MXPA04011657A

MXPA04011657A - Compuestos de heteroarilo que inhiben la adhesion de leucocitos mediada por integrinas (4.

Info

Publication number: MXPA04011657A
Application number: MXPA04011657A
Authority: MX
Inventors: Konradi Andrei
Original assignee: Elan Pharm Inc
Priority date: 2002-05-24
Filing date: 2003-05-27
Publication date: 2005-08-18
Also published as: NO20045276L; CA2480756A1; EP1507533A4; AU2003237302B8; US7335663B2; US7008949B2; BR0309619A; EP1507533B1; US20050130999A1; TW200307671A; JP2005529155A; WO2003099231A3; AU2003237302A1; ATE464298T1; AU2003237302B2; EP1507533A2; ZA200407944B; IL164323A; JP4413135B2; CN1311829C

Abstract

Se describen compuestos que se unen a la integrina (4, donde la integrina (4 es con preferencia VLA-4. algunos de estos compuestos tambien pueden inhibir la adhesion de leucocitos y, en particular, adhesion de leucocitos mediada por la integrina (4, donde la integrina (4 es con preferencia VLA-4. Dichos compuestos son utiles en el tratamiento de enfermedades inflamatorias en un paciente mamifero, por ejemplo, humano, como asma, enfermedad de Alzheimer, ateroesclerosis, demencia producida por el SIDA, diabetes, enfermedad inflamatoria de intestinos, artritis reumatoide, transplante de tejidos, metastasis de tumores e isquemia de miocardio. Los compuestos tambien pueden administrarse para el tratamiento de enfermedades inflamatorias del cerebro como la esclerosis multiple.

Description

COMPUESTOS DE HETEROARILO QUE INHIBEN LA ADHESIÓN DE LEUCOCITOS MEDIADA POR INTEGRINAS <X ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Campo de la invención Esta invención se refiere a compuestos que inhiben la adhesión de leucocitos y, en particular, la adhesión de leucocitos mediada por integrinas a4, donde la integrina a4 es con preferencia VLA-4.

Técnica anterior La VLA-4 (denominada también integrina a4ß? y CD49d/CD29), identificada por primera vez por Hemler and Takada1, es un miembro de la familia de la integrina ß? de receptores de la superficie celular, cada uno de los cuales comprende dos sub-unidades, una cadena CC4 y una cadena ß? . La VLA-4 contiene una cadena a¾ y una cadena ß?. Existen, por lo menos, nueve integrinas ß?, todas compartiendo la misma cadena ß? y cada una con una cadena ce distinta. Estos nueve receptores se unen, todos, a un complemento diferente de las varias moléculas de la matriz celular, como fibronectina , laminina y colágeno. VLA-4, por ejemplo, se une a la f ibronectina . VLA-4 también se une a moléculas que no son de la matriz expresadas por las células endoteliales y otras células. Estas moléculas que no son de la matriz incluyen VCAM-1, que se expresa en las células endoteliales de la vena umbilical humana activada por citocinas en cultivo. Los distintos epitopes de VLA-4 son responsables de las actividades de unión a la fibronectina y VCAM-1 y se ha demostrado que cada actividad se inhibe en forma independiente.2 La adhesión intracelular mediada por VLA-4 y otros receptores de la superficie celular está asociada con un número de respuestas inflamatorias. En el sitio de una lesión u otro estimulo inflamatorio, las células endoteliales vasculares activadas expresan moléculas que son adhesivas para los leucocitos. La mecánica de adhesión de los leucocitos a las células endoteliales incluye, en parte, el reconocimiento y la unión de los receptores de la superficie celular en los leucocitos a las correspondientes moléculas de la superficie celular en las células endoteliales. Una vez unidos, los leucocitos migran a través de la pared de los vasos sanguíneos para ingresar en el sitio lesionado y liberan mediadores químicos para combatir la infección. Para ver revisiones de la adhesión de los receptores del sistema inmune, ver, por ejemplo, Springer3 y Osborn4. Trastornos inflamatorios del cerebro, como la encefalomielitis autoinmune ( EAE ) , la esclerosis múltiple (MS) y la meningitis, son ejemplos de trastornos del sistema nervioso central en los cuales el mecanismo de adhesión de los leucocitos/ endotelio genera la destrucción de tejido cerebral por el contrario saludable. Grandes números de leucocitos atraviesan la barrera hematoencefálica (BBB) en sujetos con estas enfermedades inflamatorias. Los leucocitos liberan mediadores tóxicos que causan daño extensivo a los tejidos generando conducción dañada del nervio y parálisis. En otros sistemas de órganos, el daño a los tejidos ocurre, además, a través de un mecanismo de adhesión que genera la migración o la activación de los leucocitos. Por ejemplo, se ha demostrado que el ataque inicial que sigue a la isquemia de miocardio del tejido del corazón puede complicarse en forma adicional por el ingreso de los leucocitos en el tejido lesionado causando aún un ataque mayor (Vedder et al.) .5 Otras condiciones inflamatorias o médicas mediadas por un mecanismo de adhesión incluyen, a modo de ejemplo, asma,6"8 enfermedad de Aizheimer, ateroesclerosis,9"10 demencia producida por el SIDA,11 diabetes12"14 (que incluye diabetes aguda de inicio juvenil), enfermedad inflamatoria de intestinos15 (que incluye colitis ulcerativa y enfermedad de Crohn), esclerosis múltiple,16"17 artritis reumatoide , 18-21 transplante de tejidos,22 metástasis de tumores,23"28 meningitis, encefalitis, infarto, y otros traumas cerebrales, nefritis, retinitis, dermatitis atópica, soriasis, isquemia de miocardio y lesión aguda de pulmón mediada por leucocitos como la que ocurre en el síndrome de insuficiencia respiratoria en adultos. Las aminopiridinas sustituidas, como clase, se han revelado como inhibidores de la unión de VLA-4 a VCAM-1 y, conforme a lo antedicho, exhiben propiedades ant nnflamator ías . Mientras que estos compuestos poseen propiedades antagonistas para dicha unión, la biodisponibilidad potenciada de estos compuestos aumentaría su eficacia.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN Esta invención se refiere al descubrimiento de que ciertos compuestos de N- [2-W , N' -dietilamino- 5-aminosulfonil-fenilpirimidin-4-il ] p-carbomiloxi-fenilalanina poseen una biodisponibilidad inesperadamente superior, según la medición de su AUC, en comparación con otros compuestos de aminopirimidina sustituidos descritos previamente. En uno de los aspectos de su composición, esta invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) : en el cual cada X es, en forma independiente, flúor, cloro o bromo; p es 0 o un entero de 1-3; R1 se selecciona del grupo formado por metilo y etilo; R2 se selecciona del grupo formado por alquilo inferior, alquenilo inferior, y alquilencicloalquilo inferior; y sus sales aceptables para farmacéutico . En una realización preferida, invención provee compuestos de Fórmula II: en el cual cada X se selecciona en forma independiente del grupo formado por flúor y cloro, m es un entero igual a 1 ó 2; R2 se selecciona del grupo formado por alquilo inferior, alquenilo inferior, y alquilencicloalquilo inferior; y sus sales aceptables para uso farmacéutico . En una realización preferida en particular, esta invención provee compuestos de Fórmula III: en el cual cada X es, en forma independiente, flúor o cloro; n es cero o uno; R2 es -CH2R' donde R' se selecciona del grupo formado por hidrógeno, metilo o -CH = CH2; y sus sales aceptables para uso farmacéutico . En otra realización preferida en particular, esta invención provee compuestos de Fórmula (IV) : en el cual cada X es, en forma independiente, flúor, cloro o bromo; p es 0 o un entero de 1 - 3 ; R1 se selecciona del grupo formado por metilo y etilo; R2 es alquinilo inferior; y sus sales aceptables para uso farmacéutico . Incluso en otra realización particularmente preferida, esta invención provee compuestos de Fórmula V: en el cual cada X se selecciona en forma independiente del grupo formado por flúor y cloro, m es un entero igual a 1 ó 2 ; R2 es alquinilo inferior; y sus sales aceptables para uso farmacéutico . Incluso en otra realización particularmente preferida, esta invención provee compuestos de Fórmu 1 a VI : (VI) en el cual cada X es, en forma independiente, flúor o cloro; n es cero o uno; R2 es alquinilo inferior; y sus sales aceptables para uso farmacéu ico . R2 es, con preferencia, propargilo, en cualesquiera de las Fórmulas IV, V o VI. Los compuestos de N- [2-?' , N' -diet ilamino-5-ami osulfoni 1 fenilpirimidin- 4-i 1 ] p-carbomi loxi fenilalanina dentro del alcance de esta invención incluye aquellos que se indican en la Tabla I como sigue: Ej emplo R2 No . 17 2, 4-difluorofenilo metilo 18 2, 4-difluorofenilo etilo 19 3, 5-diclorofenilo metilo 20 3, 5-diclorofenilo etilo 21 4-fluorofenilo n-propilo 22 4-fluorofenilo alilo 23 4-fluorofenilo isobutilo 24 4-f luorofenilo n-bu ilo 25 2, 6-difluorofenilo metilo 26 2, 3-difluorofenilo metilo 27 4-fluorofenilo propargilo 28 2, 4-difluorofenilo propargi lo 29 4-fluorofenilo 2-trisfluoroetilo Los compuestos específicos dentro del alcance de esta invención incluyen los siguientes. Como se usan a continuación, estos compuestos se nombran en base a los derivados de cido propiónico pero, en forma alternativa, estos compuestos podrían haberse nombrado en base a los derivados de N-[2-N' ,?' -diet ilamino-5-aminosulfonilfenilopirimidin-4-il ] p-carbomiloxi-fenilalanina . ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4-clorobencensulfonil)metilamino] -pirimidin-4- i lamino } -3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxifenil ) propiónico; ácido 2- { 2-diet ilamino-5- [ ( 4 flúorobencensulfonil) meti lamino] -pirimidin-4-i lamino } -3- ( -dimetilcarbamoiloxifenil ) propiónico,· ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ (3, 4 difluorobencensulfonil) met i lamino] -pirimidin-4-ilamino } -3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxifenil ) propiónico; ácido 2 - { 2 -diet ilamino-5- [ ( 3 , 4 diclorobencensulfonil) meti lamino ] -pir imidin- 4-ilamino}-3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxifen i 1 ) propiónico ; ácido 2- { 2-dietilamino-5 [ (bencensulfonil) met i lamino] ~pirimidin-4-ilamino}-3- ( 4 -dimet ilcarbamoiloxi fenil ) propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ (2 fluoro encens l foni 1 ) met i lamino ] -pirimidin- 4-ilamino}-3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxifenil ) propiónico; ácido 2 -{ 2 -diet ilamino-5- [( 3 fluorobencensulfonil) metilamino] -pirimidin- 4 -ilamino}-3- ( -dimet i lcarbamoiloxifeni 1 ) propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4 fluorobencensulfonil) i sopropi lamino ] -pirimidin-4-ilamino } -3- ( -dimet i lcarbamoiloxifenil) propió ico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4 fluorobencensulfonil) etilamino] -pirimidin- 4 -i lamíno} -3- ( -dimet i lcarbamo loxifenil) ropiónico; ácido 2-{2- dietilamino-5- [ ( 3 , 4 di fluorobencensul fonil ) isopropilamino] -pirimidin-4 -ilamino } -3- ( 4-dimet ilcarbamoiloxifenil )propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4 clorobencensulfonil) isopropilamino] -pirimidin- 4 -ilamino } -3- ( 4-dimet ilcarbamoiloxifenil ) propión ice- ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ (3, 4 dif luorobencensul fonil) etilamino] -pirimidin-4-ilamino}-3- ( 4 -dimet ilcarbamoiloxifenil )propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4 clorobencensulfonil) etilamino] pirimidin-4 -ilamino} -3- ( 4 -dimet i lcarbamoiloxi fenil ) propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4 fluorobencensulfonil) ciclopropi 1 omet ilamino ] -pi rimidin-4 -ilamino } - 3 - ( 4 -dimet ilcarbamoilo ifenil ) ropiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 3 , 5 di fluorobencensulfonil) met i lamino] -pirimidin- 4 -ilamino } -3- ( -dimet ilcarbamoiloxifenil ) propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 3 , 5 difluorobencensulfonil) et i lamino ] - irimidin-4 -ilamino}-3-( -dimetilcarbamoiloxi-llenil ) propiónico; ácido 2- { 2 -dieti lamino-5 - [ ( 2 , di fluorobencensul foni 1 ) met ilamino ] -pirimidin- -ilamino } -3- ( -dimet ilcarbamoiloxifenil ) propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ (2 , 4 difluorobencensulfonil) et i lamino ] -pirimidin-4 -ilamino}-3- ( 4-dimetilcarbamoiloxi fenil ) propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 3 , 5 diclorobencensulfonil) met i lamino] - irimidin-4-i lamino } -3- ( 4-dimetilcarbamoiloxifenil ) ropiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 3 , 5 diclorobencensulfonil) etilamino] -pirimidin- -ilamino}-3-( 4-dimetilcarbamoiloxifenil ) propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4 fluorobencensulfonil ) -n-propilamino ] -pirimidin-4-ilamino}-3- ( 4-dimeti lcarbamoilo ifenil ) propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4 fluorobencensul fonil ) alilamino] -pirimidin-4 -ilamino}-3-( 4-dimetilcarbamoiloxifenil ) propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ (4 fluorobencensulfonil) isobutí lamino ] -pirimidin-4-i lamino } -3 - ( 4 -dimetilcarbamoiloxifenill ) propiónico,· ácido 2 - { 2 -diet ilamino-5- [ ( fluorobencensulfonil) -n-butilamino ] -pirimidin-4-i lamino } -3- ( 4-dimetilcarbamoiloxifenil ) propiónico ; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ (2 , 6 difluorobencensul foni 1 ) meti lamino ] -pirimidin-4 -i lamino } -3 - (4 -dimet i lcarbamoi 1 oxifenil) propiónico ; ácido 2- { 2-diet ilamino-5- [ ( 2 , 3 di flúorobencensul fonil ) et i lamino ] -pirimidin-4-i lamino } -3 - ( -dimetilcarbamoi loxi feni 1 ) propiónico; ácido 2- { 2 -dietilamino-5- [ ( -fluorobencensulfonil)propargilamino]pirimidin-4-ilamino } -3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxifenil ) propiónico; ácido 2 - { 2 -diet ilamino- 5- [ ( 2 , 4 -di fluorobencensul fonil) propargi lamino ] -pirimidin-4-ilamino } -3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxifenil )propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4-fluorobencensul fonil) - (2-trisfluoroetilo) -amino] -pirimidin- 4 -ilamino } -3- (4-dimetilcarbamoiloxifenil ) propiónico; y sus sales aceptables para uso farmacéutico . En otro aspecto, esta invención provee composiciones farmacéuticas que comprenden un vehículo aceptable para uso farmacéutico y una cantidad terapéuticamente efectiva de los compuestos definidos aquí. En uno de los aspectos de su método, esta invención se refiere a un método para el tratamiento de una enfermedad mediada, por lo menos en parte, por la integrina OC4, con preferencia VLA-4, en un paciente, cuyo método comprende administrar una composición farmacéutica que comprende un vehículo aceptable para uso farmacéutico y una cantidad terapéuticamente efectiva un compuesto de esta invención . Los compuestos y las composiciones farmacéuticas de esta invención son útiles para el tratamiento de condiciones de enfermedades mediadas, por lo menos en parte, por la integrina a4, donde la integrina oc4 es con preferencia VLA-4 o adhesión a leucocitos. Dichas condiciones de enfermedad incluyen, a modo de ejemplo, asma, enfermedad de Alzheimer, ateroesclerosis, demencia producida por el SIDA, diabetes (que incluye diabetes aguda de inicio juvenil), enfermedad inflamatoria de intestinos (que incluye colitis ulcerativa y enfermedad de Crohn), esclerosis múltiple, artritis reumatoide, transplante de tejidos, metástasis de tumores, meningitis, encefalitis, infarto, y otros traumas cerebrales, nefritis, retinitis, dermatitis atópica, soriasis, isquemia de miocardio y lesión aguda de pulmón mediada por leucocitos como la que ocurre en el síndrome de insuficiencia respiratoria en adultos. Otras condiciones de enfermedad incluyen, sin carácter limitativo, condiciones inflamatorias como eritema nudoso, co juntivitis alérgica, neuritis óptica, uveitis, rinitis alérgica, espondinitis anquilosante, artritis soriática, vasculitis, síndrome de Reiter, lupus eritematoso sistémico, esclerosis sistémica progresiva, polimiositis , dermatomiositis, granulomatosis de egner, aortitis, sarcoidosis, linfocitopenia , arteritis temporal, pericarditis, miocarditis, insuficiencia coronaria congestiva, poliarteritis nudosa, síndromes de hipersensibilidad, alergia, síndromes hipereosinofí lieos , Síndrome de Churg-Strauss, enfermedad crónica de obstrucción pulmonar, neumonitis por hipersensibilidad, hepatitis crónica activa, cistitis intersticial,. insuficiencia endocrina autoinmune, cirrosis biliar primaria, anemia aplástica autoinmune, hepatitis crónica persistente y tiroiditis. En una realización preferida, la condición de la enfermedad mediada por la integrina es una enfermedad inflamatoria.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Como se mencionó con anterioridad, esta invención se refiere a compuestos' que inhiben la adhesión de leucocitos y, en particular, la adhesión de leucocitos mediada, por lo menos en parte, por las integrinas 0C4, con preferencia VLA-4. Sin embargo, antes de describir esta invención en mayor detalle, primero se definirán los siguientes términos .

Definiciones Salvo que se indique lo contrario, los siguientes términos usados en la memoria descriptiva y en las reivindicaciones tienen los significados que se les asigna a continuación: Como se usa aquí, "alquilo inferior" se refiere a grupos alquilo monovalentes que tienen desde 1 hasta 5 átomos de carbono que incluyen grupos alquilo de cadena recta y ramificada. Este término se ejemplifica a través de grupos como metilo, etilo, iso-propilo, n-propilo, n-butilo, iso-butilo, sec-butilo, t-butilo, n-pentilo y similares. "Alquilo inferior" puede estar sustituido en forma opcional con un halógeno, como cloro, flúor, bromo y similares. El término "alquileno inferior" se refiere a grupos alquileno divalentes de desde 1 hasta 4 átomos de carbono que incluyen grupos alquileno de cadena recta o ramificada. Este término se ejemplifica a través de grupos como metileno, etileno, n-propileno, iso-propileno ( -CH2CH ( CH3 ) - y -CH (CH3) CH2-) y similares. El término "alquiñi lo inferior" se refiere a un grupo alquinilo que, con preferencia, tiene desde 2 hasta 6 átomos de carbono y que tiene por lo menos 1 sitio y con preferencia sólo 1 sitio de insaturación de alquinilo (es decir, -C=C) . Este término se ejemplifica a través de grupos como acetilo (-C=CH), propargilo ( -CH2-C=CH ) , 3-butinilo (-CH2CH2C=CH3) y similares. El término "cicloalquilo inferior" se refiere grupos alquilo cíclicos de desde 3 hasta 6 átomos de carbono que tiene un anillo cíclico simple que incluye, a modo de ejemplo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo. El término "alqui lencicloalquilo inferior" se refiere al grupo formado por a alquileno inferior-cicloalquilo inferior, como se define aquí. Dichos grupos están ejemplificados por metilenciclopropilo ( -CH2-ciclopropilo) , etilenciclopropilo y similares. "Vehículo aceptable para uso farmacéutico" se refiere a un vehículo que es útil en la preparación de una composición farmacéutica que en general es segura, no tóxica, y no es indeseable biológicamente o de otro modo, e incluye un vehículo que es aceptable para uso veterinario así como también para uso farmacéutico en humanos. "Un vehículo aceptable para uso farmacéutico" como se usa en la memoria descriptiva y en las reivindicaciones incluye uno y más de dichos vehículos . "Tratar" o "tratamiento" de una enfermedad incluye : (1) prevenir la enfermedad, es decir, hacer que los síntomas clínicos de la enfermedad no se desarrollen en un mamífero que puede estar predispuesto o expuesto a la enfermedad aunque aún no haya experimentado o mostrado los síntomas de la enfermedad, (2) inhibir la enfermedad, es decir, detener o reducir el desarrollo de la enfermedad o sus síntomas clínicos, o (3) aliviar la enfermedad, es decir, provocar la regresión de la enfermedad o sus síntomas clínicos. Una "cantidad terapéuticamente efectiva" significa la cantidad de un compuesto que, cuando se administra a un mamífero para tratar una enfermedad, es suficiente para lograr el efecto de dicho tratamiento para la enfermedad. La "cantidad terapéuticamente efectiva" variará dependiendo del compuesto, la enfermedad y su severidad, la edad, el peso, etc., del mamífero que recibe el tratamiento. "Sal aceptable para uso farmacéutico" se refiere sales aceptables para uso farmacéutico de un compuesto de Fórmula I cuyas sales derivan de una variedad de contraiones orgánicos o inorgánicos conocidos en la técnica e incluyen, sólo a modo de ejemplo, sodio, potasio, calcio, magnesio, amonio, tetraalquilamonio , y similares y cuando la molécula contiene un grupo funcional básico, sales de ácidos orgánicos o inorgánicos, como clorhidrato, bromhidrato, tartrato, mesilato, acetato, maleato, oxalato y similares. Las integrinas son una extensa familia de proteínas de ligación a la transmembrana homologa que son los principales receptores en las células animales para unirse a la mayoría de las proteínas de matriz extracelular , como colágeno, fibronectina y laminina. Las integrinas son heterodímeros formados por una cadena a y una cadena ß. Hasta la fecha, se han identificado veinte heterodímeros de integrina diferentes, realizados con 9 sub-unidades a diferentes y 14 sub-unidades ß diferentes. El término "integrinas a4" se refiere a la clase de heterodímero, receptores de la superficie celular ligados a la enzima que contienen la sub-unidad 014 emparejada con cualesquiera de las sub-unidades ß?. VLA-4 es un ejemplo de una integrina 4 , y es un heterodímero de las sub-unidades a4 y ß?, y se denomina también integrina c pi.

Preparación del Compuesto Los compuestos de esta invención pueden prepararse a partir de materiales iniciales ampliamente disponibles usando los métodos y los procedimientos identificados en los ejemplos que siguen. Estos métodos y procedimientos definen protocolos de reacción específicos para la preparación de compuestos de N- [ 2 - ' , N ' -die t i 1 amino-5-aminosulfonilfenil-pirimidin-4-il]p-carbomiloxi-fenilalanina . Los compuestos dentro del alcance que no estén ejemplificados en estos ejemplos y métodos se preparan ampliamente mediante la sustitución apropiada de los materiales iniciales que se encuentran disponibles en el mercado o se conocen en la técnica. Otros procedimientos y otras condiciones de reacción para preparar los compuestos de esta invención se describen en los ejemplos que se incluyen a continuación. En forma adicional, otros procedimientos para la preparación de compuestos útiles en ciertos aspectos de esta invención se describen en la Patente de los Estados Unidos No. 6.492.372 cuya descripción se incorpora aquí a modo de referencia en su totalidad.

Formulaciones Farmacéuticas Cuando se emplean como productos farmacéuticos, los compuestos de esta invención se administran usualmente en forma de composiciones farmacéuticas. Estas composiciones pueden administrarse a través de una variedad de vías que incluyen la via oral, rectal, transdérmica , subcutánea, intravenosa, intramuscular, e intranasal. Estas composiciones son efectivas tanto por aplicación inyectable como oral. Dichas composiciones se preparan de un modo conocido en la técnica farmacéutica y comprenden, por lo menos, un compuesto activo. Esta invención incluye, además, composiciones farmacéuticas que contienen, como ingrediente activo, uno o más de los compuestos de Fórmula I-VII anteriores asociados con un vehículo aceptable para uso farmacéuticos. En la fabricación de las composiciones de esta invención, el ingrediente activo usualmente se mezcla con un excipiente, se diluye con un excipiente o se incluyen dentro de dicho vehículo que puede tener forma de cápsula, saché, papel u otro recipiente. El excipiente empleado es normalmente un excipiente apropiado para administrar a sujetos humanos u otros mamíferos. Cuando el excipiente sirve como diluyente, puede ser un material sólido, semi-sólido o líquido, que actúa como vehículo, portador, o medio para el ingrediente activo. De este modo, las composiciones pueden tener la forma de comprimidos, pildoras, polvos, pastillas, sachés, caché, elixires, suspensiones, emulsiones, soluciones, jarabes, aerosoles (como un sólido o en un medio líquido), ungüentos que contienen, por ejemplo, hasta el 10% en peso del compuesto activo, cápsulas blandas o duras de gelatina, supositorios, soluciones inyectabas estériles, y polvos envasados estériles . En la preparación de una formulación, puede ser necesario moler el compuesto activo para proveer el tamaño de partículas apropiado antes de combinarlo con los otros ingredientes. Si el compuesto activo es sustancialmente insoluble, normalmente se muele hasta un tamaño de partículas de malla inferior a 200. Si el compuesto activo es sustancialmente soluble en agua, el tamaño de partículas normalmente se ajusta por molienda para proveer una distribución sustancialmente uniforme en la formulación, por ejemplo, malla de ap oximadamente 40. Algunos ejemplos de excipientes apropiados incluyen lactosa, dextrosa, sacarosa, sorbitol, manitol, almidones, goma acacia, fosfato de calcio, alginatos, tragacanto, gelatina, silicato de calcio, celulosa microcri stalina , polivinilpirrolidona, celulosa, agua, jarabe, y metil celulosa. Las formulaciones pueden incluir en forma adicional: agentes lubricantes como talco, estearato de magnesio, y aceite mineral; agentes humectantes; agentes emulsionantes y de suspensión; agentes preservantes como metil- y propilhidroxi-benzoatos ; agentes edulcorantes; y agentes sabori zantes . Las composiciones de la invención pueden formularse para proveer una liberación rápida, prolongada o demorada del ingrediente activo luego de la administración al paciente mediante el empleo de procedimientos conocidos en la técnica. Las composiciones se formulan, con preferencia, en una forma de dosificación unitaria, cada dosificación contiene desde aproximadamente 5 hasta aproximadamente 100 mg , más usualmente desde aproximadamente 10 hasta aproximadamente 30 mg, del ingrediente activo. El término "formas de dosificación unitarias" se refiere a unidades físicamente individuales apropiadas como dosificaciones unitarias para sujetos humanos y otros mamíferos, cada unidad contiene una cantidad predeterminada de material activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado, en asociación con un excipiente farmacéutico apropiado. El compuesto activo es efectivo en un amplio rango de dosificación y en general se administra en una cantidad farmacéuticamente efectiva. Se comprenderá, sin embargo, que la cantidad del compuesto realmente administrada será determinada por un médico, luego de la evaluación de circunstancias relevantes, que incluyen la condición que desea tratarse, la vía de administración elegida, el compuesto real administrado, la edad, el peso y la respuesta del paciente individual, la gravedad de los síntomas del paciente, y similares.

Para preparar composiciones sólidas como comprimidos, el ingrediente activo principal se mezcla con un excipiente farmacéutico para formar una composición de pre- formulación sólida que contiene una mezcla homogénea de un compuesto de la presente invención. Cuando se hace referencia a estas composiciones de pre-formulación como homogéneas, se entiende que el ingrediente activo está disperso en forma pareja en toda la composición de tal modo que la composición pueda sub-dividirse ampliamente en formas de dosificación unitarias de igual efectividad como comprimidos, pildoras y cápsulas. Esta pre-formulación sólida se sub-divide entonces en formas de dosificación unitarias del tipo descrito con anterioridad que contiene desde, por ejemplo, 0.1 hasta aproximadamente 500 mg del ingrediente activo de la presente invención.' Los comprimidos o las pildoras de la presente invención pueden recubrirse o de otro modo formar compuestos para proveer una forma de dosificación que brinde la ventaja de la acción prolongada. Por ejemplo, el comprimido o la pildora pueden comprender un componente de dosificación interna y de dosificación externa, el último en forma de envoltura sobre el primero. Los dos componentes pueden estar separados por una capa entérica que sirve para resistir la desintegración en el estómago y permitir que el componente interno pase intacto al duodeno o que se demore su liberación. Una variedad de materiales puede utilizarse para dichas capas o dichos recubrimientos entéricos, dichos materiales incluyen un número de ácidos políméricos y mezclas de ácidos poliméricos con materiales tales como lacar, alcohol cetilico y acetato de celulosa. Las formas liquidas en las cuales las nuevas composiciones de la presente invención pueden incorporarse para administración por vía oral o por inyección incluyen soluciones acuosas, jarabes saborizados en forma apropiada, suspensiones acuosas u oleosas, y emulsiones saborizadas con aceites comestibles como aceite de semilla de algodón, aceite de sésamo, aceite de coco o aceite de maní, como así también elixires y vehículos farmacéuticos similares . Las composiciones para inhalación o insuflación incluyen soluciones y suspensiones en solventes acuosos u orgánicos aceptables para uso farmacéutico, o sus mezclas, y polvos. Las composiciones líquidas o sólidas pueden contener excipientes apropiados aceptables para uso farmacéutico, como se describió supra . Con preferencia, las composiciones se administran por vía oral o respiratoria por nariz para lograr efecto local o sistémico. Las composiciones incluidas, con preferencia, en solventes aceptables para uso farmacéutico pueden nebulizarse a través del uso de gases inertes. Las soluciones nebulizadas pueden aspirarse directamente del dispositivo de nebulización o el dispositivo de nebulización puede unirse a la cámara de una mascarilla facial, o máquina respiradora de presión positiva intermitente. Las composiciones en solución, suspensión o polvo pueden administrarse, con preferencia, por vía oral o nasal, a partir de dispositivos que aplican la formulación en un modo apropiado . Los siguientes Ejemplos de Formulación ilustran las composiciones farmacéuticas de la presente invención.

Ejemplo de Formulación 1 Se preparan cápsulas duras de gelatina que contienen los siguientes ingredientes: Ingrediente Cantidad (mg/cápsula) Ingrediente Activo 30.0 Almidón 305.0 Estearato de magnesio 5.0 Los ingredientes anteriores se mezclan y se llenan en cápsulas duras de gelatina en cantidades de 340 mg.

Ejemplo de Formulación 2 La fórmula de un comprimido se prepara usando los ingredientes que siguen: Ingrediente Cantidad (mg/comprimido ) Ingrediente Activo 25.0 Celulosa, microcristalina 200.0 Dióxido de silicona coloidal 10.0 Ácido esteárico 5.0 Los componentes se mezclan y se comprimen para formar comprimidos, cada uno con un peso de 240 mg .

Ejemplo de Formulación 3 Se prepara una formulación de inhalador en polvo anhidro que contiene los siguientes componentes : Ingrediente % en peso Ingrediente Activo 5 Lactosa 95 La mezcla activa se mezcla con la lactosa y la mezcla se agrega a un dispositivo de inhalación de polvo anhídrido.

Ejemplo de Formulación 4 Se preparan comprimidos, cada uno con 30 mg de ingrediente activo, de la siguiente manera: Ingrediente Cantidad (mg/comprimido ) Ingrediente Activo 30.0 mg Almidón 45.0 mg Celulosa microcristalina 35.0 mg Polivinilpirrolidona 4.0 mg (como solución al 10% en agua) Carboximetil almidón 4.5 mg sádico Estearato de magnesio 0.5 mg Talco 1.0 mg Total 120 mg El ingrediente activo, almidón y celulosa se pasan a través de un tamiz U.S. de malla No. 20 y se mezclan minuciosamente. La solución de polivinilpirrolidona se mezcla con los polvos resultantes, que luego se pasan a través de un tamiz U.S. de malla 16. Los gránulos producidos de este modo se secan a 50° hasta 60°C y se pasan a través de un tamiz U.S. de malla 16. El carboximetil almidón sádico, estearato de magnesio, y talco, pasados previamente a través de un tamiz U.S. de malla No. 30, se agregan a los gránulos que, luego de mezclar, se comprimen en una máquina para realización de comprimidos para lograr como rendimiento comprimidos cada uno con un peso de 120 mg .

Ejemplo de Formulación 5 Se realizan cápsulas, cada una con 40 mg de medicamento, de la siguiente manera: Ingrediente Cantidad (mg/cápsula) Ingrediente Activo 40.0 mg Almidón 109.0 mg Estearato de magnesio 1.0 mg Total 150.0 mg El ingrediente activo, almidón, y estearato de magnesio se mezclan, se pasan a través de un tamiz U.S. de malla No. 20, y se llenan en cápsulas duras de gelatina en cantidades de 150 mg .

Ejemplo de Formulación 6 Se realizan supositorios, cada uno con 25 mg de ingrediente activo, de la siguiente manera: Ingrediente Cantidad Ingrediente Activo 25 mg Glicéridos de ácido graso saturado hasta 2.000 mg El ingrediente activo se pasa a través de un tamiz U.S. de malla No. 60 y se suspende en glicéridos de ácido graso saturado previamente fundidos usando el mínimo calor necesario. La mezcla se vierte luego en un molde para supositorios de capacidad nominal 2.0 g y se deja enfriar.

Ejemplo de Formulación 7 Se realizan suspensiones, cada una con 50 mg de medicamento por cada dosis de 5.0 mL, de la siguiente manera: Ingrediente Cantidad Ingrediente activo 50.0 mg Goma xántica 4.0 mg Carboximetilcelulosa de sodio (11%) Celulosa microcristalina (89%) 50.0 mg Sacarosa 1.75 g Benzoato de sodio 10.0 mg Sabor y Color c.s.p. Agua purificada 5.0 mL El medicamento, la sacarosa y la goma xántica se mezclan, se pasan a través de un tamiz U.S. de malla No. 10, y luego se mezclan con una solución realizada previamente de la celulosa microcristalina y carboximetilcelulosa de sodio en agua. El benzoato de sodio, el sabor y el color se diluyen con parte del agua y se agregan con agitación. Luego se agrega agua suficiente para producir el volumen requerido.

Ejemplo de Formulación 8 Ingrediente Cantidad (mg/cápsula) Ingrediente Activo 15.0 mg Almidón 407.0 mg Estearato de magnesio 30 mg Total 425.0 mg El ingrediente activo, almidón, y estearato de magnesio se mezclan, se pasan a través de un tamiz U.S. de malla No. 20, y se llenan en cápsulas duras de gelatina en cantidades de 425 rag.

Ejemplo de Formulación 9 Una formulación intravenosa puede prepararse de la siguiente manera: Ingrediente Cantidad Ingrediente Activo 250.0 mg Solución Salina Isotónica 1000 mL Ejemplo de Formulación 10 Una formulación tópica puede prepararse de la siguiente manera: Ingrediente Cantidad Ingrediente Activo 1-10 g Cera Emulsionante 30 g Parafina Liquida 20 g Parafina Blanda Blanca 2 a 100 g La parafina blanca, blanda se calienta hasta que se derrite. La parafina líquida y la cera emulsionante se incorporan y se agitan hasta que se disuelven. El ingrediente activo se agrega y se continúa agitando hasta que esté disperso. La mezcla se enfria luego hasta que está sólida. Otra formulación preferida empleada en los métodos de la presente invención emplea dispositivos de administración transdérmica ("parches") . Dichos parches transdérmicos pueden utilizarse para proveer infusión continua o discontinua de los compuestos de la presente invención en cantidades controladas. La construcción y el uso de los parches transdérmicos para la administración de agentes farmacéuticos se conocen en la técnica. Ver, por ejemplo, la patente de los Estados Unidos No. 5.023.252, concedida el 11 de junio de 1991, que se incorpora aquí a modo de referencia. Dichos parches pueden construirse para administración continua, pulsátil o a demanda de agentes farmacéuticos. Pueden usarse técnicas de colocación directa o indirecta cuando se debe o se necesite introducir la composición farmacéutica al cerebro. Las técnicas directas incluyen usualmente la colocación de un catéter de administración de fármacos en el sistema ventricular del huésped para atravesar la barrera hemato-encefálica . Uno de dichos sistemas de administración implant ables usados para el transporte de factores biológicos a las regiones anatómicas especificas del cuerpo se describe en la Patente de los Estados Unidos No. 5.011.472 que se incorpora aquí a modo de referencia . Las técnicas indirectas, que en general se prefieren, usualmente incluyen la formulación de las composiciones para proveer latentización del fármaco mediante la conversión de fármacos hidrofílicos en fármacos solubles en lípidos. La latentización generalmente se logra a través del bloqueo de los grupos hidroxi, carbonilo, sulfato, y amina primaria presentes en el fármaco para tornar el fármaco más soluble en lípidos y dócil para transporte a través de la barrera hemato-encefálica . En forma alternativa, la aplicación de fármacos hidrofílicos puede potenciarse a través de la infusión intra-arterial de soluciones hipertónicas que pueden abrir en forma transitoria la barrera hemato-encefálica .

Utilidad Los compuestos de esta invención inhiben, in vivo, la adhesión de los leucocitos a las células endoteliales, mediada, por lo menos en parte, por las integrinas a4, donde la integrina a4 es con preferencia VLA-4, a través de la unión competitiva a las integrinas a4 , con preferencia VLA-4. Conforme a lo antedicho, los compuestos de esta invención pueden usarse en el tratamiento de enfermedades en mamíferos mediadas por integrinas a4, donde la integrina a4 es con preferencia VLA-4, o adhesión a leucocitos. Dichas enfermedades incluyen enfermedades inflamatorias en pacientes mamíferos como asma, enfermedad de Alzheimer, ateroesclerosis , demencia producida por el SIDA, diabetes (que incluye diabetes aguda de inicio juvenil), enfermedad inflamatoria de intestinos (que incluye colitis ulcerativa y enfermedad de Crohn) , esclerosis múltiple, artritis reumatoide, transplante de tejidos, metástasis de tumores, meningitis, encefalitis, infarto, y otros traumas cerebrales, nefritis, retinitis, dermatitis atópica, soriasis, isquemia de miocardio y lesión aguda de pulmón mediada por leucocitos como la que ocurre en el síndrome de insuficiencia respiratoria en adultos . La cantidad administrada al paciente mamífero variará dependiendo de lo que se administra, la finalidad de la administración, como profilaxis o terapia, el estado del paciente, el modo de administración, y similares. En aplicaciones terapéuticas, las composiciones se administran a un paciente que ya sufre una enfermedad en una cantidad suficiente para curar o por lo menos detener en forma parcial los síntomas de la enfermedad y sus complicaciones. Una cantidad adecuada para lograr esto se define como "dosis terapéuticamente efectiva." Las cantidades efectivas para este uso dependerán de la condición de la enfermedad tratada como así también a criterio del médico tratante dependiendo de factores tales como la gravedad de la inflamación, la edad, el peso y la condición general del paciente, y similares. Las composiciones administradas a un paciente se encuentran en forma de las composiciones farmacéuticas descritas con anterioridad. Estas composiciones pueden esterilizarse por técnicas de esterilización convencionales, o pueden filtrarse en forma estéril. Las soluciones acuosas resultantes pueden envasarse para su uso como están, o liofili zarse , debiéndose combinar la preparación liofilizada con un vehículo acuoso estéril antes de la administración. El pH de las preparaciones de compuestos normalmente oscilará desde 3 hasta 11, con mayor preferencia desde 5 hasta 9 y aun con mayor preferencia desde 7 hasta 8. Se comprenderá que el uso de algunos de los excipientes, vehículos o estabilizadores anteriores producirá la formación de sales farmacéuticas. La dosificación terapéutica de los compuestos de la presente invención variará de acuerdo con, por ejemplo, el uso particular para el cual se realiza el tratamiento, el modo de administración del compuesto, la salud y la condición del paciente, y el criterio del médico que prescribe. Por ejemplo, para administración intravenosa, la dosis será normalmente dentro del rango de aproximadamente 20 ]ig hasta aproximadamente 500 ]iq por kilogramo de peso corporal, con preferencia aproximadamente 100 pg hasta aproximadamente 300 pg por kilogramo de peso corporal. Los rangos de dosificación apropiados para administración intranasal son, en general, de aproximadamente 0.1 pg hasta 1 mg por kilogramo de peso corporal. Las dosis efectivas pueden extrapolarse a partir de curvas de dosis-respuesta derivadas de sistemas de prueba in vitro o en modelos de animales. Los siguientes ejemplos de síntesis y biológicos se ofrecen para ilustrar esta invención y no se interpretarán bajo ningún concepto como limite del alcance de esta invención. Salvo que se indique lo contrario, todas las temperaturas son en grados Celsius .

EJEMPLOS En los ejemplos que siguen, las siguientes abreviaturas tienen los siguientes significados. Si no se define una abreviatura, ésta tiene, su significado generalmente aceptado.

AUC Área bajo la curva BSA albúmina de suero de bovino DMA 4-N, N-dimet ilaminopiridina DMSO dimetilsulfóxido EDC 1- ( 3-dimetilaminopropilo ) -3- eti 1 carbodi imida , clorhidrato EDTA Ácido et ilendiamino tetraacético EtOAc acetato de etilo ETOH etanol bd doblete amplio bs singulete amplio d doblete m muít iplete triplete singulete eq o eq. equivalente FACS Clasificador Celular Activado por Fluorescencia FITC Isotiocianato de fluoresceina Fmoc N- ( 9-fluorenilmetoxicarbonil ) FmocONSu N- ( g-fluorenilmetoxicarbonil ) - succinimida g gramos i.p. intraperitoneal h hora HBSS Solución Salina Balanceada de Hank HEPES ácido 4- (2-hidroxietil ) -1-piperazin- etansulfónico HOBT hidrato de 1-hidroxibenzotriazol hr hora IgG Fc un dominio de unión de la inmunogiobuli a kg kilogramo LCMS Cromatografía Líquida Espectroscopia de Masa litro m metro M Molar Hct hematocrito, o medición de los glóbulos rojos envasados obtenidos por centrifugación en un volumen de una muestra de sangre HB hemoglobina MCH hemoglobina corpuscular promedio; Hb/RBC MCHC recuento- de hemoglobina corpuscular expresado como porcentaje; Hb/Hct. MCV volumen corpuscular promedio, el promedio del volumen de eritrocitos, expresado convencionalmente en micrometros cúbicos por glóbulo rojo RBC recuento de glóbulos rojos MeOH metano 1 mg miligramo mL mililitro mm milímetro mM milimolar mol moles mmol milimol mp punto de fusión mpk miligramos por kilogramo N normal NaOEt etóxido de sodio NMM N-metilmorfo lina OtBu = ter-butóxido PBS++ = Solución salina con amortiguador de fosfato Phe = L-fenilalanina Pro = L-prolina psi = libras por pulgada cuadrada q.s. = llevar a volumen Rf = Factor de retención rpm = rotaciones por minuto rt = temperatura ambiente sat = saturado t-BuOH = ter-butanol TEA = ácido t rifluoroacético THF = tet rahidrofurano TLC o tic= cromatografía de capa delgada TYR = tirosina µ? = microlitro µ? = micromolar ig = microgramo vt = Volumen total WBC = Glóbulos Blancos p/p = peso a peso p/v = peso a volumen v/v = volumen a volumen Ejemplo 1 Preparación del ácido 2 - { 2 -diet i lamino- 5- [ ( 4 - fluorobe censulfonil) met i lamino] pirimidin-4- i lamino } -3- ( 4-dimetilcarbamoiloxif nil ) propiónico General. Se realizó cromatografía flash usando un Biotage Flash 75L, usando cartuchos de sílice KP-Sil de 800 g (32-63 µ?, 60 angstrom, 500-550 m2/g) . Se reportan los Rfa, para cromatografía analítica de fase delgada, usando placas EM Science Silica Gel F(254) de 250 µ? de espesor para la fase normal, y placas Walman MKC 18F de 200 µ? de espesor para la fase inversa.

Paso 1: Preparación de 2 , 4-Dicloro-5-nitropirimidina . 5-Nitrouracilo, se trató con oxicloruro ded fósforo y , N -dimeti lani lina , de acuerdo con el procedimiento de Whittaker (J. Chem. Soc. 1951, 1565), para dar el compuesto del título, que también se encontraba disponible de City Chemical (West Haven, CT) .

Paso 2 : Preparación de t-butil éster del ácido 2- (2-dietilamino-5-nitropirimidin-4-ilamino) -3- (4-hidroxifenil) propiónico . A una solución de ácido 2 -amino- 3 - ( 4 -hidroxifenil ) propiónico, (30.6 g, 0.129 mol) en THF (250 mL) a -10°C sé agregó 2 , 4-dicloro-5-nitropirimidina (25g, 0.129 mol), manteniendo la temperatura por debajo' de 5°C durante el agregado. Una vez que el agregado estuvo completo, se agregó N, -diisopropileti lamina (33.7 mL, 0.194 mol) gota a gota. Luego de agitar durante 1 h a -10°C, se agregó lentamente dietilamina (66.73 mL, 0.645 mol) y luego la mezcla de reacción se entibió hasta temperatura ambiente toda la noche. La mezcla de reacción se diluyó con éter dietilico (500 mL ) , y la fase orgánica se lavó con ácido cítrico 0.2N (3 x 150 mL) , agua (1 x 150 mL), y 10% de K2C03 (3 x 150 mL) . La fase orgánica se secó ( a2S0 ) , se filtró y se concentró al vacío para obtener como rendimiento un residuo amarillo. El residuo se purificó por cromatografía flash (20% EtOAc/hexanos en gel de sílice) para obtener como rendimiento 37.39 g (67%) del compuesto del título como una espuma amarilla. Rf=0.21 (25% EtOAc/hexanos en gel de sílice).

Paso 3: Preparación de t-butil éster del ácido 2- (2-dietilamino-5-nitropirimidin-4-ilaniiiio) -3- (4-dimetilcarbamoiloxifenil) propiónico . A una solución de t-butil éster del ácido 2 - ( 2 -diet ilamino- 5-nit rop i rimidin- 4 -il amino ) - 3 - ( 4 -hidroxi-fenilo ) propiónico (31.80 g, 0.074 mol) en CH2C12 (600 mL) se agregó DMAP (9.00 g, 0.074 mol) . Luego de 5 minutos se agregó trietilamina (10.23 mL, 0.074 mol) gota a gota. Se agregó cloruro de N,N-dimetilcarbamilo (13.83 mL, 0.110 mol) gota a gota, y la reacción se calentó hasta el reflujo toda la noche. La mezcla de reacción se concentró al vacío y se absorbió en EtOAc (1 L) . La fase orgánica se lavó con ácido cítrico 0.5 M (3 x 250 mL ) , NaHC03 sat. (3 x 250 mL), salmuera (1 x 250 mL), se secó (MgS04), se filtró y se concentró al vacío para obtener como rendimiento 37.0 g (99%) el compuesto del titulo como un sólido blanco, Paso 4 : Preparación de t-butil éster del ácido 2- (2-dietilamino-5-aminopirimidin-4-ilamino) -3- (4-dimetilcarbamoiloxifenil) propiónico . Una mezcla de t-butil éster del ácido 2- (2-dietilamino-5-nitropirimidin-4-ilamino) -3- (4-dimetilcarbamoil-oxifenil ) propiónico (37.0 g, 0.073 mol) y 10% de Pd/C (3.8 g, 10% en peso de Pd) en EtOH (250 mL) se agitó bajo 60 psi de hidrógeno hasta que la TLC (50% de EtOAc/hexanos en gel de sílice) mostró el 100% de conversión al producto (48 horas) . La mezcla de reacción se filtró luego a través de un tapón de Celite y se concentró al vacío para obtener como rendimiento 32.0 g (92%) el compuesto del título como una espuma violeta.

Paso 5: Preparación de t-butil éster del ácido 2- {2-dietilamino-5- [ (4-fluorobencensulfonil) amino] -pirimidin-4-ilamino } -3- (4-dimetilcarbamoiloxifenil) propiónico . Una solución en piridina (120 mL) de t-butil éster del ácido 2- ( 2-dietilamino-5-aminopirimidin-4-ilamino) -3- ( 4-dimet ilcarbamoiloxi-fenil ) propiónico (32.0 g, 0.067 mol) se enfrió hasta -20°C con un baño de hielo seco/CH3CN. La mezcla se agitó durante 30 minutos y luego se agregó cloruro de p-fluorobencensulfonilo (13.18 g 0.067 mol) lentamente. La reacción se agitó a -20 °C durante 4.5 hrs, y luego se agregó 3-dimet ilaminopropil amina (8.52 mL, 0.067 mol), y luego la mezcla se dejó entibiar hasta alcanzar la temperatura ambiente toda la noche. La reacción se concentró al vacío. El residuo se absorbió en EtOAc (1 L) , y la fase orgánica se lavó con ácido cítrico 0.5 M (3 x 900 mL) , agua (1. x 900 mL ) , NaHC03 sat. (3 x 900 mL), salmuera (1 x 900 mL ) , se secó (MgS04), se filtró y se concentró al vacío para obtener como rendimiento un residuo marrón. El residuo se purificó, por cromatografía flash (50% de EtOAc/hexanos en gel de sílice) para obtener como rendimiento 33.04g (77%) el compuesto del título como una espuma amarilla. Rf= 0.54 (3:2 EtOAc/hexanos en gel de sílice) .

Paso 6: Preparación de t-butil éster del ácido 2- {2-dietilamino-5- [ (4-fluorobencensuifonil) metilamino] -pirimidin-4-ilamino} -3- (4-dimetil-carbamoiloxifenil) propiónico . A una solución de t-bulil éster del ácido 2-{2-dietilamino-5-[(4-fluorobencensulfonil)-ami o]-pir imidin-4 -i lamino }-3- (4-dimetil-carbamoiloxifenil ) -propiónico (33.04 g, 0.052 mol) en acetona (510 mL) se agregó K2C03 (8.69 g, 0.063 mol), y la mezcla se agitó durante 10 min a temperatura ambiente. Sulfato de dimetilo (5.95 mL, 0.063 mol) se agregó luego lentamente, y la mezcla de reacción se agitó toda la noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentró al vacío, y el residuo se absorbió en EtOAc (600 mL) . La fase orgánica se lavó con agua (2 x 400 mL) , salmuera (2 x 400 mL), se secó MgSC , se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía flash (2:1 hexanos /EtOAc en gel de sílice) para obtener como rendimiento 28.69 g (85%) el compuesto del título como un sólido blanco.

Paso 7: Preparación de clorhidrato del ácido 2- {2-dietilamino-5- [ (4-fluorobencensulfonil) metilamino] -pirim±din-4-ilamino}-3- (4-dimetilcarbamoiloxifenil) propiónico . Una solución en ácido fórmico (500 inL) de t-butil éster del ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4-fluorobencensulfonil) metilamino ] -pirimidin-4-i lamino } -3- (4-dimetilcarbamoiloxifenil) propiónico (28.69 g, 0.044 mol) se calentó hasta 70°C durante 2 h, y luego se concentró al vacio.. El residuo se disolvió nuevamente en ácido fórmico (500 mi) , y luego se calentó nuevamente a 70°C durante 2 h, y luego se concentró nuevamente al vacío. El residuo se disolvió nuevamente en ácido fórmico (500 mi) , y luego se calentó nuevamente a 70 ° C durante 1 h. La solución se redujo en volumen en un 90%, y luego se trató con HC1 1.0M (44 mL, 0.044 mol) y agua destilada (490 mi.) . La solución homogénea resultante se concentró al vacío, y luego se agregó agua destilada (100 mL) , y la solución homogénea se liofilizó durante 14 días para obtener como rendimiento 26.76 g (96%) el compuesto del titulo, como un sólido blanco. XH R N (CD3OD) d 7.96-7.92 (m, 2H) , 7.45-7.25 (m, 4H) , 7.06-6.95 (m, 3H) , 5.00-4.93 (m, 1H), 3.55-3.40 (m, 5H), 3.34-3.20 (m, , 2H), 3.15-3.05 (m, 5H) , 3.07-3.00 (m, 3H), 1.22 (bs, 6 H) 13C RMN (CD3OD) d 171.6, 168.3, 154.5, 144.4, 137.9, 135.1, 135.0, 134.1, 125.5, 120.6, 120.3, 39.6, 39.2, 39.1, 15.2 MS m/z 589 (MH+) Ejemplo 2 Preparación del ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4- clorobencen-sulfonil) met i 1 amino ] i imidin-4- i lamino } -3- ( 4 -dimeti 1 carbamoi loxi feni 1 )propiónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 6 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 1. El paso 5 se realizó usando cloruro de -clorobencensulfonilo en lugar de cloruro de 4-fluorobencensulfonilo . :H RMN (CD3OD) d 7.88-7.85 (m, 2H), 7.72-7.69 (m, 2H), 7.39-7.25 (m, 2H), 7.14-6.92 (m, 3H), 5.00-4.85 (m, 1H) , 3.60-3.50 (m, 1H), 3.37-3.28 (m, 6H), 3.15-3.07 (m, 6H) 3.01 (bs, 3H), 1.22 (bs, 6H) 13C RMN (CD3OD) d 208.6, 145, 3, 134.9, 128.8 , 124.9, 124.5, 124.4, 116.3, 50,2, 30.4, 30.0, 6.0 S m/z 605 (MH+) Ejemplo 3 Preparación del ácido 2- { 2-diet ilamino-5- [ ( 3, 4- difluorobencensulfonil) meti lamino] pirimidin-4- ilamino } -3- ( -dimeti 1 -carbamoi loxi feni 1 ) pro iónico Los pasos 1, 2, 3, 4r 6 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 1. El paso 5 se realizó usando cloruro de 3 , 4 -di fluorobencensulfonilo en lugar de cloruro de 4-fluorobencensulfonilo . XH RMN (CD3OD) d 7.84-7.77 (m, 1H) , 7.67 (bs, 1H), 7.58-7.53 (ra, 1H) , 7.37-7.34 (m, 1H) , 7.22-7.18 (m, 1H), 7.08-7.02 (m, 3H), 4.83-4.76 (m, 1H), 3.55-3.54 (m, 4H), 3.35-3.33 (m, 1H), 3.23-3.12 (m, 6H), 3.03-2.99 (m, 3H) , 1.19 (bs, 6H) 13C RMN (CD3OD) 5 178.3, 177.8, 163.2, 162.6, 159.3, 159.1, 155.9, 155.7, 154.3, 153.0, 152.5, 152.4, 138.4, 138.1, 134.0, 129.5, 125.3, 122.4, 122.2, 121.7, 121.4, 115.3, 59.3, 46.0, 42.4, 41.9, 40.4, 39.9, 39.2, 39.1, 15.76 MS m/z 607.2 (MH+) Ejemplo 4 Preparación del ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 3 , 4- diclorobencensulfonil) met i 1 amino ] pirimidin-4- ilamino}-3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxifenil ) propiónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 6 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 1. El paso 5 se realizó usando cloruro de 3 , -diclorobencensulfonilo en lugar de cloruro de 4 -fluorobencensul foni lo . 1ñ RMN (CD3OD) 5 8.00-7.98 (m, 1H), 7.83-7.74 (m, 2H) , 7.37-7.34 (m, 1H), 7.21-7.20 (m, 1H), 7.10-7.02 (m, 3H) , 4.85-4.83 (m, 1H), 3.55-3.53 (m, 2H), 3.35-3.33 (m, 1H) , 3.21-3.12 (m, 6H), 3.04-2.99 (m, 6H), 1.19 (bs, 6H) 13C RMN (CD3OD) 6 176.4, 166.2, 161.7, 161.2, 158.0, 157.8, 152.8, 151.5, 150.5, 140.2, 139.8, 139.5, 136.8, 135.8, 133.9, 132.6, 132.0, 129.8, 123.8, 113.7, 113.4, 57.8, 44.6, 40.8, 40.4, 38.7, 38.3, 37.7, 37.5, 14.1 MS m/z 639.1 (MH+) Ejemplo 5 Preparación del ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ (bencensulfonil) met i lamino ] -pirimidin-4-ilamino}-3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxifenil )propoónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 6 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 1. El paso 5 se realizó usando cloruro de bencensulfonilo en lugar de cloruro de 4-fluorobencensulfonilo. 2H RMN (CD3OD) d 8.14 (bs, 1H), (7.85-7.84 (m, 1H), 7.8-7.78 (m, 1H) , 7.69-7.66 (m, 2H), 7.40-7.37 (m, 1H), 7.21-7.195 (m, 1H), 7.04-7.03 (m, 2H), 7.95-7.90 (m, 1H), 5.52 (bs, 1H), 3.54-3.53 (m, 2H) , 3.36-3.33 (m, 6H) , 3.13-3.12 (m, 3H), 3.01-3.00 (m, 3H) , 1.20-1.17 (m, 6?) 13C RMN (CD3OD) d 165.9, 152.8, 136.7, 135.8, 132.6, 131.6, 130.2, 123.8, 44.7, 37.5, 14.0 MS m/z 571.2 (MH+) Ejemplo 6 Preparación del ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 2- fluorobencensulfonil)metilamino] pirimidin-4- i lamino } -3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxifenil )prop iónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 6 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 1. El paso 5 se realizó usando cloruro de 2-f luorobencensulfonilo en lugar de cloruro de 4 - fluorobencensul foni lo . 2? RMN (CD3OD) d 8.31 (bs, 1H) , 7.94-7.85 (m, 2H) , 7.57-7.44 (m, 3H) , 7.34-7.30 (m, 1H), 7.15-7.12 (m, 2H) , 5.00-4.85 (1H), 3.63-3.62 (m, 4H) , 3.50-3.42 (m, 1H) , 3.34-3.30 (m, 4H) , 3.29-3.22 (m, 4H), 3.11-3.10 (m, 2H) , 1.28 (bs , 6H) 13C RMN (CD3OD) d 176.5, 166.4, 163.1, 160.4, 159.7, 157.7, 152.8, 151.5, 150.7, 138.5, 138.3, 136.7, 133.7, 132.5, 132.2, 127.1, 123.7, 119.9, 119.6, 113.4, 57.8, 44.6, 40.6, 39.0, 38.4, 37.7, 37.5, 14.1 Ejemplo 7 Preparación del ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 3- fluorobencensulfonil) meti lamino ]pirimidin-4- ilamino}-3 - ( 4 -dirtiet ilcarbamoi loxifenil ] propiónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 6 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 1. El paso 5 se realizó usando cloruro de 3-fluorobencensulfonilo en lugar de cloruro de 4-fluorobencensulfonilo . 1H RMN (CD3OD) d 8.15-8.12 (bs, 1H), 7.72-7.68 (m, 1H), 7.63-7.60 (m, 1H), 7.53-7.52 (m, 1H), 7.38-7.35 (m, 1H) , 7.21-7.20 (m, 1H), 7.10-6.99 (m, 3H), 4.87-4.86 (m, 1H) , 3.54-3.53 (m, 4H), 3.35-3.34 (m, 3H) , 3.15-3.12 (m, 4H), 3.05-3.00 (m, 4H) , 1.20 (bs, 6H) 13C RMN (CD3OD) d 166.1, 153.1, 136.9, 134.1, 132.8, 126.5, 124.1, 123.2, 122.9, 117.7, 117.4, 103.4, 45.0, 38.0, 14.3 S m/z 589.2 (MH+) Ejemplo 8 Preparación del ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4- fluorobencensulfonil ) isopropilamino ]pirimidin-4- i lamino } -3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxifenil ) propiónico Los pasos 1, 2 y 3 se realizaron como para el Ejemplo 1. ? partir de entonces, los pasos 4 y 6 se lograron en un pote, de acuerdo con el siguiente procedimiento. A partir de entonces, los pasos 5 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 1. XH RMN (CD3OD) d 8.20-8.16 (m, 1H), 7.95-7.84 (m, 2H), 7.36-7.25 (m, 3H), 7.24-7.15 (m, 3H), 7.07-6.98 (m, 3H) , 5.07-5.05 (m, 1H), 4.90-4.86 (m, 1H), 4.65-4.62 (m, 1H), 4.49-4.41 (m, 1H), 3.63-3.56 (m, 3H) , 3.38-3.31 (m, 2H), 3.27-3.11 (m, 2H), 3.00-2.99 (m, 3H) , 1.27-1.21 (m, 6H), 1.05-0.99 (m, 6H) 13C RMN (CD3OD) 6 175.8, 175.5, 169.6, 166.3, 165.9, 163.5, 163.4, 157.7, 153.0, 152.9, 152.3, 138.1, 136.4, 136.1, 133.1, 133.0, 133.0, 132.9, 132.7, 132.3, 123.8, 118.8, 118.7, 118.5, 118.4, 107.5, 57.6, 57.2, 54.7, 44.7, 38.7, 38.1, 37.6, 37.5, 23.0, 22.9, 22.2, 22.0, 14.1, 14.0 Procedimiento alternativo en un pote para la preparación del t-butil éster del ácido 2- (2-dietilamino-5-isopropilaminopirimidin-4-il ) -3- (4-dimetilcarbamoiloxifenil) propiónico . Una mezcla de t-butil éster del ácido 2- (2-dieti lamino-5-nitropirimidin-4-ilamino) -3- (4-dimetilcarbamoiloxifenil ) propiónico (5.0 g, 0.010 mol), ácido acético glacial (10 gotas), acetona (2.19 mL, 0.030 mol), y óxido de platino (0.250 g, 5% en peso) en EtOH (1 5 mL) se hidrogenó a 45 psi de hidrógeno hasta que la TLC (50% de EtOAc/hexanos ) mostró el 100% de conversión al producto (20 horas) . La mezcla de reacción se filtró luego a través de un tapón de Celite y se concentró al vacío para obtener como rendimiento un residuo marrón. El residuo se purificó por cromatografía flash (4:1 EtOAc/hexanos) para obtener como rendimiento 3.54 g (70%) 9 como una espuma púrpura.

Ejemplo 9 Preparación del ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4-fluorobencensulfonil)etilamino]pirimidin-4-ilamino}- 3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxi fenil ) ropiónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 5 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 1. El Paso 6 se realizó usando yoduro de etilo en lugar de sulfato de dimetilo. 1ñ RMN (CDC13) d 0.89 (t, J = 7.2, 1.8H) 1.06 (t, J = 7.1, 1.2H) 1.10-1.30 (m, 6H), 2.97 (s, 3H) , 3.05 (s, 3H), 3.10-3.90 (m, 8H) , 4.82 (q, J = 5.4, 0.6H), 4.91 (q, J = 6.1, 0.4H), 6.80-7.45 (m, 8H), 7.77 (m, 2H) , 12.44 (bs, 1H) S m/z 603.3 (MH+) Ejemplo 10 Preparación del ácido 2 - { 2 -di et i lamino- 5 - [ ( 3 , 4 - difluorobencensulfonil) i sopropi lamino jpirimidin-4- i lami o } -3- (4 -dimetilocarbamoiloxifenil ) propiónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 6 y. 7 se realizaron como para el Ejemplo 8. El paso 5 se realizó usando cloruro de 3 , -difluorobencensulfonilo en lugar de cloruro de 4-fluorobencensulfonilo . 1R R N (CD3OD) d 8.20-8.19 (m, 1H) , 7.84-7.78 (m, 1H) , 7.70-7.64 (m, 1H) , 7.54-7.48 (m, 1H) , 7.39-7.31 (m, 1H), 7.20-7.17 (m, 1H), 7.05-6.96 (m, 2H), 4.91-4.89 (m, 1H) , 4.70-4.68 (m, 1H) , 4.48-4.41 (m, 2H) , 3.60-3.58 (m, 3H) , 3.34-3.33 (m, 1H), 3.27-3.20 (m, 1H) , 3.09-3.08 (m, 2H), 2.98-2.97 (m, 2H), 1.28-1.19 (m, 6H) , 1.06-0.98 (m, 6H) , 0.83-0.81 (m, 1H) 13C RMN (CD3OD) d 177.6, 177.2, 167.9, 164.9, 164.8, 159.2, 159.1, 155.7, 154.5, 154.4, 152.4, 152.3, 140.4, 140.3, 137.8, 134.3, 133.9, 129.3, 129.2, 125.4, 122.6, 122.5, 122.4, 122.2, 121.5, 121.2, 109.1, 59.5, 59.1, 56.7, 56.6, 46.4, 46.3, 39.6, 39.3, 39.2, 24.7, 24.5, 23.9, 23.6, 15.7, 15.6 Ejemplo 11 Preparación del ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4- clorobencensulfonil) isopropi lamino ] pirimidin-4- ilamino}-3- ( 4 -dimet ilcarbamoiloxifenil ] propión ico Los pasos 1, 2, 3, 4, 6 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 8. El paso 5 se realizó usando cloruro de 4-clorobencensulfonilo en lugar de cloruro de 4 - fluorobencensul fonilo . 1K RMN (CD30D) d 8.18-8.17 (m, 1H), 7.85-7.78 (m, 1H), 7.62-7.58 (m, 1H), 7.38-7.35 (m, 1H), 7.34-7.24 (m, 1H), 7.17-7.16 (m, 1H), 7.10-7.05 (m, 2H), 7.04-6.98 (m, 2H) , 4.98-4.87 (m, 1H), 4.73-4.68 (m, 1H), 4.55-4.38 (m, 2H), 3.70-3.52 (m, 3H), 3.40-3.30 (m, 1H), 3.28-3.18 (m, 1H), 3.17-3.08 (m, 2H), 3.05-2.98 (m, 2H), 1.25-1.20 (m, 6H) , 1.04-0.96 (m, 6H), 0.80-0.77 (m, 1H) 13C RMN (CD3OD) d 175.7, 175.5, 166.2, 165.8, 169.6, 163.5, 163.4, 157.6, 152.9, 152.8, 138.0, 136.3, 136.1, 133.1, 133.0, 132.9, 132.7, 132.2, 123.8, 118.8, 118.6, 118.5, 118.5, 118.3, 107.5, 57.6, 57.2, 54.7, 44.6, 38.6, 38.1, 37.6, 37.5, 22.9, 22.8, 22.2, 21.9. 14.1, 13.9 Ejemplo 12 Preparación del ácido 2- { 2-dietilaitiino-5- [ ( 3 , 4- difluorobencensulfonil) etilamino] pirimidin- - i lamino } -3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxifenil ) propiónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 6 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 9. El paso 5 se realizó usando cloruro de 3 , 4 -dif luorobencensulfonilo en lugar de cloruro de 4-f luorobencensulfonilo . ?? RMN (CD3OD) d 8.15-8.14 (m, 1H) , 7.80-7.75 (m, 1H) , 7.73-7.62 (m, 1H), 7.60-7.49 (m, 1H), 7.30-7.18 (m, 1H) , 7.16-7.00 (m, 2H), 5.58-5.50 (m, 1H), 4.90-4.83 (m, 1H) , 5.78-5.70 (m, 1H) , 3.85-3.75 (m, 1H), 3.65-3.54 (m, 3H) , 3.40-3.23 (m, 5H), 3.18-3.10 (m, 3H) , 3.05-2.98 (m, 3H), 1.25-1.15 (m, 3H), 1.18-1.05 (t, 1.5H), 1.02-1.00 (t, 1.5H) 13C RMN (CD3OD) d 165.8, 152.7, 145.7, 136.4, 136.3, 132.5, 132.2, 127.5, 123.6, 120.7, 120.4, 81.4, 57.0, 44.3, 38.5, 38.1, 37.4, 14.9, 14.6, 14.1, 14.0 S m/z 621.5 (MH+) Ejemplo 13 Preparación del ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4- clorobencensulfonil) etilamino ] pirimidin- 4 -ilamino } - 3 - ( -dime t i 1 carbamo ilo i fen i 1 ) propiónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 6 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 9. El paso 5 se realizó usando cloruro de 4-clorobencensulfonilo en lugar de cloruro de 4-f luorobencensulfonilo . 1H RMN (CD3OD) d 8.15-8.14 (m, 1H), 7.84-7.79 (m, 1H) , 7.67-7.61 (m, 1H) , 7.37-7.33 (m, 1H), 7.22-7.18 (m, 1H) , 7.14-7.13 (m, 1H) , 7.06-7.00 (m, 3H) , 4.80-4.75 (m, IH), 4.18-4.10 (m, 1H) , 3,65-3.30 (m, 3H), 3.28-3.20 (m, 3H), 3.18-3.08 (m, 2H), 3.03-2.98 (m, 2H) , 2.05-2.04 (m, 1H), 1.30-1.16 (m, 9H), 1.10-1.08 (t, 1.5H), 0.99-0.95 (t, 1.5H) 13C RMN (CD3OD) d 176.2, 176.1, 166.7, 162.7, 162.3, 157.6, 152.9, 142.0, 138.8, 136.5, 132.8, 132.5, 132.0, 131.8, 123,8, 111.7, 111.4, 57.9, 57.8, 44.9, 38.9, 38.3, 37.8, 37.7, 15.1, 14.9, 14.3, 14.2 MS m/z 619.4 (MH+) Ejemplo 14 Preparación del ácido 2 - { 2 -diet ilamino-5- [ ( 4 -fluorobencensulfonil) cicl opropilmet i lamino ] pirimidin -4-ilamino}-3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxifenil )propiónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 5 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 1. El Paso 6 se realizó usando bromomet ilciclopropano y carbonato de cesio en lugar de sulfato de dimetilo y carbonato de potasio. 1R RMN (CDCI3) d -0.2-0.2 (m, 2.4H) , 0.2-0.45 (m, 1.6H) , 0.54 (m, 0.6H) , 0.85 (m, 0.4H), 1.00-1.40 (m, 6H) , 2.80-3.80 (m, 14H) , 4.79 (q, J = 5.5, 0.6H) , 4.91 (q, J = 6.3, 0.4H), 6.70-7.40 (m, 8H) , 7.77 (m, 2H) , 10.26 (bs, 1H) MS m/z 629.2 (MH+) Ejemplo 15 Preparación del ácido 2- { 2-dietilaittino-5- [ ( 3 , 5- difluorobencensulfonil) metilamino ] pir imidin- 4- ilamino}-3-( 4 -dimetilcarbamoiloxifenil ] propión ico Los pasos 1, 2, 3, 4, 6 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 1. El paso 5 se realizó usando cloruro de 3 , 5 -di f luo robencensul foni lo en lugar de cloruro de 4-fluorobencensulfonilo . xti RMN (CD3OD) d 7.68-7.67 (m, 1H) , 7.67-7.56 (m, 2H) , 7.42-7.40 (m, 2H) , 7.31-7.30 (m, 1H), 7.26-7.23 (m, 2H), 5.20-4.90 (m, 1H) , 4.35-4.33 (m, 1H) , 3.78-3.74 (m, 4H) , 3.57-3.54 (2H) , 3.38-3.33 (m, 2H) , 3.26-3.21 (m, 2H) , 2.41-2.39 (m, 2H), 2.26-2.25 (m, 2H) , 1.50-1.38 (m, 6H) 13C RMN (CD3OD) d 162.5, 162.3, 159.2, 159.0, 148.0, 146.1, 132.2, 127.8, 127.7, 127.6, 118.9, 109.1, 109.0, 108.7, 108.6, 106.2, 105.8, 52.5, 39.6, 34.1, 32.9, 9.5 Ejemplo 16 Preparación del ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 3 , 5- difluorobencensulfon' il) etilamino] pirimidin-4- i lamino ? -3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxifenil )propiónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 5 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 15. El Paso 6 se realizó usando yoduro de etilo en lugar de sulfato de dimetilo . XH RMN (CD3OD) d 7.45-7.43 (m, 1H), 7.42-7.18 (m, 2H), 7.21-7.16 (m, 2H), 7.07-7.06 (m, 1H), 7.04-6.97 (m, 2H) , 5.51 (bs, 1H), 4.86-4.82 (m, 1H), 4.72-4.66 (m, 1H) , 3.84-3.77 (m, 1H), 3 : 59-3.50 (m, 3H), 3.34-3.31 (m, 2H) , 3.12-3.10 (m, 3H), 2.99-2.96 (m, 3H), 1.22-1.14 (m, 9H), 1.10-1.05 (t, 1.5H), 0.97-0.95 (t, 1.5H) 13C RMN (CD3OD) d 159.9, 150.9, 150.1, 134.0, 130.0, 129.7, 121.2, 107.9, 86.7, 42.0, 41.9, 36.3, 35.2, 35.1, 12.8, 12.5, 11.9, 11.8 Ejemplo 17 Preparación del ácido 2 - { 2 -dieti 1 amino- 5 - [ ( 2 , - difluorobencensulfonil)metilamino]pirimidin-4- i lamino } -3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxifenil )propiónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 6 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 1. El paso 5 se realizó usando cloruro de 2 , 4 -difluorobencensulfonilo en lugar de cloruro de 4-fluorobencensulfonilo . 1H RMN (CD3OD) d 8.16-8.11 (m, 1H), 7.59-7.56 (m, 2H) , 7.48-7.45 (mf 2H) , 7.26-7.24 (m, 3H), 5.21-5.16 (m, 1H) , 3.79-3.77 (m, 4H) , 3.57-3.54 (m, 3H) , 3.48-3.46 (m, 2H) , 3.44-3.34 (m, 3H) , 3.22-3.21 (p?, 3H) , 1.45-1.44 (m, 6H) 13C RMN (CDC1) d 180.2, 170.3, 166.6, 150.3, 129.0, 128.9, 128.7, 125.9, 125.4, 117.5, 117.4, 116.5, 114.8, 107.7, 107.4, 95.5, 90.8, 68.0, 65.1, 55.7, 50.8, 37.6, 36.4, 31.9, 31.7, 31.6, 13.2, 9.4, 8.3, 7.8 Ejemplo 18 Preparación del ácido 2 - { 2 -diet i lamino- 5 - [ ( 2 , 4 - difluorobencensulfonil) et i lamino] pirimidin-4- i lamino } -3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxifenil ) propiónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 5 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 17. El Paso 6 se realizó usando yoduro de etilo en lugar de sulfato de dimetilo . ?? RMN (CD3OD) d 8.15 (bs, 1H) , 7.91-7.76 (m, 1H), 7.32-7.30 (m, 2H), 7.20-7.19 (m, 2H) , 7.04-7.00 (m, 2H) , 4.84-4.83 (m, 1H) , 4.74-4.67 (m, 1H) , 4.14-4.07 (m, 1H), 3.92-3.82 (m, 1H) , 3.51-3.49 , (m, 3H) , 3.34-3.31 (m, 3H), 3.12-2.99 (m, 2H), 2.98-2.97 (m, 2H), 2.03-2.02 (m, 1H) , 1.26-1.17 (m, 6H) , 1.10-1.06 ( t , 1.5H), 1.03-0.98 (t, 1.5H) 13C RMN (CD3OD) d 173.6, 173.3, 171.4, 167.7, 164.3, 161.2, 159.9, 159.3, 157.1, 156.7, 155.2, 152.4, 151.0, 150.3, 134.0, 133.3, 133.1, 132.9, 130.0, 123.2, 122.9, 122.8, 121.3, 121.2, 112,0, 111.8, 111.6, 111.5, 107.7, 107.2, 106.0, 105.9, 105.6, 105.2, 60.0, 54.8, 42.0, 36.5, 35.9, 35.3, 35.1, 19.3, 13.0, 12.9, 12.7, 11.9, 11.8 Ejemplo 19 Preparación del ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 3.5- diclorobencensulfoníl) met i lamino] pirimidin-4- i lamino } -3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxifeni 1 ) propióni co Los pasos 1, 2, 3, 4, 6 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 1. El paso 5 se realizó usando 3 , 5-diclorocloruro de bencensulfonilo en lugar de cloruro de 4 - f luorobencensul foni lo . 1H RMN (CD3OD) d 7.84-7.82 (m, 1H), 7.76-7.75 (m, 3H) , 7.34-7.32 (m, 1H), 7.19-7.10 (m, 1H), 7.03-7.00 (m, 2H) , 5.50 (bs, 1H), 4.83-4.82 (m, 1H) , 4.74-7.73 (m, 1H) , 3.55-3.38 (m, 4H), 3.34-3.32 (m, 2H), 3.15-3.11 (m, 4H) , 3.02-2.99 (m, 3H), 1.18-1.15 (m, 6H) 13C RMN (CD3OD) 5 157,1, 155.2, 150.1, 149.7, 140.1, 135.9, 134.3, 132.9, 130.0, 129.9, 126.01 121.2, 110.7, 55.2, 54.8, 42.0, 38.5, 38.1, 36.5, 35.9, 35.2, 35.1, 11,9 MS m/z 63-0.1 (MH+) Ejemplo 20 Preparación del ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 3 , 5- diclorobencensulfonil)etilamino]pirimidin-4- ilamino}-3- ( 4-dimetilcarbamoiloxifenil ) propiónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 5 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 19. El Paso 6 se realizó usando yoduro de etilo en lugar de sulfato de dimet i lo . 1H RMN (CD30D) d 8.15 (bs, 1H), 7.84-7.84-7.79 (m, 1H), 7.76-7.74 (m, 2H), 7.33-7.30 (m, 1H) , 7.22-7.11 (m, 2H), 7.04-6.98 (m, 1H) , 5.51 (bs, 1H) , 4.86-4.82 (m, 1H), 4.72-4.67 (m, 1H), 3.77-3.75 (m, 1H), 3.60-3.50 (m, 3H) , 3.34-3.29 (m, 2H), 3.27-3.22 (m, 2H) , 3.12-3.11 (m, 2H), 2.99-2.98 (m, 2H), 1.23-1.14 (m, 6H) , 1.10-1.05 (t, 1.5H), 0.99-0.94 (t, 1.5H) 13C RMN (CD3OD) d 173.6, 173.4, 163.7, 159.9, 159.3, 157.3, 156.8, 155.2, 155.1, 152.1, 150.8, 150.2, 141.4, 141.2, 135.9, 134.0, 132.7, 130.0, 129.7, 125.8, 125.7, 121.3, 121.2, 107.9, 107.4, 54.8, 54.7, 42.0, 36.4, 35.8, 35.3, 35.1, 12.8, 12.5, 11.9, 11.8 MS m/z 653.2 (MH+) Ejemplo 21 Preparación del ácido 2 - { 2 -diet il amino- 5 - [ ( 4 - fluorobencensulfonil) -n- [prop i lamino] pir imidin-4- i lamino } -3- ( -dimeti lcarbamoiloxifenil ) propiónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 5 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 1. El Paso 6 se realizó usando yoduro de 1-propilo en lugar de sulfato de dimetilo. 1H RMN (CDC13) d 0.75 (m, 3H) , 1.00-1.50 (m, 8H) , 3.00 (s, 3H), 3.08 (s, 3H), 3.20-3.70 (m, 8H), 4.79 (q, J = 6.3, 0.6H), 4.91 (q, J = 6.6, 0.4H), 5.73 (bs, 0.6H) , 5.92 (bs, 0.4H), 6.90-7.45 (m, 7H) , 7.76 (m, 2H) MS m/z 617.2 (MH+) Ejemplo 22 Preparación del ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( -fluorobencensulfonil) alilamino ] pir imidin- - i lamino } - 3- (4-dimetilcarbamoiloxifenil) ropiónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 5 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 1. El Paso 6 se realizó usando bromuro de alilo en lugar de sulfato de dimetilo. 1H RMN (CDC13) 6 1.20 (m, 6H) , 2.98 (s, 3H) , 3.06 (s, 3H), 3.10-4.30 (m, 8H) , 4.75-4.95 (m, 1H) , 5.07 (m, 2H) , 5.48 (m, 0.6H), 5.67 (m, 0.4H)r 6.90-7.45 (m, 8H), 7.76 (m, 2 H), 11.07 (bs, 1H) MS m/z 615.2 (MH+) Ejemplo 23 Preparación del ácido 2- { 2-diet i lamino-5- [ ( 4 - fluorobencensulfonil) isobuti lamino ]pirimidin- - ilamino}-3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxifenil jpropiónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 5 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 1. El Paso 6 se realizó usando yoduro de isobutilo en lugar de sulfato de dimetilo. MS m/z 631.2 (MH+) Ejemplo 24 Preparación del ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4- fluorobencensulfonil)-n-butilamino]pirimidin-4- ila ino}-3- ( 4 -dimet ilcarbamoi loxifeni 1 ) propiónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 5 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 1. El Paso 6 se realizó usando yoduro de 1-butilo en lugar de sulfato de dimetilo. 1R RMN (CDC13) d 0.82 (q, J = 7.1, 3H) , 1.05-1.40 (m, 10H), 3.01 (s, 3H) , 3.10 (s, 3H), 3.15-3.80 (m, 8H) , 4.75 (q, J = 6.3, 0.6H), 4.91 (q, J = 5.9, 0.4H), 5.79 (d, J = 5.4, 0.6H), 5.91 (d, J = 6.6, 0.4H), 7.00-7.40 (m, 7H), 7.77 (m, 2H) Ejemplo 25 Preparación del ácido 2 - { 2-diet ilamino-5- [ ( 2 , 5- difluorobencensulfonil) metilamino ]pirimidin-4- ilamino}-3- ( -dimetilcarbamoiloxi feni 1 )propiónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 6 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 1. El paso 5 se realizó usando cloruro de 2 , 6-di fluorobencensul fonilo en lugar de cloruro de - fluorobencensul foni 1 o . XH RMN (CD3OD) d 8.38-8.37 (m, 1H) , 7.99-7.95 (m, 1H) , 7.55-7.54 (m, 2H), 7.50-7.42 (m, 2H), 7.27-7.22 (m, 2H) , 5.08-5.06 (m, 1H), 3.76-3.74 (m, 4H), 3.59-3.54 (m, 3H) , 3.49-3.42 (m, 4H), 3.36-3.34 (m, 2H), 3.23-3.21 (m, 2H) , 1.40 (bs, 6H) 13C RMN (CD3OD) d 161.4, 159.2, 155.8, 153.1, 148.1, 147.1, 133.6, 132.0, 127.8, 119.0, 111.1, 110.8, 110.7, 108.5, 105.8, 94.8, 86.4, 66.7, 54.0, 52.8, 39.7, 35.8, 34.2, 33.7, 32.9, 32.8, 9.4 Ejemplo 26 Preparación del ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 2 , 3- difluorobencensulfonil) eti lamino] pirimidin-4- ilamino}-3-( 4 -dimeti lcarbamoiloxi fenil) propiónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 6 , 7 se realizaron como para el Ejemplo 1. El paso 5 se realizó usando cloruro de 2 , 3-dif luorobencensulfonilo en lugar de cloruro de 4 -fluorobencensul fonilo . El cloruro de 2 , 3-dif luorobencensulfonilo se preparó a través del siguiente procedimiento. XH RMN (CD3OD) d 8.32 (bs, 1H), 7.90-7.80 (m, 2H), 7.59-7.48 (m, 3H) , 7.27-7.23 (m, 2H) , 5.09-5.08 (m, 1H) , 3.77-3.70 (m, 4H), 3.60-3.51 (m, 3H), 3.50-3.42 (m, 2H) , 3.39-3.31n (a, 3H) , 3.32-3.18 (m, 2H) , 1.43-1.41 (m, 6H) 13C RMN (CD3OD) d 170.4, 160.8, 158.1, 156.1, 153.0, 151.6, 150.5, 148.9, 148.2, 147.3, 147.2, 143.9, 143.5, 142.6, 141.1, 140.9, 131.8, 127.7, 125.1, 123.8, 120.8, 120.6, 119,2, 40.5, 35.7, 33.4, 32.9, 32.7, 9.0 Preparación de cloruro de 2,3-difluorbencensulfonilo . El siguiente procedimiento se ejecutó usando dos matraces. En el primer matraz, se disolvió, 2 , 3 -di fluoroani 1 i na (2.0 g, 0.015 mol) en HC1 concentrado (15.9 mL) , y la solución resultante se enfrió hasta -5°C, usando un baño de hielo/NaCl. Una solución de nitrito de sodio (1.18 g, 0.017 mol) en agua destilada (13.6 mL) se agregó en porciones con agitación, mientras se mantenía la temperatura por debajo de 0°C, y la mezcla se agitó durante 10 min. En el segundo matraz, se agregó cloruro de tionilo (5.08 mL, 0.069 mol) gota a gota a agua destilada (30.6 mL), que se había enfriado previamente hasta -5°@ usando un baño de hielo/ NaCl. La solución resultante se dejó entibiar hasta alcanzar la temperatura ambiente, y luego se agregó Cu(I)Cl (0.08 g, 0.77 mmol), y luego la mezcla de reacción se enfrió nuevamente hasta -5°C. Con agitación y enfriamiento continuos, los contenidos del primer matraz se agregaron en porciones de 2 mL a los contenidos del segundo matraz, y la mezcla se agitó durante 30 min, durante cuyo tiempo se formó un precipitado. El precipitado se aisló por filtración, se enjuagó con agua fría, y se almacenó al vacío para dar 3.25 g (98%) 10 como un sólido blanco.

Ejemplo 27 Preparación del ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4- fluorobencensulfonil) proparailamino] pirimidin- 4 - ilamino}-3- ( -dimetilcarbamoiloxifenil )propiónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 5 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 1. El Paso 6 se realizó usando bromuro de propargilo en lugar de sulfato de dimetilo . 2H RMN (CDCI3) d 1.15 (m, 6H), 2.27 (d, J = 2.1, 1H) , 2.97 (s, 3H), 3.06 (s, 3H), 3.10-3.70 (m, 6H), 3.75 (dd, J = 17.7, 2.0, 0.6H) , 3.95 (dd, J = 18.1, 2.0, 0.4 H) , 4.51 (dd, J = 19.5, 2.2, 0.6H), 4.54 (dd, J = 18.1, 2.2, 0.4H) , 4.79 (q, J = 5.9, 0.6H) , 4.88 (q, J = 6.6, 0.4H), 6.42 (bd, 0.4H) , 6.65 (bs, 0.6H), 6.85-7.30 (m, 6H), 7.52 (s, 0.6H), 7.56 (s, 0.411), 7.85 (m, 211) , 8.20 (bs, 1 H) MS m/z 613.2 (MH+) Ejemplo 28 Preparación del ácido 2 - { 2 -diet i 1 amino- 5 - [ ( 2 , 4 - di flúorobencensulfonil) propargi lamino] pirimidin-4- ilaitino}-3 - ( 4-dimetilcarbamoiloxifenil )prop iónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 5 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 17. El Paso 6 se realizó usando bromuro de propargilo en lugar de sulfato de dimet i 1 o . 1H RMN (CDCI3) d 1.16 (q, J = 7.5, 6H), 2.27 (m, 1H) , 2.99 (s, 3H) , 3.09 (s, 3H) , 3.10-3.70 (m, 6H) , 4.04 (dd, J = 17.7, 2.4, 0.6H), 4.24 (dd, J = 17.9, 2.2, 0.4H) , 4.47 (m, 1H), 4.81 (q, J = 5.9, 0.6H), 4.89 (q, J = 6.3, 0.4H), 6.27 (d, J = 7.5, 0.4H), 6.41 (d, J = 5.7, 0.6 H) , 6.90-7.10 (m, 4 H) , 7.16 (d, J = 8.3, 1H), 7.28 (d, J = 8.3, 1H) , 7.55 (bs, 1H), 7.66 (s, 0.6H), 7.67 (s, 0.4H), 7.81 (m, 1H) Ejemplo 29 Preparación del ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4 - fluorobencensulfonil) - (2, 2, 2-trifluoroetil) - amino]pirimidin-4-ilamino}-3- ( -dimet ilcarbamoil- oxifenil ) pro iónico Los pasos 1, 2, 3, 4, 5 y 7 se realizaron como para el Ejemplo 1. El Paso 6 se realizó usando triflato de 2 , 2 , 2-trifluoroetilo y carbonato de cesio en lugar de sulfato de dimetilo y carbonato de potasio . XH RMN ( CDCI3 ) d 1.14 (m, 6H) , 2.98 (s, 3H) r 3.06 (s, 3H) , 3.10-4.20 (m, 8H) , 4.80 (q, J = 5.9, 0.6H) , 4.87 (q, J = 6.2, 0.4H) , 6.09 (d, J = 5.9, 0.4H), 6.18 (bd, 0.6H) , 6.80-7.50 (m, 7H) , 7.55 (bs, 1H) , 7.77 (m, 2H) ; MS m/z 657.2 (MH+) Ejemplo A Ensayo de Adhesión de Integrina a ß?: Adhesión de células Jurkat MR a Fibronectina de Plasma Humano Procedimiento: placas de 96 receptáculos (Placas para EIA Costar 3590) se recubrieron con fibronectina humana (Gibco/BRL, cat #33016-023) a una concentración de 10 µ?/p??, toda la noche a 4°C. Luego se bloquearon las placas con una solución de albúmina de suero de bovino (BSA; 0.3%) en solución salina. Se rotularon células JurkatMR (mantenidas en crecimiento de fase log) con Calcein AM de acuerdo con las instrucciones del fabricante, y se suspendieron a una concentración de 2 x 106 ¦ células/mL en Hepes/Solución salina/BSA. Las células se expusieron luego a compuestos de evaluación y control durante 30 minutos a temperatura ambiente antes de transferir a receptáculos individuales de la placa recubierto con fibronectina. Se permitió que la adhesión ocurra durante 35 minutos a 37°C. Los receptáculos luego se lavaron con leve aspiración y se pipetearon con solución salina nueva. Se cuantificó la fluorescencia asociada con las células adherentes restantes usando un lector de placas de fluorescencia a EX 485/EM 530. Se prepararon cultivos celulares separando primero células JurkatMR de fase fija a 1:10 el dia uno, y 1:2 el día dos para realizar la evaluación el día 3. Las células separadas 1:10 el día uno se separaron 1:4 el día 3 para la evaluación del día 4. Las placas de evaluación se prepararon primero realizando una solución de procesamiento de fibronectina humana Gibco/BRL (cat # 33016-023) en PBS++ , a 10 ug/mL. Luego se recubrió una placa EIA Costar 3590 a 50 L/receptáculo durante 2 horas a temperatura ambiente (aunque también se puede dejar toda la noche a 4°C) . Finalmente la placa se aspiró y se bloqueó con Hepes /amortiguador de solución salina, 100 µ?/receptáculo, durante 1 hora a TA seguido de lavado tres veces con 150 µL de PBS++. Las diluciones del compuesto se lograron preparando diluciones seriales 1:3 de compuestos de la siguiente manera. Para cada placa (4 compuestos /placa ) 600 L se agregaron a 4 Bio-Rad Titertubes en un rack de Titertube. Se agregó compuesto a cada tubo apropiado para dar una concentración 2X usando métodos conocidos en el arte. Usando Falcon Flexiplates, se agregaron 100 µ? de amortiguador de Hepes/ Solución salina o suero humano a las hileras B hasta G. Se usó un pipeteador de múltiples canales configurado a 180 pL con cuatro puntas que espaciaban el pipeteador en forma pareja.

Cada grupo de cuatro tubos se mezcló 5 veces y se transfirieron 180 i de compuesto 2X a la primera columna de cada dilución de compuesto en la Hilera B, dejando la Hilera A vacia. Se agregaron 180 pL a los otros receptáculos en la Hilera A. Las diluciones seriales se realizaron en la placa transfiriendo 50 a la siguiente dilución y mezclando 5 veces, cambiando las puntas cada vez después de mezclar. Las diluciones se detuvieron para la Hilera F. La Hilera G no tenia compuesto presente . Una solución de 20 pg/ml en amortiguador de Hepes/solución salina o suero humano, de anticuerpo 21/6 fue el control positivo y se dejó de lado en un reactivo hasta el agregado a la placa de suspensión de células . El manchado de las células se logró cultivando primero las células JurkatMR de fase log por centrifugado en tubos de 50 mL (1100 rpm durante 5 minutos) . Las células se suspendieron nuevamente en 50 mL de PBS ++ , , se centrifugaron y se suspendieron nuevamente en 20 mL de PBS++. Las células se mancharon agregando 20 L de Calcein ?? durante 30 minutos a TA. El volumen se llevó a 50 mL con amortiguador de Hepes/solución salina y se realizó el recuento de las células, se centrifugaron y se suspendieron hasta 2 x 105 células/mL en amortiguador de Hepes/solución salina o suero humano . Los compuestos se incubaron usando el siguiente procedimiento. En una nueva flexiplate, se agregaron 65 µ? de las células coloreadas a las Hileras B hasta H. Luego 65 L de compuestos 2X se agregaron a las hileras apropiadas después de la configuración de la placa y se mezclaron 3X. Se agregaron 65 µL de anticuerpo 2X-21/6 a la Hilera H y se mezclaron 3X . Finalmente la placa se incubó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La adhesión de la fibronectina se midió usando un lector de placa fluorescente a EX 485/EM 530 luego del siguiente procedimiento de procesamiento. Luego de la incubación, las células se mezclaron 3X y 100 µL se transfirieron a las placas recubiertas con Fibronectina y se incubaron a 37°C durante aproximadamente 35 minutos. Cada placa se lavó, hilera por hilera, pipeteando suavemente 100 L de PBS++ a TA a los laterales de los receptáculos y volteando la placa 90 grados para aspirar. Este procedimiento se repitió por un total de 3 lavados. Cada receptáculo se llenó con 100 pL luego de lavar pipeteando a los lados del receptáculo . Se calculó un valor de IC50 para cada compuesto, tanto en presencia de suero humano como en ausencia de suero humano. La IC50 es la concentración a la cual el crecimiento o la actividad se inhiben en un 50%. Los datos se presentan en las siguientes tablas.

Adhesión Celular a Fibronectxna de Plasma Humano ¡Sin el suero humano) Ejemplo No. IC50 ^g/mL) 1 0.002 2. 0.002 3. 0.002 4. 0.004 5. 0.001414 6. 0.000511 7. 0.000821 8. 0.003002 9. 0.001 10. 0.00465 11. 0.002436 12. 0.003 13. 0.004 14. 0.001 Ejemplo No. IC50 ^g/mL) 15. 0.000915 16. 0.001035 17. 0.001 18. 0.002 19. 0.003393 20. 0.005114 21. 0.003138 22. 0.001506 23. 0.004 24. 0.003 25. 0.006 26. 0.001 27. 0.001 28. 0.004 29. 0.0022 Adhesión Celular a la Fibronectina del Plasma Humano (Con suero humano) Ejemplo No. IC50 (pg/mL) 1 0.318 2. 0.317 3. 0.152 4. 0.4 5. 1.851378 6. 0.313768 Ejemplo B Estudio de Saturación In vitro para determinar la unión de los compuestos candidatos para ?^ß? Lo que sigue describe un ensayo in vitro para determinar los niveles plasmáticos necesarios para que un compuesto se active en el modelo Experimental de Encefalomielitis Autoinmune ( "EAE" ) , descrito en el siguiente ejemplo, o en otros modelos in vivo. Se lavaron células Jurkat de cultivo log y se re-suspendieron en plasma normal de animal que tenía 20 µ^/ta?, del anticuerpo 15/7 (Yednock, et al., J. Biol, Chem. , (1995) 270 ( 48 ) : 287 0 ) . Las células Jurkat se diluyen a la mitad en sus muestras de plasma normal que contienen cantidades de compuesto candidato conocido en varias concentraciones que varían desde 66 µ? hasta 0.01 µ?, usando una dilución serial estándar de 12 puntos para una curva estándar, o en muestras de plasma obtenidas de la sangre periférica de los animales tratados con compuesto candidato. Luego se incuban las células durante 30 minutos a temperatura ambiente, se lavan dos veces con solución salina con amortiguador de fosfato ("PBS") que contenía 2% de suero de feto de bovino y 1 mM de cada uno de cloruro de calcio y cloruro de magnesio (medio de ensayo) para eliminar el anticuerpo 15/7 no unido. Las células se exponen luego a Fe de IgG anti-ratón F (ab' ) 2 de cabra conjugado con ficoeritrina (Immunotech, Westbrook, ME), que se ha adsorbido para cualquier reactividad cruzada no especifica por co-incubación con 5% de suero de las especies animales estudiadas, a 1:200 y se ha incubado en la oscuridad a 4°C durante 30 minutos. Se lavaron las células dos veces con medio de ensayo y se re-suspendieron en el mismo. Luego se analizaron con un análisis estándar con un Clasificador Celular Activado por Fluorescencia ("FACS") como se describe en Yednock et al. J. Biol. Chem., 1995, 270:28740. Luego se grafican los datos como fluorescencia versus dosis, por ejemplo, en un modo normal de dosis-respuesta. Los niveles de dosificación que resultan en la meseta superior de la curva representan los niveles necesarios para obtener la eficacia en un modelo in vivo: Este ensayo también puede usarse para determinar los niveles plasmáticos necesarios para saturar los sitios de unión de otras integrinas, como la integrina 9ß?, que es la integrina relacionada más cercanamente con ???ß? (Palmer et al, 1993, J. Cell Bio., 123: 1289). Dicha unión predice la utilidad in vivo para condiciones inflamatorias mediadas por la integrina a9ß?, que incluyen, a modo de ejemplo, hipersensibilidad y oclusión de las vias respiratorias que ocurre con el asma crónica, proliferación celular del músculo liso en ateroesclerosis, oclusión vascular luego de una angi opla s t ia , fibrosis y cicatrización glomerular como resultado de una enfermedad renal, estenosis aórtica, hipertrofia de las membranas sinoviales en casos de artritis reumatoide, e inflamación y cicatrización que ocurre con la progresión de colitis ulcerativa y enfermedad de Crohn. Conforme a lo antedicho, el estudio antes mencionado puede realizarse con una linea celular de carcinoma de colon humano, SW 480 (ATTC #CCL228) transfectada con cADN que codifica la integrina cig (Yokosaki et al., 1994, J. Biol. Chem., 269:26691), en lugar de las células Jurkat, para medir la unión de la integrina a9ß?. Como control, pueden usarse células SW 480 que expresan otras sub-unidades ce y Pi .

Conforme a lo antedicho, otro aspecto de esta invención se refiere a un método para el tratamiento de una enfermedad en un paciente mamífero, cuya enfermedad está mediada por y cuyo método comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de esta invención. Dichos compuestos se administran, con preferencia, en una composición farmacéutica descrita aquí con anterioridad. La dosificación diaria efectiva dependerá de la edad, el peso, la condición del paciente cuyos factores puede evaluarlos el médico tratante. Sin embargo, en una realización preferida, los compuestos se administran desde aproximadamente 20 hasta 500 g/kg por día.

Ejemplo C Dosificación en Cassette y Análisis del Suero para la determinación de la biodisponibilidad La biodisponibilidad oral se evaluó aplicando a las ratas una dosis con un cassette, es decir mezcla de 6 compuestos por solución de dosificación. El cassette incluyó 5 artículos de prueba y un compuesto estándar, para una dosis total de 10 mg/kg. Cada artículo de prueba/compuesto se convirtió en la sal de sodio con NAOH 1N equimolar y se disolvió en agua a 2 mg/mL. El cassette se preparó mezclando volúmenes iguales de cada una de las seis soluciones. La solución de dosificación del cassette se mezcló bien y luego se ajustó el pH hasta 7.5-9. La solución de dosificación se preparó el dia anterior al estudio y se agitó toda la noche a temperatura ambiente. Ratas Macho de Sprague Dawley (SD) de Charles River Laboratories, de 6-8 semanas de edad se usaron en esta evaluación. Las ratas se dejaron en cuarentena por lo menos durante un dia y se les brindó acceso libre a comida y agua. El dia anterior a la administración del cassette, se sometió a ayuno a las ratas durante aproximadamente 16 horas . Se asignaron cuatro ratas SD en cada cassette. Una dosis única de la solución de dosificación se administró por via oral a cada rata. El volumen de dosificación (5 mL/kg) y el tiempo se registraron y las ratas recibieron alimento 2 h después de la aplicación de la dosis. Se extrajeron muestras de sangre por punción cardiaca en los siguientes momentos: 4 h, 8 h y 12 h. Inmediatamente antes de la obtención de la sangre, se anestesiaron las ratas con gas CO2 dentro de 10-20 segundos. Luego de 12 horas de la obtención de las muestras, se sacrificó a las ratas a través de asfixia con CO2 seguido de dislocación cervical . Las muestras de sangre se mantuvieron en tubos microcontenedor con heparina a temperatura inferior a la ambiental (4°C) antes de ser procesadas. Las muestras de sangre se centrifugaron (10000 rpm durante 5 minutos) y las muestras de plasma se eliminaron y se almacenaron en un congelador a -20°C hasta que se analizaron para determinar los niveles de fármaco. Los niveles de fármaco en el plasma se analizaron usando el siguiente protocolo para precipitación directa del plasma . Las muestras de plasma in vivo se prepararon en una placa de 96 receptáculos de 1.5 mL, agregando, en orden, 100 L del plasma de prueba, 150 µL de metanol, seguido de vortex durante 10-20 segundos. Se agregaron 150 de 0.05 ng/ L de un Estándar Interno en acetonitrilo y se sometieron a vortex durante 30 segundos. Las muestras de la curva estándar se prepararon en una placa de 96 receptáculos de 1.5 mL, agregando, en orden, 100 L de plasma de ratón de control, seguido de 150 µ?, de metanol y aplicando vortex durante 10-20 segundos. Se agregaron 150 ]i de 0.05 ng/uL de un Estándar Interno en acetonitrilo y se sometieron a vortex durante 30 segundos. Las muestras se salpicaron con 0-200 ng (10 concentraciones) del compuesto de interés en 50% de metanol para obtener un rango de curva estándar de 0.5 ng/mL - 2,000 ng/mL. Nuevamente, la muestra se sometió a vortex durante 30 segundos. Luego se centrifugaron las muestras durante 20-30 minutos a 3000 rpm en un microcentrifugador Eppendorf antes de que el 80-90% del sobrenadante se transfiriera a una placa limpia de 96 receptáculos. Luego se evaporó el solvente orgánico hasta que las muestras estuvieron secas (bajo N2 a 40°C/30-60 min (Zymark Turbovap)) . El residuo se disolvió luego en 200 - 600 L de fase móvil (50% CH3OH/0.1% TFA) . Luego se aplicó LC/MS/MS usando un espectrómetro de masa cuadrupolar triple PE-Sciex API-3000 (SN0749707), Perkin-Elme , Series200auto-sampler, y bomba de shimadzu 10A. La adquisición se realizó con PE-Sciex Analyst (vl.l) y el análisis de los datos y la cuantif icación se lograron usando PE-Sciex Analyst (vl.l) . Se inyectó un volumen de muestra de 5-50 en una columna de fase inversa ThermoHypersil DASH-18 (Keystone 2.0 x 20 mm, 5 µp?, PN : 8823025-701) usando una fase móvil de 25% de CH3OH, 0.1% de TFA-100% de CH3OH, 0.1% de TFA. El tiempo del ciclo fue de aproximadamente 8 minutos a una velocidad de flujo de aproximadamente 300 pL/minutos .. El área bajo la curva (AUC) se calculó usando la regla trapezoidal lineal de t=0 hasta el tiempo de la última muestra tx (ver Handbook of Basic Pharmacokinetics , Wolfeang A. Ritschel and Gregory L. Kearns, 5TH ed, 1999) .

AUC0?TX = S((Cn + CN+1)/2) ) · (tn+1 - tn) [ (ug/mL) h] En el caso del paradigma de dosificación con cassette, las muestras a 4, 8 y 12 h luego de la dosis extravascular , se calculó el AUC desde t = 0 hasta t = 12 h. Los valores de AUC0?12 se calcularon para cada animal individual y el promedio de AUC0?I2ti se suministra en la tabla que sigue.

Ejemplo No. AUC 1. 2.3308 2. 1.8689 3. 1.5483 4. 0.5965 5. 0.9577 6. 0.6538 7. 0.717 8. 0.5088 9. 1.564 10. 0.1215 11. 0.4251 12. 0.8-447 13. 1.5806 14. 0.7164 15. 0.2098 16. 0.1721 17. 1.0075 18. 0.2578 19. 0.0697 20. 0.0536 21. 0.6321 22. 0.6297 23. 0.413 24. 0.4983 25. 0.4559 26. 0.3392 27. 1.6258 28. 0.7968 29. 0.2941 Ejemplo D Modelos de Asma Las condiciones inflamatorias mediadas por la integrina 4ß? incluyen, por ejemplo, influjo de eosinófilos, hiper-sensibilidad y oclusión de las vias respiratorias que ocurre con el asma crónica. Lo que sigue describe modelos de asma en animales que se usaron para estudiar los efectos in vivo de los compuestos de esta invención para usar en el tratamiento del asma.

Modelo de Asma de la Rata Siguiendo los procedimientos descritos por Chapman et al, Am J. Resp. Crit. Care Med, . 153 4, A219 (1996) y Chapman et al, Am . J. Resp. Crit Care Med 155: 4, A881 (1997) , ambos incorporados aquí en su totalidad a modo de referencia. Ovalbúmina (OA; 10 µg/mL) se mezclaron con hidróxido de aluminio (10 mg/mL) y se inyectaron (i.p.) en ratas de Noruega Marrón el día 0. Las inyecciones de OA, junto con el adyuvante, se repitieron los días 7 y 14. El día 21, los animales sensibilizados se mantuvieron en tubos plásticos y se expusieron (60 minutos) a un aerosol de OA (10 mg/kg) en un sistema de exposición sólo de la nariz. Los animales se sacrificaron 72 horas después con pentobarbital (250 mg/kg, i.p.) . Los pulmones se lavaron a través de una cánula traqueal usando 3 alícuotas (4 mL) de solución de Hank (HBSS x 10, 100 mL; EDTA 100 mM, 100 mL ; HEPES 1 M, 25 mL; llevada a 1 L con H20) ; las células recuperadas se reunieron y el volumen total de fluido recuperado se ajustó a 12 mL por el agregado de solución de Hank. Se realizó el recuento de células totales (Sysmex microcell counter F-500, TOA Medical Electronics Otd., Japón) y el ungüento se preparó diluyendo el fluido recuperado (hasta aproximadamente 106, células/mL) y pipeteando una alícuota (100 pL) en un centrífugo (Cytospin, Shandon, REINO UNIDO) . El ungüento se secó al aire, se fijó usando una solución de verde ligero en metanol (2 mg/mL) durante 5 segundos y se manchó con eosina G (5 segundos) y tiazina (5 segundos) (Diff-Quick, Browne Ltd. REINO UNIDO) para diferenciar los eosinófilos, neutrófilos, macrófagos y linfocitos. Se realizó un recuento de 500 células del ungüento por microscopio con luz bajo inmersión en aceite (x 100) . Los compuestos de esta invención se formularon en una suspensión de 0.5% de carboximetilcelulosa y 2% Tween 80 y se administraron por vía oral a ratas que se habían sensibilizado al alérgeno, ovalbúmina. Los compuestos que inhibieron la acumulación de leucocitos inducida por alérgenos en las vías respiratorias de ratas Marrones de Noruega activamente sensibilizadas se consideraron activas en este modelo.

Modelo de Asma de Ratones Los compuestos también se evaluaron en un modelo de inflamación pulmonar aguda en ratones siguiendo los procedimientos descritos por Kung et al., Am J. Respir. Cell Mol. Biol. 13:360-365, (1995) y Schneider et al., (1999) . Am J. Respir. Cell Mol. Biol. 20:448-457, (1999), que se incorporan, cada uno, aquí a modo de referencia en su totalidad. Se sensibilizaron ratones Hembra Negros/6 (8-12 semanas de edad) el dia 1 por inyección intraperitoneana (i.p.) de 0.2 mL de mezcla de ova/alum que contenia 20 µg de ova (Grado 4 , Sigma) y 2 mg de Alum inyectado (Pierce) . Se administró una inyección propulsora el día 14. Los ratones se provocaron los días 28 y 29 con ova al 1% en aerosol (en 0.9% de solución salina) durante 20 minutos. Se sacrificaron los ratones y se obtuvieron muestras de lavaje broncoalveolar (3 mL) el día 30, 48 horas luego de la primera provocación. Los eosinófilos se cuant ificaron por un método de manchado de FACs/FITC. Los compuestos de esta invención se formularon en una suspensión de 0.5% de carboximetilcelulosa y 2% de Tween 80 y se administraron por via oral a ratones que hablan sido sensibilizados al alérgeno, ovalbúmina. Los compuestos que inhibieron la acumulación de leucocitos inducida por alérgenos en las vías respiratorias de ratones C57BL/6 activamente sensibilizados se consideraron activos en este modelo .

Modelo de Asma de las Ovejas Este modelo emplea los procedimientos descritos por Abraham et al., J. Clin, Invest, 93: 776-787 (1994) y Abraham et al., Am J. Respir Crit Care Med 156: 696-703 (1997), ambos incorporados aqui en su totalidad a modo de referencia. Los compuestos de esta invención se han evaluado por administración intravenosa (solución acuosa de solución salina), oral (2% de Tween 80, 0.5% de carboximetilcelulosa) y aerosol a ovejas que son hipersensibles al antigeno Ascaris suum. Los compuestos que reducen la respuesta bronquial temprana inducida por antigenos y/o bloquea la respuesta de las vias respiratorias en su última fase, por ejemplo tienen un efecto protector contra las respuestas tardías inducidas por antígeno e hipersensibilidad de las vías respiratorias ( AHR"), se consideran activos en este modelo. Las ovejas alérgicas que habían demostrado desarrollar respuestas bronquiales tempranas y tardías al antígeno Ascaris suum se usaron para estudiar los efectos de los compuestos candidatos en las vías respiratorias. Luego de la anestesia tópica de los pasajes nasales con 2% de lidocaína, se insertó un catéter de globo a través de uno de los orificios de la nariz hacia el esófago inferior. Luego se incubaron los animales con un tubo endotraqueal con manguito a través del otro orificio de la nariz con un broncoscopio de fibra óptica flexible como guía. Se estimó la presión pleural de acuerdo con Abraham (1994) . Se generaron aerosoles (ver formulación que sigue) usando un nebulizador médico descartaba que suministró un aerosol con un diámetro aerodinámico promedio de masa de 3.2 µp? determinado por el dispositivo de impacto en cascada de Andersen. El nebulizador se conectó a un sistema de dosímetro formado por una válvula solenoide y una fuente de aire comprimido (20 psi). El producto del nebulizador se dirigió a un sector plástico en forma de T, uno de cuyos extremos estaba conectado el puerto de inspiración de un respirador de pistón. La válvula solenoide se activó durante 1 segundo al inicio del ciclo de inspiración del respirador. Los aerosoles se aplicaron a VT de 500 mL y una tasa de 20 aspiraciones/minuto. Una solución al 0.5% de bicarbonato de sodio sólo se usó como control. Para evaluar la sensibilidad bronquial, se generaron las curvas acumulativas de concentración-respuesta al carbacol de acuerdo con Abraham (1994) . Se tomaron muestras para biopsias bronquiales antes y después de iniciar el tratamiento y 24 horas después de la provocación con antígeno. Las biopsias bronquiales se realizaron de acuerdo con Abraham ( 1994 ) . También se realizó un estudio de adhesión in vitro de los macrófagos alveolares de acuerdo con Abraham (1994), y se calculó un porcentaje de células adherentes.

Formulación del Aerosol Una solución del compuesto candidato en bicarbonato de sodio al 0 , 5% /solución salina (p/v) a una concentración de 30.0 mg/mL se prepara usando el siguiente procedimiento: A . Preparación de solución stock de solución salina/bicarbonato de sodio al 0.5%: 100 mL Procedimiento: 1. Agregar 0.5 g de bicarbonato de sodio en un matraz volumétrico de 1 00 mL . 2. Agregar aproximadamente 90.0 mL de solución salina y sonicar hasta que se disuelva. 3. Llevar a 100.0 mL con solución salina y mezclar minuciosamente.

B . Preparación de 30.0 mq/mL de Compuesto Candidato: 10.0 mL Procedimiento: 1. Agregar 0.300 g del compuesto candidato en un matraz volumétrico de 10.0 mL . 2. Agregar aproximadamente 9.7 mL de solución stock de solución salina/bicarbonato de sodio al 0.5%. 3. Sonicar hasta que el compuesto candidato esté completamente disuelto. 4. Llevar a 10.0 mL con solución stock del 0.5% de bicarbonato de sodio/solución salina y mezclar minuciosamente.

Ejemplo E Estudio de Toxicidad de 10 días en Ratones C57B6 Se condujo un estudio de 10 días para evaluar la toxicidad de los compuestos de la presente invención en ratones hembra C57B6. El compuesto se administró por cebadura a cinco niveles de dosificación, 0 (control vehículo), 10, 30, 100, 300 y 1000 mg/kg (mpk) , con cinco ratones en cada nivel de dosificación. El volumen de dosificación para todos los niveles fue de 10 mL/kg. Las soluciones o suspensiones de dosis se prepararon en 2% de Tween 80 en 0.5% de carboximetilcelulosa (CMC) y nuevas soluciones o suspensiones de dosis se prepararon cada dos - tres días. Las observaciones en vida incluyeron los pesos corporales (día del estudio 1, 2, 3, 5, 7, 8 y 11), observaciones clínicas diarias de los laterales de la jaula (1-2/día) y batería de observación funcional periódica (día del estudio -1, 2 y 9) . Al final, se obtuvieron muestras de sangre por punción cardiaca para determinar la patología clínica (hematología y química clínica) y los niveles de fármacos. Las muestras de sangre con EDTA se analizaron para realizar el recuento de glóbulos blancos totales, el recuento de glóbulos rojos, hemoglobina, hematocritos e índices de eritrocitos (MCV, MCHr MCHC), plaquetas y una diferencia de WBC de cinco partes (neutrófilos , linfocitos , monocitos, eosinófilos y basófilos). Las muestras de plasma heparinizadas se analizaron para determinar la presencia de alanina transaminasa, aspartato transaminasa, fosfatasa alcalina, bilirrubina total, albúmina, prote na, calcio, glucosa, nitrógeno de urea, creatinina, colesterol y triglicéridos . Luego de la recolección de sangre, se realizó necropsia al esqueleto y se pesaron los órganos (hígado, baso, ríñones, corazón y timo) . Muestras de tejidos; cerebro, glándulas salivales, timo, corazón, pulmón, hígado, ríñones, baso adrenal, estómago, duodeno, íleon, colon y útero/ovario, se recolectaron y se fijaron con formalina. Los tejidos los animales del grupo de vehículo de control y 300 y 1000 se procesaron en portaobjetos de vidrio coloreado con H y E y se evaluaron para determinar lesiones histopatológicas . Los resultados de los cambios de peso corporal, pesos de órganos absolutos y relativos y patología clínica se analizaron para determinar diferencias estadísticamente significativas con los vehículos de control a través de la prueba de comparación múltiple de Dunnet usando el software Prism. Los resultados de la batería de observación funcional se analizaron para evaluar las diferencias usando las pruebas exactas de Dunnet y Fisher y los efectos de tendencia de la dosis por el test de correlación de Cochran-Mantel -Haens zel usando el software SAS . Usando una formulación oral convencional, los compuestos de esta invención serian activos en este modelo .

Ejemplo F Artritis Inducida por Adyuvante en Ratas La artritis inducida por adyuvante ( "AIA" ) es un modelo en animales útil en el estudio de la artritis reumatoide (RA), que se induce por invección de M. tuberculosis en la base de la cola de ratas de Lewis. Entre 10 y 15 días posteriores a la inyección, los animales desarrollan una artritis progresiva, grave. En general, se evalúa la capacidad de los compuestos para alterar la tumefacción de la pata posterior y el daño óseo resultante del edema inducido por adyuvante en ratas. Para cuantificar la inhibición de la tumefacción de la pata trasera producida por AIA, se han definido dos fases de la inflamación: (1) la pata trasera inyectada primaria y secundaria, y (2) la pata trasera secundaria sin inyección, que en general comienza a desarrollarse aproximadamente luego de once dias a partir de la inducción de la inflamación en la pata inyectada. La reducción del último tipo de inflamación es una indicación de actividad inmunosupresora . Ver Chang, Arth. Rheum., 20, 1135-1141 (1977) . El uso de un modelo de AR en animales, como AIA, permite estudiar los eventos celulares involucrados en las primeras etapas de la enfermedad. La expresión de CD44 en macrófagos y linfocitos está regulada en sentido ascendente en el primer desarrollo de la artritis por adyuvante, mientras que la expresión de LFA-1 está regulada en sentido ascendente más tarde en el desarrollo de la enfermedad. La comprensión de las interacciones entre las moléculas de adhesión y el endotelio en las primeras etapas de la artritis por adyuvante podría conducir a avances significativos en los métodos usados en el tratamiento de la AR.

Referencias Las siguientes publicaciones, patentes, y licitudes de patentes se citan en esta memoria scriptiva como números superindices : Hemler and Takada, Publicación de la Solicitud de Patente Europea No. 330.506, publicada el 30 de agosto de 1989 Elices, et al., Cell, 60:577-584 (1990) Springer, Nature 346 : 425-434 (1990) Osborn, Cell, _6_2: 3-6 (1990) Vedder, et al., Surgery, 106 : 509 (1989) Pretolani, et al., J. Fap . Med. , 180: 795 (1994) Abraham, et al., J. Clin. Invest., 9J3_: 776 (1994) Mulligan, et al., J. Immunology, 150: 2407 (1993) Cybulsky, et al., Science, 251 : 788 (1991) Li, et al., Arterioscler . Thromb., 13_: 197 (1993) Sasseville, et al., Am . J. Path., 144 : 27 (1994) Yang, et al., Proc. Nat. Acad. Science (USA), 90 : 10494 (1993) Burkly, et al., Diabetes, 4_3: 529 (1994) Barón, et al., J. Clin. Invest., 93_: 1700 (1994) Hamann, et al., J. Immunology, 151: 3283 (1994) 16 Yednock, et al., Nature, 356 : 63 (1992) 17 Barón, et al., J. Exp , Med . , 177 : 57 (1993) 18 van Dinther-Janssen, et al., J. Immunology, 147: 4207 (1991) 19 van Dinther- Janssen, et al., Annals. Rheumatic Dis.r 52_: 672 (1993) 20 Elices, et al., J. Clin. Invest., 93_: 405 (1994 ) 21 Postigo, et al., J. Clin. Invest., 8_9: 1445 (1991) 22 Paul, et al., Transpl. Proceed. , 25_: 813 (1993) 3 Okarhara, et al., Can. Res., 54_: 3233 (1994) 24 Paavonen, et al., Int. J. Can., 5_8: 298 (1994) Schadendorf, et al., J. Path . , 170 : 429 (1993) 26 Bao, et al., Diff., 52_: 239 (1993) 27 Lauri, et al., British J. Cáncer, 6j3_: 862 (1993) 28 Kawaguchi, et al., Japanese J. Cáncer Res., 83 : 1304 (1992) 9 Konradi, et al., PCT/USOO/01686, presentada el 21 de enero de 2000. Todas las publicaciones anteriores se incorporan como referencia aquí en su totalidad hasta el mismo punto que si se indicara que cada publicación individual y específicamente se incorporará como referencia en su totalidad.

Claims

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN Habiendo descrito el presente invento, considera como una novedad y, por lo tanto, reclama como propiedad lo contenido en siguientes REIVINDICACIONES : 1. Un compuesto de fórmula (I) : caracterizado porque cada X es, en forma independiente, flúor, cloro o bromo; p es 0 o un entero de 1-3; R1 se selecciona del grupo formado por metilo y etilo; R2 se selecciona del grupo formado por alquilo inferior, alquenilo inferior, y alqui lencicloalquilo inferior; y sus sales aceptables para uso farmacéut ico .
2. Un compuesto de Fórmula caracterizado porque cada X se selecciona en forma independiente del grupo formado por flúor y cloro , m es un entero igual a 1 ó 2 ; R2 se selecciona del grupo formado por alquilo inferior, alquenilo inferior, y alquilencicloalquilo inferior; y sus sales aceptables para uso farmacéutico .
3. Un compuesto de Fórmula III: (III) caracterizado porque cada X es, en forma independiente, flúor o cloro; n es cero o uno; R2 es -CH2R' donde R' se selecciona del grupo formado por hidrógeno, metilo o -CH = CH2; y sus sales aceptables para uso farmacéutico.
4. Un compuesto según cualesquiera de las reivindicaciones 1, 2 ó 3, caracterizado porque R2 es CH3.
5. Un compuesto según la reivindicación 3, caracterizado porque X es F o Cl, y n es 0.
6. Un compuesto seleccionado del grupo formado por: ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4-clorobencensulfonil)met i lamino] -pirimidin-4- i lamino } -3- (4 -dimetilcarbamoiloxifenil ) propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4 fluorobencensulfonil) meti lamino] -pirimidin-4-i lamino } -3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxi fenil ) propiónico ; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 3 , difluorobencensulfonil) met i lamino ] -pirimidin-4-ilamino } -3- ( -dimetilcarbamoiloxifenil ) propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 3 , 4 diclorobencensulfonil) met i lamino ] - irimidin- 4 -ilamino}-3-(4 -dimet ilcarbamo iloxi fenil ) propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5 [ ( heneensulfonil) met i lamino ] -pirimidin-4-ilamino}-3- ( 4 -dimet ilcarbamo i loxifenil) propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ (2 fluorobencensulfonil ) metilamino] -pirimidin-4-i lamíno } -3- ( 4 -dimet ilcarbamoiloxi fenil ) propiónico ; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 3 fluorobencensulfonil) metilamino] -pirimidin-4-i lamino } - 3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxi fenil ) propión ico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ (4 fluorobencensulfonil) isopropilamino] -pirimidi n- -ilamino}-3- ( -dimetilcarbamoilo i fenil ) propiónico; ácido 2- { 2-diet ilamino-5- [ ( 4 fluorobencensulfonil) etilamino] -pirimidin- -i lamino } -3- ( 4 -dime ilcarbamoi loxifenil ) propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 3 , 4 difluorobencensulfonil) isopropilamino] -pirimidin-4-ilamino}-3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxi fenil )propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4 clorobencensulfoni 1 ) isopropilamino] -pi rimidin- 4 -ilamino}-3- ( 4 -dimet ilcarbamoiloxi fenil )propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ (3, 4 difluorobencensulfonil) etilamino ] -pirimidin- -i lamino } - 3- ( 4 -dimeti lcarbamo iloxi fenil ) propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4 clorobencensulfonil) eti lamino] -pirimidin-4-ilamino}-3 - ( 4 -dimet i lcarbamoiloxi fenil ) propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4 fluorobencensulfonil) ciclopropilomet i lamino ] -pirimidin-4 -i lamino } -3- ( 4-dimetilcarbamoiloxifenil ) propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 3 , 5 difluorobencensulfonil) meti lamino] -pirimidin-4 -ilamino}-3- ( 4 -dimet ilcarbamoiloxi fenil ) propiónico ; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 3 , 5 difluorobencensulfonil) etilamino] -pirimidin-4-ilamino } -3- ( 4 -dimeti lcarbamoi lo i fenil ) propiónico ; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ (2 , 4 difluorobencensulfonil) meti lamino ] -pirimidin-4- lamino } -3- ( 4 -dimet lcarbamoiloxi fenil ) propiónico ; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ (2 , 4 difluorobencensulfonil) etilamino] -pirimidin-4-ilamino}-3- ( 4 -dimet ilcarbamoi loxifenil ) propiónico; ácido 2 - { 2-dietilamino-5- [ ( 3 , 5 diclorobencensulfonil ) metilamino ] -pirimidin-4-i lamino } - 3- ( 4 -dimet ilcarbamoi loxi fenil ) propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 3 , 5 diclorobencensulfonil ) etilamino] -pirimidin-4-ilamino}-3- ( 4 -dimet ilcarbamoi lo i fenil ) propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ (4 fluorobencensulfonil ) -n-propi lamino ] -pirimidin- -ilamino}-3- ( 4 -dimet ilcarbamoiloxi fenil ) propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4 fluorobencensulfonil ) alilamino] -pirimidin-4-i lamíno } -3- ( 4 -dimet ilcarbamoi loxifenil ) pro iónico; ácido 2- { 2 -dietilamino-5- [ ( fluorobencensulfonil ) isobutilamino] -pirimidin-4-ilaminol-3- ( 4 -dimetilcarbamo i loxi fenil ) propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 4 fluorobencensulfonil ) -n-butilamino] -pirimidin-4 -i lamino } -3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxi fenil ) propiónico; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 2 , 5· difluorobencensulfonil) metilamino] -pirimidin-4-i lamino } - 3- ( -dimeti learbamo iloxi fenil ) propiónico ; ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ ( 2 , 3· di fluorobencensulfonil) et i lamino] -pirimidin-4-ilamino } -3- ( -dimet ilcarbamoiloxi fenil )propiónico; ácido 2- { 2-diet ilamino-5- [ ( 4-fluorobencensulfonil ) - (2-trisfluoroetilo) -amino] -pirimidin- -i lamino } -3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxifenil )propiónico; y sus sales aceptables para uso farmacéutico .
7. Una composición farmacéutica que comprende un vehículo aceptable para uso farmacéutico y una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto según cualesquiera de las reivindicaciones 1-3, 5 ó 6.
8. Un método para el tratamiento de una enfermedad mediada por la integrina a.4 en un paciente cuyo método comprende administrar una composición farmacéutica que comprende un vehículo aceptable para uso farmacéutico y una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto según cualesquiera de las reivindicaciones 1-3, 5 ó 6.
9. El método según la reivindicación 8, caracterizado porque la enfermedad mediada por la integrina ct4 es una enfermedad inflamatoria.
10. Un compuesto de Fórmula (IV) : (IV) caracterizado porque cada X es, en forma independiente, flúor, cloro o bromo; p es 0 o un entero de 1 - 3; R1 se selecciona del grupo formado por metilo y etilo; es alquinilo inferior y sus sales aceptables para farmacéut ico .
11. Un compuesto de Fórmula V caracterizado porque cada X se selecciona en forma independiente del grupo formado por flúor y cloro , m es un entero igual a 1 ó 2 ; R2 es alquinilo inferior; y sus sales aceptables para uso farmacéutico .
12. Un compuesto de Fórmula VI: (VI) caracterizado porque cada X es, en forma independiente, flúor o cloro; n es cero o uno; R2 es alquinilo inferior; y sus sales aceptables para uso farmacéutico .
13. Un compuesto según cualesquiera de las reivindicaciones 10, 11 ó 12, caracterizado porque R2 es propargilo.
14. Un compuesto según la reivindicación 12, caracterizado porque X es F o Cl, y n es 0.
15. Un compuesto seleccionado del grupo formado por: ácido 2- { 2-dietilamina-5- [ ( 4-fluorobencensulfonil) propargilamino] irimidin-4-i lamino } -3- ( 4 -dimetilcarbamoiloxifenil ) propiónico, ácido 2- { 2-dietilamino-5- [ (2, 4-difluorobencensulfonil) propargilamino] pirimidin-4-ilamino}-3- ( 4-dimetilcarbamoiloxifenil ) propiónico; y sus sales aceptables para uso farmacéutico.
16. Una composición farmacéutica que comprende un vehículo aceptable para uso farmacéutico y una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto según cualesquiera de las reivindicaciones 10-12, 14 ó 15.
17. Un método para el tratamiento de una enfermedad mediada por la integrina 4 en un paciente, cuyo método comprende administrar una composición farmacéutica que comprende un vehículo aceptable para uso farmacéutico y una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto según cualesquiera de las reivindicaciones 10-12, 14 ó 15.
18. El método según la reivindicación 17, caracterizado porque la enfermedad mediada por la integrina <x4 es una enfermedad inflamatoria.
19. El método según la reivindicación 17, caracterizado porque la enfermedad es artritis reumatoide.