TWI250873B

TWI250873B - Ophthalmic compositions for treating ocular hypertension

Info

Publication number: TWI250873B
Application number: TW092130678A
Authority: TW
Inventors: James B Doherty; Meng-Hsin Chen; Luping Liu; Swaminathan R Natarajan; Robert M Tynebor
Original assignee: Merck & Co Inc
Priority date: 2002-11-08
Filing date: 2003-11-03
Publication date: 2006-03-11
Also published as: KR20050072805A; MA27497A1; JP5061293B2; EP1562909B1; US20040097575A1; CA2505086C; AU2003287506A1; CA2505086A1; AU2003286884A1; DOP2003000747A; AU2003287506B2; IS7822A; JP2006508190A; NZ539593A; RU2005117627A; AR041991A1; PE20040692A1; US7196082B2; PL377172A1; HRP20050409A2

Description

1250873 玖、發明說明：【發明所屬之技術領域】本發明係關於式I之有效卸通道阻斷劑化合物或其調配物、，以用於治療青光眼及在病人眼睛中導致提高的眼内壓力之其他病症。本發明亦關於該等化合物之使用，以為哺礼動物物種（特別係人類）之眼睛提供神經保護效應。【先前技術】 —青光眼係一種眼睛退化疾病，其中眼内壓力太高而無法具現正苇的眼睛功此。因此，視神經頭部可受到損害，並導致視覺功能之不可逆的損失。若未治療，則青光i可最終導致失明。高眼壓（亦艮p，不具有視神經頭部損害或特徵性青光眼視場缺陷的眼内壓力提高的病症）現在被多數眼科學家相信可僅代表青光眼發病之最早階段。雖然存在右干用於治療青光眼及提高的眼内壓力之療法，但是該等藥劑之功效及副作用特性（side effectpr〇file)不理想。最近發現，鉀通道阻斷劑可減少眼睛中之眼内壓力，且因此提供又一方法來治瘵高眼壓及與其相關之退化眼部病症。鉀通道之阻斷可減少流體分泌，且在某些情況下，可增加平滑肌收縮，且將被期望來降低I〇p並具有眼睛中之神經保護效應。（參看美國第5,573,758及5,925,342號專利；乂〇咖

等人，Invest. Ophthalmol· Vis. Sci 38，1997 ; WO 89/10757、WO 94/28900及 WO 96/33719)。【發明内容】本發明係關於有效鉀通道阻斷劑或其調配物在青光眼及 88762 1250873 -(CH2)nC3_1G雜環基，該雜環基與烷基視情況經1至3個選自Ra 之個基團所取代時，可實現本發明之又一實施例。當η為0 時，可實現本發明之一子實施例。本發明又另一具體例中，當Ra選自F、a、Br、I、CF3、N(R)2 > N02 > CN > -O- ^ -CONHRg > -CON(R8)2 ^ -0(CH2)nC00R > -NH(CH2)n0R 、-C〇〇R、-0CF3、-NHCOR、-S〇2R、-S〇2NR2、-SR、（CrC6烷基）〇-、-(CH2)n〇(CH2)m〇R、-(012)ηα6烷氧基、（芳基）〇·、-〇H、（CVC6 烷基）S(〇)„r、H2N-C(NH)-、（CrC6 烷基）C(〇)-、（CrC6 烷基）0C(〇)NH-、-(CrC6 烷基）NRw(CH2)nC3_10 雜環基-Rw、-(CHA-ZLCPZ2)：^!^、 _(C2_6烯基)NRw(CH2)nC3_1G雜環基-Rw、-(C2_6晞基 VZ^CPZ2)—!^、 -(CH2)nS〇2R、-(CH2)nS〇3H、-(CH2)nP〇(〇R)2、C2_6烯基、及(^-€10烷基，該烷基及烯基視情況經1至3個選自CrC6烷基及COOR之基團所取代。本發明中可用之化合物實例見於表1 : 表1

〇

R1 R2 K 88762 -10- 1250873 K K K K xV K '〇 ^rr^< '〇 »/ντυ 0 p^r (〇)汾 η η=0-3 OH '〇 -1-(CH2)n〇H n=0-3 v-T< '〇或醫藥上可接受之鹽、對映體、非對映體或其混合物。此處利用以下定義之術語（除非另外規定），来詳細描述本發明。本發明之化合物可具有不對稱中心、對掌軸及對掌平面，且可以消旋物、外消旋混合物，及具有被包括在本發明中之所有可能的同分異構體（包括光學異構體）的各個非對 88762 -11 - 1250873 映體的形態存在。（參看E丄.Eliel與S.H· Wilen之“Stereochemistry of Carbon Compounds”（John Wiley與 Sons，紐約 1994)中的特定頁：1119-1190) 〇當任何變數（例如芳基、雜環、R1、R6等）在任何組份中出現超過一次時，其每次出現的定義在每次其他出現時是獨立的。僅當取代基/或變數之組合可產生穩定的化合物時，才允許該等組合。當Ra係且键結於碳原子時，其被稱為羰基；當其鍵結於氮（例如吡啶基上之氮原子）時或硫原子時，其分別被稱為N-氧化物及硫氧化物基團。除非另外定義，術語“烷基”係指單價烷烴（碳氫化合物）所衍生之包含1至10個碳原子的基團。該基團可係直線的、分支的或環狀的。較佳烷基包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、t-丁基、環丙基、環戊基及環己基。當該烷基被稱為經烷基所取代時，則其與“分支烷基，，可互換使用。除非另外定義，環烷基係包含3至15個碳原子，且在碳原子之間不具有交替或共振雙鍵之烷基。其可包含丨至4個稠合的環。該等環烷基單元之實例包含（但不限於）環丙基、環丁基、環戊基、環己基及環庚基。烯基為c2-c6烯基。燒氧基係指具有ϋ由氧橋而鍵結於其上之所示S目的碳原子之燒基’減基可按此處所描述的方式視情況經取代。該等基®為具有指定長度且以直鏈或分支組態存在的基團，且若該長度上具有兩個或兩個以上碳原子，則該等基 -12 - 88762 l25〇873 團可包括雙键或三鍵。該等'燒氧基之實例為甲氧基、乙s 基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、第：丁氧：、戊氧基、異戊氧基、己氧基、異己氧基、晞丙氧基、二丙氧基，及其類似物。鹵素（鹵基）係指氯、氟、礎或溴。芳基係指芳香環（例如苯基、經取孜取代足奉基及其類似物），以及稠合的環（例如審基、菲基及其類似包含具有至少6個碳原子之至少一個 U此万基一 ^ 個％可存在鬲達5個該寺環，其中包含高達22個原子，且在相鄰唉原子或合適的雜原子=具有交替(共振)雙鍵。芳基之實例為苯基、萘基、四氮奈基、印滿基辦貧 # * — ,^ 丞·冬基、非基、1基或厄基及菲基’較佳為木基、審基式菲I ^ ，、戈非基。方基可同樣按所定義的方式經取代。較佳經取代之芳基包括苯基與萘基。此處所使用之術語·“雜戸+{，，4*、“、，町〜雖％基或“雜環，，代表飽和或不的穩定3-至7-員單環，十拉—。或％疋8-至11-員雙環雜環，且並由碳原子及選自N、C^s 、 /、、，且成足群的1至4個雜原子組成，且括其中上述雜環稠人^ 、口土冬％《任何雙環基團。該種雜環可鍵結至任何雜原子戋入二卜^ 原子上，產生一種穩定結構。稠口雄裱系統可包括碳環，+ π 且而要僅包括一個雜環。術語‘‘雜裱基”或“雜環”包拓％〜甘、、 " 命方基邵分。該等雜環單元之實例包括 (但不限於）吖庚因其 # ;, ,μ # #、，土、+并咪唑基、苯并異噁唑基、苯并 % ^㈣基 '苯并Ρ塞喃基、苯并吱喃基、苯并噻一二：“基、笨并噁唑基、色滿基、幸啉基、二氫 …喃基、二氣苯并,塞吩基、二氣苯并。塞喃基、二氯苯 88762 1250873 咳喃基、咪峻口定

p林基、4諾琳基、四氫吱喃基、、四氫異喳淋基、四氫p奎啉并噻喃砜、二氫吡咯基、丨，3_二氧戊環基、基、咪唑啉基、咪唑基、啕哚啉基、啕嗓兴17弓卜木口林基、兴峻P林基、異口塞口垒餘其、基、噻嗎啉基、噻嗎啉亞颯、噻唑基、噻唑啉基、魂吩并呋喃基、噻吩并噻吩基及噻吩基。雜環較佳選自：I吖庚因醯基（azepinonyl)、苯并咪唑基、2_二吖庚因醯基、二氫咪唑基、二氫吡咯基、咪唑基、2_咪唑啶醯基（imidaz^di⑽邮) 六氫吡啶基、六氫吡畊基、吲嗓基、異p奎淋基、嗎淋基、比走基峨P各淀基、氫P比淀g盔基（piperidin〇nyl)、2_喃啶醯基（pyrimidinonyl)、2-吡咯啶醯基（pyr〇mdin〇nyl)、喹啉基、四氫呋喃基、四氫異喹啉基及噻吩基。術語“雜原子，，意即在一獨立基礎上所選擇的〇、S或N。術吾雜芳基”係指具有5或6個環原子的單環芳香烴，或具有8至1〇個原子的二環芳香基團，其包含至少一個雜原子 ◦、S或N，其中碳原子或氮原子是鍵結點，·且‘其中一個或兩個額外之碳原子視情況被選自〇或s的雜原子取代，且其中1至3個額外之碳原子視情況被氮雜原子取代，該雜芳基視情況被按此處所描述的方式取代。該等雜環單元之實例包括（但不限於）苯并咪唑基、苯并異噁唑基、苯并呋咕基 88762 -14 - 1250873

、苯并吡喃基、苯并嘍喃基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、色滿基、幸啉基、二氫苯並并咬喃基、二氯苯并p塞吩基、二氯本并p塞喃基、二A私并17塞喃颯、吱喃基、咪吐基、4卜朵淋基、吲嗓、異色滿基、異啕哚啉基、異喳啉基、異嘧唑基' 莕啶基、噁二唑基、吡淀基、说啡基、说α坐基、塔17井基、喊淀基、说p各基、峻σ坐口林基、？奎ρ林基、ρ奎諾琳基、四氫異峻ρ林基、四氫峻ρ林基、噻唑基、噻吩并咬喃基、嘧吩并噻吩基、噻吩基及三唑基。額外之氮原子可該第一個氮與氧或硫共同存在，生成（例如）Ρ塞二吐。

本發明亦關於治療高眼壓或青光眼之組合物及方法，其係藉由對需要治療之病人投予式I之化合物之一種與以下各物之組合·· β-腎上腺素阻斷劑，例如4嗎心安（timolol)、倍他索洛爾（betaxolol)、左旋倍他索洛爾、山羊豆甞（carteolol)、左旋布諾洛爾；擬副交感劑，例如腎上腺素、艾比定（i〇Pidine) 、溴莫尼定（brimonidine) '可樂定（clonidine)、對-胺基可樂定 ;碳酸if酶抑制劑，例如漆素得（dorzolamide)、醋峻績胺 (acetazolamide)、間峻續胺（metazolamide)或布吲唑橫胺（brinzolamide) ;EP4促效劑（例如在 WO 02/24647、W〇 02/42268、EP 1114816、 W〇01/46140及WO 01/72268中揭示之該等促效劑）‘；前列腺素，例如樂通舒特（latanoprost)、青服平（travaprost)、烏諾前列酮 (unoprostone)、利視即樂（rescula) ; S1033(在美國第 5,889,052、 5,296,504、5,422,368及5，151，444號專利中陳述之化合物）；低血壓脂質，例如露明甘（lumigan)及在美國第5,352,708號專利中陳 88762 -15 - 1250873

述之化合物；在美國第4,690,931號專利中揭示之神經保護劑，特別係在WO 94/13275中陳述之依利羅地（eliprodil)及R-依利羅地（eliprodil)，包括美金剛胺（memantine);或在 PCT/US00/31247 陳述之5-HT2受體的促效劑’特別係1 - (2 -胺基丙基）-3 -甲基-1H-咪唑-6-醇富馬酸鹽及2-(3-氣-6-甲氧基-吲唑小基）小甲基-乙胺。低血壓脂質（在具有驗性前列腺素結構之α-鏈環上的羧酸基團被電化學中性取代基所取代）之一實例在於：在該實例中，該羧酸基團被Cm烷氧基例如〇CH3 (PGF2a 1-〇CH3) 或羥基（PGF2al-〇H)所取代。較佳的鉀通道阻斷劑為鈣活化之鉀通道阻斷劑。更佳的鉀通道阻斷劑為高傳導、鈣活化之鉀（Maxi-K)通道阻斷劑。 Maxi-K通道為離子通道之族，該等離子通道普遍存在於神經元、平滑肌及上皮組織中，且被細胞膜電位及細胞内的 Ca2+所門控。

本發明基於該發現，即Maxi-K通道若被阻斷則可藉由抑制淨溶質及H2〇流出，來抑制含水體液產生，且因此降低 I0P。該發現提示了，Maxi-K通道阻斷劑可用於治療其他眼科疾病（例如斑狀水腫及斑狀退化）。已知降低I0P將促進血液流向視網膜及視神經。因此，本發明之化合物可用於治療斑狀水腫及/或斑狀退化。據信，降低I0P之Maxi-K通道阻斷劑可用於提供神經保護效應。該等Maxi-K通道阻斷劑亦被認為可藉由降低IOP來有效地增加視網膜及視神經頭部的血液速度，並增加視網膜及視神經氧含量，當將這些搞合在一起時可有利於視神經 88762 -16- 1250873 健康。因此，本發明還關於一種方法，其用於增加視網膜及視神經頭部血液速度，增加視網膜及視神經氧張力，以及提供神經保護效應或其組合。許多市售藥物可充當鉀通道拮抗劑之功能。該等藥物中最重要的藥物包括化合物Glyburide、Glipizide及Tolbutamide。該等鉀通道拮抗劑可用作抗糖尿病試劑。本發明之化合物可組合一種或多種該等化合物以治療糖尿病。

钾通道拮抗劑亦可被用作第3類抗心律失常試劑，其可被用來治療人類中的急性梗塞。已知許多自然出現之毒素可阻斷4甲通道，該等毒素包括蜂毒明肽（Apamin)、伊貝瑞毒素 (Iberiotoxin)、卡律蟹毒素（Charybdotoxin)、諾辛毒素（Noxiustoxin) 、卡裏毒素（Kaliotoxin)、（多種）樹木毒素、肥大細胞脫粒 (MCD)肽，及β-銀環蛇毒素（β-ΒΤΧ)。本發明之化合物可組合一種或多種該等化合物以治療心律失常。

抑鬱症係關於神經傳遞質釋放的降低。抑鬱症之當前治療方法包括神經傳遞質攝取之阻斷劑，及涉及神經傳遞質退化之酶的抑制劑，該等抑制劑可延長神經傳遞質的壽命。阿茲海默氏疾病（Alzheimer’s disease)之特徵亦在於減少的神經傳遞質釋放。3種等級的藥物係被研究以用於治療阿茲海默氏疾病：膽驗能增效劑，例如：抗膽驗酯酶藥物（例如毒爲豆驗（eserine)及塔克林（四氫胺基 p丫淀（tetrahydroaminocridine))) ;影響神經元新陳代謝（在別處幾乎無影響）之抗痴呆藥 (nootropic)(例如p比乙驢胺、奥拉驢胺）；及影響腦脈管系統之該等藥物（例如甲績酸雙氫麥角毒與包括印棟素酸 88762 17 1250873 (Nimodipine)之鈣通道阻斷藥物的混合物）。據報導，司立士林（SdegHine)，為-種增加腦多巴胺及降腎上腺素之化酶B抑制劑，已使某歧阿兹沲點氏咗一木一丨』炫母默氏屄涡病人的病情適度改善1蟄合劑已引起相信阿兹海默氏疾病㈣因於銘= 性的人的注意。已採用影響行為之藥物（包括神經安定^ 及抗焦慮藥。抗焦慮藥(其為溫和鎮定劑)不比神經安定藥有效。本發明係關於可充當鉀通道拮抗劑使用之新穎化合物。在本發明範圍中的化合物展示鉀通道拮抗劑活性，且因此可用糸與鉀通道功能失調相關聯之失調症治療中。許多認：失調症(例如阿茲海默氏疾病、記憶力喪失或抑鬱症) 可受益於提高的神經傳遞質釋放，該等神經傳遞質例如為·五蛵色胺、多巴胺或乙醯膽鹼及其類似物。％狀丨《通 C之阻斷保持了細胞去極化，且因此提高該等活神經傳遞質的分泌。 ~ 本發明之化合物在老年癡呆症治療中可與以下各物組合瓦膽驗ϋ日每藥物’例如毒爲豆驗及塔克林（四氫胺其口丫 \ · "哫），抗痴呆藥，例如吡乙醯胺、奥拉醯胺、甲磺醯雙氫麥角母’可選擇的鈣通道阻斷劑，例如印楝素酸；或單胺氧化酶Β抑制劑，例如司立吉林。本發明之化合物在治療〜率不整中可與以下各物組合使用：蜂毒明肽、伊貝瑞毒素、卡律蟹毒素、諾辛毒素、卡裏毒素、（多種）樹木毒素肥大細胞脫粒（MCD)肽、β-銀環蛇毒素（β-ΒΤΧ)或其組合。本發明 > 几〈化合物可與以下各物組合使用以治療糖尿病： 88762 -18- 1250873 優降糖、格列甲嗪、甲苯磺丁脲或其組合。處”例為例示性，並不限制所申請之本發明。本發明之化口物中的每一種均為鉀通道拮抗劑，因此可用於所描逑足神銓學失碉症，在該種失調症中，需要將細胞保持在去極化狀怨，以獲得最大的神經傳遞質釋放。本發明所生 2 ^化合物容易與合適且已知的醫藥上可接受之賦形劑組合來生產組合物，可將該等組合物施用至哺乳動物(包括人類）以獲得有效的鉀通道阻斷。就，藥用途而言，式ϊ化合物的鹽將係醫藥上可接受之鹽疋/、他鹽可用於製備根據本發明之化合物或其醫藥矣义之I ^本發明之化合物是酸性時，合適的“醫藥上可接文< 鹽”係指由包括無機鹼及有機鹼的醫藥上可接受〈無毒驗製備而來的鹽。由無機驗衍生而來的鹽包括銘鹽、銨鹽、鈣鹽、銅鹽、鐵鹽、亞鐵鹽、鋰鹽、鎂鹽、錳鹽亞孟最钾鹽、納鹽、鋅鹽及其類似物。特別較佳的係銨=、鈣鹽、鎂鹽、鉀鹽及鈉鹽。由醫藥上可接受之有機無毒鹼衍生而來的鹽包括··一級胺鹽、二級胺鹽及三級胺鹽，i取代胺，其包括天然經取代胺、環胺及鹼離子交換樹脂，例如精胺酸、甜菜鹼、咖啡因、膽鹼、n，nL:苄基伸乙基一版、二乙胺、二乙胺基乙醇、2-二甲胺基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基嗎啉、队乙基六氫吡啶、葡萄糖胺、胺基葡萄糖、組胺酸、海卓胺（hydrabamine)、異丙胺、賴胺酸、甲基葡萄糖胺、嗎啉、六氫吡畊、六氫吡啶、聚胺樹脂、普魯卡因、嗓呤、可可驗、三乙胺、三甲胺、 88762 -19- 1250873 二丙胺、三竣甲基胺甲貌及其類似物。當本發明之化合物是鹼性時，鹽可由包括無機酸及有機酸的醫藥上可接受之無毒酸製備而來。該等酸包括乙酸、苯磺酸、苯甲酸、樟腦磺酸、檸檬酸、乙磺酸、富馬酸、葡萄糖酸、穀胺酸、氫溴酸、鹽酸、2羥乙基磺酸、乳酸、馬來酸、羥基丁二酸、扁桃酸、甲磺酸、半乳糖二酸、硝酸、雙羥萘甲酸（pamoic acid)、泛酸、磷酸、丁二酸、硫酸、酒石酸、對甲苯磺酸及其類似物。特別較佳的酸為檸檬酸、氫溴酸、鹽酸、馬來酸、磷酸、硫酸及酒石酸。在 Berg等人之 r“Pha麵cemical Salts，，，；此續 ⑼:h9」中更芫整地描述上述醫藥上可接受之鹽與其他典型醫藥上可接受之鹽的製備。如此處所使用，術語“組合物，，意欲包含具有特定劑量之特足成份的產物，以及由特定劑量之特定成份的組合（直接或間接）產生的任何產物。當根據本發明之化合物對人類個體投藥時，日劑量通常由處方醫師確定，該劑量通常根據個別病人之年齡、體重 f生別及反應’以及病人症狀的嚴重性而變化。所使用之Ma破通道阻斷劑可以一治療有效劑f，經靜脈内、皮下、局部、經皮、腸道夕卜或藉由熟習此項技術者熟知的任何其他方法來施用。眼用醫樂組合物較佳適合於以溶液、懸浮液、軟膏、軟劑形式或固體插人物之形態局部施用於眼晴。該化合物之眼用調配物可包含⑽i，至1%之藥劑，尤其係㈣至1% 88762 -20- 1250873 彻。可採用較高劑量(例如約1〇%)或更低之劑是該劑量可有效地減少眼内壓力、治療青光眼、増加：：流動速度或氧張力。對單劑量而言，嶋5_啤，較2 0.1至500 ng，尤其為丨至丨⑻吨之化合物可施加至人類眼部。 /便！含該化合物之醫藥製劑與無毒醫藥有機裁戶|或典母酉樂典機載劑混合。典型的醫藥上可接受之劑係’（例如）水、水及水溶性溶劑（例如低錢㈣或芳: 醇)的混合物、植物油、聚燒二醇、石油基之膠質、乙基：維素、油酸乙酉旨、幾甲基纖維素、聚乙缔㈣燒酉同、十四燒酸異丙酿及其他習知可採用的可接受之載劑。醫藥製劑吓可包含·無毒輔助物質，例如乳化劑、防腐劑、潤濕劑、基礎劑（bodymg agent)及其類似物，例如聚乙二醇2〇〇、3如Y 400 及 600，碳蠟（carb_x)1，〇〇〇、15〇〇、4，_、6 〇〇〇及 ; 抗菌組份，例如四級銨化合物、已知具有冷滅菌屬性且使用時無害的苯汞基鹽、硫柳汞、對_羥基苯甲酸甲酯及丙酯、苯甲醇、苯乙醇；緩衝成份，例如硼酸鈉、乙酸鈉、葡萄糖鹽緩衝劑，及其他習知成份，例如脫水山梨糖醇單月桂酸酯、三乙醇胺、油酸鹽、聚氧乙晞脫水山梨糖醇單标櫚酸酯、丁二酸二辛基磺酸鈉、單硫代甘油、硫代山梨糖醇伸乙二胺四乙酸’及其類似物。另外，’合適的眼用載體（vehicle)可充當載劑媒體而被用於本發明之目的，該等眼用載體包括習知的磷酸鹽緩衝劑載體系統、等滲硼酸載體、等滲氣化鈉載體、等滲硼酸鈉及其類似物。該醫藥製劑亦可以微粒調配物之形式存在。該醫藥製劑也可以固體 88762 -21 - 1250873

插入物的形式存在。舉例而言，吾人可使用一種水可溶之固體聚合物以充當該藥劑之載劑。用來形成該插入物之聚合物可為任何水溶性無毒聚合物，例如：纖維素衍生物，例如甲基纖維素、竣甲基纖維素鈉、（經低竣烷基纖維素）、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素；丙稀酸鹽’例如聚丙烯酸鹽、乙基丙烯酸鹽、聚丙缔醯胺；天然產物，例如凝膠、藻朊酸鹽、果膠、黃蓍膠、刺梧桐、用又菜屬、瓊脂、阿拉伯膠；澱粉衍生物，例如澱粉酷酸@曰每甲基藏粉醚、輕丙基澱粉；以及其他合成衍生物，例如聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯甲醚、聚氧化乙烯、中和的卡波（carbopol)及黃原膠、結蘭膠职⑷、及該聚合物之混合物。用於被施用本發明之調配物的合適的個體包括靈長類動物、人類及其他動物，特別係人類及馴化的動物（例如貓與狗）。 ”

居酱藥製劑可包含：無毒輔助物質，例如使用時係無害的抗菌組份，例如硫柳汞、苯曱氯烷銨、對-羥基苯甲酸甲酯丙酉曰 +基十二统溴按（benzyldodecinium bromide)、苯甲醇或苯乙醇；緩衝成份，例如氯化鈉、硼酸鈉、乙酸鈉、檸檬酸鈉、或葡萄糖酸鹽緩衝劑；及其他習知成‘份，例如脫水山梨糖醇單月桂酸酯、三乙醇胺、聚氧乙晞脫水山梨糖醇單棕櫚酸酯、乙二胺四乙酸，及其類似物。可按需要經常施用眼用溶液或懸浮液，以在眼睛中保持可接文之IOP值。可設想每日約一次或兩次對哺乳動物眼晴 88762 -22- 1250873 進行施藥。局邵眼部施藥而言，本發明之新穎調配物可呈溶潘 r 、懸浮液或固體插入物之形態、，其係調配使早仫训里包含孩活性組份之治療有效劑量或复倍(在組合治療的情況下)。，、右干藉由示例方式提供的下列實例對本發明加以說明。孩等實例所使用之術語的定義如下： SM —起始材料， DMS〇一二甲亞砜， TLC -薄層層析法， SGC-矽膠層析法， PhMgBr —溴化苯鎂，小時， THF —四氫吱喃， DMF—二甲基甲醯胺， min —分鐘， LC/MS —液體層析法/質譜分析法， HPLC -高效能液體層析法，

PyBOP —六氟瑪酸苯并三。坐小基氧代參、（二甲胺基）鱗， Equiv=eq=當量， NBS —N-溴琥珀醯胺，及 AIBN — 2,2’-偶氮二異丁腈。根據圖1製成（可適當地加以修改）本發明之化合物。亦根據圖1製造實例1-3。 88762 •23 - 1250873

在圖1中，利用NBS、AIBN及過氧化苯酸來溴化硝基茴香醚。以氫化鉀處理溴硝基茴香醚產生該氰基硝基茴香醚。以氫化作用使硝基轉化成胺基。接著以亞硝酸鈉及HC1處理該胺基，以產生州唑環。在該反應中，一旦苯胺部分之亞硝化作用產生重氮基，該重氮基就被該酸性苯氰化物捕獲在分子内。所得衍生物之互變作用生成了 4丨。坐核。以格利亞（Gringard)處理該腈，接著水解所得的亞胺鎂錯合物，生成所要的燒基/芳基i同。製備實例1

COOEt 在 500 mL燒瓶中，注入 336 mmole(13.44g;60o/())之NaH。在氬氣氛下，添加150 mL之DMS0，接著在5°C逐滴添加32 mL之氰乙酸乙醋（2.2 equiv; 352 mmole)。當所有添加完成後，該反應經1小時溫至室溫。添加30 g粉末態之起始物硝基苯衍生物 (160 mmole)。該反應混合物在一封閉系統中於9(TC下加熱8 88762 -24 - 1250873 小時。酸化及標準操作獲得粗製油狀殘餘物，其經矽膠管柱純化獲得39 g所需結晶產物，該結晶產物如下經予以去羧基獲得芊腈。以上所獲得的38克SM溶於400 mL之1N碳酸鈉中。該均質溶液在室溫下攪拌2天。TLC分析指示反應完成。反應混合物酸化，且以乙酸乙酯（100 mL X 4)萃取。所組合之有機相經硫酸鈉乾燥並濃縮，且殘留物進行SGC獲得所需產物。 !H NMR CDC13： 7.72 (1H? d? J = 3 Hz); 7.61 (1H, d? J - 8.5 Hz); 7.25 (1H, dd5 J = 3 及 8.5 Hz); 4.17 (2H，s); 3·94 (3H，s)· LCMS [M+H] = 193。

製備實例2

10 g芊腈衍生物溶於20 mL THF中，接著以50 mL甲醇稀釋。將該反應混合物放在一壓力管中，添加Pd-C (10% wt/10 mole %)，且該反應混合物在40 psi下氫化。當用於N〇2基還原所需量的氳被消耗後，停止該反應。TLC分析顯示為點對點轉換。該反應混合物經矽藻土墊過濾，且濾液濃縮成固體且在下一步驟中直接使用。粗製苯胺衍生物（52 mmole)溶解/懸浮在2NHCl(150mL)中，且被卻至5°C，接著添加5.4g亞硝酸鋼之10 mL水溶液。該反應混合物攪拌1小時，並逐漸溫至室溫。TLC分析指示SM完全消耗並形成一新的點。以乙酸乙脂（100 mL X 4)萃取該反應混合物；收集、乾燥並濃縮有機相。殘餘物藉SCG純化獲得所需產物。LCMS [M+H]= 174。 88762 -25- 1250873 製備實例3

稱出4.15 g叫丨唑且將水與2次甲苯（100 ml)洗液共沸，藉由旋轉蒸發器移除甲苯共沸混合物。在高真空下充分乾燥並執行氬氣清洗。在氬氣下，溶於40 ml乾燥THF與92 ml乾燥乙醚中。在冰水槽中冷卻至。饋入3 eq之氯化異丙鎂（在 THF中6 ml 2 Μ溶液），且在室溫下攪拌0.5小時。小心饋入1N HC1 (240 ml)並攪拌1小時。利用TLC追蹤反應。以EtOAc萃取，旋轉蒸發，並生產所需產物。LCMS [M+H] = 219。製備實例4

Etoy^〇Et ΜθΟ**-ίχ^νγ^ Νν Χλ<ν CH〇

步驟A :在室溫下使聯氨（0.624 mol，20 g)與400 mL乙二醇中之100 g 2-氟-4-甲氧基-苯乙酮攪拌4小時，接著該反應混合物加熱至150°C歷時48小時。TLC分析指示完全反應。將該反應混合物分成二氯甲烷與鹽水。有機相經硫酸鈉乾燥，且蒸發成固體。自己烷/二氯甲烷再結晶獲得6-甲氧基-3-甲基-1H-丨口坐。 ^NMIICCDCI^): 7.5 (1¾ d，7.5 Hz); 6.8 (2¾ m); 3.8 (3¾ s); 2.55 (3¾ s)。 LCMS [M+H] = 163。

78g6 -甲氧基-3-甲基-1Η-Θ卜坐溶於包含1.1 equiv三乙胺之1L 88762 -26- 1250873

MeCN中，0.2 equiv之DMAP冷卻至-5°C ;接著緩慢添加含Boc20 (1.1 equiv)之200 mL MeCN。在室溫下攪拌該反應2小時後，該反應混合物蒸發成油狀，其分配於Et〇Ac與鹽水間、經硫酸鈉乾燥並蒸發。殘餘物施加至一短SGC，且以15% EtOAc之己烷溶離。蒸發獲得Boc保護之產物。 NMR (CDCL3): 7.6 (1H, bs); 7.42 (1H? d? J = 7.5 Hz); 6.85 (1¾ dd); 3.8 (3H，s);2.5(3H，s); 1.7(9H，s)。 LCMS [M+H] = 263。 100 g BOC-保護之吲唑溶於600 mL CC14中，接著添加1.1 equiv之NBS及0·2 equiv之Bz2〇。反應混合用氬氣真空清洗，且在日光燈下在光線存在下回流加熱5小時。反應混合物經一 SG墊過濾並濃縮。殘餘之油經一短SGC純化。獲得單溴化物，及二溴化衍生物之混合溶離份。單溴化物：W NMR (CDCL3)·· 7·7 (1H，d，7.5 Ηζ); 7·6 (1H，bs); 6·95 (1H， dd); 4.7 (2¾ s); 3.9 (3H5 s); 1.7 (9H, s)；二溴化物：NMR (CDCL3): 8.05 (1H，d，J = 7.5 Hz); 7·6 (1H，bs); 7.0 (1H，dd); 6.85 (1H，s); 3·9 (3H，s); 1.7 (9H，s); 乙酸鈉（22.5 g)添加至二溴化物（23.2 g)之乙酸溶液中。該混合物放置在油槽中，且回流加熱若干小時直至反應完全。混合物冷卻至室溫，且接著倒入冰/水中獲得‘米色固體之所需化合物。該固體藉由過濾分離，且在氮氣氛内乾燥。 lH NMR (CDC13)： δ 10.23 (1H? s); 8.19 (1Η? d); 7.02 (1Η, dd); 6.96 (1H? d); 3.90 (3H，s)。步驟B : 88762 -27- 1250873 原甲酸二乙酯（40 ml)添加至由步驟A所得的中間物中，且於130°C加熱若干小時。所得混合物濃縮乾燥，獲得褐色固體的標題化合物。 ^ NMR (DMSO): δ 10.08 (1¾ s); 7.98 (1H5 d); 7.25 (1H? d); 7.02 (1¾ dd); 6·81 (lH，s); 3.82 (3H，s);3.52(4H，q); l.ll (6H，t)。製備實例5 在0 C下，環戊基溴化鎂（6.32 mL，12.65 mmol)添加至溶解於 THF (15 mL)之由製備實例2 (1·〇〇 g，a5 mmd)所得的中間物溶液中。使反應溫至周圍溫度，且反應完成後，以飽和淬冷。利用EtOAc萃取所得的反應混合物，且合併之有機層以鹽水洗滌、經MgS〇4乾燥並在真空中濃縮。經由Si〇2凝膠層析法純化該產物，獲得580 mg之所需產物。lHNMR(CDcy δ : 1·702 (2 H，m)，1.803 (2 H，m)，2.005 (4 H，m), 3.904 (3 H，s)，4.070 (1 H， m)，6.915 (1 H，s)，7.010 (1 H，d)，8·272 (1 H，d)。製備實例6 1。

經由與製備實例5所描述之程序相似的程序製備所需化合物’但以環己基溴化鎂替代環戊基溴化錢。1H NMR δ : 1.327 (1 H，m)，1.479 (2 H，m)，1.604 (2 H，m)，1.781 (1 H，m)，1.861 (2 88762 -28- 1250873 H? m)5 2.000 (2 H5 m)? 3.641 (l H? m)5 3.902 (3 H? s)? 6.923 (1 H, s)? 7.008 (1 H，d)，8.259 (1 H，d)。實例1

料办万；DMF (3 mL)中，接著添加氫化鈉（〇·88麵㈣。在室溫下攪拌該反應15分鐘，接著添加溴乙酸第三丁酯（0.669 mmole)。在至溫下攪拌該反應3〇分鐘。分析顯示起始材料完全消耗同時形成新的產物點。藉由添加水淬冷該反應混合物。^行標準含水操作，接著藉由SGC純化該粗製產物，後得白色固體之所需產物。 1H 證於 CDCL 中·· 8·22 (1H，d，卜 9 邮 6 97 (1H，dd，卜 2 及 9 Hz); 6.5 (1H, d J = 2 Hz); 5.4 (2¾ s); 3.94 ( 3H5 s); 2.8 (1¾ m); 1.38 (9H? s); 1.27 (6H，d，J = 6.5 Hz)。 LCMS = [M+H] = 317 〇實例2

88762 •29- 1250873 l-(3-{[6-(2-羥基乙基）吡啶_3_基]羰基卜6_曱氧基_1H_吲唑小基）-3,3-二甲基丁酮步驟A :

在氮氣氛下，三丁基烯丙基錫（3.4ml)與二氯雙（三苯膦）鈀（〇.7g)添加至含2,5_二溴吡啶（24g)之甲苯溶液中。混合物回流加熱若干小時並減壓濃縮。殘餘物再溶於“濕乙醚，，中並緩慢添加DBU (3 ml)獲得渾濁液體。該混合物經矽膠墊過滤並濃縮。殘餘物溶於二氣甲烷/甲醇=1/1溶液中，並冷卻至-78 C °於溶液中通入臭氧直至反應混合物變成藍色。反應加熱至0 C，且分批添加氫硼化鈉（〇·5 g)。在〇它攪拌丨小時後，混合物倒入水中，且以乙酸乙酯萃取。有機層以1N Na〇、鹽水洗滌，乾燥（MgS〇4)，且在減壓力下濃縮，獲得粗製醇類。該醇類經矽膠（二氯甲烷/乙酸乙酯=丨/丨）純化獲得所需醇類。在0°C下，咪唑（0.4 g)與TBS-C1 (0.8 g)添加至該醇於二氣甲燒之溶液中。該混合物攪拌1小時。反應倒入〇1 N HClaq中並以二氣甲燒萃取。該有機層以鹽水洗務，以MgS04 乾燥且蒸發。殘餘物藉矽膠（100%二氯甲烷）純化獲得所需化合物。 !H NMR (CDC13): δ 8.61 (1H? d); 7.73 (1H, dd); 7.14 (1H, d); 3.97 (2H, t); 2·96 (2H，t); 0.86 (9H，s); -0.02 (6H，s)。步驟B : 88762 -30- 1250873

藉由與實例5、步驟5、6、7與8所描述之程序相似的程序製備所需化合物。該化合物經矽膠（己烷/乙酸乙酯=1/3)純化。 lU NMR (CHC13): δ 9.53 (1H5 d); 8.54 (1¾ dd); 8.35 (1H? d); 7.37 (1¾ d); 7.07 (1H，dd); 6.56 (1H，d); 5.45 (2H，s); 4.11 (2H，t); 3.90 (3H，s); 3.18 (2H， t); 1.38(9H，s)。 LC-MS (Μ+Η)=396·2。藉由如實例1所描述之吲唑的烷化反應（對製備實例6之所需化合物進行某些修改）製造以下所示之實例3_5。另外，可藉由使用製備實例4之吲唑或由此處所描述之程序製備的其他坐’採用類似程序製備實例1與4之類似物。實例3

DMF(lOmL)與中間物 3 (597 m 以己纟元洗務之60%油分散液）中 (597 mg，2.44 mmol)添加至 195 mg NaH 液）中。反應在在室溫下被攪拌30 38762 -31 - 1250873 min後，添加1-氯頻哪酮（3.81 mL，2.92 mmol)。20分鐘後，該反應物以吐〇淬冷且用EtOAc稀釋。水層以EtOAc萃取，且組合之有機層以H2〇、鹽水洗滌，以MgS〇4乾燥，並在真空中濃縮。該粗製材料經由矽膠層析法純化。 4 NMR (CDC13) δ : 1.361 (9 H，s)，1_683 (2 H，m)，1.788 (2 H，m)，1·974 (4 H，m)，3·872 (3 H，s)，4.029 (1 H，m)，5.372 (2 H，s)，6.514 (1 H，s)，6.986 (1 Η，d)，8.267 (1 Η，d)。實例4

使用製備實例8，以實例3所描述之程序製備該化合物。該標題化合物經由Si02製備性板層析法純化。1HNMR (CDC13) δ : 1.285-1.575 (15 H，m)，1.833 (2 H，d)，1·994 (2 H，d)，3.615 (1 H, m)， 3.860 (3 Η，s)，5.372 (2 Η，s)，6.490 (1 Η，s)，6.981 (1 Η，d)，8.254 (1 Η，d)。實例5

U162 -32- 1250873 二-弟二-丁基4-{[l-(3,3-二甲基-2-氧代丁基）-6 -甲氧基-1-H-㈤唑-3-基]羰基}羥基乙基芊基步驟1

在室溫下，聯氨（0.624 mol，20 g)與在400 mL乙二醇中之100 g氟乙醯苯一起攪拌4小時，其後，該反應混合物加熱至150 °C歷時48小時。TLC分析顯示完全反應。將該反應混合物分配於二氣甲燒與鹽水間。經硫酸鋼來乾燥有機相並蒸發成為固體。自己烷/二氣甲烷再結晶獲得4唑。 iHNMR^CDOU): 7.5 (1H，d，7.5 Hz); 6.8 (2H，m); 3.8 (3H，s); 2·55 (3H，s)。 LCMS [Μ+Η] = 163。步驟2

6-甲氧基-3-甲基小Η_啕唑 6-甲氧基-3-甲基小啕唑甲酸-第三丁酯 78 丨峻溶於含1.1 equiv三-乙基胺的1L MeCN中，0.2 equiv之 DMAP冷卻至-5°C ;接著缓慢添加含Boc2〇（1.1 equiv)之200 mL MeCN。在室溫下攪拌該反應物2小時後，該反應混合物蒸發成油狀，其分配於EtOAc與鹽水間、經硫酸鈉乾燥，蒸發。殘餘物施加至一短SGC上，且以15% EtOAc之己：)：完溶離。蒸發獲得產物。 lH NMR (CDCL3)： 7.6 (1H, bs); 7.42 (1H? d, J = 7.5 Hz); 6.85 (1H? dd); 3.8 Λ勹 -JJ -

88762 1250873 (3H，s);2.5(3H，s); L7(9H，s)。 LCMS [M+H] = 263。步驟3

100 g 4卜坐溶於600 mL之CC14中，接著添加1 · 1 equiv之NBS與 0·2 equiv之Bz2〇。反應混合物以氬氣真空清洗，且在日光燈光線下回流加熱5小時。反應混合物經一 SG墊過濾並濃縮。殘餘油經一短SGC純化。獲得85 g純溴化物。混合之溶離份產生二-溴化物衍生物。單溴化物：W NMR (CDCL3)·· 7.7 (1H，d，7.5 Hz); 7.6 (1H，bs); 6.95 (1H， dd); 4·7 (2H，s); 3·9 (3H，s); 1·7 (9H，s)。二溴化物：4 NMR (CDCL3): 8.05 (1H，d，J = 7.5 Hz); 7.6 (1H, bs); 7·0 (1H，dd); 6.85 (1H，s); 3·9 (3H，s); 1·7 (9H，s)。步驟4

3-(溴甲基)-6•甲氧基小Η- 3-甲醯基各甲氧基小Η- 吲唑啕唑-甲酸第三丁酯

5 g溴化物溶於10 mL之DMSO中，冷卻至0°C，接著添加2.5 equiv之TMANO(三甲基胺N-氧化物）。反應攪拌0.5小時，接著進行標準操作且經SG墊過漉定量地獲得所需產物。LCMS 88762 -34 - 1250873 [M+H] = 277。 lU NMR (CDCL3)： 10.2 (1H? s); 8.1 (1H? d, J - 7.5 Hz); 7.6 (1H, bs); 7.0 (lH，dd);3.9(3H，s); 1.7(9H，s)。步驟5

Boc

玻璃儀器在高真空下以火焰乾燥。在燒瓶中，異丙基MgCl (5 mL，2 Μ溶液）緩慢添加至純碘-芊基醇衍生物（3.6 g，10 mmol)中。在室溫下攪拌2小時後，添加含4卜坐衍生物（1.1 g，4 mmol)之15 mL THF。反應混合物在室溫下攪拌2小時。LC-MS顯示該反應完成。將該反應混合物注入30 mL飽和NH4C1中，接著添加40 mL乙醚。分離有機層，水層以乙醚（40 mL)萃取。組合之有機層以飽和K2C〇3 (2x30 mL)、水（40 mL)及鹽水（20 mL)洗條。移除溶劑，殘餘物用於下一步驟反應，且不進一步純化。LCMS [M+H] = 499。步騾6與7

88762 -35 1250873 5 g石夕藻土與4·3 g之PCC (MW 215.56，約2 eq)添加至含4卜坐 (由步驟5所得的粗製產物）之20 mL二氯甲烷溶液中。反應混合物在室溫攪拌2小時。LC-MS顯示反應完成，[CMS [M+H]= 497。反應混合物經過濾。移除溶劑，殘餘物溶解在1〇 mL MeOH中，且添加20 mL之2N HC1。在室溫下攪拌丨小時後， LCMS與TLC分析顯示完全反應。該反應混合物以Et〇Ac (2x30 mL)萃取。移除溶劑，殘餘物用於下一步驟反應，且不進一步純化。LCMS [M+H] = 283。步驟8

1.5 g 之 K2CO3 與 1.5 mL 溴頻哪酮（Bromopinacolone)(Mw 179.06, dl.326, 2.0 g，11 mmol)添加至含丨峻（由步驟7所得的342 mg粗製產物，約10 mmol)之15 mL丙_中。混合物在一密封管中在80°C 攪拌2小時。濾除鹽後，移除溶劑，殘餘物以HPFC純化獲得白色固體產物。 lH NMR (CDCL3) = 8.3 (3H, m); 7.5 (1H? d5 J = 7.5 Hz); 7.05 (1H, dd); 7.6 (1H，bs); 5·4 (2H，s); 4.8 (2H，bs); 3.9 (3H，s); 1·38 (9H，s)。 LCMS [M+H] = 38卜功能分析 A. Maxi-K 通道 88762 -36- 1250873

Maxi-K通道抑制劑之識別可利用Aurora生物科學技術進行，且基於所表現之Maxi-K通道在TsA-201細胞中之通道之α與 β次單位兩者的過渡型轉染（transient transfection)後設定細胞休止電位之能力。在無抑制劑的情況下，細胞展示内部為負、接近Ek (-80 mV)的超極化之薄膜電位，該Ek係由Maxi-K通道之活性所導致。Maxi-K通道之阻斷將導致細胞去極化。薄膜電位之變化可由電壓感應熒光共振能量轉移（FRET)染色對（dye pair)確定，該等染色對使用兩種組份、施體香豆素 (CC2DMPE)與接受體歐辛諾（〇xanol)(DiSBAC2(3))。該歐辛諾係一種親油性陽離子，且根據薄膜電位在該薄膜上分佈。在通常條件下，當該細胞内部相對於外部為負時，歐辛諾被積聚在該薄膜之外葉，且香豆素之激活將導致FRET出現。導致薄膜去極化之條件將導致該歐辛諾重新分佈於細胞内部，因此，導致FRET降低。因此，在薄膜去極化後，比率變化（施體/受體）增加。

可藉由將FUGENE6TM充當轉染劑，按先前方式（Hanner等人之（1998) J· Biol· Chem. 273，16289-16296)執行 TsA-201細胞中之 Maxi-K通道的過渡型轉染。在轉染後24小時，細胞收集於不含Ca2'Mg2+的Dulbecco磷酸鹽-緩衝鹽水（D-PBS)中，離心分離，以60,000細胞/孔之密度舖在96孔聚-d-離胺酸所塗覆之平板上，並隔夜培養。該等細胞接著以D-PBS洗滌1次，且以 D-PBS 中之 100 μΐ之 4 μΜ CC2DMPE-0.02% pluronic-127裝載（load) 。在室溫下，細胞在暗處培養30分鐘。然後，細胞以D-PBS 洗滌2次，且以含下列各物（mM)之100 μΐ之6 μΜ DiSBAC2(3)裝 88762 -37- 1250873 載：140 NaQ、0·1 κα、2 CaCl2、1 MgCl2、20 Hepes-Na〇H、pH 7.4 、10葡萄糖。試驗化合物稀釋於此溶液中，且同時添加。在室溫下，細胞在暗處培養3 0分鐘。

平板被裝入電壓/離子探針讀數（VIPR)儀器中，且記錄 CC2DMPE與DiSBAC2(3)兩者之螢光發射記錄10秒。此處，添加100 μΐ之含下列之高鉀溶液（mM): 140 κα、2 CaCl2、1 MgCl2、 2〇 Hepes-KOH、pH 7·4、10葡萄糖，且兩種染料之榮光發射又記錄10秒。在添加高鉀溶液前，該比率CC2DMPE/DiSBAC2(3) 等於1。在不存在任何抑制劑的情況下，在添加高鉀溶液之後，該比率在1.65-2.0之間變化。當該等Maxi-K通道被已知的標準或試驗化合物中的任一種完全抑制時，該比率仍為1。因此，可藉由監控螢光比率之濃度相依變化，來滴定Maxi-K 通道抑制劑的活性。

吾人發現，本發明之化合物在IC5G於約1 nM至約20 μΜ範圍内之螢光比率有濃度相依抑制作用，更佳在約10 ηΜ至約 500 nM範圍内。 B. 化合物對高傳導鈣活化之钾通道的影響的電生理分析人類無色纖毛上皮細胞利用電生理分析方法來確定人類無色纖毛上皮細胞中之高傳導4弓活化之钟（Maxi-K)通道的活性。通過Maxi-K通道的電流記錄在貼片挾制（patch clamp)技術的内外組態中，在該組態中，該吸管溶液朝向通道外側，該槽液朝向細胞内邊。被切除之貼片包含1至約50個Maxi-K通道。藉由Maxi-K通道之較大單通道電導（250-300 pS)、並藉由通道對於細胞電 88762 -38 - 1250873 位之門控的敏感性及細胞内鈣濃度，可識別Maxi_K通道。利用標準電生理技術記錄薄膜電流。玻璃吸管（Gamer 7〇52) 以Kopf拉出券（型號750)拉於兩個階段中，且當裝滿鹽水時電極電阻係1 -3兆歐姆。薄膜電流以EpC9 (heka儀器）或 Axopatch ID (Axon儀器）放大器記錄，且以ITC>16介面（Instmtech 公司）完成數位轉換。吸官裝滿下列成分（mM) : 15〇 KC1、10

Hepes、1 MgCl2、0·01 CaCl2、3·65 KOH、PH 7.20。該槽（細胞内）溶

液相同’除了在某些狀況下’移除鈣、添加1 mM之EGTA、用20 mM KF代替20 mM KC1以消除鈣來試驗通道門控之鈣敏感性。利用槽灌注將藥物施加至該通道之細胞内邊。人類無色纖毛上皮細胞以所描述的方式（Martin-Vasallo、P·，

Ghosh，S.、及 Coca-Prados，Μ.，1989, J. Cell. Physiol. ML 243-252)在組

織培養中生長，且在使用前被鍍至玻璃蓋玻片上。於該吸管與細胞表面之間形成高電阻封組阻（> 1 Gohm)，且切除内外貼片。在該貼片中之Maxi-K通道由於其門控屬性而被識別；增加通道開啟機率以響應細胞去極化，並提高細胞内之鈣。在用來藥理分析之貼片中，「移除細胞内之鈣」可消除電壓門控電流。在導致通道開啟的去極化電壓階躍或斜線上升後，量測Maxi-K電流。以合適的濃度（0.001至100 μΜ)將本發明之化合‘物施加至該通道之細胞内邊。該等化合物減少通道開啟機率，且一旦化合物被自該實驗腔室清除，該效應就被逆轉。在本發明之化合物的該等條件下，用於阻斷Maxi-K通道之IC5G在約0.5 nM至約10 μΜ範圍内。 88762 -39-

Claims

130678號專利申請案 t請專利範圍替換本(94年12月）拾、申請專利範圍月曰修(更)正本 H __ 1· 一種具有式I結構之化合物，

、、〇 R3 式I 或醫藥上可接受之鹽、對映體、非對映體或其混合物：隹其中， Ry代表Η或Cm烷基； R2 代表氫、Q.U)烷基、OH、C2·6 埽基、_(CH2)n〇(CH2)m〇R、或 _ (CHJnCw燒氧基，該燒基視情況經個選自Ra之基所取代； ' R3代表氫、Q-K)烷基、-(CH2)nC00R、硝基、氰基或_素， · 該烷基視情況經1-3個選自Ra之基所取代； R4與R5獨立地代表氫、C】-6烷氧基、〇H、Ck烷基、COOR、 φ SOqCw烷基、COCw烷基、S03H、-〇(CH2)nN(R)2、-〇(CH2)nC02R …0P0(0H)2、CF3、OCFrN(R)2、硝基、氰基、C1>>6 燒胺基，或鹵素；且 R6 代表氫、Ci-io 坑基、-(CH2)nC6-i〇芳基、雜環基、-(CH2)nC3_8環烷基，該烷基、雜環基或芳基視情況經L3 個選自Ra之基所取代，其中該（等）Ra可键結於任何碳原子或選自N與S之雜原子上； 88762 1250873 Ra代表 F、α、Br、I、CF3、N(R)2、N02、CN、办、.COR8、 -CONHR8、-CON(R8)2、-0(CH2)nC00R、-NH(CH2)nOR、_CO〇R、 -OCF3、CF2CH2OR、-NHCOR、-S02R、-S02NR2、-SR、（CrC6 烷基）0-、-(CH2)nO(CH2)mOR、-(CHACw 烷氧基、（芳基）〇-、 -(CH2)nOH、（CrC6 烷基）S(0)m-、H2N-C(NH)-、（CrC6 烷基）C(O)-、 (Crc6 烷基）0C(0)NH-、-(CrC6烷基)NRw(CH2)nC3_10雜環基-Rw、 -(C1-C6 燒基）〇(CH2)nC3_i〇雜環基-Rw、-(C〗-C6 坑基）S(CH2)nC3]〇雜環基 _RW、-(Q-C6烷基）-C3_H)雜環基-Rw、、-(C2-6 締基）NRw(CH2)nC3.i〇雜 ί募基-Rw、_(C2-6 歸基）〇(CH2)nC3.i〇雜琢基-Rw、KC2-6 晞基）S(CH2)nC3.n^^·每基-Rw、-(C2-6 晞基）-C3.10 雜環基-Rw、-(C2-6 晞基、-(CH2)nS〇2R、-(CH2)nS03H 、-(CH2)nPO(OR)2、C3-1()環烷基、C㈣芳基、C3.1()雜環基、C2.6 烯基及CrC1G烷基，該烷基、晞基、烷氧基、雜環基及芳基視情況經1-3個選自CrC6烷基、鹵素、（CH2)nOH、CN、 N02、CON(R)2及COOR之基所取代； Z1與Z2獨立地代表NRW、Ο、CH2或S ; R代表氫或(^6烷基； Rw代表 Η、Ck燒基、-C(0)Ci_6：fe 基、燒基、- S〇2N(R)2 、-SC^Cm烷基、-S02C6-1G 芳基、N02、CN 或-C(0)N(R)2 ; R8代表-(CH2)nC3_8環烷基、-(CH2)nC3_1G雜環基、匕6烷氧基或 -(CH2)nC5-lG雜芳基、-(CH2)nC6_1()芳基’該雜環基、芳基或雜芳基視情況經1-3個選自Ra之基所取代； m係 0-3 ; η係0-3 ;且 1250873 q係 0-2 〇 2. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中R6係Q-u)烷基或 -(CH2)nC3_8環烷基，且心係(^_6烷基，該烷基視情況經1-3個選自Ra之基所取代。 3. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中R2係Cwo烷基，且 R3係Qw烷基，該烷基視情況經1-3個選自Ra之基所取代〇 4. 一種化合物，其為·· 表1

R1 R2 K -K K •K 88762 -3- !25〇873

或醫藥上可接受之鹽、對映體、非對映體或其混合物。如申叫專利範圍第1項之化合物，其用於治療高眼壓或光眼。如申請專利項之化合物，其用於治療斑狀水腫、斑狀退化、增加視網膜與視神經頭部血液速度、增加視網膜與視神經氧張力、及/或神經保護效應。如申請專利範圍第1項之化合物，其用於防止包含鉀通道之哺乳動物細胞的複極化或超極化，或對需要之病人治療阿茲海默氏疾病、抑鬱症、認知障礙，及/或心律不整失調症。 88762 -4 - 1250873 8·種用於治療高眼壓或青光眼之醫藥組合物，直包本如申請專利範圍第i項之式丨化合物與醫藥上可接受之;劑 9·如申請專利範圍第8項之醫藥組合物，其中式地合物係以相調配物施用’該種局部調配物以溶液或懸浮液態施：，且视情況包含黃原膠或結冷膠。 10·如申請專利範圍第8項之醫藥組合物，其中視情況添加屬、由X下各物組成之群之活性成分··卜腎上腺素阻斷劑、$副交感劑、擬交感劑、碳酸肝酶抑制劑、Ep4促效劑則列腺素或其衍生物、降壓脂質、神經保護劑，及/或 5-HT2受體促效劑。 11·如申請專利範圍第1〇項之醫藥組合物，其中該卜腎上腺素阻斷劑係嘧嗎心安（timolol)、倍他索洛爾（betax〇1〇1)、左万疋倍他索洛爾、山羊豆苷（carte〇1〇1)、或左旋布諾洛爾，·該挺一文感劑係毛果芸香驗；該擬交感劑係腎上腺素、艾比定（lopidme)、溴莫尼定（brim〇nidine)、可樂定（咖咖此）或對-胺基可樂定；該碳酸酐酶抑制劑係漆素得（d〇rz〇lamide) 、醋唑磺胺（acetaz〇iamide)、間唑磺胺（metaz〇lamide)或布峋峻續胺（brinzolamide);該前列腺素係樂通舒特（latan〇pr〇st)、月服平（travaprost)、烏諾前列J同（unoprostone)、利視即樂 (rescula)或S1033 ;該降壓脂質係露明甘（lumigan);該神經保護劑係依利羅地（eliprocm)、R-依利羅地或美金剛胺 (memantine);且該5-HT2受體促效劑係1-(2-胺基丙基）-3-甲基-1H-咪唑-6·醇富馬酸或2-(3-氯-6-甲氧基唑小基）小 88762 -5- 1250873 甲基-乙胺。

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