KR20100131474A - 개선된 항암치료 - Google Patents
개선된 항암치료 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20100131474A KR20100131474A KR1020107022267A KR20107022267A KR20100131474A KR 20100131474 A KR20100131474 A KR 20100131474A KR 1020107022267 A KR1020107022267 A KR 1020107022267A KR 20107022267 A KR20107022267 A KR 20107022267A KR 20100131474 A KR20100131474 A KR 20100131474A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- aplidine
- pharmaceutically acceptable
- sorafenib
- sunitinib
- day
- Prior art date
Links
- 0 CC(C)C[C@@](*(C)C(C(CCC1)*1C(C(C)=O)=O)=O)*=O Chemical compound CC(C)C[C@@](*(C)C(C(CCC1)*1C(C(C)=O)=O)=O)*=O 0.000 description 2
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
- A61K31/436—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having oxygen as a ring hetero atom, e.g. rapamycin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
- A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
- A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/15—Depsipeptides; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
Abstract
본 발명은 아플리딘의 소라페니브, 템시롤리무스 및 수니티니브들로부터 선택되는 다른 항암제와의 조합들 및 암의 치료에 있어서의 이들 조합들의 용도에 관한 것이다.
Description
본 발명은 아플리딘(aplidine)과 다른 항암제들(anticancer drugs), 특히 소라페니브(sorafenib), 수니티니브(sunitinib) 및 템시롤리무스(temsirolimus)들로부터 선택되는 다른 항암제들의 조합 및 이들 조합들의 암의 치료에서의 용도에 관한 것이다.
신체의 일부에서의 세포들이 통제를 벗어나서 성장하기 시작하는 경우에 암이 발달하게 된다. 비록, 많은 종류의 암이 존재하기는 하나, 이들 모두는 비정상적인 세포들의 통제를 벗어난 성장으로부터 야기된다. 암세포들은 근처의 조직들에 침투할 수 있고, 그리고 혈류 및 림프계를 통하여 신체의 다른 부분들에로 확산될 수 있다. 여러 암의 주요 형태(main types)들이 존재한다. 암종(carcinoma)은 악성신생물(malignant neoplasm)이며, 이는 상피세포들(epithelial cells)의 제어되지 않는, 진행성의 비정상적인 성장이다. 상피세포들은 기관들, 관(vessels)들의 라이닝(lining) 및 다른 소공동들(small cavities)을 포함하여 신체의 내부 및 외부 표면들을 피복하고 있다. 육종(sarcoma)은 뼈, 연골, 지방, 근육, 혈관들 또는 다른 연결조직이나 지지조직들 내에서 발생하는 암이다. 백혈병(leukemia)은 골수(bone marrow) 등과 같은 조혈조직(blood-forming tissue) 내에서 발생하는 암이며, 대량의 비정상적인 혈액세포들(blood cells)이 생성되도록 하고, 혈류에로 들어가도록 한다. 림프종(lymphoma) 및 다발성 골수종(multiple myeloma)들은 면역계의 세포들로부터 발생되는 암들이다.
게다가, 암은 침투성이며, 주변 조직들에 잠입하는 경향이 있고, 그리고 전이(metastases)를 야기한다. 이는 직접적으로 주변 조직들 내로 확산될 수 있으며, 또한 림프계 및 순환계들을 통하여 신체의 다른 부분들에로 확산될 수도 있다.
수술 및 국부화된 질병에 대한 방사(radiation) 및 화학요법들을 포함하여 암에 대한 많은 치료법들이 획득가능하다. 그러나, 많은 암 형태들에 대한 획득가능한 치료법들의 효능(efficacy)은 제한되어 있으며, 임상적인 이득들(clinical benefits)을 나타내는 새로운, 개량된 형태들의 치료법들이 요구되고 있다. 이는 특히 현재 후기의 및/또는 전이된 질병을 앓고 있는 환자들 및 저항의 획득 또는 연관된 독성들로 인한 치료제들의 투여에서의 제한으로 인하여 무효이거나 또는 견딜 수 없게 된 기 구축된 치료법들로 이미 치료를 받은 후의 퇴행성 질병(progressive disease)이 재발된 환자들에 대해서 특히 사실이다.
1950년대 이후, 암의 화학요법적인 관리에서 명백한 진전이 이루어졌다. 불행히도, 전체 암환자들의 50% 이상이 초기 치료에 대응하지 못하거나 또는 치료의 초기 대응 이후 재발을 경험하고 그리고 극단적으로는 퇴행성의 전이 질병(progressive metastatic disease)로 사망하고 있다. 따라서, 새로운 항암제들의 설계 및 발견에 대한 당면한 책임이 절대적으로 중요하다.
전통적인 형태에 있어서의 화학요법은 일차적으로는 DNA, RNA 및 단백질 생합성을 포함하여 일반적인 세포상 대사과정(cullular metabolic processes)들을 표적으로 하는 것에 의하여 빠르게 증식하는 암세포들을 사멸시키는 것에 중점을 두어 왔다. 화학요법제(chemotherapy drugs)들은 그들이 어떻게 암세포들 내의 특정의 화학물질들에 영향을 주는 지, 어떤 세포상 활동들이나 진행들이 약물로 영향을 받는 지, 그리고 어떤 특정의 세포 단계들(specific cellular phases)이 상기 약물에 영향을 받는 지들에 기초하여 여러 그룹들로 구분된다. 화학요법제들의 가장 공통적으로 사용되는 형태들에는 DNA-알킬화제들(DNA-alkylating drugs ; 시클로포스파미드(cyclophosphamide), 이포스파미드(ifosfamide), 시스플라틴(cisplatin), 카보플라틴(carboplatin), 디카바진(dacarbazine) 등과 같은), 대사길항제들(antimetabolites ; 5-플루오로우라실(5-fluorouracil), 카페시타빈(capecitabine), 6-머캅토퓨린(6-mercaptopurine), 메토트렉세이트(methotrexate), 젬시타빈(gemcitabine), 시타라빈(cytarabine), 플루다라빈(fludarabine) 등과 같은), 유사분열저해제들(mitotic inhibitors ; 파클리탁셀(paclitaxel), 도세탁셀(docetaxel), 빈블라스틴(vinblastine), 빈크리스틴(vincristine) 등과 같은), 안트라사이클린류(anthracyclines ; 다우노루비신(daunorubicin), 독소루비신(doxorubicin), 에피루비신(epirubicin), 이다루비신(idarubicin), 미토크산트론(mitoxantrone) 등과 같은), 토포아이소머라제 I 및 II 저해제들(topoisomerase I and II inhibitors ; 토포테칸(topotecan), 이리노테칸(irinotecan), 에토포시드(etoposide), 테니포시드(teniposide) 등과 같은) 그리고 호르몬요법제(hormone therapy ; 타목시펜(tamoxifen), 플루타미드(flutamide) 등과 같은) 들이 포함된다.
이상적인 항암제는 비-암세포들에 대한 그의 독성에 비해 넓은 지표(wide index)를 가지며, 암세포들을 선택적으로 사멸시킬 수 있으며, 또한 상기 약물에의 연장된 노출 후에서 조차도 암세포들에 대하여 그의 효능을 유지할 수 있어야 한다. 불행히도, 공지된 약물들에 대한 현재의 화학요법들 중 어느 것도 이상적인 프로파일(profile)을 갖고 있지 못하다. 대부분은 매우 좁은 치료적인 지표들을 가지며, 게다가, 화학요법제의 치사농도(sublethal concentrations)에 약간 못 미치게 노출된 암에 걸린 세포들은 이러한 약물에 대하여 저항성을 발달시킬 수 있으며, 종종 다양한 다른 항암제들에 대하여도 교차-저항성(cross-resistance)을 발달시킬 수 있다.
아플리딘(디하이드로디뎀닌 비 ; dehydrodidemnin B)은 지중해의 해양 피낭동물인 아플리디움 알비칸스(Aplidium albicans)로부터 단리되는 고리형 뎁시펩티드(cyclic depsipeptide)이며, 이는 국제특허공개공보 제WO 91/04985호의 대상이다. 이는 디뎀닌스(didemnins)로 알려진 화합물들과 연관이 있으며, 하기의 화학식 1의 구조를 갖는다:
아플리딘, 그의 용도들, 조성들 및 합성에 대한 그 더 이상의 정보는 특허출원들인 국제특허공개공보 제WO 91/04985호, 동 제WO 99/42125호, 동 제WO 01/35974호, 동 제WO 01/76616호, 동 제WO 2004/084812호, 동 제WO 02/30441호, 동 제WO 02/02596호, 동 제WO 03/33013호, 동 제WO 2004/080477호, 동 제WO 2004/080421호, 동 제WO 2007/101235호, 동 제WO 2008/135793호 및 국제특허출원 제PCT/EP2008/064117호들에서 찾을 수 있다. 본인들은 이들 특허출원 명세들 각각의 내용을 특정의 참조로 여기에 포함시킨다.
동물 임상전 연구들(animal preclinical studies) 및 인간 임상 1단계 연구들(human clinical Phase I studies) 둘 다에서, 아플리딘은 백혈병 및 림프종들을 포함하여 광대역(broad spectrum)의 종양 형태들에 대하여 세포독성의 잠재능(cytotoxic potential)을 갖는 것으로 나타났다. 예를 들면, 페어클로쓰, 지. 등의 문헌(Faircloth, G. et al.: "Dehydrodidemnin B (DDB) a new marine derived anticancer agent with activity against experimental tumour models", 9th NCI-EORTC Symp. New Drugs Cancer Ther. (March 12-15, Amsterdam) 1996, Abst 111); 페어클로쓰, 지. 등의 문헌(Faircloth, G. et al.: "Preclinical characterization of aplidine, a new marine anticancer depsipeptide", Proc. Amer. Assoc. Cancer Res. 1997, 38: Abst 692); 디펜브록 에이취, 피터 알, 페어클로쓰 지티, 만자나레스 아이, 지메노 제이, 하나우스케 에이알 등의 문헌(Depenbrock H, Peter R, Faircloth GT, Manzanares I, Jimeno J, Hanauske AR.: "In vitro activity of aplidine, a new marine-derived anti-cancer compound, on freshly explanted clonogenic human tumour cells and haematopoietic precursor cells Br. J. Cancer, 1998; 78: 739-744); 페어클로쓰 지, 그랜트 더블류, 남 에스, 지메노 제이, 만자나레스 아이, 라인하르트 케이 등의 문헌(Faircloth G, Grant W, Nam S, Jimeno J, Manzanares I, Rinehart K.: "Schedule-dependency of aplidine, a marine depsipeptide with antitumor activity", Proc. Am. Assoc. Cancer Res. 1999; 40: 394); 브로기니 엠, 마르치니 에스, 딘칼씨 엠, 타라볼레띠 지, 지아바찌 알, 페어클로쓰 지, 지메노 지 등의 문헌(Broggini M, Marchini S, D'Incalci M, Taraboletti G, Giavazzi R, Faircloth G, Jimeno J.: "Aplidine blocks VEGF secretion and VEGF/VEGF-R1 autocrine loop in a human leukemic cell line", Clin. Cancer Res. 2000; 6 (suppl): 4509); 에르바 이, 바싸노 엘, 디리베르티 지, 무라도어 아이, 치오리노 지, 우베지오 피, 비그나티 에스, 코데고니 에이, 데시데리오 엠에이, 페어클로쓰 지, 지메노 제이 및 딘칼씨 엠 등의 문헌(Erba E, Bassano L, Di Liberti G, Muradore I, Chiorino G, Ubezio P, Vignati S, Codegoni A, Desiderio MA, Faircloth G, Jimeno J and D'Incalci M.: "Cell cycle phase perturbations and apoptosis in tumour cells induced by aplidine", Br. J. Cancer 2002; 86: 1510-1517); 파즈-아레스 엘, 안토니 에이, 프롱크 엘, 트웰브스 씨, 알론소 에스, 코르테스-퓨네스 에이취, 셀리 엔, 고메즈 씨, 로페즈-라자로 엘, 구즈만 씨, 지메노 제이, 카예 에스 등의 문헌(Paz-Ares L, Anthony A, Pronk L, Twelves C, Alonso S, Cortes-Funes H, Celli N, Gomez C, Lopez-Lazaro L, Guzman C, Jimeno J, Kaye S.: "Phase I clinical and pharmacokinetic study of aplidine, a new marine didemnin, administered as 24-hour infusion weekly" Clin. Cancer Res. 2000; 6 (suppl): 4509); 레이몬드 이, 아디-바고 엔, 바우딘 이, 리브라그 브이, 파이브레 에스, 레코트 에프, 라이트 티, 로페즈 라자로 엘, 구즈만 씨, 지메노 제이, 듀크레우크스 엠, 레 슈발리에르 티, 아르만드 제이피 등의 문헌 (Raymond E, Ady-Vago N, Baudin E, Ribrag V, Faivre S, Lecot F, Wright T, Lopez Lazaro L, Guzman C, Jimeno J, Ducreux M, Le Chevalier T, Armand JP.: "A phase I and pharmacokinetic study of aplidine given as a 24-hour continuous infusion every other week in patients with solid tumor and lymphoma", Clin. Cancer Res. 2000; 6 (suppl): 4510); 마로운 제이, 벨랑거 케이, 세이모어 엘, 솔져스 디, 카펜티어 디, 고엘 알, 스튜어트 디, 토미악 이, 지메노 제이, 매튜스 에스 등의 문헌(Maroun J, Belanger K, Seymour L, Soulieres D, Charpentier D, Goel R, Stewart D, Tomiak E, Jimeno J, Matthews S. : "Phase I study of aplidine in a 5 day bolus q 3 weeks in patients with solid tumors and lymphomas", Clin. Cancer Res. 2000; 6 (suppl): 4509); 이즈퀴에르도 엠에이, 보우만 에이, 마르티네즈 엠, 씨셀라 비, 지메노 제이, 구즈만 씨, 게르마 제이, 스미쓰 제이 등의 문헌(Izquierdo MA, Bowman A, Martinez M, Cicchella B, Jimeno J, Guzman C, Germa J, Smyth J.: "Phase I trial of aplidine given as a 1 hour intravenous weekly infusion in patients with advanced solid tumors and lymphoma", Clin. Cancer Res. 2000; 6 (suppl): 4509) 등을 참조하시오.
기계론적인 연구들에서는 아플라딘이 ALL-MOLT4 세포들 내에서의 VEGF 분비를 차단할 수 있고, 그리고 저농도(5nM)에서 시험관 내 세포독성 활성이 신생(de novo)의 또는 재발의 ALL 및 AML을 앓는 소아과의 환자들로부터의 AML 및 ALL 시료들에서 관찰되었다는 것을 나타내고 있다. 아플라딘은 시험관 내에서 약물 처리된 백혈병에서 G1기 정지 및 G2기 정지(a G1 and a G2 arrest) 둘 다를 유발하는 것으로 나타나고 있다. VEGF 수용체(VEGF receptor)의 하향조절(down regulation)과는 별개로 아플리딘의 작용 모드에 대하여는 거의 알려지지 않았다.
아플리딘에 대한 1단계의 임상연구들(phase I clinical studies)에 있어서, 엘-카르니틴(L-carnitine)이 24시간 예비조치(pretreatment)로 주어지거나 또는 공동투여(co-administered)되어 골수독성(myelotoxicity)을 예방하도록 하였으며, 이는 예를 들면, 국제특허공개공보 제WO 02/30441호를 참조하시오. 엘-카르니틴의 공동투여는 약물-유발(drug-induced)의 근육 독성으로부터의 회복을 개선시키는 것으로 여겨지고 있다.
앞서, 분석된 약물 조합들이 병용요법(combination therapy)에서 백혈병 및 림프종들의 처치에 대하여 유용한 지의 여부를 평가하기 위하여 다른 항암제들과 함께 아플리딘에 대한 시험관 내 및 생체 내 분석들이 수행되었다. 특히, 국제특허공개공보 제WO 2004/080421호에서는, 백혈병 및 림프종의 치료에 대하여 아플리딘이 메토트렉세이트, 사이토신아라비노시드(cytosine arabinoside), 미토크산트론(mitoxantrone), 빈블라스틴(vinblastine), 메틸프레드니솔론(methylprednisolone) 및 독소루비신(doxorubicin)과 함께 평가되었다. 반면에, 국제특허공개공보 제 WO 2007/101235호에서는, 폐암(lung cancer), 유방암(breast cancer), 결장암(colon cancer), 전립선암(prostate cancer), 신장암(renal cancer), 흑색종(melanoma), 다발성 골수종, 백혈병 및 림프종의 치료에 대하여 아플리딘이 특별히 파클리탁셀, 독소루비신, 시스플라틴, 무수아비산(arsenic trioxide), 5-플루오로우라실, 사이토신아라비노시드, 카보플라틴, 7-에틸-10-히드록시캄프토테킨(7-ethyl-10-hydroxycamptothecin), 에토포시드(etoposide), 멜파란(melphalan), 덱사메타손(dexamethasone), 시클로포스파미드, 보르테조미브(bortezomib), 에를로티니브(erlotinib), 트라스트쥬마브(trastuzumab), 레날리도미드(lenalidomide), 인터류킨-2(interleukin-2), 알파-인터페론 2(interferon-α 2), 다카르바진(dacarbazine), 베바씨쥬마브(bevacizumab), 이다루비신(idarubicin), 탈리도미드(thalidomide) 및 리툭시마브(rituximab)들과 함께 평가되었다. 국제특허공개공보 제WO 2008/135793호에서는, 인간 환자들에 있어서 두 약물들의 조합의 투여에 대하여 실현가능한 스케쥴(schedule) 및 투여량(dosage)을 제공하면서 아플리딘이 특별히 카보플라틴과 함께 평가되었다. 마지막으로, 국제특허출원 제PCT/EP2008064117호에서는, 췌장암종(pancreatic carcinoma)의 치료에 대하여 아플리딘이 특별히 젬시타빈과 함께 평가되었다.
암이 동물들 및 인간들의 죽음의 주요 원인이기 때문에, 암으로 고통받는 환자들에 투여될 안전하고 그리고 효과적인 치료법을 얻기 위하여 많은 노력들이 이루어져 왔고 그리고 여전히 진행중에 있다. 본 발명에 의하여 해결하고자 하는 과제는 암의 치료에 있어서 유용한 항암요법들을 제공하는 것이다.
본 발명은 다른 항암제들, 특히 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들의 약효를 증가시키고, 그에 따라 아플리딘 및 다른 항암제들이 암의 치료에 대한 병용요법에서 성공적으로 사용될 수 있도록 하는 것이다. 따라서, 본 발명은 병용요법들을 사용하여 암을 치료하기 위한 약제학적 조성물, 키트(kits), 방법들 및 병용요법을 위한 약물(medicament)의 생산에서의 아플리딘의 용도들에 관한 것이다.
본 발명의 하나의 관점에 따르면, 본 발명자들은 아플리딘에 기초하고 그리고 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제(anticancer drug)를 사용하여 암의 치료에 유용한 병용요법들을 제공한다.
다른 구체예에 있어서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 치료학적으로 유효한 양 및 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 치료학적으로 유효한 양을 아플리딘의 투여 전, 투여 동안 또는 투여 후에 투여하는 것을 포함하는 암을 치료하는 방법을 포함하고 있다. 상기 두 약물들은 동일한 조성물의 일부를 구성하거나 또는 동시에 또는 서로 다른 시간에 투여하기 위한 별도의 조성물로서 제공할 수 있다.
또 다른 관점에 있어서, 본 발명은 암의 치료에 있어서 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 항암제의 치료학적 효능을 증가시키는 방을 포함하며, 이는 치료를 필요로 하는 환자에게 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 치료학적으로 유효한 양을 투여하는 것을 포함한다. 아플리딘은 소라페니브, 수니티니브 또는 템시롤리무스를 투여하기 이전, 투여하는 동안 또는 투여 후에 투여된다.
또 다른 구체예에 있어서, 본 발명은 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제들과의 병용요법에 있어서 암의 치료를 위한 약물(medicament)의 제조를 위한 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 용도를 포함한다.
연관된 구체예에 있어서, 본 발명은 아플리딘과의 병용요법에 있어서 암의 치료를 위한 약물의 제조를 위한 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 용도를 포함한다.
또 다른 관점에 있어서, 본 발명은 암의 치료를 위한 병용요법에서 사용될 약제학적 조성물을 포함하며,이 약제학적 조성물은 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 및/또는 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들을 포함한다.
본 발명은 또한 암의 치료에서 사용되기 위한 키트(kit)를 포함하며, 이는 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 투여 제형(dosage form) 및/또는 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 투여 제형 및 조합에서의 두 약물들의 사용에 대한 지시사항(instructions)들을 포함한다.
하나의 바람직한 관점에 있어서, 본 발명은 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염과 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 상승작용적 조합들(synergistic combinations)에 관한 것이다.
도 1은 대조(비히클(vehicle)), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 CAKI-1 종양들의 종양 중량 발달(tumor weight evolution)(평균±표준오차(SEM))을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 60㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 13일 후(day 13 post-implantation)에 개시하였다.
도 2는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 CAKI-1 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 13일 후에 개시하였다.
도 3은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 CAKI-1 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 60㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 13일 후에 개시하였다.
도 4는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 CAKI-1 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 13일 후에 개시하였다.
도 5는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 60㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 14일 후에 개시하였다.
도 6은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 14일 후에 개시하였다.
도 7은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 60㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 14일 후에 개시하였다.
도 8은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 14일 후에 개시하였다.
도 9는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 A498 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 60㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 26일 후에 개시하였다.
도 10은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 A498 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 26일 후에 개시하였다.
도 11은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 A498 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 60㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 26일 후에 개시하였다.
도 12는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 A498 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 26일 후에 개시하였다.
도 13은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 CAKI-1 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 40㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 23일 후에 개시하였다.
도 14는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 CAKI-1 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 23일 후에 개시하였다.
도 15는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 CAKI-1 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 40㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 23일 후에 개시하였다.
도 16은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 CAKI-1 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 23일 후에 개시하였다.
도 17은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 40㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 10일 후에 개시하였다.
도 18은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 10일 후에 개시하였다.
도 19는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 40㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 10일 후에 개시하였다.
도 20은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 10일 후에 개시하였다.
도 21은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 A498 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 40㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 19일 후에 개시하였다.
도 22는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 A498 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 19일 후에 개시하였다.
도 23은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 A498 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 40㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 19일 후에 개시하였다.
도 24는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 A498 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 19일 후에 개시하였다.
도 25는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 템시롤리무스(토리셀(TORISEL®)) 또는 아플리딘 플러스 템시롤리무스들로 처치된 마우스에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 템시롤리무스는 20㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 12일 후에 개시하였다.
도 26은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 템시롤리무스(토리셀(TORISEL®)) 또는 아플리딘 플러스 템시롤리무스들로 처치된 마우스에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 템시롤리무스는 10㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 12일 후에 개시하였다.
도 27은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 템시롤리무스(토리셀(TORISEL®)) 또는 아플리딘 플러스 템시롤리무스들로 처치된 마우스에서의 CAKI-1 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 템시롤리무스는 10㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 21일 후에 개시하였다.
도 28은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 템시롤리무스(토리셀(TORISEL®)) 또는 아플리딘 플러스 템시롤리무스들로 처치된 마우스에서의 CAKI-1 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 템시롤리무스는 20㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 21일 후에 개시하였다.
도 29는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 템시롤리무스(토리셀(TORISEL®)) 또는 아플리딘 플러스 템시롤리무스들로 처치된 마우스에서의 NCI-H-460 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 템시롤리무스는 10㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 7일 후에 개시하였다.
도 30은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 템시롤리무스(토리셀(TORISEL®)) 또는 아플리딘 플러스 템시롤리무스들로 처치된 마우스에서의 NCI-H-460 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 템시롤리무스는 20㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 7일 후에 개시하였다.
도 31은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 HepG2 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 19일 후에 개시하였다.
도 32는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 HepG2 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 60㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 19일 후에 개시하였다.
도 33은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 LOX-IMVI 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 60㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 11일 후에 개시하였다.
도 34는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 LOX-IMVI 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 11일 후에 개시하였다.
도 2는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 CAKI-1 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 13일 후에 개시하였다.
도 3은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 CAKI-1 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 60㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 13일 후에 개시하였다.
도 4는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 CAKI-1 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 13일 후에 개시하였다.
도 5는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 60㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 14일 후에 개시하였다.
도 6은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 14일 후에 개시하였다.
도 7은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 60㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 14일 후에 개시하였다.
도 8은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 14일 후에 개시하였다.
도 9는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 A498 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 60㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 26일 후에 개시하였다.
도 10은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 A498 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 26일 후에 개시하였다.
도 11은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 A498 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 60㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 26일 후에 개시하였다.
도 12는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 A498 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 26일 후에 개시하였다.
도 13은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 CAKI-1 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 40㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 23일 후에 개시하였다.
도 14는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 CAKI-1 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 23일 후에 개시하였다.
도 15는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 CAKI-1 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 40㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 23일 후에 개시하였다.
도 16은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 CAKI-1 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 23일 후에 개시하였다.
도 17은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 40㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 10일 후에 개시하였다.
도 18은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 10일 후에 개시하였다.
도 19는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 40㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 10일 후에 개시하였다.
도 20은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 10일 후에 개시하였다.
도 21은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 A498 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 40㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 19일 후에 개시하였다.
도 22는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 A498 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 19일 후에 개시하였다.
도 23은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 A498 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 40㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 19일 후에 개시하였다.
도 24는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 수니티니브(수텐트(SUTENT®)) 또는 아플리딘 플러스 수니티니브들로 처치된 마우스에서의 A498 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.04㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 수니티니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 19일 후에 개시하였다.
도 25는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 템시롤리무스(토리셀(TORISEL®)) 또는 아플리딘 플러스 템시롤리무스들로 처치된 마우스에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 템시롤리무스는 20㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 12일 후에 개시하였다.
도 26은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 템시롤리무스(토리셀(TORISEL®)) 또는 아플리딘 플러스 템시롤리무스들로 처치된 마우스에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 템시롤리무스는 10㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 12일 후에 개시하였다.
도 27은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 템시롤리무스(토리셀(TORISEL®)) 또는 아플리딘 플러스 템시롤리무스들로 처치된 마우스에서의 CAKI-1 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 템시롤리무스는 10㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 21일 후에 개시하였다.
도 28은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 템시롤리무스(토리셀(TORISEL®)) 또는 아플리딘 플러스 템시롤리무스들로 처치된 마우스에서의 CAKI-1 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 템시롤리무스는 20㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 21일 후에 개시하였다.
도 29는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 템시롤리무스(토리셀(TORISEL®)) 또는 아플리딘 플러스 템시롤리무스들로 처치된 마우스에서의 NCI-H-460 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 템시롤리무스는 10㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 7일 후에 개시하였다.
도 30은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 템시롤리무스(토리셀(TORISEL®)) 또는 아플리딘 플러스 템시롤리무스들로 처치된 마우스에서의 NCI-H-460 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 템시롤리무스는 20㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 7일 후에 개시하였다.
도 31은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 HepG2 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 19일 후에 개시하였다.
도 32는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 HepG2 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 60㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 19일 후에 개시하였다.
도 33은 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 LOX-IMVI 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 60㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 11일 후에 개시하였다.
도 34는 대조(비히클), 아플리딘(APLIDIN®), 소라페니브 또는 아플리딘 플러스 소라페니브들로 처치된 마우스에서의 LOX-IMVI 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내는 그래프이다. 아플리딘은 0.06㎎/㎏/일의 투여량으로 그리고 소라페니브는 30㎎/㎏/일의 투여량으로 투여하였다. 치료들은 이식 11일 후에 개시하였다.
본 발명자들은 놀랍게도 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스 각각이 개별적으로 아플리딘과 조합되는 경우에 이들(소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스)의 항암 활성(anticancer activity)이 크게 강화된다는 것을 발견하였다. 따라서, 본 발명은 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스 및 이들의 혼합물로부터 선택되는 다른 항암제와 아플리딘의 조합에 기초하여 암의 효과적인 치료를 제공하는 것에 관련되어 있다.
"암"에 대하여는, 이는 종양들(tumors), 신생물들(neoplasias) 및 임의의 다른 악성의 조직 또는 세포들을 포함하는 것을 의미한다.
다른 관점에 있어서, 본 발명은 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 및 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들을 사용하는 상승작용적 조합들(synergistic combinations)에 관한 것이다. 이러한 상승작용적 조합들은 실시예 1 내지 7들 및 상승작용적 조합들에 대한 결과들을 분석하는 것을 포함하여 본 명세서에서 기술되는 방법론(methodology)의 적용에 의하여 수득될 수 있다.
본 명세서를 통하여 사용된 바와 같은 용어 "조합"은 동일하거나 또는 분리된 약제학적 조성물들 내에서 그리고 동시에 또는 서로 다른 시간들에서의 치료제들(therapeutic agents)의 투여를 포함하는 것을 의미한다. 상기 치료제들이 서로 다른 시간들에서 투여되는 경우, 이들은 일어날 상기 상승작용적 반응(synergistic response)을 제공하기에 충분히 가까운 시간 내에 투여되어야 한다.
또 다른 관점에 있어서, 본 발명은 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염을 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들과 함께 사용하는 병용요법에 의하여 암의 유효한 치료를 위한 약물의 제조를 위한 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 사용에 관한 것이다.
연관된 관점에 있어서, 본 발명은 소라페니브, 수니티니브 또는 템시롤리무스 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염들과 함께 사용하는 병용요법에 의하여 암의 유효한 치료를 위한 약물의 제조를 위한 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 사용에 관한 것이다.
또 다른 관점에 있어서, 본 발명은 이러한 치료를 필요로 하는 환자에게 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 치료학적으로 유효한 양과 함께 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 치료학적으로 유효한 양을 투여하는 단계를 포함하는 암을 치료하는 방법에 관한 것이다.
본 발명은 또한 이러한 치료를 필요로 하는 환자에게 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 치료학적으로 유효한 양과 함께 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 치료학적으로 유효한 양을 투여하는 단계를 포함하는 암을 치료하는 방법을 제공한다.
종양의 형태 및 질병의 전개단계(development stage)에 따라, 본 발명의 치료방법의 항암효과들에는 종양 성장의 저해(inhibition), 종양 성장 지연, 종양 퇴화(regression), 종양 수축, 치료의 중단에 의한 종양 재성장에 대한 증가된 시간, 질병 발달의 완행(slowing) 및 전이의 방지(prevention)들이 포함되나, 이들에 제한되는 것은 아니다. 본 발명의 치료방법이 이러한 치료를 필요로 하는 인간 환자 등과 같은 환자에게 적용되는 경우에, 상기 치료방법은 예를 들면 항암효과의 정도(extent), 반응속도, 질병 발달에 대한 시간 또는 생존율 등에 의해 측정되는 바와 같은 효과를 생성할 수 있을 것이 기대된다. 특히, 본 발명의 상기 치료방법은 인간 환자들, 특히 앞서의 화학요법에 대하여 재발되거나 또는 난치인 환자들에 적합하다.
앞서 언급한 바와 같이, 아플리딘은 하기 화학식 1의 구조를 갖는 고리형 뎁시펩티드이다:
[화학식 1]
용어 "아플리딘"은 본 명세서에서는 임의의 약제학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 용매화물(solvate), 수화물, 전구약물(prodrug) 또는 환자에의 투여에 의하여 본 명세서에서 기술된 바와 같은 상기 화합물들을 제공(직접적으로 또는 간접적으로)할 수 있는 임의의 다른 화합물들 모두를 포함하는 것으로 의도된다. 그러나, 비-약제학적으로 허용가능한 염들 또한 이들이 약제학적으로 허용가능한 염들의 제조에서 유용할 수 있기 때문에 본 발명의 관점 내에 속한다는 것도 이해될 수 있을 것이다. 염들, 에스테르들, 용매화물들, 수화물들 및 전구약물들의 제조는 당해 기술분야에서 공지된 방법들에 의하여 수행될 수 있을 것이다.
아플리딘의 전구약물인 임의의 화합물은 본 발명의 범주 및 정신 내에 속하는 것이다. 용어 "전구약물"은 그의 최광의의 의미로 사용되며, 또한 생체 내에서 아플리딘으로 전환되는 그들의 유도체들을 포함한다. 상기 전구약물은 생물학적 조건들 하에서 가수분해화(hydrolyze), 산화 또는 달리 반응하여 아플리딘을 제공한다. 이러한 유도체들은 당해 기술분야에서 숙련된 자들에게는 쉽게 일어날 수 있는 것이며, 예를 들면, 유리히드록시기(free hydroxy group)가 에스테르 유도체로 전환되는 화합물을 포함한다.
본 명세서에서 언급되는 임의의 화합물은 이러한 특정의 화합물과 마찬가지로 특정의 변형들 또는 형태들을 나타내는 것으로 의도된다. 특히, 본 명세서에서 언급되는 화합물들은 비대칭 중심들을 가질 수 있으며, 따라서 서로 다른 거울상이성질체 형태들(enantiomeric forms)로 존재할 수 있다. 본 명세서에서 언급되는 모든 광학이성질체들 및 입체이성질체들 및 이들의 혼합물들은 본 발명의 범주 내에 속하는 것으로 고려된다. 따라서, 본 명세서에서 언급되는 임의의 주어진 화합물은 라세미체(racemate), 하나 또는 그 이상의 거울상이성질체들, 하나 또는 그 이상의 부분입체이성질체 형태들(diastereomeric forms), 하나 또는 그 이상의 회전장애이성질체 형태들(atropisomeric forms) 및이들의 혼합물들 중의 어느 하나를 나타내는 것으로 의도된다. 특히, 본 발명의 상기 화합물들은 그들의 비대칭에 따른 거울상이성질체들 또는 부분입체이성질체들을 포함할 수 있다. 이중결합에 대한 입체이성질체현상(stereoisomerism)이 또한 가능하며, 따라서 일부 경우들에 있어서, 분자는 (E)-이성질체 또는 (Z)-이성질체로서 존재할 수 있다. 상기 분자가 여러 개의 이중결합들을 포함하는 경우, 각 이중결합은 그 자체의 입체이성질체현상을 가질 것이며, 이는 상기 분자의 다른 이중결합들의 입체이성질체현상과 동일하거나 또는 서로 다를 수 있다. 단일의 이성질체들 및 이성질체들의 혼합물들은 본 발명의 관점 내에 속하는 것이다.
더욱이, 본 명세서에서 언급되는 화합물들은 기하이성질체들(geometric isomers)(즉, 시스 및 트랜스 이성질체들)로서, 호변체들(tautomers)로서 또는 회전장애이성질체들로서 존재할 수도 있다. 특히, 용어 호변체는 평형상태에 존재하며, 또한 하나의 이성질 형태에서 다른 이성질 형태로 쉽게 변환되는 화합물의 둘 또는 그 이상의 구조상 이성질체들 중의 하나를 의미한다. 통상의 호변체성 쌍들(tautomeric pairs)은 아민-이민(amine-imine), 아미드-이미드(amide-imide), 케토-엔올(keto-enol), 락탐-락팀(lactam-lactim) 등이다. 더욱이, 본 명세서에서 언급되는 임의의 화합물은 이러한 형태들이 매질(medium) 중에 존재하는 경우에, 수화물들, 용매화물들 및 다형체들(polymorphs) 및 이들의 혼합물을 나타내는 것으로 의도된다. 게다가, 본 명세서에서 언급되는 화합물들은 동위원소-표지된 형태들(isotopically-labelled forms)로 존재할 수 있다. 모든 기하이성질체들, 호변체들, 회전장애이성질체들, 수화물들, 용매화물들, 다형체들 및 본 명세서에서 언급된 상기 화합물들의 동위원소-표지된 형태들, 및 이들의 혼합물들은 본 발명의 범주에 속하는 것으로 고려된다.
본 발명에 따라 사용되는 아플리딘은 국제특허공개공보 제WO 02/02596호, 동 제WO 01/76616호 및 동 제WO 2004/084812호들에서 기술된 바와 같은 합성공정에 따라 제조될 수 있으며, 이들을 본 명세서에서 참조로 인용한다.
사용될 수 있는 아플리딘의 약제학적 조성물들에는 정맥내 투여(intravenous administration)를 위한 적절한 부형제들(excipients)을 갖는 용액들, 현탁액들, 에멀젼들, 동결건조된 조성물들이 포함된다. 바람직하게는, 아플리딘은 치료적인 용도에 적절한 제형(formulation) 내에 아플리딘과 부형제들을 포함하는 멸균, 동결건조된 제품으로서 공급되고 그리고 저장될 수 있다. 특히, 만니톨(mannitol)을 포함하는 제형이 바람직하다. 아플리딘 제형들에 대한 자세한 안내는 그의 전체로서 본 명세서에서 참조로 인용하는 국제특허공개공보 제WO 99/42125호에 주어져 있다.
아플리딘 또는 그의 약제학적 조성물들의 투여는 바람직하게는 정맥내 주사(intravenous infusion)에 의하는 것이다. 72시간까지, 보다 바람직하게는 1 내지 24시간의 주사시간들을 사용하는 것이 바람직하고, 약 1시간, 약 3시간 또는 약 24시간이 가장 바람직하다. 병원에서 밤새 머무르지 않고 치료를 수행하는 것을 허용하는 짧은 주사시간들은 특히 바람직하다. 그러나, 주사는 24시간 정도 또는 필요한 경우 좀 더 길게 될 수 있다. 주사는 다양한 패턴들(patterns)을 갖는 적절한 간격들, 설명하면 선택적으로 주 1회, 주 2회 또는 전형적으로 1주 또는 수 주의 시간간격들을 가지며 매주 반복되어 주당 보다 더 빈번한 패턴들로 실행될 수 있다.
소라페니브는 하기 화학식 2의 구조를 갖는 키나아화제 저해제(kinase inhibitor)이다:
이 약물은 그의 토실화 염(tosylate salt)의 형태로 넥사바르®(NEXAVAR®)의 거래명으로 시판되고 있다. 이 약물은 암의 특정한 형태, 특히 간세포암종(hepatocellular carcinoma) 및 신세포암종(renal cell carcinoma)들의 치료를 위한 것으로 현재 표시되고 있다. 단일제제(single agent)로서, 추천되는 경구적으로 투여되는 일일 투여량(daily dose)은 음식물 없이(적어도 식사 1시간 전 또는 2시간 후) 2회로 400㎎이며, 치료는 환자가 더 이상 임상적으로 치료법으로부터 도움을 이롭지 않거나 또는 수용불가능한 독성이 일어날 때까지 지속되어야 한다. 이 약물에 대한 정보는 웹사이트 www.nexavar.com 및 소라페니브에 대한 대규모의 문헌들로부터 획득가능하다.
소라페니브는 다중의 세포내 키나아제(CRAF, BRAF 및 돌연변이 BRAF) 및 세포 표면 키나아제(KIT, FLT-3, RET, VEGFR-1, VEGFR-2, VEGFR-3, and PDGFR-β)를 저해하는 것으로 나타났다(빌헬름 에스엠 등의 문헌(Wilhelm SM et al. Cancer Res. 2004, 64, 7099-7109)). 이들 키나아제들 중의 여럿은 종양세포 시그널링(signaling), 신생혈관형성(angiogenesis) 및 세포자멸사(apoptosis)에 관여하는 것으로 여겨진다. 소라페니브는 인간 간암 및 신세포암의 종양 성장 및 신생혈관형성 그리고 면역결핍마우스들(immunocompromised mice) 내에서의 여러 다른 인간 종양 이종이식(xenografts)을 저해한다.
수니티니브는 하기의 화학식 3의 구조를 갖는 다중-키나아제 저해제(multi-kinase inhibitor)이다:
이 약물은 그의 말산염(malate salt)의 형태로 수텐트®(SUTENT®)의 거래명으로 시판되고 있다. 이 약물은 암의 특정한 형태, 특히 간질성 종양(gastrointestinal stromal tumor ; GIST) 및 신세포암들의 치료를 위한 것으로 현재 표시되고 있다. 단일제제로서, 추천되는 경구적으로 투여되는 일일 투여량은 4주의 치료 후의 2주의 휴지의 스케쥴로 일일 1회 투여로 50㎎이다. 개개인의 안정성 및 내성(견딜 수 있음)에 기초하여 12.5㎎ 증분(increments)의 투여량 증가 또는 경감이 추천된다. 이 약물에 대한 정보는 웹사이트 www.sutent.com 및 수니티니브에 대한 대규모의 문헌들로부터 획득가능하다.
수니티니브는 복합수용체 티로신 키나아제들(multiple receptor tyrosine kinases ; RTKs)을 저해하며, 이들 중 일부는 종양 성장, 병적 신생혈관형성(pathologic angiogenesis) 및 암의 전이성 진행(metastatic progression)에 관련되어 있다. 수니티니브는 다양한 키나아제들(80개 이상의 키나아제들)에 대한 그의 저해활성(inhibitory activity)으로 평가되었으며, 혈소판-유도 성장인자수용체들(platelet-derived growth factor receptors)(PDGFRα 및 PDGFRβ), 혈관내피성장인자수용체들(vascular endothelial growth factor receptors)(VEGFR1, VEGFR2 및 VEGFR3), 줄기세포인자 수용체(stem cell factor receptor)(KIT), Fms-형 티로신키나아제-3(Fms-like tyrosine kinase-3 ; FLT3), 콜로니자극인자수용체 1형(colony stimulating factor receptor Type 1)(CSF-1R) 및 신경교세포주유도 향신경성인자수용체(glial cell-line derived neurotrophic factor receptor)(RET)의 저해제로서 동정되었다(베르거스 지 등의 문헌(Bergers G et al. J. Clin. Invest. 2003, 111, 1287-1295)). 이들 RTKs들의 활성의 수니티니브 저해는 생화학적으로 그리고 세포분석법들(cellular assays)들에서 입증되었으며, 또한 기능의 저해는 세포증식분석들(cell proliferation assays)에서 입증되었다. 1차 대사산물(metabolite)은 생물학적으로 그리고 세포분석법들들에서 수니티니브와 비교하여 유사한 효력(potency)을 나타내고 있다.
수니티니브는 생체 내에서 RTK 표적들(targets)을 발현하는 종양 이종이식들에서 복합 RTKs들(PDGFRβ VEGFR2, KIT)의 인산화(phosphorylation)를 저해하였으며, 또한 종양 성장 또는 종양 퇴화의 저해를 입증하였으며 및/또는 암의 일부 실험실적인 모델들에서의 전이들을 억제하였다. 수니티니브는 시험관 내에서 조절장애된(dysregulated) 표적 RTKs들(PDGFR, RET 또는 KIT)을 발현하는 종양 세포들의 성장을 저해하고, 또한 생체 내에서 PDGFRβ 및 VEGFR2-의존성 종양 신생혈관형성을 저해하는 능력을 입증하였다.
템시롤리무스는 하기 화학식 4의 구조를 갖는 mTOR(라파마이신(rapamycin)의 포유동물 표적)의 저해제이다:
이 약물은 토리셀®(TORISEL®)의 거래명으로 시판되고 있으며, 신세포암의 치료를 위한 것으로 현재 표시되고 있다. 단일제제로서, 추천되는 투여량은 주당 1회 30 내지 60분간에 걸치는 주사로 25㎎이며, 치료는 질병의 퇴화 또는 수용불가능한 독성이 일어날 때까지 지속되어야 한다. 이 약물에 대한 정보는 웹사이트 www.torisel.com 및 템시롤리무스에 대한 대규모의 문헌들로부터 획득가능하다.
템시롤리무스는 세포 내 단백질(FKBP-12)에 결합하고, 그리고 상기 단백질-약물 착체(protein-drug complex)는 세포 분화를 제어하는 mTOR의 활성을 저해한다. mTOR 활성의 저해는 처치된 세포들 내에서의 G1기 성장 정지의 결과를 가져온다. mTOR이 저해되는 경우, PI3 키나아제/AKT 경로(PI3 kinase/AKT pathway) 내에서의 mTOR의 다운스트림(downstream)인 p70S6k 및 S6 리보솜 단백질(ribosomal protein)을 인산화시키는 그의 능력이 차단된다. 신세포암 세포주들을 사용하는 시험관 내 연구들에 있어서, 템시롤리무스는 mTOR의 활성을 저해하였으며, 저산소증-유발인자들(hypoxia-inducible factors) HIF-1 및 HIF-2 알파 및 혈관내피성장인자의 감소된 수준들이라는 결과를 가져왔다.
본 명세서에서 언급된 임의의 약물의 약제학적으로 허용가능한 염들은 통상의 화학적인 방법들에 의하여 염기성 또는 산성부(basic or acidic moiety)를 포함하는 모화합물(parent compound)로부터 합성된다. 대체로, 이러한 염들은, 예를 들면, 이들 화합물들의 유리산(free acid) 또는 염기 형태들을 수중 또는 유기용매 중 또는 이들 둘의 혼합물 중의 적절한 염기 또는 산의 화학양론적인 양과의 반응에 의하여 제조된다. 대체로, 에테르, 에틸아세테이트, 에탄올, 이소프로판올 또는 아세토니트릴 등과 같은 비수성의 매질(nonaqueous media)들이 바람직하다. 산부가염들(acid addition salts)의 예들에는 예를 들면 염산염(hydrochloride), 브롬산염(hydrobromide), 요오드산염(hydroiodide), 황산염(sulphate), 질산염(nitrate), 인산염(phosphate) 등과 같은 무기산부가염, 및 예를 들면 아세트산염(acetate), 삼불화아세트산염(trifluoroacetate), 말레산염(maleate), 푸마르산염(fumarate), 시트르산염(citrate), 옥살산염(oxalate), 숙신산염(succinate), 타타르산염(tartrate), 말산염, 만델산염(mandelate), 메탄술폰산염(methanesulphonate) 및 파라-톨루엔술폰산염(p-toluenesulphonate) 등과 같은 유기산부가염들이 포함된다. 염기부가염들의 예들에는 예를 들면 나트륨, 칼륨, 칼슘 및 암모늄염 등과 같은 무기염들, 및 예를 들면 에틸렌디아민(ethylenediamine), 에탄올아민(ethanolamine), N,N-디알킬렌에탄올아민(N,N-dialkyleneehtanolamine), 트리에탄올아민(triethanolamine) 및 염기성 아미노산염들(basic aminoacids salts) 등과 같은 유기알칼리염들이 포함된다.
게다가, 본 명세서에서 언급되는 임의의 약물은 유리화합물(free compound) 또는 용매화물들(예를 들면, 수화물들)의 결정형태가 될 수 있으며, 두 형태들 모두 본 발명의 범주 내에 속하는 것으로 의도된다. 용매화의 방법들은 대체로 당해 기술분야에서 공지되어 있다.
아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염, 및 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들은 동시에 또는 서로 다른 시간들에서의 투여를 위한 별도의 약물들로서 제공될 수 있다. 바람직하게는, 아플리딘 및 다른 항암제들은 서로 다른 시간들에서의 투여를 위한 별도의 약물들로서 제공된다. 별도로 그리고 서로 다른 시간들에서 투여되는 경우, 아플리딘 또는 상기 다른 항암제 둘 중의 어느 하나가 먼저 투여될 수 있다. 게다가, 두 약물들은 동일자 또는 이일자들에서 투여될 수 있으며, 또한 이들은 치료 사이클(treatment cycle) 동안에 동일한 스케쥴 또는 서로 다른 스케쥴을 사용하여 투여될 수 있다. 따라서, 본 발명의 상기 약제학적 조성물들은 단일의 약제학적으로 허용가능한 제형 내에 상기 성분들(약물들) 전부를 포함할 수 있다. 달리, 상기 성분들은 별도로 조성되고 그리고 다른 하나와의 조합으로 투여될 수 있다. 당해 기술분야에서 숙련된 자들에게 잘 알려진 여러 약제학적으로 허용가능한 제형들이 본 발명에서 사용될 수 있다. 게다가, 상기 조합의 상기 약물들은 서로 다른 투여경로들을 사용하여 제공될 수 있다. 예를 들면, 상기 약물들 중의 어느 하나는 예를 들면 정제(tablet) 또는 캡슐(capsule) 등과 같은 경구 투여(oral administration)에 적절한 형태가 될 수 있고, 그리고 다른 하나는 예를 들면 멸균 용액(sterile solution), 현탁액 또는 에멀젼 등과 같은 비경구적 주사(parenteral injection)(정맥내 주사, 피하 주사, 근내 주사, 혈관 주사 또는 주입)에 적절한 형태가 될 수 있다. 달리, 두 약물들은 동일한 투여 경로에 의하여 제공될 수 있다. 본 발명의 사용에 적절한 제형의 선택은 투여의 형태(mode) 및 상기 조성물의 상기 구성성분들의 용해도 특성들에 기초하여 당해 기술분야에서 숙련된 자들에 의하여 일상적으로 수행될 수 있다.
상기 조합의 상기 화합물들의 정확한 용법(dosage)은 특정의 제형, 적용의 방법 및 특정의 병소(site), 숙주(host) 및 치료되는 종양에 따라 달라질 수 있을 것이다. 연령, 체중, 성별, 식이상태(diet), 투여의 시간, 배설 속도(rate of excretion), 숙주의 상태, 약물 조합들, 반응민감도들(reaction sensitivities) 및 질병의 중증도(severity of the disease) 등과 같은 다른 인자들이 고려될 수 있다. 투여는 최대 허용 투여량(maximum tolerated dose) 내에서 연속적으로 또는 주기적으로 수행될 수 있다. 아플리딘의 투여에 대한 더 자세한 안내는 국제특허공개공보 제WO 01/35974호에 주어져 있으며, 이는 본 명세서에서 그의 전체로서 참조로 인용되었다.
또 다른 관점에 있어서, 본 발명은 암의 치료에 있어서 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제와의 조합으로 아플리딘을 투여하기 위한 키트에 관한 것으로서, 적어도 하나의 사이클에 대한 투여량 단위들(dosage units)의 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 공급량 및 조합 내에서의 두 약물들의 사용에 대한 인쇄된 지시들을 포함한다.
연관된 관점에 있어서, 본 발명은 암의 치료에 있어서 아플리딘과의 조합으로 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 항암제의 투여를 위한 키트에 관한 것으로서, 적어도 하나의 사이클에 대한 투여량 단위들의 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 공급량 및 조합 내에서의 두 약물들의 사용에 대한 인쇄된 지시들을 포함한다.
연관된 관점에 있어서, 본 발명은 암의 치료에 있어서 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제와의 조합으로 아플리딘을 투여하기 위한 키트에 관한 것으로서, 적어도 하나의 사이클에 대한 투여량 단위들의 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 공급량, 적어도 하나의 사이클에 대한 투여량 단위들의 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 공급량 및 조합 내에서의 두 약물들의 사용에 대한 인쇄된 지시들을 포함한다.
또 다른 관점에 있어서, 본 발명은 또한 암의 치료에 있어서 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들과의 조합에서 사용되기 위한 것으로서 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.
또 다른 관점에 있어서, 본 발명은 또한 암의 치료에 있어서 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염들과의 조합에서 사용되기 위한 것으로서 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.
게다가, 본 발명은 또한 암의 치료에서 사용되기 위한 것으로서 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염, 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.
또 다른 관점에 있어서, 본 발명은 또한 암의 치료에 있어서 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들과의 조합으로 사용하기 위한 조성물의 제조에 있어서 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 용도를 제공한다.
연관된 관점에 있어서, 본 발명은 또한 암의 치료에 있어서 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염과의 조합으로 사용하기 위한 조성물의 제조에 있어서 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 용도를 제공한다.
그리고 또 다른 관점에 있어서, 본 발명은 또한 암의 치료에서 사용하기 위한 조성물의 제조에 있어서 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염, 및 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 용도를 제공한다.
또 다른 관점에 있어서, 본 발명은 또한 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들과의 병용요법에 있어서 암의 치료를 위한 약물의 제조를 위한 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 용도를 제공한다.
연관된 관점에 있어서, 본 발명은 또한 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염과의 병용요법에 있어서 암의 치료를 위한 약물의 제조를 위한 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 용도를 제공한다.
연관된 관점에 있어서, 본 발명은 또한 암의 치료를 위한 약물의 제조를 위한 것으로서 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들과의 병용요법에 있어서의 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 용도를 제공한다.
또 다른 관점에 있어서, 본 발명은 또한 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들과의 병용요법에 있어서 암의 치료를 위한 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 용도를 제공한다.
연관된 관점에 있어서, 본 발명은 또한 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염과의 병용요법에 있어서 암의 치료를 위한 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염의 용도를 제공한다.
또 다른 관점에 있어서, 본 발명은 또한 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들과의 병용요법에 있어서 암의 치료를 위한 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 용도를 제공한다.
또 다른 관점에 있어서, 본 발명은 또한 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들과의 병용요법에 있어서 약물로서의 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 용도를 제공한다.
연관된 관점에 있어서, 본 발명은 또한 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염과의 병용요법에 있어서 약물로서의 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 용도를 제공한다.
또 다른 관점에 있어서, 본 발명은 또한 약물로서 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들과의 조합에 있어서의 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 용도를 제공한다.
또 다른 관점에 있어서, 본 발명은 또한 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들과의 병용요법에 있어서 암의 치료를 위한 약물로서의 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 용도를 제공한다.
연관된 관점에 있어서, 본 발명은 또한 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염과의 병용요법에 있어서 암의 치료를 위한 약물로서의 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 용도를 제공한다.
또 다른 관점에 있어서, 본 발명은 또한 암의 치료를 위한 약물로서 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들과의 조합에 있어서의 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 용도를 제공한다.
또 다른 관점에 있어서, 본 발명은 또한 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 치료학적으로 유효한 양과의 조합에 있어서의 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 치료학적으로 유효한 양을 포함하는 암의 치료를 위한 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공한다.
연관된 관점에 있어서, 본 발명은 또한 아플리딘 및 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 치료학적으로 유효한 양과의 조합에 있어서의 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 치료학적으로 유효한 양을 투여하는 것을 포함하는 암의 치료를 위한 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들을 제공한다.
또 다른 관점에 있어서, 본 발명은 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염의 치료학적으로 유효한 양의 투여와의 조합에 있어서 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 치료학적으로 유효한 양의 투여를 포함하며, 여기에서 상기 조합이 함께 또는 별개로 투여될 수 있는, 암의 치료를 제공한다. 본 발명의 바람직한 구체예들에 있어서, 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 및 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들은 상승작용적으로 유효한 양들로 투여된다.
바람직하게는, 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들과의 조합은 신암종(renal carcinoma), 간암종(hepatocarcinoma)(또한 간종양(hepatoma)로도 알려짐), 흑색종, 유방암, 폐암, 췌장암(pancreatic cancer), 신경아세포종(neuroblastoma) 및 간질성 종양(GIST)들의 치료에 사용된다. 신암종, 간암종, 흑색종, 비소세포폐암(NSCLC) 및 유방암의 치료를 위한 상기 조합의 사용이 특히 바람직하다.
하나의 구체예에 있어서, 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염과 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염의 상기 조합은 생체 내에서 종양 성장을 저해하거나 또는 종양의 크기를 감소시킨다. 특히, 상기 조합은 암종 세포들, 육종 세포들, 백혈병 세포들, 림프종 세포들 및 골수종 세포들의 생체 내 성장을 저해한다. 바람직하게는, 상기 조합은 신암종 세포들, 간암종 세포들, 흑색종 세포들, 유방암 세포들, 폐암 세포들, 췌장암 세포들, 신경아세포종 세포들 및 GIST 세포들의 생체 내 성장을 저해한다. 특히, 상기 조합은 인간 신암종 세포들, 인간 간암종 세포들, 인간 흑색종 세포들 및 인간 NSCLC 세포들의 생체 내 성장을 저해한다. 유사하게, 상기 조합은 생체 내 암종, 육종, 백혈병, 림프종 및 골수종 종양들의 크기를 감소시킨다. 바람직하게는, 상기 조합은 생체 내 신암종, 간암종, 흑색종, 유방암, 폐암, 췌장암, 신경아세포종 및 GIST의 크기를 감소시킨다. 특히, 상기 조합은 생체 내 인간 신장 종양들, 인간 간암종, 인간 흑색종 및 인간 NSCL 암종의 크기를 감소시킨다.
예를 들면, 상기 조합은 동물 모델들 내에서의 인간 암 이종이식들, 특히 인간 신장 종양 이종이식들, 인간 간암종 이종이식들, 인간 흑색종 이종이식들 및 인간 NSCLC 이종이식들의 종양 성장을 저해하거나 또는 크기를 감소시킨다. 상기 조합으로 투여된 동물 모델들에서의 인간 암 이종이식들의 제한된 성장 또는 감소된 크기는 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염과, 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염의 상기 조합이 특정한 형태의 암을 앓는 환자를 치료하는 데 효과적이라는 것을 지지하고 있다. 게다가, 동물 모델들 내에서의 낮은 수준의 독성은 암 세포들에 대한 상기 조합의 선택적 세포독성 활성을 제공한다.
본 발명의 하나의 구체예에 따르면, 두 약물들(아플리딘과 소라페니브, 아플리딘과 수니티니브 또는 아플리딘과 템시롤리무스)을 조합하는 치료의 평균종양중량을 소라페니브, 수니티니브 또는 템시롤리무스 단일요법(monotherapy) 치료 각각의 평균종양중량을 비교하여 종양성장저해가 평가된다. 게다가, 약효강화(potentiation)의 평가에 대한 정의(definition) 및 기준(criteria) 그리고 상기 병용요법에 대한 가성성(additivity)의 정도들은 다음과 같다:
- 상기 병용요법에서 사용된 바와 같은 동일한 스케쥴 및 투여량에 대하여 상기 병용요법의 반응이 단일제제(single agent)(단일요법)으로서 투여된 가장 활성인 약물의 최상의 반응에 비하여 더 큰 경우에 약효강화가 결정될 수 있다.
- 가성성은 단일요법 치료들의 종양성장저해의 백분율(%) 대 다음과 같은 병용요법의 종양성장저해의 백분율을 비교하는 것에 의하여 결정된다:
1. 100 - %T/C로서 상기 조합들에서 사용된 투여량들에서 단일요법으로서 투여된 상기 약물들 각각에 대한 종양성장저해의 백분율(%)의 결정. %T/C는 대조군(C)에서의 평균종양중량에 대하여 치료군들(T)에서의 평균종양중량을 비교하는 것에 의하여 결정된다(T/C x 100%).
2. 2개의 기록들을 함께 더하여 만일 각 약품(agent)이 단일요법으로서 투여되는 경우에서 나타나는 반응과 동일한 반응을 생성하는 경우 "예기된 반응(expected response)"로 결정한다.
3. 이 "예기된 반응"은 상기 병용요법군들에 대하여 결정된 종양성장저해의 백분율로부터 차감된다:
a. 음의 수(negative number)는 상기 두 약물들의 조합의 효과가 부가(additive) 보다 낮다는 것을 의미한다.
b. 만일 상기 결과의 수가 0에 가까운 경우, 상기 두 약물들의 조합의 효과는 부가로서 결정된다.
c. 양의 수는 상기 두 약물들의 조합의 효과가 부가 보다 높다는 것을 의미한다.
따라서, 상기 병용요법의 보다 더 큰 부가의 효과는 상승작용적인 효과에 대응하며, 여기에서 상기 두 약물들의 상기 조합의 효과는 단독으로 주어지는 경우에서의 상기 약물들 각각의 효과의 관점에서 기대되는 것보다 치료학적으로 우월한 것이다.
따라서, 또 다른 관점에 있어서, 본 발명은 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들과 함께 아플리딘, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 유효한 양을 투여하는 것을 포함하는, 종양의 크기를 감소시키는 방법을 제공한다.
연관된 관점에 있어서, 본 발명은 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염과 함께 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 유효한 양을 투여하는 것을 포함하는, 종양의 크기를 감소시키는 방법을 제공한다.
연관된 관점에 있어서, 본 발명은 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 및 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 유효한 조합을 함께 또는 별도로 투여하는 것을 포함하는, 종양의 크기를 감소시키는 방법을 제공한다.
또 다른 관점에 있어서, 본 발명은 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들과 함께 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 유효한 양을 투여하는 것을 포함하는, 종양 성장을 저해하는 방법을 제공한다.
연관된 관점에 있어서, 본 발명은 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염과 함께 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 유효한 양을 투여하는 것을 포함하는, 종양 성장을 저해하는 방법을 제공한다.
연관된 관점에 있어서, 본 발명은 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염과, 소라페니브, 수니티니브 및 템시롤리무스들로부터 선택되는 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 유효한 조합을 함께 또는 별도로 투여하는 것을 포함하는, 종양 성장을 저해하는 방법을 제공한다.
하기의 실시예들은 본 발명을 더욱 설명한다. 상기 실시예들은 본 발명의 범주를 제한하는 것으로서 해석되어서는 안될 것이다.
보다 정확한 설명을 제공하기 위하여, 본 명세서에서 주어지는 정량적인 표현들 중의 일부는 "대략(about)"이라는 용어로 제한하지 않았다. 상기 용어 "대략"이 명백하게 사용되거나 또는 그렇지 않거나 간에, 본 명세서에서 주어지는 모든 양은 실제의 주어진 값을 언급하는 것을 의미하고, 그리고 이는 또한 이러한 주어진 값에 대한 근사치는 이러한 주어진 값에 대한 실험 조건 및/또는 측정 조건들로 인한 등가물 또는 근사치들을 포함하여 당해 기술분야에서 통상적인 기술을 가진 자를 기준으로 하여 상당하게 추론될 수 있을 것이라는 것은 이해되어야 한다.
실시예들
실시예 1. 인간 신장 종양 이종이식들에서의 소라페니브와의 조합에서의 아플리딘의 효과를 결정하기 위한 생체 내 연구들
이들 연구들의 목표는 인간 신장 종양의 3개의 이종이식 모델들을 이용하는 것에 의하여 소라페니브의 항종양 활성(antitumoral activity)을 강화시키는 아플리딘의 능력을 평가하는 것이다.
모든 실험들에 대하여 암컷 비흉선 누드 마우스들(female athymic nude mice ; 미합중국 위스콘신주 매디슨 소재의 할란 스프라그 돌리(Harlan Sprague Dawley))가 활용되었다. 마우스들이 5주령(5 weeks of age)이 되었을 때, 마우스들을 종양 단편들 또는 세포 현탁액들로 이식시켰다. 동물들을 케이지(cage) 당 5마리의 마우스들을 환기되는 랙 케이징(rack caging) 내에 가두고, 음식물과 물을 자유식(ad libitum)으로 사육하였다. 상기 마우스들을 종양 단편 또는 세포 현탁액들로 이식하기 1주전까지 순응시켰다. 비히클 대조군(vehicle control group)에는 15마리의 마우스들이 포함되고, 그리고 처치군들에는 그룹 당 10마리의 마우스들이 포함되었다.
이들 연구들에서 사용된 종양 모델들은 미합중국 버지니아주 마나사스(Manassas) 소재 미국표준균주배양수록보존소(ATCC)로부터 획득한 인간 신장 청정 암종 세포주(human kidney clear carcinoma cell line)인 CAKI-1 세포주, 원천적으로 DCT 종양은행(DCT Tumor Bank)으로부터 획득한 인간 신장 암종 세포주인 MRI-H-121 세포주, 그리고 상기 ATCC로부터 획득한 인간 신장 암종 세포주인 A498 세포주들이다.
MRI-H-121 및 CAKI-1 분석들에 대하여는, 적심제(wetting agent)로서 멸균의 얼의 평형 염액(Earle's Balanced Salt solution)을 사용하여, 생체 내 이식가능 라인 경로 1(in vivo transplantable line passage 1)로부터 투관침을 사용하여 3㎣의 조직 종양 단편들로 우측 옆구리 상에 피하적으로(subcutaneously ; SC) 동물들을 이식시켰다. 이식 시에 취해진 세균배양(bacterial cultures)은 이식 후 24시간 및 48시간 후에서의 오염에 대하여 음성(negative)이었다.
A498 세포들을 최소필수배지(MEM), 2mM 엘-글루타민(L-glutamine) 및 10% 우태혈청(FBS) 내에서 성장시켰다. 시험관 내 경로 4-20(in vitro passage 4-20)으로부터의 세포들을 23G의 바늘 및 1cc의 주사기를 사용하여 무항생제 또는 무혈청의 0.2㎖ 50% 매트리겔(Matrigel)/50% 배지 내의 5x106 세포/마우스로 피하적으로 연구용 마우스들에 이식시켰다. 매트리겔은 4℃에서 액체이고, 그리고 37℃에서 고체이며, 세포들을 국부화된 영역 내에서 긴밀한 연관을 유지시키는 것에 의하여 종양 성장을 촉진하는 생물학적 세포외 기질(biological extracellular matrix)이다. 이식을 위하여 준비된 상기 세포들의 분취량들(aliquots)에 대하여 세균배양들을 수행하였다. 모든 배양들은 이식 후 24시간 및 48시간 후에서의 세균 오염에 대하여 음성이었다.
버니어캘리퍼스(Vernier calipers)를 사용하는 것에 의하여 종양 측정들이 결정되었다. 편장형 타원면(prolate ellipsoid)에 대한 용적을 계산하기 위한 식을 사용하여 2-차원적인 종양 측정들로부터 종양 용적(㎣)을 추측하였다: 종양 용적(㎣) = [L*W2] ÷2, 여기에서 L은 길이이고, 이는 종양의 ㎜ 단위의 가장 긴 직경이고, 그리고 W는 넓이이고, 이는 종양의 ㎜ 단위의 가장 짧은 직경이다. 단위 밀도(unit density)를 가정하여, 용적을 중량으로 변환시켰다(즉, 1㎣ = 1㎎). MRI-H-121에 대하여는 143±2㎎, CAKI-1에 대하여는 259±32㎎ 그리고 A498에 대하여는 111±3㎎(평균±표준편차(SD))의 범위 내로 종양들이 적절한 용적에 달하는 경우, 랩캣® 인 라이프 모듈 브이 8.0 에스피1 종양 추적 및 측정 소프트웨어((LabCat® In Life module V 8.0 SP1 tumor tracking and measurement software)를 사용하는 것에 의하여 종양중량에 기초하여 마우스들을 처치군들과 대조군들로 불규칙하게 구분하였다.
MRI-H-121-종양-함유 마우스들의 처치(treatment)는 이식이후 일수(DPI ; Day Post Implantation) 14일에서, CAKI-1에 대하여는 이식이후 일수 13일에서 그리고 A498에 대하여는 이식이후 일수 26일에서 개시하였다. 처리일들 및 종양 크기들이 측정되는 경우에 체중들을 기록하였다. 상기 두 약물들이 동일자에 투여되는 경우에서의 일수들에 있어서는, 상기 병용요법군들을 상기 두 약물들을 치료들을 연속하는 시도 없이 동시에 공동-투여(co-administering)하는 것에 의하여 처치하였다.
아플리딘은 크레모포어 이엘/에탄올/물(Cremophor EL/ethanol/water ; CEW) 15/15/70으로 0.5㎎/㎖의 농도로 재조성(reconstituted)된, 동결건조된 아플리딘 분말의 바이알들(vials)의 형태로 제공되었다. 계속해서 CEW 내의 상기 아플리딘 용액을 0.18/0.18/0.84의 CEW의 최종비율이 되도록 0.9% 염수로 투여량 제형 농도들로 희석시켰다.
소라페니브는 그의 토실화 염의 형태의 소라페니브를 포함하는 200㎎의 적색으로 착색된 정제의 형태로 제공되었다. 상기 소라페니브 용액은 상기 정제를 50㎎/㎖의 농도로 크레모포어 이엘/에탄올(50/50) 내에 용해시키는 것에 의하여 제조되었다. 계속해서 상기 용액을 주사용수(water for infusion ; wfi) 내에서 (12.5, 12.5, 75)의 CEW의 최종 비율로 희석시켰다. CEW 내의 상기 소라페니브 용액을 투여량 제형 농도들로 주사용수에서 희석시켰다.
3개의 이종이식 모델들에 대한 연구군들(study groups) 및 치료 식이요법들(treatment regimens)을 하기 표 1에 기재하였다.
| 군 | 동물들의 개체수(N) | 투여량 | 경로 | 스케쥴 | 시험 물질 |
| G1 (대조군) |
15 | 10㎖/㎏/일 10㎖/㎏/일 |
IP PO |
Qdx9x2 Qdx21 |
CEW (0.18/0.18/0.84) CEW (12.5, 12.5, 75) |
| G2 | 10 | 0.060㎎/㎏/일 | IP | Qdx9x2 | 아플리딘 |
| G3 | 10 | 0.040㎎/㎏/일 | IP | Qdx9x2 | 아플리딘 |
| G4 | 10 | 60㎎/㎏/일 | PO | Qdx21 | 소라페니브 |
| G5 | 10 | 30㎎/㎏/일 | PO | Qdx21 | 소라페니브 |
| G6 | 10 | 0.060㎎/㎏/일 60㎎/㎏/일 |
IP PO |
Qdx9x2 Qdx21 |
아플리딘 소라페니브 |
| G7 | 10 | 0.060㎎/㎏/일 30㎎/㎏/일 |
IP PO |
Qdx9x2 Qdx21 |
아플리딘 소라페니브 |
| G8 | 10 | 0.040㎎/㎏/일 60㎎/㎏/일 |
IP PO |
Qdx9x2 Qdx21 |
아플리딘 소라페니브 |
| G9 | 10 | 0.040㎎/㎏/일 30㎎/㎏/일 |
IP PO |
Qdx9x2 Qdx21 |
아플리딘 소라페니브 |
IP : 복강투여; PO : 경구투여
Qdx9x2 : 2 사이클, 여기에서 시험 동물은 9 연속일들 동안 매일 투여되고 사이클들 사이에서 3일의 휴지기(rest period)를 가짐
Qdx21 : 21 연속일들 동안 매일 시험 동물의 투여
처리 개시로부터 연구가 종결될 때까지 주당 2회 종양 크기 측정들을 기록하였다. 서로 다른 농도들에서 평가된 소라페니브 평균 종양 중량에 대하여 조합(아플리딘 및 소라페니브)에서의 두 약물들 사이에서의 평균 종양 중량을 비교하여 종양 성장 저해를 평가하였다.
모든 평가들에서 모든 동물군들에 대한 종양 용적에 대하여 평균, 표준편차 및 평균의 표준오차들이 결정되었다. 병용요법군들과 하나의 단일요법 처치군들 사이에 어떤 임의의 통계학적으로 명백한 차이점들이 존재하는 지의 여부를 결정하기 위하여 연구의 마지막에서를 포함하여 각 측정일에서의 종양 용적들에 대하여 스튜던트 티 검증(Student's t test)을 수행하였다.
약효강화의 평가에 대한 정의 및 기준 그리고 상기 병용요법에 대한 가성성의 정도들은 다음과 같다:
- 상기 병용요법에서 사용된 바와 같은 동일한 스케쥴 및 투여량에 대하여 상기 조합군(combination group)의 반응이 단일제제(단일요법)으로서 투여된 가장 활성인 약물의 최상의 반응에 비하여 더 큰 경우에 약효강화가 결정되었다.
- 가성성은 앞서 기술한 바와 같이 단일요법군들의 종양성장저해의 백분율(%) 대 다음과 같은 조합군들의 종양성장저해의 백분율을 비교하는 것에 의하여 결정되었다:
1. 100 - %T/C로서 상기 조합들에서 사용된 투여량들에서 단일요법으로서 투여된 상기 약물들 각각에 대한 종양성장저해의 백분율(%)을 결정하였다. %T/C는 대조군(C)에서의 평균종양중량에 대하여 치료군들(T)에서의 평균종양중량을 비교하는 것에 의하여 결정되었다(T/C x 100%).
2. 2개의 기록들을 함께 더하여 만일 각 약품이 단일요법으로서 투여되는 경우에서 나타나는 반응과 동일한 반응을 생성하는 경우 "예기된 반응"로 결정하였다.
3. 이 "예기된 반응"은 상기 병용요법군들에 대하여 결정된 종양성장저해의 백분율로부터 차감되었다:
a. 음의 수(negative number)는 상기 두 약물들의 조합의 효과가 부가(additive) 보다 낮다는 것을 의미하였다.
b. 만일 상기 결과의 수가 0에 가까운 경우, 상기 두 약물들의 조합의 효과는 부가로서 결정되었다.
c. 양의 수는 상기 두 약물들의 조합의 효과가 부가 보다 높다는 것을 의미하였다.
따라서, 상기 병용요법의 보다 더 큰 부가의 효과는 상승작용적인 효과에 대응하며, 여기에서 상기 두 약물들의 상기 조합의 효과는 단독으로 주어지는 경우에서의 상기 약물들 각각의 효과의 관점에서 기대되는 것보다 치료학적으로 우월한 것이다.
개개 마우스 체중 측정을 초기 체중(처치의 최초일)에 대하여 비교하는 것에 의하여 체중 효과들이 결정되었다. 20% 이상의 체중 손실의 NCI 활성 기준이 화합물 독성을 측정(gauge)하는 데 사용되었다.
CAKI
-1 인간 신장 종양 이종이식에서의 결과들
표 2(표 2a는 표 2의 계속)는 처치들 각각에 대하여 수득된 %T/C 값들을 보고하고 있으며, 도 1 내지 4들은 대조군(비히클), 아플리딘, 소라페니브 또는 서로 다른 투여량들에서의 아플리딘 플러스 소라페니브로 처치된 마우스들 내에서의 CAKI-1 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내고 있다.
표 3은 아플리딘의 0.06㎎/㎏/일 및 소라페니브의 60㎎/㎏/일의 투여량으로 CAKI-1 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 소라페니브의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 소라페니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의
정도 |
||
| G2 | G4 | G6 | |||||
| 13 | -1.6 | -4.5 | -1.7 | -6.1 | 4.3 | 아니오 | - |
| 16 | -5.7 | -14.0 | -23.2 | -19.7 | -3.5 | 아니오 | - |
| 21 | -8.5 | -21.2 | -9.9 | -29.7 | 19.8 | 예 | 부가보다 큼 |
| 23 | -9.0 | -16.6 | -5.8 | -25.6 | 19.8 | 예 | 부가보다 큼 |
| 28 | -7.5 | -10.5 | 21.2 | -18.0 | 39.2 | 예 | 부가보다 큼 |
| 31 | -0.3 | -5.2 | 28.3 | -5.5 | 33.8 | 예 | 부가보다 큼 |
| 34 | -1.8 | -10.2 | 25.9 | -12.0 | 37.9 | 예 | 부가보다 큼 |
| 37 | -7.7 | -19.5 | 24.7 | -27.2 | 51.9 | 예 | 부가보다 큼 |
| 41 | -3.1 | -20.5 | 24.1 | -23.6 | 47.7 | 예 | 부가보다 큼 |
| 44 | 0.6 | -26.3 | 17.2 | -25.7 | 42.9 | 예 | 부가보다 큼 |
| 49 | 3.5 | -26.0 | 17.8 | -22.4 | 40.2 | 예 | 부가보다 큼 |
표 4는 아플리딘의 0.06㎎/㎏/일 및 소라페니브의 30㎎/㎏/일의 투여량에서의 CAKI-1 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일 제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘과 소라페니브의 종양성장저해의 %를 나타낸다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 소라페니브와의 조합의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의
정도 |
||
| G2 | G5 | G7 | |||||
| 13 | -1.6 | -5.4 | -4.7 | -7.0 | 2.3 | 아니오 | - |
| 16 | -5.7 | -13.4 | -21.4 | -19.0 | -2.3 | 아니오 | - |
| 21 | -8.5 | -13.0 | -5.6 | -21.4 | 15.9 | 예 | 부가보다 큼 |
| 23 | -9.0 | -17.1 | 2.3 | -26.1 | 28.4 | 예 | 부가보다 큼 |
| 28 | -7.5 | 9.7 | 9.0 | 2.2 | 6.8 | 예 | 부가 |
| 31 | -0.3 | 16.0 | 15.8 | 15.7 | 0.2 | 아니오 | - |
| 34 | -1.8 | 14.0 | 11.9 | 12.3 | -0.4 | 아니오 | - |
| 37 | -7.7 | 7.2 | 7.4 | -0.5 | 7.9 | 예 | 부가 |
| 41 | -3.1 | 2.0 | 4.8 | -1.2 | 6.0 | 예 | 부가 |
| 44 | 0.6 | -5.8 | 0.8 | -5.2 | 6.0 | 예 | 부가 |
| 49 | 3.5 | -2.8 | 7.3 | 0.7 | 6.6 | 예 | 부가 |
표 5는 아플리딘의 0.04㎎/㎏/일 및 소라페니브의 60㎎/㎏/일의 투여량에서의 CAKI-1 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일 제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘과 소라페니브의 종양성장저해의 %를 나타낸다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 소라페니브와의 조합의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의
정도 |
||
| G3 | G4 | G8 | |||||
| 13 | -1.5 | -4.5 | -1.4 | -6.0 | 4.6 | 예 | 부가 |
| 16 | -8.2 | -14.0 | -26.8 | -22.2 | -4.6 | 아니오 | 부가보다 작음 |
| 21 | -4.9 | -21.2 | -11.2 | -26.1 | 14.8 | 예 | 부가보다 큼 |
| 23 | -4.3 | -16.6 | -7.4 | -20.9 | 13.5 | 예 | 부가보다 큼 |
| 28 | -4.6 | -10.5 | 4.1 | -15.0 | 19.1 | 예 | 부가보다 큼 |
| 31 | 3.2 | -5.2 | 13.0 | -2.0 | 15.0 | 예 | 부가보다 큼 |
| 34 | -0.9 | -10.2 | 11.5 | -11.1 | 22.6 | 예 | 부가보다 큼 |
| 37 | -8.7 | -19.5 | 9.3 | -28.3 | 37.6 | 예 | 부가보다 큼 |
| 41 | -9.5 | -20.5 | 10.8 | -30.0 | 40.8 | 예 | 부가보다 큼 |
| 44 | -8.4 | -26.3 | 2.8 | -34.7 | 37.5 | 예 | 부가보다 큼 |
| 49 | -4.4 | -26.0 | 6.4 | -30.4 | 36.8 | 예 | 부가보다 큼 |
CAKI-1 인간 신장 종양 세포주에 대하여 아플리딘과 소라페니브가 단일 제제(단일요법)로서 투여된 경우, 이들은 비활성이었다. 게다가, 이들 처치들은 평균 체중에서 명백하게 감소하는 원인이 되지 않았으며, 모든 마우스들은 연구의 끝에서 체중이 증가하였다.
그러나, 0.060㎎/㎏/일의 투여량의 아플리딘이 60㎎/㎏/일의 투여량의 소라페니브와 조합되는 경우, 28일부터 연구의 마지막인 49일까지 종양 성장의 통계학적으로 명백한 저해가 관찰되었다. 이 조합은 항종양 활성의 부가적 약효강화(additive potentiation) 보다 더 큰 결과를 가져왔다. 게다가, 0.040㎎/㎏/일의 투여량의 아플리딘과 60㎎/㎏/일의 투여량의 소라페니브의 조합이 또한 항종양 활성의 부가적 약효강화 보다 더 큰 결과를 가져왔다. 투여 기간(dosing period) 또는 투여 기간의 종료 직후 동안 및 분석이 종결될 때까지의 일수들 사이에서 모든 케이스들에서의 효과들이 관찰되었다. 마지막으로, 복합 요법은 증가된 독성의 증거없이 마우스들에 의하여 잘 견뎌내어졌다.
MRI
-H-121 인간 신장 종양 이종이식에서의 결과들
표 6은 처치들 각각에 대하여 수득된 %T/C 값들을 보고하고 있으며, 도 5 내지 8들은 대조군(비히클), 아플리딘, 소라페니브 또는 서로 다른 투여량들에서의 아플리딘 플러스 소라페니브로 처치된 마우스들 내에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내고 있다.
| 군 | 일수에 대한 % T/C | ||||||||||
| 14 | 16 | 20 | 23 | 27 | 30 | 34 | 37 | 41 | 44 | 48 | |
| G1 (대조군) |
- | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - |
| G2 | 102.0 | 97.5 | 81.5 | 73.9 | 98.4 | 88.5 | 75.8 | 75.0 | 88.3 | 90.2 | 95.5 |
| G3 | 103.5 | 104.0 | 85.1 | 85.9 | 94.1 | 86.4 | 91.0 | 85.6 | 92.5 | 93.9 | 94.9 |
| G4 | 103.8 | 85.0 | 66.5 | 71.7 | 70.4 | 75.6 | 69.6 | 71.1 | 74.7 | 71.0 | 71.8 |
| G5 | 99.7 | 85.6 | 62.1 | 59.2 | 78.7 | 72.0 | 66.1 | 72.5 | 79.5 | 77.6 | 76.1 |
| G6 | 101.7 | 99.8 | 65.4 | 54.4 | 64.0 | 50.3 | 43.9 | 44.0 | 45.5 | 49.9 | 56.9 |
| G7 | 101.5 | 101.6 | 66.3 | 64.7 | 67.6 | 67.2 | 53.7 | 58.6 | 68.6 | 71.8 | 73.1 |
| G8 | 99.7 | 99.0 | 74.1 | 60.8 | 66.0 | 63.0 | 69.5 | 65.2 | 74.3 | 61.1 | 58.9 |
| G9 | 102.4 | 90.6 | 74.8 | 63.5 | 64.8 | 66.4 | 61.4 | 59.0 | 66.2 | 57.8 | 64.6 |
표 7은 아플리딘의 0.06㎎/㎏/일 및 소라페니브의 60㎎/㎏/일의 투여량으로 MRI-H-121 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 소라페니브의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 소라페니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의
정도 |
||
| G2 | G4 | G6 | |||||
| 14 | -2.0 | -3.8 | -1.7 | -5.7 | 4.1 | - | - |
| 16 | 2.5 | 15.0 | 0.2 | 17.5 | -17.3 | - | - |
| 20 | 18.5 | 33.5 | 34.6 | 52.1 | -17.5 | 아니오 | - |
| 23 | 26.1 | 28.3 | 45.6 | 54.4 | -8.8 | 아니오 | - |
| 27 | 1.6 | 29.6 | 36.0 | 31.2 | 4.8 | 예 | 부가 |
| 30 | 11.5 | 24.4 | 49.7 | 35.9 | 13.8 | 예 | 부가보다 큼 |
| 34 | 24.2 | 30.4 | 56.1 | 54.6 | 1.4 | 예 | 부가 |
| 37 | 25.0 | 28.9 | 56.0 | 53.9 | 2.1 | 예 | 부가 |
| 41 | 11.7 | 25.3 | 54.5 | 37.0 | 17.5 | 예 | 부가보다 큼 |
| 44 | 9.8 | 29.0 | 50.1 | 38.7 | 11.3 | 예 | 부가보다 큼 |
| 48 | 4.5 | 28.2 | 43.1 | 32.6 | 10.4 | 예 | 부가보다 큼 |
표 8은 아플리딘의 0.06㎎/㎏/일 및 소라페니브의 30㎎/㎏/일의 투여량으로 MRI-H-121 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 소라페니브의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 소라페니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의
정도 |
||
| G2 | G5 | G7 | |||||
| 14 | -2.0 | 0.3 | -1.5 | 1.6 | 0.2 | 아니오 | |
| 16 | 2.5 | 14.4 | -1.6 | 16.9 | -18.5 | 아니오 | |
| 20 | 18.5 | 37.9 | 33.7 | 56.5 | -22.8 | 아니오 | |
| 23 | 26.1 | 40.8 | 35.3 | 66.9 | -31.6 | 아니오 | |
| 27 | 1.6 | 21.3 | 32.4 | 22.9 | 9.4 | 예 | 부가보다 큼 |
| 30 | 11.5 | 28.0 | 32.8 | 39.5 | -6.7 | 아니오 | - |
| 34 | 24.2 | 33.9 | 46.3 | 58.1 | -11.8 | 예 | 부가보다 작음 |
| 37 | 25.0 | 27.5 | 41.4 | 52.6 | -11.2 | 예 | 부가보다 작음 |
| 41 | 11.7 | 20.5 | 31.4 | 32.2 | -0.8 | 예 | 부가 |
| 44 | 9.8 | 22.4 | 28.2 | 32.2 | -4.0 | 예 | 부가 |
| 48 | 4.5 | 23.9 | 26.9 | 28.3 | -1.4 | 아니오 | - |
표 9는 아플리딘의 0.04㎎/㎏/일 및 소라페니브의 60㎎/㎏/일의 투여량으로 MRI-H-121 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 아플리딘 및 소라페니브 투여의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 소라페니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의
정도 |
||
| G3 | G4 | G8 | |||||
| 14 | -3.5 | -3.8 | -0.3 | -7.3 | 7.5 | 아니오 | - |
| 16 | -4.0 | 15.0 | -1.0 | 11.1 | -10.1 | 아니오 | - |
| 20 | 14.9 | 33.5 | -25.9 | 48.5 | -22.5 | 아니오 | - |
| 23 | 14.1 | 28.3 | -39.2 | 42.4 | -3.2 | 예 | 부가 |
| 27 | 5.9 | 29.6 | -34.0 | 35.5 | -1.5 | 예 | 부가 |
| 30 | 13.6 | 24.4 | -37.0 | 38.0 | -0.9 | 예 | 부가 |
| 34 | 9.0 | 30.4 | -30.5 | 39.4 | -8.9 | 아니오 | - |
| 37 | 14.4 | 28.9 | -34.8 | 43.3 | -8.5 | 예 | 부가보다 작음 |
| 41 | 7.5 | 25.3 | -25.7 | 32.9 | -7.2 | 아니오 | - |
| 44 | 6.1 | 29.0 | -38.9 | 35.1 | 3.8 | 예 | 부가 |
| 48 | 5.1 | 28.2 | -41.1 | 33.2 | 7.9 | 예 | 부가보다 큼 |
표 10은 아플리딘의 0.04㎎/㎏/일 및 소라페니브의 30㎎/㎏/일의 투여량으로 MRI-H-121 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 소라페니브의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 소라페니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의
정도 |
||
| G3 | G5 | G9 | |||||
| 14 | -3.5 | 0.3 | -2.4 | -3.2 | 0.8 | - | - |
| 16 | -4.0 | 14.4 | 9.4 | 10.4 | -1.0 | - | - |
| 20 | 14.9 | 37.9 | 25.2 | 52.9 | -27.7 | 아니오 | - |
| 23 | 14.1 | 40.8 | 36.5 | 54.8 | -18.3 | 아니오 | - |
| 27 | 5.9 | 21.3 | 35.2 | 27.2 | 8.0 | 예 | 부가보다 큼 |
| 30 | 13.6 | 28.0 | 33.6 | 41.5 | -8.0 | 예 | 부가보다 작음 |
| 34 | 9.0 | 33.9 | 38.6 | 42.9 | -4.3 | 예 | 부가보다 작음 |
| 37 | 14.4 | 27.5 | 41.0 | 41.9 | -1.0 | 예 | 부가 |
| 41 | 7.5 | 20.5 | 33.8 | 28.0 | 5.8 | 예 | 부가보다 큼 |
| 44 | 6.1 | 22.4 | 42.2 | 28.5 | 13.6 | 예 | 부가보다 큼 |
| 48 | 5.1 | 23.9 | 35.4 | 28.9 | 6.4 | 예 | 부가보다 큼 |
상기 MRI-H-121 인간 신장 종양은 본 연구에서 시험된 투여량들 및 스케쥴에서 단일 제제(단일요법)로서 투여되는 경우에는 아플리딘 처치에 대하여는 난치성이었다. 게다가, 단일 제제(단일요법)로서 60 또는 30㎎/㎏/일로 투여되는 소라페니브로의 처치는 통계학적으로 명백한 종양 성장의 저해를 가졌으나, 그러나 활성에 대한 NCI 기준에는 미치지 못했다.
반면에, 0.060㎎/㎏/일의 투여량의 아플리딘이 60㎎/㎏/일의 투여량의 소라페니브와 조합되는 경우, 항종양 활성의 부가적 약효강화 보다 더 큰 통계학적으로 명백한 부가가 관측되었다. 게다가, 0.040㎎/㎏/일의 투여량의 아플리딘과 30㎎/㎏/일의 투여량의 소라페니브의 조합 또한 항종양 활성의 부가적 약효강화 보다 더 큰 결과를 가져왔다.
마지막으로, 아플리딘을 소라페니브와 조합하는 처치들은 34일차에서 최대 15%의 체중 손실로 체중에서의 수용가능한 감소의 결과를 가져왔다. 일부 분리된 개개 동물들이 30% 이상의 체중 손실을 나타내었다.
A498 인간 신장 종양 이종이식에서의 결과들
표 11은 처치들 각각에 대하여 수득된 %T/C 값들을 보고하고 있으며, 도 9 내지 12들은 대조군(비히클), 아플리딘, 소라페니브 또는 서로 다른 투여량들에서의 아플리딘 플러스 소라페니브로 처치된 마우스들 내에서의 A498 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내고 있다.
| 군 | 일수에 대한 % T/C | |||||||||
| 26 | 29 | 33 | 36 | 40 | 43 | 47 | 50 | 54 | 61 | |
| G1 (대조군) |
- | - | - | - | - | - | - | - | - | - |
| G2 | 96.8 | 72.3 | 71.0 | 77.0 | 85.3 | 78.6 | 86.5 | 82.6 | 90.9 | 87.8 |
| G3 | 100.8 | 84.6 | 78.7 | 74.8 | 90.2 | 65.1 | 89.8 | 71.5 | 86.7 | 89.5 |
| G4 | 97.4 | 87.8 | 80.2 | 68.6 | 82.9 | 51.4 | 74.9 | 71.1 | 78.7 | 81.3 |
| G5 | 97.0 | 97.4 | 76.6 | 84.2 | 98.7 | 70.1 | 91.2 | 85.9 | 105.9 | 89.6 |
| G6 | 100.7 | 67.8 | 41.3 | 39.1 | 55.0 | 29.6 | 31.7 | 33.7 | 50.1 | 59.2 |
| G7 | 94.1 | 58.6 | 43.7 | 43.2 | 56.5 | 40.8 | 40.4 | 47.9 | 69.4 | 72.3 |
| G8 | 95.3 | 72.3 | 60.6 | 53.9 | 69.6 | 57.8 | 45.7 | 44.7 | 65.1 | 79.7 |
| G9 | 96.8 | 76.2 | 73.1 | 63.5 | 67.7 | 60.9 | 76.2 | 78.9 | 93.0 | 99.4 |
표 12는 아플리딘의 0.06㎎/㎏/일 및 소라페니브의 60㎎/㎏/일의 투여량으로 A498 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 소라페니브의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 소라페니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의
정도 |
||
| G2 | G4 | G6 | |||||
| 26 | 3.2 | 2.6 | -0.7 | 5.9 | -6.5 | 아니오 | - |
| 29 | 27.7 | 12.2 | 32.2 | 40.0 | -7.8 | 예 | 부가보다 작음 |
| 33 | 29.0 | 19.8 | 58.7 | 48.8 | 9.9 | 예 | 부가보다 큼 |
| 36 | 23.0 | 31.4 | 60.9 | 54.4 | 6.5 | 예 | 부가보다 큼 |
| 40 | 14.7 | 17.1 | 45.0 | 31.8 | 13.2 | 예 | 보다보다 큼 |
| 43 | 21.4 | 48.5 | 70.4 | 70.0 | 0.4 | 예 | 부가 |
| 47 | 13.5 | 25.1 | 68.3 | 38.6 | 29.7 | 예 | 부가보다 큼 |
| 50 | 17.4 | 28.9 | 66.3 | 46.3 | 20.0 | 예 | 부가보다 큼 |
| 54 | 9.1 | 21.3 | 49.9 | 30.3 | 19.6 | 예 | 부가보다 큼 |
| 61 | 12.2 | 18.7 | 40.8 | 30.9 | 9.9 | 예 | 부가보다 큼 |
표 13은 아플리딘의 0.06㎎/㎏/일 및 소라페니브의 30㎎/㎏/일의 투여량으로 A498 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 소라페니브의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 소라페니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의
정도 |
||
| G2 | G5 | G7 | |||||
| 26 | 3.2 | 3.0 | 5.9 | 6.3 | -0.4 | 예 | 부가 |
| 29 | 27.7 | 2.6 | 41.4 | 30.3 | 11.1 | 예 | 부가보다 큼 |
| 33 | 29.0 | 23.4 | 56.3 | 52.4 | 3.9 | 예 | 부가보다 큼 |
| 36 | 23.0 | 15.8 | 56.8 | 38.8 | 18.0 | 예 | 부가보다 큼 |
| 40 | 14.7 | 1.3 | 43.5 | 16.0 | 27.4 | 예 | 부가보다 큼 |
| 43 | 21.4 | 29.9 | 59.2 | 51.3 | 7.9 | 예 | 부가보다 큼 |
| 47 | 13.5 | 8.8 | 59.6 | 22.3 | 37.3 | 예 | 부가보다 큼 |
| 50 | 17.4 | 14.1 | 52.1 | 31.6 | 20.6 | 예 | 부가보다 큼 |
| 54 | 9.1 | -5.9 | 30.6 | 3.2 | 27.5 | 예 | 부가보다 큼 |
| 61 | 12.2 | 10.4 | 27.7 | 22.6 | 5.1 | 예 | 부가보다 큼 |
표 14는 아플리딘의 0.04㎎/㎏/일 및 소라페니브의 60㎎/㎏/일의 투여량으로 A498 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 소라페니브의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 소라페니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의
정도 |
||
| G3 | G4 | G8 | |||||
| 26 | -0.8 | 2.6 | 4.7 | 1.9 | 2.8 | - | - |
| 29 | 15.4 | 12.2 | 27.7 | 27.7 | 0.0 | 예 | 부가 |
| 33 | 21.4 | 19.8 | 39.4 | 41.1 | -1.7 | 예 | 부가 |
| 36 | 25.2 | 31.4 | 46.1 | 56.6 | -10.5 | 예 | 부가보다 작음 |
| 40 | 9.8 | 17.1 | 30.4 | 26.9 | 3.4 | 예 | 부가보다 큼 |
| 43 | 34.9 | 48.5 | 42.2 | 83.5 | -41.3 | 아니오 | - |
| 47 | 10.2 | 25.1 | 54.3 | 35.3 | 19.1 | 예 | 부가보다 큼 |
| 50 | 28.5 | 28.9 | 55.3 | 57.3 | -2.0 | 예 | 부가 |
| 54 | 13.3 | 21.3 | 34.9 | 34.6 | 0.3 | 예 | 부가 |
| 61 | 10.5 | 18.7 | 20.3 | 29.1 | -8.8 | 예 | 부가보다 작음 |
표 15는 아플리딘의 0.04㎎/㎏/일 및 소라페니브의 30㎎/㎏/일의 투여량으로 A498 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 소라페니브의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 소라페니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의
정도 |
||
| G3 | G5 | G9 | |||||
| 26 | -0.8 | 3.0 | 3.2 | 2.3 | 0.9 | 아니오 | - |
| 29 | 15.4 | 2.6 | 23.8 | 18.0 | 5.8 | 아니오 | - |
| 33 | 21.4 | 23.4 | 26.9 | 44.7 | -17.8 | 아니오 | - |
| 36 | 25.2 | 15.8 | 36.6 | 41.0 | -4.4 | 아니오 | - |
| 40 | 9.8 | 1.3 | 32.3 | 11.2 | 21.1 | 예 | 부가보다 큼 |
| 43 | 34.9 | 29.9 | 39.1 | 64.8 | -25.8 | 아니오 | - |
| 47 | 10.2 | 8.8 | 23.8 | 19.0 | 4.8 | 예 | 부가보다 큼 |
| 50 | 28.5 | 14.1 | 21.1 | 42.6 | -21.5 | 아니오 | - |
| 54 | 13.3 | -5.9 | 7.0 | 7.4 | -0.4 | 아니오 | - |
| 61 | 10.5 | 10.4 | 0.6 | 20.9 | -20.3 | 아니오 | - |
본 연구에서 시험된 투여량들 및 스케쥴에서 단일 제제들(단일요법)로서 투여된 아플리딘 또는 소라페니브로의 A498 인간 신장 종양의 처치는 종양 성장의 저해에 있어서 대조군에 대하여 통계학적인 명백함 쪽으로 향하는 경향을 나타냈으나, 그러나 활성에 대한 NCI 기준에는 미치지 못했다.
상기 조합군들에 대하여는 통계학적으로 명백한 항종양 반응이 관측되었다. 0.060㎎/㎏/일의 투여량의 아플리딘이 60㎎/㎏/일 또는 30㎎/㎏/일의 투여량의 소라페니브와 조합되는 경우, 보다 더 큰 항종양 활성의 부가적 약효강화가 관측되었다.
마지막으로, 복합 요법은 증가된 독성의 증거없이 마우스들에 의하여 잘 견뎌내어졌다.
실시예 2. 인간 신장 종양 이종이식들에서의 수니티니브와의 조합에서의 아플리딘의 효과를 결정하기 위한 생체 내 연구들
이들 연구들의 목표는 인간 신장 종양의 3개의 이종이식 모델들을 이용하는 것에 의하여 수니티니브의 항종양 활성(antitumoral activity)을 강화시키는 아플리딘의 능력을 평가하는 것이다.
모든 실험들에 대하여 암컷 비흉선 누드 마우스들(미합중국 위스콘신주 매디슨 소재의 할란 스프라그 돌리)가 활용되었다. 마우스들이 5주령이 되었을 때, 마우스들을 종양 단편들 또는 세포 현탁액들로 이식시켰다. 동물들을 케이지 당 5마리의 마우스들을 환기되는 랙 케이징 내에 가두고, 음식물과 물을 자유식으로 사육하였다. 상기 마우스들을 종양 단편 또는 세포 현탁액들로 이식하기 1주전까지 순응시켰다. 비히클 대조군에는 15마리의 마우스들이 포함되고, 그리고 처치군들에는 그룹 당 10마리의 마우스들이 포함되었다.
이들 연구들에서 사용된 종양 모델들은 실시예 1에서와 동일하였다(CAKI-1, MRI-H-121 및 A498 세포주들). MRI-H-121 및 A498 종양 모델들이 실시예 1에서 기술된 바와 같이 동물들에 이식되었다.
CAKI-1 세포들을 맥코이 배지(McCoy's medium), 2mM 엘-글루타민 및 항생제가 없는 10% 우태혈청 내에서 성장시켰다. 시험관 내 경로 4-20으로부터의 세포들을 23G의 바늘 및 1cc의 주사기를 사용하여 무항생제 또는 무혈청의 0.2㎖ 50% 매트리겔(Matrigel)/50% 배지 내의 5x106 세포/마우스로 피하적으로 연구용 마우스들에 이식시켰다. 이식을 위하여 준비된 상기 세포들의 분취량들에 대하여 세균배양들을 수행하였다. 모든 배양들은 이식 후 24시간 및 48시간 후에서의 세균 오염에 대하여 음성이었다.
실시예 1에서 기술한 바와 같이 종양 측정들이 결정되었다. MRI-H-121에 대하여는 142±52㎎, CAKI-1에 대하여는 181±7㎎ 그리고 A498에 대하여는 207±13㎎(평균±표준편차)의 범위 내로 종양들이 적절한 용적에 달하는 경우, 랩캣® 인 라이프 모듈 브이 8.0 에스피1 종양 추적 및 측정 소프트웨어를 사용하는 것에 의하여 종양중량에 기초하여 마우스들을 처치군들과 대조군들로 불규칙하게 구분하였다.
MRI-H-121-종양-함유 마우스들의 처치는 이식이후 일수(DPI) 10일에서, CAKI-1에 대하여는 이식이후 일수 23일에서 그리고 A498에 대하여는 이식이후 일수 19일에서 개시하였다. 처리일들 및 종양 크기들이 측정되는 경우에 체중들을 기록하였다. 상기 두 약물들이 동일자에 투여되는 경우에서의 일수들에 있어서는, 상기 병용요법군들을 상기 두 약물들을 치료들을 연속하는 시도 없이 동시에 공동-투여하는 것에 의하여 처치하였다.
아플리딘은 크레모포어 이엘/에탄올/물(CEW) 15/15/70으로 0.5㎎/㎖의 농도로 재조성된, 동결건조된 아플리딘 분말의 바이알들의 형태로 제공되었다. 계속해서 CEW 내의 상기 아플리딘 용액을 0.18/0.18/0.84의 CEW의 최종비율이 되도록 0.9% 염수로 투여량 제형 농도들로 희석시켰다.
수니티니브는 그의 말산염의 형태의 수니티니브를 포함하는 25㎎ 캡슐의 형태로 제공되었다. 0.5% 카복시메틸셀룰로오스(Carboxy Methyl Cellulose ; CMC) 내에 상기 캡슐 내용물을 용해시키고, 주사용수로 더 희석시키는 것에 의하여 제형을 준비하였다. 상기 제형을 현탁액(suspension)으로 경구적으로 동물들에게 투여하였다.
3개의 이종이식 모델들에 대한 연구군들 및 치료 식이요법들을 하기 표 16에 기재하였다.
| 군 | 동물들의 개체수(N) | 투여량 | 경로 | 스케쥴 | 시험 물질 |
| G1 (대조군) |
15 | 10㎖/㎏/일 10㎖/㎏/일 |
IP PO |
Qdx9x2 Qdx21 |
CEW (0.18/0.18/0.84) 0.5% CMC |
| G2 | 10 | 0.060㎎/㎏/일 | IP | Qdx9x2 | 아플리딘 |
| G3 | 10 | 0.040㎎/㎏/일 | IP | Qdx9x2 | 아플리딘 |
| G4 | 10 | 40㎎/㎏/일 | PO | Qdx21 | 수니티니브 |
| G5 | 10 | 30㎎/㎏/일 | PO | Qdx21 | 수니티니브 |
| G6 | 10 | 0.060㎎/㎏/일 40㎎/㎏/일 |
IP PO |
Qdx9x2 Qdx21 |
아플리딘 수니티니브 |
| G7 | 10 | 0.060㎎/㎏/일 30㎎/㎏/일 |
IP PO |
Qdx9x2 Qdx21 |
아플리딘 수니티니브 |
| G8 | 10 | 0.040㎎/㎏/일 40㎎/㎏/일 |
IP PO |
Qdx9x2 Qdx21 |
아플리딘 수니티니브 |
| G9 | 10 | 0.040㎎/㎏/일 30㎎/㎏/일 |
IP PO |
Qdx9x2 Qdx21 |
아플리딘 수니티니브 |
IP : 복강투여; PO : 경구투여
Qdx9x2 : 2 사이클, 여기에서 시험 동물은 9 연속일들 동안 매일 투여되고 사이클들 사이에서 4 내지 5일의 휴지기를 가짐
Qdx21 : 21 연속일들 동안 매일 시험 동물의 투여
처리 개시로부터 연구가 종결될 때까지 주당 2회 종양 크기 측정들을 기록하였다. 서로 다른 농도들에서 평가된 수니티니브 평균 종양 중량에 대하여 조합(아플리딘 및 수니티니브)에서의 두 약물들 사이에서의 평균 종양 중량을 비교하여 종양 성장 저해를 평가하였다.
모든 평가들에서 모든 동물군들에 대한 종양 용적에 대하여 평균, 표준편차 및 평균의 표준오차들이 결정되었다. 병용요법군들과 하나의 단일요법 처치군들 사이에 어떤 임의의 통계학적으로 명백한 차이점들이 존재하는 지의 여부를 결정하기 위하여 연구의 마지막에서를 포함하여 각 측정일에서의 종양 용적들에 대하여 스튜던트 티 검증을 수행하였다.
약효강화의 평가에 대한 정의 및 기준 그리고 상기 병용요법에 대한 가성성의 정도들은 실시예 1에 기술된 것과 동일하였다.
개개 마우스 체중 측정을 초기 체중(처치의 최초일)에 대하여 비교하는 것에 의하여 체중 효과들이 결정되었다. 20% 이상의 체중 손실의 NCI 활성 기준이 화합물 독성을 측정하는 데 사용되었다.
CAKI
-1 인간 신장 종양 이종이식에서의 결과들
표 17(표 17a는 표 17의 계속)은 처치들 각각에 대하여 수득된 %T/C 값들을 보고하고 있으며, 도 13 내지 16들은 대조군(비히클), 아플리딘, 수니티니브 또는 서로 다른 투여량들에서의 아플리딘 플러스 수니티니브로 처치된 마우스들 내에서의 CAKI-1 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내고 있다.
표 18은 아플리딘의 0.06㎎/㎏/일 및 수니티니브의 30㎎/㎏/일의 투여량으로 CAKI-1 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 수니티니브의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 수니티니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의 정도 | ||
| G2 | G5 | G7 | |||||
| 23 | 9.7 | 1.2 | 7.2 | 10.9 | -3.6 | 아니오 | - |
| 27 | 9.1 | -11.5 | -9.5 | -2.5 | -7.0 | 아니오 | - |
| 30 | 15.4 | -4.7 | 10.9 | 10.6 | 0.3 | 아니오 | - |
| 34 | 19.4 | 1.1 | 21.8 | 20.5 | 1.3 | 아니오 | - |
| 36 | 19.7 | 4.9 | 20.0 | 14.8 | 5.2 | 아니오 | - |
| 41 | 19.2 | -3.7 | 21.3 | 15.6 | 5.7 | 아니오 | - |
| 44 | 19.2 | 9.4 | 32.0 | 28.5 | 3.5 | 아니오 | - |
| 49 | 9.8 | -26.5 | 10.0 | -16.7 | 26.7 | 예 | 부가보다 큼 |
| 51 | 9.8 | -13.6 | 15.8 | -3.8 | 19.6 | 예 | - |
| 55 | 10.3 | 23.0 | -8.2 | -12.7 | 4.5 | 예 | - |
| 58 | 5.6 | -23.6 | -9.2 | -18.0 | 8.8 | 예 | - |
표 19는 아플리딘의 0.04㎎/㎏/일 및 수니티니브의 40㎎/㎏/일의 투여량으로 CAKI-1 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 수니티니브의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 수니티니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의 정도 | ||
| G3 | G4 | G8 | |||||
| 23 | 5.4 | 4.1 | 8.3 | 9.5 | -1.2 | 아니오 | - |
| 27 | -1.5 | 3.6 | 14.1 | 2.1 | 12.1 | 예 | 부가보다 큼 |
| 30 | -4.6 | 0.3 | 14.6 | -4.3 | 18.9 | 예 | 부가보다 큼 |
| 34 | -7.7 | 4.9 | 31.0 | -2.8 | 33.8 | 예 | 부가보다 큼 |
| 36 | 5.8 | 11.9 | 20.4 | 6.1 | 14.3 | 예 | 부가보다 큼 |
| 41 | -13.3 | 10.8 | 29.7 | -2.5 | 32.1 | 예 | 부가보다 큼 |
| 44 | 0.0 | 24.0 | 36.5 | 24.0 | 12.6 | 예 | 부가보다 큼 |
| 49 | -5.3 | 5.3 | 23.3 | 0.1 | 23.3 | 예 | 부가보다 큼 |
| 51 | 5.0 | 6.7 | 32.6 | 11.7 | 20.9 | 예 | 부가보다 큼 |
| 55 | -2.4 | -0.1 | 17.2 | -2.4 | 19.6 | 예 | 부가보다 큼 |
| 58 | -14.4 | 1.6 | -6.2 | -12.8 | 6.6 | 아니오 | - |
표 20은 아플리딘의 0.04㎎/㎏/일 및 수니티니브의 30㎎/㎏/일의 투여량으로 CAKI-1 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 수니티니브의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 수니티니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의 정도 | ||
| G3 | G5 | G9 | |||||
| 23 | 5.4 | 1.2 | 0.1 | 6.6 | -6.5 | 아니오 | - |
| 27 | -1.5 | -11.5 | -42.3 | -13.0 | -29.2 | 아니오 | - |
| 30 | -4.6 | -4.7 | -23.5 | -9.4 | -14.2 | 아니오 | - |
| 34 | -7.7 | 1.1 | -0.4 | -6.6 | 6.2 | 아니오 | - |
| 36 | 5.8 | 4.9 | -14.3 | -10.7 | -3.7 | 아니오 | - |
| 41 | -13.3 | -3.7 | -5.4 | -16.9 | 11.5 | 아니오 | - |
| 44 | 0.0 | 9.4 | 3.0 | 9.4 | -6.4 | 아니오 | - |
| 49 | -5.3 | -26.5 | -6.1 | -31.7 | 25.6 | 아니오 | - |
| 51 | 5.0 | -13.6 | 2.8 | -8.6 | 11.4 | 아니오 | - |
| 55 | -2.4 | 23.0 | 6.8 | -25.4 | 32.2 | 예 | 부가보다 큼 |
| 58 | -14.4 | -23.6 | -6.0 | -38.0 | 32.0 | 아니오 | - |
KI-1 인간 신장 종양 세포주에 대하여 아플리딘과 수니티니브가 단일 제제(단일요법)로서 투여된 경우, 이들은 비활성이었다. 게다가, 이들 처치들은 평균 체중에서 명백하게 감소하는 원인이 되지 않았으며, 모든 마우스들은 연구의 끝에서 체중이 증가하였다.
그러나, 0.040㎎/㎏/일의 투여량의 아플리딘이 40㎎/㎏/일의 투여량의 수니티니브와 조합되는 경우, 활성의 약효강화가 관측되어 종양 성장 저해의 부가의 약효강화 보다 더 큰 결과를 가져왔다. 게다가, 아플리딘의 수니티니브와의 조합은 최대 7.2%의 체중 손실로 체중에서의 수용가능한 감소를 야기하였다.
MRI
-H-121 인간 신장 종양 이종이식에서의 결과들
표 21(표 21a는 표 21의 계속)은 처치들 각각에 대하여 수득된 %T/C 값들을 보고하고 있으며, 도 17 내지 20들은 대조군(비히클), 아플리딘, 수니티니브 또는 서로 다른 투여량들에서의 아플리딘 플러스 수니티니브로 처치된 마우스들 내에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내고 있다.
표 22는 아플리딘의 0.06㎎/㎏/일 및 수니티니브의 40㎎/㎏/일의 투여량으로 MRI-H-121 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 수니티니브의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 수니티니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의 정도 | ||
| G2 | G4 | G6 | |||||
| 10 | -8.7 | -8.4 | -3.1 | -17.1 | 13.9 | 아니오 | - |
| 13 | 20.9 | 3.7 | 15.5 | 24.6 | -9.1 | 아니오 | - |
| 18 | 27.5 | 20.7 | 42.4 | 48.1 | -5.8 | 아니오 | - |
| 21 | 12.0 | -10.6 | 19.7 | 1.4 | 18.3 | 아니오 | - |
| 27 | 21.6 | 21.1 | 34.1 | 42.8 | -8.6 | 예 | 부가보다 작음 |
| 31 | 17.5 | 18.4 | 53.3 | 35.9 | 17.4 | 예 | 부가보다 큼 |
| 34 | 19.4 | 7.7 | 48.1 | 27.1 | 21.0 | 예 | 부가보다 큼 |
| 39 | 19.2 | 13.8 | 46.6 | 33.1 | 13.6 | 예 | 부가보다 큼 |
| 42 | 22.0 | 19.7 | 51.3 | 41.7 | 9.5 | 예 | 부가보다 큼 |
| 46 | 32.4 | 28.4 | 51.4 | 60.8 | -9.4 | 예 | 부가보다 작음 |
| 49 | 28.2 | 26.0 | 43.6 | 54.2 | -10.6 | 아니오 | - |
표 23은 아플리딘의 0.06㎎/㎏/일 및 수니티니브의 30㎎/㎏/일의 투여량으로 MRI-H-121 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 수니티니브의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 수니티니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의 정도 | ||
| G2 | G5 | G7 | |||||
| 10 | -8.7 | 2.8 | -5.1 | -5.9 | 0.8 | 아니오 | - |
| 13 | 20.9 | 12.8 | 32.3 | 33.7 | -1.4 | 아니오 | - |
| 18 | 27.5 | 20.8 | 40.4 | 48.3 | -7.9 | 아니오 | - |
| 21 | 12.0 | 15.5 | 13.8 | 27.5 | -13.7 | 아니오 | - |
| 27 | 21.6 | 23.7 | 39.9 | 45.3 | -5.5 | 예 | 부가보다 작음 |
| 31 | 17.5 | 18.6 | 44.2 | 36.1 | 8.1 | 예 | 부가보다 큼 |
| 34 | 19.4 | 11.7 | 30.2 | 31.1 | -0.9 | 예 | 부가보다 작음 |
| 39 | 19.2 | 15.4 | 29.8 | 34.6 | -4.8 | 예 | 부가보다 작음 |
| 42 | 22.0 | 19.8 | 41.4 | 41.8 | -0.4 | 예 | 부가보다 작음 |
| 46 | 32.4 | 28.5 | 41.6 | 60.9 | -19.3 | 예 | 부가보다 작음 |
| 49 | 28.2 | 19.0 | 27.0 | 47.2 | -20.2 | 아니오 | - |
표 24는 아플리딘의 0.04㎎/㎏/일 및 수니티니브의 40㎎/㎏/일의 투여량으로 MRI-H-121 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 수니티니브의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 수니티니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의 정도 | ||
| G3 | G4 | G8 | |||||
| 10 | 3.6 | -8.4 | -0.5 | -4.7 | 4.2 | 아니오 | - |
| 13 | 26.3 | 3.7 | 20.5 | 30.0 | -9.5 | 아니오 | - |
| 18 | 39.4 | 20.7 | 21.8 | 60.1 | -38.3 | 아니오 | - |
| 21 | 18.9 | -10.6 | 5.5 | 8.3 | -2.7 | 아니오 | - |
| 27 | 3.1 | 21.1 | 32.9 | 24.2 | 8.7 | 예 | 부가보다 큼 |
| 31 | 0.8 | 18.4 | 38.8 | 19.2 | 19.6 | 예 | 부가보다 큼 |
| 34 | -1.9 | 7.7 | 29.8 | 5.8 | 23.9 | 예 | 부가보다 큼 |
| 39 | -9.8 | 13.8 | 28.1 | 4.0 | 24.1 | 예 | 부가보다 큼 |
| 42 | -8.2 | 19.7 | 37.7 | 11.6 | 26.1 | 예 | 부가보다 큼 |
| 46 | -3.3 | 28.4 | 40.6 | 25.1 | 15.5 | 예 | 부가보다 큼 |
| 49 | 1.0 | 26.0 | 26.3 | 27.1 | 0.7 | 아니오 | - |
표 25는 아플리딘의 0.04㎎/㎏/일 및 수니티니브의 30㎎/㎏/일의 투여량으로 MRI-H-121 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 수니티니브의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 수니티니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의 정도 | ||
| G3 | G5 | G9 | |||||
| 10 | 3.6 | 2.8 | -4.1 | 6.4 | -10.5 | 아니오 | - |
| 13 | 26.3 | 12.8 | 26.0 | 39.1 | -13.1 | 아니오 | - |
| 18 | 39.4 | 20.8 | 25.1 | 60.2 | -35.2 | 예 | 부가보다 작음 |
| 21 | 18.9 | 15.5 | 13.9 | 34.4 | -20.5 | 아니오 | - |
| 27 | 3.1 | 23.7 | 19.0 | 26.8 | -7.8 | 예 | 부가보다 작음 |
| 31 | 0.8 | 18.6 | 35.9 | 19.4 | 16.5 | 예 | 부가보다 큼 |
| 34 | -1.9 | 11.7 | 21.6 | 9.8 | 11.8 | 예 | 부가보다 큼 |
| 39 | -9.8 | 15.4 | 28.4 | 5.6 | 22.9 | 예 | 부가보다 큼 |
| 42 | -8.2 | 19.8 | 27.1 | 11.7 | 15.4 | 예 | 부가보다 큼 |
| 46 | -3.3 | 28.5 | 30.5 | 25.2 | 5.3 | 예 | 부가 |
| 49 | 1.0 | 19.0 | 24.6 | 20.1 | 4.5 | 아니오 | - |
비록 아플리딘 처치가 0.060㎎/㎏/일에서 종양 성장의 저해에 대한 활성에 대하여 힌트(hints)를 나타내었음에도 불구하고, 상기 MRI-H-121 인간 신장 종양은 본 연구에서 시험된 투여량들 및 스케쥴에서 단일 제제(단일요법)로서 투여되는 경우에는 아플리딘 및 수니티니브에 대하여는 난치성이었다. 게다가, 이들 처치들은 평균 체중에서 명백하게 감소하는 원인이 되지 않았으며, 모든 마우스들은 연구의 끝에서 체중이 증가하였다.
그러나, 두 약물들이 조합된 경우, 통계학적으로 명백한 활성의 약효강화가 시험된 모든 투여량 수준들에서 관측되었다. 이 약효강화는 부가 보다 더 큰 것으로 결정되었다. 게다가, 아플리딘의 수니티니브와의 조합은 최대 8.7%의 체중 손실로 체중에서의 수용가능한 감소를 야기하였다.
A498 인간 신장 종양 이종이식에서의 결과들
표 26은 처치들 각각에 대하여 수득된 %T/C 값들을 보고하고 있으며, 도 21 내지 24들은 대조군(비히클), 아플리딘, 수니티니브 또는 서로 다른 투여량들에서의 아플리딘 플러스 수니티니브로 처치된 마우스들 내에서의 A498 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내고 있다.
| 군 | 일수에 대한 % T/C | |||||||||
| 19 | 22 | 26 | 29 | 34 | 37 | 41 | 44 | 48 |
51
|
|
| G1 (대조군) |
- | - | - | - | - | - | - | - | - |
-
|
| G2 | 101.0 | 87.5 | 88.3 | 120.5 | 102.7 | 123.5 | 142.2 | 120.5 | 137.8 | 125.2 |
| G3 | 113.0 | 109.5 | 116.0 | 111.9 | 99.4 | 133.2 | 114.2 | 118.1 | 111.6 | 102.5 |
| G4 | 112.8 | 124.9 | 80.5 | 112.8 | 56.1 | 39.3 | 43.1 | 61.7 | 58.1 | 54.0 |
| G5 | 117.3 | 115.8 | 111.6 | 136.0 | 104.0 | 89.0 | 96.5 | 91.9 | 84.9 | 81.8 |
| G6 | 108.0 | 112.8 | 77.1 | 87.2 | 60.9 | 18.3 | 29.9 | 58.2 | 56.4 | 52.6 |
| G7 | 102.9 | 85.3 | 79.2 | 92.7 | 76.0 | 55.0 | 65.0 | 76.1 | 76.3 | 68.5 |
| G8 | 99.2 | 93.7 | 91.2 | 99.5 | 79.9 | 50.4 | 57.8 | 65.9 | 67.8 | 58.2 |
| G9 | 106.5 | 96.3 | 99.3 | 110.7 | 95.3 | 95.2 | 98.1 | 85.6 | 91.2 | 80.2 |
표 27은 아플리딘의 0.06㎎/㎏/일 및 수니티니브의 40㎎/㎏/일의 투여량으로 A498 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 수니티니브의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 수니티니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의 정도 | ||
| G2 | G4 | G6 | |||||
| 19 | -1.0 | -12.8 | 8.0 | -13.8 | 5.8 | 아니오 | - |
| 22 | 12.5 | -24.9 | -12.8 | -12.4 | -0.4 | 아니오 | - |
| 26 | 11.7 | 19.5 | 22.9 | 31.2 | 8.3 | 아니오 | - |
| 29 | -20.5 | -12.8 | 12.8 | -33.3 | 46.1 | 예 | 부가보다 큼 |
| 34 | -2.7 | 43.9 | 39.1 | 41.2 | -2.1 | 아니오 | - |
| 37 | -23.5 | 60.5 | 81.7 | 37.0 | 44.7 | 예 | 부가보다 큼 |
| 41 | -42.2 | 56.9 | 70.1 | 14.7 | 55.4 | 예 | 부가보다 큼 |
| 44 | -20.5 | 38.3 | 41.8 | 17.8 | 24.0 | 예 | 부가보다 큼 |
| 48 | -37.8 | 41.9 | 43.6 | 4.1 | 39.5 | 예 | 부가보다 큼 |
| 51 | 25.2 | 46.0 | 47.4 | 20.8 | 26.6 | 예 | 부가보다 큼 |
표 28은 아플리딘의 0.06㎎/㎏/일 및 수니티니브의 30㎎/㎏/일의 투여량으로 A498 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 수니티니브의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 수니티니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의 정도 | ||
| G2 | G5 | G7 | |||||
| 19 | -1.0 | -17.3 | -2.9 | -18.3 | 15.4 | 예 | 부가보다 큼 |
| 22 | 12.5 | -15.8 | 14.7 | -3.3 | 18.0 | 예 | 부가보다 큼 |
| 26 | 11.7 | -11.6 | 20.8 | 0.1 | 20.7 | 예 | 부가보다 큼 |
| 29 | -20.5 | -36.0 | 7.3 | -56.4 | 63.7 | 예 | 부가보다 큼 |
| 34 | -2.7 | -4.0 | 24.0 | 6.7 | 30.7 | 예 | 부가보다 큼 |
| 37 | -23.5 | 11.0 | 45.0 | -12.5 | 57.5 | 예 | 부가보다 큼 |
| 41 | -42.2 | 3.5 | 35.0 | -38.8 | 73.8 | 예 | 부가보다 큼 |
| 44 | -20.5 | 8.1 | 23.9 | -12.4 | 36.3 | 예 | 부가보다 큼 |
| 48 | -37.8 | 15.1 | 23.7 | -22.7 | 46.4 | 예 | 부가보다 큼 |
| 51 | 25.2 | 18.2 | 31.5 | -7.1 | 38.6 | 예 | 부가보다 큼 |
표 29는 아플리딘의 0.04㎎/㎏/일 및 수니티니브의 40㎎/㎏/일의 투여량으로 A498 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 수니티니브의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 수니티니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의 정도 | ||
| G3 | G4 | G8 | |||||
| 19 | -13.0 | -12.8 | 0.8 | -25.8 | 26.6 | 예 | 부가보다 큼 |
| 22 | -9.5 | -24.9 | 6.3 | -34.4 | 40.7 | 예 | 부가보다 큼 |
| 26 | -16.0 | 19.5 | 8.8 | 3.5 | 5.3 | 아니오 | - |
| 29 | -11.9 | -12.8 | 0.5 | -24.7 | 25.2 | 예 | 부가보다 큼 |
| 34 | 0.6 | 43.9 | 20.1 | 44.5 | -24.3 | 아니오 | - |
| 37 | -33.2 | 60.5 | 49.6 | 27.3 | 22.3 | 아니오 | - |
| 41 | -14.2 | 56.9 | 42.2 | 42.7 | -0.5 | 아니오 | - |
| 44 | -18.1 | 38.3 | 34.1 | 20.2 | 13.9 | 아니오 | - |
| 48 | -11.6 | 41.9 | 32.2 | 30.3 | 1.9 | 아니오 | - |
| 51 | -2.5 | 46.0 | 41.8 | 43.5 | -1.7 | 아니오 | - |
단일 제제(단일요법)로서 투여된 아플리딘은 본 연구에서 시험된 투여량, 경로 및 투여의 스케쥴에서 종양 성장의 저해에 대하여 효과가 없었다. 게다가, 단일제제(단일요법)로서 40㎎/㎏의 투여량에서 투여된 수니티니브는 종양 성장 저해에 대한 활성 쪽으로의 경향을 갖는다는 결과를 가져왔으나, 이 활성의 수준은 NCI 기준에 도달하지 못하였다. 이들 처치들은 평균 체중에서 명백하게 감소하는 원인이 되지 않았으며, 모든 마우스들은 연구의 끝에서 체중이 증가하였다.
반면에, 0.060㎎/㎏/일의 투여량의 아플리딘이 40㎎/㎏/일 또는 30㎎/㎏/일의 투여량의 수니티니브와 조합되는 경우, 보다 큰 항종양 활성의 부가적 약효강화가 관측되었다.
마지막으로, 아플리딘의 수니티니브와의 조합은 최대 13%의 체중 손실로 체중에서의 수용가능한 감소를 야기하였다.
실시예 3. 인간 신장 종양 이종이식에서의 템시롤리무스와의 조합에서의 아플리딘의 효과를 결정하기 위한 생체 내 연구
이 연구의 목표는 인간 신장 종양의 이종이식 모델을 이용하는 것에 의하여 템시롤리무스의 항종양 활성을 강화시키는 아플리딘의 능력을 평가하는 것이다.
모든 실험들에 대하여 암컷 비흉선 누드 마우스들(미합중국 위스콘신주 매디슨 소재의 할란 스프라그 돌리)가 활용되었다. 마우스들이 5주령이 되었을 때, 마우스들을 종양 단편들로 이식시켰다. 동물들을 케이지 당 5마리의 마우스들을 환기되는 랙 케이징 내에 가두고, 음식물과 물을 자유식으로 사육하였다. 상기 마우스들을 종양 단편들로 이식하기 1주전까지 순응시켰다. 비히클 대조군에는 15마리의 마우스들이 포함되고, 그리고 처치군들에는 그룹 당 10마리의 마우스들이 포함되었다.
이 연구에서 사용된 종양 모델은 원천적으로 DCT 종양은행으로부터 획득한 인간 신장 암종 세포주인 MRI-H-121 세포주이다. MRI-H-121 분석에 대하여는, 적심제로서 멸균의 얼의 평형 염액을 사용하여, 생체 내 이식가능 라인 경로 1로부터 투관침을 사용하여 3㎣의 조직 종양 단편들로 우측 옆구리 상에 피하적으로(SC) 동물들을 이식시켰다. 이식 시에 취해진 세균배양은 이식 후 24시간 및 48시간 후에서의 오염에 대하여 음성이었다.
실시예 1에서 기술한 바와 같이 종양 측정들이 결정되었다. 종양 성장이 95±1.6㎎의 평균 크기 범위 이내가 되었을 때, 랩캣® 인 라이프 모듈 브이 8.0 에스피1 종양 추적 및 측정 소프트웨어를 사용하는 것에 의하여 종양중량에 기초하여 마우스들을 처치군들과 대조군들로 불규칙하게 구분하였다.
MRI-H-121-종양-함유 마우스들의 처치는 이식이후 일수(DPI) 12일에서 개시하였다. 처리일들 및 종양 크기들이 측정되는 경우에 체중들을 기록하였다. 상기 두 약물들이 동일자에 투여되는 경우에서의 일수들에 있어서는, 상기 병용요법군들을 상기 두 약물들을 치료들을 연속하는 시도 없이 동시에 공동-투여하는 것에 의하여 처치하였다.
아플리딘은 크레모포어 이엘/에탄올/물(CEW) 15/15/70으로 0.5㎎/㎖의 농도로 재조성된, 동결건조된 아플리딘 분말의 바이알들의 형태로 제공되었다. CEW 내의 상기 아플리딘 용액을 0.18/0.18/0.84의 CEW의 최종비율이 되도록 0.9% 염수로 투여량 제형 농도들로 희석시켰다.
템시롤리무스는 템시롤리무스의 비-수성의, 에탄올성의, 멸균 용액 25㎎/㎖을 함유하는 바이알들의 형태로 제공되었다. 이 용액을 폴리소르베이트 80(polysorbate 80)(40중량/용적%), 폴리에틸렌글리콜400(polyethylene glycol 400)(42.8중량/용적%) 및 무수알코올(19.9중량/용적%)을 포함하는 희석용액으로 희석시켰다. 계속해서, 상기 용액을 투여량 제형 농도들로 0.9% 염수로 더 희석시켰다.
상기 이종이식 모델에 대한 연구군들 및 치료 식이요법들을 하기 표 30에 기재하였다.
| 군 | 동물들의 개체수(N) | 투여량 | 경로 | 스케쥴 | 시험 물질 |
| G1 (대조군) |
15 | 10㎖/㎏/일 | IP | A | CEW (0.18/0.18/0.84) |
| G2 | 10 | 0.060㎎/㎏/일 | IP | A | 아플리딘 |
| G3 | 10 | 20㎎/㎏/일 | IP | B | 템시롤리무스 |
| G4 | 10 | 10㎎/㎏/일 | IP | B | 템시롤리무스 |
| G5 | 10 | 0.060㎎/㎏/일 20㎎/㎏/일 |
IP IP |
A B |
아플리딘 템시롤리무스 |
| G6 | 10 | 0.060㎎/㎏/일 10㎎/㎏/일 |
IP IP |
A B |
아플리딘 템시롤리무스 |
IP : 복강투여
A : 2 사이클, 여기에서 시험 물질은 첫번째로 9 연속일들 동안 매일 그리고 두번째로 5 연속일들 동안 매일 투여되고 사이클들 사이에서 5일간의 휴지기를 가짐
B : 3 사이클, 여기에서 시험 물질은 5 연속일들 동안 매일 투여되고 사이클들 사이에서 2일간의 휴지기를 가짐
처리 개시로부터 연구가 종결될 때까지 주당 2회 종양 크기 측정들을 기록하였다. 서로 다른 농도들에서 평가된 템시롤리무스 평균 종양 중량에 대하여 조합(아플리딘 및 템시롤리무스)에서의 두 약물들 사이에서의 평균 종양 중량을 비교하여 종양 성장 저해를 평가하였다.
모든 평가들에서 모든 동물군들에 대한 종양 용적에 대하여 평균, 표준편차 및 평균의 표준오차들이 결정되었다. 병용요법군들과 하나의 단일요법 처치군들 사이에 어떤 임의의 통계학적으로 명백한 차이점들이 존재하는 지의 여부를 결정하기 위하여 연구의 마지막에서를 포함하여 각 측정일에서의 종양 용적들에 대하여 스튜던트 티 검증을 수행하였다.
약효강화의 평가에 대한 정의 및 기준 그리고 상기 병용요법에 대한 가성성의 정도들은 실시예 1에 기술된 것과 동일하였다.
개개 마우스 체중 측정을 초기 체중(처치의 최초일)에 대하여 비교하는 것에 의하여 체중 효과들이 결정되었다. 20% 이상의 체중 손실의 NCI 활성 기준이 화합물 독성을 측정하는 데 사용되었다.
표 31은 처치들 각각에 대하여 수득된 %T/C 값들을 보고하고 있으며, 도 25 내지 26들은 대조군(비히클), 아플리딘, 템시롤리무스 또는 서로 다른 투여량들에서의 아플리딘 플러스 템시롤리무스로 처치된 마우스들 내에서의 MRI-H-121 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내고 있다.
| 군 | 일수에 대한 % T/C | |||||||||
| 12 | 15 | 19 | 22 | 27 | 30 | 34 | 37 | 40 | 47 | |
| G1 (대조군) |
- | - | - | - | - | - | - | - | - |
-
|
| G2 | 98.3 | 109.0 | 84.9 | 94.0 | 86.3 | 97.5 | 97.0 | 95.0 | 107.6 | 101.6 |
| G3 | 97.7 | 66.8 | 41.5 | 35.1 | 27.4 | 28.5 | 26.3 | 28.4 | 28.5 | 27.0 |
| G4 | 95.8 | 62.2 | 42.3 | 45.7 | 38.3 | 36.9 | 32.6 | 35.8 | 42.5 | 43.8 |
| G5 | 98.2 | 74.8 | 30.2 | 19.9 | 21.4 | 24.0 | 19.1 | 21.9 | 32.3 | 31.1 |
| G6 | 95.6 | 59.1 | 29.7 | 22.5 | 18.1 | 14.5 | 17.2 | 22.2 | 26.7 | 26.1 |
표 32는 아플리딘의 0.06㎎/㎏/일 및 템시롤리무스의 20㎎/㎏/일의 투여량으로 MRI-H-121 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 템시롤리무스의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 템시롤리무스와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의 정도 | ||
| G2 | G3 | G5 | |||||
| 12 | 1.7 | 2.3 | 1.8 | 4.0 | -2.2 | 아니오 | - |
| 15 | -9.0 | 33.2 | 25.2 | 24.2 | 1.0 | 아니오 | - |
| 19 | 15.1 | 58.5 | 69.8 | 73.6 | -3.8 | 예 | 부가보다 작음 |
| 22 | 6.0 | 64.9 | 80.1 | 70.9 | 9.2 | 예 | 부가 |
| 27 | 13.7 | 72.6 | 78.6 | 86.3 | -7.7 | 예 | 부가보다 작음 |
| 30 | 2.5 | 71.5 | 76.0 | 74.0 | 2.0 | 예 | 부가 |
| 34 | 3.0 | 73.7 | 80.9 | 76.7 | 4.2 | 예 | 부가 |
| 37 | 5.0 | 71.6 | 78.1 | 76.6 | 1.5 | 예 | 부가 |
| 40 | -7.6 | 71.5 | 67.7 | 63.9 | 3.8 | 아니오 | - |
| 47 | -1.6 | 73.0 | 68.9 | 71.4 | -2.5 | 아니오 | - |
표 33은 아플리딘의 0.06㎎/㎏/일 및 템시롤리무스의 10㎎/㎏/일의 투여량으로 MRI-H-121 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 템시롤리무스의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 템시롤리무스와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의 정도 | ||
| G2 | G3 | G5 | |||||
| 12 | 1.7 | 4.2 | 4.4 | 5.9 | -1.5 | 예 | 부가보다 작음 |
| 15 | -9.0 | 37.8 | 40.9 | 28.8 | 12.1 | 예 | 부가보다 큼 |
| 19 | 15.1 | 57.7 | 70.3 | 72.8 | -2.5 | 예 | 부가 |
| 22 | 6.0 | 54.3 | 77.5 | 60.3 | 17.2 | 예 | 부가보다 큼 |
| 27 | 13.7 | 61.7 | 81.9 | 75.4 | 6.5 | 예 | 부가 |
| 30 | 2.5 | 63.1 | 85.5 | 65.6 | 19.9 | 예 | 부가보다 큼 |
| 34 | 3.0 | 67.4 | 82.8 | 70.4 | 12.4 | 예 | 부가보다 큼 |
| 37 | 5.0 | 64.2 | 77.8 | 69.2 | 8.6 | 예 | 부가 |
| 40 | -7.6 | 57.5 | 73.3 | 49.9 | 23.4 | 예 | 부가보다 큼 |
| 47 | -1.6 | 56.2 | 73.9 | 54.6 | 19.3 | 예 | 부가보다 큼 |
MRI-H-121 이종이식 종양들은 본 실험에서 시험된 투여량, 투여의 스케쥴들 및 경로들에서 아플리딘 요법에 대하여 난치성이었다. 이종이식 종양들은 0.06㎎/㎏/일의 아플리딘 더하기(플러스) 20㎎/㎏/일의 템시롤리무스의 조합의 효과를 적절하기에 평가하기에는 너무 큰 활성을 제공하는 보다 높은 투여량과 함께 10㎎/㎏/일 및 20㎎/㎏/일으로 투여되는 템시롤리무스로의 치료에는 매우 민감하였다. 그러나, 0.06㎎/㎏/일의 아플리딘이 10㎎/㎏/일의 템시롤리무스와 조합되는 경우, 통계학적으로 명백한 활성의 약효강화가 관측되었다. 이 약효강화는 부가 보다 더 큰 것으로 결정되었다. 아플리딘 플러스 템시롤리무스의 치료학적 조합은 어떠한 부가의 독성의 증거 없이 마우스들에 대하여 잘 견디어졌다.
실시예 4. 인간 신장 종양 이종이식 CAKI-1에서의 템시롤리무스와의 조합에서의 아플리딘의 생체 내 연구
모든 실험들에 대하여 암컷 비흉선 누드 마우스들(미합중국 위스콘신주 매디슨 소재의 할란 스프라그 돌리)가 활용되었다. 마우스들이 6 내지 8주령이 되었을 때, 마우스들을 세포 현탁액들로 이식시켰다. 동물들을 환기되는 랙 케이징 내에 가두고, 음식물과 물을 자유식으로 사육하였다. 상기 마우스들을 종양 이식하기 전 적어도 5일 동안 순응시켰다. 비히클 대조군에는 15마리의 마우스들이 포함되고, 그리고 처치군들에는 그룹 당 10마리의 마우스들이 포함되었다. 본 연구에서 사용된 종양 모델은 CAKI-1이었고, 이는 실시예 2에서 기술된 동물들 내에 이식된 것이다.
실시예 1에서 기술한 바와 같이 종양 측정들이 결정되었다. 종양 성장이 140±34㎎(평균±표준편차)의 범위 이내가 되는 경우에, 랩캣® 인 라이프 모듈 브이 8.0 에스피1 종양 추적 및 측정 소프트웨어를 사용하는 것에 의하여 종양중량에 기초하여 마우스들을 처치군들과 대조군들로 불규칙하게 구분하였다.
CAKI-1-종양-함유 마우스들의 처치는 이식이후 일수(DPI) 21일에서 개시하였다. 처리일들 및 종양 크기들이 측정되는 경우에 체중들을 기록하였다. 상기 두 약물들이 동일자에 투여되는 경우에서의 일수들에 있어서는, 상기 병용요법군들을 상기 두 약물들을 치료들을 연속하는 시도 없이 동시에 공동-투여하는 것에 의하여 처치하였다.
아플리딘은 크레모포어 이엘/에탄올/물(CEW) 15/15/70으로 0.5㎎/㎖의 농도로 재조성된, 동결건조된 아플리딘 분말의 바이알들의 형태로 제공되었다. CEW 내의 상기 아플리딘 용액을 0.18/0.18/0.84의 CEW의 최종비율이 되도록 0.9% 염수로 투여량 제형 농도들로 희석시켰다.
템시롤리무스는 템시롤리무스의 비-수성의, 에탄올성의, 멸균 용액 25㎎/㎖을 함유하는 바이알들의 형태로 제공되었다. 이 용액을 폴리소르베이트 80(40중량/용적%), 폴리에틸렌글리콜400(42.8중량/용적%) 및 무수알코올(19.9중량/용적%)을 포함하는 희석용액으로 희석시켰다. 계속해서, 상기 용액을 투여량 제형 농도들로 0.9% 염수로 더 희석시켰다.
3개의 이종이식 모델들에 대한 연구군들 및 치료 식이요법들을 하기 표 34에 기재하였다.
| 군 | 동물들의 개체수(N) | 투여량 | 경로 | 스케쥴 | 시험 물질 |
| G1 (대조군) |
15 | 10㎖/㎏/일 10㎖/㎏/일 |
IP IP |
Qdx9x2 Qdx5x2 |
CEW (0.18/0.18/0.84) 0.9% 염수 |
| G2 | 10 | 0.060㎎/㎏/일 | IP | Qdx9x2 | 아플리딘 |
| G3 | 10 | 20㎎/㎏/일 | IP | Qdx5x2 | 템시롤리무스 |
| G4 | 10 | 10㎎/㎏/일 | IP | Qdx5x2 | 템시롤리무스 |
| G5 | 10 | 0.060㎎/㎏/일 20㎎/㎏/일 |
IP IP |
Qdx9x2 Qdx5x2 |
아플리딘 템시롤리무스 |
| G6 | 10 | 0.060㎎/㎏/일 10㎎/㎏/일 |
IP IP |
Qdx9x2 Qdx5x2 |
아플리딘 템시롤리무스 |
IP : 복강투여
Qdx9x2 : 2 사이클, 여기에서 시험 동물은 9 연속일들 동안 매일 투여되고 사이클들 사이에서 6일의 휴지기를 가짐
Qdx5x2 : 2 사이클, 여기에서 시험 동물은 5 연속일들 동안 매일 투여되고 사이클들 사이에서 4일의 휴지기를 가짐
처리 개시로부터 연구가 종결될 때까지 주당 2회 종양 크기 측정들을 기록하였다. 서로 다른 농도들에서 평가된 템시롤리무스 평균 종양 중량에 대하여 조합(아플리딘 및 템시롤리무스)에서의 두 약물들 사이에서의 평균 종양 중량을 비교하여 종양 성장 저해를 평가하였다.
모든 평가들에서 모든 동물군들에 대한 종양 용적에 대하여 평균, 표준편차 및 평균의 표준오차들이 결정되었다. 병용요법군들과 하나의 단일요법 처치군들 사이에 어떤 임의의 통계학적으로 명백한 차이점들이 존재하는 지의 여부를 결정하기 위하여 연구의 마지막에서를 포함하여 각 측정일에서의 종양 용적들에 대하여 스튜던트 티 검증을 수행하였다.
약효강화의 평가에 대한 정의 및 기준 그리고 상기 병용요법에 대한 가성성의 정도들은 실시예 1에 기술된 것과 동일하였다.
개개 마우스 체중 측정을 초기 체중(처치의 최초일)에 대하여 비교하는 것에 의하여 체중 효과들이 결정되었다. 20% 이상의 체중 손실의 NCI 활성 기준이 화합물 독성을 측정하는 데 사용되었다.
표 35(표 35a는 표 35의 계속)는 처치들 각각에 대하여 수득된 %T/C 값들을 보고하고 있으며, 도 27 및 28들은 대조군(비히클), 아플리딘, 템시롤리무스 또는 서로 다른 투여량들에서의 아플리딘 플러스 템시롤리무스로 처치된 마우스들 내에서의 CAKI-1 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내고 있다.
표 36은 아플리딘의 0.06㎎/㎏/일 및 템시롤리무스의 20㎎/㎏/일의 투여량으로 CAKI-1 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 템시롤리무스의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 템시롤리무스와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의 정도 | ||
| G2 | G3 | G5 | |||||
| 21 | 1.8 | 1.7 | 4.0 | 3.5 | 0.5 | 아니오 | - |
| 24 | 5.4 | 23.3 | 20.2 | 28.7 | -8.5 | 아니오 | - |
| 27 | 24.4 | 24.7 | 49.5 | 49.1 | 0.4 | 예 | 부가 |
| 30 | 34.0 | 53.0 | 55.8 | 87.0 | -31.2 | 예 | 부가보다 작음 |
| 34 | 19.0 | 57.8 | 48.9 | 76.8 | -27.9 | 아니오 | - |
| 38 | 8.9 | 52.0 | 57.5 | 60.9 | -3.4 | 예 | 부가 |
| 42 | 15.9 | 48.1 | 49.0 | 64.0 | -15.0 | 예 | 부가보다 작음 |
| 45 | 19.3 | 41.1 | 47.0 | 60.4 | -13.4 | 예 | 부가보다 작음 |
| 48 | 19.9 | 36.4 | 45.8 | 56.3 | -10.5 | 예 | 부가보다 작음 |
| 56 | 10.2 | 24.7 | 28.2 | 34.9 | -6.7 | 예 | 부가보다 작음 |
| 58 | 10.1 | 21.2 | 30.7 | 31.3 | -0.6 | 예 | 부가 |
표 37은 아플리딘의 0.06㎎/㎏/일 및 템시롤리무스의 10㎎/㎏/일의 투여량으로 CAKI-1 인간 신장 종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 템시롤리무스의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 템시롤리무스와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의 정도 | ||
| G2 | G4 | G6 | |||||
| 21 | 1.8 | 4.3 | 2.3 | 6.1 | -3.8 | 아니오 | - |
| 24 | 5.4 | 30.1 | 17.1 | 35.5 | -18.4 | 아니오 | - |
| 27 | 24.4 | 18.7 | 53.9 | 43.1 | 10.8 | 예 | 부가보다 큼 |
| 30 | 34.0 | 46.8 | 70.3 | 80.8 | -10.5 | 예 | 부가보다 작음 |
| 34 | 19.0 | 49.6 | 56.7 | 68.6 | -11.9 | 예 | 부가보다 작음 |
| 38 | 8.9 | 48.9 | 58.1 | 57.8 | 0.3 | 예 | 부가 |
| 42 | 15.9 | 39.7 | 55.1 | 55.6 | -0.5 | 예 | 부가 |
| 45 | 19.3 | 33.3 | 55.7 | 52.6 | 3.1 | 예 | 부가 |
| 48 | 19.9 | 33.8 | 47.2 | 53.7 | -6.5 | 예 | 부가보다 작음 |
| 56 | 10.2 | 26.6 | 35.0 | 36.8 | -1.8 | 예 | 부가보다 작음 |
| 58 | 10.1 | 23.5 | 36.7 | 33.6 | 3.1 | 예 | 부가 |
CAKI-1 인간 신장 종양 세포주에 대하여 아플리딘이 단일 제제(단일요법)로서 투여된 경우, 이는 비활성이었다. 게다가, 10㎎/㎏/일 및 20㎎/㎏/일의 투여량들에서의 단일 제제로서의 템시롤리무스로의 처치는 투여 반응에 기초하는 CAKI-1 세포주에 대하여 활성을 나타내기는 하였으나, 이는 활성에 대한 NCI 기준에 부합하지는 않았다. 게다가, 이들 처치들은 평균 체중에서 명백하게 감소하는 원인이 되지 않았으며, 모든 마우스들은 연구의 끝에서 체중이 증가하였다.
그러나, 0.060㎎/㎏/일의 투여량의 아플리딘이 10㎎/㎏/일의 투여량의 템시롤리무스와 조합되는 경우, 활성의 약효강화가 관측되어 종양 성장 저해의 부가의 약효강화 보다 더 큰 결과를 가져왔다. 게다가, 아플리딘의 템시롤리무스와의 조합은 체중에서의 수용가능한 감소를 야기하였으며, 또한 모든 마우스들은 본 연구의 끝에서 체중이 증가하였다.
실시예 5. 인간 비소세포폐암(NSCLC) 이종이식에서의 템시롤리무스와의 조합에서의 아플리딘의 생체 내 연구
모든 실험들에 대하여 암컷 비흉선 누드 마우스들(미합중국 위스콘신주 매디슨 소재의 할란 스프라그 돌리)가 활용되었다. 마우스들이 6 내지 8주령이 되었을 때, 마우스들을 세포 현탁액들로 이식시켰다. 동물들을 환기되는 랙 케이징 내에 가두고, 음식물과 물을 자유식으로 사육하였다. 상기 마우스들을 종양 이식하기 전 적어도 5일 동안 순응시켰다. 비히클 대조군에는 15마리의 마우스들이 포함되고, 그리고 처치군들에는 그룹 당 10마리의 마우스들이 포함되었다.
본 연구에서 사용된 종양 모델은 NCI-H-460이었고, 이는 미합중국 버지니아주 마나사스 소재 미국표준균주배양수록보존소(ATCC)로부터 획득한 인간 NSCLC 세포주이다. NCI-H-460 세포들을 RPMI-1640 배지, 10% 우태혈청, 10mM 헤페스(Hepes), 1mM 피루브산나트륨(sodium pyruvate), 4.5g/ℓ 글루코스(glucose), 1.5g/ℓ 중탄산나트륨(sodium bicarbonate) 및 2mM 엘-글루타민 내에서 성장시켰다. 시험관 내 경로 11로부터의 세포들을 23G의 바늘 및 1cc의 주사기를 사용하여 무항생제 또는 무혈청의 0.2㎖ 50% 매트리겔(Matrigel)/50% 배지 내의 5x106 세포/마우스로 피하적으로 연구용 마우스들에 이식시켰다. 이식을 위하여 준비된 상기 세포들의 분취량들에 대하여 세균배양들을 수행하였다. 모든 배양들은 이식 후 24시간 및 48시간 후에서의 세균 오염에 대하여 음성이었다.
실시예 1에서 기술한 바와 같이 종양 측정들이 결정되었다. 종양 성장이 110±25㎎(평균±표준편차)의 범위 이내가 되는 경우에, 랩캣® 인 라이프 모듈 브이 8.0 에스피1 종양 추적 및 측정 소프트웨어를 사용하는 것에 의하여 종양중량에 기초하여 마우스들을 처치군들과 대조군들로 불규칙하게 구분하였다.
NCI-H-460-종양-함유 마우스들의 처치는 이식이후 일수(DPI) 7일에서 개시하였다. 처리일들 및 종양 크기들이 측정되는 경우에 체중들을 기록하였다. 상기 두 약물들이 동일자에 투여되는 경우에서의 일수들에 있어서는, 상기 병용요법군들을 상기 두 약물들을 치료들을 연속하는 시도 없이 동시에 공동-투여하는 것에 의하여 처치하였다.
아플리딘은 크레모포어 이엘/에탄올/물(CEW) 15/15/70으로 0.5㎎/㎖의 농도로 재조성된, 동결건조된 아플리딘 분말의 바이알들의 형태로 제공되었다. CEW 내의 상기 아플리딘 용액을 0.18/0.18/0.84의 CEW의 최종비율이 되도록 0.9% 염수로 투여량 제형 농도들로 희석시켰다.
템시롤리무스는 템시롤리무스의 비-수성의, 에탄올성의, 멸균 용액 25㎎/㎖을 함유하는 바이알들의 형태로 제공되었다. 이 용액을 폴리소르베이트 80(40중량/용적%), 폴리에틸렌글리콜400(42.8중량/용적%) 및 무수알코올(19.9중량/용적%)을 포함하는 희석용액으로 희석시켰다. 계속해서, 상기 용액을 투여량 제형 농도들로 0.9% 염수로 더 희석시켰다.
3개의 이종이식 모델들에 대한 연구군들 및 치료 식이요법들을 하기 표 38에 기재하였다.
| 군 | 동물들의 개체수(N) | 투여량 | 경로 | 스케쥴 | 시험 물질 |
| G1 (대조군) |
15 | 10㎖/㎏/일 10㎖/㎏/일 |
IP IP |
Qdx9x2 Qdx5x2 |
CEW (0.18/0.18/0.84) 0.9% 염수 |
| G2 | 10 | 0.060㎎/㎏/일 | IP | Qdx9x2 | 아플리딘 |
| G3 | 10 | 20㎎/㎏/일 | IP | Qdx5x2 | 템시롤리무스 |
| G4 | 10 | 10㎎/㎏/일 | IP | Qdx5x2 | 템시롤리무스 |
| G5 | 10 | 0.060㎎/㎏/일 20㎎/㎏/일 |
IP IP |
Qdx9x2 Qdx5x2 |
아플리딘 템시롤리무스 |
| G6 | 10 | 0.060㎎/㎏/일 10㎎/㎏/일 |
IP IP |
Qdx9x2 Qdx5x2 |
아플리딘 템시롤리무스 |
IP : 복강투여
Qdx9x2 : 2 사이클, 여기에서 시험 동물은 9 연속일들 동안 매일 투여되고 사이클들 사이에서 5일의 휴지기를 가짐
Qdx5x2 : 2 사이클, 여기에서 시험 동물은 5 연속일들 동안 매일 투여되고 사이클들 사이에서 4일의 휴지기를 가짐
처리 개시로부터 연구가 종결될 때까지 주당 2회 종양 크기 측정들을 기록하였다. 서로 다른 농도들에서 평가된 템시롤리무스 평균 종양 중량에 대하여 조합(아플리딘 및 템시롤리무스)에서의 두 약물들 사이에서의 평균 종양 중량을 비교하여 종양 성장 저해를 평가하였다.
모든 평가들에서 모든 동물군들에 대한 종양 용적에 대하여 평균, 표준편차 및 평균의 표준오차들이 결정되었다. 병용요법군들과 하나의 단일요법 처치군들 사이에 어떤 임의의 통계학적으로 명백한 차이점들이 존재하는 지의 여부를 결정하기 위하여 연구의 마지막에서를 포함하여 각 측정일에서의 종양 용적들에 대하여 스튜던트 티 검증을 수행하였다.
약효강화의 평가에 대한 정의 및 기준 그리고 상기 병용요법에 대한 가성성의 정도들은 실시예 1에 기술된 것과 동일하였다.
개개 마우스 체중 측정을 초기 체중(처치의 최초일)에 대하여 비교하는 것에 의하여 체중 효과들이 결정되었다. 20% 이상의 체중 손실의 NCI 활성 기준이 화합물 독성을 측정하는 데 사용되었다.
표 39는 처치들 각각에 대하여 수득된 %T/C 값들을 보고하고 있으며, 도 29 및 30들은 대조군(비히클), 아플리딘, 템시롤리무스 또는 서로 다른 투여량들에서의 아플리딘 플러스 템시롤리무스로 처치된 마우스들 내에서의 NCI-H-460 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내고 있다.
| 군 | 일수에 대한 % T/C | ||||||||
| 7 | 10 | 13 | 16 | 20 | 23 | 27 | 29 | 31 | |
|
G1
(대조군) |
- | - | - | - | - | - | - | - | - |
| G2 | 101.2 | 95.5 | 73.2 | 77.4 | 88.5 | 84.3 | 86.4 | 96.9 | 96.0 |
| G3 | 98.2 | 41.2 | 30.5 | 30.9 | 26.3 | 27.4 | 35.6 | 48.2 | 56.8 |
| G4 | 102.1 | 49.9 | 37.1 | 34.1 | 30.9 | 31.4 | 42.6 | 57.8 | 60.3 |
| G5 | 99.2 | 50.3 | 31.5 | 29.5 | 26.9 | 25.2 | 30.2 | 37.1 | 41.5 |
| G6 | 101.8 | 46.4 | 32.2 | 23.3 | 23.9 | 22.5 | 25.5 | 29.8 | 35.1 |
표 40은 아플리딘의 0.06㎎/㎏/일 및 템시롤리무스의 20㎎/㎏/일의 투여량으로 NCI-H-460 인간 비소세포폐암 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 템시롤리무스의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 템시롤리무스와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의 정도 | ||
| G2 | G3 | G5 | |||||
| 7 | -1.2 | 1.8 | 0.8 | 0.6 | 0.2 | 아니오 | - |
| 10 | 4.5 | 58.8 | 49.7 | 63.3 | -13.6 | 아니오 | - |
| 13 | 26.8 | 69.5 | 68.5 | 96.3 | -27.8 | 아니오 | - |
| 16 | 22.6 | 69.1 | 70.5 | 91.7 | -21.2 | 아니오 | - |
| 20 | 11.5 | 73.7 | 73.1 | 85.2 | -12.1 | 아니오 | - |
| 23 | 15.7 | 72.6 | 74.8 | 88.3 | -13.5 | 예 | 부가보다 작음 |
| 27 | 13.6 | 64.4 | 69.8 | 78.0 | -8.2 | 예 | 부가보다 작음 |
| 29 | 3.1 | 51.8 | 62.9 | 54.9 | 8.0 | 예 | 부가보다 큼 |
| 31 | 4.0 | 43.2 | 58.5 | 47.2 | 11.3 | 예 | 부가보다 큼 |
표 41은 아플리딘의 0.06㎎/㎏/일 및 템시롤리무스의 10㎎/㎏/일의 투여량으로 NCI-H-460 인간 비소세포폐암 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 템시롤리무스의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 템시롤리무스와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의 정도 | ||
| G2 | G4 | G6 | |||||
| 7 | -1.2 | -2.1 | -1.8 | -3.3 | 1.5 | 아니오 | - |
| 10 | 4.5 | 50.1 | 53.6 | 54.6 | -1.0 | 예 | 부가보다 작음 |
| 13 | 26.8 | 62.9 | 67.8 | 89.7 | -21.9 | 예 | 부가보다 작음 |
| 16 | 22.6 | 65.9 | 76.7 | 88.5 | -11.8 | 예 | 부가보다 작음 |
| 20 | 11.5 | 69.1 | 76.1 | 80.6 | -4.5 | 예 | 부가보다 작음 |
| 23 | 15.7 | 68.6 | 77.5 | 84.3 | -6.8 | 예 | 부가보다 작음 |
| 27 | 13.6 | 57.4 | 74.5 | 71.0 | 3.5 | 예 | 부가 |
| 29 | 3.1 | 42.2 | 70.2 | 45.3 | 24.9 | 예 | 부가보다 큼 |
| 31 | 4.0 | 39.7 | 64.9 | 43.7 | 21.2 | 예 | 부가보다 큼 |
NCI-H-460 인간 비소세포폐암 세포주에 대하여 아플리딘이 단일 제제(단일요법)로서 투여된 경우, 이는 비활성이었다. 게다가, 10㎎/㎏/일 및 20㎎/㎏/일의 투여량들에서의 단일 제제로서의 템시롤리무스로의 처치는 활성에 대한 NCI 기준에 부합하는 NCI-H-460 세포주에 대한 활성을 나타내었다. 게다가, 이들 처치들은 평균 체중에서 명백하게 감소하는 원인이 되지 않았으며, 모든 마우스들은 연구의 끝에서 체중이 증가하였다.
그러나, 0.060㎎/㎏/일의 투여량의 아플리딘이 10㎎/㎏/일 및 20㎎/㎏/일의 투여량의 템시롤리무스와 조합되는 경우, 본 연구의 끝에서 활성의 약효강화가 관측되어 종양 성장 저해의 부가의 약효강화 보다 더 큰 결과를 가져왔다. 게다가, 아플리딘의 템시롤리무스와의 조합은 체중에서의 수용가능한 감소를 야기하였으며, 또한 모든 마우스들은 본 연구의 끝에서 체중이 증가하였다.
실시예 6. 인간 간종양 이종이식에서의 소라페니브와의 조합에서의 아플리딘의 생체 내 연구
모든 실험들에 대하여 암컷 비흉선 누드 마우스들(미합중국 위스콘신주 매디슨 소재의 할란 스프라그 돌리)가 활용되었다. 마우스들이 6 내지 8주령이 되었을 때, 마우스들을 세포 현탁액들로 이식시켰다. 동물들을 환기되는 랙 케이징 내에 가두고, 음식물과 물을 자유식으로 사육하였다. 상기 마우스들을 종양 이식하기 전 적어도 5일 동안 순응시켰다. 비히클 대조군에는 15마리의 마우스들이 포함되고, 그리고 처치군들에는 그룹 당 9마리의 마우스들이 포함되었다.
본 연구에서 사용된 종양 모델은 HepG2이었고, 이는 미합중국 버지니아주 마나사스 소재 미국표준균주배양수록보존소(ATCC)로부터 획득한 인간 간종양 세포주이다. HepG2 세포들을 최소필수배지, 10% 우태혈청, 1.5g/ℓ 중탄산나트륨, 0.1mM 비-필수 아미노산들(non-essential amino acids), 1.0mM 피루브산나트륨 및 2mM 엘-글루타민 내에서 성장시켰다. 시험관 내 경로 4-20으로부터의 세포들을 23G의 바늘 및 1cc의 주사기를 사용하여 무항생제 또는 무혈청의 0.2㎖ 50% 매트리겔/50% 배지 내의 5x106 세포/마우스로 피하적으로 연구용 마우스들에 이식시켰다. 이식을 위하여 준비된 상기 세포들의 분취량들에 대하여 세균배양들을 수행하였다. 모든 배양들은 이식 후 24시간 및 48시간 후에서의 세균 오염에 대하여 음성이었다.
실시예 1에서 기술한 바와 같이 종양 측정들이 결정되었다. 종양 성장이 130±44㎎(평균±표준편차)의 범위 이내가 되는 경우에, 랩캣® 인 라이프 모듈 브이 8.0 에스피1 종양 추적 및 측정 소프트웨어를 사용하는 것에 의하여 종양중량에 기초하여 마우스들을 처치군들과 대조군들로 불규칙하게 구분하였다.
HepG2-종양-함유 마우스들의 처치는 이식이후 일수(DPI) 19일에서 개시하였다. 처리일들 및 종양 크기들이 측정되는 경우에 체중들을 기록하였다. 상기 두 약물들이 동일자에 투여되는 경우에서의 일수들에 있어서는, 상기 병용요법군들을 상기 두 약물들을 치료들을 연속하는 시도 없이 동시에 공동-투여하는 것에 의하여 처치하였다.
아플리딘은 크레모포어 이엘/에탄올/물(CEW) 15/15/70으로 0.5㎎/㎖의 농도로 재조성된, 동결건조된 아플리딘 분말의 바이알들의 형태로 제공되었다. CEW 내의 상기 아플리딘 용액을 0.18/0.18/0.84의 CEW의 최종비율이 되도록 0.9% 염수로 투여량 제형 농도들로 희석시켰다.
소라페니브는 그의 토실화 염의 형태의 소라페니브를 포함하는 200㎎의 적색으로 착색된 정제의 형태로 제공되었다. 상기 소라페니브 용액은 상기 정제를 50㎎/㎖의 농도로 크레모포어 이엘/에탄올(50/50) 내에 용해시키는 것에 의하여 제조되었다. 계속해서 상기 용액을 주사용수(wfi) 내에서 (12.5, 12.5, 75)의 CEW의 최종 비율로 희석시켰다. CEW 내의 상기 소라페니브 용액을 투여량 제형 농도들로 주사용수에서 희석시켰다.
3개의 이종이식 모델들에 대한 연구군들 및 치료 식이요법들을 하기 표 42에 기재하였다.
| 군 | 동물들의 개체수(N) | 투여량 | 경로 | 스케쥴 | 시험 물질 |
| G1 (대조군) |
15 | 10㎖/㎏/일 10㎖/㎏/일 |
IV PO |
A B |
0.18% 염수 내 위약 CEW (12.5/12.5/75) |
| G2 | 9 | 0.060㎎/㎏/일 | IP | C | 아플리딘 |
| G3 | 9 | 60㎎/㎏/일 | PO | B | 소라페니브 |
| G4 | 9 | 30㎎/㎏/일 | PO | B | 소라페니브 |
| G5 | 9 | 0.060㎎/㎏/일 60㎎/㎏/일 |
IP PO |
C B |
아플리딘 소라페니브 |
| G6 | 9 | 0.060㎎/㎏/일 30㎎/㎏/일 |
IP PO |
C B |
아플리딘 소라페니브 |
IP : 복강투여; PO : 경구투여; IV : 정맥 내 투여
A : 이식이후 일수 19, 26 및 33; B : 이식이후 일수 19 내지 34; C : 이식이후 일수 : 19 내지 27
위약(플라시보) : 500㎎ 슈크로스 + 34㎎ 인산칼륨(potassium phosphate) + 인산(phosphoric acid) 충분량(q.s.) pH 3.8 내지 4.4
처리 개시로부터 연구가 종결될 때까지 주당 2회 종양 크기 측정들을 기록하였다. 서로 다른 농도들에서 평가된 소라페니브 평균 종양 중량에 대하여 조합(아플리딘 및 소라페니브)에서의 두 약물들 사이에서의 평균 종양 중량을 비교하여 종양 성장 저해를 평가하였다.
모든 평가들에서 모든 동물군들에 대한 종양 용적에 대하여 평균, 표준편차 및 평균의 표준오차들이 결정되었다. 병용요법군들과 하나의 단일요법 처치군들 사이에 어떤 임의의 통계학적으로 명백한 차이점들이 존재하는 지의 여부를 결정하기 위하여 연구의 마지막에서를 포함하여 각 측정일에서의 종양 용적들에 대하여 스튜던트 티 검증을 수행하였다.
약효강화의 평가에 대한 정의 및 기준 그리고 상기 병용요법에 대한 가성성의 정도들은 실시예 1에 기술된 것과 동일하였다.
개개 마우스 체중 측정을 초기 체중(처치의 최초일)에 대하여 비교하는 것에 의하여 체중 효과들이 결정되었다. 20% 이상의 체중 손실의 NCI 활성 기준이 화합물 독성을 측정하는 데 사용되었다.
표 43은 처치들 각각에 대하여 수득된 %T/C 값들을 보고하고 있으며, 도 31 및 32들은 대조군(비히클), 아플리딘, 소라페니브 또는 서로 다른 투여량들에서의 아플리딘 플러스 소라페니브로 처치된 마우스들 내에서의 HepG2 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내고 있다.
| 군 | 일수에 대한 % T/C | ||||
| 19 | 22 | 26 | 30 | 33 | |
| G1 (대조군) |
- | - | - | - | - |
| G2 | 95.9 | 97.0 | 66.7 | 76.9 | 91.0 |
| G3 | 88.8 | 78.7 | 60.1 | 61.8 | 66.2 |
| G4 | 101.4 | 123.5 | 91.3 | 100.9 | 90.4 |
| G5 | 97.1 | 97.2 | 69.1 | 66.1 | 62.5 |
| G6 | 94.6 | 90.9 | 62.8 | 61.6 | 58.9 |
표 44는 아플리딘의 0.06㎎/㎏/일 및 소라페니브의 60㎎/㎏/일의 투여량으로 HepG2 인간 간종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 소라페니브의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 소라페니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의 정도 | ||
| G2 | G3 | G5 | |||||
| 19 | 4.1 | 11.2 | 2.9 | 15.3 | -12.4 | 아니오 | - |
| 22 | 3.0 | 21.3 | 2.8 | 24.3 | -21.5 | 아니오 | - |
| 26 | 33.3 | 39.9 | 30.9 | 73.2 | -42.3 | 아니오 | - |
| 30 | 23.1 | 38.2 | 33.9 | 61.3 | -27.4 | 아니오 | - |
| 33 | 9.0 | 33.8 | 37.5 | 42.8 | -5.3 | 예 | 부가보다 작음 |
표 45는 아플리딘의 0.06㎎/㎏/일 및 소라페니브의 30㎎/㎏/일의 투여량으로 HepG2 인간 간종양 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 소라페니브의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 소라페니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의 정도 | ||
| G2 | G4 | G6 | |||||
| 19 | 4.1 | -1.4 | 5.4 | 2.7 | 2.7 | 예 | 부가 |
| 22 | 3.0 | -23.5 | 9.1 | -20.5 | 29.6 | 예 | 부가보다 큼 |
| 26 | 33.3 | 8.7 | 37.2 | 42.0 | -4.8 | 예 | 부가 |
| 30 | 23.1 | -0.9 | 38.4 | 22.2 | 16.2 | 예 | 부가보다 큼 |
| 33 | 9.0 | 9.6 | 41.1 | 18.6 | 22.5 | 예 | 부가보다 큼 |
HepG2 인간 간종양 세포주에 대하여 아플리딘 및 소라페니브들이 단일 제제(단일요법)로서 투여된 경우, 이들은 비활성이었다. 게다가, 이들 처치들은 평균 체중에서 명백하게 감소하는 원인이 되지 않았다.
그러나, 0.060㎎/㎏/일의 투여량의 아플리딘이 30㎎/㎏/일의 투여량의 소라페니브와 조합되는 경우, 활성의 약효강화가 관측되어 종양 성장 저해의 부가의 약효강화 보다 더 큰 결과를 가져왔다. 게다가, 아플리딘의 소라페니브와의 조합은 체중에서의 수용가능한 감소를 야기하였다.
실시예 7. 인간 흑색종 이종이식에서의 소라페니브와의 조합에서의 아플리딘의 생체 내 연구
모든 실험들에 대하여 암컷 비흉선 누드 마우스들(미합중국 위스콘신주 매디슨 소재의 할란 스프라그 돌리)가 활용되었다. 마우스들이 6 내지 8주령이 되었을 때, 마우스들을 종양 단편으로 이식시켰다. 동물들을 환기되는 랙 케이징 내에 가두고, 음식물과 물을 자유식으로 사육하였다. 상기 마우스들을 종양 이식하기 전 적어도 5일 동안 순응시켰다. 비히클 대조군에는 15마리의 마우스들이 포함되고, 그리고 처치군들에는 그룹 당 10마리의 마우스들이 포함되었다.
본 연구에서 사용된 종양 모델은 LOX-IMVI이었고, 이는 미국 국립암연구소(National Cancer Institute ; NCI)의 발달치료학부(Department of Developmental Therapeutics)로부터 획득한 인간 흑색종 세포주이다. 적심제로서 멸균의 얼의 평형 염액을 사용하여, 생체 내 이식가능 라인 경로 1로부터 13게이지(13 gauge)의 투관침을 사용하여 2㎣의 LOX-IMVI의 조직 종양 단편들로 우측 옆구리 상에 피하적으로(SC) 동물들을 이식시켰다. 이식 시에 취해진 세균배양은 이식 후 24시간 및 48시간 후에서의 오염에 대하여 음성이었다.
실시예 1에서 기술한 바와 같이 종양 측정들이 결정되었다. 종양 성장이 130±44㎎(평균±표준편차)의 범위 이내가 되는 경우에, 랩캣® 인 라이프 모듈 브이 8.0 에스피1 종양 추적 및 측정 소프트웨어를 사용하는 것에 의하여 종양중량에 기초하여 마우스들을 처치군들과 대조군들로 불규칙하게 구분하였다.
LOX-IMVI-종양-함유 마우스들의 처치는 이식이후 일수(DPI) 11일에서 개시하였다. 처리일들 및 종양 크기들이 측정되는 경우에 체중들을 기록하였다. 상기 두 약물들이 동일자에 투여되는 경우에서의 일수들에 있어서는, 상기 병용요법군들을 상기 두 약물들을 치료들을 연속하는 시도 없이 동시에 공동-투여하는 것에 의하여 처치하였다.
아플리딘은 크레모포어 이엘/에탄올/물(CEW) 15/15/70으로 0.5㎎/㎖의 농도로 재조성된, 동결건조된 아플리딘 분말의 바이알들의 형태로 제공되었다. CEW 내의 상기 아플리딘 용액을 0.18/0.18/0.84의 CEW의 최종비율이 되도록 0.9% 염수로 투여량 제형 농도들로 희석시켰다.
소라페니브는 그의 토실화 염의 형태의 소라페니브를 포함하는 200㎎의 적색으로 착색된 정제의 형태로 제공되었다. 상기 소라페니브 용액은 상기 정제를 50㎎/㎖의 농도로 크레모포어 이엘/에탄올(50/50) 내에 용해시키는 것에 의하여 제조되었다. 계속해서 상기 용액을 주사용수(wfi) 내에서 (12.5, 12.5, 75)의 CEW의 최종 비율로 희석시켰다. CEW 내의 상기 소라페니브 용액을 투여량 제형 농도들로 주사용수에서 희석시켰다.
3개의 이종이식 모델들에 대한 연구군들 및 치료 식이요법들을 하기 표 46에 기재하였다.
| 군 | 동물들의 개체수(N) | 투여량 | 경로 | 스케쥴 | 시험 물질 |
| G1 (대조군) |
15 | 10㎖/㎏/일 10㎖/㎏/일 |
IP PO |
A B |
CEW (0.18/0.18/0.84) CEW (12.5/12.5/75) |
| G2 | 10 | 0.060㎎/㎏/일 | IP | A | 아플리딘 |
| G3 | 10 | 60㎎/㎏/일 | PO | B | 소라페니브 |
| G4 | 10 | 30㎎/㎏/일 | PO | B | 소라페니브 |
| G5 | 10 | 0.060㎎/㎏/일 60㎎/㎏/일 |
IP PO |
A B |
아플리딘 소라페니브 |
| G6 | 10 | 0.060㎎/㎏/일 30㎎/㎏/일 |
IP PO |
A B |
아플리딘 소라페니브 |
IP : 복강투여; PO : 경구투여;
A : 이식이후 일수 11 내지 19; B : 이식이후 일수 11 내지 2534
처리 개시로부터 연구가 종결될 때까지 주당 2회 종양 크기 측정들을 기록하였다. 서로 다른 농도들에서 평가된 소라페니브 평균 종양 중량에 대하여 조합(아플리딘 및 소라페니브)에서의 두 약물들 사이에서의 평균 종양 중량을 비교하여 종양 성장 저해를 평가하였다.
모든 평가들에서 모든 동물군들에 대한 종양 용적에 대하여 평균, 표준편차 및 평균의 표준오차들이 결정되었다. 병용요법군들과 하나의 단일요법 처치군들 사이에 어떤 임의의 통계학적으로 명백한 차이점들이 존재하는 지의 여부를 결정하기 위하여 연구의 마지막에서를 포함하여 각 측정일에서의 종양 용적들에 대하여 스튜던트 티 검증을 수행하였다.
약효강화의 평가에 대한 정의 및 기준 그리고 상기 병용요법에 대한 가성성의 정도들은 실시예 1에 기술된 것과 동일하였다.
개개 마우스 체중 측정을 초기 체중(처치의 최초일)에 대하여 비교하는 것에 의하여 체중 효과들이 결정되었다. 20% 이상의 체중 손실의 NCI 활성 기준이 화합물 독성을 측정하는 데 사용되었다.
표 47은 처치들 각각에 대하여 수득된 %T/C 값들을 보고하고 있으며, 도 33 및 34들은 대조군(비히클), 아플리딘, 소라페니브 또는 서로 다른 투여량들에서의 아플리딘 플러스 소라페니브로 처치된 마우스들 내에서의 LOX-IMVI 종양들의 종양 중량 발달(평균±표준오차)을 나타내고 있다.
| 군 | 일수에 대한 % T/C | |||||
| 11 | 14 | 18 | 20 | 22 | 22 | |
| G1 (대조군) |
- | - | - | - | - | - |
| G2 | 102.9 | 82.9 | 79.3 | 98.5 | 102.0 | 105.4 |
| G3 | 98.6 | 101.2 | 77.7 | 71.7 | 64.8 | 73.3 |
| G4 | 102.1 | 96.9 | 77.4 | 75.9 | 77.3 | 93.4 |
| G5 | 100.9 | 80.0 | 53.9 | 52.0 | 57.9 | 64.9 |
| G6 | 97.3 | 76.7 | 51.5 | 51.3 | 65.6 | 82.7 |
표 48은 아플리딘의 0.06㎎/㎏/일 및 소라페니브의 60㎎/㎏/일의 투여량으로 LOX-IMVI 인간 흑색종 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 소라페니브의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 소라페니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의 정도 | ||
| G2 | G3 | G5 | |||||
| 11 | -2.9 | 1.4 | -0.9 | -1.5 | 0.6 | 아니오 | - |
| 14 | 17.1 | -1.2 | 20.0 | 15.9 | 4.1 | 예 | 부가 |
| 18 | 20.7 | 22.3 | 46.1 | 43.0 | 3.1 | 예 | 부가 |
| 20 | 1.5 | 28.3 | 48.0 | 29.8 | 18.2 | 예 | 부가보다 큼 |
| 22 | -2.0 | 35.2 | 42.1 | 33.2 | 8.9 | 예 | 부가보다 큼 |
| 25 | -5.4 | 26.7 | 35.1 | 21.3 | 13.8 | 예 | 부가보다 큼 |
표 49는 아플리딘의 0.06㎎/㎏/일 및 소라페니브의 30㎎/㎏/일의 투여량으로 LOX-IMVI 인간 흑색종 이종이식에 대하여 단일제제들로서 그리고 조합으로서 투여된 아플리딘 및 소라페니브의 종양 성장 저해의 백분율을 나타내고 있다. 게다가, 상기 투여량들에서의 아플리딘의 소라페니브와의 조합에서의 약효강화 및 가성성의 정도가 제공되었다.
| 일수 | 저해 % |
예기된
반응 |
실제
반응 |
약효
강화 |
반응의 정도 | ||
| G2 | G4 | G6 | |||||
| 11 | -2.9 | -2.1 | 2.7 | -5.0 | 7.7 | 예 | 부가 |
| 14 | 17.1 | 3.1 | 23.3 | 20.2 | 3.1 | 예 | 부가 |
| 18 | 20.7 | 22.6 | 48.5 | 43.3 | 5.2 | 예 | 부가 |
| 20 | 1.5 | 24.1 | 48.7 | 25.6 | 23.1 | 예 | 부가보다 큼 |
| 22 | -2.0 | 22.7 | 34.4 | 20.7 | 13.7 | 예 | 부가보다 큼 |
| 25 | -5.4 | 6.6 | 17.3 | 1.2 | 16.1 | 예 | 부가보다 큼 |
LOX-IMVI 인간 흑색종 세포주에 대하여 아플리딘 및 소라페니브들이 단일 제제(단일요법)로서 투여된 경우, 이들은 비활성이었다. 게다가, 이들 처치들은 평균 체중에서 명백하게 감소하는 원인이 되지 않았으며, 모든 마우스들은 본 연구의 끝에서 체중이 증가되었다.
그러나, 0.060㎎/㎏/일의 투여량의 아플리딘이 30㎎/㎏/일 및 60㎎/㎏/일의 투여량의 소라페니브와 조합되는 경우, 활성의 약효강화가 관측되어 종양 성장 저해의 부가의 약효강화 보다 더 큰 결과를 가져왔다. 게다가, 아플리딘의 소라페니브와의 조합은 체중에서의 수용가능한 감소를 야기하였으며, 모든 마우스들은 본 연구의 끝에서 체중이 증가되었다.
Claims (15)
- 암의 치료를 필요로 하는 환자에게 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 치료학적으로 유효한 양 및 소라페니브, 템시롤리무스, 및 수니티니브 로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 치료학적으로 유효한 양을 투여하는 것을 포함하는 암을 치료하는 방법.
- 암의 치료를 필요로 하는 환자에게 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 치료학적으로 유효한 양을 투여하는 것을 포함하는, 암의 치료에 있어서 소라페니브, 템시롤리무스 및 수니티니브들로부터 선택되는 항암제의 치료 효능을 강화시키는 방법.
- 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염, 및 소라페니브, 템시롤리무스 및 수니티니브들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들이 동일한 조성물의 일부를 형성하는 것을 특징으로 하는 방법. - 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염, 및 소라페니브, 템시롤리무스 및 수니티니브들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들이 동시에 투여되거나 또는 서로 다른 시간에 투여되기 위한 별도의 조성물들로서 제공되는 것을 특징으로 하는 방법. - 제 4 항에 있어서,
아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염, 및 소라페니브, 템시롤리무스 및 수니티니브들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들이 서로 다른 시간에 투여되기 위한 별도의 조성물들로서 제공되는 것을 특징으로 하는 방법. - 전술한 항 들 중 어느 하나의 항에 있어서,
아플리딘과 조합되는 상기 항암제가 소라페니브 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염임을 특징으로 하는 방법. - 제 1 항 내지 제 5 항들 중의 어느 하나의 항에 있어서,
아플리딘과 조합되는 상기 항암제가 템시롤리무스 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염임을 특징으로 하는 방법. - 제 1 항 내지 제 5 항들 중의 어느 하나의 항에 있어서,
아플리딘과 조합되는 상기 항암제가 수니티니브 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염임을 특징으로 하는 방법. - 전술한 항 들 중 어느 하나의 항에 있어서,
치료되어야 할 암이 신장 암종, 간암종, 흑색종, 유방암, 폐암, 췌장암, 신경아세포종 및 간질성 종양(GIST)들로부터 선택되는 것임을 특징으로 하는 방법. - 청구항 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 하나의 항에 따른 방법을 위한 약물의 제조를 위한 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 용도.
- 청구항 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 하나의 항에 따른 방법을 위한 약물의 제조를 위한 소라페니브, 템시롤리무스 및 수니티니브들로부터 선택되는 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 용도.
- 청구항 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 하나의 항에 따른 방법을 위한 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염.
- 청구항 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 하나의 항에 따른 방법을 위한 소라페니브, 템시롤리무스 및 수니티니브들로부터 선택되는 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염.
- 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염, 및 소라페니브, 템시롤리무스 및 수니티니브들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들을 포함하는 약제학적 조성물.
- 아플리딘 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 투여 제형, 소라페니브, 템시롤리무스 및 수니티니브들로부터 선택되는 다른 항암제 또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염들의 투여 제형 및 이들 두 약물의 병용시의 지침 내용을 포함하여 이루어지는, 암 치료용 키트.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US3487008P | 2008-03-07 | 2008-03-07 | |
| US61/034,870 | 2008-03-07 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20100131474A true KR20100131474A (ko) | 2010-12-15 |
Family
ID=40626851
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020107022267A KR20100131474A (ko) | 2008-03-07 | 2009-03-06 | 개선된 항암치료 |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20110009335A1 (ko) |
| EP (1) | EP2262523A1 (ko) |
| JP (1) | JP2011513429A (ko) |
| KR (1) | KR20100131474A (ko) |
| CN (1) | CN101965191A (ko) |
| AU (1) | AU2009221720A1 (ko) |
| CA (1) | CA2717409A1 (ko) |
| IL (1) | IL208001A0 (ko) |
| MX (1) | MX2010009697A (ko) |
| RU (1) | RU2010140888A (ko) |
| WO (1) | WO2009111698A1 (ko) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20130094901A (ko) * | 2012-02-17 | 2013-08-27 | 주식회사 보타메디 | 항암치료 효과 증강용 조성물 |
| KR101895418B1 (ko) * | 2017-03-13 | 2018-09-05 | 건국대학교 글로컬산학협력단 | 에모딘을 포함하는 소라페니브의 암 치료 효과 증강용 조성물 |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102626412B (zh) * | 2012-03-23 | 2014-01-15 | 武汉大学 | 一种治疗恶性肿瘤的药物组合物 |
| JOP20190254A1 (ar) | 2017-04-27 | 2019-10-27 | Pharma Mar Sa | مركبات مضادة للأورام |
Family Cites Families (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4950649A (en) * | 1980-09-12 | 1990-08-21 | University Of Illinois | Didemnins and nordidemnins |
| US4493796A (en) * | 1980-09-12 | 1985-01-15 | Board Of Trustees, Univ. Of Ill. | Didemnins A, B, C, and derivatives thereof, as antiviral agents |
| IT1153974B (it) * | 1982-09-23 | 1987-01-21 | Erba Farmitalia | Composizioni farmacologiche a base di cisplatino e metodo per il loro ottenimento |
| ATE74761T1 (de) * | 1985-09-20 | 1992-05-15 | Cernitin Sa | Verwendung von pflanzenpollenextrakten zur herstellung von das wachstum von tumorzellen hemmenden pharmazeutischen praeparaten und verfahren zu ihrer herstellung. |
| US20030148933A1 (en) * | 1990-10-01 | 2003-08-07 | Pharma Mar S.A. | Derivatives of dehydrodidemnin B |
| GB8922026D0 (en) * | 1989-09-29 | 1989-11-15 | Pharma Mar Sa | Novel anti-viral and cytotoxic agent |
| US5580871A (en) * | 1992-11-20 | 1996-12-03 | The Dupont Merck Pharmaceutical Company | 4-Heteroaryl- 1,4-dihydropyridine compounds with calcium agonist and alpha1 -antagonist activity |
| US5462726A (en) * | 1993-12-17 | 1995-10-31 | Bristol-Myers Squibb Company | Method of inhibiting side effects of solvents containing ricinoleic acid or castor oil or derivatives thereof employing a thromboxane A2 receptor antagonist and pharmaceutical compositions containing such solvents |
| US6156724A (en) * | 1996-06-07 | 2000-12-05 | Rinehart; Kenneth L. | Uses of didemnins as immunomodulating agents |
| US6034058A (en) * | 1997-04-15 | 2000-03-07 | Rinehart; Kenneth L. | Semi-synthetic alanyl dilemnin analogs |
| DE69840497D1 (de) * | 1997-05-07 | 2009-03-12 | William J Crumb | Verwendung von Aplidine zur Behandlung von kardiovaskulären Erkrankungen |
| US6245759B1 (en) * | 1999-03-11 | 2001-06-12 | Merck & Co., Inc. | Tyrosine kinase inhibitors |
| ATE363910T1 (de) * | 1999-11-15 | 2007-06-15 | Pharma Mar Sa | Behandlung von krebserkrankungen durch aplidin |
| WO2001076616A1 (en) * | 2000-04-07 | 2001-10-18 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Tamandarin and didemnin analogs and methods of making and using them |
| UA76718C2 (uk) * | 2000-06-30 | 2006-09-15 | Фарма Мар, С.А. | Протипухлинні похідні аплідину |
| BR0114604A (pt) * | 2000-10-12 | 2003-10-14 | Pharma Mar Sa | Tratamento de cnceres |
| PT1435991E (pt) * | 2001-10-19 | 2009-01-16 | Pharma Mar Sa | Utilização de aplidina para o tratamento de cancro pancreático |
| KR20060002778A (ko) * | 2003-03-12 | 2006-01-09 | 파르마 마르, 에스.에이. | 개선된 항종양 치료 |
| AU2004218883B2 (en) * | 2003-03-12 | 2009-10-01 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Aplidine for multiple myeloma treatment |
| ES2575518T3 (es) * | 2006-02-28 | 2016-06-29 | Pharma Mar S.A. | Tratamiento mejorado de mieloma múltiple |
| AU2008313627A1 (en) * | 2007-10-19 | 2009-04-23 | Pharma Mar, S.A. | Improved antitumoral treatments |
-
2009
- 2009-03-06 CN CN2009801081361A patent/CN101965191A/zh active Pending
- 2009-03-06 JP JP2010549907A patent/JP2011513429A/ja active Pending
- 2009-03-06 AU AU2009221720A patent/AU2009221720A1/en not_active Abandoned
- 2009-03-06 US US12/920,427 patent/US20110009335A1/en not_active Abandoned
- 2009-03-06 WO PCT/US2009/036327 patent/WO2009111698A1/en active Application Filing
- 2009-03-06 RU RU2010140888/15A patent/RU2010140888A/ru not_active Application Discontinuation
- 2009-03-06 KR KR1020107022267A patent/KR20100131474A/ko not_active Application Discontinuation
- 2009-03-06 EP EP09716290A patent/EP2262523A1/en not_active Withdrawn
- 2009-03-06 MX MX2010009697A patent/MX2010009697A/es not_active Application Discontinuation
- 2009-03-06 CA CA2717409A patent/CA2717409A1/en not_active Abandoned
-
2010
- 2010-09-05 IL IL208001A patent/IL208001A0/en unknown
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20130094901A (ko) * | 2012-02-17 | 2013-08-27 | 주식회사 보타메디 | 항암치료 효과 증강용 조성물 |
| KR101895418B1 (ko) * | 2017-03-13 | 2018-09-05 | 건국대학교 글로컬산학협력단 | 에모딘을 포함하는 소라페니브의 암 치료 효과 증강용 조성물 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IL208001A0 (en) | 2010-12-30 |
| RU2010140888A (ru) | 2012-04-20 |
| WO2009111698A1 (en) | 2009-09-11 |
| CA2717409A1 (en) | 2009-09-11 |
| AU2009221720A1 (en) | 2009-09-11 |
| CN101965191A (zh) | 2011-02-02 |
| EP2262523A1 (en) | 2010-12-22 |
| JP2011513429A (ja) | 2011-04-28 |
| US20110009335A1 (en) | 2011-01-13 |
| MX2010009697A (es) | 2010-09-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR101512503B1 (ko) | 개선된 항종양 치료 | |
| KR20210107069A (ko) | 항체-약물 컨쥬게이트와 키나아제 저해제의 조합 | |
| CN106860870B (zh) | 抗肿瘤生物碱的联合治疗 | |
| TW200803842A (en) | Antineoplastic combinations of temsirolimus and sunitinib malate | |
| US20220175706A1 (en) | Calcium lactate compositions and methods of use | |
| US20090227490A1 (en) | Antitumoral Treatments | |
| PT1615640E (pt) | Combinações antineoplásticas | |
| KR20100126479A (ko) | 개선된 항종양 치료법들 | |
| US20110070232A1 (en) | Combination Therapy with an Antitumor Alkaloid | |
| KR20210008527A (ko) | 비스플루오로알킬-1,4-벤조디아제피논 화합물을 포함하는 조성물 및 이의 사용 방법 | |
| KR20100131474A (ko) | 개선된 항암치료 | |
| KR20210010524A (ko) | 샘낭암종을 치료하기 위한 비스플루오로알킬-1,4-벤조디아제피논 화합물을 포함하는 조성물 | |
| EP3999062A1 (en) | Treatment of urothelial and kidney cancers by use of endothelin b receptor antagonists | |
| US20100240595A1 (en) | Improved Antitumoral Treatments | |
| WO2008135793A1 (en) | Combination of aplidine and carboplatin in anticancer treatments | |
| US20210393601A1 (en) | Ezh1/2 dual inhibitor-containing pharmaceutical composition to be used as a combination drug | |
| TWI841481B (zh) | 乳酸鈣組成物及使用方法 | |
| CA3141072A1 (en) | Methods and uses for treating cancer | |
| WO2019106424A1 (en) | Dianhydrogalactitol for the treatment of diffuse intrinsic pontine gliomas | |
| Sorbera et al. | Deforolimus |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| WITN | Application deemed withdrawn, e.g. because no request for examination was filed or no examination fee was paid |