NO339322B1 - Formuleringer inneholdende cynara scolymus og phaseolus vulgaris ekstrakter som er nyttige i behandlingen av fedme - Google Patents

Description

Oppfinnelsens område

Den foreliggende oppfinnelsen angår formuleringer inneholdende et ekstrakt av Cynara scolymus, fortrinnsvis med et høyt innhold av kaffequinasyrer, og et ekstrakt av Phaseolus vulgaris, i et forhold mellom 1:0.25 og 1:1.

Denne sammensetningen er nyttig for å redusere fedme fordi den minsker kolesterol, triglyserider, blodglukose og appetitten.

Bakgrunn for oppfinnelsen

Fedme er for tiden ett av de store helseproblemene, spesielt i de industrialiserte landene, med alvorlige konsekvenser i forbindelse med hjerte, blodomløp og skjel-ett.

Karbohydrater er en viktig kilde for kalorier, og bidrar til syntesen av fett i individer predisponert for fedme eller type II diabetes. Da hyperglykemi fører til en økning i energioppsamling, er tilgangen av forbindelser som reduserer biotilgjengelig glukose veldig viktig. Da stivelser er hovedkilden for glukose, har spesifikke <x-glukosidase- og a-amylaseinhibitorer, fått fren planteematerialer eller ved syntese, blitt studert. Det har lenge vært kjent at noen frø og belgfrukter inneholder stoffer som kan ha ugunstige virkninger på dietten hvis spist før de er helt ferdigkokt. Mange belgfrukter inneholder proteaseinhibitorer, amylaseinhibitorer og stoffer som hindrer predatorer fra å fortsette å bruke dem ved å redusere appetitten. Disse stoffene, kalt fytohemagglutininer, kan forårsake hyperplasi av bukspyttkjertelen ved høye doser, men kan være nyttige i appetittkontroll ved lavere doser.

Ved høye doser, overlever disse lektinene overgangen i tarmen og binder til entero-cyttene hvor de forårsaker utsondringen av kolesystokinin, et trofisk hormon som stimulerer utsondring av bukspyttkjertelen, følgelig forårsakende dens forstørrelse. Kolesystokinin har også gunstige effekter, fordi den minsker appetitten ved å redusere gastrisk bevegelse.

Det er kjent fra litteraturen at vandige eller hydroalkoholiske ekstrakter av Cynara scolymus har hypokolesterolemisk, koleretisk og antidyspeptisk aktivitet. Den hy-pokolesterolemiske aktiviteten, som har blitt rapportert i mange år, er assosiert med to klasser av stoffer: cynarin, en dikaffequinasyre, og flavonoider derivert fra luteolin, som har blitt demonstrert/' vitro å inhibere kolesterolsyntese i leveren. Deler av aktiviteten er assosiert med den koleretiske virkningen spesifikk for Cynara scolymus ekstrakter. En prosess for ekstraksjon av Cynara scolymus er beskrevet i WO 2007/006391.

NAZNI P ET AL: "Hypoglycemic and hypolipidemic effect of Cynara scolymus among selected type 2 diabetic individuals" PAKISTAN JOURNAL OF NUTRITION 2006 PAKISTAN, vol. 5, no. 2, 2006, side 147-151, beskriver anvendelse av Cynara scolymus i diabetes-pasienters kosthold.

CELLENO L ET AL: "A dietary supplement containing standardized Phaseolus vulgaris extract influences body composition of overweight men and women" INTERNA-TIONAL JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES 26 JAN 2007 AUSTRALIA, vol. 4, no. 1, 26 January 2007 (2007-01-26), side 45-52, beskriver en virkning av Phaseolus vulgaris på kroppsvekten.

TORMO M A ET AL: "HYPOGLYCAEMIC AND ANOREXIGENIC ACTIVITIES OF AN ALPHAAMYLASE INHIBITOR FROM WHITE KIDNEY BEANS (PHASEOLUS VULGARIS) IN WISTAR RATS" BRITISH JOURNAL OF NUTRITION, CAMBRIDGE UNIVERSITY PRESS, CAMBRIDGE, GB, vol. 92, no. 5, November 2004 (2004-11), sider 785-790, beskriver en virkning av Phaseolus vulgaris på kroppsvekten og blodglukosenivået i mus.

Beskrivelse av oppfinnelsen

Det har nå blitt funnet at ved å kombinere Cynara scolymus ekstrakter med Phaseolus vulgaris ekstrakter, blir det oppnådd overraskende effekter på reduksjonen av kroppsvekt, proporsjonal med den administrerte dosen; data fra rotter tydet på at virkningen på kroppsvektsreduksjon ikke bare er assosiert med en reduksjon i blodglukosenivået, men også med en klar reduksjon i matinntak. Forskjellige far-makologiske eksperimenter viser at dette reduserte matinntaket, til tross for ube-grenset tilgang til mat, ikke er assosiert med en enkel toksisk effekt, men med en modifisering av ønsket for å spise.

Kombinasjonen av et artisjokkekstrakt, som hjelper til med å øke fjerningen av fett og glukose ved å modifisere glukosetransport i tarmen og leveren, med stoffer som reduserer stivelsesmetabolismen, er spesielt viktig i opprettholdelsen av kroppsvekt, og blokkerer dens økning.

Detaljert beskrivelse av oppfinnelsen

Ekstraktene som kan bli anvendt ifølge denne oppfinnelsen er kommersielle ar-tisjokkekstrakter, ekstrakter ifølge WO 2007/006391, eller et artisjokkekstrakt med et høyt innhold av kaffequinasyrer og luteolinglykosider, oppnåelige ved ekstraksjon fra ikke-tørkede spiselige hoder med C1-C3 alkoholer eller blandinger derav med vann.

Ekstraksjonen fra de ikke-tørkede spiselige hoder av Cynara scolymus blir fortrinnsvis utført med etanol eller etanol/vannblandinger, spesielt etanol/vann i for-holdet 7:3 v/v. Etter opprensing blir et ekstrakt oppnådd som skiller seg fra kjente ekstrakter på grunn av dets høye innhold av kaffequinasyrer og flavonoider uttrykt som luteolinglykosider. Ekstraktet innehar også hypoglykemisk aktivitet. Ekstraktet kan bli fremstilt fra forskjellige artisjokkkultivarer, fortrinnsvis fra den taggete typen, og enda mer fortrinnsvis fra den Sardinske taggete typen.

Det foretrukne artisjokkekstraktet har et kaffequinasyreinnhold i området mellom 30 og 60%, fortrinnsvis rundt 45%, og et flavonoidinnhold, uttrykt som luteolinglykosider, i området mellom 2 og 5%, fortrinnsvis rundt 2.5%.

Et kommersielt ekstrakt kan bli anvendt som Phaseolus vulgaris ekstrakt; imidlertid er Phaseolus vulgaris ekstraktet beskrevet i PCT/EP2006/012012 foretrukket. Nevnte ekstrakt er oppnåelig ved ekstraksjon fra Phaseolus sp. med blandinger av etanol og vann, og erkarakterisert vedet alfa-amylaseinhibitorinnhold på mellom 1200 og 1600 USP/mg (HPLC titer mellom 7 og 14 % w/w) og et fytohemagglutinininnhold

på mellom 12,000 og 30,000 HAU/g. Nevnte ekstrakt kan bli oppnådd ved en prosess som omfatter:

a) ekstraksjon av Phaseolus sp. med vandige buffere som har en pH i området mellom 3 og 6.5 og etterfølgende separering av ekstraktet fra biomassen, som mu-ligens kan bli ytterligere ekstrahert med bufferen til uttømming av alfa-amylase-og fytohemagglutinininhibitorer; b) filtrering eller sentrifugering av de kombinerte ekstraktene og konsentrasjon til et volum tilsvarende omtrent 10% av vekten til biomassen til starte kst ra ktet etter sentrifugering; c) differensiell presipitering av det konsentrerte vandige ekstraktet med for-tynnet etanol, til en sluttkonsentrasjon mellom 60 og 70 % v/v; d) separering av utfelt stoff og represipitering fra demineralisert vann med 60 % etanol eller diafiltrering på en membran med en 10,000 Da cut-off, og tørking av

presipiteringsrest.

Kombinasjonen av de to ekstrakter i et forhold mellom 1: 0.25 og 1:1 omfatter doser i området fra 50 til 500 mg per dose for Cynara scolymus ekstraktet, fortrinnsvis 200 mg, og fra 50 til 200 mg per dose for Phaseolus vulgaris ekstraktet, fortrinnsvis 100 mg, for inntak før måltider eller når mat rik i karbohydrater blir spist.

Den hypoglykemiske aktiviteten til sammensetningen ifølge oppfinnelsen er overraskende overlegen den hypoglykemiske aktiviteten til de to bestanddelene alene. Resultatene oppnådd ifølge metoden beskrevet av Tormo MA et al., Br. J. Nutr. 96, 539, 2006, er vist i tabellen.

Sammensetningen ifølge oppfinnelsen er egnet for å bli inkorporert i farmasøytiske formuleringer slik som tabletter, drasjeer, myke og harde gelatinkapsler og cellulo- sekapsler. Ekstraktene blir fortrinnsvis formulert i oljer rike i flerumettede co3/co6 syrer slik som Oenothera biennis (Kjempenattlys) olje.

De samme resultatene som observert i laboratoriedyrene har blitt bekreftet i men-nesker ved doser på mellom 50 og 1000 mg per dag.

De følgende eksempler illustrerer oppfinnelsen i detalj.

Eksempel 1 - Fremstilling av ekstrakt av Cynara scolymus vr. Spinosus

Putt 2 kg med Cynara scolymus hoder, vr. Sardinian spinosus, kuttet opp og fryst ved innhøsting, inn i en perkolator med en varmemantel, og dekk med 4760 ml 95° EtOH for å oppnå et alkoholinnhold på omtrent 70 % (forutsatt et 85 % vanninn-hold i planten). Oppretthold i kontakt i 3 timer ved 70°C, deretter ta ut. I de etter-følgende ekstraksjoner, ekstraher med EtOH 70% v/v ved 70°C, med full dekking av planten, med en kontakttid på minimum 3 timer. Utfør totalt 5 ekstraksjoner, ved å bruke omtrent 15 I med løsemiddel.

Kombiner perkolatene og konsentrer under vakuum ved 35°C til omtrent 15% av tørket rest.

La det kjøles ved romtemperatur, separer den uløselige fraksjonen, og putt den klare vandig løsningen på en kolonne pakket med 530 ml med XAD-7 HP resin.

Vask kolonnen, først med 530 ml vann (kast eluatet) og deretter med 1325 ml 90% EtOH. Konsentrer det hydroetanoliske eluatet og tørk ved 50°C under vakuum i 24 timer. 18.59 g med renset ekstrakt vil bli oppnådd. HPLC titere: kaffequinasyrer 49.13%, flavonoider 2.68%.

Eksempel 2 - Formulering av Cynara scolymus og Phaseolus vulgaris ekstrakter inn i oljesuspensjon for myke gelatinkapsler

Enhetssammensetninq:

Framstillingsprosess

Varm Oenothera biennis olje til omtrent 70°C og smelt glyserylmonostearat i

den under røring.

- Tilsett soyalekitinet til den oppnådde løsningen.

Disperger Cynara scolymus og Phaseolus vulgaris ekstraktene i den oppnådde løsningen, ved å sørge for jevn fordeling.

Avkjøl gradvis den oppnådde løsningen, under opprettholdelse av røring.

Eksempel 3 - Formulering av Cynara scolymus og Phaseolus vulgaris ekstrakter inn i harde gelatinkapsler

Enhetssammensetninq:

Framstillingsprosess

Bland ekstrakter, mikrokrystallinsk cellulose, laktose og silisiumdioksid.

Del den oppnådde blandingen mellom harde gelatinkapsler.

Eksempel 4 - Formulering av Cynara scolymus og Phaseolus vulgaris ekstrakter inn i granulater for modifisert frigivelse

Enhetssammensetning:

Framstillingsprosess

Granuler ekstraktene, mikrokrystallinsk cellulose og natrium karboksymetyl-cellulose med en vandig løsning med Povidon.

- Tørk og kalibrer det oppnådde granulatet.

Belegg granulatene med en vandig suspensjon av metakrylsyre kopolymer,

trietylsitrat, talkum og simeticone.

Eksempel 5 - Formulering av Cynara scolymus og Phaseolus vulgaris ekstrakter til granulater for umiddelbar frigivelse

Enhetssammensetninq:

Fremstillinqsprosess

Granuler ekstraktene, mikrokrystallinsk cellulose og natrium karboksymetyl-cellulose med en vandig løsning med Povidon.

- Tørk og kalibrer det oppnådde granulatet.

Eksempel 6 - Blanding av Cynara scolymus og Phaseolus vulgaris ekstrakt granulater med forskjellige frigivelsesprofiler

Fremstillinqsprosess

Bland 50% av granulatet beskrevet i eksempel 4 med 50% av granulatet beskrevet i eksempel 5.

Fordel blandingen oppnådd mellom harde gelatinkapsler.

Claims (5)

1. Sammensetningkarakterisert vedat den omfatter et ekstrakt av Cynara scolymus og et ekstrakt av Phaseolus vulgaris i et forhold på mellom 1:0.25 og 1:1.

2. Sammensetning ifølge krav 1, hvori Cynara scolymus ekstraktet har et ka-fequinasyreinnhold i området mellom 30 og 60 % og et luteolinglykosidinnhold i området mellom 2 og 5 %.

3. Sammensetning ifølge krav 1 eller 2, hvori Phaseolus vulgaris ekstraktet erkarakterisert vedet alfa-amylaseinhibitorinnhold på mellom 1200 og 1600 USP/mg (HPLC titer mellom 7 og 14 % w/w) og et fytohemagglutinininnhold i området mellom 12,000 og 30,000 HAU/g.

4. Sammensetning ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 3, ytterligere inneholdende Oenothera biennis olje.

5. Anvendelse av en formulering ifølge krav 1-4 for fremstilling av medikamen-ter med hypoglykemisk og anti-fedme virkning.