NL8200110A

NL8200110A - Nieuwe verbindingen met anti-allergene effecten, werkwijze voor de bereiding daarvan, en preparaten die ze bevatten.

Info

Publication number: NL8200110A
Application number: NL8200110A
Authority: NL
Original assignee: Nippon Chemiphar Co
Priority date: 1981-01-22
Filing date: 1982-01-13
Publication date: 1982-08-16
Also published as: CA1180716A; US4465851A; IT8267060A0; CH652119A5; DE3201817C2; FR2498183A1; BR8200212A; BE891790A; FR2498183B1; DE3201817A1; SE8200309L; IT1191163B; KR880001104B1; KR830009011A; SE455789B

Description

.......... -......... ......... ............- - -· ‘ t i - 1 -

Nieuwe verbindingen met anti-allergene effecten, werkwijze voor de bereiding daarvan, en preparaten die ze bevatten.

Deze uitvinding betreft nieuwe verbindingen die serine-protease sterk remmen en sterke anti-allergene effecten hebben.

A. Okano et al hebben in J. Med. Chem.

5 15, no. 3 (1972) 247 aangegeven dat 4-guanidinomethylcyclo- hexaancarbonzuur piasmine in zwakke mate remt.

Nu is gevonden dat bepaalde nieuwe guanidinomethylcyclohexaancarbonzuur-derivaten serine-proteasen sterk remmen en sterke anti-allergene effecten vertonen. Deze 10 uitvinding beoogt nieuwe verbindingen met dergelijke effecten te verschaffen, een werkwijze voor de bereiding daarvan, en preparaten die ze bevatten. Deze sterke effecten vindt men bij verbindingen volgens de algemene formule 1, waarin R een indanyl-, indolyl-, chinolyl- of chromonyl-groep is of een halogeennaftyl-15 of nitronaftyl-groep of een groep volgens formule 2, waarin R' een halogeenatoom of een alkyl-, nitro-, cyaan-, aceet-amido-, aminosulfonyl-, benzoyl-, fenoxy- of trifluormethyl-groep voorstelt, R" een waterstof- of halogeenatoom of een alkyl-groep is en R'T1 een waterstof- of halogeenatoom of een alkyl-20 groep voorstelt, en hun farmaceutisch aanvaardbare zouten.

In het bijzonder vertonen verbindingen volgens de formule 1 waarin R een groep volgens formule 2 is (waarbij Rr, R" en R'f’ de bovengenoemde definities hebben) uitstekende anti-allergene werkingen.

25 De werking van verbindingen volgens for mule 1 bestaat in de eerste plaats uit een sterk afremmen van serine-proteases zoals trypsine, chymotrypsine, thrombine en urokinase. Ook vertonen de verbindingen sterke anti-allergene effecten en remmen zij in sterke mate de door 'Verbinding 48/80" 30 uitgelokte afgifte van histamine door mastcellen. Bovendien zijn deze verbindingen beduidend werkzaam in het voorkomen van anafylaxis en 8200110 » ί - 2 - het onderdrukken van experimentele asthma bij caviaas.

Het remmen van diverse serine-proteases.

Het afremmen van de hydrolyserende werking van trypsine, piasmine, püasma-kallikreïne en thrombine op 5 TAME (Na-tosyl-L-arginine-methylester) werd gemeten met de

Hesterine-methode zoals gemodificeerd door Roberts. Het remmen van de hydrolyserende werking van pancreas-kallikreïne op BAEe (Na-benzoyl-L-arginine-ethylester) werd bepaald met de Hesterine-methode na 30 minuten incuberen in een 0,1 M boraat-10 buffer met pH = 8,0 van 37°C. Het afremmen van urokinase werd gemeten door 60 i.e. urokinase 30 minuten bij 37°C in een 0,06 M fosfaat-buffer met pH =» 7,5 die 0,09 M NaCl bevatte met 10 mM AGLMe (acetylglycyl-L-lysine-methylester) te incuberen en dan een bepaling met chromotroop zuur uit te voeren. Het af-15 remmen van chymotrypsine werd bepaald met de Hesterine-methode na 30 minuten incubatie bij 37°C in een 0,1 M boraat-buffer met pH = 8,0 met 15 mM ATE (Na-acetyl-L-tyrosine-ethylester). De uitkomsten hiervan staan in tabel A.

20 8200110 # i -3-- α) 03 in 'i ΐΛ ιο ιπ cd I I 1 I I··

{3000 O OOO

!d x x x x χ χ χ

O vö vO vO o - - O

^|«n « ·> «>*>«> 0 co cm — η co ~ to <u 5 <r -d- -st «d· to o·

•S' 'I I I I

o o o o o o

1 X NX NX jX

m to vo co -d· to co Γ* Λ Λ l\ Λ Λ Λ

E_l 04 — — <Ν σι CM

Φ 0 ΪγΗ <u -d· st <1·

I S-ι 1 I I

cd # O O O

g ·Η ·—* 1

W r-1 X X X

CO s~\ Cd rH ΙΟ Ο O

Φ 2 r-) Cd * * * w pm pd — co <o cd " Φ ------------ U to oom S-t H 0

Cu -w I >r) I 03ΦιΟ-νΤΙΟ'·3·<Ι'<1·ιΟΐΟ)Ο

a) ω cd μ I l l I I I I i_ I

(3 β φ ,Ν O o o o o o o o o __J ,_J <« ,_J T—t 1—* i—< ^ ^

μ gUHXXXXXXXXX

<u gör-icMCMOioocoiooo ο) o gJ * λ ^ λ λ λ λ Λ Λ μρπ,χνΟΓοσ'-'-ΝΤ’— cNcocs , φ 03 δ-?---------------- μ 0) Ο Φ -d- -Cf -d· -d·

> to 0 ! II I

·Η -Η O OOO

t-ι ο to X XX X

(Uöocdvo öö o _Q Cd > r-I " " * « cd > pL, cm <t <r cm E-ι Φ bO -H-----------

0 W

•r·) cd Φ g 0Ö

g +J -H

Φ O CO _ pd φ p< to to to -f 'f M3 o >, i I l II l 0 μ ooo oo o

O O XXX XX X

ë r- o cm O co o pL Λ Λ Λ Λ Λ Λ

,β σι Os — — CM VO

ο φ «d- -d· -d- to

0 1 I I II

-HO O O o o

p4 X XX XX

o* σι co σν o ^ η λ λ #\ λ E-) —» co cm — σι üo 0 •Η 1¾ CMCOtOvOCO<TtflO<^

tW -H - - — CM CM

φ ,o o 0 Μ φ o PM > 0 8200110 i » - 4 -

Effecten op het door verbinding 48/80 uitgelokte vrijkomen van histamine uit mastcellen.

Van een mastcellen-suspensie met 3,5 x 10 ^ cellen per ml werd 1,5 ml gemengd met 1 ml fysio-5 logische zout-oplossing die 10 jx% van de te beproeven stof bevatte, en dit mengsel werd 7 minuten op 37°C geïncubeerd, waarna 1 ml oplossing met daarin 3,5 ^tg verbinding 48/80 toegevoegd werd. Na nog 20 minuten incuberen op 37°C werd de suspensie tot 4°C afgekoeld en werd het afgegeven histamine met de methode 10 van Shore et al bepaald. Van alle monsters werd vastgesteld dat ze de fluorometrische bepaling niet stoorden. De uitkomsten staan in tabel B.

Tabel B

15 Proef- Remming (in %) van de verbinding_ histamine-afgifte_

No. 2 46,7 7 18,4 13 38,8 20 23 12,7 28 60,9 2Q 20,6

Stof A 5,0

Na2CG 10,0 25

Stof A is het hydrochloride van fenyl-trans-4-(guanidino-methyl)cyclohexaancarboxylaat, een verbinding volgens formule 1 waarin niet alleen R' en R"* waterstof zijn maar ook R.

Na2CG = dinatriumchromoglycaat.

30 Het is bekend dat chromoglycaat het vrijkomen van histamine uit mastcellen tegengaat (Life Sciences 10 (1973) 805-812 en Internal Medicine, 42., No. 6 (1978) 933) en daarom wordt chromoglycaat als anti-allergisch middel ge- 8200110 . Cr « - 5 - bruikt. Maar de verbindingen volgens de uitvinding remmen het vrijkomen van histamine uit mastcellen veel sterker dan het Na2CG.

Passieve huid-anafylaxis.

5 Ratten kregen oraal bepaalde doses van de te beproeven stof. Een uur later werd in elke ratterug subcutaan 0,05 ml antigeen ingespoten, zijnde 32 x met fysiologische zout-oplossing verdund rattenserum tegen eieralbumine. Weer 48 uur later kregen de ratten intraveneus per kg lichaams-10 gewicht 2,5 ml fysiologische zout-oplossing die per ml 10 mg eieralbumine en 5 mg Evans blauw bevatte. Weer 45 minuten later werd de rat gedood en na leegbloeden werd de ruggehuid 2 geprepareerd, en werd het oppervlak in mm gemeten van het gebied waarover de kleurstof had kunnen verspreiden.

15 Verbinding no. 2 gaf in een dosis van 125 mg/kg oraal een remming van 91,16 %.

Schultz-Dale-reactie.

Mannelijke caviaas werden met Freund’s complete adjuvans-methode tegen runderserum gesensibiliseerd.

20 Na een pauze van 10 dagen werden de dieren nogeens op dezelfde wijze gesensibiliseerd. Weer 2 weken later werd uit elke cavia de ileum weggenomen, en deze werd geplaatst in een magnus-buis die de te beproeven stof bevatte, en waaraan ook 500 yug runderserumalbumine toegevoegd werd. De samentrekking van 25 de ileum werd gemeten. De uitkomsten hiervan staan in tabel C.

Remming van de samentrekking (%) \ Eindconc. Z7 7”ï 7~ï

Verbi^ van de 50 ^g/ml 25 /igM

30 ding Nvproefstof no. \ 2 100 64,3 3 100 83,3 10 100 100 35 2Ö 100 80

Stof Δ 00 82 0 0 1 1 0 - 6 -

Het tegengaan van de werkingen van acetylcholine en histamine.

Deze werden op gebruikelijke wijze bepaald op ileums uit caviaas. De uitkomsten hiervan waren als volgt: 5________Tabel D__

Anti-acety 1 cho line- Anti-his tamine-effect remming effect remming van de contractie van de contrac- ___________(%)_ tie (%)_ 10 XEindconc. van de

Xnroefstof 50 yug/ml 25 yug/ml 50 yug/ml 25 yug/ml

Verb.

no._X_____ 15 2 100 96 96,5 82 3 100 100 100 98 10 100 89,8 100 100 28 76 68 100 99,7 29 80 52 20 Stof A 100 100

Na2CG - - 0 0

Actieve systemische anafylaxis in muizen.

In vaccin tegen Bordetella pertussis 25 (van de Takeda Chemical Industries, Ltd.) werd eieralbumine opgelost tot een concentratie van 1 mg/ml, en muizen kregen hiervan intraperitoneaal 10 ml/kg. 22 dagen later werd een actieve systemische anafylaxis opgewekt door elke muis intraveneus per kg lichaamsgewicht 10 ml fysiologische zout-oplos-30 sing met daarin 3 mg eieralbumine toe te dienen. Maar een uur daarvoor hadden de muizen oraal de te beproeven stof als suspensie in 5 % arabische gom gekregen. 24 uur na deze uitdaging werd het aantal muizen geteld dat nog in leven was.

Van de blanco groep waren alle 5 muizen 35 dood, maar met 500 mg/kg aan verbinding no. 2 waren 4 van de 5 muizen nog in leven, en met 250 mg/kg en met 100 mg/kg steeds 2 van de 5.

8200110 _ 7 _

Experimentele asthma in geïmmuniseerde caviaas.

Mannelijke caviaas van het ras Hartley-met een gewicht van 300 tot 35Q g werden passief geïmmuniseerd door intraveneuze injectie van 0,5 ml/kg konijnenserum tegen 5 eieralbumine. 24 uur later werden de caviaas in een ademhalings-kamer gezet en gedurende 900 seconden blootgesteld aan een continue mist van een 2 % eieralbumine-oplossing. Maar 1 uur voor deze beproeving hadden de dieren een suspensie van de te beproeven stof in 5 % arabische gom toegediend gekregen. Geno-10 teerd werd hoe lang het duurde voordat de dieren omvielen; de uitkomsten hiervan staan in tabel E.

De werking tegen experimentele asthma werd ook beproefd bij actief geïmmuniseerde caviaas, en wel als volgt: Mannelijke caviaas van het ras Hartley met een 15 lichaamsgewicht van 300 tot 350 g werden geïmmuniseerd door subcutane injectie in de liesstreek van 5 mg/kg mengsel van . gelijke volume-delen eieralbumine-oplossing van 1 mg/ml en het complete adjuvans van Freund. Tien dagen later werd de immunisering herhaald door dezelfde emulsie subcutaan in de 20 oksels te injiciëren. Op de 26s dag na de eerste immunisering ondergingen de dieren dezelfde beproeving als de passief geïmmuniseerde dieren. De resultaten hiervan staan ook in tabel E.

82 0 0 1 1 0 - 8 - co 0 5 0 cu i—i cd 6 60 ·!-)

-B

43

P

0 ^ ·β • 2.

O Ö <U ö 3 s

P

B §

<D B

rS -¾ -H

O) ΟΊ o B

•rl cn o > — o m 6 o -

o « σ\ B

vO A CS CU 0 0 cn ~ O O O P 0 <u — Λ -3-0 0 0 0 0 ia ρ ·θ οι ca 0 0 (O «- O O *> Λ Λ Λ -Η Ή I—I -B lOIOCTn- CA b 0 0 cni ΟΊ Λ O -3· “ ·> " n r—11 A O cn O O O LH 0 0 0 «> <jn O O O —' Ό 0 * *>OA « CA ΟΊ CA i-·

-3M O CA Λ Λ Λ 0 <U

p cs cai ca - σ\ cu-P

nj — — | λ O cm ·» « « ccn

-o O OOO 0 B

^ η ι\ n - CD -H 0

O r-- cm t— | λ ι-~ σι m cn 0 B

o CS f-· CAI Γ> A A A

> — — — I Λ CM I

O Λ Λ Λ 1

Λ Λ Λ Ο Λ Ο Ο Ο I

0 V0 CS| CS| CA — Ο Ο Ο 0 — ν0| -3" I Λ Γ~ <Α CA 0Ί -0 —ι —I — I CS ΑΛΑ £0 0 Λ 0 -Η Λ Λ η Ο 0 - ΛΛΛ •ηΡΟ cn raio ·βο ra ν σ -r-ι cd — u*> un cn pen ra en ca

PH CO — — Λ 0 CS IS co VO

•B M

Ö *H

| | _ Ή 0 t> 0 0 > •B 0

CO -H

..0 P

10 0 O CS

0 0( <1 0 0 |5 0 CS O 60 60 60

* ^ > r-s 0 4<i 44 BS

0 0 60 0 ö 0 6000 - 60 60 60 0 b 44 -b b raees

-H 0 ^00 B

0 0-H 60 C -rl Ο0ΟΟΙΓΙ 0 ü0 g-H0 ü > o m es 60 0 43 0 U-1CS — 0 0 CS O B O 00 0 0— O 0 — r-l 0 H pq V LO>w P3 > 8200110 - 9 -

Acute toxiciteit.

Deze werd beproefd op normale muizen van de stam ICR (mannetjes van 24 g en vrouwtjes van 22 g) en ratten van de stam Wistar (mannetjes van 95 g, vrouwtjes van 5 90 g). Verbinding no. 2 werd oraal toegediend met behulp van een maagsonde. Gedurende 7 dagen werden de dieren waargenomen. Met behulp van de methode van Litchfield-Wilcoxon werden de LD^g-waarden berekend. Deze waren:

Bij mannelijke muizen 5400 mg/kg, bij vrouwelijke muizen 7300 10 mg/kg, bij mannelijke ratten 11.000 mg/kg en bij vrouwelijke ratten 10.800 mg/kg.

Zoals reeds gezegd kunnen de ester-groepen R in formule 1 indanyl, indolyl, chinolyl, chromonyl, halogeennaftyl en nitronaftyl zijn en een groep volgens for-15 mule 2 waarin R' een halogeenatoom of een alkyl-, nitro-, cyaan-, aceetamido-, aminosulfonyl-, benzoyl-, fenoxy- of trifluormethyl-groep voorstelt. Goede voorbeelden van gesubstitueerde naftyl-groepen zijn 4-chloor-l-naftyl en 4-nitro-1-naftyl. Geschikte groepen volgens formule 2 zijn chloorfenyl, 20 broomfenyl, joodfenyl, methylfenyl, ethyi>f enyl, propyl^fenyl, butylfenyl, t-butylfenyl, nitrofenyl, cyaanfenyl, aceetamino-fenyl, aminosulfonylfenyl, benzoylfenyl, fenoxyfenyl, trifluor-methylfenyl, 4-chloor-2-isopropyl~5-methylfenyl, 2-isopropyl- 5-methylfenyl, 2,4-dichloorfenyl, 2,4,6-trichloorfenyl e.d.

25 De verbindingen volgens formule 1 kun nen zowel het cis-als het trans-isomeer zijn. De voorkeur gaat uit naar de trans-isomeren.

Farmaceutisch aanvaardbare zouten van de verbindingen volgens de uitvinding zijn combinaties van deze 30 basen met zoutzuur, zwavelzuur, fosforzuur, broomwaterstofzuur, azijnzuur, melkzuur, maleïnezuur, fumaarzuur, wijnsteenzuur, citroenzuur, methaansulfonzuur, p-tolueensulfonzuur e.d.

De verbindingen volgens de uitvinding, volgens formule 1 waarin R een der eerder gegevens betekenis-35 sen heeft, kunnen bereid worden door 4-guanidinomethylcyclo-hexaancarbonzuur of een reactief derivaat daarvan te laten 8200110 * * - 10 - reageren met een verbinding volgens de formule ROH, waarin R genoemde eerdergegeven betekenis heeft.

Geschikte reactieve derivaten van het 4-guanidinomethylcyclohexaancarbonzuur zijn de zuuhalogeniden 5 zoals het zuurchloride, zuurbromide e.d. en de gemengde arihy-driden die men met behulp van ethylchloorformiaat bereidt.

Ook de fenolen volgens de formule ROH kunnen in een geactiveerde vorm ingezet worden, waarvan bis(4-chloorfenyl)sulfiet en bis(4-t-butylfenyl)sulfiet voorbeelden zijn.

10 De reactie van 4-guanidinomethylcyclo- hexaancarbonzuur met een dergelijk disulfiet gebeurt door het mengsel de uitgangsstoffen 1 tot 20 uur op kamertemperatuur te roeren. Geschikte oplosmiddelen die daarbij gebruikt kunnen worden zijn dimethylformamide, dimethylaceetamide, pyridine en 15 dergelijke. De reactie van een reactief derivaat van het 4-guanidinomethylcyclohexaancarbonzuur met een fenol volgens de formule ROH gebeurt door een mengsel der uitgangsstoffen te roeren bij een temperatuur tussen kamertemperatuur en het kookpunt van het oplosmiddel. Geschikte oplosmiddelen die daarbij 20 gebruikt kunnen worden zijn dimethylformamide, dimethylaceetamide, pyridine, dichloormethaan, dichloorethaan, chloroform, acetonitril en dergelijke. Toepassing van een zuurwegvanger zoals triethylamine, dimethylaniline of pyridine is daarbij soms aan te bevelen.

25 Xndien het 4-guanidinomethylcyclohexaan- carbonzuur direct zonder omzetting in een reactief derivaat daarvan uitgevoerd wordt gebeurt de reactie bij voorkeur in aanwezigheid van een condensatiemiddel, bijvoorbeeld een carbo-diïmide zoals dicyclohexylcarbodiïmide, of een Lewis-zuur zoals 30 fosforoxychloride of boortrifluoride. De reactie gebeurt in oplossing, bijvoorbeeld in tolueen, xyleen of dimethylformamide, of een der bovengenoemde oplosmiddelen of een mengsel daarvan, en bij een temperatuur tussen kamertemperatuur en het kookpunt van het oplosmiddel.

35 De verbindingen volgens de uitvinding kunnen zowel oraal als parenteraal heel goed toegediend worden.

8200110 - Jl -

Natuurlijk geniet de orale toediening de voorkeur, en daarvoor gebruikt men capsules, tabletten, poeders of korrels. In dergelijke toedieningsvormen is de actieve stof gemengd met ten minste ëén verdunningsmiddel zoals lactose, maïszetmeel of 5 kristallijne cellulose, een smeermiddel zoals magnesiumstea-raat, een bindmiddel zoals hydroxypropylcellulose, en eventueel met een kleurstof, smaakstof of geurstof e.d.

De dosering van de verbindingen volgens de uitvinding in diverse preparaten kan nogal variëren. Maar 10 nodig is dat zodanige hoeveelheden gebruikt worden dat twee geschikte doseringsvormen bereikt worden. Welke dosering men kiest hangt af van het gewenste therapeutische effect, de wijze van toediening en de duur van de behandeling. Een dergelijke dosering ligt in het algemeen tussen 30 en 900 mg/dag.

15 De uitvinding wordt nu nader toegelicht door de volgende, niet beperkende voorbeelden.

Voorbeeld I

2’-methylfenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexaancarboxylaat- hydrochloride 20 Een suspensie van 5,9 g trans-4-guanidino- methylcyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 3,24 g o-cresol en 6,2 g dicyclohexylcarbodiïmide in 100 ml droog pyridine liet men 14 dagen op kamertemperatuur staan. Na voltooide reactie werd de oplossing door filtreren geklaard en het filtraat droog-25 gedampt. Het residu werd tweemaal uitgewassen met ether dat afgeschonken werd, en daarna tweemaal met tolueen. Na verwijdering van het tolueen werd de vaste stof uit isopropanol ge-herkristalliseerd, wat 2,64 g (32 % opbrengst) 2-methylfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaancarboxylaat-hydrochloride 30 als kleurloze kristallen met een smeltpunt 157-159°C gaf.

IR-spectrum (in KBr): sterke piek bij 1748 cm ^ (carbonyl). Voorbeeld II

'41-t-butyIfeny1-trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaancarboxy-laat-hydrochloride 35 Een suspensie van 9,4 g trans-4-guanidino- methylcyclohexaancarbonzuur, 7,2 g p-t-butylfenol en 10,0 g 8200110 , -12- dicyclohexylcarbodiïmide in 61 ml mengsel van droog pyridine en droog dimethylformamide werd 24 uur op kamertemperatuur geroerd. Het oplosmiddel werd onder verlaagde druk verwijderd, en aan het residu werd 240 ml 0,1 N zoutzuur toegevoegd. Na 5 1 uur roeren op kamertemperatuur werd een onoplosbare rest afge filtreerd en met ethylacetaat uitgewassen. Filtraat en wasvloeistoffen werden samen nog eens gefiltreerd en dan onder verlaagde druk drooggedampt. Het residu gaf bij afkoelen witte kristallen. Deze werden met ether uitgewassen en uit ethanol/ 10 ether geherkristalliseerd, wat 10,3 g (70 % opbrengst) 4-t-bu-tylfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaancarboxylaat-hydrochloride als kleurloze kristallen met smeltpunt 189-196°C gaf. De kristallen werden nogeens geherkristalliseerd uit ethanol/ether, wat een kleurloos produkt met een smeltpunt 15 208-210°C gaf.

IR-spectrum (in KBr): sterke piek bij 1750 cm ^ (carbonyl).

NMR (CD^OD): 8 = 0,60 - 2,80 (10 H, m, cyclohexaan-protonen) 1,38 (9H, s, -C(C^)3) 3,20 (2H, d, J=8Hz, -CH2-N) 20 7,20 - 7,90 (4H, m, aromatische protonen).

Voorbeeld III

4-methylfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)cyelohexaancarboxylaat-hydrochloride

Een mengsel van 8,9 g bis(p-methylfenyl)-25 sulfiet (verkregen uit p-cresol en thionylchloride), 2,0 g trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 18 ml droog dimethylformamide en 9 ml droog pyridine werd 16 uur op kamertemperatuur geroerd. Na voltooide reactie werd het oplosmiddel onder verlaagde druk verwijderd en werd aan het 30 residu diethylether toegevoegd, waardoor kristallen ontstonden. Deze werden met diethylether en daarna met ethylacetaat uitgewassen en uit methanol/diethylether geherkristalliseerd wat 1,93 g (69,9 % opbrengst) 4-methylfenyl-trans-4-(guanidino-methyl)cyclohexaancarboxylaat-hydrochbride als kleurloze kris-35 tallen met smeltpunt 151—153°C gaf.

IR-spectrum (in KBr): pieken bij 1639, 1663 en 1742 cm 8200110 - 13 - NMR (CD^OD): <5 = 0,78 - 2,55 (10H, m, cyclohexaan-protonen) 2,29 (3H, s, CH3) 3,05 (2H, d, N-CH2-)‘ 6,72 - 7,46 (4H, m, aromatische protonen)

5 Voorbeeld IV

4-ethyIfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaancarboxylaat-hydrochloride

Een suspensie van 2,35 g trans-4-(guanidinomethyl) cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 2,47 g dicyclo-10 hexylcarbodiïmide en 1,46 g p-ethylfenol in een mengsel van 30 ml droog pyridine en 10 ml droog dimethylformamide werd twee dagen op 30°C geroerd. Na filtreren werd het residu met 10 ml pyridine uitgewassen. Filtraat en wasvloeistof werden samen drooggedampt, en dat residu werd met ether en daarna met • 15 ethylacetaat uitgewassen en dan met 20 ml aceton uitgetrokken.

Aan de aceton-oplossing werd ether toegevoegd, waardoor zich kristallen afscheiden. Deze werden uit methanol/ether geher-kristalliseerd wat 410 mg 4-ethyIfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)-cyclohexaancarboxylaat-hydrochloride als kleurloze kristallen 20 met smeltpunt 137—139°C gaf.

IR-spectrum (in KBr): piek bij 1750 cm Voorbeeld V

2-chloorfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaancarboxylaat-hydrochloride 25 Een mengsel van 1,18 g trans-4-(guanidino methyl) cyclohexylcarbonzuur-hydrochloride, 1,24 g dicyclohexyl-carbodiïmide, 0,77 g o-chloorfenol en 20 ml droog pyridine werd 4 dagen op kamertemperatuur geroerd. De vaste stof werd afgefiltreerd en het filtraat werd drooggedampt. Aan het residu 30 werd 10 ml dioxaan toegevoegd, waardoor kristallen ontstonden. Deze werden uit isopropanol geherkristalliseerd, wat 1,27 g (70 % opbrengst) 2-chloorfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)-cyclohexaancarboxylaat-hydrochloride als kleurloze kristallen met een smeltpunt 157-158°C gaf.

35 IR-spectrum (in KBr): sterke piek bij 1723 cm ^ (carbonyl).

8200110 * ί - 14 -

Voorbeeld VI

4-broomfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)cyelohexaancarboxylaat-hydrochloride

Een mengsel van 1,18 g trans-4-(guani-5 dinomethyl)cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 1,24 g dicyclo- hexylcarbodiïmide, 1,04 g 4-broom£enol en 20 ml droog pyridine werd 2 dagen op kamertemperatuur geroerd. De vaste stof werd afgefiltreerd en het filtraat drooggedampt. Aan het residu werd 10 ml aceton toegevoegd waardoor kristallen ontstonden.

10 Deze werden uit isopropanol geherkristalliseerd, waardoor 1,06 g (52 % opbrengst) 4-broomfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)-cyclohexaancarboxylaat-hydrochloride als kleurloze kristallen met een smeltpunt 165-166°C verkregen werd.

IR-spectrum (in KBr): sterke piek bij 1735 cm * (carbonyl).

15 Voorbeeld VII

4-j oodfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaancarboxylaat-hydrochloride

Een mengsel van 10,7 g trans-4-(guanidinomethyl) cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 10 g p-jood-20 fenol, 9,4 g dicyclohexylcarbodixmide en 100 ml droog pyridine werd 17 uur op kamertemperatuur geroerd. Na affiltreren van een onoplosbare rest werd het pyridine onder verlaagde druk verdampt. Aan het residu werd 300 ml 0,1 N zoutzuur toegevoegd, waardoor een witte stof ontstond die afgefiltreerd 25 en met ethylacetaat uitgewassen en vervolgens in methanol opgelost werd. Na verwijdering van wat onoplosbare rest door filtreren en na afkoelen werd ether toegevoegd, waardoor 10 g (50,3 % opbrengst) 4-joodfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)-cyclohexaancarboxylaat-hydrochloride als kleurloze kristallen 30 met smeltpunt 195-197°C verkregen werd.

Infrarood-spectrum (in KBr): sterke piek bij 1740 cm * (carbonyl) NMR (CD^OD, CDCl^): 5 = 0,96 - 2,70 (10H, m, cyclohexaan- protonen) 35 3,06 (2H, d, J=7Hz, -CH2-) 6,80 - 7,80 (4H, m, aromatische protonen).

8200110 - 15 -

Voorbeeld VIII

2,4,6-trichloorfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaancar-boxylaat-hydrochloride

Een mengsel van 5 g trans-4-(guanidino-5 methyl)cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 4,2 g 2,4,6-tri- chloorfenol, 4,4 g dicyclohexylcarbodiïmide en 50 ml droog pyridine werd 17 uur op kamertemperatuur geroerd. Na affiltreren van wat onoplosbare rest werd bet pyridine onder verlaagde druk verdampt. Aan het verkregen olieresidu werd ethylacetaat 10 toegevoegd waardoor zich een bleekgele stof afscheidde, die geïsoleerd en in warm chloroform opgelost werd. Na affiltreren van wat onoplosbaar materiaal werd de oplossing afgekoeld, waardoor een kleurloos poeder ontstond, dat afgefiltreerd en eerst met koud chloroform en daarna met ether uitgewassen werd, waar-15 door 4,0 g (45,5 % opbrengst) 2,4,6-trichloorfenyl-trans-4- (guanidinomethyl)cyclohexaancarboxylaat-hydrochloride als kleurloos poeder met smeltpunt 151-155°C verkregen werd. Infrarood-spectrum (in KBr): sterke piek bij 1760 cm * (carbonyl). NMR (CD^OD): δ = 1,00 - 2,90 (10H, m, cyclohexaan-protonen) 20 3,10 (2H, d, J=7Hz, -CHg-) 7,52 (2H, s, aromatische protonen).

Voorbeeld IX

2,4-dichloorfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaancarboxy-laat-hydrochloride 25 Aan een mengsel van 3 g trans-4-(guani dinomethyl) cyclohexaancarbonzuur en 15 ml droog dimethylform-amide werden onder koeling met een waterbad 1 g bis(2,4-dichloor-fenyl)sulfiet en 5 ml droog pyridine toegevoegd. Het oplosmiddel werd verwijderd en het residu met ether uitgewassen, 30 wat een soort gom gaf dat in 30 ml methanol opgelost werd. Deze oplossing werd met actieve kool behandeld en daarna onder verlaagde druk drooggedampt. Aan het residu werden ether en 20 ml aceton toegevoegd, en het mengsel werd geroerd totdat het begon te kristalliseren. De ontstane kristallen werden afgefiltreerd 35 en met een klein beetje aceton en daarna met diëthylether uitgewassen, wat 2,7 g (56 % opbrengst) 2,4-dichloorfenyl-trans-4- 8200110 5 - 16 - (guanidinomethyl)cyclohexaancarboxylaat-hydrochloride als kleurloos poeder met smeltpunt 133-138°C gaf.

Ill-spectrum (in KBr): sterke piek bij 1760 cm NMR (CD^OD): δ = 0,84 - 2,80 (10H, m, cyclohexaan-protonen) 5 2,96-3,16 (2H, m, -CH2-N) 7,00 - 7,52 (3H, m, aromatische protonen).

Voorbeeld X

4-chloorfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaancarboxylaat-hydrochloride 10 Een mengsel van 2,0 g trans-4-(guanidino- methyl)-cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 8,5 g bis(p-chloor-fenyl)sulfiet (verkregen uit p-chloorfenol en thionylchloride), 18 ml droog dimethylformamide en 9 ml droog pyridine werd 1 uur bij kamertemperatuur geroerd. Nu werd het oplosmiddel onder 15 verlaagde druk verwijderd en het residu met diethylether uitgewassen, hetgeen kristallen gaf. Deze werden met diethylether en daarna met ethylacetaat uitgewassen, en daarna uit methanol/ diethylether geherkristalliseerd, wat 1,77 g (60,2 % opbrengst) 4-chloorfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaancarboxylaat-20 hydrochloride als kleurloze kristallen met smeltpunt 163-165°C gaf.

IR-spectrum (in KBr): sterke piek bij 1747 cm NMR (CD^OD): δ = 0,81 - 2,88 (10H, m, cyclohexaan-protonen) 3,26 (2H, d, N-CH2-) 25 7,28 - 7,99 (4H, m, aromatische protonen).

Voorbeeld XI

4-chloorfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaancarboxylaat-hydrochloride

Een mengsel van 2,35 g trans-4-guanidino-30 methylcyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 2,47 g dicyclohexyl-carbodiïmide, 1,54 g p-chloorfenol en 50 ml droog pyridine werd 3 dagen op 30°C geroerd. De vaste stof werd afgefiltreerd en met 10 ml pyridine uitgewassen. Filtraat en wasvloeistof werden samen drooggedampt, en aan het residu werd 5 ml koud wa-35 ter toegevoegd. Het nu ontstane neerslag werd afgefiltreerd en het filtraat onder verlaagde druk drooggedampt. Het residu werd 8200110 « - 17 - met ether en daarna met ethylacetaat uitgewassen, en vervolgens in warm aceton opgehomen. Afkoelen van deze aceton-oplossing gaf kristallen die uit methanol/ether geherkristalli-seerd werden, wat het gewenste 4-chloorfenyl-trans-4-(guanidino-5 methyl)-cyclohexaancarboxylaat-hydrochloride gaf.

Voorbeeld XII

2,4-dimethylfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaancarboxy-laat-hydrochloride

Een mengsel van 5,9 g trans-4-(guani-10 dinomethyl)-cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 6,18 g dicyclohexylcarbodiïmide, 3,66 g 2,4-dimethylfenol en 100 ml droog pyridine werd 4 dagen bij 30°C geroerd. De vaste stof werd afgefiltreerd en het filtraat onder verlaagde druk droogge-dampt. Het residu werd eerst met ether en dan met ethylacetaat 15 gewassen, 'en vervolgens werd er benzeen aan toegevoegd, waarna bij oproeren kristallisatie inzette. De kristallen werden afgescheiden en uit isopropanol/ethylacetaat geherkristalliseerd, wat 6,22 g (73 % opbrengst) 2,4-dimethylfenyl-trans-4-(guanidinomethyl) -cyclohexaancarboxylaat-hydrochloride als kleurloze 20 kristallen met een smeltpunt 151-153°C gaf.

IR-spectrum (in KBr): sterke piek bij 1745 cm ^ (carbonyl). Voorbeeld XIII

2-isopropyl-5-methylfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaan-carboxyla'at-hydrochloride 25 Een mengsel van 10,0 g trans-4-(guani dinomethyl) cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 6,4 g thymol, 8,75 g dicyclohexylcarbodiïmide en 100 ml droog pyridine werd 36 uur bij kamertemperatuur geroerd. Na verwijderen van enig vaste stof werd het filtraat onder verlaagde druk drooggedampt, 30 en aan het residu werd onder afkoelen 200 ml 0,1 N zoutzuur toegevoegd. Na 12 uur roeren op kamertemperatuur werd het neerslag afgefiltreerd en werd aan het filtraat een klein beetje water toegevoegd. Toen men dit mengsel liet staan ontstonden er witte kristallen in. Deze werden afgescheiden en in methanol 35 opgelost. Na opnieuw filtreren werd de oplossing weer drooggedampt en werd er weer water aan het residu toegevoegd, waardoor 8200110 - 18 - opnieuw witte kristallen ontstonden. Deze werden uit water/- methanol geherkristalliseerd, wat 6,0 g 2-isopropy1-5-methyl- fenyl-trans-4-(guanSinomethy1)cyclohexaancarboxylaat-hydro- chloride als kleurloze kristallen met smp. 158yl60°C gaf.

5 IR-spectrum (in KBr): sterke piek bij 1730 cm" (carbonyl) NMR TCD30D): 5 » 1,15 (6H, d, CH(CH3)2) 0,91 - 2,36 (10H, m , cyclohexaan protonen) 2,27 (3H, s, CH3) 2,95 (1H, m, CH(CH3)2).

10 Voorbeeld XIV

2-isopropyl-4-cbloor-5-metbylfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)-cyclohexaancarboxylaat-hydrochloride

Een mengsel van 10 g trans-4-(guanidino-metbyl)cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 7,83 g 2-isopropy1-15 4-chloor-5-methylfenol, 8,75 g dicyclohexylcarbodiïmide en 100 ml droog pyridine werd 14 uur bij kamertemperatuur geroerd. Wat vaste stof werd afgefiltreerd en met pyridine uitgewassen. Filtraat en wasvloeistof werden samen drooggedampt, en het residu werd met 200 ml 0,1 N zoutzuur opgeroerd, waardoor 20 kristallen ontstonden. Deze werden afgescheiden, achtereenvol gens met water, ethylacetaat, benzeen en ether uitgewassen, en in isopropanol opgêlost. Na verwijderen van een onoplosbare rest werd het filtraat drooggedampt en werd het residu in di-isopropylether opgenomen. Bij bewaren op 3°C scheiden zich 25 hier kristallen uit af, die uit isopropanol/diïsopropylether geherkristalliseerd werden, hetgeen 5 g van de in de titel genoemde verbinding met een smeltpunt 185-187°C gaf.

IR-spectrum (in KBr): sterke piek bij 1735 cm 1 (carbonyl). Voorbeeld XV

30 4-nitróféiiyl-trans-4-(güanidlnómèthyl)cyclóhexaancarboxylaat- hydrochloride

Een mengsel van 5,0 g trans-4-(guani-dinomethyl)-cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 6,18 g dicyclohexylcarbodiïmide, 6,95 g p-nitrofenol en 100 ml droog 35 pyridine werd 40 uur bij kamertemperatuur geroerd. Na verwijderen van wat onoplosbaar materiaal werd het filtraat drooggedampt en aan het residu aceton toegevoegd. Na verwijderen 8200110 - 19 -

van een onoplosbare rest werd ook het aceton verwijderd en werd het residu in ethylacetaat opgenomen, uit welke oplossing zich kristallen afscheiden. Deze werden uit isopropanol geherkristalliseerd, wat 1,9 g (25 % opbrengst) van de in de 5 titel genoemde verbinding met smeltpunt van ongeveer 155°C gaf. IR-spectrum (in KBr): sterke piek bij 1760 cm * (carbonyl). Voorbeeld XVI

4-aceetamidófenyl-trans-4-(guanidlnomëthyl)-cyclohexaancarboxy-laat-hydrochloride 10 Een mengsel van 1,17 g trans-4-(guani- dinomethyl)cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 1,13 g dicyclo-hexylcarbodiïmide, 0,83 g p-aceetamidofenol en 30 ml droog pyridine werd 15 dagen op 30°C geroerd. De ontstane kristallen werden afgefiltreerd en in 10 ml koud water gesuspendeerd. Na 15 verwijderen van wat onoplosbaar materiaal werd het filtraat drooggedampt, hetgeen kleurloze kristallen gaf. Deze werden uit isopropanol/ethylacetaat geherkristalliseerd wat 495 mg (27,2 % opbrengst) van de in de titel genoemde verbinding met smeltpunt 223-224°C gaf.

20 IR-spectrum (in KBr): sterke piek bij 1755 cm (carbonyl). Voorbeeld XVII

4-benzoylfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaancarboxylaat- hydrochloride

Een mengsel van 1,18 g trans-4-(guani-25 dinomethyl)cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 1,24 g dicyclo-hexylcarbodiïmide, 1,18 g 4-hydroxybenzofenon en 20 ml droog pyridine werd 9 dagen bij kamertemperatuur geroerd. Na verwijderen van wat onoplosbaar materiaal werd het filtraat drooggedampt. Het residu werd met benzeen uitgewassen en gedroogd, en dan 30 in aceton opgenomén. Uit deze oplossing scheiden zich kristallen af, die uit isopropanol geherkristalliseerd werden, wat 442 mg (21 % opbrengst) van de in de titel genoemde verbinding als kleurloze kristallen met smeltpunt 199-200°C gaf.

IR-spectrum (in KBr): sterke piek bij 1755 cm * (carbonyl).

35 8200110 - 20 -

Voorbeeld XVIII

4-aminosulfonylfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaan- carboxylaat-hydrochloride

Een mengsel van 5,90 g trans-4-(guani-5 dinomethyl)cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 6,18 g di- cyclohexylcarbodiïmide, 5,19 g p-fenolsulfonamide en 100 ml droog pyridine werd 12 dagen bij 30°C geroerd. Na verwijderen van wat onoplosbaar materiaal werd het filtraat droogge-dampt en het residu in ethylacetaat opgenomen. Na omroeren en 10 enige tijd staan werd de vloeistof afgeschonken en werd ethylacetaat toegevoegd. Nu ontstonden er kristallen, en de opbrengst was 6,4 g (65 %) aan de in de titel genoemde verbinding als bleek geelbruin poeder met smeltpunt 194—196°G.

Voorbeeld XIX

15 2-fenoxyfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaancarboxylaat- hydrochloride a) Een mengsel van 10 g o-fenoxyanisool, 80 ml 52 % joodwaterstofzuur, 80 ml azijnzuur en 40 ml azijnzuur anhydride werd lj uur onder terugvloeikoeling gekookt. Na 20 afkoelen werd het readiemengsel in ijswater uitgegoten, waardoor een neerslag ontstond. Dit werd afgescheiden en in ether opgenomen, en de oplossing werd achtereenvolgens met verzadigde pekel, een waterige natriumthiosulfaat-oplossing en weer met verzadigde pekel gewassen, op natriumsulfaat gedroogd en 25 drooggedampt. Er bleef een gele stof achter die in azijnzuur opgenomen werd, en na goed roeren werd deze oplossing in water uitgegoten waardoor kristallen ontstonden. Deze werden afgescheiden, met water en met n-hexaan uitgewassen en onder verlaagde druk bij 80°C gedroogd, wat 7,8 g o-fenoxyfenol als 30 lichtgeel poeder gaf.

NMR-spectrum (in CDCl^): δ = 5,50 (1H, breed singulet, OH) en 6,60-7,40 (9H, m, aromatische protonen) .

b) Een mengsel van 7,5 g trans-4- 35 (guanidinomethyl)-cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 6 g o-fenoxyfenol, 6,5 g dicyclohexylcarbodiïmide en 10 ml droog 8200110 - 21 - pyridine werd 24 uur bij kamertemperatuur geroerd. Na verwijderen van wat onoplosbaar materiaal werd bet oplosmiddel onder verlaagde druk verwijderd en werd het residu in water opgenomen.

Na verwijderen van een onoplosbare restwerd het filtraat weer 5 onder verlaagde druk drooggedampt. Dit residu werd achtereenvolgens met benzeen en met droge benzeen gewassen. Na drogen werd het residu tweemaal met droge ether gewassen wat 9 g (69,2 % opbrengst) van de in de titel genoemde verbinding als hygroscopisch, lichtgeel poeder met smeltpunt 73-75°C gaf.

10 IR-spectrum (in KBr): sterke piek bij 1755 cm * (carbonyl).

NMR (CD^OD): S = 1,70-2,56 (10H, m, cyclohexaan-protonen) 3,00 (2H, d, J=8Hz, -0Η£) 6,80-7,40 (9H, m, aromatische protonen).

Voorbeeld XX

15 3-trifluormethylfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)-cyclohexaan- carboxylaatlhydrochloride

Een mengsel van 10,0 g trans-4-(guani-dinomethyl)-cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 6,9 g m-tri-fluormethylfenol, 8,75 g dicyclohexylcarbodiïmide en 100 ml 20 droog pyridine werd 18 uur bij kamertemperatuur geroerd. Na verwijderen van wat onoplosbaar materiaal werd het filtraat onder verlaagde druk drooggedampt, wat bleekgele kristallen gaf. Deze werden met 200 ml 0,1 N zoutzuur opgeroerd en na 1 uur roeren werden de kristallen met water gewassen en uit ethyl-25 acetaat/ether geherkristalliseerd, wat 9,6 g (59,7 % opbrengst) van de in de titel genoemde verbinding als naaldjes met smeltpunt 88-91°C gaf.

IR-spectrum (in KBr): sterke piek bij 1742 cm * (carbonyl).

NMR (CD^OD): δ = 0,98-2,16 (10H, m, cyclohexaan protonen), 30 3,11 (2H, d, CH2N) 7,34-7,83 (4H, m, aromatische protonen).

Voorbeeld XXI

2-cyaanfenyl-trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaancarboxylaat-hydrochloride 35 Een mengsel van 9,88 g trans-4-(guani dinomethyl) cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 5 g o-cyaan- 8200110 - 22 - fenol, 8,64 g dicyclohexylcarbodiïmide en 100 ml droog pyridine werd 66 uur bij kamertemperatuur geroerd. Na verwijderen van wat onoplosbaar materiaal, dat met pyridine uitgewassen werd, werden filtraat en wasvloeistof samen drooggedampt. Het residu 5 werd met ethylacetaat uitgewassen en in 30 ml ethanol opgelost.

Na verwijderen van een onoplosbare rest werd 10 ml water aan het filtraat toegevoegd. Bij afkoelen sloegen hier kleurloze naaldjes uit neer; opbrengst 9,82 g aan de in de titel genoemde verbinding met smeltpunt 102-105°C.

10 IR-spectrum (in nujol): pieken bij 2250 cm ^ (CN) en 1760 (CO) NMR (CD^OD): S ~ 0,9-2,8 (10H, m, cyclohexaan-protonen) 3,01 (2H, d, J=6Hz, CH2N) 7,14-7,65 (4H, m, aromatische protonen).

Voorbeeld XXII

15 4-cyaanfenyl-traiis-4-(guanidinomethyl)cyclohexaancarboxylaat- hydrochloride

Een mengsel van 9,88 g trans-4-(guanidinomethyl) cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 5 g p-cyaan-fenol, 8,64 g dicyclohexylcarbodiïmide en 100 ml droog pyridine 20 werd 18 uur bij kamertemperatuur geroerd. Na verwijderen van wat onoplosbaar materiaal werd het filtraat met pyridine en daarna met ether uitgewassen. Aan de aldus verkregen kristallen werd 100 ml methanol toegevoegd, en na 15 minuten roeren werd een onoplosbare rest afgefiltreerd, en het filtraat tot 25 -50°C afgekoeld, waardoor een neerslag ontstond dat verwijderd werd. Het filtraat werd drooggedampt, wat 7,7 g van de in de titel genoemde verbinding als kleurloze kristallen met smeltpunt 182-186°C gaf.

IR-spectrum (in KBr): pieken bij 2225 cm * (CN) en 1735 cm ^ (CO). 30 NMR (CD^OD): δ = 0,9-2,8 (10H, m, cyclohexaan protonen) 3,08 (2H, d, J=6,4 Hz, Ciyï) 7,30 en 7,79 (elk 2H, elke d, J = 8 Hz, aromatische protonen).

Voorbeeld XXIII

35 '(Indany1-5)-trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaancarboxylaat- hydrochloride 8200110 > 3 f - 23 -

Een mengsel van 5,6 g trans-4-(guanidi-nomethy1)cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 3,18 g 5-hy-droxyindaan, 5,9 g dicyclohexylcarbodiïmide, 30 ml droog pyridine en 35 ml droog dimethylformamide liet men overnacht op 5 kamertemperatuur staan. Na verwijderen van wat onoplosbaar materiaal werd het filtraat onder verlaagde druk drooggedampt en werd aan het residu 50 ml 0,1 N zoutzuur toegevoegd. Er ontstonden nu kristallen die uit isopropanol geherkristalliseerd werden, wat 4,39 g (53 % opbrengst) van de in de titel geil 0 noemde verbinding met smeltpunt 157-159°C gaf.

IR-spectrum (in KBr): sterke piek bij 1760 cm * (carbonyl). Voorbeeld XXIV

(Coumarinyl-7)-trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaancarboxylaat-hydrochloride 15 Een oplossing van 5,6 g trans-4-(guani dinomethyl) -cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 3,84 g 7-hy-droxy-coumarien en 5,9 g dicyclohexylcarbodiïmide in een mengsel van 35 ml droog dimethylformamide en 30 ml droog pyridine liet men overnacht op kamertemperatuur staan. Na verwijderen 20 van wat onoplosbaar materiaal werd het filtraat onder verlaagde druk drooggedampt. Aan het residu werd 50 ml water toegevoegd, waardoor kristallen ontstonden die uit isopropanol/methanol geherkristalliseerd werden. Dit gaf 6,04 g (72 % opbrengst) van de in de titel genoemde verbinding met smeltpunt 179—181°C.

25 IR-spectrum (in KBr): pieken bij 1740 en 1762 cm ^ (carbonyl). Voorbeeld XXV

(Indolyl-4)-trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaancarboxylaat-hydrochloride

Een oplossing van 5,2 g trans-4-(guani-30 dinomethyDcyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 2,93 g 4-hy-droxyindool en 5,0 g dicyclohexylcarbodiïmide in een mengsel van 25 ml droog pyridine en 25 ml droog dimethylformamide liet men overnacht op kamertemperatuur staan. Na verwijdering van wat onoplosbaar materiaal werd het filtraat onder verlaagde 35 druk drooggedampt en voegde men 20 ml isopropanol en 1 ml water aan het residu toe. Dit mengsel liet men 3-2 uur staan waarna 8200110 - 5 - 24 -

wat onoplosbare stof verwijderd en het filtraat onder verlaagde druk drooggedampt werd. Aan dit residu werd water toegevoegd, waardoor kristallen ontstonden die uit ethanol ge-herkristalliseerd werden, wat 5,22 g (67,5 % opbrengst) van 5 de in de titel genoemde verbinding met smeltpunt 182-183°C gaf. IR-spectrum (in KBr): sterke piek bij 1740 cm 1 (carbonyl). Voorbeeld XXVI

(Chinolyl-8)-trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaancarboxylaat-hydrochloride 10 Een oplossing van 5,2 g trans-4-(guani dinomethyl) cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 3,19 g 8-hydroxychinoline en 5,0 g dicyclohexylcarbodiïmide in een mengsel van 13 ml droog pyridine en 30 ml droog dimethylform-amide liet men overnacht op kamertemperatuur staan. Na ver-15 wij deren van wat onoplosbaar materiaal werd het filtraat onder verlaagde druk drooggedampt en werden 50 ml ethylacetaat en 100 ml 0,1 N zoutzuur aan het residu toegevoegd. De waterlaag werd met ethylacetaat gewassen en drooggedampt, wat 5,4 g van de in de titel genoemde verbinding als lichtgroene stroop gaf.

20 Voorbeeld XXVII

(Flavónyl-3)-trans-4-(guanidinomethyl)-cyclohexaancarboxylaat-hydroChloride

Een mengsel van 9,89 g trans-4-(guanidinomethyl) -cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 10,1 g 3-hy-25 droxyflavon, 8,66 g dicyclohexylcarbodiïmide en 100 ml droog pyridine werd 16 uur bij kamertemperatuur geroerd. Wat onoplosbaar materiaal werd afgefiltreerd en met pyridine uitgewassen. Filtraat en wasvloeistof werden samen drooggedampt en aan het residu werd 0,1 N zoutzuur toegevoegd. Deze combinatie werd 30 met ethylacetaat uitgewassen en de waterlaag werd tot 30 ml ingedampt. Na een nacht in de ijskast sloeg de gewenste verbinding uit de geconcentreerde waterfase neer in de vorm van kleurloze naaldjes met smeltpunt 201-203°C.

IR-spectrum (in KBr): sterke piek bij 1768 cm * (carbonyl) 35 NMR (in CD^OD): 8 = 1,98-2,66 (10H, m, cyclohexaan-protonen) 3,06 (2H, d, J=6,0 Hz, ay») 7,22-8,14 (9H, m, aromatische protonen).

8200110 - 25 -

Voorbeeld XXVIII

(4-chloornaftyl)-transr4-(guanxdomethyl)cyclohexaancarboxylaat- hydrochloride

Een mengsel van 3,3 g trans-4-(guani-5 dinomethyl)cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 2,5 g 4-chloor- naftol, 3,2 g dieyclohexylcarbodixmide en 42 ml droog pyridine werd 48 uur bij kamertemperatuur geroerd. Na verwijderen van wat onoplosbaar materiaal werd het filtraat geconcentreerd en werd aan het residu 42 ml 0,1 N zoutzuur toegevoegd. Na 30 minu-10 ten roeren bij kamertemperatuur konden kristalletjes afgefiltreerd worden die met ether uitgewassen en uit ethanol/ether geherkristalliseerd werden. Dit gaf 4,2 g (75,7 %) van de in de titel genoemde verbinding met smeltpunt 201-201,5°C. IR-spectrum (in KBr): sterke piek bij 1755 cm (carbonyl).

15 Voorbeeld XXIX

(1-nitronaftyl-2)-trans-4-(guanidinomethyl)cyclohexaancarboxy-laat-hydrochloride

Een mengsel van 10,0 g trans-4-(guanidinomethyl) cyclohexaancarbonzuur-hydrochloride, 8,0 g 1-nitro-20 naftol-2, 8,75 g dieyclohexylcarbodixmide en 100 ml droog pyridine werd 15 uur bij kamertemperatuur geroerd. Na verwijderen van wat onoplosbaar materiaal werd het filtraat onder verlaagde druk drooggedampt en werd aan het residu 200 ml zoutzuur toegevoegd. Na 1 uur roeren waren er kristallen ontstaan, die 25 afgefiltreerd, met water en met ethylacetaat uitgewassen en vervolgens gedroogd werden. Daarna werden ze in een mengsel van water en chloroform gesuspendeerd en dit werd een nacht lang geroerd. De kristallen werden nu met water en daarna met ethylacetaat uitgewassen en gedroogd, wat 14 g van de in de 30 titel genoemde verbinding met smeltpunt 159-160,5°C gaf. IR-spectrum (in KBr): piek bij 1762 cm * (carbonyl).

NMR (inDMSO-dg): δ = 0,96-2,08 (10H, m, cyclohexaan-protonen), 3,08 (2H, d, qyo 7,10-7,78 (6H, m, aromatische protonen).

35 8200110

Claims

1. Verbindingen volgens de algemene formule 1, waarin R een indanyl-, indolyl-, chinolyl-, chromo- 5 nyl-, halogeennaftyl- of nitronaftyl-groep of een groep volgens formule 2 voorstelt, waarin R' een halogeenatoom of een alkyl-, nitro-, cyaan-, aceetamido-, aminosulfonyl-, benzoyl-, fenoxy- of trifluormethyl-groep voorstelt, R" een waterstof-of halogeenatoom of een alkyl-groep is en R’'' een waterstof-10 of halogeenatoom of een alkyl-groep voorstelt, en de farmaceutisch aanvaardbare zouten daarvan.

2. Verbindingen volgens conclusie 1, waarin R een groep volgens formule 2 is, en de farmaceutisch aanvaardbare zouten daarvan. 15 3. 4-t-butylfenyl-trans-4-(guanidino- methyl)cyclohexaancarboxylaat en het hydrochloride daarvan.

4. Werkwijze voor het bereiden van verbindingen volgens formule 1, waarin R ëën der eerder gegeven betekenissen heeft,'met het kenmerk, dat men 4-(guanidino-20 methyl)cyclohexaancarbonzuur of een reactief derivaat daarvan laat reageren met een verbinding volgens formule ROH, waarin R ëën der eerder gegeven definities heeft, of dat men 4-(guani-dinomethyl)cyclohexaancarbonzuur laat reageren met een reactief derivaat van een verbinding volgens de formule ROH.

5. Preparaat met anti-allergene werking, met het kenmerk, dat het als actieve stof een verbinding volgens de algemene formule 1, waarin R een der eerder gegeven definities heeft, of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan bevat. 30 8200110 -2/- Verbetering van errata in de beschrijving behorende bij de octrooiaanvrage no. 82.00110 Ned. voorgesteld door aanvrager

2. OT 1382 _____ Verander in regels 1-2 van blz. 12 "61 ml mengsel van droog pyridine en" in "een mengsel van 61 ml droog pyridine en 61 ml". Voeg op blz. 18 tussen regels 28 en 29 in: NMR (CD30D): δ = 1,10 (3H, d, J=7,2 Hz CHCH3) 2,26. (3H, s, CH3) 3,03 (2H, d, J=6 Hz, CH2N) 6,97 (1H, s, aromatisch proton) 7,36 (1H, s, aromatisch proton). JKr/JvdB 8200110