KR20010083042A - 피롤로[2,3디]피리미딘 조성물 및 이의 용도 - Google Patents

피롤로[2,3디]피리미딘 조성물 및 이의 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR20010083042A
KR20010083042A KR1020007013675A KR20007013675A KR20010083042A KR 20010083042 A KR20010083042 A KR 20010083042A KR 1020007013675 A KR1020007013675 A KR 1020007013675A KR 20007013675 A KR20007013675 A KR 20007013675A KR 20010083042 A KR20010083042 A KR 20010083042A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
substituted
deazapurine
pyrrolo
pyrimidine
phenyl
Prior art date
Application number
KR1020007013675A
Other languages
English (en)
Other versions
KR100722194B1 (ko
Inventor
알린도 엘. 카스텔하노
브라이언 맥키벤
데이비드 제이. 휘털
Original Assignee
추후제출
오에스아이 파마슈티컬스, 인코포레이티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 추후제출, 오에스아이 파마슈티컬스, 인코포레이티드 filed Critical 추후제출
Publication of KR20010083042A publication Critical patent/KR20010083042A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR100722194B1 publication Critical patent/KR100722194B1/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A61K31/52—Purines, e.g. adenine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/12—Antidiarrhoeals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/08—Bronchodilators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/14—Decongestants or antiallergics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/16—Otologicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/12—Antidiuretics, e.g. drugs for diabetes insipidus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

아데노신 수용체 자극 질병의 치료에 유용한 새로운 아데자퓨린이 공개되었다.

Description

피롤로[2,3디]피리미딘 조성물 및 이의 용도{PYRROLO[2,3d]PYRIMIDINE COMPOSITIONS AND THEIR USE}
아데노신은 특히 심혈관 및 신경 계통내의 많은 생리적 활동에 대한, 편재되어 있는 조절자이다. 아데노신의 효과는 특정 세포 표면 수용체 단백질에 의해 매개되는 것으로 나타난다. 아데노신은 진정, 혈관확장, 심박수 및 수축 억제, 혈소판 응집 저해, 글루코즈 신생합성의 자극 및 지방분해 저해를 포함한 다양한 생리적 활동을 조절한다. 아데닐레이트 사이클레이즈에 대한 효과외에, 아데노신은 칼슘 채널을 열고, 칼슘 채널을 통한 유량을 감소시키고, 및 수용체-매개 기작을 통해 포스포이노시티드 회전율을 저해 또는 자극시키는 것으로 나타난다 (참조, 예를 들어, C.E. Muller 및 B. Stein "Adenosine Receptor Antagonists: Structures and Potential Therapeutic Applications, "Current pharmaceutical Design, 2:501 (1996) 및 C.E. Muller "A1-Adenosine Receptor Antagonists, "Exp. Opin. Ther. Patents 7(5):419(1997)).
아데노신 수용체는 퓨린수용체의 초군에 속하는 것으로 이것은 현재 P1(아데노신) 및 P2(ATP, ADP 및 다른 뉴클레오타이드류) 수용체로 더 세분화된다. 지금까지, 뉴클레오시드 아데노신에 대한 4 개의 아유형의 수용체들이 인간을 포함한 다양한 종으로부터 클론되어 있다. 두 가지 수용체 아유형 (A1및 A2)는 나노몰 범위에서 아데노신에 대하여 친화성을 보이며, 다른 두 아유형 A2b및 A3는 저 친화성 수용체로서 아데노신에 대하여 낮은 마이크로몰 범위에서 친화성을 가진다. A1및 A3아데노신 수용체 활성은 아데닐레이트 사이클레이즈 활성을 저해하게 되는 반면, A2a및 A2b활성은 아데닐레이트 사이클레이즈의 자극을 유발한다.
몇 개의 A1길항체들이 인식성 질환, 신장 병, 및 심장 부정맥을 치료하기 위해 개발되었다. A2a길항체들은 모버스 파킨슨 (파킨슨 병)을 앓고 있는 환자에게 유용할 것이라고 제안되었다. 특히, 국부 전달의 유용성의 견지에서, 아데노신 수용체 길항체는 알레르기성 염증 및 천식 치료에 유용할 수 있다. 유용한 정보 (예를 들어, Myce & Metzger "DNA antisense Therapy for Asthma in an Animal Model" Nature (1997) 385:721-5)에 의하면 이러한 병리생리학적 맥락에서, A1길항체들은 호흡 상피세포 아래에 있는 활근육의 수축을 막는 반면 A2b또는 A3수용체 길항체들은 비만세포 탈과립화를 막으면서 히스타민 및 다른 염증 중개체의 방출을 완화시킨다. A2b수용체들은 위장관을 통해서, 특히 대장 및 소장 상피세포에서 발견되었다. A2b수용체들은 cAMP 반응을 매개하는 것으로 알려져있다 (Strohmeier 등, J. Bio. Chem. (1995) 270:2387-94).
아데노신 수용체들은 소, 돼지, 원숭이, 래트, 기니아 피그, 마우스, 토끼 및 인간을 위시한 다양한 포유동물 종의 망막에 존재하는 것으로 알려져 있다 (참조, Blazynski 등, Discrete Distributions of Adenosine Receptors in Mammalian Retina, Journal of Neurochemistry, 권 54호, 페이지 648-655 (1990); Woods 등, Characterization of Adenosine A1-Receptor Binding Sites in Bovine Retinal Membranes, Experimental Eye Research, 권 53호, 페이지 325-331 (1991); 및 Braas 등, Endogenous adenosine and adenosine receptors localized to ganglion cells of the retina, Proceedings of the National Academy of Science, 권 84호, 페이지 3906-3910 (1987)). 최근, 윌리암스는 배양된 인간 망망 세포 라인에서 아데노신 전달 부위를 발견한 것을 보고하였다 (윌리암스 등, Nucleoside Transport Sites in a Cultured Human Retinal Cell Line Established By SV-40T Antigen Gene, Current Eye Research, 권 13호 페이지 109-118 (1994)).
예전에, 아데노신 흡수를 조절하는 화합물은 망막 및 시신경두 손상을 치료하는 유용한 치료제로서 제안되어 왔다. 세이드의 미국 특허 제 5,780,450 호에서, 발명자는 안질환을 치료하기 위해 아데노신 흡수 저해체를 사용하는 것을 논의하고 있다. 세이드는 특이성 A3수용체 저해체의 사용을 개시하지 않고 있다. 미국 특허 제 5,780,450의 전체 내용은 본 명세서에서 참조문헌으로서 개시된다.
추가의 아데노신 수용체 길항체들이 약학적 도구로서 필요하고 상기 언급된 질환 상태 및/또는 조건에 대한 약물로서 상당한 관심이 표명되고 있다.
발명의 요약
본 발명은, 적어도 부분적으로, 하기와 같이 설명되는, 어떤 N-6 치환 7-데아자퓨린을 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태를 치료하는 데 사용할 수 있는 것에 기초한다. 그러한 상태의 예는 아데노신 유도체의 활성이 증가되는 것들, 즉, 기관지염, 위장 질환 또는 천식을 포함하낟. 이러한 상태는 아데노신 수용체 활성이 이데닐레이트 사이클레이즈 활성의 저해 또는 자극을 이끈다는 점에서 특징적이라 할 수 있다. 본 발명의 조성물 및 방법은 거울상 이성질체적으로 또는 부분입체 이성질체적으로 순수한 N-6 치환 7-데아자퓨린을 포함한다. 바람직한 N-6 치환 7-데아자퓨린류는 아세트아미드, 카르복스아미드, 치환된 시클로헥실, 예를 들어, 시클로헥사놀, 또는 알킬렌 사슬을 통해 N-6 질소에 부착된 우레아 부분체를 가지는 것들을 포함한다.
본 발명은 치료학적으로 유용한 양의 N-6 치환 7-데아자퓨린을 포유동물에 투여하여 아데노신 수용체의 활성 조절이 일어나는, 포유동물에서 아데노신 수용체를 조절하는 방법에 관한 것이다. 적합한 아데노신 수용체는 A1, A2, 또는 A3의 군을 포함한다. 바람직한 구체예에서, N-6 치환 7-데아자퓨린은 아데노신 수용체 길항체이다.
본 발명은 또한 치료학적으로 유용한 양의 N-6 치환 7-데아자퓨린을 포유동물에 투여하여 포유동물에서 질환 치료가 일어나게 하는, 포유동물에서 N-6 치환7-데아자퓨린 질환, 예를 들어, 천식, 기관지염, 알레르기성 비염, 만성 장애 폐질환, 망막 질환, 위장 질환 및 안질환을 치료하는 방법에 관한 것이다. 적합한 N-6 치환 7-데아자퓨린은 하기 일반식 (I)로 표시되는 화합물 및 이의 약학적 허용 염을 포함한다.
(Ⅰ)
R1및 R2는 각각 수소 원자 또는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체이거나 같이 치환 또는 미치환 헤테로시클릭 환을 형성한다. R3는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체이다. R4는 수소원자 또는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체이다. R5및 R6는 독립적으로 할로겐 원자, 예를 들어, 염소, 불소 또는 취소이거나, 수소 원자 또는 치환 또는 미치환된 알킬, 아릴, 또는 알킬아릴 부분체 이거나, R4및 R5또는 R5및 R6는 함께 치환 또는 미치환된 헤테로시클릭 또는 카르보시클릭 환을 형성한다.
특정 구체예에서, R1및 R2는 각각 독립적으로 치환 또는 미치환 시클로알킬 또는 헤테로아릴알킬 부분체일 수 있다. 다른 구체예에서, R3는 수소 원자 또는 치환 또는 미치환 헤테로아릴 부분체이다. 또 다른 구체예에서, R4, R5및 R6는 각각독립적으로 헤테로아릴 부분체일 수 있다. 바람직한 구체예에서, R1은 수소원자이고, R2는 시클로헥사놀, 예를 들어 트랜스-시클로헥사놀이고, R3는 페닐이고, R4는 수소원자이고, R5는 메틸 기이고, R6는 메틸기이다. 또 다른 구체예에서, R1은 수소원자이고, R2는이고, R3는 페닐이고, R4는 수소원자이고, 및 R5및 R6는 메틸기이다.
본 발명은 또한 포유동물에서 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태, 예를 들어, 천식, 기관지염, 알레르기성 비염, 만성 장애 폐질환, 망막질환, 위장 질환 및 안질환을 치료하는 약학 조성물에 관한 것이다. 상기 약학 조성물은 치료학적으로 유용한 양의 N-6 치환 7-데아자퓨린 및 약학적 허용 담체를 포함한다.
본 발명은 또한 포유동물에서 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태를 치료하는 포장된 약학 구성물에 관한 것이다. 포장된 약학 구성물은 적어도 하나의 N-6 치환 7-데아자퓨린의 약학적 유효량을 보유하는 용기 및 포유동물에서 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태를 치료하는 N-6 치환 7-데아자퓨린을 사용하는 설명서를 포함한다.
본 발명은 또한 식 1의 화합물에서 R1은 수소; R2는 치환 또는 미치환 시클로알킬, 치환 또는 미치환 알킬 이거나 또는 R1및 R2가 함께 치환 또는 미치환 헤테로시클릭 환을 형성하고; R3는 미치환 또는 치환 아릴이고, R4는 수소이고; 및 R5및R6은 각각 독립적으로 수소 또는 알킬인 화합물 및 이의 약학적 허용 염을 포함한다. 본 구체예의 데아자퓨린류는 유익하게는 선택성 A3수용체 길항체일 수 있다. 이러한 화합물은 많은 치료적 용도, 예를 들어, 천식, 심장질환과 연관된 신장질환, 및 녹내장 치료에 유용할 수 있다. 특히 바람직한 구체예에서, 상기 데아자퓨린은 예를 들어, 생체내에서 에스테라제 촉매 가수분해에 의해 활성 약물로 대사될 수 있는 수용성 전구약물(프로드럭)이다.
또 다른 구체예에서, 본 발명은 세포를 N-6 치환 7-데아자퓨린 (예를 들어, 바람직하게는 아데노신 수용체 길항체)과 접촉시킴으로써 세포에서 아데노신 수용체 (예를 들어 A3)의 활성을 저해하는 방법을 특징으로 한다.
다른 관점에서, 본 발명은 동물에 식 (I)의 N-6 치환 7-데아자퓨린의 유효량을 투여함으로써 동물 (예를 들어, 인간)의 눈에 난 손상을 치료하는 방법을 특징으로 한다. 바람직하게는, 상기 N-6 치환 7-데아자퓨린은 상기 동물의 세포내의 A3아데노신 수용체의 길항체이다. 상기 손상은 망막 또는 시신경두에 있고 및 급성 또는 만성일 수 있다. 상기 손상은, 예를 들어, 녹내장, 부종, 국소빈혈, 저산소혈 또는 상처의 결과로 생긴 것일 수 있다.
본 발명은 또한 식 (I)의 N-6 치환 7-데아자퓨린을 포함하는 약학 조성물을 특징으로 한다. 바람직하게는, 약학적 제제는 안약 약제 (예를 들어, 눈주위, 구후 (retrobulbar), 내안(introocular) 주사약제, 전신성 약제, 또는 외과적 세척 용액)이다.
또 다른 구체예에서, 본 발명은 식 (II)를 가지는 데아자퓨린을 특징으로 한다.
(Ⅱ)
상기식에서,
X 는 N 또는 CR6이고;
R1및 R2는 각각 독립적으로 수소 또는 치환 또는 미치환된 알콕시, 아미노알킬, 알킬, 아릴, 또는 알킬아릴이거나 또는, R1및 R2둘다 수소가 아니라는 조건에서, 함께 치환 또는 미치환 헤테로시클릭 환을 형성하고;
R3는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴알킬 또는 아릴이고;
R4는 수소 또는 치환 또는 미치환 C1-C6알킬이고;
L은 수소, 치환 또는 미치환 알킬 또는 R4및 L이 서로 치환 또는 미치환 헤테로시클릭 또는 카르보시클릭 환을 형성하고;
R6는 수소, 치환 또는 미치환 알킬 또는 할로겐이고;
Q는 CH2, O, S 또는 NR7으로 여기서 R7은 수소 또는 치환 또는 미치환 C1-C6알킬이고; 및
W는 미치환 또는 치환 알킬, 시클로알킬, 아릴, 아릴알킬, 비아릴, 헤테로아릴, 치환 카르보닐, 치환 티오카르보닐 또는 치환 설포닐 인데, 상기에서, R3가 피롤리디노이라면, R4는 메틸이 아니라는 조건을 만족한다. 본 발명은 또한 본 발명의 화합물의 약학적 허용 염 및 전구 약물에 관한 것이다.
유용한 구체예에서, 식 (II)에서, X는 CR6이고 Q는 Ch2, O, S 또는 NH이고, 여기서 R6는 상기 정의한 바와 같다.
식 (II)의 또 다른 예에서, X는 N이다.
본 발명은 또한 세포를 본 발명의 화합물과 접촉시킴으로써 세포에서 아데노신 수용체 (예를 들어, A2b아데노신 수용체)의 활성을 저해하는 방법에 과한 것이다. 바람직하게는, 상기 화합물은 상기 수용체의 길항체이다.
본 발명은 또한 동물에게 식 (II)의 화합물 (A2b의 길항체)의 유효량을 투여함으로써 동물에서 위장 질환 (예, 설사) 또는 호흡기 질환 (예, 알레르기성 비염, 만성 장애 폐질환)을 치료하는 방법에 관한 것이다. 바람직하게는 상기 동물은 인간이다.
본 발명의 특징 및 다른 상세 사항들이 더욱 특정하게 설명될 것이고 청구 범위에서 지적될 것이다. 본 발명의 특정 구체예는 예증의 방법으로 나타낸 것이고 본 발명의 한계물로서 나타낸 것이 아님이 이해될 것이다. 본 발명의 중심적 특성은 본 발명의 범위를 벗어나지 않고 다양한 구체예에서 나타나 있다.
본 발명은 포유동물에서 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태를 치료하는 방법에 관한 것이다. 이 방법은 하기 설명되는 바와 같이 치료학적 유효량의 N-6 치환 7-데아자퓨린을 포유동물에 투여하여 동물에서 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태의 치료가 일어나게 하는 것을 포함한다.
용어 "N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태"는 하기 설명되는 바와 같이 본 발명의 N-6 치환 7-데아자퓨린으로의 치료에 감응성을 나타내는 것을 특징으로 하는 질환 상태 또는 조건을 포함하는 것으로 의도된 바, 상기 치료는 본 발명의 N-6 치환 7-데아자퓨린으로 달성된, 상태의 적어도 하나의 증상 또는 효과의 상당한 감소를 포함한다. 전형적으로, 그러한 상태는 숙주내에 아데노신의 증가와 연관이 있어서 이 숙주는 가끔씩 한정적이지 않는 예로서, 독소 방출, 염증, 혼수, 수저류(water retention), 체중 증가나 감소, 췌장염, 기종 (emphysema), 류마티스 관절염, 골관절염, 다중 기관 질환, 소아 및 성인 호흡 곤란 증후군, 알레르기성 비염, 만성 장애 폐 질환, 안질환, 위장 질환, 피부 종양 촉진, 면역 결핍 및 천식을 포함하는 생리 증후군을 경험한다 (참조, 예를 들어, C. E. Muller 및 B. Stein "Adenosine Receptor Antagonists: Structures and Potential Therapeutic Applications, "Current Pharmaceutical Design, 2:501 (1996) 및 C. E. Muller "A1-Adenosine Receptor Antagonists, "Exp. Opin. Teer. Patents 7(5);419 (1997) 및 I. Feoktistove, R. Polosa, S. T. Holgate 및 I. Biaggioni "Adenosine A2breceptors: a novel therapeutic target in asthma?" TiPS 19;148 (1998)). 상기 그러한 증상과 연계된 효과는 한정되지 않는 예로서, 발열, 숨가쁨, 구역질, 설사, 허약, 두통 및 심지어 죽음을 포함한다. 한 구체예에서 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태는 아데노신 수용체류, 예를 들어, A1, A2a, A2b, A3등의 자극으로써, 세포내 칼슘 농도 및/또는 PLC (포스포리파제 C)의 활성이 조절되어서, 매개되는 그러한 질환 상태를 포함한다. 바람직한 구체예에서, N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태는 아데노신 수용체(류)와 연관되는 바, 예를 들어, N-6 치환 7-데아자퓨린이 길항체로서 작용한다. 본 발명의 화합물, 예를 들어, 생물학적 효과를 중개하는 아데노신 수용체 아유형류에 의해 치료될 수 있는 적절한 감응성 상태의 예는 중추신경계 (CNS) 증상, 심혈관 증상, 망막성 증상, 호흡성 증상, 면역성 증상, 위장성 증상 및 대사성 증상을 포함한다. 피험체에서 아데노신의 상대적인 양은 하기 기술된 증상들과 관계가 있다: 즉, 아데노신의 증가된 양이 증상, 예를 들어, 바람직하지 않은 생리적 반응, 예를 들어 천식 발병을 시발할 수 있다.
CNS 증상은 전달물질 방출 감소 (A1), 진정 (A1), 감소된 운동 활성 (A2a), 항경련 작용, 화학 수용체 자극 (A2) 및 통각과민 (hyperalgesia)를 포함한다. 본 발명의 화합물의 치료적 적용은 치매, 알쯔하이머 질환 및 기억력 증진 치료를 포함한다.
심혈관 증상은 혈관 확장 (A2a), (A2b) 및 (A3), 혈관 수축 (A1), 심동질환(A1), 혈소판 저해 (A2a), 음성 심근 수축 및 변전 (A1), 부정맥, 심계 항진 및 혈관 신생을 포함한다. 본 발명의 화합물의 치료적 적용은, 예를 들어, 심장의 허혈성 심장 질환의 예방 및 강심약, 심근 조직 보호 및 심장 기능의 회복을 포함한다.
망막 증상은 감소된 GFR (A1), 혈관간세포 수축 (A1), 항배뇨과다증 (A1) 및 레닌(renin) 방출 저해 (A1)을 포함한다. 본 발명의 화합불의 적절한 치료 적용은 이뇨제, 나트륨뇨 배설 항진제, 급성 신장 질환의 칼슘 핍절, 신장 방지/예방제, 항고혈압제, 항부종제 및 항신장염 제로서의 용도를 포함한다.
호흡기 증상은 기관지 확장 (A2), 기관지 수축 (A1), 만성 장애 폐 질환, 알레르기성 비염, 점액 분비 및 호흡 저하를 포함한다. 본 발명의 화합물의 적절한 적용 대상은 항천식성 적용, 이식 후 폐질환의 치료 및 호흡기 질환을 포함한다.
면역적 증상은 면역 억제 (A2), 호중구 주화성 (neutrophil chemotaxis) (A1), 호중구 초산화물 (superoxide) 발생 (A2a) 및 미만세포 탈과립화 (A2b및 A3)을 포함한다. 길항체의 치료적 적용은 알레르기성 및 비알레르기성 염증, 예를 들어, 히스타민 및 다른 염증성 중개자의 방출을 포함한다.
위장성 증상은 산 분비의 저해 (A1)를 포함한다. 치료적 적용은 역류 및 궤양성 조건을 포함한다. 위장성 증상은 또한, 대장성, 소장성 및 설사성 질환, 예를 들어, 소장성 염증과 관련된 설사성 질환 (A2b)를 포함한다.
안과 질환은 망막성 및 시신경두 상해 및 상처 관련 질환 (A3)를 포함한다. 바람직한 구체예에서, 상기 안과 질환은 녹내장이다.
본 발명의 화합물의 다른 치료적 적용은 비만 (지질 분해 특성) 치료, 고혈압, 우울증 치료하는 진정제, 항불안제, 유도제 및 지사제, 예를 들어, 설사를 발병시키지 않고 운동성을 수행하는 제제로서의 용도를 포함한다.
용어 "질환 상태"는 아신 의 바람직하지 않은 농도, 아데닐릴 사이클라제 활성, 아데노신 수용체의 이상 자극과 연관된 증가된 생리적 활성, 및/또는 cAMP 증가에 의해 야기되거나 이와 관련된 상태를 포함하는 것으로 의도된다. 일 구체예에서, 질환 상태는, 예를 들어, 천식, 만성 장애 폐질환, 알레르기성 비염, 기관지염, 망막성 질환, 위장성 질환 또는 안과 질환이다. 다른 예는 만성 기관지염 및 낭포성 섬유종을 포함한다. 염증성 질환의 적절한 예는 비임파성 백혈병, 심근 허혈, 안기나 (angina), 경색, 뇌혈관 허혈, 간헐성 파행, 임계 수족 허혈, 정맥성 고혈압, 정맥류성 정맥, 정맥성 궤양형성, 및 동맥경화증을 포함한다. 손상된 재관류 상태는, 예를 들어, 재건 수술, 혈전 붕괴, 또는 혈관형성술과 같은 임의의 수술 후 상처를 포함한다.
용어 "N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태의 치료" 또는 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태를 치료하는 것"은 상술한 바와 같이 질환 상태 또는 조건의 변화를 포함하는 것으로서, 포유동물에서의 생리적 증후가 상당히 감소되거나 최소화된 것을 의도한다. 상기 용어는 또한 아데노신의 비정상적 양과 연관된 생리적 증후또는 증상의 조절, 방지 또는 저해를 포함한다. 바람직한 일 구체예에서, 질환 상태 또는 조건의 조절은 질환 상태 또는 조건이 제거된 그러한 것이다. 다른 바람직한 구체예에서, 상기 조절은 아데노신 수용체 활성의 비정상적인 양이 조절도지만 다른 생리적 계통 및 인자들은 영향을 받지 않는 그러한 것으로 선택된다.
용어 "N-6 치환 7-데아자퓨린"은 기술적으로 인식되며 식 (I)을 가지는 화합물
(Ⅰ)
"N 치환 7-데아자퓨린" 및 이의 약학적 허용염을 포함하며, 한 구체예에서, 또한, 본 명세서에서 설명되는 특정한 N-6 치환 퓨린을 포함한다.
구체예에서, 상기 N-6 치환 7-데아자퓨린은 N-6 벤질 또는 N-6 페닐에틸 치환체가 아니다. 다른 구체예에서, R4는 벤질 또는 페닐에틸 치환체가 아니다. 바람직한 구체예에서, R1및 R2는 둘다 수소원자이지는 않다. 또 다른 바람직한 구체예에서, R3는 수소 원자가 아니다.
용어 N-6 치환 7-데아자퓨린의 "치료학적 유효량"은, 하기 설명되는 바와 같이 포유동물 내에서 의도된 기능을 수행, 예를 들어, 포유동물에서 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태 또는 질환 상태를 치료하기에 필요한 또는 충분한 치료 화합물의 양을 의미한다. 상기 치료 화합물의 유효량은 포유동물에 이미 존재하는 원인 물질의 양, 나이, 성별, 체중 및, 표유 동물에서 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태에 영향을 끼치는 본 발명의 치료 화합물의 능력과 같은 요소에 따라 변할 수 있다. 당해 분야의 일반적인 기술자는 상술한 요소를 연구하고 과도한 실험없이도 치료 화합물의 유효량에 관하여 결정을 내릴 수 있을 것이다. 후술하는 바와 같이, 생체외 또는 생체내 평가 실험을 이용하여 상기 치료 화합물의 "유효량"을 결정할 수 있다. 보편적인 기술 숙련자들은 상술한 평가 실험에 사용하기 위한 용도의 또는 치료성 처리물로서 상기 치료 화합물의 적절한 양을 선택할 수 있을 것이다.
치료적 유효량은 바람직하게는 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태 또는 조건과 연관된 적어도 하나의 증후 또는 증상을 처리되지 않은 피험체에 대하여 적어도 약 20% (더욱 바람직하게는 적어도 약 40%, 더더욱 바람직하게는 적어도 약 60 %, 더 바람직하게는 적어도 약 80%)로 감소시키는 것이다. 평가 실험은 그러한 증후 및/또는 증상의 감소를 측정하도록 당해 분야의 숙련자들에 의해 고안될 수 잇다. 그러한 변수를 특정할 수 있는 임의의 기술적으로 인지된 방법은 본 발명의 부분으로서 포함되도록 의도된다. 예를 들어, 천식이 치료될 질환 상태라면, 피험자의 폐로부터 사용된 공기의 양을 당해 분야 공지된 기술을 사용하여 치료 전후에 측정하여 공기 부피에서의 증가를 측정한다. 이와 유사하게, 염증이 치료될 질환 상태라면, 염증이 일어난 부위를 당해 분야 공지 기술을 사용하여 치료 전후에 측정하여 염증 부위에서의 감소 상태를 측정할 수 있다.
용어 "세포"는 원핵성 및 진핵성 세포를 둘다 포함한다.
용어 "동물"은 아데노신 수용체를 가진 임의의 유기체 또는 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태에 민감한 임의의 유기체를 포함한다. 이러한 동물의 예는 효모, 포유동물류, 파충류, 및 조류를 포함한다. 이는 또한 트랜스제닉 동물을 포함한다.
용어 "포유 동물"은 공지된 것으로서, 동물, 더욱 바람직하게는, 온혈동물, 가장 바람직하게는, 소, 양, 돼지, 말, 개, 고양이, 래트류, 마우스, 및 인간을 포함하는 것으로 의도된다. N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태, 염증, 기종, 천식, 중추신경계 조건, 또는 급성 호흡 곤란증에 민감한 포유 동물은 본 발명의 부분으로서 포함된다.
또 다른 관점에서, 본 발명은 포유 동물에 치료적 유효량의 N-6 치환 7-데아자퓨린을 투여하여 포유동물에서 아데노신 수용체의 조절이 일어나게 하는 아데노신 수용체 조절 방법에 관한 것이다. 적절한 아데노신 수용체는 A1, A2또는 A3의 군을 포함한다. 바람직한 구체예에서, 상기 N-6 치환 7-데아자퓨린은 이신 수용체 길항체이다.
용어 "아데노신 수용체 조절"은 화합물이 아데노신 수용체와 작용하여, 아데노신 수용체와 연관된 증가된, 감소된, 또는 비정상적인 생리적 활성 또는 아데노신 수용체의 조절로부터 기인된 후속적 캐스캐이드 증상을 야기하는 그러한 경우를 포함한다. 아데노신 수용체와 연관된 생리적 활성은 진정 작용의 유도, 혈관 확장, 심박수 억제 및 수축, 혈소판 응집성 저해, 글루코즈 생성 자극, 지방분해의 저해,칼슘 채널의 개방, 칼슘 채널의 유량 감소, 등을 포함한다.
용어 "조절하다", "조절하는" 및 "조절"은 예를 들어, 본 발명의 치료적 방범의 문맥 속에서, 아데노신 수용체의 비정상적인 자극과 연관된 바람직하지 않은 생리적 활성의 증가 결과를 방지, 제거 또는 저해하는 것을 포함한다. 다른 구체예에서, 상기 용어 조절은 길항제 작용, 예를 들어, 아데노신 수용체의 과도 자극으로부터 유래한, 알레르기 및 알레르기성 염증의 매재자의 활성 또는 생성의 감소를 포함한다. 예를 들어, 본 발명의 치료적 데아자퓨린은 아데노신 수용체와 상호 작용하여 예를 들어, 아데닐레이트 사이클라제 활성을 저해할 수 있다.
용어 "비정상적 아데노신 수용체 활성으로 특징지워지는 조건"은 아데노신 수용체의 비정상적인 자극과 연관되어, 수용체의 자극이 질병, 질환 또는 조건과 직 간접적으로 연계되는 일련의 생화학적 및/또는 생리적 사건을 야기하는, 그러한 질병, 질환 또는 조건을 포함한다. 아데노신 수용체의 이러한 자극은 질병, 질환 또는 조건의 단독적인 원인 물질에 의한 것이 아니라 단순히, 치료될 질병, 질환 또는 조건과 전형적으로 연계된 증상들의 부분을 야기하는 것과 연관되어 있다는 것이다. 수용체의 비정상적 자극은 단독 인자이거나 적어도 하나의 다른 제제가 치료될 상태에 연루될 수 있다. 조건들의 예는 염증, 위장 질환 및 증가된 아데노신 수용체 활성의 존재에 의해 표명되는 그러한 증후들을 위시한, 상술한 질병 상태를 포함한다. 바람직한 예는 천식, 알레르기성 비염, 반성 장애 폐질환, 부종, 기관지염, 위장 질환 및 녹내장과 연계된 그러한 증후들을 포함한다.
용어 "비정상적인 아데노신 수용체 활성에 의해 특징지워진 조건의 치료"는상기 조건과 전형적으로 연계된 적어도 하나의 증후를 완화 또는 감소시키는 것을 포함하도록 의도된다. 상기 치료는 또한 하나의 증후이상의 완화 또는 감소를 포함한다. 바람직하게는, 상기 치료는 상기 조건과 연계된 증후를 고치는, 예를 들어, 상당히 제거하는 것이다.
본 발명은 식 (I)을 가지는 화합물 N-6 치환 7-데아자퓨린에 관한 것이다
(Ⅰ)
상기식에서,
R1및 R2는 각각 수소 원자 또는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체이거나, 함께, 치환 또는 미치환 헤테로시클릭 환을 형성하고;
R3는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체이고;
R4는 수소원자 또는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체이다. R5및 R6는 독립적으로 할로겐 원자, 예를 들어, 염소, 불소 또는 취소이거나, 수소 원자 또는 치환 또는 미치환된 알킬, 아릴, 또는 알킬아릴 부분체 이거나, R4및 R5또는 R5및 R6는 함께 치환 또는 미치환된 헤테로시클릭 또는 카르보시클릭 환을 형성한다. 또한, 상기 N-6 치환 7-데아자퓨린의 약학적 허용염을 포함한다.
특정 구체예에서, R1및 R2는 각각 독립적으로 치환 또는 미치환 시클로알킬 또는 헤테로아릴알킬 부분체일 수 있다. 다른 구체예에서, R3는 수소 원자 또는 치환 또는 미치환 헤테로아릴 부분체이다. 또 다른 구체예에서, R4, R5및 R6는 각각 독립적으로 헤테로아릴 부분체일 수 있다.
일 구체예에서, R1은 수소원자이고, R2는 치환 또는 미치환 시클로헥산, 시클로펜틸, 시클로부칠 또는 시클로프로판 부분체이고, R3는 치환 또는 미치환 페닐 부분체이고, R4는 수소 원자이고 및 R5및 R6는 둘 다 메틸기이다.
다른 구체예에서, R2는 시클로헥산놀, 시클로헥산디올, 시클로헥실설폰아미드, 시클로헥산아미드, 시클로헥실에스트, 시클로헥센, 시클로펜탄올 또는 시클로펜탄디올 및 R3는 페닐 부분체이다.
또 다른 구체예에서, R1은 수소원자이고, R2는 시클로헥산올, R3는 치환 또는 미치환 페닐, 피리딘, 퓨란, 시클로펜탄, 또는 티오펜 부분체이고, R4는 수소 원자, 치환 알킬, 아릴 또는 아릴알킬 부분체이고, 및 R5및 R6는 각각 독립적으로 수소원자, 또는 치환 도는 미치환 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체이다.
또 다른 구체예에서, R1은 수소원자이고, R2는 치환 또는 미치환 알킬아민, 아릴아미드 또는 알킬아릴아미드, 치환 또는 미치환 알킬설폰아미드, 아릴설폰아미드 또는 알킬아릴 설폰아미드, 치환 또는 미치환 알킬우레아, 아릴우레아 또는 알킬아릴우레아, 치환 또는 미치환 알킬카바메이트, 아릴카바메이트 또는 알킬아릴카바메이트, 치환 또는 미치환 알킬카르복실 산, 아릴카르복실산 또는 알킬아릴카르복실 산이고, R3는 치환 또는 미치환 페닐 부분체이고, R4는 수소 원자이고 및 R5및 R6는 둘 다 메틸기이다.
또 다른 구체예에서, R2는 구아니딘, 개질 구아니딘, 시아노구아니딘, 티오우레아, 티오아미드 또는 아미딘이다.
일 구체예에서, R2는이고,
여기서 R2a-R2c는 각각 독립적으로 수소원자 또는 포화 또는 불포화 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체 및 R2d는 수소원자 또는 포화 도는 불포화 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체, NR2eR2f또는 OR2g로서, 여기서 R2e-R2f는 각각 독립적으로 수소원자 또는 포화 또는 불포화 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체이다. 택일적으로, R2a및 R2b는 함께 약 3 내지 8개 구성원을 가지는 크기의 환을 가지는 카르로시클릭 또는 헤테로시클릭 환, 예를 들어, 시클로프로필, 시클로펜틸, 시클로헥실 기를 형성한다.
본 발명의 일 관점에서, R5및 R6둘 다가 메틸기가 아니며, 바람직하게는, R5및 R6중 하나는 알킬 기, 예를 들어, 메틸기이고 다른 하나는 수소 원자이다.
본 발명의 다른 관점에서, R4가 1-페닐에틸이고 R1이 수소원자일 때, R3는 페닐, 2-클로로페닐, 3-클로로페닐, 4-클로로페닐, 3,4-디클로로페닐, 3-메톡시페닐 또는 4-메톡시페닐이 아니며, R4및 R1이 1-페닐에틸일 때, R3는 수소원자가 아니며, 도는 R4가 수소원자이고 R3가 페닐일 때, R1은 페닐에틸이 아니다.
본 발명의 다른 관점에서, R5및 R6는 함께 카르보시클릭 환, 예를 들어,, 피리미도[4,5-6]인돌을 형성하면, R3은 페닐이 아니고, R4가 1-(4-메틸페닐)에틸, 페닐이소프로필, 페닐 또는 1-페닐에틸이고, 또는 R3이 수소원자가 아닐 때, R4는 1-페닐에틸이다. R5및 R6에 의해 형성되는 카르보시클릭 환은 방향족 또는 지방족일 수 있고 4 및 12 개 탄소수 사이의 원자를 가지는, 예를 들어, 나프틸, 페닐시클로헥실 등일 수 있고, 바람직하게는 5 내지 7개의 탄소 원자를 가지는, 예를 들어, 시클로펜틸 또는 시클로헥실일 수 있다. 택일적으로, R5및 R6는 함께, 후술하는 것과 같은 헤테로시클릭 환을 형성할 수 있다. 대표적인 헤테로시클릭 환은 4 내지 12 개 탄소 원자, 바람직하게는 5 내지 7 개 탄수 원자를 포함하며 방향족 또는 지방족일 수 있다. 상기 헤테로시클릭 링은 환 구조의 하나 이상의 탄소 원자를 하나 이상의 이종 원자로 치환되는 것을 포함하여, 더 치환될 수있다.
본 발명의 또 다른 관점에서, R1및 R2는 헤테로시클릭 환을 형성한다. 대표적인 예는 모포리노, 피페라진 등과 같은, 예를 들어, 4-히드록시피페리딘류, 4-아미노피페리딘류와 같은, 후술하는 헤테로시클릭 환을 포함한다. R1및 R2가 함께 피레라지노 기,,을 형성할 때, R7은 수소원자 또는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴, 또는 알킬아릴 부분체이다.
본 발명의 또 다른 관점에서, R4및 R6가 함께 헤테로시클릭 환, 예를 들어,을 형성할 수 있다. 상기 헤테로시클릭 환은 방향족 또는 지방족일 수 있고, 4 내지 12 개 탄소 원자를 가지는 환, 예를 들어, 나프틸, 펜틸시클로헥실 등을 형성할 수 있고, 방향족 또는 지방족, 예를 들어, 시클로헥실, 시클로펜틸일 수 있다. 상기 헤테로시클릭 환은 링 구조체의 탄수 원자를 하나 이상의 이종원자로 치환하는 것을 포함하여, 더 치환될 수 있다. 택일적으로, R4및 R5는 함께 후술하는 것과 같은 헤테로시클릭 환을 형성할 수 있다.
특정 구체예에서, N-6 치환 7-데아자퓨린은 N-6 벤질 또는 N-6 페닐에틸 치환되지 않는다. 다른 구체예에서, R4는 벤질 또는 페닐에틸 치환되지 않는다. 바람직한 구체예에서, R1및 R2는 둘다 수소 원자가 아니지는 않다. 다른 바람직한 구체예에서, R3는 수소원자가 아니다.
본 발명의 화합물은 예를 들어, 에스테라제 촉매 가수분해에 의해 생체내에서 활성 약물로 대사되는 수용성 전구 약물을 포함한다. 가능한 전구약물의 예는 예를 들어, -OC(O)(Z)NH2로 치환된 시클로알킬로서 R2를 가진 데아자퓨린을 포함하며, 상기 식에서, Z는 자연적 또는 비자연적으로 발생하는 아미노산 또는 이의 유사체, α, β, γ 또는 ω 아미노산, 또는 디펩티드의 측쇄이다. 바람직한 아미노산 측쇄는 글리신, 알라닌, 발린, 루이신, 이소루이신, 리신, α-메틸알라닌, 아미노시클로프로판 카르복실 산, 아제티딘-2-카르복실 산, β-알라닌, γ-아미노부티르 산, 알라닌-알라닌 또는 글리신-알라닌을 포함한다.
다른 구체예에서, 본 발명은, 식 (I)의 데아자퓨린 및 이의 약학적 허용염을 특징으로 하는 바,
상기식에서,
R1은 수소;
R2는 치환 또는 미치환 시클로알킬, 치환 또는 미치환 알킬 이거나 또는 R1및 R2가 함께 치환 또는 미치환 헤테로시클릭 환을 형성하고;
R3는 미치환 또는 치환 아릴이고;
R4는 수소이고; 및
R5및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 알킬이다. 이 구체예의 데아자퓨린류는 잠재적으로 선택적 A3수용체 길항체일 수 있다.
일 구체예에서, R2는 치환 (예를 들어, 히드록시 치환) 또는 미치환 시클로알킬이다. 이의 상세 구체예에서, R1및 R4는 수소이고, R3는 미치환 또는 치환 페닐이고, R5및 R6는 각각 알킬이다. 바람직하게는 R2는 모노-히드록시시클로펜틸 또는 모노-히드록시시클로헥실이다. R2는 또한 -NH-C(=O)E로 치환될 수 있는 바, E는 치환 또는 미치환 C1-C4알킬 (예를 들어, 알킬아민, 예를 들어, 에틸아민)이다.
R1및 R2는 또한 함께 치환 또는 미치환 헤테로시클릭 환을 형성할 수 있고, 상기 환은 아민 또는 아세트아미노 기와 치환 될 수 있다.
다른 관점에어, R2는 -A-NHC(=O)B일 수 있고, 여기서, A는 미치환 C1-C4알킬 (예를 들어, 에틸, 프로필, 부틸)이고 및 B는 치환 또는 미치환 C1-C4알킬 (예를 들어, 메틸, 아미노알킬, 예를 들어, 아미노메틸 또는 아미노에틸, 알킬아미노, 예를 들어, 메틸아미노, 에틸아미노)이고, 바람직하게는 R1및 R4가 수소일 때, R3는 미치환 또는 치환된 페닐 미고 R5및 R6는 각각 알킬이다. B는 치환 또는 미치환 시클로알킬, 예를 들어, 시클로프로필 또는 1-아미노-시클로프로필일 수 있다 .바람직하게는, R3는 하나 이상의 치환체 (예를 들어, o-, m- 또는 p-클로로페닐, o-, m- 또는 p-플로로페닐)을 가질수 있다.
유익하게는, R3는 치환 또는 미치환 헤테로아릴로, 바람직하게는, R5및 R6가 각각 알킬일 때이다. 헤테로 아릴 기의 예는 피리딜, 피리미딜, 피리다지닌, 피라지닐, 피롤릴, 트기아졸릴, 티오아졸릴, 옥사졸릴, 옥사디아졸릴, 퓨라닐, 메틸렌디옥시페닐 및 티오페닐을 포함한다. 바람직하게는, R3는 2-피리딜, 3-피리딜, 4-피리딜, 2-피리미딜 또는 3-피리미딜이다.
바람직하게는, 일 구체예에서, R5및 R6각각은 수소이다. 다른 구체예에서, R5및 R6는 각각 메틸이다.
특히 바람직한 구체예에서, 본 발명의 데아자퓨린류는 예를 들어, 에스테라제 촉매 가수분해에 의해 생체내에서 활성 약물로 대사될 수 있는 수용성 전구 약물이다. 바람직하게는, 상기 전구약물은 -OC(O)(Z)NH2로 치환된 시클로알킬인 R2기를 포함하는 바, 상기 Z는자연적 또는 비자연적으로 발생하는 아미노산 또는 이의 유사체, α, β, γ 또는 ω 아미노산, 또는 디펩티드의 측쇄이다. 바람직한 아미노산 측쇄는 글리신, 알라닌, 발린, 루이신, 이소루이신, 리신, α-메틸알라닌, 아미노시클로프로판 카르복실 산, 아제티딘-2-카르복실 산, β-알라닌, γ-아미노부티르 산, 알라닌-알라닌 또는 글리신-알라닌을 포함한다.
특히 바람직한 구체예에서, Z는 글리신의 측쇄이고, R2는 시클로헥실이고,R3는 페닐이고, R5및 R6는 메틸이다.
다른 구체예에서, 상기 데아자퓨린은 4-(시스-3-히드록시시클로펜틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘이다.
다른 구체예에서, 상기 데아자퓨린은 4-(시스-3-(2-아미노아세톡시)시클로펜틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘 트리플루오로아세트산 염이다.
다른 구체예에서, 상기 데아자퓨린은 4-(3-아세트아미노)피페리디닐-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘이다.
다른 구체예에서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-N'-메틸우레아프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘이다.
다른 구체예에서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-아세트아미노부틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘이다.
다른 구체예에서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-N'-메틸우레아부틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘이다.
다른 구체예에서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-아미노시클로프로필아세트아미노에틸)아미노-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘이다.
다른 구체예에서, 상기 데아자퓨린은 4-(트랜스-4-히드록시시클로헥실)아미노-2-(3-클로로페닐)-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘이다.
다른 구체예에서, 상기 데아자퓨린은 4-(트랜스-4-히드록시시클로헥실)아미노-2-(3-플루오로페닐)-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘이다.
다른 구체예에서, 상기 데아자퓨린은 4-(트랜스-4-히드록시시클로헥실)아미노-2-(4-피리딜)-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘이다.
또 다른 구체예에서, 본 발명은 세포를 N-6 치환 7-데아자퓨린 (예를 들어, 바람직하게는 아데노신 수용체 길항체)와 접촉시킴으로써 세포내에서 아데노신 수용체 (예를 들어, A1, A2A, A2B또는 바람직하게는 A3)의 활성을 저해하는 방법을 특징으로 한다.
다른 관점에서, 본 발명은 동물에게 N-6 치환 7-데아자퓨린의 유효량을 투여함으로써 동물 (예를 들어, 인간)의 눈에 생긴 상해를 치료하는 방법을 특징으로 한다. 바람직하게는, N-6 치환 7-데아자퓨린은 동물 세포에서 A3아데노신 수용체의 길항체이다. 상기 상해는 망막 또는 시신경두에 있는 것이고 급성 또는 만성일 수 있다. 상기 상해는, 녹내장, 부종, 허혈, 저산소증 또는 상처의 결과일 수 있다.
바람직한 구체예에서, 본 발명은 상상한 식 (II)를 가지는 데아자퓨린을 특징으로하는 바,
X는 N 또는 CR6이고;
R1및 R2는 각각 독립적으로 수소 또는 치환 또는 미치환 알콕시, 아미노알킬, 알킬, 아릴, 또는 알킬아릴이거나, 둘 다가 수소는 아니라는 조건에서, 함께 치환 또는 미치환 헤테로시클릭 환을 형성하며;
R3는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴알킬 또는 아릴이고;
R4는 수소 또는 치환 또는 미치환 C1-C6알킬이고;
L은 수소, 치환 또는 미치환 알킬 또는 R4및 L이 서로 치환 또는 미치환 헤테로시클릭 또는 카르보시클릭 환을 형성하고;
R6는 수소, 치환 또는 미치환 알킬 또는 할로겐이고;
Q는 CH2, O, S 또는 NR7으로 여기서 R7은 수소 또는 치환 또는 미치환 C1-C6알킬이고; 및
W는 미치환 또는 치환 알킬, 시클로알킬, 아릴, 아릴알킬, 비아릴, 헤테로아릴, 치환 카르보닐, 치환 티오카르보닐 또는 치환 설포닐 인데, 상기에서, R3가 피롤리디노이라면, R4는 메틸이 아니라는 조건을 만족한다.
일 구체예에서, 식 (II)의 화합물에서, X는 CR6이고 및 Q는 CH2, O, S 또는 NH이다. 다른 구체예에서, X는 N이다.
식 (II)의 화합물의 다른 구체예에서, W는 치환 또는 미치환 아릴, 5- 또는 6-원자 헤테로아릴 또는 비아릴이다. W는 하나 이상의 치환체와 치환될 수 있다. 치환체의 예는: 할로겐, 히드록시, 알콕시, 아미노, 아미노알킬, 아미노카르목시아미드, CN, CF3, CO2R8, CONHR8, CONR8R9, SOR8, SO2R8, 및 SO2NR8R9를 포함하고, 여기서, R8및 R9은 각각 독립적으로 수소 또는 치환 또는 미치환 알킬, 시클로알킬, 아릴, 또는 아릴알킬이다. 바람직하게는, W는 치환 또는 미치환 페닐, 예를 들어, 메틸렌디옥시페닐일 수 있다. W는 또한 치환 또는 미치환 5-원자 헤테로아릴 환, 예를 들어, 피롤, 피라졸, 옥사졸, 이미다졸, 트리아졸, 테트라졸, 퓨란, 티오펜, 티아졸, 및 옥사디아졸일 수 있다. 바람직하게는, W는 6-원자 헤테로아릴 환, 예를 들어, 피리딜, 피리미딜, 피리다지닐, 피라지날 및 티오페닐 일 수 있다. 바람직한 구체예에서, W는 2-피리딜, 3-피리딜, 4-피리딜, 2-피리미딜, 4-피리미딜, 또는 5-피리미딜이다.
식 (II)의 화합물의 일 유용한 구체예에서, Q는 HN이고 W는 3-피라졸로 링으로서 이는 미치환 되거나 치환 또는 미치환 알킬, 시클로알킬, 아릴 또는 아릴알킬에 의해 N-치환된 것이다.
식 (II)의 화합물의 다른 구체예에서, Q는 산소이고 W는 2-티아졸로링으로서 이는 미치환되었거나 치환 또는 미치환 알킬, 시클로알킬, 아릴 또는 아릴알킬에 의해 치환된 것이다.
식 (II)의 화합물의 또 다른 구체예에서, W는 치환 또는 미치환 알킬, 시클로알킬, 예를 들어, 시클로펜틸 또는 아릴알킬이다. 치환체의 예는 할로겐, 히드록시, 치환 또는 미치환 알킬, 시크롤알킬, 아릴, 아릴알킬 또는 NHR10으로서 R10은 수소 또는 치환 또는 미치환 알킬, 시클로알킬, 아릴 또는 아릴알킬이다.
또 다른 구체예에서, 본 발명은 식 (II)의 데아자퓨린을 특징으로 하는 바, W는 -(CH2)a-C(=O)Y 또는 -(CH2)a-C(=S)Y이고, a 는 0 내지 3의 정수이고, Y 는 아릴, 알킬, 아릴알킬, 시클로알킬, 헤테로알킬, 알키닐, NHR11R12이거나, Q가 NH인 조건에서, OR13로서, 여기서 R11, R12및 R13은 각각 독립적으로 수소 또는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴, 아릴알킬, 또는 시클로알킬이다. 바람직하게는, Y는 5- 또는 6-원자 헤테로아릴 환이다.
더욱이, W는 -(CH2)b-S(=O)jY일 수 있고, 여기서, j 는 1 또는 2이고, b는 0, 1, 2, 도는 3이고, Y는 아릴, 알킬, 아릴알킬, 시클로알킬, 알키닐, 헤테로아릴, 또는 NHR14R15로서, b가 1일 때, Q는 CH2조건하에서이고, 상기에서 R14, R15및 R16은 각각 독립적으로 수소 또는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴, 아릴알킬 또는 시클로알킬이다.
또 다른 구체예에서, R3은 치환 또는 미치환 페닐, 피리딜, 피리미딜, 피리다지닐, 피라지날, 피롤릴, 트리아졸릴, 티아졸릴, 옥사졸릴, 옥사디아졸릴, 피라졸릴, 퓨라닐, 메틸렌디옥시페닐, 및 티오페닐로 구성되는 군으로부터 선택된다. R3가 페닐일 때, 그것은, 예를 들어, 히드록실, 알콕시 (예를 들어, 메톡시), 알킬 (예를 들어, 톨릴) 및 할로겐 (예를 들어, o-, m- 도는 p-플루오로페닐 또는 o-, m-, 도는 p-츨로로페닐)로 치환될 수 있다. 유리하게는, R3는 2-, 3- 또는 4-피리딜 또는 2- 또는 3-피리미딜일 수 있다.
본 발명은 또한 R6가 수소 또는 C1-C3알킬인 데아자퓨린에 관한 것이다. 바람직하게는 R6는 수소이다.
본 발명은 또한 R1이 수소이고 R2가 치환 또는 미치환 알킬 또는 알콕시, 치환 또는 미치환 알킬아민, 아릴아민, 또는 알킬아릴아민, 치환 또는 미치환 아미노알킬, 아미노 아릴, 또는 아미노알킬아릴, 치환 또는 미치환 알킬아미드, 아릴아미드 또는 알킬아릴아미드, 치환 또는 미치환 알킬설폰아미드, 아릴설폰아미드 또는 알킬아릴설폰아미드, 치환 또는 미치환 알킬우레아, 아릴우레아 또는 알킬아릴우레아, 치환 또는 미치환 알킬카르바메이트, 아릴카르바메이트 또는 알킬아릴카르바메이트, 또는 치환 또는 미치환 알킬카르복실 산, 알릴카르복실 산 또는 알킬카르복실 산인 데아자퓨린류를 포함한다. 바람직하게는, R2는 치환 또는 미치환 시클로알킬, 예를 들어, 모노- 또는 디히드록시-치환 시클로헥실 또는 시클로펜틸 (바람직하게는, 모노히드록시-치환 시클로헥실 또는 모노히드록시-치환 시클로펜틸)이다.
유용하게는, R2는 하기 식일 수 있다:
상기 식에서, A는 C1-C6알킬, C3-C7시클로알킬, 일 내지 일곱 개 원자의 사슬, 또는 삼 내지 일곱 개 원자의 환으로서, 선택적으로 C1-C6알킬, 할로겐류, 히드록실, 카르복실, 티오 또는 아미노 기로 치환되며;
B는 메틸, N(Me)2, N(Et)2, NHMe, NHMe, NHEt, (CH2)rNH3+, NH(CH2)rCH3,(CH2)rNH2, (CH2)rCHCH3NH2, (CH2)rNHMe, (CH2)rOH, CH2CN, (CH2)mCO2H, CHR18R19, 또는 CHMeOH로서, 상기에서, r은 0 내지 2의 정수이고, m은 1 또는 2이고, R18은 알킬이고, R19는 NH3 +또는 CO2H이고 또는 R18및 R19는 함께을 형성하고, 여기서 p는 2 또는 3이고; 및
R17은 C1-C6알킬, C3-C7시클로알킬, 하나 내지 일곱 개 원자의 사슬, 또는 삼 내지 일곱 개 원자의 환으로, 선택적으로 C1-C6알킬, 할로겐류, 히드록실, 카르복실, 티오 또는 아미노 기로 치환된 것이다.
유용하게는, A는 치환 또는 미치환 C1-C6알킬이다. B는 치환 또는 미치환 C1-C6알킬일 수 있다.
바람직한 구체예에서, R2는 식 -A-NHC(=O)B이다. 특히 유용한 구체예에서, A는 -CH2CH2-이고 및 B는 메틸이다.
본 발명의 화합물은 예를 들어, 에스테라제 촉매 가수분해에 의해 생체내에서 활성 약물로 대사되는 수용성 전구 약물을 포함할 수 있다. 가능한 전구 약물의 예는 예를 들어, -OC(O)(Z)NH2로 치환된 시클로알킬로서 R2를 가진 데아자퓨린을 포함하며, 상기 식에서, Z는 자연적 또는 비자연적으로 발생하는 아미노산 또는 이의 유사체, α, β, γ 또는 ω 아미노산, 또는 디펩티드의 측쇄이다. 바람직한 아미노산 측쇄는 글리신, 알라닌, 발린, 루이신, 이소루이신, 리신, α-메틸알라닌, 아미노시클로프로판 카르복실 산, 아제티딘-2-카르복실 산, β-알라닌, γ-아미노부티르 산, 알라닌-알라닌 또는 글리신-알라닌을 포함한다.
다른 구체예에서, R1및 R2는 함께을 형성하는 바,
상기 식에서 n은 1 또는 2이고 및 상기식에서 상기 환은 선택적으로 하나 이상의 히드록실, 아미노, 티올, 카르복실, 할로겐, CH2OH, CH2NHC(=O)알킬 또는 CH2NHC(=)NH 알킬 기에 의해 치환될 수 있다. 바람직하게는 n은 1 또는 2이고 상기 환은 -NHC(+O) 알킬로 치환된다.
하나의 유용한 구체예에서, R1은 수소이고, R2는 치환 또는 미치환 C1-C6알킬이고, Q는 O, S 또는 NR7으로서, R7은 수소 또는 치환 또는 미치환 C1-C6알킬이고, 및 W는 치환 또는 미치환 아릴이다. 바람직하게는, R2는 -A-NHC(=O)B이고, 여기서 A 및 B는 각각 독립적으로 치환 또는 미치환 C1-C4알킬이다. 예를 들어, A 는 CH2CH2일 수 있다. B는, 예를 들어, 알킬 (예를 들어, 메틸), 또는 아미노알킬 (예를 들어, 아미노메틸)일 수 있다. 바람직하게는, R3는 미치환 페닐이고 L은 수소이다. R6는 메틸일 수 있고 바람직하게는 수소이다. 바람직하게, Q는 O, S 또는 NR7으로서, 여기서 R7은 수소 또는 치환 또는 미치환 C1-C6알킬, 예를 들어, 메틸이다.W는 치환 또는 미치환 페닐 (예를 들어, 알콕시, 할로겐 치환된)이다. 바람직하게는 W는 p-플루오로페닐, p-클로로페닐, 또는 p-메톡시페닐이다. W는 또한 헤테로아릴, 예를 들어, 2-피리딜일 수 있다.
특히 바람직한 구체예에서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-아세틸아미노에틸아미노-6-페녹시메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘이다.
특히 바람직한 다른 구체예에서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(4-플루오로페녹시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘이다.
특히 바람직한 다른 구체예에서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(4-클로로페녹시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘이다.
특히 바람직한 다른 구체예에서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(4-메톡시페녹시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘이다.
특히 바람직한 다른 구체예에서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(2-피리딜옥시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘이다.
특히 바람직한 다른 구체예에서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노6-(N-페닐아미노)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘이다.
특히 바람직한 다른 구체예에서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(N-메틸-N-페닐아마노)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘이다.
특히 바람직한 다른 구체예에서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-N'-메틸우레아에틸)아미노-6-페녹시메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물로 세포를 접촉시킴으로써 세포에서 아데노신 수용체 (예를 들어, A2b이신 수용체)의 활성을 저해하는 방법에 관한 것이다. 바람직하게는, 상기 화합물은 상기 수용체의 길항체이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 (예를 들어, A2b의 길항체)의 유효량을 동물에 투여함으로써 동물에서 위장 질환 (예를 들어, 설사)을 치료하는 방법에 관한 것이다. 바람직하게는 상기 동물은 인간이다.
또 다른 구체예에 있어서, 본 발명은 본 발명의 N-6 치환 7-데아자퓨린 및 약학적 허용 담체를 함유한 약학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 동물에 본 발명의 데아자퓨린을 치료적 유효량 투여하여 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태의 치료가 그 동물에서 일어나게 하는 동물에서의 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태를 치료하는 방법에 관한 것이다. 유용하게는, 이러한 질환 상태는 아데노신에 의해 매개될 수 있다. 바람직한 질병 상태의 예는, 중추신경계 질환, 심혈관 질환, 망막 질환, 염증성 질환, 알레르기성 질환, 위장성 질환, 안과 질환 및 호흡기 질환을 포함한다.
용어 "알킬"은 직쇄 알킬 기, 분지 알킬기, 시클로알킬(알리시클릭) 기, 알킬 치환 시클로알킬기 및 시클로 알킬 치환 알킬 기를 위시한 포화 지방족 기의 부분을 가르킨다. 용어 알킬은 탄화수소 백분 상의 하나 이상의 탄소를 대체하는 산소, 질소, 황 또는 인 원자를 더 포함할 수 있는, 알킬 기이다. 바람직한 구체예에서, 직쇄 또는 분지 알킬은 백본 상에 30 이하의 탄소 원자를 가지며 (예를 들어, C1-C30직쇄, C3-C30분지사슬), 및 더욱 바람직하게는 20 이하의 탄소 원자를 가진다. 유사하게, 바람직한 시클로알킬은 환 구조물에 4-10 개 탄소 원자를 가지며, 더 바람직하게는, 5, 6 또는 7개 탄소를 가진다.
또한, 본 명세서 및 청구범위에 걸쳐 사용된 용어 알킬은 "미치환 알킬" 및 "치환 알킬"을 포함하는 것으로 의도되며, 후자는 탄화수소 백본의 하나 이상의 탄소상에 있는 수소를 치환하는 치환체를 가지는 알킬 분체를 뜻한다. 그러한 치환체는, 예를 들어, 할로겐, 히드록실, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 알콕시카르보닐, 아릴녹시카르보닐옥시, 카르복실레이트, 알킬카르보닐, 알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 알킬티오카르보닐, 알콕실, 포스페이트, 포스포나토, 포스피나토, 시아노, 아미노 (알킬 아미노, 디알킬아미노, 아릴아미노, 디아릴아미노, 및 알킬아릴아미노를 위시한), 아실아미노 (알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 카바모일 및 우레이도을 위시한), 아미디노, 이미노, 설피드릴, 알킬티오, 아릴티오, 티오카르복실레이트, 설페이트, 설포나토, 설파모일, 설폰아미도, 니트로, 트리플루오로메틸, 시아노, 아지도, 헤테로시클릴, 알킬아릴, 또는 방향족 또는 헤테로아로마틱 분체를 포함할 수 있다. 당해 분야의 숙련자에게는 탄화수소 사슬상에 치환된 분체 자체가 적절하게 치환 될 수 있다는 것은 명백한 일이다. 시클로알킬은 예를 들어, 상술한 치환체로 더 치환될 수 있다. "알킬아릴" 분체는 아릴로 치환된 알킬 (예를 들어, 페닐메틸(벤질))이다. 용어 "알킬"은 또한 길이에서 유사하며 상술한 알킬류로 치환이 가능한 불포화 지방족 기로서, 그러나, 적어도 하나의 이중 또는 삼중 결합을 각각 가지는 것을 포함한다.
본 명세서에서 사용된바와 같이, 용어"아릴"은 0 내지 4개의 이종원자를 포함할 수 있는 5- 및 6-원자 단일환 방향족 기, 예를 들어, 벤젠, 피롤, 퓨란, 티오펜, 이미다졸, 벤족사졸, 벤조티아졸, 트리아졸, 테트라졸, 피라졸, 피리딘, 피라진, 피리다진 및 피리미딘 등을 위시한, 아릴 기를 의미한다. 아릴 기는 또한 나프틸, 퀴놀릴, 인돌릴 등과 같은 폴리시클릭 융합 방향족 기를 포함한다. 환 구조체에 이종원자를 가지는 그러한 아릴 기는 또한 "아릴 헤테로사이클", "헤테로아릴" 또는 "헤테로아로마틱"으로 칭하여진다. 상기 방향족 환은 하나 이상의 고리 위치에서, 상술한 바와 같은 그러한 치환체, 예를 들어, 할로겐, 히드록실, 알콕시, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 알콕시카르보닐옥시, 아릴옥시카르보닐옥시, 카르복실레이트, 알킬카르보닐, 알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 알킬티오카르보닐, 포스페이트, 포스포나토, 포스피나토, 시아노, 아미노 (알킬 아미노, 디알킬아미노, 아릴아미노, 디아릴아미노, 및 알킬아릴아미노를 위시한), 아실아미노 (알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 카바모일 및 우레이도을 위시한), 아미디노, 이미노, 설피드릴, 알킬티오, 아릴티오, 티오카르복실레이트, 설페이트, 설포나토, 설파모일, 설폰아미도, 니트로, 트리플루오로메틸, 시아노, 아지도, 헤테로시클릴, 알킬아릴, 또는 방향족 또는 헤테로아로마틱 분체와 같은 치환체로 치환될 수 있다 아릴 기는 또한 방향족이 아닌 알리시클릭 또는 헤테로시클릭 환과 융합 또는 브릿지되어 폴리사이클 (예를 들어, 테트랄린)을 형성한다.
용어 "알케닐" 및 "알키닐"은 길이에서 유사하고 상술한 알킬로 치환이 가능한 불포화 지방족 기를 지칭하는 것으로 그러나, 적어도 하나의 이중 또는 삼중 결합을 각각 가진다. 예를들어, 본 발명은 시아노 및 프로파길 기를 사용한다.
탄소수가 특별히 정해지지 않으면, 본 명세서에 사용된 "저급 알킬"은 하나 내지 열 개의 탄소를 가지는, 더 바람직하게는 백본 구조에 하나 내지 여섯 개 탄소 원자, 더더욱 바람직하게는 백본 구조에 하나 내지 세 개의 탄소 원자를 가지는 알킬 기를 의미한다. 유사하게, "저급 알케닐" 및 "저급 알키닐"은 유사 사슬 길이를 가진다.
용어 "알콕시알킬", "폴리아미노알킬" 및 "티오알콕시알킬"은 상술한 바와 같이 알킬 기를 치칭하며, 이는 탄화수소 백본의 하나 이상의 탄소를 대신하면서, 산소, 질소 또는 황 원자를 더 포함한다.
용어 "폴리시클릴" 또는 "폴리시클릭 라디칼"은 두 개 이상의 시클릭 환 (예를 들어, 시클로알킬류, 시클로알케닐류, 시클로알키닐류, 아릴류 및/또는 헤테로시클릴류)의 라디칼로서, 두 개 이상의 탄소가 두 개의 인접 환에 공통되는 것, 즉, 고리들이 "융합된 고리들"인 것을 지칭한다. 비-인접 원자를 통해 연결된 고리들을 "브릿지화"된 고리라 칭한다. 폴리사이클 고리 각각은 상술한 바와 같이, 할로겐, 히드록실, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 알콕시카르보닐, 아릴옥시카르보닐옥시, 카르보닐레이트, 알킬카르보닐, 알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 알킬티오카르보닐, 알콕실, 포스페이트, 포스포나토, 포스피나토, 시아노, 아미노 (알킬 아미노, 디알킬아미노, 아릴아미노, 디아릴아미노, 및 알킬아릴아미노를 위시한), 아실아미노 (알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 카바모일 및 우레이도을 위시한), 아미디노, 이미노, 설피드릴, 알킬티오, 아릴티오, 티오카르복실레이트, 설페이트, 설포나토, 설파모일, 설폰아미도, 니트로, 트리플루오로메틸, 시아노, 아지도, 헤테로시클릴, 알킬아릴, 또는 방향족 또는 헤테로아로마틱 분체와 같은 치환체로 치환될 수 있다.
본 명세서에서 사용된 용어 "이종 원자"는 탄소 또는 수소외에 임의의 다른 원소의 원자를 의미한다. 바람직한 이종 원자는 질소, 산소, 황 및 인이다.
용어 "아미노 산"은 단백질에서 자연적 또는 비자연적으로 발생하는 아미노산, 예를 들어, 글리신, 알라닌, 발린, 시스테인, 루이신, 이소루이신, 세린, 트레오닌, 메티오닌, 글루탐 산, 아스파트 산, 글루타민, 아스파라긴, 리신, 아르기닌, 프롤린, 히스티딘, 페닐알라닌, 티로신, 및 트립토판을 포함한다. 아미노산 유사체는 적절한 관능기를 가진 연장된 또는 짧아진 측쇄 또는 다양한 측쇄를 가지는 아미노산을 포함한다. 또한, 아미노산은 아미노산의 구체가 입체이성체성 형태일 때, 아미노산의 D 및 L 입체이성체를 포함한다. 용어 "디펩티드"는 서로 연결된 두 개 이상의 아미노산을 포함한다. 바람직하게는, 디펩티류는 펩티드 연결을 통해 연결된 두 개 아미노산이다. 특히 바람직한 디펩티드류는, 예를 들어, 알라닌-알라닌 또는 글리신-알라닌을 포함한다.
본 발명의 화합물 일부의 구조는 비대칭적 탄소 원자를 포함하는 것임을 언급한다. 따라서, 특별한 언급이 없는 한, 그러한 비대칭으로부터 일어나는 이성체 (예를 들어, 모두 거울상 이성체 및 부분입체 이성체)는 본 발명의 범위에 속하는 것으로 이해되어야 할 것이다. 그러한 이성체는 전통적인 분리 기술 및 입체화학적으로 조절된 합성에 의해 상당히 순수한 형태로 얻어질 수 있다.
본 발명은 또한 포유동물에서 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태, 예를 들어, 호흡기 질환 (예를 들어, 천식, 기관지염, 만성 장애 폐질환 및 알레르기성 비염), 망막 질환, 위장관 질환, 및 안과 질환을 치료하는 약학 조성물에 관한 것이다. 상기 약학 조성물은 상술한바, N-6 치환 7-데아자퓨린의 치료적 유효량 및 약학 허용 담체를 포함한다. 상술한 모든 데아자퓨린은 치료적 처치를 위해 포함된다는 것으로 이해되어야 한다. 또한, 본 발명의 데아자퓨린류는 단독 또는 본 발명의 다른 데아자퓨린과 조합하여, 또는 부가적인 치료 화합물, 예를 들어, 항생제, 항염증제 또는 항암제와 같이 조합하여 사용될 수 있음이 이해되어야 한다.
용어 "항생제"는 당해 분야에 인지되어 있으며, 및 병원균의 성장을 제거하거나 저해하며 병원균에 선택적으로 유독하나 감염된 숙주 대상에 대해서는 최소의 독 또는 무독 한 효과를 나타내는, 미생물을 성장시킴으로써 제조된 그러한 물질 및 이의 합성 유도체를 포함하는 것으로 의도된다. 항생제의 적절한 예는, 아미노글리코시드, 세팔로스포린류, 클로람페니콜, 퓨시드 산, 마크롤리드, 페니실린, 폴리믹신, 테트라시클린 및 스트렙토마이신의 기분 군을 포함하지만 이에 한정되지 않는다.
용어 "항염증제"는 당해 분야에 인식되어 있고, 염증의 원인 물질, 예를 들어, 글루코코르디코이드, 아스피린, 이부프로펜, NSAIDS 등을 직접적으로 길항하지 않고 몸체 메커니즘 상에 작용하는 그러한 제제를 포함하는 것으로 의도된다.
용어 "항암제"는 당해분야에 공지되어 있고, 바람직하게는 다른 생리적 기능에 역영향을 주지않고, 암세포의 성장을 감소, 제거 또는 방지하는 그러한 제제를 포함하는 것으로 의도된다. 대표적인 예는 시스플라틴 및 시클로포스파아미드를 포함한다.
본 발명의 화합물이 약제물로서 인간 및 포유동물에 투여될 때, 그것들은 그 자체로서 주어지거나, 예를 들어, 활성 성분을 0.1 내지 99.5 % (더욱 바람직하게는 0.5 내지 90 %)를 약학적 허용 담체와 조합하여 함유하는 약학 조성물로 주어진다.
본 명세서에서 사용된 구절 "약학적 허용 담체"는 액체, 고체 충진제, 희석제, 부형제, 용매 또는 캡슐화 물질과 같이, 본 발명의 화합물을 대상체 내로 또는 대상체로 운반 또는 전달하여, 그 화합물이 의도된 기능을 수행하도록 하게하는, 약학적 허용 물질, 조성물, 매개물을 의미한다. 전형적으로, 그러한 화합물은 몸체의 한 기관 또는 부분으로부터 몸체의 다른 기관 또는 부분으로 운반 또는 전달된다. 그러한 담체는 제제의 다른 성분과 양립하며 환자에 해롭지 않아야 한다는 의미에서 "허용 가능"해야만 한다. 약학적 허용 담체로서 기능할 수 있는 물질의 몇가지 예는; 락토즈, 글루코즈 및 수크로즈와 같은 설탕류; 옥수수 전분 및 감자 전분 같은 전분류; 소듐 카르복실메틸 셀룰로즈, 에틸 셀룰로즈 및 셀룰로즈 아세테이트와 같은 셀룰로즈 및 이의 유도체; 분말화된 트라가간트; 맥아; 젤라틴; 탈크; 코코아 버터 및 좌약 왁스와 같은 부형제; 땅콩유, 면화씨 오일; 잇꽃유, 참깨유, 올리브유, 옥수수유 및 대두유같은 오일류; 프로글리콜과 같은 글리콜류; 글리세린, 소르비톨, 만니톨 및 폴리에틸렌 글리콜과 같은 폴리올류; 에틸 올리에이트 및 에틸 라우레이트와 같은 에스테르류; 수산화 마그네슘 및 수산화 알루미늄과 같은 완충제; 알긴 산; 무균수; 생리등장액; 링거액; 에틸 알콜; 포스페이트 완충액; 및약학 제제에 사용되는 다른 비독성, 친화성 물질을 포함한다.
전술한 바와 같이, 본 발명의 특정 구체예는 아미노 또는 알킬아미노과 같은 염기성 관능기를 포함할 수 있고, 따라서 약학 허용 산으로 약학 허용 염을 형성할 수 있다. 이것과 관련해서, 용어 "약학 허용 염"은 본 발명의 화합물의 상대적으로 비독성적인 무기 및 유기 산 첨가 염을 가르킨다. 이러한 염은 본 발명의 화합물을 최종적으로 분리 및 여과하는 동안 또는 본 발명의 정제된, 무염기 형태로 있는 화합물을 적절한 유기 또는 무기산과 반응시키고 그 결과 생성된 염을 분리함으로써 그 자리에서 생성될 수 있다. 대표적인 염은 취화 수소, 염화 수소, 설페이트, 비설페이트, 포스페이트, 나이트레이트, 아세테이트, 발러레이트, 올리에이트, 팔미테이트, 스테아레이트, 라우레이트, 벤조에이트, 락테이트, 포스페이트, 토실레이트, 시트레이트, 말러레이트, 퓨마레이트, 석시네이트, 타르타레이트, 나프틸레이트, 메실레이트, 글루코헵토네이드, 락토비오네이트 및 라우릴설포네이트 염 등을 포함한다 (참조, Berge 등 (1997) "Pharmaceutical Salts", J. Pharm Sci. 66:1-19).
다른 경우에 있어서, 본 발명의 화합물들은 하나 이상의 관능기를 포함할 수 있고, 따라서 약학적 허용 염기와 약학적 허용 염을 형성할 수 있다. 이 경우, 용어 "약학적 허용 염"은 본 발명의 화합물의 상대적으로 비독성인, 무기 및 유기 염기 첨가 염을 가르킨다. 이러한 염은 화합물의 최종 분리 및 정제동안, 또는 유리 산 형태로 있는 정제된 화합물을, 약학 허용 금속 양이온의 수산화물, 탄산염 또는 중탄산염과 같이 적절한 염기와 반응시키거나 약학적 허용 유기, 일급, 이급 또는삼급 아민과 반응시킴으로써 그대로 제조된다. 대표적인 알카리 또는 알카리 토금속 염은 리튬, 소듐, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 및 알루미늄 염 등을 포함한다. 염기 첨가 염 형성에 유용한 대표적인 유기 아민류는 에틸아민, 디에틸아민, 에틸렌디아민, 에탄올아민, 디에탄올아민, 피페라진 등을 포함한다.
용어 "약학적 허용 에스테르류"는 본 발명의 화합물의 상대적으로 비독성인, 에스테르화된 산물을 지칭한다. 이러한 에스테르류는 화합물을 최종적인 분리 및 정제화하는 동안에 또는 유리 산 형태로 있는 정제된 화합물 또는 히드록시를 적절한 에스테르하 제제와 반응시킴으로써 그대로 제조될 수 있다. 카르복실산을 촉매 존재하에서 알콜로 처리함으로써 에스테르로 전환시킬 수 있다. 히드록실 함유 유도체들을 알카노일 할로겐화물과 같은 에스테르화 제제로 처리하여 에스테르류로 전환시킬 수 있다. 이 용어는 생리적 조건하에서 용매화될 수 있는 저급 탄화수소 기, 예를 들어, 알킬 에스테르류, 메틸, 에틸 및 프로필 에스테르류를 포함하는 것으로 의도된다 (참조, 예를 들어, Berge 등, 상기 문헌).
본 발명은 생체내에서 본 발명의 치료 화합물로 전환되는 전구 약물의 사용에 대한 것이다 (참조, 예를 들어, R.B. Silverman, 1992, "The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action", Academic Press, Chp. 8). 그러한 전구약물을 사용하여 치료 화합물의 생체 분포 (예를 들어,프로테아제의 반응 부위로 들어가지 않게 되게) 또는 약물동력학 성질을 변경할 수 있다. 예를 들어, 카르복실 산 기는, 예를 들어, 메틸 기 또는 에틸기를 사용하여 에스테르화 함으로써 에스테르를 생성할 수 있다. 이 에스테르가 대상체에 투여될 때, 에스테르는 효소적으로 또는비효소적으로, 환원적으로 또는 가수분해적으로 절단되어 음이온성 기을 나타낸다. 음이온성 기는 분체 (예를 들어, 아실옥시메틸 에스테르류)와 에스테르되며 절단되어 중간 화합물을 나타내고 이는 다시 분해되어 활성 화합물을 생성한다. 다른 구체예에서, 상기 전구약물은 설페이트 또는 설포네이트의 환원 형, 예를 들어, 티올이며, 이는 생체내에서 치료 화합물로 산화된다. 더욱이, 음이온성 분체는 어떤 기로 에스테르화될 수 있고 이는 활성적으로 생체내에서 전달되거나 대상 기관에 의해서 선택적으로 흡수되어진다. 상기 에스테르를 선택하여 치료 분체가, 담체 분체에 대하여 후술하는 바와 같이, 특정 반응 부위로 특이적으로 타겟화하게 할 수 있다.
습윤 제제, 유화제 및 윤할제, 예를 들어, 소듐 라우릴 설페이트 및 마그네슘 스테아레이트, 는 물론 착색제, 방출제, 코팅제, 감미제, 향료제, 및 방향제, 방부제 및 항산화제를 상기 조성에 사용할 수 있다.
약학적 허용 항산화제의 예는; 아스코브 산, 시스테인 히드로클로라이드, 소듐 비설페이트, 소듐 메타비설파이트, 소듐 설파이트, 등과 같은 수용성 항산화제; 아스코빌 팔미테이트, 부틸레이티드 히드록시아니솔 (BHA), 부틸레이티드 히드록시톨루엔 (BHT), 레시틴, 프로필 갈레이트, α-토코페롤 등과 같은 지용성 항산화제; 및 시트르산, 에틸렌디아민 테트라아세트 산 (EDTA), 소르비톨, 타르타르 산, 인산 등과 같은 메탈 킬레이팅 제제를 포함한다.
본 발명의 제형은 경구, 비강, 국소, 경피, 구강, 설하, 직장, 질 및/또는 비경구 투여에 적합한 것들을 포함한다. 상기 제형은 편의상 단위 투여 형태로 제공될 수 있고 조제 분야에 공지된 의의 방법으로 만들 수 있다. 단일 투여 형태를 만들기 위해 담체 물질과 혼합할 수 있는 활성 성분의 양은 일반적으로 치료 효과를 나타내는 화합물의 양이 될 것이다. 일반적으로, 이러한 양은, 100 퍼센트중에서, 활성성분의 1 퍼센트에서 99 퍼센트 범위이고, 바람직하게는 약 5 퍼센트 내지 70 퍼센트, 더욱 바람직하게는 약 10 퍼센트 내지 30 퍼센트 범위이다.
이러한 제형 및 조성물을 제조하는 방법은 본 발명의 화합물을 담체와 함께, 선택적으로 하나 이상의 보조 성분과 혼합하는 단계를 포함한다. 일반적으로, 상기 제형들은 본 발명의 화합물을 액체 담체 또는 미세하게 분쇄된 고형 담체, 또는 둘다와 함께 균일하고도 섬세하게 혼합시킨 다음, 필요한 경우 산물을 제형함으로써 제조된다.
경구 투여에 적합한 본 발명의 제형은 캡슐, 카세제 (cachets), 알약, 정제, 로젠지 (lozenge) (향료된 기본물질, 통상 수크로즈 및 아카시아 또는 트라가칸스), 분말, 과립의 형태로 또는 수성 또는 비 수성액내의 용액 또는 현탁액으로, 또는 수중유 (oil-in-water) 또는 유중수 (water-in-oil) 에멀젼으로, 또는 정제 (pastille) (젤라틴 및 글리세린, 또는 수크로즈 및 아카시아와 같은 비활성 기본 물질을 사용하여)로서, 및/또는 구강 세척제 등으로서 존재할 수 있고, 각각의 제형은 활성 성분으로서 본 발명의 화합물의 소정량을 함유한다. 본 발명의 화합물은 또한, 큰 알약 (bolus), 연약 (electuary) 또는 페이스트로서 투여될 수 있다.
경구 투여용 고형 투여 형태에서 (캡슐, 정제, 알약, 당의정, 분말,과립등), 활성 성분을 소듐 사이트레이드나 디칼슘 포스페이트 및/또는 하기 중 임의의 것과 같은 하나 이상의 약학 허용 담체와 혼합한다: 예를 들어, 전분, 락토즈, 수크로즈, 글루코즈, 만니톨 및/또는 실릭 산등과 같은 충전제 또는 부가제; 예를 들어, 카르복시메틸셀룰로즈, 알지네이트, 젤라틴, 폴리비닐 피롤리돈, 수크로즈 및/또는 아카시아와 같은 충전제 결합제; 글리세롤과 같은 흡습제; 아가-아가, 칼슘 카보네이트, 감자 또는 타피오카 전분, 알긴 산, 임의의 실리케이트 및 소듐 카보네이트 등과 같은 붕해제; 파라핀과 같은 용액 지연제; 4금 알모늄 화합물과 같은 흡수 촉진제; 예를 들어, 세틸 알콜 및 글리세롤 모노스테아레이트와 같은 습윤제; 카올린 및 벤토나이트 점토와 같은 흡수제; 탈크, 칼슘 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 고형 폴리에틸렌 글리콜, 소듐 라우릴 설페이트 및 이의 혼합물과 같은 윤할제; 및 착색제. 캡슐, 정제 및 알약의 경우, 약학적 조성물은 또한 완충제를 포함한다. 유사 형태의 용액 조성물은 락토즈 또는 젓당과 같은 부형제는 물론, 고 분자량 폴리에틸렌 글리콜 등을 사용하는 연질 및 경질-충진 젤라틴 캡슐내의 충전제로서 사용될 수 있다.
정제는 선택적으로 하나 이상의 보조 성분과 같이 압축 또는 성형함으로써 만들 수 있다. 압축된 정제는 결합제 (예를 들어, 젤라틴 또는 히드록시프로필 메틸 셀룰로즈), 윤활제, 비활성 희석제, 방부제, 붕해제 (예를 들어, 소듐 스타치 글리콜레이트 또는 가교된 소듐 카르복시메틸 셀룰로즈), 표면 활성 또는 분산제를 사용하여 만들 수 있다. 성형된 정제는 습윤된 화합물 분말과 안정한 액체 희석제의 혼합물을 적절한 기계에서 성형함으로써 만들 수 있다.
본 발명의 약학 조성물의 정제 및 다른 고형 두여 형태, 예를 들어, 당의정, 캡슐, 알약 및 과립은 장용성제피 (enteric coating) 및 약학 제조 분야에 공지된 다른 코팅물과 같은 외피 및 껍질로 제조될 수 있다. 이들은 또한 예를 들어, 히드록시프로필메틸 셀룰로즈, 다른 폴리머 매트릭스, 리포좀 및/또는 소구체를 사용하여 활성 물질을 다양한 비율로 서서히 또는 조절되게 방출하도로 제형되어 바람직한 방출 양상을 나타낼 수 있다. 이들은, 예를 들어, 박테리아-견제 필터를 통하는 여과 방법으로써 또는 소독수에 용해될 수 있는 소독 고형 조성물의 형태로 소독제를 투입시키거나 또는 사용직전에 어떤 다른 소독 조사매개물을 투입시킴으로써 소독될 수 있다. 이러한 조성물들은 선택적으로 불투명화제를 함유할 수 있고 활성물질만 또는 바람직하게는 위장과의 특정 부분에서, 선택적으로는 지연 방식으로 방출하는 조성물일 수 있다. 사용할 수 있는 포매 (embedding) 조성물의 예는 중합체성 물질 및 왁스를 포함한다. 활성 성분은 또한, 적절하다면, 하나 이상의 상기 부형제와 같이 미소-캡슐 형태로 있을 수 있다.
본 발명의 화합물의 경구 투여용 액체 투여 형태는 약학적 허용 에멀젼, 마이크로에멀젼, 용액, 현탁액, 시럽 및 엘릭서 (elixir)를 포함한다. 활성 성분외에, 상기 액체 투여 형태는 비활성 당해 분야에 공통적으로 사용되는 희석제, 예를 들어, 물 또는 다른 용매, 가용제, 및 유화제, 예를 들어, 에틸 알콜, 이소프로필 알콜, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 오일류 (특히, 면화씨, 낙화생, 옥수수, 배 (germ), 올리브, 피마자 및 참깨 유), 글리세롤, 테트라히드로퓨릴 알콜, 폴리에틸렌 글리콜류 및 소르비탄의 지방산 에스테르 및 이의 혼합물을 포함할 수 있다.
비활성 희석제 외에, 경구 조성물은 또한 습윤제, 유화 및 현탁제, 감미제, 풍미제, 착색제, 향료제 및 방부제와 같은 보조제를 포함할 수 있다.
상기 활성 화합물에 더하여, 현탁액은 예를 들어, 에톡실화된 이소스테아릴 알콜류, 폴리옥시에틸렌 소르비톨과 소르비탄 에스테르류, 미소결정성 셀룰로즈, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가-아가 및 트라가칸스, 및 이의 혼합물과 같은 현탁액을 포함할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물의 직장 및 질내 투여용 제형은 좌약 형태로 제공될 수 있고, 이는 본 발명의 하나 이상의 화합물을, 예를 들어, 코코아 버터, 폴리에틸렌 글리콜, 좌약 왁스 또는 살리실레이트를 포함하는 하나 이상의 적절한 비자극 부형제 또는 담체와 같이 혼합하여 제조될 수 있고, 실온에서는 고형이지만 체온에서는 액형이며, 따라서, 항문 또는 질내 강에서 용해되며 활성 화합물을 방출한다.
질내 투여에 적절한 본 발명의 제형은 또한 당해 분야에 적절한 것으로 공지된 담체와 같은 것을 함유하는 페사리, 탐폰, 크림, 젤, 페이스트, 거품 또는 스프레이 제형을 포함한다.
본 발명의 화합물을 국소 또는 경피 투여하는 투약 형태는 분말, 스프레이, 연고, 페이스트, 크림, 로션, 젤, 용액, 패치 및 흡입물을 포함한다. 활성 화합물은 약학 허용 담체와 멸균 조건하에서 및 필요하다면, 임의의 방부제, 완충제 또는 촉진제와 같이 혼합될 수 있다.
상기 연고, 페이스트, 크림 및 젤은, 본 발명의 활성 성분외에, 부형제, 예를 들어, 동물 및 식물 지방, 오일, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸스, 셀룰로즈 유도체, 폴리에틸렌 글리콜류, 실리콘류, 벤토나이크류, 실릭 산, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다.
분말 및 스프레이는, 본 발명의 화합물에 더하여, 락토즈, 탈크, 실릭 산, 수산화 알루미늄, 칼슘 실리케이트 및 폴리아미드 분말, 또는 이들 물질의 혼합물과 같은 부형제를 포함할 수 있다. 스프레이는 추가로 통상적인 촉진제, 예를 들어, 클로로플루오로탄화수소류 및 휘발성 미치환 탄화수소류, | 부탄 및 프로판을 포함할 수 있다.
경피 패치는 몸체에 본 발명의 화합물을 조절적으로 전달하는 것을 제공하는 추가의 장점을 지닌다. 그러한 투약 형태는 적절한 매체에서 화합물을 용해 또는 분산시킴으로써 만들어 질 수 있다. 흡수 증진제를 또한 사용하여 피부를 통하여 상기 화합물의 투과량을 증진할 수 있다. 그러한 투과량의 비율은 속도 조절막을 제공하거나 활성 화합물을 폴리머 매트릭스 또는 젤에 분산시킴으로써 조절될 수 있다.
안과 제형, 안연고, 분말, 용액 등이 또한 본 발명의 범위 내에 있는 것으로 고려된다. 바람직하게는, 약학 제조물은 안과 제형 (예를 들어, 눈주위, 구후 또는 내안 (intraocula) 주사 제형, 전신성 제형,또는 외과적 세척액)이다. 다양한 운반체가 사용될 수 잇다. 이 운반체는 기본적으로 수용성이다. 제형의 경우는 물론 문제의 눈에 용액을 한 두 방울 떨어뜨림으로써 조성물을 용이하게 투여하는 환자 능력을 고려할 때, 수용액이 일반적으로 바람직하다. 그러나, 본 발명의 데아자퓨린류는 다른 유형의 조성물, 예를 들어, 현탁액, 점성 또는 반점성 젤 또는 다른 유형의 고형 또는 반고형 조성물로 용이하게 투입될 수 있다. 본 발명의 안과 조성물은 또한 다양한 다른 성분, 예를 들어, 완충제, 방부제, 공-용매 및 점증제를 포함할 수 있다.
적절한 버퍼 시스템(예, 인산나트륨, 아세트산나트륨 또는 붕산나트륨)을 가하여 저장 조건하에서 pH 변화를 방지할 수 있다.
안과용 생성물은 전형적으로 다회 투여 형태로 포장된다. 사용동안에 세균오염을 방지하기 위해서는 보존제가 필요하다. 적당한 보존제에는 염화벤즈알코늄, 티메로살, 클로로부탄올, 메틸파라벤, 프로필파라벤, 페닐에틸알코올, 에데트산이나트륨, 소르브산, 폴리쿼터늄-1, 또는 본 기술분야의 숙련자에게 공지된 다른 시약이 있다. 그러한 보존제는 전형적으로 0.001 내지 1.0 % 중량/부피("% w/v") 수준에서 사용된다.
본 발명의 데아자퓨린이, 구후 또는 눈주위 주사 및 내안 세척 또는 주사와 같은 내안 수술동안에 투여될 때, 부형제로서 밸런스된 염 자극 용액의 사용이 가장 바람직하다. BSSR살균 자극용액 및 BSS PlusR살균 내안 자극용액 (미국 텍사스주의 포트 워스의 알콘 래버러토리 사)이 생리학적으로 밸런스된 내안 자극용액의 예이다. 후자 유형의 용액은, 본 명세서에 참고로 그 전체 내용이 포함되는 미국 특허 제 4,550,022 호(가라베디안 등)에 기재되어 있다. 구후 및 눈주위 주사는 본 기술분야의 숙련자에게 공지되어 있고, Ophthalmic Surgery: Principles ofPractice, Ed., G.L Spaeth. W.B. Sanders Co., Philadelphia, Pa., U.S.A., pp 85-87 (1990)과 같은 여러 문헌에 기재되어 있다.
상기한 바와같이, 세포수준에서 망막 및 시각 신경 헤드조직에의 손상을 방지하거나 감소시키기 위한 데아자퓨린의 사용은 특히 본 발명의 한 구체예의 중요한 양태이다. 치료될 수 있는 안염 상태에는, 망막병증, 반상퇴화, 안 허혈, 녹내장과, 허혈 재관류 상해, 광화학적 상해 및 안과수술과 관련된 상해, 특히 광 또는 수술도구에의 노출로 인한 망막 또는 시각신경의 상해와 같은 안 조직에의 상해와 관련된 손상이 있으나 이에 한정되지 않는다. 또한 본 화합물은 유리체(vitreal) 또는 결막하 주사를 수행하는 안과 수술과 같은 안과 수술에서 보조제로서 사용될 수 있다. 화합물은 임시 상태의 급성 치료에 사용될 수 있거나 만성, 특히 퇴행성 질환의 경우에서 투여될 수 있다. 또한 화합물은 특히 안과수술 또는 비침습성 안과수술 또는 다른 유형의 수술을 하기 전에 예방적으로 사용될 수 있다.
비경구 투여에 적당한 본 발명의 약학적 조성물은 한가지 이상의 약학적으로 허용가능한 살균된 등장성 수성 또는 비수성 용액, 분산액, 현탁액 또는 유화액, 또는 사용하기 직전에 살균된 주사가능한 용액 또는 분산액으로 재구성될 수 있는 살균된 분말과 조합하여 본 발명의 한가지 이상의 화합물로 이루어지며, 의도된 부형제 또는 현탁제 또는 농후제의 혈액과 등장인 조제물이 되게 하는 용질, 산화방지제, 버퍼용액, 세균발육저지제를 함유할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물에 사용될 수 있는 적당한 수성 및 비수성 담체의 예로는 물, 에탄올, 폴리올 (예, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜등) 및 그 적당한 혼합물, 올리브유와 같은 식물성 오일, 올레산에틸과 같은 주사가능한 유기 에스테르가 있다. 적당한 유동성은 분산액의 경우에 필요한 입경의 유지에 의해 레시틴과 같은 코팅물질의 사용, 및 계면활성제의 사용에 의해 유지될 수 있다.
이들 조성물은 보존제, 습식제, 유화제 및 분산제와 같은 보조제를 함유할 수 있다. 미생물 작용은 각종 항균성 및 항진균성 시약, 예를들면, 파라벤, 클로로부탄올, 페놀소르브산 등을 포함시킴으로써 방지된다. 또한 자당, 염화나트륨 등과 같은 등장제를 조성물에 포함시키는 것도 바람직하다. 또한, 주사가능한 약학적 형태의 연장된 흡수는 모노스테아르산알루미늄 및 젤라틴과 같은 흡수를 지연시키는 시약을 포함시킴으로써 발생한다.
어떤 경우에는, 약제의 효과를 연장시키기 위해, 피하 또는 근육내 주사로부터 약제의 흡수를 느리게 하는 것이 바람직하다. 이것은 수용성이 약한 결정성 또는 무정형 물질의 현탁액을 사용하여 이루어진다. 약제의 흡수율은 용해율에 의존하며 결정 크기 및 결정 형태에도 의존할 수 있다. 대안으로, 비경구적으로 투여되는 약제 형태의 지연된 흡수는 약제를 오일 부형제에 용해하거나 현탁시킴으로써 이루어진다.
주사가능한 저장형태는 폴리락티드-폴리글리콜리드와 같은 미생물에 의해 분해가능한 폴리머중에 있는 화합물의 미소캡슐 매트릭스를 형성함으로써 제조된다. 약제 대 폴리머 비율, 및 사용된 특정 폴리머의 성질에 따라서 약제 방출율이 제어될 수 있다. 다른 미생물에 의한 분해가능한 폴리머의 예로는 폴리(오르토에스테르) 및 폴리(무수물)이 있다. 또한 저장성 주사가능한 조제물은 신체 조직과 상용성인 리포솜 또는 마이크로에멀젼중에 약제를 포함시켜 제조된다.
본 발명의 제조물은 경구적, 비경구적, 국소적 또는 직장으로 투여될 수 있다. 제조물은 각 투여 경로에 적당한 형태로 제조된다. 예를들면, 제조물은 정제 또는 캡슐형태, 주사에 의한 흡입, 안 로션, 연고, 좌약 등으로 투여되고 로션 또는 연고로 국소적으로, 좌약으로 직장으로 주사, 주입 또는 흡입에 의해 투여된다. 경구 투여가 바람직하다.
본문에 사용된 어구 "비경구 투여" 및 "비경구적으로 투여된"은 통상 주사에 의한 장내 및 국소 투여 이외의 투여 모드를 의미하며, 정맥내, 근육내, 동맥내, 척수 초내, 포내, 안와내, 심장내, 피내, 복강내, 경기관, 피하, 표피하, 관절내, 피막하, 거미막하, 수강내 및 흉골내 주사 및 주입을 포함하나 이에 한정되지 않는다.
본문에 사용된 어구 "전신성 투여", "전신적으로 투여된", "말초성 투여" 및 "말초적으로 투여된"은 환자의 시스템에 도입되어 대사 및 다른 유사 과정을 발생시키는게 하도록 화합물, 약제 또는 다른 물질을 중추신경계에 간접적으로 투여하는 것, 예를들면 피하 투여를 의미한다.
이들 화합물은 경구, 스프레이에 의해 코, 직장, 질내, 비경구적, 대조내 및, 분말, 연고 또는 점적제에 의한 구강 및 설하와 같은 국소적인 어느 적당한 투여 경로에 의해 치료를 위해 인간 및 다른 동물에 투여될 수 있다.
선택한 투여 경로와 무관하게 적당한 수화물 형태에 사용될 수 있는 본 발명의 화합물 및/또는 본 발명의 조성물은 본 기술분야의 숙련자에게 공지된 종래의 방법에 의해 약학적으로 허용가능한 투여형태로 조제된다.
본 발명의 약학적 조성물중의 유효 성분의 실제 투여수준은 특정 환자에 대한 원하는 치료결과를 얻는데 효과적인 유효성분의 양, 환자에게 무독성인 조성물 및 투여 모드를 얻기 위해 다양해질 수 있다.
선택된 투여수준은 사용된 본 발명의 특정 화합물 또는 그것의 에스테르, 염 또는 아미드의 활성, 투여경로, 투여시간, 사용된 특정 화합물의 배설율, 치료시간, 다른 약제, 사용된 특정 화합물과 조합하여 사용된 화합물 및/또는 물질, 나이, 성, 중량, 상태, 치료받는 환자의 일반 건강 및 이전의 의학적 히스토리를 포함하는 다양한 인자, 및 의학 기술분야에 공지된 유사 인자에 의존한다.
본 기술분야에 관련된 의사 또는 수의사는 필요한 약학적 조성물의 유효량을 쉽게 정하고 처방할 수 있다. 예를들면, 의사 또는 수의사는 필요한 투여량보다 적은 수준에서 약학적 조성물에 사용된 본 발명의 화합물의 투여량을 정하여 원하는 치료효과를 얻고 원하는 효과가 달성될 때까지 투여량을 점진적으로 증가시킬 수 있다.
일반적으로, 본 발명의 화합물의 적당한 1일 투여량은 치료효과를 얻는데 효과적인 최소 투여량인 화합물 양이다. 그러한 효과적인 투여량은 일반적으로 상기한 인자에 의존한다. 나타낸 진통 효과에 사용될 때 환자에 대한 본 발명 화합물의 정맥내 및 피하 투여량 범위는 매일 약 0.0001 내지 약 200 mg/kg체중, 보다 바람직하게는 매일 약 0.01 내지 약 150 mg/kg, 보다 더욱 바람직하게는 매일 약 0.2내지 약 140 mg/kg이다.
원한다면, 활성 화합물의 효과적인 1일 투여량은 하루중 적당한 간격에서 임의로 단위투여량 형태로 2, 3, 4, 5, 6회 이상으로 나누어 투여될 수 있다.
투여되는 본 발명의 화합물만이 가능할 때, 약학적 조성물로서 화합물을 투여하는 것이 바람직하다.
또한 본 발명은 N-6 치환된 7 데아자퓨린 반응상태, 예를들면 포유동물에서 원하지 않는 증가된 아데노신 수용체 활성을 치료하기 위한 포장된 약학적 조성물에 관한 것이다. 포장된 약학적 조성물에는 상기한 적어도 한가지의 데아자퓨린의 치료적 유효량이 담긴 용기 및 포유동물에서 데아자퓨린 반응상태를 치료하기 위한 데아자퓨린을 사용하기 위한 설명서가 있다.
본 발명의 데아자퓨린은 유기 합성용 표준 방법을 사용하여 제조될 수 있다. 데아자퓨린은 역상 HPLC, 크로마토그래피, 재결정 등에 의해 정제되고, 그 구조는 질량스펙트럼 분석, 원소분석 IR 및/또는 NMR 스펙트럼분광법으로 확인된다.
전형적으로, 본 발명의 데아자퓨린 뿐만 아니라 중간체 합성도 용액에서 시행된다. 한 개이상의 보호기도 전형적인 과정으로 첨가되고 제거되며 본 기술분야의 숙련자에게 공지되어 있다. 본 발명의 데아자퓨린 중간체의 제조의 전형적인 합성 반응식은 하기하는 반응식 I에 명시되어 있다.
본 발명은 한정하는 것으로 해석되지 않는 다음 실시예에 의해 더 예시된다. 배경기술 섹션에서 인용된 참고문헌을 포함하여 본원에서 인용된 모든 참고문헌, 계류중인 특허출원 및 공개된 특허출원의 내용은 참고로 본문에 포함된다. 실시예에서의 모델은 허용된 모델이며 이들 모델의 효능입증은 인간에서의 효능도 기대하는 것으로 이해한다.
본 발명의 데아자퓨린은 유기 합성용 표준방법을 사용하여 제조될 수 있다. 데아자퓨린은 역상 HPLC, 크로마토그래피, 재결정 등에 의해 정제되고, 그 구조는 질량스펙트럼 분석, 원소분석 IR 및/또는 NMR 스펙트럼분광법으로 확인된다.
전형적으로, 본 발명의 데아자퓨린 뿐만 아니라 중간체 합성도 용액에서 시행된다. 한 개이상의 보호기도 전형적인 과정으로 첨가되고 제거되며 본 기술분야의 숙련자에게 공지되어 있다. 본 발명의 데아자퓨린 중간체의 제조의 전형적인 합성 반응식은 하기하는 구성 I에 명시되어 있다.
상기 식에서, R3, R5및 R6은 상기한 바와 같다.
일반적으로, 보호된 2-아미노-3-시아노-피롤은 아실할라이드로 처리되어 카르복시아미도-3-시아노-피롤을 생성하여 산성 메탄올로 처리하여 폐환시켜 피롤로[2,3d]피리미딘-4(3H)-온을 얻을 수 있다(Muller, C.E. et al. J. Med. Chem. 40:4396 (1997)). 피롤로 보호기를 제거한 다음에 염소화 시약, 예를들면 옥시염화인으로 처리하여 치환 또는 비치환된 4-클로로-7H-피롤로[2,3d]피리미딘을 얻었다. 클로로피리미딘을 아민으로 처리하여 7-데아자퓨린을 얻었다.
예를들면, 반응식 I에 나타낸 바와같이, N-(1-dl-페닐에틸)-2-아미노-3-시아노-피롤을 피리딘 및 디클로로메탄중의 아실할라이드로 처리하였다. 얻어진 N-(1-dl-페닐에틸)-2-페닐카르복시아미노-3-시아노-피롤을 메탄올/황산의 10:1 혼합물로 처리하여 폐환시켜dl-7H-7-(1-페닐에틸)피롤[2,3d]피리미딘-4(3H)-온을 얻었다. 피리미딘을 폴리인산(PPA) 다음에 POCl3로 처리하여 페닐에틸기를 제거하여 중요한 중간체인 4-클로로-7H-피롤로[2,3d]피리미딘을 얻었다. 4-클로로-7H-피롤로[2,3d]피리미딘을 표 1에 나열된 각종 아민으로 더 처리하여 화학식 (I) 및 화학식 (II)의 화합물을 얻는다.
표 1
6-치환 피롤류를 제조하기 위한 일반적인 방식이 하기 구성 (구성 II)에 나타나 있다.
구성 Ⅱ
상기식에서, R1내지 R5은 상기 정의한 바와 같다.
에틸 시아노아세테이트를 α-할로케톤과 에스테르 교환 반응 및 알킬화 시키면 케토메틸에스테르가 행성된다. 케톤을 보호한 후 아미딘 (예를 들어, 알킬, 아릴 또는 알킬아릴) 히드로클로라이드로 처리하여 케탈 보호 피리미딘을 생성하였다. 보호기를 제거한 후, 포스포러스 옥시클로라이드로 고리화 및 처리하여 염화물 중간체를 얻고 이를 아민으로 더 처리하여 아민 6-치환 피롤을 생성하였다. 또한, 기술 분야에 공지된 조건하에서 상기 피롤 질소를 알킬화하였다.
5-치환 피롤를 제조하기 위한 일반적인 방식이 하기 계획 (구성 III)에 도시되어 있다.
구성 Ⅲ
상기식에서, R1내지 R6은 상기 정의한 바와 같고 R은 제거가능한 보호기이다.
말로노니트릴과 과량의 케톤을 축합한 후 생성물을 브롬화시켜, 출발물질, 단일브롬화된 및 이중브로화된 생성물의 혼합물을 얻고, 이를 알킬아민, 아릴아민 또는 알킬아릴아민으로 처리하였다. 결과된 아민 생성물을 산 염화물로 아실화시키고 단일아실화된 피롤을 산 존재하에서 고리화시켜 상응하는 피리미딘을 얻었다. 피롤 보호기를 폴리인산을 사용하여 제거하고 포스포러스 옥시클로라이드로 처리하여 염소화된 생성물을 얻었다. 다음 염소화된 피롤을 아민으로 처리하여 아민 5-치환 피롤을 생성하였다. 당해 기술 분야에 공지된 조건하에서, 이러한 피롤 질소를 알킬화시킬 수 있었다.
구성 IV 및 V에 본 발명의 데아자퓨린 1 및 2를 제조하는 방법이 설명되어 있다.
상기식에서 R5및 R6는 전술한 바, 예를 들어, CH3, 와 같다.
6-메틸 피롤로피리미딘류의 특수 제조
6-메틸피롤로피리미딘류 (1) [R5=CH3]로의 주요 반응은 시아노아세테이르를 벤즈아미딘을 사용하여 피리미딘으로 고리화시키는 것이다. 메틸 시아노아세테이트가, 상응하는 에틸 에스테르보다, 벤즈아미딘과 더 효과적으로 피리미딘으로 고리화될 수 있을 것으로 여겨진다. 따라서, NaOMe 존재하에서, 에틸 시아노아세테이트 및 다량의 α-할로아세틸 부분체, 예를 들어, 클로로아세톤과 에스테르 교환반응 및 알킬화시키면 바람직한 메틸 에스테르 (3)를 79% 수율로 생성한다 (구성 IV). 케토에스테르 (3)을 아세탈 (4)로서 81 % 수율로 보호되었다. 피리미딘 (5)로의 새로운 고리화 방법은 아미딘 하이드로클로라이드, 예를 들어, 벤즈아미딘, 예를 들어, 벤즈아미딘 하이드로클로라이드을 DBU 2 당량과 사용하여 54% 분리 수율로 (5)를 생성하였다. 이러한 방법은, 구아니딘과의 고리화 동안 NaOMe를 사용하여, 공지된 조건을 사용하는 20%에서 수율을 높인다. 피롤-피리미딘 (6)로의 고리화는 수성 HCL에서 아세탈을 탈보호하여 78%의 수율로 이루어졌다. (6)를 포스포러스 옥시클로라이드와 환류하에서 반응하여 상응하는 4-클로로 유도체 (7)을 얻었다. 135℃에서 디메틸 설폭사이드에서 트란스-4-아미노시클로헥산올로 커플링하여 (7)으로부터 (1)을 57%로 얻었다. 당해분야의 숙련자는 시약 선택에 따라서, 바람직한 치환체 R5를 선택하는 데 큰 유연성이 있다는 것을 알고 있다.
구성 Ⅳ
5-메틸피롤로피리미딘류의 특수 제조
환류 벤젠에서 말로노니트릴 및 과량의 케톤, 예를 들어, 아세톤을 크뇌베나아겔 (Knoevengel) 축합하여 증류후 (8)을 50% 수율로 생성하였다. 벤조일 페록사이드 존재하 클로로포름에서 (8)을 N-브로모석신이미드로 브롬화시켜 출발물질, 모모-(9) 및 디-브롬화된 생성물 (5/90/5)의 혼합물을 증류 후에 얻었다 (7) %). 이 혼합물을 α-메틸알킬아민 또는 α-메틸아릴아민, 예를 들어, α-메틸벤질아민과 반응시켜 아미노피롤 (10)을 얻었다. 짧은 실리카 젤 컬럼을 통과 시킨후, 부분적으로 정제된 아민 (31% 수율)을 산 염화물, 예를 들어, 염화 벤조일과 이실화시켜 모노-(11) 및 디아신화된 (12) 피롤을 생성하고 이들을 플래쉬 크로마토그래피로 분리하였다. 분산된 피롤 (12)을 산 가수분해하여 아실피롤 (11)을 29%의 혼합 수율로 생성하였다. 진한 황산 및 DMF에서 고리화시켜 (13) (23%)을 생성하고, 이를 폴리인산을 사용하여 (14)로 탈보호하였다. 환류하에서 (14)와 포스포러스 옥시클로라이드를 반응하여 상응하는 4-클로로 유도체 (15)를 생성하였다. 135℃의 디메틸 설폭사이드에서 트란스-4-아미노시클로헥산올로 커플링하여 (14)으로부터 (2) [R6=CH3]를 30%로 얻었다. 당해분야의 숙련자는 시약 선택에 따라서, 바람직한 치환체 R5를 선택하는 데 큰 유연성이 있다는 것을 알고 있다.
구성 Ⅴ
R 6 -치환 피롤류, 예를 들어, 5-메틸 피롤로피리미딘류로의 대안적 합성 경로
R6-치환 피롤류, 예를 들어, 5-메틸피롤로피리미딘류로의 대안적 경로는 에틸 시아노아세테이트를 (16)으로 에스테르 교환 반응 및 알킬화시키는 것을 포함한다 (구성 VI). (16)을 DBU 2 당량을 가진 벤즈아미딘 하이드로클로라이드로 축합시켜 피리미딘 (17)을 생성한다. 수성 HCl에서 아세탈을 탈보호시킴으로써 피롤-피리미딘 (14)로 고리화시킨다. 환류하에서 (14)을 포스포러스 옥시클로라이드와 반응시켜 상응하는 4-클로로 유도체 (15)를 얻었다. 135℃의 디메틸 설폭사이드에서 트란스-4-아미노시클로헥산올로 커플링하여 ((2)를 얻었다. 이 과정은 표적 화합물 (2)로 합성하는 반응 수를 9에서 4 단계로 감소시킨다. 더욱이, 수율이 극적으로 향상된다. 또한, 당해분야의 숙련자는 시약 선택에 따라서, 바람직한 치환체 R5를 선택하는 데 큰 유연성이 있다는 것을 알고 있다.
구성 Ⅵ
des-메틸 피롤을 제조하기 위한 일반적 접근은 다음 구성(구성 VII)에 나타낸다.
구성 Ⅶ
상기 식에서 R1내지 R3은 상기한 바와 같다.
염기의 존재하에서 알킬 시아노아세테이트를 디에틸아세탈로 알킬화하여 시아노 디에틸 아세탈을 얻고, 이것을 아미딘 염으로 처리하여 메틸 피롤로피리디민 전구체를 얻었다. 전구체를 염소화하고 아민으로 처리하여 상기한des-메틸 피롤로피리미딘 표적물을 생성하였다.
예를들면, 구성 Ⅷ은 화합물 (18)의 합성을 나타낸다.
구성Ⅷ
시중 구입가능한 메틸 시아노아세테이트를 탄산칼륨 및 NaI의 존재하에서 브로모아세트알데히드 디에틸 아세탈로 알킬화하여 (19)를 얻었다. 피리미딘(20)으로의 고리화는 두 단계로 이루어진다. 먼저, 피리미딘-아세탈을 (19)와 염화벤즈아미딘과 2당량의 DBU를 반응시켜 얻었다. 얻어진 피리미딘-아세탈을 수성 1N HCl로 정제하지 않고 탈보호하여 얻어진 알데히드를 고리화하여 피롤로-피리미딘(20)을 얻고, 이것을 여과하여 분리하였다. 환류하에서 (20)과 옥시염화인을 반응시켜 해당하는 4-클로로 유도체(21)를 얻었다. 135 ℃에서 클로로 유도체와 DMSO중의 트랜스-4-아미노시클로헥산올을 커플링시켜 화합물(21)로부터 화합물 (18)을 얻었다.
구성 II-VIII은 피롤로피리미딘 고리중의 5- 및 6-위치를 관능화하는 것이 가능하다는 것을 나타낸다. 상이한 출발물질을 사용하고 상기 반응 구성을 약간 변형시켜, 각종 관능기를 화학식(I) 및 화학식 (II)에서의 5- 및 6-위치에서 도입될 수 있다. 표 2는 일부 실시예를 나타낸다.
표 2
본 발명은 한정하는 것으로 해석되지 않는 다음 실시예에 의해 더 예시된다. 배경기술 섹션에서 인용된 참고문헌을 포함하여 본원에서 인용된 모든 참고문헌, 계류중인 특허출원 및 공개된 특허출원의 내용은 참고로 본문에 포함된다. 실시예에서의 모델은 허용된 모델이며 이들 모델의 효능입증은 인간에서의 효능도 기대하는 것으로 이해한다.
실시예
제조 1:
Seela 및 Lupke의 알킬화 방법을 변형하여 사용하였다1. 에틸 시아노아세테이트 (6.58 g, 58.1 mmol)을 함유하는 MeOH (20 mL)의 얼음 냉각 (0℃) 용액에 NaOMe (25% w/v, 58.1 mmol) 용액을 서서히 첨가하였다. 10분후, 크로로아세톤 (5 mL; 62.8 mmol)을 서서히 첨가하였다. 4시간 후, 상기 용액을 제거하였다. 갈색 오일을 EtOAc (100 mL)로 희석하고 H2O (100 mL)로 세척하였다. 유기 분획을 건조하고 여과시키고 및 갈색 오일 (7.79 g; 79%)로 농축하였다. 오일 (3) (구성 IV)은 메틸/에틸 에스테르 생성물 (9/1)의 혼합물이고 더 정제하지 않고 사용하였다.1H NMR(200 MHz,CDCl3)δ4.24(q, J=7.2 Hz,OCH2),3.91(dd,1H,J=7.2,7.0Hz,CH), 3.62 (s,3H,OCH3),3.42(dd,1H,J=15.0,7.1Hz,1xCH2);3.02(dd,1H,J=15.0,7.0Hz,1 x CH2) ; 2.44(s,3H,CH3),1.26(t,J=7.1Hz,에스테르-CH3)
1Seela,F.;Lupke,U.Chem.Bar.1977,110, 1462-1469.
제조 2
Seela 및 Lupke의 방법을 사용하였다1. 따라서, TsOH (100 mg) 존재하에서 케톤 (3) (구성 IV; 5.0 g, 32.2 mmol)을 에틸렌 글리콜 (4 mL, 64.4 mmol)로 보호하여 플래쉬 크로마토그래피 (SiO2; 3/7 EtOAc/Hex, Rf0.35) 후에 오일로서 (4)를 생성하였다 (구성 IV; 5.2 g, 81.0). 여기에는 여전히 ~5% 에틸 에스테르를 포함하고 있다.1H NMR(200 MHz,CDCl3)δ4.24(q, J=7.2 Hz,OCH2),3.98(s,4H,2 x 아세탈-CH2),3.79(s,3H,OCH3),3.62(dd,1H,J=7.2,7.0Hz,CH), 2.48(dd,1H,J=15.0,7.1Hz,1 x CH2), 2.32(dd,1H,J=15.0,7.0Hz,1 x CH2) ; 1.35(s,3H,CH3),1.26(t,J=7.1Hz,에스테르-CH3);MS(ES):2000.1(M++1).
1Seela,F.;Lupke,U.Chem.Bar.1977,110, 1462-1469.
제조 3
아세탈 (4) (구성 IV, 1 g, 5.02 mmol), 벤즈아미딘 (786 mg, 5.02 mmol) 및 DBU (1.5 mL, 10.04 mmol)을 함유하는 무수 DMF (15 mL) 용액을 85 ℃로 15 시간 가열하였다. 이 혼합물을 CHCl3(30 mL)로 희석시키로 0.5 N NaOH (10 mL) 및 H2O (20 mL)로 세척하였다. 유기 분획을 건조하고 여과한 후 갈색 오일로 농축시켰다. 플래쉬 크로마토그래피 (SiO2; 1/9 EtOAc/CH2Cl2, Rf0.35)를 시행하였으나, 컬럼에 물질이 결정화되었다. 실리카 젤을 MeOH로 세척하였다. 생성물 (5) (구성 IV)를 함유하는 분획물을 농축하고 더 이상의 정제 없이 사용하였다 (783 mg, 54.3 %):1H NMR(200 MHz, CDCl3)δ8.24(m, 2H, Ar-H),7.45(m,3H,Ar-H),5.24 (brs,2H,NH2),3.98(s,4H,2 x 아세탈-CH2),3.60-3.15(m,2H,CH2),1.38(s,3H,CH3);MS(ES) :288.1(M++1)
화합물 (20)의 제조 (구성 VIII): 아세탈 (19) (4.43 g, 20.6 mmol)1, 벤즈아민 하이드로클로라이드 (3.22 g, 20.6 mmol) 및 DBU (6.15 mL, 42.1 mmol)을 함유하는 무수 DMF (20 mL)의 용액을 85℃로 15 시간 가열하였다. 이 혼합물을 CHCl3100 mL로 희석시키고 H2O (2x50 mL)로 세척하였다. 유기 분획을 건조시키고 여과한 후 진한 갈색 오일로 농축시켰다. 진한 갈색 오일을 1N HCl (100 mL)내에서 실온에서 2 시간 교반하였다. 결과된 슬러리를 여과하여, 황갈색 고형물로서 (20)의 HCl 염을 산출하였다 (3.60g, 70.6 %);1H NMR(200MHz, DMSO-d6) 11.92(s,1H), 8.05(m,2H,Ar-H),7.45(m,3H,Ar-H),7.05(s,1H,피롤-H);MS(ES):212.1(M++1).
제조 4:
아세탈 (5) (700 mg, 2.44 mmol)을 함유하는 1N HCl (40 mL) 용액을 실온에서 2 사간 교반하였다. 결과된 슬러리를 여과하여 황갈색 고형물로서 20페닐-6-메틸-7H-피롤로[2,3d]피리미딘-4(3H)-온을 수득하였다 (498 mg, 78.0 %):1H NMR(200MHz, DMSO-d6) 11.78(s,1H),8.05(m,2H,Ar-H),7.45(m,3H,Ar-H),7.45(s,3H,Ar-H),6.17(s,1H,피롤-H),2.25(s,3H,CH3);MS(ES):226.1(M++1).
제조 5:
Chen 등의 고리화 방법을 변형하여 사용하였다1. 취화물 (9) (구성 V; 20.0 g, 108 mmol; 90% 순도)를 포함하는 이소프로필 알콜 (60 mL)의 얼음 냉각된 (0℃) 용액에 α-메틸벤질아민 (12.5 mL, 97.3 mmol)의 용액을 서서히 첨가하였다. 이 검은 용액을 실온으로 가온시키고 15 시간 교반하였다. 이 혼합물을 EtOAc (200 mL)로 희석시키고 0.5 N NaOH (50 mL_로 세척하였다. 유기 분획을 건조시키고, 여과한 후 검은 타르로 농축하였다 (19.2 g; 94%). 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (SiO2; 4/96 MeOH/CH2Cl2, Rf0.35)로 부분 정제하여 흑색 고형물로서 화합물 dl-1-(1-페닐에틸)-2-아미노-3-시아노-4-메틸피롤: MS(ES):226.1 (M++1) (19) (6.38 g, 31%)를 얻었다.
1Chen Y.L.; Mansbach, R.S.;Winter,S.M.;Brooks,E.;Collins,J.;Corman,M.L. ; Dunaiskis,A.R.; Faraci, W.S.; Gallaschun, R.J.;Schmidt, A.;Schulz, D.W.J.Med.Chem. 1977,40, 1749-1754
제조 6
dl-1-(1-페닐에틸)-2-아미노-3-시아노-4,5-디메틸피롤1(14.9 g, 62.5 mmol) 및 피리딘 (10.0 mL)을 함유하는 디클로로메탄 (50.0 mL)의 용액에 염화 벤조일 (9.37 g, 66.7 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 0℃에서 1시간 고반후, 헥산 (10.0mL)을 첨가하여 생성물을 침전시켰다. 용매를 진공에서 제거하고 고형물을 EtOH/H2O로부터 재결정화시켜 dl-1-(1-페닐에틸)-2페닐카르보닐아미노-3-시아노-4,5-디메틸피롤 13.9 g (65%)를 얻었다. mp 218-221℃;1H NMR(200MHz,CDCl3)δ1.72(s,3H), 1.76(d,J=7.3Hz,3H),1.98(s,3H),5.52(q,J=7.3 Hz,1H),7.14-7.54(m.9H),7.68-7.72(dd,J=1.4 Hz,6.9Hz,2H),10.73(s,1H);MS (ES): 344.4(M++1).
1Liebigs Ann. Chem. 1986, 1485-1505
하기 화합물은제조 6과 유사한 방법으로 수득하였다:
dl-1-(1-페닐에틸)-2-(3-피리딜)카르보닐아미노-3-시아노-4,5-디메틸피롤.1H NMR (200 MHz, CDCl3)δ 1.83(d,J=6.8(d,J=6.8 z,3H),2.02(s,3H),2.12(s,3H), 5.50(q,J=6.8Hz, 1H),7.14-7.42(m,5H),8.08(m,3H); MS(ES):345.2(M++1).
1H NMR(200MHz, CDCl3)δ1.84(d,J=7.4 Hz,3H),1.92(s,3H),2.09(s,3H), 5.49(q,J=7.4 Hz, 1H),6.54(dd, J=1.8Hz,3.6Hz,1H),7.12-7.47(m,7H);MS(ES):334.2 (M++1),230.1.
1H NMR(200 MHz,CDCl3)δ1.80(d,J=7Hz 3H),1.89(s,3H),2.05(s,3H),5.48(q,J =1Hz,1H),6.59(s,1H),7.12-7.40(m,6H),7.93(s,1H),MS(ES):334.1(M++1),230.0
dl-1(1-페닐에틸)-2-시클로펜필카르보닐아미노-3-시아노-4,5-디에틸피롤.1H NMR(200 MHz, CDCl3)δ1.82(d,J=7.4Hz,3H),1.88(s,3H), 2.05 (s,3H),1.63-1.85(m,8H),2.63(m,1H),5.43(q,J=7.4Hz,1H),6.52(s,1H),7.05-7.20(m, 5H);MS(ES): 336.3(M++1).
dl-1(1-페닐에틸)-2-(2-티에닐)카르보닐아미노-3-시아노-4,5-디메틸피롤.1H NMR(200 MHz, CDCl3)δ1.83(d,J=7.0 Hz,3H),1.99(s,3H), 2.12 (s,3H),5.49(q,J=7.0 Hz,1H),6.90(m,1H),7.18-7.36(m, 6H),7.79(m,1H); MS (ES) : 350.2(M++1),246.1.
dl-1(1-페닐에틸)-2-(4-플루오로페닐)카르보닐아미노-3-시아노-4,5-디메틸페닐.1H NMR(200 MHz, CDCl3)δ1.83(d,J=7.4 Hz,3H),1.96(s,3H), 2.08 (s,3H),5.51(q,J=7.4 Hz,1H),7.16-7.55(m, 9H); MS (ES) : 362.2(M++1),258.1.
dl-1(1-페닐에틸)-2-(3-플루오로페닐)카르보닐아미노-3-시아노-4,5-디메틸피롤.1H NMR(200 MHz, CDCl3)δ1.83(d,J=7.4 Hz,3H),1.97(s,3H), 2.10 (s,3H),5.50(q,J=7.4 Hz,1H),7.05-7.38(m, 7H),7.67-7.74(m,2H); MS (ES) : 362.2(M++1),258.1.
dl-1(1-페닐에틸)-2-(2-플루오로페닐)카르보닐아미노-3-시아노-4,5-디메틸피롤.1H NMR(200 MHz, CDCl3)δ1.85(d,J=7.2 Hz,3H),1.94(s,3H), 2.11 (s,3H),5.50(q,J=7.2 Hz,1H),7.12-7.35(m, 6H),7.53(m,1H),7.77(m,1H),8.13(m,1H): MS (ES) : 362.2(M++1),258.0.
dl-1(1-페닐에틸)-2-이소프로필카르보닐아미노-3-시아노-4,5-디메틸피롤.1H NMR(200 MHz, CDCl3)δ1.19(d,J=7.0 Hz,6H), 1.82 (d,J=7.2Hz,3h), 1.88(s,3H), 2.06 (s,3H),2.46- (m,1H),5.39(m,J=7.2Hz,1H),6.64(s,1H),7.11-7.36(m, 5H); MS(ES):310.2(M++1),206.1
dl-1-(1-페닐에틸)-2-아미노-3-시아노-4-메틸피롤을 아실화하는 경우, 모노아실화된 dl-1-(1-페닐에틸)-2-벤조일아미노-3-시아노-4-디메틸피롤 및 디아실화된 피롤 dl1-(1-페닐에틸)-2-아미노-3-시아노-4-메틸피롤을 수득하였다. 모노아실화된 피롤:1H NMR (200 MHz, CDCl3)δ7.69(d,2H,J=7.8Hz, Ar-H), 7.58-7.12(m,8H,Ar-H),6.18(s,1H,피롤-H),5.52(q,1H,J=7.2 Hz,CH-CH3),2.05(s,3H,피롤-CH3), 1.85(d,3H,J=7.2Hz,CH-CH 3);MS (ES): 330.2(M++1);디아실화된 피롤:1H NMR (200 MHz,CDCl3)δ7.85(d,2H, J=7.7 Hz,Ar-H),7.74(d,2H,J=7.8Hz,Ar-H),7,52-7.20 (m,2H,Ar-H),6.21(s,1H,피롤-H),5.52(q,1H,J=7.2Hz,CH-CH3),1.77(d,3H, J=7.2Hz,CH-CH 3),1.74(s,3H,피롤-CH3);MS(ES):434.1(M++1).
제조 7:
dl-1-(1-페닐에틸)-2-페닐카르복시아미도-3-시아노-4,5-디메틸피롤 (1.0 g, 2.92 mmol)을 함유한 메탄올 910.0 mL) 용액에 진한 황산을 0℃에서 첨가하였다. 결과된 혼합물을 15 시간 환류시키고 실온으로 냉각하였다. 침전물을 여과하여 dl-5,6-디메틸-2-페닐-7H-7-(1-페닐에틸)피롤로[2,3d]피리미딘-4(3H)-온 0.48 g (48 %)를 생성하였다.1H NMR(200 MHz, CDCl3)δ2.02(d,J=7.4Hz,3H),2.04(s,3H), 2.41(s,3H),6.25(q,J=7.4Hz,1H),7.22-7.50(m,9H),8.07-8.12(dd,J=3.4Hz,6.8Hz,2H), 10.51(s,1H);MS (ES):344.2(M++1).
하기 화합물들을제조 7과 유사하게 수득하였다.
dl-5,6-dim에틸-2-(3-피리딜)-7H-7-(1-페닐에틸) 피롤로 [2,3d] 피리미딘-4-(3H)-온.1H NMR(2OOMHz,CDCl3)δ2.03(d,J=7.2Hz,3H), 2.08(s,3H), 2.42(s,3H), 6.24(q,J=7.2Hz,1H),7.09-7.42(m,5H), 8.48(m,2H) ,8.70 (m,3H) ;MS (ES): 345.1(M++1)
dl-5,6-디메틸-2-(2-퓨릴)-7H-7-(1-페닐에틸) 피롤로 [2,3d] 피리미딘-4-(3H)-온.1H NMR(2OOMHz,CDCl3)δ1.98(d,J=7.8Hz,3H), 1.99(s,3H),2.37(s,3H),6.12(q,J=7.8Hz,1H),6.48(dd,J=1.8 Hz, 3.6Hz,1H) 7.17-7.55(m,7H), 9.6(s,1H);MS (ES):334.2(M++1)
dl-5,6-디메틸-2-(3-퓨릴)-7H-7-(1-페닐에틸) 피롤로 [2,3d] 피리미딘-4-(3H)-온.1H NMR(2OOMHz,CDCl3)δ1.99(d,J=7Hz,3H), 2.02(s,3H), 2.42(s,3H), 6.24(q,J=7Hz,1H),7.09(s,1H),7.18-7.32(m,5H),7.48(s,1H),8.51(s,1H): ;MS (ES): 334.2(M++1).
dl-5,6-디메틸-2-시클로펜틸-7H-7 (1-페닐에틸) 피롤로 [2,3d] 피리미딘-4(3H)-온.1H NMR(2OOMHz,CDCl3)δ1.95(d,J=7.4Hz,3H), 2.00(s,3H), 2.33(s,3H), 1.68-1.88(m,8H),2.97(m,1H), 6.10(q,J=7.4 Hz,1H),7.16-7.30(m,5H), 9.29(s,1H) ;MS (ES):336.3(M++1).
dl-5,6-디메틸-2-(2-티에닐)-7H-7-(1-페닐에틸) 피롤로 [2,3d] 피리미딘-4-(3H)-온.1H NMR(2OOMHz,CDCl3)δ2.02(d,J=7.2Hz,3H), 2.06(s,3H), 2.41(s,3H), 6.13(q,J=7.2 Hz,1H), 7.12(dd,J=4.8, 2.8 Hz,1H), 7.26-7.32 (m,5H), 7.44(d,J=4.8 Hz,1H),8.01(d,J=2.8Hz,1H) ,11.25 (s,1H) ;MS (ES):350.2(M++1).
dl-5,6-디메틸-2-(3-티에닐)-7H-7-(1-페닐에틸) 피롤로 [2,3d] 피리미딘-4-(3H)-온.1H NMR(2OOMHz,CDCl3)δ2.00(d,J=7.4Hz,3H), 2.05(s,3H), 2.43(s,3H),6.24(q,J=7.4 Hz,1H), 7.24-7.33 (m,5H), 7.33-7.39 (m,1H) 7.85(m.1H), 8.47(m,1H),12.01(s,1H);MS (ES):350.2(M++1).
dl-5,6-디메틸-2-(4-플루오로페닐)-7H-7-(1-페닐에틸) 피롤로 [2,3d] 피리미딘-4-(3H)-온.1H NMR(2OOMHz,CDCl3)δ2.01(d,J=6.8Hz,3H), 2.05(s,3H), 2.42(s,3H),6.26(q,J=6.8 Hz,1H), 7.12-7.36(m,7H), 8.23-8.30(m, 2H), 11.82(s, 1H);MS (ES):362.3(M++1).
dl-5,6-디메틸-2-(3-플루오로페닐)-7H-7-(1-페닐에틸) 피롤로 [2,3d] 피리미딘-4-(3H)-온.1H NMR(2OOMHz,CDCl3)δ2.02(d,J=7.4Hz,3H), 2.06(s,3H), 2.44(s,3H),6.29(q,J=7.4 Hz,1H), 7.13-7.51(m,7H), 8.00-8.04(m, 2H), 11.72 (s, 1H);MS (ES):362.2(M++1).
dl-5,6-디메틸-2-(2-플루오로페닐)-7H-7-(1-페닐에틸) 피롤로 [2,3d] 피리미딘-4-(3H)-온.1H NMR(2OOMHz,CDCl3)δ2.00(d,J=7.2Hz,3H), 2.05(s,3H), 2.38(s,3H), 6.24(q,J=7.2 Hz,1H), 7.18-7.45(m,8H), 8.21(m,1H), 9.54 (s, 1H);MS (ES):362.2(M++1).
dl-5,6-디메틸-2-이소프로필-7H-7-(1-페닐에틸)피롤로[2,3d]피리미딘-4 (3H)-온.1H NMR(2OO MHz,CDCl3) δ1.30(d,J=6.8Hz,3H), 1.32(d,J=7.0Hz,3H), 2.01(s,3H),2.34(s, 3H), 2.90 (m, 1H), 6.13 (m, 1H), 7.17-7.34 (m, 5H), 10.16 (s, 1H); MS (ES):310.2(M++1).
제조 8
dl-1-(1-페닐에틸)-2-벤조일아미노-3-시아노-4-디메틸피롤 (785 mg, 2.38 mmol) 및 진한 H2SO4(1 mL)을 함유하는 DMF (13 mL)을 130℃에서 48 시간동안 교반하였다. 이 흑색 용액을 CHCl3(100 mL)로 희석시키고 1 N NaOH (30 mL) 및 염수 (30 mL)로 세척하였다. 유기 분획을 건조하고 여과하고 농축 한후, 플래쉬 크로마토그래피 (SiO2; 8/2 EtOAc/Hex, Rf0.35)로 정제하여 흑색 고형물로서 화합물 dl-5-메틸-2-페닐-7H-7-(1-페닐에틸)피롤로[2,3d]피리미딘-4(3H)-온 (184 mg, 24 %)를 수득하였다.1H NMR(200 MHz, CDCl3) δ8.18(m,2H,Ar-H), 7.62-7.44(m,3H,Ar-H), 7.40-7.18(m,5H,Ar-H), 6.48(s, 1H, 피롤-H),6.28(q, 1H,J=7.2Hz, CH-CH3),2.18(s,3H, 피롤-CH3),2.07(d,3H,J=7.2Hz,CH-CH 3);MS(ES):330.2(M++1).
제조 9
dl-1-(1-페닐에틸)-2-아미노-3-시아노-4,5-디메틸피롤 (9.60 g, 40.0 mmol) 및 개미산 (50.0 mL, 98 %)의 혼합물을 5 시간 환류하였다. 실온으로 냉각하고 플라스크의 옆면을 긁은 후 많은 침전물을 얻고 이를 여과하였다. 세척하여 중성 pH를 보일 때까지 이 물질을 물로 세척하여dl-5,6-디메틸-7H-7-(1-페닐에틸)피롤로[2,3d]피리미딘-4(3H)-온을 생성하였다.1H NMR(200 MHz, CDCl3)δ1.96(d,J=7.4 Hz,3H),2.00(s,3H),2.38(s,3H), 621 (q,J=7.4Hz,1H), 7.11-7.35(m,5H),7.81(s,1H),11.71(s,1H);MS(ES):268.2(M++1).
제조 10
dl-5,6-디메틸-2-페닐-7H-7-(1-페닐에틸)피롤로[2,3d]피리미딘-4(3H)-온 (1.0 g, 2.91 mmol)을 폴리인산 (30.0 mL_에 현탁시켰다. 이 혼합물을 100℃에서 4 시간 가열하였다. 뜨거운 현탁액을 얼음울 상에 붓고, 격렬히 교반하여 현탁액을 분산시키고 KOH를 사용하여 pH 6으로 알키리화하였다. 결과된 고체를 여과하고 수집하여 5,6-디메틸-2-페닌-7H-피롤로[2,3d]피리미딘-4(3H)-온 0.49 g (69 %)를 얻었다.
1H NMR(200 MHz,DMSO-d6)δ2.17(s,3H),2.22(s,3H),7.45(br,3H),8.07(br,2H), 11.49(s,1H),11.82(s,1H);MS(ES):344.2(M++1).
하기 화합물을제조 10과 유사한 방법으로 수득하였다
5-메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘-4(3H)-온. MS(ES):226.0 (M++1).
5,6-디메틸-2-(3-dyridyl)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘-4(3H)-온. MS(ES): 421.1(M++1).
5,6-디메틸-2(2-퓨릴)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘-4(3H)-온.1H NMR (200MHz,DMSO-d6)δ2.13(s,3H),2.18(s,3H),6.39(dd, J=1.8,3.6Hz,1H),6.65(dd, J=1.8Hz,3.6Hz, 1H),7.85(dd, J=1.8,3.6Hz,1H),11.45(s,1H),11.60(s,1H);MS(ES): 230.1(M++1).
5,6-디메틸-2-cyclopenty-7H-피롤로[2,3d]피리미딘-4(3H)-온.1H NMR(200 MHz, DMSO-d6)δ1.57-1.91(m,8H),2.12(s,3H),2.16(s,3H),2.99(m,1H),11.24 (s,1H), 11.38(s,1H);MS(ES):232.2(M++1).
5,6-디메틸-2-(2-티에닐)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘-4(3H)-온.1H NMR (200 MHz, DMSO-d6)δ2.14(s,3H),2.19(s,3H),7.14(dd,J=3.0,5.2 Hz,1H),7.70(d,J=5.2Hz 1H),8.10(d,J=3.0 Hz,1H),11.50(s,1H);MS(ES):246.1(M++1).
5,6-디메틸-2-(3-티에닐)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘-4(3H)-온.1H NMR(200 MHz, DMSO-d6)δ2.17(s,3H),2.21(s,3H),7.66(m,1H),7.75(m.1H),8.43(m,1H) ,11.47(s, 1H); MS(ES):258.2(M++1).
5,6-디메틸-2-(3-플루오로페닐)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘-4(3H)-온.1H NMR (200 MHz,DMSO-d6)δ2.18(s,3H),2.21(s,3H),7.33(m,1H),7.52(m,1H), 7.85-7.95(m,2H),11.56(s,1H),11.80(s,1H);MS(ES):258.1(M++1).
5,6-디메틸-2-(2-플루오로페닐)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘-4(3H)-온.1H NMR (200 MHz,DMSO-d6)δ2.18(s,3H),2.22(s,3H),7.27-7.37(m,2H),7.53(m,1H), 7.68(m,1H),11.54(s,1H),11.78(s,1H);MS(ES):258.1(M++1).
5,6-디메틸-2-이소프로필-7H-피롤로[2,3d]피리미딘-4(3H)-온.1H NMR(2000 MHz, DMSO-d6)δ1.17(d,J=6.6Hz,6H),2.11(s,3H),2.15(s,3H),2.81(m,1H), 11.20(s,1H),11.39(s,1H);MS(ES):206.1(M++1).
5,6-디메틸-7H-피롤로[2,3d]피리미딘-4(3H)-온.1H NMR(200 MHz, DMSO-d6)δ2.13(s,3H), 2.17(s,3H),7.65(s,1H);MS(ES):164.0(M++1).
제조 11
5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤[2,3d]피리미딘-4(3H)-온 (1.0 g, 4.2 mmol)을 함유하는 포스포러스 옥시클로라이드 (25.0 mL) 용액을 6시간 동안 환류시킨 후 진공에서 농축 건조시켰다. 이 잔류물에 물을 첨가하여 결덩화를 유도하고 결과된 고형물을 여과하고 수집하여 4-클로로-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 0.90 g (83 %)를 얻었다.1H NMR(200 MHz, DMSO-d6)δ2.33(s,3H), 2.33(s,3H),7.46-7.49 (m,3H),8.30-8.35(m,2H),12.20(s,1H);MS(ES):258.1(M++1)
하기 화합물들을제조 11과 유사한 방법으로 수득하였다:
4-클로로-5-메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘. MS(ES):244.0 (M++ 1).
4-클로로-6-메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘. MS(ES):244.0 (M++ 1).
4-클로로-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200 MHz,DMSO-d6) 8.35(2,2H),7.63(br s,1H),7.45(m,3H),6.47(br s, 1H);MS(ES):230.0(M++1).
4-클로로-5,6-디메틸-2-(3-피리딜)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘. MS(ES): 259.0(M++1).
4-클로로-5,6-디메틸-2-(2-퓨릴)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR (200MHz, DMSO-d6)δ2.35(s,3H),2.35(s,3H),6.68(dd,J=1.8,3.6Hz,1H),7.34(dd, J=1.8 Hz,3.6Hz,1H),7.89(dd,J=1.8,3.6Hz,1H);MS(ES):248.0(M++1).
4-클로로-5,6-디메틸-2-(3-퓨릴)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR (200MHz, DMSO-d6)δ2.31(s,3H),2.31(s,3H),6.62(s,1H),7.78(s,1H),12.02(s,1H);MS (ES):248.1(M++1).
4-클로로-5,6-디메틸-2-시클로펜틸-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR (200MHz, DMSO-d6)δ1.61-1.96(m,8H),2.27(s,3H),2.27(s,3H),3.22(m,1H),11.97 (s,1H);MS(ES):250.1(M++1).
4-클로로-5,6-디메틸-2-(2-티에닐)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR (200MHz, DMSO-d6)δ2.29(s,3H),2.31(s,3H),7.14(dd,J=3.1Hz,4.0Hz,1H),7.33(d, J=4.9 Hz,1H),7.82(d,J=3.1Hz,1H),12.19(s,1H);MS(ES):264.0(M++1).
4-클로로-5,6-디메틸-2-(4-플루오로페닐)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR (200MHz, DMSO-d6)δ2.23(s,3H),2.33(s,3H),7.30(m,2H),8.34(m,2H),12.11(s, 1H); MS(ES):276.1(M++1).
4-클로로-5,6-디메틸-2-(3-플루오로페닐)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR (200MHz, DMSO-d6)δ2.31(s,3H),2.33(s,3H),7.29(m,1H),7.52(m,1H),7.96(m, 1H), 8.14(m,1H),11.57(s,1H);MS(ES):276.1(M++1).
4-클로로-5,6-디메틸-2-(2-플루오로페닐)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR (200MHz, DMSO-d6)δ2.34(s,3H),2.34(s,3H),7.33(m,2H),7.44(m,1H),7.99(m, 1H), 12.23(s,1H);MS(ES):276.1(M++1).
4-클로로-5,6-디메틸-2-이소프로필-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR (200MHz, DMSO-d6)δ1.24(d,J=6.6Hz,6H), 2.28(s,3H),2.28(s,3H),3.08(q,J=6.6Hz, 1H),11.95(s,1H);MS(ES):276.1(M++1).
4-클로로-5,6-디메틸-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200 MHz, DMSO-d6)δ2.31(s,3H),2.32(s,3H),8.40(s,1H);MS(ES):182.0(M++1).
dl-4-클로로-5,6-디메틸-2-페닐-7H-7-(1-페닐에틸)피롤로[2,3d] 피리미딘.
제조 12:
dl-,2-디아미노프로판 (1.48 g, 20.0 mmol) 및 탄산 나트륨 (2.73 g, 22.0 mmol)을 함유하는 디옥산 (1000.0 mL) 및 물 (100.0 mL)의 용액에 디-tert-디카르보네이트 (4.80 g, 22.0 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 결과된 혼합물을 14 시간 고반하였다. 디옥산을 진공에서 제거하였다. 침전물을 여과 제거하고 여과물을 진공에서 농축 건조시켰다. 잔류물을 EtOAc를 사용하여 빻고 여과하였다. 여과물을 진공에서 농축 건조하여 dl-1-아미노-2-(1,1-디메틸에톡시)카르보닐아미노-프로판 및 dl-2-아미노-1-(1,1-디메틸에톡시)카르보닐아미노-프로판의 혼합물을 얻었는 데 이들은 정상적인 크로마토그래피 방법으로는 분리될 수 없었다. 이 혼합물을실시예 8에서의 반응에 사용하였다.
제조 13:
Fmoc-β-알라-OH (1.0 g, 3.212 mmol) 및 옥살릴 클로라이드 (0.428 g, 0.29 mL, 3,.373 mmol)을 함유하는 디클로로메탄 (20.0 mL) 용액에 디메틸포름아미드를 0℃에서 몇 방울 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 1 시간 교반한 후, 시클로프로필메틸아민 (0.229 g, 0.28 mL, 3.212 mmol) 및 트리에틸아민 (0.65 g, 0.90 mL, 6.424 mmol)을 첨가하였다. 10 분 후, 이 혼합물을 1 M 하이드로클로라이드 (10.0mL)로 처리하고 결과된 수성 혼합물을 디클로로메탄 (3x30.0 mL)로 추출하였다. 유기 용액을 진공에서 농축 건조하였다. 잔류물을 20% 피페리딘을 함유하는 N,N-디메틸포름아미드 (20.0 mL)의 용액으로 0.5 시간 처리하였다. 진공에서 상기 용매를 제거한 후, 잔류물을 1 M 하이드로클로라이드 920.0 mL) 및 에틸 아세테이트 (20.0 mL)로 처리하였다. 이 혼합물을 분히하고 수성층을 고형 수산화 나트륨으로 pH=8로 알카리화시켰다. 침전물을 여과 제거하고 수용액을 20% 피리딘으로 용출시키는 이온 교환 컬럼 처리하여 N-시클로프로필메틸 β-알라닌 아미드 0.262 g (57%)를 생성하였다.1H NMR(200 MHz,CD3OD)δ0.22(m,2H),0.49(m,2H),2.40(t,2H),2.92(t,2H), 3.05(d,2H);MS(ES):143.1(M++1).
제조 14:
N-tert-부톡시카르보닐-트란스-1,4-시클로헥실디아민.
트란스-1,4-시클로넥실디아민 (6.08 g, 53.2 mmol)을 디클로로메탄 (100 mL)에 용해하였다. 디-t-부틸디카르보네이트 (2.32 g, 10.65 mmol)을 함유한 디클로로메탄 (40 mL) 용액을 캐뉼러 (cannula)를 통해 첨가하였다. 20 기간 후, 반응물을 CHCl3와 물사이에 분배하였다. 층들을 분리하고 수성층을 CHCl3(x3)으로 추출하였다. 합쳐진 유기 층을 MgSO4상에서 건조시키고, 여과하고 농축하여 백색 고체 1.20 g (53 %)를 산출하였다.1H NMR (200MHz,CDCl3):δ1.0-1.3(m,4H),1.44(s,9H),1.8-2.1(m,4H),2.62 (brm,1H),3.40(brs,1H),4.37(brs,1H);MS(ES):215.2(M++1).
4(N-아세틸)-N-tert-부톡시카르보닐-트란스-1,4-시클로헥실디아민.
N-tert-부톡시카르보닐-트란스-1,4-시클로디아민 (530 mg, 2.47 mmol)을 디클로로메탄 (20 mL)에 용해하였다. 무수 아세트산 (250 mg, 2.60 mmol)을 적가하였다. 16시간 후, 반응액을 물 및 CHCl3로 희석시켰다. 층들을 분리하고 수성층을 CHCl3(x3)으로 추출하였다. 합쳐진 유기 층을 MgSO4상에서 건조시키고, 여과하고 농축하였다. 재결정화 (EtOH/H2O)하여 백색 결정 190 mg (30 %)를 산출하였다.1H NMR (200MHz,CDCl3):δ0.9-1.30(m,4H),1.43(s,9H),1.96-2.10(m,7H), 3.40 (brm,1H),3.70(brs,1H),4.40(brs,1H),4.40(brs,1H);MS(ES): 257.2(M++1), 242.1(M+-15),201.1(M+-56).
4-(4-트란스-아세트아미도시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-(1-페닐에틸)피롤로[2,3d]피리미딘.
4-(N-아세틸)-N-tert-부톡시카르보닐-트란스-1,4-시클로헥실디아민 (190 mg, 0.74 mmol)을 디클로로메탄 (5 mL) 에 녹이고 TFA (6 ml)로 희석시켰다. 16 시간 후, 반응액을 농축하였다. 조생성물 고체, DMSO (2 mL), NaHCO3(200 mg, 2.2 mmol) 및 4-클로로-5,6-디메틸-2-7H-피롤롤[2,3d]피리미딘 (35 mg, 0.14 mmol)을 한 플라스크내에 혼합하고 130℃로 가열하였다. 4.5 시간후에, 상기 반응물을 실온으로 냉각시키고 EtOAc 및 물로 희석하였다. 층들을 분리하고 수성층을 CHCl3(x3)으로 추출하였다. 합쳐진 유기 층을 MgSO4상에서 건조시키고, 여과하고 농축하였다. 크로마토그라피 (실리카 정제판; 20:1 CHCl3:EtOH)하여 황갈색 고체 0.3 mg (1 % 수율)을 산출하였다. MS(ES): 378.2 (M++1).
4(N-메탄설포닐)-N-tert-부톡시카르보닐-트란스-1,4-시클로헥실디아민.
트란스-1,4-시클로헥실디아민 (530 mg, 2.47 mmol)을 디클로로메탄 (20 ml)에 녹이고 피리딘 (233 mg, 3.0 mmol)로 희석시켰다. 메탄설포닐 클로라이드 (300 mg, 2.60 mmol)을 적가하였다. 16 시간 후, 반응물을 물 및 CHCl3로 희석시켰다. 층들을 분리하고 수성층을 CHCl3(x3)으로 추출하였다. 합쳐진 유기 층을 MgSO4상에서 건조시키고, 여과하고 농축하였다. 재결정화 (EtOH/H2O)하여 백색 결정 206 mg (29 %)를 산출하였다.1H NMR (200MHz,CDCl3):δ1.0-1.40(m,4H),1.45(s,9H),2.00-2.20(m,4H), 2.98 (s,3H),3.20-3.50(brs,2H),4.37(brs,1H);MS(ES):239.1(M++1), 278.1(M+-15), 237.1(M+-56).
4-(4-트란스-메탄설파미도시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-(1-페닐에틸0피롤롤[2,3d]피리미딘
4-(N-설포닐)-N-tert-부톡시카르보닐-트란스-1,4-시클로헥실디아민 (206 mg,0.71 mmol)을 디클로로메탄 (5 ml)에 녹이고 TFA (6 ml)로 희석시켰다. 16 시간 후, 반응액을 농축하였다. 조 반응 혼합물, DMSO (2 mL), NaHCO3(100 mg, 1.1 mmol) 및 1-클로로-5,6-디메틸-2-7H-피롤로[2,3d]피리미딘을 한 플라스크내에 혼합하고 130℃로 가열하였다. 1.5 시간후에, 상기 반응물을 실온으로 냉각시키고 EtOAc (x3). 합쳐진 유기 층을 MgSO4상에서 건조시키고, 여과하고 농축하였다. 크로마토그라피 (실리카 예비판; 20:1 CHCl3:EtOH)하여 황갈색 고체 2.6 mg (5 % 수율)을 산출하였다. MS(ES): 414.22 (M++1).
실시예 1
4-클로로-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 (0.50 g, 1.94 mmol) 및 4-트란스-히드록시시클로헥실아민 (2.33 g, 19.4 mmol)을 함유한 메틸 설폭시드 (10.0 mL) 용액을 130 ℃에서 5시간 가열하였다. 실온으로 냉각 후, 물 (10.0 ml)을 첨가하고 결과된 수용액을 EtOAc (3x10.0 mL)로 추출하였다. 합쳐진 EtOAc 용액을 건조하고 (MgSO4) 여과한 후, 여과물을 진공에서 농축 건조하고, 잔류물을 실리카 젤 상에서 크로마토그래피하여 4-(4-트란스-히드록시시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 0.49 g (75 %)를 수득하였다 mp 197-199 ℃:1H NMR(200MHz,CDCl3)δ1.25-1.59(m,8H),2.08(s,3H),2.29(s.3H),3.68-3.79(m,1H),4.32-4.38(m,1H),4.88(d,J=8Hz,1H),7.26-7.49(m,3H),8.40-8.44(dd,J=2.2,8Hz,2H),10.60(s,1H);MS(ES):337.2(M++1).
하기 화합물을실시예 1의 방법과 유사한 방법으로 수득하였다:
4-(4-트란스-히드록시시클로헥실)아미노-6-메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200MHz,CDCl3)δ11.37(s,1H,피롤-NH),8.45 (m,2H,Ar-H),7.55(m,3H,Ar-H),6.17(s,1H,피롤-H),4.90(br d, 1H,NH),4.18(m,1H, CH-O),3.69(m,1H,CH-N),2.40-2.20(m,2H),2.19-1.98(m.2H),2.25(s,3H,CH3)1.68-1.20(m,4H);MS(ES):323.2(M++1).
4-(4-트란스-히드록시시클로헥실)아미노-5-메틸-2-페닐-7H-피롤[2,3d]피리미딘.1H NMR(200MHz,CDCl3)δ11.37(s,1H,피롤-NH),8.40 (m,2H,Ar-H),7.45(m,3H,Ar-H),5.96(s,1H,피롤-H),4.90(br d, 1H,NH),4.18(m,1H, CH-O),3.69(m,1H,CH-N),2.38-2.20(m,2H),2.18-1.98(m.2H),2.00(s,3H,CH3)1.68-1.20(m,4H);MS(ES):323.2(M++1).
4-(4-트란스-히드록시시클로헥실)아미노-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘. mp245.5-246.5°C;1H NMR(200MHz,CD3OD)δ8.33(m,2H,Ar-H),7.42(m,3H,Ar-H),7.02(d,1H,J=3.6Hz,피롤-H),6.53(d, 1H,J=3.6Hz,피롤-H),4.26(m,1H, CH-O),3.62(m,1H,CH-N),2.30-2.12(m,2H)2.12-6(m.2H),1.64-1.34(m,4H);MS,M+1=309.3; Anal(C18H20N4O)C,H,N.
4-(4-트란스-히드록시시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-(3-피리딜)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200MHz,CDCl3)δ1.21-1.54(m,8H);2.28(s,3H);2.33(s,3H); 3.70(m,1H),4.31(m,1H),4.89(d,1H),7.40(m,1H),8.61(m,2H),9.64(m.1H);MS(ES):338.2(M++1).
4-(4-트란스-히드록시시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-(2-퓨릴)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200MHz,CDCl3)δ1.26-1.64(m,8H);2.22(s,3H);2.30(s,3H); 3.72(m,1H),4.23(m,1H),4.85(d,1H),6.52(m,1H),7.12(m,1H),7.53(m.1H),9.28(s,1H);MS(ES):327.2(M++1).
4-(4-트란스-히드록시시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-(3-퓨릴)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200 MHz,CDCl3)δ1.25-1.63(m,8H),2.11(s,3H), 2.27(s,3H), 3.71(m,1H),4.20(m,1H),4.84(d,1H),7.03(m,1H),7.45(m,1H),8.13(m,1H),10.38(m,1H);MS(ES);327.2(M++1).
4-(4-트란스-히드록시시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-시클로펜틸-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200 MHz,CDCl3)δ1.26-2.04(m,16H),2.26(s,3H), 2.27(s,3H),3.15(m,1H),3.70(m,1H),4.12(d,1H),4.75(d,1H),MS(ES);329.2(M++1).
4-(4-트란스-히드록시시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-(2-티에닐)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘-4-아민.1H NMR(200 MHz,CDCl3) δ1.28-1.59(m,8H),2.19(s,3H), 2.29(s,3H),3.74(m,1H),4.19(m,1H),4.84(d,1H),7.09(m,1H),7.34(m,1H),7.85(m,1H),9.02(s,1H);MS(ES);342.2(M++1).
4-(4-트란스-히드록시시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-(3-티에닐)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200 MHz,CDCl3)δ1.21-1.60(m,8H),1.98(s,3H), 2.23(s,3H),3.66(m,1H),4.22(m,1H),7.27(m,1H),7.86(m,1H),8.09(m,1H),11.23(s,1H;MS(ES);342.2(M++1).
4-(4-트란스-히드록시시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-(4-플루오로페닐)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200 MHz,CDCl3)δ1.26-1.66(m,8H),1.94(s,3H), 2.28(s,3H),3.73(m,1H),4.33(m,1H),4.92(d,1H),7.13(m,2H),8.41(m,2H),11.14(s,1H);MS(ES);355.2(M++1).
4-(4-트란스-히드록시시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-(3-플루오로페닐)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200 MHz,CDCl3)δ1.26-1.71(m,8H),2.06(s,3H), 2.30(s,3H),3.72(m,1H),4.30(m,1H),4.90(d,1H),7.09(m,1H),7.39(m,1H),8.05(m,1H),8.20(m,1H),10.04(s,1H);MS(ES);355.2(M++1).
4-(4-트란스-히드록시시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-(2-플루오로페닐)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200 MHz,CDCl3)δ1.30-1.64(m,8H),2.17(s,3H), 2.31(s,3H),3.73(m,1H),4.24(m,1H),4.82(d,1H),7.28(m,2H),8.18(m,1H),9.02(m,1H),12.20(s,1H);MS(ES);355.3(M++1).
4-(4-트란스-히드록시시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-isopropy-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200 MHz,CDCl3)δ1.31(d,J=7.0Hz,6H),1.30-1.65(m,8H), 2.27(s,3H),2.28(s,3H),3.01(m,J=7.0Hz,1H),4.14(m,1H),4.78(d,1H);MS(ES);303.2.
dl-4-(2-트란스-히드록시시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-이소프로필-7H-피롤로[2,3d]피리미딘1H NMR(200MHz,CDCl3)d,1.31-1.42(br,4H),1.75-1.82(br,4H), 2.02(s,3H),2.29(s,3H),3.53(m,1H),4.02(m,1H),5.08(d,1H),7.41-7.48(m,3H), 8.30(m,2H),10.08(s,1H);MS(ES);337.2(M++1).
4-(3,4-트란스-디히드록시시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘. MS(ES):353.2(M++1).
4-(3,4-시스-디히드록시시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘. MS(ES):353.2(M++1).
4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘. mp 196-199°C;1H NMR(200 MHz,CDCl3)δ1.72(s,3H),1.97(s,3H),2.31(s,3H),3.59(m,2H),3.96(m,2H),5.63(br,1H),7.44-7.47(m,3H),8.36-8.43(dd,J=1Hz,7Hz,2H), 10.76(s,1H);MS(ES):324.5(M++1).
dl-4-(2-트란스-히드록시시클로펜틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.
1H NMR(200 MHz,CDCl3)δ1.62(m,2H),1.79(br,4H),1.92(s,3H),2.29(s,3H), 4.11(m,1H),4.23(m,1H),5.28(d,1H),7.41-7.49(m,3H),8.22(m,2H),10.51(s,1H); MS(ES):323.2(M++1).
12-트란스-히드록시시클로펜틸아민의 제조는 PCT 9417090 참조.
dl-4-(3-트란스-히드록시시클로펜틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.
1H NMR(200 MHz,CDCl3)δ1.58-1.90(br,6H),2.05(s,3H),2.29(s,3H),4.48-4.57(m,1H),4.91-5.01(m,2H),7.35-7.46(m,3H),8.42-8.47(m,2H),10.11(s,1H); MS(ES):323.2(M++1).
13-트란스-히드록시시클로펜틸아민 제조는 EP-A-322242 참조.
dl-4-(3-시스-히드록시시클로펜틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1
1H NMR(200 MHz,CDCl3)δ1.82-2.28(br,6H),2.02(s,3H),2.30(s,3H),4.53-4.60(m,1H),4.95-5.08(m,1H),5.85-5.93(d,1H),7.35-7.47(m,3H),8.42-8.46(m,2H), 10.05(s,1H);MS(ES):323.2(M++1).
13-시스-히드록시시클로펜틸아민 제조는 EP-A-322242 참조.
4-(3,4-트란스-디히드록시시클로펜틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1 1H NMR(200 MHz,CDCl3)δ1.92-1.99(br,2H),2.14(s,3H),2.20(br,2H), 2.30(s,3H),2.41-2.52(br,2H),2.14(s,3H), 2.20(br,2H)2.30(s,3H),2.41-2.52(br,2H),4.35(m,2H),4.98(m,2H),7.38-7.47(m,3H),8.38-8.42(m,2H)9.53(s,1H); MS(ES):339.2(M++1).
13,4-트란스-디히드록시시클로펜틸아민 제조는 PCT 9417090 참조.
4-(3-아미노-3-옥소프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.
1H NMR(200 MHz,CDCl3)δ2.02(s,3H),2.29(s,3H),2.71(t,2H),4.18(m,2H), 5.75-5.95(m,3H),7.38-7.48(m,3H),8.37-8.41(m,2H),10.42(s,1H):MS(ES):310.1(M++1)
4-(3-N-시클로프로필메틸아미노-3-옥소프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.
1H NMR(200 MHz,CD3OD)δ0.51(q,2H),0.40(q,2H),1.79-1.95(br,1H), 2.36(s,3H),2.40(s,3H),2.72(t,2H),2.99(d,2H),4.04(t,2H),7.58-7.62 (m,3H),8.22-8.29(m,2H):MS(ES):364.2(M++1).
4-(2-아미노-2-oxo에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘1H NMR(200 MHz,CD3OD)δ2.31(s,3H),2.38(s,3H),4.26(s,2H),7.36(m,3H), 8.33(m,2H);MS(ES):396.1(M++1).
4-(2-N-메틸아미노-2-oxo에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘1H NMR(200 MHz,CDCl3)δ1.99(s,3H),2.17(s,3H),2.82(d,3H),4.39(d,2H), 5.76(t,1H),6.71(br,1H),7.41-7.48(m,3H),8.40(m,2H),10.66(s,1H);MS(ES): 310.1(M++1).
4-(3-tert-부틸oxyl-3-옥소프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200 MHz,CDCl3)δ1.45(s,9H),1.96(s,3H),2.29(s,3H),2.71(t,2H), 4.01(q,2H),5.78(t,1H),7.41-7.48(m,3H),8.22-8.29(m,2H);MS(ES):367.2(M++1).
4-(2-히드록시에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200 MHz,CDCl3)δ1.92(s,3H),2.29(s,3H),3.81-3.98(br,4H),5.59(t,1H),7.39-7.48(m,3H),8.37(m,2H),10.72(s,1H); MS(ES):283.1(M++1).
4-(3-히드록시프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200 MHz,CDCl3)δ1.84(m,2H),1.99(s,3H),2.32(s,3H), 3.62(t,2H), 3.96(m,2H),3.35(t,1H),7.39-7.48(m,3H),8.36(m.2H)10.27(s,1H);MS(ES):297.2(M++1)
4-(4-히드록시부틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200 MHz,CDCl3)δ1.71-1.82(m,4H),1.99(s,3H),2.31(s,3H),3.68-3.80(m,4H), 5.20(t.1H),7.41-7.49(m,3H),8.41(m,2H),10.37(s,1H);MS(ES):311.2(M++1).
4-(4-트란스-아세틸아미노시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.
4-(4-트란스-메틸설포닐아미노시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.
4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-7(1-페닐에틸)피롤로[2,3d]피리미딘.
4-(4-트란스-히드록시시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-(1-페닐에틸)피롤로[2,3d]피리미딘.
4-(3-피리딜메틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-7(1-페닐에틸)피롤로[2,3d]피리미딘.
4-(2-메틸프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-7-(1-페닐에틸)피롤로[2,3d]피리미딘.
실시예 2
트리페닐포스핀 (0.047 g, 0.179 mmol) 및 베조 산 (0.022 g, 0.179 mmol)을 함유한 0℃로 냉각된 THF (1.0 mL)의 교반 현탁액에 4-(4-트란스-히드록시시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 (0.05 g, 0.149 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 다음 디에틸 아조디카르복실레이트 (0.028 ml, 0.179 mmol)을 10 분에 걸쳐 적가하였다. 다음, 반응액을 실온으로 가온하였다. 반응을 TLC로 완료시킨 후, 반응 혼합물을 수성 중탄산 나트륨 (3.0 mL)로 냉각하였다. 수성상을 분리하고 에테르로 추출하였다 (2x5.0 mL). 유기 추출물을 혼합하고, 건조시키고 및 진공에서 농축 건조시켰다. 잔류물에 에테르 (2.0 mL) 및 헥산 (5.0 mL)을 첨가하고 이때 트리페닐포스핀 옥사이드를 여과 제거하였다. 여과물을 농축하여 점성의 오이을 생성이고 이를 컬럼 크로마토그래피 (헥산:에틸 아세테이트=4:1)로 정제하여 4-(4-시스-벤조일옥시시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 5.0 mg (7.6 %)를 수득하였다 MS (ES): 441.3 (M++1). 이 반응액은 또한 4-(3-시클로헥세닐)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 50.0 mg (84 %)를 생성하였다. MS (ES):319.2 (M++1).
실시예 3:
4-(4-시스-벤조일옥시시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 (5.0 mg, 0.0114 mmol)을 함유하는 에탄올 (1.0 mL) 용액에 2 M 수산화 나트륨 10 방울을 첨가하였다. 1 시간 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (3x5.0 mL)로 추출하였고 유기 층을 건조시키고 여과한 후, 진공에서 농축 건조시켰다. 잔류물을 컬럼크로마토그래피 (헥산:에틸 아세테이트=4:1)하여 4-(4-시스-히드록시시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 3.6 mg (94 %)를 생성하였다. MS (ES):337.2 (M++1).
하기 화합물을실시예 3과 유사하게 수득하였다.
4-(3-N,N-디메틸-3-옥소프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.
1H NMR(200MHz,CDCl3)δ2.01(s,3H),2.31(s,3H),2.73(t,2H),2.97(s,6H),4.08(m,2H), 6.09(t,1H),7.41-7.48(m,3H),8.43(m,2H),10.46(s,1H);MS(ES):338.2(M++1).
4-(2-포밀아미노에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.
1H NMR(200MHz,CDCl3)δ2.26(s,3H),2.37(s,3H),3.59-3.78(m,2H),3.38-4.01(m,2H), 5.48-5.60(m,1H),7.38-7.57(m,3H),8.09(s,3H),8.30-8.45(m,2H)8.82(s,1H);MS(ES): 310.1(M++1).
4-(3-아세틸아미노프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘. MS (ES):338.2 (M++1).
실시예 4
4-(3-tert-부틸옥시-3-옥소프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 (70.0 mg, 0.191 mmol)을 트리플루오로아세트 산:디클로로메탄 (1:1, 5.0 mL)에 용해하였다. 결과된 용액을 실온에서 1 시간 동안 교반한 후 2 시간 환류시켰다. 실온으로 냉각시킨후, 혼합물을 진공에서 농축 건조하였다. 잔류물을 정제 박막 크로마토그래피 (EtOAc:헥산:AcOH=7:2.5:0.5)하여 4-(3-히드록시-3-옥소프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 40.0 mg (68 %)를 얻었다.1H NMR(200MHz,CD3OD) δ2.32(s,3H), 2.38(s,3H), 2.81(t,2H), 4.01(t,2H), 7.55(m,3H), 8.24(m,2H);MS(ES):311.1(M++1).
4-(3-아미노프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.MS(ES):296.1(M++1), 279.1(M+-NH3).
실시예 5
4-(3-히드록시-3-옥소프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 (50.0 mg, 0.161 mmol)을 N,N-디메필포름아미드 (0.50 mL), 디옥산 (0.50 mL) 및 물 (0.25 mL)의 혼합물에 용해하였다. 이 용액에, 메틸아민 (0.02 mL, 40% 수용액, 0.242 mmol), 트리에틸아민 (0.085 mL) 및 N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트 (61.2 mg, 0.203 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 10분간 교반후,용액을 농축하고 잔류물을 정제 박막 크로마토그라피 (EtOAc)처리하여 4(3-N-메틸-3-옥소프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7ㅗ-피롤로[2,3d]피리미딘 35.0 mg (67 %)를 얻었다.
NMR(200MHz,CDCl3)δ1.92(s,3H),2.30(s,3H),2.65(t,2H),4.08(t,2H),5.90(t,1H),6.129(m,1H),7.45(m,3H),8.41(m,2H),10.68(s,1H);MS(ES):311.1(M++1).
하기 화합물을실시예 5와 유사하게 수득하였다.
4-(2-시클로프로판카르보닐아미노에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.MS(ES):350.2(M++1).
4-(2-이소부티릴아미노에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.MS(ES):352.2(M++1).
4-(3-프로피오닐아미노프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200MHz,CDCl3)δ1.00-1.08(t,3H),1.71-2.03(m,4H),2.08(s,3H), 2.37(s,3H)3.26-3.40(m,2H),3.79-3.96(m,2H),5.53-5.62(m,1H),6.17-6.33(m,1H), 7.33-7.57(m,3H),8.31-8.39(m,2H),9.69(s,1H);MS(ES):352.2(M++1).
4-(2-메틸설포닐아미노에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200MHz,CDCl3)δ2.18(s,3H),2.27(s,3H),2.92(s,3H),3.39-3.53(m,2H)3.71-3.88(m,2H),5.31-5.39(m,1H),6.17-6.33(m,1H),7.36-7.43(m,3H),8.20-8.25(m,2H),9.52(s,1H);MS(ES):360.2(M++1).
실시예 6
4-클로로-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 (0.70 g, 2.72 mmol) 및 1,2-디아미노에탄 (10.0 mL, 150 mmol)의 혼합물을 불활성 분위기하에서 6시간 환류하였다. 과량의 아민을 진공에서 제거하고, 잔류물을 에테르 및 헥산을 사용하여 순차적으로 세척하여 4-(2-아미노에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 0.75 g (98%)를 생성하였다. MS(ES); 282.2 (M++1), 2651.1 (M+-NH3).
실시예 7
4-(2-아미노에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 (70.0 mg, 0.249 mmol) 및 트리에틸아민 (50.4 mg, 0.498 mmol)을 함유한 디클로로메탄 (2.0 mL)의 용액에 프로피오닐 클로라이드 (25.6 mg, 0.024 mL, 0.274 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 1 시간 후, 혼합물을 진공에서 농축시키고 잔류물을 정제 박막 크로마토그래피 (EtOAc)처리하여 4-(2-프로피오닐아미노에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 22.0 mg (26%)를 생성하였다. MS (ES): 338.2 (M++1).
하기 화합물을실시예 7과 유사하게 수득하였다.
4-(2-N'-메틸우레아에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.
1H NMR(200MHz,CDCl3)δ2.13(s,3H),2.32(s,3H),3.53(d,3H),3.55(m,2H),3.88(m,2H), 4.29(m,1H),5.68(t,1H),5.84(m,1H),7.84(m,1H),7.42(m,3H),8.36(dd,2H),9.52(s,1H); MS(ES):339.3(M++1).
4-(2-N'-에틸우레아에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘. MS (ES): 353.2 (M++1).
실시예 8:
1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 하이드로클로라이드 (41.1 mg, 0.215 mmol), 디메틸아미노피리딘 (2.4 mg, 0.020 mmol) 및 피루브 산 (18.9 mg, 0.015 mL, 0.215 mmol)을 함유한 디클로로메탄 (2.0 mL) 용액에 4-(2-아미노에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로{2,3d]피리미딘 (55.0 mg, 0.196 mmol)을 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 4 시간 교반하였다. 통상적인 조처 및 컬럼 크로마토그래피 (EtOAc)를 실시하여 4-(2'-피루필아미도에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘. MS (ES): 352.2 (M++1).
실시예 9:
4-(2-아미노에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 (60.0 mg, 0.213 mmol)을 함유한 디클로로메탄 (2.0 mL) 용액에 N-트리메틸실릴 이소시아네이트 (43.3 mg, 0.051 mL, 0.320 mmol)을 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 3 시간 교반하고, 중탄산 나트륨 용액을 첨가하였다. 소량의 실리카 젤을 통해 여과한 후, 여과물을 진공에서 농축 건조시켜 4-(2-우레아에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 9.8 mg (14%)를 얻었다. MS (ES): 325.2 (M++1).
하기 화합물을실시예 9와 유사하게 수득하였다.
dl-4-(2-아세틸아미노프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200MHz,CDCl3)δ1.28-1.32(d,J=8Hz,3H),1.66(s,3H),1.96(s,3H), 2.30(s,3H),3.76-3.83(m,2H),4.10-4.30(m,1H),5.60-5.66(t,J=6Hz,1H),7.40-7.51(m,3H),8.36-8.43(m,2H),10.83(s,1H);MS(ES):338.2(M++1).
(R)-4-(2-아세틸아미노프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200MHz,CDCl3)δ1.31(d,3H),1.66(s,3H), 1.99(s,3H),2.31(s,3H), 3.78-3.83(m,2H),4.17-4.22(m,1H),5.67(t,1H),7.38-7.5(m,3H),8.39(m,2H), 10.81(s,1H);MS(ES):338.2(M++1).
(R)-4-(1-메틸-2-아세틸아미노에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200MHz,CDCl3)δ1.41(d,3H),1.68(s,3H), 2.21(s,3H),2.34(s,3H),3.46-3.52(br,m,2H),4.73(m,1H),5.22(d,1H),7.41-7.46(m,3H),8.36-8.40(m,2H),8.93(s,1H);MS(ES):338.2(M++1).
(S)-4-(2-아세틸아미노프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200MHz,CDCl3)δ1.31(d,3H),1.66(s,3H),2.66(s,3H),2.35(s,3H), 3.78-3.83(m,2H),4.17-4.22(m,1H),5.67(t,1H),7.38-7.5(m,3H),8.39(m,2H), 8.67(s,1H);MS(ES):338.2(M++1).
(S)-4-(1-메틸-2-아세틸아미노에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200MHz,CDCl3)δ1.41(d,3H),1.68(s,3H), 2.05(s,3H), 2.32(s,3H),3.46-3.52(m,2H),4.73(m,1H),5.22(d,1H),7.41-7.46(m,3H),8.36-8.40(m,2H),10.13(s,1H);MS(ES):338.2(M++1).
실시예 10:
4-클로로-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로{2,3d]피리미딘과 dl-1-아미노-2-(1,1-디메틸에톡시)카르보닐아미노-프로판 및 dl-2-아미노-1-(1,1-디메틸에톡시)카르보닐아미노-프로판의 혼합물과의 반응을실시예 1과 유사하게 실행하였다. 이 반응은 dl-4-(1-메틸-2-(1,1-디메틸에톡시)카르보닐아미노)에틸아미노)-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로92,3d]피리미딘 및 dl-4-(2-메틸-2-(1,1-디메틸에톡시)카르보닐아미노)에틸아미노-5,6-디메일-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘의 혼합물을 생성하였고 이를 컬럼 크로마토그래피 (EtOAc;헥산=1:3)을 분리하였다. 제 일 분획물을 dl-4-(1-메틸-2-(1,1-디메틸에톡시)카르보닐아미노에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘:1H NMR(200MHz,CDCl3)δ1.29-1.38(m,12H),1.95(s,3H), 2.31(s,3H),3.34-3.43(m,2H),4.62-4.70(m,1H),5.36-5.40(d,J=8Hz,1H),5.53(br,1H), 7.37-7.49(m,3H),8.37-8.44(m,2H),10.75(s,1H);MS 396.3(M++1). 제 2 분획물은 dl-4-(2-(1,1-디메틸에톡시)카르보닐아미노프로필0아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘:
1H NMR(200MHz,CDCl3)δ1.26-1.40(m,12H),2.00(s,3H), 2.31(s,3H),3.60-3.90(m,2H),3.95-4.10(m,1H),5.41-5.44(d,J=6.0Hz,1H),5.65(br,1H),7.40-7.46(m,3H),8.37-8.44(m,2H),10.89(s,1H);MS(ES):396.2(M++1).
하기 화합물을실시예 9와 유사하게 수득하였다.
(S,S)-4-(2-아세틸아미노시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1H NMR(200MHz,CDCl3)δ1.43(m,4H),1.60(s,3H),1.83(m,2H), 2.18(s,3H),2.30(m,2H),2.32(s,3H),3.73(br,1H),4.25(br,1H),5.29(d,1H),7.43-7.48(m,3H),8.35-8.40(m,2H),9.05(s,1H).
4-(2-메틸-2-아세틸아미노프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘.1HNMR(200MHz,CDCl3)δ1.51(m,6H),1.56(s,3H),2.07(s,3H),2.36(s,3H),3.76(d,2H),5.78(t,1H),7.41-7.48(m,3H),7.93(s,1H),8.39(m,2H),10.07(s,1H):MS(ES):352.3(M++1).
실시예 11
dl-4(1-메틸-2-(1,1-디메틸에톡시)카르보닐아미노에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 (60.6 mg, 0.153 mmol)을 디클로로메탄 (2.0 mL)에서 트리플루오로아세트 산으로 14 시간 처리하였다. 유기 용매를 진공에서 건조 제거하였다. 잔류물을 N,N-디메틸포름아미드 (2.0 mL)에 용해하고 트기에틸아민 (2.0 mL)에 용해하였다. 이 용액에 무수 아세트 산 (17.2 mg, 0.016, 0.16 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 결과 혼합물을 실온에서 48시간 교반한 다음, 진공에서 농축 건조하였다. 잔류물을 정제 박막 크로마토그래피 (EtOAc) 처리하여 dl-4-(1-메틸-2-아세킬아미노에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 27.0 mg (52%)를 생성하였다.1H NMR(200MHz,CDCl3)δ1.38-1.42(d,J=8HZ,3H), 1.69(s,3H),2.01(s,3H),2.32(s,3H),3.38-3.60(m,2H),4.65-4.80(m,1H),5.23-5.26 (d,J=6Hz,1H)7.40-7.51(m,3H),8.37-8.43(m,2H),10.44(s,1H):MS(ES):338.2(M++1).
실시예 12
4-클로로-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 (0.15 g, 0.583 mmol) 및 (1R, 2R)-(-)-1,2-디아미노시클로헥산 (0.63 g, 5.517 mmol)로부터 실시예 1과 유사하게 제조된, (R,R)-4-(2-아미노시클로헥실)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘을 N,N0디메틸포름아미드 (10.0 mL)에서 트리에틸 아민 (0.726 g, 7.175 mmol) 및 무수 아세트 산 (0.325 g, 3.18 mmol)로 실온에서 2시간 처리하였다. 진공에서 용매를 제거한 후, 에틸 아세테이트 (10.0 mL) 및 물 (10.0 mL)을 잔류물에 첨가하였다. 혼합물을 분리하고 수성층을 에틸 아세테이트 (2x10.0 mL)로 추출하였다. 합쳐진 에틸 아세테이트 용액을 건조시키고 (MgSO4) 여고하였다. 여과물을 진공에서 농축 건조하고 잔류물을 컬럼 크로마타그래피 (EtOAc:헥산=1:1)로 처리하여 (R,R)-4-(2-아세틸아미노시클로헥실)아미노-5,6-디메칠-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 57.0 mg (26 %)를 생성하였다.1H NMR(200MHz,CDCl3)δ1.43(m,4H),1.60(s,3H),1.84(s,2H),2.22(s,3H),2.30(m,2H),2.33(s,3H),3.72(br,1H),4.24(br,1H),5.29(d,1H),7.43-7.48(m,3H),8.35-8.39(m,2H), 8.83(s,1H):MS(ES):378.3(M++1).
실시예 13
4-(2-히드록시에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 (40.0 mg, 0.141 mmol)을 함유한 피리딘 (1.0 mL) 용액에 0℃에서 무수 아세트산을 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 4시간 교반하고 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 정제 박막 크로마토그래피 (EtOAc:헥산=1:1)로 처리하여 4-(2-아세틸옥시에틸)아미노-5,6-이메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 32.3 mg (71 %)를 생성하였다.1H NMR(200MHz,CDCl3)δ1.90(s,3H),2.08(s,3H),2.31(s,3H),4.05(m,2H), 4.45(t,2H),5.42(m,1H),7.41-7.49(m,3H),8.42(m,2H),8.42(m,2H),11.23(s,1H).
실시예 14:
Fmoc-β-Ala-OH (97.4 mg, 0.313 mmol) 및 옥살릴 클로라이드 (39.7 mg, 27.3 uL, 0.313 mmol)을 함유한 디클로로메탄 (4.0 mL) 용액게 N,N-디메틸포름아미드를 한 방울 적가하고 0℃에서 1시간 교반 후, 4-(2-아미노에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d)피리미딘 (80.0 mg, 0.285 mmol) 및 트리에틸아민 (57.6 mg, 79.4 uL, 0.570 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 3시간 후, 이 혼합물을 진공에서 농축하고 잔류물을 20% 피페리딘을 함유하는 N,N-디메틸포름아미드 (2.0 mL) 용액에 0.5 시간 처리하였다. 용매을 진공에서 제거한 후, 잔류물을 디에틸 에테르:헥산 (1:5)로 세척하여 4-(6-아미노-3-아자-4-옥소헥실)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘을 3.0 mg (3%) 얻었다. MS (ES): 353.2 (M++1)
실시예 15:
4-(2-아미노에틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 (70.0 mg, 0.249 mmol) 및 무수 석신산 (27.0 mg, 0.274 mmol)을 함유하는 디클로로메탄 (4.0 mL) 용액에 N,N-디메틸폴름아미드를 한 방울 떨어뜨리고 실온에서 4시간 교반하였다. 이 반응 혼합물을 20% 수산화 나트륨 (3x5.0 mL)으로 추출하였다. 이 수성용액을 3 M 염화수소를 사용하여 pH=7.0으로 산성화시켰다. 전체 혼합물을 에틸 아세테이트 (3x10 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기 용액을 건조시키고 (MgSO4) 여과하였다. 여과물을 진공에서 농축 건조시켜 4-(7-히드록시-3-아자-4,7-디옥소헵틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘을 15.0 mg (16%) 생성하였다. MS (ES): 382.2 (M++1)
실시예 16:
이메틸포름아미드 (DMF) 10 mL에 4-시스-3-히드록시시클로펜틸)아미노-2-페닐-5,6-디메틸-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 700 mg을 실온에서 첨가 한 후, N-Noc 글리신 455 mg, N,N-디메틸아미노피리딘 (DMAP) 20 mg, 히드록시벤조트리아졸 (HOBT) 293 mg, 및 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보이미드 히드로클로라이드 (EDCl) 622 mg을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 교반하면서 밤새 방치하였다. 다음 DMF 감압하에서 제거하고 반응 혼합물을 에틸 아세테이드 20 mL 및 물 50 mL 사이에 분할하였다. 수성 분을 에틸 아세테이트 (2x20 mL)로 더 추출하고 합쳐진 유기 분을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농툭하였다. 에틸 아세테이트/헥산으로 용출하면서 실리카 젤상에서 정제하여 바람직한 생성물: 4-(시스-3-(N-t-부톡시카르보닐-2-아미노아세톡시)시클로펜틸)아미노-2-페닐-5,6-디메틸-7H-피롤[2,3d]피리미딘 410 mg을 생성하였다. MS (ES) (M++1)=480.2. 다음, 에스테르를 20% 트리플루오로아세트 산을 함유하는 디클로로메탄 5 mL로 실온에서 처리하고, 밤새 방치한 후, 농축하였다. 에틸 아세테이트를 사용 분쇄하여 300 mg의 회백색 고체; 4-(시스-3-(2-아미노아세톡시)시클로펜틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 트리플루오아세트 산 염을 생성하였다 MS (ES) (M++1)=380.1
당해 분야의 숙련자는 하기 화합물이 전술한 방법으로 합성될 수 있음을 인식할 것이다.
4-(cis-3-히드록시시클로펜틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 MS(ES)(M++1)=323.1.
4-(cis-3-(2-아미노아세톡시)시클로펜틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘트리플루오로아세트 산 염 MS(ES)(M++1)=380.1.
4-(3-아세트아미도)피페리디닐-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘MS(ES)(M++1)=364.2.
4-(2-N'-메틸우레아프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘,MS(ES)(M++1)=353.4.
4-(2-아세트아미도부틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘,MS(ES)(M++1)=352.4.
4-(2-N'-메틸우레아부틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘MS(ES)(M++1)=367.5.
4-(2-아미노시클로프로필아세트아미도에틸)아미노-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘MS(ES)(M++1)=309.1.
4-(트란스-4-히드록시시클로헥실)아미노-2-(3-클로로페닐)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘MS(ES)(M++1)=342.8.
4-(트란스-4-히드록시시클로헥실)아미노-2-(3-플루오로페닐)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘 MS(ES)(M++1)=327.2.
4-(트란스-4-히드록시시클로헥실)아미노-2-(4-피리딜)-7H-피롤로[2,3d]피리미딘MS(ES)(M++1)=310.2.
실시예 17
구성Ⅸ
(7) (구성 IX)의 피롤 질소를 염기성 조건에서 디-t-부틸디카르보네이트를 사용하여 보호하여 상응하는 카르바메이트 (22)을 생성하였다. (22)를 부위선택적으로 라디칼 브롬화시켜 브롬화물 (23)을 산출하였다. 일반적으로, 화합물 (23)은 다양한 친핵 커플링 동반자에 대해서 주요 친핵 중간체로서 역할한다. 이 알킬 브로마이드를 소듐 페놀레이트 트리하이드레이트호 치환하여 화합물 (24)을 산출하였다. 후속적으로 아릴 클로라이드를 치환하고 및 t-부틸 카바메이트 보호기를 제거하는 것을 한 단계로 실행하여 바람직한 화합물 (25)을 산출하였다.
구성 IX에 따른 화합물 (22)-(25)의 합성 상세
디-t-부틸 디카보네이트 (5.37 g, 24.6 mmol) 및 디메틸아미노피리딘 (1.13g, 9.2 mmol)을 (7) (1.50 g, 6.15 mmol) 및 피리딘 (30 mL)을 함유하는 용액에 첨가하였다. 20시간 후, 반응액을 농축시키고 잔류믈을 CH2Cl2와 물 사이로 분할하였다. CH2Cl2층을 분리하고, MgSO4로 건조시키고 여과한 후, 농축하여 흑색 고형물을 산출하였다. 플래쉬 크로마토그래피 (SiO2; 1/9 EtOAc/헥산, Rf0.40)하여 백색 고체 (22)를 1.70 g (80%) 산출하였다.1H NMR(200MHz,CDCl3)δ8.50(m,2H,Ar-H),7.45(m,3H,Ar-H),6.39(s,1H,피롤-H),2.66(s,3H,피롤-CH3),1.76(s,9H,carbamate-CH3);MS,M+1=344.1;Mpt=175-177°C.
N-브로모석신이미드 (508 mg, 2.86 mmol) 및 AIBN (112 mg, 0.68 mmol)을 (22) (935 mg, 2.71 mmol) 및 CCl4(50 mL)을 함유하는 용액에 첨가하였다. 이 용액을 가열하여 환휴하엿다. 2시간 후, 반응액을 실온으로 냉각시키고 진공에서 농축시켜 백색 고체를 산출하였다. 플래쉬 크로마토그래피 (SiO2; 1/1 CH2Cl2/헥산, Rf0.30)하여 백색 고체 (23)를 960 mg (84%) 산출하였다.1H NMR(200MHz,CDCl3)δ8.52(m,2H,Ar-H),7.48(m,3H,Ar-H),6.76(s,1H,피롤-H),4.93(s,2H,피롤-CH2Br),1.79(s,9H,carbamate-CH3);MS,M+1=423.9;Mpt=155-157°C.
소듐 펜옥사이드 트리하이드레이트 (173 mg, 1.02 mmol)을 브롬화물 (23) (410 mg, 0.97 mmol)이 용해된 CH2Cl2(5 mL) 및 DMF (10 mL) 용액에 일부 첨가하였다. 2 시간후, 반응용액을 CH2Cl2및 물로 분할하였다. 물 층을 CH2Cl2로 추출하였다. 합쳐진 CH2Cl2층을 물로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고 농축하여 황색 고형물을 생성하였다. 플래쉬 크로마토그래피 (SiO2; 1/6 EtOAc/헥산, Rf0.30)하여 백색 고체 (24)를 210 mg (50%) 산출하였다.1H NMR(200MHz,CDCl3)δ8.53(m,2H,Ar-H),7.48(m,3H,Ar-H),7.34(s,2H,Ar-H),7.03(s,3H,Ar-H),6.83(s,1H,피롤-H),5.45(s,2H,ArCH2O),1.76(s,9H,carbamate-CH3);MS,M+=436.2.
25
(24) (85 mg, 0.20 mmol), N-아세틸에틸렌디아민 9201 mg, 1.95 mmol) 및 DMSO (3 mL)을 함유하는 용액을 100℃로 가열하였다. 1시간 후, 온도를 130℃로 올렸다. 3시간 후, 반응액을 실온으로 냉각시키고 EtOAc 및 물 사이로 분할하였다. 물층츨 EtOAc로 추출하였다 (x2). 합쳐진 EtOAc 층을 물로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고 농축시겼다. 플래쉬 크로마토그래피 (SiO2; 1/9 EtOH/CHCl3, Rf0.25)하여 거품성 백색 고체 (25)를 73 mg (93%) 산출하였다.1H NMR(200MHz, DMSO-d6)δ11.81(brs,1H,N-H),8.39(m,2H,Ar-H),8.03(br t,1H,N-H),7.57(brt,1H,N-H),7.20-7.50(m,5H,Ar-H),6.89-7.09(m,3H,Ar-H),6.59(s,1H,피롤-H), 5.12(s,2H,ArCH2O),3.61(m,2H,NCH2),3.36(m,2H,NCH2),1.79(s,3H,COCH3);MS,M+1=402.6
하기 화합물을실시예 17:과 유사하게 수득하였다.
4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-페녹시메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘. mp 196-197°C;MS(ES):401.6(M++1).
4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(4-플루오로페녹시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘. MS(ES):420.1(M++1).
4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(4-클로로페녹시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘. MS(ES):436.1(M++1).
4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(4-메톡시페녹시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘. MS(ES):432.1(M++1).
4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(N-피리딘-2-온)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘. MS(ES):403.1(M++1).
4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(N-페닐아미노)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘. MS(ES):400.9(M++1).
4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(N-메틸-N-페닐아미노)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘. MS(ES):414.8(M++1).
4-(2-N'-메틸우레아에틸)아미노-6-페녹시메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d]피리미딘. MS(ES):416.9(M++1).
인간 아데노신 A1 및 A2a 수용체에 대한 효모 β-갈락토시다제 리포터 유전자 분석
효모 균주(S. cerevisiae)를 인간 아데노신 A1 (A1R; CADUS 균주 CY12660) 또는 인간 A2a(A2a; CADUS 균주 CY8362)로 형질전환시키고 lacZ(β-갈락토시다제) 리포터 유전자를 첨가하여 기능적 판독물로 사용하였다. 형질전환의 전체 설명은 하기한다(효모 균주 참조). A1 및 A2a 수용체에 대해 유사 친화성을 갖는 효능있는 아데노신 수용체 아고니스트인 NECA(5'-N-에틸카르복스아미도아데노신)을 모든 분석용 리간드로서 사용하였다. 시험 화합물을 8가지의 농도(0.1-10,000 nM)에서 CY12660 또는 CY8362에 의한 NECA 유래의 β-갈락토시다제 활성을 저해하는 능력을 조사하였다.
효모 스톡 배양액 제조각 효모 균주, CY12660 및 CY8362를 LT 한천 플레이트 상에서 스트리킹하고 30 ℃에서 배양하여 콜로니를 관찰하였다. 이들 콜로니로부터의 효모를 LT 액체(pH 6.8)에 가하고 30 ℃에서 하룻밤 성장시켰다. 각 효모균주를 분광 광도법(분자 장치 VMAX)으로 측정하여 OD600=1.0-2.0 (약 1-2×107세포/ml)으로 희석하였다. 각 6 ml의 효모액 배양액에 대해, 40 % 글리세롤(1:1.5 부피:부피) 4ml를 첨가하였다("효모/글리세롤 스톡"). 이 효모/글리세롤 스톡으로부터, 10개의 1ml 분취량을 제조하고 분석하는데 필요할 때까지 -80 ℃에서 저장하였다.
효모 A1R 및 A2aR 분석각 CY8362 및 CY12660 효모/글리세롤 스톡중 한 개의 바이알을 해빙하여 pH 6.8의 보충된 LT 액상배지(92 ml LT 배지, 40 % 글루코스 5 ml, 1 M KOH 0.45 ml 및 파이프 2.5 ml 첨가)를 접종하는데 사용하였다. 액상 배지를 30 ℃에서 16-18 시간(하룻밤) 성장시켰다. 다음에 하룻밤 배양된 배양액으로부터의 분취량을 4U/ml 아데노신 데아미나제 (송아지 장 점막으로부터의 VI형 또는 VII형, Sigma)를 함유하는 LT 배지에서 희석하여 CY8362(A2aR)에 대해서는 OD600=0.15 (1.5×106세포/ml)를, CY12660(A1R)에 대해서는 OD600=0.50 (5×106세포/ml)를 얻었다.
96-웰 마이크로타이터 플레이트에서 100ul의 최종 부피로 분석을 시행하여 2 % DMSO의 최종 농도가 모든 웰에서 이루어졌다. 1차 스크리닝을 위해, 1-2가지의 농도(10 uM, 1 μM)의 시험 화합물을 사용하였다. 화합물 프로필을 위해, 8가지의 농도(10000, 1000, 500, 100, 50, 10, 1 및 0.1 nM)로 시험하였다. 각 마이크로타이터 플레이트에 대해, 20 % DMSO 10 ul를 "대조군" 및 "전체" 웰에 가하고 시험 화합물(20 % DMSO중) 10ul를 "미지" 웰에 가하였다. 이어서, NECA (A1R에 대해서는 5 uM, A2aR에 대해서는 1 uM) 10 ul를 "전체" 및 "미지" 웰에 가하고; PBS 10ul를 "대조군"웰에 가하였다. 최종 첨가에서, 효모 균주 CY8362 또는 CY12660 80 ul를 모든 웰에 가하였다. 모든 플레이트를 간단히 교반하고(랩라인 오비탈 진탕기 2-3분), 건조 오븐에서 30 ℃에서 4시간동안 배양하였다.
β-갈락토시다제 활성을 비색 기질(예, ONPG, CPRG), 발광 기질(예, 갈락톤-스타) 또는 형광 기질(예, FDG, 레소루핀) 중 어느 한가지를 사용하여 정량할 수 있다. 형광 검출은 간섭이 없고 비용이 낮아서 우수한 신호:잡음 비에 근거하여 바람직하다. 플루오레세인 디갈락토피라노시드(FDG, 분자 프로브 또는 마커 유전자 기술), 형광성 β-갈락토시다제 기질을 20 ul/웰에서 모든 웰에 가하였다(최종 농도=80 uM). 플레이트를 5-6초간 진탕하고(랩라인 오비탈 진탕기), 90분동안 37 ℃에서 배양하였다(95 % O2/5 % CO2배양기). 90분의 배양시간이 끝난 후에, β-갈락토시다제 활성을 1 M Na2CO3의 20 ul/웰을 사용하여 중지시키고 모든 플레이트를 5-6초간 진탕시켰다. 다음에 플레이트를 6초간 교반하고 상대 형광 강도를 형광계(Tecan Spectrafluor; 여기=485 nm, 방출= 535 nm)를 사용하여 측정하였다.
계산"대조군" 웰에 대한 상대 형광 값을 기본으로 놓고 "전체" 및 "미지" 값으로부터 공제하였다. 화합물 프로필을 로그 변환(x-축: 화합물 농도) 다음에 IC50값(GraphPad Prism)에 적당한 한 부분의 경쟁 곡선을 통해 분석하였다.
효모 균주.사카로마이세프 세레비지아균주 CY12660[farl*1442 tbt1-1 fusl-HIS3can1 ste14::trp1::LYS2 ste3*1156 gpa1(41)-Gαi3 lys2 ura3 leu2 trp1:his3;LEU2 PGKp-Mfα1Leader-hA1R-PHO5term 2mu-orig REP3 Ampr]and CY8362[gpa1prGαsE10K far1*1442 tbt1-1 fus1-HIS3 can1 ste14::trp1:LYS2 ste3*1156lys2 ura3 leu2 trpl his3;LEU2 PGKp-hA2aR 2mu-ori REP3 Ampr]이 개발되었다
LT 배지LT(Leu-Trp 보충) 배지는, 발린 1.0 g, 아스파르트산 1.0 g, 페닐알라닌 0.75 g, 리신 0.9 g, 티로신 0.45 g, 이소류신 0.45 g, 메티오닌 0.3 g, 아데닌 0.6 g, 우라실 0.4 g, 세린 0.3 g, 프롤린 0.3 g, 시스테인 0.3 g, 아르기닌 0.3 g, 히스티딘 0.9 g 및 트레오닌 1.0 g이 보충된 DIFCO 효모 질소 기재로 이루어진다.
인간 A1 아데노신 수용체를 발현하는 효모 균주의 구조
본 실시예에서, 효모 페로몬 시스템 경로로 기능적으로 통합된, 인간 A1 아데노신 수용체를 발현하는 효모 균주의 구조가 기재된다.
1. 발현 벡터 구조
인간 A1 아데노신 수용체에 대한 효모 발현 벡터를 구성하기 위해, A1 아데노신 수용체 cDNA는, 표준 기술 및 인간 A1 아데노신 수용체의 공개된 서열에 근거하여 설계된 프라이머를 사용하여 인간 해마상융기 mRNA의 역전사효소 PCR에 의해 얻었다. PCR 생성물을 효모 발현 플라스미드 pMP15의NcoI 및XbaI 부위로 계대 클로닝하였다.
pMP15 플라스미드는 다음과 같은 pLPXt로부터 발생하였다: YEP51의XbaI 부위 (Broach, J.R. et al. (1983) "Vectors for high-level, inducible expression of cloned genes in yeast" p. 83-117 in M. Inouye(ed.), Experimental Manipulation of Gene Expression. Academic Press, New York)를 제한효소 절단, 말단 필링 및 재 라이게이션으로 제거하여 Yep51NcoDXba를 얻었다. 다른XbaI 부위는BamHI에 의한 제한효소 절단, 말단 필링, 링커(New England Biolabs, # 1081) 라이게이션,XbaI 분해 및 재 라이게이션으로BamHI에서 발생하여 YEP51NcoXt를 얻었다. 이 플라스미드를Esp31 및NcoI로 분해하고 Leu2 및 PCR로 얻은 PGKp 단편으로 라이게이션하였다. 2 kb Leu2 PCR 생성물을 Esp31 및 BglII 부위를 함유하는 프라이머를 사용하여 YEP51Nco로부터 증폭에 의해 얻었다. 660개의 염기쌍 PGKp PCR 생성물은BglII 및NcoI 부위를 함유하는 PCR 프라이머로 pPGKαs(Kang, Y.-S.et al. (1990)Mol. Cell. Biol. 10:2582-2590)으로부터 증폭에 의해 얻었다. 얻은 플라스미드는 pLPXt로 언급된다. pLPXt는 a-인자 프레-프로 리더의 코딩 영역을NcoI 부위로 삽입함으로써 변형된다. 프레프로 리더를 삽입하여NcoI 클로닝 부위는 리더의 3' 말단에서 유지되나 5' 말단에서는 다시 발생되지 않았다. 이 방식으로 수용체는NcoI 및XbaI에 의한 플라스미드의 분해로 클로닝될 수 있다. 얻은 플라스미드는 pMP15로 언급된다.
pMP15로 삽입된 인간 A1 아데노신 수용체 cDNA는 p5095로 칭한다. 이 벡터에서, 수용체 cDNA는 효모 a-인자 프레프로 리더중 3' 말단으로 융합된다. 단백질 숙성 동안에 프레프로 펩티드 서열이 절단되어 성숙한 완전한 길이의 수용체가 얻어진다. 이것은 효모 분비경로를 통해 수용체의 가공동안에 발생한다. 이 플라스미드는 Leu 선별(즉, 류신이 없는 배지상에서 성장)로 유지된다. 클로닝된 코딩 영역의 서열이 정해지고 공개된 문헌에서와 동일하다는 것을 알았다(GenBank 수탁번호 S45235 및 S56143).
2. 효모 균주 구조
인간 A1 아데노신 수용체를 발현하는 효모 균주를 구성하기 위해, 효모 균주 CY7967를 출발 모 균주로 사용하였다. CY7967의 유전형은 다음과 같다.
MATα gpaD1163 gpal(41)gαi3 far lD1442 tbt-1 FUSI-HIS3 canl ste14::trp1::LYS2 ste3D1156 lys2 ura3 leu2 trp1 his3.
유전자 마커를 하기한다:
MATa: 교배형 a.
gpalD1163: 내생 효모 G-단백질 GPA1기 결실되었다.
gpal(41)Gai3: gpal(41)-Gai3을 효모 게놈으로 통합시켰다. 이 키메라 Ga
단백질은 포유동물 G-단백질 Gai3에 융합된 내생 효모 Ga
서브유닛 GPA1의 처음 41개의 아미노산으로 구성되고 동원
N-말단 아미노산이 결실되었다.
farlD1442: FAR1 유전자(세포주기 정지)가 결실되었다(이로써 페로몬
반응경로의 활성시에 세포주기 정지 방지)
tbt-1: 일렉트로포레이션으로 형질전환 효능이 높은 균주
FUS1-HIS3: FUS1 프로모터 및 HIS3 코딩 영역사이에서의 융합(이로써
페로몬 유래가능한 HIS3 유전자).
can 1: 아르기닌/카나비닌 투과효소.
ste14::trp1::LYS2: STE14, C-파르네실 메틸트랜스퍼라제의 유전자 붕괴(이로써
페로몬 경로를 통해 기본 신호화 저하).
ste3D1156: 내생 효모 STR, a 인자 페로몬 수용체(STE3)가 붕괴되었다.
lys2: 2-아미노아피데이트 환원효소에서의 결함, 효모는 성장하는데
리신이 필요.
ura3: 오로티딘-5'-포스페이트 데카르복실라제에서의 결함, 효모는
성장하는데 우라실이 필요.
leu2: b-이소프로필말레이트 데하이드로제나제에서의 결함, 효모는
성장하는데 류신이 필요.
trp1: 포스포리보실안트라닐레이트에서의 결함, 효모는 성장하는데
트립토판이 필요.
his3: 이미다졸글리세로포스페이트 데하이드로게나제에서의 결함,
효모는 성장하는데 히스티딘이 필요.
두 개의 플라스미드를 일렉트로포레이션에 의해 균주 CY7967로 형질전환하였다: 플라스미드 p5095 (인간 A1 아데노신 수용체를 코딩화; 상기함) 및 FUS1-β-갈락토시다제 리포터 유전자 플라스미드인 플라스미드 p1584. 플라스미드 p1584는 플라스미드 pRS426에서 유래하였다(Christianson, T.W. et al. (1992) Gene 110: 119-1122). 플라스미드 pRS426은 누클레오티드 2004-2016에서 폴리링커를 함유한다. FUS1 프로모터 및 β-갈락토시다제 유전자 사이의 융합물을 제한부위 EagI 및 XhoI에서 삽입하여 플라스미드 p1584를 얻었다. p1584 플라스미드는 Trp 선별(즉, 류신이 없는 배지상에서 성장)에 의해 유지된다.
CY12660으로 언급되는 p5095 및 p1584를 운반하는 결과 균주는 인간 A1 아데노신 수용체를 발현한다. 이 균주를 액체 또는 한천 플레이트상에서 성장시키기 위해, 류신 및 트립토판이 없는 최소의 배지를 사용하였다. 플레이트상에서 성장 분석(FUS1-HIS3)을 시행하기 위해, 플레이트 pH는 6.8이고, 0.5-2.5 mM 3-아미노-1,2,4-트리아졸을 함유하고 류신, 트립토판 및 히스티딘이 없었다. 특이성에 대한 대조로서, 한가지 이상의 다른 효모기제 7개의 트랜스멤브레인 수용체 스크린과의 비교는 모든 실험에 포함되었다.
인간 A2a 아데노신 수용체를 발현하는 효모 균주의 구조
본 실시예에서, 효모 페로몬 시스템 경로로 기능적으로 통합된 인간 A2a 아데노신 수용체를 발현하는 효모 균주의 구조가 기재된다.
1. 발현 벡터 구조
인간 A2a 아데노신 수용체에 대한 효모 발현 벡터를 구성하기 위해, 인간 A2a 수용체 cDNA를 필 머피(Phil Murphy, NIH) 박사에게 얻었다. 이 클론을 수용할 때, A2a 수용체 삽입물을 서열화하고 공개된 서열(GenBank 수탁번호 S46950)과 동일하다는 것을 알았다. 수용체 cDNA를 VENT 폴리머라제에 의해 플라스미드로부터 삭제하고 플라스미드 pLPBX로 클로닝하고, 효모중의 구성성분인 포스포글리세레이트 키나제(PGK) 프로모터에 의해 수용체 발현을 하게 한다. 전체 삽입물의 서열을 다시 서열화하고 공개된 서열과 동일하다는 것을 알았다. 그러나, 사용된 클로닝 방법에 의해 수용체의 카르복시 말단에 첨부된 3개의 아미노산, GlySerVal이 있었다.
2. 효모 균주 구조
인간 A2a 아데노신 수용체를 발현하는 효모 균주를 얻기 우해, 효모 균주 CY8342를 출발 모 균주로 사용하였다. CY8342의 유전자형은 다음과 같다:
MATαfar1D1442 tbt1-l lys2 ura3 leu2 trpl his3 fus1-HIS3 can1 ste3D1156 pgaD1163 ste14::trp1::LYS2 gpa1p-rGαsE10K(or gpalp-rGαsD229S or pgalp-rGαsE10K+D229S)
유전자 마커는 G-단백질 변이만 제외하고는 실시예 1에 기재된 바와 같다. 인간 A2a 수용체 발현을 위해 효모 균주를 사용하고 내생 효모 G단백질 GPA1이 결실되었고 포유동물의 Gαs로 치환되었다. 3개의 래트 Gαs돌연변이체를 사용하였다. 이들 변이체는 효모 βγ에 효율적으로 커플링하는 단백질로 전환시키는 한 개 또는 두 개 부분의 돌연변이를 포함한다. 이들은 GαsE10K (10 위치에서 글루탐산이 리신으로 치환), GαsD229S(229 위치에서 아스파르트산이 세린으로 치환) 및 GαsE10K+D229S(두개 부분의 돌연변이 포함)으로서 동정된다.
균주 CY8342 (3개의 돌연변이체 래트 Gαs단백질중의 하나를 운반)를 모 벡터 pLPBX (수용체-) 또는 pLPBX-A2a(수용체+) 중 어느 한가지로 형질전환시켰다. β-갈락토시다제 코딩 서열(상기함)에 융합된 FUS1 프로모터가 있는 플라스미드를 가하여 페로몬 반응경로의 활성화 정도를 평가하였다.
인간 A1 아데노신 수용체를 발현하는 효모 균주를 사용하는 기능적 분석
본 실시예에서, 인간 A1 아데노신 수용체의 조절체에 대한 효모에서의 기능적 스크리닝 분석 현상을 기재한다.
1. 분석에 사용된 리간드
이 수용체에 대한 천연 아고니스트인 아데노신 뿐만 아니라 두 개의 다른 합성 아고니스트를 분석하는데 사용하였다. EC50이 약 75 nM이라고 보고된 아데노신, 및 친화성이 약 50 nM인 (-)-N6-(2-페닐이소프로필)-아데노신 (PIA)를 실험에서 사용하였다. 5'-N-에틸카르복스아미도-아데노신 (NECA)을 모든 성장 분석에 사용하였다. 성장 배지에서 아데노신의 존재로 인한 신호화를 방지하기 위해, 아데노신데아미나제 (4U/ml)을 모든 분석물에 가하였다.
2. 효모에서의 생물학적 반응
이종 효모 시스템에 기능적으로 커플링하기 위한 A1 아데노신 수용체의 능력은 A1 수용체 발현 벡터 (상기한 p5095)를 상이한 G 단백질 서브유닛을 발현한 일련의 효모 균주로 도입함으로써 평가되었다. 대부분의 이들 형질전환체는 Gαi또는 Gαo서브타입의 Gα서브유닛을 발현하였다. 추가의 Gα단백질을 혼합된 수용체-Gα단백질 커플링의 가능한 동정에 대해 시험하였다. 다양한 균주에서,STE18또는 키메라STE18-Gγ2구조물을 효모 게놈으로 통합시켰다. 효모 균주는 불완전한HIS3유전자를 보호하고FUS1-HIS3의 복제물을 통합하여 3-아미노-1,2,4-트리아졸(0.2, 0.5 및 1.0 mM에서 시험)을 함유하고 히스티딘이 없는 선별 배지에서 선별되게 하였다. 형질전환체를 분리하고 3-아미노-1,2,4-트리아졸, 4U/ml 아데노신 데아미나제를 함유하고 히스티딘이 없는 배지상에 단층을 제조하였다. 리간드의 다양한 농도(예, 0, 0.1, 1.0 및 10 mM에서의 NECA)의 5개의 마이크로리터를 적용하였다. 성장을 2일간 모니터하였다. 리간드-의존 성장반응은 다양한 효모 균주에서 이 방식으로 시험하였다. 결과는 하기 표 1에 요약되어 있다. 기호 (-)는 리간드-의존 수용체 활성이 검출되지 않은 것이고 (+)는리간드-의존 반응을 나타내는 것이다. 용어 "LIRMA"는 리간드와 무관한 수용체 매개된 활성을 나타낸다.
표 3
효모 균주 Gα서브유닛 Gγ서브유닛 균주 변이체 결과
CY1316 GPA1 STE18 -
GPA41-Gαi1 +
GPA41-Gαi2 +
GPA41-Gαi3 +
GPA41-Gai2-GαOB LIRMA
GPA41-GαSE10K -
GPA41-GαSD229S -
CY7967 GPA41-GαI3인터그레이티드 +++
CY2120 GPA1 STE18 sst2Δ +
GPA41-Gαil +
GPA41-Gαi2 +
GPA41-Gαi3 +
GPA41-Gαi2-GαOB LIRMA
GPA41-GαSE10K _
GPA41-GαSE229S _
CY9438 GPA1 STE18-Gγ2 _
GPA41-Gαil +
GPA41-Gαi3 +
GPA41-Gαi3 +
GPA41-Gαi2-GαOB LIRMA
GPA41-GαSE10K _
GPA41-GαSE229S _
CY10560 GPA1-integrated STE18-Gγ2 sst2Δ ++
표3에 지시된 바와 같이, 가장 강건한 신호가 GPA1(41)-Gαi3키메라를 발현하는 효모 균주에서 일어난다.
III.fus1-LacZ 분석
상기 페로몬 반응 경로의 활성을 더 상세히 특징짓기 위해, 아고니스트 자극에 대응한 fus1LacZ를 통한 β-갈락토시다제의 합성을 측정하였다. β-갈락토시다제 분석을 수행하기 위해, 리간드를 농도를 증가시키면서 Ste18-Gγ2 키메라 및 GPA41-Gα3i를 같이 발현하는 효모 균주에서 발현되는 인간 A1 아신 수용체의 중간 대수 증식 배약액에 첨가하였다. 형질전환체를 분리하고 히스티딘 및 아데노신 디아미나제 4 U/ml 존재하에서 밤새 배양하였다. 아신 디아미나제 4 U/ml 및 리간드와 같이 5 시간 배양한 후, β-갈락토시타제용 기줄로서 CPRG를 사용하여 β-갈락토시다제의 유도 정도를 측정하였다. 각 분석에 5x105세포를 사용하였다.
NECA 자극으로 얻어진 결과는 10-8M의 NECA 농도에서는 β-갈락토시다제 활성이 약 2배 정도 자극된다는 것을 나타낸다. 또한, 약 10 배의 자극 지표가 10-5M의 NECA 농도에서 관측되었다.
이러한 분석의 유용성은 이러한 균주 상에 길항체의 활성을 확인함으로써 더 적용될 수 있다. 두 개의 공지된 아신 길항체, XAC 및 DPCPX를, β-갈락토시다제 분석에서 NECA (5 mM에서)에 반하여 활성화될 수 있는 능력에 대하여 시험하였다. 이러한 분석에서, β-갈락토시다제 유도는 기질로서 FDG를 사용하고 분석당 1.6x105세포를 사용하여 측정하였다. 결과는 XAC 및 DPCPX 둘다 각각 44nM 및 49 nM의 IC50값을 가지면서, 효모-발현 A1 아신 수용체의 강력한 길항체로서 작용하였다는 것을 나타낸다.
이허난 저해 효과가 A1 아유형에게 특이적인 것인가을 결정하기 위해, 일련의 보조 실험을 효모-기반 A2a 수용체 분석 (실시예 4에서 설명)을 사용하여 실시하였다. A2a 효모-기반 분석으로 얻어진 결과는 XAC가 상대적으로 효과적인 A2a 수용체 길항체라는 것을 나타내고 이는 발간되 보고서들과 일치하고 있다. 밤면에, DPCPX는 발간된 보고서로부터 예상되는 바와 같이, 이러한 수용체에서 상대적으로 비활성적이었다.
IV.방사성리간드 결합
수용체의 방사성 리간드 결합 변수를 측정하여 A1 아신 수용체 분석을 더 심화하였다. 인간 A1 아신 수용체를 발현하는 효모로부터 제조된 막을 사용하여, [3H]CPX를 수 개 아신 수용체 참조 화합물 XAC, DPCPX 및 CGS에 의해 치환 결합하는 것을 분석하였다. 인간 A1 아신 수용체를 분석하는 효모 막을 사용한 결과를 인간 A2a 아신 수용체 또는 인간 A3 수용체를 발현하는 효모 막으로부터의 결과와 비교하여 결합 특이성을 조사하였다. 이러한 분석을 수행하기 위해, 0.4 nM [3H]CPX을 사용하고 및 아신 수용체 리간드 농도를 증가시키면서 막 50 mg을 항온처리하였다. 항온 처리는 프로테아제 저해체의 존재하에서 50 mM 트리스-HCl, pH 7.4, 1 mM EDTA, 10 mM MgCl2, 0.25 % BSA 및 2 U/ml 아신 디아미나제를 사용하여 60분간 실온에서 실시하였다. 얼음-냉각된 50 mM 트리스-HCl, pH 7.4에 10 mM MgCl2가 첨가된 것을 첨가하여 결합을 종결 시킨 후, Packard 96-웰 수집기를 사용하여, 미리 0.5 % 폴리에틸렌이민으로 적신 GF/B 필터 상에서 빠르게 여과하였다. Prism 2.01 소프트웨어를 사용하는 비선형 최소 제곱 곡선 피팅 방식을 사용하여 데이터를 분석하였다. 이 실험에서 얻은 IC50값을 아래 표 4에 요약하였다.
표 4
IC 50 [nM]
화합물 hA1R hA2aR hA3R
XAC 6.6 11.7 53.1
DPCPX 8.5 326.4 1307.0
CGS-15943 13.1 15.8 55.5
NECA 215.5 294.9 34.9
R-PIA 67.6 678.1 23.6
IB-MECA 272.7 859.4 3.1
알록소진 1072.0 1934.0 8216.0
이러한 데이터는 참조 화합물은 문헌에 보고된 것과 일치하는 친화도를 가지는 것으로 나타난다. 이 데이터는 또한 효모 기반 분석이 수용체 아유형 특이성을 구별할 정도로 충분히 민감하다는 것을 나타낸다.
인간 A2a 아신 수용체를 발현하는 효모 균주를 사용하는 기능성 분석
이 번 실시예에서는, 인간 A1 아신 수용체의 조절자에 대한 효모에서의 기능성 스크리닝 분석 개발이 기재된다.
I.분석에 사용된 리간드
자연적 리간드 아신은 물론 다른 완전히 특성화된 그리고 상업적으로 이용가능한 리간드를 효모에서 기능적으로 발현되는 인간 A2a 수용체의 연구에 사용하였다. 3 개의 리간드를 이번 분석을 실행하는 데 사용되었다.
리간드 보고된 Ki 기능
아신 500 n 아고니스트
5'-N-에틸카르복스아미도아신(NECA) 10-15 nM 아고니스트
(-)-N6(2-페닐이소프로필)-아신 (PIA) 100-125 nM 아고니스트
성장 배지에서 아신의 조재로 인하여 신호되는 것을 방지하기 위해, 아신 디아미나제 (4U/ml)을 모든 분석물에 사용하였다.
II.효모에서 생물학적 반응
A2a 수용체 아고니스트들을, A2a 수용체 발현 플라즈미드로 형질전환되고 GαsE10K, GαsD229S, 또는 GαsE10K+D229S를 발현하는 효모에서 페로몬 반응 경로를 가극하는 능력에 대하여 분석하였다. 효모 표현형에서의 변경으로 수용체 의존 방식으로 페로몬 반응 경로를 자극하는 리간드의 능력을 할 수 있다. 수용체 활성화는 표현형을 히스티딘 영양요구 변이주로부터 히스티딘 기본 유기영양주 (fus1-HIS3의 활성화)로 변화시킨다. 3 개의 독립적인 형질전화체를 분리하고 히스티딘 존재하에서 밤새 배양하였다. 세포를 세턱하여 히스티딘을 제거하고 2x106세포/ml로 희석하였다. 각 형질전환체 5 μl를 4U/ml 아데노신 디아미나제가 있거나 없는 상태의 비선택적 배지 (히스티딘 포함) 또는 선택적 배지 (1 mM AT)상에 넣었다. 플레이트를 30℃에서 24시간 배양하였다. 히스티딘 존재하에서, 수용체+(R+) 및 수용체-(R-) 균주 둘다는 성장할 수 있었다. 그러나 히스티딘이 결핍된 상태에서는, 오긱 R+세포만이 성장하였다. 어떤 리간드도 이러한 플레이트에 첨가되지 않았기 때분에 이러한 결과에 대하여 두가지 설명이 가능하다. 한가지 가능한 해석은, 수용체 보유 효모가 리간드 독립적 수용체 매개 활성화 (LIRMA)에 의해 성장에 유리한 점에 있었다는 것이다. 대안적으로, 상기 효모는 상기 리간드 아신을 합성해왔을수도 있었다. 이러한 두가지 가능성을 구별하기 위해서, 리간드를 분해하는 효소, 아신 디아미나제 (ADA)를 성장 효소 및 플레이트에 첨가하였다. 아신 디아미나제 존재하에서, R+세포는 히스티딘 결핍하에서는 더 이상 자라지 않았고, 이는 효소가 정말로 리간드를 합성하고 있던 중이었다는 것을 가르킨다.
이러한 해석은 액상에처 A2a 성장 분석으로 확인된다. 이러한 실험에서 R+효모 (Aea 수용체를 발현하는 GαSE10K 균주)를 아신 디아미나제 존재 (4 U/ml) 또는 결핍하에서 3 가지 농도 (1x106세포/ml; 3x105세포/ml; 또는 1x105세포/ml)로 접종하였다. 분석의 스트린젠시를 3-아미노-1,24-트리아졸 (AT), 이미다졸글리세롤-P 디하이드라타제, HIS3 유전자의 단백질 생성물의 농도 (0, 0.1, 0.2 또는 0.4 mM)를 증가시키면서 향상시켰다. 아신 디아미나제 및 3-아미노-1,2,4-트리아졸의 존재하에서 효모는 덜 활기차게 성장하였다. 그러나 3-아미노-1,24-트리아졸 결핍하에서, 아신 디아미나제는 효과를 가지니 못했다. 따라서, 아신 디아미나제 자체는 페로몬 반응 경로에 직접적인 영향을 끼치지 않는다.
고도의 스크리닝 처리를 위해 축소화될 수 있는 것과 성장을 측정하는 대안적 방법은 A2a 수용체 리간드 스팟 분석이다. A2a 수용체 (A2aR+)을 발현하거나 수용체 (R-)이 결핍된 GαSE10K 균주를 히스티딘 및 4U/ml 아신 디아미나제 존재하에서 밤새 배양하였다. 세포를 세척하여 하스티딘을 제거하고 5x106세포/ml로 희석시켰다. 1x106세포를 4U/ml 아신 디아미나제 및 0.5 또는 1.0 mM 3-아미노-1,2,4-트리아졸 (AT)를 함유하는 선택 플레이스 상에 분산시키고 1 시간 동안 건조시켰다. 상기 단일 층에 하기 시약 5 μl를 적용하였다: 10 mM 아신, 38.7 mM 히스티딘, 디메틸설폭사이드 (DMSO), 10 mM PIA 또는 10 mM NECA. 세포를 30℃에서 24 시간 성장 시켰다. 이 결과는 수용체가 결핍된 세포는 히스티딘이 배지에 첨가될 때만 성장 할 수 있다는 것이다. 반면에 R+세포는 A2a 수용체 리간드 PIA 및 NECA 가 점적된 구역에서만 성장하였다. 상기 플레이트는 아신 디아미나제를 포함하고 있기 때문에 아신이 점적되는 곳에서의 성장 부재는 아신 디아미나제가 활성적이라는 것을 확인하는 것이다.
III.fus1LacZ 분석
효모 교배 경로의 활성화를 정량화하기 위해, fus1LacZ을 통한 β-갈락토시다제의 합성을 측정하였다. GαSE10K, GαSD229S 또는 GαSE10K+D229S를 발현시키는 효모 균주를 인간 A2a 수용체 (R+)를 코딩하는 플라즈미드 또는 수용체 (R_)가 결핍된 플라즈미드로 형질전환시켰다. 형질전환체를 분리하고 히스티딘 및 4 U/ml 아신 디아미나제 존재하에서 밤새 성장시켰다. 1x107세포를 1x106세포/ml로 희석시키고 4 시간 동안 NECA의 농도를 증가시키면서 배양한 후, 세포에서의 β-갈락토시다제 활성을 측정하였다. 결과는 본질적으로 β-갈락토시다제 활성이 R-균주에서 나타나지 않지만, NECA의 농도가 증가됨에 따라, GαSE10K, GαSD229S 또는 GαSE10K+D229S를 발현시키는 R+균주에서 β-갈락토시다제 활성이 증가되는 것을 측정되는 데, 이는 증가된 리간드 농도에 노출되는 것에 대하여, 측정된 β-갈락토시다제의 단위가서 투여량 의존적 증가 양태를 보인다. 이러한 투여량 의존성은 A2a 수용체 발현 세포에서만 관측된다. 더욱이, A2a 수용체에 대해 가장 강력한 GαS제조물은 GαSE10K였다. GαSD229S 제조물이 A2a 수용체에 대한 두 번째로 강력한 GαS제조물이고, GαSE10K+D229S는, 비록 GαSE10K+D229S 제조물이 β-갈락토시다제 활성을 즉시 감지할 정도의 크기로 자극할 지라도, 시험된 세가지 GαS제조물 중에서 가장 낮다.
확인된 분석 방법에 대한 더 구체적인 설명은, 1998년 6월 2일에 출원된 (대리인 사건 번호. CPI-093), "효모에서 아신 수용체의 기능적 발현" 제하의 U.S. 출원 일련 번호 09/088985을 참조하라. 이의 전체 내용은 본 명세서의 참조문헌으로 제시되어 있다.
인간 아신 수용체 아유형의 약학적 특성화
재료 및 방법
재료. [3H]-DPCPX[시클로펜틸-1,3-디플로필크산틴, 8-[디프로필-2,3-3H(N)] (120.o Ci/mmol);[3H]-CGS 21680, {카르복시에틸-3H(N)] (30 Ci/mmol) 및 [125I]-AB-MECA([125I]-4-아미노벤질-5'N-메틸카르복사미데오아신)(2,200 Ci/mmol)을 New England Nuclear (Boston, MA)로부터 구입하였다. XAC (크산틴 아민 동족체); NECA(5'-N-에틸카르복사이데오아신); 및 IB-MECA를 Research Biochemicals International (RBI, Natick, MA)로부터 구입하였다. 아신 디아미나제 및 환전 프로테아제 저해체 칵테일 정제를 Boehringer Mannheim Corp. (Indianapolis, IN)로부터 구입하였다. 이간 아신 2a [RB-HA2a]를 안정적으로 발현하는 HEK-293 세포 유래 세포막; 아신 2b [RB-HA2b] 또는 아신 3 [RB-HA3] 수용체 아유형류 각각은 Receptor Biology (Beltsville, MD)로부터 구입하였다. 세포 배양 시약은 Life Technologies (Gand Island, NY)에서 구입하였고 단 혈청은 Hyclone (Logan, UT)에서 구입하였다.
효모 균주. 사카로마이세스 세레비지아균주 CY12660[far1*1442 tbt1-1 fus1-HIS3 can1 ste14::trp1::LYS2 ste3*1156 gpa1(41)-Gαi3 lys2 ura3 leu2 trp1:his3;LEU2 PGKp-Mfα1leader-hA1R-PHO5term 2mu-orig REP3 Ampr]and CY8362[gpa1p-rGαsE10K farl*1442 tbt1-1 fus1-HIS3 can1 ste14::trp1:LYS2 ste3*1156 lys2 ura3 leu2trp1 his3;LEU2 PGKp-hA2aR 2mu-ori REP3 Ampr] 를 전술한 바와 같이 개발하였다.
효모 배양형질전환된 효모를 2% 글루코스가 보충된 Leu-Trp [LT] 배지 (pH 5.4)에서 성장시켰다. 세포막을 준비하기 위해, LT 배지 250 ml에 밤새 배양된 30 ml 배양액으로부터 1-2x106세포/ml이 초기 역가로 접종하고 회전에 의한 영구 산소 공급하에서 30℃에서 배양하였다. 16 시간 성장 후, 세포를 원심분리로 모으고 후술하는 바와 같이 세포막을 얻었다.
포유동물 조직 배양인간 아신 2a 수용체 아유형 (Cadus 클론 번호 5)를 안정적으로 발현하는 HEK-293 세포를 10% 송아지 혈청 및 1X 페니실린/스트렙토마이신이 보충된 둘베코의 최소 배지 (DMEM)상에서 배양하였는 데, 500 mg/ml G418 항생제를 사용하고 선택된 압력하에서 37℃의 5% CO2분위기의 배양조건이었다.
효모 세포막 준비밤새 배양 후, 250 ml 배양액을 Sorval RT6000 원심분리기에서 2,000xg 속력으로 원심분리하여 세포를 수집하였다. 세포를 얼음 냉각수에서 세척하고, 4℃에서 원심분리하고, 펠렛을 프로테아제 저해체 칵테일 정제 (25 ml 완충액 당 1 정제)가 보충된 얼음-냉각된 용균 완충액 [5 mM 트리스-HCl, pH 7.5; 5 mM EDTA; 및 5 mM EGTA] 10 ml에 재 현탁시켰다. 유리알 917g; 메쉬 400-500; Sigma)를 현탁액에 넣고 세포를 4℃에서 5분간 격렬히 볼텍싱하여 세포를 파괴하였다. 이균질액을 추가 30 ml 용균완충액와 프로페아제 저해체로 희석시키고 3,000 xg에서 5 분간 원심분리시켰다. 후속적으로 세포막을 36,000 xg (Sorvall RC5B, 다입 SS34 로터) 45 분간 펠렛화시켰다. 결과된 세포막 펠렛을 프로테아제 저해체 칵테일 정제 (50 ml 완충액당 1 정제)가 보충된 5 ml 세포막 완충액 [50 mM 트리스-HCl, pH 7.5; 0.6 mM EDTA; 및 5 mM MgCl2]에 재현탁 시키고 추후 실험을 위해 -80℃에서 보관하였다.
포유동물 세포막 준비HEK-293 세포막을 전술한 바와 같이 준비하였다 (Duzic E 등; J. Biol. Chem., 267, 9844-9851, 1992). 요약하여, 세포를 PBS로 세척하고 고무 찰자 (rubber policeman)으로 수거하였다. 세포를 Sorvall RT6000 원심분리기에서 200 xg의 속도로 4℃에서 펠렛화시켰다. 펠렛을 4℃의 용균 완충액 (5 mM 트리스-HCL, pH 7.5;5 mM EDTA; 5 mM EGTA; 0.1 mM 페닐메틸설포닐 플루오라이드, 10 mg/ml 펩스타틴 A; 및 10 mg/ml 아프로티닌) 5 ml/dish에 현탁하고 Dounce 균질기에서 균질화시켰다. 다음, 세포 분해물을 36,000 xg (Sorvall RC5B, type SS34 로터)에서 45 분간 원심분리하고 세포막 완충액 [50 mM 트리스-HCl, pH 7.5; 0.6 mM EDTA; 5 mM MgCl2; 0.1 mM 페닐메틸설포닐 플우오라이드, 10 mg/ml 펩스타틴 A; 및 10 mg/ml 아프로티닌) 5 ml에 재현탁시키고 추후 실험을 위해 -80℃에서 보관하였다.
브래드포드 염료-결합 방식 (Bradford, M.: Anal. Biochem. 72:248 (1976))에 기초한, Bio-Rad 단백질 분석 키트를 사용하여 효모 및 포유동물 세포막내의 전체 단백질 농도를 결정하였다.
아신 1 수용체 아유형 포화 및 경쟁 방사성리간드 결합
방사활성 리간드로서 길항체 [3H] DPCPX를 사용하여, 인간 A1 수용체 아유형으로 형질전환된 효모 세포의 세포막상에 포화 및 경쟁 결합을 수행하였다. 세포막을 결합 완충액 [50 mM 트리스-HCl, pH 7.4; 10 mM MgCl2; 1.0 mM EDTA; 0.25% BSA; 2 U/ml 아신 디아미나제 및 1 프로테아제 저해체 칵테일 정제/50 ml 함유]에 1.0 mg/ml의 농도로 희석하였다. 포화 결합에 있어서는, 96-웰 마이크로타이터 플레이트 상에서, 세포막 (50 μg/웰)을 [3H]-DPCPX (1.0 nM)과 같이, 최종 부피가 100 ml인 결합 완충액에서 1 시간동안 25 ℃에서 배양하는 데 10 μm 미표지된 XAC 부재 및 존재하에서 또는 경쟁 화합물의 농도를 증가시키면서 배양한다.
아신 2a 수용체 아유형 경쟁 방사성 리간드 결합
방사활성 리간드로서 아고니스트 [3H] CGS-21680을 사용하여, 인간 A2a 수용체 아유형을 안정적으로 발현시키는 HEK293 세포의 세포막상에서의 경쟁 결합을 수행하였다. 세포막을 결합 완충액 [50 mM 트리스-HCl, pH 7.4; 10 mM MgCl2; 1.0 mM EDTA; 0.25% BSA; 2 U/ml 아신 디아미나제 및 1 프로테아제 저해체 칵테일 정제/50 ml 함유]에 0.2 mg/ml의 농도로 희석하였다. 96-웰 마이크로타이터 플레이트 상에서, 세포막 (10 μg/웰)을 [3H]-CGS-21680 (100 nM)과 같이, 최종 부피가 100 ml인결합 완충액에서 1 시간동안 25 ℃에서 배양하는 데 50 μm 미표지된 NECA 부재 및 존재하에서 또는 경쟁 화합물의 농도를 증가시키면서 배양한다.
아신 3 수용체 경쟁 방사성 리간드 결합
방사활성 리간드로서 아고니스트 [125I] AB-MECA를 사용하여, 인간 A3 수용체 아유형을 안정적으로 발현시키는 HEK293 세포의 세포막상에서의 경쟁 결합을 수행하였다. 세포막을 결합 완충액 [50 mM 트리스-HCl, pH 7.4; 10 mM MgCl2; 1.0 mM EDTA; 0.25% BSA; 2 U/ml 아신 디아미나제 및 1 프로테아제 저해체 칵테일 정제/50 ml 함유]에 0.2 mg/ml의 농도로 희석하였다. 96-웰 마이크로타이터 플레이트 상에서, 세포막 (10 μg/웰)을 [125I] AB-MECA (0.75 nM)과 같이, 최종 부피가 100 μl인 결합 완충액에서 1 시간동안 25 ℃에서 배양하는 데 10 μm 미표지된 IB-MECA 부재 및 존재하에서 또는 경쟁 화합물의 농도를 증가시키면서 배양한다.
배양 말기에, 10 mM MgCl2가 보충된 얼음 냉각된 50 mM 트리스-HCl (pH 7.4)를 첨가하여, A1, A2a 및 A3 수용체 아유형 방사성 리간드 결합 분석을 종결하고, Filtermate 196 세포 수집기 (Packard)를 사용하여, 미리 0.5 % 폴리에틸렌이민으로 적신 유리 섬유 필터 (96-웰 GF/B UniFilters, Packard) 상에서 빠르게 여과하였다. 필터 플레이트를 건조시키고, 50 μl/웰 섬광 유체 (MicroScint-20, Packard)로 피복하고, TopCount (Packard)에서 계수하였다. 분석은 세 번 실시되었다. 비특이성 결합은 AiR, A2aR 및 A3R에서 전체 결합중 5.6±0.5%, 10.8±1.4% 및 15.1±2.6% 이었다.
아신 2b 수용체 아유형 경쟁 방사성 리간드 결합
방사활성 리간드로서 아고니스트 [125I] DPCPX를 사용하여, 인간 A2b 수용체 아유형을 안정적으로 발현시키는 HEK293 세포의 세포막상에서의 경쟁 결합을 수행하였다. 세포막을 결합 완충액 [10 mM 헤페스-KOH, pH 7.4; 1.0 mM EDTA; 0.1 mM 벤즈아미딘 및 2 U/ml 아신 디아미나제]에 0.3 mg/ml의 농도로 희석하였다. 96-웰 마이크로타이터 플레이트 상에서, 세포막 (15 μg/웰)을 [3H] DPCPX (15 nM)과 같이, 최종 부피가 100 μl인 결합 완충액에서 1 시간동안 25 ℃에서 배양하는 데, 10 μm 미표지된 XAC 부재 및 존재하에서 또는 경쟁 화합물의 농도를 증가시키면서 배양한다. 배양 말기에, 얼음 냉각된 10 mM Hepes-KOH (pH 7.4)를 첨가하여, 결합 분석을 종결하고, Filtermate 196 세포 수집기 (Packard)를 사용하여, 미리 0.5 % 폴리에틸렌이민으로 적신 유리 섬유 필터 (96-웰 GF/B UniFilters, Packard) 상에서 빠르게 여과하였다. 필터 플레이트를 건조시키고, 50 μl/웰 섬광 유체 (MicroScint-20, Packard)로 피복하고, TopCount (Packard)에서 계수하였다. 분석은 세 번 실시되었다. 비특이성 결합은 전체 결합의 14.3±2.3 %이었다.
[3H] DPCPX; [3H]CGS-21680 및 [125I] AB-MECA의 특이적 결합은 전체 결합 및 비특이적 결합사이의 차이로 정의된다. 화합물의 저해 백분율은 전체 결합에 대하여 계산되었다. 경쟁 테이터는 하나의 부위 모델에 반복 곡선 적용으로 분석하였고, GraphPad Prizm 2.01 소프트웨어를 사용하여, K1값을 IC50값으로부터 계산하였다. (Cheng 및 Prusof, Biochem. Pharmacol. 22, 3099-3109, 1973)
결과
어떤 세포 표면 수용체의 일차 기능은 적절한 리간드를 인식하는 것이다. 따라서, 우리는 리간드 결합 친화성을 결정하여 효모에서 발현된 아신 1 수용체 아유형의 기능적 실체를 수립하였다. 인간 아신 1 수용체 아유형 제조물로 형질전환한 사카로마이세스 세레비지아로부터 제조된 조 세포막은 4.0±0.19 nM의 KD를 가지면서, [3H] DPCP의 특이성 포하 결합을 나타내었다. KD및 Bmax값은 포화 등온선으로부터 계산되었고, 데이터를 스캣차드 (Scatchard) 변환시키면, 결합 부위가 단일 군이라는 것을 알수 있다. 효모 세포막 제조물에서 아신 결합 부의의 밀도는 716.8±43.4 fmol/mg 막 단백질로 견적되었다.
인간 A1 수용체 아유형으로 형질전환된 재조합 효모 세포의 약학적 아유형 특성을 아유형 선택적 아신 리간드(XAC, DPCPX; CGS-15943; CDS-0646142; CDS-046123; NECA, (R)-PIA; IB-MECA 및 알록사진(alloxazine))를 사용하여 조사하였다. 그것은 예상된 순위 순서로 [3H] DPCPX와 경쟁하였다. 이러한 화합물을 사용하여 기록된 치환 곡선은 모든 리간드에 일반적인 기울기를 보여주며, 리간드 각각에 대한 데이터는 단일 부위 피트에 의해 모델화될 수 있었다. 상기 곡선으로부터 개별 화합물에 대해 추정된 겉보기 해리 상수 (표 5)는 다른 출처로부터 얻어진 수용체에 대하여 발표된 값과 일치한다.
표 5
인간 A1 수용체 아유형으로 형질 전환된 효모세포의 세포막에 대한 Ki 값
리간드 KI(nM)
XAC 5.5
DPCPX 7.1
CGS-1594 10.8
NECA 179.6
(R)-PIA 56.3
IB-MECA 606.5
알록사진 894.1
CDS-046142 13.9
CDS-046123 9.8
표 6 내지 12는 본 발명의 데아자퓨린의 효능 및 구조 활성 프로필을 나타낸다. 표 13 및 14는 데아자퓨린 구조에 대한 기능성을 조절함으로써 안간 아신 수용체 부위에 해하여 선택성을 성취할 수 있다는 것을 나타낸다. 표 14는 또한 설정된 화합물들이 나노몰이하의 활성을 가지며 표 13의 화합물과 비교할 때 A2b수용체에 대하여 더 높은 선택성을 가진다는 놀라운 발견을 나타내고 있다.
표 6
CDS-046142 시리즈의 활성: N6-치환체의 효과
표 7
CDS-046142 시리즈의 활성: N2-치환체의 효과
표 8
CDS-046142 시리즈의 활성: 피롤 환 치환체의 효과
표 9
표 10
CDS-046143 시리즈의 활성: N6-치환체의 효과
표 11
CDS-046143 시리즈의 활성: N6-치환체의 효과
표 12
CDS-046123의 "리트로-아마이드" 유사체
표 13
선택성 아신 길항체의 프로필
12-티에닐-2-일;2C5-H;3수용성;4R5및 R6는 수소;5R3는 3-플루오로페닐
6R3는 3-클로로페닐;7R3 는 -4-피리딜;8% 활성@ 10μM
표 14
선택성 A2b길항제의 프로필
코드 XR1 R2 결합 데이터 Ki(nK)
A1 A2A A2B A3
CDS-129851 -O-ph Me 41.7 21 0.3 14.6
CDS-143995 -O-ph(p)F Me 33 58 0.01 18
CDS-143994 -O-ph(p)Cl Me 825 591 0.3 60
CDS-143988 -N-피리딘-2-온 Me 60 41 47 48
CDS-143996 -NH-ph Me 49 31 109 57
참조문헌 합병
본 명세서에서 나타난 모든 특허, 간행된 특허 출원서 및 다른 참조문헌은 본 명세서에 참조문헌으로써 합병되었음을 선언합니다.
등가물
당해 분야의 숙련자는 단지 통상적인 실험을 이용하여 본 명세서에 상술된 특정 구체예와 동등한 많은 등가물이 있음을 인식하거나 확신할 수 있을 것이다. 그러한 등가물은 하기 청구 범위의 범위내에 포함되는 것으로 의도된다.

Claims (186)

  1. 포유동물에 N-6 치환 7-데아자퓨린의 치료적 유효량을 투여하여, 포유동물에서 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태의 치료가 일어나게 하는, 포유동물에서 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태를 치료하는 방법
  2. 제 1 항에 있어서, 상기 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태는 질병상태이고 이 질병 상태는 아데노신에 의해 매개되는 질환인 것을 특징으로 하는 방법.
  3. 제 2 항 에 있어서, 상기 N-6 치환 7-데아자퓨린은 N-6 벤질 또는 N-6 페닐에틸 치환되지 않은 것을 특징으로 하는 방법.
  4. 제 2 항 에 있어서, 상기 질병 상태는 중추신경계 질환, 심혈관 질환, 망막성 질환, 염증성 질환, 알레르기성 질환, 위장성 질환, 안과 질환 또는 호흡기 질환인 것을 특징으로 하는 방법.
  5. 제 1 항 에 있어서, 상기 N-6 치환 7-데아자퓨린은 식 1을 가지는 것을 특징으로 하는 방법.
    (Ⅰ)
    상기식에서,
    R1및 R2는 각각 수소 원자 또는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체이거나 같이 치환 또는 미치환 헤테로시클릭 환을 형성하고;
    R3는 수소 원자 또는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체이고;
    R4는 수소원자 또는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체이고;
    R5및 R6는 독립적으로 할로겐 원자, 수소 원자 또는 치환 또는 미치환된 알킬, 아릴, 또는 알킬아릴 부분체 이거나, R4및 R5또는 R5및 R6는 함께 치환 또는 미치환된 헤테로시클릭 또는 카르보시클릭 환을 형성한다.
  6. 치료학적으로 유용한 양의 N-6 치환 7-데아자퓨린을 포유동물에 투여하여 아데노신 수용체의 활성 조절이 일어나는, 포유동물에서 아데노신 수용체를 조절하는 방법.
  7. 제 6 항 에 있어서, 상기 아데노신 수용체는, A1, A2, A2a,A2b또는 A3인 것을 특징으로 하는 방법.
  8. 제 6 항 에 있어서, 상기 아데노신 수용체는 중추신경계 질환, 심혈관 질환, 망막성 질환, 염증성 질환, 알레르기성 질환, 위장성 질환, 안과 질환 또는 호흡기 질환과 연관되는 것을 특징으로 하는 방법.
  9. 제 6 항 에 있어서, 상기 N-6 치환 7-데아자퓨린 은 식 (I)을 가지는 것을 특징으로 하는 방법.
    (Ⅰ)
    상기식에서,
    R1및 R2는 각각 수소 원자 또는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체이거나 같이 치환 또는 미치환 헤테로시클릭 환을 형성하고;
    R3는 수소 원자 또는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체이고;
    R4는 수소원자 또는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체이고;
    R5및 R6는 독립적으로 할로겐 원자, 수소 원자 또는 치환 또는 미치환된 알킬, 아릴, 또는 알킬아릴 부분체 이거나, R4및 R5또는 R5및 R6는 함께 치환 또는 미치환된 헤테로시클릭 또는 카르보시클릭 환을 형성한다.
  10. 치료학적으로 유용한 양의 N-6 치환 7-데아자퓨린을 포유동물에 투여하여 포유동물에서 천식의 치료가 일어나는, 포유동물에서 천식 치료 방법.
  11. 식 (I)을 가지는 N-6 치환 7-데아자퓨린 및 이의 약학 허용 염
    (Ⅰ)
    상기식에서,
    R1및 R2는 각각 수소 원자 또는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체이거나 같이 치환 또는 미치환 헤테로시클릭 환을 형성하고;
    R3는 수소 원자 또는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체이고;
    R4는 수소원자 또는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체이고;
    R5및 R6는 독립적으로 할로겐 원자, 수소 원자 또는 치환 또는 미치환된 알킬, 아릴, 또는 알킬아릴 부분체 이거나, R4및 R5또는 R5및 R6는 함께 치환 또는 미치환된 헤테로시클릭 또는 카르보시클릭 환을 형성하는 e, R4는 1-페닐에틸이 아니라는 조건이다.
  12. 제 11 항 에 있어서,
    R1은 수소이고;
    R2는 치환 또는 미치환 시클로알킬, 치환 또는 미치환 알킬, 이거나, R1및 R2가 함께 치환 또는 미치환 헤테로시클릭 환을 형성하고;
    R3는 치환 또는 미치환 알킬이고;
    R4는 수소원자이고; 및
    R5및 R6는 독립적으로 할로겐 원자 또는 알킬인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린 및 이의 약학 허용염.
  13. 제 12 항 에 있어서, 상기 R2는 치환 또는 미치환 시클로알킬인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  14. 제 13 항 에 있어서, 상기 R1및 R4는 수소이고, R3는 치환 또는 미치환 페닐이고, R5및 R6는 각각 알킬인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  15. 제 14 항 에 있어서, 상기 R2는 적어도 하나의 히드록시기와 치환되는 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  16. 제 15 항 에 있어서, 상기 R2는 모노-히드록시시클로펜틸인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린
  17. 제 15 항 에 있어서, 상기 R2는 모노-히드록시시클로헥실인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린
  18. 제 14 항 에 있어서, 상기 R2는 -NH-C(=O)E이고, 여기서 E는 치환 또는 미치환 C1-C4알킬인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  19. 제 18 항 에 있어서, E는 알킬아민인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  20. 제 19 항 에 있어서, 상기 E는 에틸아민인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  21. 제 12 항 에 있어서, R1및 R2는 함께 치환 또는 미치환 헤테로시클릭 환을 구성하는 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  22. 제 21 항 에 있어서, 상기 헤테로시클릭 환은 아민으로 치환되는 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  23. 제 21 항 에 있어서, 상기 헤테로시클릭 환은 아세트아미도로 치환되는 것을 특징으로 하는 데아자퓨린
  24. 제 24 항 에 있어서, R1및 R4는 수소이고, R3는 치환 또는 미치환 페닐이고, 및 R5및 R6는 각각 알킬인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  25. 제 24 항 에 있어서, R1및 R4는 수소이고, R3는 치환 또는 미치환 페닐이고, R5및 R6는 각각 알킬인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  26. 제 25 항 에 있어서, 상기 A는 CH2CH2인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  27. 제 25 항 에 있어서, 상기 A는 CH2CH2CH2인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  28. 제 25 항 에 있어서, 상기 A는 CH2CH2CH2CH2인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  29. 제 25 항 에 있어서, 상기 B는 메틸인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  30. 제 25 항 에 있어서, 상기 B는 아미노알킬인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  31. 제 30 항 에 있어서, 상기 B는 아미노메틸인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  32. 제 30 항 에 있어서, 상기 B는 아미노에틸인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  33. 제 25 항 에 있어서, 상기 B는 알킬아미노인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  34. 제 33 항 에 있어서, 상기 B는 메틸아미노인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  35. 제 33 항 에 있어서, 상기 B는 에틸아미노인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  36. 제 25 항 에 있어서, 상기 B는 치환 또는 미치환 시클로알킬인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  37. 제 36 항 에 있어서, 상기 B는 시클로프로필인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  38. 제 36 항 에 있어서, 상기 B는 1-아미노-시클로프로필인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  39. 제 12 항 에 있어서, 상기 R3는 치환 또는 미치환 페닐인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  40. 제 39 항 에 있어서, 상기 R5및 R6는 각각 알킬인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  41. 제 40 항 에 있어서, 상기 R3는 미치환 페닐인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  42. 제 40 항 에 있어서, 상기 R3는 치환 페닐인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  43. 제 42 항 에 있어서, 상기 R3는 적어도 하나의 치환체를 가지는 페닐인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  44. 제 43 항 에 있어서, 상기 R3는 o-, m- 또는 p-클로로페닐인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  45. 제 43 항 에 있어서, 상기 R3는 o-, m- 또는 p-플루오로페닐인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  46. 제 12 항 에 있어서, 상기 R3는 치환 또는 미치환 헤테로아릴인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  47. 제 46 항 에 있어서, R5및 R6는 각각 알킬인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  48. 제 47 항 에 있어서, 상기 R3는 피리딜, 피리미딜, 피리다지닐, 피라지닐, 피롤릴, 트리아졸릴, 티오아졸릴, 옥사졸릴, 옥사디아졸릴, 퓨라닐, 메틸렌디옥시페닐 및 티오페닐로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  49. 제 48 항 에 있어서, 상기 R3는 2-피리딜, 3-피리딜 또는 4-피리딜인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  50. 제 48 항 에 있어서, 상기 R3는 2-피리미딜 또는 3-피리미딜인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  51. 제 12 항 에 있어서, R5및 R6는 각각 수소인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  52. 제 12 항 에 있어서, R5및 R6는 각각 메틸인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  53. 제 12 항 에 있어서, 상기 화합물은 4-(시스-3-히드록시시클로펜틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  54. 제 12 항 에 있어서, 상기 화합물은 4-(시스-3-(2-아미노아세톡시)시클로펜틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘 트리플루오로아세트산 염인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  55. 제 12 항 에 있어서, 상기 화합물은 4-(3-아세트아미노)피페리디닐-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  56. 제 12 항 에 있어서, 상기 화합물은 4-(2-N'-메틸우레아프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  57. 제 12 항 에 있어서, 상기 화합물은 4-(2-아세트아미노부틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  58. 제 13 항 에 있어서, 상기 화합물은 4-(2-N'-메틸우레아부틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  59. 제 12 항 에 있어서, 상기 화합물은 4-(2-아미노시클로프로필아세트아미노에틸)아미노-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  60. 제 12 항 에 있어서, 상기 화합물은 4-(트랜스-4-히드록시시클로헥실)아미노-2-(3-클로로페닐)-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  61. 제 12 항 에 있어서, 상기 화합물은 4-(트랜스-4-히드록시시클로헥실)아미노-2-(3-플루오로페닐)-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  62. 제 12 항 에 있어서, 상기 화합물은 4-(트랜스-4-히드록시시클로헥실)아미노-2-(4-피리딜)-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘인것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  63. 식 (II)를 가지는 데아자퓨린
    (Ⅱ)
    상기식에서,
    X 는 N 또는 CR6이고;
    R1및 R2는 각각 독립적으로 수소 또는 치환 또는 미치환된 알콕시, 아미노알킬, 알킬, 아릴, 또는 알킬아릴이거나 또는, R1및 R2둘다 수소가 아니라는 조건에서, 함께 치환 또는 미치환 헤테로시클릭 환을 형성하고;
    R3는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴알킬 또는 아릴이고;
    R4는 수소 또는 치환 또는 미치환 C1-C6알킬이고;
    L은 수소, 치환 또는 미치환 알킬 또는 R4및 L이 서로 치환 또는 미치환 헤테로시클릭 또는 카르보시클릭 환을 형성하고;
    R6는 수소, 치환 또는 미치환 알킬 또는 할로겐이고;
    Q는 CH2, O, S 또는 NR7으로 여기서 R7은 수소 또는 치환 또는 미치환 C1-C6알킬이고; 및
    W는 미치환 또는 치환 알킬, 시클로알킬, 아릴, 아릴알킬, 비아릴, 헤테로아릴, 치환 카르보닐, 치환 티오카르보닐 또는 치환 설포닐 인데,
    상기에서, R3가 피롤리디노이라면, R4는 메틸이 아니라는 조건을 만족한다.
  64. 식 (III)을 가지는 58항의 데아자퓨린
    (III)
    상기식에서 Q는 CH2, O, S 또는 NH이다.
  65. 제 64 항 에 있어서, R4는 수소이고, L은 수소 또는 메틸이고, R3는 치환 또는 미치환 아릴인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  66. 제 65 항 에 있어서, W는 치환 또는 미치환 아릴, 5- 또는 6-원자 헤테로아릴 또는 비아릴인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  67. 제 66 항 에 있어서, W는 할로겐, 히드록시, 알콕시, 아미노, 아미노알킬,아미노카르복시아미드, CN, CF3, CO2R8, CONHR8, CONR8R9, SOR8, SO2R8, 및 SO2NR8R9로 구성되는 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환체로 치환도며, 여기서, R8및 R9은 각각 독립적으로 수소 또는 치환 또는 미치환 알킬, 시클로알킬, 아릴, 또는 아릴알킬인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  68. 제 66 항 에 있어서, W는 메틸렌디옥시페닐인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  69. 제 66 항 에 있어서, W는 치환 또는 미치환 페닐인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  70. 제 66 항 에 있어서, W는 치환 또는 미치환 5-원자 헤테로아릴 환인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  71. 제 66 항 에 있어서, W는 피리딜, 피리미elf, 피리다지닐, 피라지닐, 피롤릴, 트리아졸릴, 티오아졸릴, 옥사졸릴, 옥사디아졸릴, 피라졸릴, 퓨라닐 및 티오페닐구 구성괴는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  72. 제 71 항 에 있어서, Q는 NH이고, W는 미치환되거나 또는 치환 또는 미치환알킬, 시클로알킬, 아릴 또는 아릴알킬에 의해 N-치환되는 3-피라졸로 환인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  73. 제 71 항 에 있어서, Q는 산소이고 W는 미치환되거나 또는 치환 또는 미치환 알킬, 시클로알킬, 아릴, 또는 아릴알킬에 의해 치환되는 2-티아졸로 환인 것을 특징으로 하는.
  74. 제 66 항 에 있어서, W는 6-원자 헤테로아릴 환인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  75. 제 74 항 에 있어서, W는 2-피리딜, 3-피리딜 및 4-피리딜로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  76. 제 74 항 에 있어서, W는 2-피리딜, 3-피리딜 및 5-피리딜로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  77. 제 65 항 에 있어서, W는 치환 또는 미치환 알킬, 시클로알킬, 알키닐 또는 아릴알킬인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  78. 제 77 항 에 있어서, W는 알키닐인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  79. 제 78 항 에 있어서, W는 할로겐, 히드록시, 치환 또는 미치환 알킬, 시크롤알킬, 아릴, 아릴알킬 또는 NHR10로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환체로 치환되며, R10은 수소 또는 치환 또는 미치환 알킬, 시클로알킬, 아릴 또는 아릴알킬인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  80. 제 77 항 에 있어서, W는 치환 또는 미치환 시클로펜틸인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  81. 제 65 항 에 있어서, W는 -(CH2)a-C(=O)Y 또는 -(CH2)a-C(=S)Y으로서, a 는 0 내지 3의 정수이고, Y 는 아릴, 알킬, 아릴알킬, 시클로알킬, 헤테로알킬, 알키닐, NHR11R12이거나, Q가 NH인 조건에서, OR13로서, 여기서 R11, R12및 R13은 각각 독립적으로 수소 또는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴, 아릴알킬, 또는 시클로알킬인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  82. 제 81 항 에 있어서, a 는 1인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  83. 제 81 항 에 있어서, Y는 5- 또는 6-원자 헤테로아릴 환인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  84. 제 65 항 에 있어서, W는 -(CH2)b-S(=O)jY이고, 여기서, j 는 1 또는 2이고, b는 0, 1, 2, 또는 3이고, Y는 아릴, 알킬, 아릴알킬, 시클로알킬, 알키닐, 헤테로아릴, 또는 NHR14R15로서, b가 1일 때, Q는 CH2조건하에서이고, 상기에서 R14, R15및 R16은 각각 독립적으로 수소 또는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴, 아릴알킬 또는 시클로알킬인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  85. 제 64 항 에 있어서, R3는 치환 또는 미치환 페닐, 피리딜, 피리미딜, 피리다지닐, 피라지닐, 피롤릴, 트리아졸릴, 티오아졸릴, 옥사졸릴, 옥사디아졸릴, 피라졸릴, 퓨라닐, 메틸렌디옥시페닐 및 티오페닐로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  86. 제 85 항 에 있어서, R3은 미치환 페닐인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  87. 제 85 항 에 있어서, R3는 적어도 하나의 치환체를 가지는 페닐인 것을 특징으로 하는 방법.
  88. 제 87 항 에 있어서, 상기 치환체는 히드록실, 알콕시, 알킬 및 할로겐으로구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  89. 제 88 항 에 있어서, 상기 치환체는 할로겐인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  90. 제 89 항 에 있어서, R3는 o-, m-, 또는 p-플루오로페닐인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  91. 제 89 항 에 있어서, R3는 o-, m-, 또는 p-클로로페닐인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  92. 제 88 항 에 있어서, R3는 알킬 치환된 페닐인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  93. 제 92 항 에 있어서, R3는 톨릴인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  94. 제 88 항 에 있어서, R3는 알콕시 치환 페닐인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  95. 제 94 항 에 있어서, R3는 메톡시 페닐인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  96. 제 85 항 에 있어서, R3는 2-, 3- 또는 4-피리딜인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  97. 제 85 항 에 있어서, R3는 2- 또는 3-피리미딜인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  98. 제 64 항 에 있어서, R6는 수소 또는 C1-C3알킬인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  99. 제 98 항 에 있어서, R6는 수소인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  100. 제 64 항 에 있어서, R1이 수소이고 R2가 치환 또는 미치환 알킬 또는 알콕시, 치환 또는 미치환 알킬아민, 아릴아민, 또는 알킬아릴아민, 치환 또는 미치환 아미노알킬, 아미노 아릴, 또는 아미노알킬아릴, 치환 또는 미치환 알킬아미드, 아릴아미드 또는 알킬아릴아미드, 치환 또는 미치환 알킬설폰아미드, 아릴설폰아미드또는 알킬아릴설폰아미드, 치환 또는 미치환 알킬우레아, 아릴우레아 또는 알킬아릴우레아, 치환 또는 미치환 알킬카르바메이트, 아릴카르바메이트 또는 알킬아릴카르바메이트, 또는 치환 또는 미치환 알킬카르복실 산, 알릴카르복실 산 또는 알킬카르복실 산인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  101. 제 100 항 에 있어서, R2는 치환 또는 미치환 시클로알킬인 데아자퓨린.
  102. 제 101 항 에 있어서, R2는 모노- 또는 디히드록시-치환 시클로헥실인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  103. 제 102 항 에 있어서, R2는 모노히드록시-치환 시클로헥실인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  104. 제 101 항 에 있어서, R2는 모노 또는 디히드록시-치환 시클로펜틸인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  105. 제 104 항 에 있어서, R2는 모노히드록시-치환 시클로펜틸인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  106. 제 100 항 에 있어서, R2는이고,
    상기식에서,
    A는 C1-C6알킬, C3-C7시클로알킬, 일 내지 일곱 개 원자의 사슬, 또는 삼 내지 일곱 개 원자의 환으로서, 선택적으로 C1-C6알킬, 할로겐류, 히드록실, 카르복실, 티오 또는 아미노 기로 치환되며;
    B는 메틸, N(Me)2, N(Et)2, NHMe, NHMe, NHEt, (CH2)rNH3+, NH(CH2)rCH3, (CH2)rNH2, (CH2)rCHCH3NH2, (CH2)rNHMe, (CH2)rOH, CH2CN, (CH2)mCO2H, CHR18R19, 또는 CHMeOH로서, 상기에서, r은 0 내지 2의 정수이고, m은 1 또는 2이고, R18은 알킬이고, R19는 NH3 +또는 CO2H이고 또는 R18및 R19는 함께을 형성하고, 여기서 p는 2 또는 3이고; 및
    R17은 C1-C6알킬, C3-C7시클로알킬, 하나 내지 일곱 개 원자의 사슬, 또는 삼 내지 일곱 개 원자의 환으로, 선택적으로 C1-C6알킬, 할로겐류, 히드록실, 카르복실, 티오 또는 아미노 기로 치환된 것 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  107. 제 106 항 에 있어서, A는 치환 또는 미치환 C1-C6알킬인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  108. 제 106 항 에 있어서, B는 치환 또는 미치환 C1-C6알킬인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  109. 제 106 항 에 있어서, R2는 -A-NHC(=O)B인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  110. 제 109 항 에 있어서, A는 -CH2CH2- 및 B는 메틸인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  111. 제 11, 12, 65 또는 66 항 에 있어서, 생체내에서 활성 약물로 대사되는 수용성 전구약물 (prodrug)를 포함하는 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  112. 제 111 항 에 있어서, 상기 전구약물은 에스테라제 촉매 가수분해에 의해 생체내에서 대사되는 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  113. 제 111 항 에 있어서, R2는 -OC(O)(Z)NH2로 치환된 시클로알킬로서, 여기서,Z는 자연적 또는 비자연적으로 발생하는 아미노산 또는 이의 유사체, α, β, γ 또는 ω 아미노산, 또는 디펩티드의 측쇄인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  114. 제 114 항 에 있어서, Z는 글리신, 알라닌, 발린, 루이신, 이소루이신, 리신, α-메틸알라닌, 아미노시클로프로판 카르복실 산, 아제티딘-2-카르복실 산, β-알라닌, γ-아미노부티르 산, 알라닌-알라닌 또는 글리신-알라닌의 측쇄인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  115. 제 64 항 에 있어서, R1및 R2는 함께을 형성하고, 상기식에서 n은 1 또는 2이고 및 상기식에서 상기 환은 선택적으로 하나 이상의 히드록실, 아미노, 티올, 카르복실, 할로겐, CH2OH, CH2NHC(=O)알킬 또는 CH2NHC(=)NH 알킬 기에 의해 치환되는 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  116. 제 115 항 에 있어서, n은 1 또는 2이고 상기 환은 -NHC(+O) 알킬로 치환되는 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  117. 제 64 항 에 있어서, R1은 수소이고, R2는 치환 또는 미치환 C1-C6알킬이고, R3는 치환 또는 미치환 페닐이고, R4는 수소이고, L은 수소, 치환 또는 미치환C1-C6알킬이고, Q는 O, S 또는 NR7으로서 여기서 R7은 수소 또는 치환 또는 미치환 C1-C6알킬이고; 및 W는 미치환 또는 치환 아릴인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  118. 제 117 항 에 있어서, R2는 -A-NHC(=O)B로서 A 및 B는 독립적으로 미치환 C1-C4알킬인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  119. 제 118 항 에 있어서, A는 CH2CH2인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  120. 제 118 항 에 있어서, B는 메틸인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  121. 제 118 항 에 있어서, B는 아미노알킬인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  122. 제 121 항 에 있어서, B는 아미노메틸인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  123. 제 117 항 에 있어서, R3는 미치환 페닐인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  124. 제 117 항 에 있어서, L은 수소인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  125. 제 117 항 에 있어서, R6는 수소 또는 메칠인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  126. 제 125 항 에 있어서, R6는 수소인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  127. 제 117 항 에 있어서, Q는 O인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  128. 제 117 항 에 있어서, Q는 S인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  129. 제 117 항 에 있어서, Q는 NR7으로서 여기서 R7은 수소 또는 치환 또는 미치환 C1-C6알킬인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  130. 제 129 항 에 있어서, R7은 수소인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  131. 제 129 항 에 있어서, R7은 메틸인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  132. 제 117 항 에 있어서, 상기 W는 미치환 페닐인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  133. 제 117 항 에 있어서, 상기 W는 적어도 하나의 치환체를 가진 페닐인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  134. 제 133 항 에 있어서, 상기 치환체는 할로겐인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  135. 제 134 항 에 있어서, W는 p-플루오로페닐인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  136. 제 134 항 에 있어서, W는 p-클로로페닐인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  137. 제 133 항 에 있어서, 상기 치환체는 알콕시인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  138. 제 137 항 에 있어서, W는 p-메톡시인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  139. 제 117 항 에 있어서, W는 헤테로아릴인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  140. 제 139 항 에 있어서, W는 2-피리딜인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  141. 제 117 항 에 있어서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-아세틸아미노에틸아미노-6-페녹시메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  142. 제 117 항 에 있어서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(4-플루오로페녹시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  143. 제 117 항 에 있어서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(4-클로로페녹시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘인 것을 특징으로 하는 데아자퓨린.
  144. 제 117 항 에 있어서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(4-메톡시페녹시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘인 데아자퓨린.
  145. 제 117 항 에 있어서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(2-피리딜옥시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘인 데아자퓨린.
  146. 제 117 항 에 있어서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노6-(N-페닐아미노)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘인 데아자퓨린.
  147. 제 117 항 에 있어서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(N-메틸-N-페닐아마노)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘인 데아자퓨린.
  148. 제 117 항 에 있어서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-N'-메틸우레아에틸)아미노-6-페녹시메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘인 데아자퓨린.
  149. 세포에서 아데노신 수용체의 활성을 저해하는 방법에 있어서, 상기 세포를 제 11, 12, 14, 25, 63 또는 65 항의 데아자퓨린과 접촉시키는 것을 포함하는 것을 것을 특징으로 하는 방법.
  150. 제 149 항 에 있어서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-아세틸아미노에틸아미노-6-페녹시메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(4-플루오로페녹시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(4-클로로페녹시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(4-메톡시페녹시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(2-피리딜옥시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노6-(N-페닐아미노)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(N-메틸-N-페닐아마노)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-N'-메틸우레아에틸)아미노-6-페녹시메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(시스-3-히드록시시클로펜틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(시스-3-(2-아미노아세톡시)시클로펜틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘 트리플루오로아세트산 염, 4-(3-아세트아미노)피페리디닐-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-N'-메틸우레아프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세트아미노부틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-N'-메틸우레아부틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아미노시클로프로필아세트아미노에틸)아미노-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(트랜스-4-히드록시시클로헥실)아미노-2-(3-클로로페닐)-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 데아자퓨린은 4-(트랜스-4-히드록시시클로헥실)아미노-2-(3-플루오로페닐)-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 및 4-(트랜스-4-히드록시시클로헥실)아미노-2-(4-피리딜)-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
  151. 제 149 항 에 있어서, 상기 아데노신 수용체는 A2b아데노신 수용체인 것을 특징으로 하는 방법.
  152. 제 151 항 에 있어서, 상기 데아자퓨린은 상기 A2b아데노신 수용체의 길항체인 것을 특징으로 하는 방법.
  153. 제 149 항 에 있어서, 상기 아데노신 수용체는 A3아데노신 수용체인 것을 특징으로 하는 방법.
  154. 제 153 항 에 있어서, 상기 N-6 치환 7-데아자퓨린은 상기 A3아데노신 수용체의 길항체인 것을 특징으로 하는 방법.
  155. 포유동물의 위장관 질병을 치료하는 방법에 있어서, 포유동물에게 제 63 또는 65 항의 데아자퓨린의 유효량을 투여하는 것을 특징으로 하는 방법.
  156. 제 155 항 에 있어서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-아세틸아미노에틸아미노-6-페녹시메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(4-플루오로페녹시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(4-클로로페녹시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(4-메톡시페녹시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(2-피리딜옥시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노6-(N-페닐아미노)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(N-메틸-N-페닐아마노)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 및 4-(2-N'-메틸우레아에틸)아미노-6-페녹시메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘로 구성되는 군으로부터 선택되는 방법.
  157. 제 155 항 에 있어서, 상기 질병은 설사인 것을 특징으로 하는 방법.
  158. 제 155 항 에 있어서, 상기 동물은 인간인 것을 특징으로 하는 방법.
  159. 제 155 항 에 있어서, 상기 데아자퓨린은 상기 동물의 세포내에 있는 A2b아데노신 수용체의 길항체인 것을 특징으로 하는 방법.
  160. 동물에서 호흡기 질환을 치료하는 방법에 있어서, 동물에게 제 63 또는 64 항의 데아자퓨린을 유효량 투여하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  161. 제 160 항 에 있어서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-아세틸아미노에틸아미노-6-페녹시메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(4-플루오로페녹시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(4-클로로페녹시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(4-메톡시페녹시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(2-피리딜옥시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노6-(N-페닐아미노)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(N-메틸-N-페닐아마노)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 및 4-(2-N'-메틸우레아에틸)아미노-6-페녹시메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘로 구성되는 군으로부터 선택되는 방법.
  162. 제 160 항 에 있어서, 상기 질환은 천식, 만성 장애 폐질환, 알레르기성 비염, 또는 상부 호흡기 질환인 것을 특징으로 하는 방법.
  163. 제 160 항 에 있어서, 상기 동물은 인간인 것을 특징으로 하는 방법.
  164. 제 160 항 에 있어서, 상기 데아자퓨린은 동물의 세포내에 있는 A2b아데노신 수용체의 길항체인 것을 특징으로 하는 방법.
  165. 동물에서 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태를 치료하는 방법에 있어서, 동물에게 제 11, 12, 14, 25, 63 또는 64항의 데아자퓨린을 치료적으로 유효한 양으로 투여하여, 그 동물에서의 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태 치료가 일어나는 것을 특징으로 하는 방법.
  166. 제 165 항 에 있어서, 상기 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태는 질병 상태로서 이는 아데노신 매개 질환인 것을 특징으로 하는 방법.
  167. 제 166 항 에 있어서, 상기 질병 상태는 중추신경계 질환, 심혈관 질환, 망막성 질환, 염증성 질환, 알레르기성 질환, 위장관 질환 또는 호흡기 질환인 것을 특징으로 하는 방법.
  168. 동물의 눈에 난 상해를 치료하는 방법에 있어서, 동물에 제 11, 12, 14 또는 25 항의 N-6 치환 7-데아자퓨린을 유효량 투여하는 것을 것을 특징으로 하는 방법.
  169. 제 168 항 에 있어서, 상기 N-6 치환 7-데아자퓨린은 4-(시스-3-히드록시시클로펜틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(시스-3-(2-아미노아세톡시)시클로펜틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘 트리플루오로아세트산 염, 4-(3-아세트아미노)피페리디닐-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로 [2,3d] 피리미딘, 4-(2-N'-메틸우레아프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H- 피롤로[2,3d]피리미딘, 4-(2-아세트아미노부틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-N'-메틸우레아부틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로 [2,3d] 피리미딘, 4-(2-아미노시클로프로필아세트아미노에틸)아미노-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(트랜스-4-히드록시시클로헥실)아미노-2-(3-클로로페닐)-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 데아자퓨린은 4-(트랜스-4-히드록시시클로헥실)아미노-2-(3-플루오로페닐)-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 및 4-(트랜스-4-히드록시시클로헥실)아미노-2-(4-피리딜)-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘으로 구성되는 군으로부터 선택된다.
  170. 제 168 항 에 있어서, 상기 상해는 망망성 또는 시신경두 상해인 것을 특징으로 하는 방법.
  171. 제 168 항 에 있어서, 상기 상해는 급성 또는 만성인 것을 특징으로 하는 방법.
  172. 제 168 항 에 있어서, 상기 상해는 녹내장, 부종, 허혈, 저산소증 또는 상처의 결과인 것을 특징으로 하는 방법.
  173. 제 168 항 에 있어서, 상기 동물은 인간인 것을 특징으로 하는 방법.
  174. 제 168 항 에 있어서, 상기 N-6 치환 7-데아자퓨린은 상기 동물의 세포에 있는 A3아데노신 수용체의 길항체인 것을 특징으로 하는 방법.
  175. 치료학적으로 유효한 양의 제 11, 12, 14, 25, 63 또는 64 항의 데아자퓨린 및 약학적 허용 담체을 포함하는 약학 조성물.
  176. 제 175 항 에 있어서, 상기 데아자퓨린은 4-(2-아세틸아미노에틸아미노-6-페녹시메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(4-플루오로페녹시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(4-클로로페녹시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(4-메톡시페녹시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(2-피리딜옥시)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노6-(N-페닐아미노)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세틸아미노에틸)아미노-6-(N-메틸-N-페닐아마노)메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-N'-메틸우레아에틸)아미노-6-페녹시메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(시스-3-히드록시시클로펜틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(시스-3-(2-아미노아세톡시)시클로펜틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘 트리플루오로아세트산 염, 4-(3-아세트아미노)피페리디닐-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-N'-메틸우레아프로필)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아세트아미노부틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-N'-메틸우레아부틸)아미노-5,6-디메틸-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(2-아미노시클로프로필아세트아미노에틸)아미노-2-페닐-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 4-(트랜스-4-히드록시시클로헥실)아미노-2-(3-클로로페닐)-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 데아자퓨린은 4-(트랜스-4-히드록시시클로헥실)아미노-2-(3-플루오로페닐)-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘, 및 4-(트랜스-4-히드록시시클로헥실)아미노-2-(4-피리딜)-7H-피롤로[2,3d] 피리미딘으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  177. 제 175 항 에 있어서, 상기 치료적으로 유효한 양은 호흡기 질환 또는 위장관 질환을 치료하는 데 유효한 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  178. 제 177 항 에 있어서, 상기 위장관 질환은 설사인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  179. 제 177 항 에 있어서, 상기 호흡기 질환은 천식, 알레르기성 비염 또는 만성 장애 폐질환인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  180. 제 175 항 에 있어서, 상기 약학 제제는 안과 제형인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  181. 제 180 항 에 있어서, 상기 약학 제제는 눈주위, 구후 또는 내안 주사 제형인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  182. 제 180 항 에 있어서, 상기 약학 제제는 전신성 제형인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  183. 제 180 항 에 있어서, 상기 약학 제제는 외과적 세척액인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  184. 포유동물에서 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응성 상태를 치료하는 포장된 약학 조성물에 있어서,
    제 11, 12, 14, 25, 63 또는 64 항의 적어도 하나의 데아자퓨린을 치료적으로 유효한 양으로 보유하는 용기; 및
    동물에서의 N-6 치환 7-데아자퓨린 감응상태를 처치하는 상기 데아자퓨린을 사용하는 설명서를 포함하는 것을 특징으로 하는 포장된 약학 조성물.
  185. 의 제조 방법에 있어서,
    a)및을 반응시켜를 제공하는 단계로서 상기 식에서, P는 저급 알킬 또는 보호기이고;
    b) 단계 a)의 생성물을 고리화하여을 제공하는 단계;
    c) 단계 b)의 생성물을 염소화시켜을 제공하는 단계; 및
    d) 단계 c)의 생성물을 처리하여을 제공하는 단계를 포함하는 것으로서,
    상기 식에서,
    R1및 R2는 각각 수소 원자 또는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체이거나 같이 치환 또는 미치환 헤테로시클릭 환을 형성하고,
    R3는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체이고; 및
    R5는 할로겐 원자, 수소 원자 또는 치환 또는 미치환된 알킬, 아릴, 또는 알킬아릴 부분체인 것을 특징으로 하는 방법.
  186. 를 제조하는 방법에 있어서,
    a)및을 반응시켜를 제공하는 단계로서 상기 식에서, P는 제거할 수 있는 보호기이고;
    b) 단계 a)의 생성물을 고리화 조건에서 처리하여을 제공하는 단계;
    c) 단계 b)의 생성물을 적절한 조건에서 처리하여을 제공하는 단계; 및
    d) 염소화된 단계 c)의 생성물을 아민으로 처리하여을 제공하는 단계를 포함하는 것으로서,
    상기 식에서,
    R1및 R2는 각각 수소 원자 또는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체이거나 같이 치환 또는 미치환 헤테로시클릭 환을 형성하고,
    R3는 치환 또는 미치환 알킬, 아릴 또는 알킬아릴 부분체이고; 및
    R6는 할로겐 원자, 수소 원자 또는 치환 또는 미치환된 알킬, 아릴, 또는 알킬아릴 부분체인 것을 특징으로 하는 방법.
KR1020007013675A 1998-06-02 1999-06-01 피롤로[2,3디]피리미딘 조성물 및 이의 용도 KR100722194B1 (ko)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US8770298P 1998-06-02 1998-06-02
US60/087,702 1998-06-02
US12321699P 1999-03-08 1999-03-08
US60/123,216 1999-03-08
US12652799P 1999-03-26 1999-03-26
US60/126,527 1999-03-26

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20010083042A true KR20010083042A (ko) 2001-08-31
KR100722194B1 KR100722194B1 (ko) 2007-05-29

Family

ID=27375739

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020007013675A KR100722194B1 (ko) 1998-06-02 1999-06-01 피롤로[2,3디]피리미딘 조성물 및 이의 용도

Country Status (25)

Country Link
US (3) US6800633B2 (ko)
EP (2) EP1082120A1 (ko)
JP (1) JP4611524B2 (ko)
KR (1) KR100722194B1 (ko)
CN (1) CN100528874C (ko)
AP (1) AP1411A (ko)
AR (1) AR020590A1 (ko)
AU (1) AU763658B2 (ko)
BR (1) BR9911612A (ko)
CA (1) CA2334200C (ko)
CZ (1) CZ302486B6 (ko)
DZ (1) DZ2805A1 (ko)
EA (1) EA003604B1 (ko)
HU (1) HUP0103836A3 (ko)
ID (1) ID27600A (ko)
IL (1) IL139787A0 (ko)
MX (1) MXPA00011889A (ko)
NO (1) NO325233B1 (ko)
NZ (1) NZ508314A (ko)
OA (1) OA12147A (ko)
PL (1) PL204628B1 (ko)
TR (1) TR200003513T2 (ko)
TW (1) TWI242435B (ko)
WO (1) WO1999062518A1 (ko)
YU (1) YU76100A (ko)

Families Citing this family (75)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6514949B1 (en) 1994-07-11 2003-02-04 University Of Virginia Patent Foundation Method compositions for treating the inflammatory response
EP1679668B1 (en) * 1996-09-04 2010-01-27 Intertrust Technologies Corp. Trusted infrastructure support systems, methods and techniques for secure electronic commerce, electronic transactions, commerce process control and automation, distributed computing, and rights management
US6686366B1 (en) 1998-06-02 2004-02-03 Osi Pharmaceuticals, Inc. Compounds specific to adenosine A3 receptor and uses thereof
US6878716B1 (en) 1998-06-02 2005-04-12 Osi Pharmaceuticals, Inc. Compounds specific to adenosine A1 receptor and uses thereof
ID27600A (id) 1998-06-02 2001-04-12 Osi Pharm Inc KOMPOSISI PIROLO (2,3d) PIRIMIDIN DAN PENGGUNAANNYA
US6232297B1 (en) 1999-02-01 2001-05-15 University Of Virginia Patent Foundation Methods and compositions for treating inflammatory response
US7427606B2 (en) 1999-02-01 2008-09-23 University Of Virginia Patent Foundation Method to reduce inflammatory response in transplanted tissue
US7378400B2 (en) 1999-02-01 2008-05-27 University Of Virginia Patent Foundation Method to reduce an inflammatory response from arthritis
US7214665B2 (en) 2001-10-01 2007-05-08 University Of Virginia Patent Foundation 2-propynyl adenosine analogs having A2A agonist activity and compositions thereof
PT1246623E (pt) * 1999-12-02 2006-12-29 Osi Pharm Inc Compostos específicos para o receptor de adenosina a1,a2a e a3 e as suas utilizações
US6680322B2 (en) 1999-12-02 2004-01-20 Osi Pharmaceuticals, Inc. Compounds specific to adenosine A1 receptors and uses thereof
US6664252B2 (en) 1999-12-02 2003-12-16 Osi Pharmaceuticals, Inc. 4-aminopyrrolo[2,3-d]pyrimidine compounds specific to adenosine A2a receptor and uses thereof
US7160890B2 (en) 1999-12-02 2007-01-09 Osi Pharmaceuticals, Inc. Compounds specific to adenosine A3 receptor and uses thereof
DE60107835T2 (de) 2000-04-26 2005-12-22 Eisai Co., Ltd. Medizinische zusammensetzungen zur förderung der aktivierung der eingeweide
WO2002006242A2 (en) * 2000-07-18 2002-01-24 Neurogen Corporation 5-substituted 2-aryl-4-pyrimidinones
HUP0302173A2 (hu) * 2000-09-15 2003-09-29 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Protein kináz inhibitorokként alkalmazható pirazolvegyületek
ZA200301703B (en) * 2000-09-15 2004-03-02 Vertex Pharma Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors.
SI1318997T1 (sl) * 2000-09-15 2006-12-31 Vertex Pharma Pirazolne spojine, uporabne kot inhibitorji protein-kinaze
US6660731B2 (en) 2000-09-15 2003-12-09 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors
US6680324B2 (en) * 2000-12-01 2004-01-20 Osi Pharmaceuticals, Inc. Compounds specific to adenosine A1 receptors and uses thereof
US6673802B2 (en) 2000-12-01 2004-01-06 Osi Pharmaceuticals, Inc. Compounds specific to adenosine A3 receptor and uses thereof
UA74228C2 (uk) * 2000-12-01 2005-11-15 Осі Фармасьютікалз, Інк. ПОХІДНІ ПІРОЛО[2,3-d]ПІРИМІДИНУ, СПЕЦИФІЧНІ ДО АДЕНОЗИНОВОГО A<sub>1</sub>, A<sub>2А</sub> І A<sub>3</sub> РЕЦЕПТОРА, СПОСІБ ЇХ ОДЕРЖАННЯ ТА ФАРМАЦЕВТИЧНА КОМПОЗИЦІЯ
HUP0400692A3 (en) * 2000-12-01 2007-09-28 Osi Pharmaceuticals Substituted 7h-pyrrolo[2,3-d]pyrimidine derivatives, their use and pharmaceutical compositions containing them
ES2265452T3 (es) 2000-12-21 2007-02-16 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compuestos de pirazol utiles como inhibidores de la proteina quinasa.
GB0100622D0 (en) * 2001-01-10 2001-02-21 Vernalis Res Ltd Chemical compounds V111
TWI238824B (en) 2001-05-14 2005-09-01 Novartis Ag 4-amino-5-phenyl-7-cyclobutyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidine derivatives
DE10148883A1 (de) 2001-10-04 2003-04-10 Merck Patent Gmbh Pyrimidinderivate
TWI301834B (en) 2001-10-22 2008-10-11 Eisai R&D Man Co Ltd Pyrimidone compound and pharmaceutical composition including the same
WO2003048120A2 (en) 2001-11-30 2003-06-12 Osi Pharmaceuticals, Inc. 2-aryl pyrrologpyrimidines for a1 and a3 receptors
AU2002366801B8 (en) * 2001-12-20 2009-05-21 Osi Pharmaceuticals, Inc. Pyrrolopyrimidine A2b selective antagonist compounds, their synthesis and use
US20030229067A1 (en) * 2001-12-20 2003-12-11 Arlindo Castelhano Pyrrolopyrimidine A2b selective antagonist compounds, their synthesis and use
US6916804B2 (en) 2001-12-20 2005-07-12 Osi Pharmaceuticals, Inc. Pyrimidine A2b selective antagonist compounds, their synthesis and use
PT1483247E (pt) 2002-03-13 2009-08-18 Euro Celtique Sa Pirimidinas substituídas por arilo e a sua utilização
MY141867A (en) 2002-06-20 2010-07-16 Vertex Pharma Substituted pyrimidines useful as protein kinase inhibitors
US20040138238A1 (en) * 2002-08-08 2004-07-15 Dhanoa Dale S. Substituted aminopyrimidine compounds as neurokinin antagonists
US7674791B2 (en) 2003-04-09 2010-03-09 Biogen Idec Ma Inc. Triazolopyrazines and methods of making and using the same
EP1633756B1 (en) 2003-04-09 2008-12-24 Biogen Idec MA Inc. A2a adenosine receptor antagonists
WO2004092170A2 (en) 2003-04-09 2004-10-28 Biogen Idec Ma Inc. Triazolotriazines and pyrazolotriazines useful as a2a adenosine receptor antagon ists
AR043880A1 (es) * 2003-04-22 2005-08-17 Solvay Pharm Gmbh Mesilato acido de 4-(4.trans-hidroxiciclohexil) amino-2-fenil-7h-pirrolo (2,3-d) pirimidina y sus formas polimorfas
US7488736B2 (en) * 2004-05-17 2009-02-10 Epix Delaware, Inc. Thienopyridinone compounds and methods of treatment
EP1778712B1 (en) 2004-08-02 2013-01-30 University Of Virginia Patent Foundation 2-propynyl adenosine analogs with modified 5'-ribose groups having a2a agonist activity
US7442687B2 (en) 2004-08-02 2008-10-28 The University Of Virginia Patent Foundation 2-polycyclic propynyl adenosine analogs having A2A agonist activity
WO2006028618A1 (en) 2004-08-02 2006-03-16 University Of Virginia Patent Foundation 2-polycyclic propynyl adenosine analogs with modified 5'-ribose groups having a2a agonist activity
US7576211B2 (en) * 2004-09-30 2009-08-18 Epix Delaware, Inc. Synthesis of thienopyridinone compounds and related intermediates
US7598265B2 (en) * 2004-09-30 2009-10-06 Epix Delaware, Inc. Compositions and methods for treating CNS disorders
MY179032A (en) 2004-10-25 2020-10-26 Cancer Research Tech Ltd Ortho-condensed pyridine and pyrimidine derivatives (e.g.purines) as protein kinase inhibitors
UY29177A1 (es) 2004-10-25 2006-05-31 Astex Therapeutics Ltd Derivados sustituidos de purina, purinona y deazapurina, composiciones que los contienen métodos para su preparación y sus usos
US20060205625A1 (en) * 2005-02-18 2006-09-14 Solvay Pharmaceuticals Gmbh Pharmaceutical compositions comprising NEP-inhibitors, inhibitors of the endogenous endothelin producing system and diuretics
AR056763A1 (es) 2005-11-03 2007-10-24 Vertex Pharma Aminopirimidinas sustituidas con tiazol o pirazol,utiles como agentes anticancer y composiciones farmaceuticas que las contienen.
EP1968603A4 (en) * 2006-01-03 2013-01-16 Algebra Inc THERAPEUTIC AMINARYLSULFONAMIDE CONJUGATE COMPOUNDS
DK3421471T3 (da) 2006-04-25 2021-06-14 Astex Therapeutics Ltd Purin- og deazapurinderivater som farmaceutiske forbindelser
TW200808819A (en) * 2006-06-19 2008-02-16 Solvay Pharm Gmbh Use of adenosine A1 antagonists in radiocontrast media induced nephrophaty
CA2685876A1 (en) 2007-05-02 2008-11-13 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Thiazoles and pyrazoles useful as kinase inhibitors
WO2009018415A1 (en) 2007-07-31 2009-02-05 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Process for preparing 5-fluoro-1h-pyrazolo [3, 4-b] pyridin-3-amine and derivatives thereof
US20110160232A1 (en) 2007-10-04 2011-06-30 Pingda Ren Certain chemical entities and therapeutic uses thereof
WO2009114874A2 (en) 2008-03-14 2009-09-17 Intellikine, Inc. Benzothiazole kinase inhibitors and methods of use
US8637542B2 (en) 2008-03-14 2014-01-28 Intellikine, Inc. Kinase inhibitors and methods of use
WO2009153261A1 (en) * 2008-06-18 2009-12-23 Solvay Pharmaceuticals Gmbh HYDROXYPHENYL-SUBSTITUTED PYRROLO[2,3d]PYRIMIDINE DERIVATIVES, PROCESSES AND INTERMEDIATE PRODUCTS FOR THEIR PREPARATION AND MEDICAMENTS CONTAINING THESE COMPOUNDS
CN102124009B (zh) 2008-07-08 2014-07-23 因特利凯公司 激酶抑制剂及其使用方法
RU2473549C2 (ru) * 2008-07-31 2013-01-27 Дженентек, Инк. Пиримидиновые соединения, композиции и способы применения
EP2323622A1 (en) 2008-09-03 2011-05-25 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Co-crystals and pharmaceutical formulations comprising the same
US8476431B2 (en) 2008-11-03 2013-07-02 Itellikine LLC Benzoxazole kinase inhibitors and methods of use
EP2445877B1 (en) * 2008-12-03 2014-07-23 Nanotherapeutics, Inc. Bicyclic compounds and methods of making and using same
CA2766151A1 (en) * 2009-06-24 2010-12-29 Genentech, Inc. Oxo-heterocycle fused pyrimidine compounds, compositions and methods of use
TWI466885B (zh) 2009-07-31 2015-01-01 Japan Tobacco Inc 含氮螺環化合物及其醫藥用途
BR112012011188A2 (pt) * 2009-11-12 2021-06-29 F.Hoffmann - La Roche Ag ''composto,composição farmacêutica e uso de um composto"
CN102712642B (zh) * 2009-11-12 2015-08-12 霍夫曼-拉罗奇有限公司 N-7取代的嘌呤和吡唑并嘧啶化合物、组合物和使用方法
WO2012080735A1 (en) 2010-12-16 2012-06-21 Convergence Pharmaceuticals Limited Ask1 inhibiting pyrrolopyrimidine derivatives
US9295673B2 (en) 2011-02-23 2016-03-29 Intellikine Llc Combination of mTOR inhibitors and P13-kinase inhibitors, and uses thereof
CN104350056A (zh) * 2012-06-07 2015-02-11 霍夫曼-拉罗奇有限公司 端锚聚合酶的吡咯并嘧啶酮和吡咯并吡啶酮抑制剂
WO2014153509A1 (en) 2013-03-22 2014-09-25 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Combination of catalytic mtorc 1/2 inhibitors and selective inhibitors of aurora a kinase
CN110128316B (zh) * 2019-05-22 2021-08-31 北京大学深圳研究生院 5位取代的β-脯氨酸及其衍生物的制备方法
WO2022109495A1 (en) * 2020-11-23 2022-05-27 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for linking rna stem loops
CN113105469B (zh) * 2021-04-13 2022-04-22 中国科学院新疆理化技术研究所 一种三环呋喃并[2,3-d]嘧啶酮类化合物及用途
CN116621843B (zh) * 2022-06-13 2024-05-24 四川大学华西医院 一种dna甲基转移酶1抑制剂及其制备方法和用途

Family Cites Families (84)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3037980A (en) * 1955-08-18 1962-06-05 Burroughs Wellcome Co Pyrrolopyrimidine vasodilators and method of making them
GB915303A (en) * 1958-03-13 1963-01-09 Wellcome Found Pyrrolo[2,3-d]pyrimidine derivatives and the manufacture thereof
US3910913A (en) 1969-11-04 1975-10-07 American Home Prod 4,5-Diamino-7H-pyrrolo{8 2,3-d{9 pyrimidine derivatives
US4550022A (en) 1981-10-05 1985-10-29 Alcon Laboratories, Inc. Tissue irrigating solution
DE3145287A1 (de) * 1981-11-14 1983-05-19 Troponwerke GmbH & Co KG, 5000 Köln Pyrrolo (2.3-d)pyrimidine, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als arzneimittel
US4473571A (en) * 1983-01-17 1984-09-25 Sterling Drug Inc. 8-Substituted-2-(4-pyridinyl)-9H-purin-6-amines and their cardiotonic use
IN157280B (ko) 1983-07-15 1986-02-22 Hoechst India
GB8729994D0 (en) 1987-12-23 1988-02-03 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
IL89028A0 (en) 1988-01-29 1989-08-15 Lilly Co Eli Quinoline,quinazoline and cinnoline derivatives
WO1991004254A1 (fr) * 1989-09-19 1991-04-04 Teijin Limited DERIVE DE PYRROLO[2,3-d]PYRIMIDINE, SON PROCEDE DE PREPARATION, ET PREPARATION PHARMACEUTIQUE COMPRENANT LE DERIVE COMME INGREDIENT ACTIF
US5681941A (en) 1990-01-11 1997-10-28 Isis Pharmaceuticals, Inc. Substituted purines and oligonucleotide cross-linking
US5208240A (en) 1991-03-12 1993-05-04 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. 8-substituted purines as selective adenosine receptor agents
US5710158A (en) 1991-05-10 1998-01-20 Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. Aryl and heteroaryl quinazoline compounds which inhibit EGF and/or PDGF receptor tyrosine kinase
US5721237A (en) 1991-05-10 1998-02-24 Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. Protein tyrosine kinase aryl and heteroaryl quinazoline compounds having selective inhibition of HER-2 autophosphorylation properties
AU658646B2 (en) 1991-05-10 1995-04-27 Rhone-Poulenc Rorer International (Holdings) Inc. Bis mono-and bicyclic aryl and heteroaryl compounds which inhibit EGF and/or PDGF receptor tyrosine kinase
US5714493A (en) 1991-05-10 1998-02-03 Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals, Inc. Aryl and heteroaryl quinazoline compounds which inhibit CSF-1R receptor tyrosine kinase
US5516894A (en) 1992-03-11 1996-05-14 The General Hospital Corporation A2b -adenosine receptors
ES2150941T3 (es) * 1992-04-03 2000-12-16 Upjohn Co Aminas biciclicas-heterociclicas eficaces farmaceuticamente.
GB9323290D0 (en) 1992-12-10 1994-01-05 Zeneca Ltd Quinazoline derivatives
RU2124015C1 (ru) * 1992-12-17 1998-12-27 Пфайзер Инк. Производные пирроло [2,3-d] пиримидинов, фармацевтическая композиция, пирроло [2,3-d] пиримидины, производные пиррола
GB9301000D0 (en) 1993-01-20 1993-03-10 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
HUT72677A (en) 1993-02-26 1996-05-28 Merrell Dow Pharma Xanthine derivatives as adenosine a1 receptor antagonists
ATE255582T1 (de) 1993-04-08 2003-12-15 Univ Columbia Verfahren zur synthese von 4-und/oder 5-(di) substituierten 2-aminoimidazolen aus 2- aminoimidazolen und aldehyden
WO1995011681A1 (en) 1993-10-29 1995-05-04 Merck & Co., Inc. Human adenosine receptor antagonists
CA2180841C (en) 1994-01-10 2007-03-27 Sasson Cohen 1-aminoindan derivatives and compositions thereof
US5914349A (en) 1994-01-10 1999-06-22 Teva Pharmaceutical Industries, Ltd. Compositions containing and methods of using 1-aminoindan and derivatives thereof and process for preparing optically active 1-aminoindan derivatives
IL112249A (en) 1994-01-25 2001-11-25 Warner Lambert Co Pharmaceutical compositions containing di and tricyclic pyrimidine derivatives for inhibiting tyrosine kinases of the epidermal growth factor receptor family and some new such compounds
IL112248A0 (en) * 1994-01-25 1995-03-30 Warner Lambert Co Tricyclic heteroaromatic compounds and pharmaceutical compositions containing them
ATE222921T1 (de) 1994-01-26 2002-09-15 Novartis Erfind Verwalt Gmbh Modifizierte oligonukleotide
US5646156A (en) 1994-04-25 1997-07-08 Merck & Co., Inc. Inhibition of eosinophil activation through A3 adenosine receptor antagonism
ES2109796T3 (es) * 1994-05-03 1998-01-16 Ciba Geigy Ag Derivados de pirrolopirimidilo con efecto antiproliferante.
US5877180A (en) 1994-07-11 1999-03-02 University Of Virginia Patent Foundation Method for treating inflammatory diseases with A2a adenosine receptor agonists
NZ293249A (en) * 1994-09-29 1999-04-29 Novartis Ag 4-amino-5,7-diaryl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidines and their use
AU4303996A (en) 1994-12-19 1996-07-10 Novartis Ag 6'-substituted carbocyclic nucleosides
EP0729758A3 (en) * 1995-03-02 1997-10-29 Pfizer Pyrazolopyrimidines and pyrrolopyrimidines to treat neuronal disorders and other diseases
US6403599B1 (en) * 1995-11-08 2002-06-11 Pfizer Inc Corticotropin releasing factor antagonists
US5747498A (en) 1996-05-28 1998-05-05 Pfizer Inc. Alkynyl and azido-substituted 4-anilinoquinazolines
US5646130A (en) 1995-06-30 1997-07-08 Ocean University Of Oingdao Low molecular weight sulfated polysaccharides and uses thereof
DK0836605T3 (da) 1995-07-06 2002-05-13 Novartis Ag Pyrrolopyrimidiner og fremgangsmåder til deres fremstilling
IT1277392B1 (it) 1995-07-28 1997-11-10 Schering Plough S P A Analoghi eterociclici di 1,2,4-triazolo(1,5-c]pirimidine ad attivita' antagonista per il recettore a2a dell'adenosina
US5780450A (en) 1995-11-21 1998-07-14 Alcon Laboratories, Inc. Use of adenosine uptake inhibitors for treating retinal or optic nerve head damage
GB9624482D0 (en) 1995-12-18 1997-01-15 Zeneca Phaema S A Chemical compounds
WO1997033879A1 (en) 1996-03-15 1997-09-18 Merck & Co., Inc. Compounds and methods for selectively inhibiting activation of the human a3 adenosine receptor
JPH09291089A (ja) 1996-04-26 1997-11-11 Yamanouchi Pharmaceut Co Ltd 新規な５−チアゾリルウラシル誘導体又はその塩
WO1997047601A1 (fr) 1996-06-11 1997-12-18 Yoshitomi Pharmaceutical Industries, Ltd. Composes heterocycliques fusionnes et leurs utilisations medicinales
TW498067B (en) 1996-07-19 2002-08-11 Hoffmann La Roche 4-hydroxy-piperidine derivatives
US5780481A (en) 1996-08-08 1998-07-14 Merck & Co., Inc. Method for inhibiting activation of the human A3 adenosine receptor to treat asthma
CA2262421C (en) 1996-08-23 2007-10-02 Novartis Ag Substituted pyrrolopyrimidines and processes for their preparation
JP2000516961A (ja) 1996-08-30 2000-12-19 イーライ・リリー・アンド・カンパニー 非古典的ピロロ［２，３―ｄ］ピリミジン抗葉酸物質
US5786360A (en) 1996-11-19 1998-07-28 Link Technology Incorporated A1 adenosine receptor antagonists
AU7890598A (en) * 1996-12-27 1998-07-31 Yoshitomi Pharmaceutical Industries, Ltd. Fused pyrimidine compounds and medicinal use thereof
FR2763334A1 (fr) 1997-05-13 1998-11-20 Lipha Derives anthraniliques
AU740770B2 (en) * 1997-06-18 2001-11-15 Aderis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for preventing restenosis following revascularization procedures
AU8764398A (en) 1997-07-29 1999-02-22 Medco Research, Inc. N6-substituted-adenosine-5'-uronamides as adenosine receptor modulators
US6151484A (en) 1997-08-08 2000-11-21 Ericsson Inc. Communications apparatus and methods for adaptive signal processing based on mobility characteristics
US6436989B1 (en) 1997-12-24 2002-08-20 Vertex Pharmaceuticals, Incorporated Prodrugs of aspartyl protease inhibitors
US6117878A (en) 1998-02-24 2000-09-12 University Of Virginia 8-phenyl- or 8-cycloalkyl xanthine antagonists of A2B human adenosine receptors
US6878716B1 (en) * 1998-06-02 2005-04-12 Osi Pharmaceuticals, Inc. Compounds specific to adenosine A1 receptor and uses thereof
ID27600A (id) 1998-06-02 2001-04-12 Osi Pharm Inc KOMPOSISI PIROLO (2,3d) PIRIMIDIN DAN PENGGUNAANNYA
US6686366B1 (en) 1998-06-02 2004-02-03 Osi Pharmaceuticals, Inc. Compounds specific to adenosine A3 receptor and uses thereof
ATE290910T1 (de) 1998-07-16 2005-04-15 Univ Pennsylvania Verwendung von a3-adenosine antagonisten zur herstellung eines arzneimittels zur senkung des augeninnendrucks
US6463687B1 (en) * 1998-09-25 2002-10-15 Edward J. Dorstewitz Collapsible safety sign
US6158306A (en) 1998-10-06 2000-12-12 Gasparre; Pasquale Jar holder
PT1246623E (pt) 1999-12-02 2006-12-29 Osi Pharm Inc Compostos específicos para o receptor de adenosina a1,a2a e a3 e as suas utilizações
US6680322B2 (en) 1999-12-02 2004-01-20 Osi Pharmaceuticals, Inc. Compounds specific to adenosine A1 receptors and uses thereof
US6664252B2 (en) 1999-12-02 2003-12-16 Osi Pharmaceuticals, Inc. 4-aminopyrrolo[2,3-d]pyrimidine compounds specific to adenosine A2a receptor and uses thereof
US7160890B2 (en) 1999-12-02 2007-01-09 Osi Pharmaceuticals, Inc. Compounds specific to adenosine A3 receptor and uses thereof
US6628342B2 (en) 2000-01-05 2003-09-30 Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. Video signal processing apparatus
JP3317948B2 (ja) 2000-01-20 2002-08-26 エヌイーシーマイクロシステム株式会社 半導体集積回路のレイアウト設計方法及び半導体集積回路
US6465456B2 (en) 2000-06-29 2002-10-15 Bristol-Myers Squibb Company Isoxazolinone antibacterial agents
US6673802B2 (en) 2000-12-01 2004-01-06 Osi Pharmaceuticals, Inc. Compounds specific to adenosine A3 receptor and uses thereof
HUP0400692A3 (en) 2000-12-01 2007-09-28 Osi Pharmaceuticals Substituted 7h-pyrrolo[2,3-d]pyrimidine derivatives, their use and pharmaceutical compositions containing them
US6680324B2 (en) 2000-12-01 2004-01-20 Osi Pharmaceuticals, Inc. Compounds specific to adenosine A1 receptors and uses thereof
WO2003048120A2 (en) 2001-11-30 2003-06-12 Osi Pharmaceuticals, Inc. 2-aryl pyrrologpyrimidines for a1 and a3 receptors
AU2002366801B8 (en) 2001-12-20 2009-05-21 Osi Pharmaceuticals, Inc. Pyrrolopyrimidine A2b selective antagonist compounds, their synthesis and use
US6916804B2 (en) 2001-12-20 2005-07-12 Osi Pharmaceuticals, Inc. Pyrimidine A2b selective antagonist compounds, their synthesis and use
US20030229067A1 (en) 2001-12-20 2003-12-11 Arlindo Castelhano Pyrrolopyrimidine A2b selective antagonist compounds, their synthesis and use
US20030139427A1 (en) 2002-08-23 2003-07-24 Osi Pharmaceuticals Inc. Bicyclic pyrimidinyl derivatives and methods of use thereof
US7202252B2 (en) 2003-02-19 2007-04-10 Endacea, Inc. A1 adenosine receptor antagonists
JP6297783B2 (ja) 2013-03-08 2018-03-20 住友電気工業株式会社 炭化珪素半導体装置およびその製造方法
CN103309150B (zh) 2013-06-26 2015-06-17 上海华力微电子有限公司 版图数据的处理方法
KR102109129B1 (ko) 2013-07-02 2020-05-08 삼성전자주식회사 반사형 포토마스크 블랭크 및 반사형 포토마스크
JP6502627B2 (ja) 2014-07-29 2019-04-17 太陽誘電株式会社 コイル部品及び電子機器
CN106531794B (zh) 2015-09-15 2021-02-09 联华电子股份有限公司 高压金属氧化物半导体晶体管元件及其制造方法

Also Published As

Publication number Publication date
HUP0103836A2 (hu) 2002-02-28
AU763658B2 (en) 2003-07-31
NO20006090L (no) 2001-01-31
KR100722194B1 (ko) 2007-05-29
BR9911612A (pt) 2001-02-06
AU4226599A (en) 1999-12-20
US20020028782A1 (en) 2002-03-07
ID27600A (id) 2001-04-12
DZ2805A1 (fr) 2005-01-30
PL204628B1 (pl) 2010-01-29
EP2011499A2 (en) 2009-01-07
CZ302486B6 (cs) 2011-06-15
CN1311680A (zh) 2001-09-05
AP1411A (en) 2005-05-10
IL139787A0 (en) 2002-02-10
EA200001245A1 (ru) 2001-08-27
EP1082120A1 (en) 2001-03-14
EP2011499A3 (en) 2010-10-20
US6800633B2 (en) 2004-10-05
AR020590A1 (es) 2002-05-22
JP2002516861A (ja) 2002-06-11
MXPA00011889A (es) 2003-04-25
YU76100A (sh) 2003-12-31
JP4611524B2 (ja) 2011-01-12
CA2334200C (en) 2011-01-25
TWI242435B (en) 2005-11-01
WO1999062518A1 (en) 1999-12-09
PL347020A1 (en) 2002-03-11
NZ508314A (en) 2004-03-26
CN100528874C (zh) 2009-08-19
CA2334200A1 (en) 1999-12-09
OA12147A (en) 2006-05-05
US20090082369A1 (en) 2009-03-26
NO20006090D0 (no) 2000-11-30
TR200003513T2 (tr) 2001-06-21
AP2000002015A0 (en) 2000-12-31
EA003604B1 (ru) 2003-06-26
US20050043332A1 (en) 2005-02-24
HUP0103836A3 (en) 2003-05-28
CZ20004443A3 (cs) 2002-03-13
US7429574B2 (en) 2008-09-30
NO325233B1 (no) 2008-03-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100722194B1 (ko) 피롤로[2,3디]피리미딘 조성물 및 이의 용도
US6680324B2 (en) Compounds specific to adenosine A1 receptors and uses thereof
US6673802B2 (en) Compounds specific to adenosine A3 receptor and uses thereof
US6680322B2 (en) Compounds specific to adenosine A1 receptors and uses thereof
US6664252B2 (en) 4-aminopyrrolo[2,3-d]pyrimidine compounds specific to adenosine A2a receptor and uses thereof
US7160890B2 (en) Compounds specific to adenosine A3 receptor and uses thereof
JP4579497B2 (ja) アデノシンａ１、ａ２ａ、およびａ３受容体に特異的な化合物、ならびにそれらの使用
KR100840727B1 (ko) 아데노신 ａ1, ａ2ａ 및 ａ3 수용체 특이 화합물 및 그의 사용방법
AU2002248151A1 (en) Compounds specific to adenosine A1, A2A, and A3 receptor and uses thereof
US6686366B1 (en) Compounds specific to adenosine A3 receptor and uses thereof
US6878716B1 (en) Compounds specific to adenosine A1 receptor and uses thereof
KR100897430B1 (ko) 아데노신 ａ₁, ａ₂ａ 및 ａ₃ 수용체에 특이적인 화합물및 그의 용도

Legal Events

Date Code Title Description
N231 Notification of change of applicant
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20110428

Year of fee payment: 5

LAPS Lapse due to unpaid annual fee