MXPA05004889A - Composiciones oftalmicas para el tratamiento de la hipertension ocular. - Google Patents

Abstract

Esta invencion se relaciona con compuestos potentes bloqueadores del canal de potasio de Formula I o una formulacion de ellos para el tratamiento del glaucoma y otras condiciones las cuales conducen a elevar la presion intraocular en el ojo de un paciente; esta invencion tambien se relaciona con el uso de tales compuestos para dar un efecto neuroprotector al ojo de especies mamiferas, particularmente humanos.

Description

COMPOSICIONES OFTALMICAS PARA EL TRATAMIENTO DE LA HIPERTENSION OCULAR ANTECEDENTES DE LA INVENCION El glaucoma es una enfermedad degenerativa del ojo en la cual la presión intraocular (PIO) es demasiado alta para permitir el funcionamiento normal del ojo. Como resultado, pueden causarse daños en la cabeza del nervio óptico y dar lugar a una pérdida irreversible de la función visual. Si el glaucoma no se trata puede conducir hasta la ceguera. Actualmente la mayoría de los oftalmólogos creen que la hipertensión ocular, ej. la condición de presentar una presión intraocular elevada sin daño en la cabeza del nervio óptico o defectos en el campo de visual característicos del glaucoma, representa simplemente la fase más temprana en el inicio del glaucoma. Hay varias terapias para el tratamiento del glaucoma y la presión intraocular elevada, pero la eficacia y los perfiles de efectos secundarios de estos agentes no son los ideales. Recientemente fueron encontrados bloqueadores del canal de potasio para reducir la presión intraocular en el ojo y por lo tanto se dio lugar a más de una aproximación para el tratamiento de la hipertensión ocular y de las enfermedades oculares degenerativas relacionadas. El bloqueo de los canales de potasio puede disminuir la secreción de fluido, y bajo ciertas circunstancias, incrementar la contracción del músculo liso y podría esperarse la disminución de la PIO y tener efectos neuroprotectores en el ojo (ver las patentes con números US 5,573,758 y US 5,925,342; Moore, et al., Invest. Ophthalmol. Vis. Sci 38, 1997; WO 89/10757, WO94/28900, y WO 96/33719).

CAMPO DE LA INVENCION Esta invención está relacionada con el uso de potentes bloqueadores del canal de potasio o una formulación de ellos en el tratamiento del glaucoma y otras enfermedades que están relacionadas con una elevada presión infraocular en el ojo del paciente. Esta invención también está relacionada con el uso de dichos compuestos para ofrecer un efecto neuroprotector para el ojo de especies de mamíferos, particularmente humanos. Más particularmente esta invención se refiere al tratamiento del glaucoma y/o la hipertensión ocular (presión infraocular elevada) utilizando nuevos compuestos de indazol que tienen la fórmula estructural I: Fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable, un enantiómero, un diastereómero o mezcla de ellos: donde, R representa un hidrógeno, o C1-6 alquil; RY representa H, o Ci_6 alquil; Rw representa H, C-|-6 alquil, -C(O)C-|-6 alquil, -C(0)OCi_6 alquil, -S02N(R)2, -SO2C1-6 alquil, -SO2C6-I O aril, N02) CN o -C(0)N(R)2; R2 representa hidrógeno, C1-10 alquil, OH, C2-6 alquenil, -(CH2)nO(CH2)mOR, -(CH2)nCi-6 alcoxi, -(CH2)nC3-8 cicloalquil, -(CH2)nC3-10 heterociclil, o -(CH2)nC6-10 an'> dicho alquil, heterociclil, o aril opcionalmente substituido con de 1 a 3 grupos seleccionados de Ra; R3 representa hidrógeno, C1-10 alquil, -(CH2)nC3-8 cicloalquil, - (CH2)nC3-l o heterociclil, -(CH2)nCOOR, -(CH2)nC6-10 aril, nitro, ciano o halógeno, dicho alquil, heterociclil, o aril opcionalmente substituido con de 1 a 3 grupos de Ra; R4 y R5 independientemente representan hidrógeno, C1-6 alcoxi, OH, C<i_6 alquil, COOR, SOqC1-6 alquil, COC1-6 alquil, SO3H, -O(CH2)nN(R)2, -O(CH2)nCO2R, -OPO(OH)2, CF3, OCF3 -N(R)2, nitro, ciano, C-]-6 alquilamino, o halógeno; y R6 representa hidrógeno, C1-10 alquil, -(CH2)nC6-10 an'> " (CH2)nC3-l O heterociclil, - ~(CH2)riC3-8 cicloalquil, dicho aril, heterociclil y alquil opcionalmente substituido con de 1 a 3 grupos seleccionados de Ra, donde el Ra(s) puede estar unido a cualquier átomo de carbono o heteroátomo seleccionado entre N y S; R8 representa cicloalquil, -(CH2)n 3-10 heterociclil, C1-6 alcoxi o -(CH2)nC5-io heteroaril, -(CH2)nC6-10 aril dicho heterociclil, aril o heteroaril opcionalmente substituidos con de 1 a 3 grupos seleccionados entre Ra; Ra representa F, Cl, Br, I, CF3, N(R)2, N02, CN, -O-, -CORs, - CONHR8, -CON(R8)2, -0(CH2)nCOOR, -NH(CH2)nOR, -COOR, -OCF3, CF2CH2OR, -NHCOR.-S02R, -SO2NR2, -SR, (C-,-C6 alquil)0-, -(CH2)nO(CH2)mOR, -(CH2)nCl-6 alcoxi, (aril)O-, -(CH2)nOH, (C C6 alquil)S(0)m-, H2N-C(NH)-, (C C6 alquil)C(O)-, (C C6 alquil)OC(0)NH-, -(C -CQ alquil)NRw(CH2)nC3-10 heterociclil-Rw, -(C-j-C6 alquil)O(CH2)nC3-10 heteroc¡clil-RW) -(C-j -Cg alquil)S(CH2)nC-3-10 heterociclil-Rw, -(C^ -CQ alquil)- C3-I O heterociclil-Rw, -(CH2)n-Zl-C(=Z2)N(R)2, -(C2-6 alquenil)NRw(CH2)nC3-io heterocidil-Rw, -(C2-6 alquenll)0(CH2)nC3-lo heterociclil-Rw, -(C2-6 alquen¡l)S(CH2)nC-3-l O heterociclil-Rw, -(C2-6 alquenil)-C3-10 heterocicl¡l-Rw, -(C2-6 -(CH2)nS02R, -(CH2)nS03H, -(CH2)nPO(OR)2, C3-i ocicloalquil, C6-10 aril, C3-10 heterociclil, C2-6 alquenil, y C-j-C-j n alquil, dicho alquil, alquenil, alcoxi, heterociclil y aril opcionalmente substituido con de 1 a 3 grupos seleccionados de CrC6 alquil, halógeno, (CH2)nOH, CN, NO2, CON(R)2 y COOR; Z"! y ?2 independientemente representa NRW, O, CH2, o S; m es 0-3; n es 0-3 y q es 0-2. Este y otros aspectos de la invención serán realizados bajo la mirada de la invención como un todo.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION La presente invención se refiere a nuevos bloqueadores del canal de potasio de Fórmula I. También se relaciona con un método para disminuir la presión infraocular elevada o para el tratamiento de glaucoma mediante la administración, preferentemente por administración tópica o intracameral, de una composición que contiene un bloqueador del canal de potasio de Fórmula i descrita aquí arriba y un transportador farmacéuticamente aceptable. En otra materialización Rw se selecciona entre H, Ci-6 alquil, - C(0)Ci-6 alquil y -C(0)N(R)2 y todas las otras variables son como originalmente se describieron. Además otra materialización de esta invención se realiza cuando F¿6 es C-i-10 alquil, (CH2)nC3-8 cicloalquil, dicho alquil, opcionalmente substituido con de 1 a 3 grupos de Ra, y todas las demás variables son como originalmente se describieron.

Además otra materialización de esta invención se realiza cuando F?6 es C1-10 alquil opcionalmente substituido con de 1 a 3 grupos de Ra, y todas las demás variables son como originalmente se describieron. Además otra materialización de esta invención es realizada cuando Ry es C-|-6 alquil, y todas las otras variables como han sido descritas originalmente. Aún otra materialización de esta invención se realiza cuando R2 es C-i-10 alquil o -(CH2)nC3-8 cicloalquil y R3 es C-|-10 alquil, o (CH2)nC3-10 heterociclil, dicho heterociclil y alquil opcionalmente substituido con de 1 a 3 grupos de Ra. Una submaterialización de esta invención se realiza cuando n es 0. Otra realización de la presente invención se realiza cuando Ra se selecciona entre F, Cl, Br, I, CF3, N(R)2, N02, CN, -O-, -CONHRs, - CON(R8)2, -0(CH2)nCOOR, -NH(CH2)nOR, -COOR, -OCF3, -NHCOR, -S02R, -S02NR2j -SR, (CrC6 alquil)0-, -(CH2)nO(CH2)mOR, -(CH2)nCl-6 alcoxi, (aril)O-, -OH, (CrC6 alquil)S(0)m-, H2N-C(NH)-, (C|-C6 alquil)C(O)-, (C C6 alquil)OC(0)NH-, -(C]-C6 alquil)NRw(CH2)nC3-10 heterociclil-RW) - -(C2-6 alquenil)NRw(CH2)nC3-10 heterocicliI-Rw,-(C2-6 alquenil)-Zl-C(=Z2)N(R)2r(CH2)nS02R, -(CH2)nS03H, (CH2)nP0(0R)2, C2-6 alquenil, y C-J -C^ Q alquil, dicho alquil y alquenil, opcionalmente substituido con de 1 a 3 grupos seleccionados de C-^-Cg alquil, y COOR; Ejemplos de los compuestos utilizados en esta invención se encuentran en el Cuadro 1: o una sal farmacéuticamente aceptable, enantiómero, diastereómero o una mezcla de ellos. La invención se describe aquí en detalle utilizando los términos definidos abajo a menos que otra cosa se especifique. Los compuestos de la presente invención pueden tener centros asimétricos, ejes quirales y planos quirales, y encontrarse como racematos, mezclas racémicas, y como diatereómeros individuales, con todos los posibles isómeros, incluyendo los isómeros ópticos, estando todos incluidos en la presente invención. (Ver E.L. Eliel y S.H. Wilen Estereoquímica de los compuestos de carbono{John Wiley e hijos, New York 1994), en particular las páginas 19- 90) Cuando alguna de las variables (e.j. aril, heterociclo, R1 , R6 etc.) se presenta más de una vez en algún constituyente, su definición en cada caso es independiente de los otros casos. Además, las combinaciones de substituyentes / o variables sólo son permitidas si los resultados de tales combinaciones dan lugar a compuestos estables. Cuando Ra es -O- y está unido a un carbono es referido como un grupo carbonil y cuando está unido a un nitrógeno ( e.j., el átomo de nitrógeno en un grupo piridil) o átomo de azufre es referido como un N-oxido y un grupo sulfóxido, respectivamente. El término "alquil" se refiere a un radical derivado de un alcano monovalente (hidrocarbono) que contiene desde 1 hasta 10 átomos de carbono a menos que se defina de otra manera. Puede ser lineal, ramificado o cíclico. Los grupos alquilos preferidos incluyen metil, etil, propil, isopropil, butil, t-butil, ciclopropil, ciclopentil y ciclohexil. Cuando el grupo alquilo se dice que está substituido con un grupo alquilo, es utilizado indiferentemente como " grupo alquilo ramificado". El cicloalquil es una especie de alquilo que contiene desde 3 a 15 átomos de carbono, a menos que otra cosa sea definida, sin dobles enlaces resonantes o alternativos entre átomos de carbono. Puede contener de 1 a 4 anillos, los cuales están fusionados. Ejemplos de tales elementos cicloalquil incluyen, pero no están limitados a, ciclopropil, ciclobutil, ciclopentil, ciclohexil y cicloheptil. Alquenil es C-2-C6 alquenil. Alcoxi se refiere a un grupo alquil de un número de átomos de carbono indicado, unido a través de un puente de oxígeno, con el grupo alquilo opcionalmente substituido como se ha descrito aquí. Dichos grupos son estos grupos de longitud determinada en una configuración lineal o ramificada y si son de dos o más átomos de carbono de longitud, ellos pueden incluir un doble o un triple enlace. Ejemplos de estos grupos alcoxi son metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, ¡sobutoxi, butoxi terciario, pentoxi, isopentoxi, hexoxi, isohexoxi, aliloxi, propargiloxi, y similares. Halógeno (halo) se refiere a cloro, flúor, yodo o bromo. Aril se refiere a anillos aromáticos, ej., fenil, fenil substituido y similares, así como anillos los cuales están fusionados, ej., naftil, fenantrenil y similares. Un grupo aril que contiene al menos un anillo que tiene por lo menos 6 átomos, hasta cinco de tales anillos estando presentes, contienen hasta 22 átomos, con alternativos (resonantes) dobles enlaces entre átomos de carbonos adyacentes o heteroátomos apropiados. Ejemplos de grupos arilos son fenil, naftil, tetrahidronaftil, indanil, bifenil, fenantril, antril o acenaftil y fenantrenil, preferentemente fenil, naftil o fenantrenil. Los grupos arilo pueden de la misma manera estar substituidos como se ha definido. Los arilos substituidos preferentemente incluyen fenil y naftil. El término heterociclil o heterocíclico, como se utiliza aquí, representa un monociclo estable de 3 a 7 miembros o un anillo heterocíclico bicíclico estable de 8 a miembros el cual es saturado o insaturado, y el cual consiste en átomos de carbono y de uno a cuatro heteroátomos seleccionados del grupo consistente en N, O, y S, e incluyendo algún grupo bicíclico en el cual alguno de los anillos heterocíclicos definidos arriba está fusionado a un anillo de benceno. El anillo heterocíclico puede estar unido a algún heteroátomo o átomo de carbono lo cual resulta en la creación de una estructura estable. Un sistema anular heterocíclico fusionado puede incluir anillos carbocíclicos y necesita incluir sólo un anillo heterocíclico. El término heterociclo o heterocíclico incluye mitades heteroaril. Ejemplos de tales elementos heterocíclicos incluyen, pero no están limitados a, azepinil, bencimidazolil, bencisoxazolil, benzofurazanil, benzopiranil, benzotiopiranil, benzofuril, benzotiazolil, benzotienil, benzoxazolil, cromanil, cinnolinil, dihidrobenzofuril, dihidrobenzotienil, dihidrobenzotiopiranil, dihidrobenzotiopiranil sulfona, dihidropirrolil, 1 ,3-dioxolanil, furil, imidazolidinil, imidazolinil, ¡midazolil, indolinil, indolil, isocromanil, isoindolinil, isoquinolinil, isotiazolidinil, isotiazolil, isotiazolidinil, morfolinil, naftiridinil, oxadiazolil, 2-oxoazepinil, oxazolil, 2-oxopiperazinil, 2-oxopiperdinil, 2-oxopirrolidinil, piperidil, piperazinil, piridil, pirazinil, pirazolidinil, pirazolil, piridazinil, pirimidinil, pirrolidinil, pirrolil, quinazolinil, quinolinil, quinoxalinil, tetrahidrofuril, tetrahidroisoquinolinil, tetrahidroquinolinil, tiamorfolinil, tiamorfolinil sulfoxido, tiazolil, tiazolinil, tienofuril, tienotienil, y tienil. Preferentemente, el heterociclo es seleccionado de 2-azepinonil, bencimidazolil, 2-diazapinonil, dihidroimidazolil, dihidropirrolil, ¡midazolil, 2-imidazolidinonü, indolil, isoquinolinil, morfolinil, piperidil, piperazinil, piridil, pirrolidinil, 2-piperidinonil, 2-pirimidinonil, 2-pirollidinonil, quinolinil, tetrahidrofuril, tetrahidroisoquinolinil, y tienil. El término "heteroátomo" significa O, S o N, seleccionado en unas bases independientes. El término "heteroaril" se refiere a un grupo hidrocarbonado aromático monocíclico que tiene en el anillo de 5 a 6 átomos, o un grupo aromático bicíclico que tiene de 8 a 10 átomos, conteniendo al menos un heteroátomo, O, S o N, en el cual un átomo de carbono o nitrógeno es el punto de unión, y en el cual uno o dos átomos de carbono adicionales están opcionalmente reemplazados por un heteroátomo seleccionado de O o S, y en el cual de 1 a 3 átomos de carbono adicionalmente son opcionalmente reemplazados por heteroátomos de nitrógeno, dicho grupo heteroaril está opcionalmente substituido como ha sido descrito. Ejemplos de tales elementos heterocíclicos incluyen, pero no están limitados a bencimidazolil, bencisoxazolil, benzofurazanil, benzopiranil, benzotiopiranil, benzofuril, benzotiazolil, benzotienil, benzoxazolil, cromanil, cinnolinil, dihidrobenzofuril, dihidrobenzotienil, dihidrobenzotiopiranil, dihidrobenzotiopiranil sulfona, furil, imidazolil, indolinil, indolil, isocromanil, isoindolinil, isoquinolinil, isotiazolil, naftiridinil, oxadiazolil, piridil, pirazinil, pirazolil, piridazinil, pirimidinil, pirrolil, quinazolinil, quinolinil, quinoxalinil, tetrahidroisoquinolinil, tetrahidroquinolinil, tiazolil, tienofuril, tienotienil, tienil y triazolol. Adicionalmente los átomos de nitrógeno puede estar presente juntos con el primer nitrógeno y oxígeno o azufre, dando como ej., tiadiazol. Esta invención también está relacionada con composiciones y métodos de tratamiento de la hipertensión ocular o glaucoma mediante la administración a un paciente en necesidad de ello de uno de los compuestos de formula I en combinación con un agente bloqueante d-adrenérgico tal como timolol, betaxolol, levobetaxolol, carteolol, levobunolol, un agente parasimpatomimético tal como epinefrina, iopidina, brimonidina, clonidina, para-aminoclonidina, inhibidor de la anhidrasa carbónica tal como dorzolamida, acetazolamida, metazolamida o brinzolamida, un agonista EP4 (tales como los reivindicados en WO 02/24647, WO 02/42268, EP 1114816, WO 01/46140 y WO 01/72268), una prostaglandina tal como latanoprost, travaprost, unoprostona, rescula, S1033 (compuestos puestos de manifiesto en las patentes con N° US. 5,889,052; 5,296,504; 5,422,368; y 5,151 ,444); un lípido hipotensivo tal como lumigan y los compuestos puestos de manifiesto en las patentes con N° US 5,352,708; un neuroprotector reivindicado en la patente con N° US 4,690,931 , particularmente eliprodil y R-eliprodil como se puso de manifiesto en WO 94/13275, que incluye memantina; o un agonista de los receptores 5-HT2 como se puso de manifiesto en PCT/US00/3 247, particularmente 1-(2-aminoprop¡l)-3-metil-1 H-¡mdazol-6-ol fumarato y 2-(3-cIoro-6-metoxi-indazol-1-il)-1-metil-etilamina. Un ejemplo de lípido hipotensivo (el grupo ácido carboxílico en una cadena d unida a una estructura básica de prostaglandina que está sustituida con substituyentes electroquímicamente neutros) es este en el cual el grupo ácido carboxílico está substituido con un grupo C-1-6 alcoxi tal como OCH3 (PGF2a I-OCH3), o un grupo hidroxi (PGF2a 1-OH). Los bloqueadores preferidos de los canales de potasio son los bloqueadores de canales de potasio activados con calcio. Más preferentemente los bloqueadores de los canales de potasio con alta conductancia, bloqueadores de canales de potasio activados con calcio (Maxi-K) . Los canales Maxi-K son una familia de canales iónicos que son prevalentes en tejidos neuronales, músculo liso y tejidos epiteliales y los cuales son controlados por potencial de membrana y Ca2+ intracelular. La presente invención está basada en el descubrimiento de que los canales maxi-K si están bloqueados, inhiben la producción de humor acuoso mediante la inhibición del soluto neto y evacúa H2O y por ello disminuye la PIO. Este descubrimiento sugiere que los bloqueadores del canal maxi-K son útiles para el tratamiento de otras disfunciones oftalmológicas tales como edema macular y degeneración macular. Es conocido que disminuyendo la PIO se promociona que la sangre fluya a la retina y al nervio óptico. Por lo tanto, los compuestos de esta invención son útiles para el tratamiento del edema macular y/o la degeneración macular. Se cree que los bloqueadores del canal maxi-K los cuales disminuyen la PIO son útiles para dar lugar a un efecto neuroprotector. Se cree también que son efectivos para aumentar la velocidad de la sangre retinal y en la cabeza del nervio óptico y para incrementar el oxígeno retinal y del nervio óptico mediante la disminución de la PIO, lo cual cuando se da a la vez beneficia a la salud del nervio óptico. Como resultado, esta invención está relacionada con un método para incrementar la velocidad de la sangre retinal y de la cabeza del nervio óptico, incrementando la tensión de oxígeno en el nervio óptico y retinal así como dando lugar a una efecto neuroprotector o una combinación de ellos. Un número de los medicamentos que se encuentran en el mercado funcionan como antagonistas del canal de potasio. Los más importantes de estos incluyen los compuestos Gliburida, Glipizida y Tolbutamida. Estos antagonistas del canal de potasio son utilizados como agentes antidiabéticos. Los compuestos de esta invención pueden ser combinados con uno o más de estos compuestos para tratar la diabetes. Los antagonistas del canal de potasio son también utilizados como agentes antiarítmicos de Clase 3 para tratar infartos agudos en humanos. Un número de toxinas que se producen naturalmente son conocidas como bloqueadores de los canales de potasio, estas incluyen Apamin, Iberiotoxin, Charibdotoxin, Noxiustoxin, Kaliotoxin, Dendrotoxin(s), péptido degranulador de célula cebada (DCC), y d-Bungarotoxin (d-???). Los compuestos de esta invención pueden ser combinados con uno o más de uno de estos compuestos para tratar arritmias. La depresión está relacionada con la disminución de la liberación de neurotransmisores. Los tratamientos actuales para la depresión incluyen bloqueadores de la captación de neurotransmisores, e inhibidores de las enzimas relacionadas en la degradación de neurotransmisores los cuales actúan prolongando la vida de los neurotransmisores. La enfermedad de Alzheimer también está caracterizada por una disminución de la liberación de neurotransmisores. Tres clases de medicamentos están siendo investigados para tratar la enfermedad del Alzheimer potenciadores colinérgicos tales como medicamentos anticolinesterasa (e.g., fisostigmina (eserina), y Tacrina (tetrahidroaminocridina)); nootrópicos que afectan el metabolismo neuronar con mínimos efectos en otros lugares (e.g., Piracetam, Oxiracetam; y aquellos medicamentos que afectan la vasculatura cerebral tales como una mezcla de mesilatos ergoloides y medicamentos que bloquean el canal de calcio incluyendo Nimodipine. Selegiline, un inhibidor monoamina oxidasa B en cual incrementa la dopamina cerebral y la norepinefrina ha ido descrito que causa mejoras moderadas en algunos pacientes de Alzheimer. Los agentes quelantes de aluminio han sido de interés para aquellos que creen que la enfermedad de Alzheimer es debida a la toxicidad de aluminio. Los medicamentos que afectan al comportamiento han sido empleados, incluyendo neurolépticos, y anxiolíticos. Los anxiolíticos, los cuales son moderadamente tranquilizantes, son menos efectivos que los neurolépticos. La presente invención está relacionada con compuestos nuevos los cuales son utilizados como antagonistas del canal de potasio. Los compuestos dentro del campo de la invención presentan actividad antagonista de los canales de potasio y por ello son útiles en trastornos asociados con un mal funcionamiento del canal de potasio. Un número de desórdenes cognitivos tales como la enfermedad de Alzheimer, pérdida de memoria o depresión pueden beneficiarse del aumento en la liberación de neurotransmisores como serotonina, dopamina o acetilcolina y similares. El bloqueo de los canales Maxi-K mantienen la despolarización celular y por ello mejoran la secreción de estos neurotransmisores vitales. Los compuestos de esta invención puede estar combinadas con medicamentos anticolinesterasa tales como fisostigmina (eserina) y Tacrine (tetrahidroaminocridina), nootrópicos tales como Piracetam, Oxiracetam, mesílatos ergoloides, bloqueadores selectivos del canal de calcio tales como Nimodipina, o inhibidores de la monoamina oxidasa B tales como Selegilina, en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer. Los compuestos de esta invención pueden estar también combinados con Apamin, Iberiotoxin, Charibdotoxin, Noxiustoxin, Kaliotoxin, Dendrotoxin(s), péptido degranulador de célula cebada (DCC), d-Bungarotoxin (d-???) o una combinación de ellas en el tratamiento de arritmias. Los compuestos de esta invención pueden más allá estar combinados con Gliburide, Glipizide, Tolbutamide o una combinación de ellos para el tratamiento de la diabetes. Los ejemplos de aquí ilustran pero no limitan la invención reivindicada. Cada uno de los compuestos reivindicados son antagonistas del canal de potasio y son por ellos útiles en los desórdenes neurológicos descritos en los cuales es deseable mantener la célula en un estado despolarizado para desarrollar la mayor liberación de neurotransmisores. Los compuestos producidos en la presente invención son combinados con conocidos y adecuados excipientes aceptables para dar lugar a composiciones las cuales pueden ser administradas a mamíferos, incluyendo humanos, para desarrollar un bloqueo efectivo del canal de potasio. Para el uso en medicina, las sales de los compuestos de fórmula I serán sales farmacéuticamente aceptables. Otras sales, pueden, sin embargo, ser útiles en la preparación de estos compuestos de acuerdo con la invención o sus sales farmacéuticamente aceptable. Cuando el compuesto de la presente invención es acídico, apropiadas "sales farmacéuticamente aceptables" se refieren a sales preparadas de bases no tóxicas farmacéuticamente aceptables que incluyen bases orgánicas e inorgánicas. Las sales derivadas de las bases inorgánicas incluyen aluminio, amonio, calcio, cobre, férrica, ferrosa, litio, magnesio, sales mangánicas, manganosa, potasio, sodio, zinc y similares. Particularmente son preferidos el amonio, calcio, magnesio, potasio y sales de sodio. Las sales derivadas de bases orgánicas no tóxicas farmacéuticamente aceptables incluyen sales de aminas primarias, secundarias y terciarias, aminas substituidas incluyendo las aminas naturalmente substituidas, aminas cíclicas y resinas de intercambio iónico básicas, tales como arginina, betaína cafeína, colina, N,N1-dibenziletilenediamina, dietilamin, 2-dietilaminoetanol, 2-dimetilaminoetanol, etanolamina, etilenediamina, N-etilmorfolina, N-etilpiperidina, glucamina, glucosamina, histidina, hidrabamina, isopropilamina, lisina, metilglucamina, morfolina, piperazina, piperidina, resinas poliamínicas, procaina, purinas, teobromina, trietilamina, trimetilamina tripropilamina, trometamina y similares. Cuando el compuesto de la presente invención es básico, las sales pueden ser preparadas a partir de ácidos no tóxicos farmacéuticamente aceptables, que incluyen ácidos inorgánicos y orgánicos. Tales ácidos incluyen acético, bencenesulfónico, benzoico, camforsulfónico, cítrico, etanesulfónico, fumárico, glucónico, glutámico, hidrobrómico, hidroclórico, isetiónico, láctico, maleíco, málico, mandélico, metanesulfónico, múcico, nítrico, pamoico, pantoténico, fosfórico, succínico, sulfúrico, tartárico, ácido p-toluenesulfónico y similares. Particularmente se prefieren ácidos como cítrico, hidrobrómico, hidroclórico, maleíco, fosfórico, sulfúrico y tartárico. La preparación de las sales farmacéuticamente aceptables descritas arriba y otras sales farmacéuticamente aceptables está totalmente descrita por Berg et al., "Sales Farmacéuticas," J. Pharm. Se/., 1977:66:1-19.

Como se utiliza aquí, se pretende que el término "composición" encierre un producto que comprende los ingredientes especificados en las cantidades específicas, así como los productos que resultan, directamente o indirectamente, de la combinación de los ingredientes específicos en las cantidades especificadas. Cuando un compuesto de acuerdo con esta invención es administrado a un sujeto humano, la dosis diaria será normalmente determinada por la prescripción médica, la dosis generalmente variará de acuerdo con la edad, peso, sexo y la sensibilidad del paciente individual, tanto como de la severidad de los síntomas del paciente. Los bloqueadores del canal maxi-K utilizados pueden ser administrados en una cantidad terapéuticamente efectiva intravenosamente, subcutáneamente, tópicamente, transdermalmente, parentalmente, o por cualquier otro método conocido de aquellos que se encuentran en el estado de la técnica. Las composiciones farmacéuticas oftálmicas son preferentemente adaptadas para administración tópica a el ojo en la forma de soluciones, suspensiones, pomadas, cremas o como un inserto sólido. Las formulaciones oftálmicas de este compuesto pueden contener desde 0.01 ppm a 1 % y especialmente 0.1 ppm a1% de medicamento. Dosis más altas como, por ejemplo, alrededor del 10% o dosis más bajas pueden ser empleadas para dar lugar a la dosis que es efectiva en la reducción de la presión infraocular, tratamiento del glaucoma, incremento de la velocidad de flujo sanguíneo o tensión de oxígeno. En una sola dosis, desde entre 0.01 a 5000 ng, preferentemente de 0.1 a 500 ng, y especialmente de 1 a 100 ng del compuesto puede ser aplicado al ojo humano. La preparación farmacéutica la cual contiene el compuesto puede ser convenientemente mezclada con un transportador farmacéutico orgánico no tóxico, o con un transportador farmacéutico inorgánico no tóxico. Los transportadores farmacéuticamente aceptables típicos son, por ejemplo, agua, mezcla de agua y solventes miscibles con agua tales como alcanoles de cadena corta o aralcanoles, aceites vegetales, polialquilen glicoles, petróleo basado en gelatina, etil celulosa, etil oleato, carboximetilcelulosa, polivinilpirrolidona, isopropil miristato y otros transportadores aceptables convencionalmente empleados. La preparación farmacéutica puede también contener substancias auxiliares no tóxicas tales como emulsionantes, preservantes, agentes humectantes, agentes incorporados y similares, como por ejemplo, polietilen glicoles 200, 300, 400 y 600, carboceras 1 ,000, 1 ,500, 4,000, 6,000 y 10,000, componentes antibacterianos tales como amonios cuaternarios, sales fenilmercúricas conocidas por tener propiedades esterilizantes en frío y los cuales no son dañinos en el uso, timerosal, metil y propil paraben, bencil alcohol, fenil etanol, ingredientes de tampón tales como borato sódico, acetato sódico, tampones gluconato, y otros ingredientes convencionales tales como sorbitan monolaurato, trietanolamina, oleato, polioxietileno sorbitan monopalmitilato, dioctil sódico sulfosuccinato, monotioglicerol, tiosorbitol, ácido etilenediamin tetracético, y similares.

Adicionalmente, vehículos oftálmicos adecuados pueden ser utilizados como transportadores media para el presente propósito incluyendo sistemas convencionales de medios de tampón fosfato, medios ácido bórico isotónicos, medios cloruro sódico isotónicos, medios borato sódico isotónicos y similares. La preparación farmacéutica puede ser también en forma de formulación de micropartículas. La preparación farmacéutica puede también estar en forma de inserto sólido. Por ejemplo, uno puede usar un polímero soluble en agua sólido como transportador para el medicamento. El polímero utilizados para formar el inserto puede ser cualquier polímero no tóxico soluble en agua, por ejemplo, derivados de celulosa tales como metilcelulosa, carboximetil celulosa sódica, (celulosa de bajo hidroxialquil ), hidroxietil celulosa, hidroxipropil celulosa, hidroxipropilmetil celulosa; acrilatos tales como sales ácidas poliacrílicas, etilacrilatos, poliactilamidas; productos naturales tales como gelatina, alginatos, pectinas, tragacanth, karaya, chondrus, agar, acacia; los derivados de almidón tales como acetato de almidón, hidroximetil almidón éteres, hidroxipropil almidón, también como derivados sintéticos tales como polivinil alcohol, polivinil pirrolidona, polivinil metil éter, óxido de polietileno, carbopol neutralizado y goma xantan, goma gellan, y mezclas de dichos polímeros. Los sujetos adecuados para la administración de la formulación de la presente invención incluyen primates, hombre y otros animales, particularmente hombres y animales domésticos tales como gatos y perros.

La preparación farmacéutica pueden contener substancias auxiliares no tóxicas tales como componentes antibacterianos los cuales no son dañinos en su uso, por ejemplo, timerosal, cloruro de benzalconium, metil y propil paraben, bromuro de bencildodecinium, bencil alcohol, o feniletanol; ingredientes del tampón tales como cloruro sódico, borato sódico, acetato sódico, citrato sódico, o tampón gluconato; y otros ingredientes convencionales tales como monolaurato sorbitan, trietanolamina, polioxietileno sorbitan monopalmitilato, ácido etilenediamina tetraacético, y similares. La solución oftálmica o la suspensión puede ser administrada con tanta asiduidad como sea necesaria para mantener un nivel aceptable de PIO en el ojo. Está contemplada la administración a un ojo de un mamífero unas una o dos veces al día. Para administración tópica ocular las nuevas formulaciones de esta invención puede tomar la forma de soluciones, geles, pomadas, suspensiones, o insertos sólidos, formulados para una dosis unitaria que comprende una cantidad farmacéuticamente efectiva del componente activo o alguna multiplicidad de ellos en el caso de terapia combinada. Los siguientes ejemplos dados a nivel informativo son demostrativos de la presente invención. Las definiciones de los términos utilizados en los ejemplos son los siguientes: MP - Material de partida, DMSO - dimetil sulfóxido, CCF - cromatografía de capa fina, CSG - cromatografía de silica gel, PhMgBr- bromuro de fenilmagnesio h = hr = hora, THF -tetrahidrofurano, DMF - dimetilformamida, min - minuto, CL/EM - cromatografía líquida/espectrometría de masas, HPLC - Cromatografía líquida de alto rendimiento, PyBOP - Benzotriazol-1-iloxitris-(dimetil amino)fosfonio hexafluorofosfato, equiv = eq = equivalente, NBS - N-Bromosuccinamida y AIBN - 2,2'-azobisisobutironitrilo. Los compuestos de esta invención puede ser realizados, con modificaciones donde sea apropiado, de acuerdo al Esquema 1. Los Ejemplos 1-3 son también producidos de acuerdo con el Esquema 1.

ESQUEMA 1 1. NaH, DMSO En el Esquema 1 el nitroanisol es brominado utilizando NBS, AIBN y benzoil peróxido. El tratamiento del bromonitroanisol con cianuro de potasio rindió el cianonitroanisol. La conversión del grupo nitro a una amina es realizado por hidrogenacion. La amina es luego tratada con nitrito sódico y HCI para rendir el anillo de indazol. En esta reacción tan pronto como el diazonio es generado por nitrosación de la mitad de anilina es retenido ¡ntramolecularmente por el cianuro bencil acídico. La tautomerización del resultado derivado da el núcleo de indazol. El tratamiento del nitrilo con un Gringard seguido de la hidrólisis del complejo resultante imino-magnesio da la deseada alquil/aril cetona.

EJEMPLO PREPARATIVO 1 matraz de 500 mL se añadió 336 mmoles (13.44g; 60%) de NaH. Bajo argón se añadió 150 mL de DMSO, seguido de la adición gota a gota de 32 mL de etil cianoacetato (2.2 equiv.; 352 mmloes) a 5o C. Después de todas las adiciones la reacción se templó hasta temperatura ambiente durante 1h. 30 g del nitro benceno de partida derivado fue añadido como polvo (160 mmoles). La mezcla de reacción fue calentada en un sistema cerrado a 90°C durante 8horas. La acidificación y el trabajo estándar dio un residuo aceitoso en bruto el cual fue purificado sobre una columna de silica gel para dar 39 g del producto cristalino deseado el cual fue decarboxilado para dar el bencil nitrilo como sigue. Treinta y ocho gramos del MP obtenido arriba se disolvieron en 400 mL de carbonato sódico 1 N. La solución homogénea fue agitada a temperatura ambiente durante dos días. El análisis de CCF indicó la competencia de la reacción. La mezcla de reacción fue acidificada y extraída con etil acetato (100 mL X 4). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato sódico y se concentraron y el residuo fue objeto de CSG para dar el producto deseado. 1H RMN CDCL3: 7.72 (1H, d, J = 3 Hz); 7.61 (1 H, d, J = 8.5 Hz); 7.25 (1H, dd, J = 3 y 8.5 Hz); 4.17 (2H, s); 3.94 (3H, s). CLEM [M+H] = 193.

EJEMPLO PREPARATIVO 2 Se disolvieron 10g de bencilnitrilo derivado en 20 mL THF seguido de la dilución con 50 mL de metanol. La mezcla de reacción fue acogida en un tubo de presión, se añadió Pd-C (10% wt/ 10 mol %) y la mezcla de reacción se hidrogenó a 40 psi. Después de que la cantidad de hidrógeno requerida para la reducción del grupo NO2 fue consumida la reacción fue parada. El análisis con CCF indicó una conversión mancha a mancha. La mezcla de reacción se filtró a través del relleno de celita y el filtrado fue concentrado hasta un sólido y utilizado directamente en el siguiente paso. La anilina derivada en bruto (se disolvió en 52 mmoles /y se suspendió en HCI 2N (150 mL), enfriada a 5 oc seguida de la adición de 5.4g de nitrito sódico en 10 mL de agua. La mezcla de reacción fue agitada durante una hora calentando gradualmente a temperatura ambiente. El análisis CCF indicó el consumo completo del MP y la formación de una nueva mancha. La mezcla de reacción fue extraída con etil acetato (100 mL X 4); la fase orgánica fue recogida, secada y concentrada. El residuo fue purificado por CSG para dar el producto deseado.

CLEM [M+H] = 174 EJEMPLO PREPARATIVO 3 Se pesó 4.15 g de indazol y agua azeotrópica con 2 tolueno (100 mi) de lavado, retirando el tolueno azeotropo mediante rotavapor. Se secó minuciosamente bajo alto vacío y se desarrolló purgas de argón. Se disolvió en 40 mi de THF seco y 92 mi de éter seco bajo argón, Se enfrió a 5°C en un baño de agua helada. Se añadió 3 eq de cloruro de isopropilmagnesio ((6 mi de una solución 2M en THF) y se agitó durante 0.5 hr a temperatura ambiente. Con cuidado se añadió HCI 1N (240 mi) y se agitó durante 1 h. Se monitorizó la reacción mediante CCF. Se extrajo con EtOAc, se llevó al rotavapor y se produjo el producto deseado. CLEM [M+H] = 219 EJEMPLO PREPARATIVO 4 Paso A 100 g de 2-fluoro-4-metoxi-acetofenona en 400 ml_ de etilen glicol fue agitado a temperatura ambiente con hidrazina (0.624 mol, 20 g) durante 4h después de la cual la mezcla de reacción fue calentada a 150 °C durante 48h. El análisis de CCF indicó la reacción completa. La mezcla de reacción se separó en diclorometano y aguas madre. La fase orgánica se secó sobre sulfato sódico y se evaporó hasta un sólido. Se re-cristalizó a partir de hexano/diclorometano para dar 6-metoxi-3-metil-1 H-indazoI. 1H RMN (CDCL3): 7.5 (1H, d, 7.5 Hz); 6.8 (2H, m); 3.8 (3H, s); 2.55 (3H, s) CLEM [M+H] = 163 78g de 6-metoxi-3-metil-1 H-indazol fue disuelto en 1L de MeCN conteniendo 1.1 equiv de tri-etil amina, 0.2 equiv de DMAP fueron enfriados a -5 °C; seguido por la adición lenta de Boc20 (1.1 equiv) en 200 mL de MeCN. Después de agitar durante 2h la reacción a temperatura ambiente la mezcla de reacción fue evaporada a un aceite el cual fue separado entre EtOAc y aguas madre, secado sobre sulfato de sodio y evaporado. El residuo fue aplicado a una corta CSG y eluído con 15% EtOAc en hexano. La evaporación dio el producto Boc-protegido. 1H RMN (CDCL3): 7.6 (1 H, bs); 7.42 (1 H, d, J = 7.5 Hz); 6.85 (1 H, dd); 3.8 (3H, s); 2.5 (3H, s); 1.7 (9H, s) CLEM [M+H] = 263 100 g de indazol BOC-protegido fue disuelto en 600 ml_ de CCI4, seguido por la adición de 1.1 equiv de NBS y 0.2 equiv de Bz20. La mezcla de reacción fue purgada en vacío con argón y puesta a reflujo durante 5h en presencia de la luz de una lámpara solar. La mezcla de reacción fue filtrada sobre una pieza de SG y concentrado. El residuo de aceite fue purificado sobre una corta CSG. Se obtuvieron mono-bromuro y una mezcla de fracciones de di-bromo derivado. mono-bromuro: 1H RMN (CDCL3): 7.7 (1 H, d, 7.5 Hz); 7.6 (1H, bs); 6.95 (1H, dd); 4.7 (2H, s); 3.9 (3H, s); 1.7 (9H, s); di-bromuro: 1 H RMN (CDCL3): 8.05 (1H, d, J = 7.5 Hz); 7.6 (1H, bs); 7.0 (1 H,dd); 6.85 (1 H, s); 3.9 (3H, s); 1.7 (9H, s); A una solución de dibromuro (23.2g) en ácido acético se añadió acetato de sodio (22.5g). La mezcla fue emplazada en un baño de aceite y puesta a reflujo durante un par de horas hasta que se completó la reacción. La mezcla fue enfriada a temperatura ambiente y luego se vertió en hielo/agua para dar el compuesto deseado como un sólido blanco grisáceo. El sólido se aisló por filtración y se secó sobre atmósfera de nitrógeno. 1H RMN (CDCI3) : d 10.23 (1 H, s); 8.19 (1 H, d); 7.02 (1H, dd); 6.96 (1H, d); 3.90 (3H, s).

Paso B: AI intermedio del Paso A se añadió trietil ortoformato (40ml) y se calentó a 130°C durante un par de horas. La mezcla resultante fue concentrada hasta sequedad para dar el compuesto principal como un sólido marrón. 1H RMN (DMSO) : d 10.08 (1 H, s); 7.98 (1 H, d); 7.25 (1 H, d); 7.02 (1 H, dd); 6.81 (1 H, s); 3.82 (3H, s); 3.52 (4H, q); 1.11 (6H, t).

EJEMPLO PREPARATIVO 5 A una solución del intermedio del ejemplo preparativo 2 (1.00 g, 5.75 mmoles) disuelta en THF (15 mL) se añadió bromuro de ciclopentil magnesio (6.32 mL, 12.65 mmoles) a 0 °C. Se permitió a la reacción templarse a temperatura ambiente y luego fue envejecida con NH4CI saturado hasta terminación. La mezcla de reacción resultante fue extraída con EtOAc y las capas orgánicas combinadas fueron lavadas con aguas madre, secadas sobre MgS04, y concentradas in vacuo. El producto fue purificado vía cromatografía en gel Si02 para rendir 580 mg del producto deseado. 1H RMN (CDCI3) d : 1.702 (2 H, m), 1.803 (2 H, m), 2.005 (4 H, m), 3.904 (3 H, s), 4.070 (1 H, m), 6.915 (1 H, s), 7.010 (1 H, d), 8.272 (1 H, d).

EJEMPLO PREPARATIVO 6 El compuesto deseado fue preparado por un procedimiento similar al descrito para el Ejemplo Preparativo 5, pero se utilizó bromuro de ciclohexil magnesio en vez de bromuro de ciclopentil magnesio. H RMN (CDCI3) d : 1.327 (1 H, m), 1.479 (2 H, m), 1.604 (2 H, m), 1.781 (1 H, m), 1.861 (2 H, m), 2.000 (2 H, m), 3.641 (1 H, m), 3.902 (3 H, s), 6.923 (1 H, s), 7.008 (1 H, d), 8.259 (1 H, d).

EJEMPLO 1 Indazol (0.60 mmoles del Ejemplo Preparativo 3) material de partida obtenido como arriba fue disuelto en DMF (3 mL) seguido de la adición de hidruro sódico (0.88 mmoles) . La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 min, seguido por la adición de tert-butil bromo acetato (0.669 mmoles). La reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 30 min. El análisis en CCF y CL-EM indicó el completo consumo del material de partida concurrente con la formación de una nueva mancha producto. La mezcla de reacción fue envejecida añadiendo agua. El trabajo estándar acuoso seguido por la purificación del producto en bruto mediante CSG dio en producto deseado en forma de sólido blanco. 1H RMN en CDCL: 8.22 (1 H, d, J = 9 Hz); 6.97 (1 H, dd, J = 2 and 9 Hz); 6.5 (1H, d J = 2 Hz); 5.4 ( 2H, s); 3.94 ( 3H, s); 2.8 (1 H, m); 1.38 (9H, s); 1.27 (6H, d, J = 6.5 Hz). CLEM = [M+H] = 317 EJEMPLO 2 1 -(3-iT6-(2 hidrox¡etil)p¡ridina-3-incarbonil>-6-metoxi-1 H-indazol-1 -iD-3.3- dimetilbutan-2-ona A una solución de 2,5-dibromopiridina (2.4g) en tolueno se añadió tributilaliltin (3.4 mi) y diclorobis(trifen¡lfosfina) paladio (0.7g) bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue puesta a reflujo durante un par de horas y concentrado bajo presión reducida. El residuo fue re-disuelto en "éter húmedo" y se añadió DBU (3ml) lentamente para dar una solución turbia. La mezcla se filtró a través de silica gel y se concentró. El residuo se disolvió en una solución metileno cloruro/metanol=1/1 y se enfrió a -78 °C. A esta solución se burbujeó ozono hasta que la mezcla de reacción cambió a color azul. La reacción se templó a 0 °C y se añadió una porción adecuada de borohidruro de sodio (0.5g). Después de agitar a 0 °C durante 1 hora, la mezcla fue vertida en agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con NaOHaq1 N, aguas madre, secado (MgS04), y concentrado bajo presión reducida para proporcionar el alcohol en bruto. El alcohol fue purificado con sílica gel (cloruro de metileno/ etil acetato=1/1) para dar el alcohol deseado. A una solución de alcohol en cloruro de metileno se le añadió imidazol (0.4g) y TBS-Cl (0.8g) a 0 °C. La mezcla se agitó durante 1 hora. La reacción fue vertida en 0.1 N HCIaq y se extrajo con cloruro de metileno. La capa orgánica se lavó con aguas madre, secada (MgS04) y evaporada. El residuo se purificó en silica gel (100% cloruro de metileno) para dar el compuesto deseado. H RMN (CDCI3) : d 8.61 (1 H, d); 7.73 (1 H, dd); 7.14 (1 H, d); 3.97 (2H, t); 2.96 (2H, t); 0.86 (9H, s); -0.02 (6H, s).

Paso B El compuesto deseado fue preparado mediante un procedimiento similar al descrito en, los pasos 5, 6, 7, y 8 del Ejemplo 5. Este compuesto se purificó en silica gel (hexanos/ etil acetato=1/3). 1H RMN (CHCI3) : d 9.53 (1 H, d); 8.54 (1 H, dd); 8.35 (1 H, d); 7.37 (1 H, d); 7.07 (1 H, dd); 6.56 (1 H, d); 5.45 (2H, s); 4.11 (2H, t); 3.90 (3H, s); 3.18 (2H, t); 1.38 (9H, s). CL-EM (M+H)=396.2. Los Ejemplos 3-5 como se muestra abajo fueron realizados, con alguna modificación del compuesto deseado del Ejemplo Preparativo 6, mediante alquilación del indazol como se describió en el Ejemplo 1. Adicionalmente, análogos de los Ejemplos 1 y 4 pueden ser preparados siguiendo análogos procedimientos análogos utilizando el indazol del Ejemplo Preparativo 4 o alternativamente otro indazol preparado siguiendo el procedimiento descrito aquí.

EJEMPLO 3 A 195 mg de NaH (dispersión al 60 % en aceite lavada con hexano) se añadió DMF (10 mL) y el intermedio 3 (597 mg, 2.44 mmoles). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 min antes de añadir 1-cloropinacolona (3.81 mL, 2.92 mmoles). Después de 20 min la reacción se envejeció con H20 y se diluyó con EtOAc. La capa acuosa fue extraída con EtOAc y las capas orgánicas combinadas se lavaron con H20, aguas madre, secada en MgS04, y concentrada in vacuo. El material en bruto fue purificado via cromatografía en silica gel para rendir. H RMN (CDC ) d : 1.361 (9 H, s), 1.683 (2 H, m), 1.788 (2 H, m), 1.974 (4 H, m), 3.872 (3 H, s), 4.029 (1 H, m), 5.372 (2 H, s), 6.514 (1 H, s), 6.986 (1 H, d), 8.267 (1 H, d).

EJEMPLO 4 Utilizando el Ejemplo Preparativo 8, este compuesto se preparó como se describió en el Ejemplo 3. El compuesto principal se purificó vía cromatografía de plato preparatoria Si02. 1H RMN (CDCI3) d : 1.285-1.575 (15 H, m), 1.833 (2 H, d), 1.994 (2 H, d), 3.615 (1 H, m), 3.860 (3 H, s), 5.372 (2 H, s), 6.490 (1 H, s), 6.981 (1 H, d), 8.254 (1 H, d).

EJEMPLO 5 di-tert--but¡l 4-{H -(3,3-d¡metif-2-oxobut¡l)-6-metoxi-1 -H-indazol-3- ¡ncarbonillhidroxil etil bencil 100 g de fluoro-acetofenona en 400 mL de etilen glicol se agitaron a temperatura ambiente con hidrazina (0.624 mol, 20 g) durante 4h después de lo cual la mezcla de reacción se calentó a 150 °C durante 48h. El análisis CCF indicó que se completó la reacción. La mezcla de reacción se separó en diclorometano y aguas madre. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se evaporó hasta sólido. Se re-cristalizó desde hexano/diclorometano para dar indazol. 1H RMN (CDCL3): 7.5 (1 H, d, 7.5 Hz); 6.8 (2H, m); 3.8 (3H, s); 2.55 (3H, s) CLEM [M+H] = 163 Paso 2 6-metoxi-3-metil-1 -H tert-butil-6-metoxi-3-metil- indazol 1 -indazol-carboxilato 78g de indazol fueron disueltos en 1 L de MeCN que contiene 1.1 equiv de tri-etil amina, 0.2 equiv de DMAP se enfriaron a -5 °C; seguido por una lenta adición de Boc20 (1.1 equiv) en 200 ml_ de MeCN. Después de agitar durante 2h la reacción a temperatura ambiente la mezcla de reacción se evaporó a un aceite el cual fue separado entre EtOAc y aguas madre, secado sobre sulfato sódico y evaporado. El residuo se aplicó a una corta CSG y eluido con 15% EtOAc en hexano. La evaporación dio el producto. 1H RMN (CDCL3): 7.6 (1 H, bs); 7.42 (1H, d, J = 7.5 Hz); 6.85 (1 H, dd); 3.8 (3H, s); 2.5 (3H, s); 1.7 (9H, s) CLEM [M+H] = 263 100 g de ¡ndazol se disolvieron en 600 ml_ de CCI4, seguido por una adición de 1.1 equiv de NBS y 0.2 equiv de Bz20. La mezcla de reacción fue purgada al vacio con argón y puesta a reflujo durante 5h en presencia de luz de una lámpara solar. La mezcla de reacción fue filtrada a través de un relleno de SG y concentrada. El residuo aceitoso fue purificado en una corta CSG. Se obtuvo 85 g de bromuro puro. Las fracciones mezcladas rindieron dibromo derivado mono-bromuro: 1H RMN (CDCL3): 7.7 (1 H, d, 7.5 Hz); 7.6 (1 H, bs); 6.95 (1H, dd); 4.7 (2H, s); 3.9 (3H, s); 1.7 (9H, s); di-bromuro: 1 H RMN (CDCL3): 8.05 (1 H, d, J = 7.5 Hz); 7.6 ( H, bs); 7.0 (1 H.dd); 6.85 ( H , s); 3.9 (3H, s); 1.7 (9H, s); Paso 4 3-(bromometil)-6-metox¡- t-butil-3-form¡l-6-metoxi- 1-H-indazol 1-H-indazol-1-carboxilato 5 g de bromuro se disolvieron en 0 mL de DMSO, enfriado a 0 C seguido de la adición de 2.5 equiv de TMANO (trimetil amina N-oxido). La reacción se agitó durante 0.5h luego un trabajo estándar y se filtró a través de un relleno de SG para dar el producto deseado cuantitativamente. CLEM [ +H] = 277 1H RMN (CDCL3): 10.2 (1 H, s); 8.1 (1 H, d, J = 7.5 Hz); 7.6 (1 H, bs); 7.0 (1 H, dd); 3.9 (3H, s); 1.7 (9H, s); Paso 5 Los artículos de cristal fueron secados a llama bajo alto vacío. Al iodo-bencil alcohol derivado puro (3.6 g, 10 mmoles) en el frasco se le añadió lentamente isopropilMgCI ( 5 mL, solución 2M). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 hr, se añadió el ¡ndazol derivado (1.1g, 4 mmoles) en 15 mL THF. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 hr. La CL-EM mostró que la reacción fue completa. Se vertió la mezcla de reacción en 30 mL de NH4CI saturado, seguido de la adición de 40 mL de éter. La capa orgánica se separó, y la capa acuosa se extrajo con éter (40 mL). Las capas orgánicas combinadas fueron lavadas con K2C03 (2x30 mL) saturado, agua (40 mL) y aguas madre (20 mL). El solvente fue eliminado, el residuo fue utilizado durante el siguiente paso de reacción sin más purificaciones. CLEM [M+H] = 499 Pasos 6 y 7 A una solución de indazol (en bruto desde el paso 5) en 20 mL de diclorometano se añadió 5 g de celita y 4.3 g de PCC (MW 215.56, -2 eq). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 hr. La CLEM mostró que la reacción se completó CLEM [M+H] = 497. La mezcla de reacción se filtró. El solvente se eliminó, el residuo se disolvió en 10 mL de MeOH, y se añadió 20 mL de HCI 2N. Después de agitar durante 1 hr a temperatura ambiente los análisis CLEM y CCF indicaron que la reacción fue completa. La mezcla de reacción se extrajo con EtOAc (2x30 mL). El solvente se extrajo, el residuo se utilizó para el siguiente paso de reacción sin más purificaciones. CLEM [M+H] = 283 Paso 8 A una solución de indazol (342 mg de producto en bruto del paso 7, -10 mmoles)) en 15 mL de acetona se añadió 1.5 g de K2C03 y 1.5 mL Bromopinacolona (Mw179.06, d1.326, 2.0 g, 11 mmoles). La mezcla de reacción se agitó a 80 °C en un tubo sellado durante 2 hr. Después de filtrar las sales, el solvente se eliminó, el residuo se purificó por HPFC para dar el producto en forma de sólido blanco. 1H RMN (CDCL3) = 8.3 (3H, m); 7.5 (1 H, d, J = 7.5 Hz); 7.05 (1 H, dd); 7.6 (1 H, bs); 5.4 (2H, s); 4.8 (2H, bs); 3.9 (3H, s); 1.38 (9H, s) CLEM [M+H] = 381 Ensayos funcionales A. Canal Maxi-K La identificación de los inhibidores del canal Maxi-K puede ser efectuada utilizando tecnología Aurora Biosciences, y está basada en la habilidad de expresión de los canales Maxi-K para fijar el potencial de reposo celular después de la transfección transitoria de ambas subunidades y del canal en células TsA-201. En la ausencia de inhibidores, las células muestran un potencial de membrana hiperpolarizado, negativo en el interior, cercano a EK (-80 mV) el cual es una consecuencia de la actividad del canal Maxi-K. La obstrucción del canal Maxi-K causará la desporalización de la célula. Los cambios en el potencial de membrana pueden ser determinados con transferencia de energía de resonancia fluorescente voltaje-sensitiva (FRET) los pares tintados que usan dos componentes , un donante coumarin (CC2DMPE) y un aceptar oxanol (DiSBAC2(3)). El oxanol es un anión lipofílico y distribuye a través de la membrana en función del potencial de membrana. Bajo condiciones normales, cuando el interior de la célula es negativo respecto al exterior, el oxanol es acumulado en la lámina más externa de la membrana y la excitación del coumarin será la causa para que ocurra FRET . Las condiciones que llevan a la despolarización de la membrana causarán que el oxanol se redestribuya en el interior de la célula , y, como consecuencia un decrecimiento en FRET. Así, el radio de cambio (donor/aceptor) se incrementa después de la despolarización de la membrana. La transfección transitoria del canal Maxi-K en células TsA-201 pueden ser llevadas a cabo como se describió previamente (Hanner et al. (1998) J. Biol. Chem. 273, 16289-16296) utilizando FUGENE6™ como reactivo de transfección. Veinticuatro horas después de la transfección , las células son recogidas en Ca2+-Mg2+-libre Dulbecco's fosfato-tampón salino (D-PBS), se sometió a centrifugación, se depositó en 96-pocillos poli-d-lisina de platos cubiertos a una densidad de 60,000 células/pocilio, e incubadas durante la noche. Las células son luego lavadas 1x con D-PBS, y cargadas con 100 I de 4 M CC2DMPE-0.02% plurónico-127 en D-PBS. Las células son incubadas a temperatura ambiente durante 30 min en la oscuridad. Después, las células son lavadas 2x con D-PBS y cargadas con 100 I de D¡SBAC2(3) 6 M en (mM): 140 NaCI, 0.1 KCI, 2 CaCI2, 1 MgCI2, 20 Hepes-NaOH, pH 7.4, 10 glucosa. Los compuestos test son diluido en esta solución, y añadidas al mismo tiempo. Las células son incubadas a temperatura ambiente durante 30 min en la oscuridad. Los platos son cargados en un instrumento de sonda de lectura voltaje/ión (VI PR), y la emisión fluorescente de ambos CC2DMPE y DiSBAC2(3) son recogidos durante 10seg. En este punto, 100 µ? de solución de alto-potasio (mM): 140 KCI, 2 CaCI2, 1 MgCI2, 20 Hepes-KOH, pH 7.4, 10 glucosa son añadidos y la emisión fluorescente de ambos tintados dejados durante 10 seg. adicionales. La razón CC2DMPE/D¡SBAC2(3), antes de la adición de la solución de alto-potasio igual a 1. En ausencia de inhibidor, el radio después de la adición de soluciones de alto-potasio varía entre 1.65-2.0. Cuando el canal Maxi-K ha sido completamente inhibido por un estándar conocido o compuesto test, la razón se mantiene en 1. Es posible, por tanto, titrar la actividad del inhibidor del canal Maxi-K monitorizando el cambio concentración-dependiente en la razón de fluorescencia. Se encontró que los compuestos de esta invención causan inhibición concentración-dependiente de la razón de fluorescencia con IC50's en el rango de alrededor de 1nM a alrededor de 20 µ?, más preferentemente de alrededor de 10 nM a alrededor de 500 nM.

B. Ensayos electrofísiolóqicos de los efectos del compuesto de los canales de potasio de alta-conductancia cálcico-activados Células humanas del epitelio ciliares no pigmentadas La actividad de los canales (maxi-K) de potasio de alta conductancia cálcico-activados en células epiteliales ciliares no pigmentadas fue determinado utilizando métodos electrofisiológicos. Las corrientes a través de canales maxi-K fueron recogidos en la configuración dentro-fuera en la técnica patch clamp, donde la solución de la pipeta afronta la cara extracelular del canal y la solución de baño afronta la cara intracelular. Los parches aislados contienen de uno a alrededor de cincuenta canales maxi-K. Los canales Maxi-K fueron identificados por su conductancia de canal única larga (250-300 pS), y mediante la sensibilidad de la puerta del canal al potencial de membrana y a la concentración intracelular de calcio. Las corrientes de membranas fueron recogidas utilizando técnicas electrofisiológicas estándar. Las pipetas de cristal (Garner 7052) fueron atraídas en dos estados con un atractor Kopf (modelo 750),y el electrodo de resistencia fue 1-3 megohms cuando se llenó con salina. Las corrientes de membranas fueron recogidas con EPC9 (Instrumentos HEKA) o Axopatch 1 D (Instrumentos Axon) amplificadores, y la conversión digital fue hecha con interfaces ITC-16 (Instrutech Corp). Las pipetas fueron rellenadas con (mM); 150 KCI, 10 Hepes, 1 MgCI2, 0.01 CaCI2, 3.65 KOH, pH 7.20. La solución de baño (intracelular) fue idéntica, excepto, en algunos casos, el calcio se retiró, EGTA 1 mM fue añadido y KCI 20 mM fueron reeemplazados con KF 20 mM para eliminar el calcio para testar la sensibilidad al calcio de las puertas del canal. Los medicamentos fueron aplicados a la cara intracelular del canal mediante baño de perfusión. Las células epiteliales ciliares humanas no-pigmentadas crecieron en un cultivo de tejidos como se describió (Martín-Vasallo, P., Ghosh, S., y Coca-Prados, M., 1989, J. Cell. Physiol. 141, 243-252), y dispuesto en una cubierta de cristal antes de usar. Una alta resistencia de aislamiento (>1 Gohm) se formaron entre la pipeta y la cara de la célula, y los parches de dentro y fuera fueron aislados. Los canales Maxi-K en el parche fueron identificados por las propiedades de apertura y cierre, la probabilidad de abrir el canal se incrementaba en respuesta a la despolarización de membrana y al calcio intracelular elevado. En parches utilizados en análisis farmacológicos, suprimiendo el calcio intracelular se eliminaba las corrientes de voltage apertura cierre. Las corrientes Maxi-K fueron medidas después de los pasos de despolarización de voltaje o las salidas que causaron la apertura de los canales. Los compuestos de esta invención fueron aplicados a la cara intracelular del canal en concentraciones apropiadas (0.001 to 100 µ?). Los compuestos redujeron la probabilidad de apertura de canales, y este efecto fue reversible lavando los compuestos desde una cámara experimental. El IC50 para bloquear los canales maxi-K bajo estas condiciones para los compuestos de esta invención estuvieron en los rangos desde alrededor de 0.5 nM a alrededor de 10 µ?.

Claims (13)

NOVEDAD DE LA INVENCION REIVINDICACIONES

1.- Un compuesto de fórmula estructural I:

Formula I o una sal farmacéuticamente aceptable, enantiomero, diastereómero o mezcla de ellos: donde, R representa hidrógeno, o C-|-6 alquil; Ry representa H, o C-1-6 alquil; Rw representa H, C1_6 alquil, -0(0)0-1-6 alquil, -C(0)OCi_6 alquil, -S02N(R)2, -SO2C1-6 alquil, -SO2C-6-IO aril, N02, CN o -C(0)N(R)2; R2 representa hidrogeno, C1-10 alquil, OH, C2-6 alquenil, -(CH2)nO(CH2)mOR, -(CH2)nCl-6 alcoxi, -(CH2)nC3-8 cicloalquil, -(CH2)nC3-10 heterociclil, o -(CH2)nC6-10 aril, dicho alquil, heterociclil, o aril opcionalmente substituido con de 1 a 3 grupos seleccionados de Ra; R3 representa hidrógeno, C1-10 alquil, -(CH2)nC-3-8 cicloalquil, -(CH2)nC3-i o heterociclil, -(CH2)nCOOR, -(CH2)nC6-10 aril, nitro, ciano o halógeno, dicho alquil, heterociclil, o aril opcionalmente substituido con de 1 a 3 grupos de Ra; R4 y R5 independientemente representan hidrógeno, C-i-6 alcoxi, OH, C -6 alquil, COOR, SOqC1-6 alquil, COC-|-6 alquil, SO3H, -0(CH2)nN(R)2, -0(CH2)nC02R, -OPO(OH)2, CF3, OCF3 -N(R)2, nitro, ciano, C1-6 alquilamino, o halógeno; y R6 representa hidrógeno, C1-10 alquil, -(CH2)nC6-10 aril, -(CH2)nC3- o heterociclil, -(??2)?^3-8 cicloalquil, dicho aril, heterociclil y alquil opcionalmente substituidos con de 1 a 3 grupos seleccionados de Ra, donde el Ra(s) puede estar unido a algún átomo de carbono o heteroátomo seleccionado entre N y S; Rs representa -(CH2)nC3-8 cicloalquil, -(CH2)n 3-10 heterociclil, C-|-6 alcoxi o ~(CH2)nC5-10 heteroaril, -(CH2)nC6-lO aril dicho heterociclil, aril o heteroaril opcionalmente substituido con de 1 a 3 grupos seleccionados entre Ra; Ra representa F, Cl, Br, I, CF3, N(R)2, N02, CN, -O-, -COR8, -CONHRs, -CON(R8)2. -0(CH2)nCOOR, -NH(CH2)nOR, -COOR, -OCF3, CF2CH2OR, -NHCOR, -S02R, -SO2NR2, -SR, (C-J -CQ alquil)0-, -(CH2)nO(CH2)mOR, -(CH2)nCl-6 alcoxi, (aril)O-, -(CH2)nOH, (CrC6 alquil)S(0)m-, H2N-C(NH)-, (CrC6 alquil)C(O)-, (C|-C6 alquil)OC(0)NH-, -(C C6 alquil)NRw(CH2)nC3-10 heteroc¡clil-Rw, -(Cj-C6 alquil)0(CH2)nC3- o heterociclil-Rw, -(C-j-Cg alquil)S(CH2)nC3-io heterociclil- Rw, -(C^Ce alquil)-C3-10 heteroc¡clil-Rw, -(CH2)n-Zl-C(=Z2)N(R)2, -(C2-6 alquenil)NRw(CH2)nC3- o heterociclil-Rw, -(C2-6 alquenil)O(CH2)nC3- 0 heterociclil-Rw, -(C2-6 alquenil)S(CH2)nC3-l0 heterociclil-Rw, -(C2-6 alquenil)-C3-IO heterociclil-Rw, -(C2-6 -(CH2)nS02R, - (CH2)nS03H, -(CH2)nPO(OR)2, C3_iocicloalquil, C6-10 aril, C3-10 heterociclil, C2-6 alquenil, y alquil, dicho alquil, alquenil, alcoxi, heterociclil y aril opcionalmente substituido con de 1 a 3 grupos seleccionado de C C6 alquil, halógeno, (CH2)nOH, CN, N02, CON(R)2 y COOR; ?1 y ?2 independientemente representa NRWl O, CH2, o S; m es 0-3; n es 0-3 y q es 0-2. 2. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque R6 es C-|-io alquil, o (CH2)nC3-8 cicloalquil y Ry es C-j-6 alquil, dicho alquil, opcionalmente substituido con de 1 a 3 grupos de Ra.

3. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque R2 es C1-10 alquil o -(CH2)nC3-8 cicloalquil y R3 es C1-10 alquil, o (CH2)nC-3-lO heterociclil, dicho heterociclil y alquil opcionalmente substituido con de 1 a 3 grupos de Ra.

4.- Un compuesto el cual es: n=0-3 o una sal farmacéuticamente aceptable , enantiómero, diastereómero o mezcla de ellos .

5. - El uso de un compuesto de la fórmula estructural I, como el que se reclama en la reivindicación 1 , para preparar un medicamento para el tratamiento de la hipertensión ocular o glaucoma en un paciente.

6. - El uso del compuesto que se reclama en la reivindicación 1 , o una sal farmacéuticamente aceptable, enantiómero, diastereómero o mezcla de ellos, para preparar un medicamento para el tratamiento de edema macular, degeneración macular, incremento de la velocidad sanguínea de la cabeza del nervio óptico y retinal, un incremento en la tensión de oxígeno del nervio óptico y retinal, y/o un efecto neuroprotrector en un paciente.

7. - El uso de un compuesto como el que se reclama en la reivindicación 1 , o una sal farmacéuticamente aceptable, enantiómero, diastereómero o mezcla de ellos, para preparar un medicamento para prevenir la repolarización o hiperpolarización de una célula de mamíferos que contienen un canal de potasio o para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer, depresión, desórdenes cognitivos, y/o desórdenes de arritmias en un paciente.

8. - El uso de un compuesto como el que se reclama en la reivindicación 1 , o una sal farmacéuticamente aceptable, enantiómero, diastereomero o mezcla de ellos, para preparar un medicamento para el tratamiento de la diabetes en un paciente.

9. - Una composición que comprende el compuesto de fórmula I que se reclama en la reivindicación 1 y un transportador farmacéuticamente aceptable.

10. - La composición de conformidad con la reivindicación 9, caracterizada además porque el compuesto de formula I es aplicado como una formulación tópica, dicha formulación tópica administrada como una solución o suspensión y opcionalmente contiene goma xantan o goma gellan.

11. - La composición de conformidad con la reivindicación 9, caracterizada además porque el ingrediente activo pertenece al grupo consistente en: agente bloqueante d-adrenérgico, agente parasimpato-mimético, agente simpatomimético, inhibidor de la anhidrasa carbónica, agonista EP4, una prostaglandina o derivado de ellos, lípido hipotensivo, neuroprotector, y/o es opcionalmente añadido el receptor agonista 5-HT2.

12. - La composición de conformidad con la reivindicación 11 , caracterizada además porque el agente bloqueante d-adrenérgico es timólo!, betaxolol, levobetaxolol, carteolol, o levobunolol; el agente parasimpatomimético es pilocarpina; el agente simpatomimético es epinefrina, brimonidina, iopidina, clonidina, o para-aminoclonidina, el inhibidor de la anhidrasa carbónica es dorzolamida, acetazolamida, metazolamida o brinzolamida; la prostaglandina es latanoprost, travaprost, unoprostona, rescula, o S1033, el lípido hipotensivo es lumigan, el neuroprotector es eliprodil, R-eliprodil o memantina; y el receptor agonista 5-HT2 es 1-(2- aminoprop¡l)-3-metil-1 H-imdazol-6-ol fumarato o 2-(3-c!oro-6-metoxi-indazol-1 -il)-1-met¡l-etilam¡na.

13.- Un método in Vitro para prevenir la repolarización o la hiperpolarización de una célula de mamífero que contiene el canal de potasio, proveyendo un compuesto como el que se reclama en la reivindicación 1 , o una sal farmacéuticamente aceptable, enantiómero, diastereomero o mezclas de los mismos a dicha célula.