CN101965191A

CN101965191A - 改善的抗癌治疗

Info

Publication number: CN101965191A
Application number: CN2009801081361A
Authority: CN
Inventors: 多琳·莱帕赫; 巴勃罗曼努埃尔·阿维莱斯马林; 玛丽亚何塞·纪廉纳瓦罗
Original assignee: Pharmamar SA
Current assignee: Pharmamar SA
Priority date: 2008-03-07
Filing date: 2009-03-06
Publication date: 2011-02-02
Also published as: KR20100131474A; EP2262523A1; US20110009335A1; RU2010140888A; JP2011513429A; AU2009221720A1; IL208001A0; MX2010009697A; WO2009111698A1; CA2717409A1

Abstract

本发明涉及阿普立定和另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物的联合，和所述联合在癌症治疗中的用途。

Description

改善的抗癌治疗

技术领域

本发明涉及阿普立定(aplidine)和其它的抗癌药的组合，特别地其它的抗癌药选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物(temsirolimus)，并且本发明涉及该组合治疗癌症中的用途。

发明背景

当身体的一部分的细胞开始失去控制地生长时，癌症就产生了。虽然有许多种癌症，但是它们全都是由异常细胞的不受控制的生长所引发的。癌细胞能够侵入邻近的组织，并能够通过血流和淋巴系统蔓延至身体的其它部分。癌症有几种主要类型。上皮癌是一种产生于上皮细胞的恶性肿瘤，其不受控制的和渐进的异常生长。上皮细胞覆盖身体的内外表面，包括器官，血管膜(lining of vessels)和其他的小腔。肉瘤是产生于骨、软骨、脂肪、肌肉、血管或其它的结缔组织或支持组织中的细胞的癌。白血病是产生于血液形成组织例如骨髓的癌，导致大量的异常的血细胞产生并进入血流。淋巴瘤和多发性骨髓瘤是产生于免疫系统的细胞的癌。

此外，癌症具有扩散性，倾向于渗入到周围组织并引起转移。它能够直接地扩散到周围组织，也可以通过淋巴和循环系统扩散至身体的其他部分。

对于癌症有许多治疗方法，包括对局部病灶的手术和放射疗法，以及化疗。然而，现有的治疗方法对于许多癌症类型的效力是有限的，需要表现临床受益的新的、改进形式的疗法。对于患有晚期和/或转移性的疾病的患者尤其如此，并且对于以前曾经用已有疗法治疗过的复发进行性疾病的患者也是如此，在这些病人中，由于获得了耐药性或由于相关毒性而导致的治疗实施的限制，已有治疗通常没有效果或无法忍受。

自从20世纪50年代，在癌症的化学治疗的管理上已经取得了显著的进步。令人遗憾地，所有癌症患者中50％以上对最初的治疗没有响应，或者在对疗法初始响应后经历复发，并且最终死于进行性转移疾病。因此，目前致力于设计和发现新的抗癌试剂是非常重要的。

经典形式的化疗主要集中在通过靶向常规细胞的代谢过程来杀死迅速增殖的癌细胞，所述代谢过程包含DNA、RNA和蛋白质生物合成。化疗药物根据它们如何影响癌细胞内特定的化学物质、该药物干扰了何种细胞的活性或过程和该药物影响了细胞周期的哪个特定的阶段而被分成几个组。最常用的化疗药物的类型包括：DNA-烷基化药物(如环磷酰胺、异环磷酰胺、顺铂、卡铂、氮烯唑胺)，抗代谢物(5-氟尿嘧啶、卡培他滨、6-巯基嘌呤、氨甲蝶呤、吉西他滨、阿糖胞苷、氟达拉滨)，有丝分裂抑制剂(如紫杉醇、多西紫杉醇、长春花碱、长春新碱)，蒽环类抗生素(如柔红霉素、阿霉素、表柔比星、伊达比星、米托蒽醌)，拓扑异构酶I和II抑制剂(如托泊替康、依立替康、依托泊苷、替尼泊苷)，和激素治疗(如它莫西芬、氟他胺)。

理想抗肿瘤药物可以选择性地杀死癌细胞，同时针对非癌细胞相对于其毒性具有一个广义指数，并且即使在长时间暴露于药物之后，也可以保持它对于癌细胞的效力。令人遗憾地，用已知的试剂的现有的化疗都不具有理想的性质。大部分的具有非常窄的治疗指数，此外，暴露于稍低于致死浓度的化疗药物中的癌细胞可能形成对类似试剂的耐药性，并常常形成对几种其它的抗肿瘤试剂的交叉耐药性。

阿普立定(脱氢膜海鞘素B)是环状缩酚肽，它是从地中海海洋被囊动物Aplidium albicans中分离出来的，并且是WO 91/04985的主题。其涉及已知为膜海鞘素的化合物，并具有以下结构：

关于阿普立定、其应用、制剂和合成的更多的信息可见于专利申请WO91/04985、WO 99/42125、WO 01/35974、WO 01/76616、WO 2004/084812、WO 02/30441、WO 02/02596、WO 03/33013、WO 2004/080477、WO2004/080421、WO 2007/101235、WO 2008/135793和PCT/EP2008/064117。通过具体引用，我们将这些专利申请文本的内容并入本文。

在动物临床前研究和人临床I期研究中，阿普立定都已经显示具有针对广谱的肿瘤类型包括白血病和淋巴瘤的潜在的细胞毒性。例如参见：

Faircloth，G.等.：″Dehydrodidemnin B(DDB)a new marine derived anticancer agent with activity against experimental tumour models″，9thNCI-EORTC Symp.New Drugs Cancer Ther.(March 12-15，Amsterdam)1996，Abst 111；

Faircloth，G.等：″Preclinical characterization of Aplidine，a new marine anticancer depsipeotide″，Proc.Amer.Assoc.Cancer Res.1997，38：Abst 692；

Depenbrock H，Peter R，Faircloth GT，Manzanares I，Jimeno J，Hanauske AR.：“In vitro activity of Aplidine，a new marine-derived anti-cancer compound，on freshly explanted clonogenic human tumour cells and haematopoietic precursor cells”Br.J.Cancer，1998；78：739-744；

Faircloth G，Grant W，Nam S，Jimeno J，Manzanares I，Rinehart K.：“Schedule-dependency of Aplidine，a marine depsipeptide with antitumor activity”，Proc.Am.Assoc.Cancer Res.1999；40：394；

Broggini M，Marchini S，D’Incalci M，Taraboletti G，Giavazzi R，Faircloth G，Jimeno J.：“Aplidine blocks VEGF secretion and VEGF/VEGF-R1autocrine loop in a human leukemic cell line”，Clin.Cancer Res.2000；6(suppl)：4509；

Erba E，Bassano L，Di Liberti G，Muradore I，Chiorino G，Ubezio P，Vignati S，Codegoni A，Desiderio MA，Faircloth G，Jimeno J and D’Incalci M.：“Cell cycle phase perturbations and apoptosis in tumour cells induced by aplidine”，Br.J.Cancer 2002；86：1510-1517；

Paz-Ares L，Anthony A，Pronk L，Twelves C，Alonso S，Cortes-Funes H，Celli N，Gomez C，Lopez-Lazaro L，Guzman C，Jimeno J，Kaye S.：“Phase I clinical and pharmacokinetic study of aplidine，a new marine didemnin，administered as 24-hour infusion weekly”Clin.Cancer Res.2000；6(suppl)：4509；

Raymond E，Ady-Vago N，Baudin E，Ribrag V，Faivre S，Lecot F，Wright T，Lopez Lazaro L，Guzman C，Jimeno J，Ducreux M，Le Chevalier T，Armand JP.：“A phase I and pharmacokinetic study of aplidine given as a 24-hour continuous infusion every other week in patients with solid tumor and lymphoma”，Clin.Cancer Res.2000；6(suppl)：4510；

Maroun J，Belanger K，Seymour L，Soulieres D，Charpentier D，Goel R，Stewart D，Tomiak E，Jimeno J，Matthews S.：“Phase I study of aplidine in a 5天bolus q 3weeks in patients with solid tumors and lymphomas”，Clin.Cancer Res.2000；6(suppl)：4509；

Izquierdo MA，Bowman A，Martinez M，Cicchella B，Jimeno J，Guzman C，Germa J，Smyth J.：“Phase I trial of aplidine given as a 1 hour intravenous weekly infusion in patients with advanced solid tumors and lymphoma”，Clin.Cancer Res.2000；6(suppl)：4509。

机制研究表明阿普立定可以在ALL-MOLT4细胞中阻滞VEGF分泌，并且在来自儿科患者中的AML和ALL样品中观察到低浓度(5nM)下的体外细胞毒活性，所述儿科患者患有原发或复发的ALL和AML。阿普立定表现出在药物处理的白血病细胞中体外诱导G1和G2阻滞。除了下调VEGF受体之外，人们对阿普立定的其它作用方式了解的很少。

在阿普立定的I期临床研究中，以24小时预处理或共同施用L-肉毒碱来防止骨髓毒性，参见例如WO 02/30441。共同施用L-肉毒碱被认为能够提高药物诱导的肌肉毒性的恢复。

以前，为了评估测定的药物组合在治疗白血病和淋巴瘤的联合治疗中是否有用，用阿普立定联合其它的抗癌试剂进行体外和体内测定。在WO2004/080421中，对阿普立定和氨甲蝶呤、阿糖胞苷、米托蒽醌、长春花碱、甲泼尼龙、多柔比星的联合治疗白血病和淋巴瘤进行了具体地评估。在另一个方面，在WO 2007/101235中，对阿普立定和紫杉醇、多柔比星、顺铂、三氧化二砷、5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷、卡铂、7-乙基-10-羟基喜树碱、依托泊苷、美法仑、地塞米松、环磷酰胺、硼替佐米、埃罗替尼、曲妥单抗、来那度胺、白介素-2、干扰素-α2、氮烯唑胺、贝伐单抗、伊达比星、沙利度胺和利妥昔单抗的联合治疗肺癌、乳腺癌、结肠癌、前列腺癌、肾癌、黑色素瘤、多发性骨髓瘤、白血病和淋巴瘤进行了具体地评估。在WO 2008/135793中，对阿普立定和卡铂的组合进行了具体地评估，提供了适合将两种药物的组合施用给人类患者的列表和剂量。最后，在PCT/EP2008/064117中，对阿普立定和吉西他滨联合治疗胰腺癌进行了具体地评估。

由于癌症是动物和人死亡的主要原因，为了获得可以向患有癌症的患者实施的安全且有效的治疗手段，人们已经做了许多努力并且仍在继续努力。本发明所要解决的问题是提供能有效治疗癌症的抗癌疗法。

发明概述

本发明证实阿普立定可加强其它的抗癌试剂，特别是索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物，因此阿普立定及其他抗癌试剂可以成功地用于癌症治疗的联合治疗。因此，本发明涉及药物组合物，试剂盒，使用联合治疗来治疗癌症的方法，以及阿普立定在制备用于联合治疗的药物中的用途。

根据本发明的一个方面，基于阿普立定，使用另一种选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物，我们对于癌症的治疗提供了有效的联合治疗。

在另一个实施例中，本发明包括一种治疗癌症的方法，其包括给需要类似治疗的患者施用治疗有效量的阿普立定或其药物学上可接受的盐，并在施用阿普立定之前、同时或之后施用治疗有效量的另一种选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐。所述两种药物可以形成同一组合物的组成部分，或作为单独的组合物而提供，从而可在相同时间或不同时间施用。

在另一个方面，本发明包括一种加强癌症药物治疗效能的方法，所述抗癌药物选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物，其包括给有需要的患者施用治疗有效量的阿普立定或其药物学上可接受的盐。阿普立定在施用索拉非尼、舒尼替尼或西罗莫司脂化物之前、同时或之后施用。

在另一个实施例中，本发明包括阿普立定或其药物学上可接受的盐在制备用于治疗癌症的药物中的用途，所述药物和另一种选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物联合治疗。

在一个相关的实施例中，本发明包括选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐在制备用于治疗癌症的药物中的用途，所述药物和阿普立定联合治疗。

在又一方面，本发明包括用于癌症治疗的联合治疗的一种药物组合物，所述组合物包含阿普立定或其药物学上可接受的盐，和/或另一种选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐。

本发明也包括一种用于癌症治疗的试剂盒，其包含阿普立定或其药物学上可接受的盐的剂型，和/或另一种选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐的剂型，以及两种药物联合使用的说明书。

在一个优选的方面，本发明涉及阿普立定或其药物学上可接受的盐，和另一种选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐的协同联合。

附图说明

图1用对照(载体)、阿普立定索拉非尼或阿普立定加索拉非尼处理的小鼠中CAKI-1肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.06mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按60mg/kg/天的剂量施用索拉非尼。在植入13天后开始治疗。

图2用对照(载体)、阿普立定

索拉非尼或阿普立定加索拉非尼处理的小鼠中CAKI-1肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.06mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按30mg/kg/天的剂量施用索拉非尼。在植入13天后开始治疗。

图3用对照(载体)、阿普立定索拉非尼或阿普立定加索拉非尼处理的小鼠中CAKI-1肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.04mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按60mg/kg/天的剂量施用索拉非尼。在植入13天后开始治疗。

图4用对照(载体)、阿普立定

索拉非尼或阿普立定加索拉非尼处理的小鼠中CAKI-1肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.04mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按30mg/kg/天的剂量施用索拉非尼。在植入13天后开始治疗。

图5用对照(载体)、阿普立定

索拉非尼或阿普立定加索拉非尼处理的小鼠中MRI-H-121肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.06mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按60mg/kg/天的剂量施用索拉非尼。在植入14天后开始治疗。

图6用对照(载体)、阿普立定

索拉非尼或阿普立定加索拉非尼处理的小鼠中MRI-H-121肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.06mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按30mg/kg/天的剂量施用索拉非尼。在植入14天后开始治疗。

图7用对照(载体)、阿普立定

索拉非尼或阿普立定加索拉非尼处理的小鼠中MRI-H-121肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.04mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按60mg/kg/天的剂量施用索拉非尼。在植入14天后开始治疗。

图8用对照(载体)、阿普立定

索拉非尼或阿普立定加索拉非尼处理的小鼠中MRI-H-121肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.04mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按30mg/kg/天的剂量施用索拉非尼。在植入14天后开始治疗。

图9用对照(载体)、阿普立定

索拉非尼或阿普立定加索拉非尼处理的小鼠中A498肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.06mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按60mg/kg/天的剂量施用索拉非尼。在植入26天后开始治疗。

图10用对照(载体)、阿普立定

索拉非尼或阿普立定加索拉非尼处理的小鼠中A498肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.06mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按30mg/kg/天的剂量施用索拉非尼。在植入26天后开始治疗。

图11用对照(载体)、阿普立定

索拉非尼或阿普立定加索拉非尼处理的小鼠中A498肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.04mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按60mg/kg/天的剂量施用索拉非尼。在植入26天后开始治疗。

图12用对照(载体)、阿普立定索拉非尼或阿普立定加索拉非尼处理的小鼠中A498肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.04mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按30mg/kg/天的剂量施用索拉非尼。在植入26天后开始治疗。

图13用对照(载体)、阿普立定

舒尼替尼

或阿普立定加舒尼替尼处理的小鼠中CAKI-1肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.06mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按40mg/kg/天的剂量施用舒尼替尼。在植入23天后开始治疗。

图14用对照(载体)、阿普立定

舒尼替尼

或阿普立定加舒尼替尼处理的小鼠中CAKI-1肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.06mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按30mg/kg/天的剂量施用舒尼替尼。在植入23天后开始治疗。

图15用对照(载体)、阿普立定舒尼替尼

或阿普立定加舒尼替尼处理的小鼠中CAKI-1肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.04mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按40mg/kg/天的剂量施用舒尼替尼。在植入23天后开始治疗。

图16用对照(载体)、阿普立定

舒尼替尼

或阿普立定加舒尼替尼处理的小鼠中CAKI-1肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.04mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按30mg/kg/天的剂量施用舒尼替尼。在植入23天后开始治疗。

图17用对照(载体)、阿普立定舒尼替尼或阿普立定加舒尼替尼处理的小鼠中MRI-H-121肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.06mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按40mg/kg/天的剂量施用舒尼替尼。在植入10天后开始治疗。

图18用对照(载体)、阿普立定

舒尼替尼或阿普立定加舒尼替尼处理的小鼠中MRI-H-121肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.06mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按30mg/kg/天的剂量施用舒尼替尼。在植入10天后开始治疗。

图19用对照(载体)、阿普立定

舒尼替尼

或阿普立定加舒尼替尼处理的小鼠中MRI-H-121肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.04mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按40mg/kg/天的剂量施用舒尼替尼。在植入10天后开始治疗。

图20用对照(载体)，阿普立定

舒尼替尼或阿普立定加舒尼替尼处理的小鼠中MRI-H-121肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.04mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按30mg/kg/天的剂量施用舒尼替尼。在植入10天后开始治疗。

图21用对照(载体)、阿普立定

舒尼替尼

或阿普立定加舒尼替尼处理的小鼠中A498肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.06mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按40mg/kg/天的剂量施用舒尼替尼。在植入19天后开始治疗。

图22用对照(载体)、阿普立定

舒尼替尼

或阿普立定加舒尼替尼处理的小鼠中A498肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.06mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按30mg/kg/天的剂量施用舒尼替尼。在植入19天后开始治疗。

图23用对照(载体)、阿普立定

舒尼替尼或阿普立定加舒尼替尼处理的小鼠中A498肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.04mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按40mg/kg/天的剂量施用舒尼替尼。在植入19天后开始治疗。

图24用对照(载体)、阿普立定

舒尼替尼

或阿普立定加舒尼替尼处理的小鼠中A498肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.04mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按30mg/kg/天的剂量施用舒尼替尼。在植入19天后开始治疗。

图25用对照(载体)、阿普立定

西罗莫司脂化物

或阿普立定加西罗莫司脂化物处理的小鼠中MRI-H-121肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.06mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按20mg/kg/天的剂量施用西罗莫司脂化物。在植入12天后开始治疗。

图26用对照(载体)、阿普立定西罗莫司脂化物

或阿普立定加西罗莫司脂化物处理的小鼠中MRI-H-121肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.06mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按10mg/kg/天的剂量施用西罗莫司脂化物。在植入12天后开始治疗。

图27用对照(载体)、阿普立定、西罗莫司脂化物或阿普立定加西罗莫司脂化物处理的小鼠中CAKI-1肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.06mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按10mg/kg/天的剂量施用西罗莫司脂化物。在植入21天后开始治疗。

图28用对照(载体)、阿普立定、西罗莫司脂化物或阿普立定加西罗莫司脂化物处理的小鼠中CAKI-1肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.06mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按20mg/kg/天的剂量施用西罗莫司脂化物。在植入21天后开始治疗。

图29用对照(载体)、阿普立定、西罗莫司脂化物或阿普立定加西罗莫司脂化物处理的小鼠中NCI-H-460肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.06mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按10mg/kg/天的剂量施用西罗莫司脂化物。在植入7天后开始治疗。

图30用对照(载体)、阿普立定、西罗莫司脂化物或阿普立定加西罗莫司脂化物处理的小鼠中NCI-H-460肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.06mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按20mg/kg/天的剂量施用西罗莫司脂化物。在植入7天后开始治疗。

图31用对照(载体)、阿普立定、索拉非尼或阿普立定加索拉非尼处理的小鼠中HepG2肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±标准标准数误差)。按0.06mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按30mg/kg/天的剂量施用索拉非尼。在植入19天后开始治疗。

图32用对照(载体)、阿普立定、索拉非尼或阿普立定加索拉非尼处理的小鼠中HepG2肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.06mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按60mg/kg/天的剂量施用索拉非尼。在植入19天后开始治疗。

图33用对照(载体)、阿普立定、索拉非尼或阿普立定加索拉非尼处理的小鼠中LOX-IMVI肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.06mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按60mg/kg/天的剂量施用索拉非尼。在植入11天后开始治疗。

图34用对照(载体)、阿普立定、索拉非尼或阿普立定加索拉非尼处理的小鼠中LOX-IMVI肿瘤的肿瘤重量进展(平均值±SEM)。按0.06mg/kg/天的剂量施用阿普立定，并按30mg/kg/天的剂量施用索拉非尼。在植入11天后开始治疗。

发明详述

我们惊讶地发现当索拉非尼、舒尼替尼或西罗莫司脂化物与阿普立定联合时，其抗癌活性大大增强。因此，本发明旨在提供一种基于阿普立定和另一种选自索拉非尼、舒尼替尼、西罗莫司脂化物及其混合物的抗癌药物的联合应用的有效的癌症疗法。

“癌症”意味着包含肿瘤、瘤形成和任何其它的恶性组织或细胞。

在另一方面，本发明涉及使用阿普立定或其药物学上可接受的盐和另一种选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐的协同联合。所述协同的联合可以通过应用本文所述的方法来获得，其包括在实施例1-7中展示的那些并分析了对于协同联合的结果。

说明书通篇使用的术语“联合”指的是包括在相同的或独立的药物制剂中的治疗剂的在相同时间或不同时间的施用。如果在不同时间施用治疗剂，治疗剂的施用应该在时间上足够接近，以便使协同响应发生。

在另一个方面，本发明涉及阿普立定或其药物学上可接受的盐在有效治疗癌症的药物的制备中的用途，所述药物通过使用阿普立定或其药物学上可接受的盐和另一个选自索拉非尼、舒尼替尼、西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐的联合治疗来治疗癌症。

在一个相关的方面，本发明涉及选自索拉非尼、舒尼替尼、西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐的用于制备药物的用途，所述药物通过使用索拉非尼、舒尼替尼、西罗莫司脂化物或其药物学上可接受的盐和阿普立定或其药物学上可接受的盐的联合治疗能够有效治疗癌症。

在又一方面，本发明涉及一种治疗癌症的方法，所述方法包括将治疗有效量的阿普立定或其药物学上可接受的盐与治疗有效量的选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐相联合，施用给需要所述治疗的患者。

本发明也提供一种治疗癌症的方法，所述方法包括将治疗有效量的选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐和治疗有效量的阿普立定或其药物学上可接受的盐相联合，施用给需要所述治疗的患者。

根据肿瘤的类型和疾病的发展阶段，本发明的治疗方法的抗癌效果包含，但不局限于，抑制肿瘤生长、延缓肿瘤生长、使肿瘤退化、使肿瘤收缩、增加治疗停止时肿瘤再生长的时间、减缓疾病进展和预防转移。当将本发明的治疗方法施用到需要上述治疗的患者、如人类患者时，可以预期地，所述治疗方法将产生一种可通过如抗癌效果的程度、响应速率，疾病进展的时间或生存率来衡量的效果。特别地，本发明的所述治疗方法适于人类患者，尤其那些复发的或先前的化疗无法治疗的患者。同样展望了一线治疗。

如上所述，阿普立定是具有下列结构的环状缩酚酸肽：

本文中术语“阿普立定”涵盖了任何药物学上可接受的盐、酯、溶剂化物、水合物、药物前体或任何其它的在施用给患者时能够提供(直接地或间接地)这里所描述的化合物的化合物。然而，应该认识到非药物学上可接受的盐也落入本发明的范畴，因为这些可以用于制备药物学上可接受的盐。盐、酯、溶剂化物、水合物和药物前体的制备可以通过本领域已知的方法来进行。

作为阿普立定的药物前体的任何化合物是在本发明的范围和精神之内。术语“药物前体”以其广义使用，并且包括在体内转变为阿普立定的那些衍生物。所述药物前体可以在生物学条件下水解、氧化、或者发生其他反应来提供阿普立定。本领域技术人员将容易地想到类似衍生物，并且衍生物包含例如其中游离羟基被转变为酯衍生物的化合物。

本文涉及的任何化合物旨在表示上述的具体化合物以及某种变化或形式。特别地，本文涉及的化合物可以具有不对称中心，因此以不同的对映体形式存在。可以认为所有的本文涉及的化合物的光学异构体和立体异构体和它们的混合物都在本发明的范畴内。因此本文涉及的任何给定的化合物旨在表示外消旋化合物、一种或多种对映体形式、一种或多种非对映形式、一种或多种阻旋异构体形式中任何一种及其混合物。特别地，本发明的化合物可以包含取决于它们的不对称或非对映异构体的对映体。关于双键的立体异构现象也是可能的，因此某些情况下分子可以以(E)-异构体或(Z)-异构体存在。如果所述分子包含多个双键，每个双键将具有它自己的立体异构现象，所述立体异构现象可以与所述分子的另一个双键的立体异构现象相同或不同。单一的异构体及异构体的混合物落入本发明的范围之内。

此外，本文涉及的化合物可以以几何异构体(即顺式和反式异构体)、互变异构体或阻旋异构体存在。具体地说，所述术语互变异构体指的是化合物两个或更多结构异构体中的一种，其以平衡状态存在并且容易从一种同分异构体形式转变成另一种。常见的互变异构对是胺-亚胺、酰胺-酰亚胺、酮-烯醇、内酰胺-内酰亚胺等。另外，本文涉及的任何化合物，当类似形式存在于介质中时，旨在表示水化物、溶剂化物和多晶型物及其混合物。此外，本文涉及的化合物可以以同位素标记的形式存在。本文涉及的化合物的所有的几何异构体、互变异构体、阻旋异构体、水合物、溶剂化物、多晶型物和同位素标记形式及其混合物，都在本发明的范围内。

可以遵循如在WO 02/02596，WO 01/76616和WO 2004/084812中公开的合成过程制备根据本发明使用的阿普立定，这些专利申请通过引用而结合到本文中。

可以使用的阿普立定的药物组合物包括溶液、悬浮液、乳化液、冻干组合物等，以及用于静脉内给药的合适的赋形剂。优选地，阿普立定可以作为无菌的冻干制品而提供和储存，所述制品包括足够治疗应用的制剂中的阿普立定和赋形剂。特别地包括甘露糖醇的制剂是优选的。WO 99/42125给出了在阿普立定制剂上的进一步指导，所述文献通过引用而结合到本文中。

阿普立定或其药物组合物的施用优选地通过静脉输注。我们优选使用多达72小时的输注时间，更优选1-24小时，其中约1、约3或约24小时是最优选的。短的输注时间尤其理想，因为这样可以进行治疗，而不用在医院过夜。然而，输注根据需要可以是约24小时或如果需要甚至更长。输注可以以变化的模式以适当的间隔进行，举例来说，每周一次，每周两次，或每周更多次，任选地以典型地一或数周的间隙每周重复。

索拉非尼是一种具有下列结构式的激酶抑制剂：

该药物以它的甲苯磺酸盐的形式销售，所述甲苯磺酸盐商标为

目前已知该药物可用于某些类型癌症的治疗，特别是用于肝细胞癌和肾细胞癌。作为单独的试剂，推荐口服日剂量是400mg，每天两次，不吃东西(进餐前至少1小时或之后2小时)，并且治疗应该继续，直到患者不再从治疗中临床上受益为止，或者直到出现不能接受的毒性为止。关于该药物的信息可从网站www.nexavar.com和关于索拉非尼的大量文献中获得。

索拉非尼显示出具有抑制多胞内的(CRAF、BRAF和突变型BRAF)和细胞表面激酶(KIT、FLT-3、RET、VEGFR-1、VEGFR-2、VEGFR-3和PDGFR-β)(Wilhelm SM等，Cancer Res.2004，64，7099-7109)的能力。这些激酶中的几种被认为与肿瘤细胞信号、血管生成和细胞凋亡有关。索拉非尼抑制人类肝细胞癌和肾细胞癌以及其它的几种人类肿瘤异种移植在免疫系统受损的小鼠中的肿瘤生长和血管生成。

舒尼替尼是一种具有下列结构式的多激酶抑制剂：

该药物以它的苹果酸盐的形式销售，并具有商标为

目前已知该药物可用于某些类型癌症的治疗，特别是用于胃肠道间质瘤(GIST)和肾细胞癌。作为单独的试剂，推荐剂量是一天一次，每次口服剂量50mg，4周的治疗进程，接着停2周。剂量增加或减少12.5mg，推荐的增量基于个体安全性和耐受性。关于该药物的信息可从网站www.sutent.com和关于舒尼替尼的大量的文献中获得。

舒尼替尼抑制多种受体酪氨酸激酶(RTKs)，其中的一些受体酪氨酸激酶与肿瘤生长、病理血管生成和癌症转移进展有关。评定舒尼替尼对于它的针对各种激酶(＞80激酶)的抑制作用，并且其被确定为血小板衍生生长因子受体(PDGFRα和PDGFRβ)、血管内皮生长因子受体(VEGFR1、VEGFR2和VEGFR3)、干细胞因子受体(KIT)、Fms样酪氨酸激酶-3(FLT3)、集落刺激因子受体型1(CSF-1R)和神经胶质细胞系衍生神经营养因子受体(RET)的抑制剂(Bergers G et al.J.Clin.Invest.2003，111，1287-1295)。舒尼替尼已经在生物化学和细胞试验中被证明具有抑制这些RTKs的活性的作用，并且已经在细胞增殖试验中证明其具有抑制功能。在生物化学和细胞试验中，初级代谢产物与舒尼替尼相比展现了类似的效力。

舒尼替尼抑制在体内表达RTK靶的肿瘤异种移植的多RTKs(PDGFRβ、VEGFR2、KIT)的磷酸化作用，并且证明具有对肿瘤生长或肿瘤退化的抑制作用和/或抑制在某些癌症的实验模型中的转移。已证明舒尼替尼能够抑制体内表达失控(dysregulated)靶RTKs(PDGFR、RET或KIT)的肿瘤细胞的生长，并且能抑制体内PDGFRβ-和VEGFR2-依赖的肿瘤血管生成。

西罗莫司脂化物是一种具有下列结构式的mTOR(哺乳动物雷帕霉素靶蛋白)的抑制剂：

所述药物以商品名

销售，并且目前已发现它可用于肾细胞癌的治疗。作为单独的试剂使用，推荐剂量是25mg，经过30-60分钟时间输注，每周一次，并且应该继续治疗，直到疾病进展或出现不可接受的毒性为止。关于该药物的信息可在网站www.torisel.com和关于西罗莫司脂化物的大量的文献中获得。

西罗莫司脂化物结合到胞内的蛋白质(FKBP-12)，并且所述蛋白质-药物络合物抑制控制细胞分裂的mTOR的活性。mTOR活性的抑制导致待治疗的肿瘤细胞的G1生长抑制。mTOR被抑制时，就丧失了它的磷酸化在PI3激酶/AKT通路中位于mTOR的下游的p70S6k和S6核糖体蛋白的能力。在体外研究中使用肾细胞癌细胞系，西罗莫司脂化物抑制mTOR的活性，并导致缺氧诱导因子HIF-1和HIF-2α和血管内皮细胞生长因子的水平的下降。

本文涉及的任何药物的药物学上可接受的盐是通过常规的化学方法从母体化合物合成的，所述母体化合物包含碱性的或酸性的部分。通常，所述盐是比如通过这些化合物的游离酸或碱形式和化学当量的合适的碱或酸在水中或在有机溶剂或在水和有机溶剂的混合物中反应而制备的。通常，非水介质如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈是优选的。酸加成盐的例子包含无机酸加成盐如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐，和有机酸加成盐如醋酸盐、三氟醋酸盐、马来酸盐、延胡索酸盐、柠檬酸盐、草酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、苹果酸盐、扁桃酸盐、安乃近和对甲苯磺酸盐。碱加成盐的例子包含无机盐如钠、钾、钙和铵盐，以及有机的碱金属盐如乙二胺、乙醇胺、N，N-二亚烃基乙醇胺、三乙醇胺和碱性的氨基酸盐。

此外，本文涉及的任何药物可以是结晶形式，或者作为游离化合物，或者作为溶剂化物(例如水合物)，两种形式都在本发明的范围内。溶剂化方法在本领域是众所周知的。

阿普立定或其药物学上可接受的盐，和另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐，可以作为独立的药物提供，在相同时间或在不同时间给药。优选地，阿普立定和另一个抗癌药物作为独立的药物提供，并在不同的时间给药。当独立地并且在不同时间给药时，阿普立定或另一个抗癌药物中的任何一个都可以先给药。此外，两个药物可以在同日或在不同日给药，并且它们可以在治疗循环中使用相同的时间表或不同的时间表给药。因此，本发明的药物组合物可以包括单个药物学上可接受的制剂的所有的组分(药物)。做为选择，所述组分可以独立地配制，并彼此联合给药。本领域技术人员熟知的各种的药物学上可接受的制剂可用于本发明。另外，组合的药物可以使用不同的给药途径给药。例如，一种药物可以是适于口服的形式，如作为片剂或胶囊，另一种是适于肠胃外注射的形式(包含静脉、皮下、肌内、血管内或输注)，如作为无菌溶液、悬浮液或乳化液。做为选择，两种药物可以通过相同的给药途径给药。可以通过本领域技术人员根据给药模式和组合物组分的溶解度特性，来常规的进行一种合适的用于本发明的制剂的选择。

该联合的化合物的正确的剂量将根据具体的制剂、应用的方式和具体的位点、宿主和待治疗的肿瘤而变化。也应考虑其它的因素如年龄、体重、性别、饮食、给药时间、排泄率、宿主的状况、药物联合、反应敏感度和疾病的严重程度。可以在最大耐受剂量内持续地或周期性地进行给药。关于阿普立定给药的进一步指导在WO 01/35974中给出，将通过引用而结合到本文。

在另一方面，本发明涉及一种用于癌症治疗的试剂盒，所述试剂盒用于将一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物相与阿普立定联合给药，所述试剂盒包括用于至少一个周期的剂量单位的一批阿普立定或其药物学上可接受的盐，以及关于两种联合药物使用的打印的说明书。

在一个相关的方面，本发明涉及一种用于癌症治疗的试剂盒，所述试剂盒用于将一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物与阿普立定联合给药，所述试剂盒包括用于至少一个周期的剂量单位的一批选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐，以及关于两种联合药物使用的打印的说明书。

在一个相关的方面，本发明涉及一种用于癌症治疗的试剂盒，所述试剂盒用于将一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物与阿普立定联合给药，所述试剂盒包括用于至少一个周期的剂量单位的一批阿普立定或其药物学上可接受的盐，用于至少一个周期的剂量单位的一批另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐，以及关于两种联合药物使用的打印的说明书。

在另一方面，本发明也提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括阿普立定或其药物学上可接受的盐，以及一个药物学上可接受的载体，其用于和另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐联合治疗癌症。

在又一方面，本本发明也提供一种药物组合物，所述组合物包含另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐，以及一个药物学上可接受的载体，其用于和阿普立定或其药物学上可接受的盐联合治疗癌症。

此外，本发明也提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括阿普立定或其药物学上可接受的盐，一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐以及一个药物学上可接受的载体，其用于联合治疗癌症。

在另一方面，本发明进一步提供了阿普立定或其药物学上可接受的盐在制备用于和另一个选自索拉非尼、舒尼替尼、西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐联合治疗癌症的组合物中的用途。

在一个相关的方面，本发明进一步提供了选自索拉非尼、舒尼替尼西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐在制备用于和阿普立定或其药物学上可接受的盐联合治疗癌症的组合物中的用途。

并且在又一方面，本发明也提供了阿普立定或其药物学上可接受的盐和其他的选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐在制备用于癌症治疗的组合物中的用途。

在另一方面，本发明进一步提供阿普立定或其药物学上可接受的盐在制备用于和其他的选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐联合治疗癌症的药物中的用途。

在一个相关的方面，本发明进一步提供了一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐在制备和阿普立定或其药物学上可接受的盐联合治疗癌症的药物中的用途。

在一个相关的方面，本发明进一步提供了阿普立定或其药物学上可接受的盐与另一个选自索拉非尼、舒尼替尼与和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐在用于治疗癌症的药物的制造中的用途。

在另一方面，本发明进一步提供阿普立定或其药物学上可接受的盐在治疗癌症中的用途，其与另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐联合治疗。

在一个相关的方面，本发明进一步提供了一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐在治疗癌症中的用途，其与阿普立定或其药物学上可接受的盐联合治疗。

在另一方面，本发明进一步提供阿普立定或其药物学上可接受的盐和另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐在治疗癌症中的用途。

在另一方面，本发明进一步提供阿普立定或其药物学上可接受的盐作为药物的用途，其和另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐联合治疗。

在一个相关的方面，本发明进一步提供了一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐作为药物的用途，其和阿普立定或其药物学上可接受的盐联合治疗。

在另一方面，本发明进一步提供阿普立定或其药物学上可接受的盐和另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐联合作为药物的用途。

在另一方面，本发明进一步提供阿普立定或其药物学上可接受的盐作为治疗癌症的药物的用途，其和另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐联合治疗。

在一个相关的方面，本发明进一步提供了一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐作为用于治疗癌症的药物的用途，其和阿普立定或其药物学上可接受的盐联合治疗。

在另一方面，本发明进一步提供阿普立定或其药物学上可接受的盐和另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐联合作为用于治疗癌症的药物的用途。

在另一方面，本发明提供阿普立定或其药物学上可接受的盐用于治疗癌症，其包括与治疗有效量的选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐联合施用治疗有效量的阿普立定或其药物学上可接受的盐。

在一个相关的方面，本发明进一步提供了选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐用于治疗癌症，其包括与治疗有效量的阿普立定或其药物学上可接受的盐联合施用治疗有效量的选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐。

在另一个方面，本发明提供癌症的治疗，其包括施用治疗有效量的阿普立定或其药物学上可接受的盐，与施用治疗有效量的另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐相联合，其中所述联合可以是一起或独立地给药。在本发明的优选实施例中，以协同地有效量施用阿普立定或其药物学上可接受的盐和另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐。

优选地，阿普立定或其药物学上可接受的盐和另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐的联合用于治疗肾癌、肝癌(亦称肝细胞瘤)、黑素瘤、乳腺癌、肺癌、胰腺癌和胃肠基质肿瘤(GIST)。特别地优选的是该联合用于治疗肾癌、肝癌、黑素瘤、NSCLC和乳腺癌。

在一个实施例中，阿普立定或其药物学上可接受的盐和另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐的联合可抑制体内肿瘤生长或减少肿瘤的尺寸。特别地，该联合可抑制癌细胞、肉瘤细胞、白血病细胞、淋巴瘤细胞和骨髓瘤细胞的体内生长。优选地，该联合可抑制肾癌细胞、肝癌细胞、黑素瘤细胞、乳腺癌细胞、肺癌细胞、胰腺癌细胞、成神经细胞瘤细胞和GIST细胞的体内生长。具体地说，该联合可抑制人类肾癌细胞、人类肝癌细胞、人类黑素瘤细胞和人类NSCLC细胞的体内生长。类似地，该联合可减少体内的癌、肉瘤、白血病、淋巴瘤和骨髓瘤肿瘤的尺寸。优选地，该联合可减少体内的肾癌、肝癌、黑素瘤、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、成神经细胞瘤和GIST的尺寸。具体地说，该联合可减少体内的人类肾肿瘤、人类肝癌、人类黑素瘤和人类NSCL癌的尺寸。

例如，所述联合可抑制肿瘤生长或降低人类癌异种移植物的尺寸，特别是在动物模型中的人类肾肿瘤异种移植物，人类肝癌异种移植物，人类黑素瘤异种移植物和人类NSCLC异种移植物的尺寸。在动物模型中，通过施用所述联合可以减小人类癌异种移植物的生长或尺寸，该联合包括阿普立定或其药物学上可接受的盐和另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐，这对于治疗具有该特别的类型的癌症的患者是有效的。另外，动物模型中的低水平的毒性提供了该联合针对癌细胞的选择细胞毒活性。

根据本发明的一个实施例，通过比较联合两种药物(阿普立定和索拉非尼，阿普立定和舒尼替尼，阿普立定和西罗莫司脂化物)的治疗方法和索拉非尼、舒尼替尼或西罗莫司脂化物的单一治疗方法的平均肿瘤重量来评定对肿瘤生长抑制的效果。另外，用于评价所述联合治疗的增强和加成性程度的定义和标准如下：

当联合治疗的响应大于以与联合治疗相同的进度和剂量作为单一试剂施用(单一治疗)的最具活性的药物的响应时，可以确定为增强。

通过比较如下的单一治疗和联合治疗的肿瘤生长抑制的％来确定加成性：

1、肿瘤生长抑制％的确定，作为100-％T/C，以在该联合中使用的剂量施用每种药物作为单一治疗。％T/C是通过比较在治疗组(T)平均肿瘤重量与在对照组(C)的平均肿瘤重量来获得的(T/C x 100％)。

2、如果每种试剂产生与其作为单一治疗施用时的相同的响应，将两个分数加在一起来确定“预期响应。

3、所述“预期响应”从用于联合治疗组的确定的肿瘤生长抑制％中减去：

a、负数意味着两种药物联合的效果小于相加的效果。

b、如果所得数值接近零，两种药物联合的效果确定为相加。

c、正数意味着两种药物联合的效果大于相加的效果。

因此，大于联合治疗的相加效果相当于协同效果，其中鉴于每一种药物单独给药的效果，两种药物联合的治疗效果优于所预期的效果。

因此，在另一方面，本发明提供一种用于减少肿瘤尺寸的方法，所述方法包括将有效量的阿普立定或其药物学上可接受的盐与另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐联合给药。

在一个相关的方面，本发明提供一种用于减少肿瘤的尺寸的方法，所述方法包括将有效量的选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐与阿普立定或其药物学上可接受的盐联合给药。

在一个相关的方面，本发明提供一种用于减少肿瘤的尺寸的方法，所述方法包括阿普立定或其药物学上可接受的盐与选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的一个抗癌药物或其药物学上可接受的盐的有效的联合的一起或单独给药。

在另一方面，本发明提供一种用于抑制肿瘤生长的方法，所述方法包括有效量的阿普立定或其药物学上可接受的盐与另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐的联合给药。

在一个相关的方面，本发明提供一种用于抑制肿瘤生长的方法，所述方法包括有效量的选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐与阿普立定或其药物学上可接受的盐的联合给药。

在一个相关的方面，本发明提供一种用于抑制肿瘤生长的方法，所述方法包括阿普立定或其药物学上可接受的盐与选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐的有效组合的一起或单独的给药。

下列实施例将进一步阐述本发明。所述实施例不应理解为对本发明范围的限制。

为了提供一个更简洁的说明，本文中给出的一些数量表达式没有用术语“约”来限定。应当理解的是，无论是否明确使用术语“约”，本文中给出的每一个数量意味着涉及实际的给定值，而且还意味着涉及所述给定值的近似值，所述近似值将根据本领域普通技术人员进行适度的推断，取决于对于所述给定值的实验和/或测量条件，所述数量包含等值和近似值。

具体实施例

实施例1确定阿普立定与索拉非尼联合在人类肾肿瘤异种移植物中的效果的体内研究。

该研究的目标在于通过使用三个人类肾癌的异种移植模型来评定阿普立定加强索拉非尼抗肿瘤活性的能力。

所有的实验都使用雌性无胸腺裸鼠(Harlan Sprague Dawley，Madison，WI)。当小鼠5周大时，将肿瘤片段或细胞悬浮液植入小鼠。在通风齿条笼中安置动物，每笼5只小鼠，食品和水随意。在用肿瘤片段或细胞悬浮液植入之前驯化小鼠1周。载体对照组包含15只小鼠，并且治疗组每组具有10只小鼠。

用于该研究的肿瘤模型是CAKI-1细胞系、MRI-H-121细胞系和A498细胞系，所述CAKI-1细胞系是来自ATCC(Manassas，VA)的人类肾透明癌细胞系，所述MRI-H-121细胞系是来自DCT肿瘤库的人类肾癌细胞系，以及所述A498细胞系是来自ATCC(Manassas，VA)的人类肾癌细胞系。

对于MRI-H-121和CAKI-1试验，使用套管针将3mm³的的组织肿瘤片段在动物右侧面皮下植入(SC)，所述组织肿瘤片段来自体内可移植的系传代1次，使用无菌的Earle′s平衡盐溶液作为润湿剂。在植入时采用的细菌培养基在植入后24和48小时对于污染都是阴性的。

在添加有2mM的L-谷氨酰胺和10％FBS的MEM中培养A498细胞。来自体外传代4-20次的细胞皮下植入到研究小鼠内：5x10⁶细胞/小鼠，在没有抗生素或血清的0.2ml 50％基质胶/50％基质，使用23G针和1cc注射器。基质胶是在4℃时是液体并且在37℃时是固体的生物学细胞外基质，它通过将细胞紧密关联的维持在局部区域来促进肿瘤生长。将细菌培养物等分成准备植入的细胞。所有的培养物在植入后24和48小时对于细菌污染都是阴性的。

通过使用游标卡尺来确定肿瘤尺寸。用计算长椭球体积的公式从二维肿瘤尺寸估计肿瘤体积(mm³)：肿瘤体积(mm³)＝[L x W²]÷2，其中L是长度，它是肿瘤最长的直径，单位为mm，并且W是宽度，它是肿瘤最短的直径，单位为mm。假定单位密度，将体积转变为重量(即1mm³＝1mg)。当肿瘤到达适宜的体积时，对于MRI-H-121在143±2mg尺寸范围内，对于CAKI-1在259±32mg尺寸范围内，和对于A498111±3mg尺寸范围内(平均值±标准差)，根据通过使用生命模块V 8.0SP1肿瘤追踪和测量软件测定的肿瘤重量将小鼠随机分到治疗组和对照组中。

MRI-H-121荷瘤小鼠的治疗在DPI(植入后的天数)14天开始，CAKI-1的治疗在DPI 13天开始，并且A498的治疗在DPI 26天开始。根据治疗天数，当测量肿瘤尺寸时记录体重。在那些同日施用两种药物的日子中，通过同时共同施用两种药物来治疗联合治疗组，没有试图确定治疗的顺序。

以阿普立定冻干粉剂的管瓶的形式来提供阿普立定，所述粉剂在克列莫佛EL/乙醇/水(CEW)15/15/70中重组达到浓度0.5mg/mL。然后用0.9％盐水将在CEW中的阿普立定溶液稀释到定量制剂浓度，最终的CEW的比例是0.18/0.18/0.84。

以200mg微红色含有索拉非尼的甲苯磺酸盐形式的索拉非尼的片剂的形式提供索拉非尼。通过在克列莫佛EL/乙醇(50/50)中溶解片剂得到浓度50mg/mL索拉非尼溶液。然后在水中稀释所述溶液用于输注(wfi)，直到最终的CEW的比例(12.5，125，75)。在CEW中的索拉非尼溶液在输注溶液中被稀释至定量制剂浓度。

对于三个异种移植模型的研究组和治疗方案在表I中列出：

表I

IP：腹腔内给药；PO：口服给药

Qdx9x2：两个循环，其中连续9天每天施用试验材料，在两个循环之间休息3天

Qdx21：连续21天每天施用试验材料

从治疗开始直到研究终止，一周两次记录肿瘤尺寸。在不同的试验浓度比较两种药物联合(阿普立定和索拉非尼)的平均肿瘤重量与索拉非尼的平均肿瘤重量，由此评定肿瘤生长抑制。

确定所有评估中的所有动物组的肿瘤体积的平均值、平均值的标准平均数偏差和标准误差。在每个测量日，包含研究的末尾，对肿瘤体积进行Student’s t检验，来确定是否在联合治疗组和单个的单一治疗组之间有任何统计学上的的显著差异。

用于评估联合治疗的增强和加成性程度的定义和标准如下：

当联合治疗组的响应大于以与联合治疗相同的进度和剂量施用的作为单一试剂的最具活性试剂的最佳响应时，可以确定为增强。

如上所述，通过如下比较单一治疗组和联合治疗组的肿瘤生长抑制％来确定加成性：

1、对于具有在联合中施用的剂量作为单一治疗施用的每种药物，确定肿瘤生长抑制％，作为100-％T/C。％T/C是通过比较在治疗组(T)平均肿瘤重量与在对照组(C)的平均肿瘤重量来获得的(T/C x 100％)。

2、如果每种试剂产生如作为单一治疗施用时的相同的响应，将两个分数加在一起来确定“预期响应”。

a.负数意味着两种药物联合的效果小于相加的效果。

b.如果所得数接近零，两种药物联合的效果确定为相加。

c.正数意味着两种药物联合的效果大于相加的效果。

因此，联合治疗大于相加的效果相当于协同作用，其中鉴于每一种药物单独给药的效果，两种药物联合的治疗效果优于所预期的效果。

通过将每个小鼠体重与最初体重(治疗第一天)比较来确定体重效果。体重损失＞20％的NCI活性标准用来估计化合物毒性。

CAKI-1人类肾肿瘤异种移植物的结果

表II报道了由每种治疗得到的％T/C值，并且图1-4示出了在小鼠中的CAKI-1肿瘤的肿瘤重量发展(平均值±标准平均数偏差)，所述小鼠用不同剂量的对照(载体)、阿普立定、索拉非尼、或阿普立定加索拉非尼治疗。

表II

表II(续)

表III示出了阿普立定和索拉非尼作为单独的试剂施用和联合施用对于CAKI-1人类肾肿瘤异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.06mg/kg/天的阿普立定和60mg/kg/天的索拉非尼的剂量。另外，提供了所述剂量的阿普立定和索拉非尼联合的增强和加成性程度。

表III

表IV示出了阿普立定和索拉非尼作为单独的试剂施用和联合施用对于CAKI-1人类肾肿瘤异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.06mg/kg/天的阿普立定和30mg/kg/天的索拉非尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和索拉非尼联合的增强和加成性程度。

表IV

表V示出了阿普立定和索拉非尼作为单独的试剂施用和联合施用对于CAKI-1人类肾肿瘤异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.04mg/kg/天的阿普立定和60mg/kg/天的索拉非尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和索拉非尼联合的增强和加成性程度。

表V

当阿普立定和索拉非尼作为单独的试剂针对CAKI-1人类肾肿瘤细胞系施用时，它们是无效的。另外，该治疗未导致平均体重的显著下降，并且所有小鼠在研究结束时都增加了重量。

然而，当阿普立定以0.060mg/kg/天的剂量与索拉非尼以60mg/kg/天的剂量联合施用时，从28天到研究末尾的49天可以观察到肿瘤生长的统计学显著的抑制作用。该联合导致大于抗癌活性相加的增强。另外，阿普立定以0.040mg/kg/天的剂量与索拉非尼以60mg/kg/天的剂量联合施用也导致大于抗癌活性相加的增强。在定量期间的末尾或直接地紧接定量期间和持续直到试验终止的日子里，观察所有情况下的效果。最后，小舒对联合治疗的耐受很好，没有增强的毒性证据。

MRI-H-121人类肾肿瘤异种移植物中的结果

表VI报道了由每种治疗得到的％T/C值，并且图5-8示出了在小鼠中的MRI-H-121肿瘤的肿瘤重量发展(平均值±标准平均数偏差)，所述小鼠用不同剂量的对照(载体)、阿普立定、索拉非尼、或阿普立定加索拉非尼治疗。

表VI

表VII示出了阿普立定和索拉非尼作为单独试剂施用和联合施用对于MRI-H-121人类肾肿瘤异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.06mg/kg/天的阿普立定和60mg/kg/天的索拉非尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和索拉非尼联合的增强和加成性程度。

表VII

表VIII示出了阿普立定和索拉非尼作为单独的药剂施用和联合施用对于MRI-H-12人类肾肿瘤异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.06mg/kg/天的阿普立定和30mg/kg/天的索拉非尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和索拉非尼联合的增强和加成性程度。

表VIII

表IX示出了阿普立定和索拉非尼作为单独的药剂施用和联合施用对于MRI-H-121人类肾肿瘤异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.04mg/kg/天的阿普立定和60mg/kg/天的索拉非尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和索拉非尼联合的增强和加成性程度。

表IX

表X示出了阿普立定和索拉非尼作为单独的药剂施用和联合施用对于MRI-H-121人类肾肿瘤异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.04mg/kg/天的阿普立定和30mg/kg/天的索拉非尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和索拉非尼联合的增强和加成性程度。

表X

当以研究中的剂量和测试进程将阿普立定作为单独试剂(单一治疗)施用时，阿普立定治疗难以治疗MRI-H-121人类肾肿瘤。另外，以30或60mg/kg/天用索拉非尼作为单独试剂(单一治疗)进行治疗时，具有显著的统计学上的肿瘤生长的抑制作用，然而达不到NCI对于活性的标准。

另一方面，当0.060mg/kg/天的剂量的阿普立定与60mg/kg/天的剂量的索拉非尼联合时，观察到统计学上显著的大于抗癌活性相加的增强。

最后，阿普立定和索拉非尼的联合治疗导致平均体重的可接受的下降，在第34天有最大的15％的重量损失。一些孤立的个体动物体重损失大于20％。

A498人类肾肿瘤异种移植物的结果

表XI示出了由每种治疗得到的％T/C值，并且图9-12示出了在小鼠中的A498肿瘤的肿瘤重量发展(平均值±标准平均数偏差)，所述小鼠用不同剂量的对照(载体)、阿普立定、索拉非尼、或阿普立定加索拉非尼治疗。

表XI

表XII示出了阿普立定和索拉非尼作为单独试剂施用和联合施用对于A498人类肾肿瘤异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.06mg/kg/天的阿普立定和60mg/kg/天的索拉非尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和索拉非尼联合的增强和加成性程度。

表XII

表XIII示出了阿普立定和索拉非尼作为单独试剂施用和联合施用对于A498人类肾肿瘤异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.06mg/kg/天的阿普立定和30mg/kg/天的索拉非尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和索拉非尼联合的增强和加成性程度。

表XIII

表XIV示出了阿普立定和索拉非尼作为单独试剂施用和联合施用对于A498人类肾肿瘤异种移植的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.04mg/kg/天的阿普立定和60mg/kg/天的索拉非尼的剂量进行施用。另外，提供了所述剂量的阿普立定和索拉非尼联合的增强和加成性程度。

表XIV

表XV示出了阿普立定和索拉非尼作为单独试剂施用和联合施用对于A498人类肾肿瘤异种移植的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.04mg/kg/天的阿普立定和30mg/kg/天的索拉非尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和索拉非尼联合的增强和加成性程度。

表XV

以研究中的剂量和测试进程用阿普立定或索拉非尼作为单独试剂(单一治疗)施用对于A498人类肾肿瘤的治疗，与对照组相比，具有趋向于在肿肿瘤生长的抑制作用上的统计显著性，然而达不到NCI对于活性的标准。

观察到联合组有统计上显著的抗肿瘤的响应。当0,060mg/kg/天的剂量的阿普立定与60或30mg/kg/天的剂量的索拉非尼联合时，观察到抗肿瘤活性的大于相加的增强。

最后，小鼠对联合治疗具有很好的耐受，而没有增强的毒性证据。实施例2确定阿普立定与舒尼替尼的联合对于人类肾肿瘤异种移植物的治疗效果的体内研究。

该研究的目标在于通过使用三个人类肾癌的异种移植物模型来评定阿普立定加强舒尼替尼抗肿瘤活性的能力。

所有的实验都使用雌性无胸腺裸鼠(Harlan Sprague Dawley，Madison，WI)。当小鼠5周大，将肿瘤片段或细胞悬浮液植入小鼠。在通风齿条笼中安置动物，每笼5只小鼠，食品和水任意。在用肿瘤片段或细胞悬浮液植入之前驯化小鼠1周。载体对照组包含15只小鼠，并且治疗组每组具有10只小鼠。

用于该研究的肿瘤模型与实施例1中的相同(CAKI-1细胞系，MRI-H-121细胞系和A498细胞系)。如实施例1公开的将MRI-H-121和A498肿瘤模型植入动物中。

在添加有2mM的L-谷氨酰胺和10％FBS并没有抗生素的McCoy’y培养基中培养CAKI-1细胞。来自体外传代4-20次的细胞皮下植入研究小鼠：5x10⁶细胞/小鼠，在没有抗生素或血清的0.2mL 50％基质胶/50％介质，使用23G针和1cc注射器。将细菌培养物等分到准备植入的细胞。所有的培养物在植入后24和48小时对于细菌污染都是阴性的。

如实施例1所公开的来确定肿瘤的尺寸。当肿瘤生长到对于MRI-H-121在142±52mg、对于CAKI-1在187±7mg和对于A498207±13mg(平均值±标准差)的尺寸范围内，根据通过使用

生命模块V 8.0SP1肿瘤追踪和测量软件测定的肿瘤重量将小鼠随机分到治疗组和对照组中。

MRI-H-121荷瘤小鼠的治疗在DPI(植入后的天数)10天开始，CAKI-1的治疗在DPI 23天开始，并且A498的治疗在DPI 19天开始。根据治疗天数和当测量肿瘤尺寸时记录体重。在那些两种药物同天施用的日子中，通过同时共同施用两种药物来治疗联合治疗组，没有试图确定治疗的顺序。

以冻干阿普立定粉剂的管瓶的形式来提供阿普立定，所述粉剂是在克列莫佛EL/乙醇/水(CEW)15/15/70中重组，达到浓度0.5mg/mL。然后用0.9％盐水将CEW中的阿普立定溶液稀释到定量制剂浓度，最终的CEW的比例是0.18/0.18/0.84。

以25mg含有舒尼替尼的马来酸盐形式的舒尼替尼的胶囊的形式提供舒尼替尼。通过将所述胶囊内含物溶解在0.5％羧甲基纤维素(CMC)中，并且进一步用wfi稀释来得到制剂。所述制剂作为混服液口服给药至所述动物。

三个异种移植物模型的研究组和治疗方式在表XVI中列出：

表XVI

IP：腹腔内给药；PO：口服给药

Qdx9x2：两个循环，其中连续9天每天施用试验材料，在两个循环之间休息4-5天

Qdx21：连续21天每天施用试验材料

从治疗开始直到研究终止，一周两次记录肿瘤尺寸。将联合的两个试剂(阿普立定和舒尼替尼)之间的平均肿瘤重量与不同的试验浓度的舒尼替尼的平均肿瘤重量比较，来评定肿瘤生长抑制作用。

确定所有评估中的所有动物组的肿瘤体积的平均值、平均值的标准偏差和标准误差。在每个测量日进行对肿瘤体积的Student’s t检验，包括在研究的末尾，来确定是否在联合治疗组和单个的单一治疗组之间有任何统计学上的显著差异。

用于评价联合治疗的增强和加成性程度的定义和标准同实施例1中所公开的。

通过将每个小鼠体重与原始体重(治疗第一天)比较来确定体重效果。体重损失＞20％的NCI活性标准用来估计化合物毒性。

CAKI-1人类肾肿瘤异种移植物的结果

表XVII示出了由每种治疗得到的％T/C值，并且图13-16示出了在小鼠中的CAKI-1肿瘤的肿瘤重量发展(平均值±标准平均数偏差)，所述小鼠用不同剂量的对照(载体)、阿普立定、舒尼替尼、或阿普立定加舒尼替尼治疗。

表XVII

表XVII(续)

表XVIII示出了阿普立定和舒尼替尼作为单独试剂施用和联合施用对于CAKI-1人类肾肿瘤异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.06mg/kg/天的阿普立定和30mg/kg/天的舒尼替尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和舒尼替尼联合的增强和加成性程度。

表XVIII

表XIX示出了阿普立定和舒尼替尼作为单独试剂施用和联合施用对于CAKI-1人类肾肿瘤异种移植的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.04mg/kg/天的阿普立定和40mg/kg/天的舒尼替尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和舒尼替尼联合的增强和加成性程度。

表XIX

表XX示出了阿普立定和舒尼替尼作为单独试剂施用和联合施用对于CAKI-1人类肾肿瘤异种移植的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.04mg/kg/天的阿普立定和30mg/kg/天的舒尼替尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和舒尼替尼联合的增强和加成性程度。

表XX

当阿普立定和舒尼替尼作为单独试剂施用时(单一治疗)，对于CAKI-1人类肾肿瘤细胞系，它们是无效的。另外，该治疗并未导致平均体重的显著下降，并且所有小鼠在研究结束时都增加了重量。

然而，当阿普立定以0.040mg/kg/天的剂量与舒尼替尼以40mg/kg/天的剂量联合时，观察到活性的增强，导致肿瘤生长抑制作用大于相加的增强。此外，阿普立定和舒尼替尼联合导致可接受的体重的下降，具有最大7.2％的重量损失。

MRI-H-121人类肾肿瘤异种移植物中的结果

表XXI示出了由每种治疗得到的％T/C值，并且图17-20示出了在小鼠中的MRI-H-121肿瘤的肿瘤重量发展(平均值±标准平均数偏差)，所述小鼠用不同剂量的对照(载体)、阿普立定、舒尼替尼、或阿普立定加舒尼替尼治疗。

表XXI

表XXI(续)

表XXII示出了阿普立定和舒尼替尼作为单独试剂施用和联合施用对于MRI-H-121人类肾肿瘤异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.06mg/kg/天的阿普立定和40mg/kg/天的舒尼替尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和舒尼替尼联合的增强和加成性程度。

表XXII

表XXIII示出了阿普立定和舒尼替尼作为单独试剂施用和联合施用对于MRI-H-121人类肾肿瘤异种移植物的肿瘤生长抑制百分率，其剂量为0.06mg/kg/天的阿普立定和30mg/kg/天的舒尼替尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和舒尼替尼联合的增强和加成性程度。

表XXIII

表XXIV示出了阿普立定和舒尼替尼作为单独试剂施用和联合施用对于MRI-H-121人类肾肿瘤异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.04mg/kg/天的阿普立定和40mg/kg/天的舒尼替尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和舒尼替尼联合的增强和加成性程度。

表XXIV

表XXV示出了阿普立定和舒尼替尼作为单独试剂施用和联合施用对于MRI-H-121人类肾肿瘤异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.04mg/kg/天的阿普立定和30mg/kg/天的舒尼替尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和舒尼替尼联合的增强和加成性程度。

表XXV

当阿普立定和舒尼替尼作为单独试剂(单一治疗)以实验中的剂量和测试进程施用时，阿普立定和舒尼替尼难以治疗MRI-H-121人类肾肿瘤，尽管0.060mg/kg/天的阿普立定治疗显示了肿瘤生长的抑制活性的暗示。另外，治疗并未导致平均体重的显著的下降，并且所有小鼠到研究结束时重量都增加了。

然而，当两种药物联合时，在所有测试的剂量水平都观察到统计学上显著的活性增强。确定所述增强大于相加。此外，阿普立定和舒尼替尼的联合导致可接受的体重下降，具有最大8.7％的重量损失。

A498人类肾肿瘤异种移植的结果

表XXVI示出了由每种治疗得到的％T/C值，并且图21-24示出了在小鼠中的A498肿瘤的肿瘤重量发展(平均值±标准平均数偏差)，所述小鼠用不同剂量的对照(载体)、阿普立定、舒尼替尼、或阿普立定加舒尼替尼治疗。

表XXVI

表XXVII示出了阿普立定和舒尼替尼作为单独试剂施用和联合施用对于A498人类肾肿瘤异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.06mg/kg/天的阿普立定和40mg/kg/天的舒尼替尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和舒尼替尼联合的增强和加成性程度。

表XXVII

表XXVIII示出了阿普立定和舒尼替尼作为单独试剂施用和联合施用对于A498人类肾肿瘤异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.06mg/kg/天的阿普立定和30mg/kg/天的舒尼替尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和舒尼替尼联合的增强和加成性程度。

表XXVIII

表XXIX示出了阿普立定和舒尼替尼作为单独试剂施用和联合施用对于A498人类肾肿瘤异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.04mg/kg/天的阿普立定和40mg/kg/天的舒尼替尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和舒尼替尼联合的增强和加成性程度。

表XXIX

作为单独试剂施用的阿普立定(单一治疗)以研究中的剂量、途径和进程进行给药，其对肿瘤生长的抑制作用没有效果。另外，以40mg/kg/天的剂量作为单独试剂施用的舒尼替尼(单一治疗)导致在肿瘤生长抑制的活性的趋势，然而该活性水平达不到NCI标准。该治疗并未导致平均体重的显著的下降，并且所有小鼠在研究结束时重量增加。

相反地，当0.060mg/kg/天的剂量的阿普立定与40或30mg/kg/天的剂量的舒尼替尼联合治疗时，观察到抗肿瘤活性的大于相加的增强。

最后，阿普立定和舒尼替尼的联合治疗导致可接受的体重下降，具有最大13％的重量损失。

实施例3确定阿普立定与西罗莫司脂化物的联合对于人类肾肿瘤异种移植物的效果的体内研究。

该研究的目标在于通过使用人类肾癌的异种移植模型来评定阿普立定加强西罗莫司脂化物抗肿瘤活性的能力。

所有的实验都使用雌性无胸腺裸鼠(Harlan Sprague Dawley，Madison，WI)。当小鼠5周大时，将肿瘤片段植入小鼠。在通风齿条笼中安置动物，每笼5只小鼠，随意供给食品和水。在用肿瘤片段植入之前驯化小鼠1周。载体对照组包含15只小鼠，并且治疗组每组具有10只小鼠。

用于研究的肿瘤模型是MRI-H-121细胞系，所述细胞系是来自DCT肿瘤库的人类肾癌细胞系。对于MRI-H-121试验，使用套管针将3mm³的的组织肿瘤片段在动物右侧面皮下(SC)植入，所述组织肿瘤片段来自体内可植入的系传代1次，使用无菌的Earle′s平衡盐溶液作为润湿剂。在植入时采用的细菌培养物在植入后24和48小时对于污染都是阴性的。

如实施例1所公开的来确定肿瘤的尺寸。当肿瘤生长到平均大小范围95±1.6mg时(平均值±标准差)，根据通过使用

MRI-H-121荷瘤小鼠的治疗在DPI(植入后的天数)12天开始。在治疗和测量肿瘤尺寸时，记录体重。在那些两种药物同天施用的日子中，通过同时共同施用两种药物来治疗联合治疗组，没有试图确定治疗的顺序。

以冻干阿普立定粉剂的管瓶的形式来提供阿普立定，所述粉剂在克列莫佛EL/乙醇/水(CEW)15/15/70中重组达到浓度为0.5mg/mL。然后用0.9％盐水将在CEW中的阿普立定溶液到稀释定量制剂浓度，最终的CEW的比例是0.18/0.18/0.84。

以管瓶的形式来提供西罗莫司脂化物，所述管瓶包含25mg/mL西罗莫司脂化物的非水的、乙醇的、无菌的溶液。所述溶液用稀释溶液稀释，所述稀释溶液包含聚山梨酸酯80(40％w/v)，聚乙二醇400(42.8％w/v)和无水乙醇(19.9％w/v)。然后，所述溶液进一步在0.9％盐水中稀释至定量制剂浓度。

对于异种移植模型的研究组和治疗方式在表XXX中列出：

表XXX

IP：腹腔内给药

A：两个循环，其中首先连续9天每天施用试验材料，然后连续5天每天施用试验材料，在两个循环之间休息5天。

B：三个循环，其中连续5天每天施用试验材料，并在循环之间休息2天

从治疗开始直到研究终止，一周两次记录肿瘤尺寸。比较不同的试验浓度的两种药物联合(阿普立定和西罗莫司脂化物)的平均肿瘤重量与西罗莫司脂化物的平均肿瘤重量，由此评定肿瘤生长抑制作用。

确定所有评估中的所有动物组的肿瘤体积的平均值、平均值的标准偏差和标准误差。在每个测量日进行对肿瘤体积的Student’s t检验，包含研究的末尾，由此来确定在联合治疗组和单一治疗组之间是否存在任何统计学上的的显著差异。

通过将每个小鼠体重大小与原始体重(治疗第一天)比较来确定体重效果。体重损失＞20％的NCI活性标准被用来估计化合物毒性。

表XXXI报道了由每种治疗得到％T/C值，并且图25-26示出了在小鼠中的MRI-H-121肿瘤的肿瘤重量发展(平均值±标准平均数偏差)，所述小鼠用不同剂量的对照(载体)、阿普立定、西罗莫司脂化物、或阿普立定加西罗莫司脂化物治疗。

表XXXI

表XXXII示出了阿普立定和西罗莫司脂化物作为单独试剂施用和联合施用对于MRI-H-121人类肾肿瘤异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.06mg/kg/天的阿普立定和20mg/kg/天的西罗莫司脂化物。另外，提供了所述剂量的阿普立定和西罗莫司脂化物联合的增强和加成性程度。

表XXXII

表XXXIII示出了阿普立定和西罗莫司脂化物作为单独试剂施用和联合施用对于MRI-H-121人类肾肿瘤异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.06mg/kg/天的阿普立定和10mg/kg/天的西罗莫司脂化物。另外，提供了所述剂量的阿普立定和西罗莫司脂化物联合的增强和加成性程度。

表XXXIII

在实验中，以测试施用的剂量、进程和途径的阿普立定难以治疗MRI-H-121异种移植肿瘤。异种移植肿瘤对于以10和20mg/kg/天施用的西罗莫司脂化物的治疗都很敏感，并且更高的剂量提供了太强的活性而不能正确地评定0,06mg/kg/天的阿普立定与20mg/kg/天的西罗莫司脂化物联合的效果。

然而，当0.06mg/kg/天的阿普立定与10mg/kg/天的西罗莫司脂化物联合时，观察到统计上显著的活性增强。确定该增强是大于相加的。小鼠对于阿普立定加上西罗莫司脂化物的联合治疗具有很好的耐受，而没有任何额外毒性的证据。

实施例4阿普立定与西罗莫司脂化物联合对于人类肾肿瘤异种移植CAKI-1治疗的体内研究。

所有的实验都使用雌性无胸腺裸鼠(Harlan Sprague Dawley，Madison，WI)。当小鼠6-8周大时，将细胞悬浮液植入小鼠。在通风齿条笼中安置动物，随意供给食品和水。在肿瘤植入之前使小鼠至少驯化5天。载体对照组包含15只小鼠，并且治疗组每组具有10只小鼠。用于该研究的肿瘤模型是CAKI-1，如实施例2所公开的将所述CAKI-1植入动物。

如实施例1所公开的来确定肿瘤的尺寸。当肿瘤生长在140±34mg(平均值±标准差)的平均大小范围内时，根据通过使用

CAKI-1荷瘤小鼠的治疗在DPI(植入后的天数)21天开始。当治疗和测量肿瘤尺寸时，记录体重。在那些同天施用两种药物的日子中，通过同时共同施用两种药物来治疗联合治疗组，没有试图确定治疗的顺序。

以冻干阿普立定粉剂的管瓶的形式来提供阿普立定，所述粉剂在克列莫佛EL/乙醇/水(CEW)15/15/70中重组到浓度为0.5mg/mL。然后用0.9％盐水将CEW中的阿普立定溶液稀释到定量制剂浓度，最终的CEW的比例是0.18/0.18/0.84。

以管瓶的形式来提供西罗莫司脂化物，所述管瓶包含25mg/mL西罗莫司脂化物的非水的、乙醇的、无菌的溶液。所述溶液用稀释溶液稀释，所述稀释溶液包含聚山梨酸酯80(40％w/v)、聚乙二醇400(42.8％w/v)和无水乙醇(19.9％w/v)。然后，所述溶液进一步在0.9％盐水中稀释至定量制剂浓度。

三个异种移植模型的研究组和治疗方式在表XXXIV中列出：

表XXXIV

IP：腹腔内给药

Qdx9x2：两个循环，其中连续9天每天施用试验材料，并在两个循环之间休息6天

Qdx5x2：两个循环，其中连续5天每天施用试验材料，并在两个循环之间休息4天

从治疗开始直到研究终止，一周两次记录肿瘤尺寸。将不同的试验浓度的两个试剂联合(阿普立定和西罗莫司脂化物)的平均肿瘤重量与西罗莫司脂化物的平均肿瘤重量进行比较，来评定肿瘤生长抑制作用。

确定所有评估中所有动物组的肿瘤体积的平均值、平均值的标准偏差和标准误差。在每个测量日进行对肿瘤体积的Student’s t检验，包含在研究的末尾，来确定是否在联合治疗组和单一治疗组之间有任何的统计学上的的显著差异。

用于评价对于联合治疗的增强和加成性程度的定义和标准同实施例1中所公开的。

表XXXV示出了由每种治疗得到的％T/C值，并且图27和28示出了在小鼠中的CAKI-1肿瘤的肿瘤重量发展(平均值±标准平均数偏差)，所述小鼠用不同剂量的对照(载体)、阿普立定、西罗莫司脂化物、或阿普立定加西罗莫司脂化物治疗。

表XXXV

表XXXV(续)

表XXXVI示出了阿普立定和西罗莫司脂化物作为单独试剂施用和联合施用对于CAKI-1人类肾肿瘤异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.06mg/kg/天的阿普立定和20mg/kg/天的西罗莫司脂化物。另外，提供了所述剂量的阿普立定和西罗莫司脂化物联合的增强和加成性程度。

表XXXVI

表XXXVII示出了阿普立定和西罗莫司脂化物作为单独试剂施用和联合施用对于CAKI-1人类肾肿瘤异种移植物的肿瘤生长抑制％，其用量为0.06mg/kg/天的阿普立定和10mg/kg/天的西罗莫司脂化物。另外，提供了所述剂量的阿普立定和西罗莫司脂化物联合的增强和加成性程度。

表XXXVII

当阿普立定作为单独试剂施用时，阿普立定对于CAKI-1人类肾肿瘤细胞系是无效的。此外，以10和20mg/kg/天的剂量的西罗莫司脂化物作为单独试剂的治疗，根据剂量响应对于CAKI-1细胞系显示了活性，但是它不满足NCI对于活性的标准。另外，治疗并未导致平均体重的显著的下降，并且所有小鼠到研究结束时体重都增加了。

然而，当0.06mg/kg/天的阿普立定与10mg/kg/天的西罗莫司脂化物联合时，观察到活性增强，导致肿瘤生长抑制的相加的增强作用。此外，阿普立定和西罗莫司脂化物的联合导致体重的可接受的下降，并且所有小鼠在研究结束时体重增加。

实施例5阿普立定与西罗莫司脂化物联合对于人类非小细胞肺癌(NSCLC)异种移植物的治疗的体内研究。

所有的实验都使用雌性无胸腺裸鼠(Harlan Sprague Dawley，Madison，WI)。当小鼠6-8周大时，将细胞悬浮液植入小鼠。在通风齿条笼中安置动物，随意供给食品和水。在用肿瘤植入之前使小鼠至少驯化5天。载体对照组包含15只小鼠，并且治疗组每组具有10只小鼠。

用于该研究的肿瘤模型是NCI-H-460，NCI-H-460是来自ATCC(Manassas，VA)的人类NSCLC细胞系。NCI-H-460细胞在RPMI-1640培养基中生长，所述培养基包括10％FBS、10mM的羟乙基哌嗪乙磺酸、1mM丙酮酸钠、4.5g/L葡萄糖、1.5g/L碳酸氢钠和2mM的L-谷氨酰胺。来自体外传代11次的细胞被皮下植入研究小鼠：5x10⁶细胞/小鼠，在没有抗生素或血清的0.2mL 50％基质胶/50％介质，使用23G针和1cc注射器。将细菌培养物等分到准备植入的细胞。所有的培养物在植入后24和48小时对于细菌污染都是阴性的。

如实施例1所公开的来确定肿瘤的尺寸。当肿瘤生长在110±25mg(平均值±标准差)的平均大小范围内时，根据通过使用

NCI-H-460荷瘤小鼠的治疗在DPI(植入后的天数)7天开始。在治疗和测量肿瘤尺寸时，记录体重。在那些同天施用两种药物的日子中，通过同时共同施用两种药物来治疗联合治疗组，没有试图确定治疗的顺序。

以冻干阿普立定粉剂的管瓶的形式来提供阿普立定，所述粉剂在克列莫佛EL/乙醇/水(CEW)15/15/70中重组到浓度0.5mg/mL。然后用0.9％盐水将在CEW中的阿普立定溶液稀释到定量制剂浓度，最终的CEW的比例是0.18/0.18/0.84。

以管瓶的形式来提供西罗莫司脂化物，所述管瓶包含25mg/mL西罗莫司脂化物的非水的、乙醇的、无菌的溶液。所述溶液用稀释溶液稀释，所述稀释溶液包含聚山梨酸酯80(40％w/v)、聚乙二醇400(42.8％w/v)和无水乙醇(19.9％w/v)。然后，所述溶液在0.9％盐水中进一步稀释至定量制剂浓度。

对于三个异种移植模型的研究组和治疗方式在表XXXVIII中列出：

表XXXVIII

IP；腹腔内给药

Qdx9x2：两个循环，其中连续9天每天施用试验材料，并在两个循环之间休息5天

从治疗开始直到研究终止，一周两次记录肿瘤尺寸。将不同的试验浓度的两个试剂联合(阿普立定和西罗莫司脂化物)的平均肿瘤重量与西罗莫司脂化物的平均肿瘤重量进行比较，由此评定肿瘤生长抑制作用。

确定所有评估中的所有动物组的肿瘤体积的平均值、平均值的标准偏差和标准误差。在每个测量日进行对肿瘤体积的Student’s t检验，包含在研究的末尾，以确定在联合治疗组和单一治疗组之间是否有任何统计学上的显著差异。

表XXXIX报道了由每种治疗得到的％T/C值，并且图29和30示出了在小鼠中的NCI-H-460肿瘤的肿瘤重量发展(平均值±标准平均数偏差)，所述小鼠用不同剂量的对照(载体)、阿普立定、西罗莫司脂化物、或阿普立定加西罗莫司脂化物治疗。

表XXXIX

表XXXX示出了阿普立定和西罗莫司脂化物作为单独试剂施用和联合施用对于NCI-H-460人类NSCLC异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.06mg/kg/天的阿普立定和20mg/kg/天的西罗莫司脂化物。另外，提供了所述剂量的阿普立定和西罗莫司脂化物联合的增强和加成性程度。

表XXXX

表XXXXI示出了阿普立定和西罗莫司脂化物作为单独试剂施用和联合施用对于NCI-H-460人类NSCLC异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.06mg/kg/天的阿普立定和10mg/kg/天的西罗莫司脂化物。另外，提供了所述剂量的阿普立定和西罗莫司脂化物联合的增强和加成性程度。

表XXXXI

当阿普立定作为单独试剂施用时(单一治疗)，阿普立定对于NCI-H-460人类NSCLC细胞系是无效的。此外，以10和20mg/kg/天的剂量的西罗莫司脂化物作为单独试剂的治疗，对于NCI-H-460细胞系显示了符合NCI对于活性的标准的活性。另外，治疗并未导致平均体重的显著的下降，并且所有小鼠到研究结束时体重都增加了。

然而，当0.06mg/kg/天的阿普立定与10和20mg/kg/天的西罗莫司脂化物联合时，观察到活性的增强，导致在研究后期肿瘤生长抑制的大于相加的增强。此外，阿普立定和西罗莫司脂化物的联合导致体重的可接受的下降，并且所有小鼠在研究结束时体重增加。

实施例6阿普立定与索拉非尼联合对于人类肝细胞瘤异种移植物治疗的体内研究

所有的实验都使用雌性无胸腺裸鼠(Harlan Sprague Dawley，Madison，WI)。当小鼠6-8周大时，将细胞悬浮液植入小鼠。在通风齿条笼中安置动物，随意供给食品和水。在肿瘤植入之前使小鼠至少驯化5天。载体对照组包含15只小鼠，并且治疗组每组具有9只小鼠。

用于该研究的肿瘤模型是HepG2，HepG2是来自ATCC(Manassas，VA)的人类肝癌细胞系。HepG2细胞在MEM培养基中生长，所述培养基含有10％FBS、1.5g/L碳酸氢钠、0.1mM非必要的氨基酸、1.0mM丙酮酸钠和2mM的L-谷氨酰胺。来自体外传代4-20次的细胞被皮下植入到研究小鼠：5x10⁶细胞/小鼠，在没有抗生素或血清的0.2mL50％基质胶/50％介质，使用23G针和1cc注射器。将细菌培养物等分到准备植入的细胞。所有的培养物在植入后24和48小时对于细菌污染都是阴性的。

如实施例1所公开的来确定肿瘤的尺寸。当肿瘤生长在130±44mg(平均值±标准差)的平均大小范围内，根据通过使用

HepG2荷瘤小鼠的治疗在DPI(植入后的天数)19天开始。在治疗当天和测量肿瘤尺寸时，记录体重。在那些同天施用两种药物的日子中，通过同时共同施用两种药物来治疗联合治疗组，没有试图确定治疗的顺序。

以冻干阿普立定粉剂的管瓶的形式来提供阿普立定，所述粉剂在克列莫佛EL/乙醇/水(CEW)15/15/70中重组到浓度为0.5mg/mL。然后用0.9％盐水将在CEW中的阿普立定溶液稀释到定量制剂浓度，最终的CEW的比例是0.18/0.18/0.84。

以200毫克微红色片剂的形式提供索拉非尼，所述片剂包含索拉非尼甲苯磺酸盐形式的索拉非尼。通过将片剂溶解在克列莫佛EL/乙醇(50/50)中来得到浓度50mg/mL的索拉非尼溶液。然后在水中稀释所述溶液以用于输注(wfi)，得到最终的CEW的比例(12.5，12.5，75)。将CEW中的索拉非尼溶液在wfi中稀释至定量制剂浓度。

三个异种移植模型的研究组和治疗方式在表XXXXII中列出：

表XXXXII

IP：腹腔内给药；PO：口服给药；IV：静脉给药

A：DPI 19，26和33；B：DPI 19-34；C：DPI 19-27

安慰剂：500mg 蔗糖+34mg 磷酸钾+磷酸q.s.pH 3.8-4.4

从治疗开始直到研究终止，一周两次记录肿瘤尺寸。将不同的试验浓度的两种试剂联合(阿普立定和索拉非尼)的平均肿瘤重量与索拉非尼的平均肿瘤重量进行比较，由此来评定肿瘤生长抑制作用。

确定所有评估中的所有动物组的肿瘤体积的平均值、平均值的标准偏差和标准误差。在每个测量日进行对肿瘤体积的Student’s t检验，包含在研究的末尾，由此来确定在联合治疗组和单一治疗组之间是否有任何统计学上的的显著差异。

表XXXXIII报道了由每种治疗得到的％T/C值，并且图31和32示出了在小鼠中的HepG2肿瘤的肿瘤重量发展(平均值±标准平均数偏差)，所述小鼠用不同剂量的对照(载体)、阿普立定、索拉非尼、或阿普立定加索拉非尼治疗。

表XXXXIII

表XXXXIV示出了阿普立定和索拉非尼作为单独试剂施用和联合施用对于HepG2人类肝癌异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.04mg/kg/天的阿普立定和60mg/kg/天的索拉非尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和索拉非尼联合的增强和加成性程度。

表XXXXIV

表XXXXV示出了阿普立定和索拉非尼作为单独试剂施用和联合施用对于HepG2人类肝癌异种植入的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.06mg/kg/天的阿普立定和30mg/kg/天的索拉非尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和索拉非尼联合的增强和加成性程度。

表XXXXV

当阿普立定和索拉非尼作为单独试剂施用时，它们对于HepG2人类肝癌细胞系是无效的。另外，治疗不导致平均体重的显著的下降。

然而，当0.06mg/kg/天的阿普立定与30mg/kg/天的索拉非尼联合时，观察到活性的增强，导致肿瘤生长抑制的相加的增强。此外，阿普立定和索拉非尼的联合导致体重的可接受的下降。

实施例7阿普立定与索拉非尼联合对于人类黑素瘤异种移植物的治疗的体内研究

所有的实验都使用雌性无胸腺裸鼠(Harlan Sprague Dawley，Madison，WI)。当小鼠6-8周大时，将肿瘤片段植入小鼠。在通风齿条笼中安置动物，随意供给食品和水。在肿瘤植入之前使小鼠至少驯化5天。载体对照组包含15只小鼠，并且治疗组每组具有10只小鼠。

用于该研究的肿瘤模型是LOX-IMVI，LOX-IMVI是来自美国国家癌症研究所(NCI)的发展治疗部门的人类黑素瘤细胞系。将来自体内移植系传代1次的LOX-IMVI的2mm³的组织肿瘤片段，使用13口径套管针皮下植入(SC)到动物右侧面，使用无菌的Earle′s平衡盐液作为润湿剂。在植入时采用的细菌培养物在植入后24和48小时对于污染都是阴性的。

如实施例1所公开的来确定肿瘤的尺寸。当肿瘤生长到平均大小范围130±44mg时(平均值±标准差)，根据通过使用

生命模块V 8.0 SP1肿瘤追踪和测量软件测定的肿瘤重量将小鼠随机分到治疗组和对照组中。

LOX-IMVI荷瘤小鼠的治疗在DPI(植入后的天数)11天开始。在治疗当天和测量肿瘤尺寸时，记录体重。在那些同天施用两种药物的日子中，通过同时共同施用两种药物来治疗联合治疗组，没有试图确定治疗的顺序。

以200毫克微红色片剂的形式提供索拉非尼，所述片剂包含甲苯磺酸盐形式的索拉非尼。通过将片剂溶解在克列莫佛EL/乙醇(50/50)中来得到浓度50mg/mL的索拉非尼溶液。然后在水中稀释所述溶液以用于输注(wfi)，得到最终的CEW的比例(12.5，12.5，75)。将在CEW中的索拉非尼溶液在wfi中稀释至定量制剂浓度。

对于三个异种移植模型的研究组和治疗方式在表XXXXVI中列出：

表XXXXVI

IP：腹腔给药；PO：口服给药

A：DPI 11-19；B：DPI 11-25

从治疗开始直到研究终止，一周两次记录肿瘤尺寸。将不同的试验浓度的两种试剂联合(阿普立定和索拉非尼)的平均肿瘤重量与索拉非尼的平均肿瘤重量进行比较，由此来来评定肿瘤生长抑制作用。

确定所有评估中的所有动物组的肿瘤体积的平均值、平均值的标准偏差和标准误差。在每个测量日进行对肿瘤体积的Student’s t检验，包含在研究的末尾，来确定在联合治疗组和单一治疗组之间是否有任何的统计学上的的显著差异。

表XXXXVII报道了由每种治疗得到的％T/C值，并且图33和34示出了在小鼠中的LOX-IMVI肿瘤的肿瘤重量发展(平均值±标准平均数偏差)，所述小鼠用不同剂量的对照(载体)、阿普立定、索拉非尼、或阿普立定加索拉非尼治疗。

表XXXXVII

表XXXXVIII示出了阿普立定和索拉非尼作为单独试剂施用和联合施用对于LOX-IMVI人类黑素瘤异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.06mg/kg/天的阿普立定和60mg/kg/天的索拉非尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和索拉非尼联合的增强和加成性程度。

表XXXXVIII

表XXXXIX示出了阿普立定和索拉非尼作为单独试剂施用和联合施用对于LOX-IMVI人类黑素瘤异种移植物的肿瘤生长抑制％，其剂量为0.06mg/kg/天的阿普立定和30mg/kg/天的索拉非尼。另外，提供了所述剂量的阿普立定和索拉非尼联合的增强和加成性程度。

表XXXXIX

当阿普立定和索拉非尼作为单独试剂施用时，它们对于LOX-IMVI人类黑素瘤细胞系是无效的。另外，治疗不导致平均体重的显著的下降，并且所有小鼠在研究结束时都增加了重量。

然而，当0.06mg/kg/天的阿普立定与30和60mg/kg/天的索拉非尼联合时，观察到活性的增强，导致肿瘤生长抑制的相加的增强。此外，阿普立定和索拉非尼的联合导致体重的可接受的下降，并且所有小鼠在研究结束时都增加了重量。

Claims

1.一种治疗癌症的方法，其包括给需要治疗的患者施用治疗有效量的阿普立定或其药物学上可接受的盐，和治疗有效量的另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐。

2.一种增强选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物的癌症治疗的治疗效果的方法，其包括给需要的患者施用治疗有效量的阿普立定或其药物学上可接受的盐。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中阿普立定或其药物学上可接受的盐，和另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐，形成同一组合物的一部分。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其中提供阿普立定或其药物学上可接受的盐和另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐，它们作为独立的组合物在相同时间或不同时间给药。

5.根据权利要求4所述的方法，其中提供阿普立定或其药物学上可接受的盐和另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐，它们作为独立的组合物在不同时间给药。

6.根据前述权利要求任一项所述的方法，其中与阿普立定联合的抗癌药物是索拉非尼或其药物学上可接受的盐。

7.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中与阿普立定联合的抗癌药物是西罗莫司脂化物或其药物学上可接受的盐。

8.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中与阿普立定联合的抗癌药物是舒尼替尼或其药物学上可接受的盐。

9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所要治疗的癌症选自由肾癌、肝癌、黑素瘤、乳腺癌、肺癌、胰腺癌和胃肠道间质瘤(GIST)组成的组中。

10.阿普立定或其药物学上可接受的盐在用于根据权利要求1-9中任一项所述方法的药物的制备中的用途。

11.选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐在用于根据权利要求1-9中任一项所述方法的药物的制备中的用途。

12.用于根据权利要求1-9中任一项所述的方法的阿普立定或其药物学上可接受的盐。

13.用于根据权利要求1-9中任一项所述的方法的选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐。

14.一种药物组合物，其包含阿普立定或其药物学上可接受的盐，和另一个选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受的盐。

15.一种用于癌症治疗的试剂盒，其包含阿普立定或其药物学上可接受盐的剂型，另一种选自索拉非尼、舒尼替尼和西罗莫司脂化物的抗癌药物或其药物学上可接受盐的剂型，和两种药物联合使用的说明书。