NO334096B1 - Nye antitumorale derivater avledet fra aplidin - Google Patents

Nye antitumorale derivater avledet fra aplidin Download PDF

Info

Publication number
NO334096B1
NO334096B1 NO20026242A NO20026242A NO334096B1 NO 334096 B1 NO334096 B1 NO 334096B1 NO 20026242 A NO20026242 A NO 20026242A NO 20026242 A NO20026242 A NO 20026242A NO 334096 B1 NO334096 B1 NO 334096B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
group
substituted
compound according
aplidine
synthesis
Prior art date
Application number
NO20026242A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20026242D0 (no
NO20026242L (no
Inventor
Carmen Cuevas
Pilar Gallego
Ignacio Manzanares
Simon Munt
Ignacio Rodriguez
Concepcion Polanco
Felix Cuevas
Paloma Mandez
Original Assignee
Pharma Mar Sa
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GB0016148A external-priority patent/GB0016148D0/en
Priority claimed from GB0103750A external-priority patent/GB0103750D0/en
Application filed by Pharma Mar Sa filed Critical Pharma Mar Sa
Publication of NO20026242D0 publication Critical patent/NO20026242D0/no
Publication of NO20026242L publication Critical patent/NO20026242L/no
Publication of NO334096B1 publication Critical patent/NO334096B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K11/00—Depsipeptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0205—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-(X)3-C(=0)-, e.g. statine or derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/02—Linear peptides containing at least one abnormal peptide link
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Description

Den foreliggende oppfinnelse angår nye antitumorale derivater avledet fra aplidin.
BAKGRUNN FOR OPPFINNELSEN
Aplidin har en syklisk struktur med en sidekjede, som følger:
Didemninene utgjør en klasse av sykliske depsipeptider som er blitt isolert fra forskjellige arter av Trididemnum genus (Rinehart jr. et al., J. Am. Chem. Soc, 103, 1857-59
(1981), Rinehart jr. et al., Science, 212, 933-935 (1981)) med sterk antitumoral og antiviral aktivitet. Blant disse er aplidin et av de mest antitumoralt aktive, naturlig forekommende didemniner. En beskrivelse av isoleringen og den antitumorale aktivitet av aplidin vil finnes i US patentskrift nr. 5 834 586.
Et antall syntetiske eller naturlig forekommende analoger av aplidin er blitt beskrevet (Rinehart jr. et al., J. Med. Chem., 1996, 39, 2819-2834), hvor det forekommer diverse modifikasjoner i sidekjeden, men hvor den makrosykliske struktur er bibeholdt.
Nylig er det blitt beskrevet forbindelser med en struktur beslektet med didemninenes struktur, hvilke forbindelser betegnes tamandariner (Fenical, W. et al., J. Org. Chem., 2000, 65,782-792). Disse ble isolert fra en ikke-identifisert sjøpung av familien didemnidae. Disse molekyler viste seg å avvike kun ved tilstedeværelse av hydroksyisovaleriansyre (Hiv<3>) i stedet for hydroksyisovalerylpropionsyre (Hip<3>). De er blitt beskrevet som høyaktive antivirale, antitumorale og immunsuppressive peptider.
WO 98/17302A angår syntese av Amino Hip analoger av didemnin A.
WO 98/17275A angår semi-syntetisk didemnin analoger.
WO 93/00362A angår nye peptider (didemniner), deres fremstilling og deres anvendelse.
EP 0393883A angår nye cytotoksiske sykliske depsipeptider fralunicate trididemnum solidum. US 6034058 angår semi-syntetiske alaryl didemnin analoger.
R. Sakai et al; Journal of Medicinal Chemistry, Vol. 39, nr. 14,1996; Side 2819-2834 angår struktur/aktivitet relasjoner av didemninene.
Vervoort et al,. J. Org. Chem. 2000, 65, 782-792 angår tamandarins A og B.
ES 2102322A angår en fremstillingsprosedyre for didemnin A.
WO0176616A angår tamanderin og didemnin analoger og metoder for å fremstille og bruke dem.
US6509315 angår didemnin analoger og fragmenter og fremgangsmåter for å fremstille og anvende dem.
SAMMENFATNING AV OPPFINNELSEN
Den foreliggende oppfinnelse angår forbindelsene som her beskrives, og som betegnes som aplidinderivater, for medisinsk bruk, spesielt for behandling av tumorer. Oppfinnelsen angår også farmasøytiske preparater inneholdende disse forbindelser, for behandling av tumorer, f.eks. faste tumorer. Behandling av faste tumorer som f.eks. tumorer i blære, bryst, tykktarm, mage, lever, NSCL, eggstokker, bukspyttkjertel, svelg, prostata, nyre, SCL, retino-blastom, melanom, fibrosarkom, chondrosarkom eller osteosarkom, eller behandling av leukemi/lymfomer som f.eks. ALL (promyelocytisk leukemi), ALL (akutt lymfoblastom), CML (kronisk myelogen leukemi), ALL (B-celle), leukemi (hårete B-celle), leukemi (plasmacelle), lymfom (T-celle), lymfom (kutan T-celle), lymfom (udifferensiert), lymfom (Burkitts B-celle), lymfom (histiocytisk), lymfom (B-celle), lymfom (Burkitts ascites) foretrekkes spesielt.
Eksempler på farmasøytisk preparater ifølge oppfinnelsen innbefatter faste former (f.eks. tabletter, piller, kapsler, granuler) eller væskeformer (oppløsinger, suspensjoner eller emulsjoner) med egnet sammensetning for oral, topisk eller parenteral administrering, og de kan inneholde den rene forbindelse alene eller i kombinasjon med en bærer eller andre farmakologisk aktive forbindelser. Det kan være nødvendig at disse preparater er sterile når de skal administreres parenteralt.
Det kan være hensiktsmessig å binde forbindelsen til et bærerprotein eller annet egnet middel for avlevering til det menneskelige legeme eller til et dyrelegeme. Bindingen kan være en direkte binding mellom en bærer og forbindelsen, eller bindingen kan oppnås indirekte via et egnet sammenbindende middel.
Administreringen av forbindelsen eller preparatene ifølge den foreliggende oppfinnelse kan foretas etter en hvilken som helst egnet metode, som f.eks. ved intravenøs infusjon, ved hjelp av orale preparater eller ved intraperitoneal og intravenøs administrering. Det foretrekkes å benytte infusjonstider på inntil 24 timer, mer foretrukket 2-12 timer og mest foretrukket 2-6 timer. Korte infusjonstider som tillater utførelse av behandlingen uten overnatting på et hospital, foretrekkes spesielt. Imidlertid kan infusjonstiden være på 12-24 timer eller sågar lenger, dersom dette kreves. Infusjonen kan foretas med egnede intervaller på si fra 2 til 4 uker. Farmasøytiske preparater inneholdende forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan avleveres med liposom- eller nanosfæreinnkapsling, i preparater for avlevering av den aktive bestanddel over tid eller ved hjelp av andre standard avleveringsmetoder.
Den riktige dose av forbindelsen vil variere med den valgte sammensetning, administreringsmåten og med behandlingsstedet, verten og krefttypen eller tumoren som behandles. Andre faktorer, som alder, kroppsvekt, kjønn, diett, tidspunkt for administreringen, avføringshastighet, pasientens tilstand, legemiddelkombinasjoner, ømfintlighet og graden av sykdommen må også tas hensyn til. Administreringen kan foretas kontinuerlig eller periodisk innenfor den maksimalt tålte dose.
Forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan anvendes sammen med andre legemidler, slik at det oppnås en kombinasjonsterapi. De andre legemidler kan utgjøre en del av det samme preparat, eller de kan benyttes som et separat preparat for administrering samtidig eller på et annet tidspunkt. Identiteten til det andre legemidlet er ikke underlagt spesielle begrensninger, og egnede slike legemidler innbefatter: a) legemidler med antimitotiske virkninger, spesielt slike som sikter seg inn på celleskjelettelementer, inklusive mikrotubulusmodulatorer, som f.eks. taxanlegemidler (f.eks. taxol, paklitaxel, taxotere, docetaxel), podofylotoksiner eller vincaalkaloider (vinkristin, vinblastin), b) antimetabolittlegemidler, som f.eks. 5-fluorouracu, cytarabin, gemcitabin; purinanaloger, som f.eks. pentostatin og metotreksat), c) alkyleringsmidler, som f.eks. nitrogensenneper (som f.eks. cyklofosfamid eller ifosfamid), d) legemidler som sikter seg inn på DNA, som f.eks. antrasyklinlegemidlene adriamycin, doksorubicin, farmorubicin eller epirubicin, e) legemidler som sikter seg inn på topoisomeraser, som f.eks. etoposid; f) hormoner og hormonagonister eller -antagonister, som f.eks. østrogener, antiøstrogener (tamoksifen og beslektede forbindelser) og androgener,
flutamid, leuprorelin, goserelin, cyprotron eller oktreotid,
g) legemidler som tar sikte på signaltransduksjon i tumorceller, deriblant antistoffderivater, som f.eks. herceptin, h) alkylerende legemidler, som f.eks. platinalegemidler (cisplatin, karbo-platin, oksaliplatin, paraplatin) eller nitrosoureaforbindelser,
i) legemidler som potensielt påvirker metastaser av tumorer, som f.eks.
matriksmetalloproteinaseinhibitorer,
j) genterapi- og antisensemidler,
k) antistoffterapeutika, og
1) andre bioaktive forbindelser av marin opprinnelse, spesielt ecteinascidiner, som f.eks. ET-743.
Foreliggende oppfinnelsen angår forbindelser kjennetegnet ved at de har formelen:
hvor:
X på uavhengig basis er -C(R)2, -0-, -S- eller -NR-, hvor R på uavhengig basis er H eller en organisk gruppe valgt blant en Ci-C]2-alkylgruppe, en C2-Ci2-alkenylgruppe, en Ce-Ci8-arylgruppe, en aralkylgruppe og substituerte derivater derav substituert med én eller flere grupper valgt blant en heterosyklisk gruppe som inneholder én, to eller tre heteroatomer valgt fra N, O eller S atomer, en Ci-Cn-alkoksygruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe og en halogengruppe;
Y er -CO- eller -COCHCH3CO-;
R4er H eller en organisk gruppe valgt blant en amidogruppe RCONH-, en acylgruppe RCO-, en C|-C|2-alkylgruppe, en C2-Ci2-alkenylgruppe, en C6-Ci8-arylgruppe, en aralkylgruppe og substituerte derivater derav substituert med én eller flere grupper valgt blant en heterosyklisk gruppe som inneholder én, to eller tre heteroatomer valgt fra N, 0 eller S atomer, en C i -Ci2-alkoksygruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe og en halogengruppe;
hvor i hvert tilfelle R er en Ci-Ci2-alkylgruppe, en C2-Ci2-alkenylgruppe, en C6-Cig-arylgruppe, en aralkylgruppe og substituerte derivater derav substituert med en heterosyklisk gruppe som inneholder én, to eller tre heteroatomer valgt fra N, 0 eller S atomer, en C1-C12-alkoksygruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe eller en halogengruppe;
X| er O eller S; og
når Y er -CO-, så
a) er X2CR, 0 (og R2er fraværende), S (og R2er fraværende), eller N, hvor R uavhengig er H eller en organisk gruppe valgt blant en Ci-Ci2-alkylgruppe, en C2-Ci2-alkenylgruppe, en C6-Ci8-arylgruppe, en aralkylgruppe og substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en heterosyklisk gruppe som inneholder én, to eller tre heteroatomer valgt fra N, O eller S atomer, en Ci-C^-alkoksygruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe og en halogengruppe; og
Ri og R2er uavhengig av hverandre H eller en organisk gruppe valgt blant en Ci-Ci2-alkylgruppe, en C2-Ci2-alkenylgruppe, en C6-C]g-arylgruppe, en aralkylgruppe, en amidogruppe RCONH- og en acylgruppe RCO-, hvor R er en Ci-Ci2-alkylgruppe, en C|-Ci2-alkenylgruppe, en C6-Ci8-arylgruppe, en aralkylgruppe eller substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en Ci-Ci2-alkoksygruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe og en halogengruppe, og Ri og R2kan, når X2er N, videre være -SO2R, hvor R er som definert; eller
b) har aa8 formel
hvor R3er en organisk gruppe valgt blant en Ci-Ci2-alkylgruppe, en C2-Ci2-alkenylgruppe, en
C6-Cig-arylgruppe, en aralkylgruppe, en gruppe RSO2- og en acylgruppe RCO-, hvor R er en en Ci-Ci2-alkylgruppe, en C2-Ci2-alkenylgruppe, en C6-Ci8-arylgruppe, en aralkylgruppe eller substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe eller en halogengruppe; eller
c) danner Ri og R2sammen med X2et eventuelt substituert C3-Ci2-sykloalkyl, et eventuelt substituert C6-C]8-aryl eller en eventuelt substituert heterosyklisk gruppe valgt blant
kumarinyl, kinolinyl, pyridyl, pyrazinyl, pyrimidyl, furyl, pyrrolyl, tienyl, tiazolyl, oksazolyl, imidazolyl, indolyl, benzofuranyl, benzotiazol, tetrahydrofuranyl, tetrahydropyranyl, piperidinyl og morfolino; hvor de eventuelle substituentene er valgt blant Ci-Ci2-alkylgruppe, C2-C12-
alkenylgruppe, C6-Ci8-arylgruppe, aralkylgruppe og substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en karbonylgruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe og en halogengruppe; eller d) er aa8 erstattet med en organisk gruppe valgt blant en C6-Ci8-arylgruppe, en aralkylgruppe, en gruppe RS02- og en acylgruppe RCO- hvor R er en C|-Ci2-alkylgruppe, en C6-Ci8-arylgruppe, en aralkylgruppe eller substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en karbonylgruppe, en Ci-Ci2-alkoksygruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en aminogruppe, en guanidinogruppe og en halogengruppe;
når Y er -COCHCH3CO-, så
a) er X2N, og Ri og R2er uavhengig av hverandre H eller en organisk gruppe valgt blant en Ci-Ci2-alkylgruppe, en C2-Ci2-alkenylgruppe, en C6-Cig-arylgruppe, en aralkylgruppe,
en amidogruppe RCONH-, en gruppe -SO2R og en acylgruppe RCO-, hvor R er en C1-C12-alkylgruppe, en C2-Ci2-alkenylgruppe, en C6-Ci8-arylgruppe, en aralkylgruppe eller substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en heterosyklisk gruppe som inneholder én, to eller tre heteroatomer valgt fra N, O eller S atomer, en C1-C12-, en C|-Ci2-alkoksygruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe eller en halogengruppe, eller
b) har aa8 formel:
hvor R3er en gruppe RSO2- hvor R er Ci-Cn-alkyl, eller R3er en C2-Ci2-alkenylgruppe, en
aralkylgruppe eller substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en karbonylgruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe eller en halogengruppe; eller
c) danner Ri og R2sammen med X2en eventuelt substituert C3-Ci2-sykloalkyl-, en eventuelt substituert C6-Ci8-aryl- eller en eventuelt substituert heterosyklisk gruppe valgt blant
kumarinyl, kinolinyl, pyridyl, pyrazinyl, pyrimidyl, furyl, pyrrolyl, tienyl, tiazolyl, oksazolyl, imidazolyl, indolyl, benzofuranyl, benzotiazol, tetrahydrofuranyl, tetrahydropyranyl, piperidinyl og morfolino; hvor de eventuelle substituentene er valgt blant Ci-Ci2-alkylgruppe, C2-C12-alkenylgruppe, C6-Ci8-arylgruppe, aralkylgruppe og substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en karbonylgruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe eller en halogengruppe; eller
d) er aa8 erstattet med en organisk gruppe valgt blant en Cé-Cis-arylgruppe, en aralkylgruppe og en gruppe RS02-, hvor R er en Ci-Ci2-alkylgruppe, en C6-Ci8-arylgruppe eller
en aralkylgruppe, og substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en C1-C12-
alkoksygruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en aminogruppe, en guanidinogruppe eller en halogengruppe;
hvor aralkyl grupper er dannet av en Ci-C^-alkylgruppe substituert med en Ce-Cig-arylgruppe og farmasøytisk akseptable salter derav.
Foretrukne forbindelser innbefatter dem hvor X er -NR-, hvor R er som ovenfor angitt. Mer foretrukket er vil X være -NH- eller -NMe-, og mest foretrukket er X gruppen -NH-.
Andre foretrukne forbindelser innbefatter dem hvor X er -0-.
Gruppen Y kan være - COCHCH3CO -, eller -CO-.
En foretrukket klasse av forbindelser den hvor X er -NH- eller -O-, og Y er - COCHCH3CO- eller -CO-.
Fortrinnsvis er R4metyl.
Fortrinnsvis er Xi =0.
Fortrinnsvis er X2R1en eventuelt substituert aralkyloksygrupe, som f.eks. en benzyloksygruppe.
Andre foretrukne forbindelser innbefatter dem hvor X2R1er en eventuelt substituert aminogruppe, mer foretrukket dem hvor X2R1er en gruppe -NHRi, hvor Ri er en eventuelt substituert alkylgruppe, alkenylgruppe, arylgruppe eller aralkylgruppe, spesielt en alkylgruppe eller en arylgruppe, som f.eks. en fenylgruppe eller en butylgruppe.
Andre foretrukne forbindelser omfatter dem hvor X2R1er en eventuelt substituert alkylgruppe, spesielt dem hvor X2R1er en propylgruppe, isopropylgruppe, pentylgruppe eller biotingruppe.
En gruppe foretrukne forbindelser utgjør de hvor -C(=0)X2R|R2danner en eventuelt substituert aminosyreacylgruppe. Den eventuelt substituerte aminosyreacylgruppe kan passende være eventuelt substituert prolin, og mer spesielt kan det eventuelt substituerte prolin være et eventuelt substituert norvalin-prolin, eventuelt substituert alanin-prolin, Boc-prolin, eventuelt substituert alkyl-prolin. Fortrinnsvis er det eventuelt substituerte prolin norvalin-prolin, Z-norvalin-prolin, alanin-prolin, Z-alanin-prolin, Boc-alanin-prolin, iso-butyrylprolin eller eventuelt beskyttet D-laktylprolin.
En annen gruppe foretrukne forbindelser innbefatter dem hvor Xi er S, og X2R1er en gruppe -NHRi, hvor R| er en eventuelt substituert alkylgruppe, alkenylgruppe, arylgruppe eller aralkylgruppe. Fortrinnsvis er Ri en alkylgruppe eller en arylgruppe, mer foretrukket en fenylgruppe eller en butylgruppe.
Ri og R2kan sammen med X2danne en heterosyklisk gruppe som eventuelt er substituert med én eller flere grupper R3. Eksempelvis kan den heterosykliske gruppe være kum arm.
Foretrukne forbindelser innbefatter dem hvor aa8 er erstattet med en organisk gruppe RSO2-, hvor R er som ovenfor angitt, f.eks. metyl.
Eksempler på forbindelser i henhold til oppfinnelsen innbefatter:
8-[fenylurea]-didemnin A,
8-[butylurea]-didemnin A, 3-[Val]-8-[isobutyryl]-didemnin A, 3 - [Hi v] -9- [i sobutyryl] -aplidin, 3-[Val]-9-[isobutyryl]-aplidin, 3-[Hiv]-8-[iso buty ryi ]-didemninA, 3-[Hiv]-9-[Ala]-aplidin, 3-[Hiv]-9-[Nva]-aplidin, 8-[fenyltiourea]-didemnin A, 8-[kumarin]-didemnin A, 8-[butyltiourea]-didemnin A, 8- [metylsulfonyl]-didemnin A, 3-[Val]-Z-didemnin A, 3-[Hiv]-8-[Val]-didemnin A, 3-[Hiv]-8-[butyryl]-didemnin A, 3-[Hiv]-9-[Z-Ala]-aplidin, 3-[Hiv]-Z-didemnin A, 3-[Hiv]-9-[Z-Nva]-aplidin, 3-[Hiv]-9-[Boc-Ala]-aplidin, 3-[Hiv]-8-[Boc-Val]-didemnin A, 3-[Hiv]-8-[Val]-9-[isobutyryl]-didemnin A, 3-[Hiv]-8-[heksanoyl]-didemnin A, 9- [metyl sulfony 1] -aplidin.
I et beslektet aspekt av oppfinnelsen omfatter eksempel forbindelser 9- [norvalin] -aplidin,
3-[Val]-didemnin A,
3-[Hiv]-didemnin A,
9-[Z-Nva]-aplidin, 8-[Gly]-9-[kumarin]-didemnin A, 8-[biotin]-didemnin A, 3-[Hiv]-7,8-[spiro]-9-[Boc]-aplidin, 7,8-[spiro]-9-[pyr]-aplidin, 3-[Hiv]-9-[lac(OTBDMS)]-aplidin 7,8-[spiro]-9-[Boc]-aplidin, 3-[Val]-9-[lac(OTBDMS)]-aplidin 3-[Hiv]-9-[D-lac(OTBDMS)]-aplidin 7,8-[spiro]-9-[isobutyryl]-aplidin, 3-[Hiv]-7,8-[spiro]-9-[pyr]-aplidin, 3-[Hiv]-7,8-[spiro]-9-[isobutyryI]-aplidin,
3-[Hiv]-7,8-[spiro]-9-[akryloyl]-aplidin og
3-[Aip]-aplidin.
I et beslektet aspekt av oppfinnelsen er denne rettet på forbindelser med de følgende formler:
og beslektede strukturer.
Den foreliggende beskrivelse omtaler en syntesevei for dannelse av aa3 = [Hiv] eller [Val]<3>eller [Aip]<3>som en del av meget kraftige og sjeldne antitumormidler som er blitt satt på liste for kliniske forsøk når tilstrekkelig store mengder blir tilgjengelig, og deres enkleste isomerer, hvor aminosyrerestene er ombyttet. Denne fremgangsmåte er enantio- og stereo-regulert og hurtig, idet den trekker fordeler av standardmetodene for syntese i oppløsningsfase.
Den foretrukne utførelsesform ifølge den foreliggende oppfinnelsen er representert ved formel I, hvor aa3 på uavhengig basis betegner ct-aminosyrer av L- eller D-konfigurasjon. X betegner på uavhengig basis C(R)2, O, S eller NR, hvor R på uavhengig basis er H eller en organisk gruppe valgt blant alkyl, alkenyl, aryl, aralkyl og deres substituerte derivater substituert med en en eller flere av en heterosykliskgruppe, en alkoksygrupper hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en aminogruppe, en guanidinogruppe eller en halogengruppe. R har fortrinnsvis fra l til ca. 12 karbonatomer, mer foretrukket fra 1 til ca. 8 karbonatomer, enda mer foretrukket fra 1 til ca. 6 karbonatomer og mest foretrukket 1,2, 3 eller 4 karbonatomer. Metyl, etyl og propyl, inklusive isopropyl, er særlig foretrukne alkyl-grupper i forbindelsene ifølge oppfinnelsen. aa3 er mest foretrukket ct-(a'-hydroksyisovaleryl)-propionyl (Hip) (X = O,
Y = -COCHCH3CO-), serie A, eller a-(a'-aminoisovaleryl)propionyl (Aip) (X = NH,
Y = -COCHCH3CO-), serie N, eller valin (X = NH, Y = -CO-), serie V, eller a-hydroksy-isovaleryl (X = -O-, Y = -CO-), serie H, eller N-metylvalin (X = NMe, Y = -CO-), -serie M. aa8 er på uavhengig basis a-aminosyrer av L- eller D-konfigurasjon i de tilfeller hvor dette er aktuelt. X2er definert avhengig av identiteten til Y.
For eksempel,
når Y er -CO-, så
a) er X2CR, O (og R2er fraværende), S (og R2er fraværende), eller N, hvor R uavhengig er H eller en organisk gruppe valgt blant en C|-C|2-alkylgruppe, en C2-Ci2-alkenylgruppe, en C6-C|g-arylgruppe, en aralkylgruppe og substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en heterosyklisk gruppe som inneholder én, to eller tre heteroatomer valgt fra N, 0 eller S atomer, en Ci-Ci2-alkoksygruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe og en halogengruppe; og
Ri og R2er uavhengig av hverandre H eller en organisk gruppe valgt blant en Ci-Ci2-alkylgruppe, en C2-Ci2-alkenylgruppe, en C6-C]g-arylgruppe, en aralkylgruppe, en amidogruppe RCONH- og en acylgruppe RCO-, hvor R er en Ci-Ci2-alkylgruppe, en Ci-Ci2-alkenylgruppe, en C6-Ci8-arylgruppe, en aralkylgruppe eller substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en Ci-Ci2-alkoksygruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe og en halogengruppe, [og Ri og R2kan, når X2er N, videre være -SO2R, hvor R er som definert]; eller
b) har aa8 formel
hvor R3er en organisk gruppe valgt blant en Ci-Ci2-alkylgruppe, en C2-Ci2-alkenylgruppe, en Cé-Cig-arylgruppe, en aralkylgruppe, en gruppe RSO2- og en acylgruppe RCO-, hvor R er en en Ci-Ci2-alkylgruppe, en C2-Ci2-alkenylgruppe, en C6-Cig-arylgruppe, en aralkylgruppe eller substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe eller en halogengruppe; eller c) danner Ri og R2sammen med X2et eventuelt substituert C3-Ci2-sykloalkyl, et eventuelt substituert C6-Ci8-aryl eller en eventuelt substituert heterosyklisk gruppe valgt blant kumarinyl, kinolinyl, pyridyl, pyrazinyl, pyrimidyl, furyl, pyrrolyl, tienyl, tiazolyl, oksazolyl, imidazolyl, indolyl, benzofuranyl, benzotiazol, tetrahydrofuranyl, tetrahydropyranyl, piperidinyl og morfolino; hvor de eventuelle substituentene er valgt blant C|-Ci2-alkylgruppe, C2-C12-alkenylgruppe, C6-Ci8-arylgruppe, aralkylgruppe og substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en karbonylgruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe og en halogengruppe; eller d) er aa8 erstattet med en organisk gruppe valgt blant en Ce-Cig-arylgruppe, en aralkylgruppe, en gruppe RS02- og en acylgruppe RCO- hvor R er en Ci-Ci2-alkylgruppe, en C6-Ci8-arylgruppe, en aralkylgruppe eller substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en karbonylgruppe, en Ci-C^-alkoksygruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en aminogruppe, en guanidinogruppe og en halogengruppe;
når Y er -COCHCH3CO-, så
a) er X2N, og Ri og R2er uavhengig av hverandre H eller en organisk gruppe valgt blant en Ci-Ci2-alkylgruppe, en C2-Ci2-alkenylgruppe, en C6-Cig-arylgruppe, en aralkylgruppe,
en amidogruppe RCONH-, en gruppe -S02R og en acylgruppe RCO-, hvor R er en Ci-Ci2-alkylgruppe, en C2-Ci2-alkenylgruppe, en C6-Ci8-arylgruppe, en aralkylgruppe eller substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en heterosyklisk gruppe som inneholder én, to eller tre heteroatomer valgt fraN, O eller S atomer, en C]-Ci2-, en Ci-C]2-alkoksygruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe eller en halogengruppe, eller
b) har aa8 formel:
hvor R3er en gruppe RS02- hvor R er Ci-Ci2-alkyl, eller R3er en C2-Ci2-alkenylgruppe, en
aralkylgruppe eller substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en karbonylgruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe eller en halogengruppe; eller
c) danner Ri og R2sammen med X2en eventuelt substituert C3-Ci2-sykloalkyl-, en eventuelt substituert C6-Ci8-aryl- eller en eventuelt substituert heterosyklisk gruppe valgt blant
kumarinyl, kinolinyl, pyridyl, pyrazinyl, pyrimidyl, furyl, pyrrolyl, tienyl, tiazolyl, oksazolyl, imidazolyl, indolyl, benzofuranyl, benzotiazol, tetrahydrofuranyl, tetrahydropyranyl, piperidinyl og morfolino; hvor de eventuelle substituentene er valgt blant Ci-Ci2-alkylgruppe, C2-Ci2-alkenylgruppe, C6-Ci8-arylgruppe, aralkylgruppe og substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en karbonylgruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe eller en halogengruppe; eller
d) er aa8 erstattet med en organisk gruppe valgt blant en C6-Ci8-arylgruppe, en aralkylgruppe og en gruppe RS02-, hvor R er en Ci-C]2-alkylgruppe, en Cé-Cis-arylgruppe eller
en aralkylgruppe, og substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en Ci-Ci2-alkoksygruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en aminogruppe, en guanidinogruppe eller en halogengruppe.
Alkylgrupper har fortrinnsvis fra 1 til ca. 12 karbonatomer, mer foretrukket fra 1 til ca. 8 karbonatomer, ytterligere mer foretrukket fra 1 til ca. 6 karbonatomer og mest foretrukket 1,2, 3 eller 4 karbonatomer. Metyl, etyl og propyl, inklusive isopropyl, er særlig foretrukne alkylgrupper i forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelse. Slik den her benyttes, refererer betegnelsen "alkyl" seg, med mindre annet er angitt, til både sykliske og ikke-sykliske forbindelser, skjønt sykliske grupper vil omfatte minst tre karbonringledd. Foretrukne aminosyrer er beskyttet eller ubeskyttet D- eller L-glysin, valin, leucin, isoleucin, fenylalanin, tyrosin, tryptofan, metionin, cystein, aspartat, asparagin, glutaminsyre, glutamin, lysin, arginin, prolin, serin, treonin, histidin og hydroksyprolin. Foretrukne peptider kan dannes med de ovennevnte aminosyrer.
Slik den her benyttes, skal betegnelsen "organisk gruppe" betegne en hydrokarbongruppe som er klassifisert som en alifatisk gruppe, en syklisk gruppe eller en kombinasjon av alifatiske og sykliske grupper (f.eks. aralkylgrupper). I sammenheng med den foreliggende oppfinnelse menes med betegnelsen "alifatisk gruppe" et mettet eller umettet, rettkjedet eller forgrenet hydrokarbon. Denne betegnelsen brukes for å omfatte f.eks. alkyl-, alkenyl- og alkynylgrupper. Med betegnelsen "alkylgruppe" menes en mettet, rettkjedet eller forgrenet hydrokarbongruppe innbefattende f.eks. metyl, etyl, isopropyl, isobutyl, t-butyl, heptyl, dodecyl, oktadecyl, amyl, 2-etylheksyl, 2-metylbutyl, 5-metylheksyl og lignende. Med betegnelsen "alkenylgruppe" menes en umettet, rettkjedet eller forgrenet hydrokarbongruppe med én eller flere karbon-karbondobbeltbindinger, som f.eks. en vinylgruppe. Med betegnelsen "alkynyl-gruppe" menes en umettet, rettkjedet eller forgrenet hydrokarbongruppe med én eller flere karbon-karbontrippelbindinger. Med betegnelsen "syklisk gruppe" menes en lukket, ringformet hydrokarbongruppe klassifisert som en alisyklisk gruppe, aromatisk gruppe eller heterosyklisk gruppe. Med betegnelsen "alisyklisk gruppe" menes en syklisk hydrokarbongruppe med egenskaper som ligner alifatiske gruppers egenskaper. Med betegnelsen "aromatisk gruppe" eller "arylgruppe" menes en mono- eller polysyklisk, aromatisk hydrokarbongruppe. Med betegnelsen "heterosyklisk gruppe" menes en hydrokarbongruppe som danner en lukket ring, hvor ett eller flere av atomene i ringen er et annet element enn karbon (f.eks. nitrogen, oksygen, svovel osv.).
Foretrukne alkoksygrupper i forbindelsene ifølge oppfinnelsen innbefatter grupper med én eller flere oksygenbindinger og fra 1 til ca. 12 karbonatomer, mer foretrukket fra 1 til ca. 8 karbonatomer, enda mer foretrukket fra 1 til ca. 6 karbonatomer og mest foretrukket 1,2,3 eller 4 karbonatomer.
Egnede heteroaromatiske grupper i forbindelsene ifølge oppfinnelsen inneholder ett, to eller tre heteroatomer valgt blant N, O og S og innbefatter f.eks. kumarinyl, innbefattende 8-kumarinyl, kinolinyl, inklusive 8-kinolinyl, pyridyl, pyrazinyl, pyrimidyl, furyl, pyrrolyl, tienyl, tiazolyl, oksazolyl, imidazolyl, indolyl, benzofuranyl og benzotiazol. Egnede hetero-alisyklisk grupper i forbindelsene ifølge oppfinnelsen inneholder ett, to eller tre heteroatomer valgt blant N, 0 og S og inkluderer f.eks. tetrahydrofuranyl-, tetrahydropyranyl-, piperidinyl-, morfolino- og pyrrolidinylgrupper.
Egnede karbosykliske arylgrupper i forbindelsene ifølge oppfinnelsen innbefatter enkelt- og flerringsforbindelser, inklusive flerringsforbindelser som inneholder separate og/eller kondenserte arylgrupper. Typiske karbosykliske arylgrupper inneholder 1-3 separate eller kondenserte ringer og fra 6 til ca. 18 karbonringatomer. Særlig foretrukne karbosykliske arylgrupper innbefatter fenyl, inklusive substituert fenyl, som f.eks. 2-substituert fenyl, 3-substituert fenyl, 2,3-substituert fenyl, 2,5-substituert fenyl, 2,3,5-substituert og 2,4,5-substituert fenyl, inklusive slike grupper én eller flere av fenylgruppens substituenter utgjøres av en elektron-uttrekkende gruppe som f.eks. halogen, cyan, nitro, alkanoyl, sulfinyl, sulfonyl og lignende; naftyl, inklusive 1-naftyl og 2-naftyl; bifenyl; fenantryl; og antracyl.
Eventuelt beskyttede aminogrupper kan beskyttes ved bruk av grupper som det er kjent å anvende for dette formål. Egnede beskyttende grupper for aminer innbefatter karbamater, amider og andre beskyttende grupper, som f.eks. alkyl, arylalkyl, sulfo- eller halogenarylalkyl, halogenalkyl, alkylsilylalkyl, arylalkyl, sykloalkylalkyl, alkylarylalkyl, heterosyklylalkyl, nitro-arylalkyl, acylaminoalkyl, nitroarylditioarylalkyl, disykloalkylkarboksamidoalkyl, sykloalkyl, alkenyl, arylalkenyl, nitroarylalkenyl, heterosyklylalkenyl, heterosyklyl, hydroksyheterosyklyl, alkylditio, alkoksy- eller halogen- eller alkylsulfinylarylalkyl, heterosyklylacyl og andre karbamater, og alkanoyl, halogenalkanoyl, arylalkanoyl, alkenoyl, heterosyklylacyl, aroyl, arylaroyl, halogenaroyl, nitroaroyl og andre amider, samt alkyl, alkenyl, alkylsilylalkoksyalkyl, alkoksy-alkyl, cyanalkyl, heterosyklyl, alkoksyarylalkyl, sykloalkyl, nitroaryl, arylalkyl, alkoksy- eller hydroksyarylalkyl, og mange andre grupper. Slike grupper kan eventuelt være substituert med de tidligere nevnte substituentgrupper.
Henvisninger som her er gitt til substituerte grupper i forbindelsene ifølge oppfinnelsen, refererer seg til den spesifiserte del som kan være substituert i én eller flere tilgjenge-lige stillinger med én eller flere egnede grupper, f.eks. halogen som f.eks. fluor, klor, brom og jod; cyan; hydroksyl; nitro; azido; alkanoyl som f.eks. en Ci-6-alkanoylgruppe som f.eks. acyl og lignende; karboksamido; alkylgrupper innbefattende de grupper som har fra 1 til ca. 12 karbon-atomer eller fra 1 til ca. 6 karbonatomer og mer foretrukket 1-3 karbonatomer; alkenyl- og alkynylgrupper innbefattende grupper med én eller flere umettede bindinger og fra 2 til ca. 12 karbonatomer eller fra 2 til ca. 6 karbonatomer; alkoksygrupper som har én eller flere oksygenbindinger og fra 1 til ca. 12 karbonatomer eller fra 1 til ca. 6 karbonatomer; aryloksy som f.eks. fenoksy; alkyltiogrupper, inklusive de deler som har én eller flere tioeterbindinger og fra 1 til ca. 12 karbonatomer eller fra 1 til ca. 6 karbonatomer; alkylsulfinylgrupper, inklusive de deler som har én eller flere sulfinylbindinger og fra 1 til ca. 12 karbonatomer eller fra 1 til ca. 6 karbon-atomer; alkylsulfinylgrupper, inklusive de deler som har én eller flere sulfonylbindinger og fra 1 til ca. 12 karbonatomer eller fra 1 til ca. 6 karbonatomer; aminoalkylgrupper, som f.eks. grupper med ett eller flere N-atomer og fra 1 til ca. 12 karbonatomer eller fra 1 til ca. 6 karbon-atomer; karbosyklisk aryl med 6 eller flere karbonatomer, spesielt fenyl (f.eks. hvor R er en substituert eller usubstituert bifenyldel); og aralkyl som f.eks. benzyl.
Det er anerkjent på dette tekniske området at en høy grad av substituering ikke bare er aksepterbar men ofte er tilrådelig. Det forutsettes således substituering i forbindelsene ifølge oppfinnelsen. Som et middel til å forenkle redegjørelsene og bruken av en viss terminologi gjennom denne patentsøknad er betegnelsene "gruppe" og "del" benyttet for å differensiere mellom kjemiske spesies som tillater substituering eller som kan være substituert, og de som ikke tillater substituering eller ikke kan være substituert. Når således betegnelsen "gruppe" benyttes for å beskrive en kjemisk substituent, innbefatter det beskrevne kjemiske materialet den usubstituerte gruppe og den samme gruppe med O-, N- eller S-atomer, f.eks. i sidekjeden, så vel som en karbonylgruppe eller annen konvensjonell substituering. Når betegnelsen "del" benyttes for å beskrive en kjemisk forbindelse eller en substituent, er det kun et usubstituert kjemisk materiale som er ment å skulle være innbefattet. Eksempelvis er uttrykket "alkylgruppe" ment å skulle innbefatte ikke bare alkylsubstituenter som er mettede hydrokarboner med åpen kjede, som f.eks. metyl, etyl, propyl, isobutyl og lignende, men også alkylsubstituenter som bærer ytterligere substituenter som er kjent i faget, som f.eks. hydroksy, alkoksy, amino, karboksyl, karboksamido, halogenatomer, cyan, nitro, alkylsulfonyl osv. Således innbefatter "alkylgruppe" etergrupper, halogenalkylgrupper, alkoholer, tioler, karboksyl, aminer, hydroksyalkylgrupper, sulfoalkylgrupper osv. På den annen side er uttrykket "alkyldel" begrenset til kun å innbefatte alkylsubstituenter som er mettede hydrokarboner med åpen kjede, som f.eks. metyl, etyl, propyl, isobutyl og lignende.
I den foreliggende beskrivelse omtales syntesemetoder.
En fremgangsmåte er omtalt for fremstilling av et didemninfragment med strukturen:
omfatter kobling av Boc-D-allo-Ileu-OH med litiumenolatet av benzylacetat.
Karbonylgruppen i et didemninfragment med formelen: kan reduseres til et didemninfragment med strukturen:
Hydroksygruppen i en forbindelse med formel: kan beskyttes, hvorved det fås et didemninfragment med strukturen:
Videre avbeskyttelse av benzylestergruppen gir et didemninfragment med strukturen:
En annen fremgangsmåte som omtales for fremstilling av et didemnin-fragment omfatter kobling av en første reaktant med strukturen:
med en andre reaktant med strukturen: hvorved det fås et didemninfragment med strukturen:
hvor X er -O- eller -NH-, hvor R er en aminbeskyttende gruppe, og hvor R er en hydroksy-beskyttende gruppe. Hensiktsmessig kan X være -O-, mens R er tert.-butyldimetylsilyl, eller X er -NH-, mens R er Boe.
En annen fremgangsmåte som omtales for fremstilling av et didemnin-fragment omfatter kobling av en første reaktant med strukturen:
med en andre reaktant med strukturen: hvorved det fås et didemninfragment med strukturen:
hvor X er valgt blant -0-, -NMe- og -NH-, hvor R er en aminbeskyttende gruppe, og hvor R er H. Hensiktsmessig er X -O-, mens R er H, eller X er -NH-, mens R er Boe, eller X er -NMe-, mens R er Boe.
En fremgangsmåte som omtales omfatter hydrolyse av didemninfragmentet med formel: for dannelse av et didemninfragment med strukturen:
hvor X er-OH eller-NH2.
Ved en annen fremgangsmåte foretas hydrolyse av didemninfragmentet: for dannelse av et didemninfragment med strukturen:
hvor X er -NH2eller -NHMe.
Videre omtales en fremgangsmåte for fremstilling av et didemninfragment hvor en første reaktant med strukturen:
kobles sammen med en andre reaktant med strukturen: for dannelse av et didemninfragment med strukturen:
hvor X er valgt blant -O-, -NMe og -NH-, hvor Y er -(COCHCH3)nCO-, hvor n er 0 eller 1.
En fremgangsmåte innebærer hydrolyse av didemninfragmentet:
for dannelse av et didemninfragment med strukturen:
hvor X er -O- eller -NH-, hvor Y er -(COCHCH3)nCO-, hvor n er 0 eller 1.
En annen fremgangsmåte omtales, hvor metoden omfatter å koble en første reaktant som har strukturen:
sammen med en andre reaktant med strukturen: for dannelse av et didemninfragment med strukturen:
Ved en ytterligere omtalt fremgangsmåte foretas avbeskyttelse av benzylestergruppen i didemninfragmentet med formel: for dannelse av et didemninfragment med strukturen:
En omtalt fremgangsmåte for fremstilling av et didemninfragment, omfatter kobling av en første reaktant med strukturen:
med en andre reaktant med strukturen: for dannelse av et didemninfragment med strukturen:
hvor X er -O- eller -NH-, og Y er -(COCHCH3)nCO-, hvor n er 0 eller 1.
En fremgangsmåte innebærer avbeskyttelse av didemninfragmentet: for dannelse av et didemninfragment med strukturen:
hvor X er -O- eller -NH-, og Y er -(COCHCH3)nCO-, hvor n er 0 eller 1.
En ytterligere omtalt fremgangsmåte for fremstilling av et didemninfragment omfatter ringslutning av fragmentet med formel: for dannelse av en didemninanalog med strukturen:
hvor X er -O- eller -NH-, og Y er -(COCHCH3)nCO-, hvor n er 0 eller 1.
Ved en ytterligere omtalt fremgangsmåte foretas hydrolyse av didemninanalogen: for dannelse av en didemninanalog med strukturen:
hvor X er -O- eller -NH-, og Y er -(COCHCH3)nCO-, hvor n er 0 eller 1.
En fremgangsmåte omtales for fremstilling av en didemninanalog, fremgangsmåten omfatter kobling av en første reaktant med strukturen:
med en andre reaktant med strukturen: for dannelse av en didemninanalog med strukturen:
hvor X er -0- eller -NH-, og Y er -(COCHCH3)nCO-, hvor n er 0 eller 1.
En annen fremgangsmåte som omtales omfatter avbeskyttelse av didemninfragmentet med formelen: for dannelse av et didemninfragment med strukturen:
hvor X er -O- eller -NH-, og Y er -(COCHCH3)nCO-, hvor n er 0 eller 1.
En omtalt fremgangsmåte for fremstilling av et didemninfragment omfatter kobling av fragmentet med strukturen:
med en andre reaktant med strukturen: for dannelse av et didemninfragment med strukturen:
Ytterligere en omtalt fremgangsmåte omfatter avbeskyttelse av didemninfragmentet med formel: for dannelse av et didemninfragment med strukturen:
En fremgangsmåte som omtales for fremstilling av en didemninanalog omfatter kobling av didemninanalogen med formel:
med fragmentet: for dannelse av didemninanalogen med strukturen:
hvor X er -O- eller -NH-, og Y er -(COCHCH3)nCO-, hvor n er 0 eller 1.
En ytterligere omtalt fremgangsmåte for fremstilling av en didemninanalog omfatter kobling av didemninanalogen med strukturen:
med fragmentet med strukturen: for dannelse av didemninanalogen med strukturen:
hvor X er -O- eller -NH-, og R er i-propyl, hvor X er -O-, og R er n-propyl, og R er n-pentyl.
En ytterligere fremgangsmåte som omtales for fremstilling av en didemninanalog omfatter kobling av didemninanalogen med strukturen:
med fragmentet med strukturen: for dannelse av en didemninanalog med strukturen:
Ved en omtalt fremgangsmåte foretas avbeskyttelse av didemninanalogen: for dannelse av et didemninfragment med strukturen:
En omtalt fremgangsmåte for fremstilling av en didemninanalog omfatter kobling av didemninanalogen med strukturen:
med fragmentet med strukturen: for dannelse av didemninanalogen med strukturen:
En annen fremgangsmåte omfatter avbeskyttelse av didemninanalogen: for dannelse av en didemninanalog med strukturen:
En omtalt fremgangsmåte for fremstilling av en didemninanalog omfatter kobling av didemninanalogen: med isobutyrylklorid for dannelse av didemninanalogen med strukturen:
En fremgangsmåte som omtales for fremstilling av en didemninanalog omfatter kobling av didemninanalogen med strukturen:
med fragmentet med strukturen: for dannelse av didemninanalogen med strukturen:
hvor R er Boe, isobutyryl, pyruvyl eller akryloyl.
En omtalt fremgangsmåte for fremstilling av en didemninanalog omfatter kobling av didemninanalogen med strukturen:
med fragmentet med strukturen: for dannelse av didemninanalogen med strukturen:
hvor R er SC^Me eller Z-Nva.
En fremgangsmåte som omtales omfatter avbeskyttelse av didemninanalogen: for dannelse av en didemninanalog med strukturen:
hvor R.2er Nva.
En fremgangsmåte for fremstilling av en didemninanalog som omtales omfatter kobling av didemninanalogen med strukturen:
med fragmentet med strukturen: for dannelse av didemninanalogen med strukturen:
hvor R er Boe, isobutyryl eller pyruvyl.
En omtalt fremgangsmåte for fremstilling av en didemninanalog omfatter kobling av didemninanalogen med strukturen:
med fragmentet med strukturen: for dannelse av didemninanalogen med strukturen:
Det fremgangsmåte for fremstilling av en didemninanalog som omtales omfatter kobling av didemninanalogen med strukturen:
med fragmentet med strukturen: for dannelse av didemninanalogen med strukturen:
En annen omtalt fremgangsmåte for fremstilling av en didemninanalog omfatter kobling av didemninanalogen med strukturen:
med fragmentet med strukturen: for dannelse av didemninanalogen med strukturen:
Ytterligere fremgangsmåte for fremstilling av en didemninanalog som omtales omfatter kobling av didemninanalogen med strukturen: med metylsulfonylklorid, for dannelse av didemninanalogen med strukturen:
En omtalt fremgangsmåte for fremstilling av en didemninanalog omfatter kobling av didemninanalogen med strukturen:
med fragmentet med strukturen: for dannelse av didemninanalogen med strukturen:
hvor X er 0 eller S, og R er butyl eller fenyl.
Det vil forstås at disse fremgangsmåter kun illustrerer den foreliggende tekno-logien og kan modifiseres etter ønske. Spesielt kan forskjellige beskyttende grupper tilpasses for beskyttelse av aminogrupper og hydroksygrupper. Ulike reagenser kan anvendes for innføring av ønskede grupper. Substituentene kan varieres etter ønske.
NÆRMERE REDEGJØRELSE FOR DE FORETRUKNE UTFØRELSER
Forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelse kan fremstilles syntetisk. Frem-gangsmåtene som her beskrives for syntese av aplidin og derivater, kan også anvendes for syntese av et bredt spekter av didemniner.
Strukturene av enkelte av forbindelsene er vist på figur 1:
Aa3-aplidinderivater er syntetiske sykliske depsipeptider som er strukturelt likeartede med aplidin (forbindelse II) (aa3 = Hip, også kjent som dehydrodidemnin B), som er et naturlig forekommende didemnin som er isolert fra sjøpungen Aplidium albicans (figur 1). De fremstilte molekyler avviker fira hverandre ved tilstedeværelse av hydroksyisovaleriansyre (Hiv) (forbindelse I) eller valin (forbindelse V) eller metylvalin (forbindelse VI) eller a-(a'-aminoisovaleryl)propionyl (Aip) (forbindelse VII) i stedet for hydroksyisovalerylpropionsyre-enheten (Hip) (II) som er til stede i alle andre naturlig forekommende didemniner av samme slag. Likeartetheten mellom disse to strukturer er også nylig blitt funnet mellom didemnin B
(forbindelse III), som er den mest velkjente forbindelse i denne klasse depsipeptider, og et nytt isolert syklisk depsipeptid fra en ikke identifisert brasiliansk sjøpung av familien Didemnidae: Tamandarin A (forbindelse IV). Forbindelser I, V, VI og VII er didemninderivater som ikke forekommer i naturen.
Den strukturelle homologi mellom III og IV reflekteres også i deres respektive biologiske aktivitet. Ved sammenligning av de to forbindelser oppviser IV lignende nivåer av antitumoraktivitet in vitro ved klonogene forsøk samt proteinbiosyntesehemmende egenskaper, og den har vist seg å være noe mer aktiv in vitro enn III mot karsinom i bukspyttkjertelen. Imidlertid oppviser ikke forbindelse IV noen som helst tumortypespesifisitet på en NCI 60 cellers plate. Didemnin B viste seg å være toksisk i doser nær dem som kreves for terapeutisk anvendelse, og det er sannsynlig at IV er et bredspektret toksin snarere enn et selektivt middel.
[Hiv]<3->aplidin (I) oppviser ellers de samme gunstige egenskaper som er funnet for aplidin (II) med hensyn til didemnin B (III), ved at det er mer spesifikt overfor faste tumorer som tykktarmskreft, chondrosarkom og osteosarkom ved MTS-prøven. [Val] -aplidin (V) og [MeVal]<3->aplidin (VI) er for øvrig nye forbindelser som oppviser en høy grad av antitumoraktivitet in vitro. Sluttelig er det sannsynlig at forbindelser V, VI og VII i forhold til det beslektede aplidin vil føre til en økning i hydrogenbindingen på det aktive sted, slik at det fås mer aktive forbindelser. Dessuten kan tilstedeværelsen av amidbindingen som erstatter esterbindingen, kunne forbedre stabiliteten av syklodepsipeptidkjernen.
Her skal den første totale syntese av de forskjellige serier av aplidinderivater angis. Som et eksempel er retrosynteseanalysen vist på figur 2.
Nøkkeltrinnene innbefatter en effektiv makroringslutning av lineære forløper-forbindelser 6 og en praktisk stereoselektiv syntese av Ist-aa3-Leu-Pro-enhet (Al) og det høyre fragment Dl. En avsluttende kobling av makrosyklusen 4 med forskjellige sidekjeder gir aa3-aa8-aplidin og derivater. Hardførheten av denne syntesemetodologi er blitt vist med godt resultat ved utvikling av en praktisk syntese for fremstilling av aplidin II (aa3 = Hip).
Dannelsen av en makrosyklisk kjerne er det viktige nøkkeltrinn i samtlige serier. Vellykket ringdannelse ved samtlige av de fire mulige amidbindinger er blitt oppnådd ved tidligere synteser av didemninene. I det foreliggende arbeidet ble imidlertid bindingen som forbinder N(Me)-0(Me)-Tyr og Pro valgt som punktet for makroringslutningen på grunnlag av tidligere utviklingsarbeid under totalsyntesen av aplidin II (G. Jou, I. Gonzales, F. Albericio, P. Lloyd-Williams, E. Giralt, J. Org. Chem., 1997, 62, 354-366, og patentet ES-2102322).
Den makrosykliske kjerne splittes i den venstre Ist-aa3-Leu-Pro-tetrapeptidenhet Al ogdipeptidet Boc-Thr-(Z-NMe-OMe-Tyr)-OH Dl.
Syntesen av det høyre dipeptidfragment Dl er allerede beskrevet. Imidlertid tillater syntesen vist i reaksjonsskjema 1 fremstilling av dette mellomprodukt i kilogramsmålestokk. Syrefunksjonen i Boc-Thr(OH)-OH ble beskyttet med fenacylbromid, hvilket direkte gav alkoholen D3, som så ble forestret med Z-N(Me)-0(Me)-Tyr-OH ved bruk av DCC i nærvær av DMAP, hvorved D2 ble oppnådd. Fjerning av fenacylgruppen med Zn i eddiksyre gav uten problem fragmentet Dl.
Fremstillingen av forløperen Al er vist i reaksjonsskjema 2 for de forskjellige serier. For SHPL-, SVPL- og SMPL-seriene gav det første koblingstrinn mellom Leu-Pro-OBzl (A5) og kommersielt tilgjengelig syre (Bl) direkte alkoholen A3, som var klar for den neste reaksjon med isostatin (Cl). For syntesene i SAPL- og SNPL-seriene blir veien en annen enn den tidligere beskrevne, fordi Bl er en P-ketoester som syntetiseres fra henholdsvis a-(a'-hydroksyisovaleryl)propionsyre og a-(a'-aminoisovaleryl)propionsyre. Syntesen av fragmentet B2 (SAPL- og SNPL-seriene) er vist i reaksjonsskjema 3. Hydrogenolyse fra B2 til Bl utføres like før ettrinnskoblingsreaksjonen med A5.
Fremstillingen av hele fragmentet Al er basert på tilgjengeligheten av isostatin-delen, som er blitt fremstilt ut fra det ikke-proteinogene, aminobeskyttede Boc-D-alloisoleucin (C5) i store mengder. Synteseveien for fremstilling av Cl er vist i reaksjonsskjema 4.
Aktivering av karboksylfunksjonaliteten av Boc-D-allo-Ile med karbonyldi-imidazol med påfølgende kondensasjon av benzylacetatet med litiumenolat gav P-ketoester (C4). Stereoselektiv reduksjon med KBH4i metanol gav C3. Ved beskyttelse av den sekundære hydroksylgruppe som TBDMS-eteren (C2) og hydrogenolyse av den resulterende benzylester ble isostatin (Cl) oppnådd.
Påfølgende trinn som gir forbindelser I, II, V og VII, er vist i reaksjonsskjema 5.
Kobling av fragmenter Al og Dl med HBTU/HOBt gav den rettkjedede forløper-forbindelse av type 7. Hydrogenolyse av beskyttende grupper Cbz og benzyl forløper glatt med Pd(OH)2, under dannelse av 6. Makroringslutningstrinnet ved bruk av HATU/HOAt ga mellom-produktet 5 i godt utbytte (75 %). Hydrogenklorid i dioksan ble benyttet for avspalting av den beskyttende gruppe Boe, hvorved aminet 4 ble oppnådd. Denne forbindelse ble koblet sammen med Z-NMe-D-Leu-OH, hvorved forbindelse 3 ble oppnådd. Denne ble så underkastet hydrogenolyse med Pd-C. Den resulterende forbindelse 2 ble koblet sammen med Pyr-Pro-OH som sidekjede ved bruk av DIPCDI, hvorved de tilsvarende forbindelser ble oppnådd.
Det er interessant at forløpere av type 2, som er analoge med didemnin A i alle de tidligere nevnte aspekter, har tjent som byggestener for syntese av noen interessante beslektede forbindelser, da N-endegruppen, en fri, sekundær aminogruppe, tilveiebringer et sted for til-binding av forskjellige acylgrupper til det sykliske depsipeptid.
I en tidligere undersøkelse (Rinehart et al., J. Med. Chem., 1996, 39, 2819-2834) ble også acylderivater av didemnin A (dA) 3 funnet å være aktive, slik som de beslektede, opp-havlige forbindelser 2. For aa3-serien har oppfinnerne også funnet aktivitet hos forbindelser 3.
Tabeller 1 og 2 viser IC50-verdiene som ble funnet for forbindelser 1.
Forbindelsene som her fremstilles, er vist i reaksjonsskjemaer 5 og 6. Disse forbindelser innbefatter Na<->propionyl-[aa]<3->dA, Na<->butyryl-[aa]<3->dA, Na<->isobutyryl-[aa]<3->dA og Na<->pentanoyl-[aa]<3->dA.
Analoger som har to acyl underenheter etter N-endegruppen i aa3-dA-kjernen, ble fremstilt for undersøkelse av de strukturfaktorer som bidrar til spesifisiteten overfor visse tumorer. Diacylforbindelsene (isobutyryl-Pro-OH, O-isobutyryl-Lac-Pro-OH og N-benzyl-Ala-Pro-OH ble fremstilt og kondensert med forbindelser av type 2 etter DIPCDI-metoden, for dannelse etter avbeskyttelse og rensing av henholdsvis [aa]<3->[isobutyryl]<9->aplidin, [O-isobutyryl-Lac]<9->aplidin og [Ala]<9->aplidin.
Spiroforbindelser ble også bundet til hverandre for å danne aktive forbindelser:
Syntesen for dannelse av spirosykliske fragmenter er vist i reaksjonsskjema 7. Syntesen starter med den tidligere publiserte forbindelse 8. Referanser: a) Seebach, D. et al., J. Am. Chem. Soc., 1983, 105, 5390-5398; b) Genin, M.J. et al., J. Org. Chem., 1993, 58,2334-2337.
Reaksjonsskjema 8
Foretrukne aplidinderivater: forbindelser fra serie A
Spiroforbindelser ble også bundet sammen, slik som i de foregående serier, for dannelse av aktive forbindelser:
(1) Denne forbindelse er beskrevet i litteraturen: J. Org. Chem., 2000, 65, 782-792. Forbindelsenes syntese ble publisert før forbindelsene ble oppdaget: Lett., 2000, vol. 0, nr. O, A-D.
Metodologi: etter Berjeron et al., Biochem. and Bioph. Res. Commun., 1984, 121, 3, 848-854. 388 = murint lymfom. A549 - humant lungekarsinom. HT29 = humant tykktarmskarsinom. MEL28 = humant melanom. DU145 = humant prostatakarsinom.
Liste over forkortelser
Diverse
AA aminosyre
Ist isostatin
Hip hydroksyisovalerylpropionsyre
Hiv hydroksyisovaleriansyre
Aip aminoisovalerylpropionsyre
Lac melkesyre
LC væskekromatografi
HPLC væskekromatografi med høy ytelse
TLC tynnsjiktkromatografi
Smp. smeltepunkt
Rt retensjonstid
Kvant. kvantitativt utbytte
ESI-MS elektrospray-ioniseringsmassespektre
Besk<y>ttende grupper
Bn benzyl
Boe tert.-butyloksykarbonyl
TBDMS tert.-butyldimetylsilyl
Z benzyloksykarbonyl
Pac fenyleddiksyre
Løsemidler
THF tetrahydrofuran
Heks heksan
ACN acetonitril
DCM diklormetan
EtOAc etylacetat
DMF dimetylformamid
MTBE metyl-tert.-butyleter
Et20 dietyleter
t-BuOH tert.-butanol
TFA trifluoreddiksyre
MeOH metanol
EtOH etanol
IPA isopropanol
Reagenser
CDT l,l'-karbonyldiimidazol
HOBt 1-hydroksybenzotriazol
HBTU N- [(1 H-benzotriazol-1 -yl)(dimetylamino)metylen] -N-metanaminiumheksafluorfosfat-N-oksid BOP-C1 bis-(2-okso-3-oksazolidinyl)fosfinklorid HATU N-[(dimetylamino)-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridin-1 -ylmetylen]-N-metylmetanaminiumheksafluorfosfat-N-oksid HOAt l-hydroksy-7-azabenzotriazol
DCC disykloheksylkarbodiimid
DIPCDI N,N'-diisopropylkarbodiimid
TBAF tetrabutylammoniumfluorid
AcOH eddiksyre
p-TsOH p-toluensulfonsyre DMAP 4-dimetylaminopyridin
NMM N-metylmorfolin
DIPEA diisopropyletylamin
TEA trietylamin
TFA trifluoreddiksyre
Generell prosedyre
Alle operasjoner ble utført under en inert argonatmosfære. Samtlige løsemidler var av reagenskvalitet (anvendt under opparbeidd ser) eller av HPLC-kvalitet (benyttet som reaksjonsløsemiddel og/eller som renseløsemiddel). Vannfrie løsemidler ble benyttet direkte i den form de ble levert av produsenten. Tetrahydrofuran ble destillert umiddelbart før bruk for å fjerne stabiliseringsmiddel. Alle andre reagenser var kommersielle forbindelser av den høyest til-gjengelige renhet. Analytisk tynnsjiktkromatografi (TLC) ble utført på Merck silikagel-aluminiumsplater (60, F254) forhåndsbelagt med en fluorescerende indikator. Visualisering ble foretatt ved bruk av ultrafiolett lys (254 nm), fosformolybdensyre (5 % vekt/vol) i 95 % etanol eller vanillin. Proton- og karbonmagnetiske resonansspektre ( 1 H- og 1 " XC-NMR) ble tatt opp på et Varian-300 (300 MHz) Fourier-transformasjonsspektrometer, og kjemiske forandringer ble uttrykt i deler pr. million (ppm) i forhold til CHCI3som en intern referanse (7,26 ppm for<*>H og 77,0 for<13>C). Multiplisiteter angis som singlett (s), dublett (d), dublett av dubletter (dd), dublett av tripletter (dt), triplett (t), kvartett (q), multiplett (m) og bred singlett (bs), og koblings-konstanter (J) ble uttrykt i Hz. Optisk dreining (i grader) ble målt med et Jasco Pl020-polarimeter. Elektrospray- ioniseringsmassespektre (ESI-MS) ble tatt opp på en Hewlett Packard-serie 1100 MSD. Element-flashkolonnekromatografi ble utført på E. Merck silikagel 60 (240-400 mesh) eller RP Cl8 (40-63 urn) ved bruk av de løsemiddelsystemer som er angitt for de enkelte utførelser.
I det følgende beskrives syntesen av mellomprodukter oppnådd på veien mot aplidin (SAPL), [Aiv]<3->aplidin (SNPL), [Hiv]<3->aplidin (SHPL), [Val]<3->aplidin (SVPL) og [MeVal]<3->aplidin (SMPL), og en beskrivelse er gitt for en rekke eksempler, mange av disse omfattes av foreliggende oppfinnelse.
Eksempel 1
Syntese av benzvl-( 4R. 5S)- 4-( tert.- butoksvkarbonvlamino)- 5- metvl- 3- oksoheptanoat ( C4)
Til en oppløsning av Boc-D-allo-Ile-OH (15,26 g; 65,9 mmol) i tørt THF (200 ml) ved 0 °C under argonatmosfære ble det tilsatt CDI (16,04 g; 98,96 mmol). Etter 15 minutter ble blandingen tillatt å oppvarmes til romtemperatur, og den ble omrørt i 16 timer. Den resulterende oppløsning ble kjølt til -78 °C og tilsatt via en kanyle til en godt omrørt oppløsning av benzyllitiumenolat kjølt ved -78 °C (625 ml; 0,37 M) [fremstilt ved drypping av en oppløsning av benzylacetat (33,34 ml) i THF (165 ml) til en oppløsning av litiumdiisopropylamid (0,36 M) i THF/heksan 3:1 (642 ml) ved -78 °C]. Temperaturen bør holdes < -75 °C. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved -78 °C i 60 minutter. Deretter ble den tillatt å øke til -10 °C (30 minutter), og det ble så foretatt ny kjøling til -78 °C. Reaksjonen ble så stoppet med 200 ml mettet, vandig ammoniumklorid, og det ble foretatt ekstraksjon med DCM (3 x 500 ml) ved romtemperatur. De sammenslåtte ekstrakter ble vasket først med vandig, mettet NaHC03(500 ml) og deretter med saltoppløsning (200 ml). Etter tørking (Na2S04) og oppfølgende fjerning av løsemidlet ble det oppnådd en olje som ble påført på silika Cl 8 og tilført toppen av en LC-RPC18-kolonne [Lichroprep RPC-18 (40-60 mikron)]. Eluering ved bruk av en gradient ACN-H20 (60-100 % ACN) gav produktet C4 som en fargeløs olje (16,7 g; 70 %). [ a]™
-20,0 (c 1, CHC13); TLC: Rf= 0,32 (Merck, RP-C18, ACN-H20 7:3).
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,77 (d, 3 H), 0,94 (t, 3 H), 1,25 (s, 9 H), 1,60 (m, 1 H), 1,90 (m, 2 H), 3,58 (s, 2 H), 4,47 (dd, 1 H), 5,00 (d, 1 H), 5,18 (s, 2 H), 7,35 (bs, 5 H).
Eksempel 2
Syntese av ( 3S, 4R, 5SVN-( tert.- butoksvkarbonyl) isostatinbenzylester ( C3)
C4 (16,7 g; 45,9 mmol) ble oppløst i metanol (690 ml) ved 0 °C. Kaliumborhydrid (7,43 g; 137,8 mmol) ble tilsatt til den omrørte oppløsning, og etter 30 minutter ble reaksjonen stoppet med vandig HC1 (0,1 N) til pH 4 og ekstrahert med DCM (300 ml). Ekstrakten ble vasket først med vandig NaHC03(100 ml, mettet) og deretter med saltoppløsning (100 ml). Etter tørking (Na2S04) og påfølgende fjerning av løsemidlet ble alkoholen C3 oppnådd (15,7 g; 93 %) som en fargeløs olje. Rf = 0,45 (heksan-EtOAc 2:1); [oc]D-9,5 (c 0,76, CHCI3); Rf = 0,45 (EtOAc-heksan 1:2). 1 H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,81 (d, 3 H), 0,90 (t, 3 H), 1,20 (m, 1 H), 1,36 (m, 1 H), 1,40 (s, 9 H), 1,90 (m, 1 H), 2,55 (dd, 1 H), 2,70 (dd, 1 H), 3,20 (d, 1 H), 3,61 (m, 1 H), 3,90 (m, 1 H), 4,40 (d, 1 H), 5,18 (s, 2 H), 7,40 (bs, 5 H).
Eksempel 3
Syntese av Boc- f3S. 4R. 5SVIstfTBDMSVOBn ( CD
Til en oppløsning av C3 (15,7 g; 42,9 mmol) i tørt DMF (65 ml) ved 0 °C ble imidazol (8,77 g; 128,8 mmol), DMAP (1,57 g; 12,81 mmol) og TBDMSC1 (19,42 g; 128,8 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble tillatt å oppvarmes til romtemperatur natten over, hvoretter den ble fordelt mellom Et20 (200 ml) og ble suksessivt behandlet med vandig HC1 (100 ml, 0,1 N), vandig NaHC03(100 ml, mettet) og saltoppløsning (50 ml). Etter tørking (Na2S04) og fjerning av løsemidlet ble residuet renset ved flash-LC (silikagel, heksan), hvorved det ble oppnådd 19,96 g C2 (97 %). [a]D10,6 (c 1,01, CHC13); Rf = 0,73 (EtOAc-heksan 1:2).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 5 0,15 (s, 6 H), 0,82 (s, 9 H), 0,85 (d, 3 H), 0,89 (t, 3 H), 1,18 (m, 1 H), 1,35 (m, 1 H), 1,41 (s, 9 H), 1,77 (m, 1 H), 2,45 (dd, 1 H), 2,60 (dd, 1 H), 3,62 (m, 1 H), 4,20 (m, 1 H), 4,40 (d, 1 H), 5,05 (d, 1 H), 5,15 (d, 1 H), 7,40 (bs, 5 H).
Eksempel 4
Syntese av Boc- r3S. 4R. 5S)- IstfTBDMSVOH ( CD
Til en oppløsning av C2 (10,48 g; 21,8 mmol) i THF (110 ml), avgasset og renset med argon, ble det tilsatt Pd/C 10 % (2,096 g; 20 vekt%). Blandingen ble omrørt under H2(1 atm) i 16 timer, hvoretter den ble filtrert gjennom et 0,45 mm tefionfilter og ble konsentrert under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd 7,8 g av en fargeløs olje. Fargeløse krystaller (6 g; 70 %) ble oppnådd etter krystallisering i ACN ved -20 °C. [ a] 2» 1,8 (c 0,594, DCM) [lit. [a]D1,74 (c 2,64, CHC13), Synthesis, 1991,294]; Rf = 0,45 (Merck HPTLC, RP-C18, ACN-H20 8:2). 1 H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,18 (s, 6 H), 0,82 (s, 9 H), 0,85 (d, 3 H), 0,89 (t, 3 H), 1,10-1,20 (m, 2 H), 1,42 (s, 9 H), 1,80 (m, 1 H), 2,50 (m, 2 H), 3,58 (m, 1 H), 4,11 (m, 1 H).
Eksempel 5
Syntese av ( 2Sy2- tert.- butvl( dimetv0silvloksv- 3- metvlsmørsvre ( SAPLB4)
Til en omrørt oppløsning av (S)-2-hydroksy-3-metylsmørsyre (21,12 g; 181,9 mmol) i DMF (91 ml) ved 0 °C under argonatmosfære ble det tilsatt imidazol (27,24 g; 400,11 mmol) og DMAP (6,94 g; 54,56 mmol). Etter 5 minutter ble tert.-butyldimetylklorsilan (60,31 g; 400,11 mmol) tilsatt. Blandingen ble tillatt å oppvarmes til 23 °C og ble omrørt natten over. Den urene reaksjonsblanding ble fordelt mellom Et20 (250 ml) og vandig HC1 (250 ml; 0,1 N). Den organiske fase ble vasket suksessivt med vandig NaHC03(250 ml, mettet) og saltoppløsning (250 ml), tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert under redusert trykk, hvorved det bis-silylerte produkt ble oppnådd som en blekgul olje. En oppløsning av dette produkt i 100 ml THF ble dryppet i 10 minutter til en kjølt (0 °C) oppløsning av KOH (30,47 g; 543 mmol) i THF/H20 (543 ml; 181 ml). Etter 40 minutter ble reaksjonsblandingen fordelt mellom H20 (300 ml) og Et20 (500 ml). Den vandige fase ble fordelt mellom kald (0 °C) vandig HC1 (200 ml; 3 N) og EtOAc (5 x 250 ml). De sammenslåtte organiske ekstrakter ble tørket (Na2SC>4), filtrert og konsentrert under redusert trykk, hvorved SAPLB4 ble oppnådd som en blekgul olje (38,38 g; 91 %). 1 H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,02 (m, 6 H), 0,90 (m, 15 H), 2,08 (m, 1 H), 4,06 (d, 1 H).
Eksempel 6
Syntese av benzvl-( 4S)- 4- tetr.- butvl( dimetvl) silvloksv- 5- metvl- 3- oksoheksanoat ( SAPLB3)
Til en oppløsning av (S)-2-(tert.-butyldimetylsilyloksy)-3-metylsmørsyre (15,31 g; 65,9 mmol) i tørt THF (200 ml) ved 0 °C under argonatmosfære ble det tilsatt CDI (16,04 g; 98,96 mmol). Etter 15 minutter ble blandingen tillatt å oppvarmes til romtemperatur, og den ble omrørt i 16 timer. Den resulterende oppløsning ble kjølt til -78 °C og ble tilsatt med en kanyle til en godt omrørt oppløsning kjølt ved -78 °C av benzyllitiumenolat kjølt ved -78 °C (625 ml; 0,37 M) [fremstilt ved drypping av en oppløsning av benzylacetat (33,34 ml) i THF (165 ml) til en oppløsning av litiumdiisopropylamid (0,36 M) i THF/heksan 3:1 (642 ml) ved -78 °C]. Temperaturen bør holdes < -75 °C. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved -78 °C i 60 minutter. Deretter ble den tillatt å øke til -10 °C (30 minutter), og det ble så foretatt ny kjøling til -78 °C. Reaksjonen ble så stoppet med 200 ml mettet, vandig ammoniumklorid, og det ble foretatt ekstraksjon med DCM (3 x 500 ml) ved romtemperatur. De sammenslåtte ekstrakter ble vasket først med vandig, mettet NaHC03(500 ml) og deretter med saltoppløsning (200 ml). Etter tørking (Na2S04) og oppfølgende fjerning av løsemidlet ble det oppnådd en olje som ble påført på silika Cl 8 og tilført toppen av en LC-RPC18-kolonne [Lichroprep RPC-18 (40-60 mikron)]. Eluering ved bruk av en gradient ACN-H20 (60-100 % ACN) gav SAPLB3 som en fargeløs olje (16,1 g; 70%). [a]D
-25 (c 0,5, MeOH); Rf = 0,32 (Merck, RP-C18, ACN-H20 7:3).
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,02 (m, 6 H), 0,92 (m, 15 H), 1,92 (m, 1 H), 3,63 (s, 2 H), 3,80 (s, 2 H), 3,38 (d, 1 H), 5,17 (d, 1 H), 5,20 (d, 1 H), 7,35 (bs, 5 H).
Eksempel 7
Syntese av benzvl-( 4SV4- tert.- butoksvkarbonvlamino- 5- metyl- 3- oksoheksanoat ( SNPLB3)
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPLB3 fra Boc-Val-OH (10 g; 46,0 mmol), ble den ønskede forbindelse oppnådd etter rensing ved flash-LC (silikagel, gradient heksan-EtOAc fra 10:1 til 5:1) som en olje (6,9 g; 43 %).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,77 (d, J = 7, 3 H), 0,98 (d, J = 7, 3 H), 1,44 (s, 9 H), 2,22 (m, 1 H), 3,58 (s, 2 H), 4,31 (m, 1 H), 5,03 (m, 1 H), 5,18 (s, 2 H), 7,34 (bs, 5 H).
ESI-MS beregnet for C19H27NO5: 349,19. Funnet (m/z): 372,1 (M + Na)<+>.
Eksempel 8
Syntese av benzyl-( 2RS, 4S)- 4- tert.- butyl( dimetvl) silyloksv- 2, 5- dimetyl- 3- oksoheksanoat
( SAPLB2)
Esteren SAPLB3 (15,12 g; 41,49 mmol) i tørt THF (43 ml) ble dryppet til en oppløsning av litiumdiisopropylamin ved -78 °C [tilberedt ved tilsetning av butyllitium (1,6 M oppløsning i heksan; 31,12 ml; 49,79 mmol) dråpevis til diisopropylamin (7,26 ml; 51,86 mmol) i tørt THF (83 ml) under argon ved -78 °C i 30 minutter]. Blandingen ble omrørt i 0,5 time, hvoretter jodmetan ble tilsatt (52,11 ml; 829,8 mmol). Blandingen ble tillatt å oppvarmes til 23 °C og ble deretter omrørt kontinuerlig i 24 timer. Ytterligere jodmetan ble tilsatt (2,67 ml; 42 mmol), og blandingen ble omrørt i<y>tterligere 24 timer eller inntil alt utgangsmateriale var forsvunnet. Blandingen ble så fordelt mellom vandig NH4CI (50 ml, mettet) og EtOAc (2 x 200 ml). Det organiske sjikt ble vasket først med vandig NaHCC>3 (100 ml, mettet) og saltoppløsning (100 ml), tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert, hvorved det ble oppnådd 12 g en gul olje. Det rene produkt (SAPLB2) ble oppnådd etter rensing ved LC-silika, gradient heksan-Et20 fra 100:0 til 100:2 som en diastereomer blanding av epimerer ved C2 (10 g; 63 %).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,01 (s, 3 H), 0,02 (s, 3 H), 0,91 (m, 15 H), 1,30 (d, 3 H), 2,01 (m, H), 4,01 (m, 1 H), 5,10 (d, 1 H), 5,15 (d, 1 H), 7,34 (bs, 5 H).
Eksempel 9
Syntese av benzyl-( 2RS. 4SV4- tert.- butoksvkarbonvlamino- 2. 5- dimetyl- 3 - oksoheksanoat ( SNPLB2^
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPLB2, ved å starte med SNPLB3 (10 g; 46,0 mmol), ble den ønskede forbindelse oppnådd etter rensing ved flash-LC (silikagel, gradient heksan-EtOAc fra 10:1 til 5:1) som en diastereomer blanding (1:1) av epimerer ved C2 (4,4 g; 62 %). Rf = 0,4 og 0,37 (silika, heksan/EtOAc 3:1).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,72 (m, 3 H), 0,86 (m, 3 H), 1,37 (m, 3 H), 1,44 (s, 9 H), 2,22 (rn, 1 H), 3,79 (m, 1 H), 4,43 (m, 1 H), 5,02 (m, 1 H), 5,16 (m, 2 H), 7,34 (m, 5 H). ESI-MS beregnet for C20H29NO5: 363,20. Funnet (m/z): 364,1 (M + H)<+.>
Eksempel 10
Syntese av Leu- Pro- OBn som klorhvdratsalt ( A5)
Til en kolbe inneholdende Boc-Leu-Pro-OBn (113,8 g; 272 mmol) ble en oppløsning av hydrogenklorid i dioksan (209 ml; 5,3 N) tilsatt, og omrøringen ble fortsatt i 5
timer eller inntil det var oppnådd en total omsetning ved TLC (forsvinning av utgangsmaterialet: Rf = 0,47 (heksan-EtOAc 2:1, silika). Oppløsningen ble konsentrert under redusert trykk, og den resulterende olje ble drevet ut med CHC13(3 x 50 ml), CHC13-MTBE (30 ml-50 ml), MTBE (50 ml) og heksan (50 ml). Residuet ble tørket under vakuum (16 timer) for å fjerne rester av HC1,
hvorved den ønskede forbindelse ble oppnådd som et hvitt, fast stoff. Dette stoff, A5 (96,4 g; 100 %), ble benyttet direkte uten rensing i det neste trinn. -85,21 (c = 1, CHC13).
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,92 (d, J = 7,1, 3 H), 0,96 (d, J = 7,1, 3 H), 1,55 (m, 1 H), 1,82-2,14 (m, 5 H), 2,26 (m, 1 H), 3,42 (m, 1 H), 3,90 (m, 1 H), 4,32 (bs, 1 H), 4,64 (m, 1 H), 5,01 (d, J = 11,5,1 H), 5,16 (d, J = 11,5,1 H), 7,34 (m, 5 H), 8,40 (bs, 3 H).
ESI-MS beregnet for C18H26N2O3: 318,19. Funnet (m/z): 319,2 (M + H)<+>.
Eksempel 11
Syntese av TBDMS- Hip- Leu- Pro- OBn ( SAPLA41
Til en kolbe inneholdende en avgasset oppløsning av SAPLB2 (20 g; 52,88 mmol) i vannfritt THF (158 ml), og utstyrt med et inn- og utløpsrør for gass, ble det tilsatt 10 % Pd/C (6,0 g; 30 vekt%) under argonatmosfære. Deretter ble en hydrogenstrøm ført gjennom blandingen i 8 timer, eller inntil det var oppnådd en fullstendig omsetning ved TLC (forsvinning av utgangsmaterialet). Den resulterende blanding ble gjennomboblet med argon for å fortrenge hydrogenet og filtrert under argon i en trakt av sintret glass gjennom en slags celittpute til en kjølt kolbe (-5 °C) inneholdende HOBt (7,17 g; 52,88 mmol) og HBTU (21,0 g; 55,53 mmol). Ytterligere 158 ml THF ble tilsatt for å skylle celitten. Til blandingen (ved -5 °C) ble det tilsatt NMM (5,8 ml; 52,88 mmol), og etter 5 minutter en kjølt (-5 °C) oppløsning inneholdende: A5 (31,96 g; 89,81 mmol), NMM (16 ml; 145 mmol) og DMF (120 ml), friskt tilberedt. Reaksjonsblandingen ble tillatt å oppvarmes til romtemperatur og ble omrørt i 14 timer. Den urene reaksjonsblanding ble filtrert, og løsemidlet ble fjernet under redusert trykk. Til den gjenværende oppløsning av DMF ble 300 ml EtOAc tilsatt, og det ble foretatt vasking suksessivt med vandig HC1 (200 ml; 0,1 N) og vandig NaHC03(200 ml, mettet) og skylling med 300 ml salt-oppløsning. Den organiske fase ble tørket (Na2SC>4), filtrert og konsentrert. Det resulterende materialet ble belagt med silika (EtOAc som løsemiddel) og kromatografert på silikagel under eluering med EtOAc:heksan, gradient fra 1:5 til 1:1, hvorved 26,8 g SAPLA4 (78 %) ble oppnådd som en tykk, fargeløs olje. Produktet bestod av en 1:1 blanding av diastereomerer. Rf= 0,5 (silika, heksan/EtOAc 1:1, mørk blått/vanillin).
IR (film, DCM) 3295, 3060 og 3040, 2957, 2934, 2880, 2858, 1736, 1634, 1528, 1454,1387, 1252, 1171, 1070 cm"1.
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 5 0,01 (s, 3 H), 0,03 (s, 3 H), 0,85-0,97 (m, 12 H), 0,92 (s, 9 H), 0,93 (s, 9 H), 1,33 (d, J = 7,0, 3 H), 1,37 (d, J = 7,0, 3 H), 2,40-2,65 (m, 3 H), 1,92-2,28 (m, 4 H), 3,64-3,76 (m, 1 H), 4,69-4,82 (m, 1 H), 5,05 (d, J = 11,8, 1 H), 5,20 (d, J = 11,8, 2 H), 6,73 (d, J = 8,9,1 H), 6,98 (d, J = 9,0,1 H), 7,34 (bs, 5 H).
<13>C-NMR (75 MHz, CDC13) 8 -5,24, -4,81,15,70,17,43,17,57,18,84, 21,48, 21,61,18,05,23,28,24,43,24,55,24,76,25,68,28,87, 31,36, 31,77,41,27,41,67,48,68,48,55, 48,89, 58,71,66,84, 83,84, 83,29,128,09,128,47,135,40,169,24,170,67,170,89,171,16, 171,20,209,11,211,62. m/z (FAB) 611,5 [(M + Na)<+>, 15], 589,5 [(M + H)<+>, 100]; m/z (FAB-HRMS) 589,369 045, CaaHsiNaOeSi krever (M + H)<+>, 589,367291.
Eksempel 12
Syntese av Boc- Aip- Leu- Pro- Obn ( SNPLA41
Til en avgasset oppløsning av SNPLB2 (2,3 g; 6,32 mmol) i tørt THF (30 ml) ble det tilsatt 10 % Pd/C (0,74 g; 16 vekt%), hvoretter det ble foretatt hydrogenering ved atmosfæretrykk i 5 timer 30 minutter, eller inntil fullstendig omsetning ved TLC (forsvinning av utgangsmaterialet). Den resulterende blanding ble filtrert gjennom en slags celittpute, og ytterligere 20 ml THF ble tilsatt for å skylle celitten. Til den filtrerte oppløsning (ved -5 °C) ble det tilsatt BOP-C1 (1,77 g; 6,96 mmol) og NMM (765 ul, 6,91 mmol) og etter 30 minutter en kjølt (-5 °C) oppløsning inneholdende: A5 (3,15 g; 8,85 mmol), NMM (1,88 ml; 8,84 mmol) og DMF (14 ml) tilberedt 10 minutter tidligere. Reaksjonsblandingen ble tillatt å oppvarmes til romtemperatur og ble omrørt i 17 timer. Den urene reaksjonsblanding ble filtrert, og det faste stoff ble vasket med EtOAc (100 ml). De sammenslåtte organiske oppløsninger ble vasket suksessivt med vandig KHS04(50 ml, 10 %), vandig NaHC03(50 ml, mettet) og saltoppløsning (50 ml). Den organiske fase ble tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum, og det resulterende materialet ble kromatografert på silikagel under eluering med EtOAc:heksan, gradient fra 1:4 til 1:1, hvorved det ble oppnådd 750 mg SNPLA4 (20 %) som et hvitt, fast stoff. Dette produkt bestod av en blanding av diastereomerer. Rf = 0,26 og 0,17 (silika, heksan/EtOAc 1:1).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,74-1,04 (m, 12 H), 1,31-1,70 (m, 6 H), 1,43 (s, 9 H), 2,01 (m, 3 H), 2,22 (m, 2 H), 3,60 (m, 2 H), 3,77 (m, 1 H), 4,40 (m, 1 H), 4,58 (m, 1 H), 4,69 (m, 1 H), 5,14 (m, 2 H), 6,75 (d, J = 8,7, 1 H), 7,04 (d, J = 7,8, 1 H), 7,34 (bs, 5 H).
<I3>C-NMR (75 MHz, CDCl3) 8 16,74,16,91,20,22,21,94,23,53,24,80,25,06, 28,48, 29,14,41,29,41,41,46,98,49,45,49,64, 51,26, 59,06, 63,70, 64,27, 67,08, 79,86, 80,10, 128,32,128,48,128,74,135,74,156,28,169,15,169,32,171,18,171,91.
ESI-MS beregnet for C31H47N3O7: 573,34. Funnet (m/z): 574,4 [(M + H)]+.
Eksempel 13
Syntese av Hiv- Leu- Pro- OBn ( SHPLA41
Til en kolbe inneholdende A5 (2,06 g; 4,78 mmol) i DCM (5 ml) ved 0 °C ble NMM (506 mg; 5,01 mmol) tilsatt under omrøring. Etter 15 minutter ble (2S)-2-hydroksy-3-metylbutansyre (hydroksyisovaleriansyre) (487 mg; 4,78 mmol) og DCC (986 mg; 4,78 mmol) tilsatt porsjonsvis. Reaksjonsblandingen ble tillatt å oppvarmes til 23 °C og ble omrørt i 14
timer. Suspensjonen ble fortynnet med CHC13(25 ml) og ble fordelt mellom vandig HC1 (10 ml;
1 N), vandig NaHC03(10 ml, mettet) og saltoppløsning (10 ml), tørket (Na2S04) og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash-LC (silikagel, gradient heksan-EtOAc fra 1:1 til 1:3), hvorved det ble oppnådd 1,13 g SHPLA4 (80 %) som et hvitt, fast stoff. Rf = 0,46
(heksan-EtOAc 1:2).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,81, (d, J = 7,0, 3 H) 0,92 (m, 6 H), 0,97 (d, J = 7,0, 3 H), 1,42 (m, 1 H), 1,63 (m, 2 H), 2,00 (m, 3 H), 2,19 (m, 2 H), 3,60 (m, 1 H), 3,85 (m, 1 H), 3,88 (d, J = 4,8,1 H), 4,46 (m, 1 H), 4,80 (m, 1 H), 5,06 (d, J = 12,3,1 H), 5,14 (d, J = 12,3, 1 H), 7,32 (m, 5 H), 7,41 (d, J = 8,4, 1 H).
<I3>C-NMR (75 MHz, CDCI3) 8 15,32,19,08,21,38, 23,11,24,41, 24,69,28,77, 31,31,40,54, 46,81, 48,20, 58,82, 66,69, 75,76, 127,93, 128,14,128,37,135,28,171,39,171,95, 173,94.
Eksempel 14
Syntese av Boc- Val- Leu- Pro- OBn ( SVPLA4>>
Til en kolbe inneholdende Boc-valin-OH (652 mg; 3 mmol) i DCM (6 ml) ved 0 °C ble det tilsatt NMM (0,35 ml; 3,15 mmol). Etter omrøring i 15 minutter ble A5 (1,065 g; 3 mmol), HOBt (405 mg; 3,0 mmol) og DCC (650 mg; 3,15 mmol) tilsatt porsjonsvis. Reaksjonsblandingen ble tillatt å oppvarmes til 23 °C og ble omrørt i 14 timer. Suspensjonen ble fortynnet med DCM (25 ml) og ble vasket suksessivt med vandig KHSO4(2 x 10 ml; 10 %), vandig NaHC03(2x10 ml, mettet) og saltoppløsning (10 ml), tørket over Na2S04, filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash-LC (silika, gradient EtOAc-heksan fra 2:1 til 1:1), hvorved det ble oppnådd 1,48 g SVPLA4 (93 %) som et hvitt, fast stoff. Rf = 0,57 (heksan-EtOAc 1:2).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,83-0,95 (m, 12 H), 1,2-1,4 (m, 1 H), 1,42 (s, 9 H), 1-40-1,51 (m, 1 H), 1,60-1,75 (m, 1 H), 1,82-2,20 (m, 5 H), 3,50-3,60 (m, 1 H), 3,74-3,78 (m, 1 H), 3,91-3,96 (m, 1 H), 4,52-4,57 (s, 1 H), 4,75-4,77 (m, 1 H), 5,04 (bs, 1 H), 5,05 (d, J = 12,3,1 H), 5,17 (d, J = 12,3,1 H), 6,60 (d, J = 8,4,1 H), 7,26-7,35 (m, 5 H).
<13>C-NMR (75 MHz, CDC13) 8 7,61,19,19,21,66, 23,23,24,43,24,78,24,87, 25,55,28,20,28,87,30,91,33,86,41,68,46,73,48,86,58,77, 59,74,66,82,79,66, 128,08, 128,21,128,46,135,47,155,66,170,83,171,33,171,60.
ESI-MS beregnet for C28H43N3O6: 517,32. Funnet (m/z): 518,2 [(M + H)]<+>.
Eksempel 15
Syntese av Boc- Me- Val- Leu- Pro- OBn ( SMPLA4)
Etter prosedyren benyttet for syntese av SVPLA4, med utgangspunkt i A5 (1,07 mg; 3,00 mmol) og Boc-(Me)Val-OH (694 mg; 3,00 mmol) ble den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff (1,39 g; 87 %) etter rensing ved flash-LC (silikagel, gradient EtOAc-heksanfra2:l til 1:1). Rf =0,51 (heksan-EtOAc 1:2).
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,83-0,91 (m, 12 H), 1,45 (s, 9 H), 1,93-2,03 (m, 4 H), 2,18-2,22 (m, 2 H), 2,76 (s, 3 H), 3,40-3,50 (m, 2 H), 3,55-3,62 (m, 1 H), 3,75-3,85 (m, 1 H), 4,00-4,10 (m, 1 H), 4,50-4,60 (m, 1 H), 4,70-4,82 (m, 1 H), 5,07 (d, J = 11,2,1 H), 5,24 (d, J = 11,2,1 H), 6,20 (m, 0,5 H), 6,50 (m, 0,5 H), 7,26-7,35 (m, 5 H).
<13>C-NMR (75 MHz, CDCI3) 8 18,43, 19,77, 21,53, 23,23, 24,47, 24,77, 25,89, 25,30,28,85,41,25,46,67,48,51, 58,75, 64,05, 66,79,128,06,128,18,128,44,135,49,170,12, 170,80,171,660.
ESI-MS beregnet for C29H45N3O6: 531,33. Funnet (m/z): 532,3 (M + H)<+>.
Eksempel 16
Syntese av Hip- Leu- Pro- OBn TSAPLA3)
Til en kolbe inneholdende SAPLA4 (15,86 g; 26,97 mmol) ble det tilsatt en klar, fargeløs oppløsning av 1 M tetrabutylammoniumfluorid i THF (80,9 ml; 80,9 mmol), og blandingen ble kraftig omrørt ved romtemperatur i 15 minutter (eller til total omsetning som vist ved TLC). Reaksjonen ble stoppet ved tilsetning av 4 ml H2O og 50 g silikagel. Det urene materialet ble konsentrert og renset ved flash-LC (silikagel, gradient heksan:EtOAc fra 2:1 til 1:1), hvorved det ble oppnådd 12,2 g SAPLA3 (95 %) som et hvitt, fast stoff (blanding av diastereomerer). Rf = 0,36 og 0,29 (silika, heksan:CHCl3:IPA; 1:5:1).
IR (film, DCM) v 3450-3293, 3060 og 3040,2961,2946,2883,2852,1746,1632, 1533,1454,1357,1387,1265,1173,1095,1045,1018 cm-<1>.
'H-NMR (500 MHz, CDCI3) 8 0,71 (d, J = 6,8, 3 H), 0,81 (d, J = 6,6, 3 H), 0,88 (d, J = 6,5, 3 H), 0,91 (d, J = 6,5, 3 H), 0,94 (d, J = 6,5, 3 H), 0,99 (d, J = 7,1, 3 H), 1,07 (d, J = 6,5, 3 H), 1,36 (d, 6,5,3 H), 1,43-1,52 (m, 2 H), 1,60-1,66 (m, 1 H), 1,93-2,10 (m, 3 H), 2,12-2,23 (m, 2 H), 3,53-3,58 (m, 1 H), 3,65 (q, J = 7,1,1 H), 3,67-3,73 (m, 1 H), 3,89 (q, J = 7,1,1 H), 3,96 (d, J = 4,2, 1 H), 4,22 (d, J = 4,1, 1 H), 4,54-4,56 (m, 1 H), 4,58-4,62 (m, 1), 4,69-4,73 (m, 1 H), 5,1 (d, J = 12,1,1 H), 5,18 (d, J = 12,1,1 H), 6,57 (d, J = 8,5,1 H), 6,63 (d, J = 8,5, 1 H), 7,28-7,38 (m, 5 H).
<13>C-NMR (75 MHz, CDCI3) 8 14,06,14,26,15,85,16,48, 20,07,20,53, 22,02, 22,25, 25,37, 25,46, 29,45, 29,53, 31,59, 32,09, 41,13, 42,29, 49,93, 50,91, 51,02, 59,52, 67,60, 81,02, 128,78,129,2,169,48,171,58, 172,17, 209,76. m/z (FAB) 497,4 [(M + Na)<+>, 12], 475,5 [(M + H)<+>, 100]. m/z (FAB-HRMS) 497,263 162, C26H38N206krever (M + Na)<+>497,262757.
Analyse beregnet for C26H38N206: C 65,82; H 8,02; N 5,91. Funnet: C 65,97; H 8,18; N 5,76.
Eksempel 17
Syntese av Aip- Leu- Pro- OBn ( SNPLA31
Til en oppløsning av SNPLA4 (750 mg; 1,30 mmol) i dioksan (15 ml, vannfritt) ble det tilsatt en oppløsning av hydrogenklorid i dioksan (39 ml; 5,3 N), og blandingen ble om-rørt i 5 timer eller inntil total omsetning som vist ved TLC (forsvinning av utgangsmaterialet). Oppløsningen ble konsentrert under redusert trykk, og den resulterende olje ble avdrevet med CHCI3(15 ml), MTBE (15 ml) og heksan (15 ml). Residuet ble tørket under vakuum for å fjerne rester av HC1, hvorved det ble oppnådd et skumaktig, fast stoff. Det oppnådde SNPLA3 (660 mg; kvantitativt utbytte) ble anvendt direkte i det neste trinn uten noen ytterligere rensing.
ESI-MS beregnet for C26H39N3O5: 473,29. Funnet: 474,2 (M + H)<+.>
Eksempel 18
Syntese av Val- Leu- Pro- OBn ( SVPLAS^ l
Til en kolbe inneholdende SVPLA4 (215 mg; 0,41 mmol) ble en oppløsning av hydrogenklorid i dioksan (1,5 ml; 5,3 N) tilsatt, og blandingen ble omrørt i 5 timer eller inntil total omsetning var blitt vist ved TLC. Oppløsningen ble konsentrert under redusert trykk, og den resulterende olje ble fordrevet med CHCI3(5 ml), MTBE (5 ml) og heksan (5 ml). Residuet ble tørket under vakuum for å fjerne rester av HC1, hvorved SVPLA3 ble oppnådd som et skumaktig, fast stoff (185 mg, kvantitativt utbytte). Dette ble benyttet direkte i det neste trinn uten ytterligere rensing.
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,86-0,90 (m, 6 H), 1,04 (d, J = 6,3, 3 H), 1,12 (d, J = 6,3, 3 H), 1,45-1,55 (m, 1 H), 1,60-1,80 (m, 2 H), 1,82-2,11 (m, 2 H), 2,11-2,25 (m, 1 H), 2,25-2,40 (m, 1 H), 3,50-3,70 (m, 1 H), 3,80-3,95 (m, 2 H), 4,52-4,57 (s, 1 H), 4,70-4,85 (m, 1 H), 5,05 (d, J = 12,1 H), 5,20 (d, J = 12,3,1 H), 7,27-7,37 (m, 5 H), 7,91 (m, 1 H), 8,62 (bs, 2 H).
<13>C-NMR (75 MHz, CDC13) 5 18,57, 18,79, 21,83, 23,11, 24,50, 24,67, 24,90, 25,34, 28,92, 30,23, 33,25, 40,40,47,04, 49,46, 49,94, 59,26, 60,02, 66,88,128,16, 128,27, 128,51,135,48, 167,54, 170,80,171,94.
Eksempel 19
Syntese av ( MeWal- Leu- Pro- OBn ( SMPLA3^
Etter prosedyren benyttet for syntese av SVPLA3, med utgangspunkt i SMPLA4 (940 mg; 1,94 mmol), ble den ønskede forbindelse (828 mg; kvantitativt utbytte) oppnådd som et hvitt, fast stoff. Dette produkt ble benyttet direkte i det neste trinn uten<y>tterligere rensing.
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,93 (d, J = 6,3, 6 H), 1,07 (d, J = 6,3, 3 H), 1,21 (d, J = 6,3, 3 H), 1,47 (m, 1 H), 1,73 (m, 2 H), 2,00 (m, 3 H), 2,23 (m, 1 H), 2,52 (m, 1 H), 2,83 (bs, 3 H), 3,56-3,65 (m, 2 H), 3,77 (m, 1 H), 4,59 (m, 1 H), 4,66 (m, 1 H), 5,07 (d, J = 12,3,1 H), 5,19 (d, J = 12,3, 1 H), 7,27-7,38 (m, 5 H), 7,90 (m, 1 H), 9,11 (m, 0,5 H), 9,61 (m, 0,5 H).
<13>C-NMR (75 MHz, CDC13) 8 13,98,18,37,19,57,21,33,22,52,23,16, 24,74, 28,77,29,78, 31,54, 32,54, 39,87,46,75, 50,09, 58,91, 66,85,122,12,128,06,128,24,128,47, 135,43, 166,22, 170,73, 171,54.
ESI-MS beregnet for C24H38C1N304: 431,2. Funnet (m/z): 432,2 (M + H)<+>.
Eksempel 20
Syntese av Boc- IstfTBDMSVHip- Leu- Pro- OBn ( SAPLA2)
Til en oppløsning av SAPLA3 (12,2 g; 25,44 mmol) i vannfritt DCM (75 ml) ved -5 °C under argonatmosfære ble DMAP (0,932 g; 7,6 mmol), Cl (11,89 g; 30,53 mmol) og DCC (6,613 g; 32,05 mmol) tilsatt porsjonsvis, mens temperaturen ble holdt < -5 °C (i et bad av is og salt). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 14 timer ved -5 °C og ble deretter filtrert og konsentrert. Råmaterialet ble drevet ut med ACN, kjølt til -10 °C og deretter filtrert og på ny konsentrert. Det resulterende materialet ble oppløst i EtOAc (400 ml) og vasket sekvensielt med vandig KHS04(2 x 200 ml; 10 %), saltoppløsning (200 ml) og vandig NaHC03(200 ml, mettet) og skylt med saltoppløsning (200 ml). Den organiske fase ble tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd en fargeløs olje som ble kromatografert på silikagel under eluering med heksan-EtOAc, gradient fra 3:1 til 2:1, hvorved det ble oppnådd SAPLA2 (19,35 g; 90 %) som et hvitt skum (blanding av diastereomerer).
IR (film, DCM) v 3365-3200,3069,3038,2959, 2930, 2882,2857,1746,1688, 1640,1533,1456,1389,1258,1171,1086 cm-'. 1 H-NMR (500 MHz, CDC13) 5 0,01 (s, 3 H), 0,03 (s, 3 H), 0,05 (s, 3 H), 0,07 (s, 3 H), 0,77-1,03 (m, 18 H), 0,84 (s, 9 H), 0,85 (s, 9 H), 1,33 (d, J = 7,4, 3 H), 1,32-1,36 (m, 2 H), 1,49 (d, J = 7,5,3 H), 1,38-1,62 (m, 3 H), 1,42 (s, 9 H), 1,44 (s, 9 H), 1,51-1,77 (m, 1 H), 1,88-2,37 (m, 3 H), 2,17-2,33 (m, 2 H), 2,47-2,74 (m, 2 H), 3,34-3,72 (m, l H), 3,72-3,82 (m, 1 H), 3,99-4,40 (m, 1 H), 4,03-4,16 (m, 1 H), 4,49 (d, J = 10,3,1 H), 4,54-4,59 (m, 1 H), 4,63-4,70 (m, 2 H), 4,75 (d, J = 4,5,1 H), 4,77-4,81 (m, 1 H), 4,95-5,19 (m, 2 H), 5,22 (d, J = 5,2,1 H), 5,32 (d, J = 10,5,1 H), 6,38 (d, J = 10,9,1 H), 6,71 (d, J = 7,4,1 H), 6,76 (d, J = 8,4,1 H), 8,60 (d, J = 9,5,1 H). <13>C-NMR (75 MHz, CDC13) 8 -5,05, -4,49,11,83,12,03,13,01,13,51,13,83, 14,08,16,92,17,10,17,85,19,14,19,65,21,57,22,09,22,96,23,28,24,36,24,60, 24,85,25,73, 26,97, 27,33, 28,35, 28,46, 28,93, 29,09, 29,65, 34,12, 34,16, 40,45,40,85, 41,18,42,20, 46,74, 46,16,47,99,48,34,48,90,49,42, 57,62, 58,81, 58,96, 60,46, 66,62, 66,88, 68,18, 69,69, 78,98, 79,24, 79,84, 82,95, 128,08-128,49, 135,48, 135,61,155,85,158,27, 157,44, 168,40,169,07, 170,65,170,86,171,42,171,79,203,09, 205,97. m/z (FAB) 846,6 [(M + H)<+>, 15], 746,6 (100); m/z (FAB-HRMS) 868,516 630, GisHvsNAoSi krever (M + Na)<+>868,511930.
Eksempel 21
Syntese av Boc- Ist( TBDMSVAip- Leu- Pro- OBn ( SNPLA21
Til en kolbe inneholdende SNPLA3 (klorhydrat) (660 mg; 1,12 mmol) i DCM (15 ml, vannfritt) ved 0 °C ble NMM (0,19 ml) tilsatt. Etter 15 minutter ble Cl (632 mg; 1,62 mmol), HOBt (266 mg; 1,73 mmol) og DCC (331 mg; 1,60 mmol) tilsatt porsjonsvis. Kolben ble tillatt å oppvarmes til romtemperatur, og omrøringen ble fortsatt natten over. Den urene reaksjonsblanding ble fordelt mellom DCM (50 ml) og vandig KHS04(2 x 20 ml; 10 %). Den organiske fase ble vasket suksessivt med vandig NaHCC>3 (2 x 20 ml, mettet) og saltoppløsning (20 ml), tørket (NaiSC^), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende hvite, faste stoff ble renset ved flash-LC (silikagel, gradient heksan-EtOAc fra 4:1 til 1:1), hvorved den ønskede forbindelse ble oppnådd som et hvitt, fast stoff (700 mg; 73 %, blanding av diastereomerer).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 5 0,05 (s, 3 H), 0,08 (s, 3 H), 0,09 (s, 3 H), 0,68-1,05 (18 II, m), 0,87 (9 H, s), 1,05-1,85 (12 H, m), 1,42 (9 H, s), 1,85-2,10 (3 H, m), 2,11-2,31 (2 H, m), 2,32-2,46 (2 H, m), 2,47-2,60 (m, 2 H), 3,34-3,90 (2 H, m), 3,93-4,30 (2 H, m), 4,50-4,89 (6 H, m), 4,90-5,12 (2 H, m), 5,07 (d, J = 12,2,2 H), 5,18 (d, J = 12,2, 2 H), 5,60 (1 H, d, J = 9,7), 5,67 (1 H, d, J = 10,2), 5,89 (1 H, d, J = 11,2), 6,56 (1 H, d, J = 7,3), 6,70 (1 H, d, J = 8,3), 6,76 (1 H, d, J = 6,8), 6,94 (d, J = 6,8, 1 H), 7,01-7,19 (m, 1 H), 7,32 (bs, 5 H), 8,17 (1 H, d, J = 7,8), 8,28 (d, J = 7,8,1 H).
ESI-MS beregnet for CasHtoN^Sk 844,54. Funnet (m/z): 845,5 (M + H)<+.>
Eksempel 22
Svntese av Boc- Ist( TBDMSVHiv- Leu- Pro- OBn CSHPLA21
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntesen av SAPLA2, med utgangspunkt i SHPLA4 (850 mg; 2,0 mmol) og Cl (935 mg; 2,4 mmol) ble den ønskede forbindelse oppnådd (1,53 g; 97 %) etter rensing ved flash-LC (silika, gradient heksan-EtOAc fra 3:1 til 2:1). Rf= 0,63 (heksan-EtOAc 2:1).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) blanding av Boc-NH-rotamerer: 8 0,04 (s, 3 H), 0,06 (s, 3 H), 0,88 (s, 9 H), 0,78-1,04 (m, 18 H), 1,10-2,80 (m, 11 H), 1,44 (s, 9 H), 1,46 (s, 9 H), 3,57 (m, 2 H), 3,74 (m, 1 H), 3,85 (m, 1 H), 4,03 (m, 1 H), 4,23 (d, J = 4,8, 1 H), 4,48 (m, 1 H), 4,85 (m, 1 H), 4,90 (d, J = 10,1 H), 5,05 (m, 1 H), 5,20 (d, J = 10,1 H), 5,23 (d, J = 10,1 H), 6,64 (d, J = 6,4,1 H), 6,88 (d, J = 8,6,1 H), 7,32 (m, 5 H), 8,54 (d, J = 8,3,1 H).
<13>C-NMR (75 MHz, CDC13) 8 -5,14, -4,58, 11,84,12,97, 17,78, 17,92, 18,98, 21,05,23,11,23,49,25,61,26,92,28,36,28,70, 30,12, 33,68, 38,72,42,86,46,51,48,18, 58,67, 60,24, 66,52, 71,14, 79,40, 82,66,127,96, 128,01, 128,33,135,36, 157,30, 169,92,171,10, 171,69,171,97.
ESI-MS beregnet for C42H71N3O9: 789,50. Funnet: 790,5 (M + H)<+.>
Eksempel 23
Svntese av Boc- IstfTBDMSVVal- Leu- Pro- OBn fSVPLA21
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntesen av SNPLA2, med utgangspunkt i SVPLA3 (klorhydrat) (1,2 g; 2,64 mmol), Cl (1,23 g; 3,17 mmol), DCC (654 mg; 3,17 mmol), HOBt (464 mg; 3,43 mmol), NMM (0,35 ml) og DCM (6 ml) ble den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff (1,87 g; 89 %) etter rensing ved flash-LC (silikagel, gradient heksan-EtOAc fra 3:1 til 2:1).
'H-NMR(500 MHz, CDCl3) 8 0,07 (bs, 6 H), 0,81-0,96 (m, 27 H), 1,11-1,38 (m, 3 H), 1,39-1,47 (bs, 7 H), 1,51 (bs, 3 H), 1,58-1,70 (m, 3 H), 1,70-1,84 (m, 1 H), 1,86-2,60 (m, 4 H), 2,28-2,58 (m, 2 H), 3,58-3,62 (m, 1 H), 3,62-3,73 (m, 1 H), 3,73-3,90 (m, 1 H), 4,05-4,12 (m, 1 H), 4,13-4,19 (m, 1 H), 4,19-4,23 (m, 1 H), 4,49-4,54 (m, 1 H), 4,77-5,06 (m, 2 H), 5,18 (d, J = 12,3,1 H), 5,55 (bs, 1 H), 6,44-6,61 (m, 2 H), 7,30-7,35 (m, 5 H), 7,94-7,98 (m, 1 H).
ESI-MS beregnet for C42H72N40gSi: 788,51. Funnet (m/z): 789,5 (M + H)<+.>
Eksempel 24
Syntese av Boc- Ist( TBDMSV( MeWal- Leu- Pro- OBn ( SMPLA21
Til en kolbe inneholdende SMPLA3 (klorhydrat) (176 mg; 0,38 mmol) i DCM (2 ml, vannfritt) ved 0 °C ble NMM (41 ul, 0,38 mmol) ble tilsatt. Etter 15 minutter ble Cl (176 mg; 0,46 mmol) og DCC (93 mg; 0,46 mmol) tilsatt porsjonsvis. Kolben ble tillatt å oppvarmes til romtemperatur, og omrøringen ble fortsatt natten over. Reaksjonsblandingen ble fordelt mellom DCM (10 ml) og vandig KHS04(2x5 ml; 10 %). Den organiske fase ble vasket suksessivt med vandig NaHC03(2x5 ml, mettet) og saltoppløsning (5 ml), tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende hvite, faste stoff ble renset ved flash-LC (silika, gradient heksan-EtOAc fra 3:1 til 2:1), hvorved det ble oppnådd 127 mg SMPLA2 (42 %) som et hvitt, fast stoff. Rf = 0,51 (heksan-EtOAc 1:1).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 -0,08 (s, 3 H), 0,05 (s, 3 H), 0,75-0,86 (m, 27 H), 1,00-1,43 (m, 11 H), 1,52-1,65 (m, 1 H), 1,68-1,80 (m, 1 H), 1,83-2,01 (m, 3 H), 2,08-2,24 (m, 2 H), 2,40 (m, 2 H), 2,87 (s, 3 H), 3,50-3,57 (m, 3 H), 3,71-3,76 (m, 1 H), 4,29 (m, 1 H), 4,47-4,63 (m, 4 H), 5,01 (d, J = 12,9,1 H), 5,11 (d, J = 12,9,1 H), 6,41 (d, J = 7,8,0,5 H), 6,62 (d, J = 7,8,1 H), 7,01 (d, J = 7,8, 0,5 H), 7,23-7,28 (m, 5 H).
<13>C-NMR (75 MHz, CDC13) 6 11,56,13,57,13,98,17,83,18,87,19,46, 21,77, 22,94,23,11,24,50,24,71, 24,80,25,64, 25,76,25,97,27,29, 28,18,28,75, 30,40, 34,18,39,28, 40,85,46,58,48,61, 57,03, 58,65, 62,26,66,63,69,21, 78,72,127,92,128,05,128,11,128,33, 135,42,155,91,169,76,170,48,171,56,172,01.
ESI-MS beregnet for C43H74N408Si: 802,53. Funnet (m/z): 825,5 (M + Na)<+.>
Eksempel 25
Syntese av Ist- Hip- Leu- Pro- OBn ( SAPLA1)
Til en oppløsning inneholdende SAPLA2 (19,32 g; 22,8 mmol) i vannfritt dioksan (78 ml) ble en oppløsning av saltsyre i vannfritt dioksan (4,2 N; 220 ml; 924 mmol) tilsatt. Den resulterende oppløsning ble omrørt ved 21 °C i 4,30 timer, eller inntil utgangsmaterialet var forsvunnet fullstendig (TLC). Deretter ble oppløsningen konsentrert under redusert trykk. Residuet ble oppløst i DCM (25 ml) og konsentrert for å fjerne rester av HC1. Det resulterende residuum ble tørket under vakuum inntil all fri HC1 var blitt fjernet (3 timer), hvorved det ble oppnådd 17,3 g SAPLA1 (15,1 g; kvant.) i form av et hvitt skum (blanding av diastereomerer).
Eksempel 26
Syntese av Ist- Aip- Leu- Pro- OBn ( SNPLA11
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntesen av SAPLA1, med utgangspunkt i SNPLA2 (700 mg; 0,82 mmol), ble den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff (545 mg, kvant.) etter utfelling med Et20 (blanding av diastereomerer). 1 H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,86-1,04 (m, 18 H), 1,02-1,22 (m, 3 H), 1,23-1 (m, 5 H), 1,60-1,80 (m, 2 H), 1,82-2,01 (m, 3 H), 2,24 (m, 2 H), 2,40-2 (m, 2 H), 3,24 (m, 1 H), 3,45 (m, 1 H), 3,60 (m, 1 H), 3,70-4,05 (m, 2 H), 4,46 (m, 2 H), 4,47-4,75 (m, 2 H), 5,10 (bs, 2 H), 7,34 (bs, 5 H), 7,98 (bs, 1 H), 8,10 (bs, 1 H).
ESI-MS beregnet for C34H54N4O7: 630,40. Funnet (m/z): 631,4 (M + H)<+>.
Eksempel 27
Syntese av Ist- Hiv- Leu- Pro- OBn ( SHPLA11
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPLA1, med utgangspunkt i SHPLA2 (1,53 g; 1,94 mmol), ble den ønskede forbindelse (1,12 g, kvant.) oppnådd som et hvitt, fast stoff etter utfelling med Et20.
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,86-1,04 (m, 18 H), 1,10-1,22 (m, 3 H), 1,42 (m, 2 H), 1,70 (m, 2 H), 1,97 (m, 3 H), 2,24 (m, 2 H), 2,83 (m, 1 H), 2,97 (m, 1 H), 3,34 (m, 1 H), 3,61 (m, 1 H), 3,75 (m, 1 H), 3,90 (m, 1 H), 4,56 (m, 2 H), 4,75 (m, 1 H), 5,04 (d, J = 11,1 H), 5,18 (d, J = 11, 1 H), 7,34 (bs, 5 H), 8,21 (bs, 3 H).
ESI-MS beregnet for C31H49N3O7: 575,36. Funnet (m/z): 576,3 (M + H)<+>.
Eksempel 28
Svntese av Ist- Val- Leu- Pro- OBn fSVPLAD
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL Al, med utgangspunkt i SVPLA2 (1,87 g; 2,36 mmol), ble den ønskede forbindelse (1,40 g, kvant.) oppnådd som et hvitt, fast stoff etter utfelling med Et20.
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,82-1,01 (m, 15 H), 1,01-1,10 (m, 3 H), 1,20-1,79 (m, 5 H), 1,81-2,05 (m, 4 H), 2,05-2,15 (m, 2 H), 2,50-2,68 (m, 2 H), 2,82-3,1 (m, 1 H), 3,20-3,35 (m, 1 H), 3,50-3,70 (m, 1 H), 3,80-3,90 (m, 1 H), 4,18-4,30 (m, 1 H), 4,35-4,45 (m, 1 H), 4,45-4,55 (m, 1 H), 4,60-4,70 (m, 1 H), 5,02 (d, J = 12,3,1 H), 5,15 (d, J = 12,3,1 H), 7,28-7,38 (m, 5 H), 7,5 (bs, 1 H), 7,9 (bs, 3 H), 8,15 (bs, 1 H).
<13>C-NMR (75 MHz, CDC13) 8 10,81,14,67,18,29,19,32,21,48, 23,14,24,48, 24,76,25,81, 30,29, 33,41,40,31,46,96,49,35,59,14, 59,94, 60,67, 66,94,128,11,128,32, 128,54, 135,32, 171,58,171,74, 171,80, 172,57.
ESI-MS beregnet for C31H5oN406: 574,35. Funnet (m/z): 575,3 (M + H)<+>.
Eksempel 29
N- tert.- butvloksvkarbonyltreonin- fenacylester ( D3)
Til en omrørt suspensjon av Boc-Thr-OH (21,91 g; 0,1 mol) i EtOAc (200 ml) ved 0 °C ble TEA (14 ml; 0,1 mol) og bromacetofenon (19,0 g; 0,1 mol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble tillatt å oppvarmes til 20 °C, ble omrørt i 2 døgn og ble deretter fortynnet med EtOAc (500 ml). Etter vasking suksessivt med vandig HC1 (200 ml; 0,1 N), H20 (100 ml), vandig NaHC03(200 ml; 1 N) og saltoppløsning (200 ml), tørking (Na2S04), filtrering og konsentrering i vakuum ble residuet triturert med Et20 og filtrert. Det resulterende fast stoff ble tørket i mørke, hvorved det ble oppnådd 28,6 g (85 %) D3. Rf = 0,55 (heksan-EtOAc 1:1, silika); smp. = 114,2 °C; [ a])] - 29, A (c 2, EtOAc).
'H-NMR (300 MHz, CDC13): 8 = 1,31 (d, J = 6,6, 3 H), 1,46 (s, 9 H), 3,77 (br d, OH), 4,44 (dd, J = 9,6,1 H), 4,6 (q, 1 H), 5,34 (d, J = 16,5,1 H), 5,37 (br d, OH) 5,68 (d, J = 16,8,1 H), 7,51 (t, 2 H), 7,65 (t, 1 H), 7,92 (dd, 2 H).
Eksempel 30
N- benzvloksvkarbonvl- N. O- dimetvl- L- tvrosin ( Ell
Til en omrørt oppløsning av Z-Tyr-OH (63,24 g; 200 mmol) i THF (900 ml) ved 0 °C ble det tilsatt finpulverisert KOH (112,72 g; 2 mol) porsjonsvis, hvoretter det ble tilsatt tetrabutylammoniumhydrogensulfat (6,36 g; 10 vekt%). Deretter ble dimetylsulfat (127,2 ml; 1,33 mol) tildryppet over et tidsrom på 30 minutter, reaksjonsblandingens temperatur ble holdt lavere enn 4 °C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i ytterligere 30 minutter, og 950 ml H2O ble tilsatt. Etter omrøring 5 timer ved 0 °C ble reaksjonsblandingen fortynnet med eter (1500 ml), hvoretter det vandige sjikt ble fraskilt, og det organiske sjikt ble ekstrahert med vandig NaHC03(2 x 500 ml, mettet). De sammenslåtte vandige sjikt ble surgjort til pH 1 med vandig 1 M KHSO4og ekstrahert med EtOAc (5 x 500 ml). De organiske sjikt ble slått sammen, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert. Residuet ble utfelt med etyleter. Etter filtrering ble El oppnådd som et hvitt, fast stoff (53,85 g; 78 %).
[ a])] -57,16 (c 2,23, CHC13) (lit. [a]D= -48 (c = 2,23 CHC13), JACS, 112,21, 1990).
Eksempel 31
0-( benzvloksvkarbonvl- N. O- dimetvl- L- tvrosvlVN- tert.- butvloksvkarbonvl- L- treonin-fenacvlester ( D2)
Til en oppløsning av D3 (33,72 g; 100 mmol) i DCM ved 0 °C ble DMAP (3,66 g;
30 mmol) og El (34,33 g; 100 mmol) tilsatt. Etter omrøring i 10 minutter ved 0 °C ble DCC
(22,7 g; 110 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble tillatt å oppvarmes til romtemperatur og ble omrørt natten over. Deretter ble blandingen filtrert og filtratet inndampet til tørrhet. Residuet ble drevet ut med ACN (100 ml), hvoretter det ble filtrert på ny, og filtratet ble konsentrert. Residuet ble oppløst i EtOAc (200 ml) og fordelt suksessivt mellom vandig KHSO4(100 ml; 10 %),
vandig NaHC03(100 ml, mettet) og saltoppløsning (100 ml). Den organiske fase ble tørket
(Na2S04), filtrert og konsentrert. Residuet ble renset ved flash-LC (silikagel, gradient EtOAc-heksan fra 1:4 til 1:2), hvorved det ble oppnådd 65,5 g (98 %) D2. [ a])] = -39,56 (c 1,06, CHC13); Rf = 0,55 (EtOAc:heksan 1:1).
Eksempel 32
0-( benzvloksvkarbonvl- N, 0- dimetvl- L- tvrosvl)- N- tert.- butvloksvkarbonvl- L- treonin ( Dl)
Til en homogen oppløsning av D2 (24,49 g; 38,4 mmol) i vandig AcOH (211 ml; 90 %) ved 0 °C ble malt Zn tilsatt (18,65 g; 288,3 mmol). Den resulterende blanding ble omrørt ved 0 °C i 3 timer, inntil utgangsmaterialet var forsvunnet (overvåket ved TLC). Reaksjonsblandingen ble filtrert over celitt og vasket med EtOAc (200 ml). Filtratet ble konsentrert under redusert trykk, og residuet ble drevet ut med Et20 (200 ml) og filtrert. Filtratet ble fordelt suksessivt mellom vandig KHSO4(100 ml; 10 %) og saltoppløsning (100 ml). Den organiske fase ble tørket (Na2S04) og konsentrert, hvorved det ble oppnådd en olje som ble renset ved flash-LC [Lichroprep RPC18, ACN:H20 1:1 (800 ml; deretter 7:3 (600 ml)], hvorved det ble oppnådd 15,53 g Dl (74 %) som et hvitt, fast stoff, [ a] 2* -27,6 (c 2,187, DCM); lit. [a]D-20,5 (c 2, DCM), JOC, 62, 2, 1997; Rf = 0,58 [ACN/H20 (7:3)].
IR (film, DCM) v 3400, 3050,2900,1715,1613,1514,1456, 1402,1368,1248, 1165,1061,1036 cm"<1>. 1 H-NMR (200 MHz, CDC13) 8 1,29 (d, J = 6,5, 3 H), 1,45 (s, 9 H), 2,74 (s, 3 H), 2,75 (s, 3 H), 2,76-3,31 (m, 2 H), 3,77 (s, 3 H), 4,42-4,52 (m, 1 H), 4,66-4,83 (m, 1 H), 5,01-5,16 (m, 2 H), 5,30-5,53 (m, 2 H), 6,72-6,81 (m, 2 H), 6,95-7,09 (m, 2 H), 7,35 (bs, 5 H). ,<3>C-NMR (75 MHz, CDC13) 8 16,44,16,82, 28,23, 31,71, 31,97, 33,82, 33,68, 55,14, 56,87, 56,75, 60,39, 60,58, 67,51, 67,76, 71,83, 72,47, 80,40, 113,91, 127,59, 128,69, 129,77,136,42,156,00,156,19,156,71,158,31,159,47,169,78. m/z (FAB) 567,1 [(M + Na)<+>, 46], 545,1 [(M + H)<+>, 7], 445,1 (100); m/z (FAB-HRMS) 567,233 280, C28H35N209krever (M + Na)<+>567,231 851.
Eksempel 33
Syntese av Boc- Thr( Z- N( Mel- Q( MeVTvrVIst- Hip- Leu- Pro- OBn ( SAPL71
Til en kolbe inneholdende HBTU (9,079 g; 23,9 mmol), HOBt (3,490 g; 22,8 mmol), SAPLA1 (15,258 g; 22,8 mmol) og Dl (12,417 g; 22,8 mmol) ble en oppløsning av vannfritt DCM (296 ml) og vannfritt DMF (148 ml) tilsatt med kanyle under argonatmosfære ved -5 °C. Etter omrøring i 5 minutter ble DIPEA (15,9 ml; 91,2 mmol) tilført dråpevis med en sprøyte, mens temperaturen ble holdt < -5 °C. Den resulterende reaksjonsblanding ble omrørt i 21 timer ved -5 °C. MTBE (300 ml) og KHS04(200 ml, 10 %) ble tilsatt, og den resulterende blanding ble filtrert og konsentrert til 300 ml. Ytterligere 200 ml MTBE ble tilsatt, sjiktene ble skilt fra hverandre, og den organiske fase ble behandlet fortløpende med vandig KHSO4(200 ml; 10 %), saltoppløsning (200 ml) og vandig NaHSC<4 (200 ml, mettet) og skylt med saltoppløsning (200 ml). Den organiske fase ble tørket (Na2S04) og konsentrert under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd 30 g av en gul olje. Oljen ble oppløst i MTBE og behandlet med heksan under omrøring. Det ble utfelt et fast stoff, og ytterligere mengder heksan ble tilsatt. Det faste stoff ble frafiltrert, hvorved det ble oppnådd 18,33 g (69 %) SAPL7 som et hvitt, fast stoff. Dette produkt bestod av en blanding av to diastereomerer. Rf = 0,80 og 0,59 (heksan:EtOAc 1:2).
IR (film, DCM) v 3350,2961,2927,2893,1744,1688,1638,1514,1454,1368, 1304, 1248, 1171, 1067, 1036 cm'<1>. 1 H-NMR (500 MHz, CDC13) 8 0,74-0,92 (m, 18 H), 1,05-1,15 (m, 2 H), 1,18-1,20 (m, 2 H), 1,23 (d, J = 6,8,3 H), 1,25 (d, J = 6,8, 3 H), 1,29 (d, J = 6,9,3 H), 1,42 (s, 9 H), 1,45 (s, 9 H), 1,50-1,66 (m, 3 H), 1,89-2,02 (m, 4 H), 2,17-2,25 (m, 2 H), 2,37-2,42 (m, 1 H), 2,81 (s, 3 H), 2,88 (s, 3 H), 2,91 (s, 3 H), 2,95 (s, 3 H), 2,84-2,93 (m, 2 H), 3,17-3,25 (m, 1 H), 3,53-3,59 (m, 1 H), 3,75 (s, 3 H), 3,88-3,98 (m, 4 H), 4,49 (d, J = 3,1,1 H), 4,51 (d, J = 3,1,1 H), 4,53-4,57 (m, 1 H), 4,68-4,72 (m, 1 H), 4,96-4,99 (m, 1 H), 5,02-5,33 (m, 4 H), 5,02 (d, J = 3,2,1 H), 5,23 (d, J = 3,1,1 H), 5,26-5,33 (m, 1 H), 5,47 (1 d, J = 9,5,1 H), 6,74 (d, J = 7,8, 2 H), 6,77 (d, J = 7,7, 2 H), 7,08 (d, J = 7,7,2 H), 7,17 (d, J = 7,5,1 H), 7,21 (d, J = 9,5,1 H), 7,23-7,36 (m, 10 H), 7,75 (d, J = 7,9,1 H), 7,79 (d, J = 8,2,1 H). <13>C-NMR (75 MHz, CDC13) 8 11,95,13,27,15,16,16,47,17,33,18,79,21,28, 23,65,24,65,24,72,27,09,28,08,28,93,31,20, 31,32, 33,62, 33,98, 38,38,41,01,47,12,49,38, 54,96, 55,17, 57,89, 58,83, 60,01, 60,16,67,18, 71,05, 71,32, 80,34, 81,24,113,89,127,51, 128,59, 129,69,129,77, 135,52, 136,77,156,93, 158,27, 169,87,170,62,171,15, 171,85, 172,39, 204,88. m/z(FAB) 1181,2 [(M + Na)<+>, 201,1159,2 [(M + H)<+>, 80], 1059,2 (100).
Analyse beregnet for C62H87N5Oi6: C 64,30; H 7,52; N 6,05. Funnet: C 64,14; H 7,66; N 5,95.
Eksempel 34
Syntese av Boc- Thr( Z- N( Me)- 0( Me)- TvrVIst- Aip- Leu- Pro- OBn ( SNPL7)
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL7, med utgangspunkt i SNPLA1 (150 mg; 0,22 mmol) og Dl (122 mg; 0,22 mmol), ble den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff (130 mg; 51 %) etter rensing ved flash-LC (silikagel, gradient EtOAc-heksan fra 2:1 til 1:3) (blanding av diastereomerer).
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,74-1,03 (m, 18 H), 1,16-1,37 (m, 10 H), 1,45 (s, 9 H), 1,68 (m, 3 H), 1,99 (m, 4 H), 2,22 (m, 2 H), 2,48 (m, 1 H), 2,82 (s, 3 H), 2,84-3,10 (m, 2 H), 3,19 (m, 1 H), 3,51-3,69 (m, 2 H), 3,75 (s, 3 H), 3,72-4,02 (m, 3 H), 4,18 (m, 1 H), 4,50-4,73 (m, 4 H), 5,00-5,27 (m, 5 H), 5,49 (m, 2 H), 6,54 (d, J = 9,2,1 H), 6,78 (d, J = 6,8,2 H), 7,02 (d, J = 6,8, 2 H), 7,18 (m, 1 H), 7,23-7,36 (m, 10 H), 7,52 (d, J = 6,8,1 H).
ESI-MS beregnet for C62H8gN6015: 1156,63. Funnet: 1158,3 (M + H)<+>.
Eksempel 35
Syntese av Boc- Thr( Z- N( Me)- 0( Me)- Tvr)- Ist- Hiv- Leu- Pro- OBn ( SHPL7)
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL7, med utgangspunkt i SHPLA1 (1,12 g; 1,94 mmol) og SAPLD1 (544,6 mg; 1,94 mmol), ble den ønskede forbindelse (1,045 g; 61 %) oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved flash-LC (silikagel, gradient EtOAc-heksan fra 1:1 til 1:2). Rf = 0,46 (heksan-EtOAc 1:2). 1 H-NMR (300 MHz, CDC13) 5 0,74-1,02 (m, 18 H), 1,20 (m, 5 H), 1,40 (m, 3 H), 1,46 (s, 9 H), 1,62 (m, 2 H), 1,82-2,20 (m, 3 H), 2,20 (m, 2 H), 2,50 (m, 1 H), 2,78 (s, 3 H), 2,90 (m, 1 H), 3,20 (m, 1 H), 3,58 (m, 1 H), 3,67 (s, 3 H), 3,79 (m, 1 H), 3,88 (m, 1 H), 4,06 (m, 2 H), 4,40 (m, 2 H), 4,82 (m, 2 H), 4,94 (m, 1 H), 4,98 (m, 1 H), 5,08 (m, 1 H), 5,28 (m, 3 H), 5,56 (d, J = 6,2,1 H), 6,84 (d, J = 8,3, 2 H), 6,98 (d, J = 6,5,1 H), 7,07 (d, J = 8,3,2 H), 7,34 (m, 10 H), 7,52 (d, J = 6,2, 1 H).
<13>C-NMR(75 MHz, CDC13) 8 11,27,13,77,13,95,16,75,17,46,18,31, 20,78, 20,96,23,09,24,35,24,53,26,74,27,93,28,63, 30,17, 33,76, 39,06,40,01,46,69,48,17, 54,89, 57,04, 57,68, 58,65, 60,20, 60,60, 66,74, 67,08, 68,31, 70,30, 78,49, 79,90, 113,62, 127,36, 127,70,128,14,128,18,128,31,129,64,135,19, 136,31, 155,86,156,61, 158,09,169,77, 170,70, 171,06,171,17,171,78.
ESI-MS beregnet for C59H83N5O15: 1101,59. Funnet: 1102,7 (M + H)<+.>
Eksempel 36
Syntese av Boc- Thr( Z- N( MeVO( Me)- Tvryist- Val- Leu- Pro- Bn fSVPL^
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL7, med utgangspunkt i SVPLA1 (1,44 g; 2,37 mmol) og Dl (1,29 g; 2,37 mmol), ble den ønskede forbindelse (1,96 g; 75 %) oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved flash-LC (silikagel, gradient EtOAc-heksan fra 2:1 til 1:3). Rf = 0,56 (EtOAc).
'H-NMR (300 MHz, CDC13): 8 0,83-0,95 (m, 15 H), 1,0-1,22 (m, 4 H), 1,23-1,44 (m, 9 H), 1,60-1,65 (m, 1 H), 1,87-2,01 (m, 4 H), 2,09-2,20 (m, 3 H), 2,77 (bs, 8 H), 2,84-3,01 (m, 1 H), 3,17-3,24 (m, 1 H), 3,51-3,60 (m, 1 H), 3,73 (s, 3 H), 3,80-3,90 (m, 2 H), 4,03-4,15 (m, 1 H), 4,25-4,40 (m, 2 H), 4,40-4,52 (m, 1 H), 4,70-4,80 (m, 2 H), 5,00-5,26 (m, 4 H), 5,34-5,36 (m, 1 H), 5,58 (m, 1 H), 6,75 (d, 2 H, J = 7,8), 6,96-7,09 (m, 1 H), 7,04 (d, 2 H, J = 8,1), 7,04-7,12 (m, 1 H), 7,16-7,20 (m, 1 H), 7,18-7,30 (m, 10 H).
<13>C-NMR(75 MHz, CDC13) 8 11,43,13,63,17,17,18,35,19,21,21,40,23,23, 24,49, 24,67, 26,87, 28,10, 28,79, 30,48, 32,11, 33,84, 38,47, 40,37,41,22,46,80,48,61, 55,04, 56,88, 57,95, 58,75, 59,25, 60,82, 66,87,67,33, 69,40, 70,50, 76,44, 80,45,113,58, 127,51, 127,74,127,88,128,10,128,25,128,33,128,46,128,72,129,64,129,77,135,35,136,37,156,77, 158,29,169,83,170,57,171,3,171,4,172,81.
ESI-MS beregnet for C59H84N6Oi4: 1100,60. Funnet (m/z): 1101,7 (M + H)<+>.
Eksempel 37
Syntese av Boc- Thr( N( Me)- 0( MeVTvr)- Ist- Hip- Leu- Pro- OH ( SAPL6)
Til en oppløsning av SAPL7 (18,33 g; 15,8 mmol) i THF (uten stabiliseringsmiddel, 500 ml) som var avgasset og renset med argon, ble Pd(OH)2-C (20 % Pd; 7,33 g; 40 vekt%). Blandingen ble omrørt under H2(1 atm) i 20 timer, hvoretter det ble foretatt filtrering ved bruk av et 0,45 p, teflonfilter og foretatt konsentrering under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd et hvitt, fast stoff. 30 ml toluen ble tilsatt, og det ble på ny foretatt konsentrering under redusert trykk og høy vakuum, hvorved det ble oppnådd 14,78 g SAPL6 (kvant.) som et hvitt, fast stoff.
'H-NMR(500 MHz, CDC13) 8 0,79-1,08 (m, 18 H), 1,09-1,18 (m, 3 H), 1,26 (bs, 3 H), 1,29 (d, J = 7,1, 3 H), 1,47 (s, 9 H), 1,50-1,66 (m, 3 H), 1,84-1,94 (m, 1 H), 1,90-2,28 (m, 4 H), 2,35-2,50 (m, 4 H), 2,30-2,35 (m, 1 H), 2,44-3,18 (m, 4 H), 2,60 (m, 3 H), 3,53-3,61 (m, 1 H), 3,77 (s, 3 H), 3,88-4,07 (m, 4 H), 4,12-4,72 (m, 4 H), 5,18-5,24 (m, 1 H), 5,24 (bs, 1 H), 6,84 (d, J = 7,9) 2 H), 7,08 (d, J = 8,0,2 H), 7,13 (d, J = 8,2,1 H), 7,18 (d, J = 8,2,1 H), 7,62-7,68 (bs, 1 H). m/z (FAB) 972,7 [(M + K)<+>, 33], 934,9 (M)<+>, 100].
Eksempel 38
Syntese av Boc- Thr( N( MeVO( MeVTvrVIst- Aip- Leu- Pro- OH TSNPL61
Til en oppløsning av SNPL7 (130 mg; 0,11 mmol) i en blanding av IPA:H20 (2:1; 4 ml:2 ml), som var avgasset og renset med argon, ble det tilsatt Pd(OH)2-C (20 % Pd; 45 mg; 35 vekt%). Blandingen ble omrørt under H2(1 atm) i 20 timer, hvoretter det ble foretatt filtrering ved bruk av et 0,45 p teflonfilter og foretatt konsentrering under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd et hvitt, fast stoff. IPA (10 ml) ble tilsatt, og det ble på ny foretatt konsentrering under redusert trykk og høy vakuum, hvorved det ble oppnådd 100 mg SNPL6 (kvant.) som et hvitt, fast stoff.
ESI-MS beregnet for C47H76N6Oi3: 932,55. Funnet: 934,0 (M + H)<+.>
Eksempel 39
Syntese av Boc- Thr( N( Me)- Q( Me)- Tvr)- Ist- Hiv- Leu- Pro- QH ( SHPL6)
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL6, med utgangspunkt i SHPL7 (1,045 g; 0,95 mmol) ble den ønskede forbindelse (825 g; 99 %) oppnådd som et hvitt, fast stoff.
ESI-MS beregnet for C44H7iN5013: 877,50. Funnet: 878,5 (M + H)<+.>
Eksempel 40
Syntese av Boc- Thr( N( MeVOfMeVTvrVIst- Val- Leu- Pro- OH ( SVPL61
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL6, med utgangspunkt i SVPL7 (250 mg; 0,23 mmol) ble den ønskede forbindelse (195 mg; 97 %) oppnådd som et hvitt, fast stoff.
ESI-MS beregnet for C44H72N6Oi2: 876,56. Funnet (m/z): 877,5 (M + H)<+.>
Eksempel 41
Svntese av svklo- N( MeVO( Me)- Tvr)- 0-( Boc- ThrVIst- Hip- Leu- Pro ( SAPL6^
I en kjølt (-5 °C) 5 liters reaktor utstyrt med en mekanisk rører inneholdende ACN (3,2 1), ble HATU (14,436 g; 37,9 mmol) og HOAt (5,254 g; 38,6 mmol) tilsatt under argonatmosfære og under omrøring. SAPL6 (14,77 g; 15,8 mmol) oppløst i ACN (500 ml) tilsatt. NMM (3,65 ml; 33,18 mmol) ble tildryppet med en sprøyte, mens temperaturen ble holdt lavere enn -5 °C. Den resulterende reaksjonsblanding ble tillatt å nå romtemperatur og ble omrørt i 20 timer. Løsemidlet ble avdampet under redusert trykk. Råproduktet ble drevet ut med EtOAc (500 ml), og oppløsningen ble filtrert for å fjerne utfelling. Oppløsningen ble vasket suksessivt med vandig KHS04(2 x 500 ml), saltoppløsning (500 ml), vandig NaHC03(500 ml, mettet) og ble skylt med 500 ml saltoppløsning. Den organiske fase ble tørket (Na2S04) og konsentrert under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd et gult, fast stoff (17,52 g) som ble renset ved flash-kromatografi (silikagel, gradient heksan:EtOAc fra 3:1 til 1:1), hvorved det ble oppnådd 9,83 g (68 %) SAPL5 som et hvitt, fast stoff. Rf = 0,60 (heksan:EtOAc 1:3). [a]D-209,4 (c 0,3, CHCI3).
IR (film, DCM) v 3343,2961,2927,2893,1734,1640,1514,1454,1368,1302, 1248, 1167, 1018 cm'1.
'H-NMR (500 MHz, CDCI3) 8 0,78 (d, J = 7,1, 3 H), 0,85 (d, J = 7,0, 3 H), 0,87 (d, J = 7,0, 3 H), 0,89-0,93 (m, 9 H), 1,10-1,20 (m, 1 H), 1,20 (d, J = 6,4, 3 H), 1,30 (d, J = 6,9, 3 H), 1,36 (m, 2 H), 1,40 (m, 2 H), 1,44 (s, 9 H), 1,48-1,72 (m, 2 H), 1,72-1,78 (m, 1 H), 1,83-1,88 (m, 1 H), 2,01-2,17 (m, 3 H), 2,27-2,29 (m, 1 H), 2,47-2,53 (m, 1 H), 2,53 (s, 3 H), 2,93 (bs, 1 H), 3,14-3,19 (m, 2 H), 3,34-3,37 (dd, J, = 14,8, J2= 4,1,1 H), 3,54-3,56 (dd, J, = 10,5, J2= 4,1,1 H), 3,58-3,63 (m, 1 H), 3,68-3,72 (m, 1 H), 3,78 (s, 3 H), 3,94-3,98 (m, 1 H), 3,98 (q, J = 7,5,1 H), 4,07-4,11 (3 d, J = 3,8, 1 H), 4,57-4,61 (m, 2 H), 4,77-4,81 (m, 1 H), 4,97-4,98 (q, J = 3,5,1 H), 5,02 (d, J = 10,5,1 H), 5,18 (d, J = 4,2,1 H), 6,81 (d, J = 8,5,2 H), 7,05 (d, J = 8,5, 2 H), 7,19 (d, J = 10,2,1 H), 7,64 (d, J = 10,1,1 H).
,<3>C-NMR (75 MHz, CDC13) 8 11,56,14,68,14,97,15,27,16,61,18,45,20,64, 23,50,24,71,24,78, 26,92,27,73,27,94, 31,55, 33,94,33,94, 38,27, 38,52,40,64,46,86,49,54,
49,65, 55,16, 55,19, 55,84, 57,12,65,96,67,30,71,00, 80,27, 81,41,114,02,130,22,158,53, 168,30,169,31,170,12,170,29,171,20,172,38,204,51. m/z (FAB) 938,9 [(M + Na)<+>, 55], 916,9 [(M + H)<+>, 100]; m/z (FAB-HRMS) 916,532 120, C47H73N5O13, krever (M + H)<+>= 916,528300.
Eksempel 42
Syntese av svklo- N( Me)- 0( Me)- Tvr- Q-( Boc- Thr)- Ist- Aip- Leu- Pro ( SNPL5)
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL5, med utgangspunkt i SNPL6 (100 mg; 0,11 mmol), ble 40 mg (57 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff etter flash-LC (silikagel, EtOAc:heksan, gradient 4:1 til rent EtOAc). Rf = 0,4 (EtOAc).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 5 0,76 (d, J = 6,8, 3 H), 0,83-0,96 (m, 15 H), 1,10-1,20 (m, 1 H), 1,25 (d, J = 6,4,3 H), 1,27 (d, J = 6,3, 3 H), 1,32 (d, J = 6,8, 3 H), 1,41 (m, 2 H), 1,44 (s, 9 H), 1,50-1,70 (m, 2 H), 1,99-2,31 (m, 5 H), 2,61 (s, 3 H), 2,91-3,04 (m, 1 H), 3,11-3,37 (m, 2 H), 3,48-3,64 (m, 3 H), 3,69-3,81 (m, 1 H), 3,80 (s, 3 H), 4,18 (m, 2 H), 4,46-4,67 (m, 3 H), 4,81 (t, J = 10,7, 1 H), 5,01 (m, 1 H), 6,85 (d, J = 8,3, 2 H), 7,07 (d, J = 8,3, 2 H), 7,33 (d, J = 8,7,1 H), 7,65 (d, J = 9,2,1 H), 7,86 (d, J = 10,7,1 H).
ESI-MS beregnet for C47H74N6012: 914,54. Funnet (m/z): 915,5 (M + H)<+>.
Eksempel 43
Syntese av svklo- N( MeVO( MeVTvr- Q-( Boc- ThrVIst- Hiv- Leu- Pro ( SHPL5)
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL5, med utgangspunkt i SHPL6 (2,45 g; 2,78 mmol), ble 2,1 g (88 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff etter krystallisering fra DCM/n-heptan (1:3). Rf = 0,33 (heksan-EtOAc 1:3).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 5 0,82-1,04 (m, 18 H), 1,19 (m, 5 H), 1,41 (s, 9 H), 1,42 (m, 2 H), 1,63 (m, 1 H), 1,77 (m, 1 H), 1,90 (m, 1 H), 2,00-2,22 (m, 3 H), 2,44 (m, 1 H),
2,58 (s, 3 H), 2,95 (m, 1 H), 3,14 (m, 1 H), 3,26 (m, 1 H), 3,36 (m, 1 H), 3,58 (m, 1 H), 3,68 (m, 2 H), 3,78 (s, 3 H), 3,96 (m, 1 H), 4,12 (m, 1 H), 4,30 (m, 1 H), 4,61 (m, 1 H), 4,87 (m, 1 H),
4,94 (m, 1 H), 5,03 (m, 1 H), 6,84 (d, J = 8,3,2 H), 7,07 (d, J = 8,3,2 H), 7,54 (d, J = 7,3,1 H), 7,69 (d,J = 6,4,1H).
<13>C-NMR(75 MHz, CDC13) 8 11,38,14,57,15,15,18,11,18,45,20,67,23,40, 24,70,26,91,27,89, 30,20, 33,57, 33,90, 38,51,39,07,46,62,48,13, 55,16, 56,05, 56,23,56,94, 65,67, 68,60, 71,13, 79,41, 80,01,113,97,129,69,130,25,155,75,158,49,168,51,169,57, 170,24,170,94,171,06,173,59.
ESI-MS: beregnet for C44H69N5Oi2: 859,49. Funnet (m/z): 860,4 (M + H)<+.>
Eksempel 44
Svntese av svklo- N( MeVO( MeVTvr- Q-( Boc- ThrVIst- Val- Leu- Pro ( SVPL5
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL5, med utgangspunkt i SVPL6 (90 mg; 0,1 mmol), ble 30 mg (35 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved flash-LC (silika, gradient heksan-EtOAc fra 1:4 til 1:10). Rf = 0,35 (EtOAc).
'H-NMR (300 MHz, CDCI3): 8 0,85-1,00 (m, 18 H), 1,14-1,38 (m, 8 H), 1,44 (s, 9 H), 1,57 (m, 2 H), 1,76-1,95 (m, 2 H), 2,01-2,21 (m, 2 H), 2,33 (dd, J, = 7,3, J2= 14,7,1 H), 2,53 (m, 1 H), 2,57 (s, 3 H), 3,17 (dd, J, = 10,7, J2= 14,7,1 H), 3,35 (dd, J, = 4,4, J2= 14,2, 1 H), 3,56 (dd, J, = 3,9, J2= 10,3,1 H), 3,59-3,77 (m, 4 H), 3,78 (s, 3 H), 4,06 (dt, J, = 3,9, J2= 9,3,1 H), 4,33 (dd, J, = 2,9, J2= 9,3, 1 H), 4,38 (dd, J, = 6,8, J2= 10,3,1 H), 4,58 (dd, Ji = 5,4, J2= 7,3,1 H), 4,79 (t, J = 10,3,1 H), 4,98 (d, J = 9,3,1 H), 5,03 (dd, J, = 2,4, J2= 6,3,1 H), 6,81 (bs, 1 H), 6,84 (d, J = 8,3,2 H), 7,08 (d, J = 8,3,2 H), 7,24 (d, J = 9,8,1 H), 7,54 (d, J = 9,8,1 H).
<13>C-NMR (75 MHz, CDCI3) 8 11,48, 14,50,15,20, 18,86,19,44, 21,03, 23,64, 24,83, 24,96,26,97,28,01, 28,135, 30,21, 33,53, 33,96, 38,56, 38,61,41,05,41,66,46,84,48,53,
55,24, 55,51,56,31,57,14, 59,75,65,85, 70,60,80,52,114,11,129,75,130,33,156,77,158,67, 168,53,170,21,170,29,170,73,171,02,174,34.
ESI-MS beregnet for C44H70N6O11: 858,51. Funnet (m/z): 859,5 (M + H)<+.>
Eksempel 45
Syntese av svklo- N( Mel- Q( MeVTvr- 0-( ThrVIst- Hip- Leu- Pro (SAPL4)
Til en kolbe inneholdende SAPL5 (8,79 g; 9,6 mmol) i vannfritt dioksan (93 ml) ble en oppløsning av saltsyre i vannfritt dioksan (5,3 N; 122 ml; 647 mmol) tilsatt. Den resulterende oppløsning ble omrørt ved romtemperatur i 8 timer, eller inntil utgangsmaterialet var fullstendig forsvunnet. Etter endt reaksjon ble oppløsningen konsentrert under redusert trykk. Residuet ble fortynnet med CHCI3(100 ml) og på ny konsentrert. Det hvite, urene skum ble ko-fordampet med CHCb/heksan, hvorved det ble oppnådd 8,17 g SAPL4 (100 % utbytte) som et hvitt, fast stoff. m/z (FAB) 838,3 [(M + Na)<+>, 28], 816,3 [(M + H)<+>, 100].
Eksempel 46
Svntese av svklo- N( Me)- Q( MeVTvr- 0-( ThrVIst- Aip- Leu- Pro ( SNPL4)
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL4, med utgangspunkt i SNPL5 (40 mg; 43 pmol), ble 36 mg av den ønskede forbindelse (kvantitativt utbytte) oppnådd som et hvitt, fast stoff etter utfelling med Et20.
ESI-MS: beregnet for C42H65N50ii: 815,47. Funnet (m/z): 815,5 (M)<+.>
Eksempel 47
Syntese av svklo- N( MeVO( MeVTvr- 0-( ThrVIst- Hiv- Leu- Pro ( SHPL4)
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL4, med utgangspunkt i SHPL5 (500 mg; 0,58 mmol), ble 440 mg av den ønskede forbindelse (kvantitativt utbytte) oppnådd som et hvitt, fast stoff etter utfelling med Et20.
ESI-MS: beregnet for C39H61N5O10: 759,44. Funnet (m/z): 760,4 (M + H)<+>.
Eksempel 48
Syntese av svklo- N( MeVOrMeVTvr- Q-( ThrVIst- Val- Leu- Pro ( SVPL41
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL4, med utgangspunkt i SVPL5 (25 mg; 29 pmol), ble 22 mg av den ønskede forbindelse (kvantitativt utbytte) oppnådd som et hvitt, fast stoff etter ko-fordamping med MTBE.
ESI-MS beregnet for C39H62N609: 758,5. Funnet (m/z): 759,5 [(M + H)]+.
Eksempel 49
Z- N- metvl- D- leucin ( Hn
Ref: Coggins, J.R., Benoiton,N.L., Can. J. Chem \ 91\, 49,1968.
Til en omrørt oppløsning av Z-D-Leu-OH (10,32 g; 38,9 mmol) i vannfritt THF (120 ml) ved 0 °C under argonatmosfære ble jodmetan (8,55 ml; 136,1 mmol) tildryppet med en sprøyte. Deretter ble natriumhydrid (4,80 g; 120,6 mmol; 60 % dispersjon i mineralolje) tilsatt porsjonsvis, mens temperaturen ble holdt ved 0 °C. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 24 timer. Løsemidlet ble fjernet under redusert trykk, og residuet ble oppløst i EtOAc (120 ml) og ekstrahert med vandig NaHC03(300 ml, mettet). Den vandige fase ble vasket med EtOAc (2 x 100 ml). Den vandige fase ble kjølt ned, fast sitronsyre ble tilsatt inntil pH 1-2 var nådd, og oppløsningen ble ekstrahert med EtOAc (4 x 250 ml), tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert. Produktet ble krystallisert i EtOAc-heptan (1:3), hvorved det ble oppnådd 7,84 g Hl (72 %) som et hvitt, krystallinsk, fast stoff. Smp. 71-72 °C. [er]<*5>+23 (c 1, EtOH).
Eksempel 50
Syntese av Z- didemnin A ( SAPL3")
Til en kolbe inneholdende HATU (8,76 g; 23,0 mmol), HOAt (3,17 g; 23,1 mmol) SAPL4 (7,09 g; 15,8 mmol) og Hl (3,486 g; 12,5 mmol), ble vannfritt DCM (100 ml) og vannfritt DMF (50 ml) tilsatt under argonatmosfære, og oppløsningen ble omrørt ved -5 °C (isbad). NMM (2,3 ml; 21,0 mmol) ble tildryppet med en sprøyte, mens temperaturen ble holdt ved -5 °C. Den resulterende reaksjonsblanding ble omrørt ved -5 °C i 2 timer og ble deretter tillatt å komme opp i romtemperatur i løpet av ytterligere 14 timer. Løsemidlet ble avdampet under redusert trykk. Råproduktet ble drevet ut med EtOAc (100 ml), og oppløsningen ble filtrert for å fjerne noe utfelt stoff. Oppløsningen ble vasket suksessivt med vandig KHSO4(2 x 100 ml; 10 %), saltoppløsning (100 ml) og vandig NaHC03(100 ml, mettet) og ble skylt med salt-oppløsning (100 ml). Den organiske fase ble tørket (Na2S04) og konsentrert under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd et gult, fast stoff som ble renset ved flash-LC (silikagel, gradient heksan:EtOAc fra 2:1 til 1:1), hvorved det ble oppnådd 7,98 g SAPL3 (89 % utbytte) som et hvitt, fast stoff. Rf = 0,18 (heksan/EtOAc 1:1).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,79-1,00 (m, 24 H), 1,10-2,25 (m, 10 H), 1,18 (d, J = 6,3,3 H), 1,25 (s, 3 H), 1,32 (d, J = 6,8, 3 H), 2,28-2,34 (m, 1 H), 2,49 (dd, J, = 10,7, J2= 17,0, 1 H), 2,54 (s, 3 H), 2,83 (s, 3 H), 2,95 (m, 1 H), 3,02-3,24 (m, 2 H), 3,31-3,40 (dd, J, = 3,9, J2= 14,1,1 H), 3,53-3,64 (m, 2 H), 3,65-3,75 (m, 1 H), 3,78 (s, 3 H), 3,92-4,20 (m, 3 H), 4,58 (t, J = 4,8,1 H), 4,75-4,85 (m, 3 H), 5,00 (m, 1 H), 5,12-5,26 (m, 3 H), 6,84 (d, J = 8,3, 2 H), 6,86 (bs, 1 H), 7,07 (d, J = 8,3,2 H), 7,21-7,44 (m, 6 H), 7,92 (d, J = 8,3,1 H).
<13>C-NMR(75 MHz, CDCI3) 8 11,57, 14,05, 15,18,16,73, 18,52, 20,83, 22,62, 22,96,23,66,24,55, 24,81, 25,03,25,28,26,90,27,86,28,95, 31,28, 31,81, 33,91, 34,02, 38,51, 38,61,47,03,49,61, 55,21, 55,38, 55,50,57,28, 66,10, 67,65, 67,93, 70,47, 81,44,114,09, 127,83,128,46, 129,74, 130,29, 158,60,168,36, 169,59, 170,28,171,20,172,22, 204,80.
ESI-MS beregnet for C57Hg4N60,4: 1076,60. Funnet (m/z): 1077,6 (M + H)<+>.
Eksempel 51
Syntese av rAipl3- Z- didemnin A ( SNPL3^
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL3, med utgangspunkt i SNPL4 (35 mg; 41 pmol) og Hl (17 mg; 61 pmol), ble 36 mg (81 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved flash-LC (silikagel, gradient heksan-EtOAc fra 1:4 til Rent EtOAc). Rf = 0,30 (EtOAc). 1 H-N MR (300 MHz, CDC13) 8 0,74 (d, J = 6,3, 3 H), 0,80-1,00 (m, 21 H), 1,10-2,25 (m, 10 H), 1,21 (d, J = 5,8, 3 H), 1,24 (s, 3 H), 1,34 (d, J = 6,3, 3 H), 2,61 (s, 3 H), 2,86 (s, 3 H), 3,12-3,25 (dd, J, = 11,2, J2= 14,1,1 H), 3,27-3,36 (dd, J, = 4,3, J2= 14,1,1 H), 3,52-3,63 (m, 3 H), 3,69-3,81 (m, 2 H), 3,80 (s, 3 H), 4,09 (m, 3 H), 4,47-4,63 (m, 3 H), 4,76-4,92 (m, 2 H), 5,00 (m, 1 H), 5,08 (m, 1 H), 5,18 (s, 2 H), 6,85 (d, J = 8,3,2 H), 6,97 (d, J = 6,97,1 H), 7,07 (d, J = 8,3,2 H), 7,35 (bs, 5 H), 7,48 (d, J = 8,3,1 H), 7,67 (d, J = 8,3,1 H), 7,87 (d, J = 10,2,1 H).
ESI-MS beregnet for C57H85N7O13: 1075,62. Funnet (m/z): 1076,6 (M + H)<+>.
Eksempel 52
Syntese av rHivl3- Z- didemnin A ( SHPL3)
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL3, med utgangspunkt i SHPL4 (116 mg; 0,15 mmol) og Hl (63 mg; 0,23 mmol), ble 86 mg (52 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved flash-LC (silikagel, gradient heksan-EtOAc fra 1:1 til 1:2). Rf = 0,27 (heksan-EtOAc 1:2). 1 H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,80-1,08 (m, 24 H), 1,18 (m, 3 H), 1,21 (m, 4 H), 1,58 (m, 2 H), 1,74 (m, 1 H), 1,80-2,42 (m, 6 H), 2,56 (s, 3 H), 2,80 (s, 3 H), 2,88 (m, 1 H), 3,15 (m, 1 H), 3,32 (m, 1 H) 3,60 (m, 3 H), 3,78 (s, 3 H), 3,83 (m, 1 H), 3,98 (m, 1 H), 4,42 (m, 1 H), 4,58 (m, 1 H), 4,75 (m, 1 H), 4,84 (m, 1 H), 4,92 (d, J = 3,8, 1 H), 5,00 (m, 1 H), 5,20 (m, 2 H), 6,65 (d, J = 6,3,1 H), 6,84 (d, J = 8,3,2 H), 7,07 (d, J = 8,3,2 H), 7,34 (m, 5 H), 7,50 (d, J = 6,7, 1 H), 7,75 (d, J = 7,2, 1 H).
<13>C-NMR(75 MHz, CDCI3) 8 11,58,14,21,15,39,17,64,18,63,20,74, 21,88, 22,84,23,48,24,22, 24,75,27,05,27,84,29,34,29,99, 33,42, 33,86, 35,81, 38,52, 39,37,46,63, 48,14, 55,13, 55,47, 55,53, 55,87, 56,92, 65,68, 67,72, 68,60, 70,61, 79,09, 113,95,127,71, 127,86,128,35,129,63,130,22,158,48,168,46,169,36,169,84,170,29,170,93,171,00,173,73.
ESI-MS: beregnet for C54H80N6O13: 1020,58. Funnet (m/z): 1021,5 (M + H)<+>.
Eksempel 53
Syntese av rVal13- Z- didemnin A ( SVPL31
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL3, med utgangspunkt i SVPL4 (20 mg; 25 pmol) og SAPLH1 (11 mg; 37,5 pmol), ble 19 mg (72 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved flash-LC (silikagel, gradient heksan-EtOAc fra 1:1 til 1:5). Rf = 0,44 (EtOAc). 1 H-NMR (300 MHz, CDC13): 8 0,85-1,06 (m, 21 H), 1,10-1,4 (m, 5 H), 1,16 (d, J = 6,6, 3 H), 1,50-1,63 (m, 6 H), 1,72-1,87 (m, 2 H), 1,88-2,40 (m, 6 H), 2,58 (s, 3 H), 2,86 (s, 3 H), 3,17 (dd, J, = 10,5, J2= 14,2,1 H), 3,36 (dd, J, = 3,9, J2= 14,2,1 H), 3,43 (bs, 1 H), 3,51-3,72 (m, 4 H), 3,79 (s, 3 H), 3,98-4,16 (m, 1 H), 4,40-4,47 (m, 2 H), 4,58 (dd, J, = 5,7, J2= 7,8,1 H), 4,67-4,85 (ra, 2 H), 4,80-5,09 (m, 1 H), 5,16 (d, J = 12,4, 1 H), 5,24 (d, J = 12,4, 1 H), 6,84 (d, J = 8,4,1 H), 6,90-6,94 (bs, 1 H), 7,09 (d, J = 8,4,1 H), 7,28-7,50 (m, 6 H).
,3C-NMR(75 MHz, CDC13) 8 11,99,14,37,15,70,18,55,19,82,21,40,21,99, 22,81, 23,17, 23,98, 24,62, 25,00, 25,24,27,28, 28,26, 29,93, 30,23, 33,58, 34,10, 36,16, 38,78, 41,98,47,10,48,79, 54,73, 55,45, 56,62,57,40, 59,51, 66,02, 68,18, 70,37, 71,03,114,30, 128,00,128,27,128,72,129,86,130,56,136,49,158,28,158,85,168,75,169,27,170,40,170,75, 171,04, 173,91, 175,03.
ESI-MS beregnet for C54H8iN70|2: 1019,59. Funnet (m/z): 1020,5 (M + H)<+>.
Eksempel 54
Syntese av didemnin A ( SAPL2)
Til en oppløsning av SAPL3 (6,59 g; 6,1 mmol) i THF (uten stabiliseringsmiddel, 262 ml) som var blitt avgasset og renset med argon, ble Pd(OH)2-C (20 %; 3,29 g; 50 vekt%) ble tilsatt. Blandingen ble omrørt under H2(1 atm) i 20 timer og deretter filtrert gjennom et 0,45 pm teflonfilter og konsentrert under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd et hvitt, fast stoff. CHCh (2 x 25 ml) ble tilsatt, og blandingen ble på ny konsentrert under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd 5,51 g (96 %) SAPL2 som et hvitt, fast stoff. Rf = 0,22 (CHCl3:fBuOH 90:10).
'H-NMR (500 MHz, CDCI3) 8 0,82-0-92 (m, 24 H), 1,11-1,19 (m, 1 H), 1,22 (d, J = 6,9,3 H), 1,32 (d, J = 6,8, 3 H), 1,30-1,35 (m, 1 H), 1,35-1,63 (m, 6 H), 1,71-1,81 (m, 2 H), 1,93-2,07 (m, 1 H), 2,07-2,18 (m, 2 H), 2,28-2,34 (m, 1 H), 2,49-2,52 (dd, J, = 11,J2= 10,5,1 H), 2,54 (s, 3 H), 2,72 (bs, 3 H), 2,79 (bs, 3 H), 2,86-2,94 (bs, 1 H), 2,72-2,79 (bd, J = 10,5,1 H), 3,15-3,18 (dd, Ji = 14,5, J2= 10,5,1 H), 3,33-3,36 (dd, J, = 14,5, J2= 4,5,1 H), 3,54-3,57 (dd, J, = 10,5, h = 4,5, 1 H), 3,56-3,61 (m, 1 H), 3,78 (s, 3 H), 3,96-4,00 (m, 1 H), 4,03-4,08 (m, 1 H), 4,11-4,80 (bs, 1 H), 4,56-4,62 (m, 1 H), 4,68-4,81 (m, 3 H), 4,99-5,01 (q, J = 3,5,1 H), 5,16 (bs, 1 H), 6,83 (d, J = 8,5, 2 H), 6,95 (bs, 1 H), 7,07 (d, J = 8,5, 2 H), 7,21-7,25 (bs, 1 H), 7,95 (bs, 1
H).
<I3>C-NMR (75 MHz, CDCI3) 8 11,55, 14,95, 15,26, 16,82,18,56, 20,89, 22,00, 23,08, 23,76,24,58,24,85,25,10,27,12,29,35,29,35,29,65,29,69, 31,36, 33,96, 34,14, 38,51, 38,64,40,14, 55,38, 55,56, 57,31,66,17, 67,85, 70,58, 80,96, 80,98, 81,57,114,12,130,33, 158,63,168,41,169,33,169,70,170,38,171,24, 172,28,172,28, 172,93,204,83.
m/z (FAB) 944,2 [(M + H)<+>, 100].
Eksempel 55
Svntese av rAip13- didemnin A ( SNPL21
Til en oppløsning av SNPL3 (33 mg; 35 pmol) i en blanding av IPA/H20 (2 ml:l ml), som var blitt avgasset og renset med argon, ble Pd(OH)2-C (20 %; 20 mg; 60 vekt%) ble tilsatt. Blandingen ble omrørt under H2(1 atm) i 20 timer og ble deretter filtrert gjennom et 0,45 pm teflonfilter og konsentrert under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd et hvitt, fast stoff. IPA (2x5 ml) ble tilsatt, og oppløsningen ble på ny konsentrert under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd 32 mg (97 %) SNPL2 som et hvitt, fast stoff.
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,78 (d, J = 6,8, 3 H), 0,82-0,92 (m, 21 H), 1,11-2,58 (m, 21 H), 2,41 (s, 3 H), 2,62 (s, 3 H), 2,75-3,00 (m, 4 H), 3,15-3,18 (dd, J, = 10,7, J2= 14,7,1 H), 3,33-3,36 (dd, = 14,5, J2= 4,2,1 H), 3,51-3,78 (m, 3 H), 3,78 (s, 3 H), 3,92 (m, 1 H), 4,01-4,20 (m, 2 H), 4,50 (t, J = 4,8,1 H), 4,59 (t, J = 6,3,1 H), 4,75-4,91 (m, 2 H), 5,05 (m, 1 H), 6,84 (d, J = 8,3, 2 H), 7,07 (d, J = 8,3, 2 H), 7,70 (d, J = 5,8,1 H), 7,78 (d, J = 9,7,1 H), 7,89 (d, J = 6,3,1 H), 8,14 (d, J = 7,8,1 H).
ESI-MS beregnet for C49H79N7O1,: 941,58. Funnet (m/z): 942,7 (M + H)<+>.
Eksempel 56
Syntese av rHivl3- didemnin A ( SHPL2)
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL2, med utgangspunkt i SHPL3 (86 mg; 0,08 mmol), ble 73 mg av den ønskede forbindelse (97 %) oppnådd som et hvitt, fast stoff. Rf = 0,36 (CHCl3/MeOH 95:5).
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,82-1,02 (m, 24 H), 1,12-2,42 (m, 16 H), 2,54 (s, 3 H), 2,64 (s, 3 H), 2,95 (m, 1 H), 3,15 (m, 1 H), 3,35 (m, 1 H), 3,52-3,90 (m, 5 H), 3,78 (s, 3 H), 4,04 (m, 1 H), 4,38 (m, 1 H), 4,48 (m, 1 H), 4,57 (m, 1 H), 4,88 (m, 1 H), 4,91 (d, J = 5,3, 1 H), 5,22 (m, 1 H), 6,84 (d, J = 8,3, 2 H), 7,07 (d, J = 8,3,2 H), 7,54 (d, J = 9,2,1 H), 7,60 (d, J = 9,4, 1 H), 8,68 (d, J = 6,2,1 H).
,<3>C-NMR (75 MHz, CDCI3) 8 11,78,14,07,16,13,17,90,18,56,20,98, 21,74, 22,94, 23,60,24,44,24,78,25,06,27,17,27,92, 30,09, 33,34, 33,89,38,71,40,30,46,86,48,22, 54,99, 55,23, 56,97, 57,21, 65,81, 68,53, 70,37, 79,47,114,03,129,76,130,29,158,57,168,18, 169,40, 169,86,170,20, 170,92, 174,16.
ESI-MS beregnet for C46H74N6O1,: 886,54. Funnet (m/z): 887,2 (M + H)<+.>
Eksempel 57
Syntese av rVall3- didemnin A ( SVPL2>>
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL2, med utgangspunkt i SVPL3 (19 mg; 18 pmol), ble 16 mg av den ønskede forbindelse (97 %) oppnådd som et hvitt, fast stoff. Rf = 0,36 (CHCl3/MeOH 95:5).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 -0,82-1,02 (m, 21 H), 1,85-1,32 (m, 9 H), 1,42-1,83 (m, 7 H), 1,87-2,23 (m, 8 H), 2,34 (bs, 3 H), 2,60 (b s, 1 H), 2,85 (dd, Ji = 5,7, J2= 7,8,1 H), 3,16 (dd, J, = 10,8, h = 14,2,1 H), 3,37 (dd, J, = 4,2, J2= 14,2,1 H), 3,48 (bs, 1 H), 3,57-3,68 (m, 4 H), 3,79 (s, 3 H), 3,95-4,15 (m, 2 H), 4,45-4,52 (m, 2 H), 4,61 (dd, J, = 4,8, J2= 7,8,1 H), 4,77 (t, J = 9,9,1 H), 5,02-5,15 (m, 1 H), 6,84 (d, J = 8,4, 1 H), 7,09 (d, J = 8,4,1 H), 7,59-7,62 (m,2H), 7,78-7,81 (m, 2 H).
<13>C-NMR (75 MHz, CDC13) 8 11,98,14,46,16,14,18,50,19,83, 21,50, 22,55, 22,81, 22,95,23,46,23,98,27,33, 28,27,28,33,29,94,33,71, 34,16, 38,94,41,93,42,11,45,72, 47,18,48,94, 53,64, 55,03, 55,50, 56,72, 57,55, 59,22, 59,56, 66,16, 70,71,114,36,118,53, 120,85,130,02,130,58,168,71,169,74,170,23,171,18,175,10.
ESI-MS beregnet for C46H75N7O10: 885,56. Funnet (m/z): 856,5 (M + H)<+.>
Eksempel 58
Syntese av Pvr- Pro- OBn ( F21
H-Pro-OBn.HCl pyrodruesyre F2
Til en oppløsning av H-Pro-OBnHCl (10,0 g; 41,3 mmol) i vannfritt DMF (50 ml) ved 0 °C under argonatmosfære ble NMM (4,55 ml; 43,8 mmol) tildryppet med en sprøyte, mens temperaturen ble holdt ved 0 °C. HOBt (18,98 g; 124 mmol) ble så tilsatt porsjonsvis. Etter 15 minutter ble pyrodruesyre (8,61 g; 97,79 mmol) oppløst i vannfritt DCM (10 ml) tildryppet med en sprøyte, mens temperaturen ble holdt lavere enn 3 °C. Til slutt ble DCC (22,17 g; 107,46 mmol), som var oppløst i DCM (80 ml), tildryppet med en kompensert trakt. Blandingen ble tillatt å anta romtemperatur (2 timer) og ble omrørt i ytterligere 12 timer. Reaksjonsblandingen ble filtrert for å fjerne utfellingen, og oppløsningen ble konsentrert under redusert trykk. Residuet ble oppløst i EtOAc (500 ml) og ble vasket suksessivt med vandig KHS04(100 ml, 10 %), vandig NaHC03(400 ml, mettet) og saltoppløsning (400 ml), tørket (Na2S04) og filtrert. Løsemidlet ble fjernet under redusert trykk, og residuet ble drevet ut med ACN (100 ml), kjølt ved -30 °C i 2 timer og filtrert for å fjerne overskuddet av N,N-disykloheksylurea. Den resulterende brune olje (15,82 g) ble renset ved flash-LC (silikagel, gradient fra heksan til heksamEtOAc 2:1), hvorved det ble oppnådd 9,06 g F2 (66 % utbytte) som et hvitt, fast stoff. Rf = 0,25 (heksan:EtOAc 2:1).
IR (film, DCM) v 3035,2956,2884,1744,1717,1645,1499,1443,1383,1352, 1273,1175,1092 cm"<1>.
'H-NMR (200 MHz, CDCI3) 5 1,75-2,40 (m, 4 H), 2,37 (s, 3 H), 2,44 (s, 3 H), 3,45-3,82 (m, 2 H), 4,52-4,61 (m, 1 H), 4,88-4,97 (m, 1 H), 5,14-5,15 (m, 2 H), 5,17-5,20 (m, 2 H), 7,34 (bs, 5 H).
<I3>C-NMR (50 MHz, CDC13) 8 22,11,25,22,26,5,27,10,28,53,31,48,47,53, 44,81, 59,76, 67,02, 67,31, 128,11, 128,64,135,24, 170,1, 170,2, 198,0.
m/z (CI) 293 [(M+NH4)<+>, 100].
Analyse beregnet for C15Hi7N04: C 65,44; H 6,22; N 5,08. Funnet: C 65,04; H 6,0l;N5,ll.
Eksempel 59
Syntese av Pvr- Pro- OH ( ¥1 )
En oppløsning av F2 (8,63 g; 31,34 mmol) og palladium på aktivert trekull (10 %;
86 mg; 10 vekt%) i avgasset MeOH (125 ml) ble anbrakt i en høytrykks-Parr-reaktor og ble renset med nitrogengass (2 x 207 kPa). Reaksjonsblandingen ble innelukket under hydrogen (207 kPa) og ble omrørt ved 23 °C i 4,5 timer. Blandingen ble filtrert gjennom et 0,45 pm teflonfilter og ble konsentrert under redusert trykk. Residuet (6,29 g) ble overtrukket med Si02og ble tilført på toppen av en kolonne (LC 5,5 x 10,0 cm) og eluert med heksan:EtOAc 1:2, hvorved det ble
oppnådd 4,64 g (80 %) Fl som et hvitt, fast stoff. Rf = 0,22 (heksan:EtOAc 1:1). [ a]™ -92,4 (c 0,12, CHCI3). Smp. 67-69 °C.
IR (film, DCM) v 3450-3000,2961-2870,1719,1643,1615,1452,1354,1205, 1175,1094,1018 cm"<1>.
'H-NMR (200 MHz, CDCI3) 8 1,85-2,45 (m, 4 H), 2,43 og 2,47 (s, 3 H), 3,42-3,85 (m, 2 H), 4,52-4,61 (m, 1 H), 4,88-4,97 (m, 1 H), 7,21-7,40 (bs, 1 H).
,<3>C-NMR (75 MHz, CDC13) 8 22,03,25,23, 26,48,27,00,28,23, 31,44,47,57, 48,37, 59,61, 59,39, 162,47,162,52,175,04, 176,29, 197,18. m/z (CI) 220 [(M + N2H7)<+>, 15], 203 [(M +NH4)<+>, 100], 186 [(M + H)<+>, 16].
Analyse beregnet for C8HnN04: C 51,88; H 5,99; N 7,56. Funnet: C 52,13; H 5,85; N 7,65.
Eksempel 60
Syntese av aplidin ( SAPL1)
Til en kald (3 °C) oppløsning av Fl (4,908 g; 26,5 mmol) i vannfritt DCM (40 ml) ble det tilsatt, under nitrogenatmosfære, en oppløsning av DIPCDI (1,806 mg; 14,3 mmol) i DCM (10 ml), og oppløsningen ble omrørt ved 3 °C i 60 minutter. Deretter ble en oppløsning av SAPL2 (5,0 g; 5,3 mmol) i DCM (50 ml) overført via kanyle til den anvendte oppløsning under nitrogentrykk. Etter 90 timer (4 døgn) ved denne temperatur ble vandig HC1 (50 ml; 0,1 N) ble tilsatt, og reaksjonsblandingen ble omrørt i 15 minutter. Deretter ble det organiske sjikt dekantert og fordelt mellom vandig KHSO4(50 ml; 5 %), vandig NaHC03(50 ml; 5 %) og saltoppløsning (25 ml). Den organiske fase ble tørket (Na2SC>4), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende blekgule, faste stoff ble renset ved flash-LC (Lichroprep RP-18,40-63 pm, gradient MeOH:H20:TFA fra 70:30:0,1 til 90:10:0,1), hvorved det ble oppnådd 5,4 g SAPL1 (93 %) (blanding av rotamerer). Rf = 0,40 og 0,28 (DCM:AcOEt, 2:3), 0,52 og 0,45 (CHCl3-MeOH, 9,5:0,5); [ct]D-95,9 (cl,8, CHC13). 1 H-NMR (500 MHz, CDC13) 8 0,84-0,93 (m, 24 H), 1,16-1,70 (m, 9 H), 1,72-1,81 (m, 1 H), 1,81-1,90 (m, 1 H), 1,90-2,24 (m, 6 H), 2,30-2,39 (m, 1 H), 2,49 (s, 3 H) 2,51 (s, 3 H), 2,55 (s, 3 H), 2,52-2,64 (m, 1 H), 2,85 (bs, 1 H), 2,94 (bs, 1 H), 3,09 (s, 3 H), 3,13 (s, 3 H), 3,15-3,18 (m, 1 H), 3,21-3,26 (dd, Ji = 15,8, J2= 6,1,1 H), 3,32-3,36 (dd, Ji = 14,5, J2= 4,1,1 H), 3,54-3,60 (m, 1 H), 3,66-3,72 (m, 1 H), 3,78 (s, 3 H), 3,80-3,87 (m, 1 H), 3,96-3,99 (m, 1 H), 4,03-4,11 (m, 2 H), 4,15-4,23 (2 q, J = 7,5,1 H), 4,55-4,57 (2 d, J, = 5,5, J2= 2,2,1 H), 4,59-4,62 (t, 1 H), 4,56-4,64 (dd, J, = 6,5, J2= 2,5,1 H), 4,68-4,71 (t, 1 H), 4,76-4,81 (t, 1 H), 5,10-5,18 (m, 1 H), 5,17 (d, J = 3,5,1 H), 5,18 (d, J = 3,5, 1 H), 5,27-5,31 (m, 2 H), 6,82 (d, J = 8,5, 2 H), 6,83 (d, J = 8,5,2 H), 7,05 (d, J = 8,5,2 H), 7,06 (d, J = 8,5,2 H), 7,02 (d, J = 7,1,1 H), 7,16 (d, J = 9,5,1 H), 7,17 (d, J = 9,5,1 H), 7,59 (d, J = 5,5,1 H), 7,77 (d, J = 9,5,1 H), 7,83 (d, J = 9,4,1 H). 13C-NMR (75 MHz, CDC13) 8 11,63,11,68,14,11,14,70,15,26,15,30,16,00, 16,20,16,88,16,93,18,62,18,85,20,89,20,94,21,62, 21,36,23,44,23,57,23,84,23,93,24,66, 24,77, 24,85, 25,02, 26,22, 26,34, 27,09, 27,6, 27,06, 27,30, 27,95, 27,99, 29,33, 29,69, 31,31-31,37, 33,97, 34,06, 36,02, 36,45, 38,68, 38,76,41,01,41,15,47,00,48,42,48,48,48,86,49,20, 49,51, 54,65, 54,75, 55,26, 55,58, 55,61, 57,14, 57,27, 57,47, 57,79, 66,24, 67,80, 67,99, 70,34, 70,67, 81,0,81,52,114,10,130,31,156,0,158,65,161,1,161,60,168,20,169,53, 169,59, 170,45,171,25,171,80,171,95,172,26,172,33,197,5,204,80,204,85. m/z (FAB) 1132,6 [(M + Na)<+>, 42], 1110,8 [(M + H)<+>, 100].
Eksempel 61
Syntese av rAipl3- aplidin ( SNPL11
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL1, med utgangspunkt i SNPL2 (10 mg; 10,6 pmol) og Fl (10 mg; 54 pmol), ble det oppnådd 8 mg av den ønskede forbindelse (68 %) som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC (HyperPrep PEP 100 Cl 8, isokratisk ACN/H2O 85:15, strømningsmengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, tR= 10,5 og 12,0 minutter).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,80-1,03 (m, 24 H), 1,11-1,70 (m, 9 H), 1,72-1,81 (m, 1 H), 1,81-1,90 (m, 1 H), 1,90-2,24 (m, 6 H), 2,30-2,39 (m, 1 H), 2,53 (s, 3 H), 2,55 (s, 3 H), 2,65 (s, 3 H), 2,52-2,66 (m, 2 H), 2,94 (m, 1 H), 3,07 (s, 3 H), 3,11 (s, 3 H), 3,15-3,18 (m, 1 H), 3,22-3,31 (dd, J, = 4,3, J2= 15,1,1 H), 3,54-3,60 (m, 2 H), 3,67-3,92 (m, 2 H), 3,80 (s, 3 H),
3,98 (m, 1 H), 4,13-4,29 (m, 3 H), 4,45-4,75 (m, 4 H), 4,81 (t, J = 9,7, 1 H), 5,09 (m, 1 H), 5,18 (m, 1 H), 5,26-5,44 (m, 3 H), 6,84 (d, J = 8,3, 2 H), 7,07 (d, J = 8,3, 2 H), 7,30 (d, J = 8,3, 1 H), 7,36 (d, J = 8,3,1 H), 7,68 (d, J = 9,7,1 H), 7,87 (d, J = 4,3,1 H), 8,09 (d, J = 9,7,1 H), 8,28 (d, J = 10,2,1 H).
ESI-MS beregnet for C57H88N80,4:1108,64. Funnet (m/z): 1110,3 (M + H)<+>.
Eksempel 62
Syntese av ( Hiv) 3- aplidin ( SHPLl)
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL1, med utgangspunkt i SHPL2 (72 mg; 0,081 mmol) og Fl (75 mg; 0,405 mmol), ble 68 mg (79 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved flash-LC (Lichroprep RPC18, gradient ACN/H20/TFA fra 70:30:0,5 til 90:10:0,5). Rf = 0,49 (ACN/H20/TFA 90:10:1). 1 H-NMR (300 MHz, CDC13) 80-80-1,10 (m, 24 H), 1,12-1,50 (m, 18 H), 1,50-2,30 (m, 6 H), 2,42 (m, 1 H), 2,53 (s, 3 H) 2,55 (s, 3 H), 2,57 (s, 3 H), 2,96-3,40 (m, 3 H), 3,05 (s, 3 H), 3,10 (s, 3 H), 3,63 (m, 5 H), 3,78 (s, 3 H), 3,90 (m, 1 H), 4,01 (m, 1 H), 4,30 (m, 1 H), 4,63 (m, 1 H), 4,69 (m, 1 H), 4,86 (m, 1 H), 5,02 (d, J = 4,8, 1 H), 5,09 (m, 1 H), 5,20 (m, 1 H), 5,30 (m, 1 H), 6,83 (d, J = 8,3,2 H), 6,89 (d, J = 6,3,1 H), 7,07 (d, J = 8,3, 2 H), 7,29 (d, J = 9,7,1 H), 7,34 (m, 2 H), 7,43 (d, J = 5,3,1 H), 7,74 (d, J = 9,7,1 H), 7,80 (d, J = 10,2,1 H).
<13>C-NMR(75 MHz, CDC13) 8 12,06,14,22,14,30,16,49,16,76,17,84,19,17,
21,08, 21,41, 21,54, 22,54, 23,79, 23,94, 24,05, 24,16, 24,82, 24,96, 25,05, 25,98, 26,45, 27,37, 27,57,28,21, 28,59,30,31, 30,83, 31,56, 31,62, 33,74, 34,24, 36,02, 36,25, 38,91, 38,96, 39,46, 39,86,46,92,48,44,48,71,49,06, 54,95, 55,49, 57,16, 57,68, 58,23, 59,13, 66,16, 66,28, 69,10, 70,83, 71,14, 79,12,114,31,129,96,130,12,130,59,158,86,168,69,168,81,169,75,169,82, 170,18,170,45,170,52,170,69,170,84,171,21,171,28,172,47,173,17,174,66,174,82,197,63, 201,38.
ESI-MS beregnet for Cs^tyOu: 1053,60. Funnet (m/z): 1054,9 (M + H)<+.>
Eksempel 63
Svntese av rVall3- aplidin fSVPLll
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL1, med utgangspunkt i SVPL2 (10 mg; 11 pmol) og Fl (10,5 mg; 57 pmol) ble 8 mg (69 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC (HyperPrep PEP 100 Cl 8, isokratisk ACN/H2O 85:15, strømningsmengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, Xr10,9 og 12,3 minutter).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,82-1,02 (m, 24 H), 1,13-1,38 (m, 9 H), 1,55 (m, 2 H), 1,67-1,81 (m, 4 H), 1,95-2,02 (m, 3 H), 2,10-2,17 (m, 2 H), 2,26-2,39 (m, 2 H), 2,56 (s, 3 H), 2,57 (s, 3 H), 2,58 (s, 3 H), 2,74-2,92 (m, 1 H), 3,10 (s, 3 H), 3,15 (s, 3 H), 3,20 (m, 1 H), 3,36 (dd, J, = 4,4, J2= 14,2, 1 H), 3,49-3,72 (m, 5 H), 3,79 (s, 3 H), 3,97-4,13 (m, 2 H), 4,38 (dd, J, = 4,6, J2= 14,2,1 H), 4,49 (m, 1 H), 4,60 (m, 1 H), 4,68-4,81 (m, 2 H), 5,11 (m, 1 H), 5,26-5,30 (m, 1 H), 5,33-5,40 (m, 1 H), 6,84 (d, J = 7,8,2 H), 7,08 (d, J = 8,3,2 H), 7,36-7,52 (m, 2 H), 7,48 (d, J = 9,6,1 H), 7,61 (d, J = 6,8,1 H).
ESI-MS beregnet for Cs^NgOis: 1052,62. Funnet (m/z): 1053,6 (M + H)<+.>
Eksempel 64
Syntese av rHiv13- risobutvrvll8- didemnin A ( SISHPL11
Til en oppløsning av SHPL2 (10 mg; 11,2 pmol) i DCM (200 pl) ved 0 °C under argonatmosfære ble det tilsatt DIPEA (3 pl, 16,8 pmol) og isobutyrylklorid (1,4 pl, 13,4 pmol). Etter 3 timer ved 22 °C ble DCM (3 ml) ble tilsatt, og blandingen ble vasket suksessivt med vandig HC1 (2 ml; 0,1 N), vandig NaHC03(2 ml, mettet) og saltoppløsning (2 ml), tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Etter rensing av residuet ved HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isokratisk ACN/H20 85:15, strømningsmengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, tR= 19 minutter) ble 10 mg (94 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff.
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,82-1,10 (24 H, m), 1,13-1,65 (18 H, m), 1,72-2,58 (6 H, m), 2,56 (s, 3 H), 2,89 (s, 3 H), 2,92 (m, 2 H), 3,13 (m, 2 H), 3,36 (dd, J, = 4,6, J2= 15,6,1 H), 3,54-3,73 (m, 3 H), 3,78 (s, 3 H), 3,91 (m, 2 H), 4,40 (m, 1 H), 4,60 (m, 1 H), 4,89 (m, 1 H), 4,99 (d, J = 5,3,1 H), 5,03 (m, 1 H), 5,20 (m, 1 H), 6,73 (d, J = 9,3,1 H), 6,84 (d, J = 9,6,2 H), 7,08 (d, J = 9,6, 2 H), 7,55 (d, J = 8,6,1 H), 7,82 (d, J = 11,1 H).
,<3>C-NMR (75 MHz, CDCI3) 8 11,78, 14,63,15,69, 17,92,19,03, 19,31, 19,66,
21,03,22,29,23,19,23,85, 24,71,25,14,27,27,28,22, 30,39, 30,51, 31,15, 33,80, 34,25,35,61, 38,85, 39,63, 46,98, 48,51, 53,29, 53,65, 55,49, 56,01, 56,35, 57,26, 66,07, 69,07, 70,94, 79,33, 114,31,130,08,130,60,158,84,168,79,169,75,170,34,170,68,171,36,171,73,174,02,179,84.
ESI-MS beregnet for C5oH8oN6Oi2: 956,58. Funnet (m/z): 957,5 (M + H)<+>.
Eksempel 65
Syntese av rVall3- risobutvrvll8- didemnin A ( 8ISVPL11
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av 8ISHPL1, med utgangspunkt i SVPL2 (20 mg; 22,6 pmol), ble 19 mg (88 %) av den ønskede forbindelse oppnådd etter rensing ved HPLC (HyperPrep PEP 100 Cl8, isokratisk ACN/H20 85:15, strømningsmengde:
7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, tR= 19 minutter).
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,81-1,02 (m, 24 H), 1,14-1-38 (m, 5 H), 1,15 (d, J = 6,6, 3 H), 1,19 (d, J = 6,6, 3 H), 1,38-1,80 (m, 7 H), 1,80-2,40 (m, 6 H), 2,57 (s, 3 H), 2,58-2,64 (m, 1 H), 2,85-2,92 (m, 1 H), 2,93 (s, 3 H), 3,16 (dd, J, = 10,5, J2= 14,4,1 H), 3,36 (dd, Ji = 4,5, J2= 14,4,1 H), 3,39 (bs, 1 H), 3,56 (dd, 1 H, J = 4,5,10,8), 3,59-3,72 (m, 3 H), 3,78 (s, 3 H), 4,01 (td, J, = 3,3, J2= 10,2, 1 H), 4,39-4,47 (m, 2 H), 4,58 (dd, J, = 5,7, J2= 7,5,1 H), 4,79 (t, J = 9,9,1 H), 5,03-5,14 (m, 2 H), 6,84 (d, J = 8,4,2 H), 7,04 (d, J = 7,8,1 H), 7,08 (d, J = 8,4, 1 H), 7,36 (d, J = 9,0,1 H), 7,45 (d, J = 10,2,1 H), 7,51 (d, J = 10,2,1 H).
,<3>C-NMR(75 MHz, CDC13) 8 180,24,175,10,173,18,171,14,170,72,170,42, 169,38,168,73, 158,87, 130,60, 130,02,114,33,71,31,70,50,66,11, 59,47, 57,42, 56,56, 55,51, 54,93, 53,84,48,83,47,13,41,94, 38,94, 35,67, 34,17,33,63, 31,32, 31,10,29,96, 28,32,27,25, 25,30,25,05,24,82,24,01,23,22,21,42,19,88,19,72,11,25,18,51,15,60,14,32,11,96.
ESI-MS beregnet for CsoHsit<y>On: 955,60. Funnet: 956,8 (M + H)<+.>
Eksempel 66
Syntese av rHivl3- rbutvrvl18- didemnin A ( 8BSHPL11
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av 8ISHPL1, med utgangspunkt i SHPL2 (10 mg; 11,2 pmol), ble 9 mg (84 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isokratisk ACN/H20 85:15, strømningsmengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, tR= 18,6 minutter).
'H-NMR(300 MHz, CDC13) 8 0,82-1,10 (m, 24 H), 1,11-1,72 (m, 18 H), 1,75-2,51 (m, 6 H), 2,56 (s, 3 H), 2,84 (s, 3 H), 2,92 (m, 2 H), 3,15 (m, 2 H), 3,35 (dd, J, = 5,0, J2= 15,6,1 H), 3,54-3,77 (m, 3 H), 3,79 (s, 3 H), 3,91 (m, 2 H), 4,40 (m, 1 H), 4,60 (m, 1 H), 4,89 (m, 1 H), 4,98 (d, J, = 6,0,1 H), 5,04 (m, 1 H), 5,20 (m, 1 H), 6,78 (d, J, = 9,6,1 H), 6,84 (d, J, = 9,6,2 H), 7,08 (d, J, = 9,6,2 H), 7,54 (d, J, = 9,6,1 H), 7,82 (d, J, = 10,6,1 H).
<I3>C-NMR(75 MHz, CDC13) 8 11,82, 14,15,14,55,15,72,17,96,18,67,19,01, 21,05, 22,37,23,13,23,84,24,71,25,14,27,30,28,21, 29,92, 30,38, 30,63, 33,78, 34,25, 35,69, 35,97, 38,85, 39,61, 46,98, 48,52, 53,27, 55,49, 55,99, 56,25, 57,27, 66,07, 69,07, 70,96, 79,40, 114,31,130,08,130,59,158,85,168,78,169,73,170,42,170,64,171,36,171,65,174,07,175,79.
ESI-MS beregnet for C5oH8oN6Oi2: 956,60. Funnet (m/z): 957,8 (M + H)<+.>
Eksempel 67
Syntese av rHivlVheksanovlf- didemnin A ( 8HSHPLn
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av 8ISHPL1, med utgangspunkt i SHPL2 (10 mg; 11,2 pmol), ble 9 mg (82 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isokratisk ACN/H20 85:15, strømningsmengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, tR= 27,8 minutter).
'H-NMR(300 MHz, CDC13) 8 0,82-1,10 (m, 24 H), 1,11-1,72 (m, 22 H), 1,80-2,51 (m, 6 H), 2,56 (s, 3 H), 2,84 (s, 3 H), 2,93 (m, 2 H), 3,14 (m, 2 H), 3,35 (dd, J, = 4,4, J2= 14,1,1 H), 3,54-3,76 (m, 3 H), 3,79 (s, 3 H), 3,91 (m, 2 H), 4,41 (m, 1 H), 4,60 (m, 1 H), 4,88 (m, 1 H), 4,98 (d, J, = 5,3, 1 H), 5,03 (m, 1 H), 5,19 (m, 1 H), 6,76 (d, J, = 8,7,1 H), 6,84 (d, J, = 8,7, 2 H), 7,08 (d, J, = 8,7,2 H), 7,51 (d, J, = 8,8,1 H), 7,81 (d, J, = 9,7,1 H).
<13>C-NMR (75 MHz, CDC13) 8 11,59,13,94,14,34,15,49,17,73,18,77, 20,81, 22,14,22,46,22,90, 23,60,24,47,24,69,24,90,27,08,27,97, 30,14, 30,40, 31,54, 33,53, 33,76, 34,02, 35,47, 38,62, 39,40,46,76,48,28, 53,04, 55,26, 55,78, 55,90, 57,04, 65,84, 68,82, 70,72, 79,17,114,07, 129,84,130,36,158,61, 168,54, 169,51, 170,15, 170,41,171,12, 171,42, 173,86, 175,75.
ESI-MS beregnet for C52H84N6Oi2: 984,61. Funnet (m/z): 985,8 (M + H)<+.>
Eksempel 68
Syntese av isobutvryl- Pro- OBn
Til en oppløsning av H-Pro-OBn.HCl (500 mg; 2,07 mmol) i DCM (10 ml) ved 0 °C ble NMM (680 pl, 6,21 mmol) tilsatt under argonatmosfære. Etter 10 minutter ble isobutyrylklorid (240 pl, 2,27 mmol) tilsatt, og reaksjonen ble tillatt å oppvarmes til 20 °C og ble omrørt i 5 timer. Blandingen ble filtrert, og filtratet ble vasket suksessivt med vandig HC1 (15 ml; 1 N), vandig NaHC03(10 ml, mettet) og saltoppløsning (10 ml), og deretter tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd 560 mg (98 %) av den ønskede forbindelse. Rf = 0,42 (heksan:EtOAc 1:1).
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 1,20-1,40 (2 d, 6 H), 1,90-2,35 (m, 4 H), 2,35 (q, 1 H), 3,40-3,80 (m, 2 H), 4,30 (m, 1 H), 5,20 (m, 2 H), 7,40 (m, 5 H).
Eksempel 69
Syntese av isobutvrvl- Pro- OH
Til en oppløsning av isobutyryl-Pro-OBn (430 mg; 1,56 mmol) i avgasset MeOH ble det tilsatt Pd/C (10 %) (43 mg; 10 vekt%), hvoretter det først ble foretatt overstrømning med argon og gjennombobling med hydrogen. Blandingen ble omrørt under H2i 14 timer og ble så avgasset og filtrert. Oppløsningen ble konsentrert, og residuet ble krystallisert med MTBE/- heksan, hvorved det ble oppnådd 140 mg (48 %) av den ønskede forbindelse som et hvitt, fast stoff.
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 1,20 (m, 6 H), 1,90-2,10 (m, 3 H), 2,50 (m, 1 H), 2,70 (q, 1 H), 3,40-3,70 (m, 2 H), 4,60 (dd, 1 H).
ESI-MS beregnet for C9H15NO3: 185,11. Funnet (m/z): 186,1 (M + H)<+>.
Eksempel 70
Syntese av rHivlVisobutvrvlf- aplidin ( 9ISHPL11
Til en oppløsning av isobutyryl-Pro-OH (10 mg; 54 pmol) i DCM (150 pl) ved 0 °C ble det tilsatt DIPCDI (5 pl, 32 pmol). Omrøring ble fortsatt i 60 minutter, hvoretter blandingen ble overført til en kolbe inneholdende SHPL2 (10 mg; 11,2 pmol) i DCM (150 pl). Etter 4 døgn ved 2-4 °C ble blandingen fortynnet med DCM (2 ml) og vasket suksessivt med vandig HC1 (1 ml; 0,1 N), vandig NaHC03(1 ml, mettet) og saltoppløsning (1 ml). Den organiske fase ble tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert. Residuet ble renset ved HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isokratisk ACN/H20 85:15, strømningsmengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, tR= 13 og 14 minutter), hvorved det ble oppnådd 9 mg 9ISHPL1 (72 %) som et hvitt, fast stoff. 1 H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,82-1,10 (m, 24 H), 1,21-1,50 (m, 18 H), 1,52-2,70 (m, 10 H), 2,56 (s, 3 H), 3,00-3,44 (m, 4 H), 3,08 (s, 3 H), 3,55-3,72 (m, 5 H), 3,78 (s, 3 H), 4,00 (m, 3 H), 4,26 (m, 1 H), 4,62 (m, 2 H), 4,86 (m, 1 H), 5,02 (d, J = 5,03,1 H), 5,30 (m, 2 H), 6,84 (d, J = 9,0,2 H), 7,07 (d, J = 9,0,2 H), 7,29 (d, J = 11,0,1 H), 7,80 (d, J = 9,0,1 H), 7,88 (d, J= 11,1 H).
<13>C-NMR(75 MHz, CDC13) 8 12,04,14,44,16,91, 17,94, 18,96, 19,03,19,15, 21,07,21,59, 23,87, 24,10,24,89,25,08,26,04, 27,54,28,21,28,87, 30,33, 31,61, 32,64, 33,77, 34,24, 36,19, 39,07, 39,33, 39,81,46,87, 47,52,48,45, 54,74, 55,49, 56,20, 57,08, 58,50, 66,41, 69,13, 71,48, 79,16,114,27,130,30,130,59,158,80,168,55,169,88,170,86,171,06,171,22, 173,63,174,92,176,19.
ESI-MS beregnet for C55H87N7O13: 1053,64. Funnet (m/z): 1054,6 (M + H)<+>.
Eksempel 71
Syntese av rVallVisobutvrvlf- aplidin ( 9ISVPL1)
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av 9ISHPL1, med utgangspunkt i SVPL2 (10 mg; 11,2 pmol), ble 9 mg (77 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isokratisk ACN/H20 85:15, strømningsmengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, tR= 15,3 minutter).
'H-NMR (300 MHz, CDCI3): 8 0,82-1,01 (m, 24 H), 1,14-1,37 (m, 12 H), 1,148-2,35 (m, 8 H), 2,55 (s, 3 H), 2,57-2,68 (m, 1 H), 2,77-2,83 (m, 1 H), 3,12 (s, 3 H), 3,19-3,23 (m, 1 H), 3,35-3,41 (m, 2 H), 3,52-3,56 (m, 1 H), 3,58-3,70 (m, 3 H), 3,78 (s, 3 H), 4,03-4,13 (m, 1 H), 4,33-4,35 (m, 1 H), 4,44-4,48 (m, 1 H), 4,55-4,66 (m, 2 H), 4,70-4,83 (m, 1 H), 5,35-5,39 (m, 2 H), 6,82 (d, J = 8,4, 2 H), 7,06 (d, J = 8,4,2 H), 7,25 (bs, 2 H), 7,37 (d, 10,5,1 H), 7,46 (d, J = 8,7,1 H), 7,60 (d, J = 9,3,1 H), 8,07 (bs, 1 H).
<13>C-NMR(75 MHz, CDCI3) 8 12,10, 14,44, 16,84, 18,63, 18,95, 19,92, 21,31, 21,61,23,91,24,05,24,86,25,00,25,30,26,06,27,41,28,33,28,93, 30,00, 31,76, 32,65, 33,59, 31,16, 36,21, 39,17,41,71,42,19,47,08,47,57,48,88, 54,37, 54,65, 55,50, 56,15, 57,33, 58,70, 59,33,66,45, 70,92, 71,54,114,29,130,28,130,59,158,82,168,41,170,08, 170,52,170,69, 171,03, 172,65,173,80,175,68,176,42.
ESI-MS beregnet for CssHggNgO^: 1052,65. Funnet (m/z): 1053,8 (M + H)<+>.
Eksempel 72
Svntese av Z- NVa- Pro- OMe
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av F2, med utgangspunkt i ZNVa-OH (261 mg; 1,04 mmol), H-Pro-OMc.HCl (156,6 mg; 0,94 mmol), ble 315 mg (87 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som en fargeløs olje etter rensing ved IX på silika (heksan-EtOAc, gradient fra 3:1 til 1:1). Rf = 0,42 (heksan-EtOAc 1:1).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,97 (t, J = 6,9, 2 H), 1,44 (seks, J = 7,5, 2 H), 1,53-1,65 (m, 1 H), 1,68-1,77 (m, 1 H), 1,82-2,09 (m, 3 H), 2,17-2,24 (m, 1 H), 3,43-3,80 (m, 2 H), 3,71 (s, 3 H), 4,45-4,55 (m, 2 H), 5,07 (s, 2 H), 5,51 (d, J = 8,4,1 H), 7,32-7,35 (m, 5 H).
Eksempel 73
Syntese av NVa- Pro- OH
Til en oppløsning av Z-NVa-Pro-OMe (36 mg; 99 pmol) i en blanding av THF og MeOH (130 pl:130 pl) ved 0 °C ble vandig LiOH (130 pl, 15 vekt%) tilsatt. Etter 6 timers omrøring ble reaksjonsblandingen fordelt mellom H2O (3 ml) og dietyleter (3x2 ml). Den organiske fase ble så ekstrahert med NaHCC«3 (3x2 ml). De sammenslåtte vandige faser ble nøytralisert (pH = 5) med vandig HC1 (0,1 N) og fordelt med Et20 (3x3 ml). Den organiske fase ble tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert, hvorved det ble oppnådd 36 mg av den ønskede forbindelse (kvantitativt utbytte) som en fargeløs olje.
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,96 (t, J = 6,9,2 H), 1,41 (seks, J = 7,4,2 H), 1,53-1,65-1,77 (m, 2 H), 1,82-2,10 (m, 3 H), 2,17-2,24 (m, 1 H), 3,52-3,81 (m, 2 H), 4,45-4,58 (m, 2 H), 5,07 (bs, 2 H), 5,81 (d, J = 8,4,1 H), 7,30-7,35 (m, 5 H), 7,41 (bs, 1 H).
ESI-MS beregnet for QgH^Os: 348,17. Funnet (m/z): 349,2 (M + H)<+>.
Eksempel 74
Svntese av rZ- NVa- Pro19- aplidin ( 9NVSAPL2^
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL1, med utgangspunkt i SAPL2 (18 mg; 19 pmol) og Z-NVa-Pro-OH (34 mg; 97 pmol), ble 16 mg av den ønskede forbindelse (66 %) oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC (HyperPrep PEP 100 Cl8, isokratisk ACN/H2O 85:15 (strømningsmengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, tR= 29 minutter).
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,84-0,96 (m, 27 H), 1,12-1,85 (m, 19 H), 2,00-2,25 (m, 7 H), 2,30-2,40 (m, 1 H), 2,54 (s, 3 H), 2,62 (dd, J, = 10,5, J2= 17,7,1 H), 2,93 (d, 4,2, 1 H), 3,14 (s, 3 H), 3,14-3,20 (m, 1 H), 3,28-3,34 (m, 2 H), 3,50-3,67 (m, 4 H), 3,77-3,80 (m, 1 H), 3,79 (s, 3 H), 3,82-3,91 (m, 1 H), 4,00-4,17 (m, 2 H), 4,27 (dd, J, = 6,3, J2= 13,2, 1 H), 4,43-4,51 (m, 2 H), 4,58-4,63 (m, 1 H), 4,69-4,75 (m, 1 H), 4,77-4,82 (m, 1 H), 5,07 (d, 1 H, J = 12,9, 2 H), 5,13 (d, J = 12,9,1 H), 5,32-5,41 (m, 2 H), 6,07 (d, J = 8,7,1 H), 6,83 (d, J = 8,4, 2 H), 7,06 (d, J = 8,4,2 H), 7,17 (d, J = 9,9,1 H), 7,32 (m, 5 H), 7,83 (d, J = 9,0,1 H).
,<3>C-NMR(75 MHz, CDCI3) 8 11,68,13,74,14,56,15,24,16,39,16,85, 18,61, 20,94,21,26,23,34, 23,70,24,76,24,90,25,02,26,00, 27,17,27,81,28,54,31,29, 31,40, 33,30, 33,85, 33,86, 36,19, 38,62, 38,84,41,31,46,91,47,21,49,38,49,49, 52,50, 54,96, 55,24, 55,25, 56,50, 57,17, 57,96, 62,53, 66,40, 67,93, 70,64, 81,37-114,04, 127,89, 127,77, 128,32,129,97, 130,29,136,84,156,72,158,55,168,48,169,36,169,58,170,52,171,27,171,71,172,54,173,22, 205,08.
ESI-MS beregnet for C67HiooN8Oi6:127,73. Funnet (m/z): 1273,7 (M + H)<+>.
Eksempel 75
Svntese av rHivl3- rZ- NVa- Pro19- aplidin ( 9NVSHPL2^
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL1, med utgangspunkt i SHPL2 (10 mg; 11,2 pmol) og Z-NVa-Pro-OH (20 mg; 56 pmol), ble 8 mg av den ønskede forbindelse (60 %) oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isokratisk ACN/H20 85:15, strømningsmengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, tR= 26,7 minutter).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,82-1,10 (m, 24 H), 1,12-1,80 (m, 22 H), 1,82-2,35 (m, 6 H), 2,42 (m, 1 H), 2,56 (s, 3 H), 2,96-3,38 (m, 4 H), 3,10 (s, 3 H), 3,48-3,72 (m, 5 H), 3,78 (s, 3 H), 3,88 (m, 1 H), 4,01 (m, 1 H), 4,18 (m, 1 H), 4,47 (m, 1 H), 4,68 (m, 2 H), 4,87 (m, 1 H), 5,02 (d, J, = 5,3,1 H), 5,08 (m, 2 H), 5,28 (m, 1 H), 5,42 (m, 1 H), 6,10 (d, J = 8,3,1 H), 6,84 (d, J = 8,3,2 H), 7,07 (d, J = 8,3, 2 H), 7,31 (m, 6 H), 7,72 (d, J = 4,3,1 H), 7,78 (d, J = 8,7, 1H).
<13>C-NMR (75 MHz, CDC13) 8 12,06,13,88,14,22,16,85,17,76,18,89,19,18, 21,12, 21,47, 23,72, 23,98, 25,08, 26,25, 27,57, 28,15, 28,79, 30,32, 31,61, 33,45, 33,72, 34,07, 35,95, 38,92, 39,59, 39,90,46,87,47,44,48,46, 52,76, 55,21, 55,49, 56,77, 57,17, 58,37, 66,41, 66,65, 69,22, 71,14, 79,07, 114,24, 127,87,128,00, 128,56, 130,25, 130,55, 157,00, 158,79, 168,82,169,86,170,36,170,58,170,77,171,30,171,86,173,28,174,94.
ESI-MS beregnet for C^HgeNgOis: 1216,7. Funnet (m/z): 1217,5 (M + H)<+.>
Eksempel 76
Svntese av rNVa- Prol9- aplidin ( 9NVSAPLn
En avgasset blanding av 9NVSAPL2 (10 mg; 7,8 pmol) og Pd/C (10 %, 5 mg) i IPA:H20 (0,2 ml:0,l ml) ble mettet (og holdt ved 1 atm) med hydrogengass under omrøring i 14 timer. Deretter ble blandingen filtrert (teflon 0,45 pm) og konsentrert under vakuum, hvorved det ble oppnådd 8,8 mg av den ønskede forbindelse (kvantitativt utbytte) som et hvitt, fast stoff.
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,85-0,95 (m, 27 H), 1,18-1,51 (m, 18 H), 1,50-2,45 (m, 7 H), 2,59-2,83 (m, 1 H), 2,57 (s, 3 H), 2,57-2,80 (m, 3 H), 2,81-2,95 (m, 1 H), 3,14 (s, 3 H), 3,15-3,40 (m, 3 H), 3,52-3,79 (m, 4 H), 3,79 (s, 3 H), 4,45-4,52 (m, 1 H), 4,61-4,65 (m, 1 H), 4,70-4,85 (m, 2 H), 5,17 (d, J = 3,3,1 H), 5,36-5,39 (m, 2 H), 6,84 (d, J = 8,1,2 H), 7,86 (d, J = 8,7, 2 H), 7,19 (d, J = 10,2,1 H), 7,82 (d, J = 9,0,1 H), 7,80-7,85 (m, 1 H).
ESI-MS beregnet for C59H4oN80,4: 1138,69. Funnet (m/z): 1139,7 [(M + H)]+.
Eksempel 77
Svntese av rHivl3- rNVa- Prol9- aplidin ( 9NVSHPLn
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av 9NVSAPL1, med utgangspunkt i 9NVSHPL2 (10 mg; 8,2 pmol), ble det oppnådd 8 mg av den ønskede forbindelse (kvantitativt utbytte) som et hvitt, fast stoff.
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,82-1,10 (m, 30 H), 1,12-1,85 (m, 22 H), 1,92-2,35 (m, 6 H), 2,42 (m, 1 H), 2,56 (s, 3 H), 3,10-3,45 (m, 4 H), 3,10 (s, 3 H), 3,50-3,70 (m, 5 H), 3,78 (s, 3 H), 3,82 (m, 1 H), 4,01 (m, 1 H), 4,26 (m, 1 H), 4,65 (m, 1 H), 4,64 (m, 1 H), 4,88 (m, 1 H), 5,02 (d, J = 5,3,1 H), 5,32 (m, 2 H), 6,84 (d, J = 8,3, 2 H), 7,07 (d, J = 8,3, 2 H), 7,38 (d, J = 8,7, 1 H), 7,60 (d, J = 4,3, 1 H), 7,80 (d, J = 9,3,1 H).
<13>C-NMR(75 MHz, CDC13) 8 12,03,14,13,14,30,16,80,17,81,18,72,19,15, 21,09,21,55,23,73,23,96,25,07, 26,16,27,55, 28,17,28,72, 29,91, 30,33, 31,52, 33,80, 34,17, 36,00, 38,94,39,51, 39,84,46,88,47,51,48,45, 55,01, 55,49, 56,91, 57,15, 58,10, 66,37,69,17, 71,10, 79,12,114,29,130,21,130,57,158,82,163,66,168,91,169,86,170,38,170,75,170,82, 171,30,173,22,174,79.
ESI-MS beregnet for CseHwNgOu: 1082,66. Funnet (m/z): 1083,7 (M + H)<+.>
Eksempel 78
Svntese av rHivl3- rL- Lac( OTBDMSll9- aplidin T9LSHPL2( L>) 1
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL1, med utgangspunkt i SHPL2 (10 mg; 11,2 pmol) og (L)-Lac(OTBDMS)-Pro-OH (17 mg; 56 pmol), ble 9 mg av den ønskede forbindelse (68 %) oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC (HyperPrep PEP 100 Cl8, gradient ACN/H20 85:15-100:0 i 10 minutter, strømningsmengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, tR= 30,1 minutter).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,08 (s, 3 H), 0,10 (s, 3 H), 0,82-1,10 (m, 24 H), 1,11-1,72 (m, 18 H), 1,75-2,51 (m, 6 H), 2,41 (m, 1 H), 2,56 (s, 3 H), 3,00-3,40 (m, 5 H), 3,11 (s, 3 H), 3,53-3,82 (m, 3 H), 3,79 (s, 3 H), 3,91 (m, 2 H), 4,02 (m, 1 H), 4,27 (m, 1 H), 4,50 (m, 1 H), 4,63 (m, 2 H), 4,87 (m, 1 H), 5,01 (d, J = 4,8,1 H), 5,27 (m, 2 H), 6,84 (d, J = 8,7,2 H), 7,07 (d, J = 8,7, 2 H), 7,29 (d, J = 9,7,1 H), 7,63 (d, J = 5,8, l H), 7,88 (d, J = 9,7,1 H).
<13>C-NMR (75 MHz, CDC13) 8 -4,26, -4,12, 12,04, 14,40,16,91, 17,97, 19,14, 20,60, 21,11,21,66, 23,82,24,11,24,96,25,08,26,11,26,37,27,53,28,18, 28,37, 30,33,31,69, 33,75, 34,19,36,23, 39,00, 39,36,39,81,46,87,47,64,48,45, 54,91, 55,37, 55,48, 56,81,57,08, 58,37, 66,38, 69,14, 69,89, 71,42, 79,19, 82,66,114,23,130,36,130,59,158,77,168,43,469,86, 170,72,171,01, 171,21,172,03,173,62,174,91.
ESI-MS beregnet for C6oH99N7Oi4Si: 1169,7. Funnet (m/z): 1170,9 (M + H)<+.>
Eksempel 79
Svntese av fHivl3- rD- Lac( OTBDMSll9- aplidin r9LSHPL2( P^ 1
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL1, med utgangspunkt i SHPL2 (10 mg; 11,2 pmol) og (D)-Lac(OTBDMS)-Pro-OH (17 mg; 56 pmol), ble 9 mg av den ønskede forbindelse (68 %) oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC (HyperPrep PEP 100 C 18, gradient ACN/H20 85:15-100:0 i 10 minutter, strømningsmengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, tR= 30,4 minutter).
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,03 (m, 3 H), 0,06 (m, 3 H) 0,87 (s, 9 H), 0,82-1,10 (m, 24 H), 1,11-1,72 (m, 18 H), 1,75-2,30 (m, 6 H), 2,41 (m, 1 H), 2,56 (s, 3 H), 3,00-3,40 (m, 5 H), 3,06 (s, 3 H), 3,56 (m, 1 H), 3,65 (m, 2 H), 3,78 (s, 3 H), 3,90 (m, 1 H), 4,01 (m, 1 H), 4,17 (m, 1 H), 4,25 (m, 1 H), 4,39 (m, 1 H), 4,61 (m, 2 H), 4,86 (m, 1 H), 5,00 (d, J = 4,8, 1 H), 5,25 (m, 2 H), 6,84 (d, J = 8,3,2 H), 7,07 (d, J = 8,3,2 H), 7,29 (d, J = 9,7,1 H), 7,74 (d, J = 5,3, 1 H), 7,87 (d, J = 9,7,1 H).
<13>C-NMR (75 MHz, CDC13) 8 -4,87, -4,84, 12,04, 14,38, 16,89, 17,94, 19,14,
20,24,21,08,21,60,23,85,24,12,24,90,25,06,25,13,26,01,26,53,27,53,27,83,28,20, 30,33, 31,51, 33,76, 34,20, 36,16, 38,99, 39,35,39,82,46,87,47,02,48,46, 54,79, 55,42, 55,48, 57,08, 57,18,58,28, 66,39, 69,11, 71,43, 72,61,79,18,114,25,130,29,130,59,158,79,168,45,169,86, 170,77,170,81,170,97,171,20,172,53,173,67,174,84.
ESI-MS beregnet for C6oH99N70,4Si: 1169,7. Funnet (m/z): 1170,8 (M + H)<+.>
Eksempel 80
Svntese av rVall3- rL- Lac( OTBDMSll9- aplidin r9LSVPL2( L) 1
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL1, med utgangspunkt i SVPL2 (10 mg; 11,2 pmol) og (L)-Lac(OTBDMS)-Pro-OH (17 mg; 56 pmol), ble 9 mg av den ønskede forbindelse (68 %) oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC (HyperPrep PEP 100 C 18, isokratisk ACN/H20 85:15, strømningsmengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, tR= 17,8 minutter).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,14 (s, 6 H), 0,71-1,06 (m, 27 H), 1,10-1,42 (m, 10 H), 1,43-1,84 (m, 8 H), 1,85-2,40 (m, 11 H), 2,57 (s, 3 H), 2,80 (d, J = 14,7,1 H), 3,15 (s, 3 H), 3,15-3,23 (m, 1 H), 3,33-3,42 (m, 2 H), 3,54 (dd, J, = 4,2, J2= 10,8,1 H), 3,58-3,69 (m, 3 H), 3,79 (s, 3 H), 3,88-3,90 (m, 1 H), 4,05-4,12 (bt, 1 H), 4,32 (bs, 1 H), 4,43-4,68 (m, 4 H), 4,77 (t, J = 10,5,1 H), 5,31-5,35 (m, 2 H), 6,83 (d, J = 8,4, 2 H), 7,08 (d, J = 8,7, 2 H), 7,39 (d, J = 9,9,1 H), 7,45 (d, J = 9,0, 1 H), 7,60 (d, J = 10,5, 1 H), 7,83 (d, J = 4,5,1 H).
<13>C-NMR (75 MHz, CDC13) 8-4,67, -4,49,11,84,14,13,16,67,18,19,18,41, 19,68,20,48, 21,15,21,40,23,61,23,92,24,72,24,80, 25,06,25,88,26,24, 27,17,28,04,28,13, 29,78, 31,57, 33,33, 33,81, 35,99, 38,84,41,56, 41,95,46,83, 47,52, 48,68, 54,09, 54,64, 55,26, 56,63,57,13,58,36, 59,12,66,20, 70,10,70,57,71,27, 77,20,114,01,130,13,130,36,158,55, 168,09,169,76,170,07,170,48,170,77,172,21,172,33,173,58,175,45.
ESI-MS beregnet for CspH^NgOu: 1168,72. Funnet (m/z): 1169,8 (M + H)<+>.
Eksempel 81
Svntese av [ Hivl3- rL- Lacl9- aplidin røLSHPLlCLYl: Tamandarin A
Til en oppløsning av 9LSHPL2(L) (16 mg; 14 pmol) i THF (500 pml, vannfritt) ved 0 °C under argonatmosfære ble det tilsatt TBAF (50 pl, 1 M i THF). Etter 1 time ved 22 °C ble blandingen konsentrert i vakuum, og råproduktet ble renset ved flash-LC (silikagel, gradient DCM:MeOH fra 1 % til 5 %), hvorved det ble oppnådd 813 mg (88 %) av den ønskede forbindelse som et hvitt, fast stoff.
Eksperimentelle data er blitt publisert av Fenical, W. et al., J. Org. Chem., 2000, 65, 782-792.
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,82-0,96 (m, 18 H), 1,02 (d, J = 3,4, 3 H), 1,04 (d, J = 3,4, 3 H), 1,14-2,28 (m, 14 H), 1,24 (s, 3 H), 1,34 (d, J = 6,8,3 H), 1,43 (d, J = 6,8, 3 H), 2,44 (dd, Ji = 7,8, h = 17,1,1 H), 2,58 (s, 3 H), 3,00 (bs, 1 H), 3,10 (s, 3 H), 3,14-3,31 (m, 2 H), 3,37-3,43 (m, 2 H), 3,56-3,72 (m, 5 H), 3,79 (s, 3 H), 3,90 (t, J = 7,8, 1 H), 4,02 (dt, J, = 3,4, J2= 9,8, 1 H), 4,25 (d, J = 3,9,1 H), 4,30 (t, J = 6,8,1 H), 4,37 (dd, Ji = 7,3, J2= 8,3,1 H), 4,65 (m, 1 H), 4,71 (t, J = 7,4,1 H), 4,87 (t, J = 11,2,1 H), 5,03 (d, J = 4,9,1 H), 5,29 (dd, Ji = 3,4, J2= 11,7,1 H), 5,42 (m, 1 H), 6,83 (d, J = 8,3, 2 H), 7,07 (d, J = 8,3, 2 H), 7,34 (d, J = 9,8, 1 H), 7,48 (d, J = 5,4,1 H), 7,76 (d, J = 9,8,1 H).
ESI-MS beregnet for Cs^NvOw: 1055,6. Funnet: 1056,7 (M + H)<+.>
Eksempel 82
Svntese av rHiv13- rD- Lac19- aplidin røLSHPLKDYI
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av 9LSHPL1(L), med utgangspunkt i 9LSHPL2(D) (20 mg; 17 pmol) og TBAF (50 pl, 1 M i THF), ble det oppnådd 14 mg (78 %) av den ønskede forbindelse som et hvitt, fast stoff etter rensing ved flash-LC (silikagel, gradient DCM:MeOH fra 1 % til 5 %).
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,78-1,08 (m, 18 H), 1,02 (d, J = 3,9, 3 H), 1,04 (d, J = 3,4, 3 H), 1,10-2,36 (m, 14 H), 1,20 (d, J = 6,3, 3 H), 1,34 (d, J = 6,3, 3 H), 1,37 (d, J = 6,3, 3 H), 2,38-2,50 (dd, Ji = 7,8, J2= 17,5,1 H), 2,56 (s, 3 H), 3,10 (s, 3 H), 3,13-3,20 (m, 1 H), 3,22-3,28 (m, 1 H), 3,37-3,42 (dd, J, = 3,9, J2= 4,3,1 H), 4,61-4,68 (m, 3 H), 3,69-3,76 (m, 3 H), 3,77 (m, 1 H), 3,78 (s, 3 H), 3,90 (t, J = 7,8, 1 H), 3,97-4,07 (m, 1 H), 4,26 (m, 1 H), 4,41 (q, J = 6,3, 1 H), 4,63 (m, 1 H), 4,71 (m, 1 H), 4,86 (t, J = 10,7,1 H), 5,01 (d, J = 4,8,1 H), 5,21-5,37 (m, 2 H), 6,83 (d, J = 8,3,2 H), 7,06 (d, J = 8,3,2 H), 7,41 (m, 2 H), 7,77 (d, J = 9,2, 1 H).
ESI-MS beregnet for C54H85N7O14: 1055,62. Funnet: 1056,6 (M + H)<+.>
Eksempel 83
Svntese av rVall3- rL- Lacl9- aplidin røLSVPLKUl
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av 9LSHPL1, med utgangspunkt i 9LSVPL2 (5 mg; 4,3 pmol), ble det oppnådd 4 mg (88 %) av den ønskede forbindelse som et hvitt, fast stoff etter rensing ved flash-LC (silikagel, gradient DCM:MeOH fra 1 % til 5 %). 1 H-NMR (300 MHz, CDC13) 5 0,82-1,02 (m, 18 H), 1,16-1,42 (m, 4 H), 1,32 (d, J = 3,0, 3 H), 1,40 (d, J = 6,6, 3 H), 1,56-1,83 (m, 8 H), 1,95-2,34 (m, 11 H), 2,58 (s, 3 H), 2,84 (d, J = 14,7,1 H), 3,15 (s, 3 H), 3,15-3,23 (m, 1 H), 3,36-3,42 (m, 1 H), 3,55 (dd, Ji = 9,0, J2= 10,5, 2 H), 3,64-3,66 (m, 3 H), 3,95 (dd, J, = 3,3, J2= 9,9,1 H), 4,08 (td, J, = 7,5, J2= 17,1,1 H), 4,32 (bs, 1 H), 4,41 (dd, J, = 6,6, J2= 9,9,1 H), 4,48 (dd, J, = 5,1, J2= 10,5,1 H), 4,61 (dd, Ji = 6,0, J2= 6,6,1 H), 4,69-4,80 (m, 2 H), 5,29-5,35 (m, 1 H), 5,57 (m, 1 H), 6,84 (d, J = 8,1,2 H), 7,08 (d, J = 8,7,2 H), 7,37 (d, J = 3,9, 1 H), 7,40 (d, J = 5,4,1 H), 7,60 (d, J = 10,8,1 H), 7,72 (d, J = 3,9,1 H).
ESI-MS beregnet for Cs^NgO^: 1054,63. Funnet: 1055,8 (M + H)<+>.
Svntese av spiro[" 4. 4] nonanenheten
Eksempel 84
Svntese av N- rr2RV2- allvl- N-( tert.- butoksvkarbonvnprolvl]- D- leucin ( 91
Til en kjølt (0 °C) oppløsning av 8 (1,53 g; 6 mmol) i vannfritt DCM (33 ml) under argonatmosfære ble det tilsatt HO At (980 mg; 7,2 mmol), D-Leu-OBn.pTsOH (2,65 g; 12 mmol), NMM (1,21 g; 12 mmol) og DCC (1,48 g; 7,2 mmol). Blandingen ble omrørt i 2 timer ved 0 °C og deretter i 12 timer ved romtemperatur. Ytterligere mengder D-Leu-OBn.pTsOH (0,66 g; 3 mmol) og NMM (0,30 g; 3 mmol) ble tilsatt, og blandingen ble omrørt i ytterligere 3 timer. Blandingen ble filtrert, og løsemidlet ble avdampet i vakuum. Residuet ble oppløst i EtOAc (30 ml) og ble vasket suksessivt med NaHC03(2 x 25 ml, mettet), sitronsyre (2 x 25 ml; 10 %) og saltoppløsning (25 ml). Den organiske oppløsning ble tørket (Na2S04) og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved LC på silika (heksan-EtOAc, 6:1), hvorved det ble oppnådd 2,63 g 9 (96 %) som en fargeløs olje. [ a] f} 12,4° (c 1, MeOH). HPLC [kolonne Bondapack Ci8(Waters), 10 m, 3,9 x 300 mm, strømningsmengde: 1 ml/minutt, ved 214 nm, elueringsmiddel ACN/0,05 % TFA (40:60)], tR= 9,08 minutter].
'H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) 8 0,86 (m, 6 H), 1,37 (s, 9 H), 1,55-1,72 (m, 5 H), 2,00 (m, 2 H), 2,64 (m, 1 H), 2,86 (m, 1 H), 3,15 (m, 1 H), 3,55 (m, 1 H), 4,41 (m, 1 H), 5,05-5,11 (m, 4 H), 5,63-5,72 (m, 1 H), 7,28-7,35 (m, 5 H).
<13>C-MNR (75 MHz, aceton-d6) 8 21,6,22,8,24,6, 28,3, 34,7,38,2,41,3,49,38, 51,0, 66,9,69,7, 80,1,119,1,128,3,132,7,153,9,172,8.
Ref. Syntese av 8: a) Seebach, D. et al., J. Am. Chem. Soc., 1983, 105, 5390-5398.
b) Genin, M.J. et al., J. Org. Chem., 1993, 58,2334-2337.
Eksempel 85
Svntese av ( 5RARS )-\-( tert.- butoksvkarbonvn- 7- r( ligVl- benzvloksvkarbonvl- 3- metvlbutvll- 8-hvdroksy- 6- okso- 1. 7- diazaspiror4. 4] nonan ( 10)
Til en oppløsning av 9 (1,56 g; 3,42 mmol) i MeOH/H20 (2:1,108 ml) under argonatmosfære ble en oppløsning av Os04(2,5 vekt%; 2,9 ml) i tert.-butanol tilsatt. Det ble foretatt omrøring i 10 minutter, og NaI04(2,195 g; 10,3 mmol) ble tilsatt. Etter omrøring i 24 timer ble reaksjonsblandingen fortynnet med H20 (100 ml) og ekstrahert med EtOAc (3 x 50 ml). De sammenslåtte organiske ekstrakter ble vasket med saltoppløsning (50 ml), tørket (Na2S04) og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved LC på silika (heksan-EtOAc, gradient fra 80:20 til 0:100 %), hvorved det ble oppnådd diastereomerer 10a og 10b (sammen: 1,17 g; 76 %) som et hvitt, fast stoff.
10a: HPLC [kolonne Novapack Ci8(Waters), 3,9 x 150 mm,
= 1 ml/minutt, X = 214 nm, elueringsmiddel: CH3CN/0,05 % TFA (40/60)], tR= 14,45 minutter; smp. 140-141 °C. [ a]™ -4° (c 1, MeOH).
'H-NMR (300 MHz, aceton-d6) 8 0,90 (m, 6 H), 1,29 (s, 9 H), 1,64-2,30 (m, 9 H), 2,68 (dd, 1 H, J, = 6, J2= 13,1 H), 3,37 (m, 2 H), 4,51 (dd, 1 H), 5,13 (d, J = 15, 2 H), 5,79 (t, J = 5, 2 H), 7,40 (m, 5 H).
<13>C-MNR (75 MHz, aceton-d6) 8 21,8, 23,8, 24,1, 24,9, 28,5, 39,6, 40,8, 41,5, 48,5, 66,8, 79,4, 79,8, 81,2,129,1,129,3,128,6,171,7,172,0.
ESI-MS: beregnet for C25H36N206: 460,26. Funnet (m/z): 483,4 (M + Na)<+>.
10b: HPLC [kolonne Novapack Cig (Waters), 3,9 x 150 mm, <|> = 1 ml/minutt, X = 214 nm, elueringsmiddel: CH3CN/0,05 % TFA (40/60)], tR= 18,75 minutter; smp. 134-135°C.
[a]<*>+26 (c 1,2, MeOH).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,90 (6 H, m), 1,40 (9 H, s), 1,50-2,60 (9 H, m), 3,40 (2 H, m), 4,20-5,40 (5 H, m), 7,40 (5 H, m).
<13>C-MNR (75 MHz, aceton-d6) 8 21,3, 23,2, 24,1, 24,9, 28,3, 38,9, 40,2, 42,5, 47,9, 53,2, 66,8,77,5, 79,4, 80,6,129,1,171,2,174,1.
ESI-MS beregnet for C25H36N206: 460,26. Funnet (m/z): 483,5 (M + Na)<+>.
Eksempel 86
Svntese av ( 5i?)- 7-[( li?)- l- benzvloksvkarbonvl- 3- metvlbutvn- 6- okso- 1. 7- diazaspiro[ 4. 4] nonan som trifluoracetatsalt ( 11)
Til en oppløsning av 10 (430 mg; 0,93 mmol) i TFA (10 ml) ble NaBFL, (106 mg; 2,8 mmol) tilsatt. Blandingen ble omrørt i 2 timer, hvoretter reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk. Residuet ble fordelt mellom H20 (5 ml) og DCM (20 ml). Den organiske fase ble tørket (Na2S04) og konsentrert i vakuum, hvorved det ble oppnådd 318 mg av forbindelse 11 (kvantitativt utbytte) som en oransjefarget olje. [»]„ +15 (c 1, MeOH).
'H-NMR (300 MHz, aceton-d6) 0,91 (m, 6 H), 1,50 (m, 1 H), 1,66-1,94 (m, 2 H), 2,11-2,72 (m, 6 H), 3,48-3,72 (m, 4 H), 4,74 (dd, Ji = 6, J2= 15,1 H), 5,18 (s, 2 H), 7,37 (m, 5 H).
,<3>C-MNR (75 MHz, aceton-d6) 8 21,3, 23,2, 23,9, 25,5, 30,2, 34,6, 38,0,42,2, 46,6, 53,9, 67,6, 69,6,129,3,161,1,161,6,170,9,172,6.
ESI-MS beregnet for C20H28N2O3: 344,21. Funnet (m/z): 345,3 (M + H)<+>.
Eksempel 87
Svntese av ( 5R )- 1 -( tert- butoksvkarbonvlV 7- IY1 R )- 1 - karboksv- 3- metvlbutvl - 6- okso- 1. 7-diazaspiro[ 4. 4] nonan ( 121
Til en oppløsning av 11 (150 mg; 0,44 mmol) i ACN (5 ml) ble tetrametyl-ammoniumhydroksidpentahydrat (158 mg; 0,87 mmol) og B0C2O (144 mg; 0,66 mmol) tilsatt under omrøring. Etter 6 timer ble ytterligere mengder TMAH, 5 H2O (158 mg) og Boc20 (192 mg) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 2 døgn, hvoretter den ble fordelt mellom H20 (10 ml) og DCM (25 ml). Den vandige fase ble frysetørket og renset ved bruk av LC på silika (DCM-MeOH, gradient fra 92:8 til 60:40), hvorved det ble oppnådd 100 mg av forbindelse 12 (64 %) som et hvitt, fast stoff.
Eksempel 88
Svntese av ( 5i?)- l-( isobutyrvl)- 7-[( l/ ?)- l- benzvloksvkarbonvl- 3- metvlbutvl]- 6- okso- lJ-diazaspiro[ 4. 4] nonan ( 13)
Til en oppløsning av 11 (169 mg; 0,49 mmol) i vannfritt DCM (10 ml) ved 0 °C under argonatmosfære ble det tilsatt TEA (199 mg; 1,96 mmol), DMAP (6 mg; 0,049 mmol) og tildryppet isobutyrylklorid (104 mg; 0,98 mmol). Reaksjonsblandingen ble tillatt å oppvarmes til romtemperatur og ble omrørt i 24 timer. Råproduktet ble fordelt mellom H2O (10 ml) og DCM (10 ml). Den organiske fase ble vasket med saltoppløsning (10 ml), tørket (Na2SC«4) og konsentrert i vakuum. 150 mg ren forbindelse 13 (74 %) i form av et hvitt, fast stoff ble oppnådd etter LC på silika (heksan-EtOAc, gradient fra 60:40 til 0:100). HPLC [kolonne Novapack Cig (Waters), 3,9 x 150 mm, <t>= 1 ml/minutt, X = 214 nm, elueringsmiddel: CH3CN/0,05 % TFA (50/50)], tR= 4,50 minutter; smp. 87 °C. [ a] f} + 9, 6 (c 1,4, MeOH).
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,90 (2 d, J = 7, 6 H), 1,09-1,12 (2 d, 6 H), 1,37 (septuplett, J = 6,1 H), 1,61-2,10 (m, 7 H), 2,64 (m, 2 H), 3,14 (dd, Ji = 9, J2= 17,1 H), 3,64 (m, 3 H), 4,85 (dd, J, = 5, J2= 10,1 H), 5,14 (d, J = 6,2 H), 7,32 (m, 5 H).
<13>C-NMR (300 MHz, CDC13) 8 18,6, 18,7, 21,2, 23,1, 24,0, 24,8, 29,5, 32,5, 35,7, 37,6,40,5,47,8, 52,7,66,7, 76,3,170,8,174,3,174,9.
ESI-MS beregnet for C24H34N2O4: 414,25. Funnet (m/z): 415,4 (M + H)<+.>
Eksempel 89
Svntese av ( 5j?Vl-( pvruvvl)- 7- r( li?)- l- benzvloksykarbonvl- 3- metylbutvl]- 6- okso- 1. 7-diazaspiro[ 4. 4] nonan ( 141
Pyruvylklorid ble fremstilt i henhold til metoden beskrevet i litteraturen (Pansare, S.V., Gnana R.R., "Asymmetric Allylation and reduction on an Ephedrine-Derived Template: Stereoselective Synthesis of oc-Hydroxy Acids and Derivatives", J. Org. Chem., 1998, 63,4120-4124). 188 mg (1,57 mmol) a,a-diklormetylmetyleter ble tilsatt til pyrodruesyre (115 mg;
1,31 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 20 minutter, og den resulterende oppløsning ble oppvarmet til 50-55 °C, hvoretter den ble omrørt i ytterligere 30 minutter. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøles til romtemperatur, og 3 ml DCM ble tilsatt.
Til en oppløsning av 11 (150 mg; 0,33 mmol) i vannfritt DCM (4 ml) ved 0 °C under argonatmosfære ble det tilsatt TEA (200 mg; 1,98 mmol) og DMAP (4 mg; 0,033 mmol) til den friskt tilberedte oppløsning av pyruvylklorid ved 0 °C. Reaksjonsblandingen ble tillatt å oppvarmes til romtemperatur og ble omrørt i 6 timer. Råproduktet ble vasket suksessivt med sitronsyre (5 ml; 10 %), vandig NaHC03(mettet, 5 ml) og saltoppløsning (5 ml). Den organiske fase ble tørket (Na2S04) og konsentrert. 77 mg (56 %) ren forbindelse 14 ble oppnådd som en olje etter LC på silika (heksan-EtOAc, 1:3). HPLC [kolonne Novapack C]8(Waters), 3,9 x 150 mm, <(> = 1 ml/minutt, A, = 214 nm, elueringsmiddel: ACN/0,05 % TFA (50/50)], tR= 5,87 og 6,72 minutter.
'H-NMR (200 MHz, CDC13) 5 0,92 og 0,95 (2 d, J = 6, 6 H); 1,42 (m, 1 H), 1,61-2,39 (m, 7 H), 2,44 (s, 3 H), 2,77 (m, 1 H), 3,22 (m, 1 H), 3,56-3,78 (m, 2 H), 3,92 (m, 1 H), 4,67 og 4,85 (dd, J, = 6, J2= 10,1 H), 5,21 (s, 2 H), 7,34 (m, 5 H).
<13>C-MNR (75 MHz, CDC13) 8 21,2,23,0,24,4, 24,8,26,4, 29,3, 35,6, 37,3,40,7, 48,9, 53,0, 66,8, 68,6,135,0,166,0,170,8,173,0,198,0.
ESI-MS beregnet for C23H30N2O5: 414,22. Funnet (m/z): 415,4 (M + H)<+.>
Eksempel 90
Svntese av ( SK )- 1 -( 2- metvlakrylovl)- 7-[( 1 RI- 1 - benzvloksvkarbonvl- 3- metvlbutvn- 6- okso- 1. 7-diazaspiror4. 4] nonan ( 151
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av 13, med utgangspunkt i 11 (200 mg; 0,43 mmol) og metylakryloylklorid (89 mg; 0,86 mmol), ble 70 mg (50 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som en fargeløs olje etter rensing ved LC (silikagel, heksan-EtOAc, 2:1). HPLC [kolonne Novapack C!8(Waters), 3,9 x 150 mm, = 1 ml/minutt, X = 214 nm, elueringsmiddel: ACN/0,05 % TFA (25/75)], Rt = 6,38 minutter.
'H-NMR (200 MHz, CDC13) 8 0,91 (t, J = 6, 6 H), 1,44 (m, 1 H), 1,64-1,93 (m, 5 H), 1,93 (s, 3 H), 1,96-2,12 (m, 2 H), 2,78 (m, 1 H), 3,20 (m, 1 H), 3,56-3,68 (m, 3 H), 4,80 og 4,77 (2 d, J = 10,1 H), 5,16 (s, 2 H), 5,19 (d, J = 9,2 H), 7,32 (m, 5 H).
<13>C-MNR (75 MHz, CDC13) 8 19,8, 21,4, 23,0, 24,2, 24,9, 29,9, 37,1, 37,7,41,1, 50,2, 53,2, 66,6, 67,4,116,9, 128,1,128,3,128,4,135,0,141,7,170,7,174,1.
ESI-MS beregnet for C24H32N2O4: 412,24. Funnet: 413,3 (M + H)<+.>
Eksempel 91
Svntese av ( 5/ g)- l-( isobutvrvlV7-[( l/ ?)- l- karboksv- 3- metvlbutyl]- 6- okso- 1. 7-diazaspiror4. 41nonan ( 16)
En avgasset oppløsning av 13 (134 mg; 0,32 mmol) i metanol inneholdende 10 % Pd/C (27 mg) ble hydrogenert under et trykk på 90 kPa i 24 timer. Blandingen ble filtrert gjennom en celittpute, og den filtrerte oppløsning ble konsentrert under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd 100 mg 16 (95 %) som en fargeløs olje. Smp. 68-69 °C. [ a]™ -2° (c 1,1, MeOH).
'H-NMR [300 MHz, aceton-d6]8 0,87-0,91 (2 d, J = 7, 6 H), 1,09-1,12 (2 d, 6 H), 1,46 (m, 1 H), 1,70 (m, 2 H), 1,90-2,10 (m, 5 H), 2,49 (m, 1 H), 2,70 (m, 1 H), 3,30 (m, 1 H), 3,49 (dt, J, = 8, h = 10,1 H), 3,61-3,75 (m, 2 H), 4,71 (dd, J, = 5, J2= 11,1 H).
<I3>C-NMR (75 MHz, CDC13) 8 16,4,16,6,21,1,23,0,24,3, 25,0, 30,8,32,6,36,6, 36,9, 40,6, 48,0, 53,4, 67,5, 171,8, 174,2, 176,2.
ESI-MS beregnet for C17H28N2O4: 324,20. Funnet: 323,3 (M-l)<+.>
Eksempel 92
Svntese av ( 5R )- 1 -( pvruvvlV7- IY1 R )- 1 - karboksy- 3- metvbutvl]- 6- okso- 1. 7- diazaspiro[ 4. 4] nonan
OI)
En avgasset oppløsning av 14 (79 mg; 0,26 mmol) i 20 ml metanol inneholdende Pd-C (10 %; 22 mg) ble hydrogenen under atmosfæretrykk i 45 minutter. Den filtrerte opp-løsning ble konsentrert under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd 79 mg av forbindelse 17 (95 %) som a et hvitt, fast stoff.
HPLC [kolonne Novapack C18(Waters), 3,9 x 150 mm, = 1 ml/minutt, X = 214 nm, elueringsmiddel: ACN/0,05 % TFA (20/80)], Rt = 13,14 minutter.
'H-NMR (200 MHz, CDC13) 8 0,93 (m, 6 H), 1,43 (m, 1 H), 1,71-2,22 (m, 7 H), 2,34 (s, 3 H), 2,41 (s, 3 H), 2,74 (m, 1 H), 3,31 (m, 1 H), 3,74 (m, 2 H), 3,92 (m, 1 H), 4,80 (dd, J, = 6, J2=10,1H), 7,07(bs,lH).
<13>C-MNR (200 MHz, CDCI3) 8 21,3, 23,2, 24,7,25,1,27,1,29,9, 36,0,37,0,41,0, 49,3, 53,6, 69,1,162,1,172,7,173,7,197,5.
ESI-MS beregnet for C23H3oN205: 324,17. Funnet (m/z): 325,1 (M + H)<+.>
Eksempel 93
Syntese av ( 5j?Vl-( 2- metylakrvlovl)- 7-[( li?)- l- karboksv- 3- metvlbutvl]- 6- okso- 1. 7- diazaspiro-K. 41nonan ( 181
Til en oppløsning av 15 (65 mg; 0,16 mmol) i 2,5 ml metanol ble det tilsatt vandig NaOH (1,6 ml; 1 N) og H20 (1,6 ml), og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 1 time. Den resulterende blanding ble konsentrert under redusert trykk, og residuet ble fordelt mellom H20 (20 ml) og DCM (20 ml). Den vandige fase ble surgjort til pH = 2 med vandig HC1 (10 ml; 0,1 N) og ekstrahert med DCM (3 x 20 ml). De sammenslåtte organiske faser ble vasket med saltoppløsning (25 ml), tørket (Na2SC«4) og konsentrert under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd 44 mg av forbindelse 18 (85 %) som et hvitt, fast stoff. HPLC [kolonne Novapack Cis(Waters), 3,9 x 150 mm, <|> = 1 ml/minutt, X = 214 nm, elueringsmiddel: ACN/0,05 % TFA (25/75)], Rt = 6,38 minutter. 'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,86 (d, J = 5, 3 H), 0,89 (d, J = 5, 3 H), 1,42 (m, 1 H), 1,55-2,25 (m, 8 H), 2,56 (m, 1 H), 3,19-3,44 (m, 2 H), 3,57-3,67 (m, 2 H), 4,78 (d, J = 11, 1 H), 4,82 (d, J = 11,1 H), 5,18 (d, J = 6, 2 H).
<13>C-MNR (75 MHz, CDC13) 8 19,5, 21,2,23,1,24,2,25,1, 30,9,36,5, 37,6,40,9, 50,5, 53,7, 67,5,117,5,140,6,170,8,174,2.
EST-MS beregnet for C17H26N2O4: 322,19. Funnet: 323,2 (M + H)<+.>
Eksempel 94
Svntese av [( 5R )-\-( tert.- butoksvkarbonvn- 7-|"( ligVl - karboksv- 3- metvlbutvll- 6- okso- lJ-diazaspiror4. 41nonanl7' 9- aplidin ( 9SBSAPL11
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL3, med utgangspunkt i SAPL4 (10 mg; 13 pmol), 12 (5 mg; 14 pmol), HATU (12,4 mg), HOAt (4,5 mg), NMM (3,3 pl), DCM (140 pl) og DMF (70 pl), ble 11 mg (73 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isokratisk ACN/H20 85:15, strømningsmengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, Rt = 30 minutter). 1 H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,85-0,97 (m, 24 H), 1,19-1,34 (m, 18 H), 1,48 (s, 9 H), 1,50-2,20 (m, 6 H), 2,32-2,36 (m, 1 H), 2,54 (s, 3 H), 2,58-2,72 (m, 2 H), 2,97-3,08 (m, 1 H), 3,10-3,22 (m, 3 H), 3,34 (dd, 1 H, J = 3,9, 13,8), 3,46-3,79 (m, 6 H), 3,79 (s, 3 H), 4,03-4,12 (m, 2 H), 4,28 (dd, 1 H, J = 6,6,13,2), 4,57-4,63 (m, 2 H), 4,79-4,88 (m, 2 H), 5,15 (d, 1 H, J = 3,3), 5,21-5-23 (m, 1 H), 6,84 (d, 2 H, J = 8,4), 7,07 (d, 2 H, J = 8,7), 7,28 (d, 1 H, J = 10,8), 7,79 (d, 1 H, J = 6,6), 7,82 (d, 1H,J = 9,9).
<13>C-NMR(75 MHz, CDC13) 8 11,66,15,21,15,43,16,79,17,23,18,69,18,77, 21,24,23,67,23,95, 24,10, 24,90,25,10, 25,38,27,04,28,23,28,75, 29,93, 31,61, 34,50, 33,88, 34,16, 36,20, 36,57, 38,76, 39,09, 39,78,41,29,47,27,47,76,49,60,49,96, 52,66, 55,50, 56,26, 57,38, 58,18, 66,74,66,86, 68,34, 70,53, 80,75, 81,93,114,33,130,23,130,54,168,08,169,83, 170,18,170,80,171,43,172,55,175,04,205,04.
ESI-MS beregnet for CeoHgsNyOu: 1151,7. Funnet (m/z): 1152,4 (M + H)<+.>
Eksempel 95
Svntese av rHiv13-[ f5j?Vl- ftert.- butoksvkarbonvlV7- rflJ?Vl- karboksv- 3- metvlbutvll- 6- okso- 1. 7-diazaspiror4. 41nonanl7' 9- aplidin ( 9SBSHPL11
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL3, med utgangspunkt i SHPL4 (10 mg; 13 pmol), 12 (5 mg; 14 pmol), HATU (14 mg), HOAt (5 mg), NMM (6 pl), DCM (150 pl) og DMF (50 pl), ble 10 mg (70 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC (HyperPrep PEP 100 Cl 8, isokratisk ACN/H20 85:15, strømningsmengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, Rt = 28,1 minutter).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,80-1,07 (m, 24 H), 1,08-1,67 (m, 12 H), 1,48 (s, 9 H), 1,68-2,30 (m, 10 H), 2,41 (m, 1 H), 2,55 (s, 3 H), 2,68 (m, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 3,07-3,40 (m, 4 H), 3,42-3,72 (m, 6 H), 3,78 (s, 3 H), 3,90 (m, 1 H), 4,01 (m, 1 H), 4,29 (m, 1 H) 4,63 (m, 1 H), 4,77 (m, 1 H), 4,87 (m, 1 H), 5,02 (d, J = 4,8, 1 H), 5,25 (m, 1 H), 6,84 (d, J = 8,3, 2 H), 7,07 (d, J = 8,3,2 H), 7,31 (d, J = 9,7,1 H), 7,50 (d, J = 5,8,1 H), 7,85 (d, J = 9,7,1 H).
I3C-NMR(75 MHz, CDCI3) 8 12,07, 14,25, 17,12, 17,92, 19,15,21,11,21,18, 23,80,24,00,24,06, 24,86,25,08,25,15,27,58, 28,21,28,82,30,33,31,18, 33,78, 34,28, 35,77, 36,65, 39,07, 39,45, 39,86,46,91,48,14,48,47, 52,62, 55,49,57,13,58,42,66,36, 66,80, 69,14, 70,84, 79,19, 80,55, 114,27, 130,29, 130,59, 154,12, 158,81,168,25,169,84, 170,72, 170,80, 170,90, 171,25, 174,89.
ESI-MS beregnet for CstHkMOu: 1095,6. Funnet (m/z): 1096,9 (M + H)<+.>
Eksempel 96
Svntese av r( r5/ ?Vl- risobutvrvn- 7- rrii?Vl- karboksv- 3- metvlbutvll- 6- okso- 1. 7-diazaspiro[ 4. 41nonanl7' 9- aplidin( 9SISAPLl>)
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL3, med utgangspunkt i SAPL4 (11 mg; 12,9 pmol), 16 (5 mg; 15,4 pmol), HATU (14 mg), HOAt (5 mg), NMM (3,6 pl), DCM (155 pl) og DMF (78 pl), ble 10 mg (69 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC (HyperPrep PEP 100 Cl 8, isokratisk ACN/H20 85:15, strømningsmengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, tR= 19 minutter). 1 H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,86-1,00 (m, 24 H), 1,12 (d, J = 6,9, 3 H), 1,18 (d, J = 6,6, 3 H), 1,34 (t, J = 6,6, 2 H), 0,90-1,30 (m, 7 H), 1,56-2,25 (m, 16 H), 2,30-2,80 (m, 3 H), 2,55 (s, 3 H), 2,95-3,06 (m, 1 H), 3,15-3,25 (m, 3 H), 3,65 (dd, 1 H) 3,52-3,79 (m, 6 H), 3,79 (s, 3 H), 3,98-4,15 (m, 1 H), 4,28 (dd, J, = 6,6, J2= 10,3,1 H), 4,59 (m, 2 H), 4,79-4,85 (m, 2 H), 5,17 (d, J = 3,6,1 H), 5,40-5,44 (m, 1 H), 6,84 (d, J = 8,4,2 H), 7,06 (d, J = 8,7,2 H), 7,24 (d, J = 11,1,1 H), 7,90 (d, J = 9,3,1 H), 8,56 (d, J = 5,1,1 H).
<13>C-NMR(75 MHz, CDC13) 8 11,50,14,92, 15,22,16,68,16,95,18,50,18,59,
18,81, 20,94,23,42,23,80,24,49,24,68,24,90,25,11, 26,91,27,98, 30,93, 31,30, 35,58, 33,88, 34,16,35,85, 36,24, 38,64,38,84, 39,71,41,29,47,01,47,76,49,42,49,62, 52,66, 55,26, 55,73, 57,12,58,21,66,57, 67,40,68,10, 70,79,81,57,114,07,130,05,130,31,158,57,168,12,169,66, 170,08,170,56,171,13,171,96, 172,37, 174,04,175,41,205,04.
ESI-MS beregnet for C59H91N7O14: 1121,66. Funnet: 1122,8 (M + H)<+.>
Eksempel 97.
Svntese av rHivl3- rf5/ ?Vl- rtert.- butoksvkarbonvn- 7- r( ligl- l- karboksv- 3- metvlbutvn- 6- okso- 1. 7-diazaspiror4. 41nonanl7" 9- aplidin ( 9SISHPLn
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL3, med utgangspunkt i SHPL4 (10 mg; 13 pmol), 16 (4,5 mg; 14 pmol), HATU (14 mg), HOAt (5 mg), NMM (6 pl), DCM (150 pl) og DMF (50 pl), ble 10 mg (72 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC (HyperPrep PEP 100 Cl 8, isokratisk ACN/ H20 85:15, strømningsmengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, tR= 16,9 minutter).
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,80-1,07 (m, 24 H), 1,08-1,47 (m, 12 H), 1,48-2,30 (m, 16 H), 2,36 (m, 2 H), 2,56 (s, 3 H), 2,65 (m, 1 H), 2,96 (m, 1 H), 3,18 (m, 2 H), 3,36 (m, 2 H), 3,65 (m, 6 H), 3,78 (s, 3 H), 3,91 (m, 1 H), 4,02 (m, 1 H), 4,25 (m, 1 H) 4,63 (m, 1 II), 4,72 (m, 2 H), 4,87 (m, 1 H), 5,02 (d, J = 4,8,1 H), 5,45 (m, 1 H), 6,84 (d, J = 8,7,2 H), 7,07 (d, J = 8,7, 2 H), 7,27 (d, J = 4,8,1 H), 7,88 (d, J = 9,7, 1 H), 8,32 (d, J = 4,8, 1 H).
ESI-MS beregnet for C56H87N7Oi3:1065,6. Funnet (m/z): 1066,7 (M + H)<+.>
Eksempel 98
Svntese av IY 5R )- 1 -( pvruvvlV7- r( 1 R )- 1 - karboksv- 3- metvlbutvll- 6- okso- 1. 7-diazaspiror4. 41nonanl7' 9- aplidin ( 9SPSAPL1)
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL3, med utgangspunkt i SAPL4 (10 mg; 11,7 pmol), 17 (5 mg; 15,4 pmol), HATU (12 mg), HOAt (5 mg), NMM (5 pl), DCM (140 pl) og DMF (70 pl), ble 9 mg (63 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC (HyperPrep PEP 100 Cl 8, isokratisk ACN/H20 85:15, strømningsmengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, tR= 14,4 minutter). 1 H-NMR (300 MHz, CDC13) 6 0,90-1,00 (m, 24 H), 1,05-1,40 (m, 12 H), 1,40-2,25 (m, 16 H), 2,27-2,41 (m, 1 H), 2,42-2,70 (m, 3 H), 2,54 (s, 3 H), 2,92-2,98 (m, 1 H), 3,12-3,38 (m, 4 H), 3,54-3,78 (m, 4 H), 3,79 (s, 3 H), 4,01-4,12 (m, 2 H), 4,20-4,26 (m, 2 H), 4,57-4,62 (m, 2 H), 4,77-4,82 (m, 2 H), 535,18 (d, J = 3,0,2 H), 5,37-5,42 (m, 1 H), 6,84 (d, J =-8,7, 2 H), 7,07 (d, J = 8,7,2 H), 7,20 (d, J = 9,6,1 H), 7,85 (d, J = 9,6,1 H), 98,04 (d, J = 5,4,1 H).
<13>C-NMR (75 MHz, CDCI3) 8 11,86,14,97,15,47,16,78,17,12,18,84,21,20,
21,27, 23,62,24,14, 15,03, 25,15, 25,30, 27,35, 27,51,28,19, 30,46, 31,52, 34,27, 35,95, 39,01, 40,07, 41,59,47,25, 49,72, 53,08, 55,51, 55,81, 57,38, 58,21, 66,66, 68,19, 69,23, 70,74, 81,69, 85,15,114,33,130,13,130,56,158,85,161,12,168,49,169,81,169,91,170,81,171,38,171,69, 172,60, 173,34, 197,64,205,19.
ESI-MS beregnet for C58H87N7O15= 1121,63. Funnet: 1122,3 (M + H)<+.>
Eksempel 99
Svntese av THivf- K 5R )- 1 -( pvruvvll- 7- f( 1 R )- 1 - karboksv- 3- metvlbutvll- 6- okso- 1. 7-diazaspiror4. 41nonanl7- 9- aplidin( 9SPSHPLll
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL3, med utgangspunkt i SHPL4 (10 mg; 13 pmol), 17 (4,5 mg; 14 pmol), HATU (14 mg), HOAt (5 mg), NMM (6 pl), DCM (150 pl) og DMF (50 pl), ble 10 mg (72 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC (HyperPrep PEP 100 Cl 8, isokratisk ACN/H20 85:15, strømningsmengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, tR= 13,6 minutter).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 5 0,80-1,10 (24 H, m), 1,11-1,80 (12 H, m), 1,81-2,30 (10 H, m), 2,45 (m, 1 H), 2,55 (s, 3 H), 2,57 (s, 3 H), 3,07-3,43 (m, 6 H), 3,52-3,77 (m, 6 H), 3,78 (s, 3 H), 3,91 (m, 1 H), 4,03 (m, 1 H), 4,29 (m, 1 H) 4,63 (m, 1 H), 4,72 (m, 1 H), 4,87 (m, 1 H), 5,03 (d, J = 4,3,1 H), 5,45 (m, 1 H), 6,84 (d, J = 8,3,2 H), 7,07 (d, J = 8,3,2 H), 7,29 (d, J = 8,7, 1 H), 7,81 (d, J, = 9,2, 1 H), 7,87 (d, J = 4,8, 1 H).
ESI-MS beregnet for CssItøNvOu: 1065,6. Funnet: 1066,4 (M + H)<+.>
Eksempel 100
Svntese av [ Hiv] 3-\( 5R )-] -( akrvlovlV7- r( l R )-\- karboksy- 3- metylbutvl1- 6- okso- l. 7- diazaspiro-r4. 41nonanl7- 9- aplidin ( 9SASHPL11
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av SAPL3, med utgangspunkt i
SHPL4 (10 mg; 13 pmol), 18 (5,8 mg; 14 pmol), HATU (14 mg), HOAt (5 mg), NMM (6 pl), DCM (150 pl) og DMF (50 pl), ble 10 mg (72 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isokratisk ACN/H20 85:15, strømningsmengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, tR= 16,4 minutter).
1 H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,85-0,96 (m, 18 H), 1,02-1,05 (m, 6 H), 1,14-1,45 (m, 12 H), 1,49-1,64 (m, 4 H), 1,68-1,77 (m, 1 H), 1,89-2,05 (m, 3 H), 1,99 (s, 3 H), 2,10-2,28 (m, 4 H), 2,43 (dd, J, = 7,8, J2= 17,1,1 H), 2,57 (s, 3 H), 2,60-2,68 (m, 1 H), 2,97 (bs, 1 H), 3,13-3,40 (m, 4 H), 3,54-3,77 (m, 5 H), 3,79 (s, 3 H), 3,89-4,07 (m, 2 H), 4,27 (m, 1 H), 4,64 (m, 1 H), 4,73 (m, 1 H), 4,88 (m, 1 H), 5,03 (d, J = 4,4,1 H), 5,30 (d, J = 20,1 H), 5,30-5,39 (m, 1 H), 6,84 (d, J = 8,3,2 H), 7,08 (d, J = 8,3,2 H), 7,29 (s, 1 H), 7,88 (d, J = 9,8,1 H), 8,23 (d, J = 7,4, 1 H).
ESI-MS beregnet for C56H85N7Oi3: 1063,6. Funnet 1064,6 (M + H)<+.>
Eksempel 101
Svntese av rHivl3- rZ- Ala19- aplidin ( 9ZASHPL21
Til en kolbe inneholdende Z-Ala-Pro-OH (36 mg; 112 pmol) i DCM (0,4 ml) ved 0 °C under argonatmosfære ble DIPCDI (10 pl, 64 pmol) tilsatt, og blandingen ble omrørt i 60 minutter. Deretter ble en oppløsning av SHPL2 (20 mg; 22,5 pmol) i DCM (0,2 ml) tilsatt, og etter 3 døgn ble reaksjonen stoppet ved tilsetning av vandig HC1 (3 ml; 0,1 N). Blandingen ble omrørt i 5 minutter og ble deretter fortynnet med DCM (4 ml) og vasket suksessivt med vandig KHS04(4 ml, 10 %), vandig NaHC03(4 ml, mettet) og saltoppløsning (4 ml). Den organiske fase ble tørket (Na2SC>4), filtrert og konsentrert. Rensing av residuet ved HPLC (HyperPrep PEP 100 Cl 8, isokratisk ACN/H20 85:15, (strømningsmengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, tR= 18,2 minutter) gav 30 mg (67 %) 9ZASHPL2 som et hvitt, fast stoff.
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,82-1,10 (m, 24 H), 1,12-1,50 (m, 18 H), 1,52-2,70 (m, 6 H), 2,45 (m, 1 H), 2,56 (s, 3 H), 2,96-3,38 (m, 4 H), 3,10 (s, 3 H), 3,52-3,72 (m, 5 H), 3,85 (m, 1 H), 3,78 (s, 3 H), 4,01 (m, 1 H), 4,18 (m, 1 H), 4,51 (m, 1 H), 4,64 (m, 1 H), 4,71 (m, 1 H), 4,87 (m, 1 H), 5,02 (d, J, = 5,3,1 H), 5,06 (m, 2 H), 5,25 (m, 1 H), 5,42 (m, 1 H), 6,10 (d, J = 8,3, 1 H), 6,84 (d, J = 8,3, 2 H), 7,07 (d, J = 8,3,2 H), 7,31 (m, 6 H), 7,70 (d, J = 4,3, 1 H),
7,77 (d,J = 9,7,1H).
<I3>C-NMR(75 MHz, CDC13) 8 11,80,13,97,16,63,17,02,17,48, 18,93,20,86, 21,15,23,45,23,76,24,78,25,96, 27,31,27,92, 28,50, 30,06, 31,36, 33,44, 33,82, 35,66, 38,70, 39,38, 39,63,46,54,46,62,46,98,47,10,48,19,48,59, 54,89, 54,97, 55,22, 56,44, 56,90, 58,14, 66,16, 66,36, 68,95, 70,94, 78,78,114,00,127,75,128,30,129,90,130,26,156,31,158,53, 168,67,169,57,170,06,170,25,170,65,171,97,173,08,174,67.
ESI-MS beregnet for C62H92N8015: 1188,67. Funnet (m/z): 1189,7 (M + H)<+.>
Eksempel 102
Svntese av rHivl3- rBoc- Ala19- aplidin ( 9BASHPL2)
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av 9ZASHPL2, med utgangspunkt i SHPL2 (10 mg; 11,2 pmol), Boc-Ala-Pro-OH (17 mg; 57 umol), DIPCDI (5 ul) og DCM (300 pl), ble 9 mg (70 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC (HyperPrep PEP 100 Cl8, gradient ACN/H20 85:15-100:0 i 10 minutter, strømnings-mengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, tR= 14,5 minutter).
1 H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,82-1,10 (m, 24 H), 1,12-1,50 (m, 15 H), 1,40 (s, 9 H), 1,52-2,70 (m, 9 H), 2,45 (m, 1 H), 2,60 (s, 3 H), 3,00-3,43 (m, 4 H), 3,10 (s, 3 H), 3,62 (m, 5 H), 3,79 (s, 3 H), 3,90 (m, 1 H), 4,02 (m, 1 H), 4,20 (m, 1 H), 4,41 (m, 1 H), 4,67 (m, 2 H), 4,87 (m, 1 H), 5,02 (d, Ji = 4,3,1 H), 5,26 (m, 1 H), 5,40 (m, 1 H), 5,76 (d, J = 7,8,1 H), 6,84 (d, J = 8,3, 2 H), 7,07 (d, J = 8,3, 2 H), 7,32 (d, J = 9,7, 1 H), 7,73 (d, J = 4,8, 1 H), 7,80 (d, J = 9,7, 1H).
<13>C-NMR(75 MHz, CDC13) 8 12,06,14,34,16,88,17,20,17,77,19,17,21,10, 21,41, 23,72, 24,03, 25,06, 26,17, 27,60, 28,19, 28,60, 30,31, 31,63, 33,74, 35,96, 38,96, 38,93, 39,59, 39,86,46,86,47,27,48,29,48,45,55,18, 55,42, 55,49, 56,59, 57,16, 58,44,66,43, 69,14, 71,30, 79,05, 79,40, 114,29,130,21,130,54,156,06,158,83,168,80,169,87,170,51,170,64, 170,94, 171,31, 172,59, 173,45, 174,92.
ESI-MS beregnet for Cs^NgOis: 1154,68. Funnet (m/z): 1155,6 (M + H)<+.>
Eksempel 103
Svntese av rHivl3- rAlal9- aplidin C9ASHPL11
Til en kolbe inneholdende 9BASHPL2 (8 mg; 6,92 pmol), ble en oppløsning av saltsyre i vannfritt dioksan (1,5 ml; 5,3 N; 7,9 mmol) tilsatt. Den resulterende oppløsning ble omrørt ved romtemperatur i 5 timer, eller inntil utgangsmaterialet var fullstendig forsvunnet, som vist ved TLC. Deretter ble oppløsningen konsentrert under redusert trykk, og residuet ble oppløst i DCM og på ny konsentrert. Det hvite, skumaktige råprodukt ble utfelt med DCM/heksan (2 ml/4 ml), hvorved det ble oppnådd 7,2 mg 9ASHPL1 (kvantitativt utbytte) som et hvitt, fast stoff.
ESI-MS beregnet for Cs^NgOn: 1054,6. Funnet (m/z): 1055,6 (M + H)<+>.
Eksempel 104
Svntese av rHivl3- rBoc- Pro18- didemnin A ( 8PSHPL21
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av 9ZASHPL2, med utgangspunkt i SHPL2 (10 mg; 11,2 pmol), Boc-Pro-OH (13 mg; 57 pmol), DIPCDI (5 pl) og DCM (300 pl), ble 9 mg (74 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC (HyperPrep PEP 100 Cl8, gradient ACN/H20 85:15-100:0 i 10 minutter, strømningsmengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, tR= 18,7 minutter).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,82-1,10 (m, 24 H), 1,12-2,30 (m, 22 H), 1,47 (s, 9 H), 2,41 (m, 1 H), 3,04 (s, 3 H), 3,10-3,74 (m, 7 H), 3,78 (s, 3 H), 3,91 (m, 1 H), 4,01 (m, 1 H), 4,31 (m, 1 H), 4,59 (m, 1 H), 4,87 (m, 1 H), 5,02 (d, J = 4,8, 1 H), 5,16 (m, 1 H), 5,36 (m, 1 H), 6,84 (d, J = 8,3,2 H), 7,07 (d, J = 8,3,2 H), 7,17 (d, J = 6,3,1 H), 7,35 (d, J = 9,7,1 H), 7,85 (d, J = 9,7, 1 H).
,<3>C-NMR (75 MHz, CDCI3) 8 12,04,14,41,16,76,17,97,19,12,21,03,21,66, 23,92,24,00,24,77,25,09, 25,20,27,53, 28,21,28,72,29,67, 30,35, 31,23, 33,80, 34,30, 36,24, 39,05, 39,37, 39,80,46,90,47,33,48,42, 54,48, 55,49, 55,58, 55,84, 57,12, 58,08,66,31,69,11, 71,05, 79,23, 80,28,114,29,130,23,130,59,154,91,158,82,168,37,169,88,170,66,170,86, 171,28,171,40,174,10,174,79.
ESI-MS beregnet for C56H91N7O14:1085,6. Funnet (m/z): 1086,7 (M + H)<+.>
Eksempel 105
Svntese av rHivl3- rProl8- didemnin A f8PSHPLll
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av 9ASHPL1, med utgangspunkt i 8PSHPL2 (7 mg; 6,4 pmol), ble 6 mg av den ønskede forbindelse (kvantitativt utbytte) oppnådd som et hvitt, fast stoff.
ESI-MS beregnet for C51H81N7O12: 983,59. Funnet (m/z): 984,6 (M + H)<+.>
Eksempel 106
Svntese av rHivl3- rBoc- Vall8- didemnin A ( 8VSHPL2)
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av 9ZASHPL2, med utgangspunkt i SHPL2 (10 mg; 11,2 pmol), Boc-Val-OH (12 mg; 56 pmol), DIPCDI (5 pl) og DCM (300 pl), ble det oppnådd 9 mg (82 %) av den ønskede forbindelse som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC (HyperPrep PEP 100 Cl8, gradient ACN/H20 85:15-100:0 i 10 minutter, strømnings-mengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 nm, tR= 22,1 minutter).
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,82-1,10 (m, 30 H), 1,12-1,82 (m, 12 H), 1,45 (s, 9 H), 1,84-2,40 (m, 6 H), 2,56 (s, 3 H), 2,96 (s, 3 H), 2,97 (m, 3 H), 3,13 (m, 1 H), 3,35 (m, 1 H), 3,56 (m, 1 H), 3,65 (m, 2 H), 3,79 (s, 3 H), 3,85 (m, 1 H), 4,03 (m, 1 H), 4,24 (m, 1 H), 4,41 (m, 1 H), 4,61 (m, 1 H), 4,88 (m, 1 H), 4,99 (d, J, = 5,3,1 H), 5,07 (m, 1 H), 5,19 (m, 1 H), 5,60 (d, J = 8,3, 1 H), 6,84 (d, J = 8,3,2 H), 7,03 (d, J = 8,7,2 H), 7,07 (d, J = 8,3,2 H), 7,46 (d, J = 10,2, 1 H), 7,84 (d, J = 9,2,1 H).
ESI-MS beregnet for C56H91N7O14: 1085,6. Funnet (m/z): 1086,7 (M + H)<+.>
Eksempel 107
Svntese av rHiv13- rVan8- didemnin A ( 8VSHPL11
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av 9ASHPL1, med utgangspunkt i 8VSHPL2 (8 mg; 7,4 pmol), ble 7 mg av den ønskede forbindelse (kvantitativt utbytte) oppnådd som et hvitt, fast stoff.
ESI-MS beregnet for C51H83N7O12: 985,61. Funnet (m/z): 986,6 (M + H)<+.>
Eksempel 108
Svntese av rHivl3- rVal18- risobutvrvll9- didemnin A ( 8V9ISHPLD
Til en oppløsning av 8VSHPL1 (6 mg; 5,8 pmol) i DCM (200 pml) ved 0 °C under argonatmosfære ble det tilsatt NMM (3,3 pl; 30 pmol) og isobutyrylklorid (2 pl; 19 pmol). Etter 5 timers omrøring ved romtemperatur ble reaksjonsblandingen fortynnet med DCM (5 ml) og vasket suksessivt med vandig KHSO4(5 ml; 10 %), vandig HCCbNa (5 ml, mettet) og salt-oppløsning (5 ml). Den organiske oppløsning ble tørket (Na2SC«4), filtrert og konsentrert under redusert trykk, hvorved 6 mg (97 %) av forbindelse SV9ISHPL1 ble oppnådd som et hvitt, fast stoff. 1 H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,82-1,10 (m, 36 H), 1,12-1,85 (m, 10 H), 1,90-2,45 (m, 6 H), 2,56 (s, 3 H), 2,90 (m, 1 H), 3,00 (s, 3 H,), 3,13 (m, 2 H), 3,36 (dd, J, = 4,3, J2= 14,1,1 H), 3,64 (m, 6 H), 3,78 (s, 3 H), 3,87 (m, 1 H), 3,97 (m, 1 H), 4,21 (m, 1 H), 4,34 (m, 2 H), 4,61 (m, 1 H), 4,87 (m, 1 H), 4,98 (d, J = 4,8,1 H), 5,17 (m, 2 H), 6,24 (d, J = 6,3,1 H), 6,84 (d, J = 8,3, 2 H), 7,07 (d, J = 8,3,2 H), 7,32 (d, J = 6,3,1 H), 7,35 (d, J = 4,3,1 H), 7,81 (d, J = 9,7,1 H).
ESI-MS beregnet for C55H89N7O13: 1055,6. Funnet (m/z): 1056,7 (M + H)<+.>
Eksempel 109
Svntese av [ kumarin18- didemnin A ( 8CSAPL1)
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av 9ZASHPL2, med utgangspunkt i SAPL2 (20 mg; 21 pmol) og kumarin-3-karboksylsyre (20 mg; 107 pmol), ble 18 mg (76 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isokratisk ACN/H20 85:15, strømningsmengde: 7 ml/minutt, 250 x 21 mm, ved 270 n, tR= 16,5 minutter).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,78-1,00 (m, 24 H), 1,20-2,50 (m, 22 H), 2,56 (s, 3 H), 2,92 (s, 3 H), 3,08-3,25 (m, 2 H), 3,90 (m, 1 H), 3,60 (m, 2 H), 3,70 (m, 1 H), 3,79 (s, 3 H), 3,92-4,25 (m, 3 H), 4,60 (m, 1 H), 4,80 (m, 2 H), 5,15 (m, 1 H), 5,18 (d, J = 3,4,1 H), 5,28 (m, 1 H), 6,84 (d, J = 8,3, 2 H), 7,08 (d, J = 8,3,2 H), 7,20 (d, J = 6,3,1 H), 7,37 (m, 2 H), 7,45 (d, J = 9,7,1 H), 7,58 (m, 2 H), 7,96 (m, 1 H), 8,23 (m, 1 H).
ESI-MS beregnet for CsoHgaNeOis: 1114,58. Funnet: 1116,3(M + H)<+.>
Eksempel 110
Svntese av kumarin- 3- karbonvlaminoeddiksvremetvlester ( 8G9C2)
Til en rundkolbe inneholdende metylglysin (89 mg; 1,00 mmol), 3-karboksy-kumarin og vannfritt DCM (25 ml) under argonatmosfære ble N'-(3-dimetylaminopropyl)-N-etylkarbodiimidhydroklorid (EDC) (479 mg; 2,50 mmol) og DMAP (489 mg; 4,00 mmol) tilsatt ved romtemperatur. Den resulterende blanding ble omrørt i 1,5 timer (total omsetning ble registrert ved TLC). Deretter ble 20 ml DCM tilsatt, og oppløsningen ble vasket suksessivt med vandig NaHC03(10 ml, mettet) og saltoppløsning (10 ml). Den organiske fase ble tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert. Det resulterende oransjefargede, faste stoff ble renset ved flash-LC (silikagel, gradient heksan:EtOAc fra 1:1 til 2:1), hvorved det ble oppnådd 445 mg av den ønskede forbindelse (kvantitativt utbytte) som en fargeløs olje. Rf = 0,08 (heksan/EtOAc 1:1).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 3,79 (s, 3 H), 4,25, (d, J = 5,4, 2 H), 7,40 (m, 2 H), 7,74 (d, J = 7,3,1 H), 7,68 (m, 2 H), 8,91 (s, 1 H), 9,25 (s, 1 H).
ESI-MS beregnet for C13H1 iN05: 261,06. Funnet: 283,1 (M + Na)<+.>
Eksempel 111
Svntese av kumarin- 3- karbonylaminoeddiksvre ( 8G9C11
Til en oppløsning av kumarin-3-karbonylaminoeddiksyremetylester (312 mg; 1,19 mmol) i THF (12 ml) under argonatmosfære ved 0 °C (isbad) ble det dryppet en oppløsning av LiOH i H2O (0,2 M). Reaksjonsblandingen ble kraftig omrørt ved romtemperatur, inntil total omdannelse var blitt registrert ved TLC (2 timer). Oppløsningen ble delvis konsentrert, og Et20 ble tilsatt (10 ml). Det organiske sjikt ble vasket med NaHC03(10 ml, mettet), og de sammenslåtte vandige sjikt ble surgjort med 10 % KHSO4(pH = 3-4) og ekstrahert med eter (3 x 20 ml). Det organiske sjikt ble konsentrert under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd 280 mg 8G9C1 (95 %) som et hvitt, fast stoff.
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 4,18 (d, J = 5,3, 2 H), 7,41 (m, 1 H), 7,45 (d, J = 7,8,1 H), 7,74 (d, J = 7,3,1 H), 7,78 (t, J = 8,3,1 H), 7,85 (d, J = 7,8,1 H), 8,89 (s, 1 H), 9,41 (m, 1 H).
ESI-MS beregnet for Ci2H9N05: 247,05. Funnet: 248,0 (M + H)<+>.
Eksempel 112
Svntese av rGlv18- rkumarinl9- didemnin A ( 8G9CSAPLD
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av 9ZASHPL2, med utgangspunkt i SAPL2 (20 mg; 21 pmol) og kumarin-3-karbonylaminoeddiksyre (26 mg; 105 pmol), ble 18 mg (72 %) av den ønskede forbindelse oppnådd som et hvitt, fast stoff etter HPLC ("Symetry Prep" Cl8, isokratisk ACN/H20 60:40, strømningsmengde: 3 ml/minutt 150 x 7,8 mm, ved 270 nm, tR= 17,5 minutter). 1 H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,85-0,94 (m, 24 H), 1,23-2,17 (m, 21 H), 2,30-2,44 (m, 1 H), 2,56 (s, 3 H), 3,01 (s, 3 H), 3,10-3,24 (m, 2 H), 3,40 (dd, J, = 5,4, J2= 14,2,1 H), 3,59-3,74 (m, 3 H), 3,79 (s, 3 H), 3,99-4,21 (m, 4 H), 4,37-4,44 (m, 1 H), 4,60 (m, 1 H), 4,68 (m, 1 H), 4,81 (t, J = 9,8,1 H), 5,18 (d, J = 3,4,1 H), 5,25 (dd, J, = 2,9, J2= 5,9,1 H), 5,20-5,45 (m, 1 H), 6,84 (d, J = 8,3,2 H), 7,08 (d, J = 8,3,2 H), 7,19-7,28 (m, 1 H), 7,34-7,42 (m, 2 H), 7,63-7,72 (m, 2 H), 7,88 (d, J = 8,3, 2 H), 9,00 (s, 1 H), 9,57 (m, 1 H).
ESI-MS beregnet for C6iH85N70,6: 1171,61. Funnet: 1172,5 (M + H)<+.>
Eksempel 113
Svntese av N- metvlsulfonvl- Pro- OBz ( P2)
Til en oppløsning av Pro-OBn (HC1) (300 mg; 1,24 mmol) i DCM (25 ml, vannfritt) ved 0 °C under argonatmosfære ble DIPEA (0,7 pl) og metansulfonylklorid (116 pl) tildryppet med en sprøyte. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. DCM (10 ml) ble tilsatt, og oppløsningen ble vasket suksessivt med vandig KHSO4(15 ml; 10 %), vandig NaHCC«3 (15 ml, mettet) og saltoppløsning (15 ml). Den organiske fase ble tørket (Na2SC<4), filtrert og konsentrert under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd rent P2 (350 mg; 1,24 mmol; kvantitativt utbytte) som et hvitt, fast stoff. Rf = 0,55 (heksan/AcOEt 1:1).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 1,91-2,08 (m, 3 H), 2,19-2,31 (m, 1 H), 2,93 (s, 3 H), 3,38-3,54 (m, 2 H), 3,65 (s, 3 H), 4,51 (dd, J, = 3,4, J2= 8,3,1 H), 5,11 (d, J = 12,2,1 H), 5,18 (d, J = 12,2, 1 H), 7,31 (m, 5 H).
ESI-MS beregnet for Ci3H,7N04S: 283,09. Funnet: 284,1 (M + H)<+.>
Eksempel 114
Svntese av N- metylsulfonvl- Pro- OH ( Pl)
En avgasset blanding av N-metylsulfonyl-Pro-OBz (P2) (250 mg; 0,88 mmol) og Pd(OH)2/C (20 % Pd, 100 mg; 40 vekt%) i IPA:H20 (26 ml: 13 ml) ble mettet med H2og holdt ved 1 atm hydrogengass under omrøring i 3 timer. Deretter ble blandingen filtrert gjennom et teflonfilter (0,45 pm) og konsentrert under vakuum. 128 mg (75 % utbytte) av den ønskede forbindelse ble oppnådd som et hvitt, fast stoff, som ikke ble underkastet noen ytterligere rensing. 1 H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 1,94-2,03 (m, 2 H), 2,07-2,14 (m, 1 H), 2,22-2,35 (m, 1 H), 2,96 (s, 3 H), 3,44 (m, 2 H), 4,44 (dd, J, = 3,9, J2= 8,8,2 H), 9,10 (m, 1 H).<I3>C-NMR (75 MHz, CDC13) 8 24,96, 31,08, 38,46,48,06, 60,66, 174,75. ESI-MS beregnet for C6Hi 1NO4S: 193,22. Funnet: 194,0 (M + H)<+>.
Eksempel 115
Svntese av [ metvlsulfonvll9- aplidin ( 9MSAPL11
Etter fremgangsmåten beskrevet for syntese av 9ZASHPL2, med utgangspunkt i SAPL2 (10 mg; 10,7 pmol) og N-metylsulfonyl-Pro-OH (10 mg; 53 pmol), ble 9 mg av den ønskede forbindelse (74 %) oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC ("Symetry Prep" Cl8, isokratisk ACN/H20 60:40, strømningsmengde: 3 ml/minutt, 150 x 7,8 mm, ved 270 nm, tR= 9 minutter).
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,78-1,00 (m, 24 H), 1,20-2,50 (m, 26 H), 2,56 (s, 3 H), 2,93 (m, 1 H), 3,04 (s, 3 H), 3,06 (s, 3 H), 3,08-3,25 (m, 2 H), 3,28-3,50 (m, 2 H), 3,60 (m, 2 H), 3,70 (m, 1 H), 3,79 (s, 3 H), 4,05 (m, 2 H), 4,17 (m, 1 H), 4,60 (m, 2 H), 4,81 (m, 2 H), 5,10 (m, 1 H), 5,19 (d, J = 3,4,1 H), 5,33 (m, 1 H), 6,84 (d, J = 8,3,2 H), 6,86 (m, 1 H), 7,07 (d, J = 8,3, 2 H), 7,09 (m, 1 H), 7,82 (d, J = 9,2, 1 H).
ESI-MS beregnet for CssHgvNvOisS: 1117,60. Funnet: 1118,7 (M + H)<+>.
Eksempel 116
Svntese av rmetvlsulfonvlf- didemnin A ( 8MSAPLD
Til en oppøsning av SAPL2 (10 mg; 10,7 pmol) i DCM (200 pl, vannfritt) ved
0 °C under argonatmosfære ble det tilsatt DIPEA (3 pl) og metansulfonylklorid (0,85 pl). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 5 °C natten over. DCM (10 ml) ble tilsatt, og oppløsningen ble vasket suksessivt med vandig KHS04(5 ml; 10 %), vandig NaHC03(5 ml, mettet) og saltoppløsning (5 ml). Den organiske fase ble tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert under redusert trykk, hvorved 11 mg rent 8MSAPL1 (kvantitativt utbytte) ble oppnådd som et hvitt, fast stoff.
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 5 0,83-0,97 (m, 24 H), 1,10-1,45 (m, 10 H), 1,50-1,65 (m, 5 H), 1,76-1,82 (m, 2 H), 2,00-2,20 (m, 3 H), 2,27-2,36 (m, 1 H), 2,45-2,55 (m, 1 H), 2,56 (s, 3 H), 2,90 (s, 3 H), 3,02 (s, 3 H), 3,08 (d, J = 16,6, 1 H), 3,17 (dd, Ji = 10,7, J2= 14,1, 1 H), 3,37 (m, 1 H), 3,60 (m, 2 H), 3,70 (m, 1 H), 3,79 (s, 3 H), 3,99-4,11 (m, 3 H), 4,49 (m, 1 H), 4,59 (m, 1 H), 4,78 (m, 2 H), 5,06 (m, 1 H), 5,19 (d, J = 3,9, 1 H), 6,68 (d, J = 8,8,1 H), 6,84 (d, J = 8,3,2 H), 7,07 (d, J = 8,3,2 H), 7,33 (d, J = 9,8,1 H), 7,61 (d, J = 8,8,1 H).
ESI-MS beregnet for C5oH8oN60|4S: 1020,55. Funnet: 1022,1 (M + H)<+>.
Eksempel 117
Svntese av rbiotinf- didemnin A ( 8BISAPLn
Til en oppløsning av HATU (24 mg; 61 pmol), HOAt (8 mg; 63 pmol), SAPL2 (20 mg; 21,4 pmol) og d-biotin (7,8 mg; 32 pmol), i vannfritt DCM (400 pl) ved 0 °C under argonatmosfære ble NMM tildryppet med en sprøyte. Den resulterende blanding ble omrørt i 2 timer ved 0 °C og deretter ved romtemperatur i ytterligere 14 timer. DCM (10 ml) ble tilsatt, og oppløsningen ble vasket suksessivt med vandig KHS04(5 ml, 10 %), vandig NaHC03(5 ml, mettet) og saltoppløsning (5 ml). Den organiske fase ble tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Den ønskede forbindelse (18 mg; 72 %) ble oppnådd som et hvitt, fast stoff etter rensing ved HPLC ("Symetry Prep" Cl 8, gradient ACN/H20 60:40-100:0 i 10 minutter, strømningsmengde: 3 ml/minutt 150 x 7,8 mm, ved 270 nm, tR= 6 minutter).
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,78-1,00 (m, 24 H), 1,20-1,98 (m, 23 H), 2,00-2,62 (m, 7 H), 2,53 (s, 3 H), 2,80-3,00 (m, 2 H), 2,86 (s, 3 H), 3,16 (m, 2 H), 3,35 (m, 2 H), 3,57 (m, 2 H), 3,70 (m, 1 H), 3,79 (s, 3 H), 4,01 (m, 2 H), 4,10 (m, 1 H), 4,31 (m, 1 H), 4,46 (m, 1 H), 4,56 (m, 1 H), 4,82 (m, 2 H), 5,00 (m, 1 H), 5,14 (m, 2 H), 5,67 (s, 1 H), 6,23 (s, 1 H), 6,84 (d, J
= 8,3,2 H), 7,07 (d, J = 8,3,2 H), 7,28 (d, J = 8,5,1 H), 7,35 (d, J = 7,8,1 H), 8,01 (d, J = 8,7, 1H).
ESI-MS beregnet for C59H92N80|4S: 1168,65. Funnet: 1169,6 (M + H)<+.>
Eksempel 118
Svntese av [" fenylurea18- didemnin A ( SPUSAPLl^)
Til en oppløsning av SAPL2 (10 mg; 10,7 pmol) i DCM (200 pl, vannfritt) ved 0 °C under argonatmosfære ble det tilsatt fenylisocyanat (1,3 pl, 12 pmol), og reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 4 timer. DCM (10 ml) ble tilsatt, og oppløsningen ble vasket suksessivt med vandig KHS04(5 ml; 10 %), vandig NaHC03(5 ml, mettet) og saltoppløsning (5 ml). Den organiske fase ble tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd 11 mg (94 %) rent 8PUSAPL1 som et hvitt, fast stoff.
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,85-0,94 (m, 24 H), 1,11-1,43 (m, 4II), 1,22 (d, J = 6,8, 3 H), 1,35 (d, J = 6,8, 3 H), 1,49-1,83 (m, 5 H), 1,73 (s, 3 H), 2,02 (m, 1 H), 2,14 (m, 2 H), 2,34 (dt, J, = 3,4, J2= 6,8, 1 H), 2,54 (s, 3 H), 2,91 (s, 3 H), 3,04 (d, J = 16,6,1 H), 3,17 (dd, J, = 11,2, J2= 14,6,1 H), 3,36 (dd, J, = 3,9, J2= 14,2,1 H), 3,57 (dd, J, = 4,4, J2= 10,7,1 H), 3,59-3,63 (m, 1 H), 3,67-3,75 (m, 1 H), 3,79 (s, 3 H), 3,96-4,10 (m, 2 H), 4,19 (q, J = 6,8,1 H), 4,58 (m, 1 H), 4,74 (dd, J, = 3,9, J2= 8,8,1 H), 4,78-4,85 (m, 1 H), 5,05 (m, 2 H), 5,17 (d, J = 3,4, 1 H), 6,52 (s, 1 H), 6,84 (d, J = 8,3, 2 H), 7,03-7,09 (m, 3 H), 7,22-7,32 (m, 4 H), 7,39 (d, J = 8,3, 2 H), 7,93 (d, J = 8,8, 1 H).
<I3>C-NMR (75 MHz, CDC13) 8 11,70,15,51,17,16,18,74,21,11, 22,41,23,29, 23,98, 24,94, 25,10, 25,32, 26,97, 28,18, 30,36, 31,57, 34,44, 36,51, 38,86, 41,64, 45,23,47,30, 49,80, 50,08, 54,60, 55,50, 56,06, 57,51, 62,77,66,45,68,17, 70,72, 81,93,114,36,120,76, 123,86, 129,12,130,04, 130,57, 138,78, 141,00, 157,78, 158,87, 169,92,170,68, 171,49, 172,43, 173,44,181,47,192,38,204,93, 206,66.
ESI-MS beregnet for C56H83N7O13: 1161,60. Funnet: 1062,6 (M + H)<+.>
Eksempel 119
Svntese av rfenvltioureal8- didemnin A ( 8PTSAPL11
Etter fremgangsmåten for syntese av SPUSAPL1, med utgangspunkt i SAPL2 (10 mg; 10,7 pmol) og fenyltioisocyanat (1,3 pl, 12 pmol), ble det etter 15 timers omrøring oppnådd 11 mg (93 %) av den ønskede forbindelse som et hvitt, fast stoff, uten ytterligere rensing.
'H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,84-0,99 (m, 24 H), 1,14-1,46 (m, 9 H), 1,46-1,78 (m, 9 H), 1,98-2,19 (m, 3 H), 2,34 (m, 1 H), 2,54 (s, 3 H), 2,91 (m, 1 H), 3,00 (s, 3 H), 3,08-3,21 (m, 1 H), 3,36 (dd, J, = 4,4, J2= 14,1,1 H), 3,55-3,64 (m, 2 H), 3,66-3,74 (m, 1 H), 3,79 (s, 3 H), 3,96-4,12 (m, 2 H), 4,21 (q, J = 6,8,1 H), 4,59 (t, J = 5,3,1 H), 4,75 (dd, Ji = 3,4, J2= 8,3,1 H), 4,83 (t, J = 10,3, 1 H), 5,05-5,12 (m, 2 H), 5,16 (d, J = 3,4,1 H), 6,30 (t, J = 7,3,1 H), 6,84 (d, J = 8,3,2 H), 7,07 (d, J = 8,3,2 H), 7,21-7,37 (m, 6 H), 7,93 (d, J = 8,8,1 H), 8,08 (d, J = 8,8, 1H).
<13>C-NMR(75 MHz, CDC13) 8 11,68,15,28,15,85,17,15,18,73,21,12, 22,73, 23,66,24,01,25,13,25,33,26,62, 28,16,29,92, 31,53, 32,42, 32,90, 34,41, 36,77, 38,86,41,69, 47,28, 50,12, 55,50, 56,48, 57,51, 59,87, 66,47, 70,75, 81,91,114,37, 125,25,125,95,126,57, 127,54,129,12,129,77, 130,06,130,57,135,43,158,88,168,54,169,90,170,70,171,49,172,38, 190,41.
ESI-MS beregnet for C56H83N7Ol2S: 1077,58. Funnet: 1078,5 (M + H)<+.>
Eksempel 120
Svntese av rbutvlureal "- didemnin A f8BUSAPLll
Etter fremgangsmåten for syntese av 8PUSAPL1, med utgangspunkt i SAPL2 (10 mg; 10,7 pmol) og butyltioisocyanat (1,4 pl, 12 pmol), ble det etter 4 timers omrøring oppnådd 9 mg (78 %) av den ønskede forbindelse som et hvitt, fast stoff, uten ytterligere rensing. 1 H-NMR (300 MHz, CDC13) 8 0,85-0,94 (m, 24 H), 1,10-1,80 (m, 24 H), 2,03 (m, 1 H), 2,13 (m, 2 H), 2,33 (m, 1 H), 2,55 (s, 3 H), 2,72 (s, 3 H), 3,02 (d, J = 16,1, 1 H), 3,17 (dd, J, = 11,2, h = 14,2, 1 H), 3,23-3,40 (m, 3 H), 3,62-3,78 (m, 3 H), 3,79 (s, 3 H), 4,03 (m, 2 H), 4,19 (q, J = 6,8,1 H), 4,58 (m, 2 H), 4,71 (dd, J, = 3,4, J2 = 8,3,1 H), 4,82 (m, 1 H), 5,00 (m, 2 H), 5,16 (d, J = 3,4,1 H), 5,22-5,28 (m, 2 H), 6,85 (d, J = 8,8,2 H), 7,08 (d, J = 8,3,2 H), 7,21-7,29 (m, 1 H), 7,96 (d, J = 9,2,1 H).
ESI-MS beregnet for C54H87N7O13: 1041,64. Funnet: 1042,7 (M + H)<+.>
Eksempel 121
Svntese av rbutvltioureal8- didemnin A ( 8BTSAPL11
Etter fremgangsmåten for syntese av 8PUSAPL1, med utgangspunkt i SAPL2 (10 mg; 10,7 pmol) og butyltioisocyanat (1,5 pl, 12 pmol), ble det etter 15 timers reaksjon oppnådd 10 mg (86 %) av den ønskede forbindelse som et hvitt, fast stoff, uten ytterligere rensing.
'H-NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,86-0,97 (m, 24 H), 1,14-1,78 (m, 27 H), 1,99-2,14 (m, 3 H), 2,34 (m, 1 H), 2,55 (s, 3 H), 2,88 (s, 3 H), 3,01 (d, J = 16,6,1 H), 3,16 (dd, J, = 11.2, J2= 14,6,1 H), 3,36 (dd, J, = 4,4, J2= 14,2,1 H), 3,49-3,74 (m, 3 H), 3,79 (s, 3 H), 4,02 (d, J = 6,8,2 H), 4,21 (q, J = 6,8,1 H), 4,58 (m, 1 H), 4,70 (dd, J, = 2,9, J2= 8,3,1 H), 4,82 (t, J = 10.3, 1 H), 5,07-5,12 (m, 2 H), 5,09 (d, J = 3,9, 1 H), 5,60 (m, 1 H), 6,36 (dd, J, = 5,4, J2= 8,3, 1 H), 6,84 (d, J = 8,8,2 H), 7,08 (d, J = 8,8,2 H), 7,84 (d, J = 8,3,1 H), 7,91 (d, J = 9,3,1 H). ESI-MS beregnet for C54H87N70,2S: 1057,61. Funnet: 1080,7 (M + Na)<+>.

Claims (32)

1. Forbindelse med formelen:
hvor: X på uavhengig basis er -C(R)2, -O-, -S- eller -NR-, hvor R på uavhengig basis er H eller en organisk gruppe valgt blant en Ci-Ci2-alkylgruppe, en C2-Ci2-alkenylgruppe, en C6-Cig-arylgruppe, en aralkylgruppe og substituerte derivater derav substituert med én eller flere grupper valgt blant en heterosyklisk gruppe som inneholder én, to eller tre heteroatomer valgt fra N, O eller S atomer, en C|-Ci2-alkoksygruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe og en halogengruppe; Y er -CO- eller -COCHCH3CO-; R4er H eller en organisk gruppe valgt blant en amidogruppe RCONH-, en acylgruppe RCO-, en Ci-Ci2-alkylgruppe, en C2-Ci2-alkenylgruppe, en C6-C|g-arylgruppe, en aralkylgruppe og substituerte derivater derav substituert med én eller flere grupper valgt blant en heterosyklisk gruppe som inneholder én, to eller tre heteroatomer valgt fra N, O eller S atomer, en Ci-Ci2-alkoksygruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe og en halogengruppe; hvor i hvert tilfelle R er en Ci-Ci2-alkylgruppe, en C2-Ci2-alkenylgruppe, en C6-Cig-arylgruppe, en aralkylgruppe og substituerte derivater derav substituert med en heterosyklisk gruppe som inneholder én, to eller tre heteroatomer valgt fra N, O eller S atomer, en Ci-Ci 2-alkoksygruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe eller en halogengruppe; Xi er O eller S; og når Y er-CO-, så a) er X2CR, O (og R2er fraværende), S (og R2er fraværende), eller N, hvor R uavhengig er H eller en organisk gruppe valgt blant en CrCi2-alkylgruppe, en C2-C|2-alkenylgruppe, en C6-Ci8-arylgruppe, en aralkylgruppe og substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en heterosyklisk gruppe som inneholder én, to eller tre heteroatomer valgt fra N, 0 eller S atomer, en Ci-Ci2-alkoksygruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe og en halogengruppe; og Ri og R2er uavhengig av hverandre H eller en organisk gruppe valgt blant en Ci-Ci2-alkylgruppe, en C2-Ci2-alkenylgruppe, en C6-Ci8-arylgruppe, en aralkylgruppe, en amidogruppe RCONH- og en acylgruppe RCO-, hvor R er en Ci-Ci2-alkylgruppe, en Ci-Ci2-alkenylgruppe, en C6-Ci8-arylgruppe, en aralkylgruppe eller substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en Ci-Ci2-alkoksygruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe og en halogengruppe, og Ri og R2kan, når X2er N, videre være -SO2R, hvor R er som definert; eller b) har aa8 formel
hvor R3er en organisk gruppe valgt blant en C|-Ci2-alkylgruppe, en C2-Ci2-alkenylgruppe, en Cé-Cis-arylgruppe, en aralkylgruppe, en gruppe RSO2- og en acylgruppe RCO-, hvor R er en en Ci-Ci2-alkylgruppe, en C2-Ci2-alkenylgruppe, en C6-Ci8-arylgruppe, en aralkylgruppe eller substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe eller en halogengruppe; eller c) danner Ri og R2sammen med X2et eventuelt substituert C3-Ci2-sykloalkyl, et eventuelt substituert C6-Cis-aryl eller en eventuelt substituert heterosyklisk gruppe valgt blant kumarinyl, kinolinyl, pyridyl, pyrazinyl, pyrimidyl, furyl, pyrrolyl, tienyl, tiazolyl, oksazolyl, imidazolyl, indolyl, benzofuranyl, benzotiazol, tetrahydrofuranyl, tetrahydropyranyl, piperidinyl og morfolino; hvor de eventuelle substituentene er valgt blant Ci-Ci2-alkylgruppe, C2-C12-alkenylgruppe, C6-Ci8-arylgruppe, aralkylgruppe og substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en karbonylgruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe og en halogengruppe; eller d) er aa8 erstattet med en organisk gruppe valgt blant en Cé-Cis-arylgruppe, en aralkylgruppe, en gruppe RSO2- og en acylgruppe RCO- hvor R er en Ci-Ci2-alkylgruppe, en C6-Cig-arylgruppe, en aralkylgruppe eller substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en karbonylgruppe, en Ci-Ci2-alkoksygruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en aminogruppe, en guanidinogruppe og en halogengruppe; når Y er -COCHCH3CO-, så a) er X2N, og Ri og R2er uavhengig av hverandre H eller en organisk gruppe valgt blant en C|-Ci2-alkylgruppe, en C2-Ci2-alkenylgruppe, en C6-Ci8-arylgruppe, en aralkylgruppe, en amidogruppe RCONH-, en gruppe -S02R og en acylgruppe RCO-, hvor R er en Ci-Ci 2- alkylgruppe, en C2-C)2-alkenylgruppe, en Cé-Cig-arylgruppe, en aralkylgruppe eller substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en heterosyklisk gruppe som inneholder én, to eller tre heteroatomer valgt fraN, 0 eller S atomer, en C1-C12-, en Ci-Ci2-alkoksygruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe eller en halogengruppe, eller b) har aa8 formel:
hvor R3er en gruppe RSO2- hvor R er Ci-Ci2-alkyl, eller R3er en C2-Ci2-alkenylgruppe, en aralkylgruppe eller substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en karbonylgruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe eller en halogengruppe; eller c) danner Ri og R2sammen med X2en eventuelt substituert C3-Ci2-sykloalkyl-, en eventuelt substituert C6-Cig-aryl- eller en eventuelt substituert heterosyklisk gruppe valgt blant kumarinyl, kinolinyl, pyridyl, pyrazinyl, pyrimidyl, furyl, pyrrolyl, tienyl, tiazolyl, oksazolyl, imidazolyl, indolyl, benzofuranyl, benzotiazol, tetrahydrofuranyl, tetrahydropyranyl, piperidinyl og morfolino; hvor de eventuelle substituentene er valgt blant Ci-Ci2-alkylgruppe, C2-C12-alkenylgruppe, C6-Ci8-arylgruppe, aralkylgruppe og substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en karbonylgruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en eventuelt beskyttet aminogruppe, en guanidinogruppe eller en halogengruppe; eller d) er aa8 erstattet med en organisk gruppe valgt blant en C6-Cig-arylgruppe, en aralkylgruppe og en gruppe RS02-, hvor R er en Ci-Ci2-alkylgruppe, en Cé-Cig-arylgruppe eller en aralkylgruppe, og substituerte derivater derav substituert med én eller flere av en Ci-Ci2-alkoksygruppe, en hydroksygruppe, en merkaptogruppe, en aminogruppe, en guanidinogruppe eller en halogengruppe; hvor aralkyl grupper er dannet av en Ci-Ci2-alkylgruppe substituert med en C6-Cig-arylgruppe og farmasøytisk akseptable salter derav.
2. Forbindelse ifølge krav 1, hvor X er -NR-, hvor R er som definert i krav 1.
3. Forbindelse ifølge krav 2, hvor X er -NH- eller -NMe-.
4. Forbindelse ifølge krav 3, hvor X er -NH-.
5. Forbindelse ifølge krav 1, hvor X er -0-.
6. Forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 1-5, hvor Y er -CO-.
7. Forbindelse ifølge krav 1, hvor X er -NH- eller -O-, og Y er -COCHCH3CO- eller -CO-.
8. Forbindelse ifølge et hvilket som helst av de foregående krav, hvor R4er metyl.
9. Forbindelse ifølge et hvilket som helst av de foregående krav, hvor X| er =0.
10. Forbindelse ifølge et hvilket som helst av de foregående krav, hvor X2R1er en eventuelt substituert aralkyloksygrupe.
11. Forbindelse ifølge krav 10, hvor X2R1er en benzyloksygruppe.
12. Forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 1 -9, hvor X2R1er en eventuelt substituert aminogruppe.
13. Forbindelse ifølge krav 12, hvor X2R1er en gruppe -NHRi, hvor Ri er en eventuelt substituert Ci-Ci2-alkylgruppe, C2-Ci2-alkenylgruppe, C6-Ci8-arylgruppe eller aralkylgruppe.
14. Forbindelse ifølge krav 13, hvor Ri er en Ci-Ci2-alkylgruppe eller en C6-Cig-arylgruppe.
15. Forbindelse ifølge krav 14, hvor Ri er en fenylgruppe eller en butylgruppe.
16. Forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 1 -9, hvor at X2Rier en eventuelt substituert Ci-Ci2-alkylgruppe.
17. Forbindelse ifølge krav 16, hvor X2R1er en propylgruppe, isopropylgruppe, pentylgruppe eller biotingruppe.
18. Forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 1 -9, hvor -C(=0)X2RiR2danner en eventuelt substituert aminosyreacylgruppe.
19. Forbindelse ifølge krav 18, hvor den eventuelt substituerte aminosyreacylgruppe er et substituert prolin.
20. Forbindelse ifølge krav 19, hvor det substituerte prolin er eventuelt substituert norvalin-prolin, eventuelt substituert alanin-prolin, Boc-prolin, eventuelt substituert alkyl-prolin.
21. Forbindelse ifølge krav 19, hvor det substituerte prolin er norvalin-prolin, Z-norvalin-prolin, alanin-prolin, Z-alanin-prolin, Boc-alanin-prolin, isobutyrylprolin eller eventuelt beskyttet D-laktylprolin.
22. Forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 1-8, hvor Xi er S, og at X2Rier en gruppe -NHRi, hvor R]er en eventuelt substituert Ci-Ci2-alkylgruppe, C2-Ci2-alkenylgruppe, C6-Ci8-arylgruppe eller aralkylgruppe.
23. Forbindelse ifølge krav 22, hvor Ri en Ci-Ci2-alkylgruppe eller en Q-Cig-arylgruppe.
24. Forbindelse ifølge krav 23, hvor Ri en fenylgruppe eller en butylgruppe.
25. Forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 1-9, hvor Ri og R2sammen med X2danner en eventuelt substituert heterosyklisk gruppe.
26. Forbindelse ifølge krav 25, hvor den heterosykliske gruppe er kumarin.
27. Forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 1-8, hvor aa8 er erstattet med en organisk gruppe RSO2-, hvor R er som definert i krav 1.
28. Forbindelse ifølge krav 27, hvor R er metyl.
29. Forbindelse ifølge krav 1, hvor den er valgt blant: 8-[fenylurea]-didemnin A, 8-[butylurea]-didemnin A, 3 -[Val] -8- [isobutyryl] -didemnin A, 3 - [Hi v] -9- [i sobutyry 1] -aplidin, 3 - [Val]-9- [isobutyryl] -aplidin, 3-[Hiv]-8-[isobutyryl]-didemnin A, 3-[Hiv]-9-[Ala]-aplidin, 3-[Hiv]-9-[Nva]-aplidin, 8-[fenyltiourea]-didemnin A, 8-[kumarin]-didemnin A, 8-[butyltiourea]-didemnin A, 8-[metylsulfonyl]-didemnin A, 3-[Val]-Z-didemnin A, 3-[Hiv]-8-[Val]-didemnin A, 3-[Hiv]-8-[butyryl]-didemnin A, 3-[Hiv]-9-[Z-Ala]-aplidin, 3-[Hiv]-Z-didemnin A, 3-[Hiv]-9-[Z-Nva]-aplidin, 3-[Hiv]-9-[Boc-Ala]-aplidin, 3-[Hiv]-8-[Boc-Val]-didemnin A, 3-[Hiv]-8-[Val]-9-[isobutyryl]-didemnin A, 3-[Hiv]-8-[heksanoyl]-didemnin A, 9-[metylsulfonyl]-aplidin.
30. Forbindelse,karakterisert vedat den er valgt blant: 9-[norvalin]-aplidin, 3-[Val]-didemnin A, 3-[Hiv]-didemnin A, 9-[Z-Nva]-aplidin, 8-[Gly]-9-[kumarin]-didemnin A, 8-[biotin]-didemnin A, 3-[Hiv]-7,8-[spiro]-9-[Boc]-aplidin, 7,8-[spiro]-9-[pyr]-aplidin, 3-[Hiv]-9-[lac(OTBDMS)]-aplidin 7,8-[spiro]-9-[Boc]-aplidin, 3-[Val]-9-[lac(OTBDMS)]-aplidin 3-[Hiv]-9-[D-lac(OTBDMS)]-aplidin 7,8- [spiro] -9- [i sobutyryl] -aplidin, 3-[Hiv]-7,8-[spiro]-9-[pyr]-aplidin, 3-[Hiv]-7,8-[spiro]-9-[isobutyryl]-aplidin, 3-[Hiv]-7,8-[spiro]-9-[akryloyl]-aplidin og 3-[Aip]-aplidin.
31. Forbindelse ifølge krav 29, hvor den er 8-[fenylurea]-didemnin A.
32. Forbindelse ifølge et hvilket som helst av de foregående krav, hvor den har form av et farmasøytisk aksepterbart salt
NO20026242A 2000-06-30 2002-12-27 Nye antitumorale derivater avledet fra aplidin NO334096B1 (no)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB0016148A GB0016148D0 (en) 2000-06-30 2000-06-30 Synthetic methods for aplidine and new antitiumoral derivatives
GB0103750A GB0103750D0 (en) 2001-02-15 2001-02-15 Synthetic methods for aplidine and new antitumoral derivatives methods of making and using them
PCT/GB2001/002901 WO2002002596A2 (en) 2000-06-30 2001-07-02 Synthetic methods for aplidine and new antitumoral derivatives, methods of making and using them

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO20026242D0 NO20026242D0 (no) 2002-12-27
NO20026242L NO20026242L (no) 2003-02-27
NO334096B1 true NO334096B1 (no) 2013-12-09

Family

ID=26244577

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20026242A NO334096B1 (no) 2000-06-30 2002-12-27 Nye antitumorale derivater avledet fra aplidin

Country Status (25)

Country Link
US (2) US7348310B2 (no)
EP (1) EP1294747B1 (no)
JP (1) JP5289662B2 (no)
KR (1) KR100866056B1 (no)
CN (2) CN104650177A (no)
AT (1) ATE393775T1 (no)
AU (1) AU6769801A (no)
BR (1) BRPI0112375B8 (no)
CA (1) CA2414609C (no)
CY (1) CY1108549T1 (no)
CZ (1) CZ304204B6 (no)
DE (1) DE60133817T2 (no)
DK (1) DK1294747T3 (no)
ES (1) ES2305083T3 (no)
HK (1) HK1052940B (no)
HU (1) HU228998B1 (no)
IL (2) IL153680A0 (no)
MX (1) MXPA03000202A (no)
NO (1) NO334096B1 (no)
NZ (1) NZ523367A (no)
PL (1) PL208651B1 (no)
PT (1) PT1294747E (no)
SI (1) SI1294747T1 (no)
UA (1) UA76718C2 (no)
WO (1) WO2002002596A2 (no)

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030148933A1 (en) 1990-10-01 2003-08-07 Pharma Mar S.A. Derivatives of dehydrodidemnin B
GB9803448D0 (en) 1998-02-18 1998-04-15 Pharma Mar Sa Pharmaceutical formulation
MXPA02004862A (es) * 1999-11-15 2003-01-28 Pharma Mar Sa Tratamiento de aplidina para canceres.
US6509315B1 (en) 2000-04-07 2003-01-21 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Didemnin analogs and fragments and methods of making and using them
JP2003535048A (ja) 2000-04-07 2003-11-25 ザ・トラステイーズ・オブ・ザ・ユニバーシテイ・オブ・ペンシルベニア タマンダリンおよびジデムニン同族体およびそれらの作成および使用法
UA76718C2 (uk) 2000-06-30 2006-09-15 Фарма Мар, С.А. Протипухлинні похідні аплідину
RU2003113210A (ru) 2000-10-12 2004-11-27 Фарма Мар, С.А. (Es) Лечение раковых заболеваний
SI1603584T1 (sl) 2003-03-12 2009-02-28 Dana Farber Cancer Inst Inc Aplidin za zdravljenje multiple mieloma
CN101579520A (zh) 2003-03-12 2009-11-18 达纳-法伯癌症协会有限公司 用于多发性骨髓瘤的治疗的aplidine
EP1613338A4 (en) 2003-03-21 2009-06-24 Madeleine M Joullie TAMANDARIN ANALOGUES, FRAGMENTS THEREOF AND METHODS OF MAKING AND USING THE SAME
WO2007100385A2 (en) * 2005-10-31 2007-09-07 Genentech, Inc. Macrocyclic depsipeptide antibody-drug conjugates and methods
ME02450B (me) * 2006-02-28 2016-09-20 Pharma Mar Sa POBOLJŠANO LIJEČENJE MULTlPLOG MIJELOMA
US20100240595A1 (en) * 2007-10-19 2010-09-23 Pharma Mar ,S.A. Improved Antitumoral Treatments
CN101965191A (zh) * 2008-03-07 2011-02-02 法马马有限公司 改善的抗癌治疗
WO2011020913A2 (en) 2009-08-21 2011-02-24 Pharma Mar, S.A. Cyclodepsipeptide antiviral compounds
JP2013537181A (ja) * 2010-09-10 2013-09-30 サノフイ 抗血栓活性及び改善された代謝安定性を有するビオチン化多糖類
JOP20190254A1 (ar) 2017-04-27 2019-10-27 Pharma Mar Sa مركبات مضادة للأورام
EP4114436A1 (en) 2020-03-02 2023-01-11 Pharma Mar S.A. Compounds for use in the treatment of coronavirus infection
PE20230302A1 (es) 2020-03-02 2023-02-13 Pharma Mar Sa Pld para su uso combinado en el tratamiento del coronavirus
US20230159594A1 (en) 2020-03-02 2023-05-25 Pharma Mar, S.A. Compounds for use in viral infections
US20230158104A1 (en) 2020-03-02 2023-05-25 Pharma Mar, S.A. Compounds for use in autoimmune conditions
CN115594739A (zh) * 2021-06-28 2023-01-13 浙江珲达生物科技有限公司（Cn） 一种dehydrodidemnin B类化合物的制备方法
WO2024165764A1 (en) 2023-02-10 2024-08-15 Pharma Mar, S.A. Plitidepsin for use in the treatment of non-integrated dna viral infections

Family Cites Families (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4493796A (en) * 1980-09-12 1985-01-15 Board Of Trustees, Univ. Of Ill. Didemnins A, B, C, and derivatives thereof, as antiviral agents
US4950649A (en) * 1980-09-12 1990-08-21 University Of Illinois Didemnins and nordidemnins
DE3161556D1 (en) 1980-09-12 1984-01-05 Univ Illinois Novel antibiotics, derivatives thereof, processes for their extraction, and compositions containing them
IT1153974B (it) * 1982-09-23 1987-01-21 Erba Farmitalia Composizioni farmacologiche a base di cisplatino e metodo per il loro ottenimento
US4948791A (en) * 1989-04-10 1990-08-14 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Novel Cytotoxic cyclic depsipeptides from the tunicate trididemnum solidum
GB8922026D0 (en) * 1989-09-29 1989-11-15 Pharma Mar Sa Novel anti-viral and cytotoxic agent
DE4120327A1 (de) * 1991-06-20 1992-12-24 Basf Ag Neue peptide, ihre herstellung und verwendung
US5462726A (en) * 1993-12-17 1995-10-31 Bristol-Myers Squibb Company Method of inhibiting side effects of solvents containing ricinoleic acid or castor oil or derivatives thereof employing a thromboxane A2 receptor antagonist and pharmaceutical compositions containing such solvents
US5861439A (en) * 1994-11-14 1999-01-19 Alza Corporation Method for enhanced electrotransport agent delivery
US6509316B2 (en) * 1995-03-07 2003-01-21 George Washington University Pharmaceutical compositions, methods, and kits for treatment and diagnosis of lung cancer
ES2102322B1 (es) * 1995-07-13 1998-03-01 Pharma Mar Sa Procedimiento de preparacion de didemnina a.
JP4172726B2 (ja) * 1996-05-22 2008-10-29 ルイトポルド・ファーマシューティカルズ・インコーポレーテッド シス―ドコサヘキサエン酸とドセタキセルとの共有複合体を含有する製剤
US6156724A (en) * 1996-06-07 2000-12-05 Rinehart; Kenneth L. Uses of didemnins as immunomodulating agents
DE69723728T2 (de) * 1996-10-24 2004-06-03 The Board Of Trustees For The University Of Illinois, Urbana Totalsynthese des amino hip analogen von didemnin a
DE69735583T2 (de) * 1996-10-24 2007-04-05 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois, Urbana Semisynthetisches verfahren zur herstellung von didemninanalogen
US6034058A (en) * 1997-04-15 2000-03-07 Rinehart; Kenneth L. Semi-synthetic alanyl dilemnin analogs
CA2288639A1 (en) * 1997-05-07 1998-11-12 Pharma Mar, S.A. Aplidine as an l-type calcium channel enhancer
GB9803448D0 (en) 1998-02-18 1998-04-15 Pharma Mar Sa Pharmaceutical formulation
PT1100589E (pt) * 1998-07-30 2005-05-31 Sigma Tau Ind Farmaceuti Utilizacao de propionil-l-carnitina e acetil-l-carnitina na preparacao de medicamentos com actividade anticancerigena
US6890904B1 (en) * 1999-05-25 2005-05-10 Point Therapeutics, Inc. Anti-tumor agents
JP2003500360A (ja) 1999-05-25 2003-01-07 ポイント セラピューティクス， インコーポレイテッド ボロプロリン化合物類を含む抗癌剤
MXPA02004862A (es) 1999-11-15 2003-01-28 Pharma Mar Sa Tratamiento de aplidina para canceres.
JP2003535048A (ja) * 2000-04-07 2003-11-25 ザ・トラステイーズ・オブ・ザ・ユニバーシテイ・オブ・ペンシルベニア タマンダリンおよびジデムニン同族体およびそれらの作成および使用法
US6509315B1 (en) * 2000-04-07 2003-01-21 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Didemnin analogs and fragments and methods of making and using them
UA76718C2 (uk) * 2000-06-30 2006-09-15 Фарма Мар, С.А. Протипухлинні похідні аплідину
JP2004510824A (ja) 2000-10-12 2004-04-08 ファルマ・マール・ソシエダード・アノニマ ガンの治療
ATE411036T1 (de) 2001-10-19 2008-10-15 Pharma Mar Sa Verwendung von aplidine in der behandlung von pankreaskrebs
CN101579520A (zh) 2003-03-12 2009-11-18 达纳-法伯癌症协会有限公司 用于多发性骨髓瘤的治疗的aplidine

Also Published As

Publication number Publication date
IL153680A0 (en) 2003-07-06
DK1294747T3 (da) 2008-10-27
CY1108549T1 (el) 2014-04-09
AU6769801A (en) 2002-01-14
UA76718C2 (uk) 2006-09-15
HK1052940B (zh) 2008-10-24
NZ523367A (en) 2004-12-24
JP5289662B2 (ja) 2013-09-11
NO20026242D0 (no) 2002-12-27
KR20030013477A (ko) 2003-02-14
NO20026242L (no) 2003-02-27
KR100866056B1 (ko) 2008-10-30
CZ304204B6 (cs) 2014-01-02
CN1449408A (zh) 2003-10-15
PT1294747E (pt) 2008-08-08
BRPI0112375B8 (pt) 2021-05-25
PL360531A1 (en) 2004-09-06
US20080009435A1 (en) 2008-01-10
DE60133817D1 (de) 2008-06-12
BR0112375A (pt) 2003-06-24
CZ20024233A3 (cs) 2003-06-18
PL208651B1 (pl) 2011-05-31
CA2414609A1 (en) 2002-01-10
CA2414609C (en) 2012-04-24
SI1294747T1 (sl) 2008-12-31
HK1052940A1 (en) 2003-10-03
ATE393775T1 (de) 2008-05-15
BRPI0112375B1 (pt) 2020-12-01
CN104650177A (zh) 2015-05-27
MXPA03000202A (es) 2003-10-15
US7348310B2 (en) 2008-03-25
ES2305083T3 (es) 2008-11-01
US20040097413A1 (en) 2004-05-20
JP2004502702A (ja) 2004-01-29
DE60133817T2 (de) 2009-05-20
HUP0301387A3 (en) 2005-04-28
WO2002002596A3 (en) 2002-05-23
WO2002002596A2 (en) 2002-01-10
IL153680A (en) 2012-05-31
HUP0301387A2 (hu) 2003-08-28
US7678765B2 (en) 2010-03-16
HU228998B1 (en) 2013-07-29
EP1294747A2 (en) 2003-03-26
EP1294747B1 (en) 2008-04-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US7678765B2 (en) Synthetic methods for aplidine and new antitumoral derivatives, methods of making and using them
EP2780039B1 (en) Cytotoxic peptides and antibody drug conjugates thereof
US7737114B2 (en) Didemnin analogs and fragments and methods of making and using them
EP1276491B1 (en) Tamandarin and didemnin analogs and methods of making and using them
EP2836485B1 (en) Conformationally constrained, fully synthetic macrocyclic compounds
JP2006523214A (ja) タマンダリン類似物およびこれらのフラグメントそして製造方法および使用方法
Pfizenmayer et al. Synthesis and biological activities of [N-MeLeu5]-and [N-MePhe5]-didemnin B
WO2016179398A1 (en) Isoform-selective lysine deacetylase inhibitors
RU2299887C2 (ru) Способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных, способы их промышленного получения и применения
EP4303221A1 (en) Novel tetrahydroisoquinoline alkaloid compound containing macrocycle
AU2001267698B2 (en) Synthetic methods for aplidine and new antitumoral derivatives, methods of making and using them
AU2001267698A1 (en) Synthetic methods for aplidine and new antitumoral derivatives, methods of making and using them
EP3759108B1 (de) Polyprolin-mimetika des prolin-abgeleiteten moduls-15
CN101575363B (zh) Aplidine及新抗肿瘤衍生物的合成方法、及其制备和使用方法
CN101568543B (zh) 大环肽作为丙型肝炎病毒抑制剂
ES2356273T3 (es) Péptidos macrocíclicos como inhibidores del virus de la hepatitis c.
NZ624470B2 (en) Cytotoxic peptides and antibody drug conjugates thereof

Legal Events

Date Code Title Description
MK1K Patent expired