MXPA00011889A - Composiciones de pirrolo (2,3d) piridina y su uso. - Google Patents

Abstract

Se describen Deseaza Purinas nuevas las cuales, son utiles par tratamiento de enfermedades estimuladas por el receptor de adenosina.

Description

COMPOSICIONES DE PIRRÓLO [2,3d] PIRIMIDINA Y SU USO Antecedentes del Invento La adenosina es un modulador de numerosas actividades fisiológicas que se encuentra en todas partes, particularmente dentro de los sistemas cardiovascular y nervioso. Los efectos de la adenosina parecen ser mediados por las proteínas específicas receptoras de la superficie celular. La adenosina modula diferentes funciones fisiológicas, incluyendo la inducción de la sedación, vasodilatación, supresión de los latidos y contractilidad cardíaca, inhibición de la capacidad para agregar las plaquetas, estimulación de la gluconeogénesis y inhibición de la lipólisis. Además de sus efectos en la actividad del adenilato de la ciclasa, La adenosina ha mostrado abrir los canales de potasio, reducir el flujo a través de los canales de calcio, e inhibir o estimular la rotación de la fosfoinositida a través de los mecanismos mediados por el receptor (ver por ejemplo, la publicación de C. E. Muller y B. Stein "Antagonistas Receptores de Adenosina: Estructuras y Aplicaciones Terapéuticas Potenciales" (Adenosine Receptor Antagonists: Structures and Potential Therapeutic Applications), Current Pharmaceutical Design, 2: página 501 (1996) y la publicación de C. E. Muller "Antagonistas Receptores de Adenosina Ai", (Ai-Adenosine Receptor Antagonists), Exp. Opin. Ther. Patents 7 (5): Página 419 (1997)). Los receptores de adenosina pertenecen a la superfamilia de los receptores de purina, los cuales, actualmente están subdivididos en los receptores Ti (adenosina) y P2 (ATP, ADP, y otros nucleótidos). Se han clonado cuatro subtipos receptores para la adenosina del nucleótido de varias especies, incluyendo los humanos. Dos subtipos del receptor (A: y A2a), exhiben afinidad para la adenosina en un rango nanomolar, mientras que los otros dos subtipos de receptores conocidos A2b y A3 tienen poca afinidad , siendo la afinidad con la adenosina en el rango micromolar bajo. La activación del receptor de adenosina Ai y A3 puede conducir a una inhibición de la actividad del adenilato de la ciclasa, mientras que la activación del A2a y A2b causa la estimulación de la actividad del adenilato de la ciclasa. Se han desarrollado pocos antagonistas Ai para el tratamiento de enfermedades cognoscitivas, fallas renales y arritmias cardíacas. Se ha sugerido que los antagonistas A2a pueden ser benéficos para pacientes que sufren de Morbus Parkinson (enfermedad de Parkinson). Particularmente, en vista de la ad ministración local potencial, los antagonistas del receptor de adenosina pueden ser valiosos para el tratamiento de la inflamación alérgica y el asma. La información disponible (por ejemplo, la publicación de Nyce & Metzger "Terapia Antipercepción de ADN para el Asma en el Modelo Animal" (DNA antisense Therapy for Asthma in an Animal Model) Nature (1997) 385 : páginas 721 a 725), indica que en este contexto patofisiológico, los antagonistas Ai pueden bloquear la contracción del músculo liso del epitelio respiratorio subyacente, mientras que los antagonistas del receptor A2b o A3 pueden bloquear la desgranulación de la célula maestra, mitigando la liberación de histamina y otros mediadores inflamatorios. Los receptores A2b han sido descubiertos a través del aparato gastrointestinal, especialmente en el colon y el epitelio intestinal. Se ha sugerido, que los receptores A2b son mediadores de las respuestas cAMP (Strohmeier y asociados, J . Bio. Chem. (1995) 270 : Páginas 2387 a 2394). Los receptores de adenosina también han mostrado existir en las retinas de varias especies de mamíferos, ¡ncluyendo bovinos, porcinos, monos, ratas, cerdos de guinea, ratones, conejo y humanos (ver la publicación de Blazynski y asociados, "Distribuciones Separadas de Receptores de Adenosina en la Retina de Mamíferos" (Discrete Distributions of Adenosine Receptors ¡n Mammalian Retina) Journal of Neurochemistry, volumen 54, páginas 648 a la 655 (1990); la publicación de Woods y asociados, "Caracterización de los Sitios de Enlace del Receptor Ai de Adenosina en Membranas de la Retina de Bovinos" (Characterization of Adenosine A-i- Receptor Binding Sites in Bovine Retinal Membranes) Experimental Eye Research, volumen 53, páginas 325 a la 331 (1991 ); y la publicación de Braas y asociados, "Adenosina Endógena y Receptores de Adenosina Localizados en la Células de los Gángleos de la Retina" (Endogenous adenosine and adenosine receptors localized to ganglion cells of the retina) Proceeding of the National Academy of Science, volumen 84, páginas 3906 a 3910 (1987)). Recientemente, Williams reportó la observación de que los sitios de transporte de la adenosina en la línea celular cultivada de la retina humana (Williams y asociados, "Sitios de Transporte de Nucleósidos en una Línea Celular Cultivada de la Retina Humana Establecida por el Gen Antígeno SV-40 T" (Nucleoside Transport Sites in a Cultured Human Retinal Cell Line Established By SV- 40 T Antigen Gene) Current Eye Research, volumen 13, páginas 109 a 1 18 (1994)). Los compuestos que regulan la asimilación de la adenosina, han sido sugeridos anteriormente como agentes terapéuticos potenciales para el tratamiento de enfermedades de la cabeza del nervio óptico y la retina. En la Patente Norteamericana No. 5,780,450 otorgada a Shade, Shade explica el uso de los inhibidores de asimilación de adenosina para el tratamiento de enfermedades de los ojos. Shade no describe el uso de inhibidores específicos del receptor A3. El contenido completo de la Patente Norteamericana No. 5,780,450, está incorporado a la presente descripción como referencia. Se necesitan antagonistas receptores de adenosina adicionales como herramientas farmacéuticas, y son considerados de interés como medicinas para las condiciones y/o estados de enfermedad anteriormente mencionados.

Sumario del Invento La presente invención está basada, por lo menos en parte, en el descubrimiento de que ciertas 7-deazapurina substituida por N-6 descritas anteriormente, pueden ser utilizadas para tratar un estado que responde a la 7-deazapurina substituida por N-6. Los ejemplos de dichas condiciones incluyen aquellos, en los cuales es auamentada la actividad de los receptores de adenosina, por ejemplo, bronquitis, enfermedades gastrointestinales o asma. Estas condiciones, pueden ser caracterizadas porque la activación del receptor de adenosina puede conducir a la inhibición o estimulación de la actividad del adenilato de la ciclasa. Las composiciones y métodos de la presente invención, incluyen 7-deazapurinas sustituidas por N-6 enantioméricas o diastoméricamente puras. Las 7-deazapurinas substituidas por N-6 incluyen aquellas que tienen una acetamida, carboxamida, ciciohexilo substituido, por ejemplo, ciclohexanol, o una porción de urea adherida al nitrógeno N-6, a través de una cadena de alquileno. La presente invención pertenece a los métodos para la modulación del (los) receptor(es) de adenosina de un mamífero, mediante la administración al mamífero de una cantidad terapéuticamente efectiva de una 7-deazapurina substituida por N-6, de modo que ocurra la modulación de la actividad receptora de la adenosina. Los receptores adecuados de adenosina incluyen las familias A-i , A2, o A3. En una modalidad preferida, la 7-deazapurina substituida por N-6 es un antagonista del receptor de adenosina. La presente invención pertenece además a los métodos para el tratamiento de enfermedades con la 7-deazapurina substituida por N-6, por ejemplo, asma, bronquitis, rinitis alérgica, enfermedad obstructiva pulmonar crónica, desórdenes renales, desórdenes gastrointestinales, desórdenes de la vista, en un mamífero administrando al mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva de una 7-deazapurina substituida por N-6, de modo que ocurre el tratamiento de la enfermedad en el mamífero. Las 7-deazapurinas substituida por N-6 adecuadas incluyen aquellas ilustradas en la formula general I : Y las sales farmacéuticamente aceptables de las mismas. Ri y R2 son cada una independientemente un átomo de hidrógeno, o una porción alquilo, arilo, o alquilarilo substituida o no substituida o que juntas forman un anillo heterocíclico substituido o no substituido. R3 es una porción alquilo, arilo o alquilarilo substituido o no substituido. R4 es un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo substituida o no substituida. R5 y Rß son cada una independientemente un átomo de halógeno, por ejemplo, cloro, fluoro o bromo, un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo substituida o no substituida o R4 y R5, o R5 y Rß juntos, forman un anillo heterocíclico o carbocíclico substituido o no substituido. En ciertas modalidades, R1 y R2 pueden ser cada una independientemente porciones cicloalquilo o heteroarilalquilo substituido o no substituido. En otras modalidades, R3 es un átomo de hidrógeno o una porción heteroarilo substituido o no substituido. Todavía en otras modalidades, R4, R5 y RT pueden ser cada una independientemente porciones heteroarilo. En una modalidad preferida, R1 es un átomo de hidrógeno, R2 es un ciclohexanol, por ejemplo trans-ciclohexanol, R3 es fenilo, R4 es un átomo de hidrógeno, R5 es un grupo metilo y RT es un grupo metilo. Y todavía en otra modalidad , R1 es un átomo de hidrógeno, R2 es es fen"0' 4 es un átomo de hidrógeno y R5 y Ré son grupos tilo La presente invención pertenece adicionalmente a las composiciones farmacéuticas para el tratamiento de condiciones que responden a la 7-deazapurina substituida por N-6 en un mamífero, por ejemplo, asma, bronquitis, rinitis alérgica, enfermedad crónica pulmonar obstructiva, desórdenes renales, desórdenes gastrointestinales y desórdenes de la vista. La composición farmacéutica incluye, una cantidad terapéuticamente efectiva de una 7-deazapurina substituida por N-6 y un vehículo farmacéuticamente aceptable. La presente invención, también pertenece a las composiciones farmacéuticas empacadas para el tratamiento de condiciones que responden a la 7-deazapurina substituida por N-6 en un mamífero. La composición farmacéutica empacada, incluye un contenedor que tiene una cantidad terapéuticamente efectiva de, por lo menos, una 7-deazapurina substituida por N-6 y las instrucciones para usar la 7-deazapurina substituida por N-6 para el tratamiento de enfermedades que responden a la 7-deazapurina substituida por N-6 en un mamífero. La presente invención además pertenece a los compuestos de la fórmula 1 en donde: Ri es hidrógeno; R2 es cicloalquilo substituido o no substituido, alquilo substituido o no substituido, o Ri y R2 juntas forman un anillo heterocíclico substituido o no substitu ido; R3 es arilo no substituido o substituido; R es hidrógeno; y Rs y Rß son cada una independientemente hidrógeno o alquilo, y las sales farmacéuticamente aceptables de las mismas. Las deazapurinas de esta modalidad pueden ser ventajosamente antagonistas selectivos del receptor A3. Estos compuestos pueden ser útiles para numerosos usos terapéuticos tales como, por ejemplo, el tratamiento del asma, la falla del riñon asociada con fallas cardíacas y glaucoma. En una modalidad particularmente preferida, la deazapurina es soluble en agua que tiene una capacidad de ser metabolizada en vivo a una droga activa mediante, por ejemplo, hidrólisis de esterasa catalizada. Todavía en otra modalidad , la presente invención caracteriza un método para inhibir la actividad de un receptor de adenosina (por ejemplo, A3 en una célula, poniendo un contacto la célula con la 7-deazapurina substituida por N-6 (por ejemplo, preferentemente, un antagonista del receptor de adenosina). En otro aspecto, la presente invención caracteriza un método para tratar un daño en el ojo de un animal (por ejemplo, un humano) mediante la administración a dicho animal de una cantidad efectiva de una 7-deazapurina substituida por N-6 de la Fórmula 1 . Preferentemente, la 7-deazapurina substituida por N-6 es un antagonista de los receptores de adenosina A3 en las células del animal. El daño es a la retina o a la cabeza del nervio óptico y puede ser agudo o crónico. El daño puede ser el resultado de, por ejemplo, glaucoma, adema, isquemia, hipoxia o trauma. La presente invención, también caracteriza una composición farmacéutica que comprende la 7-deazapurina substituida por N-6 de la Fórmula I . Preferentemente, la preparación farmacéutica es una formulación oftálmica (por ejemplo, es una formulación de inyección periocular, retrobulbar o intraocular, una formulación sistémica, o una solución de irrigación quirúrgica). Todavía en otra modalidad, la presente invención caracteriza una deazapurina que tiene la formula I I : («) en donde X es N o CR6; Ri y R2 son cada una independientemente hidrógeno o alcoxilo, aminoalquilo, alquilo, arilo o alquilarilo substituido o no substiuido, o juntas forman un anillo heterocíclico substituido o no substituido, a condición de que ninguna de Ri o R2 sean hidrógeno; R3 es alquilo, arilaquilo o arilo substituido o no substituido; R4 es hidrógeno o alquilo C1 - Ce substituido o no substituido; L es hidrógeno, alquilo substituido o no substituido, o R4 y L juntas forman un anillo heterocíclico o carbocíclico substituido o no substitu ido; Rß es hidrógeno, alquilo substituido o no substituido o halógeno; Q es CH2, O, S, o NR7, en donde R es hidrógeno o alquilo C1 - C substituido o no substituido; y W es alquilo, cicloalquilo, arilo, arilalquilo, biarilo, heteroarilo, substituido o no substituido, carbonilo substituido, tiocarbonilo substituido o sulfonilo substituido; A condición de que si R3 es pirrolidino, entonces R4 no es metilo. La presente invención, pertenece también a las sales farmacéuticamente aceptables y prodrogas de los compuestos de la presente invención. En una modalidad ventajosa, X es CR6 y Q es CH2, O, S, o N H en la fórmula I I , en donde Rß es tal y como se definió anteriormente. En otra modalidad de la fórmula I I , X es N .

La presente invención, pertenece además, a un método para la inhibición de la actividad de un receptor de adenosina (por ejemplo, un receptor A2b de adenosina) en una célula, poniendo en contacto la célula con un compuesto de la presente invención. Preferentemente, el compuesto es un antagonista del receptor. La presente invención pertenece también a un método para el tratamiento de una enfermedad gastrointestinal (por ejemplo, diarrea) o una enfermedad respiratoria (por ejemplo, rinitis, rinitis alérgica, enfermedad crónica pulmonar obstructiva) en un animal , mediante la administración al animal de una cantidad efectiva de un compuesto de la fórmula I I (por ejemplo, un antagonista de A2b). Preferentemente, el animal es un humano.

Descripción Detallada del Invento. Las características y otros detalles de la presente invención, ahora se describirán de una manera más particular y se señalarán en las Reivindicaciones adjuntas. Deberá quedar entendido, que las modalidades particulares de la presente invención, son mostradas a modo de ilustración y no como una limitación de la presente invención. Las características principales de la presente invención, pueden ser empleadas en varias modalidades sin salirse del alcance de la presente invención. La presente invención pertenece a métodos para el tratamiento de condiciones que responden a la 7-deazapurina substituida por N-6 en un mamífero. Los métodos incluyen la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de una 7-deazapurina substituida por N-6, descrita anteriormlente, a un mamífero, de modo que ocurra el tratamiento de la enfermedad que responde a la 7-deazapurina substituida por N-6 en el mamífero. Los términos "condición que responde a la 7-deazapurina substituida por N-6" pretenden incluir una condición o estado de enfermedad caracterizado por su capacidad de respuesta al tratamiento con una 7-deazapurina substituida por N-6 de la presente invención tal y como se describió anteriormente, por ejemplo, el tratamiento incluye una disminución significativa de, por lo menos un síntoma o efecto de la condición lograda con una 7-deazapurina substituida por N-6 de la presente invención. Generalmente, dichas condiciones están asociadas con un aumento de la adenosina dentro de una célula huésped , de modo que la célula huésped frecuentemente experimenta síntomas fisiológicos, los cuales incluyen, pero no están limitados a, la liberación de toxinas, inflamación, coma, retención de agua, ganancia de peso o pérdida de peso, pancreatitis, enfisema, artritis reumatoide, osteoartritis, falla múltiple de órganos, síndrome de agotamiento respiratorio en infantes y adultos, rinitis alérgica, enfermedad crónica pulmonar obstructiva, enfermedades de los ojos, enfermedades gastrointestinales, promoción de tumores en la piel, inmunodeficiencia y asma (ver por ejemplo, la publicación de C. E. Muller y B. Stein "Antagonistas Receptores de Adenosina: Estructuras y Aplicaciones Terapéuticas Potenciales" (Adenosine Receptor Antagonists: Structures and Potential Therapeutical Applications), Current Pharmaceutical Design, 2: página 501 (1996); y la publicación de C.E. Muller "Antagonistas del Receptor de Adenosina A-T' (A-i-Adenosine Receptor Antagonists), Exp. Opin. Ther Patents 7 (5): página 419 (1997); y la publicación de I . Feoktistove, R. Polosa, S.T. Holgate e I . Biaggioni "Receptores de Adenosina A2b: ¿un objetivo terapéutico nuevo en el asma?" (Adenosine A2b receptores: a Novel Therapeutical Target in Asthma?) TiPS 19: página 148 (1998)). Los efectos frecuentemente asociados con dichos síntomas, incluyen, pero no están limitados a fiebre, dificultades respiratorias, náuseas, diarrea, debilidad , dolor de cabeza y hasta la muerte. En una modalidad , la enfermedad que responde a la 7-deazapurina substituida por N-6, ¡ncluye aquellas condiciones de enfermedad , las cuales son mediadas por la estimulación de los receptores de adenosina, por ejemplo, Ai , A2a, A2b, A3, etc. , de modo se modulan las concentraciones de calcio en las células y/o la activación de PLC (fosfolipasa C). En una modalidad preferida, una enfermedad que responde a la 7-deazapurina substituida por N-6 está asociada con un receptor de adenosina, por ejemplo, la 7-deazapurina substituida por N-6 actúa como un antagonista. Los ejemplos de las enfermedades que responden al tratamiento adecuado por los compuestos de la presente invención, por ejemplo, los subtipos de receptor de adenosina, los cuales son mediadores de los efectos biológicos que incluyen efectos en el sistema nervioso central (SNC), efectos cardiovasculares, efectos renales, efectos respiratorios, efectos inmunológicos, efectos gastrointestinales y efectos metabólicos. La cantidad relativa de adenosina en un sujeto, puede estar asociada con los efectos enumerados a continuación. Estos niveles aumentados de adenosina pueden detonar un efecto, por ejemplo, una respuesta fisiológica no deseable, por ejemplo, un ataque de asma. Los efectos en el SNC incluyen la liberación disminuida del transmisor (Ai ), la sedación (Ai ), la actividad locomotora disminuida (A2a), la actividad anticonvulsiva, la estimulación quimiorreceptora (A2) y la hiperalgesia. Las aplicaciones terapéuticas de los compuestos de la presente invención incluyen el tratamiento de la demencia, la enfermedad de Alzheimer y mejoras en la memoria. Los efectos card iovasculares incluyen la vasodilatación (A2a), (A2b) y (A3), la vasoconstricción (Ai ), bradicardia (Ai ), inhibición de plaquetas (A2a), inotropía y dromotropía card íaca negativa (Ai ), arritmia, taquicardia y angiogénesis. Las aplicaciones terapéuticas de los compuestos de la presente invención incluyen, por ejemplo, la prevención del daño inducido por la isquemia del corazón y la cardiotónica, la protección del tejido del miocardio y la restauración de la función cardíaca. Los efectos renales incluyen el GFR disminuido (Ai ), la contracción de la célula mesangial (Ai ), la antidiuresis (Ai ) y la inhibición de la liberación de renina (Ai ). Las aplicaciones terapéuticas adecuadas de los compuestos de la presente invención ¡ncluyen el uso de los compuestos de la misma como diuréticos, natriuréticos, restauradores de potasio, protectores del riñón/prevención de una falla renal aguda, los agentes antihipertensores, antioedematosos y agentes antinefríticos. Los efectos respiratorios incluyen la broncodilatación (A2), la broncoconstricción (Ai ), la enfermedad crónica pulmonar obstructiva, rinitis alérgica, secreción del moco y depresión respiratoria (A2). Las aplicaciones terapéuticas adecuadas para los compuestos de la presente invención incluyen aplicaciones antiasmáticas, el tratamiento de enfermedad del pulmón después del trasplante y enfermedades respiratorias. Los efectos inmunológicos incluyen, inmunosupresión (A2), quimiotaxis neutrófila (A2), generación neutrófila del superóxido (A2a) y desgranulación de la célula maestra (A2b y A3). Las aplicaciones terapéuticas de los antagonistas, incluyen la inflamación alérgica y no alérgica, por ejemplo, la liberación de histamina y otros mediadores inflamatorios. Los efectos gastrointestinales incluyen la inhibición de secreción de ácidos (Ai ) y la aplicación terapéutica puede incluir condiciones de reflujo y úlcera. Los efectos gastrointestinales también incluyen enfermedades del colon, intestinales y diarrea, por ejemplo, la enfermedad de diarrea asociada con la inflamación intestinal (A2b). Los desórdenes de los ojos ¡ncluyen lesión en la cabeza del nervio óptico y de la retina, y enfermedades relacionadas con traumas (A3). En una modalidad preferida, la enfermedad de los ojos es glaucoma. Otras aplicaciones terapéuticas de los compuestos de la presente ¡nvención incluyen el tratamiento de la obesidad (propiedades lipolíticas), hipertensión, tratamiento de la depresión, sedantes, anxiolíticos, como antilépticos y como laxantes, por ejemplo, que afectan la movilidad sin causar diarrea. El término "condición de enfermedad" intenta incluir aquellas condiciones causadas o asociadas con niveles no deseados de adenosina, actividad del adenililo de la ciclasa, actividad fisiológica aumentada asociada con la estimulación aberrante de los receptores de adenosina y/o un aumento en el cAMP. En una modalidad, la condición de enfermedad es, por ejemplo, asma, enfermedad crónica pulmonar obstructiva, rinitis alérgica, bronquitis, desórdenes renales, desórdenes gastrointestinales y/o desórdenes de los ojos. Los ejemplos adicionales incluyen bronquitis crónica y fibrosis quística. Los ejemplos adecuados de enfermedades inflamatorias ¡ncluyen leucemia no linfosítica, isquemia al miocardio, angina, infarto, isquemia cerebrovascular, claudicación intermitente, isquemia crítica del limbo, hipertensión venosa, venas varicosas, ulceración venosa y artereoesclerosis. Las condiciones de reperfusión dañada incluyen, por ejemplo, cualquier trauma postquirúrgico, tal como cirugía reconstructiva, trombólisis o angioplastía. El término "tratamiento de condiciones que responden a la 7-deazapurina substituida por N-6" o "tratamiento de una condición que responde a la 7-deazapurina substituida por N-6", intentan incluir los cambios en un estado o condición de enfermedad, tal y como se describió anteriormente, de modo que los síntomas fisiológicos en un mamífero pueden ser disminuidos o minimizados de una manera significativa. El término incluye también el control, prevención o inhibición de los efectos fisiológicos asociados con una cantidad aberrante de adenosina. En una modalidad preferida, el control de la condición o estado de enfermedad , es tal, que la condición o estado de enfermedad es erradicado. En otra modalidad preferida, el control es selectivo de modo que los niveles aberrantes de la actividad del receptor de adenosina son controlados mientras que no son afectados otros sistemas o parámetros fisiológicos. El término "7-deazapurina substituida por N-6" es reconocido en el arte y tiene la intención de inclu ir aquellos compuestos que tienen la fórmula I : la "7-deazapurina substituida por N" incluye las sales farmacéuticamente aceptables de la misma, y en una modalidad , también incluye ciertas purinas substituidas por N-6 descritas en la presente descripción.

En ciertas modalidades, la 7-deazapurina substituida por N-6, no es bencilo substituido por N-6 o feniletilo substituido por N-6. En otras modalidades R4 no es bencilo o feniletilo substituido. En las modalidades preferidas, ambas Ri y R2 no son átomos de hitrógeno. Todavía en otras modalidades preferidas, R3 no es un átomo de hitrógeno. El término "cantidad terapéuticamente efectiva" de una 7-deazapurina substituida por N-6, descrita anteriormente, es la cantidad suficiente de un compuesto terapéutico necesario para realizar su función pretendida dentro de un animal, por ejemplo, tratar una condición de enfermedad que responde a la 7-deazapurina substituida por N-6, o una condición de enfermedad en un mamífero. Una cantidad efectiva del compuesto terapéutico puede variar de acuerdo con factores, tales como la cantidad del agente causante o ya presente en el animal, la edad , peso y sexo del mamífero, y la capacidad de los compuestos terapéuticos de la presente invención, para afectar el estado que responde a la 7-deazapurina substituida por N-6 en el mamífero. Un experto en el arte podría estudiar los factores anteriormente mencionados y hacer una determinación con respecto a la cantidad efectiva del compuesto terapéutico sin experimentación indebida. También se puede utilizar un ensayo in vitro o in vivo para determinar una "cantidad efectiva" de un compuesto terapéutico descrito anteriormente. Los expertos en el arte seleccionarían una cantidad apropiada del compuesto terapéutico para usarla en el ensayo anteriormente mencionado o como un tratamiento terapéutico. La cantidad terapéuticamente efectiva, preferentemente disminuye por lo menos un síntoma o efecto asociado con la condición o estado que responde a la 7-deazapurina substituida por N-6 que está siendo tratada en, por lo menos aproximadamente un 20% (más preferentemente en por lo menos aproximadamente un 40%, aún más preferentemente en por lo menos aproximadamente el 60% y todavía más preferentemente en por lo menos aproximadamente el 80%), en relación con sujetos no tratados. Se pueden diseñar ensayos por parte de aquellos expertos en el arte, para medir la disminución de dichos síntomas y/o efectos. Se tiene la intención de que cualquier ensayo conocido en el arte con capacidad de medición de dichos parámetros, que puede ser incluido como parte de la presente invención . Por ejemplo, si el asma es la condición que está siendo tratada, entonces, el volumen de aire que está siendo gastado desde los pulmones de un sujeto puede ser medido antes y después del tratamiento para la med ición del aumento en el volumen, utilizando una técnica reconocida en el arte. De un modo similar, si la inflamación es la condición que está siendo tratada, entonces el área, la cual está inflamada puede ser medida antes y después del tratamiento para la medición de la disminución en el área inflamada, utilizando una técnica reconocida en el arte. El término "célula", incluye tanto células procarióticas como eucarióticas.

El término "animal", incluye cualquier organismo con receptores de adenosina o cualquier organismo susceptible a una enfermedad que responde a la 7-deazapurina substituida por N-6.

Los ejemplos de los animales incluyen hongos, mamíferos, reptiles y pájaros. También están incluidos los animales transgénicos. El término "mamífero" es reconocido en el arte y pretende incluir a cualquier animal, preferentemente a un animal de sangre caliente, preferentemente ganado, ovejas, cerdos, caballos, perros, gatos, ratas, ratones y humanos. Los mamíferos susceptibles a las condiciones que responden a la 7-deazapurina substituida por N-6, por ejemplo, en las condiciones de inflamación , enfisema, asma, sistema nervioso central o síndrome de agotamiento respiratorio agudo, están incluidos como parte de la presente invención. En cualquier aspecto, la presente invención pertenece a los métodos para la modulación de un receptor de adenosina en un mamífero por medio de la administración a d icho mamífero de una cantidad terapéuticamente efectiva de una 7-deazapurina substituida por N-6, de modo que ocurre la modulación del receptor de adenosina en el mamífero. Los receptores de adenosina adecuados incluyen las familias de Ai , A2 o A3. En una modalidad preferida, la 7-deazapurina substituida por N-6 es un antagonista del receptor de adenosina. El término "modulación del receptor de adenosina" pretende incluir aquellos casos en donde el compuesto interactúa con un receptor de adenosina, causando el aumento, disminución o la actividad fisiológica anormal asociada con un receptor de adenosina o efectos de cascada subsecuentes, resultantes de la modulación del receptor de adenosina. Las actividades fisiológicas asociadas con los receptores de adenosina, incluyen la inducción de sedación, vasodilatación, supresión de los latidos y contractilidad cardíaca e inhibición de la capacidad para agregar plaquetas, estimulación de gluconeogénesis, inhibición de lipólisis, apertura de los canales de potasio, reducción del flujo de los canales de calcio, etc. Los términos "modular", "modulado" y "modulación", intentan incluir la prevención, erradicación o inhibición del aumento resultante de la actividad fisiológica no deseada asociada con la estimulación anormal de un receptor de adenosina, por ejemplo, en el contexto de los métodos terapéuticos de la presente invención. En otra modalidad, el término "modula" ¡ncluye efectos antagónicos, por ejemplo, la disminución de la actividad o producción de mediadores de alergia e inflamación alérgica, los cuales son el resultado de la sobreestimulación de los receptores de adenosina. Por ejemplo, las deazapurinas terapéuticas de la presente invención pueden ¡nteractuar con los receptores de adenosina para inhibir, por ejemplo, la actividad del adenilato de la ciclasa. El término "condición caracterizada por la actividad aberrante del receptor de adenosina", intenta incluir aquellas enfermedades, desórdenes o condiciones, los cuales están asociados con la estimulación aberrante de un receptor de adenosina, de modo que la estimulación del receptor causa una cadena de eventos bioquímicos y/o fisiológicos, los cuales están directa o indirectamente asociados con la enfermedad, desorden o condición. Esta estimulación de un receptor de adenosina, no tiene que ser el único agente causante de la enfermedad , desorden o condición, sino solamente ser responsable de causar algunos de los síntomas generalmente asociados con la enfermedad, desorden o condición que está siendo tratada. La estimulación aberrante del receptor puede ser el único factor, o por lo menos otro agente puede estar involucrado en la condición que está siendo tratada. Los ejemplos de las condiciones, incluyen aquellos estados de enfermedad enumerados anteriormente, incluyendo la inflamación, enfermedades gastrointestinales, y aquellos síntomas manifestados por la presencia de la actividad aumentada del receptor de adenosina. Los ejemplos preferidos incluyen aquellos síntomas asociados con el asma, rinitis alérgica, enfermedad crónica pulmonar obstructiva, enfisema, bronquitis, desórdenes gastrointestinales y glaucoma. El término "tratando o tratamiento de una condición caracterizada por una actividad aberrante del receptor de adenosina", pretende incluir el alivio de, o la disminución de por lo menos un síntoma generalmente asociado con la condición. El término también ¡ncluye el alivio o disminución de más de uno de los síntomas. Preferentemente, el tratamiento cura, por ejemplo, elimina substancialmente los síntomas asociados con la condición. La presente invención pertenece a compuestos de 7-deazapurina substituida por N-6 que tienen la fórmula I: en donde Ri y R2 son cada una independientemente un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo substituida o no substituida o que juntas forman un anillo heterocíclico substituido o no substitu ido; R3 es un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo, o alquilarilo substituida o no substituida; R4 es un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo substituida o no substituida. R5 y RT son cada una independientemente un átomo de halógeno, por ejemplo, cloro, fluoro o bromo, un átomo de hidrógeno o una porción alqu ilo, arilo o alquilarilo substituida o no substituida o R4 y R5? o R5 y R juntas forman un anillo heterocíclico o carbocíclico substituido o no substituido. También están incluidas las sales farmacéuticamente aceptables de las 7-deazapupnas substituidas por N-6. En ciertas modalidades, R1 y R2 pueden ser cada independientemente porciones cicloalquilo o heteroarilalquilo substituidas o no substituidas. En otras modalidades, R3 es un átomo de hidrógeno o una porción heteroarilo substituida o no substituida. Aún en otras modalidades R4, R5 y Re pueden ser cada una independientemente una porción heteroarilo. En una modalidad , R1 es un átomo de hidrógeno, R2 es una porción ciciohexano, ciclopentilo, ciclobutilo o ciclopropano substituido o no substituido, R3 es una porción fenilo substituida o no substituida, R es un átomo de hidrógeno y, R5 y Re son ambas grupos metilo. En otra modalidad, R2, es un ciclohexanol, un ciclohexanediol, una ciclohexilsulfonamida, una ciclohexanamida, una ciclohexiléster, un ciciohexeno, un ciclopentanol o un ciclopentanediol y R3 es una porción fenilo. Todavía en otra modalidad, R1 es un átomo de hidrógeno, R2 es un ciclohexanol, R3 es una porción fenilo, piridina, furan, ciclopentano, o tiofeno substituido o no substituido, R4 es un átomo de hidrógeno, una porción alquilo, arilo o arilalquilo substituida, y R5 y Rß son cada una independientemente un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo substituida o no substituida. Todavía en otra modalidad, R1 es un átomo de hidrógeno, R2 es una alquilamina, arilamina, o alquilarilamina substituida o no substituida, una alquilamida, arilamida o alquilarilamida substituida o no substituida, una alquilsulfonamida, arilsulfonamida o alquilarilsulfonamida substituida o no substituida, una alquilurea, arilurea, o alquilarilurea substituida o no substituida, un alquilcarbamato, arilcarbamato o alquilarilcarbamato subsituido o no substituido, un ácido alquilcarboxíllco, ácido arilcarboxílico o ácido alquilarilcarboxílico substituido o no substituido, R3 es una porción fenilo substituida o no substituida, R4 es un átomo de hidrógeno y R5 y Rß son grupos metilo. En una modalidad adicional , R2 es guanidina, una guanidina modificada, cianoguanid ina, una tiourea, una tioamida o una amidina.

En una modalidad , R2 puede ser, en donde R2a-R2c son cada una independientemente un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo saturada o no saturada, y R2c. es un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo saturada o no saturada, NR2e, R2f o OR2g, en donde R2e-R2g son cada una independientemente un átomo de hidrógeno o porciones alquilo, arilo o alquilarilo saturadas o no saturadas. Alternativamente, R2a y R2b juntas, pueden formar un anillo carbocíclico o heterocíclico que tiene un tamaño de anillo entre aproximadamente 3 y 8 miembros, por ejemplo, grupos ciclopropilo, ciclopentilo, ciciohexilo. En un aspecto de la presente invención, ninguna de R5 y Re son metilo, preferentemente, una de R5 y Rß es un grupo alquilo, por ejemplo, un grupo metilo y la otra es un átomo de hidrógeno.

En otro aspecto de la presente invención , cuando R4 es 1 -feniletilo y Ri es un átomo de hidrógeno, entonces R3 no es fenilo, 2-clorofenilo, 3-clorofenilo, 4-clorofenilo, 3,4-diclorofenilo, 3-metoxifenilo, o 4-metoxifenilo o cuando R4 y Ri son 1 -feniletilo, entonces R3 no es un átomo de hidrógeno o cuando R4 es un átomo de hidrógeno y R3 es un fenilo, entonces Ri no es feniletilo. En otro aspecto de la presente invención , cuando R5 y Rß juntas forman un anillo carbocíclico, por ejemplo, pirimido[4,5-6]indole, entonces R3 no es fenilo cuando R4 es 1 -(4-metilfenil)etilo, fenilisopropilo, fenilo o 1 -feniletilo o cuando R3 no es un átomo de hidrógeno cuando R4 es 1 -feniletilo. El anillo carbocíclico formado por R5 o Re puede ser, ya sea aromático o alifático, y puede tener entre 4 y 12 átomos de carbono, por ejemplo, naftilo, fenilciclohexilo, etc. , preferentemente de entre 5 y 7 átomos de carbono, por ejemplo, ciclopentilo o ciciohexilo. Alternativamente, R5 y Re juntas pueden formar un anillo heterocíclico, tal como aquellos que se describirán a continuación. Los anillos heterocíclicos incluyen entre 4 y 12 átomos de carbono, preferentemente entre 5 y 7 átomos de carbono, y pueden ser, ya sea aromáticos o alifáticos. El anillo heterocíclico puede ser substituido adicionalmente incluyendo la substitución de uno o más átomos de carbono de la estructura del anillo por uno o más heteroátomos. Todavía en otro aspecto de la presente invención, Ri y R2 forman un anillo heterocíclico. Los ejemplos representativos incluyen, pero no están limitados a, aquellos anillos heterocíclicos que se mencionan a continuación, tales como morfolino, piperazina y similares, por ejemplo, 4-hidroxipiperidinas, 4-aminopiperidinas. En donde R-i y R2 juntas forman un grupo piperazino, R puede ser un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo substituida o no substituida. Todavía en otro aspecto de la presente invención, R4 y R5 juntas, pueden formar un anillo heterocíclico, por ejemplo, El anillo heterocíclico puede ser, ya sea aromático o alifático, y puede formar un anillo que tiene entre 4 y 12 átomos de carbono, por ejemplo, naftilo, fenilciclohexilo, etc. , y puede, ser ya sea, aromático o alifático, por ejemplo, ciciohexilo, ciclopentilo. El anillo heterocíclico puede ser substituido adicionalmente, incluyendo la substitución de los átomos de carbono de la estructura del anillo por uno o más heteroátomos. Alternativamente, R4 y R5 juntas pueden formar un anillo heterocíclico, tales como aquellos que se describen a continuación. En ciertas modalidades, la 7-deazapurina substituida por N-6 no es bencilo subtituido por N-6 o feniletilo subsituido por N-6. En otras modalidades, R4 no es bencilo o feniletilo substituido. En las modalidades preferidas, R1 y R2 no son átomos de hidrógeno ambas. Todavía en otras modalidades preferidas, R3 no es un átomo de hidrógeno.

Los compuestos de la presente invención pueden comprender prodrogas solubles en agua las cuales son metabolizadas in vivo a una droga activa, por ejemplo, por medio de hidrólisis de esterasa catalizada. Los ejemplos de las prodrogas potenciales incluyen deazapurinas con, por ejemplo, R2 como cicloalquilo substituido por -OC(0)(Z)NH2, en donde Z es una cadena lateral de un aminoácido que ocurre naturalmente o no naturalmente, o un análogo del mismo, unos aminoácidos a, ß, y, o ?, o un dipéptido. Las cadenas laterales de aminoácido preferidas incluyen aquellas de glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina, lisina, a-metilalanina, ácido carboxílico aminociclopropano, ácido azetidina-2 carboxílico, ß-alanina, ácido ?-aminobutírico, alanina-alanina, o glicina-alanina.

En una modalidad adicional , la presente invención caracteriza deazapurinas de la fórmula (I ), en donde: Ri es hidrógeno; R2 es cicloalquilo substituido o no substituido, alquilo substituido o no substitu ido, o Ri y R2 juntas forman un anillo heterocíclico substituido o no substituido; R3 es un arilo no substituido o substituido; R4 es hidrógeno; y R5 y Re son cada una independientemente hidrógeno o alquilo, y las sales farmacéuticamente aceptables de las mismas. Las deazapurinas de esta modalidad pueden ser potencialmente selectivas de antagonistas del receptor A3. En una modalidad, R2 es cicloalquilo substituido (por ejemplo, hidroxilo substituido), o no substituido. En una submodalidad ventajosa, R1 y R4 son hidrógeno, R3 es fenilo no substituido o substituido, y R5 y RT son cada una alquilo. Preferentemente, R2 es mono-hidroxiciclopentilo o mono-hidroxiciclohexilo. R2 también puede ser substituida por -N H-C(=0)E, en donde E es alquilo C1-C4 substituido o no substituido (por ejemplo, alquilamina, por ejemplo, etilamina). R1 y R2 también pueden formar juntas un anillo heterocíclico substituido o no substituido, el cual puede ser substituido por un grupo amina o acetamido. En otro aspecto, R2 puede ser -A-NHC(=0)B, en donde A es alquilo C1-C4 no substituido (por ejemplo, etilo, propilo, butilo), y B es alquilo C1-C4 substituido o no substituido (por ejemplo, metilo, aminoalquilo, por ejemplo, aminometilo o aminoetilo, alquilamino, por ejemplo, metilamino, etilamino); preferentemente cuando R1 y R4 son hidrógeno, R3 es fenilo no substituido o substitu ido, y R5 y RT son cada una alquilo. B puede ser cicloalquilo substituido o no substituido, por ejemplo, ciclopropilo o 1 -amino-ciclopropilo. En otra modalidad, R3 puede ser fenilo substituido o no substituido, preferentemente cuando R5 y RT son cada una alquilo. Preferentemente, R3 puede tener uno o más substituyentes (por ejemplo, o-, m- o p- clorofenilo, o-, m- o p-fluorofenilo). Ventajosamente, R3 puede ser heteroarilo substituido o no substituido, preferentemente cuando R5 y Rß son cada una alquilo. Los ejemplos de los grupos heteroarilo incluyen piridilo, pirimidilo, piridazinilo, pirazinilo, pirrolilo, triazolilo, tioazolilo, oxazolilo, oxadiazolilo, furanilo, metilenodioxifenilo y tiofenilo.

Preferentemente, R3 es 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, 2-pirimidilo o 3-pirimidilo, Preferentemente en una modalidad, R5 y Re son cada una hidrógeno. En otra, R5 y Re son cada una metilo. En una modalidad particularmente preferida, las deazapurinas de la presente invención, son prodrogas solubles en agua que pueden ser metabolizadas in vivo a una droga activa, por ejemplo, mediante la hidrólisis de esterasa catalizada. Preferentemente la prodroga comprende un grupo R2 el cual es cicloalquilo substituido por -OC(O)(Z)NH2, en donde Z es una cadena lateral de un aminoácido que ocurre naturalmente o no naturalmente, un análogo del mismo, un aminoácido a, ß, y, o ?, o un dipéptido. Los ejemplos de las cadenas laterales preferidas incluyen las cadenas laterales de glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina, lisina, a-metilalanina, ácido aminociclopropano carboxílico, ácido azetidina-2-carboxílico, ß-alanina, ácido ?-aminobutírico, alanina-alanina, o glicina-alanina. En una modalidad particularmente preferida, Z es una cadena lateral de glicina, R2 es ciciohexilo, R3 es fenilo, y R5 y Rß son metilo. En otra modalidad, la deazapurina es 4-(cis-3-hidroxiciclopentil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina.

En otra modalidad, la deazapurina es sal de ácido 4-(cis-3-(2-aminoacetoxi)ciclopentil)amino-5,6-dimetil-2-fen¡l-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina trifluoroacético. En otra modalidad, la deazapurina es 4-(3-acetam ido)p ¡ perid ¡ n il-5, 6-d i met¡l-2-f en i l-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina. En otra modalidad, la deazapurina es 4-(2-N'-metilureapropil)a ino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. En otra modalidad, la deazapurina es 4-(2-acetam idobuti I )a mino-5, 6-d i meti l-2-f en i l-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina. En otra modalidad , la deazapurina es 4-(2-N'-meti I u rea bu til )amino-5, 6-d i meti l-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina. En otra modalidad, la deazapurina es 4-(2-aminociclopropilacetamidoetil)amino-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina.

En otra modalidad , la deazapurina es 4-(trans-4-h id roxiciclohexi I )a m i no-2-(3-clorofen i I )-7 H-pirrolo [2, 3d] pirimidina. En otra modalidad , la deazapurina es 4-(trans-4-h ¡droxiciclohexi I )am¡no-2-(3-f I uorofen ¡I )-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina. En otra modalidad, la deazapurina es 4-(trans-4-hidroxiciclohex¡l)amino-2-(4-piridil)-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. Todavía en otra modalidad , la presente invención caracteriza un método para la inhibición de la actividad de un receptor de adenosina (por ejemplo, Ai , A2A, A2B, o, preferentemente, A3) en una célula, poniendo en contacto la célula con la 7-deazapurina substituida por N-6 (por ejemplo, preferentemente, un antagonista del receptor de adenosina). En otro aspecto, la presente invención caracteriza un método para el tratamiento de un daño al ojo de un animal (por ejemplo, un humano) mediante la administración al animal de una cantidad efectiva de una 7-deazapurina substituida por N-6. Preferentemente la 7-deazapurina substituida por N-6 es un antagonista de los receptores A3 de adenosina en las células del animal. El daño es a la retina o a la cabeza del nervio óptico y puede ser agudo o crónico. El daño puede ser el resultado de, por ejemplo, glaucoma, edema, isquemia, hipoxia o trauma. En una modalidad preferida, la presente invención caracteriza una deazapurina que tiene la fórmula I I , anterior, en donde: X es N o CR6; Ri y R2 son cada una independientemente hidrógeno, o alcoxilo, aminoalquilo, alquilo, arilo, o alquilarilo substituido o no substituido, o juntas forman un anillo heterocíclico substituido o no substituido, siempre que ninguna de Ri y R2 no sean hidrógeno; R3 es alquilo, arilalquilo, o arilo substituido o no substituido; R4 es hidrógeno o alquilo Ci-Cß substituido o no substituido; L es hidrógeno, alquilo substituido o no substituido, o R4 y L juntas forman un anillo heterocíclico o carbocíclico substituido o no substituido; Rß es hidrógeno, alquilo substituido o no substituido, o halógeno; Q es CH2, O, S, o N R | en donde R7 es hidrógeno o alquilo Ci-Cß substituido o no substituido; y W es alquilo, cicloalquilo, alquinilo, arilo, arilalquilo, biarilo, heteroarilo substituido o no substituido, carbonilo substituido, tiocarbonilo substituido, o sulfonilo substituido, a condición de que si R3 es pirrolidino, entonces R4 no es metilo. En una modalidad, en los compuestos de la fórmula I I , X es CR6 y Q es CH2, O, S, o NH . En otra modalidad , X es N . En una modalidad adicional de los compuestos de la fórmula I I , W es arilo substituido o no substituido, heteroarilo de miembros 5-ó 6-, o biarilo. W puede ser substituida por uno o más substituyentes. Los ejemplos de los substituyentes incluyen: halógeno, hidroxilo, alcoxilo, amino, aminoalquilo, aminocarboxiamida, CN, CF3, CO2R8, CONHR8, CONR8R9, SOR8, S02Rs. y S02N R8R9, en donde R8 y Rg son cada una independientemente hidrógeno, o alquilo, cicloalquilo, arilo, o arilalquilo substituido o no substituido. Preferentemente, W puede ser fenilo substituido o no substituido, por ejemplo, metilenodioxifenilo. W también puede ser un anillo heteroarilo de miembro 5- substituido o no substituido, por ejemplo, pirróle, pirazole, oxazole, imidazole, triazole, tetrazole, furan, tiofeno, tiazole, y oxadiazole. Preferentemente, W puede ser un anillo heteroarilo de miembro 6-, por ejemplo, piridilo, pirimidilo, piridazinilo, pirazinal, y tiofenilo. En una modalidad preferida, W es 2-piridilo, 3-pirid ilo, 4-piridilo, 2-pirimidilo, 4-pirimidilo, o 5-pirimidilo.

En una modalidad ventajosa de los compuestos de la fórmula I I , Q es NH y W es un anillo 3-pirazolo, el cual es no substituido o substituido-N por un alquilo, cicloalquilo, arilo, o arilalquilo substituido o no substituido. En otra modalidad de los compuestos de la fórmula I I , Q es oxígeno, y W es un anillo 2-tiazolo el cual es no substituido o substituido por alquilo, cicloalquilo, arilo, o arilalquilo substituido o no substituido. En otra modalidad de los compuestos de la fórmula I I , W es alquilo, cicloalquilo substituido o no substituido, por ejemplo, ciclopentilo, o arilalquilo. Los ejemplos de los substituyentes incluyen halógeno, hidroxilo, alquilo, cicloalquilo, arilo, arilalquilo substituido o no substituido, o N H R10, en donde R10 es hidrógeno, o alquilo, cicloalquilo, arilo, o arilalquilo substituido o no substituido.

Todavía en otra modalidad, la presente invención caracteriza una deazapurina de la fórmula II en donde W es -(CH2)a-C(=0)Y o -(CH2)a-C(=S)Y, y a es un entero de 0 a 3, Y es arilo, alquilo, arilalquilo, cicloalquilo, heteroarilo, alquinilo, NHRn R?2, o, a condición de que Q sea NH, OR13, en donde Rn , R?2 y R?3 son cada una independientemente hidrógeno, o alquilo, arilo, arilalquilo o cicloalquilo no substituido o substituido. Preferentemente, Y es un anillo heteroarilo de miembros 5- ó 6-. Además, W puede ser -(CH2)b-S(=0)jY, en donde j es 1 ó 2, b es 0, 1 , 2 ó 3, Y es arilo, alqu ilo, arilalquilo, cicloalquilo, alquinilo, heteroarilo, NHR14R15, siempre que cuando b sea 1 , Q sea CH2, y en donde R , R15 y R-ie son cada una independientemente hidrógeno, o alquilo, arilo, arilalquilo o cicloalquilo no substituido o substituido. En otra modalidad, R3 es seleccionada del grupo consistente de fenilo, piridilo, pirimidilo, piridazinilo, pirazinal , pirrolilo, triazolilo, tioazolilo, oxazolilo, oxadiazolilo, pirazolilo, furanilo, metilenodioxifenilo, y tiofenilo substituido o no substituido. Cuando R3 es fenilo, puede ser substituida con, por ejemplo, hidroxilo, alcoxilo, (por ejemplo, metoxilo), alquilo (por ejemplo, tolilo), y halógeno, (por ejemplo, o-, m-, o p- fluorofenilo o o-, m-, o p-clorofenilo). Ventajosamente, R3 puede ser 2-, 3-, ó 4- piridilo o 2- ó 3- pirimidilo. La presente invención también pertenece a una deazapurina en donde RT es hidrógeno o alquilo C1-C3. Preferentemente, R6 es hidrógeno.

La presente invención ¡ncluye también deazapurinas en donde Ri es hidrógeno, y R2 es alquilo o alcoxilo substituido o no substituido, alquilamina, arilamina, o alquilarilamina substituida o no substituida, aminoalquilo, amino arilo, o aminoalquilarilo substituido o no substituido, alquilamida, arilamida, o alquilarilamida substituida o no substituida, alquilsulfonamida, arilsulfonamida o alquilarilsulfonamida substituida o no substituida, alquilurea, arilurea, o alquilarilurea substituida o no substitu ida, alquilcarbamato, arilcarbamato, o alquilarilcarbamato substituido o no substituido, o ácido alquilcarboxílico, ácido arilcarboxílico o ácido alquilarilcarboxílico substituido o no substituido. Preferentemente, R2 es cicloalquilo substituido o no substituido, por ejemplo, ciciohexilo o ciclopentilo substituido por mono- o dihidroxilo (preferentemente, ciciohexilo substituido por monohidroxilo o ciclopentilo substituido por monohidroxilo). Ventajosamente, R2 puede ser de la fórmula siguiente: en donde A es alquilo Ci-Ce, cicloalquilo C3-C , una cadena de uno a siete átomos, o un anillo de tres a siete átomos, substituidos opcionalmente por alquilo Ci-Cd, halógenos, grupos hidroxilo, carboxilo, tiol, o amino; B es metilo, N(Me)2, N(Et)2, N HMe, NHEt, (CH2)rNH3+, NH(CH2)rCH3, (CH2)rN H2, (CH2)rCHCH3NH2, (CH2)rNH Me, (CH2)rOH, CH2CN, (CH2)mC02H, CHR1 8R?9, o CHMeOH , en donde r es un entero de 0 a 2, m es 1 ó 2, R?8 es alquilo, R19 es N H3+ o CO2H o R?8 y R19 juntas son: — CH-NH— \ / (CH2)p en donde p es 2 ó 3; y R17 es alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C7, una cadena de uno a siete átomos, o un anillo de tres a siete átomos, substituido opcionalmente por alquilo C?-C6, halógenos, grupos hidroxilo, carboxilo, tiol, o amino. Ventajosamente, A es alquilo Ci-Cß no substituido o substituido. B puede ser alquilo Ci-Ce no substituido o substituido. En una modalidad preferida, R2 es de la fórmula -A-N HC(=0)B. En una modalidad particularmente ventajosa, A es -CH2CH2- y B es metilo. Los compuestos de la presente invención pueden comprender prodrogas solubles en agua las cuales son metabolizadas in vivo a una droga activa, por ejemplo, med iante la hidrólisis de esterasa catalizada. Los ejemplos de las prodrogas potenciales incluyen deazapurinas con, por ejemplo, R2 como cicloalquilo substituido por -OC(0)(Z)N H2, en donde Z es una cadena lateral de un aminoácido que ocurre naturalmente o no naturalmente, o un análogo del mismo, un aminoácido a, ß, y, o ?, o un dipéptido. Las cadenas laterales de aminoácido preferidas incluyen aquellas de glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina, lisina, a-metilalanina, ácido aminociclopropano carboxílico, ácido azetidina-2-carboxílico, ß-alanina, ácido y-aminobutírico, alanina-alanina, o glicina-alanina. En otra modalidad, Ri y R2 juntas son: N en donde n es 1 ó 2, y en donde el anillo puede ser substituido opcionalmente por uno o más grupos hidroxilo, amino, tiol, carboxilo, halógeno, CH2OH, alquiloCH2NHC(=0), o alqu¡loCH2NHC(=0)NH. Preferentemente, n es 1 ó 2 y dicho anillo es substituido por alquilo-NHC(=O). En una modalidad ventajosa, Ri es hidrógeno, R2 es alquilo CI -CT substituido o no substituido, R3 es fenilo substituido o no substituido, R4 es hidrógeno, L es hidrógeno o alquilo Ci-Cß substituido o no substituido, Q es O, S o NR7, en donde R7 es hidrógeno o alquilo Ci-Cß substituido o no substituido, y W es arilo substituido o no substituido. Preferentemente, R2 es -A-NHC(=0)B, en donde A y B son cada una independientemente alquilo C1-C4 substituido o no substituido. Por ejemplo, A puede ser CH2CH2. B puede ser, por ejemplo, alquilo (por ejemplo, metilo), o aminoalquilo (por ejemplo, aminometilo). Preferentemente, R3 es fenilo no substituido y L es hidrógeno. Re puede ser metilo o preferentemente, hidrógeno. Preferentemente, Q es O, S, o N R7 en donde R7 es hidrógeno o alquilo C1-C6 substituido o no substituido, por ejemplo, metilo. W es fenilo no substituido o substituido (por ejemplo, alcoxilo substituido por halógeno). Preferentemente, W es p-fluorofenilo, p-clororofenilo, o p-metoxifenilo. W puede ser también heteroarilo, por ejemplo, 2-pirid ilo. En una modalidad particularmente preferida, la deazapurina es 4-(2-aceti la mi noetil )a mi no-6-f enoxi meti l-2-f en ¡I-7H -pirrolo[2,3d] pirimidina. En una modalidad particularmente preferida, la deazapurina es 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(4-fluorofenoxi)metil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. En una modalidad particularmente preferida, la deazapurina es 4-(2-acetila mi noetil )a mi no-6-(4-clorofenoxi)metil-2-fen¡l-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. En una modalidad particularmente preferida, la deazapurina es 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(4-metox¡fenoxi)metil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina. En una modalidad particularmente preferida, la deazapurina es 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(2-piridilox¡)metil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pipmid¡na. En una modalidad particularmente preferida, la deazapurina es 4-(2-aceti la mi noetil )a mi no-6-(N-fen ¡lami no)metil-2-fen il-7 H-pirrolo[2,3d]p¡r¡midina.

En una modalidad particularmente preferida, la deazapurina es 4-(2-aceti la mi noetil )a mi no-6-(N -metil-N-f en i lami no)metil-2-f eni I-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina. En una modalidad particularmente preferida, la deazapurina es 4-(2-N'-metilureaetil)amino-6-fenoximetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina. La presente invención pertenece además a un método para la inhibición de la actividad de un receptor de adenosina (por ejemplo, un receptor A2b de adenosina) en una célula, poniendo en contacto la célula con un compuesto de la presente ¡nvención. Preferentemente, el compuesto es un antagonista del receptor. La presente invención también pertenece a un método para el tratamiento de una enfermedad gastrointestinal (por ejemplo, diarrea) en un animal, administrando a dicho animal una cantidad efectiva de un compuesto de la presente invención (por ejemplo, un antagonista de A2b). Preferentemente, el animal es un humano. En otra modalidad, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que contiene una 7-deazapurina substituida por N-6 de la presente invención y un vehículo farmacéuticamente aceptable. La presente invención también pertenece a un método para el tratamiento de una condición que responde a la 7-deazapurina substituida por N-6 en un animal , administrando a un mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva de una deazapurina de la presente invención, de modo que ocurre el tratamiento de la condición que responde a la 7-deazapurina substituida por N-6 en el animal. Ventajosamente, el estado de enfermedad puede ser un desorden mediado por la adenosina. Los ejemplos de las condiciones de enfermedad preferidas incluyen: desórdenes del sistema nervioso central, desórdenes cardiovasculares, desórdenes renales, desórdenes inflamatorios, desórdenes alérgicos, desórdenes gastrointestinales, desórdenes de los ojos y desórdenes respiratorios. El término "alquilo" se refiere a la radical de grupos alifáticos saturados, incluyendo grupos alquilo de cadena recta, grupos alquilo de cadena ramificada, grupos cicloalquilo (alicíclicos), grupos cicloalquilo substituidos con alquilo, y grupos alquilo substituidos con cicloalquilo. El término alquilo incluye adicionalmente grupos alquilo, los cuales pueden incluir adicionalmente átomos de oxígeno, nitrógeno, azufre o fósforo, que reemplazan uno o más carbonos de la estructura del hidrocarburo, por ejemplo, átomos de oxígeno, nitrógeno, azufre o fósforo. En las modalidades preferidas, el alquilo de cadena recta o cadena ramificada, tiene 30 o menos átomos de carbono en su estructura (por ejemplo, una cadena recta de Ci-C30, y una cadena ramificada de C3-C3o), y más preferentemente 20 o menos. De un modo similar, los cicloalquilos preferidos tienen de 4 a 10 átomos de carbono en su estructura del anillo, y más preferentemente tienen 5, 6 ó 7 carbonos en la estructura del anillo.

Además, el término alquilo tal y como se usa en toda esta descripción y en las Reivindicaciones intenta incluir, tanto los "alquilos no substituidos" como los "alquilos substituidos", refiriéndose éste último a las porciones alquilo que tienen substituyentes que reemplazan un hidrógeno en uno o más de los carbonos de la estructura del hidrocarburo. Dichos substituyentes pueden incluir, por ejemplo, halógeno, hidroxilo, alquilcarboniloxilo, arilcarboniloxilo, alcoxicarboniloxilo, ariloxicarboniloxilo, carboxilato, alquilcarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquiltiocarbonilo, alcoxilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, ciano, amino (incluyendo alquil amino, dialquilamino, arilamino, diarilamino, y alquilarilamino), acilamino (incluyendo alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamoilo y ureido), amidino, imino, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, sulfonato, sulfamoilo, sulfonamido, nitro, trifluorometilo, ciano, azido, heterociclilo, alquilarilo, o una porción aromática o heteroaromática. Los expertos en el arte deberán entender, que las porciones substituidas de la cadena de hidrocarburo pueden por sí mismas ser substituidas, si es apropiado. Los cicloalquilos pueden ser substitu idos adicionalmente, por ejemplo, con los substituyentes descritos anteriormente. Una porción "alquilarilo" es un alquilo substituido por un arilo (por ejemplo, fenilmetilo (bencilo)). El término "alquilo" también incluye grupos alifáticos no saturados análogos en la longitud y posible substitución para los alquilos descritos anteriormente, pero que contienen por lo menos un enlace doble o triple, respectivamente.

El término "arilo" como se usa en la presente invención, se refiere a la radical de los grupos arilo, incluyendo grupos aromáticos de anillo simple de miembros 5- y 6- que pueden incluir desde cero hasta cuatro heteroátomos, por ejemplo, benceno, pirróle, furano, tiofeno, imidazole, benzoxazole, benzotiazole, triazole, tetrazole, pirazole, piridina, pirazina, piridazina y pirimidina, y similares. Los grupos arilo ¡ncluyen también grupos aromáticos policíclicos fusionados tales como naftilo, quinolilo, indolilo, y similares. A esos grupos arilo que tienen heteroátomos en la estructura del anillo, nos podemos referir también como "heterociclos arilo", "heteroarilos" o "heteroaromáticos". El anillo aromático puede ser substituido en una o más posiciones del anillo, con los substituyentes que se describieron anteriormente, como por ejemplo, halógeno, hidroxilo, alcoxilo, alquilcarboniloxilo, arilcarboniloxilo, alcoxicarboniloxilo, ariloxicarboniloxilo, carboxilato, alquilcarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquiltiocarbonilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, ciano, amino (incluyendo alquil amino, dialquilamino, arilamino, diarilamino, y alquilarilamino), acilamino (¡ncluyendo alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamoilo y ureido), amidino, imino, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, sulfonato, sulfamoilo, sulfonamido, nitro, trifluorometilo, ciano, azido, heterociclilo, alquilarilo, o una porción aromática o heteroaromática. Los grupos arilo también pueden ser fusionados o tener puentes con anillos alicíclicos o heterocíclicos, los cuales no son aromáticos como para formar un policiclo (por ejemplo, tetralin).

Los términos "alquenilo" y "alquinilo" se refieren a grupos alifáticos no saturados análogos en la longitud y posible substitución, a los alquilos descritos anteriormente, pero que contienen por lo menos un enlace doble o triple, respectivamente. Por ejemplo, la presente invención contempla grupos ciano y propargilo. A menos que el número de carbonos sea especificado de otra manera, "alquilo inferior" como se usa en la presente invención, significa un grupo alquilo, tal y como se definió anteriormente, pero que tiene de uno a diez carbonos, más preferentemente de uno a seis átomos de carbono en su estructura, y aún más preferentemente, de uno a tres átomos de carbono en su estructura. De un modo similar, "alquenilo inferior" y "alquinilo inferior" tienen longitudes de cadena similares. Los términos "alcoxialquilo", "poliaminoalquilo" y "tioalcoxialquilo" se refieren a grupos alquilo, tal y como se describieron anteriormente, los cuales incluyen adicionalmente átomos de oxígeno, nitrógeno o azufre, reemplazando uno o más carbonos de la estructura del hidrocarburo, por ejemplo, átomos de oxígeno, nitrógeno o azufre. Los términos "policiclilo" o "radical policíclica" se refieren a la radical de dos o más anillos cíclicos (por ejemplo, cicloalquilos, cicloalquenilos, cicloalquinilos, arilos y/o heterociclilos) en los cuales dos o más carbonos son comunes a dos anillos que se enlazan, por ejemplo, los anillos son "anillos fusionados". Los anillos que son unidos a través de los átomos no adyacentes, son denominados anillos "con puentes". Cada uno de los anillos del policiclo puede ser substituido por dichos substituyentes descritos anteriormente, como por ejemplo, halógeno, hidroxilo, alquilcarboniloxilo, arilcarboniloxilo, alcoxicarboniloxilo, ariloxicarboniloxilo, carboxilato, alquilcarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alqu iltiocarbonilo, alcoxilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, ciano, amino (incluyendo alquil amino, dialquilamino, arilamino, diarilamino, y alquilarilamino), acilamino (incluyendo alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamoilo y ureido), amidino, imino, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, sulfonato, sulfamoilo, sulfonamido, nitro, trifluorometilo, ciano, azido, heterociclilo, alquilo, alquilarilo, o una porción aromática o heteroaromática. El término "heteroátomo" como se usa en la presente invención, significa un átomo de cualquier elemento diferente al carbono o hidrógeno. Los heteroátomos preferidos son nitrógeno, oxígeno, azufre y fósforo. El término "aminoácidos" incluye aminoácidos que ocurren de manera natural y no natural, encontrados en las proteínas, tales como glicina, alanina, valina, cisteina, leucina, isoleucina, serina, treonina, metionina, ácido glutámico, ácido aspártico, glutamina, asparagina, lisina, arginina, prolina, histidina, fenilalanina, tirosina, y triptofano. Los aminoácidos análogos incluyen aminoácidos con cadenas laterales prolongadas o acortadas, o cadenas laterales variantes con los grupos funcionales apropiados. Los aminoácidos también incluyen estereoisómeros D y L de un aminoácido cuando la estructura del aminoácido admite formas estereoisoméricas. El término "dipéptido" incluye dos o más aminoácidos enlazados juntos. Preferentemente, los dipéptidos son dos aminoácidos enlazados por medio de un enlace de péptido. Los dipéptidos particularmente preferidos incluyen, por ejemplo, alanina-alanina y glicina-alanina. Deberá observarse que la estructura de algunos de los compuestos de la presente invención, incluye átomos de carbono asimétricos. Por consiguiente, deberá entenderse que los isómeros que se originan de dicha asimetría (por ejemplo, todos los enantiómeros y diastereómeros) están incluidos dentro del alcance de la presente invención, a menos que se indique lo contrario. Dichos isómeros pueden ser obtenidos en una forma substancialmente pura, por medio de las técnicas clásicas de separación y por la síntesis controlada estereoqu ímicamente. La presente invención pertenece adicionalmente a composiciones farmacéuticas para el tratamiento de condiciones que responden a la 7-deazapurina substituida por N-6 en un mamífero, por ejemplo, desórdenes respiratorios (por ejemplo, asma, bronquitis, desorden crónico pulmonar obstructivo, y rinitis alérgica), desórdenes renales, desórdenes gastrointestinales, y desórdenes de los ojos. La composición farmacéutica incluye una cantidad terapéuticamente efectiva de una 7-deazapurina substituida por N-6, descrita anteriormente, y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Deberá quedar entendido, que todas las deazapurinas descritas anteriormente están incluidas para el tratamiento terapéutico. Deberá entenderse adicionalmente que las deazapurinas de la presente invención pueden ser utilizadas solas o en combinación con otras deazapurinas de la presente ¡nvención o en combinación con compuestos terapéuticos adicionales, tales como antibióticos, antiinflamatorios, o agentes anticáncer, por ejemplo. El término "antibiótico" es reconocido en el arte y se pretende que incluya aquellas substancias producidas med iante el crecimiento de microorganismos y los derivados sintéticos de los mismos, los cuales eliminan o inhiben el crecimiento de los patógenos y que son selectivamente tóxicos para los patógenos mientras que producen efectos mínimos o no dañinos al sujeto huésped infectado. Los ejemplos adecuados de los antibióticos ¡ncluyen, pero no están limitados a, las clases principales de aminoglicósidos, cefalosporinas, cloramfenicoles, ácidos fuscídicos, macrólidos, penicilinas, polimixinas, tetraciclinas y estreptomicinas. El término "antiinflamatorio" es reconocido en el arte y pretende incluir aquellos agentes los cuales actúan en los mecanismos del cuerpo, sin antagonizar directamente con el agente causante de la inflamación, tales como los glucocorticoides, aspirina, ibuprofen, NSAI DS, etc. El término "agente anticáncer" es reconocido en el arte y pretende incluir aquellos agentes los cuales disminuyen, erradican o evitan el crecimiento de las células cancerosas, preferentemente, sin afectar adversamente otras funciones fisiológicas. Los ejemplos representativos incluyen cisplatín y ciclofosfamida. Cuando los compuestos de la presente invención son administrados en la forma de farmacéuticos, a humanos y mamíferos, pueden ser administrados por sí mismos o en la forma de una composición farmacéutica que contiene, por ejemplo, de 0.1 a 99.5% (más preferentemente, de 0.5 a 90%) del ingrediente activo en combinación con un vehículo farmacéuticamente aceptable. La frase "vehículo farmacéuticamente aceptable" como se usa en la presente descripción significa un material, composición o vehículo farmacéuticamente aceptable, tal como un líquido o rellenador sólido, diluyente, excipiente, solvente o material encapsulador, que tiene la función de llevar o transportar un(os) compuesto(s) de la presente ¡nvención, dentro o al sujeto de modo que pueda realizar su función pretendida. Generalmente, dichos compuestos son llevados o transportados desde un órgano o porción del cuerpo, a otro órgano o porción del cuerpo. Cada vehículo debe de ser "aceptable" en el sentido de ser compatible con los otros ingredientes de la formulación y no perjudicial para el paciente. Algunos ejemplos de los materiales que pueden servir como vehículos farmacéuticamente aceptables incluyen: azúcares, tales como lactosa, glucosa y sacarosa; almidones, tales como almidón de maíz y almidón de papá; celulosa, y sus derivados, tales como carboxlmetil celulosa sódica, etil celulosa y acetato de celulosa; tragacanto pulverizado; malta; gelatina; talco; excipientes, tales como manteca de cacao y ceras para supositorio; aceites, tales como aceite de cacahuate, aceite de semilla de algodón, aceite de flor de azafrán, aceite de sésamo, aceite de oliva, aceite de maíz y aceite de soya; glicoles, tales como glicol propileno; polioles, tales como glicerina, sorbitol, manitol y glicol polietileno; esteres, tales como oleato etilo y laurato etilo; agar; agentes reguladores, tales como hidróxido de magnesio e hidróxido de aluminio; ácido algínico, agua libre de pirógeno, salina isotónica; solución de Ringer; alcohol etílico; soluciones reguladoras de fosfato; y otras sustancias compatibles no tóxicas empleadas en las formulaciones farmacéuticas. Tal y como se estableció anteriormente, ciertas modalidades de los compuestos de la presente invención pueden contener un grupo funcional básico, tal como un amino o alquilamino, y son, por lo tanto, capaces de formar sales farmacéuticamente aceptables con ácidos farmacéuticamente aceptables. El término "sales farmacéuticamente aceptables" en este aspecto, se refiere a las sales de adición acida inorgánicas y orgánicas, relativamente no tóxicas, de los compuestos de la presente invención. Estas sales pueden ser preparadas in situ durante el aislamiento final y purificación de los compuestos de la presente invención, o reactivando separadamente un compuesto purificado de la presente invención en su forma de base libre con un ácido orgánico o inorgánico adecuado, y aislando la sal formada de esta manera. Las sales representativas incluyen las sales de hidrobromuro, clorhidrato, sulfato, bisulfato, fosfato, nitrato, acetato, valerato, oleato, palmitato, estearato, laurato, benzoato, lactato, fosfato, tosilato, citrato, maleato, fumarato, succinato, tartrato, naftilato, mesilato, glucoheptonato, lactobionato, y laurilsulfonato, y similares. (Ver, por ejemplo, Berge y asociados (1977) "Sales Farmacéuticas" (Pharmaceuticals Salts", J . Pharm. Sci. 66, páginas 1 a 19). En otros casos, los compuestos de la presente invención pueden contener uno o más grupos ácidos funcionales y, por lo tanto, tienen la capacidad para formar sales farmacéuticamente aceptables con bases farmacéuticamente aceptables. El término "sales farmacéuticamente aceptables" en estos casos se refiere a las sales de adición de base, inorgánicas y orgánicas, relativamente no tóxicas, de los compuestos de la presente ¡nvención. Estas sales pueden ser preparadas de un modo similar in situ durante el aislamiento final y purificación de los compuestos, o reactivando separadamente el compuesto purificado en su forma de ácido libre con una base adecuada, tales como el hidróxido, carbonato o bicarbonato de un catión de metal farmacéuticamente aceptable, con amonia, o con una amina primaria, secundaria o terciaria orgánica farmacéuticamente aceptable. Los alcalinos o sales de tierra alcalina representativos incluyen el litio, sodio, potasio, calcio, magnesio y sales de aluminio y similares. Las aminas orgánicas representativas útiles para la formación de sales de adición de base, ¡ncluyen etilamina, dietilamina, etilenodiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina y similares.

El término "esteres farmacéuticamente aceptables" se refiere a productos esterificados, relativamente no tóxicos, de los compuestos de la presente invención. Estos esteres pueden ser preparados in situ durante el aislamiento final y purificación de los compuestos, o reactivando separadamente el compuesto purificado en su forma de ácido libre o hidroxilo con un agente de esterificación adecuado. Los ácidos carboxílicos pueden ser convertidos en esteres mediante el tratamiento con un alcohol en la presencia de un catalizador. El hidroxilo que contiene derivados puede ser convertido en esteres por medio de un tratamiento con un agente de esterificación, tal como haluros alcanoilo. El término intenta adicionalmente incluir los grupos de hidrocarburo inferior con capacidad para ser disueltos bajo condiciones fisiológicas, por ejemplo, esteres alquilo, esteres metilo, etilo y propilo. (Ver, por ejemplo, Berge y asociados, anterior). La presente invención contempla además el uso de prodrogas, las cuales son convertidas in vivo en los compuestos terapéuticos de la presente invención (ver, por ejemplo, R. B. Silverman, 1992, "La Química Orgánica del Diseño de Droga y Acción de Droga" (The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action), Academic Press, Capítulo 8). Dichas prodrogas pueden ser utilizadas para alterar la biodistribución (por ejemplo, permitir compuestos los cuales no entrarían generalmente en el sitio reactivo de la proteasa) o la farmacocinética del compuesto terapéutico. Por ejemplo, un grupo de ácido carboxílico puede ser esterificado, por ejemplo, con un grupo metilo o un grupo etilo para producir un éster. Cuando el éster es administrado a un sujeto, el éster es lavado, enzimáticamente o no enzimáticamente, reductivamente o hidrolíticamente, para revelar el grupo aniónico. Un grupo aniónico puede ser esterificado con porciones (por ejemplo, esteres aciloximetilo) los cuales son lavados para revelar un compuesto intermedio el cual se descompone subsecuentemente para producir el compuesto activo. En otra modalidad, la prodroga es una forma reducida de un sulfato o sulfonato, por ejemplo, un tiol, el cual es oxidado in vivo para producir el compuesto terapéutico. Además, una porción aniónica puede ser esterificada a un grupo, el cual es transportado activamente in vivo, o el cual es tomado selectivamente por los órganos objetivo. El éster puede ser seleccionado para que permita la llegada al objetivo específico de las porciones terapéuticas a sitios reactivos particulares, tal y como se describirán a continuación, con respecto a las porciones de vehículo. Los agentes humedecedores, emulsificadores y lubricantes, tales como sulfato laurilo sódico y estearato de magnesio, así como agentes colorantes, agentes de liberación, agentes de recubrimiento, endulzadores, saborizantes y agentes perfumadores, conservadores y antioxidantes, también pueden estar presentes en las composiciones. Los ejemplos de antioxidantes farmacéuticamente aceptables incluyen: antioxidantes solubles en agua, tales como ácido ascórbico, clorhidrato de cisteína, bisulfato de sodio, metabisulfito de sodio, sulfito de sodio y similares; antioxidantes solubles en aceite, tales como palmitato ascorbilo, hidroxianisole butilado (BHA), hidroxitolueno butilado (BHT), lecitina, propil galato, alfa-tocoferol, y similares; y agentes de quelación de metal, tales como ácido cítrico, ácido etilenodiamina tetraacético (EDTA), sorbitol, ácido tartárico, ácido fosfórico, y similares. Las formulaciones de la presente invención incluyen las formulaciones adecuadas para administración oral, nasal, tópica, transdérmica, bucal, sublingual, rectal , vaginal y/o parental . Las formulaciones pueden ser presentadas de manera conveniente, en forma de dosis unitarias y puede ser preparadas por cualesquiera métodos bien conocidos en el arte farmacéutico. La cantidad del ingrediente activo que puede ser combinada con un material transportador para producir una forma de dosis única generalmente será la cantidad del compuesto, la cual produce un efecto terapéutico. Generalmente, de un cien por ciento, esta cantidad estará en un rango de aproximadamente el 1 por ciento hasta aproximadamente el noventa y nueve por ciento del ingrediente activo, preferentemente desde aproximadamente el 5 por ciento hasta aproximadamente el 70 por ciento, y más preferentemente desde aproximadamente el 10 por ciento hasta aproximadamente 30 por ciento. Los métodos para la preparación de estas formulaciones o preparaciones incluyen los pasos de asociar un compuesto de la presente ¡nvención con el transportador y adicionalmente, uno o más ingredientes accesorios. En general, las formulaciones son preparadas, asociando íntima y uniformemente, un compuesto de la presente invención con vehículos líqu idos, o vehículos sólidos divid idos finamente o ambos y luego, si es necesario, dándole forma al producto. Las formulaciones de la presente invención adecuados para la administración oral pueden ser en la forma de cápsulas, pastillas, pildoras, tabletas, grageas (utilizando bases saborizadas, generalmente sacarosa y acacia o tragacanto), polvos, granulos o en la forma de una solución o una suspensión en un líquido acuoso, o no acuoso, o como una emulsión líquida de aceite en agua o agua en aceite, o como un elíxir o jarabe o como pastillas (utilizando una base inerte, tal como gelatina y glicerina o sacarosa y acacia) y/o lavados bucales y similares, conteniendo cada una, una cantidad previamente determinada en el compuesto de la presente invención como ingrediente activo. Un compuesto de la presente invención también puede ser administrado como un bolo, electuario o pasta. En las formas de dosificación sólida de la presente invención para la administración oral (cápsulas, tabletas, pildoras, pastillas, polvos, granulos y similares), el ingrediente activo es mezclado con uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables, tales como citrato de sodio o fosfato de dicalcio, y/o cualquiera de los siguientes: rellenadores o prolongadores, tales como almidones, lactosa, sacarosa, glucosa, manitol, y/o ácido salicílico; enlazadores tales como por ejemplo, carboximetilcelulosa, alginatos, gelatinas, pirrolidona polivinílica, sacarosa y/o acacia; humectantes tales como glicerol ; agentes de desintegración tales como agar-agar, carbonato de calcio, almidón de papa o tapioca, ácido algínico, ciertos silicatos, y carbonato de sodio; agentes retardadores de la solución, tales como parafina; aceleradores de absorción, tales como compuestos de amonia cuaternaria; agentes de humedecimiento, tales como por ejemplo, alcohol cetílicio y monoestearato de glicerol; absorbentes tales como, caolín y arcilla de bentonita; lubricantes tales como talco, estearato de calcio, estearato de magnesio, glicoles polietilenos sólidos, sulfato laurilo de sodio, y mezclas de los mismos; y agentes colorantes. En el caso de las cápsulas, tabletas y pildoras, las composiciones farmacéuticas también pueden comprender agentes reguladores. Las composiciones sólidas de un tipo similar, también pueden ser empleadas como rellenadores en las cápsulas de gelatina rellenas suaves o duras, usando dichos excipientes como lactosa o azúcares de leche, así como glicoles polietileno de alto peso molecular y similares. Se puede hacer una tableta mediante la compresión o moldeo, opcionalmente con uno o más ingredientes accesorios. Las tabletas comprimidas pueden ser preparadas utilizando el enlazador (por ejemplo, gelatina o celulosa hidroxipropilmetilo), lubricante, diluyente inerte, conservadores, desintegrantes (por ejemplo, glicolato de almidón sódico, o carboximetil celulosa sódica enlazada cruzada), agentes activos de superficie o dispersantes. Las tabletas moldeadas pueden hacerse por medio del moldeo en una máquina adecuada de una mezcla del compuesto pulverizado, humedecido con un diluyente líquido inerte. Las tabletas y otras formas sólidas de dosificación de las composiciones farmacéuticas de la presente invención , tales como pastillas, cápsulas, pildoras y granulos, pueden ser clasificados o preparados opcionalmente con recubrimientos o caparazones, tales como capas entéricas y otros recubrimientos bien conocidos en el arte de la formulación farmacéutica. También pueden ser formulados como para proporcionar liberación lenta o controlada del ingrediente activo que las contiene utilizando, por ejemplo, hidroxipropilmetil celulosa en proporciones variables para proporcionar el perfil deseado de liberación, otras matrices de polímero, liposomas y/o micro esferas. Éstas pueden ser esterilizadas mediante filtración a través de un filtro de retención de bacterias, o incorporando los agentes de esterilización en la forma de composiciones sólidas estériles, las cuales pueden ser disueltas en agua estéril, o algún otro medio estéril que se puede inyectar inmediatamente antes de usarse. Estas composiciones también pueden contener opcionalmente agentes de opacidad, y pueden ser de una composición que libera el ingrediente activo solamente, o preferentemente, en una cierta porción del aparato gastrointestinal, opcionalmente, de una manera retardada. Los ejemplos de las composiciones de incrustación que pueden ser usadas incluyen sustancias poliméricas y ceras. El Ingrediente activo también puede estar en la forma microencapsulada, si es apropiado, con uno o más de los excipientes anteriormente descritos. Las formas de dosificación líquida para la administración oral de los compuestos de la presente invención, incluyen, emulsiones, micro emulsiones, soluciones, suspensiones, jarabes y elíxires farmacéuticamente aceptables. Además del ingrediente activo, las formas de dosificación líquida pueden contener diluyentes inertes comúnmente usados en el arte, tales como por ejemplo, agua u otros solventes, agentes de solubilización y emulsificadores, tales como alcohol etílico, alcohol isopropílico, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bencílico, benzoato bencílico, glicol propileno, 1 ,3-gicol butileno, aceites (en particular, de semilla de algodón, de nuez molida, de maíz, de germen, de oliva, de castor y de sésamo), glicerol, alcohol tetrahidrofurílico, glicoles polietilenos y esteres de ácido graso de sorbitan, y mezclas de los mismos. Además de los diluyentes inertes, las composiciones orales también pueden incluir adyuvantes, tales como agentes de humidificación, agentes de emulsificación de suspensión, endulzadores, saborizantes, colorantes, perfumes y agentes conservadores. Las suspensiones, además de los compuestos activos pueden contener agentes de suspensión tales como por ejemplo, alcoholes isoestearílicos etoxilados, sorbitol poliexoetilenos y esteres de sorbitan, celulosa microcristalina, metahidróxido de aluminio, bentonita, agar-agar y tragacanto, y mezclas de los mismos.

Las formulaciones de las composiciones farmacéuticas de la presente invención para la administración rectal o vaginal pueden estar presentes en la forma de supositorios, los cuales pueden ser preparados mezclando uno o más compuestos de la presente invención, con uno o más excipientes adecuados no irritantes que comprenden por ejemplo, manteca de cacao; glicol polietileno, una cera para supositorio o un salicilato, y los cuales son sólidos a la temperatura ambiente, pero líquidos a la temperatura del cuerpo y, por lo tanto, se derretirán en el recto o en la cavidad vaginal y liberarán el compuesto activo. Las formulaciones de la presente invención las cuales son adecuadas para administración vaginal también incluyen, pesarios, tampones, cremas, geis, pastas, espumas o formulaciones de rocío que contienen dichos transportadores que son conocidos en el arte como apropiados para este fin. Las formas de dosificación para la administración tópica o transdérmica de un compuesto de la presente invención incluyen polvos, rocíos, ungüentos, pastas, cremas, lociones, geis, soluciones, parches e inhalantes. El compuesto activo puede ser mezclado bajo condiciones estériles con un vehículo farmacéuticamente aceptable, y con cualesquiera conservadores, reguladores o impulsores que puedan ser requeridos. Los ungüentos, pastas, cremas y geis pueden contener, además de un compuesto activo de la presente invención, excipientes tales como grasas animales y vegetales, aceites, ceras, parafinas, almidón, tragacanto, derivados de celulosa, glicoles polietilenos, silicones, bentonitas, ácido salicílico, talco y óxido de zinc, y mezclas de los mismos. Los polvos y rocíos pueden contener además de un compuesto de la presente invención, excipientes tales como lactosa, talco, ácido salicílico, hidróxido de aluminio, silicatos de calcio y polvo de piliamida o mezclas de estas sustancias. Los rocíos pueden contener adicionalmente propulsores acostumbrados, tales como clorofluorohidrocarburos, e hidrocarburos volátiles no substituidos tales como butano y propano. Los parches transdérmicos tienen la ventaja agregada de proporcionar la administración controlada de un compuesto de la presente invención al cuerpo. Dichas formas de dosificación se pueden hacer disolviendo o dispersando un compuesto en el medio apropiado. Los aumentadores de absorción pueden también ser usados para aumentar el flujo del compuesto a través de la piel. El rango de dicho flujo puede ser controlado, ya sea proporcionando una membrana controladora del rango, o d ispersando el compuesto activo en una matriz de polímero o gel. Las formulaciones oftálmicas, ungüentos para los ojos, polvos, soluciones y similares, también están contempladas dentro del alcance de la presente invención. Preferentemente, la preparación farmacéutica es una formulación oftálmica (por ejemplo una formulación para inyección periocular, retrobulbar o intraocular, una formulación sistémica, o una solución de irrigación quirúrgica).

Las formulaciones oftálmicas de la presente invención pueden incluir una o más deazapurinas y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Se pueden utilizar varios tipos de vehículos. Los vehículos generalmente serán de naturaleza acuosa. Las soluciones acuosas son generalmente preferidas, basadas en el caso de la formulación, así como en la capacidad del paciente para administrar fácilmente dichas composiciones por medio de la instilación de una o dos gotas de las soluciones en los ojos afectados. Sin embargo, las deazapurinas de la presente invención , también pueden ser incorporadas fácilmente en otros tipos de composiciones tales como suspensiones, geis viscosos o semi-viscosos y otros tipos de composiciones sólidas o semi-sólidas. Las composiciones oftálmicas de la presente ¡nvención pueden incluir también varios otros ingredientes, tales como reguladores, conservadores, co-solventes, y agentes de construcción de viscosidad . Un sistema regulador apropiado (por ejemplo, fosfato de sodio, acetato de sodio o borato de sodio) puede ser agregado para evitar el descenso del pH bajo condiciones de almacenamiento. Los productos oftálmicos son empacados generalmente en forma de dosis múltiples. Por lo tanto, se requieren los conservadores para evitar la contaminación microbiana durante el uso. Los conservadores adecuados incluyen : cloruro de benzalconio, timerosal, clorobutanol, metilparabeno, propil parabeno, alcohol feniletílico, edetato disódico, ácido sórbico, policuaternio-1 , y otros agentes conocidos por aquellos expertos en el arte. Dichos conservadores son empleados generalmente en un nivel de desde 0.001 % hasta 1 .0% peso/volumen ("%p/v"). Cuando las deazapurinas de la presente invención son administradas durante los procedimientos quirúrgicos intraoculares, tales como a través de una inyección retrobulbar o periocular y perfusión o inyección intraocular, el uso de soluciones irrigadoras de sal balanceadas son las más preferidas como vehículos . La solución irrigadora estéril BSS® y la solución irrigadora estéril intraocular BSS Plus® (Alcon Laboratorio, Inc. Fort Worth, Texas, EUA) son ejemplos de soluciones irrigadoras intraoculares fisiológicamente balanceadas. Este último tipo de solución se refiere a la Patente Norteamericana No. 4, 550, 022 (Garabedian y asociados), cuyo contenido completo está incorporado a la presente descripción como referencia. Las inyecciones retrobulbares y perioculares son conocidas por aquellos expertos en el arte y se describen en numerosas publicaciones incluyendo por ejemplo, "Cirugía Oftálmica: Principios de la Práctica" (Ophthalmic Surgery: Principies of Practice) (Editores, G.L. Spaeth, W.B. Sanders Co. , Philadelfia Pennsylvania EUA, páginas 85 a 87 (1990)). Tal como se indicó anteriormente, el uso de las deazapurinas para evitar o reducir los daños a los tejidos de la cabeza del nervio óptico o de la retina en el nivel celular es un aspecto particularmente importante de una modalidad de la presente invención. Las condiciones oftálmicas que pueden ser tratadas incluyen, pero no están limitadas a retinopatias, degeneración macular, isquemia ocular, glaucoma y daños asociados con lesiones a los tejidos oftálmicos, tales como lesiones de isquemia de reperfusión, lesiones fotoquímicas, lesiones asociadas con la cirugía ocular, particularmente, lesiones a la retina y a la cabeza del nervio óptico por la exposición a la luz o instrumentos quirúrgicos. Los compuestos también pueden ser usados como adjuntos a la cirugía oftálmica, tales como por inyección vitrea o subconjuntival después de la cirugía oftálmica. Los compuestos pueden ser usados para el tratamiento de casos agudos en condiciones temporales, o pueden ser administrados crónicamente, específicamente en el caso de una enfermedad degenerativa. Los compuestos también pueden ser usados profilácticamente, especialmente antes de una cirugía ocular o procedimientos oftálmicos no invasivos, u otros tipos de cirugía. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención adecuadas para la administración parenteral, comprenden uno o más compuestos de la presenten ¡nvención, en combinación con una o más soluciones acuosas o no acuosas estériles isotónicas farmacéuticamente aceptables, dispersiones, suspensiones o emulsiones, o polvos estériles los cuales pueden ser reconstituidos en soluciones estériles inyectables o dispersiones justamente antes de usarlas, las cuales pueden contener antioxidantes, reguladores, bacteriostatos, solutos, los cuales producen la formulación isotónica con la sangre del receptor o la suspensión de agentes espesadores.

Los ejemplos de vehículos acuosos o no acuosos adecuados que pueden ser empleados en las composiciones farmacéuticas en la presente invención incluyen agua, etanol, polioles (tales como glicerol, gllcol propileno, glicol polietileno y similares), y mezclas adecuadas de los mismos, aceites vegetales, tales como aceite de oliva y esteres orgánicos inyectables, tales como oleato de etilo. La fluidez apropiada puede ser mantenida, por ejemplo, mediante el uso de materiales de recubrimiento tales como lecitina, por el mantenimiento del tamaño de partículas requerido en el caso de dispersiones, y por el uso de surfactantes. Estas composiciones también pueden contener adyuvantes tales como conservadores, agentes de humidificación, agentes de emulsificación y agentes dispersantes. La prevención de la acción de los microorganismos puede ser asegurada mediante la inclusión de varios agentes antibacteriales y antifungales, como por ejemplo, parabeno, clorobutanol, ácido sórbico de fenol, y similares. También puede ser deseable incluir en las composiciones agentes isotónicos tales como azúcares, cloruro de sodio y similares. Además, se puede obtener la absorción prolongada de la forma farmacéuticamente inyectable, por medio de la inclusión de agentes los cuales demoran la absorción , tales como monoestearato de aluminio y gelatina. En algunos casos, con el objeto de prolongar el efecto de una droga, es deseable hacer más lenta la absorción de la droga de la inyección subcutánea o intramuscular. Esto se puede lograr mediante el uso de una suspensión líquida de un material cristalino o amorfo que tiene una baja solubilidad en agua. El índice de absorción de la droga depende entonces de su rango de disolución, el cual, a la vez puede depender del tamaño del cristal y la forma cristalina. Alternativamente, la absorción retardada de la forma de droga administrada parenteralmente es lograda disolviendo o suspendiendo la droga en un vehículo de aceite. Las formas de depósitos inyectables se hacen formando matrices microencapsuladas de los compuestos sujetos en polímeros biodegradables tales como poliláctido-poliglicólido. Dependiendo del rango de la droga a polímero, y la naturaleza del pol ímero particular empleado, el rango de liberación de la droga puede ser controlado. Los ejemplos de otros polímeros biodegradables incluyen poli(ortoésteres) y poli(anhídridos). Las formulaciones de depósitos inyectables, también son inyectadas atrapando la droga en liposomas o microemulsiones, las cuales son compatibles con el tejido del cuerpo. Las preparaciones de la presente invención pueden ser administradas oralmente, parentalmente, tópicamente o rectalmente. Éstas son administradas por supuesto, mediante formas adecuadas para cada ruta de administración. Por ejemplo, son administradas en tabletas o en forma de cápsulas, por inyección , inhalación, loción para los ojos, ungüento, supositorios, etc. , la administración por inyección, infusión o inhalación; tópica por medio de lociones o ungüentos; y rectal por medio de supositorios. La preferida es la administración oral.

Las frases "administración parenteral" y "administrada parenteralmente" tal y como se usa en la presente invención significan modalidades de administración diferentes a la administración enteral y tópica, generalmente por medio de una inyección, e incluye sin limitación, las inyecciones intravenosas, intramusculares, intraarteriales, ¡ntratecales, intracapsulares, intraorbitales, intracardíacas, intradérmicas, intraperitoneales, transtraqueales, subcutáneas, subcuticulares, intraartículares, subcapsulares, subaracnoídes, intraespinales, e intraesternales y las infusiones de este mismo tipo. Las frases "administración sistémica", "sistémicamente administradas", "administración periférica" y "periféricamente administradas" tal y como se usan en la presente invención significan administración de un compuesto, droga u otro material, que no sea directamente en el sistema nervioso central, de modo que se introduzca en el sistema del paciente y de este modo esté sujeta al metabolismo u otros procesos similares, por ejemplo, la administración subcutánea. Estos compuestos pueden ser administrados a los humanos y otros animales, para la terapia por cualqu ier ruta de administración adecuada, incluyendo oral, nasal, como por ejemplo, un rocío rectal, intravaginal, parenteral, intracisternal, y tópica, y por medio de polvos, ungüentos o gotas, incluyendo bucal y sublingual. Independientemente de la ruta de administración seleccionada, los compuestos de la presente invención pueden ser utilizados en una forma hidratada adecuada y/o las composiciones farmacéuticas de la presente invención, son formuladas en formas de dosis farmacéuticamente aceptables mediante el método convencional conocido por aquellos expertos en el arte. Los niveles reales de dosificación de los ingredientes activos en las composiciones farmacéuticas de la presente invención, pueden variar con el objeto de obtener una cantidad del ingrediente activo, la cual sea efectiva para lograr la respuesta terapéutica deseada para un paciente particular, composición , y modo de administración, sin ser tóxica para el paciente. Los niveles de dosificación seleccionados dependerán de una variedad de factores, incluyendo la actividad del compuesto particular de la presente invención empleado, y el éster, sal o amida del mismo, la ruta de administración, el tiempo de administración, el rango de excreción del compuesto particular que está siendo empleado, la duración del tratamiento, otras drogas, compuestos y/o materiales utilizados en combinación con el compuesto particular empleado, la edad, sexo, peso, condición, salud general e historia médica anterior del paciente que está siendo tratado, y factores similares bien conocidos en el arte médico. Un médico o veterinario que tenga una experiencia ordinaria en el arte puede determinar fácilmente y prescribir la cantidad efectiva de la composición farmacéutica requerida. Por ejemplo, un médico o veterinario podría comenzar la dosificación de los compuestos de la presente invención empleados en la composición farmacéutica, en niveles inferiores que los requeridos, con el objeto de lograr el efecto terapéutico deseado y aumentar gradualmente la dosificación hasta que se haya logrado el efecto deseado. En general, la dosis diaria adecuada de un compuesto de la presente invención será esa cantidad del compuesto la cual es la dosis más baja efectiva para producir un efecto terapéutico. Dicha dosis efectiva generalmente dependerá de los factores descritos anteriormente. Generalmente, cuando las dosis intravenosas y subcutáneas de los compuestos de la presente invención, son utilizadas para los efectos analgésicos adecuados, en un paciente, estarán en un rango de desde aproximadamente 0.0001 a aproximadamente 200 mg por kilogramo del peso del cuerpo por día, más preferentemente de desde aproximadamente 0.01 hasta aproximadamente 150 mg por kilogramo por d ía, y aún más preferentemente, de desde aproximadamente 0.2 hasta aproximadamente 140 mg por kilogramo por día. Si se desea, la dosis diaria efectiva del compuesto activo puede ser administrada en la forma de dos, tres, cuatro, cinco, seis o más subdosis, administradas separadamente en intervalos apropiados durante todo el día, opcionalmente, en formas de dosificación unitarias. Aunque es posible que un compuesto de la presente ¡nvención sea administrado solo, es preferible administrar el compuesto en la forma de una composición farmacéutica.

La presente invención pertenece también a las composiciones farmacéuticas empacadas para el tratamiento de condiciones que responden a la 7 deazapurina substituida por N-6, por ejemplo, la actividad aumentada no deseable del receptor de adenosina en un mamífero. Las composiciones farmacéuticas empacadas ¡ncluyen un recipiente que guarda la cantidad terapéuticamente efectiva de por lo menos de una deazapurina, tal y como se describió anteriormente, y las instrucciones para usar la deazapurina para el tratamiento de condiciones que responden a la deazapurina en el mamífero. Las deazapurinas de la presente invención pueden ser preparadas utilizando métodos estándares para la síntesis orgánica. Las deazapurinas pueden ser purificadas por medio de HPLC de fase inversa, cromatografía, recristalización, etc. , y sus estructuras confirmadas por medio de análisis de espectro de masa, análisis de elementos, espectroscopia IR y/o RMN. Generalmente, la síntesis de los intermedios así como de las deazapurinas de la presente invención es realizada en solución. La adición o remoción de uno o más grupos protectores, es también una práctica general y es conocida por aquellos expertos en el arte. Los esquemas sintéticos típicos para la preparación de los intermedios de deazapurina de la presente invención, están señalados a continuación en el Esquema 1 . La presente invención es ilustrada adicionalmente por medio de los ejemplos siguientes, los cuales de ninguna manera deben ser interpretados como limitativos. El contenido de todas las referencias, las solicitudes de Patente pendientes, y las solicitudes de patente publicadas, citadas durante toda esta solicitud , incluyen aquellas a las que se hizo referencia en la sección de antecedentes, las cuales están incorporadas en la presente descripción como referencia. Deberá quedar entendido que los modelos utilizados en todos los ejemplos son modelos aceptados, y que la demostración de la eficacia de estos modelos predice la eficacia en los humanos. Las deazapurinas de la presente invención pueden ser preparadas utilizando métodos estándares para la síntesis orgánica. Las deazapurinas pueden ser purificadas por HPLC de fase inversa, cromatografía, recristalización, etc. , y sus estructuras confirmadas por análisis de espectro de masa, análisis de elementos, espectroscopia I R y/o RMN. Normalmente, la síntesis de intermediarios así como las deazapurinas de la presente invención, se realiza en una solución. La adición y remoción de uno ó más grupos de protección también es una práctica típica y es conocida por los expertos en el arte. Los esquemas sintéticos típicos para la preparación de intermediarios de deazapurina de la presente invención, se señalan a continuación en el esquema 1 .

Esquema 1 en donde R3, R5 y R son tal como se definió anteriormente. En general, se puede tratar un 2-amino-3-ciano-pirrolo protegido, con un haluro de acilo para formar un carboxiamido-3-ciano-pirrolo el cual puede ser tratado con metanol ácido para efectuar el cierre de anillo para un pirrolo[2,3d]pir¡midina-4(3H)-ona (Muller, C.E. y asociados, J . Med. Chem. 40:4396(1997)). La remoción del grupo de protección de pirrólo es seguido por el tratamiento con un reactivo de clorinación, por ejemplo oxicloruro de fósforo, 4-cloro-7H-pirrolo[2,3d]pirimidinas substituidas o no substitu idas producidas. El tratamiento de cloropirimidina con aminas, produjo 7-deazapurinas. Por ejemplo, tal como se muestra en el esquema 1 , se trató un N-(1 -dl-feniletil)-2-amino-3-ciano-pirrolo con un haluro de acilo en piridina y clorometano. El N-(1 -dl-feniletilo)-2-fenilcarboxiamida-3-ciano-pirrolo resultante se trató con una mezcla de 10: 1 de metanol/ ácido sulfúrico para efectuar el cierre de anillo, dando como resultado un dl-7H-7-( 1 -feniletilo)pirrolo[2,3d]pirimidina-4(3H)-ona. La remoción del grupo de feniletilo por medio del tratamiento de la pirimidina con ácido polifosfórico (PPA) seguido de POCI3 produjo un intermediario clave, el 4-cloro-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. El tratamiento adicional del 4-cloro-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina con varias aminas descritas en la Tabla 1 , proporciona los compuestos de la fórmula (I) y (I I ). 15 20 25 Un método general para preparar Pirrólos Substituidos-6, se ilustan en el siguiente esquema (I I).

Esquema II En donde Ri hasta R5 son tal como se definió anteriormente. La transesterificación y alquilación de cianoacetato de etilo con un a-halocetona- produjo un éster etometílico. La protección de la cetona seguida del tratamiento con un clorhidrato de amidina (por ejemplo, alquilo, arilo o alquilarilo), produjo la pirimidina protegida por el cetal resultante. La remoción del grupo de protección, seguida de la ciclado y tratamiento con oxicloruro de fósforo produjo el intermediario de cloruro, el cual podría ser tratado adicionalmente con una amina para producir un pirrólo substituido-6 por amina. Adicionalmente, la alquilación del nitrógeno pirrólo puede lograrse por medio de condiciones reconocidas en el arte. En el esquema (Esquema l l l), que se encuentra a continuación, se ilustra un método general para preparar pirrólos substituidos-5. Esquema lll Desde Ri hasta R se definen tal como se mencionó anteriormente, y R es un grupo de protección removible. La condensación de malononitrilo y un exceso de unas cetonas seguidas de la brominación del producto, produjo una mezcla del material de partida, productos monobrominados y dibrominados, los cuales fueron tratados con un alquilamina, arilamina ó alquilarilamina. El producto de amina resultante fue acilatado con un cloruro de ácido y el pirrólo monoacilatado fue ciclizado en la presencia de ácido para producir la pirimidina correspondiente. El grupo de protección de pirrólo fue removido con ácido polifosfórico y tratado con oxiclururo de fósforo para producir un producto clorinado. El pirrólo clorinado podría ser tratado subsecuentemente con una amina para producir un pirrólo substituido -5 por amina. La alquilación del nitrógeno de pirrólo, se puede lograr por medio de condiciones reconocidas en el arte. Los esquemas IV y V ilustran métodos para preparar las deazapurinas 1 y 2 de la presente invención. en donde R5 y RT son tal como se mencionó anteriormente, por ejemplo, CH3.

Preparación específica de 6-metil-pirrolopirimidinas : La reacción clave para las 6-metilpirrolopirimidinas (1 )[Rs =CH3] fue la ciclado de un cianoacetato con benzamidina para una pirimidina. Se considera que el cianoacetato de metilo podría ciclizar en forma más eficiente con benzamidina para una pirimidina, que el éster etílico correspondiente. Por lo tanto, la transesterificación y alquilación del ciano acetato de etilo en la presencia de NaOMe y un exceso de una porción de a-haloacetilo, por ejemplo, cloroacetona, produjo el éster metílico deseado (3) en una producción del 79% (Esquema IV). El cetoéster (3) fue protegido en la forma del acetal (4) en una producción del 81 %. Se logró un nuevo método de ciclado para la pirimid ina (5), con un clorhidrato de amidina, por ejemplo, clorhidrato de benzamidina, con 2 equivalentes de DBU para producir el (5) en una producción aislada del 54%. Este método mejora la producción del 20%, utilizando las condiciones publicadas, las cuales utilizan NaOMe durante la ciclado con guanidina. Se logró la ciclado para el pirrolo-pirimidina (6), a través de la desprotección del acetal en HCl acuoso en una producción del 78%. La reacción (6) con oxicloruro de fósforo sometido a reflujo, produjo el derivado de cloro-4 correspondiente (7). El acoplamiento con trans-4-aminociclohexanol en sulfóxido de dimetilo a una temperatura de 135°C se produjo (1 ) en 57% del (7). Un experto en el arte, apreciará que la elección de reactivos permite una gran flexibilidad al elegir el substituyente R5 deseado.

Esquema IV Preparación específica de 5-metilpirrolopirimidinas La condensación Knoevengel del malononitrilo y un exceso de cetona, por ejemplo, acetona en reflujo de benceno, produjo 8 en una producción del 50% después de la destilación. La brominación de 8 con N-bromosuccinimida en la presencia de peróxido de benzoilo en cloroformo, produjo una mezcla del material de partida en la forma de productos mono-(9) y di-brominados (5/90/5) después de la destilación (70%). La mezcla se hizo reaccionar con una a-metilalquilamina o una a-metilarilamina, por ejemplo, a-metilbenzilamina, para producir el aminopirrolo (10). Después de pasar a través de una columna corta de gel de sílice, la amina parcialmente purificada (producción del 31 %) fue acilatada con un cloruro ácido, por ejemplo, cloruro de benzoilo para producir pirrólos mono-(1 1 ), y diacilatados (12), los cuales fueron separados mediante cromatografía instantánea. La hidrólisis acida del pirrólo disubstituído (12), generó una producción combinada del 29% para el acilpirrolo (1 1 ). La ciclado en la presencia del ácido sulfúrico concentrado y DMF, produjo (13) (23%), la cual fue desprotegida con un ácido polifosfórico para (14). La reacción de ( 14) con oxicloruro de fósforo sometido a reflujo, proporcionó el derivado cloro-4 correspondiente (15). El acoplamiento con trans-4-aminociclohexanol en sulfóxido dimetilo a una temperatura de 135°C produjo (2) [R6 = CH3] en una producción del 30% de (14) (ver Esquema V). Un experto en el arte, apreciará que la elección de los reactivos permite una gran flexibilidad en la elección del substituyente R .

Esquema V Ruta sintética alternativa para pirrólos substituidos R«. por ejemplo. 5-metil -pirrolopi rim i di ñas: Esta ruta alternativa para pirrólos substituidos -Re, por ejemplo, 5-metil-pirrolopirimidinas, comprende la transesterificación y alquilación de cianoacetato de etilo para (16) (Esquema VI). La condensación de (16) con clorhidrato de benzamidina con 2 equivalentes de DBU , produce la pirimid ina (17). La ciclado para el pirrolo-pirimidina (14) se logrará a través de la desprotección del acetal en HCl acuoso. La reacción de (14) con oxicloruro de fósforo, sometida a reflujo, produjo el derivado cloro-4 correspondiente (15). El acoplamiento con trans-4-aminociclohexanol en sulfóxido de dimetilo a 135°C produce 2. Este procedimiento reduce el número de reacciones sintéticas para el compuesto objetivo (2) de 9 a 4 pasos. Además, la producción se mejora en forma importante. Nuevamente, un experto en el arte apreciará que la elección de los reactivos permite una gran flexibilidad en la elección del substituyente del R6 deseado.

Esquema VI 16 En el esquema (Esquema Vi l ) que se encuentra a continuación, tra un método general para preparar el des-metil-pirrolo.

Esquema VII En donde desde R1 hasta R3 son definidas como se mencionó anteriormente. La alquilación de un cianoacetato alquilo con un acetal dietilo en la presencia de una base, produjo un acetal de cianodietilo el cual fue tratado con una sal de amidina para producir un precursor de metil-pirrolopirimidina. El precursor fue clorinado y tratado con una amina para formar la des-metil-pirrolopirimidina objetivo, tal como se mostró anteriormente. Por ejemplo, el Esquema Vl l l ilustra la síntesis del compuesto (18).

Esquema Vlll 18 El cianoacetato metilo comercialmente disponible, fue alquilatado con bromoacetaldehido deitil acetal en la presencia de carbonato de potasio y Nal para producir (19). La ciclado para la pirimidina (20), se logró en dos pasos. I nicialmente, la pirimidina-acetal fue formada a través de la reacción de (19) con clorhidrato de benzamidina con 2 equivalentes de DBU . La pirimidina-acetal resultante, fue desprotegida sin purificación en 1 N HCl acuoso y el aldehido resultante fue ciclizado para el pirrolo-pirimidina (20), el cual fue aislado mediante filtración. La reacción (20) con oxicloruro de fósforo sometido a reflujo, produjo el derivado cloro-4 correspondiente (21 ). El acoplamiento del derivado de cloro con trans-4-aminociclohexanol en DMSO a 135°C, produjo el compuesto (18) a partir del compuesto (21 ). Los Esquemas ll-VIII demuestran que es posible funcionalizar la posición -5 y -6 del anillo de pirrolopirimidina. A través del uso de diferentes reactivos de partida y de ligeras modificaciones de los esquemas de reacción anteriores, se pueden introducir varios grupos funcionales en las posiciones -5 y -6 en la fórmula (I ) y (I I ). La tabla 2, ilustra algunos ejemplos.

TABLA 2. Lista seleccionada de pirrolopirimidinas substituidas -5 y -6 La presente invención se ilustra adicionalmente por medio de los ejemplos que se encuentran a continuación, los cuales no deben ser tomados en forma alguna como una limitación adicional. Los contenidos de todas las referencias, solicitudes de Patentes pendientes y solicitudes de Patentes publicadas, citadas a través de toda esta solicitud , incluyendo las referenciadas en la sección de antecedentes, están incorporadas en la presente invención como referencia. Debe entenderse que los modelos utilizados a través de todos los ejemplos, son modelos aceptados y que la demostración de eficacia en estos modelos antiacipa la eficacia en humanos. Ejemplificación Preparación 1 : Se utilizó una modificación del método de alquilación de Seela y Lüpke1. A una solución de cianoacetato de etilo (6.58 g , 58.1 mmol) en MeOH (20 ml) enfriada con hielo (0°C), se le agregó lentamente una solución de NaOMe (25% w/v; 58.1 mmol). Después de 10 minutos, se agregó lentamente cloroacetona (5 ml; 62.8 mmol). Después de 4 horas el solvente fue removido. El aceite café fue dilu ido en EtOAc (100ml) y lavado con H20 ( 100ml). La fracción orgánica fue secada, filtrada y concentrada hasta obtener un aceite café (7.79 g; 79%). El aceite (3) (Esquema IV) fue una mezcla de productos de éster metílico/ metil (9/1 ), y se utilizó sin purificación adicional. 1 H RMN (200 M Hz, CDCI3) d 4.24 (q , J=7.2 Hz, OCH2), 3.91 (dd , 1 H, J=7.2, 7.0 Hz, CH), 3.62 (s,3H, OCH3), 3.42 (dd , 1 H , J= 15.0, 7.1 Hz, 1 x CH2);3.02 (dd, 1H, J = 15.0, 7.0 Hz, 1x CH2) ;2.44 (s,3H, CH3), 1.26 (t, J=7.1 Hz, éster-CH3). 1Seela, F.; Lüpke, U. Chem. Ber. 1977, 110, 1462-1469.

Preparación 2: Se utilizó el procedimiento de 1Seela y Lüpke. Por lo tanto, la protección de cetona (3) (Esquema IV; 5.0 g, 32.2 mmol) con glicol etileno (4 ml, 64.4 mmol) en la presencia de TsOH (100 mg) produjo (4) en forma de un aceite (Esquema IV; 5.2 g, 81.0) después de la cromatografía instantánea (S¡02; 3/7 EtOAc/ Hex, Rf 0.35). Todavía tenía ~ 5% de éster etílico: 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 4.24 (q, J=7.2 Hz, OCH2), 3.98 (s, 4H, 2 x acetal-CH2), 3.79 (s, 3H, OCH3), 3.62 (dd, 1H, J=7.2, 7.0 Hz, CH), 2.48 (dd, 1H, J = 15.0, 7.1 Hz, 1 x CH2), 2.32 (dd, 1H, J = 15.0, 7.0 Hz, 1 x CH2); 1.35 (s, 3H, CH3), 1.26(t, J=7.1 Hz, éster-CH3); MS(ES): 200.1 (M++ 1). 1Seela, F.; Lüpke, U. Chem. Ber. 1977, 110, 1462-1469.

Preparación 3: Se calentó a una temperatura de 85°C durante 15 horas, una solución de acetal (4) (Esquema IV, 1 g, 5.02 mmol), benzamidina (786 mg, 5.02 mmol), y DBU (1.5 ml, 10.04 mmol) en DMF seco (15 ml). La mezcla fue diluida con CHCI3 (30 ml) y lavada con 0.5 N NaOH (10 ml) y H20 (20 ml). La fracción orgánica fue secada, filtrada y concentrada hasta obtener un aceite café. Se intentó realizar la cromatografía instantánea (Si02; 1/9 EtOAc/CH2CL2, P/ 0.35) pero el material se cristalizó en la columna. El gel de sílice fue lavado con MeOH. Las fracciones que contienen el producto (5) (Esquema IV) fueron concentradas y utilizadas sin purificación adicional (783 mg, 54.3%): 1 H RMN (200 MHz, CDCI3) d 8.24 (m, 2H , Ar-H), 7.45 (m, 3H, Ar-H), 5.24 (br s, 2H, NH2), 3.98 (s, 4H , 2 x acetal-CH2), 3.60-3.15 (m, 2H , CH2), 1 .38 (s, 3H , CH3); MS (ES): 288.1 (M++ 1 ). Preparación del compuesto (20) (Esquema Vl l l): Se calentó a una temperatura de 85°C durante 15 horas una solución de acetal (19) (4.43 g, 20.6 mmol)1 , clorhidrato de benzamina (3.22 g, 20.6 mmol), y DBU (6.15 ml, 41 .2 mmol) DMF (20 ml) seco. La mezcla fue dilu ida con 100 ml de CHCI3, y lavada con H20 (2 x 50 ml). La fracción orgánica fue secada, filtrada y concentrada hasta obtener un aceite café obscuro. El aceite café obscuro fue agitado en 1 N HCl (100 ml) durante 2 horas a temperatura ambiente. La parte resultante fue filtrada produciendo la sal HCl (20) en forma de un sólido color marrón (3.60 g, 70.6%); 1 H RMN (200 MHz, DMSO-d6) 1 1 .92 (s, 1 H), 8.05 (m, 2H, Ar-H), 7.45 (m, 3H , Ar-H), 7.05(s, 1 H , pirrolo-H); MS(ES):212.1 (M++1 ).

Preparación 4: Se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente, una solución de acetal (5) (700mg , 2.44 mmol) en 1 N HCl (40ml). La pasta resultante fue filtrada produciendo la sal HCL de 2-fenil-6-metil-7H-pirrolo[2,3d]pirim¡din-4(3H)-ona en la forma de un sólido color marrón (498 mg, 78.0%): 1 H RMN (200 MHz, DMSO-d6) d 1 1 .78 (s, 1 H), 8.05 (m, 2H, Ar-H), 7.45 (m, 3H, Ar-H), 6.17 (s, 1H, pirrolo-H), 2.25 (s, 3H, CH3);MS(ES): 226.1 (M++1).

Preparación 5: Se utilizó 1una modificación del método de ciclado del método de Chen y asociados. A una solución de bromuro enfriada con hielo (0°C) de bromuro (9) (Esquema V; 20. Og, 108 mmol; pureza del 90%), en alcohol isopropílico (60 ml) se le agregó lentamente una solución de a-metilbencilamina (12.5 ml, 97.3 mmol). La solución color negro se calentó a una temperatura ambiente durante 15 horas. La mezcla fue diluida con EtOAc (200 ml) y lavada con 0.5 N NaOH (50 ml). La fracción orgánica fue secada, filtrada y concentrada hasta abtener un alquitrán color negro (19.2 g; 94%). El residuo fue purificado parcialmente mediante cromatografía instantánea (Si02; 4/96 MeOH/CH2CL2, Rf 0.35) hasta obtener un sólido color negro (6.38 g, 31%) en la forma del compuesto dl-1-(1-feniletil)-2-amino-3-ciano-4-metilpirrolo:MS (ES): 226.1 (M++1). .1997, 40, 1749-17541Chen, Y.L.; Mansbac , R.S.; Winter, S.M.; Brooks, E. ¡Collins, J.¡ Corman, M.L.; Dunaiskis, A. R.; Faraci, W. S.; Gallaschun, R. J.; Schmidt, A,; Schulz, D. W. J. Med. Chem.

Preparación 6: Una solución de dl-1-(1-feniletil)-2-amino-3-ciano-4,5-dimetilpirrolo1 (14.9 g, 62.5 mmol) y piridina (10.0 ml) en diclorometano (50.0 ml) se le agregó cloruro de benzoilo (9.37 g, 66.7 mmol) a 0°C. Después de agitarse a una temperatura de 0°C durante una hora, se agregó hexano (10.0 ml) para ayudar a la precipitación del producto. El solvente fue removido al vacío y el sólido fue recristalizado a partir de EtOH/H20 para producir 13.9 g (65%) de dl-1-(1-feniletil)-2-fenilcarbonilamina-3-ciano-4,5-dimetilpirrolo. pf 218-221°C;1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.72 (s, 3H), 1.76 (d, J=7.3 Hz, 3H), 1.98 (s, 3H), 5.52 (q, J=7.3 Hz, 1H), 7.14-7.54 (m, 9H), 7.68-7.72 (dd, J = 1.4 Hz, 6.9 Hz, 2h), 10.73 (s, 1H); MS (ES): 344.4 (M++1). iebigs Ann. Chem. 1986, 1485-1505. Los compuestos que se encuentran a continuación fueron obtenidos en forma similar a Preparación 6: de d 1-1 -(1 -feniletil )-2-(3-piridil )carbon i lami no-3-ciano-4, 5-dimetilpirrolo. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.83 (d, J= 6.8Hz, 3H), 2.02 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 5.50 (q, J=6.8 Hz, 1H), 7.14-7.42 (m, 5H), 8.08 (m, 2H), 8.75 (m, 3H); MS (ES): 345.2 (M++1). dl-1-(1-feniletil)-2-(2-furil)carbonilamino-3-ciano-4,5-dimetilpirrolo. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.84 (d, J= 7.4 Hz, 3H), 1.92 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 5.49 (q, J=7.4 Hz, 1H) 6.54 (dd, J= 1.8 Hz, 3.6 Hz, 1H), 7.12-7.47 (m, 7H); MS (ES): 334.2 (M++1), 230.1. dl-1-(1-feniletil)-2-(3-furil)carbonilamino-3-ciano-4,5-dimetilpirrolo. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.80 (d, J= 7 Hz 3H), 1.89 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 5.48 (q, J= 7Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 7.12-7.40 (m, 6H), 7.93 (s, 1H); MS(ES): 334.1 (M++1), 230.0. d I- 1-(1 -fen iletil)-2-ciclopenti Icarboni lam i no-3-ciano-4, 5-d i metil pirrólo. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.82 (d, J= 7.4 Hz, 3H), 1.88 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 1.63-1.85 (m, 8H) 2.63 (m, 1H), 5.43 (q, j= 7.4 Hz, 1H), 6.52 (s, 1H), 7.05-7.20 (m, 5H);MS (ES): 336.3 (M++1). dl-1-(1-feniletil)-2-(2-tienil)carbonilamino-3-ciano-4,5-dimetilpirrolo. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.82 (d, J=6.8 Hz, 3H), 1.96 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 5.49 (q, J=6.8 Hz, 1H), 7.05-7.55 (m, 8H);MS (ES):350.1 (M++1), 246.0. dl-1-(1-feniletil)-2-(3-tienil)carbonilamino-3-ciano-4,5-dimetilpirrolo. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.83 (d, J=7.0 Hz, 3H), 1.99 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 5.49 (q, J=7.0 Hz, 1H), 6.90 (m, 1H), 7.18-7.36 (m, 6H), 7.79 (m, 1H); MS (ES): 350.2 (M++1), 246.1. d 1-1 -(1 -feniletil )-2-(4-f I uorofeni I )carbon i lami no-3-ci a no-4, 5-dimetilpirrolo. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.83 (d, J=7.4 Hz, 3H), 1.96 (s, 3H), 2.08 (s, 3H), 5.51 (q,J=7.4 Hz, 1H), 7.16-7.55 (m, 9H);MS (ES): 362.2 (M++1), 258.1. d 1-1 -(1 -fen iletil )-2-(3-f luorof enil )carbon i lami no-3-ci a no-4, 5-dimetilpirrolo. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.83 (d, J=7.4 Hz, 3H),1.97 (s, 3H), 2.10(s, 3H), 5.50 (q, J = 7.4Hz, 1H), 7.05-7.38 (m, 7H), 7.67-7.74 (m, 2H); MS (ES): 362.2(M++1), 258.1. d 1-1 -(1 -feniletil )-2-(2-f I uorofeni I )carbon i lami no-3-c¡ano-4, 5-dimetilpirrolo. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.85 (d, J=7.2 Hz, 3H), 1.94 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 5.50 (q, J= 7.2 hz, 1H), 7.12-7.35 (m, 6H), 7.53 (m, 1H), 7.77 (m, 1H), 8.13(m, 1H), MS (ES): 362.2(M++1), 258.0. dl-1-(1-feniletil)-2-isopropilcarbonilamino-3-c¡ano-4,5-dimetilpirrolo. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.19 (d, J=7.0 Hz, 6H), 1.82 (d, J= 7.2 Hz, 3H), 1.88 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.46 (m, 1H), 5.39 (m, J=7.2 Hz, 1H), 6.64 (s, 1h), 7.11-7.36 (m, 5H); MS (ES): 310.2 (M++1), 206.1.

En el caso de la acilación de dl-1-(1-feniletil)-2-amino-3-ciano- 4-metilpirrolo, se obtuvieron dl-1-(1-fen¡letil)-2-benzoilamino-3-ciano-4-dimetilpirrolo monoacilatado y dl-1-(1-feniletil)-2-dibenzoilamino-3-ciano-4-metilpirrolo de pirrólo diacilatado. Pirrólo monoacilatado 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 7.69 (d, 2H J=7.8 Hz, Ar-H), 7.58-7.12 (m, 8H, Ar-H), 6.18 (s, 1H, pirrólo- CH3), 5.52 (q, 1H,J=7.2 Hz, CH-CH3), 2.05 (s, 3H, pirroloCH3),1.85 (d, 3H, J=7.2 Hz, CH-CJH3);MS (ES): 330.2 (M++1); pirrólo diacilatado 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 7.85 (d, 2H J = 7.7 Hz, Ar-H), 7.74 (d, 2h, J= 7.8 Hz, Ar-H), 7.52-7.20 (m, 9H, Ar-H), 7.04 (m, 2H, Ar-H), 6.21 (s, 1H, pirrolo-H), 5.52 (q, 1H, J=7.2 Hz, CH-CH3), 1.77 (d, 3H, J=7.2 Hz, CH-CH3), 1.74 (s, 3H, pirrrolo-CH3); MS (ES): 434.1 (M++1).

Preparación 7: A una solución de dl-1-(1-feniletil)-2-fenilcarboxiamido-3-ciano- 4,5-dimetilpirrolo (1.0 g. 2.92 mmol) en metanol ( 10.0 ml) se le agregó ácido sulfúrico concentrado (1.0 ml) a una temperatura de 0°C. La mezcla resultante fue sometida a reflujo durante 15 horas y fue enfriada a una temperatura ambiente. El precipitado fue filtrado para producir 0.48 g (48%) de dl-5,6-dimetil-2-fenil-7H-7-(1-feniletil)pirrolo[2,3d]pirimidin-4(3h)-ona. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 2.02 (d, J=7.4 Hz, 3H), 2.04 (s, 3H), 2.41 (s, 3H), 6.25 (q, J=7.4 Hz, 1H), 7.22-7.50 (m, 9H), 8.07-8.12 (dd, J=3.4 Hz, 6.8 Hz, 2H), 10.51 (s, 1H); MS (ES): 344.2 (M++1). Los compuestos que se encuentran a continuación fueron obtenidos en forma similar a la de la Preparación 7: dl-5,6-dimetil-2-(3-piridil)-7H-7-(1-feniletil)pirrolo[2,3d]pirimidín-4(3H)-ona. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 2.03 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 2.08 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 6.24 (q, J=7.2 Hz, 1H), 7.09-7.42 (m, 5H), 8.48 (m, 2H), 8.70 (m, 3H); MS(ES): 345.1 (M++1). dl-5,6-dimetil-2-(2-furil)-7H-7-(1-feniletil)pirrolo[2,3d]pirimidin-4(3H)-ona. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.98 (d, J=7.8 Hz, 3H),1.99 (s, 3H), 2.37 (s, 3H), 6.12 (q, J=7.8 Hz, 1H), 6.48 (dd, J= 1.8 Hz, 3.6 Hz, 1H), 7.17-7.55 (m, 7H), 9.6 (s, 1H);MS (ES): 334.2 (M++1). dl-5,6-dimetil-2-(3-furil)-7H-7-(1-feniletil)pirrolo[2,3d]pirimid¡n-4(3H)-ona.1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.99 (d, J=7 Hz, 3H), 2.02 (s, 3H), 2.42(s, 3H), 6.24 (q, J=7Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 7.18-7.32 (m, 5H), 7.48 (s, 1H), 8.51 (s, 1H); MS (ES): 334.2 (M + + 1). d I-5, 6-d i meti l-2-ciclopentil-7H-7-(1 -fen iletil )pirrolo[2,3d] piri m idi n-4(3H)-ona. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.95 (d, J=7.4 Hz, 3H), 2.00 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 1.68-1.888m, 8H), 2.978m, 1H), 6.10 (q, J=7.4 Hz, 1H), 7.16-7.30 (m, 5H), 9.29 (s, 1H); MS (ES): 336.3 (M++1). dl-5,6-d¡metil-2-(2-tienil)-7H-7-(1-feniletil)pirrolo[2,3d]pirimidin-4(3H)-ona. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 2.02 (d, J=7.2 Hz, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.41(s, 3H),6.13 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 7.12 (dd, J=4.8, 2.8 Hz, 1H), 7.26-7.32 (m, 5H), 7.44 (d, J=4.8 Hz, 1H), 8.01 (d, J= 2.8 Hz, 1H) 11.25 (s, 1H); MS (ES): 350.2 (M+ + 1). dl-5,6-dimetil-2-(3-tienil)-7H-7-(1-feniletil)pirrolo[2,3d]pirimidin-4(3H)-ona. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 2.00 (d, J=7.4 Hz, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.43 (s, 3H),6.24 (q, J= 7.4 Hz, 1H), 7.24-7.33 (m, 5H), 7.33-7.39 (m, 1H), 7.85 (m, 1H), 8.47 (m, 1H), 12.01 (s, 1H);MS (ES): 350.2 (M++1). dl-5,6-dimetil-2-(4-fluorofenil)-7H-7-(1-feniletil)pirrolo[2,3d]pirimidin-4(3H)-ona. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 2.01 (d, J=6.8Hz, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 6.26 (q, J= 6.8 Hz, 1H), 7.12-7.36 (m, 7H), 8.23-8.30 (m, 2H), 11.82 (s, 1H); MS (ES): 362.3 (M++1). dl-5,6-dimetil-2-(3-fluorofenil)-7H-7-(1-feniletil)pirrolo[2,3d]pirimidin-4(3H)-ona. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 2.02 (d, J=7.4 Hz, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.44(s, 3H), 6.29 (q, J= 7.4 Hz, 3H), 7.13-7.51 (m,7H), 8.00-8.04 (m, 2H), 11.72 (s, 1H); MS(ES): 362.2 (M+ + 1). dl-5,6-dimetil-2-(2-fluorofenil)7H-7-(1-feniletil)pirrolo[2,3d]pirimidin-4)3H)- ona 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 2.00 (d, J= 7.2 Hz, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.38 (s, 3H), 6.24 (q, J= 7.2 Hz, 1H), 7.18-7.45 (m, 8H), 8.21 (m, 1H), 9.54 (s, 1H); MS (ES): 362.2 (M++1). dl-5, 6-d imetil-2-isopropil-7H-7-(1 -feni letil)pirrolo[2,3d]pirimidin-4(3H)-ona.1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.30 (d, J=6.8 Hz, 3H), 1.32 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 2.01(s, 3H), 2.34 (s, 3H), 2.90 (m, 1H), 6.13 (m, 1H), 7.17-7.34 (m, 5H), 10.16 (s, 1H);MS (ES): 310.2 (M++1).

Preparación 8: Se agitó una solución de dl-1-(1-feniletil)-2-benzoilamina-3-ciano-4-dimetilpirrolo ( 785 mg, 2.38 mmol) con H2S0 concentrado (1 ml) en DMF (13 ml) a una temperatura de 130°C durante 48 horas,. La solución de color negro fue diluida con CHCI3 (100ml) y lavada con 1N NaOH (30 ml), y salmuera (30 ml). La fracción orgánica fue secada, filtrada y concentrada, y purificada con cromatografía instantánea (Si02; 8/2 EtOac/Hex, Rf 0.35) hasta obtener un sólido color café (184 mg, 24%) como dl-5-metil-2-fenil-7H-7-(1-feniletil)pirrolo[2,3d]pirimidin-4(3H)-ona. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 8.18 (m, 2H, Ar-H), 7.62-7.44 (m, 3H, Ar-H), 7.40-7.18 (m, 5H, Ar-H), 6.48 (s, 1H, pirrolo-H), 6.28 (q, 1H, J= 7.2 Hz, CH-CH3), 2.18 (s, 3H, pirrolo-CH3), 2.07 (d, 3H, J=7.2 Hz, CH-CH3); MS (ES): 330.2 (M++1).

Preparación 9: Se sometió a reflujo durante 5 horas una mezcla de dl-1-(1-feniletil)-2-amino-3-ciano-4,5-dimetilpirrolo (9.60 g, 40.0 mmol) y de ácido fórmico (50.0 ml, 98%). Después de enfriarla a temperatura ambiente y de rallar los lados del matraz, se formó y se filtró un precipitado copioso. El material fue lavado con agua hasta que los lavados mostraron un pH neutral para producir dl-5,6-dimetil-7H-7-(1-feniletil)pirrolo[2,3d]pirimidin-4(3H)-ona, 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.96 (d, J= 7.4 Hz, 3H), 2.00 (s, 3H), 2.38 (s, 3H), 6.21(q, J= 7.4 Hz, 1H), 7.11-7.35 (m, 5H), 7.81 (s, 1H), 11.71 (s, 1H); MS (ES): 268.2 (M++1).

Preparación 10: Se suspendió dl-5,6-dimetil-2-fenil-7H-7-(feniletil)pirrolo[2,3d]pirimidin-4(3H)- ona (1.0 g, 2.91 mmol), en ácido polifosfórico (30.0 ml). La mezcla fue calentada a una temperatura de 100°C durante 4 horas. La suspensión caliente fue vertida en agua de hielo y se agitó vigorosamente para dispersar la suspensión, y se hizo base hasta obtener un pH 6 con KOH. El sólido resultante fue filtrado y recolectado para producir 0.49 g 869%) de 5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidin -4(3H)-ona. 1H RMN (200 MHz, DMSO-de) d 2.17 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 7.45(br, 3H), 8.07 (br, 2H), 11.49 (s, 1H), 11.82 (s, 1H); MS (ES): 344.2 (M++1). Los compuestos que se encuentran a continuación fueron obtenidos de manera similar a la de la Preparación 10: 5-metil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidin-4(3H)-ona. MS (ES): 226.0 (M++1). 5,6-dimetil-2-(3-piridil)-7H-pirrolo[2,3d]p¡rimidin-4(3H)-ona. MS (ES): 241.1 (M++1). 5,6-dimetil-2-(2-furil)-7H-pirrolo[2,3d]pirimidin-4(3H)-ona. 1H RMN (200 MHz, DMSO-de) d 2.13(s,3H), 2.18 (s, 3H), 6.39 (dd, J= 1.8, 3.6 Hz, 1H), 6.65 (dd, J= 1.8 Hz, 3.6 Hz, 1H), 7.85 (dd, J= 1.8, 3.6 Hz, 1H), 11.45 (s, 1H), 11.60 (s, 1H); MS (ES): 230.1 (M++1). 5,6-dimetil-2-(3-furil)-7H-pirrolo[2,3d]pirimidin-4(3H)-ona. 1H RMN (200 MHz, DMSO-de) d 2.14(s,3H), 2.19 (s, 3H), 6.66 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 11.3 (s, 1H), 11.4 (s, 1H); MS (ES):230.1 (M++1). 5,6,dimetil-2-ciclopentil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidin-4(3H)-ona. 1H RMN (200 MHz, DMSO-de) d 1.57-1.91 (m, 8H), 2J2 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 2.99 (m, 1H), 11.24 (s, 1H), 11.38 (s, 1H); MS (ES):232.2 (M++1). 5,6-dimetil-2-(2-tienil)-7H-pirrolo[2,3d]pirimidin-4(3H)-ona. 1H RMN (200 MHz, DMSO-de) d 2.14 (s, 3H), 2.19 (s, 3H), 7.14 (dd, J= 3.0, 5.2 Hz, 1H), 7.70 (d, J= 5.2 Hz 1H), 8.10 (d, J=3.0 Hz, 1H) 11.50 (s, 1H); MS (ES): 246.1 (M++1). 5,6-dimetil-2-(3-tienil)-7H-pirrolo[2,3d]pirimidin-4(3H)-ona. 1H RMN (200 MHz, DMSO-d6) d 2.17 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 7.66 (m,1H), 7.75 (m, 1H), 8.43 (m, 1H), 11.47 (s, 1H), 11.69 (s, 1H); MS (ES): 246.1 (M++1). 5,6-dimetil-2-(4-fluorofenil)-7H-p¡rrolo[2,3d]pirimidin-4(3H)-ona. 1H RMN (200 MHz, DMSO-d6)d 2.17 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 7.31 (M, 2H), 8.12 (m, 2H), 11.47 (s, 1H); MS (ES): 258.2 (M++1). 5,6-dimetil-2-(3-fluorofenil)-7H-pirrolo[2,3d]pirimidin-4(3H)-ona. 1H RMN (200 MHz, DMSO-d6) d 2.18 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 7.33 (m, 3H), 7.52 ( m, 1H), 7.85-7.95 (m, 2H), 11.56 (s, 1H), 11.80 (s, 1H); MS (ES): 258.1 (M + + 1). 5,6-dimetil-2-(2-fluorofenil)-7H-pirrolo[2,3d]pirimidin-4(3H)-ona. 1H RMN (200 MHz, DMSO-de) d 2.18 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 7.27-7.37 (m, 2H), 7.53 (m 1H), 7.68 (m, 1H), 11.54 (s,1H), 11.78 (s, 1H); MS (ES): 258.1 (M + + 1). 5,6-dimetil-2-isopropil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidin-4(3H)-ona. 1H RMN (200 MHz, DMSO-de) d 1.17(d, J=6.6 Hz,6H), 2.11 (s,3H), 2.15 (s,3H), 2.81 (m 1H), 11.20 (s, 1H), 11.39 (s,1H); MS (ES): 206.1 (M + + 1). 5,6-dimetil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidin-4(3H)-ona.1H RMN (200 MHz, DMSO-de) d 2.13 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 7.65 (s,1H); MS (ES): 164.0 (M++1).

Preparación 11 : Se sometió a reflujo durante 6 horas una solución de 5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidin-4(3H)-ona (1.0 g, 4.2 mmol) en oxicloruro de fósforo (25.0 ml), y posteriormente se concentró al vacío para secado. Se agregó agua al residuo para inducir la cristalización, y el sólido resultante fue filtrado y recolectado para producir 0.90 g (83%) de 4-cloro-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1H RMN (200 MHz, DMSO-d6) d 2.33 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 7.46-7.49 (m, 3H), 8.30-8.35 (m, 2H), 12.20 (s, 1H); MS (ES): 258.1 (M++1).

Los compuestos que se encuentran a continuación se obtuvieron en forma similar a la de la Preparación 11 : 4-cloro-5-metil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. MS (ES): 244.0 (M++1). 4-cloro-6-metil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimid¡na. MS (ES): 244.0 (M++1). 4-cloro-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1H RMN (200 MHz, DMSOde) d 8.35 (2,2H), 7.63 (br s, 1H), 7.45 (m, 3H), 6.47 (br s, 1H); MS (ES): 230.0 (M++1). 4-cloro-5,6-dimetil-2-(3-p¡ridil)-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. MS (ES): 259.0 (M++1). 4-cloro-5,6-dimetil-2-(2-furil)-7H-pirrolo[2,3d]pirimid¡na. 1H RMN (200 MHz, DMSO-de) d 2.35 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 6.68 (dd, J = 1.8, 3.6 Hz, 1H), 7.34 (dd, J = 1.8 Hz, 3.6 Hz, 1H), 7.89 (dd, J = 1.8, 3.6 Hz, 1H); MS (ES): 248.0 (M++1). 4-cloro-5,6-dimetil-2-(3-furil)-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1H RMN (200 MHz, DMSO-de) d 2.31 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 6.62 (s, 1H),7.78 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 12.02 (s, 1H); MS (ES): 248.1 (M++1 4-cloro-5, 6-d i meti l-2-ciclopentil-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina. 1H RMN (200 MHz, DMSO-de) d 1.61-1.96 (m, 8H), 2.27 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 3.22 (m, 1H),11.97 (s, 1H); MS (ES): 250.1 (M++1). 4-cloro-5,6-dimetil-2-(2-tienil)-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1H RMN (200 MHz, DMSO-de) d 2.29 (s,3H), 2.31 (s,3H), 7.14 (dd, J = 3.1Hz, 4.0Hz, 1H), 7.33 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 12.19 (s, 1H); MS (ES): 264.1 (M++1). 4-cloro-5,6-dimetil-2-(3-tienil)-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1H RMN (200 MHz, DMSO-de) d 2.32 (s,3H), 2.32 (s, 3H), 7.62 (dd, J = 3.0, 5.2 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 3.0 Hz, 1H); MS (ES): 264.0 (M++1). 4-cloro-5, 6-d i meti l-2-(4-fluorofen ¡I )-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina. 1H RMN (200 MHz, DMSO-d6) d 2.33 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 7.30 (m, 2H), 8.34 (m,2H), 12.11 (s, 1H); MS (ES): 276.1. (M + + 1). 4-cloro-5, 6-d i meti l-2-(3-fluorofenil)-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina. 1H RMN (200 MHz, DMSO-d6) d 2.31 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 7.29 (m,1H), 7.52 (m,1H), 7.96 (m, 1H), 8.14 (m, 1H), 11.57 (s, 1H); MS (ES): 276.1. (M++1). 4-cloro-5, 6-d i meti l-2-(2-f I uorofenil)-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina. 1 H RMN (200 MHz, DMSO-d6) d 2.34 (s, 3H), 2.34 (s, 3H), 7.33 (m,2H), 7.44 (m, 1 H), 7.99 (m, 1 H), 12.23 (s, 1 H); MS (ES): 276.1 . (M++1 ). 4-cloro-5,6-dimetil-2-isopropil-7H-pirrolo[2,3d]pirimid ina. 1 H RMN (200 MHz, DMSO-de) d 1 .24 (d, J = 6.6 Hz, 6H), 2.28 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 3.08 (q, J =6.6Hz, 1 H), 1 1 .95 (s, 1 H); MS (ES): 224.0 (M++1 ). 4-cloro-5,6-dimetil-7H-pirrolo[2,3d]pirimid¡na. 1 H RMN (200 MHz, DMSO-de) d 2.31 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 8.40 (s, 1 H); MS (ES): 182.0 (M++1 ). d l-4-cloro-5, 6-d i meti l-2-fenil-7H-7-( 1 -f en i letil)pirrolo[2,3d] pirimidina.

Preparación 12: A una solución de dl-1 ,2-diaminopropano (1 .48 g, 20.0 mmol) y carbonato de sodio (2.73 g, 22.0 mmol) en dioxano (100. 0 ml) y agua (100.0 ml), se le agregó di-tert-dicarbonato (4.80 g, 22.0 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agitó durante 14 horas. El dioxano fue removido al vacío. El precipitado fue filtrado y el filtrado fue concentrado al vacío hasta el secado. El residuo fue triturado con EtOAc y posteriormente fue filtrado. El filtrado fue concentrado al vacío hasta el secado para producir una mezcla de dl-1 -amino-2-(1 , 1 -dimetiletoxi)carbonilamino-propano y dl-2-amino-1 -(1 , 1 -dimetiletoxi)carbonilamino-propano, los cuales no se pudieron separar a través del método de cromatografía normal . La mezcla se utilizó para reacción en el Ejemplo 8.

Preparación 13: A una solución de Fmoc-ß-Ala-OH (1 .0 g , 3.212 mmol) y cloruro de oxalilo (0.428 g, 0.29 ml, 3.373 mmol) en d iclorometano (20.0 ml), se le agregaron algunas gotas de N , N-dimetilformamida a una temperatura de 0°C. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 1 hora seguida de la adición de ciclopropilmetilamina (0.229 g, 0.28 ml, 3.212 mmol) y trietilamina (0.65 g, 0.90 ml, 6.424 mmol). Después de 10 minutos, la mezcla fue tratada con 1 M clorhidrato (10.0 ml), y la mezcla acuosa fue extractada con diclorometano (3 x 30.0 ml). La solución orgánica fue concentrada al vacío hasta el secado secado. El residuo fue tratado con una solución de piperidina al 20% en N , N-dimetilforamida (20.0 ml) durante 0.5 horas. Después de la remoción del solvente al vacío, el residuo fue tratado con 1 M clorhidrato (20.0 ml) y acetato de etilo (20.0 ml). La mezcla fue separada y la capa acuosa se hizo base con hidróxido de sodio sólido hasta un pH = 8. El precipitado fue removido mediante filtración y la solución acuosa fue sometida a una columna de intercambio de iones diluida con piridina al 20% para producir 0.262 g (57%) de amida de N-ciclopropilmetil ß-alanina. 1 H RMN (200 MHz, CD3OD) d 0.22 (m, 2H ), 0.49 (m,2H), 0.96 (m, 2H), 2.40 (t,2H), 2.92 (t,2H ),3.05 (d, 2H); MS (ES): 143.1 (M+ + 1 ).

Preparación 14: Se disolvió N-tert-butoxicarbonil-trans-1 ,4-ciclohexildiamina. trans-1 ,4-ciclonexildiamina (6.08 g, 53.2 mmol), en diclorometano (100mL). Se agregó por medio de una cánula una solución de di-t-butildicarbonato (2.32 g, 10.65 mmol en 40 ml de diclorometano). Después de 20 horas, la reacción fue dividida entre CHCI3 y agua. Las capas fueron separadas y la capa acuosa fue extractada con CHCI3 (3x). Las capas orgánicas combinadas fueron secadas sobre MgS04, filtradas y concentradas para producir 1 .20 g de un sólido blanco (53%). 1 H-RMN (200M Hz, CDCI3): d 1 .0-1 .3 (m, 4H), 1 .44 (s, 9H), 1 .8-2.1 (m, 4H), 2.62 (brm, 1 H), 3.40 (brs, 1 H),4.37 (brs, 1 H); MS (ES): 215.2 (M++ 1 ). Se disolvió 4-(N-acetil)-N-tert-butoxicarbonil-trans-1 ,4-ciclohexildiamina. N-tert-butoxicarbonil-trans-1 ,4-ciclohexildiamina (530 mg, 2.47 mmol) en diclorometano (20 ml). Se agregó en forma de gotas anhídrido acético (250 mg, 2.60 mmol). Después de 16 horas, la reacción fue diluida con agua y CHCI3. Las capas fueron separadas y la capa acuosa fue extractada con CHCI3 (3x). Las capas orgánicas combinadas fueron secadas sobre MgS04, filtradas y concentradas. La recristalización (EtOH/H20) produjo 190 mg de cristales blancos (30%). 1 H RMN (200 MHz, CDCI3): d 0.9-1 .30 (m, 4H ), 1 .43 (s, 9H), 1 .96-2.10 (m, 7H), 3.40 (brs, 1 H), 3.70 (brs, 1 H), 4.40 (brs, 1 H), 4.40 (brs, 1 H); MS (ES): 257.2 (M++ 1 ),2.42.1 (M+ -15), 201 .1 (M+ -56). 4-(4-trans-acetamidociclohexil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-(1 -f en i leti I )pirrolo[2,3d] pirimidina. Se disolvió 4-(N-acetil)-N-tert-butoxicarbonil-trans-1 ,4-ciclohexildiamina (190 mg, 0.74 mmol), en d iclorometano (5 ml) y se diluyó con TFA (6 ml). Después de 16 horas, la reacción se concentró. El sólido crudo, DMSO (2mL), NaHC03 (200 mg, 2.2 mmol) y 4-cloro-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimid¡na (35 mg, 0.14 mmol), se combinaron en un matraz y se calentaron a una temperatura de 130°C. Después de 4.5 horas, la reacción fue enfriada a temperatura ambiente y diluida con EtOAc y agua. Las capas fueron separadas y la capa acuosa fue extractada con EtOAc (3x). Las capas orgánicas combinadas fueron secadas sobre MgS04, filtradas y concentradas. La cromatografía (placa de preparación de sílice; 20: 1 CHCI3: EtOH), produjo 0.3 mg de un sólido color marrón (producción del 1 %). MS (ES): 378.2 (M++1 ). 4-(N-metanosulfonil)-N-tert-butoxicarbonil-trans-1 ,4-ciclohexildiamina. Se disolvió trans-1 ,4-ciclohexildiamina (530 mg, 2.47 mmol), en diclorometano (20 ml) y se diluyó con piridina (233 mg, 3.0 mmol). Se agregó en forma de gotas cloruro de metanosulfonilo (300 mg, 2.60 mmol). Después de 16 horas, la reacción fue diluida con agua y CHCI3. Las capas fueron separadas y la capa acuosa fue extractada con CHCI3 (3x). Las capas orgánicas combinadas fueron secadas sobre MgS?4, filtradas y concentradas. La recristalización (EtOH/H20) produjo 206 mg de cristales blancos (29%). 1 H-RMN (200MHz, CDCI3): d 1 .10-1 .40 (m, 4H), 1 .45 (s, 9H), 2.00-2.20 (m, 4H), 2.98(s, 3H) 3.20-3.50 (brs, 2H), 4.37 (brs, 1 H); MS (ES) 293.1 (M + + 1 ), 278.1 (M+ -15), 237.1 (M+ -56). 4-(4-trans-metanosulfamidociclohexil)amino-5,6- imetil-2-fenil-7H-(1 -feniletil)pirrolo[2,3d]pirim idina. Se disolvió 4-(N-sulfonil)-N-tert-butoxicarbonil-trans-1 ,4-ciclohexildiamina (206 mg, 071 mmol), en diclorometano (5 ml) y fue diluido con TFA (6 ml). Después de 16 horas, la reacción fue concentrada. La mezcla de reacción cruda, DMSO (2 ml), NaHC03 (100 mg, 1 .1 mmol) y 1 -cloro-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina, se combinaron en un matraz y fueron calentadas a una temperatura de 130°C. Después de 15 horas, la reacción fue enfriada a temperatura ambiente y fue diluida con EtOAc (3x). Las capas orgánicas combinadas fueron secadas sobre MgS04, filtradas y concentradas. La cromatografía (placa de preparación de sílice, 20: 1 CHCI3/EtOH), produjo 2.6 mg de un sólido color marrón (producción del 5%). MS (ES): 414.2 (M++ 1 ).

Ejemplo 1 : Se calentó a una temperatura de 130°C durante 5 horas, una solución de 4-cloro-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina (0.50 g, 1 .94 mmol) y 4-trans-hidroxiciclohexilamina (2.23 g , 19.4 mmol) en sulfóxido de metilo (10.0 ml). Después de enfriar la temperatura ambiente, se agregó agua (10.0 ml) y la solución acuosa resultante fue extractada con EtOAc (3 x 10.0 ml). La solución de EtOAc combinada fue secada (MgS04) y filtrada, el filtrado fue concentrado al vacío hasta el secado, el residuo fue cromatografiado sobre gel de sílice para producir 0.49 g (75%) de 4-(4-trans-hidroxiciclohexil)am¡no-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. pf 197- 199°C; 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.25-1.59 (m, 8H), 2.08 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 3.68-3.79 (m, 1H), 4.32-4.38 (m, 1H), 4.88 (d, J= 8 Hz, 1H), 7.26-7.49 (m, 3H), 8.40-8.44 (dd, J= 2.2, 8 Hz, 2H), 10.60 (s, 1H); MS (ES): 337.2 (M++1).

Los compuestos que se encuentran a continuación se obtuvieron en forma similar a la del Ejemplo 1: 4-(4-trans-hidroxiciclohexil)amino-6-metil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina.1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 11.37 (s, 1H, pirrolo-NH), 8.45 (m, 2H, Ar-H), 7.55 (m, 3H, Ar-H), 6.17 (s,1H, pirrolo-H), 4.90 (br d, 1H, NH), 4.18 (m, 1H, CH-O), 3.69 (m, 1H, CH-N), 2.40-2.20 (m, 2H) 2.19-1.98 (m, 2H), 2.25 (s, 3H, CH3) 1.68-1.20 (m, 4H); MS (ES): 323.2 (M++1). 4-(4-trans-hidroxiciclohexil)amino-5-metil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina.1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 11.37 (s, 1H, pirrolo-NH), 8.40 (m, 2H, Ar-H), 7.45 (m, 3H, Ar-H), 5.96 (s, 1H, pirrolo-H), 4.90 (br d, 1H, NH), 4.18 (m, 1H, CH-O), 3.69 (m, 1H, CH- N), 2.38-2.20 (m, 2H), 2.18-1.98 (m, 2H),2.00 (s, 3H, CH3) 1.68-1.20 (m, 4H); MS (ES): 323.2 (M++1). 4-(4-trans-hidroxiciclohexil)amino-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. pf 245.5-246.5°C; 1H RMN (200MHz, CD3OD) d 8.33(m, 2H, Ar-H), 7.42 (m, 3H, Ar-H), 7.02 (d, 1H, J=3.6 Hz, pirrolo-H), 6.53 (d, 1H, J=3.6 Hz, pirrolo-H), 4.26 (m, 1H, CH-O), 3.62 (m, 1H, CH-N), 2.30-2.12 (m, 2H), 2.12-1.96 (m, 2H), 1.64-1.34 (m, 4H); MS, M + 1=309.3; Anal (C?8H20N4O) C,H,N. 4-(4-trans-hidroxiciclohexil)amino-5,6-dimetil-2-(3-piridil)-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina.1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.21-1.54(m, 8H); 2.28 (s, 3H); 2.33 (s, 3H); 3.70 (m, 1H), 4.31 (m, 1H), 4.89 (d, 1H), 7.40 (m, 1H), 8.61 (m, 2H), 9.64 (m, 1H); MS (ES): 338.2 (M++1). 4-(4-trans-hidroxiciclohexil)amino-5,6-dimetil-2-(2-furil)-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina.1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.26-1.64 (m, 8H); 2.22 (s, 3H), 2.30 (s, 3H); 3.72 (m, 1H), 4.23 (m, 1H), 4.85 (d, 1H), 6.52 (m, 1H), 7.12 (m, 1H), 7.53 (m, 1H), 9.28 (s, 1H); MS (ES): 327.2 (M++1). 4-(4-tra ns-h id roxi ciciohexil )a mi no-5, 6-d i meti l-2-(3-f uri I )-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina.1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.25-1.63 (m, 8H);2.11 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 3.71 (m, 1H), 4.20 (m, 1H), 4.84 (d, 1H), 7.03 (m, 1H), 7.45 (m, 1H), 8.13 (m, 1H), 10.38 (m, 1H); MS (ES): 327.2 (M + + 1). 4-(4-trans-hidroxiciclohexil)amino-5,6-dimetil-2-ciclofentil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.26-2.04 (m, 16H), 2.26 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 3.15 (m, 1H), 3.70 (m, 1H), 4.12 (m, 1H), 4.75 (d, 1H); MS (ES):329.2 (M++1). 4-(4-trans-h id roxi ciciohexil )a mi no-5, 6-d i meti l-2-(2-ti enil )-7H-pirrolo[2,3d]pirimidin-4-amina.1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.28-1.59 (m, 8H), 2.19 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 3.74 (m, 1H), 4.19 (m, 1H), 4.84 (d, 1H), 7.09 (m, 1H), 7.34 (m, 1H), 7.85 (m, 1H), 9.02 (s, 1H); MS (ES):343.2 (M+ + 1). 4-(4-trans-hidroxiciclohexil)amino-5,6-dimetil-2-(3-tienil)-7H-pirrolo[2,3d]pirimidin.1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.21-1.60(m, 8H),1.98 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 3.66 (m, 1H), 4.22 (m, 1H), 7.27 (m, 1H), 7.86 (m, 1H), 8.09 (m, 1H), 11.23 (s, 1H); MS (ES): 343.2 (M++1). 4-(4-trans-hidroxiciclohexil)amino-5,6- imetil-2-(4-fluorofenil)-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina.1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.26-1.66 (m, 8H), 1.94 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 3.73 (m, 1H), 4.33 (m, 1H), 4.92 (d, 1H), 7.13 (m, 2H), 8.41 (m, 2H), 11.14 (s, 1H); MS (ES): 355.2 (M++1). 4-(4-trans-hidroxiciclohexil)amino-5,6-dimetil-2-(3-fluorofenil)-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina.1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.26-1.71 (m, 8H), 2.06 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 3.72 (m, 1H), 4.30 (m, 1H), 4.90 (d, 1H), 7.09 (m, 1H), 7.39 (m, 1H), 8.05 (m, 1H), 8.20 (m, 1H) 10.04 (s, 1H); MS (ES):355.2 (M++1). 4-(4-trans-h id roxi ciciohexil )a mi no-5, 6-d i meti l-2-(2-f I uorofeni I )-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.30-1.64 (m, 8H), 2.17 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 3.73 (m, 1H), 4.24 (m, 1H), 4.82 (d, 1H), 7.28 (m, 2H), 8.18 (m, 1H), 9.02 (m, 1H), 12.20 (s, 1H); MS (ES): 355.3 (M++1). 4-(4-trans-h id roxi ciciohexil )a mi no-5, 6-d i meti l-2-isopropil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.31 (d, J = 7.0 Hz, 6H), 1.30-1.65 (m, 8H), 2.27 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 3.01 (m, J =7.0 Hz,1H), 3.71 (m, 1H), 4.14 (m, 1H), 4.78 (d, 1H); MS (ES): 303.2. dl-4-(2-trans-hidroxiciclohexil)amino-5,6-dimetil-2-isopropil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.31-1.42 (br, 4H), 1.75-1.82 (br, 4H), 2.02 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 3.53 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 5.08 (d, 1H), 7.41-7.48 (m, 3H), 8.30 (m, 2H), 10.08 (s, 1H); MS (ES): 337.2 (M + + 1). 4-(3,4-trans-dihidroxiciclohexil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H- pirrolo[2,3d]pirimidina. MS (ES): 353.2 (M++1). 4-(3, 4-c¡s-d¡ hidroxi Iciclohexi I )a mi no-5, 6-d ¡met¡l-2-f eni I-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. MS (ES): 353.2 (M++1). 4-(2-acetilaminoetil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. pf 196-199°C; 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.72 (s, 3H), 1.97 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 3.59 (m, 2H), 3.96 (m, 2H), 5.63 (br, 1H), 7.44-7.47 (m, 3H), 8.36-8.43 (dd, J = 1 Hz, 7 Hz, 2H), 10.76 (s, 1H); MS (ES): 324.5 (M++1). dl-4-(2-trans-hidroxiciclopentil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina.1 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.62 (m, 2H), 1.79 (br, 4H), 1.92 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 4.11 (m, 1H), 4.23 (m, 1H), 5.28 (d, 1H), 7.41-7.49 (m, 3H), 8.22 (m, 2H), 10.51 (s, 1H); MS (ES): 323.2 (M++1). 1 Para la preparación de 2-trans-hidroxiciclopentilamina, consultar documento PCT 9417090. dl-4-(3-trans-hidroxiciclopentil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina.1 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.58-1.90 (br, 6H), 2.05 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 4.48-4.57 (m, 1H), 4.91-5.01 (m, 2H), 7.35-7.46 (m, 3H), 8.42-8.47 (m, 2H), 10.11 (s, 1H); MS (ES): 323.2 (M + + 1). 1 Para la preparación de 3-trans-hidroxiciclopentilamina, consultar documento EP-A-322242. dl-4-(3-cis-hidroxiciclopentil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1 1 H RMN (200 M Hz, CDCI3)d 1 .82-2.28 (br,6H), 2.02 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 4.53-4.60 (m, 1 H), 4.95-5.08 (m, 1 H), 5.85-5.93 (d , 1 H), 7.35-7.47 (m,3H), 8.42-8.46 (m, 2H), 10.05 (s, 1 H ); MS (ES): 323.2 (M++1 ). 1 Para la preparación de 3-cis-hidroxiciclopentilamina, consultar documento EP-A-322242. 4-(3,4-trans-dihidroxiciclopentil)amino-5,6-d¡metil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina.1 1 H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1 .92-1 .99 (br, 2H), 2.14 (s, 3H), 2.20 (br, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.41 -2.52 (br, 2H), 4.35 (m, 2H), 4.98 (m, 2H), 7.38- 7.47 (m, 3H), 8.38-8.42 (m, 2H), 9.53 (s, 1 H); MS (ES): 339.2 (M++1 ). 1 Para la preparación de 3,4-trans-dihidroxiciclopentilamina, consultar documento PCT 9417090. 4-(3-amino-3-oxopropil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1 H RMN (200 MHz, CDCI3) d 2.02 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.71 (t, 2H), 4.18(m, 2H), 5.75-5.95 (m, 3H), 7.38-7.48 (m, 3H), 8.37-8.41 (m, 2H), 10.42 (s, 1 H); MS (ES): 310.1 (M++1 ). 4-(3-N-ciclopropilmetilamino-3-oxopropil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1H RMN (200 MHz, CD3OD) d 0.51 (q, 2H), 0.40 (q, 2H), 1.79-1.95 (br, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.40 (s, 3H), 2.72 (t, 2H), 2.99 (d, 2H), 4.04 (t, 2H), 7.58-7.62 (m, 3H), 8.22-8.29 (m,2H); MS (ES): 364.2 (M++1). 4-(2-amino-2-oxoetil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina 1H RMN (200 MHz, CD3OD) d 2.31 (s,3H), 2.38 (s, 3H), 4.26 (s, 2H), 7.36 (m, 3H), 8.33 (m, 2H); MS (ES): 396.1 (M++1). 4-(2-N -meti lamí no-2-oxoeti I )amino-5, 6-di metil-2-f eni I-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.99 (s,3H), 2.17 (s, 3H), 2.82 (d, 3H), 4.39 (d, 2H), 5.76 (t, 1H), 6.71 (br, 1H), 7.41-7.48 (m, 3H), 8.40 (m, 2H),10.66 (s, 1H); MS (ES): 310.1 (M++1). 4-(3-tert-butiloxil-3-oxoprop¡l)am¡no-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina.1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.45 (s, 9H), 1.96 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.71 (t, 2H), 4.01 (q, 2H), 5.78 (t, 1H), 7.41-7.48 (m,3H), 8.22-8.29 (m, 2H); MS (ES): 367.2 (M++1). -(2-hi roxietil)amino-5,6- imetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimi ina. 1H RMN (200MHz, CDCI3) d 1.92 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 3.81- 3.98 (br, 4H), 5.59 (t, 1H),7.39- 7.48 (m, 3H), 8.37 (m, 2H), 10.72 (s, 1H); MS (ES): 2.83.1 (M++1). 4-(3-h id roxi propi I )am i no-5, 6-d i meti l-2-fen i l-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.84 (m, 2H), 1.99 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 3.62 (t, 2H), 3.96 (m, 2H), 3.35 (t, 1H), 7.39- 7.48 (m, 3H), 8.36 (m, 2H), 10.27 (s, 1H) ; MS (ES): 297.2 (M + + 1). 4-(4-hidroxibutil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina.1H RMN (200MHz, CDCI3) d 1.71-1.82 (m, 4H), 1.99 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 3.68-3.80 (m, 4H), 5.20 (t, 1H), 7.41-7.49 (m, 3H), 8.41 (m, 2H), 10.37 (s, 1H); MS (ES): 311.2 (M++1). 4-(4-trans-acetilaminociclohexil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 4-(4-trans-metilsulfonilaminociclohexil)amino-5,6- imetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 4-(2-acetilaminoetil)amino-5,6-dimetil-2-fen¡l-7H-7-(1 f en i letil)pirrolo[2,3d] pirimidina. 4-(4-trans-hidroxiciclohexil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-1' fen i leti I )pirrolo[2,3d] pirimidina. 4-(3-piridilmetil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-7-(1 -f en i letil)pirrolo[2,3d] pirimidina. 4-(2-metilpropil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-7-(1 -f en ileti I )pirrolo[2,3d] pirimidina.

Ejemplo 2: A una suspensión agitada de trifenilfosfina (0.047 g, 0.179 mmol) y ácido benzoico (0.022 g, 0.179 mmol) en THF (1 .0 ml) enfriada a una temperatura de 0°C, se le agregó 4-(4-trans-h id roxiciclohexi I )a mi no-5, 6-d ¡met¡l-2-fen i l-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina (0.05 g, 0.149 mmol) a una temperatura de 0°C. Posteriormente se agregó en forma de gotas durante 10 minutos, azodicarboxilato dietilo (0.028 ml, 0.179 mmol). Posteriormente, la reacción se dejó calentar a temperatura ambiente. Después que la reacción se completó por medio de TLC, la mezcla de reacción fue extinguida con bicarbonato de sodio acuoso (3.0 ml). La fase acuosa fue separada y extractada con éter (2 X 5.0 ml). Los extractos orgánicos fueron combinados, secados y concentrados al vacío hasta el secado. Al residuo se le agrego éter (2.0 ml) y hexano (5.0 ml), por lo que se filtró el volumen de óxido de trifenilfosfina. La concentración del filtrado produjo un aceite viscoso el cual fue purificado mediante cromatografía de columna (hexano: acetato de etilo=4: 1 ) para producir 5.0 mg (7.6%) de 4-(4-cis-benzoiloxiciclohexil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. MS (ES): 441 .3 (M+ + 1 ). La reacción, también produjo 50.0 mg (84%) de 4-(3-ciclohexenil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. MS (ES): 319.2 (M++1 ). Ejemplo 3: A una solución de 4-(4-cis-benzoiloxiciclohexil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina (5.0 mg , 0.01 14 mmol) en etanol (1 .0mL), se le agregaron 10 gotas de 2M hidróxido de sodio. Después de 1 hora, la mezcla de reacción fue extractada con acetato de etilo (3 x 5.0 ml) y la capa orgánica fue secada, filtrada y concentrada al vacío hasta el secado. El residuo fue sometido a cromatografía de columna (hexano: acetato de etilo=4: 1 ) para producir 3.6 mg (94%) de 4-(4-cis-hidroxiciclohexil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. MS (ES): 337.2 (M++1 ). Los compuestos que se encuentran a continuación fueron obtenidos en una forma similar a la del Ejemplo 3: 4-(3-N, N-d imetil-3-oxopropil)amino-5, 6-di metil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1 H RMN (200 MHz, CDCI3) d 2.01 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.73 (t, 2H), 2.97 (s, 6H), 4.08 (m, 2H), 6.09 (t, 1 H), 7.41 -7.48 (m, 3H), 8.43 (m, 2H), 10.46 (s, 1 H ); MS (ES): 338.2 (M++1 ). 4-(2-form ila mi noetil )a mi no-5, 6-di metil-2-fenil-7 H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1 H RMN (200 MHz, CDCI3) d 2.26 (s, 3H), 2.37 (s, 3H), 3.59-3.78 (m, 2H), 3.88-4.01 (m, 2H ), 5.48-5.60 (m, 1 H), 7.38-7.57 (m, 3H), 8.09 (s, 1 H ), 8.30-8.45 (m, 2H), 8.82 (s, 1 H); MS (ES): 310.1 (M + + 1 ). 4-(3-acetilaminopropil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. MS (ES): 338.2 (M++1 ).

Eiemplo 4: Se disolvió 4-(3-tert-butiloxi-3-oxopropil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina (70.0 mg, 0.191 mmol) en ácido trifluoroacético: diclorometano (1 : 1 , 5.0 ml). La solución resultante fue agitada a temperatura ambiente durante 1 hora y posteriormente fue sometida a reflujo durante 2 horas. Después de enfriarla a temperatura ambiente, la mezcla fue concentrada al vacío hasta el secado. El residuo fue sometido a cromatrografía de preparación de capa delgada (EtOAc:hexano:AcOH=7:2.5:0.5) para producir 40.0 mg (68%) de 4-(3-hidroxi-3-oxopropil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]p¡rimidina. 1 H RMN (200 MHz, CD3OD) d 2.32 (s, 3H), 2.38 (s, 3H), 2.81 (t, 2H ), 4.01 (t, 2H), 7.55 (m, 3H), 8.24 (m, 2H); MS (ES): 31 1 .1 (M++1 ). El compuesto que se encuentra a continuación se obtuvo en forma similar a la del Ejemplo 4: 4-(3-aminopropil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-p¡rrolo[2,3d]pirim¡dina. MS (ES): 296.1 (M++ 1 ), 279.1 (M+-NH3).

Ejemplo 5: Se disolvió 4-(3-hidroxi-3-oxopropil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina (50.0 mg, 0.161 mmol) en una mezcla de N , N-dimetilformamida (0.50 ml), dioxano (0.50 ml) y agua (0.25 ml). A esta solución se le agregó metilamina (0.02 ml , 40% por peso en agua, 0.242 mmol), trietilamina (0.085 ml) y tetrafluoroborato de uronio N , N, N'N'-tetrametilo (61 .2 mg, 0.203 mmol). Después de mezclar a temperatura ambiente durante 10 minutos, la mezcla fue concentrada y el residuo fue sometido a cromatografía de preparación de capa delgada (EtOAc) para producir 35.0 mg (67%) de 4-(3-N-metil-3-oxopropil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1 H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1 .92 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 2.65 (t, 2H), 4.08 (t, 2H), 5.90 (t, 1 H), 6.12 (m, 1 H),7.45 (m, 3H), 8.41 (m, 2H), 10.68 (s, 1 H); MS (ES): 31 1 .1 (M++1 ). Los compuestos que se encuentran a continuación se obtuvieron en forma similar a la del Ejemplo 5: 4-(2-ciclopropanocarbonilaminoetil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidine. MS (ES): 350.2 (M++ 1 ). 4-(2-¡sobuti rila mi noetil )a mi no-5, 6-d ¡meti l-2-fen i I-7H-pirrolo[2,3d]pirimidine. MS (ES): 352.2 (M++1 ). 4-(3-propionilaminopropil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1 H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1 .00-1 .08 (t, 3H), 1 .71 -2.03 (m, 4H), 2.08 (s, 3H), 2.37 (s, 3H), 3.26-3.40 (m , 2H), 3.79-3.96 (m, 2H), 5.53-5.62 (m, 1 H), 6.17-6.33 (m, 1 H), 7.33-7.57 (m, 3H) 8.31 -8.39 (m, 2H), 9.69 (s, 1 H); MS (ES): 352.2 (M++1 ). 4-(2-metilsulfonilaminoetil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina.1 H RMN (200 MHz, CDCI3) d 2.18 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.92 (s, 3H), 3.39-3.53 (m, 2H), 3.71 -3.88 (m, 2H), 5.31 -5.39 (m, 1 H), 6.17-6.33 (m, 1 H), 7.36-7.43 (m, 3H) 8.20-8.25 (m, 2H), 9.52 (s, 1 H); MS (ES): 360.2 (M++ 1 ).

Eiemplo 6: Se sometió a reflujo una mezcla de 4-cloro-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina (0.70 g, 2.72 mmol) y 1 ,2-diaminoetano (10.0 ml , 150 mmol) bajo atmósfera inerte durante 6 horas. La amina excedente fue removida al vacío, el residuo fue lavado consecutivamente con éter y hexano para producir 0.75 g (98%) de 4-(2-aminoetil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. MS (ES); 282.2 (M++ 1 ), 265.1 (M+-NH3).

Ejemplo 7: A una solución de 4-(2-aminoetil)amino-5,6-d¡metil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina (70.0 mg, 0.249 mmol) y trietilamina (50.4 mg, 0.498 mmol) en diclorometano (2.0 ml), se le agregó cloruro de propionilo (25.6 mg, 0.024 ml , 0.274 mmol) a una temperatura de 0°C. Después de 1 hora, la mezcla fue concentrada al vacío y el residuo fue sometido a cromatografía de preparación de capa delgada (EtOAc) para producir 22.0 mg (26%) de 4-(2-propionilaminoetil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. MS (ES): 338.2 (M++ 1 ). Los compuestos que se encuentran a continuación se obtuvieron en una forma similar a la del Ejemplo 7: 4-(2-N'-metilureaetil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1 H RMN (200 MHz, CDCI3) d 2.13 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 3.53 (d, 3H), 3.55 (m, 2H), 3.88 (m, 2H), 4.29 (m, 1 H), 5.68 (t, 1 H), 5.84 (m, 1 H) 7.42 (m, 3H), 8.36 (dd, 2H), 9.52 (s, 1 H ); MS (ES): 339.3 (M++1 ). 4-(2-N'-etilureaetil)amino-5, 6-d imeti l-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirim¡dina. MS (ES): 353.2 (M++1 ).

Ejemplo 8: A una solución de clorhidrato de 1 -(3-dimetilaminoprop¡l)-3-etilcarbodiimida (41 .1 mg, 0.215 mmol), dimetilaminopiridina (2.4 mg, 0.020 mmol) y ácido pirúvico (18.9 mg, 0.015 ml, 0.215 mmol) en diclorometano (2.0 ml), se le agregó 4-(2-aminoetil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina (55.0 mg, 0.196 mmol). La mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 4 horas. Posteriormente, las conversiones usuales y la cromatografía de columna (EtOAc), produjeron 10.0 mg (15%) de 4-(2'- piruvilaminoetil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimi ina. MS (ES): 352.2 (M+ + 1 ).

Ejemplo 9 : A una solución de 4-(2-aminoetil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina (60.0 mg, 0.213 mmol) en d iclorometano (2.0 ml), se le agregó isocianato N-tri metilsililo (43.3 mg, 0.051 ml, 0.320 mmol). La mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 3 horas, seguida de la adición de bicarbonato de sodio acuoso. Después de la filtración a través de una pequeña cantidad de gel de sílice, el filtrado fue concentrado al vació hasta el secado para producir 9.8 mg (14%) de 4-(2-ureaetil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimid ina. MS (ES): 325.2 (M++1 ). Los compuestos que se encuentran a continuación fueron obtenidos en forma similar a la del Ejemplo 9: a7-4-(2-acetilaminoprop¡l)amino-5,6-d¡met¡l-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1 .28-1 .32 (d, J=8 Hz, 3 H), 1 .66 (s, 3H), 1 .96 (s, 3H), 2.30 (s, 3H) 3.76-3.83 (m, 2H), 4.10-4.30 (m, 1 H), 5.60-5.66 (t, J=6 Hz, 1 H), 7.40-7.51 (m, 3H), 8.36-8.43 (m, 2H), 10.83 (s, 1 H); MS (ES): 338.2 (M+ +1 ).

(R)-4-(2-acetilaminopropil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.31 (d, 3H), 1.66 (s,3H) 1.99 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 3.78-3.83 (m, 2H), 4.17-4.22 (m, 1H), 5.67 (t,1H), 7.38-7.5 (m, 3H), 8.39 (m, 2H), 10.81 (s, 1H); MS (ES): 338.2 (M+ +1).

(R)-4-(1-metil-2-acetilaminoet¡l)amino-5,6-dimetil-2-fen¡l-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.41 (d, 3H), 1.68 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.34 (s, 3H), 3.46-3.52 (br, m, 2H), 4.73 (m, 1H), 5.22 (d, 1H), 7.41-7.46 (m, 3H), 8.36-8.40 (m, 2H), 8.93 (s, 1H); MS (ES): 338.2 (M+ + 1).

(S)-4-(2-acetilaminopropil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.31 (d, 3H), 1.66 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 3.78-3.83 (m, 2H), 4.17-4.22 (m, 1H), 5.67 (t, 1H), 7.38-7.5 (m, 3H), 8.39 (m, 2H), 8.67 (s, 1H); MS (ES): 338.2 (M+ +1).

(S)-4-(1-metil-2-acetilaminoetilo)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.41 (d, 3H), 1.68 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 3.46-3.52 (m, 2H), 4.73 (m, 1H), 5.22 (d, 1H), 7.41-7.46 (m, 3H), 8.36-8.40 (m, 2H), 10.13 (s, 1H); MS (ES): 338.2 (M+ +1).

Ejemplo 10: La reacción de 4-cloro-5,6-dimetil-2-fenil-7H-p¡rrolo[2,3d]piramidina con la mezcla de /-1-amino-2-(1 ,1-dimetiletoxi)carbonilamina-propano y /-2-amino-1-(1 ,1-dimetiletoxi)carbonilamina-propano, se corrió en forma similar a la del Ejemplo 1. La reacción produjo una mezcla de c/-4-(1 -metil-2-( 1,1 -di meti letoxi)carbon ¡lami no)et¡ lami no-5, 6-d ¡meti l-2-fen i I-7H-pirrolo[2,3d]p¡ram¡dina y d/-4-(2-metil-2-(1 ,1-d¡metiletoxi)carbonilam¡no)etilamino-5,6-dimet¡l-2-fenil-7H-p¡rrolo[2,3d]piramid¡na, los cuales fueron separados mediante cromatografía de columna (EtOAc:hexanos=1 :3). La primera fracción fue a7-4-(1-metil-2-(1 ,1-dimet¡letoxi)carbonilaminoet¡l)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]piramidina: 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.29-1.38 (m, 12H), 1.95 (s, 3H), 2.31 (s, 3H) 3.34-3.43 (m, 2H), 4.62-4.70 (m, 1H), 5.36-5.40 (d, J=8 Hz, 1H), 5.53 (br, 1H), 7.37-7.49 (m, 3H) 8.37-8.44 (m, 2H), 10.75 (s, 1H) MS 396.3 (M+ +1); la segunda fracción fue d/-4-(2-(1,1-dimetiletoxi)carbonilam¡noprop¡l)am¡no-5,6-dimetil-2-fen¡l-7H-p¡rrolo [2,3d]piramidina: 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.26-1.40 (m, 12 H), 2.00 (s, 3H), 2.31 (s, 3H) 3.60-3.90 (m, 2H), 3.95-4.10 (m, 1H), 5.41-5.44 (d, J=6.0 Hz, 1H), 5.65 (br, 1H), 7.40-7.46 (m, 3H), 8.37-8.44 (m, 2H), 10.89 (s, 1H); MS (ES): 396.2 (M+ +1). Los compuestos que se encuentran a continuación fueron obtenidos en forma similar a la del Ejemplo 10: (S,S)-4-(2-acetilaminociclohexil)amino-5,6-dimet¡l-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]piramidina. 1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1 .43 (m, 4H), 1 .60 (s, 3H), 1 .83 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.30 (m, 2H), 2.32 (s, 3H), 3.73 (br, 1 H), 4.25 (br, 1 H), 5.29 (d, 1 H), 7.43-7.48 (m, 3H), 8.35-8.40 (m, 2H), 9.05 (s, 1 H). 4-(2-metil-2-acetilaminopropil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1 H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1 .51 (s, 6H), 1 .56 (s, 3H), 2.07 (s, 3H), 2.36 (s, 3H), 3.76 (d , 2H ), 5.78 (t, 1 H), 7.41 -7.48 (m, 3H), 7.93 (s, 1 H), 8.39 (m, 2H), 10.07 (s, 1 H); MS (ES): 352.3 (M+ +1 ).

Ejemplo 1 1 : Se trató d/-4-(1 -metil-2-(1 , 1 -dimetiletoxi)carbonilaminoetil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina (60.6 mg, 0.153 mmol), con ácido trifluoroacético (0.5 ml) en diclorometano (2.0 ml) durante 14 horas. El solvene orgánico fue removido al vacío hasta el secado. El residuo fue disuelto en N, N-dimetilformamida (2.0 ml) y trietilamina (2.0 ml). Se agregó a la solución anhídrido acético (17.2 mg, 0.016, 0.169 mmol) a una temperatura de 0°C. La mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente durante 48 horas y posteriormente fue concentrada al vacío hasta el secado. El residuo fue sometido a cromatografía de preparación de capa delgada (EtOAc) para producir 27.0 mg (52%) de d/-4-(1 -metil-2-acetilaminoetil)amino-5,6- dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina.1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.38-1.42 (d, J=8 Hz, 3H), 1.69 (s, 3H), 2.01 (s, 3H), 2.32 (s, 3H) 3.38-3.60 (m, 2H), 4.65-4.80 (m, 1H), 5.23-5.26 (d, J=6 Hz, 1H), 7.40-7.51 (m, 3H), 8.37-8.43 (m, 2H), 10.44 (s, 1H); MS (ES): 338.2 (M+ +1).

Ejemplo 12: Se trató (R,R)-4-(2-aminociclohexil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina, preparada en forma similar a la del Ejemplo 1 de 4-cloro-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina (0.15 g, 0.583 mmol) y (1R, 2R)-(-)-1, 2-diaminociclohexano (0.63 g, 5.517 mmol), con trietilamina (0.726 g, 7.175 mmol) y anhídrido acético (0.325 g, 3.18 mmol) en N, N-dimetilformamida (10.0 ml) a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de la remoción del solvente al vacío, se agregó acetato de etilo al residuo (10.0 ml) y agua (10.0 ml). La mezcla fue separada y la capa acuosa fue extractada con acetato de etilo (2 x 10.0 ml). La solución de acetato de etilo combinada fue secada (MgS04) y filtrada. El filtrado fue concentrado al vacío hasta el secado y el residuo fue sometido a cromatografía de columna (EtOAc:Hexano=1 :1) para producir 57.0 mg (26%) de (R,R)-4-(2-acetilaminociclohexil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina.1H RMN (200 MHz, CDCI3) d 1.43 (m, 4H), 1.60 (s, 3H), 1.84 (m, 2H), 2.22 (s, 3H), 2.30 (m, 2H), 2.33 (s, 3H), 3.72 (br, 1H), 4.24 (br, 1H), 5.29 (d, 1H), 7.43-7.48 (m, 3H), 8.35-8.39 (m, 2H), 8.83 (s, 1H); MS (ES): 378.3 (M+ +1).

Ejemplo 13: A una solución de 4-(2-hidroxietil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina (40.0 mg, 0.141 mmol) en piridina (1 .0 ml) se le agregó anhídrido acético (0.108 g, 1 .06 mmol) a una temperatura de 0°C. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 4 horas y el solvente fue removido al vacío. El residuo fue sometido a cromatografía de preparación de capa delgada (EtOAc:hexano=1 : 1 ) para producir 32.3 mg (71 %) de 4-(2-acetiloxietil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina. 1H RMN (200 M Hz, CDCI3) d 1 .90 (s, 3H), 2.08 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 4.05 (m, 2H), 4.45 (t, 2H), 5.42 (m, 1 H), 7.41 -7.49 (m, 3H), 8.42 (m, 2H ), 1 1 .23 (s, 1 H).

Ejemplo 14: Se agitó a una temperatura de 0°C durante una hora una solución de Fmoc-ß-Ala-OH (97.4 mg, 0.313 mmol) y cloruro de oxalilo (39.7 mg, 27.3 µL, 0.313 mmol) en diclorometano (4.0 ml) con una gota de N , N-dimetilformamida, seguido por la adición de 4-(2-am ¡ noeti I )am i no-5, 6-d i meti l-2-fe ni l-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina (80.0 mg, 0.285 mmol) y trietilamina (57.6 mg, 79.4 µL, 0.570 mmol) a una temperatura de 0°C. Después de 3 horas la mezcla fue concentrada al vacío y el residuo fue tratado con la solución de piperidina al 20% en N, N-dimetilformamida (2.0 ml) durante 0.5 horas. Después de la remoción del solvente al vacío, el residuo fue lavado con éter dietílico:hexano (1 :5) para producir 3.0 mg (3%) de 4-(6-amino-3- aza-4-oxohexil )am i no-5, 6-d i metil-2-fen i l-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina. MS (ES): 353.2 (M+ +1 ).

Ejemplo 15: Se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas una solución de 4-(2-am i noetil )a m i no-5, 6-d imeti l-2-f en i l-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina (70.0 mg, 0.249 mmol) y anhídrido succínico (27.0 mg , 0.274 mmol) en diclorometano (4.0 ml) con una gota de N , N-dimetilformamida. La mezcla de reacción fue extractada con hidróxido de sodio al 20% (3 x 5.0 ml). La solución acuosa fue acidificada con 3M clorhidrato para un pH=7.0. La mezcla completa fue extractada con acetato de etilo ( 3 x 10 ml). La solución orgánica combinada fue secada (MgS04) y filtrada. El filtrado fue concentrado al vacío hasta el secado, para producir 15.0 mg (16%) de 4-(7-hidroxi-3-aza-4, 7-dioxoheptil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-p¡rrolo[2,3d]p¡r¡midina. MS (ES): 382.2 (M+ +1 ).

Ejemplo 16: A 10 ml de dimetilformamida (DMF) a temperatura ambiente se le agregó 700 mg de 4-c/s-3-hidroxiciclopent¡l)amino-2-fenil-5,6-dimetil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina seguido de 455 mg de glicina N-Boc, 20 mg de N, N-dimet¡lam¡nopiridina (DMAP), 293 mg de hidroxibenzotriazole (HOBT) y 622 mg de clorhidrato de 1 -(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarboimida (EDCI). La mezcla de reacción se dejó en agitación durante la noche. Posteriormente, la DMF fue removida bajo presión reducida y la mezcla de reacción fue dividida entre 20 ml de acetato de etilo y 50 ml de agua. La porción acuosa fue extractada adicionalmente con 2x20 ml de acetato de etilo y las porciones orgánicas combinadas fueron lavadas con salmuera, secadas sobre sulfato de sodio anhidro, filtrada y concentrada. La purificación sobre gel de sílice, eluyendo con acetato de etilo/hexano produjo 410 mg del producto deseado: 4-(c/s-3-(N-t-butoxicarbonil-2-aminoacetoxi) ciclopentil) amino-2-fenil-5,6-dimetil-7/-/-pirrolo[2,3d]pirimidina, MS (ES)(M+ +1 ) = 480.2. Posteriormente el éster fue tratado con 5 ml de ácido trifluoroacético al 20% en diclorometano a temperatura ambiente, se dejó durante la noche y posteriormente fue concentrado. La trituración con acetato de etilo produjo 300 mg de un sólido descolorido; sal de ácido trifluoroacético 4-(c/s-3-(2-aminoacetoxi)ciclopentil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina, MS (ES) (M+ +1 )=380.1 . Un experto en el arte apreciará que los siguientes compuestos pueden ser sintetizados a través de los métodos descritos anteriormente: 4-(c/s-3-hidroxiciclopentil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina MS (ES) (M+ + 1 )=323.1 .

Sal de ácido 4-(c/s-3-(2-aminoacetoxi)ciclopentil)amino-5,6-dimetil-2-pentil-7H-pirrolo[2,3d] pirimidinatrifluoroacético MS (ES) (M+ + 1 )= 380.1. 4-(3-acetamida)piperidinil-5,6-dimetil-2-fenil-7-pirrolo[2,3d]pirimidina MS (ES): 364.2 (M+ +1 ). 4-(2-N'-metilureapropil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7/-/-pirrolo[2,3d]pirimidina, MS (ES) (M+ +1 )=353.4. 4-(2-acetamidobutil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7 -/-pirrolo[2,3d]pirimidina, MS (ES) (M+ +1 )= 352.4. 4-(2-N'-metilureabutil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7/-/-pirrolo[2,3d]pirimidina MS (ES) (M+ + 1 )= 367.5. 4-(2-aminociclopropilacetamidaetil)amino-2-fenil-7/-/-p¡rrolo[2,3d] pirimidina MS (ES) (M+ +1 )= 309.1 4-(írans-4-hidroxiciclohexil)amino-2-(3-clorofenil)-7/- -pirrolo[2,3d] pirimidina MS (ES) (M+ +1 )=342.8. 4-(íraps-4-h id roxi ciciohexil )a mi no-2-(3-fl uorofeni I )-7/-/-pirrolo[2,3d] pirimidina MS (ES) (M+ +1 )= 327.2. 4-(frans-4-h id roxi ciciohexil )a mi no-2-(4-pirid i I )-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina MS (ES) (M+ + 1 )= 310.2.

Ejemplo 17: Esquema IX Se protegió el nitrógeno de pirrólo (7) (Esquema IX), con di-f-butildicarbonato bajo condiciones básicas para producir el carbamato correspondiente (22). La brominación radical de (22) procedió en forma regioselectiva a la producción de bromuro (23). En general, el compuesto (23) sirvió como un intermediario electrofílico clave para varios socios de acoplamiento nucleofílico. El desplazamiento del bromo alquilo con trihidrato de fenolato de sodio produjo el compuesto (24). El desplazamiento subsecuente del cloruro de arilo y la remoción del grupo de protección de carbamato-butilo ocurrió en un paso, produciendo el compuesto deseado (25).

Síntesis detallada de los compuesto (22)-(25) y de acuerdo con el Esquema IX Se agregaron dicarbonato de Di-í-butilo (5.37 g, 24.6 mmol) y dimetilaminopiridina (1 .13 g, 9.2 mmol) a una solución que contiene (7) (1 .50 g, 6.15 mmol) y piridina (30 ml). Después de 20 horas la reacción fue concentrada y el residuo fue dividido entre CH2CI2 y agua. La capa CH2CI2 fue separada, secada sobre MgS04, filtrada y concentrada para producir un sólido color negro. La cromatografía instantánea (Si02; 1 /9 EtOAc/Hexanos, Rf 0.40), produjo 1 .70 g (80%) de un sólido color blanco (22). 1 H RMN (200 MHz, CDCI3) d 8.50 (m, 2H , Ar-H ), 7.45 (m, 3H , Ar-H), 6.39 (s, 1 H, pirrolo-H), 2.66 (s, 3H, pirrolo-CH3), 1 .76 (s, 9H , carbamato-CH3); MS M +1 = 344.1 ; pf =175-177°C.

Se agregaron N-Bromosuccinimida (508 mg, 2.86 mmol) y AI BN (1 12 mg, 0.68 mmol) a una solución que contiene (22) (935 mg, 2.71 mmol) y CCU (50 ml). La solución fue calentada a reflujo. Después de 2 horas la reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró al vacío para producir un sólido color blanco. La cromatografía instantánea (Si02; 1 /1 CH2CI2/Hexanos, R/0.30) produjo 960 mg (84%) de un sólido color blanco (23). H RMN (200 MHz, CDCI3) d 8.52 (m, 2H, Ar-H ), 7.48 (m, 3H, Ar-H), 6.76 (s, 1 H, pirrolo-H), 4.93 (s, 2H, pirrolo-CH2Br), 1 .79 (s, 9H, carbamato-CH3); MS, M + 1 = 423.9; pf=155-157°C.

Se agregó trihidrato de fenóxido de sodio (173 mg, 1 .02 mmol), en una porción a una solución de bromo (23) (410 mg, 0.97 mmol) disuelto en CH2CI2 (5 ml) y DMF (10 ml). Después de 2 horas, la solución de reacción fue dividida entre CH2CI2 y agua. La capa de agua fue extractada con CH2CI2. Las capas de CH2CI2 combinadas fueron lavadas con agua, secadas sobre MgS?4, filtradas y concentradas para producir un sólido color amarillo. La cromatografía instantánea (Si02; 1 /6 EtOAc/Hexanos, R/030) produjo 210 mg (50%) de un sólido color blanco (24). 1 H RMN (200 MHz, CDCI3) d 8.53 (m, 2H , Ar-H), 7.48 (m, 3H , Ar-H), 7.34 (m, 2H , Ar-H), 7.03 (m, 3H , Ar-H), 6.83 (s, 1 H, pirrolo-H ), 5.45 (s, 2H , ArCH20), 1 .76 (s, 9H, carbamato-CH3); MS, M+ =436.2. 25 Se calentó a una temperatura de 100°C una solución que contiene (24) (85 mg, 0.20 mmol), N-acetiletilenodiamina (201 mg, 1 .95 mmol) y DMSO (3 ml). Después de una hora, la temperatura se elevó hasta 130°C. Después de 3 horas la reacción fue enfriada a temperatura ambiente y dividida entre EtOAc y agua. La capa de agua fue extractada con EtOAc (2x). Las capas de EtOAc combinadas fueron lavadas con agua, secadas sobre MgS04, filtradas y concentradas. La cromatografía instantánea (Si02; 1 /10 EtOH/ CHCI3, R/0.25) produjo 73 mg (93%) de un sólido espumoso color blanco (25). 1 H RMN (200 MHz, DMSO-d6) d 1 1 .81 (br s, 1 H, N-H), 8.39 (m, 2H, Ar-H), 8.03 (br t, 1 H , N-H), 7.57 (br t, 1 H, N-H), 7.20-7.50 (m, 5H, Ar-H), 6.89-7.09 (m, 3H, Ar-H), 6.59 (s, 1 H, pirrolo-H), 5.12 (s, 2H, ArCtf20), 3.61 (m, 2H , NCH2), 3.36 (m, 2H, NCH2), 1 .79 (s, 3H, COCH3); MS M +1 =402.6.

Los compuestos que se encuentran a continuación fueron obtenidos en forma similar a la del Ejemplo 17: 4-(2-acetila mi noetil )a mi no-6-f enoxi meti l-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. pf 196-197°C; MS (ES):401 .6 (M+ +1 ). 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(4-fluorofenoxi)metil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. MS(ES):420.1 (M+ + 1 ). 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(4-clorofenoxi)metil-2-fenil-7/-/-pirrolo[2,3d]pirimidina. MS(ES):436.1 (M+ + 1 ). 4-(2-acetilam¡noet¡l)amino-6-(4-metoxifenoxi)met¡l-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. MS(ES):432.1 (M+ + 1 ). 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(N-piridin-2-ona)metil-2-fenil-7/-/-pirrolo[2,3d]pirimidina. MS(ES):403.1 (M+ + 1 ). 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(N-fenilamino)metil-2-fenil-7/-/-pirrolo[2,3]pirimidina. MS(ES):400.9 (M+ + 1 ). 4-(2-acetila mi noetil )a mi no-6-( N-meti l-N-fe ni la mino )metil-2-fe ni I-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. MS(ES):414.8 (M+ + 1 ). 4-(2-N '-metil ureaetil)am i no-6-fenoxi meti l-2-f eni I-7H-pirrolo[2,3d]pirimid¡na. MS (ES):416.9 (M+ + 1 ).

Ensayos del gen reportador de ß-Galactosidasa de hongo para el receptor de adenosina A1 y A2a de humano Se transformaron las deformaciones de hongo (S. cerevisiae) con adenosina A1 de humano (A1 R; deformación CADUS CY12660) o A2a de humano (A2a; deformación CADUS CY8362) y la adición de un gen reportador lacZ(ß-Galactosidasa) para utilizarlo como un lector funcional. A continuación se encuentra la descripción completa de las transformaciones (ver deformaciones de hongos). Se utilizó ÑECA (5'-N-etilcarboxamidoadenosina), un potente receptor de adenosina agonista con afinidad similar para los receptores A1 y A2a, en la forma de un ligante para todos los ensayos. Los compuestos de prueba fueron examinados en 8 concentraciones (0.1 - 10,000 nM) para su capacidad de inhibición de la actividad ß-Galactosidasa inducida por ÑECA mediante CY12660 o CY8362.

Preparación de cultivos del material de existencia de hongo. Cada una de las deformaciones de hongo respectivas, CY12660 y CY8362, fueron manchados sobre una placa de agar LT e incubados a una temperatura de 30°C hasta que se observaron las colonias. El hongo procedente de estas colonias, se agregó a un líquido LT (pH 6.8) y fueron cultivadas durante la noche a una temperatura de 30°C. Posteriormente, cada deformación de hongo fue diluida hasta un ODeoo=1 -0-2.0 (aproximadamente 1 -2 X 107 células/ml), tal como se determinó en forma espectrofotométrica (Aparatos moleculares VMAX). Para cada 6 ml de cultivo líquido de hongo, se agregaron 4 ml de glicerol al 40% (1 : 1 .5 vohvol) ("hongo/material de existencia de glicerol"). A partir de este hongo/material de existencia de glicerol, se prepararon diez alícuotas de 1 ml y fueron almacenadas a una temperatura de -80°C hasta que fueron requeridas para el ensayo.

Ensayo de hongo A1 R v A2aR. Cada frasquito de CY8362 y CY12660 de hongo/material de existencia de glicerol, fue descongelado y se utilizó para inocular el medio líquido LT suplementado, pH 6.8 (92 ml de líquido LT, al cual se le agregaron: 5 ml de glucosa al 40%, 0.45 ml de 1 M KOH y 2.5 ml de tubos, pH 6.8). Los cultivos líquidos fueron desarrollados durante de 16 a 18 horas (durante la noche) a una temperatura de 30°C. Las alícuotas procedentes de los cultivos que se dejaron durante la noche, fueron diluidas posteriormente en el medio LT, con un contenido de 4U/ml de deaminasa de adenosina (Tipo VI o Vi l de mucosa intestinal de becerro, Sigma), para obtener OD6oo= 0.15 (1 .5 X 106 células/ml) para CY8362 (A2aR) y OD60o=0.50 (5X106 células/ml) para CY12660 (A1 R).

Los ensayos fueron conducidos con un volumen final de 100 ul en placas microtrituradoras de 96 depósitos, de modo que se alcanzó una concentración final de DMSO al 2% en los depósitos. Para la selección primaria, se utilizaron 1 -2 concentraciones de los compuestos de prueba (10 uM, 1 µM). Para el perfilado del compuesto, se probaron 8 concentraciones (10000, 1000, 500, 100, 50, 10, 1 y 0.1 nM). A cada placa microtrituradora, se le agregó 10 ul de DMSO al 20% para depósitos de "Control" y "Total", mientras que se agregó 10 ul del Compuesto de Prueba (en DMSO al 20%) a depósitos "desconocidos". De manera subsecuente, se agregaron 10 ul de ÑECA ( 5 uM para A1 R y 1 uM para A2aR), para los depósitos "Totales" y "Desconocidos"; se agregó 10 ul de PBS a los depósitos de "Control". En la adición final, se agregaron a todos los depósitos 80 ul de deformación de hongo, CY8362 o CY12660. Posteriormente, todas las placas fueron agitadas brevemente (agitador de órbita LabLine de 2-3 minutos) y se dejaron encubar durante 4 horas a una temperatura de 30°C en un horno de secado.

La actividad de ß-Galactosidasa puede ser cuantificada utilizando ya sea susbtratos colorimétricos (por ejemplo ONPG, CPRG), luminiscentes (por ejemplo, Galacton-Star) o fluorométricos (por ejemplo, FDG, Resorufin). Normalmente, se prefiere la detección de fluorescencia en una base de proporción señal superior: ruido, libre en forma relativa de interferencia y con un costo bajo. La digalactopiranisida de fluorescencia (FDG, pruebas moleculares o Tecnologías de gen marcador), un substrato de ß-Galactosidasa, se agregó a todos los depósitos en una concentración de 20 ul/depósito (concentración final= 80 uM). Las placas fueron agitadas durante 5-6 segundos (agitador de órbita LabLine), y posteriormente fueron encubadas a una temperatura de 37°C durante 90 minutos (incubador 95% 02/5% C02). Al final del periodo de 90 minutos de incubación se detuvo la actividad de ß-Galactosidasa utilizando 20 ul/depósito de 1 M Na2C03, y todas las placas fueron agitadas durante 5-6 segundos. Posteriormente, las placas fueron agitadas durante 6 segundos y se determinó la intensidad de fluorescencia relativa utilizando un fluorómetro (Espectrofluor Tecan; exitación= 485 nm, emisión= 535 nm).

Cálculos. Los valores de fluorescencia relativa para los depósitos de "Control", fueron interpretados tal como en los antecedentes y restados de los valores "Totales" y "Desconocidos". Los perfiles del compuesto fueron analizados a través de transformación logarítmica (eje-x: concentración de compuesto), seguido de una curva de competición de sitio que se ajusta para calcular los valores IC50 (GraphPad Prism).

Deformaciones de hongo. Saccharomyces cerevisiae Se desarrollaron deformaciones de CY12660 [far1 * 1442 tbt1 -1 fus 1 -H 1 S3 can 1 ste 14: :trp1 : :LYS2 ste3*1 156 gpa 1 (41 )-Ga¡3 Iys2 ura3 Ieu2 trp1 :his3; LEU2 PGKp-Mfa1 Leader-hA1 R-PH05term 2mu-orig REP3 AMPr] y CY8362 [gpal p-rGasE10K far1 *1442 tbt1 -1 fus1 -H IS3 can 1 ste14::trp1 :LYS2 ste3*1 156 Ivs2 ura 3 Ieu2 trpl his3; LEU2 PGKp-hA2aR 2mu-ori REP3 AMPr].

Medio LT. El medio LT (Leu-Trp suplementado), está compuesto de 100 g de base de nitrógeno de hongos de DI FCO, suplementado con lo siguientes: 1 .0 g de valina, 1 .0 g de ácido aspártico, 0.75 g de fenilalanina, 0.9 g de lisina 0.45 g de tirosina, 0.45 g de isoleucina, 0.3 g metionina, 0.6 g de adenina, 0.4 g de uracil, 0.3 g de serina, 0.3 g de prolina, 0.3 g de cisteína, 0.3 g de arginina, 0.9 g de histidina y 1 .0 g de treonina.

Construcción de Deformaciones de Hongos que Expresan el Receptor de Adenosina A1 de Humano En este ejemplo, se describe la construcción de deformaciones de hongos que expresan un receptor de adenosina A1 de humano integrado funcionalmente dentro de la trayectoria del sistema de feromona de hongos.

I. Construcción del Vector de Expresión Para construir un vector de expresión de hongos para un receptor de adenosina A1 de humano, se obtuvo el cADN del receptor de adenosina A1 , mediante PCR de transcriptasa inversa de mARN de hipocampo de humano, utilizando primarios designados basados en la secuencia publicada del receptor de adenosina A1 de humano y técnicas estándar. El producto PCR fue subclonado en los sitios Ncol y Xbal del pMP15 de plásmido de la expresión de hongos.

El plásmido pMP15 fue creado a partir del pLPXt tal y como sigue: el sitio Xbal de YEP51 (Broach, J. R. y asociados (1983) "Vectores para la expresión inducible de alto nivel de genes clonados en hongos" (Vectors for High-level, inducible expression of cloned genes in yeast), páginas 83 a 1 17 en la edición de M. Inouye, Manipulación Experimental de Expresión Genética. Academic Press, Nueva York), fue eliminada mediante digestión, llenado de final y religación para crear Yep51 NcoDXba. Se creó otro sitio Xbal en el sitio BamHl mediante digestión con BamHl , llenado del extremo, ligación del enlazador (New England Biolabs, # 1081 ), digestión Xbal y religación para generar YEP51 NcoXt. Este plásmido fue digerido con Esp31 y Ncol y ligado para fragmentos de Leu2 y PGKp generados mediante PCR. El producto 2 kb Leu2 PCR, fue generado mediante amplificación a partir de YEP51 Nco utilizando primarios que contienen sitios Esp31 y Bg/l l . Se generó el producto PGKp PCR de 660 pares base, mediante amplificación a partir de pPGKas (Kang , Y. -S y asociados (1990) Mil. Cell. Biol. 10: páginas 2582 a 2590) con primarios PCR que contienen sitios Bg/l l y Ncol . El plásmido resultante es llamado pLPXt. El pLPXt fue modificado, insertando la región de codificación del conductor factor-a pre-pro dentro del sitio Ncol . El conductor pre-pro fue insertado de modo que el sitio de clonación Ncol se mantuvo en el extremo 3' del conductor, pero no se regeneró en el extremo 5'. De esta forma, los receptores pueden ser clonados mediante digestión del plásmido Ncol y Xbal . El plásmido resultante es llamado pMP15. El plásmido pMP15 dentro del cual , se insertó el cADN del receptor de adenosina A1 de humano, se designó como p5095. En este vector, el receptor cADN es fusionado al extremo 3' del conductor de factor-a pre-pro de hongos. Durante la maduración de la proteína, las secuencias de péptido pre-pro son divididas para generar el receptor maduro de longitud completa. Esto ocurre durante el procesamiento del receptor a través de la trayectoria de secreción de hongos. Este plásmido se mantiene mediante selección Leu (por ejemplo, crecimiento en un medio que carece de leucina). Se determinó la secuencia de la región de codificación clonada y se encontró que será equivalente a ésta en la literatura publicada (números de acceso GenBank S45235 y S56143).

II. Construcción de la Deformación de Hongos. Para crear una deformación de hongos que expresa el receptor de adenosina A1 de humano, se utilizó la deformación de hongos CY7967 como la deformación parental de partida. El genotipo de CY7967 es tal como sigue: MATa gpaD1163 gpa1(41)Ga¡3 far 1D1442 tbt-1 FUS1-HIS3 canl ste14::trp1:: LYS2 ste3D1156 Iys2 ura3 Ieu2 trpl his3 Los marcadores genéticos son revisados como se indica a continuación: MATa Correspondencia tipo a. gpa1D1163 Se ha eliminado el GPA1 de la proteína- G de hongos endógeno. gpa1(41)Ga¡3 gpa1(41)Gai3 se integró en el genoma de hongos. Esta proteína Ga quimérica está compuesta de los primeros 41 aminoácidos de la subunidad GPA1 Ga de hongos endógeno fusionada a la Ga¡3 de proteína-G de mamífero, en la cual los aminoácidos de terminal-N cognatos han sido eliminados. far 1D1442 se ha eliminado (evitando de este modo el arresto de ciclo celular) al momento de la activación de la trayectoria de la respuesta de feromonas) del gen FAR1 (responsable del arresto del ciclo celular). tbt-1 deformación con una alta eficiencia de transformación mediante electroporación. FUS 1 -H IS3 una fusión entre el promotor FUS 1 y la región de codificación H IS3 (creando de este modo un gen H IS3 inducible por feromonas). can l permeasa de arginina/canavinina. Ste14: :trpl: :LYS2 interrupción del gen de STE 14, una metiltransferasa de fanesilo-C (disminuyendo de este modo la señalización basal a través de la trayectoria de la feromona). ste3D1 156 STR de hongos endógeno, se interrumpió el receptor de feromona de factor-a (STE3).

Iys2 defecto en la reductasa aminoapidato-2, hongos que necesitan lisina para crecer . ura3 defecto en decarboxilasa de orotidina-5'- fosfato, hongos que necesita uracilo para crecer. Ieu2 defecto en deshidrogenasa de isopropilmalato-b, hongos que necesita leucina para crecer. trpl defecto en fosforibosilantranilato, hongos que necesita criptopano para crecer. his3 defecto en dehidrogenasa de imidazoleglicerolfosfato, hongos que necesitan histidina para crecer. Se transformaron dos plásmidos dentro de la deformación CY7967 mediante electroporación: plásmido p5095 (codificación de receptor de adenosina A1 de humano; descrito anteriormente) y plásmido p1584, el cual es un plásmido de gen reportero de FUS1 -ß-galactosidasa. El plásmido p1584 se derivó del plásmido pRS426 (Christianson, T. W. y asociados (1992) Gene 1 10: páginas 1 19 a 1 122). El plásmido pRS426 contiene un sitio polienlazador en los nucleótidos del 2004 al 2016. Se insertó una fusión entre el promotor FUS1 y el genß-galctocidasa en los sitios de restricción Eagl y Xhol para crear el plásmido p1584. El plásmido p1584 se mantiene mediante selección Trp (por ejemplo, crecimiento en un medio que carece de leucina). La deformación resultante que transporta a p5095 y p1584, referida como CY12660, expresa el receptor de adenosina A1 de humano. Para crecer esta deformación en líquido o en placas de agar, se utilizó un mínimo medio que carece de leucina y triptofano Para llevar a cabo un ensayo de crecimiento sobre placas (ensayando FUS-H IS3), las placas estuvieron en un pH 6.8 y contenían 0.5-2.5 mM de 3-amino-1 ,2,4-triazole y leucina, triptofano e histidina carecida. Como un control para especificidad , en todos los experimentos se incluyó una comparación con uno o más de siete selecciones del receptor de transmembrana con base en hongos.

Construcción de Deformaciones de Hongos que Expresan el Receptor de Adenosina A2a de Humano. En este ejemplo, se describe la construcción de deformaciones de hongos que expresan un receptor de adenosina A2a de humano integrado funcionalmente dentro de la trayectoria del sistema de feromona de hongos.

I. Construcción del Vector de Expresión. Para construir un vector de expresión de hongos para el receptor de adenosina A2a de humano, se obtuvo el cADN del receptor A2a de humano del Dr. Phil Murphy (N I H ). Una vez que se recibió este clon, el inserto del receptor A2a fue secuenciado y se encontró idéntico al de la secuencia publicada (Número de acceso GenBank # S46950). El cADN del receptor fue excisado del plásmido mediante PCR con polimerasa VENT y clonado dentro del plásmido pLPBX, el cual conduce a la expresión del receptor mediante un promotor de fosfoglicerato de quinasa (PGK) constitutivo en hongos. La secuencia de todo el inserto, una vez más fue secuenciada y se encontró idéntica con la de la secuencia publicada. Sin embargo, en virtud de la estrategia de clonación empleada, existen tres aminoácidos adheridos al término-carboxi del receptor, GlySerVal.

II. Construcción de la Deformación de Hongos. Para crear una deformación de hongos que expresa el receptor de adenosina A2a de humano, se utilizó la deformación de hongos CY8342 como la deformación parental de hongos. El genotipo de CY8342 es tal como sigue a continuación: MATa far1 D1442 tbt1 -1 Iys2 ura3 leu 2 trpl his3 fus1 -H IS3 can l ste3D1 156 gpaD1 163 ste14::trp1 ::LYS2 gpa1 p-rGasE10K (o gpal p-rGasD229S o gpa1 p-rGasE 10K + D229S) En el Ejemplo 1 , se describen los marcadores genéticos, excepto para la variación de la proteína-G. Para la expresión del receptor A2a de humano, se utilizaron deformaciones de hongos en las cuales la proteína-G de hongos endógena GPA1 ha sido eliminada y reemplazada mediante un Gas de mamífero. Se utilizaron 3 mutantes Gas de rata. Estas variantes contienen una o dos mutaciones de puntos, las cuales las convierten en proteínas que se acoplan eficientemente a la hongos ß?. Estas son identificadas como GasEl OK (en el cual, el ácido glutámico en la posición 10, es reemplazado con lisina), GasD229S (en la cual el ácido aspártico en la posición 229 es reemplazado con serina) y GasE 10K + D229S (el cual contiene ambas mutaciones de punto). La deformación CY8342 (que transporta una de las tres proteínas Gas de rata mutante) se transformó, ya sea con el pLPBX del vector parental (Receptor") o con pLPBX-A2a (Receptor*). Se agregó un plásmido con el promotor FUS1 fusionado a las secuencias de codificación de ß-galactosidasa (descritas anteriormente) para evaluar la magnitud de activación de la trayectoria de respuesta de la feromona.

Ensayo Funcional Utilizando Deformaciones de Hongos que Expresan el Receptor de Adenosina A1 de Humano. En este Ejemplo, se describe el desarrollo de un ensayo de selección funcional en hongos para moduladores del receptor de adenosina A1 de humano.

I. Ligantes Utilizados en el Ensayo La adenosina, un agonista natural para este receptor, así como otros dos agonistas sintéticos, se utilizaron para el desarrollo de este ensayo. La adenosina, reportada para tener un EC50 de aproximadamente 75 nM, y (-)-N6-(2-fenilisopropil)-adenosina (PÍA) con una afinidad reportada de aproximadamente 50 nM, se utilizaron en un subgrupo de experimentos. Se utilizó 5'-N-etilcarboxamido-adenosina (Ñ ECA) en todos los ensayos de crecimiento. Para evitar la señalización debido a la presencia de adenosina en el medio de crecimiento, se agregó a todos los ensayos deaminasa de adenosina (4U/ml).

II. Respuesta Biológica en Hongos. La capacidad del receptor de adenosina A1 para acoplar funcionalmente en un sistema de hongos heterólogo, se evaluó introduciendo el vector de expresión del receptor A1 (p5095, descrito anteriormente) en una serie de deformaciones de hongos que expresaron diferentes subunidades de la proteína G. La mayoría de estos transformadores, expresaron subunidades Ga del subtipo Ga¡ o Ga0- También se probaron proteínas Ga adicionales, para la posible identificación de acoplamiento de proteína Ga-receptor promiscuos. En varias deformaciones, se integró una construcción STE 18 o una construcción STE18-G?2 quimérica en el genoma de la hongos. Las deformaciones de hongos albergaron un gen HIS3 defectuoso y una copia integrada de FUS 1 -HIS3, permitiendo de este modo la selección en un medio selectivo que contiene 3-amino-1 ,2,4-triazole (probado en 0.2, 0.5 y 1 .0 mM) y que carece de histidina. Los transformadores fueron aislados y las monocapas fueron preparadas en un medio que contiene 3-amino-1 ,2,4-triazole, 4 U/ml de diaminasa de adenosina y carente de histidina. Se aplicaron cinco microlitros de varias concentraciones del ligante (por ejemplo, ÑECA en 0, 0.1 , 1 .0 y 10 mM). El crecimiento se supervisó durante dos d ías. Se probaron de esta forma en varias deformaciones de hongos las respuesta del crecimiento que dependen del ligante. Los resultados se resumen en la Tabla 3 que se encuentra a continuación. El símbolo (-) indica que no se detectó la activación del receptor que depende del ligante, mientras que (+) denota la respuesta que depende del ligante. El término "LI RMA", indica la activación mediada por el receptor que es independiente del ligante.

Tal como se indicó en la Tabla 3, se descubrió que la señalización más robusta ocurre en una deformación de hongos que expresa la quimera GPA1 (41 )-Ga¡3.

III. Ensayo fusl -LacZ Para caracterizar más completamente la activación de la trayectoria de la respuesta de feromona, se midió la síntesis de ß-galactosidasa a través de fusI LacZ en respuesta a la estimulación agonista. Para realizar el ensayo de ß-galactosidasa, se agregaron concentraciones en aumento de ligante a un cultivo de medio registro del receptor de adenosina A1 de humano expresado en una deformación de hongos que co-expresa una quimera Ste18-G?2 y GPA4i-Ga¡3. Los transformadores fueron aislados y crecidos durante la noche en la presencia de histidina y de 4 U/ml diaminasa de adenosina. Después de cinco horas de incubación con 4 U/ml de diaminasa de adenosina y ligante, se mid ió la inducción de ß-galactosidasa utilizando CPRG como el substrato para ß-galactosidasa. Se utilizaron células de 5 x 105 por ensayo. Los resultados obtenidos con la estimulación Ñ ECA, indicaron que en una concentración Ñ ECA de 10"8 M , se logró aproximadamente la estimulación de dos dobleces de la actividad de ß-galactosidasa. Además, se observó un índice de estimulación de aproximadamente 10 dobleces en una concentración ÑECA de 10"5 M. La utilidad de este ensayo se extendió a través de la validación de la actividad de antagonistas en esta deformación. Se probaron dos antagonistas de adenosina conocidos XAC y DPCPX, para su habilidad para competir contra ÑECA (en 5 mM) para la actividad en el ensayo de ß-galactosidasa. En estos ensayos, se midió la inducción de ß-galactosidasa utilizando FDG en la forma del substrato y células de 1 .6 x 105 por ensayo. Los resultados indicaron que tanto XAC como DPCPX sirvieron como potentes antagonistas del receptor de adenosina A1 expresado por hongos, con valores IC50 de 44 nM y 49 nM, respectivamente. Con el objeto de determinar si este efecto inhibidor fue específico para el subtipo A1 , se realizaron una serie de experimentos complementarios con el ensayo del receptor A2a basado en hongos (descrito en el Ejemplo 4). Los resultados obtenidos con el ensayo basado en hongos A2a, indicaron que XAC fue un antagonista receptor A2a relativamente efectivo, consistente con los reportes publicados. En contraste, DPCPX fue relativamente inerte en este receptor, tal como se esperaba en los reportes publicados.

IV. Enlace Radioligante El ensayo del receptor de adenosina A1 , fue caracterizado adicionalmente a través de la medida de los parámetros de enlace radioligante del receptor. El enlace de desplazamiento de [3H]CPX a través de varios compuestos de referencia del receptor de adenosina, XAC, DPCPX y CGS, se analizó utilizando membranas preparadas a partir de hongos que expresa el receptor de adenosina A1 de humano. Los resultados con membranas de hongos que expresan el receptor de adenosina A1 de humano, fueron comparados con aquellos procedentes de membranas de hongos que expresan el receptor de adenosina A2a de humano o el receptor A3 de humano, para examinar la especificidad de enlace. Para llevar a cabo el ensayo, se incubaron cincuenta mg de membranas con 0.4 nM [3H]CPX y concentraciones en aumento de ligantes del receptor de adenosina. La incubación fue en 50 mM Tris-HCl, pH 7.4, 1 mM EDTA, 10mM MgCI2, 0.25% BSA y 2 U/ml de diaminasa de adenosina en la presencia de inhibidores de proteasa durante 60 minutos a temperatura ambiente. El enlace se terminó mediante la adición de 50 mM tris-HCl enfriado con hielo, pH 7.4, además de 10 mM MgCI2, seguido de filtración rápida sobre filtros GF/B previamente lavados con 0.5% de polietienimina, utilizando un albergador de 96 depósitos Packard . Los datos fueron analizados a través del procedimiento de adaptación de la curva menos cuadrada no lineal, utilizando el software Prism 2.01 . Los valores de IC50 obtenidos en este experimento, se resumen en la Tabla 4 que se encuentra a continuación : Tabla 4 Estos datos indican que los compuestos de referencia tienen afinidades consistentes con los reportados en la bibliografía. Los datos indican adicionalmente, que los ensayos basados en hongos son de suficiente sensibilidad para diferenciar la especificidad del subtipo del receptor.

Ensayo Funcional Utilizando Deformaciones de Hongos que Expresan el Receptor de Adenosina A2a de Humano En este ejemplo, se describe el desarrollo de un ensayo de selección funcional en hongos para moduladores del receptor de adenosina A1 de humano.

I. Ligantes Utilizados en el Ensayo La adenosina del ligante natural , así como otros ligantes completamente caracterizados y disponibles comercialmente, se utilizaron para el estudio del receptor A2a de humano funcionalmente expresado en hongos. Se han utilizado tres ligantes en el establecimiento de este ensayo. Estos incluyen: Ligante K¡ Reportado Función Adenosina 500 Nm agonista 5'N-etilcarboxamidoadenosina 10-15 nM agonista (ÑECA) (-)-N6-(2-fenililopropil)-adenosina 100-125 nM agonista (PÍA) Para evitar la señalización debido a la presencia de adenosina en el medio de crecimiento, se agregó a todos los ensayos deaminasa de adenosina (4 U/ml).

II. Respuesta Biológica en Hongos Se probaron agonistas del receptor A2a para la capacidad para estimular la trayectoria de la respuesta de feromona en hongos transformada con el plásmido de expresión del receptor A2a y que expresa ya sea GasE10K, GasD229S o GasE10K+D229S. se indicó la capacidad del ligante para estimular la trayectoria de respuesta de feromona en una forma que depende del receptor, mediante una alteración en el fenotipo de hongos. La activación del receptor, modificó el fenotipo procedente de la auxotropía de histidina a prototropía de histidina (activación de fus1 -H IS3). Se aislaron tres transformadores independientes y se crecieron durante la noche en la presencia de histidina. Las células fueron lavadas para remover la histidina y diluidas hasta 2 x 106 células/ml. Se mancharon 5 µl de cada transformador sobre un medio no selectivo (incluyendo histidina) o un medio selectivo (1 nM AT) en la ausencia o presencia de 4 U/ml de deaminasa de adenosina. Las placas fueron crecidas a una temperatura de 30°C durante 24 horas. En la presencia de histidina, las deformaciones tanto de Receptor* (R+) y Receptor" (R") tuvieron la capacidad de crecimiento. Sin embargo, en la ausencia de histidina únicamente crecieron células R+. Ya que no se había agregado el ligante a estas placas, fueron posibles dos explicaciones para este resultado. Una interpretación posible fue que el receptor que soporta al hongo estuvo en una ventaja de crecimiento debido a la activación mediada por el receptor independiente del ligante (LI RMA). De manera alternativa, el hongo pudo haber sintetizado la adenosina del ligante. Para distinguir entre estas dos posibilidades, una enzima que degrada, el ligante deaminasa de adenosina (ADA), se agregó a la hongos y placas de crecimiento. En la presencia de células R+ de deaminasa de adenosina, no crecieron más en la ausencia de histidina, indicando que el hongo en efecto sintetizó el ligante. Esta interpretación se confirmó mediante un ensayo de crecimiento A2a en líquido. En este experimento la hongos R+ (una deformación GasE10K que expresa el receptor A2a) fue inoculada en tres densidades (1 x 106 célula/ml ; 3 x 105 célula/ml; 1 x 105 célula/ml) en la presencia o ausencia de deaminasa de adenosina (4 U/ml). La severidad del ensayo se mejoró con concentraciones en aumento (0, 0.1 , 0.2 ó 0.4 mM) de 3-amino-1 ,2,4-triazole (AT), un antagonista competitivo de la dehidratasa de imidazoleglicerol-P, el producto de proteína del gen HIS3. En la presencia de deaminasa de adenosina y 3-amino-1 ,2,4-triazole, la hongos creció en forma menos vigorosa. Sin embargo, en la ausencia de 3-amino-1 ,2,4-triazole, la deaminasa de adenosina tuvo un pequeño efecto. Por lo tanto, la deaminasa de adenosina por sí misma no tuvo efecto directo sobre la trayectoria de la respuesta de feromona. Un método alternativo para medir el crecimiento y uno que puede ser minimizado para selección de alto rendimiento es un ensayo de manchado del ligante del receptor A2a. La deformación GasE10K que expresa el receptor A2a (A2aR+) o que carece del receptor (R-) fue crecida durante la noche en la presencia de histidina y 4 U/ml de deaminasa de adenosina. Las células fueron lavadas para remover la histidina y diluidas hasta 5 x 106 células/ml, Las células de 1 x 106 fueron rociadas en placas selectivas que contienen 4 U/ml de deaminasa de adenosina y 0.5 ó 1 .0 mM de 3-amino-1 ,2,4-triazole (AT), y se dejaron secar durante 1 hora. 5 µl de los reactivos siguientes fueron aplicados a la monocapa: 10 mM de adenosina, 38.7 mM de histidina, dimetiisulfóxido (DMSO), 10 mM de PÍA O 10 mM de ÑECA. Las células fueron cultivadas durante 24 horas a una temperatura de 30°C. Los resultados mostraron que las células sin receptor únicamente podrían crecer cuando se agregó histidina al medio. En contraste, las células R+ únicamente crecieron en áreas en donde PÍA de los ligantes del receptor A2a y ÑECA fueron manchados. Ya que las placas contenían deaminasa de adenosina, la carencia de crecimiento en donde la adenosina fue manchada, confirmó que la deaminasa de adenosina estuvo activa. lll. Ensayo fusl LacZ Para cuantificar la activación de la trayectoria de ajuste de los hongos, se midió la síntesis de ß-galactosidasa a través de fusl lacZ. Las deformaciones de hongos que expresan GasE10K, GasD229S, GasE 10K+D229S fueron transformados con un plásmido que codifica el receptor A2a de humano (R+) o con un plásmido que carece del receptor (R-). Los transformadores fueron aislados y crecidos durante la noche en la presencia de histidina y 4 U/ml de deaminasa de adenosina. Las células de 1 x 107 fueron diluidas hasta células de 1 x 106 /ml y fueron expuestas a concentraciones en aumento de ÑECA durante 4 horas, seguido de la determinación de la actividad de ß-galactosidasa en las células. Los resultados demostraron que esencialmente no se detectó actividad de ß-galactosidasa y las deformaciones de R-, en donde las cantidades en aumento de la actividad de ß-galactosidasa fueron detectadas en las deformaciones de R+ que expresan ya sea GasE10K, GasD229S, GasE10K+D229S conforme incrementó la concentración de ÑECA, indicando un incremento en unidades de ß-galactosidasa que depende de la dosis, detectado en respuesta a la exposición a la concentración del ligante incrementada. Esta dependencia de la dosis, únicamente se observó en células que expresan el receptor A2a. Además, la construcción Gas más potente para el receptor A2a fue GasE10K. La construcción GasD229S fue la segunda construcción Gas más potente para el receptor A2a, mientras que la construcción GasE 10K+D229S fue la menos potente de las tres construcciones Gas probadas, aún cuando la construcción de GasE 10K+D229S estimuló rápidamente cantidades detectables de actividad ß-galactosidasa. Para una descripción adicional de los ensayos identificados, consultar la Solicitud de Patente Norteamericana Serie No. 09/088985, titulada "Expresión Funcional de Receptores de Adenosina en Hongos", presentada el 2 de Junio de 1998 (Expediente legal No. CPI-093), cuyos contenidos completos están incorporados a la presente invención como referencia.

Caracterización Farmacológica de los Subtipos del Receptor de Adenosina de Humano Material y Métodos Materiales. [3H]-DPCPX [Ciclopentil-1 ,3-dipropilxantina, 8- [dipropil-2,3-3H(N)] (120.0 Ci/mmol); [3H]-CGS 21680, [carboxietil-3H (N)] (30 Ci/mmol) y [125I]-AB-MECA ([125l]-4-Aminobencil-5'-N-Metilcarboxamidoadenosina) (2,200 Ci/mmol) fueron comprados en New England Nuclear (Boston, MA). XAC (Xantina amina congenera); ÑECA (5'-N- Etilcarboxamidoadenosina); y IB-MECA de Research Biochemicals International (RBI , Natick, MA). La Deaminasa de Adenosina y las tabletas de coctel del inhibidor de proteasa Completas fueron compradas en Boehringer Mannheim Corp. (Indianapolis, I N). Las membranas de las células H EK-293 expresan en forma estable la Adenosina de humano 2a [RB-HA2a]; y los subtipos del receptor de Adenosina 2b [RB-HA2b] o Adenosina 3 [RB-HA3], fueron comprados respectivamente en Receptor Biology (Beltsville, MD). Los reactivos de cultivo celular fueron de Life Technologies (Grand Island, NY), excepto el suero que fue de Hyclone (Logan, UT).

Deformaciones de hongos. Saccharomyces cerevisiae. Tal como se mencionó anteriormente, se desarrollaron deformaciones CY12660 [far1 *1442 tbt1 -1 fus1 -H IS3 can l ste 14: :trp1 : : LYS2 ste3*1 156 gpa1 (41 )-Ga¡3 Iys2 ura3 Ieu2 trp1 :his3; LEU2 PGKp-Mfa1 Leader- hA1 R-PH05term 2mu-orig REP3 AMPr] y CY8362 [gpa 1 p-rGa sE 10K far1 *1442 tbt1 -1 fus1 -HIS3 can l ste14: :trp1 :LYS2 ste3*1 156 Iys2 ura3 Ieu2 trpl his3; LEU2 PGKp-hA2aR 2mu-or¡ REP3 AMPr].

Cultivo de hongos. El hongo transformado fue crecido en el medio Leu-Trp [LT] (pH 5.4) suplementado con glucosa al 2%. Para la preparación de membranas de 250 ml del medio LT se inocularon con un titulador de partida de células de 1 -2 x 106 /ml a partir de 30 ml de cultivo que se dejó durante la noche y se incubó a una temperatura de 30°C bajo oxigenación permanente mediante rotación. Después de un crecimiento de 16 horas las células fueron cosechadas mediante centrifugación, y las membranas fueron preparadas tal como se describió anteriormente.

Cultivo de Tejido de Mamífero. Las células HEK-293 que expresaron en forma estable el subtipo del receptor de Adenosina de humano 2a (clon Cadus # 5), fueron cultivadas en un medio esencial mínimo de Dulbeco (DMEM) suplementado con 10% de suero de bovino fetal y 1 X penicilina/estreptomicina bajo presión selectiva utilizando 500 mg/ml de antibiótico G418, a una temperatura de 37°C en una atmósfera de C02 humidificada al 5%.

Preparaciones de la Membrana Celular de la Hongos. 250 ml de cultivos fueron cosechados después de ¡ncubación durante la noche mediante centrifugación a 2,000 x g en un centrífugo RT6000 Sorvall.

Las células fueron lavadas en agua enfriada con hielo, centrifugadas a una temperatura de 4°C y las bolitas fueron resuspendidas en 10 ml de regulador de lísis enfriado con hielo [5 mM de Tris-HCl, pH 7.5; 5 mM de EDTA; y 5 mM de EGTA] , suplementado con tabletas de coctel de inhibidor de Proteasa (1 tableta por 25 ml de regulador). Se agregaron a la suspesión cuentas de vidrio (17 g; Malla 400-600; Sigma), y las células fueron rotas mediante proceso vigoroso de vortex a una temperatura de 4°C durante 5 minutos. El homogenado fue diluido con regulador de lisis de 30 ml adicional , además de inhibidores de proteasa y fue centrifugado a 3,000 x g durante 5 minutos. De manera subsecuente, las membranas fueron hechas bolitas a 36,000 x g (rotor tipo SS34, Sorvall RC5B) durante 45 minutos. La bolita de membrana resultante fue resuspendida en 5 ml de regulador de membrana [50 mM de Tris-HCl, pH 7.5; 0.6 mM de EDTA; y 5 mM de MgCI2] , suplementada con tabletas de coctel de inhibidor de Proteasa (1 tableta por 50 ml de regulador), y almacenada a una temperatura de -80°C para experimentos adicionales.

Preparaciones de la Membrana Celular de Mamífero. Se prepararon membranas de la célula HEK-293, tal como se describió anteriormente (Duzic E y asociados: J. Biol. Chem. , 267, páginas 9844 a 9851 , 1992). Las células fueron lavadas brevemente con PBS y cosechadas con un artefacto de goma. Las células fueron hechas bolita a una temperatura de 4°C a 200 x g en un centrífugo RT6000 Sorvall. La bolita fue resuspendida en 5 ml/plato de regulador de lísis a una temperatura de 4°C (5 mM de Tris-HCl, pH 7.5; 5 mM de EDTA; 5 mM de EGTA; OJ mM de fluoruro de fenilmetilsulfonilo, 10 mg/ml de pepstatin A; y 10 mg/ml de aprotinin) y fue homogeneizada en un homogeneizador Dounce. El lisato de la célula posteriormente fue centrifugado a 36,000 x g (rotor tipo SS34, Sorvall RC5B) durante 45 minutos, y la bolita fue resuspendida en 5 ml de regulador de membrana [50 mM de Tris-HCl, pH 7.5; 0.6 mM de EDTA; y 5 mM de MgCI2; 0.1 mM de fluoruro de fenilmetilsulfonilo, 10 mg/ml de pepstatin A; y 10 mg/ml de aprotinin], y almacenada a una temperatura de -80°C para experimentos adicionales. Los equipos de ensayo de proteína Bio-Rad, basados en el procedimiento de enlace por tinta Bradford, (Bradford, M.: Anal. Biochem. 72, página 248 (1976)), se utilizaron para determinar la concentración total de proteína en membranas de hongos y de mamífero.

Enlace radioligante de saturación y competencia del subtipo del receptor de Adenosina 1. El enlace de saturación y competencia en membranas procedentes de célula de hongos transformadas con el subtipo del receptor de humano A1 , se llevaron a cabo utilizando el antagonista [3H] DPCPX en la forma de un ligante radioactivo. Las membranas fueron diluidas en regulador de enlace [50 mM de Tris-HCl, pH 7.4; que contiene 10 mM de MgCI2; 1 .0 mM de EDTA; 0.25% de BSA; 2 U/ml de deaminasa de adenosina y 1 tableta de coctel de inhibidor de proteasa/50 ml] en concentraciones de 1 .0 mg/ml. En el enlace de saturación, las membranas (50 µg/depósito) fueron incubadas con concentraciones en aumento de [3H] DPCPX (0.05 - 25 nM) en un volumen final de 100 µl de regulador de enlace a una temperatura de 25°C durante 1 hora en la ausencia y presencia de 10 µM de XAC no marcado en una placa microtrituradora de 96 depósitos. En el enlace de competición, las membranas (50 µg/depósito) fueron incubadas con [3H] DPCPX (1 .0 nM) en un volumen final de 100 ml de regulador de enlace a una temperatura de 25°C durante 1 hora en la ausencia y presencia de 10 µM de XAC no marcado o concentraciones en aumento de compuestos de competición en una placa microtrituradora de 96 depósitos.

Enlace radioligante de competición del subtipo del receptor de Adenosina 2a El enlace de competición en membranas de la célula HEK293 que expresa en forma estable el subtipo del receptor de humano A2a, se llevó a cabo utilizando el agonista [3H] CGS-21680 en la forma de un ligante radioactivo. Las membranas fueron diluidas en un regulador de enlace [50 mM de Tris-HCl, pH 7.4; que contiene 10 mM de MgCI2; 1 .0 mM de EDTA; 0.25% de BSA; 2 U/ml de deaminasa de adenosina y 1 tableta de coctel de inhibidor de proteasa/50 ml] en concentraciones de 0.2 mg/ml. Las membranas (10 µg/depósito) fueron incubadas con [3H] CGS-21680 (100 nM) en un volumen final de 100 ml de regulador de enlace a una temperatura de 25°C durante 1 hora en la ausencia y presencia de 50 µM de ÑECA no marcado o concentraciones en aumento de compuestos de competición en una placa microtrituradora de 96 depósitos.

Enlace radioligante de competición del receptor de Adenosina 3 El enlace de competición en membranas de la célula HEK293 que expresa en forma estable el subtipo del receptor de humano A3, se llevó a cabo utilizando el agonista [125l] AB-MECA en la forma de un ligante radioactivo. Las membranas fueron diluidas en un regulador de enlace [50 mM Tris-HCl, pH 7.4; que contiene 10 mM de MgCI2; 1 .0 mM de EDTA; 0.25% de BSA; 2 U/ml de deaminasa de adenosina y 1 tableta de coctel de inhibidor de proteasa/50 ml] en concentraciones de 0.2 mg/ml. Las membranas (10 µg/depósito) fueron incubadas con [125l] AB-MECA (0.75 nM) en un volumen final de 100 µl de regulador de enlace a una temperatura de 25°C durante 1 hora en la ausencia y presencia de 10 µM de IB-MECA no marcado o concentraciones en aumento de compuestos de competición en una placa microtrituradora de 96 depósitos. Al final de la incubación, se determinaron los ensayos del enlace radioligante de los subtipos del receptor A1 , A2a y A3, mediante la adición de 50 mM de regulador Tris-HCl enfriado por hielo (pH 7.4) suplementado con 10 mM de MgCI2, seguido de filtración rápida sobre filtros de fibra de vidrio (96 depósitos GF/B UniFilters, Packard), lavados previamente en 0.5% de polietiienimina en un cosechador de 196 células Filtermate (Packard). Las placas del filtro fueron secadas cubiertas con 50 µl/depósito de fluido de centelleo (MicroScint-20, Packard) y contadas en un Contador Superior (Packard). Los ensayos se realizaron por triplicado. El enlace no específico fue 5.6 ± 0.5%, 10.8 ± 1 .4% y 15.1 ± 2.6% del enlace total en un ensayo de enlace A1 R, A2aR y A3R, respectivamente.

Enlace radioligante de competición del subtipo del receptor de Adenosina 2b El enlace de competición en membranas de la célula HEK293 que expresa en forma estable el subtipo del receptor de humano A2b, se llevó a cabo utilizando el antagonista receptor A1 [3H] DPCPX en la forma de un ligante radioactivo. Las membranas fueron diluidas en regulador de enlace [10 mM Hepes-KOH , pH 7.4; que contiene 1 .0 mM de EDTA; 0.1 mM de Benzamidina y 2 U/ml de deaminasa de adenosina] en una concentración de 0.3 mg/ml. Las membranas (15 µg/depósito) fueron incubadas con [3H] DPCPX (15 nM) en un volumen final de 100 µl de regulador de enlace a una temperatura de 25°C durante 1 hora en la ausencia y presencia de 10 µM de XAC no marcado o concentraciones en aumento de compuestos de competición en una placa microtrituradora de 96 depósitos. Al final de la incubación, el ensayo se determinó mediante la adición de 10 mM de regulador Hepes-KOH enfriado por hielo (pH 7.4) seguida de filtración rápida sobre filtros de fibra de vidrio (96 depósitos GF/C UniFilters, Packard), lavados previamente en 0.5% de polietiienimina en un cosechador de 196 células Filtermate (Packard). Las placas del filtro fueron secadas cubiertas con 50 µl/depósito de fluido de scintilación (MicroScint-20, Packard) y contadas en un Contador Superior (Packard). Los ensayos se realizaron por triplicado. El enlace no específico fue de 14.3 ± 2.3% del enlace total. El enlace específico de [3H] DPCPX; [3H] CGS-21680 y [125l] AB-MECA se definió como la diferencia entre el enlace total y el enlace no específico. El porcentaje de inhibición de los compuestos se calculó contra el enlace total. Los datos de competición fueron analizados mediante ajuste de curva interactiva para un modelo de sitio, y los valores K| fueron calculados a partir de valores IC50 (Cheng y Prusof, Biochem. Pharmacol. 22, páginas 3099 a 3109, 1973) utilizando el software GraphPad Prizm 2.01 .

Resultados Una función primaria de ciertos receptores de la superficie celular, es reconocer ligantes apropiados. Por lo tanto, determinamos que las afinidades del enlace ligante para establecer la integridad funcional del subtipo del receptor de Adenosina 1 se expresó en el hongo. Las membranas crudas preparadas a partir de Saccharomyces cerevisiae transformadas con la construcción del subtipo del receptor de Adenosina 1 , exhibieron un enlace saturable específico de [3H] DPCPX con un KD de 4.0 ± 0.19 nM . Los valores KD y Bmax fueron calculados a partir de isotermía de saturación y la transformación Scatchard de los datos indicaron una clase de sitios de enlace simple. Las densidades de los sitios de enlace de adenosina en las preparaciones de la membrana de hongos, fueron estimados en 716.8 ± 43.4 fmol/mg de proteína de membrana. Las características de subtipo farmacológico de las células de hongos recombinante, transformadas con el subtipo de receptor de humano A1 , fueron investigadas con ligantes de adenosina selectiva del subtipo (XAC, DPCPX; CGS-15943; CDS-046142; CDS-046123; ÑECA, (R)-PIA; IB-MECA y Aloxazina). Eso compitió con [3H] DPCPX en el orden de posición esperado. Las curvas de desplazamiento registradas con estos compuestos mostraron el remojo típico con todos los ligantes, y los datos para cada uno de los ligantes podría ser modelado mediante un ajuste de un sitio. Las constantes de disasociación aparente, estimadas para el compuesto individual de las curvas (Tabla 5) son consistentes con el valor publicado para el receptor obtenido de otras fuentes.

TABLA 5 Valores Ki para membranas procedentes de células de hongos transformadas con el subtipo del receptor humano A1 Ligantes K, (nM) XAC 5.5 DPCPX 7 1 CGS-1594 -10.8 ÑECA 179 6 (R)-PIA 56.3 IB-MECA 606,5 Aloxazina 894.1 CDS-046142 13 9 CDS-046123 9.8 Las Tablas de la 6 a la 12 demuestran la eficiencia y perfiles de la actividad de la estructura de deazapurinas de la presente invención. Las Tablas 13 y 14 demuestran la selectividad que puede lograrse para los sitios del receptor de adenosina de humano mediante la modulación de la funcionalidad con respecto a la estructura de deazapurina. La Tabla 14 también demuestra el sorprendente descubrimiento de que los compuestos manifestados en la presente invención tienen actividad subnanomolar, y selectividad superior para el receptor A2b comparado con los compuestos que se encuentran en la Tabla 13.

Tabla 6 Actividad de Series CDS-046142: Efectos del Sustituyente -N6 Tabla 7 Actividad de Series CDS-046142: Efecto de Substituyente-C2 Tabla 8 Actividad de Series CDS-046142: Efecto de Substituyente de Anillo de Pirróle Tabla 9 Tabla 10 Actividad de Series CDS-046123: Efecto de Substituyente N6 Tabla 11 Actividad de Series CDS-046123: Afecto de Substituyente-N6 Tabla 12 Análogos de CDS-046123 "Retro-Amida" Tabla 13 Perfil de Antangonistas de Adenosina Selectiva -tienil-2-ilo; 2C5-H ; 3 soluble en agua; 4 R5 y R6 son hidrógeno; 5 R3 3-fluorofenilo; 6 R3 es 3-clorofenilo; 7 R3 es 4-piridilo; 8 porcentaje actividad @ 10 µM TABLA 14 Perfil de Antagonistas A2b Selectivos Incorporación como Referencia Todas las patentes, solicitudes de patente publicadas y otras referencias descritas en la presente invención, están incorporadas en forma expresa a la misma como referencia.

Equivalentes Los expertos en el arte reconocerán, o tendrán la capacidad de reconocer, utilizando nada más que la experimentación de rutina, muchos equivalentes a las modalidades específicas de la presente invención descritas en forma específica en la misma. Dichos equivalentes pretenden estar comprendidos dentro del alcance de las Reivindicaciones que se encuentran a continuación.

Claims (186)

R E I V I N D I C A C I O N E S Habiendo descrito la presente invención, se considera como novedad y, por lo tanto, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes REIVINDICACIONES:

1 . Un método para el tratamiento de una condición que responde a la 7-deazapurina substituida por N-6 en un mamífero que comprende la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva a un mamífero de una 7-deazapurina substituida por N-6 de tal forma que ocurra ese tratamiento de la cond ición que responde a 7-deazapurina substituida por N-6.

2. El método tal y como se describe en la Reivindicación 1 , caracterizado además porque dicha condición que responde a la 7-deazapurina substituida por N-6 es una condición de enfermedad, en donde la condición de enfermedad es una enfermedad mediada por la adenosina.

3. El método tal y como se describe en la Reivindicación 1 , carcterizado además porque dicha 7-deazapurina substituida por N-6, no es bencilo substituido por N-6 o feniletilo substituido por N-6.

4. El método tal y como se describe en la Reivindicación 2, caracterizado además porque dicha condición de enfermedad es una enfermedad del sistema nervioso central, una enfermedad cardiovascular, una enfermedad renal, una enfermedad inflamatoria, una enfermedad alérgica, una enfermedad gastrointestinal, una enfermedad ocular o una enfermedad respiratoria.

5. El método tal y como se describe en la Reivindicación 1 , caracterizado además porque dicha 7-deazapurina substituida por N-6 tiene la fórmula 1 : en donde: Ri y R2 son cada una independientemente un átomo de hidrógeno, o una porción alquilo, arilo, o alquilarilo substituida o no substituida o que juntas forman un anillo heterocíclico substituido o no substituido; R3 es un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo substituido o no substituido; R4 es un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo substituida o no substituida. R5 y Rd son cada una independientemente un átomo de halógeno, un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo substituida o no substituida o R4 y R5, o R5 y R6 juntos, forman un anillo heterocíclico o carbocíclico substituido o no substituido.

6. Un método para modular el receptor de adenosina en un mamífero, comprendiendo la administración al mamífero de una cantidad terapéuticamente efectiva de una 7-deazapurina substituida por N-6 de modo que ocurre la modulación del receptor de adenosina en el mamífero.

7. El método tal y como se describe en la Reivind icación 6, caracterizado además porque el receptor de adenosina es A-i , A2, A2a, A2b o A3.

8. El método tal y como se describe en la Reivindicación 6, caracterizado además porque dicho receptor de adenosina está asociado con una enfermedad del sistema nervioso central, una enfermedad cardiovascular, una enfermedad renal, una enfermedad inflamatoria, una enfermedad gastrointestinal, una enfermedad de los ojos, una enfermedad alérgica o una enfermedad respiratoria.

9. El método tal y como se describe en la Reivindicación 6, caracterizado además porque dicha 7-deazapurina substituida por N-6 tiene la fórmula I : en donde: Ri y R2 son cada una independientemente un átomo de hidrógeno, o una porción alquilo, arilo, o alquilarilo substituida o no substituida o que juntas forman un anillo heterocíclico substituido o no substituido; R3 es un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo substituido o no substituido; R4 es un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo substituida o no substituida. R5 y Rß son cada una independientemente un átomo de halógeno, un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo substituida o no substituida o R4 y R5, o R5 y R6 juntos, forman un anillo heterocíclico o carbocíclico substituido o no substituido.

10. Un método para tratar el asma en un mamífero, comprendiendo la administración a un mamífero de una cantidad terapéuticamente efectiva de 7-deazapurina substituida por N-6, de modo que ocurre dicho tratamiento del asma en el mamífero.

1 1 . Una 7-deazapurina substituida por N-6 que tiene la fórmula I: en donde: Ri y R2 son cada una independientemente un átomo de hidrógeno, o una porción alquilo, arilo, o alquilarilo substituida o no substituida o que juntas forman un anillo heterocíclico substituido o no substituido, a condición de que ninguna de Ri y R2 sean átomos de hidrógeno o que ninguna de Ri o R2 sean 1 -feniletilo; R3 es un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo substituido o no substituido; R4 es un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo substituida o no substituida. R5 y R son cada una independientemente un átomo de halógeno, un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo substituida o no substituida o R4 y R5, o R5 y R6 juntos, forman un anillo heterocíclico o carbocícllco substituido o no substituido, a condición de que R4 no sea 1 -feniletilo, y las sales farmacéuticamente aceptables de las mismas.

12. Una deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 1 , caracterizada además porque Ri es hidrógeno; R2 es un cicloalquilo substituido o no substituido, un alquilo substituido o no substituido o Ri y R2 juntas forman un anillo heterocíclico substituido o no substituido; R3 es un arilo no substituido o substituido; R4 es hidrógeno; y R5 y Rß son cada una independientemente hidrógeno o alquilo, y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

13. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 12, caracterizada además porque R2 es cicloalquilo substituido o no substituido.

14. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 13, caracterizada además porque R1 y R4 son hidrógeno, R3 es fenilo no substituido o substituido y R5 y R6 son cada una alquilo.

15. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 14, caracterizada además porque R2 es substituida con por lo menos un grupo hidroxilo.

16. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 15, caracterizada además porque R2 es mono-hidroxiciclopentilo.

17. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 15, caracterizada además porque R2 es mono-hidroxiciclohexilo.

18. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 14, caracterizada además porque R2 es substituida por -N H-C(=0)E, en donde E es alquilo C1-C4 substituido o no substituido.

19. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 18, caracterizada además porque E es alquilamina.

20. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 19, caracterizada además porque E es etilamina.

21 . La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 12, caracterizada además porque Ri y R2 juntas forman un anillo heterocíclico substituido o no substituido.

22. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 21 , caracterizada además porque dicho anillo heterocíclico es substituido por una amina.

23. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 21 , caracterizada además porque d icho anillo heterocíclico es substituido por acetamida.

24. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 12, caracterizada además porque R2 es -A- NHC(=0)B, en donde A es alquilo C1-C4 no substituido, y B es alquilo C1-C4 substituido o no substituido.

25. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 24, caracterizada además porque R1 y R4 son hidrógeno, R3 es fenilo no substituido o substituido y R5 y R6 son cada una alquilo.

26. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 25, caracterizada además porque A es CH2CH2.

27. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 25, caracterizada además porque A es CH2CH2CH2.

28. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 25, caracterizada además porque A es CH CH2CH2CH2.

29. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 25, caracterizada además porque B es metilo.

30. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 25, caracterizada además porque B es aminoalquilo.

31 . La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 30, caracterizada además porque B es aminometilo.

32. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 30, caracterizada además porque B es aminoetilo.

33. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 25, caracterizada además porque B es alquilamino.

34. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 33, caracterizada además porque B es metilamino.

35. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 33, caracterizada además porque B es etilamino.

36. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 25, caracterizada además porque B es cicloalquilo substituido o no substituido.

37. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 26, caracterizada además porque B es ciclopropilo.

38. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 36, caracterizada además porque B es 1 -amino-ciclopropilo.

39. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 12, caracterizada además porque R3 es fenilo substituido o no substituido.

40. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 39, caracterizada además porque R5 y Rß son cada una alquilo.

41 . La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 40, caracterizada además porque R3 es fenilo no substituido.

42. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 40, caracterizada además porque R3 es fenilo substituido.

43. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 42, caracterizada además porque R3 es fenilo con por lo menos un substituyente.

44. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 43, caracterizada además porque R3 es o-, m- o p-clorofenilo.

45. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 43, caracterizada además porque R3 es un o-, m- o p-fluorofenilo.

46. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 12, caracterizada además porque R3 es heteroarilo substituido o no substituido.

47. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 46, caracterizada además porque R5 y Rß son cada una alquilo.

48. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 47, caracterizada además porque R3 es seleccionada del grupo consistente de piridilo, pirimidilo, piridazinilo, pirazinilo, pirrolilo, triazolilo, tioazolilo, oxazolilo, oxadiazolilo, furanilo, metilenodioxifenilo y tiofenilo.

49. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 48, caracterizada además porque R3 es 2-piridilo, 3-piridilo o 4-piridilo.

50. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 48, caracterizada además porque R3 es 2-pirimidilo o 3-pirimidilo.

51 . La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 12, caracterizada además porque R5 y Rß son cada una hidrógeno.

52. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 12, caracterizada además porque R5 y Rß son cada una metilo.

53 La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 12, caracterizada además porque d icho compuesto es 4-(c/s-3-hidrox¡ciclopentil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7/-/-pirrolo[2,3d] pirimidina.

54. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 12, caracterizada además porque dicho compuesto es sal de ácido 4-(c/s-3-(2-aminoacetoxi)ciclopentil)amino-5,6-dimetil-2-fen i I- 7/-/-pirrolo[2,3d] pirimidina trifluoroacético.

55. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 12, caracterizada además porque dicho compuesto es 4-(3-acetamido)piperidinil-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d] pirimid ina.

56. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 12, caracterizada además porque dicho compuesto es 4-(2-N '-meti I ureapropil)a mi no-5, 6-d i meti l-2-fe nil- 7H-pirrolo[2,3d] pirimidina.

57. El compuesto tal y como se describe en la Reivindicación 12, caracterizado además porque dicho compuesto es 4-(2-aceta midobu til )a mi no-5, 6-di metil-2-f enil- 7H-pirrolo[2,3d]pirimidina.

58. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 13, caracterizada además porque dicho compuesto es 4-(2-N'-metilureabutil)amino-5,6-dimetil-2-fenil- 7H-pirrolo[2,3d] pirimidina.

59. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 12, caracterizada además porque dicho compuesto es 4-(2-aminociclopropilacetamidoetil)amino-2-fenil-7 -/-pirrolo[2,3d] pirimidina.

60. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 12, caracterizada además porque dicha deazapurina es 4-(rrans-4-hidroxiciclohexil)amino-2-(3-clorofenil) -7H-pirrolo[2,3d] pirimidina.

61 . La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 12, caracterizada además porque dicha deazapurina es 4-(rraA7S-4-hidroxiciclohexil)am¡no-2-(3-fluorofen¡l) -7H-pirrolo[2,3d] pirimidina.

62. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 12, caracterizada además porque dicha deazapurina es 4-(fra/7s-4-hid roxiciclohexi I )a mi no-2-(4-pirid i I)- 7H-pirrolo[2,3d] pirimidina.

63. Una deazapurina que tiene la fórmula I I : en donde X es N o CR6; Ri y R2 son cada una independientemente hidrógeno o alcoxilo, aminoalquilo, alquilo, arilo o alqu ilarilo substituido o no substituido, o juntas forman un anillo heterocíclico substituido o no substitu ido, a condición de que ninguna de Ri o R2 sean hidrógeno; R3 es alquilo, arilaquilo o arilo substituido o no substituido; R4 es hidrógeno o alquilo Ci - C6 substituido o no substituido; L es hidrógeno, alquilo substituido o no substituido, o R4 y L juntas forman un anillo heterocíclico o carbocíclico substituido o no substitu ido; R es hidrógeno, alquilo substituido o no substituido o halógeno; Q es CH2, O, S, o NR , en donde R7 es hidrógeno o alquilo C1 - Ce substituido o no substituido; y W es alquilo, cicloalquilo, alquinilo, arilo, arilalquilo, diarilo, heteroarilo, substituido o no substituido, carbonilo substituido, tiocarbonilo substituido o sulfonilo substituido; a condición de que si R3 es pirrolidino, entonces R no es metilo.

64 La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 58 que tiene la fórmula l l l : en donde Q es CH2, O, S, o NH.

65. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 64, caracterizada además porque R4 es hidrógeno, L es hidrógeno o metilo y R3 es arilo no substituido o substituido.

66. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 65, caracterizada además porque W es arilo substituido o no substituido, heteroarilo de miembros 5- ó 6- o biarilo.

67. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 66, caracterizada además porque W es substituido por uno o más substituyentes seleccionados del grupo consistente de halógeno, hidroxilo, alcoxilo, amino, aminoalquilo, aminocarboxiamida, CN , CF3, C02R8, CON HR8 CON R8R9, SOR8, S02R8 y S02NR8Rg, en donde R8 y Rg son cada una independientemente hidrógeno, o alquilo, cicloalquilo, arilo o arilalquilo substituido o no substituido.

68. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 66, caracterizada además porque W es metilendioxifenilo.

69. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 66, caracterizada además porque W es fenilo substituido o no substituido.

70. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 66, caracterizada además porque W es un anillo heteroarilo de miembro 5- substituido o no substituido.

71 . La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 66, caracterizada además porque W es seleccionada del grupo consistente de piridilo, pirimidilo, piridazinilo, pirazinilo, pirrolilo, triazolilo, tioazolilo, oxazolilo, oxadiazolilo, pirazolilo, furanilo y tiofenilo.

72. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 71 , caracterizada además porque Q es NH , y W es un anillo 3-pirazolo el cual es no subtituido o N substituido por alquilo, cicloalquilo, arilo y arilalquilo substituido o no substituido.

73. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 71 , caracterizada además porque Q es oxígeno y W es un anillo 2-tiazolo el cual es no substituido o substituido por alquilo, cicloalquilo, arilo o arilalquilo substituido o no substituido.

74. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 66, caracterizada además porque W es un anillo heteroarilo de miembro 6-.

75. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 74, caracterizada además porque W es seleccionada del grupo consistente de 2-piridilo, 3-piridilo y 4-piridilo.

76. La deazapurlna tal y como se describe en la Reivindicación 74, caracterizada además porque W es seleccionada del grupo consistente de 2-pirimidilo, 4-pirimidilo y 5-pirimidilo.

77. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 65, caracterizada además porque W es alquilo, cicloalquilo, alquinilo o arilalquilo substituido o no substituido.

78. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 77, caracterizada además porque W es alqulnilo.

79. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 78, caracterizada además porque W es substituida por uno o más substituyentes seleccionados del grupo consistente de halógeno, hidroxilo; alquilo, cicloalquilo, arilo o arilalquilo substituido o no substituido o NHR10 en donde R-?0 es hidrógeno, o alquilo, cicloalquilo, arilo o arilalquilo substituido o no substituido.

80. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 77, caracterizada además porque W es ciclopentilo substituido o no substituido.

81 . La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 65, caracterizada además porque W es -(CH2)a-C(=0)Y ó -(CH2)a-C(=S)Y, en donde a es 0, 1 , 2 ó 3, Y es arilo, alquilo, arilalquilo, cicloalquilo, heteroarilo, NHRn R?2, o siempre que Q es NH , OR-I3, y en donde Rn , R-?2 y R13 son cada una independientemente hidrógeno, o alqu ilo, arilo, arilalquilo o cicloalquilo no substituido o substituido.

82. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 81 , caracterizada además porque a es 1 .

83. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 81 , caracterizada además porque Y es un anillo heteroarilo de miembros 5- ó 6-.

84. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 65, caracterizada además porque W es -(CH2)b-S(=0)jY, en donde j es 1 ó 2, b es 0, 1 , 2, ó 3, Y es arilo, alquilo, arilalquilo, cicloalquilo, heteroarilo, NHR14R15 o siempre que Q es NH , OR16, y en donde R14, R15 y R16 son cada una independientemente hidrógeno, o alquilo, arilo, arilalquilo o cicloalquilo no substituido o substituido.

85. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 64, caracterizada además porque R3 es seleccionada del grupo consistente de fenilo, piridilo, pirimidilo, piridazinilo, pirazinilo, pirrolilo, triazolilo, tioazolilo, oxazolilo, oxadiazolilo, pirazolilo, furanilo, metilenodioxifenilo y tiofenilo substituido y no substituido.

86. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 85, caracterizada además porque R3 es fenilo no substituido.

87. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 85, caracterizada además porque R3 es fenilo con por lo menos un substituyente.

88. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 87, caracterizada además porque d icho substituyente es seleccionado del grupo consistente de hidroxilo, alcoxilo, alquilo y halógeno.

89. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 88, caracterizada además porque dicho substituyente es halógeno.

90. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 89, caracterizada además porque R3 es o-, m-, o p-fluorofenilo.

91 . La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 89, caracterizada además porque R3 es o-, m-, o p-clorofenilo.

92. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 88, caracterizada además porque R3 es fenilo substituido por alquilo.

93. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 92, caracterizada además porque R3 es tolilo.

94. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 88, caracterizada además porque R3 es fenilo substituido por alcoxilo.

95. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 94, caracterizada además porque R3 es metoxi fenilo.

96. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 85, caracterizada además porque R3 es un 2-, 3- ó 4-piridilo.

97. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 85, caracterizada además porque R3 es un 2- ó 3-pirimidilo.

98. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 64, caracterizada además porque Rß es hidrógeno o alqu ilo C1 -C3.

99. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 98, caracterizada además porque Rß es hidrógeno.

100. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 64, caracterizada además porque Ri es hidrógeno, y R2 es alquilo o alcoxilo substituido o no substituido; alquilamina, arilamina o alquilarilamina substituida o no substituida; aminoalquilo, aminoarilo o aminoalquilarilo substituido o no substituido; alquilamida, arilamida o alquilarilamida substituida o no substituida; alquilsulfonamida, arilsulfonamida o alquilarilsulfonamida substituida o no substituida; alquilurea, arilurea o alquilarilurea substituida o no substituida; alquilcarbamato, arilcarbamato o alqu ilarilcarbamato substituido o no substituido; ácido alquilcarboxílico, ácido arilcarboxílico o ácido alquilarilcarboxílico substituido o no substituido.

101 . La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 100, caracterizada además porque R2 es cicloalquilo substituido o no substituido.

102. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 101 , caracterizada además porque R2 es ciciohexilo substituido por mono- o dihidroxilo-.

103. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 102, caracterizada además porque R2 es ciciohexilo substituido por monohidroxilo.

104. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 101 , caracterizada además porque R2 es ciclopentilo substituido por mono- o dihidroxilo-.

105. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 104, caracterizada además porque R2 es ciclopentilo substituido por monohidroxilo.

106. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 100, caracterizada además porque R2 es en donde A es alquilo C-i-Cß, cicloalquilo C3-C7, una cadena de uno a siete átomos, o un anillo de tres a siete átomos, substituidos opcionalmente por alquilo Ci-Ce, halógenos, grupos hidroxilo, carboxilo, tiol, o amino; B es metilo, N(Me)2, N(Et)2, NHMe, NH Et, (CH2)rNH3+, NH(CH2)rCH3, (CH2)rN H2, (CH2)rCHCH3NH2, (CH2)rNH Me, (CH2)rOH , CH2CN , (CH2)mC02H, CHR18Ri9, o CHMeOH, en donde r es un entero de 0 a 2, m es 1 ó 2, R-?8 es alquilo, R-?9 es NH3+ o C02H o R-?8 y R-ig juntas son: — CH-NH— \ / (CH2)p en donde p es 2 ó 3; y R1 es alquilo Ci-Cß, cicloalquilo C3-C7, una cadena de uno a siete átomos, o un anillo de tres a siete átomos, substituido opcionalmente por alquilo C?-C6, halógenos, grupos hidroxilo, carboxilo, tiol , o amino.

107. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 106, caracterizada además porque A es alquilo C-i-Cß no substituido o substituido.

108 La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 106, caracterizada además porque B es alquilo C-i-Cß no substituido o substituido.

109. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 106, caracterizada además porque R2 es -A-NHC(=0)B.

1 10. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 109, caracterizada además porque A es -CH2CH2- y B es metilo.

1 1 1 . La deazapurina tal y como se describe en las Reivindicaciones 1 1 , 12, 65 ó 66, caracterizada además porque comprende una prodroga soluble en agua que es metabolizada en vivo para obtener una droga activa.

1 12. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 1 1 , caracterizada además porque dicha prodroga es metabolizada en vivo por hidrólisis de esterasa catalizada.

1 13. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 1 1 , caracterizada además porque R2 es cicloalquilo substituido por -OC(0)(Z)NH2, en donde Z es una cadena lateral de un aminoácido que ocurre de manera natural o no natural, o un análogo del mismo, o aminoácidos a, ß, y o ? aminoácidos o un dipéptido.

1 14. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 13, caracterizada además porque Z es una cadena lateral de glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina, lisina, a-metilalanina, ácido aminociclopropano carboxílico, ácido azetidina-2-carboxílico, ß-alanina, ácido ?-aminobutírico, alanina-alanina o glicina-alanina.

1 15. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 64, caracterizada además porque Ri y R2 juntas son: en donde n es 1 ó 2, y en donde el anillo puede ser substituido opcionalmente por uno o más grupos hidroxilo, amino, tiol, carboxilo, halógeno, CH2OH, alquilo CH2NHC(=0) ó alquilo CH2N HC(=0)NH.

1 16. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 15, caracterizada además porque n es 1 ó 2, y dicho anillo es substituido por alquilo-N HC(=0).

1 17. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 64, caracterizada además porque Ri es hidrógeno, R2 es alquilo C-i-Cß substituido o no substituido, R3 es fenilo substituido o no substituido, R es hidrógeno, L es hidrógeno o alquilo C?-C6 substituido o no substituido, Q es O, S o NR , en donde R es hidrógeno o alquilo Ci-Ce substituido o no substituido y W es arilo substituido o no substituido.

1 18. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 17, caracterizada además porque R2 es -A- NHC(=0)B, en donde A y B son cada una independientemente alquilo C1-C4 no substituido.

1 19. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 18, caracterizada además porque A es CH2CH2.

120. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 18, caracterizada además porque B es metilo.

121 . La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 18, caracterizada además porque B es aminoalquilo.

122. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 121 , caracterizada además porque B es aminometilo.

123. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 1 7, caracterizada además porque R3 es fenilo no substituido.

124. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 17, caracterizada además porque L es hidrógeno.

125. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 17, caracterizada además porque Rß es hidrógeno o metilo.

126. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 125, caracterizada además porque Re es hidrógeno.

127. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 17, caracterizada además porque Q es O.

128. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 17, caracterizada además porque Q es S.

129. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 17, caracterizada además porque Q es NR7, en donde R7 es hidrógeno o alquilo C-i-Cß substituido o no substituido.

130. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 129, caracterizada además porque R7 es hidrógeno.

131 . La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 129, caracterizada además porque R7 es metilo.

132. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 17, caracterizada además porque W es fenilo no substituido.

133. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 17, caracterizada además porque W es fenilo con por lo menos un substituyente.

134. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 33, caracterizada además porque dicho substituyente es halógeno.

135. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 134, caracterizada además porque W es p-fluorofenilo.

136. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 134, caracterizada además porque W es p-clorofenilo.

137. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 133, caracterizada además porque dicho substituyente es alcoxilo.

138. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 137, caracterizada además porque W es p-metoxilo.

139. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 17, caracterizada además porque W es heteroarilo.

140. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 139, caracterizada además porque W es 2-piridilo.

141 . La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 17, caracterizada además porque dicha deazapurina es 4-(2-acet¡ la mi noetil )amino-6-f enoxi meti l-2-fe nil- 7H-pirrolo[2,3d] pirimidina.

142. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 17, caracterizada además porque dicha deazapurina es 4-(2-aceti lam i noetil )a mi no-6-(4-f luorof enoxi )metil-2-fe nil- 7/7-pirrolo[2,3d] pirimid ina.

143. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 17, caracterizada además porque dicha deazapurina es 4-(2-aceti lam i noetil )am i no-6-(4-clorof enoxi )metil-2-fe nil- 7/7-pírrolo[2,3d]pirimidina.

144. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 17, caracterizada además porque dicha deazapurina es 4-(2-aceti lam i noetil )amino-6-(4-metoxif enoxi )metil-2-f enil- 7/7-pirrolo[2,3d] pirimidina.

145 La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 17, caracterizada además porque dicha deazapurina es 4-(2-aceti lami noetil)am i no-6-(2-pirid i loxi )metil-2-fe nil- 7/7-pirrolo[2,3d] pirimidina.

146. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 17, caracterizada además porque dicha deazapurina es 4-(2-acetilaminoetil)am¡no-6-(N-fenilamino)metil-2-fenil-7 7-pirrolo[2,3d] pirimidina.

147. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 1 7, caracterizada además porque dicha deazapurina es 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(N-metil-N-fenilamino)metil-2-fenil-7/7-pirrolo[2,3d] pirimidina.

148. La deazapurina tal y como se describe en la Reivindicación 1 17, caracterizada además porque dicha deazapurina es 4-(2-N '-meti lureaetil)a mi no-6-fenoxi meti l-2-fenil- 7/7-pirrolo[2,3d] pirimidina.

149. Un método para inhibir la actividad de un receptor de adenosina en una célula, el cual comprende poner en contacto dicha célula con una deazapurina tal y como se describe en las Reivindicaciones 1 1 , 12, 14, 25, 63 ó 65.

150. El método tal y como se describe en la Reivindicación 149, caracterizado además porque dicha deazapurina es seleccionada del grupo consistente de: 4-(2-acet¡ la mi noetil )amlno-6-f enoxi meti l-2-f eni I-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina; 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(4-fluorofenoxi)metil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina; 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(4-clorofenoxi)metil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina; 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(4-metoxifenoxi)metil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d] pirimid ina; 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(2-piridiloxi)metil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d] pirimid ina; 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(N-fenilamino)metil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina; 4-(2-acetila mi noetil )a mi no-6-(N -metil-N-f en i lami no)meti I-2-f en i l-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina; 4-(2-N'-metilureaetil)amino-6-fenoximetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina; 4-(c/'s — 3-hidroxiciclopentil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina; Sal de ácido 4-(c/'s-3-(2-aminoacetoxi)ciclopentil)amino-5,6-d i meti l-2-f en i I- 7/7-pirrolo[2,3d] pirimidina trifluoroacético; 4-(3-acetamido)piperidinil-5,6-dimetil-2-fenil-7/7-pirrolo[2,3d]pirimid ina; 4-(2-N'-metilureapropil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7 7-pirrolo[2,3d] pirimidina; 4-(2-acetamidobutil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7/7-pirrolo[2,3d] pirimidina; 4-(2-N'metllureabutil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d] pirimidina; 4-(2-aminociclopropilacetamidoet¡l)amino-2-fenil-7/7-pirrolo[2,3d]pirim¡dina; 4-(í?ans-4-hidroxiciclohexil)amino-2-(3-clorofenil)-7/7-pirrolo[2,3d]pirimidina, 4-(frans-4-h id roxiciclohex¡l)amino-2-(3-fl uorofeni I)- 7/7-pirrolo[2,3d]pirimidina, y 4-(íraps-4-hidroxiciclohexil)amino-2-(4-piridil)-7/7-pirrolo[2,3d]pirimidina.

151 . El método tal y como se describe en la Reivindicación 149, caracterizado además porque dicho receptor de adenosina es un receptor de adenosina A2b.

152. El método tal y como se describe en la Reivindicación 151 , caracterizado además porque dicha deazapurina es un antagonista de dicho receptor de adenosina A2 .

153. El método tal y como se describe en la Reivindicación 149, caracterizado además porque dicho receptor de adenosina comprende un receptor de adenosina A3.

154. El método tal y como se describe en la Reivindicación 153, caracterizado además porque dicha 7-deazapurina substituida por N-6 es un antagonista de dicho receptor de adenosina A3.

155. Un método para el tratamiento de una enfermedad gastrointestinal en un animal el cual comprende la administración a dicho animal de una cantidad efectiva de una deazapurina tal y como se describe en las Reivindicaciones 63 ó 65.

156. El método tal y como se describe en la Reivindicación 1 55, caracterizado además porque dicha deazapurina es seleccionada del grupo consistente de: 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-fenoximetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina; 4-(2-aceti la mi noetil )a mi no-6-(4-f luorof enoxi )metil-2-f en il-7 H-pirrolo[2, 3, d] pirimidina; 4-(2-aceti la mi noetil )a mi no-6-(4-clorof enoxi )metil-2-fe ni I-7H-pi rrolo[2, 3, d] pirimidina; 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(4-metoxifenoxi)metil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3,d]pirimidina; 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(2-piridiloxi)metil-2-fenil-7H-pi rrolo[2, 3, d] pirimidina; 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(N-fenilamino)met¡l-2-fenil-7H-pirrolo[2, 3, d] pirimidina; 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(N-metil-N-fenilamino)metil-2-fen¡l-7H-pirrolo[2,3,d]pirimidina; y 4-(2-N'-metilureaetil)amino-6-fenoximetil-2-fenil-7H-pi rrolo[2, 3, d] pirimidina.

157. El método tal y como se describe en la Reivindicación 155, caracterizado además porque dicha enfermedad es diarrea.

158. El método tal y como se describe en la Reivindicación 155, caracterizado además porque dicho animal es un humano.

159 El método tal y como se describe en la Reivindicación 155, caracterizado además porque dicha deazapurina es un antagonista de los receptores de adenosina A2b en las células de dicho animal.

160. Un método para el tratamiento de una enfermedad respiratoria en un animal el cual comprende la administración a dicho animal de una cantidad efectiva de una deazapurina tal y como se describe en las Reivindicaciones 63 ó 64.

161 . El método tal y como se describe en la Reivindicación 160, caracterizado además porque dicha deazapurina es seleccionada del grupo consistente de: 4-(2-aceti la mi noetil )a mi no-6-f enoxi meti l-2-fenil-7 H-pirrolo[2,3d] pirimidina; 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(4-fluorofenoxi)metil-2-fenil-7H-pi rrolo[2, 3, d] pirimidina; 4-(2-acetila mi noetil )a mi no-6-(4-clorof enoxi )metil-2-fe ni I-7H-pi rrolo[2, 3, d] pirimidina; 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(4-metoxifenoxi)metil-2-fenil-7H-pi rrolo[2, 3, d] pirimidina; 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(2-pirid iloxi )metil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3,d]pirimidina; 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(N-fenilamino)metil-2-fen¡l-7H-pirrolo[2, 3, d] pirimidina; 4-(2-acet¡laminoetil)amino-6-(N-metil-N-fenilamino)metil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3,d]pirimidina; y 4-(2-N'-metilureaetil)amino-6-fenoximetil-2-fenil-7H-pi rrolo[2, 3, d] pirimidina.

162. El método tal y como se describe en la Reivindicación 160, caracterizado además porque dicha enfermedad es asma, enfermedad crónica pulmonar obstructiva, rinitis alérgica, o un desorden respiratorio superior.

163. El método tal y como se describe en la Reivindicación 160, caracterizado además porque dicho animal es un humano.

164. El método tal y como se describe en la Reivindicación 160, caracterizado además porque dicha deazapurina es un antagonista de los receptores de adenosina A2b en las células de dicho animal.

165. Un método para el tratamiento de una condición que responde a la 7-deazapurina substituida por N-6 en un animal el cual comprende la administración a un mamífero de una cantidad terapéuticamente efectiva de una deazapurina tal y como se describe en las Reivindicaciones 1 1 , 12, 14, 25, 63 ó 64 de modo que ocurre el tratamiento de una enfermedad que responde a la 7-deazapurina substituida por N-6.

166. El método tal y como se describe en la Reivindicación 165, caracterizado además porque dicha condición que responde a la 7-deazapurina substituida por N-6 es una condición de enfermedad , en donde la condición de enfermedad es una enfermedad mediada por la adenosina.

167. El método tal y como se describe en la Reivindicación 166, caracterizado además porque dicha condición de enfermedad es una enfermedad del sistema nervioso central, una enfermedad cardiovascular, una enfermedad renal, una enfermedad inflamatoria, una enfermedad alérgica, una enfermedad gastrointestinal o una enfermedad respiratoria.

168. Un método para el tratamiento de un daño al ojo de un animal el cual comprende la administración a dicho animal de una cantidad efectiva de una 7-deazapurina substituida por N-6 tal y como se describe en las Reivindicaciones 1 1 , 12, 14 ó 25.

169. El método tal y como se describe en la Reivindicación 168, caracterizado además porque dicha 7-deazapurina substituida por N-6 es seleccionada del grupo consistente de: 4-(c/'s-3-hidroxiciclopentil)am¡no-5,6-dimetil-2-fenil- 7/7-pirrolo[2,3d] pirimidina, sal de ácido 4-(c/s-3-(2-aminoacetoxi)ciclopentil)amino-5,6-d i metil-2-fen i I- /7-pirrolo[2,3d] pirimidinatrifluoroacético, 4-(3-acetamido)piperidinil-5,6-dimetil-2-fen¡l-7/7-pirrolo[2,3d]pirimidina, 4-(2-N'-metilureapropil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7/7-pirrolo[2,3d] pirimidina, 4-(2-acetamidobutil)amino-5,6-dimetil-2-fenil- 7/7-pirrolo[2,3d] pirimid ina, 4-(2-N'-metilureabutil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7/7-pirrolo[2,3d]pirimidina, 4-(2-aminociclopropilacetamidoetil)amino-2-fenil-7/7-pirrolo[2,3d]pirimidina, 4-(íra/?s-4-hidroxiciclohexil)amino-2-(3-clorofenil)-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina, 4-(f rans-4-h id roxiciclohexil)a mi no-2-(3-f luorof enil)- /7-pirrolo[2,3d]pirimidina, y 4-(írans-4-hidroxiciclohexil)amino-2-(4-piridil)-7/7-pirrolo[2,3d] pirimidina,

1 70. El método tal y como se describe en la Reivindicación 168, caracterizado además porque dicho daño comprende un daño a la retina o a la cabeza del nervio óptico.

171 . El método tal y como se describe en la Reivindicación 168, caracterizado además porque dicho daño es agudo o crónico.

172. El método tal y como se describe en la Reivindicación 168, caracterizado además porque dicho daño es el resultado de glaucoma, edema, isquemia, hipoxia o trauma.

173. El método tal y como se describe en la Reivindicación 168, caracterizado además porque dicho animal es un humano.

174. El método tal y como se describe en la Reivindicación 168, caracterizado además porque dicha 7-deazapurina substituida por N-6 es un antagonista de los receptores de adenosina A3 en las células de dicho animal.

175. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de una deazapurina tal y como se describe en las Reivindicaciones 1 1 , 12, 14, 25, 63 ó 64 y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

176. Una composición farmacéutica tal y como se describe en la Reivindicación 175, caracterizada además porque dicha deazapurina es seleccionada del grupo consistente de: 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-fenoximetil-2-fenil-7/7-pirrolo[2,3d]pirimidina, 4-(2-aceti la mi noetil )a mi no-6-(4-f luorof enoxi )metil-2-f enil- 7H-pirrolo[2,3d]pirimidina, 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(4-clorofenoxi)metil-2-fen¡l-7 7-pirrolo[2,3d]pirimidina, 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(4-metoxifenoxi)metil-2-fenil-7/7-pirrolo[2,3d] pirimidina, 4-(2-aceti la mi noetil )a mi no-6-(2-pirid ¡loxi )metil-2-fe nil- 7/7-pirrolo[2,3d] pirimidina, 4-(2-acetilaminoetil)amino-6-(N-fenilamino)metil-2-fenil-7 7-pirrolo[2,3d]pirimidina, 4-(2-acetilaminoet¡l)amino-6-(N-metil-N-fenilam¡no)metil-2-fenil-7/7-pirrolo[2,3d] pirimidina, 4-(2-N'-metilureaetil)amino-6-fenoximetil-2-fenil-7 7-pirrolo[2,3d]pirimidina, 4-(c/s-3-hidroxiciclopent¡l)amino-5,6-dimet¡l-2-fenil-7 7-pirrolo[2,3d]pirimidina, sal de ácido 4-(c/'s-3-(2-aminoacetoxi)ciclopentil)amino-5,6-d i meti l-2-fen i I- 7/7-pirrolo[2,3d] pirimidina trifluoroacético 4-(3-acetamido)piperidinil-5,6-dimetil-2-fenil-7 7-pirrolo[2,3d] pirimidina, 4-(2-N'-metilureapropil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7/7-pirrolo[2,3d]pirimidina, 4-(2-acetamidobutil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7 7-pirrolo[2,3d]pirimidina, 4-(2-N'-metilureabutil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7 7-pirrolo[2,3d] pirimidina, 4-(2-aminociclopropilacetamidoetil)amino-2-fenil-7/7-pirrolo[2,3d] pirimidina, 4-(írans-4-hidroxiciclohexil)amino-2-(3-clorofenil)-7 7-pirrolo[2,3d] pirimidina, 4-(í?a/?s-4-hidroxiciclohexil)amino-2-(3-f luorofenil)- /7-pirrolo[2,3d]pirimidina, y 4-(fraps-4-hidroxiciclohexil)amino-2-(4-piridil)-7/7-pirrolo[2,3d]pirimidina.

177. Una composición farmacéutica tal y como se describe en la Reivindicación 175, caracterizada además porque dicha cantidad terapéuticamente efectiva es efectiva para el tratamiento de una enfermedad respiratoria o una enfermedad gastrointestinal.

178. La composición farmacéutica tal y como se describe en la Reivindicación 177, caracterizada además porque dicha enfermedad gastrointestinal es diarrea.

1 79. La composición farmacéutica tal y como se describe en la Reivindicación 177, caracterizada además porque dicha enfermedad respiratoria es asma, rinitis alérgica, o enfermedad crónica pulmonar obstructiva.

180. La preparación farmacéutica tal y como se describe en la Reivindicación 175, caracterizada además porque dicha preparación farmacéutica es una formulación oftálmica.

181 . La preparación farmacéutica tal y como se describe en la Reivindicación 180, caracterizada además porque dicha preparación farmacéutica es una formulación para inyección periocular, retrobulbar o intraocular.

182. La preparación farmacéutica tal y como se describe en la Reivindicación 180, caracterizada además porque dicha preparación farmacéutica es una formulación sistémica.

183. La preparación farmacéutica tal y como se describe en la Reivindicación 180, caracterizada además porque dicha preparación farmacéutica es una solución de irrigación quirúrgica.

184. Una composición farmacéutica empacada para el tratamiento de una condición que responde a la 7-deazapurina substituida por N-6 en un mamífero el cual comprende: un recipiente que mantiene una cantidad terapéuticamente efectiva de por lo menos una deazapurina tal y como se describe en las Reivindicaciones 1 1 , 12, 14, 25, 63 ó 64; e instrucciones para el uso de dicha deazapurina para el tratamiento de la condición que responde a dicha 7-deazapurina substituida por N-6 en un mamífero.

185. Un método para la preparación de que comprende los pasos de: a) hacer reaccionar: para producir en donde, P es un alquilo inferior o un grupo protector; b) Ciclar el producto del paso (a) para producir c) Clorinar el producto del paso (b) para producir d) Tratar el producto del paso (c) con una amina produciendo de este modo ,en donde Ri y R2 son cada una independientemente un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo, o alquilarilo substituido o no substituido o forman juntas un anillo heterocíclico substituido o no substituido; R3 es una porción alquilo, arilo, o alquilarilo substituida o no substituida; y R es un átomo de halógeno, un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo substituido o no substituido.

186. Un método para la preparación de que comprende los pasos de: a) Hacer reaccionar: para producir ,en donde P es un grupo protector removible; b) Tratar el producto del paso (a) bajo condiciones de ciclado para producir c) Tratar el producto del paso (b) bajo condiciones adecuadas para producir y d) Tratar el producto clorinado del paso (c) con una amina para producir , en donde R-i y R2 son cada una independientemente un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo, o alquilarilo substituida o no substituida o forman juntas un anillo heterocíclico substituido o no substituido; R3 es una porción alquilo, arilo o alquilarilo substituida o no substituida; y Rß es un átomo de halógeno, un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo substituida o no substituida.