NL8001599A

NL8001599A - Mercaptoacylderivaten van keto-gesubstitueerd proline en pipecolinezuur.

Info

Publication number: NL8001599A
Application number: NL8001599A
Authority: NL
Original assignee: Squibb & Sons Inc
Priority date: 1980-03-21
Filing date: 1980-03-18
Publication date: 1981-10-16
Also published as: FR2478632B1; JPH0140827B2; ATA147080A; AT371436B; JPS56133261A; FR2478632A1; DE3009684A1; CH645619A5; SE8001620L; SE431331B; GB2070586A; PT70988A

Description

Η

Mercaptoacylderivaten van keto-gesubstitueerd proline en pipecolinezuur.

De uitvinding heeft betrekking op keto-deriva-ten van mercaptoacylproline en pipecolinezuur met de formule 1 en de zouten daarvan, waarin R en R£ onafhankelijk worden gekozen uit waterstof en lager alkyl, waarbij R2 slechts lager alkyl is 5 indien Rj eveneens lager alkyl is, Rj en R^ onafhankelijk worden gekozen uit waterstof, lager alkyl, lager alkylthio, -(CH_) -SH en door halogeen gesubstitueerd lager alkyl, R^ voorstelt waterstof, een hydrolyseerbaar verwijderbare beschermende groep, een chemisch verwijderbare beschermende groep of, wanneer Rj en R^ 10 een andere betekenis bezitten dan -(G^) -SH, een sulfide met de formule la, m voorstelt 0, 1 of 2, n voorstelt 1, 2 of 3 en p en q elk voorstellen 1 of 2, waarbij deze niet tegelijkertijd 2 kunnen zijn.

Het sterretje in de bovengenoemde formules duidt 15 een asymmetrie-centrum in de ring aan. In het geval van proline, dat wil zeggen wanneer p en q beide 1 zijn, bezit dit centrum de L-configuratie. In het geval van pipecolinezuur, datw.1 zeggen wanneer een van de symbolen p en q 2 is, bezit dit centrum de D.L- of L-configuratie.

20 Asymmetrische centra kunnen eveneens aanwezig zijn in de mercaptoacyl-zijketen in afhankelijkheid van de definitie van Rj, R2 en R^. De produkten kunnen daarom bestaan in stereo-isomere vormen of in de vorm van racemische mengsels daarvan.

Deze vallen alle binnen het raam van de uitvinding. Bij de hieron-25 der beschreven synthese kan gebruik worden gemaakt van het race-maat of van een van de enantiomeren als uitgangsmaterialen. Wanneer het racemische uitgangsmateriaal wordt gebruikt bij de synthese kunnen de verkregen stereo-isomeren in het eindprodukt worden gescheiden onder toepasang van gebruikelijke chromatogra- 800 1 5 99 y * 2 fische of gefractioneerde kristallisatie-methodes. Indien een asymmetrie-centrum in de mercaptoacyl-zijketen aanwezig is bezit dit bij voorkeur de D-configuratie.

De uitvinding heeft in ruimste zin betrekking 5 op de mercaptoacyl-derivaten van proline en pipecolinezuur met de formule 1 en de zouten daarvan, op preparaten, die dergelijke verbindingen bevatten, en op een werkwijze voor de toepassing van deze verbindingen als anti-hypertensieve middelen.

Onder de uitdrukking "lager alkyl" als gebruikt 10 bij de definiëring van de symbolen R, Rj, R2 en R^ worden verstaan rechte of vertakte koolwaterstofresten met tot 7 koolstofatomen, bijvoorbeeld methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, t-butyl, pentyl, isopentyl, etc. De lagere alkylgroepen, die de voorkeur genieten, zijn die met tot 4 koolstofatomen, waarbij 15 methyl en ethyl in het bijzonder de voorkeur genieten. Op analoge wijze worden onder de uitdrukkingen "lager alkoxy" en "lager alkylthio" verstaan dergelijke lagere alkylgroepen, vastgehecht aan zuurstof of zwavel.

De uitdrukking "door halogeen gesubstitueerd 20 lager alkyl" heeft betrekking op lagere alkylgroepen als hierboven vermeld, waarbij een of meer waterstofatomen zijn vervangen door chloor, broom of fluor, zoals trifluormethyl, pentafluorethyl, 2.2,2-trichloorethyl, chloormethyl, broommethyl, etc.

De uitdrukking "hydrolyseerbaar verwijderbare 25 beschermende groep" als gebruikt bij de definiëring van R^ heeft betrekking op een groep, die verwijderd kan worden door een gebruikelijke hydrolyse of ammonolyse. Acylgroepen met de formule O

II

R^-C- zijn geschikt voor dit doel, waarbij R^ kan voorstellen 30 lager alkyl met 1-7 koolstofatomen, lager alkyl, gesubstitueerd door een of meer chloor-, broom- of fluoratomen, -(CH^)r~cyclo-alkyl, waarbij de uitdrukking "cycloalkyl" betrekking heeft op verzadigde ringen met 3-7 koolstofatomen, bij voorkeur cyclo-hexyl, een arylgroep, zoals 35 -(CVr- , een heterogroep zoals ^ jj

X

8001599

V

3 • J ί of “(CH ) —j"0 J , waarin r voorstelt 0, 1, 2 of 3, r Sr

Rg voorstelt waterstof, lager alkyl met 1-4 koolstofatomen, in 5 het bijzonder methyl, lager alkoxy met 1-4 koolstofatomen, in het bijzonder methoxy, lager alkylthio met 1-4 koolstofatomen, in het bijzonder methylthio, chloor, broom, fluor, trifluormethyl of hydroxy, en X voorstelt zuurstof of zwavel. Voorkeursgroepen zijn de lagere alkanoylgroepen met tot 4 koolstofatomen, in het bijzon- jq der acetyl en benzoyl.

De uitdrukking "chemisch verwijderbare beschermende groep" als gebruikt bij de definiëring van R^ heeft betrekking op groepen zoals p-methoxy, p-methoxybenzylcarbonyl, trityl, t-butoxycarbonyl, etc. Deze groepen kunnen na de voltooi-ing van de acyleringsreactie worden ve-rwijderd onder toepassing van variërende middelen, zoals door behandeling met trifluor-azijnzuur en anisool.

Voorkeursverbindingen met de formule 1 zijn de L-proline-bevattende derivaten, dat wil zeggen waarbij p en q 20 beide 1 zijn en R waterstof voorstelt.

Met betrekking tot de mercaptoacyl-zijketen wordt opgemerkt, dat als eindprodukten de voorkeur genieten de verbindingen, waarin R^ voorstelt waterstof, m voorstelt 0 of 1, R^ voorstelt waterstof en Rj en R£ beide voorstellen lager alkyl met 25 1-4 koolstofatomen, in het bijzonder beide methyl, of R2 voor stelt waterstof en Rj voorstelt waterstof, lager alkyl met 1-4 koolstofatomen, in het bijzonder methyl, trifluormethyl, methyl-thio of mercaptomethyl. Als intermediairen zowel als eindprodukten genieten eveneens de voorkeur de bovengenoemde zijketens, 30 waarin R^ voorstelt lager alkanoyl met 1-4 koolstofatomen, in het bijzonder acetyl, of benzoyl.

Als eindprodukten genieten in het bijzonder de voorkeur de verbindingen met de formule 1 met een mercaptoacyl-zijketen, waarin R^ voorstelt waterstof, m 1 is, R^ en Rj 35 waterstof voorstellen, R2 voorstelt methyl of waterstof, en, 8001599 4 wanneer R^methyl voorstelt, het asymmetrische koolstofatoom, waaraan R^ is vastgehecht, in de D-configuratie is.

De verbindingen met de formule 1 worden verkregen door koppeling van een keto-gesubstitueerd proline of pipe-5 colinezuur met de formule 2 met een zuur of een chemisch equivalent daarvan met de formule 3, waarin R^' voorstelt waterstof, een hydrolyseerbaar of chemisch verwijderbare beschermende groep, onder vorming van het produkt met de formule 4.

Deze reactie kan worden uitgevoerd in tegenwoor-10 digheid van een koppelingsmiddel, zoals dicyclohexylcarbodiïmide of dergelijke, of het zuur kan worden geactiveerd door vorming van zijn gemengde anhydride, symmetrisch anhydride, zuurhaloge-nide, actieve ester of toepassing van Woodward-reagens K, N-ethoxy-carbonyl-2-ethoxy-1,2-dihydrochinoline of dergelijke. Voor een 15 overzicht met betrekking tot de methodes of acylering wordt verwezen naar Methoden der Organischen Chemie (Houben-Weyl), Vol. XV, part II, pag. 1 e.v. (1974). Bij voorkeur wordt het zuurhalogenide, in het bijzonder het zuurchloride, met de formule 3 in reactie gebracht met het zuur met de formule 2.

20 Indien het proline of pipecolinezuur met de formule 2 in reactie wordt gebracht in de ester-vorm kan het resulterende esterprodukt worden omgezet in het vrije zuur, dat wil zeggen dat R waterstof voorstelt, onder toepassing van gebruikelijke middelen. Indien bijvoorbeeld R ethyl voorstelt kan 25 deze ester-beschermende groep door verzeping worden verwijderd.

Het produkt met de formule 4 wordt bij voorkeur geïsoleerd en gezuiverd door kristallisatie, bijvoorbeeld door vorming van het dicyclohexylamine-zout en daarnavolgende omzetting van het zout in het vrije zuur door behandeling met een waterige 30 oplossing van een zuur, zoals kaliumzuursulfaat.

Het produkt met de formule 4, dat de acylgroep R^-CO- draagt, kan in de produkten met de formule 1, waarin R^ waterstof voorstelt, worden omgezet onder toepassing van een gebruikelijke hydrolyse of door ammonolyse.

35 De produkten met de formule 1, waarin Rj en R^ een andere betekenis bezitten dan -(CH„) -SH en R, voorstelt een

Zn 4 8001599 5 groep met de formule lb, worden verkregen door directe oxydatie met jodium van een produkt met de formule 1, waarin waterstof voorstelt.

De esters met de formule 1, waarin R voorstelt 5 lager alkyl, kunnen worden verkregen uit de carbonzuurverbindingen, dat wil zeggen waarin R waterstof voorstelt, onder toepassing van gebruikelijke veresteringsprocedures, bijvoorbeeld door verestering met een diazoalkaan, zoals diazomethaan, een 1-alkyl- 3-p-tolyltriazeen, zoals l-n-butyl-3-p-tolyltriazeen, of derge-10 lijke.

De verbindingen met de formule 1 kunnen eveneens worden bereid door verwijdering van de beschermingsgroep, volgens gebruikelijke methodes, van een keto-gesubstitueerd proline-of pipecolinezuur-produkt met de formule 1, waarvan de keto-15 groep is beschermd door gebruikelijke beschermingsgroepen, bij voorbeeld een ketal-beschermingsgroep, bijvoorbeeld een dialkoxy-ketal, zoals de verbinding met de formule 5, waarvan de beschermingsgroep kan worden verwijderd door hydrolyse, zoals met een waterige oplossing van chloorwaterstofzuur bij kamertemperatuur.

20 De verbindingen met de formule 5 kunnen worden bereid uitgaande van een N-carbobenzyloxyketo-gesubstitueerd proline of pipecolinezuur met de formule 2, dat vervolgens wordt behandeld met methanol in tegenwoordigheid van trimethylorthoformiaat in geconcentreerd zwavelzuur, waarna de N-beschermingsgroep wordt 25 verwijderd door hydrogenolyse in tegenwoordigheid van een palla-dium-koolstof-katalysator onder vorming van het dimethoxy-inter-mediair met de formule 6, Het intermediair met de formule 6 wordt vervolgens gekoppeld met een zuur of een chemisch equivalent daarvan met de formule 3 onder vorming van de dimethoxyverbindingen 30 met de formule 5.

Verwezen wordt eveneens naar de volgende publika-ties, die verdere illustratieve methodes beschrijven voor de bereiding van de uitgangsmaterialen en intermediairen, namelijk de Amerikaanse octrooischriften 4.046.889, 4.105.776, 4.154.935 en 35 4.116.962, Can. J. Biochem. & Physiol. 37, 583-587 (1959), JACS

79, 185-192 (1957), JACS 79, 192-397 (1957). Buil. Soc. Chem.

800 1 5 99 6 1965(8), 2253-2259, en Aus. J. Chem. 20, 1493-1509 (1967).

De in deze publikaties geïllustreerde procedures kunnen worden toegepast als algemene methodes voor de synthese van de verbindingen en de scheiding van de isomeren, die gebruikt 5 kunnen worden bij de onderhavige uitvinding. Verdere illustratieve details kunnen gevonden worden in de voorbeelden, die dienen als modellen voor de bereiding van andere leden van de groep.

De ve-rbindingen volgens de uitvinding vormen basische zouten met een verscheidenheid van anorganische of orga-10 nische basen. De zoutvormende ionen, afgeleid van dergelijke basen, kunnen zijn metaalionen, bijvoorbeeld aluminium-, alkalimetaal-ionen, zoals natrium of kalium, aardalkalimetaalionen, zoals calcium of magnesium, of aminezoutionen, waarvan een aantal bekend zijn voor dit doel, bijvoorbeeld aralkylaminen, zoals dibenzyl-15 amine, N.N-dibenzylethyleendiamine, lagere alkylaminen, zoals methylamine, t-butylamine, procaine, lagere alkylpiperidinen, zoals N-ethylpiperidine, cycloalkylaminen, zoals cyclohexylamine of dicyclohexylamine, 1-adamantanamine, benzathine, of zouten afgeleid van aminozuren, zoals arginine, lysine of dergelijke.

20 De fysiologisch aanvaardbare zouten, zoals de natrium- of kalium zouten, kunnen medicinaal worden toegepast, zoals hieronder beschreven, en genieten de voorkeur. Deze en andere zouten, die niet noodzakelijk fysiologisch aanvaardbaar zijn, zijn bruikbaar bij de isolatie of zuivering \an een produkt, dat aanvaardbaar is voor 25 de hieronder beschreven doeleinden, zoals geïllustreerd met het dieyclohexylaminezout in de voorbeelden. De zouten worden bereid door reactie van de zuur-vorm van de verbinding met een equivalent van de base, die het gewenste basische ion verschaft, in een medium, waarin het zout precipiteert, of in een waterig medium en 30 een daarna volgende lyofilisering. De vrije zuur-vorm kan worden verkregen uit het zout onder toepassing van gebruikelijke neutra-lisatie-techhieken, bijvoorbeeld met kaliumhydrogeensulfaat, chloor-waterstofzuur, etc.

De verbindingen met de formule 1, waarin voor-35 stelt waterstof, 0 1t R^-C- of een substituent van het disulfide- 800 1 5 99 7 type, in het bijzonder waarin waterstof voorstelt, zijn bruikbaar als hypotensieve middelen. Zij remmen de omzetting van het deca-peptide angiotensine I in angiotensine II en zijn daarom bruikbaar voor het verminderen van met angiotensine gerelateerde hypertensie.

5 Door de inwerking van het enzyme renine op angiotensinogeen, een pseudoglobuline in bloedplasma, wordt angiotensine I gevormd. Angiotensine I wordt door angiotensine-omzettend enzym (ACE) omgezet in angiotensine II. Deze laatste is een actieve bloeddrukver-hogende stof, die gezien wordt als de oorzaak van variërende vor-10 men hypertensie bij variërende zoogdier-species, bijvoorbeeld ratten en honden. De verbindingen volgens de uitvinding verbreken de angiotensinogeen -* (renine) *· angiotensine I -»· (ACE) ->· angiotensine II keten door remming van het angiotensine-omzettend enzym en vermindering of eliminering van de vorming van de bloed-15 drukverhogende stof angiotensine II. Aldus wordt door toediening van een produkt, dat een of meer verbindingen met de formule 1 bevat, de van angiotensine afhankelijke hypertensie bij de zoogdier-species, die daaraan lijden, verminderd. Een enkelvoudige dosis of bij voorkeur 2-4 deeldoses dagelijks op basis van onge-20 veer 0,1-100 mg per kg lichaamsgewicht per dag, bij voorkeur ongeveer 1-15 mg per kg lichaamsgewicht per dag, is geschikt voor het verminderen van de bloeddruk. De stof wordt bij voorkeur oraal toegediend, maar parenterale toedieningswijzen, zoals de subcutane, intramusculaire, intraveneuze of intraperitoneale toediening, kun-25 nen eveneens worden toegepast.

De verbindingen volgens de uitvinding kunnen eveneens worden gerecepteerd in combinatie met een diureticum voor de behandeling van hypertensie. Een combinatieprodukt, bevattende een verbinding volgens de uitvinding en een diureticum, kan worden 30 toegediend in een doeltreffende hoeveelheid, die omvat (voor een zoogdier van 70 kg) een totale dagelijkse dosis van ongeveer 30 tot 600 mg, bij voorkeur ongeveer 30-300 mg, van een verbinding volgens de uitvinding en ongeveer 15-300 mg, bij voorkeur ongeveer 15-200 mg van het diureticum, aan een zoogdier-species, waar-35 voor een dergelijke behandeling noodzakelijk is. Voorbeelden van diuretica, die gebruikt kunnen worden in combinatie met een verbin- 800 1 5 99 * »

V

δ ding volgens de uitvinding, zijn de thiazide-diuretica, bijvoorbeeld chloorthiazide, hydrochloorthiazide, flumethiazide, hydroglume thiazide, benzdroflumethiazide, methchlothiazide, trichloorme-thiazide, polythiazide of benzthiazide, zowel als ethacrynine-5 zuur, ticrynafeen, chloorthalidon, furodemide, musolimine, bume-tanide, triamtereen, amiloride en spironolacton, en de zouten van dergelijke verbindingen.

De verbindingen met de formule 1 kunnen ten ge-bruike bij de vermindering van de bloeddruk worden gerecepteerd 10 tot preparaten, zoals tabletten, capsules of elixers, voor de orale toediening of steriele oplossingen of suspensies voor de parenterale toediening. Ongeveer 10-500 mg van een verbinding of mengsel van verbindingen met de formule 1 wordt gemengd met een fysiologisch aanvaardbaard vehikel, dragermateriaal, excipiëns, 15 bindmiddel, conserveermiddel, stabiliseermiddel, smaakstof, etc., onder vorming van een eenheidsdoseringsvorm als vereist in de aanvaarde farmaceutische praktijk. De hoeveelheid actieve stof in deze preparaten of produkten is zodanig, dat een geschikte dosering in het aangegeven traject wordt verkregen.

20 De uitvinding wordt verder toegelicht maar niet beperkt door de volgende voorbeelden.

Voorbeeld I

1-/3-(acetylthio^l-oxopropyl/^-oxo-L-proline.

(a) N-carbobenzyloxy-4-hydroxy-L-proline.

25 26,5 g (0,02 mol) 4-hydroxy-L-proline en 32,8 ml (0,23 mol) benzylchloorformiaat worden in reactie gebracht in 200 ml water en 100 ml aceton in tegenwoordigheid van 20 g (0,02 mol) kaliumhydrogeencarbonaat en 69,2 g (0,50 mol) kaliumcarbonaat en opgewerkt met 90 ml geconcentreerd chloorwaterstofzuur als 30 beschreven in Can. J. Biochem. & Physiol. 37_, 584 (1959) ter verkrijging van N-carbobenzyloxy-4-hydroxy-L-proline. Dit produkt wordt in reactie gebracht met cyclohexylamine onder vorming van het cyclohexylaminezout in een opbrengst van 69 g; smeltpunt -193-195°C. Het zout (34 g) wordt geneutraliseerd met N. chloor-35 waterstofzuur, waarbij 27 g van het vrije zuur als een kleurloze glas worden verkregen; / ct_7p° “ “70 (c 1 % in chloroform).

800 1 5 99 9 (b) N-carbobenzyloxy-4-keto-L-proline.

21,5 g (0,81 mol) N-carbobenzyloxy-4-hydroxy-L-proline worden geoxydeerd in 1,2 liter aceton met 83 ml 8N. chroomzuur in zwavelzuur als beschreven in JACS 79, 189 (1957).

5 Teneinde de daarnavolgende filtratie van de chroomzouten te vergemakkelijken worden 30 g Celiet (diatomeeënaarde) toegevoegd aan de acetonoplossing alvorens het oxydatiemiddel wordt toegevoegd. Een luchtroerder wordt gebruikt. Het reactiemengsel wordt afgefiltreerd en het aceton-filtraat wordt geconcentreerd tot 10 ongeveer 300 ml alvorens het te verdunnen met 1 liter chloroform. De oplossing wordt gewassen met 300 ml verzadigde natriumchloride (4 x), gedroogd (MgSO^), afgefiltreerd en het oplosmiddel afgedampt, waarbij men N-carbobenzyloxy-4-keto-L-proline (22,8 g) verkrijgt, dat wordt gekristalliseerd uit ether (50 ml)-hexaan 15 (150 ml), waarbij men 17,2 g (81 %) produkt verkrijgt; smeltpunt = 99-101°C, /o7^6= +17° (c = 1 % in chloroform).

(c) 4-keto-L-próline-hydrobromide

Aan 4,0 g (0,015 mol) N-carbobenzyloxy-4-keto-L-proline worden toegevoegd 20 ml broomwaterstof in azijnzuur 20 (30-32 %).Het mengsel wordt veelvuldig geschud (gedraaid) over een periode van 8 minuten. Na afloop van deze periode (wanneer geen bruising meer optreedt) wordt de geel-oranje oplossing bedekt met een laag van 250 ml ether, waarbij het gomachtige produkt wordt samengewreven. De ether wordt verworpen en de resul-25 terende kleverige vaste stof wordt samengewreven met verse ether en tenslotte met 50 ml acetonitril, waarbij 4-keto-L-proline-hydrobromide wordt verkregen als een kristallijne vaste stof in een gewicht van 2,7 g (85 %); smeltpunt = 153-155°C (ontl.); / a_7^ = -49° (c * 1 % in water).

30 (d) 1-/3-(acetylthio)-l-oxopropyl/-4-oxo-L-proline

Een geroerde oplossing van 4,1 g (0,0195 mol) 4-keto-L-proline-hydrobromide in 50 ml water wordt afgekoeld tot 5°C en in porties behandeld met vast natriumcarbonaat (de schui-ming wordt geregeld door toevoeging van enkele druppels ether) 35 tot een pH van 8,0 (ongeveer 2 g zijn nodig). Vervolgens wordt onder voortgezette roering en afkoeling een oplossing van 3,5 g 8001599 10 (0,012 mol) 3-acetylthiopropionylchloride in 5 ml ethylacetaat in porties toegevoegd met behulp van een pipet ouder handhaving van de pH op 7,0-8,0 door druppelsgewijze toevoeging van 25 % (g/v) natriumcarbonaatoplossing (ongeveer 10 ml). Na ongeveer 5 10 minuten stabiliseert de pH zich op 8,0-8,4. Na een voortgezet te roering en koeling gedurende in totaal 1 uur wordt de oplossing gewassen met ethylacetaat (2 x 50 ml), bedekt met een laag van 50 ml ethylacetaat, geroerd, afgekoeld, zorgvuldig aangezuurd met geconcentreerd chloorwaterstofzuur tot een pH van 2,0, 10 verzadigd met natriumchloride en vervolgens worden de lagen gescheiden. De waterige fase wordt geëxtraheerd met een verdere hoeveelheid ethylacetaat (3 x 50 ml), de gecombineerde organische lagen gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel afgedampt, tenslotte bij 0,2 mm, waarbij 4,8 g van een geel-oranje glasachtig residu wordt 15 verkregen. Het residu wordt opgelost in 35 ml ethylacetaat en behandeld met een oplossing van 3,5 g dicyclohexylamine in 5 ml ethylacetaat. Na enten en wrijven scheidt zich kristallijn 1-/3-(acetylthio-l-oxopropyl)/-4-oxo-L-proline,dicyclohexylamine-zout af; gewicht na afkoeling gedurende de nacht 2,7 g (nagenoeg 20 kleurloos); smeltpunt = 191-193°C (ontl.); / - -24° (c = 1 % in CHC13).

Dit cyclohexylaminezout wordt in het vrije zuur omgezet door het te suspenderen in ethylacetaat en te behandelen met 45 ml 10 %*s kaliumhydrogeensulfaat en roeren totdat twee la-25 gen zijn verkregen. Na de scheiding van de lagen wordt de waterige fase geëxtraheerd met ethylacetaat (4 x 75 ml), de organische lagen worden gecombineerd, gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel wordt afgedampt, waarbij 3,7 g van een licht geel glasachtig materiaal worden verkregen.

30 Anal. Berekend voor CjoH13N05S:

C 46,32, H 5,05, N 5,40, S 12,37 Gevonden: C 47,05, H 5,50, N 5,18, S 12,07 Voorbeeld II

1-(3-mercapto-l-oxopropyl)-4-oxo-L-proline.

35 Argon wordt geleid door een koude oplossing van 9 ml geconcentreerd ammoniumhydroxyde in 22 ml water gedurende 800 1 5 99 % 11 30 minuten. Dit materiaal wordt vervolgens onder koeling en in een argonatmosfeer toegevoegd aan 3,65 g (0,014 mol) l-/3-(acetylthio)-l-oxopropyl/-4-oxo-L-proline, Ongeveer 30 minuten zijn nodig voor het oplossen van het proline-uitgangsmateriaal met behulp van 5 een magnetische roerder. Het roeren in een argonatmosfeer wordt bij kamertemperatuur gedurende nog 2 uren voortgezet, waarna de oplossing wordt geëxtraheerd met 30 ml ethylacetaat (deze bewerking en de hieronder beschreven bewerkingen worden zoveel mogelijk uitgevoerd in een argonatmosfeer). De waterige laag wordt 10 afgekoeld, geroerd, bedekt met een laag van 30 ml ethylacetaat en in porties aangezuurd met 1:1 HC1. Natriumchloride wordt toegevoegd, de lagen worden gescheiden en de waterige fase wordt geëxtraheerd met een verdere hoeveelheid ethylacetaat (3 x 30 ml).

Een bruine gomachtige fractie blijft onoplosbaar in elk van de 15 fasen. Na de droging boven MgSO^ worden de gecombineerde ethyl- acetaat-lagen ingedampt, waarbij een in hafdzaak vast residu wordt verkregen, dat overgaat in een amorfe vaste stof bij samenwrijving daarvan met ether, en de verdamping woret herhaald, waarbij 1,4 g licht geel materiaal worden verkregen.

20 1,3 g van dit materiaal wordt gewreven onder 50 ml ether, afgekoeld gedurende I uur in een argonatmosfeer, afgefiltreerd, gewassen met ether en in vacua gedroogd, waarbij 1,0 g l-(3-mercapto-l-oxopropyl)-4-oxo-L-proline worden verkregen; &£ 0,67 (methanol op silicagel, zichtbaar gemaakt in jodiurn-25 damp).

Anal. Berekend voor CgHjjNO^S . 0,5 ^0 C 42,46, H 5,35, N 6,19, S 13,71 Gevonden: C 42,66, H 5,39, N 6,30, S 13,30

Voorbeeld III

30 (S)-1-/(3-ace ty1thio)-2-methyl-1-oxopropy1)-4-oxo-L-proline.

Volgens de procedure van voorbeeld I maar onder toepassing van D-3-acetylthio-2-methylpropionylchloride in plaats van 3-acetylthiopropionylchloride verkrijgt men (S)-l-/(3-acetyl-thio)-2-methyl-I-oxopropy1/-4-oxo-L-pro1ine.

35 800 1 5 99 k.

12

Voorbeeld IV

(S)ύ1-(3-mercapto-2-methyl-1-oxopropy1)-4-oxo-L-proline.

Het produkt van voorbeeld III wordt behandeld met ammoniumhydroxyde volgens de procedure van voorbeeld II, 5 waarbij men (S)-1-(3-mercapto-2-methy1-1-oxopropy1)-4-oxo-L-proline verkrijgt.

Voorbeeld V

1-/(3-ace ty1thió)-2-tr iflüófmé thy1-1-oxopropy1/T4-oxo-L-proline.

(a) D.L-3-(acetylthÏ,o)-2-tri£luórmethylpropionzuur.

10 a-Trifluormethylacrylzuur (10 g, 0,071 mol) /bereid volgens de procedure, beschreven in J.Chem.Soc. 1954, 37.1/ wordt afgekoeld in een zout-ijs-water-bad, geroerd en in porties behandeld met 5,7 ml (0,075 mol) 97 %'s thiolazijnzuur. Na de toevoeging wordt de gele vloeistof in de koude gedurende 1 uur 15 geroerd en nadat men de temperatuur heeft laten oplopen tot kamertemperatuur wordt gedestilleerd, waarbij 14 g (91 %) D.L- 3-(a<Btylthio)-2-trifluormethylpropionzuur als een licht gele olie wordt verkregen; kookpunt 149-153 °C/13 mm. Het materiaal wordt vast bij opslag daarvan in de koude.

20 (b) D.L-3-(acêtylthio)-2-trifluormethylpropionylchloride.

Het D.L-3-(acetylthio)-2-trifluormethylpropionyl-zuur (7 g, 0,032 mol) wordt behandeld met 18 ml (0,25) herdestil-leerd thionylchloride en het mengsel wordt gedurende 3 uren onder terugvloeikoeling verwarmd. Na de verwijdering van de overmaat 25 thionylchloride op een roterende verdamper wordt het residu ge destilleerd, waarbij 6,8 g D.L-3-(acetylthio)-2-trifluormethyl-propionylchloride als een lichtgele olie worden verkregen: kookpunt = 80-82°C/16 mm.

(c) 1-/(3-acetylthió)-2-trifluórmethyl-l-oxopi.opyl/-4-oxo-30 L-proline.

Het D.L-3-(acetylthio)-2-trifluormethylpropionylchloride wordt in reactie gebracht met 4-keto-L-proline-hydro- bromide volgens de procedure van voorbeeld 1(d) onder vorming van 1-/(3-acety1thio)-2-trifluormethy1-1-oxopropy1/-4-oxo-1-proline.

35 Dit mengsel van diastereoisomeren kan vervolgens onder toepassing van gebruikelijke procedures worden gescheiden.

8001599 13

Voorbeeld VI

l-(3-mercapto-2-trifluormethyl-l-oxopropyl)-4-oxo-L-proline.

Het produkt van voorbeeld V (in de vorm van het diastereoisomeer-mengsel of als de gescheiden isomeren)wordt 5 gehydrolyseerd met geconcentreerde ammonia volgens de procedure van voorbeeld II onder vorming van 1-(3-mercapto-2-trifluormethyl-1-oxopropyl)-4-oxo-L-proline.

Voorbeeld VII

(S)-l-(3-mercap to-2-mèrcap tomethy1-1-oxopropyl)-4-oxo-L-proline.

10 (a) (S)-1-/3-(acétylthio)-2-(acetylthiomethyl)-l-oxopropyl/-4-oxo- L-proline,

Volgens de procedure van voorbeeld I maar onder toepassing van D-3-acetylthiomethy1-3-acetylthiopropionylchloride in plaats van 3-acetylthiopropionylchloride in gedeelte (d) ver-15 krijgt men (S)-l-/3-(acetylthio)-2-(acetylthiomethyl)-l-oxopropyl/- 4-oxo-L-proline.

(b) (S)-1-(3-Mercapto-2-mercaptomethy1-1-oxopropyl)-4-oxo-L-proline.

Het produkt uit gedeelte (a) wordt gehydrolyseerd 20 met geconcentreerde ammonia volgens de procedure van voorbeeld II, waarbij men (S)-l-(3-mercapto-2-mercaptomethyl-l-oxopropyl)- 4-oxo-L-proline verkrij gt.

Voorbeeld VIII

1-(3-mercapto-2-methylthio-l-oxopropyl)-4-oxo-L-proline.

25 (a) 3-(acetylthio)-2-(methylthio)propionzuur 12,5 g (0,094 mol) methyl-2-(methylthio)-acrylaat /bereid uit methyl-2-chlooracrylaat volgens de procedure van Gundesmann c.s. Chemische Berichte _94, 3254 (1916)_/ worden geroerd met IN, waterig natriumhydroxyde (94 ml) onder koeling met 30 ijs. Men laat de temperatuur van het mengsel oplopen tot kamertemperatuur, waarna gedurende 5 uren wordt geroerd. De resulterende oplossing wordt gewassen met ether en vervolgens aangezuurd tot een pH van 2 met geconcentreerd chloorwaterstofzuur. Het vaste precipitaat wordt geëxtraheerd in methyleenchloride en de oplos-35 sing wordt gewassen met verzadigde natriumchloride en het oplosmiddel afgedampt. Het vaste residu, 2-(methylthio)acrylzuur; 8001599 ft 14 smeltpunt = 70-75°C, wordt direct bij de volgende reactie gebruikt.

Equimolaire hoeveelheden 2-(methylthio)acrylzuur en thiolazijnzuur worden in een argonatmosfeer gemengd en gedurende verscheidene uren bij 80°C geroerd onder vorming van 3-(acetyl-5 thio)-2-(methylthio)propionzuur.

(b) 3-(acetylthio)-2-(methylthio)propionzuurchloride.

Het 3-(acetylthio)-2-(methylthio)propionzuur wordt onder terugvloeikoeling verwarmd in thionylchloride gedurende 2 uren. Het reactiemengsel wordt gedestilleerd ter verwijde-10 ring van de overmaat thionylchloride en het produkt wordt in vacuo gedestilleerd, waarbij 3-(acetyithio)-2-(methylthio)propion-zuurchloride wordt verkregen.

(c) 1-/3-(acetylthio)-2-methylthio-1-oxopropyl/-4-oxo-L-proline.

Het 3-(acetylthio)-2-(methylthio)propionzuur-15 chloride wordt in reactie gebracht met 4-keto-L-proline-hydrobromide volgens de procedure van voorbeeld 1(d) onder vorming van 1-/3-(acetylthio)-2-methylthio-l-oxopropyl/-4-oxo-L-proline.

(d) 1-(3-mercap to-2-methylthio-1-oxopropyl)-4-oxo-L-pro1ine,

Het produkt uitgedeelte (c) wordt gehydrolyseerd 20 met geconcentreerde ammonia volgens de procedure van voorbeeld II onder vorming van l-(3-mercapto-2-methylthio-l-oxopropyl)-4-oxo-L-proline.

Voorbeeld IX

1 -(4-mercap to-1 -oxóbuty 1) -4-óxó-L-proline 25 (a) 1-/4-(ace tylthio)-1-oxobuty1/-4-oxo-L-pro1ine.

Volgens de procedure van voorbeeld I maar onder toepassing van 4-acetylthiobutyroylchloride in plaats van 3-ace-tylthiopropionylchloride in gedeelte (d) verkrijgt men l-/4-(ace-tylthio)-l-oxobutyl/-4-oxo-L-proline.

30 (b) 1-(4-mercap to-1-oxobutyl)-4-oxo-L-proline.

Het produkt uit gedeelte (a) wordt gehydrolyseerd met geconcentreerde ammonia volgens de procedure van voorbeeld II, waarbij men l-(4-mercapto-l-oxobutyl)-4-oxo-L-proline verkrijgt. Voorbeeld X

35 j—(2-mercaptó-1-oxoethyl)-4-oxo-L-proline.

(a) 1-/2-(acetylthio)-l-oxóethyl/-4-oxo-L-proline.

8001599 +> 15

Volgens de procedure van voorbeeld I maar onder toepassing van acetylthioacetylchloride in plaats van 3-acetyl-thiopropionylchloride in gedeelte (d) verkrijgt men l-/2-(acetyl-thio)-l-oxoethyl/-4-oxo-L-proline, 5 (b) 1-(2-mercap to-1-oxoethyl)-4-oxo-L-pro1ine.

Het produkt uit gedeelte (a) wordt gehydrolyseerd met geconcentreerde ammonia volgens de procedure van voorbeeld II, waarbij men 1-(2-mercap to-1-oxoe thy1)-4-oxo-L-proline verkrijgt.

10 Voorbeeld XI

l-(3-mercapto-2.2-dimethyl-1-oxopropyl)-4-oxo-L-proline (a) 1-/3-(acetylthio)-2,2-dimethyl-1-oxopropyl/-4-oxo-L-proline

Volgens de procedure van voorbeeld I maar onder toepassing van 3-acetylthio-2.2-dimethylpropionylchloride in plaats 15 van 3-acetylthiopropionylchloride in gedeelte (d) verkrijgt men 1-/3-(acetylthio)-2.2-dimethyl-1-oxopropyl/-4-oxo-L-proline.

(b) · 1-(3-mercapto-2.2-dimethyl-l-oxopropyl)-4-oxo-L-proline

Het produkt uit gedeelte (a) wordt gehydrolyseerd met geconcentreerde ammonia volgens de procedure van voorbeeld II, 20 · waarbij men 1-(3-mercapto-2.2-dimethyl-1-oxopropyl)-4-oxo-L-pro- line verkrijgt.

Voorbeeld XII

(S)-1-(3-mercapto-2-ethyl-1-oxopropyl)-4-oxo-L-proline (a) (S)—1—/3—(acetylthio)-2-ethyl-1-oxopropyl/-4-oxo-L-pro1ine.

25 " Volgens de procedure van voorbeeld I maar onder toepassing van D-3-acetylthio-2-ethylpropionylchloride in plaats van D-3-acetylthio-2-methylpropionylchloride in gedeelte (d) verkrijgt men (S)-l-/3-(acetylthio)-2-ethyl-l-oxopropyl/-4-oxo-L-proline.

30 (b) (S)-l-(3-mercapto-2-ethyl-l-oxopropyl)-4-L-proline

Het produkt uit gedeelte (a) wordt gehydrolyseerd met geconcentreerde ammonia volgens de procedure van voorbeeld II, waarbij men (S)-l-(3-mercapto-2-ethyl-l-oxopropyl)-4-oxo-L-proline verkrijgt.

35 Voorbeeld XIII

l-(3-mercapto-l-oxopropyl)-4-óxo-L-pipecolinezuur 8001599 16 (a) 1-/3-(acetylthio)-l-oxopropyl/-4-oxo-L-pipecolinezuur

Volgens de procedure van voorbeeld I maar onder toepassing van 4-keto-L-pipecolinezuur in plaats van 4-keto-L-proline in gedeelte (d) verkrijgt men 1-/3-(acetylthio)-l-oxo-5 propyl/-4-oxo-L-pipecolinezuur.

(b) 1- (3-Meircapto- l-oxópropyl)-4-oxo-L-pipecolinezuur

Het produkt uit gedeelte (a) wordt gehydroly-seerd met geconcentreerde ammonia, waarbij men l-(3-mercapto-l-oxopropyl)-4-oxo-L-pipecolinezuur verkrijgt.

10 Voorbeeld XIV

(S)-1-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-5-oxo-L-pipecolinezuur (a) (S)-1-/3-(acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl·/-5-oxo-l·-pipecoline-zuur

Volgens de procedure van voorbeeld I maar onder jij toepassing van 5-keto-L-p ip eco line zuur in plaats van 4-keto-L- proline in gedeelte (d) en D-3-acetylthio—2-methylpropionylchlori-de in plaats van acetylthiopropionylchloride in gedeelte (d) verkrijgt men (S)-l-/3-(acetylthio-2-methyl-l-oxopropyl/-5-keto-L-pipeco-linezuur.

20 (b) (S)-l-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-5-keto-L-pipecoline- züur

Het produkt uit gedeelte (a) wordt gehydrolysee-rd met geconcentreerde ammonia volgens de procedure van voorbeeld II, waarbij men (S)-l-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-5-keto-L-25 pipecolinezuur verkrijgt.

Voorbeeld XV

l-(3-mercapto-2“trifluórmethVl-l-oxopropyl)-4-oxo-L-proline.

(a) 3-//(4-methoxy)fenylmethyl/thiö/-2-trifluormethylpropionyl-chloride , 30 Een zuiver mengsel van 1-trifluormethylacryl- zuur (3,9 g) en 4-methoxybenzylthiol (4,3 g) wordt bij 100-110° gedurende 1 uur geroerd. Men laat het mengsel afkoelen tot kamertemperatuur en de vaste stof wordt herkristalliseerd uit cyclo-hexaan, waarbij men 3-//(4-methoxy)fenylmethyl/thio/-2-trifluor-35 meth^ropionzuur verkrijgt; smeltpunt » 72-74°G.

Behandeling van dit zuur met thionylchloride 800 1 5 99 17 geeft 3-//(4-methoxy)fenylmethyl/thio/-2-trifluormethylpropionyl-chloride.

(b) 1-/3-//(4-methoxy)fenylmethyl/thio/-2-trifluormethyl-l-oxo-propyl/-4-oxo-L-proline 5 Het 3-//(4-methoxy)fenylmethyl/thio/-2-trifluor- methylpropionylchloride uit gedeelte (a) wordt in reactie gebracht met 4-keto-L-proline, waarbij men 1-/3-//(4-methoxy)fenylmethyl/thio/- 2-trifluormethyl-l-oxopropyl/-4-oxo-L-proline verkrijgt.

(c) 1-(3-mercaptó-2-trifluórmethyl-l-oxopropyl)-4-oxo-L-proline.

10 Het produkt uit gedeelte (b) wordt gemengd met trifluorazijnzuur en anisool in een stikstofatmosfeer. De oplosmiddelen worden in vacuo verwijderd,, waarbij men als residu 1-(3-mercapto-2-trifluormethy1-1-oxopropy1)-4-oxo-L-proline ver-krijgt.

15 Voorbeeld XVI

(S)-1-(3-mercap to-3-me thyl-3-oxopropy1)-4-oxo-L-proline.

(a) (S)-1-/3-(acetylthio)-3-methyl-1-oxopropy1/-4-oxo-L-proline.

Volgens de procedure van voorbeeld I maar onder toepasang van D-3-acetylthio-3-methylpropionylchloride in plaats 20 van 3-acetylthiopropionylchloride in gedeelte (d) verkrijgt men (S)-1-/3-(acetylthio)-3-methyl-l-oxopropyl/-4-oxo-L-proline.

(b) (S) — 1—(3-mercapto-3-methyl-l-oxopropyl)-4-oxo-L-proline

Het produkt uit gedeelte (a) wordt gehydroly-seerd met geconcentreerde ammonia, waarbij men (S)-1-(3-mercapto-3-25 methyl-l-oxopropyl)-4-oxo-L-proline verkrijgt.

Voorbeelden XVII-XXV

Volgens de procedure van voorbeeld I maar onder vervanging van het 3-acetylthiopropionylchloride door het zuurchloride in kolom I van onderstaande tabel verkrijgt men 30 het acylmercaptoprodukt in kolom II van onderstaande tabel.

8001599 18

rH

I 1 tui <ι- rü I <r

G nr I I 1 ' > J

•rl| pH '—' p-> ^ <U rH ^

r—I ^ !>, I I >H g >> tH

0 rH j3 rH I Λ

P !>, P O !>. ft CM P P

ft ft <U ·Η ,G O I 0) 3

ΙΟ g Λ P H^OrCI

ρ ρ ι p ω ft ο H g

1 a cm g S‘d P S

Ο Ο I rH I x Λ I p

M *--»>> <N Ο P - I

0 o o c I I — ·τ

ii ·η o "» ·-· -< 'i- I

sr — ,G ,a O I

II P P ·Η ^ G ·Ρ 0 1'~~% rH cd ,G Ο Ο P *pj H rH >> rH O P ·Η X> P Λ

H rH rfi f>> /-N rÜ P ^ P

ftp G CD rH rH P Cd Ο tH

g O CU O G >. >> ^ ÜÖ >. rH

o P 6 .n.H^ajö^rH ^--jS b rH ft I U rH P G O G >> rHrHO Ö

O O CM cd O <U ·Η ,Ω *H G >> O ,£3 O

|2^1 ÜiHHrHMrHO GPP P

/-N ft ο o cd ο ,α cuftcd P

10 rH I Ο P Ο P P 4HIU cd r· ·Η ^ 1-3 rH ft ft id rl iJ /"N Ü 1 rC ö I Λ I -π I υ >. ι <-i a p-sP <U Ο Ο p >> p c-s P Q !>* >p

OrH ·Η (<! ·Η I P I rH P P >> •h >> ,g ο P o 3 o fi*. ωορ * ,e!o pi p mh *ö Ö l a <u a) UN I <f I Ο I Ο ·Η l <t a C J3 ·

rH G <U CM 1 CM | CM | P(U'd-|rH-HOO

>i (U G 'τ' ^· •M-'-'M' >iHH s Ο P ·Η ^ rH CM I ^ I ft ·Η rH G O CJ ·Η

N rH —» >-) · ^ \ \ I !-Η^>ί4> P ?*> rH

G I Ol ft CM rH I rH <f Ο I ftMHftOO

ajco p co o ^ ^ w p ro o v—' I '~-/P

,Q ft P ft N ft -"p ft P "*· P '*'* ft

v_/| I I ft ^ Ο I O-^-ll ft > I > I

I — P3 — ο I p— Pihi—oi g i p co I I I xcofti ftcni I >4 cm Χ <r |

-'./-nO^-sO'^OhnO-^'Q p-pO^O^-O

icn^cni ι X cn X l Hwi ι ι l r v_/ O '—·' ' ·—· O ^ O " O P-' rr r- rr Ο

(U I

Ό ·"-

•H O I

P ·Η rH I

O P >, «>1

rH P P I

P I ^ P *>.

Ο CM rH <U 0

rH 1 >i H

£.--0 1 -fi '

Ö ο O cm P — I

(U Ο ·Η p I I —- o —.

ΗΌ-Η p P — -- rH ·Η O

•h ft p cd ο o >. P *h

ΘΡΟ I U ·Η *H G p P

OOP -- r- P P O -- p Η H fi rH rH P P P rH * ojdrH >. >> -- -- p b r* hd o >1 G CÜ P rH rH Cd <U G >1 Η ΐ OOP >>> >i Ο Ό O Ö >,p ,α·Η<υ pi ö /-s ·ρ ,α o GO) PPP O O rH P P J3

oa cdoo ^3 >>ocd P

•Hi UrHO P p pirHCJ cd ft CM /-NJ3rHOICdO)cdCUQ)j3^ o

01 rHO.G'OO'ÜO'd'PÜrH r^(U

P o rH CJ *H /-N ·Η /~· ·Η rH rH >Ί rH Ό ft ·Η G ><·Η P rH UrH P |>^>iji OJ bT* ΟΛ cUGPOI>>0!^0^3GP,GHp

• HP «HOPrHprHTlrHPOaj'HCUO

^3 rH /3·Ηΐ^33^3·ΗΛω·ΗθΡ^·Ρ

P>, PftCMCJcWOPUBftrHOOrG

rHO I Ο · (—I I rH ^ rH I O^rjrHO

>,N CM P CM >ïCM >,ftih,-<l- P G,G OP

OG v ft · G v fi I Gwft<Uü>^>>

N <U '^.rHCMO'^O-d'O'^.rHMHrHOO

G^3 •^.^ν^·Η'>.·Η'-'·Η^.>ί'-'!>>'-,Ρ (UI I .E3 ·— GP I ft'^ftl-C'v.P'^-ί^

nco cOP'^OfOO'^'OCOP'^.CU — P

11 ituiPiPiPiaiiulG

cor p gnftflftrtftOM G<tp 8001599 ♦ 19

Voorbeeld XXVI

(S)-1-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-4-oxo-L-proline-l-adaman-tanaminezout

Het produkt van voorbeeld IV kan eveneens wor-5 den bereid volgens de hieronder beschreven procedure.

(a) N-Carbobenzyloxy-4.4-dimethoxy-L-proline-methylester,

Een geroerde oplossing van 7,8 g (0,03 mol) N-carbobenzyloxy-4-keto-L-proline uit voorbeeld I in 60 ml methanol wordt behandeld met 96 ml trimethylorthoformiaat, gevolgd door 10 0,6 ml geconcentreerd zwavelzuur, waarna men het mengsel geduren de de nacht bij kamertemperatuur laat staan.

De lichtgele oplossing wordt geroerd, behandeld met 1,5 g kaliumcarbonaat, gevolgd door 30 ml water, en de grootste hoeveelheid van het oplosmiddel wordt verwijderd op een ro-15 terende verdamper, waarbij een stroopachtig residu wordt verkregen, dat wordt geschud met 30 ml water en 30 ml chloroform. Na de scheiding van de lagen wordt de waterige fase geëxtraheerd met een verdere hoeveelheid chloroform (3 x 30 ml) en de gecombineerde organische lagen worden gewassen met 45 ml verzadigde natrium-20 chloride-oplossing en gedroogd (MgSO^). Door afdamping van het oplosmiddel verkrijgt men 8,4 g (88 %) N-carbobenzyloxy-4.4-di-methoxy-L-proline-methylester.

(b) N-carbobenzyloxy-4.4-dimethoxy-L-proline.

De ester (8,4 g, 0,026 mol) uit gedeelte (a) 25 wordt opgelost in 80 ml methanol, druppelsgewijze bij -1 tot 4°C behandeld met 18 ml (0,036 mol) 2N. natriumhydroxyde, gedurende 1 uur op 0°C gehouden en gedurende de nacht op kamertemperatuur.

Na de-verwijdering van ongeveer de helft van het oplosmiddel op een roterende verdamper wordt de oplossing verdund met 150 ml 30 water, gewassen met 100 ml ether (de wasvloeistof wordt verworpen) , aangezuurd onder koeling met 63 ml 1:1 chloorwaterstofzuur tot een pH van 2 en geëxtraheerd met ethylacetaat (4 x 750 ml).

De gecombineerde extracten worden gewassen met 50 ml verzadigde natriumchloride-oplossing, gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel 35 afgedampt, waarbij 8,0 g van een lichtgele viskeuze olie worden verkregen. De olie wordt opgelost in 35 ml ethanol, behandeld met 800 1 5 99 20 3,0 g cyclohexylamine in 10 ml ethanol en verdund tot 500 ml met ether. Bij enten en wrijven wordt het kristallijne N-carbobenzyl-oxy-4.4-dimethoxy-L-proline-cyclohexylaminezout afgescheiden; gewicht na de afkoeling gedurende de nacht 7,0 g; smeltpunt = 5 157-159°C (s, 151) / a_7^ = -34° (c = 1 % in EtOH). Dit materi aal wordt herkristalliseerd uit 100 ml acetonitril, waarbij het zout als een kleurloze vaste stof wordt verkregen; smeltpunt = 158-160°C (s, 154°); faj*6 = -33° (c = 1 % in EtOH).

Het N-carbob enzyloxy-4.4-dimethoxy-L-proline-10 cyclohexylaminezout wordt gesuspendeerd in 40 ml ethylacetaat, geroerd en behandeld met 25 ml IN. chloorwaterstofzuur. Nadat twee heldere lagen zijn verkregen worden deze gescheiden en de waterige fase wordt geëxtraheerd met een verdere hoeveelheid ethylacetaat (3 x 40 ml), de gecombineerde organische lagen wor-15 den gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel wordt afgedampt, tenslotte bij 0,2 mm en 40°C, waarbij 7,2 g (70 %) N-carbobenzyloxy-4.4-dimethoxy-L-proline worden verkregen als een lichtgele viskeuze stroop.

(c) 4.4-άίιηΒίίκ^-Ι-ρή)1ίη6.

20 Een oplossing van N-carbobenzyloxy-4.4-dimethoxy- L-proline (72 g, 0,022 mol) in 210 ml methanol-water (2:1) wordt behandeld met 2,3 g % %'s palladium-koolstof en geschud op een Parr-hydrogeneerapparaat gedurende 6 uren. De katalysator wordt afgefiltreerd in een stikstofatmosfeer, gewassen met methanol en 25 de gecombineerde filtraten worden ingedampt, tenslotte bij 0,1-0,2 mm, waarbij een gedeeltelijk kristallijn residu wordt verkregen.

Dit residu wordt opgenomen in 200 ml methanol en de indamping wordt herhaald. Wanneer de vaste stof wordt gewreven onder ether (verdamping wordt weer herhaald) verkrijgt men 3,6 g (95 %) nagenoeg 30 kleurloos 4.4-dimethoxy-L-proline; smeltpunt * 192-194°C (ontl.); /"a_7p6 = -47° (c — 1 % in MeOH).

Een monster, gekristalliseerd uit methanol-ether, is kleurloos en smelt bij 197-198°C (ontl.); / a_7^ = -49° (c - 1 % in MeOH).

35 (d) (S)-1-/3-(acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl/-4.4-dimethoxy- L-proline.

800 1 5 99 21

Een geroerde oplossing van 3,3 g (0,019 mol) o 4.4-dimethoxy-L-proline m 50 ml water wordt afgekoeld tot 5 C en gebracht op een pH van 8,5 door toevoeging van 25 %’s natrium-carbonaatoplossing (g/v). Vervolgens wordt onder voortgezet roe-5 ren en koelen een oplossing van 3,8 g (0,021 mol) D-3-acetyl-thio-2-methylpropanoylchloride in 5 ml ether in porties toegevoegd onder handhaving van de pH op 7,5-8,5 door druppelsgewijze toevoeging van 25 %'s natriumcarbonaatoplossing. Nadat de pH zich heeft gestabiliseerd op 8,2-8m4 (na ongeveer 15 minuten) wordt het 10 roeren en koelen gedurende in totaal 1 uur voortgezet. De oplossing wordt vervolgens gewassen met 50 ml ethylacetaat (de wasvloeistof wordt verworpen), bedekt met een laag van 50 ml ethylacetaat, afgekoeld, geroerd, zorgvuldig aangezuurd met 1:1 chloorwaterstofzuur tot een pH van 2,0, verzadigd met natriumchlo-15 ride en de lagen worden gescheiden. De waterige fase wordt geëxtraheerd met een verdere hoeveelheid ethylacetaat (3 x 50 ml), de gecombineerde organische lagen worden gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel wordt afgedampt, tenslotte bij 0,2 mm, waarbij 6,7 g van een stroperig produkt worden verkregen. Deze stroop wordt 20 behandeld in 70 ml ethylacetaat met 3,9 g dicyclohexylamine, waarbij 6,5 g kleurloos (S)-l-/3-(acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl/- 4.4-dimethoxy-L-proline-dicyclohexylaminezout worden verkregen in twee opbrengsten (3,1 g en 3,4 g); smeltpunt = 158-160°C (s, 145°) ï /“ct_7^6 = -71° (c = 1 % in EtOH).

25 Na de herkristallisatie uit 20 ml hete ethylace taat - 60 ml hexaan weegt het kleurloze vaste zout 6,0 g; smeltpunt = 158-166°C (s, 155°); /~a_7^5 = -69° (c = 1 % in EtOH).

Het dicyclohexylaminezout wordt in het vrije zuur omgezet door 5,0 g te suspenderen in 50 ml ethylacetaat, afkoeling 30 en behandeling met 60 ml 10 %fs kaliumhydrogeensulfaat-oplossing onder vorming van twee heldere lagen. Na de scheiding wordt de waterige fase geëxtraheerd met ethylacetaat (3 x 50 ml), de gecombineerde organische lagen worden gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel wordt afgedampt, tenslotte bij 0,1-0,2 mm en 45°C, waarbij 35 4,1 g (69 %) (S)-l-/3-(acetylthio-)-2-methyl-l-oxopropyl/~4.4- dimethoxy-L-proline als een viskeus, nagenoeg glasachtig materiaal 800 1 5 99 22 worden verkregen; / α_7^ * -112° (c = 1 % in EtOH).

(d) (S )-1- (3-mêr captó-2-nnethyl- 1-óxopropyl) -4.4-dimethoxy-L-proline

Argon wordt geleid door een koude oplossing van 5 8,5 ml geconcentreerd ammoniumhydroxyde in 20 ml water gedurende 0,25 uur. Deze laatste wordt vervolgens onder koeling en in een argonatmosfeer toegevoegd aan 4,1 g (0,013 mol) (S)-1-/3-(acetyl-thio)-2-methyl-l-oxopropyl/-4.4-dimethoxy-L-proline en het mengsel wordt in een ijsbad gezwenkt totdat een lichtgele oplossing 10 is verkregen (ongeveer 15 minuten). Het roeren in een argonatmos-feer wordt bij kamertemperatuur gedurende nog 2 uren voortgezet en vervolgens wordt de oplossing geëxtraheerd met 30 ml ethylace-taat (deze bewerking en de daarnavolgende bewerkingen worden zoveel mogelijk uitgevoerd in een argonatmosfeer), De waterige laag 15 wordt afgekoeld, geroerd, bedekt met een laag van 30 ml ethyl- acetaat en in porties aangezuurd met ongeveer 16 ml 1:1 chloorwa-terstofzuur. De lagen worden gescheiden, de waterige fase wordt geëxtraheerd met een verdere hoeveelheid ethylacetaat (3 x 30 ml), de gecombineerde ethylacetaat-lagen worden gedroogd (MgSO^) en 20 het oplosmiddel wordt afgedampt, waarbij 3,5 g (100 %) (S)-l-(3-mercapto-2-methy1-1-oxopropyl)-4.4-dimethoxy-L-proline worden verkregen als een kleurloze viskeuze stroop; / a_/^ = -72° (c = 1 % in EtOH).

Deze laatste (3,4 g) wordt samengewreven met 25 20 ml ethylacetaat, gewreven (gekrast), verdund met 30 ml hexaan en afgekoeld, waarbij een kleurloze vaste stof met een gewicht van 2,6 g wordt verkregen; smeltpunt = 108-110°C; Γ<x_!^ s -77° (c = 1 % in EtOH).

(f) (S)-1-(3-mercapto-2-methy1-1-oxopropyl)-4-oxo-L-proline, 30 1-adamantanaminezóut

Het (S)-l-(3-mercapto-2-methy1-1-oxopropyl)- 4.4-dimethoxy-L-proline (0,4 g, 0,0014 mol) wordt toegevoegd aan 8 ml geroerd N.HC1, waardoor van te voren gedurende 10 minuten argon is geleid. Nadat een oplossing is verkregen wordt de kolf 35 afgesloten onder argon en gedurende de nacht op kamertemperatuur gehouden. De volgende trappen worden eveneens uitgevoerd in een 8001599 23 argonatmosfeer in de mate waarin dit mogelijk is. Aan de geroerde oplossing worden toegevoegd 20 ml methyleenchloride en na de verzadiging met natriumchloride worden de lagen gescheiden. De waterige fase wordt geëxtraheerd met een verdere hoeveelheid 5 methyleenchloride (3 x 15 ml), de organische lagen worden gecombineerd, gedroogd (MgSO^) en de oplosmiddelen afgedampt, waarbij een schuimachtig residu wordt verkregen. Na de samenwrijving met ether (verdamping herhaald) wordt 0,26 g (S)-l-(3-mercapto-2-methy1-1-oxopropy1)-4-oxo-L-pro1ine verkregen als een amorfe vaste 10 stof (hygroscopisch).

0,245 g van dit produkt worden opgelost in 7 ml acetonitril en behandeld met 0,17 g 1-adamantanamine, waarbij het zout als een volumineuze vaste stof wordt geprecipiteerd. Na de afkoeling gedurende de nacht wordt het kleurloze materiaal afge-15 filtreerd, gewassen met koude acetonitril en ether en in vacuo gedroogd, waarbij men 0,36 g (S)-l-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)- 4-oxo-L-proline, 1-adamantanaminezout (1:1) verkrijgt; smeltpunt = 188-190°C (ontl.); s. 184°; / «7^ = -13° (c = 1 % in methanol).

Anal. Berekend voor CnH,„N0,S. C«„H,.,N . 0,25 H„0: - 9 13 4 10 17 2 20 C 58,96, H 8,02, N 7,24, S 8,29

Gevonden: C 58,60, H 8,37, N 7,36, S 8,29

Voorbeeld XXVII

1.1 *-/dithiobis(1-oxo-3,l-propanediyl)/bis/4-oxo-L-proline/

Het produkt van voorbeeld II wordt opgelost in 25 water en de pH wordt ingesteld op 6,5 door toevoeging van IN.

natriumhydroxyde. Aan deze geroerde oplossing wordt druppelsgewijze een 0,5 M. jodium-oplossing in 95 %'s ethanol (6,34 g jodium/ 50 ml oplossing) toegevoegd onder handhaving van de pH op 5,5-6,5 met IN. natriumhydroxyde. De overmaat jodium wordt verwijderd met 30 verdund natriumthiosulfaat en de oplossing wordt geconcentreerd, afgekoeld en aangezuurd met 1:1 chloorwaterstofzuur. Oplosmiddel wordt toegevoegd en de lagen worden gescheiden. De organische laag wordt gedroogd (MgSO^) en het oplosmiddel afgedampt, waarbij 1.1'-/dithiobis( l-oxo-3.1-propanediyl)/bis/4-oxo-L-proline/ als 35 residu wordt verkregen.

8001599 24

Voorbeeld XXVIII

1-/3“(acetylthio)-1-oxopropyl/-4-oxo-L-proline-methylester,

Een oplossing van het produkt van voorbeeld I in ether wordt behandeld met een kleine overmaat diazomethaan.

5 Na staan bij kamertemperatuur gedurende 2 uren wordt het oplosmiddel afgedampt, waarbij l-/3-(acetylthio)-l-oxopropyl/-4-oxo-L-proline-methylester wordt verkregen.

Voorbeeld XXIX

l-(3-mercapto-l-OXopropyl)-4-oxo-L-proline-methylester 10 Het produkt van voorbeeld XXVIII wordt gehydro- lyseerd met geconcentreerde ammonia volgens de procedure van voorbeeld II, waarbij l-(3-mercapto-l-oxopropyl)-4-oxo-L-proline-methylester wordt verkregen.

Voorbeeld XXX

15 1-(3-mercap to-1-oxopropyl)^-oxo-L-proline-natriumzout.

Een oplossing van 1,0 g van het produkt van voorbeeld II wordt opgelost in 10 ml water en behandeld met een equivalent natriumhydrogeencarbonaat. De oplossing wordt gevriesdroogd, waarbij 1-(3-mercapto-1-oxopropyl)-4-oxo-L-proline-20 natriumzout wordt verkregen.

Op analoge wijze wordt onder gebruikmaking van kaliumhydrogeencarbonaat het overeenkomstige kaliumzout verkregen.

Voorbeeld XXXI

25 (S)-1-(3-mércapto-2-methyl-1-oxopropyl)^-oxo-L-proline- natriumzout

Een oplossing van 1,0 g van het produkt van voorbeeld IV wordt opgelost in 10 ml water en behandeld met ëën equivalent natriumhydrogeencarbonaat. De oplossing wordt 30 gevriesdroogd, waarbij l-(3-mercapto-2-methyl-1-oxopropyl)-4- oxo-L-proline-natriumzout wordt verkregen.

35 Voorbeeld XXXII

1000 tabletten, die elk de volgende bestanddelen 8001599 25 bevatten: 1-(3-mercapto-1-oxopropyl)-4-oxo-L-proline 100 mg

Maïszetmeel 50 mg 5 Gelatine 7,5 mg

Avicel (microkristallijne cellulose) 25 mg

Magnesiumstearaat 2,5 mg 185 mg worden bereid (uit voldoende hoeveelheden in massa) door menging 10 van l-(3-mercapto-1-oxopropyl)-4-oxo-L-proline en maïszetmeel met

een waterige oplossing van het gelatine. Het mengsel wordt gedroogd en gemalen tot een fijn poeder. Het Avicel en vervolgens het magnesiumstearaat worden bijgemengd onder granulering. Dit mengsel wordt vervolgens samengedrukt in een tabletpers onder vorming 15 van 1000 tabletten, die elk 100 mg actief bestanddeel bevatten. Voorbeeld XXXIII

Tabletten, die elk 100 mg (S)-l-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-4-oxo-L-proline bevatten, worden bereid op de in voorbeeld XXXII beschreven wijze.

20 Voorbeeld XXXIV

1000 tabletten, elk bevattende 50 mg l-(3-mer-capto-l-oxopropyl)-4-oxo-L-proline, worden bereid uit de volgende bestanddelen: 1-(3-mercapto-1-oxopropyl)- 25 4-oxo-L-proline 50 g

Lactose 100 g

Avicel 150 g

Maïszetmeel 50 g

Magnesiumstearaat 5 g 30 Het 1-(3-mercapto-1-oxopropyl)-4-oxo-L-proline, lactose en Avicel worden gemengd en het mengsel wordt vervolgens gemengd met maïszetmeel. Magnesiumstearaat wordt toegevoegd. Het droge mengsel wordt samengedrukt in een tabletpers onder vorming van 1000 tabletten van elk 355 mg, die elk 50 mg actief bestand-35 deel bevatten. De tabletten worden bekleed met een oplossing van Methocel E 15 (methylcellulose), bevattende als kleurstof een 800 1 5 99 r * 26 lakvers, die geel no. 6 bevat.

Voorbeeld XXXV

Tabletten, die elk bevatten 50 mg (S)-l-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-4-oxo-L~proline, worden bereid 5 op de in voorbeeld XXXIV beschreven wijze.

Voorbeeld XXXVI

Uit twee stukken bestaande no. 1 gelatine capsules, elk bevattende 100 mg l-(3-mercapto-l-oxopropyl)-4-oxo-L-proline-natriumzout, worden gevuld met een mengsel van de 10 volgende bestanddelen: l-(3-mercapto-l-oxopropyl)-4-oxo-L-proline 100 mg

Magnesiumstearaat 7 mg

Lactose 193 mg

Voorbeeld XXXVII

15 Gelatinecapsules, bevattende 100 mg (S)-l-(3- mercapto-2-methyl-1-oxopropyl)-4-oxo-L-proline-natriumzout, worden bereid opt de in voorbeeld XXXVI beschreven wijze.

Voorbeeld XXXVIII

Een injecteerbare oplossing wordt bereid uit 20 de volgende bestanddelen: l-(3-mercapto-l-oxopropyl)-4-oxo-L-proline 500 g

Methylparaben 5 g

Propylparaben 1 g

Natriumchloride 25 g 25 Water voor injectie qs. 5 liter

De actieve stof, conserveermiddelen en natrium-chloride worden opgelost in 3 liter water en vervolgens wordt het volume gebracht op 5 liter. De oplossing wordt afgefiltreerd door een steriele filter en aseptisch afgevuld in van te voren 30 gesteriliseerde flesjes, die vervolgens worden afgesloten met van te voren gesteriliseerde rubberen afsluitingen. Elk flesje bevat 5 ml oplossing in een concentratie van 100 mg actief bestanddeel per ml oplossing voor injectie.

Voorbeeld XXXIX

35 Een injectie-oplossing, bevattende (S)—1—(3— mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-4-oxo-L-proline wordt bereid op 8001599 27 de in voorbeeld XXXVIII beschreven wijze.

Voorbeeld XL

6000 tabletten, elk bevattende de volgende bestanddelen: 5 l-(3-mercapto-l-oxopropyl)-4-oxo-L-proline 100 mg

Avicel (microkristallijne cellulose) 100 mg

Hydrochlorothiazide 12,5 mg

Lactose U.S.P. 113 mg

Maïszetmeel U.S.P. 17,5 mg 10 Stearinezuur U.S.P. 7 mg 350 mg worden bereid uit voldoende hoeveelheden door vorming van slakken uit l-(3-mercapto-l-oxopropyl)-4-oxo-L-proline, Avicel en een gedeelte van het stearinezuur. De slakken worden gemalen en ge-15 leid door een zeef no. 2, vervolgens gemengd met het hydro- chloorthiazide, lactose, maïszetmeel en de rest van het stearinezuur. Het mengsel wordt samengeperst tot capsule-vormige tabletten van 350 mg in een tabletpers. De tabletten worden gekerfd teneinde het in twee breken daarvan mogelijk te maken.

20 Voorbeeld XLI

Tabletten, bevattende (S)-l-(3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-4-oxo-L-proline en hydrochloorthiazide, worden bereid op de in voorbeeld XL beschreven wijze.

Het produkt van voorbeelden I, III, V-XXV en 25 XXVII-XXIX kan eveneens worden gerecepteerd volgens de procedures van voorbeelden XXXII-XLI.

300 1 5 99

Claims

1. Verbindingen met de algemene formule 1 of fysiologisch aanvaardbare zouten daarvan, waarin R voorstelt waterstof of lager alkyl, Rj en R^ onafhankelijk worden gekozen 5 uit waterstof, lager alkyl, lager alkylthio, -(CE^^-SH en door halogeen gesubstitueerd lager alkyl, R2 voorstelt waterstof of lager alkyl, waarbij R2 slechts lager alkyl is wanneer Rj lager alkyl voorstelt, m voorstelt 0, 1 of 2, n voorstelt 1, 2 of 3, p en q elk voorstellen 1 of 2, waarbij beide niet tegelijkertijd 10 2 zijn, en R^ voorstelt waterstof, een hydrolyseerbaar verwijder bare beschermende groep, een chemisch verwijderbare beschermende groep of, wanneer Rj en R^ een andere betekenis bezitten dan -(®2)n-SH, een groep met de formule la.

2. Verbindingen volgens conclusie 1, met het 15 kenmerk, dat p 2 en q 1 is.

3. Verbindingen volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat p 1 en q 2 is.

4. Verbindingen volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat p en q beide 1 zijn. 2Q

5. Verbindingen met de algemene formule 7 of fysiologisch aanvaardbare zouten daarvan, waarin Rj en R2 beide voorstellen lager alkyl met 1-4 koolstofatomen of R2 voorstelt waterstof en R^ voorstelt waterstof, lager alkyl met 1-4 koolstof-atomen, trifluormethyl, methylthio, of mercaptomethyl, m voor-22 stelt 0 of 1 en R^ voorstelt waterstof, lager alkanoyl met 1-4 koolstofatomen of benzoyl.

6. Verbindingen volgens conclusie 5, met het kenmerk, dat Rj en R2 beide methyl voorstellen en η 1 is.

7. Verbindingen volgens conclusie 5, met het 30 kenmerk, dat R2 waterstof, Rj trifluormethyl en m 1 voorstellen.

8. Verbindingen volgens conclusie 5, met het kenmerk, dat R2 waterstof, Rj methylthio en m 1 voorstellen.

9. Verbindingen volgens conclusie 5, met het kenmerk, dat R2 waterstof, Rj mercaptomethyl en m 1 voorstellen.

10. Verbindingen volgens conclusie 5, met het kenmerk, dat Rj en R2 beide waterstof voorstellen. 8001599

11. Verbindingen volgens conclusie 10, met het kenmerk, dat m 1 is.

12. Verbindingen volgens conclusie 11, met het kenmerk, dat acetyl is,

13. Verbindingen volgens conclusie II, met het kenmerk, dat R^ waterstof is.

14. Verbindingen volgens conclusie 10, met het kenmerk, dat m 0 is.

15. Verbindingen volgens conclusie 5, met het 10 kenmerk, dat R^ waterstof, Rj methyl en m 1 voorstellen.

16. Verbindingen volgens conclusie 15, met het kenmerk, dat R^ acetyl is.

17. Verbindingen volgens conclusie 15, met het kenmerk, dat R^ waterstof is.

18. De verbinding volgens conclusie 17, namelijk (S)-1-(3-mercapto-2-methyl-1-oxopropyl)-4-oxo-L-proline.

19. Farmaceutisch preparaat voor de behandeling van hyper tens ie, met het kenmerk, dat het omvat een farmaceutisch aanvaardbare drager en een of meer hypotensieve middelen of fysio-20 logisch aanvaardbare zouten daarvan met de algemene formule 1, waarin R voorstelt waterstof of lager alkyl, Rj en R^ onafhankelijk worden gekozen uit waterstof, lager alkyl, lager alkylthio, -(CHp^-SH en door halogeen gesubstitueerd lager alkyl, R2 voorstelt waterstof of lager alkyl, waarbij R2 slechts lager alkyl 25 voorstelt wanneer Rj lager alkyl is, m voorstelt 0, 1 of 2, n voor stelt 1, 2 of 3, p en q elk voorstellen 1 of 2, waarbij zij beide niet tegelijkertijd 2 zijn, R^ voorstelt waterstof, een hydroly- seerbaar verwijderbare beschermende groep of, wanneer Rj en R2 een andere betekenis bezitten dan -(CE^^-SH, een groep 30 met de formule la.

20. Farmaceutisch preparaat volgens conclusie 19 met het kenmerk, dat het hypotensieve middel een verbinding is met de formule 17, waarin Rj en R2 beide voorstellen lager alkyl met 1-4 koolstofatomen of R2 voorstelt waterstof en Rj voorstelt 35 waterstof, lager alkyl met 1-4 koolstofatomen, trifluormethyl, methylthio of mercaptomethyl, m voorstelt 0 of 1 en R^ voorstelt 8001599 waterstof, lager alkanoyl met 1-4 koolstofatomen of benzoyl.

21. Preparaat volgens conclusie 20, met het kenmerk, dat Rj, R2 en R^ waterstof en m 1 voorstellen.

22. Preparaat volgens conclusie 20, met het 5 kenmerk, dat Rj methyl, R2 en R^ waterstof en m 1 voorstellen.

23. Preparaat volgens conclusie 19, met het kenmerk, dat het eveneens een diureticum bevat.

24. Werkwijze voor het verminderen van hyperten-sie, mét het kenmerk, dat men een doeltreffende hoeveelheid van 10 een preparaat volgens conclusie 19 toedient.

25. Werkwijze ter bereiding van een keto-gesub-stitueerd poline of pipecolinezuur met de algemene formule 1 of een fysiologisch aanvaardbaar zout daarvan, waarin R voorstelt waterstof of lager alkyl, Rj en R^ onafhankelijk worden gekozen 15 uit waterstof, lager alkyl, lager alkylthio, -(G^) -SH en door halogeen gesubstitueerd lager alkyl, R2 voorstelt waterstof of lager alkyl, waarbij R2 slechts lager alkyl voorstelt wanneer Rj lager alkyl voorstelt, m voorstelt 0, 1 of 2, n voorstelt 1, 2 of 3, p en q elk voorstellen 1 of 2, waarbij deze beide niet 20 tegelijkertijd 2 zijn, en R^ voorstelt waterstof, een hydrolyseer-baar verwijderbare beschermende groep, een chemisch verwijderbare beschermende groep, of, wanneer Rj ^ een andere betekenis bezitten dan -(CE^^-SH, een groep met de formule la, met het kenmerk, dat men (a) een keto-gesubstitueerd proline of pipecoline-25 zuur met de formule 2 koppelt met een zuur of een chemisch equivalent daarvan met de formule 3, waarin R^' voorstelt waterstof of een hydrolyseerbaar of chemisch verwijderbare beschermende groep, onder vorming van een produkt, waarin R^ voorstelt waterstof of een hydrolyseerbaar of chemisch verwijderbare beschermende groep, 30 en men desgewenst deze beschermende groep verwijdert en, wanneer Rj en R^ een andere betekenis bezitten dan -(C^^-SH, het produkt, waarin R^ wat-erstof voorstelt, oxydeert met jodium onder vorming van een produkt, waarin R^ voorstelt een groep met de formule la, of (b) uit het gewenste produkt, waarin de keto-groep is 35 beschermd, de beschermende groep verwijdert.

26. Werkwijze volgens conclusie 25, met het 8001599 kenmerk,dat p 2 en q 1 is.

27. Werkwijze volgens conclusie 25, met het kenmerk, dat p 1 en q 2 is.

28. Werkwijze volgens conclusie 25, met het 5 kenmerk, dat p en q beide 1 zijn.

29. Werkwijze volgens conclusie 25, met het kenmerk, dat het produkt een produkt is met de formule 7 of een fysiologisch aanvaardbaar zout daarvan, waarin Rj en R£ beide voorstellen lager alkyl met 1-4 koolstofatomen of Rg voorstelt water- 10 stof en Rj voorstelt waterstof, lager alkyl met 1-4 koolstof atomen, trifluormethyl, methylthio of mercaptomethyl, m voorstelt 0 of 1 en R^ voorstelt waterstof, lager alkanoyl met 1-4 koolstofatomen of benzoyl.

30. Werkwijze volgens conclusie 29, met het 15 kenmerk, dat Rj en R£ beide methyl en η 1 voorstellen.

31. Werkwijze volgens conclusie 29, met het kenmerk, dat R2 waterstof, Rj trifluormethyl en m 1 voorstellen.

32. Werkwijze volgens conclusie 29, met het kenmerk, dat R2 waterstof, Rj methyl-thio en m 1 voorstellen. 20

33» Werkwijze volgens conclusie 29, met het kenmerk, dat R2 waterstof, Rj mercaptomethyl en m 1 voorstellen.

34. Werkwijze volgens conclusie 29, met het kenmerk, dat Rj en R2 beide waterstof voorstellen.

35. Werkwijze volgens conclusie 34, met het 25 kenmerk, dat m 1 is.

36. Werkwijze volgens conclusie 35, met het kenmerk, dat R^ acetyl is.

37. Werkwijze volgens conclusie 35, met het kenmerk, dat R^ waterstof is.

38. Werkwijze volgens conclusie 35, met het kenmerk, dat m 0 is.

39. Werkwijze volgens conclusie 29, met het kenmerk, dat R2 waterstof, Rj methyl en m 1 voorstellen.

40. Werkwijze volgens conclusie 39, met het ken- 35 merk, dat R^ acetyl is.

41. Werkwijze volgens conclusie 39, met het 8001599 kenmerk, dat waterstof is.

42. Werkwijze volgens conclusie 41, met het kenmerk, dat het produkt (S)-l-(3-mercapto-2-methyl-l“Oxopropyl)-4-oxo-L-proline is.

43. Verbindingen, preparaten en werkwijzen als beschreven in de beschrijving en/of voorbeelden. I.. 8001599