UA74228C2 - ПОХІДНІ ПІРОЛО[2,3-d]ПІРИМІДИНУ, СПЕЦИФІЧНІ ДО АДЕНОЗИНОВОГО A₁, A_2А І A₃ РЕЦЕПТОРА, СПОСІБ ЇХ ОДЕРЖАННЯ ТА ФАРМАЦЕВТИЧНА КОМПОЗИЦІЯ - Google Patents

Abstract

Даний винахід відноситься до сполук формули: , які специфічно інгібують A1, А2A і А3 рецептори, і застосування даних сполук для лікування захворювань, пов'язаних з A1, А2A і А3 аденозиновими рецепторами у суб'єктів, яке включає введення суб'єкту терапевтично ефективної кількості сполук.

Description

Опис винаходу

Дана заявка є частковим продовженням і по ній запитується пріоритет на основі заявок на патент США 2 МоМо09/728316, поданої 1 грудня 200Ор., 09/728607, поданої 1 грудня 200О0р., і 09/728616, поданої 1 грудня 2000р., кожна з яких включена в даний опис як посилання у всій своїй повноті.

У даній заявці згадуються сполуки, які специфічно зв'язуються з )) А 4 аденозиновими рецепторами (як наприклад, крім іншого, стор. 3-61, 104-142 і 199-280); ії) Ага аденозиновими рецепторами (як наприклад, крім іншого, стор. 142-159 і стор. 221-224) і Аз аденозиновими рецепторами (як наприклад, крім іншого, стор. 160-199 70 1225-229).

Аденозин являє собою широко поширений модулятор численних видів фізіологічної активності, зокрема у серцево-судинній і нервовій системах. Виявляється, що дія аденозину опосередковується специфічними рецепторними білками поверхні клітини. Аденозин модулює різні фізіологічні функції, включаючи індукування седативної дії, розширення судин, придушення частоти серцевих скорочень і скорочуваності серця, інгібування 12 агрегації тромбоцитів, стимулювання глюконеогенезу та інгібування ліполізу. Було показано, що в доповнення до його дії на аденілатциклазу, аденозин відкриває калієві канали, зменшує потік через кальцієві канали та інгібує або стимулює фосфоїнозитидний оборот за допомогою рецептор-опосередкованих механізмів (дивись, наприклад, "С.Е.МиПег апа В.5іеіїп Адепозіпе Кесеріог Апіадопівів: Зігисігез апа Роїепііаї Тнегарецііс

Арріїсайопе", Ситепі РІагтасецшіса! ЮОевідп 2:501 (1996) і "С.Е.МиШег Аі-Адепозіпе Кесеріог Апіадопівів",

Ехр, Оріп.Тнег. Райепів 7(5): 419 (1997).

Аденозинові рецептори належать до надсімейства пуринових рецепторів, які в цей час поділяють на Р. і (аденозин) і Ро (АТФ, АДФ та інші нуклеотиди) рецептори. До цього часу з різних видів, включаючи людину, було клоновано чотири підтипи рецепторів для аденозинового нуклеозиду. Два підтипи рецепторів (А 4 і Ага) виявляють спорідненість до аденозину в наномолярному діапазоні, тоді як два інших відомих підтипи А з, і Аз є с рецепторами з низькою спорідненістю до аденозину в нижньому мікромолярному діапазоні. Активація А 4 і Аз Ге) аденозинового рецептора може приводити до інгібування активності аденілатциклази, тоді як активація А за і Ась викликає стимуляцію аденілатциклази.

Для лікування порушення пізнавальної здатності, ниркової недостатності і серцевої аритмії було розроблено декілька Аїі антагоністів. Було висловлене припущення, що Ага антагоністи можуть виявитись сприятливими для со пацієнтів, страждаючих від паркінсонізму (хвороба Паркінсона). Зокрема, беручи до уваги здатність до місцевої су доставки, антагоністи аденозинового рецептора можуть виявитись цінними для лікування алергічного запалення і астми. Доступна інформація (наприклад, "Мусе 5 Меїгдег ОМА апііїзепзе Тпегару ог Авіпта іп ап АпітаїЇ сч

Модае!", Маїшге (1997) 385: 721-5) вказує, що в даному патофізіологічному контексті А. антагоністи можуть «ф блокувати скорочення гладкої мускулатури, яка лежить під дихальним епітелієм, тоді як антагоністи А оь або Аз рецептора можуть блокувати дегрануляцію тучних клітин, зменшуючи вивільнення гістаміну та інших запальних - медіаторів. А2ь рецептори були виявлені у шлунково-кишковому тракті, особливо в епітелії прямої кишки і тонкого кишечника. Було висловлене припущення, що А 2ь рецептори опосередковують ЦАМФ реакцію у відповідь (Зігоптеїег еї а/!., У.Віо.Спет. (1995) 270:2387-94). «

Також було показано, що аденозинові рецептори існують на сітківці різних видів ссавців, включаючи велику З рогату худобу, свиню, мавпу, щура, морську свинку, мишу, кролика і людину (дивись, Віагупекі еї аї., Оівзсгесге с Оівігібшіопе ої Адеповзіпе Кесеріоге іп таттаїйап Кейіпа, доигпа! ої Меигоспептівігу, моїште 54, радез 648-655

Із» (1990); М/ооаз еї аї., СНагасіегілайоп ої Адепозіпе А,Кесеріог Біпаіїпд Зйез іп Воміпе Кейіпа! Метргапез,

Ехрегітепіа! Еуе Кевзеагсі, моїште 53, радез 325-331 (1991); і Вгааз еї аЇ,, Епдодепоиз адеповзіпе апа адеповзіпе гесеріоге Іосаїїйлей (йо дапдіоп о сейв ої (пе сгейпа, Ргосеедіпуов ої (Ше Майопа! Асадету ої 49 Ясієпсе, моїШте 84, радез 3906-3910 (1987) Нещодавно повідомлялось про результати спостережень і аденозинових транспортних сайтів у культивованій клітинній лінії сітківки людини (Матв еї аї!., Мисіеовіде «» Тгапзрогі Зйез іп а Сийигев Нитап Кеїйїпа! се Ііпе Евіарівпей ру 5М-40 Т Апіїдеп депе, Ситепі Еуе

Кезеагсі, моїште 13, радез 109-118 (1994)). о Сполуки, які регулюють поглинання аденозину, раніше були запропоновані як потенційні терапевтичні агенти ка 20 для лікування пошкодження сітківки і головного зорового нерва. У патенті США 5780450, виданому Зпаде, автор обговорює застосування інгібіторів поглинання аденозину для лікування очних захворювань. Зпаде не описує со застосування специфічних інгібіторів А з рецептора. Повний зміст патенту США Мо5780450 включений у даний опис як посилання.

Як фармакологічні інструменти необхідні додаткові антагоністи аденозинових рецепторів, і вони 25 представляють суттєвий інтерес як лікарські засоби для згаданих вище хворобливих станів і/або захворювань.

ГФ) Даний винахід відноситься до сполук, які селективно зв'язуються з А 1-аденозиновим рецептором, виліковуючи таким чином захворювання, пов'язане з А /-аденозиновим рецептором, у суб'єкта при введенні о суб'єкту терапевтично ефективної кількості таких сполук. Захворювання, що піддається лікуванню, пов'язане з порушенням пізнавальної здатності, нирковою недостатністю, серцевою аритмією, дихальним епітелієм, 60 вивільненням трансмітерів, седативною дією, звуженням кровоносних судин, брадикардією, негативною серцевою інотропією і дромотропією, бронхостенозом, нейтрофільним хемотаксисом, рефлюксом або виразковим захворюванням.

Даний винахід оснований, принаймні частково, на тому факті, що деякі М-6 заміщені 7-дезазапурини, описані нижче, можна використати для лікування хворобливого стану, що дає реакцію у відповідь на М-6 заміщений бо 7-дезазапурин. Приклади таких станів включають ті, в яких підвищена активність аденозинових рецепторів,

наприклад, бронхіт, шлунково-кишкові захворювання або астма. Такі стани можуть бути охарактеризовані тим, що активація аденозинового рецептора може вести до інгібування або стимуляції активності аденілатциклази.

Композиції і способи винаходу включають енантіомерно або діастереомерно чисті М-6 заміщені 7-дезазапурини.

Переважні М-6 заміщені 7-дезазапурини включають ті, які містять фрагменти ацетаміду, карбоксаміду, заміщеного циклогексилу, наприклад, циклогексанол, або сечовини, приєднані до М-6 азоту через алкіленовий ланцюг.

Даний винахід відноситься до способів модулювання аденозинового рецептора(ів) у ссавця шляхом введення ссавцеві терапевтично ефективної кількості М-б6 заміщеного 7-дезазапурину таким чином, що 70 відбувається модуляція активності аденозинового рецептора. Відповідні аденозинові рецептори включають сімейство А, А» і Аз. У переважному варіанті здійснення М-б заміщений 7-дезазапурин є антагоністом аденозинового рецептора.

Крім того, винахід відноситься до способів лікування захворювань, що дають реакцію у відповідь на М-6 заміщені 7-дезазапурини, наприклад, астми, бронхіту, алергічного риніту, хронічного обструктивного /5 захворювання легень, ниркових захворювань, шлунково-кишкових захворювань і очних захворювань у ссавця шляхом введення ссавцеві терапевтично ефективної кількості М-6 заміщеного 7-дезазапурину, таким чином, що відбувається лікування захворювання у ссавця. Відповідні М-6 заміщені 7-дезазапурини включають ті, які проілюстровані загальною формулою |: яки і

ХЖУ-

В 4 іч с 4) і їх фармацевтично прийнятні солі. Кожний з К. і Ко незалежно являє собою атом водню або заміщений або і) незаміщений алкільний, арильний або алкіларильний фрагмент, або вони разом утворюють заміщене або незаміщене гетероциклічне кільце. Кз являє собою заміщений або незаміщений алкільний, арильний або алкіларильний фрагмент. К/ являє собою атом водню або заміщений або незаміщений алкільний, арильний або 3 зо алкіларильний фрагмент. Кожний з К5 і Кб незалежно являє собою атом галогену, наприклад, хлор, фтор або бром, атом водню або заміщений або незаміщений алкільний, арильний або алкіларильний фрагмент, або К5 с являє собою карбоксил, складні ефіри карбоксилу або карбоксаміди, або К / і К5, або Кі Ке разом утворюють (су заміщене або незаміщене гетероциклічне або карбоциклічне кільце.

У деяких варіантах здійснення кожний з К 4 і Ко незалежно може являти собою заміщені або незаміщені « циклоалкільні або гетероарилалкільні фрагменти. У інших варіантах здійснення К»з являє собою атом водню або ї- заміщений або незаміщений гетероарильний фрагмент. Ще в інших варіантах здійснення кожний з К,/, Кв і Ке незалежно може являти собою гетероарильний фрагмент. У переважному варіанті здійснення К 4 являє собою атом водню, Ко являє собою циклогексанол, наприклад, транс-циклогексанол, Кз являє собою феніл, К; являє собою атом водню, Кь являє собою метильну групу і К 5 являє собою метильну групу. В іншому варіанті « здійснення К. являє собою атом водню, Ко являє собою в о ж Ж :з» Ак МНнМе ,

Кз являє собою феніл, К;4 являє собою атом водню, Кб і Ко являють собою метильні групи.

Винахід додатково відноситься до фармацевтичних композицій для лікування станів, що дають реакцію у -І відповідь на М-6 заміщені 7-дезазапурини, у ссавців, наприклад, астми, бронхіту, алергічного риніту, хронічного обструктивного захворювання легень, ниркових захворювань, шлунково-кишкових захворювань і ве очних захворювань. Фармацевтична композиція включає терапевтично ефективну кількість М-6 заміщеного ко 7-дезазапурину і фармацевтично прийнятного носія.

Даний винахід також відноситься до упакованих фармацевтичних композицій для лікування станів, що дають ю реакцію у відповідь на М-6 заміщені 7-дезазапурини, у ссавців. Упаковані фармацевтичні композиції включають с контейнер, що містить терапевтично ефективну кількість принаймні одного М-6 заміщеного 7-дезазапурину, та інструкції з використання М-6 заміщеного 7-дезазапурину для лікування станів, що дають реакцію у відповідь на

М-6 заміщені 7-дезазапурини, у ссавців.

Далі винахід відноситься до сполук формули І, де

Ку являє собою водень;

Ф) Ко являє собою заміщений або незаміщений циклоалкіл, заміщений або незаміщений алкіл, або К 4 і Ко» ка разом утворюють заміщене або незаміщене гетероциклічне кільце;

Ез являє собою незаміщений або заміщений арил; во КЕ. являє собою водень; і кожний з Кь і К; незалежно являє собою водень або алкіл, і їх фармацевтично прийнятних солей.

Дезазапурини даного варіанту здійснення можуть переважно бути селективними антагоністами А. рецептора.

Дані сполуки можуть виявитись корисними для множини терапевтичних застосувань, як, наприклад, лікування астми, ниркової недостатності, пов'язаної з серцевою недостатністю, і глаукоми. В особливо переважному 65 варіанті здійснення дезазапурин являє собою розчинні у воді проліки, які здатні метаболізувати іп мімо в активний лікарський засіб, наприклад, за допомогою гідролізу, який каталізується естеразою.

Ще в одному варіанті здійснення, винахід відноситься до способу інгібування активності аденозинового рецептора (наприклад, Аз) у клітині шляхом контактування клітини з М-б6 заміщеним 7-дезазапурином (наприклад, переважно антагоністом аденозинового рецептора).

В іншому аспекті винахід відноситься до способу лікування пошкодження ока у ссавця (наприклад, людини) шляхом введення тварині ефективної кількості М-6 заміщеного 7-дезазапурину формули І. Переважно ІМЧ-6 заміщений 7-дезазапурин є антагоністом Аз аденозинових рецепторів у клітинах ссавців. Пошкодження відноситься до сітківки або зорового головного нерва і може бути гострим або хронічним. Пошкодження може бути результатом, наприклад, глаукоми, набряку, ішемії, гіпоксії або травми. 70 Винахід також відноситься до фармацевтичної композиції, що включає М-б6 заміщену сполуку формули |.

Переважно фармацевтичний препарат являє собою офтальмологічну композицію (наприклад, композицію для періокулярної, ретробульбарної або внутрішньоочної ін'єкції, системну композицію і хірургічний зрошувальний розчин).

Ще в одному варіанті здійснення винахід відноситься до сполуки, що має формулу І:

Ви я ву А у ї іп, де Х являє собою М або СК в; кожний з К. і Ко незалежно являє собою водень або заміщений або незаміщений алкокси, аміноалкіл, алкіл, арил або алкіларил, або разом вони утворюють заміщене або незаміщене гетероциклічне кільце, за умови, що обидва К. і Ко не є воднем; Кз являє собою заміщений або незаміщений алкіл, арилалкіл або арил; КК. являє собою водень або заміщений або незаміщений С.-Сев алкіл; являє собою водень, заміщений або незаміщений алкіл, або Ву і | разом утворюють заміщене або незаміщене СМ гетероциклічне або карбоциклічне кільце; КБє являє собою водень, заміщений або незаміщений алкіл, або о галоген; С) являє собою СН», 0, 5 або МК), де К, являє собою водень або заміщений або незаміщений С 4-Св алкіл; і М/ являє собою незаміщений або заміщений алкіл, циклоалкіл, арил, арилалкіл, біарил, гетероарил, заміщений карбоніл, заміщений тіокарбоніл або заміщений сульфоніл; за умови, що якщо Кз являє собою піролідино, то К. не є метилом. Винахід також включає фармацевтично прийнятні солі і проліки сполук за со винаходом. сч

У переважному варіанті здійснення Х являє собою СК б, і 0) являє собою СН», О, З або МН у формулі ІІ, де

Кв, є таким, як визначено вище. с

В іншому варіанті здійснення формули ІЇ, Х являє собою М. «г

Винахід додатково відноситься до способу інгібування активності аденозинового рецептора (наприклад,

Зо Агь-аденозинового рецептора) в клітині при контактуванні клітини зі сполукою за винаходом. Переважно сполука ї- є антагоністом рецептора.

Винахід також відноситься до способу лікування шлунково-кишкового захворювання (наприклад, діареї) або захворювання дихальних шляхів (наприклад, алергічного риніту, хронічного обструктивного захворювання « легень) у тварини шляхом введення тварині ефективної кількості сполуки формули І! (наприклад, антагоніста

Азу). Переважно тварина являє собою людину. З с Відмітною особливістю винаходу також є сполука, що має структуру:

МН.

Ж | Ре я -| М, 1» де Кк являє собою // транс-4-гідроксициклогексил, 2-метиламінокарбоніламіноциклогексил, 2-метиламінокарбоніламіноциклогексил, ацетамідоетил або метиламінокарбоніламіноетил; іме) де Кз являє собою заміщене або незаміщене чотирьох-шестичленне кільце; т 50 де Кь являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл, арил, арилалкіл, аміно, заміщений арил, де вказаний заміщений алкіл являє собою-С(К 7)(Ка)ХК»о, де Х являє собою О, 5 або МК 40, де кожний з К; і Ка незалежно с являє собою М або алкіл, де кожний з К» і К/о незалежно являє собою алкіл або циклоалкіл, або К», Ко і азот разом утворюють заміщене або незаміщене кільце, що містить 4-7 членів; де Кь являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл, циклоалкіл; або фармацевтично прийнятна сіль, або пролікарське похідне, або біологічно активний метаболіт; за умови, що коли К.; являє собою ацетиламіноетил, Кз не є 4-піридилом.

ІФ) В одному варіанті здійснення сполуки К з являє собою феніл, пірол, тіофен, фуран, тіазол, імідазол, іме) піразол, 1, 2,4-триазол, піридин, 2(1Н)-піридон, 4(1Н)-піридон, піразин, піримідин, піридазин, ізотіазол, ізоксазол, оксазол, тетразол, нафталін, тетралін, нафтиридин, бензофуран, бензотіофен, індол, 60 2,3-дигідроіндол, 1Н-індол, індолін, бензопіразол, 1,3-бензодіоксол, бензоксазол, пурин, кумарин, хромон, хінолін, тетрагідрохінолін, ізохінолін, бензімідазол, хіназолін, піридо(2,3-б|піразин, піридоїЇЗ,4-б|піразин, піридоїЇЗ,2-с|Іпіридазин, піридоїЇЗ,4-б|піридин, 1Н-піразоліІЗ,2-4|піримідин, птеридин, 2(1Н)-хінолон, 1(2Н)-ізохінолон, 1,4-бензізоксазин, бензотіазол, хіноксалін, хінолін-М-оксид, ізохінолін-М-оксид, хіноксалін-М-оксид, хіназолін-М-оксид, бензоксазин, фталазин, цинолін або має структуру: б5

Ве Б:

Є й де У являє собою вуглець або азот; де К» і Ко-незалежно являють собою Н, заміщений або незаміщений алкіл, заміщений або незаміщений арил, галоген, метокси, метиламіно або метилтіо. Даний винахід також відноситься до сполуки, що має структуру:

Но о Ре го

Ж | Ре

Ву М

У, де Кз являє собою арил, заміщений арил або гетероарил; де Ке являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл або циклоалкіл; де К 5 являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл, арил, арилалкіл, аміно, заміщений арил, де вказаний заміщений алкіл являє собою-С(К 7)(Ка)МКоКіо, де кожний з К; і Кв являє собою М або алкіл, де кожний з К 5 і К/о являє собою алкіл або циклоалкіл, або К 9, Кліо і азот разом утворюють кільцеву систему, що містить 4-7 членів.

Даний винахід також відноситься до способу інгібування активності А /-аденозинового рецептора в клітині, що включає контактування вказаної клітини з вищезгаданими сполуками.

Відмітні особливості та інші подробиці винаходу тепер будуть описані більш конкретно і відображені у формулі винаходу. Потрібно розуміти, що конкретні варіанти здійснення винаходу наведені як ілюстрація, а не обмеження винаходу. Принципові відмітні особливості даного винаходу можуть бути використані у різних варіантах здійснення, не відступаючи від об'єму винаходу. с

Даний винахід відноситься до способів лікування станів, що дають реакцію у відповідь на М-6б-заміщений Го) 7-дезазапурин у ссавця. Способи включають введення ссавцеві терапевтично ефективної кількості М-6 заміщеного 7-дезазапурину, описаного нижче, так що відбувається лікування стану у ссавця, що дає реакцію у відповідь на М-6-заміщений 7-дезазапурин.

Вираз "стан, що дає реакцію у відповідь на М-6-заміщений 7-дезазапурин", призначений для позначення со хворобливого стану або захворювання, яке відрізняється реакцією у відповідь на лікування М-6 заміщеним Га 7-дезазапурином за винаходом, як описано нижче, наприклад, лікування включає значне зменшення принаймні одного симптому або наслідку хворобливого стану, що досягається з використанням М-б заміщеного сч 7-дезазапурину за винаходом. Звичайно, такі стани пов'язані із збільшенням кількості аденозину у хазяїна, так «І що хазяїн часто переживає фізіологічні симптоми, які включають, але не обмежуються цим, вивільнення токсинів, 32 запалення, кому, затримку води, набирання ваги або втрату ваги, панкреатит, емфізему, ревматоїдний артрит, в остеоартрит, множинне ураження органів, дитячий або дорослий респіраторний дистрес-синдром, алергічний риніт, хронічне обструктивне захворювання легень, очні захворювання, шлунково-кишкові захворювання, стимулювання шкірних новоутворень, імунодефіцит і астма (дивись, наприклад, "С.Е.Миїег апа В.5(еіп Адеповіпе «

Кесеріог Апіадопівів: Зігисігез ап Роїепіїаї ТПНегареціїс Арріїсайопв", Ситепі РНаптасешіса! Оевідп, 2:501 (1996) і "С.Е.МиПег А.-Адепозіпе Кесеріог Апіадопівів", Ехр.Оріп.ТНег.Раїепів 7(5):419 (1997), і не) с І.РеокКіівіоме, К.Роіоза, З.Т.НоїЇда(е і "І.Віаддіопі Адепозіпе Агь гесеріогг: а поме! (Ннегареціїс їагде(ї іп Авійта з» ТІРЗ 19: 148 91998)). Дія, часто пов'язана з такими симптомами, включає, але не обмежується цим, жар, нестачу дихання, нудоту, діарею, слабкість, головний біль і навіть смерть. В одному варіанті здійснення хворобливий стан, що дає реакцію у відповідь на М-6 заміщений 7-дезазапурин, включає ті захворювання, які опосередковані стимуляцією аденозинових рецепторів, наприклад, А 4, Ага; Агр, Аз і т.д., таких, при яких модулюється

Ше концентрація кальцію у клітинах і/або активація РІС (фосфоліпази С). У переважному варіанті здійснення ї» хворобливий стан, що дає реакцію у відповідь на М-6 заміщений 7-дезазапурин, пов'язаний з аденозиновим(ими) рецептором(ами), наприклад, М-6 заміщений 7-дезазапурин діє як антагоніст. Приклади відповідних таких, що о дають реакцію у відповідь, станів, які можна лікувати за допомогою сполук за винаходом, наприклад, підтипів ко 20 аденозинових рецепторів, які опосередковують біологічну дію, включають дію на центральну нервову систему (ЦНС), серцево-судинну дію, ниркову дію, дихальну дію, імунологічний дію, шлунково-кишкову дію і метаболічну со дію. Відносна кількість аденозину у суб'єкта може бути пов'язана з перерахованою нижче дією; тобто підвищені рівні аденозину можуть ініціювати дію, наприклад, небажану фізіологічну реакцію у відповідь, наприклад, приступ астми. 29 Дія на ЦНС включає знижене вивільнення трансмітера (А 4), седативну дію (Аг), знижену рухову активність (ФІ (Ага), протисудомну активність, стимуляцію хеморецептора (А 2) і гіпералгезію. Терапевтичне застосування сполук винаходу включає лікування недоумства, хвороби Альцгеймера і поліпшення пам'яті. о Серцево-судинна дія включає розширення судин (А за), (Агь) і (Аз), звуження судин (А 4), брадикардію (А.), інгібування тромбоцитів (А 24) негативну серцеву інотропію і дромотропію, аритмію, тахікардію і ангіогенез. 60 Терапевтичне застосування сполук винаходу включає, наприклад, профілактику індукованого ішемією пошкодження серця і стимуляцію діяльності серця, захист тканин міокарда і відновлення функції серця.

Ниркова дія включає знижену швидкість клубочкової фільтрації (А), мезангіальне скорочення клітин (А .), антидіурез (А) та інгібування вивільнення реніну (А 4). Відповідні терапевтичні застосування сполук за винаходом включають застосування сполук, що пропонуються як діуретики, натрійуретики, препаратів при бо кадієвій недостатності, для захисту нирок/профілактики гострої ниркоподібної недостатності,

антигіпертензивного, протинабряклого і протинефритного агентів.

Респіраторна дія включає розширення бронхів (А 5), звуження бронхів (А 4), хронічне обструктивне захворювання легень, алергічний риніт, слизові виділення і утискування дихання (А 5). Відповідні терапевтичні

Застосування сполук за винаходом включають протиастматичні застосування, лікування захворювання легень після трансплантації і респіраторних захворювань.

Імунологічна дія включає придушення імунітету (А 5), нейтрофільний хемотаксис (А5), нейтрофільне генерування супероксиду (А 24) і дегрануляцію тучних клітин (Азь і Аз). Терапевтичне застосування антагоністів включає алергічне і неалергічне запалення, наприклад, вивільнення гістаміну та інших запальних медіаторів. 70 Шлунково-кишкова дія включає інгібування виділення кислоти (А 4), терапевтичне застосування може включати рефлюкс і виразкові захворювання. Шлунково-кишкова дія також включає захворювання прямої кишки, тонкого кишечника і діарею, наприклад, діарею, пов'язану із запаленням кишечнику (Аз).

Очні захворювання включають захворювання, пов'язані з пошкодженням і травмою сітківки і головного зорового нерва (Аз). У переважному варіанті здійснення очне захворювання являє собою глаукому.

Інші терапевтичні застосування сполук за винаходом включають лікування ожиріння (ліполітичні властивості), підвищений тиск, лікування депресії, седативну, нейролептичну дію, і дію як протилепрозні і проносні засоби, що, наприклад, впливають на рухливість, але не викликають діарею.

Мається на увазі, що термін "хворобливий стан" включає ті стани, які викликані або пов'язані з небажаними рівнями аденозину, активністю аденілилциклази, підвищеною фізіологічною активністю, пов'язаною з го аномальною стимуляцією аденозинових рецепторів і/або підвищенням ЦАМФ. В одному варіанті здійснення хворобливий стан являє собою, наприклад, астму, хронічне обструктивне захворювання легень, алергічний риніт, бронхіт, ниркові захворювання, шлунково-кишкові захворювання або очні захворювання. Додаткові приклади включають хронічний бронхіт і циститний фіброз. Відповідні приклади запальних захворювань включають нелімфоцитну лейкемію, ішемію міокарда, стенокардію, інфаркт, церебрально-васкулярну ішемію, сч об переміжну кульгавість, критичне недокрів'я кінцівок, венозну гіпертензію, варикозне захворювання вен, виразкове захворювання вен і артеріосклероз. Погіршені реперфузійні стани включають, наприклад, будь-яку і) постхірургічну травму, як наприклад при відновній хірургії, тромболізі і ангіопластиці.

Мається на увазі, що вираз "лікування стану, що дає реакцію у відповідь на М-6 заміщений 7-дезазапурин", або "проведення курсу лікування стану, що дає реакцію у відповідь на М-6б заміщений 7-дезазапурин", включає со зо такі зміни у захворюванні або хворобливому стані, як описано вище, що фізіологічні симптоми у ссавця можуть бути значно зменшені або зведені до мінімуму. Вираз також включає контролювання, профілактику або с інгібування фізіологічних симптомів або дій, пов'язаних з аномальною кількістю аденозину. В одному с переважному варіанті здійснення, контролювання захворювання або хворобливого стану полягає у викорінюванні захворювання або хворобливого стану. В іншому переважному варіанті здійснення, « з5 Контролювання є селективним таким чином, що контролюються аномальні рівні активності аденозинового ча рецептора, тоді як інші фізіологічні системи і параметри не зачіпаються.

Мається на увазі, що термін "М-6 заміщені 7-дезазапурини" є загальноприйнятим в даній області і включає сполуки, які мають формулу І: ш пед ц « щі ор інн з с КОТ

ХДУ

:з» ву 4 х ія "М-заміщений 7-дезазапурин" включає його фармацевтично прийнятні солі і, в одному варіанті здійснення, -І також включає деякі описані тут М-6 заміщені пурини.

У деяких варіантах здійснення М-6 заміщений 7-дезазапурин не є М-6 бензил або М-6 фенілетил заміщеним. В ве інших варіантах здійснення К, не є бензил або фенілетил заміщеним. У переважних варіантах здійснення обидва ко Ку і Б» не є атомами водню. Ще в інших переважних варіантах здійснення К»з не є атомом водню.

Вираз "терапевтично ефективна кількість" М-6 заміщеного 7-дезазапурину, описаного нижче, являє собою ю таку кількість терапевтичної сполуки, яка є необхідною або достатньою для виконання призначеної функції в с організмі ссавця, наприклад, для лікування стану, що дає реакцію у відповідь на М-6-заміщений 7-дезазапурин, або захворювання у ссавця. Ефективна кількість терапевтичної сполуки може змінюватись відповідно до таких факторів як кількість збудника захворювання, вже присутнього у ссавці, вік, стать і вага ссавця і здатність ов терапевтичних сполук за даним винаходом впливати на стан, що дає реакцію у відповідь на М-6б-заміщений 7-дезазапурин, у ссавця.

Ф) Звичайний фахівець в даній області буде здатний дослідити вищезгадані фактори і визначити ефективну ка кількість терапевтичної сполуки без надмірного експериментування. Для визначення "ефективної кількості" описаних вище терапевтичних сполук також можна використати аналіз іп міго або іп мімо. Звичайний фахівець во вибере відповідну кількість терапевтичної сполуки для використання у вищезгаданому аналізі або як терапевтичне лікування.

Терапевтично ефективна кількість переважно зменшує принаймні один симптом або дію, пов'язану зі станом, що дає реакцію у відповідь на М-6 заміщений 7-дезазапурин, або із захворюванням, що піддається лікуванню, принаймні приблизно на 2095 (більш переважно принаймні приблизно на 4095, ще більш переважно принаймні 65 приблизно на 6095 і ще більш переважно принаймні приблизно на 80905) у порівнянні з суб'єктом, що не піддається лікуванню. Фахівцем в даній області можуть бути розроблені аналізи для вимірювання зниження таких симптомів і/або дій. Мається на увазі, що будь-який відомий в даній області аналіз, здатний вимірювати такі параметри, включений як частина даного винаходу. Наприклад, якщо астма є станом, що піддається лікуванню, то об'єм повітря, що витрачається легенями суб'єкта, може бути виміряний до і після лікування для вимірювання збільшення об'єму з використанням відомих методик в даній області. Аналогічно, якщо запалення є станом, що піддається лікуванню, то площа, яка запалена, може бути виміряна до і після лікування для вимірювання зменшення запаленої площі з використанням відомих методик в даній області.

Термін "клітина" включає як прокаріотичні, так і еукаріотичні клітини.

Термін "тварина" включає будь-який організм, що містить аденозинові рецептори, або будь-який організм, 70 сприйнятливий до стану, що дає реакцію у відповідь на М-6 заміщений 7-дезазапурин. Приклади тварин включають дріжджі, ссавців, рептилій і птахів. Термін також включає трансгенних тварин.

Термін "ссавець" є загальноприйнятим в даній області, і, мається на увазі, що він включає тварину, більш переважно теплокровну тварину, найбільш переважно велику рогату худобу, овець, свиней, коней, собак, кішок, щурів, мишей і людей. Ссавці, сприйнятливі до стану, що дає реакцію у відповідь на М-6 заміщений 7-дезазапурин, наприклад, до запалення, емфіземи, астми, захворювання центральної нервової системи або гострого респіраторного дистрес-синдрому, включені як частина даного винаходу.

В іншому аспекті даний винахід охоплює способи модулювання аденозинового рецептора(ів) у ссавця шляхом введення ссавцеві терапевтично ефективної кількості М-6 заміщеного 7-дезазапурину, таким чином, що відбувається модулювання аденозинового рецептора у ссавця. Відповідні аденозинові рецептори включають сімейство А, А» або Аз. У переважному варіанті здійснення М-б6 заміщений 7-дезазапурин є антагоністом аденозинового рецептора.

Мається на увазі, що вираз "модулювання аденозинового рецептора" включає ті випадки, де сполука взаємодіє з аденозиновим рецептором(ами), викликаючи підвищену, знижену або аномальну фізіологічну активність, пов'язану з аденозиновим рецептором або подальшими каскадними ефектами, що є результатом с ов Модулювання аденозинового рецептора. Фізіологічна активність, пов'язана з аденозиновими рецепторами, включає індукування заспокоєння, розширення судин, придушення частоти серцевих скорочень, інгібування і) агрегації тромбоцитів, стимуляцію глюконеогенезу, інгібування ліполізу, розкриття кальцієвих каналів, зменшення потоку через кальцієві канали і т.д.

Мається на увазі, що терміни "модулювати", "що модулює" і "модулювання" включають запобігання, корекцію со зо або інгібування одержаного зростання небажаної фізіологічної активності, пов'язаної з аномальною стимуляцією аденозинового рецептора, наприклад, в контексті терапевтичних способів за винаходом. В іншому варіанті с здійснення термін "модулювання" включає антагоністичні ефекти, наприклад, зменшення активності або с продукування алергічних медіаторів і алергічного запалення, яке виникає при понадстимуляції аденозинового рецептора(ів). Наприклад, терапевтичні дезазапурини за винаходом можуть взаємодіяти з аденозиновим - з5 рецептором для інгібування, наприклад, активності аденілатциклази. ча

Мається на увазі, що вираз "стан, який характеризується аномальною активністю рецептора" включає ті захворювання, порушення або хворобливі стани, які пов'язані з аномальною стимуляцією аденозинового рецептора, в яких стимуляція рецептора викликає біохімічний або фізіологічний ланцюг подій, які безпосередньо або непрямо пов'язані із захворюванням, порушенням або хворобливим станом. Така стимуляція аденозинового « 70 рецептора не повинна бути єдиною причиною захворювання, порушення або хворобливого стану, але є тільки в с відповідальною за виклик деяких симптомів, типово пов'язаних із захворюванням, порушенням або хворобливим

Й станом, що піддається лікуванню. Аномальна стимуляція рецептора може бути єдиним фактором або а щонайменше один інший агент може бути включений у стан, що піддається лікуванню. Приклади станів включають ті захворювання, які перераховані раніше, включаючи запалення, шлунково-кишкові захворювання |і ті симптоми, які виявляються через підвищену активність аденозинового рецептора. Переважні приклади -І включають ті симптоми, які пов'язані з астмою, алергічним ринітом, хронічним обструктивним захворюванням легень, емфіземою, бронхітом, шлунково-кишковими захворюваннями і глаукомою. о Мається на увазі, що вираз "проведення курсу лікування або лікування стану, який характеризується

ГІ аномальною активністю аденозинового рецептора" включає ослаблення або зменшення вияву принаймні одного симптому, пов'язаного із захворюванням. Лікування також включає полегшення або зменшення вияву більше ніж де одного симптому. Переважно, лікування виліковує, наприклад, по суті виключає симптоми, пов'язані із с захворюванням.

Даний винахід відноситься до сполуки, М-6 заміщених 7-дезазапуринів, що мають формулу І:

Яекуия що ко в; 4 і во її, де кожний з К. і Ко незалежно являє собою атом водню або заміщений або незаміщений алкільний, арильний або алкіларильний фрагмент, або вони разом утворюють заміщене або незаміщене гетероциклічне кільце; Кз являє собою атом водню або заміщений або незаміщений алкільний, арильний або алкіларильний фрагмент; К4 являє собою атом водню або заміщений або незаміщений алкільний, арильний або алкіларильний фрагмент. 65 Кожний з К5 і Ко незалежно являє собою атом галогену, наприклад, хлор, фтор або бром, атом водню або заміщений або незаміщений алкільний, арильний або алкіларильний фрагмент, або К, і Кв, або Кб і Кк; разом утворюють заміщене або незаміщене гетероциклічне або карбоциклічне кільце. Також включені фармацевтично прийнятні солі М-6 заміщених 7-дезазапуринів.

У деяких варіантах здійснення кожний з К 4 і Ко незалежно може являти собою заміщений або незаміщений циклоалкільний або гетероарилалкільний фрагмент. В іншому варіанті здійснення Кз являє собою атом водню або заміщений або незаміщений гетероарильний фрагмент. Ще в інших варіантах здійснення кожний з Ка, Б і Ко може незалежно являти собою гетероарильний фрагмент.

В одному варіанті здійснення К. являє собою атом водню, К» являє собою заміщений або незаміщений циклогексановий, циклопентильний, циклобутильний або циклопропановий фрагмент, Кз являє собою /о заміщений або незаміщений фенільний фрагмент, Ку являє собою атом водню, і обидва Кб і Ко являють собою метил.

В іншому варіанті здійснення Ко являє собою циклогексанол, циклогександіол, циклогексилсульфонамід, циклогексанамід, циклогексиловий складний ефір, циклогексен, циклопентанол або циклопентандіол, і Кз являє собою фенільний фрагмент.

Ще в одному варіанті здійснення К. являє собою атом водню, К » являє собою циклогексанол, К з являє собою заміщений або незаміщений фенільний, піридиновий, фурановий, циклопентановий або тіофеновий фрагмент, К. являє собою атом водню, заміщений алкільний, арильний або арилалкільний фрагмент, кожний

З Кв і Ке незалежно являє собою атом водню або заміщений або незаміщений алкільний, арильний або алкіларильний фрагмент.

Ще в одному варіанті здійснення Кі являє собою атом водню, Ко являє собою заміщений або незаміщений алкіламін, ариламін або алкілариламін, заміщений або незаміщений алкіламід, ариламід або алкілариламід, заміщений або незаміщений алкілсульфонамід, арилсульфонамід або алкіларилсульфонамід, заміщений або незаміщений алкілсечовину, арилсечовину або алкіларилсечовину, заміщений або незаміщений алкілкарбамат, арилкарбамат або алкіларилкарбамат, заміщений або незаміщений алкілкарбонову кислоту, арилкарбонову с ов КИСЛОТУ або алкіларилкарбонову кислоту, Кз являє собою фенільний фрагмент, К. являє собою атом водню, і Ке і Ко являють собою метильні групи. і)

У наступному варіанті здійснення К 2 являє собою гуанідин, модифікований гуанідин, ціаногуанідин, тіосечовину, тіоамід або амідин.

В одному варіанті здійснення Ко може являти собою со кі ко с

Якоб» Ї сем де Коа-Кос кожний незалежно являють собою атом водню або насичений або ненасичений алкільний, «Е арильний або алкіларильний фрагмент, і Код являє собою атом водню або насичений або ненасичений алкіл, 32 арильний або алкіларильний фрагмент, МЕоеРог або ОК»од, де Кое-Код Кожний незалежно являє собою атом - водню або насичений або ненасичений алкільний, арильний або алкіларильний фрагменти. Альтернативно, Код

Її Коь можуть разом утворювати карбоциклічне або гетероциклічне кільце, що має розмір кільця від З до 6 членів, наприклад, циклопропільну, циклопентильну, циклогексильну групи. «

В одному аспекті винаходу обидва Кб і К" не є метильними групами, переважно один з К» і Ко являє собою алкільну групу, наприклад, метильну групу, а інший є атомом водню. З с В іншому аспекті винаходу, коли К. являє собою 1-фенілетил, і К ях являє собою атом водню, тоді Кз не є "» фенілом, 2-хлорфенілом, З-хлорфенілом, 4-хлорфенілом, 3,4-дихлорфенілом, З-метоксифенілом або " 4-метоксифенілом, або коли К, і К/ являють собою 1-фенілетил, тоді Кз не є атомом водню, або коли К, являє собою атом водню, і Кз являє собою феніл, тоді К. не є фенілетилом.

В іншому аспекті винаходу, коли Кб і Ко разом утворюють карбоциклічне кільце, наприклад, -і кори ї її З ); їмо) ду ні х з 50 -. або піримідо|4,5-Єб|індол, тоді Кз не є фенілом, коли К; являє собою 1-(4-метилфеніл)етил, фенілізопропіл,

ІЧ е) феніл або 1-фенілетил, або Кз не є атомом водню, коли К; являє собою 1-фенілетил. Карбоциклічне кільце, утворене К» і Ко, може бути або ароматичним, або аліфатичним і може містити від 4 до 12 атомів вуглецю, наприклад, нафтил, фенілциклогексил і т.д., переважно від 5 до 7 атомів вуглецю, наприклад, циклопентил або циклогексил. Альтернативно, К; і Ко разом можуть утворювати гетероциклічне кільце, таке як такі, що обговорюються нижче. Типові гетероциклічні кільця включають від 4 до 12 атомів вуглецю, переважно від 5 до 7 о атомів вуглецю і може бути або ароматичним, або аліфатичним. Гетероциклічне кільце може бути додатково іме) заміщеним, включаючи заміщення біля одного або декількох атомів вуглецю кільцевої структури, що містить один або декілька гетероатомів. 60 Ще в одному аспекті винаходу, Ку і Ко утворюють гетероциклічне кільце. Ілюстративні приклади включають, але не обмежуються цим, перераховані нижче гетероциклічні кільця, такі як морфоліно, піперазин і тому подібні, наприклад, 4-гідроксипіперидини, 4-амінопіперидини. Коли К. і Ко разом утворюють піперазино групу, б5

Ї

М.

С

2 тт то К; може являти собою атом водню або заміщений або незаміщений алкільний, арильний або алкіларильний фрагмент.

Ще в одному аспекті винаходу, К, і К5 разом можуть утворювати гетероциклічне кільце, наприклад, яко з ра де гетероциклічне кільце може бути або ароматичним або аліфатичним і можуть утворювати кільце, що містить від 4 до 12 атомів вуглецю, наприклад, нафтил, фенілциклогексил і т.д. і може бути або ароматичним, 72 або аліфатичним, наприклад, циклогексил, циклопентил.

Гетероциклічне кільце може бути додатково заміщеним, включаючи заміщення біля атомів вуглецю кільцевої структури, що містить один або декілька гетероатомів. Альтернативно, К, і К5 разом можуть утворювати гетероциклічне кільце, таке як такі, що обговорюються нижче.

У деяких варіантах здійснення М-6 заміщений 7-дезазапурин не є М-6-бензил або М-6-фенілетилзаміщеним. У інших варіантах здійснення БК не є бензил- або фенілетил-заміщеним. У переважних варіантах здійснення обидва К. і Ко» не є атомами водню. Ще в інших переважних варіантах здійснення К»з не є Н.

Сполуки винаходу можуть включати водорозчинні проліки, які описані у У/099/33815, Міжнародній заявці на патент Мо РСТ/О5О8/04595, поданій 9 березня, 1998 року і опублікованій 8 липня 1999. Повний зміст УУО99/33815 спеціально включений в даний опис як посилання. Водорозчинні проліки метаболізують іп мімо до активного с лікарського засобу, наприклад, за допомогою каталізованого естеразою гідролізу. Приклади потенційних проліків г) включають дезазапурини, в яких, наприклад, Ко являє собою циклоалкіл, заміщений-С(О0)(2)МН 5, де 2 є бічним ланцюгом природної або синтетичної амінокислоти або її аналога, о-, р-, у-або о-амінокислот або дипептиду.

Переважні бічні ланцюги включають бічні ланцюги гліцину, аланіну, валіну, лейцину, ізолейцину, лізину, о-метилаланіну, аміноциклопропанкарбонової кислоти, азетидин-2-карбонової кислоти, со

В-аланіну, у-амінобутанової кислоти, аланін-аланіну або гліцин-аланіну. Ге

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до дезазапуринів формули (І), де К 4 являє собою сч водень; Ко являє собою заміщений або незаміщений циклоалкіл, заміщений або незаміщений алкіл, або К. і Ко разом утворюють заміщене або незаміщене гетероциклічне кільце; Кз являє собою незаміщений або заміщений « арил; К.; являє собою водень, і кожний з К5 і К; незалежно являє собою водень або алкіл, і їх фбармацевтично м прийнятних солей. Дезазапурини даного варіанту здійснення потенційно можуть бути селективними антагоністами Аз рецептора.

В одному варіанті здійснення Ко являє собою заміщений (наприклад, гідроксизаміщений) або незаміщений циклоалкіл. У переважному варіанті здійснення К. і КК; являють собою водень, Кз являє собою незаміщений або « 20 заміщений феніл, і кожний з Кв і Ко являє собою алкіл. Переважно Ко являє собою моно-гідроксициклопентил з або моно-гідроксициклогексил. Ко також може бути заміщений групою-МН-С(ОЕ, де Е являє собою заміщений с або незаміщений С.-С.алкіл (наприклад, алкіламін, наприклад, етиламін). :з» Також Ку. і Ко разом можуть утворювати заміщене або незаміщене гетероциклічне кільце, яке може бути заміщене аміном або ацетамідо групою.

В іншому аспекті, Ко може являти собою-А-МН-С(О)В, де А являє собою незаміщений С о 4-С, алкіл -1 но (наприклад, етил, пропіл, бутил), і В являє собою заміщений або незаміщений С 4-С; алкіл (наприклад, метил, аміноалкіл, наприклад, амінометил або аміноетил, алкіламіно, наприклад, метиламіно, етиламіно), переважно, т. коли Ку і К. являють собою водень, Кз являє собою незаміщений або заміщений феніл, і кожний з К5 і Ко являє з собою алкіл. В може являти собою заміщений або незаміщений циклоалкіл, наприклад, циклопропіл або 1-аміноциклопропіл. іме) 50 В іншому варіанті здійснення Кз може являти собою заміщений або незаміщений феніл, переважно, коли со кожний з Кв і Ко являє собою алкіл. Переважно К з може містити один або декілька замісників (наприклад, о-, м- або п-хлорфеніл, о-, м- або п-фторфеніл).

Переважно, Кз може являти собою заміщений або незаміщений гетероарил, переважно, коли кожний з Кб і Ко являє собою алкіл. Приклади гетероарильних груп включають піридил, піримідил, піридазиніл, піразиніл, піроліл, триазоліл, тіоазоліл, оксазоліл, оксадіазоліл, фураніл, метилендіоксифеніл і тіофеніл. Переважно, Кз

ГФ) являє собою 2-піридил, З-піридил, 4-піридил, 2-піримідил або З-піримідил. з Переважно в одному варіанті здійснення кожний з К;5 і Ко являє собою водень. В іншому варіанті здійснення кожний з КЕ і Ко являє собою метил.

В особливо переважному варіанті здійснення дезазапурини за винаходом являють собою розчинні у воді 60 проліки, які можуть метаболізувати іп мімо до активного лікарського засобу, наприклад, за допомогою каталізованого естеразою гідролізу. Переважно проліки включають Ко групу, яка заміщена у циклоалкілі-ОС(О)(2)МН»., де 72 являє собою бічний ланцюг природної або синтетичної амінокислоти, її аналога, о-, р-, у- або 5- амінокислоти або дипептиду. Приклади переважних бічних ланцюгів включають бічні б5 панцюги гліцину, аланіну, валіну, лейцину, ізолейцину, лізину, 5-метилаланіну, аміноциклопропанкарбонової кислоти, азетидин-2-карбонової кислоти, В-аланіну, у-амінобутанової кислоти, аланін-аланіну або гліцин-аланіну.

В особливо переважному варіанті здійснення 7 являє собою бічний ланцюг гліцину, К о являє собою циклогексил, Кз являє собою феніл, і К5 і К5 являють собою метил. в іншому варіанті здійснення дезазапурин являє собою 4-(цис-3-гідроксициклопентил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідин.

В іншому варіанті здійснення дезазапурин являє собою сіль трифтороцтової кислоти 4-(цис-3-(2-аміноацетокси)циклопентил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7 Н-піроло|2,3-4|піримідину. в іншому варіанті здійснення дезазапурин являє собою 4-(3-ацетамідо)піперидиніл-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин. 70 в іншому варіанті здійснення дезазапурин являє собою 4-(2-М'-метилуреапропіл)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідин. в іншому варіанті здійснення дезазапурин являє собою 4-(2-ацетамідобутил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідин. в іншому варіанті здійснення дезазапурин являє собою 4-(2-М'-метилуреабутил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідин. в іншому варіанті здійснення дезазапурин являє собою 4--2-амшоциклопропілацетамідоетил)аміно-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин. в іншому варіанті здійснення дезазапурин являє собою 4-(транс-4-гідроксициклогексил)аміно-2-(3-хлорфеніл)-7 Н-піроло|2,3-4|піримідин. в іншому варіанті здійснення дезазапурин являє собою 4-(транс-4-гідроксициклогексил)аміно-2-(3-фторфеніл)-7 Н-піроло|2,3-4|піримідин. в іншому варіанті здійснення дезазапурин являє собою 4-(транс-4-гідроксициклогексил)аміно-2-(4-піридил)-7Н-піроло|2,3-4|піримідин.

Ще в одному варіанті здійснення винахід відноситься до способу інгібування активності аденозинового сч ов рецептора (наприклад, Ач,Ага, Агр або переважно Аз) у клітині контактуванням клітини з М-6 заміщеним 7-дезазапурином (наприклад, переважно, з антагоністом аденозинового рецептора). і)

В іншому аспекті винахід відноситься до способу лікування пошкодження ока у тварини (наприклад, людини) введенням тварині ефективної кількості М-б6 заміщеного 7-дезазапурину. Переважно М-6б заміщений 7-дезазапурин є антагоністом Аз аденозинових рецепторів у клітинах тварин. Пошкодження відноситься до со зо сітківки або головного зорового нерва і може бути гострим або хронічним. Пошкодження може бути результатом, наприклад, глаукоми, набряку, ішемії, гіпоксії або травми. с

У переважному варіанті здійснення винахід відноситься до дезазапурину, що має формулу ІЇ, див. вище, де Х с являє собою М або СК в; кожний з К; і Ко незалежно являє собою водень або заміщений або незаміщений алкокси, аміноалкіл, алкіл, арил або алкіларил, або разом вони утворюють заміщене або незаміщене « гетероциклічне кільце, за умови, що обидва К. і Ко не є воднем; Кз являє собою заміщений або незаміщений ї- алкіл, арилалкіл або арил; К. являє собою водень або заміщений або незаміщений С.4-Се алкіл; | являє собою водень, заміщений або незаміщений алкіл, або К, і Ї разом утворюють заміщене або незаміщене гетероциклічне або карбоциклічне кільце; Ко являє собою водень, заміщений або незаміщений алкіл, або галоген; С являє собою СН», О, 5 або МК), де К, являє собою водень або заміщений або незаміщений С 4-Се алкіл; і МУ являє « собою незаміщений або заміщений алкіл, циклоалкіл, алкініл, арил, арилалкіл, біарил, гетероарил, заміщений 7-3 с карбоніл, заміщений тіокарбоніл або заміщений сульфоніл, за умови, що якщо К»ь являє собою піролідино, то Ку не є метилом. ;» В одному варіанті сполуки формули ІІ, Х являє собою СК 5, і ОО являє собою СН 5, О, 5 або МН. В іншому варіанті здійснення Х являє собою М.

У наступному варіанті сполук формули ІІ, МУ являє собою заміщений або незаміщений арил, 5- або б--ленний -І гетероарил або біарил. М/ може бути заміщений одним або декількома замісниками. Приклади замісників включають: галоген, гідрокси, алкокси, аміно, аміноалкіл, амінокарбоксіамід, СМ, СЕз, СОоКа, СОМНК», о Сов», ЗОВ» і БООМЕ Ко», де кожний з Ка і Ко незалежно являє собою водень або заміщений або незаміщений ко алкіл, циклоалкіл, арил або арилалкіл. Переважно, М/ може являти собою заміщений або незаміщений феніл, 5р Наприклад, метилендіоксифеніл. МУ також може являти собою заміщене або незаміщене 5-ч-ленне гетероарильне де кільце, наприклад, пірол, піразол, оксазол, імідазол, триазол, тетразол, фуран, тіофен, тіазол і оксадіазол. с Переважно МУ може являти собою б--ленне гетероарильне кільце, наприклад, піридил, піримідил, піридазиніл, піразиніл і тіофеніл. У переважному варіанті здійснення МУ являє собою 2-піридил, З-піридил, 4-піридил, 2-піримідил, 4-піримідил або 5-піримідил.

В одному переважному варіанті сполук формули ІЇ, СО) являє собою МН, і М/ являє собою З-піразольне кільце, яке є незаміщеним або М-заміщеним або не заміщеним алкілом, циклоалкілом, арилом або арилалкілом.

Ф) В іншому варіанті сполук формули Ії, С) являє собою кисень, і М/ являє собою 2-тіазольне кільце, яке є ка незаміщеним або заміщеним або не заміщеним алкілом, циклоалкілом, арилом або арилалкілом.

В іншому варіанті сполук формули ІІ, МУ являє собою заміщений або незаміщений алкіл, циклоалкіл, бо наприклад, циклопентил або арилалкіл. Приклади замісників включають галоген, гідрокси, заміщений або незаміщений алкіл, циклоалкіл, арил, арилалкіл або МНК.о, де Кіо являє собою водень або заміщений або незаміщений алкіл, циклоалкіл, арил або арилалкіл. Ще в одному варіанті здійснення винахід відноситься до дезазапурину формули ІІ, де М/ являє собою-(СН 25)4-С(-О) М або-(СНо)а-С(-5)У, і а являє собою ціле число від

О до 3, У являє собою арил, алкіл, арилалкіл, циклоалкіл, гетероарил, алкініл, МНК 44К.2, або, за умови, що бв5 являє собою МН, ОК 43, де кожний з К.4, Кл2 і Кіз незалежно являє собою водень або незаміщений або заміщений алкіл, арил, арилалкіл або циклоалкіл. Переважно У являє собою 5- або б--ленне гетероарильне кільце.

Крім того, МУ може являти собою- (СН 2)ь-(О) ХХ, де | дорівнює 1 або 2, Ь дорівнює 0, 1, 2 або З, М являє собою арил, алкіл, арилалкіл, циклоалкіл, алкініл, гетероарил, МНАК.4К.5, або, за умови, що коли Б дорівнює 1,

З'являє собою СН», і де кожний з К.4, Кв і Ко незалежно являє собою водень або незаміщений або заміщений алкіл, арил, арилалкіл або циклоалкіл.

В іншому варіанті здійснення, Кз вибирають з групи, що включає заміщений або незаміщений феніл, піридил, піримідил, піридазиніл, піразинал, піроліл, триазоліл, тіазоліл, оксазоліл, оксадіазоліл, піразоліл, фураніл, метилендіоксифеніл і тіофеніл. Коли Кз являє собою феніл, він може бути заміщеним, наприклад, гідроксилом, /о алкокси (наприклад, метокси), алкілом (наприклад, толіл) і галогеном (наприклад, о-, м- або п-фторфеніл або о-, м- або п-хлорфеніл). Переважно, Кз може являти собою 2-, 3- або 4-піридил або 2- або З-піримідил.

Винахід також включає дезазапурин, в якому Ко, являє собою водень або С.4-Сз алкіл. Переважно, Ко являє собою водень.

Винахід також включає дезазапурини, в яких Ку являє собою водень, і К » являє собою заміщений або /5 незаміщений алкіл або алкокси, заміщений або незаміщений алкіламін, ариламін або алкілариламін, заміщений або незаміщений аміноалкіл, аміноарил або аміноалкіларил, заміщений або незаміщений алкіламід, ариламід або алкілариламід, заміщений або незаміщений алкілсульфонамід, арилсульфонамід або алкіларилсульфонамід, заміщений або незаміщений алкілсечовину, арилсечовину або алкіларилсечовину, заміщений або незаміщений алкілкарбамат, арилкарбамат або алкіларилкарбамат, або заміщений або 2о незаміщений алкілкарбонову кислоту, арилкарбонову кислоту або алкіларилкарбонову кислоту.

Переважно, Ко являє собою заміщений або незаміщений циклоалкіл, наприклад, моно- або дигідроксизаміщений циклогексил або циклопентил (переважно моногідроксизаміщений циклогексил або моногідроксизаміщений циклопентил).

Переважно Ко може мати одну з наступних формул: сч бок КО ЮК, о

М з де А являє собою С 4-Св алкіл, С--С, циклоалкіл, ланцюг з одного-семи атомів або кільце з трьох-семи атомів, необов'язково заміщене С.4-Се алкілом, галогенами, гідроксилом, карбоксилом, тіолом або аміногрупами; со 30 де В являє собою метил, М(Ме) 5, М(ЕО», МНМе, МНЕ (СНо»МНзі, МН(СНО»СН»з, (СНо)-2-МН», Ге (сн.»сНнен.МН,, (СН2ЬМНМе, (СНо)»ОН, СНЬСМ, (СНо)тСО5Н, СНЕ.8Кло або СНМеЕОН, де г є цілим числом від сч

О до 2, т дорівнює 1 або 2, Кв являє собою алкіл, Ко являє собою МНа" або СОН, або Кв і Ко разом являють собою: « - сн - - мн 35 сно | ї- де р дорівнює 2 або 3; і К-7 являє собою С 4-Сев алкіл, С3--С7 циклоалкіл, ланцюг з одного-семи атомів або кільце з трьох-семи атомів, необов'язково заміщене С -Се алкілом, галогенами, гідроксилом, карбоксилом, тіолом або аміногрупами. «

Переважно, А являє собою незаміщений або заміщений С .4-Се алкіл. В може являти собою незаміщений або -о заміщений С.-Се алкіл. с У переважному варіанті здійснення К » має формулу-А-МНО(-О)В. В особливо переважному варіанті :з» здійснення А являє собою-СНоСН»5-, і В являє собою метил.

Сполуки за винаходом можуть включати розчинні у воді проліки, які метаболізують іп мімо в активний лікарський засіб, наприклад, за допомогою гідролізу, каталізованого естеразою. Приклади потенційних проліків - включають дезазапурини, в яких, наприклад, Ко знаходиться у вигляді циклоалкілу, заміщеного-ОС(О)(2)МН 5, де 7 являє собою бічний ланцюг існуючої у природі або не існуючої у природі амінокислоти або її ве аналога, с-, р-, у- або 5-аміноксилоти або дипептиду. Переважні бічні ланцюги амінокислот включають ланцюги ко гліцину, аланіну, валіну, лейцину, ізолейцину, лізину, х-метилаланіну, аміноциклопропанкарбонової кислоти, азетидин-2-карбонової кислоти, В-аланіну, у-аміномасляної кислоти, аланін-аланіну або гліцин-аланіну. о В іншому варіанті здійснення К. і Ко разом являють собою 42) С

Кк з де п дорівнює 1 або 2, і де кільце необов'язково може бути заміщеним одним або декількома гідроксилом, (Ф) аміно, тіолом, карбоксилом, галогеном, СН2ОН, СНОМНО(:О)алкільною або СНОМНО(-О)МНалкільною групами. ко Переважно п дорівнює 1 або 2, і вказане кільце заміщене МНО(-О)алкілом.

В одному переважному варіанті здійснення К 4 являє собою водень, К о» являє собою заміщений або во незаміщений С.-Се алкіл, Кз являє собою заміщений або незаміщений феніл, Ку; являє собою водень, І являє собою водень або заміщений або незаміщений С.4-Се алкіл, О являє собою О, 5 або МК 7, де К, являє собою водень або заміщений або незаміщений С.--Св алкіл, і М/ являє собою заміщений або незаміщений арил.

Переважно Ко являє собою-А-МНО(-О)В, де кожний з А і В незалежно являє собою незаміщений або заміщений

С.-С, алкіл. Наприклад, А може являти собою СН СНо. В може являти собою, наприклад, алкіл (наприклад, в5 метил) або аміноалкіл (наприклад, амінометил). Переважно, Кз являє собою незаміщений феніл, і Ї являє собою водень. Ко може являти собою метил або, переважно, водень. Переважно, СО) являє собою 0, 5 або МК 7, де К7 являє собою водень або заміщений або незаміщений С 4-Св алкіл, наприклад, метил. МУ являє собою незаміщений або заміщений феніл (наприклад, алкокси-, галоген-заміщений). Переважно, МУ являє собою п-фторфеніл, п-хлорфеніл або п-метоксифеніл. МУ також може являти собою гетероарил, наприклад, 2-піридил. в особливо переважному варіанті здійснення дезазапурин являє собою 4-(2-ацетиламіноетил)аміно-б6-феноксиметил-2-феніл-7 Н-піроло|2,3-4|піримідин. в особливо переважному варіанті здійснення дезазапурин являє собою 4-(2-ацетиламіноетил)аміно-6-"4-фторфенокси)метил-2-феніл-7 Н-піроло|2,3-4|піримідин. в особливо переважному варіанті здійснення дезазапурин являє собою 7/0. 4-(2-ацетиламіноетил)аміно-6-(4-хлорфенокси)метил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-а|піримідин. в особливо переважному варіанті здійснення дезазапурин являє собою 4-(2-ацетиламіноетил)аміно-6-(4-метоксифенокси)метил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин. в особливо переважному варіанті здійснення дезазапурин являє собою 4-(2-ацетиламіноетил)аміно-6-(2-піридилокси)метил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідин. в особливо переважному варіанті здійснення дезазапурин являє собою 4-(2-ацетиламіноетил)аміно-6-«"М-феніламіно)метил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідин. в особливо переважному варіанті здійснення дезазапурин являє собою 4-(2-ацетиламіноетил)аміно-6-«"М-метил-М-феніламіно)метил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин. в особливо переважному варіанті здійснення дезазапурин являє собою 4-(2-М'-метилуреаетил)аміно-6-феноксиметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-а|піримідин.

Далі винахід відноситься до способу інгібування активності аденозинового рецептора (наприклад, А 25 аденозинового рецептора) у клітині контактуванням клітини зі сполукою за винаходом. Переважно сполука є антагоністом аденозинового рецептора.

Винахід також відноситься до способу лікування шлунково-кишкового захворювання (наприклад, діареї) у сч ов тварини шляхом введення тварині ефективної кількості сполуки за винаходом (наприклад, антагоніста А з).

Переважно тварина являє собою людину. і)

В іншому варіанті здійснення винахід відноситься до фармацевтичної композиції, що містить М-6 заміщений 7-дезазапурин за винаходом і фармацевтично прийнятний носій.

Винахід також відноситься до способу лікування хворобливого стану, що дає реакцію у відповідь на М-6 со зо заміщений 7-дезазапурин у тварини шляхом введення ссавцеві терапевтично ефективної кількості дезазапурину за винаходом, таким чином, що відбувається лікування стану, що дає реакцію у відповідь на М-6 заміщений с 7-дезазапурин у тварини. Переважно, захворювання може являти собою порушення, опосередковане с аденозином. Приклади переважних хворобливих станів включають: порушення центральної нервової системи, серцево-судинні захворювання, ниркові захворювання, запальні захворювання, алергічні захворювання, -

Зз5 Шлунково-кишкові захворювання, очні захворювання і захворювання дихальних шляхів. ча

Термін "алкіл" відноситься до радикалу насичених аліфатичних груп, включаючи лінійні алкільні групи, розгалужені алкільні групи, циклоалкільні (аліциклічні) групи, алкілзаміщені циклоалкільні групи |і циклоалкілзаміщені алкільні групи. Термін алкіл додатково включає алкільні групи, які можуть додатково включати атоми кисню, азоту, сірки або фосфору, що заміняють один або декілька вуглеводів в основному « Вуглеводневому ланцюгу, наприклад, атоми кисню, азоту, сірки або фосфору. У переважних варіантах /-- с здійснення алкіл з лінійним або розгалуженим ланцюгом містить ЗО або менше атомів вуглецю в основному . ланцюгу (наприклад, С.--Сзо для лінійного ланцюга, Сз-Сзо для розгалуженого ланцюга) і, більш переважно, 20 и?» або менше. Аналогічно, переважні циклоалкіли мають 4-10 атомів вуглецю у своїй кільцевій структурі і, більш переважно, мають 5, 6 або 7 вуглеводів в кільцевій структурі.

Більш того мається на увазі, що термін алкіл, як він використаний в описі і формулі винаходу, включає як -І "незаміщені алкіли7, так і "заміщені алкіли7, останні відносяться до алкільних фрагментів, що мають замісники, які замінюють водень у одного або декількох вуглеводів в основному вуглеводневому ланцюгу. Такі о замісники можуть включати, наприклад, галоген, гідроксил, алкілкарбонілокси, арилкарбонілокси, ко алкоксикарбонілокси, арилоксикарбонілокси, карбоксилат, алкілкарбоніл, алкоксикарбоніл, амінокарбоніл, алкілтіокарбоніл, алкоксил, фосфат, фосфонато, фосфінато, ціано, аміно (включаючи алкіламіно, діалкіламіно, ю ариламіно, діариламіно і алкілариламіно) ациламіно (включаючи алкілкарбоніламіно, арилкарбоніламіно, с карбамоїл і уреїдо), амідино, іміно, сульфгідрил, алкілтіо, арилтіо, тіокарбоксилат, сульфати, сульфонато, сульфамоїл, сульфонамідо, нітро, трифторметил, ціано, азидо, гетероцикліл, алкіларил або ароматичний або гетероароматичний фрагмент. Фахівцям в даній області потрібно розуміти, що фрагменти, розташовані як

Замісники у вуглеводневому ланцюгу, самі можуть бути заміщеними, якщо це можливо. Циклоалкіли додатково можуть бути заміщеними, наприклад, описаними вище замісниками. "Алкіларильний фрагмент" являє собою

Ф) алкіл, заміщений арилом (наприклад, фенілметил (бензил)). Термін "алкіл" також включає ненасичені аліфатичні ка групи, аналогічні по своїй довжині і можливому заміщенню описаним вище алкілам, але також які містять принаймні один подвійний або потрійний зв'язок, відповідно. во Термін "арил", як він використаний у даному описі, відноситься до арильного радикалу, включаючи 5- і б--ленні ароматичні групи, що складаються з одного кільця, які можуть включати від нуля до чотирьох гетероатомів, наприклад, бензол, пірол, фуран, тіофен, імідазол, бензоксазол, бензотіазол, триазол, тетразол, піразол, піридин, піразин, піридазин і піримідин і тому подібні. Арильні групи також включають поліциклічні конденсовані ароматичні групи, такі як нафтил, хіноліл, індоліл і тому подібні. Ті арильні групи, які мають б5 Гетероатоми в кільцевій структурі, також можуть згадуватись як "арильні гетероцикли", "гетероарили" або "гетероароматичні" групи. Ароматичне кільце може бути заміщеним в одному або декількох положеннях кільця такими замісниками, як описано вище, як наприклад, галоген, гідроксил, алкокси, алкілкарбонілокси, арилкарбонілокси, алкоксикарбонілокси, арилоксикарбонілокси, карбоксилат, алкілкарбоніл, алкоксикарбоніл, амінокарбоніл, алкілтіокарбоніл, фосфат, фосфонато, фосфінато, ціано, аміно (включаючи алкіламіно, діалкіламіно, ариламіно, діариламіно і алкілариламіно) ациламіно (включаючи алкілкарбоніламіно, арилкарбоніламіно, карбамоїл і уреїдо), амідино, іміно, сульфгідрил, алкілтіо, арилтіо, тіокарбоксилат, сульфати, сульфонато, сульфамоїл, сульфонамідо, нітро, трифторметил, ціано, азидо, гетероцикліл, алкіларил або ароматичний або гетероароматичний фрагмент. Арильні групи також можуть бути конденсованими або пов'язані містками з аліциклічними або гетероциклічними кільцями, які не є ароматичними, що таким чином 7/0 утворюють поліцикл (наприклад, тетралін).

Термін "алкеніл" і "алкініл" відноситься до ненасичених аліфатичних груп, аналогічних по своїй довжині і можливому заміщенню описаним вище алкілам, але які також містять принаймні один подвійний або потрійний зв'язок, відповідно. Наприклад, у винаході розглядаються ціано і пропаргільні групи.

Якщо число атомів вуглецю не вказане інакше, "нижчий алкіл", як використано у даному описі, означає /5 алкільну групу, як визначено вище, але яка містить від одного до десяти вуглеводів, більш переважно від одного до шести вуглеводів у структурі основного ланцюга, ще більш переважно від одного до трьох атомів вуглецю у структурі свого основного ланцюга. Аналогічно, "нижчий алкеніл" і "нижчий алкініл" мають аналогічну довжину ланцюга.

Терміни "алкоксіалкіл", "поліаміноалкіл" і "тіосалкоксіалкіл" відносяться до алкільних груп, як описано 2о вище, які додатково включають атоми кисню, азоту або сірки, що заміняють один або декілька вуглеводів у вуглеводневому основному ланцюгу, наприклад, атоми кисню, азоту або сірки.

Терміни "поліцикліл" або "поліциклічні радикали" відносяться до радикалів, що складаються з двох або більше циклічних кілець (наприклад, циклоалкіли, циклоалкеніли, циклоалкініли, арили і/або гетероцикліли), в яких два або декілька вуглеводів є спільними для двох суміжних кілець, наприклад, кільця є "конденсованими сч ов Кільцями". Кільця, які сполучені за допомогою несуміжних атомів, називаються "місточковими" кільцями. Кожне з кілець поліциклу може бути заміщене такими замісниками, як описане вище, такими як, наприклад, галоген, і) гідроксил, алкілкарбонілокси, арилкарбонілокси, алкоксикарбонілокси, арилоксикарбонілокси, карбоксилат, алкілкарбоніл, алкоксикарбоніл, амінокарбоніл, алкілтіокарбоніл, алкоксил, фосфат, фосфонато, фосфінато, ціано, аміно (включаючи алкіламіно, діалкіламіно, ариламіно, діариламіно і алкілариламіно), ациламіно со

Зо (включаючи алкілкарбоніламіно, арилкарбоніламіно, карбамоїл і уреїдо), амідино, іміно, сульфгідрил, алкілтіо, арилтіо, тіокарбоксилат, сульфати, сульфонато, сульфамоїл, сульфонамідо, нітро, трифторметил, ціано, азидо, с гетероциклил, алкіл, алкіларил або ароматичний або гетероароматичний фрагмент. с

Термін "гетероатом", як він використаний у даному описі, означає атом будь-якого елемента, відмінного від вуглецю або водню. Переважними гетероатомами є азот, кисень, сірка і фосфор. «

Термін "амінокислоти" включає природні і синтетичні амінокислоти, що виявляються в білках, такі як ї- гліцин, аланін, валін, цистеїн, лейцин, ізолейцин, серин, треонін, метіонін, глутамінова кислота, аспартамова кислота, глутамін, аспарагін, лізин, аргінін, пролін, гістидин, фенілаланін, тирозин і триптофан. Аналоги амінокислот включають амінокислоти з подовженими або укороченими бічними ланцюгами або відмінними бічними ланцюгами з відповідними функціональними групами. Амінокислоти також включають ЮО і 1 « стереоіїзомери амінокислот, коли структура амінокислоти допускає існування стереоізомерних форм. Термін з с "дипептид" включає дві або декілька амінокислот, пов'язаних разом. Переважно, дипептиди являють собою дві амінокислоти, пов'язані пептидним зв'язком. Особливо переважні дипептиди включають, наприклад ;» аланін-аланін або гліцин-аланін.

Потрібно зазначити, що структура деяких сполук за даним винаходом включає асиметричні атоми вуглецю, і таким чином вони існують у вигляді рацематів і рацемічних сумішей, окремих енантіомерів, діастереомерних -І сумішей і індивідуальних діастереомерів. Всі такі ізомерні форми даних сполук включені в даний винахід.

Кожний стереогенний вуглець може мати К або 5 конфігурацію. Відповідно, потрібно розуміти, що ізомери, які ве виникають при такій асиметрії (наприклад, всі енантіомери і діастереомери) включені в об'єм даного винаходу, ко якщо не указано іншого. Такі ізомери можуть бути одержані по суті в чистій формі за допомогою класичних способів розділення і шляхом стереохімічно селективного синтезу. ю Винахід додатково відноситься до фармацевтичних композицій для лікування станів, що дають реакцію у с відповідь на М-6 заміщені 7-дезазапурини у ссавців, наприклад, респіраторних захворювань (наприклад, астма, бронхіт, хронічне обструктивне захворювання легень і алергічний риніт), ниркових захворювань, шлунково-кишкових захворювань і очних захворювань. Фармацевтична композиція включає терапевтично ов ефективну кількість М-6 заміщеного 7-дезазапурину, описаного вище, Її фармацевтично прийнятний носій.

Потрібно розуміти, що всі описані вище дезазапурини включені для терапевтичного лікування. Додатково (Ф, потрібно розуміти, що дезазапурини за винаходом можна використати окремо або в поєднанні з іншими ка дезазапуринами за винаходом, або в поєднанні з додатковими терапевтичними сполуками, такими, наприклад, як антибіотики, протизапальні або протиракові агенти. во Термін "антибіотик" є загальноприйнятим в даній області, і, передбачається, що він включає ті речовини, які продукуються зростаючими мікроорганізмами, і їх синтетичні похідні, які виключають або інгібують зростання патогенів і є селективно токсичними до патогенів, надаючи мінімальне або не надаючи шкідливого впливу на інфікованого суб'єкта-хазяїна. Відповідні приклади антибіотиків включають, але не обмежуються цим, принципові класи аміноглікозидів, цефалоспоринів, хлорамфеніколів, фусцинових кислот, макролідів, 65 пеніцилінів, поліміксинів, тетрациклінів і стрептоміцинів.

Термін "протизапальний" є загальноприйнятим в даній області, і, передбачається, що він включає ті агенти,

які впливають на механізми тіла без прямого антагонізування агента, що є причиною запалення, такі як глюкокортикоїди, аспірин, ібупрофен, НСПЗЗ (нестероїдні протизапальні засоби) і т.д.

Термін "протираковий агент" є загальноприйнятим в даній області, і, передбачається, що він включає ті агенти, які зменшують, викорінюють або запобігають зростанню ракових клітин, переважно без негативного впливу на інші фізіологічні функції. |Ілюстративні приклади включають цисплатин і циклофосфамід.

Коли сполуки за даним винаходом вводять у вигляді лікарських засобів людям і ссавцям, їх можна давати в чистому вигляді або у вигляді фармацевтичної композиції, що містить, наприклад, від 0,1 до 99,595 (більш переважно від 0,5 до 90965) активного інгредієнта в поєднанні з фармацевтично прийнятним носієм. 70 Вираз "фармацевтично прийнятний носій", як він використаний у даному описі, означає фармацевтично прийнятну речовину, композицію або носій, таку як рідкий або твердий наповнювач, розріджувач, ексципієнт, розчинник або інкапсулюючу речовину, включену в доставку або транспортування сполуки) за винаходом всередині суб'єкта або до суб'єкта таким чином, що сполука виконує призначену функцію. Звичайно такі сполуки доставляють або транспортують від органу або частини тіла до іншого органу або частини тіла. Кожний носій /5 повинен бути "прийнятним" у значенні сумісності з іншими інгредієнтами рецептури і не завдавати шкоди пацієнту. Деякі приклади речовин, які можуть служити як фармацевтично прийнятні носії, включають: цукор, такий як лактоза, глюкоза і сахароза; крохмаль, такий як кукурудзяний крохмаль і картопляний крохмаль; целюлозу і її похідні, такі як карбоксиметилцелюлоза натрію, етилцелюлоза і ацетат целюлози; порошкоподібні камеді; солод; желатин; тальк; ексципієнти, такі як масло какао і віск для супозиторіїв; олії, такі як 2о арахісова олія, бавовняна олія, соняшникова олія, кунжутна олія, оливкова олія, кукурудзяна олія і соєва олія; гліколі, такі як пропіленгліколь; багатоатомні спирти, такі як гліцерин, сорбіт, маніт і поліетиленгліколь; складні ефіри, такі як етил олеат і етиллаурат; агар; буферні агенти, такі як гідроксид магнію і гідроксид алюмінію; альгінову кислоту; апірогенну воду; ізотонічний фізіологічний розчин; розчин

Рінгера; етиловий спирт; фосфатні буферні розчини і інші нетоксичні сумісні речовини, що використовуються у сч фармацевтичних препаратах.

Як указано вище, деякі варіанти здійснення даних сполук можуть містити основні функціональні групи, такі і) як аміно або алкіламіно, і тому здатні утворювати фармацевтично прийнятні солі з фармацевтично прийнятними кислотами. Термін "фармацевтично прийнятні солі" у даному відношенні відноситься до відносно нетоксичних кислотно-адитивних солей сполук за даним винаходом з неорганічними або органічними кислотами. Дані солі о зо Можуть бути одержані іп зйш при кінцевому виділенні і очищенні сполук за винаходом або шляхом окремої взаємодії очищеної сполуки за винаходом у формі її вільної основи з відповідною органічною або неорганічною с кислотою і виділення утвореної таким чином солі. Ілюстративні солі включають гідробромід, гідрохлорид, с сульфат, бісульфат, фосфат, нітрат, ацетат, валерат, олеат, пальмітат, стеарат, лаурат, бензоат, лактат, фосфат, тозилат, цитрат, малеат, фумарат, сукцинат, тартрат, нафтилат, мезилат, глюкогептонат, дактобіонат і - лаурилсульфонатні солі і тому подібні (дивись, наприклад, Вегде еї аЇ. (1977) "Рагтасецііса! заїйв8", 9. ї-

Рпагт. Зсі., 66:1-19).

В інших випадках сполуки за даним винаходом можуть містити одну або декілька кислотних функціональних груп і таким чином здатні утворювати фармацевтично прийнятні солі з фармацевтично прийнятними основами.

Термін "фармацевтично прийнятні солі" у таких випадках відноситься до відносно нетоксичних « основно-адитивних солей сполук за даним винаходом з неорганічними або органічними основами. Такі солі /- с можуть бути одержані аналогічним чином іп зіш під час кінцевого виділення і очищення сполук або шляхом . окремої взаємодії очищеної сполуки у формі її вільної кислоти з відповідною основою, такою як гідроксид, и?» карбонат або бікарбонат фармацевтично прийнятного катіону металу, з аміаком або з фармацевтично прийнятними органічними первинними, вторинними або третинними амінами. Ілюстративні лужні або лужноземельні солі включають солі літію, натрію, калію, кальцію, магнію і алюмінію і тому подібні. -І Ілюстративні органічні аміни, корисні для утворення основно-адитивних солей, включають етиламін, діетиламін, етилендіамін, етаноламін, діетаноламін, піперазин і тому подібні. ве Термін "фармацевтично прийнятні складні ефіри" відноситься до відносно нетоксичних етерифікованих ко продуктів сполук за даним винаходом. Дані складні ефіри можуть бути одержані іп зи під час кінцевого 5р Виділення і очищення сполук або шляхом окремої взаємодії очищеної сполуки у формі її вільної кислоти або ю гідроксилу з відповідним етерифікуючим реагентом. Карбонові кислоти можуть бути перетворені у складні ефіри с при обробці спиртом у присутності каталізатора. Гідроксилвмісні похідні можуть бути перетворені у складні ефіри при обробці етерифікуючим агентом, таким як алканоїлгалогеніди. Крім того мається на увазі, що термін включає нижчі вуглеводневі групи, здатні до сольватації у фізіологічних умовах, наприклад, алкілові складні в ефіри, метилові, етилові і пропілові складні ефіри (дивись, наприклад, Вегое еї аї., див. вище).

У винаході додатково розглядається застосування проліків, які перетворюються іп мімо у терапевтичні

Ф) сполуки за винаходом (дивись, наприклад, К.В.5іїмегтап, 1992, "Тпе Огдапіс Спетізігу ої Огид ЮОевзіпд апа ЮОгид ка Асійоп", Асадетіс Ргезз, Спаріег 8). Такі проліки можуть використовуватись для зміни біорозподілу (наприклад, щоб зробити можливими сполуки, які не будуть звичайним чином вступати у реакційноздатні сайти протеази) або бо для фармакокінетики терапевтичної сполуки. Наприклад, група карбонової кислоти може бути етерифікована, наприклад, метильною групою або етильною групою з одержанням складного ефіру. Коли складний ефір вводять суб'єкту, складний ефір розщеплюється під дією ферментів або неферментативно, відновлювально або гідролітично, вивільняючи аніонну групу. Аніонна група може етерифікуватись фрагментами (наприклад, ацилоксиметильні складні ефіри), які розщеплюються, вивільняючи проміжну сполуку, яка згодом розкладається, 65 даючи активну сполуку. В іншому варіанті здійснення проліки являють собою відновлену форму сульфату або сульфонату, наприклад, тіол, який окислюється іп мімо до терапевтичної сполуки. Крім того, аніонний фрагмент може бути етерифікований до групи, яка активно транспортується іп мімо, або яка селективно поглинається органами-мішенями. Складний ефір може бути вибраний так, щоб дати можливість специфічно націлювати терапевтичні фрагменти на конкретні реакційноздатні сайти, як описано далі для фрагментів-носіїв.

Змочувальні агенти, емульгатори і змащувальні агенти, такі як лаурилсульфат натрію і стеарат магнію, а також барвники, вивільняючі агенти, агенти покриття, підсолоджувачі, смакові агенти і віддушки, консерванти і антиоксиданти також можуть бути присутніми в композиціях.

Приклади фармацевтично прийнятних антиоксидантів включають водорозчинні антиоксиданти, такі як аскорбінова кислота, гідрохлорид цистеїну, бісульфат натрію, метабісульфіт натрію, сульфіт натрію і тому 70 подібні; розчинні в олії антиоксиданти, такі як аскорбіл пальмітат, бутильований гідроксіанізол (ВНА), бутильований гідрокситолуол (ВНТ), лецитин, пропілгалат, альфа-токоферол і тому подібні; і хелатуючі метал агенти, такі як лимонна кислота, етилендіамінтетраоцтова кислота (ЕДТА), сорбіт, винна кислота, фосфорна кислота і тому подібні.

Композиції за даним винаходом включають склади, відповідні для перорального, назального, місцевого, 7/5 Черезшкірного, букального, сублінгвального, ректального, вагінального і/або парентерального введення.

Препарати можуть зручним чином існувати у вигляді одиничних дозованих лікарських форм і можуть бути одержані будь-якими способами, добре відомими в області фармацевтики. Кількість активного інгредієнта, яку можна об'єднувати з носієм для одержання одиничної дозованої форми, звичайно буде такою кількістю сполуки, яка надає терапевтичну дію. Звичайно, виключаючи сто процентів, дана кількість буде коливатись від приблизно 1 процента до приблизно дев'яноста дев'яти процентів активного інгредієнта, переважно від приблизно 5 процентів до приблизно 70 процентів, найбільш переважно від приблизно 10 процентів до приблизно 30 процентів.

Способи одержання даних композицій або складів включають стадію об'єднання сполуки за даним винаходом з носієм і, необов'язково, одним або декількома допоміжними інгредієнтами. Звичайно, композиції сч одержують шляхом однорідного і ретельного змішування сполуки за даним винаходом з рідкими носіями або тонко подрібненими твердими носіями, або обома, а потім, за необхідністю, формування продукту. (8)

Композиції за винаходом, відповідні для перорального введення, можуть бути представлені у вигляді капсул, облаток, пілюль, таблеток, коржиків (з використанням смакової основи, звичайно сахарози і гуміарабіку або трагаканту), порошків, гранул або у вигляді розчину або суспензії у водній або неводній рідині, або вигляді со зо рідкої емульсії олія-у-воді або вода-в-олії, або у вигляді еліксиру або сиропу, або у вигляді пастилок (з використанням інертної основи, такої як желатин і гліцерин, або сахарози і гуміарабіку), і/або у вигляді с полоскання для рота і тому подібного, кожний з яких містить заздалегідь визначену кількість сполуки за даним с винаходом як активного інгредієнта. Сполуку за даним винаходом також можна вводити у вигляді болюсу, електуарію або пасти. -

У твердих препаративних лікарських формах за винаходом для перорального введення (капсули, таблетки, ча пілюлі, драже, порошки, гранули і тому подібне) активний інгредієнт змішують з одним або декількома фармацевтично прийнятними носіями, такими як цитрат натрію або дикальцій фосфат, і/або будь-яким з наступних агентів: наповнювачі або заповнювачі, такі як крохмаль, лактоза, сахароза, глюкоза, маніт і/або кремнева кислота; зв'язувальні речовини, такі як, наприклад, карбоксиметилцелюлоза, альгінати, желатин, « Пполівінілпіролідон, сахароза іабо гуміарабік; зволожувач, такі як гліцерин; дезінтегруючі агенти, такі як з с агар-агар, карбонат кальцію, картопляний або маїсовий крохмаль, альгінова кислота, деякі силікати і карбонат натрію; уповільнюючі розчинення агенти, такі як парафін; прискорювачі всмоктування, такі як четвертинні ;» амонійні сполуки; змочувальні агенти, такі як, наприклад, цетиловий спирт і гліцерин моностеарат; абсорбенти, такі як каолін і бентонітова глина; змащувальні речовини, такі як тальк, стеарат кальцію, стеарат магнію, тверді поліетиленгліколі, лаурилсульфат натрію і їх суміші; і барвники. У випадку капсул, таблеток і пілюль, -І фармацевтичні композиції також можуть містити буферні агенти. Тверді композиції аналогічного типу також можуть використовуватись як наповнювачі у м'яких і твердих желатинових капсулах, що наповнюються з ве використанням таких ексципієнтів як лактоза або молочний цукор, а також високомолекулярні поліетиленгліколі і

ГІ тому подібне.

Таблетка може бути одержана пресуванням або формуванням, необов'язково з використанням одного або ю декількох додаткових інгредієнтів. Пресовані таблетки можуть бути одержані з використанням зв'язувальної с речовини (наприклад, желатину або гідроксипропілметилцелюлози), змащувальної речовини, інертного розріджувача, консерванту, дезінтегранту (наприклад, крохмальгліколяту натрію або зшитої карбоксиметилцелюлози натрію), поверхнево-активного або диспергуючого агента. Формовані таблетки можуть бути одержані формуванням у відповідному пристрої суміші порошкоподібної сполуки, зволоженої інертним рідким розріджувачем.

Ф) Таблетки та інші тверді препаративні лікарські форми фармацевтичних композицій за даним винаходом, такі ка як драже, капсули, пілюлі і гранули, необов'язково можуть мати насічки або бути одержані з використанням покриттів або оболонок, таких як розчинні у кишечнику покриття та інші покриття, добре відомі в області бо одержання фармацевтичних рецептур. Вони також можуть бути складені таким чином, щоб забезпечити повільне або контрольоване вивільнення з них активного інгредієнта з використанням, наприклад, гідроксипропілметилцелюлози у різних пропорціях для створення бажаного профілю вивільнення, інших полімерних матриць, ліпосом і/або мікросфер. Вони можуть бути стерилізовані, наприклад, через фільтр, який утримує бактерії, або за допомогою включення стерилізуючих агентів у формі стерильних твердих композицій, 65 які можуть бути розчинені у стерильній воді або деяких інших стерильних ін'єкційних середовищах безпосередньо перед вживанням. Дані композиції також необов'язково можуть містити агенти для придания каламутності і можуть являти собою композицію, яка вивільняє активний інгредієнт(и) тільки або переважно у певній частині шлунково-кишкового тракту, необов'язково, уповільненим чином. Приклади композицій, що імплантуються, які можуть використовуватись, включають полімерні речовини і віск. Активний інгредієнт також

Може бути у мікроінкапсульованій формі, якщо це підходить, з одним або декількома описаними вище ексципієнтами.

Рідкі дозовані лікарські форми для перорального введення сполук за винаходом включають фармацевтично прийнятні емульсії, мікроемульсії, розчини, суспензії сиропи і еліксири. У доповнення до активного інгредієнта рідкі дозовані лікарські форми можуть містити інертні розріджувачі, що звичайно використовуються змо В даній області, такі як, наприклад, вода або інші розчинники, солюбілізуючі агенти і емульгатори, такі як етиловий спирт, ізопропіловий спирт, етилкарбонат, етилацетат, бензиловий спирт, бензилбензоат, пропіленгліколь, 1,3-бутиленгліколь, олії (зокрема, бавовняна, арахісова, кукурудзяна, олія паростків, оливкова, касторова і кунжутна олії), гліцерин, терагідрофуриловий спирт, поліетиленгліколи і складні ефіри сорбіту і жирних кислот і їх суміші.

Крім інертних розріджувачів пероральні композиції також можуть включати допоміжні агенти, такі як змочувальні агенти, емульгуючі і суспендуючі агенти, підсолоджувачі, смакові добавки, барвники, віддушки і консерванти.

Суспензії в доповнення до активних сполук, можуть містити суспендуючі агенти, наприклад, такі як етоксильовані ізостеарилові спирти, поліоксіетгиленовий сорбіт і складні ефіри сорбіту, мікрокристалічна 2о целюлоза, метагідроксид алюмінію, бентоніт, агар-агар і трагакант, і їх суміші.

Рецептури фармацевтичних композицій за винаходом для ректального або вагінального введення можуть бути представлені у вигляді супозиторію, який може бути одержаний змішуванням одного або декількох сполук за винаходом з одним або декількома відповідними неподразнюючими ексципієнтами або носіями, що включають, наприклад, масло какао, поліетиленгліколь, віск для супозиторіїв або саліцилат, які є твердими при сч кімнатній температурі, але рідкими при температурі тіла і отже будуть розплавлятись у прямій кишці або о вагінальній порожнині і вивільняти активну сполуку.

Рецептури за даним винаходом, які є придатними для вагінального введення, також включають песарії, тампони, креми, гелі, пасти, пінисті або препарати, що розпилюються, які містять такі носії, що відомі в даній області, як відповідні для даного застосування. со зо Препаративні лікарські форми для місцевого або черезшкірного введення сполуки за даним винаходом включають порошки, спреї, мазі, пасти, креми, лосьйони, гелі, розчини, пластири та інгалятори. Активна с сполука може бути змішана у стерильних умовах з фармацевтично прийнятним носієм і з будь-яким необхідним су консервантом, буфером або пропелентом.

Мазі, пасти, креми і гелі можуть містити, у доповнення до активної сполуки за даним винаходом, « ексципієнти, такі як тваринні і рослинні жири, олії, віск, парафіни, крохмаль, трагакант, похідна целюлоза, ї- поліетиленгліколі, силікони, бентоніти, кремнієва кислота, тальк і оксид цинку, або їх суміші.

Порошки і спреї можуть містити, в доповнення до сполуки за даним винаходом, ексципієнти, такі як лактоза, тальк, кремнієва кислота, гідроксид алюмінію, силікати кальцію і поліамідний порошок, або суміші даних речовин. Спреї додатково можуть містити звичайні пропеленти, такі як хлорфторвуглеводні і леткі незаміщені «

Вуглеводні, такі як бутан і пропан. з с Черезшкірні пластири мають додаткову перевагу в забезпеченні контрольованої доставки сполуки за даним винаходом до тіла. Такі препаративні лікарські форми можуть бути одержані шляхом розчинення або ;» диспергування сполуки у відповідному середовищі. Для збільшення проникнення речовини через шкіру можуть бути додані підсилювачі всмоктування. Швидкість такого потоку через шкіру можна контролювати або за допомогою швидкість-контролюючої мембрани, або при диспергуванні активної сполуки у полімерній матриці або -І гелі.

Офтальмологічні препарати, очні мазі, порошки, розчини і тому подібне також розглядаються як такі, що о попадають в об'єм даного винаходу. Переважно, фармацевтичний препарат являє собою офтальмологічну ко композицію (наприклад, препарат для періокулярної, ретробульбарної або внутрішньоочної ін'єкції, системний препарат або хірургічний зрошувальний розчин). ю Офтальмологічні препарати за даним винаходом можуть включати один або декілька дезазапуринів і с фармацевтично прийнятний носій. Можна використати різні типи носіїв. Носій звичайно буде водним за своїй природою. Звичайно віддають перевагу водним розчинам, основуючись на типі композиції, а також здатності пацієнта легко вводити такі композиції, закапуючи одну або дві краплі розчину в уражене око. Однак, ов дезазапурини за даним винаходом також легко можуть бути введені в інші типи композицій, такі як суспензії, в'язкі або напівв'язкі гелі або інші типи твердих або напівтвердих композицій. офтальмологічні композиції за

Ф) даним винаходом також можуть включати різні типи інгредієнтів, такі як буфери, консерванти, співрозчинники і ка агенти, які створюють в'язкість.

Відповідна буферна система (наприклад, фосфат натрію, ацетат натрію або борат натрію) може бути додана бо для запобігання зміні рН в умовах зберігання.

Офтальмологічні продукти звичайно упаковуються у вигляді безлічі дозованих форм. Таким чином, для запобігання мікробному забрудненню під час використання потрібні консерванти. Відповідні консерванти включають: хлорид бензалконію, тимерозал, хлорбутанол, метилпарабен, пропілпарабен, фенілетиловий спирт, едетат динатрію, сорбінову кислоту, полікватерній-ї або інші агенти, відомі фахівцям в даній області. Такі 65 Консерванти звичайно використовуються на рівні від 0,001 до 1,090 ваг./об'єм (о ваг./об.).

Коли дезазапурини за даним винаходом вводять під час внутрішньоочної хірургічної процедури, наприклад,

за допомогою ретробульбарної або періокулярної ін'єкції і внутрішньоочного введення або ін'єкції, найбільш переважним є використання збалансованих сольових зрошувальних розчинів як носіїв. Прикладами фізіологічно збалансованих внутрішньоочних зрошувальних розчинів є В55Ф стерильний зрошувальний розчин і В55 Рій стерильний внутрішньоочний зрошувальний розчин (Аїсоп І арогаїйогієв, Іпс., Богі МУогій, Техаз, ОЗА). Останній тип розчину описаний у патенті США 4550022 (Сагабеавдіап еї аі.), повний зміст якого включений в даний опис як посилання. Ретробульбарні і періокулярні ін'єкції відомі фахівцям в даній області і описані у численних публікаціях, включаючи, наприклад, ОрпїНпаІтіс Зигдегу: Ргіпсіріев ої Ргасіїсе (Офтальмологічна хірургія: принципи практики) Еа., с. .Зраейй, МУ.В.Запаегз Со., РпіПадеїрніа Ра., ОА, сторінки 85-87 (1990). 70 Як указано вище, застосування дезазапуринів для профілактики або зменшення пошкодження тканин сітківки або головного зорового нерва на клітинному рівні являє собою особливо важливий аспект одного варіанту здійснення винаходу. офтальмологічні захворювання, які можна лікувати, включають, але не обмежуються цим, ретинопатію, дегенерацію жовтої плями, ішемію ока, глаукому і пошкодження, пов'язані з пошкодженням тканин ока, такі як ішемічні реперфузійні пошкодження, фотохімічні пошкодження і пошкодження, пов'язані з хірургією /5 Ка, особливо пошкодження сітківки або головного зорового нерва, викликані дією світла або хірургічними інструментами. Сполуки також можна використати як супутнє лікування в офтальмологічній хірургії, наприклад, як ін'єкцію всередину сітківки або надкон'юнктивну ін'єкцію після офтальмологічної хірургії. Сполуки можна використати для короткочасного лікування тимчасово виникаючих захворювань, або їх можна вводити постійно, особливо у разі дегенеративного захворювання. Сполуки також можна використати профілактично, особливо 2о перед очним хірургічним втручанням або неінвазивними офтальмологічними процедурами, або іншими типами хірургічного втручання.

Фармацевтичні композиції за даним винаходом, придатні для парентерального введення, включають одну або декілька сполук за винаходом в поєднанні з одним або декількома фармацевтично прийнятними стерильними ізотонічними водними або неводними розчинами, дисперсіями, суспензіями або емульсіями, або у с вигляді стерильних порошків, вологовміст яких відновлюється безпосередньо перед застосуванням у стерильних розчинах або дисперсіях для ін'єкцій, які можуть містити антиоксиданти, буфери, бактеріостатичні агенти, і) розчинні речовини, що надають рецептурі ізотонічних властивостей з кров'ю передбачуваного реципієнта, або суспендуючі або згущувальні агенти.

Приклади відповідних водних і неводних носіїв, які можна використати у фармацевтичних композиціях за со зо Винаходом, включають воду, етанол, багатоатомні спирти (такі як гліцерин, пропіленгліколь, поліетиленгліколь і тому подібні) і їх відповідні суміші, олії, такі як оливкова олія, та ін'єктовані органічні складні ефіри, с такі як етилолеат. Належна текучість може підтримуватись, наприклад, за рахунок використання матеріалів с покриттів, таких як лецитин, підтримка необхідного розміру частинок у разі дисперсій і застосування поверхнево-активних речовин. -

Дані композиції також можуть містити допоміжні агенти, такі як консерванти, змочувальні агенти, ї- емульгуючі агенти і диспергуючі агенти. Запобігання дії мікроорганізмів можна гарантувати при включенні до складу композиції різних протимікробних і протигрибкових агентів, наприклад, парабену, хлорбутанолу, фенолсорбінової кислоти і тому подібних. Також може виявитись бажаним включати до складу композицій ізотонічні агенти, такі як цукор, хлорид натрію і тому подібні. Крім того, пролонговане всмоктування « Ін'єктованої фармацевтичної форми може досягатись шляхом введення агентів, які уповільнюють всмоктування, з с таких як моностеарат алюмінію і желатин.

У деяких випадках для досягнення тривалої дії лікарського засобу бажано уповільнити всмоктування ;» лікарського засобу при підшкірній або внутрішньом'язовій ін'єкції. Це може досягатись за рахунок застосування рідкої суспензії кристалічної або аморфної речовини, що володіє низькою розчинністю у воді. Швидкість

Всмоктування лікарського засобу тоді залежить від швидкості його розчинення, що, в свою чергу, може залежати -І від розміру кристала і кристалічної форми. Альтернативно, уповільнене всмоктування парентерально препаративної лікарської форми, що вводиться, здійснюють шляхом розчинення або суспендування лікарського ве засобу в масляному носії. ко Ін'єктовані депо-форми одержують шляхом утворення мікроїнкапсульованих матриць сполук, що обговорюються, у біознищуваних полімерах, таких як полілактид-полігліколід. В залежності від співвідношення о лікарського засобу і полімеру і природи конкретного полімеру, що використовується, можна контролювати с швидкість вивільнення лікарського засобу. Приклади інших біознищуваних полімерів включають полі(орто-складні ефіри) і полі(ангідриди). Ін'єктовані депо-форми також одержують шляхом захоплення лікарського засобу ліпосомами або мікроемульсіями, які сумісні з тканинами тіла. 5Б Препарати за даним винаходом можна вводити перорально, парентерально, місцево або ректально.

Звичайно, їх вводять у вигляді форм, придатних для кожного шляху введення. Наприклад, їх вводять у вигляді (Ф) таблеток або капсул, шляхом ін'єкції, інгаляції, у вигляді очного лосьйону, мазі, супозиторію і т.д., ка здійснюють введення за допомогою ін'єкції, вливання або інгаляції; місцево з використанням лосьйону або мазі; і ректально з використанням супозиторіїв. Переважним є пероральне введення. во Вирази "парентеральне введення" і "вводять парентерально", як вони використовуються в даному описі, означають способи введення, які відрізняються від ентерального і місцевого введення, звичайно шляхом ін'єкції і включають, без обмежень, внутрішньовенну, внутрішньом'язову, внутрішньоартеріальну, внутрішньооболонкову, внутрішньокапсульну, внутрішньоочну, внутрішньосерцеву, внутрішньошкірну, внутрішньоочеревинну, транстрахейну, підшкірну, підкутикулярну, внутрішньосуглобну, підкапсульну, 65 субарахноїдальну, інтраспінальну і внутрішньогрудинну ін'єкцію та інфузію.

Вирази "системне введення" і "вводять системно", "периферичне введення" і "вводять периферично", як вони використані в даному описі, означають введення сполуки, лікарського засобу або іншої речовини іншим шляхом, ніж безпосереднє введення в центральну нервову систему, так що вона надходить в систему пацієнта і таким чином зазнає метаболізму та інших подібних процесів, наприклад, при підшкірному введенні.

Дані сполуки можна вводити людям та іншим тваринам для лікування за допомогою будь-якого відповідного шляху введення, включаючи пероральне, назальне, наприклад, за допомогою спрею, ректальне, внутрішньовагінальне, парентеральне, інтрацистернальне і місцеве введення, наприклад, за допомогою порошків, мазей і крапель, включаючи букальне і сублінгвальне введення.

Незалежно від вибраного шляху введення, сполуки за даним винаходом, які можуть використовуватись у 70 відповідній гідратованій формі, і/або фармацевтичні композиції за даним винаходом одержують у вигляді фармацевтично прийнятних препаративних лікарських форм звичайними способами, відомими фахівцям в даній області.

Фактичні рівні дозування активних інгредієнтів у фбрармацевтичних композиціях за даним винаходом можуть змінюватись так, щоб одержувати кількість активного інгредієнта, яка є ефективною для досягнення бажаної 7/5 терапевтичної реакції у відповідь для конкретного пацієнта, композиції і способу введення, не будучи токсичним для пацієнта.

Вибрані рівні дозування будуть залежати від множини факторів, включаючи активність конкретної сполуки, що використовується за даним винаходом, або її складного ефіру, солі або аміду, шлях введення, час введення, швидкість виведення з організму конкретної сполуки, що використовується, тривалість лікування, інші лікарські 2о засоби, сполуки і/або речовини, що використовується в поєднанні з конкретною сполукою, що використовується, вік, стать, вага, захворювання, загальний стан здоров'я і попередню історію хвороби пацієнта, що піддається лікуванню, і аналогічні фактори, добре відомі в медицині.

Лікуючий лікар або ветеринар, що є звичайним фахівцем в даній області, легко може визначити і прописати ефективну кількість необхідної фармацевтичної композиції. Наприклад, лікуючий лікар або ветеринар можуть сч об почати із застосування доз сполук, що використовуються у фармацевтичній композиції, на рівнях, більш низьких, ніж потрібно для досягнення бажаної терапевтичної дії, і поступово збільшувати дозування доти, поки не буде (8) досягнутий бажаний ефект.

Звичайно, відповідна денна доза сполуки за винаходом буде такою кількістю сполуки, яка являє собою найменшу дозу, ефективну для надання терапевтичної дії. Така ефективна доза звичайно буде залежати від со зо описаних вище факторів. Звичайно внутрішньовенні і підшкірні дози сполук за даним винаходом для пацієнта, коли їх використовують для надання вказаної анальгетичної дії, будуть коливатись від приблизно 0,0001 до с приблизно 20Омг на кілограм ваги тіла на добу, більш переважно від приблизно 0,01 до приблизно 15Омг на кг на с добу і ще більш переважно від приблизно 0,2 до приблизно 14Омг на кг на добу.

При бажанні, ефективну денну дозу активної сполуки можна водити у вигляді двох, трьох, чотирьох, п'яти, «

Зз5 шести або більше піддоз, що вводяться окремо з відповідними проміжками протягом дня, необов'язково у ча вигляді одиничних дозованих лікарських форм.

Хоча сполуку за даним винаходом можливо вводити саму по собі, переважним є введення сполуки у вигляді фармацевтичної композиції.

Даний винахід також відноситься до упакованих фармацевтичних композицій для лікування хворобливих « станів, що дають реакцію у відповідь на М-6 заміщений 7-дезазапурин, наприклад, при небажаній підвищеній пт») с активності аденозинового рецептора у ссавця. Упаковані фармацевтичні композиції включають контейнер, що . містить терапевтично ефективну кількість принаймні одного дезазапурину, як описано вище, і інструкції з а використання дезазапурину для лікування стану, що дає реакцію у відповідь на дезазапурин.

Дезазапурини даного винаходу можуть бути одержані з використанням стандартних способів органічного бинтезу. Дезазапурини можуть бути очищені ВЕРХ із оберненою фазою, хроматографією, перекристалізацією і -І т.д. і їх структури підтверджені за допомогою мас-спектрального аналізу, елементного аналізу, ІЧ і/або ЯМР спектроскопії. ве Звичайно, синтез проміжних сполук, а також дезазапуринів за винаходом здійснюють у розчині. Приєднання і ко видалення однієї або декількох захисних груп також є звичайним на практиці і відомо фахівцям.

Типові схеми синтезу проміжних сполук для одержання дезазапуринів за винаходом представлені нижче на о схемі І. с Даний винахід додатково відноситься до сполуки, що має структуру (ІМ):

МАЯ; вв го 5 пут М

ГФ) М, 7 де Кі являє собою транс-4-гідроксициклогексил, 2-метиламінокарбоніламіноциклогексил, ацетиламіноетил або метиламінокарбоніламіноетил; в. де Кз являє собою заміщене або незаміщене чотирьох-шестичленне кільце; Ффеніл, пірол, тіофен, фуран, тіазол, імідазол, піразол, 1,2,4--риазол, піридин, 2(1Н)-піридон, 4(1Н)-піридон, піразин, піримідин, піридазин, ізотіазол, ізоксазол, оксазол, тетразол, нафталін, тетралін, нафтиридин, бензофуран, бензотіофен, індол, 2,3З-дигідроіїндол, 1Н-індол, індолін, бензопіразол, 1,3-бензодіоксол, бензоксазол, пурин, кумарин, хромон, хінолін, тетрагідрохінолін, ізохінолін, бензімідазол, хіназолін, піридо(|2,3-б|піразин, в піридо|З,4-БІпіразин, піридо|З,2-БІпіридазин, піридо|3,4-Біпіридин, | 1Н-піразоліз,4-аІпіримідин, птеридин, 2(1Н)-хінолон, 1(2Н)-ізохінолон, 1,4-бензізоксазин, бензотіазол, хіноксалін, хінолін-М-оксид,

ізохінолін-М-оксид, хіноксалін-М-оксид, хіназолін-М-оксид, бензоксазин, фталазин, цинолін, або має структуру:

Ся й о т. ра де У являє собою вуглець або азот; де К»о і К»" незалежно являють собою Н, заміщений або незаміщений алкіл, заміщений або незаміщений арил, галоген, метокси, метиламіне або метилтіо; де К5 являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл, арил, арилалкіл, аміно, заміщений арил, де вказаний заміщений алкіл являє собою-С(К 7)(Ка)ХК»о, де Х являє собою О, 5 або 70. МВ.о, де кожний з В. і Б незалежно являє собою М або алкіл, де кожний з Р» і Бо незалежно являє собою алкіл 7! Кв 91 чо або циклоалкіл, або МКОК10 являє собою заміщене або незаміщене кільце, що містить від 4 до 7 членів; де Кб являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл, циклоалкіл; або до її фармацевтично прийнятної солі, похідних проліків або біологічно активного метаболіту, за умови, що коли К. являє собою ацетиламіноетил, К з не є 4-піридилом.

В одному варіанті здійснення сполуки, що має структуру ІМ, МКоК.о являє собою заміщене або незаміщене кільце, що містить від 4 до 7 членів, яке вибране з групи, що складається з:

Фо)

Я)я п де т дорівнює 0, 1 або 2,

Се, а Й с з о де п дорівнює 0, 1, 2 або З; де Ку являє собою водень,-ОН,-СН 2ОН,-С(-О)МКоКчо, МНЕ; де К.44 являє собою-С(-О)СН»ь або-5О»оМе, або щк,

А (ге) й де К являє собою Н, алкіл або арил. с

При іншому варіанті здійснення сполуки, що має структуру ІМ, Кз має структуру сч я з « ж -Ж- | | ! ! М. де М являє собою вуглець або азот; де Ко» являє собою М або галоген, О-алкільну групу, аміногрупу або сульфідну групу; де Кь являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл, арил, арилалкіл, аміно, заміщений арил, де вказаний заміщений алкіл являє собою-С(К 7)(Ка)МКоК.о, де кожний з К; і Ка незалежно являє собою М або алкіл, де « дю кожний з Ка і Ко незалежно являє собою алкіл або циклоалкіл, або Ко, Ко і азот разом утворюють заміщене або з незаміщене кільце, що складається з 4-7 членів. с В іншому варіанті здійснення сполуки У являє собою вуглець. :з» В іншому варіанті здійснення сполуки Ко являє собою водень.

В іншому варіанті здійснення сполуки Ко являє собою водень. 15 В іншому варіанті здійснення сполуки К5 являє собою водень. - В іншому варіанті здійснення сполуки кожний з Кб і Ко; являє собою метил.

В іншому варіанті здійснення сполуки Кь являє собою-С(К7)ХКа)МР»оР.о, де кожний з К;7 і Ка незалежно являє т. собою М або алкіл, де кожний з К» і Ко незалежно являє собою алкіл або циклоалкіл, або Ко, К:о і азот разом т утворюють заміщене або незаміщене кільце, що складається з 4-7 членів.

В іншому варіанті здійснення сполуки Ко являє собою галоген. ко В іншому варіанті здійснення сполуки У являє собою азот. со Ще в одному варіанті здійснення сполуки Ко являє собою водень.

У наступному варіанті здійснення сполуки кожний з К;» і Ко являє собою водень.

Даний винахід також відноситься до сполуки, що має структуру (М): но, о о й м СО в ща М н х, 60 й о де Кз являє собою арил, заміщений арил або гетероарил; де Ке являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл або циклоалкіл; де К 5 являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл, арил, арилалкіл, аміно, заміщений арил, де вказаний заміщений алкіл являє собою-С(К 7)(Ка)МКоКіо, де кожний з КЕ; і Кв незалежно являє собою М або алкіл, де кожний з К» і Ко являє собою алкіл або циклоалкіл, або Ко, Ко 65 і азот разом утворюють кільцеву систему, що складається з 4-7 членів.

В одному варіанті здійснення сполуки, що має структуру М, кожний з К. і Кв являє собою Н; де Ко являє собою Н і Ко являє собою-К412С(О)К з.

В іншому варіанті здійснення сполуки, що має структуру М, кожний з К. і Кв являє собою Н; де кільцева система являє собою морфоліно, тіоморфоліно, М-4-заміщений піперазино, 2-заміщений піперизин або К в заміщений піролідино, піперидин, де Ку являє собою Н, ОН, СН 2ОН,-С(5О)МКоКчіо, МК. де К./41 являє собою-С(-О)СНьз,-5О»оМе.

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має наступну структуру:

С сн сн е з

У

(Сполука 706)

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: що Ф ко се бру- ру ї

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру:

Но і "Мн н с бр. сл й шо (Сполука 1318-а)

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: (ее) зо о! сч "мн н о ч

М су ; З (Сполука 1318-Б5) -

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру:

Фо; їх

М х шщ с ! "» (Сполука 1319) " В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру:

В, Со їз с ІЧ їмо) а ма 70 (Сполука 1320) со В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру:

Фе,

Су й а о (Сполука 1321) іме) Сполука має структуру 60 б5 сні й

М шо чн не а

АД

Сх.

Ву М ім

М, де Кз являє собою 5-6--ленне ароматичне кільце; де Кб і Ко незалежно являють собою М або алкіл.

В одному варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: т. | т бру- » су (Сполука 1500)

В одному варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: сСиз -у с р і) со в б (ее) сч

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: сч аое, о

Ве ч

Се і - ав 40 . ря | - с В іншому варіанті здійснення сполуки 1500, сполука має структуру: с

І о

І» 7

С й - су" | , щ» о У наступному втіленні сполуки, сполука має структуру: с, о кою со Я

СЕ тн сте о сих

Ге! сут К о Даний винахід також відноситься до сполуки, що має структуру: 60 б5 ї" а кН

СХ тн Ве

Гай

Ж | Не хх

Ву М М н

М, де Кз являє собою 5-6--ленне ароматичне кільце; де К;5 і Ко незалежно являють собою М або алкіл; за умови, що Кз не є 4-піридилом.

В одному варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: пе. о т ва нн. п 20 со (Сполука 1501)

Даний винахід додатково відноситься до сполуки, що має структуру: с 25 о

Ши о ни. Ре ву М ім о

М, 30 де Кз являє собою заміщене 5-6--ленне ароматичне кільце; де К» і К5 незалежно являють собою М або алкіл. сем

В одному варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: сч -к сов « 35 с | у - (Сполука 1520)

Даний винахід додатково відноситься до сполуки, що має структуру: « а 7. з я ло-

С |і ; » 7 н - їх, х де Кз являє собою 5-6-ч-ленне ароматичне кільце; де Х являє собою кисень або сірку. - В одному варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: це: щ» т зе ; Со- мо ех с (Сполука 1503)

Даний винахід додатково відноситься до сполуки, що має структуру: о

Тен ф ю о де Кз являє собою 5-6-ч-ленне ароматичне кільце; де Х являє собою кисень або сірку. 60 В одному варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру:

Іо сля о 65 ;

(Сполука 1504)

Даний винахід також відноситься до способу лікування захворювання, пов'язаного з А 4 аденозиновим рецептором у суб'єкта, що включає введення суб'єкту терапевтично ефективної кількості сполуки, що має формулу ІМ, М, МІ, МІ, МІ, М, ІХ або Х.

В одному варіанті здійснення способу суб'єкт являє собою ссавця. В іншому варіанті здійснення способу ссавець є людиною.

У наступному варіанті здійснення способу, А аденозиновий рецептор пов'язаний з порушенням пізнавальної здатності, нирковою недостатністю, серцевою аритмією, епітелієм дихальних шляхів, вивільненням трансмітера, /о Седативною дією, звуженням кровоносних судин, брадикардією, негативною серцевою |інотропією і дромотропією, бронхостенозом, нейтрофільним хемотаксисом, станом рефлюксу або виразковим захворюванням.

Даний винахід також відноситься до комбінованої терапії астми, що включає сполуки ІМ і М,і стероїд, р2-агоніст, глюкокортикоїд, антагоніст люкотриєну або антихолінергічний агоніст. Захворювання, 75 пов'язані з А4, Ага, Агь і Аз аденозиновими рецепторами, описані в УМО 99/06053 ії М/О-09822465, М/О-09705138,

УО-09511681, УУО-09733879, ОР-09291089, РСТ/О5О8/16053 і патенті США Мо 5516894, повний зміст яких у всій своїй повноті включений в даний опис як посилання.

Даний винахід також відноситься до водорозчинних проліків сполук, що мають структуру ІМ, М, МІ, МІ, МІ,

МІ, ЇХ або Х, де вказані водорозчинні проліки метабол ізують іп мімо до активного лікарського засобу, який селективно інгібує А аденозиновий рецептор.

В одному варіанті здійснення проліків, вказані проліки метаболізують іп мімо за допомогою каталізованого естеразою гідролізу.

Даний винахід також відноситься до фармацевтичної композиції, що включає проліки їі фармацевтично прийнятний носій. Га

Даний винахід додатково відноситься до способу інгібування активності А 4 аденозинового рецептора в клітині, який включає контактування вказаної клітини зі сполукою, що має структуру ІМ, М, МІ, МІ, МІ, МІП, ІХ або хХ. о

В одному варіанті здійснення способу сполука є антагоністом вказаного А! аденозинового рецептора.

Даний винахід також відноситься до способу лікування шлунково-кишкового захворювання у суб'єкта, що включає введення терапевтично ефективної кількості сполуки, що має структуру ІМ, М, МІ, МІ, МІ, МІ, ІХ або Х. ее

В одному варіанті здійснення способу вказане захворювання являє собою діарею.

В іншому варіанті здійснення способу суб'єкт є людиною. с

В іншому варіанті здійснення способу сполука є антагоністом А; аденозинових рецепторів. сі

Даний винахід також відноситься до способу лікування захворювання дихальних шляхів у суб'єкта, що включає введення суб'єкту ефективної кількості сполуки, що має структуру ІМ, М, МІ, МІ, МІ, М, ІХ або Х. З

В одному варіанті здійснення способу вказане захворювання являє собою астму, хронічне обструктивне рч- захворювання легень, алергічний риніт або захворювання верхніх дихальних шляхів.

В іншому варіанті здійснення способу суб'єкт є людиною.

В іншому варіанті здійснення способу вказана сполука є антагоністом А аденозинових рецепторів. «

Даний винахід також відноситься до способу лікування пошкодження ока у суб'єкта, що включає введення 70 вказаному суб'єкту ефективної кількості сполуки, що має структуру ІМ, М, МІ, МІ, МІЇ, МІ, ЇХ або Х. - с В одному варіанті здійснення способу вказане пошкодження включає пошкодження сітківки або зорового ц головного нерва. "» В іншому варіанті здійснення способу вказане пошкодження є гострим або хронічним.

В іншому варіанті здійснення способу вказане пошкодження є результатом глаукоми, набряку, ішемії, гіпоксії або травми. - В іншому варіанті здійснення способу суб'єкт є людиною.

В іншому варіанті здійснення способу сполука є антагоністом А; аденозинових рецепторів. е Даний винахід також відноситься до фармацевтичної композиції, що включає терапевтично ефективну ко кількість сполуки, що має структуру ІМ, М, МІ, МІ, МІЇ, МП, ЇХ або Х, і фармацевтично прийнятний носій.

В іншому варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказана терапевтично ефективна кількість є о ефективною для лікування захворювання дихальних шляхів або шлунково-кишкового захворювання. с В іншому варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказане шлунково-кишкове захворювання являє собою діарею.

В іншому варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказане захворювання дихальних шляхів являє собою астму, алергічний риніт або хронічне обструктивне захворювання легень.

В іншому варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказана фармацевтична композиція являє собою о офтальмологічний препарат. ко В іншому варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказана фармацевтична композиція являє собою препарат для періокулярної, ретробульбарної або внутрішньоочної ін'єкції. 60 Ще в одному варіанті здійснення фармацевтичної композиції дана фармацевтична композиція являє собою системний препарат.

У додатковому варіанті здійснення фармацевтичного препарату вказана фармацевтична композиція являє собою хірургічний зрошувальний розчин.

Даний винахід також відноситься до упакованої фармацевтичної композиції для лікування захворювання, 65 пов'язаного з А 3У-аденозиновим рецептором у суб'єкта, що включає: (а) контейнер, що містить терапевтично ефективну кількість А--аденозин специфічної сполуки, і (Б) інструкції для використання вказаної сполуки для лікування вказаного захворювання у суб'єкта.

Як використано в даному описі, вираз "сполука є А- селективною" означає, що сполука має константу зв'язування з Араденозиновим рецептором принаймні в десять разів вище, ніж аналогічна константа для Аза, Агь або Аз аденозину.

Даний винахід також відноситься до способу одержання сполуки, що має структуру (ІМ), який включає стадії: а) взаємодії

Мо, Ее о

СК і дя е з одержанням

Ме те

Сх. ко ї т

Р ; де Р являє собою захисну групу, що видаляється; 5) обробки продукту стадії а) в умовах циклізації з одержанням он ге м Ї т5

А с) обробки продукту стадії Б) у відповідних умовах з одержанням а Ав

С й с

А | бі ви (8) а) обробки хлорованого продукту стадії с) МНК. з одержанням

МНА. Ав й | (ее) 5

А

М М с де Кі являє собою транс-4-гідроксициклогексил, 2-метиламінокарбоніламіноциклогексил, ацетиламіноетил с або метиламінокарбоніламіноетил; « де Кз являє собою заміщене або незаміщене чотирьох-шестичленне кільце; де Кь являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл, арил, арилалкіл, аміно, заміщений арил, де вказаний - заміщений алкіл являє собою-С(К 7)(Ка)ХК»о, де Х являє собою О, 5 або МК 40, де кожний з К; і Ка незалежно являє собою М або алкіл, де кожний з К» і Ко незалежно являє собою алкіл або циклоалкіл, або МКоК:о являє собою заміщене або незаміщене кільце, що містить від 4 до 7 членів; « де Ко являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл, циклоалкіл; або її фармацевтично прийнятної солі, пролікарського похідного або біологічно активного метаболіту; за умови, що коли Кі. являє собою - с ацетиламіноетил, Кз не є 4-піридилом. а Даний винахід також відноситься до способу одержання сполуки, що має структуру М, який включає стадії ,» а) взаємодії мо, Ре е

А, со а "У 5 -І

Ь о з одержанням іме) о й; вав іме) но т

ІЧ е) де Р являє собою захисну групу, що видаляється; 5) обробки продукту стадії а) в умовах циклізації з одержанням н те а

А е

Ф) з ву М ім о броб її ідпові с) обробки продукту стадії Б) у відповідних умовах з одержанням а бо - ре | т: і с т М ім 4) обробки хлорованого продукту стадії с) ю, з одержанням б5 о чн Ке са

А й хх

В М Ді де Кз являє собою арил, заміщений арил, гетероарил; де Ке являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл або циклоалкіл; де К 5 являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл, 70 арил, арилалкіл, аміно, заміщений арил, де вказаний заміщений алкіл являє собою-С(К 7)(Ка)МКоКіо, де кожний з К7 і Кв являє собою М або алкіл, де кожний з К » і К/о являє собою алкіл або циклоалкіл, або МК оо являє собою кільцеву систему, що містить від 4 до 7 членів.

Сполуки, представлені формулами Мі, МІ ї МІ, можуть бути синтезовані за будь-якою зі схем 1І-МІ.

Сполуки, представлені формулою ІХ і Х, можуть бути одержані за схемою ІХ.

Винахід далі проілюстрований наступними прикладами, які жодним чином не треба розглядати як додаткове обмеження. Зміст всіх посилань, що чекають рішення заявок на патенти і опублікованих заявок на патенти, процитованих в даній заявці, включаючи процитовані в розділі "Передумови створення винаходу", включений в даний опис як посилання. Потрібно розуміти, що моделі, використані у прикладах, є загальноприйнятими моделями, і демонстрування ефективності на даних моделях передбачає ефективність на людях.

Даний винахід буде краще зрозумілий з наведених далі експериментальних подробиць. Однак, фахівцеві в даній області буде без великих зусиль зрозуміло, що конкретні способи і результати, що обговорюються, є тільки ілюстрацією винаходу, як описано більш детально у формулі винаходу, яка йде далі.

Дезазапурини за винаходом можуть бути одержані стандартними способами органічного синтезу.

Дезазапурини можуть бути очищені ВЕРХ із оберненою фазою, хроматографією, перекристалізацією і т.д, іїх с структури підтверджені масспектральним аналізом, елементним аналізом, ІЧ і/або ЯМР спектроскопією. о

Звичайно синтез проміжних сполук, а також дезазапуринів за винаходом проводять у розчині. Додавання і видалення однієї або декількох захисних груп також типово для практичного здійснення і відомо фахівцям у даній області. Типові схеми синтезу для одержання проміжних продуктів дезазапуринів за винаходом представлені нижче на схемі І. (ге)

Схема Ї че, - не, е с о хх. 1 ре ува сч п, нан к в; х Ге тн М

А піридино СНОСІ, А М м Хегалоген м че о я мем, но, Х й Кк, ТРА - с лес « к я ре пис

Ме п - . и? о - а т г х ва тосі, руч - ря -І « м ІЧ юс к; " ї де Ку, Кб і Ко є такими, як визначено вище. т В цілому, захищений 2-аміно-3-ціано-пірол може бути оброблений ацилгалогенідом з утворенням карбоксамідо-3-ціанопіролу, який може бути оброблений підкисленим метанолом для здійснення замикання ко кільця в піроло|2,3-4|Іпіримідин-4--(ЗН)-он (МиПег СЕ. еї аї., дУ.Меа.Спет. 40:4396 (1997)). Видалення захисної со групи піролу з подальшою обробкою хлоруючим реагентом, наприклад, оксихлоридом фосфору, приводить до заміщених або незаміщених 4-хлор-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідинів. Обробка хлорпіримідину амінами давала 7-дезазапурини.

Наприклад, як показано на схемі І, М-(1-а1-фенілетил)-2-аміно-3-ціаношрол обробляли ацилгалогенідом у піридині і дихлорметані. Одержаний М-(1-й1-фенілетил)-2-фенілкарбоксамідо-3-ціанопірол обробляли сумішшю

ГФ) метанол/сірчана кислота у співвідношенні 10:11 для проведення замикання кільця, що приводить до 7 а1-7Н-7-(1-фенілетил)піроло|2,3-4|Іпіримідин-4(ЗН)-ону. Видалення фенілетилової групи при обробці піримідину поліфосфорною кислотою (РРА) з подальшою обробкою РОСІ;, давало ключову проміжну сполуку во 4-хлор-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин. Подальша обробка 4-хлор-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідину різними амінами, перерахованими у таблиці 1, дає сполуки формули (І) і (1). б5

Таблиця І

ША ето оз 323,2 351,27 о | !

Ї

Б 343,18 Ї 430,35 ' ї 337,21 359,4 й ре ет он тот 354,19 з 104,32 то 330,18 ря с 330,45 чу т п 347,22 Ї 339,47 т а 350728 353,41 а ев я нн 344,19 324,45

ЗД насам о о 394,16 359,38 і) ший

ТТ 3,2 373,40 й

Со Ето со | і СК сч ня 359,39 ре 387,41 Ге! їх ); СО ще ' « 403,33 ії 344,48 й вк Й че « 351,43 337,53 а тр « й. вк - с с ря 330,37 ц І 295,2 . СУ й на т 2»

Ії 4б7,23 ді 321,2 ві що -і а т» СОо- 355,28 х 337,53 а ' х то о и з 50 ка! 441,33 350,2 со ою З ! зо що 413,24 343,2 і і У ще о щу ко є 372,48 г 373,2

А бо 307,2 г мах

Загальний підхід до одержання 6б-заміщених піролів зображений на наступній схемі (Схема ІІ). б5

Схема ІІ й І у; ож М НО - - (Й в т

У он мк я то я Ж й (Й | Ф; ву Мне т з м сн н с в 15. у А т ї У У у ря Зо Ї т | Но т іх мА ин бр ра г іх « | се 2 о де К.-К» є такими, як визначено вище.

Переетерифікація і алкілування етилціаноацетату а-галогенкетоном приводять до кетометилового складного ефіру. Захист кетону з подальшою обробкою гідрохлоридом амідину (наприклад, алкіл, арил або алкіларил) приводить до кінцевого піримідину, захищеного кеталем. Видалення захисної групи з подальшою циклізацією і (ге) обробкою оксихлоридом фосфору приводить до хлорвмісної проміжної сполуки, яка далі може бути оброблена сч аміном з одержанням амін-6-заміщеного піролу. Додатково може бути здійснене алкілування азоту піролу в умовах, відомих в даній області. с

Загальний підхід до синтезу 5-заміщених піролів зображений на наступній схемі (Схема 1)

Схема Ш - е Меноисн Ша - ноти «Ж, Х ве т т "г їй не т « ка о Г-4 «З - АХ з кт г "т м в с же Я Її ! к я

ГЧ а и? ги ї д, 5-Й Се- 7 ра « р « ях х яз Х

ЧК» я и мах я іме) ух знання М юю ЖАХ пу - х

ІЧ е) й ; де К.-Ке є такими, як визначено вище, і К являє собою захисну групу, що видаляється.

Конденсація малононітрилу і надлишку кетону з подальшим бромуванням продукту приводить до суміші вихідної речовини, монобромованого і дибромованого продуктів, які були оброблені алкіламіном, ариламіном о або алкіларил аміном. Одержаний амінний продукт ацилювали хлорангідридом кислоти і моноацильований пірол циклізували в присутності кислоти з одержанням відповідного піримідину. Захисну групу піролу видаляли іме) поліфосфорною кислотою і обробляли оксихлоридом фосфору з одержанням хлорованого продукту.

Хлорований пірол згодом міг бути оброблений аміном, даючи аміно-5-заміщений пірол. Алкілування азоту піролу 60 може бути здійснене в умовах, відомих в даній області.

На схемах ІМ і М зображені способи одержання дезазапуринів 1 і 2 за винаходом. б5

«о. т а ми т й " к У

А. "р. зву ті із М" н 4 2, 70 де К» і Ке є такими, як описано вище, наприклад, СН.

Конкретне одержання б-метилпіролопіримідинів

Ключовою реакцією для одержання б-метилпіролопіримідинів (1) (К 5-СНУЗ| була циклізація ціаноацетату з бензамідином у піримідин. Передбачали, що метилціаноацетат буде циклізуватись з бензамідином у піримідин більш ефективно, ніж відповідний етиловий складний ефір. Тому, переетерифікація і алкілування етилціаноацетату в присутності МаОМе і надлишку о-галогенацетильного фрагменту, наприклад, хлорацетону, давала бажаний метиловий складний ефір (3) з виходом 7995 (схема ІМ). Складний кетоефір (3) захищали у вигляді ацеталю (4) з виходом 8195. Новий спосіб циклізації у піримідин (5) здійснювали з використанням гідрохлориду амідину, наприклад, гідрохлориду бензамідину, з використанням 2 еквівалентів ДБУ, одержуючи 5 з виходом виділеного продукту 5495. Даний спосіб дозволяє поліпшити вихід з 2095 відповідно до опублікованих умов, де під час циклізації з гуанідином використовується МаОМе. Циклізацію у пірол-піримідин (6) проводили зняттям ацетального захисту у водної НОСІ з 7895 виходом. Взаємодія (6) з оксихлоридом фосфору при кипінні із зворотним холодильником давала відповідне 4-хлорпохідне (7). Поєднання з транс-4-аміноциклогексанолом у диметилсульфоксиді при 13593 давало (1) з виходом 5795 з (7). Фахівцеві в даній області буде очевидно, що с вибір реагентів допускає велику гнучкість при виборі бажаного замісника К5.

Схема ІМ і)

С о У о т «ЖК -- ту со

Ю, в , сч од - чн - -ДШУЄУ « нс з і -

Ту

І с ри Со» - 5

І з У на т с | не . н и и І поса -І ! з. о ко Конкретне одержання 5-метилпіролопіримідинів г) 20 Конденсація Кневенагеля малонітрилу і надлишку кетону, наприклад, ацетону в киплячому бензолі приводила до 8 з виходом 5095 після перегонки. Бромування 8 М-бромсукцинімідом у присутності перекису со бензоїлу у хлороформі давало суміш вихідної речовини, моно- (9), їі дибромованого продуктів (5/90/5) після перегонки (7095). Суміш піддавали взаємодії з о-метилалкіламіном або о-метилариламіном, наприклад, о-метилбензиламіном, одержуючи амінопірол (10). Після пропущення Через коротку колонку з 22 силікагелем частково очищений амін (вихід 3195) ацилювали хлорангідридом кислоти, наприклад,

Ф! бензоїлхлоридом, одержуючи моно- (11) і діацильовані (12) піроли, які розділяли флеш-хроматографією. юю Кислотний гідроліз дизаміщеного піролу (12) давав загальний вихід у 2995 для ацилпіролу (11). Циклізація у присутності концентрованої сірчаної кислоти і ДМФ давала (13) (2395), в якому знімали захист поліфосфорною кислотою, одержуючи (14). Взаємодія (14) з оксихлоридом фосфору при кипінні із зворотним холодильником 60 давала відповідне 4-хлорпохідне (15). Поєднання з транс-4-аміноциклогексанолом у диметилсульфоксиді при 13592 давало (2) |К6-СН»| у з виходом 3095 з (14) (дивись схему М). Фахівцеві в даній області буде очевидно, що вибір реагентів допускає велику гнучкість при виборі бажаного замісника Кб. б5

Схема М о ши не. ся «о. сн би "Аг о. «С з 9 2 "ме. ох : «пенні ши н н з рин 1 о че, с. б АЮ -- - " " і т

А " 28 ; о сн он - Єд. сю- ання І ї с Ї М - д., сч су | (о) "

Альтернативний шлях синтезу Ко-заміщених піролів, наприклад, 5-метилпіролопіримідинів

Даний альтернативний шлях до К б-заміщених піролів, наприклад, 5-метилпіролопіримідинів, включає с переетерифікацію і алкілування етилціаноацетату з утворенням (16) (схема МІ). Конденсація (16) з сч гідрохлоридом бензамідину з використанням 2 еквівалентів ДБУ давала піримідин (17). Циклізацію у пірол-піримідин (14) будуть проводити шляхом зняття ацетального захисту у водної НСІ. Взаємодія (14) з Ге оксихлоридом фосфору при кипінні із зворотним холодильником давала відповідне 4-хлорпохідне (15). «

Поєднання з транс-4-аміноциклогексанолом в диметилсульфоксиді при 135923 давало (2). За даною методикою число синтетичних реакцій для цільової сполуки (2) зменшується з 9 до 4 стадій. Крім того, вихід різко - поліпшується. Знову ж, фахівцеві в даній області буде очевидно, що вибір реагентів допускає велику гнучкість при виборі бажаного замісника Кб.

Схема МІ « ( --е х - о ц і як о Осн

І» ; ме - З- 16 - не он г» ре ее се т 50 б хх ко и

ІЧ е) он сс - -- м ку у що н и х

Ф) и г я ді Загальний підхід до одержання дез-метилпіролу зображений на наступній схемі (Схема МІЇ). 60 Мо н р. дою

ХУ в м М н б5

Схема МИ

Х а хо й Ж й що . ве я т Пул е «с не ех т он н а н с свй «б ДЮ ву бен х на в; бен х на н "

Ме.А; н

НМ» бр

А М ку І х - де К.-К»з є такими, як визначено вище.

Алкілування алкілціаноацетату діетилацеталем у присутності основи давало ціанодіетилацеталь, який обробляли сіллю амідину, одержуючи попередник метилпіролопіримідину. Попередник хлорували і обробляли аміном з утворенням цільового дез-метилпіролопіримідину, як показано вище. сч

Наприклад, на схемі МІ! зображений синтез сполуки (18).

Схема МП Ге)

Х Ше У й А з -, з з. : учи с є не ме " Ше се 19 с ни сн н чІ ми; а м й Ж - р; г З птн Ч чі | м риття 20 н І на п " « - с он, . що 7 ІФ їн н - бе ілі -і зо х с» " н ю Комерційно доступний метилціаноацетат алкілували діетилацеталем бромацетальдегіду в присутності ко 20 карбонату калію і Ма), одержуючи (19). Циклізацію у піримідин (20) проводили в дві стадії. Спочатку, утворювався піримідин-ацеталь при реакції (19) з гідрохлоридом бензамідину з використанням 2 еквівалентів со ДБУ. В одержаному піримідин-ацеталі без очищення знімали захисну групу водної Тн НОСІ і одержаний альдегід циклізували у піроло-піримідин (20), який виділяли фільтруванням. Взаємодія (20) з оксихлоридом фосфору при кипінні із зворотним холодильником приводила до відповідного 4-хлорпохідного (21). Зв'язування хлорпохідного 29 з транс-4-аміноциклогексанолом в ДМСО при 1352С давало сполуку (18) із сполуки (21). (ФІ На схемах ІІ-МІЇ продемонстровано, що можна функціоналізувати 5- і б-положення піролопіримідинового юю кільця. З використанням різних вихідних реагентів і незначних модифікацій вищезгаданих реакційних схем різні функціональні групи можуть бути введені в 5- і б-положення у формулі (І) і (І). Деякі приклади проілюстровані у таблиці 2. 60 б5

Таблиця 2.

Вибраний перелік 5- і б-заміщених піролопіримідинів.

Вихідний тен 15011 ри

Гі ІН СНгС(0)осЕз ад

Ссіоукнси, сНз теза

Кваліфікованому фахівцеві відомо, що метаболізм описаних тут сполук у суб'єкта буде приводити до деяких біологічно активних метаболітів, які служать як лікарські засоби.

Винахід далі проілюстрований наступними прикладами, які жодним чином не треба розглядати як додаткове 2о обмеження. Зміст всіх посилань, що чекають рішення заявок на патенти і опублікованих заявок на патенти, процитованих в даній заявці, включаючи процитовані в розділі "Передумови створення винаходу", включений в даний опис як посилання. Потрібно розуміти, що моделі, використані у прикладах, є загальноприйнятими моделями, і демонстрування ефективності на даних моделях передбачає ефективність на людях.

Одержання 1. сч 25 Використали модифікацію способу алкілування Зееіа і І йрке". До розчину, що охолоджується льодом, (02С) етилціаноацетату (6,58г, 58,1ммоль) в Меон повільно додавали розчин МаОМе (2595 ваг./об.; 58,1ммоль). Через о хвилин повільно додавали хлорацетон (5мл; 62,8ммоль). Через 4 години розчинник видаляли. Коричневе масло розбавляли ЕЮОАс (100мл) і промивали Н 20 (100мл). Органічну фракцію сушили, фільтрували і концентрували, одержуючи коричневе масло (7,79г; 7990). Масло (3) (схема ІМ) являло собою суміш продуктів (се) 30 метилового/етилового складних ефірів (9/1) і його використали без додаткового очищення. "Н-ЯМР (200МГЦ, сч

СОСІ) 5 4,24 (кв, 9-7,2Гц, ОСН»), 3,91 (дд, 1Н, 9У-7,2, 7,0Гц, СН), 3,62 (с, ЗН, ОСН»), 3,42 (дд, 1Н, 9У-15,0, 7,1гц, їх»); 3,02 (дд, 1Н, 9У-15,0, 7,0Гц, 1хСН»); 2,44 (с, ЗН, СН), 1,26 (т, 9-7, 1Гц, складноефірний-СНва). с 1 Веєїа БЕ.; Ї арке ). Спет.Вег. 1977, 110, 1462-1469. «

Одержання 2: 35 Використали метод бЗееіа і Ійрке!". Таким чином, захист кетону (3) (схема ІМ; 5,0г, 32,2ммоль) - етиленгліколем (4мл, 64,4ммоль) в присутності ТОН (10Омг) давала 4 у вигляді масла (схема ІМ; 5,2г, 81,0) після флеш-хроматографії (5іО 2; 3/7 ЕЮдАс/гексани, К, 0,35). Продукт все ще містить 596 етилового складного ефіру: ТН-яЯМР (200МГц, СОСІ») 5 4,24 (кв, 9-7, 2Гц, ОСН»), З, 98 (с, 4Н, 2хацетальний-СН»5), 3,79 (с, ЗН, ОСН»), « 3,62 (дд, 1Н, 9-72, 7,0Гц, СН), 2,48 (дд, 1Н, 9У-15,0, 71Гц, 1хСН»), 2,32 (дд, 1Н, 9У-15,0, 7,0Гц, ї1хСН»); 1,35 (с, -в с ЗН, СН»), 1,26 (т, 9-7 1Гц, складноефірний-СНа); Мас-спектр (Еб-електророзпилення): 200,1 (М 1). й 1 Веєїа БЕ.; Ї арке ). Спет.Вег. 1977, 110, 1462-1469. и"? Одержання 3:

Розчин ацеталю (4) (схема ІМ; 1,0г, 5,02ммоль), бензамідину (78бмг, 5,02ммоль) і ДБУ (1,5мл, 10,04ммоль)

В сухому ДМФ (15мл) нагрівали при 8523 протягом 15 годин. Суміш розбавляли СНІ з (ЗОмл) і промивали 0,5н -І Ммаон (ТОмл) ї НьО (20мл). Органічну фракцію сушили, фільтрували і концентрували, одержуючи коричневе ї» масло. Була зроблена спроба флеш-хроматографії (5іО»; 1/9 ЕЮАс/СНоСІ», К; 0,35), але речовина кристалізувалась на колонці. Силікагель промивали МеонН. Фракції, що містять продукт (5) (схема ІМ), іме) концентрували і використовували без додаткового очищення (78Змг, 54,395): "Н-ЯМР (200МГц, СОСІв) 5 8,24 з 20 (м, 2Н, Аг-Н), 7,45 (м, ЗН, Аг-Н), 5,24 (ушир.с, 2Н, МН»), 3,98 (с, 4Н, 2хацетальний-СН»о), 3,60-3,15 (м, 2Н, СН»), 1,38 (с, ЗН, СНУ»); Мас-спектр (Е5): 288,1 (М'"-1). со Одержання сполуки (20) (схема МІ): Розчин ацеталю (19) (4,43г, 20,бммоль) 1, гідрохлориду бензамідину (3,22г, 20,бммоль) і ДБУ (6,15мл, 41,2ммоль) в безводному ДМФ (20мл) нагрівали при 852С протягом п'ятнадцяти годин. Суміш розбавляли СНСІ з і промивали НьО (2х50О0мл). Органічну фракцію сушили, фільтрували і 29 концентрували, одержуючи темно-коричневе масло. Темно-коричневе масло перемішували в ін НСІ (100мл) (ФІ протягом 2 годин при кімнатній температурі. Одержану суспензію фільтрували, одержуючи НОСІ сіль сполуки (20) 7 у вигляді золотисто-коричневої твердої речовини (3,б0г, 70,696); "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-йдв) 11,92 (с, 1Н), 8,05 (м, 2Н, Аг-Н), 7,45 (м, ЗН, Аг-Н), 7,05 (с, 1Н, пірол-Н); Мас-спектр (Е5): 212,1 (М"--1). во Одержання 4:

Розчин ацеталю (5) (700мг, 2,44ммоль) в їн НС (40мл) перемішували протягом 2 годин при кімнатній температурі. Одержану суспензію фільтрували, одержуючи Не сіль 2-феніл-6-метил-7Н-піроло(|2,3-4|піримідин-4(ЗН)-ону у вигляді золотисто-коричневої твердої речовини (498мг, 78,0 "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-йдв) 5 11,78 (с, 1Н), 8,05 (м, 2Н, АІ-Н), 7,45 (м, ЗН, АГ-Н), 6,17 (с, 1Н, 65 пірол-Н), 2,25 (с, ЗН, СН); Мас-спектр (Е5): 226,1 (М"1).

Одержання 5:

Використали модифікацію способу циклізації Снеп еї а)! До розчину броміду (9), що охолоджується льодом (022), (схема М; 20,0г, 1О8ммоль, 9095 чистота) в ізопропіловому спирті (бОмл) повільно додавали розчин о-метилбензиламіну (12,5мл, 97,З3ммоль). Чорний розчин залишали нагріватись до кімнатної температури | перемішували протягом 15 годин. Суміш розбавляли Е(ОАс (200мл) і промивали О,5н Маон (5Омл). Органічну фракцію сушили, фільтрували і концентрували, одержуючи чорну смолу (19,2г; 9495). Залишок частково очищали флеш-хроматографією (5105; 4/96 МеОн/СНьсСі», К; 0,35), одержуючи чорну тверду речовину (6,38г, 3195), що являє собою а1-1-(1-фенілетил)-2-аміно-3-ціано-4-метилпірол: Мас-спектр (Е5): 226,1 (М7--1). 1 Спеп У.|.; Мапзраси Б.5.; Муіпієтг 5.М.; Вгооке Е.; Соїйпв 3). Соптап М.І. ЮОципаїзків А.К.; Еагасі МУ.8.; 70 ЗаМазспип В.).; Зсптідї А.; Зспці2 ОМ. ).Мед.Спет., 1997,40, 1749-1754.

Одержання б: До розчину а1-1-(1-фенілетил)-2-аміно-3-ціано-4,5-диметилпіролу (14,9г, 62,5ммоль) і піридину (10,О0мл) в дихлорметані (50,О0мл) додавали хлористий бензоїл (9,37г, 66,/7ммоль) при 092С. Після перемішування при 02 протягом 1 години додавали гексан для полегшення кристалізації продукту. Розчинник видаляли у вакуумі і тверду речовину перекристалізовували з суміші ЕЮН/Н 20, одержуючи 13,9г (6590) то а1-1-(1-фенілетил)-2-фенілкарбоніламіно-3-ціано-4,5-диметилпіролу, т.пл. 218-2212С; "Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІВ) 5 1,72 (с, ЗН), 1,76 (д, 9У-7,3ГцЦ, ЗН), 1,98 (с, ЗН), 5,52 (кв, 9У-7,3ГЦ, 1Н), 7,14-7,54 (м, 9Н), 7,68-7,72 (дд,

Ух, АГц, 6,9Гц, 2Н), 10,73 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 344,4 (М"--1). 1 ШЦерідз Апп.Спет., 1986, 1485-1505,

Аналогічним чином одержували наступні сполуки.

Одержання бА: а1-1-(1-фенілетил)-2-(З-піридил)карбоніламіно-3-ціано-4,5-диметилпірол. "Н-ЯМР (200МГц, СОСІї) 5 1,83 (д, 9У-6,8ГЦ, ЗН), 2,02 (с, ЗН), 2,12 (с, ЗН), 5, 50 (кв, У-6,8ГЦ, 71Н), 7,14-7,42 (м, 5Н), 8,08 (м, 2Н), 8,75 (м, ЗН); Мас-спектр (Е5): 345,2 (М 1). с а1-1-(1-фенілетил)-2-(2-фурил)карбоніламіно-3-ціано-4,5-диметилпірол. "Н-ЯМР (200МГц, СОСІв) 5 1,84 (д, Го)

У-7,4ГЦ, ЗН), 1,92 (с, ЗН), 2,09 (с, ЗН), 5, 49 (кв, 9-7, 4Гц, 71Н), 6,54 (дд, 9У-1,8Гц, З,6бГц, 1Н), 7,12-7,47 (м, 7Н); Мас-спектр (Е5): 334,2 (М"--1), 2301. а1-1-(1-фенілетил)-2-(3-фурил)карбоніламіно-3-ціано-4,5-диметилпірол. "Н-ЯМР (200МГц, СОСІв) 5 1,80 (д, со зо З-7Гц, ЗН), 1,89 (с, ЗН), 2,05 (с, ЗН), 5,48 (кв, У-7ГЦ, 1Н), 6,59 (с, 1Н), 7,12-7,40 (м, 6Н), 7,93 (с, 1Н);

Мас-спектр (Е5): 334,1 (М"--1), 230,0. сч а1-1-(1-фенілетил)-2-циклопентилкарбоніламіно-3-ціано-4,5-диметилпірол. "Н-ЯМР (200МГц, СОСІ) 5 1,2 Д ФМ (д, 9У-7,4ГЦ, ЗН), 1,88 (с, ЗН), 2, 05 (с, ЗН), 1,63-1,85 (м, 8Н), 2,63 (м, 71Н), 5,43 (кв, У-7,4Гц, 1Н), 6,52 « (с, 1Н), 7,05-7,20 (м, 5Н); Мас-спектр (Е5): 336,3 (М"--1). а1-1-(1-фенілетил)-2-(2-тієніл)/карбоніламіно-3-ціано-4,5-диметилпірол. "Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІв) 5 1,82 (д, -

У-6,8Гц, ЗН), 1,96 (с, ЗН), 2,09 (с, ЗН), 5,49 (кв, У-6,8Гц, 1Н), 7,05-7,55 (м, 8Н); Мас-спектр (Е5): 350,1 (М), 246,0. а1-1-(1-фенілетил)-2-(3-тієніл)/карбоніламіно-3-ціано-4,5-диметилпірол. "Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІв) 5 1,83 (д, « 20 У-7,0ГцЦ, ЗН), 1,99 (с, ЗН), 2,12 (с, ЗН), 5,49 (кв, У-7,0Гц, 1Н), 6,90 (м, 1Н), 7,18-7,96 (м, 6Н), 7,79 (м, З с 1Н); Мас-спектр (Е5): 350,2 (М"-1), 246,1. ц а1-1-(1-фенілетил)-2-(4-фторфеніл)карбоніламіно-3-ціано-4,5-диметилпірол. "Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІв) 5 1,83 ня (д, 9-7,4Гц, ЗН), 1,96 (с, ЗН), 2,08 (с, ЗН), 5, 51 (кв, 9-7,4Гц, 1Н), 7,16-7,55 (м, 9Н); Мас-спектр (Е5): 362,2 (М'1), 258,1. а1-1-(1-фенілетил)-2-(3-фторфеніл)карбоніламіно-3-ціано-4,5-диметилпірол. "Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІв) 5 1,83 7 (д, 9У-7,4ГцЦ, ЗН), 1,97 (с, ЗН), 2,10 (с, ЗН), 5,50 (кв, 9У-7,4ГЦ, 71Н), 7,05-7,38 (м, 7Н), 7,67-7,74 (м, 2Н);

ЧК» Мас-спектр (Е5): 362,2 (М"--1), 258,1.

ГФ а1-1-(1-феніл етил)-2-(2-фторфеніл)карбоніламіно-3-ціано-4,5-диметилпірол. "Н-ЯМР (200МГц, СОСІв) 5 1,85 (д, 9У-7,2ГЦ, ЗН), 1,94 (с, ЗН), 2,11 (с, ЗН), 5,50 (кв, 9У-7,2Гц, 1Н), 7,12-7,35 (м, 6Н), 7,53 (м, 1Н), де 7,77 (м, 1Н), 8,13 (м, 1Н); Мас-спектр (Е5): 362,2 (М), 258,0.

Че) а1-1-(1-фенілетил)-2-ізопропілкарбоніламіно-3-ціано-4,5-диметилпірол. "Н-ЯМР (200МГц, СОСІв) 5 1,19 (д,

У-7,0Гц, 6Н), 1,82 (д, 9У-7,2ГцЦ, ЗН), 1,88 (с, ЗН), 2,06 (с, ЗН), 2,46 (м, 1Н), 5,39 (м, 9У-7,2Гц, 1Н), 6,64 (с, 1Н), 7,11-7,36 (м, 5Н); Мас-спектр (Е5): 310,2 (М"-1), 206,1. оо При ацилюванні а1-1-«1-фенілетил)-2-аміно-3-ціано-4-метилпіролу одержували моноацильований

Ге! а1-1-(1-фенілетил)-2-бензоїламіно-3-ціано-4-диметилпіролу і діацильований пірол а1-1-(1-фенілетил)-2-дибензоїламіно-3-ціано-4-метилпіролу. Моноацильований пірол: "Н-ЯМР (200МГц, СОСІв) 5 о 7,69 (д, 2Н, 9У-7,8Гц, Аг-Н), 7,58-7,12 (м, 8Н, Аг-Н), 6,18 (с, 1Н, пірол-М), 5,52 (кв, 1Н, 9У-7,2Гц, СН-СН»), 2,05 (с,

ЗН, пірол-СНУз), 1,85 (д, ЗН, 9У-7,2Гц, СН-СНу); Мас-спектр (Е5): 330,2 (М'-1); Діацильований пірол: "Н-ЯМР бо (200МГц, СОС) 5 7,85 (д, 2Н, 9У-7,7ГЦ, А-Н), 7,74 (д, 2Н, 9У-7,8ГЦ, Аг-Н), 7,52-7,20 (м, 9Н, Аг-Н), 7,04 (м, 2Н, АгГ-Н), 6,21 (с, 1Н, пірол-Н), 5,52 (кв, 1Н, 9-7,2Гц, СН-СН»), 1,77 (д, ЗН, 9У-7,2Гц, СН-СН»), 1,74 (с, ЗН, пірол-СНа); Мас-спектр (Е5): 434,1 (М 1).

Одержання 7: 65 До розчину а1-1-(1-фенілетил)-2-фенілкарбоксіаміно-3-ціано-4,5-диметилпіролу (1,0г, 2,р92ммоль) в метанолі (10,Омл) додавали концентровану сірчану кислоту (1О0мл) при 02С. Одержану суміш нагрівали при кипінні із зворотним холодильником протягом 15 годин і охолоджували до кімнатної температури. Осад відфільтровувати, одержуючи 0,48г (48965) а1-5,6-диметил-2-феніл-7Н-7-(1-фенілетил)піроло|2,3-ЯІпіримідин-4(ЗН)-он..- "НАЯМР (200МГц, СОС) 5 2,02 (д, 9У-7,4ГцЦ, ЗН), 2,04 (с, ЗН), 2,41 (с, ЗН), 6,25 (кв, 9У-74ГуЦ, 1Н), 7,22-7,50 (м, 55 9Н), 8,07-8,12 (дд, У-3,4Гц, 6,8Гц, 2Н), 10,51 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 344,2 (М"1). Наступні сполуки одержували способом, аналогічним описаному в одержанні 7. а1-5,6-диметил-2-(З-піридил)-7Н-7-(1-фенілетил)піроло|2,3-а4|Іпіримідин-4 (ЗН)-он. "Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІ») 5 2,03 (д, 9У-7,2Гц, ЗН), 2,08 (с, ЗН), 2,42 (с, ЗН), 6,24 (кв, 9У-7,2ГцЦ, 1Н), 7,09-7,42 (м, 5Н), 8,48 (м, 2Н), 8,70 (м, ЗН); Мас-спектр (Е5): 345,1 (М -1). то а1-5,6-диметил-2-(2-фурил)-7Н-7-(1-фенілетил)піроло|2,3-ЯІпіримідин-4(3ЗН)-он.ї "Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІВ) 5 1,98 (д, 9-7, 8ГЦ, ЗН), 1,99 (с, ЗН), 2,37 (с, ЗН), 6.12 (кв, У-7,8Гц, 1), 6,48 (дд, 9У-1,8Гц, З,6Гц, МН), 7,17-7,55 (м, 7Н), 9,6 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 334,1 (М -1). а1-5,6-диметил-2-(3-фурил)-7Н-7-(1-фенілетил)піроло|2,3-Ягримідин-4(3Н)-он. "Н-ЯМР (200МГЦц, СОС) 5 75 1,99 (д, 9У-7ГЦ, ЗН), 2,02 (с, ЗН), 2,42 (с, ЗН), 6,24 (кв, 9У-7ГЦ, 71Н), 7,09 (с, 1Н), 7,18-7,32 (м, 5Н), 7,48 (с, 1Н), 8,51 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 334,2 (М'-1). а1-5,6-диметил-2-циклопентил-7Н-7-(1-фенілетил)піроло|2,3-а4|Іпіримідин-4 (ЗН)-он. "Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІ») 5 1,95 (д, 9У-7,4ГЦц, ЗН), 2,00 (с, ЗН), 2,33 (с, ЗН), 1,68-1,88 (м, 8Н), 2,97 (м, 1Н), 6,10 (кв, У-7,4Гц, 1Н), 7,167, ЗО (м, 5Н), 9,29 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 336,3 (М 1). 20 а1-5,6-диметил-2-(2-тієніл)-7Н-7-(1-фенілетил)піроло|2,3-а|Іпіримідин-4(3Н)-он. С Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІВ) 5 2,02 (д, 9У-7,2ГцЦ, ЗН), 2,06 (с, ЗН), 2,41 (с, ЗН), 6.13 (кв, 9У-7,2ГЦ, 1), 7,12 (дд, 9-48, 2,8Гц, МН), 7,26-7,32 (м, 5Н), 7,44 (д, 9У-4,8Гц, 1Н), 8,01 (д, 9У-2,8Гц, 1Н) 11,25 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 350,2 (М 1). а1-5,6-диметил-2-(З-тієніл)-7Н-7-(1-фенілетил)піроло|2,3-а|Іпіримідин-4(3Н)-он. С Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІВ) 5 с 25 2,00 (д, 9-74АГЦ, ЗН), 2,05 (с, ЗН), 2,43 (с, ЗН), 6,24 (кв, У-7,4ГЦ, 1), 7,24-7,33 (м, 5Н), 7,33-7,39 (м, 1Н), 7,85 (м, 1Н), 8,47 (м, 1Н), 12,01 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 350,2 (М 1). о а1-5,6-диметил-2-(4-фторфеніл)-7Н-7-(1-фенілетил)піроло|2,3-4ЯІпіримідин-4(ЗН)-он.. "Н-ЯМР (200МГЦ,

СОСІЩ.) 6 2,01 (д, 9У-6,8ГЦ, ЗН), 2,05 (с, ЗН), 2,42 (с, ЗН), 6,26 (кв, У-6,8ГЦ, 1Н), 7,12-7,36 (м, 7Н), 8,23-8,30 (м, 2Н), 11,82 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 362,3 (М'"-1). со 30 а1-5,6-диметил-2-(3-фторфеніл)-7Н-7-(1-фенілетил)піроло|2,3-іпіримідин-4(ЗН)-он.. "Н-ЯМР (200МГЦ, с

СОСІ)) 6 2,02 (д, -7,4Гц, ЗН), 2,06 (с, ЗН), 2,44 (с, ЗН), 6,29 (кв, У-7,4Гц, 1Н), 7,13-7,51 (м, 7Н), сч 8,00-8,04 (м, 2Н), 11,72 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 362,2 (М"1). а1-5,6-диметил-2-(2-фторфеніл)-7Н-7-(1-фенілетил)піроло|2,3-4ЯІпіримідин-4(ЗН)-он.. "Н-ЯМР (200МГЦ, З з5 СОСІ) 6 2,00 (д, 9У-7,2Гц, ЗН), 2,05 (с, ЗН), 2,38 (с, ЗН), 6,24 (кв, 9У-7,2Гц, 1Н), 7,18-7,45 (м, 8Н), 8,21 в (м, 1), 9,54 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 362,2 (М"-1). а1-5,6-диметил-2-ізопропіл-7Н-7-(1-фенілетил)піроло|2,3-ЯІпіримідин-4(3Н)-он. "Н-ЯМР (200МГц, СОСІв) 5 1,30 (д, 9У-6,8ГЦ, ЗН), 1,32 (д, 9У-7,0Гц, ЗН), 2,01 (с, ЗН), 2,34 (с, ЗН), 2,90 (м, 1Н), 6,13 (м, 1Н), « 7,17-7,34 (м, БН), 10,16 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 310,2 (М'-1). -о 70 Одержання 8: с Розчин а1-1-(1-фенілетил)-2-бензоїламіно-3-ціано-4-метилпіролу (785мг, 2,3в8ммоль) з концентрованої НеЗзОХ :з» (Імл) в ДМФ (1Змл) перемішували при 1302С протягом 48 годин. Чорний розчин розбавляли СНСІз (100 мл) і промивали їн МасОнН (ЗОмл) і насиченим розчином солі (ЗОмл). Органічну фракцію сушили, фільтрували, концентрували і очищали флеш-хроматографією (5іО»; 8/2 ЕЮАс/гексани, К,; 0,35), одержуючи коричневу тверду -І речовину (6,38г, 3196), що являє собою а1-5-метил-2-феніл-7Н-7-(1-фенілетил)піроло|2,3-4|піримідин-4(ЗН)-он.. "Н-ЯМР (200МГц, СОСІв) 5 8,18 (м, 2Н, о АГ-Н), 7,62-7,44 (м, ЗН, Аг-Н), 7,407,18 (м, 5Н, Аг-Н), 6,48 (с, 1Н, пірол-Н), 6,28 (кв, 1Н, 9У-7,2Гц, СН-СНУ), 2,18 ко (С, ЗН, пірол-СН3у), 2,07 (д, ЗН, 9-7,2Гц, СН-СНу); Мас-спектр (Е5): 330,2 (М -1). з 50 Одержання 9:

Суміш а1-1--1-фенілетил)-2-аміно-3-ціано-4,5-диметилпіролу (9,60г, 40, О0ммоль) і мурашиної кислоти с (50,Омл, 9895) нагрівали при кипінні із зворотним холодильником протягом 5 годин. Після охолоджування до кімнатної температури і потирання бічних сторін колби утворювався рясний осад, який відфільтровували.

Речовину промивали водою доти, поки промивні води не показували нейтрального значення рН, одержуючи а1-5,6-диметил-7Н-7-(1-фенілетил)піроло|2,3-4ЯІпіримідин-4(3ЗН)-он. 'Н-ЯМР (200МГц, СОСІ) 585 1,96 (д, о У-7,4ГЦ, ЗН), 2,00 (с, ЗН), 2,38 (с, ЗН), 6,21 (кв, 9У-7, 4ГуЦ, 71Н), 7, 11-7,35 (м, 5Н), 7,81 (с, 1Н), 11,71 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 268,2 (М 1). о Одержання 10: а1-5,6-диметил-2-феніл-7Н-7-(1-фенілетил)піроло|2,3-4|Іпіримідин-4(ЗН)-он (1,0г, 2,9їммоль) суспендували у 60 поліфосфорній кислоті (30,О0мл). Суміш нагрівали при 1009 протягом 4 годин. Гарячу суспензію виливали в крижану воду, інтенсивно перемішували для диспергування суспензії і підлуговували твердим КОН до рН 6.

Одержану тверду речовину відфільтровували і виділяли, одержуючи 0,49г (6990) 5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-а4|Іпіримідин-4(3ЗН)-он. "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-йв) 5 2,17 (с, ЗН), 2,22 (с, ве ЗН), 7,45 (ушир., ЗН), 8,07 (ушир., 2Н,), 11,49 (с, 1Н), 11,82 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 344,2 (М'--1).

Наступні сполуки одержували способом, аналогічним описаному в одержанні 10:

Б-метил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин-4(ЗН)-он. Мас-спектр (Е5): 226,0 (М"1). 5,6-диметил-2-(3-піридил)-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин-4(ЗН)-он. Мас-спектр (Е5): 241,1 (М 1). 5,6-диметил-2-(2-фурил)-7Н-піроло|2,3-ЯІпіримідин-4(3ЗН)-он.ї "Н-ЯМР (200МГгЦц, ДМСО-дв) 5 2,13 (с, ЗН), 9 2,18 (с, ЗН), 6,39 (дд, У-1,8, 3,6Гц, 1Н), 6,65 (дд, У-1,8Гц, 3,бГц, 1Н), 7,85 (дд, У-1,8, 3,6Гц, 1Н,), 11,45 (с, 1Н), 11,60 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 230, 1 (М'1). 5,6-диметил-2-(3-фурил)-7Н-піроло|2,3-ЯІпіримідин-4(3ЗН)-он.ї "Н-ЯМР (200МГЦц, ДМСО-дв) 5 2,14 (с, ЗН), 2,19 (с, ЗН), 6, 66 (с, 1Н), 7,78 (с, 1Н), 8,35 (с, 1Н), 11,3 (с, 1Н), 11,4 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 230,1 (М"-1). 76 5,6-диметил-2-циклопентил-7Н-піроло|2,3-4Іпіримідин-4(ЗН)-он.. "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-дйв) 5 1,57-1,91 (м, 8Н), 2,12 (с, ЗН), 2,16 (с, ЗН), 2,99 (м, 1Н), 11,24 (с, 1Н), 11,38 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 232,2 (М '1). 5,6-диметил-2-(2-тієніл)-7Н-піроло|2,3-4)піримідин-4(3ЗН)-он. "Н-ЯМР (200МГц6, ДМСО-йв) 5 2,14 (с, ЗН), 2,19 (с, ЗН), 7,14 (дд, 9У-3,0, 5,2ГЦ, 1), 7,70 (д, 9У-5,2ГЦ, 1), 8,10 (д, 9У-3,0ГЦ, 1Н), 11,50 (с, 1Н);

Мас-спектр (Е5): 246,1 (М -1). 5,6-диметил-2-(З-тієніл)-7Н-піроло|2,3-4)піримідин-4(3ЗН)-он. "Н-ЯМР (200МГц6, ДМСО-йв) 5 2,17 (с, ЗН), 2,21 (с, ЗН), 7,66 (м, 1Н), 7,75 (м, 1Н), 8,43 (м, 1Н), 11,47 (с, 1Н), 11,69 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 246,1 (М 1). 5,6-диметил-2-(4-фторфеніл)-7Н-піроло|2,3-а|Іпіримідин-4(3Н)-он. "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-дв) 5 2,17 (с,

ЗН), 2,21 (с, ЗН), 7,31 (м, 2Н), 8,12 (м, 2Н), 11,47 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 258,2 (М"-1). 5,6-диметил-2-(3-фторфеніл)-7Н-піроло|2,3-а|Іпіримідин-4(3Н)-он. "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-дв) 5 2,18 (с,

ЗН), 2,21 (с, ЗН), 7,33 (м, 1Н), 7,52 (м, 1Н), 7,85-7,95 (м, 2Н), 11,56 (с, 1Н), 11,80 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 258,1 (Мч). 5,6-диметил-2-(2-фторфеніл)-7Н-піроло|2,3-ЯІпіримідин-4(3Н)-он. "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-йв) 5 2,18 (с,

ЗН), 2,22 (с, ЗН), 7,27-7,37 (м, 2Н), 7,53 (м 1Н), 7,68 (м, 1Н), 11,54 (с, 1Н), 11,78 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 258,1 см (МУ. о) 5,6-диметил-2-ізопропіл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин-4(ЗН)-он.. "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-дв) 5 1,17 (д, 9-6,6ГЦ, 6Н), 2,11 (с, ЗН), 2,15 (с, ЗН), 2,81 (м, 1Н), 11,20 (с, 1Н), 11,39 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 206,1 (М 1). 5,6-диметил-7Н-піроло|2,3-4ЯІпіримідин-4(3ЗН)-он.ї "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-йв) 5 2,13 (с, ЗН), 2,17 (с, З), 00 7,65 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 164,0 (М"-1). сч

Одержання 11:

Розчин 5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин-4(ЗН)-ону (1,0г, 4,2ммоль) в оксихлориді фосфору с (25,Омл) нагрівали при кипінні із зворотним холодильником протягом 6 годин, а потім концентрували у вакуумі « досуха. До залишку додавали воду для індукування кристалізації і одержану тверду речовину відфільтровували і

Зо збирали, одержуючи 0,9г (8395) 4-хлор-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-а|Іпіримідину. "Н-ЯМР (200МГЦ, т

ДМСО-йав) 5 2,33 (с, ЗН), 2,33 (с, ЗН), 7,46-7,49 (м, ЗН), 8,30-8,35 (м, 2Н), 12,20 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 258,1 (М).

Наступні сполуки одержували способом, аналогічним описаному в одержанні 11: « 4-хлор-5-метил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин. Мас-спектр (Е5): 244,0 (М'"-1). шщ с 4-хлор-6-метил-2-феніл-7Н-піроло(|2,3-4|піримідин. Мас-спектр (Е5): 244,0 (М"-1). и 4-хлор-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4Іпіримідин. "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-йв) 5 8,35 (2,2Н), 7,63 (ушир.с, 1Н), а 7,45 (м, ЗН), 6,47 (ушир.с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 230,0 (М"-1). 4-хлор-5,6-диметил-2-(З-піридил)-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин. Мас-спектр (Е5): 259,0 (М 1). - 15 4-хлор-5,6-диметил-2-(2-фурил)-7Н-піроло|2,3-а|Іпіримідин.ї "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-йдв) 5 2,35 (с, ЗН), 2,35 (с, ЗН), 6,68 (дд, 9У-1,8, З,6Гц, 71Н), 7,34 (дд, У-1,8Гц, 3,6Гц, 1), 7,89 (дд, 9У-1,8, 3,6Гц, 1Н); Мас-спектр пи (ЕБ): 248,0 (М"-1). ка 4-хлор-5,6-диметил-2-(3-фурил)-7Н-піроло|2,3-а|Іпіримідин.й "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-йв) 5 2,31 (с, ЗН), 2,31 т 50 (с, ЗН), 6,62 (с, 1Н), 7,78 (с, 1Н), 8,18 (с, 1Н), 12,02 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 248,1 (М 1). 4-хлор-5,6-диметил-2-циклопентил-7Н-піроло|2,3-4Іпіримідин. "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-йдв) 5 1,61-1,96 (м, со 8Н), 2,27 (с, ЗН), 2,27 (с, ЗН), 3,22 (м, 1Н), 11,97 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 250,1 (М" 1). 4-хлор-5,6-диметил-2-(2-тієніл)-7Н-піроло |2,3-а4|Іпіримідин. "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-йв) 5 2,29 (с, ЗН), 2,31 (с, ЗН), 7, 14 (дд, 9У-31Гц, 4,0ГЦ, 7Н), 7,33 (д, 9У-4,9ГЦ, 1), 7,82 (д, 9У-31ГЦ, 1Н), 12,19 (с, 1Н);

Мас-спектр (Е5): 264,1 (М 1).

Ф) 4-хлор-5,6-диметил-2-(З-тієніл)-7Н-піроло|2,3-4Іпіримідин. "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-йв) 5 2,32 (с, ЗН), 2,32 іме) (с, ЗН), 7,62 (дд, У-3,0, 5,2ГцЦ, 1Н), 7,75 (д, У-5,2Гц, 1Н), 8,20 (д, У-3,0Гц, 1Н); Мас-спектр (Е5): 264,0 (М 7-1). 4-хлор-5,6-диметил-2-(4-фторфеніл)-7Н-піроло|2,3-4|піримідин.ї "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-йв) 5 2,33 (с, ЗН), 60 2,33 (с, ЗН), 7,30 (м, 2Н), 8,34 (м, 2Н), 12,11 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 276,1 (М). 4-хлор-5,6-диметил-2-(3-фторфеніл)-7Н-піроло|2,3-4Іпіримідин. "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-йв) 5 2,31 (с, ЗН), 2,33 (с, ЗН), 7,29 (м, 1Н), 7,52 (м, 1Н), 7,96 (м, 1Н), 8,14 (м, 1Н), 11,57 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 276,1 (М 1). 4-хлор-5,6-диметил-2-(2-фторфеніл)-7Н-піроло|2,3-4Іпіримідин. "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-йв) 5 2,34 (с, ЗН), 65 2,34 (с, ЗН), 7,33 (м, 2Н), 7,44 (м, 1Н), 7,99 (м, 1Н), 12,23 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 276,1 (М 1). 4-хлор-5,6-диметил-2-ізопропіл-7Н-піроло|2,3-д|піримідин.ї Н-ЯМР (200мгц4, ДМСО-(15) 5 1,24 (5, 9У-6,6Гц,

ЄН), 2,28 (с, ЗН), 2,28 (с, ЗН), 3,08 (кв, 9У-6,6Гц, 1Н), 11,95 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 224,0 (М'-1). 4-хлор-5,6-диметил-7Н-піроло|2,3-ЯІпіримідин. "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-дв) 5 2,31 (с, ЗН), 2,32 (с, ЗН), 8,40 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 182,0 (М"--1). 1нН-4-хлор-5,6-диметил-2-феніл-7Н-7-(1-фенілетил)піроло|2,3-4)гримідин.

Одержання 12:

До розчину а1-діамінопропану (1,48г, 20,О0ммоль) і карбонату натрію (2,73г, 22, О0ммоль) в діоксані (100,О0мл) і воді (100,О0мл) додавали ди-трет-бутилдикарбонат (4,80г, 22,0ммоль) при кімнатній температурі.

Одержану суміш перемішували протягом 14 годин. Діоксан видаляли у вакуумі. Осад відфільтровували і 70 фільтрат концентрували у вакуумі досуха. Залишок розтирали з ЕАс і потім відфільтровувати. Фільтрат концентрували у вакуумі досуха, одержуючи суміш аїІ-1-аміно-2-( 1,1-диметилетокси)карбоніламінопропану і а1-2-аміно-1-(1,1-диметилетокси)карбоніламінопропану, які не вдалось розділити звичайними методами хроматографії. Суміш використали для реакції у прикладі 8.

Одержання 13:

До розчину ЕРтос-р-Аіа-ОН (1,0г, 3,212ммоль) і оксалілхлориду (0,428г, 0,29мл, З,37З3ммоль) у дихлорметані (20,О0мл) додавали декілька крапель М,М-диметилформаміду при 09С. Суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 1 години з подальшим додаванням циклопропілметиламіну (0,229г, 0,28мл, 3,212ммоль) і триетиламіну (0,65г, О,9Омл, 6,424ммоль). Через 10 хвилин суміш обробляли 1М гідрохлоридом (10,Омл) і водну суміш екстрагували дихлорметаном (3х30,0мл). Органічний розчин концентрували у вакуумі досуха. Залишок розтирали з 2096-ним розчином піперидину в М,М-диметилформаміді (20,О0мл) протягом 0,5 години. Після видалення розчинника у вакуумі залишок розтирали з 1М хлористим воднем (20,Омл) і етилацетатом (20,Омл).

Суміш розділяли і водний шар підлуговували твердим гідроксидом натрію до рН 8. Осад видаляли фільтруванням і водний шар піддавали іонообмінній колонковій хроматографії елююючи 2095 піридин, одержуючи 0,262г (5790) аміду М-циклопропілметил-р-аланіну. "Н-ЯМР (200МГгЦц, СО500) 5 0,22 (м, 2Н), 0,49 с (м, 2Н), 0,96 (м, 2Н), 2,40 (т, 2Н), 2,92 (т, 2Н), 3,05 (д, 2Н); Мас-спектр (Е5): 143,1 (М 7-1). (8)

Одержання 14:

М-трет-Бутоксикарбоніл-транс-1,4-циклогексилдіамін. транс-1,4-Циклогексилдіамін (6,08г, 53,2ммоль) розчиняли в дихлорметані (10Омл). Через канюлю додавали с зо Возчин ди-трет-бутил-дикарбонату (2,32г, 10,65ммоль в 40мл дихлорметану). Через 20 годин реакційну суміш розподіляли між СНСІз і водою. Шари розділяли і водний шар екстрагували СНСЇ з (Зх). Об'єднані органічні с шари сушили над Мо5О», фільтрували і концентрували, одержуючи 1,20г білої твердої речовини (5395). "Н-ЯМР Га (200МГц, СОСІ5) 5 1,0-1,3 (м, 4Н), 1,44 (с, 9Н), 1,8-2,1 (м, 4Н), 2,62 (ушир.м, 1Н), 3,40 (ушир.с, 1Н), 4,37 (ушир.с, НО); Мас-спектр (Е5): 215,2 (М"-1). З 4-(М-Ацетил)-М-трет-бутоксикарбоніл-транс-1,4-циклогексилдіамін. ї-

М-трет-Бутоксикарбоніл-транс-1,4-циклогексилдіамін (530мг, 2,47ммоль) розчиняли в дихлорметані (20мл).

Додавали краплями оцтовий ангідрид (25О0мг, 2,6б0ммоль). Через 16 годин реакційну суміш розбавляли водою і

СНеСЇз. Шари розділяли і водний шар екстрагували СНСЇІ»з (Зх). Об'єднані органічні шари сушили над Мо5О,, « фільтрували і концентрували. Перекристалізація (ЕЮН/Н 50) давала 190мг білих кристалів (3095). "Н-ЯМР (200МГц, СОС) 85 0,9-1,30 (м, 4Н), 1,43 (с, 9Н), 1,96-2,10 (м, 7Н), 3,40 (ушир.с, Ш), 3,70 (ушир.с, 1Н), ші с 4,40 (ушир.с, 1Н), 4, 40 (ушир.с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 257,2 (МТ), 242,1 (М7-15), 201,1 (М"-56). : » 4-(4--транс-Ацетамідоциклогексил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7 Н-(1-фенілетил)піроло|2,3-4|піримідин 4-(М-Ацетил)-М-трет-бутоксикарбоніл-транс-1,4-циклогексилдіамін (190мг, 0,74ммоль) розчиняли у дихлорметані (бмл) і розбавляли ТФОК (бмл). Через 16 годин реакційну суміш концентрували. Неочищену тверду речовину, е:в) (2мл), Ммансо»з (200мг, 2,2мМмМоль) і

Ше 4-хлор-5,6-диметил-2-феніл-7 Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин (Збмг, 0,14ммоль) об'єднували в колбі і нагрівали до ьч 13020. Через 4,5 години реакційну суміш охолоджували до кімнатної температури і розбавляли Е(Ас і водою. 1ТНари розділяли і водний шар екстрагували ЕТАс (3х). Об'єднані органічні шари сушили над Мо5Оо ,, фільтрували і концентрували. Хроматографія (препаративна пластина з силікагелем; 20:11, СНСІЗ:ЕЮН) давала іме) 7о О,Змг золотисто-коричневої твердої речовини (195 вихід). Мас-спектр (Е5): 378,2 (М"-1) «со 4-(М-Метансульфоніл)-М-трет-бутоксикарбоніл-транс-1,4-циклогексилдіамін транс-1,4-Циклогексилдіамін (530мг, 2,47ммоль) розчиняли в дихлорметані (2Омл) і розводили піридином (23З3мг, З,0ммоль). Додавали краплями метансульфонілхлорид (З0Омг, 2,60ммоль). Через 16 годин реакційну суміш розбавляли водою і СНСІ5. Шари розділяли і водний шар екстрагували СНСІз (Зх). Об'єднані органічні шари сушили над Ма5О,, фільтрували і концентрували. Перекристалізація (ЕЮН/Н 250) давала 206бмг білих (Ф) кристалів (2995). "Н-ЯМР (200МГц, СОСІв) 5 1,10-1,40 (м, 4Н), 1,45 (с, 9Н), 2,00-2,20 (м, 4Н), 2,98 (с, ЗН), ко 3,20-3,50 (ушир.с, 2Н), 4,37 (ушир.с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 293,1 (М"-1), 278,1 (М7-15), 237,1 (М"-56). 4-(4--ранс-Метансульфамідоциклогексил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7 Н-(1-фенілетил)піроло|2,3-4|піримідин 60 4-(М-Сульфоніл)-М-трет-бутоксикарбоніл-транс-1,4-циклогексилдіамін (206бмг, 0,71ммоль) (бмл) і розбавляли

ТФОК (бмл). Через 16 годин реакційну суміш концентрували. Неочищену реакційну суміш, ДМСО (2мл), Мансо»з (100мг, 1,їммоль) і 4-хлор-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідин (Збмг, 0,14ммоль) об'єднували в колбі і нагрівали до 1302С. Через 15 годин реакційну суміш охолоджували до кімнатної температури і розбавляли

ЕЮАс (Зх). Об'єднані органічні шари сушили над Мо95О,, фільтрували і концентрували. Хроматографія 65 (препаративна пластина з силікагелем; 20:11, СНСІЗ:ЕОН) давала 2,бмг золотисто-коричневої твердої речовини (5965 вихід). Мас-спектр (Е5): 414,2 (М"--1)

Приклад 1:

Розчин 4-хлор-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідину (0,5Ог, 1,94ммоль) і 4-транс-гідроксициклогексиламіну (2,23г, 19.4ммоль) у метил сульфоксиді (10,Омл) нагрівали при 1302С протягом 5 годин. Після охолоджування до кімнатної температури додавали воду (10,Омл) і одержаний водний розчин екстрагували ЕТАс (3х10,О0мл). Об'єднаний ЕфОАс розчин сушили (Мо950,;), фільтрували і фільтрат концентрували у вакуумі досуха, залишок хроматографували на силікагелі одержуючи 0,49г (75965) 4-(4-транс-гідроксициклогексил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-Япіримідину. Т.пл. 197-19992; "Н-ЯМР (200МГц, СОСІ) 6 1,25-1,59 (м, 8Н), 2,08 (с, ЗН), 2,29 (с, ЗН), 3,68-3,79 (м, 1Н), 4,32-4,38 (м, 1Н), 4,88 70. (д, У9-8ГцЦ, 1Н), 7,26-7,49 (м, ЗН), 8,40-8,44 (дд, У-2,2, 8Гц, 2Н), 10,60 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 337,2 (М"1).

Наступні сполуки були одержані способом, аналогічним описаному в прикладі 1: 4-(д-транс-гідроксициклогексил)аміно-6-метил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4| піримідин. "Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІ») 5 11,37 (с, 1Н, пірол-МН), 8,45 (м, 2Н, Аг-Н), 7,55 (м, ЗН, Аг-Н), 6,17 (с, 1Н, пірол-Н), 4,90 (ушир.д, 1Н,

МН), 4,18 (м, ІЕ, СН-О), 3,69 (м, 1Н, СН-М), 2,40-2,20 (м, 2Н), 2,19-1,98 (м, 2Н), 2,25 (с, ЗН, СНаз) 1,68-1,20 (м, 79 ДН); Мас-спектр (ЕБ): 323,2 (М). 4-(д-транс-гідроксициклогексил)аміно-5-метил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4| піримідин. "Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІ») 5 11,37 (с, 1Н, пірол-МН), 8,40 (м, 2Н, Аг-Н), 7,45 (м, ЗН, Аг-Н), 5,96 (с, 1Н, пірол-Н), 4,90 (ушир.д, 1Н,

ММ), 4,18 (м, 1Н, СН-О), 3,69 (м, 1Н, СН-М), 2,38-2,20 (м, 2Н), 2,18-1,98 (м, 2,00 (с, ЗН, СН») 1,68-1,20 (м, 4Н); Мас-спектр (ЕБ): 323,1 (М). 4-(4-транс-гідроксициклогексил)аміно-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідину. Т.пл. 245,5-246,59С; "Н-ЯМР (200МГц, СОС) 5 8,33 (м, 2Н, А-Н), 7,42 (м, ЗН, Аг-Н), 7,02 (д, 1Н, 9У-3,6Гуц, пірол-Н), 6,53 (д, 1Н, 4-3,6ГЦ, пірол-Н), 4,26 (м, 1Н, СН-О), 3,62 (м, 1Н, СН-М), 2,30-2,12 (м, 2Н), 2,12-1,96 (м, 2Н), 1,64-1,34 (м, 4Н); Мас-спектр М--1-309,3; Елементний аналіз (С6НоМ4О) С, Н, М. Ге! 4-(4-транс-гідроксициклогексил)аміно-5,6-диметил-2-(З-піридил)-7Н-піроло|2,3-4Іпіримідин.8 "Н-ЯМР (200МГЦ, о

СОСІя) 8 1,21-1,54 (м, 8Н); 2,28 (с, ЗН); 2,33 (с, ЗН); 3,70 (м, 1Н), 4,31 (м, 1Н), 4,89 (д, 1Н), 7,40 (м, 1Н), 8,61 (м, 2Н), 9,64 (м, 1Н); Мас-спектр (Е5): 338,2 (М 1). 4-(4-транс-гідроксициклогексил)аміно-5,6-диметил-2-(2-фурил)-7Н-піроло|2,3-4ФІпіримідин. "Н-ЯМР (200МГЦ, со

СОСІя) 85 1,26-1,64 (м, 8Н), 2,22 (с, ЗН), 2,30 (с, ЗН), 3,72 (м, 1Н), 423 (м, 1Н), 4,85 (д, 1Н), 6,52 (м, то 1Н), 7,12 (м, 1Н), 7,53 (м, 1Н), 9,28 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 327,2 (М"1). с 4-(4-транс-гідроксициклогексил)аміно-5,6-диметил-2-(3-фурил)-7Н-піроло|2,3-4ФІпіримідин. "Н-ЯМР (200МГЦ, с

СОСІя) 5 1,25-163 (м, 8 М), 2,11 (с, ЗН), 2,27 (с, ЗН), 3,71 (м, 1Н), 4,20 (м, 1Н), 4,84 (д, 1Н), 7,03 (м, 1Н), 7,45 (м, 1Н), 8,13 (м, 1Н), 10,38 (м, 1Н); Мас-спектр (Е5): 327,2 (М"--1). З 4-(4-транс-гідроксициклогексил)аміно-5,6-диметил-2-циклопентил-7Н-піроло|2,3-4Іпіримідин. "Н-ЯМР і - (200МГц, СОСІ5) 5 1,26-2,04 (м, 16 М), 2,26 (с, ЗН), 2, 27 (с, ЗН), 3,15 (м, 1Н), 3,70 (м, 1Н), 4,12 (м, 1Н), 4,75 (д, 1Н); Мас-спектр (Е5): 329,2 (М"--1). 4-(4-транс-гідроксициклогексил)аміно-5,6-диметил-2-(2-тієніл)-7Н-піроло|2,3-4Ігримідин-4-амін.. "Н-ЯМР « ю (200МГц, СОС) 5 1,28-1,59 (м, 8Н), 2,19 (с, ЗН), 2,29 (с, ЗН), 3,74 (м, 1Н), 4,19 (м, 1Н), 4,84 (д, 1Н), З с 7,09 (м, 1Н), 7,34 (м, 1Н), 7,85 (м, 1Н), 9,02 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 343,2 (М"1). . 4-(4-транс-гідроксициклогексил)аміно-5,6-диметил-2-(3-тієніл)-7Н-піроло|2,3-4Япіримідин. "Н-ЯМР (200МГЦу, и? СОСІя) 5 1,21-1,60 (м, 8Н), 1, 98 (с, ЗН), 2,23 (с, ЗН), 3,66 (м, 1Н), 4,22 (м, 1Н), 7,27 (м, 1Н), 7,86 (м, 1Н), 8,09 (м, 1Н), 11,23 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 343,2 (М 1). 4-(4-транс-гідроксициклогексил)аміно-5,6-диметил-2-(4-фторфеніл)-7Н-піроло|2,3-4Іпіримідин. "Н-ЯМР -і (200МГц, СОС) 5 1,26-1,66 (м, 8Н), 1,94 (с, ЗН), 2,28 (с, ЗН), 3,73 (м, 1Н), 4,33 (м, 1Н), 4,92 (д, 1Н), їх 7,13 (м, 2Н), 8,41 (м, 2Н), 11,14 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 355,2 (М"1). юю 4-(4-транс-гідроксициклогексил)аміно-5,6-диметил-2-(3-фторфеніл)-7Н-піроло|2,3-4Іпіримідин. "Н-ЯМР (200МГц, СОС) 5 1,26-1,71 (м, 8Н), 2,06 (с, ЗН), 2.30 (с, ЗН), 3,72 (м, 1Н), 4,30 (м, 1Н), 4,90 (д, тн), іме) 7о 7,09 (м, 1Н), 7,39 (м, 1Н), 8,05 (м, 1Н), 8,20 (м, 1Н), 10,04 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 355,2 (М 1). с 4-(4-транс-гідроксициклогексил)аміно-5,6-диметил-2-(2-фторфеніл)-7Н-піроло|2,3-4Іпіримідин. "Н-ЯМР (200МГц, СОС) 5 1,30-1,64 (м, 8Н), 2,17 (с, ЗН), 2.31 (с, ЗН), 3,73 (м, 1Н), 4,24 (м, 1Н), 4,82 (д, 1Н), 7,28 (м, 2Н), 8,18 (м, 1Н), 9,02 (м, 1Н), 12,20 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 355,3 (М'1). 4-(д-транс-гідроксициклогексил)аміно-5,6-диметил-2-ізопропіл-7Н-піроло|2,3-а|Іпіримідин. "Н-ЯМР (200МГЦ, о СОСІя) 8 1,31 (д, 9У-7,0Гц, 6Н), 1,30-1,65 (м, 8Н), 2,27 (с, ЗН), 2,28 (с, ЗН), 3,01 (м, 9У-7,0Гц, 1), 3,71 (м, 1Н), 4,14 (м, 1Н), 4,78 (д, 1Н); Мас-спектр (Е5): 303,2 (М"--1). о а1-4-(2-транс-гідроксициклогексил)аміно-5,6-диметил-2-ізопропіл-7Н-піроло|2,3-4ЯІпіримідин.. "Н-ЯМР (200МГЦ,

СОСІя) 65 1,31-1,42 (ушир., 4Н), 1,75-1,82 (ушир., 4Н), 2,02 (с, ЗН), 2,29 (с, ЗН), 3,53 (м, 1Н), 4,02 (м, 60 1Н), 5,08 (д, 1Н), 7,41-7,48 (м, ЗН), 8,30 (м, 2Н), 10,08 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 337,2 (М -1). 4-(3,4-транс-дигідроксициклогексил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7 Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин. Мас-спектр (Е5): 353,2 (М"1). 4-(3,4-цис-дигідроксициклогексил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин. Мас-спектр (Е5): 65 353,2 (М). 4-(2-ацетиламіноетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин. Т.пл. 196-199; ТН-ЯМР

(200МГц, СОС) 65 1,72 (с, ЗН), 1,97 (с, ЗН), 2,31 (с, ЗН), 3,59 (м, 2Н), 3,96 (м, 2Н), 5,63 (ушир., 1Н), 7,44-7 47 (м, ЗН), 8,36-8,43 (дд, 9-1Гц, 7Гц, 2Н), 10,76 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 324,5 (М"-1). 1н-4-(2-транс-гідроксициклопентил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-Япіримідин. 'Н-ЯМР (200МГЦ, СОСІв) 5 1,62 (м, 2Н), 1,79 (ушир., 4Н), 1,92 (с, ЗН), 2,29 (с, ЗН), 4,11 (м, 1Н), 423 (м, 1Н), 5,28 (д, 1Н), 7,41-7,49 (м, ЗН), 8,22 (м, 2Н), 10,51 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 323,2 (М"1).

Для одержання 2-транс-гідроксициклопентиламіну дивись РСТ 9417090. 1н-4-(З-транс-гідроксициклопентил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-а4|Іпіримідин. "Н-ЯМР (200МГЦ,

СОСІЗ) 5 1,58-1,90 (ушир., 6Н), 2,05 (с, ЗН), 2,29 (с, ЗН), 4,48-4,57 (м, 1Н), 4,91-5,01 (м, 2Н), 7,35-7,46 то (м, ЗН), 8,42-8, 47 (м, 2Н), 10,11 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 323,2 (М 1).

Для одержання З-транс-гідроксициклопентиламіну дивись ЕР-А-322242. а1-4-(3-цис-гідроксициклопентил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідин. "Н-ЯМР (200МГуЦ,

СОСІя) 5 1,82-2,28 (ушир, 6Н), 2,02 (с, ЗН), 2,30 (с, ЗН), 4,53-4,60 (м, 1), 4,95-5,08 (м, 1Н), 5,85-5,93 75 (д, 1Н), 7,35-7,47 (м, ЗН), 8,42-8,46 (м, 2Н), 10,05 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 323,2 (М 1).

Для одержання З-цис-гідроксициклопентиламіну дивись ЕР-А-322242. 4-(3,4-транс-дигідроксициклопентил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4)піримідин. "Н-ЯМР (200МГЦ,

СОСІя) 5 1,92-1,99 (ушир., 2Н), 2,14 (с, ЗН), 2,20 (ушир., 2Н), 2,30 (с, ЗН), 2,41-2,52 (ушир., 2Н), 4,35 (м, 2Н), 4,98 (м, 2Н), 7,38-7,47 (м, ЗН), 8,38-8,42 (м, 2Н), 9,53 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 339,2 (М 1).

Для одержання З3,4-транс-дигідроксициклопентиламіну дивись РСТ 9417090. 4-(3-аміно-3-оксопропіл)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4Іпіримідин. 'Н-ЯМР (200МГц, СОСІв) 5 2,02 (с, ЗН), 2,29 (с, ЗН), 2,71 (т, 2Н), 4,18 (м, 2Н), 5,75-5,95 (м, ЗН), 7,38-7,48 (м, ЗН), 8,37-8,41 (м, 2Н), 10,42 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 310,1 (М 7-1). сч 4-(3-М-циклопропілметиламіно-3-оксопропіл)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-ЯІпіримідин. "Н-ЯМР (200МГц, СОС) 5 0,51 (кв, 2Н), 0,40 (кв, 2Н), 1,79-1,95 (ушир., 1Н), 2,36 (с, ЗН), 2,40 (с, ЗН), 2,72 (т, (8) 2Н), 2,99 (д, 2Н), 4,04 (т, 2Н), 7,58-7,62 (м, ЗН), 8,22-8,29 (м, 2Н); Мас-спектр (Е5): 364,2 4-(2-аміно-2-оксоетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-ЯІпіримідин. "Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІв) 5 2,31 (с, ЗН), 2,38 (с, ЗН), 4,26 (с, 2Н), 7,36 (м, ЗН), 8,33 (м, 2Н); Мас-спектр (Е5): 396,1 (М --1). с 4-(2-М-метиламіно-2-оксоетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7 Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин. "Н-ЯМР (20О0МГЦц, с

СОСІ3) 6 1,99 (с, ЗН), 2,17, (с, ЗН), 2,82 (д, ЗН), 4,39 (д, 2Н), 5, 76 (т, 1Н), 6,71 (ушир., 1Н), 7,41-7,48 (м, ЗН), 8,40 (м,-4Н), 1-0,66 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 310,1 (М"-1). с 4-(З-трет-бутилоксил-3-оксопропіл)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4)піримідин. "Н-ЯМР (200МГЦц, Ж з СОСІз) 5 1,45 (с, 9Н), 1,96 (с, ЗН), 2,29 (с, ЗН), 2,71 (т, 2Н), 4,01 (кв, 2Н), 5,78 (т, 1Н), 7,41-7,48 (м, М

ЗН), 8,22-8,29 (м, 2Н); Мас-спектр (Е5): 367,2 (М'-1). 4-(2-гідроксіетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-ЯІпіримідин. "Н-ЯМР (200МГц, СОСІВ) 5 1,92 (с,

ЗН), 2,29 (с, ЗН), 3,81-3,98 (ушир., 4Н), 5, 59 (т, 71Н), 7,39-7,48 (м, ЗН), 8,37 (м, 2Н), 10,72 (с, МН); «

Мас-спектр (Е5): 283,1 (М"--1). 4-(3-гідроксипропіл)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-а|Іпіримідин. "Н-ЯМР (200МГц, СОСІв) 5 1,84 З с (м, 2Н), 1,99 (с, ЗН), 2,32 (с, ЗН), 3,62 (т, 2Н), 3,96 (м, 2Н), 3,35 (т, 1Н), 7,39-7,48 (м, ЗН), 8,36 (м, з 2Н), 10,27 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 297,2 (М'1). 4-(2-гідроксибутил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7 Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин. ТНА-ЯМР (200МГгЦц, СОС) 5 1,71-1,82 (м, 4Н), 1,99 (с, ЗН), 2,31 (с, ЗН), 3,68-3,80 (м, 4Н), 5,20 (т, 1), 7,41-7,49 (м, ЗН), 8,41 (м, -і 2Н), 10,37 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 311,2 (М'1). 4-(4-т-транс-ацетиламіноциклогексил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло |2,3-4|піримідин. те 4-(4--ранс-метилсульфоніламіноциклогексил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7 Н-піроло|2,3-4|піримідин. ко 4-(2-ацетиламіноетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7 Н-7-(1-фенілетил)піроло|2,3-4|Іпіримідин. 4-(4-транс-гідроксициклогексил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7 Н-(1-фенілетил)піроло|2,3-4|Іпіримідин. о 4-(З-піридилметил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7 Н-7-(1-фенілетил)піроло|2,3-4|Іпіримідин. со 4-(2-метилпропіл)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7 Н-7-(1-фенілетил)піроло|2,3-4|Іпіримідин.

Приклад 2:

До суспензії, що перемішується, трифенілфосфіну (0,047г, 0,17Оммоль) і бензойної кислоти (0,022г, 0О,179ммоль) в ТГгФ (1,Омл), охолодженої до 0, додавали 4-(4-транс-гідроксициклогексил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин (0,05г, 0,149ммоль) при о 02. Потім додавали краплями протягом 10 хвилин діетилазодикарбоксилат (0,028мл, 0,179ммоль). Реакційну іме) суміш залишали нагріватись до кімнатної температури. Після завершення реакції за ТШХ реакційну суміш гасили водним розчином бікарбонату натрію (3З,Омл). Водну фазу відділяли і екстрагували ефіром (2х5,Омл). Органічні 60 екстракти об'єднували, сушили і концентрували у вакуумі досуха. До залишку додавали ефір (2,Омл) і гексан (5,Омл), після чого об'ємний осад трифенілфосфіноксиду відфільтровували. Концентрування фільтрату давало в'язке масло, яке очищали колонковою хроматографією (гексан-етилацетат-4:1), одержуючи 5,0мг (7,690) 4-(4-цис-бензоїлоксициклогексил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7 Н-піроло|2,3-4|піримідину. Мас-спектр (ЕБ5): 441,3 (М). Реакція також давала 50,0мг (8496) бо 4-(3-циклогексенил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідину. Мас-спектр (Е5): 319,2 (М 1).

Приклад 3:

До розчину 4-(4-цис-бензоїлоксициклогексил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4дІгримідину (5,Омг, 0,0114ммоль) в етанолі (1,О0мл) додавали 10 крапель 2М гідроксиду натрію. Через 1 годину реакційну суміш екстрагували етилацетатом (3х5,Омл) і органічний шар сушили, фільтрували і концентрували у вакуумі досуха.

Залишок піддавали колонковій хроматографії (гексан'етилацетат-4:1), одержуючи Збмг (9495) 4-(4-цис-гідроксициклогексил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідину. Мас-спектр (ЕБ) 337,2 (М).

Наступні сполуки одержували способом, аналогічним описаному в прикладі 3: 70 4-(3-М,М-диметил-3З-оксопропіл)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7 Н-піроло|2,3-4|піримідин. ТН-ЯМР (20О0МГЦц,

СОСІЩ) 6 2,01 (с, ЗН), 2,31 (с, ЗН), 2,73 (т, 2Н), 2,97 (с, 6Н), 4,08 (м, 2Н), 6,09 (т, 1Н), 7,41-7,48 (м,

ЗН), 8,43 (м, 2Н), 10,46 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 338,2 (М" 1). 4-(2-форміламіноетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-а|Іпіримідин. "Н-ЯМР (200МГц, СОСІв) 5 2,26 (с, ЗН), 2,37 (с, ЗН), 3,59-3,78 (м, 2Н), 3,88-4,01 (м, 2Н), 5,48-5,60 (м, 71Н), 7,38-7,57 (м, ЗН), 8,09 (с, то 1Н), 8,30-8,45 (м, 2Н), 8,82 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 310,1 (М'-1). 4-(З-ацетиламінопрошл)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин. Мас-спектр (Е5): 338,2 (М"-1).

Приклад 4: 4-(3-Бутилоксі-3-оксопропіл)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідин (70,Омг, О,191ммоль) го Возчиняли в суміші трифтороцтова кислота:дихлорметан (1:1, 5,О0мл). Одержаний розчин перемішували при кімнатній температурі протягом 1 години, а потім нагрівали при кипінні із зворотним холодильником протягом 2 годин. Після охолоджування до кімнатної температури суміш концентрували у вакуумі досуха. Залишок піддавали препаративній тонкошаровій хроматографії (ЕОАс.тексан"АсОоН-7:2, 5:0,5), одержуючи 40,Омг (6895) 4-(3-гідроксі-3-оксопропіл)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-а|Іпіримідину. 'Н-ЯМР (200МГц, СО800) 5 с 25 2,32 (с, ЗН), 2,38 (с, ЗН), 2,81 (т, 2Н), 4,01 (т, 2Н), 7,55 (м, ЗН), 8,24 (м, 2Н); Мас-спектр (Е5): 311,1 (М"1). о

Наступну сполуки одержували способом, аналогічним описаному в прикладі 4: 4-(З-амінопропіл)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4Іпіримідин. Мас-спектр (Е5): 296,1 (М'-1),279, 1 (М'-МНУ).

Приклад 5: со 30 4-(3-Гідроксі-3-оксопропіл)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин (50,Омг, Обіммоль) сч розчиняли в суміші М,М-диметилформаміду (0,5Омл), діоксану (0,5Омл) і води (0,25мл). До цього розчину додавали метиламін (0,02мл, 4090 ваг. у воді, 0,242ммоль), триетиламін (0,085мл) і тетрафторборат с

М,М,М',М'-тетраметилуронію (61,2мг, 0,20З3ммоль). Після перемішування при кімнатній температурі протягом 10 « хвилин розчин концентрували і залишок піддавали препаративній тоншаровій хроматографії (ЕЮЮАс), одержуючи

Зо 35,Омг (6796). 4-(3-М-метил-3-оксопропіл)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-ЯІпіримідину. "Н-ЯМР (200МГЦ, -

СО5О0) 5 1,92 (с, ЗН), 2,30 (с, ЗН), 2,65 (т, 2Н), 4,08 (т, 2Н), 5,90 (т, 1Н), 6,12 (м, 7Н), 7,45 (м, ЗН), 8,41 (м, 2Н), 10,68 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 311,1 (М'1).

Наступні сполуки одержували способом, аналогічним описаному в прикладі 5: « 4-(2-циклопропанкарбоніламіноетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-дпіримідин. Мас-спектр (Е5Б)И - с 350,2 (М"1). й 4-(2-ізобутириламіноетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідин. Мас-спектр (Е5Б): 3522 "» (М'). 4-(З-пропіоніламінопропіл)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-Япіримідин. "Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІв) 5 1,00-1,08 (т, ЗН), 1,71-2,03 (м, 4Н), 2,08 (с, ЗН), 2,37 (с, ЗН), 3,26-340 (м, 2Н), 3,79-3,96 (м, 2Н), - 5,53-5,62 (м, 1Н), 6,17-6,33 (м, 1Н), 7,33-7,57 (м, ЗН), 8,31-8,39 (м, 2Н), 9,69 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 352,2 (М'1). ї» 4-(-2-метилсульфоніламіноетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин. ТН-ЯМР (20О0МГЦц,

СОС) 5 218 (с, ЗН), 2,27 (с, ЗН), 2,92 (с, ЗН), 3,39-3,53 (м, 2Н), 3З,71-3,88 (м, 2Н), 5,31-5,39 (м, 1Н), з 6,17-6,33 (м, 1Н), 7,36-7,43 (м, ЗН), 8,20-8,25 (м, 2Н), 9,52 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 360,2 (М 1). ко 50 Приклад 6: со Суміш /4-хлор-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло(2,3-4|піримідину (0,70г, 2,72ммоль) і 1,2-діаміноетану (10,Омл, 150ммоль) нагрівали при кипінні із зворотним холодильником в інертній атмосфері протягом 6 годин.

Надлишок аміну видаляли у вакуумі, залишок промивали послідовно ефіром і гексаном, одержуючи 0,75г (98905) 4-(2-аміноетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідину. Мас-спектр (Е5): 265,1 (М'"-МН»).

Приклад 7: (Ф) До розчину 4-(2-аміноетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідину (70О,Омг, 0,249ммоль) і ко триетиламіну (50,4мг, 0,498ммоль) в дихлорметані (2,0мл) додавали пропіонілхлорид (25,бмг, 0,024мл, 0,274ммоль) при 02С. Через 1 годину суміш концентрували у вакуумі і залишок піддавали препаративній во тонкошаровій хроматографії (ЕЮоАсС), одержуючи 2,0мг (2690) 4-(2-пропіоніламіноетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідину. Мас-спектр (Е5): 338,2 (М'"--1).

Наступні сполуки одержували способом, аналогічним описаному в прикладі 7: 4-(2-М'-метилуреаетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4)піримідин. 'Н-ЯМР (200МГц, СОСІв) 5 2,13 (с, ЗН), 2,32 (с, ЗН), 3,53 (д, ЗН), 3,55 (м, 2Н), 3,88 (м, 2Н), 4,29 (м, 1Н), 5,68 (т, 1Н), 5,84 (м, бо 1Н), 7,42 (м, ЗН), 8,36 (дд, 2Н), 9,52 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 339,3 (М'1).

4-(2-М'-етилуреаетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4Іпіримідин. Мас-спектр (Е5): 353,2 (М'1).

Приклад 8:

До розчину гідрохлориду 1-"3-диметиламінопропіл)-3З-етилкарбодіїміду (41.1мг, 0,215ммоль), диметиламінопіридину (2,4мг, 0,02О0ммоль) і піровиноградної кислоти (18,9мг, 0,015мл, 0,215ммоль) в дихлорметані (2,0мл) додавали 4-(2-аміноетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-(|піримідин (55,Омг, 0,196бммоль). Суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 4 годин. Звичайна обробка і колонкова хроматографія (ЕЮ:оАсС) потім давали 10,О0мг (1596) 4-(2'і-пірувіламідоетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідину. Мас-спектр (Е5): 352,2 (М"--1).

Приклад 9:

До розчину 4-(2-аміноетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідину (6б0О,Омг, 0,213ммоль) в дихлорметані (2,О0мл) додавали М-триметилсилілізоціанат (43,3мг, 0,051мл, 0,320ммоль). Суміш перемішували при кімнатній температурі протягом З годин з подальшим додаванням водного розчину бікарбонату натрію. Після фільтрування через невелику кількість силікагелю фільтрат концентрували у вакуумі досуха, одержуючи 9,8мг 75. (1495) 4-(2-уреаетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідину. Мас-спектр (Е5): 325,2 (М"-1).

Наступні сполуки одержували способом, аналогічним описаному в прикладі 9: а1-4-(2-ацетиламінопропіл)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4)піримідин. 'Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІв) 5 1,28-1,32 (д, 9У-8Гц, ЗН), 1,66 (с, ЗН), 1,96 (с, ЗН), 2,30 (с, ЗН) 3,76-3,83 (м, 2Н), 4,10-4,30 (м, 1Н), 5,60-5,66 (т, У-6Гц, 1Н), 7,40-7,51 (м, ЗН), 8,36-8,43 (м, 2Н), 10,83 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 338,2 (М"--1). 720 (2к)-4-(2-ацетиламінопропіл)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-а|Іпіримідин. "Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІв) 5 1,31 (д, ЗН), 1,66 (с, ЗН) 1,99 (с, ЗН), 2,31 (с, ЗН), 3,78-3,83 (м, 2Н), 4,17-4,22 (м, 1Н), 5,67 (т, МН), 7,38-7,5 (м, ЗН), 8,39 (м, 2Н), 10,81 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 338,2 (М -1). (2)-4-(1-метил-2-ацетиламіноетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-Япіримідин. "Н-ЯМР (200МГуЦ, Га

СОСІз) 5 1,41 (д, ЗН), 1,68 (с, ЗН), 2,21 (с, ЗН), 2,34 (с, ЗН), 3,46-3,52 (ушир, м, 2Н), 4,73 (м, 1Н), 5,22 о (д, 1Н), 7,41-7,46 (м, ЗН), 8,36-8,40 (м, 2Н), 8,93 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 338,2 (М -1). (8)-4-(2-ацетиламінопропіл)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4Іпіримідин.й "Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІВ5) 5 1,31 (д, ЗН), 1,66 (с, ЗН) 2,26 (с, ЗН), 2,35 (с, ЗН), 3,78-3,83 (м, 2Н), 4,17-4,22 (м, 1Н), 5,67 (т, МН), 7,38-7,5 (м, ЗН), 8,39 (м, 2Н), 8,67 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 338,2 (М -1). 09 (8)-4-(1-метил-2-ацетиламіноетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-Япіримідин. 'Н-ЯМР (200МГгЦц, СМ

СОСІз) 5 1,41 (д, ЗН), 1,68 (с, ЗН), 2,05 (с, ЗН), 2,32 (с, ЗН), 3,46-3,52 (м, 2Н), 4,73 (м, 1Н), 5,22 (д, сч 1Н), 7,41-7,46 (м, ЗН), 8,36-8, 40 (м, 2Н), 10,13 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 338,2 (М 1).

Приклад 10: «

Взаємодію 4-хлор-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідину з сумішшю ї- а1-1-аміно-2-(1,1-диметилетокси)карбоніламінопропану і а1-2-аміно-1-(1,1-диметилетокси)карбоніламінопропану проводили способом, аналогічним описаному в прикладі 1. Реакція давала суміш а1-4-(1-метил-2-(1,1-диметилетокси)карбоніламіно)етиламіно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідину і а1-4-(-2-метил-2-(1,1-диметилетокси)карбоніламіно)етиламіно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідину, « які розділяли колонковою хроматографією (ЕЮАс.тексани-1:3). Перша фракція являла собою з с а1-4-(1-метил-2-(1,1-диметилетокси)карбоніламіноетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-а|Іпіримідин.

Й Н-ЯМР (200МГц, СОС) 5 1,29-1,38 (м, 12Н), 1,95 (с, ЗН), 2,31 (с, ЗН) 3,34-343 (м, 2Н), 4,62-4,70 (м, "» 1Н), 5,36-540 (д, 9У-8ГЦ, 1Н), 5,53 (ушир., 7Н), 7,37-7, 49 (м, ЗН), 8,37-8,44 (м, 2Н), 10,75 (с, 1Н).

Мас-спектр (Е5): 396,3 (М). Друга фракція являла собою 45. а1-4-(2-(1,1-диметилетокси)карбоніламінопропіл)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-троло|2,3-4)піримідин.. "Н-ЯМР -і (200МГц, СОС) 5 1,26-140 (м, 12Н), 2,00 (с, ЗН), 2,31 (с, ЗН) 3,60-3,90 (м, 2Н), 3,95-4,10 (м, 1), їз 5,41-5,44 (д, 2-6,0ГЦ, 1Н), 5,65 (ушир., 1Н), 7,40-7,46 (м, ЗН), 8,37-8,44 (м, 2Н), 10,89 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 396,2 (М 1). о Наступні сполуки одержували способом, аналогічним описаному в прикладі 10: ко 50 (5,8)-4-(2-ацетиламіноциклогексил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4піримідин. 'Н-ЯМР (200МГЦ,

СОСІз) 5 1,43 (м, 4Н), 1,60 (с, ЗН), 1,83 (м, 2Н), 2,18 (с, ЗН), 2,30 (м, 2Н), 2,32 (с, ЗН), 3,73 (ушир., со 1Н), 4,25 (ушир., 1Н), 5,29 (д, 1Н), 7,43-7,48 (м, ЗН), 8,35-8,40 (м, 2Н), 9,05 (с, 1Н). 4-(2-метил-2-ацетиламінопропіл)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідин. "НА-ЯМР (200МГу, 5 СОСІя) 5 1,51 (с, 6Н), 1,56 (с, ЗН), 2,07 (с, ЗН), 2,36 (с, ЗН), 3,76 (д, 2Н), 5,78 (т, 1Н), 7,41-7,48 (м,

ЗН), 7,93 (с, 1Н), 8,39 (м, 2Н), 10,07 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 352,3 (М --1).

Ф) Приклад 11: ко а1-4--1-Метил-2-(1,1-диметилетокси)карбоніламіноетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7 Н-піроло|2,3-4|піримідин (60,бмг, О0,153ммоль) обробляли трифтороцтовою кислотою (0.5мл) у дихлорметані (2,Омл) протягом 14 годин. бо Органічний розчинник видаляли у вакуумі досуха. Залишок розчиняли в М,М-диметилформаміді (2,Омл) і триетиламіні (2,0мл). До розчину при 09 додавали оцтовий ангідрид (17,2мг, 0,169ммоль). Одержану суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 48 годин, а потім концентрували у вакуумі досуха. Залишок піддавали препаративній тонкошаровій хроматографії (ЕЮоАсС), одержуючи 27,Омг (5290) а1-4--1-метил-2-ацетиламіноетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідин. ТН-ЯМР (20О0МГЦц, б5 СОСІ.) 6 1,38-1,42 (д, У-8Гц, ЗН), 1,69 (с, ЗН), 2,01 (с, ЗН), 2,32 (с, ЗН) 3,38-3,60 (м, 2Н), 4,65-4,80 (м, 1Н), 5,23-5,26 (д, У-6Гц, 1Н), 7,40-7,51 (м, ЗН), 8,37-8,43 (м, 2Н), 10,44 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 338,2 (М"1).

Приклад 12: (К,Кк)-4-(2-Аміноциклогексил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7 Н-піроло|2,3-Я|піримідин, одержаний способом, аналогічним описаному в прикладі 1, з 4-хлор-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-Я|піримідину (0,15г, 0,58Зммоль) і (1К,2К)-(-)-1,2-діаміноциклогексану (0,63г, 5,517ммоль), обробляли триетиламіном (0,726Гг, 7,175ммоль) і оцтовим ангідридом (0,325г, 3,18ммоль) в М,М-диметилформаміді (10,0мл) при кімнатній температурі протягом 2 годин. Після видалення розчинника у вакуумі до залишку додавали етилацетат (10,Омл) і воду (10,0мл). Суміш розділяли і водний шар екстрагували етилацетатом (2хХ10,Омл). Об'єднаний розчин в етилацетаті сушили (Мао5О)) і фільтрували. Фільтрат концентрували у вакуумі досуха і залишок піддавали 70 колонковій хроматографії (ЕЮАс:гексан-1:1), одержуючи 57,0мг (2690) (К,К)-4-(2-ацетиламіноциклогексил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин. ТНА-ЯМР /(200МГЦ,

СОСІз) 5 1,43 (м, 4Н), 1,60 (с, ЗН), 1,84 (м, 2Н), 2,22 (с, ЗН), 2,30 (м, 2Н), 2,33 (с, ЗН), 3,72 (ушир., 1Н), 4,24 (ушир., 1Н), 5,29 (д, 1Н), 7,43-7,48 (м, ЗН), 8,35-8,39 (м, 2Н), 8,83 (с, 1 Н); Мас-спектр (Е5): 378,3 (М'"-1).

Приклад 13:

До розчину 4-(2-гідроксіетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло(2,3-4|Іпіримідину (40,Омг, 0,141ммоль) в піридині (1,0мл) додавали оцтовий ангідрид (0,108г, 1,0бммоль) при 09. Суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 4 годин і розчинник видаляли у вакуумі. Залишок піддавали препаративній тонкошаровій хроматографії (ЕЮАс:гексан-1:1), одержуючи 32,3Мг (71960) 4-(2-ацетилоксіетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-а|Іпіримідину. "Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІв) 5 1, 90 (с, ЗН), 2,08 (с, ЗН), 2,31 (с, ЗН), 4,05 (м, 2Н), 4,45 (т, 2Н), 5,42 (м, 1Н), 7,41-7,49 (м, ЗН), 8,42 (м, 2Н), 11,23 (с, 1Н).

Приклад 14:

Розчин ЕГтос-р-Аіа-ОН (97,4мг, 0,31Зммоль) і оксалілхлориду (39,7мг, 27,3мкл, 0,31Зммоль) у дихлорметані (4,сОмл) з однією краплею М, М-диметилформаміду перемішували при 09С протягом 1 години з подальшим додаванням 4-(2-аміноетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідину (80,Омг, 0,285ммоль) і сч триетиламіну (57,6мг, 79,4мкл, 0,570ммоль) при 02С. Через З години суміш концентрували у вакуумі і залишок. (3 розтирали з 2096-ним розчином піперидину в М,М-диметилформаміді (2,0мл) протягом 0,5 години. Після видалення розчинника у вакуумі залишок промивали сумішшю діетиловий ефіртексан (1:5), одержуючи З,0мг 9396) 4-(6-аміно-3-аза-4-оксогексил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідину. Мас-спектр (Е5): со зо 3532 (М).

Приклад 15: с

Розчин /4-(2-аміноетил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідину (70,О0мг, 0,249ммоль) |«КЕ сч янтарного ангідриду (27,0мг, 0.274ммоль) у дихлорметані (4,0мл) з 1 краплею М,М-диметилформаміду перемішували при кімнатній температурі протягом 4 годин. Реакційну суміш екстрагували 2095-ним гідроксидом « натрію (3х5,О0мл). Водний розчин підкисляли ЗМ хлористим воднем до рН 7,0. Суміш цілком екстрагували їм- етилацетатом (З3х1Омл). Об'єднані органічний розчин сушили (Ма5О),) і фільтрували. Фільтрат концентрували у вакуумі досуха, одержуючи 15,0мг (16965) 4-(7-гідроксі-3-аза-4,7-діоксогептил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідину. Мас-спектр (Е5): 382,2 (М"1). «

Приклад 16: шщ с До 10мл диметилформаміду (ДМФ) при кімнатній температурі додавали 7О0мг й 4-(цис-3-гідроксициклопентил)аміно-2-феніл-5,6-диметил-7Н-піроло|2,3-4|піримідину з подальшим додаванням «» 455мг М-Вос гліцину, 20мг М,М-диметиламінопіридину (ОМАР), 29Змг гідроксибензотриазолу (НОВТ) і 622мМГг гідрохлориду 1-(З-диметиламінопропіл)-З-етилкарбодііміду (ЕОСТ1). Реакційну суміш залишали перемішуватись протягом ночі. ДМФ потім видаляли при зниженому тиску і реакційну суміш розподіляли між 20мл етилацетату і -і Б5Омл води. Водну частину екстрагували додатково 2х20мл етилацетату і об'єднані органічні частини промивали насиченим розчином солі, сушили над безводним сульфатом натрію, фільтрували і концентрували. Очищення на ть силікагелі, при елююванні сумішшю етилацетат/гексан давало А10мг цільового продукту: ка 4-(цис-3-(М-трет-бутоксикарбоніл-2-аміноацетокси)циклопентил)аміно-2-феніл-5,6-диметил-7 Н-піроло|2,3-4|пірим ідину. Мас-спектр (ЕБ): (М'"--1)-480,2. Складний ефір потім обробляли Бмл 2095-ної трифтороцтової кислоти у о дихлорметані при кімнатній температурі, залишали на ніч і потім концентрували. Розтирання з етилацетатом

ІЧ е) давало ЗООмг не зовсім білої твердої речовини; солі трифтороцтової кислоти 4-(цис-3-(2-аміноацетокси)циклопентил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідину. Мас-спектр (Е5): (М'1)-380,1.

Фахівцеві в даній області буде зрозуміло, що наступні сполуки можуть бути синтезовані за допомогою о описаних вище способів: 4-(цис-3-гідроксициклопентил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідин. Мас-спектр (Е5): о (М'-1)-32311. сіль трифтороцтової кислоти 60 0 А-(цис-3-(2-аміноацетокси)циклопентил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло(|(2,3-4|Іпіримідину. Мас-спектр (Е5): (МТ) -380,1. 4-(3-ацетамідо)піперидиніл-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідин. Мас-спектр (Е5): (М -1)-364,2. 4-(2-М-метилуреапропіл)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-троло|2,3-4|Іпіримідин. Мас-спектр (Е5): (М"-1)-353,4. 65 4-(2-ацетамідобутил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло(|2,3-4|піримідин. Мас-спектр (Е5): (М'"--1)-352 4. 4-(2-М-метилуреабутил)аміно-5,6-диметил-2-феніл-7Н-піроло(2,3-4|піримідин. Мас-спектр (Е5): (М"--1)-367,5.

4-(2-аміноциклопропілацетамідоетил)аміно-2-феніл-7 Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин. Мас-спектр (ЕБ5): (М'1)-309,1. 4-(транс-4-гідроксициклогексил)аміно-2-(3-хлорфеніл)-7 Н-піроло|2,3-4|піримідин. Мас-спектр (Е5): (М'1)-342,8. 4-(транс-4-гідроксициклогексил)аміно-2-(3-фторфеніл)-7Н-піроло|2,3-4|піримідин. Мас-спектр (ЕБ5): (М'Н1)-327,2. 4-(транс-4-гідроксициклогексил)аміно-2-(4-піридил)-7Н-піроло|2,3-4|піримідин. Мас-спектр (Е5): (М"-1)-310,2.

Приклад 17 710 Схема ІХ

КА АЙ - ЛИ с х Су я Су оно ' й -й

ЖК п ру -ш -їУ

Я ом

Азот піролу (7) (схема ІХ) захищали ди-трет-бутилдикарбонатом в лужному середовищі, одержуючи відповідний карбамат (22). Радикальне бромування (22) проходило регіоселективно, даючи бромід (23).

Звичайно, сполука (23) служить ключовою електрофільною проміжною сполукою для різних нуклеофільних партнерів у реакціях поєднання. Заміщення алкілброміду тригідратом феноляту натрію давало сполуку (24).

Подальше заміщення арилхлориду і видалення трет-бутилкарбаматної захисної групи відбувалось в одну стадію, даючи цільову сполуку (25). с

Докладний синтез сполук (22)-(25) відповідно до схеми ІХ. г) а

Сб

Бе М (ее) ц ра с в КУ

Т с

Ди-трет-бутилдикарбонат (5,37г, 24,б6ммоль) і диметиламінопіридин (1,13г, 9,2ммоль) додавали до розчину, що містить (7) (1,50г, 6,15ммоль) і піридин (ЗОмл). Через 20 годин реакційну суміш концентрували і залишок « розподіляли між СН 2Сі» і водою. Нар, що містить СНоСіІ», відділлли, сушили над МозоО /, фільтрували і ї- концентрували, одержуючи чорну тверду речовину. Флеш-хроматографія (5 25/1/9Е(ОАс/гексани, К, 0,40) давала 1,7Ог (8095) білої твердої речовини. ТН-ЯМР (200МГц, СОСІ»5) 5 8,50 (м, 2Н, Аг-Н), 7,45 (м, ЗН, Аг-Н), 6,39 (с, 1Н, пірол-Н), 2,66 (с, ЗН, пірол-СН»), 1,76 (с, 9Н, карбамат-СНз); Мас-спектр, М-1-344,1; Т.пл.-175-177960. « бр" ші с су ще х» ОЙ

М-бромсукцинімід (508мг, 2,8бммоль) і АЇІВМ (азобісізобутиронітрил) (112мг, 0О,б8ммоль) додавали до розчину, що містить (22) (935мг, 2,71їммоль) і ССіІ. (5бмл). Розчин нагрівали при кипінні із зворотним -і холодильником. Через 2 години реакційну суміш охолоджували до кімнатної температури і концентрували у вакуумі, одержуючи білу тверду речовину. Флеш-хроматографія (5іО»; 1/1 СНоСіо/гексани, К, 0,30) давала 9бОмг т (8496) білої твердої речовини (23). "Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІ») 5 8,52 (м, 2Н, Аг-Н), 7,48 (м, ЗН, Аг-Н), 6,76 (с, ко 1Н, пірол-Н), 4,93 (с, 2Н, пірол-СН2оВГ), 1,79 (с, 9Н, карбамат-СН); Мас-спектр, Мі-1-423,9; т.пл.-155-15726. з 50 а со бо--О ве пі сл, ти

ГФ) Тригідрат феноксиду натрію (17Змг, 1,02ммоль) додавали в один прийом до розчину броміду (23) (41Омг, з 0,97ммоль), розчиненого у СНоСІ» (5мл) і ДМФ (1Омл). Через 2 години реакційний розчин розподіляли між СНьСі» і водою. Водний шар екстрагували СНоСі». Об'єднані СНоСІ» шари промивали водою, сушили над Мазо,, во фільтрували і концентрували, одержуючи жовту тверду речовину. Флеш-хроматографія (ЗО 5; 1/6

ЕЮАс/гексани, К0,30) давала 210мг (5095) білої твердої речовини (24). "Н-ЯМР (200МГц, СОСІ5) 5 8,53 (м, 2Н,

АГ-Н), 7,48 (м, ЗН, Аг-Н), 7,34 (м, 2Н, Аг-Н), 7,03 (м, ЗН, Аг-Н), 6,83 (с, 1Н, пірол-Н), 5, 45 (с, 2Н, АгСНоС), 1,76 (с, 9УН, карбамат-СН); Мас-спектр, М'-436,2. б5

У доло

Розчин, що містить (24) (85мг, 0,20ммоль), М-ацетилетилендіамін (201мг, 1,95ммоль) і ДМСО (Змл) нагрівали то при 10020. Через 1 годину температуру підіймали до 1302. Через З години реакційну суміш охолоджували до кімнатної температури і розподіляли між ЕЮдАс і водою. Водний шар екстрагували Е(Ас (2х). Об'єднані ЕЮАс шари промивали водою, сушили над Ма5О,), фільтрували і концентрували. Флеш-хроматографія (50 5; 1/10

ЕЮН/СНСЇІ», Ех 0,25) давала 7Змг (9396) білої піноподібної твердої речовини (25). "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-ав) 5 11,81 (ушир.с, 1Н, М-Н), 8,39 (м, 2Н, Аг-Н), 8,03 (ушир, т, 1Н, М-Н), 7,57 (ушир, т, 1Н, М-Н), 7,20-7,50 (м, 5Н, Аг-Н), 6,89-7,09 (м, ЗН, Аг-Н), 6,59 (с, 1Н, пірол-Н), 5,12 (с, 2Н, АКСН».О), 3,61 (м, 2Н, МСН), 3,36 (м, 2Н,

МСН), 1,79 (с, ЗН, СОСН»); Мас-спектр, М-1- 402,6

Наступні сполуки одержували способом, аналогічним описаному в прикладі 17. 4-(2-ацетиламіноетил)аміно-б6-феноксиметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4Я|Іпіримідин. Т.пл. 196-19720. Мас-спектр (ЕБ): 401,6 (М"-1). 4-(2-ацетиламіноетил)аміно-6-"4-фторфенокси)метил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідин. Мас-спектр (Е5): 420,1 (М"1). 4-(2-ацетиламіноетил)аміно-6-«4-хлорфенокси)метил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин. Мас-спектр (Е5): 436,1 (М'1). с 4-(2-ацетиламіноетил)аміно-6-(4-метоксифенокси)метил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідин. Мас-спектр (Е5): о 432,1 (М'1). 4-(2-ацетиламіноетил)аміно-6-(М-піридин-2-он)метил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин. Мас-спектр (Е5): 403,1 (М'н1). 4-(2-ацетиламіноетил)аміно-6-«"М-феніламіно)метил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідин. Мас-спектр (Е5): со

Зо 400,9 (М н1). с 4-(2-ацетиламіноетил)аміно-6-«"М-метил-М-феніламіно)метил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин. Мас-спектр сч (Е5Б): 414,9 (М"-1). 4-(2-М'-метилуреаетил)аміно-б6-феноксиметил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин. Мас-спектр (Е5): 416,9 З зв (М). їм

Приклад 18: Синтез антагоністів А; аденозину

Сполука 1319 і сполука 1320 (таблиця 13 нижче) можуть бути синтезовані з використанням описаних тут загальних способів. « ноу, в С 7 х го -- бо - щі » Сполука 26 Х-Е Сполука 1319

Сполука 27 Х-СІ Сполука 1320

Сполука 1319 (8196). "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-йв) 5 1,37 (м, 4Н), 1,93 (м, 2Н), 2,01 (м, 2Н), 4,11 (ушир.с,

Ше 1), 4,61 (д, ЯН, 9-4,4ГЦ), 6,59 (м, 71Н), 7,09 (м, 1), 7,21 (м, 2Н), 7,49 (дд, ІН, 1-8Гц, 14Гц), 8,03 (м, т» 1Н), 8,18 (д, 1Н, У-8Гцу), 11,55 (ушир.с, 1Н). Мас-спектр (Е5): 327,0 (М"--1). 7 Сполука 1320 (3196). Мас-спектр (Е5): 343,1 (М 1).

Приклад 19: Синтез антагоніста А; аденозину іме) 50 Сполука 1321 (таблиця 13, нижче) може бути синтезована з використанням наведених далі загальних способів. со А ск Он е пт, ту ДАХ ВИ ко ля ГОВІ н "а » з 0 о Спонука 132)

Сполуку 28 (10,93г, 50,/бммоль) розчиняли в ДМФ (б/7мл). Послідовно додавали гідрохлорид о 4-амідинопіридину (8,0г, 50,7бммоль) і ДБУ (15,4г, 101,5ммоль) і реакційну суміш нагрівали до 859. Через 22 години реакційну суміш охолоджували до кімнатної температури і ДМФ видаляли у вакуумі. Темне масло 60 розбавляли 2М НОСІЇ (8Омл). Реакційну суміш залишали. Через 2 години розчин охолоджували до 10 2сС і фільтрували. Тверду речовину промивали холодною водою і сушили, одержуючи 7,40г жовтої твердої речовини.

Сполука 29 (6995). "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-йв) 5 6,58 (с, 1Н), 7,27 (с, 1Н), 8,53 (д, 2Н, 9-5,6), 9,00 (д, 2Н, 95,2Гц), 12,35 (ушир.с, 1Н). Мас-спектр (Е5): 212,8 (М"--1). 65 Сполуку 29 (7, 4ммоль, 29,вммоль) розбавляли РОСІ» і нагрівали до 1052С. Через 18 годин реакційну суміш охолоджували до кімнатної температури і РОСІз видаляли у вакуумі. Густе темне масло розбавляли Меон

(/5мл) з подальшим додаванням ефіру (120мл). Аморфну червону тверду речовину відфільтровували і промивали ефіром, одержуючи 3,82г червоної твердої речовини. Неочищена тверда речовина має приблизно 809р5-ну чистоту і її використовують без додаткового очищення у наступній реакції. Мас-спектр (Е5): 230,7 (М'1).

Сполука 1321. "Н-ЯМР (200МГц, ДМСО-дв) 5 1,38 (м, 4Н), 1,92 (ушир.с, 2Н), 2,02 (ушир.с, 2Н), 3,44 (ушир.с, 1Н), 4,14 (ушир.с, 1Н), 4,56 (д, 1Н, |-4Гуц), 6,63 (м, 1Н), 7,15 (м, 1Н), 7,32 (д, 1Н, У-6,2Гц), 8,20 (д, 2Н, 9-4,АГЦ), 8,65 (д, 2Н, 9-4, АГц), 11,67 (ушир.с, 1Н). Мас-спектр (Е5): 310,2 (М"--1).

Сполука 1501 (таблиця 15 нижче). "Н-ЯМР (7095) (200МГц, СО5О0) 5 1,84 (с, ЗН), 3,52 (т, 2Н, У-6,0Гц), 3,83 (т, 2Н, У-6Гц), 6,51 (д, 1Н, 9У-3,4Гц), 7,06 (д, 1Н, 9У-3,8Гц), 7,42 (м, ЗН), 8,36 (м, 2Н). Мас-спектр (Е5): 296,0 0 (м 11).

Сполука 1502 (таблиця 15 нижче). Мас-спектр (Е5): 345,0 (М 7-1).

Сполука 1500 (таблиця 15 нижче). "Н-ЯМР (7095) (200МГц, СОСІв) 5 1,40-1,80 (м, 6Н), 1,85-2,10 (м, 2Н), 2,18 (с, ЗН), 2,33 (с, ЗН), 2,50 (д, ЗН), 3,90-4,10 (м, 2Н), 4,76 (м, 1Н), 5,50 (д, 1Н), 6,03 (м, 1Н), 7,40 75 (м, ЗН), 8,37 (м, 2Н), 9,15 (ушир.с, 1Н). Мас-спектр (Е5): 393,3 (М'1).

Приклад 20: Синтез антагоніста А аденозину

Сполука 1504 (таблиця 15 нижче) може бути синтезована за загальними методиками, наведеними далі. а я "СХ їрА,- АД -- Доу си суч пл се с" (0, с "о 3 32 Сполука 1504

Сполуку 31 (200мг, 0.47ммоль) розчиняли в ДХМ (4мл). Додавали послідовно триетиламін (51мг, О.5ммоль) і тіоморфолін (52мг, О,5ммоль). Розчин перемішували протягом декількох хвилин, потім залишали на 72 години. с

Реакційну суміш розбавляли ДХМ і Н.О і шари відділяли. Водний шар екстрагували ДХМ. Об'єднані ДХМ шари Ге) сушили над МозО,, фільтрували і концентрували. До неочищеного зразка додавали діетиловий ефір і одержану тверду речовину відфільтровували, одержуючи 10Омг білої твердої речовини 32 (62965). "Н-ЯМР (200МГЦ,

СОСІ) 6 1,76 (с, 9Н), 2,66 (ушир.с, 2Н), 2,79 (ушир.с, 2Н), 3,86 (с, 2Н), 7,46 (м, ЗН), 8,50 (м, 2Н). со зо Сполуку 32 об'єднували з ДМСО (Змл) і транс-4-аміноциклогексанолом (144мг, 1,25ммоль) і нагрівали при 13022 протягом 4 годин. Реакційну суміш охолоджували до кімнатної температури і розбавляли ЕЮАс і Н 250. се

Шари розділяли і водний шар екстрагували ЕЮАс (2х) Об'єднані органічні шари промивали НоО і насиченим сч розчином солі, сушили над МазоО,), фільтрували і концентрували. Хроматографія (діоксид кремнію, 8:1

СНСІУ/ЕЮН) давала З2мг золотисто-коричневого масла. Додавали діетиловий ефір і одержану тверду речовину Ж відфільтровували, одержуючи 5мг білої твердої речовини (996). О5ІС-148265: "Н-ЯМР (200МГц, СО3О0) 5 1,44 ї- (ушир.м, 4Н), 2,03 (ушир.м, 2Н), 2,21 (ушир.м, 2Н), 2,70 (ушир.м, 8Н), 3,63 (м, 4Н), 3,92 (м, 1Н), 4,26 (ушир.с, 1Н), 6,42 (с, 1Н), 7,42 (м, ЗН), 8,33 (м, 2Н).

Приклад 21: Синтез антагоніста А аденозину

Сполука 1503 (таблиця 15 нижче) може бути синтезована за загальними методиками, наведеними нижче. « а й "г - т - у і - б ул с од го а о с Кк В; 31 33 Сполука 1503

Бромід, сполуку 31 (220мг, 0.47ммоль) розчиняли в суміші 1:11 ДМФ:дихлорметан (5мл). До цього розчину це. додавали КоСОз (71мг, 0,52ммоль) і морфолін (0,047мл, 0,47ммоль). Суміш залишали перемішуватись при ї» кімнатній температурі протягом ночі. Розчинники видаляли у вакуумі і залишок розподіляли між Н 20 і дихлорметаном. Органічний шар сушили над МозоО,, фільтрували і концентрували, одержуючи не зовсім білу о тверду речовину, яка при розтиранні з сумішшю ефір/гексани давала 175мг білої твердої речовини 33 ко 50 (8496). "Н-ЯМР (200МГц, СОСІз) 5 1,9 (9Н, с), 2,54 (4Н, с), 3,65 (4Н, с), 3,85 (1Н, с), 6,59 (1Н, с), 7,45 со (ЗН, м), 8,5 (2Н, м).

Сполуку 33 (5Омг, 0,11ммоль) і транс-4-аміноциклогексанол (105мг, О0,9їммоль) вміщували в ДМСО (2мл).

Одержаний розчин продували М», а потім нагрівали до 1002С на масляній бані і перемішували протягом ночі. 5 Неочищену реакційну суміш виливали у воду і двічі екстрагували етилацетатом (5Омл). Об'єднані органічні шари промивали Н.О. Після сушіння Мо5О , і фільтрування органічний шар концентрували у вакуумі, одержуючи (Ф. оранжеву тверду речовину. Хроматографія (діоксид кремнію, 10956 СНЗОН в СНоСІ») давала 15мг (3395). "Н-ЯМР ко (200МГц, СОСІ) 85 1,24-1,62 (4Н, м), 1,85 (2Н, м), 2,10 (2Н, м), 2,26 (4Н, м), 3,53 (4Н, м), 4,22 (1Н, м), 4,73 (1Н, м), 5,85 (1Н, д), 6,15 (1Н, с), 7,25 (ЗН, м), 8,42 (2Н, М), 10,0 (1Н, с). Мас-спектр (Е5): 408,0 (М 1). 60 Сполуки 1500, 1501 і 1502 можуть бути синтезовані з використанням тих же стадій одержання прикладу 20 при обробці сполуки 32 відповідним заміщеним аміном.

Аналіз А і Ага аденозинового рецептора людини з використанням репортерного гена В-галактозидази дріжджів.

Штами дріжджів (5.сегемізіде) трансформували аденозином А; (АК; САБО штам СУ12660) людини або 65 аденозином Ага (Ага; САБО штам СУ8362) людини і доповнювали Іас2 (В-галактозидаза) репортерним геном для використання як функціонального виведення. Повний опис трансформацій перерахований нижче (дивись

Штами дріжджів). Як ліганд для всіх аналізів використали МЕСА (5-М-етилкарбоксамідоаденозин), що являє собою ефективний агоніст аденозинового рецептора з аналогічної афінністю до А; і Ага рецепторів. Сполуки, що тестуються, досліджували у 8 концентраціях (0,1-1000О0нМ) на їх здатність інгібувати МЕСА-індуковану активність В-галактозидази СУ12660 або СУ8362.

Одержання вихідних культур дріжджів: кожний з відповідних дріжджових штамів, СУ12660 або СУ8362, наносили смугами на агарові пластини та інкубували при 302 доти, поки не спостерігали утворення колоній.

Дріжджі цих колоній додавали до ІТ рідини (рН 6,8) СУ8362 і вирощували протягом ночі при 302С. Кожний дріжджовий штам потім розводили до ОПеоо-1,0-2,0 (приблизно 1-2х10"клітин/мл), як визначено 70 спектрофотометрично (Моїіесціаг Оемісез ММАХ). З розрахунку на кожні бмл рідкої дріжджової культури додавали 4дмл 4096 гліцерину (1:1,506./06.) ("дріжджовий/гліцериновий вихідний препарат). З цього дріжджового/гліцеринового вихідного препарату готували десять аліквот по 7мл і зберігали при-80 С до проведення аналізу.

Дріжджовий А./КеС о і Азак о аналіз: розморожували одну ампулу кожного з СУ8362 і СУ12660 12 дріжджового/гліцеринового вихідного препарату і використали для інокулювання доповненого ІТ рідкого середовища, рН 6,8 (92мл рідкої І Т, до якої додавали: 5мл 4090 глюкози, 0,45мл 1М КОН і 2,5мл Рірез, рН 6,8).

Рідкі культури вирощували протягом 16-18 годин (протягом ночі) при ЗО С. Аліквоти культур, одержаних протягом ночі, потім розводили в ІТ середовищі, що містить 4М.Е./мл аденозиндезамінази (тип МІ або МІ! з бичачої слизової кишечника, Зідта), для досягнення ОП вро .0,15 (1,5х10Уклітин/мл) для СУ8362 (А ак) і 720 оп оюто, БО (Бх1Обклітин/мл) для СУ 12660 (А.К).

Аналізи проводили при кінцевому об'ємі 100мкл в 9б-ямкових мікротитрувальних планшетах при кінцевій концентрації ДМСО 290, що досягається у всіх ямках. Для первинного скринінгу використали 1-2 концентрації сполук, що тестуються (10мМмкМ, їмкМ). Для профілювання сполуки досліджували 8 концентрацій (10000, 1000, сч 500, 50,10, 1 ї О0.1нНМ). У кожний планшет для мікротитрування додавали 1Омкл 2095-ного ДМСО в "контрольні" і "загальні" ямки, тоді як ТОмкл сполуки (в 20956 ДМСО), що тестується, додавали в "невідомі" ямки. Згодом в (о) "контрольні" і "загальні" ямки додавали 1їОмкл МЕСА (5мкл для АК, мкл для А 5аКк); 1Омкл РВЗ (забуференого фосфатом фізіологічного розчину) додавали в "контрольні" ямки. При кінцевому додаванні у всі ямки додавали 8Омкл дріжджового штаму, СУ8362 або СУ12660. Потім всі планшети струшували протягом короткого проміжку со зо часу (Гарі іпе орбітальний шейкер, 2-3хв.) і залишали інкубуватись протягом 4 годин при 302С у сушильній печі.

Активність В-галактозидази може бути кількісно оцінена з використанням або колориметричного (наприклад, с

ОМРО, СРС), люмінесцентного (наприклад, Са|асіоп-З(аг) або флуориметричного субстрату (наприклад, ЕОО, сч

Кезогиїіп). У цей час флуоресцентна реєстрація є переважною на основі кращого співвідношення сигнал: шум, відносної свободи від інтерференції і низької вартості. Флуоресцеїн дигалактопіранозид (ГО, Моїіесціаг Ргорез « або Магкег Сепе Тесппоіодієв), флуоресцентний субстрат В-галактозидази, додавали у всі ямки при концентрації їм- 20мкл/ямку (кінцева концентрація-8ОмкМ). Планшети струшували протягом 5-6 секунд (Гарі іпе орбітальний шейкер), а потім інкубували при 372С протягом 90 хвилин (9595 О2/5956 СО» інкубатор). У кінці 90-хвилинного періоду інкубації активність В-галактозидази зупиняли з використанням 20мкл/ямку 1М Ма 5СО» і всі планшети струшували протягом 5-6 секунд. Планшети потім струшували протягом б секунд і визначали відносну « інтенсивність флуоресценції з використанням флуориметра (Тесап Зресігайног; збудження-485нм, шщ с випущення-5З5нм). . Розрахунки: Значення відносної флуоресценції для "контрольних" ямок інтерпретували як фон і віднімали із а "загальних" і "невідомих" значень. Профілі сполук аналізували за допомогою логарифмічного перетворення (вісь х: концентрація сполуки) з подальшою одновузловою конкурентною кривою, відповідною розрахунку значення

ІСво (ОгарпРаа Ргізт). -і Штами дріжджів: використали штами Засспаготусевз сегемівіае СОУ 12660 (Гагі"1442 6-1 ТивіІ-піз3 сапі віе4:грі:с! 52 віе3"1156 дра(41)-ОдіЗ Іуз2 игаЗ Іец2 ігрі: піз3; ГЕ6О2 РОКр-МЕоіІЇ еадег-пАІК-РНОБетт 2ти-огід шк КЕРЗ Атрг)| і СУ8362 (Ідраїр--боБїОкК Тагі"1442 151-1 тТи8І-НІЗЗ сапі віе!4: (рії М52 віе3"1156 Іуз2 газ ко Іец2 Ігрі піз3; І 6ШО2 РОКр-пАгак 2ти-огі КЕРЗ Атрг).

Ї Т середовище: І Т (І ен-Ттр доповнене) середовище складається з 100г ОІРСО дріжджової азотистої основи, ді доповненої наступним: 1,0г валіну, 1,0г аспарагінової кислоти, 0,75г фенілаланіну, 0,9г лізину, 0.45г (де) тирозину, 0,45г ізолейцину, 0,3г метіоніну, 0О,бг аденіну, 0,4г урацилу, 0,Зг серину, О0,Зг проліну, 0,Зг цистеїну, 0,Зг аргініну, 0,9г гістидину і 1,Ог треоніну.

Конструювання штамів дріжджів, які експресують А. аденозиновий рецептор людини.

У даному прикладі описано конструювання штамів дріжджів, які експресують А 41 аденозиновий рецептор людини, функціонально інтегрований у шлях дріжджової феромонової системи. і) Конструювання вектора експресії ко Для конструювання дріжджового вектора експресії А| аденозинового рецептора людини одержували кДНК А 4 аденозинового рецептора за допомогою ПЛР зворотної транскриптази мРНК гіпокампу людини з використанням 60 праймерів, розроблених на основі опублікованої послідовності А- аденозинового рецептора людини, і стандартних методик. Продукт ПЛР субклонували в Мсо/! і Хьаї сайти дріжджової плазміди експресії РМРІБ.

РМРІ15 плазміду створювали з рКРХІ таким чином: Хбраї сайт ХЕРБІ1 (Вгоасі ..К. еї аї!., (1983) "Месіогв ог підп-Іеме!ї, іпацсіріе оехргезвіоп ої осіопей депез іп ЖМеазі"ї р.83-117 в М.Іпоцуе (ей.) Ехрегітепіа)!

Мапіршіайоп ої Сепе Ехргезвзіоп. Асадетіс Ргезв, Мем/ МогК) ліквідували розщепленням, заповненням кінця і 65 повторним лігуванням для створення Херб51МсорхХва. Інший сайт Хвба! створювали на Ватні сайті спаленням за допомогою Ватні, заповненням кінця, лінкерним (Мем Епадіапа Віоіарв, 2 1081) лігуванням, Хва! розщепленням і повторним лігуванням для генерування Мерб1МсохХіІ. Цю плазміду розкладали за допомогою ЕзрЗі і Месої! і лігували до Гец2 і РоОКр фрагментів, генерованих ПЛР. Продукт ПЛР ГІ ец2, розміром 2 тисячі основ, генерували ампліфікацією з Мерб1Мсо з використанням праймерів, що містять сайти Езр31 і ВаїІї. Продукт ПЛР РОКр з 660 пар основ генерували ампліфікацією з рРОКоїв (Капд МУ.-5. еї аї., (1990), Мої. СеїІ. ВіоІї. 10:2582-2590) за допомогою ПЛР праймерів, що містять сайти Во і МсоЇ. Одержану плазміду називають ріРХі. РІ РХІ модифікували вставкою кодуючої області рге-рго лідера а-фактора в сайт МесоІ. Вставку рге-рго лідера проводили таким чином, що Мсо! клонуючий сайт підтримували на 3' кінці лідера, але не регенерували на 5'кінці. Таким чином рецептори можуть клонуватись розщепленням плазміди за допомогою МІсої! і Хва!. Одержану 7/0 плазміду називають рМР 15, рге-рго лідера а-фактора.

РМРІ15 плазміду, в яку вставляли КкКДНК аденозинового рецептора А людини, позначали як рбо095. У цьому векторі КДНК рецептора конденсована з 3' кінцем рге-рго лідера а-фактора дріжджів. Під час дозрівання білка рге-рго пептидні послідовності розщеплюються, генеруючи зрілий рецептор з повною довжиною. Це відбувається під час обробки рецептора на секреторному шляху дріжджів. Дану плазміду підтримують І еи селекцією (тобто /5 Зростання на середовищі з нестачею лейцину). Визначали послідовність клонованої області кодування і було встановлено, що вона еквівалентна опублікованій в літературі (привласнені номери в СепВапк 545235 і 556143).

ІЇ. Конструювання дріжджового штаму

Для створення штаму дріжджів, який експресу є А 5 аденозиновий рецептор людини, як вихідного батьківського штаму використали штам дріжджів СУ7967. Генотип СУ7967 наступний:

МАТос дра 01163 дра(41)СаїЗ Ттапбоб1442 ї16Б-1 РО5Б1-НІЗЗ сап 1 віеі4:чгрі:! 52 8віе301156 Іуз2 цигаЗ Іец2 ігр! піз3

Генетичні маркери розглянуті нижче. сч зв й дріжджової Са субодиниці ОРАТ, злитої з С-білком СаїЗ ссавців, в якому гвіанцеві амінокислоти, які мають загальне походження, були видалені активації шляху відповіді на феромон (ее) зо см см щ зв м « - с Дві плазміди трансформували у штам СУ7967 електропорацією: плазміда р5095 (кодуюча А; аденозиновий ч рецептор людини; описана вище) і плазміда Р 1584, яка є плазмідою РГИО5Б1-В-галактозидазного репортерного -» гена. Плазміду Р 1584 одержували з плазміди рКк5426 (СпПгізгіапзоп Т.МУ. еї аЇ. 91992) Сепе 110:119-1122).

Плазміда рКк5426 містить полілінксерний сайт на нуклеотидах 2004-2016. Проводили інсерцію злиття РО5Б1 промотора і В-галактозидазного гена в сайти рестрикції Еаді і Хпо! для створення плазміди Р 1584. Плазміду з -і 1584 підтримували Тгр селекцією (тобто зростання на середовищі з нестачею лейцину). ї» Одержаний штам, який несе р5оО95 і р1584, що згадується як СУ12660, експресує А 4 аденозиновий рецептор людини. Для зростання даного штаму в рідині або на агарових пластинах використали мінімальне середовище з ко нестачею лейцину і триптофану. Для здійснення аналізу зростання на планшетах (аналізування РО51-НІБЗЗ), 7 50 планшети знаходились при рН 6,8 і містили 0,5-2,5мМ З-аміно-1,2,4-триазолу і нестачу лейцину, триптофану і гістидину. Як контроль специфічності у всі експерименти включали порівняння з одним або декількома іншими і42) сімома трансмембранними рецепторними відборами на основі дріжджів.

Конструювання штамів дріжджів, які експресують Агааденозиновий рецептор людини.

У даному прикладі описано конструювання штамів дріжджів, які експресують А 24 аденозиновий рецептор людини, функціонально інтегрований у шлях дріжджової феромонової системи. о Конструювання вектора експресії

Для конструювання дріжджового вектора експресії А 4 аденозинового рецептора людини одержували ко КДНК А» аденозинового рецептора від Ог. РНпїЇ Мигрпйу (МІН). При одержанні даного клону секвенували Аза рецепторну вставку, і було встановлено, що вона ідентична опублікованій послідовності (привласнений номер в 60 СепВапк ї 546950). КДНК рецептора вирізали з плазміди ПЛР за допомогою МЕМТ полімерази і клонували в плазміду р/ВХ, яка стимулювала експресію рецептора за допомогою складового промотора фосфогліцерат кінази (РОК) у дріжджах. Ще раз визначали послідовність амінокислот цілої вставки і встановили, що вона ідентична опублікованій послідовності. Однак внаслідок використаної тут стратегії клонування три амінокислоти були додані до карбоксильного кінця рецептора, сіузЗегмаїЇ. 65 Конструювання штаму дріжджів

Для створення штаму дріжджів, який експресує А 24 аденозиновий рецептор людини, як вихідного -Д7-

батьківського штаму використали штам дріжджів СУ8342. Генотип СУ8342 наступний:

МАТо ТапоО1442 15И-1 Іуг2 цгаЗз Іец2 грі піз3 Ти8І-НІЗЗ сапі віеЗ3О1156 одрарнбЗ віеі4: фрі: 152 ара!р-гоа5ЕТОК (або дра!Ір-го3502295 або драІр--гса56ЕТ1ОКО2295)

Генетичні маркери є такими, як описано вище, за винятком маркера для варіювання О-білка. Для експресії Аза рецептора людини використали штами дріжджів, в яких був видалений ендогенний дріжджовий б-білок ОРА1 і замінений на С45 ссавця. Використали три щурячих С 45 мутанти. Такі варіанти містять одну або дві точки мутації, які перетворюють їх в білки, які раціонально зшиваються з В у-дріжджів. Вони були ідентифіковані як С 25Е10К (в яких глутамінова кислота в десятому положенні замінена на лізин), С аг02295 (В 70 якому аспартамова кислота в положенні 229 замінена на серин) і б а25Е10К02295 (який містить обидві точки мутації).

Штам СУ8342 (який несе один з трьох мутантних щурячих С а5 білків) трансформували за допомогою або батьківського вектора рі РВХ (Рецептор) або за допомогою рі РВХ-Ага (Рецептор"). Додавали плазміду з ЕО51 промотором, злитим з кодуючими послідовностями В-галактозидази (описаними вище) для оцінки величини 75 активації шляху феромонової відповіді.

Функціональний аналіз з використанням штамів дріжджів, які експресують А аденозиновий рецептор

У даному прикладі описана розробка аналізу функціонального скринінгу модуляторів А 1 аденозинового рецептора людини в дріжджах

Ї. Ліганди, що використовуються в аналізі

Для розробки даного аналізу використали аденозин, природний агоніст даного рецептора, а також два інших синтетичних агоністи. У підмножині експериментів використали аденозин, що має за опублікованими даними

ЕСьо, яке складає приблизно 75Бнм, і (-)-М6-(2-фенілізопропіл)уаденозин (РІА) з опублікованої афінністю приблизно БОнм. У всіх аналізах зростання використали 5'-М-етилкарбоксамідоаденозин (МЕСА). Для запобігання передачі сигналів через присутність аденозину в середовищі для зростання у всіх аналізахдодавали «М аденозиндеаміназу (АМЕ/мл). (5)

ІЇ. Біологічна реакція у відповідь в дріжджах

Здатність А- аденозинового рецептора функціонально зв'язуватись з гетерологічною системою дріжджів оцінювали шляхом введення вектора експресії А 4 рецептора (р5095, описано вище) в ряд дріжджових штамів, які експресують різні субодиниці білка б. Більшість таких трансформантів експресувало С 4 субодиниці (ее)

Са, або Со підтипу. Додаткові Са білки також були протестовані для можливої ідентифікації неоднорідності їх сч зв'язування рецептор-С у, білок. У різних штамах ЗТЕ18 або химерний ЗТЕ18-Су конструкт інтегрували в геном дріжджів. се

Штами дріжджів приховували дефективний НІЗЗ ген і інтегровану копію РОБ1-НІЗЗ, даючи таким чином « можливість для відбору в селективному середовищі, що містить 3-аміно-1,2,4-триазол (протестований при 02, 0,5 і 1,0ММ) і який не має гістидину. Трансформанти виділяли і готували моношари на середовищі, що містить і -

З-аміно-1,2,4-триазол, 4МЕ/мл аденозиндеамінази і не містить гістидину. Використали п'ять мікролітрів різних концентрацій ліганду (наприклад, МЕСА в концентрації 0, 0,1, 1,0 і 10мМ). Зростання контролювали протягом 2 днів. Таким чином у різних штамах дріжджів досліджували ліганд-залежну реакцію у відповідь зростання. «

Результати підсумовані нижче в таблиці 1. Символ (-) вказує, що ліганд-залежна активація рецептора не визначалась, тоді як (ї) означає ліганд-залежну відповідь. Термін ЧІКМА" вказує на ліганд-незалежну - с активацію, опосередковану рецептором. г» 4 нини по ПОЛЯ ПОЛЯ НОЯ - ПОЕТ НО НН ПОС НОЯ НАЛЕННЯ г ення 1 ю явив 111 юю ни т ЗУ ПОН ПОЛЯ ПЕН пи сот НН НО НС со по У НОЯ НОЯ НАННЯ п У МОЯ ПОЛЯ ПОН нини ши ши й ту оеміоантевоний вже 0000000 о нини ши ши ю я бо яв 11 ява 111 кивнув 00000010 вмк ни У У МОЯ ПОЛЯ ПОН б5 ни с ВИ МОЯ ПОЛЯ ПОН суваза СРА/ ЗТЕ18-Су?2 -

пил т УМ ПОЛЯ ПОЛЯ ПОН яв 11 ява 111 ; кивнув 00000010 вмк ни У У МОЯ ПОЛЯ ПОН бе мбаютв 000011

Як указано в таблиці З, було встановлено, що найбільш сильна передача сигналів відбувалась у штамі дріжджів, який експресує ОРА.(41)-Со;3 химерний білок.

ШІ. ти8і Гас2 аналіз

Щоб більш повно охарактеризувати активацію шляху феромонової реакції у відповідь, вимірювали синтез 75 В-галактозидази за допомогою из ас у відповідь на агоністичну стимуляцію. Для здійснення

В-галактозидазного аналізу підвищені концентрації ліганду додавали до тіа-юд культури А; аденозинового рецептора людини, який експресується у штамі дріжджів, що співекспресує Зіе18-5 у2 химеру і ОРАЗ(41)-Со/з.

Виділяли трансформанти і вирощували протягом ночі у присутності гістидину і 4АМЕ/мл аденозиндезамінази.

Через п'ять годин інкубування з 4АМЕ/мл аденозиндезамінази і лігандом вимірювали індукцію В-галактозидази з використанням СРЕС як субстрата для В-галактозидази. Для аналізу використали 5х105 клітин.

Результати, одержані з МЕСА стимуляцією, вказували, що при концентрації МЕСА 10 ЗМ досягається приблизно 2-х кратна стимуляція активності В-галактозидази. Крім того, приблизно 10-кратний індекс стимуляції спостерігався при концентрації МЕСА, що становить 10М.

Застосування даного аналізу розширювали для оцінки активності антагоністів на даному штамі. Два відомих с 29 антагоністи аденозину, ХАС і ОРСРХ, досліджували на їх здатність конкурувати з МЕСА (при 5мМ) на активність (У в аналізі В-галактозидази. У даних аналізах індукування В-галактозидази вимірювали з використанням ЕОС як субстрату і 1,6х109 клітин на аналіз. Результати показують, що як ХАС, так і ОРСРХ служать ефективними антагоністами експресованого дріжджами А; аденозинового рецептора при значеннях ІС 5о 44нмі 49нм, відповідно. 09

Для визначення, чи є ця інгібуюча дія специфічною для А /4 підтипу, був проведений ряд доповнюючих сем експериментів за допомогою аналізу Ага рецептора на основі дріжджів. Результати, одержані в аналізі Ага рецептора на основі дріжджів, вказували, що ХАС був відносно ефективним антагоністом Аза рецептора, см узгоджуючись з опублікованими даними. Навпаки, ОРСРХ був відносно інертним для даного рецептора, як чІ очікувалось з опублікованих повідомлень.

ЇМ. Радіолігандне зв'язування. -

Аналіз А; аденозинового рецептора додатково охарактеризували вимірюванням параметрів радіолігандного зв'язування рецептора. Аналізували замісне зв'язування | ЗНІСРХ з декількома посилальними сполуками рецептора аденозину, ХАС, ОРСРХ і СО5 з використанням мембран, одержаних з дріжджів, які експресують А 4 « 20 аденозиновий рецептор людини. Результати для дріжджових мембран, які експресують А 4 аденозиновий -о рецептор людини, порівнювали з результатами для дріжджових мембран, які експресують А за аденозиновий с рецептор людини або Аз рецептор людини, для оцінки специфічності зв'язування. Для проведення даного ;» аналізу п'ятдесят міліграм мембран інкубували з 0,4нм | ЗНІСРХ і концентраціями лігандів аденозинового рецептора, що збільшуються. Інкубування проводили в 50мМ Ттіз-НСІ, рН 7,4, 1мММ ЕОТА, 10мММ Масі», 0,2596

БСА Її 2МЕ/мл аденозиндеамінази у присутності інгібіторів протеази протягом 60 хвилин при кімнатній -І температурі. Зв'язування зупиняли шляхом додавання охолодженого льодом 50ММ Ттгів-НСІ, рН 1,4, плюс 10ММ

Масі», з подальшим швидким фільтруванням через СЕ7В фільтри, попередньо промиті 0,595 поліетиленіміном з ве використанням 96-ямкового харвестера Раскага. Дані аналізували методом підбору нелінійної кривої за методом ко найменших квадратів з використанням програмного забезпечення Ргізт2.02. Одержані в даному експерименті 5р значення ІСво підсумовані нижче у таблиці 4: іме) со пи НИ С ов ЖАЄ 1650 о ю во

Ці дані вказують, що посилальні сполуки володіли афінністю, відповідною опублікованій у літературі. Дані додатково показують, що аналізи на основі дріжджів мають достатню чутливість для розпізнавання 65 специфічності підтипу рецептора.

Функціональний аналіз з використанням штамів дріжджів, які експресують Ага аденозиновий рецептор

У даному прикладі описана розробка аналізу функціонального скринінгу модуляторів Аі аденозинового рецептора людини у дріжджах

Ї. Ліганди, що використовуються в аналізі

Природний ліганд аденозин, а також інші ретельно охарактеризовані і комерційно доступні ліганди використані для вивчення Ага рецептора людини, який функціонально експресується дріжджами. При створенні даного аналізу використали три ліганди. Вони включають: о

Для запобігання передачі сигналів через присутність аденозину в середовищі для зростання у всіх аналізах /5 додавали аденозиндезаміназу (АМЕ/мл).

І. Біологічна реакція у відповідь в дріжджах

Агоністи Ага рецептора досліджували на їх здатність стимулювати шлях феромонової реакції у відповідь у дріжджах, трансформованих плазмідою експресії Ага рецептора і експресуючих або с54а5Е1ОК, б4502295 або

Са«ЕТ1ОК0О2295. На здатність ліганда стимулювати шлях феромонової реакції у відповідь рецептор-залежним ор Чином вказувала зміна фенотипу дріжджів. Активація рецептора модифікувала фенотип від гістидинової ауксотрофи на гістидинову прототрофію (активація Ти8І-НІЗ3). Виділяли три незалежних трансформанти і вирощували протягом ночі у присутності гістидину. Клітини промивали для видалення гістидину і розводили з розрахунку 2х109 клітин/імл. По бмкл кожного трасформанту наносили у вигляді плями на неселективне середовище (включає гістидин) або селективне середовище (1мММ АТ) за відсутності або у присутності АМЕ/мл с аденозиндеамінази. Планшети вирощували при 309 протягом 24 годин. У присутності гістидину як

Рецептор" (ВУ), так і Рецептор- (БК) штами були здатні до зростання. Однак, за відсутності гістидину росли о тільки клітини ВК". Оскільки в дані планшети не додавали ліганд, можливо два пояснення даного результату.

Одне можливе пояснення полягає в тому, що дріжджі, які містять рецептор, мали перевагу у зростанні завдяки ліганд-незалежній рецептор-опосередкованій активації (ІКМА). Альтернативно, дріжджі могли виявитись со здатними синтезувати аденозин. Для того, щоб розрізнити ці дві можливості до зростаючих дріжджів і планшетів с додавали фермент, який руйнує ліганд, аденозиндезаміназу (АСА). У присутності аденозиндеамінази КК" клітини більше не росли за відсутності гістидину, вказуючи на те, що дріжджі дійсно синтезували ліганд. с

Дана інтерпретація була підтверджена аналізом А за зростання у рідині. У даному експерименті дріжджі «т (штам Са5ЕТОК, який експресує А за рецептор) інокулювали при трьох щільностях (1х10 5 клітин/мл; З3х109 клітин/мл або 1х105 клітин/мл) у присутності або за відсутності аденозиндезамінази (4АМЕ/мл). Переконливість - аналізу підвищували за допомогою збільшення концентрацій (0, 0,1, 0,2 або О4мММ) З-аміно-1,2,4-триазолу (АТ), конкурентного антагоніста імідазолгліцерол-Р дегідратази, білкового продукту НІЗЗ гена. У присутності аденозиндеамінази і З-аміно-1,2,4--риазолу дріжджі росли менш інтенсивно. Однак, за відсутності «

З-аміно-1,2,4-триазолу аденозиндеаміназа справляла незначну дію. Таким чином, сама аденозиндеаміназа не З т0 справляє безпосередньої дії на шлях феромонової реакції у відповідь. с Альтернативний підхід до вимірювання зростання, такий, який можна зробити мініатюрним для "з високопродуктивного скринінгу, являє собою спот-аналіз А2а рецепторного ліганду. б а5ЕЇТОК штам, який експресує Ага рецептор (Агак") або не має рецептор (ЕК), вирощували протягом ночі в присутності гістидину і 4МЕ/мл аденозиндеамінази. Клітини промивали для видалення гістидину і розводили до 5х10 6 клітин/мл. На -І відбірні планшети, що містять 4МЕ/мл аденозиндеамінази і від 0,5 до 1,0ММ З-аміно-1,2,4-триазолу (АТ), наносили 1х105 клітин і залишали сохнути протягом 1 години. На моношар наносили наступні реагенти: 10ММ те аденозину, 38,7ММ гістидину, диметилсульфоксид (ДМСО), 10ММ РІА або 10ММ МЕСА. Клітини вирощували ко протягом 24 годин при 302. Результати продемонстрували, що клітини без рецептора могли рости тільки при юю 50 додаванні до середи гістидину. Навпаки, БК" клітини рости тільки на площах, куди були нанесені у вигляді плями Ага рецепторні ліганди РІА або МЕСА. Оскільки планшети містили аденозиндеаміназу, недолік зростання,

ІЧ е) там де у вигляді плями був нанесений аденозин, підтверджував, що аденозиндеаміназа була активною.

ШІ. ти8і Гас2 аналіз

Для кількісної активації шляхи схрещування дріжджів вимірювали синтез В-галактозидази через ГивіЇ ас. Штами дріжджів, які експресують С а5Е1ОК, б4502295:або С45Е1ОК-02295, трансформували плазмідою, що о кодує Ага рецептор людини (К"), або плазмідою, що не має рецептора (КУ). Трансформанти виділяли і вирощували протягом ночі в присутності гістидину і 4АМЕ/мл аденозиндеамінази. 1х10" клітин розводили до 1х10" о клітин/мл і піддавали дії концентрації МЕС А, що підвищується, протягом 4 годин з подальшим утворенням активності В-галактозидази у клітинах. Результати показали, що по суті активність В-галактозидази не 60 виявлялась в В: штамах, тоді як підвищені кількості активності В-галактозидази виявлялися в БК" штамах, які експресують або Са5ЕЛОК, С4502295, або Са5Е1ОКО2295, по мірі збільшення концентрації МЕСА, вказуючи на доза-залежне збільшення в одиницях В-галактозидази, виявленої як реакція у відповідь на дію підвищеної концентрації ліганду. Така залежність від дози спостерігалась тільки у клітинах, які експресують Ага рецептор. Крім того, найбільш ефективним Са5 конструктом для Ага рецептора виявилась (с а5Е1ОК. бо Конструкт Са502295 виявився другим найбільш ефективним С ав конструктом для Ага рецептора, тоді як -БО0-

СаєЕ1ОКА-О2295 конструкт був найменше ефективним з трьох протестованих Оа5 конструктів, хоча навіть конструкт Са6бЕТОКіО2295 стимулював кількості активності В-галактозидази, що легко виявляються.

Для додаткового опису вказаних аналізів дивись публікацію заявки на патент США Мо Ш5-2002-0015967-А1, опубліковану 7 лютого 2002 року, озаглавлену "Рипсіопа! Ехргеззіоп ої Адепозіпе Кесеріогз іп Уеавзі", зараз ліквідовану, повний зміст якої включений в даний опис як посилання.

Фармакологічна характеристика підтипів аденозинового рецептора людини

Матеріали. ІЗНІ ОРСРХ |(циклопентил-1,3-дипропілксантин, 8-Ідипропіл-2,3-3Н(М))| (120,0 кюрі/ммоль);

ГнНІСОо5 21680, Ікарбоксіетил-"Н(Ю) (ЗО кюрі/ммоль); і Г25Ц-АВ-МЕСА 70...(И1251|-4-амінобензил-5'-М-метилкарбоксамідоаденозин) (2200 кюрі/ммоль) були одержані від Мем Епдіапіа Мисіеаг (Возіоп, МА). ХАС (що відноситься до класу ксантинаміну); МЕСА (5-М-етилкарбоксамідоаденозин) і ІВ-МЕСА одержані від Кезеагсп Віоспетіса!з Іпіегпайопа! (КВІ, МаїйсК, МА). Змішані таблетки аденозиндеамінази і повний інгібітор протеази закуповували у Воейгіпдег Маппеїйт Согр. (Іпаіапароїїз, ІМ). Мембрани НЕК-293 клітин, які стабільно експресують А2 аденозин (КВ-НА?га), 26 1 аденозин ІКВ-НА2Б) або аденозин З (КВ-НАЗІ підтипи рецепторів людини, відповідно, були одержані від Кесеріог Віоіоду (Веїї5змйШе, МО). Реагенти клітинних культур одержані від Ге Тесппоіодіез (Сгапа Ізвіапа, МУ) за винятком сироватки, одержаної від

Нусіопе (І одап, ОТ).

Штами дріжджів: використали штами Засспаготусевз сегемівіде СУ12660 (аг"1442 1-1 ти8І-НІЗЗ сапі віеід:Ягрі:ЇУЗ2 віе3"1156 одра((41)-Со;3 Іу82 газ Іец2 (грі: піз3; ГЕО2 РОКр-МеЕої еадег-пАІК-РНОЗегт 2ти-огід

ВЕРБ5Б Атрі) і СУ8362 (|драі!р--боБОК тТагі"1442 16І-1 Ти5І-НІЗЗ3 сапі віеі4:йгрі:!М52 віе3"1156 Іуг2 газ

Іец2 (грі піз3; І 6ШО2 РОКр-пАгак 2ти-огі КЕРЗ Атріг), як описано вище.

Культура дріжджів: трансформовані дріжджі вирощували в ГІ ецш-Тгр (ІТ) середовищі (рН 5,4), доповненим 290 глюкози. Для одержання мембран 25Омл ІТ середовища інокулювали при вихідному титрі 1-2х10 6 клітин/мл

ЗОмл культури, одержаної протягом ночі, і інкубували при 302С при постійному постачанні киснем за рахунок сч 29 обертання. Після 16 годин зростання клітини збирали центрифугуванням і одержували мембрани, як описано Ге) нижче.

Культура тканини людини: НЕК-293 клітини, які стабільно експресують підтип 2а аденозинового рецептора людини (клон Садиз 55), вирощували в мінімальному незамінному середовищі Дульбекко (ОМЕМ), доповненого 10956 фетальною телячою сироваткою і сумішшю 1Х пеніцилін/стрептоміцин при вибраному тиску з со використанням 500мг/мл 5418 антибіотика при 372С у зволоженій атмосфері, що містить 595 СО». Ге

Одержання мембран дріжджових клітин: 250мл культури збирали після інкубування протягом ночі сч центрифугуванням при 20009 у центрифузі Зогмаї! КТ6000. Клітини промивали охолодженою льодом водою, центрифугували при 42С і осад від центрифугування повторно суспендували в 1їО0мл охолодженого льодом « лізисного буфера |5мМ Ттів-НСІ, рН 7,5; 5МмМ ЕОТА і 5ММ ЕСТАЇ, доповненого змішаними таблетками інгібітора їч- протеази (1 таблетка на 25мл буфера). Скляні бусини (17г; 400-6б0Омеш; Зідгаа) додавали до суспензії і клітини руйнували шляхом інтенсивного вихрового перемішування при 4 «С протягом 5 хвилин. Гомогенат розводили додатково ЗОмл лізисного буфера плюс інгібітори протеази і центрифугували при 30009 протягом 5 хвилин.

Згодом мембрани осаджували при 3600049 (ЗогмаІ КО5В ротор типу 5534) протягом 45 хвилин. Одержаний осад « мембран повторно суспендували в 5мл мембранного буфера |50мМ Ттів-НСІ, рН 7,5; 0,бмМ ЕОТА і 5мМ МосСі»), З с доповненого змішаними таблетками інгібітора протеази (1 таблетка на 5Омл буфера) і зберігали при-809С для . подальших експериментів. а Одержання мембран клітин ссавців: мембрани клітин НЕК-293 одержували, як описано раніше (Юиліс Е. Еї аї.,

У.ВіоІ.Спет., 267, 9844-9851, 1992). Стисло, клітини промивали забуференим фосфатом фізіологічним розчином (РВБ5) і збирали за допомогою гумового збирача. Клітини осаджували при 4922 і 2009 у центрифузі Зогмаї -І КТб6000. Осад від центрифугування повторно суспендували в 5мл на чашку лізисного буфера при 42С |бмММ ї» Тгів-НСІ, рН 7,5; 5мММ ЕОТА; 5ММ ЕСТА; 0,1мММ фенілметилсульфонілфториду, 1Омг/мл пепстатину А і ТОмг/мл апротиніну)|), і гомогенізували в гомогенізаторі Юоцпсе. Клітинний лізат потім центрифугували при 360004 ко (бБогмаї КС5В ротор типу 5534) протягом 45 хвилин і одержаний при центрифугуванні осад повторно 5оО суспендували в бмл мембранного буфера |5ОмМ Ттігз-НСІ, рН 7,55 0бмМ ЕОТА; 5мММ Моасі»; 0мМ о фенілметилсульфоніл фториду, 1О0мг/мл пепстатину А і 10мг/мл апротиніну) і зберігали при-802С для подальших

ІЧ е) експериментів.

Набори для протеїнового аналізу Віо-Кай на основі методики Бредфорда зв'язування з барвником (Вгадіога

М., Апаї.Віоспет. 72:248 (1976)) використали для визначення загальної концентрації білка у мембранах дріжджів і ссавців. о Насичення і конкурентне радіолігандне зв'язування підтипу 1 аденозинового рецептора: Насичення і конкурентне зв'язування на мембранах дріжджових клітин, трансформованих АЇ підтипом рецептора людини, де проводили з використанням антагоніста | НІОРСРХ як радіоактивного ліганду. Мембрани розводили в буфері для зв'язування |(5ОмММ Тгів-НСІ, рН 7,4; утримуючий 10ММ МосСі 2; 1,0мММ ЕОТА; 0,25956 БСА; 2МЕ/мл 60 аденозиндеамінази і 1 змішану таблетку інгібітора протеази/5Омл) при концентраціях 1,Омг/мл.

При насиченому скріпленні мембрани (5Омкг/ямку) інкубували з концентраціями | ЗНІОРСРХ, що збільшуються, (0,05-25нм) в кінцевому об'ємі 100мкл буфера для зв'язування при 25 С протягом 1 години за відсутності або у присутності 10мкМ неміченого ХАС в 96-ямковому планшеті для мікротитрування.

При конкурентному скріпленні мембрани (5Омкг/ямку) інкубували з | ЗНІОРСРХ (1,0нм) в кінцевому об'ємі 65 100мкл буфера для зв'язування при 252 протягом 1 години за відсутності або у присутності 10мМкМ неміченого

ХАС або концентрацій конкуруючих сполук, що збільшуються, в 96-ямковому планшеті для мікротитрування.

Конкурентне радіолігандне зв'язування підтипу 2а аденозинового рецептора: Конкурентне зв'язування на мембранах НЕК293 клітин, які стабільно експресують Аза підтип рецептора людини, проводили з використанням агоніста ІЗНІ СО5-21680 як радіоактивного ліганду. Мембрани розводили в буфері для зв'язування |ХОММ

Ттів-НСІ, рН 7,4; утримуючий 10мММ Мосі»; 1,0ММ ЕОТА; 0,2595 БСА; 2МЕ/мл аденозиндеамінази і 1 змішану таблетку інгібітора протеази/5О0мл| при концентраціях 0,2мг/мл. Мембрани (1Омкг/ямку) інкубували з | ЗНІ

Со5-21680 (100нм) в кінцевому об'ємі ї00мкл буфера для зв'язування при 25 оС протягом 1 години за відсутності або у присутності 5ХОМмкМ неміченого МЕСА або концентрацій конкуруючих сполук, які збільшуються, в 70 9б-ямковому планшеті для мікротитрування.

Конкурентне радіолігандне зв'язування підтипу З аденозинового рецептора: Конкурентне зв'язування на мембранах НЕК293 клітин, які стабільно експресують АЗ підтип рецептора людини, проводили з використанням агоніста ("291 АВ-МЕСА як радіоактивного ліганду. Мембрани розводили в буфері для зв'язування |зХ0ММ

Ттів-НСІ, рН 7,4; утримуючий 10мММ Мосі»; 1,0ММ ЕОТА; 0,2595 БСА; 2МЕ/мл аденозиндеамінази і 1 змішану таблетку інгібітора протеази/5Омл| при концентраціях 0,2мг/мл. Мембрани (1Омкг/ямку) інкубували з | 7251)

АВ-МЕСА (0,75нм) в кінцевому об'ємі 10О0мкл буфера для зв'язування при 25 оС протягом 1 години за відсутності або у присутності 5ОмМмкМ неміченого ІВ-МЕСА або концентрацій конкуруючих сполук, що збільшуються, в 96-ямковому планшеті для мікротитрування.

При закінченні інкубування аналізи радіолігандного зв'язування А, Аза і Аз підтипів рецептора закінчували за допомогою додавання охолодженого льодом 50мММ Ттіз-НСІ (рН 7,4), доповненого 10ММ МоСіІ» з подальшим швидким фільтруванням через фільтри зі скляним волокном (9б-ямок, СР/В Опігікегв, РасКага, заздалегідь промитих 0,595 поліетиленіміном у харвестері клітин РікКегтайе 196 (РасКага). Фільтрувальні планшети сушили, покривали з розрахунку 5Хомкл/ямку сцинтиляційною рідиною (Місгозсіпі-20, РасКага) і обраховували у ТорСоипі (Раскага). Аналізи проводили у трьох послідовностях. Неспецифічне зв'язування становило 5,6--0,595, 10,8-4-1,490 с і 15,1--2,695 від загального зв'язування в аналізах зв'язування АЇК, Агак і АЗК, відповідно. Ге)

Конкурентне радіолігандне зв'язування підтипу 2Ь аденозинового рецептора: Конкурентне зв'язування на мембранах НЕК293 клітин, які стабільно експресують Ась підтип рецептора людини, проводили з використанням атнагоніста А! рецептора |ЗНІОРСРХ як радіоактивного ліганду. Мембрани розводили в буфері для зв'язування с зо МПОмММ Нерез-КОН, рН 7,4; містить 1,0мМ ЕОТА; 0,1ММ бензамідину і 2МЕ/мл аденозиндеамінази)| при концентраціях 0,Змг/мл. Мембрани (15мкг/ямку) інкубували з | ЗНІ ОРСРХ (15нм) у кінцевому об'ємі 100мкл с буфера для зв'язування при 252С протягом 1 години за відсутності або у присутності 10мкМ неміченого ХАСабо су концентрацій конкуруючих сполук, що збільшуються, у 9б-ямковому планшеті для мікротитрування. При закінченні інкубування аналіз закінчували додаванням охолодженого льодом 10мММ Нерез-КОН (рН 74) буфера з М подальшим швидким фільтруванням через фільтри зі скляним волокном (96б-ямок, СР/В Опігікегв, РаскКага), - попередньо промиті 0,590 поліетиленіміном у харвестері клітин Рікегта(е 196 (РасКага). Фільтрувальні планшети сушили, покривали з розрахунку 5Омкл/ямку сцинтиляційною рідиною (Місгозсіпі-20, Раскага) і обраховували у

ТорСошпі (Раскага). Аналізи проводили у трьох послідовностях. Неспецифічне зв'язування становило 14,3 2,390 « від загального зв'язування.

Специфічне зв'язування |ЗНІ ОРСРХ, І|ЗНІ СО5-21680 і |"25ІЇ АВ-МЕСА визначали як різницю між загальним /-- с зв'язуванням і неспецифічним зв'язуванням. Процент інгібування сполуками розраховували відносно загального ч зв'язування. є» Конкурентні дані аналізували за допомогою ітеративної кривої, відповідної односайтової моделі, і значення

Кі розраховували зі значень ІСво (Спепд апа Ргизої, Віоспет. РІаптасої!.22, 3099-3109, 1973) з використанням програмного забезпечення Ргі2т 2.01. -і Результати. ї» Первинною функцією деяких рецепторів поверхні клітин є розпізнавання відповідних лігандів. Відповідно, авторами даного винаходу визначена афінність лігандного зв'язування для встановлення функціональної ко цілісності підтипу 1 аденозинового рецептора, який експресується дріжджами. Неочищені мембрани, одержані 7 50 від Засспаготусевз сегемізіде, трансформованих конструктом підтипу 1 аденозинового рецептора людини, виявляли специфічне насичене зв'язування | ЗНІ ОРСРХ з КО 4,00,19нм. Значення Кр і Вуах розраховували з со ізотерми насичення і перетворення даних по Скатчарду, які вказують один клас сайтів зв'язування. Щільність сайтів аденозинового зв'язування у препаратах дріжджових мембран оцінювали як 716,8 -43,4фмоль/мг мембранного білка.

Фармакологічні характеристики підтипу рекомбінантних дріжджових клітин, трансформованих підтипом АїЇ

ГФ) рецептора, досліджували за допомогою підтип-селективних аденозинових лігандів (ХАС, ОРСРХ, Со5-15943; юю Сполука 600; Сполука 1002; МЕСА, (К)-РІА, ІВ-МЕСА і алоксазин), які конкурували з |ІЗНІ ОРСРХ в очікуваному ранговому порядку. Криві заміщення, зареєстровані для даних сполук, показали типову крутизну для всіх лігандів, і дані для кожного ліганду можна було моделювати за допомогою односайтового підходу. Видимі 60 константи дисоціації, оцінені з кривих для окремої сполуки (таблиця 5), відповідають опублікованому значенню для рецептора, одержаного з інших джерел. бо Ліганди Кі (нм)

МЕСА 179,6 (ву Рі

ІВ-МЕСА 606,5 веди о Сполука 1002 вв

У таблицях 6-12 показані профілі ефективності і структурної активності дезазапуринів за винаходом. У таблицях 13-14 показана селективність, яка може бути досягнута для сайтів аденозинових рецепторів людини шляхом модулювання функціональних груп біля дезазапуринової структури. У таблиці 14 також показане те несподіване відкриття, що сполуки, вказані в даному описі, володіють субнаномолярною активністю і більш високою селективністю до Азь рецептора у порівнянні зі сполуками в таблиці 13.

Таблиця 6

Вплив Му,-замісника рн ме й

М тру.

З к н пиши сншшш

Сполука В Зв'язування К; 1 Дріжджі ІС» (НМ) с см) (о) 600 - 13,95 37,2

З сн 601 і 1423 510,000 «в та у; (ее) 602 ро 453,5 510,000 0, й 603 196,5 4442,0 с

Й 515,00 516060 че

ШІ КО

1

Ї 297,9 510000

ПИ Ехо рій НИОНННННЯ ПОМОННИ їх 607 ) 309,7 х1060с . и? -і

ЧК» іме) іме)

ІЧ е) іме) 60 б5

608 й 295,1 ! на ШИ е | ! с 193,9

Ге 610 г 111,5

У х і Фе би 511 с ай 785,6 219000 й на Оол шш 612 г 51,8

Се і нас

Транс (5,5)

Гдз 7 726,0

Ж і

КЕ

МнАс

Транс (К,К) 614 ба 32,1

З

«а 615 816,3 2577,0 з Її с а. «а 616 З 34,3 о) ! є;

Таблиця 7 (ее)

Вплив С,-замісника гу" с не и с к

До З кот

Н - 7-24 2 2 2 - («2 (М) 760 604,5 51990с

С 5 с 701 ж 157,7 763,1 « І и? 702 г 198,5 2782,5 Що т ЩО й б с» 7601 я с1,1 297,0 то і 1

ІЧ е)

ВИ та | я 62, нн іме) Е п с М

І Ше б5 -5Д-

Таблиця 8

Вилив замісника пірольного кільця

Ки ді нм п я

М

У м

За п в й А1 ' виш ШИ пре, Тем

Кі(нм) ІС (нм) 800 с Ме Ме 3311 210000 !

НИ

7 Й с к-т І воз а Ме |ме |2210 210300 2 0/9 804 з Я Ме Ме 853,1 с 0 воз У Ме Ме 4512 ї

ШІ 8 От | сч во ча 5-4 Ме |Ме 84513 І

С чі ГГ і (о) 807 з - Ме |Ме / 35,3

Ф

Таблиця 9 г) кнА Ме с

Гай х и сч ро « м- ) -

Ме о ни ПИ ПОЛ пн

Сполука Кк Зв'язування К; | Дріжджі ІС. (М) (нм) 900 1 й 853, ще « ! 1 що що їй нт в! 903 35,3 я пк -

ЧК» ко ко 42) ко 60 б5

Таблиця 10

Вплив М,-замісника

НА ме " с У

Ме ем т ух н юр ОО Я Л 1 ЛА Ок - ОО З

Сполука Зв'язування К; | Дріжджі (нМ) ІСзо (М) 1060 а а 1789 10009 1001 Ї 94,4 1865 ой н Й 75 й і 902 Ї 3,8 82,8 ! ва кону ' 4 й І о о 1004 бу 32,8 545, 8 5 1005 " 147,5 3972 ака сч 1006 й К 151,7 2318 юр г) 1607 її 592,5 »10000 юр 1008 А же 193,1 |3217 со зо єтри сч

Що 7 но М й М Ш 356 |? і 235,3 34162 - ютт ше Шо й то омани їх оре в! з Таблиця 11 п

Вплив Му-замісника чнА ме -І о х че

Жах ї- М Х о) й 20 дк шин ши шнн ишш

Сполука Зв'язування К, Дріжджі 1С.5 с (нм) (нм) 1109 ю- 8,8 115,7 й 60 бо

1102 5-х нини | 10,3 101,3 й 9 1104 Ї 6,5 58,7 аа

ГГ, 1105 105,4 472,1 ! ше

ОТ, б 5.80071162,4 10 ку" за 107 кур 126,5 1297,0 а, 1108 оч 2,3 15 1065 00 и

Й

К

) ше - пл МнАсС 2,5 кон 112 ! 213 ни в с щі 6)

Заблиця 12 «Ретро-амідні» аналоги «НА Ме ай У со то | " сч с м " ух

Н с нини ПО ПО и 7 рин М ШИ й, нм й о е: мне 1201. я, 7,4 285,7 т « що - с 1202 ї 85,8 3345,0 її ; - 1203 5 |525,1 204070 - 1204 1060,9 510009

Й

-| 2 н 1295 о 1272 510090 - Кн ке 71205 Мн; 50,8 1058 ва 70 тр 1207 тр 48,5 701,5 с бо б5

Таблиця 13

Профіль селективпих аленозинових антагоністів їн мо Зв'язування К, (НМ) с

Є

Ї ма хх СІ

У пе тд вс вн - '8- ,0- З , мно ' 70 ян 25,1 48,6 с---- пи в сен 1301 Ме 27,8 50,7 34,6 425,81

Ко 1302 н 29,2 75,6 250,1 1,3 ючи й 1303 о 17,4 111,3 120,5 | 44,8 юн, 13024 оо 13,5- 933,7 138»0 | 21,5 о 30,9 х 1305 кН 73079 305 5 х і о 13057 Й ОН 15, 766,3 168,3 71,7 х | со 1307 29,1 190,6 1143,0 31 х у «аз 1308 "й 180 230 670 1,5 се

От (в) 1309 » 109 199 0,3 рч-

Її м

Я о ї палях 7 « 1310 ї 255 765 55 22,6

Ко і - с - 1311 и 531 981 736 5,3

Б Ж ч » ше ме я я 1312 г 443 2965 р Х -6,2 чен, т чне -І н 1313 зо 55 р с» тів , ко 1311 о 87 204 3077178,02 х !

І

Кк. 20 сн. в і (Фе) 1315 ж ї 75,060 | 720,0001 3,260 507 крани І і 60 б5

1316 ШИ ї 333 710,000 | 710,00017.95 7

Ха Ж ж і 1317 Су 7167006) 7100001 720,000 1 363 те ! х 13187 жо 3,750,5 басжвб, я з3отаоє 630ж76 не ! х 13197 я 1,8 206 502 276 шо х 132075 су 8,0 17531 530 | 15 х 13217 ОМ 8,0 131 1031 545

Я в "2-тієніл-2-іл; 2С5-Н; Зводорозчинний; "Б»5 і К6 являють собою водень; "Кз являє собою З-фторфеніл; ФР являє собою З-хлорфеніл; "Р являє собою 4-піридил; 895 активність (Ф 10мкМ

Таблиця 14

Профіль селективності А» антагоністів та т сч во (о) м бо (ее) су кож сч с

Сполука ХА, ЕЕ Дані зв'язування К, (нм) «

А Аза Азв Аз 1400 -О-РЕ Ме 41,7 21 10146 М 1401 -О-Р(ВЕ Ме 33 58 8,8 18 1402 -О-РрС Ме 825 591 22 60 1403 -М-піридин-2-он Ме І5) 41 18 48 1404 -МН-Ві Ме 49 м 46 «

Таблиця 15

Сполуки, селективні до А -аденозинового рецептора шщ с ж принаймні в 10 разів більш селективний, ніж інші три підтипи

Сполук Структура КА, |Відповідня ІВідповідни |Відповід ів з» а й КА йК-Азь | ний К- и Аз 756 т - у г» 1318 нок, х ю Фе у то Со- !

І і 1315 О- я

І най,

Со

Ф) и іме) бо б5

1318 ож х ши т Й ! під 1319

Ї ' 10 .' 1560 Її ж (т 1321 й Ж бо с

Щі о 1320 що -У- Ж со (ее) с 1500 (й

З | Ге

Со ! | З г. | - 1321 й х в ! « « бо З ж с ва " ! ' ! и т не. ж ти и» 1501 з ве

Ї

- Її СГ» ве 1502 -ї ка нд М-к ма 70 оо

ІЧ е) 1503 сх Ще щ ке 1504 о у; й с»

Сторінки 142-159 відносяться до сполук, специфічних до Ага рецептора

Даний винахід також відноситься до сполук, які селективно зв'язуються з А 24-аденозиновим рецептором, б5 виліковуючи таким чином захворювання, пов'язане з А за-аденозиновим рецептором, у суб'єкта при введенні суб'єкту терапевтично ефективної кількості таких сполук. Захворювання, що піддається лікуванню, пов'язане,

наприклад, із захворюванням центральної нервової системи, серцево-судинним захворюванням, нирковим захворюванням, запальним захворюванням, шлунково-кишковим захворюванням, очним захворюванням, алергічним захворюванням або захворюванням дихальних шляхів.

Даний винахід також відноситься до сполуки, що має структуру: вк

М- в

Сай до. ї-я іт М н

М. де МК.» являє собою заміщене або незаміщене 4-8-ч-ленне кільце; де Кз являє собою заміщене або незаміщене чотирьох-шестичленне кільце; де Кь являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл, арил, арилалкіл, аміно, заміщений арил, де вказаний заміщений алкіл являє собою С(К 7)(Ка)ХК»о, де Х являє собою О, 5 або МК 40, де кожний з К;, і Ка незалежно 75 являє собою М або алкіл, де кожний з К» і Кіо незалежно являє собою алкіл або циклоалкіл, або Ко, Ко і азот разом утворюють заміщене або незаміщене кільце, що містить від 4 до 7 членів; де Ке являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл або циклоалкіл; за умови, що МК.Ко не є З-ацетамідопіперидино, З-гідроксипіролідино, З-метоксикарбонілметилпіролідино,

З-амінокарбонілметил або піролідино; за умови, що МКК» являє собою 3-гідроксиметилпіперидино тільки в тому випадку, якщо Кз являє собою 4-піридил.

Даний винахід також відноситься до способу інгібування активності А за аденозинового рецептора в клітині, який включає контактування вказаної клітини з вищезгаданими сполуками.

Даний винахід також відноситься до сполуки, що має структуру: вк с

Мм-- ДВ дю. й

ДЖ | пе їх М М н

МІ, де МК.» являє собою заміщене або незаміщене 4-8-ч-ленне кільце; со де Кз являє собою заміщене або незаміщене чотирьох-шестичленне кільце; с де Кь являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл, арил, арилалкіл, аміно, заміщений арил, де вказаний заміщений алкіл являє собою-С(К 7)(Ка)ХК»о, де Х являє собою О, 5 або МК 40, де кожний з К; і Ка незалежно с являє собою М або алкіл, де кожний з К» і Ко незалежно являє собою алкіл або циклоалкіл, або Ко, Ко і азот «Е разом утворюють заміщене або незаміщене кільце, що містить від 4 до 7 членів;

Зо де Ке являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл або циклоалкіл; в. за умови, що МК.Ко не є З-ацетамідопіперидино, З-гідроксипіролідино, З-метоксикарбонілметилпіролідино,

З-амінокарбонілметил або піролідино; за умови, що МКК» являє собою 3-гідроксиметилпіперидино тільки в тому випадку, якщо Кз являє собою 4-піридил. «

В одному варіанті здійснення сполуки Кз являє собою заміщене або незаміщене чотирьох-шестичленне кільце, феніл, пірол, тіофен, фуран, тіазол, імідазол, піразол, 1,2,4-триазол, піридин, 2(1Н)-піридон, о) с 4(1Н)-піридон, піразин, піримідин, піридазин, ізотіазол, ізоксазол, оксазол, тетразол, нафталін, тетралін, "» нафтиридин, бензофуран, бензотіофен, індол, 2,3-дигідроїндол, 71Н-індол, індолін, бензопіразол, " 1,3-бензодіоксол, бензоксазол, пурин, кумарин, хромон, хінолін, тетрагідрохінолін, ізохінолін, бензімідазол, хіназолін, піридо(|2,3-б|піразин, піридоїЗ,4-б|піразин, піридоїЇЗ,2-с|Іпіридазин, піридоїЇЗ,4-б|піридин, 1Н-піразоліЗ,4-а)гримідин, птеридин, /2(1Н)-хінолон, 1(2Н)-ізохінолон, 1,4-бензізоксазин, бензотіазол, - хіноксалін, хінолін-М-оксид, ізохшолін-М-оксид, хіноксалін-М-оксид, хіназолін-М-оксид, бензоксазин, фталазин, ї5» цинолін, або має структуру: 7 о Ше ви мо в) со де У являє собою вуглець або азот; де Кз являє собою Н, заміщений або незаміщений алкіл, заміщений або незаміщений арил, галоген, метокси, метиламіно, метилтіо.

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру:

Ге) ваБи

По Її йИ "ОО со. си: де т дорівнює 1 або 2; де К. і Кв, кожний, незалежно являє собою Н,-ОН,-СН 2ОН,-СНСнНоОНн,-С(О)МН», гетероатом або-С(-О)МК.4К.4; де К.4 являє собою арил, заміщений арил, або гетероарил; де К.41 являє собою алкіл або ХК.4", де Х являє собою О або М, і К.4" являє собою заміщений алкіл або арил. в в | іншому варіанті здійснення сполуки КО ОБ» являє собою (0)-2-амінокарбонілпіролідино, (0)-2-гідроксиметилпіролідино, (0)-2-гідроксиметил-транс-4-гідроксипіролідино, піперазино або

З-гідроксиметилпіперидино.

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: ча

Ве "7

АДо

Ве М М н Н де т дорівнює 0, 1, 2 або З; де М являє собою О, З або МЕ, де К являє собою К А або Кв; де КА і Кдвд кожний 70 незалежно являє собою Н.-ОН,-СН ОН,-СНоСНоОН,-С(-О)МН», гетероатом або-С(-О)МК.4К44; де К.і4 являє собою арил, заміщений арил, або гетероарил; де К.1 являє собою алкіл або ХК 44", Де Х являє собою О або М, і К/4" являє собою заміщений алкіл або арил.

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: тд

У ! (Сполука 1600)

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: 4

У оо о їй (8) (Сполука 1601)

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: о Мн; (ее) і , що ч І сч

ФУ

" Ї У с

З и ту « их і - (Сполука 1602)

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: / у ай щі «

М й - с г с и М (Сполука 1603) -і В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: ї- , ка у зи дО

ІЧ е) К я (Сполука 1604)

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: що

Ф) г ок

М а іме) бо і й Мо

М

(Сполука 1605)

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: б5

Со ян н І не ст о (Сполука 1606)

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: м

Фе (Сполука 1607)

Ще в одному варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: сут

Фе а

У наступному варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: с

Су (о) к зо ва, Щі о с

Даний винахід додатково відноситься до сполуки, що має структуру (М): с нс. о т -

НИ. у сн, ї-

ЖЕО с 5

М. дл - с іх де Ко являє собою М або метил. ів . . НЯ а У одному варіанті здійснення сполуки М, сполука має структуру: - ше . і. оС їх г й - й іме) ! р ко (Сполука 1608) с В іншому варіанті здійснення сполуки У, сполука має структуру: ну. о ї й Її --е о Ст. юю Су і ий во Даний винахід також відноситься до способу лікування захворювання, пов'язаного з А 24 аденозиновим рецептором, у суб'єкта, який включає введення суб'єкту терапевтично ефективної кількості будь-якої зі сполук

ІМ або М.

В одному варіанті здійснення способу сполука виліковує вказані захворювання шляхом стимулювання аденілатциклази. 65 В іншому варіанті здійснення способу суб'єкт являє собою ссавця.

В іншому варіанті здійснення способу ссавець є людиною.

В іншому варіанті здійснення способу вказаний А 24 аденозиновий рецептор пов'язаний з хворобою

Паркінсона і захворюваннями, пов'язаними з руховою активністю, розширенням судин, інгібуванням тромбоцитів, нейтрофільним генеруванням супероксиду, порушенням здатності до пізнавання або старечим недоумством.

Захворювання, пов'язані з АЇ, Ага, А2Ь і АЗ аденозиновими рецепторами, описані у М/О 99/06053 і

УОо-09822465, УУО-09705138, УУО-09511681, УУО-09733879, ОР-09291089, РСТ/О598/16053 і патенті США

Мо5516894, повний зміст яких у всій своїй повноті включений в даний опис як посилання.

Даний винахід також відноситься до водорозчинних проліків сполук ІМ або М, де вказані водорозчинні проліки метаболізують іп мімо до активного лікарського засобу, який селективно інгібує А за аденозиновий /о рецептор.

В одному варіанті здійснення проліків вказані проліки метаболізують іп мімо за допомогою каталізованого естеразою гідролізу.

Даний винахід також відноситься до фармацевтичної композиції, що включає проліки їі фармацевтично прийнятний носій.

Даний винахід також відноситься до способу інгібування активності А за аденозинового рецептора в клітині, який включає контактування клітини зі сполукою ІМ або М.

В одному варіанті здійснення способу сполука є антагоністом вказаного Ага аденозинового рецептора.

В іншому варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказана фармацевтична композиція являє собою офтальмологічний препарат.

В іншому варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказана фармацевтична композиція являє собою препарат для пер і окулярної, ретробульбарної або внутрішньоочної ін'єкції.

В іншому варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказана фармацевтична композиція являє собою системний препарат.

Даний винахід також відноситься до способу лікування шлунково-кишкового захворювання у суб'єкта, що с ов Включає введення ефективної кількості сполук ЇМ або М.

В одному варіанті здійснення способу вказане захворювання являє собою діарею. і)

В іншому варіанті здійснення способу суб'єкт є людиною.

В іншому варіанті здійснення способу сполука є антагоністом Ага аденозинових рецепторів.

Даний винахід крім того відноситься до способу лікування захворювання дихальних шляхів у суб'єкта, який со зр Включає введення суб'єкта ефективної кількості сполуки ІМ або М.

В одному варіанті здійснення способу вказане захворювання являє собою астму, хронічне обструктивне с захворювання легень, алергічний риніт або захворювання верхніх дихальних шляхів. с

В іншому варіанті здійснення способу суб'єкт є людиною.

В іншому варіанті здійснення способу сполука є антагоністом Ага аденозинових рецепторів. «

Даний винахід також відноситься до способу лікування пошкодження ока у суб'єкта, який включає введення ча вказаному суб'єкту ефективної кількості сполуки ІМ або М.

В одному варіанті здійснення способу вказане пошкодження включає пошкодження сітківки або зорового головного нерва.

В іншому варіанті здійснення способу вказане пошкодження є гострим або хронічним. «

В іншому варіанті здійснення способу вказане пошкодження є результатом глаукоми, набряку, ішемії, з с гіпоксії або травми.

В іншому варіанті здійснення способу суб'єкт є людиною. ;» В іншому варіанті здійснення способу сполука є антагоністом Ага аденозинових рецепторів.

Даний винахід також відноситься до фармацевтичної композиції, що включає терапевтично ефективну

Кількість сполук ІМ або М і фармацевтично прийнятний носій. -І В одному варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказана терапевтично ефективна кількість є ефективною для лікування хвороби Паркінсона і захворювань, пов'язаних з руховою активністю, розширенням о судин, інгібуванням тромбоцитів, нейтрофільним генеруванням супероксиду, порушенням здатності до

ГІ пізнавання або старечим недоумством.

В іншому варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказана фармацевтична композиція являє собою ю офтальмологічний препарат. с В іншому варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказана фармацевтична композиція являє собою препарат для періокулярної, ретробульбарної або внутрішньоочної ін'єкції.

В іншому варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказана фармацевтична композиція являє собою ов системний препарат.

В іншому варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказана фармацевтична композиція являє собою

Ф) хірургічний зрошувальний розчин. ка Даний винахід також відноситься до комбінованої терапії хвороби Паркінсона, що включає сполуку ІМ або М і будь-який з допамінових підсилювальних агентів. во Даний винахід також відноситься до комбінованої терапії раку, що включає сполуку ІМ або М і будь-який з цитотоксичних агентів.

Даний винахід також відноситься до комбінованої терапії глаукоми, що включає сполуку ІМ або М і агоніст простагландину, мускариновий агоніст або В-2 антагоніст.

Даний винахід також відноситься до упакованої фармацевтичної композиції для лікування у суб'єкта 65 захворювання, пов'язаного з Ага аденозиновим рецептором, що включає: (а) контейнер, що містить терапевтично ефективну кількість сполук ІМ або М; ії (Б) інструкції для використання вказаної сполуки для лікування вказаного захворювання у суб'єкта.

Даний винахід також відноситься до способу одержання сполуки ІМ, що включає стадії а) взаємодії

Ме, Ре о «Коня

І з одержанням о ве бо ну авкі: і де Р являє собою захисну групу, що видаляється; 5) обробки продукту стадії а) в умовах циклізації з одержанням он Ре

Гай ре | в: у т- М ім с) обробки продукту стадії Б) у відповідних умовах з одержанням їй й

Ж | Яв : і в М ій а) обробки хлорованого продукту стадії с) МНК.» з одержанням

Мет я с

ЧУ о

А | во

ХУ вм й де МК.» являє собою заміщене або незаміщене 4-8 членне кільце; со зо де Кз являє собою заміщене або незаміщене чотирьох-шестичленне кільце; де Кь являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл, арил, арилалкіл, аміно, заміщений арил, де вказаний с заміщений алкіл являє собою-С(К 7)(Ка)ХК», де Х являє собою О, З або МК 10, де кожний з К;і Ка незалежно су являє собою М або алкіл, де кожний з К» і К/о незалежно являє собою алкіл або циклоалкіл, або Ко, Ко і атом азоту разом утворюють кільцеву систему з 4-7 членів; « де Ке являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл або циклоалкіл; ча за умови, що МК.Ко не є З-ацетамідопіперидино, З-гідроксипіролідино, З-метоксикарбонілметилпіролідино,

З-амінокарбонілметил або піролідино; за умови, що МК.» являє собою З3-гідроксиметилпіперидино тільки в тому випадку, якщо Кз являє собою 4-піридил. «

Даний винахід також відноситься до способу одержання сполуки М, що включає стадії а) взаємодії з мс. Ре о с и » І з одержанням о Ме Ре з ві ак ць те ;

ГІ де Р являє собою захисну групу, що видаляється; 5) обробки продукту стадії а) в умовах циклізації з одержанням ко он те о

М й с) обробки продукту стадії Б) у відповідних умовах з одержанням а Ре о ся со 1 ко ву ій 4) обробки хлорованого продукту стадії с) спочатку диметиламіном і формальдегідом, потім 60 М-метилбензиламіном і, нарешті, МНЬК. з одержанням

Мня, ве

Гай ре | ть щі ву М ІМ 65 де К. являє собою ацетамідоетил; де К з являє собою 4-піридил, де К 5 являє собою М або метил; де К в являє собою М-метил-М-бензиламінометил.

Як використано в даному описі вираз "сполука є Ага селективною" означає, що сполука має константу зв'язування з Ага аденозиновим рецептором, яка принаймні в десять разів перевищує константу для А 4, Аоь або

Аз аденозинових рецепторів.

Даний винахід додатково проілюстрований наступними прикладами, які жодним чином не треба розглядати як такі, що є додатковими обмеженнями. Зміст всіх посилань, які чекають рішення заявок на патенти і опублікованих заявок на патенти, процитованих в даній заявці, включаючи процитовані в розділі "Передумови створення винаходу, включений в даний опис як посилання. Потрібно розуміти, що моделі, використані в прикладах, є загальноприйнятими моделями, і демонстрування ефективності на даних моделях передбачає 70 ефективність на людях.

Даний винахід буде краще зрозумілий із експериментальних подробиць, що йдуть далі. Однак, фахівець в даній області легко зрозуміє, що конкретні способи і результати, що обговорюються, є тільки ілюстрацією винаходу, як описано більш детально у формулі винаходу, яка йде далі.

Приклад 22: Синтез антагоністів Аза аденозину, сполук 1601, 1602 і 1603. 15 о м І Си шюбтр ти ча го -- и СО т- о ов я ї мон М

Ще С б с" ІН сполука 26 сполука 27 сполука 28 сполука 1601

Сполуку 26 (10,93г, 50,/бммоль) розчиняли у ДМФ (б/мл). Послідовно додавали гідрохлорид 20 4-амідинопіридину (8,0г, 50,7бммоль) і ДБУ (15,4г, 101,5ммоль) і реакційну суміш нагрівали до 852С. Через 22 години реакційну суміш охолоджували до кімнатної температури і ДМФ видаляли у вакуумі. Темне масло розбавляли 2М НОЇ (8Омл). Реакційну суміш залишали для проходження реакції. Через 2 години розчин охолоджували до 102С і фільтрували. Тверду речовину промивали холодною водою і сушили, одержуючи 7,40г 25 жовтої твердої речовини, сполука 27 (6995). "Н-ЯМР (200МГц, д6-ДМСО) 5 6,58 (с, 1Н), 7,27 (с, 1Н), 8,53 (д, см 2Н, 95,6Гц), 9,00 (д, 2Н, 9-5,2Гц), 12,35 (ушир.с, 1Н). Мас-спектр (Е5): 212,8 (М"--1). о

Сполуку 27 (7 4ммоль, 29,8ммоль) розбавляли РОСІ» і нагрівали до 10590. Через 18 годин реакційну суміш охолоджують до кімнатної температури і РОСІз видаляють у вакуумі. Густе темне масло розбавляють Меон (Убмл) з подальшим додаванням ефіру (120мл). Аморфну червону тверду речовину відфільтровують і со 30 промивають ефіром, одержуючи 3,82г червоної твердої речовини. Неочищена тверда речовина, сполука 28, має приблизно 8095-ну чистоту і використовується без додаткового очищення у наступній реакції. /"Н-ЯМР сч (200МГц, а-ДдмМсСО) 5 6,58 (с, 1Н), 7,27 (с, 1), 8,53 (д, 2Н, 2-5,6ГЦ), 9,0 (д, 2Н, 9-52Гщ), 1235 ЙД УСІ (ушир.с, 1Н). Мас-спектр (Е5): 212,8 (М 1). «

Сполука 1601: ДМСО (5мл) і О-пролінол (500мг, 4,94ммоль) додавали до сполуки 28 (500мг, 2,17ммоль). 35 Реакційну суміш нагрівали до 1202. Через 18 годин реакційну суміш охолоджували до кімнатної температуриі їч- розбавляли ЕЮЮАс і Н.О. Шари розділяли і водний шар екстрагували ЕАс (2х). Об'єднані органічні шари промивали НО (2х), насиченим розчином солі, сушили над Ма5О,, фільтрували і концентрували, одержуючи 200мг золотисто-коричневої твердої речовини. Тверду речовину перекристалізовували з ЕЮАс, одержуючи 82мМг «Ф, золотисто-жовтої твердої речовини. ТН-ЯМР (200МГц, а6--ДМСО) 5 2,05 (м, 4Н), 3,43 (м, 1Н), 3,70-4,00 (м, З

ЗН), 4,50 (ушир.с, 1Н), 4,92 (ушир.с, 1Н), 6,62 (м, 1Н), 7,22 (м, 1Н), 8,22 (д, 2Н, 9У-6,0Гц), 6,64 (д, 2Н, с 96,2Гуц); Мас-спектр (Е5) 296,0 (М --1), т.пл.-210-2202С (розкладання). :з» Сполука 1602: Хроматографія (діоксид кремнію, 91, СНС1 з/Меон) давала 10мг золотисто-коричневої твердої речовини (2905). ТН-ЯМР (200МГЦц, а-дмесо) 5 2,00-2,50 (м, 4Н), 4,05 (м, 1Н), 4,21 (м, 1Н), 6,71 (д,

ЛН,9У-3,2Гц), 7,18 (д, 1Н, 9У-3,2Гц), 8,37 (д, 2Н, 9-4,8Гц), 8,56 (д, 2Н, 9У-5,0Гц). Мас-спектр (Е5): 309,1 (М 1). - | Сполука 1603: Хроматографія (діоксид кремнію, 20:11, гексани/ЕЮАс) давала 135мг золотисто-коричневої їх твердої речовини (5395). "Н-ЯМР (200МГЦц, 46-ДМСО) 5 2,00-2,50 (м, 4Н), 4,05 (м, 1Н), 4,21 (м, 1Н), 6,71 (д, 1Н, 0-3,2Гц), 7,18 (д, 1Н, 9-3,2Гц), 8,37 (д, 2Н, 9-4,8Гц), 8,56 (д, 2Н, 9-5,0Гц). Мас-спектр (Е5): 309, 1 (М 1). ю Сполука 1605: У круглодонній колбі ємністю 5Омл розчиняли бомг Не солі ко 20 2-(4-піридил)-4-хлорпіримідинопіролу в 2мл безводного ДМСО. До розчину додавали сіль трифтороцтової кислоти 3-(К)-гідрокси-(Ю0)-пролінолу (38Омг) і 50Омг бікарбонату натрію. Потім суміш продували током со газоподібного азоту протягом 5 хвилин і нагрівали до 1302С. Через 2 години реакційну суміш охолоджували до кімнатної температури і ДМСО видаляли у вакуумі. Залишок розподіляли між Е(ОАс (15мл) і насиченим водним розчином бікарбонату натрію (15мл). Органічний шар відділяли і промивали насиченим розчином солі (15мл) і 29 сушили над Ма»ЗО). Після видалення розчинника неочищений продукт очищали препаративною ТШХ

ГФ) (СНоСІ/МеонН-95/5), одержуючи ЗБмг (5095). "Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІї) 2,3-2,5 (1Н), 3,4-3,8 (ЗН), 4,4-4,6

Ге (2Н), 6,4 (1Н), 7,1 (1Н), 8,2 (д, 2Н), 8,7 (д, 2Н), 11,0 (1Н). Мас-спектр (Е5): 312 (М" 1).

Приклад 23: Синтез антагоніста Ага аденозину, сполука 1606.

СУ бо а у ч м у --- у се стик сік сполука 28 сполука 29 сполука 1606

Сполуку 28 (200мг) обробляли ДМФ (ЗОмл), метиловим ефіром 2,2-диметилгліцину (7Змг НСЇ солі в 2мл води) бо і БООбмг бікарбонату натрію. Через 18 годин ДМФ видаляли у вакуумі. Залишок розподіляли між Е(ОАс (ЗОмл) і насиченим водним розчином бікарбонату натрію (15мл). Органічний шар промивали насиченим розчином солі (15мл), сушили над сульфатом натрію, фільтрували і концентрували. Хроматографія (діоксид кремнію, 10:4, гексани/Е(Ас) давала 150мг чистого продукту, сполука 29 (69965). "Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІв)1,4 (с, 6Н); 3,8 (с,

ЗН); 3,9 (с, 2Н); 6,4 (с, 1Н); 7,4-7,5 (м, ЗН); 8,4 (м, 2Н); 9,8 (с, 1Н).

Сполука 1606: Спосіб одержання такий же, як для сполуки 1605 (7296). "Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІв) 1,3 (с, б6Н), 1,7-1, 9 (м, 2Н); 2,05-2,30 (м, 2Н); 3,6-4,1 (м, 11); 4,80-4,95 (м, 1Н); 6,4 (с, 1); 7,4-7,6 (м, ЗН); 8,3-8,4 (д, У-8,5Гц, 2Н), 10 (с, 1Н). Мас-спектр (Е5): 424,0 (М"1).

Наступні сполуки можуть бути синтезовані аналогічним чином.

Сполука 1600: (5195) Мас-спектр (Е5) 326,0 (М 1).

Сполука 1607: "Н-ЯМР (200МГЦц, СОСІї) 1,40-1,80 (м, 5Н), 2,80-3,50 (м, ЗН), 4,60-4,80 (м, ЗН), 6,66 (д, 1Н, 9а-6,2Гц), 7,26 (м, 1Н), 8,21 (д, 2Н, У-6,3Гц), 8, 65 (д, 2Н, У-5,8Гц), 11,90 (с, 1Н). М5 (Е5): 310,1 (М"1).

Сполука 1608: (6495) "Н-ЯМР (200МГЦц, д6-ДМСО) 1,75 (с, ЗН), 2,11 (с, ЗН), 2,29 (с, ЗН), 3,56 (м, бН), 7,23-7,А1 (м, 5Н), 8,00 (ушир.с, 1Н), 8,23 (д, 2Н, 9У-6,0ГЦ), 8,63 (д, 2Н, 9У-5,4ГЦ), 8,82 (ушир.с, 1Н), 11,56 (ушир.с, 1Н). Мас-спектр (Е5): 444,0 (М 1).

Сполука 1609: "Н-ЯМР (200МГц, СО300) 3,40 (м, 4Н), 4,29 (м, 4Н), 6,99 (с, 1Н), 7,5-7,2 (м, ЗН), 7,90 (д, 2Н), 8,39 (д, 2Н), 8,61 (д, 2Н). М5 (ЕБ): 357,0 (М'-1).

Таблиця 16

Сполуки, селективні до А -аденозинового рецептора

Структура Відпов| КА» ідний ідний К-Аз

КАХ, К-АА» 1600 г щ й

Ї ій - (8)

З | й ! у й ' : 1601 -Ш25- тк со що он

Ї Й у щи с с

Фе « і з м й вт і - 1602 СУ нн я р, ї й о цщ со з с

М с : " 1 и? Итттт патини -І

ЧК» іме) з 50

ІЧ е)

Ф) іме) 60 б5

1603 | я о

С н Н ! г | У по І

С їбоє І У х н

Ф зи и й 1605 чо х и

М

-О

Ж ши лий 1606 ок Ш о Га

Фо я о і с Й я ; / і не (ее) 1607 х й Су г " с - М, с | « ! з м ІЧ

Кт - 1608 сі х

Шк с я « мн А Ф

А - с ут те . "» й 15 Сторінки 160-199 відносяться до сполук, специфічних до Аз рецептора -1 Даний винахід також оснований на сполуках, які селективно зв'язуються з А з аденозиновим рецептором, таким чином сприяючи лікуванню захворювання, пов'язаного з Аз аденозиновим рецептором у суб'єкта шляхом т» введення суб'єкту терапевтично ефективної кількості таких сполук. Захворювання, що піддається лікуванню, т відноситься, наприклад, до астми, гіперчутливості, риніту, сінної лихоманки, сироваткової хвороби, алергічного васкуліту, атопічного дерматиту, дерматиту, псоріазу, екземи, ідіопатичного фіброзу легень, ко еозинофільного холециститу, хронічного захворювання дихальних шляхів, гіпереозинофільних синдромів, со еозинофільного гастроентериту, набряку, кропивниці, еозинофільного захворювання міокарда, періодичного ангіоневротичного набряку з еозинофілією, запального захворювання кишечника, виразкового коліту, алергічного грануломатозу, карциноматозу, еозинофільної гранульоми, спадкового гістиоцитозу, гіпертензії, дегрануляції тучних клітин, пухлини, серцевої гіпоксії церебральної ішемії, діурезу, ниркової недостатності, неврологічного захворювання, психічного порушення, порушення здатності до пізнавання, ішемії міокарда,

ГФ) бронхостенозу, артриту, аутоїмунного захворювання, хвороби Крона, хвороби Граве, діабету, розсіяного 7 склерозу, анемії, псоріазу, порушень здатності відтворення потомства, системного Червоного вовчака, реперфузійного пошкодження, діаметру артеріол мозку, вивільнення алергічних медіаторів, склеродерми, во інсульту, загальної ішемії порушення центральної нервової системи, серцево-судинного захворювання, ниркового захворювання, запального захворювання, шлунково-кишкового захворювання, очного захворювання, алергічного захворювання, захворювання дихальних шляхів або імунологічного захворювання.

Даний винахід також відноситься до сполуки, що має структуру: б5 ше ве

Гсай о є ву М ім , де Ку являє собою Н, і К »2 являє собою циклопропілметиламінокарбонілетил, цис-3-гідроксициклопентил, ацетамідобутил, метиламінокарбоніламінобутил, етиламінокарбоніламінопропіл, метиламінокарбоніламінопропіл, 2-ацетиламіно-3-метилбутил, М,М-діетиламінокарбоніламіноетил, 70 тіоацетамідоетил, З-аміноацетилоксициклопентил, З-гідроксициклопентил, 2-піролілкарбоніламіноетил, 2-імідазолідинонетил, 1-амінокарбоніл-2-метилпропіл, 1-амінокарбоніл-2-фенілетил, З-гідроксіазетидино, 2-імідазолілетил, ацетамідоетил, 1-(К)-феніл-2-гідроксіетил, М-метиламінокарбонілпіридил-2-метил, або К. КЕ» і азот разом являють собою З3-ацетамідопіперидино, З3-гідроксипіролідино, З-метилоксикарбонілметилпіролідино,

З-амінокарбонілметилпіролідино або З-гідроксиметилпіперидино, де Кз являє собою заміщене або незаміщене чотирьох-шести членне кільце, пірол, тіофен, фуран, тіазол, імідазол, опіразол, 1,2,4-триазол, піридин, 2(1Н)-піридон, 4(1Н)-піридон, піразин, піримідин, піридазин, ізотіазол, ізоксазол, оксазол, тетразол, нафталін, тетралін, нафтиридин, бензофуран, бензотіофен, індол, 2,3-дигідроіїндол, 1Н-індол, індолін, бензопіразол, 1,3-бензодіоксол, бензоксазол, пурин, кумарин, хромон, хінолін, тетрагідрохінолін, ізохінолін, бензімідазол, хіназолін, піридо(2,3-б|піразин, піридоїЇЗ,4-б|піразин, піридоїЇЗ,2-е|піридазин, піридоїЇЗ,4-б|піридин, 1Н-піразоліІЗ,4-4|піримідин, птеридин, 2(1Н)-хінолон, 1(2Н)-ізохінолон, 1,4-бензізоксазин, бензотіазол, фталазин або цинолін, де К5 являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл, арил або заміщений арил, де Ке являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл або циклоалкіл.

Даний винахід також відноситься до способу інгібування активності А з аденозинового рецептора в клітині, Ге! який включає контактування клітини з вищезгаданими сполуками. о

Типові схеми синтезу для одержання проміжних сполук дезазапурину за винаходом представлені у загальних рисах нижче на схемі І.

Даний винахід також відноситься до способу одержання сполуки ІМ, що включає стадії а) взаємодії (ее)

М", Рв о й но, і ва с й с з одержанням чІ лав я їх й ї; їкея

Р де Р являє собою захисну групу, що видаляється; « 5) обробки продукту стадії а) в умовах циклізації з одержанням он т - од

Ко: хна с) обробки продукту зі стадії б) у відповідних умовах з одержанням с ве

Дю їі ї» цес | ! ся ко с) обробки хлорованого продукту стадії с) МНК.Р» з одержанням з 50 МАР ге

Гай

ФСУ» щі

Ву М М де Ку являє собою Н, і К »2 являє собою циклопропілметиламінокарбонілетил, цис-3-гідроксициклопентил, ацетамідобутил, метиламінокарбоніламінобутил, етиламінокарбоніламінопропіл,

ГФ) метиламінокарбоніламінопропіл, 2-ацетиламіно-3-метилбутил, М,М-діетиламінокарбоніламіноетил, 7 тіоацетамідоетил, З-аміноацетилоксициклопентил, З-гідроксициклопентил, 2-піролілкарбоніламіноетил, 2-імідазолідинонетил, 1-амінокарбоніл-2-метилпропіл, 1-амінокарбоніл-2-фенілетил, З-гідроксіазетидино, во 2-імідазолілетил, ацетамідоетил, 15(К)-феніл-2-тідроксіетил, М-метиламінокарбонілпіридил-2-метил, або В. г і азот разом являють собою З3-ацетамідопіперидино, З3-гідроксипіролідино, З-метилоксикарбонілметилпіролідино,

З-амінокарбонілметилпіролідино або З-гідроксиметилпіперидино, де Кз являє собою заміщене або незаміщене чотирьох-шести членне кільце; де К5 являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл або циклоалкіл; де Ке являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл, арил або заміщений арил. бо Даний винахід також відноситься до способу одержання сполуки М, що включає стадії а) взаємодії

Ме Ре о - і ви

Р з одержанням

Ме Рв

Ж

В М Ре

З Н н 70 о де Р являє собою захисну групу, що видаляється; 5) обробки продукту стадії а) в умовах циклізації з одержанням он Ав

М

Ж | Во: хх ву М М с) обробки продукту зі стадії б) у відповідних умовах з одержанням с ве

М го. Що

У

Ву М Кк с) обробки хлорованого продукту стадії с) МНЄСНа(СНо)тСсНоМнНОТесток і з одержанням

МНАсНаСНатсНЬМНе(зО)ВА ве с

З о

Хо сх Ш- вм й де т дорівнює 0, 1 або 2; со зо де Кі являє собою циклопропілметил, метил, метиламіно або амінометил; де Кз являє собою арил, заміщений арил, гетероарил; Ге де Кь являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл, арил, арилалкіл, аміно, заміщений арил, де вказаний сч заміщений алкіл являє собою-С(К7)(Ка)МКоК.о, Де кожний з К, і Кз являє собою М або алкіл, де кожний з Ке і Ко являє собою алкіл або циклоалкіл, або Ко, Ко і атом азоту разом утворюють кільцеву систему з 4-7 членів. «І де Ке являє собою М, алкіл, заміщений алкіл або циклоалкіл. м

Даний винахід додатково відноситься до способу одержання сполуки МІ, що включає а) взаємодії

Мо Ре р . с « «Х і Ру і - с з одержанням ;» жи ше я -і й ; їз де Р являє собою захисну групу, що видаляється; 5) обробки продукту стадії а) в умовах циклізації з одержанням ко он Ве му 0 р ре | Вк: со ву й с) обробки продукту зі стадії б) у відповідних умовах з одержанням а Я ті

Ф а де а) обробки хлорованого продукту стадії с) нн 60 ( ;

МнАс з одержанням б5

С

М Ре

Гай се»

Я я М м де Кз являє собою незаміщений арил, де Ке являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл або циклоалкіл; 70 де Кь являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл, арил, арилалкіл, аміно, заміщений арил, де вказаний заміщений алкіл являє собою-С(К7)(Ка)МК»оК.о, де кожний з К; і Кз являє собою М або алкіл, де кожний з Ка і Ко являє собою алкіл або циклоалкіл, або Ко, Ко і атом азоту разом утворюють кільцеву систему з 4-7 членів.

Даний винахід також відноситься до сполуки, що має структуру:

В.

Сою--в, Ве -

А | те зм М

Ку Н

Ім де Кі являє собою Н, і К » являє собою циклопропілметиламінокарбонілетил, цис-3-гідроксициклопентил, ацетамідобутил, метиламінокарбоніламінобутил, етиламінокарбоніламінопропіл, метиламінокарбоніламінопропіл, 2-ацетиламіно-3-метилбутил, М,М-діетиламінокарбоніламіноетил, тіоацетамідоетил, З-аміноацетилоксициклопентил, З-гідроксициклопентил, 2-піролілкарбоніламіноетил, 2-імідазолідинонетил, 1-амінокарбоніл-2-метилпропіл, 1-амінокарбоніл-2-фенілетил, З-гідроксіазетидино, 2-імідазолілетил, ацетамідоетил, 1-(К)-феніл-2-гідроксіетил, М-метиламінокарбонілпіридил-2-метил, або К- Кі. СІ атом азоту разом являють собою З-ацетамідопіперидино, З-гідроксипіролідино, о

З-метилоксикарбонілметилпіролідино, З-амінокарбонілметилпіролідино або З3-гідроксиметилпіперидино, де Кз являє собою заміщений або незаміщений бензол, пірол, тіофен, фуран, тіазол, імідазол, піразол, 1,2,4--риазол, піридин, 2(1Н)-піридон, 4(1Н)-піридон, піразин, піримідин, піридазин, ізотіазол, ізоксазол, оксазол, тетразол, нафталін, тетралін, нафтиридин, бензофуран, бензотіофен, індол, 2,3-дигідроіндол, (ее)

ЗН-індол, індолін, бензопіразол, 1,3-бензодіоксол, бензоксазол, пурин, кумарин, хромон, хінолін, сч тетрагідрохінолін, ізохінолін, бензімідазол, хіназолін, піридо(|2,3-б|піразин, піридоїЗ,4-б|піразин, піридоїЇЗ,2-с|Іпіридазин, піридоїЇЗ,4-б|піридин, 1Н-піразоліІЗ,4-4|гримідин, птеридин, 2(1Н)-хінолон, Є 1(2Н)-ізохінолон, 1,4-бензізоксазин, бензотіазол, хіноксалін, хінолін-М-оксид, ізохінолін-М-оксид, « хіноксалін-М-оксид, хіназолін-М-оксид, бензоксазин, фталазин або цинолін, де К5 являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл, арил або заміщений арил; че де Ке являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл або циклоалкіл.

В одному варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: ви « іі і но - п г й п » бр сн В) -І М

В іншому варіанті здійснення сполуки Кз являє собою феніл. т» В іншому варіанті здійснення сполуки Ко являє собою водень або метил. т В іншому варіанті здійснення сполуки К 5 являє собою водень, метил, феніл, З-хлорфенілоксиметил або транс-2-феніламінометилпіролідинометил. ко Даний винахід далі відноситься до сполуки, що має структуру: о с ра р; Й м ле

Гай

Ф АХ що юю й й

М во де т дорівнює 0, 1 або 2; де Кі являє собою циклопропілметил, метил, метиламіне або амінометил; де Кз являє собою арил, заміщений арил або гетероарил; де Кь являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл, арил, арилалкіл, аміно, заміщений арил, де вказаний заміщений алкіл являє собою-С(К7)(Ка)МК»оК.о, де кожний з К; і Кз являє собою М або алкіл, де кожний з Ка і Ко б5 являє собою алкіл або циклоалкіл, або Ко, Ко і азот разом утворюють кільцеву систему, що містить від 4 до 7 членів;

де Ке являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл або циклоалкіл.

В одному варіанті здійснення сполуки М, т дорівнює 0, і Кз являє собою феніл.

В іншому варіанті здійснення сполуки М, т дорівнює 1, і Кз являє собою феніл.

В іншому варіанті здійснення сполуки М, т дорівнює 2, і Кз являє собою феніл.

В іншому варіанті здійснення сполуки М, К5б і Ко є метилами.

В іншому варіанті здійснення сполуки У, сполука має структуру: пн.

АХ. 70 щі

Мк сн, -Й

Жах І й " (Сполука 1316)

В іншому варіанті здійснення сполуки У, сполука має структуру: на, д-

Ще ун сні с ; о Ї У Ге) су й (Сполука 1311) (ее)

В іншому варіанті здійснення сполуки У, сполука має структуру: с і їй ти « й - тк тяз3

А.

СУ у ч ! - с (Сполука 1202) :з» В іншому варіанті здійснення сполуки У, сполука має структуру:

Кун я - в ї нн св. ко - ад | у; т іме) я

ІЧ е) (Сполука 1310)

В іншому варіанті здійснення сполуки У, сполука має структуру: у о ва

По) М бо Ї /" г У м, (Сполука 1312) 65 Винахід далі відноситься до сполуки, що має структуру:

че, з о ст, 4 ( т | в: ся, су" я

М М

(Сполука 609) 70 Винахід також відноситься до сполуки, що має структуру:

МНАс

С с

АДОт сад М т й мМ де Кз являє собою незаміщений арил; де Ке являє собою Н, алкіл, заміщений алкіл або циклоалкіл; де Кь являє собою М, алкіл, заміщений алкіл, арил, арилалкіл, аміно, заміщений арил, де вказаний 2о Заміщений алкіл являє собою-С(К7)(Ка)МКоК.о, де кожний з К; і К5 являє собою М або алкіл, де кожний з Кв і Ко являє собою алкіл або циклоалкіл, або К о, Ко і азот разом утворюють кільцеву систему, що містить від 4 до 7 членів.

В одному варіанті здійснення сполуки МІ, сполука має структуру: ін сн;

Ст т о є се о 7 (ее) (Сполука 1309)

Іанті здій с

У одному варіанті здійснення сполуки 1309, сполука має структуру:

Сл с о "т сну т с че

Ср ех н

В іншому варіанті здійснення сполуки 1309, сполука має структуру: « тут - с ст и іх. я з» сну

Ж к | У т

Зк Тр -і щ» - й . .

Даний винахід також відноситься до сполуки, що має структуру: іме) й "дн ве іме) 2

Ре

ІЧ е) тем н

МІ І де Кі являє собою З-гідроксициклопентилетиламінокарбоніламіно, М,М-діетиламінокарбоніламіноетил, тіоацетамідоетил, З-аміноацетилоксициклопентил, З-гідроксициклопентил, 2-піролілкарбоніламіноетил,

ГФ) 2-імідазолідинонетил, 1-амінокарбоніл-2-метилпропіл, 1-амінокарбоніл-2-фенілетил, З-гідроксіазетидино, 7 2-імідазолілетил, ацетамідоетил, 1-(К)-феніл-2-гідроксіетил або М-метиламінокарбонілпіридил-2-метил; де Кб» і Ко незалежно являють собою Н, заміщений або незаміщений алкіл або арил. во В одному варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: б5 т". о во се в ти ст

Що Со- (Сполука 1700) 70 В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: не ни це се су М (Сполука 1701)

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: те н. не сч нн сн о й бр-- (ее) зо (Сполука 1702)

І п с

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру:

Її с

Ж т у і - т Сн, "й | У «

Сну я з с ; - (Сполука 1704)

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру:

Щі 7 о «г» о ю 2 му 0 т риз - со « тру. з 7 А м Й (Сполука 1705)

ГФ) В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: но, у 60 Мн 65 (Сполука 1706)

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру:

й 95 бо ст

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: чу

Со " ті

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: но, "5 аву и Га о

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: но і с то че сч

Фо ч со : і -

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: г о ; « " не - с чи . » п й | х я я й -І їз (Сполука 1707)

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: їх) -ї в СА со це ва

Ф) ке (Сполука 1708)

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: 60 б5 нм. о в

Мн сну с з 7 су її (Сполука 1709)

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: нн о аа у 7 х (Сполука 1710)

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру:

Б с г х с | уч М о Ге) (Сполука 1712)

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: со бот с

Гай нм се стен зи у в « м. (Сполука 1713)

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: щити мВ, « бр ні - во у ;»

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: т -І їх чн в т Іф,

Ту І о. ма 70 - со й (Сполука 1714)

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру:

То

ГФ) мя о) | фо ов К - 60 а

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: б5

У- й о

І Ї з су ї с. (Сполука 1715)

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру:

У-ї н о» вн й Ср і сте -о

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: - у-

Є

Су о

Даний винахід також відноситься до сполуки, що має структуру: ве в. и Ре (ге) р сч і те

М с н

Ут | «І де К/ Ко і атом азоту разом являють собою З-гідроксипіролідино, З-метилоксикарбонілметилпіролідино, м

З-амінокарбонілметилпіролідино або З-гідроксиметилпіперидино; де Кб» і Ко незалежно являють собою Н, заміщений або незаміщений алкіл або арил.

В одному варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: їй «

Х - я Фе ч п т су І (Сполука 1711)

Ш- ; гацті япій .

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: «їз» чо

Ї іме) т шк к | У со сут ря ЧИ, (Сполука 1703)

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: (Ф) не,

Є бо "й У я

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: б5 но,

М" "й У у/ м су и м й

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: що

Ї а от о (Сполука 1716)

Й

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру:

А т сч ф (о) пс | і д су у с

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: ча с с 5-7 ч а те ей | У

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: не ші во 2» бра с

Су о -І ї5» (Сполука 1717)

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: ко -ї а тю С

ІЧ е) р н | У сі одадия, о В іншомуваріанті здійснення сполуки, сполука має структуру: чне й 7 60 р т | У ді й М

І Ї й Й 6-Х !

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: б5

С

М й Со - ах о сю о с (Сполука 1718)

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру: 70 Фе їх зе я о с

В іншому варіанті здійснення сполуки, сполука має структуру:

С ч со в

Даний винахід також відноситься до способу лікування захворювання, пов'язаного з АЗ аденозиновим Ге! рецептором у суб'єкта, який включає введення суб'єкту терапевтично ефективної кількості будь-якої зі сполук о

ІМ, М, МІ! або МІП.

В одному варіанті здійснення способу суб'єкт являє собою ссавця.

В іншому варіанті здійснення способу ссавець є людиною.

В іншому варіанті здійснення способу вказаний АЗ аденозиновий рецептор пов'язаний із захворюванням (ее) центральної нервової системи, серцево-судинним захворюванням, астмою, гіперчутливістю, ринітом, сінною лихоманкою, сироватковою хворобою, алергічним васкулітом, атонічним дерматитом, дерматитом, псоріазом, с екземою, ідіопатичним фіброзом легень, еозинофільним холециститом, хронічним захворюванням дихальних Ге шляхів, гіпереозинофільним синдромом, еозинофільним гастроентеритом, набряком, кропивницею, еозинофільним захворюванням міокарда, періодичним ангіоневротичним набряком з еозинофілією, запальним З захворюванням кишечника, виразковим колітом, алергічним грануломатозом, карциноматозом, еозинофільною - гранульомою, спадковим гістиоцитозом, гіпертензією, дегрануляцією тучних клітин, пухлиною, серцевою гіпоксією, церебральною ішемією, діурезом, нирковою недостатністю, неврологічним захворюванням, психічним порушенням, порушенням пізнавальної здатності, ішемією міокарда, бронхостенозом, артритом, аутоїмунним « захворюванням, хворобою Крона, хворобою Граве, діабетом, розсіяним склерозом, анемією, псоріазом, порушеннями здатності відтворення потомства, системним червоним вовчаком, реперфузійним пошкодженням, - с діаметром артеріол мозку, вивільненням алергічних медіаторів, склеродермою, інсультом, загальною ішемією, а порушенням центральної нервової системи, серцево-судинним захворюванням, нирковим захворюванням, ,» запальним захворюванням, шлунково-кишковим захворюванням, очним захворюванням, алергічним захворюванням, захворюванням дихальних шляхів або імунологічним захворюванням.

Захворювання, пов'язані з АТ, Ага, А2Ь і АЗ аденозиновими рецепторами описані у М/О 99/06053 і -і УОо-09822465, УУО-09705138, УУО-09511681, УУО-09733879, ОР-09291089, РСТ/О598/16053 і патенті США 1» Мо5516894, повний зміст яких у всій своїй повноті включений в даний опис як посилання.

Даний винахід також відноситься до водорозчинних проліків будь-якої зі сполук ІМ, М, МІ, МІ або МІ; де ко вказані водорозчинні проліки метаболізують іп мімо до активного лікарського засобу, який селективно інгібує т 50 АЗ аденозиновий рецептор.

В одному варіанті здійснення проліків вказані проліки метаболізують іп мімо за допомогою каталізованого

ІЧ е) естеразою гідролізу.

Даний винахід також відноситься до фармацевтичної композиції, що включає проліки їі фармацевтично прийнятний носій.

Даний винахід також відноситься до способу інгібування активності АЗ аденозинового рецептора в клітині, який включає контактування вказаної клітини з будь-якою зі сполук ІМ, М, МІ, МІ або МІ. о В одному варіанті здійснення способу сполука є антагоністом вказаного АЗ аденозинового рецептора. іме) В іншому варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказана фармацевтична композиція являє собою офтальмологічний препарат. 60 В іншому варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказана фармацевтична композиція являє собою препарат для періокулярної, ретробульбарної або внутрішньоочної ін'єкції.

В іншому варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказана фармацевтична композиція являє собою системний препарат.

Даний винахід також відноситься до способу лікування шлунково-кишкового захворювання у суб'єкта, що 65 включає введення ефективної кількості будь-якої зі сполук ІМ, М, МІ, МІЇ або МІП.

В одному варіанті здійснення способу вказане захворювання являє собою діарею.

В іншому варіанті здійснення способу суб'єкт є людиною.

В іншому варіанті здійснення способу сполука є антагоністом АЗ аденозинових рецепторів.

Даний винахід крім того відноситься до способу лікування захворювання дихальних шляхів у суб'єкта, який

Включає введення суб'єкта ефективної кількості будь-якої зі сполук ІМ, М, МІ, МІ або МІ.

В одному варіанті здійснення способу вказане захворювання являє собою астму, хронічне обструктивне захворювання легень, алергічний риніт або захворювання верхніх дихальних шляхів.

В іншому варіанті здійснення способу суб'єкт є людиною.

В іншому варіанті здійснення способу сполука є антагоністом АЗ аденозинових рецепторів. 70 Даний винахід також відноситься до способу лікування пошкодження ока у суб'єкта, який включає введення вказаному суб'єкту ефективної кількості будь-якої зі сполук ІМ, М, МІ, МІІ або МІП.

В одному варіанті здійснення способу вказане пошкодження включає пошкодження сітківки або зорового головного нерва.

В іншому варіанті здійснення способу вказане пошкодження є гострим або хронічним.

В іншому варіанті здійснення способу вказане пошкодження є результатом глаукоми, набряку, ішемії, гіпоксії або травми.

В іншому варіанті здійснення способу суб'єкт є людиною.

В іншому варіанті здійснення способу сполука є антагоністом АЗ аденозинових рецепторів.

Даний винахід також відноситься до фармацевтичної композиції, що включає терапевтично ефективну

Кількість будь-якої зі сполук ІМ, М, МІ, МІ! або МІ ії фармацевтично прийнятний носій.

В одному варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказана терапевтично ефективна кількість є ефективною для лікування захворювання дихальних шляхів або шлунково-кишкового захворювання.

В іншому варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказане шлунково-кишкове захворювання являє собою діарею. с

В іншому варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказане захворювання дихальних шляхів являє собою астму, алергічний риніт або хронічне обструктивне захворювання легень. і)

В іншому варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказана фармацевтична композиція являє собою офтальмологічний препарат.

В іншому варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказана фармацевтична композиція являє собою со зо препарат для періокулярної, ретробульбарної або внутрішньоочної ін'єкції.

В іншому варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказана фармацевтична композиція являє собою с системний препарат. с

В іншому варіанті здійснення фармацевтичної композиції вказана фармацевтична композиція являє собою хірургічний зрошувальний розчин. «

Даний винахід також відноситься до упакованої фармацевтичної композиції для лікування захворювання, ї- пов'язаного з Аз аденозиновим рецептором, у суб'єкта, що включає: (а) контейнер, який містить терапевтично ефективну кількість будь-якої зі сполук ІМ, М, МІ, МІЇ або МІ; ії (Б) інструкції для використання вказаної сполуки для лікування вказаного захворювання у суб'єкта.

Сполуки, представлені формулами ІМ, М, МІ, МІЇ або МІ, можуть бути синтезовані згідно зі схемами І1-ЇХ. «

Як використано в даному описі, вираз "сполука є Аз селективною" означає, що сполука має константу ств) с зв'язування з АЗ аденозиновим рецептором, яка принаймні в десять разів перевищує константу для

А, Аза або Азу аденозинових рецепторів. ;» Даний винахід додатково проілюстрований наступними прикладами, які жодним чином не треба розглядати як такі, що є додатковими обмеженнями. Зміст всіх посилань, що чекають рішення заявок на патенти і опублікованих заявок на патенти, процитованих в даній заявці, включаючи процитовані у розділі "Передумови -І створення винаходу, включений в даний опис як посилання. Потрібно розуміти, що моделі, використані в прикладах, є загальноприйнятими моделями, і демонстрація ефективності на даних моделях передбачає пи ефективність на людях. ко Фахівець в даній області буде знати, що метаболізм описаних тут сполук у суб'єкта продукує певні біологічно активні метаболіти, які можуть служити як лікарські засоби. ю Даний винахід буде краще зрозумілий з експериментальних подробиць, які йдуть далі. Однак, фахівець в с даній області легко зрозуміє, що конкретні способи і результати, що обговорюються, є тільки ілюстрацією винаходу, як описано більш детально у формулі винаходу, яка йде далі.

Приклад 24: Експериментальні АЗ аденозинові антагоністи

Сполука 1700 (таблиця 17, нижче): Мас-спектр (Е5) 366,1 (М 7-1). о Сполука 1710 (таблиця 17, нижче): Мас-спектр (Е5) 381,1 (М 1).

Сполука 1316 (таблиця 17, нижче): Мас-спектр (Е5) 353,2 (М--1). о Сполука 1703 (таблиця 17, нижче): Мас-спектр (Е5) 357,1 (М 1).

Сполука 1719 (таблиця 17, нижче): "Н-ЯМР (200МГЦц, аб-ДМСО) (1,75 (м, 2Н), 3,11 (м, 2Н), 3,35 (с, ЗН), 60 359 (м, 2Н), 5,72 (м, 1Н), 5,96 (м, 1Н), 6,55 (с, 1Н), 7,15 (с, 1Н), 7,49 (м, 2Н), 8,32 (м, 2Н).)

Сполука 1704 (таблиця 17, нижче): Мас-спектр (Е5) 367,0 (М 1).

Сполука 1706 (таблиця 17, нижче); "Н-ЯМР (200МГц, СОСІв) а 1,22 (м, 2Н), 1,60-2,40 (м, 4Н), 4,53 (м, 1Н), 4,94 (м, 1Н), 5,70 (д, 1Н, 9У-8,2Гц), 6,35 (д, 1Н, 9-2, 8Гц), 6,97 (д, 1Н, 92-2,0ГуЦ), 7,50 (м, ЗН), 8,40 65 (м, 2Н), 10,83 (ушир.с, 1Н).

Сполука 1707 (таблиця 17, нижче): Мас-спектр (Е5) 347,0 (М" 1).

Сполука 1708 (таблиця 17, нижче): Мас-спектр (Е5) 399,0 (М7 1).

Сполука 1709 (таблиця 17, нижче): Мас-спектр (Е5) 385,9 (М 1).

Сполука 1710 (таблиця 17, нижче): Мас-спектр (Е5) 434,0 (М 7-1).

Сполука 1711 (таблиця 17, нижче): "Н-ЯМР (200МГц, СО3О00) а 3,95 (д, 2Н, У-5,8Гц), 4,23-4,31 (м, 2Н), 4,53 (т, 2Н, 2-8,8Гц), 6,30 (д, 1Н, 9У-3,0ГЦ), 6,98 (д, 71Н, 9У-3,0ГЦ), 7,45-7,48 (м, ЗН), 7,83-8,42 (м, 2Н), 9,70 (ушир.с, 1Н). Мас-спектр (Е5) 281, 1 (М"--1).

Сполука 1712 (таблиця 17, нижче): "Н-ЯМР (200МГц, СО3О0) а 3,02 (м, 2Н), 3,92 (м, 2), 5,09 (2,2Н), 0 6,53 (с, 1Н), 6,90-7,04 (ушир.с, 71Н), 6,92 (м, 2Н), 7,02 (м, 1), 7,21 (дд, ЯН, уУ-8,2Гц), 7,40 (м, ЗН), 7,50-7,80 (ушир.с, 1Н), 8,33 (м, 2Н). Мас-спектр (Е5) 445,1 (М'1).

Сполука 1713 (таблиця 17, нижче 1Н-ЯМР (200МГц, СОС) а 1,65-1,80 (м, 7Н), 1,88-2,00 (м, 1), 2,10-2,40 (м, 1Н), 2,70-3,05 (м, ЗН), 3,09-3,14 (м, 2Н), 3, 16-3,38 (м, 1Н), 3,45 (д, 1Н, 9У-14Гц), 3,53-3,60 (м, 2Н), 3.84-3,92 (м, 2Н), 3,97 (д, 71Н, 9У-14ГЦ), 5,55 (т, 1Н, 9У-5,8ГЦ), 6,17 (с, 1Н), 6,55-6,59 (м, 2Н), 75 8,64-6,71 (м, 1Н), 7,11-7,19 (м, 2Н), 7,43-7,46 (м, ЗН), 8,38-8,42 (м, 2Н). Мас-спектр (Е5) 484,0 (М 1).

Сполука 1714 (таблиця 17, нижче): Мас-спектр (Е5) 471,0 (М"1).

Сполука 1715 (таблиця 17, нижче): Мас-спектр (Е5) 505,0 (М 7-1).

Сполука 1716 (таблиця 17, нижче): "Н-ЯМР (200МГц, СО3О0) а 1,65 (м, 1Н), 2,18 (м, 1Н), 2,49 (ушир.д, 2М, 9У-6,2ГЦ), 2,64 (м, 1Н), 3,38 (м, 1Н), 3,69 (с, ЗН), 3,72 (м, 71Н), 3,93 (м, 1Н), 4,10 (м, 1Н), 5,06 (22 20 Н),б6,58 (с, 1Н), 6,92 (м, 2Н), 7,02 (м, 1Н), 7,23 (дд, 1Н, У-8,1Гц), 7,39 (м, ЗН), 8,32 (м, 2Н).

Сполука 1717 (таблиця 17, нижче); "Н-ЯМР (200МГц, СО3О0) а 1,69 (м, 1Н), 2,26 (м, 1Н), 2,42 (д, 2Н,

У-7,4ГЦ), 2,72 (м, 7Н), 3,53 (м, 1Н), 3,83 (м, 1Н), 4,02 (м, 1Н), 4,14 (дд, 1Н, 9-10,6, 7,0Гц), 5,14 (22 НМ), 6,69 (с, 1Н), 6,96 (м, 2Н), 7,06 (м, 1Н), 7,25 (дд, 1Н, У-8,0Гц), 7,39 (м, ЗН), 8,35 (м, 2Н). Мас-спектр (ЕБ5) 462,2 сч (М). 25

Сполука 1718 (таблиця 17, нижче); "Н-ЯМР (200МГц, СО3О0) а 1,40-2,00 (м, 5Н), 3,52 (д, 2Н, 7,6Гу), о 3,80-4,00 (м, 71Н), 4,00-4,20 (м, ЗН), 4,50 (м, 2Н), 6,36-6.50 (м, 2Н), 6,54 (с, 1Н), 6,84-6,92 (м, 1Н), 7,05 (т, 1Н, 9-8,2Гц), 7,30-7,45 (м, ЗН), 8,24 (д, 2Н, 9-9,8Гц). Мас-спектр (Е5) 449,0 (М'1).

Таблиця І7 (ее) 30 Сполуки, селективні до АЗ-аденозинового рецептора сч ж принаймні в 10 разів більш селективний, ніж інші три підтипи сч 7129 ГІ ій « 35 | 5 | - у с і ст | « 4017 и - х ! шщ с Зря г» ту. 1309 ІЧ ях ; о їх "бот т бо

ЗИ р г ю о"

ІЧ е)

Ф) іме) 60 б5

1791 Я г ей еще

Зукжу- 1311 р

Зукаку 1312 ПИ" фан су" |. . 1310 ре т я ри сч | У о

Кві 2 шо й 7 1315 -- й с

АХ. сч що ч 1102 те т « ве - й Со- ;» сут | ж -І с» ко му 0 4) (Ф. ко 60 65

1703 і т 1704 Г г р 70 У 1705 с ж с. и

Со м се 1706 ги т я-ї 2 ш - Фа; о с, (8) 1707 щ ж с

Е що сч т" с сло 7 з ї- й и я я « ки С0о-о з с с :з» 1709 ня. де 6-6 У «АХ, ій -. з соО їх ке ї7о СС т му . со Со (Ф) ко 60 65

711 рі ГІ

Фе су з 1712 С ї - й соч 1713 си с ро я І н І о ще 1714 7 оба со

Ге 1715 м я я д- 7 (ее)

Тв хо У с а сч

Фо - т з Ст ці 1717 -щх щу ; с ' -- - с ! 1718 щ

І» С

Слон -І ш о 1719 тво (я ! з АХ, Що во і ше ' (Че) оо

Фо х у - вд о Даний винахід відноситься до сполуки, що має структуру: ко 5 Мн, щі во со ( х сажу н 1505

Даний винахід також відноситься до сполуки, що має структуру: 65

С

М о а 2

М

С мн 1506 Й

Даний винахід крім того відноситься до сполуки, що має структуру: (5) МН; со ваші

М

Со 1507

Даний винахід також відноситься до сполуки, що має структуру: нов)

М о

Її --к 1508 й

Даний винахід крім того відноситься до сполуки, що має структуру: с (5) Мне ме и о рр се нн (ее) зо 1509 Й

Даний винахід також відноситься до сполуки, що має структуру: с (ЗІ Мне ме Ди сч ; ре ва « н че 1510

Даний винахід також відноситься до сполуки, що має структуру: (5) М.

Сук « тр є бо 7 с ч » 15131 Й " Даний винахід крім того відноситься до сполуки, що має структуру:

Сич си зол. - во ко 1512 І

ГІ 50 Даний винахід також відноситься до сполуки, що має структуру: ї5)

ІЧ е) не З буть У о-итОон

М п 1513 Й о Даний винахід крім того відноситься до сполуки, що має структуру: он іме) (

М. ня са 60 Яр ст 1514

Даний винахід крім того відноситься до сполуки, що має структуру: б5 он їй їр-є су М о 1515 70 Даний винахід також відноситься до сполуки, що має структуру: оп ми ше ай су : 1516

Даний винахід крім того відноситься до сполуки, що має структуру: стю. о н 1518

Даний винахід також відноситься до сполуки, що має структуру: сч сл о

Сл н с 1519 .

Даний винахід крім того відноситься до сполуки, що має структуру: с он х с о - нн бр" - ст 1520 , «

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до способу лікування захворювання, пов'язаного з Аїі з с аденозиновим рецептором у суб'єкта, який включає введення суб'єкту терапевтично ефективної кількості сполук 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519 або 1520. з У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до вищезгаданого способу, де суб'єкт являє собою ссавця.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до вищезгаданого способу, де ссавець є людиною. -І У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до вищезгаданого способу, де вказаний А 14 аденозиновий рецептор пов'язаний з порушенням здатності до пізнавання, нирковою недостатністю, серцевою пи аритмією, епітелієм дихальних шляхів, вивільненням трансмітера, седативною дією, звуженням кровоносних ко судин, брадикардією, негативною серцевою інотропією і дромотропією, бронхостенозом, нейтрофільним Хемотаксисом, рефлюксом або виразковим захворюванням. де У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до водорозчинних проліків сполуки 1505, 1506, 1507, с 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519 або 1520, де водорозчинні проліки метаболізують іп мімо, даючи активний лікарський засіб, який селективно інгібує А- аденозиновий рецептор.

У наступному варіанті здійснення винаходу вказані проліки метаболізують іп мімо за допомогою дв Каталізованого естеразою гідролізу.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до фармацевтичної композиції що включає

Ф) вищезгадані проліки і фармацевтично прийнятний носій. ка У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до способу інгібування активності А 4 аденозинового рецептора в клітині, який включає контактування клітини зі сполуками 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, бо 0019511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519 або 1520.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до вищезгаданого способу інгібування активності А 14 аденозинового рецептора в клітині, де сполука є антагоністом А аденозинового рецептора.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до вищезгаданого способу інгібування активності А 14 аденозинового рецептора в клітині, де клітина є клітиною людини. 65 У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до вищезгаданого способу інгібування активності А 14 аденозинового рецептора в клітині людини, де сполука є антагоністом А аденозинового рецептора.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до способу лікування у суб'єкта захворювання, пов'язаного з А я аденозиновим рецептором, де вказане захворювання являє собою астму, хронічне обструктивне захворювання легень, алергічний риніт або захворювання верхніх дихальних шляхів.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до способу лікування у суб'єкта захворювання, пов'язаного з А я аденозиновим рецептором, де вказане захворювання являє собою астму, хронічне обструктивне захворювання легень, алергічний риніт або захворювання верхніх дихальних шляхів, і де суб'єкт є людиною.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до способу лікування вищезгаданого захворювання, де /о вказана сполука є антагоністом А; аденозинових рецепторів.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до комбінованої терапії астми, що включає сполуки 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519 або 1520 і стероїд, В2 агоніст, глюкокортикоїд, антагоніст люкотриєну або антихолінергічний агоніст.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до фармацевтичної композиції що включає /5 терапевтично ефективну кількість сполуки 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519 або 1520 і фармацевтично прийнятного носія.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до способу лікування захворювання дихальних шляхів з використанням сполуки 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519 або 1520, де вказане захворювання являє собою астму, алергічну риніт або хронічне обструктивне 2о Захворювання легень.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до вищезгаданої фармацевтичної композиції(й), де вказана фармацевтична композиція являє собою препарат для періокулярної, ретробульбарної або внутрішньоочної ін'єкції.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до вищезгаданої фармацевтичної композиції(й), де сч г5 вказана фармацевтична композиція являє собою системний препарат.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до вищезгаданої фармацевтичної композиції(й), де і) вказана фармацевтична композиція являє собою хірургічний зрошувальний розчин.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до упакованої фармацевтичної композиції для лікування захворювання, пов'язаного з А; аденозиновим рецептором, у суб'єкта, що включає: со зо (а) контейнер, який містить терапевтично ефективну кількість сполук 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519 або 1520, і с (Б) інструкції для використання вказаної сполуки для лікування вказаного захворювання у суб'єкта. с

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до фармацевтично прийнятної солі сполуки 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516,1517,1518, 1519 або 1520. -

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до вищезгаданої фармацевтично прийнятної солі, де ї- фармацевтично прийнятна сіль сполуки 1509, 1511, 1518 або 1519 містить катіон, вибраний з групи, що складається з натрію, кальцію і амонію.

Ще в одному наступному варіанті здійснення винахід відноситься до способу лікування захворювання, пов'язаного з А. аденозиновим рецептором у суб'єкта, де А- аденозиновий рецептор пов'язаний із застійною « серцевою недостатністю. в с Ілюстративний приклад

Приклад 21: Синтез аміду ; » 1-(6-(4-гідрокси-4-фенілпіперидин-1-ілметил)-2-феніл-7Н-піроло|2,3а|піримідин-4-іл|Іпіролідин-2-карбонової кислоти (1505)

Сполуку 1505 синтезували способом, аналогічним способу прикладу 17, з використанням схеми синтезу ІХ і -І | -пролінаміду і 4-фенілпіперидин-4-олу, одержуючи: ть спот іме) же ва 7 ск

ІЧ е) 1505 "Н-ЯМР (а5-ДМСО) а а 1,53 (с, 1Н), 1,60 (с, 1Н), 1,84-2,30 (м, 6Н), 2,66 (м, 2Н), 3,60 (с, 2Н), 3,88 (м, 1Н), 4,02 (м, 7Н), 4,66 (д, 1Н, 9У-6,8Гц), 4,73 (с, 1Н), 6,44 (с, 1Н), 6,94 (с, 1Н), 7,12-7,50 (м, ТОН), 8,35 (м, 2Н), 11,6 (ушир.с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 305,1 (М'1); т. пл. х234-23526. (Ф) Приклад 22. Синтез |М-(2-феніл-7Н-піроло|2,3-іпіримідин-4-іл)-(І)-пролінаміду| (1506)

Ге Сполуку 1506 синтезували з використанням схеми синтезу МІ! і І -пролінаміду, одержуючи:

Ср "М ше;

С

1806 "Н-ЯМР (а5-ДМСО) а 2,05 (м, 4Н), 3,85 (м, 1Н), 4,05 (м, 1Н), 4,70 (д, 1Н, У-8,0Гц), 6,58 (ушир.с, 1Н), 6,95 (ушир.с, 1Н), 7,15 (д, 1Н, 5-3,4ГЦ), 7,40 (м, ЗН), 7,50 (ушир.с, 1Н), 8,40 (м, 2Н), 11,6 (ушир.с, 1Н); 65 Мас-спектр (ЕБ)У; 308,3 (М"41). Т.пл -236-23 ВС.

Приклад 23:

Синтез |М-(2-феніл-б6-метоксиметил-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин-4-іл)-(І)-пролінаміду) (1507)

Сполуку 1507 одержували з використанням сполуки 23 як попередника за схемою синтезу ІХ, одержуючи: ае сі ем нНОСН, ДХМ, СТСОАв Мт ст одно си оте 23 в Ж

Бромід 23 (4,23г, 1О0ммоль) розчиняли в безводному метанолі (бОмл) і ДХМ (120мл) і обробляли А9О02СсСЕ» в то атмосфері Мо при кімнатній температурі протягом 1 години. Тверду речовину видаляли фільтруванням і промивали ДХМ (2х20мл). Фільтрат концентрували у вакуумі. Залишок повторно розчиняли в ДХМ (8Омл).

Одержаний розчин потім промивали насиченим розчином МанНсСоО»з і насиченим розчином солі, сушили над

Ма5О,, фільтрували і концентрували, одержуючи 3,71г (4, 9995) не зовсім білої твердої речовини. "Н-ЯМР 75 (СОСІ,) а 1,75 (с, 9Н), 3,51 (с, ЗН), 4,83 (с, 2Н), 6,70 (с, 1Н), 7,47 (м, ЗН), 8,52 (м, 2Н). сі 13) зруА- ву " У І лпролінамід, ДМСО о о.

Торт пра у оо І202С, 4 год, су н ря й 1507

Арилхлорид 4 (2,448г, б,5бммоль), ДМСО (15мл), І-пролінамід (4,0г, З5,О0ммоль) і МансСоО»з (2,9Гг) об'єднували і нагрівали до 1202С в атмосфері азоту. Через 4 години реакційну суміш охолоджували до кімнатної температури і розбавляли водою (бОмл). Одержану суспензію екстрагували ДХМ (10х). Об'єднані органічні шари промивали насиченим розчином МанНнсСоО»з і насиченим розчином солі, сушили над М49зоО,, фільтрували і сч ре концентрували, одержуючи 2,48г коричневої твердої речовини. Чистий продукт (1,86г, 8195) одержували після флеш-хроматографії у вигляді білої твердої речовини. Білі кристали одержані з суміші ТГФ/гексан. Т. пл. (о) -213-21520. "Н-ЯМР (СОСІ) а 2,15 (м, ЗН), 2,52 (М, 71Н), 3,26 (с, ЗН), 3,92 (м, 1Н), 4,10 (м, 1Н), 442 (с, 2Н), 5,08 (д, 1Н, У-8,2ГЦ), 5,49 (ушир.с, 1Н), 6,48 (с, 1Н), 7,08 (ушир.с, 1Н), 7,42 (м, ЗН), 8,38 (м, 2Н), 9,78 (ушир.с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 352,2 (М'1). с

Приклад 24: Синтез аміду 4-гідрокси-1-(2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідин-4-іл)піролідин-2-карбонової кислоти (1508) с

Сполуку 1508 одержували за синтетичною схемою МІ! з використанням цис-гідроксипролінаміду, одержуючи: Га нов

Се «

М о о їм

М сл 7Н-ЯМР (ас-ДМСО) 4 1,90 (м, 1Н), 3,85 (д, 1Н, 9У-9,2Гц), 4,08 (м, 1Н), 4,37 (с, 1Н), 4,67 (дд, 1Н, 9-88, 4,0Гц), 5,30 (с, 1Н), 6,55 (с, 1Н), 7,15 (с, 2Н), 7,37 (м, ЗН), 7,64 (с, 1Н), 8,37 (м, 2Н), 11,65 (ушир.с, « 40. ЛН); Мас-спектр (Е5): 324,2 (М"1); т.пл.-268-27196. шщ с Приклад 25: Синтез ц 3-І4-((5)-2-карбамоїл-піролідин-1-іл)-2-феніл-7 Н-піроло|2,3-4Іпіримідин-б-іл|Іпропіонової кислоти (1509) "» Сполуки 1509 одержували з використанням як попередник сполуки 23 за схемою синтезу ІХ, одержуючи: сі Сі рел МівзнРО.. МаНоРО, ЇС-сю -і с й но ДМСО, 502С, 3,5 год, Ст оо 2390 , 2» ра рія ко Трет-Бутоксикарбонілзахищений арилбромід 23 (4,0г, 9,бммоль), сухий ДМСО (25мл), МаньоРоО, (454мг, г) 50 З,Т9ммоль) і МазНРО, (1,62г, 114ммоль) об'єднували і нагрівали при 502С в атмосфері аргону протягом приблизно 3,5 годин. Суміш потім виливали у воду (200мл) і екстрагували трьома порціями по 100мл ЕОАс. со Об'єднані органічні шари ретельно промивали водою, насиченим розчином солі, сушили над Мао, фільтрували і концентрували, одержуючи жовту тверду речовину, яку очищали розтиранням її з етанолом, одержуючи 1,55г блідо-жовтої твердої речовини (7). Маточний розчин очищали флеш-хроматографією (1090 22 ЕЮДс в гексані), одержуючи додатково 454мг (6090). ТН-ЯМР (СОС) а 1,77 (с, 9Н), 7,25 (с, 1Н), 7,48 (м,

ГФ) ЗН), 8,52 (м, 2Н) 10,39 (с, 1Н); т.пл.-1562С (розкл.). сі с о ко ке же й

Ко ею «(РАМРеСНСОхви сить 60 в т ре ТгФ,0еС. 1 год. в рий

Альдегід 7 (б0Омг, 1,7ммоль) розчиняли у безводному ТГФ (20мл) і охолоджували до 02С в атмосфері аргону. До нього додавали краплями через канюлю охолоджений до 0 кФеС розчин трет-бутоксикарбонілметилентрифенілфосфорану (694мг, 1,8ммоль) в 1Омл сухого ТГФ. Через З години суміш 65 концентрували і очищали розтиранням з етанолом, одержуючи 565мг (7395) білої твердої речовини (8). "Н-ЯМР (СОСІ») а 1,58 (с, 9Н), 1,79 (с, 9Н), 6,46 (д, 1Н), 6,95 (с, 1Н), 7,48 (м, ЗН), 8,09 (д, 1Н), 8,56 (м, 2Н).

сі о а о вад: вед: у Яоо- вик Су мо --

Лео тгФ, БОС в ото в о - -

Розчин сполуки 8 (565мг, 1,2ммоль) в бмл ТГФ розбавляли до 10О0мл ЕАс. Після додавання бООмг каталізатора (595 ваг. Ра, 5095 НО) і продування аргоном суміш гідрували при атмосферному тиску. Через 8 годин суміш фільтрували, концентрували і очищали флеш-хроматографією (1095 ЕЮАс в гексані), виділяючи 200мг (35965) 9 у вигляді прозорого масла, яке закристалізовувалось при стоянні. "Н-ЯМР (СОСІв) а 1,42 (с,

ОН), 1,75 (с, 9Н), 2,65 (т, 2Н), 3,32 (т, 2Н), 6,41 (с, 1Н) 7,45 (м, ЗН), 8,51 (м, 2Н). а о (5) Мне н Зр-ль І-пролінамід ке я ДМСО, 85 » моти, с йео що с М -- о н 75 8 - 10

Арилхлорид 9 (200мг, 0,44ммоль), ДМСО (1Омл) і І -пролінамід (44Омг, 4, 4ммоль) об'єднували і нагрівали до 859С в аргоні. Через 14 годин суміш охолоджували до кімнатної температури і розподіляли між водою і етилацетатом. Шари розділяли і водний шар промивали ЕАс (3х). Об'єднані органічні шари ретельно промивали водою, насиченим розчином солі, сушили над МазО,, фільтрували і концентрували, одержуючи 10 у вигляді жовтої плівки, яку очищали флеш-хроматографією (2,595 МеоН в СН 2Сі5). 185мг (9790). Мас-спектр (Е5): 435,8 (М"1). (5 2 о діоксан с рел ЛЕ. ть с вдо о то 3509

Складний ефір 10 (ЗОмг,ммоль) в 5мл діоксану гідролізували додаванням 0,5мл концентрованої НСІ. Через З години суміш концентрували у вакуумі і перекристалізовували з суміші ЕЮН/ЕЮАс, одержуючи 1509 у вигляді білої твердої речовини (2Омг, 61905). Мас-спектр (Е5): 380 (М 1). со

Приклад 26: Синтез су

ІМ-(2-феніл-6-амінокарбонілметоксиметил-7 Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин-4-іл)-(І)-пролінаміду| (1510)

Сполуку 1510 одержували з використанням сполуки 23 як попередника за схемою синтезу ІХ, одержуючи: с сі а сон я Її, 9-7 « ери носно сн». То су Я ДХМ, АВОТЕ Кт. 2 год. су «о в. 23 рі 12 ра

Бромід 23 (1,27г, Зммоль) і молекулярні сита (5г) перемішували у безводному метилгліколяті (5,8г, бОммоль) і ДХМ (40мл). Розчин обробляли АдоТії в атмосфері М» і залишали перемішуватись протягом З годин. «

Тверду речовину видаляли фільтруванням і промивали ДХМ (2хмл). Фільтрат концентрували у вакуумі. Залишок /птв) с повторно розчиняли в ДХМ (8Омл). Одержаний розчин потім промивали водою, насиченим розчином МоНСсОз і насиченим розчином солі, сушили над Мо5О,, фільтрували і концентрували, одержуючи 1,35г (9995) не зовсім . и? білої твердої речовини (12). ТН-яЯМР (СОС) а 1,75 (с, 9Н), 3,80 (с, ЗН), 5,0 (с, 2Н), 6,78 (с, 1Н), 7,47 (м, ЗН), 8,52 (м, 2Н). сі сосну Сожуия сю -І перу І-пролінамід бр во б вет ру, 12 5 о й 13 ра

Арилхлорид 12 (177мг, 04їммоль), ДМСО (1Омл), І-пролінамід (46бмг, 4ммоль)» і МансСоО» (500Омг) ко об'єднували і нагрівали до 1202 в атмосфері аргону. Через 4 години реакційну суміш охолоджували до со кімнатної температури і розбавляли водою (бОмл). Одержану суспензію екстрагували ДХМ (5хЗОмл). Об'єднані органічні шари промивали насиченим розчином МансСоО»з і насиченим розчином солі, сушили над Ма5зо,, фільтрували і концентрували, одержуючи коричневу тверду речовину. Чистий продукт (154мг, 9295) одержували в після флеш-хроматографії у вигляді білої твердої речовини (13). "Н-ЯМР (СОС) а 2,15 (м, ЗН), 2,52 (м, 1Н), 3,55 (с, ЗН), 4,58 (с, 2Н), 5,08 (с, ІН ), 5,85 (ушир.с, 1Н), 6,48 (с, 1Н), 7,08 (ушир.с, 1Н), 7,42 (м, ЗН), о 8,40 (м, 2Н), 10,58 (ушир.с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 410,1 (М 1). ко І МН: І5) мно ме ува ні оуючне бо р Мн сна у м» 9. во ї-О кт. ля сі 13 г тю. м

Метиловий складний ефір 13 (124мг, О0,Зммоль) розчиняли в НОСН» (15мл). Аміак барботували через розчин протягом 0,5 години. Реакційну суміш потім перемішували ще протягом З годин при кімнатній температурі. Після 65 видалення розчинника одержували 111мг білої твердої речовини (1510, 9390). 7"Н-ЯМР (СОСІ»в) а 1,82 (м, ЗН), 2,20 (м, 1Н), 2,80 (м, 1Н), 3,10 (м, 1Н), 3,63 (дд, 2Н, 9У4-13,8Гц, 9У2-19,4ГцЦ), 3,87 (м, 1Н), 4,07 (м, 1Н), 4,97 (м,

1Н), 5,96 (м, 2Н), 6,35 (с, 1Н), 6,86 (ушир.с, 1Н), 7,11 (ушир.с, 1Н), 7,37 (м, ЗН), 8,28 (м, 2Н), 11,46 (ушир.с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 394,8 (М 1).

Приклад 27:

Синтез І4-(2-карбамоїлпіролідин-1-іл)-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин-б6-карбонової кислоти) (1511)

Сполуку 1511 одержували з використанням сполуки 15 як попередника за синтетичною схемою МІЇ, одержуючи: с сі уз уде потім, РНБО у 70 су нм? поши то

НО о -209С, 4 год. о 145. 16 ГУ

До суспензії гідриду натрію (78Омг бОбо-ної суспензії в маслі, 19,5ммоль) у безводному ДМФ (20мл), що охолоджується на бані лід/вода, в потоці азоту додавали розчин піролопіримідину 15 (2,00г, 7,52ммоль) у ДМФ (10мл) протягом 5 хвилин. Через 15 хвилин додавали бензолсульфонілхлорид (1,2мл, 9,40Оммоль), потім видаляли охолоджуючу баню. Через 4 години реакційну суміш виливали в суміш льоду і насиченого розчину

НІансо»з, тверду речовину, що випала в осад, відфільтровували і розтирали з ацетоном (3) і метанолом (2), одержуючи 2,37г бежевої твердої речовини. Дана тверда речовина містить приблизно 1Омол.бо ДМФ (на цій основі вихід становив 8395) і може бути використана на наступній стадії; чистий зразок можна одержати хроматографічним очищенням на силікагелі з використанням ацетону як елюента. "Н-ЯМР (СОСІіІВ) а 6,70 (д,

У-42ГЦ, 1Н), 7,47-7,68 (м, 6Н), 7,76 (д, 9У-4,2ГЦ, 71Н), 8,24-8,32 (м, 2Н), 8,48-8,56 (м, 2Н); 14 (твердий): п-3146см", 1585, 1539, 1506, 1450, 1417, 1386, 1370, 1186, 1176, 1154, 1111, 1015, 919, 726, 683, 616, 607;

Мас-спектр (Е5): 372/370 (МН); т.пл.-226-22726. сч с

Ше цім СО» А Ін

СИ, ІРА о су (о) 16 Ша тик. 17 "у

До розчину М-сульфонілзаміщеної сполуки 16 (337мг, 0,911ммоль) у сухому ТГФ (З4мл), охолодженому со сумішшю сухий лід/ацетон, додавали ББА"ТГФ (1,Омл, 1,5 М розчин в циклогексані, 1,5ммоль). Через 45 хвилин Га діоксид вуглецю барботували в розчин протягом 5 хвилин, потім видаляли охолоджуючу баню. Коли розчин досягав температури навколишнього середовища, розчинники упарювали, одержуючи 398мг солі 17, що містить с приблизно 0,беквів. (ІРг»МСО»2іі, у вигляді жовтої твердої речовини. Сіль використали без очищення на «І наступній стадії. "Н-ЯМР (а5-ДМСО) а 6,44 (с, 1Н), 7,50-7,75 (м, 6Н), 8,33-8,40 (м, 2Н), 8,53 (дд, У-8,0, 1,6Гц, 2Н). М сі (3) мн; пр І -пролінамід дея

СЛ о ру 17 ШЕ 80еС, 15,5 год. зво « о - с Розчин літієвої солі 17 (5Омг) і І -пролінаміду (122мг, 1,07ммоль) в ДМСО (1,5мл) нагрівали в потоці азоту а при 802С протягом 15,5 годин. До охолодженого розчину додавали 495-ну водну оцтову кислоту (1Омл) і суміш є» екстрагували ЕІЮАс (5х1Омл). Об'єднані органічні шари промивали 4956-ною водною оцтовою кислотою (1Омл), водою (1Омл) і насиченим розчином солі (1ІОмл) і сушили над Мо50О5. Фільтрування і концентрування давали 40мг 18 у вигляді жовтуватої твердої речовини, яку використали без очищення на наступній стадії. "Н-ЯМР і (20.00) а 1,95-2,96 (м, 4Н), 3,85-3,95 (м, 71Н), 3,95-4,17/ (м, 71Н), 4,72 (ушир.с, 1Н), 7,14 (с, 1Н), їз 7,35-7,45 (м, ЗН), 7,45-7,70 (м, ЗН), 8,33-8,50 (м, 4Н). ко Су соку, тре ман " о мости ит су со з пах 202С,2 год. с ей

Розчин гідроксиду натрію в метанолі (1,5мл, 5М, 7,5ммоль) додавали до розчину піролопіримідину 18 (4Омг,

О,081ммоль) в метанолі (2мл). Через 2 години рН доводили до 5, велику частину метанолу упарювали, суміш екстрагували ЕТАс (5хХ1Омл), об'єднані органічні шари промивали насиченим розчином солі і сушили над

ГФ) Мао5О,. Фільтрування і концентрування давали 24мг блідо-жовтої твердої речовини, які розтирали з сумішшю ко толуол/г(ОАс/Меон, одержуючи 15,бмг (5595) кислоти 1511 у вигляді злегка жовтуватої твердої речовини. "Н-ЯМР (СО5О0) а 2,05-2,20 (м, 4Н), 3,95-4,10 (м, 1Н), 4,15-4,25 (м, 1Н), 4,85 (ушир.с, 1Н), бо 07.14 (с, 1Н), 7,35-7,42 (м, ЗН), 8,38-8,45 (м, 2Н); 14 (твердий): п-3192см7, 2964, 2923, 2877, 1682, 1614, 1567, 1531, 1454, 1374, 1352, 1295, 1262, 1190, 974, 754, 700; Мас-спектр (Е5): 352 (М"-1); т.пл х2202С (розкл.).

Приклад 28: Синтез аміду (1-(б-метил-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідин-4-іл)-(5)-піролідин-2-карбонової кислоти) (1512)

Сполуку 1512 синтезували з використанням наступних стадій: б5

/5) НК ру І-пролінамід м ! с Мо Тдмсо,ваес Фа м

Шй7О н 20 1512

Арилхлорид 20 (Зг, 10,7ммоль), ДМСО (5Омл) і (5)-пролінамід об'єднували і нагрівали при 852С в атмосфері аргону. Після перемішування протягом ночі (14 годин) суміш охолоджували до кімнатної температури і виливали в 800мл води. Цю суміш екстрагували три рази порціями по 200мл ЕЮАс. Об'єднані органічні шари ретельно промивали водою (Зх30Омл), насиченим розчином солі, сушили над М950,, фільтрували і концентрували, 70 одержуючи темно-коричневу тверду речовину. Тверду речовину перекристалізовували двічі з ЕЮАс, одержуючи 1,95г (5795) золотисто-рудої твердої речовини (1512). "Н-ЯМР (а45-ДМСО) а 1,8-2,2 (м, 4Н), 2,3 (с, ЗН), 3,8 (м, 1), 4,0 (м, 1Н), 4,6 (д, 71Н) 6,2 (с, 1Н), 6,9 (с, 1), 7,2 (м, ЗН), 7,3 (с, 1Н), 8,4 (м, 2Н), 11,5 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 322 (М"--1).

Приклад 29: Синтез аміду 1-(6-(2-гідроксіетоксиметил)-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|піримідин-4-іл|Іпіролідин-2-карбонової кислоти (1513)

Сполуку 1513 синтезували способом, аналогічним способу прикладу 17, відповідно до синтетичної схеми ІХ з використанням І -пролінаміду і етаном-1,2-діолу, одержуючи: «нн бул й о-тон 1513

Мас-спектр (Е5) 382 (М"-1) Га

Приклад 30: Синтез 4-(6-імідазол-1-ілметил-2-феніл-7Н-піроло(|2,3-4|піримідин-4-іламіно)циклогексанолу о (1514)

Сполуки 1514 синтезували способом, аналогічним способу прикладу 17, відповідно до синтетичної схеми ІХ з використанням М-6б-аміноциклогексанолу і імідазолу, одержуючи: он (ее) " о Х нм с с бор М су ІД ч- н 1614 «

Мас-спектр (Е5) 389 (М 1) -

Приклад 31: Синтез 4-(4-гідроксициклогексиламіно)-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин-б6-карбонової кислоти с (1515) "» Сполуку 1515 синтезували способом, аналогічним способу прикладу 27, відповідно до синтетичної схеми ІХ з " використанням М-6-аміноциклогексанолу, одержуючи: он і т т» нм ю бр

Х, мо су Мо со Мас-спектр (Е5) 353 (М" 1)

Приклад 32: Синтез 4-(6-(2-гідроксіетоксиметил)-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин-4-іламіно)циклогексанолу| (1516) оо Сполуку 1516 синтезували способом, аналогічним способу одержання сполуки 1513, відповідно до

ГФ! синтетичної схеми ІХ з використанням М-6-аміноциклогексанолу, одержуючи: он ко т 60 не он ру

Б

Со н 1516 бо Мас-спектр (Е5) 383 (М"1)

Приклад 33: Синтез метилового ефіру 4-(4-гідроксициклогексиламіно)-2-феніл-7 Н-піроло|2,3-4|піримідин-б6-карбонової кислоти (1517) с се ун сни : осн. бо ді обо о 202С,3 год. оо "о ща;

Розчин літієвої солі 17 (О0,1З3ммоль) у безводному ДМФ (4мл) перемішують з йодистим метилом (0,1мл, 70 1,бммоль) при 202С в атмосфері аргону протягом З годин. ДМФ упарюють і додають водний розчин хлориду амонію (15мл). Суміш екстрагують ЕЮ Ас (З3х15мл), об'єднані органічні шари промивають водою (2хХ1Омл) і насиченим розчином солі (ЛОмл) і сушать над Мо50О,). Фільтрування і концентрування дають 21мг (38905) метилового складного ефіру 22. ві 1 нм "он он 22 ит

Розчин метилового складного ефіру 22 (24,5мг, 0,057ммоль) і 4-транс-аміноциклогексанолу (ббмг, 0,57мМмоль) в ДМСО (1,5мл) нагрівають в атмосфері азоту при 802С протягом 5 годин, потім нагрівання припиняють і перемішування при 202 продовжують протягом 13,5 годин. До охолодженого розчину додають 490-ну водну оцтову кислоту (1Омл) і суміш екстрагують ЕЮАс (З3х1Омл). Об'єднані органічні шари промивають 4965-ною водною оцтовою кислотою (1Омл), водою (1Омл), 2н Маон (1Омл), водою (1Омл), і насиченим розчином солі (ІОмл) і сушать над М950,. До розчину неочищеної речовини, одержаної після фільтрування і концентрування се (Н-ЯМР вказує на приблизно 5095-не видалення бензолсульфонільної групи) в ТГФ (2мл), додають розчин о мМаон в мМеон (0,5мл 5М розчину, 2,5ммоль) при температурі навколишнього середовища. Через 20 хвилин додають воду і насичений розчин МанНсСО»з (по бмл кожні) і суміш екстрагують ЕЮАс (4х15мл). Об'єднані органічні шари промивають 2н Маон (1Омл), водою (1Омл) і насиченим розчином солі (ЛОмл) і сушать над

Ма9зо,. Хроматографія неочищеної речовини, одержаної після фільтрування і концентрування, на силікагелі при со елююванні сумішшю гексани/ЕЮАс 1:1 1:2 дає 8,бмг (4195) 1517 у вигляді білої твердої речовини, т.пл. с 225-2272С. "Н-ЯМР (СО5О0) а 1,38-1,62 (м, 4Н), 1,95-2,10 (м, 2Н), 2,10-2,25 (м, 2Н), 3,55-3,70 (м, 1Н), 3,91 (с, ЗН), 4,20-4,35 (м, 1Н), 7,32 (с, 1Н), 7,35-7,47 (м, ЗН), 8,35-8,42 (м, 2Н); 14 (твердий): п-3352см'", 3064, с 2935, 2860, 1701, 1605, 1588, 1574, 1534, 1447, 1386, 1333, 1263, 1206, 1164, 1074, 938, 756, 705; Мас-спектр «Ж (Е5): 367 (МН). | чн

Приклад За: Синтез метилового ефіру

І4-(2-карбамоїлпіролідин-1-іл)-2-феніл-7 Н-піроло|2,3-4|піримідин-б6-ілметокси|оцтової кислоти (1518)

Сполуку 1518 синтезували способом, аналогічним способу прикладу 26, з використанням як попередника сполуки 12, одержуючи: « то с що - Фа Ж и и"? Су у вто

Н

1518 це. Мас-спектр (ЕВ) 410 (М" 1) ї» Приклад 35: Синтез (|4-(2-карбамоїлпіролідин-1-іл)-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин-б-ілметокси|оцтової кислоти (1519) о Сполуку 1519 синтезували способом, аналогічним спосібу одержання сполуки 1518, де складноефірну ко 20 метильну групу гідролізували за допомогою основи, одержуючи: со ль м- (ві о сук я мит н

Ф) ко 15198

Мас-спектр (Е5) 396 (М -1) во Приклад 36: Синтез аміду 4-(4-гідроксициклогексиламіно)-2-феніл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин-б6-карбонової кислоти (1520) ду ді" ни не кл осн М, С. ; су з днів сте бо 23 й й 1520

Газоподібний аміак конденсують в розчин піролопіримідину 23 (7,8мг, 0,021ммоль) в метанолі (бмл), що охолоджується сумішшю сухий лід/(ацетон, доти, поки не досягається загальний об'єм 12мл. Після перемішування протягом 10 днів при 202С розчинники упарюють і залишок очищають препаративною ТШХ на силікагелі, елююючи сумішшю 5956 МеОН в СНоСі». Одержану таким чином речовину розтирають з простим ефіром, одержуючи 6,5мг (8895) аміду 1520 у вигляді білої твердої речовини, т.пл. 225-2272С (розкл.). "Н-ЯМР (2б0О500) а 1,40-1,60 (м, 4Н), 2,00-2,15 (м, 2Н), 2,15-2,25 (м, 2Н), 3,55-3,70 (м, 1Н), 4,20-4,35 (м, 1), 1,16 (с, 1Н), 7,35-7,47 (м, ЗН), 8,34-8,40 (м, 2Н); 14 (твердий): п-3358см', 3064, 3025,2964,2924,2853, 1652, 1593, 1539, 1493, 1452, 1374, 1326, 1251, 1197, 1113, 1074, 1028, 751, 699; Мас-спектр (Е5): 352 (МН).

Активність сполук

Насичення і конкурентне радіолігандне зв'язування підтипу 1 аденозинового (Ат) рецептора проводили для сполук 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519 і 1520, як описано тут і нарівні з іншим на стор. 123 даного опису. Всі вищезазначені сполуки рівні або перевершують аффинность зв'язування з А 14 рецептором посилальних сполук 1318 або 1319, як описано тут і нарівні з іншим в таблиці 13, 75 на стор. 136 даного опису.

Передбачається, що розчинність у воді вищезгаданих сполук, перерахованих в таблиці 18, буде кращою, ніж посилальних сполук 1318 або 1319 внаслідок їх значений сіодР, які були розраховані з використанням комп'ютерної програми С5 СпетОгаму, СпетОгам/ ОНга, мег.6.0 21999, розробленої Сатьгіддезой Согрогайоп, 100 Сатрбгідде рагк Огіме, Сатрьгідде, МА 021140.

Перераховані в таблиці 18 сполуки, специфічні до А рецептора, мали більш низькі значення сі о9Р, між приблизно 1,5 і приблизно 3,4, в порівнянні з посилальними сполуками 1318 або 1319, що мають значення сі сдР близько 3,8. Не можна було прогнозувати, що більш полярні А рецепторні сполуки, перераховані в таблиці 18 і які мають більш низькі значення сі одР, ніж посилальні сполуки 1318 або 1319, все ще будуть зберігати ефективність і селективність зв'язування А. рецептора у порівнянні з цими посилальний сполуками. с о со зо сч сч « зв М « з що - з

Сторінки 221-224 відносяться до додаткових сполук, специфічних до Аза рецептора.

Ше Даний винахід відноситься до сполуки, що має структуру: «» т ЯН»

Ск де ем со й 1609

Даний винахід також відноситься до сполуки, що має структуру: ту не

Ф) Ск, па ШИ У 60 й 1610

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до способу лікування захворювання у суб'єкта, пов'язаного з Ага аденозиновим рецептором, що включає введення суб'єкту терапевтично ефективної кількості в сполук 1609 або 1610.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до вищезгаданого способу, де суб'єкт являє собою ссавця.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до вищезгаданого способу, де ссавець є людиною.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до способу лікування захворювання, пов'язаного з А 24 аденозиновим рецептором у суб'єкта, де Аза аденозиновий рецептор пов'язаний з руховою активністю, розширенням судин, інгібуванням тромбоцитів, нейтрофільним генеруванням супероксиду, порушеннями здатності до пізнавання, старечим недоумством або хворобою Паркінсона.

Винахід відноситься до вищезгаданого способу, де сполука сприяє лікуванню захворювання за допомогою стимулювання аденілатциклази. 70 Винахід також відноситься до водорозчинних проліків сполуки 1609 або 1610, де водорозчинні проліки метаболізують іп мімо, даючи активний лікарський засіб, який селективно інгібує Ага аденозиновий рецептор.

Винахід також відноситься до водорозчинних проліків сполуки 1609 або 1610, де проліки метаболізують іп мімо за допомогою каталізованого естеразою гідролізу.

Винахід також відноситься до фармацевтичної композиції, що включає водорозчинні проліки сполуки 1609 або 1610 і фармацевтично прийнятного носія.

Винахід також відноситься до способу інгібування активності А за аденозинового рецептора в клітині, який включає контактування клітини зі сполуками 1609 або 1610.

Винахід також відноситься до способу інгібування активності А за аденозинового рецептора в клітині, який включає контактування клітини зі сполуками 1609 або 1610, де сполука є антагоністом вказаного А 24 го аденозинового рецептора.

Винахід також відноситься до вищезгаданого способу, де клітина є клітиною людини.

Винахід також відноситься до вищезгаданого способу, де клітина є клітиною людини, і сполука є антагоністом Ага аденозинових рецепторів.

Винахід також відноситься до фармацевтичної композиції, що включає терапевтично ефективну кількість сч ов сполуки 1609 або 1610 і фармацевтично прийнятного носія.

Винахід також відноситься до вищезгаданої фармацевтичної композиції, де терапевтично ефективна кількість і) є ефективною для лікування хвороби Паркінсона і захворювання, пов'язаного з руховою активністю, розширенням судин, інгібуванням тромбоцитів, нейтрофільним генеруванням супероксиду, порушеннями здатності до пізнавання або старечим недоумством. со зо Винахід також відноситься до вищезгаданої фармацевтичної композиції, де фармацевтична композиція є офтальмологічним препаратом. с

Винахід також відноситься до вищезгаданої фармацевтичної композиції, де фармацевтична композиція являє (су собою препарат для періокулярної, ретробульбарної або внутрішньоочної ін'єкції.

Винахід також відноситься до вищезгаданої фармацевтичної композиції, де фармацевтична композиція є «

Зз5 системним препаратом. ча

Винахід також відноситься до вищезгаданої фармацевтичної композиції, де фармацевтична композиція являє собою хірургічний зрошувальний розчин.

Винахід також відноситься до комбінованої терапії хвороби Паркінсона, що включає сполуки 1609 або 1610 і будь-який з допамінових посилюючих агентів. «

Винахід також відноситься до комбінованої терапії раку, що включає сполуки 1609 або 1610 і будь-який з з с цитотоксичних агентів.

Винахід також відноситься до комбінованої терапії глаукоми, що включає сполуки 1609 або 1610 і агоніст ;» простагландину, мускариновий агоніст або В-2 антагоніст.

Винахід також відноситься до упакованої фармацевтичної композиції для лікування у суб'єкта захворювання, пов'язаного з А»ь аденозиновим рецептором, що включає: -І (а) контейнер, який містить терапевтично ефективну кількість сполук 1609 або 1610, і (Б) інструкції для використання вказаної сполуки для лікування вказаного захворювання у суб'єкта. о Ілюстративний приклад ко Приклад 41: Синтез аміду 1-(6-феніл-2-піридин-4-іл-7Н-піроло(2,3-4|піримідин-4-іл)піролідин-2-карбонової 5ор Кислоти (1609). ю Сполуку 1609 синтезували взаємодією І-пролінаміду з відповідною хлоридною проміжною сполукою, с описаною на схемі ІІ на стор. 67, з одержанням:

Фе о о КТ ко 1509

ТН-ЯМР (д5-ДМСО) а 1,95-2,15 (м, 4Н), 4,00 (ушир.с, 1Н), 4,15 (ушир.с, 1Н), 4,72 (ушир.с, 1Н), 6,90 60 (ушир.с, 1Н), 7,19 (ушир.с, 1Н), 7,30 (т, 1Н, 9У-7,0ГЦ), 7,44 (т, 2Н, 9У-7,0ГЦ), 7,59 (с, 1Н), 7,92 (ушир.с, 2Н), 8,26 (д, 2Н, У-6,2Гц), 8,65 (д, 2Н, У-6,2Гц); Мас-спектр (Е5): 384,9 (М"1); т.шт «280-3162С (розкл.).

Приклад 42:

Синтез аміду 1-(6-(З-метоксифеніл)-2-піридин-4-іл-7Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин-4-іл|Іпіролідин-2-карбонової кислоти (1610). бо Сполуку 1610 синтезували взаємодією І-пролінаміду з відповідною хлоридною проміжною сполукою,

описаною на схемі ІІ на стор. 67, з одержанням:

СУК н о ем груо

М ч У н 1610 І 7ТН-ЯМР (а5-ДМСО) а 2,07 (м, 4Н), 3,85 (с, ЗН), 4,02 (м, 1Н), 4,17 (м, 1Н), 4,75 (м, 1Н), 6,89 (м, 1Н), 7,00 (с, 1), 7,23 (с, 1Н), 7, 35 (т, ІН, 9-8,2ГцЦ), 7,53 (с, 2Н), 7,60 (с, 1Н), 8,28 (д, 2Н, 92-5,8ГцЦ), 8,67 (д, 2Н, 9-5,8Гцу), 12,37 (с, 1Н); Мас-спектр (Е5): 415,0 (М -1).

Активність сполук

Конкурентне радіолігандне зв'язування підтипу 2а аденозинового (Ага) рецептора проводили для сполук 1609 і 1610, як описано тут і, нарівні з іншим, на стор.123 даного опису. Встановлено, що сполуки 1609 і 1610 володіють афінністю і селективністю зв'язування з А» рецептором.

Сторінки 225-229 відносяться до додаткових сполук, специфічних до Аз рецептора.

Даний винахід також відноситься до сполуки, що має структуру: м

М н "и

СО с Ні сч о 1720

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до способу інгібування активності А з аденозинового рецептора в клітині, який включає контактування клітини зі сполукою 1720. ее)

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до способу інгібування активності Аз аденозинового рецептора в клітині, де сполука є антагоністом Аз аденозинового рецептора. с

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до вищезгаданого способу інгібування активності А з Ге аденозинового рецептора в клітині, де клітина є клітиною людини.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до способу інгібування активності А з аденозинового в рецептора в клітині, де клітина є клітиною людини, і де сполука є антагоністом Аз аденозинового рецептора. -

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до способу лікування пошкодження ока у суб'єкта, який включає введення суб'єкту композиції, що включає терапевтично ефективну кількість сполуки 1720.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до вищезгаданого способу, де пошкодження включає « пошкодження сітківки або зорового головного нерва.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до терапії глаукоми, що включає введення суб'єкту - с терапевтично ефективної кількості сполуки 1720. ц У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до терапії глаукоми, що включає один або декілька "» антагоністів аденозинового рецептора, що переважно включає антагоніст Аз аденозинового рецептора (переважно М-6 заміщений 7-дезазапурин, найбільш переважно |(2-(ЗН-імідазол-4-іл)етил|-(2-феніл-7Н-піроло(|2,3-4|Іпіримідин-4-іл)амін). -І В альтернативному варіанті здійснення винахід відноситься до комбінованої терапії глаукоми, що включає антагоніст Аз аденозинового рецептора (переважно М-б заміщений 7-дезазапурин, найбільш переважно е (2-(ЗН-імідазол-4-іл)етилІ-(2-феніл-7 Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин-4-іл)яамін) і одну або декілька інших сполук, ко вибраних з групи, що складається з антагоністів бета-адреносептора (тобто бета-адренергічних антагоністів або бета-блокаторів) (наприклад, тимолол малеат, бетаксолол, картеолол, левобунолол, метипранолол, 1І-653328 ді (ацетат 1-652698), антагоністів бета-1-адреноцептора), агоністів альфа-2-адреноцептора (наприклад, (Че аплаклонідин, бримонідин, АСМ-195795, АСМ-190837 (аналог Вау-а-6781)), інгібіторів карбонової ангідрази (бринзоламід, дорзоламід, МК-927 (інгібітор ізофермента карбонової ангідрази || людини), інгібітори ізофермента карбонової ангідрази ІМ), холінергічних агоністів (наприклад, мускаринові холінергічні агоністи,

Карбахол, пілокарпін НС, опілокарпін нітрат, пілокарпін, проліки пілокарпіну (наприклад, 00-22А), простагландинів і агоністів простагландинового рецептора (наприклад, латанопрост, унопростон |ізопропіл,

Ф, агоністи РОБ2 альфа, агоністи простаноїд-селективного ЕК рецептора, РО агоністи, такі як гіпотензивні ко простаміди), інгібіторів ангіотензин-конвертуючого ферменту (АСЕ) (наприклад, спіраприл, спіраприлат), антагоністів АМРА рецептора, 5-НТ агоністів (наприклад, селективний агоніст 5-НТ ТА рецептора, такий як бо МКо-242 (5-(3-(25)-1,4-бензодіоксан-2-ілметил)аміно|пропокси-1,3-бензодіоксол НС), інгібіторів ангіогенезу (наприклад, стероїд анекортав), ММОА антагоністів (наприклад, НО-211, мемантин, агоніст канабіноїдного

ММОА-рецептора дексанабінол, проліки і аналоги дексанабінолу, КІ12В-селективні антагоністи (наприклад, еліпродил (51 -82.0715)), інгібіторів реніну (наприклад, СОоР-38560, 5ЗМК-43845), агоністів канабіноїдного рецептора (наприклад, тетрагідроканабінол (ТНС) і аналоги ТНС, селективні агоністи СВ2 канабіноїдного 65 рецептора (наприклад, 1-768242, І -759787), сполуки такі як анандамід, які зв'язуються як з мозок-специфічними

СВ1 рецепторами, так і периферичними СВ2 рецепторами), антагоністів ангіотензинового рецептора (наприклад,

антагоністи ангіотензин || рецептора (наприклад, С5-088), селективні антагоністи ангіотензин !| АТ-Ї рецептора, такі як лосартан калію, гідрохлортіазиду (НСТ72), агоністів соматостатину (наприклад, непептидний агоніст соматостатину ММС-26-9100), глюкокортикоїдних антагоністів, інгібіторів дегрануляції тучних клітин (наприклад, недокроміл), блокаторів альфа-адренергічного рецептора (наприклад, дапіпразол, антагоністи альфа-2-адреноцептора, антагоністи альфа-1-адреноцептора (наприклад, буназозин)), антагоністів альфа-2-адреноцептора, міметиків тромбоксану А2, інгібіторів протеїнкінази (наприклад, Н7), похідних простагландину Е (наприклад, 5-1033), антагоністів простагландин-2 альфа (наприклад, РИХА-34), агоністів допаміну О1 ії 5-НТ2 (фенольдопам), агентів, що вивільняють окисел азоту (наприклад, МСХ-904 або МОСХ-905, /о похідні тимололу, які вивільняють окисел азоту), антагоністів 5-НТ2 (наприклад, сарпогрелат), ММОА антагоністів (наприклад, проліки і аналоги дексанабінолу), антагоністів альфа-1-адреноцептора (наприклад, буназозин), інгібіторів циклооксигенази (наприклад, диклофенак або нестероїдна сполука непафенак), інозину, агоністів допамінового 002 рецептора і альфа 2 адреноцептора (наприклад, талипексол), антагоніста допамінового Ю1 рецептора і агоністів 02 рецептора (наприклад, 502-051 С-756), антагоністів вазопресинового /5 рецептора (наприклад, антагоністи вазопресин М2 рецептора (наприклад, ЗК-121463)), ендотеліальних антагоністів (наприклад, ТВС-2576), 1-(3-гідрокси-2-фосфонілметоксипропіл)уцитозину (НРМР і споріднених аналогів і проліків, лігандів рецептора тироїдного гормону (наприклад, КВ-130015), мускаринових МІ агоністів, антагоністів ММОА-рецептора (наприклад, дексанабінол- антагоніст канабіноїдного ММОА-рецептора), РО агоністів, таких як гіпотензивні ліпіди, простамідів, блокаторів натрієвих каналів, ММОА антагоністів, блокаторів іонних каналів змішаної дії, комбінацій антагоністів бета адреноцептора і РОБ2 альфа агоністів (наприклад, латанопрост і тимодол), активаторів гуанілатциклази (наприклад, натрійуретичний пептид (АМР), Що відноситься до передсердя, або непептидні міметики), інгібіторів АМР нейтральної ендопептидази, нітровазодилаторів (наприклад, нітрогліцерин, гідралазин, нітропрусид натрію), модуляторів енотелінового рецептора (наприклад, ЕТ-1 або непептидні міметики, сарафотоксин-Зос), етакринової кислоти, інших аналогів сч ов феноксіоцтової кислоти (наприклад, індакринон, тикринафен), руйнувачів актину (наприклад, латрункулін), блокаторів кальцієвих каналів (наприклад, верапаміл, ніфедипін, бровінкамін, нівалдипін) і нейтрозахисних і) агентів.

Комбінована терапія глаукоми, що включає сполуку 1720 і одну або декілька сполук, вибраних з групи, що складається з антагоністів бета-адреноцептора, агоністів альфа-2-адреноцептора, інгібіторів карбонової со зо ангідрази, холінергічних агоністів і агоністів простагландинового рецептора.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до фармацевтичної композиції що включає с терапевтично ефективну кількість сполуки 1720 і фармацевтично прийнятного носія. с

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до упакованої фармацевтичної композиції для лікування захворювання, пов'язаного з Аз аденозиновим рецептором у суб'єкта, що включає: - 35 (а) контейнер, який містить терапевтично ефективну кількість сполуки 1720; і ї- (Б) інструкції для використання вказаної сполуки для лікування вказаного захворювання у суб'єкта.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до способу одержання композиції, яка включає сполуку 1720, даний спосіб включає змішування сполуки 1720 з відповідним носієм.

У наступному варіанті здійснення винахід відноситься до фармацевтично прийнятної солі сполуки 1720, де « 40 Фармацевтично прийнятна сіль містить аніон, вибраний з групи, що складається з малеату, фумарату, тартрату, З с ацетату, фосфату і мезилату.

Ілюстративний приклад. ;» Приклад 43: Синтез |2-(ЗН-імідазол-4-іл)летилі|-(2-феніл-7 Н-піроло|2,3-4|піримідин-4-іл)аміну (1720)

Сполуку 1720 синтезували з використанням як попередника сполуки 1 за синтетичною схемою МІЇ, 45 одержуючи:

М їм сі с ве о гістамін, дМСО нн з су НО Пес вунаоов и ту 1 Су т 50 о 4тго

Арилхлорид 1 (400мг, 1,50ммоль), ДМСО (1Омл) і гістамін (1,67г, 15,0ммоль) об'єднують і нагрівають до со 1202 у потоці азоту. Через 6,5 годин реакційну суміш охолоджують до кімнатної температури і розподіляють між ЕІАс і водою. Шари розділяють і водний шар екстрагують Е(ОАс (Зх). Об'єднані органічні шари промивають насиченим розчином солі (2х), сушать над Ма9505;, фільтрують і концентрують, одержуючи 494мг коричневої твердої речовини. Тверду речовину промивають холодним Меон і перекристалізовують з МеонН, одержуючи

ГФ) 197мг (4395) не зовсім білої твердої речовини (1720). "Н-ЯМР (СО3О0) а 3,05 (т, 2М, 9-7,0Гц), 3,94 (т, 2Н, 7 У-7,0ГЦ), 6,50 (д, 1Н, 9-3,5Гц), 6,88 (ушир.с, 1Н), 7,04 (д, 1Н, 9У-3,5Гц), 7,42 (м, ЗН), 7,57 (с, 1Н), 8,34 (м, 2Н); Мас-спектр (Е5): 305,1 (М'1); т.пл.-234-23596. 60 Активність сполук

Конкурентне радіолігандне зв'язування аденозин-3 (А з) рецептора проводили для сполуки 1720, як описано тут і, нарівні з іншим, на сторінках 123-124 даного опису. Встановлено, що сполука 1720 володіє афінністю зв'язування А з рецептора, що в 10 разів перевищує таку для посилальної сполуки 1308, як описано в даному описі і, крім іншого, в таблиці 13 на сторінці 136 опису. 65 Включення як посилання.

Всі патенти, опубліковані заявки на патенти та інші наведені тут посилання спеціально включені в даний опис як посилання.

Еквіваленти

Фахівці в даній області розпізнають або зможуть пересвідчитись, використовуючи не більш ніж рутинні експерименти, в існуванні багатьох еквівалентів конкретних варіантів здійснення винаходу, спеціально описаних тут. Мається на увазі, що такі еквіваленти охоплюються об'ємом наступної формули винаходу.

Даний винахід крім того відноситься до сполук, що мають формулу: ее

Зах і У 70 сумо-

ХІІ. де КІМК» разом утворюють кільце, що має структуру: о о або або Ку. являє собою Н, і Ко являє собою он

І . І . І І с

К5 являє собою М або заміщений або незаміщений алкіл або алкіларил. о

Claims (1)

1. Формула винаходу с зо 1. Сполука, що має структуру: т т с « МО х ї- що їй Н « Хо - с де Х являє собою С, . К.М» разом утворюють кільце, що має структуру: "» но ,

   - М МН.

   МН.

   М т» х або юю 9 о з 50 або Ку. являє собою Н і Ко являє собою он, со о

   ГФ) або Ку. являє собою Н і Ко являє собою з ГЕ І НМ - 60 де, якщо К-МК» разом є б5 но ,

   МН. М - М МН. х або о о) то Кв являє собою Н, -СН «(«МС5НаХОонНХСьнНь), -«СНгОСснН», -«СН.»ЬСс(О0ОНн, -СНгОоСнНоС(ОМН», -СКООН,

   70. -Снуь, -ССНХ(СНО»ОН, -СНгОСНС(О)ОСН» або -«СНХОСНС(ООН; і якщо Ку; являє собою Н і Ко являє собою он, то К5 являє собою -СНА(МоСзНаі), -Ф(О)ОН, -СНО(СНОІ»ОН, -СКО)ОСН» або -С(О)МН», і якщо К; являє собою Н і Ко являє собою - М ї- нн и з с ' то К5 являє собою Н; о або де Х являє собою М, КІМК» являє собою с сч МНА ІЧ с ' ч і В5 являє собою СеНв, (СЕЄНДОСН», - або її фармацевтично прийнятна сіль.

   2. Сполука за п.1, що має структуру - « х й - с і І МН. ан м т ;» (8) МО х | й -І | сх М й о -е ю З. Сполука за п.1, що має структуру: з 50

   МІН. со М т о М» Б | р ех ІЧ

   Ф. | Мн г -

   4. Сполука за п. 1, що має структуру 60 б5

   НО МН. м шо о І, Не 5 о-и се Ше ІЧ МІ Н . -

   5. Сполука за п.1, що має структуру: но

   МН. в - и ЩВ) І НИ ор Б: М . го | Мн ше

   6. Сполука за п.1, що має структуру: і у МН. см м т а о шу о 4 ІЧ і; он со | оз Ми й І с кт с

   7. Сполука за п. 1, що має структуру: « з і . -и м СОоМмН. о аж й Мои І, « ІЧ зо Д оз МОВ | - с шк ;» 8. Сполука за п. 1, що має структуру: ( у МН: -І І їх ме с ан юю ДИТ » юю ще ІЧ е)

   9. Сполука за п.1, що має структуру: / Х МН. МІ о о т гу. що ІЧ во | Ми ш: ще

   10. Сполука за п.1, що має структуру: б5

   СОУ мн. м - м хе о . шиття ДОН Ше ІЧ он ші

   11. Сполука за п.1, що має структуру: о Н НУ М ІНВ; Ш- поши -кЕ Ше ІІ ІМ Н . дО с

   25 .

   12. Сполука за п. 1, що має структуру: (о) он (ее) с (8) сч НМ ч ме У ан чн -А- / з че М ба - «

   13. Сполука за п.1, що має структуру: но) с он І» й (8) і (8) ве ІК! ан ю до му т вх ша йо Ше ІЧ со | М Н . шт

   14. Сполука за п.1, що має структуру: Ф) ко бо б5 ан (8) ІК щ-- 00-- ван шт й: М Й їв! . шк

   15 .

   15. Сполука за п.1, що має структуру: ЇЇ УдВ ем. м -о а ме ш о ща щ- з й ин ІЧ су Н . с

   16. Сполука за п. 1, що має структуру: і) ЇЇ УдВ ем. М -о Го) г) Зо МО ч чо с З он ин м с су її «

   17. Сполука за п. 1, що має структуру: М он (8) їх - с (8) з НМ МО: МН. - Згус то М 1» | м нин 7 й ГІ 20 18. Сполука за п.1, що має структуру: со СУ МА: - М - й ІЧ Ф) З -к о М Н - 60

   19. Сполука за п.1, що має структуру: б5 го У --М - о З и 5 М

   Н .

   20. Сполука за п.1, що має структуру: ЩІ 5 ій К Н ІН Са р до с о або її фармацевтично прийнятна сіль.

   21. Сполука за будь-яким одним з пп.1-20, яка придатна для виготовлення лікарського засобу для лікування захворювання, пов'язаного з А/, Ага або Аз аденозиновим рецептором, у суб'єкта.

   22. Сполука за п. 21, де захворюванням, пов'язаним з А 4 аденозиновим рецептором, є затримка води, ее) брадикардія, бронхіт, бронхоспазм, хвороба Альцгеймера, серцева гіпоксія, негативна серцева інотропія і дромотропія, гіпертензія, запалення, захворювання, пов'язане з седативною дією, порушення пізнавальної с здатності, ниркова недостатність, серцеві аритмії, рефлюкс, виразкове захворювання або захворювання, Ге пов'язане з дихальним епітелієм, вивільненням трансмітерів, звуженням кровоносних судин, нейтрофільним хемотаксисом, скороченням гладкої мускулатури під дихальним епітелієм, звуженням кровоносних судин або З дегрануляцією тучних клітин. -

   23. Сполука за п. 21, де захворюванням, пов'язаним з А 4 аденозиновим рецептором, є астма, хронічне обструктивне захворювання легенів, алергічний риніт або захворювання верхніх дихальних шляхів.

   24. Сполука за п. 21, де захворюванням, пов'язаним з А 4 аденозиновим рецептором, є застійна серцева « недостатність.

   25. Сполука за п. 21, де захворюванням, пов'язаним з А 24 аденозиновим рецептором, є порушення - с пізнавальної здатності, старече недоумство, глаукома або хвороба Паркінсона, або захворювання, пов'язане з ц руховою активністю, розширенням судин, інгібуванням тромбоцитів або нейтрофільним генеруванням "» супероксиду.

   26. Сполука за п. 21, де захворюванням, пов'язаним з Аз аденозиновим рецептором, є глаукома.

   27. Сполука за п. 21, де захворюванням, пов'язаним з А з аденозиновим рецептором, є астма, глаукома, -І ретинопатія, пошкодження ока внаслідок ішемії, дегенерація жовтої плями, ішемія міокарда, бронхіт, хронічне обструктивне захворювання легенів або бронхоспазм, або захворювання, пов'язане з очним запаленням, або е дегрануляцією тучних клітин. ко 28. Сполука за п. 21, де захворюванням, пов'язаним з Ага аденозиновим рецептором, є хвороба Паркінсона.

   29. Спосіб одержання сполуки за п. 20, що включає стадії (а) взаємодії сполуки о сі ІЧ е) М | х су М о Н о) там з гістаміном в присутності диметилсульфоксиду; (Б) нагрівання реакційної суміші в інертній атмосфері; 60 (с) охолоджування реакційної суміші і відділення органічного шару від водного шару; (а) промивання органічного шару насиченим розчином солі, осушення і фільтрація з утворенням цільової сполуки.

   30. Спосіб за п. 29, в якому на стадії (Б) реакційну суміш нагрівають в атмосфері азоту.

   31. Спосіб за п. 29, в якому на стадії (4) органічний шар осушують Ма5О,. бо 32. Фармацевтична композиція для лікування захворювання, пов'язаного з А 4, Ага або Аз аденозиновим рецептором, у суб'єкта, що містить терапевтично ефективну кількість сполуки за будь-яким одним з пп.1-20 і фармацевтично прийнятний носій.

   33. Композиція за п. 32, яка додатково містить одну або декілька сполук, вибраних з групи, що складається З антагоністів бета-адреноцептора, агоністів альфа-2-адреноцептора, інгібіторів карбонової ангідрази, холінергічних агоністів, простагландинів і агоністів простагландинового рецептора, інгібіторів ангіотензинконвертуючого ферменту (АСЕ), антагоністів АМРА рецептора, 5-НТ агоністів, інгібіторів ангіогенезу, ММОА антагоністів, інгібіторів реніну, агоністів канабіноїдного рецептора, антагоністів ангіотензинового рецептора, гідрохлортіазиду (НСТ2), агоністів соматостатину, глюкокортикоїдних антагоністів, 70 інгібіторів дегрануляції тучних клітин, блокаторів альфа-адренергічних рецепторів, антагоністів альфа-2-адреноцептора, міметиків тромбоксану А», інгібіторів протеїнкінази, похідних простагландину БЕК, антагоністів простагландин-2 альфа, агоністів допаміну ОО і 5-НТ2, агентів, що вивільняють окисел азоту, антагоністів 5-НТ2, інгібіторів циклооксигенази, інозину, агоністів допамінового Оо рецептора і альфа 2 адреноцептора, антагоніста допамінового ОО. рецептора і агоністів О» рецептора, антагоністів вазопресинового /5 рецептора, ендотеліальних антагоністів, 1-(3-гідрокси-2-фосфонілметоксипропілцитозину (НРМРС) їі родинних аналогів і проліків, лігандів рецептора тироїдного гормону, мускаринових М. агоністів, блокаторів натрієвих каналів, блокаторів іонних каналів змішаної дії, антагоністів бета-адреноцептора і комбінації РОБ2 альфа агоністів, активаторів гуанілатциклази, нітровазодилаторів, модуляторів ендотелінового рецептора, етакринової кислоти, інших аналогів феноксіоцтової кислоти, руйнувачів актину, блокаторів кальцієвих каналів і 2о Ннейрозахисних агентів.

   34. Композиція за п. 32, яка додатково містить одну або декілька сполук, вибраних з групи, що складається з антагоністів бета-адреноцептора, агоністів альфа-2-адреноцептора, інгібіторів карбонової ангідрази, холінергічних агоністів і агоністів простагландинового рецептора. тріїгя я " : " " : : пов с Офіційний бюлетень "Промислоава власність". Книга 1 "Винаходи, корисні моделі, топографії інтегральних мікросхем", 2005, М 11, 15.11.2005. Державний департамент інтелектуальної власності Міністерства освіти і і) науки України. (ее) с с « -

   - . и? -і щ» іме) іме) ІЧ е) іме) 60 б5