NL7909246A - Ketal en thioketal derivaten van mercaptoacylprolinen. - Google Patents

Description

/ f

Ketal en thioketal derivaten van mercaptoacylprolinen,

De uitvinding heeft betrekking op nieuwe ketal en thioketal derivaten van mercaptoacylprolinen en pipecolinezuren met formule 1 alsmede zouten daarvan, waarin R en Rg onafhankelijk waterstof of een korte keten alkylgroep zijn, vooropgesteld dat R alleen 5 maar een korte keten alkylgroep is wanneer ook een korte keten alkylgroep is, R^ en. R^ onafhankelijk waterstof, een korte keten alkyl, korte keten alkylthio, -(CH_) -SH of halogeen-gesubstitueerde

m A

korte keten alkylgroep zijn, Χ^, X2 en *3 onafhankelijk zuurstof of zwavel zijn, R^ en R, onafhankelijk een korte keten alkyl, korte 10 keten alkenyl, korte keten alkynyl, cycloalkyl, halogeen-gesubstitueerde korte keten alkyl, door hydroxy gesubstitueerde korte keten alkylgroep, een groep met formule 15, formule 16 of formule 17 zijn, __ of Rj en R2 tezamen een polymethyleengroep vormen om een ongesubstitueerde of gesubstitueerde 5- of 6-ring te voltooien, 15 Wanneer en R2. tezamen een polymethyleengroep .

met 2 of 3 koolstofatomen vormen, kunnen-deze cyclische ketalen en thioketalen worden weergegeven door formule 18, formule 19 en formule * - . .. -·. 20, waarin t gelijk is aan 2 of 3, 'én R_ en R.n beide waterstof of

v; .... y 1U

*··...—·» \: ·* ' . , ’ een kórte keten alkylgroep zijn of de ene waterstof is en de andere ' "V *' Y: 20 een korte keten alkylgroep, een door halogeen gesubstitueerde korte keten alkylgroep, een door hydroxy gesubstitueerde korte keten alkylgroep of een groep met formule 15, formule 16 of formule 17 zijn.

Bij voorkeur is slechts één koolstofatoom van de polymethyleenketen gesubstitueerd.

25 Ry is waterstof, een korte keten alkylgroep met 1-4 koolstofatomen, in het bijzonder een methylgroep, een korte keten alkóxygroep met 1-4 koolstofatomen, in het bijzonder een methoxygroep, een korte keten alkylthiogroep met 1-4 koolstofatomen, in het bijzonder methylthio, chloor, broom, fluor, trifluormethvl of hydroxygroep.

7909246 2 *

Rg is waterstof, een hydrolyseerbare verwijderbare beschermingsgroep, een chemische verwijderbare beschermingsgroep, of, wanneer en R^ geen -groep zijn, een sulfide met formule 21, waarin m gelijk is aan 0, 1 of 2, n gelijk is aan 1, 2 of 3, en 5 p en q ieder gelijk zijn aan 1 of 2, vooropgesteld dat niet beide 2 zijn.

Het sterretje in formule 21 geeft een asymmetrie-centrum in de ring aan. In het geval van proline, dat wil zeggen dat p en q beide 1 zijn, is dit centrum in de L-configuratie. In het 10 geval van pipecolinezuur, dat wil zeggen dat één van de indices p en q gelijk is aan 2, is dit centrum in de D, L of L-configuratie.

Asymmetrie-centra kunnen ook aanwezig zijn in de mercaptoacyl zijketen afhankelijk van de definitie van R^, R^ en Rg.

Een ander asymmetrie-centrum kan ook aanwezig zijn in de ring, wanneer 15 xi"Ri 011 X2_R2 verschillend zijn. De produkten kunnen derhalve voorkomen in stereo-isomere vormen of als racemische mengsels daarvan.

Deze vallen allen binnen het kader van de uitvinding. De hieronder beschreven synthese kan uitgaan van het racemaat of één van de enan-tiomeren als uitgangsmaterialen. Wanneer het racemische uitgangsma-20 teriaal wordt gebruikt bij de synthesemethode, kunnen de in het eind-* prödükt verkregen·, stereo-isomer en worden gescheiden volgens gebruikelijke chromatografische of gefractioneerde kristallisatie methoden.

Bij voorkeur is het in de D-configuratie wanneer er een asymmetrie-- .. centrum in de mercaptoacyl zijketen zit. . '* ' *ƒ ·,-v~ 25 De uitvinding heeft in de-ruimste zin betrekking ./ ’ Λ , * V 3 ’ ** * óp de mercaptoacyl derivaten van proline en pipecolinezuur met formule 1- en zouten daarvan, en op preparaten die dergelijke verbindingen bevatten, alsmede de methode voor het gebruik van dergelijke verbindingen als antihypertènsiemiddelén. De uitvinding heeft ook 30 betrekking op bepaalde nieuwe tussenprodukten die gebruikt kunnèn worden bij de bereiding van verbindingen met formule 1.

De uitdrukking "korte keten alkyl", zoals die hierin wordt gebruikt voor hét bepalen van de symbolen R, Rj, R2, R3» R, en Rr, heeft betrekking op de rechte of vertakte koolwaterstof-35 ketens met tenhoogste 7 koolstofatomen, zoals bijvoorbeeld methyl, 7909248 i 9' 3 ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, tert.butyl, pentyl, isopentyl. De korte keten alkylgroepen waaraan de voorkeur wordt gegeven bevatten tenhoogste 4 koolstofatomen, waarbij de grootste voorkeur uitgaat naar methyl en ethyl. Dienovereenkomstig hebben de uit-5 drukkingen "korte keten alkoxy" en "korte keten alkylthio" betrekking od dergelijke korte keten alkylgroepen gebonden aan een zuurstof of zwavelatoom.

De uitdrukking "cycloalkyl" heeft betrekking op verzadigde ringen met 3-7 koolstofatomen waarbij de grootste voorkeur 10 wordt gegeven aan cyclohexy1.

De uitdrukking’* met halogeen gesubstitueerde korte keten alkyl" heeft betrekking op de hierboven beschreven korte keten alkylgroepen, waarin één of meer waterstofatomen zijn vervangen door chloor, broom of fluoratomen, zoals trifluormethyl, pentafluorethyl, 15 2,2,2-trichloorethyl, chloormethyl, en broommethyl.

De uitdrukking "door hydroxy gesubstitueerde korte keten alkyl" heeft betrekking op hierboven beschreven korte keten alkylgroepen, waarin één waterstofatoom is vervangen door een hydroxy-groep, zoals een hydroxymethyl of 2-hydroxyethylgroep.

20 De uitdrukking "korte keten alkenyl", zoals gebruikt bij het definiëren van de symbolen R^ en R^, heeft betrekking op mono-onverzadigde rechte of vertakte koolwaterstofketens met 2-7 koolstofatomen, zoals ethenyl, propenyl, isopropenyl en butenyl.

De korte keten alkynylgroepen zijn rechte of vertakte koolwaterstof-25 ketens met 2-7 koolstofatomen die een drievoudige binding bevatten, zoals bijvoorbeeld propargyl.

De korte keten alkenylgroep waaraan de voorkeur wordt gegeven bevatten 2-5 koolstofatomen en de korte keten alkynylgroepen waaraan de voorkeur wordt gegeven zijn die met 2-4 koolstof-30 atomen.

De uitdrukking "door hydrolyse verwijderbare be-schermingsgroep" zoals die gebruikt wordt bij het bepalen van Rg heeft betrekking op een groep die verwijderd kan worden door gebruikelijke hydrolyse of ammonolyse. Acylgroepen met de formule Rg-C(O)-35 zijn voor dit doel geschikt, waarin Rg een korte keten alkylgroep 7909246 4 > 4 met 1-7 koolstofatomen, een korte keten alkylgroep, die gesubstitueerd is door één of meer chloor, broom of fluoratomen, een groep -(CH_) -cycloalkylgroep, een arylgroep, zoals een groep met formule « 3Γ 15, een heterogroep, zoals een groep met formule 16 of een groep met 5 formule 17 zijn, waarin r gelijk is 0, 1, 2 of 3 en en Xj de bovenstaande betekenis hebben. Voorkeursgroepen zijn de korte keten ' alkanoylgroepen met tenhoogste 4 koolstofatomen, in het bijzonder acetyl, alsmede benzoyl.

De uitdrukking "chemisch verwijderbare bescher-10 mingsgroep" als gebruikt bij het bepalen van Rg, heeft betrekking op groepen zoals p-methoxybenzyl, p-methoxybenzyloxycarbonyl, tri-tyl en tert.butoxycarbonyl. Deze groepen kunnen worden verwijderd na voltooiing van de acyleringsreactie op verschillende wijzen, afhankelijk van de definitie van X^-R^ en Xg-Rg' zoals door behandeling 15 met trifluorazijnzuur en anisol, natrium en vloeibare ammoniak, of kwik(II)trifluoracetaat.

Voorkeursverbindingen met formule 1 zijn de L-proline bevattende derivaten, dat wil zeggen p en 1 zijn beide—1 en R is waterstof.

20 Met betrekking tot de mercaptoacyl zijketen, wordt als eindprodukten de voorkeur gegeven aan die verbindingen waarin R5 waterstof is, m gelijk is aan 0 of 1, R4 waterstof is en Rg en Rg beide een korte keten alkylgroep met 1-4 koolstofatomen, in het bijzonder beide methyl, zijn of Rg waterstof is en Rg waterstof, een 25 korte keten alkylgroep met 1-4 koolstofatomen, in het bijzonder methyl, een trifluormethyl, methylthio of mercaptomethylgroep is.

Ook wordt de voorkeur gegeven als zowel tussenprodukten als eindprodukten, aan de bovengenoemde zijketens, waarin Rg een korte keten alkanoylgroep met 1-4 koolstofatomen is, in het bijzonder een acetyl-30 groep, of een benzoylgroep.

Als eindprodukten wordt in het bijzonder de voorkeur gegeven aan de verbinding met de formule 1, waarin in de mercaptoacyl zijketen Rg waterstof is, m gelijk is aan 1, R^ en Rg waterstof zijn, Rg een methylgroep is en het asymmetrische koolstofatoom 35 waaraan Rg gebonden is in de D-configuratie is.

7909246 5

Voorkeursverbindingen met betrekking tot de sub-stituenten aan de prolinering zijn de verbindingen waarin R^ en R2 onafhankelijk bestaan uit een korte keten alkylgroep met 1-4 koolstof-atomen, in het bijzonder een methyl of ethylgroep, of een groep met 5 formule 15a, formule 16a, formule 16b of formule 17a zijn, en R^ waterstof, een methyl, methoxy, methylthiogroep, Cl, Br, F, een tri-fluormethyl of hydroxygroep is, of X^-R^ en X2-R2 samen een 9r°ep vormen met formule 22, formule 23, formule 24, formule 25, formule 26 of formule 27, waarin Rg en R10 beide waterstof of beide een korte 10 keten alkylgroep met 1-4 koolstofatomen zijn, in het bijzonder beide . waterstof of beide een methylgroep zijn, of Rg waterstof is en R10 een korte keten alkylgroep met 1-4 koolstofatomen, in het bijzonder een methylgroep is, een door hydroxy gesubstitueerde korte keten alkylgroep met 1-4 koolstofatomen, in het bijzonder een hydroxymethyl-15 groep, of een door halogeen gesubstitueerde korte keten alkylgroep, in het bijzonder een trifluormethylgroep, is.

De verbindingen waaraan de grootste voorkeur wordt gegeven wat betreft de substituenten aan de prolinering, zijn de verbindingen waarin Χχ en X2 aan elkaar gelijk zijn, in het bijzonder 20 de verbindingen waarin X^-R^ en X2~R2 ^eide een methoxygroep of beide een ethoxygroep zijn of X^-R^ en X2~R2 tezamen een groep vormen met formule 22a, 22b, 23a, 23b, 26a en 27a.

De verbindingen met formule 1 worden verkregen door kopDelen van het gesubstitueerde proline of pipecolinezuur met 25 formule 2 met een zuur of chemisch equivalent met formule 3, waarin Rg' waterstof, een hydrolyseerbare of chemisch verwijderbare bescher-mingsgroep is, waardoor het produkt met formule 4 wordt verkregen.

Deze reactie kan worden uitgevoerd in aanwezigheid van een koppelingsmiddel, zoals dicyclohexylcarbodiimide of derge-30 lijke, of het zuur kan worden geactiveerd door vorming van zijn gemengde zuuranhydride, symmetrische zuuranhydride, zuurhalogenide, actieve ester of het gebruik van Woodward reagens K, N-ethoxycarbo-nyl-2-ethoxy-1,2-dihydrochinoline of dergelijke. Voor een overzicht van de acyleringsmethode wordt verwezen naar Methoden der Organischen 35 Chemie (Houben-Weyl), vol. XV, deel II, blz. 1, ff. (1974). Bij 7909243 "η > 6 voorkeur laat men het zuurhalogenide, in het bijzonder het zuurchlo-ride, met formule 3, reageren met het zuur met formule 2,

Wanneer het proline of pipecolinezuur met formule 2 tot reactie wordt gebracht als ester, kan het gevormde esterpro-5 dukt met formule 4, dat wil zeggen R is een alkylgroep, worden omgezet in het vrije zuur, dat wil zeggen R is waterstof, volgens gebruikelijke methoden. Wanneer bijvoorbeeld R een ethylgroep kan deze ester-beschermingsgroep worden verwijderd door verzepen.

Het produkt met formule 4 wordt bij voorkeur 10 geïsoleerd en gezuiverd door kristalliseren, bijvoorbeeld door vormen van dicyclohexylaminezout en daarna omzetten van het zout in de vrije zuur vorm door behandeling met een waterige oplossing van een zuur, zoals kaliumwaterstofsulfaat.

Het produkt met formule 4 dat de acvlgroep Rg-C(O)-15 bevat, kan worden omgezet in de prödukten met formule 1, waarin Rg waterstof is, door gebruikelijke hydrolyse of door ammonolyse.

Het produkt met formule 1, waarin Rg en R4 geen · groep -(CH2)n-SH zijn en Rg een groep met formule 21a is, worden verkregen door directe oxydatie met jood van een produkt met formule 20 1, waarin Rg waterstof is.

De esters met formule 1, waarin R een korte keten alkylgroep is, kunnen worden verkregen uit de carbonzuurverbindingen, dat wil zeggen waarin R waterstof is, door gebruikelijke veresterlngs-methoden, bijvoorbeeld door veresteren met een diazoalkaan, zoals 25 diazomethaan, een l-alkyl-3-p-tolyltriazeen, zoals l-n-butyl-3-p-tolyltriazeen, of dergelijke.

De di-gesubstitueerde proilinen of pipecolinezu-ren met formule 2, waarin Xj-R^ en X2”R2 aan elkaar gelijk zijn, kunnen worden verkregen door een N-beschermde ketoverbinding met 30 formule 5, waarin Cbz een carbobenzyloxygroep is, te laten reageren met een alcohol of thiol met formule 6, in aanwezigheid van een orthoformiaat of thioformiaat met formule HCfXj-R^g en een zuur zoals geconcentreerd zwavelzuur of p-tolueensulfonzuur. Deze reactie kan worden uitgevoerd in een inert organisch oplosmiddel, zoals 35 benzeen, azijnzuur, ether, cyclohexaan of dergelijke, bij voorkeur 79 0 S24 8 r 7 * onder verwarmen, bijvoorbeeld in de buurt van de terugvloeitemperatuur. Zie Buehler c.s., Survey of Organic Synthesis (Wiley & Sons, 1977), vol.1, biz. 516-519. Het produkt van deze reactie is het N-beschermde tussenprodukt met formule 7.

5 Het N-beschermde tussenprodukt met formule 7 kan worden behandeld met een mol.equiv. van een alcohol of thiol met formule 8 onder hierboven beschreven omstandigheden waardoor het tussenprodukt met formule 9 wordt verkregen. Door gebruik te maken van een molaire overmaat van de alcohol of het thiol met formule 8 10 verkrijgt men het tussenprodukt met formule 10. De N-beschermings-groep kan dan worden verwijderd volgens gebruikelijke methoden, bijvoorbeeld wanneer Xj en X2 beide zuurstof zijn, door hydrogenolyse in aanwezigheid van palladium-koolstof katalysator of wanneer één van beide of beide groenen en X2 zwavel zijn, door behandeling 15 met HBr en azijnzuur, waardoor de di-gesubstitueerde verbindingen met formule 2 worden verkregen.

Op overeenkomstige wijze kunnen de spiroverbin-dincen met formule 2, dat wil zeggen Rj en R2 vormen samen een poly-methyleengroep, worden verkregen door de ketoverbinding met formule 20 5 te laten reageren met de alcohol of het thiol met formule 11, waarin RQ, R.n en t de bovenstaande betekenis hebben in aanwezigheid van een zuur, zoals p-tolueensulfonzuur, waardoor het tussenprodukt met formule 12 wordt verkregen. In plaats daarvan kan de di-gesub-stitueerde verbinding met formule 7 direct worden behandeld met een 25 molaire overmaat van de alcohol of het thiol met formule 11, waardoor het tussenprodukt met formule 12 wordt verkregen. Deze methode is in het bijzonder bruikbaar wanneer Rg en R^ één van beide of beide geen waterstof zijn.

Zoals hierboven beschreven kan de N-beschermings-30 groep worden verwijderd waardoor de spiroverbindingen met formule 2 worden verkregen.

Als een andere methode kan de invoering van de groepen Xj-Rj en X2~R2 later in de reactiereeks geschieden. Volgens deze modificatie wordt de beschermde ketoverbinding met formule 5 35 behandeld ter verwijdering van de beschermingsgroep, bijvoorbeeld 7909245 8 met broomwaterstofzuur, hetgeen leidt tot een tussenprodukt met formule 13, dat daarna geacyleerd wordt met het zuur, bij voorkeur het zuurhalogenide, met formule 3, waardoor de verbinding met formule 14 wordt verkregen.

* 5 De groepen X^-R^ en X2"R2 spirogroep met formule 28 kunnen dan op dit punt worden ingevoerd volgens de methor den als hierboven beschreven, waardoor het produkt met formule 4 wordt verkregen.

Ook wordt verwezen naar de onderstaande publica-10 ties voor verdere toelichting van methoden voor het bereiden van uitgangsmaterialen en tussenprodukten: de Amerikaanse octrooischriften 4.046.889, 4.105.776, 4.154.935 en 4.116.962? Can. J. Biochem. & Physiol. 37, 584 (1959); J.A.C.S. 79, 189 (1957); J. Med. Chem. 21, 445 (1978); 15 Aus, J. Chem. 20, 1493-1509 (1967); Buehler c.s., Survey of

Organic Synthesis (Wiley & Sons, 1977), vol. 1, biz. 516-519, vol. 2, biz. 461-470; Chem. Pharm. Bull., Tokio, 26 2209 en 2217 (1978);

Can. J. Chem. 47, 860 (1969); J. A. C. S., 80 6350 (1958); Harrison c.s., Compendium of Organic Synthetic Methodes (wiley-Interscience, 20 New York, 1971), biz. 449-456; J.A.C.S., 79 192 (1956); Bull. Soc. Chem., 1965 (8), biz. 2253-2259; J.Org. Chem., 25, 521-530 (1960).

De daarin beschreven methoden kunnen als algemene methoden worden gebruikt voor de synthese van verbindingen en scheiding van isomeren die gebruikt kunnen worden voor de in deze tekst 25 beschreven uitvinding. Aanvullende bijzonderheden ter toelichting zijn vermeld in de voorbeelden die als model dienen voor de bereiding van andere leden van de groep.

De verbindingen volgens de uitvinding vormen basische zouten met verschillende anorganische of organische basen.

30 Het zout-vormende ion dat van dergelijke basen is afgeleid, kan bestaan uit metaalionen, bijvoorbeeld aluminium, alkalimetaalionen, zoals natrium of kalium, aardalkalimetaalionen, zoals calcium of magnesium, of een aminezoution, waarvan een aantal voor dit doel bekend zijn, zoals bijvoorbeeld aralkylaminen, zoals dibenzylamine, 35 N,N-dihenzylethyleendiamine, korte keten alkylaminen, zoals methyl- 79 0 9 2 4 6 ψ 9 amine, tert.butylamine, procaine, korte keten alkyl piperidinen, zoals N-ethylpiperidine, cycloalkylaminen, zoals cyclohexylamine of dicyclohexylamine, 1-adamanthaanamine, benzathine of zouten van aminozuren, zoals arginine en lysine, De fysiologisch aanvaardbare 5 zouten, zoals de natrium of kaliumzouten, kunnen medisch worden gebruikt, zoals hieronder wordt beschreven, en verdienen de voorkeur. Deze en andere zouten, die niet noodzakelijkerwijze fysiologisch aanvaardbaar zijn, zijn bruikbaar voor het isoleren of zuiveren van een produkt dat aanvaardbaar is voor de hieronder beschreven doel-10 einden, zoals toegelicht aan de hand van het dicyclohexylaminezout in de voorbeelden. De zouten worden gevormd door de zure vorm van de verbinding te laten reageren met een equivalent van de base die het gewenste basische ion verschaft in een medium, waarin het zout neerslaat, of in een waterig medium gevolgd door lyofiliseren. De vrije 15 zuurvorm kan worden verkregen uit het zout door gebruikelijke neutra-liseringstechnieken, bijvoorbeeld met kaliumbisulfaat of zoutzuur.

• De verbinding met formule 1 waarin Rj. waterstof, een groep Rg-C(O)- of een disulfide type substituent is, in het bijzonder waarin R_ waterstof is, zijn bruikbaar als hypotesie mid-20 delen. Ze verhinderen de omzetting van het decapeptide angiotensine I in angiotensine II en zijn derhalve bruikbaar voor het verlichten van met angiotensine verband houdende hypertensie. De werking van het enzyme renine op angiotensinogeen, een pseudoglobuline in bloedplasma, vormt angiotensine I. Angiotensine I wordt omgezet door 25 angiotensine omzettend enzyme (ACE) in angiotensine II. Dit laatste is een actieve drukstof, die als veroorzakend middel wordt beschouwd in verschillende vormen van hypertensie bij verschillende zoogdier-soorten, bijvoorbeeld ratten en honden. De verbindingen volgens de uitvinding grijpen in in de reactiereeks angiotensinogeen (renine) 30 —* angiotensine I — (ACE) —angiotensine II, door het angiotensine omzettende enzyme te storen en de vorming van de drukstof angiotensine II te verminderen of te verhinderen. Derhalve wordt door toediening van een preparaat dat één of meer verbindingen met formule 1 bevat, angiotensine afhankelijke hypertensie bij de zoogdiersoorten 35 die daaraan lijden, verlicht. Een enkele dosis, of bij voorkeur 7909246 > 1° twee of vier verdeelde dagelijkse doses, verschaft op een basis van 0,1-100 mg/kg lichaamsgewicht/dag, bij voorkeur 1-15 mg/kg lichaams-gewicht/dag, is geschikt voor het verlagen van de bloeddruk. De stof wordt bij voorkeur oraal toegediend, maar parenterale toedie-5 ningswegen, zoals subcutaan, intramusculair, intraveneus of intra-peritonaal, kunnen ook worden gebruikt.

De verbindingen volgens de uitvinding kunnen ook worden geformuleerd in combinatie met een diureticum voor de behandeling van hypertensie. Een combinatieorodukt dat een verbinding vol-10 gens de uitvinding en een diureticum bevat, kan worden toegediend in een werkzame hoeveelheid, die (voor een zoogdier van 70 kg) een totale dagelijkse dosering bevat van 30-600 mg, bij voorkeur 30-300 mg, van een verbinding volgens de uitvinding en 15-300 rag, bij voorkeur 15-200 mg, van het diureticum, voor een zoogdiersoort dat daar-15 aan behoefte heeft. Voorbeelden van de beoogde diuretica ten gebruike in combinatie met een verbinding volgens de uitvinding zijn de thiazide diuretica, bijvoorbeeld chloorthiazide, hydrochloorthiazide, flumethiazide, hydroflumethiazide, benzdroflumethiazide, methchlo-thiazide, trichloormethiazide, polythiazide of benzthiazide, alsmede 20 ethacrynzuur, ticrynafeen, chloorthalidon, furosemide, musolimine, bumetanide, triamtereen, amiloride en spironolacton alsmede zouten van dergelijke verbindingen.

De verbindingen met formule 1 kunnen worden geformuleerd voor gebruik bij de verlaging van de bloeddruk in prepa-25 raten, zoals tabletten, capsules of elixirs voor orale toediening of in steriele oplossingen of suspensies voor parenterale toediening. Omstreeks 10-500 mg van een verbinding of mengsel van verbindingen met formule 1 wordt samengesteld met een fysiologisch aanvaardbare drager, excipient, bindmiddel, conserveringsmiddel, stabilisator, 30 smaakstof en dergelijke in een eenheidsdoseringsvorm zoals verlangd wordt volgens de aanvaarde farmaceutische praktijk. De hoeveelheid actieve stof in deze preparaten is zodanig, dat een geschikte dosering in het aangegeven traject wordt verkregen.

De onderstaande voorbeelden dienen ter nadere 35 toelichting van de uitvinding. Deze voorbeelden zijn voorkeursuit- 7909246 ♦ 11 voeringsvormen en dienen ook als modellen voor de bereiding van andere verbindingen volgens de uitvinding. De temperaturen zijn vermeld in ° C.

Voorbeeld I

5 /~7(S),8S_7-7-(Acetvlthio)-2-methvl-l-oxopropyl-l,4-dioxo-7-azaspi- ro/ 4,4 /nonaan-8-carbonzuur.

a) N-carbobenzyloxy-4-hydroxy-L-proline.

26.5 g (0,20 mol) 4-Hydroxy-L-proline en 32,8 ml 10 (0,23 mol) benzylchloorformiaat worden tot reactie gebracht in 200 ml water en 100 ml aceton in aanwezigheid van 20 g (0,02 mol) kalium-bicarbonaat en 69,2 g (0,50 mol) kaliumcarbonaat en opgewerkt met 90 ml geconcentreerd zoutzuur, zoals beschreven in Can. J. Biochem.

& Physiol. 37, 584 (1959) teneinde N-carbobenzyloxy-4-hydroxy-L- 15 proline te verkrijgen. Dit produkt wordt tot reactie gebracht met cyclohexvlamine onder vorming van het cyclohexy1aminzout in een opbrengst van 69 g, smpt. 193-195°. Het zout (34 g) wordt geneutraliseerd met ln zoutzuur, waardoor 27 g vrij zuur worden verkregen als een kleurloos glas met /_ -70°, (c, 1 % in chloroform).

20 b) N-carbobenzyloxy-4-keto-L-proline.

21.5 g (0,81 mol) N-carbobenzyloxy-4-hydroxy-L-proline wordt geoxydeerd in 1,2 1 aceton met 82 ml 8n chroomzuur in zwavelzuur, zoals beschreven in J.A.C.S. 79, 189 (1957). Teneinde de daaropvolgende filtratie van chroomzouten te vergemakkelijken worden 25 30 g Celite (diatomeeënaarde) toegevoegd aan de acetonoplossing vóór toevoeging van het oxydatiemiddel. Er wordt een luchtroerder gebruikt. Het reactiemengsel wordt afgefiltreerd en het aceton filtraat wordt geconcentreerd tot omstreeks 300 ml alvorens te verdunnen met 1 1 chloroform. De oplossing wordt gewassen met 300 ml verzadigd natrium- 30 chloride (4 keer), gedroogd (MgSO^), gefiltreerd en het oplosmiddel wordt verdampt waardoor N-carbobenzyloxy-4-keto-L-proline (22,8 g) wordt verkregen, dat wordt omgekristalliseerd uit ether (50 ml) -hexaan (150 ml) waardoor 17,2 g (81 %) produkt worden verkregen met smpt. 99-101°, / +17° (c, 1 % in chloroform).

35 7908246 12 * c) N-carbobenzvloxy-4,4-ethyleendioxy-L-proline.

Een geroerd mengsel van 12,8 g (0,049 mol) N- carbobenzyloxy-4-keto-L-proline, 53 ml (0,095 mol) ethyleenglycol en 0,35 g p-tolueensulfonzuur.H^o in 1,31 1 benzeen wordt verwarmd en 5 de verkregen oplossing wordt 7 uur onder terugvloeien verwarmd (gevormd water wordt verzameld in een Dean-Stark apparaat). Na een nacht lang staan bij kamertemperatuur wordt de onderste glycollaag afgescheiden en de benzeenoplossing wordt gewassen met 150 ml verzadigd natriumchloride, gedroogd (MgS04) en het oplosmiddel wordt 10 verdampt waardoor 14,6 g N-carbobenzyloxy-4,4-ethyleendioxy-L-pro-line worden verkregen als een stroperig residu. Dit laatste wordt opgelost in 60 ml ethanol, afgefiltreerd, behandeld met 5 g cyclo-hexylamine en verdund met ether. Na enten en wrijven scheidt zich het kristallijne cyclohexylaminezout af; gewicht na een nacht lang 15 koelen 9,0 g, snpt. 179-180° (s. 173°). Het materiaal wordt omgekristalliseerd uit acetonitrile, snpt. 182-184° (s. 179°) -21° (c, 1 % in EtOH).

Het cyclohexylaminezout (8,4 g) wordt gesuspendeerd in 40 ml ethylacetaat, geroerd, gekoeld en behandeld met 40 20 ml ln zoutzuur. De lagen worden gescheiden, de waterige fase wordt geëxtraheerd met aanvullend ethylacetaat (3 x 40 ml), de gecombineerde organische lagen worden gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel wordt verdampt, aan het einde bij 0,2 mm. Het stroperige residu, dat begint uit te kristalliseren, wordt onder ether gewreven en de 25 ether wordt verdampt, waardoor 6,4 g (42 %) worden verkregen aan vrijwel kleurloos N-carbobenzyloxy-4,4-ethyleendioxy-L-proline, snpt. 101-103° (s. 98°) -34° (c, 1 % in CHCl3).

d) 4,4-Ethyleendioxy-L-proline.

Een oplossing van 3,2 g (0,0104 mol) N-carboben-30 zyloxy-4,4-ethyleendioxy-L-proline in 100 ml methanol-water (2:1) wordt behandeld met 1 g 5 % palladium-koolstof en geschud gedurende 6 uur in een Parr hydrogenator. De katalysator wordt afgefiltreerd onder stikstof, gewassen met methanol en de gecombineerde filtraten worden ingedampt, tenslotte bij 0,1-0,2 mm, waardoor 1,7 g (94 %) 35 worden verkregen aan kleurloze vaste stof, 4,4-ethyleendioxy-L-proline 7909246 13 A/» net smpt. 245-247° (ontl.); / *ƒ -32 (c, 0,5 % in 1:1 Me0H-H20).

e) /_ 7(s),8S /-7-/ 3-(Acetylthio)-2-methyl-1-oxopropyl 7-1,4-dioxo-7-azasPiro/~4,4 /nonaan-8-carbonzuur.

Een geroerde oplossing van 3,2 g 4,4-ethyleen-5 dioxy-L-proline (0,185 mol) in 50 ml water wordt gekoeld tot 5° en in gedeelten behandeld met vast natriumcarbonaat tot pH 8,5, Daarna wordt, onder voortzetting van het roeren en koelen, een oplossing van 3,7 g (0,020mol) D-3-acetylthio-2-methylpropanoylchloride in 5 ml ether wordt in gedeelten toegevoegd terwijl de pH op 8,5 wordt 10 gehouden met 25 %-ige natriumcarbonaatoplossing (omstreeks 14 ml).

. Na 1¾ uur wordt de oplossing behandeld met 50 ml ethylacetaat, geroerd, gekoeld, voorzichtig aangezuurd met zoutzuur (1:1) tot pH

2,0, verzadigd met natriumchloride en de lagen worden gescheiden.

De waterige fase wordt geëxtraheerd met aanvullende ethylacetaat 15 (3 x 50 ml), de gecombineerde organische lagen worden gedroogd (MgSC>4) en het oplosmiddel wordt verdampt, tenslotte bij 0,2 mm. Het vaste residu wordt onder‘ether gewreven en de verdamping wordt herhaald, waardoor 5,9 g (100 %) worden verkregen van f_ 7(S) 3-{ace- tvlthio) -2-methyl-l-oxopropyl_/-l, 4-dioxo-7-azaspiro/_ 4,4__/nonaan-20 8-carbonzuur, smpt. 108-111°.

Het produkt wordt omgezet in het dicyclohexyl-aminezout met 3,4 g dicyclohexylamine in 70 ml ethylacetaat. Door enten en wrijven slaat het kristallijne zout neer en dit wordt omgekristalliseerd uit 95 ml acetonitrile, opbrengst 6,7 g, smpt. 187-25 189° (s. 184°) -59° (c, 1 % in EtOH).

Het dicyclohexylaminezout wordt omgezet in het vrije zuur door het in ethylacetaat te suspenderen en te behandelen met 75 ml 10 %-ig kaliumbisulfaat en te roeren tot twee lagen zijn verkregen. Na scheiden van de lagen wordt de waterige fase geëxtra-30 heerd met ethylacetaat (4 x 75 ml), de organische lagen worden gecombineerd, gedroogd (MgS04) en het oplosmiddel wordt verdampt waardoor 4,1 g kleurloos / 7(S),8S_/-7-/“3-(acetylthio)-2-methyl-l-oxo-propyl_/-l ,4-dioxo-7-azaspiro/-4,4__/nonaan-8-carbonzuur met smpt. 120-122° (s. 117°), -118° (c, 1 % in EtOH) worden verkregen.

35 7909246 14

Voorbeeld II

/~7(S),8S 7-7-(3-Mercapto-2-methyl-l-oxopropyl>-1,4-dioxo-7-azaspiro-/ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur.

5 Argon wordt geleid door een koude oplossing vein 8,5 ml geconcentreerd ammoniumhydroxyde in 20 ml water. 4,0 g (0,013 mol) /_ 7(S),8S_/-7-/ 3-{acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl__/-l,4-dioxO- 7-azaspiro/ 4,4 7nonaan-8-carbonzuur uit voorbeeld I-e worden daarna toegevoegd en het mengsel wordt in een ijsbad gedurende enkele minu-10 ten geroerd en daarna bij kamertemperatuur onder argon gedurende 2 uur. De oplossing wordt behandeld met 30 ml ethylacetaat, gekoeld, geroerd en aangezuurd met 16 ml zoutzuur (1:1). De lagen worden gescheiden, de waterige fase wordt geëxtraheerd met nog 30 ml ethylacetaat (2 keer), de ethylacetaatextracten worden gecombineerd, 15 gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel wordt ingedampt waardoor f_ 7 (S), 8S_/-7-(3-mercapto-2-methyl-1-oxopropyl)-1,4-dioxo-7-azaspiro/_ 4,4_/-nonaan-8-carbonzuur wordt verkregen als een vast residü. Het produkt wordt onder ether gewreven en de verdamping wordt herhaald. Het produkt wordt dan getritureerd met 30 ml hexaan, gedurende 1 uur gekoeld, 20’ gefiltreerd onder argon en gedroogd in vacuum, waardoor 2,7 g van

een kleurloze vaste stof, /_ 7(S) f8S__/-7-(3-mercapto-2-methyl-l-oxo-propyl) -1,4-dioxo-7-azaspiro£ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur met smpt. 131-133° (s. 125°) £~o-66° (c, 1 % in EtOH) worden verkregen. Voorbeeld III

25 (S)-1-/ (3-Acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl_/-4,4-dimethoxy-L-proline.

a) N-Carbobenzyloxy-4,4-dlmethoxy-L-prollne, methylester.

Een geroerde oplossing van 7,8 g (0,03 mol) N-30 carbobenzyloxy-4-keto-L-proline uit voorbeeld X in 60 ml methanol wordt behandeld met 96 ml trimethylorthoformiaat, gevolgd door 0,6 ml geconcentreerd zwavelzuur waarna men het mengsel een nacht lang bij kamertemperatuur laat staan.

De bleekgele oplossing wordt geroerd, behandeld 35 met 1,5 g kaliumcarbonaat, gevolgd door 30 ml water en de massa van 7909246 15 het oplosmiddel wordt verwijderd op een roterende verdamper, waardoor een stroperig residu wordt verkregen, dat geschud wordt met 30 ral water en 30 ml chloroform. Na het scheiden van de lagen wordt de waterige fase geëxtraheerd met aanvullende chloroform (3 x 30 ml) 5 en de gecombineerde organische lagen worden gewassen met 45 ml verzadigde natriumchloride-oplossing en gedroogd (MgSO^). Verdampen van het oplosmiddel levert 8,4 g (88 %) N-carbobenzyloxy-4,4-dimethoxv-L-proline,methylester.

b) N-Carbobenzvloxv-4,4-dimethoxy-L-proline♦ 10 De ester (8,4 g, 0,026 mol) uit deel a) wordt opgelost in 80 ml methanol, druppelsgewijze bij -1° tot +4° behandeld met 18 ml (0,036 mol) 2n natriumhydroxyde, 1 uur op 0° gehouden en daarna een nacht lang bij kamertemperatuur. Na verwijderen van ongeveer de helft van het oplosmiddel op een roterende verdamper wordt 15 de oplossing verdund met 150 ml water, gewassen met 100 ml ether (wasvloeistof wordt weggeworpen), aangezuurd onder koelen met 63 ml 1:1 zoutzuur tot pH 2 en geëxtraheerd met ethylacetaat (4 x 750 ml), De gecombineerde extracten worden gewassen met 50 ml verzadigde natriumchloride-oplossing, gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel wordt 20 verdampt, waardoor 8,0 g van een bleekgele visceuze olie worden verkregen. De olie wordt opgelost in 35 ml ethanol, behandeld met 3,0 g cyclohexylamine in 10 ml ethanol en verdund met 50Ó ml ethér. Na enten en wrijven scheidde zich het kristallijne N-carbobenzyloxy- 4,4-dimethoxy-L-proline cyclohexylaminezout' af, dat na een nacht 25 lang koelen werd gewogen op 7,0 g, smpt, 157-159° (s, 151°), (_ <*_/ -34° (c, 1 % in EtOH). Dit materiaal wordt omgekristalliseerd uit 100 ml acetonitrile waardoor het zout wordt verkregen als een kleurloze vaste stof met smpt. 158-160° (s. 154°), f_ cx_/^ -33° (c, 1 % in EtOH).

30 Het N-carbobenzyloxy-4,4-dimethoxy-L-proline cyclo hexylaminezout wordt gesuspendeerd in 40 ml ethylacetaat, geroerd en behandeld met 25 ml ln zoutzuur. Wanneer twee heldere lagen zijn verkregen, worden deze gescheiden, de waterige fase wordt geëxtraheerd met aanvullend ethylacetaat (3 x 40 ml), de gecombineerde organische 35 lagen worden gedroogd (mgSO^) en het oplosmiddel wordt verdampt, 79 0 9 2 4 ff 16 tenslotte bij 0,2 mm en 40°, waardoor 7,2 g {70 %) N-carbobenzyloxy- 4,4-dimethoxy-L-proline worden verkregen als een bleekgele visceuze stroop.

c) 4,4-Dimethoxy-L-proline.

5 Een oplossing van N-carbobenzyloxy-4,4-dimethoxy- L-proline (72 g, 0,022 mol) in 210 ml methanol-water (2:1) wordt -behandeld met 2,3 g 5 % palladium-koolstof en 6 uur op een Parr hydrogenator geschud. De katalysator wordt afgefiltreerd onder stikstof, gewassen roet methanol, en de gecombineerde filtraten worden 10 ingedampt, tenslotte bij 0,1-0,2 mm, waardoor een gedeeltelijk kristallijn residu wordt verkregen. Dit residu wordt opgenomen in 200 ml methanol en het indampen wordt herhaald. Bij wrijven van de vaste stof onder ether (de verdamping wordt opnieuw herhaald) worden 3,6 g (95 %) vrijwel kleurloze 4,4-dimethoxy-L-proline, smpt.

15 192-194° (ontl.), ~47° 1 % in Me0H> verkregen.

Een uit methanol-ether gekristalliseerd monster is kleurloos en smelt bij 197-198° (ontl.), /“<X_7^6 -49° (c, 1 % in MeOH). — d) (S) -l-/*~3- (acetylthio) -2-methyl-1-oxopropyl 7~ 20 4,4-dimethoxy-L-proline.

Een geroerde oplossing van 3,3 g (0,019 mol) 4,4-dimethoxy-L-proline in 50 ml water wordt tot 5° gekoeld en op pH 8,5 gebracht door toevoegen van 25 %-ige natriumcarbonaatoplossing. Daarna wordt onder voortgezet roeren en koelen een oplossing van 3,8 g 25 (0,021 mol) D-3-acetvlthio-2-methylpropanoylchloride in 5 ml ether in gedeelten toegevoegd terwijl de pH op 7,5-8,5 wordt gehouden door druppelsgewijs toevoegen van 25 %-ige natriumcarbonaatoplossing.

Nadat de pH gestabiliseerd is op 8,2-8,4 (na ongeveer 15 min.), wordt het roeren en koelen nog in totaal 1 uur voortgezet. De oplossing 30 wordt vervolgens gewassen met 50 ml ethylacetaat (de wasvloeistof wordt weggeworpen) afgedekt met 50 ml ethylacetaat, gekoeld, geroerd, voorzichtig aangezuurd met 1:1 zoutzuur tot pH 2,0, verzadigd met natriumchloride en de lagen worden gescheiden. De waterige fase wordt geëxtraheerd met aanvullend ethylacetaat (3 x 50 ml), de gecombineer-35 de organische lagen worden gedroogd (MgSO^), en het oplosmiddel wordt 7909246 17 verdampt, tenslotte bij 0,2 mm, waardoor 6,7 g verkregen worden van een stroperig produkt. Deze stroop wordt in 70 ml ethylacetaat behandeld met 3,9 g dicyclohexylamine, waardoor 6,5 g kleurloos (S)-1-/ 3-(acetylthio)-2-methyl-1-oxopropyl_/-4,4-dimethoxy-L-proline 5 dicyclohexylaminezout wordt verkregen in twee oogsten (3,1 g en 3,4 g), smpt. 158-160° (s. 145°), -71° (c, 1 % in EtOH).

Na omkristalliseren uit 20 ml warme ethylacetaat - 60 ml hexaan, weegt het kleurloze vaste zout 6,0 g, smpt. 158-166° (s. 155°) /"^_7p5 “69° (c, 1 % in EtOH).

10 Het dicyclohexylaminezout wordt omgezet in het vrije zuur door suspenderen van 5,0 g in 50 ml ethylacetaat, koelen en behandelen met 60 ml 10 %-ige kaliumbisulfaatoplossing waardoor twee heldere lagen worden verkregen. Na scheiden van de lagen wordt de waterige fase geëxtraheerd met ethylacetaat (3 x 50 ml), de ge-15 combineerde organische lagen worden gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel wordt verdampt, tenslotte bij 0,1-0,2 mm en 45°, waardoor 4,1 g (69 %) (S)-1-/—3-(acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl_/-4,4-dimethoxy-L-proline worden verkregen als een visceus, bijna glasachtig materiaal met £ -112° (σ, 1 % in EtOH).

20 Voorbeeld IV

(S)-1-(3-Mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-4,4-dimethoxy-L-proline.

Argon wordt geleid door een koude oplossing van 8,5 ml geconcentreerd ammoniumhydroxyde in 20 ml water gedurende een 25 kwartier. De oplossing wordt dan onder koelen en onder een argon-deken toegevoegd aan 4,1 g (0,013 mol) (S)-l~/_ 3-(acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl /-4,4-dimethoxy-L-proline en het mengsel wordt in een ijsbad gezwenkt tot een bleekgele oplossing is verkregen (ongeveerd 15 min.). Roeren onder argon wordt bij kamertemperatuur nog 30 2 uur voortgezet en daarna wordt de oplossing geëxtraheerd met 30 ml ethylacetaat (deze en de daarna volgende bewerkingen worden zoveel mogelijk onder een argondeken uitgevoerd). De waterige laag wordt gekoeld, geroerd, afgedekt met 30 ml ethylacetaat en in gedeelten aangezuurd met ongeveer 16 ml 1:1 zoutzuur. De lagen worden geschei-35 den, de waterige fase wordt geëxtraheerd met aanvullend ethylacetaat 79 0 9 2 4 6 18 (3 x 30 ml), de gecombineerde ethylacetaatlagen worden gedroogd (MgSOj en het oplosmiddel wordt verdampt, waardoor 3,5 g (100 %) 4 (S)-1-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-4,4-dimethoxy-L-proline worden verkregen als een kleurloze visceuze stroop met /_ -72° (c, 5 1 % in EtOH).

Deze laatste (3,4 g) wordt met 20 ml ethylacetaat getritureerd, gewreven, verdund met 30 ml hexaan en gekoeld, waardoor een kleurloze vaste stof wordt verkregen, 2,6 g, smpt. 108-110°, /“(Xjf -77° (c, 1 % in EtOH).

10 Voorbeeld V

(S) -1-/7(Acetyl thio) -2-methyl-l-oxopropyl_/-4,4-diethoxy-L-proline.

a) N-Carbobenzvloxy-4,4-diethoxy-L-proline, ethyl- ester.

15 Overeenkomstig de methode van voorbeeld III (a), maar met gebruikmaking van triethvlorthoformiaat in plaats van tri-methylorthoformiaat rn ethanol in plaats van methanol Verkrijgt men 10,8 g N-carbobenzyloxy-4,4-diethoxy-L-proline, ethylester als ©en gele olie.

20 b) N-Carbobenzyloxy-4,4-diethoxy-L-proline.

De ruwe ester uit deel a) (10,8 g, 0,03 mol) wordt verzeept met 70 ml ln natriumhydroxyde volgens de methode van voorbeeld IV (b), 30 ml ethanol wordt toegevoegd in hoeveelheden van 10 ml, waardoor een oplossing wordt verkregen, waardoor 10,5 g van een 25 gele visceuze olie worden verkregen. Deze olie wordt opgelost in 100 ml ether en behandeld met cyclohexylamine (3,0 g). Na enten en wrijven scheidden zich 8,3 g van het kristallijne N-carbobenzyloxy-4,4-diethoxy-L-proline cyclohexylaminezout af; smpt. 123-126° (s. 114°), r«7l6 -32° (c, 1 % in ethanol).

30 Dit materiaal wordt omgekristalliseerd uit 20 ml acetonitrile waardoor 7,0 g van het zout worden verkregen als een kleurloze vaste stof? smpt. 125-128° (s. 115°), / C(_/^ -31° (c, 1 % in ethanol).

Het N-carbobenzyloxy-4,4-diethoxy-L-proline cyclo-35 hexylaminezout wordt gesuspendeerd in 40 ml ethylacetaat, geroerd en 7909245 19 behandeld met 20 ml In zoutzuur. De lagen worden gescheiden en de waterige fase wordt geëxtraheerd met aanvullend ethylacetaat (3 x 40 ml), de organische lagen worden gecombineerd, gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel wordt verdampt, waardoor 5,6 g (56 %) N-carbobenzyl-5 oxy-4,4-diethoxy-L-proline worden verkregen als een lichtgele olie.

c) 4,4-Diethoxy-L-proline.

Een oplossing van N-carbobenzvloxy-4,4-diethoxy-L-proline (5,6 g, 0,017 mol) in 180 ml 2:1 ethanol-water wordt behandeld met 2 g van een 5 % palladium-koolstof katalysator en onder 10 3 atm waterstof gedurende 6 uur geschud. Het ruwe, gedeeltelijk vaste produkt wordt eerst onder ethanol en daarna onder ether gewreven en het verdampen wordt iedere keer herhaald, waardoor 3 g (91 %) worden verkregen van een vrijwel kleurloze vaste stof, 4,4-diethoxy-L-proline? smpt. 172-174° (ontij; voorafgegaan door geleidelijk donker 15 worden en sinteren, / y_/^ -40° (c, 1 % in methanol).

Analyse berekend voor CgH^NO^ , 0,25 H^O: C 52,03; H 8,49; N 6,74;

Gevonden: C 52,22; H 8,59; N 6,69.

d) (S)—1—/ 3—(Acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl /- 20 4,4-diethoxv-L-proline.

Het 4,4-diethoxy-L-proline (2,9 g, 0,014 mol) uit deel c) en 3 g (0,017 mol) D-3-acetylthio-2-raethylpropionylchloride, opgelost in 3,5 ml ether, worden in 35 ml water in aanwezigheid van natriumcarbonaat tot reactie gebracht volgens de methode van voor-25 beeld III d) waardoor 5,4 g van een bleekgele visceuze olie worden verkregen. Dit olie-achtige produkt wordt in 40 ml ethylacetaat behandeld met 2,6 g dicyclohexylamine en verdund met 60 ml hexaan, waardoor twee oogsten van 4,9 g (S)-V 3-(acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl 7-4,4-diethoxy-L-proline dicyclohexylaminezout worden 30 verkregen met smpt. 135-138° (s. 132°). Na omkristalliseren uit 15 ml warme ethylacetaat - 45 ml hexaan weegt het kleurloze vaste zout 4,2 g; smpt. 138-140° (s. 135°), Γ°\7^ -63° (c, 1 % in ethanol).

Analyse berekend voor ^5^25^6^ * ci2^23Ns C 61,33; H 9,15; N 5,30; S 6,06; 35 gevonden: C 61,48; H 9,55; N 5,25; S 5,91.

7908243 20

Het dicyclohexylaminezout wordt omgezet in het vrije zuur door suspenderen van 4,2 g in 40 ml ethylacetaat, koelen en behandelen met 40 ml 10 %-ige kaliumbisulfaatoplossing, waardoor twee lagen worden verkregen. Na scheiden van de lagen wordt de wate-5 rige fase geëxtraheerd met ethylacetaat (3 x 50 ml), de gecombineerde organische lagen worden gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel wordt -ingedampt, waardoor 3,0 g (61 %) (S) — 1 —3-(acetylthio)-2-methy 1-1-oxopropyl_T-4,4-diethoxy-L-proline worden verkregen als een bleekgele visceuze stroop.

10 Voorbeeld VI

(S)-4,4-Diethoxy-l-(3-mer.capto-2-methyl^l-oxopropyl2”L-proline.

Argon wordt geleid door een koude oplossing van 5,5 ml geconcentreerd ammoniumhydroxyde in 13 ml water gedurende één kwartier. Deze oplossing wordt dan onder koelen en onder een stik-15 stofdeken toegevoegd aan 3,0 g (0,0086 mol) (S)-l-,/ 3-(acetylthio)- 2-methyl-1-oxopropyl /-4,4-diethoxy-L-proline en het mengsel wordt opgewerkt zoals beschreven in voorbeeld IV, waardoor 2,4 g (92 %) (S)-4,4-diethoxy-1-(3-mercapto-2-methyl-1-oxopropyl)-L-proline worden verkregen als een vrijwel kleurloze visceuze stroop [_ w_/^ -64°, 20 (c, 1 % in ethanol).

Analyse bereken!voor ci3H23N05 * H20: C 50,38? H 7,64; N 4,52; S 10,35; gevonden: C 50,68; H 7,96; N 4,78; S 10,07.

Voorbeeld VII

25 £ 2 (S), 3S_/-2-/_~3- (Acetylthio) -2-methyl-1 -oxopropy l__/-6, lO-dioxo-2- azaspiro/_ 4,5__/decaan-3 -carbonzuur.

a) N-Carbobenzyloxy-4,4-trimethyleendioxy-L-pro- line.

30 De reactie van 8,2 g (0,031 mol) N-carbobenzyl- oxy-4-keto-L-proline en 45 ml (0,62 mol) propaan-1,3-diol in 450 ral benzeen in aanwezigheid van 500 mg p-tolueensulfonzuur levert 12,3 g ruw visceus esterprodukt. Dit produkt wordt verzeept met 70 ml ln natriumhydroxyde waardoor 10,6 g ruw N-carbobenzyloxy-4,4-trimethy-35 leendioxy-L-proline als een gele Olie worden verkregen. Deze laatste 7005246 21 wordt opgelost in 40 ral ethanol - 400 ral ether en behandeld aet 3,2 g cyclohexylamine waardoor 10,1 g N-carbobenzyloxy-4,4-trimethyleen-dioxy-L-proline cyclohexylaminezout worden verkregen met srapt. 163-165° (s. 160°) /"of_7^6 -27° (c, 1 % in ethanol). Kristalliseren van 5 9,8 g vein het zout uit 300 ml acetonitrile levert 9,5 g kleurloos vast cvclhexylaminezout; srapt. 165-167° (s. 162°), £o<_/^ -27° (c, 1 % in ethanol). Het cyclohexylaminezout (9,0 g) wordt gesuspendeerd in 40 ral ethylacetaat, geroerd, gekoeld en behandeld met 45 ml In zoutzuur. De lagen worden gescheiden, de waterige fase wordt geëxtra-10 heerd met aanvullend ethylacetaat (3 x 40 ml), de gecombineerde organische lagen worden gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel wordt ingedampt waardoor 7,1 g (75 %) glasachtig N-carbobenzyloxy-4,4-tri-methyleendioxy-L-proline worden verkregen.

b) 4,4-Trlraethyleendioxy-L-proline.

15 Een oplossing van 7,1 g (0,022 mol) N-carbobenzyl oxy-4, 4-triraethyleendioxy-L-proline in 200 ml 2:1 methanol-water wordt gehydrogeneerd" in aanwezigheid van 2 g 5 % palladium-koolstof katalysator waardoor 3,8 g (93 %) vrijwel kleurloos 4,4-trimethyleen-dioxy-L-oroline worden verkregen met smpt. 234-236° (ontl.), vooraf-20 gegaan door geleidelijk donker worden en sinteren: / t*j\5 -36° (c, 0,5 % in 1:1 methanol-water).

Analyse berekend voor CgH^NO^: C 51,33; H 7,00; N 7,48; gevonden C 51,42; H 7,11; N 7,40.

25 c) /~2(S),3S 7-2-/~3-(Acetylthio)-2-methvl-1-oxo- oropyl 7-6,10-dioxy-2-azaspiro/ 4,5 /decaan-3-carbonzuur.

4,4-Trimethyleendioxy-L-proline (3,7 g, 0,02 mol) wordt geacyleerd met 4,0 g (0,022 mol) D-3-acetylthio-2-methylpro-pionylchloride in 50 ml water in aanwezigheid van natriumcarbonaat 30 volgens de methode van voorbeeld I (e) waardoor 7,3 g van een glasachtig ruw produkt worden verkregen.

Het produkt wordt omgezet in zijn dicyclohexyl-aminezout met 3,6 g dicyclohexylamine in 70 ml ethylacetaat. Bij enten en wrijven slaat het kristallijne zout neer waardoor 7,5 g 35 van het dicyclohexylarainezout worden verkregen met smpt. 168-170° 7903245 « 22 (s.l66°), /, -59° (c, 1 % in ethanol). Omkristalliseren uit 30 ml acetonitrile levert 6,5 g kleurloos vast zout met smpt. 169-171°, — — 25 o / ot—/ -63 , (c, 1 % in ethanol).

Het dicyclohexylaminezout wordt omgezet in het 5 vrije zuur door 6,4 g te suspenderen in 75 ml ethylacetaat en te behandelen met 75 ml 10 %-ig kaliumbisulfaat en te roeren tot er twee lagen worden verkregen. Na scheiden van de lagen wordt de waterige fase geëxtraheerd met ethylacetaat (4 x 75 ml), de organische lagen worden gecombineerd, gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel wordt 10 verdampt, waardoor 4,3 g (67 %) glasachtig /_ 2(S),3S_/-2-/ 3-(ace-tylthio)-2-methyl-1-oxopropvl_/-6,10-dioxo-2-azaspiro,/ 4,5_/decaan-3-carbonzuur worden verkregen.

Voorbeeld VIII

Γ\2 (S),3S_/-2-(3-Mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-6,10-dioxo-2-aza-15 spiro£ 4,5_/decaan-3-carbonzuur.

/~2 (S),3S_7-2-/—3-(Acetylthio)-2-methyl-l-oxopro- pyl_/-6,10-dioxo-2-azaspiro/_ 4,5_/decaan-3-carbonzuur (4,3 g, 0,013 mol) wordt gehydrolyseerd met 8,5 ml geconcentreerde ammoniak vol- 20 gens de methode van voorbeeld II waardoor 0,9 g kleurloos vast pro- dukt wordt verkregen met /_ -64° (c, 0,5 % in ethanol). Een aanvullende 0,8 g produkt wordt verkregen door extraheren van de waterige fase met chloroform; /_ -66°. De twee oogsten worden opgelost in chloroform, ingedampt, onder ether gewreven en het 25 verdampen wordt herhaald waardoor 1,7 g (46 %) f_ 2 (S) ,3S_/-2-(3- mercapto-2-methyl-1-oxopropyl)-6,10-dioxo-2-azaspiro,/ 4,5_/decaan-3- o —26

carbonzuur worden verkregen met smpt, 169-171 (s, 167°), /_ "X_/D

-71° (c, 1 % in methanol).

Analyse berekend voor ci2Hi9N°5S: 30 C 49,81; H 6,62; N 4,84; S 11.08; gevonden: C 49,67; H 6,67; N 4,93; S 11,10.

Voorbeeld IX

/~7 (S) ,8S__7-7-/~3- (Acetylthio) -2-methyl-1 -oxopropyW-7-aza-1,4-di-thiaspiro/”4,4_7nonaan-8-carbonzuur.

35 7903246 23 a) N-Carbobenzvloxy-4,4-ethyleendithlo-L-proline, methylester.

Een geroerde oplossing van 3,9 g (0,014 mol) N-carbobenzyloxy-4-keto-L-proline, methylester in 60 ml methyleenchlo-5 ride wordt behandeld met 3 ml (0,036 mol) ethaandithiol, gekoeld tot 8° en onder een argondeken behandeld met 3 ml (0,024 mol) boortri-fluorde-etheraat. Na verwijderen van het koelbad wordt de bleekgele oplossing geroerd gedurende nog 1 uur en een nacht lang bij kamertemperatuur bewaard, De oplossing wordt geroerd, behandeld met ver-10 scheidene stukken gestampt ijs, gevolgd door 20 ml water. Na 30 min. worden de lagen gescheiden en de waterige fase (50 ml) wordt geëxtraheerd met aanvullend methyleenchloride (3 x 30 ml). De gecombineerde organische lagen worden gewassen met 50 ml verzadigde natriurachlori-de-oplossing, gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel wordt verwijderd 15 op een roterende verdamper waardoor 6 g (100 %) worden verkregen van een bleekgele olie, N-carbobenzyloxy-4,4-ethyleendithio-L-pro-line, methylester.

b) N-Carbobenzyloxy-4,4-ethyleendithio-L-prollne.

Het methylesterprodukt uit deel a) (7,4 g, onge-20 veerd 0,018 mol) wordt opgelost in 65 ml methanol, druppelsgewijze bij -1° tot +4° behandeld met 14,5 ml (0,029 mol) 2n natriumhydroxy-de, 1 uur oo 0° gehouden en daarna een nacht lang bij kamertemperatuur. Na verwijderen van ongeveer de helft van het oplosmiddel op een roterende verdamper wordt de oplossing verdund met 125 ml water, met 25 ether gewassen (wasvloeistof weggeworpen), onder koelen aangezuurd met 5 ml 1:1 zoutzuur tot een pH van 2, en geëxtraheerd met ethyl-acetaat (4 x 50 ml). De gecombineerde extracten worden gewassen met 50 ml verzadigd natriumchloride, gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel wordt verdampt, waardoor 6 g bleekgele visceuze olie worden verkre-30 gen. Deze olie wordt opgelost in 25 ml ethanol, behandeld met 1,8 g cyclohexylamine in 5 ml ethanol en tot 300 ml verdund met ether. Na enten en wrijven scheidt het kristallijne cyclohexylaminezout zich af waardoor na een nacht lang koelen 5,7 g N-carbobenzyloxy-4,4-ethyleendithio-L-proline cyclohexylaminezout worden verkregen met 35 smpt. 205-207° (s. 201°). Omkristalliseren uit 50 ml ethanol-400 ml 79 0 92 4 6

A

24 ether levert 4,9 g kleurloos vast zout met smpt. 207-209° (s. 201°), /“cx_7^5 -15° (c, 1 % in chloroform).

Het cyclohexylaminezout (4,8 g) wordt gesuspendeerd in 25 ml ethylacetaat, geroerd en behandeld met 25 ml In zout-5 zuur. Nadat twee heldere lagen zijn verkregen worden de lagen gescheiden, de waterige fase wordt geëxtraheerd met aanvullend ethylacetaat (3 x 25 ml), de gecombineerde organische lagen worden gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel wordt verdampt waardoor 3,8 g (62 %) N-carbobenzyloxy-4,4-ethyleendithio-L-proline worden verkregen als 10 een bleekgele visceuze stroop.

c) 4,4-Ethyleendithlo-L-proline hydrobromide.

N-carbobenzyloxy^4,4-ethyleendi thio-L-proline (3,7 g, 0,011 mol) wordt behandeld met 20 ml broomwaterstof in azijnzuur (30-32 %) losjes afgestopt en magnetisch geroerd. Het mengen is 15 moeilijk wegens de viscositeit van het uitgangsmateriaal en dit laatste wordt zoveel raogelijk met een spatel verbroken. In de tussentijd begint het kristallijne produkt zich af te scheiden. Aanvullende hoeveelheden broomwaterstof in azijnzuur worden na 15 min. (10 ml) en na 25 ml (5 ml) toegevoegd en het roeren wordt in totaal 35 20 min. voortgezet. Ether (250 ml) wordt toegevoegd om het neerslaan van het produkt te voltooien en na 15 min. koelen wordt het roomkleurige materiaal onder stikstof afgefiltreerd, gewassen met ether en in vacuum gedroogd, waardoor 2,7g 4,4-ethyleendithio-L-proline, hydrobromide worden verkregen met smpt. 240-242° (ontl.); sinteren o — “*26 o 25 en donker worden vanaf ongeveer 200 ; /_ <X_/D -40 (c, 0,5 % in 1:1 chloroform-methanol).

d) /*~7 (S) ,8S 7-7-/~3- (Acetylthio) -2-methyl-1 -oxo-propyl 7-7-aza-l,4-dithiasplro/~~4,4 7nonaan-8-carbonzuur.

Een geroerde oplossing van 2,6 g (0,0091 mol) 30 4,4-ethyleendithio-L-proliné, hydrobromide in 25 ml water wordt tot 5° gekoeld en op een pH van 8,2 gebracht door toevoegen van 25 %-ig natriumcarbonaat. Terwijl het roeren en koelen wordt voortgezet wordt een oplossing van 1,9g (0,01 mol) D-3-acetylthio-2-raethylpropionyl-chloride in 2,5 ml ether in gedeelten toegevoegd terwijl de pH op 35 7,5-8,2 wordt gehouden door druppelsgewijs toevoegen van 25 %-ig 7909246 25 natriumcarbonaat. Nadat de pH gestabiliseerd is op 8,2-8,5 (na ongeveer 15 min.) wordt het roeren en koelen nog gedurende in totaal 1 uur voortgezet. De oplossing wordt daarna gewassen met 25 ml ethyl-acetaat (wassing weggeworpen), afgedekt met 25 ml ethylacetaat, ge-5 koeld, geroerd, zorgvuldig aangezuurd met 1:1 zoutzuur tot pH 2,0, verzadigd met natriumchloride en de lagen worden gescheiden. De waterige fase wordt geëxtraheerd met aanvullend ethylacetaat (3 x 25 ml), de gecombineerde organische lagen worden gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel wordt verdampt, tenslotte bij 0,2 mm, waardoor 2,6 g 10 stroperig produkt worden verkregen dat begint uit te kristalliseren.

• Dit laatste wordt in 30 ml ethylacetaat behandeld met 1,5 g dicyclo- hexylamine, waardoor 3,0 g kleurloos dicyclohexylaminezout worden verkregen met smpt. 176-178° (s. 170°), _/«_/ -55° (c, 1 % in etha nol) , Dit materiaal wordt in een mortier gemalen onder 15 ml aceto-15 nitrile, 1 uur gekoeld, gefiltreerd, gewassen met 5 ml koude acetonitrile en met ether en gedroogd, waardoor22,9 g dicyclohexylamine- mm*2 δ zout worden verkregen met smpt. 177-179 (s, 172 )? /_ Λ_/0 -56° (c, 1 % in ethanol).

Analyse berekend voor ci3HigN04S · Cj2H23N! 20 C 56,56? H 7,98; N 5,28? S 18,12? gevonden: C 56,21? H 8,18? N 5,05; S 18,00.

Het bovengenoemde dicyclohexylaminezout wordt omgezet in het vrije zuur door suspenderen van 2,8 g in 30 ml ethylacetaat, koelen en behandelen met 30 ml 10 %-ig kaliumbisulfaat 25 waardoor twee heldere lagen worden verkregen. Na scheiden van de lagen wordt de waterige fase geëxtraheerd met ethylacetaat (3 x 30 ml), de gecombineerde organische lagen worden gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel wordt verdampt, tenslotte bij 0,1-0,2 mm en 45°, waardoor 2,0 g (63 %) kleurloos vast £ 7(S),8S_/-7-/ 3-(acetylthio)-30 2-methyl-1 -oxopropyl_/-7-aza-1,4-dithiaspiro/ 4,4_/nonaan-8-carbon- zuur, worden verkregen met smpt. 125-126° (s. 122°); [_ Of/ -101° (c, 1 % in ethanol).

35 -·; ·> P 9 h n ** Urn T* > 26

Voorbeeld X

/~7(S),8S_/-7-(3-Mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-7-aza-1,4-dithia-spiro/ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur.

5 Argon wordt geleid door een koude oplossing van 3,5 ml geconcentreerde ammoniak in 8,5 ml water gedurende 15 min.

De oplossing wordt daarna onder koelen en onder een argondeken toegevoegd aan 1,9 g (0,0054 mol) _/ 7(S),8S_/-7-/ 3-(acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl_/-7-aza-l,4-dithiaspiro/ 4,4Vnonaan-8-carbonzuur 10 en het mengsel wordt in een ijsbad gezwenkt tot een oplossing is verkregen. Het roeren onder argon wordt bij kamertemperatuur nog een aanvullende 2 uur voortgezet, en daarna wordt de oplossing geëxtraheerd met 15 ml ethylacetaat onder een argondeken. De waterige laag wordt gekoeld, geroerd, af gedekt met 15 ml ethylacetaat, en in ge-15 deel ten aangezuurd met omstreeks 6,5 ml 1:1 zoutzuur. De lagen wor den gescheiden, de waterige fase wordt geëxtraheerd met aanvullende ethylacetaat (3 x 15 ml) en de gecombineerde acetaatlagen worden gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel wordt verdampt waardoor een glasachtig residu wordt verkregen dat bij wrijven onder ether vast wordt. 20 Het verdampen wordt herhaald en het kleurloze produkt wordt gesuspendeerd in 30 ml hexaan, gefiltreerd en in vacuum gedroogd, waardoor 1,4 g (84 %) /~7(S),8S_7-7-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-7-aza- 1,4-dithiaspiro/ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur worden verkregen met smpt. 116-118° (s. 105°), /“«T^6 -44° (c, 1 % in ethanol).

25 Analyse berekend voor cuHi7N03S3! C 42,97? H 5,57? N 4,56? S 31,29? SH 100 %? gevonden: C 42,70? H 5,71; N 4,54? S 31,16? SH 100 %.

Voorbeeld XI

/~7 (S), 8S_/-7-(3-Mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-1,4-dioxo-7-azaspiro-30 (_ 4,5Vdecaan-8-carbonzuur.

a) f~l (5),8S 7-7-/~3-(Acetylthio)-2-methyl-l-oxo-propyl /-1t4-dioxo-7-azasprio/ 4,5 /decaan-8-carbonzuur.

Overeenkomstige de methode van voorbeeld I maar 35 met gebruikmaking van een equivalente hoeveelheid N-carbobenzyloxy- 7909246 27 5-keto-L-pipecolinezuur in plaats van het N-carbobenzyloxy-4-keto-L-proline in deel c) en daarna verdergaand met de methode van deel (d) en deel (e) verkrijgt men /~7(S),8S_7-7-/ 3-(acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl_/-l,4-dioxo-7-azaspiro/_ 4,5-Vdecaan-8-carbonzuur.

5 b) /~7 (S) ,8S 7-7-(3-Mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)- 1,4-dioxo-7-azaspiro/ 4,5 /decaan-8-carbonzuur.

Het produkt uit deel (a) wordt gehydrolyseerd met geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld II ter verkrijging van /_ 7(S),8S_/-7-(3-mercapto-2-raethy1-1-oxopropyl)-1,4-10 dioxo-7-azaspirq/ 4,5_/decaan-8-carbonzuur.

Voorbeeld XII

!_ 1 (S),2S__/-1- (3-Mercapto-2-methyl-l-oxopropyl) -5,5-dimethoxy-2-piperidinecarbonzuur.

15 a) /~1(S),2S 7-1-Γ3-(Acetvlthlo)~2-methyl-l-oxo- propyl /-5,5-dimethoxy-2-olperidinecarbonzuur,

Overeenkomstig de methode van voorbeeld III maar met gebruikmaking van een equivalente hoeveelheid N-carbobenzyloxy- 5-keto-L-pipecolinezuur in plaats van het N-carbobenzyloxy-4-keto-L-20 proline in deel (a) verkrijgt men 1(5) ,2S_/-1-/ 3-(acetylthio)-2-methyl-1-oxopropvl__/-5,5-dimethoxy-2-piperidinecarbonzuur.

b) /~~1(S),2S 7-1-(3-Mercapto-2-methyl-1-oxopro-pyl)-5,5-dimethoxy-2-piperidinecarbonzuur.

Het produkt van deel (a) wordt gehydrolyseerd met 25 geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld iv ter verkrijging van /~1 (Ξ),2S_7-l-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)- 5,5-dimethoxy-2-piperidine-carbonzuur.

Voorbeeld XIII

Γ1 (S),2-__/-l-(3-Mercapto-2-methyl-l-oxqpropyl)-4,4-dimethoxy-2-30 piperidinecarbonzuur.

a) /~~1 (S) ,2- 7-1-/ 3-(Acetylthio) -2-methyl-1-oxoorooyl /-4,4-dimethoxy-2-piperidinecarbonzuur.

Overeenkomstig de methode van voorbeeld III maar 35 met gebruikmaking van een equivalente hoeveelheid van N-carbobenzyl- 7909246 28 * oxy-4 -keto-pipecolinezuur in plaats van het N-carbobenzyloxy-4-keto-L-proline in deel (a) verkrijgt men / 1(S),2-_/-l-/ 3-(acetylthio)-2-methyl-1-oxopropyl /-4,4-diethoxy-2-piperidinecarbonzuur.

b) /~1(S),2- 7-1-(3-Mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-5 4,4-dimethoxy-2-piperidinecarbonzuur.

Het produkt uit deel (a) wordt gehydrolyseerd met geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld IV ter verkrijging van /~1(S),2-_7-1-(3-mercapto-2-methyl-1-oxopropyl)-4, 4-dimethoxy-2-piperidinecarbonzuur.

10 Voorbeeld XIV

/~2 (S),3S_7-2-(3-Mercapto-2-methyl-1-oxopropyl)-6, lO-dMia-2-aza-spiro/_4,5_/decaan-3-carbonzuur.

a) /~2(S),3S /-2-/ 3-(acetylthio)-2-methyl-1-oxo-15 propyl /-6,10-dithia-2-azaspiro/ 4,5 /decaan-3-carbonzuur.

Overeenkomstig de methode van voorbeeld IX maar met gebruikmaking van propaan-1,3-dithiol in plaats van het ethaandithiol in deel (a) verkrijgt men /~2(S),3S_7-2-/“3-(acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl_7- 6.10- dithio-2-azaspiro/""4,5_7decaan-3-carbonzuur.

20 b) /*~2(S),3S /-2-(3-ffiercapto-2-methyl-1-oxopropyl)- 6.10- dithia-2-azaspiro/ 4,5 7decaan-3-carbonzuur.

Het produkt uit deel (a) wordt gehydrolyseerd met geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld X ter verkrijging van £ 2(S),3S_/-2-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-6,10-di-25 thia-2-azaspiro/_ 4,5^_/decaan-3-carbonzuur.

Voorbeeld XV

/ 7(S),8S 7-7-(3-Mercapto-2-methyl-1-oxopropy1)-1-oxo-4-thia-7-aza-spiro/^ 4,4Vnonaan-8-carbonzuur.

30 a) /~7(S) ,8S T-7-/~~3- (Acetylthio) -2-methyl-1- oxopropyl /.-oxo-4-thia-7-azaspiro/ 4,4 /nonaan-8-carbonzuur.

overeenkomstig de methode van voorbeeld I maar met gebruikmaking van 2-mercaptoethanol in plaats van het ethyleen-glycol in deel (c) verkrijgt men £ 7 (S) ,8S__/-7V 3-(acetylthio)-2-35 methyl-1-oxopropyl_/-l-oxo-4-thia-7-azaspiro/> 4,4__/nonaan-8-carbon- 7801246 29 zuur.

b) £ 7(S),8S/-7-(3-Mercanto-2-methyl-l-oxopropyl)-1 -οχρ-4-thla-7-azaspi.ro/ 4,4 /nonaan-8-carbOnzuur.

Het produkt uit deel (a) wordt gehydrolyseerd met 5 geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld II ter verkrijging van / 7(S),8S_y-7-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-l-oxo-4-thia-7-azaspiro/_ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur.

Voorbeeld XVI

(8S)-7-/ 3-(Acetylthio)-2-trifluormethyl-l-oxopropyl_/-l,4-dioxo-7-10 azaspiro/”i,4 Vnonaan-8-carbonzuur. (Isomeren A en B).

a) D,L-3-(Acetylthio)-2-trifluormethylpropionzuur. a-Trifluoroethylacrylzuur (10 g, 0,071 mol) (bereid volgens de methode als beschreven in J. Chem. Soc., 1954, blz. 371) . 15 wordt gekoeld in een zout-ijs-water bad, geroerd en in gedeelten be handeld met 5,7 ml (0,075 mol) 97 %-ig thiolazijnzuur. Na de toevoeging wordt de gele vloeistof in de koude gedurende 1 uur geroerd, waarna men hem laat opwarmen tot kamertemperatuur en destilleert waardoor 14 g (91 %) D,L-3-(acetylthio)-2-trifluormethylpropionzuur 20 worden verkregen als een lichtgele olie, kpt. 149-153°/13 mm. Het materiaal wordt bij opslag in de koude vast.

b) D ,1.-3- (Acetylthio) -2-trifluormethylnroplonyl- chloride.

Het D,L-3-(acetylthio)-2-trifluormethylpropionzuur 25 (7 g, 0,032 mol) wordt behandeld met 18 ml (0,25 mol) vers gedestil leerd thionylchloride en het mengsel wordt 3 uur onder terugvloeien verwarmd. Na verwijdering van de overmaat thionylchloride op een roterende verdamper wordt het residu gedestilleerd waardoor 6,8 g D,L-3-(acetylthio)-2-trifluormethylpropionylchloride worden verkre-30 gen als een bleekgele olie met kpt. 80-82°/16 mm.

c) (8S)-7-/~~3-(acetylthio)-2-trifluormethyl-l-oxo-propyl 7-1,4-dloxo-7-azasplro/ 4,4 /nonaan-8-carbonzuur (Isomeren A en B).

4,4-Ethyleendioxy-L-proline (2,4 g, 0,014 mol) 35 wordt tot reactie gebracht met 3,4 g (0,014 mol) D,L-3-(acetylthio)- 7909246 3.0

••V

2-trifluormethylpropionylchloride in 40 ml water in aanwezigheid van natriumcarbonaat volgens de methode van voorbeeld I (e) waardoor 4,5 g worden verkregen van een vrijwel kleurloos produkt met smpt, 126-145° (s. 115°), /"aj^5 -34° (c, 1 % in ethanol).

5 Het mengsel van diastereo-isomeren (4,2 g) wordt gesuspendeerd in 45 ml ether, 2 uur geroerd, gekoeld gedurende 20 min. en de onopgeloste vaste stof wordt afgefiltreerd, gewassen met koude ether, en luchtdroog gemaakt, waardoor 2,7 g produkt worden verkregen met smpt. 166-172° (s. 140°), -62° (c, 1 % in 10 ethanol). Het materiaal wordt daarna in een mortier gemalen onder 25 ml ether, gefiltreerd gedurende 15 min., gewassen met wat ether-en opnieuw luchtdroog gemaakt, waardoor 2,1 g produkt worden verkregen met smpt. 172-177° (s. 143°). Na kristalliseren uit 11 ml kokende isopropanol en een nacht lang koelen worden 1,55 g kleurloos 15 (8S)-7-/~3-(acetylthio)-2-trifluormethvl-l-oxopropyl_/-l,4-dioxo- ' 7-azaspiro/_ 4,4__/nonaan-8-carbonzuur, isomeer A verkregen met smpt.

192-194° (s. 183°), /"<>'J^5 -32° (c, 1 % in ethanol). Een monster wordt omgekristalliseerd uit isopropanol; smpt. 193-195° (s. 184°) j_ -134° (c, 1 % in ethanol).

20 Isomeer B wordt verkregen door de bovengenoemde ether en isopropanolfiltraten te combineren en de oplosmiddelen onder verlaagde druk te verwijderen waardoor 2,2 g van een bleekgele vaste stof worden verkregen met smpt. 108-109° (s. 95°), /_ +30° (c, 1 % in ethanol). Dit materiaal wordt gezuiverd door kristal-25 liseren uit 6 mlisopropanol waardoor 1,2 g van een vrijwel kleurloze . vaste stof worden verkregen met smpt. 153-155° (s. 130°), J_ *_/D +40° (c, 1 % in ethanol). Na kristalliseren uit 4 ml ethylacetaat -6 ml hexaan worden 1,1 g (8S)-7-£ 3-(acetylthio)-2-trifluormethyl-1-oxopropyl__/-l,4-dioxo-7-azaspiro/ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur, isomeer 30 B verkregen met smpt. 153-155°. (s. 141°), £ °L/^ +41° (c, 1 % in ethanol).

Voorbeeld XVII

(8S)-7-(3-Mercapto-2-trifluormethyl-l-oxopropyl)-1,4-dioxo-7-aza-sprio/^4,4_/nonaan-8-carbonziir, isomeer A.

35 7009246 31 ïsomeer A produkt uit voorbeeld XVI (1,45 g, 0,0039 mol) wordt gehydrolyseerd met 2,5 ml geconcentreerde ammoniak in 6 ml water gedurende 1 uur op de wijze als beschreven in voorbeeld II, waardoor 1,25 g (97 %) kleurloos (8S)-7-(3-mercapto-2-trifluor- 5 methyl- 1-oxopropyl) -1,4-dioxo-7-azaspiro/~4,4__7nonaan-8-carbonzuur, isomeer A worden verkregen als een glasachtig produkt, -61° (c, 1 % in ethanol). TLC; 0,40 (95:5:5 methyleenchloride-methanol- azijnzuur,* vis, SH reagens, pma en verwarm).

Analyse berekend voor C.,H,,F_NO_S: 11 14 3 5 10 C 40,12; H 4,28; N 4,25; S 9,74; F 17,31; gevonden: C 40,10; H 4,43; N 4,51; S 9,63; F 17,10.

Het bovengenoemde zuur wordt opgelost in ethyl-acetaat en behandeld met 1-adamanthaanamine waardoor het 1-adaman-taanaminezout-wordt verkregen met smpt. 213-215° (ontl.), / 15 -47° (c, 1 % in methanol).

Voorbeeld XVIII

(8S)-7-(2-Mercapto-2-trifluormethyl-l-oxopropyl)-1,4-dioxo-7-aza-sniro/ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur, isomeer B.

20 Isomeer B produkt uit voorbeeld XVI (1,05 g,

0,0028 mol) wordt gehydrolyseerd met 2 ml geconcentreerde ammoniak in 5 ml water volgens de methode als beschreven inv»rbeeld II waardoor 0,9 g (97 %) (8S)-7-(3-mercapto)-2-trifluormethyl-1-oxopropyl) -l,4-dioxo-7-azasoiro£ 4, 4_/nonaan-8-carbonzuur, isomeer B

^ _25 2g worden verkregen als een bleekgele visceuze stroop; /«_/„ -16 (c, 1 % in ethanol). Het materiaal zet zich af als een wasachtige vaste stof met smpt. 61-64° (s. 55°).

Analyse berekend voor C^H^F^NO^S . 0,25 H^O: C 39,58; H 4,38; N 4,20; S 9,61; F 17,01; 20 gevonden: C 39,60; H 4,28; N 4,26; S 9,62; F 16,89.

Voorbeeld XIX

l-/"3-(Acetylthio)-2-trifluormethyl-l-oxopropyl__/-4,4-dimethoxy-L-proline, isomeren A en B.

Overeenkomstig de methode van voorbeeld XVI maar 35 7 9 0 δ 2 4 §

A

* 32 met gebruikmaking van 4,4-dimethoxy-L-proline in plaats van het 4,4-ethvleendioxy-L-proline in deel (c) verkrijgt men 1-V 3-{acetyl-thio)-2-trifluormethyl-l-oxopropyl_/-4,4-dimethoxy-L-proline als een racemisch mengsel. De afzonderlijke isomeren kunnen worden ge- 5 scheiden op de wijze als beschreven in voorbeeld XVI.

Voorbeeld XX

1-(3-Mercapto-2-trifluormethvl-1-oxoprooyl)-4,4-dimethoxy-L-proline , isomeer A en isomeer B.

10 Ieder afzonderlijk isomeer produkt uit voorbeeld XIX wordt gehydrolyseerd met geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld IV ter verkrijging van 1-(3-mercapto-2-trifluor-methyl-l-oxopropyl)-4,4-dimethoxy-L-proline, isomeer A en l-(3-mercapto-2-trif luormethyl-1-oxopropyl) -4,4-dimethoxy-L-proline, 15 isomeer B,

Voorbeeld XXI

£ 7(S),8S 7-7-(3-Mercapto-2-mercaptomethyl-l-oxqpropyl)-l,4-dioxo- 7-azaspiro/_ 4,4__/nonaan-8-carbonzuur.

20 a) /*~7 (S) ,8S 7-7-/~3-(Acetylthlo) -2- (acetylthlo- methyl)-1-oxopropyl /-1,4-dioxo-7-azaspiro/ 4,4 /nonaan-8-carbonzuur.

Overeenkomstig de methode van voorbeeld I maar met gebruikmaking van D-2-acetylthiomethyl-3-acetvlthiopropionyl-chloride in plaats van het D-3-acetylthio-2-methylpropionylchloride 25 in deel (e) verkrijgt men £ 7(S),8S_/-7-/ 3-(acetylthio)-2-(acetyl-thiomethyl)-1 -oxopropyl_7-1,4-dioxo-7-azaspiro/_ 4,4_/nonaan-8-car-bonzuur.

b) f“'7(S) ,8S 7-7-(3-Mercapto-2-mercaptomethyl-l-oxopropyl)-1,4-dioxo-7-azasplro/ 4,4 /nonaan-8-carbonzuur.

30 Het produkt uit deel (a) wordt gehydrolyseerd met geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld II ter verkrijging van /_ 7(S) ,8S__/-7-n-mercapto^-mercaptomethyl-l-oxopropyD-l ,4-dioxo-7-azaspiro/_4,4_/nonaan-8-carbonzuur.

35 '3 9 8 2 4 6 33 ·*

voorbeeld XXII

(S)-1-(3-Mercapto-2-mercaptomethyl-1-oxopropyl)-4,4-dimethyl-L-proline.

5 a) (S)—1—/ 3-(Acetylthio)-2-(acetylthiomethvl)-1- oxopropyl /-4,4-dimethoxy-L-proline,

Overeenkomstig de methode van voorbeeld III, maar met gebruikmaking van D-2-acetylthiomethyl-3-acetylthiopropionyl-chloride in plaats van het D-3-acetvlthio-2-methylpropionylchloride 10 in (d) verkrijgt men (S)-l-/ 3-{acetylthio)-2-{acetylthiomethyl)-l-oxopropyl__/-4,4-dimethoxy-L-proline.

b) (S)-1-(3-Mercapto-2-mercaptomethyl-l-oxopro-pyl)-4,4-dimethoxv-L-prollne.

Het produkt uit deel (a) wordt opgelost met ge-15 concentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld IV ter verkrijging van (S) -1 - (3-mercapto-2-mercaptomethyl-1-oxopropyl)-4,4-dimethoxy-L-proline.

Voorbeeld XXIII

(8S)-7-(3-Mercapto-2-methylthio-1-oxopropyl)-1,4-dioxo-7-azaspiro-20 /"4,4_7nonaan-8-carbonzuur.

a) 3-(Acetylthio)-2-(methylthio)propionzuur.

12,5 g (0,094 mol) methyl-2-(methylthio)propionyl-chloride /"bereid uit methyl-2-chlooracrylaat volgens de methode van 25 Gundesmann c.s,, Chemische Berichte 94, 3254 (1916)__/ worden geroerd met 1 n waterig natriumhydroxyde (94 ml) onder ijskoeling. Het mengsel laat men opwarmen tot kamertemperatuur, en roert daarna 5 uur.

De verkregen oplossing wordt gewassen met ether, en daarna aangezuurd tot pH 2 met geconcentreerd zoutzuur. Het vaste neerslag wordt 30 geëxtraheerd met methyleenchloride en de oplossing wordt gewassen met verzadigd natriumchloride en het oplosmiddel wordt verdampt. Het vaste residu, 2-methylthioacrylzuur, smpt. 70-75°,wordt onmiddellijk in de daaropvolgende reactie gebruikt.

Equimolaire' hoeveelheden 2-methylthioacrylzuur 35 en thiolazijnzuur worden argon gemengd en verscheidene uren bij 80° 7 9 C ; 2 4 6 t 34 geroerd ter verkrijging van 3-(acetylthio)-2-(methylthio)propionzuur.

b) 3-(Acetylthio)-2-(methylthio)propionzuurchlorl-de.

Het 3-(acetylthio)-2-(methylthio)propionzuur 5 wordt in thionylchloride gedurende 2 uur onder terugvloeiing verwarmd. Het reactiemengsel wordt gedestilleerd teneinde overmaat thionylchloride te verwijderen en het produkt wordt in vacuum gedestilleerd ter verkrijging van 3-(acetylthio)-2-(methylthio)-propionzuurehloride.

c) (8S)-7-/ 3-(Acetylthio)-2-methylthio-1-oxopro-10 pyl /-1,4-dioxo-7-azasplro/ 4,4 /nonaan-8-carbonzuur, 4.4- Ethyleendioxy-L-proline wordt tot reactie gebracht met 3-(acetylthio)-2-(methylthio)propionzuurehloride volgens de methode van voorbeeld I (e) ter verkrijging van (8S)-7-£ 3-(acetylthio)-2-methylthio-1 -oxopropyl_/-1,4-dioxo-7-azaspiro/ 4,4__/- 15 nonaan-8-carbonzuur.

d) (8S)-7-(3-Mercapto-2-methylthio-1-oxopropyl)- 1.4- dioxo-7-azaspiro/ 4,4/nonaan-8-carbonzuur,

Het produkt uit deel (c) wordt behandeld met geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld II ter 20 verkrijging van (8S)-7-(3-mercapto-2-methylthio~l-oxopropyl)-l,4-dioxo-7-azaspiro/~4,4__/nonaan-8-carbonzuur,

Voorbeeld XXIV

1 - (3-Mercapto-2-methylthio-1 -oxopropyl) -4,4-dimethoxy-L-proline.

25 a) 1—/ 3—(Acetylthio)-2-methylthio-1-oxopropyl /- .

4.4- dimethoxy-L-prollne.

4.4- Dimethoxy-L-proline wordt tot reactie gebracht met 3-(acetylthio)-2-(methylthio)propionzuurehloride volgens de methode van voorbeeld III (d) ter verkrijging van 1-/ 3-(acetylthio)- 30 2-methylthio-l-oxopropyl_/-4,4-dimethoxy-L-proline.

b) 1-(3-Mercapto-2-methylthio-1-oxopropyl)-4,4-dimethoxy-L-prollne.

Het produkt uit deel (a) wordt gehydrolyseerd met geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld IV ter 35 verkrijging van l-(3-mercapto-2-methylthio-1-oxopropyl)-4,4-dimethoxy- 7909246 35 L-proline.

Voorbeeld XXV

(8S)-7-(3-Mercapto-1-oxopropyl)-1,4-dioxo-7-azaspixo/ 4,4__/nonaan- 8-carbonzuur.

5 a) (8S)-7-/~3-(Acetylthio)-1-oxopropyl /-1,4-dioxo-7-azaspiro/ 4,4-/nonaan-8-carbonzuur.

4.4- Ethyleendioxy-L-proline wordt tot reactie gebracht met 3-acetylthiopropionylchloride volgens de methode van 10 voorbeeld I (e) ter verkrijging van (8S) -7-/_ 3-(acetylthio)-1-oxo-propyl_/-1,4-dioxo-7-azaspiro/^ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur.

b) (8S)—7—(3-Mercapto-1-oxooropyl)-1,4-dioxo-7-azaspjro/ 4,4 /nonaan-8-carbonzuur.

Het produkt uit deel (a) wordt gehydrolyseerd 15 met geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld II ter verkrijging van (8S)-7-(3-mercapto-l-oxopropyl)-1,4-dioxo-7-azaspi-xo/_ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur.

Voorbeeld XXVI

1-(3-Mercapto-l-oxopropyl)-4,4-dimethoxy-L-proline.

20 a) l·-/ 3-(Acetvlthio)-1-oxopropyl /-4,4-dimethoxy- L-proline.

4.4- Dimethoxy-L-proline wordt tot reactie gebracht met 3-acetylthiopropionylchloride volgens de methode van voorbeeld 25 III (d) ter verkrijging van l-/_ 3-(acetylthio)-l-oxopropyl_/-4,4-dimethoxy-L-oroline.

b) 1-(3-Mercapto-1-oxopropvl)-4,4-dimethoxy-L- proline.

Het produkt uit deel (a) wordt gehydrolyseerd met 30 geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld IV ter

verkrijging van 1-(3-mercapto-l-oxopropyl)-4,4rdiraethoxy-L-proline. Voorbeeld XXVII

(8S)-7-(4-Mercapto-l-oxobutyl)-1,4-dioxo-7-azaspiro/_ 4,4__/nonaan-8-carbonzuur.

35 79 0 9 2 4 § 36 a) (8S)-7-/ 4-(Acetylthio)-1-oxobutyl /-1,4-dioxo- 7-azaspiro/ 4,4 /nonaan-8-carbonzuur.

4.4- Ethyleendioxy-L-proline wordt tot reactie gebracht met 4-acetylthiobutyroy1chloride volgens de methode van 5 voorbeeld I (e) ter verkrijging van 8(S)-7-/_4-(acetylthio)-1-oxo-butyl_7-l ,4-dioxo-7-azaspiro/ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur b) (8S)-7-(4-Mercapto-l-oxobutyl)-1,4-dioxo-7-azaspiro/ 4,4 /nonaan-8-carbonzuur.

Het produkt uit deel (a) werd gehydrolyseerd met 10 geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld IX ter verkrijging van (8S)-7-(4-mercapto-l-oxobutyl)-l,4-dioxo-7-azaspiro-4,4_/nonaan-8-carbonzuur.

Voorbeeld XXVIII

1-(4-Mercapto-l-oxobutyl)-4,4-dimethoxy-L-proline, 15 a) l-/~4-(Acetylthlo)-1-oxobutyl /-4,4-dimethoxy- L-proline.

4.4- Dimethoxy-L-proline wordt tot reactie gebracht met 4-acetylthiobutyroylchloride volgens de methode van voorbeeld III

20 (d) ter verkrijging van l-/_ 4-{acetylthio)-l-oxobutyl_/-4,4-dimethoxy- L-proline.

b) 1-(4-Mercapto-l-oxobutyl)-4,4-dimethoxy-L-pro- llne.

Het produkt uit deel (a) wordt gehydrolyseerd met 25 geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld IV ter verkrijging van 1-(4-mercapto-l-oxobutyl)-4,4-dimethoxy-L-proline. Voorbeeld XXIX

(8S)-7-(2-Mercapto-l-oxoethyl)-1,4-dioxo-7-azaspiro£ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur.

30 a) (8S)-7-/~2-(Acetylthio)-1-oxoethyl 7-1,4-dioxo- 7-azaspiro/ 4,4 /nonaan-8-carbonzuur.

4.4- Ethyleendioxy-L-proline wordt tot reactie gebracht met acetylthioacetylchloride volgens de methode van voor- 35 beeld I (e) ter verkrijging van (8S)-7-/_ 2-(acetylthio)-l-oxoethyl_/- v 9 0 9 2 4 β 37 1, 4-dioxo-7-azaspiro/ 4,4__/nonaan-8-carbonzuur.

b) (8S)-7-(2-Mercapto-1-oxoethyl)-1,4-dioxo-7-azaspiro/ 4,4 /nonaan-8-carbonzuur.

Het produkt uit deel (a) wordt gehydrolyseerd met 5 geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld II ter verkrijging van (8S)-7-(2-mercapto-l-oxoethyl)-1,4-dioxo-7-azaspiro~

/ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur. voorbeeld XXX

1-(2-Mercapto-1-oxoethyl)-4,4-dimethoxy-L-proline.

10 a) l-/~2-(Acetylthio)-1-oxoethyl /-4,4-dimethoxy- L-prol Ine.

4.4- Dimethoxy-L-proline wordt tot reactie gebracht met acetylthioacetylchloride volgens de methode van voorbeeld III

15 (d) ter verkrijging van 1-/ 2-(acetylthio)-l-oxoethyl_”-4,4-dimethoxv- L-proline.

b) 1- (2-mercapto-1 -oxoethyl) -4,4-dimethoxy-I.-oro- line.

Het produkt uit deel (a) wordt gehydrolyseerd met 20 geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld IV ter verkrijging van 1-(2-mercapto-l-oxoethyl)-4,4-dimethoxy-L-proline. voorbeeld XXXI

(8S)-7-(3-Mercapto-2,2-dimethyl-1-oxopropyl)-1,4-dioxo-7-azaspiro-/ 4,4__/nonaan-8-carbonzuur.

25 a) (85)-7-/ 3-(Acetylthio)-2,2-dimethyl-1-oxopro-pvl /-l,4-dioxo-7-azaspjro/ 4,4 /nonaan-8-carbonzuur.

4.4- Ethyleendioxy-L-proline wordt tot reactie gebracht met 3-acetvlthio-2,2-dimethylpropionylchloride volgens de 30 methode van voorbeeld I (e) ter verkrijging van (8S)-7-/^3-(acetyl-thio)-2,2-dimethyl-l-oxopropyl_7-l,4-dioxo-7-azaspiro/ 4,4__/nonaan- 8-carbonzuur.

b) (8S)-7-(3-Mercapto-2,2-dimethyl-1-oxopropyl)- 1,4-dioxo-7-azaspiro/ 4,4 /nonaan-8-carbonzuur.

35 Het produkt uit deel (a) wordt gehydrolyseerd met

7 9 0 9 2 M

38

geconcentreerde ammoniak ter verkrijging van (8S)-7-(3-mercapto-2,2-dimethyl-l-oxopropyl)-1,4-dioxo-7-azaspiro£ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur. Voorbeeld XXXII

1- (3-Mercapto-2,2-dimethyl- 1-oxopropyl) -4,4-dimethoxy-L-proline.

5 a) l_-£ 3- (Acetylthio) -2,2-dimethyl-l-oxopropyl /- 4,4-dimethoxy-L-proline.

4.4- Dimethoxy-L-proline wordt tot reactie gebracht met 3-acetylthio-2,2-dimethylpropionylchloride volgens de methode van 10 voorbeeld III (d) ter verkrijging van 1-/ 3-(acetylthio)-2,2-dimethyl-1-oxopropyl_/-4,4-dimethoxy-L-proline.

b) 1-(3-Mercapto-2,2-dimethyl-l-oxopropyl)-4,4-dimethoxy-L-proline,.

Het produkt uit deel (a) wordt gehydrolyseerd met 15 geconcentreerde ammoniak volgens de methode vein voorbeeld IV ter verkrijging van 1-(3-mercapto-2,2-dimethyl-l-oxopropyl)-4,4-dimethoxy-L-proline,

Voorbeeld XXXIII

/ 7 (S),8S_7-7-(3-Mercapto-2-ethyl-l-oxopropyl__/-l,4-dioxo-7-azaspiro-20 /""4,4_/nonaan-8-carbonzuur.

a) /~7(S),8S /-7-/ 3-(Acetylthio)-2-ethyl-1-oxopropyl /-1,4-dioxo-7-azaspiro/ 4,4 /nonaan-8-carbonzuur.

4.4- Ethyleendioxy-L-proline wordt tot reactie ge-25 bracht met D-3-acetylthio-2-ethylpropionylchloride volgens de methode van voorbeeld I (e) ter verkrijging van f_ 7 (S) ,8S_/-7-/_ 3- (acetylthio) -2-ethyl-l-oxopropyl_/-l ,4-dioxo-7-azaspiro/_ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur.

b) /~~7 (S) ,8S 7-7-(3-Mercapto-2-ethyl-1-oxopropyl)- 30 1,4-dioxo-7-azaspiro/ 4,4 /nonaan-8-carbonzuur.

Het produkt uit deel (a) wordt gehydrolyseerd met geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld II ter verkrijging van £ 7(S),8S_/-7-(3-mercapto-2-ethyl-l-oxopropyl)-l,4-dioxo-7-azaspiro£ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur.

35 Voorbeeld XXXIV

7909246 39 (S) -1- (3-Mercapto-2-ethyl-l-oxopropy3>-4,4-dimethoxy-L-proline- a) (S)-l-/~3-(Acetvlthio)-2-ethyl-l-oxoprooyl /- 4,4-dlmethoxv-L-proline.

5 4,4-Dimethoxy-L-proline wordt tot reactie gebracht met D-3-acetylthio-2-ethylprooionylchloride volgens de methode van voorbeeld III (d) ter verkrijging van (SJ-lV 3-(acetylthio)-2-ethyl-1-oxopropy1_/-4,4-dimethoxy-L-proline.

b) (5)-1-(3-Mercapto-2-ethyl-1-oxonropvl)-4,4- 10 dinethoxy-L-proline.

Het produkt uit deel (a) wordt gehydrolyseerd met geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld IV ter verkrijging van (S)-1-(3-raercapto-2-ethyl-l-oxopropyl)-4,4-dimethoxy-L-proline.

15 Voorbeeld XXXV

f_ 8S_/-7- (3-Mercapto-2-trifluormethyl-1 -oxooropyl) -7-aza-1,4-dithia-spiro/ 4,4-/nonaan-8-carbonzu\ir.

a) 3l·-/ / (4-Methoxy)fenylmethyl /thio /-2-tri-20 fluormethylnropionylchloride.

Een zuiver mengsel van l-trifluormethvlacrylzuur (3,9 g) en 4-methoxybenzylthiol (4,3 g) wordt 1 uur bij 100-110° geroerd. Het mengsel laat men tot kamertemperatuur afkoelen en de vaste stof wordt omgekristalliseerd uit cyclohexaan, waardoor 25 3-/ / (4-methoxy)fenylmethyl_/thio_/-2-trifluormethylpropionzuur met smot. 72-74° wordt verkregen.

Behandeling van dit zuur met thionylchloride levert 3-/ [_ (4-methoxy)fenylmethyl_7thio_/-2-trifluormethylpropionyl-chloride.

30 b) f_ 8S /-7-/ 3_-£ (_ (4-Methoxy) fenylmethyl /thio /- 2-trifluormethyl-l-oxopropyl /-7-aza-1,4-dlthiaspiro/ 4,4 /nonaan-8-carbonzuur.

Het 3-/ /_ (4-methoxy)fenylmethyl_/thio_/-2-tri-fluormethylpropionylchloride uit deel (a) wordt tot reactie gebracht 35 met 4,4-ethyleendithio-L-proline volgens de methode van voorbeeld IX

7900245 40 (d) ter verkrijging van /_ 8S__/-7-/ 3-/ / (4-methoxy)fenylmethyl_/-thio_7-2-trifluormethyl-l-oxopropyl_/-7-aza-l,4-dithiaspiro/_ 4,4_/-nonaan-8-carbonzuur.

c) /_ 8S /-7- (3-Mercapto-2-trlfluormethyl-l-oxo-5 oropyl)-7-aza-l,4-dithiasoiro/ 4,4 /nonaan-8-carbonzuur.

Het produkt uit deel (b) wordt vermengd met tri-fluorazijnzuur en anisol onder stikstof. De oplosmiddelen worden onder vacuum verwijderd waardoor als residu wordt verkregen f_ 8S__/- 7- (3-mercapto-2 -trifluormethyl-1 -oxopropyl) -7-aza-1,4-dithiaspiro- 10 /_ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur.

Voorbeeld XXXVI

/""3S_/-7-(3-Mercapto-2-methylthip-1-oxopropyl)-7-aza-1,4-dithiaspiro-(_ 4,4_/nonaan-8 -carbonzuur.

15 a) 3_-/ / (4-Methoxy)fenylmethvl /thlo /-2-methyl- thioproplonylchloride« 3-/_ (4-methoxy)fenylmethyl_/thio_/-2-methyl-thiopropaanzuur bereid volgens de methode van voorbeeld X in Amerikaans octrooischrift 4.116.962 wordt behandeld met thionylchloride 20 ter verkrijging.van 3-/_ f_ (4-methoxy)fenylmethyl_/thio_/-2-methyl-thiopropionylchloride.

b) (_ 8S /-7-/ 2“/ /. (4-methoxy) fenylmethyl /-thio /-2-methylthio-1-oxopropyl 7-7-aza-l,4-dithiaspiro/ 4,4 /nonaan- 8- carbonzuur.

25 Het 3-/ /"(4-methoxy)fenylmethvl_/thio_/-2-methyl- thiopropionylchloride uit deel (a) wordt tot reactie gebracht met 4,4-ethyleendithio-L-proline volgens de methode van voorbeeld IX (d) ter verkrijging vein /~8S_/-7-/_ 3-/_ /_ (4-methoxy) fenylmethyl_/thio_/-2-methylthio-l-oxopropyl_/-7-aza-l,4-dithiaspiro// 4,4_/nonaan-8-30 carbonzuur.

c) /_ 8S /-7-(3-Mercapto-2-methylthio- 1-oxopropyl)* 7-aza-l,4-dithiaspiro/ 4,4 /nonaan-8-carbonzuur.

Het produkt uit deel (b) wordt vermengd met tri-fluorazijnzuur en anisol onder stikstof. De oplosmiddelen worden 35 onder vacuum verwijderd, waardoor als residu wordt verkregen 7909245 41 ,/ 8S_/-7-(3-raercapto-2-methylthio-l-oxonropyl)-7-a2a-i,4-dithiaspiro-(_ 4,4__/nonaan-8-carbonzuur.

Voorbeeld XXXVII

/ 7(S),8S 7-7-(3-Mercapto-3-methyl-l-oxopropyl)-1,4-dioxo-7-azaspiro-5 /_ 4,4_/nonaan-8-carbonzunr.

a) [_ 7(S),8S /-7-/ 3- (Acetylthio) -3-methyl-1-oxo-oropyl /-1,4-dioxo-7-azaspiro/ 4,4 /nonaan-8-carbonzuur.

4,4-EthyleendiojQr-L-proline wordt tot reactie ge-10 bracht met D-3-acetylthio-3-methylpropionylchloride volgens de methode van voorbeeld I (e) ter verkrijging van £ 7(S),8S_/-7-/ 3-(acetylthio) -3-methyl-1-oxonronyl_/-l,4-dioxo-7-azaspiro/^ 4,4_/nonaan-8-car-bonzuur.

b) /~7(S),8S /-7-(3-Mercapto-3-methvl-l-oxopropyl)- 15 1,4-dioxo-7-azaspiro/ 4,4 /nonaan-8-carbonzuur.

Het produkt uit deel (a) wordt gehydrolyseerd met geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld II ter verkrijging van /"7(S),8S_/-7-(3-mercapto-3-methyl-l-oxopropyl)-l,4-dioxo-7 -azasniro/-"4,4__/nonaan-8-carbonzuur.

20 Voorbeeld XXXVIII

(S)-1-(3-Mercaoto-3-methyl-1-oxopropyl)-4,4-dimethoxy-L-proline.

a) (S)-l-/~3-(Acetylthio)-3-methvl-l-oxopropyl 7~ 4,4-dimethoxy-L-proline.

25 4,4-Dimethoxy-L-proline wordt tot reactie gebracht met D-3-acetylthio-3-methylpropionylchloride volgens de methode van voorbeeld III (d) ter verkrijging van (S)-l-/ 3-(acetylthio)-3-methyl-1-oxopronyl_7-4,4-dimethoxy-L-proline.

b) (S)-1-(3-Mercapto-3-methyl-1-oxopropyl)-4,4-30 dimethoxv-L-proline.

Het produkt uit deel (a) wordt gehydrolyseerd met geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld IV ter verkrijging van (S)-l-(3-mercapto-3-methyl-l-oxopropyl)-4,4-dimethoxy-L-proline.

730924« 35 42

Voorbeeld XXXIX

1-(3-Mercapto-l-oxoDropyl)-4,4-dimethylthio-L-proline.

a) 4-Keto-L-prollne, hydrobromide♦ 5 Aan 4,0 g (0,015 mol) N-carbobenzyloxy-4-keto-L- proline worden 20 ml broonwaterstof in azijnzuur (30-32 %) toegevoegd, Het mengsel wordt herhaalde malen in een tijdbestek van 8 min. gezwenkt. Aan het einde van deze periode (het bruisen heeft o opgehouden) wordt de geel-oranje oplossing afgedekt met 25 ether, 10 en het rubberachtige produkt wordt getritureerd. De ether wordt weggeworpen en de verkregen plakkerige vaste stof wordt getritureerd met verse ether en tenslotte met 50 ral acetonitrile, waardoor 4-keto- L-proline, hydrobromide wordt verkregen als een kristallijne vaste stof in een hoeveelheid van 2,7 g (85 %), met smpt. 153-155° (ontl.), 15 / cx -49° (c, 1 % in water).

— — D _ _ b) 1~/~3 -(Acetvlthio)-1-oxopropyl /-4-oxo-L-proline. Een geroerde oplossing van 4,1 g (0,0195 mol) 4-keto-L-proline, hydrobromide in 50 ml water wordt gekoeld tot 5° en in gedeelten behandeld met vast natriumcarbonaat (het schuimen 20 wordt in de hand gehouden door toevoegen van een paar druppels ether) tot pH 8,0 (ongeveer 2 g nodig). Daarna wordt onder voortgezet roeren en koelen een oplossing van 3,5 g (0,012 mol) 3-acetylthiopropanoyl-chloride in 5 ml ethylacetaat in gedeelten toegevoegd door middel van een pipet# terwijl de pH op 7,0-8,0 wordt gehouden door druppelsge-25 wijze toevoegen van 25 %-ige natriumcarbonaatoplossing (ongeveer 10 ml). Na omstreeks 10 min. stabiliseert de pH zich op 8,0-8,4. Na voortgezet roeren en koelen gedurende in totaal 1 uur wordt de oplossing gewassen met ethylacetaat (2 x 50 ml), afgedekt met 50 ml ethylacetaat, geroerd, gekoeld, voorzichtig aangezuurd met geconcentreerd 30 zoutzuur tot pH 2,0, verzadigd met natriumchloride en de lagen worden gescheiden. De waterige fase wordt geëxtraheerd met aanvullend ethylacetaat (3 x 50 ml),de gecombineerde organische lagen worden gedroogd (MgSO ) en het oplosmiddel wordt verdampt, tenslotte bij fr 0,2 mm, ter verkrijging van 4,8 g ven een geel-oranje glasachtig 35 residu. Dit residu wordt opgelost in 35 ml ethylacetaat en behandeld 7909245 43 met een oplossing van 3,5 g dicyclohexylamine in 5 ml ethylacetaat. Bij enten en wrijven scheidt zich kristallijn 1-V 3-(acetylthio)-1-oxopropvl 7-4-oxo-L-prolinedicyclohexylaminezout af, dat na een nacht lang koelen 2,7 g weegt (vrijwel kleurloos), smpt. 191-193° 5 (ontl.}, />_7f -24° (c, i % in CHCl3).

Dit dicyclohexylaminezout wordt omgezet in het vrije zuur met behulp van kaliumbisulfaat op de wijze als beschreven in voorbeeld I (e) ter verkrijging van 3,7 g 1-/ 3-(acetylthio)-l-oxopropyl_7-4-oxo-L-proline als een bleekgele glasachtige vaste stof. 10 c) 1 -/~~3- (Acetylthio) -1 -oxopropyl /-4,4-dimethvl- thio-L-proline.

Het 1-/”3-(Acetylthio)-l-óxopropyl_/-4-oxo-L-proline wordt tot reactie gebracht met methylthiol volgens de methode van voorbeeld IX (a) ter verkrijging van 1-/ 3-(acetylthio)-l-oxo-15 t>ropyl_7-4,4-dimethylthio-L-proline.

d) 1-(3-Mercaoto-1-oxopropyl)-4,4-dimethylthio-L- proline.

Het produkt uit deel (a) wordt gehydrolyseerd met geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld II ter 20 verkrijging van l-(3-mercapto-l-oxopropyl)-4,4-dimethylthio-L-proline. Voorbeeld XL

Γ2 (S),3S_7-2-(3-Mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-8,8-dimethyl-6,10-dioxo-2-azaspiro/_4,5_/decaan-3-carbonzuur.

25 a) /~2(S),3S 7-2-/“ 3-(Acetylthio)-2-methyl-l-oxo- oropvl 7-8,8-dimethvl-6,10-dloxo-2-azaspiro/~¢,5 7decaan-3-carbonzuur.

Met gebruikmaking van de methode van voorbeeld I maar met toepassing van 2,2-dimethylpropaan-l,3-diol in plaats van het ethyleenglycol in deel (c) verkrijgt men / 2 (S) ,3S__/-2-/ 3-(ace-30 tylthio)-2-methyl-1-oxopropyl_7-8,a-dimethyl-6,10-dioxo-2-azaspiro- / 4,5_/decaan-3-carbonzuur, b) /~2(S),3S 7-2-(3-Mercapto-2-methyl-1-oxopropyl)- 8,8-dlmethvl-e,10-dloxo-2-azaspiro/~4.5 7decaan-3-carbonzuur.

Het produkt uit deel (a) wordt gehydrolyseerd met 35 geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld II ter 7900246 i 44 verkrijging van / 2(S),3S_/-2-(3-raercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-8,8-dimethyl -6 , 10-dioxo-2-azaspiro/_ 4,5_/decaan-3-carbonzuur.

Coorbeeld XLI

/ 7(S),8S_7-7-(3-Mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-i,4-dioxo-7-azaspiro-5 (_ 4,4_/nonaan-2-methyl-8-carbonzuur.

a) N-Carbobenzyloxy-4,4- (1-aethylethyleendioxy) - .. L-proline, methylester.

Een geroerd mengsel van 8 g (0,025 mol) N-carbo-10 benzyloxy-4,4-dimethoxy-L-proline, methylester uit voorbeeld III a), 2,4 g (0,032 mol) propaan-1,2-diol, 0,4 g p-tolueensulfonzuur mono-hydraat en 400 ml tolueen worden onder terugvloeiing verwarmd (1ΙΟΙ 12°). De terugvloeisnelheid wordt zodanig geregeld dat langzaam vloeistof overdestilleert door middel van een Dean-Stark buis in een 15 gekalibreerde cilinder. Nadat 80 ml oplosmiddel zijn verzameld wordt een gelijk volume vers oplosmiddel aan de reactiekolf toegevoegd door een vultrechter. Deze methode van verwijderen en vervangen van 80 ral oplosmiddel wordt 4 keer herhaald over een totale terugvloei-periode van 1,25 uur.

20 Na een nacht lang staan wordt het mengsel gewassen met water (2 x 100 ml), de gecombineerde wassingen wordt teruggeëxtraheerd met 100 ml tolueen, de gecombineerde organische lagen worden gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel wordt verwijderd op een roterende verdamper, tenslotte bij 0,2 mm, waardoor 8,2 g (99%) 25 N-carbobenzyloxy-4,4-(l-methylethyleendioxy)-L-proline, methylester worden verkregen als een geel visceuze olie.

b) N-Carbobenzyloxy-4,4-(1-methylethyleendioxy)- L-proline.

Het ruwe methylesterprodukt uit deel (a) (8,2 g, 30 0,025 mol) wordt opgelost in 80 ml methanol, druppelsgewijze bij -1° tot +4° behandeld met 18 ml (0,036 mol) 2n natriumhydroxyde, 1 uur bij 0° bewaard en daarna een nacht lang bij kamertemperatuur.

Na verwijderen van ongeveer de helft van het oplosmiddel op een roterende verdamper wordt de oplossing verdund met 150 ml water, gewassen 35 met 100 ml ether (wasvloeistof weggeworpen), aangezuurd onder koelen 7909248 45 net 6,3 ml 1:1 zoutzuur tot pH 2 en geëxtraheerd met ethylacetaat (4 x 75 ml). De gecombineerde extracten worden gewassen met 50 ml verzadigd natriumchloride, gedroogd (MgSC>4) en de oplossing wordt ingedampt, waardoor 8 g van een rood-oranje visceuze olie worden 5 verkregen. Deze olie wordt opgelost in 50 ml acetonitrile, opgewarmd geroerd en behandeld met 3,8 g 1-adamantaanamine. Het vaste zout scheidt zich snel af. Na een nacht lang koelen wordt het materiaal gefiltreerd, gewassen met koude acetonitrile en met ether en in vacuum gedroogd waardoor 10,3 g ruw adamantaanaminezout worden ver-10 kregen met smpt. 202-204° (ontl.), / -13° (c, 1 % in methanol).

Na titreren met 50 ml kokende acetonitrile en koelen woog het bleek zeemkleurige vaste zout 9,4 g; smpt. 202-204° (ontl.), [_ -13° (c, 1 % in methanol).

Het bovengenoemde adamantaanaminezout wordt ge-15 suspendeerd in 40 ml ethylacetaat, geroerd en behandeld met ln zoutzuur. Nadat twee heldere lagen zijn verkregen worden deze gescheiden, de waterige fase wordt geëxtraheerd met aanvullend ethylacetaat (3 x 40 ml), de gecombineerde organische lagen worden gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel wordt verdampt, tenslotte bij 0,2 mm en 40°, waardoor 20 5,8 g (72 %) N-carbobenzyloxy-4,4-(1-methylethyleendioxy)-L-proline worden verkregen als een geel-oranje visceuze stroop.

c) 4,4-(1-Methylethvleendioxy)-L-proline.

Een oplossing van het bovengenoemde N-carbobenzyl-oxy-4,4-(1-methylethyleendioxy)-L-proline (5,6 g, 0,017 mol) in 25 150 ml 2:1 methanol-water wordt behandeld met 1,6 g 5 % palladium- koolstof katalysator en gedurende 5 uur onder 3 atm. waterstof geschud. De katalysator wordt afgefiltreerd onder stikstof,gewassen met methanol en de gecombineerde filtraten worden verdankt, tenslotte bij 0,1-0,2 mm, waardoor een kristallijn residu wordt verkregen.

30 Dit laatste wordt gesuspendeerd in 200 ml methanol en de verdamping wordt herhaald. Het vaste residu wordt onder ether gewreven (de verdamping wordt weer herhaald), waardoor 3,0 g (94 %) worden verkregen van een bleek zeemkleurig 4,4-(l-methylethyleendioxy)-L-pro-line met snot. 219-221° (ontl.);·voorafgegaan door geleidelijk donker 35 worden en sinteren; /. -22° (c, 1 % in 1:1 ethanol-water).

7809248 46 d) /_ 7 (S) ,8S /-7-/ 3- (Acetylthio) -2-methyl» 1-oxo-propyl /-1,4-dioxo-7-azaspiro/ 4>4 /nonaan-2-methyl-8-carbonzuur.

Het 4,4-(1-methylethyleendioxy)-L-proline (2,8 g, 0,015 mol) wordt tot reactie gebracht met 3,0 g (0,017 mol) D-3-5 acetylthio-2-methylpropionylchloride in 40 ml water volgens de methode van voorbeeld I (e) waardoor 5,0 g worden verkregen aan visceus geel produkt. Dit laatste wordt behandeld met 2,8 g dicyclohexylamine in 45 ml ethylacetaat waardoor 4,2 g worden verkregen van een vrijwel kleurloos / 7(S),8S_/-7-/ 3-(acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl__/-l ,4-10 dioxo-7-azaspiro/_ 4,4__/nonaan-2-methyl-8-carbonzuur, dicyclohexyl- aminezout; smpt. 170-172° (s. 168°); /a_/^ -58° (c, 1 % in ethanol). Na kristalliseren uit 12 ml acetonitrile weegt het kleurloze vaste zout 3,85 g (51 %), smpt. 170-172° (s. 168°); /”of/J5 “57° (c, 1 % in ethanol).

15 Analyse berekend voor ^^21^63 ’ C12H23N: C 60,90; B 8,65; N 5,46; S 6,26; gevonden; C 60,93; H 8,72; N 5,43; S 6,35.

Het dicyclohexylaminezout wordt omgezet in het vrije zuur door 3,8 g te suspenderen in ethylacetaat en te behandelen 20 met 45 ml 10 %-ig kaliumbisulfaat en te roeren tot twee lagen zijn verkregen. Na het scheiden van de lagen wordt de waterige fase geëxtraheerd met ethylacetaat (4 x 40 ml), de organische lagen worden gecombineerd, gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel verdampt, waardoor 2.5 g (51 %) worden verkregen van een kleurloze vaste stof [_ 7 (S) ,8S__/- 25 7 -f~3- (acetylthio) -2 -methyl -1 -oxopropyl_/-1,4-dioxo-7-azaspiro/_ 4,4_/- nonaan-2-methyl-8-carbonzuur, smpt. 65-68° (s. 48°); /_ -100° (c, 1 % in ethanol).

e) /~7 (S),8S /*—7— (3-mercapto-2-methyl- 1-oxopropyl) - 1,4-dloxo-7-azaspiro/~~4,4 /nonaan-2-methyl-8-carbonzuur.

30 Het produkt uit deel (d) wordt gehydrolyseerd met geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld II waardoor 2.05 g /~7(S),8S_7-7-(3-mercapto-2-methyl-1-oxopropyl)-1,4-dioxo-7-azaspiro/~4,4 /nonaan-2-methyl-8-carbonzuur worden verkregen als een visceuze kleurloze olie, /^0(^/^-57° (c, 1 % in ethanol).

35 7909245 47

Voorbeelden XLII-LXXV

Overeenkomstig de methode van voorbeeld XLI wordt de dimethoxy-gesubstitueerde verbinding uit kolom I (of zijn alkyl-ester) behandeld met het diol of dithiol uit kolom II waardoor het 5 spiro-tussenprodukt uit kolom III wordt verkregen. Verwijdering van de N-beschermingsgroep (en de alkylestergroep) en acylering met het acylchloride uit kolom IV levert het produkt van kolom V/ dat gehy-drolyseerd kam worden tot het produkt uit kolom vi.

Kolom I Kolom II

10 Formule 9 waarin R = H; Rj, R2 = Formule 11

CH3; Xj, X2 » O

Kolom III Kolom IV

Formule 12, R * H Formule 29

KOlom V

15 Formule 30 KOlom VI

formule 31.

20 Q 9 2 4 6 48 l

CN

a u

m m ro fo /λ, I W

cd a a a a Γ /~\ | _/ a u u u u KJJ L=/ g Η Η H *-l a a a a a a a° a a a a a a m c*i m m co n b a a a a «ου ο o o a a o

CN

a m u a in m m » O a cm a a m cn \ I cm a u u a a \ a—o—o a c> o—o a cm i-i. u u—w a a I \ / a \ / °N/ 0-0« V 0-0«

% v-OB λ I «—o—o« /\ I

s V*o * u o—w a u—o a ύ v? u—o a o—o a O cn m cn cs n in cn cn t, a a a a aaaa

i—( 1-( 1-1 1-( 1—ί iH

i—i iH iH 1—4 1—ί i—( Ό

H

(I) W H

φ Η Η > Η H

Λ Η H W > > > m a ι-ί a a a a o x x x x x x £ 7809246 49 t

CM

33 Φ? Ó , ώ - ω Λ °tr C" [OJ »

05 Ο E Ο Vs/' U

0 a* _ g ^ S3 Ν Ν "* 53 S3 BS I ® * ρ>° 53 S3 Ο Β Β S3 η η ”

m t, E _ „ S

PS ο S3 ο E *** O

e @ in cm cm f

53 53 S3 <N

<N O—O E U ® Ξ sf1 af1 V / B- o—o a I „

III I a~\ I I

δ C—to E C—O E U—O E o—o E 0—0 E 0 — 0 E

0 CM CM Cl JN CJ CM

ft E E E ** E * 0* ,-t *-< -η «Η »1 ft *-l i-i <p-1 ** -1 tj

rt H

β) H M

Ο Η X ., H

η > Η H ΰ δ S x S' s 3 ? ο η ο ^ λ * * ν v %j ?„ — 50 Λ μ Φ ± \ ΟI m Ο G m 00 XS <1* J 03 _,/ jn w

ο3 Γ ο I 2 υ —' Ε C

Ο Μ

V

a .Η ιΗ ' it Ν *-· Ν ρΓΓ 03 a 03 I S3 03 03° Κ S3 S3 S3 S3 03 η m η ff) η η S3 X 03 S3 S3 _ 03 U CJ G G G 03 η f-i S3 rn r C· è ” S3W S3N ^ cs

—/ GUI S3 I

I T l cs G—O S3 cs cs S3 S3 f' / S3

S3 G—O S3 G—W S3 cs cn / G

sH CJ , r S3 33 ™ β S3-G-0 S3 Bc/ „«/ T Ö-<0)”Ö-.G G-O S3 3 U\ °\ 5-0 S3 \ ' a « \ \ I G—O 03 ' B G—O S3 G — O S3 G--W 03 G — O S3 CS G — O S3 O cs cs cs cs 03 cs

Cu S3 S3 SS S3 B3

Jj1 1-1 1-1 ι-< i-l i-t iH

P j »—! iM 1—1 1—1 i-l 1-1

•O

H

0) H

(U Η H

Λ > Η Η Η X

sa a a . .5 a a :> 7909246 51

CM

a

η U

S cm y ΙΟ J ® © m . (éj V K rl c CO I Β Β c*i ® I— / —/ r Γ* os h a u * o u—' —' ° g rH -4 ,-4 -H .-4 «* a b a β b a ssaa g0 κ Kaaa a kbb η m η n rn co ci m a S3 a a a a ®

cuo ο ο u o o - ° E

i" a" a a" a =" fOJ ρΓ« u o—o o-w Λΐ 9 o—o ►! -°4 — bT3 ^ jS1 λ- / / 53 S3 S3 a / / w O-w a o-c 0-0 O-w c/ </ o-w 0-0 cm 5 I I I I e 6 I I S-Dx 1 Hr”* "b” Hr° Hr” Hr° H7" Hr° Hr° Hr° £ S3 S3 a a a . a a a ·*

¢-.-4 «-Ι CM CM CM «-* *^t-iCM

g, —i CM *-· ^ ^-1 CM CM CM «-1

2 H

V, η Η H

S W H > Η H £ Δ WHHH > > > > ÖSSSS3 3 SS3 £ ’9 0 92 4 6 52 ΓΟI η m η η co Ε Ε ΕΠ SJ Ο Ε ο ο ο Ο Ο ο Μ α) g Η «Η Η Η «Μ «* I & ® W » 53 \0 Ε ffi Ε Ε Ε 53 33 η u“>

Ε η en η BS

η υ ' S3 Ε Ε 04 ε ε ιο υ υ υ ο Γ. Γο © S ι" *=/ ι I η CN (Ν <Ν Ε DG Pt, Ε Β Ε η CM υ—ο Ο Ο Ο Ο

<η Β Β Ε I I I I I

υ ο*» Ο ΕΕΕΕΕΕΕΕ %. / 0—0 Ο — W 0—0 0—0 α» / β * ι t ι 1 / \ , Γ I J »ι J « δ Ο 0—0 Ο 0—0 O—W 0—0 0—0

Ο ΓΟ Μ ΓΟ «Ν CN CN

Eu Ε Ε Ε Ε Ε Ε Ε φ* ΟΙ W «Μ ^ Μ & «Η — CN ΓΊ *-> —

V

Η Η β) Η Η α) X Η Η Η £> Λ Η X X X! X Η sa s s a s a £ 7909248 53

Voorbeelden LXXV-CXXIV

Overeenkomstig de methode van voorbeeld XLI wordt de di-gesubstitueerde verbinding uit kolom I (of zijn alkylester) behandeld met een xnol.equiv. van de alcohol of het thiol uit kolom 5 (II, waardoor de verbinding als vermeld in kolom III wordt verkregen. In plaats daarvan verkrijgt men bij behandeling van de dimethoxy-gesubstitueerde verbinding met formule 1 (of zijn alkylester) met een molaire overmaat van de alcohol of het thiol uit kolom II de di-gesubstitueerde verbinding uit kolom IV. Verwijdering van de N-be-10 schermingsgroep (en de alkylestergroep) uit het tussenprodukt van hetzij kolom III of kolom IV gevolgd door acyleren met het zuurchlo-ride uit kolom V levert het produkt uit respectievelijk kolom VI en kolom VII. Deze verbindingen kunnen dan worden gehydrolyseerd tot de produkten uit respectievelijk kolom VIII en IX.

15 Kolom I Kolom II

Formule 7, R =* H Formule 8

Kolom III Kolom IV

Formule 9 Formule 10 20

Kolom v Kolom vi

Formule 32 Formule 33

Kolom VII Kolom VIII

25 Formule 34 Formule 35

Kolom IX Formule 36 30 79 0 824 6 54 μ Ε , Ο ' Τ cm <s /\ Ε S3 * S- β" D ί U β" @ ^ C” L° £ Ρ Ρ Μ ^

4) (U

g ,-Ι (\| *Η τ* Ν «Η ^-Ί >-Ι Ν -Η "-·

θ'* Β Ε Β Β Β I rtBE I BB

m Β ce°fflö:wVw!BWöswte«tc co mm mm m n m Β

a Β EB Β Β EO

co ο Ο Ο Ο Ο Ο O W

« IIBIISBIBIBI I

η Β ο η ι-t 1 m Β Ο σι W _ ^èèfèl? c- Ρ tn Β *r τ I I cm I jn I ™

σιΕ m O m Μ E cjB CNE

m E csOI BEE. OBOE O

BOO ΐ-ΡΟΟΟγΟγΟγ

I I l-HI I I I I I I · I

cmw w I ο ο ο ο ο ο o 9 9 X I i Ο I I 1 I i I * 1 > mm mm mm m m mm m m _beeeeebbbbb e «000000000009

• 1 1 11 I I I I I I I I

iH . Ο Ο ΟΟ Ο Ο Ο Ο Ο Ο Ο O

Xllll I I I I I ! I I

0^«-l *—i r-t ▼-( «Η r-l *-! *—< <H »H *-( »-f ρ, ♦H »-l ; τ—< «-Ι <r« i-t *H tH *H «"· «Η .

Ό H W

Η Η Η Η Η f> H

(U Η Η Η X Η Η Η H > S*

<D>>>>HXXXXXXX Λ X X XX X X..X X X X X X

gaaaaaaaaaaaa 79 0 9 2 4 5 55 Μ %

CM

Κ Ο ]

ΐ é Β" êu" f s"s" (ο) s" (Ο) is" U

a δ ίη ® g „H <-l Ν ^ rtT-l »-< ·Η CN 1-ιΝ·^ η Ο^ΕΕΙ Βκ5«®®®ιΚ m ffi a® a a a bbssüVkkbkk a" "" m b" (f g" g" κη V V a VVkVVkikk π°Π<ο} 0--- , i β L/ t=/ u e. H S B B a .« v. '« - v, :- 1:- :- f ? ? ? ? V V V ¥ V V V Ϋ > ° ° ° $?<??<? 9??? in in m

„ a" Bn a” B« a” K<n bP a" a" > pP pP

f V V V V V V V V V V V V

>ooo ooo oooooo jj* *·( t—( τΗ ,Η,Η,-Ι ¢, .M ^ »1 — — — ’i W — — ^ '

H

ίο Η H ._,

rH Η Η N μ. LJ

2 ϊΐ $3 S Η Η > Η Η H

I ggg oüouvtttt g 3*3 8*χ*χ**** § 7903248 56

J

# es 1 an cn V 1 (Q) 8 S a D> fol ro 8 ro ro ro cn I w B" 8 8 δ 0 ^ 1=/ ^ o

U

cu g t-λ *-t *-ι N »-t βΓ’’ K a 8 B .. B I Ε 8 Β Β 8 x° a bbb bebbbeb ro CO ro ro a co ro K a ro a o fc b

co O U fc OWL! O

« I BIBOBI I IBl ro

B

8

c @ x @ ©f Ea/ C° lS

„fly »r e f f sT =f g M

υΜυυτυυ υυυυτ CNO w wwwwwwwww

x I I I I i I I I I I I

mm in co roa coma ro ro ro ro 8 ^ a a cn a b cn a b a a a ο ουουυοοουο '^ό όόόόόόόόόό

XI I I I I I. I I I I

(¾ »-l «-Ι *H *—! *H . *H »H <-< 1-1 Ψ-Ι 1-1

V

'φ H

JS fi η B > „ - ö Ö X

ο ^ υυουυδδδδο :> 79 0 9 2 4 5 57 m n en n uT n m ^ J*' J*1 « g § S 6 J"(OJo o S e δ 5 S 8 fff* κι KKSStas® i kk

K^KKBJSÖWSS** KKK

en η m m m n K BS K Cu ® p

n U U 9 V te V « a V

K K 53 I I ffi * 1 * ' ~ 1 fi §) @ | C-D° |(/ζ' f ΙΛ X 2· X 1 i* > > (Γ k"

«üuvrvvVVV TiV

'« ά ά . é O 9 9 9 « « w o ? X l l l i I I I 1 1 lil m rn m η η η η ™ Μ ^ ^T1

»-« K 5 K K 53 B ® ® 53 ® K

kuuccuu®99 999 '-óiiiii&oi c ° <?

Xii i I I I I 1 1 1 11 T* CV CS *-* <N <*1 CMCS-<

Ό H

0 HH> HHH £ H

Λ HHHH>>>> Q 3 οαυδυυαυοα u o a £ ·;' 9 G 3 2 4 5 58 ω Γθ| bT «art « u u

g rH rH

«3* tó e e _ e

VO

«KEK

n ro m

E BE

M U ü U

K III

CM

E

U

ê

§ V

CM CM <*ï CM E E fa

K O O O

I III

CM O O CO

X I II

m η n

rt E E E

« u u u I lil ^ o o o

XI II

&< CM —<

D( (N H CM

Ό

Η H

O) Η H >

<U Η Η H

A XXX

8 ö ö δ :> 59

Voorbeeld CXXV

(S,S,S,S)-7,7'-/"bithiodi(2-methyl-1-oxopropaan-3,l-diyl)_/di£ 1,4-dioxa-7-azaspiro/_4,4_/nonaan-8-carbonzuur_/ 5 /-7 (S),8S_7-7-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-

l,4-dioxo-7-azaspiro/ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur (3,0 g, 0,0109 mol) uit voorbeeld II wordt opgelost in 80 ml water en de pH wordt ingesteld op 6,5 met In natriumhydroxyde. Aan deze geroerde oplossing worden druppelsgewijs in totaal 11 ml 0,5 molaire joodoplossing in 10 95 % ethanol (6,34 g jood/50 ml oplossing) toegevoegd terwijl de pH

op 5,5-6,5 wordt gehouden met ln natriumhydroxyde. Na 15 min. wordt een spoor overmaat jood verwijderd met verdund natriumthiosulfaat en de oplossing wordt geconcentreerd tot omstreeks 50 ml, gekoeld en aangezuurd met 1:1 zoutzuur. Methyleenchloride (30 ml) wordt toege-15 voegd en het mengsel wordt verzadigd met natriumchloride, geroerd en de lagen worden gescheiden. De waterige fase wordt geëxtraheerd met aanvullend methyleenchloride (3 x 20 ml), de gecombineerde organische lagen worden gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel verdampt, tenslotte bij 0,2 mm. Het broze residu wordt onder ether gewreven en de verdam-20 ping wordt herhaald, waardoor 2,8 g aan bleekgeel vast residu worden verkregen. Het materiaal wordt opnieuw opgelost in 50 ml methyleenchloride, gewassen met water (3 x 10 ml), de gecombineerde waterige lagen worden teruggeëxtraheerd met 20 ml methyleenchloride en de gecombineerde lagen worden gedroogd (MgSO^). Verdampen en tritureren 25 met ether zoals hierboven beschreven levert 2,2 g (73 %) van de roomkleurige amorfe vaste stof (S,S,S,S)r7,7'V dithiodi(2-methyl-l-oxo-propaan-3,1 -diyl) __/di/_ 1,4-dioxo-7-azaspiro/_ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur_/; smpt. 61-63° (schuimen), (s. 50°), / cx_/^6 -92° (c, 1 % in ethanol).

Analyse berekend voor C22H32N2°10S ‘ H2°: 30 C 46,63; H 6,05; N 4,94; S 11,31; gevonden: C 46,52; H 6,29; N 4,63; S 10,96,

Voorbeeld CXXVI

(S,S,S,S)-7,7'-f~Dithiodi(2-methyl-oxopropaan-3,1 -diyl)_7di/_ 7-aza- 1,4-dithiaspiro/~4,4_/nonaan-8-carbonzuur_/.

7902248 35 60 /”"7(S) ,8S_T-7-(3-Mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-7-aza-1,4-dithiaspiro/_ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur uit voorbeeld X wordt tot reactie gebracht met jood volgens de methode van voorbeeld CXXV ter verkrijging van (S,S,S,S)-7,7'-/“dithiodi(2-methyl-1-oxopropaan-5 3,1 -diyl) _7di/~7-aza-1,4-dithiaspiro/“4,4_7nonaan-8-carbonzuur_/-

Voorbeeld cxxvil (S,S,S,S)-1,1'-/ Dithiodi(2-methyl-l-oxopropaan-3,l-diyl2/-di/_ 4,4-dimethoxy-L-proline^/ 10 (S)-l-(3-Mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-4,4-dime- thoxy-L-proline uit voorbeeld IV wordt tot reactie gebracht met jood volgens de methode van voorbeeld CXXV ter verkrijging van (S,S,S,S)-1,1’-/ dithiodi(2-methyl-l-oxopropaan-3,l-diyl)_/di/ 4,4-dimethoxy-L-proline_/ 15 Voorbeeld cxxvill /~7 (S),8(S) J-l-/""3-(Acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl__/-l,4-dioxo-7-azaspiro/~4,4_/nonaan-8-carbonzuur methylester.

Een oplossing van het produkt van voorbeeld I in 20 ether wordt behandeld met geringe overmaat diazomethaan. Na 2 uur staan bij kamertemperatuur wordt het oplosmiddel verdampt ter verkrijging van Γ7(S),8S_/-7-/ 3-(acetylthio)-2-methyl-1-oxopropy 1__/- 1.4- dioxo-7-azaspiro-/ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur, methylester.

Voorbeeld CXXIX

25 L KS) ,8S 7-7-(3-Mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-l,4-dioxo-7-azaspiro-/ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur, methylester.

Het produkt uit voorbeeld CXXVIII werd gehydroly-seerd met geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld 3Q II ter verkrijging van /""7(S) ,8S_7-7-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)- , 1.4- dioxo-7-azaspiro/_ 4,4_7nonaan-8-carbonzuur, methylester. voorbeeld cxxx (S)-1-/“3-(Acetylthio)-2-methyl-1-oxopropy 1_/ -4,4-dimethoxy-L-proline, methylester.

35 ;'3 0S2 4 6 s 61

Een oplossing van het produkt uit voorbeeld III in ether wordt behandeld met een geringe overmaat diazomethaan. Na staan bij kamertenperatuur wordt het oplosmiddel verdampt ter verkrijging van (S)-l-/ 3-(acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl_/-4,4-di- 5 methoxy-L-oroline, methylester.

Voorbeeld CXXXI

(S)-1-(3-Mercapto-2-methyl-1-oxonropy1)-4,4-dimethoxy-L-proline, methylester.

10 Het produkt uit voorbeeldCXXX wordt gehydrolyseerd met geconcentreerde ammoniak volgens de methode van voorbeeld IV ter verkrijging van (S)-l-(3-mercapto-2-xnethyl-l-oxopropyl)-4,4-di-methoxy-L-proline, methylester.

Voorbeeld CXXXII

15 /“7 (S),8S_/7-(3-Mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-1,4-dioxo-7-azaspiro- /""4,4_/nonaan-8-carbonzuur, natriumzout.

Een oplossing van 1,0 g van het produkt van voorbeeld II wordt opgelost in 10 ml water en behandeld met 1 equiv.

20 natriumbicarbonaat. De oplossing wordt gevriesdroogd ter verkrijging van /~7(S),8S_7-7-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-1,4-dioxo-7-aza-spiro/*~4,4__/nonaan-8-carbonzuur, natriumzout.

Op overeenkomstige wijze wordt door gebruik van kaliumbicarbonaat het overeenkomstige kaliumzout verkregen.

25 Voorbeeld CXXXIII

<S)-1-(3-Mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-4,4-dimethoxy-L-proline, natriumzout.

Een oplossing van 1,0 g van het produkt van voor- 30 beeld IV wordt opgelost in 10 ml water en behandeld met 1 equiv.

natriumbicarbonaat. De oplossing wordt gevriesdroogd ter verkrijging van (S)-l-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-4,4-dimethyl-L-proline, natriumzout.

Op overeenkomstige wijze wordt door gebruikmaking 35 van kaliumbicarbonaat het overeenkomstige kaliumzout verkregen.

'9 f! S2 4 6 62

Voorbeeld CXXXIV

1000 Tabletten die ieder de volgende bestanddelen bevatten: f~l (S),8S_7-7-(3-Mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-5 1,4-dioxo-7-azaspiro/^ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur 100 mg

Maïszetmeel 50 mg

Gelatine 7,5 mg

Avicel (microkristallijne cellulose) 25 mg

Magnesiumstearaat 2,5 mg 10 185 mg worden gemaakt (uit voldoende hoeveelheden stof) door het f_ 7(S),8S__/- 7- (3-mercapto-2-methyl-1 -oxopropyl) -1,4-dioxo-7-azaspiro/i 4,4nonaan- 8- carbonzuur en maïszetmeel te mengen met een waterige oplossing van de gelatine. Het mengsel wordt gedroogd en gemalen tot een fijn poe-

15 der. Het Avicel en daarna het magnesiumstearaat worden onder granuleren vermengd. Dit mengsel wordt dan samengeperst tot op een tablet-pers teneinde 1000 tabletten te vormen die ieder 100 mg actief bestanddeel bevatten. voorbeeld CXXXV

20 Tabletten die ieder 100 mg (S)-l-{3-mercapto-2- methyl-1-oxopropyl) -4 ,4-dimethoxy-L-proline bevatten worden vervaardigd op de wijze als beschreven in·voorbeeld CXXXIV.

Voorbeeld CXXXVI

- 1000 Tabletten die ieder 50 rag 7(S) ,8S__/-7-(3- 25 mercapto-2-methyl-l-oxopropyl) -1,4-dioxo-7-azaspiro/^ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur bevatten worden vervaardigd uit de volgende bestanddelen: /_ 7(S),8S_/-7-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)- 1,4-dioxo-7-azaspiro,/ 4,4__/nonaan-8-carbonzuur 50 g

Lactose 100 g 30 Avicel 150 g

Maïszetmeel 50 g

Magnesiumstearaat 5 g

Het (_ 7(S),8S_/-7-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopro-pyl)-1,4-dioxo-7-azaspiro£ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur, lactose en 35 Avicel worden vermengd en daarna vermengd met het maïszetmeel.

7909245 63

Magnesiumstearaat wordt toegevoegd. Het droge mengsel wordt samengeperst op een tablet-tenpers teneinde 1000 tabletten van ieder 355 mg te vormen die ieder 50 mg actief bestanddeel bevatten. De tabletten worden bekleed met een oplossing van Methocel E 15 (methvlcellulose) 5 die als kleur een lakverf met geel no. 6 bevat.

Voorbeeld CXXXVII

Tabletten met ieder 50 mg (S)-l-(3-raercapto-2-methyl-l-oxoproDyl)-4,4-dimethoxy-L-proline bevatten worden vervaardigd op de wij2e als beschreven in voorbeeld CXXXVI.

10 Voorbeeld CXXXVIII

uit twee delen bestaande no. 1 gelatine capsules die ieder 100 mg /~7(S),8S_7-7-(3-raercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-l,4-dioxo-7-azaspiro/ 4,4_Tnonaan-8-carbonzuur, natriumzout bevatten worden gevuld met een mengsel van de volgende bestanddelen; 15 /—7(S),8S_/-7-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)- 1,4-dioxo-7-azaspiro/ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur, natriumzout 100 mg

Magnesiumstearaat 7 mg

Lactose 193 mg

20 Voorbeeld CXXXIX

Gelatine capsules met 100 mg (S)-l-(3-mercapto-2-methyl-1-oxoproDyl)-4,4-dimethoxy-L-proline, natriumzout worden vervaardigd op de wijze zoals beschreven in voorbeeld CXXXVIII. Voorbeeld CXL

25 Een injecteerbare oplossing wordt als volgt be reid: {_ 7(S) ,8S_/-7- (3-Mercapto-2-methyl-l-oxopropyl) - l,4-dioxo-7-azaspiro/ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur 500 g

Methylparaben 5 g 30 Propylnartóen 1 g

Natriumchloride 25 g

Water voor injectie als nodig tot 5 1

De actieve stof, conserveringsmiddelen en natriumchloride worden opgelost in 3 1 water en daarna wordt het volume op 35 51 gebracht. De oplossing wordt afgefiltreerd door een steriel filter 7900246 64 en aseptisch afgevuld in van tevoren gesteriliseerde flacons, die vervolgens worden gesloten met vooraf gesteriliseerde rubber sluitingen. Iedere flacon bevat 5 ml oplossing in een concentratie van 100 mg actief bestanddeel per ml oplossing voor injectie.

5 Voorbeeld CXLI

Een injecteerbare oplossing die (S)-l-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-4,4-dimethoxy-L-proline bevat wordt bereid op de wijze als beschreven in voorbeeld CXL.

Voorbeeld CXLII

10 6000 Tabletten die ieder de volgende bestanddelen bevatten: /~7 (S),8S_/-7-(3-mercapto-2-methyl-1-oxopropyl)- 1,4-dioxo-7-azaspiro/^ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur 100 mg

Avicel-(microkristallijne cellulose) 100 mg 15 Hydrochloorthiazide 12,5 mg

Lactose U.S.P, 113 mg ' Maïszetmeel U.S.P, 17,5 mg stearinezuur U.S.P. 7 mg 350 mg 20 worden vervaardigd uit voldoende hoeveelheden van de bestanddelen door /_ 7(S),8S_T-7-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-l,4-dioxo-7-azaspiro,/ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur, Avicel en een gedeelte van het stearinezuur tot brokken te verwerken. De brokken worden gemalen en door een nr. 2 zeef gevoerd, daarna vermengd met het hydrochloorthia- 25 zide, de lactose, het maïszetmeel en de rest van het stearinezuur.

Het mengsel wordt saraengeperst tot 350 mg capsule-vormige tabletten in een tablettenpers. De tabletten worden gekerfd om ze in de helft te kunnen delen.

Voorbeeld CXLIII

30 Tabletten die ieder (S)-1-(3-mercapto~2-methyl-l- oxopropyl)-4,4-dimethoxy-L-proline bevatten en hydrochloorthiazide kunnen worden vervaardigd op de wijze als beschreven in voorbeeld CXLII.

De produkten van de voorbeelden I, III en VII- 35 CXXXÏÏI kunnen eveneens worden geformuleerd volgens de methode van de voorbeelden CXXXIV-CXLIII.

7909246

Claims (32)

1. Nieuwe ketal en thioketal derivaten van mercap- toacylprolinen met formule 1 of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan, waarin R waterstof of een korte keten alkylgroep is, en

5 Rj onafhankelijk een korte keten alkyl, korte keten alkenyl, korte keten alkynyl, cycloalkyl, door halogeen gesubstitueerde korte keten alkyl, door hydroxy gesubstitueerde korte keten alkylgroep, een groep met formule 15, formule 16 of formule 17 zijn, of en R2 tezamen een polymethyleengroep met formule 37 vormen, Xj, x2 en Xg 10 onafhankelijk zuurstof of zwavel zijn, Rg en R^ onafhankelijk van elkaar waterstof, korte keten alkyl, korte keten alkylthiogroep, -(CH_) SH of door halogeen gesubstitueerde korte keten alkylgroep 2. n zijn, R. waterstof of een korte keten alkylgroep is, vooropgesteld, O dat R. alleen maar een korte keten alkvlgroeo is, wanneer R-, een 6 J 15 korte keten alkylgroep ist m gelijk is aan 0, 1 of 2, n gelijk is aan 1, 2 of 3, p en q zijn ieder 1 of 2 vooropgesteld dat ze niet beide tegelijk 2 zijn? t is gelijk aan 2 of 3, R? is waterstof, een korte keten alkylgroep met 1-4 koolstofatomen, een korte keten alkoxy-groep met 1-4 koolstofatomen, een korte keten alkylthiogroep met 20 1-4 koolstofatomen, chloor, broom, fluor, een trifluormethylgroep of een hydroxygroep; Rg en R^q zijn beiden waterstof, beiden een korte keten alkylgroep of de een is waterstof en de ander een korte keten alkyl, door halogeen gesubstitueerde korte keten alkyl, door hydroxy gesubstitueerde korte keten alkylgroep of een groep met 25 formule 15, formule 16 of formule 17, en Rg is waterstof, een door hydrolyse verwijderbare beschermingsgroep, een chemisch verwijderbare beschermingsgroep of, vooropgesteld dat geen van de beide groepen R3 en R4 een groep -(CH2)n-SH is, een groep met formule 21.

2. Verbinding volgens conclusie 1, waarin p gelijk 30 is aan 2 en q gelijk is aan 1.

3. Verbinding volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat p gelijk is aan 1 en q gelijk is aan 2.

4. Verbinding volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat p en q beide 1 zijn.

5. Verbinding volgens conclusie 4, met het kenmerk, 909246 dat X en X. onafhankelijk zuurstof of zwavel zijn, R waterstof of i « een korte keten alkylgroep is, Rj en R2 ieder een korte keten alkyl-groep met 1-4 koolstofatomen zijn of tezamen twee verbonden methy-leen-groepen vormen, R^ en R^ ieder waterstof of een korte keten 5 alkylgroep met 1-4 koolstofatomen zijn, Rg waterstof, een korte keten alkanoyl met 1-4 koolstofatomen of een benzoylgroep is, Rg waterstof is en m gelijk is aan 0 of 1.

6. Verbinding volgens conclusie 4, met het kenmerk, dat X1 en X2 beide zuurstof zijn, R, R4, Rg en Rg ieder waterstof 10 zijn, R en R_ ieder een korte keten alkylgroep met 1-4 koolstofato- X ώ men zijn of R^ en R2 ieder een methyleengroep zijn en tezamen een ethyleendioxyring voltooien, R^ een methylgroep is en m gelijk is aan 1.

7. Verbinding volgens conclusie 4, met het kenmerk, 15 dat Xj“Rj en X2~R2 een efckyleendioxyring voltooien.

8. Verbinding volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat deze voldoet aan formule 38, of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan, waarin R waterstof of een korte keten alkylgroep is, Rj en R2 onafhankelijk een korte keten alkyl, korte keten alkenyl, 20 korte keten alkynyl, cycloalkyl, halogeen-gesubstitueerde korte keten alkyl, hydroxy-gesubstitueerde korte keten alkylgroep, een groep met formule 15, formule 16 of formule 17 zijn of R^ en R2 tezamen een polymethyleengroep met formule 37 vormen, , X2 en onafhankelijk zuurstof of zwavel zijn, R^ en R^ onafhankelijk waterstof, 25 een korte keten alkyl, korte keten alkylthio, -(CH_) -SH of halogeen- « u gesubstitueerde korte keten alkylgroep zijn, Rg waterstof of een korte keten alkylgroep is, vooropgesteld dat Rg alleen maar een korte keten alkylgroep is wanneer een korte keten alkylgroep is, m gelijk is aan 0, 1 of 2, n gelijk is aan 1, 2 of 3, t gelijk is aan 30 2 of 3, R? waterstof, een korte keten alkylgroep met 1-4 koolstof- atomen, een korte keten alkoxygroep met 1-4 koolstofatomen, een korte keten alkylthiogroep met 1-4 koolstofatomen, chloor, broom, fluor, trifluormethyl of hydroxy is, Rg en R1Q beide waterstof, beide een korte keten alkylgroep of één van beide waterstof en de andere een 35 korte keten alkyl, halogeen-gesubstitueerde korte keten alkyl, /90924? * * hydroxy-gesubstitueerde korte keten alkylgroep, een groep met formule 15, formule 16 of formule 17 is en R5 waterstof, een hydrolyseerbaar verwijderbare beschermingsgroep, een chemisch verwijderbare bescher-mingsgroep is, of, vooropgesteld dat Rg noch R^ een groep -(CH2)n-SH 5 is, een groep met formule 21 is.

9. Verbinding volgens conclusie 8, met het kenmerk, dat R waterstof, R4 waterstof, Rg en Rg beide een korte keten alkyl-groep met 1-4 koolstofatomen zijn of Rg waterstof is en Rg waterstof, een korte keten alkylgroep met 1-4 koolstofatomen, trifluormethyl, 10 methylthio of mercaptomethylgroep is, Rg waterstof, een korte keten alkanovlgroep met 1-4 koolstofatomen of een benzoylgroep is, X^ en X2 zuurstof of zwavel zijn, Rj en R2 ieder een korte keten alkylgroep met 1-4 koolstofatomen, een groep met formule 15a, formule 16a, formule 16b of formule 17a zijn, m gelijk is aan 0 of 1 en R^ water-15 stof, een methyl, methoxy, methylthio, chloor, broom, fluor, trifluormethyl of hydroxygroep is.

10. Verbinding volgens conclusie 9, met het kenmerk, dat R waterstof is, R^ waterstof is, Rg en Rg beide een methylgroep zijn, of Rg waterstof is en Rg waterstof, een methyl, trifluormethyl, 20 methylthio of mercaptomethylgroep is, Rg waterstof, een acetyl of benzoylgroep is, X^ en X2 aan elkaar gelijk zijn, Rj en R2 een methyl, ethylgroep of een groep met formule 15a, formule 16a, formule 16b of formule 17a zijn, m gelijk is aan 0 of 1 en Ry waterstof, een methyl, methoxy, methylthio, chloor, broom, fluor, trifluormethyl 25 of hydroxygroep is.

11. Verbinding volgens conclusie 10, met het kenmerk, dat daarin R, R^, Rg en Rg waterstof zijn, Rg een methylgroep is, m gelijk is aan 1 en en R2 beide een methyl of ethylgroep zijn.

12. Verbinding.volgens conclusie 11, met het ken merk, dat Xj en X2 beide zuurstof zijn.

13. Verbinding volgens conclusie 12, (S)-1-(3-mercapto-2-methyl-l-oxqpropyl)-4,4-dimethoxy-L-proline.

14. Verbinding volgens conclusie 12, (S)-1-(3-35 mercapto-2-methyl-l-oxopropyl) -4,4-diethoxy-ïiproline. 7909246 * * *

15. Verbinding volgens conclusie 8, met het kenmerk, dat daarin R waterstof is, R^ waterstof is, R^ en Rg beide een korte keten alkylgroep met 1-4 koolstofatomen zijn, of Rg waterstof is en R3 waterstof, een korte keten alkylgroep met 1-4 kool-5 stofatomen, een trifluormethyl, methylthio of mercaptomethylgroep is, r_ waterstof, een korte keten alkanoylgroep met 1-4 koolstofatomen 5 of een benzoylgroep is, X^-R^ en %2~R2 samen9aan onder vorming van een groep met formule 22, formule 23, formule 24, formule 25, formule 26, formule 27, R en R n beide waterstof zijn of beide een korte 10 keten alkylgroep met 1-4 koolstofatomen zijn of Rg waterstof is en R10 een korte keten alkylgroep met 1-4 koolstofatomen, hydroxy-gesubstitueerde alkylgroep met 1-4 koolstofatomen, of halogeen-gesubstitueerde korte keten alkylgroep met 1-4 koolstofatomen is, en m gelijk is aan 0 of 1.

16. Verbinding volgens conclusie 15, met het ken merk, dat Rg en R^Q beide waterstof zijn of Rg waterstof is en R^g • een methyl, hydroxymethyl, of trifluormethylgroep is.

17. Verbinding volgens conclusie 16, met het kenmerk, dat R waterstof is, R4 waterstof is, R^ en Rg beide een methyl-20 groep zijn of Rg waterstof en R3 waterstof, een methyl, trifluormethyl, methylthio of mercaptomethylgroep is, Rg waterstof, een acetyl of benzoylgroep is, en Xj-Rj en X2“R2 samen een 9roeP met formule 22a, formule 22b, formule 23a, formule 23b, formule 26a, of formule 27a vormen.

18. Verbinding volgens conclusie 17, met het ken merk, dat R, R4, Rg en Rg waterstof zijn, R3 een methylgroep is en m gelijk is aan 1. 19. verbinding volgens conclusie 18, f_ 7{S),8S_/- 7-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-1,4-dioxo-7-azaspiro£ 4,4__/nonaan- 30 8-carbonzuur.

20. Verbinding volgens conclusie 18, / 2(S),3S_/-2-(3-mercapto-2-methyl-1-oxopropyl)-6,10-dioxo-2-azaspiro/_4,5_/de-caan-3-carbonzuur.

21. Verbinding volgens conclusie 18, / 7(S),8S_/- 35 7-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-7-aza-l,4-dithiaspiro/_ 4,4_/- 7909240 i. ·¥ nonaan-8-carbonzuur.

22. Verbinding volgens conclusie 18 £ 7(s),8S_/- 7- (3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-1,4-dioxo-7-azaspiro/ 4,4_/nonaan- 8- carbonzuur.

23. Verbinding volgens conclusie 17, met het ken- merk, dat daarin R, R., R_ en R. waterstof zijn, R, een trifluor-methylgroep is en m gelijk is aan 1.

24. Verbinding volgens conclusie 23, (8S)-7-{3-mercapto-2-trifluormethyl-l-oxopropyl)-1,4-dioxo-7-azaspiro/ 4,4_/- 10 nonaan-8-carbonzuur.

25. Verbinding volgens conclusie 8, met het kenmerk, dat daarin R^ en geen van beide een groep -(CH^J^-SH zijn en Rg een groep met formule 21b is.

26. Verbinding volgens conclusie 25, (S,S,S,S)- 15 7,7 *-/~dithiodi{2-methyl-l-oxopropaan-3,1-diyl _/di/_ l,4-dioxo-7- azaspiro/ 4,4_/nonaan-8-carbonzuur_/.

27. Farmaceutisch preparaat, met het kenmerk, dat dit één of meer verbindingen met formule 1 of zouten daarvan bevat, waarin R waterstof of een korte keten alkylgroep is, R^ en Rj onaf- 20 hankelijk een korte keten alkyl, korte keten alkenyl, korte keten alkynyl, cycloalkyl, halogeen-gesubstitueerde korte keten alkyl, hydroxy-gesubstitueerde korte keten alkylgroep of een groep met formule 15, formule 16 of formule 17 zijn, of R^ en tezamen een polymethyleenketen met formule 37 vormen, Xj, X2 en X^ onafhankelijk 25 zuurstof of zwavel zijn, R^ en R^ onafhankelijk waterstof, een korte keten alkyl, korte keten alkylthio, -(CHj^-SH of halogeen-gesubstitueerde korte keten alkylgroep zijn, Rg waterstof of een korte keten alkylgroep is, vooropgesteld dat Rg alleen maar een korte keten alkylgroep is wanneer R^ een korte keten alkylgroep is, m gelijk is 30 aan 0, 1 of 2, n gelijk is aan 1, 2 of 3, p en q ieder 1 of 2 zijn, vooropgesteld dat ze niet beiden 2 zijn, t gelijk is aan 2 of 3, R^ gelijk is aan waterstof, een korte keten alkylgroep met 1-4 koolstof-atomen, een korte keten alkoxygroeo met 1-4 koolstofatomen, een korte keten alkylthiogroeo met 1-4 koolstofatomen, chloor, broom, fluor, 35 trifluormethyl of hydroxygroep, Rg en R^Q beiden waterstof zijn, 7939249 ί beiden een korte keten alkylgroep zijn of één waterstof is en de andere een korte keten alkyl, halogeen-gesubstitueerde korte keten alkyl, hydroxy-gesubstitueerde korte keten alkylgroep of een groep met formule 15, formule 16 of formule 17 is, en Rg waterstof, een 5 hydrolyseerbaar verwijderbare beschermingsgroep, of, indien geen van de groepen Rg en R^ een groep is, een groep met formule 21 is.

28. Farmaceutisch preparaat volgens conclusie 27, met het kenmerk, dat dit tevens een diureticum bevat.

29. Werkwijze voor de bereiding van nieuwe keto en thioketal derivaten van mercaptoacylprolinen, met het kenmerk, dat men een verbinding met formule 1 of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan bereidt, waarin R waterstof of een korte keten alkylgroep is, R^en R^ onafhankelijk een korte keten alkyl, korte 15 keten alkenyl, korte keten alkynyl, cycloalkyl, halogeen-gesubstitueerde korte keten alkyl, hydroxy-gesubstitueerde korte keten alkylgroep, een groep met formule 15, formule 16 of formule 17 zijn of Rj en Rj tezamen een polymethyleenketen vormen met formule 37, Xj, Xj en onafhankelijk zuurstof of zwavel zijn, R^ en R^ onafhanke-20 lijk waterstof, een korte keten alkyl, korte keten alkylthio, -<CH2)n-SH of halogeen-gesubstitueerde korte keten alkylgroep zijn, Rc waterstof of een korte' keten alkylgroep is, vooropgesteld dat b Rg alleen maar een korte keten alkylgroep is wanneer Rg een korte keten alkylgroep is, m gelijk is aan 0, 1 of 2, n gelijk is asm 1, 25. of 3, p en q ieder 1 of 2 zijn, vooropgesteld dat ze niet beide 2 zijn, t gelijk is aan 2 of 3, R^ waterstof, een korte keten alkylgroep met 1-4 koolstofatomen, een korte keten alkoxygroep met 1-4 koolstofatomen, een korte keten alkylthiogroep met 1-4 koolstofatomen, chloor, broom, fluor, trifluormethyl of hydroxygroep is, Rg en R^g 30 beide waterstof zijn, beide een korte keten alkylgroep zijn, of de ene waterstof is en de andere een korte keten alkyl, halogeen-gesubstitueerde korte keten alkyl, hydroxy-gesubstitueerde korte keten alkylgroep, of een groep met formule 15, formule 16 of formule 17 is, en Rg waterstof, een hydrolyseerbaar verwijderbare beschermingsgroep, 35 een chemisch verwijderbare beschermingsgroep of, vooropgesteld dat '?09246 _ i. A * oeen van de groepen R-, en R. een groen -(CH„) -SH is, een groep met j 4 J. n formule 21 is, bereidt, doordat men (1) een gesubstitueerd proline of pipecolinezuur met formule 2 laat reageren met een zuur met formule 3, waarin ' waterstof of een hydrolyseerbaar of chemisch 5 verwijderbare beschermingsgroep is, volgens gebruikelijke methoden, of (2) een verbinding met formule 5a, waarin R^' de bovenstaande betekenis heeft, laat reageren met een alcohol of thiol RjXjH, R2X2H of met forinule 11» onder vorming van een produkt waaring

10 R5 waterstof of een hydrolyseerbaar of chemisch verwijderbaar beschermingsgroep is en deze beschermingsgroep verwijdert onder vorming van een produkt waarin R^ waterstof is en de aldus verkregen pro-dukten waarin Rg waterstof is oxydeert om een produkt te verkrijgen waarin R^ een groep met formule 21a is.

30. Werkwijze voor de bereiding van nieuwe ketal en thioketal derivaten van mercaptoacylprolinen, zoals hierin beschreven. 20 7 3 0 S 2 4 6 R, Rz .- - II Ri Ri V Λ . ,· s I R'-s —(c hV — C— COOH /c\ f 'w | R4 R* 0 ^ , ,1 . I H I I 3 Ry_S— (CH)--C — C- N- C - C OOR i H . Rt 1 Ri Rz R, R* I I I1 I V /x* XKC/Xe c ^ ("*?£ ^(CH*) m R» (H,C)p N(CH<.) ‘ i I j II HN-C - COOR R$—S— (CH) —- C — CO— N - C rCOOR I* 1 V I I H * R6 H 4 o o J C • <^P R4 Rj 0 (HiC)|f Cbz — N- C—COOR Rj—S— (CH) —C —C -N-C-COOH r I * I u* 5. r4 Sa h R,—X,—H *1 Ri 6' I X, X, V Xe x N c' R — X — H / y \ 1 1 8 (H^p (CHa)q η (H vc)p (CH^ Cbz — N -C —COOR Cbz— N- C-COOR I * j * H H' p p Rg R,o v _ Λ N|0 V / > I4 W X \ h / \ x,^ x Xj X1 Xj x< (^C)p'" VOq it H V(CH»), Cbz —N -C—COOR Π . Cbz — N-C—COOH I* " I * 79 0 3 2 4 6 h 10 12 H E.R. SQUIBB δ SOMS, INC., te Princeton, New Jersey, Ver.St.v.Amerika ' ! § (H.C)^ X(CH^ rV Rj (Hfp X(|Hi-^ H— N-C— COOH rX-S—(CH) —C— C-N- C-COOH I * 4 /^| I # h 13 R(, h i4 —(CHe)^~{§^ Ο _εΗΗΪΠ R, 'Ra X? S 15 15a 16 16a --ςι V’ '6b ,7 " ,7a ^ ,ζ) R,°\^s Rio .¾ Rt R*. flch\ X xK Λ °^s s ^ ^ n (HzC)p (CH,) 19 20 * · *» S I I —S-(CH) — C—C--N -C—COOR Ww I I « R|i ^ H 21 H X» S RT, Rj (H^)p (CH,)q R, R2 —S —(CH\ — C — CO — N C — COOH Xi M «I 21a H ?> ί Π S—(chL—C — C—N —COOR R, R, I O’) V — t HjC— cHj 4 21b R,° i 'o R,° \> /CH> ,, \/ HjC— CH 2 _/ 3 I I ^c— C 22 22a oo R™ I I NR,0 79 0 9 2 4 6 22b ^ 23 S">^ E.R. SQUIBB & SONS, DIC., ts Princeton, Mew Jersey, Ver,St.v.Amerika t • ' /CH5 r r, . I I II /'- C|N HeC^CH, s S s S R,o I I R|0 I I \/ \/ O S O S 23a 23b ^ 24 >s>/ 25 R%x^/Rio CHj. HjC^CHj HtC^ R9-/Ru> /C\ I I J i HjC'-^CHs HiC CHj. s s s s 26 , 26a \/ 27 27a R$ R to \,r/ 0 R R 0 S' \ Rj— c - s - (ch) — c - c - a «· * " R, \ z"·' 90 K4> 28 ^ R$ R,o N(C)t" *r \ X O R4 Ri 0 (H*9)p §u*)q II J N I II I I R*_C-S-/CHL — C — C - N- C-COOH ϋ I I 3Q r6 h R« /Rio- >)*C x\/^ S § V" Rg-C-S—(CH)„— C -C—Cl RA R> 0 (HZC)P (CH,)q i4 32 HS—(CH)*— C — C-N - C-COOH. 79 0 9 2 4 6 R& V EtR. SQUIBB S SONS, INC., te Princeton, New Jersey, Ver.St.v.Amerika ï’ ï ;<v O Rj O (^C)p (CHt-) 33 I! I I il I I R8—C —C-C-N-N-COOH I H Rfc ?* l· xz kz O Rj O (H2-C) ζ ll J N I II I I R8-C-S-(CH)^-C-C- N- C — COOH ^ Rfc H ï R, XK χ, / X Ri, Ri <j (HiC)p (CHj^ HS— (CH) — C—C-N-C—COOH I ' l 3S Ri, H R* Rt I i X2 X* *4 f» o &*fk ' HS— (CHjM—C— C-N-C— COOH 36 Ré H R$ . Rjo Ri Ra X i, i, ^ ^ RJj Rj 0 X «

37 I . I ll f 38 Rs· — S —(CHjw— C— C- N--— COOR ”00 9 2 4 6 Rt H E.S.. SQUIBB & SOUS, INS., te Princeton, New Jersey, Ver.St.v.Amerika