PL180281B1 - Antymikrobiologiczna farmaceutyczna lub kosmetyczna kompozycjaoraz sposób wytwarzania nienasyconych kwasów dikarboksylowych PL PL - Google Patents
Antymikrobiologiczna farmaceutyczna lub kosmetyczna kompozycjaoraz sposób wytwarzania nienasyconych kwasów dikarboksylowych PL PLInfo
- Publication number
- PL180281B1 PL180281B1 PL93308222A PL30822293A PL180281B1 PL 180281 B1 PL180281 B1 PL 180281B1 PL 93308222 A PL93308222 A PL 93308222A PL 30822293 A PL30822293 A PL 30822293A PL 180281 B1 PL180281 B1 PL 180281B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- acid
- unsaturated
- dicarboxylic acids
- derivative
- acids
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C57/00—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms
- C07C57/02—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms with only carbon-to-carbon double bonds as unsaturation
- C07C57/13—Dicarboxylic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/33—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing oxygen
- A61K8/36—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
- A61K8/362—Polycarboxylic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/10—Anti-acne agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q15/00—Anti-perspirants or body deodorants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q17/00—Barrier preparations; Preparations brought into direct contact with the skin for affording protection against external influences, e.g. sunlight, X-rays or other harmful rays, corrosive materials, bacteria or insect stings
- A61Q17/005—Antimicrobial preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/02—Preparations for care of the skin for chemically bleaching or whitening the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/08—Anti-ageing preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q5/00—Preparations for care of the hair
- A61Q5/006—Antidandruff preparations
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Birds (AREA)
- Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
1. Antymikrobiologiczna farmaceutyczna lub kosmetyczna kompozycja, zwlaszcza przeciw Propionibac- terium acnes i Staphylococcus aureus, równiez do rozjasniania skóry, zawierajaca skladnik aktywny i dermatolo- gicznie dopuszczalny kosmetyczny nosnik, znamienna tym, ze jako skladnik aktywny zawiera od 0,001% do 20% wagowych nienasyconego alifatycznego kwasu dikarboksylowego o 8 do 22 atomach wegla i/lub alkoholo- wej, amidowej lub estrowej pochodnej nienasyconego alifatycznego kwasu dikarboksylowego zawierajacej od 15 do 22 atomów wegla w glównym lancuchu weglowodorowym.. 6. Sposób wytwarzania nienasyconych kwasów dikarboksylowych o 8 do 22 atomach wegla, znamienny tym, ze nienasycony(-e) C1 0 - 2 4 monokarboksylowy(-e) kwas(-y) lub jego(ich) pochodna(-e) w postaci kwasu hydroksykarboksylow ego(-ych), albo C 1 6 - 2 2 nienasycony kw as(-y) tluszczow y(-e), jego(ich) estr(-y), zwlaszcza triglicerydy ewentualnie w postaci olejów, albo C 1 0 -2 4 alken(-y), nienasycony(-e) akanol(-e) o lancuchu dluzszym niz pozadany produkt poddaje sie ograniczonemu beta-utlenianiu, z uzyciem drozdzy roz- mnazajacych sie w pozywce wzrostowej, korzystnie szczepu Candida cloacae 5GLA12, stosujac pH w zakresie 7,1- 7,6, a z brzeczki fermentacyjnej wydziela sie produkt przez zakwaszanie i ekstrakcje eterem dietylowym. PL PL
Description
Przedmiotem wynalazku jest antymikrobiologiczna farmaceutyczna lub kosmetyczna kompozycja i sposób wytwarzania nienasyconych kwasów dikarboksylowych.
Związki wytwarzane sposobem według wynalazku mogą być stosowane na skórę w celach kosmetycznych, takich jak usuwanie trądzika i do rozjaśniania skóry.
Znane jest stosowanie nasyconych kwasów dikarboksylowych (o wzorze ogólnym COOH(CH2)nCOOH) na skórę w celach medycznych i kosmetycznych. Na przykład patent
180 281
Stanów Zjednoczonych US 4386104 (Nazzaro-Porro) ujawnia nasycone kwasy dikarboksylowe, zawieraj ące 7 do 13 atomów węgla stosowane do leczenia trądzika i innych schorzeń skórnych.
Szczególnie o nasyconym kwasie dikarboksylowym C9 (kwas azelainowy) o wzorze COOH(CH2)7COOH często wspomina się jako o skutecznym w leczeniu trądzika i innych schorzeniach skóry jak i w rozjaśnianiu skóry.
Przedmiotem wynalazku jest antymikrobiologiczna farmaceutyczna lub kosmetyczna kompozycja, zwłaszcza przeciw Propionibacterium acnes i Staphylococcus aureus, również do rozjaśniania skóry, zawierająca składnik aktywny i dermatologicznie dopuszczalny kosmetyczny nośnik, charakteryzująca się tym, że jako składnik aktywny zawiera od 0,001% do 20% wagowych nienasyconego alifatycznego kwasu dikarboksylowego o 8 do 22 atomach węgla i/lub alkoholowej, amidowej lub estrowej pochodnej nienasyconego alifatycznego kwasu dikarboksylowego zawierającej od 15 do 22 atomów węgla w głównym łańcuchu węglowodorowym.
Korzystnie kompozycja zawierajeden lub więcej niżjeden nienasycony kwas dikarboksylowy C16 i/lub jego wyżej określonąpochodną, albo jeden lub więcej niżjeden nienasycony kwas dikarboksylowy C18 i/lub jego wyżej określoną pochodną.
Szczególnie korzystną pochodną kwasu dikarboksylowego jest amid lub ester niższego alkilu.
Kompozycja według wynalazku szczególnie korzystnie zawiera 0,01% do 1%o wagowego składnika aktywnego.
Dalszym przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania nienasyconych kwasów dikarboksylowych o 8 do 22 atomach węgla, charakteryzujący się tym, że nienasycony C10.24 monokarboksylowy(-e) kwas(-y) lub jego(ich) pochodną(-e) w postaci kwasu hydroksykarboksylowego(-ych), albo C^.22 nienasycony kwas(-y) tłuszczowy(-e) jego(ich) ester(-y), zwłaszcza triglicerydy ewentualnie w postaci olejów, alken(-y), nienasycony(-e) alkanol(-e) o łańcuchu dłuższym niż pożądany produkt poddaje się ograniczonemu beta-utlenianiu, z użyciem drożdży rozmnażających się w pożywce wzrostowej, korzystnie szczepu Candida cloacae 5GLA12, stosując pH w zakresie 7,1-7,6; a z brzeczki fermentacyjnej wydziela się produkt przez zakwaszanie i ekstrakcje eterem dietylowym.
W korzystnym sposobie według wynalazku jako substrat stosuje się nienasycony związek C16-22·
Szczególnie korzystnie jako substrat stosuje się kwas oleinowy, kwas linolowy, kwas linolenowy lub kwas arachidowy.
Innym korzystnym substratemjest substrat zawierający trigliceryd nienasyconego kwasu.
W szczególnie korzystnych wykonaniach wynalazku stosuje się substrat zawierający olej z oliwek, olej słonecznikowy lub olej rycynowy.
W sposobie według wynalazku stosuje się drożdże rosnące w warunkach bez ograniczenia azotu.
Jak dotąd nienasycone kwasy dikarboksylowe nie były łatwo dostępne w handlu, chociaż sposób syntezy pewnych nienasyconych kwasów dikarboksylowych ujawniono w Europejskim Patencie EP-0229252. W rzeczywistości część tej klasy związków nie była wcześniej opisana, jakkolwiek wiadomo, że pewne nienasycone kwasy dikarboksylowe, zwłaszcza pewne C6, C8, C10 i C12 mono-nienasycone mogą być wykryte w moczu pacjentów z umiarkowanym niedoborem łańcucha koenzymu A dehydrogenazy (Jin and Tserng (1989) Journal of Lipid Research 31, 763-771). Pewne inne nienasycone kwasy dikarboksylowe są ujawnione w różnych innych publikacjach.
Europejski Patent EP-0341796 ujawnia mikrobiologiczny sposób wytwarzania nasyconych kwasów dikarboksylowych z nasyconych kwasów tłuszczowych (kwasów monokarboksylowych) o dłuższym łańcuchu lub z triglicerydów z użyciem beta-utleniających mutantów Candidia Cloacae. Obecnie twórcy niniejszego wynalazku, stosując mutanty ujawnione w Europejskim Patencie EP-0341796 wytworzyli pewne nienasycone kwasy dikarboksylowe, z których część jest nowych, a które jak stwierdzono mająnieoczekiwanie lepsze właściwości do stosowania na skórę w celach medycznych i kosmetycznych.
180 281
Sposobem według wynalazku wytwarza się polinienasycone kwasy dikarboksylowe (to znaczy kwasy dikarboksylowe zawierające 2 lub więcej podwójnych wiązań węgiel/węgiel), mające pomiędzy 8 a 22 atomów węgla (włącznie). Są to związki nowe wyłączając grupę związków składającą się z: kwasu 2,5-oktadienodikarboksylowego, kwasu 1,7-oktadienodikarboksylowego; kwasu 2,4,6-oktatriendikarboksylowego; kwasu 1,3,5,7-nonatetraenodikarboksylowego; kwasu 2,5,8-dekatrienodikarboksylowego; kwasu 3,6-dodekadienodikarboksylowego; i kwasu 3,13-heksadekadienodikarboksylowego. Związki wyliczone wyżej jako wyłączone są znane z różnych publikacji ze stanu techniki (na przykład Grundman, 1937 Ber. 70B, 1148-1153).
Wszystkie nowe związki mogąbyć zsyntetyzowane nowąmetodą, przedstawiona w szczegółach poniżej. Jest korzystne, aby związek był kwasem dikarboksylowym o parzystej liczbie określającej długość łańcucha węglowodorowego. Szczególnie korzystne są związki C16.
Innąkorzystna właściwościązwiązkówjest to, aby podwójne wiązania węgiel/węgiel były oddzielone dwoma pojedynczymi wiązaniami węgiel/węgiel (to znaczy podwójne wiązania mogą być korzystnie usytuowane przy atomach węgla 3 i 6 lub 2 i 5 itd.), jako że takie związki najłatwiej wytwarza się nowym sposobem według wynalazku.
Nieoczekiwanie stwierdzono, że nowe nienasycone kwasy dikarboksylowe, a w zasadzie ogólnie nienasycone kwasy dikarboksylowe (zwłaszcza nienasycone kwasy dikarboksylowe C16 i C18) mają znacznie większą aktywność niż odpowiadające im nasycone dikarboksylowe jako środki antymikrobiologiczne i środki kosmetyczne.
Ze stanu techniki wynika, że do przypadków nadających się do traktowania kwasami dikarboksylowymi należą: trądzik (Patent Stanów Zjednoczonych Ameryki US-4386104); zmarszczki (Patent Europejski EP-336880); czerniak złośliwy (Patent Stanów Zjednoczonych Ameryki US-4818768); dermatozy (Patent Europejski EP-229654); dermatozy z przebarwieniem i egzema (Patent Stanów Zjednoczonych Ameryki US-4292326) trądzik różowaty (Patent Europejski EP-890308); piegi (Patent Japoński JP-91024412), łojotok (Patent Niemiecki DE-3133425) i liszajec.
Podobnie ze stanu techniki wynika, że pewne pochodne kwasów dikarboksylowych są również skuteczne w leczeniu pewnych schorzeń. Do takich związków należą estry i sole (Patent Stanów Zjednoczonych Ameryki US-4818768) i merkaptopochodne kwasów dikarboksylowych (Patent Stanów Zjednoczonych Ameryki US-4292326). Inne publikacje literaturowe dotyczące użyteczności pochodnych kwasów dikarboksylowych to na przykład Japoński Patent JP-58170713, Europejski Patent EP-0297436 i Europejski Patent EP-0305407. Niemieckie zgłoszenie patentowe nr DE-4033567 ujawnia między innymi, pochodne monoestrowe kwasów dikarboksylowych C3-C14 (główny łańcuch węglowodorowy) (które mogą być nasycone lub nienasycone) jako środki przeciw łojotokowe do stosowania w kosmetyce lub w farmacji do nakładania miejscowego na włosy i skórę.
Sposób działania na ludzką skórę w celach medycznych lub kosmetycznych związkami wytwarzanymi sposobem według wynalazku polega na stosowaniu nienasyconych kwasów dikarboksylowych i/lub pochodnych nienasyconych kwasów dikarboksylowych, które to pochodne zawierają 15 lub więcej atomów węgla w głównym łańcuchu węglowodorowym.
Określenie „główny łańcuch węglowodorowy” użyte w odniesieniu do pochodnych kwasów dikarboksylowych jest pomyślany jako określające część cząsteczki usytuowaną pomiędzy atomami tlenku dwóch karboksylowych grup kwasowych (lub ich przekształconych w pochodne reszt). Stąd, na przykład pochodne mające wzór R-OOC-CH^COO-R1 i R-OOC-CłL-CTh-COO-R1 byłyby opisane jako mające odpowiednio łańcuchy węglowodorowe C3 i C4. Pochodnymi mogą być na przykład alkohole, podstawione lub niepodstawione amidy, mono- lub diestry (arylowe lub alkilowe, zwłaszcza niższe estry alkilowe).
Nienasycone kwasy dikarboksylowe stosowane w części wynalazku odnoszącej się do sposobu, korzystnie zawierają8 do 22 atomów węgla, z najkorzystniej 16 lub 18 atomów węgla. Pochodna nienasyconego kwasu dikarboksylowego korzystnie zawiera 16 do 18 atomów węgla w głównym łańcuchu węglowodorowym.
180 281
Stwierdzono, że pewne nienasycone kwasy dikarboksylowe są szczególnie aktywne przeciw Propionibacterium acnes (P. acnes) i Staphylococcus auresu (Staph. aureus), stąd na ogół można również uznać związki wytworzone sposobem według wynalazku jako przydatne do leczenia wszelkich przypadków, gdzie wiadomo, lub podejrzewa się, że P. acnes i/lub Staph. aureus stanowią przyczynę powstawania, trwania lub zaostrzenia schorzenia.
Nienasycone kwasy dikarboksylowe mogąbyć stosowane do leczenia wielu schorzeń skóry, takich jak trądzik itp., omówionych wyżej w stanie techniki. Podobnie pomyślane sąodniesienia do pochodnych takich jak estry i sole omówione w stanie techniki.
Do innych przypadków, jakie mogą być podatne na poprawę stanu przy stosowaniu nienasyconych kwasów dikarboksylowych lub ich pochodnych należą łupież oraz występowanie nadmiernego zapachu ciała. Ponadto twórcy niniejszego wynalazku wykazali, że nienasycone kwasy dikarboksylowe nieoczekiwanie okazały się skuteczne jako inhibitory tyrozynazy i jako inhibitory syntezy melaniny w hodowanych komórkach w testach służących do oceny aktywności związków jako środków rozjaśniających skórę.
Sposób rozjaśniania skóry za pomocą związków wytworzonych sposobem według wynalazku polega na stosowaniu niensacyconych kwasów dikarboksylowych lub ich pochodnych w postaci farmaceutycznych lub kosmetycznych kompozycji, które zawierają jeden lub więcej nienasycony kwas dikarboksylowy i/lub pochodną nienasyconego kwasu dikarboksylowego, która to pochodna zawiera 15 lub więcej atomów węgla w głównym łańcuchu węglowodorowym. Zazwyczaj takie kompozycje formuje się w postać do miejscowego stosowania na skórę. Nienasycone kwasy dikarboksylowe i ich pochodne łatwo włącza się do takich kompozycji, które na przykład mogą przybierać postać kremów, płynów lub żeli. Odpowiednie preparaty są dobrze znane specjalistom z tej dziedziny i sąujawnione, na przykład w Patencie Stanów Zjednoczonych Ameryki US-4818768.
Sposób wytwarzania antybakteryjnych lub rozjaśniających skórę kompozycji do stosowania miejscowego na skórę polega na zmieszaniu skutecznej ilości nienasyconego kwasu dikarboksylowego lub jego pochodnej z dermatologicznie dopuszczalnym kosmetycznym lub farmaceutycznym nośnikiem.
Możliwe jest stosowanie nienasyconego kwasu dikarboksylowego i/lub pochodnej nienasyconego kwasu dikarboksylowego, która to pochodna zawiera 15 lub więcej atomów węgla w głównym łańcuchu węglowodorowym, jako aktywnej substancji terapeutycznej. Możliwe jest stosowanie nienasyconego kwasu dikarboksylowego lub jego pochodnej jako środka rozjaśniającego skórę i/lub środka antymikrobiologicznego. Kwasy dikarboksylowe stosowane w takich kompozycjach mogą być wytwarzane niżej opisaną nową metodą. Alternatywnie mogą być one wytwarzane znanymi metodami, na przykład ujawnionymi w Patencie Europejskim EP-029506 albo według Uemura i in. (1988, Proceedings ofWorld Conference on Biotechnology for the Fats and Oil Industry, American Oil Chemists Society), według Buhler i Schindlera (1984 w „Aliphatic Hydrocarbons in Biotechnology, Rehm and Reed (Eds.) 169, Verlag Chemie, Weiheim) lub według Picataggio i in. (1992, Biotechnology 10, 894-898). Pewne nienasycone kwasy dikarboksylowe mogą być dogodnie wytwarzane z nienasyconych materiałów wyjściowych o dłuższym łańcuchu z użyciem mutantów ujawnionych w Europejskim Patencie EP-0341796, które uprzednio były stosowane do wytwarzania związków nasyconych. Dalszym aspektem wynalazku jest sposób wytwarzania nienasyconych kwasów dikarboksylowych przez ograniczone beta-utlenianie (skrócenie łańcucha) nienasyconych materiałów wyjściowych o dłuższym łańcuchu z użyciem drożdży rozmnażających się w pożywce wzrostowej.
Korzystnie wytwarzane są niensasyone kwasy dikarboksylowe C8-C22, a najkorzystniej C16 lub Cu. Odpowiednie do tego celu drożdże ujawnione są w Europejskim Patencie EP-0341796 i przez Casey i in., /(1990) Journal of General Microbiology, 136, 1197-1202.
Szczepy takie (na przykład Candida cloacae 5GLA12, w skrócie oznaczane „LA 12”) wykazują ograni czoną lub zmniejszoną aktywność beta-utleniania.
180 281
Drożdże dogodnie wprowadza się do nienasyconych kwasów tłuszczowych występujących w postaci estrów, korzystnie w postaci estrów triglicerydowych takich jak olej. Do szczególnie odpowiednich przykładów należąnienasycone oleje takie jak olej słonecznikowy i olej z oliwek.
Korzystnie oleje użyte jako materiały wyjściowe są triglicerydami, w których dominującym nienasyconym kwasem tłuszczowym o długim łańcuchu jest związek C16-C22 albo bardziej korzystnie C20 lub C18. Korzystnie materiał wyjściowy jest głównie polinienasycony. Fermentacja takich materiałów wyjściowych przez szczepy takie jak LA12 może spowodować wytwarzanie mieszanin nienasyconych kwasów dikarboksylowych o skróconych łańcuchach (przeważnie związków C8-C18). Taka mieszanina produktów może być rozdzielona na frakcj ę, na przykład przez różnicową ekstrakcję rozpuszczalnikową.
Jeśli założyć, że podczas beta-utleniania występuje losowe usuwanie jednostek C2 i, że nie zachodzi izomeryzacja produktów, to przy użyciu kwasu oleinowego jako substratu, można przewidzieć tworzenie się następujących produktów: kwas cis-7-heksadecenodikarboksylowy; kwas cis-5-tetradecenodikarboksylowy; kwas cis-7-tetradecenodikarboksylowy; kwas cis-3-dodecenodikarboksylowy; kwas cis-5-dodecenodikarboksylowy; kwas cis-3-decenodikarboksylowy; kwas cis-5-decenodikarboksylowy i kwas cis-3-oktenodikarboksylowy.
Natomiast z kwasu linolowego można oczekiwać następujących produktów: kwas cis-6,9-heksadekadienodikarboksylowy; kwas cis-4,7-heksadekadienodikarboksylowy; kwas cis-5,8-tetradekadienodikarboksylowy; kwas cis-4,7-tetradekadienodikarboksylowy; kwas cis-2,5-tetradekadienodikarboksylowy; kwas cis-3,6-dodekadienodikarboksylowy; kwas cis-4,7-dodekadienodikarboksylowy; kwas cis-2,5-dodekadienodikarboksylowy; kwas cis-3,6-dekadienodikarboksylowy; kwas cis-2,5-dekadienodikarboksylowy; kwas cis-2,5-oktadienodikarboksylowy; kwas cis-4-decenodikarboksylowy i kwas cis-2-oktenodikarboksylowy.
Podobnie, przy użyciu kwasu linolenowego jako materiału wyjściowego przewidywane produkty są następujące: kwas cis-4,7,10-heksadekatrienodikarboksylowy; kwas cis-6,9,12-heksadekatrienodikarboksylowy; kwas cis-2,5,8-tetradekatrienodikarboksylowy; kwas cis-4,7,10-tetradekatrienodikarboksylowy; kwas cis-2,5,8-dodekatrienodikarboksylowy i kwas cis-3,6-dodekadienodikarboksylowy; kwas cis-2,5,8-dekatrienodikarboksyłowy; kwas cis-3,6-dekadienodikarboksylowy; kwas cis-4-decenodikarboksylowy; kwas cis-2,5-oktadienodikarboksylowy; kwas cis-4-oktenodikarboksylowy i kwas cis-2-oktenodikarboksylowy.
We wszystkich przypadkach mieszanina produktów będzie zawierać niewielkie ilości produktów o tej samej długości łańcucha jak związek wyjściowy.
W rzeczywistości, ponieważ korzystnymi substratami są estry nienasyconych kwasów tłuszczowych (zwłaszcza estry kwasów tłuszczowych Cj to produkty fermentacji zależą od wyjściowych substratów. Tak więc przez dobór substratów można wytworzyć cały zakres nienasyconych kwasów dikarboksylowych.
Pewne odpowiednie substraty są zidentyfikowane w Patencie Europejskim EP-0229252 i obejmują one C0-C24 alkeny i inne nienasycone węglowodory takie jak nienasycone alkanole (zwłaszcza C16, C^ i C22 nienasycone alkanole) odpowiadające im kwasy monokarboksylowe lub ich pochodne kwasy hydroksykarboksylowe. Oczywiście, że tam, gdzie związkami wyjściowymi są związki trans-nienasycone, produktami będątrans-nienasycone produkty.
Jest wysoce korzystną właściwością sposobu według wynalazku, ze drożdże zastosowane w procesie nie rozmnażają się w warunkach ograniczonego dostępu azotu. W przeciwieństwie do metody opisanej w Patencie Europejskim EP-0341796, drożdże w sposobie według wynalazku rosną w warunkach, które są wzbogacone azotem, przy czym zmiana wartości pH wpływa na aktywność organizmu prowadzącego beta-utlenianie skracające łańcuch.
Stwierdzono, że profil składu produktu procesu fermentacji może być dogodnie modyfikowany przez zmianę pH środowiska fermentacji podczas wytwarzania nienasyconych kwasów dikarboksylowych. W szczególności możliwe jest na tej drodze zmienianie względnych stężeń cząsteczek kwasów dikarboksylowych o różnych długościach. Na przykład przez zmniejszenie pH z 7,5 do 7,1 podczas fermentacji oleju z oliwek możliwe jest zwiększenie względnej ilości nienasyconego kwasu dikarboksylowego C^. Jest to znaczące, ponieważ pewne frakcje produ180 281 któw fermentacji mogą mieć specjalnie korzystne właściwości do poszczególnych zamierzonych zastosowań. Różne frakcje różnych produktów mogą być otrzymane ze środowiska hodowli przez ekstrakcje eterem dietylowym po skorygowaniu fazy wodnej do różnych kwasowych wartości pH.
Różne aspekty wynalazku staną się bardziej zrozumiałe przez odniesienie do poniższych przykładów ilustrujących i rysunków, z których:
Figura 1 stanowi wykres stężenia kwasu dikarboksylowego (gramów na litr) w czasie, przy zastosowaniu jako substratu oleju słonecznikowego;
Figura 2 stanowi wykres stężenia kwasu dikarboksylowego (gramów na litr) w czasie przy zastosowaniu jako substratu oleju z oliwek;
Figura 3 stanowi wykres stężenia kwasu dikarboksylowego (gramów na litra) w czasie przy zastosowaniu jako substratu oleju z oliwek w warunkach zmiany pH;
Figura 4 stanowi graficzne przedstawienie procentowego zmniejszenia melaniny przez kwasy dikarboksylowe o średniej długości łańcucha, otrzymane z oleju słonecznikowego.
Przykładl . Wytwarzanie przez fermentacje nienasyconych kwasów dikarboksylowych o średniej długości łańcucha Beta-utleniający mutant Candida cloacae wytworzony przy użyciu nitrozoguanidyny (mutant LA12, patrz EP 0341796, jak również Casey i in., J. Gen. Microbiol (1990),136,1197-1202) użyto do produkcj i nienasyconych kwasów dikarboksylowych C8-C M z triglicerydów takichjak olej z oliwek i olej słonecznikowy, które zawierają znaczne ilości nienasyconych kwasów tłuszczowych. Zastosowano chemicznie zdefiniowane środowisko przedstawione niżej:
Sacharoza | 20 g/1 Ί | |
(NH4)2HPO4 | ógg ( | amoki aw 20 minut |
kh2po4 | 64 g/l | r w temp. 121°C |
Nl2SO4 | 1,5 ggl | |
Trigliceryd | 10-40 n/l/1 J | |
(na przykład olej | z oliwek lub olej słonecznikowy) | |
ZnSO4 -7H2O | 20 mg/1 | |
MnSO4 -4H2O | 20 mg/1 | | Sterylizowane przez sączenie |
FeSO4 · 7H2O | 20 mg/1 | 1 dodawane aseptycznie |
MgCl2 · 6H2O | 2 g/l | Y poochlodzeniu fennentera |
Biotyna 100 mg/1
Pantotenat 6 mg/1
Tiamina 8 mg/1
Kwas nikotynowy 30 mg/l
Pirydoksyna 20 mg/l
Warunki fermentera były następujące:
pH wzrostu: | 6,8 ' | Utaymywome |
pH produkcji | 7,4-7,5 | ' przez autodozowanie |
Temperatura: | 30°C | 10nNaOH |
Napowietrzanie: 0,1 objlobjim powietrza
Szybkość wirnika: δΟΟΗΟΟΟ obr/min.
Objętość fermentera: 2,5 l
Inokulum: 2%
Typ fermentera: Laminowanylateksem SLL - (Iow solidlatex) z łamaczem piLay
Środowisko (2,51) zaszczepiono 2% (objlobj) 24 godzinnąku/turąmutantL betL-utleaiaaiL Candida clnacae LA 12 wyhodowa^nego w środowisku ekstraktu drożdży (5 gil), sacharozy (10 gil) i peptonu (5 gil). Kultura wzrastała w ciągu 20 godzin przy pH 6,8, po czym dodano 20 mlll oleju, a pH podwyższono do 7,4-7,6 w celu zapoczątkowania produkcji nienasyconych kwasów dikarboksytowych o średniej długości łańcucha. Olejem był zarówno olej słonecznikowy lub oczysz8
180 281 czany na krzemionce olej z oliwek. Podczas produkcji kwasów dikarboksylowych wartość RQ (respiratory quotient - iloraz respiracji) spadła do około 0,6. Każdego dnia z fermentera pobierano próbki (10-20 ml) do analizy lipidów, po czym dodawano dodatkowy olej według potrzeby. Wynik fermentacji zbierano po ustaniu produkcji w 8-12 dniu.
Nienasycone kwasy dikarboksylowe o średniej długości łańcucha izolowano z brzeczki fermentacyjnej przez zakwaszenie do pH 6 przy pomocy HCl i następną ekstrakcję eterem dietylowym, izolując frakcje bogatą w C12-C14.
Brzeczkę zakwaszono następnie HCL do pH około 2,0 po czym ekstrahowano eterem dietylowym, izolując frakcję bogatą w C8-C10.
W celu izolacji mieszaniny kwasów brzeczkę zakwasza się jednorazowo obniżając pH z 7,5 do około 2,0 po czym ekstrahuje się eterem dietylowym.
Rozpuszczalnik usuwano z frakcji kwasów dikarboksylowych w wyparce obrotowej.
Przebieg czasu produkcji nienasyconych kwasów dikarboksylowych o średniej długości łańcucha z oleju słonecznikowego (SFO-Sunflower oil) i z oczyszczonego na krzemionce oleju z oliwek (OO - oliwe oil) przedstawiają odpowiednio figura 1 i 2.
Figura 1 przedstawia wytwarzanie nienasyconych kwasów dikarboksylowych C8-C14 indywidualnie i łącznie z użyciem jako substratu oleju słonecznikowego. Szybkość produkcji nienasyconych kwasów dikarboksylowych o średniej długości łańcucha wzrastała gwałtownie pomiędzy 3 i 4 dniem i faktycznie ustała do zera w 8 dniu, kiedy to stężenie kwasów dikarboksylowych stało się mniej więcej stałe.
Figura 2 przedstawia wytwarzanie nienasyconych kwasów dikarboksylowych C8-C14 indywidualnie i łącznie z użyciem jako substratu oleju z oliwek. W tym przypadku szybkość produkcji kwasów dikarboksylowych wykazywała mniej gwałtowny wzrost, ale stale wzrastała do 8 dnia.
W obu przypadkach dłuższe kwasy dikarboksylowe (C14, C12) stanowiły procentową większość całości niż kwasy dikarboksylowe o krótszym łańcuchu (C10, C8) jakkolwiek dokładny profil produktu różnił się pomiędzy obydwoma substratami (na przykład stosunkowo więcej produktu Cw uzyskano przy użyciu jako substratu oleju słonecznikowego). Dane te również przedstawiono w postaci tabelarycznej w tabeli 1.
Tabela 1
Czas fermentacji (dni) | Kwas dikarboksylowy g/l | |||||||||
C14 | C12 | C10 | C8 | Łącznie C8-C14 | ||||||
SFO | OO | SFO | OO | SFO | OO | SFO | OO | SFO | OO | |
2 | 1,7 | 0,6 | 0,5 | 0,2 | 0,2 | - | 0,1 | - | 2,5 | 0,8 |
3 | 2,7 | 1,5 | 0,9 | 0,4 | 0,6 | 0,1 | 0,2 | 0,1 | 4,1 | 2,1 |
4 | 5,7 | 3,0 | 2,3 | 0,9 | 1,8 | 0,2 | 0,6 | 0,2 | 10,4 | 4,3 |
5 | 7,4 | 3,9 | 3,4 | 1,3 | 2,6 | 0,3 | 0,8 | 0,2 | 14,2 | 5,7 |
6 | 8,4 | 5,1 | 4,2 | 3,7 | 3,2 | 0,7 | 1,0 | 0,4 | 16,8 | 8,9 |
7 | 8,4 | 6,8 | 4,5 | 3,6 | 3,5 | 1,0 | 1,1 | 0,6 | 17,5 | 12 |
8 | 8,7 | 8,8 | 4,7 | 5,1 | 3,4 | 1,2 | 1,3 | 0,8 | 18,1 | 15,9 |
Przykład II. Zmiana profilu produktu przez zmianę pH
Przy pH produkcji 7,4-7,6 z olejów (na przykład z oleju z oliwek) zawierających nienasycone kwasy tłuszczowe CR dominującym produktem jest nienasycony kwas dikarboksylowy C14. Jednakjeśli pH produkcji obniży się z 7,4-7,6 do około 7,1 dominującym produktem staje się nienasycony kwas dikarboksylowy C^. Fermentację prowadzono jak szczegółowo przedstawiono w powyższych przykładach aż do 8 dnia fermentacji, kiedy to pH obniżyło się do 7,1 powodując zwrot z CR i wzrost produkcji C12. Wyniki te ilustruje figura 3.
180 281
Figura 3 przedstawia wytwarzanie nienasyconych kwasów dikarboksylowych Cg-C^ indywidualnie i łącznie z użyciem jako substratu oleju z oliwek, gdzie w 8 dniu skorygowano pH z 7,5 do 7,1.
Jak wynika z figury 2 łączna produkcja kwasów dikarboksylowych dalej wzrasta po 8 dniu przy użyciu jako substratu oleju z oliwek. Jednak profil produktu jest znacznie zmieniony. Do 8 dnia stężenie kwasu dikarboksylowego CM stale wzrastało i był on najbardziej stężonym produktem. Jednak po punkcie zmiany warunków pH, stężenie zaczęło zmniejszać się, podczas gdy produkt C12 zaczął wzrastać tak, że po 10 dniu kwas dikarboksylowy Cn reprezentować większość produktu. Dane te są również przedstawione w postaci tabelarycznej w tabeli 2.
Tabela 2
Dzień fermentacji | Kwas dikarboksylowy (g/l) | Łącznie | ||||
C,6 | C14 | C12 | C10 | C8 | C8“Gi6 | |
1 | 0,1 | 0,6 | 0,1 | 0 | 0 | 0,8 |
2 | 0,52 | 0,7 | 0,2 | 0 | 0 | 1,42 |
3 | 0,9 | 1,5 | 0,4 | 0,1 | 0,1 | 3,0 |
4 | 1,6 | 3,0 | 0,9 | 0,2 | 0,1 | 5,8 |
5 | 2,1 | 4,4 | 1,3 | 0,3 | 0,2 | 8,3 |
6 | 1,5 | 5,5 | 2,7 | 0,7 | 0,4 | 10,8 |
7 | 0,6 | 7,1 | 3,6 | 1,0 | 0,6 | 12,9 |
8 Zmiana pH z 7,5-7,1 | 0,6 | 8,8 | 5,1 | 1,4 | 0,8 | 16,7 |
9 | 0,4 | 8,2 | 6,1 | 1,9 | 0,9 | 17,5 |
10 | 0,13 | 8,2 | 8,0 | 2,3 | 1,2 | 21,0 |
11 | 0,25 | 8,0 | 9,6 | 3,1 | 1,4 | 22,35 |
12 | 0,1 | 7,5 | 10,6 | 3,6 | 1,5 | 23,2 |
13 | 0,1 | 6,8 | 12,2 | 4,3 | 1,8 | 25,2 |
Doświadczenie to pokazuje, że profil produktu może być w pewnym zakresie kontrolowany przez pH produkcji. Szybkość wytwarzania dikarboksylowych C8-C1() pozostaje w zasadzie liniowa po zmianie pH produkcji.
Przykład III. Próba inhibitowania tyrozynazy
Inhibitowanie aktywności tyrozynazy jest stosowane do identyfikacji potencjalnych środków rozjaśniania skóry. Próbę inhibitowania tyrozynazy przeprowadzono według metody Humada i Mishima (Br. J. Derm. (1972), 86,385-394). Wszystkie roztwory były świeżo przygotowane z użyciem buforu (pH 6,8) 0,1 M fosforanu sodu jako rozcieńczalnika. Były to:
- 40 mM podstawowy roztwór inhibitora, z którego sporządzono serię rozcieńczeń otrzymując następujące stężenia 4,0; 0,4 i 0,04 mM inhibitora.
- Roztwór soli zawierający siarczan miedzi (100 pM) i chlorek magnezu (100 mM);
- Roztwór enzymu: 1 mł grzybowej tyrozynazy (2000-4000 jednostek na mg); oraz
- Roztwór substratu: 48 mg dihydroksyfenyloalaniny (DOPA)/100 ml
Roztwory enzymu i DOPA sporządzano bezpośrednio przed użyciem, ponieważ są one wrażliwe na światło.
Inhibitowanie katalizowanego przez tyrozynazę utleniania DOPA przez kwasy dikarboksylowe śledzono spektrofotometrycznie monitorując formowanie się barwnika „dopachrome” przy długości fali 492 nm. Reakcje prowadzono w 96-krotnych płytkach do mikromiareczkowania
180 281 przez dodanie 30 μΐ inhibitora (lub buforu do kontroli), 50 μΐ buforu i 20 μΐ roztworu soli. DOPA (50 μΐ) dodano celem zapoczątkowania reakcji i każdą płytkę wstrząsano w ciągu 30 sekund. Odczytu absorbancji dokonywano po 10 minutach z użyciem czytnika płytek do mikromiareczko wania (Titertek Multiscan).
Wyniki próby inhibitowania tyrozynazy pokazały, że podobnie jak kwas azelainowy, nienasycone kwasy dikarboksylowe o średniej długości łańcucha okazały się skutecznymi inhibitorami tyrozynazy, w wyniki co najmniej 50% inhibitowania aktywności enzymu przy stężeniu 10 mM. Jest to nieoczekiwane, ponieważ kwas azelainowy jest nasyconym kwasem dikarboksylowym i mającym wyraźnie różne właściwości. Kwas azelainowy w temperaturze pokojowej jest krystalicznym ciałem stałym, podczas gdy nienasycone kwasy dikarboksylowe C8/C10 są oleistymi substancjami o niskiej temperaturze topnienia.
Możliwe, że enzym reduktazy tioredoksyny jest bardziej znaczącym enzymem niż tyrozynaza w odniesieniu do regulowanego przez kwasy dikarboksylowe inhibitowania pigmentacji skóry. Ostatnie badania (opisane przez Fittońa i Goa w Drugs 41, (5), 780-798(1991)) pokazały, ze kwas azelainowy inhibituje reduktazę tioredoksyny. W świetle ujawnienia w tym opisie specjaliści powinni zatem oczekiwać, że nienasycone kwasy dikarboksylowe powinny być inhibitorami również tego enzymu.
Przykład IV. Inhibitowanie wytwarzania melaniny.
W dalszej próbie uzupełniającej przykład III badano wpływ działania nienasyconych kwasów dikarboksylowych in vitro na kultury melanocytów. Komórki wytwarzające pigment, pochodzące z czerniaka ssaków hodowano w kulturze standardowymi metodami. Korzystne są linie komórek B16 (ujawnione w Patencie Europejskim 0338104), lub komórki S-91 (na przykład ATCC CCL 51.3, klon M-3), jakkolwiek mogąbyć użyte inne linie pierwszorzędowych melanocytów myszy lub ludzkie. Komórki czerniaka hodowano w kompletnym środowisku hodowli komórek (takimjak opisano w Patencie Europejskim 0308919) w przybliżeniu do 1/3 konfluencji. Następnie do środowiska hodowli dodaje się kompozycję przeznaczoną do badania. Komórki hodowano w ciągu następnych 4 dni, a ilość wytworzonej melaniny określano przez pomiar absorbcji przy 540 nm całej melaniny wyekstrahowanej ze środowiska hodowli i z zebranych komórek.
Opisana wyżej metodę stosowano do oceny zdolności kompozycji zawierających nienasycone kwasy dikarboksylowe frakcji (C12-C14), frakcji (C8.10) lub mieszaninę kwasów w stężeniu 0,1 mM lub 1,0 mM, zmniej szania ilości wytwarzanej melaniny przez hodowle melanocytów, w stosunku do negatywnej hodowli kontrolnej. Jako pozytywnej kontroli użyto kwas kojowy (substancję stosowanąjako środek do rozjaśniania skóry). Wyniki przedstawia figura 4, która stanowi graficzny obraz procentowego zmniejszenia melaniny w hodowlach poddanych działaniu w porównaniu do kontrolnej nie poddanej działaniu. Stwierdzono, że różne frakcje kwasów dikarboksylowych w tym względzie miały w zasadzie podobne działanie.
Przykład V. Określenie aktywności antymikrobiologicznej.
Minimalne stężenie inhibitujące (MIC - Minimum Inhibitory Concentration) każdej z różnych mieszanin nienasyconych kwasów dikarboksylowych określano wrażliwość 32 szczepów Propionobacterium acnes i 32 szczepów różnych rodzajów bakterii aerobowych w obecności lub pod nieobecność 10% Intralipid (Kabi Pharmacia, Inc.), stosując technikę rozcieńczenia agarem.
Stosowano niżej opisaną metodę.
Roztwór podstawowy dla każdego środka sporządzano przez dodanie 10 gramów materiału stanowiącego kwas dikarboksylowy do 200 mililitrów trypsynowej brzeczki sojowej o podwójnej mocy (TSB - Tryptic Soy Broth - Baltimore Biological Laboratories). W każdym roztworze korygowano pH do 7,0±0,2 przy pomocy wodorotlenku sodu.
Dla każdego kwasu organicznego przygotowano dwa zestawy 200 ml kolb numerowanych 1 do 9. Do każdej kolby wprowadzono 50 cm3 TBS o podwójnej mocy. Z 5% roztworu podstawowego 50 cm3 przeniesiono do kolb nr 1 i nr 2. Przeprowadzono szereg przeniesień 50 cm3 od kolby nr 2 do kolby nr 8. Kolba nr 9 w każdym zestawie zawierała jedynie 50 cm3 TSB o podwójnej mocy bez jakiegokolwiek kwasu dikarboksylowego. Do każdej z 18 kolb dodano 2 gramy
180 281 granulowanego agaru (BBL). Wszystkie kolby autoklawowano w ciągu 15 minut w temperaturze 121 °C, pod ciśnieniem 15 psi (98,0665 kPa), po czym przetrzymywano w temperaturze 50°C na łaźni wodnej.
Do jednego zestawu kolb nr 1-9 dodano 50 cm3 gorącej, sterylizowanej wody. Kolby obracano w celu wymieszania zawartość i 25 cm3 wylano do każdej z czterech szalek Petriego i pozostawiono do zestalenia się. Do drugiego zestawu kolb dodano 50 cm3 Intralipid (wstępnie ogrzanego do 50°C). Zawartość wymieszano i wylano jak wyżej.
Standardowe inokula organizmów testowanych wytworzono przez wprowadzenie zawiesiny bakteryjnej w 0,85% PSS (physiological saline solution - roztwór soli fizjologicznej) do 0,5 standardu McFarland'a i dziesięciokrotne rozcieńczenie uzyskując 107 CFU (colony forming units - jednostki tworzące kolonię). Inokula były umieszczone w 32 studzienkach replikatora sterującego. Wielokrotnie rozgałęziony inokulator dostarcza od 0,001 do 0,002 cm3, co daje końcowe inokulum wynoszące 104 CFU na miejsce.
Płytki zaszczepiono od najniższego do najwyższego stężenia (celem zmniejszenia efektu „przeniesienia” inokulum) i pozostawiono do wyschnięcia. Płytki następnie odwrócono i inkubowano w temperaturze 35°C w ciągu 24 godzin. Płytki szczepione szczepami Propionibacterium acnes inkubowano w warunkach anaerobowych w temperaturze 35°C w ciągu siedmiu dni. Płytki kontrolne bez środka (nr 9) badano na koniec inkubacji na żywotność i oznaki zanieczyszczeń.
Końcowe wartości MIC określano przez obserwację płytki przy najniższym stężeniu środka, jakie inhibitowało widoczny wzrost mikroorganizmu. Wyniki zestawione w tabeli 3 przedstawiająMIC dla nienasyconych kwasów dikarboksylowych o średniej długości łańcucha (Mieszanina kwasów dikarboksylowych, to znaczy mieszanina dikarboksylowych kwasów Cs-C14), frakcji wzbogaconej w C^ i dla mononienasyconych związków C18 H w porównaniu z kwasem azelainowym wobec szeregu mikroorganizmów. Dane reprezentują wyniki eksperymentów, które zostały w zasadzie przeprowadzone na szeregu różnych szczepów każdego rodzaju (na przykład P. acnes szczep ATCC 6919 i 29399 [ATCC oznacza American Type Culture Collection]; Staph.aureus szczep ATCC 25923; 35556 i 29213; Staph.epidermidis aTcC 35984, 31432 i 14490; Micrococcus sedentarius ATCC 27574; M. luteus AtCc 27141, 9341 i 15957; Brevibacterium epidermidis ATCC 35514; Corynebacterium minutissium ATCC 23347,22348 i 23349).
Obecność lub brak „Intralipidu” nie miały znaczącego wpływu. Nieznaczną różnicę zaobserwowano jedynie dla mononienasyconych związków C18 b gdzie wystąpiła sugestia, że intralipid podwyższa MIC w przypadku Pacnes i M.luteus.
W niniejszym opisie, zgodnie z nomenklaturą kwasów tłuszczowych oznaczenie dikarboksylowy kwas Cj81 oznccza kwas dikarooksykwy oeiemnastowęglowy, prostołańcucliowy o jednym wiąonziu podwójnym, nnnlogiczzie dikarbsksylswy kwas C^ 2 oznacza kwas dikarboksylowy soeszastowęgloww o dwóch wiązaniach podwójnych.
180 281
Pr^óilaa dyfuzji agarowej MIIC dla kwasu azelainowego w stosunku do nienasyconych kwasów dikarboksylowych
Kwas dikarboks. Ci81 kwasu | oleinowego + „Intralipid” | 0 02 | CM O 0 | 0.15 | rc 0 | 0.31 | 1 ιε 0 | ιε 0 | l£ 0 | 0 07 | 0.07 | £00 | £00 | © | 0 15 | 0.15 | 0.15 | to © | CM Λ | >2.5 | >25 | |
c/i 7 44 22 F M w C3 C3 £ ΐ G * | z kwasu oleinowego | s © | 0.04 | 0 07 | 0 07 | 0 15 | 031 | 0.31 | 0.31 | 0 15 | 0 15 | 0.15 | 0.15 | 0.15 | i/T © | 0.15 | 0 15 | 0 15 | >2 5 | </T >2 5 | >2 5 | |
Typ kwasu dikarboksylowego (MK % | Mieszane kwayy dikarboks | z oleju słonecznikowego | l£ 0 | 0 62 | 1.25 | 0 62 | 25 | «η CM | 25 | CM | CM O | 0 62 | 0.62 | 0 62 | 0.62 | 0.62 | CM kO O | 0 62 | 0 62 | >2 5 | >25 | > 2.5 |
Mononienasycone kwayy dikarb. | wzbogacone C12 z oteju z oliwek | •Zł | 0 62 | CM | 0.62 | CM | CM | CM | CM | CM | CM | 0.62 | CM | CM | CM | tc | V2 | ι/Ί | ||||
CC 0 | m 0 | cm | 0.3 | kO © | 90 | 90 | 90 | © | kO © | kO © | kO © | kO © | kO © | CM Λ | >2. | CM A | ||||||
Mieszane kwasy dikarboks. | z oljju z oliwek | 031 | CM | in | «η | V) | in CM | 15 | CM | 0 62 | CM | 62 | CM | >2 | V2 | |||||||
CC © | 0 0 | CC Ó | CM | 1 2 | CM | CM | I—· | © | CM | kO © | 0.6 | 0 6 | >2. | CM | >2. | |||||||
© | © | 5 | ||||||||||||||||||||
Kwas azelainowy | 1.25 | •n CM | ci | 1 25 | «η CM | >25 | >2.5 | >2.5 | L 2·5 | 25 | >2.5 | >2.5 | >2.5 | >2 5 | >2.5 | >2.5 | >2.5 | > 2.5 | •O ci | >2.5 | ||
Źródło | ATCC 6919 | ATCC 29399 | ATCC 25923 | ATCC 35556 | ATCC 29213 | ATCC 35894 | ATCC 31432 | ATCC 14490 | ATCC 27574 | ATCC 27141 | ATCC 9341 | ATCC 15957 | ATCC 35514 | NCDO 2285 | ATCC 23347 | ATCC 23348 | ATCC 23349 | ATCC 27853 | ATCC 25922 | ATCC 18804 | ||
Szczep | Propioniaactesium acnes 1 | Propn^iuaaiętesium acnes | Staphylococcus aureus | Staphylo^t^c^^^us aureus | Staphylococcus aureus | Staphylococcus epidermidis | Staphylococcus epidermidis | S^hylococcus epidermidis | Mlargaoccus sedentnus | Micrococcus luteus j | Micrococcus luteus | Micrococcus luteus | 1 Brevibactesjum epidermidis | Brevibacteslum epidermidis | Corynebacteslum minutissium | Corynebactesjum minutissium | 1 minutissium | Pseudomonas aeruginosa | Esi^łierichia coli | 1 Candida albicans |
180 281
P. acnes jest głównym czynnikiem sprawczym trądzika, stąd skuteczność przeciw temu organizmowi określa przydatność w zapobieganiu i leczeniu trądzika.
Staphylococcus aureus jest patogennym organizmem gram-dodatnim, związanym z czyrakami i ropieniami.
Candida albicans jest odpornym drożdżem włączonym jako negatywna kontrola.
Pseudomonas aeruginosa i Escherichia coli obydwa są pospolitymi Gram ujemnymi organizmami.
Nieoczekiwanie we wszystkich przypadkach nienasycone kwasy dikarboksylowe (zarówno związki o średniej długości łańcucha jak i C18) okazały się bardziej aktywne niż kwas azelainowy. Związki były szczególnie skuteczne przeciw P.acnes, Staph.aureus i Staph.epidermidis. Szczególnie związki Cu wykazywały aktywność antymikrobiologiczną wielokrotnie większą niż kwas azelainowy.
Podobny eksperyment przeprowadzono, stosują tę sama metodę, w celu porównania stopnia aktywności inhibitowania (dla P.acnes) kwasu azelainowego, kwasu dikarboksylowego (otrzymanego z substratu zawierającego kwas oleinowy), mieszanego kwasu tłuszczowego (monokarboksylowego) C^ j, odpowiednich dikarboksylowych kwasów C^ i i C^ 2 (otrzymanych z substratu zawierającego kwas linolowy) i kwasu dikarboksylowego C16i (otrzymanego z substratu zawierającego kwas oleopalmitynowy).
Wyniki przedstawiono niżej w tabeli 4
MIC dla kwasu azelainowego i dikarboksylowego kwasu C·^ w zasadzie były jak poprzednie, potwierdzające wcześniejsze wyniki. Odpowiedni kwas tłuszczowy miał bardzo małą aktywność.
Tak więc kwas dikarboksylowy C^· miał prawie 100 krotną aktywność kwasu azelainowego, natomiast ekwiwalentny kwas tłuszczowy oleinowy jest mniej aktywny niż kwas azelainowy.
W doświadczeniu 4 stopień inhibitowania kontrolnego kwasu azelainowego, a zatem również próbek badanych był nieco mniejszy niż obserwowany w poprzednich doświadczeniach.
Tabela 4
MIC kwasów dikarboksylowych przeciw P. acnes ATCC 25746 w porównaniu z kontrolnym kwasem azelainowym i kwasem oleinowym
Materiał badany | MIC (%) | |||
Dośw. 1 | Dośw. 2 | Dośw. 3 | Dośw. 4 | |
Kwas azelainowy (kontrola) | 5 | 5 | 5 | >5 |
Kwas tłuszczowy C18 1 (kontrola) | nd | nd | >5 | nd |
Kwas dikarboksylowy C181 z kwasu oleinowego | 0.04 | 0.04 | 0.04 | 0.08 |
Kwas dikarboksylowy C18 2/181 z 60% kwasu linolowego | nd | nd | nd | 0.08 |
Kwas dikarboksylowy C161 z kwasu oleopalmitynowego | nd | nd | nd | 0.16 |
W doświadczeniu 4 stopień inhibitowania kontrolnego kwasu azelainowego, a zatem również próbek badanych był nieco mniejszy niż obserwowano uprzednio.
Najprawdopodobniej przyczyną tego był wydłużony okres inkubacji do 18 dni w przeciwieństwie do 7 dni w poprzedniej pracy.
180 281
Przykład IV. Kompozycja kremu. | |
Składnik | % wagowy |
Nienasycony kwas | |
diOzrboksyloww C8.22 | 1^,0 |
Chlorokreool | 0,1 |
Dwutlenek tytanu | 1,0 |
Kwas salicylowy | 2,0 |
Monostea^nian glicerolu | 2,0 |
Alkohol cetylowy | 3,0 |
Tween 80 | 5,0 |
Laurylseterosinrcznn sodu | 10,0 |
Etanolonminolauryloeterssiarczzz | 1,0 |
Olej z oliwek | 2,0 |
Witamina C | 1,0 |
Woda destylowana | do 100% |
180 281
— C1-4 —ł— C12 CIO
-θ- C8 łącznie C8-CJĄ
Fig. 1
180 281
- C 14 -ł- C12 CIO
-θ- C8 —X—łącznie C8-C14
Fig.2
180 281
- 06 -I- 04
-Θ- CIO C8 —0-łącznie C8-C16
Fig. 3
180 281
Ο,ΙιτιΜ Ε2 l.OmM
Fig. 4
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 70 egz. Cena 4,00 zł.
Claims (11)
- Zastrzeżenia patentowe1. Antymikrobiologiczna farmaceutyczna lub kosmetyczna kompozycja, zwłaszcza przeciw Propionibacterium acnes i Staphylococcus aureus, również do rozjaśniania skóry, zawierająca składnik aktywny i dermatologicznie dopuszczalny kosmetyczny nośnik, znamienna tym, że jako składnik aktywny zawiera od 0,001% do 20% wagowych nienasyconego alifatycznego kwasu dikarboksylowego o 8 do 22 atomach węgla i/lub alkoholowej, amidowej lub estrowej pochodnej nienasyconego alifatycznego kwasu dikarboksylowego zawierającej od 15 do 22 atomów węgla w głównym łańcuchu węglowodorowym.
- 2. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że zawiera jeden lub więcej niż jeden nienasycony kwas dikarboksylowy C16 i/lub jego wyżej określoną pochodną.
- 3. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że zawiera jeden lub więcej niż jeden nienasycony kwas dikarboksylowy C18 i/lub jego wyżej określoną pochodną.
- 4. Kompozycja według zastrz. 1 albo 2, albo 3, znamienna tym, że jako pochodną kwasu dikarboksylowego zawiera amid lub ester niższego alkilu.
- 5. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że zawiera 0,01% do 1%o wagowego składnika aktywnego.
- 6. Sposób wytwarzania nienasyconych kwasów dikarboksylowych o 8 do 22 atomach węgla, znamienny tym, że nienasycony(-e) CI0.24 monokarboksylowy(-e) kwas(-y) lub jego(ich) pochodną(-e) w postaci kwasu hydroksykarboksylowego(-ych), albo C]6.22 nienasycony kwas(-y) tłuszczowy (-e), jego(ich) estr(-y), zwłaszcza triglicerydy ewentualnie w postaci olejów, albo Cw.24 alken(-y), nienasycony(-e) akanol(-e) o łańcuchu dłuższym niż pożądany produkt poddaje się ograniczonemu beta-utlenianiu, z użyciem drożdży rozmnażających się w pożywce wzrostowej, korzystnie szczepu Candida cloacae 5GLA12, stosując pH w zakresie 7,1 - 7,6, a z brzeczki fermentacyjnej wydziela się produkt przez zakwaszanie i ekstrakcję eterem dietylowym.
- 7. Sposób według zastrz. 6, znamienny tym, że jako substrat stosuje się nienasycony związek C^.
- 8. Sposób według zastrz. 6 albo 7, znamienny tym, że jako substrat stosuje się kwas oleinowy, kwas linolowy, kwas linolenowy lub kwas arachidowy.
- 9. Sposób według zastrz. 6 albo 7, znamienny tym, że stosuje się substrat zawierający trigliceryd nienasyconego kwasu.
- 10. Sposób według zastrz. 6 albo 7, znamienny tym, że stosuje się substrat zawierający olej z oliwek, olej słonecznikowy lub olej rycynowy.
- 11. Sposób według zastrz. 6 albo 7, znamienny tym, że stosuje się drożdże rosnące w warunkach bez ograniczenia azotu.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GB929220667A GB9220667D0 (en) | 1992-09-30 | 1992-09-30 | Improvements in or relating to dioic acids |
PCT/GB1993/002006 WO1994007837A1 (en) | 1992-09-30 | 1993-09-27 | Unsaturated aliphatic dicarboxylic acids |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
PL308222A1 PL308222A1 (en) | 1995-07-24 |
PL180281B1 true PL180281B1 (pl) | 2001-01-31 |
Family
ID=10722786
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
PL93308222A PL180281B1 (pl) | 1992-09-30 | 1993-09-27 | Antymikrobiologiczna farmaceutyczna lub kosmetyczna kompozycjaoraz sposób wytwarzania nienasyconych kwasów dikarboksylowych PL PL |
Country Status (18)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US5753704A (pl) |
EP (1) | EP0662946B2 (pl) |
JP (1) | JP3533218B2 (pl) |
KR (2) | KR100221504B1 (pl) |
AT (1) | ATE163913T1 (pl) |
AU (1) | AU688274B2 (pl) |
BR (1) | BR9307142A (pl) |
CA (1) | CA2144312C (pl) |
CZ (1) | CZ288838B6 (pl) |
DE (1) | DE69317433T3 (pl) |
ES (1) | ES2114616T5 (pl) |
GB (1) | GB9220667D0 (pl) |
HU (1) | HU226010B1 (pl) |
MY (1) | MY110734A (pl) |
PL (1) | PL180281B1 (pl) |
SK (1) | SK281584B6 (pl) |
WO (1) | WO1994007837A1 (pl) |
ZA (1) | ZA937148B (pl) |
Families Citing this family (33)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB9220670D0 (en) * | 1992-09-30 | 1992-11-11 | Unilever Plc | Cosmetic composition |
DE4435188A1 (de) * | 1994-09-30 | 1996-04-04 | Beiersdorf Ag | Verwendung von alpha,omega-Alkandicarbonsäuren gegen Superinfektionen |
GB9814733D0 (en) | 1998-07-07 | 1998-09-02 | Unilever Plc | Method of reducing or preventing malodour |
GB9814732D0 (en) * | 1998-07-07 | 1998-09-02 | Unilever Plc | Method of reducing or preventing malodour |
CN1195486C (zh) * | 1999-07-26 | 2005-04-06 | 花王株式会社 | 除臭剂 |
US8026280B2 (en) | 2001-03-27 | 2011-09-27 | Errant Gene Therapeutics, Llc | Histone deacetylase inhibitors |
US7842727B2 (en) * | 2001-03-27 | 2010-11-30 | Errant Gene Therapeutics, Llc | Histone deacetylase inhibitors |
US7312247B2 (en) | 2001-03-27 | 2007-12-25 | Errant Gene Therapeutics, Llc | Histone deacetylase inhibitors |
US6495719B2 (en) | 2001-03-27 | 2002-12-17 | Circagen Pharmaceutical | Histone deacetylase inhibitors |
DE10150731A1 (de) * | 2001-10-13 | 2003-04-17 | Beiersdorf Ag | Wirkstoffkombination zur Verhinderung unerwünschter Hautpigmentierung |
WO2003032941A2 (de) * | 2001-10-13 | 2003-04-24 | Beiersdorf Ag | Kosmetische und/oder dermatologische wirkstoffkombination |
EP1448157A1 (de) * | 2001-11-09 | 2004-08-25 | Beiersdorf AG | Kosmetische und/ oder dermatologische zubereitung enthaltend octadecendicarbons aeure und uv-filtersubstanzen |
EP1511477A4 (en) * | 2002-05-22 | 2008-04-09 | Errant Gene Therapeutics Llc | HISTONE DEACETYLASE INHIBITORS BASED ON ALPHA-KETO-EPOXYDE COMPOUNDS |
DE10238449A1 (de) * | 2002-08-22 | 2004-03-04 | Beiersdorf Ag | Kosmetische und/oder dermatologische Zubereitung |
WO2004046104A2 (en) * | 2002-11-20 | 2004-06-03 | Errant Gene Therapeutics, Llc | Treatment of lung cells with histone deacetylase inhibitors |
DE10305965A1 (de) * | 2003-02-12 | 2004-08-26 | Beiersdorf Ag | Kosmetische und/oder dermatologische Zubereitung |
EP1817020A4 (en) * | 2004-11-08 | 2012-11-21 | Errant Gene Therapeutics Inc | INHIBITORS OF HISTONATE ACETYLASE |
DE102005032307A1 (de) * | 2005-07-11 | 2007-01-18 | Plt Patent & Licence Trading Ltd. | Oligomere freier Fettsäuren und diese enthaltende Arzneimittel |
EP1940346A2 (en) * | 2005-09-30 | 2008-07-09 | The Procter and Gamble Company | Composition for regulation of mammalian keratinous tissue |
GB0603865D0 (en) * | 2006-02-27 | 2006-04-05 | Unichema Chemie Bv | Methods for production of dioic acids |
US20070243154A1 (en) * | 2006-04-13 | 2007-10-18 | L'oreal | Solubilization of acid ingredients |
FR2958541B1 (fr) | 2010-04-08 | 2012-05-18 | Sederma Sa | Utilisation cosmetique du geranylgeranyl-2-propanol |
FR2958641B1 (fr) | 2010-04-08 | 2014-12-26 | Sederma Sa | Nouveaux composes de type polyterpenique, compositions cosmetiques, nutraceutiques et pharmaceutiques les contenant et utilisations dans ces domaines. |
FR2970868B1 (fr) | 2011-01-31 | 2023-10-27 | Sederma Sa | Extrait d'origine vegetale, composition le contenant, procede d'obtention par culture vegetale et utilisations dans les domaines cosmetique, pharmaceutique et cosmeceutique |
FR2975904B1 (fr) | 2011-06-01 | 2013-08-23 | Sederma Sa | Nouvelle utilisation topique, cosmetique ou dermopharmaceutique, d'un melange comprenant un tripeptide du type ghk et un tetrapeptide du type gqpr |
FR2978351B1 (fr) | 2011-07-28 | 2014-02-21 | Sederma Sa | Materiel d'origine vegetale, composition le contenant, et utilisation topique cosmetique |
CN102617320A (zh) * | 2012-02-08 | 2012-08-01 | 上海凯赛生物技术研发中心有限公司 | 一种对含长链二元酸盐的反应液进行处理的方法 |
FR2997299B1 (fr) | 2012-10-30 | 2014-12-26 | Sederma Sa | Association d'extraits de plantes, ingredient actif cosmetique et composition les contenant, et utilisation topique cosmetique |
CN104693018A (zh) * | 2013-12-10 | 2015-06-10 | 上海凯赛生物技术研发中心有限公司 | 一种长链二元酸发酵液的破乳和精制方法 |
FR3024037B1 (fr) | 2014-07-25 | 2018-03-02 | Sederma | Ingredient actif cosmetique ou dermatologique comprenant un melange d'acides dicarboxyliques gras insatures, compositions le comprenant et utilisations cosmetiques ou dermatologiques |
JP6577666B2 (ja) | 2015-09-23 | 2019-09-18 | ロッテ ケミカル コーポレーション | 新規なカンジダ・インファンティコーラ菌株、その変異菌株及び形質転換菌株、及びそれを用いてジオイック酸類を生産する方法 |
KR101722328B1 (ko) * | 2015-09-23 | 2017-04-10 | 롯데케미칼 주식회사 | 캔디다 인판티콜라 균주를 이용한 디오익 산류의 생산방법 |
KR101847731B1 (ko) | 2016-09-22 | 2018-04-10 | 롯데케미칼 주식회사 | 디오익 산류를 생산하는 캔디다 인판티콜라 균주 |
Family Cites Families (21)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE698091C (de) * | 1936-06-27 | 1940-11-01 | I G Farbenindustrie Akt Ges | Verfahren zur Herstellung von Polyenpolycarbonsaeuren |
US2957907A (en) * | 1958-06-30 | 1960-10-25 | Diallyl ester of polycarboxylic | |
GB1013109A (en) † | 1963-03-14 | 1965-12-15 | Leveen Harry H | Composition for accelerating tissue growth |
CH482666A (fr) * | 1966-10-12 | 1969-12-15 | Rhone Poulenc Sa | Nouveau procédé de préparation de la pyrocine |
US3497435A (en) * | 1968-05-27 | 1970-02-24 | Sun Oil Co | Photoisomerization of alpha,alpha'-dimethylmuconic acid |
US3843466A (en) † | 1969-11-10 | 1974-10-22 | Ajinomoto Kk | Method of producing dicarboxylic acids by fermentation |
US3720773A (en) † | 1970-01-22 | 1973-03-13 | Purex Corp Ltd | Method and composition for the topical treatment of herpetic keratitis |
US3793367A (en) * | 1972-11-08 | 1974-02-19 | Zoecon Corp | Trialkyltridecatetraendioic acids and esters |
FR2244485A1 (en) * | 1973-08-06 | 1975-04-18 | Aries Robert | Lithium dicarboxylic acid salts - in compositions for treatment of psychoses, esp. manic depression |
JPS609722B2 (ja) † | 1979-12-05 | 1985-03-12 | 三省製薬株式会社 | 色白化粧料 |
JPS5765194A (en) † | 1980-10-09 | 1982-04-20 | Daicel Chem Ind Ltd | Microbial preparation of unsaturated dicarboxylic acid |
SU958409A1 (ru) † | 1980-12-12 | 1982-09-15 | Институт Химии Башкирского Филиала Ан Ссср | Способ получени 2е-додецен-1,12-дикарбоновой кислоты |
JPS57136508A (en) † | 1981-02-17 | 1982-08-23 | Sansho Seiyaku Kk | Whitening cosmetic |
JPS6046085B2 (ja) † | 1982-08-04 | 1985-10-14 | 株式会社資生堂 | 化粧料 |
JPS6087206A (ja) † | 1983-10-19 | 1985-05-16 | Shiseido Co Ltd | 半透明化粧料 |
JPS62195316A (ja) † | 1986-02-20 | 1987-08-28 | Kao Corp | 皮膚料 |
JPS63227511A (ja) † | 1987-03-13 | 1988-09-21 | Masayuki Morishita | 化粧品用酸性水 |
DE3721119A1 (de) * | 1987-06-26 | 1989-01-05 | Henkel Kgaa | Fermentative herstellung von dicarbonsaeuren |
JPH0818963B2 (ja) † | 1987-09-28 | 1996-02-28 | サンスター株式会社 | 美白化粧料 |
YU183988A (en) † | 1988-09-30 | 1990-08-31 | Lek Tovarna Farmacevtskih | Process for preparing dispersion pills of dihydroergotoxine |
US5254466A (en) † | 1989-11-06 | 1993-10-19 | Henkel Research Corporation | Site-specific modification of the candida tropicals genome |
-
1992
- 1992-09-30 GB GB929220667A patent/GB9220667D0/en active Pending
-
1993
- 1993-08-27 US US08/411,750 patent/US5753704A/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-09-27 WO PCT/GB1993/002006 patent/WO1994007837A1/en not_active Application Discontinuation
- 1993-09-27 PL PL93308222A patent/PL180281B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1993-09-27 AT AT93921002T patent/ATE163913T1/de not_active IP Right Cessation
- 1993-09-27 BR BR9307142A patent/BR9307142A/pt not_active Application Discontinuation
- 1993-09-27 ES ES93921002T patent/ES2114616T5/es not_active Expired - Lifetime
- 1993-09-27 EP EP93921002A patent/EP0662946B2/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-09-27 JP JP50881994A patent/JP3533218B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1993-09-27 SK SK405-95A patent/SK281584B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1993-09-27 DE DE69317433T patent/DE69317433T3/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-09-27 KR KR1019950701222A patent/KR100221504B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1993-09-27 AU AU48289/93A patent/AU688274B2/en not_active Ceased
- 1993-09-27 CA CA002144312A patent/CA2144312C/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-09-27 HU HU9500913A patent/HU226010B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1993-09-27 ZA ZA937148A patent/ZA937148B/xx unknown
- 1993-09-27 CZ CZ1995810A patent/CZ288838B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1993-09-29 MY MYPI93001978A patent/MY110734A/en unknown
-
1999
- 1999-04-26 KR KR1019997003634A patent/KR100270595B1/ko not_active IP Right Cessation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE69317433T2 (de) | 1998-08-20 |
JPH08502054A (ja) | 1996-03-05 |
HU9500913D0 (en) | 1995-05-29 |
JP3533218B2 (ja) | 2004-05-31 |
HUT70587A (en) | 1995-10-30 |
KR100221504B1 (ko) | 1999-09-15 |
HU226010B1 (en) | 2008-02-28 |
BR9307142A (pt) | 1999-03-30 |
ATE163913T1 (de) | 1998-03-15 |
CA2144312C (en) | 2007-04-24 |
DE69317433D1 (de) | 1998-04-16 |
EP0662946B1 (en) | 1998-03-11 |
EP0662946A1 (en) | 1995-07-19 |
EP0662946B2 (en) | 2001-12-12 |
KR100270595B1 (en) | 2000-11-01 |
DE69317433T3 (de) | 2002-05-29 |
ZA937148B (en) | 1995-03-27 |
SK281584B6 (sk) | 2001-05-10 |
ES2114616T5 (es) | 2002-07-16 |
CA2144312A1 (en) | 1994-04-14 |
CZ81095A3 (en) | 1996-03-13 |
SK40595A3 (en) | 1995-08-09 |
CZ288838B6 (cs) | 2001-09-12 |
GB9220667D0 (en) | 1992-11-11 |
AU688274B2 (en) | 1998-03-12 |
US5753704A (en) | 1998-05-19 |
MY110734A (en) | 1996-11-30 |
PL308222A1 (en) | 1995-07-24 |
WO1994007837A1 (en) | 1994-04-14 |
AU4828993A (en) | 1994-04-26 |
ES2114616T3 (es) | 1998-06-01 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
PL180281B1 (pl) | Antymikrobiologiczna farmaceutyczna lub kosmetyczna kompozycjaoraz sposób wytwarzania nienasyconych kwasów dikarboksylowych PL PL | |
JP6865193B2 (ja) | 寿命を拡大させ、かつ加齢関連疾患の発症を遅らせるための方法 | |
US5696169A (en) | Antibacterial and antifungal activity method, therapeutic method of infectious diseases and preserving method of cosmetics | |
EP0589047A1 (en) | Method of treating infectious disease, method of preventing putrefaction of cosmetic, and antibacterial/antifungal agent and cosmetic | |
JP4776058B2 (ja) | 皮膚改善剤 | |
EP0342055A2 (en) | Use of pyroglutamic acid alkyl esters for the manufacture of a medicament for the treatment of ichthyosis | |
US6734210B2 (en) | Therapeutically improved salts of azelaic acid | |
CN100531799C (zh) | 增强抗感染剂作用的制剂和方法 | |
US5650149A (en) | Cosmetic composition for proliferating indigenous bacteria on skin | |
US6039961A (en) | Lipophilic hydroxylated acid, its use in cosmetics and pharmacy, and its process of preparation | |
KR20120062615A (ko) | 부챗말 추출물 또는 분획물을 이용한 피부 외용제 조성물 | |
CA2258971C (fr) | Utilisation d'une composition cosmetique pour le traitement et la prevention de la rosacee | |
US10736938B2 (en) | Method for the treatment of acne | |
JP4349809B2 (ja) | コラーゲン生成促進剤 | |
JP4220769B2 (ja) | 抗アクネ菌組成物 | |
WO2022259727A1 (ja) | 抗菌性組成物の製造方法、抗菌性組成物、抗菌方法、抗菌剤、化粧料及び皮膚外用剤 | |
JP7168921B2 (ja) | 脂肪酸組成物およびその製造方法、ならびに該脂肪酸組成物を含有する皮膚外用剤、医薬部外品および化粧品 | |
AU6347199A (en) | Use of antifungal agents for treating scleroses | |
CN118236280A (zh) | 一种1,2-苯并异噻唑啉-3-酮水悬浮制剂及其制备方法 | |
FR3094215A1 (fr) | Utilisation de dianhydrohexitol pour éliminer les effets cosmétique de l’acné | |
JP2009102414A (ja) | コラーゲン生成促進剤 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20090927 |