Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania nowych pochodnych cefalosporyn o szczególnie interesujacych wlasnosciach leczniczych.Bardziej szczególowo, wynalazek dotyczy wytwarzania nowych cefalosporyn podstawio¬ nych w pozycji 3- grupa pirydyniotiometylowa.W belgijskim opisie patentowym nr 866 038 opisano szereg sulfotlenków i sulfonów cefalosporyn o wzorze ogólnym 1, w którym X oznacza grupe SO lub S0o« Sposród rodników oznaczonych jako A, w opisie tym wymieniono w szczególnosci grupy o wzorze CH2SR5 w którym R<- moze byc grupa pirydylowa, ewentualnie podstawiona.Cefalosporyny o wzorze 1 posiadaja bardzo silne dzialanie bakteriobójcze w stosunku do bakterii Gram-dodatnich i Gram-ujemnych i sa niezwykle skuteczne przeciwko gronkowcom wytwarzajacym penicylinazy., Rmadto, w opisie patentowym RFN nr 2 921 332 opisano grupe cefalosporyn o wzorze ogólnym 2, w którym Y moze oznaczac zwlaszcza grupe N-metylopirydyniowa. Zwiazki te sa przedstawione jako antybiotyki o szerokim spektrum dzialania* Sposobem wedlug wynalazku wytwarza sie nowe cefalosporyny posiadajace zupelnie od¬ mienny profil bakteryjny od podanego dla zwiazków z opisów patentowych przytoczonych po¬ wyzej. Zwiazki posiadaja znaczna aktywnosc w stosunku do bakterii jelitowych, w tym do ba¬ kterii produkujacych J? -laktamazy, dobra aktywnosc w stosunku do Pseudomonas oraz slaba aktywnosc w stosunku do gronkoweów.Sposobem wedlug wynalazku wytwarza sie nowe cefalosporyny o wzorze ogólnym 3f w którym R| i 1^ oddzielnie oznaczaja grupy metylowe lub razem oznaczaja grupe 1,3-propyle- nowa, R-z oznacza grupe metylowa, allilowa, karboetoksymetylowa lub grupe CH2-(CH, R^ oznacza atom wodoru lub grupe hydroksylowa, jesli pierscien pirydyny przylaczony jest do2 136 101 atomu siarki grupy tiometylowej w pozycji 2 lub R^ oznacza atom wodoru, jesli pierscien pirydyny przylaczony jest do atomu siarki grupy tiometylowej w pozycji 4, Xe oznacza atom kwasu chlorowodorowego lub trifluorooctowego, n jest równe 0 lub 1 a R oznacza grupe C00 lub CODA, w której A oznacza atom wodoru, kation, grupe estrowa lub hemiacetalowa latwo ulegajaca hydrolizie lub metabolicznie labilna i farmaceutycznie dopuszczalna, taka jak ftalidylowa, piwaloiloksymetylowa, acetoksymetylowa, etoksykarbonyloksymetylowa, 1-/eto- ksykarbonyloksy/-etylowa, acetonylowa, <*- -metoksy-©£-karbometoksymetylowa, karbometoksy- metylowa, karboetoksymetylowa, w postaci syn, anti lub w postaci mieszaniny izomerów, jak równiez soli addycyjnych tych produktów z kwasami znamienny tym, ze na kwas 7-formyloami- nocefalosporanowy wolny lub w postaci soli alkalicznej dziala sie pirydynotionem-2 lub pirydynotionem-4 o wzorze 5 w roztworze wodnym buforowanym lub w obecnosci stabilizujacej soli alkalicznej, korzystnie w temperaturze 40-80°C, po czym wydziela sie otrzymany pro¬ dukt, ewentualnie w postaci kwasu, zadaje woda utleniona lub kwasem nadtlenowym przeksztal¬ cajac go w sulfotlenek, nastepnie estryfikuje sie grupe karboksylowa otrzymanego produktu za pomoca grupy labilnej otrzymujac produkt o wzorze 8, w którym Z oznacza anion nieorga¬ niczny, i który przeksztalca sie w odpowiadajaca pochodna 7-aminowa dzialaniem chlorku tionylu na przyklad w srodowisku metanolowym, tak otrzymana pochodna aminowa acyluje sie chlorkiem kwasu o wzorze 11, w którym Tr oznacza grupe ochronna grupy aminowej• Acylowa- nie na ogól prowadzi sie w rozpuszczalniku takim jak chlorek metylenu w obecnosci dime- tyloaniliny. W koncu z otrzymanej pochodnej cefalosporyny z zabezpieczonymi grupami ami¬ nowymi i karboksylowymi usuwa sie grupy ochronne dzialaniem mocnwgo kwasu organicznego lub nieorganicznego i ewentualnie gdy R^ oznacza grupe COOH przeksztalca sie otrzymany zwiazek w sól, ester lub hemiacetal.W pewnych warunkach mozliwe jest równiez przeprowadzenie czwartorzedowego zwiazku amoniowego w sól z pomoca grupy karboksylowej przy pierscieniu cefamu. W tym przypadku X nie wystepuje. Takie wewnetrzne sole stanowia integralna czesc wynalazku.W niniejszym opisie okreslenie kation oznacza jon metalu alkalicznego lub metalu ziem alkalicznych, korzystnie jon sodu, potasu lub wapnia lub tez pochodna amoniowa otrzy¬ mana przez protonowanie farmaceutycznie dopuszczalnej aminy organicznej, takiej jak ety- lenodwuamina, etanoloamina, trimetamina i podobne w celu utworzenia soli addycyjnych, okreslenie ester lub hemiacetal latwo hydrolizujacy lub metabolicznie labilny i farma¬ ceutycznie dopuszczalny oznacza rodniki takie jak wymienione powyzej, to jest ftalidyl, piwaloiloksymetyl, acetoksymetyl, etoksykarbonyloksymetyl, 1-/etoksykarbonyloksy/etyl, acetonyl, JL, -metoksy- ^ -karbometoksynietyl, karbometoksymetyl, karboetoksymetyl i podobne.Wynalazek dotyczy wytwarzania zwiazków o wzorze 3 wybranych zwlaszcza sposród: czwartorzedowej, mineralnej lub organicznej, farmaceutycznie dopuszczalnej soli izomeru syn 1-S-tlenku kwasu 7-/2-/2-aminotiazolilo-4/-2-/2-karboksy-2-propylo-oksyimino/-ace- tamido/-3-/N-allilo-2-pirydyniotiometylo/-3-cefemo-karboksylowego-4 o wzorze 3a i pro¬ duktów otrzymanych przez przeprowadzenie w sól, estryfikacje lub hemiacetalizacje przy¬ najmniej jednej grupy karboksylowej wymienionej soli i ewentualnie przeprowadzenie w sól funkcji aminowej wymienionej soli, lub tez czwartorzedowej soli wewnetrznej izomeru syn kwasu wymienionego powyzej, o wzorze 3b oraz produktów otrzymanych przez przeprowadzenie" w sól lub estryfikacje lub hemiacetalizacje funkcji kwasowej wymienionej wyzej soli wew¬ netrznej i ewentualnie przeprowadzenie w sól funkcji aminowej tej soli.Sposobem wedlug wynalazku zwiazki o wzorze 3 wytwarza sie z kwasu 7-/formyloami- no/-cefalosporanowego w sekwencji reakcji zilustrowanej schematem 1.Pierwszy etap polega na dzialaniu £irydynotionem o wzorze 5 na kwas 7-/formylo- amino/cefalosporanowy o wzorze 4, lub korzystniej na jego sól alkaliczna. Reakcje pro¬ wadzi sie w roztworze wodnym w obecnosci jodku sodu korzystnie w temperaturze 40-80°C.Produkt o wzorze 6 wydziela sie w postaci jodku pirydyniowego i ewentualnie soli alka¬ licznej.136'101 3 W nastepnym etapie uwalnia sie funkcje kwasu karboksylowego dzialaniem kwasu takiego jak kwas chlorowodorowy, a nastepnie korzystnie, z uwagi na trwalosc, przeksztalca sie jodek pirydyniowy w chlorek przez przepuszczenie go przez kolumne jonowymienna w postaci chlorowodorku.Produkt o wzorze 6, w którym Z oznacza anion nieorganiczny przeksztalca sie na¬ stepnie w odpowiedni sulfotlenek o wzorze 7 dzialaniem wody utlenionej lub kwasu nadtle¬ nowego takiego jak kwas n-chloronadbenzoesowy. Sulfotlenek o wzorze 7 przeprowadza sie da¬ lej w ester o wzorze 8, w którym Y oznacza grupe, która bedzie pózniej latwa do usuniecia, taka jak grupa dwufenylornetyIowa, t-butylowa lub trójmetylosililowa.Zwiazek o wzorze 8 poddaje sie deformylowaniu na atomie azotu grupy aminowej, na przyklad dzialaniem chlorku tionylu w srodowisku metanolu. Zwiazek 7-aminowy wydziela sie w postaci chlorowodorku o wzorze 9« Ten ostatni acyluje sie na atomie azotu stosujac chlo¬ rek kwasu o wzorze 11 • Reakcje acylowania prowadzi sie w srodowisku na przyklad chlorku metylenu w obecnosci dwumetyloaniliny. Otrzymuje aie w ten sposób zabezpieczona cefalospo- ryne o wzorze 10, z której pod wplywem srodowiska silnego kwasu, otrzymuje 6ie zwiazek o wzorze 3. W szczególnosci dla przeprowadzenia usuwania grupy zabezpieczajacej mozna tu stosowac mieszanine kwasu solnego i kwasu mrówkowego lub tez kwas trójfluorooctowy. Plry- dynotiony o wzorze 5 mozna sporzadzac z bromopirydyn tak jak przedstawiono schematem 2, wedlug którego pirydynotiony-2, a takze pirydynotiony-4 otrzymuje sie tak samo stosujac 4-bromopirydyny. Pierwszy etap polega na czwartorzedowaniu ewentualnie podstawionej bromo- pirydyny dzialaniem bromku o wzorze R,Br. Reakcje najczesciej prowadzi sie przez ogrzewa¬ nie reagentów w temperaturze wrzenia. Tak otrzymana pochodna czwartorzedowa poddaje sie reakcji z wodorosiarczkiem potasu w roztworze wodnym otrzymujac pirydynotion o wzorze 5» Zwiazki o wzorze 3 wytwarzane sposobem wedlug wynalazku, w których A jest inne niz atom wodoru, otrzymuje sie ze zwiazków o wzorze 3f w których A oznacza atom wodoru, za pomoca znanych reakcji.I tak, sole mineralne otrzymuje sie dzialaniem na zwiazki o wzorze 3, w których A^H, zasady mineralnej takiej jak wodorotlenek sodu lub kwasny weglan sodu, w ilosci równo- molowej. Reakcje prowadzi sie w rozpuszczalniku takim jak woda lub etanol a otrzymana sól wydziela sie przez odparowanie roztworu. Sole zasad organicznych otrzymuje sie przez dzia¬ lanie na roztwór kwasu o wzorze 3 (A=H) w rozpuszczalniku lub w mieszaninie odpowiednich rozpuszczalników, równomolowej ilosci zasady organiczneji Sól oddziela sie przez wytrace¬ nie eterem.Estry otrzymuje sie znanymi sposobami estryfikacjii Na przyklad stosuje sie ko¬ rzystnie reakcje chlorowcopochodnej z sola taka jak sól sodowa kwasui Reakcje te prowadzi sie korzystnie w rozpuszczalniku zdolnym do rozpuszczania wyjsciowej pochodnej kwasu, na przyklad w dwumetyloformamidzie.Izomery formy syn i anti otrzymuje sie przez odpowiedni dobór reagentów. Produkty o wzorze ogólnym 3 zostaly poddane badaniu wlasnosci farmakologicznych a zwlaszcza ich dzialania bakteriostatycznego.Dzialanie bakteriostatyczne in vitro oznaczono w srodowisku stalym metoda roz- cienczen. Uzyskane rezultaty okreslono w minimalnych stezeniach inhibitujacych (Cl-^ig/ml), dotyczacych róznych szczepów bakterii jelitowych i Pseudomonas.Ela porównania przedstawiono rezultaty otrzymane dla dwóch pokrewnych produktów, znanych z literatury, a mianowicie: -1-S-tlenku kwasu 7-/2-/2-aminotiazolilo-4-/2-karbo- ksymetoksyimino-acetamido/-3-/2-pirydylotiometylo/-3-cefemo-karboksylowego-4, izomer syn (zwiazek A, wzór 12), wedlug belgijskiego opisu patentowego nr 886 038, oraz - trójfluoro- octanu kwasu 7-/2-/2-aminotiazolilo-4/-2-/2-karboksy-2-propylo-oksyimino/-acetamido/-3- -/N-metylo-2-pirydyniotiometylo/-3-ceferaokarboksylowega-4r izomer syn (zwiazek B, wzór 13) wedlug opisu patentowego RFN nr 2 921 532.4 136 101 Rezultaty zestawione w-tablicy 1 wskazuja na szczególnie interesujaca aktywnosc produktów wedlug wynalazku w stosunku do szczepów zazwyczaj malowrazliwych na antybiotyki z rodziny cefalosporyn, a mianowicie bakterii jelitowych i Pseudomonas.Tabela 1 | Produkt I szczep j Citrobacter 49 | Iroteus 1510 Serratia BL 72 j KLebsiella RO 30 | fiiterobacter RO 46 i Eiterobacter P 99 j~ j j Pseudomonas A 22 IP I | Pseudomonas RL 112 40874 1 40763 1 1 ! 4 1 2 ! 0,031 0,5 0,25 °f5 0,5 e 8 I |«0,125 0,25 0,25 ro,5 | 1 | 4 i 4 ] 40876 ! 1 40,125 0*25 ^0,125 0,25 0,5 i 2 ! 2 ! ! 40882 ! 4 40,125 0,25 ^0,125 0,25 0,5 2 I 4 ! — — — — ! 40954 ! 41087 i A B | l !_ _!_ ! ! 2 |<0,125 1 0,25 <0,125 ^0,125 °f5 ! 2 ! 4 I ! 1 i i 0,5 ! 16 ! 8 | i _, i 1 1 , 0,25 2 0,5 1 2 J - i 0,25 1 4 ! 32 j 2 j 0,5 i 0,25 i 16 1 256 j 256 ! 8 I256 1 16 I - \ P W porównaniu ze zwiazkiem odniesienia A produkty o wzorze 3 wykazuja zdumiewajaca aktywnosc w stosunku do nastepujacych szczepów: Citrobacter, Biterobacter, Sarratia i Pseudomonas, przy jednoczesnym zachowaniu pelnej aktywnosci, co najmniej równej aktyw¬ nosci produktu odniesienia w stosunku do KLebsiella i Proteus.W porównaniu z produktem odniesienia produkty B o wzorze 3 wykazuja znacznie wyz¬ sza aktywnosc w stosunku do Citrobacter, Rroteus i Biterobacter, przy zachowaniu w sto¬ sunku do innych szczepów aktywnosci tego samego rzedu, a niekiedy nawet wyzszej• Z drugiej strony, próby prowadzone na zwierzetach nie wykazaly toksycznego dzia¬ lania produktów otrzymanych sposobem wedlug wynalazku. Ich toksycznosc jest porównywal¬ na z toksycznoscia zwiazków z rodziny cefalosporyn.Irodukty wedlug wynalazku moga byc wiec uzyte jako antybiotyki w medycynie ludz¬ kiej lub weterynaryjnej, przy wszelkich infekcjach bakteryjnych wywolanych wrazliwymi za¬ razkami* Kompozycje farmaceutyczne sporzadza sie ze zwiazków o wzorze 3 w postaci ich formy kwasowej, lub - jesli ich rozpuszczalnosc Jest niewystarczajaca - w postaci soli.Kompozycje farmaceutyczne moga byc stale lub ciekle i moga miec postac, na przy¬ klad, tabletek, kapsulek zelatynowych, granulek, past, kremów, zeli lub preparatów do wstrzykniec* Dawkowanie moze zmieniac sie w bardzo szerokich granicach, zwlaszcza w zaleznosci od rodzaju 1 stanu infekcji do wyleczenia i w zaleznosci od sposobu podawania. Dawka dla doroslego droga wstrzykniecia wynosi zazwyczaj 0,250-4 g na dzien* Ponizsze przyklady ilustruja sposób wedlug wynalazku.Fbdobnie jak zwykle w tej rodzinie zwiazków, produkty otrzymane sposobem wedlug wynalazku nie posiadaja wyraznej temperatury topnienia lecz tylko temperatury rozkladu nie pozwalajace na ich charakterystyke* Produkty beda wiec charakteryzowane za pomoca ich widm magnetycznego rezonansu jadrowego, rejestrowanych: przy 60 MHz i wobec heksametylocisiloksanu jako wzorach wew¬ netrznego* Stosowane beda nastepujace skróty: S: singletf D: dublet, T: tryplet, Q: kwadruplet* DD: dublet dubletu, S*e* singlet rozszerzony, M: multiplet, AB: uklad AB; J: stala sprzezania*136 101 5 Ponadto, dla kazdego przypadku prowadzono mikroanalizy elementarne, zgodne z przedstawionymi wzorami• Przyklad I. Trójfluorooctan 1-S-tlenku kwasu 7-/2-/2-aminotiazolilo-4/- -2-/2-karboksy-2-propylooks,yimino/-acetamido/-3-/N-allilo-2-pirydyniotiometylo/-3-ce- femokarboksylowego-4, izomer syn (CM 40874)• a) Jodek 3-/N-allilo-2-pirydyniotiometylo/-7-formyloamino-3-cefemokarboksylanu-4 potasu . Do roztworu 5,1 g jodku sodu w 25 ml wody dodano 17 g soli potasowej kwasu 7-/formylo amino/ cefalo sporanowego i 12,7 g N-allilopirydynotionu-2. Calosc mieszano w cia¬ gu 4 godzin w temperaturze 60° C. Pd oziebieniu przeniesiono roztwór do 1,7 1 acetonu, ocisnieto osad i przemyto do acetonem a nastepnie eterem. Osad wysuszono pod próznia. b) Chlorek kwasu 3-/N-allilo-2-pirydyniotiometylo/-7-formyloamino-3-cefemokarboksylo- wego-4 20 g produktu otrzymanego powyzej rozpuszczono w 100 ml wody i zakwaszono 2n kwasem solnym do pH 1,5« Z warstwy wodnej oddzielono niewielki osad, po czym wprowa¬ dzono ja do kolumny z zywica jonowymienna Amberlit IRA 68 w postaci chlorowodorku. ELu- owano wóda, odparowano wode do sucha pod próznia a pozostalosc rozpuszczono w absolutnym etanolu. Ponownie odparowano do sucha a pozostalosc rozpuszczono w eterze. Odcisnieto osad i wysuszono pod próznia. Widmo NMR: 2H przy 9,10 ppm (Hg pirydyny, NHCO, M) - 1K przy 8,45 ppm (H^ pirydyny, TD) - 2H przy 8,10 ppm (H-CO-N, H^ pirydyny, M') - 1H przy 7,95 Ppm(H£ pirydyny, TD)6,00 ppm (CH-^ M)-1H przy *5,70 ppm (H?,M) -5H pomiedzy 4,95 i 5,40 ppm (H6,CH2N+ i-CH^Mj^H przy 4,45 ppm (QH2S w 3,AB, J^ -13 Hz) -2H przy 3,60 PP» (CH2S pierscienia, AB, J^-17 Hz). c) Chlorek 1-S-tlenku kwasu 3-/N-allilo-2-pirydynotiometylo/-7-formyloamino-3-cefemo- karboksylowego-4 6 g produktu otrzymanego w b) rozpuszczono w 30 ml kwasu mrówkowego. Dodano 30 ml metanolu i oziebiono roztwór do temperatury 5°C. Dodano w ciagu 5 minut 2,7 g kwasu m-chloronadbenzoesowego. Pozwolono na wzrost temperatury do 20°C i mieszano w tej tempe¬ raturze w ciagu 30 minut. Odsaczono osad. Otrzymany roztwór rozpuszczono w 600 ml eteru.Odcisnieto osad, przemyto eterem i wysuszono pod próznia. Widmo NMR: 1H przy 8,96 ppm (Hg pirydyny, D, J ¦ 6 Hz)'- 2H przy 8,30 ppm (H^ pirydyny, NHCO, M) - 2H przy 8,10 ppm (H^ pirydyny, H-CO-N", M) - 1H przy 7,80 ppm (H^ pirydyny, TD, J « 6 Hz) - 1H przy 6,0 ppm (CH», M) - 1H przy 5,90 ppm (Hy, M) - 5H pomiedzy 5,0 i 5,50 ppm (C^N*, C^«, H6, M) - 2H przy 4,45 ppm (CH^S, AB, JAB - 13 Hz) - 2H przy 3,95 ppm (CI^S—0, AB, J^-17 Hz). d) Chlorek 1-S-tlenku 3-/N-allilo-2-pirydyniotiometylo/-7-formyloamino-3-cefemokarboksy- lanu-4 dwufenylometylu 4,5 g produktu otrzymanego we) rozpuszczono w 45 ml wody i dodano 130 ml roztworu dwufenylodwuazometanu w chlorku metylenu. frzy intensywnym mieszaniu dodano 90 ml abso¬ lutnego etanolu i utrzymywano pH 2 przez dodanie stezonego kwasu solnego.Pd 45 minutach roztwór odbarwil sie. Zdekantowano warstwe organiozna, a warstwe wodna ekstrahowano chlorkiem metylenu. Ekstrakty organiczne polaczono i zatezono do sucha. Pozostalosc rozpuszczono w absolutnym etanolu i ponownie odparowano do sucha. R- zostalosc wymieszano z eterem odcisnieto osad i wysuszono pod próznia. Widmo NMR: 1H przy 9,10 ppm (Hg pirydyny, D, J « 5Hz) - 1H przy 8,45 ppm (CONH, D, J ¦ 9 Hz) - 1H przy 8,20 ppm (H^ pirydyny, T, J - 7 Hz) - 1H przy 8,10 ppm (HC0-, S) - 1H przy 8,0 ppm (H^ pirydyny, D, J ¦ 7 Hz) - 1H przy 7,85 ppm (K^ pirydyny, T zdeformowany) - 10H przy 7,30 ppm (K aromatyczne, M) - 1H przy 6,85 ppm (C00CH««, S) - 2K przy 6,0 ppm (Hy + CH*, M) - 5H pomiedzy 5 i 5,5 ppm (H6, a^N"1", -CHg, M) - 2H przy 4,45 ppm (CHgS, AB, JAfi « 13 Hz) - 2H przy 4,0 ppm (C^S—*0, AB, J^- 17 Hz. ).6 136 101 e) Chlorowodorek chlorku 1-S-tlenku 3-/N-allilo-2-pirydyniotiometylo/-7-amino-3-cefemokar- boksylanu-4 dwufenylometylu. 3 g produktu otrzymanego powyzej rozpuszczono w 10 ml metanolu w atmosferze gazu obojetnego* Roztwór oziebiono do temperatury 10°C i dodano w ciagu 5 minut 0,8 ml chlorku tionylu, utrzymujac temperature ponizej 20 C. Mieszanine mieszano nastepnie w ciagu 30 minut w temperaturze 20°C, po czym wlano ja do 300 ml eteru. Odcisnieto osad, przemyto eterem i wysuszono pod próznia nad ?2®5* f) Chlorek 1-S-tlenku 7-/2-/2-trityloaminotiazolilo-A/-2-/2-t-butoksykarbonylo-2-propylo- -oksyimino/-acetamido/-3-/N-allilo-2-pirydyniotiometylo/-3-cefemokarboksylanu-4-dwufeny- lometylu, izomer syn.Chlorek kwasu 2-/2-trityloaminotiazolilo-4-/2-/2-t-butoksykarbonylo-2-propylo- -oksyimino/-octowego, izomer syn: 3,4 g kwasu 2-/2-trityloaminotiazolilo-4-/2-/2-t-butoksykarbonylo-2-propylo-oksy- imino/-octowego, izomer syn, zawieszono w atmosferze azotu w 20 ml chlorku metylenu.Dodano 1,4 g pieciochlorku fosforu i mieszano w ciagu 30 minut utrzymujac temperature po¬ nizej 0°C# Roztwór wlano do 200 ml heksanu, odcisnieto osad i wysuszono pod próznia nad PoOc* Otrzymany chlorek kwasowy uzyto w tej postaci do nastepnej syntezy.Sporzadzono zawiesine w, atmosferze azotu 3,3 g pochodnej otrzymanej w punkcie e) w 30 ml chlorku metylenu. Oziebiono do temperatury 5°C i dodano 1,7 ml dwumetyloaniliny a nastepnie chlorek kwasowy otrzymany powyzej, pozwalajac na wzrost temperatury do 20 C.Po 1 godzinie mieszania roztwór przemyto 30 ml 0,5 n roztworu kwasu solnego i Roztwór orga¬ niczny wysuszono i zatezono pod próznia do objetosci 10-15 ml. Otrzymany roztwór wlano do 150 ml eteru izopropylowego, odcisnieto osad, przemyto eterem izopropylowym i wysu¬ szono pod próznia.Tak otrzymany produkt surowy chromatografowano na kolumnie z zelem krzemionkowym (120 g). W wyniku eluowania mieszanina chlorek metylenu - metanol 85 - 15 (obj./obj.) otrzymano produkt oczekiwany* Widmo NMR: 1H przy 9,05 g (H^ pirydyny, D, J = 6 Hz) - 1H przy 8,85 ppm (NH, Trit, s.o. ) - 2H przy 8,25 ppm (H^ pirydyny), NHCO, H), - 1H przy 8,0 ppm (H^ pirydyny, D, J - 7 Hz) - 1H przy 7,80 ppm (H^ pirydyny, TD) - 25H przy 7,27 ppm (H aromatyczne, M) - 1H przy 6,85 ppm (H tiazolu), S) - 1H przy 6,75 ppm (COOCH = , S) - 2H przy 5,95 ppm (a^ + CH=, M) - 5H pomiedzy 5,0 i 3f5 ppm (Ct^N+, CH^, H6, M) - 2H pryy 4,45 ppm (CHgS, AB, JAB - 13 Hz) - 2H przy 4,0 ppm (CH2S—,0f AB, J^- 17 Hz) - - 6H przy 1,40 ppm (CH^-C-, S), 9H przy 1,30 ppm (wzór 14), S). g) GM 40874 1 g produktu zabezpieczonego, otrzymanego w punkcie f) rozpuszczono w 2 ml ani- zolu i oziebiono do temperatury 5°C, po czym dodano 10 ml kwasu trójfluorooctowego. R)z- wolono na podniesienie sie temperatury do 20°C i pozostawiono w tej temperaturze w ciagu 2 godzin. Odparowano pod próznia kwas trójfluorooctowy i wytracono produkt przez dodanie eteru. Produkt odcisnieto, przemyto eterem i wysuszono i Widmo NMR: 1H przy 9,05 ppm (HC pirydyny, D, J - 5 Hz) - 1H przy 8,50 ppm (NHCO, D, J » 9 Hz), - 1H przy 8,35 ppm (H^ pirydyny, M) - 1H przy 8,20 ppm (H^ pirydyny, D, J - 7 Hz) - 1H przy 7,95 ppm (He pirydy¬ ny, M) - 4H pomiedzy 7 i 10 ppm (2 COOH, Nt^) - 1H przy 6,82 ppm (H tiazolu, S) - 2H przy 6,0 ppm (Hy i CH=, M) - 5H pomiedzy 5,0 i 5,6 ppm (CHgN*, CH^ i H6, M) - 1H przy 4,5 ppm (CHgS, A od AB, J^ - 13 Hz) - 1H przy 4,32 ppm (CHgS, B od AB, JAB o 13 Hz) - - 1H przy 4,0 ppm (CH. £S—0, A od AB, JAB» 17 Hz) - 1H przy 3,8 ppm (CHgS —0, B od AB, JAfi - 17 Hz) - 6H przy 19hb ppm (wzór 15, b;.Przyklad II. Chlorowodorek chlorku 1-S-tlenku kwasu 7-/2-/2-amlnotia- zolilo-4/-2-/2-karboksy-2-propylo-oksyimino/-acetamido/-3-/N-allilo-2-pirydynJotiomety- lo.-3-cefemokarboksylowego-4, izomer syn136 101 7 Postepowano tak jak w przykladzie I do punktu f) wlacznie, po czym na tak otrzymany zabezpieczony zwiazek podzialano stezonym kwasem solnym w kwasie mrówkowym tak,- aby utwo¬ rzyc chlorowodorek.Postepujac w ten sposób jak opisano w przykladzie I i II ale stosujac odpowiednie ~ reagenty otrzymano zwiazki o wzorze 3 wyszczególnione w tablicy 2 li 3« Tablica wzór 3c T* j Nr i Nr i przy* kodowy kladu) produktu \ I i i i i I IV i 40763 i CH5 i i i i . i | }_. . 40876 ) CH, i i i i VI 4~— H R4 j Fbzycjai Warunki: i i podsta-I tempe- ! wienia { ratura pirydy-i ( C)-czas UZ i S 20-24 h Widmo NMR 4-4 40912 { CHgOCHj H i i i i i i i -4 h I 1H przy 9t00 ppm/Hg pirydyny, Dt J#6:Hz/ - 4H pomiedzy 7,60 i 8,60 ppm/NHCO, H3, H4, Hg pirydyny, W - 1H przy 6,83 ppm (H tiazolu, S) - 1H £rzy 5»97 ppm (lij, M) - 1H *Ezy 5f00 ppm (%, D,; J ;" * 4 Hz) - 2H przy 4,40 ppm (CF^S, *•*•) - 3H przy 4,2!0 ppm (CH^-N*, S) - 2H przy 3,80 pp* ( CBgS—?(, S.e ) - 6H przy 1,46 ppm (wzór 15f S) 2H J J pirydyny, _, _ ppm (N^, 2 COOH, .* ppm (K tiazolu, S) - 1H przy 5f95 ppm (K?, DDi ^-9 Hz), J2-4 Hz - 1H prey 5,05 ppm (Hg, D, J-4 Hz) - 1H przy? 4,40* mm fCK-S. A od AH. J\_«1^ Hz^ - 1tt ' pm („Cffl^a—-?ViA ***."• ,VJ 17 Hz) T 1H przy 3,76 ppm (cg^S -p B od AB, Jj^^-17 Hz) - 6H przy 1,45. ppm (wzór 15,2 D) 5H od 7,5 do 9,1 ppm (Hj.H^Hj i Hg pirydyny i NHCO, M) - 1H przy 6,85 ppm ; (H tiazolu, S) - 1H przy 6,0 ppm (IU, M) - 2H przy 5,63 ppm (CHgN+, M) -?3K ' przy 5,Q ppm 0% i C^S, M) -\2H przy 3,95 ppm (CHgS—*0, S^e) - 6H przy 1,^3 ppm (wzór 159 S)-(«CH zamaskowane dwu- < metylosulfotlenkiem) '6 136 101 tablica 2 - Cd. pa: VII |' "2—T :xrrfc2±£zfcrE 40972 i CH .1..}TUlj A1067 o^wocg IX Ul«07 3-GHJ i -CHg-CH-O^ i 20 r 2 COOH, XI I40682 CH, -24 h j 5H pomiedzy 6,5 i 10 ppm (J^N, 2 COOH, | OH, M) - 1H przy 8f60 ppm (Hg pirydyny, j M) - 1H przy 8,45 ppm (NHCO, Df J-9 Kz) i - 2H przy 7,9 ppm (fy i He pirydyny, M) - 1tt przy 6,80 ppm (H tiazolu), S) - 1H przy 6,0 ppm (l^, M) - 1H przy 4,96 ppm (Hg, D, J«5Hz) - 5H przy 4,30 ppm (C^N* i O^S, M) - 2H przy 3,85 ppm (CHgS—*0, M) - 6H przy 1,47 ppm .•(KfeJ^S). - 1H przy 9,2 ppm (NHCO, D, J - 9Hz) - 4H pomiedzy 7,5 i 8,8 ppm (H3, H^, Hg i Hg pirydyny, M) - 1H przy 6,90 ppm (H tia¬ zolu, S) - 1H przy 6,0 ppm (Hy, M) - 2H przy 5,67 ppm (CHgN*, S.e) - 1H przy 5,0 PP» (Hg, D, J • 5Hz) - 2H przy 4,30 ppm (COOCJk - Q» J - 7Hz) - 2H przy 3,90 ppm (C^S—*0, S.e) - 6H przy 1,45 ppm (wzór 15, S) - 3H przy 1,20 ppm (C00CL^CH3, T, J - 7 Hz).D, J- Jrozpusz¬ czalnik tetrahy- idrofuran !20°C-2 h r* 2t H przy 8,70 ppm (Hot pirydyny, _ '" przy 8,45 ppm (NH - CO, D, 8 Hz) - 1H J I ny, D, xii *0954 «3 ---JL- ~L 9Hz) - 2H przy 8,0 ppm (H fi pirydy- j ny, D, J»6Hz) - 1H przy 6,80 ppm (H ! tiazolu , s) - 2H przy 6,0 ppm (Hy + | CI^, M) - 2H przy 5,40 ppm (-CI^, M) | - 3H przy 5,05 ppm (Hg + CH^ , M) - 2H przy 4,45 ppm (CHgS, M).- 2H przy 3,80 ppm (CJ^S—0, AB, JAB-16 Hz) - 6H przy 1,45 ppm (C-/CH3/2, 2S). 20-5 h 2 COOH, 1H przy 20-16 h 9H pomiedzy 7,5 i 9,5 ppm (NH2, 2 C0( NHCO, H3, H4, H5 i Hg pirydyny, M) - przy 6,88 ppm (H tiazolu, S) - 1H przy 6,0 ppm (Hy, M) - 1H przy 5,07 ppm (Hg, D, J-4Hz) - 2H przy 4,45 ppm (CHg S-M) - 3H przy 4,25 ppm (q^N+, S) - 2H przy 3,93 ppm (CT^S—0, M) - 6H pomiedzy 1,5 i 2,7 ppm (wzór 16, M), 7H pomiedzy 8,3 i 9,0 ppm (NHCO, NHg, 2 COOH, % i Hg pirydyny, M) - 2H przy 7,90 ppm (H3 i Hg pirydyny, D, J-6Hz) - 1H przy 6,82 ppm (H tiazolu, S) - 1H przy 6,00 ppm (Hy, DD, J-|-9Hz, J2«5Hz) - 1H przy 5,0 ppm (Hg, D, J-5Hz) - 2H przy 4,40 ppm (C^S, S.e) - 3H przy 4,20i ppm (CHj-N*, S) - 2H przy 3,80 ppm (CF^S—?O, S#e) - 6H pomiedzy 1,5 i 3 ppm (wzór 16,M)« j136 101 9 tablica 3 - c.d.I 1 XIII i I | 41647 ¦ c"~2::::::: i -CHg-CH- CHg Ul_ i H i f...s... 1 4 —6— i 20°C-1h ¦ i:::::::::::::~j:.-™:r.=-:::::-::::-: 1H przy 8,80 ppm (NH-CO, D, J=9Hz) - 2H przy 8,70 ppm (H^ pirydyny, D, J=6Hz) - 2H przy 8,0 ppm (H f pirydyny, D, J- =6Hz), - 1H przy 6,80 ppm (H tiazolu, S) - 2H przy 6,00 ppm (Hy + CK-, M) - 2K przy 5,40 ppm (CH^, M) - 3K przy 5,05 ppm (H6 + CHglP , M) - 2H przy 4,45 ppm (CHgS, M) - 2H przy 3,80 ppm (CHgS—*0, AB, JAB»26Hz) - 4H przy 2,45 ppm (wzór 17, M) - 2H przy 1,90 ppm (wzór 18).Zastrzezenie patentowe Sposób wytwarzania nowych cefalosporyn o wzorze ogólnym 3, w którym R^ i J*2 oddziel¬ nie oznaczaja grupy metylowe lub razem oznaczaja grupy 1,3-propylenowa, R, oznacza grupe metylowa, allllowa, karboetoksymetylowa lub grupe Cl^-C»CH, R^ oznacza atom wodoru lub grupe hydroksylowa, Jesli pierscien pirydyny przylaczony Jest do atomu siarki grupy tiometylowej w pozycji 2 lub R« oznacza atom wodoru, Jesli pierscien pirydyny przylaczony Jest do atomu siarki grupy tiometylowej w pozycji 4, X oznacza anion kwasu chlorowodorowego lub triflu- orooctowego, n jest równe 0 lub 1 a R oznacza grupe C00 lub COOA w której A oznacza atom wodoru, kation, grupe estrowa lub hemiacetalowa latwo ulegajaca hydrolizie lub metabolicz¬ nie labilna i farmaceutycznie dopuszczalna, taka Jak ftalidylowa, piwaloiloksymetylowa, acetoksymetylowa, etoksykarbonyloksymetylowa, 1-/etoksykarbonyloksy/etylowa, acetonyIowa, o^-metoksy-c£-karbometoksymetylowa, karbometoksymetylowa, karboetoksymetylowa, w postaci syn, anti lub w postaci mieszaniny izomerów, jak równiez soli addycyjnych tych produktów z kwasami, znamienny t y m, ze na kwas 7-formyloaminocefalosporanowy wolny, lub w postaci soli alkalicznej, dziala sie pirydynotionem-2 lub pirydynotionem-4 o wzorze 5 - w roztworze wodnym buforowanym lub w obecnosci stabilizujacej soli alkalicznej, korzystnie w temperaturze 40-80°Cf po czym wydziela sie otrzymany produkt, ewentualnie w postaci kwasu, zadaje woda utleniona lub kwasem nadtlenowym przeksztalcajac go w sulfotlenek, nastepnie estryfikuje sie grupe karboksylowa otrzymanego produktu za pomoca grupy labilnej otrzymu¬ jac produkt o wzorze 8, w którym Z oznacza anion nieorganiczny- a Y oznacza grupe latwa do usuniecia taka jak dwufenylornetyIowa, t-butylowa lub trójmetylosililowa i który prze¬ ksztalca sie w odpowiadajaca pochodna 7-aminowa dzialaniem chlorku tionylu, tak otrzymana pochodna aminowa acyluje sie chlorkiem kwasu o wzorze 11, w którym Tr oznacza grupe ochron¬ na grupy aminowej, po czym z otrzymanej pochodnej cefalosporyny z zabezpieczonymi grupami aminowymi i karboksylowymi usuwa sie grupy ochronne dzialaniem mocnego kwasu organicznego lub nieorganicznego i ewentualnie, gdy Rr oznacza grupe COOH przeksztalca sie otrzymany zwiazek w sól, ester lub hemiacetal*156 101 N-n-C-C0-NH-fVS N«t U™} flzón N^rOCO-NH N-rC-CO-NH-r-r^ 3J R2 3 Wzór 3 CC^H2 •*6 N^C-C0-NH- 0 COOH qH CHj— C~COOH pu LHa p u O C00e Au ch,-c-cooh V"2 3 CH2136 101 Schemat 1 ,Cjr óf °HC-VC^0-C0-CH3^^ C00H Wzór 4 OHC-N-rY^ ^5A oTQcH2S-02e COOH T Wzór6 Ra O * H I OHC-N * S 4 Wzdr 7 • K3 O H I OHC-N R4 OOY Ze R3 Wzór 8 9 r J-CH£S4 R, "Wo^ 4 7© COOY* '*s /Vzd/~5 H n C-C-COOC- CH3 R2 CH3 lVzcr /O Wzór 3C-CH3 CH3 Wzór 14 \ ¦y.R4 RaBr 136 101 R4 KSH Br 7* Br R3 e R, {Mzór5) Schemat 2 0 0-C-COOH COOH R^ 3 CH3 J Wzór 3c ¦%.N-^C-C-NH O * HOOC <»VHt 3 COOH /V«5r 3d R, ®CRCOO £ TrNHvs A- ' C-COOH N Ri CH3 0-C-COOC-CHa 1 1 ó R2 CH.Wzdr // Mzór 16 -CH COOH CH2 Wzór 17 dv Wzór 18 N0CH3C00H coOH O C-C-NH 11 1 JA fjf—jrC W V C-COOH ^H ^i*0 CH '3 Wzór 13 Pracownia Poligraficzna UP PRL. Naklad 100 egz Cena 220 zl PL PL