NO322313B1 - Indol-derivater, bruk av disse som medikament, farmasoytiske preparater inneholdende disse samt anvendelse av disse for fremstilling av medikamenter for behandling og/eller forebygging av sykdommer - Google Patents

Indol-derivater, bruk av disse som medikament, farmasoytiske preparater inneholdende disse samt anvendelse av disse for fremstilling av medikamenter for behandling og/eller forebygging av sykdommer Download PDF

Info

Publication number
NO322313B1
NO322313B1 NO20016149A NO20016149A NO322313B1 NO 322313 B1 NO322313 B1 NO 322313B1 NO 20016149 A NO20016149 A NO 20016149A NO 20016149 A NO20016149 A NO 20016149A NO 322313 B1 NO322313 B1 NO 322313B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
indol
dichloro
pharmaceutically acceptable
tetramethylpiperidin
benzamide
Prior art date
Application number
NO20016149A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20016149D0 (no
NO20016149L (no
Inventor
Carlo Farina
Pietro A T Novella
Stefania Gagliardi
Original Assignee
Nikem Res Srl
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nikem Res Srl filed Critical Nikem Res Srl
Publication of NO20016149D0 publication Critical patent/NO20016149D0/no
Publication of NO20016149L publication Critical patent/NO20016149L/no
Publication of NO322313B1 publication Critical patent/NO322313B1/no

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07DHETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/10Indoles; Hydrogenated indoles with substituted hydrocarbon radicals attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/18Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00Drugs for disorders of the respiratory system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00Drugs for dermatological disorders
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06Antipsoriatics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02Ophthalmic agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06Antihyperlipidemics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04Antibacterial agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12Antivirals
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12Antivirals
    • A61P31/14Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12Antivirals
    • A61P31/14Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18Antivirals for RNA viruses for HIV
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00Antineoplastic agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00Antineoplastic agents
    • A61P35/02Antineoplastic agents specific for leukemia
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02Immunomodulators
    • A61P37/06Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07DHETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07DHETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Cardiology (AREA)

Description

NYE FORBINDELSER
Foreliggende oppfinnelse angår indol-derivater, bruk av disse som medikament, farmasøytiske preparater inneholdende disse samt anvendelse av disse for fremstilling av medikamenter for behandling og/eller forebygging av sykdommer
Sykdommer forbundet med tap av benmasse er kjent å være forårsaket av overaktivitet av osteoklastceller. Det er også kjent at visse forbindelser, vanligvis beslektet med bafilomycin, er anvendelige for behandling av slike sykdommer. For eksempel beskriver Internasjonal Søknad PublikasjonsnummerWO 91/06296 (Aktiebolaget Astra) visse bafilomycin-makrolider for behandling av benpåvirkende sykdommer.
Imidlertid er bafllomycin-derivater ikke selektive for osteoklaster hos mennesker.
Anvendelse av disse forbindelser er derfor forbundet med uakseptabel toksisitet på grunn av generell blokkade av andre essensielle v-ATPaser. Faktisk finnes det hittil ingen kjent behandling som er selektiv for de humane osteoklaster.
Søking etter en vellykket behandling av sykdommer forbundet med tap av benmasse hos mennesker er ytterligere komplisert ved at typen av det terapeutiske mål for den selektive hemning av osteoklastene er kontroversiell. Således indikerer Baron et al (Internasjonal Søknad Publikasjonsnummer WO 93/01280) at en spesifikk vacuolar ATPase (v-ATPase) er identifisert i osteoklaster som et potensielt terapeutisk mål. Imidlertid ble Baron-arbeidet utført i kyllinger og Hall et al ( Bone and Mineral 27,159-166, (1994)), i en undersøkelse relatert til pattedyr, konkluderte med at i motsetning til fugle- osteoklast v-ATPase, er pattedyr-osteoklast v-ATPase farmakologisk lignende v-ATPase i andre celler, og den er derfor sannsynlig ikke et godt terapeutisk mål.
Det har nå overraskende blitt funnet at spesielle indol-forbindelser er selektive for pattedyr-osteoklaster som selektivt hemmer deres ben-resorberende aktivitet. Disse forbindelser betraktes derfor som spesielt anvendelige for behandling og/eller forebygging av sykdommer forbundet med tap av benmasse, så som osteoporose og beslektete osteopene sykdommer, Pagets sykdom, hyperparathyroidisme og beslektede sykdommer. Disse forbindelser blir også ansett å ha antitumor-aktivitet, antiviral aktivitet (for eksempel mot Semliki Forest, Vesicular Stomatitis, Newcastle Sykdom, Influensa A og B, HIV virus), antiulcer aktivitet (for eksempel kan forbindelsene være anvendelige for behandling av kronisk gastritt og peptisk ulcer fremkalt med Helicobacter pylori), immunosuppresiv aktivitet, antilipidemisk aktivitet, antiaterosklerotisk aktivitet og å være anvendelige for behandling av AIDS og Alzheimers sykdom. Videre anses disse forbindelser også som anvendelige ved hemning av angiogenese, dvs. dannelsen av nye blodkar som observeres i forskjellige typer av patologiske tilstander ( angiogene sykdommer) så som revmatoid artritt, diabetisk retinopati, psoriasis og faste tumorer.
Oppfinnelsen tilveiebringer følgende forbindelser:4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-3-etoksy-N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)-benzamid;
4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-3-benzyloksy-N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)-benzamid; 4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-3-propoksy-N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)benzamid; 4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-N-[3-[4-(3-metoksyfenyl)piperazin-l-yl]propyl]-3-metoksy-benzamid;
4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-N-[3-[4-(2-pyrimidyl)piperazin-l-yl]propyl]-3-metoksy-benzamid;
4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)-3-metoksybenzamid; 4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-N-(l,2,2,6,6-pentametylpiperidin-4-yl)-3-etoksybenzamid; 4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-N-(l-benzylpiperidin-4-yl)-3-etoksybenzamid; 4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)-2,5-dimetoksybenzamid; 4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-N-(l,2,2,6,6-pentametylpiperidin-4-yl)-2,5-dimetoksy-benzamid;
4-(5-metoksy-6-klor-lH-indol-2-yl)-N-(2,2,6,6-tetrametylpipeirdin-4-yl)-3-etoksy-benzamid;
4-(5,6-diklor-1 H-indol-2-yl)-3-metoksy-N-(( 1 -etoksykarbonylpentyl)piperidin-4-yl)benzamid;
4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-3-metoksy-N-((karboksybutyl)piperidin-4-yl)benzamid; 4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)-3-(hydroksykarbonyl-metoksy)benzamid;
4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)-3-(2-hydroksy-etoksy)benzamid;
4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-N-(2,2,6,6-tetrametyrpiperidin-4-yl)-3-(3-amino-propoksy)-benzamid;
4K5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)-3-(2-dimemlyamino-etoksy)benzamid og
4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)-3-(2,3-dihydroksy-propoksy)benzamid.
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav eller et farmasøytisk alseptebelt solvat derav.
Visse av forbindelsene med formel (I) kan inneholde chirale atomer og/eller multiple bindinger og kan derfor foreligge som stereoisomerer. Oppfinnelsen strekker seg til alle stereoisomere former av forbindelsene med formel (I) omfattende geometriske isomerer, diastereoisomerer, enantiomerer og blandinger derav, omfattende racemiske modifikasjoner. Stereoisomerer kan separeres eller oppløses ved konvensjonelle metoder.
Egnede salter er farmasøytisk akseptable salter.
Egnede farmasøytisk akseptable salter omfatter syreaddisjonssalter og salter av karboksygrupper.
Egnede farmasøytisk akseptable syreaddisjonssalter omfatter salter med uorganiske syrer, slik som for eksempel saltsyre, bromhydrogensyre, ortofosforsyre eller svovelsyre, eller med organiske syrer slik som for eksempel som metansulfonsyre, toluensulfonsyre, eddiksyre, propionsyre, melkesyre, sitronsyre, fumarsyre, eplesyre, ravsyre, salicylsyre, maleinsyre, glycerofosforsyre eller acetylsalicylsyre.
Egnede farmasøytisk akseptable salter av karboksygrupper omfatter metallsalter, så som for eksempel aluminium, alkalimetallsalter så som natrium eller kalium og litium, jordalkalimetallsalter så som kalsium eller magnesium og ammonium eller substituerte ammoniumsalter, for eksempel de med Ci_6alkylaminer så som trietylamin, hydroksyCj. galkylaminer så som 2-hydroksyetylamin, bis(2-hydroksyetyl)amin eller tri(2-hydroksyetyl)amin, cykloalkylaminer så som dicykloheksylamin eller med procain, 1,4-dibenzyl-piperidin, N-benzyl-b-fenetylamin, dehydroabietylamin, N,N'-bisdehydroabietylamin, glucamin, N-metylglucarnin eller baser av pyridin-typen så som pyridin, collidin eller kinolin.
Egnede solvater av forbindelsene med formel (I) er farmasøytisk akseptable solvater, så som hydrater.
Saltene og/eller solvatene av forbindelsene med formel (I) som ikke er farmasøytisk akseptable, kan være anvendelige som mellomprodukter ved fremstilling av farmasøytisk akseptable salter og/eller solvater av forbindelser med formel (I) eller forbindelsene med formel (I) selv og som sådanne utgjør et annet aspekt ved foreliggende oppfinnelse.
En forbindelse med formel (I) eller et salt derav eller et solvat derav kan isoleres i henhold til kjemiske standardprosedyrer.
Fremstilling av salter og/eller solvater av forbindelsene med formel (I) kan utføres ved anvendelse av den passende konvensjonelle prosedyre.
Hvis nødvendig kan blandinger av isomerer av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse separeres i de individuelle stereoisomere ved konvensjonelle metoder. For eksempel kan enantiomerer spaltes ved anvendelse av en optisk aktiv syre som et oppløsningsmiddel. Egnete optisk aktive syrer som kan anvendes som oppløsningsmidler er beskrevet i " Topics in Stereochemistry", Vol. 6, Wiley Interscience, 1971, Allinger, N.L. og Eliel, W.L. Eds.
Den absolutte konfigurasjon av forbindelser kan bestemmes ved konvensjonelle metoder så som røntgenkrystallografiske teknikker.
Saltene og solvater av forbindelsene nevnt her kan om nødvendig fremstilles ved metoder som er konvensjonelle på området. For eksempel kan syreaddisjonssalter fremstilles ved behandling av en forbindelse med formel (I) med den tilsvarende syre.
Som nevnt ovenfor er forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse angitt å ha anvendelige terapeutiske egenskaper.
Av spesiell interesse er osteoporosen forbundet med de peri- og post-menopausale tilstander. Også omfattet er anvendelse av forbindelsene for fremstilling av medikamenter til behandling og forebygging av Pagets sykdom, hyperkalsemi forbundet med ben-neoplasmer og alle typene av osteoporose-sykdommer som er klassifisert nedenfor i henhold til deres etiologi:
Primær osteoporose
Involusjonal
Type I eller postmenopausal
Type II eller senil
Ungdommer
Idiopatisk hos unge voksne
Sekundær osteoporose
Endocrin abnormalitet
Hyperthyroidisme
Hypogonadisme
Eggstokk-agenese eller Turners syndrom
Hyperadrenocorticisme eller Cushings syndrom
Hyperparathyroidisme
Benmargsabnormaliteter
Multippelt myelom og beslektete lidelser
Systemisk mastocytose
Disseminert karsinom
Gauchers sykdom
Bindevevsabnormaliteter
Osteogenesis imperfecta
Homocystinuria
Ehlers-Danlos syndrom
Marfans syndrom
Menkes syndrom
Forskjellige årsaker
Immobilisering eller vektløshet
Sudecks atrofi
Kronisk obstruktiv pulmonal sykdom
Kronisk alkoholisme
Kronisk heparin-administrering
Kronisk inntak av antikonvulsive medikamenter
I et annet aspekt er foreliggende oppfinnelse en forbindelse med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav eller et farmasøytisk akseptabelt solvat derav, for bruk som medikament.
En forbindelse med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav eller et farmasøytisk akseptabelt solvat derav kan administreres perse eller, fortrinnsvis, som et farmasøytisk preparat som også omfatter en farmasøytisk akseptabel bærer.
Følgelig tilveiebringer foreliggende oppfinnelse også et farmasøytisk preparat omfattende en forbindelse med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav eller et farmasøytisk akseptabelt solvat derav og en farmasøytisk akseptabel bærer for denne.
Aktive forbindelser eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav eller et farmasøytisk akseptabelt solvat derav blir normalt administrert i enhetsdoseform.
En mengde som er effektiv for å behandle lidelsene ovenfor beskrevet avhenger av slike faktorer som effektiviteten av de aktive forbindelser, den spesielle karakter av det farmasøytisk akseptable salt eller farmasøytisk akseptable solvat som er valgt, karakteren og alvorlighetsgraden av lidelsene som behandles og vekten til pattedyret. Imidlertid vil en enhetsdose inneholde normalt 0,01 til 50 mg, for eksempel 1 til 25 mg, av forbindelsen ifølge foreliggende oppfinnelse. Enhetsdoser vil normalt administreres én gang eller mer enn én gang en dag, for eksempel 1,2, 3,4,5 eller 6 ganger pr. dag, mer vanlig 1 til 3 eller 2 til 4 ganger pr. dag, slik at den totale daglige dose er normalt i området for en 70 kg voksen på 0,01 til 250 mg, mer vanlig 1 til 100 mg, for eksempel 5 til 70 mg, som ligger i området omtrent 0,0001 til 3,5 mg/kg/dag, mer vanlig 0,01 til 1,5 mg/kg/dag, for eksempel 0,05 til 0,7 mg/kg/dag.
I slike behandlinger kan den aktive forbindelse administreres ved hvilken som helst egnet vei, f.eks. ved oral, parenteral eller topisk vei. For slik anvendelse vil forbindelsen normalt anvendes i form av et farmasøytisk preparat sammen med en human- eller veterinærfarmasøytisk bærer, fortynningsmiddel og/eller tilsetningsmiddel, selv om den nøyaktige form av preparatet naturlig vil avhenge av administreirngsmetoden.
Preparater blir fremstilt ved blanding, og blir hensiktsmessig tilpasset for oral, parenteral eller topisk administrering og kan som sådanne foreligge i form av tabletter, kapsler, orale flytende preparater, pulvere, granuler, drops, pastiller, rekonstituerbare pulvere, injiserbare og infuserbare løsninger eller suspensjoner, suppositorier og transdermale anordninger. Oralt administrerbare preparater er foretrukket, spesielt formede orale preparater, ettersom de er mer hensiktsmessige for generell anvendelse.
Tabletter og kapsler for oral administrering blir vanligvis presentert i en enhetsdose og inneholder konvensjonelle tilsetningsmidler så som bindemidler, fyllmidler, fortynningsmidler, tabletteringsmidler, smøremidler, sprengningsmidler, fargemidler, smakstilsetninger og fuktemidler. Tablettene kan belegges i henhold til velkjente metoder på området.
Egnede fyllmidler for anvendelse omfatter cellulose, mannitol, laktose og andre lignende midler.
Egnede sprengningsmidler omfatter stivelse, polyvinylpyrrolidon og stivelses-derivater så som natriumstivelsesglykollat. Egnede smøremidler omfatter for eksempel magnesiumstearat. Egnete farmasøytisk akseptable fuktemidler omfatter natrium-laurylsulfat.
Disse faste orale preparater kan fremstilles ved konvensjonelle blandingsmetoder, fylling, tablettering eller lignende. Gjentatte blandingsoperasjoner kan anvendes for å fordele det aktive midlet gjennom hele preparatene ved anvendelse av store mengder av fyllmidler. Slike operasjoner er selvfølgelig konvensjonelle på området.
Orale flytende preparater kan foreligge i form av for eksempel vandige eller . oljeaktige suspensjoner, løsninger, emulsjoner, siruper eller eliksirer, eller kan presenteres som et tørt produkt for rekonstituering med vann eller annen egnet konstituent før anvendelse. Slike flytende preparater kan inneholde konvensjonelle additiver så som suspenderingsmidler, for eksempel sorbitol, sirup, metylcellulose, gelatin, hydroksyetylcellulose, karboksymetylcellulose, aluminiumstearatgel eller hydrogenene spiselige fett, emulgeringsmidler, for eksempel lecitin, sorbitan-monooleat eller akasie; ikke-vandige konstituenter (som kan omfatte spiselige oljer), for eksempel mandelolje, fraksjonert kokosnøttolje, oljeaktige estere så som estere av glyserol, propylenglykol eller etylalkohol; konserveringsmidler, for eksempel metyl- eller propyl-p-hydroksybenzoat eller sorbinsyre og om ønsket konvensjonelle smaksmidler eller fargemidler.
For parenteral administrering blir fluide enhetsdoseformer fremstilt inneholdende en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse og en steril bærer. Forbindelsen, avhengig av konstituenten og konsentrasjonen, kan énten oppslemmes eller oppløses. Parenterale løsninger blir normalt fremstilt ved oppløsning av forbindelsen i en konstituent og filter-sterilisering før fylling i et egnet medisinglass eller ampulle og lukking. Fordelaktig blir tilsetningsmidler så som et lokal-anestetikum, konserveringsmidler og buffermidler også oppløst i konstituenten. For å forbedre stabiliteten kan preparatet fryses etter fylling i medisinglass og vannet fjernet under vakuum.
Parenterale suspensjoner blir fremstilt på i det vesentlige samme måte, bortsett fra at forbindelsen blir oppslemmet i konstituenten istedenfor å bli oppløst, og sterilisert ved å eksponeres for etylenoksyd før oppslemming i den sterile konstituent. Fordelaktig inngår et overflateaktivt middel eller fuktemiddel i preparatet for å lette jevn fordeling av den aktive forbindelse.
For topisk administrering kan preparatet foreligge i form av en transdermal salve eller plaster for systemisk levering av den aktive forbindelse og kan fremstilles på konvensjonell måte, for eksempel som beskrevet i standardlærebøker så som 'Dermatological Preparations - B.W. Barry (Drugs and the Pharmaceutical Sciences - Dekker) eller Harrys Cosmeticology (Leonard Hill Books).
Følgelig tilveiebringer foreliggende oppfinnelse anvendelse av en forbindelse med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav eller et farmasøytisk akseptabelt solvat derav, for fremstilling av et medikament for behandling og/eller forebygging av sykdommer forbundet med overaktivitet av osteoklaster hos pattedyr.
I enda et ytterligere aspekt tilveiebringer foreliggende oppfinnelse anvendelse av en forbindelse med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav eller et farmasøytisk akseptabelt solvat derav, for fremstilling av et medikament for behandling og/eller forebygging av osteoporose og beslektete osteopene sykdommer.
I enda et videre aspekt tilveiebringer foreliggende oppfinnelse anvendelse av en forbindelse med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav eller et farmasøytisk akseptabelt solvat derav, for fremstilling av et medikament for behandling av tumorer, spesielt dem relatert til nyrekreft, melanom, tykktarmskreft, lungekreft og leukemi., virale tilstander (for eksempel dem som involverer Semliki Forest, Vesicular Stomatitis, Newcastle Sykdom, Influensa A og B, HIV virus), ulcere (for eksempel kronisk gastritt og peptisk ulcer fremkalt av Helicobacter pylon), autoimmunsykdommer og transplantasjon, for behandling og/eller forebygging av hypercholesterolemi og aterosklerotiske sykdommer, AIDS og Alzheimer' s sykdom, angiogene sykdommer, så som revmatoid artritt, diabetisk retinopati, psoriasis og faste tumorer.
Ingen uakseptable toksikologiske effekter er forventet med forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse når de blir administrert i henhold til oppfinnelsen. Som er vanlig i praksis vil preparatene vanligvis være ledsaget av skrevne eller trykte retningslinjer for anvendelse i den aktuelle medisinske behandling.
De følgende, mellomprodukter, eksempler og farmakologiske metoder illustrerer oppfinnelsen..
Beskrivelser og Eksempler
Mellomprodukt 1: frans-4^-Diklor-2-nitro-j3-dimetylaminostyreii
En løsning av 10,3 g (50 mmol) 4,5-diklor-2-nitrotoluen ( Heiv. Chim. Acta 1936, 19, 434-439) i en blanding av 11,9 g (100 mmol) N, N~ dimetylformamid dimetylacetal i DMF (25 ml) ble oppvarmet ved 100°C i 16 timer. Den mørke reaksjonsblanding ble inndampet i vakuum, residuet fortynnet med metylenklorid og vasket to ganger med vann. Den organiske løsningen ble tørket over MgS04, deretter inndampet i vakuum, hvilket ga 12,6 g (48 mmol, utbytte 96,5%) av den rå tittelforbindelse som mørkerøde krystaller.
Mellomprodukt 2: 2-Metoksy-4-cyanobenzoylklorid
2-Metoksy-4-cyanobenzosyre ( Tetrahedron Letters, 1986,27(49), 5997-6000) (1 g, 5,6 mmol) ble oppløst i CH2CI2 (20 ml). Oksalylklorid (1,5 ml, 8,2 mmol) ble raskt innført i løsningen og en dråpe DMF ble tilsatt. En kraftig reaksjon fant sted med rikelig utvikling av gassformige produkter. Løsningen ble rørt i 1 time og fikk deretter stå natten over. Løsningsmidlet ble fjernet ved anvendelse av en rotasjonsfordamper, hvilket ga 1,1 g av et gråhvitt, fast stoff (5,6 mmol, utbytte 99%) som ble anvendt uten ytterligere rensning. Mellomprodukt 3: 3-Metoksy-4-[2-[(4,5-diklor-2-nitro)fenyl]-l-okso-etyl]-benzonitril
2-Metoksy-4-cyanobenzoylklorid (1,1 g, 5,6 mmol), fremstilt som i Mellomprodukt 3, ble tilsatt porsjonsvis til en omrørt løsning av frans-4,5-ditøor-2-nitro-P-dimetylaniinostyren (1,47 g, 5,6 mmol) og trietylamin (1,5 ml, 10 mmol) i cykloheksan (20 ml). Løsningen ble deretter tilbakeløpskokt i 16 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt, og alle de flyktige produkter ble fjernet ved anvendelse av en rotasjonsfordamper. En mørk rest ble oppnådd, som deretter ble oppløst i CH2CI2 (40 ml) og vasket én gang med 10% Na2C03 løsning (20 ml). Det organiske sjiktet ble deretter tørket med vannfritt Na2SC>4, filtrert og løsningsmidlet fjernet ved anvendelse av en rotasjonsfordamper. Mørk brunt til sort pulver (2,42 g) ble oppnådd, som ble oppløst i så lite etylacetat som mulig, og heksan ble satt til denne løsningen for å utfelle lyst brunt pulver (1,72 g, sm.p.= 167-170°C) som ble anvendt uten ytterligere rensning i neste trinn.
Dette rå mellomprodukt (1,2 g) ble oppløst i 1,4-dioksan (20 ml), og vann (10 ml) ble tilsatt. Løsningen ble tilbakeløpskokt i 48 timer, filtrert mens den fortsatt var varm og deretter avkjølt i en isvannbad. Gule til brune krystaller ble oppsamlet på en Buchner trakt og ga 0,60 g (1,6 mmol, utbytte 30%) av tittelforbindelsen, sm.p. = 171-174 °C.
'H NMR (CDCb) 8 = 8,27 (s, 1H); 7,81 (d,lH); 7,49 (s, 1H); 7,35 (dd, 1H); 7,28 (d, 1H); 4,61 (s, 2H); 4,00 (s, 3H).
Mellomprodukt 4: 3-Metoksy-4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yI)-benzonitril
3-Metoksy-4-[2-(4,5-diklor-2-nitro)fenyl-l-okso-etyl]-benzonitril (0,4 g, 1,0 mmol) ble oppløst i EtOH (10 ml) og AcOH (10 ml). Løsningen ble brakt forsiktig til tilbakeløp, og jernpulver (0,5 g, 9 mmol) ble tilsatt i små porsjoner over et tidsrom på en time.
Løsningen ble tilbakeløpskokt i 12 timer, hvoretter løsningsmidlene ble fjernet ved anvendelse av en rotasjonsfordamper. Residuet ble ekstrahert mange ganger med THF. Etter fjerning av løsningsmidlet ble rått 3-metoksy-4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-benzonitril (0,35 g, 1,0 mmol, utbytte 100%) oppnådd, som ble anvendt i neste trinn uten ytterligere rensning, sm.p. = 241-244 °C.
'H NMR (DMSO-de) 8 = 11,60 (s br, IH); 7,98 (d, 1H); 7,85 (s, 1H); 7,67 (s, 1H); 7,65 (d, 1H); 7,55 (dd, 1H); 7,14 (s, 1H); 4,00 (s, 3H).
Mellomprodukt 5: 3-Metoksy-4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-benzosyre
3-Metoksy-4-(5,6-diklor-lH-indoI-2-yl)-benzonitril (0,35 g, 1,0 mmol) ble oppslemmet i 30 % NaOH (20 ml) og 95% EtOH (20 ml). Blandingen ble tilbakeløpskokt i 12 timer og fikk deretter avkjøles til romtemperatur. Suspensjonen ble konsentrert til omtrent halve volumet ved anvendelse av en rotasjonsfordamper og deretter filtrert på en Buchnertrakt, hvilket ga et gyldenbrunt til gult farget pulver. Dette ble rørt i 2 timer i 10% HC1. Løsningen ble deretter filtrert, hvilket ga 0,256 g (0,76 mmol, utbytte 69%) av den rå tittelforbindelse som ble renset ved kromatografi, hvilket ga 150 mg ren tittelforbindelse, sm.p. > 270 °C. 'H NMR (DMSO-de) 5 = 11,60 (bred s, 1H); 7,92 (d, 1H); 7,83 (s, 1H); 7,66 (m, 3H); 7,10 (s, 1H); 4,02 (s, 3H). Mellomprodukt 6: 2-Etoksy-4-aminobenzosyre
En suspensjon av metyl-2-etoksy-4-acetamidobenzoat (50 g, 211 mmol) i vandig løsning av NaOH (15 vekt%, 200 ml) ble forsiktig tilbakeløpskokt i 16 timer. Den resulterende lysebrune løsning fikk avkjøles til romtemperatur og ble deretter videre avkjølt i et isvannbad. Konsentrert HC1 (37vekt%) ble tilsatt inntil løsningen nådde en pH på 6. Det faste stoffet utfelt fra løsningen ble filtrert under vakuum, tørket ved 50°C, hvilket ga 38,3 g av tittelforbindelsen (utbytte 100%).
Mellomprodukt 7: 2-Etoksy-4-cyanobenzosyre
I en 11 reaktor utstyrt med en forseglet mekanisk rører ble CuCN (12 g, 134 mmol) oppslemmer i 100 ml destillert vann. NaCN (18,3 g, 373 mmol) ble tilsatt under kraftig røring, og den indre temperatur ble holdt under 40°C inntil alt CuCN gikk i løsning. Suspensjonen av 2-etoksy-4-aminobenzosyre (20 g, 110 mmol) i vann (200 ml) og konsentrert HC1 (33 ml) ble rørt og avkjølt i et isbad. Når temperaturen nådde 5°C, ble en løsning av NaNC>2 (9,7 g, 140 mmol) i vann (30 ml) tilsatt dråpevis ved slik hastighet som holdt temperaturen under 5 °C.
Når alt NaNC>2 var tilsatt, ble løsningen langsomt innført gjennom en iskjølt dråpetrakt i reaktoren inneholdende NaCN/CuCN-løsningen. En reaksjon fant sted under kraftig dannelse av N2. Noen få dråper oktanol ble tilsatt for å holde skummingen under kontroll. Omrøring fortsatte i 4 timer. Den resulterende suspensjonen ble deretter ekstrahert med etylacetat (3x100 ml), og den organiske fasen ble tørket over MgS04 og inndampet under vakuum, hvilket ga 15 g av tittelforbindelsen (utbytte 71,1 %) som et lyst brunt pulver, sm.p. = 170-172X.
Mellomprodukt 8:3-Etoksy-4-(5,6-dikIor-lH-indol-2-yl)-benzosyre
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra 2-etoksy-4-cyanobenzosyre, fremstilt som i Mellomprodukt 7, ved å følge metoden ifølge Mellomprodukt 1-5. Tittelforbindelsen ble fremstilt i et totalutbytte på 18 %, basert på 2-etoksy-4-cyanobenzosyren.
'H NMR (DMSO-4;) 8 = 11,63 (s br, 1H); 7,89 (d, 1H); 7,83 (s, 1H); 7,65 (s, 1H); 7,64 (d, 1H); 7,63 (s, 1H); 7,13 (s br, 1H); 4,27 (q, 2H); 1,48 (t, 3H).
Mellomprodukt 9: Dimetyl 2,5-dimetoksytereftalat
En suspensjon av 2,5-dihydroksytereftalsyre (5 g, 25 mmol), K2CO3 (10 g, 72 mmol) og dimetylsulfat (11 ml, 116 mmol) i aceton (100 ml) ble rørt og tilbakeløpskokt i 24 timer. Blandingen ble filtrert mens den fortsatt var varm, og løsningsmidlet ble avdampet til omtrent halvparten av det opprinnelige volum. Ved avkjøling ble hvite nåler utfelt og filtrert og tørket, hvilket ga 4,6 g av tittelforbindelsen (utbytte 73%), sm.p. = 141-143°C.
Mellomprodukt 10: 2,5-Dimetoksytereftalsyre-monometylester
En suspensjon av dimetyl 2,5-dimetoksytereftalat (4 g, 15,7 mmol), fremstilt som i Mellomprodukt 9, i metanolisk KOH (0,86 g KOH i 100 ml MeOH) ble tilbakeløpskokt i 3 timer. Løsningen ble avkjølt og løsningsmidlet fjernet under vakuum. Residuet ble behandlet med fortynnet HC1 og det faste stoffet filtrert fra. Den urensede blandingen ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av 1:1 etylacetat/heksan som løsningsmiddel, hvilket ga 1,72 g av tittelforbindelsen (utbytte 44,7%), sm.p. = 123-124°C Mellomprodukt 11: 2,5-Dimetoksy-4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-benzosyre
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra 2,5-dimetoksytereftalsyre-monometylester, fremstilt som i Mellomprodukt 10, ved å følge metoden ifølge Mellomprodukt 1-5.
Tittelforbindelsen ble fremstilt med et totalt utbytte på 46%, basert på 2,5-dimetoksytereftalsyre-monometylester
'H NMR (DMSO-40 = 11,38 (s br, 1H);7,79 (s, 1H); 7,68 (s, 1H); 7,51 (s, 1H); 7,43 (s, 1H); 7,11 (d, 1H); 3,92 (s,3H); 3,91 (s,3H).
Mellomprodukt 12:4-Brom-3-hydroksybenzosyre
Denne syren ble fremstilt på lignende måte som beskrevet av Buehler et al (Buehler, C.A., Harris, J.O., Shacklett, C og Blokkerer, K.P.; J. Am. Chem. Soc, 68,574-577 (1946)). Til en omrørt suspensjon av 3-hydroksybenzosyre (50,0 g, 0,362 mol) i eddiksyre (495 ml) ved RT under argon sattes en løsning av brom (57,97 g, 0,3627 mol) i eddiksyre (192 ml) over 2 timer. I løpet av tilsetningen steg den indre temperatur fra 18,0 til 22,0°C. Blandingen ble rørt i 21 timer og deretter inndampet under vakuum, hvorved omtrent (500 ml) destillat ble oppsamlet. Den resulterende konsentrerte løsning ble lagret ved 4°C i 2 timer. Det resulterende hvite faste stoff ble filtrert fra og vasket med kaldt vann (100 ml). Dette faste stoffet ble oppløst i et minimumsvolum av kokende vann (220 ml), filtrert og fikk avkjøles til romtemperatur. Det resulterende faste stoffet ble fjernet ved filtrering, vasket med kaldt vann og tørket i en vakuumovn ved 58°C, hvilket ga tittelforbindelsen (12,50 g, utbytte 15,9%), sm.p. = 231-232°C, (lit. sm.p. 225-226°C)'.
'H NMR (400,13 MHz, DMSO-d6): 13,00 (1H, bs, C02H), 10,64 (1H, bs, OH), 7,60 (1H, d, H-5, J5^i 8,0 Hz), 7,52 (1H, d, H-2, JM 2,0 Hz), 7,29 (1H, dd, H-6, J2.6 2,0 Hz, J5-6 8,0 Hz)
Mellomprodukt 13:3-Benzyloksy-4-brombenzosyre, benzylester
Til en omrørt suspensjon av NaH (10,47 g, 60 vekt%, 0,2616 mol) i THF (1,401), ved B.l^C under argon sattes en løsning av 4-brom-3-hydroksybenzosyre (28,11 g, 0,130 mol) i THF (400 ml) over 1,25 timer, hvilket holdt den indre temperatur i området 4-15°C. Etter 1,5 timer ble en løsning av benzylbromid (44,3 g, 0,2591 mol) i THF (70 ml) tilsatt over 0,5 timer. Til den resulterende suspensjonen sattes DMF (500 ml), og blandingen fikk oppvarmes til romtemperatur. Etter ytterligere 15 timer ble ekstra DMF satt (1,5 L) til suspensjonen. Etter omtrent 30 minutter var reaksjonsblandingen i det vesentlige klar, og TLC-analyse (25%EtOAc/heksan) viste at effektivt alt utgangsmaterialet var forbrukt. Reaksjonsblandingen ble behandlet med fortynnet ammoniumklorid (100 ml) og inndampet i vakuum. Til konsentratet sattes etylacetat (1,01) og fortynnet ammoniumklorid (1,01) og fraksjonene ble separert. Den vandige fraksjon ble tilbakeekstrahert med etylacetat (1 x 450 ml og 1 x 300 ml). Den samlete organiske fraksjon ble tørket over natriumsulfat, filtrert og inndampet i vakuum. Det resulterende faste stoffet ble krystallisert fra etanohvann (9:1; vol;vol, 200 ml), oppvarmet ved tilbakeløp, hvortil det sattes etanol (65 ml) inntil alt materialet hadde løst seg. Vann ble deretter tilsatt dråpevis (17 ml), fulgt av ekstra etanol (8,0 ml). Den resulterende løsning fikk langsomt avkjøles til omgivelsestemperatur. Det resulterende faste stoffet ble filtrert fra og tørket (44,54 g). Dette faste stoffet ble deretter oppløst i varm etanol (227 ml) og vann (5,0 ml) ble tilsatt og fikk deretter langsomt avkjøles til omgivelsestemperatur. De resulterende krystaller ble filtrert fra, vasket med kald etanol (25 ml) og tørket i en vakuumovn ved 50°C, hvilket ga tittelforbindelsen (36,79 g, utbytte 71,5%). sm.p.= 80,5-81,5°C.
'H NMR (400,13 MHz, CDC13): 7,67-7,28 (13H, kompleks m, aromater), 5,35 (2H, s, CH2Ph), 5,20 (2H, s, CH2Ph).
Mellomprodukt 14: 3-Benzyloksy-4-trimetylsilanyletynylbenzosyre-benzylester
3-benzyloksy-4-brombenzosyre-benzylester (33,00 g, 83,07 mmol) ble plassert i en trehalset kolbe og atmosfæren ble erstattet under vakuum med argon ved anvendelse av en Firestone ventil. Det faste stoffet ble oppløst i THF (215 ml) under røring og deretter ble trietylamin (396 ml) tilsatt. Blandingen ble avkjølt i et is/vannbad og løsningen avgasset fem ganger som beskrevet ovenfor. Kobber(r)jodid (127 mg, 0,66 mmol) og bis(trifenylfosfln)palladium(II)k]orid (933 mg, 1,33 mmol) ble raskt tilsatt og løsningen avgasset to ganger til. Trimetylsilylacetylen (17,6 ml, 124,6 mmol) ble deretter tilsatt dråpevis med sprøyte over ti minutter. Kjølebadet ble deretter fjernet, og løsningen fikk
langsomt oppvarmes til omgivelsestemperatur. Etter 21 timer viste TLC-analyse (25%EtOAc/heksan) at i det vesentlige alt utgangsmaterialet var forbrukt. Løsningsmidlene ble fjernet ved inndampning i vakuum og etylacetat (500 ml) og fortynnet saltvann (300 ml) ble tilsatt. Den organiske fraksjonen ble skilt fra, og den vandige fasen ble tilbakeekstrahert med etylacetat (lx 250 ml og 1 x 100 ml). Den samlete organiske fraksjon ble tørket over natriumsulfat, filtrert og inndampet, hvilket ga et rått brunt fast stoff (36,2 g). Det faste stoffet ble oppløst i varm etylacetat (80 ml) hvorpå tittelforbindelsen utkrystalliserte. Dette faste stoffet ble fjernet ved filtrering, vasket med etylacetat og tørket i en vakuumovn ved 40°C, hvilket ga ren tittelforbindelse (13,75 g, utbytte 39%), sm.p. = 110,5-111,5°C.
'H NMR (400.13M Hz, CDC13): 7,66-7,28 (13H, kompleks m, aromater), 5,36 (2H, s, CH2Ph), 5,19 (2H, s, CH2Ph), 0,26 (9H, s, Si(Me3)3).
Filtratet ble satt på en silikagelpatron (400 g, Biotage 75M) som deretter ble eluert med 50% etylacetat/heksan, produktfraksjonene ble samlet og inndampet i vakuum, hvilket ga tittelforbindelsen (21,1 g, utbytte 60%) som et svakt urent lysebrunt fast stoff, som ble anvendt uten ytterligere rensning.
Mellomprodukt 15: 3-Benzyloksy-4-etynylbenzosyre-benzylester
Til en omrørt løsning av 3-benzyloksy-4-trimetylsilanyletynylbenzosyre-benzylester (13,5 g, 32,56 mmol) i THF (182 ml), under argon ved -55°C, ble tilsatt en løsning av tetra-n-butylammoniumfluorid (33,9 ml, 1,0M i THF) dråpevis over 7 minutter. Etter ytterligere 3 minutter ble en prøve tatt ut og TLC-analyse (25% EtOAc/heksan) viste at alt utgangsmaterialet var forbrukt. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av en løsning av saltsyre (0,4M, 100 ml) i fortynnet ammoniumklorid. Deretter ble etylacetat (250 ml) tilsatt og fraksjonene separert. Den vandige fraksjon ble tilbakeekstrahert med etylacetat (lx 200 ml og 1 x 50 ml). Den samlete organiske fraksjon ble tørket over natriumsulfat, filtrert og inndampet, hvilket ga en brun olje (14,3 g). Oljen ble tatt opp i toluen (40 ml) og satt på en silikagelpatron (400 g, Biotage 75M). Patronen ble deretter eluert som følger: heksan (400 ml), heksan:toluen (1:1, vohvol, 5,01) og til slutt heksan:toluen (1:1, vohvol, 2,3 1) inneholdende 4% dietyleter. De rene fraksjoner ble samlet og inndampet i vakuum, hvilket ga tittelforbindelsen (7,86 g, utbytte 70,5%) som et hvitt, fast stoff.
'H NMR (400,13MHz, CDCI3): 7,67-7,27 (13H, kompleks m, aromater), 5,34 (2H, s, CH2Ph), 5,22 (2H, s, CH2Ph), 3,44 (1H, s, acetylen).
Mellomprodukt 16:4,5-Dik)or-2-jodanilin
Til en omrørt løsning av 3,4-dikloranilin (1,944 g, 12,0 mmol) i eddiksyre (40 ml) og under argon ved omgivelsestemperatur sattes en løsning av jodmonoklorid (2,96 g, 18,23 mmol) i eddiksyre (25 ml pluss 5 ml vask) dråpevis over 22 minutter. Etter røring i 1,5 timer var et fast stoff utfelt som ble filtrert fra og vasket med 5% natriumtiosulfat (100 ml). Det faste stoffet ble oppløst i etylacetat (100 ml) og vasket med mettet natriumkarbonat (100 ml) og vann (100 ml). Det resulterende faste stoffet ble tørket over natriumsulfat, filtrert og inndampet, hvilket ga et mørkfarget fast stoff (2,69 g). Det rå faste stoff ble oppløst i EtOAc/heksan (1:1, vofcvol, 6,0 ml) og satt på en silikapatron (90 g, Biotage) som ble eluert som følger: heksan (600 ml), 4% EtOAc i heksan (1 L) og 5% EtOAc i heksan (1 L). De rene fraksjoner ble inndampet i vakuum, hvilket ga tittelforbindelsen som et gråhvitt, fast stoff (0,912 g, utbytte 26,4%).
'H NMR (400,13 MHz, CDC13): 7,66 (1H, s, H-3), 6,81 (1H, s, H-6), 4,14 (2H, bs, -NH2).
MS (AP<+>): m/z 288,0 og 290,1 (MH<+>).
Mellomprodukt 17:4-(2-Amino-4^-diklor-fenyletynyl)-3-benzyloksybenzosyre-benzylester
3-Benzyloksy-4-etynylbenzosyre-benzylester (820 mg, 2,395 mmol) og 4,5-diklor-2-jodanilin (710 mg, 2,467 mmol) ble plassert i en trehalset kolbe, og atmosfæren ble erstattet under vakuum med argon ved anvendelse av en Firestone ventil: De faste stoffene ble deretter oppløst i THF (13,0 ml) under røring, og deretter ble trietylamin (20 ml) tilsatt.
Blandingen ble avkjølt i et is/vannbad og løsningen avgasset fire ganger som beskrevet ovenfor. Kobber(I)jodid (4 mg, 0,02 mmol) og bis(trifenylfosfin)palladium(II)- klorid (27 mg, 0,04 mmol) ble raskt tilsatt og løsningen avgasset to ganger til. Kjølebadet ble deretter fjernet, og løsningen fikk langsomt oppvarmes til omgivelsestemperatur. Etter røring i 6 timer ved omgivelsestemperatur viste TLC-analyse (25% EtOAc/heksan) at all utgangsforbindelse 3-benzyloksy-4-etynylbenzosyre-benzylester var forbrukt. Løsningsmidlene ble fjernet ved inndampning i vakuum og etylacetat (50 ml) og fortynnet natriumhydrogenkarbonat (25 ml) ble tilsatt. Den organiske fraksjonen ble skilt fra, og den vandige fasen ble tilbakeekstrahert med etylacetat (1 x 25 ml). Den samlete organiske fraksjon ble tørket over natriumsulfat, filtrert og inndampet, hvilket ga et blekgult, fast stoff (1,28 g). Dette faste stoffet ble oppløst i kloroform (50 ml), silikagel tilsatt (Merck 9385, 3,25 g), og blandingen inndampet i vakuum. Råmaterialet satt på silika ble renset ved kromatografi (Biotage 40 g). Patronen ble eluert med kloroformrheksan (70:30), de rene fraksjoner ble samlet og inndampet i vakuum, hvilket ga tittelforbindelsen (1,113 g, utbytte 92,5%) som et blekgult, fast stoff. En prøve ble omkrystallisert fra toluen:kloroform (45:55), sm.p. = 152,5-153,5°C.
'H NMR (400,13MHz, CDC13): 7,71 (2H, m, aromat), 7,57-7,20 (12H, kompleks m, aromatisks), 6,63 (1H, s, aromatisk), 5,38 (2H, s, CH2Ph), 5,15 (2H, s, CH2Ph), 3,94 (2H, s, -NH2). MS (AP<+>): m/z 502,2 og 502,4 (MH<+>).
Mellomprodukt 18: 3-Benzyloksy-4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)benzosyre- benzylester
4-(2-Amino-4,5-diklor-fenyletynyl)-3-benzyloksybenzosyre-benzylester (28,32 g, 56,38 mmol) ble oppløst i varm acetonitril (1,501) under røring under argon. Blandingen ble avkjølt i et is/vannbad og løsningen avgasset i svakt vakuum ved anvendelse av en Firestone ventil, idet atmosfæren ble erstattet med argon. Denne prosedyren ble gjentatt fem ganger. Den omrørte blandingen ble oppvarmet til 66°C og bis(acetonitril)palladium-(n)klorid (1,666 g, 5,638 mmol) raskt tilsatt og deretter oppvarmet til 75°C. Etter 1,5 timer ble en prøve fjernet og analysert ved TLC (25% EtOAc/heksan), som viste at alt utgangsmaterialet var forbrukt. Reaksjonen fikk langsomt avkjøles til omgivelsestemperatur, hvoretter tittelforbindelsen krystalliserte ut fra løsning. Det faste stoffet ble
fjernet ved filtrering, vasket med kald acetonitril (125 ml) og tørket i en vakuumovn, hvilket ga tittelforbindelsen (21,375 g, utbytte 75,5%) som et hvitt, fast stoff, sm.p. = 168-169°C.
'H NMR (400,13MHz, CDC13): 9,79 (1H, bs, -NH), 7,90-7,76 (3H, kompleks m, aromater), 7,68 (1H, s, aromat), 7,55-7,32 (10H, kompleks m, aromater), 7,22 (IH, s, aromat), 6,91 (1H, m, aromat), 5,39 (2H, s, CH2Ph), 5,29 (2H, s, CH2Ph). MS (AP<*>): m/z 502,2 og 502,4 (MH<+>).
Mellomprodukt 19:3-Benzyloksy-4-(5,6-dicholoro-lH-indol-2-yl)benzosyre.
En løsning av 3-benzyloksy-4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)benzosyre-benzylester (0,2 g, 0,398 mmol) i EtOH (10 ml) og THF (5 ml) med NaOH (5,3 mg, 1,33 mmol) ble tilbakeløpskokt i 3 timer. Etter avkjøling ble løsningsmidlet fjernet under vakuum og residuet behandlet med 37% HCL Fellingen ble filtrert, vasket med vann og tørket under vakuum, hvilket ga 0,14 g (utbytte 85%) av tittelforbindelsen som et gult pulver, sm.p. = >250°C. Eksempel 1: 4-(5,6-Diklor-lH-indol-2-yl)-3-etoksy-N-(2,2,6,6*tetrametyIpiperidin-4-yl)-benzamid
Til en suspensjon av 3-etoksy-4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-benzosyre (200 mg, 0,57 mmol), fremstilt som i Mellomprodukt 8, i CH3CN (14 ml) og THF (6 ml), ble WSC (N-(3-dimetylaminopropyl)-N'-etylkarbodiimid-hydroklorid) (104 mg, 55 mmol) og 1-hydroksybenzotriazol (77 mg, 0,57 mmol) tilsatt, og reaksjonen ble tilbakeløpskokt i 3 timer.
4-amino-2,2,6,6-tetrametylpiperidin (108 mg, 0,7 mmol) ble innført i reaksjonsblandingen og tilbakeløpsbehandling fortsatte i 2 timer til. Reaksjonsblandingen ble avkjølt og løsningsmidlet ble fjernet under vakuum. Residuet ble behandlet med 30 ml 10% NaOH-
løsning og deretter filtrert. Det resulterende faste stoffet ble vasket med vann, tørket og renset ved kromatografi på silikagel, hvilket ga 154 mg av tittelforbindelsen som lysegult pulver (utbytte 55%), sm.p. = 253-255 °C.
'H NMR (DMSO-4s) 8 = 11,56 (s br, 1H); 8,28 (d br, 1H); 7,85 (d, 1H); 7,82 (s, 1H) 7,64 (s, 1H); 7,59 (s, 1H); 7,57 (d, 1H); 7,11 (s, 1H); 4,40-4,21 (m, 1H); 4,30 (q, 2H); 1,80 (d br, 2H); 1,50 (t, 3H); 1,30 (m, 2H); 1,28 (s, 6H); 1,15 (s, 6H).
ESI POS; AQA; løsningsmiddel: MeOH / spray 3 kV / skimmer: 20 V/ probe 135°C: m/z 488 (MH<+>)
Eksempel 2:4-(5,6-Diklor-lH-indol-2-yl)-3-benzyloksy.N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)-benzamid.
En løsning av 3-benzyloksy-4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)benzosyre (0,14 g, 0,34 mmol), fremstilt som i Mellomprodukt 19, i THF (14 ml), WSC (N-(3-dimetylaminopropyl)-N'-etylkarbodiimid-hydroklorid) (0,078 g, 0,408 mmol) og 1-hydroksybenzotriazol (0,0551 g, 0,408 mmol) ble tilbakeløpskokt i 6 timer. En løsning av 4-amino-2,2,6,6-tetrametyl-piperidin (0,064 g, 0,408 mmol) i THF (2 ml) ble tilsatt dråpevis og tilbakeløpskokt i ytterligere 2 timer. Løsningsmidlet ble fjernet under vakuum og residuet oppslemmet i vann. Det faste stoffet ble filtrert og tørket under vakuum. Det faste stoffet ble gnidd ut med CH3CN (5 ml), hvilket ga 0,094 g (utbytte 45%) av tittelforbindelsen som et hvitt pulver, sm.p. = 220°C.
'H-NMR (DMSO-d*) 5= 11,64 (s br, 1H); 8,24 (d br, lH); 7,87 (d, 1H); 7,76 (s, 1H); 7,68 (d, 1H); 7,62 (s, 1H); 7,59 (dd, 1H); 7,52 (d, 2H); 7,42 (dd, 2H); 7,34 (dd, 1H); 7,06 (d, 1H); 5,40 (s, 2H); 4,38-4,23 (m, 1H); 1,76 (dd, 2H); 1,25 (dd, 2H); 1,23 (s, 6H); 1,12 (s, 6H).
ESI POS; AQA ; løsningsmiddel: MeOH / spray 3 kV / skimmer: 20 VI probe 135°C: m/z 550 (MH<+>)
Eksempel 3:4-(5,6-DikIor-lH-indol-2-yl)-3-hydorksy-N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)-benzamid
En blanding av 4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-3-benzyloksy-N-(2,2,6)6-tetrametylpiperidin-4-yl)-benzanud (0,08 g, 0,145 mmol), fremstilt som beskrevet i Eksempel 2, i 37% HC1 (5 ml) og EtOH (5 ml) ble tilbakeløpskokt i 3 timer. Etter avkjøling ble løsningsmidlet fjernet under vakuum. Det resulterende faste stoffet ble renset ved kolonnekromatografi over silikagel (CH2CI2/ MeOH/ NH4OH 86:10:0,6) hvilket ga, etter utgnidning med CH3CN, 0,02 g (utbytte 39%) av tittelforbindelsen som et hvitt, fast stoff, sm.p. >270°C. <l>H-NMR (DMSO-ds) 8= 11,44 (s br, 1H); 8,16 (d br, 1H); 7,80 (d, 1H); 7,78 (s, 1H); 7,69 (s, 1H); 7,48 (d, 1H); 7,39 (dd, 1H); 7,08 (s,lH);4,36-4,20 (m, 1H); 1,73 (dd, 2H); 1,23 (dd, 2H); 1,23 (s, 6H); 1,11 (s, 6H).
ESI POS; AQA ; løsningsmiddel: MeOH / spray 3 kV / skimmer: 20 V/ probe 135°C: m/z 460 (MH<+>)
Eksempel 4: 4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-3-propoksy-N-(2^,6,6-tetrametylpiperidin-4>yl)benzamid.
En blanding av 4-(5,6-dildor-lH4ndol-2-yl)-3-hydroksy-N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)-benzamid (0,05 g, 0,109 mmol), fremstilt som beskrevet i Eksempel 3, K2CO3 (0,045 g, 0,33 mmol) og 2-brom-propan (0,046 mg, 0,33 mmol) i aceton (5 ml) ble tilbakeløpskokt i 8 timer. Etter avkjøling ble blandingen filtrert, og den organiske fasen ble fjernet under vakuum, residuet ble kromatografert over silikagel med CH2CI2/ MeOH/ NH4OH 32% (86:10:0,6). Forbindelsen oppnådd ble gnidd ut med iP^O og filtrert for å oppnå 0,017 mg (utbytte 37%) av tittelforbindelsen som et hvitt pulver, sm.p. >250°C.
'H-NMR (DMSO-de) 8= 11,55 (s br, 1H); 8,19 (d br, 1H); 7,84 (d, 1H); 7,83 (s, 1H); 7,62 (s, 1H);7,58 (s, 1H)7,56 (dd, 1H); 7,10 (d, 1H); 4,37-4,24 (m, 1H); 4,18 (t, 2H); 1,96-1,84 (m, 2H); 1,73 (dd, 2H); 1,20 (dd, 2H); 1,20 (s, 6H); 1,08 (s, 6H); 1,05 (t, 3H).
ESI POS; AQA ; løsningsmiddel: MeOH / spray 3 kV / skimmer: 20 V/ probe 135°C: m/z 502 (MH+).
Biologiske målinger
Bakgrunn. Det er kjent at etter binding til ben blir en elektrogen H+ - ådenosin-trifosfatase (ATPase) polarisert til osteoklast-bengrenseflaten. Pumpen transporterer massive mengder av protoner til resorpsjonsmikromiljøet for å bevirke mobilisering av benmineralet og for å skape den nødvendige sure pH med kollagenaser for å nedbryte benmatriksen.
Den vacuolære natur av osteoklastprotonpumpen ble opprinnelig erkjent av Blair [H. C. Blair at al., Science, 245, 855 (1989)] og videre bekreftet av Bekker [PJ. Bekker et al., J. Bone Min. Res., 5,569 (1990)] og VaanSnen [H.K. Våånånen et al., /. Cell Biol, 111, 1305 (1990)]. Bevis ble basert på preparater av randkrusete membranfragmenter fra fugle-osteoklaster (oppnådd fra margbenet av kalsium-sultete egg-leggende høner). De resulterende membranblærer blir sure som respons på ATP, hvilket fastslås lett ved å måle fluorescensstoppen av acridinoransje, en svak base som akkumulerer i sure kammere.
Det biokjemiske mønster viste at osteoklastprotonpumpen tilhørte de vacuolar-liknende ATPaser siden protontransport ble hemmet av N-etylmaleimid (NEM), et sulfydrylreagens og av bafilomycin Aj, en selektiv inhibitor for vacuolar H+ -ATPaser [J.E. Bowman et al., Proe. Nati Acad. Sei. USA, 85,7972 (1988)], mens den ble ikke hemmet av ouabain, en inhibitor for Na<+>/K<+->ATPases; natrium-ortovanadat, en inhibitor for P-ATPaser eller av omeprazol eller SCH 28080, som begge er inhibitorer av gastrisk H<+>/K<+->ATPase [J.P. Mattsson et al., Acta Physiol. Scand., 146,253 (1992)].
Det er kjent at spesifikke inhibitorer av vacuolar ATPaser, så som bafilomycin Aj,kan hemme benresorpsjon i osteoklastkulturer [K. Sundkist et al, Biochem. Biophys.
Res. Commun. 168,309-313 (1990)]
Hemning av protontransport og v-ATPase aktivitet i membranblærer.
Fremstilling av rå benmikrosomer fra kalsium-sultete egg-leggende høner. Blærer ble fremstilt fra margben oppnådd fra tibiae og lårben av egg-leggende høner som var kalsium-sultet i minst 15 dager. I korthet ble benfragmenter skrapet med et 24 skalpel-blad, oppslemmet i 40 ml isoleringsmedium (0,2 M sukrose, 50 mM KC1,10 mM Hepes, 1 mM EGTA, 2 mM ditidtheitrol, pH 7,4) og filtrert gjennom en 100 fim porestørrelse nylonduk. Hele prosedyren ble utført ved 4°C. Etter homogenisering i en potter (20 slag) i 40 ml isoleringsmedium ble en innledende sentrifugering (6,500 x gmaks x 20 min) utført for å fjerne mitokondrier og lysosomer. Supernatanten ble sentrifugert ved 100,000 x Smaks 1 *tmie>°8 pelleten ble oppsamlet i 1 ml isoleringsmedium, delt opp i 200 (il alikvoter, umiddelbart frosset i flytende nitrogen og lagret ved -80°C. Proteininnholdet ble bestemt ved anvendelse av et Biorad kolorimetrisk sett i henhold til Bradford [M. Bradford, Anal. Biochem., 72,248 (1976)]. For protontransportforsøket ble 5-10 fil av membraner anvendt.
Rensning av osteoklastmembraner. 1 ml rå mikrosomale blærer fremstilt ovenfor ble satt (omtrent 0,2 ml pr. rør ) på topen av en sukrosetrinn-gradient bestående av 3,5 ml 15%, 30% og 45 vekt % sukrose i isoleringsmedium og sentrifugert ved 280,000 gmaks 1 2 timer (SW 41 Ti rotor). Etter sentrifugering ble 30-45% sukrosegrenseflatene oppsamlet, fortynnet ca. 20-ganger i isoleringsmedium og pelletert ved 100,000 gmaks 1 * time (SW 28 rotor). Pelleten ble deretter resuspendert i 1 ml isoleringsmedium, alikvotert og frosset i flytende N2 og lagret ved -80°C inntil anvendelse.
Human nyremembraner ble oppnådd fra cortex fra et menneskenyre, frosset umiddelbart etter kirurgi, i henhold til metoden angitt i litteraturen for bovin nyre (S. Gluck, J. Biol. Chem., 265,21957 (1990)).
Fremstilling av humane osteoklastmikrosomale blærer. Osteoklast-liknende gigant-celler isolert fra osteoklastoma-tumor ble homogenisert med en glass-teflon-homogenisator (1000 opm x 20 slag) og materialet ble sentrifugert ved 6000 x gmaks i 20 minutter. Den resulterende pellet ble deretter sentrifugert ved 100000 x gmaks i 60 minutter for å pelletere den mikrosomale fraksjon. Resuspendert i 1 ml isoleringsmedium pH 7,4, frosset ved flytende nitrogen-neddykking og lagret ved -80°C inntil anvendelse. Proton transport i membranblærer ble bedømt semi-kvantitativt ved å måle den innledende skråning av fluorescensstopp av acridinoransje (eksitasjon 490 nm; emisjon 530 nm) etter tilsetning av 5-20 u.1 membranblærer i 1 ml buffer inneholdende 0,2 M sukrose, 50 mM KC1,10 mM Hepes pH 7,4,1 mM ATP.Na2,1 mM CDTA, 5 uM valinomycin og 4 uM acridin oransje. Reaksjonen ble startet ved tilsetning av 5 mM MgSQ4. Resultater ble uttrykt som prosenten av gjennomsnittet av to kontroller. Hemning av bafilomycin-sensitiv ATPase-aktivitet ble bedømt i rensete membranblærer ved å måle frigjøringen av uorganisk fosfat (Pi) i løpet av 30 min. inkubering ved 37°C i en 96-brønners plate enten i nærvær eller i fravær av bafilomycin Al. Reaksjonsmediet inneholdt 1 mM ATP, 10 mM HEPES-tris pH 8,50 mM KC1,5 uM valinomycin, 5 \ sM nigericin, 1 mM CDTA-tris, 100 JiM ammonium-molybdat, 0,2 M sukrose og membraner (20 ug protein/ml). Reaksjonen ble initiert med MgSCq (8-armet pipette) og stanset etter 30 min. ved tilsetning av 4 volumdeler av malachittgrønt-reagens (96-armet pipette) fremstilt i henhold til Chan [ Anal. Biochem. 157,375 (1986)]. Absorbans ved 650 nm ble målt etter 2 min. ved anvendelse av en mikroplateleser. Resultater er uttrykt som nmol (Pi) x mg protein" ixmhr1 og representerer for hvert forsøk, middelet±sem av triplikater.
Farmakologiske data
Forbindelser beskrevet i foreliggende oppfinnelse kan hemme bafilomycin-sensitiv ATPase fra kyllingosteoklast i et område fra 50 nM til 2pM og av human osteoklast i et område fra 30 nM til 5 |iM.

Claims (6)

1. Forbindelse valgt fra listen bestående av: 4-(5,6-dildor-lH-indol-2-yl)-3-etoksy-N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)-benzamid; 4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-3-benzyloksy-N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)-benzamid; 4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-3-propoksy-N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)benzamid; 4-(5,6-diklor-1 H-indol-2-yl)-N-[3-[4-(3-metoksyfenyl)piperazin-1 -yl]propyl] -3 - metoksybenzamid; 4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-N-[3-[4-(2-pyrimidyl)piperazin-l-yl]propyl]-3-metoksybenzamid; 4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)-3-metoksybenzamid; 4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-N-(l,2,2,6,6-pentametylpiperidin-4-yl)-3-etoksybenzarnid; 4-(5,6-diklor-1 H-indol-2-yl)-N-( 1 -benzylpiperidin-4-yl)-3-etoksybenzamid; 4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)-2,5-dimetoksybenzamid; 4-(5,6-diklor-1 H-indol-2-yl)-N-( 1,2,2,6,6-pentametylpiperidin-4-yl)-2,5-dimetoksybenzamid; 4-(5-metoksy-6-klor-lH-indol-2-yl)-N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)-3-etoksybenzamid; 4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-3-metoksy-N-((l-etoksykarbonylpentyl)piperidin-4-yl)benzamid; 4-(5,6-diklor-1 H-indol-2-yl)-3-metoksy-N-((karboksybutyl)piperidin-4-yl)benzamid; 4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)-3-(hydroksykarbonylmetoksy)benzamid; 4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)-3-(2-hydroksy-etoksy)benzamid; 4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)-3-(3-amino-propoksy)benzamid; 4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)-3-(2-dimethlyarnino- etoksy)benzamid og 4-(5,6-diklor-lH-indol-2-yl)-N-(2,2,6,6-tetrametylpiperidin-4-yl)-3-(2,3-dihydroksy- propoksy)benzamid. eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav eller et farmasøytisk alseptebelt solvat derav.
2. Forbindelse ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav eller et farmasøytisk akseptabelt solvat derav for bruk som en aktiv terapeutisk substans.
3. Farmasøytisk preparat omfattende en forbindelse ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav eller et farmasøytisk akseptabelt solvat derav og en farmasøytisk akseptabel bærer for denne.
4. Anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav eller et farmasøytisk akseptabelt solvat derav, for fremstilling av et medikament for behandling og/eller forebygging av sykdommer forbundet med overaktivitet av osteoklaster hos pattedyr.
5. Anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav eller et farmasøytisk akseptabelt solvat derav, for fremstilling av et medikament for behandling og/eller forebygging av osteoporose og beslektete osteopene sykdommer.
6. Anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav eller et farmasøytisk akseptabelt solvat derav, for fremstilling av et medikament for behandling av tumorer, spesielt de beslektet med nyre- kreft, melanom, tykktarmskreft, lungekreft og leukemi, ulcere (for eksempel kronisk gastritt og peptisk ulcer fremkalt av Helicobacter pylori), revmatpid artritt og faste tumorer.
NO20016149A 1999-06-18 2001-12-17 Indol-derivater, bruk av disse som medikament, farmasoytiske preparater inneholdende disse samt anvendelse av disse for fremstilling av medikamenter for behandling og/eller forebygging av sykdommer NO322313B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB9914371.1A GB9914371D0 (en) 1999-06-18 1999-06-18 Novel compounds
PCT/EP2000/005672 WO2001002388A1 (en) 1999-06-18 2000-06-16 Indole derivatives and their use for the treatment of osteoporosis amongst other applications

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO20016149D0 NO20016149D0 (no) 2001-12-17
NO20016149L NO20016149L (no) 2001-12-17
NO322313B1 true NO322313B1 (no) 2006-09-11

Family

ID=10855696

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20016149A NO322313B1 (no) 1999-06-18 2001-12-17 Indol-derivater, bruk av disse som medikament, farmasoytiske preparater inneholdende disse samt anvendelse av disse for fremstilling av medikamenter for behandling og/eller forebygging av sykdommer

Country Status (30)

Country Link
US (2) US6787550B1 (no)
EP (1) EP1212317B1 (no)
JP (1) JP2003503490A (no)
KR (1) KR100701109B1 (no)
CN (1) CN1179960C (no)
AR (1) AR024390A1 (no)
AT (1) ATE276245T1 (no)
AU (1) AU768726B2 (no)
BR (1) BR0011708A (no)
CA (1) CA2376657A1 (no)
CO (1) CO5200757A1 (no)
CZ (1) CZ301697B6 (no)
DE (1) DE60013859T2 (no)
DK (1) DK1212317T3 (no)
ES (1) ES2226870T3 (no)
GB (1) GB9914371D0 (no)
GC (1) GC0000341A (no)
HK (2) HK1048468B (no)
HU (1) HUP0202049A3 (no)
IL (2) IL147012A0 (no)
MX (1) MXPA01013277A (no)
MY (1) MY129425A (no)
NO (1) NO322313B1 (no)
NZ (1) NZ516131A (no)
PL (1) PL352964A1 (no)
PT (1) PT1212317E (no)
TR (1) TR200103683T2 (no)
TW (1) TWI248440B (no)
WO (1) WO2001002388A1 (no)
ZA (1) ZA200200177B (no)

Families Citing this family (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101106631B1 (ko) 2003-02-13 2012-01-20 웰스태트 테러퓨틱스 코포레이션 대사 질환의 치료용 화합물
AU2004259703A1 (en) * 2003-07-15 2005-02-03 Smithkline Beecham Corporation Novel compounds
ITMI20040875A1 (it) * 2004-04-30 2004-07-30 Ist Naz Stud Cura Dei Tumori Derivati indolici utili per il trattamento della resistenza agli agenti antitumorali
AU2005305609B2 (en) 2004-09-17 2011-10-06 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Phosphoindoles as HIV inhibitors
CA2582674A1 (en) * 2004-10-04 2006-04-20 Myriad Genetics, Inc. Compounds for alzheimer's disease
US7833805B2 (en) * 2004-10-21 2010-11-16 University Of Cincinnati Selectively permeable membranes on porous substrates
EP1911744B1 (en) 2005-07-20 2013-09-04 Masanori Somei Tryptophan derivative and use thereof
ITRM20050389A1 (it) 2005-07-22 2007-01-23 Giuliani Spa Composti e loro sali specifici per i recettori ppar ed i recettori per l'egf e loro uso in campo medico.
ITRM20050390A1 (it) * 2005-07-22 2007-01-23 Giuliani Spa Composti e loro sali specifici per i recettori ppar ed i recettori per l'egf e loro uso in campo medico.
CA2618634A1 (en) 2005-08-15 2007-02-22 Irm Llc Compounds and compositions as tpo mimetics
EP1779849A1 (en) * 2005-10-28 2007-05-02 Nikem Research S.R.L. V-ATPase inhibitors for the treatment of septic shock
EP1779848A1 (en) 2005-10-28 2007-05-02 Nikem Research S.R.L. V-ATPase inhibitors for the treatment of inflammatory and autoimmune diseases
US7820721B2 (en) 2006-01-25 2010-10-26 Wellstat Therapeutics Corporation Compounds for the treatment of metabolic disorders
KR20080089453A (ko) 2006-01-25 2008-10-06 웰스태트 테러퓨틱스 코포레이션 물질대사 장애의 치료용 화합물
EP1978948A4 (en) 2006-02-02 2010-06-16 Wellstat Therapeutics Corp COMPOUNDS FOR THE TREATMENT OF METABOLISM DISORDER
JP2009543805A (ja) * 2006-07-13 2009-12-10 スミスクライン ビーチャム コーポレーション インドリン誘導体及びgpr119作動物質
NZ575831A (en) 2006-09-29 2011-12-22 Idenix Pharmaceuticals Inc Enantiomerically pure phosphoindoles as hiv inhibitors
UA107562C2 (uk) 2008-12-05 2015-01-26 Спосіб лікування псоріазу
BRPI1008752B1 (pt) 2009-02-16 2020-02-11 Nogra Pharma Limited Compostos alquilamido, composições farmacêuticas e usos dos mesmos
WO2010144611A2 (en) * 2009-06-10 2010-12-16 3-V Biosciences, Inc. Antivirals that target transporters, carriers, and ion channels
SI2614052T1 (sl) * 2010-09-08 2015-04-30 Bristol-Myers Squibb Company Novi analogi piperazina kot širokospektralna protivirusna sredstva proti gripi
WO2012045451A1 (en) 2010-10-05 2012-04-12 Ludwig-Maximilians-Universitaet Muenchen Novel therapeutic treatment of progranulin-dependent diseases
US20120142627A1 (en) * 2010-12-06 2012-06-07 Emory University Monophosphate prodrugs of dapd and analogs thereof
JP6301844B2 (ja) 2012-02-09 2018-03-28 ノグラ ファーマ リミテッド 線維症の処置方法
KR20150002819A (ko) 2012-04-18 2015-01-07 노그라 파마 리미티드 락토스 불내증의 치료 방법
CN113825739A (zh) 2019-02-08 2021-12-21 诺格拉制药有限公司 制备3-(4’-氨基苯基)-2-甲氧基丙酸及其类似物和中间体的方法
CN113024432A (zh) * 2019-12-24 2021-06-25 上海科胜药物研发有限公司 一种氨磺必利药典杂质的制备方法

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2124511C1 (ru) * 1993-05-14 1999-01-10 Фармасьютикал Ко., Лтд Производные пиперазина
JPH10512251A (ja) 1995-01-10 1998-11-24 スミスクライン・ビーチャム・ソシエタ・ペル・アチオニ 骨粗鬆症の治療に有用なインドール誘導体
ATE277037T1 (de) * 1996-07-09 2004-10-15 Nikem Research Srl Indolderivate zur behandlung von osteoporose
KR20010033528A (ko) 1997-12-24 2001-04-25 헨리 필리 파르, 올리비에 보우언 골다공증의 치료를 위한 a.o.에 유용한 인돌 유도체

Also Published As

Publication number Publication date
IL147012A (en) 2007-06-03
AU5816500A (en) 2001-01-22
TR200103683T2 (tr) 2003-01-21
DK1212317T3 (da) 2005-01-24
GB9914371D0 (en) 1999-08-18
IL147012A0 (en) 2002-08-14
MXPA01013277A (es) 2002-06-04
DE60013859D1 (de) 2004-10-21
DE60013859T2 (de) 2005-09-29
ES2226870T3 (es) 2005-04-01
KR100701109B1 (ko) 2007-03-29
KR20020025079A (ko) 2002-04-03
NO20016149D0 (no) 2001-12-17
MY129425A (en) 2007-03-30
EP1212317A1 (en) 2002-06-12
WO2001002388A1 (en) 2001-01-11
CA2376657A1 (en) 2001-01-11
HK1049164A1 (zh) 2003-05-02
ATE276245T1 (de) 2004-10-15
AR024390A1 (es) 2002-10-02
HUP0202049A2 (hu) 2002-11-28
NO20016149L (no) 2001-12-17
JP2003503490A (ja) 2003-01-28
CN1370159A (zh) 2002-09-18
HUP0202049A3 (en) 2003-12-29
US20040235930A1 (en) 2004-11-25
BR0011708A (pt) 2002-05-21
ZA200200177B (en) 2003-09-23
HK1048468A1 (en) 2003-04-04
CN1179960C (zh) 2004-12-15
CZ20014496A3 (cs) 2002-07-17
CO5200757A1 (es) 2002-09-27
HK1048468B (zh) 2005-07-29
PL352964A1 (en) 2003-09-22
PT1212317E (pt) 2005-02-28
GC0000341A (en) 2007-03-31
EP1212317B1 (en) 2004-09-15
AU768726B2 (en) 2004-01-08
US6787550B1 (en) 2004-09-07
TWI248440B (en) 2006-02-01
CZ301697B6 (cs) 2010-05-26
NZ516131A (en) 2003-10-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO322313B1 (no) Indol-derivater, bruk av disse som medikament, farmasoytiske preparater inneholdende disse samt anvendelse av disse for fremstilling av medikamenter for behandling og/eller forebygging av sykdommer
WO2004024693A1 (ja) Hivインテグラーゼ阻害活性を有するヘテロ環化合物
EP0914321B1 (en) Indole derivatives for the treatment of osteoporosis
EP1187813A1 (en) Azolylbenzamides and analogues and their use for treating osteoporosis
EP1042316B1 (en) Indole derivatives useful a.o. for the treatment of osteoporosis
US6506758B2 (en) Indole derivatives useful A.O. for the treatment of osteoporosis
JP2000514078A (ja) 骨吸収阻害剤として有用なヘテロ芳香族ペンタジエン酸誘導体
AU641759B2 (en) Substituted indoles
JP2000514080A (ja) 骨粗鬆症の治療用インドール誘導体
WO2012174926A1 (zh) N-取代异丙二甲薁磺酰胺类衍生物及其制备方法和用途
CZ20002341A3 (cs) Indolové deriváty vhodné pro léčení osteoporózy
MXPA00006340A (en) Indole derivatives useful a.o. for the treatment of osteoporosis
JPH06211790A (ja) フタルイミド誘導体
JPH06184153A (ja) 新規なフェノチアジン化合物及びその塩、それらの製法並びにそれらを有効成分とする消化性潰瘍治療剤

Legal Events

Date Code Title Description
MM1K Lapsed by not paying the annual fees