MXPA06001004A

MXPA06001004A - Composiciones para encapsulacion y liberacion controlada.

Info

Publication number: MXPA06001004A
Application number: MXPA06001004A
Authority: MX
Inventors: Wei Zou
Original assignee: 3M Innovative Properties Co
Priority date: 2003-07-31
Filing date: 2004-07-29
Publication date: 2006-04-27
Also published as: EP1651185A1; KR20060056354A; US20080063714A1; AU2004261243A1; WO2005011629A1; KR20060054371A; AU2004261987A1; WO2005012488A3; MXPA06001054A; WO2005012488A2; JP2007500712A; BRPI0413143A; US20080039533A1; CA2534042A1; RU2006102188A; IL173301A0; CA2533128A1; JP2007500713A; EP1651035A2; RU2006102187A

Abstract

La invencion comprende composiciones y metodos utiles para encapsulacion y liberacion controlada de moleculas huesped, tales como farmacos. Las composiciones de la presente invencion comprenden una matriz que incluye moleculas que son entrelazadas en forma no covalente por cationes multivalentes, en donde las moleculas que son entrelazadas en forma no covalente son no polimericas, tienen mas de un grupo carboxi funcional y tienen por lo menos caracter aromatico o heteroaromatico parcial. Las composiciones se caracterizan porque una molecula huesped puede ser encapsulada dentro de la matriz y posteriormente liberada.

Description

COMPOSICIONES PARA ENCAPSULACION Y LIBERACION CONTROLADA CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere al campo de encapsulación y liberación controlada. En particular, la presente invención se refiere a composiciones , y métodos útiles para encapsulación y liberación controlada de moléculas huésped, como por ejemplo, fármacos.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La encapsulación y liberación controlada de una sustancia o material se puede llevar a cabo por medio de una serie de métodos. Típicamente, se puede usar un revestimiento polimérico ya sea para rodear una sustancia o para formar una mezcla con una sustancia. Otro enfoque común utiliza estructuras macroscópicas que tienen aberturas o membranas que consideran la liberación de una sustancia. La encapsulación y liberación controlada encuentran una amplia utilidad, pero son particularmente útiles en el campo del suministro de fármacos de liberación controlada. Muchos revestimientos poliméricos operan para controlar la liberación por medio de hinchamiento en presencia de agua. Esto se basa en el mecanismo de -difusión a Ref 169628 través de una matriz hinchada, lo cual puede ser difícil de controlar. De manera alternativa, los revestimientos poliméricos o mezclas de polímeros con una sustancia pueden operar también mediante erosión o degradación del polímero. En cualquiera de los dos casos, puede ser difícil controlar la velocidad de liberación, ya que la mayoría de los polímeros son de naturaleza altamente polidispersa. Además, hay un número limitado de polímeros adecuados para usar en aplicaciones farmacéuticas y un polímero dado puede interactuar con diferentes sustanqias en formas muy diferentes e impredecibles . Las estructuras macroscópicas, tales como bombas osmóticas, controlan la liberación por medio de absorción de agua del ambiente en una cámara que contiene una sustancia que es forzada desde la cámara a través de un orificio de suministro. Sin embargo, esto requiere una estructura compleja que necesita ser preparada y llenada con la sustancia que se va a suministrar. La protección de un fármaco de condiciones ambientales adversas puede ser aconsejable en ciertas aplicaciones ' de suministro de fármacos. El tracto gastrointestinal representa un ejemplo de un ambiente que puede interferir con la eficacia terapéutica de un fármaco. La capacidad de proteger de manera selectiva un fármaco de ciertas condiciones ambientales, tales como el pH bajo del estómago, y también de ser capaz de suministrar el fármaco de manera selectiva y controlable bajo otras condiciones ambientales, tales como el pH neutro del intestino delgado, es sumamente deseable. La alteración de la velocidad a la cual el fármaco es liberado a un receptor bioactivo (es decir, liberación de fármaco sostenida o controlada) puede ser también aconsejable en' ciertas aplicaciones de suministro de fármacos. Esta liberación de fármaco sostenida o controlada puede tener los efectos deseables de reducir la frecuencia de las dosis, reducir efectos secundarios e incrementar el cumplimiento del paciente .

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN En un aspecto, la presente invención provee una composición para encapsulación y liberación controlada que comprende una matriz insoluble en agua que comprende una molécula anfitriona que es entrelazada de manera no covalente por cationes multivalentes , en donde la molécula anfitriona es no polimérica, tiene más de un grupo carboxi funcional y tiene por lo menos carácter aromático o heteroaromático parcial . La composición se caracteriza porque una molécula huésped puede ser encapsulada dentro de la matriz y posteriormente liberada.

En otro aspecto, la presente invención es una composición formada de partículas que comprende partículas que comprenden una matriz insoluble en agua que incluye una molécula anfitriona que es entrelazada de manera no covalente por cationes multivalentes , en donde la molécula anfitriona es no polimérica, tiene más de un grupo carboxi funcional y tiene por lo menos carácter aromático o heteroaromático parcial. La composición se caracteriza porque una molécula huésped puede ser encapsulada dentro de la matriz y posteriormente liberada. La presente invención puede proveer una matriz que proteja de manera selectiva un fármaco de ciertas condiciones ambientales y luego suministre en forma controlable el fármaco bajo otras condiciones ambientales. En otro aspecto, la matriz será estable en el ambiente ácido del estómago y se disolverá cuando pase al ambiente ' no ácido del intestino cuando se administra a un animal. En otro aspecto, la matriz protegerá a un fármaco de degradación enzimática. Asimismo, la presente invención puede proveer una matriz que aisle de manera efectiva moléculas de fármaco en una partícula, de modo tal que se puedan evitar interacciones no favorables (por ejemplo, reacciones químicas) entre diferentes fármacos en una forma de dosificación combinada, cambios no favorables en un solo componente de fármaco (por ejemplo, maduración de Ostwald o crecimiento de partícula, cambios en forma cristalina) , y/o interacciones no favorables entre un fármaco y uno o más excipientes. En un aspecto, la matriz de la presente invención permitiría formular dos fármacos que son inestables de manera habitual en presencia uno del otro, en una forma de dosificación estable. En otro aspecto, la matriz de la presente invención permitiría formular un fármaco y excipiente que son inestables de manera habitual en presencia uno del otro, en una forma de dosificación estable. La presente invención puede proveer también un método para preparar una matriz que proteja de manera selectiva un fármaco de ciertas condiciones ambientales por medio de un proceso de mezclar directamente una molécula anfitriona, una molécula huésped y un ion de reticulación multivalente. Éstas- y otras características y ventajas de la invención se describirán a continuación en relación con diversas modalidades ilustrativas de la invención.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La figura la-Ib es un dibujo esquemático que muestra una molécula anfitriona individual y un catión multivalente individual .

La figura 2 es un esquema que muestra una matriz insoluble en agua de la presente invención. La figura 3 es un. esquema que muestra una matriz insoluble en agua de la presente invención que comprende además una molécula huésped encapsulada. La figura 4 es un esquema que muestra disociación de los constituyentes de la matriz insoluble en agua y liberación de la molécula huésped en presencia de cationes univalentes .

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención provee una composición para encapsulación y liberación controlada que comprende una matriz insoluble en agua que comprende una molécula anfitriona que es entrelazada en forma no covalente por cationes multivalentes , en donde la molécula anfitriona es no polimérica, tiene más de un grupo carboxi funcional, y tiene por lo menos carácter aromático o heteroaromático parcial. La composición se caracteriza porque una molécula huésped puede ser encapsulada dentro de la matriz y posteriormente liberada. Se ha encontrado ahora de manera sorprendente que ciertas moléculas no poliméricas que contienen más de un grupo carboxi funcional se pueden asociar con cationes multivalentes para formar una matriz insoluble en agua que es capaz de encapsular una molécula huésped y que es capaz además de liberar posteriormente de manera controlable la molécula huésped. Aunque pueden surgir muchas morfologías dependiendo de la composición particular y cantidades de las moléculas anfitrionas y cationes multivalentes, un esquema de una modalidad se describe por medio de la figura l a, b y la figura 2. La figura 1 a, b muestra una representación esquemática de una molécula anfitriona aislada 100 y un catión multivalente aislado 200. La molécula anfitriona 100 tiene funcionalidad aromática 110 que es representada esquemáticamente como un área plana o laminar dentro de la molécula anfitriona 100. La molécula anfitriona 100 ilustrada tiene también dos grupos carboxi funcionales 120 que están unidos a la funcionalidad aromática 110. El catión multivalente 200 se representa esquemáticamente mediante un óvalo. La figura 2 muestra una posible disposición de una matriz insoluble en agua 300. La funcionalidad aromática 110 de moléculas anfitrionas 100 adyacentes forma una pila en capas de moléculas anfitrionas. Estas pilas en capas tienen más interacciones entre sus grupos carboxi 120 y los cationes multivalentes 200 lo cual permite enlazamiento entre las pilas en capas. El reticulación de las pilas en capas de moléculas anfitrionas se permite debido a la valencia múltiple de los cationes. Como se ilustra en la figura 2, un catión divalente es capaz de crear un enlazamiento puente no covalente entre grupos carboxi 120 en dos diferentes moléculas anfitrionas 100. Aunque no se muestra, la valencia adicional de un catión permitiría enlazamientos puente no covalentes adicionales entre grupos carboxi 120. Las matrices insoluoles en agua de la presente invención se caracterizan porque una molécula huésped puede ser encapsulada dentro de la matriz y posteriormente liberada. La encapsulación de una molécula huésped 600 se muestra esquemáticamente en la figura 3, donde en una sola molécula huésped 600 es encapsulada entre cada par de moléculas anfitrionas 100. Aunque la ilustración en la figura 3 muestra un entrelazado individual de moléculas huésped y anfitrionas, se debe entender que la encapsulación descrita aquí se puede interpretar en forma más general . La molécula huésped es dispersada dentro de la matriz de modo tal que es encapsulada. Como tal, la molécula huésped será aislada de manera efectiva por la matriz de un ambiente externo. Por ejemplo, se puede prevenir que una molécula huésped que es habitualmente soluble en agua se disuelva en agua, ya que es encapsulada dentro de una matriz insoluble en agua. Asimismo, las moléculas huésped que son inestables en presencia de un ácido pueden ser aisladas de manera efectiva por la matriz . Por consiguiente, no se degradarán mientras estén encapsuladas- dentro de la matriz. En un aspecto, (como se muestra en la figura 3) la molécula huésped está intercalada en la matriz. Esto es, la molécula huésped está presente dentro de la matriz como moléculas aisladas rodeadas por las moléculas anfitrionas, más que como agregaciones de moléculas huésped dispersas dentro de la matriz. Donde las moléculas huésped y anfitrionas tienen dimensiones similares, esta intercalación puede tomar la forma de una estructura alterna de moléculas anfitrionas y huésped. Donde la molécula huésped es sustancialmente más grande que una molécula anfitriona, varias moléculas anfitrionas pueden rodear una sola molécula huésped. A la inversa, donde la molécula huésped es sustancialmente más pequeña que una molécula anfitriona, la separación de la matriz puede ser tal que más de una molécula huésped pueda ser encapsulada entre moléculas anfitrionas adyacentes . Más de un tipo de molécula huésped puede ser encapsulada dentro de la matriz. Como se muestra en la figura 4, si los cationes multivalentes son reemplazados por cationes univalentes 500 en una solución acuosa, entonces los enlazamientos puente no covalentes se pierden, puesto que los cationes univalentes se asociaran únicamente con un solo grupo carboxi 120. Esto permite que las moléculas anfitrionas 100 se disocien entre sí y liberen las moléculas huésped 600. La liberación de una molécula huésped dependerá de una serie de factores, entre los que se incluyen los tipos y cantidades de moléculas huésped, los tipos y cantidades de cationes multivalentes presentes, los tipos y cantidades de moléculas anfitrionas y el ambiente en el cual está colocada la matriz. La descripción anterior y las figuras 1-4 pretenden ilustrar la naturaleza general de la presente invención, pero se debe entender que las ilustraciones no pretenden especificar interacciones de unión precisas o estructura tridimensional detallada, y que estos esquemas no se deben considerar como limitantes del alcance de la presente invención. Más bien, la descripción adicional a continuación provee mayor explicación de los constituyentes de la presente invención y su disposición. La matriz insoluble en agua comprende una molécula anfitriona que es entrelazada en forma no covalente por cationes multivalentes. Por insoluble en agua se debe entender que la matriz es esencialmente no soluble en agua sustancialmente pura, como por ejemplo, agua desionizada o destilada. En muchos casos, la matriz de la presente invención estará en forma de un precipitado cuando está presente en una solución acuosa. En ciertas modalidades, la matriz puede estar en forma de . un particulado pequeño que puede ser suspendido y/o dispersado de manera uniforme dentro de una solución acuosa, pero esta clase de dispersión no se debe considerar igual a solubilidad. Además, en algunos casos una solución acuosa puede contener moléculas anfitrionas libres y/o cationes multivalentes libres que son solubles en una solución acuosa cuando están presentes como moléculas aisladas o libres, pero estas moléculas anfitrionas libres y/o cationes multivalentes libres no estarán en forma de la matriz insoluble en agua de la invención. Bajo ciertas condiciones la matriz se disolverá en soluciones acuosas que contienen cationes, como será evidente a partir de la descripción que sigue sobre liberación de moléculas huésped, pero esta disolución en soluciones acuosas que contienen cationes específicas no indica solubilidad en agua. La molécula anfitriona es no polimérica, tiene más de un grupo carboxi funcional y tiene por lo menos carácter aromático o heteroaromático parcial . Por no polimérica se entiende que la molécula anfitriona no cumple con la definición estándar de un polímero (Ver Manual de Química y Física,' 78° ed. , p. 2-51, "Una sustancia compuesta de moléculas de masa molecular relativa alta (peso molecular) , cuya estructura comprende esencialmente la " repetición múltiple de unidades derivadas, realmente o de manera conceptual, de moléculas de masa molecular relativa baja") . Aunque las definiciones precisas de masa molecular relativa alta y baja no se enumeran de manera específica, para propósitos de la presente invención el término no polimérico incluye oligómeros de cadena corta, tales como dímeros, trímeros y tetrámeros. En un aspecto, la molécula anfitriona consistente una sola unidad molecular, esto es, no puede ser representada por unidades moleculares repetidas . Las moléculas anfitrionas no poliméricas son típicamente de peso molecular relativamente bajo en comparación con polímeros de peso molecular alto típicos, y de preferencia tienen un peso molecular menor a 2000 g/mol, con mayor preferencia menor a 1000 g/mol y con preferencia superlativa menor a 600 g/mol. La molécula anfitriona tiene más de un grupo carboxi funcional, representado en su forma sin ionizar por la estructura química -C00H. La molécula anfitriona puede tener varios grupos carboxi funcionales, por ejemplo, dos o tres grupos carboxi funcionales, y en muchos casos dos grupos carboxi funcionales . Los grupos carbo.xi se pueden .unir a moléculas de carbono adyacentes en la molécula anfitriona (es decir, HOOC-C-C-COOH) , pero usualmente están unidos a moléculas de carbono que están separadas por uno o más átomos que intervienen. Se debe entender que el término grupo carboxi funcional pretende incluir formas ionizadas libres, tales como la estructura química -COO", así como sales de grupos carboxi funcionales (es decir, carboxilatos) , entre las que se incluyen, mas no se limitan a, por ejemplo, sales de sodio, potasio y amonio. La molécula anfitriona se define además porque tiene por lo menos carácter aromático o heteroaromático parcial. Por carácter aromático parcial, se entiende que por lo menos una porción de la molécula anfitriona está caracterizada por un sistema de electrones p deslocalizados cíclico. En general, todos estos compuestos comparten la característica común de que tienen electrones p deslocalizados que pueden ser expresados al usar múltiples estructuras de resonancia con 4n+2 electrones p. Aromático como término se refiere a estructuras de anillo que contienen solamente carbono, ejemplos de los cuales son grupos fenilo o naftilo. Por carácter heteroaromático parcial, se entiende que por lo menos una porción de la molécula anfitriona está caracterizada por un sistema de electrones p deslocalizados cíclico como en el caso de carácter aromático, con la excepción de que la estructura de anillo contiene por lo menos un átomo que no es carbono, por ejemplo nitrógeno, azufre u oxígeno. Ejemplos de funcionalidades eteroaromáticas incluyen pirrol, piridina, furano, tiofeno y triazina. Las moléculas anfítrionas de preferencia tienen más de un grupo funcional aromático o heteroaromático. Es un aspecto, los grupos carboxi se pueden unir directamente a un grupo funcional aromático o heteroaromático (por e emplo, carboxifenilo) . En otro aspecto, cuando la molécula anfitriona tiene más de un grupo funcional aromático o heteroaromático, los grupos carboxi se disponen de modo tal que cada grupo aromático o heteroaromático no tengan más de un grupo carboxi directamente unido. Ejemplos de tales moléculas anfitrionas incluyen ácido aurintricarboxílico, ácido pamoico, ácido 5- {4- [ [4- (3-carboxi-4-cloroanilino) fenil] (cloro) fenilmetil] anilino} -2-clorobenzoico, sal de amonio de aluminón y derivados de triazina descritos en la patente de U.S. No. 5,948,487 (Sahouani, et al.), cuya descripción se incorpora como referencia. En un aspecto, la molécula anfitriona contiene por lo menos una carga positiva formal. En otro aspecto, la molécula anfitriona puede ser zwiteriónica, esto es, que lleva por lo menos una carga positiva formal y una carga negativa formal . Las moléculas anfitrionas zwiteriónicas de la presente invención llevarán por lo menos una carga negativa. En un aspecto, la carga negativa será llevada a través de un grupo carboxi que tiene un átomo de hidrógeno disociado, -C00~ . La carga negativa puede ser compartida entre los múltiples grupos carboxi funcionales presentes, de modo tal que una representación apropiada de la molécula anfitriona consista de dos o más estructuras de resonancia. De manera alternativa, las cargas negativa o negativa parcial pueden ser llevadas por otros grupos ácidos en la molécula anfitriona.

Derivados de triazina con la estructura que se muestra a continuación. son las moléculas anfitrionas preferidas . grupo carboxi (-COOH) que es para con respecto al enlazamiento de amino a la estructura de base de triazina del compuesto. Como se ilustra arriba la molécula anfitriona es neutra, pero puede existir en formas alternativas, tales como un tautómero de zwiterión o protón, por ejemplo, donde un átomo de hidrógeno es disociado de uno de los grupos carboxilo y se asocia con uno de los átomos de nitrógeno en el anillo de triazina. La molécula anfitriona puede ser también una sal. El grupo carboxi puede ser también meta con respecto al enlazamiento de amino, como se muestra en la fórmula II que sigue (o puede ser una combinación de orientaciones para y meta, lo cual no se muestra) .

Cada R2 se selecciona de manera independiente de cualquier grupo donador de electrones, grupo atrayente de electrones y grupo electrónicamente neutro. De preferencia, R2 es hidrógeno o un grupo alquilo sustituido o no sustituido. Con mayor preferencia, R2 es hidrógeno, un grupo alquilo no sustituido, o un grupo alquilo sustituido con un grupo funcional hidroxi, éter, éster, sulfonato o halogenuro. Con preferencia superlativa R2 es hidrógeno. R3 se puede seleccionar del grupo que consiste de: anillos heteroaromáticos sustituidos, anillos heteroaromáticos no sustituidos, anillos heterociclicos sustituidos y anillos heterociclicos no sustituidos, que están enlazados al grupo triazina a través de un átomo de nitrógeno dentro del anillo de R3. R3 puede ser, mas no se limita a, anillos heteroaromáticos derivados de piridina, piridazina, pirimidina, pirazina, imidazol, oxazol, isoxazol, tiazol, oxadiazol, tiadiazol, pirazol, triazol, triazina, quinolina e isoquinolina . De preferencia, R3 comprende un anillo eteroaromático derivado de piridina o imidazol. Un sustituyente para él anillo heteroaromático R3 se puede seleccionar de, mas no se limita a, cualquiera de los siguientes grupos sustituidos y no sustituidos: alquilo, carboxi, amino, alcoxi, tio, ciano, amida, sulfonato, hidroxi, halogenuro, perfluoroalquilo, arilo, éter y éster. El sustituyente para R3 se selecciona de preferencia de alquilo, sulfonato, carboxi, halogenuro, perfluoroalquilo, arilo, éter y alquilo sustituido con hidroxi, sulfonato, carboxi, halogenuro, perfluoroalquilo, arilo y éter. Cuando R3 es una piridina sustituida el sustituyente se ubica de preferencia en la posición . Cuando R3 es un imidazol sustituido el sustituyente se ubica de preferencia en la posición 3. Ejemplos adecuados de R3 incluyen, mas no se limitan a: 4- (dimétilamino) piridio-l-ilo, 3-metilimidazolio-1-ilo, 4- (pirrolidin-l-il) iridio-l-ilo, 4-isopropilpiridinio-l-ilo, 4- [ (2-hidroxietil) metilamino] piridinio-l-ilo, 4- (3-hidroxipropil)piridinio-l-ilo, 4-metilpiridinio-l-ilo, quinolinio-l-ilo, 4-ter-butilpiridinio-1-ilo, y 4- (2-sulfoetil) iridinio-l-ilo, que se muestran en las fórmulas IV a XIII que aparecen a continuación. Ejemplos de anillos heterocíclicos de los. cuales se puede seleccionar En un aspecto, el grupo R3 mostrado en la fórmula V anterior puede tener también un grupo sustituyente que no sea metilo unido al anillo de imidazol, como se muestra a continuación, o alquilo sustituido o no sustituido. Con mayor preferencia, R es hidrógeno, un grupo alquilo no sustituido, o un grupo alquilo sustituido con un grupo' funcional hidroxi, éter, éster, sulfonato o halogenuro. Con preferencia superlativa R4 es ácido propilsulfónico, metilo u oleilo. Como se ilustra anteriormente la molécula anfitriona de fórmula I y II es neutra; no obstante, las moléculas anfitrionas de la presente invención pueden existir en una forma iónica en donde contienen por lo menos una carga positiva formal. En una modalidad, la molécula anfitriona puede ser zwiteriónica. Un ejemplo de tal molécula anfitriona zwiteriónica, 4-{ [4- (4-carboxianilino) -6- (1-piridinioil) - 1, 3, 5-triazin-2-il] amino Jbenzoato, se muestra en la fórmula III que aparece a continuación donde R3 es un anillo de piridina enlazados al grupo triazina a través del átomo de nitrógeno del anillo de piridina. Como se muestra, el nitrógeno de la piridina lleva una carga positiva y uno de los grupos carboxi funcionales lleva una carga negativa (y tiene un catión disociado, tal como un átomo de hidrógeno) , -C00". m La molécula mostrada en la fórmula III puede existir también en otras formas tautoméricas , tales como donde ambos grupos carboxi funcionales llevan una carga negativa y donde las cargas positivas son llevadas por uno de los nitrógenos en el grupo triazina y el nitrógeno en el grupo piridina. Como se describe en la patente de U.S. No. 5,948,487 (Sahouani, et al.), derivados de triazina con fórmula I se pueden preparar como soluciones acuosas, o se pueden preparar como sales las cuales se pueden volver a disolver después para formar una solución acuosa. Una ruta sintética típica para las moléculas de triazina mostradas en I anterior implica un proceso de dos pasos . Cloruro cianúrico es tratado con ácido 4-aminobenzoico para dar ácido 4-{[4-(4-carboxianilino) -G-cloro-1 , 3 , 5-triazin-2-il] amino}benzoico.

Este intermediario es tratado con un heterociclo que contiene nitrógeno sustituido o no sustituido . El átomo de nitrógeno del heterociclo desplaza el átomo de cloro en la triazina para formar la sal de cloruro correspondiente. El derivado zwiteriónico, tal como el que se muestra en la figura III anterior, se prepara al disolver la sal de cloruro en hidróxido de amonio y hacerla pasar bajo una columna de intercambio de aniones para reemplazar el cloruro con hidróxido, seguido de remoción del solvente. Estructuras alternativas, tales como aquella mostrada en II anterior, se pueden obtener al usar ácido 3 -aminobenzoico en lugar de ácido 4-aminobenzoico. En una modalidad, las moléculas que son entrelazadas en forma no covalente son capaces de formar ya sea una fase o ensamble cromónico cuando se disuelven en una solución acuosa antes de estar en presencia de cationes multivalentes (es decir, antes de que sean entrelazadas) . En otra modalidad, las moléculas que son entrelazadas en forma no covalente son capaces de formar ya sea una fase o ensamble cromónico cuando se "disuelven en una solución acuosa alcalina antes de estar en presencia de cationes multivalentes (es decir, antes de que sean entrelazadas) . Las fases o ensambles cromónicos son bien conocidos (ver, por ejemplo, Manual de Cristales Líquidos, Volumen 2B, Capitulo XVIII, Cromónicos, John Lydon, pp. 981-1007, 1998) y consisten de pilas de moléculas aromáticas de anillos múltiples y planas. Las moléculas consisten de un núcleo hidrofóbico rodeado por grupos hidrofílicos . El apilamiento adopta una serie de morfologías, pero se caracteriza típicamente por una tendencia a formar columnas creadas por una pila de capas . Se forman pilas de moléculas ordenadas que crecen con una concentración creciente, pero son distintas de las fases micelares, en que por lo general no tienen propiedades tipo agente tensioactivo y no presentan una concentración micelar crítica. Típicamente, las fases cromónicas presentarán comportamiento isodésmico, esto es, la adición de moléculas a la pila ordenada conduce a una disminución monotónica en energía libre. En un aspecto, las moléculas que son entrelazadas en forma no covalente son moléculas anfitrionas que formarán ya sea una fase cromónica M o N en solución acuosa antes de' estar en presencia de cationes multivalentes (es decir, antes de que sean entrelazadas) . En otro aspecto, las moléculas que son entrelazadas en forma no covalente son moléculas anfitrionas que formarán ya sea una fase cromónica M o N en una solución acuosa alcalina antes de estar en presencia de cationes muítivalentes (es decir, antes de que sean entrelazadas) . La fase cromonica M típicamente se caracteriza por pilas ordenadas de moléculas dispuestas en un retículo hexagonal. La fase cromonica N se caracteriza por una serie nemática de columnas, esto es, existe una ordenación de largo alcance a lo largo de las columnas característico de una fase nemática, pero hay poca ordenación o no hay ordenación entre las columnas, por lo tanto está menos ordenado que la fase M. La fase cromonica N típicamente presenta una textura schlieren, la cual se caracteriza por regiones de Indice de refracción variable en un medio transparente. La matriz insoluble en agua de la presente invención se compone de moléculas anfitrionas que son entrelazadas en forma no covalente por cationes multivalentes . Este reticulación forma una matriz tridimensional que es insoluble en agua. Por no covalente, se entiende que el reticulación no implica enlaces covalentes (o químicos) formados de manera permanente. Esto es, el reticulación no resulta de una reacción química que conduce a una molécula nueva y más grande, sino más bien resulta de asociaciones de los cationes con las moléculas anfitrionas que son lo suficientemente fuertes para mantenerlos juntos sin experimentar una reacción química. Estas interacciones son típicamente de naturaleza iónica y - pueden resultar de interacción de una carga negativa formal en la molécula anfitriona con la carga positiva formal de un catión multivalente . Debido a que el catión multivalente tiene por lo menos dos cargas positivas, es capaz de formar un enlace iónico con dos o más moléculas anfitrionas, esto es, un reticulación entre dos o más moléculas anfitrionas. La matriz insoluble en agua entrelazada surge de la combinación de interacciones molécula anfitriona - molécula anfitriona directas e interacciones molécula anfitriona - catión. Se prefieren cationes divalentes y/o trivalentes. Se prefiere aún más que una mayoría de los cationes multivalentes sean divalentes . Cationes adecuados incluyen cualesquier cationes divalentes o trivalentes, y se prefieren en particular calcio, magnesio, zinc, aluminio y hierro. En un aspecto donde las moléculas anfitrionas forman una fase o ensamble cromónico en una solución acuosa, las moléculas anfitrionas pueden formar columnas creadas a partir de pilas en capas- de moléculas anfitrionas. Los cationes multivalentes proveen . reticulacións entre estas columnas . Aunque no se desea limitar por ninguna teoría en particular, se cree que las moléculas anfitrionas se asocian entre sí mediante interacción de la funcionalidad aromática y la funcionalidad carboxi . De manera alternativa, un catión multivalente se pueda asociar con dos o más moléculas anfitrionas, lo cual en el caso de un catión divalente forma un "dlmero" que se precipita a partir de la solución y los "dímeros" precipitados interactúan entre sí a través de la funcionalidad de la molécula anfitriona para formar una matriz insoluble en agua. La composición se caracteriza porque una molécula huésped puede ser encapsulada y liberada. Ejemplos de moléculas huésped útiles incluyen colorantes, agentes cosméticos, fragancias, agentes saborizantes y compuestos bioactivos, tales como fármacos, herbicidas, pesticidas, feromonas y agentes antimicóticos . Un compuesto bioactivo se define en la presente como un compuesto destinado para usar en el diagnóstico, cura, mitigación, tratamiento o prevención de enfermedades, o para afectar la estructura o función de un organismo vivo. Los fármacos (es decir, ingredientes farmacéuticamente activos) son moléculas huésped particularmente útiles, las cuales están destinadas a tener un efecto terapéutico en un organismo. De manera alternativa, los herbicidas y pesticidas son ejemplos de compuestos bioactivos destinados a tener un efecto negativo en un organismo vivo, tal como una planta o peste. Aunque cualquier tipo de fármaco se puede emplear con las composiciones de la presente invención, fármacos particularmente adecuados incluyen aquellos que son relativamente inestables cuando se formulan como formas de dosificación sólidas, aquellos que son afectados en forma adversa por las condiciones de pH bajo del estómago, aquellos que son afectados en forma adversa por exposición a enzimas en el tracto gastrointestinal y aquellos que resulta aconsejable proveer a un paciente vía liberación sostenida o controlada. Ejemplos de fármacos adecuados incluyen fármacos antiinflamatorios, tanto esteroidales (por ejemplo, hidrocortisona, prednisolona, tríameinolona) como no esteroidales (por ejemplo, naproxeno, piroxicam) ; antibacterianos sistémicos (por ejemplo, eritromicina, tetraciclina, gentamicina, sulfatiazol, nitrofurantoina, vancomicina, penicilinas tales como penicilina V, cefalosporinas tales como cefalexina, y quinolonas tales como norfloxacina, flumequina, cirpofloxacina e ibafloxacina) ; antiprotozoarios (por ejemplo, metronidazol) ; antimicóticos (por ejemplo, nistatina) ; vasodilatadores coronarios; bloqueadores de los canales del calcio (por ejemplo, nifedipina, diltiazem) ; broncodilatadores (por ejemplo, teofilina, pirbuterol, salmeterol, isoproterenol) · inhibidores de enzimas tales como inhibidores de colagenasa, inhibidores de proteasa, inhibidores de elastasa, inhibidores de lipooxigenasa e inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina (por ejemplo, captopril, lisinopril) ; otros antihipertensivos (por ejemplo, propanolol) ; antagonistas de leucotrieno ; antiulcerativos tales como antagonistas de H2 ; hormonas esteroidales (por ejemplo, progesterona, testosterona, estradiol) ; anestésicos locales (por ejemplo, lidocaína, benzocaxna, propofol) ; cardiotónicos (por ejemplo, digital, digoxina) ,- antitusivos (por ejemplo, codeína, dextrometorfan) ; antihistaminas (por ejemplo, difenhidramina, clorfeniramina, terfenadina) ; analgésicos narcóticos (por ejemplo, morfina, fentanilo) ; hormonas peptídicas (por ejemplo, hormonas del crecimiento de humanos o animales, LHRH) ; productos cardioactivos tales como atriopéptidos ; productos proteináceos (por ejemplo, insulina) ; enzimas (por ejemplo, enzimas antiplaca, lisozima, dextránasa) ; antinauseantes (por ejemplo, carbamazina) ; · inmunosupresores (por ejemplo, ciclospbrina) ; psicoterapeuticos (por ejemplo, diazepam) ; sedantes (por ejemplo, fenobarbital) ,-anticoagulantes (por ejemplo, heparina) ; analgésicos (por ejemplo, acetaminofén) ; agentes antimigraña (por ejemplo, ergotamina, melatonina, sumatripan) ; agentes antiarrítmicos (por. ejemplo, flecainida) ; antieméticos (por ejemplo, metoclopromida, ondansetrón) ; agentes anticáncer (por ejemplo, metotrexato) ; agentes neurológicos tales como antidepresivos (por ejemplo, fluoxetina) y fármacos antiansiolíticos (por ejemplo, paroxetina) ; hemostáticos; y similares, así como las sales y esteres farmacéuticamente aceptables de los mismos. Las proteínas y péptidos son particularmente adecuados para usar con las composiciones de la presente invención. Ejemplos adecuados incluyen eritropoyetinas, interferones , insulina, anticuerpos monoclonales, . factores sanguíneos, factores de estimulación de colonias, hormonas del crecimiento, interleucinas, factores del crecimiento, vacunas terapéuticas y vacunas profilácticas. La cantidad de fármaco que constituye una cantidad terapéuticamente efectiva puede ser determinada fácilmente por los expertos en la técnica con la debida consideración del fármaco particular, el vehículo particular, el régimen de dosis particular y el efecto terapéutico deseado. La cantidad de fármaco variará típicamente de aproximadamente 0.1 a aproximadamente 70% en peso del peso total de la matriz insoluble en agua. En un aspecto el fármaco es intercalado en la matriz. En una modalidad, la molécula huésped puede ser un antígeno que se puede usar como una vacuna. En una modalidad, la molécula huésped puede ser un compuesto modificador de . la respuesta inmune. En una modalidad particular, tanto un antígeno como un modificador de la respuesta inmune están presentes como moléculas huésped, en donde el compuesto modificador de la respuesta inmune puede actuar como un adyuvante de vacuna al activar receptores de tipo toll . Ejemplos de modificadores de la respuesta inmune incluyen moléculas que se sabe inducen la liberación de citocinas, tales como, por ejemplo, interferones tipo I, TNF-a, IL-1, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IP-10, MIP-1, MIP-3, y/o MCP-1, y también pueden inhibir la producción y secreción de ciertas citocinas TH-2, tales como IL-4 e IL-5. Se dice que algunos compuestos IRM suprimen IL-1 y TNF (patente de U.S. No. 6,518,265). Ejemplos de modificadores de la respuesta inmune adecuados incluyen imidazoquinolinas, tales como imiquimod, resiquimod, clorhidrato de 4-amino-alfa, alfa, 2-trimetil-lH-imidazo [4, 5-c] quinolina-l-etanol, y compuestos descritos en las patentes de U.S. Nos. 4,689,338 (Gerster) , 4,929,624 (Gerster et al.), 5,756,747 (Gerster), 5,977,366 (Gerster et al.), 5,268,376 (Gerster), y 5,266,575 (Gerster et al.), las cuales se incorporan todas en la presente como referencia. El suministro combinado de un modificador de la respuesta inmune y un antígeno puede producir una respuesta inmune celular mejorada (por ejemplo, activación CTL) y un cambio de una respuesta inmune Th.2 a Thl . Además de tratar y prevenir otras enfermedades, esta modulación inmune de tipo se puede usar para regular respuestas alérgicas y vacunar contra alergias . El (los) compuesto (s) IRM usado (s) como moléculas huésped pueden ser ya sea los llamados IR s de molécula pequeña, los cuales son compuestos orgánicos relativamente pequeños (por ejemplo, peso molecular por debajo de aproximadamente 1000 daltons, de preferencia por debajo de aproximadamente 500 daltons) , o moléculas biológicas más grandes, tales como el tipo oligonucleótido (por ejemplo, CpG) de IRMs. Igualmente, se pueden usar combinaciones de tales compuestos. Muchos compuestos IRM incluyen una 2-aminopiridina fusionada a un anillo heterociclico que contiene nitrógeno de cinco eslabones. Ejemplos de clases de compuestos IRM de molécula pequeña incluyen, mas no se limitan a, derivados de imidazoquinolinaminas que incluyen, mas no se limitan a, imidazoquinolinaminas amida sustituidas, imidazoquinolinaminas sulfonamida sustituidas, imidazoquinolinaminas urea sustituidas, imidazoquinolinaminas aril éter sustituidas, imidazoquinolinaminas éter heterociclico sustituidas, imidazoquinolinaminas amido éter sustituidas, imidazoquinolinaminas sulfonamido éter sustituidas, imidazoquinolin éteres urea sustituidos e imidazoquinolinaminas tioéter sustituidas; tetrahidroimidazoquinolinaminas que incluyen, mas no se limitan a, tetrahidroimidazoquinolinaminas amida sustituidas, tetrahidroimidazoquinolinaminas sulfonamida sustituidas, tetrahidroimidazoquinolinaminas urea sustituidas, tetrahidroimidazoquinolinaminas aril éter sustituidas, tetrahidroimidazoquinolinaminas éter heterociclico sustituidas, tetrahidroimidazoquinolinaminas amido éter sustituidas, tetrahidroimidazoquiríolinaminas sulfonamido éter sustituidas, tetrahidroimidazoquinolin éteres urea sustituidos e tetrahidroimidazoquinolinaminas tioéter sustituidas; imidazopiridinaminas que incluyen, mas no se limitan a, imidazopiridinas amida sustituidas, imidazopiridinas sulfonamido sustituidas, e imidazopiridinas urea sustituidas; 1,2- imidazoquinolinaminas de puente; 6,7-cicloalquilimidazopiridinaminas fusionadas; imidazonaftiridin aminas; tetrahidroimidazonaftiridinaminas; oxazoloquinolin aminas; tiazoloquinolinaminas ; oxazolopiridinaminas ; tiazolopiridinaminas; oxazolonaftiridinaminas ; y tiazolonaftiridinaminas, tales como las que se describen en, por ejemplo , patentes de U.S. Nos . 4,689,338; 4, 929, 624 ; 4, 988, 815; 5,037,986; 5,175,296; 5,238, 994; 5,266,575; ,268, 376; 5,346, 905; 5,352,784; 5,367, 076; 5,389, 640; ,395, 937; 5,446, 153 ; 5,482, 936 ; 5,693,811; 5, 741, 908; ,756,747; 5, 939, 090; 6, 039, 969; 6,083,505; 6,110, 929; 6,194,425; 6,245, 776; 6,331,539; 6,376,669; 6,451, 810; 6,525, 064; 6,545, 016; 6,545,017; 6, 558,951; y 6,573,273; patente europea 0 394 026; publicación de patente de U.S. No. 2002/0055517; y publicación de patente internacional Nos. WO 01/74343; WO 02/46188; WO 02/46189; WO 02/46190; WO 02/46191; WO 02/46192; WO 02/46193; WO 02/46749; WO 02/102377; WO 03/020889; WO 03/043572 y WO 03/045391. Ejemplos adicionales de I Ms de molécula pequeña que se dice inducen el interferón (entre otras cosas) , incluyen derivados de purina (tales como aquellos que se describen en las patentes de U.S. Nos. 6,376,501 y 6,028,076), derivados de imidazoquinolinamida (tales como los que se describen en la patente de U.S. No. 6,069,149), y derivados de bencimidazol (tales como los que se describen en la patente de U.S. 6,387,938) . Se dice que los derivados de IH-imidazopiridina (tales como los que se describen en la patente de U.S. 6,518,265) inhiben las citocinas TNF e IL-1. Otros IRMs de molécula pequeña que se dice son agonistas de TLR. 7 se muestran en U.S. 2003/0199461 Al . Ejemplos de IRMs de molécula pequeña que incluyen una 4-aminopirimidina fusionada a un anillo heterocíclico que contiene nitrógeno de cinco eslabones incluyen derivados de adenina (tales como los que se describen en las patentes de U.S. Nos. 6,376,501; 6,028,076 y 6,329,381; y en WO 02/08595).. Otros compuestos de IRM incluyen grandes moléculas biológicas tales como secuencias de oligonucleotidos. Algunas secuencias de oligonucleotidos IRM contienen dinucleótidos de citosina-guanina (CpG) y. se describen, por ejemplo, en las patentes de U.S. Nos. 6,194,388; 6,207,646; 6,239,116; 6,339,068; y 6,406,705. Algunos oligonucleotidos que contienen CpG pueden incluir motivos estructurales inmunomoduladores sintéticos tales como aquellos que se describen, por ejemplo, en las patentes de U.S. Nos. 6,426,334 y 6,476,000. CpG 7909 es un ejemplo específico. Otras secuencias de nucleótidos IRM carecen de CpG y se describen, por ejemplo, en la Publicación de Patente Internacional No. WO 00/75304.

La combinación de antígeno y modificador de la respuesta ' inmune en composiciones de la presente invención, con uno o el otro o ambos presentes como moléculas huésped, puede conducir a una eficacia o respuesta de vacuna mejorada. En un aspecto, la combinación de antígeno y modificador de la respuesta inmune en composiciones de la presente invención conduce a una eficacia o respuesta de vacuna mejorada de vacunas terapéuticas que requieren proliferación de Thl o CTL. En otro aspecto, la eficacia o respuesta de vacuna mejorada se puede proveer al aumentar la presentación de antigeno (por ejemplo, via epítopes agregados) . En un aspecto, la eficacia o respuesta de vacuna mejorada se puede proveer por medio de un efecto de depósito. Las composiciones formadas de partículas de la presente invención pueden ser de un tamaño comparable en dimensión con patógenos que el sistema inmunologico ha desarrollado para combatir y, por lo tanto, pueden ser naturalmente dirigidas para absorción por células que presentan antígenos. Igualmente, las composiciones de la presente invención pueden ser suministradas por un medio dirigido para realizar un suministro localizado a un nodulo linfático drenante. La fagocitosis de una partícula que contiene tanto antígeno como modificador de la respuesta inmune puede considerar un suministro simultáneo del modificador de la respuesta inmune y el antígeno a la misma célula. Esto puede mejorar la presentación cruzada de un antxgeno de otro modo extracelular como si fuera un antígeno intracelular (como un antígeno del cáncer o antígeno viral) . Esto puede conducir a un reconocimiento de antígeno mejorado, y activación y proliferación de CTL, y considera un ataque eficiente contra células infectadas . Cuando la molécula huésped es un fármaco, la molécula anfitriona es por lo general no terapéutica. Donde la molécula anfitriona está presente como una matriz insoluble en agua entrelazada puede modular o controlar la liberación del fármaco encapsulado, lo cual por lo general afectará la actividad terapéutica del fármaco. Aunque este efecto en la actividad terapéutica puede ser un resultado directo de la función de la molécula anfitriona en la presente invención, la molécula anfitriona en sí es usualmente no terapéutica una vez que es liberada de la matriz insoluble en agua. Por ende, por no terapéutico se entiende que la molécula anfitriona sustancialmente no tiene actividad terapéutica cuando es suministrada a un organismo deseado (por ejemplo, tal como una persona, mamífero, pez o planta) en forma de moléculas aisladas. La molécula anfitriona es de preferencia en gran parte inerte en relación con las interacciones biológicas con el organismo y, por consiguiente, servirá como un vehículo para el fármaco y como un medio para controlar la liberación del fármaco. La molécula anfitriona es de preferencia no tóxica, no mutagénica y no irritante cuando es provista en cantidades y formas de dosificación adecuadas suministradas al organismo. En un aspecto, la presente invención puede proveer una composición formada de partículas que comprende partículas que incluyen una matriz insoluble en agua que incluye una molécula anfitriona que es entrelazada en forma no covalente por cationes multivalentes, en donde la molécula anfitriona es no polimérica, tiene más de un grupo carboxi funcional y tiene por lo menos carácter aromático o heteroaromático parcial. La composición se caracteriza porque una molécula huésped puede ser encapsulada dentro de la matriz y posteriormente liberada. El tamaño y forma apropiados de las partículas variará dependiendo de su uso deseado. Por ejemplo, cuando un fármaco es encapsulado dentro de la matriz, el tamaño y forma apropiados de las partículas variará dependiendo del tipo y cantidad de fármaco dispersado dentro de la matriz, la vía de suministro deseada de las partículas y el efecto terapéutico deseado. Aunque se pueden preparar partículas grandes (por ejemplo, en el orden de varios milímetros en diámetro) , el diámetro medio de masa de las partículas de la presente invención es típicamente menor a 100 µt? en tamaño, usualmente menor; a 25 µt? en tamaño y en algunos casos menor a 10 µt? en tamaño. En ciertos casos se puede desear tener partículas menores a 1 µ?a en tamaño. En particular, estos tamaños de partícula pueden ser aconsejables para suministro oral de fármacos que son inestables en el intestino debido a la presencia de ciertas enzimas. Ejemplos de tales fármacos incluyen proteínas, péptidos, anticuerpos y otras moléculas biológicas que pueden ser particularmente sensibles a los procesos enzimáticos del cuerpo. En tales casos, estas pequeñas partículas pueden ser absorbidas en la pared intestinal directamente, de modo tal que la partícula se disuelva principalmente después de pasar la barrera intestinal, de manera que la cantidad de fármaco sensible expuesto al ambiente intestinal sea reducida al mínimo. Las partículas son típicamente esféricas en su forma general, pero también pueden tomar cualquier otra forma adecuada, tal como agujas, cilindros o placas. Las partículas se pueden disolver en una solución acuosa de cationes univalentes u otros compuestos no iónicos, tales como agentes tensioactivos . Los cationes univalentes típicos incluyen sodio y potasio. La concentración de cationes univalentes necesaria para disolver las partículas dependerá del tipo y cantidad de las moléculas anfitrionas dentro de la matriz, pero para la disolución completa de las partículas debe haber por lo menos en general una cantidad molar de cationes univalentes equivalente a la cantidad molar de grupos carboxi en la matriz. De esta manera, habrá por lo menos un catión univalente para asociar con cada grupo carboxi . La velocidad a la cual una partícula se disuelve se puede ajustar también al ajustar el tipo y cantidad de catión multivalente usado para reticulación. Aunque cationes divalentes serán suficientes para entrelazar la matriz, cationes de valencia más alta proveerán reticulación adicional y conducirán a velocidades de disolución más lentas. Además de la valencia, la velocidad de disolución dependerá también del tipo de catión particular. Por ejemplo, un catión divalente no coordinante, tal como magnesio, generalmente conducirá a una disolución más rápida que- un catión divalente coordinante, tal como calcio o zinc, el cual tiene un orbital de electrón vacío capaz de formar un enlace de coordinación con un par de electrones libres . Diferentes tipos de · catión se pueden mezclar para dar una valencia de catión promedio que no sea un entero. En particular, una mezcla de cationes divalentes y trivalentes ocasionará generalmente una velocidad de disolución más lenta que una matriz similar donde todos los cationes son divalentes. En un aspecto, todas las moléculas huésped serán liberadas con el tiempo, pero se puede desear en ciertas aplicaciones que solamente una porción de las moléculas huésped sea liberada.

Por ejemplo, el tipo o cantidad de molécula anfitriona y catión multivalente se pueden ajustar de manera tal que la cantidad total de moléculas huésped que son liberadas varié dependiendo del ambiente en el cual son colocadas . En una modalidad, las partículas no se disolverán en una solución ácida y se protegen así las moléculas huésped sensibles al ácido de la degradación. En otra, las partículas no se disolverán en una solución ácida que contiene cationes univalentes y se protegen así las moléculas huésped sensibles al ácido de la degradación. En el caso particular donde la molécula huésped es un fármaco, dos tipos comunes de perfiles de liberación general que se desean son inmediata o sostenida. Para uso de liberación inmediata típicamente se desea que la mayor parte del fármaco sea liberada en un periodo de tiempo menor a aproximadamente 4 horas, por lo general menor a aproximadamente 1 hora, con frecuencia menor a aproximadamente 30 minutos, y en algunos casos menor a aproximadamente 10 minutos. En algunos casos se deseará que la liberación del fármaco sea casi instantánea, "esto es, tendrá lugar en cuestión de segundos. Para usos de liberación sostenida (o controlada) típicamente se desea que la mayor parte del fármaco sea liberada en un periodo de tiempo mayor a o igual a aproximadamente 4 horas. Se pueden desear periodos de un mes o más, por ejemplo, en diversas aplicaciones implantables . Las dosificaciones de liberación sostenida orales generalmente liberarán la mayor parte del fármaco en un periodo de tiempo de aproximadamente 4 horas a aproximadamente 14 días, algunas veces aproximadamente 12 horas a aproximadamente 7 días. En un aspecto, se puede desear liberar la mayor parte del fármaco en un periodo de tiempo de aproximadamente 24 a aproximadamente 48 horas. Igualmente, se puede desear una combinación de liberación inmediata y sostenida, donde por ejemplo, una dosificación provee una ráfaga inicial de liberación para aliviar rápidamente una condición particular seguida de un suministro sostenido para proveer un tratamiento prolongado de la condición. En algunos casos puede ser aconsejable tener una liberación pulsátil o multimodal del fármaco, de manera tal que la velocidad de liberación varíe con el tiempo, por ejemplo, al incrementar y disminuir para coincidir con el ritmo circadiano de un organismo. Asimismo, puede ser aconsejable proveer una liberación retardada del fármaco, de manera tal que una dosificación pueda ser administrada a un tiempo conveniente, tal como justo antes de ir a dormir, pero prevenir la liberación del fármaco hasta un tiempo posterior cuando pueda ser más eficaz, como por ejemplo, justo antes de despertar. Un enfoque para llevar a cabo perfiles de liberación p lsátil, multimodal o retardada puede ser mezclar dos o más tipos de partículas que tienen diferentes características de liberación de fármaco. De manera alternativa, se pueden formar partículas que tengan dos o más fases distintas, tal como un núcleo y revestimiento, que tengan diferentes características de liberación de fármaco. Las partículas de la presente invención que encapsulan un fármaco encuentran uso particular en suministro de fármacos de dosificación oral. Las formas de dosificación oral típicas incluyen dosificaciones sólidas, tales como tabletas y cápsulas, pero pueden incluir también otras dosificaciones administradas oralmente, tales como suspensiones líquidas y jarabes. En un aspecto, las composiciones de la presente invención serán partículas que son estables en solución ácida y que se disolverán en una solución acuosa de cationes univalentes. En otro aspecto, las partículas serán estables en el ambiente ácido del estómago y se disolverán cuando pasen al ambiente no ácido del intestino cuando se administran a un animal . Cuando las partículas son estables en solución ácida, las partículas pueden generalmente ser estables por periodos de tiempo mayores a 1 hora, algunas veces más de 12 horas y pueden ser estables por más de 24 horas cuando están presentes en un ambiente ácido con un pH menor a 7.0, por ejemplo, menor a aproximadamente 5.0, y en algunos casos menor a aproximadamente 3.0. Por ejemplo, partículas de la presente invención pueden proteger a la penicilina G de degradación en ambientes ácidos. Cuando es expuesta a un ambiente ácido, como por ejemplo, una solución con un pH menor a aproximadamente 5.0, la penicilina G se degrada rápidamente. La penicilina G colocada en una solución con un pH aproximadamente 2.0 y almacenada durante 2 horas a 37 °C se degrada casi por completo. La penicilina G se puede encapsular en partículas de la presente invención, tales como aquellas que comprenden derivados de triázina de fórmula I, y proteger de la degradación en un ambiente ácido. Por ejemplo, la penicilina G encapsulada en partículas entrelazadas que comprenden 4-{ [4- (4-carboxianilino) -6- (3-metil-lH-imidazol-3-ío-l-íl) -1,3, 5-triazin-2-il] amino}benzoato y una mezcla de cationes de magnesio y aluminio se puede exponer a una solución ácida con un pH de 2.0 durante 2 horas a 37°C. La mayor parte de la penicilina permanece sin degradar después de la remoción de las partículas de la solución ácida y disolución de las partículas en una solución de cloruro de sodio. En otro aspecto, el diámetro aerodinámico medio de masa de partículas que contienen fármaco es con frecuencia menor a 10 µp? y en algunos casos menor a 5 µt?, de manera tal que las partículas sean respirables cuando se suministran al tracto respiratorio de un animal mediante la vía de suministro por inhalación. El suministro de partículas por inhalación es bien conocido y se puede realizar por medio de diversos dispositivos, entre los que se incluyen inhaladores de dosis medida presurizados, por ejemplo, aquellos que se describen en la patente de U.S. No. 5,836,299 (Kwon et al.), cuya descripción se incorpora como referencia; inhaladores de polvo seco, por ejemplo, aquellos que se describen en la patente de U.S. No. 5,301,666 (Lerk, et al.), cuya descripción se incorpora como referencia; y nebulizadores , por ejemplo, aquellos que se describen en la patente de U.S. No. 6,338,443 (Piper, et al.), cuya descripción se incorpora como referencia. Se debe entender que las partículas respirables de la presente invención se pueden incorporar en una forma de dosificación por inhalación que usan métodos y procesos disponibles al experto en la técnica. Las partículas que contienen fármaco de la presente invención pueden encontrar uso adicional en dosificaciones, de suministro de fármaco que no sean orales o por inhalación, por ejemplo, por medio de inyección intravenosa, intramuscular o intraperitoneal , tales como soluciones o suspensiones acuosas o de aceite; por medio de inyección subcutánea; o por medio de incorporación en formas de dosificación transdérmicas , tópicas o mucosas, como por ejemplo, cremas, geles, parches adhesivos, supositorios y aerosoles nasales. Las composiciones de la presente invención se pueden también implantar o inyectar en diversos órganos y tejidos internos, por ejemplo, tumores cancerosos, o se pueden aplicar directamente a cavidades corporales internas, tales como durante procedimientos quirúrgicos . En una modalidad, la presente invención comprende formulaciones de suspensiones medicinales que comprenden partículas de la presente invención y un líquido. Las suspensiones de partículas en propelentés, tales como hidrofluorocarbonos u otros propelentés adecuados, pueden encontrar uso en inhaladores de dosis medida presurizados usados para suministro de fármaco por inhalación o nasal. Las suspensiones de partículas en medios con base acuosa pueden encontrar uso en nebulizadores usados para suministro de f rmacos por inhalación o nasal . De manera alternativa, las suspensiones de partículas en medios acuosos pueden encontrar también utilidad en suministro intravenoso o intramuscular. Las partículas se pueden preparar al mezclar moléculas anfitrionas con cationes multivalentes . Típicamente esto se hace al disolver la molécula anfitriona en una solución acuosa y posteriormente agregar cationes multivalentes para ocasionar la precipitación de las partículas, o de manera alternativa, al agregar una solución acuosa · de moléculas anfitrionas disueltas a una solución de cationes multivalentes . Los fármacos (u otras moléculas huésped) se pueden dispersar intercalar en la matriz al agregar fármaco ya sea a la solución acuosa de moléculas anfitrionas o la solución de cationes multivalentes antes de la precipitación. De manera alternativa, un fármaco se puede dispersar o disolver en otro excipiente o vehículo, tal como un aceite o propelente, antes de mezclar con las soluciones de moléculas anfitrionas o cationes multivalentes . Las partículas pueden ser recolectadas mediante, por ejemplo, filtración, aspersión u otro medio y secar para retirar el vehículo acuoso. En un aspecto, una molécula huésped, tal como un fármaco, se puede disolver en una solución acuosa que contiene agente tensioactivo antes de la introducción de la molécula anfitriona. Agentes tensioactivos adecuados incluyen, por ejemplo, ácidos o alcoholes grasos saturados de cadena larga y ácidos o alcoholes grasos mono o poliinsaturados . El ácido oleil fosfónico es un ejemplo de un agente tensioactivo adecuado. Aunque no se desea limitar por ninguna teoría particular, se piensa que el agente tensioactivo ayuda a dispersar la molécula huésped de modo que se pueda encapsular mejor. En un aspecto, un compuesto alcalino es agregado a la solución de moléculas huésped antes de la introducción de la molécula anfitriona. De manera alternativa, un compuesto alcalino se puede agregar a la solución de moléculas anfitrionas antes de mezclar las soluciones de moléculas huésped y moléculas anfitrionas. Ejemplos de compuestos alcalinos adecuados incluyen etanolamina, hidróxido de sodio o litio, o aminas tales como mono, di, triaminas o poliaminas. Aunque no se desea limitar por la teoría, se piensa que los compuestos alcalinos ayudan a disolver el compuesto anfitrión, particularmente donde el compuesto anfitrión es un compuesto de triazina tales como los que se describen en las fórmulas I y II anteriores. En un aspecto, la presente invención provee un método para preparar una composición para encapsulación y liberación controlada que comprende combinar una solución acuosa y un compuesto por lo menos parcialmente aromático o heteroaromático que incluye más de un grupo carboxi funcional para formar una solución que tiene una fase cromónica, y combinar la solución que tiene una fase cromónica con una solución de iones multivalentes para formar una composición precipitada para suministro de f rmacos. De manera alternativa, las; composiciones de la presente invención se pueden preparar como películas, revestimientos o depósitos directamente en contacto con un paciente. Por ejemplo, los cationes multivalentes y la molécula anfitriona no polimérica se pueden mezclar juntos o aplicar en forma consecutiva a un sitio particular en un paciente y formar así un revestimiento o depósito en el lugar dependiendo del método de aplicación. Un ejemplo de esto es formar un revestimiento tópico al aplicar de manera independiente los cationes multivalentes y la molécula anfitriona no polimérica a la piel de un paciente y permitirles permanecer en contacto durante tiempo suficiente para formar - una matriz entrelazada. Otro ejemplo es inyectar de manera independiente cationes multivalentes y las moléculas anfitrionas no poliméricas en un tejido u órgano corporal, tal como un tumor canceroso, y permitirles permanecer en contacto durante tiempo suficiente para formar una matriz entrelazada. Otro ejemplo es aplicar de manera independiente los cationes multivalentes y las moléculas anfitrionas no poliméricas directamente a un tejido interno durante un procedimiento quirúrgico, por ejemplo, para formar una matriz entrelazada que comprende un antibiótico para reducir la posibilidad de infección después de un procedimiento quirúrgico. En un aspecto la invención comprende un equipo para tratar a un paciente con una composición para encapsulación y que comprende un agente de reticulación que incluye cationes multivalentes; un agente de molécula anfitriona que comprende una molécula anfitriona no polimérica que tiene más de un grupo carboxi funcional y por lo menos carácter aromático o ' heteroaromático parcial; y un fármaco. El equipo puede comprende también un aplicador para aplicar la molécula anfitriona al paciente; un aplicador para aplicar el agente de reticulación al paciente; y un aplicador para aplicar el fármaco paciente. El aplicador para aplicar la molécula anfitriona, el agente de reticulación y el fármaco al paciente se caracterizan porque la molécula anfitriona, el agente de reticulación y el fármaco forman una matriz insoluble en agua entrelazada en forma no covalente caracterizada porgue el fármaco es encapsulado dentro de la matriz y posteriormente liberado. El agente de reticulación, agente de molécula anfitriona y fármaco pueden estar presentes en una forma adecuada para ser aplicada a un paciente. Formas típicas incluyen secada o en polvo, como una solución de cationes multivalentes , por ejemplo, como una solución acuosa, o como una crema o gel . En un aspecto, el agente de molécula anfitriona y el fármaco están presentes como una mezcla, por ejemplo, como una mezcla en una solución acuosa . El aplicador para aplicar el agente de molécula anfitriona al paciente, el aplicador para aplicar el agente de reticulación al paciente, y el aplicador para aplicar el fármaco al paciente se pueden seleccionar de manera independiente de cualquier método adecuado para poner cada componente en contacto con el paciente. Los aplicadores adecuados incluyen, por ejemplo, jeringas, bombas de aerosol, cepillos, aplicadores con bola movible e inhaladores de dosis medida. En una modalidad, el aplicador para aplicar la molécula anfitriona al paciente es una jeringa, el aplicador para aplicar el agente de reticulación al paciente es una jeringa y el aplicador para aplicar el fármaco al paciente es una jeringa. Se puede usar un solo aplicador para aplicar uno o más del agente de molécula anfitriona, el agente de reticulación y el fármaco. En una modalidad, el aplicador para aplicar tanto una mezcla de agente de molécula anfitriona y el fármaco, y el agente de reticulación es una jeringa de doble barril. En un aspecto, la jeringa de doble barril se adapta para hacer la mezcla de agente de molécula anfitriona y el fármaco, y el agente de reticulación- a medida que se aplican al paciente. En otro aspecto, la jeringa de doble barril se adapta para aplicar de manera independiente la mezcla de agente de molécula anfitriona y el fármaco, y el agente de reticulación al paciente. Las composiciones de la presente invención pueden incluir de manera opcional uno o más aditivos tales como, por ejemplo, iniciadores, cargas, plastificadores, entrelazadores, agentes de pegajosidad, aglutinantes, antioxidantes, estabilizadores, agentes tensioactivos, solubilizadores, mejoradores de permeación, adhesivos, agentes mejoradores de viscosidad, agentes colorantes, agentes saborxzantes y mezclas de los mismos. En un aspecto, la presente invención comprende un método para suministro de fármacos a un organismo, tal como una planta o animal . El método comprende proveer una composición que incluye una matriz insoluble en agua que incluye una molécula anfitriona que es entrelazada en forma no covalente por cationes multivalentes y un fármaco encapsulado dentro de la matriz. La molécula anfitriona es no polimérica, tiene más de un grupo carboxi funcional y tiene por lo menos carácter aromático o heteroaromático parcial . La composición es suministrada a un organismo de modo tal que entre en contacto con cationes univalentes y libere el fármaco encapsulado y se deja que el fármaco liberado permanezca en contacto con una parte del organismo durante un • periodo de tiempo suficiente para llevar a cabo el efecto terapéutico deseado. En una modalidad, la composición es suministrada a un animal en forma oral. En otra, la composición no liberará el fármaco encapsulado hasta que haya pasado al intestino. El fármaco encapsulado puede ser liberado inmediatamente al pasar al . intestino o puede ser liberado en una manera sostenida mientras reside dentro del intestino. En algunos casos, el fármaco encapsulado puede pasar también a o a través de la membrana intestinal y liberar el fármaco en otra parte en el animal, tal como en el sistema circulatorio. En otra modalidad, la composición es suministrada vía oral o inhalación nasal.

EJEMPLOS Preparación de estándares de color azul de Evans Una serie de soluciones de 20 mL que se vá a usar como estándares de color se preparó como sigue. Se preparó una solución de 0.0108 g de azul de Evans (sal de tetrasodio del ácido 6 , 6 ' - [Dimetil [1 , 1' -bifenil] -4 , 4 ' -diil) is (azo) ] bis [4-amino-5-hidroxi-l, 3-naftalen disulfónico] ) , en 20 mL de agua. Está se usó como un estándar de color de intensidad de 100%. Soluciones de 0.0086 g, 0.0065 g, 0.0043 g, 0.0022 g, 0.0011 g de azul de Evans en 20 mL de agua fueron preparadas mediante dilución de una solución de estándar de color de intensidad de 100% para preparar estándares de color de 80%, 60%, 40%, 20% y 10%, respectivamente. Una muestra de agua pura se usó como un estándar de color de 0%. Donde una solución que se iba a comparar con los estándares de color no coincidió de manera exacta con ningún estándar de color sencillo, un color estimado se determinó por interpolación.

EJEMPLO 1 Se preparó una mezcla al agregar 6.5046 g de agua desionizada purificada y 2.0087 g de cloruro de 1- [4 , 6-bis (4-carboxianilino) -1 , 3 , 5-triazin-2-il] -3-metil-lH-imidazol~3-io a un contenedor de vidrio y mezclar durante aproximadamente 5 minutos. A esta mezcla, se agregaron 0.5047 g de 1N etanolamina y se agitó hasta que el cloruro de 1- [4 , 6-bis (4-carboxianilino) -1,3, 5-triazin-2-il] -3-metil-lH-imidazol-3-io se disolvió por completo. En este paso 3.0174 g de la mezcla fueron retirados y luego 0.1666 g de colorante de azul de Evans se agregaron a la solución restante y se agitó hasta que el colorante se disolvió por completo. La concentración de azul de Evans fue 2.7% (p/p) . Una solución de 20 mL de 35% cloruro de magnesio hexahidratado en agua (p/p) se preparó en un vial de vidrio. Una alícuota de 0.4 g de la solución de azul de Evans preparada anteriormente se agregó a la solución de cloruro de magnesio. La mezcla resultante consistió de esferas precipitadas pequeñas en una solución transparente. El azul de Evans no fue visible en solución. La mezcla se dejó reposar durante 20 minutos después de la adición de la solución de azul de Evans, después de lo cual la solución fue decantada y las esferas fueron enjuagadas dos veces con aproximadamente 10 mi de agua desionizada purificada. Luego las esferas fueron transferidas a un vial de vidrio vacío.

EJEMPLO 2 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 1 con la excepción de que el 35% de cloruro de magnesio hexahidratado en solución de agua contenía también 0.1% lactato de aluminio (p/p) .

EJEMPLO 3 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 1 con la excepción de que el 35% de cloruro de magnesio hexahidratado en solución de agua contenía también 1.0% lactato de aluminio (p/p) .

EJEMPLO 4 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 1 con la excepción de que el 35% de cloruro de magnesio hexahidratado en solución de agua fue reemplazado por una solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% en agua (p/p) .

EJEMPLO 5 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 4 con la excepción de que la solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% en agua (p/p) contenía también 0.1% lactato de aluminio.

EJEMPLO 6 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 4 con la excepción de que la solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% en agua (p/p) contenia también 1.0% lactato de aluminio.

EJEMPLO 7 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 4 con la excepción de que se usó una solución de cloruro de calcio dihidratado al 20% en agua (p/p) .

La liberación de azul de Evans de las esferas preparadas en los ejemplos 1 a 7 se midió al agregar 20 mL de solución amortiguadora de cloruro de sodio (pH aproximado 7.5) al vial con las esferas y observar el color de la solución resultante como una función de tiempo. El porcentaje de liberación en puntos de tiempo seleccionados se estimó al comparar el color de la solución con los estándares de color preparados anteriormente y se reporta en la tabla 1.

TABLA 1 EJEMPLO 8 Se preparó una mezcla al agregar 5.9907 g de agua desionizada purificada y 1.9938 g de cloruro de 1- [4, 6-bis (4-carboxianilino) -1, 3, 5-triazin-2-il] -3-metil-lH-imidazol-3-io a un contenedor de vidrio y mezclar durante aproximadamente 5 minutos. A esta mezcla, se agregaron 0.5006 g de 1N etanolamina y se agitó durante aproximadamente 5 minutos . A esta mezcla, se agregaron 0.5163 g de clorato de amonio- y se agitó hasta que el cloruro de 1- [4, 6-bis (4-carboxianilino) -1, 3, 5-triazin-2-il] -3-metil-lH-imidazol-3-io se disolvió por completo. En este paso 2.9820 g de la mezcla fueron retirados y luego 0.1659 g de colorante de azul de Evans se agregaron a la solución restante y se agitó hasta que el colorante se disolvió por completo. La concentración de azul de Evans fue 2.7% (p/p) .

Una solución de 20 mL de 35% cloruro de magnesio hexahidratado en agua (p/p) se preparó en un vial de vidrio. Una alícuota de 0.4 g de la solución de azul de Evans preparada anteriormente se agregó a la solución de cloruro de magnesio. La mezcla resultante consistió de esferas precipitadas pequeñas en una solución transparente . El azul de Evans no fue visible en solución. La mezcla se dejó reposar durante 20 minutos después de la adición de la solución de azul de Evans, después de lo cual la solución fue decantada y las esferas fueron enjuagadas dos veces con aproximadamente 10 mi de agua desionizada purificada. Luego las esferas fueron transferidas a un vial de vidrio vacío.

EJEMPLO 9 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 8 con la excepción de que el 35% de cloruro de magnesio hexahidratado en solución de agua contenía también 0.1% lactato de aluminio (p/p) .

EJEMPLO 10 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 8 con la excepción de que el 35% de cloruro de magnesio hexahidratado en solución de agua contenía también 1.0% lactato de aluminio (p/p) .

EJEMPLO 11 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 8 con la excepción de que el 35% de cloruro de magnesio hexahidratado en solución de agua fue reemplazado por una solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% en agua (p/p) . EJEMPLO 12 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 11 con la excepción de que la solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% en agua (p/p) contenía también 0.1% lactato de aluminio.

EJEMPLO 13 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 11 con la excepción de que la solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% en agua (p/p) contenía también 1.0% lactato de aluminio.

EJEMPLO 14 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 11 con la excepción de que se usó una solución de cloruro de calcio dihidratado al 20% en agua (p/p) .

La liberación de azul de Evans de las esferas preparadas en los ejemplos 8 a 14 se midió al agregar 20 mL de solución amortiguadora de cloruro de sodio (pH aproximado 7.5) al vial con las esferas y observar el color de la solución resultante como una función de tiempo. El porcentaje de liberación en puntos de tiempo seleccionados se estimó al comparar el color de la solución con los estándares de color preparados anteriormente y se reporta en la tabla 2.

TABLA 2 Liberación de Azul de Evans (% de liberación) Ej. 0 1 2 5 10 25 30 45 60 90 150 240 360 No. min min min min min min min min min min min min min 8 0 0 1 3 10 - 20 - 20 - 20 - - 9 0 0 0 2 9 - - - - - - 25 40 0 0 0 1 1 - - 9 - - - - - 11 0 0 0 9 20 - - - - 38 - - - 12 0 0 0 8 20 35 - - - - - 50 - 13 0 0 0 0 1 - - - 10 - - 15 - 14 0 0 0 6 12 - - - - - 21 - - EJEMPLO 15 Se preparó una mezcla al agregar 6.5046 g de agua desionizada purificada y 2.0087 g de cloruro de 1- [4 , 6-bis (4-carboxianilino) -1,3, 5-triazin-2-il] -3-metil-lH-imidazol-3-io a un contenedor de vidrio y mezclar durante aproximadamente 5 minutos. A esta mezcla, se agregaron 0.5047 g de 1N etanolamina y se agitó hasta que el cloruro de 1- [4 , 6-bis (4-carboxianilino) -1,3, 5-triazin-2-il] -3-metil-lH-imidazol-3-io se disolvió por completo. En este paso 3.0174 g de la mezcla resultante y 3.6123 de agua desionizada purificada se agregaron a un contenedor de vidrio y se mezclaron durante aproximadamente 5 minutos. A esta solución, se agregaron 0.1789 g de colorante de azul de Evans y se agitó hasta que el colorante se disolvió por completo. La concentración de azul de Evans fue 2.6% (p/p) . Una solución de 20 mL de 35% cloruro de magnesio hexahidratado en agua (p/p) se preparó en un vial de vidrio. Una alícuota de 0.4 g de la solución de azul de Evans preparada anteriormente se agregó a la solución de cloruro de magnesio. La mezcla resultante consistió de esferas precipitadas pequeñas en una solución transparente . El azul de Evans no fue visible en solución. La mezcla se dejó reposar durante 20 minutos después de la adición de la solución de azul de Evans, después de lo cual la solución fue decantada y las esferas fueron enjuagadas dos veces con aproximadamente 10 mi de agua desionizada purificada. Luego las esferas fueron transferidas a un vial de vidrio vacío.

EJEMPLO 16 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 15 con la excepción de que el 35% de cloruro de magnesio exahidratado en solución de agua contenía también 0.1% lactato de aluminio (p/p) .

EJEMPLO 17 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 15 con la excepción de que el 35% de cloruro de magnesio hexahidratado en solución de agua contenía también 1.0% lactato de aluminio (p/p).

EJEMPLO 18 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 15 con la excepción de que el 35% de cloruro de magnesio hexahidratado en solución de agua fue reemplazado por una solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% en agua (p/p) .

EJEMPLO 19 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 18 con la excepción de que la solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% en agua (p/p) contenía también 0.1% lactato de aluminio.

EJEMPLO 20 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 18 con la excepción de que la solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% en agua (p/p) contenía también 1.0% lactato de aluminio.

EJEMPLO 21 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 18 con la excepción de que se usó una solución de cloruro de calcio dihidratado al 20% en agua (p/p) .

La liberación de azul de Evans de las esferas preparadas en los ejemplos 15 a 21 se midió al agregar 20 mL de solución amortiguadora de cloruro de sodio (pH aproximado 7.5) al vial con las esferas y observar el color de la solución resultante como una función de tiempo. El porcentaje de liberación en puntos de tiempo seleccionados se estimó al comparar el color de la solución con los estándares de color preparados anteriormente y se reporta en la tabla 3.

TABLA 3 EJEMPLO 22 Se preparó una mezcla al agregar 5.9907 g de agua desionizada purificada y 1.9938 g de cloruro de 1- [4, 6-bis (4-carboxianilino) -1,3, 5-triazin-2-il] -3-metil-lH-imidazol-3-io a un contenedor de vidrio y mezclar durante aproximadamente 5 minutos. ? esta mezcla, se agregaron 0.5006 g de 1N etanolamina y se agitó durante aproximadamente 5 minutos . A esta mezcla, se agregaron 0.5163 g de clorato de amonio y se agitó hasta que el cloruro de 1- [4 , 6-bis (4-carboxianilino) -1, 3, 5-triazin-2-il] -3-metil-lH-imidazol-3-io se disolvió por completo. En este paso 2.9820 g de la mezcla restante y 3.6405 g de agua desionizada purificada se agregaron a un contenedor de vidrio y se mezclaron durante aproximadamente 5 minutos. A esta solución, se agregaron 0.1783 g de colorante de azul de Evans y se agitó hasta que el colorante se disolvió por completo. La concentración de azul de Evans fue 2.6% (p/p) . Una solución de 20 mL de 35% cloruro de magnesio hexahidratado en agua (p/p) se preparó en un vial de vidrio. Una alícuota de 0.4 g de la solución de azul de Evans preparada anteriormente se agregó a la solución de cloruro de magnesio. La mezcla resultante consistió de esferas precipitadas pequeñas en una solución transparente. El azul de Evans no fue visible en solución. La mezcla se dejó reposar durante 20 minutos después de la adición de la solución de azul de Evans, después de lo cual la solución fue decantada y las esferas fueron enjuagadas dos veces con aproximadamente 10 mi de agua desionizada purificada. Luego las esferas fueron transferidas a un vial de vidrio vacío.

EJEMPLO 23 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 22 con la excepción de que el 35% de cloruro de magnesio exahidratado en solución de agua contenía también 0.1% lactato de aluminio (p/p) .

EJEMPLO 24 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 22 con la excepción de que el 35% de cloruro de magnesio hexahidratado en solución de agua contenía también 1.0% lactato de aluminio (p/p) .

EJEMPLO 25 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 22 con la excepción de que el 35% de cloruro de magnesio hexahidratado en solución de agua fue reemplazado por una solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% en agua (p/p) .

EJEMPLO 26 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 25 con la excepción de que la solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% en agua (p/p) contenía también 0.1% lactato de aluminio.

EJEMPLO 27 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 25 con la excepción de que la solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% en agua (p/p) contenía también 1.0% lactato de aluminio .

EJEMPLO 28 Esferas precipitadas se prepararon como en el ejemplo 25 con la excepción de que se usó una solución de cloruro de calcio dihidratado al 20% en agua (p/p) .

La liberación de azul de Evans de las esferas preparadas en los ejemplos 22 a 28 se midió al agregar 20 mL de solución amortiguadora de cloruro de sodio (pH aproximado 7.5) al vial con las esferas y observar el color de la solución resultante como una función de tiempo. El porcentaje de liberación en puntos de tiempo seleccionados se estimó al comparar el color de la solución con los estándares de color preparados anteriormente y se reporta en la tabla .

TABLA 4 EJEMPLO 29 Ácido pamoico, sal de disodio (3.079 g) y agua desionizada purificada (12.000 g) se agregaron a un contenedor y se agitó durante varios minutos hasta que el compuesto, sólido se dispersó por completo. Se agregó etanolamina, 1N (5.031 g) hasta que el compuesto sólido se disolvió por completo. La solución resultante fue amarilla. Se agregó colorante de azul de Evans (0.0345 g) y la mezcla se agitó hasta que el colorante se disolvió por completo. La solución intermedia resultante fue morada. Cinco gotas de la solución intermedia se agregaron a una solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% y se formaron esferas color azul claro. Después de 30 minutos, la solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% era transparente. La solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% fue decantada y reemplazada con agua desionizada purificada. Después de 30 minutos, el agua estaba color morado claro. El agua desionizada purificada fue después decantada y reemplazada con solución de cloruro de sodio al 1%. Las esferas se disolvieron parcialmente y la solución se volvió morada .

EJEMPLO 30 Ácido 5- (4- [ [4- (3-carboxi-4-cloroanilino) fenil] (cloro) fenilmetil] anilino} -2-clorobenzoico (3.0020 g) y agua desionizada purificada (12.0176 g) se agregaron a un contenedor y se agitó durante varios minutos hasta que el compuesto sólido se dispersó por completo. Se agregó etanolamina, 1N (1.1840 g) hasta que el compuesto sólido se disolvió por completo . La solución resultante f e azul oscuro/verde. Se agregó colorante de azul de Evans (0.0333 g) y la mezcla se agitó hasta que el colorante se disolvió por completo . La solución intermedia resultante permaneció azul oscuro/verde . Cinco gotas de la solución intermedia se agregaron a una solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% y se formaron esferas color azul oscuro/verde . Después de 30 minutos, una pequeña cantidad de colorante azul se pudo observar en la solución de cloruro de calcio dihidratado al 10%. La solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% fue decantada y reemplazada con agua desionizada purificada. Después de 30 minutos, el agua estaba transparente. El agua desionizada purificada fue luego decantada y reemplazada con solución de cloruro de sodio al 1%. Las esferas se disolvieron y la solución se volvió azul oscuro/verde.

EJEMPLO 31 Hematoporfirina (3.011 g) y agua desionizada purificada (12.037 g) se agregaron a un contenedor y se agitó durante varios minutos hasta que el compuesto sólido se dispersó por completo. Se agregó etañolamina, 1N (0.3945 g) hasta que el compuesto sólido se disolvió por completo. La solución resultante fue color café/negro. Se agregó colorante de azul de Evans (0.033 g) y la mezcla se agitó hasta que el colorante se disolvió por completo. La solución intermedia resultante fue negra. Cinco gotas de la solución intermedia se agregaron a una solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% y se formaron esferas color café. Después de 30 minutos, la solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% estaba transparente. La solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% fue decantada y reemplazada con agua desionizada purificada. Después de 30 minutos, el agua estaba transparente. El agua desionizada purificada fue luego decantada y reemplazada con solución de cloruro de sodio al 1%. Las esferas se disolvieron y la solución se volvió color café .

EJEMPLO 32 Sal de amonio de aluminón (3.0069 g) y agua desionizada purificada (12.0264 g) se agregaron a un contenedor y se agitó durante varios minutos hasta que el compuesto sólido se .disolvió por completo. La solución resultante fue color rojo. Se agregó colorante de azul de Evans (0.0337 g) y la mezcla se agitó hasta que el colorante se disolvió por completo. La solución intermedia resultante fue color rojo oscuro. Cinco gotas de la solución intermedia se agregaron a una solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% y se formaron esferas color rojo. Después de 30 minutos, la solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% era color rojo claro. La solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% fue decantada y reemplazada con agua desionizada purificada. Después de 30 minutos, el agua estaba color rojo. El agua desionizada purificada fue luego decantada y reemplazada con solución de cloruro de sodio al 1%. Las esferas se disolvieron y la solución se volvió color rojo oscuro/morado .

EJEMPLO 33 Ácido aurintricarboxilico (3.0006 g) y agua desionizada purificada (12.0209 g) se agregaron a un contenedor y se agitó durante varios minutos hasta que el compuesto sólido se dispersó por completo. Se agregó etanolamina, 1N (0.5972 g) hasta que el compuesto sólido se disolvió por completo. La solución resultante fue color rojo. Se agregó colorante de azul de Evans (0.0389 g) y la mezcla se agitó hasta que el colorante se disolvió por completo. La solución intermedia resultante fue color rojo oscuro. Cinco gotas de la solución intermedia se agregaron a una solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% y se formaron esferas color rojo. Después de 30 minutos, la solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% tenía una apariencia rojo transparente. La solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% fue decantada y reemplazada con agua desionizada purificada. Después de 30 minutos, el agua permaneció con la apariencia rojo transparente. El agua desionizada purificada fue luego decantada y reemplazada con solución de cloruro de sodio al 1%. Las esferas se disolvieron y la solución se volvió color rojo oscuro/morado.

EJEMPLO 34 Ácido lH-imidazol-4 , 5-dicarboxílico (3.0161 g) y agua desionizada purificada (12.0092 g) se agregaron a un contenedor y se agitó durante varios minutos hasta que el compuesto sólido se dispersó por completo. Se agregó etanolamina, 1N (3.9644 g) hasta que el compuesto sólido se disolvió por completo. La solución resultante fue color blanco. Se agregó colorante de azul de Evans (0.0318 g) y la mezcla se agitó hasta que el colorante se disolvió por completo. La solución intermedia resultante fue color azul oscuro . Cinco gotas de la solución intermedia se agregaron a una solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% y se formaron esferas color azul. Después de 30 minutos, la solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% era transparente. La solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% fue decantada y reemplazada con agua desionizada purificada. Después de 30 minutos, el agua estaba azul claro. El agua desionizada purificada fue luego decantada y reemplazada con solución de cloruro de sodio al 1%. Las esferas se disolvieron y la solución se volvió color azul oscuro .

EJEMPLO 35 Ácido 2 , 6-naftalendicarboxílico, sal de dipotasio (3.0129 g) y agua- desionizada purificada (12.0263 g) se agregaron a un contenedor y se agitó durante varios minutos hasta que el compuesto sólido se disolvió por completo. La solución resultante fue color blanco . Se agregó colorante de azul de Evans (0.0339 g) y la mezcla se agitó hasta que el colorante se disolvió por completo. La solución intermedia resultante fue color azul oscuro. Cinco gotas de la solución intermedia se agregaron a una solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% y se formaron .esferas color azul claro/gris. Después de 30 minutos, la solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% era transparente . La solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% fue decantada y reemplazada con agua desionizada purificada. Después de 30 minutos, el agua estaba azul claro. El agua desionizada purificada fue luego decantada y reemplazada con solución de cloruro de sodio al 1%-. Las esferas se disolvieron y la solución se volvió color azul oscuro .

EJEMPLO 36 Ácido pamoico (3.2300 g) y agua desionizada purificada (12.5899 g) se agregaron a un contenedor y se agitó durante varios minutos hasta que el compuesto sólido se dispersó por completo. Se agregó etanolamina, 1N (0.1737 g) hasta que el compuesto sólido se disolvió por completo. La solución resultante fue blanca. Se agregó colorante de azul de Evans (0.0375 g) y la mezcla se agitó hasta que el colorante se disolvió por completo. La solución intermedia resultante fue azul oscuro. Cinco gotas de la solución intermedia se agregaron a una solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% y se formaron esferas color azul. Después de 30 minutos, la solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% era color azul claro. La solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% fue decantada y reemplazada con agua desionizada purificada. Después de 30 minutos, el agua estaba color azul muy claro. El agua desionizada purificada fue después decantada y reemplazada con solución de cloruro de sodio al 1%. Las esferas se disolvieron y la solución se volvió azul oscuro .

KJEMPLO 37 Alizarina complexona dihidratada (0.3433 g) y agua desionizada purificada (1.7399 g) se agregaron a un contenedor y se agitó durante varios minutos hasta que el compuesto sólido se dispersó por completo. Se agregó etanolamina, 1N (0.2717 g) hasta que el compuesto sólido se disolvió por completo. La solución resultante fue color naranja. Se agregó colorante de azul de Evans (0.0339 g) y la mezcla se agitó hasta que el colorante se disolvió por completo. La solución intermedia resultante fue color morado oscuro . Cinco gotas de la solución intermedia se agregaron a una solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% y se formaron esferas color azul. Después de 30 minutos, la solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% era color morado claro. La solución de cloruro de calcio dihidratado al 10% fue decantada y reemplazada con agua desionizada purificada. Después de 30 minutos, el agua permaneció color morado claro. El agua desionizada purificada fue después decantada y reemplazada con solución de cloruro de sodio al 1%. Las esferas se disolvieron y la solución se volvió color rojo oscuro/morado .

EJEMPLO 38 Penicilina G, sal de potasio (0.8089 g) , cloruro de 1- [ , 6-bis (4-carboxianilino) -1,3, 5-triazin-2-il] -3-metil-lH-imidazol-3-io (2.0018 g) , 1N etanolamina, (0.4705 g) , y agua desionizada purificada (6.0153 g) se mezclaron juntos para formar una solución de reserva. Aproximadamente 20 mL de una solución de entrelazamiento de 35% cloruro de magnesio/ 0.5% lactato de aluminio en agua desionizada purificada se prepararon en un vial de vidrio. Una alícuota de 0.3057 g de la solución de reserva se agregó gota a gota a la solución de entrelazamiento y se ocasionó que se formaran esferas en la solución de entrelazamiento. La cantidad total de penicilina G, sal de potasio contenida en la solución de reserva agregada a la solución de entrelazamiento fue 26. G mg. El liquido restante en la solución de entrelazamiento fue decantado 5 minutos después de la adición de la solución de reserva a la solución de entrelazamiento. El líquido decantado fue filtrado a través de un filtro de 0.45 µt? y analizado para penicilina G y ácido bencilpenílico (BPA) , un conocido degradante de la penicilina G. Esto se reporta en la tabla 5 como la "Cantidad en solución de entrelazamiento" .

Aproximadamente 20 mL del agua desionizada purificada se agregaron a las esferas restantes en el vial de vidrio y se agitó suavemente durante aproximadamente 30 segundos. El agua fue extraída por decantación y filtrada a través de un filtro de 0.45 µp? y analizada para penicilina G y BPA. Esto se reporta en la tabla 5 como la "Cantidad en enjuague con agua" . Aproximadamente 50 mL de una solución de cloruro de sodio al 2% se agregaron a las esferas restantes en el vial de vidrio y se agitó en un agitador orbital a 270 rpm. Inicialmente las esferas tuvieron un tamaño en el orden de 2 mm. La disolución de las esferas se observó visualmente como una función de tiempo y se reportó de manera cualitativa como 3 etapas de desintegración. La etapa 1 se observó cuando las partículas empezaron a mostrar signos visibles de desintegración. La etapa 2 se observó cuando las esferas se habían dividido por completo en partículas grandes con un tamaño en el orden de 0.5 a 1.0 mm. La etapa 3 se observó cuando no quedaron partículas grandes y cualquier sólido restante estaba en forma de un polvo fino. Los resultados de la disolución de partículas se reportan en la tabla 6 como el tiempo (en minutos) en el que cada etapa de desintegración se alcanzó primero.

Después de agitar durante 60 minutos, la solución se filtró a través de, un filtro de 0.45 µ??? y se analizó para penicilina G y BPA. Esto se reporta en la tabla 5 como la "Cantidad en solución de cloruro de sodio" . La cantidad total de penicilina G y BPA recuperada y analizada a partir de las 3 soluciones anteriores se dividió entre la cantidad total de penicilina G contenida en la solución de reserva agregada a la solución de entrel zamiento y se reportó en porcentaje como el "Balance de masa" . La "Cantidad en solución de cloruro de sodio" se dividió entre la cantidad total de penicilina G y BPA recuperada y analizada a partir de las 3 soluciones anteriores y se reporta en porcentaje como la "Eficiencia de encapsulación" .

EJEMPLO 39 Se prepararon una solución de reserva y solución de entrelazamiento como se describe en el ejemplo 38. Una alícuota de 0.2933 g de la solución de reserva se agregó gota a gota a la solución de entrelazamiento y se ocasionó que se formaran esferas en la solución de entrelazamiento. La cantidad total de penicilina G, sal de potasio contenida en la solución de reserva agregada a la solución de entrelazamiento fue 25.5 mg. El liquido restante en la solución de entrelazamiento ' fue decantado 15 minutos después de la adición de la solución de reserva a la solución de entrelazamiento. El líquido decantado fue filtrado a través de un filtro de 0.45 µt? y analizado para penicilina G y ácido bencilpenílico (BPA) , un conocido degradante de la penicilina G. Esto se reporta en la tabla 5 como la "Cantidad en solución de entrelazamiento" . Aproximadamente 20 mL de agua desionizada purificada se agregaron a las esferas restantes en el vial de vidrio y se agitó suavemente durante aproximadamente 30 segundos. El agua fue extraída por decantación y filtrada a través de un filtro de 0.45 µ?? y analizada para penicilina G y BPA. Esto se reporta en la tabla 5 como la "Cantidad en enjuague con agua" . Aproximadamente 50 mL de una solución de cloruro de sodio al 2% se agregaron a las esferas restantes en el vial de vidrio y se agitó en un agitador orbital a 270 rpm. La disolución de las esferas se observó visualmente como una función de tiempo. Los resultados de la . disolución de •partículas se reportan en la tabla 6 de acuerdo con la descripción en el ejemplo 38.

Después de agitar durante 60 minutos, la solución se filtró a través de un filtro de 0.45 µp? y se analizó para penicilina G y BPA. Esto se reporta en la tabla 5 como la "Cantidad en solución de cloruro de sodio" . El balance de masa y la eficiencia de encapsulación se calcularon como en el ejemplo 38 y se reportan en la tabla EJEMPLO 40 Penicilina G, sal de potasio (0.8149 g) , cloruro de 1- [4, 6-bis (4-carboxianilino) -1,3, 5-triazín-2-il] -3-metil-lH-imidazol-3-io (2.0055 g) , etanolamina, 1N (0.4741 g) , asparagina (0.757 g) , y agua desionizada purificada (6.0298 g) se mezclaron juntos para formar una solución de reserva. Aproximadamente 20 mL de una solución de entrelazamiento de 35% cloruro de magnesio/ 0.5% lactato de aluminio en agua desionizada purificada se prepararon en un vial de vidrio. Una alícuota de 0.3275 g de la solución de reserva se agregó gota a gota a la solución de entrelazamiento y se ocasionó que se formaran esferas en la solución de entrelazamiento . La cantidad total de penicilina G, sal de potasio contenida en la solución de reserva agregada a la solución de entrelazamiento fue 26.5 mg.

El liquido restante en la solución de entrelazamiento fue decantado 5 minutos después de la adición de la solución de reserva a la solución de entrelazamiento. El líquido decantado fue filtrado a través de un filtro de 0.45 µt? y analizado para penicilina G y ácido bencilpenílico (BPA) , un conocido degradante de la penicilina G. Esto se reporta en la tabla 5 como la "Cantidad en solución de entrelazamiento" . Aproximadamente 20 mL del agua desionizada purificada se agregaron a las esferas restantes en el vial de vidrio y se agitó suavemente durante aproximadamente 30 segundos. El agua fue extraída por decantación y filtrada a través de un filtro de 0.45 µ?? y analizada para penicilina G y BPA. Esto se reporta en la tabla 5 como la "Cantidad en enjuague con agua" . Aproximadamente 50 mL de una solución de cloruro de sodio al 2% se agregaron a las esferas restantes en el vial de vidrio y se agitó en un agitador orbital a 270 rpm. La disolución de las esferas se observó visualmente como una función de tiempo. Los resultados de la disolución de partículas se reportan en la tabla 6 de acuerdo con la descripción en el ejemplo 38. Después de agitar durante 60 minutos, la solución se filtró a través de un filtro de 0.45 µ??? y se analizó para penicilina G y BPA. Esto se reporta en la tabla 5 como la "Cantidad en solución de cloruro de sodio" . El balance de masa y la eficiencia de encapsulación se calcularon como en el ejemplo 38 y se reportan en la tabla 5.

EJEMPLO 41 Se prepararon una solución de reserva y solución de entrelazamiento como se describe en el ejemplo 40. Una alícuota de 0.3036 g de la solución de reserva se agregó gota a gota a la solución de entrelazamiento y se ocasionó que se formaran esferas en la solución de entrelazamiento. La cantidad total de penicilina G, sal de potasio contenida en la solución de reserva agregada a la solución de entrelazamiento fue 24.5 mg. El liquido restante en la solución de entrelazamiento fue decantado 15 minutos después de la adición de la solución de reserva a la solución de entrelazamiento. El líquido decantado fue filtrado a través de un filtro de 0.45 µtta y analizado para penicilina G y ácido bencilpenílico (BPA) , un conocido degradante de la penicilina G. Esto se reporta en la tabla 5 como la "Cantidad en solución de entrelazamiento" .

Aproximadamente 20 mL de agua desionizada purificada se agregaron a las esferas restantes en el vial de vidrio y se agitó suavemente durante aproximadamente 30 segundos. El agua fue extraída por decantación y filtrada a través de un filtro de 0.45 µp? y analizada para penicilina G y BPA. Esto se reporta en la tabla 5 como la "Cantidad en enjuague con agua". Aproximadamente 50 mL de una solución de cloruro de sodio al 2% se agregaron a las esferas restantes en el vial de vidrio y se agitó en un agitador orbital a 270 rpm. La disolución de las esferas se observó visualmente como una función de tiempo. Los resultados de la disolución de partículas se reportan en la tabla 6 de acuerdo con la descripción en el ejemplo 38. Después de agitar durante 60 minutos, la solución se filtró a través de un filtro de 0.45 µp? y se analizó para penicilina G y BPA. Esto se reporta en la tabla 5 como la "Cantidad en solución de cloruro de sodio". El balance de masa y la eficiencia de encapsulación se calcularon como en el ejemplo 38 y se reportan en la tabla 5.

TABLA 5 TABLA 6 EJEMPLO 42 Se preparó una solución de reserva al agregar agua desionizada (18 g) , cloruro de 1- [ , 6-bis ( -carboxianilino) -1, 3, 5-triazin-2-il] -4- (dimetilamino) piridinio .(2 g) , y N-etil diisopropilamina (0.05 g) a un vial de vidrio y mezclar. Una gota adicional de N-etil diisopropilamina se agregó al vial y la mezcla se agitó hasta que todos los sólidos se disolvieron. El pH de la solución de reserva se ajustó a 7.4 mediante adición de ácido clorhídrico. Una alícuota (5 g) de la solución de reserva y adenosina desaminasa (0.020 g, Sigma, lote no. 70H 8145) se mezclaron juntas en un vial de vidrio hasta que la adenosina desaminasa se disolvió por completo para preparar una solución intermedia. Una solución de cloruro de calcio al 10% en agua se ajustó a un pH de 5.24 con ácido clorhídrico para usar como una solución de entrelazamiento. Una porción de la solución de entrelazamiento fue colocada en un vial de vidrio y una alícuota de la solución intermedia se agregó gota a gota para formar esferas-entrelazadas . La solución de entrelazamiento fue decantada y desechada. Las esferas entrelazadas restantes fueron lavadas con 10 mL de agua desionizada durante aproximadamente 10 segundos. El agua fue después decantada y desechada. Las esferas lavadas y entrelazadas se dividieron en dos porciones aproximadamente iguales para más pruebas . Una porción de las esferas se agregó a un vial que contenía 20 mi de una solución de prueba de ácido trifluoroacético en agua (pH de 2.0) al 0.1%. Las esferas fueron expuestas a la solución de prueba ácida a temperatura ambiente durante dos horas. La solución de prueba acida fue después decantada y desechada. Las esferas fueron enjuagadas con 10 mL de agua desionizada. El agua fue después decantada y desechada. Regulador de pH de fosfato (20 mL, pH de 7.0 con 0.15 M NaCl) se agregó al vial con las esferas restantes y el vial se agitó en un agitador con acción de muñeca durante una hora para disolver las esferas. La solución resultante fue filtrada a través de un filtro de fluoruro de polivinilideno de 0,22 µp?. La actividad de adenosina desaminasa se determinó al mezclar la solución filtrada con 1.35 mM solución de adenosina (pH de 7.0) en una relación 1:1 y luego incubar en un baño de agua a 30°C durante 2 minutos. La solución resultante fue luego analizada para concentración de inosina mediante cromatografía de líquidos de alto rendimiento (Columna: Hypercarb, 100 x 4.6 rara; fase móvil, ? = agua, B = acetonitrilo, gradiente, 0 min = 25% B, 5 min = 25% B, 10 min = 95% B; velocidad de flujo: 1 mL/min; detector: UV a 215 y 260 nm; volumen de inyección: 10 µL; tiempo de ejecución: 15 minutos) . El área pico de inosina fue 733 unidades. La otra porción de las esferas se agregó a un vial que contenía 20 mL de agua desionizada (pH aproximado 7.5) . Las esferas fueron expuestas a la solución de agua durante dos horas. El agua fue después decantada y desechada.

Regulador de pH de fosfato (20 mL, pH de 7.0 con 0.15 M NaCl) se agregó al vial con las esferas restantes y el vial se agitó en un agitador con acción de muñeca durante una hora para disolver las esferas . La solución resultante fue filtrada a través de un filtro de fluoruro de polivinilideno de 0.22 µt?. La actividad de adenosina desaminasa se determinó como se describe con anterioridad. El área pico de inosina fue 812 unidades.

EJEMPLO COMPARATIVO Adenosina desaminasa se agregó a una solución de ácido trifluoroacético en agua (pH de 2.0) al 0.1% de 20 mL para preparar una solución de prueba ácida con una concentración de aproximadamente 110 µg/mL de adenosina desaminasa. La solución se almacenó a temperatura ambiente durante 2 horas y posteriormente se ajustó a un pH de 7.0 mediante adición de 1N hidróxido de sodio. La actividad de adenosina desaminasa se determinó como se describe con anterioridad. El área pico de inosina fue 5 unidades.

EJEMPLO 43 Todos los artículos de vidrio y barras de agitación usados fueron pasivados mediante tratamiento durante diez minutos con una solución de insulina (0.001 g de insulina por 100 g de agua desionizada purificada) . Se agregó insulina de bovino (0.143 g, Sigma Aldrich Company) a agua desionizada purificada (8.0113 g) que contenía sal de sodio del ácido - oleil fosfónico' (0.005 g) y etanolamxna (0.023 g) y se mezcló durante 10 minutos. A esta mezcla, se agregaron 1.0051 g de 1- [4, 6-bis (4-carboxianilino) -1,3, 5-triazin-2-il] -3-metil-lH- imidazol-3-io, seguido de 0.1012 g de etanolamina para preparar una solución cromónica. La mezcla anterior se agitó hasta que el 1- [4 , 6-bis (4-carboxianilino) -1 , 3 , 5-triazin-2- il] -3-metil-lH-imidazol-3-io se disolvió. La solución de insulina resultante tuvo una fase cromónica. Se preparó una solución de entrelazamiento al agregar cloruro dé calcio (0.9973 g) y cloruro de zinc (0.0049 g) a agua desionizada purificada (9.0018 g) . Gotas de la solución de insulina fueron liberadas en la solución de entrelazamien o y se formaron esferas . Las esferas formadas se dejaron para entrelazamiento adicional durante 30 minutos . La solución fue decantada de las esferas y analizada para determinar la concentración de insulina que no estaba contenida dentro de las esferas. La cantidad restante de insulina se reporta como la cantidad encapsulada dentro de las esferas . La cantidad encapsulada dividida entre la cantidad total agregada se reporta como la eficiencia de encapsulación. La eficiencia de encapsulación fue 93%. Las esferas se volvieron a suspender en regulador de pH Tris, se micronizaron con un rasgador de tejido durante 30 segundos a velocidad alta y después se dejaron reposar durante 1 hora en cuyo tiempo la solución fue centrifugada y el supernatante fue analizado para concentración de insulina. Las esferas micronizadas de nuevo se suspendieron en regulador de pH tris y este proceso se repitió en puntos de tiempo de 2 , 3 y 4 horas para medir la liberación de insulina. En cada punto de tiempo, la muestra fue centrifugada antes de decantar la solución para análisis. La concentración de insulina se analizó mediante cromatografía de líquidos de alto rendimiento (Columna: ProntoSIL C-18 300A, 150 x 2.0 mm; fase móvil, A = agua con 0.1% ácido trifluoroacético , B = acetonitrilo con 0.1% ácido trifluoroacético, gradiente, 0 min = 20% B, 10 min = 50% B, 10.01 min = 95% B; velocidad de flujo: 1 mL/min; detector: UV a 210 y 280 ntri; volumen de inyección: 5 µL; tiempo de ejecución: 15 minutos) . Los resultados se muestran en la tabla 7.

TABLA 7 EJEMPLO 44 Se preparó una solución al mezclar cloruro de 1- [4, 6-bis (4-carboxianilino) -1, 3, 5-triazin-2-il] 3-metil- 1H-imidazol-3-io (1.0 g) con etanolamina (0.12 g) y agua desionizada purificada (9.0 g) . A esta solución, se agregaron un compuesto IRM . clorhidrato de 4-amino-alfa, alfa, 2-trimetil-lH-imidazo [4, 5-c] quinolin-l-etanol (0.05 g) y ovoalbúmina (10 mi de 50 mg/ml solución, 0.5 g sólidos) y se agitó hasta que el IRM y la ovoalbúmina se disolvieron. La solución IRM -ovoalbúmina resultante tuvo una fase cromónica. Se preparó una solución de entrelazamiento al agregar cloruro de magnesio hexahidratado (7.0 g) a agua desionizada purificada (13.0 g) . Gotas de la solución de IRM - ovoalbúmina (0.537 g total) fueron liberadas en 15 mL de solución de entrelazamiento y se formaron asi esferas. Las esferas formadas se dejaron para entrelazamiento adicional durante 30 minutos .

El liquido de la solución con esferas fue decantado y analizado para contenido de IRM y ovoalbúmina . Los resultados se reportan en la tabla 8 a continuación como contenido del "paso 1". Las esferas fueron posteriormente lavadas con 10 mL de agua desionizada purificada. El fluido de lavado fue decantado de las esferas y analizado para contenido de IRM y ovoalbúmina. Los resultados se reportan en la tabla 8 a continuación como contenido de "lavado" . 20 mL de una solución amortiguadora de NaCl al 0.9% (pH = 7.0, 50 mM regulador de pH de fosfato) se agregaron luego a las esferas y la suspensión resultante se almacenó a 4°C durante aproximadamente 3 días . Luego la solución fue filtrada a través de un filtro de jeringa PVDF de 0.22 µp? antes de inyección en un HPCL. La concentración de la solución filtrada fue analizada para contenido de IRM y ovoalbúmina. Los resultados' se reportan en la tabla 8 a continuación como contenido "encapsulado" . El porcentaje de encapsulación del IRM y ovoalbúmina se reporta como el porcentaj e de cada uno en el contenido de "esfera" dividido entre la cantidad total medida en las mediciones de "paso 1", "lavado" y "esfera". La concentración de IRM fue analizada mediante cromatografía de líquidos de alto rendimiento ' (Columna: ProntoSIL C-18, 150 x 3.0 ram; fase móvil, A = agua con 0.1% ácido fórmico, B = acetonitrilo, gradiente, 0 min = 10% B, 10 min = 40% B, 15 min = 95% B; velocidad de flujo: 0.5 mL/min; detector: ÜV a 254 ?p?; volumen de inyección: 2 µ?,; tiempo de ejecución: 18 minutos) . La concentración de ovoalbúmina fue analizada mediante cromatografía de líquidos de alto rendimiento (Columna: Tosoh SW2000 GPC acuosa, 300 x 4.6 mm; fase móvil, 50 mM regulador de fosfato isocrático pH 7.0 0.15 M NaCl; velocidad de flujo: 0.35 mL/min; Detector: UV a 215 nm; Volumen de Inyección: 10 µL; Tiempo de ejecución: 30 minutos) .

TABLA 8 *por debajo del límite de cuantificación de 30 µg La presente invención ha sido descrita con referencia a las diversas modalidades de la misma. La descripción detallada y ejemplos anteriores han sido provistos solamente para claridad de entendimiento, y no se deben entender limitaciones innecesarias a partir de los mismos. Será evidente para el experto en la técnica que se pueden realizar muchos cambios a las modalidades descritas sin apartarse del espíritu y alcance de la invención. Por consiguiente, el alcance de la invención no se deben limitar a los detalles exactos de las composiciones y estructuras aqui descritas, sino más bien por el lenguaje de las reivindicaciones que siguen. Las descripciones completas de las patentes, documentos y publicaciones de patente aquí citados se incorporan como referencia en su totalidad como si cada uno se incorporara de manera individual . · En caso de conflicto, regirá la presente especificación, que incluye definiciones. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el convencional para la manufactura de los objetos o productos a que la misma se refiere .

Claims

REIVINDICACIONES
Habiéndose descrito la invención como antecede, se. reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones : 1. Una composición que comprende: una matriz que comprende, moléculas que son entrelazadas en forma no covalente por cationes multivalentes, caracterizada porque las moléculas que son entrelazadas en forma no covalente son no poliméricas, tienen más de un grupo carboxi funcional y tienen por lo menos carácter aromático o heteroaromático parcial . 2. Una composición para encapsulacion y liberación controlada que comprende una composición de conformidad con la reivindicación 1, en donde las moléculas que son entrelazadas en forma no covalente son moléculas anfitrionas y la composición caracterizada porque una molécula huésped puede ser encapsulada dentro de la matriz y posteriormente liberada.
3. La. composición para encapsulacion y liberación controlada de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada porque la molécula anfitriona es zwiteriónica.
4. La composición para encapsulacion y liberación controlada de conformidad con la reivindicación 2 , caracterizada porque comprende además una molécula huésped.
5. La composición para encapsulación y liberación controlada de conformidad con la reivindicación 4, caracterizada porque la molécula huésped es un fármaco.
6. La composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque las moléculas que son entrelazadas en forma no covalente son capaces de formar ya sea una fase cromónica M o N en solución acuosa antes de estar en presencia de cationes multivalentes.
7. La composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque las moléculas que son entrelazadas en forma no covalente tienen por lo menos un carácter aromático parcial .
8. La composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque al menos uno de los grupos carboxi de las moléculas que son entrelazadas en forma no covalente está directamente unido a un grupo funcional aromático o heteroaromático .
9. La composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque la mayoría de los cationes multivalentes son divalentes.
10. La composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque los cationes multivalentes se seleccionan del grupo que consiste de calcio, magnesio, zinc, aluminio y hierro.
11. La composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque las moléculas que son entrelazadas en forma no covalente comprenden: o en donde cada I¾ se selecciona de manera independiente de cualquier grupo donador de electrones, grupo atrayente de electrones y grupo electrónicamente neutro; y R3 se selecciona del grupo que consiste de anillos heteroaromáticos y heterociclicos sustituidos y no sustituidos enlazados al grupo triazina a través de un átomo de nitrógeno dentro del anillo de R3, y tautómeros de protón y sales de los mismos .
12. La composición de conformidad con la reivindicación 11, caracterizada porque cada R2 se selecciona de manera independiente del grupo que consiste de hidrógeno, un grupo alquilo no sustituido, o un grupo alquilo sustituido con un grupo funcional hidroxi, éter, éster, sulfonato o halógenuro .
13. La composición de conformidad con la reivindicación 12 , caracterizada porque R3 comprende un anillo heteroaromático derivado del grupo que consiste de piridina, piridazina, pirimidina, pirazina, imidazol, oxazol, isoxazol, tiazol, oxadiazol, tiadiazol, pirazol, triazol, triazina, quinolina e isoquinolina .
14. La composición de conformidad con la reivindicación 12, caracterizada porque R3 comprende un anillo heteroaromático derivado de piridina o imidazol .
15. La composición de conformidad con la reivindicación 12, caracterizada porque R3 se selecciona del grupo que consiste de piridinio-l-ilo, 4- (dimetilamino) piridio-l-ilo, 3-metilimidazolio-l-ilo, 4-(pirrolidin-l-il) piridio-l-ilo, 4-isopropilpiridinio-l-ilo, 4- [ (-2 -hidroxietil) metilamino] piridinio-l-ilo, 4-(3-hidroxipropil) piridinio-l-ilo, 4-metilpiridinio-l-ilo, quinolinio-l-ilo, 4-ter-butilpiridinio-l-ilo, y 4- (2-sulfoetil) piridinio-l-ilo .
16. La composición de conformidad con la reivindicación 11, caracterizada porque la molécula anfitriona comprende: y tautomeros de protón y sales de los mismos.
17. La composición de conformidad con la reivindicación 16, caracterizada porque cada í se selecciona de manera independiente del grupo que consiste de hidrógeno, un grupo alquilo no sustituido, ó un grupo alquilo sustituido con un grupo funcional hidroxi, éter, éster, sulfonato o halogenuro.
18. La composición de conformidad con la reivindicación 17, caracterizada porque R3 comprende un anillo heteroaromático derivado del grupo que consiste de piridina, piridazina, pirimidina, p'irazina, imidazol, oxazol, isoxazol, tiazol, oxadiazol, tiadiazol, pirazol, triazol , triazina, quinolina e isoquinolina .
19. La composición de conformidad con la reivindicación 17, caracterizada porque R3 comprende un anillo heteroaromatico derivado de piridina o imidazol .
20. La composición de conformidad con la reivindicación 17, caracterizada porque R3 se selecciona del grupo que consiste de piridinio-l-ilo, 4-(dimetilamino) piridio-l-ilo, 3 -metilimidazolio-l-ilo, 4-(pirrolidin-l-il) piridio-l-ilo, 4-isopropilpiridinio-l-ilo, 4- [ (2-hidroxietil) metilamino] piridinio-l-ilo, 4-(3-hidroxipropil) piridinio-l-ilo, 4-metilpiridinio-l-ilo, quinolinio-l-ilo, 4-ter-butilpiridinio-l-ilo, y 4- (2-sulfoetil) iridinio-l-ilo .
21. Una composición formada de partículas que comprende partículas que comprenden una matriz insoluble en agua que incluye una molécula anfitriona que es entrelazada de manera no covalente por cationes multivalentes , caracterizada porque la molécula anfitriona es no polimérica, tiene más de un grupo carboxi funcional y tiene por lo menos carácter aromático o heteroaromático parcial, y las partículas se distinguen en que una molécula huésped puede ser encapsulada dentro de la matriz y posteriormente liberada .
22. La composición formada de partículas de conformidad con la reivindicación 21, caracterizada porque las partículas se pueden disolver en una solución acuosa de cationes univalentes .
23. La composición formada de partículas de conformidad con la reivindicación 21, caracterizada porque las partículas no se disuelven sustancialmente en una solución con un pH menor a aproximadamente 5.0.
24. La composición formada de partículas de conformidad con la reivindicación 21, caracterizada porque el diámetro medio de masa de las partículas es menor a 100 µt?.
25. La composición formada de partículas de conformidad con la reivindicación 21, caracterizada porque la molécula anfitriona es zwiteriónica .
26. La composición formada de partículas de conformidad con la reivindicación 21, caracterizada porque la molécula anfitriona tiene dos grupos carboxi funcionales.
27. La composición formada de partículas de conformidad con la reivindicación 21, caracterizada porque comprende además una molécula huésped.
28. La composición formada de partículas de conformidad con la reivindicación 27, caracterizada porque la molécula huésped es un fármaco.
29. La composición formada de partículas de conformidad con la reivindicación 21, caracterizada porque la molécula anfitriona es capaz de formar ya sea una fase cromónica o N en solución acuosa antes de estar en presencia de cationes multivalentes .
30. La composición formada de partículas de conformidad con la reivindicación- 21, caracterizada porque la molécula anfitriona tiene por lo menos carácter aromático parcial .
31. La composición formada de partículas de conformidad con la reivindicación 21, caracterizada porque al menos uno de los grupos carboxi de la molécula anfitriona está directamente unido a un grupo funcional aromático o heteroaromático .
32. La composición formada de partículas de conformidad con la reivindicación 21, caracterizada porque la mayoría de los cationes multivalentes son divalentes .
33. La composición formada de partículas de conformidad con la reivindicación 21, caracterizada porque los cationes multivalentes se seleccionan del grupo que consiste de calcio, magnesio, zinc, aluminio y hierro.
34. La composición formada de partículas de conformidad con la reivindicación 21, caracterizada porque la molécula anfitriona comprende : en donde cada R2 se selecciona de manera independiente de cualquier grupo donador de electrones, grupo atrayente de electrones y grupo electrónicamente neutro; y R3 se selecciona del grupo que consiste de anillos heteroaromáticos y heterociclicos sustituidos y no sustituidos enlazados al grupo triazina a través de un átomo de nitrógeno dentro del anillo de R3, y tautómeros de protón y sales de los mismos.
35. La composición formada de partículas de conformidad con la reivindicación 34, caracterizada porque cada R2 se selecciona de manera independiente del grupo que consiste de hidrógeno, un grupo alquilo no sustituido, o un grupo alquilo sustituido con un grupo funcional hidroxi, éter, éster, sulfonato o halogenuro.
36. La composición formada de partículas de conformidad con la reivindicación 35, caracterizada porque R3 comprende un anillo heteroaromático derivado del grupo que. consiste de piridina, piridazina, pirimidina, pirazina, imidazol, oxazol, isoxazol, tiazol, oxadiazol, tiadiazol, pirazol, triazol, triazina, quinolina e isoquinolina .
37. La composición formada' de partículas de conformidad con la reivindicación 35, caracterizada porque R3 comprende un anillo heteroaromático derivado de piridina o imidazol .
38. La composición formada de partículas de conformidad con la reivindicación 35, caracterizada porque R3 se selecciona del grupo que consiste de piridinio-l-ilo, 4- (dimetilamino) iridio-l-ilo, 3-metilimidazolio-l-ilo, 4- (pirrolidin-l-il) piridio-l-ilo, 4-isopropilpiridinio-l-ilo, 4- [ (2-hidroxietil) metilamino] piridinio-l-ilo, 4- (3-hidroxipropil) piridinio-l-ilo, 4-metilpiridinio-l-ilo, quinolinio-l-ilo, 4-ter-butilpiridinio-l-ilo, y 4- (2-sulfoetil) iridinio-l-ilo .
39. La composición formada de partículas de conformidad con la reivindicación 34, caracterizada porque la molécula anfitriona comprende: y tautomexos de protón y sales de los mismos.
40. La composición formada de partículas de conformidad con la reivindicación 39, caracterizada porque cada R2 se selecciona de manera independiente del grupo que consiste de hidrógeno, un grupo alquilo no sustituido, o un grupo alquilo sustituido con un grupo funcional hidroxi, éter, éster, sulfonato o halogenuro.
41. La composición formada de partículas de conformidad con la reivindicación 40, caracterizada porque R3 comprende un anillo heteroaromático derivado del grupo que consiste de piridina, piridazina, pirimidina, pirazina, imidazol, oxazol, isoxazol, tiazol, oxadiazol, tiadiazol, pirazol, triazol, triazina, quinolina e isoquinolina .
42. La composición formada de partículas de conformidad con la reivindicación 40, caracterizada porque R3 comprende un anillo . eteroaromático derivado de piridina o imidazol .
43. La composición formada de partículas de conformidad con la reivindicación 40, caracterizada porque R3 se selecciona del grupo que consiste de piridinio-l-ilo, 4-(dimetilamino) piridio-l-ilo, 3 -metilimidazolio-l-ilo, 4-(pirrolidin-l-il) iridio-l-ilo, 4-isopropilpiridinio-l-ilo, 4- [ (2-hidroxietil) metilamino] piridinio-l-ilo, 4- (3-hidroxipropil) piridinio-l-ilo, 4-metilpiridinio-l-ilo, quinolinio-l-ilo, 4-ter-butilpiridinio-l-ilo, y . 4- (2-sulfbetil) iridinio-l-ilo .
44. Una formulación de suspensión medicinal caracterizada porque comprende una composición formada de partículas de conformidad con la reivindicación 21 y un líquido .