Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania nowych pochodnych cefalosporyn o szczególnie in¬ teresujacych wlasnosciach leczniczych.Bardziej szczególowo, wynalazek dotyczy wytwa¬ rzania nowych cefalosporyn podstawionych w po¬ zycji 3 — grupa pirydyniotiometylowa.W belgijskim opisie patentowym nr 866 038 opi¬ sano szereg sufotlenków i sulfonów cefalosporyn o wzorze ogólnym 1, w którym X oznacza grupe SO lub S02. Sposród rodników oznaczonych jako A, w opisie tym wymieniono w szczególnosci grupy o wzorze CH2SR5, w których R5 moze oznaczac grupe pirydylowa, ewentualnie podstawiona.Cefalosporyny o wzorze 1 posiadaja bardzo silne dzialanie bakteriobójcze w stosunku do baterii Gram-dodatnich i Gram-ujemnych i sa niezwykle skuteczne przeciwko gronkowcom wytwarzajacym penicylinazy. Ponadto w opisie patentowym RFN nr 2 921332 opisano grupe cefalosporyn o wzorze ogólnym 2, w którym Y moze oznaczac grupe N-metylopdrydyniowa. Zwiazki te sa przedstawione jako antybiotyki o szerokim spektrum dzialania.Wynalazek pozwala na wytwarzanie nowych ce¬ falosporyn o zupelnie odmiennym profilu bakteryj¬ nym niz zwiazków z opisów patentowych przyto¬ czonych powyzej. Wytwarzane zwiazki posiadaja znaczna aktywnosc w stosunku do bakterii jelito¬ wych, w tym do bakterii produkujacych jff-lakta- mazy, dobra aktywnosc w stosunku do Pseudomo- 10 15 20 30 nas oraz slaba aktywnosc w stosunku do gran- kowców.Sposobem wedlug wynalazku nowe (pirydynio- tiometylo)cefalosporyny o wzorze ogólnym 3, w którym Ri oznacza atom wodoru lub grupe mety¬ lowa, R2 oznacza grupe metylowa lub Hi i Hi ra¬ zem oznaczaja grupe 1^-propylenowa, R» oznacza grupe metylowa, allilowa, 2-propinylowa lub kar- boetoksy metylowa, XQ oznacza anion kwaiu bro- mowodorowego lub trifluorooctowego, n jest równe 0 lub 1, R4 oznacza atom wodoru lub grupe hydro¬ ksylowa, jesli atom siarki grupy tiometylowej przy- laczony jest do pierscienia pirydyny w pozycji orto w stosunku do atomu azotu, zas B4 oznacza atom wodoru, jesli atom siarki grupy diometylowej przy¬ laczony jest do pierscienia pirydyny w pozycji para w stosunku do atomu azotu, Ra oznacza grupe -C009 lub grupe -COOA, w której A oznacza atom wodoru lub jon metalu alkalicznego, metalu ziem alkalicznych, lub grupe estrowa lub hemiace- talowa latwo ulegajaca hydrolizie lub metabolicz¬ nie labilna i farmaceutycznie dopuszczalna, taka jak ftalidylowa, pawoloiloksymetylowa, acetofcjy- metylowa, etoksykarbonyloksymetylowa, l-{etokay- karbonyloksy)etylowa, acetonylowa, a-meioksy-o- -karbometoksymetylowa, karbometoksymetylowa lub karboetoksyetylowa, w postaci syn, anti lub w postaci mieszaniny izomerów jak równiez soli ad¬ dycyjnych tych produktów z kwasami, wytwarza sie acylujac 1-S-tlenek 7-amino-3-bromometylo-3- 13$ 099136 099 3 4 -cefemokarboksylanu t-butylu o wzorze 4 aktywo¬ wanym kwasem o wzorze 5, w którym Ri i R2 maja wyzej podane znaczenie a Tr i P oznaczaja grupy ochronne, korzystnie tritylowa i t-butylowa odpowiednio, w srodowisku polarnego rozpuszczal¬ nika aprotycznego, po czym otrzymany produkt poddaje sie reakcjj z pirydynotionem-2 lub piry- dynotipciem-f o ^wzorze 7, która prowadzi sie w srodowisku polarnego rozpuszczalnika aprotyczne¬ go w temperaturze 0—50°C, nastepnie usuwa sie grupy ochronne przez hydrolize w srodowisku kwasnym i ewentualnie, gdy A oznacza atom wo¬ doru przeksztalca sie otrzymany produkt w sól, ester lub hemdacetal o wzorze 3, w którym Ri, R2, Rs, R4, R5, X0 i n maja wyzej podane znaczenie.W pewnych warunkach mozliwe jest równiez przeprowadzenie czwartorzedowego zwiazku amo- niowego w sól z pomoca funkcji karboksylowej przy pierscieniu cefemu. , Okreslenie jon metalu alkalicznego lub metalu ziem alkalicznych oznacza korzystnie jon sodowy, potasowy lub wapniowy.Wynalazek dotyczy wytwarzania zwiazków o wzo¬ rze 3 wybranych zwlaszcza sposród czwartorzedo¬ wej, nieorganicznej lub organicznej, farmaceutycz¬ nie dopuszczalnej soli izomeru syn 1-S-tlenku kwa¬ su , 7-[2-(2-aminotiazolilo-4)-2-(2-karboksy-2-propy- lo-oksyimino)-acetamido] -3 -(N-allilo-2-pirydyniotio- metylo)-3-cefemo-karboksylowego-4 o wzorze 3a i produktów otrzymanych przez przeprowadzenie w sól, estryfikacje lub hemiacetalizacje przynaj¬ mniej jednej grupy karboksylowej wymienionej soli i ewentualnie przeprowadzenie w sól funkcji aminowej wymienionej soli, lub tez czwartorzedo¬ wej soli wewnetrznej izomeru syn kwasu wymie¬ nionego powyzej, o wzorze 3b, oraz produktów otrzymanych przez przeprowadzenie w sól lub estryfikacje lub hemiacetalizacje funkcji kwasowej wymienionej wyzej soli wewnetrznej i ewentualnie przeprowadzanie w sól funkcji aminowej tej soli.Wynalazek dotyczy zwlaszcza wytwarzania trójflu- orooctanu izomeru syn 1-S-tlenku kwasu 7-[2-(2- -aminotiazolilo- 4)-2-(2-karboksy-2 - propylooksyimi- no)-acetamido]-3-(N-allilo-2 - pirydyniotiometylo)- 3- -cefemo-karboksylowego-4 lub tez bromku chloro¬ wodorku wymienionego kwasu.Sposób wytwarzania zwiazków o wzorze 3 przed¬ stawia cykl reakcji opisanych schematem 1.Pierwszy etap polega na acylowaniu 1-S-tlenku 7-amino-3-bromometylo-3-cefemokarboksylanu t-bu¬ tylu o wzorze 4 za pomoca kwasu o wzorze 5a, w którym Tr oznacza grupe tritylowa. Przed przepro¬ wadzeniem reakcji acylowania pozadane bylo pod¬ stawienie grupy aminowej kwasu o wzorze 5a grupa zabezpieczajaca, latwa do • pózniejszego usuniecia, a zwlaszcza grupe tritylowa. W celu przeprowadzenia reakcji acylowania nalezy doko¬ nac aktywacji grupy karboksylowej zwiazku o wzo¬ rze 5a, korzystnie przez przeprowadzenie w bez¬ wodnik za pomoca karbodwuimidu, zazwyczaj dwii- cykloheksylokarbodwuimidu.Reakcje aktywacji prowadzi sie w srodowisku dogodnego rozpuszczalnika organicznego takiego jak tetrahydrofuran w temperaturze o —50°, ko¬ rzystnie w temperaturze pokojowej Reakcja akty¬ wacji biegnie latwiej, gdy doda sie pochodna hyd¬ roksylowa taka jak 1-hydroksybenzotriazol. Tak otrzymany roztwór odczynnika acylujacego, po od¬ dzieleniu przez filtracje utworzonego dwucyklo- 5 heksylomocznika, dodaje sie do roztworu zwiazku o wzorze 4 w polarnym rozpuszczalniku aprotycz- nym takim jak dwumetyloformamid. Dodawanie obu reagentów mozna takze prowadzic w odwrot¬ nej kolejnosci.Dzialajac na tak otrzymany zwiazek o wzorze G pirydynotionem-2 lub pirydynotionem-4 o wzorze 7, zawierajacym przy atomie azotu podstawnik Rs i ewentualnie podstawionym w pierscieniu rodni¬ kiem R4, otrzymuje sie zwiazek o wzorze 8 w pos¬ taci czwartorzedowego bromku amoniowego.Reakcje prowadzi sie w srodowisku rozpuszczal¬ nika polarnego aprotycznego takiego jak dwume¬ tyloformamid lub N,N-dwumetyloacetamid, w tem¬ peraturze 0—50°C, korzystnie w temperaturze po¬ kojowej. Produkt o wzorze 8 wydziela sie przez wytracenie za pomoca rozpuszczalnika, w którym jest on slabo rozpuszczalny, takiego jak eter izo¬ propylowy, a nastepnie oczyszcza sie znanymi me¬ todami, a zwlaszcza za pomoca chromatografii na zelu krzemionkowym.W powyzszym sposobie mozliwe sa bez odejscia od idei wynalazku, pewne modyfikacje a miano¬ wicie ciag operacji pozwalajacy na przejscie z bro- mopochodnej o wzorze 4 do zwiazku o wzorze 8 mozna równiez przeprowadzic w odwrotnej kolej¬ nosci, a mianowicie przez podstawienie bromopo- chodnej o wzorze 4 tionem o wzorze 7, a nastepnie acylowanie na atomie azotu za pomoca kwasu o wzorze 5.I wreszcie, dla uzyskania zwiazków o wzorze 3, w których n jest równe 1, usuwa sie równoczesnie znanym sposobem grupy zabezpieczajace amine i grupy karboksylowe, zwlaszcza przez hydrolize w srodowisku kwasnym, przy uzyciu kwasu orga¬ nicznego takiego jak kwas mrówkowy lub kwas trójfluorooctowy. Surowce stosowane w procesie wedlug wynalazku, a wiec zwiazki o wzorze 4 i zwiazki o wzorze 5 a takze ich pochodne, w któ¬ rych grupa aminowa jest zablokowana grupa za¬ bezpieczajaca, sa znane.Pirydynotiony o wzorze 7 moga byc otrzymywa¬ ne z odpowiednich bromopirydyn wedlug schematu reakcji 2. Schemat ten, przedstawiony w odniesie¬ niu do uzyskiwania pirydynotiónów-2 dotyczy rów¬ niez wytwarzania pirydynotionów-4 z 4-bromopi- rydyn.Pierwszy etap polega na czwartorzedowaniu bro- mopirydyny, ewentualnie podstawionej, dzialaniem bromku RsBr. Reakcje prowadzi sie najczesciej przez ogrzewanie reagentów w temperaturze wrze¬ nia pod chlodnica zwrotna. Na tak otrzymana po¬ chodna czwartorzedowa dziala sie wodorosiarcz- kiem potasu w roztworze wodnym, uzyskujac piry- dynotion o wzorze 7.Zwiazki o wzorze 3 wytworzone sposobem wed¬ lug wynalazku, w którym A jest inne niz atom wodoru, otrzymuje sie ze zwiazków o wzorze 3, w których A oznacza atom wodoru za pomoca zna¬ nych reakcji. I tak, sole mineralne otrzymuje sie 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60136 099 dzialaniem na zwiazki o wzorze 3, w których A oznacza atom wodoru, zasady mineralnej takiej jak wodorotlenek sodu lub kwasny weglan sodu, w ilosci równomolowej. Reakcje prowadzi sie w roz¬ puszczalniku takim jak woda lub etanol a otrzy¬ mana sól wydziela sie przez odparowania rofctwora.Estry otrzymuje sie znanymi sposobami estryfi1- kacjL Na przyklad stosufe sie1 korzystnie reakcje; ckk*mwo3tt*kDda*J< z sol* taka jak $ól sodowa kwwsa. Heakcje te prowadzi sie korzystnie w roz¬ puszczalniku zdolnym do rozpuszczenia wyjsfcldwej pochodnej- kwasu, na przyklad w dwumetylofórmtt- midzie.Izomery formy syn i anti otrzymuje sie przesa odpowiedni dobór reagentów.Pred-ukty o wzorze ogólnym 3 poddano bada^ niom wlasnosci fermakologicznych a zwlaszcza ich dzialania bakteriostatycznego. Itetaianie bakterie^ statyczne in vitro oznaczono w srodowisku stalym metoda rozcienczeni. Uzyskane rezultaty okreslono w minimalnych stezeniach inhiMtttiacyel* {CMI /tgftnl); dotyczacych róznych szczepftW ttektarii ' je¬ litowych i Pseudomonas; Dla porównania przedstawiono tezttftaty o&ty- mane dli dwtfch pofcrewttydft prodkiktóW, fzxiartyeh z tóteratury, a mianowicie: 1-S-tlenku kwasu 7-f2- -aminottazftOHo-4^^ 1 - karboksymetoksyin^fr- aeel*- i^do]-3*^2^pirydylotioinetylo)» 3-^ta»o4ta^boksylo- wego-4, izomer syn (zwiazek A, wzór 9), Wdtilug belgijskiego opisu patentowego nr 8*6 030, oraa trój- fluorooctanu kwasu 7-[2-(2-amJndtiazolik)-4)-2-(2- -kaTboksy-2-prapylo^oksyi ninojnacefcamkio]3- Tab ir tywnosci produktu odniesienia w stoslinku do Ktebsiella i Ptoteus.W porównaniu z produktem odiaiesieaia Ifc pro¬ dukty o wzorze 3 wykazuja znacznie wyrtaa ak*» tywaosc w stosunku do Citratoajctei, Prote*& ii Ea«< terbacteu, przy zachowaniu w stosunku do nufyck szczepów aktywnosci tego samego rze/du, a »ie kiedy nawet wyzszej. Z drugiei stror^, próby, pco- wadzone na zwierzetach nie wykazaly toksycznego dzialania produktów otrzymanych sposobem, wed¬ lug wynalazku. Ich toksycznosc jest porównywalna z toksycznoscia innych cefalosporyn.Produkty otrzymane sposobem wedltig wym* latku moga byó Wiec ufyfe jako ató;ybi«it|*i w mtedycynie hidzkittj lub* weteyrifcryjbfffc pfrajf wszelkich infekcjach bakteryjnych wyw^tmych wrazliwymi xa*&zk*mi.Ze zwiazków er wzorae a w postata k*as*m£ YbJb — js&i kh msfrlsmzabkasó jefcfc nttw3tstfcrat»4- J4tai — u postaci jcti^ sporzadra sie kooBpat?eJfc fermttteutyfcznt^ LttnapOzjcje" ixrfiaacstfK}czad mogit byc stale lub ciekle i moga Jtfkafr posiac^ las ptay* kttufr - ltlttetefc, faisnhttfr ifem**KSWycHr ftó**IeK, pasV kfentórwy ±e*M krtr cTejlarratdw d* liiifekeftr Dai*^o^¥arró jiiofte znritóHtó si<.w bardafr sj»ttv* kich granicach zwpbaofii ,«r ^Mfriotai a& catizaf* i stanu leczonej infekcji i w zajeznosci pd sposobu podawania. Dawfea dla dbsbsjfegó cfroga. iniekcji. wynosi zazwyczaj 0,Z5Ó^-4 g na dzien.Ponizsze przyklady ilustruja sposób wedlug wy¬ nalazku. Jak zwykle w tsj grupie zwiazków, pró- ela l C^^^^_ Produkt Szczep ^**<^ Citrobacter 49 1 Proteus 1510 | Serratin RL 7Z | Klebsiella RO 30 1 Enterobacter KO 4$ 1 Enterobacter P 99 Pseudomonas A 22 IP Pseudomonas i 40874] 40914 1 4 0,0» 0,5 0,25 a;5 0,5 [ 8 8 4 <0,125 o,z5 <0,125 0,25 Ofi i 8 » ,40763 2 | «M25 0,25 0,25 0,5 1 i ¦ 4 i 4 40876 1 <0,125 0,25 <0,125 0,25 0,5 2 2 40800 % W* * 0,25 0,25 ; 1 16 i * I 4088fc * 4 .. ' <0,Izi5' r ^^5 <0,125 0,25 0=,5 ! 2 4 J 40W4 a t, 0^9,/i <0,125 ' <Ó,125 ; as i 2 i 4 u i rr a k41087 , afi ; 0;215 '* 0,5 i,1 ) * ] i i ¦ A i i» $& 33r • 0,5 , s ^ J6 • | ) ¦ ¦ j ¦' 256 -«- . ^ ] r r 1 'B i • ( t. .:f .. 1 ¦¦ 2 ..} «m i ¦ ^* I U6 \ i "I tylo-2- pfcydyniotiomtetylo)-3-cefatmokarboksylowe- go*-4, izomer syn (zwiazek B wz6i 10 wedlug opisAl patentowego RFN rir 2 2^1332, Hezultaty zestawiono w tabeli 1 wskazuja nfl szczególnie interesujaca* adctywnocc prodttfetów otrzymanych sposobem wedlug wynateiik» w sto¬ sunku d8 szczepów zazwyczaj m&towfazKWych na antybio^rki z rodzitty cefalosporyn, a mianowicie bakterii jfciitawych i Pseudomonas. W porównaniu ze iwiaaki^m odniesienia A produkty o wzorze 3 wykazuja nieoczekiwana aktywnosc w stosunku do nastepujacych szczepów: Citrobacter, Enterbaoter, Serratia i Pseudomonas, przy jednoczesnym zacho¬ waniu pelnej aktywnosci, co najmniej rtfwnej ak- 15 60 dukty otrzymafie' Axsobem wetfitog' wyttaHart&ti mtt posiadaja wyraznej ttettl^f^tury ttopnfertftf W&L tylktJ temperatury fozkfadu n* pOzwalatjatie ffi: fctt charaljterystyk^. Wrotiukty betia wi)ccv chtifsMerp- zowane za pomoce wldrtia ritógtteW^WJ fttsaer nansu jadrowego, rejestfoWsfrlytll przy tW1 Ntftl i wobec heksametylodisiloksanu jako wzdfófi wew^ netrZfiego: Stosowa** b*^ J^ticptfjace. skrórt^: »: stegM, D; dublety T: tryplet,, ^ kwadruplet, DD: tkabiefc dwblet». »e: stngiet roaszeracny^ Mc antftipitt,.AB: aklad AB,. Jh sttóo spruczmisu PetMtdto, 4}* katidego przypadku prowadaomr n»kveftn»ltfr ?i** ntentarne cUa porównania z przedfltawionyfnr wafr* TGOtn,7 136 099 8 Przyklad I. Trójfluorooctan 1-S-tlenku kwa¬ su 7-[2-(2-aminotiazolilo-4)-2-(2-karboksy-2-propy- lo-oksyimino)- acetamido]-3-(N-allilo-2-pirydyniotio- metylo)-3-cefemokarboksylowego-4, izomer syn (GM 40874). (wzór 3) Ri=R2=R3, R3=-CH2-CH = CH2, R|=H, X—= ^CFsCOO- R5=COOH, n=l. a) N-allilopirydynotion-2 Mieszanine 5 g 2-bromopirydyny i 4,2 g bromku allllu ogrzewano w temperaturze 70°C w ciagu 2,5 godziny. Dodano 10 ml acetonu i odcisnieto krysztaly bromku N-allilo-2-bromopirydyniowego, które przemyto acetonem a nastepnie eterem i wy¬ suszano. Sporzadzono Toztwór wodosiarczku potasu barbotujac strumien siarkowodoru przez roztwór 2—6 g wodorotlenku potasu w 40 ml wody, do od¬ barwienia fenoloftaleiny. Nastepnie dodano 2 g produktu otrzymanego powyzej i mieszano w tem¬ peraturze 20°C w ciagu 15 minut. Ekstrahowano trzykrotnie 50 ml chlorku metylenu, osuszono nad siarczanem magnezu i odparowano rozpuszczalnik do; sucha. Otrzymano 1 g N-allilopirydynotionu-2 wpostaci zóltego oleju. b) l^S-tlenek 7-[2-[2-(2-trityloaminotiazolilo-4)-2- T(3-t-butoksykarbonylo-2 - propylooksyimino)- aceta¬ midom^3Tbromometylo-3-cefemokarboksylanu-4 t-bu- tylu, izomer syn (wzór 6), Ri=R2=CH3.Dó roztworu 5 g chlorowodorku l-S-tlenku-7-ami- rio-3-brómometyló-3-cefemokarboksylanu-4 t-buty- lu w 90 ml chlorku metylenu dodano 1,72 ml trój- etylóamiriy, 7,57 g kwasu 2-(2-trityloaminotiazolilo- -4)-242-t-butoksykarbonylo-2 - propylo - oksyimino)- -octowego, 2,84 g dwucykloheksylokarbodwuimidu i; 0,1 g hydroksybenzotriazolu. Calosc mieszano w ciagu 15 godzin w temperaturze pokojowej, po cfcym odsaczono utworzony dwucykloheksylomocz- rjik. Pozostalosc po odparowaniu rozpuszczalnika chromatografowano na kolumnie z zelem krzemion¬ kowym (250 g). Eluowano mieszanine heksan-octan etylu 50—55 (obj./obj.) uzyskujac 4,3 g oczekiwane¬ go produktu.Widmo NMR (w roztworze w deuterowanym dwu- metylosulfotlenku), 1H przy 8,70 ppm (NH- Trlt S) — 1H przy 8,07 ppm (NH-CO, D, J=9 Hz) — 15H przy 7,25 ppm (H Trit, S) — 1H przy 6,72 ppm (H tiazolu,' S) — 1H przy 6,88 ppm (H7, DD, Ji= 4»9 Hz, J2=4 Hz) — 1H przy 4,96 ppm (H6, D, j|=4 Hz), 2H przy 4,50 ppm (CH2Br, AB, JAB = =1=12 Hz) -r- 2H przy 3,77 ppm (CH2 w 2, S.e. 9H przy 1,45 ppm) (wzór 13, s) — 6H przy 1,37 ppm (wzór 13) S/-9H przy 2,37 ppm; ej Bromek 1-S-tlenku 7-[2-(2-trityloaminotiazolilo- -4)-2-(2-t-butoksykarbonylo-2 - propylo - oksyimino)- acetamido]-3-(N-allilo-2-pirydyniotiometylo-3 - cefa- mokarboksylanu-4 t-butylu, izomer syn (wzór 8), Ri=R2=CH3, R3=CH2-CH= CH2, R4=H Mieszanine 0,7 g pochodnej bromowej otrzymanej w punkcie b) i 0,14 g N-allilopirydynotionu-2 w 4 ml N,N-dwumetyloacetamidu utrzymywanego w ciagu 3 godzin w temperaturze 20°C. Przez dodanie eteru izopropylowego wytracono osad, który od¬ cisnieto i przemyto eterem izopropylowym. Osad rozpuszczono w minimalnej ilosci chlorku metyle¬ nu i chromatografowano w kolumnie zawierajacej 20 g krzemionkowego zelu. Przez elucje mieszanina chlorku metylenu i metanolu 90—10 (obj./obj.) otrzymano 0,65 g oczekiwanego produktu, d) CM 40874. i Roztwór 0,57 g produktu zabezpieczonego otrzy¬ manego powyzej w 6 ml kwasu trójfluorooctowego utrzymywano w ciagu 45 minut w temperaturze 20°C. Zatezono pod próznia do objetosci okolo 3 ml, po czym wytracono osad przez dodanie eteru, io odcisnieto i wysuszono otrzymane 0,39 g oczekiwa¬ negoproduktu, r Widmo NMR: 1H przy 9,06 ppm (H'6 pirydyny, D, J= 5 Hz) —1H przy 8,50 ppm (NHCO, D,J= 9 Hz) — 1H przy 0,35 ppm (H'4 pirydyny, M)-1H przy 15 8,20 ppm (H'3 pirydyny, D, J= 7 Hz) — 1H przy 7,95 ppm (H'5 pirydyny, M) — 4H pomiedzy 7 i 10 ppm (2 COOH, NH2) — 1H przy 6,82 ppm (H tiazolu, S) — 2H przy 6,0 ppm (H7 i CH= , M) — 5H pomiedzy 5,0 i 5,6 ppm (CH2N+, CH2 =i H6, M) 20 — 1H przy 4,5 ppm (CH2S, A od AB, JA3 =13 Hz) — 1H przy 4,32 ppm (CH2S od AB, JAB =13 Hz) — 1H przy 4,0 ppm (CH2S-*0, A od AB, JAB =17 Hz) — 1H przy 3,8 ppm (CH2S-*0, B od AB, JAB =17 Hz) — 6H przy 1,45 ppm (wzór 14).Przyklad II. Chlorowodorek bromku 1-S- -tlenku kwasu 7-[2-(2-aminotiazolilo-4)-2-(2-karbo- ksy-2 - propylooksyimino)-acetamido - 3-(N - allilo-2- -pirydyniotiometylo)-3 - cefemo - karboksylowego - 4, izomer syn. 3a (CM 40 40874 b). 9,3 g zwiazku zabezpieczonego otrzymanego w przykladzie Ic rozpuszczono w 55 ml kwasu mrów¬ kowego 99°/o, po czym wkroplono 3,3 ml stezonego kwasu solnego i pozostawiono mieszajac w tempe¬ raturze 25°C na 1 godzine. Odsaczono utworzony osad i przemyto go 25 ml 50% kwasu mrówkowego.Przesacz odparowano do sucha pod próznia w tem¬ peraturze pokojowej. Pozostalosc rozpuszczono w 100 ml absolutnego etanolu i ponownie odparowano do sucha pod próznia w temperaturze pokojowej.Pozostalosc rozpuszczono w 50 ml metanolu i mie¬ szajac wlano otrzymany roztwór do 300 ml eteru.Odcisnieto osad i przemyto go eterem. Otrzymano 6,5 g oczekiwanego produktu, który oczyszczono przez rozpuszczenie w 50 ml metanolu i powolne wlanie roztworu przy mieszaniu do 300 ml eteru.Po odcisnieciu i wysuszeniu otrzymano ostatecznie 6,2 g CM 40874 b.Widmo NMR: 1H przy 9,10 ppm (R'6 pirydyny, D, J=6 Hz) — 1H przy 8,80 ppm (NHCO, D, J = 9 Hz) l0 — 1H przy 8,35 ppm (H'4 pirydyny, T, J=8 Hz) — 1H przy 8,22 ppm (R'3 pirydyny, D, J=8 Hz) — 1H przy 7,94 ppm (H'5 pirydyny, T, J=6 Hz) — 1H przy 7,00 ppm (H tiazolu S) — 2H przy 6,00 ppm (H7 i -CH= , M) — 5H pomiedzy 5 i 5,5 ppm (H'6, » CH2N+, CH2=, H) — 2H przy 4,45 ppm (CH2 S, M) — 2H przy 4,0 ppm (CH2S-*0, M).Przyklad III. Sól wewnetrzna 1-S-tlenku kwasu 7-[2-(2-aminotiazolilo-4)-2-(2-karboksy^-2-pro- pylooksyimino)-acetamido]-3 -(N-allilo-2 - pirydynio- «§ tiometylo)-3-cefemokarboksylowego-4, izomer syn (CM 40874 a).Do roztworu 0,3 g CM 30874 b otrzymanego w przykladzie II dodano 0,7 g zywicy jonowymiennej Amberlit IRA 400 w postaci octanu i mieszano tt w ciagu 35 minut w temperaturze pokojowej. 2y-136 0»9 9 n wice odsaczono i przemyto woda. Roztwór odparo¬ wano do sucha pod próznia w temperaturze poko¬ jowej Pozostalosc rozpuszczono w 10 ml etanolu i odparowano do sucha pod próznia w temperatu¬ rze pokojowej. Pozostalosc rozprowadzono eterem i odcisnieto osad. Po wysuszeniu otrzymano 0,210 g oczekiwanej soli wewnetrznej.Widmo: NMR; 1H przy 8,5 ppm (NHCO, D, J =9Hz) — LH przy 8,0 ppm (H$ pirydyny, D, J = 6 Hz) — 1H przy 7,45 ppm (H3 pirydyny, D, J=8 Hz) — 1H przy T,30 ppm (H4 pirydyny, M) — 2H przy 7,25 ppm (NH2, S.e.) —2H przy 6,80 ppm (H tiazolu, +H5pi- Tabel Wzór 10 rydyny, M) — 2H przy 6,00 ppm (H2 i -CH=, M) — 7H przy 5,10 ppm (H6, CH2N+, CH2S-, CH2=, M) — 1H przy 4,25 ppm (CH2S-0, A od AB, JAB = 17 Hz) — lHprzy 3,80 ppm (CH2S-*0, B odAB,JAB =17 Hz); — 6H przy 1,45 ppm (wzór 14, S).Przyklady IV—IX. Postepowano jak w przy¬ kladzie I c, stosujac bromopochodna z przykladu Ib i zmieniajac rodzaj uzytego pirydynotionu. Pro¬ wadzac usuwanie grup zabezpieczajacych tak otrzy¬ manych produktów wedlug przykladu Id, otrzy-; mano rózne zwiazki o wzorze 3 zestawione w ta¬ beli 2. a 2 3c Numer przy¬ kladu | 1 IV V vr VII Numer kodowy produktu 2 40763 40876 40912 40972 B* 3 CH3 CHa CH2C^CH CH« R4 4 H H H 3-CH, Pozycja podsta¬ wienia pirydyny 5 2 4 2 2 Warunki: tempera¬ tura (°C) — czas 6 20-24 h 20-3 h, 20-4 h ' 20^24 h Widmo NMR 7 |. 1H przy 9,00 ppm (H6 pirydyny, D, J^6 Hz) - 4H pomiedzy 7,60 i 8,60 ppm (NHCO, Ha H4, Hs pirydyny, M) — 1H przy 6,83 ppm — 1H przy 5,97 ppm (H7, M) — 1H! przy 5,00 ppm H6, D, J=4 Hz 2H przy 4,40 ppm (CH2S, S.e,) — 3H: przy 4,20 ppm (CH3 —N+, S) — 2H przy 3,80 ppm (CH-jS-^O, S*e) — 6H przy 1,46 ppm (wzór 14, S) 2H przy 8,64 ppm (H2, H6 pirydyny D, J= 7 Hz) — 1H przy 8,40 ppm (NHCO, D, J=^9 Hz) — 2H przy 7,95 ppm (H3, H5 pirydyny, D, J=7 Hz — 4H przy ?,56 ppm 2 COOH, S.e.) — lff przy e,m ppmf (H^ DD, Ji=& Hz, J2=4 Hz) — lH| przy 5fi5 ppm (H8, I, J=4 Hz) —l 1H przy 4,40 ppm (CH2S, S od AB, Jab =la Hz) ~~ 1H P^ 4,35 ppm (CH2 SB od AB JAB =13 Hz) — 3HJ przy 4,16 ppm (CH3N+, S) — lH] przy 3,W ppm l CH2S-*0, A od AB, JAB ~17 Hz), —j przy 3,7$ ppm (CH^-**), B od AB,l J AB=17 Hz) — 6H przy 1,43 ppm} 5H od 7,5 do 9,1 ppm (Hj* H* Hj i H8 pirydyny i NHCO, N) — 1H| przy 6,85 ppm (H tiazolu, S) — IhJ przy 6,0 ppm (H7, M) — 2H przy 5,65 ppm (CH2N+, N) — 3H przy] 5,0 ppm (He i GHyS, M) — 2H przy] 3,95 ppm (CH*S-M), S.e) — 6H przy 1,43 ppm (wzór 14, S) fc^CH za4 maskowane dwumetylosulfotleB-l kiem) I 5H pomiedzy 6,5 i 10 ppm (H2N,j 2 COOH, CH, M) — 1H przyj136 099 11 12 c. d. tabeli 2 8,60 ppm (H6 pirydyny, M) — 1H przy 8,45 ppm (NHOO, D, J= 9 Hz) — 2H przy 7,9 ppm (H4 i H5 piry¬ dyny, M) — 1H przy 6,80 ppm (H tia- zolu, S) — 1H przy 6,0 ppm (H7, M) — 1H przy 4,96 ppm (H6, D, J =5Hz — 5H przy 4,30 ppm (CH3N+ i CH2S, M) — 2H przy 3,85 ppm (CH2S-*0, M), 6H przy 1,47 ppm (wzór 14,S) VIII 41087 CH2COOC2- H5 H rozpusz- szczalnik tetrahydro-l furan J = 1H przy 9,2 ppm (NHCO, D — 4H pomiedzy 7,5 i 8,8 ppm H4, H5 i H6 pirydyny, M) — 1H 6,90 ppm (H diazolu, S) — 1H 6,0 ppm (H7, M) — 2H przy 5,67 (CH2N+, S.e) — 1H przy 5,0 (H6, D, J = 5 Hz) — 2H przy 4,30 6H (COOCH2-, Q, J= 7Hz) — 2H 3,90 ppm (CH2S-*0, S.e) — 1,45 ppm (wzór 14, S), — 3H 1,20 ppm (COOCH2CH3 T, J= r 9Hz) (Hi,| przy przyj ppm ppm ppm przy przy przy Hz) DC 41607 -CH2- -CH =CH2 H 20°C-2 h 2H przy 8,70 ppm (H a pirydyny, D, J = 6 Hz) — 1H przy 8,45 ppm (NH — CO, D,J= 9 Hz) —2H przy 8,0 ppm (H p pirydyny, D, J= 6Hz) —1H przy| 6,80 ppm (H tiazolu, S) — 2H przy 6,0 ppm (H7 + CH= , M) — 2H przy 5,40 ppm (=CH2, M) — 3H przy 5,05 ppm (H6 + CH2N(+), M) — 2H przy 4,45 ppm (CH2S, M) — 2H przy 3,80 ppm (CH3S-*0, AB, JAB =15 Hz) — 6H przy 1,45 ppm (C =(CH2 2 S).W tabeli tej, oprócz budowy i charakterystyki otrzymanych produktów o wzorze 3, podano rów¬ niez warunki prowadzenia (temperatura, czas) re¬ akcji podstawienia bromopochodnej tionem, zmie¬ niajace sie w zaleznosci od rodzaju uzytych reagen¬ tów.Przyklad X. Trójfluorooctan 1-S-tlenku kwa¬ su 7-[2-(2-aminotiazolilo-4)-2-(l-karboksy-l-cyklo- butylooksyimino)-acetamido]-3 -(N-allilo - 2 - pirydy- niotiometylo)-3-cefemokarboksylowego-4, izomer syn (CM 40914). (wzór 3) Ri+R^CHaJa, R =CH2=CH —CH2, R4=H, A=H, X-=CF3COO~ a) 1-S-tlenek 7-[2-(2-trityloamino-tiazolilo-4)-2-(4-t- -butoksykarbonylo-1-cyklobutylo - oksyimino)-aceta- rnido]-3-bromometylo - 3- cefemokarboksylanu - 4-5- -butylu, izomer syn.Do roztworu 4,4 g chlorowodorku 1-S-tlenku 7-amino -3-bromometylo-3 - cefemokarboksylanu-41- -butylu w 70 ml bezwodnego chlorku metylenu dodano w atmosferze azotu 1,5 ml trójetyloaminy, 5,1 g kwasu 2-(2-trityloaminotiazolilo-4)-2-(l-5-bu- toksykarbonylo-2-cyklobutylo - oksyimino)- octowego (izomer syn), 2,4 g dwucykloheksylokarbodwuimidu i 0,1 g 1-hydroksybenzotiazolu. Mieszano w ciagu 1 godziny w temperaturze pokojowej, po czym od¬ saczono utworzony dwucykloheksylomocznik 1 za- tezono roztwór pod próznia do objetosci 20 ml. 50 55 60 65 Chromatografowano na kolumnie z zelem krze¬ mionkowym (150 g). Po eluowaniu mieszanina hek- san-octan etylu 40—60 (obj./obj.) otrzymano, po od¬ parowaniu rozpuszczalnika 4,8 g oczekiwanego pro¬ duktu.Widmo NMR: 1H przy 7,90 ppm (NHCO, D J= 9Hz) —15 H przy 7,26 ppm (H aromatyczne, S) — 1H przy 6,97 ppm (NH — trityl, S.e.) — 1H przy 6,65 ppm (H tiazolu, S) — 1H przy 6,18 ppm (H7, DD, Ji=9 Hz, J2 = 4,5 Hz) — 2H przy 3,4 ppm (CH2S-*0, S.e.) — 6H pomiedzy 1,5 i 2,6 ppm (cyk- lobutyl, M) — 9H przy 1,46 ppm (wzór 11, S) — 9H przy 1,36 ppm (wzór 12, S). b) Bromek 7-[2-(2 - trityloaminotiazolilo-4)-2-(4-t- -butoksykarbonylo-1-cyklobutylo- oksyimino)-aceta- mido]-3-(N-allilo-2 - pirydymiotiometylo)-3 - cefemo- karboksylanu-3 t-butylu, izomer syn.Stosujac bromopochodna z przykladu Ha i poste¬ pujac jak w przykladzie I c, otrzymano przy uzyciu N-allilopirydynotionu-2 oczekiwany zwiazek w pos¬ taci bezbarwnego ciala stalego. c) CM 40914 Zwiazek ten otrzymano przez odbezpieczenie zwiazku otrzymanego powyzej, postepujac wedlug przykladu I d.-Widmo NMR: 1H przy 9,05 ppm (H6 pirydyny, D, J:= 6 Hz) — 1H przy 8,20 (NH-CO, D, J= 9 Hz) — 3H pomiedzy 7,6 i 8,5 ppm (H,, H4, H5136 099 13 14 pirydyny, M) — 1H przy 6,65 ppm (H tiazolu, S) — 2H przy 6,0 ppm (H7 i =CH, M) — 5H pomiedzy 4,8 i F,5 ppm (H6, CH2=, CH2N+, M) — 2H przy 4,40 ppm (CH2D, S.e) — 2H przy 3,85 ppm (CH2S-* -M), S.e.) — 6H pomiedzy 1,5 i 2,6 ppm (wzór 13, M).Przyklady XI—XIII. Postepowano jak w przy- wladzie X b i stosowano bromopochodna z przy¬ kladu Xa), zmieniajac rodzaj uzytego pirydynotio- nu. Nastepnie prowadzono odbezpieczenie wedlug przykladu I d, otrzymujac zwiazki o wzorze 3 zestawione w tabeli 3.Tabela 3 wzór 3d Nr przy¬ kladu 1 XI XII XIII Numer kodowy produktu 2 40882 40954 41647 R3 3 CH3 CH3 -CH2- -CH=CH2 R* 4 H H H Pozycja podsta¬ wienia pi¬ rydyny 5 2 4 4 Warunki: tempera¬ tura (°C) — czas 6 20—5 h 20—16 h 20°C — 1 h Widmo NMR 7 ' | 9H pomiedzy 7,5 i 9,5, ppm (NHa, 2 COCH, NHSO, H3 H4 H5 i H» pi¬ rydyny, M) — 1H przy 6,88 ppm (H tiazolu, SK— 1H przy 6,0 ppm (H7, M) — 1H przy 5,07 ppm H=4 Hz) — 2H przy 4,45 ppm (CH2S — M) — 3H przy 4,25 ppm (CH3N+, S) — 2H przy 3,93 ppm (CHs-^O, M) — 6H pomiedzy 1,5 i 2,7 ppm (wzór 15, M), 7H pomiedzy 8,3 i 9,0 ppm (NHCO,| NH2, 2 COOH, H2 i C6 pirydyny M)| — 2H przy 7,90 ppm (Hs i H5 piry¬ dyny, D, J= 6 Hz) — 1H przy 6,82 ppm (H tir zolu, S) — 1H przy 6,00 ppm (H7, DD, Ji=9 Hz, J2=5 Hz) — 1H przy 5,0 ppm (H6, D, J = 5 Hz) — 2H przy 4,40 ppm (CH2S, S.e.) — 3H przy 4,20 ppm (CHS — N+, S) 2H przy 3,80 ppm (CH2S-*0, S.e.) — 6H pomiedzy 1,5 i 3 ppm (wzór 15, M). 1H przy 8,80 ppm (NH — CO, D, J=9 Hz) — 2H przy 8,70 ppm (H a pirydyny, D, J=6 Hz) — 2H przy 8,0 ppm (H/? pirydyny, D, J=6 Hz) — ltt przy 6,80 ppm (H tiazolu, S) — 2H przy 6,00 ppm (H7 = CH= , M)— 2H przy 6,40 ppm (CH2=, M) — 3H przy 5,05 ppm (H6+CH2N0, M) 2H przy 4,45 ppm (CH2S, M) — 2H przy 3,80 ppm (CH2S-*0, AB, JAB =16 Hz) — 4H przy 2,45 (wzór 16, M) — 2H przy 1,90 ppm (wzór 17).Przyklad XIV. Trójfluorooctan 1-S-tlenku kwasu 7-[2-(2-aminotiazolilo-2)-2-(l-karboksy-l-ety- lo-oksyimino)-acetamido]-3 -(N-metylo-2 - pirydynio- tiometylo)-3-cefemokarboksylowego-4, izomer syn (CM 40800). (3) Ri=H, H2=CH3 R3=CH3, R4=H, A=H, X~= =CF3COO- Postepowanie jak w przykladzie I, zastepujac w etapie b) kwas 2-(2-trityloaminotiazolilo-4)-2-(2-t- -butoksykarbonylo - 2 - propylo - oksyimino)- octowy, izomer syn, kwasem 2-(2-trityloaminotiazolilo-4)-2- -(1-butoksykarbonylo - 1 - etylooksyimino)- octowym, izomer syn.Etapy c) i d) prowadzono w sposób identyczny otrzymujac oczekiwany produkt (CM 40800). 55 Widmo: NMR: 1H przy 9,0 ppm (H6 pirydyny, M) — 0,4 H przy 8,65 ppm (NHCO, D J=9 Hz) — 0,6 H przy 8,60 ppm (NHCO, D, J=9Hz) — 1H przy 8,32 ppm (H4 pirydyny, M) — 1H przy 8,10 ppm (Hs pirydyny, D, J=6 Hz) — 1H przy 7,80 ppm (H5 pi¬ et rydyny, M) —4N przy 7,20 ppm) NH2, 2 COOH S.e.) — 0,6 H przy 6,82 ppm (H tiazolu, S) — 0,4 N przy 6,80 ppm (H tiazolu, S) — 1H przy 5,92 ppm (H7..DD, Ji= 9 Hz, J2=4 Hz) — 1H przy 5,0 ppm (H6, M) — 1H przy 4,60 ppm (wzór 14, M) — 1H przy 4,50 6f ppm (CH2S, D, J=12 Hz) — 1H przy 4,35 ppm131 «£9 15 U (CH2S, D, J= 12 Hz) — 3H przy 4,20 ppm (CH3N+, S)"^- 1H przy 4,0 ppm (CH^^O, D, J = 17 Hz) —1H przy 3,87 ppm (CH2$^0, D, J=17 Hz) — 3H przy 1,4 ppm (wzór 14, M).Rozprzeganie sygnalów protonów nalezacych do ugrupowania -NH-CO i do tiazolu wykazalo, ze CM 40800 wystepuje w postaci mieszaniny 2 diaste- reoizomerów zwiazanych z wystepowaniem wegla asymetrycznego w podstawniku oksymu.Zaptrzez&aie patentowe 1. Sposób wytwarzania nowych (pirydyniotiome- tylo) cefalosporyn o wzorze ogólnym 3, w którym Ri ozriacza atom wodoru lub grupe metylowa, R2 oznacza grupe metylowa lub Ri i R2 razem ozna¬ czaj* grupe 1,3'propylenowa, R3 oznacza grupe me¬ tylowa, aU&lowra, -2-propinylowa lub karboetoksy- m*telowa:, X0 oznacza anion kwasu bromowodoro- wego hxb taifluoffooctowego, » jest równe 0 lub 1, Rt: oznacza atom wodoru lub grupe hydroksylowa, jfcstt atom siarki grupy tiometylowej przylaczony jest do pierscienia pirydyny w pozycji orto w sto¬ sunku do afómu azotu, zas R4 oznacza atom wodo¬ ru^ je&4 atom siarki grupy tiometylowej przyla¬ czony jest do pierscienia pirydyny w pozycji para W U 20 25 w siosu-nku. do attwmu azotu, R5 oznacza grupe -COOO, lub grupe -COOA, w której A oznacza atom wodoru lub jon metalu alkalicznego, metalu zdem alkalicznych, lub grupe estrowa lub hemiacetalowa latwo ulegajaca hydrolizie lub metabolicznie iabii- na i farmaceutycznie dopuszczalna taka jak ftali- dylowa, piwoloiloksymetylowa, acetoksymetylowa, etoksykarbonyloksymetylowa, l-(etoksykarbonylo- ksy)etylowa, acetonyIowa, o-metoksy a karbomcto* ksymetylowa, karbometoksymetylowa lub karboeto- ksyetylowa, w postaci syn, anti lub w postaci mie¬ szaniny izomerów jak równiez soli addycyjnych tych produktów z kwasami, znamienny tym, ze 1-S-tle- nek 7-amino-3-bromometylo-3-cefemokarboksylanu t-butylu acyluje sie aktywowanym kwasem o wzo¬ rze 5, w którym Ri i R2 maja wyzej podane znacze¬ nie a Tr i P oznaczaja grupy ochronne, w srodowi- isku polarnego rozpuszczalnika aprotycznego, po czym otrzymany produkt poddaje sie reakcji z pi- rydynotionem-2 lub pirydynotionem-4 o wzorze 7, która prowadzi sie w srodowisku polarnego roz¬ puszczalnika aprotycznego w temperaturze 0—50°C, usuwa sie grupy ochronne przez hydrolize w srodo¬ wisku kwasnym i ewentualnie gdy R5 oznacza gru¬ pe COOH przeksztalca sie otrzymany produkt w sól, ester lub hemiacetal. ¦" {<'¦ ' fi1: XX Wzór 7 VM^'V &L. ...C-CO-NH C-COOH Rb Wzór 2 S COOH CHZSY O O I 0-C-COOH R5 R5 Wc Wzór136 099 H2N_$ O 9 C00H CH2 CH3-C-COOH fa Chl3 CH2 Wzor 3a H2N^s o N—^C-CO-NH-r-r5,, , „ ó cooe ' CH3-C-COOH CH3 Wzór 3b CH2 CH II CH2 H2N^ O o 1 V°7| V £ Ra N—^-C-NH-r-rh 2J£ lS CH3 (T-VCH2SP Ó-C-COOH COOH VeOiCCXf CH3 R3 Wzór 3c Ra OtO COOH HOOC Wzór 3d i®Cf?COOe "V- C-COOH Pi N-0-C-C00-P R2 Wzór 5136 033 n H2N TrN!-VSx A-L + KBr CH3 COO-6-CH3 C-COOH 7 Fi 9H3 O-G-COOC-CK CK R Wzór 4 TrNK. _s. 2 CH3 flzór5a O l ii ii O NI. -. 1 Y r N 'C-C-NH r-f^j Ó-G-COOC-CH3 R2 CH3 Yizór6 CK COO-GOHj CK n3 R 3 "3 Wzór 7 n—Lc-c-Nr- 0 t a ^N^JCH^ N Ri I CH3 w© C00C-CH3 lBrw CH3 pU R, H 1© R« O-C-COOG-CH3 mór 8 Wzór 3 CK ¦Br Schemat 2 R4 R4 R4 . /R4 Br R Br 0 1 *3 Wzór?136 099 N- oco-nm- o ? HgN nr J*i o* OCHpDOH CGGH ^-CH3S /Yztf/- 5 N^C-CO-NH-^ e H^ OC-COOH COOH l,?*00 CH, CH, Wzór 10 CH D3 ^COOC-CH, I ó CH3 Wzór V i-i 9y3 i ° CH3 Wzór iz CH3 C- CH3 CH3 Wzór 13 /CH3 c- XCH3 Wzór 15 \ / COOH -CHa-X CHZ Wzór /6 CH^ Wzór 17 PL