NO329931B1 - Kondenserte heterocykliske suksinimidforbindelser og analoger derav, farmasoytiske blandinger omfattende slike, slike forbindelser for bruk som medikament samt slike forbindelser for behandling av sykdom - Google Patents

Kondenserte heterocykliske suksinimidforbindelser og analoger derav, farmasoytiske blandinger omfattende slike, slike forbindelser for bruk som medikament samt slike forbindelser for behandling av sykdom Download PDF

Info

Publication number
NO329931B1
NO329931B1 NO20031266A NO20031266A NO329931B1 NO 329931 B1 NO329931 B1 NO 329931B1 NO 20031266 A NO20031266 A NO 20031266A NO 20031266 A NO20031266 A NO 20031266A NO 329931 B1 NO329931 B1 NO 329931B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
epoxy
isoindole
dione
methyl
hexahydro
Prior art date
Application number
NO20031266A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20031266L (no
NO20031266D0 (no
Inventor
Mark Ernest Salvati
James A Balog
Dacia A Pickering
Soeren Giese
Aberra Fura
Wenying Li
Ramesh N Patel
Ronald L Hanson
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Publication of NO20031266D0 publication Critical patent/NO20031266D0/no
Publication of NO20031266L publication Critical patent/NO20031266L/no
Publication of NO329931B1 publication Critical patent/NO329931B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/08—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/08—Bridged systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/407—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with other heterocyclic ring systems, e.g. ketorolac, physostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/655—Azo (—N=N—), diazo (=N2), azoxy (>N—O—N< or N(=O)—N<), azido (—N3) or diazoamino (—N=N—N<) compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/675—Phosphorus compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pyridoxal phosphate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/10—Anti-acne agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/14—Drugs for dermatological disorders for baldness or alopecia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
    • A61P5/26—Androgens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
    • A61P5/30—Oestrogens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D487/18—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D491/18—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D495/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D495/18—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00

Description

Denne søknad krever prioritet fra USSN 60/233.519, innlevert 19. september, 2000, fra USSN 60/284.730, innlevert 18. april, 2001 og fra USSN 60/284.438, innlevert 18. april, 2001.
Oppfinnelsesområde
Foreliggende oppfinnelse vedrører kondenserte cykliske forbindelser, slike forbindelser for bruk som medikament samt slike forbindelser for behandling av sykdom så som nukleær-hormonreseptor-assosierte tilstander, som cancer, og farmasøytiske blandinger som inneholder slike forbindelser.
Bakgrunn for oppfinnelsen
Nukleærhormon-reseptorer (NHR) består av en stor superfamilie av ligand-avhengige og sekvensspesifikke transskripsjonsfaktorer. Medlemmer av denne familie påvirker transskripsjon enten direkte, gjennom spesifikk binding til promotermål-genene (Evans, i Science 240:889-895 (1988)), eller indirekte via protein-protein interaksjoner med andre transskripsjonsfaktorer (Jonat et al., Cell 62:1189-1204 (1990), Schuele et al., Cell, 62:1217-1226 (1990) og Yang-Yen et al., Cell, 62:1205-1215 (1990)). Nukleærhormonreseptor superfamilien (også kjent på området som «steroid/thyroid-hormonreseptor superfamilien») innbefatter reseptorer for en rekke hydrofobe ligander, inklusivt kortisol, aldosteron, østrogen, progesteron, testosteron, vitamin D3, thyroidhormon og retinsyre (Evans, 1988, supra). I tillegg til disse konvensjonelle nukleærhormonreseptorene, inneholder superfamilien en rekke proteiner som ikke har kjente ligander, betegnet orphan nukleærhormonreseptorer (Mangelsdorf et al., Cell, 83:835-839 (1995), 0'Malley et al., Mol. Endocrinol. 10:1293 (1996) Enmark et al., Mol. Endocrinol. 10:1293-1307 (1996) og Giguere, Endocrin. Rev. 20, 689-725 (1999)). De konvensjonelle nukleærhormonreseptorene er i alminnelighet transaktivatorer i nærvær av ligand, og kan enten være aktive repressorer eller transskripsjonelt inerte ved fravær av ligand. Enkelte av orphan-reseptorene oppfører seg som om de er transskripsjonelt inerte ved fravær av ligand. Andre oppfører seg imidlertid enten som konstitutive aktivatorer eller repressorer. Disse orphan-nukleærhormonreseptorene står enten under kontroll av ubikvitære ligander som ikke er blitt identifisert, eller trenger ikke binde til ligand for å utøve deres virkninger.
Tilfelles med andre transskripsjonsfaktorer, har nukleærhormonreseptorene en modulær struktur som utgjøres av tre distinkte domener: et N-terminalt domene av variabel størrelse som inneholder en transskripsjonen aktiveringsfunksjon AF-1, et høyt konservert DNA-bindingsdomene og et moderat konservert ligand-bindingsdomene. Ligandbindingsdomenet er ikke bare ansvarlig for bindingen av den spesifikke ligand, men inneholder også en transskripsjonen aktiveringsfunksjon betegnet AF-2 og et dimeriseringsdomene (Wurtz et al., Nature Struc. Biol. 3, 87-94
(1996), Parker et al., Nature Struc. Biol., 3, 113-115 (1996) og Kumar et al., Steroids 64, 310-319 (1999)). Selv om den fullstendige proteinsekvens av disse reseptorene kan variere betydelig, har alle et både felles strukturelt arrangement som tyder på en divergens fra en ancestral arketype, og betydelig homologi (spesielt sekvensidentitet) ved ligand-bindingsdomenet.
De steroid-bindende nukleærhormonreseptorene (SB-NHR) omfatter en subfamilie av nukleærhormonreseptorer. Disse reseptorene er beslektet ved at de har en innbyrdes felles sterkere sekvenshomologi, særlig i ligand-bindingsdomenet (LBD) enn til de andre medlemmene av NHR-superfamilien (Evans, 1988, supra) og at de alle benytter steroid-baserte ligander. Enkelte eksempler av denne subfamilie av NHR er androgenreseptoren (AR), østrogenreseptoren (ER), progesteronreseptoren (PR), glukokortikoidreseptoren (GR), mineralkortikoidreseptoren (MR), aldosteronreseptoren (ALDR) og den steroide og xenobiotiske reseptor (SXR)
(Evans et al., WO 99/35246). Basert på den sterke sekvenshomologi i LBD, kan flere orphan-reseptorer også være medlemmer av SB-NHR subfamilien.
I overensstemmelse med den høye sekvenshomologi som er funnet i LBD for hver av SB-NHR, er de naturlige ligander for hver av disse avledet fra en felles steroid kjerne. Eksempler på enkelte av de steroid-baserte ligandene benyttet av medlemmer av SB-NHR er kortisol, aldosteron, østrogen, progesteron, testosteron og dihydrotestosteron. Spesifisiteten av en bestemt steroid-basert ligand for én SB-NHR i forhold til en annen, oppnås ved differensiell substitusjon omkring steroidkjernen. Høyaffinitets-binding til en bestemt SB-NHR, koblet med høygradig spesifisitet for den bestemte SB-NHR, kan oppnås med kun ubetydelige struktur-endringer omkring steroidkjernen (f.eks. Waller et al., Toxicol. Appl. Pharmacol. 137, 219-227 (1996) og Mekenyan et al., Environ. Sei. Technol. 31, 3702-3711 (1997), bindingsaffinitet for progesteron overfor androgenreseptoren sammenlignet med testosteron).
Det er beskrevet en rekke syntetisk avledede steroide og ikke-steroide agonister og antagonister for medlemmene av SB-NHR-familien. Mange av disse agonist- og antagonist-ligandene benyttes klinisk innen humanmedisinen for å behandle en rekke tilstander. RU486 er et eksempel på en syntetisk agonist av PR, som benyttes som et fødselskontrollmiddel (Vegeto er al., Cell, 69:703-713 (1992)), og Flutamide er et eksempel på en antagonist av AR, som benyttes til behandling av prostatacancer (Neri et al., Endo. 91, 427-437 (1972)). Tamoksifen er et eksempel på en vevsspesifikk modulator av ER-funksjonen, som benyttes ved behandlingen av brystkreft (Smigel, J. Nati. Cancer Inst, 90, 647-648 (1998)). Tamoksifen kan virke som en antagonist av ER i brystvev, samtidig som den virker som en agonist av ER i ben (Grese et al., Proe. Nati. Acad. Sei. USA, 94, 14105-14110 (1997)). På grunn av de vevsselektive effektene som sees for tamoksifen, omtales dette middel og lignende midler som «partiell-agonist» eller «partiell antagonist». I tillegg til syntetisk avledede ikke-endogene ligander, kan ikke-endogene ligander for NHR oppnås fra næringsmidler (Regal et al., Proe. Soc. Exp. Biol. Med. 223, 372-378 (2000) og Hempstock et al., J. Med. Food, 2, 267-269 (1999)). De flavanoide fytoøstrogenene er et eksempel på en unaturlig ligand for SB-NHR som lett oppnås fra en nærings-middelkilde, som f.eks. soya (Quella et al., J. Clin. Oncoi, 18, 1068-1074 (2000) og Banz et ai, J. Med. Food, 2 271-273 (1999)). Evnen til å modulere transskripsjons-aktiviteten av individuelle NHR ved addisjon av en liten molekylligand, gjør dem til ideelle mål for utviklingen av farmasøytiske midler for en rekke sykdomstilstander.
Som nevnt ovenfor kan ikke-naturlige ligander konstrueres syntetisk til å tjene som modulatorer av virkningen av NHR. Når det gjelder SB-NHR, kan konstrueringen av en unaturlig ligand inkludere identifiseringen av en kjernestruktur som etterligner det naturlige steroids kjernesystem. Dette kan oppnås ved randomisert screening mot flere SB-NHR eller gjennom de dirigerte tilnærminger, ved å benytte den tilgjengelige krystallstruktur av en rekke NHR-ligand-bindingsdomener (Bourguet et al., Nature, 375, 377-382 (1995), Brzozowski et al., Nature 389, 753-758 (1997), Shiau er al., Cell 95, 927-937 (1998) og Tanenbaum er al., Proe. Nati. Acad. Sei. USA 95, 5998-6003 (1998)). Forskjellig substitusjon omkring en slik steroid mimetisk kjerne kan gi midler med selektivitet for én reseptor i forhold til en annen. I tillegg kan slike modifikasjoner benyttes for å oppnå midler med agonist- eller antagonistvirkning for en bestemt SB-NHR. Forskjellig substitusjon omkring den steroid-etterlignende kjerne, kan resultere i dannelse av en rekke høyaffinitets-agonister og antagonister med spesifisitet for, for eksempel, ER versus PR versus AR versus GR versus MR. En slik tilnærming av ulik substitusjon har vært rapportert, for eksempel for kinolin-baserte modulatorer av steroid NHR i J. Med. Chem. 41, 623 (1999); WO 9749709; US 5696133; US 5696130; US 5696127; US 5693647; US 5693646; US 5688810; US 5688808 og WO 9619458.
Forbindelsene i det følgende omfatter en kjerne som tjener som en steroid-etterligner, og er anvendelige som modulatorer av funksjonen av steroid-bindende nukleærhormonreseptorer, så vel som andre NHR, som beskrevet nedenfor.
Sammenfatning av oppfinnelsen
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer kondenserte cykliske forbindelser med den følgende formel la og salter eller stereoisomerer derav:
Som benyttet i formel la og gjennom hele foreliggende beskrivelse har symbolene de følgende betydninger om intet annet er angitt i kravene, og er ved hver forekomst, uavhengig: G er a) usubstituert eller substituert aryl som har fra 1 til 3 ringer, hver ring med 6 karbonatomer; eller b) usubstituert heteroaryl eller substituert heteroaryl valgt fra 3- til 7-leddede monocykliske ringer, 7- til 11 -leddede bicykliske ringer og 10- til 16-leddede tricykliske ringer og som har fra 1 til 3 heteroatomer valgt fra N, O og S; hvor nevnte substituerte aryl og nevnte substituerte heteroaryl er substituert med én eller flere substituenter valgt fra: Ci-C3alkyl, halogen, CF3, - C(OH)(CF3)2, OH, -0(Ci-C3alkyl), -OCF3, -N02, -NH2, -CN, -C(0)OCH3, - S(0)2-NH2, =0, -CH(CN)(fenyl), -S(0)(Ci-4alkyl), -S(0)2(Ci-4alkyl), -S(0)2N((Ci.3)alkyl)(fenyl), -O-(bromfenyl), fenyl, pyrrolyl, pyridyl, imidazolyl, tiazolyl og morfolinyl; en av Ai og A2er valgt fra CH, C(Ci-6alkyl) og C(substituert Ci-6alkyl) og den andre av Ai og A2er valgt fra CH, C(Ci-6alkyl), C(substituert Ci-6alkyl), - CH2OC(0)(Ci.6alkyl) og CR<7a>, hvor nevnte substituerte Ci.6alkyl er substituert med én eller flere substitutenter valgt fra OH, Br, CN, fenyl, morfolinyl, fluorfenoksy, bromfenoksy, cyanofenoksy, hydroksyfenoksy, trifluormetylfenoksy, benzisoksazol, fenylmetoksy, benzofuranyl, -0-fenyl-NHC(0)CH3, -S(0)n-fenyl-NHC(0)CH3, -NHS(0)2-fenyl, -NHC(O)-butyl, -NHC(0)-CF3og -NHC(0)0-butyl, hvor n er 0, 1 eller 2;
Y' er -CH2S-, -CH2S02- —0—, -CH20-, -S(=0)-, -C(=0)—NR-, -CH2NR-,
-CH2N(COR)- eller -CH2N(C02R)-, hvor nevnte gruppe R er valgt fra
hydrogen, Ci-6alkyl og fenyl;
W er -C(R<7>R<7>')—C(R<7>R<7>')-, -C(R<7>R<7>')—C(=0)- eller-CR<7>=CR<7>';
R<1>og R<1>er hver uavhengig H, Ci-ealkyl, C3.7cykloalkyl, fenyl eller benzyl;
R4 er H, Ci.6alkyl, -S02R<1>eller -S02NR<1>R<1>';
R5 er C^alkyl, -C(=0)R<1>, -S02R<1>eller -S02NR<1>R<r>; og
R7 og R<7>er hver uavhengig H, Ci-6alkyl eller Ci-6alkyl substituert med OH, halogen,
cyano, OR<4>, -NHR<4>,-NR<5>R<5>, -C(=0)R<1>, -OC(=0)R<1>, -C(=0)OR<1>,
-C(=0)NR1R1', -S02R<1>eller -S02NR1R1'; eller alternativt, hvor én av Ai og A2er CR<7a>kan nevnte R<7a>gruppe av Ai eller A2og en gruppe R<7>eller R7 sammen danne en mettet heterocyklisk ring som har fra 3 til 8 ringelementer og som har en oksygen heteroatom;
eller alternativt kan nevnte R7 og R<7>'grupper bundet til to forskjellig karbonatomer være bundet sammen for å danne en kondensert, monocyklisk heterocyklisk gruppe med fra 3 til 8 ringelementer og med fra 1 til 3 heteroatomer valgt fra N, O eller S eller karbocyklisk ring som har fra 3 til 8 karbonatomer.
Fortrinnsvis er forbindelser med formel la monomere og omfattes ikke av andre oligomerer eller polymerer.
Forbindelsene med formel la og salter derav omfatter en kjerne som kan tjene som et steroidmimetikum (og ikke fordrer nærvær av en steroid-type (f.eks. cyklo-pentano-perhydrofenantren-analog) struktur).
Videre beskrivelse av oppfinnelsen
Det følgende er definisjoner av betegnelser benyttet i foreliggende søknad. Den første definisjon som her er gitt for en gruppe eller betegnelse, gjelder vedkommende gruppe eller betegnelse gjennom hele foreliggende søknad, individuelt eller som del av en annen gruppe, med mindre annet er angitt i kravene.
Betegnelsene «alkyl» og «alk» refererer seg til et rettkjedet eller forgrenet alkan- (hydrokarbon) radikal som inneholder fra 1 til 12 karbonatomer, fortrinnsvis 1 til 6 karbonatomer. Eksempler på slike grupper innbefatter metyl, etyl, propyl, isopropyl, n-butyl, t-butyl, isobutyl, pentyl, heksyl, isoheksyl, heptyl, 4,4-dimetylpentyl, oktyl, 2,2,4-trimetylpentyl, nonyl, decyl, undecyl og dodecyl. «Substituert alkyl» refererer seg til en alkylgruppe substituert med én eller flere substituenter, fortrinnsvis 1 til 4 substituenter, i et hvilket som helst tilgjengelig tilkoblingspunkt. Eksempler på substituenter innbefatter én eller flere av de følgende grupper: halogen (f.eks. en enkelt halogensubstituent eller flere halogensubstituenter, som i sistnevnte tilfelle danner grupper som f.eks. en perfluoralkylgruppe eller en alkylgruppe som bærer CI3eller CF3), alkoksy, alkyltio, hydroksy, karboksy (dvs. -COOH), alkoksykarbonyl, alkylkarbonyloksy, amino (dvs. -NH2), karbamoyl eller substituert karbamoyl, karbamat eller substituert karbamat, urea eller substituert urea, amidinyl eller substituert amidinyl, tiol (dvs. -SH), aryl, heterocyklo, cykloalkyl, heterocykloalkyl, -S-aryl, -S-heterocyklo, -S=0-aryl, -S=0-heterocyklo, arylalkyl-O-, -S(0)2-aryl, -S(0)2-heterocyklo, -NHS(0)2-aryl, -NHS(0)2-heterocyklo, -NHS(0)2NH-aryl, -NHS(0)2NH-heterocyklo, -P(0)2-aryl, -P(0)2-heterocyklo, -NHP(0)2-aryl, -NHP(0)2-heterocyklo, -NHP(0)2NH-aryl, -NHP(0)2NH-heterocyklo, -O-aryl, -O-heterocyklo, -NH-aryl, -NH-heterocyklo, -NHC=0-aryl, -NHC=0-alkyl, -NHC=0-heterocyklo, -OC=0-aryl, -OC=0-heterocyklo, -NHC=ONH-aryl, -NHC=ONH-heterocyklo, -OC=00-aryl, -OC=00-heterocyklo, -OC=ONH-aryl, -OC=ONH-heterocyklo, -NHC=00-aryl, -NHC=00-heterocyklo, -NHC=00-alkyl, -C=ONH-aryl, -C=ONH-heterocyklo, -C=00-aryl, -C=00-heterocyklo, -N(alkyl)S(0)2-aryl, -N(alkyl)S(0)2-heterocyklo, -N(alkyl)S(02)NH-aryl, -N(alkyl)S(0)2NH-heterocyklo, -N(alkyl)P(0)2-aryl, -N(alkyl)P(0)2-heterocyklo, -N(alkyl)P(0)2NH-aryl, -N(alkyl)P(0)2NH-heterocyklo, -N(alkyl)-aryl, -N(alkyl)-heterocyklo, -N(alkyl)C=0-aryl, -N(alkyl)C=0-heterocyklo, -N(alkyl)C=ONH-aryl, -N(alkyl)C=ONH-heterocyklo, -OC=ON(alkyl)-aryl, -OC=ON(alkyl)-heterocyklo, -N(alkyl)C=00-aryl, -N(alkyl)C=00-
heterocyklo, -C=ON(alkyl)-aryl, -C=ON(alkyl)-heterocyklo, -NHS(0)2N(alkyl)-aryl, -NHS(0)2N(alkyl)-heterocyklo, -NHP(0)2N(alkyl)-aryl, NHP(0)2N(alkyl)-heterocyklo, -NHC=ON(alkyl)-aryl, -NHC=ON(alkyl)-heterocyklo, -N(alkyl)S(0)2N(alkyl)-aryl, -N(alkyl)S(0)2N(alkyl)-heterocyklo, -N(alkyl)P(0)2N(alkyl)-aryl, -N(alkyl)P(0)2N(alkyl)-heterocyklo, -N(alkyl)C=ON(alkyl)-aryl og -N(alkyl)C=ON(alkyl)-heterocyklo. I de foregående eksempler på substituenter kan i hvert tilfelle, grupper så som «alkyl», «aryl» og «heterocyklo» selv eventuelt være substituert; for eksempel er «alkyl» i gruppen «NCH=00-alkyl» omtalt ovenfor, eventuelt være substituert, slik at både «NHC=00-alkyl» og «NHC=00-substituert alkyl» er eksempler på substituenter.
Eksempler på alkylsubstituenter kan også innbefatte grupper, som f.eks. «T» og «T-R<12>» (som er definert nedenfor), spesielt for substituerte alkylgrupper innen Ajeller A2.
Betegnelsen «alkenyl» refererer seg til et rettkjedet eller forgrenet hydro-karbonradikal inneholdende fra 2 til 12 karbonatomer og minst én karbon-karbon-dobbeltbinding. Eksempler på slike grupper er etenyl eller allyl. «Substituert alkenyl» refererer seg til en alkenylgruppe substituert med én eller flere substituenter, fortrinnsvis 1 til 4 substituenter, på et hvilket som helst tilgjengelig tilkoblingspunkt. Eksempler på substituenter omfatter alkyl eller substituert alkyl, så vel som de grupper som ovenfor er angitt som eksempler på alkylsubstituenter.
Betegnelsen «alkynyl» refererer seg til et rettkjedet eller forgrenet hydro-karbonradikal inneholdende fra 2 til 12 karbonatomer og minst én karbon-til-karbon-trippelbinding. Eksempel på slike grupper er etynyl. «Substituert alkynyl» refererer seg til en alkynylgruppe substituert med én eller flere substituenter, fortrinnsvis 1 til 4 substituenter i et hvilket som helst tilgjengelig tilkoblingspunkt. Eksempler på substituenter omfatter alkyl eller substituert alkyl, så vel som de grupper som ovenfor er angitt som eksempel på alkylsubstituenter.
Betegnelsen «cykloalkyl» refererer seg til en fullstendig mettet cyklisk hydro-karbongruppe inneholdende fra 1 til 4 ringer og 3 til 8 karbonatomer per ring. Eksempler på slike grupper er cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl og cykloheksyl «Substituert cykloheksyl» refererer seg til en cykloalkylgruppe substituert med én eller flere substituenter, fortrinnsvis 1 til 4 substituenter i et hvilket som helst tilgjengelig tilkoblingspunkt. Eksempler på substituenter omfatter nitro, cyano, alkyl eller substituert alkyl, så vel som de grupper som ovenfor er angitt som eksempler på alkylsubstituenter, og som tidligere er nevnt som foretrukne arylsubstituenter under definisjonen av G. Eksempler på substituenter inkluderer også spiro-tilkoblede eller fusjonerte cykliske substituenter, spesielt cykloalkenyl eller substituert cykloalkenyl.
Betegnelsen «cykloalkenyl» refererer seg til en delvis umettet cyklisk hydro-karbongruppe inneholdende 1 til 4 ringer og 3 til 8 karbonatomer per ring. Eksempler på slike grupper er cyklobutenyl, cyklopentenyl og cykloheksenyl. «Substituert cykloalkenyl» refererer seg til en cykloalkenylgruppe substituert med én eller flere substituenter, fortrinnsvis 1 til 4 substituenter, i ethvert tilgjengelig tilkoblingspunkt. Eksempler på substituenter omfatter nitro, cyano, alkyl eller substituert alkyl, så vel som de grupper som ovenfor er angitt som eksempler på alkylsubstituenter, og som tidligere er nevnt som foretrukne arylsubstituenter ved definisjonen av G. Eksempler på substituenter er også spiro-tilkoblede eller fusjonerte cykliske substituenter, spesielt cykloalkyl eller substituert cykloalkyl.
Betegnelsene «alkoksy» eller «alkyltio» refererer seg til en alkylgruppe, som beskrevet ovenfor, bundet gjennom henholdsvis en oksygenkobling (-0-) eller en svovelkobling (-S-). Betegnelsene «substituert alkoksy» eller «substituert alkyltio» refererer seg til en substituert alkylgruppe, som beskrevet ovenfor, bundet gjennom henholdsvis en oksygen- eller en svoveltilkobling.
Betegnelsen «alkoksykarbonyl» refererer seg til en alkoksygruppe bundet gjennom en karbonylgruppe.
Betegnelsen «alkylkarbonyl» refererer seg til en alkylgruppe bundet gjennom en karbonylgruppe. Betegnelsen «alkylkarbonyloksy» refererer seg til en alkyl-karbonylgruppe bundet gjennom en oksygenkobling.
Betegnelsene «arylalkyl», «substituert arylalkyl», «cykloalkylalkyl», «substituert cykloalkylalkyl», «cykloalkenylalkyl», «substituert cykloalkenylalkyl»,
«heterocykloalkyl» og «substituert heterocykloalkyl» refererer seg til en aryl-, cykloalkyl-, cykloalkenyl- og heterocyklogruppe bundet gjennom en alkylgruppe, substituert på aryl-, cykloalkyl-, cykloalkenyl- eller heterocyklo- og/eller alkylgruppen når den er angitt som «substituert».
Betegnelsen «aryl» refererer seg til cykliske, aromatiske hydrokarbongrupper, som har 1 til 5 aromatiske ringer, spesielt monocykliske eller bicykliske grupper, så som fenyl, bifenyl eller naftyl. Når to eller flere aromatiske ringer (bicykliske, etc.) inngår, kan de aromatiske ringene av arylgruppen forbindes i et enkelt punkt (f.eks. bifenyl) eller kondenseres (f.eks. naftyl, fenantrenyl og lignende). «Substituert aryl» refererer seg til en arylgruppe substituert med én eller flere substituenter, fortrinnsvis 1,2,3,4 eller 5 substituenter, ved et hvilket som helst tilkoblingspunkt. Eksempler på substituenter omfatter nitro, cykloalkyl eller substituert cykloalkyl, cykloalkenyl eller substituert cykloalkenyl, cyano, alkyl-S(0)m- (m=0,1 eller 2), alkyl eller substituert alkyl, så vel som de grupper som er angitt ovenfor som eksempel på alkylsubstituenter, og som tidligere er nevnt som foretrukne arylsubstituenter ved definisjonen av G. Eksempler på substituenter omfatter også kondenserte cykliske substituenter, så som heterocyklo- eller cykloalkenyl-, eller substituerte heterocyklo-eller cykloalkenylgrupper (f.eks. som derved danner en fluorenyl-, tetrahydronaftalenyl- eller dihydroindenylgruppe).
«Karbamoyl» refererer seg til gruppen -CONH- som er bundet i den ene ende til resten av molekylet og i den andre ende til hydrogen eller en organisk del (så som alkyl, substituert alkyl, aryl, substituert aryl, heterocyklo, alkylkarbonyl, hydroksyl og substituert nitrogen). «Karbamat» refererer seg til gruppen -O-CO-NH-, som er bundet i én ende til resten av molekylet og i den andre ende til hydrogen eller en organisk del (så som de ovenfor angitte). «Urea» refererer seg til gruppen -NH-CO-NH-, som er bundet i én ende til resten av molekylet og i den andre ende til hydrogen eller en organisk del (som f.eks. de ovenfor nevnte). «Amidinyl» refererer seg til gruppen -C(=NH)(NH2). «Substituert karbamoyl», «substituert karbamat», «substituert urea» og «substituert amidinyl» refererer seg til karbamoyl-, karbamat-, urea- eller amidinylgrupper som beskrevet ovenfor, hvor én eller flere av hydrogen-gruppene er erstattet med en organisk del (som f.eks. de ovenfor nevnte).
Betegnelsen «heterocyklus», «heterocyklisk» og «heterocyklo» refererer seg til fullstendig mettede eller delvis eller fullstendig umettede, inklusivt aromatiske (dvs. «heteroaryl») cykliske grupper (for eksempel 3- til 7-leddede monocykliske, 7- til 11— leddede bicykliske eller 10 til 16 leddede tricykliske ringsystemer) som har minst ett heteroatom i minst én karbonatomholdig ring. Hver ring i den heterocykliske gruppe som inneholder et heteroatom, kan ha 1, 2, 3 eller 4 heteroatomer valgt fra nitrogen-atomer, oksygenatomer og/eller svovelatomer, hvor nitrogen- og svovelhetero-atomene eventuelt kan være oksydert og nitrogen-heteroatomene eventuelt være kvaternisert. (Betegnelsen «heteroarylium» refererer seg til en heteroarylgruppe som bærer et kvaternært nitrogenatom og således en positiv ladning). Den heterocykliske gruppe kan være tilkoblet resten av molekylet ved et hvilket som helst heteroatom eller karbonatom i ringen eller ringsystemet. Eksempler på monocykliske heterocykliske grupper er etylenoksyd, azetidinyl, pyrrolidinyl, pyrrolyl, pyrazolyl, oksetanyl, pyrazolinyl, imidazolyl, imidazolinyl, imidazolidinyl, oksazolyl, oksazolidinyl, isoksazolinyl, isoksazolyl, tiazolyl, tiadiazolyl, tiazolidinyl, isotiazolyl, isotiazolidinyl, furyl, tetrahydrofuryl, tienyl, oksadiazolyl, piperidinyl, piperazinyl, 2-oksopiperazinyl, 2-oksopiperidinyl, 2-oksopyrrolidinyl, 2-oksoazepinyl, azepinyl, heksahydrodiazepinyl, 4-piperidonyl, pyridyl, pyrazinyl, pyrimidinyl, pyridazinyl, triazinyl, triazolyl, tetrazolyl, tetrahydropyranyl, morfolinyl, tiamorfolinyl, tiamorfolinyl-sulfoksyd, tiamorfolinyl-sulfon, 1,3-dioksolan og tetrahydro-1,1-dioksotienyl. Eksempler på bicykliske heterocykliske grupper er indolyl, isoindolyl, benzotiazolyl, benzodioksolyl, benzoksazolyl, benzoksadiazolyl, benzotienyl, kinuklidinyl, kinolinyl, tetrahydroisokinolinyl, isokinolinyl, benzimidazolyl, benzopyranyl, indolizinyl, benzo-furyl, benzofurazanyl, kromonyl, kumarinyl, benzopyranyl, cinnolinyl, kinoksalinyl, indazolyl, pyrrolopyridyl, furopyridinyl (så som furo[2,3-c]pyridinyl, furo[3,2-b]pyridinyl] eller furo[2,3-b]pyridinyl), dihydrobenzodioksinyl, dihydrodioksidobenzotiofenyl, dihydroisoindolyl, dihydroindolyl, dihydrokinolinyl, dihydrokinazolinyl (så som 3,4-dihydro-4-okso-kinazolinyl), triazinylazepinyl og tetrahydrokinolinyl. Eksempler på tricykliske heterocykliske grupper er karbazolyl, benzidolyl, fenantrolinyl, dibenzofuranyl, akridinyl, fenantridinyl og xantenyl.
«Substituert heterocyklus», «substituert heterocyklisk» og «substituert heterocyklo» (så som «substituert heteroaryl») refererer seg til heterocyklus, heterocykliske eller heterocyklogrupper substituert med én eller flere substituenter, fortrinnsvis 1 til 4 substituenter (i et hvilket som helst tilgjengelig tilkoblingspunkt). Eksempler på substituenter omfatter cykloalkyl eller substituert cykloalkyl, cykloalkenyl eller substituert cykloalkenyl, nitro, okso (dvs. =0), cyano, alkyl-S(0)m-(m= 0,1 eller 2), alkyl eller substituert alkyl, så vel som de grupper som er angitt ovenfor som eksempler på alkylsubstituenter, og som tidligere er nevnt som foretrukne heterocyklo-substituenter ved definisjonen av G.
Betegnelsen «kvaternært nitrogen» refererer seg til et tetravalent positivt ladet nitrogenatom, inklusivt for eksempel det positivt ladede nitrogen i en tetraalkyl-ammoniumgruppe (f.eks. tetrametylammonium, N-metylpyridinium), det positivt ladede nitrogen i protonerte ammoniumforbindelser (f.eks. trimetylhydroammonium, N-hydropyridinum), det positivt ladede nitrogen i amin N-oksyder (f.eks. N-metyl-orfolin-N-oksyd, pyridin-N-oksyd), og det positivt ladede nitrogen i en N-amino-ammoniumgruppe (f.eks. N-aminopyridinium).
Betegnelsen «halogen» refererer seg til klor, brom, fluor eller jod.
Betegnelsen «hydroksylamin» og «hydroksylamid» refererer seg til gruppene henholdsvis OH-NH- og OH-NH-CO-.
Når en funksjonell gruppe betegnes «beskyttet» betyr dette at gruppen er i en modifisert form for å minske, spesielt utelukke, uønskede bivirkninger i det beskyttede sted. Egnede beskyttelsesgrupper for de her beskrevne fremgangsmåter og forbindelser omfatter de som er beskrevet i standard oppslagsverk, som f.eks. Greene, T.W., et al., Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, N.Y. (1991).
Når en betegnelse som «(CRR)n» benyttes, står den for en eventuelt substituert alkylkjede som eksisterer mellom de to fragmentene som det er bundet til, hvor lengden av kjeden er avgrenset av det området som betegnelsen n angir. Et eksempel på dette er n=0-3, som betyr at fra null til tre (CRR) enheter eksisterer mellom de to fragmentene som er tilkoblet de primære og terminale (CRR) enhetene. I det tilfellet hvor betegnelsen n er satt til null (n=0) eksisterer det en binding mellom de to fragmentene som er koblet til (CRR).
Om intet annet er angitt antas ethvert heteroatom med umettede valenser å ha tilstrekkelig hydrogenatomer til å mette valensene.
Divalente grupper, som f.eks. de ved definisjonen av W (f.eks. NR<9->CR<7>R<7>'), kan være bundet i den ene eller andre retning til resten av molekylet (f.eks.
for ovennevnte gruppe innenfor
definisjonen av W).
Karboksylat-anion refererer seg til en negativt ladet gruppe -COO".
Forbindelsene med formel la danner salter som også ligger innenfor rammen av denne oppfinnelse. Referanse til en forbindelse med formel la er her underforstått å innbefatte referanse til salter derav, om intet annet er angitt. Betegnelsen «salt(er)» betyr i denne sammenheng sure og/eller basiske salter dannet med uorganiske og/eller organiske syrer og baser. Når dessuten en forbindelse med formel la inneholder både en basisk del, som f.eks. et pyridin eller imidazol, og en sur del, som f.eks. en karboksylsyre, kan det dannes zwitterioner («indre salter»), og slike inkluderes i betegnelsen «salt(er)» slik den her benyttes. Farmasøytisk akseptable (dvs. ugiftige, fysiologisk akseptable) salter foretrekkes, selv om andre salter også er anvendelige, f.eks. i isolerings- eller rensetrinn som kan benyttes under fremstilling. Salter av forbindelsene med formel la kan dannes for eksempel ved å omsette en forbindelse la med en viss mengde syre eller base, som f.eks. en ekvivalent mengde, i et medium, f.eks. i et medium hvor saltet utfelles, eller i et vandig medium etterfulgt av lyofilisering.
Forbindelsene med formel la som inneholder en basisk del, så som et amin eller en pyridin- eller imidazolring, kan danne salter med en rekke organiske og uorganiske syrer. Eksempler på syreaddisjonssalter er acetater (f.eks. de dannet med eddiksyre ellertrihalogen-eddiksyre, foreksempel trifluoreddiksyre), adipater, alginater, askorbater, aspartater, benzoater, benzensulfonater, bisulfater, borater, butyrater, citrater, kamforater, kamfersulfonater, cyklopentanpropionater, diglukonater, dodecylsulfater, etansulfonater, fumarater, glukoheptanoater, glycerofosfater, hemisulfater, heptanoater, heksanoater, hydroklorider, hydrobromider, hydrojodider, hydroksyetansulfonater (f.eks. 2-hydroksyetansulfonater), laktater, maleater, metansulfonater, naftalensulfonater (f.eks. 2-naftalensulfonater), nikotinater, nitrater, oksalater, pektinater, persulfater, fenylpropionater (f.eks. 3-fenylpropionater), fosfater, pikrater, pivalater, propionater, salicylater, succinater, sulfater (som f.eks. de dannet med svovelsyre), sulfonater (som f.eks. de som her er nevnt), tartrater, tiocyanater, toluensulfonater, så som tosylater og undekanoater.
Forbindelsene med formel la som inneholder en sur del, så som en karboksylsyre, kan danne salter med en rekke organiske og uorganiske baser. Eksempler på basiske salter er ammoniumsalter, alkalimetallsalter, så som natrium-, litium- og kaliumsalter, jordalkalimetallsalter, så som kalsium- og magnesiumsalter, salter med organiske baser (for eksempel organiske aminer) så som benzatiner, dicykloheksylaminer, hydrabaminer (dannet med N,N-bis(dehydroabietyl)etylendiamin), N-metyl-D-glukaminer, N-metyl-D-glukamider, t-butylaminer og salter med aminosyrer, som f.eks. arginin, lysin og lignende. Basiske nitrogenholdige grupper kan kvaterniseres med slike midler som lavere alkylhalogenider (f.eks. metyl-, etyl-, propyl- og butylklorider, -bromider og -jodider), dialkylsulfater (f.eks. dimetyl-, dietyl-, dibutyl- og diamylsulfater), langkjedede halogenider (f.eks. decyl-, lauryl-, myristyl- og stearylklorider, -bromider og -jodider) og aralkylhalogenider (f.eks. benzyl- og fenetylbromider).
Prodrugs og solvater av forbindelsene over kan også være aktuelle. Betegnelsen «prodrug» betyr i denne sammenheng en forbindelse som etter administrering til et individ, er gjenstand for kjemisk omdannelse ved hjelp av metabolske eller kjemiske prosesser, for å gi en forbindelse med formel la, eller et salt og/eller solvat derav. Solvater av forbindelsene med formel la inkluderer for eksempel hydrater.
Forbindelser med formel la, og salter derav, kan eksistere i deres tautomere form (for eksempel som en amid- eller en iminoeter). Alle slike tautomere former ansees her som del av foreliggende oppfinnelse.
Alle stereoisomerer av foreliggende forbindelser (for eksempel de som kan eksistere som følge av asymmetriske karbonatomer på forskjellige substituenter), inklusivt enantiomere former og diastereomere former, ansees å falle innenfor rammen av foreliggende oppfinnelse. Individuelle stereoisomerer av forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan for eksempel være tilnærmet fri for andre isomerer (f.eks. som en ren eller tilnærmet ren, optisk isomer som har en angitt aktivitet) eller være blandet, for eksempel som racemater eller med alle andre, eller andre valgte stereoisomerer. De kirale sentrene ifølge foreliggende oppfinnelse kan ha S- eller R-konfigurasjon som definert gjennom IUPAC 1974 Recommendations. De racemiske formene kan spaltes ved hjelp av fysiske metoder, som for eksempel fraksjonert krystallisasjon, separasjon eller krystallisasjon av diastereomere derivater eller separasjon ved kiral kolonnekromatografi. De individuelle optiske isomerene kan oppnås fra racematene ved hjelp av enhver egnet metode, inklusivt konvensjonelle metoder, som for eksempel saltdannelse med en optisk aktiv syre etterfulgt av krystallisasjon.
Alle konfigurasjonsisomerer av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan være aktuelle, enten i blanding eller i ren eller tilnærmet ren form. Definisjonen av forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse omfatter både cis- (Z) og trans- (E) alken-isomerer, så vel som cis- og trans-isomerer av cykliske hydrokarbon- eller heterocyklo-ringer. Den foretrukne konfigurasjon kan således være en funksjon av den bestemte forbindelse eller av dens foretrukne aktivitet. Separasjon av konfigurasjonsisomerer kan oppnås etter en hvilken som helst egnet metode, som f.eks. søylekromatografi.
Gjennom hele denne beskrivelse kan grupper og substituenter på disse velges for å gi stabile deler og forbindelser.
Utførelsesformer som her er angitt som eksempler eller foretrukne, er ment å være illustrerende.
Fremgangsmåter for fremstilling
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan fremstilles etter fremgangsmåter illustrert i de etterfølgende Reaksjonsskjemaer I til XI. Løsningsmidler, temperaturer, trykk og andre reaksjonsbetingelser kan lett velges av fagmannen. Utgangsmaterialer er kommersielt tilgjengelige eller kan lett fremstilles av fagmannen. Kombinasjonsteknikker kan benyttes ved fremstillingen av forbindelser, for eksempel hvor mellomproduktene har grupper som er egnet for disse teknikkene. Se etterfølgende referanser som beskriver andre fremgangsmåter som kan benyttes til fremstillingen av forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse: Li, et al., Eur. J. Org. Chem. 9, 1841-1850 (1998); Li, Y-Q, Synlett, 5, 461-464 (1996); Thiemann, et al., Bull. Chem. Soc. Jpn. 67, 1886-1893 (1994); Tsuge et al., Heterocycles, 14, 423-428
(1980); Ward et al., Can. J. Chem, 75, 681-693 (1997); Ward et al., Can. J. Chem. 69, 1487-1497 (1991); Ward et al., Tetrahedron Lett. 31, 845-848 (1990), Fleming er al., J. Org. Chem. 44, 2280-2282 (1979); Jankowski et al., J. Organomet. Chem., 595, 109-113 (2000); Keglevich et al., J. Organomet. Chem. 579, 182-189 (1999); Keglevich et al., J. Organomet. Chem., 570, 49-539 (1998); Jankowski et al., Hetroat. Chem., 7, 369-374 (1996); Jankowski et al., J. Am. Chem. Soc, 113, 7011-7017
(1991); Quin et al., Tetrahedron Lett. 31, 6473-6476 (1990); Quin et al., J. Org. Chem., 59, 120-129 (1994); Quin et al., J. Org. Chem., 58, 6212-6216 (1993); Quin et al., Phosphorous, Sulfur Silicon Relat. Elem., 63, 349-362 (1991); Quin et al., Hetroat. Chem., 2, 359-367 (1991); Hussong et al., Phosphorous Sulfur. 25, 201-212
(1985); Quin et al., J. Org. Chem. 51, 3341-3347 (1986); Myers et al., J. Am. Chem. Soc, 114, 5684-5692 (1992); Myers et al., J. Am. Chem. Soc, 113, 6682-6683
(1991); Shen et al., US-patent 5817679; Cordone et al., J. Am. Chem. Soc, 111, 5969-5970 (1989); Jung er al., J. Chem. Soc. Commun. 630-632 (1984); Lay et al., J. Am. Chem. Soc, 104, 7658-7659 (1982); Gonzales et al., J. Am. Chem. Soc, 117, 3405-3421 (1995); Kreherera/., Chem. Ber., 125, 183-189 (1992); Simig et al., Synlett, 7, 425-426 (1990); Sha et al., J. Org. Chem., 55, 2446-2450 (1990); Drew er al., J. Chem. Soc, Perkin Trans. 1., 7, 1277-1284 (1985); Kreherera/., Anorg. Chem. Org. Chem., 31B, 599-604 (1976); Avalos et al., Tetrahedron Lett., 39, 9301-9304 (1998); Gousse et al., Macromolecules, 31, 314-321 (1998); Mikhailyuchenko er al., Khim. Geterotiskl. Soedin., 6, 751-758 (1993); Lubowitz er al., US-patent 4476184; Padwa et al., J. Org. Chem., 61, 3706-3714 (1996); Schlessinger et al., J. Org. Chem., 59, 3246-3247 (1994); Buchmeiser et al. WO publikasjon No. 9827423; Tanabe et al., japansk patentdokument JP 07144477; Mochizucki er al., Japansk patentdokument JP 63170383; Hosoda et al., Japansk patentdokument JP 62053963; Onaka er al., Japansk patentdokument JP 62053964; Kato er al., Japansk patentdokument JP 53086035; Kato et al., Japansk patentdokument JP 51088631; Tottori et al., Japansk patentdokument JP 49124225; Augustin et al., Tysk patentdokument DD 101271; Title et al., Fransk patentdokument FR 2031538; Gousse et al., Polym. Int. 48, 723-731 (1999); Padwa et al., J. Org. Chem., 62, 4088-4096 (1997); Theurillat-Moritz et al., Tetrahedron: Asymmetry, 7, 3163-3168 (1996), Mathews et al., J. Carbohydr. Chem., 14, 287-97 (1995); Srivastava et al., Nati. Acad. Sei. Lett. (India) 15, 41-44 (1992); Mayorga et al., Rev. Cubana Quim. 4, 1-6
(1988); Kondoli et al., J. Chem. Res., Synop., 3, 76 (1987); Primelles et al., Cent. Azucar, 7-14 (1985); Solov'eva et al., Khim. Geterotsikl. Soedin. 5, 613-15 (1984); Liu et al., Yaoxue Xuebao, 18, 752-759 (1983); Joshi et al., Indian J. Chem. Sect. B. 22B, 131-135 (1983); Amos et al. WO publikasjon No. 9829495; Odagiri era/., US-patent 4670536; Gallucci et al., Europeisk patentdokument EP 355435; Redmore, D. US-patent 3821232; Nakano er al., Heterocycles, 35, 37-40 (1993); Tomisawa er al., Chem. Pharm. Bull., 36, 1692-1697 (1988); Krow et al., J. Heterocycl. Chem., 22, 131-135 (1985); Krow et al., J. Org. Chem., 47, 1989-1993 (1982); Liu et al., Yaoxue Xuebao, 18, 752-759 (1983); Nishikawa et al., Yaoxue Xuebao JP 01061457; og/eller Rice et al., J. Med. Chem., 11 183-185 (1968).
I følgende reaskjonsskjemaer er G-L i formlene identisk med G i formel la over, Zi og Z2 er O, Qiog 0,2 er H, Y er Y' og W er W. Øvrige grupper er som tidligere definert.
Reaksjonsskjema I
Som illustrert i Reaksjonsskjema I, kan et dien med formel II omsettes med et dienofil med formel III, under betingelser som lett kan velges av fagmannen (som f.eks. varmetilførsel («A»)), for å oppnå en forbindelse med formel IV, som er en forbindelse med formel la. Et dien-mellomprodukt med formel II kan oppnås fra kommersielle kilder eller lett fremstilles av fagmannen, for eksempel i henhold til de følgende litteraturdokumenter og de referanser som er funnet i disse: Hofman er al., J. Agric. Food Chem, 45, 898-906 (1997); Baciocchi et al., J. Chem. Soc, Perkin Trans. 2, 8, 821-824 (1975); Wu et al., J. Heterocycles, 38, 1507-1518 (1994); Yin er al., Tetrahedron Lett., 38, 5953-5954 (1997); Mic'ovic' et al., Tetrahedron, 20, 2279-2287 (1964); Gorbunova et al., J. Org. Chem., 35, 1557-1566 (1999); Rassu et al., Chem. Soc Rev. 29, 109-118 (2000); Kaberdin et al., Russ. Chem. Rev., 68, 765-779 (1999); Barluenga et al., Aldrichimica Acta, 32, 4-15 (1999); Bogdanowicz-Szwed et al., Pol. Wiad. Chem., 52, 821-842 (1998); Casiraghi et al., Adv. Asymmetric Synth., 3, 113-189 (1998); og/eller Baeckvall et al., Chem. Rev., 98, 2291-2312 (1998). Et dienofil-mellomprodukt med formel III kan oppnås fra kommersielle kilder eller lett fremstilles av fagmannen, for eksempel i henhold til de følgende litteraturreferanser og referansene funnet i disse: Deshpande et al., Heterocycles, 51, 2159-2162 (1999); Seijas et al., J. Chem. Res., Synop., 7, 420-421
(1999); Langrera/., Eur. J. Org. Chem., 7, 1467-1470 (1998); Kita et al., Japansk patentdokument JP 09194458; Lopez-Alvarado et al., J. Org. Chem., 61, 5865-5870
(1996); Condon et al., US-patent 5523277; Sasakihara et al. Japansk patentdokument JP 04290868; Igarashi er al., Japansk patentdokument JP 04149173; Aoyama et al., Japansk patentdokument JP 04134063; Aoyama et al., Japansk patentdokument JP 04134062; Pastor er al. J. Org. Chem., 53, 5776-5779 (1988); og/eller Takahashi et al., Chem. Lett., 6, 1229-1232 (1987).
Reaksjonsskjema II
Som illustrert i Reaksjonsskjema II kan forbindelser med formel la oppnås ved omsetning av et primært amin med formel V med et substituert anhydrid-lignende mellomprodukt med formel VI, for eksempel i et løsningsmiddel som eddiksyre med eller uten oppvarming, for å gi en forbindelse med formel IV, som er en forbindelse med formel la. Primære aminer med formel V kan oppnås fra kommersielle kilder eller lett syntetiseres av fagmannen. Anhydrid-lignende midler med formel VI kan oppnås fra kommersielle kilder eller lett syntetiseres av fagmannen. De etterfølgende dokumenter beskriver eksempler på fremgangsmåter for syntese av mellomprodukter med formel VI, så vel som syntesemetoder som kan benyttes til syntese av forbindelser med formel IV:Kohler, E.P.; Tishler, M.; Potter, H.; Thompson, H.T. J. Am. Chem. Soc. 1939, 1057-1061; Yur'ev, Y.K.; Zefirov, N.S. J. Gen. Chem. U. S. S. R.
( Engl. Transl.) 1961, 31, 772-5; Norman, G. Gaylord US-patent 3.995.099; Schueler, P.E.; Rhodes, Y.E., J. Org. Chem., 1974, 39, 2063-9; Ishitobi, H.; Tanida, H.; Tsuji, T. Bull. Chem. Soc. Japan, 1971, 44, 2993-3000; Ståjer, G.; Viråg, M.; Szabo, A.E.; Bernåth, G.; Sohår, P.; Sillanpåå, R. Acra Chem. Scand. 1996, 50, 922-30; Hart, H.; Ghosh, T. Tetrahedron Lett. 1988, 29, 881-884; Kato, M.; Yamamoto, S.; Yoshihara, T.; Furuichi, K.; Miwa, T. Chem. Lett. 1987, 1823-1826; Kottwitz, J.; Vorbruggen, H. Synthesis, 1995, 636-637; Creary, X., J. Org. Cehm. 1975, 40, 3326-3331; Alder, K; Ache, H.-J.; Flock, F.H. Chem. Ber. 1960, 93, 1888-1895; Toder, B.H.; Branca, S.J.; Dieter, R.K.; Smith, A.B. Ill Synth. Commun. 1975, 5, 435-439; Sprague, P.W.; Heikes, J.E.; Gougoutas, J.Z.; Malley, M.F.; Harris, D.N.; og/eller Greenberg, R., J. Med. Chem., 1985, 28,1580-1590.
De ovenfor angitte fremgangsmåter kan benyttes på kombinatorisk måte, for eksempel ved å benytte en flerbrønns reaksjonsblokk, som f.eks. beskrevet i Waldemar Ruediger, Wen-Jeng Li, John W., Allen Jr., og Harold N. Weller III, US-patent 5.961.925, Apparatus for Synthesis of Multiple Organic Compounds With Pinch Valve Block Ved å anvende ovennevnte flerbrønns reaksjonsblokk kan man for eksempel foreta et multiplum av 96 reaksjoner samtidig. Løsningsmiddel kan deretter fjernes fra reagensrørene uten å tas ut fra reaksjonsblokken, og råproduktene kan utfelles ved å benytte en base, som f.eks. natriumbikarbonat. Utfellingene kan oppsamles ved filtrering av reaksjonsblokken, hvorpå de ønskede produkter kan overføres direkte til 96-brønnsplater for screening. På denne måte kan et stort utvalg av forbindelser med formel la syntetiseres og ønskede tester foretas på en automatisert måte.
Reaksjonsskjema III
Reaksjonsskjema III beskriver en fremgangsmåte for fremstilling av et mellomprodukt med formel VI som kan benyttes til å syntetisere en forbindelse med formel la, som beskrevet i Reaksjonsskjema II. Som beskrevet i Reaksjonsskjema III, kan et dien med formel II omsettes med et dienofil med formel VII for å gi mellomproduktet med formel VI. Fremgangsmåtene som benyttes for å oppnå en slik omdannelse er analoge med de beskrevet i Reaksjonsskjema I.
Reaksjonsskjema IV
Reaksjonsskjema IV beskriver en fremgangsmåte for fremstilling av et mellomprodukt med formel VI som kan benyttes til å syntetisere en forbindelse med formel la, som beskrevet i Reaksjonsskjema II. Som vist i Reaksjonsskjema IV, kan et dien med formel II omsettes med et dienofil med formel VIII for å gi mellomproduktet med formel IX. Mellomproduktet med formel IX kan dehydratiseres til et anhydrid-lignende mellomprodukt med formel VI. Dehydratisering av bis-syremellomproduktet med formel IX kan oppnås etter en rekke fremgangsmåter, som f.eks. de som er kjent for fagmannen og beskrevet i de følgende dokumenter og der siterte referanser: Sprague et al. J. Med. Chem., 28, 1580-1590 (1985); og/eller Retemi et al., J. Org. Chem., 61, 6296-6301 (1996).
Reaksjonsskjema I til IV beskriver generelle fremgangsmåter for syntesen av forbindelser med formel la, og mellomprodukter derav, hvor substitusjon i ringsystemet inkorporeres direkte, for eksempel ved nivået til det intermediære dien, dienofil, det anhydrid-lignende mellomprodukt og amingrupper. I tillegg til disse fremgangsmåter kan ytterligere substitusjon inkorporeres i den allerede fremstilte forbindelse med formel la etter en rekke metoder for å fremstille andre forbindelser med formel la. Eksempler på metoder for ytterligere substitusjon er beskrevet i Reaksjonsskjemaene V til XI.
Reaksjonsskjema V
Reaksjonsskjema V beskriver én slik fremgangsmåte for å inkorporere ytterligere substitusjon i en struktur med formel la. Som illustrert i Reaksjonsskjema V kan en forbindelse med formel X, som er en forbindelse med formel la hvor Ai og A2er CR<7>, W er NH-CHR<7>og Y er CHR7CHR<7>, funksjonaliseres ved det frie amin i gruppen W ved omsetning med ett av en rekke elektrofile midler, som f.eks. syrehalogenider eller alkylhalogenider i nærvær av en base, for eksempel etter fremgangsmåter kjent for fagmannen. I Reaksjonsskjema V, er X en utgående gruppe, og en forbindelse med formel XI er en forbindelse med formel la, hvor Ai og A2er CR<7>, W er NR<7->CHR<7>og Y er CHR<7->CHR<7>.
Reaksjonsskjema VI
Reaksjonsskjema VI beskriver en ytterligere fremgangsmåte for videre innføring av substitusjon i en forbindelse med formel la. Som vist i Reaksjonsskjema VI, kan en forbindelse med formel XII, som er en forbindelse med formel la hvor A-i og A2er CR<7>, W er S-CHR<7>og Y er CHR7-CHR<7>, partielt oksyderes med et oksydasjonsmiddel, som f.eks. mCPBA eller andre midler som vil være kjent for fagmannen, for å gi sulfoksyd-analogen med formel XIII, som er en forbindelse med formel la hvor Ai og A2er CR<7>, W er SO-CHR<7>og Y er CHR7-CHR<7>. Videre behandling av en forbindelse med formel XIII med et oksydasjonsmiddel, så som mCPBA eller andre midler som vil være kjent for fagmannen, kan gi sulfon-analogen med formel XIV, som er en forbindelse med formel la hvor A^og A2er CR<7>, W er S02-CHR<7>og Y er CHR<7->CHR<7>. Alternativt kan en forbindelse med formel XII omdannes direkte til en forbindelse med formel XIV ved forlenget behandling med et oksydasjonsmiddel, så som mCPBA eller med andre midler som vil være kjent for fagmannen.
Reaksjonsskjema VII
Reaksjonsskjema VII beskriver en annen fremgangsmåte for innføring av ytterligere substitusjon i en forbindelse med formel la. Som vist i Reaksjonsskjema VII, kan et dien med formel Ila omsettes med et dienofil med formel III, som beskrevet i Reaksjonsskjema I, for å gi en forbindelse med formel IVa, som er en forbindelse med formel la hvor Y er O, A2er CR7 og Ai er C-(CH2)q-T. Forbindelsen med formel IVa kan omsettes med et reagens med formel R<12->T for å oppnå en forbindelse med formel IVb eller IVc, som er forbindelser med formel la hvor Y er O, A2er CR<7>og Ai er henholdsvis C-(CH2)q-T'-R<12>eller C-(CH2)q-T-R<12>. Reagenset R12-T kan oppnås fra kommersielle kilder eller kan lett fremstilles av fagmannen.
I reaksjonsskjemaet ovenfor har R<12>den samme definisjon som tidligere definert for R<7>, q er null eller et heltall fra 0 til 8, og T er definert enten som (1) et nukleofilt senter så som, men ikke begrenset til, en nitrogen-, oksygen- eller svovelholdig gruppe, som kan være gjenstand for en nukleofil substitusjonsreaksjon med den utgående gruppe T, eller (2) en utgående gruppe som kan være gjenstand for en nukleofil substitusjonsreaksjon med en nukleofil gruppe T' (så som, men ikke begrenset til, en nitrogen-, oksygen- eller svovelholdig nukleofil gruppe). T har den samme definisjon som T. I foreliggende tilfelle inntrer for eksempel en nukleofil substitusjonsreaksjon når det angripende reagens (nukleofilet) bringer et elektronpar til substratet, under bruk av dette par for å danne den nye bindingen, og den utgående gruppe (nukleofuget) tar med seg elektronparet og utgår som et anionisk mellomprodukt. Angående en detaljert omtale av mekanismen for alifatiske nukleofile substitusjoner og en oversikt over spesifikke alifatiske nukleofile substitusjons-reaksjoner, se Advanced Organic Chemistry, Reactions, Mechanisms, and Structure, 4th Addition, Jerry March (red.), John Wiley & Sons, New York (1992) 293-500 og der siterte referanser. Forbindelser med formlene IVa, IVb eller IVc kan selvsagt benyttes i fremgangsmåtene beskrevet her (spesielt ved behandlingen av nukleær-hormonreseptor-assosierte betingelser) uten å være gjenstand for ytterligere reaksjon av T eller T.
Reaksjonsskjema VIII
En alternativ tilnærming til forbindelser med formel IVa, IVb og IVc er vist i Reaksjonsskjema VIII. For denne tilnærming kan teknikker som de beskrevet i Reaksjonsskjema II, III og IV benyttes til fremstillingen av et mellomprodukt med formel Via, hvor T og q er som definert i Reaksjonsskjema VII. Mellomproduktet med formel Via kan omsettes med et substituert amin med formel V, som beskrevet i Reaksjonsskjema II, for å gi forbindelsen med formel IVa, som er en forbindelse med formel la hvor Y er O, A2er CR7 og Ai er C-(CH2)q-T. Forbindelsen med formel IVa kan behandles på den måte som er beskrevet i Reaksjonsskjema VII for å oppnå forbindelser med formel IVb eller IVc, som er forbindelser med formel la hvor Y er O, A2er CR<7>og Ai er henholdsvis C-(CH2)q-T'-R<12>eller C-(CH2)q-T-R<12>.
Reaksjonsskjema IX
Reaksjonsskjema IX beskriver en annen fremgangsmåte for innføring av ytterligere substitusjon i en forbindelse med formel la. Som vist i Reaksjonsskjema IX (hvor X er en utgående gruppe), kan et dien med formel Mb omsettes med et dienofil med formel III, som beskrevet i Reaksjonsskjema I, for å gi en forbindelse med formel IVe, som er en forbindelse med formel la hvor Y er NH, og Ai og A2er CR<7>. Forbindelsen med formel IVe kan funksjonaliseres ved det frie amin ved omsetning med en rekke elektrofile midler, så som syrehalogenider eller alkylhalogenider i nærvær av en base, for eksempel etter fremgangsmåter kjent for fagmannen og beskrevet i Reaksjonsskjema V, for å gi en forbindelse med formel IVf, som er en forbindelse med formel la, hvor Y er NR<7>og Ai og A2er CR<7>.
Reaksjonsskjema X
En alternativ tilnærming til forbindelser med formel IVe og IVf er illustrert i Reaksjonsskjema X. For denne tilnærming kan slike teknikker som de som er beskrevet i Reaksjonsskjemaene II, III og IV benyttes for fremstillingen av et mellomprodukt med formel Vlb. Mellomproduktet med formel Vlb kan omsettes med et substituert amin med formel V, som beskrevet i Reaksjonsskjema II, for å gi en forbindelse med formel IVe, som er en forbindelse med formel la, hvor Y er NH og Ai og A2er CR<7>. Sistnevnte mellomprodukt kan behandles på den måte som er beskrevet i Reaksjonsskjema V for å oppnå en forbindelse med formel IVf, som er en forbindelse med formel la, hvor Y er NR<7>og Ai og A2er CR<7>.
Reaksjonsskjema XI
Reaksjonsskjema XI beskriver en annen tilnærming for innføring av ytterligere substitusjon i en forbindelse med formel la. Som illustrert i Reaksjonsskjema XI, kan et dien med formel Mc omsettes med et dienofil med formel III, som beskrevet i Reaksjonsskjema la, for å oppnå en forbindelse med formel IVg, som er en forbindelse med formel la, hvor Y er SO og Ai og A2er CR<7>. En forbindelse med formel IVg kan behandles med et oksydasjonsmiddel så som mCPBA, som beskrevet i Reaksjonsskjema VI, for å gi en forbindelse med formel IVh, som er en forbindelse med formel la, hvor Y er S02og A^og A2er CR<7.>
Reaksjonsskjema XII
Reaksjonsskjema XII beskriver en annen fremgangsmåte for å innføre ytterligere substitusjon i en forbindelse med formel la. Som illustrert i Reaksjonsskjema XII, kan en forbindelse med formel XV, som kan fremstilles i henhold til reaksjonsskjemaene ovenfor, inkuberes i nærvær av et egnet enzym eller mikroorganisme som resulterer i dannelsen av en hydroksylert analog med formel XVI. En slik prosess kan benyttes for å gi regiospesifikk så vel som enantiospesifikk inkorporering av en hydroksylgruppe i et molekyl med formel XV med en spesifikk mikroorganisme eller med en rekke forskjellige mikroorganismer. Slike mikro organismer kan for eksempel være av bakterie-, gjær- eller sopp-natur og kan anskaffes fra leverandører, så som ATCC eller identifiseres for bruk i denne metode, som f.eks. etter kjente metoder. Forbindelse XVI er en forbindelse med formel la, hvor Y er som beskrevet ovenfor og Ai og A2fortrinnsvis er CR<7>.
Reaksjonsskjema XIII
Reaksjonsskjema XIII beskriver en annen fremgangsmåte for innføring av ytterligere substitusjon i en forbindelse med formel la. Som illustrert i Reaksjonsskjema XIII, kan en forbindelse med formel XVII, som kan fremstilles i henhold til reaksjonsskjemaene ovenfor, inkuberes i nærvær av et egnet enzym eller en mikroorganisme som resulterer i dannelsen av en diol-analog med formel XVIII. En slik prosess kan benyttes for å gi regiospesifikk så vel som enantiospesifkk omdannelse av en forbindelse med formel XVII til et 1-2-diol med formel XVIII med en spesifikk mikroorganisme eller med en rekke forskjellige mikroorganismer. Slike mikroorganismer kan for eksempel være av bakterie-, gjær- eller sopp-natur, og kan anskaffes fra leverandører så som ATCC eller identifiseres for bruk i denne fremgangsmåte, så som etter kjente fremgangsmåter. Forbindelse XVIII er en forbindelse med formel la, hvor Y er som beskrevet ovenfor og Ai og A2fortrinnsvis er CR<7>.
Alle stereokonfigurasjoner av de uspesifiserte kirale sentrene i forbindelsene med formel XV, XVI, XVII og XVIII kan inngå i fremgangsmåtene over, enten alene (det vil si tilnærmet fri for andre stereoisomerer) eller i blanding med andre stereoisomere former. Omdannelse av én isomer selektivt (f.eks. hydroksylering av ekso-isomeren fremfor hydroksylering av endo-isomeren) ved kontakting av en isomer blanding, er en foretrukket utførelsesform. Omdannelse selektivt til én isomer (f.eks. hydroksylering på ekso-siden «ekso-isomeren» fremfor til endo-siden «endo-isomeren» eller regioselektiv åpning av et epoksyd for å danne bare den ene av to mulige regioisomerer av en transdiol) er foretrukket. Hydroksylering av et akiralt mellomprodukt for å danne en enkelt optisk isomer av det hydroksylerte produkt er også en foretrukket. Spaltning av en racemisk blanding av et mellomprodukt ved selektiv hydroksylering, eller epoksyd-ringåpning og dioldannelse for å frembringe den ene av to mulige optiske isomerer, er også foretrukket. Betegnelsen «spaltning» betyr i denne sammenheng partiell, så vel som, fortrinnsvis, fullstendig spaltning.
Betegnelsene «enzymatisk prosess» eller «enzymatisk metode» betyr i denne sammenheng en prosess eller fremgangsmåte som gjør bruk av et enzym eller en mikroorganisme. Betegnelsen «hydroksylering» angir i denne sammenheng addisjonen av en hydroksylgruppe til en metylengruppe, som beskrevet ovenfor. Hydroksylering kan oppnås for eksempel ved kontakt med molekylært oksygen i henhold til fremgangsmåtene over. Dioldannelse kan oppnås for eksempel ved kontakt med vann i henhold til fremgangsmåtene over. Anvendelse av «et enzym eller en mikroorganisme» i de foreliggende fremgangsmåter omfatter anvendelse av to eller flere, så vel som et enkelt enzym eller mikroorganisme.
Det enzym eller den mikroorganisme som benyttes kan være et hvilket som helst enzym eller mikroorganisme som er i stand til å katalysere de her beskrevne enzymatiske omdannelser. De enzymatiske eller mikrobielle materialene kan uansett opprinnelse eller renhet, benyttes i fri tilstand eller immobilisert på en bærer, f.eks. ved fysisk adsorpsjon eller inneslutning. Mikroorganismer eller enzymer som er egnet kan selekteres ved screening for den ønskede aktivitet, for eksempel ved å kontakte en mikroorganisme- eller enzym-kandidat med en utgangsforbindelse XV eller XVII eller et salt derav, og registrere omdannelse til den tilsvarende forbindelse XVI eller XVIII eller et salt derav. Enzymet kan for eksempel være i form av dyre- eller plante-enzymer eller blandinger derav, mikroorganismeceller, knuste celler, ekstrakter av celler eller av syntetisk opprinnelse.
Eksempler på mikroorganismer inkluderer de innenfor slektene: Streptomyces eller Amycolatopsis. Særlig foretrukne mikroorganismer er de innenfor artene Streptomyces griseus, spesielt Streptomyces griseus ATCC 10137, og Amycolatopsis orientalis, så som ATCC 14930, ATCC 21425, ATCC 35165,
ATCC 39444, ATCC 43333, ATCC 43490, ATCC 53550, ATCC 53630, og spesielt ATCC 43491. Betegnelsen «ATCC» refererer seg i denne sammenheng til tilgangs-nummeret hos American Type Culture Collection, 10801 University Blvd., Manassas Virginia 20110-2209, deponeringsinstitusjonen for organismen det refereres til. Det vil være klart at mutanter av disse organismer også kan være aktuelle, for bruk i de fremgangsmåter som her er beskrevet, så som de som er modifisert ved anvendelsen av kjemiske, fysiske (for eksempel røntgen) eller biologiske midler (for eksempel ved molekylærbiologiske teknikker).
Foretrukne enzymer omfatter de som er avledet fra mikroorganismer, særlig de mikroorganismer som er beskrevet ovenfor. Enzymer kan isoleres, for eksempel ved ekstraksjons- og rensemetoder, så som fremgangsmåter kjent for fagmannen. Et enzym kan for eksempel benyttes i dets frie tilstand eller i immobilisert form. Ifølge én utførelsesform av oppfinnelsen adsorberes et enzym på en egnet bærer, f.eks. diatoméjord (porøs Celite Hyflo Supercel), mikroporøst polypropylen (Enka Accurel® polypropylenpulver), eller et ikke-ionisk polymert adsorberingsmiddel, som f.eks. Amberlite® XAD-2 (polystyren) eller XAD-7 (polyakrylat) fra Rohm & Haas Co. Når en bærer benyttes til å immobilisere et enzym, kan den kontrollere enzympartikkel-størrelsen og forhindre aggregering av enzympartiklene når de benyttes i et organisk løsningsmiddel. Immobilisering kan oppnås for eksempel ved utfelling av en vandig løsning av enzymet med kald aceton i nærvær av Celite Hyflo Supercel, etterfulgt av vakuumtørking, eller når det er tale om ikke-ioniske polymere adsorberingsmidler, inkubering av enzymløsninger med adsorbens på en ristemaskin, fjerning av overskuddsløsning og tørking av enzym/adsorbensharpikser under vakuum. Selv om det er ønskelig å benytte den minst mulige mengde enzym, vil den enzymmengde som fordres variere med den spesifikke aktivitet av det anvendte enzym.
Hydroksylering som beskrevet ovenfor, kan skje in vivo. For eksempel kan leverenzymer selektivt, i forhold til endo-isomeren, hydroksylere ekso-isomeren av en forbindelse som angitt over. Ved utførelse av fremgangsmåtene over utenfor kroppen, kan mikrosomal hydroksylase fra lever benyttes som enzymet for katalyse.
Disse fremgangsmåtene kan også foretas ved å benytte mikrobielle celler som inneholder et enzym som har evnen til å katalysere omdannelsene. Når en mikroorganisme benyttes for å bevirke omdannelsen, kan disse fremgangsmåtene lett foretas ved å tilsette cellene og utgangsmaterialet til det ønskede reaksjonsmedium.
Når mikroorganismer benyttes kan cellene anvendes i form av intakte, fuktige celler eller tørkede celler, så som lyofiliserte, forstøvningstørkede eller varmetørkede celler, eller i form av behandlet cellemateriale, som f.eks. sprengte celler eller celleekstrakter. Celleekstrakter immobilisert på Celite® eller Accurel® polypropylen, slik som tidligere beskrevet, kan også benyttes. Anvendelse av genetisk manipulerte organismer kan også være aktuelt. Vertscellen kan være en hvilken som helst celle, f.eks. Escherichia coli, modifisert til å inneholde et gen eller gener for å uttrykke ett eller flere enzymer som er i stand til katalyse slik som her beskrevet.
Når én eller flere mikroorganismer benyttes, kan de enzymatiske fremgangsmåtene over foretas etter fermenteringen av mikroorganismen (totrinns fermentering og konvertering), eller samtidig med denne, hvilket i sistnevnte tilfelle vil si ved in situ fermentering og konvertering (ett-trinns fermentering og konvertering).
Dyrkning av mikroorganismene kan foretas av fagmannen ved bruk av et passende medium. Passende medier for dyrkning av mikroorganismer, inkluderer de som gir nødvendige næringsstoffer for veksten av mikrobecellene. Et typisk vekst-medium inkluderer nødvendige karbonkilder, nitrogenkilder og elementer (f.eks. i spormengder). Inducere kan også tilsettes. Betegnelsen «inducer» innbefatter i denne sammenheng en hvilken som helst forbindelse som forsterker dannelsen av den ønskede enzymatiske aktivitet i mikrobecellen.
Karbonkilder kan omfatte sukkere, som f.eks. maltose, laktose, glukose, fruktose, glycerol, sorbitol, sakkarose, stivelse, mannitol og propylenglykol; organiske syrer som f.eks. natriumacetat og natriumcitrat; og alkoholer som f.eks. etanol og propanol.
Nitrogenkilder kan omfatte N-Z amin A, mais-støpevæske, soyamel, kjøtt-ekstrakter, gjærekstrakter, melasser, brødgjær, trypton, «nutrisoy», pepton, «yeastamin», aminosyrer, som f.eks. natriumglutamat og lignende, natriumnitrat og ammoniumsulfat.
Sporelementer kan omfatte magnesium-, mangan-, kalium-, kobolt-, nikkel-, jern-, natrium- og kaliumsalter. Fosfater kan også tilsettes i spormenger eller fortrinnsvis i mer enn spormengder.
Det anvendte medium kan inkludere mer enn én karbon- eller nitrogenkilde eller annet næringsstoff.
Foretrukne medier for vekst inkluderer vandige medier.
Agiteringen og luftingen av reaksjonsblandingen påvirker mengden av tilgjengelig oksygen under konverteringsprosessen når den foretas for eksempel i risteflaskekulturer eller fermentortanker under vekst av mikroorganismer.
Inkubering av reaksjonsmediet skjer fortrinnsvis ved en temperatur på mellom ca. 4 og ca. 60°C. Reaksjonstiden kan passende varieres avhengig av mengden anvendt enzym og dets spesifikke aktivitet. Reaksjonstidene kan reduseres ved å øke reaksjonstemperaturen og/eller øke mengden av enzym tilsatt til reaksjons-løsningen.
Det foretrekkes også å benytte en vandig væske som reaksjonsmediet, selv om en organisk væske, eller en blandbar eller ikke-blandbar (bifasisk) organisk/vandig væskeblanding også kan benyttes. Den mengde enzym eller mikroorganisme som benyttes i forhold til utgangsmaterialet, velges slik at den muliggjør katalyse av de enzymatiske konverteringene ifølge foreliggende oppfinnelse.
Løsningsmidler for den organiske fase av et bifasisk løsningsmiddelsystem kan være ethvert organisk løsningsmiddel som ikke er blandbart med vann, så som toluen, cykloheksan, xylen og triklortrifluoretan. Den vandige fase er hensiktsmessig vann, fortrinnsvis deionisert vann, eller en egnet vandig bufferløsning, spesielt en fosfatbufferløsning. Det bifasiske løsningsmiddelsystem omfatter fortrinnsvis mellom ca. 10 og 90 volum% organisk fase og mellom ca. 90 og 10 volum% vandig fase, og inneholder mest foretrukket ca. 20 volum% organisk fase og ca. 80 volum% av den vandige fase.
Et eksempel på en utførelsesform av slike prosesser starter med til-beredningen av en vandig løsning av de enzymer eller mikrober som skal benyttes. For eksempel kan de foretrukne enzymer eller mikrober tilsettes til en passende mengde av et vandig løsningsmiddel, som f.eks. fosfat buffer eller lignende. Denne blandingen justeres fortrinnsvis til en ønsket pH og holdes ved denne.
Forbindelsene XVI og XVIII fremstillet ved hjelp av fremgangsmåtene over kan isoleres og renses, for eksempel ved ekstraksjon, destillasjon, krystallisasjon og søylekromatografi.
Foretrukne forbindelser
Foretrukne forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse omfatter forbindelser med formel la eller salter eller stereoisomerer derav hvor symbolene har de følgende betydninger og er, for hver forekomst, uavhengig
valgt:
G er a) usubstituert eller substituert aryl som har fra 1 til 3 ringer, hver ring med 6 karbonatomer; eller b) usubstituert heteroaryl eller substituert heteroaryl valgt fra 3- til 7-leddede monocykliske ringer, 7- til 11 -leddede bicykliske ringer og 10- til 16-leddede tricykliske ringer og som har fra 1 til 3 heteroatomer valgt fra N, O og S; hvor nevnte substituerte aryl og nevnte substituerte heteroaryl er substituert med én eller flere substituenter valgt fra: Ci-C3alkyl, halogen, CF3, - C(OH)(CF3)2, OH, -0(Ci-C3alkyl), -OCF3, -N02, -NH2, -CN, -C(0)OCH3, - S(0)2-NH2, =0, -CH(CN)(fenyl), -S(0)(C^alkyl), -S(0)2(C^alkyl), -S(0)2N((Ci-3)alkyl)(fenyl), -O-(bromfenyl), fenyl, pyrrolyl, pyridyl, imidazolyl, tiazolyl og morfolinyl; en av Ai og A2er valgt fra CH, C(Ci-6alkyl) og C(substituert Ci-6alkyl) og den andre av Ai og A2er valgt fra CH, C(Ci-6alkyl), C(substituert Ci-6alkyl), - CH2OC(0)(Ci.6alkyl) og CR<7a>, hvor nevnte substituerte Ci.6alkyl er substituert med én eller flere substitutenter valgt fra OH, Br, CN, fenyl, morfolinyl, fluorfenoksy, bromfenoksy, cyanofenoksy, hydroksyfenoksy, trifluormetylfenoksy, benzisoksazol, fenylmetoksy, benzofuranyl, -0-fenyl-NHC(0)CH3, -S(0)n-fenyl-NHC(0)CH3, -NHS(0)2-fenyl, -NHC(O)-butyl, -NHC(0)-CF3og -NHC(0)0-butyl, hvor n er 0, 1 eller 2;
Y' er -CH2S-, -CH2S02- —0—, -CH20-, -S(=0)-, -C(=0)—NR-, -CH2NR-,
-CH2N(COR)- eller -CH2N(C02R)-, hvor nevnte gruppe R er valgt fra
hydrogen, Ci-6alkyl og fenyl;
W er -C(R<7>R<7>')—C(R<7>R<7>')-, -C(R<7>R<7>')—C(=0)- eller-CR<7>=CR<7>';
R<1>og R<1>' er hver uavhengig H, Ci.6alkyl, C3.7cykloalkyl, fenyl eller benzyl;
R<4>er H, d-galkyl, -S02R<1>eller -S02NR<1>R<1>';
R<5>er d-ealkyl, -C(=0)R<1>, -S02R<1>eller -S02NR<1>R<r>; og
R7 og R<7>' er hver uavhengig H, Ci.6alkyl eller Ci.6alkyl substituert med OH, halogen,
cyano, OR<4>, -NHR<4>,-NR<5>R<5>, -C(=0)R<1>, -OC(=0)R<1>, -C(=0)OR<1>,
-C(=0)NR<1>R<1>', -S02R<1>eller -S02NR1R1'; eller alternativt, hvor én av Ai og A2er CR<7a>kan nevnte R<7a>gruppe av Ai eller A2og en gruppe R7 eller R7 sammen danne en mettet heterocyklisk ring som har fra 3 til 8 ringelementer og som har en oksygen heteroatom;
eller alternativt kan nevnte R7 og R7 grupper bundet til to forskjellig karbonatomer være bundet sammen for å danne en kondensert, monocyklisk heterocyklisk gruppe med fra 3 til 8 ringelementer og med fra 1 til 3 heteroatomer valgt fra N, O eller S eller karbocyklisk ring som har fra 3 til 8 karbonatomer.
Spesielt fortrukne forbindeler med formel la er de følgende: (3aa,4a,7a,7aa)-2-(4-brom-3-metylfenyl)tetrahydro-4,7-etanotiopyrano[3,4-c]pyrrol-1,3,8(2H,4H)-trion (1C);
(3aa,4a,7a,7aa)-2-(4-brom-3-metylfenyl)tetrahydro-4,7-etanotiopyrano[3,4-c]pyrrol-1,3,8(2H,4H)-trion-5,5-dioksyd (2);
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(3-klorfenyl)heksahydro-4-metyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion (3);
(3aa,4a,7a,7aa)- og (3aa,4p,7p,7aa)-4-[(acetyloksy)metyl]-3a,4,7,7a-tetrahydro-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (henholdsvis 4i & 4ii);
(3aa,4a,7a,7aa)- og (3aa,4p,7p,7aa)-4-[(acetyloksy)metyl]-heksahydro-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (henholdsvis 5i & 5ii);
(3aa,4a,7a,7aa)- og (3aa,4p,7p,7aa)-3a,4,7,7a-tetrahydro-5-(hydroksymetyl)-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (henholdsvis éi & 6ii);
(3aa,4a,7a,7aa)-3a,4,7,7a-tetrahydro-5-(hydroksymetyl)-4-metyl-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (7);
(3aa,4p,7p,7aa)-2-[3,5-bis(trifluormetyl)fenyl]heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion (8);
(3aa,4a,7a,7aa)-2-(4-bromfenyl)oktahydro-1,3-diokso-4,7-eteno-5H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-5-karboksylsyre-fenylester (9);
(3aa,4a,7a,7aa)-2-(4-bromfenyl)oktahydro-1,3-diokso-4,7-eteno-5H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-5-karboksylsyre-fenylmetylester (10);
(3aa,4a,7a7aa)-heksahydro-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-etano-1H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-1,3(2H)-dion-trifluoracetat (11);
(3aa,4a,7a,7aa)-5-acetylheksahydro-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-etano-1H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-1,3(2H)-dion (12);
(3aa,4a,7a,7aa)-5-benzoylheksahydro-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-etano-1H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-1,3(2H)-dion (13);
(Saa^aJaJaaJ-heksahydro-S-metyl^-IS-OrifluormetyOfeny^J-etano-IH-pyrrolo[3,4-c]pyridin-1,3(2H)-dion (14);
(3aa,4a,7a7aa)-heksahydro-5-(fenylmetyl)-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-etano-1H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-1,3(2H)-dion-trifluoracetat (15);
(3aa,4a,7a,7aa)-heksahydro-5-propyl-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-etano-1H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-1,3(2H)-dion-trifluoracetat (16);
(3aa,4a,4ap,5ap,6a,6aa)-2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]dekahydro-1,3-diokso-4,6-(iminometano)cykloprop[f]isoindol-7-karboksylsyre-fenylmetylester (17);
(3aa,4a,4ap,5ap,6a,6aa)-4-[dekahydro-1,3-diokso-4,6-(iminometano)cykloprop[f]-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril (18);
(3aa,4a,4ap,5ap,6a,6aa)-4-[dekahydro-7-metyl-1T3-diokso-4,6-(iminometano)-cykloprop[f]isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril (19);
(3aa,4p,7p,7aa)-4-(oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril (20B);
(3aa,4p7p7aa)-N-[4-[[2-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4T7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etyl]tio]fenyl]acetamid (21E);
(3aa,4p7p7aa)-N-[4-[[2-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso^j-epoksy-^H-isoindol^-yljetyllsulfinyljfenyliacetamid (22);
(3aa,4p7p7aa)-N-[4-[[2-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etyl]sulfonyl]fenyl]acetamid (23);
(3aa,4p,7p,7aa)- og (3aa,4a,7a,7aa)-N-[2-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]-oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4J-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etyl]benzensulfonamid (henholdsvis 24Ci & 24CN);
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-1T3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril (25B);
(3aa,4a,7a,7aa)-og (Saa^pjpjaaJ-N-^-p-p-^-cyano-S^trifluormetyOfenyl]-oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4>7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etoksy]fenyl]acetamid (henholdsvis 26Ci & 26CN);
(3aa,4a,7a,7aa)-heksahydro-2-(2-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (27D);
(1aa,2p,2aa,5aa,6p,6aa)-heksahydro-4-(2-naftalenyl)-2,6-epoksy-3H-oksireno[f]-isoindol-3,5(4H)-dion (28B);
(3aa,4a7a7aa)-2-[4-brom-3-(trifluormetyl)fenyl]-3a,4,7,7a-tetrahydro-4,7-dimetyl-4,7-epitio-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion-8-oksyd (29);
(3aa,4a,7a,7aa)-2-[4-brom-3-(trifluormetyl)fenyl]-3a,4,7,7a-tetrahydro-4,7-epitio-1H-isoindol-1,3(2H)-dion-8-oksyd (30);
(3aa,4a,7a,7aa)-heksahydro-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-imino-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (31D);
(3aa,4p,7p,7aa)-og (Saa^aJaJaaJ-Sa^JJa-tetrahydro^J-dimetyl^-IS-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (henholdsvis 32i & 32ii);
(3aa,4a,7a,7aa)-heksahydro-4,7-dimetyl-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion (33);
(3aa,4a,7a,7aa)-tetrahydro-5-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-eteno-1H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-1,3,6(2H>5H)-trion (34B);
(3aa>4p>7p,7aa)-4-[4-[2-(4-fluorfenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1>3-diokso-4>7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril (35);
(3aa,4p>7p>7aa)-4-[4-(2-brometyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4>7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril (36);
(3aa,4p,7P7aa)-heksahydro-4,7-dimetyl-2-(3-metyl-4-nitrofenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion (37);
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(2-fluorenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-[3-klor-4-(4-morfolinyl)fenyl]heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(2,3-dihydro-1H-inden-5-yl)heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-brom-1 -naftalenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-klor-1 -natfalenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p7P7aa)-2-(5-amino-1-naftalenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(7-hydroksy-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(4-nitro-1 -naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(1 H-indol-5-yl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(1 H-indazol-6-yl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(1,3-benzodioksol-5-yl)-heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-[4-amino-3-(trifluormetyl)fenyl]heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H-dion;
(3aa,4p,7p>7aa)-2-(3-klor-4-jodfenyl)heksahydro-4>7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(8-kinolinyl)-4>7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(2,3-dihydro-1,4-benzodioksin-6-yl)heksahydro-4>7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-[2-okso-4-(trifluormetyl)-2H-1-benzopyran-7-yl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7P7aa)-heksahydro-2-(4-metyl-2-okso-2H-1-benzopyran-7-yl)-4,7-epoksy-
1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(2,5-dimetoksy-4-nitrofenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2,3,5,6-tetrafluor-4-(oktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)benzonitril; (3aa,4p>7p>7aa)-heksahydro-2-(2>4>5-trifluorfenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(2,4,5-triklorfenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(2-amino-4,5-diklorfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(3,4-difluorfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (Saa^pJpJaaJ-l-acetyl^.S-dihydro-e^oktahydro-I.S-diokso^J-epoksy^H-isoindol-2-yl)-1 H-indol; (3aa>4p,7p>7aa)-2-(3-klor-4-fluorfenyl)heksahydro-4>7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa>4p,7p>7aa)-2-(3>4-diklorfen<y>l)heksah<y>dro-4>7-e<p>oks<y->1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p>7p>7aa)-heksahydro-2-(3>4>5-triklorfenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(3-klor-4-metoksyfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p>7aa)-2-(3-klor-4-metylfenyl)heksahydro-4>7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7P7aa)-heksahydro-2-(2-metyl-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p>7aa)-2-(4-klor-3-metylfenyl)heksahydro-4>7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p>7aa)-2-(3>4-dimetylfenyl)heksahydro-4>7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-[4-brom-3-(trifluormetyl)fenyl]heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7P,7aa)-2-(4-brom-3-metylfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p>7aa)-2-(4-fluor-3-nitrofenyl)heksahydro-4>7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-[4-fluor-3-(trifluormetyl)fenyl]heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion: (3aa,4p,7p>7aa)-2-(4-klor-3-nitrofenyl)heksahydro-4>7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7P,7aa)-2-[4-klor-3-(trifluormetyl)fenyl]heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-klor-2-metoksy-5-metylfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-amino-3-nitrofenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p>7aa)-heksahydro-2-(4-metyl-3-nitrofenyl)-4>7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(3,4-dimetoksyfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(3-hydroksy-4-metoksyfenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(4-metyl-5-nitro-2-pyridinyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-klor-4-(oktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-a-fenylbenzenacetonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(2-metoksy-3-dibenzofuranyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa>4p>7p>7aa)-heksahydro-2-(2>3,4-trifluorfenyl)-4>7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(2,3-dihydro-2-metyl-1,3-diokso-1H-isoindol-5-yl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-brom-2,3,5,6-tetrafluorfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(2-hydroksy-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p>7aa)-2-[2>5-diklor-4-(1H-pyrrol-1-yl)fenyl]heksahydro-4>7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-[4-(metoksymetyl)-2-okso-2H-1-benzopyran-7-yl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(6-benzotiazolyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-metoksy-4-(oktahydro-1,3-diokso-4>7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)benzoesyre-metylester;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-metyl-5-(oktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(2-okso-2H-1-benzopyran-6-yl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p7P7aa)-heksahydro-2-(2,3,5,6-tetrametyl-4-nitrofenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p>7p>7aa)-heksahydro-2-(2,4>5-trimetylfenyl)-4>7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p7aa)-2-(4-fluor-3-metylfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(3-metoksy-4-metylfenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-N-etyl-2-metyl-5-(oktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-N-fenylbenzensulfonamid;
(Saa^pJpJaa^.e-dibrom^-^ktahydro-I.S-diokso^J-epoksy^H-isoindol^-yl)-benzensulfonamid;
(3aa,4p,7p,7aa)-2,4-dimetyl-6-(oktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-3-pyridinkarbonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(2,3-dimetyl-1H-indol-5-yl)-heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(3-dibenzofuranyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p>7aa)-heksah<y>dro-2-(2,-h<y>droks<y>[1,1':3',1 "-terfenyl]-5'-yl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(5,6,7,8-tetrahydro-3-hydroksy-2-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(2,3-dihydro-1H-indol-6-yl)heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(1,3-dihydro-2,2-dioksidobenzo[c]tiofen-5-yl)heksahydro-4>7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(2-hydroksy-4,5-dimetylfenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(2,3-dihydro-2,2,3,3-tetrafluor-1,4-benzodioksin-6-yl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(1 H-indazol-5-yl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p7P7aa)-2-(4-amino-2,3,5,6-tetrafluorfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p>7aa)-2-(4-brom-3-klorfenyl)heksahydro-4>7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(5-hydroksy-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(Saa^pJpJaaH-^ktahydro-I.S-diokso^J-epoksy^H-isoindol^-yl^-Orifluor-metyl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-morfolinyl)-5-(oktahydro-1,3-diokso-4J7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-benzoesyre-metylester;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-fluor-5-(oktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(2-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(9-etyl-9H-karbazol-3-yl)heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p>7p>7aa)-2-[1>2-dihydro-8-metyl-2-okso-4-(trifluormetyl)-7-kinolinyl]-heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4a,7a,7aa)-heksahydro-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4a,7a,7aa)-heksahydro-2-(4-nitro-1 -naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-brom-3-metylfenyl)-3a,4,7,7a-tetrahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-3a,4,7,7a-tetrahydro-2-(2-naftalenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p>7p>7aa)-2-(9-etyl-9H-karbazol-3-yl)-3a>4>7,7a-tetrahydro-4>7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p>7p>7aa)-2-[4-fluor-3-(trifluormetyl)fenyl]-3a>4>7>7a-tetrahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(Saa^pJpJaaJ-l-II^-dihydro-S-metyl^-okso^trifluormetyO^-kinolinyll-Sa^JJa-tetrahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4a,7a,7aa)-4-[(acetyloksy)metyl]-2-(4-brom-3-metylfenyl)-3a,4,7,7a-tetrahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p7P7aa)-4-[(acetyloksy)metyl]-2-(4-brom-3-metylfenyl)-3a,4,7,7a-tetrahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4,7-dimetyl-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7P7aa)-4-(oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-1-naftalenkarbonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-(benzo[b]tiofen-3-yl)-heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4,7-dimetyl-2-[4-nitro-3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa>4p>7p>7aa)-4-(1,3>3a>4>7>7a-heksahydro-4>7-dimetyl-1>3-diokso-4>7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-1-naftalenkarbonitril;
(3aa,4a,7a,7aa)-heksahydro-4-metyl-2-(2-naftalenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-brom-3-metylfenyl)heksahydro-4-metyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4-metyl-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(3,5-diklorfenyl)heksahydro-4-metyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(3-klor-4-fluorfenyl)heksahydro-4-metyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-metoksy-4-(oktahydro-1,3-diokso-4-metyl-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-1 -naftalenkarbonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4-metyl-2-[4-nitro-3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-[4-(1H-imidazol-1-yl)fenyl]-4-metyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-[3-klor-4-(2-tiazolyl)fenyl]heksahydro-4-metyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4a,7a,7aa)-2-(3,5-diklorfenyl)heksahydro-4,7-imino-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4a,7a,7aa)-2-(4-brom-1 -naftalenyl)heksahydro-4 J-imino-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4a,7a,7aa)-2-(4-brom-3-metylfenyl)heksahydro-4,7-imino-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4a,7a,7aa)-heksahydro-2-(4-nitro-1 -naftalenyl)-4,7-imino-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4a,7a,7aa)-8-acetyl-2-(3,5-diklorfenyl)heksahydro-4,7-imino-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4a,7a,7aa)-oktahydro-1,3-diokso-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-etano-5H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-5-karboksylsyre-fenylester;
(3aa,4a,7a,7aa)-4-(oktahydro-1,3-diokso-4,7-etano-2H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-2-yl)-1-naftalenkarbonitril;
(3aa,4a,7a,7aa)-4-(oktahydro-5-metyl-1,3-diokso-4,7-etano-2H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-2-yl)-1 -naftalenkarbonitril;
(3aa,4a,7a,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)oktahydro-1,3-diokso-4,7-eteno-5H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-5-karboksylsyre-fenylmetylester;
(3aa,4a,7a,7aa)-4-(oktahydro-1,3-diokso-4,7-etano-2H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4a,7a,7aa)-4-(oktahydro-5-metyl-1,3-diokso-4,7-etano-2H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4a,7a,7aa)-2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]-oktahydro-1,3-diokso-4,7-eteno-5H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-5-karboksylsyre-fenylmetylester;
(3aa,4a,7a,7aa)-2-[4-brom-3-(trifluormetyl)fenyl]tetrahydro-5-metyl-4,7-eteno-1H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-1>3,6(2H>5H)-trion;
(3aa,4a,7a,7aa)-tetrahydro-5-metyl-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-eteno-1H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-1>3,6(2H>5H)-trion;
(3aa,4a,7a,7aa)-tetrahydro-5-metyl-2-(2-naftalenyl)-4,7-eteno-1H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-1,3>6(2H,5H)-trion;
(1aa,2p,2aa,5aa,6p,6aa)-heksahydro-4-[3-(trifluormetyl)fenyl]-2,6-epoksy-3H-oksireno[f]isoindol-3,5(4H)-dion;
(1aa>2p>2aa>5aa>6p,6aa)-4-(3>5-diklorfenyl)heksahydro-2>6-epoksy-3H-oksireno[f]isoindol-3,5(4H)-dion;
(1aa,2p,2aa,5aa,6p,6aa)-heksahydro-4-(4-nitro-1-naftalenyl)-2,6-epoksy-3H-oksireno[f]isoindol-3,5(4H)-dion;
(1aa,2p,2aa,5aa,6p,6aa)-4-(3,4-diklorfenyl)heksahydro-2,6-epoksy-3H-oksireno[f]isoindol-3,5(4H)-dion;
2-[4-(4-bromfenoksy)fenyl]-3a,4,7,7a-tetrahydro-4>7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
Sa^JJa-tetrahydro^^-metoksyfenylHJ-dimetyWJ-epoksy-l H-isoindol-1,3-(2H)-dion;
[(1,2,3,3a,7,7a-heksahydro-2-fenyl-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl)metyl]karbaminsyre-(3,5-dimetoksyfenyl)metylester;
2-(2>4-dimetylfenyl)-3a,4,7,7a-tetrahydro-4-(hydroksymetyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
2-(1>3-benzodioksol-5-yl)-3a,4,7,7a-tetrahydro-4-metyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
4-[bis(acetyloksy)metyl]-2-(3-bromfenyl)-3a,4J7,7a-tetrahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
N-III^.S^aJJa-heksahydro^^^^-trimetylfenylHJ-epoksy^H-isoindoM-yl]metyl]-2,2-dimetylpropanamid;
3a,4,7,7a-tetrahydro-4-(hydroksymetyl)-2-[2-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
3a,4,7,7a-tetrahydro-4-(hydroksymetyl)-2-(1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
2-klor-5-(1,3,3a,4,7,7a-heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-benzosyre-metylester;
4-[bis(acetyloksy)metyl]-2-(4-brom-2-nitrofenyl)-3a,4,7>7a-tetrahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
3a,4>7>7a-tetrahydro-4-metyl-2-(4-metyl-3-nitrofenyl)-4>7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
2-[2-klor-5-(trifluormetyl)fenyl]-3a,4,7,7a-tetrahydro-4-metyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
2-[4-klor-3-(trifluormetyl)fenyl]-3a,4,7,7a-tetrahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
2-(1>3,3a,4,7,7a-heksahydro-4-metyl-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-benzonitril;
2-(4-fluorfenyl)-3a,4J7a-tetrahydro
2,2,2-trifluor-N-[(1J2,3,3a,7,7a-heksahydro-2-fenyl-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl)-metyl]acetamid;
3a,4J7a-tetrahydro-47-dimetyl-2-(4-metyl-3-nitrofenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
2-klor-5-[1,3,3a,4,7,7a-heksahydro-4-(hydroksymetyl)-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-benzoesyre;
3a,4,7,7a-tetrahydro-4,7-dimetyl-2-(4-nitrofenyl)-4>7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
3a,4,7,7a-tetrahydro-2-(2-merkaptofenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
[P^-klorfenyO-I^.S.SaJJa-heksahydro^J-epoksy^H-isoindoM-yl]-metyl]karbaminsyre-2-metylpropylester;
N-[[2-(4-klorfenyl)-1,2>3>3a>7>7a-heksahydro-4>7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]metyl]-2>4>6-trimetylbenzensulfonamid;
[(1,2,3,3a,7,7a-heksahydro-2-fenyl-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl)metyl]karbaminsyre-1,1-dimetyletylester;
N-III^.S^aJJa-heksahydro^^-nitrofenylHJ-epoksy^H-isoindoM-ynmetyl]^^-dimetylpropanamid;
2-(2>4-diklorfenoksy)-N-[[1,2>3>3a,7>7a-heksahydro-2-(4-nitrofenyl)-4>7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]metyl]acetamid;
N-III^.S^aJJa-heksahydro^^-metylfenylHJ-epoksy^H-isoindoM-yllmetyll-S.S-dimetoksybenzamid;
N-[[2-(4-klorfenyl)-1,2>3>3a>7>7a-heksahydro-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]metyl]-2-nitrobenzensulfonamid;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-[(1 S)-1-fenyletyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-[(1 S)-2-hydroksy-1 -fenyletyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4aT7a,7aa)-3a,4,7,7a-tetrahydro-2-[(1 S)-1 -fenyletyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p>7p,7aa)-heksahydro-2-(4-morfolinylmetyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-1>3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)- og (3aa,4a,7a,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-(fenylmetyl)-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p7p7aa)-(4-[7-[2-(4-bromfenoksy)etyl]oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-4>7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7P7aa)-4-[oktahydro-7-[2-(4-jodfenoksy)etyl]-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p7P7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[4-(trifluormetyl)fenoksy)etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-7-[2-(4-metoksyfenoksy)etyl]-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[7-[2-(4-etoksyfenoksy)etyl]oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7P,7aa)-4-[7-[2-(4-klorfenoksy)etyl]oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p7P7aa)-4-[2-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etoksy]-benzoesyre-metylester;
(3aa,4p7P7aa)-heksahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-2-(3-metyl-4-nitrofenyl)-4>7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[4-(trifluormetoksy)fenoksy]-etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7P,7aa)-2-(3,5-diklorfenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4,7-dimetyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-propannitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-7-[2-(4-morfolinyl)etyl]-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril-trifluoracetat;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(5-fluor-1-naftalenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(5-fluor-4-nitro-1-naftalenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-
1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p7aa)-2-(1,1-dioksidobenzo[b]tiofen-3-yl)heksahydro-47-dimetyl-4T7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p>7p>7aa)-tetrahydro-4>7-dimetyl-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3,5(2H,4H)-trion;
(3aa,4a,7a,7aa)-tetrahydro-4,7-dimetyl-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3,5(2H,4H)-trion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(5-klor-1-naftalenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(5-klor-4-nitro-1-naftalenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-
1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-etylheksahydro-7-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p>7p,7aa)-heksahydro-4-metyl-2-(2-naftalenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion, hurtigere eluerende enantiomer;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4-metyl-2-(2-naftalenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion, langsommere eluerende enantiomer;
(Saa^p^p.ep^P^aaH-^ktahydro^.S^J-tetrametyl-I.S-diokso^J-epoksy^H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[4-(trifluormetyl)fenoksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril, hurtigere eluerende antipode;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[4-(trifluormetyl)fenoksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril, langsommere eluerende enantiomer;
(3aa,4p,5p,7p,7aa)-4-(oktahydro-5-hydroksy-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,5a,7p,7aa)-4-(oktahydro-5-hydroksy-4,7-dimetyl-1>3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(aR)-a-metoksybenzen-eddiksyre-2[(3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)-oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etylester;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(metyltio)-4-(oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(metylsulfinyl)-4-(oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)benzonitril;
(3aa,4p7P7aa)-2-(metylsulfonyl)-4-(oktahydro-47-dimetyl-1,3-diokso-47-epoksy 2H-isoindol-2-yl)benzonitril;
(3aa,4p>5p,7p,7aa)-heksahydro-5-hydroksy-7-(2-hydroksyetyl)-4-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,5p,7p,7aa)-7-[2-(4-fluorfenoksy)etyl]heksahydro-5-hydroksy-4-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(Saa^p.Sp.epjpJaaM-^ktahydro-S.e-dihydroksy^J-dimetyl-I.S-diokso^J-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,5a,6a,7p,7aa)-4-(oktahydro-5,6-dihydroksy-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p>5p>6p>7p>7aa)-4-[oktahydro-5>6-dihydroksy-4-(hydroksyetyl)-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
(Saa^p.Sp.epjpJaaH-Ioktahydro-S.e-dihydroksy^-metyl-I.S-diokso^-p-^-(trifluormetyl)fenoksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,5p,5ap,8aa,8ba)-4-(dekahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4>8a-epoksy-2H-furo[3,2-e]isoindol-2-yl)-1-naftalenkarbonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4J7-epoksy-4H-isoindol-4-eddiksyre;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4>7-epoksy-4H-isoindol-4-eddiksyre-metylester;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)-N-[(4-fluorfenyl)metyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-acetamid;
[3aR-(3aa,4p,7p>7aa)]-4-[oktahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-1>3-diokso-4>7-epoksy-2 H-isoindol-2-y I]-1 -nafta len ka rbon itril;
[3aS-(3aa,4p>7p,7aa)]-4-[oktahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-1>3-diokso-4>7-epoksy-2 H-isoindol-2-y I]-1 -nafta len ka rbon itril;
[3aR-(3aa,4p>7p>7aa)]-4-[4-[2-(3-fluorfenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4>7-epoksy-2 H-isoindol-2-y I]-1 -nafta len ka rbon itril;
[3aS-(3aa,4p>7p,7aa)]-4-[4-[2-(3-fluorfenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1>3-diokso-4>7-epoksy-2 H-isoindol-2-y I]-1 -nafta len ka rbon itril;
(3aa,4p>7p,7aa)-4-[oktahydro-4-(2-hydroksyetyl)-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1 -naftalenkarbonitril;
(3aa,4p,6p7P7aa)-4-[4-[2-(4-cyanofenoksy)etyl]oktahydro-6-hydroksy-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aS-(3aa,4p>5p,7p>7aa)]-4-[oktahydro-5-hydroksy-7-(2-hydroksyetyl)-4-metyl-1>3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aR-(3aa,4p,5p>7p>7aa)]-4-[oktahydro-5-hydroksy-7-(2-hydroksyetyl)-4-metyl-1>3-diokso-4T7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-(4-cyanofenoksy)etyl]-7-etyloktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2 H-isoindol-2-y I]-1 -nafta len ka rbon itril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[2-(acetyloksy)etyl]-2-(4-cyano-1-naftalenyl)heksahydro-7-metyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[3-(4-cyanofenyl)propyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2 H-isoindol-2-y I]-1 -nafta len ka rbon itril;
(3aa,4p,7p>7aa)-4-[4-[2-[(6-klor-1>2-benzisoksazol-3-yl)oksy]etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aS-(3aa,4p>5p,7p>7aa)]-4-[7-[2-(1>2-benzisoksazol-3-yloksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3a R-(3aa,4p, 5p, 7p, 7aa)]-4-[7-[2-( 1,2-benzisoksazol-3-yloksy)etyl]oktahyd ro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
(3aa,4p,5p,7p,7aa)-4-(oktahydro-5-hydroksy-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzon itril;
(3aa,4p,5p,7p,7aa)-4-(oktahydro-5-hydroksy-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzon itril;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)oktahydro-1,3-diokso-7-[2-(fenylmetoksy)etyl]-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-propannitril;
(3aa,4a,7a,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)oktahydro-1,3-diokso-7-[2-(fenylmetoksy)etyl]-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-propannitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)oktahydro-7-(2-hydroksyetyl)-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-propannitril;
(3aa,4a,7a,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)oktahydro-7-(2-hydroksyetyl)-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-propannitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)-7-[2-(4-fluorfenoksy)etyl]oktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-propannitril;
(3aa,4p7P7aa)-2-(7-klor-2J,3-benzoksadiazol-4-yl)heksahydro-47-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(7-klor-2-metyl-4-benzofuranyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(7-klor-2-metylbenzo[b]tiofen-4-yl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
[3aS-(3aa,4p,5p>7p>7aa)]-4-[7-[2-(acetyloksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aR-(3aa,4p,5p,7p7aa)]-4-[oktahydro-5-hydroksy-7-(2-hydroksyetyl)-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
(3aa,4p,7p>7aa(E)]-4-[oktahydro-4-metyl-1>3-diokso-7-(4-okso-4-fenyl-2-butenyl)-4>7-epoksy-2 H-isoindol-2-y I]-1 -nafta len ka rbon itril;
(3aa,4p,7p,7aa)-(4-[7-[2-(4-bromfenoksy)etyl]oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-4>7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-7-[2-(4-jodfenoksy)etyl]-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[4-(trifluormetyl)fenoksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-7-[2-(4-metoksyfenoksy)etyl]-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[7-[2-(4-etoksyfenoksy)etyl]oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[7-[2-(4-klorfenoksy)etyl]oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[2-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etoksy]benzoesyre-metylester;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-2-(3-metyl-4-nitrofenyl)-4>7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[4-(trifluormetoksy)fenoksy]-etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(3,5-diklorfenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p7P7aa)-heksahydro-47-dimetyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p7P7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[4-(fenylmetoksy)fenoksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa>4p>7p,7aa)-4-[2-(4-fluorfenoksy)etyl]heksahydro-7-metyl-2-(3-metyl-4-nitrofenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[4-[(trifluormetyl)tio]fenoksy]-etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-7-[2-(4-nitrofenoksy)etyl]-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[2-(4-fluorfenoksy)etyl]heksahydro-7-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(Saa^pJpJaaH-Ioktahydro^-metyl-I.S-diokso^-p-p-OrifluormetyOfenoksyletyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-(2-bromfenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2 H-isoindol-2-y l]-2-(trifluormetyl)benzon itri I;
(3aa>4p>7p,7aa)-4-[4-[2-(3-fluorfenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1>3-diokso-4>7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-[4-(1H-imidazol-1-yl)fenyl]-4-metyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p>7aa)-2-[3-klor-4-(2-tiazolyl)fenyl]heksahydro-4-metyl-4>7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4,7-dimetyl-2-(3-metyl-4-nitrofenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4,7-dimetyl-2-(2-metyl-4-nitrofenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p>7aa)-2-(3>5-diklorfenyl)heksahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-4>7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa>4p,7p>7aa)-2-(3>5-diklorfenyl)-4-[2-(4-fluorfenoksy)etyl]heksahydro-7-metyl-4>7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p7P7aa)-4-[oktahydro-4-[2-(4-hydroksyfenoksy)etyl]-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-(4-cyanofenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p7p7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[3-(trifluormetyl)fenoksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(Saa^pJpJaaH-^-p^S-bromfenoksyJetyljoktahydro^-metyl-I.S-diokso^J-epoksy-2 H-isoindol-2-y l]-2-(trifluormetyl)benzon itri I;
(3aa,4p7P7aa)-4-[4-[(4-fluorfenyl)metyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4T7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p7P7aa)-2-(1,6-dihydro-1-metyl-6-okso-3-pyridinyl)heksahydro-4>7-dimetyl-4,7-epoksy-l H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4,7-dimetyl-2-(1-metyl-6-okso-3-piperidinyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-(3-cyanofenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etoksy]-benzoesyre-fenylmetylester;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-(2-fenoksyetyl)-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(3,5-diklor-4-nitrofenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(3,5-diklor-4-hydroksyfenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-
1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(5-fluor-1-naftalenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4,7-dimetyl-2-(1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-[3-metoksy-4-(5-oksazolyl)fenyl]-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4-[2-(4-metoksyfenoksy)etyl]-7-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4-metyl-2-(4-nitro-1-natfalenyl)-7-[2-[4-(trifluormetyl)fenoksy]etyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-7-[2-(4-nitro-fenoksy)etyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(1,6-dihydro-1,4-dimetyl-6-okso-3-pyridinyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-7-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etoksy]-benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-(oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-1,2-benzendikarbonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-(2-brometyl)heksahydro-7-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-(4-cyanofenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2 H-isoindol-2-y I]-1 -nafta len ka rbon itril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-[2-(4-metoksyfenoksy)etyl]-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2 H-isoindol-2-y I]-1 -nafta len ka rbon itril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-[2-(3-metoksyfenoksy)etyl]-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2 H-isoindol-2-y I]-1 -nafta len ka rbon itril;
(3aa,4p>7p>7aa)-4-[4-[2-(3-fluorfenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4>7-epoksy-2 H-isoindol-2-y I]-1 -nafta len ka rbon itril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-7-[2-[3-(4-morfolinyl)fenoksy]etyl]-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
(Saa^pJpJaaH-Ioktahydro^-metyl^-p-^-nitro-S-OrifluormetyOfenoksyletyll-I.S-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-(3-cyanofenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2 H-isoindol-2-y I]-1 -nafta len ka rbon itril;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(2,3-dihydro-3-metyl-2-okso-6-benzotiazolyl)heksahydro-4>7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(2,3-dihydro-2-okso-6-benzotiazolyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-[3-(dimetylamino)fenoksy]etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
(3aa,4p7P7aa)-4-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etoksy]-1,2-benzendikarbonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-N-[2-cyano-5-(oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)fenyl]acetamid;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-(oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetoksy)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-metoksy-4-(oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-benzonitril;
(3aa,4p7p7aa)-2-[4-(4,5-diklor-1H-imidazol-1-yl)fenyl]heksahydro-47-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-[4-(4-brom-1-metyl-1H-pyrazol-3-yl)fenyl]heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-1>3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-jod-4-(oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-(4-fluorfenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2 H-isoindol-2-y I]-1 -nafta len ka rbon itril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[4-(trifluormetyl)fenoksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-(4-cyano-3-fluorfenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
(Saa^pJpJaaH-Ioktahydro^-metyl-I.S-diokso^-p-p.S.S.e-tetrafluoM-(trifluormetyl)fenoksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
(Saa^pJpJaaJ-heksahydro^J-dimetyl^-^IH-l^^-triazol-S-yOfenylHJ-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-[4-(4,5-dihydro-5-okso-1,2,4-oksadiazol-3-yl)fenyl]heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-[3-metoksy-4-(2-oksazolyl)fenyl]-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(4-hydroksy-1-naftalenyl)-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p7P7aa)-heksahydro-2-(8-hydro isoindol-1,3(2H)-dion-trifluoracetat;
(3aa,4p7P7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[metyl(fenylmetyl)amino]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4,7-dimetyl-2-(5-kinolinyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(Saa^pJpJaaJ-S^oktahydro^J-dimetyl-I.S-diokso^J-epoksy^H-isoindol^-yl)^-pyridinkarbon itril;
(3aa,4p,7p,7aa)-5-(oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-8-kinolinkarbonitril;
(3aa,4p7P7aa)-2-(5-brom-4-nitro-1-naftalenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p>7p,7aa)-heksahydro-4>7-dimetyl-2-[8-(trifluormetyl)-4-kinolinyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
4-fluorbenzoesyre-2-[(3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etylester;
(3aa,4pj7p,7aa)-heksahydro-4-metyl-7-[2-[4-(metylsulfonyl)fenoksy]etyl]-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(2-naftalenyl)-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-klor-1-naftalenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(aS)-a-metoksy-a-(trifluormetyl)-benzeneddiksyre-2-[(3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etylester;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-7-[3-(1-naftalenyl)propyl]-1,3-diokso-4,7-epoksy-2 H-isoindol-2-y I]-1 -nafta len ka rbon itril;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4,7-dimetyl-2-(2-metyl-6-kinolinyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(5-isokinolinyl)-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p,7p,7aa)-2-(6-benzotiazolyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion;
[3aR-(3aa,4p7p7aa)]-4-[oktahydro-4-[2-(3-metoksyfenoksy)etyl]-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aS-(3aa,4pJp7aa)]-4-[oktahydro-4-[2-(3-metoksyfenoksy)etyl]-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aR-(3aa,4p,7p>7aa)]-4-[4-[2-(4-cyanofenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1>3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aS-(3aa,4p>7p,7aa)]-4-[4-[2-(4-cyanofenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1>3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
(3aa,4a7a7aa)-4-[4-[(4-fluorfenyl)metyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril;
(3aa,4a,7a,7aa)-2-(1,6-dihydro-1,4-dimetyl-6-okso-3-pyridinyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion;
(3aa,4p>7p>7aa)-2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]oktahydro-1,3-diokso-7-[2-(fenylmetoksy)etyl]-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-propannitril;
(3aa,4p>7p>7aa)-2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]oktahydro-1,3-diokso-7-[2-(fenylmetoksy)etyl]-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-propannitril;
(3aa,4p,7p,7aa)-4-[7-[2-(4-cyanofenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aR-(3aa,4p,7p>7aa)]-4-[7-[2-[(5-klor-2-pyridinyl)oksy]etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aS-(3aa,4p>7p,7aa)]-4-[7-[2-(4-klorfenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1>3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aR-(3aa>4p,7p>7aa)]-4-[7-[2-(4-klorfenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1>3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aS-(3aa,4p>7p,7aa)]-4-[7-[2-(4-acetylfenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aR-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[7-[2-(4-acetylfenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aS-(3aa,4p>7p,7aa)]-4-[7-[2-(3-cyanofenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aR-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[7-[2-(3-cyanofenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aS-(3aa,4p7p7aa)]-4-[oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[(5,6,7,8-tetrahydro-1 -naftalenyl)oksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1 -naftalenkarbonitril;
[3aR-(3aa,4p>7p>7aa)]-4-[oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1>3-diokso-7-[2-[(5,6>7>8-tetrahydro-1-naftalenyl)oksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aS-(3aa,4p>7p,7aa)]-4-[7-[2-(4-fluorfenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1>3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aR-(3aa>4p>7p,7aa)]-4-[7-[2-(4-fluorfenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1>3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aS-(3aa,4pJ7p,7aa)]-4-[7-[2-(3,5-dimetoksyfenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aR-(3aa>4p,7p>7aa)]-4-[7-[2-(3>5-dimetoksyfenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-1-naftalenkarbonitril;
[3aR-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[7-[2-(4-klor-3-metylfenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aR-(3aa,4p>7p>7aa)]-4-[7-[2-(4-cyano-2,3-difluorfenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aR-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[4-etyloktahydro-7-(2-hydroksyetyl)-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aS-(3aa,4p>7p,7aa)]-4-[4-etyloktahydro-7-(2-hydroksyetyl)-1>3-diokso-4>7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril;
[3aR-(3aa,4p,7p>7aa)]-4-[4-[2-(4-cyanofenoksy)etyl]-7-etyloktahydro-1>3-diokso-4>7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1 -naftalenkarbonitril; og
[3aS-(3aa,4p>7p,7aa)]-4-[4-[2-(4-cyanofenoksy)etyl]-7-etyloktahydro-1>3-diokso-4>7-epoksy-2 H-isoindol-2-y I]-1 -nafta len ka rbon itril.
Anvendelse og nytteverdi
Forbindelsene over modulerer virkningen av nukleære hormonreseptorer (NHR), og inkluderer forbindelser som for eksempel er agonister, partielle agonister, antagonister eller partielle antagonister av androgenreseptoren (AR), østrogenreseptoren (ER), progesteronreseptoren (PR), glukokortikoidreseptoren (GR), mineralkortikoidreseptoren (MR), den steroide og xenobiotiske reseptoren (SXR), andre steroid-bindende NHR, orphan-reseptorene eller andre NHR. Selektiv modulering av én slik NHR i forhold til andre innenfor NHR-familien er å foretrekke.
«Modulering» inkluderer for eksempel aktivering (f.eks. agonistaktivitet, så som selektiv androgenreseptor-agonistaktivitet) eller inhibering (f.eks. antagonistaktivitet).
Foreliggende forbindelsene er således anvendelige ved behandling av NHR-assosierte tilstander. En «NHR-assosiert tilstand» står i denne sammenheng for en tilstand eller forstyrrelse som kan behandles ved å modulere virkningen av en NHR i et individ, hvor behandling omfatter forebyggelse (f.eks. profylaktisk behandling), delvis lindring eller helbredelse av tilstanden eller forstyrrelsen. Modulering kan skje lokalt, for eksempel i enkelte vev, eller mer omfattende i hele individet som behandles for en slik tilstand eller forstyrrelse.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er anvendelige ved fremstilling av medikamenter for behandlingen av en rekke tilstander og forstyrrelser valgt fra gruppen bestående av proliferative sykdommer, cancere, benign prostatahypertrofi, adenomer og neoplasier av prostata, benigne eller maligne tumorceller som inenholder androgenreseptoren, hjertesykdom, angiogene tilstander eller forstyrrelser, hirsutisme, akne, hyperpilosus, inflammasjon, immunmodulasjon, seboré, endometriose, polycystisk ovariesyndrom, androgen alopesi, hypogonadisme, osteoporose, undertrykkelse av spermatogenese, libido, kakeksi, anoreksi, inhibering av muskelatrofi hos oppegående pasienter, androgentilskudd ved aldersrelaterte nedsatte testosteronnivåer hos menn, cancere som uttrykker østrogenreseptoren, prostatakreft, brystkreft, endometriekreft, hetetokter, vaginal tørrhet, menopause, amenoré, dysmenoré, prevensjon, svangerskapsavbrudd, cancere inneholdende progesteronreseptoren, endometriose, kakeksi, menopause, syklussynkroni, meninginom, fibroid, fødsels-induksjon, autoimmunsykdommer, Alzheimers sykdom, psykotiske forstyrrelser, medikamentavhengighet, ikke-insulin avhengig diabetes mellitus, dopaminreseptor-medierte forstyrrelser, kongestiv hjertesvikt, feilregulering av kolesterolhomeostase og svekking av metabolismen av et farmasøytisk middel.
Forbindelser med formel la kan anvendes som agonister, partielle agonister, antagonister eller partielle antagonister av østrogenreseptoren, fortrinnsvis selektivt for vedkommende reseptor, ved en rekke medisinske tilstander som involverer modulering av østrogenreseptorveien. Anvendelser av nevnte forbindelser innbefatter: osteoporose, hetetokter, vaginal tørrhet, prostatakreft, brystkreft, endometriecancer, cancere som uttrykker østrogenreseptoren, så som ovennevnte cancere og andre, prevensjon, svangerskapsavbrudd, menopause, amenoré og dysmenoré.
Forbindelser med formel la kan anvendes som agonister, partielle agonister, antagonister eller partielle antagonister av østrogenreseptoren, fortrinnsvis selektivt for vedkommende reseptor, ved en rekke medisinske tilstander som involverer modulering av progesteronreseptorveien. Anvendelser av nevnte forbindelser innbefatter: brystkreft, andre cancere som inneholder progesteronreseptoren, endometriose, kakeksi, prevensjon, menopause, cyklus-synkronisering, menigiom, dysmenoré, fibroider, svangerskapsavbrudd, fødselsinduksjon og osteoporose.
Forbindelser med formel la kan anvendes som agonister, partielle agonister, antagonister eller partielle antagonister av glukokortikoidreseptoren, fortrinnsvis selektivt for vedkommende reseptor, ved en rekke medisinske tilstander som involverer modulering av glukokortikoidreseptorveien. Anvendelser av nevnte forbindelser innbefatter: inflammatoriske sykdommer, autoimmunsykdommer, prostatakreft, brystkreft, Alzheimers sykdom, psykotiske forstyrrelser, medikamentavhengighet, ikke-insulinavhengig diabetes mellitus, og som dopaminreseptor-blokkerende midler, eller forøvrig som middel for behandlingen av dopaminreseptor-medierte forstyrrelser.
Forbindelser med formel la kan anvendes som agonister, partielle agonister, antagonister eller partielle antagonister av mineralkortikoidreseptoren, fortrinnsvis selektivt for vedkommende reseptor, ved en rekke medisinske tilstander som involverer modulering av mineralkortikoidreseptorveien. Anvendelser av nevnte forbindelser innbefatter: medikamentabstinenssyndrom og inflammatoriske sykdommer.
Forbindelser med formel la kan anvendes som agonister, partielle agonister, antagonister eller partielle antagonister av aldosteronreseptoren, fortrinnsvis selektivt for vedkommende reseptor, ved en rekke medisinske tilstander som involverer modulering av aldosteronreseptorveien. En anvendelse av nevnte forbindelser innbefatter: kongestiv hjertesvikt.
Forbindelser med formel la kan anvendes som agonister, partielle agonister, antagonister eller partielle antagonister av androgenreseptoren, fortrinnsvis selektivt for vedkommende reseptor, ved en rekke medisinske tilstander som involverer modulering av androgenreseptorveien. Anvendelser av nevnte forbindelser innbefatter: hirsutisme, akne, seboré, Alzheimers sykdom, androgen alopesi, hypogonadisme, hyperpilosus, benign prostatahypertrofi, adenomer og neoplasier i prostata (som fremskreden metastatisk prostatakreft), behandling av benigne eller maligne tumorceller som inneholder androgenreseptoren, hvilket er tilfelle for bryst-, hjerne-, hud-, ovarie-, blære-, lymfe-, lever- og nyrecancere, pankreatiske canceres modulering av VCAM-ekspresjon og anvendelser av disse til behandlingen av hjertesykdom, inflammasjon og immunmodulasjon, modulering av VEGF-ekspresjon og anvendelser av disse til bruk som antiangiogene midler, osteoporose, undertrykkelse av spermatogenese, libido, kakeksi, endometriose, polycystisk ovariesyndrom, anoreksi, androgensupplement ved aldersrelaterte nedsatte testosteronnivåer hos menn, andropause, hormon substitusjon hos menn, seksuell dysfunksjon hos menn og kvinner og inhibering av muskelatrofi hos oppegående pasienter. For eksempel kan «pan AR» modulering være aktuell, med prostata-selektiv AR-modulering («SARM») som særlig foretrukket, som ved f.eks. behandlingen av tidlige stadier av prostatakreft.
Forbindelser med formel la kan anvendes som (fortrinnsvis selektive) antagonister av den muterte androgenreseptor, som for eksempel finnes i mange tumorlinjer. Eksempler på slike mutanter er de som finnes i representative prostata-tumorcellelinjer, som f.eks. LNCap (T877A mutasjon, Biophys. Acta, 187,1052
(1990)), PCa2b, (L701H & T877A mutasjoner, J. Uroi., 162, 2192 (1999)) og CWR22, (H874Y mutasjon, Mol. Endo., 11, 450 (1997)). Anvendelser av nevnte forbindelser omfatter: adenomer og neoplasier i prostata, brystkreft og endometriecancer.
Forbindelser med formel la kan anvendes som agonister, partielle agonister, antagonister eller partielle antagonister av den steroide og xenobiotiske reseptoren, fortrinnsvis selektivt for vedkommende reseptor, ved en rekke medisinske tilstander som involverer modulering av steroid- og xenobiotiske reseptorveien. Anvendelser av nevnte forbindelser innbefatter: behandling av feilregulering av kolesterolhomeostase, svekket metabolisme av farmasøytiske midler ved ko-administrering av et middel (forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse) som modulerer P450-regulatorvirkningene av SXR.
Ved siden av ovennevnte NHR eksisterer det også en rekke NHR for hvilke de aktiverende eller deaktiverende ligandene ikke kan karakteriseres. Disse proteinene er klassifisert som NHR som følge av sterk sekvenshomologi til andre NHR, og er kjent som orphan-reseptorer. Siden orphan-reseptorene oppviser sterk sekvenshomologi med andre NHR, omfatter forbindelser med formel la de som tjener som modulatorer av funksjonen av orphan-NHR. Orphan-reseptorer som moduleres av NHR-modulatorer, så som forbindelser innenfor rammen av formel la, er eksemplifisert til de som er angitt i Tabell 1. Eksempler på terapeutiske anvendelser av modulatorer av nevnte orphan-reseptorer er også angitt i Tabell 1.
Tabell 1. Eksempler på orphan-nukleære hormonreseptorer, form (M=monomer, D=heterodimer, H=homodimer), vevsekspresjon og mål for terapeutiske anvendelser.
(CNS=sentralnervesystemet)
Reseptor Form Vevsekspresjon Mål for terapeutisk anvendelse NURR1 M/D Dopaminerge neuroner Parkinsons sykdom
RZRp M Hjerne (hypofyse), muskel Søvnforstyrrelser
RORa M Cerebellum, Purkinjes celler Artritt, cerebellar ataksi, NOR-1 M Hjerne, muskel, hjerte, CNS-forstyrrelser, cancer
binyre, thymus
NGFI-Bp M/D Hjerne CNS-forstyrrelser
COUP-Tfa H Hjerne CNS-forstyrrelser
COUP-TFp H Hjerne CNS-forstyrrelser COUP-TFyx H Hjerne CNS-forstyrrelser
Nur77 H Hjerne, thymus, binyrer CNS-forstyrrelser
Rev-ErbAa H Muskel, hjerne (ubikvitært)Fedme
HNF-4a H Lever, nyre, tarm Diabetes
SF-1 M Gonader, hypofyse Metabolske forstyrrelser LXRa.p D Nyre (ubikvitært) Metabolske forstyrrelser GCNF M/H Testikler, ovarium Infertilitet
ERRa.p M Placenta, ben Infertilitet, osteoporose
FXR D Lever, nyre Metabolske forstyrrelser CARa H Lever, nyre Metabolske forstyrrelser
PXR H Lever, tarm Metabolske forstyrrelser
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også farmasøytiske blandinger som omfatter minst én av forbindelsene med formel la, og en farmasøytisk akseptabel bærer (konstituent eller fortynningsmiddel). Blandingene ifølge foreliggende oppfinnelse kan inneholde andre terapeutiske midler som beskrevet nedenfor, og kan formuleres for eksempel ved å benytte konvensjonelle faste eller flytende konstituenter eller fortynningsmidler, så vel som farmasøytiske tilsetningsstoffer av en type egnet for den ønskede adminstrasjonsmåte (for eksempel hjelpestoffer, bindemidler, konserveringsmidler, stabiliserende midler, aromastoffer, etc.) i henhold til teknikker velkjent innen området farmasøytisk formulering.
Det skal bemerkes at forbindelsene over er anvendelige til behandling av hvilken som helst av de tilstander eller forstyrrelser som her er nangitt eller beskrevet, så som inflammatoriske sykdommer eller cancere eller andre proliferative sykdommer, og i blandinger til behandling av slike tilstander eller forstyrrelser. Slike tilstander og forstyrrelser innbefatter så vel som de beskrevet i det følgende, så som: oppretthold av muskelstyrke og funksjon (f.eks. hos eldre); reversering eller forhindring av skrøpelighet eller ARFD (age-related functional decline) hos eldre (f.eks. sarkopeni); behandling av katabole bivirkninger av glukokortikoider; forhindring og/eller behandling av redusert benmasse, -tetthet eller -vekst (f.eks. osteoporose og osteopeni); behandling av kronisk tretthetssyndrom (CFS); kronisk «malagia»; behandling av akutt tretthetssyndrom og muskelsvinn etter elektiv kirurgi (f.eks. post-kirurgisk rehabilitering); aksellerering av sårtilheling; aksellerering av benfrakturreparasjon (så som aksellerert bedring av pasienter med hoftefraktur); aksellerert tilheling av kompliserte brudd, f.eks. distraksjonsosteogenese; ved ledderstatning; forhindring av post-kirurgisk adhesjonsdannelse; aksellerering av tannreparasjon eller vekst; opprettholdelse av sensorisk funksjon (f.eks. hørsel, syn, lukt og smak); behandling av periodontitt; behandling av wasting sekundært til brudd og wasting i forbindelse med kronisk obstruktiv lungesykdom (KOL), kronisk lever-sykdom, AIDS, vektløshet, cancer cachexia, restituering etter forbrenning og traumer, kronisk katabolsk tilstand (f.eks. koma), spiseforstyrrelser (f.eks. anoreksi) og kjemoterapi; behandling av kardiomyopati; behandling av trombocytopeni; behandling av vekstretardasjon i forbindelse med Crohns sykdom; behandling av «short bowel» syndrom; behandling av irritabel tarmsyndrom; behandling av inflammatorisk tarmsykdom; behandling av Crohns sykdom og ulcerøs kolitt; behandling av komplikasjoner assosiert med transplantasjon; behandling av fysiologisk kortvoksthet inklusivt barn med veksthormon mangel og kortvekst assosiert med kronisk sykdom; behandling av fedme og vekstretardasjon assosiert med fedme; behandling av anoreksi (f.eks. assosiert med kakeksi eller alderdom); behandling av hyperkortisolisme og Cushings syndrom; Pagets sykdom; behandling av osteoartritt, induksjon av pulsatil veksthormonfrigjøring; behandling av osteokondrodysplasi; behandling av depresjon, nervøsitet, irritabilitet og stress; behandling av nedsatt mental energi og lav selvfølelse (f.eks. motivasjon/selvsikkerhet); forbedring av kognitiv funksjon (f.eks. behandlingen av demens, inklusivt Alzheimers sykdom og tap av korttidshukommelse); behandling av katabolisme i forbindelse med pulmonal dysfunksjon og ventilator-avhengighet; behandling av kardial dysfunksjon (f.eks. assosiert med klaffefei I, myokardinfarktasjon, kardial hypertrofi eller kongestiv hjertesvikt); senkning av blodtrykk; beskyttelse mot ventrikulær dysfunksjon eller forhindring av reperfusjonshendelser; behandling av voksne i kronisk dialyse; reversering eller bremsing av katabolismetilstanden ved aldring; svekkelse eller reversering av proteinkatabolske responser etter traumer (f.eks. reversering av den katabolske tilstand assosiert med kirurgi, kongestiv hjertesvikt, kardial myopati, forbrenninger, cancer, COPD, etc); redusering av kakeksi og proteintap som følge av kronisk sykdom, som f.eks. kreft eller AIDS; behandling av hyperinsulinemi inklusivt nesidioblastose; behandling av immunsupprimerte pasienter; behandling av wasting i forbindelse med multippel sklerose eller andre neurodegenerative forstyrrelser; promovering av myelinreparasjon, vedlikehold av hudtykkelse; behandling av metabolsk homeostase og renal homeostase (f.eks. hos skrøpelige eldre); stimulering av osteoblaster, benremodellering og bruskvekst; regulering av næringsinntak; behandling av insulinresistens, inklusivt NIDDM, hos pattedyr (f.eks. mennesker); behandling av insulinresistens i hjertet; forbedring av søvnkvalitet og korrigering av den relative hyposomatotropisme ved alderdom som følge av sterkt øket REM-søvn og en minskning av REM-latens; behandling av hypotermi; behandling av kongestiv hjertesvikt; behandling av lipodystrofi (f.eks. hos pasienter som tar HIV- eller AIDS-midler, så som proteaseinhibitorer); behandling av muskelatrofi (f.eks. som følge av fysisk inaktivitet, sengeleie eller reduserte vekt-bærende tilstander); behandling av muskelskjelettsvekkelse (f.eks. hos eldre); forbedring av den generelle lungefunksjon; behandling av søvnforstyrrelser; og behandlingen av den katabolske tilstand ved langvarig kritisk sykdom; behandling av hirsutisme, akne, seboré, androgen alopesi, anemi, hyperpilosus, benign prostatahypertrofi, adenomer og neoplasier i prostata (f.eks. fremskreden metastatisk prostatacancer) og maligne tumorceller som inneholder androgenreseptoren, hvilket er tilfelle ved bryst-, hjerne-, hud-, ovarie-, blære-, lymfe-, lever og nyrecancere; cancere i hud, pankreas, endometrium, lunge og kolon; osteosarkom; hyperkalsemi ved sykdom; metastatisk bensykdom; behandling av spermatogenese, endometriose og polycystisk ovariesyndrom; motvirkning av preeklampsi, svangerskapskrampe og for tidlig fødsel; behandling av premenstruelt syndrom; behandling av vaginal tørrhet; aldersrelaterte nedsatte testosteronnivåer hos menn, andropause, hypogonadisme, hormonsubstitusjon hos menn, seksuell dysfunksjon hos menn og kvinner (f.eks. erektil dysfunksjon, nedsatt seksualdrift, seksuelt velvære, minsket libido), mannlig og kvinnelig prevensjon, hårtap, Reavens syndrom og forbedring av ben- og muskelytelse/styrke; og de tilstander, sykdommer og lidelser som kollektivt omtales som «Syndrom X» eller metabolsk syndrom, som detaljert beskrevet av Johannsson J. Clin. Endocrinol. Metab., 82, 727-34 (1997).
Forbindelsene over er av terapeutisk anvendelighet ved modulering av immuncelleaktivering/proliferasjon, f.eks. som kompetitive inhibitorer av intercellulære ligand/reseptor-bindingsreaksjoner som involverer CAM (Cellular Adhesion Molecules) og leukointegriner. For eksempel modulerer foreliggende forbindelser LFA-ICAM 1, og er særlig egnet som LFA-ICAM 1 antagonister og ved behandlingen av alle tilstander assosiert med LFA-ICAM 1, så som immunologiske forstyrrelser. Foretrukne anvendelser innbefatter: inflammatoriske tilstander, f.eks. som resultat av respons på det uspesifikke immunsystem i et pattedyr (f.eks. ARDS (adult respiratory distress syndrome), sjokk, oksygenforgiftning, multippelt organsviktsyndrom sekundært til septikemi, multippelt organsviktsyndrom sekundært til traumer, reperfusjonsskade av vev som følge av kardiopulmonal bypass, myokardinfarktasjon eller anvendelse ved trombolysemidler, akutt glomerulonefritt, vaskulitt, reaktiv artritt, dermatose med akutte inflammatoriske komponenter, slag, varmeskade, hemodialyse, leukaferese, ulcerøs kolitt, nekrotiserende enterokolitt og granulocytt transfusjonsassosiert syndrom) og tilstander som resultat av en respons av det spesifikke immunsystem i et pattedyr (f.eks. psoriasis, organ/vevstransplantatforkastelse, transplantat-mot-vert-reaksjoner og autoimmunsykdommer, inklusivt Raynauds syndrom, autoimmun thyreoiditt, dermatitt, multippel sklerose, reumatoid artritt, insulinavhengig diabetes mellitus, uveitt, inflammatorisk tarmsykdom, inklusivt Crohns sykdom og ulcerøs kolitt, samt systemisk lupus erythematosus). Forbindelsene over kan benyttes ved behandling av astma eller som et hjelpemiddel til å minske toksisitet ved cytokinterapi i behandlingen av kreft. Forbindelsene over kan benyttes ved behandlingen av alle sykdommer som for tiden kan behandles gjennom steroidterapi. Forbindelsene over kan benyttes for behandlingen av disse og andre forstyrrelser alene eller sammen med andre immunsuppressive eller antiinflammatoriske midler. En forbindelse med formel la kan administreres før inflammasjonen oppstår (for å undertrykke en forventet inflammasjon) eller etter initieringen av inflammasjonen. Når de immunsuppressive forbindelsene gis profylaktisk gis de fortrinnsvis før noen inflammatorisk respons eller symptom (for eksempel før, samtidig med eller kort etter tidspunktet for et organ- eller vevstransplantering, men før noe symptom eller organforkastelse). Den profylaktiske administrering av en forbindelse med formel la forhindrer eller svekker en eventuell påfølgende inflammatorisk respons (som for eksempel forkastelse av et transplantert organ eller vev, etc). Administrering av en forbindelse med formel la svekker enhver aktuell inflammasjon (som for eksempel forkastelsen av et transplantert organ eller vev).
Forbindelsene med formel la kan administreres for enhver av de anvendelser som her er beskrevet, på en hvilken som helst egnet måte, for eksempel peroralt, som i form av tabletter, kapsler, granuler eller pulvere; sublingvalt; bukkalt, parenteralt, som ved subkutan, intravenøs, intramuskulær eller intrasternal injeksjon eller infusjonsteknikk (f.eks. som sterile injiserbare vandige eller ikke-vandige løsninger eller suspensjoner); nasalt, inklusivt administrering til nesemembranene, som f.eks. ved inhalasjonsspray; topisk, som i form av en krem eller salve, eller rektalt, så som i form av suppositorier; i enhetsdoseformuleringer som inneholder ugiftige farmasøytisk akseptable bærere eller fortynningsmidler. Foreliggende forbindelser kan for eksempel administreres i en form egnet for umiddelbar frigjøring eller med forlenget frigjøring. Umiddelbar frigjøring eller forlenget frigjøring kan oppnås ved anvendelsen av egnede farmasøytiske blandinger som omfatter foreliggende forbindelser, eller, særlig når det er tale om forlenget frigjøring, ved anvendelsen av slike anordninger som subkutane implantater eller osmosepumper. Foreliggende forbindelser kan også administreres liposomalt.
Eksempler på blandinger for peroral administrering er suspensjoner som for eksempel kan inneholde mikrokrystallinsk cellulose for å gi øket volum, alginsyre eller natriumalginat som et suspenderingsmiddel, metylcellulose som en viskositets-forsterker, og søtningsmidler eller aromastoffer kjent på området; og tabletter med umiddelbar frigjøring som kan inneholde for eksempel mikrokrystallinsk cellulose, dikalsiumfosfat, stivelse, magnesiumstearat og/eller laktose og/eller andre hjelpestoffer, bindemidler, fyllstoffer, sprengningsmidler, fortynnings- og smøremidler, kjent på området. Forbindelsene med formel la kan også avleveres gjennom munnhulen, ved sublingval og/eller bukkal administrering. Støpte tabletter, pressede tabletter eller frysetørkede tabletter er eksempler på former som kan benyttes. Eksempler på blandinger er formuleringer av foreliggende forbindelser med hurtig oppløsende fortynningsmidler, så som mannitol, laktose, sakkarose og/eller cyklodekstriner. I slike formuleringer kan også inkluderes høymolekylære hjelpestoffer, så som celluloser (avicel) eller polyetylenglykoler (PEG). Slike formuleringer kan også inkludere et hjelpestoff som bidrar til adhesjon til slimhinner, som f.eks. hydroksypropylcellulose (HPC), hydroksypropylmetylcellulose (HPMC), natriumkarboksymetylcellulose (SCMC), maleinsyre-anhydrid kopolymer (f.eks. Gantrez) og midler til kontroll av frigjøring, så som polyakrylsyre-kopolymer (f.eks. Carbopol 934). Smøremidler, glidemidler, aromastoffer, farvestoffer og stabilisatorer kan også tilsettes for å lette tilberedning og bruk.
Eksempler på blandinger for nasal aerosol- eller inhalasjonsadministrering er løsninger i saltvann som kan inneholde for eksempel benzylalkohol eller andre egnede konserveringsmidler, absorpsjonsfremmere for å øke biotilgjengelighet, og/eller andre solubiliserings- eller dispergeringsmidler, så som de som er kjent på området.
Eksempler på blandinger for parenteral administrering er injiserbare løsninger eller suspensjoner, som kan inneholde for eksempel egnede ugiftige parenteralt akseptable fortynnings- eller løsningsmidler, så som mannitol, 1,3-butandiol, vann, Ringers løsning, en isoton natriumkloridløsning eller andre egnede dispergerings-eller fukte- og suspenderingsmidler, inklusivt syntetiske mono- eller diglycerider, og fettsyrer, inklusivt oljesyre eller Cremaphor.
Eksempler på blandinger for rektal administrering er suppositorier, som kan inneholde for eksempel, et passende ikke-irriterende hjelpestoff, så som kakaosmør, syntetiske glyceridestere eller polyetylenglykoler, som er faste ved ordinære temperaturer, men smelter og/eller løses i rektum for å frigjøre medikamentet.
Eksempler på blandinger for topisk administrering inkluderer en topisk bærer, så som Plastibase (mineralolje gelatinert med polyetylen).
Den virksomme mengde av en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse kan bestemmes av fagmannen og omfatter doseringsmengder for en voksen person på fra for eksempel ca. 1 til 100 (for eksempel 15) mg/kg kroppsvekt virkestoff per dag, som kan administreres i enkelt dose eller i form av individuelle avdelte doser, som f.eks. fra 1 til 4 ganger per dag. Det vil være klart at det spesifikke dosenivå og doseringshyppigheten for et individ kan varieres og vil avhenge av en rekke faktorer, inklusivt aktiviteten av vedkommende forbindelse som benyttes, den metabolske stabilitet og virketiden av forbindelsen, individets art, alder, kroppsvekt, generelle helsetilstand, kjønn og diett, måten og tidspunktet for administrering, utskillings-hastighet, medikamentkombinasjon og alvoret av angjeldende tilstand. Foretrukne individer for behandling er dyr, mest foretrukket pattedyrarter, så som mennesker, og kjæledyr, som f.eks. hunder og katter, som er gjenstand for NHR-assosierte tilstander.
Som nevnt ovenfor kan forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse benyttes alene eller i kombinasjon med hverandre og/eller andre egnede terapeutiske midler egnet ved behandlingen av NHR-assosierte tilstander, f.eks. et antibiotikum eller et annet farmasøytisk virkestoff.
For eksempel kan forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kombineres med vekstfremmende midler, som f.eks. , TRH, dietylstilbøstrol, teofyllin, enkefaliner, prostaglandiner av E-serien, forbindelser omtalt i US-patent 3.239.345, f.eks. zeranol, og forbindelser omtalt i US-patent 4.036.979, f.eks. sulbenox, eller peptider omtalt i US-patent 4.411.890.
Forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan også benyttes i kombinasjon med veksthormon-sekretagoger, så som GHRP-6, GHRP-1 (som beskrevet i US-patent 4.411.890 og publikasjonene WO 89/07110 og WO 89/07111), GHRP-2 (som beskrevet i WO 93/04081), NN703 (Novo Nordisk), LY444711 (Lilly), MK-677 (Merck), CP424391 (Pfizer) og B-HT920, eller med veksthormonfrigjørende faktor og dens analoger eller veksthormon og dets analoger eller somatomediner, inklusivt IGF-1 og IGF-2, eller med alfa-adrenerge agonister, så som klonidin eller serotonin 5-HTo-agonister, så som sumatriptan, eller midler som inhiberer somatostatin eller dets frigjøring, så som fysostigmin og pyridostigmin. En ytterligere anvendelse av forbindelsene ifølge oppfinnelsen er i kombinasjon med parathyroideahormon, PTH(1-34) eller bisfosfonater, så som MK-217 (alendronat).
Ytterligere en anvendelse av forbindelsene ifølge oppfinnelsen er i kombinasjon med østrogen, testosteron, en selektiv østrogenreseptormodulator, så som tamoksifen eller raloxifen, eller andre androgenreseptormodulatorer, som omtalt f.eks. i Edwards, J.P., et al., Bio. Med. Chem. Let, 9,1003-1008 (1999) og Hamann, L.G. et al. J. Med. Chem., 42, 210-212 (1999).
En ytterligere anvendelse av forbindelsene ifølge denne oppfinnelse er i kombinasjon med progesteronreseptoragonister («PRA»), så som levonorgestrel, medroxyprogesteron-acetat (MPA).
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan benyttes alene eller i kombinasjon med hverandre og/eller andre modulatorer av nukleære hormonreseptorer eller andre egnede terapeutiske midler anvendelige ved behandlingen av ovennevnte forstyrrelser, inklusivt: antidiabetiske midler; anti-osteoporose midler, anti-fedme midler, antiinflammatoriske midler, anti-anxiolytiske midler, antidepressiva, antihypertensive midler; anti-blodplatemidler; anti-trombotiske og trombolytiske midler; hjerteglykosider; kolesterol/lipid-senkende midler; mineralokortikoidreseptorantagonister, fosfodiesterase-inhibitorer; protein-tyrosinkinase-inhibitorer; thyroidea-mimetika (inklusivt thyroidea-reseptoragonister); anabole midler; HIV- eller AlDS-terapier; terapier anvendelige ved behandling av Alzheimers sykdom og andre kognitive forstyrrelser; terapier anvendelige ved behandlingen av søvnforstyrrelser; anti-proliferative midler og anti-tumor midler.
Eksempler på egnede antidiabetiske midler for bruk i kombinasjon med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er biguanider (f.eks. metformin), glukosidase-inhibitorer (f.eks. akarbose), insuliner (inklusivt insulin-sekretagoger eller insulin-sensibiliserende midler), meglitinider (f.eks. repaglinid), sulfonylurea-forbindelser (f.eks. glimepirid, glyburid og glipizid), biguanid/glyburid-kombinasjoner (f.eks. Glucovance®), tiadiazolidindioner (f.eks. troglitazon, rosiglitazon og pioglitazon), PPAR-alfaagonister, PPAR-gammaagonister, PPAR-alfa/gamma dobbeltagonister, SGLT2-inhibitorer, glykogen-fosforylase-inhibitorer, inhibitorer av fettsyre-bindende protein (aP2), som f.eks. de omtalt i USSN 09/519.079 innlevert 6. mars, 2000, glukagon-lignende peptid-1 (GLP-1) og dipeptidylpeptidase IV (DP4) inhibitorer.
Eksempler på egnede anti-osteoporose midler for bruk i kombinasjon med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er alendronat, risedronat, PTH, PTH-fragment, raloxifen, kalsitonin, steroide eller ikke-steroide progesteronreseptoragonister, RANK-ligandantagonister, «calcium sensing receptor antagonists», TRAP-inhibitorer, SERM (selective estrogen receptor modulators), østrogen- og AP-1-inhibitorer.
Eksempler på egnede anti-fedme midler for bruk i kombinasjon med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er aP2-inhibitorer, som f.eks. de omtalt i USSN 09/519.079 innlevert 6. mars, 2000, PPAR-gammaantagonister, PPAR-delta-agonister, beta 3 adrenerge agonister, som f.eks. AJ9677 (Takeda/Dainippon), L750355 (Merck) eller CP331648 (Pfizer) eller andre kjente beta 3-agonister som omtalt i US-patent 5.541.204, 5.770.615, 5.491.134, 5.776.983 og 5.488.064, en lipaseinhibitor, så som orlistat eller ATL-962 (Alizyme), en serotonin- (og dopamin-) gjenopptaksinhibitor, så som sibutramin, topiramat (Johnson & Johnson) eller axokin (Regeneron), et thyroideareseptor beta-medikament, så som en thyroidea-reseptorligand omtalt i WO 97/21993 (U. Cal SF), WO 99/00353 (KaroBio) og GB98/284425 (KaroBio) og/eller et anoreksimiddel, så som deksamfetamin, fentermin, fenylpropanolamin eller mazindol.
Eksempler på egnede antiinflammatoriske midler for bruk i kombinasjon med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er prednison, deksametason, Enbrel®, cyklooksygenase-inhibitorer (dvs. COX-1- og/eller COX-2-inhibitorer, så som NSAID, aspirin, indometacin, ibuprofen, piroksikam, Naproxen®, Celebrex®, Vioxx®), CTI_A4-lg agonister/antagonister, CD40 ligandantagonister, IMPDH-inhibitorer, så som mykofenolat (CellCept®) integrinantagonister, alfa-4-beta-7-integrinantagonister, celleadhesjons-inhibitorer, interferon-gammaantagonister, ICAM-1, tumornekrosefaktor (TNF) antagonister (f.eks. infliximab, OR1384), prostaglandin-synteseinhibitorer, budesonid, klofazimin, CNI-1493, CD4-antagonister (f.eks. priliximab), p38-mitogen-aktivert proteinkinase-inhibitorer, proteintyrosinkinase-(PTK) inhibitorer, IKK-inhibitorer, og terapier for behandlingen av irritabel tarmsyndrom (f.eks. Zelmac® og Maxi-K® åpnere, så som de omtalt i US-patent 6.184.231 B1).
Eksempler på egnede anxiolytiske midler for bruk i kombinasjon med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er diazepam, lorazepam, buspiron, oxazepam og hydroksyzin-pamoat.
Eksempler på egnede antidepressiva for bruk i kombinasjon med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er citalopram, fluoxetin, nefazodon, sertralin og paroxetin.
Eksempler på egnede antihypertensive midler for bruk i kombinasjon med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse, er beta-adrenerge blokkere, kalisumkanal-blokkere (L-type og T-type; f.eks. diltiazem, verapamil, nifedipin, amlodipin og mybefradil), diuretika (f.eks. klortiazid, hydroklortiazid, flumetiazid, hydroflumetiazid, bendroflumetiazid, metylklortiazid, triklormetiazid, polytiazid, benztiazid, etakrynsyre-trikrynafen, klorthalidon, furosemid, mysolimin, bumetanid, triamtrenen, amilorid, spironolakton), renininhibitorer, ACE-inhibitorer (f.eks. kaptopril, zofenopril, fosinopril, enalapril, ceranopril, cilazopril, delapril, pentopril, quinapril, ramipril, lisinopril), AT-1 reseptorantagonister (f.eks. losartan, irbesartan, valsartan), ET-reseptorantagonister (f.eks. sitaxsentan, atrsentan og forbindelser omtalt i US-patent 5.612.359 og 6.043.265), dobbelt ET/AII-antagonist (f.eks. forbindelser omtalt i WO 00/01389), nøytrale endopeptidase- (NEP) inhibitorer, vasopeptidase-inhibitorer (dobbelt NEP-ACE-inhibitorer) (f.eks. omapatrilat og gemopatrilat) og nitrater.
Eksempler på egnede anti-blodplatemidler for bruk i kombinasjon med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse, er GPIIb/llla-blokkere (f.eks. abciximab, eptifibatid, tirofiban), P2Y12-antagonister (f.eks. klopidogrel, tiklopidin, CS-747), tromboksan-reseptorantagonister (f.eks. ifetroban), aspirin og PDE-III-inhibitorer (f.eks. dipyridamol) med eller uten aspirin.
Eksempler på egnede hjerteglykosider for bruk i kombinasjon med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse, er digitalis og ouabain.
Eksempler på egnede kolesterol/lipid-senkende midler for bruk i kombinasjon med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse, er HMG-CoA-reduktaseinhibitorer (f.eks. pravastatin, lovastatin, atrovastatin, simvastatin, NK-104 (a.k.a. itavastatin, eller nisvastatin eller nisbastatin) og ZD-4522 (a.k.a. rosuvastatin, eller atavastatin eller visastatin), skvalensyntetaseinhibitorer, fibrater, gallesyrebindere, ACAT-inhibitorer, MTP-inhibitorer, lipoksygenaseinhibitorer, kolesterol-absorpsjons-inhibitorer og kolesterolester-transfer-proteininhibitorer (f.eks. CP-529414).
Eksempler på egnede mineralkortikoid-reseptorantagonister for bruk i kombinasjon med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse, er spironolakton og eplerinon.
Eksempler på egnede fosfodiesteraseinhibitorer for bruk i kombinasjon med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse, er PDEIII-inhibitorer, så som cilostazol og PDE V-inhibitorer, så som sildenafil.
Eksempler på egnede thyreoidea-mimetika for bruk i kombinasjon med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse, er thyrotropin, polythyroid, KB-130015 og dronedaron.
Eksempler på egnede anabole midler for bruk i kombinasjon med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse, er testosteron, TRH dietylstilbøstrol, østrogener, p-agonister, teofyllin, anabole steroider, dehydroepiandrosteron, enkefaliner, E-serie prostaglandiner, retinolsyre og forbindelser omtalt i US-patent 3.239.345, f.eks. Zeranol®; US-patent 4.036.979, f.eks. Sulbenox® eller peptider som omtalt i US-patent 4.411.890.
Eksempler på egnede HIV- eller AlDS-terapier for bruk i kombinasjon med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse, er indinavir-sulfat, saquinavir, saquinavir-mesylat, ritonavir, lamivudin, zidovudin, lamivudin/zidovudin-kombinasjoner, zalcitabin, didanosin, stavudin og megestrol-acetat.
Eksempler på egnede terapier for behandling av Alzheimers sykdom og kognitive forstyrrelser for bruk i kombinasjon med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse, erdonepezil, tacrin, revastigmin, 5HT6, gamma-sekretaseinhibitorer, beta-sekretaseinhibitorer, SK-kanalblokkere, Maxi-K-blokkere og KCNQ-blokkere.
Eksempler på egnede terapier for behandling av søvnforstyrrelser for bruk i kombinasjon med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse, er melatonin-analoger, melatonin-reseptorantagonister, ML1B-agonister og GABA/NMDA-reseptorantagonister.
Eksempler på egnede antiproliferative midler for bruk i kombinasjon med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse, er cyklosporin A, paclitaxel, FK 506 og adriamycin.
Eksempler på egnede anti-tumor midler for bruk i kombinasjon med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse, er paclitaxel, adriamycin, epotiloner, cisplatin og carboplatin.
Forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse kan dessuten benyttes i kombinasjon med næringssupplement, som f.eks. beskrevet i US-patent 5.179.080, spesielt i kombinasjon med myseprotein eller kasein, aminosyrer (så som leucin, forgrenede aminosyrer og hydroksymetylbutyrat), triglycerider, vitaminer (f.eks. A, B6, B12, folat, C, D og E), mineraler (f.eks. selen, magnesium, sink, krom, kalsium og kalium), karnitin, lipoinsyre, kreatinin og koenzym Q-10.
I tillegg kan forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse benyttes i kombinasjon med terapeutiske midler benyttet ved behandlingen av seksuell dysfunksjon, inklusivt PDE5-inhibitorer, så som sildenafil eller IC-351; med et antiresorptivt middel, hormonsubstitusjonsterapier, vitamin D-analoger, kalsitoniner, elementært kalsium og kalsiumsupplement, katepsin K-inhibitorer, MMP-inhibitorer, vitronektin-reseptorantagonister, Src SH2-antagonister, vakuolære-H+<->ATPase-inhibitorer, progesteronreseptoragonister, ipriflavon, fluorid, RANK-antagonister, PTH og analoger og fragmenter derav, Tibolon, HMG-CoA-reduktaseinhibitorer, SERM, p38-inhibitorer, prostanoider, 17-beta-hydroksysteroid-dehydrogenase-inhibitorer og Src-kinaseinhibitorer.
Forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse kan benyttes i kombinasjon med prevensjonspiller for menn, så som nonoxynol 9, eller terapeutiske midler for behandlingen av hårtap, så som minoxidil og finasterid, eller kjemoterapeutiske midler, så som LHRH-agonister.
For deres foretrukne anticancer eller antiangiogene anvendelse, kan forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse administreres alene eller i kombinasjon med andre anticancer- og cytotoksiske midler, og behandlinger egnet ved behandlingen av cancer eller andre proliferative sykdommer, for eksempel når det andre medikament har den samme eller en ulik virkningsmekanisme enn foreliggende forbindelser med formel I. Eksempler på klasser av anticancer midler og cytotoksiske midler egnet i kombinasjon med foreliggende forbindelser, inkluderer,: alkyleringsmidler, så som nitrogen-sennepsgass, alkylsulfonater, nitroso-ureaforbindelser, etyleniminer og triazener; antimetabolitter, så som folatantagonister, purin-analoger og pyrimidin-analoger; antibiotika, så som antracykliner, bleomyciner, mitomycin, dactinomycin og plicamycin; enzymer, så som L-asparaginase; farnesyl-proteintransferaseinhibitorer; 5a-reduktaseinhibitorer; inhibitorer av 17p-hydroksysteroid-dehydrogenase type 3; hormonmidler, så som glukokortikoider, østrogener/antiøstrogener, androgener/antiandrogener, progestiner og luteiniserende hormonfrigjørende hormonantagonister, octreotid-acetat; mikrotubuli-forstyrrende midler, så som ekteinaskidiner eller deres analoger og derivater; mikrotubuli-stabiliserende midler, så som taxaner, for eksempel paclitaxel (Taxol®), docetaxel (Taxotere®) og deres analoger, og epitiloner, så som epotilonene A-F og deres analoger; plante-avledede produkter, så som vinka-alkaloider, epipodofyllotoksiner, taxaner; og topoisomeraseinhibitorer; prenyl-proteintransferaseinhibitorer; og forskjellige midler, så som hydroksyurea, prokarbazin, mitotan, heksametylmelamin, platina-koordinasjonskomplekser, så som cisplatin og carboplatin; og andre midler benyttet som anticancer og cytotoksiske midler, så som biologiske responsmodifiserende midler, vekstfaktorer; immun-modulatorer og monoklonale antistoffer. Forbindelsene over kan også benyttes i sammenheng med strålebehandling.
Representative eksempler på disse klassene av anticancer midler og cytotoksiske midler innbefatter, mekloretamin-hydroklorid, cyklofosfamid, klorambucil, melfalan, ifosfamid, busulfan, carmustin, lomustin, semustin, streptozocin, thiotepa, dacarbazin, metotreksat, thioguanin, merkaptopurin, fludarabin, pentastatin, cladribin, cytarabin, fluoruracil, doxorubicin-hydroklorid, daunorubicin, idarubicin, bleomycin-sulfat, mitomycin C, actinomycin D, safraciner, saframyciner, quinocarciner, discodermolider, vinkristin, vinblastin, vinorelbin-tartrat, etoposid, etoposid-fosfat, teniposid, paclitaxel, tamoksifen, estramustin, estramustin-fosfat-natrium, flutamid, buserelin, leuprolid, pteridiner, diyneser, levamisol, aflacon, interferon, interleukiner, aldesleukin, filgrastim, sargramostim, rituximab, BCG, tretinoin, irinotecan-hydroklorid, betametason, gemcitabin-hydroklorid, altretamin og topoteca og eventuelle analoger eller derivater derav.
Foretrukne medlemmer av disse klassene omfatter, paclitaxel, cisplatin, carboplatin, doxorubicin, carminomycin, daunorubicin, aminopterin, metotreksat, metopterin, mitomycin C, ekteinaskidin 743 eller profiromycin, 5-fluoruracil, 6-merkaptopurin, gemcitabin, cytosin-arabinosid, podofyllotoksin eller podofyllotoksin-derivater, så som etoposid, etoposid-fosfat eller teniposid, melfalan, vinblastin, vinkristin, leurosidin, vindesin og leurosin.
Eksempler på anticancer midler og andre cytotoksiske midler innbefatter følgende: epotilon-derivater som nevnt i Tysk patent nr. 4138042.8; WO 97/19086, WO 98/22461, WO 98/25929, WO 98/38192, WO 99/01124, WO 99/02224,
WO 99/02514, WO 99/03848, WO 99/07692, WO 99/27890, WO 99/28324,
WO 99/43653, WO 99/54330, WO 99/54318, WO 99/54319, WO 99/65913,
WO 99/67252, WO 99/67253 og WO 00/00485; cyklin-avhengige kinaseinhibitorer som angitt i WO 99/24416 (se også US-patent 6.040.321); og prenyl-proteintransferaseinhibitorer, som angitt i WO 97/30992 og WO 98/54966; og slike midler som beskrevet generisk og spesifikt i US-patent 6.011.029 (hvis forbindelser kan benyttes sammen med eventuelle NHR-modulatorer (inklusivt, men ikke begrenset til, de ifølge foreliggende oppfinnelse) så som AR-modulatorer, ER-modulatorer, med LHRH-modulatorer, eller med kirurgisk kastrering, spesielt ved behandlingen av cancer).
Kombinasjonene over kan også formuleres eller ko-administreres med andre terapeutiske midler, som er valgt ut fra deres særlige anvendelighet ved administrering av terapier assosiert med ovennevnte tilstander. For eksempel kan forbindelsene ifølge oppfinnelsen formuleres med midler til forhindring av kvalme, hypersensibilitet og gastrisk irritasjon,så som antiemetika og Hi- og H2-antihistaminer.
Når det gjelder kreftbehandlingen benyttes forbindelsene ifølge denne oppfinnelse fortrinnsvis alene eller i kombinasjon med anticancerbehandlinger, så som strålebehandling og/eller med cytostatiske og/eller cytotoksiske midler, som f.eks., men ikke begrenset til, DNA-interaktive midler, så som cisplatin eller doxorubicin; inhibitorer av farnesyl-proteintransferase, som f.eks. de beskrevet i US-patent 6.011.029; topoisomerase ll-inhibitorer, så som etoposid; topoisomerase l-inhibitorer, så som CPT-11 eller topotecan; tubulin-stabiliserende midler, så som paclitaxel, docetaxel, andre taxaner eller epotiloner; hormonmidler, så som tamoksifen, thymidilat-syntaseinhibitorer, så som 5-fluoruracil; antimetabolitter, så som metotreksat; antiangiogene midler, så som angiostatin, ZD6474, ZD6126 og comberstatin A2; kinaseinhibitorer, så spm her2-spesifikke antistoffer, Iressa- og CDK-inhibitorer; histon-deacetylaseinhibitorer, så som CI-994 og MS-27-275. Slike forbindelser kan også kombineres med midler som undertrykker produksjonen av sirkulerende testosteron, så som LHRH-agonister eller antagonister, eller med kirurgisk kastrering.
For eksempel omfatter kjente behandlinger for fremskreden metastatisk prostatacancer «complete androgen ablation therapy», hvor tumorvekst inhiberes ved å kontrollere tilførselen av androgen til prostatavevet ved kjemisk kastrering (kastrering tjener til å inhibere produksjonen av sirkulerende testosteron (T) og dihydrotestosteron (DHT)), etterfulgt av administreringen av androgenreseptor (AR) antagonister (som inhiberer funksjonen T/DHT fra konverteringen av sirkulerende andogenforløpere til T/DHT i prostatavevet). Forbindelsene over kan benyttes som AR-antagonister ved komplett ablasjonsbehandling, alene i kombinasjon med andre AR-antagonister, så som flutamid, Casodex, nilutamide eller cyproteron-acetat.
Forbindelsene over kan benyttes i tillegg til kirurgi.
En annen anvendelse av foreliggende forbindelser er i kombinasjon med antistoffterapi, som f.eks., antistoffterapi mot PSCA. En ytterligere anvendelse er sammen med vaksine/immunmodulerende midler for behandlingen av kreft.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan benyttes i henhold til de fremgangsmåter som er beskrevet i USSN 60/284.438 med tittel «Selective Androgen Receptor Modulators and Methods for Their Identification, Design and Use», innlevert 18. april, 2001 av Mark E. Salvati er al., og USSN med tittel «Selective Androgen Receptor Modulators and Methods for Their Identification, Design and Use», innlevert 20. juni, 2001 av Mark E. Salvati et al.,.
Når det gjelder racemater av forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse kan den ene enantiomer for eksempel være en full AR-antagonist, mens den andre kan være en AR-antagonist i tumorvev uten å ha noen aktivitet eller agonistaktivitet i ikke-tumorvev inneholdende androgenreseptoren.
De ovennevnte andre terapeutiske midlene kan når de benyttes i kombinasjon med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse, for eksempel benyttes i de mengder som er angitt i Physicians' Desk Reference (PDR) eller som bestemt av fagmannen.
De etterfølgende tester kan benyttes for å fastslå aktiviteten av en forbindelse som en NHR-modulator. Forbindelser med en aktivitet på mer enn 20^m for binding eller transaktivering i enhver av disse tester foretrekkes. Forskjellige forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse ble fastslått å ha AR-modulerende aktivitet ved å benytte transaktiveringsmålinger og standard AR-bindingstester som beskrevet i det følgende.
Transaktiveringsmålinger
AR-spesifikk måling:
Forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse ble testet ved transaktiveringsmålinger av en transfektert rapportørkonstruksjon og ved å benytte den endogene androgenreseptor i vertscellene. Transaktiveringsmåling utgjør en metode for å identifisere funksjonelle agonister og partielle agonister som etterligner, eller antagonister som inhiberer, effekten av native hormoner, i dette tilfellet dihydrotestosteron (DHT). Denne målingen kan benyttes for å forutsi in vivo aktivitet, siden det er god korrelasjon i begge rekkene av data. Se f.eks. T. Berger er al., J. Steroid Biochem. Molec. Biol. 773 (1992).
For transaktiveringsmålinger) innføres et rapportørplasmid ved transfeksjon (en fremgangsmåte for å indusere celler til å motta fremmede gener) i de respektive cellene. Dette rapportørplasmid som omfatter cDNA for et rapportørprotein, så som SEAP (secreted alkaline phosphatase), kontrollert med prostata-spesifikt antigen (PSA) oppstrømssekvenser inneholdende androgenresponselementer (ARE). Dette rapportørplasmid virker som en rapportør for den transskripsjonsmodulerende aktivitet av AR. Rapportøren virker således som et surrogat for de produktene (mRNA deretter protein) som normalt uttrykkes av et gen under kontroll av AR og dets native hormon. For å påvise antagonister foretas transaktiveringsmålingen i nærvær av en konstant konsentrasjon av det naturlige AR-hormon (DHT) kjent for å indusere et definert rapportørsignal. Økende konsentrasjoner av en antatt antagonist vil minske rapportørsignalet (f.eks. SEAP-produksjon). På den annen side vil eksponering av de transfekterte cellene til økende konsentrasjoner av en antatt agonist, øke produksjonen av rapportørsignalet.
For denne måling ble LNCaP og MDA 453-celler anskaffet fra American Type Culture Collection (Rockville, MD) og holdt i henholdsvis RMPI 1640 eller DMEM-medium supplert med 10% føtalt bovint serum (FBS; Gibco). De respektive cellene ble transient transfektert ved elektroporering i henhold til den optimaliserte fremgangsmåte beskrevet av Heiser, 130 Methods Mol. Biol., 117 (2000), med pSEAP2/PSA540/enhancer rapportørplasmidet. Rapportørplasmidet ble konstruert som følger: kommersiell genomisk DNA fra humanplacenta ble benyttet til ved polymerasekjedereaksjon (PCR) å utvikle et fragment som inneholdt Bglll-setet (posisjon 5284) og Hindlll-setet i posisjon 5831 av den humane prostata-spesifikke antigenpromoter (tilgang #U37672), Schuurera/., J. Biol. Chem., 271 (12):7043-51
(1996). Dette fragment ble subklonet inn i pSEAP2/basic (Clontech) tidligere oppsluttet med Bglll og Hindlll for å frembringe pSEAP2/PSA540-konstruksjonen. Deretter ble et fragment som inneholdt fragmentet av human PSA oppstrømssekvens mellom posisjon -5322 og -3873 amplifisert ved PCR fra genomisk DNA av human placenta. Et Xhol- og Bglll-sete ble innført med primerne. Det resulterende fragment ble subklonet inn i pSEAP2/PSA540 oppsluttet med henholdsvis Xhol og Bglll for å frembringe pSEAP2/PSA540/enhancer-konstruksjonen. LNCaP- og MDA453-celler ble oppsamlet i medium inneholdende 10% aktivkull-renset FBS. Hver cellesuspensjon ble fordelt på to Gene Pulser kyvetter (Bio-Rad) som deretter fikk tilsatt 8^g av rapportørkonstruksjonen, og ble elektroporert ved å benytte en Bio-Rad Gene Pulser ved 210 volt og 960 ^ Farad. Etter transfekteringene ble cellene vasket og inkubert med medium inneholdende aktivkull-renset føtalt bovint serum uten (blank) eller i nærvær (kontroll) av 1 nM dihydrotestosteron (DHT; Sigma Chemical) og i eller uten nærvær av standard anti-androgen bicalutamid eller forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse i konsentrasjoner varierende fra 10"<10>til 10"<5>M (prøve). Hver prøve ble benyttet i to paralleller. Fortynninger av prøven ble foretatt på en Biomek 2000 laboratoryWorkstation. Etter 48 timer ble en andel av supernatanten testet på SEAP-aktivitet ved å benytte Phospha-Light Chemiluminescent Reporter Gene Assay System (Tropix, Inc.). Levedyktigheten av de gjenværende celler ble bestemt ved å benytte CellTiter 96 Aqueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay (MTS Assay, Promega). I korte trekk ble en blanding av tetrazoliumforbindelse (3-(4,5-dimetyltiazol-2-yl)-5-(3-karboksymetoksyfenyl)-2-(4-sulfofenyl)-2H-tetrazolium, indre salt; MTS) og et elektronkoblingsreagens (fenazin-metosulfat; PMS) tilsatt til cellene. MTS (Owens reagens) bioreduseres av celler til et formazan som er løselig i vevskulturmedium, og dets absorbans ved 490 nm kan derfor måles direkte fra 96-brønns testplater uten ytterligere håndtering. Mengden formazanprodukt målt ved graden av 490 nm absorbans, er direkte proporsjonal med antallet levende celler i kultur. For hvert gjentak ble SEAP-avlesningen normalisert med Abs 490-verdien oppnådd fra MTS-bestemmelsen. For antagonistmodus ble % inhibering beregnet som: % inhibering = 100 x (1-[gjennomsnittskontroll - gjennomsnitt blank/gjennomsnitt prøve - gjennomsnitt blank])
Data ble plottet, og den konsentrasjon av forbindelse som inhiberte 50% av det normaliserte SEAP ble beregnet (ICso)-
For agonistmodus ble % kontroll referert til som effekten av den testede forbindelse sammenlignet med den maksimale effekt observert med det naturlige hormon, i dette tilfellet DHT, og ble beregnet som: % kontroll = 100x gjennomsnittprøve - gjennomsnitt blank/gjennomsnitt kontroll - gjennomsnitt blank).
Data ble plottet, og den konsentrasjon av forbindelse som aktiverte til nivåer på 50% av det normaliserte SEAP for kontrollene ble beregnet (EC50).
GR-spesifisitetsmåling:
Rapportørplasmidet som ble benyttet besto av cDNA for rapportør SEAP-proteinet, som beskrevet for den AR-spesifikke transaktiveringsmåling. Ekspresjon av rapportør SEPA-proteinet ble kontrollert med mus mamma-tumorvirus LTR
(MMTV LTR) sekvenser som inneholdt tre hormonresponselementer (HRE) som kan reguleres av både GR og PR, se f.eks. G. Chalepakis et al., Cell, 53(3), 371 (1988). Dette plasmid ble transfektert inn i A549-celler, som uttrykker endogen GR, for å oppnå en GR-spesifikk transaktiveringsmåling. A549-celler ble anskaffet fra American Type Culture Collection (Rockville, MD) og holdt i RPMI 1640 supplert med 10% føtalt bovint serum (FBS; Gibco). Bestemmelse av den GR-spesifikke antagonistaktivitet av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse var identisk med den beskrevet for den AR-spesifikke transaktiveringsmåling, bortsett fra at DHT ble erstattet med 5 nM deksametason (Sigma Chemicals), en spesifikk agonist for GR. Bestemmelse av den GR-spesifikke agonistaktivitet av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse ble foretatt som beskrevet for AR-transaktiveringsmålingen, hvor man måler aktiveringen av det GR-spesifikke rapportørsystem ved tilsetning av en testforbindelse uten nærvær av en kjent GR-spesifikk agonistligand.
PR-spesifikk måling:
Det rapportørplasmid som ble benyttet var sammensatt av cDNA for rapportør SEAP-proteinet som beskrevet for den AR-spesifikke transaktiveringsmåling. Ekspresjon av rapportør SEAP-proteinet ble kontrollert med MMTV LTR- (mouse mammary tumor virus long terminal repeat) sekvensene som inneholder tre hormonresponselementer (HRE) som kan reguleres av både GR og PR. Dette plasmidet ble transfektert inn i T47D, som uttrykker endogen PR, for å oppnå en PR-spesifikk transaktiveringsbestemmelse. T47D-celler ble anskaffet fra American Type Culture Collection (Rockville, MD) og holdt i DMEM-medium supplert med 10% føtalt bovint serum (FBS; Gibco). Bestemmelse av den PR-spesifikke antagonistaktivitet av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse var identisk med den beskrevet for den AR-spesifikke transaktiveringsmåling, bortsett fra at DHT ble erstattet med 1 nM Promegaston (NEN), en spesifikk agonist for PR. Bestemmelse av den PR-spesifikke agonistaktivitet av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse ble foretatt som beskrevet for AR-transaktiveringsmålingen, hvor man måler aktiveringen av det PR-spesifikke rapportørsystem ved tilsetningen av en testforbindelse, uten nærvær av en kjent PR-spesifikk agonistligand.
AR-bindingsmåling:
For helcelle-bindingsmålingen ble humane LNCaP-celler (T877A mutant AR) eller MDA 453 (villtype AR) i 96-brønns mikrotiterplater inneholdende henholdsvis RPMI 1640 eller DMEM supplert med 10% aktivkull-renset CA-FBS (Cocaleco Biologicals) inkubert ved 37°C for å fjerne eventuell endogen ligand som måtte være kompleksert med reseptoren i cellene. Etter 48 timer ble enten en metningsanalyse for å bestemme Kdfor tritiert dihydrotestosteron [<3>H]-DHT, eller en kompetitiv bindingstest for å vurdere testforbindelsenes evne til å konkurrere med [<3>H]-DHT, foretatt. For metningsanalysen ble medier (RPMI 1640 eller DMEM-0,2% CA-FBS) inneholdende [<3>H]-DHT (i konsentrasjoner varierende fra 0,1 nM til 16 nM) uten nærvær (total binding) eller i nærvær (uspesifikk binding) av et 500 ganger molart overskudd av umerket DHT tilsatt til cellene. Etter 4 timer ved 37°C ble en alikvot av totalbindingsmediet ved hver konsentrasjon av [<3>H]-DHT uttatt for å bestemme mengden fri [<3>H]-DHT. Det gjenværende medium ble fjernet, celler ble vasket tre ganger med PBS og høstet på UniFilter GF/B-plater (Packard), Microscint (Packard) ble tilsatt og platene tellet i en Top-Counter (Packard) for å bestemme mengden bundet [<3>H]-DHT.
For metningsanalysen ble forskjellen mellom den totale binding og den uspesifikke binding definert som spesifikk binding. Den spesifikke binding ble vurdert ved hjelp av Scatchard-analyse for å bestemme Kdfor [<3>H]-DHT. Se f.eks. D. Rodbard, Mathematics and statistics of ligand assays: an illustrated guide: i: J. Langon & J.J. Clapp, red. Ligand Assay, Masson Publishing U.S.A., Inc., New York, s. 45-99 (1981).
For de kompetitive undersøkelsene ble medier inneholdende 1 nM [<3>H]-DHT og forbindelser ifølge oppfinnelsen («testforbindelser») i konsentrasjoner varierende fra 10"<10>til 10"5M, tilsatt til cellene. Det ble benyttet to paralleller for hver prøve. Etter 4 timer ved 37°C ble celler vasket, høstet og tellet som beskrevet ovenfor. Dataene ble plottet som den mengde [<3>H]-DHT (% av kontroll i fravær av testforbindelse) som var igjen, over området for doseresponskurven for en gitt forbindelse. Den konsentrasjon av testforbindelse som inhiberte 50% av mengden [<3>H]-DHT bundet i fravær av konkurrerende ligand, ble kvantifisert (IC50) etter Log-logit-transformasjon.
Ki-verdiene ble bestemt ved anvendelse av Cheng-Prusoff-ligningen for ICsoverdiene, hvor:
Etter korrigering for uspesifikk binding ble IC50-verdier bestemt. IC50er definert som den konsentrasjon av konkurrerende ligand som trengs for å redusere spesifikk binding med 50%. Kd-verdiene for [<3>H]-DHT for MDA453 og LNCaP var henholdsvis 0,7 og 0,2 nM.
Human prostatacelle-proliferasjonsbestemmelse:
Forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse ble testet («testforbindelser») på proliferasjonen av humane prostatacancercellelinjer. I den anledning ble MDA PCa2b-celler, en cellelinje avledet fra metastaser fra en pasient som ikke var kastrert, Navone et al., Clin. Cancer Res., 3, 2493-500 (1997), ble inkubert med eller uten testforbindelsene i 72 timer, og mengden [<3>H]-tymidin inkorporert i DNA ble kvantifisert som en måte for å bestemme celleantallet og derved proliferasjon. MDA PCa2b-cellelinjen ble opprettholdt i BRFF-HPC1-medium (Biological Research Faculty & Facility Inc., MD) supplert med 10% FBS. For testen ble celler utplatet i Biocoated 96-brønns mikroplater og inkubert ved 37°C i 10% FBS (aktivkull-renset)/BRFF-BMZERO (uten androgener). Etter 24 timer ble cellene behandlet uten (blindprøve) eller i nærvær av 1 nM DHT (kontroll) eller med testforbindelser (prøve) ifølge foreliggende oppfinnelse i konsentrasjoner varierende fra 10"<10>til 10"<5>M. Paralleller ble benyttet for hver prøve. Forbindelses-fortynningen ble foretatt på en Biomek 2000 laboratorie-arbeidsstasjon. 72 timer senere ble det tilsatt 0,44^Ci av [<3>H]-tymidin (Amersham) per brønn, og inkubert i ytterligere 24 timer etterfulgt av trypsinisering og høsting av cellene på GF/B-filtere. Micro-scint PS ble tilsatt til filterne før de ble tellet på en Beckman TopCount.
% inhibering ble beregnet som:
% inhibering = 100 x (1-[gj.snittkontroirgj-snittbiank/gj.snittPrøve- gj.snittbiank])- Data ble plottet, og den forbindelseskonsentrasjon som inhiberte 50% av [<3>H]-tymidin-inkorporeringen ble beregnet (ICso)-
C2C12 mus myoblast-transaktiveringsmåling
To funksjonelle transaktiveringsmålinger ble utviklet for å bestemme effekten av androgenagonister i en muskelcellebakgrunn, ved å benytte en luciferase-rapportør. Den første målingen (ARTA Stable 1) benytter en cellelinje, Stable 1
(klon #72), som stabilt uttrykker den fulle lengde av rotte-androgenreseptor, men fordrer den transiente transfeksjon av en enhancer/rapportør. Denne cellelinjen var avledet fra C2C12 musemyoblastceller. Den andre målingen (ARTA Stable 2) benytter en cellelinje, Stable 2 (klon #133), avledet fra Stable 1, som stabilt uttrykker både rAR og enhancer/luciferaserapportøren.
Enhancer/rapportørkonstruksjonen benyttet i dette system er pGL3/2XDR-1/luciferase. 2XDR-1 ble rapportert å være et AR-spesifikt responselement i CV-1-celler, Brown et al., The Journal of Biological Chemistry 272, 8227-8235, (1997). Det ble utviklet ved randomisert mutagenese av en AR/GR konsensus-enhancersekvens.
ARTA Stable 1:
1. Stable 1-celler utplates i 96-brønns format som 6000 celler/brønn i glukoserikt DMEM uten fenolrødt (Gibco BRL, eat. No.:21063-029) inneholdende 10% aktivkull- og dekstranbehandlet FBS (HyClone Cat. No.: SH30068.02), 50 mM HEPES-buffer (Gibco BRL, Cat. No.: 15630-080), 1X MEM Na-pyruvat (Gibco BRL, Cat. No.:11360-070), 0,5X Antibiotic-Antimycotic og 800 ng/mL Geneticin
(Gibco BRL, Cat. No.:10131-035).
2. 48 timer senere transfekteres cellene med pGL3/2XDR-1/luciferase ved å benytte LipofectAMINE Plus™ Reagent (Gibco BRL, Cat. No.: 10964-013). Nærmere bestemt fortynnes 5 ng/brønn pGL3/2XDR-1/luciferase DNA og 50 ng/brønn laksespermie DNA (som bærer) med 5^L/brønn Opti-MEMem medium (Gibco BRL, Cat. No.:31985-070). Til dette tilsettes 0,5^L/brønn Plus reagens. Denne blanding inkuberes i 15 minutter ved romtemperatur. I en separat beholder fortynnes 0,385^L/brønn LipofectAMINE reagens med 5^L/brønn Opti-MEM. DNA-blandingen kombineres deretter med LipofectAMINE-blandingen og inkuberes i ytterligere 15 minutter ved romtemperatur. I løpet av denne tiden fjernes mediet fra cellene og erstattes med 60^L/brønn Opti-MEM. Dette tilsettes 10^L/brønn av DNA/LipofectAMINE transfeksjonsblandingen. Cellene inkuberes i
4 timer.
3. Transfeksjonsblandingen fjernes fra cellene og erstattes med 90 av mediet som under #1 ovenfor.
4. 10^L/brønn av riktig medikamentfortynning anbringes i hver brønn.
5. 24 timer senere benyttes Steady-Glo™ Luciferase Assay system til å påvise aktivitet i henhold til produsentens instruksjoner (Promega, Cat. No.:E2520).
ARTA stable 2:
1. Stable 2-celler utplates i 96-brønns format som 6000 celler/brønn i glukoserikt DMEM uten fenolrødt (Gibco BRL, Cat. No.:21063-029) inneholdende 10% aktivkull- og dekstranbehandlet FBS (HyClone Cat. No.: SH30068.02), 50 mM HEPES-buffer (Gibco BRL, Cat. No.: 15630-080), 1X MEM Na-pyruvat (Gibco BRL, Cat. No.:11360-070), 0,5X Antibiotic-Antimycotic, 800 ng/mL Geneticin (Gibco BRL, Cat. No.: 10131-035) og 800ng/mL Hygromycin p (Gibco BRL, Cat.
No.: 10687-010). 2. 48 timer senere fjernes mediet på cellene og erstattes med 90^L ferskt medium.
10^L/brønn av riktig medikamentfortynning anbringes i hver brønn.
3. 24 timer senere benyttes Steady-Glo™ Luciferase Assay system til å påvise aktivitet i henhold til produsentens instruksjoner (Promega, Cat. No.:E2520).
Se USSN med tittel «Cell Lines and Cell-Based Assays for Identification of Androgen Receptor Modulators», innlevert 20. juni, 2001 av Jacek Ostrowski er al..
Proliferasjonsmålinger
Murin brystcelle proliferasjonsmåling:
Den evne forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse («testforbindelsene») har til å modulere funksjonen av AR, ble bestemt ved å teste nevnte forbindelser i en proliferasjonsmåling, hvor en androgen responsiv murin brystcellelinje avledet fra Shionogi-tumor (Hiraoka er al., Cancer Res., 47, 6560-6564 (1987)) ble benyttet. Stabile AR-avhengige kloner av den parentale Shionogi-linjen ble etablert ved passasje av tumorfragmenter etter de generelle fremgangsmåter som opprinnelig er beskrevet av Tetuo er al., Cancer Research, 25, 1168-1175 (1965). Ved hjelp av ovennevnte fremgangsmåte ble en stabil linje, SC114, isolert,karakterisertog benyttet for testing av eksempelforbindelser. SC114-celler ble inkubert med eller uten testforbindelsene i 72 timer, og mengden [<3>H]-tymidin inkorporert i DNA ble kvantifisert som et surrogat-sluttpunkt for å bestemme celleantallet og derved proliferasjonshastigheten, som beskrevet i Suzuki et al., J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 37, 559-567 (1990). SC114-cellelinjen ble opprettholdt i MEM inneholdende 10"<8>M testosteron og 2% DCC-behandlet FCS. For denne testen ble celler utplatet i 96-brønns mikroplater i vedlikeholdsmediet og inkubert ved 37°C. Den påfølgende dag ble mediet endret til serumfritt medium [Ham's F-12:MEM (1:1, volumdeler) inneholdende 0,1% BSA] med (antagonist-modus) eller uten (agonist-modus) 10"<8>M testosteron og testforbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse i konsentrasjoner varierende fra 10"<10>til 10"5M. Paralleller ble benyttet for hver prøve. Fortynningene av forbindelsen ble foretatt på en Biomek 2000 laboratorie arbeidsstasjon. 72 timer senere ble 0,44^Ci [<3>H]-tymidin (Amersham) tilsatt til hver brønn og inkubert i ytterligere 2 timer, med påfølgende trypsinisering og høsting av cellene på GF/B-filtere. Micro-scint PS ble tilsatt til filterne før de ble tellet på en Beckman TopCount.
For antagonist-modus ble % inhibering beregnet som:
% inhibering=100 x (1-[gj.snittprøve-gj.snittbiank/gj.snittkontroir gj.snittbiank]).
Data ble plottet og den forbindelseskonsentrasjon som inhiberte 50% av [<3>H]-tymidin-inkorporeringen ble beregnet (ICso)-
For agonist-modus ble % kontroll angitt som effekten av den testede forbindelse sammenlignet med den maksimale effekt observert med det naturlige hormon, i dette tilfelle DHT, og beregnet som:
% kontroll = 100 x (gj.snittPrØVe-<g>j.snittbiank)/(<g>j.snittkontroir<g>j-snittbiank).
Data ble plottet, og den forbindelseskonsentrasjon som inhiberte 50% av [<3>H]-tymidin-inkorporeringen ble beregnet (ECso)-
In vitro metode for å måle GR-indusert AP-1 transrepresjon:
AP-1-målingen er en cellebasert luciferaserapportør-måling. A549-celler som inneholder endogen glukokortikoidreseptor, ble stabilt transfektert med et AP-1 DNA-bindingssete koblet til luciferasegenet. Celler dyrkes deretter i RPMI + 10% føtalt kalveserum (aktivkull-behandlet) + penicillin/streptomycin med 0,5 mg/mL geneticin. Celler utplates dagen før målingen som ca. 40.000 celler/brønn. På bestemmelses-dagen fjernes mediet ved avsugning og 20 målebuffer (RPMI uten fenol-
rødt + 10% FCS (aktivkull-behandlet) + Pen/Strep) tilsettes til hver brønn. På dette
tidspunkt tilsettes hver brønn enten 20 jaL målebuffer (kontrollforsøk), forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse («testforbindelser») (løst i DMSO og tilsatt i varierende konsentrasjoner) eller deksametason (100 nM i DMSO, positiv kontroll). Platene preinkuberes deretter i 15 minutter ved 37°C, hvorpå cellene stimuleres med 10 ng/mL PMA. Platene inkuberes deretter i 7 timer ved 37°C, hvoretter 40 luciferase-substratreagens tilsettes til hver brønn. Aktivitet måles ved analyse i et luminometer sammenlignet med kontrollforsøk behandlet med buffer eller deksametason. Aktivitet angis som % inhibering av rapportørsystemet sammenlignet med bufferkontrollen med 10 ng/mL PMA alene. Kontrollen, deksametason, i en konsentrasjon på <10^M undertrykker typisk aktiviteten med 65%. Testforbindelser som oppviser en inhibering av PMA-induksjon på 50% eller mer ved en konsentrasjon av testforbindelser på <10^M vurderes som aktive.
Prostata våtvekt-måling AR-antagonistmåling:
Aktiviteten av forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse som AR-antagonister ble undersøkt i en umoden hannrottemodell, en standard, anerkjent test av anti-androgenaktivitet av en gitt forbindelse som beskrevet i L.G.Hershberger er al., Proe. Soc. Expt. Biol. Med., 83, 175 (1953); P.C. Walsh, & R.F. Gittes, «Inhibition of extratesticular stimuli to prostate growth in the castrated rat by antiandrogens», Endocrinology, 86, 624 (1970); og B.J. Furr et al., «ICI 176.334:A novel non-steroid, periferaly selective antiandrogen», J. Endocrinol., 113, R7-9 (1987).
Grunnlaget for denne test er det faktum at de mannlige seksualaksessoriske organer, som f.eks. prostata og sædvesikler, spiller en viktig rolle i reproduksjonsfunksjonen. Disse kjertlene stimuleres til vekst og holdes i størrelse og sekresjons-funksjon av det vedvarende nærvær av serumtestosteron (T), som er det hoved-serumandrogen (>95%) som produseres av leydigcellene i testiklene under kontroll av hypofysens luteiniserende hormon (LH) og folikkelstimulerende hormon (FSH). Testosteron omdannes til den mer aktive form, dihydrotestosteron (DHT) i prostata av 5a-reduktase. Adrenale androgener bidrar også med ca. 20% til total DHT i rotte prostata, sammenlignet med 40% av den i 65 år gamle menn. F. Labrie et al., Clin. Invest. Med., 16, 475-492 (1993). Dette er imidlertid ikke en hovedvei, siden kastrering både hos mennesker og dyr fører til nesten fullstendig involusjon av prostata og sædvesikler, uten samtidig adrenalektomi. Under normale betingelser understøtter derfor binyrene ikke vesentlig vekst av prostatavev. M.C. Luke, & D.S. Coffey, «The Physiology of Reproduction» red. E. Knobil & J.D. Neill, 1, 1435-1487
(1994). Siden de mannlige kjønnsorganene er det vev som er mest responsivt for modulering av androgenaktivitet, benyttes denne modell til å bestemme den androgen-avhengige vekst av de seksualaksessoriske organer i umodne kastrerte rotter.
Umodne hannrotter (19-20 dager gamle Sprague-Dawley, Harlan Sprague-Dawley) ble kastrert under metofan-anestesi. 5 dager etter inngrepet ble disse kastrerte rottene (60-70 g, 23-25 dager gamle) dosert 3 dager. Dyrene ble subkutant (s.c.) gitt 1 mg/kg testosteronpropionat (TP) i jordnøttolje, og anti-androgen testforbindelser (forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse) administrert peroralt (p.o.) med mavesonde i oppløsning/suspensjon av 80% PEG 400 og 20% Tween 80 (PEGTW). Dyrene ble dosert (vol/vekt) 0,5 mL bærer/100 g kroppsvekt. Forsøks-gruppene var som følger:
1. Kontrollbærer
2. Testosteron-propionat (TP) (3 mg/rotte/dag, subkutant)
3. TP pluss Casodex (administrert p.o. i PEGTW, QD), et anerkjent anti-androgen, som referanseforbindelse. 4. For å bestemme antagonistaktivitet ble en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse («testforbindelse») administrert (p.o. i PEGTW, QD) med TP (s.c. som administrert i gruppe 2) i et utvalg av doser. 5. For å bestemme agonistaktivitet ble en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse («testforbindelse») administrert alene (p.o. i PEGTW, QD) i et utvalg av doser.
På slutten av 3 dagers behandlingen ble dyrene avlivet og den ventrale prostata veid. For å sammenligne data fra forskjellige forsøk ble vekten av kjønns-organene først standardisert som mg per 100 g kroppsvekt, og økningen i organvekt indusert med TP ble ansett som den maksimale økning (100%). ANOVA etterfulgt av én-halet Student eller Fischer's eksakt-test ble benyttet for statistisk analyse.
Økningen og minskningen av kjønnsorganvekt reflekterer endringen av celleantallet (DNA-innhold) og cellemasse (proteininnhold), avhengig av serum-androgenkonsentrasjonen. Se Y. Okuda era/., J. Uroi., 145, 188-191 (1991). Måling av organs våtvekt er derfor tilstrekkelig til å indikere bioaktiviteten av androgener og androgenantagonister. I umodne kastrerte rotter øker erstatning av eksogene
androgener sædvesikler (SV) og den ventrale prostata (VP) på en doseavhengig måte.
Den maksimale økning i organvekt var 4 til 5 ganger ved dosering av
3 mg/rotte/dag av testosteron (T) eller 1 mg/rotte/dag av testosteron-propionat (TP) i 3 dager. EC50av T og TP var henholdsvis ca. 1 mg og 0,03 mg. Økningen i vekten av VP og SV korrelerte også med økningen i serum T- og DHT-konsentrasjon. Selv om administrering av T viste 5 ganger høyere serumkonsentrasjoner av T og DHT 2 timer etter subkutan injeksjon, enn den av TP, avtok disse høye nivåene deretter meget hurtig. Derimot var serumkonsentrasjonene av T og DHT i TP-behandlede dyr ganske konstante under de 24 timene, og TP oppviste derfor ca. 10-30 ganger høyere styrke enn fri T.
I denne modellen med umodne kastrerte rotter ble det også administrert en kjent AR-antagonist (Casodex) samtidig med 0,1 mg TP (ED8o), hvilket inhiberte den testosteron-medierte økning i vekten av VP og SV på en doseavhengig måte. Antagonist-effektene var relativt like ved peroral og subkutan dosering. Forbindelser ifølge oppfinnelsen oppviste også AR-antagonistaktivitet ved å undertrykke den testosteron-medierte økning i vekten av VP og SV.
Levator ani & prostata våtvektmåling AR-agonistmåling:
Aktiviteten av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse som AR-agonister ble undersøkt i en rottemodell på umodne hanner, en anerkjent test av anabole effekter i muskel og vedvarende effekter i kjønnsorganger for en gitt forbindelse, som beskrevet i L.G. Hershberger, et al., Proe. Soc. Expt. Biol. Med., 83, 175 (1953); B.L. Beyler et al., «Methods for evaluating anabolic and catabolic agents in laboratory animals», J. Amer. Med. Woman' s Ass., 23, 708 (1968); H. Fukuda et al., «Investigations of the levator ani muscle as an anabolic steroid assay», Nago Dai.
Vak. Ken. Nem. 14, 84 (1966).
Grunnlaget for denne test er den veldefinerte virkningen av androgene midler på oppretthold og vekst av muskelvev og seksualaksessoriske organer hos dyr og mennesker. Androgene steroider som f.eks. testosteron (T), er blitt grundigkarakterisertmed henblikk på deres evne til å opprettholde muskelmasse. Behandling av kastrerte dyr eller mennesker med en eksogen kilde av T resulterer i en reversering av muskelatrofi. Effektene av T på muskelatrofi i rotte levator ani muskulatur er grundigkarakterisert. M.Masuoka et al., « Constant cell population in normal, testosterone deprived and testosterone stimulated levator ani muscles», Am. J. Anat. 119, 263 (1966); Z. Gori et al., «Testosterone hypertrophy of levator ani muscle of castrated rats. I. Quantitative data» Boll - Soc. Ital. Biol. Sper. 42,1596
(1966); Z. Gori er al., «Testosterone hypertrophy of levator ani muscle of castrated rats. II. Electron-microscopic observations» Boll.- Soc. Ital. Biol. Sper., 42, 1600
(1966); A. Boris et al., Steroids 15, 61 (1970). Som beskrevet ovenfor er effektene av androgener på oppretthold av mannlige seksualaksessoriske organer, så som prostata og sædvesiklene, grundig beskrevet. Kastrering resulterer i hurtig involusjon og atrofi av prostata og sædvesikler. Denne effekt kan reverseres ved eksogen tilsetning av androgener. Siden både levator ani-muskelen og de mannlige kjønns-organer er de vev som best responderer på effektene av androgene midler, benyttes denne modell til å bestemme den androgen-avhengige reversering av atrofi i levator ani-muskelen og de seksualaksessoriske organer i umodne kastrerte rotter. Seksuelt modne rotter (200-250 g, 6-8 uker gamle, Sprague-Dawley, Harlan) ble anskaffet kastrert fra selgeren (Taconic). Rottene ble delt i grupper og behandlet daglig i 7 til 14 dager med ett av følgende:
1. Kontrollbærer
2. Testosteron-propionat (TP) (3 mg/rotte/dag, subkutant)
3. TP pluss Casodex (administrert p.o. i PEGTW, QD), et anerkjent anti-androgen, som referanseforbindelse. 4. For å demonstrere antagonistaktivitet ble en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse («testforbindelse») administrert (p.o. i PEGTW, QD) med TP (s.c. som administrert i gruppe 2) i et utvalg av doser. 5. For å demonstrere agonistaktivitet ble en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse («testforbindelse») administrert alene (p.o. i PEGTW, QD) i et utvalg av doser.
Ved slutten av 7-14 dagers behandlingen ble dyrene avlivet med karbon-dioksyd, og lavator ani, sædvesikkel og ventral prostata veid. For å sammenligne data fra forskjellige forsøk ble levator ani-muskelen og kjønnsorganvekten først standardisert som mg per 100 g kroppsvekt, og økningen i organvekt indusert med TP ble ansett som den maksimale økning (100%). Super-anova (én faktor) ble benyttet for statistisk analyse.
Økningen og tap av kjønnsorganvekt reflekterer endringen av celleantallet (DNA-innhold) og cellemasse (proteininnhold), avhengig av serumandrogen-konsentrasjonen. Se Y. Okuda et al., J. Uroi., 145, 188-191 (1991). Måling av organs våtvekt er derfor tilstrekkelig til å indikere bioaktiviteten av androgener og androgenantagonister. I umodne kastrerte rotter øker erstatning av eksogene androgener, levator ani, sædvesikler (SV) og prostata på en doseavhengig måte.
Den maksimale økning i organvekt var 4 til 5 ganger ved dosering av
3 mg/rotte/dag testosteron (T) eller 1 mg/rotte/dag testosteron-propionat (TP) i 3 dager. ECso-verdien av T og TP var henholdsvis ca. 1 mg og 0,03 mg. Økningen i vekten av VP og SV korrelerte også med økningen i serum T- og DHT-konsentrasjon. Selv om administrering av T viste 5 ganger høyere serumkonsentrasjoner av T og DHT 2 timer etter subkutan injeksjon, enn den av TP, avtok disse høye nivåene deretter meget hurtig. Derimot var serumkonsentrasjonene av T og DHT i TP-behandlede dyr ganske konstante under de 24 timene, og TP oppviste derfor ca. 10-30 ganger høyere styrke enn fri T.
MDA PCa2b human prostata zenograft-måling
Ved in vivo anti-tumormåling ble MDA-PCa-2b humane prostatatumorer opprettholdt i nakne Balb/c nu/nu mus. Tumorer ble formert som subkutane transplantater i voksne nakne hannmus (4-6 uker gamle) ved å benytte tumorfragmenter tatt fra donormus. Tumorpassasje ble foretatt hver 5-6 uke.
For anti-tumor effektivitetsforsøk ble det nødvendige antall dyr som trengtes for å påvise en meningsfull respons, slått sammen ved starten av forsøket, og hvert dyr gitt et subkutant implantat av et tumorfragment (~50 mg) med en 13 gauge trokar. Tumorene fikk vokse til ca. 100-200 mg (tumorer utenfor området ble utelatt), og dyrene ble jevnt fordelt på forskjellige behandlings- og kontrollgrupper. Behandling av hvert dyr ble basert på individuell kroppsvekt. Behandlede dyr ble kontrollert daglig med henblikk på behandlingsrelatert toksisitet/mortalitet. Hver gruppe av dyr ble veid før behandlingsstart (Wt1) og deretter på nytt etter den siste behandlingsdose (Wt2). Forskjellen i kroppsvekt (Wt2-Wt1) gir et mål for behandlingsrelatert toksisitet.
Tumorrespons ble bestemt ved måling av tumorer med en skyvelære to ganger per uke inntil tumorene nådde en forutbestemt «mål»-størrelse på 0,5 g. Tumorvekt (mg) ble anslått ut fra formelen:
Tumorvekt = (lengde x bredde2) / 2
Sluttpunktet for tumorrespons ble uttrykt som tumorvekstinhibering (% T/C), definert som forholdet mellom median tumorvekt av de behandlede tumorene (T) og de for kontrollgruppen (C).
For å anslå tumorcelledrap, ble først tumorvolum-doblingstiden beregnet med formelen: TVDT = mediantid (dager) for at kontrolltumorer skal nå målstørrelse - mediantid (dager) for at kontrolltumorer skal nå halvparten av målstørrelsen og, Log celledrap = (T-C) / (3,32 x TVDT)
Statistiske evalueringer av data ble foretatt ved å benytte Gehans generaliserte Wilcoxon test.
Dunning prostatatumor:
Dunning R3327H prostatatumor er et spontant oppstått veldifferensiert androgenresponsivt adenokarsinom i prostata (Smolev JK, Heston WD, Scott WW & Coffey DS, Cancer Treat Rep., 61, 273-287 (1977)). Veksten av R3327H-sublinjen er blitt valgt på grunn av dens høye androgen-avhengige og reproduserbare vekst i intakte hannrotter. Denne modellen og andre sublinjer av denne tumor har derfor vært utstrakt anvendt for å evaluere in vivo antitumoraktiviteter av antiandrogener, så som flutamid og bacilutamid/Casodex (Maucher, A., & von Angerer, J. Cancer Res. Clin. Oncol. 119, 669-674 (1993), Furr, B.J.A. Euro. URL. 18(Suppl. 3) 2-9 (1990), Shain, S.A. & Huot, RI. J. Steroid Biochem. 31, 711-718 (1988)).
Ved begynnelsen av denne undersøkelse transplanteres Dunning-tumorstykker (ca. 4x4 mm) subkutant til flanken av modne Copenhagen hannrotter (6-7 uker gamle, Harlan-Sprague Dawley, Indianapolis, MD). Ca. 6 uker etter implantasjonen ble dyrene med tumorer av målbar størrelse (ca. 80-120 mm<2>) randomisert til behandlingsgrupper (8-10 rotter/gruppe) og behandlingene innledet. En gruppe rotter kastreres for å tjene som den negative kontroll på tumorvekst. Dyrene behandles daglig med forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse, standard antiandrogener, så som bacilutamide eller bærer (kontroll) i gjennomsnittlig 10 til 14 uker. Testforbindelser løses i en bærer av (2,5 mL/kg kroppsvekt) 10% polyetylen- glykol og 0,05% Tween-80 i 1% karboksymetylcellulose, PEG/CMC (Sigma, St. Louis, MO). Typiske terapeutiske forsøk inkluderte tre grupper av tre eskalerende doser for hver standard- eller testforbindelse (innen området 300-3 mg/kg).
Tumorer i bærergruppen, kontrollgruppe-tumorene, nådde en størrelse på 1500 til 2500 mm<3>, mens de kastrerte dyrene oppviste typisk tumorstillstand over de 14 observasjonsukene. Dyr behandlet peroralt med 20 mg/kg bicalutamid eller flutamid forventes å oppvise 40% reduksjon i tumorvolumer sammenlignet med kontroller etter 14 ukers behandling. Størrelsen av tumorene måles ukentlig med nonius-skyvelære (Froboz, Sveits) ved å ta perpendikulære målinger av lengde og bredde. Tumorvolumer måles i mm<3>ved å benytte
formelen: lengde x bredde x høyde = volum. Statistiske forskjeller mellom behandlingsgrupper og kontroll evalueres ved å benytte en multippel ANOVA-analyse etterfulgt av en én-halet ikke-parametrisk Student t test.
Vektbestemmelse av moden rotteprostata
Aktiviteten av forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse ble undersøkt i en modell på kjønnsmodne hannrotter, som er en variasjon av levator ani og prostata våtvektbestemmelsen beskrevet ovenfor. In vivo målingene ovenfor er anerkjente målinger for bestemmelse av de anabole effektene i muskel og vedvarende effekter i kjønnsorganer for en gitt forbindelse, som beskrevet i L.G. Hershberger er al., 83 Proe. Soc. Expt. Biol. Med., 175 (1953); B.L.Beyler er a/.,»Methods for evaluating anabolic and catabolic agents in laboratory animals», 23 J. Amer. Med. Woman' s Ass. 708 (1968); H. Fukuda et al., »lnvestigations of the levator ani muscle as an anabolic steroid assay», 14 Nago Dai. Yak. Ken. Nem. 84 (1966). Grunnlaget for denne måling er den veldefinerte virkningen av androgene midler på oppretthold og vekst av muskelvev og seksualaksessoriske organer i dyr og mennesker.
De hannlige seksualaksessoriske organene, som f.eks. prostata og sædvesikler, spiller en viktig rolle for reproduksjonsfunksjonen. Disse kjertlene stimuleres til vekst, og opprettholdes i størrelse og sekretorisk funksjon gjennom det vedvarende nærvær av serumtestosteron (T), som er hovedandrogenet i serum (>95%) produsert av leydigcellene i testiklene under kontroll av hypofysens luteiniserende hormon (LH) og folikkelstimulerende hormon (FSH). Testosteron omdannes til den mer aktive form, dihydrotestosteron (DHT), i prostata av 5a-reduktase. Adrenale androgener bidrar også ca. 20% til total DHT i rotteprostata, sammenlignet med 40% forden hos 65 år gamle menn. F. Labrie et al., 16 Clin. Invest. Med., 475-492 (1993). Dette er imidlertid ikke en hovedvei, siden kastrering både hos dyr og mennesker fører til nesten fullstendig involusjon av prostata og sædvesiklene uten samtidig adrenalektomi. Under normale betingelser understøtter derfor binyrene ikke vesentlig vekst av prostatavev, M.C. Luke, & D.S.Coffey, «The Physiology of Reproduction» red. E. Knobil & J.D. Neill, 1, 1435-1487 (1994). Siden de mannlige kjønnsorganene og levator ani er de vev som er mest responsive for modulering av androgen-aktiviteten, benyttes denne modell til å bestemme aktiviteten av forbindelser som modulerer androgenreseptorveien hos kjønnsmodne rotter.
Samtidig med dens mitogene aktivitet på vev som prostata, sædvesikkel og muskulatur, tjener testosteron også som en negativ regulator for dets egen biosyntese. Testosteronproduksjon i leydigcellene i testiklene kontrolleres av nivået av sirkulerende LH frigitt fra hypofysen. LH-nivåer kontrolleres selv av nivået av LHRH produsert i hypothalamusområdet. Testosteronnivåene i blodet tjener til å inhibere sekresjonen av LHRH og reduserer deretter nivåer av LH og tilslutt nivåene av sirkulerende testosteron. Ved å måle blodets nivåer av LH når de påvirkes av testforbindelser, er det mulig å bestemme nivået av agonist- eller antagonistaktivitet av nevnte forbindelser på hypothalamusaksen av den endokrine syklus.
Avpassede sett av Harlan Sprague-Dawley rotter (40-42 dager gamle, 180-220 g) ble peroralt (p.o.) ved hjelp av sonde, gitt testforbindelsene i en opp-løsning/suspensjon av 80% PEG 400 og 20% Tween 20 (PEGTW) i 14 dager. To kontrollgrupper, én intakt og én kastrert, ble peroralt dosert bare med PEGTW-bæreren. Dyrene ble dosert (vol/vekt) 0,5 mL bærer/100 g kroppsvekt. Forsøks-grupper var som følger:
1. Intakt bærer (p.o. PEGTW, QD)
2. Kontrollbærer (p.o. PEGTW, QD)
3. Bicalutamid (Casodex, et anerkjent antiandrogen, som referanseforbindelse) eller en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse, p.o. i PEGTW QD (i et utvalg av doser).
Ved slutten av 14 dagers behandlingen ble dyrene avlivet, og den ventrale prostata, sædvesiklene og levator ani tatt ut kirurgisk og veid. For å sammenligne data fra forskjellige forsøk ble organvektene først standardisert som mg per 100 g kroppsvekt, og uttrykt som en prosentdel av verdien av det respektive organ i den intakte gruppe.
Rotte luteiniserende hormon (rl_H) bestemmes kvantitativt med Biotrak[125l]-settet (Amersham Pharmacia Biotek), ved å følge produsentens anvisninger. Testen er basert på det tilstedeværende LH's konkurranse i serumet om bindingen av [<125>l]rl_H til en Amerlex-M kule/antistoff-suspensjon. Den radioaktivitet som er igjen etter inkubering med serumet og påfølgende vaskinger, ekstrapoleres inn i en standardkurve for å oppnå en avlesning i ng/mL.
Økningen og tap av kjønnsorgan- og levator ani-vekt reflekterer endringen av celleantallet (DNA-innhold) og cellemasse (proteininnhold), avhengig av serum-androgenkonsentrasjonen, se Y. Okuda et al., J. Uroi., 145,188-191 (1991). Måling av organs våtvekt er derfor tilstrekkelig til å indikere bioaktiviteten av androgener og androgenantagonister. I bestemmelsen på modne rotter vil aktive agonistmidler ikke ha noen effekt eller vil øke vekten av ett eller flere av de androgenresponsive organene (levator ani, prostata, sædvesikler) og ikke ha noen effekt eller en suppressiv effekt på LH-sekresjon. Forbindelser med antagonistaktivitet vil minske vekten av ett eller flere av de androgenresponsive organene (levator ani, prostata, sædvesikler) og vil ha ingen effekt eller en redusert suppressiv effekt på LH-sekresjon.
CWR22 human prostata zenograft-måling:
In vivo antitumortesting:CWR22 humane prostatatumorer ble opprettholdt i nakne Balb/c nu/nu mus. Tumorer ble formert som subkutane transplantater i voksne nakne hannmus (4-6 uker gamle) ved å benytte tumorfragmenter tatt fra donormus. Tumorpassasje ble foretatt hver 5-6 uke.
For antitumoreffektivitetsforsøk ble det nødvendige antall dyr som trengtes for å påvise en meningsfull respons, slått sammen ved starten av forsøket, og hvert dyr gitt et subkutant implantat av et tumorfragment (~50 mg) med en 13 gauge trokar. Tumorene fikk vokse til ca. 100-200 mg (tumorer utenfor området ble utelatt), og dyrene ble jevnt fordelt på forskjellige behandlings- og kontrollgrupper. Behandling av hvert dyr ble basert på individuell kroppsvekt. Behandlede dyr ble kontrollert daglig med henblikk på behandlingsrelatert toksisitet/mortalitet. Hver gruppe av dyr ble veid før behandlingsstart (Wt1) og deretter på nytt etter den siste behandlingsdose (Wt2). Forskjellen i kroppsvekt (Wt2-Wt1) gir et mål for behandlingsrelatert toksisitet.
Tumorrespons ble bestemt ved måling av tumorer med en skyvelære to ganger per uke inntil tumorene nådde en forutbestemt «mål»-størrelse på 0,5 g. Tumorvekt (mg) ble anslått ut fra formelen:
Tumorvekt = (lengde x bredde2) / 2
Sluttpunktet for tumorrespons ble uttrykt som tumorvekstinhibering (%T/C), definert som forholdet mellom median tumorvekt av de behandlede tumorene (T) og den for kontrollgruppen (C).
For å anslå tumorcelledrap, ble først tumorvolum-doblingstiden beregnet med formelen:
TVDT = mediantid (dager) for at kontrolltumorer skal nå målstørrelse -
mediantid (dager) for at kontrolltumorer skal nå halvparten av målstørrelsen
og
Log-celledrap = (T-C) / (3,32 x TVDT)
Statistiske evalueringer av data ble foretatt ved å benytte Gehans generaliserte Wilcoxon test.
De etterfølgende eksempler illustrerer utførelsesformer av foreliggende oppfinnelse, og er ikke ment å begrense rammen for patentkravene.
Forkortelser
De følgende forkortelser er her benyttet:
DBU = 1,8-diazabicyklo[5.4.0]undek-7-en 4-DMAP = 4-dimetylaminopyridin ee = enantiomert overskudd DM F = dimetylformamid
EtOAc = etylacetat
LDA = litiumdiisopropylamid
Hunigs base = N,N-diisopropyletylamin
Me = metyl
RT = retensjonstid
TFA = trifluoreddiksyre
TH F = tetrahydrofuran
TLC = tynnsjiktkromatografi
TMS = trimetylsilyl
pTSA = para-toluensulfonsyre A - oppvarming
f-Bu = rert-butyl
PhCH3= toluen
Pd/C = palladium på aktivkull
TsCI = tosylklorid
TBSOTf = fert-butyldimetylsilyl-trifluormetansulfonat TBS = rert-butyldimetylsilan
Mel = metyljodid
(BOC)20 = di-rert-butyldikarbonat TEA = trietylamin
n-BuLi = n-butyllitium
rt = romtemperatur
LC = væskekromatografi
Ts= tosyl
Ph = fenyl
EtOH = etanol
DCE = dikloretan
DMSO = dimetylsulfoksyd
Ra-Ni = Raney-nikkel
MS = molekylsikt
MS(ES) = elektrospray massespektrometri mCPBA = m-klorperoksybenzoesyre AcOH = eddiksyre
MeOH = metanol
Et.20 =dietyleter
Ac - acetyl
DEAD = dietylazodikarboksylat
h - timer
Et = etyl
WSDCC = vannløselig dikarbonyldiimid, 1 -(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid-hydroklorid TBAF = tetrabutylammoniumfluorid DBAD = di-tert-butylazodikarboksylat DCC = dicykloheksylkarbodiimid Wilkinsons katalysator = RhCI(PPh3)3
ADDP = 1,1-[azodikarbonyl]dipiperidin DMA = dimetylacetamid
DME = 1,2-dimetoksyetan
BOP = benzotriazol-1 -yloksytris(dimetylamino)-fosfonium-heksafluorfosfat
Eksempel 1
( 3aa, 4a, 7g , 7aa)- 2- f4- brom- 3- metvlfenvl) tetrahvdro- 4, 7- etanotiopyranor3, 4-c1pvrrol- 1. 3. 8( 2H. 4H)- trion ( 1C)
A. 4-(tert-butyldimetylsiloksy)-2H-tiopyran (1A)
2,3-dihydro-4H-tiopyran-4-on (1,50 g, 13,14 mol, syntetisert som beskrevet i
Richards et al., J. Org. Chem. 46, 4836-4842 (1981)) ble løst i CH2CI2(130 ml_) og tilsatt trietylamin (5,47 ml_, 39,41 mmol). rerr-butyldimetylsilyl-trifluormetansulfonat (3,62 ml_, 15,77 mmol) ble deretter tilsatt. Etter 10 minutter ble flyktige forbindelser fjernet ved rotasjonsfordampning ved 25°C. Den resulterende gule olje ble sendt gjennom en kort kolonne av Si02under eluering med 3% TEA i heksaner for å gi 1,82 g av forbindelse IA som en orange olje.
B. 1 -[4-brom-3-metylfenyl]-1 H-pyrrol-2,5-dion (1B)
4-brom-3-metylanilin (1,55 g, 8,33 mmol) og maleinsyre-anhydrid (0,898 g, 9,16 mmol) ble løst i eddiksyre (10 ml_) og oppvarmet til 115°C i 12 timer. Reaksjonsblandingen ble deretter avkjølt til 25°C og eddiksyren fjernet i vakuum. Det resulterende residuum ble suspendert i 5% K2C03(100 ml_), omrørt i 25 minutter og deretter filtrert og renset med vann. Materialet ble deretter tørket i vakuum for å gi forbindelse IB som et lysebrunt faststoff (1,65 g). HPLC: 100% ved 2,96 min
(retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm).
C. (3aa,4a,7a,7aa)-2-(4-brom-3-metylfenyl)tetrahydro-4,7-etanotiopyrano[3,4-c]pyrrol-1,3,8(2H,4H)-trion (1C)
Forbindelse IA (0,313 g, 1,41 mmol) og forbindelse IB (0,250 g, 0,94 mmol) ble løst i toluen og kokt under tilbakeløpskjøling i 5 timer. Toluenet ble deretter fjernet ved å sende en strøm av argon gjennom reaksjonskolben. Residuet ble deretter renset ved hurtigkromatografi på Si02under eluering med 20% heksan i kloroform. Dette ga 0,168 g av enoleter-mellomproduktet som et gult faststoff. Enoleter-mellomproduktet ble løst i dikloretan (2,0 ml_) og tilsatt TFA (0,25 ml_). Etter 0,5 timer ble reaksjonen avbrutt med mettet vandig NaHC03, hvorpå blandingen ble ekstrahert med CH2CI2(2 x 30 ml_). De organiske lagene ble tørket over vannfritt natriumsulfat og inndampet for å gi 0,079 g av forbindelse IC som et hvitt faststoff. HPLC: 99% ved 3,010 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 396,9 [M+NH4]<+>.
Eksempel 2
( 3aa, 4a, 7a, 7aa)- 2-( 4- brom- 3- metylfenyl) tetrahvdro- 4, 7- etanotiopyrano[ 3, 4-clpyrrol- 1, 3, 8( 2H, 4H)- trion- 5, 5- dioksvd ( 2)
Forbindelse IC (0,040 g, 0,105 mmol) ble løst i CH2CI2(4,0 mL) og avkjølt til 0°C. m-CPBA (60% renhet, 0,061 g, 0,210 mmol) ble tilsatt og reaksjonsblandingen oppvarmet til 25°C. Etter 1 time ble en 1:1 blanding av mettet NaHC03og mettet natriumsulfitt (20 mL) tilsatt under kraftig omrøring. Etter 15 minutter ble blandingen ekstrahert med CH2CI2(2 x 30 mL), og de organiske lagene tørket over vannfritt natriumsulfat for å gi 0,031 g av forbindelse 2 som et hvitt faststoff. Ingen rensing var nødvendig. HPLC: 78% ved 2,290 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 429,8 [M+NH4]<+>.
Eksempel 3
( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- 2-( 3- klofrenvl) heksahvdro- 4- metvl-4. 7- epoksv- 1 H- isoindol- 1, 3( 2H)- dion ( 3)
3-kloranilin (0,100 g, 0,787 mmol) og 3,6-endokso-3-metylheksahydroftalsyre-anhydrid (0,172 g, 0,945 mmol) ble løst i AcOH (2,0 mL) og oppvarmet til 110°C i 11 timer. Reaksjonsblandingen ble deretter avkjølt til 25°C og helt over i kald mettet vandig K2C03og kraftig omrørt i 10 minutter. Løsningen ble deretter filtrert og renset med vann. Det resulterende filtrat ble tørket i vakuum for å gi 0,118 g av forbindelse 3 som et hvitt faststoff. Ingen ytterligere rensing var nødvendig. HPLC: 99% ved 2,510 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 229,32 [M+H]<+>.
Eksempel 4
( 3aa, 4a, 7a, 7aa)- og ( 3aa, 4B, 7[ 3, 7aa)- 4- r( acetyloksy) metyll- 3a, 4, 7, 7a-tetrahvdro- 2- r3- ftrifluormetvl) fenvn- 4. 7- epoksv- 1H-isoindol- 1, 3( 2H)- dion f henholdsvis 4i og 4ii)
2-acetoksymetylfuran (0,599 mL, 4,78 mmol) og 1-[3-(trifluormetyl)fenyl]-1H-pyrrol-2,5-dion (0,500 g, 2,39 mmol) ble løst i metylenklorid (3,0 mL) ved 25°C. Etter 22 timer ble flyktige forbindelser fjernet i vakuum, og det resulterende residuum ble renset ved hurtigkromatografi på Si02under eluering med 0-15% aceton i metylenklorid for å gi 0,438 g gul olje som en 2:1 blanding av forbindelse 4i og forbindelse 4ii, som ikke ble separert. HPLC: 100% ved 3,093 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 398,9 [M+NH4]<+.>
Eksempel 5
f3aa. 4a. 7a. 7aa)- og ( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- 4- r( acetvloksv) metvll- heksahvdro-2- r3- ftrifluormetyl) fenvn- 4. 7- epoksv- 1H- isoindol-
1, 3( 2H)- dion f henholdsvis 5i og 5ii)
Blandingen i forholdet 2:1 av forbindelse 4i og 4ii (0,361 g, fra Eksempel 4) ble løst i etylacetat (25 mL) og tilsatt Pd/C (10% Pd, 0,2 g). Hydrogen ble innført via en ballong og reaksjonsblandingen omrørt ved 25°C i 4 timer, etterfulgt av filtrering gjennom Celite og rensing med etylacetat. Konsentrering i vakuum ga en gul olje som ble bestemt å være en 2:1 blanding av forbindelse 5i og forbindelse 5ii (0,348 g), som ikke ble separert. HPLC: 100% ved 2,900 min (retensjonstid)
(YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 ml_/min, deteksjon ved 220 nm),
MS (ES): m/z 401,0 [M+NH4]<+>.
Eksempel 6
( 3aa. 4a. 7a. 7aa)- og f3aa. 4B. 7B. 7aa)- 3a. 4. 7. 7a- tetrahvdro- 5-fhvdroksvmetvl)- 2- r3- ftrifluormetyl) fenvn- 4. 7- epoksv- 1H- isoindol-1. 3( 2H)- dion ( henholdsvis 6i og 6ii)
1-[(trifluormetyl)fenyl]-1H-pyrrol-2,5-dion (0,500 g, 2,39 mmol) og 3-furanmetanol (0,412 mL, 4,78 mmol) ble løst i metylenklorid (3,0 mL) og omrørt ved 25°C i 20 timer. Flyktige forbindelser ble deretter fjernet i vakuum og det resulterende materialet renset ved hurtigkromatografi på Si02under eluering med kloroform/aceton for å gi 0,379 g av forbindelse 6i og 0,220 g av forbindelse 6ii, begge som hvite faststoff. Forbindelse 6i: HPLC: 100% ved 2,197 min (retensjonstid)
(YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm),
MS (ES): m/z 338,0 [M-H]\ Forbindelse 6ii: HPLC: 100% ved 2,477 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 ml_/min, deteksjon ved 220 nm),
MS (ES): m/z 338,0 [M-H]\
Eksempel 7
( 3aa, 4a, 7a, 7aa)- 3a, 4, 7, 7a- tetrahvdro- 5- fhydroksvmetvl)- 4- metvl-2- r3- ftrifluormetvnfenvn- 4. 7- epoksv- 1 H- isoindol- 1. 3( 2H)- dion f7)
2-metyl-3-furanmetanol (0,537 g, 4,78 mmol) og 1-[3-(trifluormetyl)fenyl]-1H-pyrrol-2,5-dion (0,500 g, 2,39 mmol) ble løst i dikloretan (2,0 mL) og omrørt ved 25°C i 20 timer. Reaksjonsblandingen ble deretter konsentrert i vakuum og renset ved hurtigkromatografi på Si02under eluering med etylacetat/metylenklorid for å gi 0,317 g av forbindelse 7 som et hvitt faststoff. Ingen annen mulig isomer ble isolert etter kromatografi. HPLC: 100% ved 2,197 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 351,9 [M-H]\ Eksempel 8 ( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- 2- r3. 5- bis( trifluormetvl) fenvnheksahvdro-4. 7- epoksv- 1 H- isoindol- 1, 3( 2H)- dion ( 8)
3,5-bis-(trifluormetyl)-anilin (0,017 g, 0,0075 mmol) ble løst i eddiksyre (0,300 mL) og overført til et 1,5 mL konisk prøveglass med septumlukking. Stamløsninger av ytterligere 95 aminer ble fremstillet som beskrevet ovenfor. Til hvert av ovennevnte prøveglass ble det tilsatt 0,4 mL (0,12 mmol) av en stamløsning av ekso-7-oksabicyklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksylsyre-anhydrid i eddiksyre.
Prøveglassene ble deretter forseglet og oppvarmet til 110°C i 11 timer. Etter avkjøling til 25°C, ble lokkene fjernet fra prøveglassene og eddiksyren fjernet i vakuum. Til hvert prøveglass ble det tilsatt 1 mL 2:1 aceton/metylenklorid og prøveglassene oppvarmet til 40°C i 1 time. Etter at alle produkter var oppløst, ble de overført via robot til filterrør med grove fritter som på forhånd var fuktet med 0,2 mL vann. Nitrogen ble blåst gjennom hvert rør inntil de flyktige organiske forbindelsene var fjernet. 1,5 mL 10% vandig K2C03ble deretter tilsatt til hvert rør, etterfulgt av kraftig risting ved 25°C i 15 min. Rørene ble deretter tørket, lukket på nytt og hvert rør tilsatt 1,0 mL vann med påfølgende risting. Rørene ble tørket på nytt og vasket med vann én gang til. Det resulterende residuum i hvert rør ble deretter tørket i vakuum i 48 timer. Etter tørking ble 1,0 mL 20% TFA i metylenklorid tilsatt til hvert rør og stativene ristet i 30 minutter. Rørene ble deretter overført til en 96-brønnsplate med tarerte hjemmelagede mikrorør på plass. Hvert rør ble undersøkt på produkt-renhet (analytisk LC) og identitet (LC-MS). Rørene ble deretter konsentrert i vakuum og veid for utbyttebestemmelse. Røret som inneholdt reaksjonsproduktet av 3,5-bistrifluormetylanilin og ekso-7-oksabicyklo[2.2.1 ]heptan-2,3-dikarboksylsyre-anhydrid, ga 0,022 g av forbindelse 8 som et hvitt faststoff. HPLC: 94% ved 4,03 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 434,2 [M+Na+MeOH]<+>. Av de øvrige 95 ytterligere omsetninger ble i alt 80 sluttprodukter oppnådd i >70% renhet og >5 mg utbytte. Flere prøver trengte ytterligere rensing, hvilket ble foretatt på en kort Si02kolonne under eluering med metylenklorid/aceton. Se Tabell 2 nedenfor.
Eksempel 9
( 3aa, 4a, 7a, 7aa)- 2- f4- bromfenvl) oktahvdro- 1, 3- diokso- 4, 7- eteno-5H- pvrrolor3. 4- clpvridin- 5- karboksvlsvre- fenvlester ( 9)
1-[4-bromfenyl]-1H-pyrrol-2,5-dion (0,250 g, 0,992 mmol, syntetisert som beskrevet i Eksempel 1B) og 1(2H)-pyridinkarboksylsyre-fenylmetylester (0,299 g, 1,49 mmol, syntetisert som beskrevet i Richard er al., J. Org. Chem., 46,4836-4842
(1981)) ble løst i toluen og oppvarmet til 85°C i 1 time. Etter avkjøling til 25°C ble toluenet fjernet i vakuum. Det resulterende residuum ble løst i en minimal mengde kloroform og produktet utfelt ved tilsetning av heksaner. Etter 1 time ved 25°C ble produktet frafiltrert og renset med kald 20% heksan i kloroform, hvilket ga forbindelse 9 som et hvitt faststoff (0,243 g) som en enkelt isomer. HPLC: 100% ved 3,393 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 454,98 [M+H]<+>.
Eksempel 10
f3aa, 4a, 7a, 7aa)- 2- f4- bromfenyl) oktahvdro- 1, 3- diokso- 4, 7- eteno- 5H-pvrrolo[ 3, 4- c] pvridin- 5- karboksvlsvre- fenylmetvlester ( 10)
1-[3-(trifluormetyl)fenyl]-1H-pyrrol-2,5-dion (3,78 g, 15,7 mmol) og 1(2H)-pyridinkarboksylsyre-fenylmetylester (4,0 g, 18,8 mmol, syntetisert som beskrevet i Richard et al., J. Org. Chem. 46, 4836-4842 (1981)) ble løst i toluen og oppvarmet til 80°C i 3 timer. Etter avkjøling til 25°C ble toluenet fjernet i vakuum og det resulterende residuum renset ved hurtigkromatografi på Si02under eluering med metanol/metylen klorid for å gi 3,2 g av forbindelse 10 som en gul olje. HPLC: 95% ved 3,510 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 457,2 [M+H]<+>. Eksempel 11 f3aa. 4a. 7a. 7aa)- heksahvdro- 2- r3- ftrifluormetvl) fenvn- 4. 7- etano- 1H-pyrrolor3, 4- clpyridin- 1, 3( 2H)- dion- trifluoracetat f 11)
Forbindelse 10 (3,2 g) ble løst i 100 mL MeOH og tilsatt 10% Pd/C DeGussa-katalysator (2 g). Hydrogen ble deretter innført via en ballong. Etter 1 time ble reaksjonsblandingen filtrert gjennom Celite og renset med MeOH. Flyktige forbindelser ble fjernet i vakuum og det resulterende råmaterialet renset ved omvendt-fase preparativ HPLC for å gi 2,5 g av forbindelse 11 som et TFA-salt (hvitt faststoff). HPLC: 99% ved 1,843 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 325,12 [M+H]<+>.
Eksempel 12
f3aa, 4a, 7a, 7aa)- 5- acetvlheksahydro- 2- r3- ftrifluormetvl) fenvn- 4, 7- etano-1H- pvrrolor3. 4- c1pvridin- 1. 3( 2H)- dion ( 12)
Forbindelse 11 (0,100 g, 0,23 mmol) ble suspendert i THF (5,0 mL) og tilsatt TEA (0,097 mL, 0,46 mmol), hvilket resulterte i en homogen løsning. Acetylklorid (0,033 mL, 0,46 mmol) ble deretter tilsatt. Etter 2 timer ble reaksjonen avbrutt med mettet vandig NaHCOs og blandingen ekstrahert med metylenklorid (3x15 mL). Råmaterialet ble renset ved preparativ TLC under eluering med kloroform/aceton for å gi 0,099 g av forbindelse 12 som en farveløs olje. HPLC: 99% ved 2,66 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 ml_/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 367,0 [M+H]<+>.
Eksempel 13
f3aa. 4a. 7a. 7aa)- 5- benzovlheksahvdro- 2- r3- ftrifluormetvl) fenvn- 4. 7- etano-
1 H- pvrrolor3. 4- clpyridin- 1. 3f2H)- dion ( 13)
Forbindelse 11 (0,100 g, 0,23 mmol) ble suspendert i THF (5,0 mL) og tilsatt TEA (0,097 mL, 0,46 mmol), hvilket resulterte i en homogen løsning. Benzoylklorid (0,05433 mL, 0,46 mmol) ble deretter tilsatt. Etter 2 timer ble reaksjonen avbrutt med mettet vandig NaHC03 og blandingen ekstrahert med metylenklorid (3x15 mL).
Råmaterialet ble renset ved omvendt-fase preparativ HPLC for å gi 0,020 g av forbindelse 13 som et hvitt skum. HPLC: 99% ved 3,183 min (retensjonstid)
(YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm),
MS (ES): m/z 429,1 [M+H]<+>.
Eksempel 14
f3aa, 4a, 7a, 7aa)- heksahydro- 5- metvl- 2- r3- ftrifluormetvl) fenvn- 4, 7-etano- 1H- pyrrolor3. 4- clpvridin- 1, 3( 2H)- dion ( 14)
Forbindelse 11 (0,100 g, 0,23 mmol) ble suspendert i THF (5,0 mL) og tilsatt TEA (0,097 mL, 0,46 mmol), hvilket resulterte i en homogen løsning. Dimetylsulfat (0,043 mL, 0,46 mmol) ble tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt ved 25°C. Etter 14 timer ble reaksjonsblandingen konsentrert i vakuum og råmaterialet renset ved preparativ TLC under eluering med 10% MeOH i metylenklorid for å gi 0,030 g av forbindelse 14 som et hvitt faststoff. HPLC: 100% ved 1,797 min (retensjonstid)
(YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm),
MS (ES): m/z 339,21 [M+H]<+>.
Eksempel 15
f3aa, 4a, 7a, 7aa)- heksahvdro- 5- ffenylmetvl)- 2- r3- ftrifluormetvl) fenvn- 4, 7-etano- 1 H- pyrrolor3. 4- clpvridin- 1. 3( 2H)- dion- trifluoracetat f 15)
Forbindelse 11 (0,100 g, 0,23 mmol) ble løst i DMF (5,0 mL) og tilsatt K2C03(0,063 g, 0,46 mmol). Benzylbromid (0,041 mL, 0,35 mmol) ble deretter tilsatt. Reaksjonsblandingen omrørt ved 25°C i 1 time og deretter filtrert og konsentrert. Råmaterialet ble renset ved omvendt-fase preparativ HPLC for å gi 0,055 g av forbindelse 15 som et hvitt faststoff. HPLC: 100% ved 2,31 min (retensjonstid)
(YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 ml_/min, deteksjon ved 220 nm),
MS (ES): m/z 415,36 [M+H]<+>.
Eksempel 16
f3aa, 4a, 7a, 7aa)- heksahvdro- 5- propyl- 2- r3- ftrifluormetvl) fenvn- 4, 7-etano- 1 H- pvrrolor3, 4- clpyridin- 1, 3( 2H)- dion- trifluoracetat f 16)
Forbindelse 11 (0,100 g, 0,23 mmol) ble løst i DMF (5,0 mL) og tilsatt K2C03(0,079 g, 0,57 mmol), og deretter 1-brompropan (0,031 mL, 0,34 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 25°C i 6 timer og deretter filtrert og konsentrert. Råmaterialet ble renset ved omvendt-fase preparativ HPLC for å gi 0,070 g av forbindelse 16 som et hvitt faststoff. HPLC: 100% ved 1,907 min (retensjonstid)
(YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm),
MS (ES): m/z 340,22 [M+H]<+>.
Eksempel 17
f3aa. 4a. 4aB. 5aB. 6a. 6aa)- 2- r4- cvano- 3- ftrifluormetvl) fenvn- dekahvdro-1. 3- diokso- 4. 6- fiminometano) cvkloproprflisoindol- 7- karboksvlsvre-fenylmetvlester ( 17)
1-metyl-3-nitro-1-nitrosoguanidin (2,5 g, 17 mmol) ble porsjonsvis tilsatt til en løsning av 40% KOH/H20 (15 mL) og Et20 (25 mL) ved 0°C. Eterlaget ble gult etter fullført tilsetning. Etter 30 minutter ved 0°C ble eterlaget helt over i en løsning av (3aa,4a,7a,7aa)-2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]-oktahydro-1,3-diokso-4,7-eteno-5H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-5-karboksylsyre-fenylmetylester (0,50 g, 1,09 mmol, fremstillet som beskrevet i Eksempel 10) og Pd(OAc)2(0,010 g) i THF (10 mL) ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble deretter langsomt oppvarmet til 25°C og omrørt i 24 timer og deretter filtrert gjennom Celite under rensing med THF. Råmaterialet ble deretter renset ved hurtigkromatografi på Si02under eluering med MeOH/CH2CI2for å gi 0,34 g av forbindelse 17 som et hvitt faststoff og en enkelt isomer. HPLC: 100% ved 3,61 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 496,25 [M+H]<+>. Eksempel 18 f3aa, 4a, 4aB, 5aB, 6a, 6aa)- 4- rdekahydro- 1, 3- diokso- 4, 6- fimino-metano) cvkloproprflisoindol- 2- vn- 2- ftrifluormetvl) benzonitril ( 18)
Forbindelse 17 (0,200 g, 0,404 mmol) ble løst i MeOH (20 mL) og tilsatt 5% Pd/C (0,200 g). Hydrogen ble deretter innført med en ballong. Etter 3 timer ble reaksjonsblandingen filtrert gjennom Celite, renset med MeOH og flyktige forbindelser fjernet i vakuum for å gi forbindelse 18 (0,130 g) som et hvitt faststoff. HPLC: 100% ved 1,80 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 362,09 [M+H]<+>.
Eksempel 19
f3aa. 4a. 4aB. 5aB. 6a. 6aa)- 4- rdekahvdro- 7- metvl- 1. 3- diokso- 4. 6- fimino-metano) cvkloproprf1isoindol- 2- vn- 2- ftrifluormetyl) benzonitril f 19)
Forbindelse 17 (0,100 g, 0,277 mmol) ble løst i CH3CN (2,0 mL). TEA
(0,19 mL, 1,39 mmol) og Mel (0,052 mL, 0,83 mmol) ble deretter tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt ved 25°C i 14 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert og råmaterialet løst i CH2Cl2/vann og ekstrahert med CH2CI2(3x15 mL).
De kombinerte organiske lagene ble tørket over vannfritt Na2S04. Råmaterialet ble renset ved hurtigkromatografi under eluering med 3% MeOH/CH2Cl2for å gi 0,030 g av forbindelse 19 som et lysegult faststoff. HPLC: 100% ved 1,720 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 ml_/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 376,11 [M+H]<+>.
Eksempel 20
f3aa. 4B. 7B. 7aa)- 4- oktahvdro- 4. 7- dimetvl- 1. 3- diokso- 4. 7- epoksv- 2H- isoindol-2- yl)- 2-( trifluormetvl) benzonitril ( 20B)
A. (3aa,4p,7B,7aa)-heksahydro-4,7-epoksy-isobenzofuran-1,3-dion (20A)
Friskt destillert dimetylfuran (1,60 mL, 15,3 mmol) ble løst i CH2CI2(2,0 mL) og tilsatt maleinsyre-anhydrid (1,0 g, 10,2 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 25°C i 16 timer og deretter konsentrert i vakuum for å gi et gult faststoff. Dette faststoffet ble løst i etylacetat (30 mL) og tilsatt Pd/C (10% Pd, 0,200 g). Hydrogen ble deretter innført med en ballong og reaksjonsblandingen omrørt i 24 timer. Pd ble fjernet ved filtrering gjennom Celite under rensing med EtOAc etterfulgt av konsentrering i vakuum for å gi forbindelse 20A (1,69 g) som et hvitt faststoff. 2-dimensjonale NOE-forsøk bekreftet at strukturtilordningen var som for forbindelse 20A.
B. (3aa,4B,7p,7aa)-4-oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril (20B)
En løsning av forbindelse 20A (603 mg, 3,21 mmol, 1 ekv.), 5-amino-2-cyanobenzotrifluorid (640 mg, 3,44 mmol, 1,07 ekv.) og TsOH (10 mg, katalytisk mengde) i toluen (5 mL) ble oppvarmet i et forseglet rør i 2 dager. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur og deretter konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 50% EtOAc/heksaner ga 400 mg (1,10 mmol, 34%) av forbindelse 20B som et hvitt faststoff. HPLC: 99% ved 3,04 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre i løpet av 4 minutter, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ESI): m/z 382,2 [M+NH4]<+>.
Eksempel 21
f3aa. 4B. 7B. 7aa)- N- r4- rr2- r2- r4- cvano- 3- ftrifluormetvl) fenvnoktahvdro- 7-metvl- 1. 3- diokso- 4. 7- epoksv- 4H- isoindol- 4- vnetvntio1fenvnacetamid ( 21E)
A. 5-metyl-2-furanetanol (21 A)
En løsning av n-BuLi (83 mL, 133,0 mmol, 1,2 ekv., 1,6M i heksaner) ble tilsatt til en omrørt løsning av 2-metylfuran (10 mL, 110,8 mmol, 1 ekv.) i THF (85 mL) ved 0°C under inert atmosfære. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 4 timer ved romtemperatur og deretter avkjølt til 0°C. Etylenoksyd (8,3 mL, 166,3 mmol, 1,5 ekv.) ble dråpevis tilsatt, og reaksjonsblandingen fikk oppvarmes til romtemperatur over natten. Etter at reaksjonen var avbrutt med mettet vandig NH4CI, ble de resulterende lagene separert og det vandige lag ekstrahert med Et20 (2X). De kombinerte organiske lagene ble tørket over Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Destillasjon ved atmosfæretrykk (170-185°C) ga 10,13 g (80,3 mmol, 72%) av forbindelse 21A som en lysegul olje.
B. 2-(2-brometyl)-5-metylfuran (21B)
Ph3Br2(3,68 g, 8,72 mmol, 1,1 ekv.) ble tilsatt til en løsning av forbindelse 21A (1 g, 7,93 mmol, 1 ekv.) i DMF (8 mL) og reaksjonsblandingen omrørt ved romtemperatur i 1 time. Reaksjonsblandingen ble tilsatt til H20 og ekstrahert med EtOAc (3X). De kombinerte organiske lagene ble vasket med H20 (2X), tørket over Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 10% EtOAc/heksaner ga 0,507 g (2,68 mmol, 34%) av forbindelse 21B.
C. N-[4-[[2-(5-metyl-2-furanyl)etyl]tio]fenyl]acetamid (21C)
Til en løsning av 4-acetamidotiofenol (442 mg, 2,64 mmol, 1 ekv.) i THF
(1 mL) ble det ved 0°C under inert atmosfære tilsatt en løsning av n-BuLi (2 mL, 3,17 mmol, 1,2 ekv., 1,6M i heksaner) i THF (1 mL). Reaksjonsløsningen ble omrørt ved romtemperatur i 10 minutter og tilsatt en løsning av forbindelse 21B (0,5 g,
2,64 mmol, 1 ekv.) i THF (3 mL). Etter at alt utgangsmateriale ifølge TLC var forbrukt, ble reaksjonen avbrutt med H20, hvorpå blandingen ble ekstrahert med EtOAc (2X), tørket over Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 50% EtOAc/heksaner ga 0,644 g (2,34 mmol, 88%) av forbindelse 21C. MS (ESI): m/z 276,09 [M+H]<+>.
D. (3aa,4B,7p,7aa)-N-[4-[[2-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]-1,2,3,3a,7,7a-heksahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-
isoindol-4-yl]etyl]tio]fenyl]acetamid (21D) En løsning av forbindelse 21C (195 mg, 0,708 mmol, 1 ekv.) og 4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1H-pyrrol-1-yl)-2-trifluormetylbenzonitril (377 mg, 1,416 mmol, 2 ekv., fremstillet som beskrevet i Eksempel 1B) i CH2CI2(1,5 mL) ble omrørt ved romtemperatur i 2 dager. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk for ifølge NMR-analyse å gi forbindelse 21D. Forbindelse 21D ble benyttet direkte i det neste trinn uten rensing. E. (3aa,4B,7p,7aa)-N-[4-[[2-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]-oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]-etyl]tio]fenyl]acetamid (21E) En løsning av rå forbindelse 21D (0,708 mmol) og 10% Pd/C (200 mg) i MeOH (20 mL) ble omrørt under hydrogenatmosfære over natten. Rensing ved preparativ kromatografi [HPLC ved 34,4 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 20 x 250 mm, 0-100% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA i 30 minutter, 10 mL/min, deteksjon ved 220 nm)] etterfulgt av hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 1% MeOH/CH2CI2ga 29 mg (0,053 mmol, 7,5%) av forbindelse 21E som et gult pulver. HPLC: 99% ved 3,44 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre i 4 minutter,
4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ESI): m/z 544,01 [M+H]<+>.
Eksempel 22
(3aa,4B,7p,7aa)-N-[4-[[2-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]-oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]-etyl]sulfinyl]fenyl]acetamid (22)
m-CPBA (12 mg, 0,05 mmol) ble porsjonsvis tilsatt til en løsning av rå forbindelse 21E (65 mg, 0,12 mmol, 1 ekv.) i CH2CI2(6 mL) inntil utgangsmaterialet var forbrukt. Rensing ved preparativ kromatografi [HPLC ved 30,5 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 30 x 250 mm, 0-100% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA i 30 minutter, 25 mL/min, deteksjon ved 220 nm)] ga 27,5 mg (0,049 mmol, 41 %) av forbindelse 22 som et lysebrunt faststoff (~1:1 blanding av diastereomerer). HPLC: 96% ved 2,88 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ESI): m/z 559,97 [M+H]<+>. Eksempel 23 (3aa,4p,7p,7aa)-N-[4-[[2-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]-oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]-etyl]sulfonyl]fenyl]acetamid (23) m-CPBA (26 mg, 0,105 mmol, 3 ekv.) ble tilsatt til en løsning av forbindelse 21E (19 mg, 0,035 mmol, 1 ekv.) i CH2CI2(6 mL) og reaksjonsblandingen omrørt ved romtemperatur inntil utgangsmaterialet og det intermediære sulfoksyd (forbindelse 22) ifølge TLC var forbrukt. Rensing ved preparativ kromatografi [HPLC ved 53,3 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 30 x 250 mm, 0-70% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA i løpet av 45 minutter, 25 mL/min, deteksjon ved 220 nm)] ga 27,5 mg (0,049 mmol, 40%) av forbindelse 23 som et hvitt faststoff. HPLC: 99% ved 2,94 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre i løpet av 4 minutter, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ESI): m/z 575,95 [M+H]<+>.
Eksempel 24
(3aa,4p,7B,7aa)- og (3aa,4a,7a,7aa)-N-[2-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]-oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]-etyl]benzensulfonamid (henholdsvis 24Ci og 24CN)
A. 5-metyl-2-furanetanol-4-metylbenzensulfonat (24A) 4-metylbenzensulfonylklorid (907 mg, 4,76 mmol) ble tilsatt til en løsning av forbindelse 21A (500 mg, 3,96 mmol) i 6 mL tørr pyridin. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 4 timer, hvorpå reaksjonen ble avbrutt med is. Reaksjonsblandingen ble ekstrahert med CH2CI2og de kombinerte organiske lagene vasket med mettet vandig natriumbikarbonat og vann, tørket og konsentrert under redusert trykk for å gi 900 mg (81 %) av forbindelse 24A som en gul olje. B. N-[2-(5-metyl-2-furanyl)etyl]benzensulfonamid (24B) Benzensulfonamid (157 mg, 1 mmol) ble tilsatt til en 10% vandig løsning av natriumhydroksyd (0,4 mL, 1 mmol). En løsning av forbindelse 24A (280 mg, 1 mmol) i aceton (1 mL) ble deretter tilsatt. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 90°C i 8 timer og deretter avkjølt til romtemperatur. Is ble tilsatt og blandingen ekstrahert med CH2CI2. De kombinerte organiske lagene ble vasket med vann, tørket og konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med CH2CI2ga 60 mg (23%) av forbindelse 24B som en gul olje. C. (3aa,4p,7p,7aa)- og (3aa,4a,7a,7aa)-N-[2-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etyl]benzensulfonamid (henholdsvis 24Ci og 24CM) 4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1 H-pyrrol-1-yl)-2-trifluormetylbenzonitril (129 mg, 0,45 mmol, fremstillet som beskrevet i Eksempel 1B) ble tilsatt til en løsning av forbindelse 24B (60 mg, 0,23 mmol) i CH2CI2(2 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 dager, konsentrert under redusert trykk og renset ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 70% EtOAc/heksaner for å gi 20 mg (16%) av det umettede Diels-Alder-produktet. Det umettede produktet (20 mg) ble umiddelbart løst i 2 mL etanol og tilsatt 10 mg 10% Pd/C. Løsningen ble omrørt ved romtemperatur over natten under hydrogenatmosfære. Blandingen ble filtrert og filtratet konsentrert under redusert trykk. Rensing ved preparativ omvendt-fase HPLC ga 7 mg av forbindelse 24Ci og 2 mg av forbindelse 24CN. Forbindelse 24Ci: HPLC: 96% ved 3,17 min (retensjonstid) (YMC ODSA S5 C18 4,6 x 50 mm, 10%-90% vandig metanol over 4 min gradient med 0,1% TFA, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 533,99 [M+H]<+>. Forbindelse 24CN: HPLC: 99% ved 38,95 min (retensjonstid) (YMC ODS S5 20 x 250 mm, 10%-90% vandig metanol over 40 min gradient med 0,1% TFA, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 533,99 [M+H]<+>. Eksempel 25 (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril (25B) A. (3aa,4B,7B,7aa)- og (3aa,4a,7a,7aa)-4-[1,3,3a,4,7,7a-heksahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril (henholdsvis 25Ai og 25Aii)
En løsning av forbindelse 21A (252 mg, 2 mmol, 1 ekv.) og 4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1H-pyrrol-1-yl)-2-trifluormetylbenzonitril (798 mg, 3 mmol, 1,5 ekv.) i CH2CI2(10 mL) ble omrørt ved romtemperatur i 2 dager. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 65% EtOAc/heksaner ga 217 mg ren forbindelse 25Ai, 73 mg ren forbindelse 25 Ai i og 310 mg av en blanding av både forbindelse 25Ai og 25AN. Alle tre fraksjonene ble isolert som hvite faststoff med et totalt isolert utbytte på 600 mg (1,53 mmol, 76,5%). Forbindelse 25Ai: HPLC: 90% ved 2,56 min (retensjonstid)
(YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 ml_/min, deteksjon ved 220 nm). Forbindelse 25AM: HPLC: 90% ved 2,56 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm).
B. (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-1,3-diokso-
4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril (25B)
En løsning av forbindelse 25Ai (0,2 g, 0,51 mmol, 1 ekv.) og 10% Pd/C
(43 mg, katalytisk) i EtOH (12 mL) ble omrørt under en hydrogenatmosfære ved romtemperatur i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom Celite og konsentrert under redusert trykk for å gi 0,2 g (0,51 mmol, 100%) av forbindelse 25B som et hvitt faststoff. HPLC: 95% ved 2,59 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ESI): m/z 394,97
[M+H]<+>.
Eksempel 26
(3aa,4a,7a,7aa)- og (3aa,4p,7p,7aa)-N-[4-[2-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etoksy]fenyl]acetamid (henholdsvis 26Ci og 26CM)
A. 2-[4-[2-(5-metyl-2-furanyl)etoksy]fenyl]acetamid (26A) Trifenylfosfin (681 mg, 2,6 mmol, 1,3 ekv.) ble tilsatt til en løsning av forbindelse 21A (252 mg, 2 mmol, 1 ekv.) og 4-acetamidofenol (302 mg, 2 mmol, 1 ekv.) i CH2CI2(4 mL). THF (5 mL) ble tilsatt for å gjøre reaksjonsblandingen homogen, og blandingen ble deretter avkjølt til 0°C. DEAD (0,41 mL, 2,6 mmol,
1,3 ekv.) ble dråpevis tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt ved romtemperatur over natten og deretter konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 60% EtOAc/heksaner og deretter ved preparativ
omvendt-fase HPLC ga 270 mg (52%, 1,04 mmol) av forbindelse 26A som et lysebrunt faststoff. MS (ESI): m/z 260,09 [M+H]<+>.
B. (3aa,4a,7a,7aa)- og (3aa,4p,7p,7aa)-N-[4-[2-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]-1,2,3,3a,7,7a-heksahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etoksy]fenyl]acetamid (henholdsvis 26Bi og 26Bii)
En løsning av forbindelse 26A (40 mg, 0,154 mmol, 1 ekv.) og 4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1H-pyrrol-1-yl)-2-trifluormetylbenzonitril (88 mg, 0,31 mmol, 2 ekv.) i CH2CI2(2 mL) ble omrørt ved romtemperatur i 2 dager. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 75% EtOAc/heksaner ga 55 mg (0,105 mmol, 68%) av en 5 til 1 blanding av forbindelser 26Bi og 26BN som et hvitt faststoff, som ble benyttet direkte i det neste trinn. HPLC: 90% ved 3,28 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 ml_/min, deteksjon ved 220 nm).
C. (3aa,4a,7a,7aa)- og (3aa,4p,7p,7aa)-N-[4-[2-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]-etoksy]fenyl]acetamid (henholdsvis 26Ci og 26Cii)
En løsning av en blanding av forbindelser 26Bi og 26BN (55 mg, 0,105 mmol, 1 ekv.) og 10% Pd/C (12 mg, katalytisk) i EtOH (3 mL) ble omrørt under hydrogenatmosfære ved romtemperatur over natten. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom Celite og konsentrert under redusert trykk for å gi 50 mg råprodukt. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 70% EtOAc/heksaner ga 18 mg (0,034 mmol, 32%) av forbindelse 26Ci [HPLC: 96% ved 3,33 min (retensjonstid)
(YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm).
MS (ES): m/z 528,01 [M+H]<+>]; og 2,3 mg (0,004 mmol, 4%, 85:15 endo:ekso) av en 85:15 blanding av forbindelse henholdsvis (ifølge<1>H NMR) 26Cii og forbindelse 26Ci [HPLC: 90% ved 3,35 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre,
4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ESI): m/z 528,12 [M+H]<+>].
Eksempel 27
( 3aa, 4a, 7a, 7aa)- heksahvdro- 2-( 2- naftalenyl)- 4, 7-epoksv- 1 H- isoindol- 1, 3( 2H)- dion f27D)
A. (endo,endo)-7-oksabicyklo[2.2.1 ]hept-5-en-2,3-dikarboksylsyre (27A)
Forbindelser 27A, 27B og 27C ble syntetisert i overensstemmelse med fremgangsmåtene beskrevet i Spraue et al., J. Med. Chem. 28, 1580-1590 (1985). En blanding avfuran (100 mL, 1,38 mol, 1 ekv.) og maleinsyre (159,6 g, 1,38 mol, 1 ekv.) i H20 (340 mL) ble omrørt ved romtemperatur i 5 dager. Blandingen ble anbragt i en skilletrakt og det vandige lag separert fra laget inneholdende uomsatt furan. Det vandige lag ble behandlet med kull, filtrert gjennom Celite og anbragt i kjøleskap. Det ønskede produkt krystalliserte fra løsning ved tilsetning av krystallisasjonskim, ble filtrert, vasket med kaldt vann og tørket over P205for å gi 70 g (0,38 mol, 28%) av forbindelse 27A som et hvitt faststoff.
B. (endo, endo)-7-oksabicyklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksylsyre (27B)
Til en løsning av forbindelse 27A (69 g, 0,375 mol, 1 ekv.) i EtOH (700 mL) ble det tilsatt 10% Pd/C (4,5 g, katalytisk) og blandingen ristet under hydrogenatmosfære ved 3,7 atm. inntil gassopptaket stanset. Blandingen ble filtrert gjennom Celite og konsentrert i vakuum for å gi 66 g (0,355 mol, 95%) av forbindelse 27B som et hvitt faststoff.
C. (3aa,4a,7a,7aa)-heksahydro-4,7-epoksybenzofuran-1,3-dion (27C)
En løsning av forbindelse 27B (66 g, 355 mol) i acetylklorid (300 mL) ble tilbakeløpsbehandlet i 1 time. Reaksjonsløsningen ble konsentrert i vakuum og det resulterende residuum omkrystallisert fra benzen for å gi 49,2 g (0,292 mol, 82%) av forbindelse 27C som et hvitt faststoff (>99% endo ifølge<1>H NM R).
D. (3aa,4a,7a,7aa)-heksahydro-2-(2-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (27D)
Forbindelse 27C (45 mg, 0,30 mmol, 1 ekv.) ble kombinert med 2-naftalenamin (47 mg, 0,33 mmol, 1,1 ekv.) i eddiksyre (1 mL) og oppvarmet til 115°C over natten. Etter at reaksjonsblandingen var avkjølt til romtemperatur, ble det tilsatt en dråpe vann og det resulterende bunnfall frafiltrert. Materialet ble vasket med metanol og tørket for å gi 65,7 mg (74,5%) av forbindelse 27D som et hvitt krystallinsk faststoff. HPLC: 99% ved 2,68 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ESI): m/z 294,0 [M+H]<+>.
Eksempel 28
f1aa. 2B. 2aa. 5aa. 6B. 6aa)- heksahvdro- 4-( 2- naftalenvl)- 2. 6- epoksv-3H- oksirenorf1isoindol- 3, 5( 4H)- dion ( 28B)
A. (1 aa,2p,2aa,5aa,6p,6aa)-tetrahydro-2,6-epoksy-oksireno[f]-isobenzofuran-3,5(2aH,5aH)-dion (28A)
Som beskrevet i Yur'ev, et al., J. Gen. Chem. U. S. S. R. ( Engl. Transl.), 31, 772-775 (1961) ble en løsning av ekso-7-oksabicyklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksylsyre-anhydrid (5 g, 30,09 mmol), maursyre (10 mL) og hydrogenperoksyd (6 mL) omrørt ved romtemperatur. Etter 30 minutter ble reaksjonsblandingen anbragt i et isbad (den ble eksoterm med gassutvikling) og fikk langsomt oppvarmes til romtemperatur. Etter omrøring over natten ble det resulterende bunnfall oppsamlet ved filtrering og vasket med iseddik og tørket for å gi 3,02 g hvitt pulver. Det rå faststoff ble kokt i acetylklorid (100 mL) i 10 timer og blandingen konsentrert til ~20 mL under redusert trykk. Det resulterende bunnfall ble filtrert, vasket med dioksaner og tørket for å gi 2,37 g av forbindelse 28A som et hvitt pulver.
B. (1 aa,2B,2aa,5aa,6p,6aa)-heksahydro-4-(2-naftalenyl)-2,6-epoksy-3H-oksireno[f]isoindol-3,5(4H)-dion (28B)
Forbindelse 28A (100 mg, 0,520 mmol, 1,2 ekv.) ble kombinert med 2-naftalenamin (0,434 mmol, 1 ekv.) i eddiksyre (2 mL) og oppvarmet til 115°C over natten. Etter at reaksjonsblandingen var avkjølt til romtemperatur, ble det tilsatt vann og det resulterende bunnfall frafiltrert. Materialet ble vasket suksessivt med vandig K2CO3og vann og deretter tørket i en vakuumovn for å gi 113,7 mg (85,3%) av forbindelse 28B som et hvitaktig krystallinsk faststoff. HPLC: 99% ved 1,76 min
(retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ESI): m/z 308,0 [M+H]<+>.
Eksempel 29
( 3aa. 4a. 7a. 7aa)- 2- r4- brom- 3-( trifluormetvl) fenvn- 3a. 4. 7. 7a- tetrahvdro- 4. 7- dimetvl- 4. 7- epitio- 1 H- isoindol- 1. 3( 2H)- dion- 8- oksvd ( 29)
2,5-dimetyltiofen (0,048 mL, 0,42 mmol) og 4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1H-pyrrol-1-yl)-2-trifluormetylbenzonitril (0,290 g, 0,625 mmol) ble løst i CH2CI2(8,0 mL) og avkjølt til -20°C. BF3Et20 (0,412 mL, 3,36 mmol) ble langsomt tilsatt etterfulgt av tilsetning av mCPBA (-50%, 0,290 g, 0,84 mmol). Etter 2 timer ved -20°C ble reaksjonsblandingen helt over i mettet vandig NaHC03og ekstrahert med CH2CI2(3 x 20 mL) og de organiske lagene tørket over vannfritt Na2S04. Råproduktet ble renset ved hurtigkromatografi på Si02under eluering med 5%-10%-20% EtOAc i CH2CI2for å gi 0,119 g av forbindelse 29 som et hvitt faststoff. HPLC: 91 % ved 3,303 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 ml_/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ESI): m/z 480,2 [M+H]<+>. Eksempel 30 f3aa, 4a, 7a, 7aa)- 2- r4- brom- 3- ftrifluormetvl) fenvn- 3a, 4, 7, 7a- tetrahydro-4. 7- epitio- 1 H- isoindol- 1. 3( 2H)- dion- 8- oksvd ( 30)
Tiofen (0,375 mL, 4,69 mmol) og 4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1H-pyrrol-1-yl)-2-trifluormetylbenzonitril (0,100 g, 0,313 mmol) ble løst i CH2CI2(50 mL) og tilsatt mCPBA (-50%, 1,62 g, 4,69 mmol) og omrørt ved 25°C i 3 timer. Trifenylfosfin (2,0 g) ble deretter tilsatt. Etter 15 minutter ble flyktige forbindelser fjernet i vakuum og det resulterende residuum løst i CH2CI2(200 mL) og vasket med mettet vandig NaHC03(3 x 50 mL) og tørket over Na2S04. Råmaterialet ble deretter renset ved hurtigkromatografi på Si02under eluering med 1 %-3%-5% metanol i CH2CI2for å gi forbindelse 30 som et hvitt pulver (0,059 g). NMR-spektroskopi og LC-analyse viste en enkelt diastereomer. HPLC: 100% ved 3,437 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ESI): m/z 443,2
[M+H]<+>.
Eksempel 31
( 3aa, 4a, 7a, 7aa)- heksahvdro- 2- r3-( trifluormetvl) fenvn- 4, 7- imino-
1 H- isoindol- 1. 3( 2H)- dion ( 31D)
A. 7-azabicyklo[2.2.1]hepta-2,5-dien-2,3,7-trikarboksylsyre-2,3-dimetyl-7-(1,1 -dimetyletyl)ester (31 A)
Den ferskt destillerte acetylendikarboksylsyre-dimetylester (6,7 mL,
54,0 mmol) og N-(tert-butyloksykarbonyl)-1H-pyrrol (9,0 mL, 54,0 mmol) ble kombinert og oppvarmet til 120°C i 3 timer. Rensing ved hurtigkromatografi på Si02under eluering med EtOAc/CH2CI2ga 8,3 g av forbindelse 31A som et gult faststoff.
B. (ekso, endo)-7-azabicyklo[2.2.1]hept-2,5-dien-2,3,7-trikarboksyl-syre-7-(1,1 -dimetyletyl)ester (31B)
Forbindelse 31A (1,0 g, 3,5 mmol) ble løst i MeOH (2,0 mL) og tilsatt vandig KOH (1 g i 5 mL H20). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 50°C i 1 time.
Reaksjonsblandingen ble deretter avkjølt til 25°C og tilsatt Pd/C (0,5 g, 10% Pd) og blandingen anbragt i et Parr-apparat i 14 timer ved 25°C. Reaksjonsblandingen ble deretter filtrert gjennom Celite under rensing med vann. Den vandige løsningen ble surgjort til pH=2 ved tilsetning av 1N HCI og deretter ekstrahert med EtOAc (2 x 100 mL). Konsentrering av de organiske lagene ga forbindelsen 31B som et lysegult faststoff.
C. (3aa,4a,7a,7aa)-heksahydro-1,3-diokso-4,7-iminoisobenzofuran-8-karboksylsyre-1,1-dimetyletylester (31C)
Den rå forbindelse 31B ble oppvarmet til 120°C i vakuum i en sublimasjonsbeholder, hvilket resulterte i sublimering av forbindelse 31C som et hvitt faststoff (0,051 g), som ble oppsamlet direkte og benyttet i det neste trinn uten videre rensing.
D. (3aa,4a,7a,7aa)-heksahydro-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-imino-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (31D)
Forbindelse 31C (0,050 g, 0,187 mmol) og 1 -amino-3-(trifluormetyl)benzen (0,30 g, 0,187 mmol) ble løst i AcOH (2,5 mL) og oppvarmet til 115°C i 4,5 timer. Reaksjonen ble avbrutt ved tilsetning av mettet vandig NaHC03, og blandingen ble ekstrahert med metylenklorid (3x15 mL). Råmaterialet ble renset ved preparativ omvendt-fase HPLC for å gi 0,030 g av forbindelse 31D som et hvitt faststoff. HPLC: 99% ved 2,33 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre,
4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ESI): m/z 311,15 [M+H]<+>.
Eksempel 32
( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- og f3aa. 4a. 7a. 7aa)- 3a. 4. 7. 7a- tetrahvdro- 4. 7- dimetvl-2- r3- ftrifluormetvl) fenvn- 4. 7- epoksv- 1 H- isoindol- 1, 3( 2H)- dion
( henholdsvis 32i og 32ii)
Ferskt destillert 2,5-dimetylfuran (0,32 mL, 2,6 mmol) ble løst i CH2CI2
(2,0 mL) og tilsatt 1-[3-(trifluormetylfenyl]-1H-pyrrol-2,5-dion (0,5 g, 2,5 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 25°C i 16 timer og deretter konsentrert under
redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 0,5% MeOH/CH2CI2ga 50 mg av forbindelse 32i og 250 mg av forbindelse 32ii, som hvite faststoff. Forbindelse 32i: HPLC: 92% ved 3,047 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 338,15 [M+H]<+>; Forbindelse 32ii: HPLC: 98% ved 3,08 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 338,30
[M+H]<+>.
Eksempel 33
( 3aa. 4a. 7a. 7aa)- heksahvdro- 4. 7- dimetvl- 2- r3-( trifluormetvl)-fenvlM. 7- epoksv- 1 H- isoindol- 1. 3( 2H)- dion ( 33)
Forbindelse 32ii (0,080 g, 0,237 mmol) ble løst i EtOAc (2 mL), og EtOH
(1 mL) og Pd/C (10% Pd, 0,050 g) ble tilsatt. Hydrogen ble deretter innført med en ballong og reaksjonsblandingen omrørt i 24 timer. Blandingen ble filtrert gjennom Celite, renset med EtOAc og konsentrert i vakuum for å gi forbindelse 33 (0,075 g)
som et hvitt faststoff. Ingen ytterligere rensing var nødvendig. HPLC: 90% ved 3,233 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 340,40 [M+H]<+>.
Eksempel 34
f3aa. 4a. 7a. 7aa)- tetrahvdro- 5- metvl- 2-( 4- nitro- 1 - naftalenvlM. 7-eteno- 1 H- pyrorlor3, 4- clpyridin- 1, 3, 6( 2H, 5H)- trion ( 34B)
A. 4,5,7,7a-tetrahydro-5-metyl-4,7-etenofuro[3,4-c]pyridin-1,3,6(3aH)-trion (34A)
Forbindelse 34A ble syntetisert ved en modifikasjon av fremgangsmåtene beskrevet i Tomisawa era/., Heterocycles, 6, 1765-1766 (1977) og Tetrahedron Lett. 29, 2465-2468 (1969). Maleinsyre-anhydrid og 1-metyl-2-pyridon ble suspendert i 30 mL vannfritt toluen. Reaksjonsbeholderen ble forsynt med en Dean-Stark-felle og tilbakeløpsbehandlet i 48 timer. Den mørkt farvede løsningen fikk avkjøles til romtemperatur, hvorpå flyktige forbindelser ble fjernet i vakuum. Den resulterende brune pasta ble løst i 10 mL kokende toluen og den varme løsningen filtrert under en nitrogenstrøm for å fjerne partikler. Ved henstand ved 25°C utfeltes det ønskede produkt fra løsning. Faststoffet ble isolert ved filtrering og vasket med kald toluen for å gi forbindelse 34A, som ble benyttet uten videre rensing.
B. (3aa,4a,7a,7aa)-tetrahydro-5-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-eteno-1 H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-1,3,6(2H,5H)-trion (34B)
1-amino-4-nitronaftalen (0,094 g, 0,5 mmol) og forbindelse 34A (0,130 g, 0,63 mmol) ble løst i AcOH (2,0 mL) og oppvarmet til 110°C i 11 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til 25°C og helt over i kald mettet vandig K2C03og kraftig omrørt i 10 minutter. Løsningen ble filtrert og renset med vann. Det resulterende filtrat ble tørket i vakuum og renset ved silikagelkromatografi ved bruk av et løsningsmiddelsystem av 4:6 EtOAc/heksan for å gi 0,172 g av forbindelse 34B som et hvitt faststoff. HPLC: 92% ved 2,472 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 378,29 [M+H]<+>.
Eksempel 35
( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- 4- r4- r2-( 4- fluorfenoksv) etvnoktahvdro- 7- metvl- 1. 3-diokso- 4, 7- epoksy- 2H- isoindol- 2- yl]- 2-( trifluormetyl) benzonitril ( 35)
DEAD (0,06 mL; 0,380 mmol, 1,5 ekv.) ble tilsatt til en løsning av trifenylfosfin (100 mg, 0,380 mmol, 1,5 ekv.) i THF (1,3 mL) ved romtemperatur under inert atmosfære. Etter omrøring i 10 minutter ble 4-fluorfenol (43 mg, 0,380 mmol,
1,5 ekv.) tilsatt i én porsjon. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 5 minutter, tilsatt forbindelse 25B (100 mg, 0,254 mmol, 1 ekv.) og omrøring fortsatt i 3,5 timer.
Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 50% EtOAc/heksaner etterfulgt av preparativ kromatografi [HPLC: 11,93 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 20 x 100 mm, eluering i 10 minutter med 0-100% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 20 mL/min, deteksjon ved 220 nm)] ga 72 mg (58%) av forbindelse 35 som et faststoff. HPLC: 99% ved 3,74 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ESI): m/z 487,1 [M-H]\
Eksempel 36
( 3aa. 4BJBJaa)- 4- r4-( 2- brometvlloktahvdro- 7- metvl- 1, 3- diokso- 4, 7-epoksv- 2H- isoindol- 2- vll- 2-( trifluormetvl) benzonitril ( 36)
En løsning av25B (495 mg, 1,26 mmol, 1 ekv.) og pyridin (0,1 mL, 1,26 mmol, 1 ekv.) i CH2CI2(2 mL) ble tilsatt til en løsning av Ph3PBr2(636 mg, 1,51 mmol,
1,2 ekv.) i CH2CI2(2 mL) ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 3 timer, hvorpå løsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk. Det resulterende residuum ble vasket 2X med 10 mL porsjoner EtOAc-heksan (6:4), og de kombinerte vaskevæskene ble renset ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 60% EtOAc/heksan for å gi 390 mg (0,85 mmol, 67,7%) av forbindelse 36 som et hvitt faststoff. HPLC: 99% ved 3,51 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm). MS (ESI): m/z 456,7
[M-H]\
Eksempel 37
( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- heksahvdro- 4. 7- dimetvl- 2-( 3- metvl- 4- nitrofenvl)-4. 7- epoksv- 1 H- isoindol- 1. 3( 2H)- dion ( 37)
En kombinasjon av 4-nitro-3-metylanilin (0,050 g, 0,33 mmol), forbindelse 20A (0,083 g, 0,43 mmol), TEA (0,2 mL), MgS04(0,075 g) og toluen (0,8 mL) ble kombinert i et forseglet rør og blandingen oppvarmet til 120°C i 14 timer. Etter avkjøling til 25°C ble reaksjonsblandingen filtrert, renset med CH2CI2og konsentrert. Råproduktet ble renset ved preparativ TLC på Si02under eluering med CH2CI2for å gi 0,075 g av forbindelse 37 som et lysegult faststoff. HPLC: 100% ved 2,733 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm;10-90% MeOH/H20-gradient + 0,1% TFA; 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 348,2 [M+NH4]<+>.
Eksempel 38 til 121
Ytterligere forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse ble fremstillet etter fremgangsmåter analoge med de beskrevet ovenfor. Forbindelsene ifølge Eksempel 38 til 121 har den følgende struktur (L er en binding):
hvor G, forbindelsesnavn, retensjonstid, molekylmasse og den anvendte fremgangsmåte, er angitt i Tabell 2. Kromatografiteknikkene benyttet for å bestemme forbindelsens retensjonstider i Tabell 2 er som følger: LCMS = YMC S5 ODS kolonne, 4,6 x 50 mm under eluering i løpet av 4 minutter med 10-90% MeOH/H20 inneholdende 0,1% TFA; 4 ml_/min, deteksjon ved 220 nm. Molekylmassen av forbindelsene angitt i Tabell 2, om angitt, ble bestemt ved MS (ES) med formelen m/z.
Eksempel 122 til 164
Ytterligere forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse ble fremstillet etter fremgangsmåter analoge med de beskrevet ovenfor. Tabell 3 angir forbindelsesnavn og struktur, retensjonstid og Eksempelnummer av fremgangsmåten som fremstillingen ifølge Tabell 3 var basert på, for forbindelsene ifølge Eksempel 122 til 164. Kromatografteknikker som ble benyttet for å bestemme retensjonstider i Tabell 3 var som følger: LCMS = YMC S5 ODS kolonne, 4,6 x 50 mm eluering i 4 minutter med 10-90% MeOH/H20 inneholdende 0,1% TFA; 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm.
LC = YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm eluering i 4 minutter med 10-90% MeOH/H20 inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 ml_/min, deteksjon ved 220 nm.
Eksempel 165 til 203
Ytterligere forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse ble fremstillet og er beskrevet videre nedenfor i Tabell 4. Tabell 4 viser forbindelsesnavn og struktur og Eksempelnummer av den fremgangsmåten som fremstillingen av Tabell 4 er basert på, for forbindelsene i Eksempel 165 til 203.
Eksempel 204 f3aa, 4B, 7B, 7aa)- 4- roktahvdro- 4- f2- hvdroksvetvl)- 7- metyl- 1, 3- diokso- 4, 7- epoksv-2H- isoindol- 2- vn- 2-( trifluormetvl) benzonitril ( 204D/ 25B) A. 2-[2-[[(1,1 -dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]etyl]-5-metylfuran (204A)
Til en løsning av forbindelse 21A (2,00 g, 15,9 mmol) i DMF (50 mL) ble det tilsatt imidazol (1,62 g, 23,9 mmol) etterfulgt av rert-butyldimetylsilylklorid (2,63 g, 17,5 mmol). Etter 2 timer ved 25°C ble reaksjonsblandingen helt over i dietyleter (300 mL) og vasket med vann (1 x 100 mL), 1N HCI (1 x 100 mL), vann (1 x 100 mL) og saltvann (1 x 50 mL) og tørket over vannfritt MgS04. Rå forbindelse 204A ble analysert ved LCMS og NMR og bestemt å være tilstrekkelig ren til anvendelse direkte i det neste trinn. HPLC: 100% ved 4,347 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 ml_/min, deteksjon ved 220 nm).
B. (3aa,4B,7p,7aa)-4-[2-[[(1,1 -dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]-etyl]heksahydro-7-metyl-4,7-epoksy-1H-isobenzofuran-1,3(2H)-dion (204B)
Forbindelse 204A (4,0 g, 18,9 mmol) og maleinsyre-anhydrid (1,42 g,
14,51 mmol) ble løst i dikloretan (10 mL) og omrørt ved 25°C i 60 timer. Flyktige forbindelser ble deretter fjernet i vakuum og den resulterende orange olje løst i absolutt etanol (50 mL) og tilsatt Pd/C (10% Pd, 1,00 g). Hydrogen ble deretter ført inn via en ballong. Etter 3 timer ble reaksjonsblandingen filtrert gjennom Celite under rensing med EtOAc og konsentrert i vakuum. Det rå anhydrid ble renset ved hurtigkromatografi på Si02under eluering med aceton/kloroform (0-2-4% aceton) for å gi 1,30 g av forbindelse 204B som en klar olje, i tillegg til 3,00 g av utgangs-forbindelsen 204A. Karakterisering ved proton-NMR-spektroskopi viste kun ekso-isomeren.
<1>H NMR, 400 MHz, CDCI3, 3,83 (2H, t, J=6,0Hz), 3,22 (1H, d, J=8,2Hz), 3,06 (1H, d, J=8,2Hz), 1,70-2,25 (6H, m), 1,55 (3H, s), 0,82 (9H, s), 0,00 (6H, s).
C. (3aa,4B,7p,7aa)-4-[4-[2-[[(1,1-dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]-etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril (204C)
Forbindelse 204B (0,250 g, 0,8 mmol) og 4-amino-2-trifluormetylbenzonitril (0,124 g, 0,668 mmol) ble suspendert i tørr toluen (2,0 mL) i et forseglet rør. MgS04(0,200 g) og trietylamin (0,5 mL) ble deretter tilsatt og røret forseglet og anbragt i et oljebad ved 125°C. Etter 40 timer ble reaksjonsblandingen avkjølt til 25°C, filtrert og konsentrert i vakuum. Råmaterialet ble renset ved hurtigkromatografi på Si02under eluering med CH2CI2for å gi 0,111 g av forbindelse 204C som et gult faststoff. HPLC: 92% ved 4,203 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ESI): m/z 531,1 [M+Na]<+>.
D. (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)-
benzonitril (204D)
Forbindelse 204C (0,031 g, 0,061 mmol) ble løst i THF (0,5 mL) og overført til en polypropylenbeholder etterfulgt av avkjøling til 0°C. HF pyridin (~47% HF, 0,1 mL) ble deretter tilsatt. Etter 15 minutter var reaksjonen ifølge LC fullstendig, og blandingen ble helt over i kald mettet NaHC03. Blandingen ble ekstrahert med CH2CI2(3x10 mL). De kombinerte organiske lagene ble vasket med 1N HCI
(1 x 20 mL) og tørket over vannfritt Na2S04. Forbindelse 204D ble isolert som en gul olje og sammenlignet med materialet fremstillet i Eksempel 25. Ingen rensing var nødvendig.
Eksempel 205
( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- og ( 3aa. 4a. 7a. 7aa)- 4- roktahvdro- 4- metvl- 1, 3- diokso- 7-ffenvlmetvl)- 4. 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 2- ftrifluormetvl)- benzonitril
( henholdsvis 205Ci og 205CM)
A. 2-metyl-5-(fenylmetyl)-furan (205A)
n-BuLI (1,8 mL, 4,51 mmol, 1,1 ekv., 2,5M i heksan) ble tilsatt til en løsning av 2-metylfuran (0,37 mL, 4,10 mmol, 1 ekv.) i vannfritt THF (3 mL) ved -25°C. Den resulterende løsning ble omrørt ved romtemperatur i 3 timer og deretter avkjølt til
-15°C. Benzylbromid (0,59 mL,4,92 mmol, 1,2 ekv.), som var sendt gjennom et lag aluminiumoksyd, ble tilsatt og løsningen oppvarmet til romtemperatur og omrørt over
natten. Mettet NH4CI-løsning (5 mL) ble tilsatt og blandingen omrørt i 1 time. Reaksjonsblandingen ble deretter ekstrahert med eter (2X) og de kombinerte organiske ekstraktene tørket og konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med heksanerga 323 mg (46%, 1,88 mmol) av forbindelse 205A som en farveløs olje. HPLC: 95% ved 3,72 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 ml_/min, deteksjon ved 220 nm) og ca. 400 mg blanding av produkt og benzylbromid (~2:1 ifølge HPLC).
B. (3aa,4B,7B,7aa)- og (3aa,4a,7a,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-(fenylmetyl)-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)-benzonitril (henholdsvis 205Bi og 205BM)
En løsning av forbindelse 205A (124 mg, 0,72 mmol, 1 ekv.) og 4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1H-pyrrol-1-yl)-2-trifluormetylbenzonitril (290 mg, 1,09 mmol,
1,5 ekv.) i CH2CI2(2 mL) ble omrørt ved romtemperatur. Etter 4 dager ble reaksjonsblandingen konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med CH2CI2ga 62 mg (0,14 mmol, 20%) av en blanding av forbindelsene 205Bi og 205BM som et hvitt faststoff, som ble benyttet direkte i det neste trinn. HPLC: 93% ved 3,69 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm).
C. (3aa,4B,7B,7aa)- og (3aa,4a,7a,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-(fenylmetyl)-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)-
benzonitril (henholdsvis 205Ci og 205CM)
En løsning av en blanding av forbindelsene 205Bi og 205BN (62 mg,
0,14 mmol, 1 ekv.) og 10% Pd/C (12 mg, katalytisk) i EtOH (3,5 mL) ble omrørt under hydrogenatmosfære ved romtemperatur i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom Celite og konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 35% EtOAc/heksaner ga 22 mg (0,05 mmol, 35%) av forbindelse 205Ci og 12 mg (0,027 mmol, 19%) av forbindelse 205CM. Forbindelse 205Ci: HPLC: 98% ved 3,75 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre,
4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ESI): m/z 458,2 [M+NH4]<+>. Forbindelse 205CM: HPLC: 97% ved 3,78 min (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ESI): m/z 473,45 [M+CH3OH]<+>. Eksempel 206 ( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- 2- r4- cvano- 3-( trifluormetvl) fenvnoktahvdro- 7- metvl- 1, 3- diokso-4, 7- epoksv- 4H- isoindol- 4- propannitril ( 206)
En løsning av forbindelse 36 (34 mg, 0,074 mmol) og NaCN (24 mg,
0,49 mmol) i DMSO (1 mL) ble oppvarmet til 100°C i 0,5 timer. Etter avkjøling ble reaksjonsblandingen helt over i H20 og det vandige lag ekstrahert med EtOAc (2X). De kombinerte organiske lagene ble vasket med H20 (2X), tørket over Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på Si02under eluering med 50% EtOAc/heksaner etterfulgt av preparativ HPLC: 30,41 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS 30 x 250 mm, eluering i 30 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 25 mL/min, deteksjon ved 220 nm) ga 6,6 mg (22%) av forbindelse 206 som et hvit faststoff. HPLC: 99% ved 2,89 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-
90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 402,1 [M-H]\
Eksempel 207
( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- 4- roktahvdro- 4- metvl- 7- r2-( 4- mofrolinvl) etvn- 1. 3- diokso- 4. 7-epoksv- 2H- isoindol- 2- vll- 2-( trifluormetvl) benzonitril- trifluoracetat ( 1:1) ( 207)
En løsning av forbindelse 36 (15,6 mg, 0,034 mmol) og morfolin (6^L,
0,068 mmol) i toluen (1 mL) ble oppvarmet til 100°C over natten. Etter avkjøling ble reaksjonsblandingen konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på Si02under eluering med 10% MeOH/CH2Cl2etterfulgt av preparativ HPLC, 23,96 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS 30 x 250 mm, eluering i 30 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 25 mL/min, deteksjon ved 220 nm) ga 8,7 mg (55%) av forbindelse 207 (TFA-salt) som et hvitt faststoff. HPLC: 99% ved 2,02 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre,
4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 464,3 [M+H]<+>.
Eksempel 208
( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- 2-( 5- fluor- 1- naftalenvl) heksahvdro- 4. 7- dimetvl- 4. 7- epoksv- 1H-isoindol- 1. 3( 2H)- dion ( 208C)
A. 1-fluor-5-nitronaftalen (208A)
Til en løsning av 6N HCI (12 mL) ble det tilsatt 1,47 g (7,83 mmol) finpulverisert 5-nitro-1-naftylamin, som beskrevet i J. Chem. Soc. 1187 (1949). Blandingen ble avkjølt til 0°C og langsomt tilsatt en kald løsning av NaNC>2 (547 mg, 7,93 mmol) i 2 mL H20 slik at temperaturen ble holdt nær 0°C. Etter fullført tilsetning ble reaksjonsblandingen omrørt i 30 minutter og filtrert. Filtratet ble avkjølt til 0°C og behandlet med kald 4,5M NaBF4-løsning (5 mL) for å gi fullstendig utfelling av diazoniumborfluoridet. Blandingen ble holdt ved 0°C i 30 minutter før filtrering, hvorpå bunnfallet ble vasket med kald 4,5M NaBF4-løsning (5 mL), iskald etanol (10 mL) og Et20 (20 mL). De oppnådde faststoff ble lufttørket for å gi 1,74 g (77%) av det tilsvarende diazoniumsalt.
Til 1,70 g (5,92 mmol) av det ovenfor oppnådde diazoniumborfluorid ble det tilsatt 5 g sand og komponentene grundig blandet. Reaksjonsblandingen ble forsiktig oppvarmet under redusert trykk inntil dekomponering inntrådte. Mot slutten av reaksjonen ble kolben ytterligere oppvarmet i 30 minutter til 130°C for å sikre fullstendig omdannelse. Etter avkjøling ble reaksjonsblandingen løst i aceton og innholdet preabsorbert på silikagel. Rensing ble oppnådd ved hurtigkromatografi (silikagel, EtOAc i heksaner 0 til 10%) for å gi 449 mg (50%) av forbindelse 208A som et hvitt faststoff.
B. 1-amino-5-fluornaftalen (208B)
En løsning av forbindelse 208A (62 mg, 0,32 mmol) i 1 mL EtOH inneholdende 0,1 mL 12N HCI ble kokt under tilbakeløpskjøling. Jernpulver (62 mg,
1,1 mmol) ble tilsatt i små porsjoner og oppvarming fortsatt i 2 timer. Blandingen ble
avkjølt, nøytralisert med 1N NaOH-løsning og det vandige lag ekstrahert med CH2CI2. De kombinerte organiske fasene ble tørket over MgS04og konsentrert for å gi et residuum som ble renset ved hurtigkromatografi (silikagel, EtOAc i heksaner 40 til 80%) i et utbytte på 42 mg (80%) av forbindelse 208B som et gult faststoff.
C. (3aa,4B,7p,7aa)-2-(5-fluor-1 -naftalenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (208C)
Forbindelse 208B (42 mg, 0,26 mmol), forbindelse 20A (54 mg, 0,27 mmol), MgS04(69 mg, 0,58 mmol) og trietylamin (191^L, 1,37 mmol) ble tatt opp i 2 mL toluen og anbragt i et forseglet rør. Det forseglede røret ble oppvarmet til 135°C i 14 timer. Den avkjølte reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom et lite lag Celite under eluering med CH2CI2, hvorpå løsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk. Residuet ble renset ved preparativ omvendt-fase HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, eluering i 10 minutter med 30-100% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA,
20 mL/min) for å gi 15 mg (17%) av forbindelse 208C som et lysegult faststoff. HPLC: 16% ved 2,96 min & 77% ved 3,06 min (retensjonstid, atropisomerer)
(YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm),
MS (ES): m/z 340,2 [M+H]<+>.
Eksempel 209
( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- 2-( 5- fluor- 4- nitro- 1 - naftalenvl) heksahvdro- 4. 7- dimetvl- 4. 7-epoksv- 1 H- isoindol- 1, 3( 2H)- dion ( 209C)
A. N-(5-fluor-1-naftalenyl)acetamid (209A)
En løsning av 141 mg (0,74 mmol) av forbindelse 208A i 2 mL AcOH ble kokt under tilbakeløpskjøling og behandlet med små porsjoner jernpulver (118 mg,
2,11 mmol). Blandingen ble holdt under tilbakeløpskjøling i 15 minutter før tilsetning av 73^L (0,78 mmol) AC2O. Etter ytterligere 15 minutter tilbakeløpsbehandling ble blandingen avkjølt og filtrert under eluering med CH2CI2. Filtratet ble deretter konsentrert og residuet renset ved hurtigkromatografi (silikagel EtOAc i heksan 20 til 50%) for å gi forbindelse 209A (145 mg, 97%) som et hvitt faststoff.
B. 1-amino-5-fluor-4-nitronaftalen (209B)
Forbindelse 209A (133 mg, 0,66 mmol) ble løst i 1 mL AcOH og den resulterende løsning avkjølt til 10°C. Ved denne temperatur ble 80^L (2,00 mmol) rød røkende HNO3tilsatt og omrøring fortsatt i 15 minutter før reaksjonen ble avbrutt ved tilsetning av knust is. Det vandige lag ble ekstrahert med CH2CI2og de kombinerte organiske fasene tørket over MgS04og konsentrert. Det resulterende residuum ble løst i 3 mL EtOH, oppvarmet til kokepunktet og behandlet med 0,5 mL 40% vandig NaOH-løsning. Omrøring ble fortsatt i 15 minutter før reaksjonsblandingen ble avkjølt og fortynnet med H20. Det vandige lag ble ekstrahert med CH2CI2og de kombinerte organiske fasene tørket over MgS04og konsentrert. Det resulterende residuum ble renset ved hurtigkromatografi (silikagel, EtOAc i heksan 40 til 70%) for å gi 36 mg (27%) av forbindelse 209B som et gult faststoff.
C. (3aa,4p,7p,7aa)-2-(5-fluor-4-nitro-1-naftalenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (209C)
Forbindelse 209B (36 mg, 0,18 mmol) ble omsatt i et forseglet rør med forbindelse 20A (38 mg, 0,19 mmol), MgS04(46 mg, 0,39 mmol) og Et3N (128^L, 0,92 mmol) i 250^L toluen i henhold til fremgangsmåten ovenfor beskrevet i Eksempel 208C, for etter rensing ved preparativ omvendt-fase HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, eluering i 10 minutter med 30-100% vandig metanol inneholdende 0,1 % TFA, 20 mL/min) å gi 27 mg (40%) av forbindelse 209C som et gult faststoff. HPLC: 8% ved 2,88 min & 84% ved 3,06 min (atropisomerer, retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 402,0
[M+H]<+>.
Eksempel 210
( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- 2- ri, 1- dioksvdobenzorb1tiofen- 3- vl) heksahvdro- 4, 7- dimetyl- 4, 7-epoksv- 1 H- isoindol- 1, 3( 2H)- dion f210)
mCPBA (160 mg, 0,641 mmol, 70% rent) ble tilsatt til en løsning av forbindelse 134 (70 mg, 0,214 mmol) i CH2CI2(2 mL) ved romtemperatur. Etter at utgangsmaterialet var forbrukt ble reaksjonen avbrutt med mettet NaHC03, hvorpå blandingen ble ekstrahert med CH2CI2. Det organiske lag ble vasket med 1N NaOH, tørket over Na2S04og konsentrert under redusert trykk for å gi 63,9 mg (83%) av forbindelse 210 som et hvitt faststoff. HPLC: 99% ved 3,81 min (retensjonstid)
(YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm),
MS (ES): m/z 360,0 [M+H]<+>.
Referanseeksempel 211
4-( 1, 3, 3a, 4, 7, 7a- heksahydro- 4, 6, 7- trimetvl- 1, 3- diokso- 4, 7- epoksv- 2H-pvrrolor3. 4- c1pvridin- 2- vl)- 2- ftrifluormetvl) benzonitril ( 211)
2,4,5-trimetyloksazol (0,48 mL, 4,14 mmol) ble løst i toluen (2,0 mL) og tilsatt
4-(2>5-dihydro-2,5-diokso-1 H-pyrrol-1-yl)-2-trifluormetylbenzonitril (1,0 g, 3,76 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 75°C under nitrogen i 2,5 timer. Løsningen ble avkjølt til romtemperatur og det resulterende bunnfall frafiltrert og renset med toluen for å gi 0,51 g (35% utbytte) av forbindelse 211 som et lysegrått faststoff. NMR-analyse viste at forbindelse 211 var én isomer (ekso/endo), men identiteten av isomeren kunne imidlertid ikke bestemmes ved NMR-analyse. HPLC: 100% ved 2,85 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 378,42 [M+H]<+>.
Eksempel 212
f3aa. 4B. 7B. 7aa)- tetrahvdro- 4. 7- dimetvl- 2- r3- ftrifluormetvl) fenvn- 4. 7- epoksv- 1H-isoindol- 1. 3. 5( 2H. 4H)- trion & f3aa. 4a. 7a. 7aa)- tetrahvdro- 4. 7- dimetvl- 2- r3-( trifluormetvl) fenvn- 4. 7- epoksv- 1H- isoindol- 1. 3. 5( 2H. 4H)- trion
( henholdsvis 212i og 212M)
2,2-dimetyl-3(H)-furanon (0,500 g, 4,46 mmol) og 1-[3-(trifluormetyl)fenyl]-1 H-pyrrol-2,5-dion (1,07 g, 4,46 mmol) ble suspendert i toluen (20 mL) i et forseglet rør. Blandingen ble oppvarmet til 110°C i 4 timer og deretter avkjølt til 25°C etterfulgt av konsentrering i vakuum. Det resulterende residuum ble renset ved hurtigkromatografi på Si02under eluering med metylenklorid for å gi 0,411 g av forbindelse 212i som et hvitt faststoff og 0,193 g av forbindelse 212N som et hvitt faststoff. Struktur-tilordningene ble bestemt ved 1-D NOE proton NMR-forsøk. Forbindelse 212i: HPLC: 100% ved 2,817 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 376,0 [M+Na]<+>. Forbindelse
212ii: HPLC: 100% ved 3,013 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 354,02 [M+H]<+>.
Eksempel 213
( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- 2-( 5- klor- 1 - naftalenvl) heksahvdro- 4. 7- dimetvl- 4. 7- epoksv- 1H-isoindol- 1, 3( 2H)- dion ( 213B)
A. 1-amino-5-klornaftalen (213A)
Til en løsning av 1,74 g (6,06 mmol) diazoniumborfluoridet (beskrevet i Eksempel 208A) i aceton (7 mL) ble det tilsatt 693 mg (7,00 mmol) CuCI i små porsjoner. Etter at nitrogenutviklingen hadde gitt seg ble acetonet fjernet under redusert trykk og residuet tatt opp i CH2CI2(30 mL). Den organiske fase ble vasket med H20 (30 mL), tørket over MgS04, konsentrert og tilslutt renset ved hurtigkromatografi (silikagel, EtOAc i heksan 0 til 15%) for å gi 754 mg (70%) 1-klor-5-nitronaftalen.
Det ovenfor syntetiserte 1-klor-5-nitronaftalen (540 mg, 2,6 mmol) ble løst i 10 mL AcOH og deretter behandlet med 415 mg (7,43 mmol) jernpulver og umiddelbart acylert med AC2O (0,26 mL, 2,73 mmol) i henhold til fremgangsmåten beskrevet i Eksempel 209A, for å gi 543 mg (95%) 1-acetamino-5-klornaftalen.
En løsning av det ovenfor syntetiserte 1-acetamino-5-klornaftalen (52 mg, 0,24 mmol) i 3 mL EtOH ble kokt under tilbakeløpskjøling og behandlet med 0,5 mL 40% vandig NaOH-løsning. Blandingen ble tilbakeløpsbehandlet inntil det ikke kunne påvises mer utgangsmateriale, avkjølt og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble tatt opp i CH2CI2(50 mL) og vasket med H20 (25 mL). Det organiske lag ble tørket over MgS04og konsentrert for å gi 41 mg (98%) av forbindelse 213A som et hvitt faststoff.
B. (3aa,4B,7p,7aa)-2-(5-klor-1 -naftalenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (213B)
Forbindelse 213A (24 mg, 0,14 mmol) ble omsatt i et forseglet rør med forbindelse 20A (29 mg, 0,15 mmol), MgS04(36 mg, 0,30 mmol) og Et3N (100^L, 0,71 mmol) i 250 toluen i henhold til fremgangsmåten beskrevet i Eksempel 208C for etter rensing ved preparativ omvendt-fase HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, eluering i 10 minutter med 30-100% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA,
20 mL/min), å gi 27 mg (40%) av forbindelse 213B som et hvitt faststoff. HPLC: 98% ved 1,82 min (retensjonstid) (YMC S5 TurboPack Pro kolonne 4,6 x 33 mm, eluering i 2 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 356,4 [M+H]<+>. Eksempel 214 ( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- 2-( 5- klor- 4- nitro- 1 - naftalenvl) heksahvdro- 4, 7- dimetvl- 4, 7- epoksv- 1 H- isoindol- 1, 3( 2H)- dion ( 214B) A. 1-amino-5-klor-4-nitronaftalen (214A)
1-acetamino-5-klornaftalen (150 mg, 0,68 mmol fremstillet som beskrevet i Eksempel 213A) ble løst i 1 mL AcOH og behandlet med 82 \ xL rød røkende HN03og deretter deacylert med 1 mL 40% vandig NaOH-løsning i 3 mL EtOH i henhold til fremgangsmåten beskrevet i Eksempel 209A for å gi 49 mg (32%) av forbindelse 214A som et gult faststoff. B. (3aa,4B,7p,7aa)-2-(5-klor-4-nitro-1-naftalenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (214B) Forbindelse 214A (27 mg, 0,12 mmol) ble omsatt i et forseglet rør med forbindelse 20A (26 mg, 0,13 mmol), MgS04(32 mg, 0,27 mmol) og Et3N (88^L, 0,63 mmol) i 250 \ iL toluen i henhold til fremgangsmåten beskrevet i Eksempel 208C for etter rensing ved preparativ omvendt-fase HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, eluering i 10 minutter med 30-100% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 20 mL/min), å gi 22 mg (45%) av forbindelse 214B som et gult faststoff. HPLC: 24% ved 3,06 min & 76% ved 3,25 min (atropisomerer, retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 418,0 [M+NH4]<+.>Eksempel 215 f3aa. 4B. 7B. 7aa)- 4- etvlheksahvdro- 7- metvl- 2-( 4- nitro- 1- naftalenvl)-4. 7- epoksv- 1 H- isoindol- 1, 3( 2H)- dion ( 215B) A. (3aa,4B,7p,7aa)-4-etylheksahydro-7-metyl-4,7-epoksyisobenzofuran-1,3-dion (215A)
2-etyl-5-metylfuran (1,89 mL, 15,3 mmol) ble løst i metylenklorid (10 mL) og
tilsatt maleinsyre-anhydrid (1,00 g, 10,2mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 25°C i 18 timer og deretter konsentrert i vakuum. Den resulterende rå bicykliske forbindelse ble løst i EtOAc (50 mL) og tilsatt 10% Pd/C (0,40 g). Hydrogen ble deretter ført inn via en ballong. Etter 4 timer ble reaksjonsblandingen filtrert gjennom Celite under rensing med EtOAc. Konsentrering i vakuum ga den rå forbindelse 215A
(1,93 g) som et hvitt faststoff. Dette materialet ble benyttet direkte i den neste omsetning uten rensing.
B. (3aa,4B,7B,7aa)-4-etylheksahydro-7-metyl-2-(4-nitro-1 -
naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (215B)
Forbindelse 215A (0,168 g, 0,798 mmol) og 4-nitro-1-naftalamin (0,10 g, 0,53 mmol) ble suspendert i toluen (0,8 mL) og tilsatt TEA (0,2 mL) og magnesiumsulfat (0,1 g). Blandingen ble oppvarmet til 135°C i et forseglet rør i 18 timer. Reaksjonsblandingen ble deretter avkjølt til romtemperatur og filtrert og renset med kloroform. Konsentrering ga råproduktet som ble renset ved preparativ TLC på Si02under eluering med metylenklorid. Dette ga forbindelse 215B (0,077 g) som et gult faststoff. HPLC: 100% ved 3,260 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 381,05 [M+H]<+>.
Referanseeksempel 216
( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- 2-( 4- cvano- 1- naftalenyl)- N-( 4- f1uor-fenvl) oktahvdro- 7- metvl- 1, 3- diokso- 4, 7- epoksy-4H- isoindol- 4- acetamid ( 216B)
A. N-(4-fluorfenyl)-5-metyl-2-furanacetamid (216A)
5-metyl-2-furaneddiksyre (1,00 g, 7,14 mmol, syntetisert som beskrevet i WO 9507893, Eksempel 19) ble løst i CH3CN/DMF (4:1, 25 mL), 1-[3-(dimetyl-amino)propyl]-3-etylkarbodiimid (1,37 g, 7,14 mmol) og 1-hydroksy-7-azabenzotriazol (0,972 g, 7,14 mmol) ble deretter tilsatt etterfulgt av 4-fluoranilin (0,676 mL,
7,14 mmol). Etter 3 timer ble reaksjonsblandingen fortynnet med EtOAc (150 mL) og vasket med 1N HCI (1 x 30 mL), mettet vandig NaHC03(1 x 30 mL), saltvann (1 x 40 mL) og tørket over natriumsulfat. Forbindelse 216A (1,581 g) ble isolert som et gult skum etter konsentrering i vakuum. Ingen ytterligere rensing var nødvendig. HPLC: 78% ved 2,647 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre,
4 mL/min, deteksjon ved 220 nm).
B. (3aa,4B,7B,7aa)-2-(4-cyano-1 -naftalenyl)-N-(4-fluorfenyl)-oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-acetamid (216B)
Forbindelse 216A (0,200 g, 0,858 mmol) og 4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1H-pyrrol-1-yl)-2-trifluormetylbenzonitril (0,164 g, 0,66 mmol) ble løst i benzen og oppvarmet til 60°C i 14 timer. Reaksjonsblandingen ble deretter avkjølt og konsentrert i vakuum. Den resulterende orange olje ble løst i EtOAc (15 mL) og tilsatt 10% Pd/C (0,050 g). Hydrogen ble deretter innført via en ballong. Etter 3 timer ble reaksjonsblandingen filtrert gjennom Celite under rensing med EtOAc og konsentrert i vakuum. Det resulterende råmaterialet ble renset ved preparativ TLC på silikagel under eluering med 5% aceton i metylenklorid for å gi 0,166 g av forbindelse 216B som et hvitt faststoff. NMR-spektroskopi viste kun en enkelt isomer som ved NOE-forsøk ble fastslått å være ekso. HPLC: 95% ved 3,200 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 484,0
[M+H]<+>.
Eksempel 217
( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- heksahvdro- 4- metvl- 2-( 2- naftalenyl)- 4. 7- epoksv- 1H-isoindol- 1. 3( 2H)- dion. hurtigere eluerende enantiomer & ( 3aa. 4B. 7B. 7aa)-heksahvdro- 4- metvl- 2-( 2- naftalenvl)- 4. 7- epoksv- 1 H- isoindol- 1, 3( 2H)- dion.
langsommere eluerende enantiomer ( henholdsvis 217i & 217M)
Den racemiske forbindelse 137 ble separert i de individuelle antipoder ved kiral omvendt-fase væskekromatografi. En Chiralpak AD-R kolonne (4,6 x 250 mm) ble benyttet under eluering med 70% acetonitril/30% vann ved 1 mL/min. UV-deteksjon ved 220 nm ble benyttet. Den hurtigere eluerende isomer, forbindelse 217i (retensjonstid=15,66 min) ble funnet å være 99,9% ee og den langsommere eluerende isomer, forbindelse 217N (retensjonstid=15,66 min) var 99,6% ee ifølge analytisk kiral omvendt-fase kromatografi.
Referanseeksempel 218
( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- 4- r4- r2- rr( 4- fluorfenyl) metvnmetvlamino1etvnoktahvdro- 7- metvl- 1, 3- diokso- 4, 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn-2( trifluormetvl) benzonitril ( 218B)
A. (4-fluorbenzyl)metylamin & bis(4-fluorbenzyl)metylamin (218A & 218A')
Forbindelser 218A og 218A' ble fremstillet i henhold til fremgangsmåten beskrevet av Singer, et al., J. Med. Chem. 29; 40-44 (1986). 4-fluorbenzylbromid (189 mg, 1,00 mmol) ble tilbakeløpsbehandlet i en løsning av etanol (1,5 mL) og metylamin (5 mL, 2M løsning i MeOH) i 3 timer. En ytterligere porsjon metylamin (2 mL) ble tilsatt og blandingen tilbakeløpsbehandlet i 1 time til. Løsningen ble avkjølt og konsentrert i vakuum og residuet løst i en blanding av 2N HCI (3 mL) og eter (1,5 mL). Lagene ble separert og det vandige lag ekstrahert med en ytterligere porsjon eter. Den vandige løsningen ble avkjølt til 0°C, titrert til pH 11 med NaOH og ekstrahert med CH2CI2. Ekstraktene ble tørket over MgS04og konsentrert for å gi 120 mg av en 2,5:1 blanding av henholdsvis forbindelse 218A og forbindelse 218A'. Den rå blandingen ble benyttet videre uten ytterligere rensing.
B. (3aa,4B,7p,7aa)-4-[4-[2-[[(4-fluorfenyl)metyl]-metylamino]-etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril (218B)
En løsning av forbindelse 36 (34,3 mg, 0,075 mmol) og forbindelsene 218A & 218A' (21 mg, -0,088 mmol (av 218A)) i toluen (0,4 mL) ble oppvarmet til 100°C over natten. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur og deretter konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 25% aceton/75% CH2CI2ga 30 mg (0,058 mmol, 77,7%) av 218B som et gult faststoff. HPLC: 99% ved 2,46 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 516,26 [M+H]<+>.
Eksempel 219
( 3aa, 4B, 5B, 6B, 7B, 7aa)- 4-( oktahvdro- 4, 5, 6, 7- tetrametvl- 1, 3- diokso- 4, 7-epoksv- 2H- isoindol- 2- vl)- 2-( trifluormetvhbenzonitril ( 219D)
A. 2,3,4,5-tetrametylfuran (219A)
Forbindelse 219A ble fremstillet i henhold til fremgangsmåtene beskrevet i Hancock et al., J. Org. Chem., 42,1850-1856 (1977) & Amarnath, et al., J. Org. Chem., 60, 301-307 (1995). 2-propanon (100 mL, 1,1 mol) ble tilbakeløpsbehandlet over Pb02(26,7 g, 0,11 mol) i 28 timer. Etter avkjøling til romtemperatur ble reaksjonsblandingen filtrert og residuet vasket med aceton. Filtratet ble konsentrert under redusert trykk for å fjerne aceton og deretter destillert ved 20 torr. Fraksjonen som gikk over mellom 100-120°C ble oppsamlet for å gi 6,75 g (42,5%) 3,4-dimetyl-heksan-2,5-dion som en lysegul olje.
En løsning av 3,4-dimetylheksan-2,5-dion (3,00 g, 21,1 mmol) og p-toluensulfonsyre (401 mg, 2,11 mmol) i benzen (30 mL) ble kokt under tilbakeløpskjøling i en Dean-Stark felle over natten. Reaksjonsblandingen ble destillert ved atmosfæretrykk for å fjerne overskudd av benzen. Den gjenværende blanding ble overført til en mindre kolbe og destillert ved atmosfæretrykk. Fraksjonen som gikk over mellom 80-100°C ble oppsamlet for å gi 509 mg (19%) av forbindelse 219A som en lysegul olje.
B. (3aa,4B,7p,7aa)-4-etyl-3a,4,7,7a-tetrahydro-4,5,6,7-tetrametyl-4,7-epoksy-isobenzofuran-1,3-dion (219B)
En løsning av forbindelse 219A (400 mg, 3,22 mmol) og maleinsyre-anhydrid (442 mg, 4,51 mmol) i Et20 (1,5 mL) ble omrørt over natten ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble deretter anbragt i en fryser i 5 dager, hvoretter de resulterende krystaller ble oppsamlet og tørket for å gi 0,26 g (37%) av forbindelse 219B som lysebrune krystaller. Den rå forbindelse 219B ble overført til det neste trinn uten videre rensing.
C. (3aa,4(3,5a,6a,7p,7aa)-4-etylheksahydro-4,5,6,7-tetrametyl-4,7-epoksy-isobenzofuran-1,3-dion (219C)
En løsning av forbindelse 219B (120 mg, 0,545 mmol) og 10% Pd/C (24 mg, katalytisk) i EtOAc (2 mL) ble omrørt under en ballong med hydrogen ved romtemperatur over natten. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom Celite og konsentrert under redusert trykk for å gi 100 mg (0,446 mmol, 81,9%) av forbindelse 219C som et hvitt faststoff, som ble benyttet videre uten ytterligere rensing.
D. (3aa,4p,5p,6p,7p,7aa)-4-(oktahydro-4,5,6,7-tetrametyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril (219D)
En løsning av forbindelse 219C (44,4 mg, 0,2 mmol), 5-amino-2-cyanobenzotrifluorid (45 mg, 0,24 mmol), TEA (0,04 mL) og MgS04(20 mg) i toluen (0,2 mL) ble oppvarmet til 135°C over natten. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur, filtrert og deretter konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 40% EtOAc/heksaner, etterfulgt av vask av det resulterende faststoff med MeOH ga 17 mg (0,043 mmol, 21,7%) av forbindelse 219D som et hvitt faststoff. HPLC: 90% ved 3,11 min (retensjonstid)
(YMC S5 ODS 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 391,2 [M-H]\
Eksempel 220
( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- 4- roktahvdro- 4- metvl- 1. 3- diokso- 7- r2- r4-( trifluormetyl) fenoksy] etyl]- 4, 7- epoksy- 2H- isoindol- 2- yl]- 2-( trifluormetyl) benzonitril,
hurtigere eluerende antipode & f3aa. 4B. 7B. 7aa)- 4- roktahvdro- 4- metvl-1. 3- diokso- 7- r2- r4- ftrifluormetvl) fenoksv1etvn- 4, 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 2-( trifluormetyl) benzonitril, langsommere eluerende enantiomer
( henholdsvis 220i og 220M)
Den racemiske forbindelse 35 ble separert i de individuelle antipoder ved kiral normalfase væskekromatografi. En Chiralpak AD kolonne (50 x 500 mm) ble benyttet under eluering med 85% heksaner/7,5% metanol/7,5% etanol, ca. 50 mL/min. UV-deteksjon ved 220 nm ble benyttet. Den hurtigere eluerende isomer, forbindelse 220i (retensjonstid=55,86 min) ble funnet å ha 95,8% ee ([a]D<25>=-53,02°, C=3,134 mg/cm<3>i CH2CI2) og den langsommere eluerende isomer, forbindelse 220N (retensjonstid=62,86 min) var 86% ee ([a]D<25>=+48,74°, C=2,242 mg/cm3 i CH2CI2) ifølge analytisk kiral normalfase kromatografi.
Eksempel 221
( 3aa, 4B, 5B, 7B, 7aa)- 4-( oktahvdro- 5- hvdroksv- 4, 7- dimetyl- 1, 3- diokso-4. 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vl)- 2-( trif1uormetvl) benzonitril ( 221B)
A. (3aa,4p,7p,7aa)-4-heksahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril (221 Ai) & (3aa,4a,7a,7aa)-4-(heksahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril (221Aii)
En løsning av 2,5-dimetylfuran (0,8 mL, 7,51 mmol) og 4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1H-pyrrol-1-yl)-2-trifluormetylbenzonitril (syntetisert som beskrevet i Eksempel 1B) (1,00 g, 3,75 mmol) i benzen (4mL) ble oppvarmet til 60°C over natten. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk og tilkoblet en høyvakuum pumpe inntil oljen størknet for å gi en 3:1 blanding (bestemt ved LC og NMR) av henholdsvis forbindelse 221 Ai & 221AM, som et brunt faststoff, som ble benyttet direkte i det neste trinn uten ytterligere rensing.
B. (3aa,4B,5p,7p,7aa)-4-(oktahydro-5-hydroksy-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril (221B)
BH3THF (3,75 mL, 3,75 mmol, 1M i THF) ble tilsatt til en løsning av rå forbindelse 221 Ai & 221 Aii (3,75 mmol) i THF (12,5 mL) ved 0°C. Etter at alt utgangsmaterialet var forbrukt, ble reaksjonsblandingen konsentrert under redusert trykk. Det resulterende residuum ble deretter løst i toluen (12,5 mL), tilsatt Me3NO (845 mg, 11,25 mmol) og blandingen kokt under tilbakeløpskjøling over natten. Reaksjonsblandingen ble deretter avkjølt til romtemperatur, tilsatt til H20 og ekstrahert med EtOAc (3X). De kombinerte organiske lagene ble tørket over MgS04og konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på Si02under eluering med 75% EtOAc/heksaner ga 0,354 g (25%) av forbindelse 221B som et lysebrunt pulver. HPLC: 90% ved 2,45 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 381,11 [M+H]<+>.
Eksempel 222
( 3aa, 4B, 5a, 7B, 7aa)- 4-( oktahvdro- 5- hydroksv- 4, 7- dimetvl- 1, 3- diokso- 4, 7-epoksv- 2H- isoindol- 2- vl)- 2- ftrifluormetvl) benzonitril ( 222D)
A. 3-[[(1,1-dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]-2,5-dimetylfuran (222A)
2,5-dimetyl-3(3H)-furanon (2,00 g, 17,8 mmol) ble løst i metylenklorid
(180 mL). TEA (7,43 mL, 53,5 mmol) ble tilsatt etterfulgt av TBSOTf (4,92 mL,
21,4 mmol) ved 25°C. Etter 1 time ble reaksjonsblandingen konsentrert i vakuum og den resulterende oppslemming sendt gjennom en silikagelkolonne forbehandlet med 3% TEA i heksaner. Produktet ble eluert med 3% TEA/heksaner for å gi 3,6 g av forbindelse 222A som en orange olje som ble benyttet direkte i påfølgende reaksjoner.
B. (3aa,4B,7p,7aa)-4-[5-[[(1,1 -dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]-1,3,3a,4,7,7a-heksahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trilfuormetyl)benzonitril (222B)
4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1 H-pyrrol-1-yl)-2-trifluormetylbenzonitril (1,00 g, 3,85 mmol) ble løst i benzen (5,0 mL) og forbindelsen 222A (1,30 g, 5,77 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 60°C i 2 timer og deretter avkjølt til 25°C. Løsningen ble deretter konsentrert i vakuum for å gi forbindelse 222B som en gul olje som ble benyttet videre i den neste reaksjon uten rensing. HPLC: 60% ved 4,013 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm). C. (3aa,4p,5a,7p,7aa)-4-[5-[[(1,1-dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]-oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)-benzonitril (222C)
Råforbindelse 222B (3,85 mmol) ble løst i etylacetat (75 mL) og tilsatt 10% Pd/C (1,20 g). Hydrogen ble deretter innført via en ballong. Etter 24 timer ble reaksjonsblandingen filtrert gjennom Celite under rensing med etylacetat og konsentrert i vakuum for å gi en gul olje. Råproduktet ble renset ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med metylenklorid/aceton (0%-1%-2% aceton) for å gi forbindelse 222C som et gult faststoff (0,710 g). HPLC: 100% ved 4,160 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 517,6 [M+Na]<+.>
D. (3aa,4p,5a,7p,7aa)-4-(oktahydro-5-hydroksy-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril (222D)
Forbindelse 222C (0,040 g, 0,081 mmol) ble løst i THF (1,0 mL) og tilsatt HF pyridin (0,5 mL). Etter 2 timer ble reaksjonsblandingen forsiktig helt over i kald mettet vandig NaHC03. Blandingen ble deretter ekstrahert med metylenklorid
(3x10 mL). De kombinerte organiske lagene ble vasket med 1N HCI (1x10 mL) og tørket over vannfritt natriumsulfat. Konsentrering i vakuum ga forbindelse 222D som et gult faststoff (0,031 g). NOE-forsøk bekreftet isomer-tilordningen. HPLC: 98% ved 2,777 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 403,06 [M+Na]<+.>
Eksempel 223
( aR)- g- metoksybenzeneddiksyre, 2r( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- 2-( 4- cvano- 1 - naftalenvl) oktahvdro- 7- metvl- 1. 3- diokso- 4. 7- epoksv- 4H- isoindol- 4- vn- etvlester
( 223C)
A. (3aa,4B,7p,7aa)-4-[4-[2-[[(1,1 -dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]etyl]-oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1 - naftalenkarbonitril (223A)
En løsning av 4-amino-1 -naftalenkarbonitril (19,2 g, 114 mmol) og maleinsyre-anhydrid (14,0 g, 113 mmol) i AcOH (230 mL) ble oppvarmet til 115°C i 12 timer. Etter avkjøling til romtemperatur ble reaksjonsblandingen konsentrert under redusert trykk og deretter fortynnet med CH2CI2(2,5 L). Det organiske lag ble vasket 3X med H20 (3 L), 1X med mettet vandig Na2C03(1 L) og 1X med saltvann (1 L), tørket over MgS04og konsentrert til~200 mL under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på kationbytterharpiks (60 g, CUBX13M6 fra United Chemical Technologies) under eluering med CH2CI2ga 25,0 g (88%) 4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1H-1-yl)-1-naftalenkarbonitril som et gult faststoff. HPLC: 96% ved 2,48 min (Phenomenex-prime S5 C18 kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 249,25 [M+H]<+>.
4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1H-1-yl)-1-naftalenkarbonitril (1,00 g, 4,03 mmol) ble suspendert i benzen (6,0 mL) i et forseglet rør og tilsatt forbindelse 204A (1,11 g, 5,24 mmol). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 60°C i 16 timer og deretter avkjølt til 25°C. Benzenet ble fjernet i vakuum for å gi et gult faststoff. Faststoffet ble løst i etylacetat (40 mL) og tilsatt Pd/C (10% Pd, 0,300 g). Hydrogen ble deretter innført via en ballong. Etter 4 timer ble reaksjonsblandingen filtrert gjennom Celite under rensing med etylacetat. Konsentrering i vakuum ga et blekgult faststoff som ble renset ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med aceton/kloroform (0%-1,5%-3% aceton) for å gi forbindelse 223A (1,53 g) som et gult skum.
HPLC: 86% ved 4,173 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm).
B. (3aa,4B,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1 -naftalenkarbonitril (223B)
Forbindelse 223A (1,37 g, 2,97 mmol) ble løst i THF (8,0 mL) og overført til en polypropylenflaske og avkjølt til 0°C. HF pyridin (2,0 mL) ble deretter tilsatt. Etter 20 minutter ble reaksjonsblandingen forsiktig helt over i kald mettet vandig natriumbikarbonat og ekstrahert med metylenklorid (3 x 30 mL). De organiske lagene ble vasket med 1N HCI og tørket over vannfritt natriumsulfat. Konsentrering i vakuum ga forbindelse 223B (0,99 g) som et gult skum som ikke ble ytterligere renset.
HPLC: 96% ved 2,443 og 2,597 (atropisomerer) min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 399,02 [M+Na]<+.>
C. (aR)-a-metoksybenzeneddiksyre, 2-[(3aa,4B,7(3,7aa)-2-(4-cyano-1 - naftalenyl)oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etylester (223C)
Forbindelse 223B (0,200 g, 0,575 mmol) ble tilsatt til en løsning av WSDCC (0,138 g, 0,719 mmol) og (R)-mandelsyre (0,096 g, 0,575 mmol) i diklormetan (6,0 mL). 4-DMAP (0,005 g) ble deretter tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt ved 25°C i 4 timer. Blandingen ble deretter fortynnet med diklormetan og vasket med 1N HCI (2x10 mL), én gang med natriumbikarbonat (10 mL) og tørket over vannfritt natriumsulfat. Konsentrering i vakuum ga forbindelse 223C (0,220 g) som et gult faststoff som ikke ble renset ytterligere. HPLC: 100% ved 3,283 min (retensjonstid)
(YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig
metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 547,26 [M+Na]<+.>
Eksempel 224
( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- 2-( metvltio)- 4-( oktahvdro- 4. 7- dimetvl- 1. 3- diokso- 4. 7-epoksv- 2H- isoindol- 2- vl) benzonitril ( 224)
4-amino-2-(metyltio)benzonitril (100 mg, 0,61 mmol, syntetisert som beskrevet i EP 40931 A1) ble omsatt i et forseglet rør med forbindelse 20A (131 mg, 0,67 mmol), MgS04(161 mg, 1,34 mmol) og Et^N (0,44 mL, 3,17 mmol) i 0,50 mL toluen i henhold til fremgangsmåten beskrevet i Eksempel 208C for etter rensing ved preparativ omvendt-fase HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, eluering i 10 minutter med 30-100% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 20 mL/min) å gi 137 mg (0,40 mmol, 66%) av forbindelse 224 som et hvitt faststoff. HPLC: 100% ved 2,73 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 401,0 [M-H+OAc]". Eksempel 225 ( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- 2-( metvlsulfinvl)- 4-( oktahvdro- 4, 7- dimetvl- 1, 3-diokso- 4, 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- yl) benzonitril ( 225)
Til en iskald suspensjon av forbindelse 224 (30 mg, 0,09 mmol) i 2 mL H20/MeOH (1:1) ble det tilsatt oxon (80 mg, 0,26 mmol) i én fast porsjon. Den resulterende blanding ble omrørt i 4 timer ved 0°C før den ble fortynnet med H20
(10 mL) og ekstrahert med CH2CI2(2 x 20 mL). De kombinerte organiske lagene ble tørket og konsentrert for å etterlate et residuum som ble renset ved filtrering av materialet gjennom et kort lag silikagel under eluering med CH2CI2for å gi 32 mg (0,09 mmol, 100%) av forbindelse 225 som en farveløs olje. HPLC: 99% ved 2,01 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 ml_/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 376,0 [M+NH4]<+>.
Eksempel 226
( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- 2-( metvlsulfonvl)- 4-( oktahvdro- 4, 7- dimetyl- 1, 3- diokso-4. 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vl) benzonitril ( 226)
Til en løsning av forbindelse 225 (48 mg, 0,14 mmol) i CH2CI2(2 mL) ble det tilsatt mCPBA (145 mg, 50% blanding, 0,42 mmol) i én fast porsjon. Den resulterende blanding fikk oppvarmes til romtemperatur og ble omrørt i 60 timer, hvoretter det ifølge HPLC ikke kunne påvises mer utgangsmateriale. Reaksjonen ble avbrutt ved tilsetning av mettet NaHC03-løsning (5 mL), lagene ble separert og det vandige lag ekstrahert med CH2CI2(20 mL). De kombinerte organiske fasene ble tørket over MgS04og konsentrert. Det gjenværende residuum ble renset ved preparativ omvendt-fase HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, eluering i 10 minutter med 30-100% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 20 ml_/min) for å gi 48 mg (0,13 mmol, 92%) av forbindelse 226 som et hvitt faststoff. HPLC: 100% ved 2,07 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 392,0 [M+NH4]<+>.
Referanseeksempel 227
( 3aa, 4B, 5B, 7B, 7aa)- 7- r2- rr( 1, 1- dimetvletvl) dimetvlsilvnoksv1etvnheksahvdro- 5- hvdroksv- 4- metvl- 2-( 4- nitro- 1 - naftalenvl)- 4, 7-epoksv- 1 H- isoindol- 1, 3( 2H)- dion ( 227B)
A. (3aa,4B,7p,7aa)-4-[2-[[(1,1 -dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]etyl]-3a,4,7,7a-tetrahydro-7-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (227A)
En løsning av forbindelse 204A (455 mg, 1,894 mmol, 2 ekv.) og 1-[4-nitronaftalen]-1 H-pyrrol-2,5-dion (254 mg, 0,947 mmol, 1 ekv.) (fremstillet som beskrevet for 4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1 H-1-yl)-1-naftalenkarbonitril,
Eksempel 223A) i benzen (2 mL) ble oppvarmet til 60°C over natten. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk for å gi råforbindelse 227A som et brunt faststoff, som ble benyttet direkte i det neste trinn uten ytterligere rensing.
B. (3aa,4p,5p,7p,7aa)-7-[2-[[(1,1 -dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]etyl]-heksahydro-5-hydroksy-4-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (227B)
BH3THF (0,95 mL, 0,95 mmol, 1M i THF, 1 ekv.) ble tilsatt til en løsning av råforbindelse 227A (0,95 mmol, 1 ekv.) i THF (2 mL) ved 0°C. Etter at forbindelse 227A ifølge HPLC var forbrukt, ble reaksjonsblandingen konsentrert under redusert trykk. Det resulterende residuum ble deretter løst i toluen (2 mL), tilsatt Me3NO
(71 mg, 2,84 mmol, 3 ekv.) og blandingen kokt under tilbakeløpskjøling over natten. Reaksjonsblandingen ble deretter avkjølt til romtemperatur, tilsatt til H20 og ekstrahert med EtOAc (3X). De kombinerte organiske lagene ble tørket over MgS04
og konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på Si02under eluering med en blanding av 75% EtOAc/heksaner ga 130,2 mg (26%) av forbindelse 227B som et brunt faststoff. HPLC: 94% ved 3,92 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 527,5
[M+H]<+>.
Eksempel 228
( 3aa, 4B, 5B, 7B, 7aa)- heksahvdro- 5- hvdroksv- 7-( 2- hydroksvetvl)- 4- metvl- 2-( 4-nitro- 1 - naftalenvl)- 4, 7- epoksv- 1 H- isoindol- 1. 3( 2H)- dion ( 228)
En blanding av TBAF (0,3 mL, 0,296 mmol, 1M løsning i THF) og HF (0,3 mL, 50% i H20) i CH3CN (6 mL) ble tilsatt til en løsning av 227B (104 mg, 0,197 mmol) i THF (2 mL) ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt over natten ved romtemperatur. Etter at utgangsmaterialet ifølge TLC var forbrukt, ble H20 og EtOAc tilsatt og lagene separert. Det vandige lag ble ekstrahert med EtOAc (1X) og de kombinerte organiske lagene ble vasket med H20 (1X) og saltvann (1X), tørket over Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på Si02under eluering med 5% MeOH/CH2CI2ga 61,2 mg (75%) av forbindelse 228 som et gult faststoff. HPLC: 99% ved 2,47 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 411,2 [M-H]\
Eksempel 229
( 3aa, 4B, 5B, 7B, 7aa)- 7- r2-( 4- fluorfenoksv) etvnheksahvdro- 5- hvdroksv- 4-metvl- 2-( 4- nitro- 1- naftalenvl)- 4. 7- epoksv- 1 H- isoindol- 1. 3( 2H)- dion
DBAD (37,7 mg, 0,164 mmol) ble tilsatt til en løsning av PPH3(43 mg,
0,164 mmol) i THF (1 mL). Etter omrøring i 10 minutter ble 4-fluorfenol (18,3 mg, 0,164 mmol) tilsatt og reaksjonsblandingen ble omrørt i ytterligere 5 minutter. En løsning av forbindelse 228 (45 mg, 0,109 mmol) i THF (1 mL) ble tilsatt og blandingen omrørt ved romtemperatur over natten. HPLC viste at den rå reaksjonsblandingen for det meste inneholdt utgangsdiol (forbindelse 228), så denne blandingen ble derfor tilsatt til en ferdiggjort blanding av PPh3(86 mg), DBAD
(75,4 mg) og fenol (36,6 mg) i THF (4 mL) ved romtemperatur. Omrøring ble fortsatt inntil all forbindelse 228 var forbrukt. Reaksjonsblandingen ble deretter konsentrert under redusert trykk. Rensing ved preparativ kromatografi [HPLC ved 15,2 min
(retensjonstid) (YMC S5 ODS A kolonne 20 x 100 mm, eluering i 15 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 20 mL/min, deteksjon ved 220 nm) ga 25,0 mg (45%) av forbindelse 229 som et lysegult faststoff. HPLC: 99% ved 3,53 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 505,2 [M-H]\
Eksempel 230
( 3aa, 4B, 5B, 6B, 7B, 7aa)- 4-( oktahvdro- 5, 6- dihvdroksv- 4, 7- dimetvl- 1, 3- diokso- 4, 7-epoksv- 2H- isoindol- 2- yl)- 2-( trifluormetvl) benzonitril & ( 3aa, 4B, 5a, 6a, 7B, 7aa)- 4-( oktahvdro- 5. 6- dihvdroksv- 4. 7- dimetvl- 1. 3- diokso- 4. 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vl)-2-( trifluormetvl) benzonitril ( henholdsvis 230Bi og 230BM)
A. (3aa,4f3,7B,7aa)-4-(1,3,3a,4,7,7a-heksahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril (230A)
3,5-dimetylfuran (1,23 mL, 11,54 mmol) og 4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1 H-pyrrol-1-yl)-2-trifluormetylbenzonitril (2,00 g, 7,69 mmol) ble løst i benzen (10 mL) og oppvarmet til 60°C i 18 timer. De flyktige organiske forbindelsene ble deretter fjernet i vakuum. Den resulterende råforbindelse 230A ble benyttet videre uten ytterligere rensing. HPLC: 71% ved 3,007 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 ml_/min, deteksjon ved 220 nm).
B. (3aa,4B,5p,6p,7p,7aa)-4-(oktahydro-5,6-dihydroksy-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)-benzonitril &
(3aa,4p,5a,6a,7p,7aa)-4-(oktahydro-5,6-dihydroksy-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)-benzonitril
(230Bi & 230BM)
Forbindelse 230A (0,100 g, 0,281 mmol) ble løst i aceton og tilsatt N-metylmorfolin-N-oksyd (50% vandig løsning,0,100 mL, 0,42 mmol). OSO4(4% vandig løsning, 0,014 mmol) ble deretter tilsatt. Etter 3 timer ved 25°C var reaksjonen fullført, og blandingen ble tilsatt natriumsulfitt (0,250 g) under kraftig omrøring. Etter 15 minutter ble saltvann (10 mL) tilsatt og løsningen ekstrahert med EtOAc (3x15 mL). De organiske lagene ble tørket over vannfritt natriumsulfat og deretter konsentrert i vakuum. Den rå diol-blandingen ble renset ved preparativ TLC under eluering med 18% aceton i kloroform for å gi 0,038 g av forbindelse 230Bi (beta side) og 0,012 g av forbindelse 230Bii (alfa side) som lysegule faststoff. Forbindelse 230Bi: HPLC: 100% ved 2,567 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 397,08 [M+H]<+>. Forbindelse 230BH: HPLC: 100% ved 2,417 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 397,08
[M+H]<+>.
Eksempel 231
( 3aa, 4B, 5B, 6B, 7B, 7aa)- 4- roktahvdro- 5, 6- dihvdroksv- 4-( hvdroksvetvl)- 7- metvl- 1, 3-diokso- 4, 7- epoksy- 2H- isoindol- 2- vl]- 1 - naftalenkarbonitril ( 231C)
A. (3aa,4B,7p,7aa)-4-[4-[2-[[(1,1 -dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]etyl]-1,3,3a,4,7,7a-heksahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1 -naftalenkarbonitril (231 A)
Forbindelse 204A (29,03 g, 120 mmol) og 4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1H-1-yl)-1-naftalenkarbonitril (20,0 g, 80,6 mmol) ble suspendert i benzen (80 mL) og oppvarmet til 60°C i 14 timer. Blandingen ble deretter konsentrert i vakuum ved 40°C i 40 minutter. Den resulterende oppslemming ble avkjølt til 25°C og deretter suspendert i MeOH (200 mL) og omrørt ved romtemperatur i 30 minutter. Løsningen ble deretter avkjølt til 0°C i 30 minutter og deretter filtrert ved rensing med kald MeOH. Det resulterende faststoff ble tørket i vakuum for å gi 26,1 g rå forbindelse 231A som et hvitt faststoff. Metanolløsningen ble konsentrert i vakuum og resuspendert i MeOH (50 mL) og avkjølt til -20°C i 4 timer. Løsningen ble deretter filtrert og renset med kald MeOH. Det resulterende faststoff ble tørket i vakuum for å gi 3,8 g av forbindelse 231A som et hvitt faststoff. HPLC: 95% ved 4,227 min (retensjonstid)
(YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 ml_/min, deteksjon ved 220 nm).
B. (3aa,4B,5p,6p,7p,7aa)-4-[4-[2-[[(1,1 -dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]-etyl]oktahydro-5,6-dihydroksy-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1 -naftalenkarbonitril (231B)
Forbindelse 231A (0,400 g, 0,851 mmol) ble løst i aceton (9,0 mL) og tilsatt N-metylmorfolin-N-oksyd (50% vandig løsning, 0,0150 mL, 1,28 mmol). Os04(4% vandig løsning, 0,043 mmol) ble deretter tilsatt. Etter 3 timer ved 25°C var reaksjonen fullført, hvorpå natriumsulfitt (1,0 g) ble tilsatt under kraftig røring. Etter 15 minutter ble saltvann (30 mL) tilsatt og løsningen ekstrahert med EtOAc (3 x 50 mL). De organiske lagene ble tørket over vannfritt natriumsulfat og deretter konsentrert i vakuum. Den rå diol ble renset ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 5-25% aceton i kloroform for å gi 0,355 g forbindelse 231B som et gult faststoff. HPLC: 93% ved 3,903 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre,
4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 522,00 [M+H]<+>.
C. (3aa,4p,5p,6p,7p,7aa)-4-[oktahydro-5,6-dihydroksy-4-(hydroksy-etyl)-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril (231C)
Forbindelse 231B (0,400 g, 0,766 mmol) ble løst i THF (5,0 mL) og overført til en polypropylenflaske og avkjølt til 0°C. HF pyridin (1,0 mL) ble deretter tilsatt. Etter 20 minutter ble reaksjonsblandingen forsiktig helt over i kald mettet vandig natrium bikarbonat og ekstrahert med metylenklorid (3 x 30 mL). De organiske lagene ble vasket én gang med 1N HCI og tørket over vannfritt natriumsulfat. Konsentrering i vakuum ga forbindelsen 231C (0,290 g) som et gult skum som ikke ble ytterligere renset. HPLC: 92% ved 2,273 og 2,423 (atropisomerer) min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 409,10
[M+H]<+>.
Eksempel 232
( 3aa, 4B, 5B, 6B, 7B, 7aa)- 4- roktahvdro- 5, 6- dihvdroksv- 4- metvl- 1, 3- diokso- 7- r2- r4-( trifluormetvl) fenoksvletvll- 4, 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vll- 2-( trifluormetvl) benzonitril ( 232C)
A. 2-metyl-5-[2-[4-(trifluormetyl)fenoksy]etyl]furan (232A)
Til en løsning av trifenylfosfin (1,56 g, 5,95 mmol) i THF (40 mL) ble det tilsatt DBAD (1,37 g, 5,95 mmol). Etter 10 minutter ble 4-trifluormetylfenol (0,964 g,
5,95 mmol) tilsatt. Etter ytterligere 10 minutter ble forbindelse 21A (0,500 g,
3,97 mmol) tilsatt. Etter 14 timer ved 25°C ble reaksjonsblandingen konsentrert i vakuum og renset ved hurtigkromatografi på silika under eluering med kloroform for å gi 0,713 g av forbindelse 232A som en klar olje.
B. (3aa,4B,7p,7aa)-4-[1,3,3a,4,7,7a-heksahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[4-(trifluormetyl)fenoksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril (232B)
Forbindelse 232A (0,301 g, 1,15 mmol) og 4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1H-pyrrol-1-yl)-2-trifluormetylbenzonitril (0,220 g, 0,846 mmol) ble suspendert i benzen (1,5 mL) og oppvarmet til 60°C i 14 timer. Blandingen ble deretter konsentrert i vakuum ved 40°C i 40 minutter. Råproduktet ble renset ved hurtigkromatografi på silika under eluering med 10-0% heksaner i metylenklorid for å gi 0,199 g av forbindelse 232B som et gult faststoff. Forbindelse 232B blekarakterisertsom ekso-diastereomeren ved hjelp av NOE-forsøk. HPLC: 94% ved 3,993 min (retensjonstid)
(YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm).
C. (3aa,4p,5p,6p,7p,7aa)-4-[oktahydro-5,6-dihydroksy-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[4-(trifluormetyl)fenoksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril (232C)
Forbindelse 232B (0,075 g, 0,140 mmol) ble løst i aceton (2,0 mL) og tilsatt N-metylmorfolin-N-oksyd (50% vandig løsning, 0,025 mL, 0,21 mmol). Os04(4% vandig løsning, 0,007 mmol) ble deretter tilsatt. Etter 3 timer ved 25°C var reaksjonen fullstendig, hvorpå natriumsulfitt (0,25 g) ble tilsatt under kraftig omrøring. Etter 15 minutter ble saltvann (5 mL) tilsatt og løsningen ekstrahert med EtOAc (3x10 mL). De organiske lagene ble tørket over vannfritt natriumsulfat og deretter konsentrert i vakuum. Den rå diol ble renset ved preparativ TLC på silikagel under eluering med 10% aceton i kloroform for å gi 0,038 g av forbindelse 232C som et gult faststoff. HPLC: 98% ved 3,747 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre,
4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 593,08 [M+Na]<+.>
Eksempel 233
f3aa, 4B, 5B, 5aB, 8aB, 8ba)- 4- fdekahvdro- 5- hvdroksv- 4- metyl- 1, 3- diokso-4. 8a- epoksv- 2H- furor3. 2- elisoindol- 2- vl)- 1 - naftalenkarbonitril ( 233)
Til en løsning av trifenylfosfin (0,072 g, 0,276 mmol) i THF (3,0 mL) ble det tilsatt DBAD (0,063 g, 0,276 mmol). Etter 10 minutter ble 4-cyanofenol (0,033 g, 0,276 mmol) tilsatt. Etter ytterligere 10 minutter ble forbindelse 231C (0,075 g, 0,184 mmol) tilsatt. Etter 3 timer ved 25°C ble reaksjonsblandingen konsentrert i vakuum og renset ved preparativ TLC på silikagel under eluering med 15% aceton i kloroform for å gi 0,068 g av forbindelse 233 som et hvitt faststoff. HPLC: 95% ved 2,430 og 2,560 min (atropisomerer) (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 391,09 [M+H]<+>.
Eksempel 234
( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- 2-( 4- cvano- 1 - naftalenvl) oktahvdro- 7- metvl- 1. 3-diokso- 4. 7- epoksv- 4H- isoindol- 4- eddiksvre ( 234B)
A. (3aa,4B,7B,7aa)-2-(4-cyano-1 -naftalenyl)-1,2,3,3a,7,7a-heksahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-eddiksyre (234A)
5-metyl-2-furaneddiksyre (0,500 g, 3,57 mmol) og 4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1H-1-yl)-1-naftalenkarbonitril (0,899 g, 3,57 mmol) ble løst i benzen (3,0 mL) og oppvarmet til 60°C i 2 timer og deretter avkjølt til 25°C. Etter 12 timer ble det utfelt et hvitt bunnfall fra løsningen, som ble frafiltrert og renset med dietyleter for å gi 1,20 g av forbindelse 234A som et lysegult faststoff. NM R viste kun én diastereomer. HPLC: 86% ved 2,767 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre,
4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 389,45 [M+H]<+>.
B. (3aa,4B,7B,7aa)-2-(4-cyano-1 -naftalenyl)oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-eddiksyre (234B)
Forbindelse 234A (1,1 g, 2,82 mmol) ble løst i EtOH/EtOAc (1:1, 50 mL) og tilsatt Pd/C (10% Pd, 0,4 g) etterfulgt av H2via en ballong. Etter 5 timer ved 25°C ble reaksjonsblandingen filtrert gjennom Celite og renset med EtOAc og konsentrert i vakuum for å gi 1,00 g av forbindelse 234B som et gult faststoff. HPLC: 80% ved 2,84 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 391,1 [M+H]<+>.
Eksempel 235
( 3aa, 4B, 7g, 7aa)- 2-( 4- cyano- 1 - naftalenyl) oktahydro- 7- metyl- 1, 3- diokso- 4, 7-epoksy- 4H- isoindol- 4- eddiksyre- metylester ( 235)
Forbindelse 234B (0,050 g, 0,125 mmol) ble løst i acetonitril (2,0 mL) og deretter tilsatt DCC (0,025 g, 0,125 mmol) etterfulgt av HOAc (0,018 g, 0,125 mmol).
4-fluorbenzylalkohol (0,014 mL, 0,125 mmol) ble tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt i 3 timer. Reaksjonsblandingen ble deretter konsentrert i vakuum og renset ved preparativ omvendt-fase HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, eluering i 15 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 20 mL/min, deteksjon ved 220 nm). Rensing førte til 0,040 g av forbindelse 235 som et hvitt faststoff i stedet for den forventede benzylester. Ingen av de antatte benzylestere ble observert ved NMR eller LC-MS. HPLC: 100% ved 3,033 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 405,51
[M+H]<+>.
Eksempel 236
( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- 2- f4- cvano- 1- naftalenvl)- N- r( 4- fluorfenvl) metvn- oktahvdro- 7-metvl- 1. 3- diokso- 4. 7- epoksv- 4H- isoindol- 4- acetamid ( 236)
Forbindelse 234B (0,100 g, 0,256 mmol) ble løst i acetonitril (4,0 mL). HOAc (0,035 g, 0,256 mmol) og DCC (0,049 g, 0,256 mmol) ble deretter tilsatt etterfulgt av 4-fluorbenzylamin (0,030 mL, 0,256 mmol). Etter 4 timer ved 25°C ble reaksjonsblandingen konsentrert i vakuum og renset ved preparativ HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, eluering i 15 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 20 mL/min, deteksjon ved 220 nm) for å gi 0,085 g av forbindelse 236 som et hvitt faststoff. HPLC: 100% ved 3,277 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 498,43 [M+H]<+>. Referanseeksempel 237 ( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- N- r2- r2-( 4- cvano- 1- naftalenvl) oktahvdro- 7- metvl- 1. 3-diokso- 4, 7- epoksv- 4H- isoindol- 4- vnetvn- 4- fluorbenzamid ( 237B) A. 4-fluor-N-[2-(5-metyl-2-furanyl)etyl]benzamid (237A)
4-fluorfenylacetylklorid (0,29 mL, 2,44 mmol) ble dråpevis tilsatt til en løsning av p-(5-metyl-2-furanyl)etanamin (300 mg, 2,44 mmol, fremstillet ifølge fremgangsmåten til Yur'ev, Yu. K. et al., J. Gen. Chem. USSR ( Engl. Transl.) 33, 3444-8
(1963)) i THF (2,5 mL) ved romtemperatur, hvoretter Et3N (0,34 mL, 2,44 mmol) dråpevis ble tilsatt. Etterat utgangsmaterialet ifølge HPLC var forbrukt, ble reaksjonen avbrutt med H20, hvorpå blandingen ble ekstrahert med CH2CI2. De kombinerte organiske lagene ble tørket over MgSCvog konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi under eluering med 0%-50% EtOAc/heksan-gradient ga 523 mg (95%) av forbindelse 237A som et hvitt faststoff. HPLC: 99% ved 2,84 min (retensjonstid) (Phenomenex-prime S5-C18 kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 248,15 [M+H]<+>.
B. (3aa,4B,7p,7aa)-N-[2-[2-(4-cyano-1-naftalenyl)oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etyl]-4-fluorbenzamid (237B)
En løsning av forbindelse 237A (221,5 mg, 0,896 mmol) og 4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1H-1-yl)-1-naftalenkarbonitril (222,4 mg, 0,896 mmol) i benzen (4 mL) ble oppvarmet til 60°C over natten. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk og løst i EtOAc (30 mL). 10% Pd/C (50 mg) ble tilsatt og blandingen omrørt under en hydrogenballong over natten. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom et lag Celite og konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi under eluering med 25%-75% EtOAc/heksan-gradient ga 160,3 mg (36%) av forbindelse 237B som et hvitaktig faststoff. HPLC: 97% ved 3,13 & 3,23 min (retensjonstid)
(Phenomenex-prime S5 C18 kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90%
vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 498,11 [M+H]<+>.
Eksempel 238
r3aR-( 3aa. 4B. 7B. 7aa) 1- 4- roktahvdro- 4-( 2- hvdroksvetvl)- 7- metvl- 1. 3- diokso- 4. 7-epoksv- 2H- isoindol- 2- vlM - naftalenkarbonitril & r3aS-( 3aa. 4B. 7B. 7aa) 1- 4-roktahvdro- 4- f2- hvdroksvetvl)- 7- metvl- 1. 3- diokso- 4. 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn-1- naftalenkarbonitril ( 238i & 238ii)
Racemisk forbindelse 223B ble separert i dens enantiomerer ved preparativ kiral HPLC (CHIRALPAK AD 5 x 50 cm kolonne; eluering med 20% MeOH/EtOH 1:1) i heptan (isokratisk) ved 50 mL/min, ca. 220 nm) for å gi den hurtigere eluerende forbindelse 238i (kiral HPLC: 13,54 min; CHIRALPAK AD 4,6 x 250 mm kolonne; eluering med 20% MeOH/EtOH (1:1) i heptan ved 1 mL/min) og den langsommere eluerende forbindelse 238ii (kiral HPLC: 14,99 min; CHIRALPAK AD 4,6 x 250 mm kolonne; eluering med 20% MeOH/EtOH (1:1) i heptan ved 1 mL/min). Den absolutte konformasjon for forbindelsene 238i & 238N ble ikke fastslått. For enkelhet angående nomenklatur er forbindelse 238i her angitt å ha en «R»-konfigurasjon og forbindelse 238N angitt å ha en «S»-konfigurasjon. Enantiomert rene produkter avledet fra forbindelse 238i er her angitt å ha en «R»-konfigurasjon og enantiomert rene produkter avledet fra forbindelse 238N er her angitt å ha en «S»-konfigurasjon.
Eksempel 239
r3aR( 3aa, 4B, 7B, 7aa) 1- 4- r4- r2-( 3- fluorfenoksv) etvnoktahvdro- 7- metvl- 1, 3- diokso-4, 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 1 - naftalenkarbonitril & r3aS- f- f3aa. 4B. 7B. 7aa) 1- 4- r4-r2- f3- fluorfenoksv) etvnoktahvdro- 7- metvl- 1. 3- diokso- 4. 7- epoksv- 2H- isoindol- 2-yll- 1 - naftalenkarbonitril ( 239i & 239M)
Til en løsning av trifenylfosfin (0,0524 g, 0,20 mmol) i THF (2,0 mL) ble det tilsatt DBAD (0,046 g, 0,2 mmol). Etter 10 minutter ble 3-fluorfenol (0,018 mL,
0,2 mmol) tilsatt. Etter ytterligere 10 minutter ble enantiomert ren forbindelse 238i (0,050 g, 0,133 mmol) tilsatt. Etter 3 timer ved 25°C ble reaksjonsblandingen konsentrert i vakuum og renset ved preparativ HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, eluering i 15 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% TFA,
20 mL/min, deteksjon ved 220 nm) for å gi 0,031 g av forbindelse 239i som et hvitt faststoff. Denne prosess ble gjentatt med enantiomert ren forbindelse 238N for å gi forbindelse 239N. Forbindelse 239i: HPLC: 100% ved 3,80 min (retensjonstid)
(YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm),
MS (ES): m/z 471,65 [M+H]<+>, [a]D<25>= -47,371 (c=4,412 mg/cm<3>, CH2CI2). Forbindelse 239N: HPLC: 100% ved 3,80 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 471,65 [M+H]<+>, [a]D<25>=+24,3 (c=4,165 mg/cm<3>, CH2CI2).
Referanseeksempel 240
( 4- fluorfenvl) karbaminsvre- 2- r( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- 2-( 4- cvano- 1-naftalenvl) oktahvdro- 7- metvl- 1, 3- diokso- 4, 7- epoksv- 4H- isoindol- 4- vn-etvlester ( 240)
Forbindelse 223B (0,100 g, 0,279 mmol) ble løst i dikloretan (3,0 mL) og tilsatt 4-fluorfenylisocyanat (0,048 mL, 0,419 mmol) etterfulgt av oppvarming til 60°C. Etter 2 timer ble reaksjonsblandingen avkjølt til 25°C og fortynnet med metylenklorid. Blandingen ble vasket én gang med mettet vandig natriumbikarbonat (20 mL) og de organiske lagene ble tørket over magnesiumsulfat. Råmaterialet ble renset ved hurtigkromatografi på silika under eluering med 15% aceton i kloroform for å gi 0,098 g av forbindelse 240 som et gult skum. HPLC: 98% ved 3,320 og 3,457 min (atropisomerer) (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 514,13 [M+H]<+>.
Eksempel 241
( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- 4- roktahvdro- 4- f2- hvdroksvetvl)- 1. 3- diokso- 4. 7- epoksv- 2H-isoindol- 2- yl1- 1 - naftalenkarbonitril ( 241D)
A. 2-[2-[[(1,1 -dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]etyl]furan (241 A) 2-(2-hydroksyetyl)furan (1,00 g, 8,93 mmol, Eksempel 255A) ble løst i DMF ved 25°C og tilsatt imidazol (0,790 g, 11,61 mmol). TBSCI (1,35 g, 8,93 mmol) ble deretter tilsatt porsjonsvis i løpet av 5 minutter. Etter 2 timer ble reaksjonsblandingen helt over i dietyleter (300 mL) og vasket suksessivt med vann (1 x 100 mL), 1N HCI (1 x 100 mL) og saltvann (1 x 100 mL). De kombinerte organiske lagene ble deretter tørket over magnesiumsulfat og konsentrert i vakuum. Forbindelse 241A ble isolert en som klar olje (1,77 g) og ble omsatt videre uten rensing. HPLC: 100% ved 4,233 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 ml_/min, deteksjon ved 220 nm). B. (3aa,4B,7p,7aa)-4-[4-[2-[[(1,1 -dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]etyl]-1,3,3a,4,7,7a-heksahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril (241B) 4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1H-1-yl)-1-naftalenkarbonitril (0,721 g, 3,40 mmol) ble suspendert i benzen (5,0 mL) i et forseglet rør og tilsatt forbindelse 241A (1,00 g, 4,42 mmol). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 60°C i 16 timer og deretter avkjølt til 25°C. Benzenet ble fjernet i vakuum for å gi et gult faststoff. Råmaterialet ble renset ved hurtigkromatografi på silika under eluering med 1-5% aceton i kloroform for å gi 1,37 g av forbindelse 241B som et gult faststoff. NMR-forsøk bekreftet ekso-isomer-tilordningen. HPLC: 100% ved 4,030 og 4,110 min (atropisomerer) (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm). C. (3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-[[(1,1 -dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]etyl]-oktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1 - naftalenkarbonitril (241C)
Forbindelse 241B (0,500 g, 1,14 mmol) ble løst i etylacetat (40 mL) og tilsatt Pd/C (10% Pd, 0,200 g). Hydrogen ble deretter innført via en ballong. Etter 4 timer ble reaksjonsblandingen filtrert gjennom Celite, renset med etylacetat og konsentrert i vakuum for å gi et blekgult faststoff, som ble renset ved hurtigkromatografi på silikakgel under eluering med aceton/kloroform (0%-1,5%-3% aceton) for å gi forbindelse 241C (0,450 g,) som et gult skum.
D. (3aa,4B,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-(2-hydroksyetyl)-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1 -naftalenkarbonitril (241D)
Forbindelse 241C (0,283 g, 0,50 mmol) ble løst i en løsning av 2% 12N HCI i absolutt etanol (10 mL). Etter 1 time ble reaksjonen avbrutt med mettet vandig natriumbikarbonat, hvorpå blandingen ble ekstrahert med metylenklorid (4 x 20 mL). De kombinerte organiske lagene ble tørket over natriumsulfat og konsentrert i vakuum for å gi 0,211 g av forbindelse 241D som et hvitt faststoff. HPLC: 100% ved 2,14 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 363,45 [M+H]<+>.
Eksempel 242
( 3aa, 4B, 6B, 7B, 7aa)- 4- r4- r2-( 4- cvanofenoksv) etvnoktahvdro- 6- hvdroksv- 1, 3-diokso- 4, 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 1- naftalenkarbonitril ( 242C)
A. (3aa,4p,6p,7p,7aa)-4-[4-[2-[[(1,1 -dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]etyl]-oktahydro-6-hydroksy-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril (242A) Forbindelse 241B (1,00 g, 2,28 mmol) og Wilkinsons katalysator (0,105 g, 0,114 mmol) ble hurtig omrørt under vakuum ved 25°C i 1 time og deretter spylt med N2. THF (30 mL) ble deretter tilsatt etterfulgt av katekol-boran (0,487 mL, 4,57 mmol) etter at olefinet var fullstendig oppløst. Etter 1 time ble reaksjonsblandingen avkjølt til 0°C og tilsatt en pH 7,2 fosfatbuffer (33 mL) og deretter EtOH (13 mL) og H202(30% vandig løsning, 3,0 g). Etter 3 timer ved 0°C var reaksjonen ifølge LC fullført, og blandingen ble ekstrahert med metylenklorid (3 x 50 mL). De kombinerte organiske lagene ble vasket med en 1:1 blanding av 10% natriumsulfitt/1 N NaOH (50 mL) og én gang med saltvann (50 mL). Alle vandige faser ble kombinert og ekstrahert med metylenklorid (50 mL), og den organiske fase ble kombinert med ekstraksjonene ovenfor. Alle organiske lag ble deretter tørket over vannfritt natriumsulfat og deretter konsentrert i vakuum. Råmaterialet ble renset ved hurtigkromatografi på silika under eluering med 10-20% aceton i kloroform for å gi 0,634 g av forbindelse 242A som et hvitt skum. HPLC: 96% ved 3,797 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 493,13 [M+H]<+>. B. (3aa,4B,6p,7p,7aa)-4-[oktahydro-6-hydroksy-4-(2-hydroksyetyl)-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1 -naftalenkarbonitril (242B)
Forbindelse 242A (0,400 g, 0,813 mmol) ble løst i en løsning av 2% 12N HCI i absolutt etanol (10 mL). Etter 1 time ble reaksjonen avbrutt med mettet vandig natriumbikarbonat og blandingen ekstrahert med EtOAc (4 x 20 mL). De kombinerte organiske lagene ble tørket over natriumsulfat og konsentrert i vakuum for å gi 0,305 g av forbindelse 242B som et hvitt faststoff. HPLC: 90% ved 2,043 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 379,09 [M+H]<+>.
C. (3aa,4p,5p,7p,7aa)-4-[4-[2-(4-cyanofenoksy)etyl]oktahydro-6-hydroksy-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1 - naftalenkarbonitril (242C)
Til en løsning av trifenylfosfin (0,054 g, 0,207 mmol) i THF (2,0 mL) ble det tilsatt DBAD (0,048 g, 0,207 mmol). Etter 10 minutter ble 4-cyanofenol (0,025 g, 0,207 mmol) tilsatt. Etter ytterligere 10 minutter ble forbindelse 242B (0,050 g, 0,138 mmol) tilsatt. Etter 3 timer ved 25°C ble reaksjonsblandingen konsentrert i vakuum og renset ved preparativ TLC på silika under eluering med 25% aceton/kloroform for å gi 0,056 g av forbindelse 242C som et hvitt faststoff. HPLC: 90% ved 2,987 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre,
4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 480,10 [M+H]<+>.
Eksempel 243
r3aS-( 3aa. 4B. 5B. 7B. 7aa) M- roktahvdro- 5- hvdroksv- 7- f2- hvdroksvetvl)- 4- metvl-1, 3- diokso- 4, 7- epoksy- 2H- isoindol- 2- yl]- 1 - naftalenkarbonitril & r3aR- f3aa. 4B. 5B. 7B. 7aa) M- roktahvdro- 5- hvdroksv- 7-( 2- hvdroksvetvl)- 4- metvl-1, 3- diokso- 4, 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 1 - naftalenkarbonitril ( 243Pi & 243DM)
A. (3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-[[(1,1 -dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]etyl]-1,3,3a,4,7,7a-heksahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1 -naftalenkarbonitril (243A) 4-(2>5-dihydro-2,5-diokso-1H-1-yl)-1-naftalenkarbonitril (18,3 g, 68,7 mmol) ble tilsatt til en løsning av forbindelse 204A (26,6 g, 110,6 mmol) i benzen (75 mL) og oppvarmet til 60°C over natten. Etter avkjøling til romtemperatur ble reaksjonsblandingen konsentrert under redusert trykk. Residuet ble behandlet med MeOH (250 mL) under omrøring ved 0°C i 10 minutter. Det resulterende faststoff ble frafiltrert, vasket med kald MeOH (2x10 mL) og tørket for å gi 26,7 g (79,5%) av forbindelse 243A som et gult faststoff. HPLC-analyse av faststoffet ovenfor viste at det var 95% rent (HPLC-betingelser: 95% ved 2,48 min (Phenomenex-prime S5-C18 kolonne, 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% H3P04, deteksjon ved 220 nm)). Filtratet ble deretter konsentrert under redusert trykk og det resulterende faststoff kromatografert under eluering med 3% aceton/CHCI3for å gi ytterligere 4,36 g av forbindelse 243A (13%), hvilket ga et totalt sluttutbytte på 92,5%. B. (3aa,4B,5p,7p,7aa)-4-[7-[2-[[(1,1 -dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]etyl]-oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1 -naftalenkarbonitril (243B)
En blanding av 243A (10 g, 20,46 mmol) og RhCI(PPh3)3(0,947 mg,
1,02 mmol) ble evakuert og fylt med argon (3X). THF (200 mL) ble tilsatt og så snart alle stoffene var oppløst ble katekolboran (4,4 mL, 40,93 mmol) langsomt dråpevis tilsatt. Etterat produktdannelsen ifølge HPLC var opphørt, ble reaksjonsblandingen avkjølt til 0°C og reaksjonen avbrutt med fosfatbuffer (330 mL, pH 7,2), hvorpå EtOH (130 mL) og H202(300 mL, 30% vandig løsning) ble tilsatt. Etter at boronatet var forbrukt ble blandingen ekstrahert med CH2CI2(3X) og de kombinerte organiske lagene vasket med 1N NaOH, 10% vandig NaHS03(1:1, 1X)og saltvann (1X). De kombinerte vaskevæskene ble ekstrahert med CH2CI2(1X) og de kombinerte organiske lagene tørket over Na2S04. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel
under eluering med 10% til 30% aceton/CHCb-gradient over 25 minutter ga 7,1 g (68%) av 243B som et lysegult faststoff. HPLC-betingelser: 98% ved 3,82 min (Phenomenex-prime S5-C18 kolonne 4,6 x 50 mm, gradienteluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% H3P04, deteksjon ved 220 nm.
C. [3aR-(3aa,4p,5B,7p,7aa)]-4-[7-[2-[[(1,1 -dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]-etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1 -naftalenkarbonitril & [3aS-(3aa,4p,5p,7p,7aa)]-4-[7-[2-[[(1,1-dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1 -naftalen-
karbonitril (243Ci & 243CM)
Den racemiske forbindelse 243B ble separert i individuelle enantiomerer ved kiral normalfase væskekromatografi. En Chiralpak OD kolonne (50 x 500 mm) ble benyttet under eluering med 13% EtOH/heksaner over 99 minutter ved 50 mL/min, deteksjon ved 220 nm. Den hurtigere eluerende isomerforbindelse 243Ci hadde en retensjonstid = 45 min og den langsommere eluerende isomerforbindelse 243CN hadde en retensjonstid = 66 min.
D. [3aS-(3aa,4p,5p,7p,7aa)]-4-[oktahydro-5-hydroksy-7-(2-hydroksy-etyl)-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1 - naftalenkarbonitril & [3aR-(3aa,4p,5p,7p,7aa)]-4-[oktahydro-5-hydroksy-7-(2-hydroksyetyl)-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril (243Di & 243DM)
Forbindelse 243Ci (0,84 g, 2,14 mmol) ble løst i 2% 12N HCI/EtOH (20 mL), omrørt i 5 minutter og konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 5-10% MeOH/CH2Cl2ga 0,57 g (88%) av 243DL Forbindelse 243Di som kom fra den hurtigere eluerende isomer (243Ci) ble funnet å være 99,7% ee ifølge analytisk kiral normalfase kromatografi. HPLC- betingelser: 99,7% ved 2,17 min (Chiracel OJ 44,6 x 250 mm, 10 mikron, 40°C, isokratisk 80% heptan/20% EtOH/MeOH (1:1), 1,0 mL/min, deteksjon ved 288 nm).
Forbindelse 243CN (0,86 g, 2,19 mmol) ble løst i 2% 12N HCI/EtOH (20 mL), omrørt i 5 minutter og konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 5-10% MeOH/ChfeCbga 0,60 g (90%) av 243DH. Forbindelse 243DM som kom fra den langsommere eluerende isomer (243CN) ble funnet å ha 87,1% ee ved analytisk kiral normalfase kromatografi. HPLC-betingelser: 87,1% ved 18,4 min (Chiralcel OJ 44,6 x 250 mm, 10 mikron, 40°C, isokratisk 80% heptan/20% EtOH/MeOH (1:1), 1,0 mL/min, deteksjon ved 288 nm).
Den absolutte konformasjon for forbindelsene 243Di & 243DM ble ikke bestemt. For enkelthet angående nomenklatur er forbindelse 243Di her angitt å ha en «S»-konfigurasjon og forbindelse 243DM å ha en «R»-konfigurasjon. Enantiomert rene produkter avledet fra forbindelse 243Di er her angitt å ha en «S»-konfigurasjon og enantiomert rene produkter avledet fra forbindelse 243DM angitt å ha en «R»-konfigurasjon.
Eksempel 244
r3aS-( 3aa, 4B, 5B, 7B, 7aa) 1- 4- r7- r2-( 4- cvanofenoksv) etvnoktahvdro- 5- hvdroksv- 4-metvl- 1. 3- diokso- 4. 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 1 - naftalenkarbonitril & r3aR-( 3aa, 4B, 5B, 7B, 7aa) 1- 4- r7- r2-( 4- cvanofenoksv)- etvnoktahvdro- 5- hvdroksv- 4-metyl- 1, 3- diokso- 4, 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 1 - naftalenkarbonitril
( 244i & 244M)
DBAD (26 mg, 0,115 mmol) ble tilsatt til en løsning av PPh3(30 mg,
0,115 mmol) i THF (0,65 mL). Etter omrøring i 10 minutter ble 4-cyanofenol (13,6 mg, 0,115 mmol) tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt i ytterligere 5 minutter. Forbindelse 243Di (30 mg, 0,076 mmol) ble tilsatt og blandingen omrørt ved rom-
temperatur i 1 time. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 30% aceton/70% CHCI3ga 23,1 mg (0,047 mmol, 61,7%) av forbindelse 244i. HPLC-betingelser: 95% ved 3,06 min (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, gradienteluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% H3P04, deteksjon ved 220 nm).
MS (ES): m/z 494,09 [M+H]<+>. [a]D= 53,30°, c = 4,5 mg/cm<3>i THF, ca. 589 nm)
DBAD (26 mg, 0,115 mmol) ble tilsatt til en løsning av PPh3(30 mg,
0,115 mmol) i THF (0,65 mL). Etter omrøring i 10 minutter ble 4-cyanofenol (13,6 mg, 0,115 mmol) tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt i ytterligere 5 minutter. Forbindelse 243DM (30 mg, 0,076 mmol) ble tilsatt og blandingen omrørt ved romtemperatur i 1 time. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 30% aceton/70% CHCI3ga 20,3 mg (0,041 mmol, 54,2%) av forbindelse 244ii. HPLC-betingelser: 90% ved 3,07 min (YMC S5 ODS 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% H3PO4, deteksjon ved 220 nm). MS (ES): m/z 494,09 [M+H]<+>. [a]D= -42,87°, c = 6,6 mg/cm3 i THF, ca. 589 nm).
Eksempel 245
( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- 4- r4- r2-( 4- cvanofenoksv) etvn- 7- etvloktahvdro- 1, 3- diokso- 4, 7-epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 1 - naftalenkarbonitril ( 245D)
A. 2-etyl-5-(2-hydroksyetyl)furan (245A)
n-BuLi (2,5M i heksan, 4,4 mL, 11 mmol) ble tilsatt til en løsning av 2-etylfuran (1,05 mL, 10 mmol) i THF (10 mL) ved -25°C. Løsningen ble oppvarmet til romtemperatur og omrørt i 3 timer. Etylenoksyd (0,75 mL) ble tilsatt ved -78°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 0,5 timer ved -15°C og over natten ved rom-
temperatur. Vandig mettet NH4CI ble tilsatt og blandingen ekstrahert med eter (3X). De kombinerte ekstraktene ble vasket med vann (1X) og saltvann (1X) og tørket over Na2S04. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 30% EtOAc/70% heksan ga 1,12 g (8,02 mmol, 80,2%) av forbindelse 245A som en gul olje.
B. (3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-etyl-1,3,3a,4,7,7a-heksahydro-7-(2-hydroksyetyl)-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1 -naftalenkarbonitril (245B)
En løsning av forbindelse 245A (280 mg, 2,00 mmol) og 4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1H-1-yl)-1-naftalenkarbonitril (496 mg, 2,00 mmol) i benzen (2 mL) ble omrørt ved 60°C i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk. Det gule faststoffet, forbindelse 245B, ble benyttet direkte i det neste trinn.
C. (3aa,4B,7p,7aa)-4-[4-etyloktahydro-7-(2-hydroksyetyl)-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1 -naftalenkarbonitril (245C)
En blanding av forbindelse 245B (764 mg, 1,97 mmol) og 10% Pd/C (115 mg, katalytisk) i EtOAc (36 mL) ble omrørt under hydrogenatmosfære ved romtemperatur i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom Celite og konsentrert under redusert trykk for å gi 779 mg av den rå forbindelse 245C. Rensing av dette råproduktet ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 70% EtOAc/30% heksan ga 235 mg (0,6 mmol, 30,1%) av forbindelse 245C. HPLC-betingelser: 99% ved 2,84 min (YMC S5 ODS 4,6 x 50 mm, gradienteluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% H3PO4, deteksjon ved 220 nm).
MS (ES): m/z 391,12 [M+H]<+>.
D. (3aa,4B,7p,7aa)-4-[4-[2-(4-cyanofenoksy)etyl]-7-etylotahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril (245D)
DBAD (44,2 mg, 0,192 mmol) ble tilsatt til en løsning av PPh3(50,4 mg, 0,192 mmol) i THF (1 mL). Etter omrøring i 10 minutter ble 4-cyanofenol (23 mg, 0,192 mmol) tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt i ytterligere 5 minutter. Forbindelse 245C (50 mg, 0,128 mmol) ble tilsatt og blandingen omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 40% EtOAc/60% heksan ga 43 mg (0,087 mmol, 68,4%) av forbindelse 245D som et hvitt faststoff. HPLC-betingelser: 99% ved 3,65 min (YMC S5 ODS 4,6 x 50 mm, gradienteluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% H3PO4, deteksjon ved 220 nm). MS (ES): m/z 492,16 [M+H]<+>.
Eksempel 246
( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- 4- r2-( acetvloksv) etvn- 2-( 4- cvano- 1- naftalenvl)-heksahvdro- 7- metvl- 4. 7- epoksv- 1 H- isoindol- 1, 3( 2H)- dion ( 246)
Forbindelse 223B (0,100 g, 0,279 mmol) ble løst i metylenklorid (3,0 mL) ved 25°C og tilsatt pyridin (0,071 mL, 0,837 mmol) og 4-DMAP (1,0 mg). Eddiksyre-anhydrid (0,053 mL, 0,559 mmol) ble deretter tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt i 20 timer ved 25°C. Etter 20 timer ble mettet vandig natriumbikarbonat tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt i 30 minutter. Blandingen ble deretter ekstrahert med metylenklorid (2 x 20 mL). De organiske lagene ble deretter vasket én gang med 1N HCI (10 mL) og så tørket over vannfritt natriumsulfat. Etter konsentrering i vakuum ble råmaterialet renset ved preparativ TLC på silika under eluering med 12% aceton i kloroform for å gi 0,073 g av forbindelse 246 som et gult skum. HPLC: 95% ved 2,837 og 3,027 min (atropisomerer) (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 441,10 [M+Na]<+.>
Referanseeksempel 247
( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- 4- roktahvdro- 4- metvl- 1. 3- diokso- 7-( 2- oksoetvl)- 4. 7-epoksv- 2H- isoindol- 2- vH- 1 - naftalenkarbonitril ( 247)
Oksalylklorid (2,OM løsning, 1,73 mL, 3,5 mmol) ble tilsatt til tørr metylenklorid (10 mL) og avkjølt til -78°C. DMSO (0,283 mL, 3,99 mmol) ble deretter tilsatt dråpevis under utvikling av gass. Etter 15 minutter ble forbindelse 223B (1,00 g, 2,66 mmol) tilsatt i metylenklorid (10 mL). Etter 15 minutter ble TEA (1,10 mL, 7,98 mmol) tilsatt og reaksjonsblandingen langsomt oppvarmet til 25°C. Vann (30 mL) ble deretter tilsatt og blandingen fortynnet med metylenklorid (100 mL). De organiske lagene ble vasket én gang med 1N HCI (30 mL), én gang med vann (30 mL) og én gang med saltvann (30 mL) og deretter tørket over vannfritt natriumsulfat. Råproduktet ble isolert ved konsentrering i vakuum for å gi forbindelse 247 som et orange skum. Råforbindelse 247 ble benyttet direkte i den neste omsetning. HPLC: 100% ved 2,70 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm). MS (ES): m/z 483,65 [M+H]<+>.
Referanseeksempel 248
r3aa. 4B( E). 7B. 7aa1- 4- r4- r3-( 4- cvanofenvl)- 2- propenvnoktahvdro- 7-metvl- 1, 3- diokso- 4, 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vll- 1 - naftalenkarbonitril & r3aa. 4B( Z). 7B. 7aa1- 4- r4- r3-( 4- cvanofenvl)- 2- propenvnoktahvdro- 7-metyl- 1, 3- diokso- 4, 7- epoksy- 2H- isoindol- 2- yl]- 1 - naftalenkarbonitril
( 248i & 248M)
(4-cyanobenzyl)-trifenylfosfoniumklorid (0,072 g, 0,174 mmol) ble suspendert i THF (2,0 mL) og avkjølt til 0°C. n-BuLi (1,6M løsning, 0,092 mL, 0,147 mmol) ble deretter tilsatt dråpevis, hvilket resulterte i en homogen løsning. Løsningen ble oppvarmet til 25°C i 15 minutter og deretter avkjølt til 0°C. Forbindelse 247 (0,050 g, 0,134 mmol) ble deretter tilsatt i THF. Etter 1 time ble reaksjonen avbrutt med mettet vandig ammoniumklorid, hvorpå blandingen ble ekstrahert med metylenklorid (3 x 20 mL). De kombinerte organiske lagene ble ble tørket over vannfritt natriumsulfat og deretter konsentrert i vakuum. Råmaterialet ble renset ved preparativ TLC under eluering med 5% aceton i kloroform for å gi 0,010 g av en blanding av forbindelse 248i & 248i i som et hvitt faststoff. En 1:1 blanding av E- og Z-olefin-isomerer blekarakterisert vedNMR-spektroskopi. HPLC: 100% ved 3,517 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4ml_/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 474,2 [M+H]<+>. Eksempel 249 ( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- 4- r4- r3-( 4- cvanofenyl) propvnoktahvdro- 7- metvl- 1, 3-diokso- 4. 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 1- naftalenkarbonitril ( 249)
Blandingen av forbindelsene 248i & 248M (0,008 g, 0,017 mmol) ble løst i EtOH (3,0 mL) og tilsatt Pd/C (10% Pd, 0,008 g). H2ble deretter innført via en ballong. Etter 18 timer ble reaksjonsblandingen filtrert gjennom Celite under eluering med EtOAc, etterfulgt av konsentrering i vakuum. Forbindelse 249 ble isolert som et hvitt faststoff (0,007 g). HPLC: 90% ved 3,520 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/ min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 476,13
[M+H]<+>.
Eksempel 250
( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- 4- r4- r2- r( 6- klor- 1, 2- benzisoksazol- 3- vl) oksv1etvnoktahvdro- 7- metvl- 1, 3- diokso- 4, 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 1 -
naftalenkarbonitril ( 250)
Til en løsning av PPh3(52 mg, 0,20 mmol) i 0,5 mL THF ble det tilsatt DBAD (46 mg, 0,20 mmol) som én fast porsjon. Den resulterende blanding ble omrørt i 10 minutter før tilsetning av 6-klor-3-hydroksy-1,2-benzisoksazol (34 mg, 0,20 mmol). Omrøring ble fortsatt i 10 minutter før en løsning av forbindelse 223B (50 mg,
0,13 mmol) i 0,5 mL THF ble innført med en kanyle. Den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 24 timer, konsentrert og renset ved preparativ omvendt-fase HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm kolonne; eluering i 10 minutter med 30-100% vandig MeOH inneholdende 0,1% TFA, 20 mL/min) for å gi et hvitt faststoff. De oppnådde faststoffene ble løst i CH2CI2, vasket med mettet NaHC03-løsning, tørket over Na2S04og konsentrert for å gi 50 mg (71%) av forbindelse 250 som en farveløs olje. HPLC: 26% ved 3,89 min og 74% ved 4,02 min (blanding av atropisomerer, retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm Ballistic, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% H3PO4, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 528,4 [M+H]<+>.
Referanseeksempel 251
( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- 4- roktahvdro- 4- metvl- 7- r2- r( 6- nitro- 1H- indazol- 3-vDoksvletvll- l , 3- diokso- 4, 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 1 -
naftalenkarbonitril ( 251)
Til en løsning av forbindelse 223B (50 mg, 0,13 mmol) i toluen (1 mL) ble det tilsatt ADDP (50 mg, 0,20 mmol), 6-nitro-3-indazolinon (36 mg, 0,20 mmol) og n-Bu3P (50^L, 0,2 mmol). Den resulterene blanding ble oppvarmet til 80°C i 24 timer, konsentrert og renset ved en kombinasjon av preparativ omvendt-fase HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm kolonne; eluering i 10 minutter med 30-100% vandig MeOH inneholdende 0,1% TFA, 20 mL/min) og hurtigkromatografi (silikagel, 25% aceton i CHCI3) for å gi 17 mg (25%) av forbindelse 251 som et gult faststoff. HPLC: 24% ved 3,60 min og 76% ved 3,74 min (blanding av atropisomerer, retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm Ballistic, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% H3P04, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 537,6
[M+H]<+>.
Eksempel 252
r3aS-( 3aa. 4B. 5B. 7B. 7aa) 1- 4- r7- r2-( 1. 2- benzisoksazol- 3- vloksv)-etvlloktahvdro- 5- hvdroksv- 4- metvl- 1. 3- diokso- 4. 7- epoksv-2H- isoindol- 2- vl1- 1 - naftalenkarbonitril ( 252)
PPh3(47 mg, 0,18 mmol), DBAD (41 mg, 0,18 mmol), 3-hydroksy-1,2-benzisoksazol (24 mg, 0,18 mmol) og forbindelse 243Di (35 mg, 0,09 mmol) ble omsatt i henhold til fremgangsmåten angitt for forbindelse 250. Rensing ble oppnådd ved omvendt-fase HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm kolonne; eluering i 10 minutter med 30-100% vandig MeOH inneholdende 0,1% TFA ved 20 mL/min) for å gi et hvitt faststoff. Det oppnådde faststoff ble løst i CH2CI2, vasket med mettet NaHC03-løsning, tørket over Na2S04og konsentrert, hvilket ga 29 mg (64%) av forbindelse 252 som en farveløs olje. HPLC: 96% ved 3,29 min (blanding av atropisomerer, retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm Ballistic, eluering i 4 minutter med 0-100% vandig metanol inneholdende 0,2% H3P04, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 510,2 [M+H]<+>. Referanseeksempel 253 r3aR-( 3aa. 4B. 5B. 7B. 7aa) 1- 4- r7- r2- f1. 2- benzisoksazol- 3- vloksv)-etvlloktahvdro- 5- hvdroksy- 4- metyl- 1, 3- diokso- 4, 7- epoksy-2H- isoindol- 2- vl1- 1 - naftalenkarbonitril ( 253)
PPh3(47 mg, 0,18 mmol), DBAD (41 mg, 0,18 mmol), 3-hydroksy-1,2-benzisoksazol (24 mg, 0,18 mmol) og forbindelse 243DM (35 mg, 0,09 mmol) ble
omsatt i henhold til fremgangsmåten angitt for forbindelse 250. Rensing ble oppnådd ved omvendt-fase HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm kolonne; eluering i 10 minutter med 30-100% vandig MeOH inneholdende 0,1% TFA ved 20 mL/min) for å gi et hvitt faststoff. Det oppnådde faststoff ble løst i CH2CI2, vasket med mettet NaHC03-løsning, tørket over Na2S04og konsentrert, hvilket ga 23 mg (51%) av forbindelse 253 som en farveløs olje. HPLC: 95% ved 3,29 min (blanding av atropisomerer, retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm Ballistic, eluering i 4 minutter med
0-100% vandig metanol inneholdende 0,2% H3PO4, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 510,4 [M+H]<+>.
Eksempel 254
f3aa. 4B. 5B. 7B. 7aa)- 4- foktahvdro- 5- hvdroksv- 4. 7- dimetvl- 1. 3- diokso-4. 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vl)- 2-( trifluormetvl) benzonitril & ( 3aa. 4B. 5B. 7B. 7aa)-4- foktahvdro- 5- hvdroksv- 4. 7- dimetvl- 1. 3- diokso- 4. 7- epoksv-2H- isoindol- 2- vl)- 2- ftrifluormetvl) benzonitril ( 254i & 254M)
Racemisk forbindelse 221B ble separert i dens enantiomerer ved preparativ kiral HPLC (CHIRALPAK AD 5 x 50 cm kolonne; eluering med 20% MeOH/EtOH (1:1) i heptan (isokratisk) med 50 mL/min) for å gi den hurtigere eluerende forbindelse 254i (kiral HPLC: 10,02 min; CHIRALPAK AD 4,6 x 250 mm kolonne; eluering med 20% MeOH/EtOH (1:1) i heptan ved 1 mL/min) og den langsommere eluerende 254N (kiral HPLC: 14,74 min; CHIRALPAK AD 4,6 x 250 mm kolonne; eluering med 20% MeOH/EtOH (1:1) i heptan ved 1 mL/min).
Eksempel 255
( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- 2-( 4- cvano- 1- naftalenvl) oktahvdro- 1. 3- diokso- 7- r2-fenvlmetoksv) etvn- 4. 7- epoksv- 4H- isoindol- 4- propannitril &
( 3aa, 4a, 7g, 7aa)- 2-( 4- cyano- 1 - naftalenvl) oktahvdro- 1, 3- diokso- 7- r2-( fenvlmetoksv) etvll- 4. 7- epoksv- 4H- isoindol- 4-propannitril ( 255Hi & 255HM)
A. 2-(2-hydroksyetyl)furan (255A) 2-(2-hydroksyetyl)furan ble fremstillet i henhold til den følgende referanse: Harmata, M. et al., J. Org. Chem. 60, 5077-5092 (1995). n-BuLi (2,5M i heksan, 44 mL, 110 mmol) ble tilsatt til en løsning av furan (8 mL, 110 mmol) i 100 mL THF ved -78°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 0°C i 4 timer og deretter tilsatt etylenoksyd (7,5 mL) ved -78°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved -15°C i 1 time og deretter over natten ved romtemperatur. Reaksjonen ble avbrutt med mettet NH4CI, hvorpå blandingen ble ekstrahert med eter (3X). De kombinerte ekstraktene ble vasket med vann (1X) og saltvann (1X). Eterløsningen ble tørket over Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 40% EtOAc/60% heksan ga 5,4 g (48,2 mmol, 43,8%) av forbindelse 255A som en lysebrun olje.
B. 2-[2-[[(1,1 -dimetyetyl)dimetysilyl)oksy]etyl]furan (255B)
Imidazol (3,65 g, 53,6 mmol) og TBSCI (6,47 g, 42,9 mmol) ble tilsatt til løsningen av forbindelse 255A (4,00 g, 35,7 mmol) i 50 mL DMF. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer og reaksjonsblandingen deretter helt over i eter. Eterløsningen ble vasket med vann (1X), 1N HCI (1X), vann (1X) og saltvann (1X). Det organiske lag ble tørket over Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 30% CH2Cl2/70% heksan ga 7,4 g (32,7 mmol, 91,7%) av 255B som en farveløs olje.
C. 2-[2-[[(1,1 -dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]etyl]-5-(2-hydroksyetyl)-furan (255C)
f-BuLi (1,2M i pentan, 10 mL, 16,99 mmol) ble dråpevis tilsatt til en omrørt løsning av 255B (3,49 g, 15,44 mmol) i 13 mL THF ved -78°C. Blandingen ble omrørt i ytterligere 4 timer ved 0°C. Etylenoksyd (1,05 mL) ble tilsatt til reaksjonsløsningen ved -78°C. Blandingen ble oppvarmet til romtemperatur og omrørt over natten. Vandig mettet NH4CI ble tilsatt og det meste av THF fjernet under redusert trykk. Blandingen ble ekstrahert med eter (3X) og de kombinerte organiske lagene vasket med vann (1X) og saltvann (1X) og tørket over IV^SCv Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 5% EtOAc/95% CH2CI2ga 2,8 g (10,4 mmol, 67%) av forbindelse 255C som en gul olje. D. 2-[2-[[(1,1 -dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]etyl]-5-[2-(fenylmetoksy)etyl]furan (255D)
Alkoholen 255C (1,00 g, 3,7 mmol) i 12 mL THF ble behandlet med 60% NaH (177,8 mg, 4,44 mmol), benzylbromid (0,53 mL, 4,44 mmol) og tetrabutyl-ammoniumjodid (50 mg, 5%) i 3 timer ved romtemperatur. Vann ble tilsatt og blandingen ekstrahert med EtOAc (3X). De kombinerte ekstraktene ble vasket med vann (1X) og saltvann (1X) og tørket over Na2S04. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 20% heksan/80% CH2CI2ga 1,10 g (3,05 mmol, 82,6%) av forbindelse 255D som en gul olje.
E. 2-(2-hydroksyetyl)-5-[2-(fenylmetoksy)etyl]furan (255E)
Tetrabutylammoniumfluorid (1,0M i THF, 3,06 mL, 3,06 mmol) ble tilsatt til løsningen av forbindelse 255D (1,1 g, 3,06 mmol) i 10 mL THF ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 10 minutter, hvorpå reaksjonen ble avbrutt med mettet NH4CI, og blandingen ekstrahert med eter (3X). De kombinerte ekstraktene ble tørket over Na2S04. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 10% EtOAc/90% CH2CI2ga 750 mg (3,05 mmol, 99,6%) av forbindelse 255E som en lysegul olje.
F. 5-[2-(fenylmetoksy)etyl]furan-2-propannitril (255F)
DEAD (1,285 mL, 8,17 mmol) ble tilsatt til en omrørt løsning av Ph3P (2,14 g, 8,17 mmol) i 12 mL tørr THF ved 0°C. Løsningen ble omrørt i 30 minutter ved romtemperatur og tilsatt forbindelse 255E (670 mg, 2,72 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 15 minutter og tilsatt aceton-cyanohydrin (0,745 mL, 8,17 mmol) ved -15°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 30 min ved -15°C og deretter ved romtemperatur over natten. Blandingen ble deretter konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 100% CH2CI2ga 180 mg (0,705 mmol, 26%) av forbindelse 255F som en farveløs olje.
G. (3aa,4B,7p,7aa)-2-(4-cyano-1 -naftalenyl)-1,2,3,3a,7,7a-heksahydro-1,3-diokso-7-[2-(fenylmetoksy)etyl]-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-propannitril (255G)
En løsning av forbindelse 255F (180 mg, 0,706 mmol) og 4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1H-1-yl)-1-naftalenkarbonitril (263 mg, 1,06 mmol) i CH2CI2(3 mL) ble omrørt ved romtemperatur i 3 dager. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 5% EtOAc/CH2CI2ga 318 mg (0,63 mmol, 89,6%) av forbindelse 255G som et lysegrått faststoff som ble benyttet direkte i det neste trinn.
H. (3aa,4(3,7p,7aa)-2-(4-cyano-1 -naftalenyl)oktahydro-1,3-diokso-7-[2-(fenylmetoksy)etyl]-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-propannitril &
(3aa,4a,7a,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)oktahydro-1,3-diokso-7-[2-(fenylmetoksy)etyl]-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-propan-
nitril (255Hi & 255HM)
En blanding av forbindelse 255G (318 mg, 0,63 mmol) og 10% Pd/C (64 mg) i EtOH (10 mL) og EtOAc (5 mL) ble omrørt under en hydrogenatmosfære ved romtemperatur over natten. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom Celite og konsentrert under redusert trykk for å gi 320 mg av råforbindelsene 255Hi & 255HN. Rensing av 25 mg av dette råprodukt ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 55% EtOAc/heksan ga 6,5 mg (0,013 mmol, 26% basert på 25 mg)) av forbindelse 255Hi & 8,1 mg (0,016 mmol, 32,4% (basert på 25 mg)) av forbindelse 255HN. Forbindelse 255Hi: HPLC-betingelser: 98% ved 3,57 min (YMC S5 ODS
4,6 x 50 mm, gradienteluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% H3PO4, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 506,15 [M+H]<+>. Forbindelse 255HN: HPLC-betingelser: 98% ved 3,51 min (YMC S5 ODS 4,6 x 50 mm, gradienteluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% H3PO4, deteksjon ved 220 nm). MS (ES): m/z 506,15 [M+H]<+>.
Eksempel 256
( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- 2-( 4- cvano- 1 - naftalenvl) oktahvdro- 7-( 2-hvdroksvetvl)- 1. 3- diokso- 4. 7- epoksv- 4H- isoindol- 4-
propannitril & f3aa. 4a. 7a. 7aa)- 2-( 4- cvano- 1- naftalenvl)-oktahvdro- 7-( 2- hvdroksvetvl)- 1, 3- diokso- 4, 7- epoksv- 4H-isoindol- 4- propannitril ( 256i & 256M)
En blanding av forbindelsene 255Hi & 255HN (200 mg, 0,396 mmol) og PdCI2(8,4 mg, katalytisk) i EtOH (1 mL) og EtOAc (3 mL) ble omrørt under hydrogenatmosfære (2 atm.) ved romtemperatur over natten. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom Celite og konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 5% MeOH/CH2CI2etterfulgt av en andre kolonne under eluering med 100% EtOAc ga 28,9 mg (0,0696 mmol, 17,6%) av forbindelse 256M og 26,5 mg (0,0639 mmol, 16,1%) av forbindelse 256i. Forbindelse 256ii: HPLC-betingelser: 90% ved 2,44 min (YMC S5 ODS 4,6 x 50 mm, gradienteluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% H3PO4, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 416,11 [M+H]<+>. Forbindelse 256i: HPLC-betingelser: 99% ved 2,47 min (YMC S5 ODS 4,6 x 50 mm, gradienteluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% H3PO4, deteksjon ved 220 nm),
MS (ES): m/z 416,11 [M+H]<+>.
Eksempel 257
( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- 2- f4- cvano- 1- naftalenvl)- 7- r2- f4- fluorfenoksv) etvlloktahvdro- 1. 3- diokso- 4. 7- epoksv- 4H-isoindol- 4- propannitril ( 257)
DBAD (15 mg, 0,065 mmol) ble tilsatt til en løsning av PPh3(17 mg,
0,065 mmol) i THF (0,3 mL). Etter omrøring i 10 minutter ble 4-fluorfenol (7,33 mg, 0,065 mmol) tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt i 5 minutter til. Forbindelse 256i (18,1 mg, 0,044 mmol) ble tilsatt og blandingen omrørt ved romtemperatur i 3 timer.
Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 60% EtOAc/30% heksan ga 5,9 mg (0,0116 mmol, 26,34%) av forbindelse 257. HPLC-betingelser: 98% ved 3,59 min (YMC S5 ODS 4,6 x 50 mm, gradienteluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% H3P04, deteksjon ved 220 nm). MS (ES): m/z 510,14
[M+H]<+>.
Eksempel 258
( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- 2-( 7- klor- 2, 1, 3- benzoksadiazol- 4- yl)- heksahvdro- 4, 7-dimetvl- 4, 7- epoksv- 1 H- isoindol- 1. 3( 2H)- dion ( 258)
A. 4-amino-7-klor-2,1,3-benzoksadiazol (258A)
En løsning av 1,0 g (5,02 mmol) 4-klor-7-nitrobenzofuran i 20 mL AcOH,
10 mL EtOAc og 2 mL H20 ble oppvarmet til 50°C og behandlet med jernpulver (1,4 g, 251 mmol). Blandingen ble oppvarmet til 80°C i 30 minutter og deretter avkjølt til romtemperatur. Blandingen ble filtrert gjennom Celite under eluering med EtOAc. Filtratet ble vasket med mettet vandig NaHC03, tørket over MgS04og konsentrert for å gi forbindelse 258A (0,80 g, 94%) som et rødt faststoff. B. (3aa,4B,7p,7aa)-2-(7-klor-2,1,3-benzoksadiazol-4-yl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (258B) Forbindelse 258A (42 mg, 0,25 mmol) ble omsatt i et forseglet rør med forbindelse 20A (73,5 mg, 0,375 mmol), MgS04(75 mg, 0,625 mmol) og Et3N (170^L, 1,25 mmol) i 250^L toluen i henhold til fremgangsmåten ovenfor beskrevet i Eksempel 208C for etter rensing ved preparativ omvendt-fase HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm eluering i 12 minutter med 30-100% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 20 mL/min) å gi 23 mg (26%) av forbindelse 258B som et gult faststoff. HPLC: 97,6% ved 2,87 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (DCI): m/z 347,9 [M]<+>. Eksempel 259 ( 3aa, 4BJBJaa)- 2-( 7- klor- 2- metyl- 4- benzofuranvl) heksahvdro-4. 7- dimetvl- 4. 7- epoksv- 1 H- isoindol- 1. 3( 2H)- dion ( 259)
7-klor-2-metyl-4-benzofuranamin (38 mg, 0,25 mmol, fremstillet i henhold til fremgangsmåten beskrevet av Enomoto & Takemura i EP 0476697 A1) ble omsatt i et forseglet rør med forbindelse 20A (73,5 mg, 0,375 mmol), MgS04(75 mg, 0,625 mmol) og Et3N (170^L, 1,25 mmol) i 250^L toluen i henhold til fremgangsmåten beskrevet i Eksempel 208C for etter rensing ved preparativ omvendt-fase HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm eluering i 12 minutter med 30-100% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 20 mL/min) å gi 42 mg (47%) av forbindelse 259 som et hvitt faststoff. HPLC: 98% ved 3,45 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (DCI): m/z 359,9
[M]<+>.
Eksempel 260
( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- 2-( 7- klor- 2- metvlbenzorb1tiofen- 4- vl)- heksahvdro-4. 7- dimetvl- 4. 7- epoksv- 1 H- isoindol- 1, 3( 2H)- dion ( 260)
A. 1-klor-2-(2-klor-allylsulfanyl)-4-nitrobenzen (260A)
En løsning av 2-klor-5-nitro-benzentiol (1,0 g, 5,27 mmol, fremstillet i henhold til fremgangsmåten beskrevet av Still er al Synth. Comm. 13, 1181 (1983)) i 15 mL DMF ble behandlet med 2,3-diklorpropen (693^L, 7,52 mmol) og K2C03(433 mg, 3,13 mmol). Blandingen ble oppvarmet til 80°C i 2 timer og fikk deretter avkjøles til romtemperatur. EtOAc (200 mL) og H20 (100 mL) ble tilsatt. Den organiske fase ble vasket med H20 (2 x 250 mL), mettet vandig NaCI (100 mL), tørket over MgS04og konsentrert. Råmaterialet ble renset ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 20% EtOAc i heksaner for å gi forbindelse 260A (1,09 g, 89%) som en orange olje.
B. 4-amino-7-klor-2-metylbenzo[b]tiofen (260B)
En løsning av 1,09 g (4,67 mmol) av forbindelse 260A i 20 mL AcOH med
10 mL EtOAc og 2 mL H20, ble oppvarmet til 80°C og behandlet med jernpulver (1,3 g, 23,4 mmol). Blandingen ble oppvarmet til 80°C i 40 minutter og fikk deretter avkjøles til romtemperatur. Blandingen ble filtrert gjennom Celite under eluering med EtOAc. Filtratet ble vasket med mettet vandig NaHC03, tørket over MgS04og konsentrert i vakuum. N,N-dietylanilin (10 mL) ble tilsatt og reaksjonsblandingen oppvarmet til 215°C i 6 timer. Etter avkjøling til romtemperatur ble 1N vandig HCI (20 mL) tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Blandingen ble ekstrahert med EtOAc (3 x 30 mL). Den organiske fase ble vasket med mettet vandig NaHC03, tørket over MgS04og konsentrert. Råmaterialet ble renset ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 25% EtOAc i heksaner for å gi forbindelse 260B (320 mg, 35%) som et beige faststoff.
C. (3aa,4B,7p,7aa)-2-(7-klor-2-metylbenzo[b]tiofen-4-yl)-heksahydro-
4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (260C)
Forbindelse 260B (49 mg, 0,25 mmol) ble omsatt i et forseglet rør med forbindelse 20A (73,5 mg, 0,38 mmol), MgS04(75 mg, 0,63 mmol) og Et3N (170^L, 1,25 mmol) i 250 \ iL toluen i henhold til fremgangsmåten beskrevet i Eksempel 208C for etter rensing ved preparativ omvendt-fase HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm eluering i 12 minutter med 30-100% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA,
20 mL/min) å gi 28 mg (30%) av forbindelse 260C som et blekgult faststoff. HPLC: 96% ved 3,18 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (DCI): m/z 376,0 [M]<+>. Referanseeksempel 261 r3aa. 4B( E). 7B. 7aal- 4- r2-( 4- cvano- 1 - naftalenvl) oktahvdro- 7- metvl- 1. 3- diokso- 4, 7- epoksv- 4H- isoindol- 4- vl]- 2- butensvre- fenylmetvlester ( 261)
Forbindelse 247 (0,500 g, 0,134 mmol) ble løst i THF (20 mL) og tilsatt benzyl(trifenylfosforanyliden) (0,55 g, 0,134 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 67°C i 2 timer og deretter konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på Si02under eluering med 5% aceton/95% CHCI3ga 0,65 g av forbindelse 261 som et gult faststoff. HPLC: 99% ved 3,717 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm),
MS (ES): m/z 507,1 [M+H]<+>.
Referanseeksempel 262
( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- 2-( 4- cvano- 1 - naftalenyl) oktahvdro- 7- metvl- 1. 3-diokso- 4. 7- epoksv- 4H- isoindol- 4- butansvre ( 262)
Forbindelse 261 (0,60 g, 1,19 mmol) ble løst i EtOH/EtOAc (5 mL/5 mL) og tilsatt 10% Pd/C (0,30 g). Hydrogen ble deretter innført via en ballong. Etter 8 timer ble reaksjonsblandingen filtrert gjennom Celite og deretter konsentrert under redusert trykk for å gi forbindelse 262 (0,47 g) som et hvitt faststoff. HPLC: 98% ved 2,81 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 419,1 [M+H]<+>.
Referanseeksempel 263
( 3aa. 4BJBJaa)- 2-( 4- cvano- 1- naftalenvl)- N-( 4- fluorfenvl) oktahvdro- 7- metvl- 1. 3- diokso- 4. 7- epoksv- 4H-isoindol- 4- butanamid ( 263)
Forbindelse 262 (0,030 g, 0,072 mmol) ble løst i CH3CN (1 mL). DCC
(0,014 g, 0,072 mmol) og HOAc (0,0098 g, 0,072 mmol) ble deretter tilsatt etterfulgt av 4-fluoranilin (0,007 mL, 0,072 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt under argon i 14 timer og råmaterialet løst i MeOH, renset ved preparativ HPLC (YMC VP-ODS kolonne, 20 x 100 mm, eluering med 20% B til 100% B over 15 minutter og holdt ved ca. 100% B i 10 minutter). Forbindelse 263 (0,020 g) ble isolert som et hvitt faststoff. HPLC: 100% ved 3,217 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 512,1 [M+H]<+>.
Eksempel 264
r3aS- f3aa. 4B. 5B. 7B. 7aa) 1- 4- r7- r2- facetvloksv) etvnoktahvdro- 5- hvdroksv- 4-metvl- 1. 3- diokso- 4. 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 1 - naftalenkarbonitril & r3aR-( 3aa, 4B, 5B, 7B, 7aa) 1- 4- roktahvdro- 5- hvdroksv- 7-( 2- hvdroksvetvl)- 4
metyl- 1, 3- diokso- 4, 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 1 - naftalenkarbonitril ( 264 & 243DM)
En racemisk blanding av forbindelsene 243Di & 243Dii (1,90 g) ble løst i
100 mL vannfritt THF i en 2 L kolbe. Vannfri rert-butylmetyleter (900 mL) og vinylacetat (40 mL) ble overført til kolben under omrøring og tilsatt lipase (20 g,
type II, rå, fra svinepankreas; Sigma, Cat. #L3126). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 21 timer ved romtemperatur, hvoretter ytterligere 5 g lipase og 20 mL vinylacetat ble tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i ytterligere 19 timer, oppbevart ved 4°C uten omrøring i 36 timer og deretter omrørt ved romtemperatur i 22 timer til (inntil kiral HPLC viste den ønskede % ee). For å overvåke reaksjonen ble 200^L av blandingen uttatt og sentrifugert. Supernatanten (100^L) ble tørket under nitrogen og det resulterende residuum løst i 100^L EtOH og underkastet HPLC-analyse:
1) Omvendt-fase HPLC: kolonne, YMC-ODS AQ 150 x 4,6; strømningshastighet, 1,2 ml_/min; prøvestørrelse, 10^L løsningsmiddel A: 1 mM HCI i vann; løsningsmiddel B, MeCN; deteksjon ved 300 nm gradient;
2) Kiral-HPLC: kolonne, CHIRALCEL OJ 4,6 x 250 mm mobil fase, heksan/MeOH/EtOH (8:1:1)
strømningshastighet, 1 mL/min; prøvestørrelse, 20^L
deteksjon ved både 220 nm og 300 nm
foretatt ved 25°C & 40°C
(for ee % bestemmelse av reaksjonsblandingen).
Enzymet ble fjernet ved filtrering og filtratet konsentrert under vakuum. Den resulterende blanding ble løst i CHCb og adsorbert på silikagel (63-200 mikron). Disse faststoffene ble påsatt en VLC-trakt (3 cm I.D., VLC står for vakuum-væskekromatografi under bruk av glasstrakter som har 24/40 slip i bunnen) inneholdende et 5 cm høyt lag silikagel (25-40 mikron), og det ble foretatt en trinnvis gradienteluering. Gradienten var 100% CHCI3i de første tre fraksjonene, etterfulgt av CHCI3-1% MeOH (3 fraksjoner), CHCI3-2% MeOH (3 fraksjoner), CHCI3-3% MeOH (3 fraksjoner), CHCI3-4% MeOH (3 fraksjoner) og tilslutt med CHCI3-5% MeOH (3 fraksjoner). Volumet av fraksjonene var 100 mL inntil de nådde CHCI3-3% MeOH og fra dette punkt av var de 200 mL. Forbindelse 264 eluertes i de to siste fraksjoner av 100% CHCI3og inntil den første fraksjonen av CHCI3-2% MeOH. Forbindelse 243DN eluertes fra den andre fraksjon av CHCI3-2% MeOH og fortsatte til den første fraksjon av CHCI3-5% MeOH. Den rå forbindelse 243DM inneholdt en liten mengde farvet urenhet som ble fjernet med en Sephadex-kolonne [LH-20 svellet i CHCI3-MeOH (2:1), kolonne (2,5 cm I.D. & 90 cm lang) for å gi 632 mg av forbindelse 243DM. Forbindelse 264: HPLC-betingelser: 98% ved 7,2 min (metode 1), kirale HPLC-betingelser: 29,0 min ca. 25°C (metode 2). Forbindelse 243DM: HPLC-betingelser: 98% ved 4,6 min (metode 1), kirale HPLC-betingelser: 96% ee ved 25,7 min (ca. 25°C) & 19,8 min (ca. 40°C) (metode 2).
Referanseeksempel 265
( 3aa, 4B, 7B, 7aa( E) 1- 4- roktahvdro- 4- metvl- 1, 3- diokso- 7-( 4- okso- 4- fenvl- 2-butenyl)- 4. 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vll- 1- naftalenkarbonitril ( 265)
Forbindelsen 247 (0,050 g, 0,134 mmol) ble løst i THF (1,5 mL) og tilsatt (fenacyliden)trifenylfosforan (0,051 g, 0,134 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 67°C i 24 timer og deretter avkjølt til 23°C og konsentrert i vakuum. Råmaterialet ble deretter renset ved preparativ HPLC. (YMC VP-ODS kolonne 20 x 100 mm, eluering med 20% B til 100% B over 15 minutter og konstant ved ca. 100% B i 10 minutter) for å gi forbindelse 265 (0,040 g) som et hvitt faststoff. HPLC: 100% ved 3,503 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 477,1 [M+H]<+>.
Eksempel 266
( 3aa. 4B. 7B. 7aa( E) 1- 4- roktahvdro- 4- metvl- 1. 3- diokso- 7- f4- okso- 4- fenvl- 2-butenvl)- 4. 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 1- naftalenkarbonitril ( 266)
Forbindelse 265 (0,010 g, 0,021 mmol) ble løst EtOH (2,0 mL) og tilsatt Pd/C (10% Pd, 0,005 g). Hydrogen ble deretter innført via en ballong og reaksjonsblandingen omrørt ved 25°C i 3 timer. Reaksjonsblandingen ble deretter filtrert gjennom Celite under rensing med EtOAc og konsentrert i vakuum for å gi forbindelse 266 som et lysebrunt faststoff (0,009 g). Ingen rensing var nødvendig. HPLC: 100% ved 3,38 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 503,2 [M+Na]<+.>
Eksempel 267 til 378
Flere forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse ble fremstillet etter fremgangsmåter analoge med de beskrevet ovenfor. Forbindelsene i Eksempel 267 til 378 har den følgende struktur (L er en binding):
hvor G, R<7>, forbindelsesnavn, retensjonstid, molekylmasse og den anvendte fremgangsmåte er angitt i Tabell 5. Den absolutte konfigurasjon for de følgende forbindelser ble ikke bestemt. For enkelhet angående nomenklatur er forbindelse 238i her angitt å ha en «R»-konfigurasjon og forbindelse 238N angitt å ha en «S»-konfigurasjon. Enantiomert rene produkter avledet fra forbindelse 238i er her angitt å ha en «R»-konfigurasjon og enantiomert rene produkter avledet fra forbindelse 238N angitt å ha en «S»-konfigurasjon. De kromatografiske teknikker som er benyttet for å bestemme forbindelsenes retensjonstider i Tabell 5 er som følger: LCMS = YMC S5 ODS kolonne, 4,6 x 50 mm eluering i 4 minutter med 10-90% MeOH/H20 inneholdende 0,1% TFA; 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm. LCMS<*>= YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm eluering i 2 minutter med 10-90% MeOH/H20 inneholdende 0,1% TFA; 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm. LC = YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm eluering i 4 minutter med 10-90% MeOH/H20 inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm. Molekylmassen av forbindelsene angitt i Tabell 5 ble bestemt ved MS (ES) ved formelen m/z.
Eksempel 379 til 381
Flere forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse ble fremstillet i henhold til fremgangsmåter analoge med de ovenfor beskrevne. Forbindelsene i Eksempel 3795til 381 har den følgende struktur (L er en binding):
hvor G, R<7>, forbindelsesnavn, retensjonstid, molekylmasse og den anvendte
fremgangsmåte er angitt i Tabell 6. Kromatografiteknikkene som er benyttet for å o bestemme forbindelsens retensjonstider i Tabell 6 er som følger: LCMS = YMC
S5 ODS kolonne, 4,6 x 50 mm eluering i 4 minutter med 10-90% MeOH/H20 inne holdende 0,1% TFA; 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm. LCMS' = YMC S5 ODS kolonne, 4,6 x 50 mm eluering i 2 minutter med 10-90% MeOH/H20 inneholdende 0,1% TFA; 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm. LC = YMS S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm eluering i 4 minutter med 10-90% MeOH/H20 inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm.
Molekylmassen av forbindelsene angitt i Tabell 6 ble bestemt ved MS (ES) med formelen m/z.
Eksempel 382 til 383
Flere forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse ble fremstillet etter fremgangsmåter analoge med de ovenfor beskrevne. Forbindelsene i Eksempel 382 til 383 har struktur, forbindelsesnavn, retensjonstid, molekylmasse og den anvendte fremgangsmåte som angitt i Tabell 7. Kromatografiteknikkene som er benyttet for å bestemme forbindelsens retensjonstider i Tabell 7 er som følger: LCMS = YMC
S5 ODS kolonne, 4,6 x 50 mm eluering i 4 minutter med 10-90% MeOH/H20 inneholdende 0,1% TFA; 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm. LCMS<*>= YMC S5 ODS kolonne, 4,6 x 50 mm eluering i 2 minutter med 10-90% MeOH/H20 inneholdende 0,1% TFA; 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm. LC = YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm eluering i 4 minutter med 10-90% MeOH/H20 inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm. Molekylmassen av forbindelsene angitt i Tabell 7 ble bestemt ved MS (ES) med formelen m/z.
Eksempel 384 til 418
Flere forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse ble fremstillet etter fremgangsmåter analoge med de ovenfor beskrevne. Forbindelsene i Eksempel 384 til 418 har den følgende struktur (L er en binding):
hvor G, R<7>, forbindelsesnavn, retensjonstid, molekylmasse og den anvendte fremgangsmåte er angitt i Tabell 8. Den absolutte konfigurasjon for de følgende forbindelser ble ikke bestemt. For enkelthets skyld angående nomenklatur ble forbindelse 243Di her angitt å ha en «S»-konfigurasjon og forbindelse 243DM å ha en «R»-konfigurasjon. Enantiomert rene produkter avledet fra forbindelse 243Di er her angitt å ha en «S»-konfigurasjon og enantiomert rene produkter avledet fra forbindelse 243DM er her angitt å ha en «R»-konfigurasjon.
Kromatografiteknikkene som er benyttet for å bestemme forbindelsens retensjonstider i Tabell 8 er som følger: LCMS = YMC S5 ODS kolonne, 4,6 x 50 mm eluering i 4 minutter med 10-90% MeOH/H20 inneholdende 0,1% TFA; 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm. LCMS<*>= YMC S5 ODS kolonne, 4,6 x 50 mm eluering i 2 minutter med 10-90% MeOH/H20 inneholdende 0,1% TFA; 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm. LC = YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm eluering i 4 minutter med 10-90% MeOH/H20 inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm. Molekylmassen av forbindelsene angitt i Tabell 8 ble bestemt ved MS (ES) med formelen m/z.
Eksempel 422 f3aa, 4B, 7B, 7aa)- 2- f7- brom- 2, 1, 3- benzoksadiazol- 4- vl) heksahydro- 4, 7-dimetvl- 4. 7- epoksv- 1 H- isoindol- 1. 3( 2H)- dion ( 422C) A. 4-brom-7-nitrobenzofurazan (422A)
Til en løsning av 2,6-dibromanilin (1,0 g, 4,0 mmol) i CHCI3(8 mL) ble det tilsatt en suspensjon av mCPBA (70% ifølge HPLC, 1,4 g, 8,0 mmol) i CHCI3(8 mL), og den resulterende blanding ble omrørt i 24 timer ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med CHCI3og vasket suksessivt med 2% Na2S203-løsning, 5% Na2C03-løsning og saltvann. Det organiske lag ble tørket over Na2S04og konsentrert under redusert trykk for å gi et faststoff, som ble suspendert i DMSO
(15 mL). Denne suspensjonen ble tilsatt en løsning av NaN3(272 mg, 4,19 mmol) i DMSO (15 mL) ved romtemperatur. Den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur inntil det meste av nitrogenet var utviklet, og ble deretter hurtig oppvarmet til 120°C i 3 minutter. Reaksjonsblandingen ble avkjølt og helt over i knust is (100 g). Etter henstand i 1 time ble bunnfallet frafiltrert, tørket i vakuum og oppløst på nytt i konsentrert H2SO4(5 mL). Denne løsningen ble tilsatt en løsning av NaN03(400 mg, 4,7 mmol) i 50% H2S04(1,6 mL), og temperaturen ble holdt ved 60°C. Etter fullført tilsetning ble blandingen oppvarmet til 85°C i 30 minutter, avkjølt til romtemperatur og helt over i knust is (40 g). EtOAc ble tilsatt, lagene separert og det vandige lag ekstrahert med EtOAc. De kombinerte organiske lagene ble tørket over Na2S04og konsentrert for å etterlate et faststoff som ble renset ved hurtigkromatografi (silikagel, EtOAc (20%) i heksaner), hvilket førte til forbindelse 422A (785 mg, 81%) som et lysebrunt faststoff.
B. 4-brom-7-aminobenzofuranzan (422B)
En løsning av forbindelse 422A (563 mg, 2,31 mmol) i AcOH (5 mL) ble oppvarmet til 70°C og tilsatt Fe°-pulver (258 mg, 4,62 mmol) i én porsjon. Den resulterende mørke reaksjonsblandingen ble omrørt i 15 minutter, avkjølt til romtemperatur og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble tatt opp i EtOAc og den resulterende løsning vasket med mettet Na2C03-løsning. Det organiske lag ble tørket over Na2S04, konsentrert og renset ved hurtigkromatografi (silikagel, EtOAc i heksaner 10 til 60%), hvilket førte til forbindelse 422B (470 mg, 95%) som et rødt faststoff.
C. (3aa,4(3,7p,7aa)-2-(7-brom-2,1,3-benzoksadiazol-4-yl)-heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (422C)
En blanding av forbindelse 422B (43 mg, 0,20 mmol), forbindelse 20A (45 mg, 0,23 mmol), MgS04(60 mg, 0,50 mmol), Et3N (139^L, 1,0 mmol) og 1,2-dimetoksyetan (300^L) ble anbragt i et forseglet rør og oppvarmet til 135°C i 14 timer. Etter avkjøling til romtemperatur ble blandingen filtrert gjennom Celite under eluering med MeOH for å gi et mørkt faststoff som ble renset ved hurtigkromatografi (silikagel, EtOAc i heksaner 5 til 40%), hvilket ga forbindelse 422C (42 mg, 54%) som et gult faststoff. HPLC: 99% ved 2,96 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm Ballistic, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% H3PO4, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm).
<1>H NMR (aceton-de, 400 MHz): 5= 8,00 (d, J=7,5Hz, 1H), 7,45 (d, J=7,5Hz, 1H), 3,31 (s, 2H), 1,98-1,93 (m, 2H), 1,74-1,69 (m, 2H), 1,57 (s, 6H).
Eksempel 423
( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- 7- roktahvdro- 4, 7- dimetyl- 1, 3- diokso- 4, 7- epoksv-2H- isoindol- 2- vl1- 2. 1. 3- benzoksadiazol- 4- karbonitril ( 423)
Til en løsning av forbindelse 422C (42 mg, 0,11 mmol) i DMA (1 mL) ble det tilsatt CuCN (20 mg, 0,22 mmol) og den resulterende blanding oppvarmet til 150°C i 5 timer. Blandingen fikk avkjøles til romtemperatur og ble fordelt mellom EtOAc og vandig NaCN-løsning (5 g/50 mL). Lagene ble separert og det vandige lag ekstrahert én gang med EtOAc. De kombinerte organiske fasene ble tørket over Na2S04, konsentrert og renset ved hurtigkromatografi (silikagel, EtOAc i heksaner 20 til 70%) for å gi forbindelse 423 (13 mg, 35%) som en gul olje. HPLC: 99% ved 2,66 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm Ballistic, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% H3PO4, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z 396,9 [M-H+OAc]".
Eksempel 424
f3aa, 4B, 7B, 7aa)- 7- roktahvdro- 4, 7- dimetyl- 1, 3- diokso- 4, 7- epoksv- 2H-isoindol- 2- vll- 2. 1. 3- benzotiadiazol- 4- karbonitril ( 424B)
A. 4-cyano-7-amino-benzotiadiazol (424A)
En løsning av 2-cyano-5-nitrofenylendiamin (78 mg, 0,44 mmol, fremstillet som beskrevet i WO 0076501) i SOCI2(2 mL) ble kokt under tilbakeløpskjøling i 3 timer. Den resulterende blanding fikk avkjøles til romtemperatur og ble deretter helt over i is/vann. CH2CI2ble tilsatt, lagene separert og det vandige lag ekstrahert to ganger med CH2CI2. De kombinerte organiske fasene ble tørket over MgS04, konsentrert og renset ved hurtigkromatografi (silikagel, EtOAc i heksaner 50%) for å gi 4-cyano-7-nitrobenzotiadiazol. Dette materialet ble løst i AcOH (2 mL) inneholdende EtOAc (1 mL) og H20 (0,2 mL) og oppvarmet til 70°C. Ved denne temperatur ble Fe°-pulver (78 mg, 1,41 mmol) tilsatt i én fast porsjon og den mørke blandingen omrørt i 20 minutter og deretter avkjølt til romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom Celite under eluering med EtOAc, vasket med mettet Na2C03-løsning, tørket over MgS04og konsentrert. Rensing ble oppnådd ved hurtigkromatografi (silikagel, EtOAc i heksaner 20 til 70%) for å gi forbindelse 424A (47 mg, 61%) som et brunt faststoff.
B. (3aa,4B,7p,7aa)-7-[oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2,1,3-benzotiadiazol-4-karbonitril (424B)
En blanding av forbindelse 424A (35 mg, 0,20 mmol), forbindelse 20A (45 mg, 0,23 mmol), MgS04(60 mg, 0,50 mmol), Et3N (139^L, 1,0 mmol) og DME (200^L) ble anbragt i et forseglet rør og oppvarmet til 135°C i 14 timer. Etter avkjøling til rom temperatur ble blandingen filtrert gjennom Celite under eluering med MeOH for å gi et mørkt faststoff, som ble renset ved en kombinasjon av hurtigkromatografi (silikagel, EtOAc i heksaner 10 til 50%) og omvendt-fase preparativ HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, eluering i 10 minutter med 27-100% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 20 mL/min) hvilket ga forbindelse 424B (36 mg, 51%) som et gult faststoff. HPLC: 98% ved 2,45 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm Ballistic, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% H3PO4, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm). MS (DCI): m/z 355,0 [M+H]<+>.
Eksempel 425
( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- N- r2- r2-( 4- cvano- 1- naftalenyl) oktahvdro- 7- metvl- 1, 3-diokso- 4, 7- epoksv- 4H- isoindol- 4- vnetvn- 4- fluor- N- metylbenzamid ( 425B)
A. 4-fluor-N-metyl-N-[2-(5-metylfuran-2-yl)-etyl]-benzamid (425A)
NaH (60% dispersjon i olje, 65 mg, 1,63 mmol) ble porsjonsvis tilsatt til en løsning av 4-fluor-N-[2-(5-metyl-2-furanyl)etyl]benzamid (269 mg, 1,09 mmol, 237A) i THF (5 mL). Etter avsluttet gassutvikling ble jodmetan (0,14 mL, 2,18 mmol) dråpevis tilsatt. Når HPLC-analyse vist at reaksjonen var 50% fullført, ble blandingen konsentrert under redusert trykk og på nytt underkastet betingelsene ovenfor. Etter at alt utgangsmaterialet var forbrukt, ble H20 tilsatt og den resulterende blanding ekstrahert med EtOAc (2x5 mL). De kombinerte organiske lagene ble tørket over Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi under eluering med 20% aceton/CHCI3ga 238 mg (84%) av forbindelse 425A. HPLC: 98% ved 2,94 min (retensjonstid) (Phenomenex-prime S5-C18 kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre,
4 mL/min, deteksjon ved 220 nm), MS (ES): m/z [M+H] = 262,38.
B. (3aa,4B,7B,7aa)-N-[2-[2-(4-cyano-1 -naftalenyl)oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etyl]-4-fluor-N-metylbenzamid (425B)
En løsning av forbindelse 425A (183 mg, 0,75 mmol) og 4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1H-1-yl)-1-naftalenkarbonitril (174 mg, 0,75 mmol) i benzen (1 mL) ble oppvarmet til 60°C i 15 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk for å gi 357 mg rått mellomprodukt. Det rå mellomproduktet (156 mg) ble løst i EtOAc (6 mL) og tilsatt 10% Pd/C (16 mg), hvorpå blandingen ble omrørt under en hydrogenballong over natten. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom et lag Celite og konsentrert under redusert trykk. Rensing ved omvendt-fase preparativ kromatografi (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, eluering i 15 minutter med 20-100% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 20 ml_/min, deteksjon ved 220 nm) ga 160,3 mg (72%) av forbindelse 425B som et hvitaktig faststoff. HPLC: 99% ved 3,23 min (retensjonstid) (Phenomenex-prime S5-C18 kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm). MS (ES): m/z [M+H] = 512,19.
Eksempel 426
( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- heksahvdro- 4. 7- dimetvl- 2- r4-( 2. 2. 2- trif1uor- 1-hvdroksvetvl) fenvll- 4. 7- epoksv- 1 H- isoindol- 1, 3( 2H)- dion ( 426B)
A. 1-(4-aminofenyl)-2,2,2-trifluor-etanol (426A)
Forbindelse 426A ble fremstillet i henhold til fremgangsmåten beskrevet av Stewart, R. et al., Can. J. Chem., 58, 2491-2496 (1980), NaBH4(47 mg, 1,235 mmol) ble tilsatt til en løsning av p-aminotrifluoracetofenon (155,7 mg, 0,823 mmol, syntetisert som beskrevet av Klabunde, K.J. et al., J. Org. Chem., 35,1711-1712
(1979)) i isopropanol (3 mL) ved romtemperatur. Etter 30 minutter ble reaksjonen avbrutt med fosfatbuffer (pH 7,2), hvorpå blandingen ble fortynnet med H20 og ekstrahert med EtOAc (2x10 mL). De kombinerte organiske lagene ble tørket over Na2S04og konsentrert under redusert trykk for å gi 154 mg (98%) av forbindelse 426A som et lysebrunt faststoff. Materialet ble benyttet direkte i det neste trinn uten rensing. HPLC: 99% ved 0,42 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm). MS (ES): m/z [M+H] = 192,13.
B. (3aa,4B,7p,7aa)-heksahydro-4,7-dimetyl-2-[4-(2,2,2-trifluor-1-hydroksyetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (426B)
En blanding av forbindelse 426A (75,3 mg, 0,394), forbindelse 20A (51,5 mg, 0,262 mmol), trietylamin (0,15 mL) og MgS04(50 mg) i toluen (1 mL) ble oppvarmet i et forseglet rør til 135°C i 15 timer. Blandingen ble filtrert og konsentrert under redusert trykk. Rensing ved omvendt-fase preparativ kromatografi (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, eluering i 15 minutter med 20-100% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 20 mL/min, deteksjon ved 220 nm) ga 63,1 mg (65%) av forbindelse 426B som et hvitt faststoff. HPLC: 98% ved 2,49 min (retensjonstid) (Phenomenex-prime S5-C18 kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm).
MS (ES): m/z [M+H] = 370,16.
Eksempel 427
( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- 4- r4- r2- rr( 1, 1- dimetvletvl) dimetvlsilvnoksv1etvn-1. 3. 3a. 4. 7. 7a- heksahvdro- 7- metvl- 1, 3- diokso- 4, 7- epoksv- 2H-isoindol- 2- vn- 2-( triflormetvl) benzonitril & ( 3aa, 4a, 7g, 7aa)- 4- r4- r2-rrf 1, 1 - dimetyletyl) dimetvlsilylloksyletyll- 1, 3, 3a, 4, 7, 7a- heksahydro-7- metvl- 1, 3- diokso- 4, 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 2- ftrifluormetyl)-benzonitril ( 427i & 427ii)
Forbindelse 204A (2,00 g, 8,50 mmol) og 4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1H-pyrrol-1-yl)-2-trifluormetylbenzonitril (1,50 g, 5,60 mmol) ble blandet i benzen (5,0 mL) og oppvarmet til 60°C i 14 timer og deretter avkjølt til 25°C. Løsningsmidlet ble fjernet ved 40°C under vakuum i 1 time for å gi råmaterialet som ble renset ved hurtigkromatografi på Si02under eluering med 0,5% EtOAc/CH2CI2for å gi 2,0 g av forbindelse 427i og 1,3 g av forbindelse 427N, begge som lysebrune faststoff. Forbindelse 427i: HPLC: 95% ved 4,200 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm). MS (ES): m/z 507,1 [M+H]<+>. Forbindelse 427N: HPLC: 95% ved 4,20 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm). MS (ES): m/z 507,1 [M+H]<+>.
Referanseeksempel 428
r3aR-( 3aa, 4B, 5BJB, 7aa) 1- 4- r7- r2- rr( 1, 1- dimetvletvl) dimetvlsilvn-oksvletvlloktahvdro- 5- hvdroksv- 4- metvl- 1, 3- diokso- 4, 7- epoksv-2H- isoindol- 2- vn- 2- ftrifluormetvl) benzonitril & r3aS-( 3aa, 4B, 5B, 7B, 7aa) 1- 4- r7- r2- rr( 1, 1- dimetvletvh-dimetvlsilvnoksvletvlloktahvdro- 5- hydroksv- 4-metvl- 1. 3- diokso- 4. 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 2- ftrifluormetvl)-benzonitril ( 428i & 428ii)
Forbindelse 427i (1,40 g, 2,77 mmol) og RhCI(PPh3)3(0,128 g, 0,14 mmol) ble blandet i en kolbe. Kolben ble deretter evakuert og fylt med argon tre ganger, etterfulgt av tilsetning av THF (3,0 mL) med en sprøyte. Etter at alle partikler var løst, ble katekolboran (0,59 mL, 5,54 mmol) tilsatt dråpevis. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 25°C under argon i 30 minutter og deretter avkjølt til 0°C. Fosfatbuffer (pH=7, 20 mL) ble tilsatt etterfulgt av EtOH (10 mL), 30% H202/H20 (2 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 0°C i 3 timer og deretter ekstrahert med diklormetan (3 x 25 mL). De kombinerte organiske lagene ble vasket med 1N NaOH (25 mL), 10% Na2S03(25 mL) og saltvann (25 mL). Råmaterialet ble deretter konsentrert og renset ved hurtigkromatografi på Si02under eluering med 2% EtOAc/CH2CI2til 10% EtOAc/CH2CI2for å gi 0,63 g av en racemisk blanding av forbindelsene 428i & 428N som et lysegult faststoff. HPLC: 99% ved 3,867 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm). MS (ES): m/z 525,1 [M+H].
Den racemiske blanding av forbindelsene 428i og 428N ble separert ved normal fase preparativ kiral HPLC under bruk av en Chiracel OD kolonne (5 cm x 50 cm) under eluering med 13% løsningsmiddel B (EtOH) i løsningsmiddel A
(heksan), strømningshastighet: 50 mL/min. Forbindelse 428i eluertes fra 34 min til 38 min og forbindelse 428ii eluertes fra 44 min til 49 min. Enantiomert overskudd ble bestemt ved kiral HPLC. Forbindelse 428i: >99% ee (12,576 min (retensjonstid)
(Chiralcel OJ kolonne 4,6 x 250 mm eluering med isokratisk 85% heptan/15% MeOH/etanol (1:1), 1 mL/min, deteksjon ved 220 nm, 40°C). Forbindelse 428ii: 99% ee 18,133 min (retensjonstid) (Chiralcel OJ kolonne 4,6 x 250 mm eluering med isokratisk 85% heptan/15% MeOH/etanol (1:1), 1 mL/min, deteksjon ved 220 nm, 40°C.
De absolutte konfigurasjoner for forbindelsene 428i & 428N ble ikke bestemt. For enkelthets skyld angående nomenklatur ble forbindelse 428i her angitt å ha en «R»-konfigurasjon og forbindelse 428N angitt å ha en «S»-konfigurasjon. Enantiomert rene produkter avledet fra forbindelse 428i er her angitt å ha en «R»-konfigurasjon og enantiomert rene produkter avledet fra forbindelse 428N er her angitt å ha en «S»-konfigurasjon.
Eksempel 429
r3aR-( 3aa, 4B, 5B, 7B, 7aa) M- roktahvdro- 5- hvdroksv- 7-( 2- hydroksvetvl)-4- metyl- 1, 3- diokso- 4J- epoksy- 2H- isoindol- 2- vll- 2-( trifluormetvl) benzonitril & r( 3aS-( 3aa. 4B. 5B. 7B. 7aa) 1-4- roktahvdro- 5- hvdroksv- 7-( 2- hvdroksvetvl)- 4- metvl- 1. 3- diokso-4. 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 2- ftrifluormetvl) benzonitril ( 429i & 429M)
Forbindelse 428i (180 mg, 0,34 mmol) ble løst i 2% HCI/EtOH (5,0 mL). Etter
30 min ble mettet NaHC03tilsatt og det vandige lag ekstrahert med diklormetan (20 mL x 3), vasket med saltvann og tørket over Na2S04for å gi 135 mg av forbindelse 429i som et hvitt faststoff. HPLC: 99% ved 2,257 min (retensjonstid)
(YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig
metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm). MS (ES): m/z 411,1 [M+H]<+>.
Fremgangsmåten ovenfor ble gjentatt med forbindelse 428N for å gi den ønskede diol-forbindelse 429N i tilsvarende utbytte.
Eksempel 430
r3aR-( 3aa. 4B. 5B. 7B. 7aa) 1- 4- r7- r2- r( 5- klor- 2- pvridinvl) oksv1etvnoktahvdro- 5- hvdroksv- 4- metvl- 1. 3- diokso- 4. 7- epoksv-2H- isoindol- 2- vn- 2- ftrifluormetvl) benzonitril ( 430)
Trifenylfosfin (0,026 g, 0,098 mmol) og DBAD (0,023 g, 0,098 mmol) ble blandet i THF (0,5 mL). Etter at den foregående blanding hadde fått reagere i 15 minutter ble 2-hydroksy-6-klorpyridin (0,016 g, 0,100 mmol) tilsatt, hvorpå blandingen fikk omrøres i 10 minutter og ble tilsatt forbindelse 429i (0,020 g, 0,049 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 25°C i 2 timer, hvorpå råmaterialet ble renset ved preparativ TLC under eluering med 10% aceton/CHCb for å gi 0,014 g av forbindelse 430 som et lysebrunt faststoff. HPLC: 100% ved 3,370 min (retensjonstid)
(YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm).
MS (ES): m/z 522,08 [M+H]<+>.
Eksempel 431
r3aS-( 3aa, 4B, 5B, 7B, 7aa) 1- 4- r7- r2- r( 5- klor- 2- pvridinvl) oksv1etvnoktahvdro- 5- hvdroksv- 4- metvl- 1. 3- diokso- 4. 7- epoksv- 2H- isoindol-2- vll- 2- ftrifluormetvDbenzonitril ( 431)
Trifenylfosfin (0,026 g, 0,098 mmol) og DBAD (0,023 g, 0,098 mmol) ble blandet i THF (0,5 mL). Etter at den foregående blanding hadde fått reagere i 15 minutter ble 2-hydroksy-6-klorpyridin (0,016 g, 0,100 mmol) tilsatt, hvorpå blandingen fikk omrøres i 10 minutter og ble tilsatt forbindelse 429ii (0,020 g, 0,049 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 25°C i 2 timer, hvorpå råmaterialet ble renset ved preparativ TLC under eluering med 10% aceton/CHCb for å gi 0,015 g av forbindelse 431 som et lysebrunt faststoff. HPLC: 100% ved 3,370 min (retensjonstid)
(YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm).
MS (ES): m/z 522,08 [M+H]<+>.
Eksempel 432
( 3aa. 4B. 7B. 7aa)- 2-( 4- cvano- 1 - naftalenvl) oktahvdro- N-( 2-hydroksyfenyD^- metyl- I. S- diokso^ J- epoksy^ H-isoindol- 4- butanamid ( 432)
Forbindelse 262 (0,100 g, 0,239 mmol) ble løst i DMF (vannfritt, 1,5 mL), tilsatt BOP (0,211 g, 0,478 mmol) og deretter 2-aminofenol (0,052 g, 0,478 mmol) og N- metylmorfolin (0,052 mL, 0,478 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 25°C under argon i 3 timer, hvorpå råmaterialet ble renset ved omvendt-fase preparativ HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, 20-100% eluering i 15 minutter med 20-100% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 20 mL/min, deteksjon ved 220 nm) for å gi 0,060 g av forbindelse 432 som et lysebrunt faststoff. HPLC: 100% ved 3,037 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm). MS (ES): m/z 510,34 [M+H]<+>.
Eksempel 433
( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- 4- r4- r3-( 2- benzoksazolyl) propvnoktahvdro- 7- metvl- 1, 3-diokso- 4. 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 1- naftalenkarbonitril ( 433)
Trifenylfosfin (0,031 g, 0,118 mmol) og DBAD (0,027 g, 0,188 mmol) ble blandet i THF (0,5 mL). Etter at den foregående blanding hadde fått reagere i 15 minutter ble forbindelse 432 (0,030 g, 0,059 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 25°C i 2 timer, hvorpå råmaterialet ble renset ved omvendt-fase preparativ HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm under eluering i 15 minutter med 20-100% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 20 ml_/min, deteksjon ved 220 nm) for å gi 0,018 g av forbindelse 433 som et lysebrunt faststoff. HPLC: 100% ved 3,357 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm). MS (ES): m/z 492,37 [M+H]<+>.
Eksempel 434
f3aa. 4B. 5B. 7B. 7aa)- 4- r4- etvloktahvdro- 5- hvdroksv- 7-( 2- hvdroksvetvl)-1. 3- diokso- 4. 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 1 - naftalenkarbonitril ( 434C)
A. tert-butyl-[2-(5-etylfuran-2-yl)-etoksy]-dimetylsilan (434A)
Imidazol (255 mg, 3,75 mmol) og TBSCI (414 mg, 2,75 mmol) ble tilsatt til en løsning av 245A (350 mg, 2,5 mmol) i DMF (4 mL). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 15 timer, og deretter ble 100 mg (0,66 mmol) ytterligere TBSCI tilsatt for å tvinge reaksjonen til ende. Etter omrøring i ytterligere 1 time ble reaksjonsblandingen fortynnet med dietyleter (100 mL) og vasket med vann (20 mL), 1N HCI (20 mL), vann (20 mL) og saltvann (20 mL). Det organiske lag ble tørket over Na2S04og konsentrert under redusert trykk for å gi 509 mg av forbindelse 434A (80,3%) som en gul olje.
B. (3aa,4B,7p,7aa)-4-[4-[2-[[(1,1 -dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]etyl]-4-etyl-1,3,3a,4,7,7a-heksahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1 -naftalenkarbonitril (434B)
En løsning av forbindelse 434A (509 mg, 2,00 mmol) og 4-(2,5-dihydro-2,5-diokso-1H-1-yl]-1-naftalenkarbonitril (498 mg, 2,00 mmol) i benzen (2 mL) ble oppvarmet til 60°C i 18 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk for å gi 992 mg (99%) av den rå forbindelse 434B, som ble benyttet direkte i det neste trinn uten videre rensing.
C. (3aa,4p,5p,7p,7aa)-4-[4-etyloktahydro-5-hydroksy-7-(2-hydroksy-etyl)-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1 -naftalen-
karbonitril (434C)
En blanding av forbindelse 434B (992 mg, 1,98 mmol) og RhCI2(PPh3)3
(183 mg, 0,198 mmol) ble evakuert og fylt med argon (3X). THF (20 mL) ble tilsatt og så snart alle partiklene var løst ble katekolboran (0,42 mL, 3,96 mmol) langsomt tilsatt dråpevis. Etter at produktdannelsen ifølge HPLC var fullført, fikk blandingen avkjøles til 0°C, hvorpå reaksjonen ble avbrutt med fosfatbuffer (34 mL, pH 7,2), etterfulgt av tilsetning av EtOH (19 mL) og H202(2,9 mL, 30% vandig løsning). Etter 2 timer ble ytterligere fosfatbuffer (6,8 mL, pH 7,2), EtOH (3,8 mL) og H202(0,6 mL) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 3 timer. Etter at boronat-mellomproduktet var forbrukt ble blandingen ekstrahert med CH2CI2(300 mL), og de kombinerte organiske lagene ble vasket med 1N NaOH, 10% vandig NaHS03og saltvann. De kombinerte organiske lagene ble tørket over Na2S04. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 10% MeOH/CH2CI2ga 75 mg (9,3%) av forbindelse 434C som et grått faststoff. HPLC-betingelser: 97% ved 2,43 min (Phenomenex-prime S5-C18 kolonne 4,6 x 50 mm, gradienteluering i 4 minutter med 10%-90% vandig metanol inneholdende 0,2% H3P04, deteksjon ved 220 nm). MS (ES): m/z 407,18 [M+H]<+>.
Eksempel 435
( 3aa. 4B. 5B. 7B. 7aa)- 4- r7- r2-( 4- cvanofenoksv) etvn- 4- etvloktahvdro- 5-hydroksy- 1, 3- diokso- 4, 7- epoksy- 2H- isoindol- 2- yl]- 1 - naftalenkarbonitril ( 435)
DBAD (39,6 mg, 0,172 mmol) ble tilsatt til en løsning av PPh3(45,1 mg,
0,172 mmol) i THF (0,8 mL). Etter omrøring i 10 minutter ble 4-cyanofenol (20,5 mg, 0,172 mmol) tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt i 5 minutter til. Forbindelse 434C (25,0 mg, 0,062 mmol) ble tilsatt og blandingen omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk. Rensing ved preparativ TLC under eluering med 10% aceton/CHCI3ga 18,1 mg (0,036 mmol, 57,6%) av
forbindelse 435. HPLC-betingelser: 96% ved 3,15 min (YMC S5 ODS 4,6 x 50 mm, gradienteluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% H3PO4, deteksjon ved 220 nm). MS (ES): m/z 508,14 [M+H]<+>.
Eksempel 436
( 3aa, 43, 73, 7aa)- 2-( 4- cvano- 1- naftalenvl) oktahvdro- N-( 2- hvdroksvfenvl)-7-metyl-1, 3- diokso- 4, 7- epoksy- 4H- isoindol- 4- etanamid ( 436)
Forbindelse 234B (0,100 g, 0,256 mmol) ble løst i DMF (vannfri, 1,5 mL), BOP (0,225 g, 0,51 mmol) ble tilsatt etterfulgt av 2-aminofenol (0,056 g, 0,51 mmol) og N-metylmorfolin (0,056 mL, 0,51 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 25°C under argon i 3 timer, hvorpå råmaterialet ble renset ved omvendt-fase preparativ HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, eluering i 15 minutter med 20-100% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 20 mL/min, deteksjon ved 220 nm) for å gi 0,078 g av forbindelse 436 som et lysebrunt faststoff. HPLC: 100% ved 3,037 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm). MS (ES): m/z 482,34 [M+H]<+>.
Eksempel 437
( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- 4- r4-( 2- benzoksazolylmetvl) oktahvdro- 7- metvl- 1, 3-diokso- 4. 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 1- naftalenkarbonitril ( 437)
Trifenylfosfin (0,082 g, 0,312 mmol) og DBAD (0,072 g, 0,312 mmol) ble blandet i THF (0,5 mL). Etter at den ovennevnte blanding hadde fått reagere i 15 minutter ble forbindelse 436 (0,075 g, 0,156 mmol) tilsatt. Blandingen ble omrørt ved 25°C i 2 timer, hvorpå råmaterialet ble renset ved preparativ HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, eluering i 15 minutter med 20-100% vandig metanol inneholdende 0,1 % TFA, 20 mL/min, deteksjon ved 220 nm) for å gi 0,052 g av forbindelse 437 som et lysebrunt faststoff. HPLC: 100% ved 3,443 min (retensjonstid) (YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm). MS (ES): m/z 464,18
[M+H]<+>.
Eksempel 438
( 3aa, 4B, 7B, 7aa)- heksahvdro- 4, 7- dimetvl- 2- r4- r2, 2, 2- trifluor- 1-hvdroksy- 1 -( trifluormetyl) etyllfenyll- 4, 7- epoksy- 1 H- isoindol-1, 3( 2H)- dion ( 438)
En blanding av 2-(4'-aminofenyl)-1,1,1,3,3,3-heksafluor-2-propanol (95,7 mg, 0,369), forbindelse 20A (48,3 mg, 0,246 mmol), trietylamin (0,15 mL) og MgS04
(50 mg) i toluen (1 mL) ble oppvarmet i et forseglet rør til 135°C over natten. Blandingen ble filtrert og konsentrert under redusert trykk. Rensing ved omvendt-fase preparativ kromatografi (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, eluering i 15 minutter med 20-100% vandig metanol inneholdende 0,1% TFA, 20 mL/min, deteksjon ved 220 nm) ga 44,0 mg (41%) av forbindelse 438 som et hvitt faststoff. HPLC: 99% ved 3,10 min (retensjonstid) (Phenomenex-prime S5-C18 kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4
minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm). MS (ES): m/z [M+H] = 438,14.
Eksempel 439 til 454
Flere forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse ble fremstillet etter fremgangsmåter analoge med de beskrevet ovenfor. Forbindelsene i Eksempel 439 til 454 har den følgende struktur (L er en binding):
hvor G, R<7>, forbindelsens navn, retensjonstid, molekylmasse og den anvendte fremgangsmåte er angitt i Tabell 9. Den absolutte konfigurasjon for de følgende forbindelser ble ikke bestemt. For enkelhets skyld angående nomenklatur er forbindelse 243Di her angitt å ha en «S»-konfigurasjon og forbindelse 243DM angitt å ha en «R»-konfigurasjon. Enantiomert rene produkter avledet fra forbindelse 243Di er her angitt å ha en «S»-konfigurasjon og enantiomert rene produkter avledet fra forbindelse 243DM er her angitt å ha en «R»-konfigurasjon. Tilsvarende er forbindelse 428i her angitt å ha en «S»-konfigurasjon og forbindelse 428N angitt å ha en «R»-konfigurasjon. Enantiomert rene produkter avledet fra forbindelse 428i er her angitt å ha en «S»-konfigurasjon og enantiomert rene produkter avledet fra forbindelse 428N er her angitt å en «R»-konfigurasjon. Kromatografiteknikkene benyttet for å bestemme forbindelsenes retensjonstider i Tabell 9 er som følger: LCMS=YMC S5 ODS kolonne, 4,6 x 50 mm under eluering i 4 minutter med 10-90% MeOH/H20 inneholdende 0,1% TFA; 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm. LCMS<*>=YMC S5 ODS kolonne, 4,6 x 50 mm under eluering i 2 minutter med 10-90% MeOH/H20 inneholdende 0,1% TFA; 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm. LC=YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm under eluering i 4 minutter med 10-90% MeOH/H20 inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 ml_/min, deteksjon ved 220 nm. Molekylmassen av forbindelsene angitt i Tabell 9 ble bestemt ved MS (ES) med formelen m/z.
Eksempel 455 til 457
Flere forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse ble fremstillet etter fremgangsmåter analoge med de beskrevet ovenfor. Forbindelsene ifølge Eksempel 455 til 457 hadde den følgende struktur (L er en binding):
hvor G, R<7>, forbindelsens navn, retensjonstid, molekylmasse og den anvendte fremgangsmåte er angitt i Tabell 10. Den absolutte konfigurasjon for de følgende forbindelser ble ikke bestemt. For enkelhets skyld angående nomenklatur er forbindelse 238i her angitt å ha «R»-konfigurasjon og forbindelse 238N angitt å ha «S»-konfigurasjon. Enantiomert rene produkter avledet fra forbindelse 238i er her angitt å ha «R»-konfigurasjon og enantiomert rene produkter avledet fra forbindelse 238N er her angitt å ha «S«-konfigurasjon. Kromatografiteknikkene benyttet for å bestemme forbindelsenes retensjonstider i Tabell 10 er som følger: LCMS=YMC S5 ODS kolonne, 4,6 x 50 mm under eluering i 4 minutter med 10-90% MeOH/H20 inneholdende 0,1% TFA; 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm: LCMS<*>=YMC S5 ODS kolonne, 4,6 x 50 mm under eluering i 2 minutter med 10-90% MeOH/H20 inneholdende 0,1% TFA; 4 mL/min, deteksjon ved 220 nm. LC=YMC S5 ODS kolonne 4,6 x 50 mm under eluering i 4 minutter med 10-90% MeOH/H20 inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 ml_/min, deteksjon ved 220 nm. Molekylmassen av forbindelsene angitt i Tabell 10 ble bestemt ved MS (ES) med formelen m/z. Eksempel 458 (3aa,4p,5p,7p,7aa)-4-(oktahydro-5-hydroksy-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril & (3aa,4p,5a,7p,7aa)- 4-(oktahydro-5-hydroksy-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol- 2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril (221B & 222D)
Forbindelse 20B ble omdannet til forbindelsene 221B og 222D (også syntetisert som forbindelsene 221B og 222D) ved biotransformasjon.
Forbindelse 20B ble hydroksylert med Amycolatopsis orientalis (ATCC 43491). En 1 mL kultur fra en frossen ampulle ble benyttet for å inokulere 100 mL medium i en 500 mL porsjon Erlenmeyer kolbe, og kolben ble inkubert ved 28°C ved 200 rpm i 3 dager. En 10 mL porsjon av denne kulturen ble benyttet til å inokulere 100 mL medium i en 500 mL Erlenmeyerkolbe, og kolben ble inkubert ved 28°C ved 200 rpm i 1 dag. 10 mL porsjoner av 1-dags kulturen ble fordelt til hver av tre 50 mL kolber. Forbindelse 20B (3 mg i 0,1 mL metanol) ble tilsatt til hver kultur og inkuberingene fortsatt i 3 dager. Kulturbuljongen i hver kolbe ble ekstrahert med 20 mL etylacetat, og de sammenslåtte etylacetatekstraktene ble inndampet til tørrhet ved 40°C under en nitrogenstrøm. Residuet ble løst i 1,2 mL metanol og analysert ved HPLC, LC/MS og LC/NMR. Løsningen inneholdt 2,5 mg gjenværende forbindelse 20B, 1,6 mg forbindelse 221B og 1,3 mg forbindelse 222D. MS- og NMR-analyser var i overensstemmelse med strukturene vist ovenfor.
Medium: 0,5% «toasted nutrisoy», 2% glukose, 0,5% gjærekstrakt, 0,5% K2HPO4, 0,5% NaCI, justert til pH 7 med HCI (R.V. Smith & J.P. Rosazza, Arch. Biochem. Biophys., 161, 551-558 (1974).
HPLC- analvse
Kolonne: Phenomenex Luna C18, 150 x 2 mm, 5 \ i
Mobil fase: løsningsmiddel A: 95% 20 mM ammoniumacetat pH 5,1, 5% acetonitril
løsningsmiddel B: 95% acetonitril, 5% 20 mM ammoniumacetat pH 5,1 lineær gradient fra 100% løsningsmiddel A til 5% løsningsmiddel A i 25 minutter etterfulgt av ekvilibrering ved 100% løsningsmiddel A i 8 minutter.
Temperatur: 40°C
Deteksjon: 250 nm
Injeksjonsvolum: 1
Retensjonstider: forbindelse 20B, 20,8 min; forbindelse 221B, 16,5 min; forbindelse 222D, 17,8 min.
HPLC- betingelser:
Kirale HPLC-betingelser ble benyttet for separeringen av enantiomerer, og akirale HPLC-betingelser ble benyttet for separeringen av diastereomerer av de hydroksylerte analoger av forbindelse 20B (dvs. forbindelser 221B og 222D og forbindelser 254i og 254N).
To metoder ble benyttet under kirale HPLC-betingelser, omvendt-fase (RP) for kiral analyse av biotransformasjonsprodukter i biologiske prøver og normal fase (NP) for ikke-biologiske prøver.
Kiral RP-HPLC-betingelse
Kiral NP-HPLC-betingelse
Under disse betingelsene hadde forbindelsene 254i og 254N retensjonstider på henholdsvis 8,5 minutter og 9,85 minutter.
Omvendt-fase HPLC ble benyttet for separering av de diastereomere forbindelsene 221B og 222D.
Mobil fase:
Løsningsmiddel A: 95% 20 mM ammoniumacetat, pH 5,1, 5% acetonitril Løsningsmiddel B: 95% acetonitril, 5% 20 mM ammoniumacetat, pH 5,1
Gradient:
Lineær gradient fra 100% løsningsmiddel A til 5% løsningsmiddel A i 25 minutter etterfulgt av ekvilibrering ved 100% løsningsmiddel A i 8 minutter. Total analysetid 36 minutter.
Strømningshastighet:
0,2 mL/min
Kolonne:
Phenomenex Luna 5 mikron da 150 x 2,0 mm id
Deteksjon:
UV-deteksjon ved 242 nm
Under disse betingelsene hadde forbindelsene 221B og 222D retensjonstider på henholdsvis 18,983 min og 20,362 min.
Eksempel 459
f3aa. 4B. 5B. 7B. 7aa)- 4- roktahvdro- 5- hvdroksv- 7- f2- hvdroksvetvl)-4- metvl- 1. 3- diokso- 4. 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- yll- 1 -
naftalenkarbonitril ( 459)
Forbindelser 223A og 331 ble omdannet til forbindelse 459 ved biotransformasjon.
Mikrobiell hydroksylering av forbindelse 223A
1. Reaksjon
Til en 500 mL kolbe inneholdende 100 mL av transformasjonsmediet, ble det tilsatt én frossen ampulle (ca. 2 mL) Streptomyces griseus ATCC 10137. Transformasjonsmediet ble fremstillet som følger: til et 2 L plastbeger ble det tilsatt 20 g dekstrose, 5,0 g gjærekstrakt, 5,0 g soyamel, 5,0 g natriumklorid, 5,0 g kalium-fosfat (dibasisk) og 1 L deionisert vann, og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 3 til 30 minutter. pH i blandingen ble deretter justert til 7,0 med 1N HCI eller 1N NaOH. Den resulterende blanding ble fordelt på 500 mL kolber (100 mL per kolbe). Kolbene ble dekket med Bio/Wrap og autoklavert ved 121 °C i 15 minutter og deretter avkjølt til romtemperatur før bruk.
Kulturen ble inkubert ved 28°C og ved 250 rpm i 24 timer. 10 mL av den resulterende kultur ble overført til en 50 mL kolbe som var blitt tilsatt 1 mg av forbindelse 223A i 0,2 mL etanol. Kolben ble inkubert ved 28°C og 250 rpm i 24 timer og reaksjonskulturen ekstrahert med EtOAc (10 mL). EtOAc-ekstraktet ble tørket under N2og residuet løst i 1 mL MeOH (reaksjonsekstrakt).
Produktanalyse
HPLC:
10^L av reaksjonsekstraktet ble injisert i en HPLC-kolonne (YMC ODS-AQ C-18 kolonne, 150 x 6,0 mm i.d.). Kolonnen ble eluert med 1 mM HCI i vann/CH3CN med 1,2 mL/min strømningshastighet; 30 til 60% CH3CN over 8 minutter, 60 til 85% CH3CN over 0,5 minutter, 85% CH3CN i 1 minutt, 85% til 30% CH3CN over
0,5 minutter. Eluentene ble overvåket ved 300 nm. Det ble observert to hovedtopper i arealforholdet 1:1, som hadde de samme UV-spektra som forbindelsene 459 og 331,
og hadde retensjonstider på henholdsvis 4,55 min og 7,23 min, som tilsvarte retensjonstidene fra autentiske prøver av forbindelse 459 (4,53 min) og forbindelse 334 (7,2 min).
LC/ MS
Reaksjonsekstrakt: to hoved-UV-topper
Topp 1, Tr 4,68 min: 391 [M+H]<+>, 343, 319, 303, 289
Topp 2, Tr 5,35 min: 375 [M+H]\ 345
Autentiske prøver
Forbindelse 459, Tr 4,82 min: 391 [M+H]<+>, 343, 319, 289
Forbindelse 331, Tr 5,48 min: 375 [M+H]<+>, 345
Mikrobiell hydroksylering av forbindelse 331
Til en 500 mL kolbe inneholdende 100 mL av transformasjonsmediet, ble det tilsatt én frossen ampulle (ca. 2 mL) Streptomyces griseus ATCC 10137. Transformasjonsmediet ble fremstillet om følger: til et 2 L plastbeger ble det tilsatt 20 g dekstrose, 5,0 g gjærekstrakt, 5,0 g soyamel, 5,0 g natriumklorid, 5,0 g kalium-fosfat (dibasisk) og 1 L deionisert vann, og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 3 til 30 minutter. pH i blandingen ble deretter justert til 7,0 med 1N HCI eller 1N NaOH. Den resulterende blanding ble fordelt i 500 mL kolber (100 mL per kolbe). Kolbene ble dekket med Bio/Wrap og autoklavert ved 121 °C i 15 min og deretter avkjølt til romtemperatur før bruk.
Kulturen ble inkubert ved 28°C og ved 250 rpm i 3 dager. 1 mL av den resulterende kultur ble overført til en 500 mL kolbe innrholdende 100 mL transformasjonsmedium og kolben inkubert ved 28°C og 250 rpm i 24 timer. 10 mL av den resulterende kultur ble overført til en 50 mL kolbe, som var tilsatt 1 mg av forbindelse 331 i 0,2 mL etanol. Kolben ble inkubert ved 28°C og 250 rpm i 23 timer. HPLC-analyse viste at det maksimale arealforhold mellom forbindelse 459 og forbindelse 331 i reaksjonskulturen var ca. 1,1/1.
Eksempel 460
f1aa. 2B. 2aa. 5aa. 6Bb. 6aa)- 4- r2- r2- rrf1. 1- dimetvletvl)-dimetvlsilvlloksvletvlloktahvdro- 6- metvl- 3. 5-diokso- 2, 6- epoksv- 4H- oksirenorf1isoindol- 4- vn-1-naftalenkarbonitril (460)
Forbindelse 231A (2,00 g, 4,10 mmol) ble løst i diklormetan (40 mL) og avkjølt til 0°C. mCPBA (2,36 g, 8,20 mmol) ble tilsatt. Reaksjonsblandingen ble deretter oppvarmet til romtemperatur og omrørt under argon i 18 timer etterfulgt av tilsetning av 10% Na2S03(25 mL) og mettet NaHC03(25 mL). Etter omrøring i 20 minutter ble det organiske lag fraskilt og det vandige lag ekstrahert med diklormetan (3 x 50 mL). De kombinerte organiske lagene ble vasket med saltvann, tørket over Na2S04og konsentrert for å gi 2,0 g forbindelse 460 som et lysegult faststoff. HPLC: 99% ved 4,00 min (retensjonstid) (Phenomenex-prime S5-C18 kolonne 4,6 x 50 mm, eluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% fosforsyre, 4 ml_/min, deteksjon ved 220 nm). MS (ES): m/z [M+H] = 505,19.
Eksempel 461
r3aR- f3aa. 4B. 7B. 7aa)- 4- r4- etvloktahvdro- 7-( 2- hvdroksvetvl)-1, 3- diokso- 4, 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 1 - naftalenkarbonitril & r3aS-( 3aa. 4B. 7B. 7aa) 1- 4- r4- etvloktahvdro- 7-( 2- hvdroksv-etvl)- 1, 3- diokso- 4, 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 1 -
naftalenkarbonitril ( 461 i & 461 ii)
Den racemiske blanding av forbindelse 245C ble separert ved normal fase preparativ kiral HPLC ved bruk av en Chiracel AD kolonne (5 cm x 50 cm) under eluering med 20% løsningsmiddel B (50% MeOH/EtOH) i løsningsmiddel A (heptan), strømningshastighet: 50 mL/min. Forbindelse 461 i eluertes fra 80 min til 100 min og forbindelse 461 ii eluertes fra 125 min til 150 min.
Den absolutte konformasjon av forbindelsene 461 i og 461 ii ble ikke bestemt. For enkelhets skyld angående nomenklatur ble forbindelse 461 i her angitt å ha en «R»-konfigurasjon og forbindelse 461 ii her angitt å ha en «S»-konfigurasjon. Enantiomert rene produkter avledet fra forbindelse 461 i er her angitt å ha en «R»-konfigurasjon og enantiomert rene produkter avledet fra forbindelse 461 ii er her angitt å ha en «S»-konfigurasjon.
Eksempel 462
r3aR-( 3aa, 4B, 7BJaa) 1- 4- r4- r2-( 4- cvanofenoksv) etvn- 7- etvloktahvdro-1, 3- diokso- 4, 7- epoksy- 2H- isoindol- 2- vl]- 1 - naftalenkarbonitril ( 462)
DBAD (29,5 mg, 0,128 mmol) ble tilsatt til en løsning av PPh3(33,6 mg, 0,128 mmol) i THF (0,5 mL). Etter omrøring i 10 minutter ble 4-cyanofenol (15,2 mg, 0,128 mmol) tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt i ytterligere 5 minutter. Forbindelse 461 i (18,3 mg, 0,047 mmol) ble tilsatt og blandingen omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 40% EtOAc/heksan ga 16,9 mg (0,034 mmol, 73,2%) av forbindelse 462. HPLC-betingelser: 98% ved 3,64 min (YMC S5 ODS 4,6 x 50 mm, gradienteluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% H3PO4, deteksjon ved 220 nm).
MS (ES): m/z 492,23 [M+H]<+>.
Eksempel 463
r3aS-( 3aa. 4B. 7B. 7aa) 1- 4- r4- r2-( 4- cvanofenoksv) etvn- 7- etvloktahvdro-1. 3- diokso- 4. 7- epoksv- 2H- isoindol- 2- vn- 1 - naftalenkarbonitril ( 463)
DBAD (29,5 mg, 0,128 mmol) ble tilsatt til en løsning av PPh3(33,6 mg, 0,128 mmol) i THF (0,5 mL). Etter omrøring i 10 minutter ble 4-cyanofenol (15,2 mg, 0,128 mmol) tilsatt, hvorpå reaksjonsblandingen ble omrørt i ytterligere 5 minutter. Forbindelse 461 ii (18,3 mg, 0,047 mmol) ble tilsatt og blandingen omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk. Rensing ved hurtigkromatografi på silikagel under eluering med 40% EtOAc/heksan ga 18,1 mg (0,037 mmol, 78,4%) av forbindelse 463. HPLC-betingelser: 97% ved 3,63 min (YMC S5 ODS 4,6 x 50 mm, gradienteluering i 4 minutter med 10-90% vandig metanol inneholdende 0,2% H3PO4, deteksjon ved 220 nm).
MS (ES): m/z 492,17 [M+H]<+>.

Claims (1)

1. Forbindelsekarakterisert vedfølgende formel:
hvor symbolene har de følgende betydninger og er, for hver forekomst, uavhengig valgt: G er a) usubstituert eller substituert aryl som har fra 1 til 3 ringer, hver ring med 6 karbonatomer; eller b) usubstituert heteroaryl eller substituert heteroaryl valgt fra 3- til 7-leddede monocykliske ringer, 7- til 11-leddede bicykliske ringer og 10- til 16-leddede tricykliske ringer og som har fra 1 til 3 heteroatomer valgt fra N, O og S; hvor nevnte substituerte aryl og nevnte substituerte heteroaryl er substituert med én eller flere substituenter valgt fra: Ci-C3alkyl, halogen, CF3, -C(OH)(CF3)2, OH, -0(d-C3alkyl), -OCF3, -N02, -NH2, -CN, -C(0)OCH3, -S(0)2-NH2, =0, - CH(CN)(fenyl), -S(0)(C^alkyl), -S(0)2(Ci^alkyl), -S(0)2N((Ci.3)alkyl)(fenyl), -O-(bromfenyl), fenyl, pyrrolyl, pyridyl, imidazolyl, tiazolyl og morfolinyl; en av Ai og A2er valgt fra CH, C(Ci-6alkyl) og C(substituert Ci-6alkyl) og den andre av Ai og A2er valgt fra CH, C(Ci.6alkyl), C(substituert Ci^alkyl), -CH2OC(0)(Ci.6alkyl) og CR<7a>, hvor nevnte substituerte Ci-6alkyl er substituert med én eller flere substitutenter valgt fra OH, Br, CN, fenyl, morfolinyl, fluorfenoksy, bromfenoksy, cyanofenoksy, hydroksyfenoksy, trifluormetylfenoksy, benzisoksazol, fenyl metoksy, benzofuranyl, -0-fenyl-NHC(0)CH3, -S(0)n-fenyl-NHC(0)CH3, -NHS(0)2-fenyl, -NHC(0)-butyl, -NHC(0)-CF3og -NHC(0)0-butyl, hvor n er 0,1 eller 2; Y er -CH2S-, -CH2S02- —0—, -CH20-, -S(=0)-, -C(=0)—NR-, -CH2NR-, -CH2N(COR)- eller -CH2N(C02R)-, hvor nevnte gruppe R er valgt fra hydrogen, Ci-6alkyl og fenyl; W er -C(R<7>R<7>')—C(R<7>R<7>')-, -C(R<7>R<7>')—C(=0)- eller -CR<7>=CR<7>'; R<1>og R<1>' er hver uavhengig H, Ci-6alkyl, C3-7cykloalkyl, fenyl eller benzyl;R<4>er H, Ci.6alkyl, -S02R<1>eller -S02NR<1>R<r>;R<5>er Ci-ealkyl, -C(=0) R<1>, -S02R<1>eller -S02NR<1>R<r>; og R7 og R7' er hver uavhengig H, Ci-6alkyl eller Ci-ealkyl substituert med OH, halogen, cyano, OR<4>, -NHR<4>,-NR<5>R<5>, -C(=0)R<1>, -OC(=0)R<1>, -C(=0)OR<1>, -C(=0)NR1R1', -S02R<1>eller -S02NR1R1'; eller alternativt, hvor én av Ai og A2er CR<7a>kan nevnte R<7a>gruppe av Ai eller A2og en gruppe R7 eller R<7>' sammen danne en mettet heterocyklisk ring som har fra 3 til 8 ringelementer og som har en oksygen heteroatom; eller alternativt kan nevnte R7 og R<7>'grupper bundet til to forskjellig karbonatomer være bundet sammen for å danne en kondensert, monocyklisk heterocyklisk gruppe med fra 3 til 8 ringelementer og med fra 1 til 3 heteroatomer valgt fra N, O eller S eller karbocyklisk ring som har fra 3 til 8 karbonatomer; eller et farmasøytisk akseptabelt salt, eller stereoisomer derav.
2. Forbindelse, ifølge krav 1karakterisert vedat den er valgt fra gruppen bestående av: (3aa,4a,7a,7aa)-2-(4-brom-3-metylfenyl)tetrahydro-4,7-etanotiopyrano[3,4-c]pyrrol-1,3,8(2H,4H)-trion(1C); (3aa,4a,7a,7aa)-2-(4-brom-3-metylfenyl)tetrahydro-4,7-etanotiopyrano[3,4-c]pyrrol-1,3,8(2H,4H)-trion-5,5-dioksyd (2); (3aa,4p,7p,7aa)-2-(3-klorfenyl)heksahydro-4-metyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (3); (3aa,4a,7a,7aa)- og (3aa,4p,7p,7aa)-4-[(acetyloksy)metyl]-3a,4,7,7a-tetrahydro-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (henholdsvis 4i & 4ii); (3aa,4a,7a,7aa)- og (3aa,4p,7p,7aa)-4-[(acetyloksy)metyl]-heksahydro-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (henholdsvis 5i & 5ii); (3aa,4a,7a,7a<x)- og (3aa,4p,7p,7aa)-3a,4,7,7a-tetrahydro-5-(hydroksymetyl)-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (henholdsvis éi & 6ii); (3aa,4a,7a,7aa)-3a,4,7,7a-tetrahydro-5-(hydroksymetyl)-4-metyl-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (7); (3aa,4p,7p,7aa)-2-[3,5-bis(trifluormetyl)fenyl]heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion (8); (3aa,4a,7a,7aa)-2-(4-bromfenyl)oktahydro-1,3-diokso-4,7-eteno-5H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-5-karboksylsyre-fenylester (9); (3aa,4a,7a,7aa)-2-(4-bromfenyl)oktahydro-1,3-diokso-4,7-eteno-5H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-5-karboksylsyre-fenylmetylester (10); (3aa,4a7a,7aa)-heksahydro-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-etano-1H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-1,3(2H)-dion-trifluoracetat (11); (3aa,4aJa,7aa)-5-acetylheksahydro-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-etano-1H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-1,3(2H)-dion (12); (3aa,4a,7a,7aa)-5-benzoylheksahydro-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-etano-1H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-1,3(2H)-dion (13); (3aa,4a7a7aa)-heksahydro-5-metyl-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-etano-1H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-1,3(2H)-dion (14); (3aa,4aJaJaa)-heksahydro-5-(fenylmetyl)-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-etano-1H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-1,3(2H)-dion-trifluoracetat (15); (3aa,4aJaJaa)-heksahydro-5-propyl-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-etano-1H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-1,3(2H)-dion-trifluoracetat (16); (3aa,4a,4ap,5ap,6a,6aa)-2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]dekahydro-1,3-diokso-4,6-(iminometano)cykloprop[f]isoindol-7-karboksylsyre-fenylmetylester (17); (3aa,4a,4ap,5ap,6a,6aa)-4-[dekahydro-1,3-diokso-4,6-(iminometano)cykloprop[f]-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril (18); (3aa,4a,4ap,5ap,6a,6aa)-4-[dekahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,6-(iminometano)-cykloprop[f]isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril (19); (3aa,4p,7p,7aa)-4-(oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril (20B); (3aa,4pJp,7aa)-N-[4-[[2-[2-[4-cyano-3-^ 4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etyl]tio]fenyl]acetamid (21E); (3aa,4pJpJaa)-N-[4-[[2-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etyl]sulfinyl]fenyl]acetamid (22); (3aa,4pJp7aa)-N-[4-[[2-[2-[4-cyano-3-(trifluorm^ 4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etyl]sulfonyl]fenyl]acetamid (23); (3aa,4p,7p,7aa)- og (3aa,4a,7a,7aa)-N-[2-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]-oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etyl]benzensulfonamid (henholdsvis 24Ci & 24Cii); (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril (25B); (3aa,4a,7a,7aa)-og (3aa,4p,7p,7aa)-N-[4-[2-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]-oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etoksy]fenyl]acetamid (henholdsvis 26Ci & 26Cii); (3aa,4a,7a,7aa)-heksahydro-2-(2-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (27D); (1aa,2p,2aa,5aa,6p,6aa)-heksahydro-4-(2-naftalenyl)-2,6-epoksy-3H-oksireno[f]-isoindol-3,5(4H)-dion (28B); (3aa,4a7a7aa)-2-[4-brom-3-(trifluormetyl)fenyl]-3a,4,7,7a-tetrahydro-4,7-dimetyl-4,7-epitio-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion-8-oksyd (29); (3aa,4a,7a,7aa)-2-[4-brom-3-(trifluormetyl)fenyl]-3a,4,7,7a-tetrahydro-4,7-epitio-1H-isoindol-1,3(2H)-dion-8-oksyd (30); (3aa,4a,7a,7aa)-heksahydro-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-imino-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (31D); (3aa,4p,7p,7aa)-og (3aa,4a,7a,7aa)-3a,4,7,7a-tetrahydro-4,7-dimetyl-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion (henholdsvis 32i & 32ii); (3aa,4a,7a,7aa)-heksahydro-4,7-dimetyl-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion (33); (3aa,4a,7a,7aa)-tetrahydro-5-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-eteno-1H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-1,3,6(2HI5H)-trion (34B); (3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-(4-fluorfenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril (35); (3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-(2-brometyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril (36); (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4J-dimetyl-2-(3-metyl-4-nitrofenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion (37); (3aa,4p,7p,7aa)-2-(2-fluorenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-[3-klor-4-(4-morfolinyl)fenyl]heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(2,3-dihydro-1H-inden-5-yl)heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-brom-1-naftalenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-klor-1 -naftalenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(5-amino-1-naftalenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(7-hydroksy-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(1 H-indol-5-yl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(1 H-indazol-6-yl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(1,3-benzodioksol-5-yl)-heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-[4-amino-3-(trifluormetyl)fenyl]heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(3-klor-4-jodfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(8-kinolinyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(2,3-dihydro-1,4-benzodioksin-6-yl)heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-[2-okso-4-(trifluormetyl)-2H-1-benzopyran-7-yl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(4-metyl-2-okso-2H-1-benzopyran-7-yl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p7aa)-2-(2,5-dimetoksy-4-nitrofenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2,3,5,6-tetrafluor-4-(oktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(2,4,5-trifluorfenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-d ion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(2,4,5-triklorfenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(2-amino-4,5-diklorfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(3,4-difluorfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-1-acetyl-2,3-dihydro-6-(oktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-y|)-l H-indol; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(3-klor-4-fluorfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-d ion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(3,4-diklorfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(3,4,5-triklorfenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(3-klor-4-metoksyfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(3-klor-4-metylfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(2-metyl-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-klor-3-metylfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(3,4-dimetylfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-[4-brom-3-(trifluormetyl)fenyl]heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-brom-3-metylfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-fluor-3-nitrofenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-[4-fluor-3-(trifluormetyl)fenyl]heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion: (3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-klor-3-nitrofenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-d ion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-[4-klor-3-(trifluormetyl)fenyl]heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-klor-2-metoksy-5-metylfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-amino-3-nitrofenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(4-metyl-3-nitrofenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(3,4-dimetoksyfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(3-hydroksy-4-metoksyfenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(4-metyl-5-nitro-2-pyridinyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-klor-4-(oktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-a-fenylbenzenacetonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(2-metoksy-3-dibenzofuranyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(2,3,4-trifluorfenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-d ion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(2,3-dihydro-2-metyl-1,3-diokso-1H-isoindol-5-yl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-brom-2,3,5,6-tetrafluorfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(2-hydroksy-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-[2,5-diklor-4-(1H-pyrrol-1-yl)fenyl]heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p7aa)-heksahydro-2-[4-(metoksymetyl)-2-okso-2H-1-benzopyran-7-yl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(6-benzotiazolyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-d ion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-metoksy-4-(oktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)benzoesyre-metylester; (3aa,4p,7p,7aa)-2-metyl-5-(oktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(2-okso-2H-1-benzopyran-6-yl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(2,3,5,6-tetrametyl-4-nitrofenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(2,4,5-trimetylfenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-fluor-3-metylfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(3-metoksy-4-metylfenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-N-etyl-2-metyl-5-(oktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-N-fenylbenzensulfonamid; (3aa,4p,7p,7aa)-2,6-dibrom-4-(oktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-benzensulfonamid; (3aa,4p,7p,7aa)-2,4-dimetyl-6-(oktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-3-pyridinkarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(2,3-dimetyl-1H-indol-5-yl)-heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(3-dibenzofuranyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aaI4pI7pI7aa)-heksahydro-2-(2'-hydroksy[1I1^3^1''-terfenyl]-5'-yl)-4I7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(5,6,7,8-tetrahydro-3-hydroksy-2-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(2,3-dihydro-1H-indol-6-yl)heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(1,3-dihydro-2,2-dioksidobenzo[c]tiofen-5-yl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(2-hydroksy-4,5-dimetylfenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(2,3-dihydro-2,2,3,3-tetrafluor-1,4-benzodioksin-6-yl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(1 H-indazol-5-yl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-amino-2,3,5,6-tetrafluorfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-brom-3-klorfenyl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(5-hydroksy-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-4-(oktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-morfolinyl)-5-(oktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-benzoesyre-metylester; (3aa,4p,7p,7aa)-2-fluor-5-(oktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(2-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(9-etyl-9H-karbazol-3-yl)heksahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4pJpJaa)-2-[1,2-dihydro-8-metyl-2-okso-4-(trifluormetyl)-7-kinolinyl]-heksahyd 4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4a,7a,7aa)-heksahydro-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4a,7a,7aa)-heksahydro-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-brom-3-metylfenyl)-3a,4,7,7a-tetrahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-3a,4,7,7a-tetrahydro-2-(2-naftalenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(9-etyl-9H-karbazol-3-yl)-3a,4,7,7a-tetrahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-[4-fluor-3-(trifluormetyl)fenyl]-3a,4,7,7a-tetrahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-1-[1,2-dihydro-8-metyl-2-okso-4-(trifluormetyl)-7-kinolinyl]-3a,4,7,7a-tetrahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4a,7a,7aa)-4-[(acetyloksy)metyl]-2-(4-brom-3-metylfenyl)-3a,4,7,7a-tetrahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[(acetyloksy)metyl]-2-(4-brom-3-metylfenyl)-3a,4,7,7a-tetrahydro-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4,7-dimetyl-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-4-(oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-(benzo[b]tiofen-3-yl)-heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4,7-dimetyl-2-[4-nitro-3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-4-(1,3,3a,4,7,7a-heksahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4a,7a,7aa)-heksahydro-4-metyl-2-(2-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-brom-3-metylfenyl)heksahydro-4-metyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4-metyl-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(3,5-diklorfenyl)heksahydro-4-metyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(3-klor-4-fluorfenyl)heksahydro-4-metyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-metoksy-4-(oktahydro-1,3-diokso-4-metyl-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4-metyl-2-[4-nitro-3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-[4-(1H-imidazol-1-yl)fenyl]-4-metyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-[3-klor-4-(2-tiazolyl)fenyl]heksahydro-4-metyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4a,7a,7aa)-2-(3,5-diklorfenyl)heksahydro-4,7-imino-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4a,7a,7aa)-2-(4-brom-1 -naftalenyl)heksahydro-4,7-imino-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4a,7a,7aa)-2-(4-brom-3-metylfenyl)heksahydro-4,7-imino-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4a,7a,7aa)-heksahydro-2-(4-nitro-1 -naftalenyl)-4,7-imino-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4a,7a,7aa)-8-acetyl-2-(3,5-diklorfenyl)heksahydro-4,7-imino-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4a,7a,7aa)-oktahydro-1,3-diokso-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-etano-5H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-5-karboksylsyre-fenylester; (3aa,4a7a,7aa)-4-(oktahydro-1,3-diokso-4,7-etano-2H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-2-yl)-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4a7a7aa)-4-(oktahydro-5-metyl-1,3-diokso-4,7-etano-2H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-2-yl)-1 -naftalenkarbonitril; (3aa,4a,7a,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)oktahydro-1,3-diokso-4,7-eteno-5H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-5-karboksylsyre-fenylmetylester; (3aa,4a,7a,7aa)-4-(oktahydro-1,3-diokso-4,7-etano-2H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4a,7a,7aa)-4-(oktahydro-5-metyl-1,3-diokso-4,7-etano-2H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4a,7a,7aa)-2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]-oktahydro-1,3-diokso-4,7-eteno-5H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-5-karboksylsyre-fenylmetylester; (3aa,4aJaJaa)-2-[4-brom-3-(trifluormetyl)fenyl]tetrahydro-5-metyl-4,7-eteno-1H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-1,3,6(2H,5H)-trion; (3aa,4a,7a,7aa)-tetrahydro-5-metyl-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-eteno-1H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-1,3,6(2H,5H)-trion; (3aa,4a,7a,7aa)-tetrahydro-5-metyl-2-(2-naftalenyl)-4,7-eteno-1H-pyrrolo[3,4-c]pyridin-1,3,6(2H,5H)-trion; (1aa,2p,2aa,5aa,6p,6aa)-heksahydro-4-[3-(trifluormetyl)fenyl]-2,6-epoksy-3H-oksireno[f]isoindol-3,5(4H)-dion; (1aa,2p,2aa,5aa,6p,6aa)-4-(3,5-diklorfenyl)heksahydro-2,6-epoksy-3H-oksireno[f]isoindol-3,5(4H)-dion; (1aa,2p,2aa,5aa,6p,6aa)-heksahydro-4-(4-nitro-1-naftalenyl)-2,6-epoksy-3H-oksireno[f]isoindol-3,5(4H)-dion; (1aa,2p,2aa,5aa,6p,6aa)-4-(3,4-diklorfenyl)heksahydro-2,6-epoksy-3H-oksireno[f]isoindol-3,5(4H)-dion; 2-[4-(4-bromfenoksy)fenyl]-3a,4,7,7a-tetrahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; 3a,4,7,7a-tetrahydro-2-(2-metoksyfenyl)-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3-(2H)-dion; [(1,2,3,3a J,7a-heksahydro-2-fenyl-4J-epoksy-4H-isoindol-4-yl)metyl]karbaminsyre-(3,5-dimetoksyfenyl)metylester; 2-(2,4-dimetylfenyl)-3a,4,7,7a-tetrahydro-4-(hydroksymetyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; 2-(1,3-benzodioksol-5-yl)-3a,4,7,7a-tetrahydro-4-metyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; 4-[bis(acetyloksy)metyl]-2-(3-bromfenyl)-3a,4,7,7a-tetrahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; N-[[1,2,3,3a,7,7a-heksahydro-2-(2,4,6-trimetylfenyl)-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]metyl]-2,2-dimetylpropanamid; 3a,4,7,7a-tetrahydro-4-(hydroksymetyl)-2-[2-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; 3a,4,7,7a-tetrahydro-4-(hydroksymetyl)-2-(1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; 2-klor-5-(1,3,3a,4,7,7a-heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-benzosyre-metylester; 4-[bis(acetyloksy)metyl]-2-(4-brom-2-nitrofenyl)-3a,4,7,7a-tetrahydro-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; 3a,4,7,7a-tetrahydro-4-metyl-2-(4-metyl-3-nitrofenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; 2-[2-klor-5-(trifluormetyl)fenyl]-3a,4,7,7a-tetrahydro-4-metyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; 2-[4-klor-3-(trifluormetyl)fenyl]-3a,4,7,7a-tetrahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; 2-(1,3,3a,4,7,7a-heksahydro-4-metyl-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-benzonitril; 2-(4-fluorfenyl)-3a,4,7,7a-tetrahydro-4-metyl-4,7-epoksy-1H-isoiondol-1,3(2H)-dion; 2,2,2-trifluor-N-[(1,2,3,3a,7,7a-heksahydro-2-fenyl-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl)-metyl]acetamid; 3a,4,7,7a-tetrahydro-4,7-dimetyl-2-(4-metyl-3-nitrofenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; 2-klor-5-[1,3,3a,477a-heksahydro-4-(hydroksymetyl)-47-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-benzoesyre; 3a,4,7,7a-tetrahydro-4,7-dimetyl-2-(4-nitrofenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-d ion; 3a,4,7,7a-tetrahydro-2-(2-merkaptofenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-d ion; [[2-(4-klorfenyl)-1,2,3,3a,7,7a-heksahydro-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]-metyl]karbaminsyre-2-metylpropylester; N-[[2-(4-klorfenyl)-1,2,3,3a,7,7a-heksahydro-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]metyl]-2,4,6-trimetylbenzensulfonamid; [(1,2,3,3a,7,7a-heksahydro-2-fenyl-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl)metyl]karbaminsyre-1,1-dimetyletylester; N-[[1,2,3,3a,7,7a-heksahydro-2-(4-nitrofenyl)-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]metyl]-2,2-dimetylpropanamid; 2-(2,4-diklorfenoksy)-N-[[1,2,3,3a,7,7a-heksahydro-2-(4-nitrofenyl)-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]metyl]acetamid; N-[[1,2,3,3a,7,7a-heksahydro-2-(4-metylfenyl)-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]metyl]-3,5-d imetoksybenzam id; N-[[2-(4-klorfenyl)-1,2,3,3a,7,7a-heksahydro-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]metyl]-2-nitrobenzensulfonamid; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-[(1S)-1-fenyletyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-[(1 S)-2-hydroksy-1 -fenyletyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4a,7a,7aa)-3a,4,7,7a-tetrahydro-2-[(1 S)-1 -fenyletyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(4-morfolinylmetyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)- og (3aa,4a,7a,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-(fenylmetyl)-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7pJaa)-(4-[7-[2-(4-bromfenoksy)etyl]oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-7-[2-(4-jodfenoksy)etyl]-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p7p7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[4-(trifluormetyl)fenoksy)etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7pJaa)-4-[oktahydro-7-[2-(4-metoksyfenoksy)etyl]-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[7-[2-(4-etoksyfenoksy)etyl]oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[7-[2-(4-klorfenoksy)etyl]oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4pJpJaa)-4-[2-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etoksy]-benzoesyre-metylester; (3aa,4p7pJaa)-heksahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-2-(3-metyl-4-nitrofenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[4-(trifluormetoksy)fenoksy]-etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(3,5-diklorfenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4,7-dimetyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-propannitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-7-[2-(4-morfolinyl)etyl]-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril-trifluoracetat; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(5-fluor-1-naftalenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(5-fluor-4-nitro-1-naftalenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(1,1 -dioksidobenzo[b]tiofen-3-yl)heksahydro-4,7-d imetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-tetrahydro-4,7-dimetyl-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3,5(2H,4H)-trion; (3aa,4a,7a,7aa)-tetrahydro-4,7-dimetyl-2-[3-(trifluormetyl)fenyl]-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3,5(2HI4H)-trion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(5-klor-1-naftalenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(5-klor-4-nitro-1-naftalenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-4-etylheksahydro-7-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4-metyl-2-(2-nattalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion, hurtigere eluerende enantiomer; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4-metyl-2-(2-naftalenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion, langsommere eluerende enantiomer; (3aa,4p,5p,6p,7p,7aa)-4-(oktahydro-4,5,6,7-tetrametyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[4-(trifluormetyl)fenoksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril, hurtigere eluerende antipode; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[4-(trifluormetyl)fenoksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril, langsommere eluerende enantiomer; (3aa,4p,5p,7p,7aa)-4-(oktahydro-5-hydroksy-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,5a,7p,7aa)-4-(oktahydro-5-hydroksy-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril; (aR)-a-metoksybenzen-eddiksyre-2[(3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)-oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etylester; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(metyltio)-4-(oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)benzonitril; (3aa,4p7p7aa)-2-(metylsulfinyl)-4-(oktahydro-47-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)benzonitril; (3aa,4p,7pJaa)-2-(metylsulfonyl)-4-(oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl )benzonitril; (3aa,4p,5p7p,7aa)-heksahydro-5-hydroksy-7-(2-hydroksyetyl)-4-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,5p,7p,7aa)-7-[2-(4-fluorfenoksy)etyl]heksahydro-5-hydroksy-4-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,5p,6p,7p,7aa)-4-(oktahydro-5,6-dihydroksy-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,5a,6a,7p,7aa)-4-(oktahydro-5,6-dihydroksy-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,5p,6p,7p,7aa)-4-[oktahydro-5,6-dihydroksy-4-(hydroksyetyl)-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p,5p,6p,7p,7aa)-4-[oktahydro-5,6-dihydroksy-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[4-(trifluormetyl)fenoksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,5p,5ap,8aa,8ba)-4-(dekahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,8a-epoksy-2H-furo[3,2-e]isoindol-2-yl)-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-eddiksyre; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-eddiksyre-metylester; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)-N-[(4-fluorfenyl)metyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-acetamid; [3aR-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[oktahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aS-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[oktahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aR-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[4-[2-(3-fluorfenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aS-(3aa,4p7p7aa)]-4-[4-[2-(3-fluorfenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-(2-hydroksyetyl)-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p,6p,7p,7aa)-4-[4-[2-(4-cyanofenoksy)etyl]oktahydro-6-hydroksy-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aS-(3aa,4p,5p,7p,7aa)]-4-[oktahydro-5-hydroksy-7-(2-hydroksyetyl)-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aR-(3aa,4p,5p,7p,7aa)]-4-[oktahydro-5-hydroksy-7-(2-hydroksyetyl)-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-(4-cyanofenoksy)etyl]-7-etyloktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[2-(acetyloksy)etyl]-2-(4-cyano-1-naftalenyl)heksahydro-7-metyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[3-(4-cyanofenyl)propyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-[(6-klor-1,2-benzisoksazol-3-yl)oksy]etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aS-(3aa,4p,5p,7p,7aa)]-4-[7-[2-(1,2-benzisoksazol-3-yloksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aR-(3aa,4p,5p,7p,7aa)]-4-[7-[2-(1,2-benzisoksazol-3-yloksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p,5p,7p,7aa)-4-(oktahydro-5-hydroksy-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,5p,7p,7aa)-4-(oktahydro-5-hydroksy-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)oktahydro-1,3-diokso-7-[2-(fenylmetoksy)etyl]-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-propannitril; (3aa,4a,7a,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)oktahydro-1,3-diokso-7-[2-(fenylmetoksy)etyl]-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-propannitril; (3aa,4p7p7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)oktahydro-7-(2-hydroksyetyl)-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-propannitril; (3aa,4a,7a,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)oktahydro-7-(2-hydroksyetyl)-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-propannitril; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)-7-[2-(4-fluorfenoksy)etyl]oktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-propannitril; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(7-klor-2,1,3-benzoksadiazol-4-yl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(7-klor-2-metyl-4-benzofuranyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(7-klor-2-metylbenzo[b]tiofen-4-yl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; [3aS-(3aa,4p,5pI7pI7aa)]-4-[7-[2-(acetyloksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1I3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aR-(3aa,4p,5p,7p,7aa)]-4-[oktahydro-5-hydroksy-7-(2-hydroksyetyl)-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa(E)]-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-(4-okso-4-fenyl-2-butenyl)-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-(4-[7-[2-(4-bromfenoksy)etyl]oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-7-[2-(4-jodfenoksy)etyl]-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p7p7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[4-(trifluormetyl)fenoksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-7-[2-(4-metoksyfenoksy)etyl]-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[7-[2-(4-etoksyfenoksy)etyl]oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[7-[2-(4-klorfenoksy)etyl]oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p7p/aa)-4-[2-[2-[4-cyano-3-(trifluorm^ 4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etoksy]benzoesyre-metylester; (3aa,4p,7BJaa)-heksahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-2-(3-metyl-4-nitrofenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p7p7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[4-(trifluormetoksy)fenoksy]-etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(3,5-diklorfenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4,7-dimetyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[4-(fenylmetoksy)fenoksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[2-(4-fluorfenoksy)etyl]heksahydro-7-metyl-2-(3-metyl-4-nitrofenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4pJpJaa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[4-[(trifluormetyl)tio]fenoksy]-etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-7-[2-(4-nitrofenoksy)etyl]-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[2-(4-fluorfenoksy)etyl]heksahydro-7-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p7p7aa)-4-[oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-7-[2-[2-(trifluormetyl)fenoksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-(2-bromfenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-(3-fluorfenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-[4-(1 H-imidazol-1 -yl)fenyl]-4-metyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p7p7aa)-2-[3-klor-4-(2-tiazolyl)fenyl]heksahydro-4-metyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7pJaa)-heksahydro-4J-dimetyl-2-(3-metyl-4-nitrofenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p7p7aa)-heksahydro-47-dimetyl-2-(2-metyl-4-nitrofenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(3,5-diklorfenyl)heksahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(3,5-diklorfenyl)-4-[2-(4-fluorfenoksy)etyl]heksahydro-7-metyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-[2-(4-hydroksyfenoksy)etyl]-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-(4-cyanofenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4pJpJaa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[3-(trifluormetyl)fenoksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-(3-bromfenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[(4-fluorfenyl)metyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(1,6-dihydro-1-metyl-6-okso-3-pyridinyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4,7-dimetyl-2-(1-metyl-6-okso-3-piperidinyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-(3-cyanofenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etoksy]-benzoesyre-fenylmetylester; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-(2-fenoksyetyl)-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p7p7aa)-2-(3,5-diklor-4-nitrofenyl)heksahydro-47-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7pJaa)-2-(3,5-diklor-4-hydroksyfenyl)heksahydro-4J-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p7p7aa)-2-(5-fluor-1-naftalenyl)heksahydro-47-dimetyl-47-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p7p7aa)-heksahydro-47-dimetyl-2-(1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4pJpJaa)-heksahydro-2-[3-metoksy-4-(5-oksazolyl)fenyl]-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4-[2-(4-metoksyfenoksy)etyl]-7-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-7-[2-[4-(trifluormetyl)fenoksy]etyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-7-[2-(4-nitrofenoksy)etyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(1,6-dihydro-1,4-dimetyl-6-okso-3-pyridinyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-7-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etoksy]-benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-(oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-1,2-benzendikarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-(2-brometyl)heksahydro-7-metyl-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-(4-cyanofenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-[2-(4-metoksyfenoksy)etyl]-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-[2-(3-metoksyfenoksy)etyl]-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p7p7aa)-4-[4-[2-(3-fluorfenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p7p7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-7-[2-[3-(4-morfolinyl)fenoksy]etyl]-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p7p7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-7-[2-[4-nitro-3-(trifluormetyl)fenoksy]etyl]-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-(3-cyanofenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(2,3-dihydro-3-metyl-2-okso-6-benzotiazolyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(2,3-dihydro-2-okso-6-benzotiazolyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-[3-(dimetylamino)fenoksy]etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etoksy]-1,2-benzendikarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-N-[2-cyano-5-(oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)fenyl]acetamid; (3aa,4p,7p,7aa)-4-(oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-(trifluormetoksy)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-2-metoksy-4-(oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-2-[4-(4,5-diklor-1H-imidazol-1-yl)fenyl]heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-[4-(4-brom-1-metyl-1H-pyrazol-3-yl)fenyl]heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-(2-hydroksyetyl)-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-2-jod-4-(oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)benzonitril; (3aa,4p7p7aa)-4-[4-[2-(4-fluorfenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p7p7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[4-(trifluormetyl)fenoksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[4-[2-(4-cyano-3-fluorfenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[2,3,5,6-tetrafluor-4-(trifluormetyl)fenoksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4,7-dimetyl-2-[4-(1H-1,2,4-triazol-3-yl)fenyl]-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-[4-(4,5-dihydro-5-okso-1,2,4-oksadiazol-3-yl)fenyl]heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-[3-metoksy-4-(2-oksazolyl)fenyl]-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(4-hydroksy-1-naftalenyl)-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(8-hydroksy-5-kinolinyl)-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2 H )-dion-trifl uoracetat; (3aa,4p7p7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[metyl(fenylmetyl)amino]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4,7-dimetyl-2-(5-kinolinyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-5-(oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-2-pyridinkarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-5-(oktahydro-4,7-dimetyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-8-kinolinkarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(5-brom-4-nitro-1-naftalenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4,7-dimetyl-2-[8-(trifluormetyl)-4-kinolinyl]-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; 4-fluorbenzoesyre-2-[(3aa,4p7p7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etylester; (3aa,4pJp,7aa)-heksahydro-4-metyl-7-[2-[4-(metylsulfonyl)fenoksy]etyl]-2-(4-nitro-1-naftalenyl)-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(2-naftalenyl)-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-klor-1-naftalenyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (aS)-a-metoksy-a-(trifluormetyl)-benzeneddiksyre-2-[(3aa,4p,7p,7aa)-2-(4-cyano-1-naftalenyl)oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-yl]etylester; (3aa,4p,7p,7aa)-4-[oktahydro-4-metyl-7-[3-(1-naftalenyl)propyl]-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-4,7-dimetyl-2-(2-metyl-6-kinolinyl)-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-heksahydro-2-(5-isokinolinyl)-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p,7p,7aa)-2-(6-benzotiazolyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1H-isoindol-1,3(2H)-dion; [3aR-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[oktahydro-4-[2-(3-metoksyfenoksy)etyl]-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aS-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[oktahydro-4-[2-(3-metoksyfenoksy)etyl]-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aR-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[4-[2-(4-cyanofenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aS-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[4-[2-(4-cyanofenoksy)etyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; (3aa,4a,7a,7aa)-4-[4-[(4-fluorfenyl)metyl]oktahydro-7-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-2-(trifluormetyl)benzonitril; (3aa,4a,7a,7aa)-2-(1,6-dihydro-1,4-dimetyl-6-okso-3-pyridinyl)heksahydro-4,7-dimetyl-4,7-epoksy-1 H-isoindol-1,3(2H)-dion; (3aa,4p7p7aa)-2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]oktahydro-1,3-diokso-7-[2-(fenylmetoksy)etyl]-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-propannitril; (3aa,4p,7p,7aa)-2-[4-cyano-3-(trifluormetyl)fenyl]oktahydro-1,3-diokso-7-[2-(fenylmetoksy)etyl]-4,7-epoksy-4H-isoindol-4-propannitril; (3aa,4p7p7aa)-4-[7-[2-(4-cyanofenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aR-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[7-[2-[(5-klor-2-pyridinyl)oksy]etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aS-(3aa,4 p, 7p, 7aa)]-4-[7-[2-(4-klorfenoksy)etyl]oktahyd ro-5-hyd roksy-4-mety 1-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aR-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[7-[2-(4-klorfenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aS-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[7-[2-(4-acetylfenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aR-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[7-[2-(4-acetylfenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aS-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[7-[2-(3-cyanofenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aR-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[7-[2-(3-cyanofenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aS-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[(5,6,7,8-tetrahydro-1-naftalenyl)oksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aR-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-7-[2-[(5,6,7,8-tetrahydro-1-naftalenyl)oksy]etyl]-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aS-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[7-[2-(4-fluorfenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aR-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[7-[2-(4-fluorfenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aS-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[7-[2-(3,5-dimetoksyfenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aR-(3aa,4p7p7aa)]-4-[7-[2-(3,5-dimetoksyfenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl)-1-naftalenkarbonitril; [3aR-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[7-[2-(4-klor-3-metylfenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aR-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[7-[2-(4-cyano-2,3-difluorfenoksy)etyl]oktahydro-5-hydroksy-4-metyl-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1 -naftalenkarbonitril; [3aR-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[4-etyloktahydro-7-(2-hydroksyetyl)-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aS-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[4-etyloktahydro-7-(2-hydroksyetyl)-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril; [3aR-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[4-[2-(4-cyanofenoksy)etyl]-7-etyloktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1 -naftalenkarbonitril; og [3aS-(3aa,4p,7p,7aa)]-4-[4-[2-(4-cyanofenoksy)etyl]-7-etyloktahydro-1,3-diokso-4,7-epoksy-2H-isoindol-2-yl]-1-naftalenkarbonitril.
3. Farmasøytisk blandingkarakterisert vedat den omfatter en forbindelse ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, og en farmasøytisk akseptabel bærer:
hvor symbolene har de følgende betydninger og er, for hver forekomst, uavhengig valgt: G er a) usubstituert eller substituert aryl som har fra 1 til 3 ringer, hver ring med 6 karbonatomer; eller b) usubstituert heteroaryl eller substituert heteroaryl valgt fra 3- til 7-leddede monocykliske ringer, 7- til 11-leddede bicykliske ringer og 10- til 16-leddede tricykliske ringer og som har fra 1 til 3 heteroatomer valgt fra N, O og S; hvor nevnte substituerte aryl og nevnte substituerte heteroaryl er substituert med én eller flere substituenter valgt fra: Ci-C3alkyl, halogen, CF3, -C(OH)(CF3)2, OH, -0(Ci-C3alkyl), -OCF3, -N02, -NH2, -CN, -C(0)OCH3, -S(0)2-NH2l=0, - CH(CN)(fenyl), -S(0)(Ci-4alkyl), -S(0)2(Ci-4alkyl), -S(0)2N((Ci.3)alkyl)(fenyl), -O-(bromfenyl), fenyl, pyrrolyl, pyridyl, imidazolyl, tiazolyl og morfolinyl; en av Ai og A2er valgt fra CH, C(Ci-6alkyl) og C(substituert Ci-6alkyl) og den andre av Ai og A2er valgt fra CH, C(Ci.6alkyl), C(substituert Ci^alkyl), -CH2OC(0)(Ci.6alkyl) og CR<7a>, hvor nevnte substituerte Ci-6alkyl er substituert med én eller flere substitutenter valgt fra OH, Br, CN, fenyl, morfolinyl, fluorfenoksy, bromfenoksy, cyanofenoksy, hydroksyfenoksy, trifluormetylfenoksy, benzisoksazol, fenyl metoksy, benzofuranyl, -0-fenyl-NHC(0)CH3, -S(0)n-fenyl-NHC(0)CH3, -NHS(0)2-fenyl, -NHC(0)-butyl, -NHC(0)-CF3og -NHC(0)0-butyl, hvor n er 0, 1 eller 2; Y er -CH2S-, -CH2S02- —O— -CH20-, -S(=0)-, -C(=0)—NR-, -CH2NR-, -CH2N(COR)- eller -CH2N(C02R)-, hvor nevnte gruppe R er valgt fra hydrogen, Ci-6alkyl og fenyl; W er -C(R7R7')—C(R7R7')- -C(R<7>R<7>')—C(=0)- eller -CR<7>=CR<7>'; R<1>og R<1>' er hver uavhengig H, Ci-6alkyl, C3-7cykloalkyl, fenyl eller benzyl;R<4>er H, Ci.6alkyl, -S02R<1>eller -S02NR<1>R<1>';R<5>er Ci-ealkyl, -C(=0) R<1>, -S02R<1>eller -S02NR<1>R<r>; og R7 og R7' er hver uavhengig H, Ci-6alkyl eller Ci-6alkyl substituert med OH, halogen, cyano, OR<4>, -NHR<4>,-NR<5>R<5>, -C(=0)R<1>, -OC(=0)R<1>, -C(=0)OR<1>, -C(=0)NR1R1', -S02R<1>eller -S02NR1R1'; eller alternativt, hvor én av Ai og A2er CR<7a>kan nevnte R<7a>gruppe av Ai eller A2og en gruppe R7 eller R<7>' sammen danne en mettet heterocyklisk ring som har fra 3 til 8 ringelementer og som har en oksygen heteroatom; eller alternativt kan nevnte R7 og R7 grupper bundet til to forskjellig karbonatomer være bundet sammen for å danne en kondensert, monocyklisk heterocyklisk gruppe med fra 3 til 8 ringelementer og med fra 1 til 3 heteroatomer valgt fra N, O eller S eller karbocyklisk ring som har fra 3 til 8 karbonatomer.
6. Farmasøytisk blanding ifølge krav 5,karakterisert vedat den ytterligere omfatter et annet anti-cancer middel.
7. Forbindelse ifølge krav 1 for bruk som medikament.
8. Forbindelse ifølge krav 1
hvor symbolene har de følgende betydninger og er, for hver forekomst, uavhengig valgt: G er a) usubstituert eller substituert aryl som har fra 1 til 3 ringer, hver ring med 6 karbonatomer; eller b) usubstituert heteroaryl eller substituert heteroaryl valgt fra 3- til 7-leddede monocykliske ringer, 7- til 11-leddede bicykliske ringer og 10- til 16-leddede tricykliske ringer og som har fra 1 til 3 heteroatomer valgt fra N, O og S; hvor nevnte substituerte aryl og nevnte substituerte heteroaryl er substituert med én eller flere substituenter valgt fra: Ci-C3alkyl, halogen, CF3, -C(OH)(CF3)2, OH, -0(Ci-C3alkyl), -OCF3, -N02, -NH2, -CN, -C(0)OCH3, -S(0)2-NH2l=0, - CH(CN)(fenyl), -S(0)(C^alkyl), -S(0)2(Ci^alkyl), -S(0)2N((Ci-3)alkyl)(fenyl), -O-(bromfenyl), fenyl, pyrrolyl, pyridyl, imidazolyl, tiazolyl og morfolinyl; en av Ai og A2er valgt fra CH, C(Ci-6alkyl) og C(substituert Ci-6alkyl) og den andre av Ai og A2er valgt fra CH, C(Ci.6alkyl), C(substituert Ci^alkyl), -CH2OC(0)(Ci.6alkyl) og CR<7a>, hvor nevnte substituerte Ci-6alkyl er substituert med én eller flere substitutenter valgt fra OH, Br, CN, fenyl, morfolinyl, fluorfenoksy, bromfenoksy, cyanofenoksy, hydroksyfenoksy, trifluormetylfenoksy, benzisoksazol, fenyl metoksy, benzofuranyl, -0-fenyl-NHC(0)CH3, -S(0)n-fenyl-NHC(0)CH3, -NHS(0)2-fenyl, -NHC(0)-butyl, -NHC(0)-CF3og -NHC(0)0-butyl, hvor n er 0, 1 eller 2; Y' er -CH2S-, -CH2S02- —O— -CH20-, -S(=0)-, -C(=0)—NR-, -CH2NR-, -CH2N(COR)- eller -CH2N(C02R)-, hvor nevnte gruppe R er valgt fra hydrogen, Ci-6alkyl og fenyl; W er -C(R<7>R<7>')—C(R<7>R<7>')-, -C(R<7>R<7>')—C(=0)- eller -CR<7>=CR<7>'; R<1>og R<1>' er hver uavhengig H, Ci-6alkyl, C3-7cykloalkyl, fenyl eller benzyl;R<4>er H, Ci.6alkyl, -S02R<1>eller -S02NR<1>R<r>;R<5>er Ci-ealkyl, -C(=0) R<1>, -S02R<1>eller -S02NR<1>R<r>; og R7 og R7' er hver uavhengig H, Ci-6alkyl eller Ci-6alkyl substituert med OH, halogen, cyano, OR<4>, -NHR<4>,-NR<5>R<5>, -C(=0)R<1>, -OC(=0)R<1>, -C(=0)OR<1>, -C(=0)NR<1>R<1>', -S02R<1>eller -S02NR1Rr; eller alternativt, hvor én av Ai og A2er CR<7a>kan nevnte R<7a>gruppe av Ai eller A2og en gruppe R7 eller R<7>' sammen danne en mettet heterocyklisk ring som har fra 3 til 8 ringelementer og som har en oksygen heteroatom; eller alternativt kan nevnte R7 og R<7>grupper bundet til to forskjellig karbonatomer være bundet sammen for å danne en kondensert, monocyklisk heterocyklisk gruppe med fra 3 til 8 ringelementer og med fra 1 til 3 heteroatomer valgt fra N, O eller S eller karbocyklisk ring som har fra 3 til 8 karbonatomer; for behandling av tilstander valgt fra gruppen bestående av proliferative sykdommer, cancere, benign prostatahypertrofi, adenomer og neoplasier av prostata, benigne eller maligne tumorceller som inenholder androgenreseptoren, hjertesykdom, angiogene tilstander eller forstyrrelser, hirsutisme, akne, hyperpilosus, inflammasjon, immunmodulasjon, seboré, endometriose, polycystisk ovariesyndrom, androgen alopesi, hypogonadisme, osteoporose, undertrykkelse av spermatogenese, libido, kakeksi, anoreksi, inhibering av muskelatrofi hos oppegående pasienter, androgentilskudd ved aldersrelaterte nedsatte testosteronnivåer hos menn, cancere som uttrykker østrogenreseptoren, prostatakreft, brystkreft, endometriekreft, hetetokter, vaginal tørrhet, menopause, amenoré, dysmenoré, prevensjon, svangerskapsavbrudd, cancere inneholdende progesteronreseptoren, endometriose, kakeksi, menopause, syklussynkroni, meninginom, fibroid, fødsels-induksjon, autoimmunsykdommer, Alzheimers sykdom, psykotiske forstyrrelser, medikamentavhengighet, ikke-insulin avhengig diabetes mellitus, dopaminreseptor-medierte forstyrrelser, kongestiv hjertesvikt, feilregulering av kolesterolhomeostase og svekking av metabolismen av et farmasøytisk middel.
NO20031266A 2000-09-19 2003-03-19 Kondenserte heterocykliske suksinimidforbindelser og analoger derav, farmasoytiske blandinger omfattende slike, slike forbindelser for bruk som medikament samt slike forbindelser for behandling av sykdom NO329931B1 (no)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US23351900P 2000-09-19 2000-09-19
US28443801P 2001-04-18 2001-04-18
US28473001P 2001-04-18 2001-04-18
PCT/US2001/019655 WO2002024702A1 (en) 2000-09-19 2001-06-20 Fused heterocyclic succinimide compounds and analogs thereof, modulators of nuclear hormone receptor function

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO20031266D0 NO20031266D0 (no) 2003-03-19
NO20031266L NO20031266L (no) 2003-05-13
NO329931B1 true NO329931B1 (no) 2011-01-24

Family

ID=27398441

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20031266A NO329931B1 (no) 2000-09-19 2003-03-19 Kondenserte heterocykliske suksinimidforbindelser og analoger derav, farmasoytiske blandinger omfattende slike, slike forbindelser for bruk som medikament samt slike forbindelser for behandling av sykdom

Country Status (36)

Country Link
US (1) US20040176324A1 (no)
EP (1) EP1319007B9 (no)
JP (1) JP4966477B2 (no)
KR (1) KR100765670B1 (no)
CN (2) CN1307181C (no)
AR (1) AR035340A1 (no)
AT (1) ATE318822T1 (no)
AU (2) AU6994301A (no)
BG (1) BG107675A (no)
BR (1) BR0113980A (no)
CA (1) CA2423071A1 (no)
CZ (1) CZ2003780A3 (no)
DE (1) DE60117551T2 (no)
DK (1) DK1319007T3 (no)
EE (1) EE200300108A (no)
ES (1) ES2260244T3 (no)
GE (1) GEP20074144B (no)
HK (1) HK1054230B (no)
HR (1) HRP20030305B9 (no)
HU (1) HUP0400455A3 (no)
IL (1) IL155019A0 (no)
IS (1) IS6750A (no)
MX (1) MXPA03002412A (no)
MY (1) MY138531A (no)
NO (1) NO329931B1 (no)
NZ (1) NZ524803A (no)
PE (1) PE20020729A1 (no)
PL (1) PL361707A1 (no)
PT (1) PT1319007E (no)
SK (1) SK4982003A3 (no)
TW (1) TWI305208B (no)
UA (1) UA78686C2 (no)
UY (1) UY26808A1 (no)
WO (1) WO2002024702A1 (no)
YU (1) YU20003A (no)
ZA (1) ZA200302963B (no)

Families Citing this family (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040077605A1 (en) * 2001-06-20 2004-04-22 Salvati Mark E. Fused heterocyclic succinimide compounds and analogs thereof, modulators of nuclear hormone receptor function
JP2004509072A (ja) * 2000-06-28 2004-03-25 ブリストル−マイヤーズ　スクイブ　カンパニー 選択的アンドロゲン受容体モジュレーター並びにその同定、設計及び使用方法
EP1854798A3 (en) * 2000-09-19 2007-11-28 Bristol-Myers Squibb Company Fused heterocyclic succinimide compounds and analogs thereof, modulators of nuclear hormone receptor function
US20040087548A1 (en) * 2001-02-27 2004-05-06 Salvati Mark E. Fused cyclic succinimide compounds and analogs thereof, modulators of nuclear hormone receptor function
US7087636B2 (en) 2001-12-19 2006-08-08 Bristol-Myers Squibb Company Fused heterocyclic compounds and analogs thereof, modulators of nuclear hormone receptor function
TWI263640B (en) * 2001-12-19 2006-10-11 Bristol Myers Squibb Co Fused heterocyclic succinimide compounds and analogs thereof, modulators of nuclear hormone receptor function
AU2002950217A0 (en) 2002-07-16 2002-09-12 Prana Biotechnology Limited 8- Hydroxy Quinoline Derivatives
KR20050044902A (ko) 2002-08-12 2005-05-13 다케다 야쿠힌 고교 가부시키가이샤 축합 벤젠 유도체 및 용도
EP1636167A2 (en) * 2003-06-10 2006-03-22 SmithKline Beecham Corporation 1-aminonaphthalenes as modulators of androgen, glucocorticoid, mineralocorticoid and progesterone receptors
US7378426B2 (en) 2004-03-01 2008-05-27 Bristol-Myers Squibb Company Fused heterotricyclic compounds as inhibitors of 17β-hydroxysteroid dehydrogenase 3
US7417040B2 (en) * 2004-03-01 2008-08-26 Bristol-Myers Squibb Company Fused tricyclic compounds as inhibitors of 17β-hydroxysteroid dehydrogenase 3
US7709516B2 (en) 2005-06-17 2010-05-04 Endorecherche, Inc. Helix 12 directed non-steroidal antiandrogens
CA2617256C (en) * 2005-08-01 2014-07-15 Takeda Pharmaceutical Company Limited Cyclic amine compound
JPWO2008007664A1 (ja) * 2006-07-11 2009-12-10 武田薬品工業株式会社 二環性複素環化合物およびその用途
US9284345B2 (en) 2007-04-12 2016-03-15 Endorecherche, Inc. 17alpha-substituted steroids as systemic antiandrogens and selective androgen receptor modulators
CN102482228A (zh) 2009-07-17 2012-05-30 盐野义制药株式会社 含有内酰胺或苯磺酰胺化合物的药物
JP6285866B2 (ja) 2011-11-23 2018-02-28 セラピューティックスエムディー インコーポレーテッドＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓｍｄ， Ｉｎｃ． 天然複合ホルモン補充製剤および療法
US9301920B2 (en) 2012-06-18 2016-04-05 Therapeuticsmd, Inc. Natural combination hormone replacement formulations and therapies
US10806740B2 (en) 2012-06-18 2020-10-20 Therapeuticsmd, Inc. Natural combination hormone replacement formulations and therapies
US20150196640A1 (en) 2012-06-18 2015-07-16 Therapeuticsmd, Inc. Progesterone formulations having a desirable pk profile
US10806697B2 (en) 2012-12-21 2020-10-20 Therapeuticsmd, Inc. Vaginal inserted estradiol pharmaceutical compositions and methods
US20130338122A1 (en) 2012-06-18 2013-12-19 Therapeuticsmd, Inc. Transdermal hormone replacement therapies
US11246875B2 (en) 2012-12-21 2022-02-15 Therapeuticsmd, Inc. Vaginal inserted estradiol pharmaceutical compositions and methods
US10568891B2 (en) 2012-12-21 2020-02-25 Therapeuticsmd, Inc. Vaginal inserted estradiol pharmaceutical compositions and methods
US9180091B2 (en) 2012-12-21 2015-11-10 Therapeuticsmd, Inc. Soluble estradiol capsule for vaginal insertion
US11266661B2 (en) 2012-12-21 2022-03-08 Therapeuticsmd, Inc. Vaginal inserted estradiol pharmaceutical compositions and methods
US10471072B2 (en) 2012-12-21 2019-11-12 Therapeuticsmd, Inc. Vaginal inserted estradiol pharmaceutical compositions and methods
US10537581B2 (en) 2012-12-21 2020-01-21 Therapeuticsmd, Inc. Vaginal inserted estradiol pharmaceutical compositions and methods
US9682960B2 (en) 2013-12-19 2017-06-20 Endorecherche, Inc. Non-steroidal antiandrogens and selective androgen receptor modulators with a pyridyl moiety
AU2015264003A1 (en) 2014-05-22 2016-11-17 Therapeuticsmd, Inc. Natural combination hormone replacement formulations and therapies
US10328087B2 (en) 2015-07-23 2019-06-25 Therapeuticsmd, Inc. Formulations for solubilizing hormones
US10286077B2 (en) 2016-04-01 2019-05-14 Therapeuticsmd, Inc. Steroid hormone compositions in medium chain oils
WO2017173071A1 (en) 2016-04-01 2017-10-05 Therapeuticsmd, Inc. Steroid hormone pharmaceutical composition
US11649234B2 (en) 2018-06-14 2023-05-16 The University Of Florida Research Foundation, Inc. Nonmuscle myosin II inhibitors for substance use relapse
US11633405B2 (en) 2020-02-07 2023-04-25 Therapeuticsmd, Inc. Steroid hormone pharmaceutical formulations
WO2022061226A1 (en) * 2020-09-19 2022-03-24 Augusta University Research Institute, Inc. Compositions and methods for inhibiting trem-1

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3261845A (en) * 1964-07-14 1966-07-19 Dow Chemical Co N-phenyl derivatives of 3,6-epoxyhexahydrophthalimide
JPS5046697A (no) * 1973-08-20 1975-04-25
US5539126A (en) * 1994-04-20 1996-07-23 Bristol-Myers Squibb Company Method for preparing homochiral maleimide intermediates, via silylation techniques
JPH10510840A (ja) * 1994-12-22 1998-10-20 リガンド・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド ステロイド受容体モジュレーター化合物および方法
ATE209207T1 (de) * 1996-06-27 2001-12-15 Ligand Pharm Inc Androgen rezeptor modulator verbindungen und verfahren
EP0979407A1 (en) * 1997-04-29 2000-02-16 The Salk Institute For Biological Studies Methods for identifying ligands for nuclear hormone receptors
US7101681B1 (en) * 1997-11-21 2006-09-05 Amgen, Inc. Nuclear hormone receptor drug screens
WO2001019831A1 (en) * 1999-09-10 2001-03-22 Novo Nordisk A/S MODULATORS OF PROTEIN TYROSINE PHOSPHATASES (PTPases)
JP2004509072A (ja) * 2000-06-28 2004-03-25 ブリストル−マイヤーズ　スクイブ　カンパニー 選択的アンドロゲン受容体モジュレーター並びにその同定、設計及び使用方法

Also Published As

Publication number Publication date
HRP20030305B9 (en) 2008-03-31
PT1319007E (pt) 2006-05-31
JP2004509895A (ja) 2004-04-02
HK1054230B (zh) 2006-07-28
AU6994301A (en) 2002-04-02
GEP20074144B (en) 2007-07-10
AR035340A1 (es) 2004-05-12
BG107675A (bg) 2003-12-31
EP1319007B1 (en) 2006-03-01
US20040176324A1 (en) 2004-09-09
CN1307181C (zh) 2007-03-28
PE20020729A1 (es) 2002-08-11
DK1319007T3 (da) 2006-06-19
KR20030028847A (ko) 2003-04-10
HRP20030305B1 (en) 2007-12-31
JP4966477B2 (ja) 2012-07-04
CN1995039A (zh) 2007-07-11
ATE318822T1 (de) 2006-03-15
DE60117551T2 (de) 2007-01-18
WO2002024702A1 (en) 2002-03-28
CZ2003780A3 (cs) 2004-01-14
UA78686C2 (en) 2007-04-25
HUP0400455A3 (en) 2007-10-29
TWI305208B (en) 2009-01-11
HRP20030305A2 (en) 2005-04-30
CA2423071A1 (en) 2002-03-28
EP1319007A1 (en) 2003-06-18
EP1319007B9 (en) 2007-10-10
CN1608069A (zh) 2005-04-20
HUP0400455A2 (hu) 2004-06-28
MY138531A (en) 2009-06-30
AU2001269943B2 (en) 2006-11-09
KR100765670B1 (ko) 2007-10-10
NO20031266L (no) 2003-05-13
DE60117551D1 (de) 2006-04-27
MXPA03002412A (es) 2004-05-05
HK1054230A1 (en) 2003-11-21
NZ524803A (en) 2004-09-24
ES2260244T3 (es) 2006-11-01
ZA200302963B (en) 2004-07-15
IS6750A (is) 2003-03-18
YU20003A (sh) 2006-03-03
IL155019A0 (en) 2003-10-31
BR0113980A (pt) 2003-06-24
PL361707A1 (en) 2004-10-04
EE200300108A (et) 2005-02-15
NO20031266D0 (no) 2003-03-19
SK4982003A3 (en) 2004-05-04
UY26808A1 (es) 2002-01-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO329931B1 (no) Kondenserte heterocykliske suksinimidforbindelser og analoger derav, farmasoytiske blandinger omfattende slike, slike forbindelser for bruk som medikament samt slike forbindelser for behandling av sykdom
US7141578B2 (en) Fused heterocyclic succinimide compounds and analogs thereof, modulators of nuclear hormone receptor function
AU2002361785B2 (en) Fused heterocyclic succinimidecompounds and analogs thereof, modulators of nuclear hormone receptor function
US7342034B2 (en) Fused heterocyclic compounds and analogs thereof, modulators of nuclear hormone receptor function
AU2001269943A1 (en) Fused heterocyclic succinimide compounds and analogs thereof, modulators of nuclear hormone receptor function
US20060111424A1 (en) Fused cyclic succinimide compounds and analogs thereof, modulators of nuclear hormone receptor function
US6953679B2 (en) Method for the preparation of fused heterocyclic succinimide compounds and analogs thereof
US7655689B2 (en) Fused heterocyclic succinimide compounds and analogs thereof, modulators of nuclear hormone receptor function
RU2298554C2 (ru) Конденсированные гетероциклические сукцинимидные соединения
KR20030014407A (ko) 융합 고리형 핵 호르몬 수용체 기능 조절체
AU2002250163A1 (en) Fused cyclic succinimide compounds and analogs thereof, modulators of nuclear hormone receptor function

Legal Events

Date Code Title Description
MM1K Lapsed by not paying the annual fees