвят под формата на подходящи мехлеми, съдържащи активния компонент, суспендиран или разтворен в един или повече носители. Носители за съставите за локално приложение под формата на мехлеми включват, без да се ограничават само до тях : минерално масло, течен вазелин, бял вазелин, пропиленгликол, W полиоксиетиленово, полиоксипропиленово съединение, емулгиращ восък и вода. Като вариант, тези фармацевтични състави могат да бъдат приготвени под формата на лосиони или кремове, съдържащи активното съединение, разтворено или суспендирано в един или повезе фармацевтичноприемливи носители. Тези носители включват, без да се ограничават само до тях : минерално масло, сорбитан моностеарат, полисорбат 60, цетилестерен восък, цетарилов алкохол, 2-октилдодеканол, бензилов алкохол и вода.
За офталмологично приложение, фармацевтичният състав може да бъде приготвен като микронизирани суспензии в изотоничен, юстиран по отношение на pH стерилен солеви разтвор или, за предпочитане, като разтвор в изотоничен, юстиран по отношение на pH стерилен солеви състав, с или без консерванти, като бензалкониев хлорид. Като алтернатива, съставите за офталмологично приложение могат да бъдат приготвени под формата на мехлем на вазелинова основа.
Фармацевтичните състави, съгласно настоящото изобретение, могат да бъдат въведени чрез назални аерозорни или инхалаторни форми. Такива състави се приготвят, съгласно техниките, които са добре познати на специалистите в областта на фармацията като солни разтвори, използвайки бензилов алкохол или други подходящи консерванти, абсорбционни промотори за засилване бионаличността, флуорирани въглеводороди, и/или други конвенционални разтварящи или диспергиращи агенти.
Описаните по-горе състави по-специално се прилагат в терапевтичната практика при заболявания, свързани с IL** медитиране, апоптозно медитирани заболявания, възпалителни процеси, автоимунни заболявания, заболявания, свързани с деструкция на костите, пролиферативни неразположения, инфекции, дегенеративни смущения, заболявания, свързани с клетъчна смърт, състояния, свързани с приемане на излишъци от алкохол, медиаторни вирусни заболявания, увеити, възпалителен перитонит, остеоартрит, панкреатит, астма, синдрома на дихателен дистрес у възрастни, гломерулонефрит, ревматоиден артрит, хроничен лупус еритроматозис (червена вълчанка), системен лупус еритроматозис, склеродерма, хроничен тироидит, заболяване на Graves, автоимунен гастрит, диабет, автоимунна хемолитична анемия, автоимунна неутропения, тромбоцитопения, хроничен активен хепатит, миастения, бременност, възпалителни заболявания на стомашно-чревния тракт, заболяване на Crohn, псориазис, алергичен дерматит, краста, заболявания, свързани с приемането на трансплантати, отхвърляне на трансплатнирани органи, остеопороза, левкемия и свързаните с нея неразположения, миелодиспластичен синдром, заболявания на костите, свързани с множествена миелома, остра миелогенозна левкемия, метастазна меланома, сарком на Kaposi, мултиплена миелома, хеморагичен шок, сепсис, септичен шок, изгаряния, бактериална дизентерия, болестта на Alzheimer, болест на Parkinson, болест на Huntington, болест на Kennedy, церебрална исхемия, епилепсия, исхемия на миокарда, остри и хронични сърдечни заболявания, инфаркт на миокарда, застойни сърдечни заболявания, атеросклероза, коронарен артериален трансплантантен байпас, гръбначно-мускулна атрофия, амиотрофична латерална склероза, мултиплена скрлероза, енцефалити свързани със HIV, възрастови изменения, алопеция, увреждания, дължащи се на удар, улцеративен колит, травматични мозъчни увреждания, увреждания на гръбначния мозък, хепатит-В, хепатит-С, хепатит-G, жълта треска, треска денге, японски енцефалит, различни форми на чернодробни заболявания, бъбречни заболявания, дегенеративни бъбречни заболявания, заболявания, свързани с Н-инфекции на пилора във връзка с гастрити и дуоденални язви, HIV-инфекции, туберкулоза и менингит.
W Съединенията и съставите се използват също така за лечение на състояния, свързани с коронарен артериален трансплантантен байпас, както и за имунотерапия при различни форми на карцином.
Количествата на компонентите, присъстващи в посочените по-горе състави, трябва да бъдат достатъчни да предизвикат забележимо намаляване на силата на страданието или на каспазната активност и/или клетъчната апоптоза, измерени по някой от методите на изследване, дадени в примерите.
Съединенията, съгласно изобретението, могат да се прилагат също така за клетъчна защита, каквато е необходима при органната трансплантация или за защита на кръвните продукти. Подобно приложение за инхибиторите на каспазата е описано в (Schierle et al., Nature Medicine, 1999. 5, 97). Методът включва третиране на клетките и тъканите, за да бъдат защитени, с разтвор, съдържащ инхибитор на каспазата. Количеството на инхибитора на каспазата, от които има нужда, зависят от ефективността на инхибитора за даден клетъчен тип и от продължителността на времето, необходимо за защита на клетките от апоптозна клетъчна смърт.
Съгласно друг аспект, съгласно настоящото изобретение, съставите могат да включват допълнително други терапевтични средства. Такива средства са, без да има ограничение само до тях, тромболитични средства, като клетъчен плазминогенен активатор и стрептокиназа. При използване на втори агент, последният се въвежда или под формата на самостоятелна дозажна форма, или като част от самостоятелна дозажна форма, съдържаща съединение или състав, съгласно настоящото изобретение.
Естествено, специфичната доза и режимът на лечение за различните пациенти зависи от много различни фактори, включително активността на конкретното съединение, което се използва, възрастта, телесното тегло, общото здравно състояние, полът, режим на хранене, моментът на въвеждане, скоростта на отделяне, комбинацията от лекарства, преценката на лекуващия лекар и тежестта на конкретното заболяване, подлежащо на лечение. Количеството на активния инградиент, също така, зависи от самото съединение и другите терапевтични агенти, ако присъстват в състава.
В предпочитания аспект, настоящото изобретение се отнася до използване на съединенията и съставите за третиране на млекопитаещи е едно от гореизброените заболявания, състоящо се във въвеждане в млекопитаещото на фармацевтичноприемлив състав, описан по-горе. При това приложение, ако пациентът е приел друто терапевтично средство или инхибитор на каспазата, възможно е едновременното приемане със съединението, съгласно изобретението, в единична дозажна форма, или в самостоятелни дозажни форми. Когато се въвежда под формата на отделни дозажни форми, другият инхибитор на каспазата може да бъде въведен предварително, по същото време, или след приемането на фармацевтично приемливия състав, включващ съединението, съгласно изобретението.
За да може да бъде по-добре разбрано, изобретението се пояснява със следните примери за получаване и тестващи примери. Тези примери са само за илюстриране и не ограничават обхвата на изобретението по никакъв начин.
Примири за синтез :
Следните примери се отнасят до методите за синтеза на отделни съединения, съгласно настоящото изобретение.
Пример 1:
Г38/к1-флуор-4-оксо-3-[(8)-3-метил-2-(карбазол-карбамоилоксибутириламино1-пентанова киселина
Метод А:
Трет. бутил естер на (8)-2-(хлоркарбамоилокси)-3-метилбутановата киселина
Към разтвор на дифосген (4,5 5g) в THF (34 ml) се добавя разтвор на трет. бутилов естер на (8)-2-хидрокси-3-метилбутановата киселина (41109 g) (за метода на синтез виж Tetrahedron. Lett., 1993, 7409 ) и пиридин (1,82 g) в THF (34 ml) на капки в продължение на 25 минути. Получената смес се оставя да се затопли при стайна температура в продължение на 4 часа, след което се филтрува през целит и филтратът се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се разтваря повторно в диетилетер (200 ml) и отново се фелтрува през целит. Филтратът се концентрира при понижено налягане до получаване на съединението от подзаглавието под формата на бледо жълто масло (5,27 g):
'Н NMR (400 MHz, CDC13) δ 0,98-1,10 (6Н, m), 1,55 (9Н, s), 2,30 (1Н, m), 4,83 (1Н, m).
Метод В:
Трет, бутил естер на (8)-3-метил-2-(карбазол-карбамоилокси)бутановата киселина
Към разтвор на карбазол (15,15 g) в дихлорметан (180 ml) и THF (142 g) при се добавя гранулиран натриев хидроксид (5,45 g) и след това-тетрабутиламониев бромид (2,93 g), Получената смес се разбърква в продължение на 30 минути, след което се добявя на капки в продължение на 55 минути разтвор на хлорформиат (21,41g) в THF (81 ml) и се оставя да се затопли до стайна температура в продължение на една нощ. След това се добавят дихлорметан (1L) и вода (350 ml) и органичната фаза се отстранява. Следва екстрахиране на водната фаза с дихлорметан (2 х 250 ml) и комбинираната органична фаза се промива с вода (200 ml), после със солеви разтвор (200 ml), суши се (магнезиев сулфат), филтрува се и се концентрира. Остатъкът се пречиства чрез флаш-хроматография (0-5% етилацетат/хексан) до получаване на съединението от подзаглавието под формата на безцветно масло (29,3 g):
lH NMR (400 MHz, CDC13) δ 1,15-1,23 (6Н, m), 1,55 (9Н, s), 2,52 (1Н, m), 5,27 (1H, d), 7,36-7,57 (4H, m), 8,03 (2H, d), 8,47 (2H, d).
Метод C :
(8)-3-метил-2-(карбазол-карбамоилокси)-бутановата киселина
Трифлуороцетна киселина (84 ml) се добавя на капки при разбаркване към студен разтвор на трет. бутил естер на (8)-3-метил2-(карбазол-карбамоилокси)-бутановата киселина (300 ml). Сместа се разбърква при 0(,С в продължение на 2 часа, след това при стайна температура в продължение на 1 час. Сместа се концентрира при понижено налягане, след което остатъкът се разтваря в сух DCM и разтворителят се отстранява отнова при понижено налягане. Процесът се повтаря неколкократно за отстраняване на остатъците от трифлуороцетна киселина. По този начин се получава киселината под формата на смолообразно зелено нещество (3,30 g):
Ή NMR (400 MHz, CDC13) δ 1,12-1,37 (6H, m), 2,70 (1Н, m), 5,47 (1H, m), 7,32-7,56 (4H, m), 8,00 (2H, d), 8,37 (2H, d).
Метод D :
Трет, бутил естер на [3S/R, 48/Р]-5-флуор-4-хидрокси-3-((8)-3метил-2-(карбазол)-карбамоилокси-бутириламидо)-пентановата киселина
Разбърквана смес от (8)-3-метил-2-(карбазол)-карбамоилоксибутанова киселина (3,30 g), трет. бутилестер на 3-амино-5-флуор-4хидрокси-пентановата киселина (2,42 g), HOBt (1,58 g), DMAP (1,49 g) и THF (80 ml) се охлажда до 0°C и се добавя EDC (2,24 g). Оставя се сместа да се затопли до стайна температура в продължение на 16 часа и след това се концентрира при понижено налягане. Остаткът се пречиства чрез флаш-хроматография (15-45% етилацетат/хексан) до получаване на съединението от подзаглавието под формата на бяла пяна (4,60 g):
Ή NMR (400 MHz, CDC13) δ 1,09-1,50 (15H, m), 2,49-2,80 (ЗН, m), 3,20-3,62 (1H, m), 3,92-4,58 (4H, m), 5,32-5,42 (1H, d), 6,86 (1H, brm), 7,40-7,55 (4H, m), 8,02 (2H, d), 8,35 (2H, m); ,9F NMR (376 MHz, CDCE) -229,6, -229,7, -230,8, -231,4.
Метод E :
Трет. бутил естер на [38/Р1-5-флуор-4-оксо-3-[(8)-3-метил-2(карбазол-карбамоилокси-бутириламино)-пентановата киселина
Разбъркван разтвор на трет. бутилестер на [3S/R, 4S/RJ-5флуор-4-хидрокси-3-((8)-3-метил-2-(карбазол)-карбамоилоксибутириламидо)-пентановата киселина (4,60 g) в безводен DCM (100 ml) се обработва с 1, 1, 1-триоцетокси-1, 1-дихидро-1, 2бензиодоксол-3 (1Н)-он (4,68 g) при 0°С. Получената смес се оставя при тази температура в продължение на 2 часа, разрежда се с етилацетат и след това се изсипва в смес 1 : 1 наситен воден разтвор на натриев бикарбонат и наситен воден разтвор на тиосулфат. Органичната утайка се отстранява, а водният разтвор се екстрахира повторно с етилацетат. Сборният органичен екстракт се суши (магнезиев сулфат) и се концентрира. Остаткът се пречиства чрез флаш-хроматография (10-40% етилацетат/хексан) до получаване на съединението от подзаглавието под формата на бяло твърдо вещество (3,96 g) :
*Н NMR (400 MHz, CDC13) δ 1,85 (4,5Н, s), 1,94-1,31 (6Н, m), 1,36 (4,5Н, s), 2,59 (1Н, m), 2,70-3,11 (2H, m), 4,91-5,31 (ЗН, m), 5,40-5,49 (1H, m), 7,25 (1H, m), 7,25 (1H, brs), 7,42 (2H, m), 7,53 (2H, m), 8,04 (2H, m), 8,35 (2H, m); ,9F NMR (376 MHz, CDC13) -232,0, -232,1.
Пример 1A:
[38/К1-5-флуор-4-оксо-3-[(8)-3-метил-2-(карбазол)-карбамоилоксибутириламино!-пентанова киселина
Това съединение се получава, като се използва метод, подобен на описания по-горе Метод С. Изолира се продуктпод формата на бяло твърдо вещество (88% последния етап):
IR (твърдо) 1721,2, 1695,6, 1664,9, 1449,8, 1378,1, 1198,9, 1940,1,
758.5 cm'1; !Н NMR (400 MHz, de-DMSO) δ 1,10 (6Н, brm), 2,41 (1Н, m), 2,54-3,04 (2H, m), 4,31-4,82 (1,6H, m, CH2F), 5,10-5,41 (2,4H, m), 7,45 (2H, m), 7,57 (2H, m), 8,22 (2H, m), 8,30 (2H, m), 8,518,99 (1H, brm), 12,60 (1H, brs), 13C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 19,0,
19,1, 19,3, 19,4, 30,4, 30,5, 30,6, 32,9, 43,5, 34,7, 47,3, 47,4, 52,0, 52,3,
80,4, 80,8, 83,2, 83,4, 83,4, 85,1, 85,2, 116,2, 116,3, 124,1, 125,7, 125,9, 137,9, 151,7, 151,9, 152,0, 168,8, 169,0, 169,2, 172,0, 173,1,
173,2, 202,2, 202,4, 202,5, 202,6; 19F NMR (376 MHz, cU-DMSO) -
226.6 (t), -226,8 (t), -230,5 (t), 230,9 (t), 232,9 (t), 233,0 (t); MS (ESI+ve) 443(M+H).
Пример 2:
[35/Е1-5-флуор-4-оксо-3-[(5)-3-метил-2-(3-хлоркарбазол)карбамоилокси-бутириламино]-пентанова киселина
Това съединение се получава по технологията описана в методи А-Е. Продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество (99% последен етап). IR (твърдо) 1721,2, 1690,6, 1664,9,
1444,7, 1367,9, 1209,1, 1940,1, cm1; Ή NMR (400 MHz, de-DMSO) δ 1,02-1,13 (6H, m), 2,40 (1H, m), 2,50-2,99 (2H, m), 4,30-4,85 (1,6H, m), 5,09-5,48 (2,4H, m), 7,48 (1H, m), 7,56-7,66 (2H, m), 8,20-8,32 (3H, m),
8,39 (1H, m), 8,55-8,99 (1H, bnn), 12,50 (1H, brs); I3C NMR (100 MHz, ф-DMSO) δ 18,1, 18,9, 19,1, 30,4, 30,5, 33,0, 34,5, 34,7, 47,4, 52,0,
52.3, 80,6, 80,9, 81,1, 83,4, 83,43, 85,1, 85,2, 103,8, 104,0, 117,0,
119.3, 121,3, 122,3, 124,3, 124,7, 127,2, 127,4, 127,9, 128,5, 136,5,
138.4, 151,5, 151,6, 151,7, 168,7, 168,9, 169,0, 169,1, 172,0, 172,1,
173,1, 173,2, 202,2, 202,4, 202,44, 202,8; (C); 19F NMR (376 MHz, φDMSO) -226,6 (t), -226,8 (t), -230,4 (t), -230,9 (t), -231,0 (t), -232,8 (t), -232,84, (t), -232,9 (t); MS (ESI+ve) 447(M+H).
Пример 3:
(38/К1-5-Флуор-4-оксо-3-[(8)-3-метил-2-(3,6-дихлоркарбазол)карбамоилокси-бутириламино]-пентанова киселина
Това съединение се получава по технологията описана в методи А-Е. Продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество (99% последен етап). IR (твърдо) 1721,2, 1669,7, 1470,3,
1434,4, 1367,9, 1209,1, 1075,9, 1945,2, cm1; Ή NMR (400 MHz, deDMSO) δ 0,98-1,14 (6H, m), 2,30-2,50 (1H, m), 2,50-3,01 (2H, m), 4,294,84 (1,5H, m), 5,09-5,41 (2,5H, m), 7,66 (2H, m), 8,19-8,29 (2H, m),
8,45 (2H, m), 8,57-8,99 (1H, brm), 12,60 (1H, br, OH); 13C NMR (100 MHz, d^-DMSO) δ 15,5, 19,1, 19,2, 30,4, 30,45, 30,6, 33,0, 34,5, 34,7,
47,3, 47,5, 52,0, 52,3, 80,8, 81,1, 81,2, 83,4, 84,43, 85,1, 85,2, 117,8,
121,1, 126,3, 128,4, 136,9, 151,2, 151,4, 168,6, 168,8, 168,9, 168,95, 172,0,172,04, 173,1, 173,14,202,2,202,3, 202,4,202,6; 19F NMR (376 MHz, de-DMSO) -226,6 (t), -226,8 (t), -230,4 (t), -230,8 (t), -232,8 (t), -232,9 (t); MS (ESI+ve) 511(M+H).
Пример 4: 138/^<1-5-Флуор-4-оксо-3-[(8)-3-метил-2-(2-хлоркарбазол)карбамоилокси-бутириламино!-пентанова киселина
Метод F :
’ -хлор-2 -нитробифенил
а
Към разтвор на 2-бромнитробензол (646 mg) в THF (17 ml) в азотна атмосфера се добавя паладиев тетракис(трифенилфосфин) (0) (900 mg). Получената смес се разбърква при стайна температура в продължение на 20 минути, след което се добавя разтвор на 4-хлорфенилборна киселина (1,0 g) в етанол (17 ml) и полученат смес се разбърква при стайна температура в продължение на 1 час. След това се добавя 2М натриев карбонат (17 ml) и реакцията протича при загряване на обратен хладник в продължение на 2 часа. След това сместа се оставя да се охлади и се концентрира при понижено налягане. Остатъкът след това се разтваря в етилацетат (100 ml) и водният слой се отстранява. Органичната фаза се промива със солеви разтвор (20 ml), суши се (магнезиев сулфат), филтрува се и се концентрира. Остатъкът се пречиства чрез флаш-хроматография (ΟΙ 0% етилацетат/хексан) до получаване на съединението от подзаглавието под формата на жълто твърдо вещество (646 mg): Ή NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,24-7,31 (2H, m), 7,41-7,47 (ЗН, m), 7,52 (1Н, m), 7,65 (1H, m), 7,90 (1H, d).
Метод G :
2-хлоркарбазол
Смес от 4’-хлор-2-нитробифенил (640 mg) и триетил фосфит (1,9 ml) се нагрява при 150°С в продължение на 3 часа. След това сместа се оставя да се охлади и се пречиства чрез флашхроматография (5-10% етилацетат/хексан) до получаване на съединението от подзаглавието под формата на бяло твърдо вещество (382 mg) :
'Н NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,12-7,23 (2Н, m), 2,40 (1Н, m), 7,467,54 (2H,m), 8,12 (2H, d).
Пример 4: [38/Н1-5-флуор-4-оксо-3-[(5)-3-метил-2-(2-хлоркарбазол)карбамоилокси-бутириламино]-пентанова киселина
Това съединение се получава по технологията, описана в методи А-Е. Продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество (99% последен етап). IR (твърдо) 1731,4, 1695,6, 1664,9,
1424.2, 1367,9, 1326,9, 1193,7, 1045,2, cm’’; ’Н NMR (400 MHz, d6DMSO) δ 1,58-1,70 (6H, m), 2,85-3,10 (1H, m), 3,10-3,54 (2H, m), 4,85-
5,39 (1,4H, m), 5,65-5,98 (2,6H, m), 7,94-8,20 (3H, m), 8,73-8,90 (4H, m), 9,10-9,56 (1H, brm), 13,2 (1H, br); 13C NMR (100 MHz, cU-DMSO) δ 17,7, 17,9, 19,0, 19,1, 19,2, 30,4, 30,5, 33,0, 34,5, 34,7, 52,0, 52,3,
80,8, 80,9, 81,1, 83,4, 84,43, 85,1, 85,2, 104,0, 117,1, 121,0, 122,1,
124.2, 124,4, 124,6, 124,8, 129,0, 132,0, 138,2, 138,4, 151,6, 151,61,
168,7, 168,9, 169,0, 172,0, 172,05, 202,4, 202,42, 202,6; 19F NMR (376 MHz, d6-DMSO) -225,99 (t), -226,2 (t), -229,8 (t), -230,3 (t), -232,3 (t), -232,4 (t); MS (ESI+ve) 477(M+H).
Пример 5:
[35/Р]-5-флуор-4-оксо-3-[(8)-3-метил-2-(2,3-дихлоркарбазол)карбамоилокси-бутириламино]-пентанова киселина
Това съединение се получава по технологията, описана в методи А-Е. 2,3-Дихлоркарбазолът по метод, подобен на този описан в методи F и G. Продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество (98% последен етап). IR (твърдо) 1721,2, 1695,7,
1434,4, 1367,9, 1204,0, 1188,6, 1045,2, cm ’; ’Н NMR (400 MHz, tV DMSO) δ 1,04-1,14 (6Η, m), 2,29-2,48 (1H, m), 2,53-3,00 (2H, m), 4,30
4,84 (1,7H, m), 5,09-5,41 (2,ЗН, m), 7,49 (1Н, m), 7,63 (1H, m), 8,20-
8,33 (2H, m), 8,42-8,49 (1H, m), 8,62(1H, m), 8,80-9,00 (1H, brm), 12,5 (1H, br); ,3C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 17,7, 17,9, 19,0, 19,1,
30,5, 33,0, 34,5, 34,7, 47,5, 52,0, 52,3, 80,8, 81,0, 81,2, 83,4, 85,1, 85,2,
116.3, 117,9, 121,5, 122,4, 124,1, 124,6, 126,1, 126,6, 129,0, 129,7,
136,8, 138,5, 151,4, 151,45, 168,6, 168,9, 172,0, 172,03, 173,1, 202,2,
202.3, 202,4, 202,5; l9F NMR (376 MHz, de-DMSO) -226,6 (t), -226,8 (t), -230,3 (t), -230,8 (t), -232,8 (t), -232,9 (t); MS (ESI+ve) 513 (M+H).
Пример 6:
[38/И]-5-флуор-4-окто-3-[(3)-3-метил-2-(2-три(Ьлуор.метил)карбазол-карбамоилокси-бутириламино]-пентанова киселина
Това съединение се получава по технологията, описана в методи А-Е. 2-Трифлуорметилкарбазолът по метод, подобен на този описан в методи F и G. Продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество (85% последен етап). IR (твърдо) 1731,4, 1695,6,
1695,7, 1434,4, 1321,8, 1198,9, 1122,1, 1065,7 cm'1; *Н NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 1,06-1,15 (1,6Н, m), 2,42 (1Н, m), 2,50-3,01 (2H, m), 4,29-4,83 (1,6H, m), 5,08-5,42 (2,4H, m), 7,53 (1H, m), 7,68 (1H,
m), 7,83(1H, m), 8,29-8,40 (2H, m), 8,48 (1H, m), 8,64(1H, m), 8,809,01 (1H, m), 12,60 (1H, brs); 13C NMR (100 MHz, (k-DMSO) δ 17,4,
17,6, 19,0, 19,1, 30,4, 31,0, 32,9, 34,5, 34,7, 52,0, 52,3, 80,7, 80,9, 81,1,
81.2, 83,4, 85,1, 113,3, 116,3, 120,7, 120,9, 123,6, 124,4, 126,2, 127,2, 127,5, 127,8, 128,1, 128,9, 137,2, 138,9, 151,6, 168,6, 169,0, 172,0,
202.2, 202,3, 202,4, 202,6; 19F NMR (376 MHz, ds-DMSO) -60,4 (s) -226,6 (t), -226,8 (t), -229,9 (t), -230,4 (t), -231,0 (t), -232,9 (t), -233,0 (t); MS (ESI+ve)511 (M+H).
Пример 7:
[38^]-5-флуор-4-оксо-3-[(5)-3-метил-2-(2-метил-карбазол)карбамоилокси-бутириламино]-пентанова киселина
Това съединение се получава по технологията, описана в методи А-Е. Продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество (90% последен етап). IR (твърдо) 1726,3, 1700,7, 1664,9,
1552,2, 1460,0, 1552,2, 1460,0, 1367,9, 1332,0, 1209,1, 1193,7, 1040,1 cm'1; ’Н NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 1,01-1,19 (6Н, m), 2,30-3,00 (6Н, m), 4,29-4,85 (1,5Н, m), 5,11-5,52 (2,5Н, m), 7,29 (1Н, m), 7,45 (1H, m), 7,55 (1H, m), 8,05-8,18 (3H, m), 8,27 (1H, m), 8,50-9,10 (1H, bnn), 12,50 (1H, brs); 13C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 17,7, 18,0, 19,0, 19,1, 19,2, 22,2, 30,4, 30,5, 30,6, 30,6, 33,0, 34,5, 34,7, 47,4, 52,0,
52.3, 52,7, 80,3, 80,6, 80,7, 80,8, 83,2, 83,4, 83,5, 85,2, 85,2, 103,8,
104,0, 116,2, 116,3, 116,6 120,3, 120,4, 123,4, 124,0, 125,2, 125,8,
127.3, 137,5, 137,9, 138,2, 151,7, 151,9, 151,9, 168,8, 169,0, 169,2,
169,2, 172,0, 172,1, 173,1, 173,2, 202,3, 202,4, 202,5, 202,6; 19F NMR (376 MHz, сЦ-DMSO) -226,55 (t), -226,76 (t), -230,43 (t), -230,89(t), -232,84 (t), -232,97 (t);
Пример 8:
[3 S/Rl -5 -флу ор-4-оксо-З - [(S)-3 -метил-2-(карбазол-карбамоилокси)бутириламино!-пентанова киселина
Това съединение се получава по технологията, описана в методи А-Е. Хлорформиатът се получава от трет.бутилестер на (S)2-хидроксибутановата киселина, както е описано в метод А. Продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество (90% последен етап). IR (твърдо) 1716,1, 1654,6, 1449,8, 1372,9, 1326,9, 1204,0, 1050,4, 1029,9 cm'1; ’Н NMR (400 MHz, d^-DMSO) δ 1,03-1,12 (ЗН, m), 1,96-2,15 (2Н, m), 2,50-3,01 (2Н, m), 4,31-4,82 (1,8Н, m),
5,11-5,43 (2Н, m), 7,45 (2Н, m), 7,59 (2Н, m), 8,18-8,32 (4Н, m), 8,589,05 (1Н, brm), 12,60 (1Η, brs); ,3C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ 9,8, 9,9, 9,94, 24,9, 25,1, 26,2, 33,0, 34,6, 34,7, 47,4, 52,0, 52,3, 77,1, 77,3,
77,4, 77,45, 83,4, 83,5, 85,2, 85,22, 116,3, 120,6, 124,0, 125,7, 127,9,
137,9, 151,5, 151,7, 169,5, 169,8, 172,0, 172,1, 173,1, 202,3, 202,4, 202,5, 202,6; i9F NMR (376 MHz, t^-DMSO) -226,6 (t), -226,8 (t), -230,4 (t), -231,0 (t), -232,9 (t), -233,0 (t);
Пример 9:
[35/К1-5-флуор-4-оксо-3-((8)-3,3-диметил-2-(карбазолкарбамоилокси)-бутириламино]-пентанова киселина
Това съединение се получава по технологията, описана в методи А-Е. Хлорформиатът се получава от трет.бутилестер на (S)2-хидрокси-3,3-диметилбутановата киселина (методът е описан в Tetrahedron. Lett.,( 1993), 7409), както е описано в метод А. Продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество (94% последен етап). IR (твърдо) 1782,7, 1721,2, 1526,6, 1444,7, 1373,0, 1332,0, 1301,3, 1198,9, 117,0, 1040,1, 753,3 cm’1; *Н NMR (400 MHz, cU-DMSO) δ 1,15 (9Н, s), 2,50-2,98 (2Н, m), 4,29-4,88 (1,5Н, m), 4,97-
5,45 (2,5Н, m), 7,45 (2Н, m), 7,59 (2Н, m), 8,23 (2Н, m), 8,33 (2Н, m), 8,50-8,97 (1Н, brm), 12,50 (1Η, brs); 13C NMR (100 MHz, d6-DMSO) δ
27.3, 33,4, 34,5, 34,6, 34,7, 34,8, 45,1, 52,5, 52,9, 83,5, 83,9, 84,0, 84,1,
84.3, 85,7, 85,73, 116,7, 116,8, 121,2, 124,6, 124,64, 126,2, 128,4,
1387,4, 152,2, 152,4, 152,5, 168,4, 168,7, 168,8, 168,9, 172,6, 172,65,
173,6, 202,6, 202,8, 202,9, 203,0; 19F NMR (376 MHz, сЦ-DMSO) -226,5 (t), -226,6 (t), -230,9 (t), -231,5 (t), -232,9 (t), -233,0 (t); MS (ESI+ve) 457 (M+H).
Пример 10: 135Ж]-5-флуор-4-оксо-3-[(5)-2-(2-хлоркарбазол-карбамоилокси)бутириламино1-пентанова киселина
Това съединение се получава по технологията, описана в методи А-Е. Хлорформиатът се получава от трет.бутилестер на (S)2-хидроксибутановата киселина, както е описано в метод А. 2-Хлоркарбазонът се получава, както е описано в методи F-G. Продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество (77% последен етап). IR (твърдо) 1733,03, 1699,89, 1662,97, 1448,18, 1423,38, 1369,84, 1332,48, 1215,16, 1199,62, 1052,26, 1033,17, 764,57, 747,53, 720,08, 651,85 cm’1; ’Н NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 1,06-1,10 (ЗН, s), 2,01-2,09 (2Н, m), 2,53-2,98 (2Н, m), 4,34-4,78 (1,6Н, m), 5,14-
5,39 (2,4Н, m), 7,45-7,61 (ЗН, m), 8,24-8,31 (4Н, m), 8,63-8,99 (1Н, m), 12,50 (1H, brs); l3C NMR (100 MHz, ck-DMSO) δ 9,7, 23,7, 25,0,
31.3, 34,6, 34,8, 52,0, 52,3, 77,4, 77,6, 83,4, 85,2, 110,9, 111,6, 116,2,
116.3, 119,0, 119,4 120,7, 120,9, 121,9, 122,1, 124,2, 124,3, 124,6, 124,8, 126,3, 128,3, 130,2, 132,0, 138,1, 138,4, 151,3, 169,6, 172,1 19F
NMR (376 MHz, d6-DMSO) -226,6 (t), -226,83 (t), -230,34(t), -231,88 (t), -232,84 (t), -232,99 (t).
/***·
Пример 11:
[35Л<1-5-флуор-4-оксо-3-[(Б)-3-метил-2-(индол)-карбамоилоксибутириламино]-пентанова киселина
Това съединение се получава по технологията, описана в методи А-Е. Продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество (92% последен етап). IR (твърдо) 1731,4, 1664,9, 1536,8,
1454.9, 1393,5, 1326,9, 1239,8, 1035,0, cm'1; !Н NMR (400 MHz, d6DMSO) δ 1,30-1,62 (6H, m), 2,79 (1Н, m), 3,00-3,48 (2H, m), 4,77-5,04 (1,6H, m), 5,42-5,88 (2,4H, m), 7,29 (TH, in), 7,70-7,90 (2H, m), 8,108,31 (2H, m), 8,51-8,63 (1H, m), 8,91-9,45 (1H, m), 13,00 (1H, brs); 13C NMR (100 MHz, cL-DMSO) δ 15,5, 17,3, 17,6, 18,9, 19,2, 30,6,
32.9, 34,5, 34,7, 47,4, 52,0, 52,3, 65,3, 80,0, 80,3, 80,5, 83,4, 83,41,
85.1, 85,2, 104,02, 108,7, 108,71, 108,8, 114,9, 122,0, 123,5, 125,0,
126,3, 130,5, 135,0, 150,4, 168,8, 169,0, 169,1, 169,14, 172,0, 172,1,
173.1, 202,2, 202,4, 202,5, 202,6; 19F NMR (376 MHz, d6-DMSO) -226,1 (t), -226,3 (t), -230,0(t), -230,5 (t), -232,3 (t), -232,4 (t), -232,5 (t), -232,6 (t); MS (ESI+ve) 393 (M+H).
Пример 12:
Г38/К]-5-флуор-4-оксо-3-[(8)-3-метил-2-(фенотиазин)карбамоилокси-бутириламино]-пентанова киселина
Метод Н:
Трет. бутилестер на (8)-3-метил-2-(фенотиазин)-карбамоилоксибутириламино]-пентановата киселина
Към разбъркван разтвор на трет. бутилестер на (S)-2хидрокси-3-метилбутановата киселина (300 mg) (методът за получаване е описан в Tetrahedron, Lett., 1993, 7409) в THF (5 ml) при 0°С се добавя натриев хидрид (60% суспензия в минерално масло, 72 mg). Получената смес се разбърква при стайна температура в продължение на 30 минути, след което се добавя фенотиазин-10-карбонилхлорид (450 mg) и получената смес се оставя да се затопли до стайна температура в продължение на 12 часа. След това реакционната смес се разрежда с етилацетат (15 ml) и вода (3 ml). Органичната фаза се отделя и водната фаза се екстрахира с 2 х 5 ml етилацетат. Смесената органична фаза се промива с солеви разтвор (5 ml), суши се (магнезиев сулфат) и се концентрира, филтрува се и се концентрира. Остатъкът се пречиства чрез флаш-хроматография (0-10% етилацетат/хексан) до получаване на съединението от подзаглавието под формата на безцветно масло (528 mg):
Ή NMR (400 MHz, CDC13) δ 0,75-0,96 (6Н, m), 1,58 (6H, m), 1,58 (9H, s), 2,20 (1H, m), 4,86 (1H, d), 7,12-7,45 (6H, m), 7,70 (2H, m).
(8)-3-метил-2-(фенотиазин)-карбамоилокси-бутанова-киселина
Депротекция на трет. бутилестер на (8)-3-метил-2(фенотиазин)-карбамоилокси бутановата киселина (528 mg), като се w· използва трифлуороцетна киселина, както е описано в метод С, води до получаването на киселината под формата на бяло твърдо вещество (440 mg):
Ή NMR (400 MHz, CDC13) δ 0,77-1,00 (6H, m), 2,29 (1H, m), 5,02 (1H, d), 7,15-7,48 (6H, m), 7,70 (2H, m).
Пример 12:
[3 S/Rl-5 -флуор-4-оксо-З - l(S)-3 -метил-2-(фенотиазин)карбамоилокси-бутириламино]-пентанова киселина
Съединението се получава по метод, подобен на този, описан в методи С-Е. Продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество (98% последен етап). IR (твърдо) 1782,7, 1710,9, 1521,5, 1465,2, 1260,3, 1219,4, 1168,1, 1045,2, 758,5 cm'1; Ή NMR (400 MHz, ф-DMSO) δ 0,64-0,87 (6H, m), 1,96-2,16 (1H, m), 2,40-2,98 (2H, m), 4,50-4,42 (4H, m), 7,28 (2H, m), 7,39 (2H, m), 7,49 (2H, m), 7,68 (2H, brm), 7,88-8,91 (1H, brm), 12,61 (1H, brs); 13C NMR (100 MHz, фDMSO) δ 16,8, 17,1, 19,0, 19,2, 30,3, 30,5, 33,0, 33,2, 34,5, 34,8, 47,3, 52,0, 52,4, 79,3, 79,6, 79,7, 83,4, 83,5, 85,1, 85,2, 103,8, 127,1, 127,2,
127,3, 127,4, 131,4, 138,0, 138,1, 152,6, 152,8, 158,82, 169,3, 169,5,
169,7, 172,0, 172,1, 172,13, 202,3, 202,4, 202,6, 202,8; 19F NMR (376 MHz, ф-DMSO) -226,6 (t), -226,8 (t), -230,3(1), -231,3 (t), -232,9 (t), -233,0 (t); MS (ESI+ve) 475 (M+H).
Пример 13:
138/К1-5-флуор-4-оксо-3-[(5)-3-метил-2-(2-хлорфенотиазин)карбамоилокси-бутириламино]-пентанова киселина
’W'·
Метод I:
2-Хлорфенотиазин карбамилхлорид
Към суспензия на 2-хлорфенотиазин (2 g) в ксилол (20 ml) се добавя дифосген (3,4 g). Сместа се нагрява до 140°С в продължение на 18 часа, след което се охлажда и ксилолът се отстранява при понижено налягане. Остатъкът се пречиства чрез флаш-хроматография (2-5% етилацетат/хексан) до получаване на съединението от подзаглавието под формата на кафяво твърдо вещество (2,04 g):
'Н NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,26-7,43 (4Н, m), 7,45-7,51 (1Н, m), 7,59-7,68 (2H, m).
Пример 13:
[35/К1-5-флуор-4-оксо-3-[(8)-3-метил-2-(2-хлорфенотиазин)карбамоилокси-бутириламино]-пентанова киселина
Това съединение се получава по технологията, описана в методи Н и С-Е. Продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество чрез реверсивна фаза HPLC (61% последен етап). IR (твърдо) 1732, 1460, 1365, 1207 cm’1; Ή NMR (400 MHz, de-DMSO) δ 0,70-0,87 (6H, m), 2,02-2,10 (TH, m), 2,58-2,90 (2H, m), 4,34-5,37 (4H, m), 7,27-7,88 (7H, m), 8,31-8,81 (1H, in); 13C NMR (100 MHz, d^-DMSO) δ 16,7/16,9, 18,9/19,1, 30,3/30,3, 34,5/34/8, 52,0/52,4, 79,6/80,0, 84,2/84,3, 127,0/127,3, 127,3, 127,6, 128,0, 129,0, 130,5,
130,9, 131,7, 137,5/137,5, 139,1/139,1, 152,3/152,5, 169,6/169,7, 172,0/172,1, 202,3/202,7 (2d, J 14,1/14,0; 19F NMR (376 MHz, de-DMSO) -226,1 (t), -226,6 (t), -226,8(1), -233,0 (t), -233,1 (t).
Пример 14: (38/К]-5-флуор-4-оксо-3-[(8)-3-метил-2-(3-хлорфенотиазин)карбамоилокси-бутириламино]-пентанова киселина
F
Това съединение се получава по технологията, подобна на описаната в методи Η, I и С-Е. Фенотиазинът е получен по технологията, описана в J. Chem. Soc. (1970), 2437-2441. Продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество (89% последен етап). IR (твърдо) 1717, 1524, 1469, 1350, 1322, 1217, 1042 cm'1; Ή NMR (400 MHz, de-DMSO) δ 0,67-0,85 (6H, m), 2,00-2,06 (1H, m), 2,58-2,87 (2H, m), 4,33-4,86 (2,6H, in), 5,15-5,36 (1,4H, m), 7,27-7,30 (1H, m), 7,38-7,51 (3H, m), 7,63-7,68 (3H, m), 8,24-8,82 (1H, m); 13C NMR (100 MHz, de-DMSO) δ 17,3/17,6(CH3), 19,4/19,5(CH3), 30,8/30,8, 35,0/35/3, 52,5/52,9, 80,0/80,1, 84,7/84,8, 127,2/127,3, 127,6,
127,9, 128,6, 130,7, 131,2, 133,7, 136,9/137,0, 137,8/137,8 153,0/153,2, 170,1/170,2, 172,5/172,6, 202,9/202,2 ;19F NMR (376 MHz, d6-DMSO) -226,7 (t), -226,9 (br), -233,0 (t); MS(ESI+ve) 509/511 (M+H).
Пример 15: [38/К1-5-флуор-4-оксо-3-[(8)-3-метил-2-(3,7-дихлорфенотиазин)карбамоилокси-бутириламино1-пентанова киселина
Това съединение се получава по технологията, подобна на описаната в методи Η, I и С-Е. Фенотиазинът е получен по технологията, описана в J. Chem. Soc. (1970), 2437-2441. Продуктът се изолира чрез реверсивна фаза HPLC под формата на бяло твърдо вещество (76% последен етап). IR (твърдо) 1793, 1721, 1521, 1465, 1317, 1214, 1086, 1044 cm'1; Ή NMR (400 MHz, de-DMSO) δ 0,710,76 (ЗН, m), 0,84-0,88 (ЗН, m), 2,05-2,12 (1H, m), 2,58-2,92 (2H, m), 4,31-4,87 (2,5H, m), 5,09-5,36 (1,5H, m), 7,47-7,56 (2H, m), 7,67-7,71 (2H, m), 7,72-7,81 (1H, m), 8,39-8,87 (1H, m); 13C NMR (100 MHz, (VDMSO) δ 16,7/16,7/17,0, 19,0/19,1/19,2/19/3, 30,3/30,3/30,4,
34,5/34/8, 52,0/52,4, 79,8/80,1, 84,2/84,3, 127,3, 127,4, 127,7, 128,5, 129,2, 129,7, 131,4, 132,0, 133,1/133,2, 136,4/136,5, 138,8/138,9, 152,2/153,3, 169,5/169,6, 172,0/172,1, 202,4/202,5; 19F NMR (376 MHz, d6-DMSO) -226,5 (br), -226,8 (t), -232,9 (t), -233,0 (br).
Пример 16;
(38/Р1-5-флуор-4-оксо-3-Г(8)-3-метил-2-(ЗА-дихлорфенотиазин)карбамоилокси-бутириламино]-пентанова киселина
Това съединение се получава по технология, подобна на описаната в методи Η, I и С-Е. Фенотиазинът е получен по технологията, описана в J. Chem. Soc. (1970), 2437-2441. Продуктът се изолира чрез реверсивна фаза HPLC под формата на бяло твърдо вещество (58% последен етап). IR (твърдо) 1736, 1436, 1365, 1222, 1050 cm’1; Ή NMR (400 MHz, A-DMSO) δ 0,66-0,85 (6H, m), 2,002,08 (1H, m), 2,57-2,93 (2H, m), 4,30-5,35 (4H, m), 7,31-7,71 (6H, m), 8,27-8,83 (1H, m); ,3C NMR (100 MHz, de-DMSO) δ 16,8/17,1,
19,0/19,1, 30,3, 34,5/34/8, 52,0/52,4, 79,7/80,0, 84,2/84,3, 179,2/178,6,
127,1, 127,3, 127,5, 128,2, 128,5, 128,5, 129,6, 130,0, 133,7,
137,3/137,3, 137,6/137,6, 152,5, 169,5/169,5, 172,0/172,1, 202,3; 19F
NMR (376 MHz, 06-DMSO) -226,6 (t), -226,8 (t), -232,9 (t).
Пример 17:
(38Л<]-5-флуор-4-оксо-3-[(8)-3-метил-2-(9,10-дихидрофенантридин)карбамоилокси-бутириламино!-пентанова киселина
Това съединение се получава по технология, подобна на описаната в методи Η, 1 и С-Е. Дихидрофенантридинът е получен по технологията, описана в./. Chem. Soc. (1951), 3207-3211. Продуктът се изолира чрез реверсивна фаза HPLC под формата на бяло твърдо вещество (56% последен етап). IR (твърдо) 1732, 1365, 1226, 1212, 1203 cm’1; !Н NMR (400 MHz, φ,-DMSO) δ 0,84 (6Н, m), 2,05 (1Н,
m), 2,55-2,90 (2H, m), 4,28-5,36 (6H, m), 7,26-7,43 (5H, m), 7,75-7,77 (1H, tn), 7,89-7,91 (2H, m), 8,24-8,81 (1H, m); 13C NMR (100 MHz, de-DMSO) δ 17,1/17,4, 18,9/19,0, 30,3/30,4, 34,4/34/8, 46,0, 51,9/52,4, 79,0/79,4, 84,2/84,3, 123,8, 124,3, 125,1, 125,7, 126,2, 128,0, 128,2,
128,3, 128,5, 131,5, 134,1, 136,9, 153,1, 170,0/170,1, 172,0/172,1, 202,4/202,8; l9F NMR (376 MHz, de-DMSO) -226,7 (br), -226,9 (br), -233,1 (t); MS(ESI+ve) 455 (M-H).
Пример 18 :
-(1 -Карбоксиметил-3-флуор-2-оксо-пропилкарбамоил)-2-метилпропилов естер на дибензоГЬ, Лазепин-5-карбоксикиселина
Това съединение се получава по технология, подобна на описаната в методи Η, I и С-Е. Продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество (100% последен етап). IR (твърдо) 1791,2,
1714,9, 1683,4, 1525,6, 1492,6, 1370,1, 1325,6, 1229,3, 1212,5, 1053,4,
1032,7, 798,4, cm1; ’Н NMR (400 MHz, de-DMSO) δ 0,50+0,68 (6Н, х m), 1,90 (1Н, m), 2,54-2,93 (2H, m), 4,20-5,44 (4H, m), 7,02 (2H, s), 7,30-7,80 (8H, m); 13C NMR (100 MHz, de-DMSO) δ 18,73, 19,17,
30,34, 34/56, 52,18, 84,37, 127,92, 128,61, 128,69, 129,63, 130,83,
134,40, 153,90, 169,64, 172,23, 202,29, 202,43, 202,63, 202,76; 19F
NMR (376 MHz, ф-DMSO) -226,83 (t), -226,87 (t), -232,93 (t), -233,07 (t), -233,1 (t), -233,32 (t); MS (ESI+ve) 469 (M-H).
Пример 19 :
1-( 1 -Карбоксиметил-3-флуор-2-оксо-пропилкарбамоил)-2-метилпропилов естер на 10, 11-дихидро-дибензоГЬ, Лазепин-5- карбоксикиселина с
Това съединение се получава по технология, подобна на описаната в методи Η, I и С-Е. Продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество (100% последен етап). IR (твърдо) 1796,9,
1683,9, 1521,8, 1491,5, 1368,3, 1324,8, 1278,6, 1213,4, 1101,9, 1108,0, 1056,4, 931,1, 776,5 746,7, cm1; ]Н NMR (400 MHz, ф-DMSO) δ 0,50-0,95 (6Н, m), 1,90 (1H, m), 2,55-3,00 (2H, m), 4,20-5,30 (8H, m), 7,10-7,50 (8H, m); 13C NMR (100 MHz, ф-DMSO) δ 15,24, 16,79, 39,44, 52,43, 78,36, 84,34, 126,80, 127,89, 128,43, 130,29, 136,29, 154,09, 169,58, 170,03, 172,19, 173,12, 202,28, 202,42; 19F NMR (376 MHz, ф-DMSO) -226,76 (t), -233,01 (t), -233,11 (t), -233,38 (t); MS (ESI+ve) 471 (M-H).
Пример 20:
[38/К1-5-флуор-4-оксо-3-((8)-3-2-дихидроиндол-1-карбамоилокси-3метил-бутириламино-пентанова киселина
Метод J:
Бензилестер на (8)-2-(имидазолкарбамоилокси)-3-метилбутановата киселина
При разбъркване към разтвор на бензилов естер на (S)-
2-хидрокси-З-метилбутановата киселина (1,5 g) (за приготвянето му виж J.Med. Chem., 1996, 39,98) в THF (20 ml) се добавя карбонилдиимидазол (1,17 g). Получената смес се разбърква при стайна температура в продължение на 12 часа. Реакционната смес се концентрира при понижено налягане и утайката се разтваря повторно в етилацетат (30 ml). Разтворът се промива с 1% фосфорна киселина (2 х 10 ml), после със солеви разтвор (10 ml), суши се (магнезиев сулфат), филтрува се и се концентрира до получаване на съединението от подзаглавието под формата на безцветно масло (1,89 g):
'H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 1,02 (ЗН, d), 1,11 (ЗН, d), 2,47 (1Н, m),
5,15 (1H, d), 5,18-5,32 (2H, m), 7,11 (1H, m), 7,18-7,60 (6H, m), 8,20 (1H, m).
Метод K :
Бензилестер на (8)-(2,3-дихидроиндол-1-карбамоилокси)-3метилбутановата киселина
При разбъркване към разтвор на бензилов естер на (S)2-имидазол-карбамоилокси)-3-метилбутановата киселина (355 g) в THF (7 ml) при 0°С се добавя метилтрифлуорметансулфонат (0,13 ml). Получената смес се разбърква в продължение на 30 минути. След това се добавя индолин (280 mg) и сместа се оставя да се затопли при стайна температура в продължение на 12 часа. Реакционната смес се концентрира при понижено налягане и утайката се разтваря повторно в етилацетат (30 ml). Разтворът се промива с наситен разтвор на натриев бикарбонат (5 ml), след това с 1М солна киселина (2x5 ml) и накрая със солеви разтвор (5 ml), суши се (магнезиев сулфат), филтрува се и се концентрира. Утайката се пречиства чрез флаш-хроматография (5-7% етелацетат/хексан) до получаване на съединението от подзаглавието под формата на безцветно масло (342mg):
Ή NMR (400 MHz, CDC13) δ 0,86-1,18 (6H, m), 2,35 (1Н, m), 3,083,25 (2H, m), 4,05-4,25 (2H, m), 4,95-5,32 (3H, m), 6,96-7,91 (9H, m).
Метод L :
(8)-(2,3-дихидроиндол-1 -карбамоилокси)-3-метилбутанова киселина
Разбъркван разтвор на бензилов естер на (S)-(2,3дихидроиндол-1-карбамоилокси)-3-метилбутанова киселина (342 g) в метнол (25 ml) се добавя към 25% паладий върху въгленов носител (80 mg). Получената смес се хидрогенира при стайна температура за 2 часа, след което се филтрува през целит и филтратът се концентрира до получаване на съединението от подзаглавието под формата на безцветно масло (255 mg):
Ή NMR (400 MHz, CDCI3) δ 0,95-1,21 (6Н, m), 2,40 (1Н, m), 3,20 (2H, m), 4,01-4,25 (2Н, m), 4,95-5,15 (1Н, m), 6,97-7,99 (4H, m).
Пример 20:
[38/Р1-5-флуор-4-оксо-3-((8)-3-2-дихидроиндол-1-карбамоилокси-3метил-бутириламино-пентанова киселина
н
Съединението се получава по процедура, подобна на тази от методи С-Е. Изолира се продукт под формата на бяло твърдо вещество (94% последен етап) : IR (твърдо) 1680,2, 1485,6, 1413,9,
1137.4, 1050,4, 758,5, cm'1; Ή NMR (400 MHz, de-DMSO) δ 0,95 (6H, brm), 2,17 (1H, brm), 2,50-2,94 (2H, m), 3,12 (2H, brm), 3,84-4,23 (2H, brm), 4,27-5,39 (4H, m), 6,98 (1H, m), 7,22 (2H, m), 7,67 (1H, brm), 7,67 (1H, brm), 7,78-8,30 (1H, brm), 12,50 (1H, brs); 13C NMR (100 MHz, de-DMSO) δ 17,2, 19,09, 19,2, 27,3, 30,4, 30,6, 32,9, 34,5,
34,6, 47,3, 47,35, 52,00 52,2, 78,3, 83,4, 85,1, 104,0, 114,2, 123,0,
125.4, 127,5, 131,7, 170,0, 172,07, 172,01, 173,2, 173,25, 202,3, 202,5, 202,6; 19F NMR (376 MHz, de-DMSO) -226,7 (t), -226,8 (t), -233,1 (t), -233,3 (t); MS (ESI+ve) 395 (M-H).
Пример 21:
Диетиламид на [35Л<]-5-флуор-4-оксо-3-1(5)-3-метил-2-(карбазол)карбамоилокси-бутириламино]-пентановата киселина
Метод М :
При разбъркване към разтвор на (100 mg) от киселината от пример 1, получена по методи А-Е, в THF (2 ml) при 0°С се добавя диетиламин (16 g) в THF (0,5 ml) и след това 1-(3диетиламинопропил)-3-(етилкарбодиимид хидрохлоридр EDC) (48 mg). Получената смес се затопля до стайна температура в продължение на 12 часа. Разтворителят се отстранява при понижено налягане и остатъкът се пречиства чрез флаш-хроматография 5060% етилацетат/хексан) до получаване на амида от подзаглавието под формата на бяло твърдо вещество (54 mg):
lH NMR (400 MHz, CDC13) δ 0,69-1,38 (12Н, m), 2,42-3,37 (7Н, m), 4,85-4,92 (1Н, m), 5,01-5,55 (ЗН, m), 7,31-7,70 (5H, m), 7,90-8,05 (2H, m), 8,25-8,42 (2H, m). 19F NMR (376 MHz, ф-DMSO) -232,6 (t), -
232,8 (t); MS (ESI+ve) 498 (M-H).
Пример 22:
Етиламид на [35/К1-5-флуор-4-оксо-3-[(8)-3-метил-2-(карбазол)карбамоилокси-бутириламино]-пентановата киселина
Съединението се получава по процедура, подобна на тази от метод М, като продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество (62%):
Ή NMR (400 MHz, CDCI3) δ 0,96-1,31 (9Н, m), 2,21-2,45 (1Н, m), 4,48-2,80 (2H, m), 3,15-3,48 (2H, m), 4,23-4,76 (ЗН, m), 5,05-5,42 (1H, m), 6,42-6,84 (1H, m), 7,38-7,60 (4H, m), 7,95-8,09 (2H, m), 8,20-8,41 (2H, m). 19F NMR (376 MHz, CDC13) -223,8 (t), -224,5 (t), -226,5 (t), 227,1 (t), -231,9 (t), -232,0 (t); MS (ESI+ve) 452 (M+H2O).
Пример 23:
Пиперазинамид на [38/К1-5-флуор-4-оксо-3-[(8)-3-метил-2(карбазол)-карбамоилокси-бутириламино]-пентановата киселина
Съединението се получава по процедура, подобна на тази от метод М, като продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество (78%) :
'Н NMR (400 MHz, CDCh) δ 1,10-1,35 (6Н, in), 1,80-3,55 (14Н, m), 4,82-4,98 (1H, m), 5,00-5,45 (3H, in), 7,38-7,60 (5H, m), 7,95-8,08 (2H, m), 8,27-8,45 (2H, m), l9F NMR (376 MHz, CDC13) -232,5 (t), -232,7 (t); MS (ESI+ve) 525 (M+H). .
w Пример 24:
N, N-диметиламиноетил амид на [38/Е]-5-флуор-4-оксо-3-Г(8)-3метил-2-(карбазол)-карбамоилокси-бутириламино1-пентановата киселина
н
Съединението се получава по процедура, подобна на тази от метод М, като продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество (49%):
lH NMR (400 MHz, CDC13) δ 1,14-1,31 (6Н, m), 1,83-3,04 (13Н, m), 3,88-4,41 (ЗН, m), 4,57-4,74 (1Н, m), 5,33-5,61 (1H, m), 6,68-7,12 (1H, m), 7,33-8,56 (4H, m), 8,01-8,05 (2H, m), 8,27-8,41(2H, m), 19F NMR (376 MHz, CDCI3) -222,4 (t), -222,5 (t); MS (ESI+ve) 513 (M+H).
Пример 25:
Пентаноамид на [35/К]-5-флуор-4-оксо-3-|(8)-3-метил-2-(карбазол)карбамоилокси-бутириламино]-пентановата киселина
Метод N :
Към разбъркван разтвор на [38/К]-5-флуор-4-оксо-3-[(8)-3метил-2-(карбазол)-карбамоилокси-бутириламино]-пентановата киселина от Пример 1 (150 mg) в дихлорметан (1,5 ml) и диметилформамид (0,075 ml) се добавя карбонилдиимидазол (66 mg). Сместа се разбърква в продължение на 2 часа, след което се охлажда до 0°С при барботиране на амоняк през разтвора. Сместа се разрежда с етилацетат/ 10% разтвор на калиев бисулфат. Органичната фаза се отстранява, а водната се екстрахира с етилацетат. Събраната органична фаза се суши над магнезиев сулфат, филтрува се и се концентрира. Остатъкът се пречиства чрез флаш-хроматография (5% метанол/дихлорметан) до получаване на амида под формата на бяло твърдо вещество (80 mg); Ή NMR (400 MHz, CDC13) δ 1,10-1,28 (6H, m), 2,12-2,75 (ЗН, m), 4,10-4,85 (4Н, m), 5,29 (1Н, m), 6,36, 6,55, 6,78, 6,98 (1Н, 4 x s), 7,18 (1H, m), 7,42 (2H, m), 7,50 (2h, m), 7,99 (2H, m), 8,29 (2H, m); 19F NMR (376 MHz, CDCI3) -225,47 (t), -226,0 (t), -227,33 (t), -227,50 (t), -228,43 (t); MS (ESI+ve) 424 (M-H2O+H).
Пример 26:
Циклохексил естер на [35/К]-5-флуор-4-оксо-3-[(5)-3-метил-2(карбазол)-карбамоилокси-бутириламино]-пентановата киселина
Съединението се получава по процедура, подобна на тази от метод М, като продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество (37%):
Ή NMR (400 MHz, CDCI3) δ 0,90-1,80 (16Η, m), 2,59 (1Η, m), 2,75-
3,15 (2H, m), 4,40 (0,5H, m), 4,64 (0,5H, m), 4,95-5,45 (4H, m), 7,25 (1H, m), 7,42 (2H, m), 7,52 (2H, m), 8,05 (2H, m), 8,36 (2H, m); 19F NMR (376 MHz, CDCI3) -231,95 (t), -232,08 (t);
Пример 27:
n-Пропилов естер на |3S/IU-5-(bnvop-4-OKCO-3-|(S')-3-MeTnji-2(карбазол)-карбамоилокси-бутириламино1-пентановата киселина
Съединението се получава по процедура, подобна на тази от метод М, като продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество (82%):
Ή NMR (400 MHz, CDCI3) δ 0,80 (ЗН, m), 1,13-1,36 (6Н, m), 1,42 (1Н, m), 1,58 (1H, m), 2,60 (1H, m), 2,80-3,08 (2H, m), 3,70 (1H, m), 3,98 (1H, m), 4,92-5,50 (4H, m), 7,21 (1H, m), 7,40 (2H, m), 7,50 (2H, m), 8,00 (2H, m), 8,32 (2H, m); 19F NMR (376 MHz, CDC1.0
-232,00 (t), -232,01 (t); MS (ESI+ve) 485 (M+H).
W··
Пример 28:
Изопропилов естер на [38/Е]-5-флуор-4-оксо-3-[(5)-3-метил-2(карбазол)-карбамоилокси-бутириламино1-пентановата киселина
F
Съединението се получава по процедура, подобна на тази от метод М, като продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество (7%):
Ή NMR (400 MHz, CDC13) δ 0,90-1,33 (12Η, m), 2,55 (1Η, m), 2,78-
3,15 (2H, m), 4,80-5,50 (5H, m), 7,25 (1H, brs), 7,43 (2H, m), 7,55 (2H, m), 8,05 (2H, m), 8,36 (2H, m); 19F NMR (376 MHz, CDCI3)
-232,00 (t), -232,03 (t);
Пример 29:
Метилов естер на [38,/К|-5-фл\ор-4-оксо-3-|(8)-3-мегил-2(карбазол)-карбамоилокси-бутириламинО]-пентановата киселина
Съединението се получава по процедура, подобна на тази от метод М, като продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество (81%):
Ή NMR (400 MHz, CDCI3) δ 1,20 (6Η, m), 2,58 (1H, m), 2,80-3,05 (2H, m), 3,42, 3,61 (3H, 2 x s), 4,98-5,26 (3H, m), 5,41 (1H, m), 7,20 (1H, brs), 7,45 (2H, m), 7,55 (2H, m), 8,04 (2H, m), 8,35 (2H, m); 19F NMR (376 MHz, CDCI3) -231,90 (t), -232,00 (t); MS (ESI+ve) 457 (M+H).
Пример 30:
Холестеролестер на [38/К1-5-флуор-4-оксо-3-[(8)-3-метил-2(карбазол)-карбамоилокси-бутириламино1-пентановата киселина
Съединението се получава по процедура, подобна на тази от метод М, като се използва карбонилдиимидазол в качеството на купелуващ агент. Продуктът се изолира под формата на бяло твърдо вещество (12%):
Ή NMR (400 MHz, CDC13) δ 0,65-2,35 (47Η, m), 2,58 (1Η, m), 2,75-3,15 (2Н, m), 4,25 (0,5Н, m), 4,48 (0,5Н, m), 4,97-5,46 (5Н, m), 7,30 (1Н, m), 7,44 (2H, m), 7,58 (2H, m), 8,05 (2H, m), 8,33 (1H, m); l9F NMR (376 MHz, CDCI3) -231,91 (t), -232,03 (t). Може да бъде изолиран и съответният кетал под формата на бяло твърдо вещество (21%);
'Н NMR (400 MHz, CDCI3) δ 0,65-2,10 (48Н, m), 2,35-3,15 (2Н, 3 х m), 3,42-3,69 (15Н, m), 4,10-4,96 (4Н, m), 5,15-5,65 (2Н, m), 6,78 (1Н, m), 7,45 (2H, m), 7,57 (2H, m), 8,05 (2H, m), 8,34 (1H, m); l9F NMR (376 MHz, CDCI3) -230,57 (t), -230,67(t).
Тестиращи методи:
Изследвания за ензими:
Изследванията за инхибиране на каспазата се основават на разцепването на флуорогенен субстрат от рекомбинантна пречистена човешка каспаза-1, -3, -7 или -8. Изследванията се провеждат обикновено по същия начин, описан в Garcia-Calvo et al., J. Biol. Chem., 1998, 273, 32608-32613, които използват субстрати, специфични за всеки ензим. Субстратът за каспаза-1 е Ацетил-ТирМед» v Вал-Ала-Асп-амино-4-метилкумарин. Субстратът за каспаза-3, -7 и - е Ацетил-Асп-Глу-Вал-Асп-амино-4-метилкумарин.
Получената степен на ензимно активиране при конкретни концентрации на инхибитора, KObS , се компютаризират чрез директно въвеждане на данните по отношение на уравнението, получено от Thomberry et al. (Biochemistry, 33, 1994, 3943-3939), при кето се използва нелинейна компютърна програма на най-малките квадрати (PRSM 2,0; Graph Pad software). За да се получи скоростна константа от втори ред, стойностите за Kinact, Kobs, се разполагат W срещу съответните им стойности на концентрациите на инхибиране и стойностите за κιη<κι се изчисляват след това с помощта на нелинейни компютаризирани регресии. За повечето от съединенията, съгласно настоящото изобретение, които са тествани срещу каспаза-1, стойността за Kinact е между 25 000 и 1 500 000 M’Vs’1; срещу каспаза-3-съответно между 9 000 и 1 500 000 M’^s’1; срещу каспаза-8- между 10 000 и 700 000 M’Ks'1.
Инхибиране на IL-Ιβ секреция от смесена популация на периферни кръвни мононуклеарни клетки (РВМС)
Въздействието на каспаза-1 върху npe-IL-Ιβ може да бъде измерено в клетъчни култури при използването на клетки с различен произход. Човешки РВМС, получен от здрави донори, представлява смесена популация от лимфоцитни и мононуклеарни клетки, които произвеждат широк спектър интерлевкини и цитохини в отговор на различни физиологични стимулатори ** Експериментална процедура
Тестваното съединение е разтворено в диметилсулфоксид (DMSO, Sigma &D-2650) до получаване на 100 тМ стоков разтвор. Той се разтваря в пълна хранителна среда, която представлява RPMI, съдаржащ 10% топлинно инактивиран фетален говежди серум (FCS) (Gibco BRL #10099-141), 2mM L-глутамин (Sigma, #G7513), 100 U пеницилин и 100 pg/ml стрептомицин (Sigma #Р7539). Крайната концентрация на тестираното съединение е в границите от 100 μΜ до 6пМ чрез осем стъпки на разреждане.Най-високата W концентрация на тестираното съединение е еквивалентна на 0,1%
DMSO при това изследване.μμ
Човешки РВМС са изолирани от Buffy Coats, получени от кръвна банка при използване на центрофугиране с Ficoll Paqueлевкоцитна сепарационна среда (Amersham, #17-1440-02) и изследването на клетките се осъществява в стерилни плаки с по 96 плоско дънни дупчици (Nunc). Във всяка дупчица се поставят 100 μΐ клетъчна суспензия, 1 х 105 клетки, 50 μΐ от съответното разредено съединение и 50 μΐ LPS (Sigma#L-3012) до крайна концентрация ng/ml. Контролите съдържат клетки +/- LPS стимулация и серийни разреждания на DMSO, разредено по същия начин, както изследваното съединение. Плаките се инкубират за 16-18 часа при 37°С в атмосфера с влажност 95%, съдържаща 5% СО2.
Спед 16-18 часа супернатантите се събират след центрофугиране на плаките на 100 G при 18°С за 15 минути, след което се изследват за съдържание на EL-Ιβ. Измерването на получения IL-Ιβ в супернатантата се извършва, като се използва кит на Quantikine (R&D Systeme), съгласно работните инструкции. Нивото на IL-Ιβ е около 600-1500 pg/ml, установено за PBMCS (периферни кръвни моноклонални клетки) при дупчици с положителни контроли.
Инхибиторният потенциал на съединенията може да бъде представен като IC50 стойност, която е концентрацията на инхибитор, при която 50% от зрелия IL-Ιβ се открива в супернатантата по отношение на положителните контроли. На Таблица 5 е дадено инхибирането на Ш-ЦЗ-секрегиране от w периферни кръвни моноклонални клетки за подбрани съединения, съгласно настоящото изобретение, както беше изложено по-горе.
Подбрани съевинения са тестирани при това изследвани и показват инхибиране на IL-1 β-отделяне със IC50 стойност между 0,04 и 20 μΜ.
Изследване чрез Anti-Fas предизвикана апоптоза.
Клетъчната апоптоза може да бъде предизвикана чрез свързване на Fas-лиганди (FasL) към неговия рецептор, CD95 (Fas).
CD95 е една от фамилиите на свързани рецептори, известни като рецептори на смъртта, които могат да предизвикат апоптоза в клетките чрез активиране на каскада от енмзимни каспази. Процесът се инициира от свързването на съответната адапна молекула FADD/MORT -1 към цитоплазмената част от CD95рецептор-лигандния комплекс. Каспаза-8 след това свързва FADD и се активира, като след това предизвиква каскада от събития, които довеждат до активиране на редица каспази и в края на краищата до клетъчна апоптоза. Апоптозата също би могла да се предизвика в клетките, които притежават CD95 чрез Jurkat Е6.1 Т - клетъчна линия от лимфомни клетки, при използване на антитела вместо FasL за образуване на напречни връзки в клетъчната повърхност на CD95. Anti-Fas-индуцираната апоптоза също би могла да се предизвика чрез активиране на каспаза-8. Това може да послужи като основа за изследване, които се базират на клетките за скрининг на съединения, които да инхибират апоптозния път на свързване на каспаза-8.
Експериментална процедура
Jurkat Е6.1-клетки се култивират в пълна хранителна среда, състояща се от RPMI-1640 (Sigma №)+10% фетален телешки серум (Gibco BRL #10099-141)+2mM L-глутамин (Sigma № G-7513). Клетките се събират при средна фаза на растеж. 100 тМ от клетките в концентрация 5-8 х 105 клетки / ml се прехвърлят в 50милилитрови стерилни сентрофужни епруветки Falcon и се центрофугират за 5 минути при стайна температура на 100 G.
Супернатантата се отстранява и събраните клетъчни утайки се ресуспендира в 25 ml пълна хранителна среда. Броят на клетките се определя и тяхната плътност се нагажда до 2 х 106 клетки / ml с помощта на пълна хранителна среда.
Тестираното съединение се разтваря в диметилсулфоксид (DMSO) (Sigma № D-2650) до получаване на 100 тМ стоков разтвор. Той се разрежда до 400 μΜ в пълна хранителна среда и се правят серийни разреждания в плака с 96 дупчици преди да се *·* прибавят към съответната плака за изследване на клетките.
100 μΐ от клетъчната суспензия (2x106 клетки) се добавят към всяка дупчица на система от плаки с 96 облодънни дупчици ( Costar № 3790). 50 μΐ от разтвора на съединението, подходящо разредено, и 50 μΜ от анти-Fas-антителата, клон CH-11 (Kamiya №-060) при крайна концентрация 10 ng/ml, се добавят във всяка дупчице. Контролните дучици се приготвят без антителата и без съединението, само със серийното разреждане на DMSO като вехикъл (контрола на изследваното съединение). Плаките се w инкубират за 16-18 часа при 37°С в атмосфера на 5% СО2 и влажност 95%.
Клетъчната апоптоза се отчита количествено чрез фрагментирането на ДНК, като се използва изследването “Cell Death Detection Assay” на Boerhinger-Mannheim, № 1544 675. След инкубация за 16-18 часа плаките се центрофугират за 5 минути при стайна температура на 100 G. 150 μΐ от супернатантата се отстраняват и се заменя с прясна пълна хранителна среда. След това, клетките се събират и към всяка клетка се добавят по 200 μΐ лизиращ буфер, с който е оборудван всеки кит за изследване. Клетките се разклащат да пълно лизиране и се инкубират за 30 минути при 4°С. Плаките, след това, се центрофугират на 1900 G за 10 минути и супернатантите се разреждат 1:20 със съответния буфер за инкубиране, съдържащ се в кита. 100 μΐ от този разтвор се изследва по съответната инструкция, приложена към кита. Оптималната плътнаст в nm (OD405) се измерва 20 минути след С прибавянето на крайния субстрат в молекулярно устройство
SPECTRAmax Plus-брояч за плаки. Построява си крива OD405 nm I концентрация на съединението и стойностите на IC50 за съединенията се пресмятат, като се използва специалната програма за построяване на криви SOFTmax Pro, използваща опцията комплект от четири параметъра.
Подбраните съединения са тестирани чрез тези изследвания и показват, че инхибират предизвиканата от Fas апоптоза при Jurkatклетки с КА-стойности между 0,001 и 0,15 μΜ.
Тъй като сме описали голям брой варианти на изпълнение на настоящото изобретение, очевидно е, че основните примери могат да бъдат променени, за да включат други варианти на изпълнение, които илюстрират приложението на съединенията и методите, съгласно изобретението. Ето защо, очевидно е, че обсегът на изобретението се определя както от допълнителните претенции, така и от специфичните варианти на изпълнение, представени с примерите.

Claims (38)

1. Използване на съединение с формула I:
R4 о r5'N Υ°ίΛ
Z R3 н ο
I ,2
R1 или фармацевтично приемливите му производни, в която :
Z е кислород или сяра;
R1 е водород, -CHN2, -R, -CH2OR, -CH2SR, или СН2У;
R е Ci_i2 алифатен, арилов, алкилов, хетероцикличен или хетероцикличен арилов радикали;
У е еректроотрицателна отцепваща се група;
«V · *** R2 е СО2Н, СН2СН2Н или техни естери, амиди или изостери;
R3 е група, способна да се свърже на 82-субпозиция в каспазата;
R4 и R? едновременно с азотния атом образуват моно-, ди- и трициклена хетероатомна система с 1-6 хетероатоми, избрани от групата на азот, кислород или сяра за производството на лекарствени средства за облекчаване на болестни състояния, свързани с необходимост от прием на инхибитори на каспазата.
2. Използване, съгласно претенция 1, характеризиращо се това, че съединението притежава една или повече от следните характеристики:
(I) Z е кислород;
(II) R1 е водород, -R, -CH2OR, -CH2SR или -CH2Y;
(III) R е CO2H или негови естер, амид или изостер.
(IV) R3 е група с молекулно тегло до 140 Daltons; или (V) R4 и R5 заедно с намиращият се между тях азотен атом, формират моно-, ди- и трициклени хетероциклени или хетероарилови пръстенни системи, в които всеки пръстен от системата съдържа 5-7 хетероатома.
3. Използване, съгласно претенция 2, характеризиращо се с това, че съединението има следните характеристики :
(I) Z е кислород;
(II) R1 е водород, -R, -CH2OR, -CH2SR или -CH2Y;
-Λ (III) R е CO2H или негови естер, амид или изостер.
(IV) R3 е група с молекулно тегло до 140 Daltons; и (V) R4 и R5 заедно с намиращият се между тях азотен атом, формират моно-, ди- и трициклени хетероциклени или хетероарилови пръстенни системи, в които всеки пръстен от системата съдържа 5-7 хетероатома.
4. Използване, съгласно претенция 3, характеризиращо се с това, че
R^-CHzY.
5. Използване, съгласно претенция 4, характеризиращо се с това, че R1 е -CH2F и R3 е См алкилова група.
6. Използване, съгласно претенция 5, характеризиращо се с това, че R4 и R5 заедно с намиращият се между тях азотен атом, формират ди- и трициклени хетероциклени или хетероарилови пръстенни системи, в които всеки пръстен от системата съдържа 5-7 хетероатома.
7. Използване, съгласно претенция 6, характеризиращо се с това, че R4 и R5 заедно с намиращият се между тях азотен атом, формират трициклени хетероциклени или хетероарилови пръстенни системи, в които всеки пръстен от системата съдържа 5-7 хетероатома.
8. Използване, съгласно претенция 7, характеризиращо се с това, че средният пръстен в трициклената система е 5- или 6-атомен.
9. Използване, съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че съединението притежава една или повече от следните характеристики :
(I) Z е кислород;
(II) R1 е -CH2OR, -CH2SR или -CH2Y;
(III) R2 е CO2H или негови естер, амид или изостер.
(IV) R3 е См алкил; или (V) R4 и R5 заедно с намиращият се между тях азотен атом, формират пръстен, избран от групата на : индол, изоиндол, индолин, индазол, пурин, дихидропиридин, бензимидазол, имидазол, имидазолин, пирол, пиролидин, пиролин, пиразол, пиразолин, пиразолидин, триазол, пиперидин, морфолин, тиоморфолин, пиперазин, карбазол, фенотиазин, феноксазин, дихидрофеназин, дихидроцинолин, дихидрохиноксалин, тетрахидрохинолин, тетрахидроизохинолин, дихидронафтиридин, тетрахидранафгиридин, дихидроакридин, β-карболин, пиридо[4,3Ь]индол, 2,3,9-триазафлуорен, 9-тиа-2,10-диазаантрацен, 3,6,9**** триазафлуорен, тиено[3,2-Ь]пирол или дихидрофенантридин.
10. Използване, съгласно претенция 9, характеризиращо се с това, че съединението притежава една или повече от следните характеристики :
(I) Z е кислород;
(II) R1 е -CH2OR, -CH2SR или -CH2Y;
(III) R е CO2H или негови естер, амид или изостер.
(IV) R е См алкил; или (V) R4 и R5 заедно с намиращият се между тях азотен атом, формират пръстен, избран от групата на : индол, изоиндол, индолин, индазол, бензимидазол, имидазол, пиролидин, пиразол, триазол, пиперидин, морфолин, тиоморфолин, пиперазин, карбазол, фенотиазин, феноксазин, дибензоазипин, дихидро-дибензоазипин, дихидрофеназин, дихидроцинолин, дихидрохиноксалин, тетрахидрохинолин, тетрахидроизохинолин, дихидронафтаридин, тетрахидронафтаридин, дихидроакридин, β-карболин, пиридо[4,3
Ь]индол, 2,3,9-триазафлуорен, 9-тиа-2,10-диазаантрацен, 3,6,9триазафлуорен, тиено[3,2-Ь]пирол или дихидрофенантридин.
11. Използване, съгласно претенция 10, характеризиращо се с това, че съединението притежава една или повече от следните характеристики:
(I) Z е кислород;
(II) R1 е -CH2OR, -CH2SR или -CH2Y;
(III) R2 е CO2H или негови естер, амид или изостер.
(IV) R3 е См алкил; или (V) R4 и R5 заедно с намиращият се между тях азотен атом, формират пръстен, избран от групата на : карбазол, фенотиазин, индол, индолин, 5Н-дибензо[Ь, £]азепин, 10,11-дихидро-5Ндибензо[Ь, ^азепин, β-карболин, пиридо[4,3-Ь]индол, 2,3,9триазафлуорен, 9-тиа-2,10-диазаантрацен, 3,6,9-триазафлуорен, тиено[3,2-Ь]пирол или дихидрофенантридин.
12. Използване, съгласно претенция 11, характеризиращо се с това, че Z е кислород; R1 е -CH2OR, -CH2SR или -CH2Y; R2 е СО2Н или негови естер, амид или изостер; R3 е См алкил; и R4 и R5 заедно с намиращият се между тях азотен атом, формират заместена или незаместена пръстенова система, избрана от групата на : карбазол, фенотиазин, индол, индолин, 5Н-дибензо[Ь, £]азепин,
10,11-дихидро-5Н-дибензо[Ь, 1'|азепин, β-карболин, пиридо[4,3Ь]индол, 2,3,9-триазафлуорен, 9-тиа-2,10-диазаантрацен, 3,6,9триазафлуорен, тиено[3,2-Ь]пирол или дихидрофенантридин.
13. Използване, съгласно претенция 12, характеризиращо се с това, че R1 е -CH2Y.
14. Използване, съгласно претенция 11, характеризиращо се с това, че R1 е -CH2F.
15. Използване, съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че съединението е избрано от съединенията, изброени в Таблица 1.
16. Използване, съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че съединението е избрано от следните съединения :
17. Използване, съгласно претенции 1-16, характеризиращо се с това, че болестното състояние и лечениета са избрани от : заболявания, свързани с IL-1 медитиране, апоптозно медитирани заболявания, възпалителни процеси, автоимунни заболявания, заболявания, свързани с деструкция на костите, пролиферативни неразположения, инфекции, дегенеративни смущения, заболявания, свързани с клетъчна смърт, състояния, свързани с приемане на излишъци от алкохол, медиаторни вирусни заболявания, увеити, възпалителен перитонит, остеоартрит, панкреатит, астма, синдрома на дихателен дистрес у възрастни, гломерулонефрит, ревматоиден артрит, хроничен лупус еритроматозис (червена вълчанка), системен лупус еритроматозис, склеродерма, хроничен тироидит, заболяване ** на Graves, автоимунен гастрит, диабет, автоимунна хемолитична анемия, автоимунна неутропения, тромбоцитопения, хроничен активен хепатит, миастения, бременност, възпалителни заболявания на стомашно-чревния тракт, заболяване на Crohn, псориазис, алергичен дерматит, краста, заболявания, свързани с приемането на трансплантати, отхвърляне на трансплатнирани органи, остеопороза, левкемия и свързаните с нея неразположения, миелодиспластичен синдром, заболявания на костите, свързани с множествена миелома, остра миелогенозна левкемия, метастазна w меланома, сарком на Kaposi, мултиплена миелома, хеморагичен шок, сепсис, септичен шок, изгаряния, бактериална дизентерия, болестта на Alzheimer, болест на Parkinson, болест на Huntington, болест на Kennedy, церебрална исхемия, епилепсия, исхемия на миокарда, остри и хронични сърдечни заболявания, инфаркт на миокарда, застойни сърдечни заболявания, атеросклероза, коронарен артериален трансплантантен байпас, гръбначно-мускулна атрофия, амиотрофична латерална склероза, мултиплена скрлероза, енцефалити свързани със HIV, възрастови изменения, алопеция, увреждания, дължащи се на удар, улцеративен колит, травматични мозъчни увреждания, увреждания на гръбначния мозък, хепатит-В, хепатит-С, хепатит-G, жълта треска, треска денге, японски енцефалит, различни форми на чернодробни заболявания, бъбречни заболявания, дегенеративни бъбречни заболявания, заболявания, свързани с Н-инфекции на пилора във връзка с гастрити и дуоденални язви, HIV-инфекции, туберкулоза и менингит, лечение на състояния, свързани с коронарен артериален трансплантантен байпас, както и за имунотерапия при различни форми на карцином.
18. Използване, съгласно претенция 1-16, характеризиращо се с това, че съединението се прилага за лечение на състояния, свързани с коронарен артериален трансплантантен байпас.
19. Използване, съгласно претенция 1-16, характеризиращо се с това, че съединението се прилага за предпазване на клетки, което включва контактуване на клетките с разтвор на съединението или на неговите фармацевтично приемливи производни.
20. Използване, съгласно претенция 1-16, характеризиращо се с това, че съединението се прилага при трансплантация на органи или за консервация на кръвни продукти.
21. Използване, съгласно претенция 1-16, характеризиращо се с това, че съединението се прилага като инградиент при имунотерапията при лечение на карцином.
22.Съединение е формула I :
или фармацевтично приемливите му производни, в която :
Z е кислород или сяра;
R1 е водород, -CHN2, -R, -CH2OR, -CH2SR, или СН2У;
R е С].]2 алифатен, арилов, алкилов, хетероцикличен или хетероцикличен арилов радикали;
У е еректроотрицателна отцепваща се група;
R2 е СО2Н, СН2СН2Н или техни естери, амиди или изостери;
R1 е група, способна да се свърже на 82-субпозиция в каспазата;
R4 и R3 едновременно с азотния атом образуват моно-, ди- и трициклена хетероатомна система с 1-6 хетероатоми, избрани от групата на азот, кислород или сяра за производството на лекарствени средства за облекчаване на болестни състояния, свързани с необходимост от прием на инхибитори на каспазата.
23. Съединение, съгласно претенция 22, характеризиращо се това, че притежава една или повече от следните характеристики :
(I) Z е кислород;
(II) R1 е водород, -R, -CH2OR, -CH2SR или -CH2Y;
(III) R2 е CO2H или негови естер, амид или изостер.
(IV) R3 е група с молекулно тегло до 140 Daltons; или (V) R4 и R5 заедно с намиращият се между тях азотен атом, формират моно-, ди- и трициклени хетероциклени или хетероарилови пръстенни системи, в които всеки пръстен от системата съдържа 5-7 хетероатома.
24. Съединение, съгласно претенция 22, характеризиращо се с това, че има следните характеристики :
(I) Z е кислород;
(II) R1 е водород, -R, -CH2OR, -CH2SR или -CH2Y;
A (III) R е CO2H или негови естер, амид или изостер.
(IV) R3 е група с молекулно тегло до 140 Daltons; и (V) R4 и R5 заедно с намиращият се между тях азотен атом, формират моно-, ди- и трициклени хетероциклени или хетероарилови пръстенни системи, в които всеки пръстен от системата съдържа 5-7 хетероатома.
25. Съединение, съгласно претенция 24, характеризиращо се с това, че R1 e-CH2Y.
26. Съединение, съгласно претенция 25, характеризиращо се с това,
1 о че R е -CH2F и R е См алкилова група.
27. Съединение, съгласно претенция 26, характеризиращо се с това, че R4 и R5 заедно с намиращият се между тях азотен атом, формират ди- и трициклени хетероциклени или хетероарилови пръстенни системи, в които всеки пръстен от системата съдържа 5-7 хетероатома.
28. Съединение, съгласно претенция 27, характеризиращо се с това, че R4 и R5 заедно с намиращият се между тях азотен атом, формират трициклени хетероциклени или хетероарилови пръстенни системи, в които всеки пръстен от системата съдържа 5-7 хетероатома.
29. Съединение, съгласно претенция 28, характеризиращо се с това, че средният пръстен в трициклената система е 5- или 6-атомен.
30. Съединение, съгласно претенция 22, характеризиращо се с това, че съединението притежава една или повече от следните характеристики :
(I) Z е кислород;
(II) Rl е -CH2OR, -CH2SR или -CH2Y;
(III) R2 е CO2H или негови естер, амид или изостер.
(IV) R3 е См алкил; или (V) R4 и R5 заедно с намиращият се между тях азотен атом, формират пръстен, избран от групата на : индол, изоиндол, индолин, индазол, пурин, дихидропиридин, бензимидазол, имидазол, имидазолин, пирол, пиролидин, пиролин, пиразол, пиразолин, пиразолидин, триазол, пиперидин, морфолин, тиоморфолин, пиперазин, карбазол, фенотиазин, феноксазин, дихидрофеназин, дихидроцинолин, дихидрохиноксалин, тетрахидрохинолин, тетрахидроизохинолин, дихидронафтиридин,
100 тетрахидранафтиридин, дихидроакридин, β-карболин, пиридо[4,3Ь]индол, 2,3,9-триазафлуорен, 9-тиа-2,10-диазаантрацен, 3,6,9триазафлуорен, тиено[3,2-Ь]пирол или дихидрофенантридин.
31. Съединение, съгласно претенция 30, характеризиращо се с това, че съединението притежава една или повече от следните характеристики:
(I) Z е кислород;
(II) R1 е -CH2OR, -CH2SR или -CH2Y;
(III) R2 е CO2H или негови естер, амид или изостер.
(IV) R3 е См алкил; или (V) R4 и R5 заедно с намиращият се между тях азотен атом, формират пръстен, избран от групата на : индол, изоиндол, индолин, индазол, бензимидазол, имидазол, пиролидин, пиразол, триазол, пиперидин, морфолин, тиоморфолин, пиперазин, карбазол, фенотиазин, феноксазин, дибензоазипин, дихидро-дибензоазипин, дихидрофеназин, дихидроцинолин, дихидрохиноксалин, тетрахидрохинолин, тетрахидроизохинолин, дихидронафтаридин, тетрахидронафтаридин, дихидроакридин, β-карболин, пиридо[4,3Ь]индол, 2,3,9-триазафлуорен, 9-тиа-2,10-диазаантрацен, 3,6,9триазафлуорен, тиено[3,2-Ь]пирол или дихидрофенантридин.
32. Съединение, съгласно претенция 31, характеризиращо се с това, че съединението притежава една или повече от следните характеристики:
(I) Z е кислород;
101 (II) R1 e -CH2OR, -CH2SR или -CH2Y;
(III) R2 е CO2H или негови естер, амид или изостер.
(IV) R3 е См алкил; или (V) R4 и R5 заедно с намиращият се между тях азотен атом, формират пръстен, избран от групата на : карбазол, фенотиазин, индол, индолин, 5Н-дибензо[Ь, 1]азепин. 10,11-дихидро-5Ндибензо[Ь, вазелин, β-карболин, пиридо[4,3-Ь]индол, 2,3,9триазафлуорен, 9-тиа-2,10-диазаантрацен, 3,6,9-триазафлуорен, тиено[3,2-Ь]пирол или дихидрофенантридин.
33. Съединение, съгласно претенция 32, характеризиращо се с това, че Z е кислород; R1 е -CH2OR, -CH2SR или -CH2Y; R2 е СО2Н или негови естер, амид или изостер; R3 е См алкил; и R4 и R5 заедно с намиращият се между тях азотен атом, формират заместена или незаместена пръстенова система, избрана от групата на : карбазол, фенотиазин, индол, индолин, 5Н-дибензо[Ь, £]азепин,
10,11-дихидро-5Н-дибензо[Ь, вазелин, β-карболин, пиридо[4,3Ь]индол, 2,3,9-триазафлуорен, 9-тиа-2,10-диазаантрацен, 3,6,9триазафлуорен, тиено[3,2-Ь]пирол или дихидрофенантридин.
34. Съединение, съгласно претенция 33, характеризиращо се с това, че R1 е -CH2Y.
35. Съединение, съгласно претенция 34, характеризиращо се с това, че R1 е -СН2Е
102
36. Съединение, съгласно претенция 22, характеризиращо се с това, че е избрано от съединенията, изброени в Таблица 1.
37. Съединение, съгласно претенция 22, характеризиращо се с това, че съединението е избрано от следните съединения :
38. Фармацевтичен състав, характеризиращ се с това, че включва съединение, съгласно която и да е от претенциите 22-37, както и фармацевтично приемлив носител.
BG107136A 2000-03-29 2002-09-23 Карбаматни инхибитори на каспазата и тяхното приложение BG107136A (bg)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US19282600P 2000-03-29 2000-03-29
PCT/US2001/010182 WO2001072707A2 (en) 2000-03-29 2001-03-29 Carbamate caspase inhibitors and uses thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
BG107136A true BG107136A (bg) 2003-05-30

Family

ID=22711181

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BG107136A BG107136A (bg) 2000-03-29 2002-09-23 Карбаматни инхибитори на каспазата и тяхното приложение

Country Status (32)

Country Link
US (2) US6689784B2 (bg)
EP (1) EP1268425B1 (bg)
JP (2) JP4298200B2 (bg)
KR (1) KR100858640B1 (bg)
CN (2) CN1994298A (bg)
AR (1) AR027993A1 (bg)
AT (1) ATE384695T1 (bg)
AU (2) AU2001249619B2 (bg)
BG (1) BG107136A (bg)
BR (1) BR0109588A (bg)
CA (1) CA2403959A1 (bg)
CZ (1) CZ20023227A3 (bg)
DE (1) DE60132567T2 (bg)
DK (1) DK1268425T3 (bg)
EA (1) EA005740B1 (bg)
EE (1) EE200200550A (bg)
ES (1) ES2296742T3 (bg)
HK (1) HK1052355B (bg)
HR (1) HRP20020782A2 (bg)
HU (1) HUP0301472A3 (bg)
IL (2) IL151829A0 (bg)
MX (1) MXPA02009633A (bg)
NO (1) NO325062B1 (bg)
NZ (1) NZ521639A (bg)
PE (1) PE20011267A1 (bg)
PL (1) PL201081B1 (bg)
PT (1) PT1268425E (bg)
SK (1) SK13922002A3 (bg)
TW (1) TWI318207B (bg)
WO (1) WO2001072707A2 (bg)
YU (1) YU73702A (bg)
ZA (1) ZA200207483B (bg)

Families Citing this family (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MXPA01010127A (es) 1999-04-09 2002-08-20 Cytovia Inc Inhibidores de la caspasa y el uso de los mismos.
BR0013666A (pt) 1999-08-27 2002-05-14 Cytovia Inc "alfa"-hidróxi-ácidos substituìdos inibidores de caspases e o seu uso
CN1994298A (zh) * 2000-03-29 2007-07-11 沃泰克斯药物股份有限公司 氨基甲酸酯天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶抑制剂及其用途
PE20011350A1 (es) 2000-05-19 2002-01-15 Vertex Pharma PROFARMACO DE UN INHIBIDOR DE ENZIMA CONVERTIDORA DE INTERLEUCINA-1ß (ICE)
US20040192889A1 (en) * 2001-03-30 2004-09-30 Dale Bredesen Cytotoxic peptides and peptidomimetics based thereon, and methods for use thereof
US7351702B2 (en) * 2001-05-23 2008-04-01 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Caspase inhibitors and uses thereof
EP1485107A1 (en) 2002-02-11 2004-12-15 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Phospholipids as caspase inhibitor prodrugs
EP1499898A2 (en) * 2002-04-19 2005-01-26 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Regulation of tnf-alpha
EP1447093A1 (en) * 2003-02-14 2004-08-18 Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts Inhibition of the CD95 ligand/receptor system for the treatment of neurological disorders and injuries
US20060217299A1 (en) * 2003-02-24 2006-09-28 Hirofumi Doi Degradation inhibitor for hepatitis b virus x interacting protein
AU2003902704A0 (en) * 2003-05-29 2003-06-19 Crc For Waste Management And Pollution Control Limited Of Unsw Process for producing a nanoscale zero-valent metal
KR101135765B1 (ko) 2004-03-12 2012-04-23 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 아스파르트산 아세탈 카스파아제 억제제의 제조를 위한방법 및 중간체
US7544855B2 (en) * 2004-04-23 2009-06-09 Buck Institute Transgenic mouse whose genome comprises an APP having a mutation at amino acid 664
JP4848367B2 (ja) * 2004-05-15 2011-12-28 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド Ｉｃｅインヒビターを使用した発作の処置
KR100619440B1 (ko) 2004-05-20 2006-09-08 한기종 포름아마이드 유도체 제조방법
EP2295054A1 (en) 2004-05-27 2011-03-16 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Ice inhibitors for the treatment of autoinflammatory diseases
KR100619439B1 (ko) 2004-05-27 2006-09-08 한기종 포밀기 도입된 아민유도체의 제조방법
US8012751B2 (en) * 2005-03-31 2011-09-06 Wisconsin Alumni Research Foundation Differentiation of pluripotent embryonic stem cells
CA2616337A1 (en) * 2005-07-28 2007-02-08 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Caspase inhibitor prodrugs
US8073703B2 (en) 2005-10-07 2011-12-06 Panasonic Corporation Acoustic signal processing apparatus and acoustic signal processing method
EP1956898A2 (en) 2005-11-30 2008-08-20 Massachusetts Institute of Technology Pathogen-detecting cell preservation systems
CA2649877A1 (en) * 2006-04-24 2007-12-21 Gloucester Pharmaceuticals Gemcitabine combination therapy
CA2656487A1 (en) * 2006-07-07 2008-01-17 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Selective caspase inhibitors
WO2008021745A2 (en) * 2006-08-16 2008-02-21 Itherx Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c virus entry inhibitors
WO2008063727A2 (en) * 2006-08-21 2008-05-29 United Therapeutics Corporation Combination therapy for treatment of viral infections
WO2008106167A1 (en) * 2007-02-28 2008-09-04 Conatus Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy comprising matrix metalloproteinase inhibitors and caspase inhibitors for the treatment of liver diseases
WO2008137567A1 (en) * 2007-05-01 2008-11-13 Cedars-Sinai Medical Center Caspase inhibitors in the treatment of infection-associated preterm delivery
KR101009588B1 (ko) * 2008-06-04 2011-01-20 거진산업주식회사 미세여과막을 이용한 부유고형물 처리장치
JP2012051804A (ja) * 2008-12-26 2012-03-15 Kyoto Univ Ｅｇ５阻害剤
KR101010350B1 (ko) * 2009-03-26 2011-01-25 삼성중공업 주식회사 역세척 여과장치
US20140309172A1 (en) 2010-11-05 2014-10-16 Dagmar Ringe Ice inhibiting compounds and uses thereof
TW201236239A (en) * 2010-11-16 2012-09-01 Solvay Rechargeable metal or metal-ion cell
EP2490021A1 (en) 2011-02-18 2012-08-22 Biotempt B.V. Modulators of PRR and GPCR signalling
US9956260B1 (en) 2011-07-22 2018-05-01 The J. David Gladstone Institutes Treatment of HIV-1 infection and AIDS
WO2015175381A1 (en) 2014-05-12 2015-11-19 Conatus Pharmaceuticals, Inc. Treatment of the complications of chronic liver disease with caspase inhibitors
WO2017079566A1 (en) 2015-11-05 2017-05-11 Conatus Pharmaceuticals, Inc. Caspase inhibitors for use in the treatment of liver cancer
KR20180101418A (ko) 2015-12-31 2018-09-12 코나터스 파마슈티칼스, 인크. 간 질환의 치료에서의 카스파제 억제제의 사용 방법
CA3039283A1 (en) 2016-10-05 2018-04-12 Novartis Ag Combination compositions comprising fxr agonists for treating or preventing a fibrotic,cirrhotic disease or disorder
CN110944985B (zh) * 2017-05-24 2022-12-13 特拉维夫大学拉玛特有限公司 用于蛋白酶的成像/检测的化学发光探针
WO2022123062A1 (en) 2020-12-11 2022-06-16 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Blocking caspase and/or fasl for preventing fatal outcome in covid-19 patients

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1991015577A1 (en) 1990-04-04 1991-10-17 Black, Roy, A. INTERLEUKIN 1'beta' PROTEASE
HU220098B (hu) 1991-08-30 2001-10-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Interleukin-1 béta proteáz enzim, és interleukin-1 béta proteáz inhibitorok
EP0618223A3 (en) 1993-03-08 1996-06-12 Sandoz Ltd Peptides, the release of Interleukin 1-Bêta, useful as anti-inflammatory agents.
WO1996030395A2 (en) 1995-03-31 1996-10-03 Takeda Chemical Industries, Ltd. Cysteine protease inhibitor
WO1997024339A1 (fr) 1995-12-27 1997-07-10 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Derives de tetrazole et medicaments les contenant a titre d'ingredients actifs
JP3492703B2 (ja) 1996-09-12 2004-02-03 アイドゥン ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド システインプロテアーゼのＩＣＥ／ｃｅｄ―３ファミリーの阻害剤としてのＣ―末端変性（Ｎ―置換）―２―インドリルジペプチド
BR9712987A (pt) * 1996-10-11 2000-04-18 Warner Lambert Co Inibidores de enzima de conversão de interleucina-1beta de sulfonamida
WO1998016502A1 (en) 1996-10-11 1998-04-23 Warner-Lambert Company ASPARTATE ESTER INHIBITORS OF INTERLEUKIN-1β CONVERTING ENZYME
US6184210B1 (en) 1997-10-10 2001-02-06 Cytovia, Inc. Dipeptide apoptosis inhibitors and the use thereof
CN1138472C (zh) 1997-10-10 2004-02-18 西托维亚公司 二肽型编程性细胞死亡抑制剂及其用途
JP2002506829A (ja) 1998-03-16 2002-03-05 サイトビア インコーポレイテッド ジペプチドのアポトーシスインヒビターおよびそれらの使用
US6242422B1 (en) 1998-10-22 2001-06-05 Idun Pharmacueticals, Inc. (Substituted)Acyl dipeptidyl inhibitors of the ice/ced-3 family of cysteine proteases
DE60030097T2 (de) 1999-03-16 2007-03-08 Cytovia, Inc., San Diego Substituierte 2-aminobenzamin caspase inhibitoren und ihre verwendung
MXPA01010127A (es) 1999-04-09 2002-08-20 Cytovia Inc Inhibidores de la caspasa y el uso de los mismos.
BR0013666A (pt) * 1999-08-27 2002-05-14 Cytovia Inc "alfa"-hidróxi-ácidos substituìdos inibidores de caspases e o seu uso
CN1994298A (zh) * 2000-03-29 2007-07-11 沃泰克斯药物股份有限公司 氨基甲酸酯天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶抑制剂及其用途

Also Published As

Publication number Publication date
PT1268425E (pt) 2008-04-01
JP2008266348A (ja) 2008-11-06
SK13922002A3 (sk) 2003-09-11
DE60132567T2 (de) 2009-01-22
PL358430A1 (en) 2004-08-09
WO2001072707A3 (en) 2002-05-23
AU4961901A (en) 2001-10-08
WO2001072707A2 (en) 2001-10-04
US20040053920A1 (en) 2004-03-18
KR20020086711A (ko) 2002-11-18
EA200201030A1 (ru) 2003-02-27
PL201081B1 (pl) 2009-03-31
DE60132567D1 (de) 2008-03-13
HRP20020782A2 (en) 2004-12-31
CA2403959A1 (en) 2001-10-04
NO325062B1 (no) 2008-01-28
EA005740B1 (ru) 2005-06-30
MXPA02009633A (es) 2003-03-10
ATE384695T1 (de) 2008-02-15
CZ20023227A3 (cs) 2003-01-15
HK1052355A1 (en) 2003-09-11
PE20011267A1 (es) 2001-12-15
NZ521639A (en) 2004-05-28
IL151829A0 (en) 2003-04-10
JP2003528855A (ja) 2003-09-30
BR0109588A (pt) 2003-02-04
ZA200207483B (en) 2003-09-18
AR027993A1 (es) 2003-04-23
KR100858640B1 (ko) 2008-09-17
EP1268425B1 (en) 2008-01-23
CN1422253A (zh) 2003-06-04
NO20024661D0 (no) 2002-09-27
TWI318207B (en) 2009-12-11
US6689784B2 (en) 2004-02-10
HUP0301472A2 (hu) 2003-08-28
DK1268425T3 (da) 2008-05-05
HUP0301472A3 (en) 2005-04-28
YU73702A (sh) 2006-03-03
CN1994298A (zh) 2007-07-11
NO20024661L (no) 2002-11-26
EP1268425A2 (en) 2003-01-02
ES2296742T3 (es) 2008-05-01
CN100358869C (zh) 2008-01-02
AU2001249619B2 (en) 2006-08-17
JP4298200B2 (ja) 2009-07-15
EE200200550A (et) 2004-02-16
HK1052355B (zh) 2008-06-27
IL151829A (en) 2012-03-29
US20020028803A1 (en) 2002-03-07
US7074782B2 (en) 2006-07-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
BG107136A (bg) Карбаматни инхибитори на каспазата и тяхното приложение
US7442790B2 (en) Caspase inhibitors and uses thereof
AU2001249619A1 (en) Carbamate caspase inhibitors and uses thereof
US6800619B2 (en) Caspase inhibitors and uses thereof
JP4676676B2 (ja) カスパーゼ阻害剤としての複素環ジカルバミド
US20020061853A1 (en) Caspase inhibtors and uses thereof
IL213397A (en) Protection module with buffer zone and method for creating it
EP1923386A2 (en) Carbamate caspase inhibitors and uses thereof