MXPA04006438A - Composiciones hemostaticas y metodos para el control de sangrado. - Google Patents

Abstract

La presente invencion proporciona composiciones hemostaticas utiles para promover la hemostasis en sitios activos de heridas sangrantes. Las composiciones hemostaticas incluyen normalmente un componente un articulo que contiene celulosa, por ejemplo gasa de algodon y un polisacarido enlazado covalentemente a la celulosa, o un polisacarido ionicamente degradado y en asociacion con el articulo. Los metodos de elaboracion y uso de las composiciones hemostaticas tambien se dan a conocer en esta invencion.

Description

COMPOSICIONES HEMOSTATICAS Y METODOS PARA CONTROLAR EL SANGRADO CAMPO TECNICO Esta invención se refiere a composiciones hemostáticas y a métodos que emplean a las mismas, y de manera más particular a composiciones hemostáticas útiles para controlar el sangrado en sitios de lesión con sangrado activo.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION Las heridas por lo general se clasifican como agudas o crónicas de conformidad con sus tendencias de cicatrización. Las heridas agudas, típicamente aquellas recibidas como resultado de cirugía o trauma, normalmente cicatrizan sin incidentes dentro de un marco de tiempo esperado. Las heridas agudas incluyen heridas tales como sitios de lesión con sangrado activo, por ejemplo heridas que tienen sangre detectable, sin coagular. El control rápido del sangrado tópico en sitios de lesión con sangrado activo es de importancia crítica en el manejo de heridas, en especial para el manejo de trauma, por ejemplo, como resultado del entrenamiento militar o de cirugía. Un método convencional para controlar el sangrado en sitios de lesión con sangrado activo, tales como hemorragias externas o una herida quirúrgica, recomienda el uso de almohadillas de gasa de algodón con capacidad para absorber 250 mi de sangre. Sin embargo, las almohadillas de algodón se consideran pasivas debido a su incapacidad para iniciar o acelerar la coagulación de la sangre. Se ha reportado que otras formulaciones promueven la hemostasis y se describen en las patentes E.U.A. Nos. 6,454,787; 6,060,461; 5,196,190; 5,667,501; 4,793,336; 5,679,372; 5,098,417; y 4,405,324. Sería de utilidad una composición hemostática que pueda acelerar la cascada de coagulación para formar un coágulo.

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION Por consiguiente, la invención se refiere a composiciones hemostáticas y métodos para elaborar y utilizar a las mismas con el fin de promover la hemostasis en sitios de lesión con sangrado activo. Las composiciones de la presente invención típicamente incluyen un artículo que contiene celulosa, por ejemplo, gasa de algodón, y un polisacárido unido covalentemente a la celulosa. En otras modalidades, un polisacárido está iónicamente entrelazado y en asociación con un artículo que comprende celulosa. Las composiciones hemostáticas pueden incluir pol isacáridos adicionales ligados covalentemente a cualquiera o ambas de la celulosa y el primer polisacárido o atrapados físicamente por una red formada por el enlazamiento covalente o entrelazamiento iónico del primer polisacárido. En un aspecto de la invención, se provee un método para controlar el sangrado en un sitio de lesión con sangrado activo de un animal. El animal puede ser un mamífero. Por ejemplo, el animal puede ser un humano, caballo, ave, perro, gato, oveja,, vaca, o mono. El método incluye aplicar una composición hemostática al sitio de lesión con sangrado activo. La composición hemostática incluye un artículo que contiene celulosa y un polisacárido, tal como dextrano, almidón, o alginato, unido covalentemente a la celulosa. Si se utiliza dextrano, éste puede estar en forma de un glóbulo, por ejemplo, glóbulos de dextrano entrelazados covalentemente. El peso molecular del dextrano puede variar desde 10,000 aproximadamente hasta 2,000,000 de Daltons aproximadamente, o desde 20,000 aproximadamente hasta 100,000 Daltons aproximadamente. Cuando un polisacárido está ligado a la celulosa, éste puede tener un límite de exclusión de peso molecular mayor de 30,000 Daltons aproximadamente. Los artículos que contienen celulosa pueden , ser barreras, estructuras, o dispositivos útiles en cirugía, procedimientos de diagnóstico, o tratamiento de heridas. Por ejemplo, un artículo que contenga celulosa puede ser un vendaje, sutura, aposito, gasa, gel, espuma, malla, película, cinta, o parche. Un. artículo que contenga celulosa puede incluir un material a base de algodón, por ejemplo, gasa de algodón. El artículo puede también incluir opcionalmente adhesivos o materiales para laminación; poliméricos . Las composiciones hemostáticas de la presente invención son útiles para acelerar la coagulación sanguínea en un sitio de lesión con sangrado activo. Antes de la aplicación de una composición hemostática, un sitio de lesión con sangrado activo podría caracterizarse en que éste sangra a una velocidad de 0.5 ml/minuto aproximadamente hasta 1,000 ml/minuto aproximadamente. Después de la aplicación de una composición hemostática, el sitio de lesión con sangrado activo podría sangrar a una velocidad menor de 0.03 ml/minuto. Por ejemplo, se puede lograr una velocidad menor de 0.03 ml/minuto en un lapso de 2 minutos aproximadamente hasta 20 minutos aproximadamente, y en algunas modalidades en menos de 5 minutos aproximadamente . Una composición hemostática puede comprender un segundo polisacárido unido covalentemente a la celulosa y, opcionalmente al primer polisacárido. El segundo polisacárido puede tener un peso molecular diferente al del primer polisacárido. Por ejemplo, el segundo polisacárido puede ser dextrano que tenga un peso molecular de 800,000 aproximadamente hasta 2M aproximadamente. De manera alternativa, el segundos polisacárido puede quedar físicamente atrapado por eE enlazamiento covalente del primer polisacárido a la celulosa . En otras modalidades, las composiciones hemostáticas de la presente invención pueden incluir un artículo que comprenda celulosa en asociación con un polisacárido ligado iónicamente consigo mismo (entrelazado) . Por ejemplo, el artículo que comprende celulosa puede estar recubierto con, impregnado con, o empapado en el polisacárido, el cual después se entrelaza iónicamente. El polisacárido puede también estar ligado covalentemente a la celulosa del artículo. Además, en algunas modalidades, el polisacárido puede estar atrapado físicamente en las fibras del artículo que comprende celulosa. Un ejemplo de un polisacárido que se puede entrelazar iónicamente es el alginato. El alginato se puede entrelazar iónicamente consigo mismo con cationes metálicos, incluyendo g2+; Ni2+; Ca2+; Sr2+; Ba2+; Zn+; Cd + ; Cu2+; Pb +; Fe3+; y Al3+ . En algunas modalidades, el catión es Ca2+. Un segundo polisacárido, tal como dextrano, también puede quedar atrapado físicamente, por ejemplo, mediante la red formada por el entrelazamiento iónico del primer polisacárido. El dextrano puede estar en forma de glóbulos entrelazados, por ejemplo, dextrano que se ha entrelazado previamente consigo mismo. El dextrano se puede unir covalentemente al vendaje, por ejemplo, ligando el dextrano a la celulosa con epiclorhidrina . En otro aspecto, una composición hemostática puede incluir esferas de dextrano-alginato, tales como esferas de dextrano-alginato ligadas iónicamente, o esferas de dextrano-alginato ligadas covalentemente, o esferas de dextrano-alginato ligados tanto iónicamente como covalentemente. En otro aspecto de la invención, se proveen composiciones hemostáticas que incluyen agentes adicionales, tales como analgésicos, esteroides, ant ihistamínicos , anestésicos, bactericidas, desinfectantes, fungicidas, vasoconstrictores, hemostáticos, fármacos quimioterapéuticos , antibióticos, queratol 11 icos , agentes para cauterización, fármacos antivirales, factor de crecimiento epidérmico, factores de crecimiento de fibroblasto, factores de crecimiento transformantes, glicoproteínas , colágeno, fibrinógeno, fibrina, humectantes, conservadores, linfocinas, citocinas, materiales para control del olor, vitaminas, y factores de coagulación. La invención también provee métodos para elaborar composiciones hemostáticas. Las composiciones hemostáticas de la presente invención se pueden elaborar incubando un agente enlazador con un polisacárido y un artículo que comprenda celulosa para formar una composición hemostática que tenga al polisacárido unido covalentemente a la celulosa. El agente enlazador puede ser cualquier agente enlazador útil para unir grupos hidroxilo disponibles en la celulosa con grupos hidroxilo disponibles en un polisacárido. Los ejemplos incluyen epiclorhidrina diclorhidrina , diepoxiburano , éter disepoxipropí lico, o éter et i len-gl ico -bis - epoxi -propílico. El paso de incubación puede efectuarse en una solución alcalina acuosa. La temperatura del paso de incubación puede variar desde 40°C aproximadamente hasta 70°C aproximadamente. En algunas modalidades, la temperatura es de aproximadamente 50 °C. El paso de incubación puede ocurrir desde 1 hora aproximadamente , hasta 24 horas aproximadamente. Además, el- paso de incubación puede efectuarse en presencia de una solución estabi 1 i zadora , por ejemplo, una solución diseñada para evitar o limitar la evaporación de agua. La solución estabilizadora puede incluir butirato de acetato de celulosa. El polisacárido unido covalentemente puede tener un límite de exclusión de peso molecular mayor de 30,000 Daltons. En algunas modalidades del método, el polisacárido es dextrano. El dextrano puede estar en forma de glóbulos entrelazados covalentemente. El peso molecular del dextrano puede variar desde 10,000 aproximadamente hasta 2M aproximadamente, o desde 20,000 aproximadamente hasta 100,000 Daltons aproximadamente. El paso de incubación se puede efectuar en una solución alcalina acuosa que tenga 12% aproximadamente hasta 75% aproximadamente de dextrano . En otro aspecto, la invención provee un método para elaborar una composición que incluye incubar un polisacárido y un catión con un artículo que contiene celulosa con el fin de formar una composición hemostática que tenga al artículo que contiene celulosa en asociación con un polisacárido entrelazado iónicamente. El polisacárido también puede estar unido covalentemente a la celulosa. El catión puede ser, por ejemplo, Ca +. El Ca2+ puede estar en forma de, o derivado a partir de glóbulos de dextrano entrelazados cargados con Ca2+. El polisacárido puede ser alginato de sodio o un derivado de ácido algínico, incluyendo sales de ácido algínico. En algunas modalidades, el paso de incubación incluye un segundo polisacárido; el segundo polisacárido puede quedar atrapado físicamente en la. red tridimensional formada por el entrelazamiento iónico del primer polisacárido. El segundo polisacárido puede ser dextrano, por ejemplo, dextrano en forma de glóbulos entrelazados. El segundo polisacárido también puede estar ligado covalentemente a la celulosa, por ejemplo, a través de un agente enlazador tal como epiclorhidrina . En otro aspecto, la invención provee un método para fabricar una composición, en el cual el método incluye el paso de mezclar una solución de polisacárido alcalino en fase acuosa con una solución de agente estabilizador en fase orgánica para formar una mezcla que tenga esferas de polisacárido; incubar un agente para entrelazamiento con la mezcla para entrelazar las esferas de polisacárido; aislar las esferas de polisacárido entrelazadas; y recubrir un artículo que comprenda una solución de alginato de sodio con las esferas de polisacárido entrelazadas. El método puede incluir remover de la mezcla al agente estabilizador en fase orgánica, por ejemplo, antes de aislar las esferas de polisacárido entrelazadas. El método también puede incluir exponer las esferas de polisacárido entrelazadas a una solución que comprenda iones de Ca2+, por ejemplo, lavar las esferas de polisacárido entrelazadas en una solución de Ca2+ . El polisacárido puede ser dextrano, y la solución de agente estabilizador en fase orgánica puede incluir butirato de acetato de celulosa. En algunas modalidades del método, las esferas de polisacárido entrelazado tienen un tamaño de 30 aproximadamente hasta 500 pm aproximadamente. Los pasos de mezclado e incubación pueden ocurrir a una temperatura de 40°C hasta 70°C aproximadamente. El paso de revestimiento puede incluir asperjar el artículo con las esferas de polisacárido entrelazadas.

La invención también se refiere a composiciones hemostáticas fabricadas de conformidad con el método anterior . En un aspecto adicional, se provee otro método para fabricar una composición. El método incluye los pasos de proveer una solución alcalina de ^ fase acuosa que tenga en la misma dextrano y alginato de sodio; preparar esferas de dextrano-alginato a partir de la solución alcalina de fase acuosa e incubar las esferas de dextrano-alginato con un agente enlazador para enlazar dichas esferas de dextrano-alginato. Las esferas de dextrano-alginato se pueden preparar utilizando cualquier método convencional en la técnica, incluyendo el uso de un atomizador mecánico. Un agente enlazador puede unir coval entemente o iónicamente o entrelazar las esferas de dextrano-alginato. Por consiguiente, un agente enlazador puede ser epiclorhidrina o una sal que contenga Ca2+ tal como cloruro de calcio. Las esferas de alginato-dextrano se pueden enlazar con un agente enlazador a base de Ca2+, y enlazar después utilizando un agente enlazador a base de epiclorhidrina o el enlazamiento se puede efectuar en el orden invertido, o en forma simultánea. El método también puede incluir recubrir, por ejemplo, asperjar, un artículo, tal como un artículo q e comprenda alginato de sodio, con las esferas de dextrano - alginato enlazadas. La invención también incluye composiciones hemostáticas fabricadas de conformidad con el método. A menos que se definan de otra manera, todos los términos técnicos y científicos utilizados en la presente invención tienen los mismos significados que aquellos entendidos comúnmente por el experto en la técnica a la cual pertenece esta invención. Aunque en la presente invención se pueden utilizar métodos y materiales similares o equivalentes a aquellos descritos para practicar la invención, los métodos y materiales apropiados se describen más adelante. Todas las publicaciones, patentes, solicitudes de. patente, y otras referencias mencionadas en la presente invención se incorporan para referencia en su totalidad. En caso de conflicto, la presente descripción, incluyendo definiciones, será la que controle. Además, los materiales, métodos, y ejemplos son únicamente ilustrativos y no pretenden ser 1 imitativos . Los detalles de una o más modalidades de la invención se indican en las figuras anexas y en la siguiente descripción. Otras características, objetivos, y ventajas de la invención serán evidentes a partir de la descripción y dibujos, y a partir de las reivindicaciones .

BREVE DESCRIPCION DE LAS FIGURAS Símbolos de referencia similares en los diversos dibujos indican elementos similares.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION Tal como se utiliza en la presente invención, los términos "enlazar" o "enlazado" pretenden indicar un enlace ya sea covalente o iónico, ya sea directo o mediado mediante una porción química o un ión, entre dos entidades químicamente distintas, por ejemplo, dextrano enlazado a celulosa. El término "entrelazar" pretende indicar un enlace covalente o iónico, ya sea directo o mediado por una porción química o ión, entre dos porciones químicamente similares, por ejemplo, dextrano entrelazado consigo mismo; alginato entrelazado consigo mismo. Las porciones químicamente similares no tienen que ser idénticas. Por ejemplo, dextrano que tenga un intervalo particular de peso molecular promedio incluye moléculas de dextrano de una variedad de pesos moleculares, y por lo tanto las moléculas de dextrano no son idénticas, sino químicamente similares. Cuando las moléculas de dextrano que tienen un intervalo de peso molecular promedio están enlazadas, por ejemplo, enlazadas covalentemente con epiclorhidrina , se dice que éstas están "entrelazadas" . Los términos "esferas", "partículas", o "glóbulos", cuando se utilizan en el contexto de la presente invención, no pretenden implicar tamaños diferentes, sino que pretenden significar términos intercambiables que describen una modalidad de una composición . El término "sitio de lesión con sangrado activo" significa, como mínimo, que en la herida está presente sangre sin coagular, por ejemplo, sangre extravascular , en particular en casos en los cuales la superficie de un tejido ha sido interrumpida o una arteria, vena, o sistema capilar se ha puesto en riesgo. La velocidad de flujo sanguíneo proveniente de un sitio de lesión con sangrado activo puede variar, dependiendo de la naturaleza de la herida. En algunos casos, un sitio de lesión con sangrado activo presentará flujo sanguíneo a una velocidad de aproximadamente 0.5 ml/minuto hasta aproximadamente 1,000 ml/minuto. Algunos sitios de lesión con sangrado activo pueden presentar velocidades de flujo sanguíneo más altas, por ejemplo, perforaciones de arterias principales tales como la aorta. Después de la aplicación de la composición hemostática, el sitio de lesión con sangrado activo puede sangrar a una velocidad menor de 0.03 ml/minuto. Por ejemplo, se pude lograr una velocidad menor de 0.03 ml/minuto en un lapso de 2 aproximadamente hasta 20 minutos aproximadamente, y en algunas modalidades en menos de 5 minutos aproximadamente.

Composiciones hemostáticas La invención se refiere a composiciones hemostáticas utilizadas para promover la heraostasis-en sitios de lesión con sangrado activo. Sin estar limitado a ninguna teoría, se cree que las composiciones hemostáticas de la presente invención controlan el sangrado iniciando y acelerando la coagulación sanguínea. Las composiciones hemostáticas de la presente invención activan las plaquetas y concentran componentes de peso molecular alto de la cascada de coagulación (por ejemplo, factores de coagulación) excluyendo componentes de alto peso molecular de la cascada, al tiempo que absorben los componentes de peso molecular más bajo en la sangre. Por consiguiente, se excluyen componentes de la cascada de coagulación que tienen un peso molecular mayor de aproximadamente 30,000 Daltons, incluyendo fibrinógeno ( PM 340,000); protrombina (PM 70,000) ; trombina ( M 34,000) ; Factor V (PM 330,000); Factor VII (PM 50,000); Factor VIII „ (PM 320,000); Factor de von illebrand (PM >850,000); Factor IX (PM 57,000); Factor X (PM 59,000); Factor XI (PM 143,000); Factor XII ( PM 76,000) ; Factor XIII (PM 320,000) ; cininógeno de peso molecular alto (Factor de Fitzgerald) (PM 120,000 - 200,000), y precalicreína (Factor de Fletcher) (PM 85,000 100,000) . Además, los experimentos de laboratorio indican que las plaquetas se agregan alrededor de las composiciones hemostáticas de la presente invención, cuando se exponen a la sangre. El resultado neto es que los factores de coagulación concentrados (componentes de la cascada de coagulación) y las plaquetas activadas activan la conversión de protrombina a trombina en presencia de Ca2+, lo cual cataliza posteriormente la conversión de fibrinógeno a multímeros de fibrina insolubles, por ejemplo un coágulo de fibrina. Se puede encontrar información adicional acerca de la cascada de coagulación y composiciones hemostáticas que contienen fibrina en la patente E . U. A. No . 5, 773 , 033. Las composiciones hemostáticas típicamente incluyen un artículo que comprende celulosa, por ejemplo, gasa de algodón, y un polisacárido unido covalentemente a la celulosa. En otras modalidades, las composiciones hemostáticas incluyen un artículo, que comprende celulosa en asociación. con un polisacárido que está iónicamente entrelazado. El polisacárido puede también unirse covalentemente a la celulosa. Las composiciones hemostáticas pueden incluir pol isacáridos adicionales unidos covalentemente a-cualquiera o ambas de la celulosa y el primer polisacárido. Otras modalidades de composiciones hemostáticas incluyen esferas de polisacárido unidas y entrelazadas, opcionalmente cargadas con un catión.» por ejemplo Ca2+ . Se debe mencionar que algunas composiciones hemostáticas comprenden tanto a una estructura macroscópica (por ejemplo, un artículo) como a una estructura microscópica (por ejemplo, redes de entrelazamientos de polisacárido o redes de enlaces covalentes de polisacárido con la celulosa) . Por lo tanto algunas composiciones hemostáticas forman redes tridimensionales de un polisacárido, ya sea como cadenas unidas iónicamente o unidas covalentemente a la celulosa del artículo. Por consiguiente, en algunas modalidades, un segundo polisacárido puede estar físicamente atrapado por la red formada por el primer pol i sacárido . Por consiguiente, en un aspecto, una composición hemostática incluye un artículo que contiene celulosa y un polisacárido, tal como dextrano, almidón o alginato, unido covalentemente a la celulosa. El artículo puede incluir celulosas naturales o sintéticas (por ejemplo, acetato de celulosa, butirato de celulosa, propionato de celulosa) . El polisacárido elegido debe ser seguro para su uso in vivo, por ejemplo, no debe ser alérgeno, no debe ser tóxico, y de preferencia no se debe metabolizar. Los pol isacáridos para uso clínico son conocidos en la técnica y se pueden conseguir a partir de una variedad de fuentes. Véase, por ejemplo, patente E.U.A. No. 6,303,585. Tal como se utiliza en la presente invención, enlaces covalentes abarcan uniones provenientes de cualquiera de las porciones químicas disponibles del polisacárido con cualquiera de las porciones químicas disponibles de la celulosa. Por ejemplo, si se utiliza el polisacárido dextrano, las porciones hidroxilo en el dextrano se pueden enlazar covalent emente con las porciones hidroxilo en la celulosa a través del agente enlazador epiclorhidrina . En dicho caso, se forma un puente de glicerilo que une el dextrano a la celulosa. Para información adicional, véase Flodin, P., e Ingelman, B., "Process for the Manufacture of Hydrophilic High Molecular Weight Substances," patente británica No. 854,715; y Flodin, P. "Chapter 2: The Preparation of Dextran Gels," Dextran Gels and Their Applications in Gel Filtration, Pharmacia, Uppsala Suecia, 1962, páginas 14 -26. El intervalo de peso molecular promedio del polisacárido puede variar, pero típicamente varía desde 10,000 aproximadamente hasta 2M Daltons aproximadamente. El intervalo de peso molecular elegido afectará el límite de exclusión de peso molecular del polisacárido unido covalentemente , y por lo tanto su capacidad para excluir y concentrar a los componentes de coagulación. El dextrano es un polisacárido de alto peso molecular que es soluble en agua. Este no es metabolizado por los humanos, y no es tóxico y es tolerado adecuadamente por la mayoría de los animales, incluyendo humanos. El peso molecular promedio del dextrano utilizado en la presente invención puede variar desde aproximadamente 10,000 hasta 2,000,000 de Daltons aproximadamente, o desde 20,000 aproximadamente hasta 100,000 Daltons aproximadamente. El dextrano puede estar en forma de glóbulos, por ejemplo, glóbulos covalentemente entrelazados, antes que éste se enlace cova entemente a la celulosa. Los glóbulos de dextrano pueden presentar un intervalo de tamaños, por ejemplo, desde aproximadamente 30 hasta aproximadamente 500 µ?t? . Los glóbulos de dextrano se pueden conseguir comercialmente, por ejemplo, como Sephadex™ (Pharmacia); véase, por ejemplo el documento UK 974,054. De manera alternativa, se pueden formar glóbulos o partículas de dextrano durante la preparación de la composición hemostática, por ejemplo, a partir del entrelazamiento covalente de moléculas de dextrano previamente no entrelazadas. En otras modalidades, el dextrano puede estar en forma de solución, por ejemplo no entrelazado, antes que éste se una covalentemente a la celulosa. El dextrano puede estar unido covalentemente a la celulosa y unido covalentemente consigo mismo por ejemplo, cuando se expone a un agente enlazador tal como epiclorhidrina . Cuando el dextrano está en forma de solución (por ejemplo sin entrelazar) , las moléculas de dextrano pueden recubrir todo o un componente del artículo, tal como las fibras de un vendaje de algodón, de modo que posteriormente forma una red o malla tridimensional enlazada, microscópica, cuando éstas se unen covalentemente a la celulosa y se entrelazan covalentemente consigo mismo. Los glóbulos de dextrano unidos a celulosa o una malla de celulosa-dextrano, como se describió previamente, contribuyen a la capacidad de una composición hemostática de excluir componentes de alto peso molecular de la cascada de coagulación. El peso molecular promedio del polisacárido, el grado de enlazamiento del polisacárido a la celulosa, y cualquier entrelazamiento del polisacárido (por ejemplo, consigo mismo) son factores en el límite de exclusión de peso molecular del polisacárido en una composición hemostática y para la reabsorción de agua de una composición hemostática. La reabsorción de agua se define como el peso de agua absorbida por un gramo de composición hemostática seca y se puede determinar utilizando métodos conocidos en la técnica. Por ejemplo, se sabe que cambios pequeños en la concentración de dextrano o en la concentración de agente enlazador (por ejemplo epiclorhidrina) pueden dar como resultado cambios dramáticos en la reabsorción de agua. Típicamente, a pesos moleculares más bajos de dextrano, resulta una reabsorción más alta de agua. Véase Flodin, P., "Chapter 2: The Preparation of Dextran Gels," Dextran Gels and Their Applications in Gel Fid trat ion, Pharmacia, Uppsala Suecia, 1962, páginas 14-26. De igual manera, el grado de hidratación del polisacárido también afecta el límite de exclusión de peso molecular. A medida que se incrementa el grado de hidratación, normalmente se incrementa el límite de exclusión de peso molecular del polisacárido. Típicamente, cuando el dextrano está unido a la celulosa, el dextrano tendrá un límite de exclusión de peso molecular mayor de 30,000 Daltons aproximadamente, excluyendo de esta manera efectivamente los componentes de la cascada de coagulación y concentrándolos sobre la superficie microscópica de la composición hemostática. Los artículos que contienen celulosa pueden ser cualesquiera barreras, estructuras, o dispositivos útiles en cirugía, procedimientos de diagnóstico, o tratamiento de heridas. Por ejemplo, un artículo que contenga celulosa puede ser un vendaje, sutura, aposito, gasa, gel, espuma, malla, película, cinta, o parche. Un artículo que contenga celulosa puede incluir un material de algodón, por ejemplo gasa de algodón. El artículo debe permitir que el polisacarido unido a la celulosa interactúe con el sitio de herida. Una composición hemostática puede comprender un segundo polisacárido unido covalentemente a la celulosa. El segundo polisacárido puede tener un peso molecular diferente al del primer polisacárido. Por ejemplo, el segundo polisacárido puede ser dextrano que tenga un peso molecular de 800,000 aproximadamente hasta 2M aproximadamente. El segundo polisacárido se puede unir covalentemente a la celulosa después que el primer polisacárido, al mismo tiempo que el primer polisacárido, o antes que el primer polisacárido. En otras modalidades, las composiciones hemostáticas de la presente invención pueden incluir un artículo que contenga celulosa en asociación con un polisacárido iónicamente entrelazado. El polisacárido también puede estar unido covalentemente a la celulosa. En este contexto, los enlaces iónicos incluyen uniones mediadas por ión entre porciones químicas disponibles en el polisacárido. Las porciones químicas típicas que se pueden mediar con un ión (por ejemplo un catión) incluyen porciones hidroxilo. Por ejemplo, el alginato de sodio o las sales de ácido algínico se pueden unir iónicamente con cationes metálicos, incluyendo Mg2+, Ni2+ , Ca2+, Sr2+, Ba2+, Zn2\ Cd2+, Cu2+, Pb2 + , Fe3+, y Al3+. Típicamente, se puede utilizar Ca2+. El alginato puede ser de cualquier tipo, incluyendo el tipo G* (ácido L-gulurónico) o el tipo M (ácido D-manurónico) , o M y G mixtos. Para mayor información acerca del alginato, véase patente E.U.A. No. 5,144,016. En algunas modalidades, un segundo polisacárido, tal como dextrano, puede estar físicamente atrapado en la red formada por el entrelazamiento iónico del primer polisacárido. El dextrano puede estar en forma de glóbulos entrelazados covalentemente , por ejemplo, dextrano que ha sido previamente entrelazado consigo mismo con epiclorhidrina , o glóbulos de Sephadex™. De manera alternativa, el dextrano puede estar en forma de solución (por ejemplo, no entrelazados), como se describió anteriormente. Además, el dextrano puede estar unido covalentemente a la celulosa, por ejemplo uniendo el dextrano a la celulosa con epiclorhidrina. Por consiguiente, el dextrano puede estar unido consigo mismo.

Otras modalidades de composiciones hemostáticas incluyen esferas de dextrano-alginato , tales como esferas de dextrano-alginato unidas iónicamente, o esferas de dextrano-alginato unidas covalentemente , o esferas de dextrano-alginato unidas en forma tanto iónica como covalente. Además, las esferas entrelazadas cargadas con iones Ca2+ también están incluidas como composiciones hemostáticas de la presente invención. Las composiciones hemostáticas pueden incluir agentes adicionales, tales como analgésicos, esteroides, ant ihistamínicos , anestésicos, bactericidas, desinfectantes, fungicidas, vasoconstrictores, hemostáticos, fármacos quimio-terapéut icos , antibióticos, queratolíticos , agentes cauterizantes, fármacos antivirales, factor de crecimiento epidérmico, factores de crecimiento de fibroblasto, factores de crecimiento transformantes, gl icoproteínas , colágeno, fibrinógeno, fibrina, humectantes, conservadores, linfocinas, citocinas, materiales para el control del olor, vitaminas, y factores de coagulación. Para información adicional sobre estos agentes adicionales para incorporación, se hace referencia el documento WO 00/27327. Las composiciones hemostáticas se pueden utilizar en combinación con materiales y adhesivos para laminación poliméricos para proveer tanto soporte mecánico como flexibilidad a un artículo y para facilitar la adhesión a la herida. Se puede encontrar información adicional sobre materiales y adhesivos para laminación poliméricos para ser utilizados en la presente invención en, por ejemplo, el documento WO 00/27327.

Composiciones farmacéuticas La presente invención también contempla composiciones farmacéuticas que comprenden algunas composiciones hemostáticas de la presente invención, por ejemplo, esferas unidas de dextrano - alginato o esferas de dextrano entrelazadas cargadas con calcio. Las composiciones farmacéuticas se pueden formular en formas convencionales utilizando uno o más vehículos fisiológicamente aceptables que contengan excipientes y auxiliares. La formulación apropiada depende de la vía de administración elegida. Un "vehículo farmacéuticamente aceptable" (también referido en la presente invención como un "excipiente") es un solvente, agente suspensor farmacéuticamente aceptable, o cualquier otro vehículo farmacológicamente inerte para suministrar una o más composiciones hemostáticas a un individuo.

Los vehículos farmacéuticamente aceptables pueden ser líquidos o sólidos, y se pueden seleccionar tomando en cuenta la manera planeada de administración para proveer el volumen, consistencia, y otras propiedades de transporte y químicas pertinentes deseadas, cuando se combinan con una composición hemostática. Si se desea, en una composición farmacéutica pueden estar presentes otros componentes. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención se pueden administrar mediante un número de métodos que dependen del área que será tratada. La administración puede ser, por ejemplo, tópica o parenteral. La administración puede ser rápida (por ejemplo mediante inyección) o se puede presentar en el transcurso de un intervalo de tiempo. Para tratar tejidos en el sistema nervioso central, las composiciones farmacéuticas se pueden administrar mediante inyección o infusión dentro del fluido cerebro- espinal , de preferencia con uno o más agentes que puedan promover la penetración de la composición farmacéutica a través de la barrera hemato-encefálica . Las formulaciones para administración por vía tópica incluyen, por ejemplo, soluciones acuosas estériles y no estériles, soluciones no acuosas en solventes comunes tales como alcoholes, o soluciones en bases oleosas líquidas o sólidas. Dichas soluciones también pueden contener soluciones reguladoras, diluyentes y otros aditivos apropiados. Las composiciones y formulaciones farmacéuticas para administración por vía tópica pueden incluir parches, ungüentos, lociones, cremas, geles, gotas, supositorios, aspersiones, líquidos, y polvos. Podrían ser necesarios o deseables vehículos farmacéuticos, bases acuosas, en polvo u oleosas, espesantes convencionales y similares . Las composiciones y formulaciones para administración por vía parenteral pueden incluir soluciones acuosas estériles, las cuales también pueden contener soluciones reguladoras, diluyentes y otros aditivos apropiados (por ejemplo, fomentadores de penetración, compuestos de vehículo y otros vehículos farmacéuticamente aceptables) . Las composiciones farmacéuticas de la presente invención incluyen, pero no se limitan a, soluciones, emulsiones, suspensiones acuosas, y formulaciones que contienen liposomas. Estas composiciones se pueden generar a partir de una variedad de componentes que incluyen, por ejemplo, líquidos preformados, sólidos auto- emulsif icables y semisólidos auto-emulsif icables . Las emulsiones con frecuencia son sistemas bifásicos constituidos por una o dos fases líquidas inmiscibles, íntimamente mezcladas y dispersas una en la otra; en general, las emulsiones pueden ser de la variedad agua en aceite (w/o) o aceite en agua (o/w) . Las formulaciones en emulsión han sido utilizadas ampliamente para el suministro por vía oral de agentes terapéuticos debido a su facilidad de formulación y eficacia de solubilización, absorción, y biodisponibil idad . Las composiciones farmacéuticas de la invención también abarcan cualesquiera sales, esteres, o sales de dichos ásteres farmacéuticamente aceptables, o cualquier otro compuesto el cual, después de ser administrado a un animal, incluyendo un humano, puedá: suministrar (directa o indirectamente) el metabolito o residuo del mismo biológicamente activo. El término "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a sales fisiológica y farmacéuticamente aceptables de las composiciones hemostáticas de la invención (es decir, sales que conservan la actividad biológica deseada sin impartir efectos toxicológicos indeseables) . Los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, sales que se forman con cationes (por ejemplo, sodio, potasio, calcio, o poliaminas tales como esperminas) ; sales ácidas de adición que se forman con ácidos inorgánicos (por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, o ácido nítrico); sales formadas con ácidos orgánicos (por ejemplo, ácido acético, ácido cítrico, ácido oxálico, ácido palmítico, o ácido fumárico) ; y sales formadas a partir de aniones de elementos (por ejemplo, cloro, bromo, y yodo) .

Métodos para controlar el sangrado En un aspecto de la invención, se provee un método para controlar el sangrado en un sitio de lesión con sangrado activo. El método incluye aplicar una composición hemostática al sitio de lesión con sangrado activo. La aplicación de la composición hemostática típicamente incluye poner en contacto la composición hemostática con la herida o superficie de sitio de sangrado. La composición hemostática se mantiene en contacto con la herida o sitio de sangrado durante un periodo suficiente para controlar el sangrado, por ejemplo, para coagular la sangre, reducir la velocidad de sangrado, o detener el sangrado. La aplicación puede incluir el uso de presión, por ejemplo, utilizando una venda elástica para mantener contacto con el sitio de sangrado. De manera alternativa, se puede empacar una herida interna con una composición hemostática hasta que se obtiene la hemostasis. En otras modalidades, se suministra una composición hemostática al sitio de herida. Por ejemplo, se puede utilizar un catéter o aguja para suministrar una composición hemostática a un sitio de perforación intravascular o a un sitio de biopsia. El catéter o la aguja se pueden revestir opcionalmente con una composición hemostática de la presente invención. Normalmente, una composición hemostática puede controlar el sangrado, por ejemplo, hasta una velocidad menor de 0.03 ml/minuto, en un periodo de 2 aproximadamente hasta 20 minutos aproximadamente. En. algunas modalidades, el sangrado se detiene inmediatamente, o en menos de 5 minutos aproximadamente. Típicamente se utilizan composiciones hemostáticas de la presente invención para inhibir o completamente detener el sangrado de un órgano del parénquima, tal como hígado, riñon, bazo, páncreas, o pulmones; o para controlar el sangrado durante la cirugía (por ejemplo, abdominal, vascular, ginecológica, dental, cirugía de transplante de tejidos, etc.) . Por ejemplo, las biopsias con aguja percutáneas son procedimientos médicos de intervención comunes. Sin embargo, las posibles complicaciones de biopsias con aguja incluyen sangrado en el sitio de la biopsia. La cantidad de sangrado se relaciona con el tamaño de la aguja, tamaño de la muestra de tejido, ubicación de la biopsia, y vascularización del tejido. Se pueden utilizar composiciones hemostáticas de la presente invención para promover la hemostasis en los sitios de biopsia con aguja. Las agujas para biopsia pueden estar revestidas con las composiciones hemostáticas de la presente invención, o se pueden utilizar para suministrar una composición hemostática al sitio de la biopsia. Para mayor información acerca de los tractos de biopsia, véase el documento E.U.A 6,447, 534. De igual manera, la cateterización y los procedimientos de intervención, tales como angioplastía y colocación de endoprótesis , por lo general se efectúan insertando una aguja hueca a través de la piel y tejido muscular del paciente hacia el sistema vascular. Después típicamente se hace pasar un alambre guía a través del lumen de la aguja hacia el interior del vaso sanguíneo. Se retira la aguja y la vaina introductora se hace avanzar a través del alambre guía hacia el interior del vaso sanguíneo, y un catéter se pasa típicamente a través del lumen de la vaina introductora y se hace avanzar a través del alambre guía para su posicionamiento. Después de completar el procedimiento médico, se retiran el catéter y la vaina introductora, dejando con frecuencia un sitio de perforación en el vaso sanguíneo, con el sangrado asociado. Las composiciones hemostáticas de la presente invención se pueden utilizar para revestir el exterior de los catéteres, endoprótesis , vainas introductoras, y alambres guía, etc., o se pueden suministrar, por r ejemplo, mediante un catéter, al sitio de perforación con el fin de promover la hemostasis. Para información adicional, véase patente E.U.A No. 6 , 391 , 048. La cantidad de composición hemostática a utilizar variará con el paciente, la herida, y la composición utilizada. Por ejemplo, las composiciones hemostáticas con reabsorciones variables de agua se pueden ensamblar (por ejemplo, apilar en orden descendente) para ser utilizadas en sangrados profusos para obtener la hemostasis.

Métodos para elaborar composiciones hemostáticas En otro aspecto, la invención provee métodos para elaborar composiciones hemostáticas. Las composiciones hemostáticas de la presente invención se pueden elaborar incubando un agente enlazador con un polisacárido y un artículo que contenga celulosa para formar una composición hemostática que tenga al polisacárido unido covalentemente a la celulosa. Se puede utilizar cualquier reactivo bifuncional o heterobifuncional biológicamente compatible como el agente enlazador, incluyendo reactivos con halógenos, epóxidos, porciones hidroxi, ésteres de succinimida, aldehidos, tioles activados, u otras porciones para que reaccionen con las aminas libres, hidróxidos, hidroxilos, o sulfhidrilos en el vendaje o en el polisacárido. El vendaje se puede modificar, por ejemplo, convertir en derivado, para, incorporar porciones reactivas tales como aminas o sulfhidrilos para que reaccionen con un agente enlazador particular. También se puede modificar el polisacárido, por ejemplo, convertir en derivado, en una manera similar, con la condición que el polisacárido convertido de esta manera en derivado permanezca farmacéuticamente apropiado para uso en animales, por ejemplo, en humanos. El agente enlazador puede ser epiclorhidrina , diclorhidrina , diepoxiburano , éter di sepoxipropí 1 i co , o éter etilen-glico-bis-epoxipropílico . Para información adicional, véase Flodin, P., e Ingelman, B., "Process for the Manufacture of Hydrophilic High Molecular Weight Substances," patente británica No. 854,715; y Flodin, P. "Chapter 2: The Preparation of Dextran Gels," Dextran Gels and Their Applications in Gel Filtration, Pharmacia, Uppsala Suecia, 1962, páginas 14-26. El paso de incubación se puede presentar en una solución alcalina acuosa. Típicamente, el polisacárido constituye desde 10% aproximadamente hasta 80% aproximadamente p/v de la solución alcalina acuosa. La concentración del agente enlazador en el paso de incubación puede variar desde 2% aproximadamente hasta 20% aproximadamente p/p del polisacárido. La temperatura del paso de incubación puede variar desde 40°C aproximadamente hasta 70°C aproximadamente. En algunas modalidades, la temperatura es de aproximadamente 50°C. El paso de incubación se puede presentar durante 1 hora aproximadamente hasta 24 horas aproximadamente. El paso de incubación también puede incluir agitación de los reactivos. Además, el paso de incubación puede efectuarse en presencia de una solución estabilizadora , por ejemplo, una solución diseñada para evitar o limitar la evaporación de agua. La solución estabilizadora puede incluir butirato de acetato de celulosa. El método también incluye neutralizar la solución alcalina acuosa, por ejemplo, con un ácido tal como HCl a una concentración de 1 a 5M. La composición hemostática se puede lavar con una solución acuosa, por ejemplo, agua destilada, o un lavado alcohólico acuoso, por ejemplo, EtOH/agua 50/50 v/v. La composición hemostática se puede lavar en serie con cantidades cada vez mayores de un lavado alcohólico, tal como 25%, 50%, 75%, y 100% de EtOH. La solución de lavado alcohólica puede contener un humectante, por ejemplo, glicerina, a una concentración de 0.1 aproximadamente hasta 2.0% aproximadamente. La composición hemostática puede secarse, por ejemplo, a 50°C aproximadamente hasta 80°C aproximadamente. Por ejemplo, la composición hemostática se puede secar a 70°C. Después de secar, el polisacárido unido covalentemente puede tener un límite de exclusión de peso molecular mayor de 30,000 Daltons. En algunas modalidades del método, el polisacárido es dextrano. El dextrano puede estar en forma de glóbulos entrelazados covalentemente. El peso molecular del dextrano puede variar desde 10,000 aproximadamente hasta 2 aproximadamente, o desde 20,000 aproximadamente hasta 100,000 Daltons aproximadamente. Típicamente, se utiliza dextrano con peso molecular de 40,000. El paso de incubación se puede presentar en una solución alcalina acuosa que tenga 12% aproximadamente hasta 75% aproximadamente de dextrano p/v. En otro aspecto, la invención provee un método para elaborar una composición hemostática que incluye incubar un polisacárido y un catión con un artículo que contenga celulosa con el fin de formar una composición hemostática que tenga al artículo que contiene celulosa en asociación con un polisacárido entrelazado iónicamente. El polisacárido puede también estar unido covalentemente a la celulosa. El catión puede ser como el descrito previamente,,, incluyendo, por ejemplo, Ca2+ . El Ca2+ puede estar en forma de, u obtenido a partir de, glóbulos de dextrano entrelazados, cargados con Ca2+. El polisacárido puede ser alginato de sodio o derivados de ácido algínico, incluyendo sales de ácido algínico. Se pueden efectuar lavados acuosos y alcohólicos de la composición hemostática, como se describió previamente. En algunas modalidades, el paso de incubación incluye un segundo polisacárido. El segundo polisacárido puede ser dextrano, por ejemplo, dextrano en forma de glóbulos entrelazados covalentemente . El segundo polisacárido puede quedar físicamente atrapado, por ejemplo, en la red tridimensional formada por el entrelazamiento iónico del primer polisacárido. El segundo polisacárido puede estar unido covalentemente al vendaje, por ejemplo, a través de un agente enlazador tal como epiclorhidrina . En una modalidad, se sumerge un artículo tal como gasa de celulosa en una solución de un primer polisacárido (por ejemplo, aproximadamente 1 a 5% de alginato de sodio) y un segundo polisacárido (por ejemplo, dextrano al 20%, peso molecular promedio 40,000) . El primer polisacárido se entrelaza iónicamente con una solución de catión, por ejemplo Ca2+ proveniente de una solución que tenga aproximadamente 0.5 a 10% aproximadamente de cloruro de calcio acuoso. La concentración de Ca2+ se puede reducir con lavados en serie, por ejemplo, para reducir la concentración de Ca2+ hasta 0.5% aproximadamente de Ca2+. Después, el primero o segundo pol isacáridos , o ambos, se pueden unir covalentemente a la celulosa y/o entrelazar utilizando una solución alcalina acuosa (por ejemplo NaOH al 20%) de un agente enlazador, por ejemplo, epiclorhidrina (por ejemplo, aproximadamente a 3-ß% del peso del segundo pol isacárido) . La composición hemostática resultante puede secarse como se describió previamente. En otra modalidad de la presente invención, se pueden mezclar esferas de polisacárido entrelazado con una solución de lavado alcohol ico-Ca2+ (por ejemplo cloruro de calcio al 1% en alcohol puro) . Las esferas de polisacárido entrelazadas se pueden adquirir, por ejemplo, como Sephadex™, o se pueden preparar a partir de una solución de polisacárido alcalina acuosa y un agente para entrelazamiento (por ejemplo, dextrano entrelazado con epiclorhidrina), según se discutió previamente. Después de lavar en la solución de al cohol - Ca2 + , las esferas de polisacárido entrelazado tienen Ca2 + en sus poros, por ejemplo, son esferas cargadas con Ca2+, y se pueden utilizar para recubrir un artículo, por ejemplo, asperjar sobre un vendaje, que ha sido previamente sumergido o remojado en una solución de polisacárido, por ejemplo, alginato de sodio, a una concentración de aproximadamente 0.5-5% de polisacárido. En algunas modalidades, el Ca2+ proveniente de las esferas entrelazadas se intercambia con el sodio proveniente de la solución de alginato de sodio, dando como resultado alginato de calcio entrelazado iónicamente, con esferas de polisacárido entrelazado físicamente atrapado en la red tridimensional del enlace iónico. La composición hemostática formada de esta manera se puede secar como se discutió previamente. En otro aspecto, la invención provee un-método para fabricar una composición, en el cual el método incluye el paso de mezclar una solución alcalina de fase acuosa de polisacárido con una solución de agente estabilizador de fase orgánica para formar una mezcla que tenga esferas de polisacárido; incubar un agente de entrelazamiento con la mezcla para entrelazar las esferas de polisacárido; aislar las esferas de polisacárido entrelazadas; y revestir un artículo que comprende una solución de alginato de sodio con las esferas de polisacárido entrelazadas. El método puede incluir remover al agente estabilizador de fase orgánica de la mezcla, por ejemplo, antes de aislar las esferas de polisacárido entrelazadas. El método también puede incluir exponer las esferas de polisacárido entrelazadas a una solución que comprenda iones de Ca2+, por ejemplo, lavando las esferas de polisacárido entrelazado en una solución de Ca2+. El polisacárido puede ser dextrano, y la solución de agente estabilizador de fase orgánica puede incluir butirato de acetato de celulosa. En algunas modalidades del método, las esferas de polisacárido entrelazado tienen un tamaño entre 30 aproximadamente y 500 µp aproximadamente. Los pasos de mezclado e incubación se pueden presentar a una temperatura de 40 "C aproximadamente hasta 70°C aproximadamente. El paso de revestimiento puede incluir asperjar el artículo con las esferas de polisacárido entrelazado. La invención también se refiere a composiciones hemostáticas fabricadas de conformidad con el método anterior. En un aspecto adicional, se provee otro método de fabricación de una composición. El método incluye los pasos de suministrar una solución alcalina de fase acuosa que tenga dextrano y alginato de sodio en la misma; preparar esferas de dextrano - alginato a partir de la solución alcalina de fase acuosa; e incubar las esferas de dextrano - alginato con un agente enlazador para formar esferas de dextrano-alginato enlazadas. Las esferas de dextrano-alginato se pueden preparar utilizando cualquier método convencional en la técnica, incluyendo el uso de un atomizador mecánico o una cuchilla de aire.

El agente enlazador puede ligar y/o entrelazar en forma covalente o iónica las esferas de dextrano- alginato . Por consiguiente, el agente enlazador puede ser epiclorhidrina o un catión tal como los descritos previamente, por ejemplo, una sal que contenga Ca2 + . Las esferas de dextrano- alginato se pueden primero unir con un agente enlazador catiónico, y después unir con un agente enlazador de tipo epiclorhidrina, o viceversa. Las esferas de dextrano-alginato se pueden unir simultáneamente con un agente enlazador tipo catión y un agente enlazador tipo epiclorhidrina. El método puede incluir también revestir, por ejemplo, asperjar, un artículo con las esferas de dextrano-alginato unidas. La invención también está dirigida a composiciones hemostáticas fabricadas de conformidad con el método. Se han descrito un número de modalidades de la invención. Sin embargo, se entenderá que se pueden hacer diversas modificaciones sin alejarse del alcance y campo de la invención. Por consiguiente, otras modalidades están dentro del campo de las siguientes reivindicaciones.

EJEMPLOS EJEMPLO 1 Composiciones de algodón-dextrano Se incuban composiciones basadas en algodón farmacéuticamente aceptables con dextrano (peso molecular 40,000) en una solución alcalina de epiclorhidrina (dextrano al 20% en NaOH p/v; epiclorhidrina aproximadamente entre 3 y 6% p/p de dextrano) . Las soluciones se dejan reaccionar durante 1 a 16 horas aproximadamente a un intervalo de temperatura desde temperatura ambiente aproximadamente hasta 60°C aproximadamente. Las reacciones de entrelazamiento resultantes se neutralizan después utilizando una solución de HC1 1 a 5 molar. Las composiciones hemostáticas de dextrano-algodón entrelazadas y unidas se lavan 4 veces aproximadamente con agua destilada. Los productos se lavan también dos veces con una solución agua destilada/alcohol al 50%, después con una solución alcohólica al 75%, y por último con una solución de alcohol al 100%, para eliminar el exceso de epiclorhidrina. Una solución de lavado alcohólica final contiene aproximadamente 0.1 hasta 2% aproximadamente de glicerina para evitar que la composición se torne quebradiza. La composición hemostática se seca a 70°C aproximadamente durante la noche .

EJEMPLO 2 Composiciones de algodón-alginato-dextrano Se disuelve un agente estabilizador, tal como butirato de acetato de celulosa en dicloruro de etileno a 3% p/v y se calienta hasta 50°C aproximadamente mientras se agita a 200 rpm aproximadamente en un recipiente de reacción de 1-2 litros cilindrico. Se disuelve dextrano (peso molecular 40,000) en agua a una concentración de 15% p/v con NaOH 5N a 2% del peso del dextrano. La solución de dextrano se agrega gradualmente a la mezcla estabilizadora con calentamiento y agitación continua. Cuando se forman gotas minúsculas del tamaño deseado (30-500 µ??) , se agrega un agente de entrelazamiento tal como epiclorhidrina al recipiente a una concentración de 20% del peso del dextrano. La reacción forma esferas de gel entrelazadas en 1-3 horas, pero se deja que continúe hasta 16 horas antes de su terminación. Se agrega acetona y se decanta dos veces para eliminar al estabilizador (butirato de acetato de celulosa) . Las esferas se tratan después con NaOH (partes iguales de NaOH 2N y 95% de alcohol etílico) durante 15 minutos aproximadamente, y se neutraliza con ácido diluido (HCl 1N) antes de la filtración y lavado con agua. Las esferas expandidas se encogen con tratamiento alcohólico (lavados alcohólicos en serie de 25, 50, 75 y 100%) . Se mezcla cloruro de calcio seco con una segunda solución de lavado alcohólica al 100% (cloruro de calcio al 1% en alcohol) , la cual se utiliza para lavar las partículas de dextrano entrelazadas. Los productos finales son composiciones secas de dextrano-calcio entrelazadas. Las composiciones con base de algodón^ farmacéuticamente aceptables se sumergen (impregnan) en una solución líquida de alginato de sodio (0.5-4%) . Después de la remoción de la solución, los materiales de algodón revestidos con alginato de sodio húmedos se asperjan o espolvorean con las composiciones de dextrano cálcico entrelazado. El calcio se intercambia con el sodio, dando como resultado alginato de calcio entrelazado. Las composiciones de algodón-dextrano- alginato hemostáticas se secan después a 70°C durante la noche.

EJEMPLO 3 Método alternativo para preparar composiciones de algodón- dextrano - alginato Se sumergen gasas de algodón en soluciones de 1 a 5% de alginato de sodio y 20% de dextrano (peso molecular 40,000) . Las mezclas se entrelazan y unen con 0.5% aproximadamente hasta 10% aproximadamente de solución de cloruro de calcio acuosa. Las composiciones se lavan para reducir la concentración de Ca2+ hasta aproximadamente 0.5% de Ca2+. Se preparan soluciones para entrelazamiento de dextrano - alginato utilizando una solución de epiclorhidrina alcalina acuosa, en las cuales la concentración de epiclorhidrina es de 3 aproximadamente hasta 6% en peso aproximadamente del dextrano. Las soluciones incluyen 20% aproximadamente de NaOH . Las composiciones hemostáticas resultantes se deja secar a temperatura ambiente hasta 60°C aproximadamente durante la noche.

EJEMPLO 4 Composiciones de algodón-dextrano Se disuelve dextrano (peso molecular 40,000) en NaOH 1N a un intervalo de 18-69% p/v de dextrano en la solución alcalina. Se agrega epiclorhidrina a una concentración de 20% del dextrano en peso a temperatura ambiente. Se agregan gasas de algodón (celulosa) farmacéuticamente aceptables a las soluciones de epiclorhidrina alcalina. Las soluciones se dejan reaccionar con agitación a una temperatura entre 25°C y 70°C. Las mezclas se calientan hasta que se forma un gel de dextrano-celulosa entrelazado en las fibras de gasa, de 1-6 horas, hasta 24 horas. Después de neutralizar con HC1 diluido (1N) , los lavados sucesivos eliminan el exceso de productos de reacción e impurezas: 4 veces en agua destilada, después con concentraciones cada vez mayores de alcohol (25, 50, 75, 100%) . Un lavado final con alcohol de 100% de EtOH que contiene desde 0.1 hasta 2.0% de glicerina para mantener las composiciones plegables. Las composiciones hemostáticas resultantes se secan a una temperatura de 70°C aproximadamente durante la noche. La reabsorción de agua para las composiciones hemostáticas varía desde 2.5 ml/g hasta 35 ml/g. Para información acerca de la reabsorción de agua, véase Flodin, P. Dextran Gels and Their Applications in Gel Filtration, Pharmacia, Uppsala Suecia, 1962, páginas 31-32.

EJEMPLO 5 Composición de celulosa-dextrano Se disuelven 150 g de dextrano (peso molecular 40 , 000) en 300 mi de NaOH 1N. Se mezclan rápidamente 30 g de epiclorhidrina con la solución de dextrano temperatura ambiente. Se sumerge una gasa de celulosa farmacéuticamente aceptable en la solución alcalina de epiclorhidrina para revestir completamente las fibras con la solución de reacción, después se coloca en una caja de fondo plano. La gasa se calienta hasta 50°C en una atmósfera húmeda, con mecimiento suave después de una hora, hasta que se forma un gel de dextrano - celulosa en las fibras de gasa, típicamente en 1-2 horas. Se continúa calentando hasta el punto final deseado, hasta 24 horas. La gasa se neutraliza, se lava, se trata con glicerina, y se seca como se describió previamente. La reabsorción de agua es de 7.5 ml/g.

EJEMPLO 6 Composición de celulosa-dextrano se disuelve dextrano (peso molecular 40,000) en NaOH 1N (34% de dextrano p/v de la solución alcalina) . Se agrega epiclorhidrina a una concentración de 20% del dextrano en peso a temperatura ambiente. Se sumerge una composición basada en fibra de celulosa farmacéuticamente aceptable, gasa 4 x 4 16 capas, en la solución alcalina de epiclorhidrina para revestir completamente las fibras con la solución de reacción, después se coloca en una caja de fondo plano. Para evitar concentrar la solución de reacción por evaporación, se utiliza una solución estabilizadora de butirato de acetato de celulosa en dicloruro de etileno (3% p/v) , la cual es inmiscible en agua, para cubrir la gasa. La gasa se calienta a 50°C, con mecimiento suave después de 1 hora, hasta que se forma un gel entrelazado y unido de dextrano-celulosa en las fibras de la gasa, típicamente en 2 a 3 horas aproximadamente. Se continúa el calentamiento hasta el punto final deseado, hasta 24 horas. Se agrega acetona y se decanta dos veces para eliminar el estabilizador. La gasa se neutraliza con HC1 diluido y se lava como se describió previamente en alcohol acuoso y soluciones de alcohol y se secan a una temperatura de 70°C aproximadamente durante la noche. La reabsorción de agua es de 15 ml/g.

EJEMPLO 7 Composición de celuloaa-dextrano Se disuelve dextrano (peso molecular 40,000) en NaOH 1N y se hace reaccionar con gasa en presencia de epiclorhidrina, seguido por neutralización, lavado, y secado como se describió anteriormente. Se elaboran composiciones de celulosa-dextrano variando el volumen de dextrano en el solvente de 12 a 75 p/v para producir una composición hemostática con reabsorciones de agua que varían desde 5 ml/g hasta 35 ml/g. Las composiciones se pueden ensamblar para uso en sangrado profuso apilándolas en orden descendente (por ejemplo, 35 ml/g a 5 ml/g) para conseguir hemostasis.

EJEMPLO 8 Esferas de dextrano-calcio Se disuelve una sustancia polimérica no iónica en un solvente apropiado con una solución alcalina agregada como un catalizador para entrelazamiento. Se disuelve un estabilizador en un solvente que sea inmiscible con el solvente del polímero y se coloca en un recipiente cilindrico. La solución de estabilizador forma la fase continua y se calienta con agitación regular. Cuando se agrega la solución de polímero a la solución de estabilizador, se forma un sistema bifásicos en el cual las gotas minúsculas de polímero se convierten en la fase dispersa. Se agrega un agente de entrelazamiento bifuncional al sistema el cual ocasiona la co-pol imeri zación (entrelazamiento) del polímero para formar esferas de gel . Después de la purificación y secado, se determina la reabsorción de agua de las esferas con el fin de clasificar la capacidad de tamizado molecular del polímero entrelazado. La reabsorción de agua se puede determinar utilizando métodos bien conocidos en la técnica, y por lo general implica hidratar 1 gramo de composición seca, y determinar la cantidad de agua absorbida por dicho gramo de composición seca. En términos generales, una mayor capacidad de expansión se relaciona con poros más grandes (por ejemplo, menos entrelazamiento) y una exclusión de peso molecular más alta. De manera más específica, se disuelven un agente estabilizador, tal como butirato de acetato de celulosa en dicloruro de etileno a 3% p/v y se calienta hasta 50°C aproximadamente mientras se agita a 200 rpm aproximadamente en un recipiente de reacción cilindrico de 1-2 litros. Se disuelve dextrano (peso molecular 40,000) en agua a una concentración de 15% p/v con NaOH 5N a 2% del peso de dextrano. La solución de dextrano se agrega gradualmente a la mezcla de estabilizador con calentamiento y agitación continuos. Cuando se forman gotas minúsculas del tamaño deseado (30-500 , se agrega un agente de entrelazamiento tal como epiclorhidrina al recipiente al 20% del peso de dextrano. La reacción forma esferas de gel entrelazadas en 1-3 horas, pero se deja continuar hasta 16 horas antes de terminar la reacción. Se agrega acetona y se decanta dos veces para eliminar el estabilizador (butirato de acetato de celulosa) . Las esferas se tratan después con NaOH (partes iguales de NaOH 2N y alcohol etílico al 95%) durante 15 minutos aproximadamente, y se neutraliza con ácido diluido (HCl 1N) antes de filtrar y lavar con agua. Las esferas expandidas se encogen con tratamiento alcohólico (lavados alcohólicos en serie de 25, 50, 75,100%) como se describió previamente. Un alcohol final contiene cloruro de calcio (0.04-1%) . El alcohol se evapora mediante secado a 70°C aproximadamente, atrapando de esta manera el calcio en los poros y sobre la superficie de las esferas de dextrano. El producto final es una composición seca de dextrano-ión calcio entrelazados. La reabsorción de agua es de 20 ml/g.

EJEMPLO 9 Composiciones de algodón-alginato-dextrano Se sumerge una gasa de algodón (celulosa) farmacéuticamente aceptable o se asperja con una solución de alginato de sodio (0.5-4%) . Las gasas revestidas con alginato de sodio húmedas se asperjan o se espolvorean con esferas de dextrano-calcio, preparadas como se describió previamente. El calcio se intercambia con el sodio en el alginato, dando como resultado alginato de calcio entrelazado. Los enlaces iónicos formados entre la celulosa, alginato, y dextrano, incorporan químicamente de esta manera a las esferas en la gasa para formar las composiciones hemostát icas .

Ejemplo 10 esferas de dextrano- alginato se disuelven 43 g de dextrano (peso molecular 40,000) el 50 mi de NaOH 2N, y se mezclan con 50 mi de una solución de alginato de sodio al 2% (43% de dextrano y 1% de alginato en 100 mi de NaOH 1N) . Las gotitas de dextrano-alginato de 50-200 µ?? se unen y entrelazan en una solución de cloruro de calcio al 1.7%. Las esferas se unen y entrelazan adicionalmente agregando 7.2 mi de epiclorhidrina a 100 mi de la solución de cloruro de calcio a 45°C con agitación. La reacción continúa durante un máximo de 16 horas hasta que se presenta la cantidad deseada de unión y entrelazamiento. Las esferas se neutraliza con HC1 diluido, se lavan con concentraciones crecientes de alcohol (25, 50, 75,100%) y se secan a una temperatura de 70°C aproximadamente durante la noche. La reabsorción de agua es de 10 ml/g.

EJEMPLO 11 Composición de esferas de algodón-dextrano-alginato Se lavan esferas de dextrano-alginato entrelazadas y unidas, preparadas como se describió previamente, en un lavado final de alcohol -cloruro de calcio (0.04-1% de cloruro de calcio) . El alcohol se evapora para atrapar el calcio en los poros de las esferas. Las esferas después se incorporan químicamente en la gasa que contiene alginato de sodio, como se describió previamente.

EJEMPLO 12 Composiciones que tienen dextranos de pesos moleculares diferentes Se mezclan 100 gramos de dextrano (peso molecular 2,000,000) disueltos en 2,000 mi de NaOH 0.5N, con 30 g de esferas de dextrano, preparadas como se describió previamente . Se mezclan las esferas entrelazadas y las soluciones de dextrano, y se agregan 100 g de epiclorhidrina . Se coloca una gasa de celulosa farmacéuticamente aceptable en una caja de fondo plano y la solución alcalina de epiclorhidrina/esfera de dextrano/dextrano se vierte lentamente sobre la gasa para recubrir completamente las fibras con las esferas de dextrano y la solución de dextrano. La gasa recubierta se calienta a 50°C con mecimiento suave, hasta que se forma un gel sobre las fibras de la gasa, típicamente en 1-2 horas. La gasa recubierta se retira de la solución y se coloca en una caja de fondo plano se continúa el calentamiento hasta el punto final deseado, 8-12 horas aproximadamente. La gasa se neutraliza, se lava y se seca, como se describió previamente. EJEMPLO 13 Pruebas de composiciones de algodón - alginato - dextrano y esferas de calcio -dextrano Se aplican dos alginatos diferentes (G, M) en concentraciones de 0.5% y/o 1% a cuadrados de gasa de algodón 2 x 2 de 12 capas, tipo VII, en cantidades de 2 o 4 mi . Se unen iónicamente 0.5 g de esferas de calcio-dextrano (que contienen 3, 6, 12 o 24 mM de calcio) al alginato de sodio en la gasa. Se agrega sangre de humano recién extraída a cada muestra de prueba, agregando 0.5 mi a cada gasa de calcio-dextrano-alginato y 0.1 mi a las esferas de calcio-dextrano solas. Como control se utiliza gasa sumergida únicamente en alginato de sodio . La sangre agregada a las esferas de calcio-dextrano coagula al contacto. Todas las gasas de calcio-dextrano-alginato coagulan la sangre en menos de 5 minutos, mientras que las gasas que contienen únicamente alginato producen sangre débilmente coagulada en > 5 minutos. Véase el siguiente Cuadro 1.

CUADRO 1 Tiempos de coagulación para composiciones hemostáticas Otras modalidades Se debe entender que aunque la invención se ha descrito en conjunto con la descripción detallada de la misma, la descripción anterior pretende ilustrar y no limitar el campo de la invención, el cual queda definido por el campo de las reivindicaciones anexas. Otros aspectos, ventajas, y modificaciones están dentro del campo de las siguientes reivindicaciones.

Claims (1)

1. NOVEDAD DE LA INVENCION Habiendo descrito el presente invento se considera como novedad y por lo tanto se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes : REIVINDICACIONES 1.- Un método para controlar el sangrado en un sitio de lesión con sangrado activo de un animal, dicho método comprende aplicar una composición hemostática a dicho sitio de lesión con sangrado activo, dicha composición hemostática comprende un artículo que comprende celulosa y un polisacárido unido covalentemente a dicha celulosa. 2. - El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque dicho polisacárido se selecciona a partir del grupo que consiste de dextrano, almidón, y alginato. 3. - El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque dicho polisacárido es dextrano. 4.- El método de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque dicho dextrano está en forma de glóbulos covalentemente entrelazados. 5. - El método de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque el peso molecular de dicho dextrano es desde 10,000 aproximadamente hasta 2,000,000 aproximadamente. 6. - El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque el peso molecular de dicho dextrano varía desde 20,000 aproximadamente hasta 100,000 aproximadamente. 7. - El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque dicho polisacárido unido covalentemente tiene un límite de exclusión de peso molecular mayor de 30,000 Daltons aproximadamente . 8. - El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque dicho artículo que comprende celulosa se selecciona a partir del grupo que consiste de un vendaje, sutura, aposito, gasa, gel, espuma, malla, película, cinta, o parche. 9.- El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque dicho artículo que comprende celulosa comprende algodón. 10. - El método de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque dicho artículo que comprende celulosa es gasa de algodón. 11.- El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque antes de la aplicación de dicha composición hemostática, dicho sitio de lesión con sangrado activo sangra a una velocidad de 0.5 ml/minuto aproximadamente hasta 1000 ml/minuto aproximadamente. 12. - El método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque después de la aplicación de dicha composición hemostática, dicho sitio de lesión con sangrado activo sangra a una velocidad de menos de 0.03 ml/min. 13. - El método de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque dicha velocidad menor de 0.03 ml/min se logra en un lapso de 2 aproximadamente hasta 20 minutos aproximadamente después de la aplicación de dicho vendaje. 14. - El método de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque dicha composición hemostática comprende también un segundo polisacarido unido covalentemente a dicha celulosa. 15. - El método de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque dicha composición hemostática comprende también dextrano que tiene un peso molecular desde 800,000 aproximadamente hasta 2M aproximadamente unido covalentemente a dicha celulosa. 16.- Un método para controlar el sangrado en un sitio de lesión con sangrado activo de un animal, dicho método comprende aplicar una composición hemostática a dicho sitio de lesión con sangrado activo, dicha composición hemostática comprende un artículo que comprende celulosa en asociación con un polisacárido iónicamente entrelazado. 17. - El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque dicho polisacárido iónicamente entrelazado es alginato. 18. - El método de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado porque dicho alginato está iónicamente entrelazado con un catión que se selecciona a partir del grupo que consiste de: Mg2+; Ni2+; Ca2+ Sr2+; Ba2+; Zn2+; Cd2+; Cu2+; Pb2+; Fe3+; y Al3+. 19.- El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque dicho catión es Ca2+. 20.- El método de conformidad con la reivindicación 17, que comprende también un segundo polisacárido físicamente atrapado en una red formada por dicho polisacárido iónicamente entrelazado. 21.- El método de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque dicho segundo polisacárido es dextrano. 22. - El método de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque dicho dextrano está en forma de glóbulos covalentemente entrelazados. 23. - El método de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque dicho polisacárido también está unido covalentemente a dicha celulosa. 24. - El método de conformidad con la reivindicación 17, caracte izado porque dicho alginato también está unido covalentemente al dextrano . 25. - El método de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado porque dicho dextrano está en forma de glóbulos covalentemente entrelazados . 26. - El método de conformidad con la reivindicación 1 or claim 16, caracterizado porque dicha composición hemostática comprende también un agente que se selecciona a partir del grupo que consiste de analgésicos, esteroides, anti-histamínicos , anestésicos, bactericidas, desinfectantes, fungicidas, vasoconstrictores, hemostáticos, fármacos quimioterapéuticos , antibióticos, queratol í ticos , agentes para cauterización, fármacos antivirales, factor de crecimiento epidérmico, factores de crecimiento de fibroblasto, factores de crecimiento transformantes, glicoproteínas , colágeno, fibrinógeno, fibrina, humectantes, conservadores, linfocinas, citocinas, materiales para control del olor, vitaminas, y factores de coagulación. 27. - Un método para fabricar una composición, dicho método comprende incubar un agente enlazador, un polisacárido, y un artículo que comprende celulosa para formar una composición hemostática que comprenda a dicho polisacárido unido covalentemente a dicha celulosa. 28. - El método de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado porque dicho agente enlazador es epiclorhidrina . 29. - El método de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado porque dicha incubación ocurre en una solución alcalina acuosa. 30.- El método de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado porque dicha incubación ocurre a una temperatura de 40°C aproximadamente hasta 70°C aproximadamente. 31.- El método de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado porque dicha incubación ocurre a una temperatura de 50°C aproximadamente. 32. - El método de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado porque se permite que dicha incubación ocurra desde 1 aproximadamente hasta 24 horas aproximadamente. 33. - El método de conformidad con la reivindicación 29, que comprende también efectuar dicho paso de incubación en presencia de una solución estabilizadora . 34. - El método de conformidad con la reivindicación 33, caracterizado porque dicha solución estabilizadora comprende butirato de acetato de celulosa. 35. - El método de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado porque dicho polisacárido es dextrano. 36. - El método de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado porque dicho dextrano está en forma de glóbulos covalentemente entrelazados. 37. - El método de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado porque el peso molecular de dicho dextrano es desde 10,000 aproximadamente hasta 2,000,000 aproximadamente. 38. - El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque el peso molecular de dicho dextrano es desde 20,000 aproximadamente hasta 100,000 aproximadamente. 39. - El método de conformidad con la reivindicación 29, caracterizado porque dicha incubación se efectúa en una solución alcalina acuosa que tiene 12% aproximadamente hasta 75% aproximadamente de dextrano. 40. - El método de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado porque dicho polisacárido unido covalentemente tiene un límite de exclusión de peso molecular mayor de 30,000 Daltons aproximadamente . 41. - El método de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado porque dicho artículo que comprende celulosa comprende algodón. 42. - El método de conformidad con la reivindicación 41, caracterizado porque dicho artículo que comprende celulosa es gasa de algodón. 43. - Un método para fabricar una composición, dicho método comprende incubar un artículo que comprende celulosa en una solución de un polisacárido y un catión para formar una composición hemostática en la cual dicho polisacárido está iónicamente entrelazado y asociado con dicho artículo. 44. - El método de conformidad con la reivindicación 43, caracterizado porque dicho polisacárido es alginato. 45. - El método de conformidad con la reivindicación 43, caracterizado porque dicho catión es el ion Ca2+. 46.- El método de conformidad con la reivindicación 45, caracterizado porque dicho Ca2+ se obtiene a partir de glóbulos de dextrano, entrelazados, porosos, cargados con ión Ca2+. 47.- El método de conformidad con la reivindicación 43, caracterizado porque dicha solución comprende también un segundo polisacárido. 48. - El método de conformidad con la reivindicación 47, caracterizado porque dicho segundo polisacárido es dextrano. 49. - El método de conformidad con la reivindicación 48, caracterizado porque dicho dextrano está en forma de glóbulos covalentemente entrelazados. 50. - El método de conformidad con la reivindicación 47, caracterizado porque dicho segundo polisacárido esta físicamente atrapado por una red formada por dicho polisacárido iónicamente entrelazado. 51. - El método de conformidad con la reivindicación 43, que comprende también incubar un segundo polisacárido y un agente enlazador con dicho artículo que comprende celulosa para, formar una composición hemostática que comprende a dicho segundo polisacárido unido covalentemente a dicha celulosa. 52. - El método de conformidad con la reivindicación 51, caracterizado porque dicho agente enlazador es epiclorhidrina . 53. - El método de conformidad con la reivindicación 51, caracterizado porque dicho segundo polisacárido es dextrano. 54. - Un método para fabricar una composición hemostática, dicho método comprende: (a) mezclar una solución alcalina de polisacárido de fase acuosa con una solución de agente estabilizador de fase orgánica para formar una mezcla que comprenda esferas de polisacárido; (b) incubar un agente de entrelazamiento con dicha mezcla para entrelazar hechas esferas de polisacárido ; (c) aislar dichas esferas de polisacárido entrelazado; y (d) recubrir un artículo que comprende una solución de alginato de sodio con dichas esferas de polisacárido entrelazado. 55.- El método de conformidad con la reivindicación 54, caracterizado porque dicho paso de aislamiento comprende retirar de dicha mezcla al agente estabilizador de fase orgánica. 56. - El método de conformidad con la reivindicación 54, que comprende también exponer dichas esferas de polisacárido entrelazado a una solución que comprende iones Ca2+. 57. - El método de conformidad con la reivindicación 54, caracterizado porque dicho polisacárido comprende dextrano. 58. - El método de conformidad con la reivindicación 54, caracterizado porque dicha solución de agente estabilizador de fase orgánica comprende butirato de acetato de celulosa. 59. - El método de conformidad con la reivindicación 54, caracterizado porque dichas esferas de polisacárido tienen un tamaño entre 30 aproximadamente y 500 µt? aproximadamente. 60. - El método de conformidad con la reivindicación 54, caracterizado porque dichos pasos de mezclado e incubación ocurren a una temperatura de 40°C aproximadamente hasta 70°C aproximadamente. 61. - El método de conformidad con la reivindicación 54, caracterizado porque dicho paso de recubrimiento se efectúa asperjando dicho artículo con dichas esferas de polisacárido entrelazado. 62. - Una composición hemostática fabricada de conformidad con el método de la reivindicación 54. 63. - Un método para fabricar una composición hemostática, dicho método comprende: (a) proveer una solución alcalina de fase acuosa que comprende dextrano y alginato de sodio; (b) preparar esferas de dextrano-alginato a partir de dicha solución alcalina de fase acuosa; y (c) incubar dichas esferas de dextrano-alginato con un agente enlazador para unir dichas esferas de dextrano-alginato. 64. - El método de conformidad con la reivindicación 63, caracterizado porque dichas esferas de dextrano-alginato se preparan con un atomizador mecánico. 65. - El método de conformidad con la reivindicación 63, caracterizado porque dicho agente enlazador es epiclorhidrina . 66. - El método de conformidad con la reivindicación 63, caracterizado porque dicho agente enlazador es agente enlazador a base de Ca2+. 67. - El método de conformidad con la reivindicación 63, caracterizado porque dichas esferas de dextrano-alginato se incuban con un agente enlazador a base de Ca24 y un agente enlazador de tipo epiclorhidrina . 68. - El método de conformidad con la reivindicación 63, que comprende también recubrir un artículo con dichas esferas de dextrano- alginato unidas . 69. - El método de conformidad con la reivindicación 68, caracterizado porque dicho recubrimiento se efectúa asperjando dichas esferas de dextrano-alginato unidas sobre dicho artículo. 70. - El método de conformidad con la reivindicación 68, caracterizado porque dicho artículo comprende una solución de alginato de sodio. 71. - Una composición hemostática fabricada de conformidad con el método de la reivindicación 63. 72. - Una composición hemostática que comprende un artículo que comprende celulosa que tenga un polisacarido unido covalentemente a dicha celulosa . 73. - La composición hemostática de conformidad con la reivindicación 72, caracterizada porque dicho polisacárido se selecciona a partir del grupo que consiste de dextrano, almidón, y alginato. 7 . - La composición hemostática de conformidad con la reivindicación 73, caracterizada porque dicho polisacárido es dextrano. o 71 75.- La composición hemostática de conformidad con la reivindicación 74, caracterizada porque dicho dextrano unido a dicha celulosa está en forma de glóbulos covalentemente entrelazados. 5 76. - La composición hemostática de conformidad con la reivindicación 73, caracterizada porque el peso molecular de dicho dextrano varía desde 10,000 aproximadamente hasta 2,000,000 aproximadamente. 77. - La composición hemostática de conformidad 10 con la reivindicación 76, caracterizada porque el peso molecular de dicho dextrano varía desde 20,000 aproximadamente hasta 100,000 aproximadamente. 78. - La composición hemostática de conformidad con la reivindicación 72, caracterizada porque dicho 15 polisacárido unido covalentemente tiene un límite de exclusión de peso molecular mayor de 30,000 Daltons aproximadamente . 79. - La composición hemostática de conformidad con la reivindicación 73, caracterizada porque dicho 20 artículo que comprende celulosa comprende algodón. 80. - La composición hemostática de conformidad con la reivindicación 79, caracterizada porque dicho artículo que comprende celulosa es gasa de algodón. 81. - Una composición hemostática que comprende 25 un artículo que comprende celulosa en asociación con alginato y dextrano entrelazados. 82. - La composición hemostática de conformidad con la reivindicación 81, caracterizada porque dicho alginato está unido covalentemente a dicha celulosa. 83. - La composición hemostática de conformidad con la reivindicación 81, caracterizada porque dicho dextrano está en forma de glóbulos covalentemente entrelazados . 84. - La composición hemostática de conformidad con la reivindicación 83, caracterizada porque dichos glóbulos de dextrano covalentemente entrelazados comprenden Ca2+. 85. - Una composición hemostática que comprende esferas de dextrano-alginato iónicamente enlazadas. 86.- La composición hemostática de conformidad con la reivindicación 85, caracterizado porque dichas esferas de dextrano-alginato iónicamente enlazadas se enlazan iónicamente con Ca2+. 87.- La composición hemostática de conformidad con la reivindicación 86, caracterizado porque dichas esferas de dextrano-alginato iónicamente enlazadas también están covalentemente entrelazadas.